JP2009538153A - トランスジェニック事象mon89034に対応するトウモロコシ植物および種子ならびにそれらを検出および使用するための方法 - Google Patents
トランスジェニック事象mon89034に対応するトウモロコシ植物および種子ならびにそれらを検出および使用するための方法 Download PDFInfo
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Abstract
Description
本願は、2006年5月26日に出願された米国仮出願番号60/808,834に対して優先権の利益を主張するものである。
本発明は、トランスジェニックトウモロコシ事象(event)MON89034ならびにその植物体の一部および種子に関する。この事象は、鱗翅(Lepidoptera)目の昆虫による昆虫侵入に抵抗性を示す。本発明はまた、このトランスジェニック事象に特有のヌクレオチド配列の存在について探索するときにこのトランスジェニック事象の存在についての診断であるDNAを含む植物および種子を使用するための方法、ならびに、このトランスジェニック事象に特有の特異的なヌクレオチド配列を検出することによって生物学的サンプル中の前記トウモロコシ事象の存在を検出するための方法にも関する。本発明は、この事象に特有のヌクレオチド配列を提供する。
本発明は、本明細書中で事象MON89034と呼ばれるトウモロコシ(Zea mays)植物の鱗翅目(Lepidopteran)抵抗性トランスジェニック品種に関し、また、トウモロコシの任意のサンプルまたは品種において検出されるときに、そのサンプルまたは品種中に存在する、トランスジェニックトウモロコシ植物事象MON89034の存在についての診断である特有のDNA配列に関し、そして、トウモロコシMON89034ならびにそれから得られる子孫植物および種子における導入遺伝子/ゲノム挿入領域の検出にも関する。
特許文献2:米国特許第6,620,988号明細書
非特許文献2:Roush(1994)Biocontrol. Sci. Technol.. 4:501-516
非特許文献3:Weising et al. (19880 Ann. Rev. Genet 22:421-477
本発明は、American Type Culture Collection(ATCC)に受入番号PTA-7455として2006年3月28日に寄託された種子を有する、MON89034と命名されたトランスジェニックトウモロコシ植物およびその(挿入されたトランスジェニックDNAに相当する少なくとも1つの対立遺伝子も含む限り)トウモロコシ事象MON89034と識別不能な子孫に関する。本発明の別の態様は、配列番号:1、配列番号:2、配列番号:3、配列番号:4および配列番号:5よりなる群から選択されるポリヌクレオチドを含む、子孫植物もしくは種子またはトウモロコシ事象MON89034の植物および種子の再生可能な一部である。本発明はまた、トウモロコシ事象MON89034の植物体の一部分を含み、その植物体の一部分が、上で示したようなポリヌクレオチドを少なくとも含む限り、これらの一部分として、花粉、胚珠、花、苗条、根、柄、花柱、雄穂、穂および葉が挙げられるが、これらに限定されない。MON89034事象に対応するトウモロコシ植物の分野におけるMON89034のゲノム内に含まれる新規遺伝的組成物およびそのようなMON89034からの製品(例えば、粗挽き粉、小麦粉、油、パルプおよび残渣バイオマス(biomass left over))は、本発明の一態様である。
以下の定義および方法は、本発明をよりよく定義するため、および、本発明を実施する際に当業者を導くために提供される。別段述べられない限り、用語は、関連分野の当業者による慣例的用法に従って理解されるべきである。分子生物学における一般的な用語の定義は、Rieger et al., Glossary of Genetics:Classical and Molecular,5th edition, Springer-Verlag:New York,1991;およびLewin, Genes V, Oxford University Press:New York,1994内に見られることがある。
(a)配列番号:5に示されるようなヌクレオチド配列;
(b)配列番号:1および配列番号:2に示されるようなヌクレオチド配列の両方;
