JP2013107899A - 抗アクチビンa抗体およびその使用 - Google Patents
抗アクチビンa抗体およびその使用 Download PDFInfo
- Publication number
- JP2013107899A JP2013107899A JP2013030740A JP2013030740A JP2013107899A JP 2013107899 A JP2013107899 A JP 2013107899A JP 2013030740 A JP2013030740 A JP 2013030740A JP 2013030740 A JP2013030740 A JP 2013030740A JP 2013107899 A JP2013107899 A JP 2013107899A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- residue
- activin
- antibody
- sequence
- seq
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
- C07K16/22—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
- A61P5/06—Drugs for disorders of the endocrine system of the anterior pituitary hormones, e.g. TSH, ACTH, FSH, LH, PRL, GH
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/10—Immunoglobulins specific features characterized by their source of isolation or production
- C07K2317/14—Specific host cells or culture conditions, e.g. components, pH or temperature
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
- C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
- C07K2317/567—Framework region [FR]
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
- C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Hematology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Child & Adolescent Psychology (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
- Pain & Pain Management (AREA)
- Obesity (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
【解決手段】特定の実施形態においては、本開示は、完全ヒト、ヒト化、およびキメラ抗アクチビンA抗体であって、ヒトアクチビンA、アクチビンA結合性断片、およびそのような抗体の誘導体と、そのような断片を含むアクチビンA結合ポリペプチドとを結合する、完全ヒト、ヒト化、およびキメラ抗アクチビンA抗体を提供する。アクチビンAに対して特異的なヒト抗原結合タンパク質もまた提供され、抗原結合タンパク質は、悪液質の減弱等の、ヒト抗アクチビンA抗体の少なくとも1つの生体内生物活性を保有する。
【選択図】なし
Description
本発明は概して、アクチビンAのシステインノットドメイン、およびアクチビンAまたはその断片と結合することが可能な抗原結合剤に関する。
多くの深刻な病状は、悪液質として知られる病態を伴い、体細胞量の低下に関係する。体細胞量(BCM)は、筋肉量、内臓量、および免疫細胞量から成る。BCMは、すべての代謝活性の95パーセントを数える、人体の最も活性な体成分である。BCMの5パーセントの低下は、罹患率の変化、筋力の低下、代謝の変化、および感染リスクの増加をもたらす。40パーセントの低下は、死亡をもたらし得る。
一実施形態においては、本発明は、a.i.L1−L14の軽鎖CDR3配列から成る群から選択されるCDR3配列から、合計2つ以下のアミノ酸添加、置換、および/または欠失により異なる軽鎖CDR3配列;ii.X73QX74X75X76X77X78X79X80(配列番号132);iii.LQHNX81YX82X83T(配列番号131);およびiv.QAWDX84STX85X86(配列番号248)から成る群から選択される配列を含む、軽鎖CDR3;b.i.H1−H14の重鎖CDR3配列から成る群から選択されるCDR3配列から、合計3つ以下のアミノ酸添加、置換、および/または欠失により異なる重鎖CDR3配列;ii.X87X88X89X90X91X92X93X94FDY(配列番号187);iii.X95X96X97YX98DX99X100GWX101X102X103(配列番号188);iv.X104X105X106X107X108X109YX110X111X112X113X114X115X116X117X118(配列番号249)から成る群から選択される配列を含む、重鎖CDR3;またはc.(a)の軽鎖CDR3配列および(b)の重鎖CDR3配列、のいずれかを含む、単離した抗原結合タンパク質を提供し、X73は、メチオニン残基、グルタミン残基、またはアルギニン残基であり、X74は、アラニン残基、チロシン残基、グルタミン残基、またはセリン残基であり、X75は、ロイシン残基、チロシン残基、またはアスパラギン残基であり、X76は、グルタミン残基、セリン残基、またはトレオニン残基であり、X77は、トレオニン残基、チロシン残基、またはイソロイシン残基であり、X78は、プロリン残基またはセリン残基であり、X79は、システイン残基、トリプトファン残基、ロイシン残基、またはプロリン残基であり、X80は、セリン残基またはトレオニン残基であり、X81は、トレオニン残基またはセリン残基であり、X82は、プロリン残基またはトレオニン残基であり、X83は、フェニルアラニン残基またはトリプトファン残基であり、X84は、アルギニン残基またはセリン残基であり、X85は、バリン残基またはアラニン残基であり、X86は、バリン残基または残基なしであり、X87は、バリン残基または残基なしであり、X88は、グルタミン残基または残基なしであり、X89は、アスパラギン酸塩残基、トリプトファン残基、または残基なしであり、X90は、セリン残基、ロイシン残基、または残基なしであり、X91は、イソロイシン残基、グルタミン酸残基、またはグルタミン残基であり、X92は、アラニン残基、ロイシン残基、またはグリシン残基であり、X93は、アラニン残基またはロイシン残基であり、X94は、プロリン残基、チロシン残基、またはグリシン残基であり、X95は、アスパラギン酸塩残基または残基なしであり、X96は、グルタミン残基または残基なしであり、X97は、アスパラギン酸塩残基またはアラニン残基であり、X98は、チロシン残基またはグリシン残基であり、X99は、セリン残基またはチロシン残基であり、X100は、セリン残基またはアルギニン残基であり、X101は、フェニルアラニン残基または残基なしであり、X102は、グリシン残基またはアスパラギン酸塩残基であり、X103は、ヒスチジン残基またはプロリン残基であり、X104は、グリシン残基または残基なしであり、X105は、セリン残基、グルタミン酸残基、または残基なしであり、X106は、アルギニン残基、セリン残基、または残基なしであり、X107は、アスパラギン酸塩残基、アスパラギン残基、セリン残基、またはグルタミン残基であり、X108は、セリン残基、アルギニン残基、またはトリプトファン残基であり、X109は、グリシン残基、アスパラギン酸塩残基、アスパラギン残基、チロシン残基、またはロイシン残基であり、X110は、セリン残基、グリシン残基、アスパラギン酸塩残基、または残基なしであり、X111は、セリン残基、バリン残基、アスパラギン残基、またはチロシン残基であり、X112は、セリン残基、アスパラギン残基、チロシン残基、またはヒスチジン残基であり、X113は、トリプトファン残基、チロシン残基、またはグルタミン残基であり、X114は、ヒスチジン残基、アスパラギン酸塩残基、チロシン残基、または残基なしであり、X115は、フェニルアラニン残基、アラニン残基、またはグリシン残基であり、X116は、アスパラギン酸塩残基、フェニルアラニン残基、ロイシン残基、またはメチオニン残基であり、X117は、チロシン残基またはアスパラギン酸塩残基であり、X118は、イソロイシン残基、バリン残基、または残基なしであり、抗原結合タンパク質は、ヒトアクチビンAと特異的と結合する。
本発明はまた、以下の項目を提供する。
(項目1)
単離された抗原結合タンパク質であって、
a.
i.配列番号:13、29、45、61、77、93、109、125、141、157、173、189、および205の軽鎖CDR3配列から成る群から選択されるCDR3配列から、合計2つ以下のアミノ酸添加、置換、および/または欠失により異なる軽鎖CDR3配列、
ii.X 73 Q X 74 X 75 X 76 X 77 X 78 X 79 X 80 、
iii.L Q H N X 81 Y X 82 X 83 T、および
iv.Q A W D X 84 S T X 85 X 86 からなる群から選択される配列を含む軽鎖CDR3、または
b.
i.配列番号:16、32、48、64、80、96、112、144、160、176、208、および224のH1−H14の重鎖CDR3配列から成る群から選択されるCDR3配列から、合計3つ以下のアミノ酸添加、置換、および/または欠失により異なる重鎖CDR3配列、
ii.X 87 X 88 X 89 X 90 X 91 X 92 X 93 X 94 F D
Y、
iii.X 95 X 96 X 97 Y X 98 D X 99 X 100 G W X 101 X1 02 X 103 、
iv.X 104 X 105 X 106 X 107 X 108 X 109 Y X 110 X 111 X 112 X 113 X 114 X 115 X 116 X 117 X 118 から成る群から選択される配列を含む重鎖CDR3、
または
c.(a)の軽鎖CDR3配列および(b)の重鎖CDR3配列、
のうちのいずれかを含み、
X 73 は、メチオニン残基、グルタミン残基、またはアルギニン残基であり、
X 74 は、アラニン残基、チロシン残基、グルタミン残基、またはセリン残基であり、
X 75 は、ロイシン残基、チロシン残基、またはアスパラギン残基であり、
X 76 は、グルタミン残基、セリン残基、またはスレオニン残基であり、
X 77 は、スレオニン残基、チロシン残基、またはイソロイシン残基であり、
X 78 は、プロリン残基またはセリン残基であり、
X 79 は、システイン残基、トリプトファン残基、ロイシン残基、またはプロリン残基であり、
X 80 は、セリン残基またはスレオニン残基であり、
X 81 は、スレオニン残基またはセリン残基であり、
X 82 は、プロリン残基またはスレオニン残基であり、
X 83 は、フェニルアラニン残基またはトリプトファン残基であり、
X 84 は、アルギニン残基またはセリン残基であり、
X 85 は、バリン残基またはアラニン残基であり、
X 86 は、バリン残基または残基なしであり、
X 87 は、バリン残基または残基なしであり、
X 88 は、グルタミン残基または残基なしであり、
X 89 は、アスパラギン酸塩残基、トリプトファン残基、または残基なしであり、
X 90 は、セリン残基、ロイシン残基または残基なしであり、
X 91 は、イソロイシン残基、グルタミン酸残基、またはグルタミン残基であり、
X 92 は、アラニン残基、ロイシン残基、またはグリシン残基であり、
X 93 は、アラニン残基またはロイシン残基であり、
X 94 は、プロリン残基、チロシン残基、またはグリシン残基であり、
X 95 は、アスパラギン酸塩残基または残基なしであり、
X 96 は、グルタミン残基または残基なしであり、
X 97 は、アスパラギン酸塩残基またはアラニン残基であり、
X 98 は、チロシン残基またはグリシン残基であり、
X 99 は、セリン残基またはチロシン残基であり、
X 100 は、セリン残基またはアルギニン残基であり、
X 101 は、フェニルアラニン残基または残基なしであり、
X 102 は、グリシン残基またはアスパラギン酸塩残基であり、
X 103 は、ヒスチジン残基またはプロリン残基であり、
X 104 は、グリシン残基または残基なしであり、
X 105 は、セリン残基、グルタミン酸残基、または残基なしであり、
X 106 は、アルギニン残基、セリン残基、または残基なしであり、
X 107 は、アスパラギン酸塩残基、アスパラギン残基、セリン残基、またはグルタミン残基であり、
X 108 は、セリン残基、アルギニン残基、またはトリプトファン残基であり、
X 109 は、グリシン残基、アスパラギン酸塩残基、アスパラギン残基、チロシン残基、またはロイシン残基であり、
X 110 は、セリン残基、グリシン残基、アスパラギン酸塩残基、または残基なしであり、
X 111 は、セリン残基、バリン残基、アスパラギン残基、またはチロシン残基であり、
X 112 は、セリン残基、アスパラギン残基、チロシン残基、またはヒスチジン残基であり、
X 113 は、トリプトファン残基、チロシン残基、またはグルタミン残基であり、
X 114 は、ヒスチジン残基、アスパラギン酸塩残基、チロシン残基、または残基なしであり、
X 115 は、フェニルアラニン残基、アラニン残基、またはグリシン残基であり、
X 116 は、アスパラギン酸塩残基、フェニルアラニン残基、ロイシン残基、またはメチオニン残基であり、
X 117 は、チロシン残基、またはアスパラギン酸塩残基であり、
X 118 は、イソロイシン残基、バリン残基、または残基なしであり、
上記抗原結合タンパク質は、ヒトアクチビンAと特異的に結合することを特徴とする単離された抗原結合タンパク質。
(項目2)
a.配列番号:11、27、43、59、75、91、107、155、171、203、および219のL1−L14のCDR1配列から、合計3つ以下のアミノ酸添加、置換、および/または欠失により異なる軽鎖CDR1配列、
b.配列番号:12、28、44、60、76、156、172、204、および220のL1−L14のCDR2配列から、合計2つ以下のアミノ酸添加、置換、および/または欠失により異なる軽鎖CDR2配列、
c.配列番号:13、29、45、61、77、93、109、125、141、157、173、189、および205のL1−L14のCDR3配列から、合計2つ以下のアミノ酸添加、置換、および/または欠失により異なる軽鎖CDR3配列、
d.配列番号:14、30、46、62、78、94、110、126、158、174、190、206、および222のH1−H14のCDR1配列から、合計2つ以下のアミノ酸添加、置換、および/または欠失により異なる重鎖CDR1配列、
e.配列番号:15、31、47、63、79、95、111、127、159、175、207、および223のH1−H14のCDR2配列から、合計3つ以下のアミノ酸添加、置換、および/または欠失により異なる重鎖CDR2配列、および
f.配列番号:16、22、32、48、64、80、96、112、144、160、176、192、208、および244のH1−H14のCDR3配列から、合計2つ以下のアミノ酸添加、置換、および/または欠失により異なる重鎖CDR3配列、
から成る群から選択されるアミノ酸配列を含むことを特徴とする項目1に記載の単離された抗体結合タンパク質。
(項目3)
a.
i.(R/K)SSQS(L/I)L(H/Y)S(T/S)(G/N)(Y/N)(N/K)(−/K)YL(D/V)、
ii.RA(S/G)QGI(S/R)N(D/N)L(V/G)、
iii.RASQSISNYLNT、および
iv.SG(D/E)K(L/W)G(D/E)K(F/Y)(A/V)(F/C)から成る群から選択される軽鎖CDR1配列、
b.
i.(H/Q/L)D(T/N/S)KRPS、および
ii.
X 40 は、アラニン残基、トリプトファン残基、またはロイシン残基であり、
X 41 は、スレオニン残基、アラニン残基、またはグリシン残基であり、
X 42 は、セリン残基、メチオニン残基、またはフェニルアラニン残基であり、
X 43 は、ロイシン残基またはアルギニン残基であり、
X 44 は、グルタミン残基、グルタミン酸残基、またはアラニン残基である、X 40 X 41 SX 42 X 43 X 44 Sから成る群から選択される軽鎖CDR2配列、
c.
i. GGS(I/F)(N/S)(S/A)(−/G)(−/G)(F/Y)YWS、
ii.
X 27 は、チロシン残基またはフェニルアラニン残基であり、
X 28 は、スレオニン残基またはセリン残基であり、
X 29 は、スレオニン残基,セリン残基、またはイソロイシン残基であり、
X 30 は、グリシン残基またはセリン残基であり、
X 31 は、チロシン残基、グリシン残基、またはトリプトファン残基であり、
X 32 は、イソロイシン残基またはメチオニン残基であり、
X 33 は、ヒスチジン残基またはグリシン残基である、G X 27 X 28 F X 29 X 30 Y X 31 X 32 X 3 および
iii.G(Y/F)TF(T/S)(S/A)Y(G/W)(L/M/I)(S/H)から成る群から選択される重鎖CDR1配列と、
d.
i.(Y/E)I(S/Y/N)(Y/H)SG(S/G)T(Y/N)YNPSLK(S/R)、
ii.(V/N)I(K/W)(Y/Q)DGS(N/E/T)(K/E)Y(H/Y)(A/V)DSVKG、および
iii.
X 60 は、トリプトファン残基またはイソロイシン残基であり、
X 61 は、アスパラギン残基、イソロイシン残基、セリン残基、またはチロシン残基であり、
X 62 は、プロリン残基またはアラニン残基であり、
X 63 は、アスパラギン残基、チロシン残基、またはグリシン残基であり、
X 64 は、セリン残基、アスパラギン残基であり、またはアスパラギン酸塩残基であり、X 65 は、グリシン残基またはセリン残基であり、
X 66 は、グリシン残基、アスパラギン残基であり、またはアスパラギン酸塩残基であり、
X 67 は、アスパラギン残基またはアルギニン残基であり、
X 68 は、チロシン残基またはセリン残基であり、
X 69 は、アラニン残基またはセリン残基であり、
X 70 は、グルタミン残基またはプロリン残基であり、
X 71 は、リジン残基またはセリン残基であり、
X 72 は、フェニルアラニン残基またはロイシン残基である、X 60 I X 61 X 62 X 63 X 64 X 65 X 66 T X 67 X 68 X 69 X 70 X 71 X 72 QG
から成る群から選択される重鎖CDR2配列、
から成る群から選択される配列を含み、
括弧で囲まれたアミノ酸残基記号は、配列内の同じ位置への代替的な残基を同定することを特徴とする項目1に記載の単離された抗原結合タンパク質。
(項目4)
a.
i.配列番号:11、27、43、59、75、91、107、155、171、203、および219の軽鎖CDR1配列、
ii.配列番号:12、28、44、60、76、156、172、204、および220の軽鎖CDR2配列、および
iii.配列番号:13、29、45、61、77、93、109、125、141、157、173、189、および205の軽鎖CDR3配列、を含む軽鎖可変ドメイン、
b.
i.配列番号:14、30、46、62、78、94、110、126、158、174、190、206、および222の重鎖CDR1配列、
ii.配列番号:15、31、47、63、79、95、111、127、159、175、191、207、および223の重鎖CDR2配列、ならびに
iii.配列番号:16、32、48、64、80、96、112、144、160、176、208、および224の重鎖CDR3配列、を含む重鎖可変ドメイン、または
c.(a)の軽鎖可変ドメインおよび(b)の重鎖可変ドメイン、
のうちのいずれかを含むことを特徴とする項目1に記載の単離された抗原結合タンパク質。
(項目5)
単離された抗原結合タンパク質であって、
a.
i.配列番号:9、25、41、57、73、89、105、121、137、153、169、185、201、および217のL1−L14の軽鎖可変ドメイン配列と少なくとも80%同一であるアミノ酸の配列、
ii.配列番号:9、25、41、57、73、89、105、121、137、153 169、185、201、および217のL1−L14の軽鎖可変ドメイン配列をコードするポリヌクレオチド配列と少なくとも80%同一であるポリヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸の配列、および
iii.配列番号:1、17、33、49、65、81、97、113、129、145、161、177、193、および209のL1−L14の軽鎖可変ドメイン配列から成るポリヌクレオチドの補体と、適度に厳密な条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸の配列、から成る群から選択される軽鎖可変ドメイン配列、
b.
i.配列番号:10、26、42、58、74、90、106、122、138、154、170、186、202、および218のH1−H14の重鎖可変ドメイン配列と少なくとも80%同一であるアミノ酸の配列、
ii.配列番号:10、26、42、58、74、90、106、122、138、154、170、186、202、および218のH1−H14の重鎖可変ドメイン配列をコードするポリヌクレオチド配列と少なくとも80%同一であるポリヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸の配列、および
iii.配列番号:2、18、34、50、66、82、98、114、130、146、162、178、194、および210のH1−H14の重鎖可変ドメイン配列から成るポリヌクレオチドの補体と、適度に厳密な条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸の配列、から成る群から選択される重鎖可変ドメイン配列、
c.(a)の軽鎖可変ドメインおよび(b)の重鎖可変ドメイン、
のうちのいずれかを含み、
上記抗原結合タンパク質は、ヒトアクチビンAと結合することを特徴とする
単離された抗原結合タンパク質。
(項目6)
a.配列番号:9、25、41、57、73、89、105、121、137、153、169、185、201、および217のL1−L14から成る群から選択される軽鎖可変ドメイン配列、
b.配列番号:10、26、42、58、74、90、106、122、138、154、170、186、202、および218のH1−H14から成る群から選択される重鎖可変ドメイン配列、または
c.(a)の軽鎖可変ドメインおよび(b)の重鎖可変ドメイン、
のうちのいずれかを含むことを特徴とする項目5に記載の単離された抗原結合タンパク質。
(項目7)
アクチビンAと結合すると、
a.アクチビンAを阻害するか、
b.アクチビンAと結合するために基準抗体とクロス競合するか、
c.上記基準抗体と同じアクチビンAのエピトープと結合するか、
d.上記基準抗体と実質的に同じKdでアクチビンAと結合するか、または
e.上記基準抗体と実質的に同じオフ率でアクチビンと結合し、
上記基準抗体は、L1H1、L2H2、L3H3、L4H4、L5H5、L6H6、L7H7、L8H8、L9H9、L10H10、L11H11、L12H12、L13H13、およびL14H14から成る組み合わせの群から選択される軽鎖および重鎖可変ドメイン配列の組み合わせを含むことを特徴とする項目1または項目5に記載の単離された抗原結合タンパク質。
(項目8)
ヒトアクチビンAと結合する時に、ヒトアクチビンA受容体とのアクチビンAの結合を阻害することを特徴とする項目1または項目5に記載の単離された抗原結合タンパク質。
(項目9)
上記抗原結合タンパク質は、ヒト抗アクチビンA抗体の少なくとも1つの生体内生物活性を保有することを特徴とする項目1または項目5に記載の単離された抗原結合タンパク質。
(項目10)
生物活性は、悪液質の減弱であることを特徴とする項目9に記載の単離された抗原結合タンパク質。
(項目11)
結腸腫瘍を持ったマウスにおける悪液質を減弱させることを特徴とする項目9に記載の単離された抗原結合タンパク質。
(項目12)
結腸腫瘍を持ったマウスにおける体重減少を回復させることを特徴とする項目9に記載の単離された抗原結合タンパク質。
(項目13)
関節リウマチのコラーゲン誘発動物モデルにおける体重減少を回復させることを特徴とする項目9に記載の単離された抗原結合タンパク質。
(項目14)
関節リウマチのコラーゲン誘発動物モデルにおける筋肉量の減少を回復させる、項目9に記載の単離された抗原結合タンパク質。
(項目15)
関節リウマチのコラーゲン誘発動物モデルにおける脂肪量の減少を回復させることを特徴とする項目9に記載の単離された抗原結合タンパク質。
(項目16)
AAV−アクチビンAを形質移入された動物モデルにおける体重減少を回復させることを特徴とする項目9に記載の単離された抗原結合タンパク質。
(項目17)
アクチビンAのシステインノット領域(アミノ酸C11−S33および/またはアミノ酸C81−E111)と特異的に結合する単離された完全ヒト抗体であって、上記抗原結合タンパク質は、ヒト抗アクチビンA抗体の少なくとも1つの生体内生物活性を保有することを特徴とする単離された完全ヒト抗体。
(項目18)
生物活性は、悪液質の減弱であることを特徴とする項目17に記載の単離された抗体。
(項目19)
結腸腫瘍を持ったマウスにおける悪液質を減弱させることを特徴とする項目17に記載の単離された抗体。
(項目20)
結腸腫瘍を持ったマウスにおける体重減少を回復させることを特徴とする項目17に記載の単離された抗体。
(項目21)
関節リウマチのコラーゲン誘発動物モデルにおける体重減少を回復させることを特徴とする項目17に記載の単離された抗体。
(項目22)
関節リウマチのコラーゲン誘発動物モデルにおける筋肉量の減少を回復させることを特徴とする項目17に記載の単離された抗体。
(項目23)
関節リウマチのコラーゲン誘発動物モデルにおける脂肪量の減少を回復させることを特徴とする項目17に記載の単離された抗体。
(項目24)
AAV−アクチビンAを形質移入された動物モデルにおける体重減少を回復させることを特徴とする項目17に記載の単離された抗体。
(項目25)
アクチビンAのシステインノット領域(アミノ酸C11−S33および/またはアミノ酸C81−E111)と特異的に結合する完全ヒト抗体であって、上記抗原結合タンパク質は、生体外のアクチビンA受容体とのアクチビンの結合を阻害することを特徴とする完全ヒト抗体。
(項目26)
アクチビンAのシステインノット領域(アミノ酸C11−S33および/またはアミノ酸C81−E111)と特異的に結合する完全ヒト単離抗体であって、上記抗原結合タンパク質は、生体内のアクチビンA受容体とのアクチビンAの結合を阻害することを特徴とする完全ヒト単離抗体。
(項目27)
アクチビンAのアミノ酸K13-Y39と特異的に結合する完全ヒト単離抗体であって、
上記抗原結合タンパク質は、生体外のアクチビンA受容体とのアクチビンAの結合を阻害することを特徴とする完全ヒト単離抗体。
(項目28)
アクチビンAのアミノ酸V82-N107と特異的に結合する完全ヒト単離抗体であって
、上記抗原結合タンパク質は、生体外のアクチビンA受容体とのアクチビンAの結合を阻害することを特徴とする完全ヒト単離抗体。
(項目29)
アクチビンAのアミノ酸K13-Y39と特異的に結合する完全ヒト単離抗体であって、
上記抗原結合タンパク質は、生体内のアクチビンA受容体とのアクチビンAの結合を阻害することを特徴とする完全ヒト単離抗体。
(項目30)
アクチビンAのアミノ酸V82-N107と特異的に結合する完全ヒト単離抗体であって
、上記抗原結合タンパク質は、生体内のアクチビンA受容体とのアクチビンAの結合を阻害することを特徴とする完全ヒト単離抗体。
本発明は、全長アクチビンAとも結合する抗体により認識されるシステインノットドメインを含む、ヒトアクチビンAの領域、および/またはアクチビンAのシステインノット領域に重複する、もしくは該領域を包含するアクチビンAの領域、ならびにこれらのシステインノットドメインを作製および使用する方法に関する。本発明は、アクチビンAまたはアクチビンAの一部と特異的に結合する、抗体を含む抗原結合剤、ならびにそのような結合剤を使用するための方法も提供する。結合剤は、1つ以上の配位子とのヒトアクチビンAの結合を阻止する、または低下させるために有用である。
et al.,Circulation 109:1379−1385,2004)。心不全のラットモデルにおいて、血中アクチビンAは、心筋梗塞の直後に上昇し、6ヶ月間持続し、アクチビンA免疫染色は、心筋細胞のみに限局した(Yndestad et
al.,2004)。心不全において、アクチビンA濃度の上昇が報告された(Yndestad,A.et al.,Circulation 109:1379−1385,2004)。
al.,1998,Cytotechnology 28:31を参照)、HeLa細胞、BHK(ATCC CRL 10)細胞株、アフリカミドリザル腎細胞株CV1に由来するCV1/EBNA細胞株(ATCC CCL 70)(McMahan et al.,1991,EMBO J.10:2821を参照)、293、293EBNA、もしくはMSR 293等のヒト胎児腎臓細胞、ヒト表皮A431細胞、ヒトColo205細胞、他の形質転換された霊長類細胞株、正常2倍体細胞、一次組織の体外培養に由来する細胞株、一次移植片、HL−60、U937、HaK、またはJurkat細胞を含む。一般的に、宿主細胞は、ポリペプチドをコードしている核酸で形質転換または形質移入され得る、培養細胞である。「組み換え宿主細胞」という語句は、発現されるための、核酸で形質転換または形質移入されている宿主細胞を表すために、使用され得る。また、宿主細胞は、調節配列が、核酸と動作可能に連結されるように、宿主細胞に導入されない限り、核酸を含むが、望ましいレベルでそれを発現しない細胞であり得る。宿主細胞という用語は、特定の対象細胞だけではなく、そのような細胞の子孫もしくは潜在的子孫も意味することが、理解される。例えば、変異または環境の影響により、特定の一時変異が、後の生成で起こるため、そのような子孫は、実際には親細胞と同一ではない場合があるが、それでもなお、本明細書に使用されるような用語の範囲内に含まれる。
一実施形態においては、本発明は、アクチビンA、例えば、ヒトアクチビンAと結合する、抗原結合タンパク質(例えば、抗体、抗体断片、抗体誘導体、抗体突然変異タンパク質、および抗体変異形)を提供する。
他の実施形態においては、本発明は、A1−A14から成る群から選択される軽鎖可変領域、またはA1−A14から成る群から選択される重鎖可変領域を含む抗原結合タンパク質、ならびにその断片、誘導体、突然変異タンパク質、および変異形を提供する。そのような抗原結合タンパク質は、「LxHy」という用語を使用して表わされ得て、以下の配列で標識されるように、「x」は、軽鎖可変領域の数に相当し、「y」は、重鎖可変領域の数に相当する。つまり、例えば、「A1HC」は、抗体A1の重鎖可変領域を表し、「A1LC」は、抗体A1の軽鎖可変領域を表す等である。より一般的に言えば、「L2H1」は、L2のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域、およびH1のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域を有する、抗原結合タンパク質を意味する。明確にするために、少なくとも2つのメンバーの群により表わされるすべての範囲は、範囲の端のメンバー間の、かつ範囲の端のメンバーを含む、すべてのメンバーを含む。したがって、群の範囲A1−A14は、A1とA14との間のすべてのメンバー、ならびにA1およびA14それら自体も含む。群の範囲A4−A6は、A4、A5、およびA6のメンバーを含む等である。
CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACCAGTTATGGTCTCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCATCCCTTACAATGGTAACACAAACTCTGCACAGAAACTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGACACATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTGTATTTCTGTGCGAGAGACAGGGACTACGGTGTCAATTATGATGCTTTTGATATCTGGGGCCAAGGGACAATGGTCACCGTCTCTTCA(配列番号:2)
A1 LC
TCCTATGAGGTGACTCAGGCACCCTCAGTGTCCGTGTCCCCAGGACAGACAGCCAGCATCACCTGCTCTGGAGATAAATTGGGGGATAAATATGCTTGTTGGTATCAGCAGAAGCCAGGCCAGTCCCCTGTGCTGGTCATCTATCAAGATAGCAAGCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGAAACACAGCCACTCTGACCATCAGCGGGACCCAGGCTATGGATGAGGCTGACTATTACTGTCAGGCGTGGGACAGCAGCACTGCGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(配列番号:1)
A2 HC
CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACCTTCAGTAGTTACGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATGGTATGATGGAAGTAATAAATACCATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAGTGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGTGAGAAGTCGGAACTGGAACTACGACAACTACTACTACGGTCTGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCAG(配列番号:18)
A2 LC
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGAAATAATTTAGGCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATTTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACAATCAGCAGTCTGCAGCCTGAAGATTTTACAACTTATTACTGTCTACAGCATAATAGTTACCCGTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA(配列番号:17)
A3 HC
GAGGTGCAGTTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCTTGGTCCAGCCTGGGGGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCCTCTGGATTCACCTTTAGTAGTTATTGGATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGCGTGGCCAACATAAAGCAAGATGGAAGTGAGGAATACTATGTGGACTCTGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAACGCCAAGAATTCACTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGGTAGCAGCAGCTGGTACTACTACAACTACGGTATGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA(配列番号:34)
A3 LC
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGAAATGATTTAGGCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACAATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCGACAGCAAAATACTTACCCGCTCACTTTCGGCGGAGGGACCAAGGTGGAGATCAAA(配列番号:33)
A4 HC
CAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGGGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGATACACCTTCACCGGCTACTATATCCACTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAACCCTAACAGTGGTGGCACAAACTATGCACAGAAGTTTCAGGGCAGGGTCACCATGACCAGGGACACGTCCATCAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGCAGGCTGAGATCTGACGACACGGCCGTGTATTTCTGTGCGAGAGATTCGGGGTATAGCAGCAGCTGGCACTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA(配列番号:50)
A4 LC
GATATTGTGATGACTCAGTCTCCACTCTCCCTGCCCGTCACCCCTGGAGAGCCGGCCTCCATCTCCTGCAGGTCTAGTCAGAGCCTCCTGCATAGTACTGGATACAACTATTTGGATTGGTACCTGCAGAAGCCAGGGCAGTCTCCACAGCTCCTGATCTATTTGGGTTCTTTTCGGGCCTCCGGGGTCCCTGACAGGTTCAGTGGCAGTGGGTCAGGCACAGATTTTACACTGAAAATCAGCAGAGTGGAGGCTGAGGATGTTGGGGTTTATTACTGCATGCAAGCTCTCCAAACTCCGTGCAGTTTTGGCCAGGGGACCAAGCTGGAGATCAAG(配列番号:49)
A5 HC
CAGGTGCAGCTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGCTCCATCAATAGTTTCTACTGGAGCTGGATCCGGCAGCCCCCAGGGAAGGGACTGGAGTGGATTGGGTATATCTATTACAGTGGGAGCACCAACTACAATCCCTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACACGTCCAAGACCCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACCGCTGCGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGACAGTATAGCAGCCCCCTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCAGCTTCCACCAAGGGCCCATCCGTCTTCCCCCTGGCGCCCTGCTCCAGGAGCACCTCCGAGAGCACAGCCGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCATGCGCCCT(配列番号:66)
A5 LC
GACATCGTGATGACCCAGTCTCCAGACTCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGAGAGGGCCACCATCACCTGCAAGTCCAGCCAGAGTATTTTATACAGTTCCAACAATAAGAAGTATCTAGTTTGGTACCAGCAGAAACCAGGACAGCCTCCTAAGCTGATCATTTACTGGACATCTATGCGGGAATCCGGGGTCCCTGACCGATTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAACAGCCTGCAGGCTGAAGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAGCAATATTATAGTACTCCGTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA(配列番号:65)
A6 HC
CAGGTGCAGCTACAGCAGTGGGGCGCAGGACTGTTGAAGCCTTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCGCTGTCTATGGTGGGTCCTTCAGTGCTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCCCCCAGGGAAGGGACTGGAGTGGATTGGGGAAATCAATCATAGTGGAGGCACCAACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTCACCATATCAGTAGACACGTCCAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACCGCCGCGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGTACAGTGGCTCGAACTGGCCTACTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA(配列番号:82)
A6 LC
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGAGCATTAGCAACTATTTAAATTGGTATCAGCAGAGACCAGGGAAAGCCCCTAAGCTCCTGATCTATGCTACATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGTCTGCAACCTGAAGATTTTGTAAGTTACTACTGTCAACAGAGTTACAGTATTTCGCCCACTTTCGGCGGCGGGACCAAGGTGGAGAACAAA(配列番号:81)
A7 HC
CAGGTGCAGCTGGTGGACTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACCTTCATTAGCTATGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATCTGGTATGATGGAAGTACTGAATACTATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAGAGAGGCAGTGGCTCTACCACTACGGTATGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA(配列番号:98)
A7 LC
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAGGTCAGGGCATTAGAAATGATTTAGTCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACAATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTGCAACTTATTACTGTCTACAACATAATACTTACCCATTCACTTTCGGCCCTGGGACCAAAGTGGATATCAAA(配列番号:97)
A8 HC
CAGGTGCAGCTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCCTCGGAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGCTCCATCAATAGTTTCTACTGGAGCTGGATCCGGCAGCCCCCAGGGAAGGGACTGGAGTGGATTGGGTATATCTATTACAGTGGGAGCACCAACTACAATCCCTCCCTCAAGAGGCGAGTCACCATATCAGTAGACACGTCCAAGACCCAGTTCTCCCTGAAGCTGAGCTCTGTGACCGCTGCGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGACAGTATAGCAGCCCCCTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA(配列番号:114)
A8 LC
GACATCGTGATGACCCAGTCTCCAGACTCCCTGGCTGTGTCTCTGGGCGAGAGGGCCACCATCACCTGCAAGTCCAGCCAGAGTATTTTATACAGCTCCAACAATAAGAAGTATCTAGTTTGGTACCAGCAGAAACCAGGACAGCCTCCTAAGTTGATCATTTACTGGACATCTATGCGGGAATCCGGGGTCCCTGACCGATTCAGTGGCAGCGGGTCTGGGACAGATTTCACTCTCACCATCAGCAGCCTGCAGGCTGAAGATGTGGCAGTTTATTACTGTCAGCAATATTATAGTACTCCGTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA(配列番号:113)
A9 HC
CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGCAGCGTCTGGATTCACCTTCAGTAGTTACGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATGGTATGATGGAAGTAATAAATACCATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCACCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAGTGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGTGAGAAGTCGGAACTGGAACTACGACAACTACTACTACGGTCTGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA(配列番号:130)
A9 LC
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGAAATAATTTAGGCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATTTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACAATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTTTACAACTTATTACTGTCTACAGCATAATAGTTACCCGTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA(配列番号:129)
A10 HC
GAGGTGCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCAGAGGTGAAAAAGCCCGGGGAGTCTCTGAAGATCTCCTGTCAGGGTTCTGGATACAGCTTTACCAGCTACTGGATCGGCTGGGTGCGCCAGATGCCCGGGAAAGGCCTGGAGTGGATGGGGATCATCTATCCTGGTGACTCTGATACCAGATACAGCCCGTCCTTCCAAGGCCAGGTCACCATCTCAGCCGACAAGTCCATCAGCACCGCCTACCTGCAGTGGAGCAGCCTGAAGGCCTCGGACACCGCCATGTATT
ACTGTGCGAGACAAGGACTGGGGTTTGACTACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA(配列番号:146)
A10 LC
TCCTATGAGCTGACTCAGCCACCCTCAGTGTCCGTGTCCCCAGGACAGACAGCCAGCATCACCTGCTCTGGAGAAAAATGGGGAGAGAAATATGCTTGTTGGTATCAGCAGAAGCCAGGCCAGTCCCCTGTGCTGGTCATCTATCAAGATACCAAGCGGCCCTCCGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCATTTCTGGGAACACAGCCACTCTGACCATCAGCGGGACCCAGGCTATGGATGAGGCTGACTATTATTGTCAGGCGTGGGACAGGAGCACTGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(配列番号:145)
A11 HC
CAGGTGCAGCTGCAGGAGTCGGGCCCAGGACTGGTGAAGCCTTCACAGACCCTGTCCCTCACCTGCACTGTCTCTGGTGGCTCCATCAGCAGTGGTGGTTACTACTGGAGCTGGATCCGCCAGCACCCAGGGAAGGGCCTGGAGTGGATTGGGTACATCTCTTACAGTGGGAGCACCTACTACAACCCGTCCCTCAAGAGTCGAGTTACCATATCAGTTGACACGTCTAAGAACCAGTTCTCCCTGAAGCTGAACTCTGTGACTGCCGCGGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGCGCGCTTACGGTGACTATCGCGGCTGGTTCGACCCCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA(配列番号:162)
A11 LC
TCCTATGAGCTGACTCAGCCACCCTCAGTGTCCGTGTCCCCAGGACAGACAGCCAGCATCACCTGCTCTGGAGATAAATTGGGGGATAAATTTGCTTTCTGGTATCAGCTGAAGCCAGGCCAGTCCCCTGTGCTGGTCATCTATCAAGATAACAAGCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACAGCCACTCTGACCATCAGCGGGACCCAGGCTATGGATGCGGCTGACTTTTACTGTCAGGCGTGGGACAGCAGCACTGTGGTATTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTA(配列番号:161)
A12 HL
CAGGTGCAGCTGGTGGAGTCTGGGGGAGGCGTGGTCCAGCCTGGGAGGTCCCTGAGACTCTCCTGTGTAGCGTCTGGATTCACCTTCAGTGCCTATGGCATGCACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGCAAGGGGCTGGAGTGGGTGGCAGTTATATGGTATGATGGAAGTAATAAATACTATGCAGACTCCGTGAAGGGCCGATTCATCATCTCCAGAGACAATTCCAAGAACACGCTGTATCTGCAAATGAACAGCCTGAGAGCCGAGGACACGGCTGTGTATTACTGTGCGAGAAGTCGGAACTGGAACTACGACTCCTACCAATACGGTTTGGACGTCTGGGGCCAAGGGACCACGGTCACCGTCTCCTCA(配列番号:178)
A12 LC
GACATCCAGATGACCCAGTCTCCATCCTCCCTGTCTGCATCTGTAGGAGACAGAGTCACCATCACTTGCCGGGCAAGTCAGGGCATTAGAAATGATTTAGGCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGAAAGCCCCTAAGCGCCTGATCTATGCTGCATCCAGTTTGCAAAGTGGGGTCCCATCAAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAATTCACTCTCACAATCAGCAGCCTGCAGCCTGAAGATTGTGCAACTTATTATTGTCTACAGCATAATAGTTATACGTGGACGTTCGGCCAAGGGACCAAGGTGGAAATCAAA(配列番号:177)
A13 HC
CAGGTTCAGCTGGTGCAGTCTGGAGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGGCTTCTGGTTACACCTTTACCAGCTATGGTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGAGGATGGGATGGATCAGCGCTTACAATGGTAACACAAACTATGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGACACATCAACGACCACAGCCTACATGGAGCTGAGGAGCCTGAGATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGATCAAGATTACTATGATAGTAGTGGTTGGGGCCACTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCA(配列番号:194)
A13 LC
TCCTATGAGCTGACTCAGCCACCCTCAGTGTCCGTGTCCCCAGGACAGACAGCCAGCATCACCTGCTCTGGAGATAAATTGGGGGATAAATATGTTTGTTGGTATCAGCAGAAGCCAGGCCAGTCCCCTGAACTGGTCATCTATCTAGATAACAAGCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACAGCCACTCTGACCATCAGCGGGACCCAGGCTATGGATGAGGCTGACTATTACTGTCAGGCGTGGGACAGCAGCACGGTATTCGGCGGAGGGACCAAACTGACCGTCCTG(配列番号:193)
A14 HC
CAGGTTCAGCTGGTGCAATCTGGAGCTGAGGTGAAGAAGCCTGGGGCCTCAGTGAAGGTCTCCTGCAAGACTTCTGGTTACACCTTTACCAGCTATGGTATCAGCTGGGTGCGACAGGCCCCTGGACAAGGGCTTGAGTGGATGGGATGGATCAGCCCTTACAATGGTAACACAAACTATGCACAGAAGTTCCAGGGCAGAGTCACCATGACCACAGACAAATCCACGAGCACAGCCTACATGGAGCTGAGGAGCCTGCGATCTGACGACACGGCCGTGTATTACTGTGCGAGAGATCAAGATTACTATGATAGTAGTGGTTGGGACCCCTGGGGCCAGGGAACCCTGGTCACCGTCTCCTCG(配列番号:210)
A14 LC
TCCTATGAGCTGACTCAGCCACCCTCAGTGTCCGTGTCCCCAGGACAGACAGCCTCCATCACCTGCTCTGGAGATAAATTGGGGGATAAATATGCTTTCTGGTATCAGCAGAAGCCAGGCCAGTCCCCTGTGCTGGTCTTCTATCATGATACCAAGCGGCCCTCAGGGATCCCTGAGCGATTCTCTGGCTCCAACTCTGGGAACACAGCCACTCTGACCATCAGCGGGACCCAGGCTATGGATGAGGCTGACTATCACTGTCAGGCGTGGGACAGCAGCACGGTCTTCGGCGGAGGGACCAAGCTGACCGTCCTAC(配列番号:209)
抗体A1〜A14アミノ酸配列、軽鎖可変領域。CDR領域は、網掛けされ、下線を引かれ、介在する部分または領域は、本明細書ではフレームワーク(FR)として言及される。
A1
SYEVTQAPSVSVSPGQTASITCSGDKLGDKYACWYQQKPGQSPVLVIYQDSKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAMDEADYYCQAWDSSTAVFGGGTKLTVL(配列番号:9)
A2
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNNLGWYQQKPGKAPKRLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFTTYYCLQHNSYPWTFGQGTKVEIK(配列番号:25)
A3
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPGKAPKRLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCRQQNTYPLTFGGGTKVEIK(配列番号:41)
A4
DIVMTQSPLSLPVTPGEPASISCRSSQSLLHSTGYNYLDWYLQKPGQSPQLLIYLGSFRASGVPDRFSGSGSGTDFTLKISRVEAEDVGVYYCMQALQTPCSFGQGTKLEIK(配列番号:57)
A5
DIVMTQSPDSLAVSLGERATITCKSSQSILYSSNNKKYLVWYQQKPGQPPKLIIYWTSMRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTINSLQAEDVAVYYCQQYYSTPWTFGQGTKVEIK(配列番号:73)
A6
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQSISNYLNWYQQRPGKAPKLLIYATSSLQSGVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFVSYYCQQSYSISPTFGGGTKVENK(配列番号:89)
A7
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRAGQGIRNDLVWYQQKPGKAPKRLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFATYYCLQHNTYPFTFGPGTKVDIK(配列番号:105)
A8
DIVMTQSPDSLAVSLGERATITCKSSQSILYSSNNKKYLVWYQQKPGQPPKLIIYWTSMRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISSLQAEDVAVYYCQQYYSTPWTFGQGTKVEIK(配列番号:121)
A9
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNNLGWYQQKPGKAPKRLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDFTTYYCLQHNSYPWTFGQGTKVEIK(配列番号:137)
A10
SYELTQPPSVSVSPGQTASITCSGEKWGEKYACWYQQKPGQSPVLVIYQDTKRPSGIPERFSGSISGNTATLTISGTQAMDEADYYCQAWDRSTVFGGGTKLTVL(配列番号:153)
A11
SYELTQPPSVSVSPGQTASITCSGDKLGDKFAFWYQLKPGQSPVLVIYQDNKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAMDAADFYCQAWDSSTVVFGGGTKLTVL(配列番号:169)
A12
DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITCRASQGIRNDLGWYQQKPGKAPKRLIYAASSLQSGVPSRFSGSGSGTEFTLTISSLQPEDCATYYCLQHNSYTWTFGQGTKVEIK(配列番号:185)
A13
SYELTQPPSVSVSPGQTASITCSGDKLGDKYVCWYQQKPGQSPELVIYLDNKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAMDEADYYCQAWDSSTVFGGGTKLTVL(配列番号:201)
A14
SYELTQPPSVSVSPGQTASITCSGDKLGDKYAFWYQQKPGQSPVLVFYHDTKRPSGIPERFSGSNSGNTATLTISGTQAMDEADYHCQAWDSSTVFGGGTKLTVL(配列番号:217)
抗体A1〜A14、重鎖可変領域のアミノ酸配列。CDR領域は、網掛けされ、下線を引かれ、他の領域は本明細書ではフレームワーク(FR)として言及される。
A1
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYGLSWVRQAPGQGLEWMGWIIPYNGNTNSAQKLQGRVTMTTDTSTSTAYMELRSLRSDDTAVYFCARDRDYGVNYDAFDIWGQGTMVTVSS(配列番号:10)
A2
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYHADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQVNSLRAEDTAVYYCVRSRNWNYDNYYYGLDVWGQGTTVTVSS(配列番号:26)
A3
EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSSYWMSWVRQAPGKGLECVANIKQDGSEEYYVDSVKGRFTISRDNAKNSLYLQMNSLRAEDTAVYYCARGSSSWYYYNYGMDVWGQGTTVTVSS(配列番号:42)
A4
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTGYYIHWVRQAPGQGLEWMGWINPNSGGTNYAQKFQGRVTMTRDTSISTAYMELSRLRSDDTAVYFCARDSGYSSSWHFDYWGQGTLVTVSS(配列番号:58)
A5
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSINSFYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKSRVTISVDTSKTQFSLKLSSVTAADTAVYYCARDSIAAPFDYWGQGTLVTVSS(配列番号:74)
A6
QVQLQQWGAGLLKPSETLSLTCAVYGGSFSAYYWSWIRQPPGKGLEWIGEINHSGGTNYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLSSVTAADTAVYYCARVQWLELAYFDYWGQGTLVTVSS(配列番号:90)
A7
QVQLVDSGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFISYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSTEYYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARERQWLYHYGMDVWGQGTTVTVSS(配列番号:106)
A8
QVQLQESGPGLVKPSETLSLTCTVSGGSINSFYWSWIRQPPGKGLEWIGYIYYSGSTNYNPSLKRRVTISVDTSKTQFSLKLSSVTAADTAVYYCARDSIAAPFDYWGQGTLVTVSS(配列番号:122)
A9
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCAASGFTFSSYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYHADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQVNSLRAEDTAVYYCVRSRNWNYDNYYYGLDVWGQGTTVTVSS(配列番号:138)
A10
EVQLVQSGAEVKKPGESLKISCQGSGYSFTSYWIGWVRQMPGKGLEWMGIIYPGDSDTRYSPSFQGQVTISADKSISTAYLQWSSLKASDTAMYYCARQGLGFDYWGQGTLVTVSS(配列番号:154)
A11
QVQLQESGPGLVKPSQTLSLTCTVSGGSISSGGYYWSWIRQHPGKGLEWIGYISYSGSTYYNPSLKSRVTISVDTSKNQFSLKLNSVTAADTAVYYCARAYGDYRGWFDPWGQGTLVTVSS(配列番号:170)
A12
QVQLVESGGGVVQPGRSLRLSCVASGFTFSAYGMHWVRQAPGKGLEWVAVIWYDGSNKYYADSVKGRFIISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARSRNWNYDSYQYGLDVWGQGTTVTVSS(配列番号:186)
A13
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKASGYTFTSYGISWVRQAPGQGLERMGWISAYNGNTNYAQKFQGRVTMTTDTSTTTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDQDYYDSSGWGHWGQGTLVTVSS(配列番号:202)
A14
QVQLVQSGAEVKKPGASVKVSCKTSGYTFTSYGISWVRQAPGQGLEWMGWISPYNGNTNYAQKFQGRVTMTTDKSTSTAYMELRSLRSDDTAVYYCARDQDYYDSSGWDPWGQGTLVTVSS(配列番号:218)
抗体A1〜A14のCDRコンセンサス配列。
軽鎖 CDR1配列
L4 RSSQSLLHSTGYN−YLD(配列番号:253)
L5、L8 KSSQSILYSSNNKKYLV(配列番号:75)
コンセンサス: X1SSQSX2LX3SX4X5X6X7X8YLX9(配列番号:115)
X1は、アルギニン残基またはリジン残基であり、
X2は、ロイシン残基またはイソロイシン残基であり、
X3は、ヒスチジン残基またはチロシン残基であり、
X4は、トレオニン残基またはセリン残基であり、
X5は、グリシン残基またはアスパラギン残基であり、
X6は、チロシン残基またはアスパラギン残基であり、
X7は、アスパラギン残基またはリジン残基であり、
X8は、リジン残基または残基なしであり、
X9は、アスパラギン酸塩残基またはバリン残基である
L2、L9 RASQGIRNNLG(配列番号:27)
L3、L12 RASQGIRNDLG(配列番号:43)
L6 RASQSISNYLN(配列番号:91)
L7 RAGQGIRNDLV(配列番号:107)
コンセンサス: RAX10QX11IX12NX13LX14(配列番号:116)
X10は、セリン残基またはグリシン残基であり、
X11は、セリン残基またはグリシン残基であり、
X12は、セリン残基またはアルギニン残基であり、
X13は、チロシン残基、アスパラギン酸塩残基、またはアスパラギン残基であり
X14は、アスパラギン酸残基、バリン残基、またはグリシン残基である
L1 SGDKLGDKYAC(配列番号:11)
L10 SGEKWGEKYAC(配列番号:155)
L11 SGDKLGDKFAF(配列番号:171)
L13 SGDKLGDKYVC(配列番号:203)
L14 SGDKLGDKYAF(配列番号:219)
コンセンサス: SGX15KX16GX17KX18X19X20(配列番号:123)
X15は、グルタミン酸残基またはアスパラギン酸塩残基であり、
X16は、トリプトファン残基またはロイシン残基であり、
X17は、グルタミン酸残基またはアスパラギン酸塩残基であり、
X18は、チロシン残基またはフェニルアラニン残基であり、
X19は、アラニン残基またはバリン残基であり、
X20は、システイン残基またはフェニルアラニン残基である
軽鎖 CDR2配列
L2 ATSSLQS(配列番号:92)
L3、L6、L7、L9、L12 AASSLQS(配列番号:44)
L5、L8 WTSMRES(配列番号:76)
L4 LGSFRAS(配列番号:254)
コンセンサス: X40X41SX42X43X44S(配列番号:124)
X40は、アラニン残基、トリプトファン残基、またはロイシン残基であり、
X41は、トレオニン残基、アラニン残基、またはグリシン残基であり、
X42は、セリン残基、メチオニン残基、またはフェニルアラニン残基であり、
X43は、ロイシン残基またはアルギニン残基であり、
X44は、グルタミン残基、グルタミン酸残基、またはアラニン残基である
L10 QDTKRPS(配列番号:156)
L11 QDNKRPS(配列番号:172)
L1 QDSKRPS(配列番号:12)
L13 LDNKRPS(配列番号:204)
L14 HDTKRPS(配列番号:220)
コンセンサス: X45DX46KRPS(配列番号:128)
X45は、グルタミン残基、ロイシン残基、またはヒスチジン残基であり、
X46は、トレオニン残基、アスパラギン残基、またはセリン残基である
軽鎖 CDR3配列
L1 QAWDSSTAV(配列番号:13)
L10 QAWDRST−V(配列番号:157)
L11 QAWDSSTVV(配列番号:173)
L13、L14 QAWDSSTV−(配列番号:205)
L2 LQHNSYPWT(配列番号:29)
L7 LQHNTYPFT(配列番号:109)
L9 LQHNSYPWT(配列番号:141)
L12 LQHNSYTWT(配列番号:189)
コンセンサス: LQHNX81YX82X83T(配列番号:131)
X81は、トレオニン残基またはセリン残基であり、
X82は、プロリン残基またはトレオニン残基であり、
X83は、フェニルアラニン残基またはトリプトファン残基である
L3 RQQNTYPLT(配列番号:45)
L4 MQALQTPCS(配列番号:255)
L5 QQYYSTPWT(配列番号:77)
L6 QQSYSISPT(配列番号:93)
L8 QQYYSTPWT(配列番号:125)
コンセンサス: X73QX74X75X76X77X78X79X80(配列番号:132)
X73は、メチオニン残基、グルタミン残基、またはアルギニン残基であり、
X74は、アラニン残基、チロシン残基、グルタミン残基、またはセリン残基であり、
X75は、ロイシン残基、チロシン残基、またはアスパラギン残基であり、
X76は、グルタミン残基、セリン残基、またはトレオニン残基であり、
X77は、トレオニン残基、チロシン残基、またはイソロイシン残基であり、
X78は、プロリン残基またはセリン残基であり、
X79は、システイン残基、トリプトファン残基、ロイシン残基、またはプロリン残基であり、
X80は、セリン残基またはトレオニン残基である
重鎖 CDR1配列
H5 GGSINS−−FYWS(配列番号:78)
H6 GGSFSA−−YYWS(配列番号:94)
H8 GGSINS−−FYWS(配列番号:126)
H11 GGSISSGGYYWS(配列番号:174)
コンセンサス: GGSX21X22X23X24X25X26YWS(配列番号:252)
X21は、イソロイシン残基またはフェニルアラニン残基であり、
X22は、アスパラギン残基またはセリン残基であり、
X23は、セリン残基またはアラニン残基であり、
X24は、グリシン残基または残基なしであり、
X25は、グリシン残基または残基なしあり、
X26は、フェニルアラニン残基またはチロシン残基である
H7 GFTFISYGMH(配列番号:110)
H4 GYTFTGYYIH(配列番号:256)
H2、H9 GFTFSSYGMH(配列番号:30)
H10 GYSFTSYWIG(配列番号:158)
コンセンサス: GX27X28FX29X30YX31X32X33(配列番号:257)
X27は、チロシン残基またはフェニルアラニン残基であり、
X28は、トレオニン残基またはセリン残基であり、
X29は、トレオニン残基、セリン残基、またはイソロイシン残基であり、
X30は、グリシン残基またはセリン残基であり、
X31は、チロシン残基、グリシン残基、またはトリプトファン残基であり、
X32は、イソロイシン残基またはメチオニン残基であり、
X33は、ヒスチジン残基またはグリシン残基である
H13 GYTFTSYGLS(配列番号:62)
H12 GFTFSAYGMH(配列番号:190)
H3 GFTFSSYWMS(配列番号:46)
H1、H14 GYTFTSYGIS(配列番号:206)
コンセンサス: GX34TFX35X36YX37X38X39(配列番号:140)
X34は、チロシン残基またはフェニルアラニン残基であり、
X35は、トレオニン残基またはセリン残基であり、
X36は、セリン残基またはアラニン残基であり、
X37は、グリシン残基またはトリプトファン残基であり、
X38は、ロイシン残基、メチオニン残基、またはイソロイシン残基であり、
X39は、セリン残基またはヒスチジン残基である
重鎖 CDR2配列
H11 YISYSGSTYYNPSLKS(配列番号:175)
H5 YIYYSGSTNYNPSLKS(配列番号:79)
H6 EINHSGGTNYNPSLKS(配列番号:95)
H8 YIYYSGSTNYNPSLKR(配列番号:127)
コンセンサス: X47IX48X49SGX50TX51YNPSLKX52(配列番号:142)
X47は、チロシン残基またはグルタミン酸残基であり、
X48は、セリン残基、チロシン残基、またはアスパラギン残基であり、
X49は、チロシン残基またはヒスチジン残基であり、
X50は、セリン残基またはグリシン残基であり、
X51は、チロシン残基またはアスパラギン残基であり、
X52は、セリン残基またはアルギニン残基である
H2、H9 VIWYDGSNKYHADSVKG(配列番号:31)
H12 VIWYDGSNKYYADSVKG(配列番号:191)
H3 NIKQDGSEEYYVDSVKG(配列番号:47)
H7 VIWYDGSTEYYADSVKG(配列番号:111)
コンセンサス: X53IX54X55DGSX56X57YX58X59DSVKG(配列番号:179)
X53は、アスパラギン残基またはバリン残基であり、
X54は、トリプトファン残基またはリジン残基であり、
X55は、チロシン残基またはグルタミン残基であり、
X56は、アスパラギン残基、グルタミン酸残基、またはセリン残基であり、
X57は、リジン残基、またはグルタミン酸残基であり、
X58は、ヒスチジン残基、またはチロシン残基であり、
X59は、アラニン残基またはバリン残基である
H4 WINPNSGGTNYAQKFQG(配列番号:258)
H1 WIIPYNGNTNSAQKLQG(配列番号:63)
H13 WISAYNGNTNYAQKFQG(配列番号:207)
H14 WISPYNGNTNYAQKFQG(配列番号:259)
H10 IIYPGDSDTRYSPSFQG(配列番号:159)
コンセンサス: X60IX61X62X63X64X65X66TX67X68X69X70X71X72QG(配列番号:180)
X60は、トリプトファン残基またはイソロイシン残基であり、
X61は、アスパラギン残基、イソロイシン残基、セリン残基、またはチロシン残基であり、
X62は、プロリン残基またはアラニン残基であり、
X63は、アスパラギン残基、チロシン残基、またはグリシン残基であり、
X64は、セリン残基、アスパラギン残基、またはアスパラギン酸塩残基であり、
X65は、グリシン残基またはセリン残基であり、
X66は、グリシン残基、アスパラギン残基、またはアスパラギン酸塩残基であり、
X67は、アスパラギン残基またはアルギニン残基であり、
X68は、チロシン残基またはセリン残基であり、
X69は、アラニン残基またはセリン残基であり、
X70は、グルタミン残基またはプロリン残基であり、
X71は、リジン残基またはセリン残基であり、
X72は、フェニルアラニン残基またはロイシン残基である
重鎖 CDR3配列
H5、H8 −−DSIAAPFDY(配列番号:80)
H6 VQWLELAYFDY(配列番号:96)
H10 −−−−QGLGFDY(配列番号:160)
コンセンサス: X87X88X89X90X91X92X93X94FDY(配列番号:187)
X87は、バリン残基または残基なしであり、
X88は、グルタミン残基または残基なしであり、
X89は、アスパラギン酸塩残基、トリプトファン残基、または残基なしであり、
X90は、セリン残基、ロイシン残基、または残基なしであり、
X91は、イソロイシン残基、グルタミン酸残基、またはグルタミン残基であり、
X92は、アラニン残基、ロイシン残基、またはグリシン残基であり、
X93は、アラニン残基またはロイシン残基であり、
X94は、プロリン残基、チロシン残基、またはグリシン残基である
H13 DQDYYDSSGW−GH(配列番号:208)
H14 DQDYYDSSGW−DP(配列番号:224)
H11 −−AYGDYRGWFDP(配列番号:176)
コンセンサス: X95X96X97YX98DX99X100GWX101X102X103(配列番号:188)
X95は、アスパラギン酸塩残基または残基なしであり、
X96は、グルタミン残基または残基なしであり、
X97は、アスパラギン酸塩残基またはアラニン残基であり、
X98は、チロシン残基またはグリシン残基であり、
X99は、セリン残基またはチロシン残基であり、
X100は、セリン残基またはアルギニン残基であり、
X101は、フェニルアラニン残基または残基なしであり、
X102は、グリシン残基またはアスパラギン酸塩残基であり、
X103は、ヒスチジン残基またはプロリン残基である
H4 −−−DSGYSSSWHFDY−(配列番号:260)
H1 −−−DRDYGVNYDAFDI(配列番号:64)
H2 −SRNWNYDNYYYGLDV(配列番号:32)
H12 −SRNWNYDSYQYGLDV(配列番号:192)
H9 −SRNWNYDNYYYGLDV(配列番号:144)
H3 GSSSWYY−YNGMDV−(配列番号:261)
H7 −ERQWLY−−HYGMDV(配列番号:112)
コンセンサス: X104X105X106X107X108X109YX110X111X112X113X114X115X116X117X118(配列番号:249)
X104は、グリシン残基または残基なしであり、
X105は、セリン残基、グルタミン酸残基、または残基なしであり、
X106は、アルギニン残基、セリン残基、または残基なしであり、
X107は、アスパラギン酸塩残基、アスパラギン残基、セリン残基、またはグルタミン残基であり、
X108は、セリン残基、アルギニン残基、またはトリプトファン残基であり、
X109は、グリシン残基、アスパラギン酸塩残基、アスパラギン残基、チロシン残基、またはロイシン残基であり、
X110は、セリン残基、グリシン残基、アスパラギン酸塩残基、または残基なしであり、
X111は、セリン残基、バリン残基、アスパラギン残基、またはチロシン残基であり、X112は、セリン残基、アスパラギン残基、チロシン残基、またはヒスチジン残基であり、
X113は、トリプトファン残基、チロシン残基、またはグルタミン残基であり、
X114は、ヒスチジン残基、アスパラギン酸塩残基、チロシン残基、または残基なしであり、
X115は、フェニルアラニン残基、アラニン残基、またはグリシン残基であり、
X116は、アスパラギン塩酸残基、フェニルアラニン残基、ロイシン残基、またはメチオニン残基であり、
X117は、チロシン残基、またはアスパラギン酸塩残基であり、
X118は、イソロイシン残基、バリン残基、または残基なしである
一実施形態においては、本発明は15、14、13、12、11、10、9、8、7、6、5、4、3、2、または1の残基のみにおいて、L1からL14から成る群から選択された、軽鎖可変ドメインの配列とは異なるアミノ酸の配列を含む、軽鎖可変ドメインを含む抗原結合タンパク質を提供し、それぞれのそのような配列の違いは、独立して1つのアミノ酸残基の欠失、挿入、または置換のいずれかである。他の実施形態では、軽鎖可変ドメインは、L1〜L14から成る群から選択された軽鎖可変ドメインの配列と少なくとも70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、または99%同一であるアミノ酸の配列を含む。他の実施形態では、軽鎖可変ドメインは、L1〜L14(L1、L2、L3、L4、L5、L6、L7、L8、L9、L10、L11、L12、L13、およびL14を含む)から成る群から選択された軽鎖可変ドメインをコードする、ヌクレオチド配列と少なくとも70%、75%、80%、85%、90%、95%、97%、または99%同一であるヌクレオチド配列によってコードされるアミノ酸の配列を含む。他の実施形態では、軽鎖可変ドメインは、L1〜L14から成る群から選択される軽鎖可変ドメインをコードするポリヌクレオチドの補体へ、適度に厳密な条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによってコードされるアミノ酸の配列を含む。他の実施形態では、軽鎖可変ドメインは、L1〜L14から成る群から選択される軽鎖可変ドメインをコードする、ポリヌクレオチドの補体へ、適度に厳密な条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによってコードされるアミノ酸の配列を含む。他の実施形態では、軽鎖可変ドメインは、L1〜L14の軽鎖ポリヌクレオチドの補体へ、適度に厳密な条件下でハイブリダイズするポリヌクレオチドによってコードされるアミノ酸の配列を含む。
et al.,1986,Gene 42:133;Bauer et al.1985,Gene 37:73;Craik,BioTechniques,January
1985,12−19;Smith et al.,1981,Genetic Engineering:Principles and Methods,Plenum Press;および米国特許番号第4,518,584号および第4,737,462号に記載される。これらおよび他の方法は、例えば、誘導体化されない抗体と比べた際、アクチビンAに対する親和性、結合力、または特異性の増加、体内外での活性または安定性の増加、または体外での副作用の減少等の所望の特性を有する、例えば、抗アクチビンA抗体の誘導体を製造するために使用することが可能である。
Curr.Prot.s in Immunol.,Suppl.4,pages 10.19.1−10.19.11により記載される抗体由来ポリペプチド(Fcドメインを含む)の様々な部分と融合する、特定の相同ポリペプチドを含む。
al.,1993,TIPS 14:139に記載されるものを含む。一実施形態においては、キメラ抗体はCDR移植抗体である。ヒト化抗体の技術は、例えば、米国特許番号第5,869,619号、第5,225,539号、第5,821,337号、第5,859,205号、第6,881,557号、Padlan et al.,1995,FASEB J.9:133−39、およびTamura et al.,2000,J.Immunol.164:1432−41に説明される。
U S A.90:2551−55.Chen,J.,M.Trounstine,F.W.Alt,F.Young,C.Kurahara,J.Loring,D.Huszar.Inter’l Immunol.5(1993):647−656,Choi
et al.,1993,Nature Genetics 4:117−23,Fishwild et al.,1996,Nature Biotech.14:845−51,Harding et al.,1995,Annals of the New York Academy of Sciences,Lonberg et al.,1994,Nature 368:856−59,Lonberg,1994,Transgenic Approaches to Human Monoclonal Antibodies in Handbook of Experimental Pharmacology 113:49−101,Lonberg et al.,1995,Internal Review of Immunology 13:65−93,Neuberger,1996,Nature Biotechnology 14:826,Taylor et al.,1992,Nucleic Acids Res.20:6287−95,Taylor et al.,1994,Inter’l Immunol.6:579−91,Tomizuka et al.,1997,Nature Genetics 16:133−43,Tomizuka et al.,2000,Pro.Nat’lAcad.Sci.USA 97:722−27,Tuaillon et al.,1993,Pro.Nat’lAcad.Sci.USA 90:3720−24,およびTuaillon et al.,1994,J.Immunol.152:2912−20に記載される。
23:175)、L細胞、293細胞、C127細胞、3T3細胞(ATCC CCL
163)、チャイニーズハムスター卵巣(CHO)細胞、HeLa細胞、BHK(ATCC CRL 10)細胞株、およびMcMahan et al.,1991,EMBO J.10:2821により記載されるような、アフリカミドリザル腎細胞株CVIに由来するCVI/EBNA細胞株(ATCC CCL 70)を含む。細菌、真菌、イースト、および哺乳類細胞宿主での使用に適切なクローニングおよび発現ベクターは、Pouwels et al.(Cloning Vectors:A Laboratory Manual,Elsevier,New York,1985)により記載される。
al.,2001,Biomol.Eng.18:95―108)。異なるVLおよびVHを含むポリペプチドを組み合わせることにより、異なるエピトープと結合する多量体のscFvを形成し得る(Kriangkum et al.,2001,Biomol.Eng.18:31―40)。1本鎖抗体の生成のために開発された技術は、米国特許第4,946,778号;Bird,1988,Science 242:423;Huston et al.,1988,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 85:5879;Ward et al.,1989,Nature 334:544,de Graaf et al.,2002,Methods Mol Biol 178:379―87に記載される技術を含む。本明細書に提供される抗体に由来する1本鎖抗体は、本発明により包含される、可変ドメインの組み合わせ、L1H1、L2H2、L3H3、L4H4、L5H5、L6H6、L7H7、L8H8、L9H9、L10H10、L11H11、L12H12、L13H13、およびL14H14を含むscFvを含むがこれらに限定されない。
in Enzymology 2:106,1991;Courtenay−Luck,“Genetic Manipulation of Monoclonal Antibodies,”in Monoclonal Antibodies:Production,Engineering and Clinical Application,Ritter et al.(eds.),page 166(Cambridge
University Press 1995);およびWard et al.,“Genetic Manipulation and Expression of Antibodies,”in Monoclonal Antibodies:Principles and Applications,Birch et al.,(eds.),page 137(Wiley−Liss,Inc.1995))を参照。
et al.,Biochem.,113(2):211―222(1974);Chou et al.,Adv.Enzymol.Relat.Areas Mol.Biol.,47:45―148(1978);Chou et al.,Ann.Rev.Biochem.,47:251―276、およびChou et al.,Biophys.J.,26:367―384(1979)を参照。さらに、二次構造の予測を補助するために、コンピュータープログラムが、現在利用可能である。二次構造を予測する一方法は、相同性モデリングに基づく。例えば、30%より大きい配列同一性、または40%より大きい類似性を有する、2つのポリペプチドまたはタンパク質は、同様の構造トポロジーを有する場合が多い。タンパク質構造データベース(PDB)の最近の成長は、ポリペプチドまたはタンパク質の構造における、見込まれる数の折り畳みを含む、改善された二次構造の予測可能性を提供している。Holm et al.,Nucl.Acid.Res.,27(1):244―247(1999)を参照。所与のポリペプチドまたはタンパク質において、制限された数の折り畳みが存在すること、および、一度臨界数の構造が分解されると、構造的予測は劇的により正確になることが、示唆されている(Brenner et al.,Curr.Op.Struct.Biol.,7(3):369―376(1997))。
et al.,1995 Ann.N.Y.Acad.Sci.764:525―35により記載される。この技術において、ヒト重鎖および軽鎖遺伝子座の要素は、内因性重鎖および軽鎖遺伝子座の標的破壊を含む胚幹細胞株に由来する系統のマウスに導入される(Bruggemann et al.,Curr.Opin.Biotechnol.8:455―58(1997)も参照)。例えば、ヒト免疫グロブリン導入遺伝子は、酵母人工染色体上のミニ遺伝子構築物または導入遺伝子座であり得て、マウスリンパ系組織におけるB−細胞特異的DNAの再配列および超変異を受ける。完全ヒトモノクローナル抗体は、トランスジェニックマウスに免疫を与えることにより得られ得て、次いで、アクチビンAに対して特異的なヒト抗体を生成し得る。免疫されたトランスジェニックマウスのリンパ細胞は、本明細書に記載される方法に従い、ヒト抗体分泌ハイブリドーマを生成するために、使用され得る。また、完全ヒト抗体を含むポリクローナル血清が、免疫動物の血液から得られ得る。
86:5728―32(1989);Alting−Mees et al.,Strategies in Molecular Biology 3:1―9(1990);Kang et al.,1991 Proc.Natl.Acad.Sci.USA 88:4363―66;Hoogenboom et al.,1992 J.Molec.Biol. 227:381―388;Schlebusch et al.,1997 Hybridoma 16:47―52、およびそれらに挙げられる参考文献を参照。例えば、Ig可変領域断片をコードする複数のポリヌクレオチド配列を含むライブラリーは、ファージコートタンパク質をコードする配列とフレーム状態にある、M13またはその変異形等の糸状バクテリオファージのゲノムに挿入され得る。融合タンパク質は、軽鎖可変領域ドメインおよび/または重鎖可変領域ドメインとの、コートタンパク質の融合であり得る。また、特定の実施形態に従い、免疫グロブリンFab断片は、ファージ粒子上にディスプレイされ得る(例えば、米国特許第5,698,426号を参照)。
一実施形態において、本発明は、単離された核酸分子を提供する。核酸は、例えば、抗原結合タンパク質の全てまたは一部をコードするポリヌクレオチド、例えば、本発明の抗体の1つの鎖または両方の鎖、もしくは断片、誘導体、変異タンパク質、またはそれらの変異形、ポリペプチドをコードするポリヌクレオチドを同定、解析、変異または増幅するためのハイブリダイゼーションプローブ、PCRプライマまたは配列決定プライマとしての使用に十分なポリヌクレオチドと、ポリヌクレオチドの発現を阻害するためのアンチセンス核酸と、上記の相補的配列とを含む。核酸は、任意の長さであることができる。それらは、例えば、長さが5、10、15、20、25、30、35、40、45、50、75、100、125、150、175、200、250、300、350、400、450、500、750、1,000、1,500、3,000、5,000ヌクレオチド以上であることができ、および/または1つ以上の付加的配列、例えば、調節配列を含むことができ、および/またはより大きな核酸、例えば、ベクターの一部であることができる。核酸は、1本鎖または2本鎖であることができ、RNAおよび/またはDNAヌクレオチド、ならびにそれらの人工変異形(例えば、ペプチド核酸)を含むことができる。
一実施形態において、本発明は、対象を治療する方法を提供する。例えば、方法は、概して、対象の健康に有益な効果があり、例えば、対象の予期される寿命を増加させる。あるいは、方法は、例えば、疾病、疾患、状態、または病気(「状態」)を治療、予防、治癒、軽減、または回復(「治療する」)することができる。本発明に従って治療される状態は、不適切な発現またはアクチビンAの活性を特徴とする。一部のかかる状態においては、発現または活性レベルが高過ぎ、治療には、本明細書に記述するようなアクチビンAアンタゴニストを投与することを含む。
新しいフレームワークおよび/または定常領域内への特異的A1〜A14CDRの操作を含む、本発明による抗体を産生する上記の方法において、所望の抗体を選択するために、適切なアッセイが利用可能である(つまり、アクチビンAへの結合親和性を決定するためのアッセイ、クロスブロッキングアッセイ、Biacoreに基づく競合結合アッセイ、生体内アッセイ)。
本明細書に提供した特定の方法は、対象にアクチビンA結合抗原結合タンパク質を投与し、それによって、特定の状態に影響するアクチビンA誘発の生物学的反応を減少させることを含む。特定の実施形態において、本発明の方法は、例えば、対象への投与または体外手順を介して、内在性アクチビンAを、アクチビンA結合抗原結合タンパク質と接触させることを含む。
別の実施形態において、本発明は、アクチビンA阻害抗原結合タンパク質および1つ以上の他の治療で対象を治療する方法を提供する。一実施形態において、そのような併用療法は、例えば、多部位または腫瘍中の分子標的を攻撃することによって、相乗作用または相加効果を達成する。本発明に関連して使用することができる併用療法の種類は、単一の疾患関連経路内の多数の結節、標的細胞内の複数の経路、および標的組織(例えば、腫瘍内)内の複数の細胞型を阻害または活性化(必要に応じて)することを含む。例えば、本発明のアクチビンA阻害剤は、アポトーシスを促進または血管新生を阻害する治療と組み合わせることができる。別の実施形態において、標的薬剤は、単独で治療的に所望の効果を引き出すことができない場合、例えば、癌細胞を感作するまたは他の薬剤の治療効果を増大させるために使用され得る。別の実施形態において、本発明によるアクチビンA阻害剤は、細胞障害性薬物またはアポトーシスを誘発する他の標的薬剤との組み合わせで使用される。別の実施形態において、アクチビンA阻害剤は、細胞生存(例えば、PKB、mTOR)に関与する異なる標的、異なる受容体チロシンキナーゼ(例えば、ErbB1、ErbB2、c−Met、c−kit)、または異なる細胞型(例えば、KDR阻害剤、c−fms)を阻害する1つ以上の薬剤との組み合わせで使用される。別の実施形態において、本発明のアクチビンA阻害剤は、特定の状態をケアする既存の基準に加えられる。治療薬の例は、ゲムシタビン、タキソール、タキソテール、およびCPT−11を含むがこれらに限定されない。
(2)抗アクチビンA結合剤への標識結合パートナ、
(3)抗アクチビンA結合剤が固定化される固相(試薬紙等)、および
(4)スクリーニング、診断、予後、もしくは治療的使用またはそれらの任意の組み合わせに対する規制認可を示す標識または挿入。
結合剤への標識結合パートナが提供されない場合、結合剤自体を、1つ以上の検出可能なマーカー、例えば、化学発光、酵素、蛍光、または放射性部分で標識することができる。
(実施例1)
アクチビンAの組み換え発現
馴化培地の限界濾過および透析濾過(UF/DF)。R−HuActivinAは、チャイニーズハムスター卵巣(chinese hamster ovary:CHO)細胞内で発現した。活性かつ精製材料を産生するために、一連のステップを展開した。精製工程は、Amicon S10Y10螺旋カートリッジを使用して15から20倍の間で馴化培地(conditioned media:C.M.)を濃縮(透析濾過)することによって開始した。次いで、5倍の10mMトリス緩衝液Ph7.0を使用して、緩衝液交換(ダイアフィルター)を行い、濾過して保存した。
抗アクチビンA雑種細胞の産生
アクチビンAに対する抗体を、ヒト免疫グロブリン遺伝子を含有するマウスである、XenoMouse(登録商標)マウス(Abgenix,Fremont,Calif.)中で育てた。XenoMouse(登録商標)系統XMG2は、完全ヒトIgG2カッパ抗体を生成するために使用した。第2の系統は完全ヒトIgG4カッパ抗体を生成するために使用した。マウスをアクチビンAで免疫化した。
CHO細胞中ヒト−huアクチビンA抗体の発現および精製
抗huアクチビンA発現プラスミドの形質移入に使用したCS−9細胞は、無血清懸濁液CHO細胞株であった。CS−9クローンは、組み換えタンパク質の発現のために、宿主細胞株として選択し、無血清培地に貯蔵した。貯蔵所は、外来性因子および無菌性に関して試験され、ウイルス性、マイコプラズマおよび微生物因子がないことが分かった。
7から10mlのC.M.に、PBS中で平衡化された単クローン抗体Select樹脂の100μlの1:2スラリーを加えた。チューブを4〜8℃で一晩回転板上に配置した。チューブを5分間1,000Xgで遠心分離し、非結合画分をデカントした。樹脂を5mlのPBSで洗浄し、遠心分離して、上記のようにデカントした。次いで、樹脂をSPIN−X、0.45um、2mlチューブに移した。樹脂を0.5mlのPBSでさらに2回洗浄し、遠心分離した。単クローン抗体は、10分間時折混合するとともに、室温でインキュベートすることによって、0.2mlの0.1M酢酸で溶出した。チューブを遠心分離し、30ulの1Mトリス緩衝液Ph8.0を溶出液に加えた。精製した単クローン抗体を4〜8℃で保存した。
C2C12細胞に基づくアクチビン活性アッセイ
このアッセイは、アクチビンAのその受容体との結合が阻害される程度を測定することによって試験される抗体の中和能力を立証する。アクチビン応答性レポーター細胞株は、pMARE−lucコンストラクトでのC2C12筋芽細胞(ATCC番号:CRL−1772)の形質移入によって産生した。pMARE−lucコンストラクトを、12の繰り返しのCAGA配列をクローニングすることによって生成し、TATAボックスのpLuc−MCSレポーターベクター(Stratageneカタログ番号219087)上流内へのアクチビン応答エレメント(Dennler et al.EMBO17:3091−3100(1998))を表した。筋芽細胞C2C12は、細胞表面上でアクチビンIIB受容体(actRIIB)を天然に発現させる。アクチビンが細胞受容体を結合する時、Smad経路が活性化され、リン酸化されたSmadは、応答エレメント(Macias−Silva et al.Cell 87:1215(1996))と結合し、ルシフェラーゼ細胞をもたらす。次いで、ルシフェラーゼ活性を、製造業者のプロトコルに従って、市販のルシフェラーゼレポーターアッセイキット(カタログ番号E4550、Promega,Madison,WI)を使用して測定する。
BIAcore(登録商標)アッセイ
アクチビンA抗体A1、A2およびA3の親和性解析は、センサチップCM5、および流動的緩衝液としての0.005パーセントP20界面活性物質(Biacore,Inc.)を使用する装置、BIAcore(登録商標)3000(Biacore,Inc.,Piscataway,NJ)で行った。組み換え成熟アクチビンAタンパク質は、製造業者の推奨プロトコルに従ってAmine Coupling Kit(Biacore,Inc.)を使用して、1級アミン基を介してリサーチグレードCM5センサチップ(Biacore,Inc.)に固定化した。
単クローン抗体に対するアクチビンA結合領域マッピング
アクチビンA上の抗体結合領域は、還元または非還元条件下のウエスタン、LysCを使用した制限プロテアーゼ消化、MSによるペプチド解析、およびBIAcoreを使用したペプチド競合を含む、多数の生化学的方法を使用して決定した。
このデータは、システインノットが、アクチビンBと比較して、アクチビンAと特異的に結合するこれらの中和抗体に結合するアクチビンAにとって重要であることを示した。システインノットは、互いに構造的に隣接する配列の2つの遠位ループを生成する。これらの2つの領域は、約C11−S33(第1のループ)および約C81−E111(第2のループ)アクチビンA(図7)の領域内の配列である。制限LysC消化は、これらの2つの領域が抗体A−1によって保護されたことを明らかにし、それらが、中和抗体と直接相互作用することを示した。中和抗体は、アクチビンAの立体構造的変化に感受性があり、それらが、抗原の非線形エピトープと結合することが示唆される。さらなるペプチド解析は、アクチビンAにおける断片G−1からK7およびS57〜F74が、中和抗体とのその結合に直接必要とされないことを示した。アクチビンBとアクチビンAの配列の比較によって、いくつかの配列差異がこの領域で発生することが示される。
選択性アッセイ
これらのアッセイは、アクチビンA、アクチビンB、アクチビンAB、インヒビンA、GDF−8、GDF−11、TGF−β−1、TGF−β−3、およびBMP4(全てR&D Systemsから)を含む種々のアクチビンおよび他のTGF−βファミリーメンバーとの、抗体A1、A2およびA3の結合の選択性を決定するために、BIAcore(登録商標)技術を使用して行った。ActRIIB/Fcを、製造業者の推奨プロトコルに従って、リサーチグレードセンサチップに共有結合的に連結した。BIAcoreアッセイは屈折率の変化を検出するので、任意の抗体が存在しない場合における制御面上の注入で検出される反応に比べて、固定化された受容体表面上への注入で検出される反応間の差は、受容体との、種々のリガンドの実際の結合を表す。抗体およびアクチビンならびにTGF−β分子の前インキュベーションとともに、結合反応の変化(増加または減少)は、分子のTGFβファミリーとの抗体結合を示す。抗体は、アクチビンB、GDF−8、GDF−11、TGF−β−1、TGF−β−3、およびBMP4とではなく、全てアクチビンAと結合するため、アクチビンAの特異性が示唆される。
キネックスA(登録商標)平衡アッセイ
KinExA(登録商標)技術(Sapidyne Instruments,Inc.)を使用する溶液ベースの平衡結合アッセイは、抗体分子と結合するアクチビンAの解離平衡(dissociation equilibrium:KD)を判定するために使用した。この溶液ベースのアッセイは、一部の例においてBIAcoreアッセイよりもより感受性があると考えられる。Reacti−Gel(登録商標)6Xを、一晩約50μg/mlのアクチビンAで前被覆し、次いでBSAでブロックした。30pMおよび100pMの抗体試料を、アクチビンA被覆ビーズに通す前に、8時間室温で種々の濃度の(0.5pMから5nM)アクチビンAとともにインキュベートした。ビーズ結合抗体の量は、スーパーブロック中1mg/mlで、蛍光(Cy5)標識したヤギ抗ヒトFc抗体によって定量化した。所与のアクチビンA濃度では、結合シグナルは、平衡で遊離抗体の濃度と比例した。KDは、KinEx A(登録商標)ソフトウェア(Sapidyne Instruments,Inc.)に提供される双対曲線一部位均一結合モデルを使用して、競合曲線の非線形回帰から取得した。結果を図8に示す。A1は、アクチビンA(KD〜3pM)に対する最大結合親和性を示す。A2およびA3は、それぞれ〜15pMおよび〜8pMでアクチビンAと結合した。
コラーゲン誘発関節炎モデルにおける体重および筋肉量減少への抗アクチビンの保護効果
この実施例は、アクチビン阻害剤が、コラーゲン誘発関節炎で見られる筋肉疲労状態を回復できるかどうかを試験するために設計した。コラーゲン誘発関節炎(Collagen−induced arthritis:CIA)は、関節リウマチ(rheumatoid arthritis:RA)といくつかの臨床的および病理学的特徴を共有する、広く利用されるマウスモデルである。CIAの正確な機構は知られていないが、CIAがTh−1媒介の炎症性疾患であることを示す多大な証拠がある。関節リウマチは、関節炎、および進行性軟骨/骨侵食に繋がる一般的な自己免疫疾患である。たとえRA進行が制御されているとしても、BCMの減少は、付加的かつ直接的な介入なしでは矯正されない。
1=1本の指の腫脹および/または発赤
2=病変のある2関節
3=3つ以上の関節
4=足および指全体の重症関節炎
処置は、8日目に開始するアクチビン抗体注射(s.c.)、週2回5mg/kgのs.c.で構成される。測定したエンドポイントは、体重、筋肉/脂肪量、食物摂取量および炎症性サイトカインであった。
若年生体ヌードマウスにおける筋肉内CHO/アクチビン異種移植
アクチビンA(CHO/アクチビン)を安定に形質移入されたCHO細胞は、1x106、5x106、および10x106の種々の用量で、筋肉内注射を介して若年生体CD1nu/nuマウスに移植した。形質移入されていないCHO細胞の同じ用量を、対照としてマウスの別々のグループに注射した。CHO/アクチビン移植は、対照と比較して急速かつ大幅な体重減少を誘発した。
AAVアクチビンマウスにおける抗アクチビン単クローン抗体A1
アクチビンAの生後過剰発現は、C57Bl/6マウスにおいて重度の悪液質様の消耗症候群をもたらした。体重は、1日目、4日目、9日目および11日目にわたって、16グラムから14、12.5に、11日目には最終的に10.5グラムにまで減少した。また、脂肪重量、除脂肪屠体重量および腓腹筋重量の減少もあった。
結腸26癌悪質液モデルにおける体重および除脂肪体重減少に対する抗アクチビンA単クローン抗体A1の保護効果
この実施例は、マウス癌悪液質モデルにおける抗アクチビンA単クローン抗体A−1の効果を防止する筋肉を実証する。癌悪液質のモデルは、0日目に8.5週齢の雄のCDF1マウス(0.5x106細胞/マウス)において、同質遺伝子的マウス結腸26腺癌細胞接種を使用して確立した。抗アクチビンA単クローン抗体A−1処置(10mg/kg、sc)は、4日目に開始し、18日間週3回行った。ナトリウム酢酸塩緩衝液(10nmナトリウム酢酸塩、5%スクロース、pH5.0)は、腫瘍を持つ対照グループマウスにおいてビヒクルとして使用した。年齢および体重を適合させた腫瘍を有さない正常CDF1マウスの1グループを、対応するベースライン対照として使用した。体重および食物摂取量は、毎週3回監視した。腫瘍サイズは、デジタル測径器で週3回測定した。体組成は、除脂肪量および脂肪量の変化を監視するために、研究の始めおよび最後にNMRを使用して測定した。実験の最後に、マウスをCO2チャンバ内で安楽死させた。末期ブロック試料を収集し、血清アクチビンAレベルをELISAで解析した。除脂肪屠体を秤量および記録し、腓腹筋および腫瘍を秤量し、適切に保存した。
アクチビンA ELISA
アクチビンAに対する抗体は、生体試料等の試料中のアクチビンAをアッセイおよび定量化するために使用することができる。組み換えヒトアクチビンA(100ng/ml、カタログ番号10−85106)およびアッセイ希釈緩衝液(0mg/ml、カタログ番号10−85101)をDSLabs(Webster、Texas)から購入し、4℃で保存した。標準物質は、アッセイ緩衝液に希釈することによって実験前に新たに調製した。
アクチビンAプロテアーゼ保護解析
プロテアーゼ保護アッセイを、アクチビンA抗体のエピトープ結合を同定するために行った。組み換えヒトアクチビンA分解製剤を3つの方法で解析した。第1の方法は、精製時に分解されたアクチビンA製剤を検査した。第2の方法は、リジンC、キモトリプシン、ペプシンおよびサーモリシンを用いたアクチビンA製剤のタンパク質分解を含んだ。第3の方法は、臭化シアンする製剤の化学分解を含んだ。
1.Gly1−His59(6,456.2Da)
2.Ser60−Tyr94(4,102.9Da)
3.Asp95−Ser116(2,452.8Da)
4.Gly1−Tyr94(10,541.1Da)
キモトリプシン様の活性により分解された製剤は、配列番号:225で示す位置で開裂される以下の種を有した。
2.31APSGYHANYCEGECPSHIAGTSGSSLSFH↓S60(配列番号263)
3.61TVINHYRMRGHSPFANLKSCCVPTKLRPMS90(配列番号264)
4.91MLYY↓DDGQNIIKKDIQNMIVEECGCS116(配列番号265)
図9に記載する種は、アクチビンA製剤がキモトリプシン、リジンC(LysC)、または臭化シアン(CNBr)によって分解される時の開裂部位の位置を示す。
アクチビンA結合アッセイ
単クローン抗体A1、A2、およびA3は、表6にリストした結合親和性によれば、アクチビンBではなくアクチビンAと結合する。したがって、アクチビンA抗体A1、A2、およびA3の親和性解析を、中和抗体結合に必要とされる領域または構造を決定するために行った。ActRII(A/B)、ActRI(A/B)(Alt4)、フォリスタチン、およびフォリスタチン関連遺伝子(FLRG)を含む、いくつかのアクチビンA結合タンパク質が既知である。
アクチビンA結合アッセイ領域マッピング(Biacore)
ブロッキングアッセイは、実施例5に記述したように、固定化した組み換えヒトアクチビンRIB−Fcキメラ表面、組み換えヒトアクチビンRIIB−Fcキメラ表面、および組み換えヒトRIIA−Fcキメラ組み換え表面上で行った。各キメラ表面上の単クローン抗体A1、A2、AKA1、およびAKA2を1nMアクチビンAでインキュベートし、相対結合反応(%)を測定した。抗体の存在下における結合反応の増加は、アクチビンAが、固定化された受容体表面と溶液中の抗体とに同時に結合できることを示し、これを「キャリーオン」と称す。結果を表7および図11に示すが、EC50は、50%結合を産出する有効な濃度を意味する。
アクチビンA/Bキメラ
アクチビンA/Bキメラを、実施例5および16に記述したように、単クローン抗体A1、A2、およびA3のエピトープ結合能力をさらに評価するために産生した。図12に示すように、2つのキメラを試験した。アクチビンA13/39B(アクチビンAの位置3〜39でのアミノ酸が、アクチビンBの位置13〜39にある対応するアミノ酸で置換される点を除き、アクチビンAのアミノ酸1〜116を含有する−配列番号:243)、およびアクチビンA82/107B(アクチビンAの位置82〜107でのアミノ酸が、アクチビンBの位置82−107での対応するアミノ酸で置換される点を除き、アクチビンAのアミノ酸1〜116を含有する−配列番号:244)。
Claims (1)
- 明細書に記載の発明。
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US84343006P | 2006-09-08 | 2006-09-08 | |
US60/843,430 | 2006-09-08 | ||
US95665307P | 2007-08-17 | 2007-08-17 | |
US60/956,653 | 2007-08-17 |
Related Parent Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009527594A Division JP5497438B2 (ja) | 2006-09-08 | 2007-09-07 | 抗アクチビンa抗体およびその使用 |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016092915A Division JP6457431B2 (ja) | 2006-09-08 | 2016-05-06 | 抗アクチビンa抗体およびその使用 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2013107899A true JP2013107899A (ja) | 2013-06-06 |
JP2013107899A5 JP2013107899A5 (ja) | 2014-05-22 |
JP5986518B2 JP5986518B2 (ja) | 2016-09-06 |
Family
ID=39103486
Family Applications (3)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009527594A Active JP5497438B2 (ja) | 2006-09-08 | 2007-09-07 | 抗アクチビンa抗体およびその使用 |
JP2013030740A Active JP5986518B2 (ja) | 2006-09-08 | 2013-02-20 | 抗アクチビンa抗体およびその使用 |
JP2016092915A Active JP6457431B2 (ja) | 2006-09-08 | 2016-05-06 | 抗アクチビンa抗体およびその使用 |
Family Applications Before (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2009527594A Active JP5497438B2 (ja) | 2006-09-08 | 2007-09-07 | 抗アクチビンa抗体およびその使用 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2016092915A Active JP6457431B2 (ja) | 2006-09-08 | 2016-05-06 | 抗アクチビンa抗体およびその使用 |
Country Status (22)
Country | Link |
---|---|
US (5) | US8309082B2 (ja) |
EP (5) | EP3133084B1 (ja) |
JP (3) | JP5497438B2 (ja) |
AR (1) | AR062703A1 (ja) |
AU (1) | AU2007294580C1 (ja) |
CA (1) | CA2661878C (ja) |
CL (1) | CL2007002567A1 (ja) |
CY (2) | CY1116037T1 (ja) |
DK (2) | DK2064239T3 (ja) |
ES (2) | ES2528798T3 (ja) |
HR (2) | HRP20150171T1 (ja) |
HU (1) | HUE030463T2 (ja) |
LT (1) | LT2559705T (ja) |
ME (1) | ME02539B (ja) |
MX (1) | MX2009002571A (ja) |
PE (1) | PE20080914A1 (ja) |
PL (2) | PL2064239T3 (ja) |
PT (2) | PT2559705T (ja) |
RS (2) | RS53819B1 (ja) |
SI (2) | SI2064239T1 (ja) |
TW (1) | TW200819466A (ja) |
WO (1) | WO2008031061A2 (ja) |
Families Citing this family (142)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
EP3489257A1 (en) | 2004-07-23 | 2019-05-29 | Acceleron Pharma Inc. | Actrii receptor polypeptides, methods and compositions |
US8067562B2 (en) | 2005-11-01 | 2011-11-29 | Amgen Inc. | Isolated nucleic acid molecule comprising the amino acid sequence of SEQ ID NO:1 |
RS58231B1 (sr) | 2005-11-23 | 2019-03-29 | Acceleron Pharma Inc | Antagonisti aktivin-actriia i primene za stimulaciju rasta kostiju |
US8128933B2 (en) | 2005-11-23 | 2012-03-06 | Acceleron Pharma, Inc. | Method of promoting bone growth by an anti-activin B antibody |
CL2007002567A1 (es) * | 2006-09-08 | 2008-02-01 | Amgen Inc | Proteinas aisladas de enlace a activina a humana. |
US8895016B2 (en) | 2006-12-18 | 2014-11-25 | Acceleron Pharma, Inc. | Antagonists of activin-actriia and uses for increasing red blood cell levels |
DK2124999T3 (da) | 2006-12-18 | 2013-01-14 | Acceleron Pharma Inc | Activin-actrii antagonister og anvendelser til behandling af anæmi |
TWI584815B (zh) | 2007-02-01 | 2017-06-01 | 艾瑟勒朗法瑪公司 | 活化素-ActRIIa拮抗劑及其治療或預防乳癌之用途 |
TW201907946A (zh) | 2007-02-02 | 2019-03-01 | 美商艾瑟勒朗法瑪公司 | 衍生自ActRIIB的變體與其用途 |
EA018221B1 (ru) * | 2007-02-09 | 2013-06-28 | Акселерон Фарма Инк. | АНТАГОНИСТЫ АКТИВИНА-ActRIIa И ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ СТИМУЛЯЦИИ РОСТА КОСТИ У БОЛЬНЫХ РАКОМ |
TWI573802B (zh) | 2007-03-06 | 2017-03-11 | 安美基公司 | 變異之活動素受體多肽及其用途 |
US8501678B2 (en) | 2007-03-06 | 2013-08-06 | Atara Biotherapeutics, Inc. | Variant activin receptor polypeptides and uses thereof |
US20110097318A1 (en) * | 2007-08-31 | 2011-04-28 | Amgen Inc. | Solid-State Protein Formulation |
CN103877564A (zh) | 2007-09-18 | 2014-06-25 | 阿塞勒隆制药公司 | 活化素-actriia拮抗剂和减少或抑制fsh分泌的用途 |
PL3494986T3 (pl) | 2008-08-14 | 2020-11-16 | Acceleron Pharma Inc. | Pułapki GDF |
US8216997B2 (en) | 2008-08-14 | 2012-07-10 | Acceleron Pharma, Inc. | Methods for increasing red blood cell levels and treating anemia using a combination of GDF traps and erythropoietin receptor activators |
JP5611222B2 (ja) | 2008-11-26 | 2014-10-22 | アムジエン・インコーポレーテツド | アクチビンiib受容体ポリペプチドの変異体及びその使用 |
EP2387412A4 (en) | 2009-01-13 | 2013-04-03 | Acceleron Pharma Inc | METHODS FOR INCREASING ADIPONECTIN |
AU2010258931B2 (en) | 2009-06-08 | 2015-04-23 | Acceleron Pharma Inc. | Methods for increasing thermogenic adipocytes |
WO2010151426A1 (en) | 2009-06-12 | 2010-12-29 | Acceleron Pharma Inc. | Truncated actriib-fc fusion proteins |
EP2490957B1 (en) | 2009-10-23 | 2016-11-23 | Amgen, Inc | Vial adapter and system |
EP2501400B1 (en) | 2009-11-17 | 2017-11-01 | Acceleron Pharma, Inc. | Actriib proteins and variants and uses therefore relating to utrophin induction for muscular dystrophy therapy |
WO2014121221A1 (en) * | 2013-02-01 | 2014-08-07 | Santa Maria Biotherapeutics, Inc. | Administration of an anti-activin-a compound to a subject |
JO3340B1 (ar) | 2010-05-26 | 2019-03-13 | Regeneron Pharma | مضادات حيوية لـعامل تمايز النمو 8 البشري |
BR112012031121B1 (pt) | 2010-06-07 | 2022-09-27 | Amgen Inc | Dispositivo de distribuição de drogas, kit e método de operar um dispositivo de distribuição de droga utilizável |
SG10201506405YA (en) | 2010-08-16 | 2015-10-29 | Amgen Inc | Polypeptides That Bind Myostatin, Compositions And Methods |
EP2638065A4 (en) * | 2010-11-08 | 2014-04-09 | Acceleron Pharma Inc | ACTRIIA BINDING AGENTS AND USES THEREOF |
MX341790B (es) | 2011-03-31 | 2016-09-02 | Amgen Inc | Adaptador de viales y sistema. |
SI2699293T1 (sl) | 2011-04-20 | 2019-05-31 | Amgen Inc. | Avtoinjekcijski aparat |
KR102222187B1 (ko) | 2011-10-14 | 2021-03-03 | 암젠 인크 | 주사기 및 어셈블리 방법 |
RS56796B1 (sr) * | 2011-11-14 | 2018-04-30 | Regeneron Pharma | Kompozicije i postupci za uvećanje mišićne mase i jačine mišića specifičnim antagonizovanjem gdf8 i/ili aktivina a |
MX358358B (es) | 2011-12-19 | 2018-08-15 | Amgen Inc | Polipeptidos de receptores de activina variantes y sus usos. |
AU2013337677B2 (en) | 2012-11-02 | 2018-06-28 | Celgene Corporation | Activin-ActRII antagonists and uses for treating bone and other disorders |
US20150290390A1 (en) | 2012-11-21 | 2015-10-15 | Amgen Inc. | Drug delivery device |
UY35148A (es) | 2012-11-21 | 2014-05-30 | Amgen Inc | Immunoglobulinas heterodiméricas |
EP2968760B1 (en) | 2013-03-15 | 2024-01-03 | Amgen Inc. | Drug cassette, autoinjector, and autoinjector system |
TWI639453B (zh) | 2013-03-15 | 2018-11-01 | 美商安美基公司 | 用於注射器之匣盒 |
WO2014144817A2 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-18 | Amgen Inc. | Inhibitory polypeptides specific to wnt inhibitors |
EP3831427A1 (en) | 2013-03-22 | 2021-06-09 | Amgen Inc. | Injector and method of assembly |
TW201920262A (zh) * | 2013-07-30 | 2019-06-01 | 美商再生元醫藥公司 | 抗活化素a之抗體及其用途 |
EP3041863A4 (en) | 2013-09-05 | 2017-08-16 | Amgen Inc. | Fc-containing molecules exhibiting predictable, consistent, and reproducible glycoform profiles |
KR102373930B1 (ko) | 2013-09-13 | 2022-03-11 | 제넨테크, 인크. | 정제된 재조합 폴리펩티드를 포함하는 방법 및 조성물 |
JP6546178B2 (ja) | 2013-09-13 | 2019-07-17 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 細胞株中の宿主細胞タンパク質及び組換えポリペプチド産物を検出及び定量化するための組成物並びに方法 |
PL3060275T3 (pl) | 2013-10-24 | 2019-12-31 | Amgen Inc. | Wstrzykiwacz i sposób montażu |
AU2014340174B2 (en) | 2013-10-24 | 2019-09-12 | Amgen Inc. | Drug delivery system with temperature-sensitive control |
WO2015119906A1 (en) | 2014-02-05 | 2015-08-13 | Amgen Inc. | Drug delivery system with electromagnetic field generator |
EP3139977B1 (en) | 2014-05-07 | 2021-02-17 | Amgen Inc. | Autoinjector with shock reducing elements |
EP3467501B1 (en) | 2014-05-16 | 2020-11-04 | Amgen Inc. | Assay for detecting th1 and th2 cell populations |
IL281354B2 (en) | 2014-06-03 | 2024-06-01 | Amgen Inc | Devices and methods to assist the user of a drug delivery device |
US9850298B2 (en) | 2014-06-13 | 2017-12-26 | Acceleron Pharma Inc. | Methods for treating ulcers in thalassemia syndrome with an ActRIIB polypeptide |
US20160075772A1 (en) | 2014-09-12 | 2016-03-17 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of Fibrodysplasia Ossificans Progressiva |
MA41052A (fr) | 2014-10-09 | 2017-08-15 | Celgene Corp | Traitement d'une maladie cardiovasculaire à l'aide de pièges de ligands d'actrii |
JP6766040B2 (ja) | 2014-10-14 | 2020-10-07 | アムジエン・インコーポレーテツド | 視覚および可聴インジケータを備える薬剤注射装置 |
RS64214B1 (sr) | 2014-12-03 | 2023-06-30 | Celgene Corp | Antagonisti aktivin-actrii i njihova primena u lečenju mijelodisplastičnog sindroma |
WO2016100781A1 (en) | 2014-12-19 | 2016-06-23 | Amgen Inc. | Drug delivery device with proximity sensor |
EP3233159B1 (en) | 2014-12-19 | 2020-03-04 | Amgen Inc. | Drug delivery device with live button or user interface field |
AU2016220141B2 (en) | 2015-02-17 | 2018-07-12 | Amgen Inc. | Drug delivery device with vacuum assisted securement and/or feedback |
EP3261690B1 (en) | 2015-02-27 | 2021-12-15 | Amgen Inc. | Drug delivery device having a needle guard mechanism with a tunable threshold of resistance to needle guard movement |
EA039118B1 (ru) * | 2015-04-01 | 2021-12-07 | Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. | Способ лечения прогрессирующей оссифицирующей фибродисплазии |
CN107771081A (zh) | 2015-04-15 | 2018-03-06 | 瑞泽恩制药公司 | 用gdf8抑制剂增加力量和功能的方法 |
KR20170140318A (ko) | 2015-04-29 | 2017-12-20 | 리제너론 파마슈티칼스 인코포레이티드 | 진행성 골화성 섬유이형성증의 치료 |
WO2016205042A1 (en) * | 2015-06-16 | 2016-12-22 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | SIRPα AGONIST ANTIBODY |
PE20180802A1 (es) * | 2015-08-05 | 2018-05-09 | Janssen Biotech Inc | Anticuerpos anti-cd154 y metodos de uso de estos |
WO2017039786A1 (en) | 2015-09-02 | 2017-03-09 | Amgen Inc. | Syringe assembly adapter for a syringe |
JP7082568B2 (ja) | 2015-12-09 | 2022-06-08 | アムジエン・インコーポレーテツド | 信号伝達キャップ付き自動注射器 |
WO2017120178A1 (en) | 2016-01-06 | 2017-07-13 | Amgen Inc. | Auto-injector with signaling electronics |
KR20180104036A (ko) | 2016-01-22 | 2018-09-19 | 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 | 항-응고 인자 xi 항체 |
WO2017139564A1 (en) * | 2016-02-11 | 2017-08-17 | The Johns Hopkins University | Compositions and methods for targeting activin signaling to treat cancer |
ES2814287T3 (es) | 2016-03-15 | 2021-03-26 | Amgen Inc | Reducir la probabilidad de rotura de cristal en dispositivos de administración de fármaco |
US11541168B2 (en) | 2016-04-29 | 2023-01-03 | Amgen Inc. | Drug delivery device with messaging label |
WO2017192287A1 (en) | 2016-05-02 | 2017-11-09 | Amgen Inc. | Syringe adapter and guide for filling an on-body injector |
JP7309363B2 (ja) | 2016-05-13 | 2023-07-18 | アムジエン・インコーポレーテツド | バイアル・スリーブ組立体 |
US11238150B2 (en) | 2016-05-16 | 2022-02-01 | Amgen Inc. | Data encryption in medical devices with limited computational capability |
US11541176B2 (en) | 2016-06-03 | 2023-01-03 | Amgen Inc. | Impact testing apparatuses and methods for drug delivery devices |
SG10202103120UA (en) | 2016-06-14 | 2021-05-28 | Merck Sharp & Dohme | Anti-coagulation factor xi antibodies |
EP3478342A1 (en) | 2016-07-01 | 2019-05-08 | Amgen Inc. | Drug delivery device having minimized risk of component fracture upon impact events |
US20190328965A1 (en) | 2016-08-17 | 2019-10-31 | Amgen Inc. | Drug delivery device with placement detection |
WO2018081234A1 (en) | 2016-10-25 | 2018-05-03 | Amgen Inc. | On-body injector |
AU2018210301A1 (en) | 2017-01-17 | 2019-08-01 | Amgen Inc. | Injection devices and related methods of use and assembly |
AU2018221351B2 (en) | 2017-02-17 | 2023-02-23 | Amgen Inc. | Insertion mechanism for drug delivery device |
CA3048520A1 (en) | 2017-02-17 | 2018-08-23 | Amgen Inc. | Drug delivery device with sterile fluid flowpath and related method of assembly |
CA3050927A1 (en) | 2017-03-06 | 2018-09-13 | Brian Stonecipher | Drug delivery device with activation prevention feature |
KR102627069B1 (ko) | 2017-03-07 | 2024-01-18 | 암겐 인코포레이티드 | 과압에 의한 바늘 삽입 |
KR20240005194A (ko) | 2017-03-09 | 2024-01-11 | 암겐 인코포레이티드 | 약물 전달 장치용 삽입 메커니즘 |
US20200131518A1 (en) | 2017-03-14 | 2020-04-30 | Amgen Inc. | Control of total afucosylated glycoforms of antibodies produced in cell culture |
ES2959935T3 (es) | 2017-03-28 | 2024-02-29 | Amgen Inc | Sistema y método de vástago de émbolo y conjunto de jeringa |
CN110709121B (zh) | 2017-06-08 | 2022-06-24 | 安进公司 | 扭矩驱动式药物递送装置 |
US11590294B2 (en) | 2017-06-08 | 2023-02-28 | Amgen Inc. | Syringe assembly for a drug delivery device and method of assembly |
WO2018231827A1 (en) * | 2017-06-12 | 2018-12-20 | Bluefin Biomedicine, Inc. | Anti-il1rap antibodies and antibody drug conjugates |
US11541183B2 (en) | 2017-06-22 | 2023-01-03 | Amgen Inc. | Device activation impact/shock reduction |
US11395880B2 (en) | 2017-06-23 | 2022-07-26 | Amgen Inc. | Electronic drug delivery device |
MA49562A (fr) | 2017-07-14 | 2020-05-20 | Amgen Inc | Système d'insertion-rétractation d'aiguille présentant un système à ressort en double torsion |
IL271173B2 (en) | 2017-07-21 | 2024-04-01 | Amgen Inc | Gas permeable sealing element for drug container and methods of assembly |
WO2019022950A1 (en) | 2017-07-25 | 2019-01-31 | Amgen Inc. | DRUG DELIVERY DEVICE WITH CONTAINER ACCESS SYSTEM AND ASSEMBLY METHOD THEREOF |
EP3658203B1 (en) | 2017-07-25 | 2022-08-31 | Amgen Inc. | Drug delivery device with gear module and related method of assembly |
WO2019032482A2 (en) | 2017-08-09 | 2019-02-14 | Amgen Inc. | HYDRAULIC-PNEUMATIC PRESSURE CHAMBER DELIVERY SYSTEM |
US11077246B2 (en) | 2017-08-18 | 2021-08-03 | Amgen Inc. | Wearable injector with sterile adhesive patch |
US11103636B2 (en) | 2017-08-22 | 2021-08-31 | Amgen Inc. | Needle insertion mechanism for drug delivery device |
WO2019070472A1 (en) | 2017-10-04 | 2019-04-11 | Amgen Inc. | FLOW ADAPTER FOR MEDICATION DELIVERY DEVICE |
WO2019070552A1 (en) | 2017-10-06 | 2019-04-11 | Amgen Inc. | DRUG DELIVERY DEVICE COMPRISING A LOCKOUT ASSEMBLY AND ASSOCIATED ASSEMBLY METHOD |
IL273323B1 (en) | 2017-10-09 | 2024-06-01 | Amgen Inc | Drug delivery device with drive assembly and related assembly method |
EP3703779A1 (en) | 2017-11-03 | 2020-09-09 | Amgen Inc. | Systems and approaches for sterilizing a drug delivery device |
JP2021501616A (ja) | 2017-11-06 | 2021-01-21 | アムジエン・インコーポレーテツド | 配置及び流量検出を備える薬物送達デバイス |
US20200338271A1 (en) | 2017-11-06 | 2020-10-29 | Amgen Inc. | Fill-finish assemblies and related methods |
EP3706826A1 (en) | 2017-11-10 | 2020-09-16 | Amgen Inc. | Plungers for drug delivery devices |
CA3079540A1 (en) | 2017-11-16 | 2019-05-23 | Amgen Inc. | Door latch mechanism for drug delivery device |
AU2018368338A1 (en) | 2017-11-16 | 2020-04-09 | Amgen Inc. | Autoinjector with stall and end point detection |
CA3092334A1 (en) | 2018-03-01 | 2019-09-06 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for altering body composition |
SG11202009216YA (en) | 2018-03-26 | 2020-10-29 | Amgen Inc | Total afucosylated glycoforms of antibodies produced in cell culture |
US10835685B2 (en) | 2018-05-30 | 2020-11-17 | Amgen Inc. | Thermal spring release mechanism for a drug delivery device |
US11083840B2 (en) | 2018-06-01 | 2021-08-10 | Amgen Inc. | Modular fluid path assemblies for drug delivery devices |
US20210260279A1 (en) | 2018-07-24 | 2021-08-26 | Amgen Inc. | Hybrid drug delivery devices with optional grip portion and related method of preparation |
MX2021000749A (es) | 2018-07-24 | 2021-03-29 | Amgen Inc | Dispositivos de suministro para administrar farmacos. |
WO2020023444A1 (en) | 2018-07-24 | 2020-01-30 | Amgen Inc. | Delivery devices for administering drugs |
WO2020023336A1 (en) | 2018-07-24 | 2020-01-30 | Amgen Inc. | Hybrid drug delivery devices with grip portion |
WO2020028009A1 (en) | 2018-07-31 | 2020-02-06 | Amgen Inc. | Fluid path assembly for a drug delivery device |
AU2019347710A1 (en) | 2018-09-24 | 2021-02-04 | Amgen Inc. | Interventional dosing systems and methods |
WO2020068476A1 (en) | 2018-09-28 | 2020-04-02 | Amgen Inc. | Muscle wire escapement activation assembly for a drug delivery device |
MX2021003492A (es) | 2018-10-02 | 2021-06-18 | Amgen Inc | Sistemas de inyeccion para la administracion de farmacos con transmision de fuerza interna. |
MX2021003491A (es) | 2018-10-05 | 2021-06-18 | Amgen Inc | Dispositivo de administracion de farmacos con indicador de dosis. |
MA53912A (fr) | 2018-10-15 | 2022-01-19 | Amgen Inc | Dispositif d'administration de médicament comprenant un mécanisme d'amortissement |
EA202191038A1 (ru) | 2018-10-15 | 2021-07-06 | Эмджен Инк. | Способ платформенной сборки для устройства доставки лекарственного средства |
AU2019370159A1 (en) | 2018-11-01 | 2021-04-22 | Amgen Inc. | Drug delivery devices with partial drug delivery member retraction |
TWI831847B (zh) | 2018-11-01 | 2024-02-11 | 美商安進公司 | 部分針頭縮回之藥物遞送裝置及其操作方法 |
EP3873566A1 (en) | 2018-11-01 | 2021-09-08 | Amgen Inc. | Drug delivery devices with partial drug delivery member retraction |
CN113195532A (zh) | 2018-12-18 | 2021-07-30 | 瑞泽恩制药公司 | 使用针对瘦素受体、gdf8和活化素a的拮抗剂增加体重和瘦肌肉质量的组合物和方法 |
AU2020263289A1 (en) | 2019-04-24 | 2021-09-16 | Amgen Inc. | Syringe sterilization verification assemblies and methods |
US20220242956A1 (en) * | 2019-05-30 | 2022-08-04 | Acceleron Pharma Inc. | Actrii-binding proteins and uses thereof |
AU2020337250A1 (en) | 2019-08-23 | 2022-03-03 | Amgen Inc. | Drug delivery device with configurable needle shield engagement components and related methods |
JP2022549329A (ja) | 2019-09-26 | 2022-11-24 | アムジェン インコーポレイテッド | 抗体組成物を製造する方法 |
BR112022013589A2 (pt) | 2020-01-08 | 2022-09-13 | Regeneron Pharma | Tratamento da fibrodisplasia ossificante progressiva |
EP4162257A1 (en) | 2020-06-04 | 2023-04-12 | Amgen Inc. | Assessment of cleaning procedures of a biotherapeutic manufacturing process |
AU2021327238A1 (en) | 2020-08-20 | 2023-04-27 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for preventing and treating cardiac dysfunction and covid-19 with activin a antagonists |
CA3197930A1 (en) | 2020-10-15 | 2022-04-21 | Amgen Inc. | Relative unpaired glycans in antibody production methods |
WO2022140670A2 (en) * | 2020-12-23 | 2022-06-30 | Phenomic Ai | Anti-activin antibodies and methods of using the same |
MX2023013640A (es) | 2021-05-21 | 2023-11-30 | Amgen Inc | Metodo de optimizacion de una receta de llenado para un contenedor de medicamento. |
CA3222409A1 (en) | 2021-06-07 | 2022-12-15 | Amgen Inc. | Using fucosidase to control afucosylation level of glycosylated proteins |
AU2022361382A1 (en) | 2021-10-05 | 2024-03-28 | Amgen Inc. | Fc-gamma receptor ii binding and glycan content |
CA3235627A1 (en) * | 2021-10-18 | 2023-04-27 | Byomass Inc. | Anti-activin a antibodies, compositions and uses thereof |
WO2023147107A1 (en) * | 2022-01-31 | 2023-08-03 | Byomass Inc. | Myeloproliferative conditions |
WO2023215725A1 (en) | 2022-05-02 | 2023-11-09 | Fred Hutchinson Cancer Center | Compositions and methods for cellular immunotherapy |
US20240199728A1 (en) | 2022-09-21 | 2024-06-20 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of treating obesity, diabetes, and liver dysfunction |
Family Cites Families (82)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US32011A (en) | 1861-04-09 | Coffee-pot | ||
US4179337A (en) | 1973-07-20 | 1979-12-18 | Davis Frank F | Non-immunogenic polypeptides |
JPS6023084B2 (ja) | 1979-07-11 | 1985-06-05 | 味の素株式会社 | 代用血液 |
US4331647A (en) | 1980-03-03 | 1982-05-25 | Goldenberg Milton David | Tumor localization and therapy with labeled antibody fragments specific to tumor-associated markers |
US4411993A (en) | 1981-04-29 | 1983-10-25 | Steven Gillis | Hybridoma antibody which inhibits interleukin 2 activity |
US4640835A (en) | 1981-10-30 | 1987-02-03 | Nippon Chemiphar Company, Ltd. | Plasminogen activator derivatives |
USRE32011E (en) | 1981-12-14 | 1985-10-22 | Scripps Clinic And Research Foundation | Ultrapurification of factor VIII using monoclonal antibodies |
JPS58117537A (ja) | 1982-01-06 | 1983-07-13 | Toray Ind Inc | 感光性樹脂組成物 |
US4737462A (en) | 1982-10-19 | 1988-04-12 | Cetus Corporation | Structural genes, plasmids and transformed cells for producing cysteine depleted muteins of interferon-β |
US4543439A (en) | 1982-12-13 | 1985-09-24 | Massachusetts Institute Of Technology | Production and use of monoclonal antibodies to phosphotyrosine-containing proteins |
US4518584A (en) | 1983-04-15 | 1985-05-21 | Cetus Corporation | Human recombinant interleukin-2 muteins |
US4496689A (en) | 1983-12-27 | 1985-01-29 | Miles Laboratories, Inc. | Covalently attached complex of alpha-1-proteinase inhibitor with a water soluble polymer |
US4902614A (en) | 1984-12-03 | 1990-02-20 | Teijin Limited | Monoclonal antibody to human protein C |
US4751180A (en) | 1985-03-28 | 1988-06-14 | Chiron Corporation | Expression using fused genes providing for protein product |
EP0206448B1 (en) | 1985-06-19 | 1990-11-14 | Ajinomoto Co., Inc. | Hemoglobin combined with a poly(alkylene oxide) |
US4935233A (en) | 1985-12-02 | 1990-06-19 | G. D. Searle And Company | Covalently linked polypeptide cell modulators |
US5225539A (en) | 1986-03-27 | 1993-07-06 | Medical Research Council | Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies |
US4973577A (en) | 1986-04-04 | 1990-11-27 | The Salk Institute For Biological Studies | FSH-releasing peptides |
US4791192A (en) | 1986-06-26 | 1988-12-13 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Chemically modified protein with polyethyleneglycol |
US4946778A (en) | 1987-09-21 | 1990-08-07 | Genex Corporation | Single polypeptide chain binding molecules |
US5011912A (en) | 1986-12-19 | 1991-04-30 | Immunex Corporation | Hybridoma and monoclonal antibody for use in an immunoaffinity purification system |
JPH01171495A (ja) * | 1987-12-25 | 1989-07-06 | Ajinomoto Co Inc | モノクローナル抗体及びそれを用いる定量法 |
US5223409A (en) | 1988-09-02 | 1993-06-29 | Protein Engineering Corp. | Directed evolution of novel binding proteins |
US5549910A (en) | 1989-03-31 | 1996-08-27 | The Regents Of The University Of California | Preparation of liposome and lipid complex compositions |
US5859205A (en) | 1989-12-21 | 1999-01-12 | Celltech Limited | Humanised antibodies |
US5466468A (en) | 1990-04-03 | 1995-11-14 | Ciba-Geigy Corporation | Parenterally administrable liposome formulation comprising synthetic lipids |
GB9014932D0 (en) | 1990-07-05 | 1990-08-22 | Celltech Ltd | Recombinant dna product and method |
JP3218637B2 (ja) | 1990-07-26 | 2001-10-15 | 大正製薬株式会社 | 安定なリポソーム水懸濁液 |
WO1992002551A1 (en) | 1990-08-02 | 1992-02-20 | B.R. Centre Limited | Methods for the production of proteins with a desired function |
JP2958076B2 (ja) | 1990-08-27 | 1999-10-06 | 株式会社ビタミン研究所 | 遺伝子導入用多重膜リポソーム及び遺伝子捕捉多重膜リポソーム製剤並びにその製法 |
US5877397A (en) | 1990-08-29 | 1999-03-02 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes |
US5814318A (en) | 1990-08-29 | 1998-09-29 | Genpharm International Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
DE69133476T2 (de) | 1990-08-29 | 2006-01-05 | GenPharm International, Inc., Palo Alto | Transgene Mäuse fähig zur Produktion heterologer Antikörper |
US5545806A (en) | 1990-08-29 | 1996-08-13 | Genpharm International, Inc. | Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
US5698426A (en) | 1990-09-28 | 1997-12-16 | Ixsys, Incorporated | Surface expression libraries of heteromeric receptors |
US5145684A (en) | 1991-01-25 | 1992-09-08 | Sterling Drug Inc. | Surface modified drug nanoparticles |
US5399363A (en) | 1991-01-25 | 1995-03-21 | Eastman Kodak Company | Surface modified anticancer nanoparticles |
WO1994004679A1 (en) | 1991-06-14 | 1994-03-03 | Genentech, Inc. | Method for making humanized antibodies |
ATE255131T1 (de) | 1991-06-14 | 2003-12-15 | Genentech Inc | Humanisierter heregulin antikörper |
US5262522A (en) | 1991-11-22 | 1993-11-16 | Immunex Corporation | Receptor for oncostatin M and leukemia inhibitory factor |
JPH05244982A (ja) | 1991-12-06 | 1993-09-24 | Sumitomo Chem Co Ltd | 擬人化b−b10 |
US5869619A (en) | 1991-12-13 | 1999-02-09 | Xoma Corporation | Modified antibody variable domains |
ES2198414T3 (es) | 1992-10-23 | 2004-02-01 | Immunex Corporation | Procedimientos para preparar proteinas oligomericas solubles. |
US5543158A (en) | 1993-07-23 | 1996-08-06 | Massachusetts Institute Of Technology | Biodegradable injectable nanoparticles |
US5457035A (en) | 1993-07-23 | 1995-10-10 | Immunex Corporation | Cytokine which is a ligand for OX40 |
US5545616A (en) * | 1994-09-22 | 1996-08-13 | Genentech, Inc. | Method for predicting and/or preventing preterm labor |
US5795587A (en) | 1995-01-23 | 1998-08-18 | University Of Pittsburgh | Stable lipid-comprising drug delivery complexes and methods for their production |
IE80468B1 (en) | 1995-04-04 | 1998-07-29 | Elan Corp Plc | Controlled release biodegradable nanoparticles containing insulin |
EP1978033A3 (en) | 1995-04-27 | 2008-12-24 | Amgen Fremont Inc. | Human antibodies derived from immunized xenomice |
US5738868A (en) | 1995-07-18 | 1998-04-14 | Lipogenics Ltd. | Liposome compositions and kits therefor |
US6133426A (en) | 1997-02-21 | 2000-10-17 | Genentech, Inc. | Humanized anti-IL-8 monoclonal antibodies |
DK0985039T3 (da) | 1997-06-12 | 2008-06-09 | Novartis Int Pharm Ltd | Kunstige antistof-polypeptider |
GB9722131D0 (en) | 1997-10-20 | 1997-12-17 | Medical Res Council | Method |
GB9928787D0 (en) | 1999-12-03 | 2000-02-02 | Medical Res Council | Direct screening method |
JP4487376B2 (ja) | 2000-03-31 | 2010-06-23 | 味の素株式会社 | 腎疾患治療剤 |
EP1290169A2 (en) | 2000-06-01 | 2003-03-12 | Amgen, Inc. | Cystine-knot polypeptides: cloaked-2 molecules and uses thereof |
GB0025144D0 (en) | 2000-10-13 | 2000-11-29 | Medical Res Council | Concatenated nucleic acid sequences |
US20030133939A1 (en) | 2001-01-17 | 2003-07-17 | Genecraft, Inc. | Binding domain-immunoglobulin fusion proteins |
MXPA05000511A (es) | 2001-07-12 | 2005-09-30 | Jefferson Foote | Anticuepros super humanizados. |
AUPR638101A0 (en) | 2001-07-13 | 2001-08-09 | Bioa Pty Limited | Composition and method for treatment of disease |
AU2002333241B2 (en) | 2001-07-18 | 2008-09-18 | Merck Patent Gmbh | Glycoprotein VI fusion proteins |
US20040202995A1 (en) | 2003-04-09 | 2004-10-14 | Domantis | Nucleic acids, proteins, and screening methods |
PL1648998T3 (pl) | 2003-07-18 | 2015-03-31 | Amgen Inc | Specyficzne czynniki wiążące czynnik wzrostu hepatocytów |
US7514534B2 (en) | 2003-11-19 | 2009-04-07 | Dyax Corp. | Metalloproteinase-binding proteins |
AU2005229009A1 (en) | 2004-03-23 | 2005-10-13 | Amgen, Inc. | Monoclonal antibodies specific for human OX40L (CD 134L) |
CA2564538A1 (en) | 2004-04-22 | 2005-12-01 | Oregon Health And Science University | Compositions and methods for modulating signaling mediated by igf-1 receptor and erbb receptors |
US7575751B2 (en) * | 2004-04-27 | 2009-08-18 | Research Development Foundation | Activin-A mutants |
JP2008520684A (ja) | 2004-11-17 | 2008-06-19 | アブジェニックス・インコーポレーテッド | Il−13に対する完全ヒトモノクローナル抗体 |
EP2361933A3 (en) | 2005-01-26 | 2012-05-02 | Amgen Fremont Inc. | Antibodies against interleukin-1 beta |
SI1865986T1 (sl) * | 2005-03-08 | 2016-05-31 | Pfizer Products Inc. | Sestavki protitelesa proti CTLA-4 |
KR20080011403A (ko) | 2005-04-25 | 2008-02-04 | 화이자 인크. | 미오스타틴에 대한 항체 |
US7537762B2 (en) | 2005-09-07 | 2009-05-26 | Amgen Fremont, Inc. | Human monoclonal antibodies to activin receptor-like kinase-1 |
US8128933B2 (en) | 2005-11-23 | 2012-03-06 | Acceleron Pharma, Inc. | Method of promoting bone growth by an anti-activin B antibody |
CL2007002567A1 (es) * | 2006-09-08 | 2008-02-01 | Amgen Inc | Proteinas aisladas de enlace a activina a humana. |
CN103877564A (zh) | 2007-09-18 | 2014-06-25 | 阿塞勒隆制药公司 | 活化素-actriia拮抗剂和减少或抑制fsh分泌的用途 |
JP5611222B2 (ja) | 2008-11-26 | 2014-10-22 | アムジエン・インコーポレーテツド | アクチビンiib受容体ポリペプチドの変異体及びその使用 |
EP2475427B1 (en) | 2009-09-09 | 2016-11-30 | Acceleron Pharma, Inc. | Actriib antagonists and dosing and uses thereof |
WO2011085165A2 (en) | 2010-01-08 | 2011-07-14 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Ca-125 immune complexes as biomarkers of ovarian cancer |
US8383607B2 (en) | 2010-03-31 | 2013-02-26 | Aeterna Zentaris Gmbh | Perifosine and capecitabine as a combined treatment for cancer |
EP2638065A4 (en) | 2010-11-08 | 2014-04-09 | Acceleron Pharma Inc | ACTRIIA BINDING AGENTS AND USES THEREOF |
EP2802308A1 (en) | 2012-01-13 | 2014-11-19 | Allergan, Inc. | Crosslinked hyaluronic acid-collagen gels for improving tissue graft viability and soft tissue augmentation |
TW201920262A (zh) | 2013-07-30 | 2019-06-01 | 美商再生元醫藥公司 | 抗活化素a之抗體及其用途 |
-
2007
- 2007-09-04 CL CL200702567A patent/CL2007002567A1/es unknown
- 2007-09-06 TW TW096133216A patent/TW200819466A/zh unknown
- 2007-09-07 AU AU2007294580A patent/AU2007294580C1/en active Active
- 2007-09-07 JP JP2009527594A patent/JP5497438B2/ja active Active
- 2007-09-07 ES ES07842088.2T patent/ES2528798T3/es active Active
- 2007-09-07 RS RS20150075A patent/RS53819B1/en unknown
- 2007-09-07 LT LTEP12154124.7T patent/LT2559705T/lt unknown
- 2007-09-07 CA CA2661878A patent/CA2661878C/en active Active
- 2007-09-07 SI SI200731605T patent/SI2064239T1/sl unknown
- 2007-09-07 DK DK07842088.2T patent/DK2064239T3/da active
- 2007-09-07 HU HUE12154124A patent/HUE030463T2/en unknown
- 2007-09-07 PT PT121541247T patent/PT2559705T/pt unknown
- 2007-09-07 EP EP16178026.7A patent/EP3133084B1/en active Active
- 2007-09-07 PL PL07842088T patent/PL2064239T3/pl unknown
- 2007-09-07 PE PE2007001204A patent/PE20080914A1/es not_active Application Discontinuation
- 2007-09-07 PL PL12154124T patent/PL2559705T3/pl unknown
- 2007-09-07 PT PT78420882T patent/PT2064239E/pt unknown
- 2007-09-07 EP EP07842088.2A patent/EP2064239B1/en active Active
- 2007-09-07 ME MEP-2016-224A patent/ME02539B/me unknown
- 2007-09-07 WO PCT/US2007/077923 patent/WO2008031061A2/en active Application Filing
- 2007-09-07 RS RS20160851A patent/RS55100B1/sr unknown
- 2007-09-07 EP EP18203136.9A patent/EP3495388A1/en active Pending
- 2007-09-07 DK DK12154124.7T patent/DK2559705T3/en active
- 2007-09-07 SI SI200731843A patent/SI2559705T1/sl unknown
- 2007-09-07 EP EP20175809.1A patent/EP3730517A1/en active Pending
- 2007-09-07 US US11/851,884 patent/US8309082B2/en active Active
- 2007-09-07 EP EP12154124.7A patent/EP2559705B1/en not_active Revoked
- 2007-09-07 MX MX2009002571A patent/MX2009002571A/es active IP Right Grant
- 2007-09-07 ES ES12154124.7T patent/ES2596184T3/es active Active
- 2007-09-07 AR ARP070103960A patent/AR062703A1/es unknown
-
2012
- 2012-07-16 US US13/550,447 patent/US8753627B2/en active Active
-
2013
- 2013-02-20 JP JP2013030740A patent/JP5986518B2/ja active Active
-
2014
- 2014-04-24 US US14/260,856 patent/US20150086556A1/en not_active Abandoned
-
2015
- 2015-01-29 CY CY20151100092T patent/CY1116037T1/el unknown
- 2015-02-13 HR HRP20150171TT patent/HRP20150171T1/hr unknown
-
2016
- 2016-05-06 JP JP2016092915A patent/JP6457431B2/ja active Active
- 2016-10-10 HR HRP20161300TT patent/HRP20161300T1/hr unknown
- 2016-10-13 CY CY20161101023T patent/CY1118693T1/el unknown
- 2016-11-08 US US15/346,617 patent/US10100109B2/en active Active
-
2018
- 2018-09-12 US US16/128,831 patent/US11542325B2/en active Active
Non-Patent Citations (4)
Title |
---|
JPN5009014250; JOURNAL OF CLINICAL ENDOCRINOLOGY AND METABOLISM Vol.75, No.2, 1992, p.571-576 * |
JPN5009014251; HYBRIDOMA Vol.10, No.2, 1991, p.309-316 * |
JPN5009014252; [ONLINE] , 20041012, R&D SYSTEMS,INC * |
JPN6012060831; Proc. Natl. Acad. Sci. USA Vol.91, 1994, p.8817-8821 * |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6457431B2 (ja) | 抗アクチビンa抗体およびその使用 | |
JP2010502740A5 (ja) | ||
AU2008330125B2 (en) | Wise binding antibodies and epitopes | |
US11541070B2 (en) | Administration of an anti-activin-A compound to a subject | |
US20140220033A1 (en) | Administration of an Anti-Activin-A Compound to a Subject | |
AU2012265564B2 (en) | Anti-activin A antibodies and uses thereof | |
AU2018201242B2 (en) | Anti-activin A antibodies and uses thereof | |
HAN et al. | Patent 2899889 Summary |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20130220 |
|
RD03 | Notification of appointment of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7423 Effective date: 20131216 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821 Effective date: 20131216 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20140116 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20140401 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20140723 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20140730 |
|
A602 | Written permission of extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A602 Effective date: 20140804 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20150122 |
|
RD04 | Notification of resignation of power of attorney |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A7424 Effective date: 20150427 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20150603 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20150609 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20151124 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20151202 |
|
A02 | Decision of refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A02 Effective date: 20160106 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20160506 |
|
A911 | Transfer to examiner for re-examination before appeal (zenchi) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A911 Effective date: 20160517 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20160608 |
|
A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20160630 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20160805 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 5986518 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |