JP2011515367A - ニコチン性アセチルコリン受容体モジュレーターとしての三置換された１，２，４−トリアゾール - Google Patents

Abstract

【化１】

本発明は、式（Ｉ）の１−アリール−３−アニリン−５−アルキル−１，２，４−トリアゾール誘導体およびそのアナログもしくは製薬学的に許容しうる塩、それらを製造する方法、それらを含有する製薬学的組成物ならびに治療におけるそれらの使用に関する。本発明は特にニコチン性アセチルコリン受容体の強力なポジティブアロステリックモジュレーターに関し、そのようなポジティブアロステリックモジュレーターはニコチン性受容体アゴニストの効能を増加する能力を有する。

Description

本発明は、１−アリール−３−アニリン−５−アルキル−１，２，４−トリアゾール誘導体およびその製薬学的に許容しうる塩、それらを製造する方法、それらを含有する製薬学的組成物ならびに治療におけるそれらの使用に関する。本発明は特にニコチン性アセチルコリン受容体の強力なポジティブアロステリックモジュレーターに関し、そのようなポジティブアロステリックモジュレーターはニコチン性受容体アゴニストの効能を増加する能力を有する。

特許文献１は、神経ペプチドＹ受容体リガンドとして３−アルキルアミノ−１，２，４−トリアゾールを記述する。

Ｍａｋａｒａ Ｇ．Ｍ．，ｅｔ ａｌ．による論文（非特許文献１）は、３−アルキルアミノ−１，２，４−トリアゾールの固相合成を記述し、そしてＮ−（４−メトキシフェニル）−１−メチル−５（４−メチルフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−アミン［ＣＡＳ Ｎｏ：４３３７１０−５５−５］のうまくいかなかった合成を例示し、そしてこの化合物の潜在的治療応用について、特にα７ニコチン性アセチルコリン受容体のポジティブアロステリックモジュレーターとしてのその使用について語らない。

Ｃｈｅｎ Ｃｈｅｎ ｅｔ ａｌ．は、非特許文献２において、１−アルキル−３−アミノ−５−アリール−１Ｈ−［１，２，４］トリアゾール、特にＮ−（２−メトキシフェニル）−１−メチル−５−（２，４−ジクロロフェニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−アミンの合成、およびコルチコトロピン放出因子−１（ＣＲＦ１）アンタゴニストとしてのそれらの使用を記述する。

特許文献２は、ＣＲＦ受容体に対する親和性を有する同様の化合物を開示する。

特許文献３は、神経学的、変性および精神障害を処置するために有用なニコチン性アセチルコリン受容体のポジティブモジュレーターとして３−アニリン−５−アリール１，２，４−トリアゾールを開示する。

コリン作動性受容体は通常は内因性神経伝達物質アセチルコリン（ＡＣｈ）に結合し、それによりイオンチャンネルの開口を引き起こす。哺乳類中枢神経系におけるＡＣｈ受容体は、それぞれ、ムスカリンおよびニコチンのアゴニスト活性に基づいてムスカリン性（ｍＡＣｈＲ）およびニコチン性（ｎＡＣｈＲ）サブタイプに分類することができる。ニコチン性アセチルコリン受容体は、５個のサブユニットを含有するリガンド依存性イオンチャンネルである。ｎＡＣｈＲサブユニット遺伝子ファミリーのメンバーは、それらのアミノ酸配列に基づいて２群；いわゆるβサブユニットを含有する一群およびαサブユニットを含有する第二の群に分類されている。３種類のαサブユニット、α７、α８およびα９は、単独で発現した場合に機能的受容体を形成することが示されており、従って、ホモオリゴマーペンタマー受容体を形成すると推定される。

ｎＡＣｈＲのアロステリック転移状態モデルが構築されており、それは少なくとも静止状態、活性化状態および「脱感作」閉チャンネル状態（受容体がアゴニストに対して非感受性になる過程）を含む。異なるｎＡＣｈＲリガンドは、それらが優先的に結合する受容体の立体配座状態を安定させることができる。例えば、アゴニストＡＣｈおよび（−）−
ニコチンは、それぞれ活性および脱感作状態を安定させる。

ニコチン性受容体の活性の変化は、多数の疾患に関与している。これらのいくつか、例えば重症筋無力症および常染色体優性夜間前頭葉癲癇（ＡＤＮＦＬＥ）は、受容体数の減少もしくは増大した脱感作のいずれかによるニコチン性伝達の活性の減少と関連する。

ニコチン性受容体の減少はまた、アルツハイマー病および統合失調症のような疾患において見られる認知障害を媒介すると仮定されている。

タバコからのニコチンの作用もまたニコチン性受容体により媒介され、そしてニコチンの作用は脱感作状態で受容体を安定させることであるので、ニコチン性受容体の増加した活性は喫煙に対する欲求を減らし得る。

ｎＡＣｈＲに結合する化合物は、学習障害、認知障害、注意欠陥もしくは記憶喪失のような減少したコリン作動性機能を伴う様々な障害の処置に提示されている。α７ニコチン性受容体活性の調節は、アルツハイマー病、レビー小体認知症、注意欠陥多動性障害、不安、統合失調症、躁病、躁鬱病、パーキンソン病、ハンチントン病、トゥーレット症候群、脳損傷、または時差ぼけ、ニコチン中毒、疼痛を包含する、コリン作動性シナプスの喪失がある他の神経学的、変性もしくは精神障害を包含する多数の疾患において有益であると考えられる。

しかしながら、ＡＣｈは受容体活性を活性化するだけでなく、脱感作および非競合的遮断を含む過程を通して阻害もするので、ＡＣｈと同じ部位で作用するニコチン性受容体アゴニストでの処置は問題がある。さらに、長期的活性化は長期にわたる不活性化を誘導するように思われる。従って、ＡＣｈのアゴニストは活性を高めると同様にそれを減少させると考えることができる。

一般に、ニコチン性受容体で、そして特に注目すべきにはα７ニコチン性受容体で、脱感作は適用したアゴニストの作用の持続時間を限定する。

ＥＰ１０４４９７０明細書 ＷＯ−２００１／４４２０７明細書 ＷＯ−２００７／１１８９０３明細書

Ｏｒｇａｎｉｃ Ｌｅｔｔｅｒｓ（２００２）Ｖｏｌ．４（１０）；１７５１−１７５４ Ｂｉｏｏｒｇａｎｉｃ ＆ Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ Ｌｅｔｔｅｒｓ １１（２００１）３１６５−３１６８

［発明の記述］
驚くべきことに、ある種の新規トリアゾール誘導体はニコチン性アセチルコリン受容体（ｎＡＣｈＲ）でのアゴニストの効能を増加できることが見出された。このタイプの作用を有する化合物（以下「ポジティブアロステリックモジュレーター」と称する）は、ニコチン性伝達の減少と関連する症状の処置に有用であると思われる。治療環境において、そのような化合物は活性化の時間的プロフィールに影響を及ぼさずに正常なニューロン間伝達を回復し得る。さらに、ポジティブアロステリックモジュレーターは、アゴニストの長
期適用で起こり得るような受容体の長期間の不活性化を引き起こすと考えられない。

本発明のポジティブｎＡＣｈＲモジュレーターは、α７ニコチン性受容体の調節が有益である精神障害、知的障害疾患もしくは疾病、炎症性疾患もしくは症状の処置もしくは予防に有用である。

本発明はポジティブアロステリックモジュレーター特性を有する、特にα７ニコチン性受容体でのアゴニストの効能を増加する１−（アリール）−３−アニリン−５−アルキル１，２，４−トリアゾール誘導体に関する。本発明はさらに、それらの製造方法およびそれらを含んでなる製薬学的組成物に関する。本発明はまた、α７ニコチン性受容体の調節が有益である精神障害、知的障害疾患もしくは疾病、または炎症性疾患もしくは症状の処置もしくは予防用の薬剤の製造のためのこれらの誘導体の使用にも関する。

本発明の化合物は、先行技術化合物と構造的にそしてα７ニコチン性アセチルコリン受容体のポジティブアロステリックモジュレーターとしてのそれらの増大した活性により薬理学的に異なる。

本発明は式（Ｉ）

［式中、
Ｒ^１は非置換のフェニル；非置換のベンゾジオキサン−６−イル；非置換のピリジニル；またはハロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシＣ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルアミノ、Ｃ_３〜６シクロアルキル、Ｃ_３〜６シクロアルキルオキシ、Ｃ_３〜６シクロアルキルアミノ、（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキル、（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルオキシおよび（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルアミノよりなる群から選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されたフェニルもしくはピリジニルであり；
Ｒ^２は水素、ハロ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシもしくはトリフルオロメトキシであり；
Ｒ^３は水素、ハロもしくはトリフルオロメチルであり；
Ｒ^４は水素もしくはハロであり；
Ｒ^２およびＲ^３は基−ＯＣＦ_２−Ｏ−を形成することができ：
Ａｌｋは直鎖状もしくは分枝鎖状Ｃ_１〜６アルカンジイルもしくはＣ_２〜６アルケンジイルであり；
Ｒ^５は水素、ヒドロキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、ハロ、Ｒ^６Ｒ^７Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−もしくはＲ^８−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
Ｒ^６はＣ_１〜３アルキル、Ｃ_３〜６シクロアルキルもしくは（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルであり；
Ｒ^７は水素もしくはＣ_１〜３アルキルであり；または
Ｒ^６およびＲ^７は、各々場合によりヒドロキシルで置換されていてもよいピロリジニルもしくはピペリジニルを形成し；
Ｒ^８は水素もしくはＣ_１〜４アルキルである］
の化合物もしくはその立体異性体、あるいはその製薬学的に許容しうる付加塩または水和物もしくは溶媒和物に関する。

本発明は特に、
Ｒ^１が非置換のフェニル；非置換のベンゾジオキサン−６−イル；非置換のピリジニル；またはハロ、トリフルオロメトキシ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシＣ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルアミノ、Ｃ_３〜６シクロアルキル、Ｃ_３〜６シクロアルキルオキシ、Ｃ_３〜６シクロアルキルアミノ、（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキル、（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルオキシおよび（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルアミノよりなる群から選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されたフェニルもしくはピリジニルであり；
Ｒ^２がハロ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシもしくはトリフルオロメトキシであり；
Ｒ^３が水素、ハロもしくはトリフルオロメチルであり；
Ｒ^４が水素もしくはハロであり；
Ｒ^２およびＲ^３が基−ＯＣＦ_２−Ｏ−を形成することができ：
Ａｌｋが直鎖状もしくは分枝鎖状Ｃ_１〜６アルカンジイルもしくはＣ_２〜６アルケンジイルであり；
Ｒ^５が水素、ヒドロキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、ハロ、Ｒ^６Ｒ^７Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−もしくはＲ^８−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
Ｒ^６がＣ_１〜３アルキル、Ｃ_３〜６シクロアルキルもしくは（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルであり；
Ｒ^７が水素もしくはＣ_１〜３アルキルであり；または
Ｒ^６およびＲ^７が、各々場合によりヒドロキシルで置換されていてもよいピロリジニルもしくはピペリジニルを形成し；
Ｒ^８が水素もしくはＣ_１〜４アルキルである
式（Ｉ）の化合物もしくはその立体異性体、あるいはその製薬学的に許容しうる付加塩または水和物もしくは溶媒和物に関する。

本発明は特に、
Ｒ^１が非置換のフェニル；非置換のベンゾジオキサン−６−イル；非置換のピリジニル；またはハロ、トリフルオロメトキシ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシＣ_１〜３アルキルおよびＣ_１〜３アルキルアミノよりなる群から選択される１もしくは２個の置換基で置換されたフェニルもしくはピリジニルであり；
Ｒ^２が水素、ハロ、メチル、メトキシもしくはトリフルオロメトキシであり；
Ｒ^３が水素、ハロもしくはトリフルオロメチルであり；
Ｒ^４が水素もしくはハロであり；
Ｒ^２およびＲ^３が３、４位において基−ＯＣＦ_２−Ｏ−を形成することができ：
Ａｌｋが直鎖状もしくは分枝鎖状Ｃ_１〜６アルカンジイルもしくはＣ_２〜６アルケンジイルであり；
Ｒ^５が水素、ヒドロキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、ハロ、Ｒ^６Ｒ^７Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−もしくはＲ^８−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
Ｒ^６がＣ_１〜３アルキル、Ｃ_３〜６シクロアルキルもしくは（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルであり；
Ｒ^７が水素もしくはＣ_１〜３アルキルであり；または
Ｒ^６およびＲ^７が、場合によりヒドロキシルで置換されていてもよいピロリジニルを形
成し；
Ｒ^８が水素もしくはＣ_１〜４アルキルである
式（Ｉ）の化合物もしくはその立体異性体、あるいはその製薬学的に許容しうる付加塩または水和物もしくは溶媒和物に関する。

本発明はさらに特に、
Ｒ^１が非置換のベンゾジオキサン−６−イル；非置換のピリジニル；またはクロロ、メチル、エチル、メトキシメチルおよびエチルアミノよりなる群から選択される１もしくは２個の置換基で置換されたピリジニルであり；
Ｒ^２が水素、ハロ、メチル、メトキシもしくはトリフルオロメトキシであり；
Ｒ^３が水素、ハロもしくはトリフルオロメチルであり；
Ｒ^４が水素もしくはハロであり；
Ｒ^２およびＲ^３が３、４位において基−ＯＣＦ_２−Ｏ−を形成することができ：
Ａｌｋが直鎖状もしくは分枝鎖状Ｃ_１〜６アルカンジイルであり；
Ｒ^５がヒドロキシルもしくはＲ^６Ｒ^７Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
Ｒ^６がメチル、エチル、シクロプロピル、シクロブチルもしくは（シクロプロピル）メチルであり；
Ｒ^７が水素もしくはメチルである
式（Ｉ）の化合物もしくはその立体異性体、あるいはその製薬学的に許容しうる付加塩または水和物もしくは溶媒和物に関する。

本発明は最も特に、
Ｒ^１が非置換のベンゾジオキサン−６−イル；１個のメチルもしくはエチルアミノ基で置換されたピリジニル；または２個のメチル基で置換されたピリジニルであり；
Ｒ^２が水素、フルオロ、クロロ、ブロモ、メトキシもしくはトリフルオロメトキシであり；
Ｒ^３が水素、フルオロ、トリフルオロメチル、クロロであり；
Ｒ^４が水素もしくはフルオロであり；
Ｒ^２およびＲ^３が３、４位において基−ＯＣＦ_２−Ｏ−を形成することができ：
Ａｌｋが直鎖状もしくは分枝鎖状Ｃ_１〜６アルカンジイルであり；
Ｒ^５がヒドロキシルもしくはＲ^６Ｒ^７Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
Ｒ^６がメチル、エチル、シクロプロピル、シクロブチルもしくは（シクロプロピル）メチルであり；
Ｒ^７が水素もしくはメチルである
式（Ｉ）の化合物もしくはその立体異性体、あるいはその製薬学的に許容しうる付加塩または水和物もしくは溶媒和物に関する。

本発明は特に、
Ｒ^１が非置換のフェニル；非置換のベンゾジオキサン−６−イル；非置換のピリジニル；またはハロ、トリフルオロメトキシ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシＣ_１〜３アルキルおよびＣ_１〜３アルキルアミノよりなる群から選択される１もしくは２個の置換基で置換されたフェニルもしくはピリジニルであり；
Ｒ^２がハロ、メチル、メトキシもしくはトリフルオロメトキシであり；
Ｒ^３が水素、ハロもしくはトリフルオロメチルであり；
Ｒ^４が水素もしくはハロであり；
Ｒ^２およびＲ^３が３、４位において基−ＯＣＦ_２−Ｏ−を形成することができ：
Ａｌｋが直鎖状もしくは分枝鎖状Ｃ_１〜５アルカンジイルもしくはＣ_２〜５アルケンジイルであり；
Ｒ^５が水素、ヒドロキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、ハロ、Ｒ^６Ｒ^７Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−もしくはＲ^８−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
Ｒ^６がＣ_１〜３アルキル、Ｃ_３〜６シクロアルキルもしくは（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルであり；
Ｒ^７が水素もしくはＣ_１〜３アルキルであり；または
Ｒ^６およびＲ^７が、場合によりヒドロキシルで置換されていてもよいピロリジニルを形成し；
Ｒ^８が水素もしくはＣ_１〜３アルキルである
式（Ｉ）の化合物もしくはその立体異性体、あるいはその製薬学的に許容しうる付加塩または水和物もしくは溶媒和物に関する。

本発明はさらに特に、
Ｒ^１が非置換のベンゾジオキサン−６−イル；非置換のピリジニル；またはクロロ、メチル、エチル、メトキシメチルおよびエチルアミノよりなる群から選択される１もしくは２個の置換基で置換されたピリジニルであり；
Ｒ^２がハロ、メチル、メトキシもしくはトリフルオロメトキシであり；
Ｒ^３が水素、ハロもしくはトリフルオロメチルであり；
Ｒ^４が水素もしくはハロであり；
Ａｌｋが直鎖状もしくは分枝鎖状Ｃ_１〜５アルカンジイルであり；
Ｒ^５がヒドロキシルもしくはＲ^６Ｒ^７Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
Ｒ^６がメチルもしくはエチルであり；
Ｒ^７が水素もしくはメチルである
式（Ｉ）の化合物もしくはその立体異性体、あるいはその製薬学的に許容しうる付加塩または水和物もしくは溶媒和物に関する。

本発明は最も特に、
Ｒ^１が非置換のベンゾジオキサン−６−イル；１個のメチルもしくはエチルアミノ基で置換されたピリジニル；または２個のメチル基で置換されたピリジニルであり；
Ｒ^２がフルオロ、クロロ、メトキシもしくはトリフルオロメトキシであり；
Ｒ^３が水素、フルオロもしくはトリフルオロメチルであり；
Ｒ^４が水素もしくはフルオロであり；
Ａｌｋが直鎖状もしくは分枝鎖状Ｃ_１〜５アルカンジイルであり；
Ｒ^５がヒドロキシルもしくはＲ^６Ｒ^７Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
Ｒ^６がメチルもしくはエチルであり；
Ｒ^７が水素もしくはメチルである
式（Ｉ）の化合物もしくはその立体異性体、あるいはその製薬学的に許容しうる付加塩または水和物もしくは溶媒和物に関する。

好ましい化合物は化合物
−（アルファＳ）−アルファ−エチル−３−［［３−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール−Ｅ１３７；
−３−［（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−Ｎ−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−アセトアミド−Ｅ２００；
−Ｎ−シクロプロピル−３−［（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−アセトアミド−Ｅ１８０；
−（アルファＳ）−アルファ−エチル−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−３−［（２，３，４−トリフルオロフェニル）アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール−Ｅ１３０；
−（アルファＳ）−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−アルファ−エチル−
３−［（２，３，４−トリフルオロフェニル）アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール−Ｅ１２７；
−（アルファＳ）−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−アルファ−メチル−３−［（２，３，４−トリフルオロフェニル）アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール−Ｅ１８９；
−３−［（３，４−ジフルオロフェニル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−Ｎ−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−アセトアミド−Ｅ１６７；
−Ｎ−シクロプロピル−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−３−［［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−アセトアミド−Ｅ１８２；
−３−［（３−クロロ−２−フルオロフェニル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−Ｎ−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−アセトアミド−Ｅ１５３；
−（アルファＳ）−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−アルファ−エチル−３−［（３，４，５−トリフルオロフェニル）アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール−Ｅ１８８；
−（アルファＳ）−アルファ−エチル−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−３−［（３，４，５−トリフルオロフェニル）アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール−Ｅ１８７；
−（アルファＳ）−アルファ−エチル−３−［（３−フルオロ−５−メトキシフェニル）アミノ］−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール−Ｅ１８６；
−（アルファＳ）−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−アルファ−エチル−３−［（３−フルオロ−５−メトキシフェニル）アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール−Ｅ１９０；
−（アルファＳ）−３−［（３−クロロ−５−メトキシフェニル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−アルファ−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール−Ｅ２０５；
−３−［（３，４−ジフルオロフェニル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−プロパンアミド−Ｅ２３４；および
−３−［（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−プロパンアミド−Ｅ２３５；
ならびにその酸付加塩および溶媒和物である。

上記にそして下記に用いる場合、
基もしくは基の一部としてのＣ_１〜３アルキルは、メチル、エチル、プロピルおよび１−メチルエチルのような１〜３個の炭素原子を有する直鎖状もしくは分枝鎖状飽和炭化水素基を定義し；
基もしくは基の一部としてのＣ_３〜６シクロアルキルは、シクロプロピル、シクロブチル、シクロペンチルおよびシクロヘキシルを定義し；
Ｃ_１〜６アルカンジイルは、例えばメチレン、１，２−エタンジイル、１，３−プロパンジイル、１，４−ブタンジイル、１，５−ペンタンジイルおよびその分枝異性体のような１〜６個の炭素原子を有する２価の直鎖状および分枝鎖状飽和炭化水素基を定義し；
Ｃ_２〜６アルケンジイルは、例えば１，２−エテンジイル、１，３−プロプ−１−エンジイルなどのような２〜６個の炭素原子を有する２価の直鎖状および分枝鎖状不飽和炭化水素基を定義し；
ハロはフルオロ、クロロ、ブロモもしくはヨードである。

式（Ｉ）の化合物ならびにその付加塩、水和物および溶媒和物のいくつかは１個もしくはそれ以上のキラリティー中心を含有し、そして立体異性体として存在し得ることが理解される。

「立体異性体」という用語は、上記にもしくは下記に用いる場合、式（Ｉ）の化合物およびそれらの付加塩が有し得る全ての可能な立体異性体を定義する。他に記載されないかもしくは示されない限り、化合物の化学表示は全ての可能な立体化学的異性体の混合物を意味し、該混合物は式（Ｉ）の基本分子構造の全てのジアステレオマーおよび鏡像異性体ならびに式（Ｉ）の個々の異性体およびそれらの塩、溶媒和物の各々であって、他の異性体を実質的に含まない、すなわち、１０％未満、好ましくは５％未満、特に２％未満そして最も好ましくは１％未満の他の異性体を伴う、を含有する。

治療用途には、式（Ｉ）の化合物の塩は、対イオンが製薬学的に許容しうるものである。しかしながら、製薬学的に許容できない酸および塩基の塩もまた、例えば製薬学的に許容しうる化合物の製造もしくは精製において、用途を見出すことができる。全ての塩は、製薬学的に許容しうるかもしくはそうでないにしても、本発明の範囲内に包含される。

上記もしくは下記のような製薬学的に許容しうる酸および塩基付加塩は、式（Ｉ）の化合物が形成することのできる治療的に有効な無毒の酸および塩基付加塩形態を含んでなるものとする。製薬学的に許容しうる酸付加塩は、塩基形態をそのような適切な酸で処理することにより都合良く得ることができる。適切な酸は、例えば、ハロゲン化水素酸、例えば塩酸もしくは臭化水素酸、硫酸、硝酸、リン酸などのような無機酸；または例えば酢酸、プロパン酸、ヒドロキシ酢酸、乳酸、ピルビン酸、シュウ酸（すなわち、エタン二酸）、マロン酸、コハク酸（すなわち、ブタン二酸）、マレイン酸、フマル酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、メタンスルホン酸、エタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、シクラミン酸、サリチル酸、ｐ−アミノサリチル酸、パモン酸などのような有機酸を含んでなる。逆に、該塩形態は適切な塩基での処理により遊離塩基形態に転化することができる。

溶媒和物という用語は、式（Ｉ）の化合物ならびにその塩が形成することのできるアルコラートをさす。

式（Ｉ）の化合物のあるものはまた、それらの互変異性体において存在することもできる。そのような形態は、上記の式において明白に示されないが、本発明の範囲内に包含されるものとする。

化合物の製造
本発明の化合物は一連の段階により一般に製造することができ、その各々は当業者に既知である。特に、本特許出願における化合物は以下の製造方法の１つもしくはそれ以上に従って製造することができる。以下のスキームにおいて、そして他に示されない限り、全ての可変記号は式（Ｉ）において定義したとおり使用される。Ｑは

を表し、ここで、Ｒ^２、Ｒ^３およびＲ^４は式（Ｉ）において定義したとおりである。

以下の中間体構造のあるものにおいて、基Ｒ^５の定義はＨＯ−ＣＨ_２（Ｉｅ）、置換されたシリルオキシ（ＩｆおよびＩＶ−ａ）および（アルキルもしくはアリール）スルホニルオキシ（Ｉｇ）を包含するように拡張される。

本発明の化合物は、当該技術分野で既知の条件下で適切なヒドラジン誘導体（ＩＩＩ）を用いて一般式（ＩＩ）のＮ−アシルカルボムイミドチオ酸（ｃａｒｂｏｍｉｍｉｄｏｔｈｉｏｉｃ ａｃｉｄ）、メチルエステル誘導体を式（Ｉ）の１，２，４−トリアゾールに転化することによりスキーム１に従って製造することができる。この転化は、ＤＭＦなどのような非プロトン性溶媒において典型的に行われ、そしてソフトルイス酸、特に塩化水銀（ＩＩ）（ＨｇＣｌ_２）の存在下で最も都合よく行われ、そして室温〜１５０℃の間の温度を必要とする。特定の態様において、反応温度は７０℃〜１２０℃の間、最も好ましくは８０℃である。式（ＩＩ）の中間体はＥもしくはＺ立体配置またはその混合物において、ならびに互変異性体（ＩＩ−ａ）においても同様にＥもしくはＺ立体配置またはその混合物において存在し得る（スキーム２）。

本発明の三置換されたトリアゾールの合成における共通中間体（ＩＩ）は、一般式（ＩＶ）のカルボン酸塩化物から出発して、３つの合成転化からなるプロトコルにより典型的に製造される（スキーム２）。第一段階において、塩化アシル（ＩＶ）を例えばチオシアン酸カリウムもしくはチオシアン酸アンモニウムのようなチオシアン酸１価陽イオン（スキーム２におけるＭ−ＮＣＳ）と反応させてインサイチューにおいて対応するイソチオシアン酸アシルを生成せしめる。この反応は、通常、溶媒としてアセトンを用いてそして０℃〜７０℃の間の温度で、好ましくは室温で行われる。

中間体イソチオシアン酸アシルは単離されず、同じ反応媒質において適切な芳香族アミン（Ｖ）で処理して一般式（ＶＩ）のＮ−アシルチオ尿素を生成せしめる。この転化は通常は０℃〜７０℃の間の温度で、好ましくは室温で行われる。

最終段階において、Ｎ−アシルチオ尿素（ＶＩ）のＳ−メチル化により一般式（ＩＩ）のＮ−アシルカルバムイミドチオ酸、メチルエステル誘導体を生成せしめる。この転化はヨウ化メチルによりもたらされ、そして強塩基、好ましくは強無機塩基、例えばＮａＨの存在を必要とし、そして例えばＤＭＦ、ＴＨＦなどのような非プロトン性溶媒において、−７０℃〜室温の間の温度、好ましくは０℃で行われる。より好ましくは、該転化は無機塩基として炭酸カリウムの存在下で、溶媒としてアセトンにおいて０℃〜６０℃の間の温度、好ましくは室温でもたらされる。

場合により、塩化アシル（ＩＶ）が市販されていない場合、該塩化アシル（ＩＶ）は当該技術分野で既知の条件により対応するカルボン酸（ＩＸ）から製造することができる。例えば、塩化アシル（ＩＶ）は、場合により触媒としてＤＭＦの存在下で、好ましくは０℃〜５０℃の間の範囲の温度で、過剰の塩化オキサリルでのカルボン酸（ＩＸ）の処理により得ることができる。該転化はまた、ジクロロメタンなどのような有機溶媒の存在下でもたらすこともできる。

本発明において記述される化合物の具体例において、塩化アシル（ＩＶ）は全合成順序のさらに下の反応条件と適合するようにある種の官能基の事前官能化および保護を必要とする。例えば、Ｒ^５がヒドロキシルである場合、スキーム３に示されるような合成順序に従って一般式（ＩＶａ）のヒドロキシル保護された塩化アシルを製造することができる（スキーム３）。

第一段階において、一般式（ＶＩＩａ）のアルカンカルボン酸エステルにおけるヒドロキシル部分は、適切なシリル保護基により保護される。特に、ジフェニルｔｅｒｔブチル基は上記および下記のような反応条件に対して不活性であるので、この基を用いることができる。好ましい態様において、ヒドロキシルエステル（ＶＩＩａ）を、場合により触媒としてジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下で、塩基としてイミダゾールの存在下でｔｅｒｔ−ブチル（クロロ）ジフェニルシランで処理する。好ましい溶媒はＤＭＦなどのような極性非プロトン性溶媒である。反応温度は、好ましくは０℃〜室温の間の範囲である。その後の転化において、アルキルカルボン酸エステルを加水分解して一般式（ＶＩＩＩａ）の対応するカルボン酸を生成せしめる。この転化は、水酸化カリウムもしくはより好ましくは水酸化リチウムのような金属水酸化物（Ｍ−ＯＨ）を用いることによりもたらすことができる。該反応は水性環境において行われ、そして少なくとも１つのもしくはより好ましくは２つの水混和性有機共溶媒、例えばＴＨＦおよびメタノールなどの存在下で最も都合良く実施される。一般式（ＩＶａ）の酸塩化物は、場合により触媒としてＤＭＦの存在下で、好ましくは０℃〜５０℃の間の範囲の温度で、過剰の塩化オキサリルでのカルボン酸（ＶＩＩＩａ）の処理により得ることができる。該転化はまた、ジクロロメタンなどのような有機溶媒の存在下でもたらすこともできる。

一般式（Ｉ）のいくつかの化合物は、置換基Ｒ^５を伴う官能基転化により得ることができる。スキーム４〜８は、該官能基転化の例を表す。スキーム４は、第一級もしくは第二級脂肪族アミンＨＮＲ^６Ｒ^７での処理を伴う対応するカルボン酸エステル（Ｉｃ）からの一般式（Ｉｂ）のカルボン酸アミドの製造を表す。１つの態様において、該転化はエステル（Ｉｃ）から直接もたらすことができる。好ましい溶媒は低級アルキルアルコール、例えばメタノールなどのようなプロトン性溶媒である。好ましい反応温度は、室温〜１２０℃の間である。

あるいはまた、アルキルカルボン酸エステル（Ｉｃ）を最初に加水分解して一般式（Ｉｄ）の対応するカルボン酸を生成せしめる。この転化は、水酸化カリウムもしくはより好ましくは水酸化リチウムのような金属水酸化物（Ｍ−ＯＨ）を用いることによりもたらすことができる。該反応は水性環境において行われ、そして少なくとも１つのもしくはより好ましくは２つの水混和性有機共溶媒、例えばＴＨＦおよびメタノールなどの存在下で最も都合良く実施される。式（Ｉｂ）のアミドへのカルボン酸（Ｉｄ）のさらなる転化は、例えば、ＤＣＭのような非プロトン性溶媒において、もしくはより好ましくはＴＨＦもしくはＤＭＦのような極性非プロトン性溶媒においてジイソプロピルエチルアミンのようなアミン塩基添加剤の存在下で、ＨＢＴＵ（Ｏ−ベンゾトリアゾール−Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−テトラメチルウロニウムヘキサフルオロホスフェート）、ＥＤＣＩ（Ｎ’−（エチルカルボニミドイル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，３−プロパンジアミン１塩酸塩）もしくはＥＤＡＣ（Ｎ’−（エチルカルボニミドイル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１，３−プロパンジアミン）のような通常のアミドカップリング試薬の存在下で上記に定義した通りの第一級もしくは第二級アミンＨＮＲ_６Ｒ_７での処理のような当該技術分野で既知の方法を用いて行われる。ある種の状況下で、添加剤としてのＨＯＢＴ（１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール）の使用は好都合である。

一般式（Ｉ）の化合物におけるＲ^５が一般式（Ｉｅ）の化合物におけるような第一級ヒドロキシル官能基である場合、これらの化合物はカルボン酸エステル（Ｉｃ）から出発してスキーム５に概説されるように得ることができる。この転化は、メタノールのような低級アルコールおよびＴＨＦのような非プロトン性溶媒からなる溶媒系において塩化カルシウムの存在下で水素化ホウ素ナトリウムを用いて成功裏に実施することができる。好ましい反応温度は、０℃〜室温の間である。あるいはまた、エステル部分の反応性がより低い場合、より強い還元剤を都合よく用いることができる。特に、ジエチルエーテルもしくはＴＨＦなどのような非プロトン性溶媒における水素化アルミニウムリチウムにより、第一級アルコール（Ｉｅ）を得ることができる。好ましい反応温度は、０℃〜室温の間である。

一般式（Ｉ）の化合物においてＲ^５がヒドロキシル官能基である場合、そして該ヒドロキシル基が第二級炭素原子に結合している場合、一般式（Ｉｅ’）の化合物は、スキーム６に示されるように、シリル保護基の除去により得ることができる。特定の態様において、一般式（Ｉｆ）の化合物におけるジフェニルｔｅｒｔブチル基は、フッ化テトラブチルアンモニウム（ＴＢＡＦ）のような求核フッ素源により除かれる。この転化は、好ましくはＴＨＦなどのような非プロトン性溶媒において実施される。好ましい反応温度は０℃〜５０℃の間、特に室温でである。

Ｒ^５がハロである一般式（Ｉ）の化合物は、スキーム７に概説されるように得ることができる。第一段階において、（Ｉｅ’）におけるヒドロキシル部分をメチルスルホネート基として官能化して（Ｉｇ）を生成せしめる。この転化は、場合により触媒としてジメチルアミノピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下で、ジクロロメタンなどのようなハロゲン化溶媒において、トリエチルアミンなどのようなアミン塩基の存在下で塩化メタンスルホニルでの（Ｉｅ’）の処理によりもたらされる。好ましい反応温度は、０℃〜室温の間である。これらの条件下で相当量の塩素化化合物（Ｉｈ）が形成される。（Ｉｇ）と（Ｉｈ）の混合物をフッ化テトラブチルアンモニウムのような求核フッ素源で処理すると、該メタンスルホネート（Ｉｇ）はフルオロアルカン（Ｉｉ）に転化される。好ましい溶媒はＴＨＦなどのような非プロトン性溶媒である。好ましい反応温度は０℃〜７０℃の間、より好ましくは室温〜５０℃の間である。

本発明の特定の状況において、一般式（Ｉｊ）の５−アルキリデン１，２，４−トリアゾールは、一般式（Ｉｅ’’）の第二級アルコールから出発することにより、ミツノブ条件下で得ることができる。第二級アルコール（Ｉｅ’’）をトリフェニルホスフィンなどのようなホスフィンおよびアゾジカルボン酸ジイソプロピル（ＤＩＡＤ）などのようなアゾジカルボキシレートの存在下で、安息香酸もしくは４−ニトロ安息香酸などのような芳香族カルボン酸で処理して、アルキリデン（Ｉｊ）を生成せしめる。

一般式（Ｉ）の化合物におけるＡｌｋが分枝鎖状Ｃ_３〜５アルカンジイルフラグメントを表す本発明の特定の状況において、該分枝を一般式（ＶＩａ）の中間体に導入して一般式（ＩＩｂ）の中間体を得ることができる（スキーム９）。活性化メチレン官能基を含有する化合物（ＶＩａ）を炭酸カリウムなどのような無機塩基の存在下で、アセトンのような非プロトン性溶媒において、ヨードメタンのようなハロＣ_１〜４アルカンで処理して、一般式（ＩＩｂ）の化合物を得る。好ましい反応温度は０℃〜５０℃の間、特に室温である。上記のものと同様に、化合物（ＩＩｂ）をスキーム１に記載の通り一般式（Ｉ）の化合物に転化することができる。

本発明の別の態様において、一般式（Ｉ）の化合物は置換基Ｒ^１を伴う官能基転化により得ることができる。スキーム１０〜１２は、該官能基転化の例を表す。

Ｒ^９が水素、ハロ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、Ｃ_１〜３アルキルアミノ、Ｃ_３〜６シクロアルキル、Ｃ_３〜６シクロアルキルオキシ、Ｃ_３〜６シクロアルキルアミノ、（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキル、（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルオキシもしくは（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルアミノを表す一般式（ＩＩ）のアルコキシ置換されたピリジニル１，２，４−トリアゾールは、ナトリウムアルコキシド、ＮａＯＣ_１〜３アルキルにより、一般式（Ｉｋ）のクロロ置換されたピリジニル１，２，４−トリアゾールを、対応するアルコール溶媒ＨＯＣ_１〜３アルキル、例えばナトリウムメトキシドを試薬として用いる場合にはメタノール中で処理し、そして圧力管もしくはマイクロ波オーブンにおいて高温で、好ましくは１００〜１３０℃で加熱することにより得ることができる（スキーム１０）。Ｃ_３〜６シクロアルキルオキシおよび（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルオキシ置換されたピリジニル誘導体は、同様にして製造することができる。

Ｒ^９が水素、ハロ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、Ｃ_１〜３アルキルアミノ、Ｃ_３〜６シクロアルキル、Ｃ_３〜６シクロアルキルオキシ、Ｃ_３〜６シクロアルキルアミノ、（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキル、（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルオキシもしくは（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルアミノを表す一般式（Ｉｍ）のアミノもしくはアルキルアミノ置換されたピリジニル１，２，４−トリアゾールは、エタノールなどのようなアルコール溶媒におけるＣ_１〜３アルキルアミンでの一般式（Ｉｋ）のクロロ置換されたピリジニル１，２，４−トリアゾールの処理、そして圧力管もしくはマイクロ波オーブンにおいて高温で、好ましくは１００〜２００℃で加熱することにより得ることができる（スキーム１１）。Ｃ_３〜６シクロアルキルアミノおよび（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルアミノ置換されたピリジニル誘導体は、同様にして製造することができる。

Ｒ^１０が水素、ハロ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシもしくはＣ_１〜３アルキルアミノを表す一般式（Ｉｎ）のモノ−もしくはジ−Ｃ_１〜３アルキル置換されたピリジニル１，２，４−トリアゾールは、８５％のＴＨＦおよび１５％のＮＭＰからなる溶媒系において触媒量のＦｅ（ａｃａｃ）_３の存在下で過剰（３〜１５当量）のグリニャール試薬Ｃ_１〜３アルキル−ＭｇＢｒでの一般式（Ｉｏ）のクロロもしくはジクロロ置換されたピリジニル１，２，４−トリアゾールの処理により得ることができる。該転化は−１０℃〜５０℃、最も好ましくは０℃〜２５℃の間の温度範囲において行うことができる（スキーム１２）。それぞれ対応する２−クロロもしくは２，６−ジクロロ前駆体（Ｉｏ）から出発することにより、この方法論によって一般式（Ｉｎ）の２−Ｃ_１〜３アルキルおよび２，６−ジＣ_１〜３アルキルピリジニル化合物の両方を得ることができることが理解される。Ｃ_３〜６シクロアルキルおよび（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルで置換されたピリジニル誘導体は、同様にして製造することができる。

薬理学
本発明の化合物は、α７ニコチン性受容体のポジティブアロステリックモジュレーターであることが見出された。α７ニコチン性受容体（α７ ｎＡＣｈＲ）は、５−ＨＴ_３、ＧＡＢＡ_Ａおよびグリシン受容体ファミリーを包含するｃｙｓ−ループイオンチャンネル型リガンド依存性イオンチャンネルのスーパーファミリーに属する。それはアセチルコリンおよびその分解産物コリンにより活性化され、そしてα７ ｎＡＣｈＲの主な特徴はアゴニストの持続的存在下でのその迅速な脱感作である。それは脳における２番目に豊富なニコチン性受容体サブタイプであり、そして多数の神経伝達物質の放出の重要な調節因子である。それは、海馬および前頭前皮質のような、注意および認知過程に関連性を有するいくつかの脳構造における離散分布を有し、そしてヒトにおける様々な精神および神経学的障害に関与している。それはまた、コリン作動性炎症経路にも関与している。

統合失調症とのその関連の遺伝学的証拠は、統合失調症マーカー（感覚ゲーティング障害）と１５ｑ１３−１４上のα７遺伝子座およびα７遺伝子のコアプロモーター領域における多型との間の強い連鎖の形態において見られる。

病理学的証拠は、統合失調症脳の海馬、前頭および帯状皮質における、パーキンソン病およびアルツハイマー病における、そして自閉症の室傍核および結合核におけるα７免疫反応性およびα−Ｂｔｘ結合の喪失を提示する。