(c)配列番号:3に示されるようなヌクレオチド配列;および
(d)配列番号:4に示されるようなヌクレオチド配列
よりなる群から選択される配列のうちのいずれか1つまたはすべてを含む。
この実施例では、トランスジェニックトウモロコシ事象MON89034の構築および分子の特徴づけを説明する。
この実施例では、ゲノム内のトランスジェニックトウモロコシ事象MON89034についての診断であるDNAを含むトウモロコシ植物の同定およびそのようなトウモロコシ植物の接合状態の判定を説明する。
Claims (66)
- トランスジェニックトウモロコシ事象MON89034と命名されたトランスジェニックトウモロコシ植物であって、前記植物を得るため、子孫を作出するため、生長植物を得るため、または種子の作物を生産するための代表的な種子が、American Type Culture Collection(ATCC)に寄託され、受入番号PTA-7455を有する前記トランスジェニックトウモロコシ事象を含む、トランスジェニックトウモロコシ植物。
- 前記事象についての診断であるDNAを含み、前記DNAは、配列番号:1、配列番号:2、配列番号:3、配列番号:4および配列番号:5よりなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項1に記載のトランスジェニックトウモロコシ植物。
- 前記事象についての診断である前記DNAが、配列番号:1および配列番号:2よりなる群からさらに選択される、請求項2に記載のトランスジェニックトウモロコシ植物、前記植物の子孫、前記植物から生長した植物の細胞または前記植物から得られる種子。
- コーンミール、トウモロコシ粉、コーン油、トウモロコシタンパク質、エタノールおよびDDGSよりなる群から選択される商品または食料品に加工された、請求項3に記載のトランスジェニックトウモロコシ植物。
- 鱗翅目昆虫の侵入に抵抗性を示す、請求項1に記載のトランスジェニックトウモロコシ植物。
- 配列番号:1および配列番号:2よりなる群から選択されるDNA分子を前記植物の細胞のゲノム内に含む、請求項1に記載のトランスジェニックトウモロコシ植物。
- 生物学的サンプル中のトランスジェニックトウモロコシ事象MON89034 DNAの存在についての診断であるアンプリコンであって、前記アンプリコンは、配列番号:1および配列番号:2に示されるような配列よりなる群から選択されるポリヌクレオチド配列を含む、アンプリコン。
- 前記生物学的サンプルが、コーンミール、コーン油、コーンケーキ、トウモロコシ種子、トウモロコシ胚芽、コーンスターチおよびトウモロコシ粉を含む、請求項7に記載のアンプリコン。
- 配列番号:5に示されるような連続的なヌクレオチドの群から選択される連続的なヌクレオチドを含む、単離されたポリヌクレオチド分子であって、前記連続的なヌクレオチドは、約11〜約12000ヌクレオチドを含み、配列番号:1に示されるようなヌクレオチド1-11または9-20および配列番号:2に示されるようなヌクレオチド1-11または9-20よりなる群から選択される連続的なヌクレオチドをさらに含む、単離されたポリヌクレオチド分子。
- 配列番号:3に示されるような連続的なヌクレオチドの群から選択される連続的なヌクレオチドを含む、単離されたポリヌクレオチド分子であって、前記連続的なヌクレオチドは、約11〜約2000ヌクレオチドを含み、配列番号:1に示されるようなヌクレオチド1-11および9-20よりなる群から選択される連続的なヌクレオチドをさらに含む、単離されたポリヌクレオチド分子。
- 配列番号:4に示されるような連続的なヌクレオチドの群から選択される連続的なヌクレオチドを含む、単離されたポリヌクレオチド分子であって、前記連続的なヌクレオチドは、約11〜約914ヌクレオチドを含み、配列番号:2に示されるようなヌクレオチド1-11および9-20よりなる群から選択される連続的なヌクレオチドをさらに含む、単離されたポリヌクレオチド分子。
- 前記連続的なヌクレオチドまたはその相補体が、トウモロコシDNAを含む生物学的サンプルからアンプリコンを生成するDNA増幅法において有用であり、前記アンプリコンの前記検出は、前記サンプル中のトランスジェニックトウモロコシ事象MON89034 DNAの存在についての診断である、請求項9〜11のいずれかに記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
