JP2017061462A - Uv光曝露から生じるタンパク質の改変と分解を減ずるまたは排除する方法 - Google Patents
Uv光曝露から生じるタンパク質の改変と分解を減ずるまたは排除する方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2017061462A JP2017061462A JP2016197842A JP2016197842A JP2017061462A JP 2017061462 A JP2017061462 A JP 2017061462A JP 2016197842 A JP2016197842 A JP 2016197842A JP 2016197842 A JP2016197842 A JP 2016197842A JP 2017061462 A JP2017061462 A JP 2017061462A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- protein
- light
- sample
- protein component
- antibody
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 214
- 230000009145 protein modification Effects 0.000 title claims description 31
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 title claims description 23
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 title description 23
- 235000004252 protein component Nutrition 0.000 claims abstract description 175
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims abstract description 122
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 89
- 239000003223 protective agent Substances 0.000 claims description 176
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 174
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 173
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 claims description 172
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 77
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 claims description 47
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 claims description 47
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 46
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims description 44
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 claims description 43
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 43
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 43
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 claims description 42
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 42
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 claims description 34
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 33
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 claims description 31
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 claims description 31
- 235000006109 methionine Nutrition 0.000 claims description 29
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 28
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 claims description 22
- LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N pyridoxine Chemical compound CC1=NC=C(CO)C(CO)=C1O LXNHXLLTXMVWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 125000000430 tryptophan group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C2=C([H])C([H])=C([H])C([H])=C12 0.000 claims description 22
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 20
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 claims description 19
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 claims description 19
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 claims description 19
- 229910052588 hydroxylapatite Inorganic materials 0.000 claims description 18
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 claims description 18
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 claims description 17
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 claims description 17
- 125000001360 methionine group Chemical group N[C@@H](CCSC)C(=O)* 0.000 claims description 14
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 claims description 14
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 claims description 14
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 235000008160 pyridoxine Nutrition 0.000 claims description 11
- 239000011677 pyridoxine Substances 0.000 claims description 11
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 claims description 11
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 claims description 11
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 claims description 11
- 229940011671 vitamin b6 Drugs 0.000 claims description 11
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 claims description 10
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 claims description 10
- 230000009467 reduction Effects 0.000 claims description 7
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 claims description 6
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 claims description 5
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims description 5
- 241000713112 Orthobunyavirus Species 0.000 claims description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 claims description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 claims description 4
- 241000701242 Adenoviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000712892 Arenaviridae Species 0.000 claims description 3
- 241001292006 Arteriviridae Species 0.000 claims description 3
- 241001533362 Astroviridae Species 0.000 claims description 3
- 241001533399 Circoviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000711950 Filoviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000700739 Hepadnaviridae Species 0.000 claims description 3
- 241001112094 Hepevirus Species 0.000 claims description 3
- 241000700586 Herpesviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000701377 Iridoviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000723741 Nodaviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000712464 Orthomyxoviridae Species 0.000 claims description 3
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000711504 Paramyxoviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000701945 Parvoviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000709664 Picornaviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000700625 Poxviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000125945 Protoparvovirus Species 0.000 claims description 3
- 241000702247 Reoviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000711931 Rhabdoviridae Species 0.000 claims description 3
- 241000710924 Togaviridae Species 0.000 claims description 3
- 108700010877 adenoviridae proteins Proteins 0.000 claims description 3
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 claims description 3
- 241000710781 Flaviviridae Species 0.000 claims description 2
- 241000150350 Peribunyaviridae Species 0.000 claims description 2
- 241001631648 Polyomaviridae Species 0.000 claims description 2
- 241000712907 Retroviridae Species 0.000 claims description 2
- 241001492478 dsDNA viruses, no RNA stage Species 0.000 claims description 2
- 241001147420 ssDNA viruses Species 0.000 claims description 2
- 241000114864 ssRNA viruses Species 0.000 claims description 2
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 abstract description 51
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 62
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 59
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 36
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 25
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 25
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 25
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 23
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 22
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 20
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 18
- 230000006870 function Effects 0.000 description 18
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 17
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 15
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 15
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 14
- 230000008859 change Effects 0.000 description 14
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 13
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 13
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 13
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 12
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 12
- 238000003998 size exclusion chromatography high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 12
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 12
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 12
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 11
- 108091006020 Fc-tagged proteins Proteins 0.000 description 11
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 11
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 11
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 11
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 10
- -1 oxygen ions Chemical class 0.000 description 10
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000008569 process Effects 0.000 description 10
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 10
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 9
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 9
- 241000894007 species Species 0.000 description 9
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 8
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 8
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 7
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 description 7
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 7
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 7
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229910004373 HOAc Inorganic materials 0.000 description 6
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 6
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 6
- 238000011021 bench scale process Methods 0.000 description 6
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 6
- 235000008729 phenylalanine Nutrition 0.000 description 6
- 230000004044 response Effects 0.000 description 6
- 238000010977 unit operation Methods 0.000 description 6
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 5
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 5
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 5
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 5
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 5
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 5
- 150000002978 peroxides Chemical class 0.000 description 5
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 5
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 5
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 5
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 4
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 239000012539 chromatography resin Substances 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 4
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 4
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 4
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 3
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 3
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 3
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 239000013626 chemical specie Substances 0.000 description 3
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 3
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 3
- 238000011118 depth filtration Methods 0.000 description 3
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 3
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 3
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 3
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 3
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 3
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 3
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 3
- 230000009993 protective function Effects 0.000 description 3
- 238000011403 purification operation Methods 0.000 description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 3
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 3
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000702628 Birnaviridae Species 0.000 description 2
- 241000714198 Caliciviridae Species 0.000 description 2
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 2
- 241000450599 DNA viruses Species 0.000 description 2
- 238000010268 HPLC based assay Methods 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 230000002939 deleterious effect Effects 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 2
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N silicon dioxide Inorganic materials O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 2
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 2
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 238000012286 ELISA Assay Methods 0.000 description 1
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000016359 Fibronectins Human genes 0.000 description 1
- 108010067306 Fibronectins Proteins 0.000 description 1
- 238000012450 HuMAb Mouse Methods 0.000 description 1
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 1
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 239000012515 MabSelect SuRe Substances 0.000 description 1
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 241001505332 Polyomavirus sp. Species 0.000 description 1
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 1
- 108020004682 Single-Stranded DNA Proteins 0.000 description 1
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 108010088160 Staphylococcal Protein A Proteins 0.000 description 1
- 108700011201 Streptococcus IgG Fc-binding Proteins 0.000 description 1
- 238000012452 Xenomouse strains Methods 0.000 description 1
- 238000004847 absorption spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 239000003011 anion exchange membrane Substances 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 229920000249 biocompatible polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 239000006143 cell culture medium Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 230000001627 detrimental effect Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- 239000013628 high molecular weight specie Substances 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 1
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 1
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 230000005865 ionizing radiation Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000013627 low molecular weight specie Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 238000011140 membrane chromatography Methods 0.000 description 1
- 102000035118 modified proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091005573 modified proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001151 other effect Effects 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 238000012510 peptide mapping method Methods 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 1
- 239000000700 radioactive tracer Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000017245 response to UV-C Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 238000011824 transgenic rat model Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
- A61L2/00—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
- A61L2/02—Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor using physical phenomena
- A61L2/08—Radiation
- A61L2/10—Ultraviolet radiation
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N1/00—Sampling; Preparing specimens for investigation
- G01N1/28—Preparing specimens for investigation including physical details of (bio-)chemical methods covered elsewhere, e.g. G01N33/50, C12Q
- G01N1/30—Staining; Impregnating ; Fixation; Dehydration; Multistep processes for preparing samples of tissue, cell or nucleic acid material and the like for analysis
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/10—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features
- B01D15/24—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by constructional or operational features relating to the treatment of the fractions to be distributed
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K1/00—General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
- C07K1/14—Extraction; Separation; Purification
- C07K1/16—Extraction; Separation; Purification by chromatography
- C07K1/22—Affinity chromatography or related techniques based upon selective absorption processes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
【解決手段】ウイルスを含むことが既知かまたは含む疑いがあるタンパク質成分を含む試料において、前記ウイルスが不活化されるUV光の標的光量を特定すること;前記試料に保護剤を添加して安定化混合物を形成すること;前記安定化混合物を選択された出力レベルおよび選択された波長で、選択された時間動作する光源により供給されるUV光に曝すこと;前記安定化混合物のUV−C曝露レベルを評価すること;ならびに評価によりUV光の前記標的光量が前記安定化混合物に照射されていないことが示された場合、前記波長、前記UV光源出力および前記UV光曝露時間のうちの1または複数を調節することを含む方法。
【選択図】図14
Description
本明細書では、「a」「an」とは特に断らない限り単数または複数を意味する。
ウイルス不活化は、治療用途のタンパク質溶液の調製において重要なステップである。事実、様々な監督機関がウイルス不活化基準を構築し、様々な業者がこの問題に取り組んでいる。ウイルス不活化技術は、フィルター技術、HTSTおよびUV−C技術を含む多くの方面で開発されている。これらの技術は各々強みを有すると同時に欠点を有する。UV−Cの場合、有効かつ効率的なウイルス不活化手法であるが、タンパク質をUV−C光に長時間曝露するとタンパク質分解および/または酸化につながり得ることが観察されている。かくして、UV−C技術は有効なウイルス不活化手法であるが、タンパク質を含む試料を高光量のUV−C光に曝露すると、タンパク質自体に有害作用が生じ得る。したがって、本開示の1つの態様では、タンパク質成分を含む試料中のウイルスを不活化するのに必要な高光量のUV−C光が使用され得る一方で同時にタンパク質自体への可能な損傷を減少または排除する方法が提供される。したがって、タンパク質成分を含む試料中のウイルスを不活化する方法が提供される。1つの実施形態では方法は以下のように実行され得る。
光量〜(P/Q)exp(−al)=(P0/Q0)exp(−a0l)
を使用して調節され得、ここでa=溶液の吸光度であり、lは環(annulas)の光路長である。式中、Pはランプの出力であり、Qは混合物の体積流量であり、吸光度=aであり;P0およびQ0は参照混合物の出力と流量であり、吸光度=a0である。例えば、Ye, Z (2007) “UV Disinfection Between Concentric Cylinders”(ジョージア工科大学博士論文)を参照されたい。
本明細書で記載し図1〜図8にも示すように、タンパク質成分を含む試料は、UV光、特にUV−C帯の光に曝露されると分解または改変し得る。しかし、UV−C帯は、例えばウイルス不活化などの様々な目的でスペクトルのなかでもっとも有効な領域であり、特に製造用途において有用である。観察されるタンパク質の分解および/または改変は、試料の溶媒成分にUV光または電離放射線を放射することで生じる反応種の存在により生じ得る。反応種の例は、酸素イオン(例えばO2−)、ヒドロキシルイオン(例えばOH−)および過酸化物(例えばH2O2)を含む。反応種の存在は、タンパク質に有害な作用を及ぼし得る。例えば、Cabiscol, et al., (2010) Int. Microbiol, 3:315およびBandyopadhyay et al. (1999) Curr. Sci. 77:658-666を参照されたい。
光量〜(P/Q)exp(−al)=(P0/Q0)exp(−a0l)
を使用して調節され得、ここでa=溶液の吸光度であり、lは環の光路長である。式中、Pはランプの出力であり、Qは混合物の体積流量であり、吸光度=aであり;P0およびQ0は参照混合物の出力と流量であり、吸光度=a0である。例えば、Ye, Z (2007) “UV Disinfection Between Concentric Cylinders” (ジョージア工科大学博士論文)を参照されたい。
本開示の別の態様では、UV光に供されたタンパク質中のメチオニン残基、トリプトファン残基、またはメチオニン残基とトリプトファン残基両方の酸化を減ずる方法が提供される。本明細書および関連文献で記載されるように、メチオニン残基とトリプトファン残基は酸化しやすいのでタンパク質不活化につながり得る。例えば、Schoneich, (2005) Biochim Biophys Acta 1703:111-19; Stadtman et al., (2003) Antioxid. Redox. Signal 5:577-82; Stadtman, (1993) Ann. Rev. Biochem. 62:797-821;およびDean et al., (1997) Biochem. J. 324:1-18を参照されたい。本開示全体に記載するように、UV光は様々な用途、例えばもっとも一般的な産業用途であるウイルス不活化において有効であるが、望ましくないタンパク質の改変および分解につながり得る。いくつかの場合、タンパク質の改変および/または分解は、UV曝露中に生成する反応種の存在が直接または間接的原因になり得る。分子レベルでは、これらの反応種はタンパク質の側鎖の残基、特にメチオニン残基とトリプトファン残基の側鎖を攻撃し得る。タンパク質ベース治療との関連では、これらの改変は最終的に高分子量の種(例えば凝集体およびマルチマー)および低分子量の種(例えば断片化タンパク質)の形成をもたらし得る。治療薬中にこれらの種が存在することは、治療を受けている患者にとっての重篤な問題へと変換し得る。
光量〜(P/Q)exp(−al)=(P0/Q0)exp(−a0l)
を使用して調節され得、ここでa=溶液の吸光度であり、lは環の光路長である。式中、Pはランプの出力であり、Qは混合物の体積流量であり、吸光度=aであり;P0およびQ0は参照混合物の出力と流量であり、吸光度=a0である。Ye、Z (2007) “UV Disinfection Between Concentric Cylinders”(ジョージア工科大学博士論文)。
UV−C光量曝露時のタンパク質改変に関するプロセス化学の評価
Fc部分を含む3つの異なる組換えタンパク質すなわちIgG2モノクローナル抗体のMab X、Mab YおよびMab Zを、哺乳動物発現系すなわちCHO細胞において発現させた。タンパク質を細胞および他の固体破片から遠心分離し、プロテインAクロマトグラフィー樹脂を用いて精製した。タンパク質は、塩が50〜300nMの範囲の酢酸ナトリウム、pHが4.3〜7.4の範囲、タンパク質濃度が2〜30g/Lを含む異なる条件の溶液に交換した。