健常者と比較して顕著な統合失調症患者の喫煙習慣のような薬理学的証拠は、α７ニコチン作動性伝達の障害を補うために自分で治療しようとする患者による試みとして解釈されている。ニコチン投与の際の動物モデルおよびヒトの両方における感覚ゲーティングの障害の一時的正常化（プレパルス抑制ＰＰＩ）および前脳コリン作動性活性が低い場合（例えば段階２睡眠）の統合失調症患者における正常な感覚ゲーティングの一時的回復は両方とも、α７ニコチン性受容体の一時的活性化およびその後に続く脱感作の結果であると解釈されている。

従って、α７ ｎＡＣｈＲを活性化することは多数のＣＮＳ（精神および神経学的）障害に治療的に有益な効果を有すると考える十分な理由がある。

すでに述べたように、α７ ｎＡＣｈＲは天然の伝達物質アセチルコリンならびにニコチンのような外来リガンドの持続的存在下で迅速に脱感作する。脱感作状態において、受容体はリガンドと結合したままであるが、機能的に不活性である。アセチルコリンおよびコリンのような天然の伝達物質は、非常に強力な分解（アセチルコリンエステラーゼ）およびクリアランス（コリン輸送体）機序の基質であるので、これはこれらにとってそれほど問題ではない。これらの伝達物質分解／クリアランス機序は、生理学的に有用な範囲において活性化可能な（ａｃｔｉｖａｔｉｂｌｅ）および脱感作したα７ ｎＡＣｈＲ間の平衡を維持すると思われる。しかしながら、天然の分解およびクリアランス機序の基質ではない合成アゴニストは、過剰刺激ならびにα７ ｎＡＣｈＲ個体群平衡を持続的脱感作状態に推し進めることの両方の潜在的不利益を有すると考えられ、それはα７ ｎＡＣｈＲ発現もしくは機能の欠損が一因となる障害において望ましくない。アゴニストは、本質的に、異なるニコチン性受容体サブタイプにわたって高度に保存されるＡＣｈ結合ポケットを標的としなければならず、他のニコチン性受容体サブタイプの非特異的活性化による有害反応の可能性につながる。従って、これらの潜在的不利益を防ぐために、α７アゴニスム（ａｇｏｎｉｓｍ）の代替治療戦略は、ポジティブアロステリックモジュレーター（ＰＡＭ）で天然のアゴニストに対する受容体反応性を高めることである。ＰＡＭは、アゴニスト結合部位と異なる部位に結合し、そしてそれ故にアゴニストもしくは脱感作特性を有すると考えられず、天然の伝達物質に対するα７ ｎＡＣｈＲの反応性を高める薬剤として定義される。この戦略の価値は、所定量の伝達物質に対してα７ ｎＡＣｈＲ反応の大きさがＰＡＭの不在下において可能な伝達のレベルに対してその存在下で増加されることである。従って、α７ ｎＡＣｈＲタンパク質の欠損がある障害について、α７ニコチン作動性伝達のＰＡＭにより誘導される増加は有益であり得る。ＰＡＭは天然の伝達物質の存在に依存するので、過剰刺激の可能性は天然の伝達物質の分解／クリアランス機序により限定される。

本発明の化合物は、全細胞電圧固定記録により決定した場合に、定性的速度論的性質に基づいて、１〜４型として分類される。この分類は、アゴニスト適用により誘発されるシグナルへの、上記のような、α７ ＰＡＭ化合物の効果に基づく。特に、該アゴニストは１ｍＭの濃度のコリンである。好ましい実験設定において、該α７ ＰＡＭ化合物およびコリンは、下記の通り、細胞に同時に適用される。脱感作は、アゴニストによる初期活性化後に外向き電流の減少として見られる全細胞電圧固定電気生理学測定におけるアゴニストの適用中の活性化の際の受容体の閉鎖として定義される。

ＰＡＭ１〜４型の定義を以下に記述する：
０型化合物は、１ｍＭのコリンにより誘発される電流のエフェクトサイズを最低限しか高めない。

１型化合物は、１ｍＭのコリンにより誘発される電流のエフェクトサイズを高めるが、受容体の反応速度論を最低限しか改変しない。特に、アゴニストにより誘発される、脱感作の速度および程度は影響されない。従って、１ｍＭのコリンに対する化合物により調節される反応は、α７ ＰＡＭ化合物の不在下での１ｍＭコリン反応の線形に近いスケーリング（ｃｌｏｓｅ ｔｏ ｌｉｎｅａｒ ｓｃａｌｉｎｇ）である。

２型化合物は、脱感作の速度および／もしくは程度を減少させながら１ｍＭのコリンにより誘発される電流のエフェクトサイズを高める。

３型化合物は、１ｍＭのコリンにより誘発される電流のエフェクトサイズを高める。１０μＭまでのより高い濃度で試験した場合に、それらは脱感作を完全に抑制する、特に２５０ミリ秒の１ｍＭのコリン適用。

４型化合物は受容体の初期脱感作、続いてアゴニスト適用中の受容体の再開口を可能にする。α７ ＰＡＭ化合物の低効能濃度で、脱感作が後に続く、アゴニストにより誘導される活性化は、初期内向き電流最大値として化合物により誘導される再開口からなお分離することができる。α７ ＰＡＭ化合物のより高い効能濃度で、再開口は脱感作による閉鎖より速く起こり、その結果として初期電流最大値は消失する。

従って、唯一の活性物質としてポジティブアロステリックモジュレーターを投与し、そのようにしてアセチルコリンもしくはコリンのような内因性ニコチン性受容体アゴニストの活性を調節すること、またはニコチン性受容体アゴニストと一緒にポジティブアロステリックモジュレーターを投与することのいずれかを含む処置の方法を提供することは本発明の目的である。本発明のこの態様の特定の形態において、処置の方法は本明細書に記述されるようなα７ニコチン性受容体のポジティブアロステリックモジュレーターおよびα７ニコチン性受容体アゴニストもしくは部分アゴニストでの処置を含んでなる。α７ニコチン性受容体アゴニスト活性を有する適当な化合物の例には：
−１，４−ジアザビシクロ［３．２．２］ノナン−４−カルボン酸，４−ブロモフェニルエステル，１塩酸塩（ＳＳＲ１８０７１１Ａ）；
−（−）−スピロ［１−アザビシクロ［２．２．２．］オクタン−３，５’−オキサゾリジン］−２’−オン；
−３−［（２，４−ジメトキシ）ベンジリデン］−アナバセイン２塩酸塩（ＧＴＳ−２１）；
−［Ｎ−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イル］−４−クロロベンズアミド塩酸塩］ＰＮＵ−２８２９８７）；
−ニコチン；
−バレニクリン；
−ＭＥＭ３４５４；
−ＡＺＤ−０３２８；および
−ＭＥＭ６３９０８
が包含される。

本発明のポジティブｎＡＣｈＲモジュレーターは、α７ニコチン性受容体活性の調節が有益である精神障害、知的障害疾患もしくは疾病もしくは症状の処置もしくは予防に有用である。本発明の方法の特定の態様は、学習障害、認知障害、注意欠陥もしくは記憶喪失の処置の方法であり、α７ニコチン性受容体活性の調節は、アルツハイマー病、レビー小体認知症、注意欠陥多動性障害、不安、統合失調症、躁病、躁鬱病、パーキンソン病、ハ
ンチントン病、トゥーレット症候群、脳損傷、または時差ボケ、ニコチン中毒、疼痛を包含する、コリン作動性シナプスの喪失がある他の神経学的、変性もしくは精神障害を包含する多数の疾患において有益であると考えられる。

ニコチン性アセチルコリン受容体α７サブユニットはコリン作動性炎症経路によるサイトカイン合成を抑制するために必須であるので、これらの化合物はまた抗炎症薬としても治療用途を見出し得る。これらの化合物により処置することができる適応症の例は、内毒素血症、内毒素性ショック、敗血症、関節リウマチ、喘息、多発性硬化症、乾癬、蕁麻疹、炎症性腸疾患、炎症性胆汁疾患、クローン病、潰瘍性大腸炎、術後イレウス、膵炎、心不全、急性肺損傷および同種移植片拒絶である。

本発明の化合物は以下の徴候：統合失調症における認識、アルツハイマー病における認識、軽度認識障害、パーキンソン病、注意欠陥多動性障害、潰瘍性大腸炎、膵炎、関節炎、敗血症、術後イレウスおよび急性肺損傷において治療用途を見出し得る。

上記の薬理学的性質を考慮して、式（Ｉ）の化合物もしくはその任意の亜群、それらの製薬学的に許容しうる付加塩、第四級アミンおよび立体化学的異性体は薬剤として使用することができる。特に、本発明の化合物は、α７ニコチン性受容体の調節が有益である精神障害、知的障害疾患もしくは疾病もしくは症状の処置もしくは予防のための薬剤の製造に用いることができる。

式（Ｉ）の化合物の有用性を考慮して、統合失調症、躁病および躁鬱病、不安、アルツハイマー病、学習障害、認知障害、注意欠陥、記憶喪失、レビー小体認知症、注意欠陥多動性障害、パーキンソン病、ハンチントン病、トゥーレット症候群、脳損傷、時差ぼけ、ニコチン中毒および疼痛のような、α７ニコチン性受容体の調節が有益である疾患を患っているヒトを包含する温血動物を処置する方法、もしくはヒトを包含する温血動物が患うのを予防する方法が提供される。該方法は、ヒトを包含する温血動物への、その全ての立体化学的異性体、その製薬学的に許容しうる付加塩、溶媒和物もしくは第四級アミンを包含する式（Ｉ）の化合物の有効量の投与、すなわち全身もしくは局所投与、好ましくは経口投与を含んでなる。

本発明のＰＡＭの治療的に有効な量はα７ニコチン性受容体の活性を調節するために十分な量であること、およびこの量はとりわけ疾患のタイプ、治療製剤における化合物の濃度および患者の症状により異なることを当業者は認識する。一般に、統合失調症、躁病および躁鬱病、不安、アルツハイマー病、学習障害、認知障害、注意欠陥、記憶喪失、レビー小体認知症、注意欠陥多動性障害、パーキンソン病、ハンチントン病、トゥーレット症候群、脳損傷、時差ぼけ、ニコチン中毒および疼痛のような、α７ニコチン性受容体の調節が有益である疾患を処置するための治療薬として投与されるＰＡＭの量は、主治医によりケースバイケースで決定される。

一般に、適当な用量は０．５ｎＭ〜２００μＭ、そしてより通常には５ｎＭ〜５０μＭの範囲における処置部位でのＰＡＭの濃度をもたらすものである。これらの処置濃度を得るために、処置を必要とし得る患者は０．０１ｍｇ／ｋｇ〜２．５０ｍｇ／ｋｇ体重の間、特に０．１ｍｇ／ｋｇ〜０．５０ｍｇ／ｋｇ体重で投与される。治療的効果を得るために必要とされる、有効成分とも本明細書において呼ばれる本発明の化合物の量は、もちろんケースバイケースで異なり、特定の化合物、投与の経路、レシピエントの年齢および症状、ならびに処置する特定の障害もしくは疾患によって異なる。処置の方法はまた、１日当たり１〜４回の間の服用の処方計画で有効成分を投与することを含むこともできる。これらの処置方法において、本発明の化合物は好ましくはアドミッション（ａｄｍｉｓｓｉｏｎ）の前に調合される。以下に本明細書において記述されるように、適当な製薬学的製
剤は周知のそして容易に利用可能な成分を用いて既知の方法により製造される。

本発明はまた、統合失調症、躁病および躁鬱病、不安、アルツハイマー病、学習障害、認知障害、注意欠陥、記憶喪失、レビー小体認知症、注意欠陥多動性障害、パーキンソン病、ハンチントン病、トゥーレット症候群、脳損傷、時差ぼけ、ニコチン中毒および疼痛のような、α７ニコチン性受容体の調節が有益である疾患を予防するかもしくは処置するための組成物も提供する。該組成物は、式（Ｉ）の化合物の治療的に有効な量および製薬学的に許容しうる担体もしくは希釈剤を含んでなる。

有効成分を単独で投与することは可能であるが、製薬学的組成物としてそれを与えることが好ましい。従って、本発明はさらに、製薬学的に許容しうる担体もしくは希釈剤と一緒に、本発明の化合物を含んでなる製薬学的組成物を提供する。担体もしくは希釈剤は、組成物の他の成分と適合しそしてそのレシピエントに有害でないという意味において「許容可能」でなければならない。

本発明の製薬学的組成物は、薬学の当該技術分野において周知である任意の方法により、例えば、Ｇｅｎｎａｒｏ ｅｔ ａｌ．Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ（第１８版，Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏｍｐａｎｙ，１９９０，特にＰａｒｔ ８：Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎｓ ａｎｄ ｔｈｅｉｒ Ｍａｎｕｆａｃｔｕｒｅを参照）に記載のもののような方法を用いて製造することができる。有効成分として、塩基形態もしくは付加塩形態の特定の化合物の治療的に有効な量を、投与に所望される製剤の形態により多種多様な形態をとり得る、製薬学的に許容しうる担体とよく混合して合わせる。望ましくは、これらの製薬学的組成物は、好ましくは、経口、経皮もしくは非経口投与のような全身投与；または吸入、鼻腔用スプレー、点眼薬によるかもしくはクリーム、ゲル、シャンプーなどによるような局所投与に適当な単位としての剤形においてである。例えば、経口用剤形の組成物を製造することにおいて、懸濁剤、シロップ剤、エリキシル剤および液剤のような経口用液状製剤の場合には例えば水、グリコール、油、アルコールなどのような通常の製薬学的媒質のいずれかを：または散剤、丸剤、カプセル剤および錠剤の場合には澱粉、糖、カオリン、滑沢剤、結合剤、崩壊剤などのような固形担体を用いることができる。錠剤およびカプセル剤は、それらの投与の容易さのために、最も都合のよい経口用単位剤形に相当し、この場合、固形の製薬学的担体が明らかに用いられる。非経口組成物では、例えば溶解性を促進するために、他の成分を含むことができるが、担体は通常は少なくとも大部分において滅菌水を含んでなる。例えば、注射可能な液剤を製造することができ、ここで、担体は食塩水溶液、グルコース溶液もしくは食塩水とグルコース溶液の混合物を含んでなる。注射可能な懸濁剤もまた製造することができ、この場合、適切な液状担体、沈殿防止剤などを用いることができる。経皮投与に適当な組成物において、担体は、場合によりわずかな割合の任意の性質の適当な添加剤と組み合わせて、場合により浸透促進剤および／もしくは適当な湿潤剤を含んでなってもよく、これらの添加剤は皮膚へのいかなる重大な有害効果も引き起こさない。該添加剤は皮膚への投与を容易にすることができ、そして／もしくは所望の組成物を製造するために役立ち得る。これらの組成物は様々な方法において、例えば経皮パッチとして、スポットオンとしてもしくは軟膏として投与することができる。

投与の容易さおよび投薬量の均一性のために単位剤形における上記の製薬学的組成物を調合することは特に好都合である。単位剤形は、本明細書および本明細書の請求項において用いる場合、単位投薬量として適当な物理的に分離した単位をさし、各単位は、必要とされる製薬学的担体と共に所望の治療効果をもたらすように計算された有効成分の所定量を含有する。そのような単位剤形の例は錠剤（分割錠もしくはコート錠を包含する）、カプセル剤、丸剤、散剤パケット、カシェ剤（ｗａｆｅｒｓ）、注射可能な液剤もしくは懸
濁剤、茶さじ一杯分、大さじ一杯分など、およびその分離した複数倍量である。

本発明の化合物は、経口、経皮もしくは非経口投与のような全身投与；または吸入、鼻腔用スプレー、点眼薬によるかもしくはクリーム、ゲル、シャンプーなどによるような局所投与に用いることができる。化合物は、好ましくは経口投与される。正確な投薬量および投与の頻度は、当業者に周知であるように、使用する式（Ｉ）の特定の化合物、処置する特定の症状、処置する症状の重症度、特定の患者の年齢、体重、性別、障害の程度および一般的な身体状態ならびに該個体が服用している可能性がある他の薬剤により決まる。さらに、該有効毎日量は、処置した患者の反応によりそして／もしくは本発明の化合物を処方する医師の評価により減らすかもしくは増やし得ることは明らかである。

賦形剤を有する組成物の記述（％）。投与の形態により、製薬学的組成物は０．０５〜９９重量％、好ましくは０．１〜７０重量％、より好ましくは０．１〜５０重量％の有効成分および１〜９９．９５重量％、好ましくは３０〜９９．９重量％、より好ましくは５０〜９９．９重量％の製薬学的に許容しうる担体を含んでなり、全てのパーセンテージは組成物の総重量に基づく。

式（Ｉ）の化合物はまた、例えば１，４−ジアザビシクロ［３．２．２］ノナン−４−カルボン酸，４−ブロモフェニルエステル，１塩酸塩（ＳＳＲ１８０７１１Ａ）；（−）−スピロ［１−アザビシクロ［２．２．２．］オクタン−３，５’−オキサゾリジン］−２’−オン；３−［（２，４−ジメトキシ）ベンジリデン］−アナバセイン２塩酸塩（ＧＴＳ−２１）；［Ｎ−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イル］−４−クロロベンズアミド塩酸塩］ＰＮＵ−２８２９８７；ニコチン；バレニクリン；ＭＥＭ３４５４；ＡＺＤ−０３２８およびＭＥＭ６３９０８のような他の通常のα７ニコチン性受容体アゴニストと組み合わせて用いることもできる。従って、本発明はまた式（Ｉ）の化合物とα７ニコチン性受容体アゴニストの組み合わせにも関する。該組み合わせは、薬剤として使用することができる。本発明はまた、α７ニコチン性受容体の調節が有益である疾患の処置における同時、別個もしくは逐次使用のための組み合わされた製剤として、（ａ）式（Ｉ）の化合物および（ｂ）α７ニコチン性受容体アゴニストを含んでなる製品にも関する。異なる薬剤は、製薬学的に許容しうる担体と一緒に単一の製剤において組み合わせることができる。

実験部分
本発明の化合物を製造するためのいくつかの方法を以下の実施例において説明する。他に記載されない限り、全ての出発材料は商業的供給業者から入手し、そしてさらに精製せずに使用した。

以下で、「ＴＨＦ」はテトラヒドロフランを意味し；「ＤＭＦ」はＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミドを意味し；「ＥｔＯＡｃ」は酢酸エチルを意味し；「ＤＣＭ」はジクロロメタンを意味し；「ＤＩＰＥ」はジイソプロピルエーテルを意味し；「ＤＭＳＯ」はジメチルスルホキシドを意味し；「ＤＭＡＰ」は４−（ジメチルアミノ）ピリジンを意味し；「ｍｉｎ」は分を意味し；「ｓａｔ．」は飽和したを意味し；「ＭｅＯＨ」はメタノールを意味し；「ＥｔＯＨ」はエタノールを意味し；「Ｅｔ_２Ｏ」はジエチルエーテルを意味し；「ａｃａｃ」はアセチルアセトネートを意味し；「ＴＢＡＦ」はフッ化テトラブチルアンモニウムを意味し；「ＤＩＡＤ」はジアゾジカルボン酸ジイソプロピルを意味し；「ＮＨ_４ＯＡｃ」は酢酸アンモニウムを意味し、そして「ｒ．ｔ．」は室温を意味する。

マイクロ波支援反応は、シングルモード反応器：Ｉｎｉｔｉａｔｏｒ^ＴＭ Ｓｉｘｔｙ
ＥＸＰマイクロ波反応器（Ｂｉｏｔａｇｅ ＡＢ）においてもしくはマルチモード反応
器：ＭｉｃｒｏＳＹＮＴＨ Ｌａｂｓｔａｔｉｏｎ（Ｍｉｌｅｓｔｏｎｅ，Ｉｎｃ．）において行った。

以下の実施例は本発明を説明するが、その範囲を限定するものではない。

説明１
（３Ｓ）−３−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］−ブタン酸メチルエステル（Ｄ１）

ＤＭＦ（２５０ｍＬ）中の（Ｓ）−３−ヒドロキシブタン酸メチルエステル（５．４７３ｇ、４６．３ｍｍｏｌ）および１Ｈ−イミダゾール（６．９３９ｇ、１０２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．５６６ｇ、４．６３ｍｍｏｌ）の氷冷しそして撹拌した溶液にｔｅｒｔ−ブチル（クロロ）ジフェニルシラン（１５．２８２ｇ、５５．６ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。１０分後に、混濁反応混合物をｒ．ｔ．まで温めておき、そして一晩撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃに溶解し、次にＨ_２Ｏ（３ｘ）、１Ｎ ＨＣｌおよびｓａｔ．ＮａＨＣＯ_３溶液で連続して洗浄した。有機相を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、そして濃縮して粘性のある無色の油を生成せしめた。収量：１０．６１４ｇの中間体Ｄ１（６４％）。

説明２
（３Ｓ）−３−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］−ブタン酸（Ｄ２）

ＭｅＯＨ／Ｈ_２Ｏ（８０ｍＬ／８０ｍＬ）中の水酸化リチウム（２．１ｇ、８９．３ｍｍｏｌ）の溶液をｒ．ｔ．でＴＨＦ（８０ｍＬ）中の中間体Ｄ１（１０．６ｇ、２９．８ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に加えた。反応混合物を一晩撹拌した。次に溶媒を減圧下で除き、そして残留物をＨ_２Ｏ／ＥｔＯＡｃ間で分配した。層を分離し、そして水相をＥｔＯＡｃ（ｘ３）で抽出し、次に濃ＨＣｌでｐＨ１に酸性化し、そしてＥｔＯＡｃ（ｘ３）で再び抽出した。合わせた有機抽出物を乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、そして減圧下で濃縮して透明な黄色の粘性のある油を生成せしめた。収量：１１ｇの中間体Ｄ２（９９．９
％）。

説明３
（３Ｓ）−３−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］−ブタノイルクロリド（Ｄ３）

塩化オキサリル（４．１ｍＬ、４８ｍｍｏｌ；濃度１．５ｇ／ｍＬ）をＤＣＭ（３００ｍＬ）中の中間体Ｄ２（１１ｇ、３２ｍｍｏｌ）およびＤＭＦ（１ｍＬ）の撹拌溶液にｒ．ｔ．で９０分間滴下して加えた。反応混合物を減圧下で蒸発させ、そしてトルエン（ｘ３）で共蒸発させて粗中間体Ｄ３を黄色の油として生成せしめた。この物質を任意のさらなる精製なしに反応順序の次の段階において使用した。

説明４
（３Ｓ）−３−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］−Ｎ−［［［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］チオキソメチル］−ブタンアミド（Ｄ４）

中間体Ｄ３（５．４ｇ、１４．９ｍｍｏｌ）をｒ．ｔ．でアセトン（１５０ｍＬ）中のチオシアン酸アンモニウム（１．１ｇ、１４．９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に滴下して加えた。２時間後に、４−フルオロ−（３−トリフルオロメチル）アニリン（２．７ｇ、１４．９ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物をｒ．ｔ．で一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除き、そして残留物をＨ_２Ｏ／ＤＣＭ間で分配した。層を分離し、そして水相をＤＣＭ（ｘ２）で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、そして濾過した。次に、溶媒を蒸発させて粗物質を粘性のある濃い橙色の油として生成せしめ、８．８ｇ（１０４．９％）を生成せしめた。この物質をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した（Ｂｉｏｔａｇｅ；４０Ｍカラム；溶離剤：０／１００〜４０／６０のＥｔＯＡｃ／ヘプタン勾配溶出）。収量：粘性のある黄色の油として３．７ｇの中間体Ｄ４（４４．４％）。

説明５
４−［［［（３，４−ジフルオロフェニル）アミノ］チオキソメチル］アミノ］−４−オキソ−ブタン酸エチルエステル（Ｄ５）

ＣＨ_３ＣＮ（４２ｍｌ）中のチオシアン酸、アンモニウム塩（５ｇ、０．０６５ｍｏｌ）の混合物をｒ．ｔ．で１５分間撹拌した。４−クロロ−４−オキソ−ブタン酸エチルエステル（０．０６１ｍｏｌ）を滴下して加え、そして混合物を６０℃で３０分間撹拌した。混合物を０℃に冷却し、そして次に３，４−ジフルオロアニリン（６ｍＬ、０．０６１ｍｏｌ）を滴下して加えた。反応混合物をｒ．ｔ．で３０分間撹拌した。次に、混合物を氷水でクエンチし、そして０℃で１５分間撹拌した。焼結漏斗を通して混合物を濾過し、乾燥させ、そしてトルエンと共沸させて残留する水を除いた。収量：１６．４０ｇの中間体Ｄ５（８５％、黄色の固体）。

同様にして、以下の中間体を製造した：

説明９
Ｎ−［（３Ｓ）−３−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］−１−オキソブチル］−Ｎ’−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−カルバムイミドチオ酸メチルエステル（Ｄ９）

Ｋ_２ＣＯ_３（１ｇ、７．３ｍｍｏｌ）をｒ．ｔ．でアセトン（７０ｍＬ）中の中間体Ｄ４（説明４に従って製造した）（３．７ｇ、６．６ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に加えた。５０分後に、ＣＨ_３Ｉ（０．５ｍＬ、７．９ｍｍｏｌ）を滴下して加え、そして反応混合物をｒ．ｔ．で１４５分間撹拌した。溶媒を減圧下で除き、そして得られる残留物をＨ_２Ｏ／ＤＣＭ間で分配した。層を分離し、そして水相をＤＣＭ（ｘ２）で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させ、粗生成物を粘性のある黄色の油として生成せしめた。収量：３．８ｇの中間体Ｄ９（９９．４％）。

同様にして、以下の中間体を製造した：

説明１４
５−［（２Ｓ）−２−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］プロピル］−Ｎ−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−アミン（Ｄ１４）

室温でＤＭＦ（６５ｍＬ）中の中間体Ｄ９（説明９に従って製造した）（３．８ｇ、６．５ｍｍｏｌ）および４−ヒドラジノ−２−メチルピリジン（０．８ｇ、６．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に塩化水銀（ＩＩ）（１．８ｇ、６．５ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を８０℃で１４０分間加熱した。冷却した反応混合物を氷上に注ぎ、そして沈殿した生成物を濾過により集めて黄色の半固体を生成せしめた。収量：４．２ｇの中間体Ｄ１４（１０１．２％）。

説明１５
３−［［［［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］チオキソメチル］アミノ］−３−オキソ−プロパン酸エチルエステル（Ｄ１５）

室温でＣＨ_３ＣＮ（１１０ｍｌ）中のチオシアン酸、アンモニウム塩（１：１）（２．
７８１ｇ；３６．５ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に３−クロロ−３−オキソ−プロパン酸エチルエステル（５ｇ；３３．２ｍｍｏｌ）をゆっくりと加えた。２時間後に、４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）ベンゼンアミン（４．２７ｍｌ；３３．２ｍｍｏｌ）を加えた。溶媒を減圧下で除いた。得られる残留物をＨ_２Ｏ／ＤＣＭ間で分配し、そして相を分離した。水相をＤＣＭ（ｘ２）で抽出し、そして合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ、そして濾過した。収量：３．６５６ｇの中間体Ｄ１５。

説明１６
３−［［（１Ｚ）−［［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］（メチルチオ）メチレン］アミノ］−２−メチル−３−オキソ−プロパン酸エチルエステル（Ｄ１６）

室温でアセトン（５０ｍｌ）中の中間体Ｄ１５（１．７６５ｇ；５．０１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液にＫ_２ＣＯ_３（０．８３１ｇ；６．０１ｍｍｏｌ）を加えた。４０分後に、ＣＨ_３Ｉ（０．６２４ｍｌ；１０．０ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応混合物を室温で撹拌した。溶媒を減圧下で除き、そして残留物をＨ_２Ｏ／ＤＣＭ間で分配した。水相をＤＣＭで抽出し、そして合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、そして濾過し、橙色の油を生成せしめた。ＬＣＭＳにより４つの異なる生成物が示され、それらをＢｉｏｔａｇｅシステム（４０Ｍカラム）、溶離剤：ＤＣＭ〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭ勾配溶出を用いてフラッシュクロマトグラフィーにより分離した。第三の画分は所望の化合物を含有した。収量：４０１ｍｇの中間体Ｄ１６。

説明Ｄ１８
５−［（２Ｓ）−２−［［（１，１−ジメチルエチル）ジフェニルシリル］オキシ］ブチル］−Ｎ−［３−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−アミン（Ｄ１８）

室温でＤＭＦ（１８０ｍＬ）中の中間体Ｄ１７（説明９に従って製造した）（１１．５ｇ、１９．１ｍｍｏｌ）および４−ヒドラジノ−２−メチルピリジン（３．１ｇ、１９．
１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に塩化水銀（ＩＩ）（５．２ｇ；１９．１ｍｍｏｌ）を加えた。５分後に、反応混合物を８０℃で１２０分間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、そして溶媒を減圧下で除いた。残留物をＨ_２Ｏ／ＥｔＯＡｃ間で分配した。水相をＥｔＯＡｃ（ｘ２）で抽出し、そして合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、そして濾過し、黄色の油を生成せしめた。収率：中間体Ｄ１８（４１％）。中間体Ｄ１８（２９ｇ；いくつかのバッチを合わせた）を１．５リットルのＥｔＯＡｃに溶解した。水中のＮａ_２Ｓの溶液（２０ｍｌ）を加え、そして混合物を強く２時間撹拌した。黒色の不溶性の沈殿物が生じた（ＨｇＳ）。反応混合物をジカライト上で濾過し、そしてＮａ_２Ｓ溶液で再び処理した。有機層を分離し、そしてブラインで洗浄した。有機層をＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、濾過し、そしてシリカゲルＳ−チオールで処理した（５０℃で２ｘ２時間）。混合物をジカライト上で濾過し、そして蒸発させた。蒸発がほぼ完了する間に生成物は結晶化した。Ｅｔ_２Ｏを加え、そして沈殿物を濾過して分離した。生成物を５０℃で真空オーブンにおいて乾燥させた。収量：２５．７０ｇの中間体Ｄ１８。

説明Ｄ１９
３−［［［［２−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］チオキソメチル］アミノ］−３−オキソ−プロパン酸メチルエステル（Ｄ１９）

ｒ．ｔ．でＭｅＣＮ（４００ｍｌ）中のチオシアン酸アンモニウム（４．６ｇ）の撹拌溶液にＭｅＣＮ（５０ｍｌ）中の３−クロロ−３−オキソ−プロパン酸メチルエステル（７．５ｇ）をゆっくりと加えた。１．５ｈ後に、反応混合物を０℃に冷却し、そしてＭｅＣＮ（５０ｍｌ）中の２−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）アニリン（９．８ｇ）の溶液をゆっくりと加えた。５〜１０分後に、その後の反応混合物をｒ．ｔ．まで温めておき、そして１ｈ後に溶媒を減圧下で除き、そして得られる残留物をＨ_２Ｏ／ＤＣＭ間で分配し、そして相を分離した。水相をＤＣＭ（ｘ２）で抽出し、そして合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、次に乾燥させた（Ｎａ_２ＳＯ_４）。濾過および濃縮により粗物質を琥珀色の油として生成せしめた。収量：１７．１ｇの中間体Ｄ１９（６０％）。

説明Ｄ２０
３−［［（１Ｚ）−［［２−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］（メチルチオ）メチレン］アミノ］−３−オキソ−プロパン酸メチルエステル

ＴＨＦ（４５０ｍｌ）中の中間体Ｄ１９（１７．１ｇ）の氷冷溶液をＮ_２の雰囲気下で撹拌した。ＮａＯｔＢｕ（１ｅｑ）を加え、そして３０分後にＴＨＦ中のヨードメタンの溶液（３．１５ｍｌ）を滴下して加えた。さらに３０分後に追加のＮａＯｔＢｕ（１ｅｑ）を加え、そして内容物を〜０℃で撹拌した。反応が４５分後に完了すると、ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液を加え、そして反応物をＥｔＯＡｃで希釈した。相を分離し、そして水相をＥｔＯＡｃ（ｘ２）で抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、次に乾燥させた（Ｎａ_２ＳＯ_４）。濾過および減圧下での濃縮により粗物質を琥珀色の油として生成せしめた。収量：１７．２ｇの中間体Ｄ２０（５９％）。

説明Ｄ２１
１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−３−［［２−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−酢酸メチルエステル（Ｄ２１）

ｒ．ｔ．でＤＭＦ（２００ｍＬ）中の中間体Ｄ２０（９．１ｇ）および２，６−ジメチル−４−ヒドラジノピリジン．ＨＣｌ（４．４８ｇ）の撹拌溶液に塩化水銀（ＩＩ）（７ｇ）を加えた。ｒ．ｔ．で５分後に、その後の反応混合物を７０℃で一晩撹拌した（反応は４０％完了）。内容物をｒ．ｔ．に冷却し、そして溶媒を減圧下で除いた。得られる残留物をＨ_２ＯとＥｔＯＡｃとの間で分配し、そして相を分離した。水相をＥｔＯＡｃ（ｘ２）で抽出し、そして合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、次に乾燥させた（Ｎａ_２ＳＯ_４）。濾過および濃縮により黄色の油を生成せしめ、それをＥｔＯＡｃに溶解し、そしてＨ_２Ｏ中の硫化ナトリウム（４ｇ）の溶液を加えた（黒色の沈殿物が生じた）。その後の反応混合物をｒ．ｔ．で数時間強く撹拌し、次にジカライトを通して濾過した。相を分離し、そして水相をＥｔＯＡｃ（２ｘ）で抽出し、そして合わせた有機抽出物をＨ_２Ｏで、次にブラインで洗浄し、そして乾燥させた（Ｎａ_２ＳＯ_４）。内容物を濾過し、濃縮し、そして得られる油をＤＣＭに溶解し、そしてＳｉ−チオール（官能化シリカゲル）を加えた。得られる懸濁液をｒ．ｔ．で数時間強く撹拌し、次に濾過し、そして蒸発させて琥珀色の油を生成せしめ、それをＢｉｏｔａｇｅシステム：溶離剤２０％ＥｔＯＡｃ：８０％ヘプタン〜１００％ＥｔＯＡｃ、勾配溶出（大部分の不純物の溶出）、次に１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭを用いてフラッシュクロマトグラフィーにより精製して所望の生成物を粘着性のある黄色の油として溶出した。黄色の油をＤＩＰＥにおいて一晩撹拌し、次に内容物を濾過して淡黄色の粉末を生成せしめた。収量：８１４ｍｇの中間体Ｄ２１（６％）。

実施例１
３−［（３，４−ジフルオロフェニル）アミノ］―１−（２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシン−６−イル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−プロパン酸（Ｅ１）

ｒ．ｔ．でＴＨＦ（９ｍｌ）中の化合物Ｅ１１４（説明１４に従って製造した）（０．００１５８ｍｏｌ）、ＭｅＯＨ（３ｍｌ）およびＨ_２Ｏ（３ｍｌ）の撹拌溶液にＬｉＯＨ．Ｈ_２Ｏ（０．００２７７ｍｏｌ）を加えた。反応混合物をｒ．ｔ．で１時間撹拌した。溶媒を減圧下で蒸発させた。ＨＣｌ（２Ｍ、２０ｍｌ）を加え、そして得られる沈殿物を濾過して分離し、そして乾燥させた。収量：０．５７０ｇの化合物Ｅ１（９０％、灰色の固体）。

実施例２
３−［（３，４−ジフルオロフェニル）アミノ］―１−（２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシン−６−イル）−Ｎ−メチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−プロパンアミド（Ｅ２）

化合物Ｅ１１４（説明１４に従って製造した）（０．０００１９ｍｏｌ）をＣＨ_３ＮＨ_２、ＴＨＦ中２．０Ｍ（１．９ｍｌ；０．００３８ｍｏｌ）に溶解し、そして溶液を１２時間還流させた。約３時間ごとにＣＨ_３ＮＨ_２、ＭｅＯＨ中２．０Ｍ（１．９ｍｌ；０．００３８ｍｏｌ）およびＴＨＦ（１ｍｌ）の追加部分を加えた。混合物を冷却し、そして溶媒を減圧下で蒸発させた。褐色の固体残留物をシリカゲル上でカラムクロマトグラフィーにより精製した（溶離剤：１００／０〜９０／１０のＤＣＭ／（ＭｅＯＨ／ＮＨ_３））。生成物画分を集め、そして溶媒を蒸発させた。収量：０．０１３ｇの化合物Ｅ２（１６％）。

実施例３
３−［（３，４−ジフルオロフェニル）アミノ］―１−（２，３−ジヒドロ−１，４−ベンゾジオキシン−６−イル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−プロパンアミド（Ｅ３）

化合物Ｅ１（実施例１に従って製造した）（０．０００６２ｍｏｌ）をＤＭＦ（５ｍｌ）に溶解した。１−ヒドロキシ−１Ｈ−ベンゾトリアゾール（０．００１８６ｍｏｌ）、（３−ジメチルアミノ−プロピル）−エチル−カルボジイミド塩酸塩（１：１）（０．００１８６ｍｏｌ）およびＮ−エチル−Ｎ−（１−メチルエチル）−２−プロパンアミン（０．００２４８ｍｏｌ）を加え、続いてジメチルアミン塩酸塩（１：１）（０．００１２４ｍｏｌ）を加えた。反応混合物をｒ．ｔ．で３時間撹拌した。反応混合物を水に注ぎ込んだ。混合物をＣＨＣｌ_３で抽出した。有機層を分離し、１Ｍ ＨＣｌ溶液で洗浄し、次にブラインで洗浄し、そして疎水性フリットを通して濾過した。溶媒を減圧下で蒸発させて黄色の固体残留物を生成せしめ、それを１時間さらに乾燥させた（ＧｅｎｅＶａｃ^Ｒにおいて）。残留物をジエチルエーテルで研和し、濾過して分離し、そして乾燥させた。収量：０．２４５ｇの化合物Ｅ３（９２％）。

実施例４
１−（２−メトキシ−３−ピリジニル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−３−［［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−プロパンアミド（Ｅ４）

化合物Ｅ７６（実施例３に従って製造した）（０．２０ｇ；０．０００４ｍｏｌ）、ＭｅＯＨ中のＮａＯＣＨ_３（１ｍｌ）およびＭｅＯＨ（４ｍｌ）の混合物をマイクロ波において１００℃で３０分間撹拌した。反応混合物を蒸発させ、そして残留物を逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した（Ｓｈａｎｄｏｎ Ｈｙｐｅｒｐｒｅｐ^Ｒ Ｃ１８ ＢＤＳ（塩基不活性化シリカ）８μｍ、２５０ｇ、Ｉ．Ｄ．５ｃｍ）。２つの移動相での勾配をかけた。相Ａ：水中０．２５％のＮＨ_４ＨＣＯ_３溶液；相Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）。所望の画分を集め、蒸発させ、そして乾燥させた。収量：３８ｍｇの化合物Ｅ４（２１％）。

実施例５
Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−（２−メチル−３−ピリジニル）−３−［［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−プロパンアミド
（Ｅ５）

化合物Ｅ７６（実施例３に従って製造した）（０．２０ｇ；０．０００４ｍｏｌ）、Ｆｅ（ａｃａｃ）_３（０．０３１ｇ；０．０００１ｍｏｌ）、ＴＨＦ（５ｍｌ）および１−メチル−２−ピロリジノン（１．５ｍｌ）の混合物を室温で撹拌し、その後でＥｔ_２Ｏ中のＣＨ_３ＭｇＢｒ、２Ｍ（２ｍｌ）およびＭｅＯＨ（５ｍｌ）を加えた。反応混合物を蒸発させ、ＤＣＭおよびＨ_２Ｏに溶解し、そしてジカライト上で濾過した。濾液をＭｇＳＯ_４上で乾燥させ、そして濾過して分離した。濾液を蒸発させた。生成物をＤＩＰＥ／Ｈ_２Ｏに溶解した。有機層を分離し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、そして濾過した。濾液を蒸発させ、そして残留物を逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した（Ｓｈａｎｄｏｎ
Ｈｙｐｅｒｐｒｅｐ^Ｒ Ｃ１８ ＢＤＳ（塩基不活性化シリカ）８μｍ、２５０ｇ、Ｉ．Ｄ．５ｃｍ）。２つの移動相での勾配をかけた。相Ａ：水中０．２５％のＮＨ_４ＨＣＯ_３溶液；相Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）。所望の画分を集め、蒸発させ、そして乾燥させた。収量：８１ｍｇの化合物Ｅ５（４７％）。

実施例６
Ｎ，Ｎ−ジメチル−１−［２−（メチルアミノ）−３−ピリジニル）−３−［［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−プロパンアミド（Ｅ６）

化合物Ｅ７６（実施例３に従って製造した）（０．２０ｇ；０．０００４４ｍｏｌ）、ＣＨ_３ＮＨ_２（２ｇ）およびＥｔＯＨ（２０ｍｌ）の混合物を１６０℃で１６時間撹拌した。次に、溶媒を蒸発させ、そして残留物を逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した（Ｓｈａｎｄｏｎ Ｈｙｐｅｒｐｒｅｐ^Ｒ Ｃ_１８ ＢＤＳ（塩基不活性化シリカ）８μｍ、２５０ｇ、Ｉ．Ｄ．５ｃｍ）。３つの移動相での勾配をかけた。相Ａ：水中０．２５％のＮＨ_４ＨＣＯ_３溶液；相Ｂ：ＭｅＯＨ；相Ｃ：ＣＨ_３ＣＮ）。純粋画分を集め、そして溶媒を蒸発させた。所望の化合物を乾燥させた。収量：０．０９１ｇの化合物Ｅ６
（収率：４６％）。

実施例７
３−［［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−プロパノール（Ｅ７）

Ｎ_２の雰囲気下でＥｔ_２Ｏ（８０ｍｌ）中の化合物Ｅ１１３（説明１４に従って製造した）（６．９８ｍｍｏｌ）の氷冷しそして撹拌した溶液に、ＬｉＡｌＨ_４（１０．５ｍｍｏｌ）を少しずつ加えた。５分後に、混合物をｒ．ｔ．まで温めておき、そして次に一晩撹拌した。次に、反応混合物を０℃に冷却し、そして追加のＥｔ_２Ｏ（２０．９ｍｍｏｌ）を加えた。５分後に、反応混合物をｒ．ｔ．まで温めた。追加のＬｉＡｌＨ_４（３当量；２１．０ｍｍｏｌ）を冷却した反応混合物に加え、そして混合物を１時間撹拌した。反応混合物を冷却し、そして１０％のＮａＯＨで注意深くクエンチした。次に、混合物をｒ．ｔ．まで温めておき、そして珪藻土のパッドを通して濾過した。濾液をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、そして濃縮して０．６３４ｇの黄色の固体を生成せしめた（収率＝２３％）。生成物を逆相高速液体クロマトグラフィーにより精製した（Ｓｈａｎｄｏｎ Ｈｙｐｅｒｐｒｅｐ^Ｒ
Ｃ１８ ＢＤＳ（塩基不活性化シリカ）８μｍ、２５０ｇ、Ｉ．Ｄ．５ｃｍ）。３つの移動相での勾配をかけた（相Ａ：９０％の水中０．５％ＮＨ_４ＯＡｃ溶液＋１０％のＣＨ_３ＣＮ；相Ｂ：ＭｅＯＨ；相Ｃ：ＣＨ_３ＣＮ）。所望の画分を集め、そして溶媒を蒸発させて白色の固体を生成せしめた。Ｈ_２Ｏを加え、そして混合物を飽和ＮａＨＣＯ_３で中和した。次に、内容物をＤＣＭで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、そして濃縮して白色の固体を生成せしめた。収量：０．０８４ｇの化合物Ｅ７（３％）。

実施例８および９
５−（３−フルオロプロピル）−Ｎ−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−アミン（Ｅ８）および５−（３−クロロプロピル）−Ｎ−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−アミン（Ｅ９）

ＤＣＭ（５ｍｌ）中の化合物Ｅ７（実施例７に従って製造した）（０．４９３ｍｍｏｌ）、Ｎ−エチル−Ｎ−（１−メチルエチル）−２−プロパンアミン（０．９８６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．０４９ｍｍｏｌ）の氷冷しそして撹拌した懸濁液に塩化メタンスルホニル（０．９８６ｍｏｌ）を滴下して加えた。５分後に、反応混合物をｒ．ｔ．まで温めておいた。反応混合物にＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液、続いてＨ_２Ｏを加えた。相を分離した。水相をＤＣＭで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、次に乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、そして溶媒を蒸発させて橙色の油を生成せしめた。この油をＴＨＦ（５ｍｌ）に溶解し、そして０℃に冷却した。ＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１．０Ｍ）（２．５０ｍｍｏｌ）を加え、そして５〜１０分後に、反応混合物をｒ．ｔ．まで温めておいた。次に、混合物を一晩撹拌した。追加のＴＢＡＦ（ＴＨＦ中１．０Ｍ）（２．５０ｍｍｏｌ）を加え、そして反応混合物を５０℃で２時間加熱した。溶媒を減圧下で除き、そして残留物をＨ_２ＯとＤＣＭとの間で分配した。層を分離した。水相をＤＣＭで抽出し、そして合わせた有機抽出物を洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、そして濃縮して橙色の油を生成せしめた。この油を最初にフラッシュクロマトグラフィーにより精製した（Ｂｉｏｔａｇｅ；４０Ｍカラム；溶離剤：１００／０〜９０／１０のＤＣＭ／ＭｅＯＨ勾配溶出）。得られる物質を逆相高速液体クロマトグラフィーによりさらに精製した（Ｓｈａｎｄｏｎ Ｈｙｐｅｒｐｒｅｐ^Ｒ Ｃ１８ ＢＤＳ（塩基不活性化シリカ）８μｍ、２５０ｇ、Ｉ．Ｄ．５ｃｍ）。２つの移動相での勾配をかけた（相Ａ：水中０．２５％のＮＨ_４ＨＣＯ_３溶液；相Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）。所望の画分を集め、そして処理した（ｗｏｒｋｅｄ−ｕｐ）。収量：１３ｍｇの化合物Ｅ８および３６ｍｇの化合物Ｅ９（それぞれ、６．６％および１７．７％）。

実施例１０
３−［［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］−アルファ−メチル−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−，（アルファＳ）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール（Ｅ１０）

ＴＨＦ（６０ｍｌ）中のＤ１４（説明Ｄ．１４に従って製造した）（４．１ｇ；６．５
ｍｍｏｌ）の氷冷しそして撹拌した懸濁液にＴＢＡＦ（１６．３ｍｌ；１６．３ｍｍｏｌ；ＴＨＦ中１．０Ｍ）を加えた。５分後に、その後の反応混合物をｒ．ｔ．まで温めておいた。１７０分後に、ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液を加え、そして混合物をＥｔＯＡｃで抽出した。合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、そして濃縮して橙色の油を生成せしめた。この物質を最初にフラッシュクロマトグラフィーにより精製した（Ｂｉｏｔａｇｅ；４０Ｍカラム；溶離剤：１００／０〜９０／１０のＤＣＭ／ＭｅＯＨ勾配溶出）。所望の画分を集め、そして溶媒を蒸発させて黄色の油状固体を生成せしめた。この物質をＭｅＯＨ／ＤＣＭに溶解した。この混合物を濾過し、そして濾液を減圧下で濃縮して１．２５１ｇの黄色の油状固体を生成せしめた。生成物を逆相高速液体クロマトグラフィーによりさらに精製した（Ｓｈａｎｄｏｎ Ｈｙｐｅｒｐｒｅｐ^Ｒ
Ｃ_１８ ＢＤＳ（塩基不活性化シリカ）８μｍ、２５０ｇ、Ｉ．Ｄ．５ｃｍ）。２つの移動相での勾配をかけた（相Ａ：水中０．２５％のＮＨ_４ＨＣＯ_３溶液；相Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）。所望の画分を集めて（溶媒の蒸発後に）クリーム色の粉末を生成せしめた。収量：３５７ｍｇの化合物Ｅ１０（１３．９％）。

実施例１１
Ｎ−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−５−［（１Ｅ）−１−プロペニル］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−アミン（Ｅ１１）

（Ｎ_２雰囲気下で）ＴＨＦ（６ｍｌ）中の化合物Ｅ１０（実施例１０に従って製造した）（１２１ｍｇ；０．３ｍｍｏｌ）、ｐ−ニトロ安息香酸（２３０．２ｍｇ；１．４ｍｍｏｌ）およびトリフェニルホスフィン（４０１．４ｍｇ；１．５ｍｍｏｌ）の氷冷しそして撹拌した溶液にＤＩＡＤ（０．３ｍｌ；１．５ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応混合物を１時間にわたってｒ．ｔ．まで温めておき、そして次にｒ．ｔ．で一晩撹拌した。溶媒を減圧下で除いて黄色の油を生成せしめた。この物質をフラッシュクロマトグラフィーにより精製した（Ｂｉｏｔａｇｅ；４０Ｍカラム；溶離剤：１００／０〜９０／１０のＤＣＭ／ＭｅＯＨ勾配溶出）。所望の画分を合わせて淡黄色の油状固体を生成せしめた。この物質をＤＩＰＥにおいて数時間撹拌した。次に混合物を濾過し、そして沈殿した固体をＤＩＰＥおよびＤＣＭで洗浄して細かいクリーム色の粉末を生成せしめた。収量：９２ｍｇの化合物Ｅ１１（７９．７％）。

実施例１２
１−（３−クロロ−４−ピリジニル）−Ｎ−［４−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］−５−（３−メトキシプロピル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−３−アミン（Ｅ１２）

ＤＣＭ（２．５ｍｌ）中のＥ１４（実施例７に従って製造した）（０．１１１ｇ：０．２５８ｍｍｏｌ）、Ｎ，Ｎ−ジエチルエタンアミン（０．０９０ｍｌ；０．６４６ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（０．００３ｇ；０．０２６ｍｍｏｌ）の氷冷しそして撹拌した懸濁液に塩化メタンスルホニル（０．０５０ｍｌ；０．６４６ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。５〜１０分後に、反応混合物を室温まで温めておいた。２．５時間後に、ＬＣＭＳはメシレートをそして残留する出発物質がないことを示した。反応混合物にＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液、続いて水を加えた。水相をＤＣＭで抽出し、そして合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、そして濃縮して橙色の油を生成せしめた。油をＮａＯＭｅ（５ｍｌ）に溶解し、そして得られる溶液を室温で一晩撹拌した。追加のＮａＯＭｅ（５ｍｌ）を加え、そして反応混合物を５０℃で２時間加熱した。反応混合物を冷却し、そしてＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液、続いて水を加え、そして相を分離した。水相をＤＣＭで抽出し、そして合わせた有機抽出物をブラインで洗浄し、次に乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、そして濃縮して淡黄色の油を生成せしめた。残留物をＢｉｏｔａｇｅシステム上でのクロマトグラフィー、溶離剤ＤＣＭ〜１０％ＭｅＯＨ／ＤＣＭにより精製した。合わせた関連画分は黄色の油を与え、そしてＲＰクロマトグラフィーにより精製してクリーム色の固体を生成せしめた。収量：２２ｍｇの化合物Ｅ１２（１００％）。

実施例１３７
（アルファＳ）−アルファ−エチル−３−［［３−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール（Ｅ１３７）

ＴＨＦ（２００ｍｌ）中の中間体Ｄ１８（説明Ｄ．１８に従って製造した）（１２．６ｇ；１９．１ｍｍｏｌ）の撹拌溶液にＴＢＡＦ（５７．４ｍｌ；５７．４ｍｍｏｌ；ＴＨＦ中１．０Ｍ）を加えた。混合物を２４時間撹拌した。ＮＨ_４Ｃｌの飽和溶液を加え、そして混合物をさらに５〜１０分間撹拌した。混合物をＥｔＯＡｃ（ｘ３）で抽出した。ＴＢＡＦの大部分がなくなるまで合わせた有機抽出物を水（ｘ５）で洗浄し、次にブラインで洗浄し、乾燥させ（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濾過し、そして減圧下で濃縮して琥珀色の油を生
成せしめた。この物質をＦｌａｓｈｍａｓｔｅｒおよびＢｉｏｔａｇｅシステム、溶離剤：ＤＣＭ〜５％ＣＨ_３ＯＨ／ＤＣＭ、１００／０〜９０／１０の勾配溶出を用いてフラッシュクロマトグラフィーにより精製し、そして関連画分を合わせてクリーム色の粉末を生成せしめた。収量：１．３ｇの化合物Ｅ１３７（１６．１％）。

実施例２５７
Ｎ−シクロプロピル−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−３−［［２−フルオロ−３−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−アセトアミド（Ｅ２５７）

ＭｅＯＨ（５ｍｌ）中の中間体Ｄ２１（Ｄ２１に従って製造した）（１．４１ｍｍｏｌ）の撹拌懸濁液にシクロプロピルアミン（５ｍｌ）を加え、そしてその後の反応混合物を４０℃で一晩撹拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して淡黄色／クリーム色の粉末を生成せしめた。この物質をＭｅＣＮから結晶化させ（生成物は８０℃で溶解する）、次に内容物を濾過し、そして乾燥させてふわふわした白色の粉末を生成せしめた。収量：５２７ｍｇの化合物Ｅ２５７（８３％）。

表１および２は、上記実施例の１つに従って製造した式（Ｉ）の化合物を記載する。

分析部分
ＬＣＭＳ
ＬＣＭＳ一般的方法Ａ
ＨＰＬＣ測定は、脱気装置を有するクォータナリポンプ、オートサンプラー、カラムオーブン（他に示されない限り、４０℃で設定する）、ダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）および以下のそれぞれの方法において特定されるようなカラムを含んでなるＡｌｌｉａｎｃｅ ＨＴ ２７９０（Ｗａｔｅｒｓ）システムを用いて行った。カラムからのフローは、ＭＳ分光器に分けられた。ＭＳ検出器は、エレクトロスプレーイオン化源を用いて設定された。質量スペクトルは、０．１秒の滞留時間を用いて１秒で１００〜１０００をスキャンすることにより得られた。キャピラリーニードル電圧は３ｋＶであり、そして供給源温度（ｓｏｕｒｃｅ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ）を１４０℃で保った。窒素をネブライザーガスとして用いた。データ収集は、Ｗａｔｅｒｓ−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘデータシステムで行った。

ＬＣＭＳ一般的方法Ｂ
ＨＰＬＣ測定は、ポンプ、Ｇｉｌｓｏｎ ２１５オートサンプラーを有するダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）および以下のそれぞれの方法において特定されるようなカラムを含んでなるＡｇｉｌｅｎｔ １１００モジュールを用いて行った。カラムからのフローは、ＭＳ分光器に分けられた。イオン化は、化合物のタイプによりエレクトロスプレーもしくはＡＰＣＩ（大気圧化学イオン化）のいずれかであった。典型的なエレクトロスプレー条件は３．５ｋＶのキャピラリーニードル電圧、２５Ｖのコーン電圧を使用し、そして供
給源温度を１２０〜１５０℃の間の温度で保った（正確な温度は化合物ごとで決定した）。典型的なＡＰＣＩ条件は１７μＡのコロナ放電電流、２５Ｖのコーン電圧、３５０℃の脱溶媒和温度を使用し、そして供給源温度を１４０〜１６０℃の間の温度で保った（正確な温度は化合物ごとで決定した）。質量スペクトルは、例えば０．１秒の滞留時間を用いて１秒で、１００〜６５０もしくは必要な場合には１０００をスキャンすることにより得られた。窒素をネブライザーガスとして用いた。

ＬＣＭＳ一般的方法Ｃ
ＨＰＬＣ測定は、Ｇｉｌｓｏｎ ２１５オートサンプラーを有するＷａｔｅｒｓダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）を有するＷａｔｅｒｓ １５１２ポンプおよび以下のそれぞれの方法において特定されるようなカラムを用いて行った。カラムからのフローは、ＭＳ分光器に分けられた。イオン化は、化合物のタイプによりエレクトロスプレーもしくはＡＰＣＩ（大気圧化学イオン化）のいずれかであった。典型的なエレクトロスプレー条件は、３．５ｋＶのキャピラリーニードル電圧および２５Ｖのコーン電圧を使用する。供給源温度を１２０〜１５０℃の間の温度で保った（正確な温度は化合物ごとで決定した）。典型的なＡＰＣＩ条件は１７μＡのコロナ放電電流、２５Ｖのコーン電圧、３５０℃の脱溶媒和温度を使用し、そして供給源温度を１４０〜１６０℃の間の温度で保った（正確な温度は化合物ごとで決定した）。質量スペクトルは、例えば０．１秒の滞留時間を用いて１秒で、１００〜６５０もしくは必要な場合には１０００をスキャンすることにより得られた。窒素をネブライザーガスとして用いた。

ＬＣＭＳ一般的方法Ｄ
ＬＣ測定は、バイナリポンプ、サンプルオーガナイザー、カラムヒーター（５５℃で設定する）、ダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）および以下のそれぞれの方法において特定されるようなカラムを含んでなるＡｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）システムを用いて行った。カラムからのフローは、ＭＳ分光器に分けられた。ＭＳ検出器は、エレクトロスプレーイオン化源を用いて設定された。質量スペクトルは、０．０２秒の滞留時間を用いて０．１８秒で１００〜１０００をスキャンすることにより得られた。キャピラリーニードル電圧は３．５ｋＶであり、そして供給源温度を１４０℃で保った。窒素をネブライザーガスとして用いた。データ収集は、Ｗａｔｅｒｓ−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘデータシステムで行った。

ＬＣＭＳ一般的方法Ｅ
ＨＰＬＣ測定は、脱気装置を有するポンプ（クォータナリもしくはバイナリ）、オートサンプラー、カラムオーブン、ダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）および以下のそれぞれの方法において特定されるようなカラムを含んでなるＨＰ １１００（Ａｇｉｌｅｎｔ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ）システムを用いて行った。カラムからのフローは、ＭＳ分光器に分けられた。ＭＳ検出器は、エレクトロスプレーイオン化源もしくはＥＳＣＩデュアルイオン化源（大気圧化学イオン化と組み合わせたエレクトロスプレー）のいずれかを用いて設定された。窒素をネブライザーガスとして用いた。供給源温度を１４０℃で保った。データ収集は、ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘソフトウェアで行った。

ＬＣＭＳ一般的方法Ｆ
ＵＰＬＣ（超高速液体クロマトグラフィー）測定は、サンプラーオーガナイザー、脱気装置を有するバイナリポンプ、４つのカラムのオーブン、ダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）および以下のそれぞれの方法において特定されるようなカラムを含んでなるＡｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）システムを用いて行った。カラムフローは、ＭＳ検出器への分割なしに使用した。ＭＳ検出器は、ＥＳＣＩデュアルイオン化源（大気圧化学イオン化と組み合わせたエレクトロスプレー）を用いて設定された。窒素をネブライザーガスとして用いた。供給源温度を１４０℃で保った。データ収集は、ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏ
ｐｅｎｌｙｎｘソフトウェアで行った。

ＬＣＭＳ一般的方法Ｇ
ＬＣ測定は、バイナリポンプ、サンプルオーガナイザー、カラムヒーター（５５℃で設定する）、ダイオードアレイ検出器（ＤＡＤ）および以下のそれぞれの方法において特定されるようなカラムを含んでなるＡｃｑｕｉｔｙ ＵＰＬＣ（Ｗａｔｅｒｓ）システムを用いて行った。カラムからのフローは、ＭＳ分光器に分けられた。ＭＳ検出器は、エレクトロスプレーイオン化源を用いて設定された。質量スペクトルは、０．０２秒の滞留時間を用いて０．１８秒で１００〜１０００をスキャンすることにより得られた。キャピラリーニードル電圧は３．５ｋＶであり、そして供給源温度を１４０℃で保った。窒素をネブライザーガスとして用いた。データ収集は、Ｗａｔｅｒｓ−Ｍｉｃｒｏｍａｓｓ ＭａｓｓＬｙｎｘ−Ｏｐｅｎｌｙｎｘデータシステムで行った。

ＬＣＭＳ−方法１
一般的方法Ａに加えて：逆相ＨＰＬＣを１．６ｍｌ／分の流速でＸｔｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８カラム（３．５μｍ、４．６ｘ１００ｍｍ）上で実施した。３つの移動相（移動相Ａ：９５％の２５ｍＭ酢酸アンモニウム＋５％のアセトニトリル；移動相Ｂ：アセトニトリル；移動相Ｃ：メタノール）を用いて６．５分で１００％Ａから１％Ａ、４９％Ｂおよび５０％Ｃまで、１分で１％Ａおよび９９％Ｂまでの勾配条件を行い、そしてこれらの条件を１分間保持し、そして１００％Ａで１．５分間再平衡化した。１０μｌの注入容量を用いた。コーン電圧はポジティブイオン化モードでは１０Ｖ、そしてネガティブイオン化モードでは２０Ｖであった。

ＬＣＭＳ−方法２
一般的方法Ａに加えて：カラムヒーターを６０℃で設定した。逆相ＨＰＬＣを１．６ｍｌ／分の流速でＸｔｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８カラム（３．５μｍ、４．６ｘ１００ｍｍ）上で実施した。３つの移動相（移動相Ａ：９５％の２５ｍＭ酢酸アンモニウム＋５％のＣＨ_３ＣＮ；移動相Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ；移動相Ｃ：ＭｅＯＨ）を用いて６．５分で１００％Ａから５０％Ｂおよび５０％Ｃまで、０．５分で１００％Ｂまでの勾配条件を行い、そしてこれらの条件を１分間保持し、そして１００％Ａで１．５分間再平衡化した。１０μｌの注入容量を用いた。コーン電圧はポジティブイオン化モードでは１０Ｖ、そしてネガティブイオン化モードでは２０Ｖであった。

ＬＣＭＳ−方法３
一般的方法Ａに加えて：カラムヒーターを４５℃で設定した。逆相ＨＰＬＣを１．６ｍｌ／分の流速でＸｔｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８カラム（３．５μｍ、４．６ｘ１００ｍｍ）上で実施した。３つの移動相（移動相Ａ：Ｈ_２Ｏ中０．１％のギ酸／メタノール ９５／５；移動相Ｂ：アセトニトリル；移動相Ｃ：メタノール）を用いて７分で１００％Ａから１％Ａ、４９％Ｂおよび５０％Ｃまでの勾配条件を行い、そしてこれらの条件を１分間保持した。１０μｌの注入容量を用いた。コーン電圧はポジティブイオン化モードでは１０Ｖであった。

ＬＣＭＳ−方法４
一般的方法Ｂに加えて：逆相ＨＰＬＣを２ｍｌ／分の流速でＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘ Ｌｕｎａ ５μ Ｃ１８（２）カラム（４．６ｘ１００ｍｍ；プラスガードカートリッジ）上で実施した。２つの移動相（移動相Ａ：０．１％のギ酸を有する水；移動相Ｂ：０．１％（Ｖ／Ｖ）のギ酸を有するＣＨ_３ＣＮ）を用いて３．５分で２ｍｌ／分の流速で９５％Ａから９５％Ｂまでの勾配条件を行い、そして２分間保持した。典型的に、２μｌ〜７μｌ（含んで）の間の注入容量を用いた。

ＬＣＭＳ−方法５
一般的方法Ｃに加えて：逆相ＨＰＬＣを２ｍｌ／分の流速でＷａｔｅｒｓ Ｘｔｅｒｒａ ＭＳ ５μ Ｃ１８カラム（４．６ｘ１００ｍｍ；プラスガードカートリッジ）上で実施した。２つの移動相（移動相Ａ：１０ｍＭの重炭酸アンモニウムを有する水；移動相Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ）を用いて３．５分で２ｍｌ／分の流速で９５％Ａから９５％Ｂまでの勾配条件を行い、そして２分間保持した。典型的に、２μｌ〜７μｌ（含んで）の間の注入容量を用いた。

ＬＣＭＳ−方法６
一般的方法Ａに加えて：カラムヒーターを４５℃で設定した。逆相ＨＰＬＣを１．６ｍｌ／分の流速でＡｔｌａｎｔｉｓ Ｃ１８カラム（３．５μｍ、４．６ｘ１００ｍｍ）上で実施した。２つの移動相（移動相Ａ：７０％のＭｅＯＨ＋３０％のＨ_２Ｏ；移動相Ｂ：Ｈ_２Ｏ中０．１％のギ酸／メタノール ９５／５）を用いて９分で１００％Ｂから５％Ｂ＋９５％Ａまでの勾配条件を行い、そしてこれらの条件を３分間保持した。１０μｌの注入容量を用いた。コーン電圧はポジティブイオン化モードでは１０Ｖ、そしてネガティブイオン化モードでは２０Ｖであった。

ＬＣＭＳ−方法７
一般的方法Ｄに加えて：逆相ＵＰＬＣ（超高速液体クロマトグラフィー）を０．８ｍｌ／分の流速で架橋エチルシロキサン／シリカハイブリッド（ＢＥＨ）Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１ｘ５０ｍｍ；Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ）上で実施した。２つの移動相（移動相Ａ：Ｈ_２Ｏ中０．１％のギ酸／ＭｅＯＨ ９５／５；移動相Ｂ：ＭｅＯＨ）を用いて１．３分で９５％Ａおよび５％Ｂから５％Ａおよび９５％Ｂまでの勾配条件を行い、そして０．２分間保持した。０．５μｌの注入容量を用いた。コーン電圧はポジティブイオン化モードでは１０Ｖ、そしてネガティブイオン化モードでは２０Ｖであった。

ＬＣＭＳ−方法８
一般的方法Ａに加えて：逆相ＨＰＬＣを１．６ｍｌ／分の流速でＡｔｌａｎｔｉｓ Ｃ１８カラム（３．５μｍ、４．６ｘ１００ｍｍ）上で実施した。２つの移動相（移動相Ａ：７０％のＭｅＯＨ＋３０％のＨ_２Ｏ；移動相Ｂ：Ｈ_２Ｏ中０．１％のギ酸／ＭｅＯＨ ９５／５）を用いて１２分で１００％Ｂから５％Ｂ＋９５％Ａまでの勾配条件を行った。１０μｌの注入容量を用いた。コーン電圧はポジティブイオン化モードでは１０Ｖ、そしてネガティブイオン化モードでは２０Ｖであった。

ＬＣＭＳ−方法９
一般的方法Ａに加えて：逆相ＨＰＬＣを３ｍｌ／分の流速でＣｈｒｏｍｏｌｉｔｈ（４．６ｘ２５ｍｍ）上で実施した。３つの移動相（移動相Ａ：９５％の２５ｍＭ酢酸アンモニウム＋５％のＣＨ_３ＣＮ；移動相Ｂ：ＣＨ_３ＣＮ；移動相Ｃ：ＭｅＯＨ）を用いて０．９分で９６％Ａ、２％Ｂおよび２％Ｃから４９％Ｂおよび４９％Ｃまで、０．３分で１００％Ｂまでの勾配条件を行い、そして０．２分間保持した。２μｌの注入容量を用いた。コーン電圧はポジティブイオン化モードでは１０Ｖ、そしてネガティブイオン化モードでは２０Ｖであった。

ＬＣＭＳ−方法１０
一般的方法Ａに加えて：カラムヒーターを６０℃で設定した。逆相ＨＰＬＣを１．６ｍｌ／分の流速でＸｔｅｒｒａ ＭＳ Ｃ１８カラム（３．５μｍ、４．６ｘ１００ｍｍ）上で実施した。３つの移動相（移動相Ａ：９５％の２５ｍＭ酢酸アンモニウム＋５％のアセトニトリル；移動相Ｂ：アセトニトリル；移動相Ｃ：メタノール）を用いて６．５分で１００％Ａから５０％Ｂおよび５０％Ｃまで、０．５分で１００％Ｂまでの勾配条件を行い、そしてこれらの条件を１分間保持し、そして１００％Ａで１．５分間再平衡化した。
１０μｌの注入容量を用いた。コーン電圧はポジティブイオン化モードでは１０Ｖ、そしてネガティブイオン化モードでは２０Ｖであった。

ＬＣＭＳ−方法１１
一般的方法Ｅに加えて：逆相ＨＰＬＣを６０℃で１．０ｍｌ／分の流速で、ＷａｔｅｒｓからのＳｕｎｆｉｒｅ−Ｃ１８カラム（２．５μｍ、２．１ｘ３０ｍｍ）上で実施した。使用した勾配条件は：６．５分で９５％Ａ（０．５ｇ／ｌの酢酸アンモニウム溶液＋５％のアセトニトリル）、２．５％Ｂ（アセトニトリル）、２．５％Ｃ（メタノール）から５０％Ｂ、５０％Ｃであり、７．０分まで維持し、そして７．３分で９．０分まで初期条件に平衡化した。注入容量２μｌ。高解像度質量スペクトル（飛行時間、ＴＯＦ検出器）は、０．３秒の滞留時間を用いて０．５秒で１００〜７５０をスキャンすることにより得られた。キャピラリーニードル電圧はポジティブイオン化モードでは２．５ｋＶ、そしてネガティブイオン化モードでは２．９ｋＶであった。コーン電圧は、ポジティブおよびネガティブイオン化モードの両方で２０Ｖであった。ロイシン−エンケファリンは、ロックマスキャリブレーションに使用する標準物質であった。

ＬＣＭＳ−方法１２
一般的方法Ｆに加えて：逆相ＵＰＬＣをＭＳ検出器への分割なしに６０℃で０．８ｍｌ／分の流速でＷａｔｅｒｓからのＢＥＨ−Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１ｘ５０ｍｍ）上で実施した。勾配条件は：４．９分で９５％Ａ（０．５ｇ／ｌの酢酸アンモニウム溶液＋５％のアセトニトリル）、５％Ｂ（アセトニトリル／メタノール、１／１の混合物）から２０％Ａ、８０％Ｂまで、５．３分で１００％Ｂまでであり、５．８分まで維持し、そして６．０分で７．０分まで初期条件に平衡化した。注入容量０．５μｌ。低解像度質量スペクトル（単一四重極、ＳＱＤ検出器）は、０．０８秒のチャンネル間遅延を用いて０．１秒で１００〜１０００をスキャンすることにより得られた。キャピラリーニードル電圧は３ｋＶであった。コーン電圧はポジティブイオン化モードでは２０Ｖ、そしてネガティブイオン化モードでは３０Ｖであった。

ＬＣＭＳ−方法１３
一般的方法Ｄに加えて：逆相ＵＰＬＣ（超高速液体クロマトグラフィー）を０．８ｍｌ／分の流速で架橋エチルシロキサン／シリカハイブリッド（ＢＥＨ）Ｃ１８カラム（１．７μｍ、２．１ｘ５０ｍｍ；Ｗａｔｅｒｓ Ａｃｑｕｉｔｙ）上で実施した。２つの移動相（移動相Ａ：Ｈ_２Ｏ中２５ｍＭの酢酸アンモニウム／アセトニトリル ９５／５；移動相Ｂ：アセトニトリル）を用いて１．３分で９５％Ａおよび５％Ｂから５％Ａおよび９５％Ｂまでの勾配条件を行い、そして０．３分間保持した。０．５μｌの注入容量を用いた。コーン電圧はポジティブイオン化モードでは１０Ｖ、そしてネガティブイオン化モードでは２０Ｖであった。

融点
多数の化合物について、融点をＭｅｔｔｌｅｒ−ＴｏｌｅｄｏからのＤＳＣ８２３ｅで決定した。融点は３０℃／分の温度勾配で測定した。値はピーク値である。

旋光度：
いくつかの化合物について、Ｐｅｒｋｉｎ Ｅｌｍｅｒ ３４１偏光計を用いて旋光度を測定した（表５に示される結果）。［α］_Ｄ ^２０は、２０℃の温度で５８９ｎｍもしくは３６５ｎｍの波長の光で測定される旋光度を示す。セル路長は１ｄｍである。実際値の後に、旋光度を測定するために使用した溶液の濃度を記載する。化合物番号Ｅ２８２およびＥ２８３を除いて、全ての測定はメタノールにおいて行った。化合物番号Ｅ２８２およびＥ２８３の測定にはＤＭＦを溶媒として使用した。

ＮＭＲ
多数の化合物について、溶媒としてＤＭＳＯ−ｄ_６を用いて、それぞれ３６０ＭＨｚおよび４００ＭＨｚで作動して、標準的なパルスシーケンスでＢｒｕｋｅｒ ＤＰＸ−３６０上でもしくはＢｒｕｋｅｒ ＤＰＸ−４００分光計上で^１Ｈ ＮＭＲスペクトルを記録した。化学シフト（δ）は、内部標準として使用したテトラメチルシラン（ＴＭＳ）に対して１００万分の１（ｐｐｍ）単位で報告される。

化合物Ｅ１３７：
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．８９（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．３７−１．５０（ｍ，１Ｈ），１．５１−１．６３（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｓ，３Ｈ），２．９３（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，７．８Ｈｚ，１Ｈ），３．００（ｄｄ，Ｊ＝１５．１，４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８１（ｓ，３Ｈ），３．９０（ｑｔ，Ｊ＝７．４，５．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），６．７０（ｔ
，Ｊ＝１．８Ｈｚ，１Ｈ），７．４７（ｔ，Ｊ＝１．７Ｈｚ，１Ｈ），７．５４（ｄｄ，Ｊ＝５．６，２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．５６（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．６１（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），９．８２（ｓ，１Ｈ）
１３Ｃ ＮＭＲ（１０１ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ９．７９（ｓ，１Ｃ），２４．１７（ｓ，１Ｃ），２９．５８（ｓ，１Ｃ），３３．９９（ｓ，１Ｃ），５５．３３（ｓ，１Ｃ），７０．２２（ｓ，１Ｃ），１０１．０７（ｑ，Ｊ＝３．７Ｈｚ，１Ｃ），１０５．０５−１０５．２８（ｍ，２Ｃ），１１５．０８（ｓ，１Ｃ），１１６．８５（ｓ，１Ｃ），１２４．１４（ｑ，Ｊ＝２７２．１Ｈｚ，１Ｃ），１３０．４６（ｑ，Ｊ＝３１．５Ｈｚ，１Ｃ），１４３．３０（ｓ，１Ｃ），１４４．１７（ｓ，１Ｃ），１５０．３３（ｓ，１Ｃ），１５３．９１（ｓ，１Ｃ），１５９．１９（ｓ，１Ｃ），１５９．７３（ｓ，１Ｃ），１６０．３０（ｓ，１Ｃ）

化合物Ｅ１９０：
^１Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．８８（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ），１．３５−１．４８（ｍ，１Ｈ），１．４８−１．６０（ｍ，１Ｈ），２．５２（ｓ，６Ｈ），２．８９（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，７．７Ｈｚ，１Ｈ），２．９７（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，５．１Ｈｚ，１Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ），３．８８（ｑｔ，Ｊ＝７．４，５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．９１（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），６．２９（ｄｔ，Ｊ＝１１．０，２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．００−７．０５（ｍ，２Ｈ），７．３８（ｓ，２Ｈ），９．６６（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ２０５：
^１Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．８８（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．３４−１．４８（ｍ，１Ｈ），１．４８−１．６０（ｍ，１Ｈ），２．５１（ｓ，６Ｈ），２．８９（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，７．７Ｈｚ，１Ｈ），２．９６（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．７４（ｓ，３Ｈ），３．８７（ｑｔ，Ｊ＝７．４，５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．９０（ｄ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），６．４９（ｔ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．１８（ｔ，Ｊ＝１．９Ｈｚ，１Ｈ），７．２３（ｔ，Ｊ＝２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３８（ｓ，２Ｈ），９．６７（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ１８７：
^１Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．８９（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．３７−１．６１（ｍ，１Ｈ），１．３７−１．６１（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｓ，３Ｈ），２．９１（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，８．１Ｈｚ，１Ｈ），２．９９（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８８（ｑｔ，Ｊ＝７．５，５．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９４（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．４２（ｄｄ，Ｊ＝１１．０，６．２Ｈｚ，２Ｈ），７．５６（ｄｄ，Ｊ＝５．４，２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６１（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．６１（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），９．９５（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ２００：
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．９９（ｔ，Ｊ＝７．３Ｈｚ，３Ｈ），２．５０（ｓ，６Ｈ），３．０７（ｑｄ，Ｊ＝７．２，５．５Ｈｚ，２Ｈ），３．８４（ｓ，２Ｈ），７．２６（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．３０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３６（ｓ，２Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．２８（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），９．６８（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ１８０：
^１Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０３１−０．４０（ｍ，２Ｈ），０．５６−０．６５（ｍ，２Ｈ），２．５０（ｓ，６Ｈ），２．５３−２．６３（
ｍ，１Ｈ），３．８１（ｓ，２Ｈ），７．２６（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．２Ｈｚ，１Ｈ），７．３１（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３５（ｓ，２Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝２．２Ｈｚ，１Ｈ），８．３９（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ），９．７２（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ１８２：
^１Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．３２−０．３７（ｍ，２Ｈ），０．５９−０．６５（ｍ，２Ｈ），２．５０（ｓ，６Ｈ），２．５４−２．６３（ｍ，１Ｈ），３．８３（ｓ，２Ｈ），６．７８−６．８３（ｍ，１Ｈ），７．３３（ｓ，２Ｈ），７．３８（ｔ，Ｊ＝８．２Ｈｚ，１Ｈ），７．５１（ｄｄ，Ｊ＝８．２，２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６４−７．６９（ｍ，１Ｈ），８．４１（ｄ，Ｊ＝４．１Ｈｚ，１Ｈ），９．８２（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ１５３：
^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．９９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），２．５０（ｓ，６Ｈ），３．０７（ｑｄ，Ｊ＝７．２，５．５Ｈｚ，１Ｈ），３．８５（ｓ，２Ｈ），７．０６（ｄｄｄ，Ｊ＝８．１，６．５，１．６Ｈｚ，１Ｈ），７．１６（ｔｄ，Ｊ＝８．２，１．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３６（ｓ，２Ｈ），８．０９（ｔｄ，Ｊ＝８．４，１．５Ｈｚ，１Ｈ），８．３０（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），９．２９（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ１８８：
^１Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．８８（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．３６−１．６０（ｍ，１Ｈ），１．３６−１．６０（ｍ，１Ｈ），２．５２（ｓ，６Ｈ），２．８９（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，７．７Ｈｚ，１Ｈ），２．９７（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８８（ｔｑ，Ｊ＝７．４，５．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９１（ｄ，Ｊ＝５．３Ｈｚ，１Ｈ），７．４１（ｄｄ，Ｊ＝１１．０，６．２Ｈｚ，２Ｈ），７．４０（ｓ，２Ｈ），９．９３（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ１８６：
^１Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．８９（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．３７−１．６１（ｍ，１Ｈ），１．３７−１．６１（ｍ，１Ｈ），２．５７（ｓ，３Ｈ），２．９１（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，７．７Ｈｚ，１Ｈ），２．９９（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，４．９Ｈｚ，１Ｈ），３．７３（ｓ，３Ｈ），３．８９（ｔｑ，Ｊ＝７．４，５．１Ｈｚ，１Ｈ），４．９４（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），６．３０（ｄｔ，Ｊ＝１１．１，２．２Ｈｚ，１Ｈ），７．０１−７．０６（ｍ，１Ｈ），７．０２（ｄ，Ｊ＝２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．５５（ｄｄ，Ｊ＝５．４，２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），８．６０（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），９．７０（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ１２７：
^１Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．８８（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．３６−１．５９（ｍ，１Ｈ），１．３６−１．５９（ｍ，１Ｈ），２．５１（ｓ，６Ｈ），２．８９（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，７．９Ｈｚ，１Ｈ），２．９７（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，４．８Ｈｚ，１Ｈ），３．８８（ｔｑ，Ｊ＝７．５，５．０Ｈｚ，１Ｈ），４．９２（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２１−７．３１（ｍ，Ｊ＝１０．０，１０．０，８．５，２．４Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｓ，２Ｈ），７．８６−７．９４（ｍ，Ｊ＝９．２，９．２，５．３，２．５Ｈｚ，１Ｈ），９．３１（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ２３５：
^１Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ２．５３（ｓ，６Ｈ），２
．７９（ｓ，３Ｈ），２．８８（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．９９（ｓ，３Ｈ），３．０８（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２６（ｄｄ，Ｊ＝８．８，２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．３０（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｓ，２Ｈ），７．６９（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），９．６９（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ２３４：
^１Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ２．７９（ｓ，３Ｈ），２．８７（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），２．９９（ｓ，３Ｈ），３．０８（ｔ，Ｊ＝６．５Ｈｚ，２Ｈ），７．２５−７．３７（ｍ，２Ｈ），７．３８（ｓ，２Ｈ），７．６４（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．８，７．３，２．３Ｈｚ，１Ｈ），９．６９（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ１３０：
^１Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．８８（ｔ，Ｊ＝７．４Ｈｚ，３Ｈ），１．３５−１．４８（ｍ，１Ｈ），１．４７−１．６０（ｍ，１Ｈ），２．５６（ｓ，３Ｈ），２．９０（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，８．１Ｈｚ，１Ｈ），２．９８（ｄｄ，Ｊ＝１５．０，４．４Ｈｚ，１Ｈ），３．８８（ｑｔ，Ｊ＝７．６，４．９Ｈｚ，１Ｈ），４．９５（ｄ，Ｊ＝５．２Ｈｚ，１Ｈ），７．２１−７．３２（ｍ，１Ｈ），７．６０（ｄ，Ｊ＝２．０Ｈｚ，１Ｈ），７．５５（ｄｄ，Ｊ＝５．４，２．１Ｈｚ，１Ｈ），７．８７−７．９４（ｍ，１Ｈ），８．５９（ｄ，Ｊ＝５．４Ｈｚ，１Ｈ），９．３６（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ１６７：
^１Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ ０．９９（ｔ，Ｊ＝７．２Ｈｚ，３Ｈ），２．５０（ｓ，６Ｈ），３．０７（ｑｄ，Ｊ＝７．２，５．４Ｈｚ，２Ｈ），３．８４（ｓ，２Ｈ），７．２５−７．３８（ｍ，４Ｈ），７．６４（ｄｄｄ，Ｊ＝１３．６，７．２，２．６Ｈｚ，１Ｈ），８．３１（ｔ，Ｊ＝５．５Ｈｚ，１Ｈ），９．７２（ｓ，１Ｈ）

化合物Ｅ１８９：
^１Ｈ ＮＭＲ（３６０ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６）δ ｐｐｍ １．１６（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，３Ｈ），２．５１（ｓ，６Ｈ），２．８６−２．９８（ｍ，２Ｈ），４．０７−４．１８（ｍ，１Ｈ），４．９４（ｄ，Ｊ＝４．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２２−７．３１（ｍ，Ｊ＝１０．０，１０．０，８．４，２．３Ｈｚ，１Ｈ），７．３７（ｓ，２Ｈ），７．８５−７．９３（ｍ，Ｊ＝９．２，９．２，５．３，２．５Ｈｚ，１Ｈ），９．３２（ｓ，１Ｈ）

ＳＦＣ−ＭＳ
いくつかの化合物についてＳＦＣ−ＭＳ（超臨界液体クロマトグラフィー−質量分析）を二酸化炭素（ＣＯ_２）および修飾剤（ｍｏｄｉｆｉｅｒ）の送達用のデュアルポンプ制御モジュール（ＦＣＭ−１２００）、１〜１５０℃の範囲における温度制御を有するカラム加熱用の熱制御モジュール（ＴＣＭ２１００）および６つの異なるカラム用のカラム選択弁（Ｖａｌｃｏ，ＶＩＣＩ，Ｈｏｕｓｔｏｎ，ＴＸ，ＵＳＡ）を含んでなるＢｅｒｇｅｒ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ（Ｎｅｗａｒｋ，ＤＥ，ＵＳＡ）からの分析ＳＦＣシステムで測定した。フォトダイオードアレイ検出器（Ａｇｉｌｅｎｔ １１００，Ｗａｌｄｂｒｏｎｎ，Ｇｅｒｍａｎｙ）は高圧フローセル（４００ｂａｒまで）を備えており、そしてＣＴＣ ＬＣ Ｍｉｎｉ ＰＡＬオートサンプラー（Ｌｅａｐ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ，Ｃａｒｒｂｏｒｏ，ＮＣ，ＵＳＡ）を用いて設定される。直行するＺ−エレクトロスプレーインターフェースを有するＺＱ質量分析計（Ｗａｔｅｒｓ，Ｍｉｌｆｏｒｄ，ＭＡ，ＵＳＡ）は、ＳＦＣ−システムと連結される。装置制御、データ収集および処理は、ＳＦＣ ＰｒｏＮＴｏソフトウェアおよびＭａｓｓｌｙｎｘソフトウェアからなる統合プラ
ットフォームで行った。

化合物番号Ｅ２４について、スクリーニングを４つの異なるカラム（Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ−Ｈ、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈ、Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＤ−Ｈ、Ｃｈｉｒａｌｐａｋ ＡＳ−Ｈ；５００ｘ４．６ｍｍ；Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ）および３つの異なる溶媒（ＭｅＯＨ、ＥｔＯＨ、２−プロパノール；溶媒は０．２％の２−プロピルアミンを含有している）で行った場合に１００％の鏡像異性体過剰率が見出された。ＳＦＣ−ＭＳは、３ｍｌ／分の流速で上記のカラムの１つで実施した。２つの移動相（移動相Ａ：ＣＯ_２；移動相Ｂ：０．２％の２−プロピルアミンを含有する上記の溶媒の１つ）を用いて１８．７５分で１０％Ｂから４０％Ｂまでの条件を行った。次に、勾配を２分で４０％Ｂから５０％Ｂまでかけ、そして３．６分間保持した。カラム温度は５０℃で設定した。

化合物番号Ｅ２４と同一のＳＦＣ−ＭＳ条件を化合物番号Ｅ１０、Ｅ１７、Ｅ１９、Ｅ２０、Ｅ１８、Ｅ２２、Ｅ１２６、Ｅ２０８、Ｅ２０７、Ｅ１４４、Ｅ１９８、Ｅ１９７、Ｅ１９９およびＥ１８９のＳＦＣ−ＭＳ測定に使用した。全てのこれらの化合物について、１００％の鏡像異性体過剰率がスクリーニング条件下で見出された。

化合物番号Ｅ３０について、ＳＦＣ−ＭＳを３ｍｌ／分の流速でＣｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ−Ｈカラム（５００ｘ４．６ｍｍ）（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ）上で実施した場合に９７．４８％の鏡像異性体純度が見出された。２つの移動相（移動相Ａ：ＣＯ_２；移動相Ｂ：０．２％の２−プロピルアミンを含有するＥｔＯＨ）を用いて１８．７５分で１０％Ｂから４０％Ｂまでの条件を行った。次に、勾配を２分で４０％Ｂから５０％Ｂまでかけ、そして３．６分間保持した。カラム温度は５０℃で設定した。

化合物番号Ｅ３０と同一のＳＦＣ−ＭＳ条件を化合物番号Ｅ１３７のＳＦＣ−ＭＳ測定に使用した。同一の条件はまた化合物番号Ｅ１３９のＳＦＣ−ＭＳ測定にも使用した。これらの条件下で、９３．５７％の鏡像異性体純度が見出された。同一の条件はまた化合物番号Ｅ１７２のＳＦＣ−ＭＳ測定にも使用した。これらの条件下で、９７．７３％の鏡像異性体純度が見出された。同一の条件はまた化合物番号Ｅ１７３のＳＦＣ−ＭＳ測定にも使用した。これらの条件下で、９７．２９％の鏡像異性体純度が見出された。同一の条件はまた化合物番号Ｅ１４５のＳＦＣ−ＭＳ測定にも使用した。これらの条件下で、９９．０１％の鏡像異性体純度が見出された。

化合物番号Ｅ１２９について、ＳＦＣ−ＭＳを３ｍｌ／分の流速でＣｈｉｒａｌｃｅｌ
ＯＪ−Ｈカラム（５００ｘ４．６ｍｍ）（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ）上で実施した場合に９６．８３％の鏡像異性体純度が見出された。２つの移動相（移動相Ａ：ＣＯ_２；移動相Ｂ：０．２％の２−プロピルアミンを含有するＭｅＯＨ）を用いて１８．７５分で１０％Ｂから４０％Ｂまでの条件を行った。次に、勾配を２分で４０％Ｂから５０％Ｂまでかけ、そして３．６分間保持した。カラム温度は５０℃で設定した。

化合物番号Ｅ２１について、ＳＦＣ−ＭＳを３ｍｌ／分の流速でＣｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＤ−Ｈカラム（５００ｘ４．６ｍｍ）（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ）上で実施した場合に９９．４０％の鏡像異性体純度が見出された。２つの移動相（移動相Ａ：ＣＯ_２；移動相Ｂ：０．２％の２−プロピルアミンを含有するＭｅＯＨ）を用いて１８．７５分で１０％Ｂから４０％Ｂまでの条件を行った。次に、勾配を２分で４０％Ｂから５０％Ｂまでかけ、そして３．６分間保持した。カラム温度は５０℃で設定した。

化合物番号Ｅ２１と同一のＳＦＣ−ＭＳ条件を化合物番号Ｅ２５のＳＦＣ−ＭＳ測定に使用した。これらの条件下で、９９．７６％の鏡像異性体純度が見出された。

化合物番号Ｅ２６について、ＳＦＣ−ＭＳを３ｍｌ／分の流速でＣｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＤ−Ｈカラム（５００ｘ４．６ｍｍ）（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ）上で実施した場合に９９．３６％の鏡像異性体純度が見出された。２つの移動相（移動相Ａ：ＣＯ_２；移動相Ｂ：０．２％の２−プロピルアミンを含有するＥｔＯＨ）を用いて１８．７５分で１０％Ｂから４０％Ｂまでの条件を行った。次に、勾配を２分で４０％Ｂから５０％Ｂまでかけ、そして３．６分間保持した。カラム温度は５０℃で設定した。

化合物番号Ｅ２８について、ＳＦＣ−ＭＳを３ｍｌ／分の流速でＣｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈカラム（５００ｘ４．６ｍｍ）（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ）上で実施した場合に９７．５２％の鏡像異性体純度が見出された。２つの移動相（移動相Ａ：ＣＯ_２；移動相Ｂ：０．２％の２−プロピルアミンを含有するメタノール）を用いて１８．７５分で１０％Ｂから４０％Ｂまでの条件を行った。次に、勾配を２分で４０％Ｂから５０％Ｂまでかけ、そして３．６分間保持した。カラム温度は５０℃で設定した。

化合物番号Ｅ２８と同一のＳＦＣ−ＭＳ条件を化合物番号Ｅ１３３のＳＦＣ−ＭＳ測定に使用した。これらの条件下で、９８．３４％の鏡像異性体純度が見出された。同一の条件はまた化合物番号Ｅ１８７のＳＦＣ−ＭＳ測定にも使用した。これらの条件下で、９７．８７％の鏡像異性体純度が見出された。

化合物番号Ｅ２７について、ＳＦＣ−ＭＳを３ｍｌ／分の流速でＣｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈカラム（５００ｘ４．６ｍｍ）（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ）上で実施した場合に９８．６９％の鏡像異性体純度が見出された。２つの移動相（移動相Ａ：ＣＯ_２；移動相Ｂ：０．２％の２−プロピルアミンを含有するＥｔＯＨ）を用いて１８．７５分で１０％Ｂから４０％Ｂまでの条件を行った。次に、勾配を２分で４０％Ｂから５０％Ｂまでかけ、そして３．６分間保持した。カラム温度は５０℃で設定した。

化合物番号Ｅ２７と同一のＳＦＣ−ＭＳ条件を化合物番号Ｅ１２８のＳＦＣ−ＭＳ測定に使用した。これらの条件下で、９９．３０％の鏡像異性体純度が見出された。同一の条件はまた化合物番号Ｅ１３２のＳＦＣ−ＭＳ測定にも使用した。これらの条件下で、９７．１１％の鏡像異性体純度が見出された。同一の条件はまた化合物番号Ｅ１３８のＳＦＣ−ＭＳ測定にも使用した。これらの条件下で、９６．７７％の鏡像異性体純度が見出された。同一の条件はまた化合物番号Ｅ１４８のＳＦＣ−ＭＳ測定にも使用した。これらの条件下で、９９．２５％の鏡像異性体純度が見出された。同一の条件はまた化合物番号Ｅ１４９のＳＦＣ−ＭＳ測定にも使用した。これらの条件下で、９９．１１％の鏡像異性体純度が見出された。

化合物番号Ｅ２９について、ＳＦＣ−ＭＳを３ｍｌ／分の流速でＣｈｉｒａｌｐａｋ ＡＤ−Ｈカラム（５００ｘ４．６ｍｍ）（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ）上で実施した場合に９７．８９％の鏡像異性体純度が見出された。２つの移動相（移動相Ａ：ＣＯ_２；移動相Ｂ：０．２％の２−プロピルアミンを含有する２−プロパノール）を用いて１８．７５分で１０％Ｂから４０％Ｂまでの条件を行った。次に、勾配を２分で４０％Ｂから５０％Ｂまでかけ、そして３．６分間保持した。カラム温度は５０℃で設定した。

化合物番号Ｅ１３１について、ＳＦＣ−ＭＳを３ｍｌ／分の流速でＣｈｉｒａｌｐａｋ
ＡＤ−Ｈカラム（５００ｘ４．６ｍｍ）（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ）上で実施した場合に９９．６０％の鏡像異性体純度が見出された。２つの移動相（移動相Ａ：ＣＯ_２；移動相Ｂ：０．２％の２−プロピルアミンを含有するＭｅＯＨ）を用いて１８．７５分で１０％Ｂから４０％Ｂまでの条件を行った。次に、勾配を２分で４０％Ｂから５０％Ｂまでかけ、そして３．６分間保持した。カラム温度は５０℃で設定した。

化合物番号Ｅ１３１と同一のＳＦＣ−ＭＳ条件を化合物番号Ｅ１４６のＳＦＣ−ＭＳ測定に使用した。これらの条件下で、９９．５５％の鏡像異性体純度が見出された。同一の条件はまた化合物番号Ｅ１４２のＳＦＣ−ＭＳ測定にも使用した。これらの条件下で、９９．０９％の鏡像異性体純度が見出された。

化合物番号Ｅ２８２について、ＳＦＣ−ＭＳを３ｍｌ／分の流速でＣｈｉｒａｌｐａｋ
ＡＤ−Ｈカラム（５００ｘ４．６ｍｍ）（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ）上で実施した場合に１００％の鏡像異性体純度が見出された。２つの移動相（移動相Ａ：ＣＯ_２；移動相Ｂ：０．２％の２−プロピルアミンを含有するメタノール）を用いた。最初に１５％Ｂを１７．１６分間保持した。次に、勾配を７分で１５％Ｂから５０％Ｂまでかけ、そして１．３４分間保持した。カラム温度は５０℃で設定した。この測定をラセミ混合物に対して比較した。

化合物番号Ｅ１９６について、ＳＦＣ−ＭＳを３ｍｌ／分の流速でＣｈｉｒａｌｐａｋ
ＡＳ−Ｈカラム（５００ｘ４．６ｍｍ）（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ）上で実施した場合に９３．７３％の鏡像異性体純度が見出された。２つの移動相（移動相Ａ：ＣＯ_２；移動相Ｂ：０．２％の２−プロピルアミンを含有するエタノール）を用いた。最初に１５％Ｂを１８分間保持した。次に、勾配を３．５分で１５％Ｂから５０％Ｂまでかけ、そして３．１分間保持した。カラム温度は５０℃で設定した。

化合物番号Ｅ１９５について、ＳＦＣ−ＭＳを３ｍｌ／分の流速でＣｈｉｒａｌｐａｋ
ＡＳ−Ｈカラム（５００ｘ４．６ｍｍ）（Ｄａｉｃｅｌ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｉｎｄｕｓｔｒｉｅｓ Ｌｔｄ）上で実施した場合に９９．５１％の鏡像異性体純度が見出された。２つの移動相（移動相Ａ：ＣＯ_２；移動相Ｂ：０．２％の２−プロピルアミンを含有するエタノール）を用いて１８．７５分で１０％Ｂから４０％Ｂまでの条件を行った。次に、勾配を２分で４０％Ｂから５０％Ｂまでかけ、そして３．６分間保持した。カラム温度は５０℃で設定した。

Ｄ．薬理学的実施例
実施例Ｄ．１ａ：Ｃａ ^２＋ フラックスイメージング（ＦＬＩＰＲ）（プロトコルＡ）
ヒトα７野生型配列（ｈα７−ｗｔ ｎＡＣｈＲ）をコードしそしてコーディング配列がプロモーターの下流に置かれるｃＤＮＡクローンの一般に哺乳類細胞そして特にラットＧＨ４Ｃ１細胞における安定発現は、哺乳類細胞の表面上での機能性α７ ｎＡＣｈＲの出現をもたらす。この技術は、α７野生型タンパク質の機能を評価する強力な手段を提供している。α７ニコチン性受容体の陽イオン透過性はカルシウムを優先的に好むことを踏まえて、ＧＨ４Ｃ１細胞系において安定に発現されるｈα７−ｗｔ ｎＡＣｈＲを通したＣａ^２＋フラックスの蛍光イメージングを本発明の化合物のモジュレーター活性を評価する第一の手段として用いた。

材料
ａ）アッセイバッファー
１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）、５ｍＭの最終濃度までのＣａＣｌ_２、０．１％ウシ血清アルブミン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ ＮＶ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）、２．５ｍＭプロベネシド（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ ＮＶ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）を補足した、ハンクス緩衝食塩水溶液（ＨＢＳＳ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｂｅｌｇｉｕｍ）。
ｂ）カルシウム感受性色素−Ｆｌｕｏ−４ＡＭ
Ｆｌｕｏ−４ＡＭ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，ＵＳＡ）を１０％のプルロン酸（Ｐｌｕｒｏｎｉｃ ａｃｉｄ）（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，ＵＳＡ）を含有するＤＭＳＯに溶解してストック溶液を生成せしめ、それを等分しそして後で使用するまで−２０℃で保存した。実験の日に、Ｆｌｕｏ−４ＡＭストックを解凍し、そしてＤＭＥＭ／Ｆ１２（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）において希釈して４μＭの最終濃度を与えた。
ｃ）９６ウェルプレート
ＢＤ Ｂｉｏｃｏａｔポリ−Ｄ−リシン９６ウェルブラック／クリアプレート（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）
ｄ）カルシウムフラックス測定
細胞内遊離カルシウムフラックスシグナルを測定するために蛍光イメージングプレートリーダー（ＦＬＩＰＲ，Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｄｅｖｉｃｅｓ Ｃｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ，Ｓｕｎｎｙｖａｌｅ，ＵＳＡ）を使用した。

方法
ｈα７−ｗｔ ｎＡＣｈＲを発現する細胞の単層をマルチウェルプレート、特にポリ−Ｄ−リシンを被覆した黒側面（ｂｌａｃｋ−ｓｉｄｅｄ）透明底の９６ウェルプレートにおいて２４時間培養し、その後で蛍光カルシウム指示薬を負荷し、特定の態様においてｆｌｕｏ−３もしくはｆｌｕｏ−４ＡＭを９０分までにわたって負荷し、さらにより特定の態様においてｆｌｕｏ−４ＡＭを９０分までにわたって負荷し、そして好ましい態様においてｆｌｕｏ−４ＡＭを６０分までにわたって負荷した。

ＰＡＭ活性は、ＦＬＩＰＲにおける細胞蛍光の常時モニタリング中にα７ニコチン性受容体アゴニストと一緒に負荷細胞に試験する化合物を適用することによりリアルタイムで検出した。アゴニスト単独による応答より大きいピーク蛍光応答を与える化合物は、α７
ｎＡＣｈＲ ＰＡＭであると考えられた。特定の態様において、α７ニコチン性受容体アゴニストはコリン、より特定の態様において１００μＭの最大下濃度で適用されるコリンであった。本発明のさらなる設定において、試験する化合物はα７ニコチン性受容体アゴニストの前に、特定の態様においてアゴニストの２０分前までに、より特定の態様においてアゴニストの１０分前までに、そしてさらにより特定の態様においてアゴニストの１０分前に適用した。

コリンに対するコントロール応答は、コリンもしくはアッセイバッファーのみのいずれかを与えるウェルにおける蛍光のピークの差から各プレート上で計算した。本発明の化合物は、０．１μＭ〜５０μＭの濃度範囲で試験した。化合物は、それらが最大効果を有する、典型的には０．１μＭ〜５０μＭの間の濃度で試験した時にそれらの効能が少なくとも５００％である場合に興味深い活性を有すると考えられた（１００μＭのコリンの効能をＰＡＭの不在下で１００％と定義した）。これらの化合物はまた、ヒト野生型α７受容体を安定に過剰発現するＧＨ４Ｃｌ細胞において全細胞パッチクランプ電気生理学により測定した場合にコリンに対する応答への増強効果も有する。

実施例Ｄ．１ｂ：Ｃａ ^２＋ フラックスイメージング（ＦＤＳＳ）（プロトコルＢ）
材料
ａ）アッセイバッファー
１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）、５ｍＭの最終濃度までのＣａＣｌ_２、０．１％ウシ血清アルブミン（Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ ＮＶ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）を補足した、ハンクス緩衝食塩水溶液（ＨＢＳＳ、Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ、Ｂｅｌｇｉｕｍ）。
ｂ）カルシウム感受性色素−Ｆｌｕｏ−４ＡＭ
Ｆｌｕｏ−４ＡＭ（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，ＵＳＡ）を１０％のプルロン酸（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｐｒｏｂｅｓ，ＵＳＡ）を含有するＤＭＳＯに溶解してストック溶液を生成せしめ、それを５ｍＭのプロベニシド（Ｓｉｇｍａ，Ａｌｄｒｉｃｈ ＮＶ，Ｂｅｌｇｉｕｍ）を補足したアッセイバッファーにおいて希釈して２μＭの最終濃度を与えた。
ｃ）３８４ウェルプレート
ＰＤＬでプレコートした、ブラック３８４ウェルプレートブラック／クリアプレート（Ｃｏｒｎｉｎｇ，Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ，ＵＳＡ）
ｄ）カルシウムフラックス測定
細胞内遊離カルシウムフラックスシグナルを測定するために機能的薬剤スクリーニングシステム（ＦＤＳＳ，Ｈａｍａｍａｔｓｕ）を使用した。

方法
ｈα７−ｗｔ ｎＡＣｈＲを発現する細胞の単層をマルチウェルプレート、特にポリ−Ｄ−リシンを被覆した黒側面透明底の３８４ウェルプレートにおいて２４時間培養し、その後で蛍光カルシウム指示薬を負荷し、特定の態様においてｆｌｕｏ−４ＡＭを１２０分までにわたって負荷した。

ＰＡＭ活性は、ＦＤＳＳにおける細胞蛍光の常時モニタリング中にα７ニコチン性受容体アゴニストと一緒に負荷細胞に試験する化合物を適用することによりリアルタイムで検出した。アゴニスト単独による応答より大きいピーク蛍光応答を与える化合物は、α７ ｎＡＣｈＲ ＰＡＭであると考えられた。特定の態様において、α７ニコチン性受容体アゴニストはコリン、より特定の態様において１００μＭの最大下濃度で適用されるコリンであった。本発明のさらなる設定において、試験する化合物はα７ニコチン性受容体アゴニストの前に、特定の態様においてアゴニストの１０分前までに適用した。

コリンに対するコントロール応答は、コリンもしくはアッセイバッファーのみのいずれかを与えるウェルにおける蛍光のピークの差から各プレート上で計算した。本発明の化合物は、０．０１μＭ〜３０μＭの濃度範囲で試験した。化合物は、３０μＭの濃度で試験した時にそれらがコリンシグナルを少なくとも５００％で強化した場合に興味深い活性を有すると考えられた（１００μＭのコリンの効能をＰＡＭの不在下で１００％と定義した）。これらの化合物はまた、ヒト野生型α７受容体を安定に過剰発現するＧＨ４Ｃｌ細胞において全細胞パッチクランプ電気生理学により測定した場合にコリンに対する応答への増強効果も有する。

実施例Ｄ．２：パッチクランプ電流記録
哺乳類細胞からのパッチクランプ記録は、リガンド依存性イオンチャンネルのサブユニットであると考えられる膜結合型タンパク質の機能を評価する強力な手段を提供している。内因性もしくは外来リガンドによるそのようなタンパク質の活性化は、受容体と関連する細孔の開口を引き起こし、それを通してイオンはそれらの電気化学的勾配を流れ降りる。ｈα７−ｗｔ ｎＡＣｈＲを発現するＧＨ４Ｃｌ組換え細胞系の場合、この受容体のカルシウムに対する優先的透過性は、ＡＣｈ、コリンおよびカルシウム電流を生じさせる他のニコチン性リガンドによる活性化の際にカルシウムが細胞に流入することを意味する。この受容体はアゴニストの存在下で迅速に脱感作するので、アゴニスト適用の時間と一致
する受容体応答の部分的もしくは完全な脱感作を防ぐために溶液の非常に迅速な交換（＜１００ｍｓ）ができる適用システムを用いることが重要である。結果として、ニコチン性効能の増大を評価するための第二の都合のよい技術は、迅速な適用システムと連結したｈα７−ｗｔ ｎＡＣｈＲを発現するＧＨ４Ｃｌ細胞からのパッチクランプ記録である。

材料
ａ）アッセイバッファー
外部記録溶液は、１５２ｍＭ ＮａＣｌ、５ｍＭ ＫＣｌ、１ｍＭ ＭｇＣｌ_２、１ｍＭカルシウム、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ；ｐＨ７．３からなった。内部記録溶液は、１４０ｍＭ ＣｓＣｌ、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ、１０ｍＭ ＥＧＴＡ、１ｍＭ ＭｇＣｌ_２、ｐＨ７．３からなった。
ｂ）パッチクランプ記録は、パッチクランプ増幅器（Ｍｕｌｔｉｃｌａｍｐ ７００Ａ，Ａｘｏｎ Ｉｎｓｔｒｕｍｅｎｔｓ，ＣＡ，ＵＳＡ）を用いて実施した。ｈα７−ｗｔ ｎＡＣｈＲを発現するＧＨ４Ｃｌ細胞は、内部記録溶液で満たした場合に１．５〜３ＭΩの先端抵抗のホウケイ酸ガラス電極で全細胞形態において電位固定した（Ｈａｍｉｌｌ ｅｔ ａｌ，１９８１）。記録は、膜抵抗＞５００ＭΩそしてより好ましくは１ＧΩおよび少なくとも６０％の直列抵抗補償で直列抵抗＜１５ＭΩで細胞上で行った。膜電位は−７０ｍＶで固定した。
ｃ）アゴニスト
ＡＣｈ、コリンは、Ｓｉｇｍａ−Ａｌｄｒｉｃｈ ＮＶ，Ｂｅｌｇｉｕｍから購入した。
ｄ）化合物適用
ｈα７−ｗｔ ｎＡＣｈＲを発現するＧＨ４Ｃｌ細胞にコントロール、アゴニストおよびＰＡＭ化合物を適用するために溶液の迅速な交換（交換分解時間（ｓｗｉｔｃｈｉｎｇ
ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ ｔｉｍｅ）＜１００ｍｓ）用の１６チャンネルＤｙｎｆｌｏｗ
ＤＦ−１６マイクロフルイディクスシステム（Ｃｅｌｌｅｃｔｒｉｃｏｎ，Ｓｗｅｄｅｎ）を用いた。

方法
ｈα７−ｗｔ ｎＡＣｈＲを発現するＧＨ４Ｃｌ細胞をＤｙｎａｆｌｏｗ灌流チャンバーにおいて外部記録溶液中で平板培養し、そして２０分までにわたって定着させた（ｓｅｔｔｌｅ）。個々の細胞を全細胞パッチし、そしてパッチピペットでチャンバーの底から外部記録溶液の連続的に流れる灌流の流れ（１２μｌ／分）に穏やかに持ち上げた。ＰＡＭ活性は、試験する化合物を負荷細胞にあらかじめ適用し、続いて細胞膜電流の常時モニタリング中にα７ニコチン性受容体アゴニストを適用することによりリアルタイムで検出した。アゴニスト単独による応答より大きい電流応答を与える化合物は、α７ ｎＡＣｈＲ ＰＡＭであると考えられた。特定の態様において、α７ニコチン性受容体アゴニストは非選択的ニコチン性アゴニストにより活性化され、さらに特定の態様においてアゴニストはコリン、そしてさらにより特定の態様において１ｍＭの最大下濃度で適用されるコリンであった。本発明のさらなる設定において、試験する化合物はα７ニコチン性受容体アゴニストの前に、さらに特定の態様においてアゴニストの３０秒前までに、そしてなおさらに特にアゴニストの５秒前に適用した。コントロール応答は、２５０ｍｓ間の最大下コリンの適用に対して各細胞において誘発される電流の曲線下面積から計算した。曲線下面積は経時的な正味電流の積分であり、そしてチャンネルを通った全イオンフラックスの共通表現である。ポジティブアロステリックモジュレーターにより引き起こされるアゴニスト効能の増加は、アゴニスト応答の「曲線下面積」（ＡＵＣ）の増強パーセントとして計算した。本発明の化合物により引き起こされるコントロールＡＵＣより大きい増強は、それらが有用な治療活性を有すると考えられることを示す。ＥＣ_５０値（効能）、最大効果（％効能）およびヒルスロープは、ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ，Ｉｎｃ．，Ｓａｎ Ｄｉｅｇｏ，ＣＡ）を用いてデータをロジスティ
ック方程式に適合させることにより概算した。

ＰＡＭ型は、上記の１９および２０頁に定義したとおりである。

ＥＣ_５０（もしくはｐＥＣ_５０）は、トッププラトーを有する明白なＳ字形曲線が得られた場合に、最大効果の半分に関連する濃度として決定した。ＥＣ_５０（もしくはｐＥＣ_５０）は、化合物活性が最大濃度でトッププラトーに達しなかった場合に最大濃度より低いと定義した（表６において「＜５」として示される）。

Ｅ．組成物実施例
「有効成分」は、これらの実施例の全体にわたって使用する場合に、式（Ｉ）の最終化合物、その製薬学的に許容しうる塩、その溶媒和物および立体化学的異性体に関する。

本発明の製剤の製法の典型的な例は下記のとおりである：
１．錠剤
有効成分 ５〜５０ｍｇ
第二リン酸カルシウム ２０ｍｇ
ラクトース ３０ｍｇ
タルカム １０ｍｇ
ステアリン酸マグネシウム ５ｍｇ
ジャガイモ澱粉 ２００ｍｇまで

本実施例において、有効成分は同量の本発明の化合物のいずれかで、特に同量の例示化合物のいずれかで置換することができる。

２．懸濁剤
水性懸濁剤は、各１ミリリットルが１〜５ｍｇの活性化合物の１つ、５０ｍｇのナトリ
ウムカルボキシメチルセルロース、１ｍｇの安息香酸ナトリウム、５００ｍｇのソルビトールおよび水を１ｍｌまで含有するように経口投与用に製造される。

３．注入剤
非経口組成物は、水中１０体積％のプロピレングリコールにおいて１．５重量％の本発明の有効成分を撹拌することにより製造される。

４．軟膏
有効成分 ５〜１０００ｍｇ
ステアリルアルコール ３ｇ
ラノリン ５ｇ
白色石油（ｗｈｉｔｅ ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ） １５ｇ
水 １００ｇまで

本実施例において、有効成分は同量の本発明の化合物のいずれかで、特に同量の例示化合物のいずれかで置換することができる。

妥当なバリエーションは、本発明の範囲からの離脱と見なされるものではない。このように記述される本発明は、当業者により様々に変更され得ることは明らかである。

Claims (9)

1. 式（Ｉ）
   

   

   ［式中、
   Ｒ^１は非置換のフェニル；非置換のベンゾジオキサン−６−イル；非置換のピリジニル；またはハロ、トリフルオロメチル、トリフルオロメトキシ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシＣ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルアミノ、Ｃ_３〜６シクロアルキル、Ｃ_３〜６シクロアルキルオキシ、Ｃ_３〜６シクロアルキルアミノ、（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキル、（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルオキシおよび（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルアミノよりなる群から選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されたフェニルもしくはピリジニルであり；
   Ｒ^２は水素、ハロ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシもしくはトリフルオロメトキシであり；
   Ｒ^３は水素、ハロもしくはトリフルオロメチルであり；
   Ｒ^４は水素もしくはハロであり；
   Ｒ^２およびＲ^３は基−ＯＣＦ_２−Ｏ−を形成することができ：
   Ａｌｋは直鎖状もしくは分枝鎖状Ｃ_１〜６アルカンジイルもしくはＣ_２〜６アルケンジイルであり；
   Ｒ^５は水素、ヒドロキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、ハロ、Ｒ^６Ｒ^７Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−もしくはＲ^８−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
   Ｒ^６はＣ_１〜３アルキル、Ｃ_３〜６シクロアルキルもしくは（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルであり；
   Ｒ^７は水素もしくはＣ_１〜３アルキルであり；または
   Ｒ^６およびＲ^７は、各々場合によりヒドロキシルで置換されていてもよいピロリジニルもしくはピペリジニルを形成し；
   Ｒ^８は水素もしくはＣ_１〜４アルキルである］
   の化合物もしくはその立体異性体、あるいはその製薬学的に許容しうる付加塩または水和物もしくは溶媒和物。
2. Ｒ^１が非置換のフェニル；非置換のベンゾジオキサン−６−イル；非置換のピリジニル；またはハロ、トリフルオロメトキシ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシＣ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルアミノ、Ｃ_３〜６シクロアルキル、Ｃ_３〜６シクロアルキルオキシ、Ｃ_３〜６シクロアルキルアミノ、（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキル、（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルオキシおよび（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルアミノよりなる群から選択される１、２もしくは３個の置換基で置換されたフェニルもしくはピリジニルであり；
   Ｒ^２がハロ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシもしくはトリフルオロメトキシであり；
   Ｒ^３が水素、ハロもしくはトリフルオロメチルであり；
   Ｒ^４が水素もしくはハロであり；
   Ｒ^２およびＲ^３が基−ＯＣＦ_２−Ｏ−を形成することができ：
   Ａｌｋが直鎖状もしくは分枝鎖状Ｃ_１〜６アルカンジイルもしくはＣ_２〜６アルケンジイルであり；
   Ｒ^５が水素、ヒドロキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、ハロ、Ｒ^６Ｒ^７Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−もしくはＲ^８−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
   Ｒ^６がＣ_１〜３アルキル、Ｃ_３〜６シクロアルキルもしくは（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルであり；
   Ｒ^７が水素もしくはＣ_１〜３アルキルであり；または
   Ｒ^６およびＲ^７が、各々場合によりヒドロキシルで置換されていてもよいピロリジニルもしくはピペリジニルを形成し；
   Ｒ^８が水素もしくはＣ_１〜４アルキルである
   請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、あるいはその製薬学的に許容しうる付加塩または水和物もしくは溶媒和物。
3. Ｒ^１が非置換のフェニル；非置換のベンゾジオキサン−６−イル；非置換のピリジニル；またはハロ、トリフルオロメトキシ、Ｃ_１〜３アルキル、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシＣ_１〜３アルキルおよびＣ_１〜３アルキルアミノよりなる群から選択される１もしくは２個の置換基で置換されたフェニルもしくはピリジニルであり；
   Ｒ^２が水素、ハロ、メチル、メトキシもしくはトリフルオロメトキシであり；
   Ｒ^３が水素、ハロもしくはトリフルオロメチルであり；
   Ｒ^４が水素もしくはハロであり；
   Ｒ^２およびＲ^３が３、４位において基−ＯＣＦ_２−Ｏ−を形成することができ：
   Ａｌｋが直鎖状もしくは分枝鎖状Ｃ_１〜６アルカンジイルもしくはＣ_２〜６アルケンジイルであり；
   Ｒ^５が水素、ヒドロキシ、Ｃ_１〜３アルキルオキシ、ハロ、Ｒ^６Ｒ^７Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−もしくはＲ^８−Ｏ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
   Ｒ^６がＣ_１〜３アルキル、Ｃ_３〜６シクロアルキルもしくは（Ｃ_３〜６シクロアルキル）Ｃ_１〜３アルキルであり；
   Ｒ^７が水素もしくはＣ_１〜３アルキルであり；または
   Ｒ^６およびＲ^７が、場合によりヒドロキシルで置換されていてもよいピロリジニルを形成し；
   Ｒ^８が水素もしくはＣ_１〜４アルキルである
   請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、あるいはその製薬学的に許容しうる付加塩または水和物もしくは溶媒和物。
4. Ｒ^１が非置換のベンゾジオキサン−６−イル；非置換のピリジニル；またはクロロ、メチル、エチル、メトキシメチルおよびエチルアミノよりなる群から選択される１もしくは２個の置換基で置換されたピリジニルであり；
   Ｒ^２が水素、ハロ、メチル、メトキシもしくはトリフルオロメトキシであり；
   Ｒ^３が水素、ハロもしくはトリフルオロメチルであり；
   Ｒ^４が水素もしくはハロであり；
   Ｒ^２およびＲ^３が３、４位において基−ＯＣＦ_２Ｏ−を形成することができ：
   Ａｌｋが直鎖状もしくは分枝鎖状Ｃ_１〜６アルカンジイルであり；
   Ｒ^５がヒドロキシルもしくはＲ^６Ｒ^７Ｎ−Ｃ（＝Ｏ）−であり；
   Ｒ^６がメチル、エチル、シクロプロピル、シクロブチルもしくは（シクロプロピル）メチルであり；
   Ｒ^７が水素もしくはメチルである
   請求項１に記載の式（Ｉ）の化合物、あるいはその製薬学的に許容しうる付加塩または水
   和物もしくは溶媒和物。
5. −（アルファＳ）−アルファ−エチル−３−［［３−メトキシ−５−（トリフルオロメチル）フェニル］アミノ］−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール；
   −３−［（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−Ｎ−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−アセトアミド；
   −Ｎ−シクロプロピル−３−［（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−アセトアミド；
   −（アルファＳ）−アルファ−エチル−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−３−［（２，３，４−トリフルオロフェニル）アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール；
   −（アルファＳ）−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−アルファ−エチル−３−［（２，３，４−トリフルオロフェニル）アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール；
   −（アルファＳ）−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−アルファ−メチル−３−［（２，３，４−トリフルオロフェニル）アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール；
   −３−［（３，４−ジフルオロフェニル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−Ｎ−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−アセトアミド；
   −Ｎ−シクロプロピル−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−３−［［３−（トリフルオロメトキシ）フェニル］アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−アセトアミド；
   −３−［（３−クロロ−２−フルオロフェニル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−Ｎ−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−アセトアミド；
   −（アルファＳ）−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−アルファ−エチル−３−［（３，４，５−トリフルオロフェニル）アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール；
   −（アルファＳ）−アルファ−エチル−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−３−［（３，４，５−トリフルオロフェニル）アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール；
   −（アルファＳ）−アルファ−エチル−３−［（３−フルオロ−５−メトキシフェニル）アミノ］−１−（２−メチル−４−ピリジニル）−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール；
   −（アルファＳ）−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−アルファ−エチル−３−［（３−フルオロ−５−メトキシフェニル）アミノ］−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール；
   −（アルファＳ）−３−［（３−クロロ−５−メトキシフェニル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−アルファ−エチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−エタノール；
   −３−［（３，４−ジフルオロフェニル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−プロパンアミド；および
   −３−［（２，２−ジフルオロ−１，３−ベンゾジオキソール−５−イル）アミノ］−１−（２，６−ジメチル−４−ピリジニル）−Ｎ，Ｎ−ジメチル−１Ｈ−１，２，４−トリアゾール−５−プロパンアミド；
   から選択される請求項１に記載の化合物ならびにその酸付加塩および溶媒和物。
6. 化合物が請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物である、精神障害、知的障害疾患もしくは疾病、または炎症性疾患もしくは障害の予防もしくは処置用の薬剤の製造のための化合物の使用。
7. 製薬学的に許容しうる担体および有効成分として請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の治療的に有効な量を含んでなる製薬学的組成物。
8. 製薬学的に許容しうる担体を請求項１〜５のいずれか１項に記載の化合物の治療的に有効な量と密接に混合することを特徴とする、請求項７に記載の組成物を製造する方法。
9. アルツハイマー病、レビー小体認知症、注意欠陥多動性障害、不安、統合失調症、躁病、躁鬱病、パーキンソン病、ハンチントン病、トゥーレット症候群、脳損傷、または時差ぼけ、ニコチン中毒、疼痛を包含する、コリン作動性シナプスの喪失がある他の神経学的、変性もしくは精神障害を包含する疾患を予防することもしくは処置することにおける同時、別個もしくは逐次使用のための組み合わされた製剤として、
   （ａ）式（Ｉ）の化合物、および
   （ｂ）−１，４−ジアザビシクロ［３．２．２］ノナン−４−カルボン酸，４−ブロモフェニルエステル，１塩酸塩（ＳＳＲ１８０７１１Ａ）；
   −（−）−スピロ［１−アザビシクロ［２．２．２．］オクタン−３，５’−オキサゾリジン］−２’−オン；
   −３−［（２，４−ジメトキシ）ベンジリデン］−アナバセイン２塩酸塩（ＧＴＳ−２１）；
   −［Ｎ−［（３Ｒ）−１−アザビシクロ［２．２．２］オクト−３−イル］−４−クロロベンズアミド塩酸塩］ＰＮＵ−２８２９８７）；
   −ニコチン；
   −バレニクリン；
   −ＭＥＭ３４５４；
   −ＡＺＤ−０３２８；および
   −ＭＥＭ６３９０８
   から選択されるα７ニコチン性受容体アゴニスト
   を含んでなる製品。