- 前記連続的なヌクレオチドまたはその相補体が、生物学的サンプル中のトランスジェニックトウモロコシ事象MON89034の存在を検出するためのヌクレオチド検出法において有用である、請求項9〜11のいずれかに記載の単離されたポリヌクレオチド分子。
- 配列番号:5に示されるような配列を含むヌクレオチドセグメントに対して実質的な相同性を示すかまたは実質的な相補性を示す連続的な少なくとも約11〜約12000ヌクレオチドからなるプローブポリヌクレオチド分子を備える、生物学的サンプル中のトランスジェニックトウモロコシ事象MON89034 DNAの存在を検出するためのキットであって、前記プローブは、配列番号:1および配列番号:2に示されるような配列よりなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、キット。
- トウモロコシDNAを含む生物学的サンプル中のトランスジェニックトウモロコシ事象MON89034 DNAについての診断であるアンプリコンを検出するための方法であって、該方法は:
(a)核酸増幅反応において前記生物学的サンプルを2つ以上のプライマーとともに接触させる工程;
(b)核酸増幅反応を行う工程;および
(c)該アンプリコンを検出する工程;
を含み、ここで、該アンプリコンは、配列番号:1および配列番号:2よりなる群から選択されるヌクレオチド配列を含み;そして
前記アンプリコンの存在は、前記サンプル中の前記事象DNAについての診断である、方法。 - 前記アンプリコンが、配列番号:1の連続的なヌクレオチド1〜11または9〜20および配列番号:2の1〜11または9〜20よりなる群から選択されるヌクレオチド配列を含む、請求項15に記載の方法。
- サンプル中のトランスジェニックトウモロコシ事象MON89034の存在についての診断であるポリヌクレオチド分子の存在を検出するための方法であって、該方法は:
(a)ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下において前記ポリヌクレオチド分子とハイブリダイズするプローブと前記サンプルとを接触させる工程;
(b)前記サンプルおよびプローブをストリンジェントなハイブリダイゼーション条件に供する工程;および
(c)前記ポリヌクレオチド分子に対する前記プローブのハイブリダイゼーションを検出する工程;
を含み、前記ポリヌクレオチド分子は、配列番号:1および配列番号:2よりなる群から選択される配列を含み;そして
前記検出工程におけるハイブリダイゼーションの検出は、前記サンプル中の前記ポリヌクレオチド分子の存在についての診断である、方法。 - 配列番号:1および配列番号:2よりなる群から選択される配列を含む、単離され、精製されたポリヌクレオチド分子。
- トランスジェニックトウモロコシ事象MON89034を事象MON89034以外のトウモロコシ植物とともに栽培することによって作出される、トランスジェニックトウモロコシ事象MON89034についての診断であるDNAを含むハイブリッドトウモロコシ植物。
- 前記種子が前記DNAを含む、請求項20に記載のハイブリッドトウモロコシ植物の種子。
- トランスジェニックトウモロコシ事象MON89034についての診断であるDNAを含むハイブリッドトウモロコシ植物。
- トランスジェニックトウモロコシ事象MON89034についての診断であるDNAを含む、請求項21に記載のハイブリッドトウモロコシ植物の種子。
- トランスジェニックトウモロコシ事象MON89034についての診断であるDNAを含む種子から生長したトウモロコシ植物。
- 請求項23に記載のトウモロコシ植物から得られた細胞、種子または該トウモロコシ植物から採取された組織であって、前記細胞、種子または組織は、前記DNAを含む、細胞、種子または組織。
- トウモロコシ植物を鱗翅目昆虫の侵入から保護するための方法であって、該方法は、標的鱗翅目害虫の食餌中に1つ以上のトランスジェニックトウモロコシ植物細胞を提供する工程を含み、各トウモロコシ植物細胞は、そのゲノム内に、配列番号:1と配列番号:2の両方に示されるような配列に対応するポリヌクレオチドおよび配列番号:1と配列番号:2との間に配列番号:5に示されるような連続的なヌクレオチド配列を含み、前記トランスジェニックトウモロコシ植物細胞を常食とする標的鱗翅目昆虫は、前記トウモロコシ植物をさらに常食とすることによって阻害される、方法。
- 前記トウモロコシ植物が、鱗翅目以外の綱の昆虫に対するタンパク質トキシン、線虫に対して毒性であるタンパク質、抑制するための標的害虫における遺伝子を標的にするdsRNAおよび抗真菌性タンパク質よりなる群から選択される異なる殺虫物質をさらに含む、請求項25に記載の方法。
- 鱗翅目昆虫の侵入からトウモロコシ植物を保護するためのトランスジェニック植物細胞の組成物であって、前記組成物は、標的鱗翅目害虫の食餌中に提供され、前記トランスジェニックトウモロコシ植物細胞の各々は、そのゲノム内に、配列番号:1と配列番号:2の両方に示されるような配列に対応するポリヌクレオチドおよび前記配列番号:1と配列番号:2との間に配列番号:5に示されるような連続的なヌクレオチド配列を含む、組成物。
- 昆虫抵抗性トウモロコシ植物またはその一部であって、前記トウモロコシ植物の種子は、受入番号PTA-7455としてAmerican Type Culture Collectionに寄託されている、昆虫抵抗性トウモロコシ植物またはその一部。
- 配列番号:1、配列番号:2、配列番号:3、配列番号:4および配列番号:5よりなる群から選択される少なくとも1つのヌクレオチド配列を有するDNAが、該植物細胞のゲノムの一部を形成している、昆虫抵抗性トウモロコシ植物細胞。
- 請求項28に記載の昆虫抵抗性トウモロコシ植物細胞の子孫細胞であって、配列番号:1、配列番号:2、配列番号:3、配列番号:4および配列番号:5よりなる群から選択される少なくとも1つのヌクレオチド配列を有するDNAが、該植物細胞のゲノムの一部を形成している、子孫細胞。
- 前記細胞が、請求項29に記載のトウモロコシ植物細胞または子孫細胞から再生されたかまたは生長した植物の種子の中に見られ、前記種子は、前記少なくとも1つのヌクレオチド配列を含む、請求項30に記載の子孫細胞。
- 昆虫抵抗性トウモロコシ植物を作出する方法であって、該方法は、請求項30に記載の細胞または子孫細胞からトウモロコシ植物を再生する工程、および前記トウモロコシ植物を異なるトウモロコシ植物と交配させることにより、子孫トウモロコシ植物を作出する工程、および配列番号:1、配列番号:2、配列番号:3、配列番号:4および配列番号:5よりなる群から選択される少なくとも1つのヌクレオチド配列について各々を解析することによって昆虫抵抗性子孫植物を選択する工程を含む、方法。
- 昆虫抵抗性トウモロコシ植物またはその一部であって、Cry2AbをコードするDNAならびに配列番号:1および配列番号:2のヌクレオチド配列を有するDNAが、前記植物またはその一部の細胞におけるゲノムの一部を形成している、昆虫抵抗性トウモロコシ植物またはその一部。
- Cry1A.105をコードするDNAをさらに含む、請求項33に記載の昆虫抵抗性トウモロコシ植物細胞。
- トウモロコシ植物の細胞(配偶子以外)が、配列番号:1、配列番号:2、配列番号:3、配列番号:4および配列番号:5よりなる群から選択されるヌクレオチド配列についてヘテロ接合性である、請求項34に記載の昆虫抵抗性トウモロコシ植物。
- トウモロコシ植物細胞が、配列番号:1、配列番号:2、配列番号:3、配列番号:4および配列番号:5よりなる群から選択されるヌクレオチド配列についてホモ接合性である、請求項28に記載の昆虫抵抗性トウモロコシ植物細胞。
- トウモロコシ事象MON89034についての診断であるトウモロコシDNAを含む生物学的サンプル中のポリヌクレオチドを検出する方法であって、前記ポリヌクレオチドは、配列番号:1または配列番号:2に示されるような結合配列を含み、該方法は:
(a)トウモロコシ事象MON89034由来のDNAを用いる核酸増幅反応において使用されるときにトウモロコシ事象MON89034についての診断であるアンプリコンを生成するプライマー対と前記サンプルとを接触させる工程;
(b)核酸増幅反応を行うことにより、該アンプリコンをもたらす工程;および
(c)該アンプリコンを検出する工程;
を含み、前記プライマー対は、(1)配列番号:3のトウモロコシゲノム部分由来の連続的な少なくとも約15ヌクレオチドを含む第1プライマーおよび配列番号:5の異種挿入DNA部分に対して相補的な連続的な少なくとも約15ヌクレオチドを含む第2プライマー、ならびに(2)配列番号:4のトウモロコシゲノム部分に対して相補的な連続的な少なくとも約15ヌクレオチドを含む第1プライマーおよび配列番号:5の異種挿入DNA部分由来の連続的な少なくとも約15ヌクレオチドを含む第2プライマー、よりなる群から選択され;(1)における前記アンプリコンは、配列番号:1を含み、(2)における前記アンプリコンは、配列番号:2を含む、方法。 - 熱的増幅反応において生物学的サンプル中のトウモロコシ事象MON89034 DNAの存在についての診断であるアンプリコンを生成する際に使用するためのポリヌクレオチドプライマー対であって、該プライマー対は:
(a)配列番号:3のトウモロコシゲノム部分由来の連続的な少なくとも約15ヌクレオチドを含む第1プライマー;および配列番号:5の異種挿入DNA部分に対して相補的な連続的な少なくとも約15ヌクレオチドを含む第2プライマー;ならびに
(b)配列番号:4のトウモロコシゲノム部分に対して相補的な連続的な少なくとも約15ヌクレオチドを含む第1プライマー;および配列番号:5の異種挿入DNA部分由来の連続的な少なくとも約15ヌクレオチドを含む第2プライマー
よりなる群から選択され、(1)におけるプライマー対を用いて生成される前記アンプリコンは、配列番号:1またはその相補体を含み、(2)におけるプライマー対を用いて生成される前記アンプリコンは、配列番号:2またはその相補体を含む、プライマー対。 - 生物学的サンプル中のトウモロコシ事象MON89034の結合配列である配列番号:1または配列番号:2を検出するためのキットであって、前記キットは:(1)配列番号:1または配列番号:2よりなる群から選択される配列に対して相補的であるか、または完全に相補的であるヌクレオチドプローブ、および(2)核酸増幅反応において使用するためのプライマー対を備え、前記プライマー対は、
(a)配列番号:3のトウモロコシゲノム部分由来の連続的な少なくとも約15ヌクレオチドを含む第1プライマーおよび配列番号:5の異種挿入DNA部分に対して相補的な連続的な少なくとも約15ヌクレオチドを含む第2プライマー;ならびに
(b)配列番号:4のトウモロコシゲノム部分に対して相補的な連続的な少なくとも約15ヌクレオチドを含む第1プライマー;および配列番号:5の異種挿入DNA部分由来の連続的な少なくとも約15ヌクレオチドを含む第2プライマー
よりなる群から選択される、キット。 - トウモロコシDNAを含む生物学的サンプル中のトウモロコシ事象MON89034の結合配列である配列番号:1または配列番号:2を検出するための方法であって、前記方法は:
(a)ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下において前記結合配列とハイブリダイズするプローブと前記サンプルとを接触させる工程;
(b)該サンプルおよびプローブをストリンジェントなハイブリダイゼーション条件に供する工程;および
(c)該結合配列への該プローブのハイブリダイゼーションを検出する工程
を含み;該生物学的サンプルへの該プローブのハイブリダイゼーションの検出は、前記サンプル中の前記結合配列の存在を示唆するものである、方法。 - (1)配列番号:3由来の連続的な少なくとも20ヌクレオチドを含む1つ以上のDNA配列とストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下においてハイブリダイズし、そして配列番号:1またはその相補体を含むポリヌクレオチドプローブ、または(2)配列番号:4由来の連続的な少なくとも20ヌクレオチドを含む1つ以上のDNA配列とストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下においてハイブリダイズし、そして配列番号:2またはその相補体を含むポリヌクレオチドプローブ、を備えるDNA検出キット。
- 生物学的サンプル中の、トウモロコシ事象MON89034の診断である結合配列の存在を検出する際に使用するためのポリヌクレオチドプライマー対を備えるDNA検出キットであって、前記ポリヌクレオチドプライマー対の第1プライマーは、ヌクレオチド約1位から約2050位の配列番号:3に示される配列に対応する逆相補配列と特異的にハイブリダイズし、そして、前記ポリヌクレオチドプライマー対の第2プライマーは、ヌクレオチド約2060位からヌクレオチド約12,208位の配列番号:5に示されるような配列と特異的にハイブリダイズし、互いに向かって伸長することにより、配列番号:1を含むアンプリコンを形成し、前記アンプリコンは、前記サンプル中のMON89034事象DNAの存在についての診断である、DNA検出キット。
- 前記プライマー対が、配列番号:3に示されるような少なくとも約11〜約2000ヌクレオチド長の任意の連続的なヌクレオチド配列を含む第1プライマーおよび配列番号:4に示されるような少なくとも約11〜約914ヌクレオチド長の任意の連続的なヌクレオチド配列の逆相補体を含む第2プライマーよりなる群から選択される、請求項42に記載のDNA検出キット。
- 生物学的サンプル中の、トウモロコシ事象MON89034の診断である結合配列の存在を検出する際に使用するためのポリヌクレオチドプライマー対を備えるDNA検出キットであって、前記ポリヌクレオチドプライマー対の第1プライマーは、配列番号:5のヌクレオチド約1位から約11,370位に示される配列に対応する逆相補配列と特異的にハイブリダイズし、前記ポリヌクレオチドプライマー対の第2プライマーは、配列番号:4のヌクレオチド約1位からヌクレオチド約914位に示されるような配列と特異的にハイブリダイズし、そして、互いに向かって伸長することにより、配列番号:2を含むアンプリコンを形成し、前記アンプリコンは、前記サンプル中のMON89034事象DNAの存在についての診断である、DNA検出キット。
- 配列番号:1および配列番号:2よりなる群から選択されるDNA分子であるか、またはそのDNA分子に対して相補的な、単離されたDNA分子。
- DNAプローブとして使用するための単離されたDNA分子であって、
生物学的サンプル中の前記単離されたDNA分子の存在は、生物学的サンプル中の、配列番号:1の連続的な少なくとも11ヌクレオチドまたはその相補体を含むトウモロコシ事象MON89034 DNAについての診断である、単離されたDNA分子。 - DNAプローブとして使用するための単離されたDNA分子であって、生物学的サンプル中の前記単離されたDNA分子の存在は、前記生物学的サンプル中のトウモロコシ事象MON89034の存在についての診断であり、前記分子は、配列番号:2の連続的な少なくとも11ヌクレオチドまたはその相補体を含む、単離されたDNA分子。
- 生物学的サンプル中のトウモロコシ事象MON89034ポリヌクレオチドの存在を検出する方法であって、該方法は:
(a)該サンプルをDNAプライマー対と接触させる工程;
(b)核酸増幅反応を行うことによって、アンプリコンを生成する工程;および
(c)前記アンプリコンを検出する工程;
を含み、前記アンプリコンは、配列番号:1または配列番号:2を含み、前記アンプリコンの検出は、前記サンプル中のトウモロコシ事象MON89034の存在についての診断である、方法。 - 安定に形質転換されたトウモロコシ植物細胞であって、そのDNAは、請求項48に記載の方法に供されるときに配列番号:1または配列番号:2を含むDNAアンプリコンを生成する、トウモロコシ植物細胞。
- 前記DNAプライマー対が、配列番号:6および配列番号:7に示されるようなヌクレオチド配列を含む、請求項48に記載の方法。
- 生物学的サンプル中のトウモロコシ事象MON89034 DNAの存在を検出する方法であって:
(a)ストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下においてMON89034 DNAとハイブリダイズし、かつ、前記条件下においてMON89034 DNA以外のトウモロコシ植物ゲノムDNAとハイブリダイズしないプローブと、該サンプルとを接触させる工程であって、前記プローブは、配列番号:lおよび配列番号:2よりなる群から選択される配列であるかまたはその配列に対して相補的である、工程;
(b)該サンプルおよびプローブをストリンジェントなハイブリダイゼーション条件に供する工程;および
(c)MON89034 DNAへの該プローブのハイブリダイゼーションを検出する工程;
を含み、ハイブリダイゼーションの検出は、前記生物学的サンプル中の前記トウモロコシ事象MON89034の存在についての診断である、方法。 - 生物学的サンプル中の、トウモロコシ事象MON89034 DNAを含むトウモロコシ植物のDNAの接合状態を判定する方法であって:
(a)(1)トウモロコシ事象MON89034 DNAを含む核酸増幅反応において使用されるときに、トウモロコシ事象MON89034についての診断である第1のアンプリコンを生成し、そして(2)MON89034 DNA以外のトウモロコシゲノムDNAを含む核酸増幅反応において使用されるときに、MON89034 DNA以外のトウモロコシゲノムDNAについての診断である第2アンプリコンを生成する、配列番号:6、配列番号:7および配列番号:10を含む3つの異なるプライマーと、該サンプルとを接触させる工程;
(b)核酸増幅反応を行う工程;および
(c)生成されたアンプリコンを比較する工程であって、一方または両方のアンプリコンの存在が、該サンプルの接合状態の診断である工程
を含む、方法。 - 少なくとも1つの親が、トウモロコシ事象MON89034である、ハイブリッドトウモロコシ植物。
- 請求項53に記載のハイブリッドトウモロコシ植物から得られるかまたは生長するトウモロコシ植物からもたらされる、花粉、胚珠、種子、根または葉であって、前記花粉、胚珠、種子、根または葉が、トランスジェニックトウモロコシ事象MON89034についての診断であるDNAを含む、花粉、胚珠、種子、根または葉。
- 請求項53に記載のハイブリッドトウモロコシ植物MON89034の子孫であって、前記子孫の細胞が、そのゲノム内に配列番号:1および配列番号:2に示されるような配列を含む、子孫。
- 配列番号:1および配列番号:2よりなる群から選択される連続した少なくとも約11〜約20ヌクレオチドを含む、単離されたポリヌクレオチドセグメントであって、前記セグメントが、トランスジェニックトウモロコシ植物MON89034の細胞から得られる、セグメント。
- 配列番号:1および配列番号:2よりなる群から選択される配列であるかまたはそれらの配列に対して相補的である、ヌクレオチド配列を含むトランスジェニックトウモロコシ植物ゲノムMON89034から得られる、単離されたポリヌクレオチドセグメント。
- 生物学的サンプル中のトウモロコシ事象MON89034ポリヌクレオチドの存在を検出する方法であって、該方法は:
(a)配列番号:1および配列番号:2よりなる群から選択される配列であるかまたはそれらの配列に対して相補的な、連続的なヌクレオチド配列を含むプローブと該サンプルとをストリンジェントなハイブリダイゼーション条件下において接触させる工程;および
(b)前記サンプルへの前記プローブのハイブリダイゼーションを検出する工程;
を含み、前記サンプルへの前記プローブのハイブリダイゼーションは、前記サンプル中の前記トウモロコシ事象MON89034ポリヌクレオチドの存在についての診断である、
方法。 - 配列番号:1および配列番号:2よりなる群から選択される配列を含むポリヌクレオチドを含む組成物であって、該組成物は、コーンミール、コーンフラワー、トウモロコシ油、コーンシルク、コーンスターチおよび加工食料品よりなる群から選択される商品生産物である、組成物。
- 生物学的サンプル中のトウモロコシ事象MON89034 DNAの存在を検出する際に使用するための、連続した約11〜約20ヌクレオチド長を含むポリヌクレオチドプローブであって、前記連続したヌクレオチドは、配列番号:1および配列番号:2よりなる群から選択される、ポリヌクレオチドプローブ。
- 前記プローブが、デオキシリボ核酸、リボ核酸およびヌクレオチド類似体よりなる群から選択されるヌクレオチドを含む、請求項60に示されるようなポリヌクレオチドプローブ。
- 前記プローブが、少なくとも1つのフルオロフォアで標識されている、請求項61に示されるようなポリヌクレオチドプローブ。
- トウモロコシ事象MON89034ヌクレオチド配列を含む商品または食料品であって、前記配列が、配列番号:1および配列番号:2よりなる群から選択される、商品または食料品。
- トウモロコシ油、コーンスターチ、コーンミール、コーンフラワー、化粧品およびバルキング剤よりなる群から選択される、請求項63に記載の商品または食料品。
- 生物学的サンプル中のトウモロコシ事象MON89034の存在についての診断であるヌクレオチド配列の存在の検出であって、前記生物学的サンプルが、トウモロコシ油、コーンミール、コーンフラワー、トウモロコシグルテン、コーンケーキおよびコーンスターチよりなる群から選択される、検出。
- トランスジェニックトウモロコシ事象MON89034に対応するゲノム内に挿入された挿入DNAセグメントについての診断であるDNAを含む、生長トウモロコシ細胞であって、前記挿入DNAセグメントは、配列番号:5に示されるようなヌクレオチド配列を含む、生長トウモロコシ細胞。
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