UV−C光量曝露時のタンパク質改変およびウイルス不活化に関する溶液添加剤の評価
pH、伝導率またはタンパク質濃度ではなくUV−C曝露がモノクローナル抗体タンパク質対象の改変および/または分解の原因であることを確定し、UV−C曝露に関連する望ましくない効果からタンパク質を保護するであろう化合物を同定する集中的研究を行った。
UV−C処理のインプロセス実行の評価
Fc部分を含む2つの異なる組換えタンパク質すなわちIgG2モノクローナル抗体のMab WおよびMab Xを、哺乳動物発現系すなわちCHO細胞において発現させた。タンパク質を細胞および他の固体破片から遠心分離および深層濾過により分離した。精製、調整および評価の後、一連の前処理試料を形成した。2つの試料レッグを作製した:一方は遠心分離および深層濾過材料由来であり、他方はそのプールをタンパク質クロマトグラフィー樹脂でさらに精製し中和したもの由来。これらのプールをそれぞれ蛍光被覆した細粒子トレーサーと合わせ、さらに保護的添加剤すなわちチロシンありとなしのプールに分けた。個々の安定化混合物の吸光度を254nm波長の分光測定で評価した。次に、これらの安定化タンパク質混合物の各々を様々な光量のUV−C光に曝露して処理した。処理は、混合物を、33ワットHqランプを内蔵するAtlantic UV Infinity(登録商標)薄膜リアクタに通すことにより達成された。混合物は、1.5mのランプを囲む石英スリーブとステンレス鋼シェルの間に形成された0.9mmの環状スペースを通って流れた。
光量〜(P/Q)exp(−al)=(P0/Q0)exp(−a0l)
に従い調節し、a=溶液の吸光度であり、lは環の光路長である。式中、Pはランプの出力であり、Qは混合物の体積流量であり、吸光度=aであり;P0およびQ0は参照混合物の出力と流量であり、吸光度=a0である。
UV−C処理のインプロセスとインライン実行の評価
Fc部分を含む3つの異なる組換えタンパク質すなわちモノクローナル抗体を、哺乳動物発現系すなわちCHO細胞において発現させる。タンパク質は、細胞および他の固体破片から遠心分離し、プロテインAクロマトグラフィー樹脂を用いて精製され得る。流れているプロテインA溶出物中の精製されたタンパク質はサージ槽に通され、ここで保護剤により調整されて安定化混合物を形成し、その後254nm波長でインライン吸収分光法により吸光度を評価される。
光量〜(P/Q)exp(−al)=(P0/Q0)exp(−a0l)
(ここでa=溶液の吸光度であり、lは環の光路長である)に従い維持するように、サージ槽から出てくる安定化混合物の変化する吸光度を明らかにするように調整される。式中、Pはランプの出力であり、Qは混合物の体積流量であり、吸光度=aであり;P0およびQ0は参照混合物の出力と流量であり、吸光度=a0である。
Claims (46)
- タンパク質成分を含む試料中のウイルスを不活化する方法であって、
(a)タンパク質成分を含む試料、ここで前記試料はウイルスを含むことが既知かまたは含む疑いがある試料、を提供すること;
(b)前記ウイルスが不活化されるUV光の標的光量を特定すること;
(c)前記試料に保護剤を添加して安定化混合物を形成すること;
(d)前記安定化混合物を選択された出力レベルおよび選択された波長で、選択された時間動作する光源により供給されるUV光に曝すこと;
(e)前記安定化混合物のUV−C曝露レベルを評価すること;ならびに
(f)評価によりUV光の前記標的光量が前記安定化混合物に照射されていないことが示された場合、前記波長、前記UV光源出力および前記UV光曝露時間のうちの1または複数を調節すること
を含む方法。 - 前記試料がクロマトグラフィーカラムプールを含む、請求項1に記載の方法。
- 前記プールが、前記タンパク質成分を含むプロテインAカラム溶出物プール、前記タンパク質成分を含むプロテインGカラム溶出物プール、前記タンパク質成分を含むHICカラムプール、前記タンパク質成分を含むSECカラムプール、前記タンパク質成分を含むIECカラムプール、および前記タンパク質成分を含むヒドロキシアパタイトカラムプール
のうちの1または複数を含む、請求項5に記載の方法。 - 前記試料がクロマトグラフィーカラム溶出物流を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記溶出物流が、前記タンパク質成分を含むプロテインAカラム溶出物流、前記タンパク質成分を含むプロテインGカラム溶出物流、前記タンパク質成分を含むHICカラム溶出物流、前記タンパク質成分を含むSECカラム溶出物流、前記タンパク質成分を含むIECカラム溶出物流および前記タンパク質成分を含むヒドロキシアパタイトカラム溶出物流
のうちの1または複数を含む、請求項4に記載の方法。 - 前記タンパク質成分が、(i)モノクローナル抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、組換え抗体、一本鎖抗体、ジアボディ、トリアボディ、テトラボディ、Fab断片、F(ab’)2断片、IgD抗体、IgE抗体、IgM抗体、IgG1抗体、IgG2抗体、IgG3抗体またはIgG4抗体およびそれらの断片のうちの1または複数を含む抗原結合タンパク質、(ii)Fcドメイン、(iii)ペプチド、(iv)Fc融合タンパク質、ならびに(v)治療用タンパク質
のうちの1または複数を含む、請求項1に記載の方法。 - 前記ウイルスが、dsDNAウイルス、ssDNAウイルス、dsRNAウイルスおよびssRNAウイルスのうちの1または複数を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記ウイルスが、アデノウイルス科、アスファウイルス科、ヘルペスウイルス科、イリドウイルス科、パピローマウイルス科、ポリオーマウイルス科、ポックスウイルス科、サーコウイルス科、ヘパドナウイルス科、パルボウイルス科、ビルナウイルス科、レオウイルス科、アレナウイルス科、ボルナウイルス科(vornaviridae)、ブニヤウイルス科、デルタウイルス科、フィロウイルス科、オルトミクソウイルス科、パラミクソウイルス科、ラブドウイルス科、アルテリウイルス科、アストロウイルス科、カリシウイルス科、コロナウイルス科(cornonavirdae)、フラビウイルス科、HEV様ウイルス、ノダウイルス科、ピコルナウイルス科、トガウイルス科およびレトロウイルス科(tertroviridae)のウイルス科
のうちの1または複数のウイルスを含む、請求項7に記載の方法。 - 前記ウイルスが、パルボウイルスMVM、レトロウイルスMuLVまたはブニヤウイルスCVVである、請求項8に記載の方法。
- 前記保護剤が、タンパク質200部当たり保護剤1部超の濃度比で前記試料に添加される、請求項1に記載の方法。
- 前記保護剤が、チロシン、トリプトファン、メチオニン、ピリドキシンおよびリボフラビンのうちの1または複数を含む、請求項1に記載の方法。
- 前記保護剤が、(i)チロシン、(ii)トリプトファン、ならびに(iii)チロシンおよびトリプトファン
のうちの1つを含む、請求項11に記載の方法。 - 前記UV光が、約200nm〜約280nmの範囲の波長を有する、請求項1に記載の方法。
- 前記UV光が、約254nmの波長を有する、請求項13に記載の方法。
- 前記標的光量が、約1mJ/cm2、約10mJ/cm2、約25mJ/cm2、約50mJ/cm2、約75mJ/cm2、約100mJ/cm2、約125mJ/cm2、約200mJ/cm2、約250mJ/cm2、約300mJ/cm2、約350mJ/cm2、約400mJ/cm2、約450mJ/cm2、約500mJ/cm2、約600mJ/cm2、約700mJ/cm2、約800mJ/cm2、約900mJ/cm2、約1000mJ/cm2および約1000mJ/cm2超
のうちの1または複数である、請求項1に記載の方法。 - 前記方法が、約0.5以上、約1.0、約1.5、約2.0、約2.5、約3.0、約3.5、約4.0、約4.5、約5.0、約5.5、約6.0、約6.5、または約6.5超のウイルス対数減少値(LRV)を提供する、請求項1に記載の方法。
- 前記方法が自動化されている、請求項1に記載の方法。
- 前記方法がタンパク質精製操作の1ステップとして実行される、請求項1に記載の方法。
- UV曝露中に生成する反応種の存在から生じるタンパク質の分解または改変を減ずる方法であって、
(a)反応種の存在下で分解または改変されることが既知かまたはその疑いがあるタンパク質成分を含む試料を提供すること;
(b)UV光の標的光量を特定すること;
(c)前記試料に保護剤を添加して安定化混合物を形成すること;
(d)前記安定化混合物を選択された出力レベルおよび選択された波長で、選択された時間動作する光源により供給されるUV光に曝すこと;
(e)前記安定化混合物のUV−C曝露レベルを評価すること;ならびに
(f)評価によりUV光の前記標的光量が前記安定化混合物に照射されていないことが示された場合、前記波長、前記UV光源出力および前記UV光曝露時間のうちの1または複数を調節すること
を含む方法。 - 前記試料がクロマトグラフィーカラムプールを含む、請求項19に記載の方法。
- 前記プールが、前記タンパク質成分を含むプロテインAカラム溶出プール、前記タンパク質成分を含むプロテインGカラム溶出プール、前記タンパク質成分を含むHICカラムプール、前記タンパク質成分を含むSECカラムプール、前記タンパク質成分を含むIECカラムプールおよび前記タンパク質成分を含むヒドロキシアパタイトカラムプール
のうちの1または複数を含む、請求項20に記載の方法。 - 前記試料がクロマトグラフィーカラム溶出物流を含む、請求項19に記載の方法。
- 前記溶出物流が、前記タンパク質成分を含むプロテインAカラム溶出物流、前記タンパク質成分を含むプロテインGカラム溶出物流、前記タンパク質成分を含むHICカラム溶出物流、前記タンパク質成分を含むSECカラム溶出物流、前記タンパク質成分を含むIECカラム溶出物流および前記タンパク質成分を含むヒドロキシアパタイトカラム溶出物流
のうちの1または複数を含む、請求項22に記載の方法。 - 前記タンパク質成分が、(i)モノクローナル抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、組換え抗体、一本鎖抗体、ジアボディ、トリアボディ、テトラボディ、Fab断片、F(ab’)2断片、IgD抗体、IgE抗体、IgM抗体、IgG1抗体、IgG2抗体、IgG3抗体またはIgG4抗体およびそれらの断片のうちの1または複数を含む抗原結合タンパク質、(ii)Fcドメイン、(iii)ペプチド、(iv)Fc融合タンパク質、ならびに(v)治療用タンパク質
のうちの1または複数を含む、請求項19に記載の方法。 - 前記保護剤が、タンパク質200部当たり保護剤1部超の濃度比で前記試料に添加される、請求項19に記載の方法。
- 前記保護剤が、チロシン、トリプトファン、メチオニン、ピリドキシンおよびリボフラビンのうちの1または複数を含む、請求項19に記載の方法。
- 前記保護剤が、(i)チロシン、(ii)トリプトファン、または(iii)チロシンおよびトリプトファン
のうちの1つを含む、請求項26に記載の方法。 - 前記UV光が、約200nm〜約280nmの範囲の波長を有する、請求項19に記載の方法。
- 前記UV光が、約254nmの波長を有する、請求項28に記載の方法。
- 前記標的光量が、約1mJ/cm2、約10mJ/cm2、約25mJ/cm2、約50mJ/cm2、約75mJ/cm2、約100mJ/cm2、約125mJ/cm2、約200mJ/cm2、約250mJ/cm2、約300mJ/cm2、約350mJ/cm2、約400mJ/cm2、約450mJ/cm2、約500mJ/cm2、約600mJ/cm2、約700mJ/cm2、約800mJ/cm2、約900mJ/cm2、約1000mJ/cm2および約1000mJ/cm2超
のうちの1または複数である、請求項19に記載の方法。 - 前記方法が自動化されている、請求項19に記載の方法。
- 前記方法がタンパク質精製操作の1ステップとして実行される、請求項19に記載の方法。
- UV光に供されたタンパク質中のメチオニン残基、トリプトファン残基、またはメチオニン残基およびトリプトファン残基
の両方の酸化を減ずる方法であって、
(a)メチオニン残基、トリプトファン残基、またはメチオニン残基およびトリプトファン残基の両方を含むタンパク質成分を含む試料を提供すること;
(b)UV光の標的光量を特定すること;
(c)前記試料に保護剤を添加して安定化混合物を形成すること;
(d)前記安定化混合物を選択された出力レベルおよび選択された波長で、選択された時間動作する光源により供給されるUV光に曝すこと;
(e)前記安定化混合物のUV−C曝露レベルを評価すること;ならびに
(f)評価によりUV光の前記標的光量が前記安定化混合物に照射されていないことが示された場合、前記波長、前記UV光源出力および前記UV光曝露時間のうちの1または複数を調節すること
を含む方法。 - 前記試料がクロマトグラフィーカラムプールを含む、請求項33に記載の方法。
- 前記プールが、前記タンパク質成分を含むプロテインAカラム溶出プール、前記タンパク質成分を含むプロテインGカラム溶出プール、前記タンパク質成分を含むHICカラムプール、前記タンパク質成分を含むSECカラムプール、前記タンパク質成分を含むIECカラムプールおよび前記タンパク質成分を含むヒドロキシアパタイトカラムプール
のうちの1または複数を含む、請求項33に記載の方法。 - 前記試料がクロマトグラフィーカラム溶出物流を含む、請求項33に記載の方法。
- 前記溶出物流が、前記タンパク質成分を含むプロテインAカラム溶出物流、前記タンパク質成分を含むプロテインGカラム溶出物流、前記タンパク質成分を含むHICカラム溶出物流、前記タンパク質成分を含むSECカラム溶出物流、前記タンパク質成分を含むIECカラム溶出物流および前記タンパク質成分を含むヒドロキシアパタイトカラム溶出物流
のうちの1または複数を含む、請求項36に記載の方法。 - 前記タンパク質成分が、(i)モノクローナル抗体、ヒト抗体、ヒト化抗体、キメラ抗体、組換え抗体、一本鎖抗体、ジアボディ、トリアボディ、テトラボディ、Fab断片、F(ab’)2断片、IgD抗体、IgE抗体、IgM抗体、IgG1抗体、IgG2抗体、IgG3抗体またはIgG4抗体およびそれらの断片のうちの1または複数を含む抗原結合タンパク質、(ii)Fcドメイン、(iii)ペプチド、(iv)Fc融合タンパク質、ならびに(v)治療用タンパク質
のうちの1または複数を含む、請求項33に記載の方法。 - 前記保護剤が、タンパク質200部当たり保護剤1部超の濃度比で前記試料に添加される、請求項33に記載の方法。
- 前記保護剤が、チロシン、トリプトファン、メチオニン、ピリドキシンおよびリボフラビンのうちの1または複数を含む、請求項33に記載の方法。
- 前記保護剤が、(i)チロシン、(ii)トリプトファン、ならびに(iii)チロシンおよびトリプトファン
のうちの1つを含む、請求項33に記載の方法。 - 前記UV光が、約200nm〜約280nmの範囲の波長を有する、請求項33に記載の方法。
- 前記UV光が、約254nmの波長を有する、請求項42に記載の方法。
- 前記標的光量が、約1mJ/cm2、約10mJ/cm2、約25mJ/cm2、約50mJ/cm2、約75mJ/cm2、約100mJ/cm2、約125mJ/cm2、約200mJ/cm2、約250mJ/cm2、約300mJ/cm2、約350mJ/cm2、約400mJ/cm2、約450mJ/cm2、約500mJ/cm2、約600mJ/cm2、約700mJ/cm2、約800mJ/cm2、約900mJ/cm2、約1000mJ/cm2および約1000mJ/cm2超
のうちの1または複数である、請求項33に記載の方法。 - 前記方法が自動化されている、請求項33に記載の方法。
- 前記方法がタンパク質精製操作の1ステップとして実行される、請求項33に記載の方法。
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201161551822P | 2011-10-26 | 2011-10-26 | |
US61/551,822 | 2011-10-26 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014539012A Division JP6526414B2 (ja) | 2011-10-26 | 2012-10-25 | Uv光曝露から生じるタンパク質の改変と分解を減ずるまたは排除する方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2017061462A true JP2017061462A (ja) | 2017-03-30 |
JP6539246B2 JP6539246B2 (ja) | 2019-07-03 |
Family
ID=47138200
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014539012A Active JP6526414B2 (ja) | 2011-10-26 | 2012-10-25 | Uv光曝露から生じるタンパク質の改変と分解を減ずるまたは排除する方法 |
JP2016197842A Active JP6539246B2 (ja) | 2011-10-26 | 2016-10-06 | Uv光曝露から生じるタンパク質の改変と分解を減ずるまたは排除する方法 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2014539012A Active JP6526414B2 (ja) | 2011-10-26 | 2012-10-25 | Uv光曝露から生じるタンパク質の改変と分解を減ずるまたは排除する方法 |
Country Status (16)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10634589B2 (ja) |
EP (1) | EP2771038B1 (ja) |
JP (2) | JP6526414B2 (ja) |
KR (1) | KR102091294B1 (ja) |
CN (1) | CN104136047B (ja) |
AU (1) | AU2012328753A1 (ja) |
BR (1) | BR112014010027A2 (ja) |
CA (1) | CA2853371A1 (ja) |
EA (2) | EA034347B1 (ja) |
ES (1) | ES2693508T3 (ja) |
HK (1) | HK1203423A1 (ja) |
IL (1) | IL232019A0 (ja) |
MX (1) | MX361039B (ja) |
SG (1) | SG11201401739YA (ja) |
WO (1) | WO2013063298A1 (ja) |
ZA (1) | ZA201402923B (ja) |
Families Citing this family (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US9603956B2 (en) * | 2013-12-12 | 2017-03-28 | Paul Newham | Dynamic enhanced and diffuse broad spectrum UVC or alternative controlled ionizing radiation source emitters for mobile and fixed placement disinfection of clinical surfaces |
GB201403775D0 (en) | 2014-03-04 | 2014-04-16 | Kymab Ltd | Antibodies, uses & methods |
EA039148B1 (ru) | 2014-06-04 | 2021-12-10 | Эмджен Инк. | Способ сбора рекомбинантного белка |
PL3227454T3 (pl) | 2014-12-01 | 2020-07-27 | Amgen Inc. | Sposób manipulowania poziomem zawartości glikanów w glikoproteinie |
US11779604B2 (en) | 2016-11-03 | 2023-10-10 | Kymab Limited | Antibodies, combinations comprising antibodies, biomarkers, uses and methods |
CN107496950B (zh) * | 2017-08-18 | 2021-02-02 | 广州市众为生物技术有限公司 | 一种紫外线照射灭活蛋白溶液中病毒的方法 |
WO2022024589A1 (ja) | 2020-07-27 | 2022-02-03 | 国立研究開発法人理化学研究所 | 感染防止装置及び感染防止方法 |
WO2022026451A1 (en) | 2020-07-30 | 2022-02-03 | Amgen Inc. | Cell culture media and methods of making and using the same |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0758031A (ja) * | 1993-08-18 | 1995-03-03 | Nissin Electric Co Ltd | イオン蒸着薄膜形成装置及び該装置を用いた成膜方法 |
JP2003511148A (ja) * | 1999-10-08 | 2003-03-25 | ブライトスマイル, インコーポレイテッド | 歯を同時照射するための装置 |
JP2004520448A (ja) * | 2001-05-30 | 2004-07-08 | ガンブロ、 インコーポレイテッド | 酸化防止剤を使用するウイルスの不活性化法 |
JP2008510538A (ja) * | 2004-08-24 | 2008-04-10 | バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッド | 生物学的液体、フロー型反応器において微生物を不活性化するための方法およびバッチ式反応器中の微生物を効果的に不活性化するために総線量を制御する方法 |
WO2011004285A1 (en) * | 2009-07-09 | 2011-01-13 | Koninklijke Philips Electronics N.V. | Skin radiation apparatus and method |
Family Cites Families (36)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5981163A (en) * | 1990-05-15 | 1999-11-09 | New York Blood Center, Inc. | Process for the sterilization of biological compositions using irradiation and quenchers of type I and type II photodynamic reactions |
GB9014932D0 (en) | 1990-07-05 | 1990-08-22 | Celltech Ltd | Recombinant dna product and method |
WO1994004679A1 (en) | 1991-06-14 | 1994-03-03 | Genentech, Inc. | Method for making humanized antibodies |
JPH05244982A (ja) | 1991-12-06 | 1993-09-24 | Sumitomo Chem Co Ltd | 擬人化b−b10 |
KR100258377B1 (ko) * | 1993-05-28 | 2000-06-01 | 존 더블유. 아담슨 엠. 디. | 생물학적 조성물의 살균 방법 및 이에 의해 생성된 생성물 |
US5925885A (en) * | 1996-05-22 | 1999-07-20 | Purepulse Technologies, Inc. | Parametric control in pulsed light sterilization of packages and their contents |
GB9722131D0 (en) | 1997-10-20 | 1997-12-17 | Medical Res Council | Method |
JPH11286453A (ja) * | 1998-03-31 | 1999-10-19 | Yoshitomi Pharmaceut Ind Ltd | 紫外線照射によるタンパク質含有組成物のウイルス不活化処理方法 |
GB9821342D0 (en) | 1998-10-02 | 1998-11-25 | Common Services Agency | Device for treatment of biological fluids |
US6660843B1 (en) | 1998-10-23 | 2003-12-09 | Amgen Inc. | Modified peptides as therapeutic agents |
GB9928787D0 (en) | 1999-12-03 | 2000-02-02 | Medical Res Council | Direct screening method |
KR20030011279A (ko) | 2000-03-23 | 2003-02-07 | 클리어런트, 인코포레이티드 | 생물학적 성분의 살균방법 |
GB0025144D0 (en) | 2000-10-13 | 2000-11-29 | Medical Res Council | Concatenated nucleic acid sequences |
US6682695B2 (en) * | 2001-03-23 | 2004-01-27 | Clearant, Inc. | Methods for sterilizing biological materials by multiple rates |
US20030064001A1 (en) * | 2001-05-17 | 2003-04-03 | Fries William M. | System for the decontamination of fluid products using light |
WO2002092138A1 (en) | 2001-05-17 | 2002-11-21 | Purepulse Technologies, Inc. | Methods and apparatus relating to treatment systems using light for the treatment of fluid products |
US6696060B2 (en) | 2001-06-14 | 2004-02-24 | Clearant, Inc. | Methods for sterilizing preparations of monoclonal immunoglobulins |
GB0117571D0 (en) * | 2001-07-19 | 2001-09-12 | Common Services Agency | UV irradiation control |
US20030059338A1 (en) | 2001-09-24 | 2003-03-27 | Mann David M. | Methods for sterilizing biological materials using flavonoid/flavonol stabilizers |
US20030064000A1 (en) * | 2001-09-24 | 2003-04-03 | Wilson Burgess | Methods of sterilizing biological mixtures using stabilizer mixtures |
US7138370B2 (en) | 2001-10-11 | 2006-11-21 | Amgen Inc. | Specific binding agents of human angiopoietin-2 |
JP4319979B2 (ja) * | 2002-04-26 | 2009-08-26 | ジェネンテック・インコーポレーテッド | タンパク質の非アフィニティ精製 |
EP1415669A1 (en) * | 2002-09-19 | 2004-05-06 | Aventis Behring GmbH | Process for sterilization of protein containing biological compositions |
KR20130036378A (ko) | 2002-12-20 | 2013-04-11 | 암겐 인코포레이티드 | 미오스타틴을 저해하는 결합제 |
US20040202995A1 (en) | 2003-04-09 | 2004-10-14 | Domantis | Nucleic acids, proteins, and screening methods |
US20050264236A1 (en) * | 2004-05-25 | 2005-12-01 | Purepulse Technologies, Inc | Apparatus and method for use in triggering a flash lamp |
CA2614329C (en) * | 2005-07-06 | 2013-01-29 | Navigant Biotechnologies, Llc | Methods for reducing pathogens in biological samples |
US7998717B2 (en) * | 2005-12-02 | 2011-08-16 | Pacific Biosciences Of California, Inc. | Mitigation of photodamage in analytical reactions |
AU2006329963B2 (en) * | 2005-12-06 | 2011-06-09 | Amgen Inc. | Polishing steps used in multi-step protein purification processes |
CN101668540A (zh) * | 2007-03-22 | 2010-03-10 | 英克隆有限责任公司 | 稳定的抗体制剂 |
US9320816B2 (en) * | 2007-06-15 | 2016-04-26 | Amgen Inc. | Methods of treating cell culture media for use in a bioreactor |
US8547536B2 (en) * | 2007-12-10 | 2013-10-01 | Novartis Ag | Analysis of mixtures including proteins |
US7585679B1 (en) * | 2008-02-22 | 2009-09-08 | Dionex Corporation | Ion chromatography system with flow-delay eluent recycle |
EP2257808B1 (en) * | 2008-02-29 | 2015-12-16 | Universiteit Gent | Method to determine the antigenicity of inactivated prrsv virus |
KR20140130512A (ko) * | 2008-03-06 | 2014-11-10 | 할로자임, 아이엔씨 | 가용성 히알루로니다아제의 대규모 제조 |
EP2684570A1 (en) * | 2008-09-10 | 2014-01-15 | F. Hoffmann-La Roche AG | Compositions and methods for the prevention of oxidative degradation of proteins |
-
2012
- 2012-10-25 EP EP12781248.5A patent/EP2771038B1/en active Active
- 2012-10-25 JP JP2014539012A patent/JP6526414B2/ja active Active
- 2012-10-25 ES ES12781248.5T patent/ES2693508T3/es active Active
- 2012-10-25 AU AU2012328753A patent/AU2012328753A1/en not_active Abandoned
- 2012-10-25 EA EA201490867A patent/EA034347B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2012-10-25 US US14/353,704 patent/US10634589B2/en active Active
- 2012-10-25 WO PCT/US2012/061965 patent/WO2013063298A1/en active Application Filing
- 2012-10-25 BR BR112014010027A patent/BR112014010027A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2012-10-25 CN CN201280064731.1A patent/CN104136047B/zh active Active
- 2012-10-25 MX MX2014004880A patent/MX361039B/es active IP Right Grant
- 2012-10-25 SG SG11201401739YA patent/SG11201401739YA/en unknown
- 2012-10-25 EA EA201992617A patent/EA201992617A1/ru unknown
- 2012-10-25 KR KR1020147012934A patent/KR102091294B1/ko active IP Right Grant
- 2012-10-25 CA CA2853371A patent/CA2853371A1/en not_active Abandoned
-
2014
- 2014-04-09 IL IL232019A patent/IL232019A0/en unknown
- 2014-04-22 ZA ZA2014/02923A patent/ZA201402923B/en unknown
-
2015
- 2015-05-05 HK HK15104253.7A patent/HK1203423A1/xx unknown
-
2016
- 2016-10-06 JP JP2016197842A patent/JP6539246B2/ja active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPH0758031A (ja) * | 1993-08-18 | 1995-03-03 | Nissin Electric Co Ltd | イオン蒸着薄膜形成装置及び該装置を用いた成膜方法 |
JP2003511148A (ja) * | 1999-10-08 | 2003-03-25 | ブライトスマイル, インコーポレイテッド | 歯を同時照射するための装置 |
JP2004520448A (ja) * | 2001-05-30 | 2004-07-08 | ガンブロ、 インコーポレイテッド | 酸化防止剤を使用するウイルスの不活性化法 |
JP2008510538A (ja) * | 2004-08-24 | 2008-04-10 | バクスター・インターナショナル・インコーポレイテッド | 生物学的液体、フロー型反応器において微生物を不活性化するための方法およびバッチ式反応器中の微生物を効果的に不活性化するために総線量を制御する方法 |
WO2011004285A1 (en) * | 2009-07-09 | 2011-01-13 | Koninklijke Philips Electronics N.V. | Skin radiation apparatus and method |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
HK1203423A1 (en) | 2015-10-30 |
KR20140079829A (ko) | 2014-06-27 |
US20140329227A1 (en) | 2014-11-06 |
EA201490867A1 (ru) | 2014-12-30 |
BR112014010027A2 (pt) | 2017-04-25 |
EA034347B1 (ru) | 2020-01-30 |
US10634589B2 (en) | 2020-04-28 |
MX361039B (es) | 2018-11-26 |
EA201992617A1 (ru) | 2020-03-10 |
CA2853371A1 (en) | 2013-05-02 |
ES2693508T3 (es) | 2018-12-12 |
ZA201402923B (en) | 2015-04-29 |
SG11201401739YA (en) | 2014-05-29 |
EP2771038A1 (en) | 2014-09-03 |
HK1203423B (ja) | 2018-08-17 |
AU2012328753A1 (en) | 2014-04-24 |
EP2771038B1 (en) | 2018-10-10 |
WO2013063298A1 (en) | 2013-05-02 |
CN104136047A (zh) | 2014-11-05 |
JP6526414B2 (ja) | 2019-06-05 |
JP2014533942A (ja) | 2014-12-18 |
JP6539246B2 (ja) | 2019-07-03 |
MX2014004880A (es) | 2014-09-15 |
KR102091294B1 (ko) | 2020-04-16 |
CN104136047B (zh) | 2018-02-06 |
IL232019A0 (en) | 2014-05-28 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6539246B2 (ja) | Uv光曝露から生じるタンパク質の改変と分解を減ずるまたは排除する方法 | |
CN107188926B (zh) | 在蛋白纯化过程中灭活病毒的方法 | |
JP7094322B2 (ja) | カプリル酸を用いてタンパク質を精製する方法 | |
JP7187436B2 (ja) | アフィニティークロマトグラフィー洗浄バッファー | |
JP2022520793A (ja) | 自動バイオ製造システム、施設、及びプロセス | |
NO20061603L (no) | Antibodies to M-CSF | |
AU2019215125B2 (en) | System and method for characterizing protein dimerization | |
JP2018085993A (ja) | 活性炭を使用して標的タンパク質を含む試料からのウイルス除去を決定する方法 | |
ES2808725T3 (es) | Método para purificar anticuerpos | |
JP2022542317A (ja) | ウイルス不活性化のための方法 | |
EA044919B1 (ru) | Способы уменьшения или устранения модификации и разложения белка, обусловленных воздействием уф-излучения | |
CN115484983B (zh) | 一种重组抗pd-1单克隆抗体的稳定制剂 | |
JP2011041475A (ja) | 抗体製造方法 | |
WO2020084503A1 (en) | A composition comprising antibody with reduced level of basic variants thereof | |
CN115803052A (zh) | 通过低ph保持的病毒清除 | |
KR101642551B1 (ko) | 칼슘인산염 침전을 이용한 불순물 제거 방법 | |
JP7272557B2 (ja) | 紫外線照射を用いたウイルス不活化方法 | |
WO2022203044A1 (ja) | ウイルスクリアランス試験の方法 | |
CN118613503A (zh) | 生物学活性降低的抗体变体 | |
JP2024518400A (ja) | 衛生化のための組成物および方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20170224 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20170905 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20171201 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20180814 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20181213 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20190212 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20190514 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20190607 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6539246 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |