JP2007513922A

JP2007513922A - ヒトｏｒｌ１受容体へのアゴニストとしてのヒドロノポール誘導体

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Publication number: JP2007513922A
Application number: JP2006543547A
Authority: JP
Inventors: メンツエル，マチアス; ライシエ，ダニア・ビー; ブルクナー，ラインハルト; ダビト，サミユエル; バン・ステーン，バーソロミユーズ・ジエイ; シヨン，ウベ; ジヤスラン，ダニエル; プロイシヨフ，ウルフ
Original assignee: ソルベイ・フアーマシユーチカルズ・ゲゼルシヤフト・ミツト・ベシユレンクテル・ハフツング
Priority date: 2003-12-12
Filing date: 2004-12-09
Publication date: 2007-05-31
Also published as: WO2005058890A2; US20050131004A1; UA84896C2; AU2004298436A1; EP1694675A2; RU2006124856A; CA2547633A1; MXPA06005675A; RU2351600C2; AR046756A1; US7241770B2; WO2005058890A3; BRPI0417161A; ZA200604791B; CN1890238A; TW200522949A

Abstract

【化１】

本発明は、ヒトＯＲＬ１（ノシセプチン）受容体へのアゴニストである１つの群のヒドロノポール誘導体に関する。本発明はこれらの化合物の製造、これらの新規なヒドロノポール誘導体の少なくとも１種の薬理学的に活性な量を活性成分として含有する製薬学的組成物ならびにＯＲＬ１受容体が含まれる障害の処置のためのこれらの製薬学的組成物の使用にも関する。本発明は一般式（１）の化合物に関し、式中、記号は記述中で示された意味を有する。

Description

本発明は、ヒトＯＲＬ１（ノシセプチン）受容体へのアゴニストであるヒドロノポール（ｈｙｄｒｏｎｏｐｏｌ）誘導体の１つの群に関する。本発明はこれらの化合物の製造、これらの新規なヒドロノポール誘導体の少なくとも１種の薬理学的に活性な量を活性成分として含有する製薬学的組成物ならびにＯＲＬ１受容体が含まれる障害の処置のためのこれらの製薬学的組成物の使用にも関する。

「オピオイド受容体−様１（ＯｐｉｏｉｄＲｅｃｅｐｔｏｒ−Ｌｉｋｅ１）」（ＯＲＬ１）受容体は、ヒトｃＤＮＡライブラリから同定された。この「オーファン受容体」はμ−、κ−及びδ−オピオイド受容体と密接な相同性を有することが確定された（非特許文献１；非特許文献２）。それが配列的及び構造的にオピオイド受容体と密接に類似しているのにかかわらず、古典的なオピオイド受容体リガンドはＯＲＬ１受容体と相互作用しない。１９９５年に、１７−アミノ酸の神経ペプチドが脳抽出物から精製され、続いてＧタンパク質−結合（Ｇｐｒｏｔｅｉｎ−ｃｏｕｐｌｅｄ）ＯＲＬ１受容体の自然のリガンドであることが示された（非特許文献３；非特許文献４）。このペプチドはオルファニンＦＱ（ｏｒｐｈａｎｉｎＦＱ）又はノシセプチンと命名され、それは３個の従来のオピオイド受容体に結合しない。これらの発見は、ＯＲＬ１受容体の機能的役割及びそれに関する新規なリガンドへの実質的な研究の引き金を引いた。それは、力価及び選択性（ＯＲＬ−１対μ−オピエート）において異なるペプチド及び非−ペプチドの両方のリガンドを記載するいくつかの総説（例えば非特許文献５を参照されたい）ならびに多数の特許出願を含む数百の公開文献を生じた。μ−オピエート受容体は体中に広く分布しているので、選択性の欠如はある範囲の望ましくないオピエート−様副作用、例えば鎮静、呼吸低下（ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙｄｅｐｒｅｓｓｉｏｎ）、便秘、耐性及び依存症に導き得る（非特許文献６）。

１，３，８−トリアザスピロ［４，５］デカン−４−オン誘導体は、２０００年６月２０日に公開された特許文献１；２００１年２月１日に公開された特許文献２及び２００３年６月１２日に公開された特許文献３に記載されている。しかしながら上記の出願のいずれにおいても、μ−オピエート受容体は言及されていない。２０００年５月３日に公開された特許文献４において、ＯＲＬ−１受容体アゴニストとしての１，３，８−トリアザスピロ［４，５］デカノン化合物はＯＲＬ１−受容体に関する選択的親和性を有すると言われているが、μ−オピエート受容体親和性についての実際の情報は：「特に好ましい化合物はミュー−受容体より高いＯＲＬ−１受容体に関する親和性を示した（すなわちＯＲＬ１−受容体に関するＩＣ_５０／ミュー−受容体に関するＩＣ_５０は１．０未満であった）」という記述に限られた。２００１年１１月１５日に公開された特許文献５はもっと特異（ｓｐｅｃｉｆｉｃ）である。この特許出願はノシセプチン受容体親和性を有するトリアゾスピロ化合物を記載している。化合物をμ−、κ−及びδ−オピエート受容体についても調べたが、わずか数例の例外を以ってＯＲＬ−１受容体よりμ−オピエート受容体に有力であることが見出された。例外は因子２未満だけ（ｂｙｌｅｓｓｔｈａｎａｆａｃｔｏｒ２）ＯＲＬ−１選択的であった。かくして最も近い先行技術は、μ−オピエート受容体を超える明瞭な選択性、すなわち少なくとも１０の因子の選択性を有する有力なＯＲＬ−１リガンドをいかにして設計するかを記載しておらず、優れたバイオアベイラビリティーも有するそのような化合物は言うまでもない。最後に、ＯＲＬ−１受容体媒介障害の処置のために有用なヒドロキシアルキル置換１，３，８−トリアザスピロ［４，５］デカン−４−オン誘導体は、２００３年９月５日に申請された特許文献６において２００４年３月１８日に公開された。
日本特許第２０００／１６９４７６号明細書国際公開第０１／０７０５０Ａ１号パンフレット米国特許第２００３／０１０９５３９Ａ１号明細書欧州特許第０９９７４６４Ａ１号明細書米国特許第２００１／００４１７１１号明細書国際公開第２００４／０２２５５８号パンフレットＭｏｌｌｅｒｅａｕｅｔａｌ．著，ＦＥＢＳＬｅｔｔ．，３４１，１９９４年，３３−３８Ｂｕｎｚｏｗｅｔａｌ．著，ＦＥＢＳＬｅｔｔ．，３４７，１９９４年，２８４−２８８Ｒｅｉｎｓｃｈｅｉｄｅｔａｌ．著，Ｓｃｉｅｎｃｅ，２７０，１９９５年，７９２−７９４Ｍｅｕｎｉｅｒｅｔａｌ．著，Ｎａｔｕｒｅ，３７７，１９９５年，５３２−５３５Ｇｒｏｎｄｅｔａｌ．著，Ａｎａｅｓｔｈｅｓｉｓｔ，５１，２００２年，９９６−１００５ＤｒｕｇＮｅｗｓＰｅｒｓｐｅｃｔ，１４，２００１年，３３５

今回驚くべきことに、１系列のヒドロノポール誘導体の中で１つの群の化合物がヒトＯＲＬ１受容体に関する非常に高い親和性を有することが示されることが見出された。さらに、これらの化合物はμ−オピエート受容体に対するＯＲＬ１受容体に関する優れた選択性を示し、経口的投与の後に容易に利用できる。

本発明は、一般式（１）

［式中：
Ｒ_１は水素、ハロゲン、ＣＦ_３、アルキル（１−６Ｃ）、シクロアルキル（３−６Ｃ）、フェニル、アミノ、アルキル（１−３Ｃ）アミノ、ジアルキル（１−３Ｃ）アミノ、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル（１−３Ｃ）、（１−３Ｃ）アルコキシ、ＯＣＦ_３、カルボキシル、アミノカルボニル又は（１−３Ｃ）アルキルスルホニルを示し、
ｍは１〜４の整数であり、但しｍが２、３又は４である場合、Ｒ_１置換基は同一又は異なることができ、
Ｒ_２は水素、場合により置換されていることができるアルキル（１−６Ｃ）、シクロアルキル（３−６Ｃ）、−ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＨ_２ＯＣＨ_３、カルボキシル、アセチル、場合により置換されていることができるベンジル又は以下の構造（２）：

の基Ｑを示し、
ここで：
［］_ｎは−（ＣＨ_２）_ｎ−を表し、ここでｎは０〜７の整数であり、
Ｒ_３は水素又はアルキル（１−３Ｃ）を示し、
Ｒ_４は水素、場合により置換されていることができるアルキル（１−６Ｃ）、飽和された、不飽和のもしくは部分的に飽和された単−、二−もしくは三環式の場合により置換されていることができる環、あるいは飽和された、不飽和のもしくは部分的に飽和された、場合により置換されていることができ、場合により１個もしくはそれより多いへテロ原子を含有することができる５もしくは６−員環で置換されたアルキル（１−３Ｃ）基を示すか、あるいは
（Ｒ_３＋Ｒ_４）は、それらが結合する窒素原子と一緒になって、飽和された、不飽和のもしくは部分的に飽和された単−、二−もしくは三環式の場合により置換されていることができる環を示す］
の化合物ならびにその薬理学的に許容され得る塩及びプロドラッグに関する。

置換基の記述において、「Ｃ_１−３−アルキル」という略語は、「メチル、エチル、ｎ−プロピル又はイソプロピル」を意味する。「場合により置換されていることができる」は、基がアルキル、アルケニル、アルキニル、アリール、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヒドロキシル、アルキルオキシ、アルケニルオキシ、アリールオキシ、アシルオキシ、アミノ、アルキルアミノ、ジアルキルアミノ、アリールアミノ、チオ、アルキルチオ、アリールチオ、シアノ、オキソ、ニトロ、アシル、アミド、アルキルアミド、ジアルキルアミド、カルボキシルから選ばれる１個もしくはそれより多い基によりさらに置換されていることができるか、又は置換されていなくてもよいか、あるいは２個の場合による置換基がそれらが結合している炭素原子と一緒になって、窒素、酸素又は硫黄から選ばれる０、１もしくは２個のヘテロ原子を含有する５−もしくは６−員芳香族もしくは非−芳香族環を形成することができることを意味する。「場合により置換されていることができる」の説明の範囲内で、「アルキル」はＣ_１−３−アルキルを意味し、「アルケニル」はＣ_１−３−アルケニルを意味し、「アルキニル」はＣ_１−３−アルキニルを意味し、「アシル」はＣ_１−３−アシルを意味し、「アリール」はフリル、チエニル、ピロリル、オキサゾリル、チアゾリル、イミダゾリル、ピラゾリル、イソオキサゾリル、イソチアゾリル、ピリジル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、１，３，５−トリアジニル、フェニル、インダゾリル、インドリル、インドリジニル、イソインドリル、ベンゾ［ｂ］フラニル、ベンゾ［ｂ］チオフェニル、ベンズ−イミダゾリル、ベンズチアゾリル、プリニル、キノリニル、イソチノリル、チノリル、フタラジニル、キナゾリニル、キノキサリニル、１，８−ナフチリジニル、プテリジニル、ナフチル又はアズレニル、好ましくはフェニル、ピリジル又はナフチルを意味する。場合による置換基は、それら自身が追加の場合による置換基を有していることができる。好ましい場合による置換基には、Ｃ_１−３アルキル、例えばメチル、エチル及びトリフルオロメチル、フルオロ、クロロ、ブロモ、ヒドロキシル、Ｃ_１−３アルキルオキシ、例えばメトキシ、エトキシ及びトリフルオロメトキシならびにアミノが含まれる。「ヘテロ原子」は、Ｎ、Ｏ又はＳのような原子を意味する。「５−もしくは６−員環」は、例えば：フラン、チオフェン、ピロール、オキサゾール、チアゾール、イミダゾール、ピラゾール、イソオキサゾール、イソチアゾール、１，２，３−オキサジアゾール、１，２，３−トリアゾール、１，３，４−チアジアゾール、ピリジン、ピリダジン、ピリミジン又はピラジン環である。

式（１）を有するすべての化合物、ラセミ体、ジアステレオマーの混合物及び個々の立体異性体が本発明に属する。かくして、不斉の可能性がある炭素原子上の置換基がＲ−立体配置又はＳ−立体配置にある化合物は、本発明に属する。

プロドラッグは、それ自体不活性であるが、１種もしくはそれより多い活性な代謝産物に変換される治療薬である。プロドラッグは、親薬剤分子の利用性への何らかの障壁を克服するために用いられる薬剤分子の生体内可逆的（ｂｉｏｒｅｖｅｒｓｉｂｌｅ）誘導体である。これらの障壁には溶解性、透過性、安定性、前全身性代謝（ｐｒｅｓｙｓｔｅｍｉｃｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ）及び標的化の制限が含まれるが、これらに限られない（ＭｅｄｉｃａｌＣｈｅｍｉｓｔｒｙ：ＰｒｉｎｃｉｐｌｅｓａｎｄＰｒａｃｔｉｃｅ，１９９４，ＩＳＢＮ０−８５１８６−４９４−５，Ｅｄ．：Ｆ．Ｄ．Ｋｉｎｇ，ｐ．２１５；Ｊ．Ｓｔｅｌｌａ著，“Ｐｒｏｄｒｕｇｓａｓｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ“，ＥｘｐｅｒｔＯｐｉｎ．Ｔｈｅｒ．Ｐａｔｅｎｔｓ，１４（３），２７７−２８０，２００４；Ｐ．Ｅｔｔｍａｙｅｒｅｔａｌ．著，”Ｌｅｓｓｏｎｓｌｅａｒｎｅｄｆｒｏｍｍａｒｋｅｔｅｄａｎｄｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｉｏｎａｌｐｒｏｄｒｕｇｓ“，Ｊ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ．，４７，２３９３−２４０４，２００４）。プロ−ドラッグ、すなわち既知の経路により人間に投与されると式（１）を有する化合物に代謝される化合物は、本発明に属する。特に、これは第１級もしくは第２級アミノ又はヒドロキシ基を有する化合物に関する。そのような化合物を有機酸と反応させ、投与後に容易に除去される追加の基が存在する式（１）を有する化合物、例えばこれらに限られないが、アミジン、エナミン、マンニッヒ塩基、ヒドロキシル−メチレン誘導体、Ｏ−（アシルオキシメチレンカルバメート）誘導体、カルバメート、エステル、アミド又はエナミノンを与えることができる。

本発明は特に：Ｒ_１が水素、ハロゲン、ＣＦ_３、アルキル（１−６Ｃ）、ヒドロキシ、（１−３Ｃ）アルコキシ又はＯＣＦ_３を示し、ｍ＝１であり、他のすべての記号が上記に示される通りの意味を有する式（１）を有する化合物に関する。

さらに特定的に、本発明は：Ｒ_１が水素、ハロゲン、ＣＦ_３、アルキル（１−６Ｃ）、ヒドロキシ、（１−３Ｃ）アルコキシ又はＯＣＦ_３を示し、ｍ＝１であり、Ｒ_２が一般式（２）を有する基Ｑを示し、他のすべての記号が上記に示される通りの意味を有する式（１）を有する化合物に関する。

さらにもっと特定的に、本発明は：Ｒ_１が水素、ハロゲン、ＣＦ_３、アルキル（１−６Ｃ）、ヒドロキシ、（１−３Ｃ）アルコキシ又はＯＣＦ_３を示し、ｍ＝１であり、Ｒ_２が一般式（２）を有する基Ｑを示し、Ｒ_３がメチル基を示し、Ｒ_４が飽和され、場合により置換されていることができ、場合により１個もしくはそれより多いへテロ原子を含有することができる６−員環で置換されたアルキル（１−３Ｃ）基を示し、［］_ｎが上記で示される通りの意味を有する式（１）を有する化合物に関する。

最も好ましい本発明の化合物は：Ｒ_１が水素、ハロゲン、ＣＦ_３、アルキル（１−６Ｃ）、ヒドロキシ、（１−３Ｃ）アルコキシ又はＯＣＦ_３を示し、ｍ＝１であり、Ｒ_２が一般式（２）を有する基Ｑを示し、Ｒ_３がメチル基を示し、Ｒ_４が場合により置換されていることができるピペリジン環で置換されたメチレン基を示し、［］_ｎが上記で示される通りの意味を有する式（１）を有する化合物である。

製薬学的に許容され得る塩は、当該技術分野において周知の標準的な方法を用いて、例えば本発明の化合物を適した酸、例えば無機酸、例えば塩酸と、あるいは有機酸と混合することにより得ることができる。

一般式（１）の本発明の化合物ならびにその塩は、ＯＲＬ１アゴニスト活性を有する。それらはＯＲＬ１受容体が含まれるか、あるいはそれらの受容体の操作（ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ）を介して処置され得る障害、特にこれらに限られないが急性及び慢性の痛みの状態、神経性食欲不振及び神経性過食症のような代謝障害、肥満；胃−腸障害、特に過敏性腸症候群、炎症性腸疾患（クローン病及び潰瘍性大腸炎）、下痢、便秘、内臓痛、尿路炎症、水の保持／排泄又は塩排泄の不均衡を特徴とする腎臓障害；心臓血管障害、例えば心筋梗塞、不整脈、高血圧、血栓症、貧血、動脈硬化症、狭心症、緑内障のような眼科学的障害；慢性閉塞性肺疾患、気管支炎及び嚢胞性線維症を含む呼吸障害；免疫系の疾患ならびにウイルス感染の処置において有用である。

本発明の化合物の試験管内及び生体内ＯＲＬ１受容体アゴニスト性は、下記に概述される方法を用いて決定された。

ヒトＯＲＬ１受容体に関する親和性
Ａｒｄａｔｉｅｔａｌ．著，Ｍｏｌ．Ｐｈａｒｍａｃｏｌ．，５１，１９９７年，８１６により記載されている試験管内受容体結合アッセイを用い、ヒトＯＲＬ１受容体に関する化合物の親和性を決定した。簡単に記載すると、ヒトＯＲＬ１受容体が安定して発現されるＣＨＯ（チャイニーズハムスター卵巣）−細胞から膜調製物を得た。適した緩衝液中で希釈された種々の濃度の試験−化合物の不在もしくは存在下で［^３Ｈ］−ノシセプチンと一緒に膜をインキュベーションした。非特異的結合を、１０^−６Ｍのノシセプチン
の存在下で残る結合として定義した。Ｐａｃｋａｒｄ細胞収穫器を用いてＰａｃｋａｒｄ
ＧＦ／Ｂガラス繊維フィルターを介し、氷−冷緩衝液を用いて数回洗浄する濾過により、結合放射性の遊離の放射性からの分離を行なった。液体シンチレーションカクテル（Ｍｉｃｒｏｓｃｉｎｔ０，Ｐａｃｋａｒｄ）を用い、シンチレーションカウンター（Ｔｏｐｃｏｕｎｔ，Ｐａｃｋａｒｄ）で結合放射性を測定した。測定される放射性を置換（ｄｉｓｐｌａｃｉｎｇ）試験化合物の濃度に対してプロットし、４−パラメーター論理回帰（ｆｏｕｒ−ｐａｒａｍｅｔｅｒｌｏｇｉｓｔｉｃｒｅｇｒｅｓｓｉｏｎ）により置換曲線（ｄｉｓｐｌａｃｅｍｅｎｔｃｕｒｖｅｓ）を計算し、ＩＣ_５０値、すなわち放射性リガンドの５０％が置換される置換化合物の濃度を得た。Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ式：
ｐＫ_１＝−ｌｏｇ（ＩＣ_５０／（１＋Ｓ／Ｋ_ｄ））
［式中、ＩＣ_５０は上記の通りであり、Ｓはモル／ｌで表されるアッセイで用いられる濃度［^３Ｈ］−ノシセプチン（典型的には０．２ｎＭ）であり、Ｋ_ｄはヒトＯＲＬ１受容体に関する［^３Ｈ］−ノシセプチンの平衡解離定数である（０．４ｎＭ）］
に従い、ＩＣ_５０値を放射性リガンド濃度及びヒトＯＲＬ１受容体に関するその親和性に関して修正することにより親和性ｐＫ_１値を計算した。

本発明の化合物は、上記の結合アッセイにおいてＯＲＬ１受容体に関する高い親和性を有する。この性質は、ＯＲＬ１受容体が含まれるか、又はこれらの受容体の操作を介して処置され得る障害の処置において、それらを有用なものとする。

μ−オピエート受容体に関する親和性
Ｗａｎｇｅｔａｌ．著，ＦＥＢＳＬｅｔｔｅｒｓ，３３８，１９９４年，２１７により記載されている試験管内受容体結合アッセイを用い、μ−オピエート受容体に関する化合物の親和性を決定した。簡単に記載すると、ヒトμ−オピエート受容体が安定に発現されるＣＨＯ−細胞から膜調製物を得、適した緩衝液中で希釈された種々の濃度における試験−化合物の不在又は存在下でμ−オピエート特異的リガンド［^３Ｈ］−ＤＡＭＧＯ（Ｄ−Ａｌａ^２，Ｎ−Ｍｅ−Ｐｈｅ^４，グリシノール^５−エンケファリン）と一緒にインキュベーションした。非特異的結合を、１０^−６Ｍのナロキソンの存在下で残る結合として定義した。遊離の放射性からの結合放射性の分離を上記の通りに行い、類似の方法で化合物の親和性を計算した。

本発明の化合物は、上記の結合アッセイにおいて、μ−オピエート受容体に関して低い親和性を有する。かくしてそれらがオピエート様モルヒネの場合に起こることが知られている望ましくない副作用を引き出すことは、ありそうもない。

試験管内ＯＲＬ１受容体アゴニズム
Ｇタンパク質−結合ＯＲＬ１受容体の活性化はアデニル酸シクラーゼ活性を阻害し、二次メッセンジャーｃＡＭＰの細胞内の濃度を低下させる。Ｊｅｎｃｋｅｔａｌ．著，Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ，９７，２０００年，４９３８−４９４３により記載されているアッセイを用い、ＯＲＬ１受容体への化合物の活性を測定した。それらは、それらのｐＫ_ｉ値に匹敵するｐＥＣ_５０−値を有する有力なアゴニストであることが示された。

意識のあるマウスにおけるひまし油誘導の下痢
本発明の化合物は、皮下投与後のペプチドノシセプチンがそうであるように、マウスにおけるひまし油誘導の下痢を軽減できることが示された。末梢的に投与される（ｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｌｙａｄｍｉｎｉｓｔｅｒｅｄ）ペプチドは血液脳関門を透過しないので、下痢におけるＯＲＬ１媒介の軽減は末梢的に媒介されることが示される。

使用される動物：ひまし油−誘導の下痢のモデルにおいて、雄のＮＭＲＩマウスをこのモデルのために用いた。すべての実験において、１つの群は１０〜１２匹の動物から成った。

実験法：実験の日に、マウスに化合物又はビヒクルを与えた（隔週間隔（ｂｉ−ｗｅｅｋｌｙｉｎｔｅｒｖａｌｓ））。ひまし油（体重のｋｇ当たり８ｍｌ）を３０分後に経口的に投与し、動物を個別にケージ内に、水に自由に近づけるようにして入れた。５時間後に便を集めた。この時間の間２０分毎に便の質を視覚検査により決定した。この下痢の点数は０＝排出なしから１＝正常な排出、２＝わずかに下痢、３＝中程度の下痢、４＝重度の下痢までの範囲であった。かくしてこの点数は下痢の開始及び強度を反映する。これらの実験において、平均の下痢の点数及び便の乾燥重量を決定した。

データ分析：化合物の効果を相対的な数（標準値のパーセント）として示す。実験において記録される最初のデータを、対合２側ｔ−テスト（ｐａｉｒｅｄｔｗｏｓｉｄｅｄ
ｔ−ｔｅｓｔ）により同じ動物における標準（化合物なし）と、あるいは非対合ｔ−テスト（ｎｏｎｐａｉｒｅｄｔ−ｔｅｓｔ）により標準群と比較した。ｐ＜０．０５の値を統計的に有意と理解した。

意識のあるラットにおける結腸通過
本発明の化合物は、ラットにおいて正常な結腸通過に影響しないことが示された。これは皮下投与後のペプチドノシセプチンの場合もそうであった。末梢的に投与されるペプチドは血液脳関門を透過しないので、末梢ＯＲＬ１受容体活性化は正常な胃腸通過を損なわないことが示される。対照的に、末梢μ−オピエート受容体活性化は、このモデルにおいて通過を強く損なうことができる。かくしてこのテストは、ＯＲＬ１受容体に関する本発明の化合物の選択性を示す。

使用される動物：実験のために、雄のＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙラットを用いた。すべての実験において、１つの群は１０〜１２匹の動物から成った。

実験法：実験の前に、全身麻酔下でラットに長期チタン盲腸フィステル（ｃｈｒｏｎｉｃ
ｔｉｔａｎｉｕｍｃｅｃａｌｆｉｓｔｕｌａ）を備えた。動物を手術から回復させ、１日３時間食物に自由に近づく摂食管理に慣らした。実験の日、摂食時間の後、フィステルを介して盲腸中にマーカー物質（８０％の硫酸バリウムを含有する２ｍｌの懸濁液）を注入し、動物に化合物又はビヒクルを与えた。続いてそれらを代謝ケージ内に入れ、便ペレットを１時間間隔で２１時間、自動収集システムを用いて集めた。この時間の間、動物は水に自由に近づけた。便中の硫酸バリウム含有量を放射線透過写真により分析し、便を秤量した。時間及び便の量に対する便中のマーカー含有量の関数は、硫酸バリウムの平均保持時間、すなわち結腸通過時間の分析を可能にした。ＢａＳＯ_４含有ペレットの平均保持時間及び合計便排出を決定した。

データ分析：化合物の効果を相対的な数（標準値のパーセント）として示す。実験において記録される最初のデータを、対合２側ｔ−テストにより同じ動物における標準（化合物なし）と比較した。ｐ＜０．０５の値を統計的に有意と理解した。結腸通過モデルにおいて、標準データは２つの標準実験（化合物の前及び後、週間隔）の平均を示す。
意識のあるラットにおける酢酸誘導内臓過敏症
本発明の化合物は、皮下投与の後にペプチドノシセプチンがそうであるように、ラットにおいて内臓過敏症を軽減できることが示された。末梢に投与されるペプチドは血液脳関門を透過しないので、内臓過敏症におけるＯＲＬ１媒介の軽減は末梢的に媒介されることが示される。

使用される動物：体重：２００〜２５０ｇの範囲内の成熟した雌のＳｐｒａｇｕｅＤａｗｌｅｙラット。１つの群は５〜１０匹の動物から成る。

実験法：実験の前に２４時間、動物を水に自由に近づけるようにして飢えさせた。酢酸（０．６％，１．５ｍｌ）を結腸内に注入した（肛門に１０ｃｍ近い方（１０ｃｍｐｒｏｘｉｍａｌｔｏｔｈｅａｎｕｓ））。５０分後、５ｃｍの長さのゴムのバルーン（６〜７ｍｌ体積）を遠位結腸（ｄｉｓｔａｌｃｏｌｏｎ）中に直腸を介して（ｒｅｃｔａｌｌｙ）挿入し、取り付けられている管をラットの尾にテーピングすることにより固定した。バルーン圧を１００ミリバールに１０分間設定することにより、結腸直腸拡張を行なった。この時間の間、視覚検査により腹の収縮の数を監視した。１０回より多い腹の収縮で結腸直腸拡張に反応する動物にみにおいて、実験を続けた。これらの動物に１回の投薬量の物質又はビヒクルを与え、投与から３０、６０、９０及び１２０分後に結腸直腸拡張案を繰り返した。

データ分析：結果を平均±ＳＤとして示す。物質又はビヒクルの投与から３０、６０、９０及び１２０分後における腹の収縮の数ならびに平均値（３０〜１２０分）を、対合２側ｔ−テストにより先行値（ｐｒｅｖａｌｕｅｓ）と比較した。３０、６０、９０及び１２０分における腹の収縮の相対的数（先行値の％）及び相対的平均値（３０〜１２０分）を、非対合２側ｔ−テスト（ｕｎｐａｉｒｅｄｔｗｏｓｉｄｅｄｔ−ｔｅｓｔｓ）により物質及びビヒクルの間で比較した。ｐ＜０．０５の値を統計的に有意と理解した。

生体内ＯＲＬ１受容体アゴニズム：ＣＮＳ−透過の欠如
本発明の化合物のほとんどは、ＶａｎｄｅｒＰｏｅｌｅｔａｌ．著，Ｐｓｙｃｈｏｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，９７，１９８９年，１４７−１４８により記載されている成人ストレス−誘導超音波発声（ＡＵＶ）法（Ａｄｕｌｔｓｔｒｅｓｓ−ｉｎｄｕｃｅｄｕｌｔｒａｓｏｎｉｃｖｏｃａｌｉｓａｔｉｏｎｐｒｏｃｅｄｕｒｅ）において活性がないことが示された。これは、化合物が血液−脳−関門を透過しないことを示す。ペプチドノシセプチンはこのアッセイにおいても活性であるが、その効果を示すために、それは脳内に直接投与される必要がある（脳室内注入により）。

中間体及び最終的生成物の合成の実施例
（−）−トランス−２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．１．１］ヘプト−２−イル）−エタノール（５）

ミルタニル（ｍｙｒｔａｎｙｌ）ブロミド（２）
トリフェニルホスフィン（１１６ｇ，０．４４モル）をアセトニトリル（１リットル）中に溶解し、Ｎ_２雰囲気下に、氷浴中で冷却した。臭素（２２．５ｍｌ，０．４４モル）を滴下した。発熱反応の温度を１０℃より低く保った。完全な滴下の後、氷浴を除去し、
アセトニトリル（２５０ｍｌ）中に溶解された（−）−トランス−ミルタノール（１）（２．６８６ｇ，０．４４モル）をゆっくり加えた。完全な添加の後、明黄色の溶液を、Ｄｅａｎ−Ｓｔａｒｋ装置を用いて３時間還流させた。反応の間、水トラップ中の溶媒を２０回除去した（合計で約２００ｍｌの溶媒）。ＧＣ分析は、出発材料の完全な転換を明らかにした。混合物を蒸発乾固した。粗混合物をシリカカラム上で精製した（溶離剤：ジクロロメタン／ジエチルエーテル１／１，ｖ／ｖ）。これは８７．８ｇのブロミド２（９１％）を明黄色の油として生じた。

ミルタニルシアニド（３）
ミルタニルブロミド（２）（８７．８ｇ，０．４１モル）をジメチルホルムアミド（１リットル）中に溶解した。シアン化ナトリウム（４０ｇ，０．８１モル）を加え、混合物を還流において５時間攪拌した。ＧＣ分析は完全な転換を明らかにした。混合物を水（３リットル）で希釈し、ｔｅｒｔ．−ブチルメチルエーテル（ＴＢＭＥ，３ｘ１．５リットル）で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濃縮乾固した。粗混合物をシリカカラム上で精製し（溶離剤：ヘプタン／ジクロロメタン，１／１，ｖ／ｖ）、５２．４ｇ（８０％）のシアニド（３）を無色の液体として与えた。

エチルエステル（４）
エタノール（５００ｍｌ）を氷浴中で冷却した。硫酸（１９０ｍｌ）を滴下した。エタノール（１００ｍｌ）中に溶解されたシアニド（３）（５２．４ｇ，０．３２モル）を加え、混合物を還流において終夜攪拌した。ＧＣ分析は完全な付加を明らかにした。混合物を冷却し、水（１．５リットル）を加えた。混合物をＴＢＭＥ（３ｘ１．５リットル）で抽出した。有機層をＮａＨＣＯ_３（飽和，１リットル）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濃縮した。収量：ほとんど無色の液体としての５４．２ｇのエステル５（８０％）。粗生成物（４）を精製せずに次の反応において用いた。

（−）−トランス−２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．１．１］ヘプト−２−イル）−エタノール（５）
テトラヒドロフラン（１リットル）中の水素化アルミニウムリチウム（２０ｇ，０．５２モル）の懸濁液に、テトラヒドロフラン（５００ｍｌ）中に溶解されたエステル（４）（５４．２ｇ，０．２６モル）を加えた。完全な添加の後、混合物を１時間還流させた。ＧＣ分析は出発材料の完全な転換を明らかにした。混合物を氷浴中で冷却し、ＨＣｌ（１Ｍ，１リットル）を注意深く加えた。完全な添加の後、混合物を水（１リットル）で希釈し、ＴＢＭＥ（３ｘ１．５リットル）で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濃縮乾固した。粗混合物をＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留（沸点８５℃，３．１０^−２ミリバール）により精製した。収量：無色の油としての３５．９ｇの化合物１（６５％）。
（＋）−トランス−２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．１．１］ヘプト−２−イル）−エタノール（１０）

ミルタニルメシレート（７）
１８．１ｇ（０．１２モル）の（＋）−トランス−ミルタノール（６）を、４００ｍｌのＤＣＭ中の１８．５ｍｌのメシルクロリド（２当量，０．２４モル，２７．５ｇ）及び４９ｍｌのピリジン（５当量，０．６０モル，４７．５ｇ）の溶液に加えた。反応混合物を室温で終夜攪拌した。水を加え、反応混合物を１時間攪拌した。有機層を抽出し、水層をさらに２回抽出した。合わせた有機層を洗浄し（飽和ＮａＨＣＯ_３，水，ブライン）、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、真空中で蒸発させて２５．９ｇ（９１％）のメシレート（７）を無色の油として与えた。

ミルタニルシアニド（８）
ミルタニルメシレート（７）（２５．９ｇ，０．１１モル）をＤＭＳＯ（２５０ｍｌ）中に溶解した。シアン化カリウム（４当量，２９．２ｇ，０．４５モル）を加え、混合物を７０℃で２日間攪拌した。ＧＣ分析は完全な転換を明らかにした。混合物を水（７５０ｍｌ）で希釈し、ＴＢＭＥ（３ｘ３００ｍｌ）で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濃縮乾固し、１７．７ｇ（定量的収量）のシアニド（８）を無色の油として与えた。

エチルエステル（９）
エタノール（２００ｍｌ）を氷浴中で冷却した。硫酸（８０ｍｌ）を滴下した。エタノール（４０ｍｌ）中に溶解されたシアニド（８）（１７．７ｇ，０．１１モル）を加え、混合物を還流において終夜攪拌した。ＧＣ分析は完全な付加を明らかにした。混合物を冷却し、水（１リットル）を加えた。混合物をＴＢＭＥ（３ｘ５００ｍｌ）で抽出した。有機層をＮａＨＣＯ_３（飽和，５００ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濃縮した。収量：黄色の油としての２０．４ｇのエステル（９）（８８％）。粗生成物（９）を精製せずに次の反応において用いた。

（＋）−トランス−ジヒドロノポール（１０）
テトラヒドロフラン（３５０ｍｌ）中の水素化アルミニウムリチウム（７．４ｇ，０．１９モル）の懸濁液に、テトラヒドロフラン（２００ｍｌ）中に溶解されたエステル（９）（２０．１ｇ，０．０９モル）を加えた。完全な添加の後、混合物を２時間還流させた。混合物を氷浴中で冷却し、ＨＣｌ（１Ｍ，１リットル）を注意深く加えた。完全な添加の後、混合物を水（３００ｍｌ）で希釈し、ＴＢＭＥ（３ｘ５００ｍｌ）で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濃縮乾固した。粗混合物をＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留（沸点８５℃，８．１０^−２ミリバール）により精製した。収量：無色の油としての９．２ｇの化合物（１０）（６１％）。

（−）−シス−２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．１．１］ヘプト−２−イル）−エタノール（１１）
出発材料として（−）−β−ピネンを用いるシス類似体の合成は、Ｊ．Ａｍｅｒ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．６８，１９４６年，６３８及び米国特許第２，４２７，３４３，２，４２７，３４４及び２．４２７．３４５号明細書に記載されている。
（＋）−シス−２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．１．１］ヘプト−２−イル）−エタノール（１８）

（＋）−β−ピネン（１３）
乾燥ガラス器中で、カリウムｔ−ブチルオキシド（ＫＯｔ−Ｂｕ，４９．４ｇ；０．４４モル）をｎ−ＢｕＬｉ（１７６ｍｌ；ヘキサン中の２．５Ｍ）に加えた。懸濁液を−７８℃に冷却した。（＋）−α−ピネン（１２）（５０ｇ；０．３７モル）を滴下した。反応混合物を室温に温め、４５時間攪拌した。反応混合物を−７８℃に冷却し、Ｂ（ＯＭｅ）_３（１３７ｍｌ；１．２０モル）を滴下した。反応混合物を室温に温めた（発熱）。１０％ＨＣｌ（水溶液，２５０ｍｌ）を滴下し、反応混合物を１時間攪拌した。層を分離させ、水層をヘプタンで抽出した（２ｘ２００ｍｌ）。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、蒸発乾固して３６．７ｇの黄色の油を与えた。粗（ｒａｗ）生成物を、Ｋｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留（８〜１２ミリバール；５０〜６０℃）を用いて精製し、３６．６ｇ（０．２７モル，収率＝７３％，純度８８％）の（＋）−β−ピネン（１３）を無色の油として与えた。

ミルタノール（１４）
（＋）−β−ピネン（１３）（３６．６ｇ；０．２７モル）をＴＨＦ（１００ｍｌ）中に溶解し、０℃に冷却した。ＴＨＦ中のＢＨ_３・ＤＭＳ（２Ｍ；４７．３ｍｌ）を滴下した。反応混合物を０．５時間攪拌した。エタノール（９０ｍｌ）を加えた。１ＭＮａＯＨ（水溶液）（９５ｍｌ）を加えた。反応混合物を０℃に冷却した。温度が３５℃より高く上昇しないようにしながら、３３ｍｌの３０％Ｈ_２Ｏ_２を滴下した。反応混合物を１時間還流させ、水中に（１リットル）注いだ。溶液をＴＢＭＥで抽出した。合わせた有機層を水及びブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、蒸発乾固した。Ｋｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留（８〜１２ミリバール，５０〜６０℃）を用いて残るα−ピネンを蒸留し、３８．６ｇ（０．２５モル，収率＝９３％）の（＋）−シス−ミルタノール（１４）を無色の油として与えた。

ミルタニルメシレート（１５）
１５．０ｇ（０．１０モル）の（＋）−シス−ミルタノール（１４）を、３００ｍｌのＤＣＭ中の１５ｍｌのメシルクロリド（２当量，０．２０モル）及び４０ｍｌのピリジン（５当量，０．５０モル）の溶液に加えた。反応混合物を室温で終夜攪拌した。水を加え、反応混合物を１時間攪拌した。有機層を抽出し、水層をさらに２回抽出した。合わせた有機層を洗浄し（飽和ＮａＨＣＯ_３，水，ブライン）、乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、真空中で蒸発させて２１．６ｇ（収率＝９３％）のメシレート（１５）を無色の油として与えた。

ミルタニルシアニド（１６）
ミルタニルメシレート（１５）（２１．６ｇ，０．０９３モル）をＤＭＳＯ（２３０ｍ
ｌ）中に溶解した。シアン化カリウム（４当量，２４．２ｇ，０．３７モル）を加え、混合物を７０℃で８日間攪拌した。ＧＣ分析は完全な転換を明らかにした。混合物を水で希釈し、ヘプタンで抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濃縮乾固し、１５．８ｇ（定量的）のシアニド（１６）を無色の油として与えた。

エチルエステル（１７）
エタノール（１５０ｍｌ）を氷浴中で冷却した。硫酸（６０ｍｌ）を滴下した。エタノール（３０ｍｌ）中に溶解されたシアニド（１６）（１６ｇ）を加え、混合物を還流において終夜攪拌した。ＧＣ分析は完全な転換を明らかにした。混合物を冷却し、水（１リットル）を加えた。混合物をＴＢＭＥ（３ｘ５００ｍｌ）で抽出した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ_３（水溶液，５００ｍｌ）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、蒸発乾固した。収量：黄色の油としての２０．６ｇのエステル（１７）（定量的）。粗生成物（１７）を精製せずに次の反応において用いた。

（＋）−シス−ジヒドロノポール（１８）
テトラヒドロフラン（４００ｍｌ）中の水素化アルミニウムリチウム（８．３ｇ，０．２２モル）の懸濁液に、テトラヒドロフラン（２００ｍｌ）中に溶解されたエステル（１７）（２３．６ｇ，０．１１モル）を加えた。完全な添加の後、混合物を２時間還流させた。混合物を氷浴中で冷却し、ＨＣｌ（１Ｍ，１リットル）を注意深く加えた。完全な添加の後、混合物を水（３００ｍｌ）で希釈し、ＴＢＭＥ（３ｘ５００ｍｌ）で抽出した。有機層をブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濃縮乾固し、黄色の油（１３．４ｇ）を与えた。粗混合物をＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留（沸点８５℃，８．１０^−２ミリバール）により精製した。収量：無色の油としての８．７ｇ（５１ミリモル；収率＝４７％）の化合物（１８）。
１−メシル−２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．１．１］ヘプト−２−イル）−エタノール（２０）（ジヒドロノポールのすべての立体異性体に関して）

０℃において、３００ｍｌのＣＨ_２Ｃｌ_２中の６７ｇ（０．４モル）の（−）−シス−２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．１．１］ヘプト−２−イル）−エタノール（１９）の懸濁液に１３９ｍｌ（１モル）のトリエチルアミンを加えた。この混合物に、１００ｍｌのジクロロメタン中の５５．２ｇ（０．４８モル）のメシルクロリドを滴下した。室温で５時間の後、反応は完了し、３００ｍｌの１ＮＨＣｌ水溶液を加えた。分離の後、水層をジクロロメタンで２回洗浄し、合わせた有機層を水で洗浄し、硫酸マグネシウム上で乾燥し、真空中で濃縮して９１．６ｇ（０．３７モル９１％）のオレンジ色で油性の粗生成物を与えた。この粗材料をさらに精製せずに次の段階に用いた。
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−（３−メチルアミノ−プロピル）−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン（２４）

８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン（２２）［下記の表中の実施例番号１］
スピロ化合物（２１）（３１０ｇ；１．３４モル）及び（ジ）ヒドロノポールメシレート（２０）（３７１ｇ；１．５１モル）をメチルエチルケトン（ＭＥＫ，１５リットル）中に溶解した。炭酸カリウム（７３５ｇ；５．３３モル）及びヨウ化ナトリウム（２２６ｇ；１．５１モル）を加え、混合物を終夜還流させた。反応混合物の冷却後、溶媒を蒸発させた。残留物をＣＨ_２Ｃｌ_２（５リットル）中に取り上げ、水（４リットル）と一緒に振った。層を分離させ、有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、溶媒を蒸発させた。残る固体をＥｔ_２Ｏ（３リットル）で洗浄し、濾過した。濾液を蒸発させ、Ｅｔ_２Ｏ（３００ｍｌ）で洗浄した。固体を濾過した。（４６６．３ｇ；１．２２モル；９１％）。
３−（３−クロロ−プロピル）−８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン（２３）
ＴＨＦ（１５００ｍｌ）を氷／水浴中で冷却した。スピロ化合物（２２）（１５０．８ｇ；０．４０モル）及びカリウムｔｅｒｔ−ブトキシド（４９ｇ；０．４４モル）を加え、得られる混合物を０℃で３０分間攪拌した。混合物は透明になった。ＴＨＦ（１５０ｍｌ）中の１−ブロモ−３−クロロプロパン（４３ｍｌ；０．４４モル）を０℃において溶液に滴下した。完全な滴下の後、冷却浴を除去し、溶液を５０℃で４時間攪拌した。冷却後、混合物を飽和ＫＨＳＯ_４（水溶液，１０００ｍｌ）中に注ぎ、ＥｔＯＡｃ（５００ｍｌ）で希釈した。層を分離させ、水層をＥｔＯＡｃ（３ｘ７５０ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層を水及びブラインで洗浄した（それぞれ１ｘ５００ｍｌ）。Ｎａ_２ＳＯ_４上における乾燥の後、溶媒を蒸発させ、黄色の油を与えた（２０５．６ｇ；０．４５モル；定量的収量）。

８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−（３−メチルアミノ−プロピル）−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン（２４）［下記の表中の実施例番号１３］
粗スピロ化合物（２３）（１６２．８ｇ，０．３６モル）をメチルアミン／ＥｔＯＨ溶液（Ｆｌｕｋａ，８Ｍ；１１５４ｍｌ；９．２３モル）中に溶解した。ヨウ化ナトリウム（２．１６ｇ；０．０１４モル）を加え、溶液をＮ_２−雰囲気下に、７０℃で３日間攪拌した。冷却後、反応混合物を水及びＥｔＯＡｃ（それぞれ５００ｍｌ）で希釈した。水層をＥｔＯＡｃ（３ｘ８００ｍｌ）で抽出した。有機層をブライン（５００ｍｌ）で洗浄した。Ｎａ_２ＳＯ_４上における乾燥の後、溶媒を蒸発させて黄色の油を与えた。この油をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２；ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ９０：１０；１％の７Ｎ
ＮＨ_３／ＭｅＯＨを含有する）により精製し、９３％の純度（ＨＰＬＣ／ＭＳに従い）を有する３０ｇの（２４）及び９６％の純度を有する８５ｇの（２４）を与えた（１１５ｇ；０．２５モル；７０％）。
スピロコア８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン（２２）中のフェニル環の置換パターンの変形

（上記のスキーム中で、ＴＭＳＣＮ＝トリメチルシリルシアニド）
１−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．１．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−ピペリジン−４−オン（２６）：
６１．１ｇ（０．４０モル）のピペリドン水和物塩酸塩（２５）、１１２．８ｇ（０．４６モル）のジヒドロノポールメシレート（２０）、６９．０ｇ（０．４６モル）のＮａＩ、２７３ｇ（１．９７モル）のＫ_２ＣＯ_３及び４．３リットルのＭＥＫの混合物を終夜還流させた。混合物を室温に冷却し、真空中で濃縮した。残留物をジクロロメタン（１．５リットル）及び水（１．５リットル）中に溶解し、層を分離させた。有機層を水（１リットル）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥した。層を真空中で濃縮し、１１３ｇの粗生成物を与え、それをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２，ヘプタン：ＥｔＯＡｃ，６：１→１：１）により精製し、７７．７ｇ（０．３１モル，７８％）の化合物（２６）をオレンジ色の油として与えた。

１−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］
−４−（３−フルオロ−フェニルアミノ）−ピペリジン−４−カルボニトリル（２８ａ）：
６５ｍｌの酢酸中の２０．０ｇ（８０．２ミリモル）の（２６）及び８．４ｍｌ（８７ミリモル）の３−フルオロアニリン（２７ａ）の溶液を、冷水浴を用いて冷却した。温度を４０℃より低く保ちながら、１０．７ｍｌ（８０．２ミリモル）のトリメチルシリルシアニドを１０分間かけて滴下した。混合物を室温で２時間攪拌し、アンモニア水（８０ｍｌ）及び氷（８０ｇ）の混合物中に注いだ。濃ＮＨ_３を用いてｐＨを１０に調整した。混合物をクロロホルムで抽出した（３ｘ２００ｍｌ）。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空中で濃縮して４０．０ｇの粗生成物を与え、それをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２，ヘプタン：ＥｔＯＡｃ，１：１）により精製し、２８．７ｇ（７７．７ミリモル，９７％）の（２８ａ）を与えた。粗生成物を精製せずに次の段階において用いることもできる。

１−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−４−（３−フルオロ−フェニルアミノ）−ピペリジン−４−カルボン酸アミド（２９ａ）：
２８．７ｇ（７８ミリモル）の（２８ａ）、１３５ｍｌのギ酸及び１３５ｍｌの無水酢酸の混合物を室温で１日攪拌した。^１Ｈ−ＮＭＲ及びＭＳにより反応を監視した。完全な反応の後、反応混合物を氷−水（８００ｍｌ）中に注いだ。３３％ＮａＯＨ（水溶液）の添加によりｐＨを１０に調整した。水層をＤＣＭ（３ｘ１リットル）で抽出した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空中で濃縮した。残留物を５５０ｍｌのｔｅｒｔ．−ブチルアルコール、４５ｍｌの水及び４５ｍｌの濃アンモニア水中に溶解した。９０ｍｌの３５％過酸化水素を室温で滴下した。混合物を終夜攪拌した。ＴＬＣにより反応を監視した。９００ｍｌの水を加え、混合物をＤＣＭ（３ｘ５００ｍｌ）で抽出した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空中で濃縮して２９．３ｇ（７６ミリモル，９８％）の（２９ａ）を黄色の固体として与え、それを精製せずに次の段階において用いた。

８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−１−（３−フルオロ−フェニル）−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン（３０ａ）：［下記の表中の実施例番号９］
４００ｍｌのホルムアミド中の２９．３ｇ（７６ミリモル）の（２９ａ）の溶液を２００℃で２時間加熱した。溶液は黄色から黒色に変化した。^１Ｈ−ＮＭＲにより反応を監視した。反応の完了の後、混合物を室温に冷却し、氷−水（８００ｇ）中に注いだ。
混合物をＤＣＭ（６ｘ１リットル）で抽出した。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空中で濃縮した。残留物を１．２リットルのメタノール中に溶解し、４．３ｇ（１１４ミリモル）の水素化ホウ素ナトリウムを分けて加えた。混合物を室温で１時間、及び６０℃でさらに１時間攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、２５ｍｌの水でクエンチングした。溶媒を真空中で蒸発させた。残留物を７５０ｍｌのアンモニア中に溶解し、ＤＣＭで抽出した（７ｘ１．５リットル）。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、真空中で濃縮して２４．８ｇの粗生成物を与え、それをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２，ヘプタン：ＥｔＯＡｃ，１：１→１：３）により精製した。溶離した生成物のＥｔ_２Ｏを用いる磨砕は３．４４ｇ（８．６ミリモル，化合物（２６）から１１．３％）の化合物（３０ａ）を白色の固体として与えた。

８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−１−（３−メトキシ−フェニル）−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン（３０ｂ）：［下記の表中の実施例番号８］
６８．０ｇ（０．２７モル）の（２６）から出発して手順（ｓｅｑｕｅｎｃｅ）を繰り返した；化合物（３０ｂ）をカラムクロマトグラフィー及びジエチルエーテルを用いる磨砕により精製し、１３．９ｇ（３４ミリモル，（２６）からの収率１２％）をオフホワイト色の固体として与えた。

８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］
−１−（３−クロロ−フェニル）−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン（３０ｃ）：［下記の表中の実施例番号７］
６７．４ｇ（０．２７モル）の（２６）から出発して手順を繰り返した；化合物（３０ｃ）をカラムクロマトグラフィー及びジエチルエーテルを用いる磨砕により精製し、７．４２ｇ（１７．８ミリモル，（２６）からの収率６．６％）をオフホワイト色の固体として与えた。

８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−１−（３−トリフルオロメチル−フェニル）−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン（３０ｄ）：［下記の表中の実施例番号１０］
化合物（３０ｄ）のために同じ手順を行なったが、所望の生成物の代わりに化合物（２９ｄ）が単離された。従って手順を部分的に繰り返した。ギ酸及び無水酢酸を用いて化合物をホルミル化し、ホルムアミド中で加熱し、最後に水素化ホウ素ナトリウムを用いて還元した。粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２，ＥｔＯＡｃ）及び続いてジエチルエーテルを用いる磨砕により精製し、７．３９ｇ（（２６）からの６．６％の全体的収率）を白色の固体として与えた。

８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−１−（４−フルオロ−フェニル）−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン（３０ｅ）：［下記の表中の実施例番号５］
４５．０ｇ（０．１８モル）の（２６）から出発して手順を繰り返した；化合物（３０ｅ）をカラムクロマトグラフィー及びジエチルエーテルを用いる磨砕により精製し、９．８２ｇ（２４．５ミリモル，（２６）からの収率１３．６％）を灰色の固体として与えた。

８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−１−（４−メトキシ−フェニル）−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン（３０ｆ）：［下記の表中の実施例番号６］
４５．０ｇ（０．１８モル）の（２６）から出発して手順を繰り返した；化合物（３０ｆ）をカラムクロマトグラフィー及びジエチルエーテルを用いる磨砕により精製し、８．９４ｇ（２１．７ミリモル，（２６）からの収率１２．１％）を白色の固体として与えた。

１−オキサ−６−アザ−スピロ［２．５］オクタン−６−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３２）：
５００ｍｌのアセトニトリル中の４４．９ｇ（０．２２５モル）の４−オキソ−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３１）の溶液に、５９．５ｇ（０．２７モル）のトリメチルスルホキソニウムヨーダイド及び１８．９ｇ（０．３３８モル）の微粉砕された水酸化カリウムを連続的に加えた。反応混合物を窒素雰囲気下に、室温において２日間激しく攪拌した。完全な転換の後、溶媒を真空中で蒸発させ、残留物をジクロロメタン中に取り上げた。有機層をクエン酸水溶液で洗浄し（６ｘ）、硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で濃縮した。この粗生成物をさらなる精製なしで次の段階に用いた（４３．５ｇ，０．２０４モル，収率９０．６％）。

４−｛［（３−｛８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−４−オキソ−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デシ−３−イル｝プロピル）−メチル−アミノ］−メチル｝−４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３３）：［下記の表中の実施例番号３５］
２．６ｇ（５．７４ミリモル）の化合物（２４）をフラスコ中に入れ、２０ｍｌのエタノールで希釈した。この溶液に１．８８ｇ（８．８１ミリモル）のエポキシド（３２）を加え、ＴＬＣが完全な転換を示すまで、混合物を加熱還流した。仕上げのために、溶媒を蒸発させ、酢酸エチルを用いて残留物を取り上げた。炭酸カリウム水溶液を用いる洗浄、硫酸ナトリウム上における乾燥及び真空中における濃縮の後、フラッシュカラムクロマトグラフィーを介して粗材料を精製し、明黄色の粘性の油を与えた（３．５１ｇ，５．１５ミリモル，収率８９．８％）。

８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛３−［（４−ヒドロキシ−ピペリジン−４−イルメチル）−メチル−アミノ］−
プロピル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン（３４）：［下記の表中の実施例番号３７］
Ｂｏｃ−誘導体（３３）（２．７９ｇ，４．１９ミリモル）をテトラヒドロフラン（２５ｍｌ）中に溶解した。この溶液に２ｍｌの濃ＨＣｌ水溶液を加え、得られる混合物を室温で終夜攪拌した。ＴＬＣ分析が完全な転換を示した後、溶媒を減圧下で除去し、得られる残留物を酢酸エチル中に溶解した。炭酸カリウム溶液を用いる洗浄、硫酸ナトリウムを用いる有機層の乾燥及び真空中における濃縮は、純粋な表題化合物を明黄色の粘性の油として与えた（２．３７ｇ，３．８ミリモル，収率９０．７％）。

４−［（ベンジル−メチル−アミノ）−メチル］−４−ヒドロキシ−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３５）
エポキシド（３２）（４６ｇ，２１６ミリモル）をジオキサン（３００ｍｌ）中に溶解した。ベンジルメチルアミン（７５ｍｌ，５８３ミリモル）を加え、混合物を９０時間還流において攪拌した。ＴＬＣ分析は完全な転換を明らかにした。混合物を蒸発乾固した。過剰のベンジルメチルアミンを真空中における蒸発により除去した（０．０５ミリバール，８０℃）。収量：オレンジ色の油としての６９．３ｇのアミノアルコール（３５）（９６％）。

４−［（ベンジル−メチル−アミノ）−メチル］−４−メトキシ−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３６）
アルコール（３５）（６９．３ｇ，２００ミリモル）をジメチルホルムアミド（５００
ｍｌ）中に溶解した。ペンタンで洗浄されたＮａＨ（９．２ｇ，２３０ミリモル）を５回に分けて３０分かけて加えた。完全な添加の後、混合物を周囲温度で４５分間攪拌した。ヨウ化メチル（１４．８ｍｌ，２４０ミリモル）を１．５分かけて加えた。混合物を周囲温度で１．５時間攪拌した。ＴＬＣ分析は、約８０〜９０％の転換を明らかにした。追加のＮａＨ，０．８ｇ，２０ミリモル）及びヨウ化メチル（１．２ｍｌ，２０ミリモル）を加え、混合物を周囲温度でさらに２時間攪拌した。過剰のＮａＨを水（１００ｍｌ）で破壊し、混合物をさらに水（３．５リットル）で希釈した。混合物を酢酸エチル（２ｘ１リットル，５００ｍｌ）で抽出した。有機層をブライン（１リットル）で洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４上で乾燥し、濃縮乾固した。微量のジメチルホルムアミドを真空中における蒸発（０．４ミリバール，８０℃）により除去した。残る混合物をシリカ上で精製した（溶離剤：ヘプタン／酢酸エチル，４／１から３／１，ｖ／ｖ）。収量：明黄色の油としての５５．２ｇのアミン（３６）（８０％）。
４−メトキシ−４−メチルアミノメチル−ピペリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチル

エステル（３７）
アミン（３６）（５５ｇ，１５８ミリモル）を酢酸エチル（５００ｍｌ）中に溶解した。Ｐｄ−Ｃ（１０％，湿潤，５ｇ）を加え、混合物を水素雰囲気下（１バール）で２３時間攪拌した。ＴＬＣ分析は不完全な転換を明らかにした。追加のＰｄ−Ｃ（２．５ｇ）を加え、混合物をＨ_２（１バール）下で１１０時間攪拌した。ＮＭＲ分析は完全な転換を明らかにした。混合物をセライト上で濾過し、セライト収穫物を酢酸エチルで洗浄し、濾液を蒸発乾固した。残留物を蒸留（バルブツウバルブ（ｂｕｌｂｔｏｂｕｌｂ），０．０４ミリバール，１３０℃）により精製し、３５ｇの化合物（３７）（８６％）を無色の油として与えた。

塩素（２３）及びアミン（３６）を用いて出発する８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛３−［（４−メトキシ−ピペリジン−４−イルメチル）−メチル−アミノ］−プロピル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン３９［下記の表中の実施例番号４５］の合成を下記に記載する通りに行なった（一般的方法）。
出発材料として８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−（２−メチルアミノ−エチル）−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オンを用いるライブラリ設計

アミドライブラリ，方法Ｉ：
Ｎ−メチルアミン（４０）（１．８３２ｇ，４．２４ミリモル）を１７０ｍｌのジクロロメタン中に溶解した。このコア溶液を用い、以下の方法で種々の酸塩化物溶液を用いてアミドを製造した：２ｍｌのコア溶液（０．０５ミリモルの（４０））をポリマー結合モルホリン（０．１６２ミリモル）で処理した。２０分の攪拌の後、室温で２ｍｌのジクロロメタン中の対応する酸塩化物（０．０６ミリモル）の溶液を加え、室温で攪拌を１日続けた。ＴＬＣ分析により反応を監視した。残る酸塩化物及びＮ−メチルアミン誘導体を除去するために、それぞれポリマー結合トリスアミン及びイソシアナート試薬（両方とも掃去剤として用いられる）を加えた。再び室温で終夜攪拌を続けてから、濾過によりポリマ
ーを除去した。濾液を減圧下で濃縮した。この案を用い、６９個の化合物が合成された。それぞれの合成されるアミドのヒトＯＲＬ１受容体への親和性を試験管内結合アッセイにおいて測定した。

アミドライブラリ，方法ＩＩ：
コアの倍液（ＴＨＦ中の０．２５Ｍ）の２００μｌに、酸塩化物の倍液（ＴＨＦ中の０．２５Ｍ）の２００μｌを加え、続いて５０μｌのトリエチルアミン溶液（ＴＨＦ中の１．０Ｍ）を加えた。３０℃で終夜（１７時間）振った後、溶媒を蒸発させ、粗生成物を分析のためにＤＭＳＯ中に取り上げた。（注意：不溶性の試薬を手で加えた）。この案を用い、２６個の化合物が合成された。それぞれの合成されるアミドのヒトＯＲＬ１受容体への親和性を試験管内受容体結合アッセイにおいて測定した。

エポキシド開環ライブラリ：
Ｎ−メチルアミン（４０）（１．３１６ｇ，３．０ミリモル）を１２０ｍｌのイソプロピルアルコール中に溶解した。このコア溶液を用い、以下の方法で種々のエポキシド溶液を用いてアミノアルコールを製造した：２ｍｌのコア溶液（０．０５ミリモルの（４０））に２ｍｌのイソプロピルアルコール中の対応するエポキシド（０．０７５ミリモル）の溶液を加えた。この混合物を８０℃に２日間加熱した。ＴＬＣ分析を用いて反応を監視した。仕上げのために、それぞれポリマー結合トリスアミン及びイソシアナート試薬（両方とも掃去剤として用いられる）を加えた。再び室温で２日間攪拌を続けてから、簡単な濾過によりポリマーを除去した。濾液を減圧下で濃縮した。この案を用い、２７個の化合物が合成された。それぞれの合成されるアミノアルコールのヒトＯＲＬ１受容体への親和性を試験管内受容体結合アッセイにおいて測定した。

ウレアライブラリ：
コアの倍液（ＴＨＦ中の０．２５Ｍ）の２００μｌに、ＴＨＦ中のイソシアニドの倍液（０．２５Ｍ）の２００μｌを加えた。ビンにキャップをし、３０℃で終夜（１７時間）振った後、溶媒を蒸発させ、粗生成物を分析のためにＤＭＳＯ中に取り上げた。この案を用いて７１個の化合物が合成された。

スルホンアミドライブラリ：
ＴＨＦ中のコアの倍液（０．２５Ｍ）及びＴＨＦ中の塩化スルホニルの倍液（０．２５Ｍ）を調製した。２００μｌのコア溶液に２００μｌの塩化スルホニルを加え、続いてＴＨＦ中の１．０ＭＤＩＰＥＡ溶液の５０μｌを加えた。ビンにキャップをし、３０℃で１６時間加熱した。生成物をカチオン交換固相抽出（ＳｏｌｉｄＰｈａｓｅＥｘｔｒａｃｔｉｏｎ）により精製した。溶媒を蒸発させ、粗生成物を分析のためにＤＭＳＯ中に取り上げた。この案を用いて６９個の化合物が合成された。

アルキル化ライブラリ：
ＤＭＦ中のコアの倍液（０．２５Ｍ）及びＤＭＦ中のハライドの倍液（０．２５Ｍ）を調製した。２００μｌのコア溶液に、１当量のＫＩを含む２００μｌのハライド溶液を加え、続いて５０μｌのジイソプロピルエチルアミン溶液（１．０Ｍ）を加えた。ビンにキャップをし、１７時間加熱した。特異的な修正：アルファ−ハロケトンは３０℃において；他は６０℃において。生成物をカチオン交換固相抽出により精製した。溶媒を蒸発させ、粗生成物を分析のためにＤＭＳＯ中に取り上げた。この案を用いて６１個の化合物が合成された。

カルバメートライブラリ：
テトラヒドロフラン中のコアの溶液（２００μＬ，０．２５Ｍ）に、ＴＨＦ中のジイソプロピルエチルアミンの溶液（５０μＬ，２Ｍ）を加え、続いてＴＨＦ中のクロロホルメートの倍液（２００μＬ，０．２５Ｍ）を加えた。ビンにキャップをし、３０度で２４時間振った。生成物をカチオン交換固相抽出により精製した。溶媒を蒸発させ、粗生成物を分析のためにＤＭＳＯ中に取り上げた。この案を用いて２１個の化合物が合成された。

ｔｅｒｔ−ウレアライブラリ：
方法：
カルバモイルクロリド及び２ｘ７５個の第２級アミンの反応の場合にこの方法に従った。すべてのビン及びフラスコを真空下で１００℃において乾燥しなければならない。すべての溶媒を乾燥しなければならない（ＣＨ_２Ｃｌ_２のためにモレキュラーシーブ及びＣＨ_３ＣＮのためにＫ_２ＣＯ_３）。

段階１
９．２ミリモルのコアを９２ｍｌのＣＨ_２Ｃｌ_２（モレキュラーシーブ４Å）中に溶解した＝０．１Ｍ溶液。この溶液に５．６８ｍｌのＤＩＰＥＡ（３．５当量）を加えた。混合物を０℃に冷却し（氷−浴）、３６．８ｍｌのＣＨ_２Ｃｌ_２中の２．７２８ｇ（４．６ミリモル）のトリホスゲンの溶液を一度に加えた。氷−浴を除去し、混合物を３０分間攪拌した。ＴＬＣ及びＬＣ−ＭＳにより反応を監視した。反応混合物を減圧下に、４０℃及び２０ミリバールで１時間濃縮した。粗生成物を３６．８ｍｌのＣＨ_３ＣＮ（Ｋ_２ＣＯ_３上において乾燥）中に溶解し、１．９２ｍｌのＤＩＰＥＡを加え、カルバモイルクロリド（Ｂ）の０．２５Ｍ溶液を得た。

段階２
ＣＨ_３ＣＮ中の第２級アミンの２００μｌ（０．２５Ｍ）にＣＨ_３ＣＮ中のカルバモイルクロリド（Ｂ）の２００μｌ（０．２５Ｍ）を加え、続いて１当量のジイソプロピルアミンを加えた。ビンにキャップをし、３０℃で１７時間振った。反応混合物を濃縮し、ＥｔＯＡｃ中に溶解し、５％ＮａＨＣＯ_３−溶液で洗浄した。溶媒を蒸発させ、粗生成物を分析のためにＤＭＳＯ中に取り上げた。この案を用いて４９個の化合物が合成された。
個々の化合物の合成
記載される実施例の製造に用いられるシントン：

化合物（２４）／（４０）を用いるアルキル化反応：一般的方法：
メチルアミン化合物をＴＨＦ中に溶解し、１．１当量のジイソプロピルエチルアミンを加えた。適したアルキル化試薬（１当量）をこの混合物に加え、溶液を加熱還流し、ＴＬＣにより監視した。完全な転換の後、溶液を濃縮し、炭酸ナトリウム水溶液を用いて残留物を取り上げた。水層をジクロロメタンで数回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濃縮し、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２，溶離剤として酢酸エチル又はＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ）を介してさらに精製した。
３−｛３−［（２，４−ジフルオロ−ベンジル）−メチル−アミノ］−プロピル｝−８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン
収率：５２％［下記の表中の実施例番号２３］
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−［３−（メチル−ピリジン−４−イルメチル−アミノ）−プロピル］−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン
収率：３２％［下記の表中の実施例番号２５］
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−［３−（メチル−ピリジン−３−イルメチル−アミノ）−プロピル］−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン，収率：１５％
［下記の表中の実施例番号２６］
変形：
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−［３−（メチル−ピリジン−２−イル−アミノ）−プロピル］−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン
１．７ｇのメチルアミン化合物２４を４ｍｌの２−フルオロピリジン中に溶解し、１５０℃で還流させた。完全な転換の後、反応混合物を水中に注ぎ、水層を酢酸エチルで数回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２，酢酸エチル）を介して精製した。
収率：６０％［下記の標中の実施例番号８３］
化合物（２４）／（４０）を用いるエポキシド開環反応：

一般的方法：
メチルアミン化合物をＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ（ｖ／ｖ＝１０／１，２ミリモル／ｍｌ）中に溶解した。エポキシド（１．５当量）の添加の後、混合物を加熱還流し、ＴＬＣにより反応を監視した。完全な転換の後、溶液を濃縮し、炭酸カリウム水溶液を用いて残留物を取り上げた。水層を酢酸エチルで数回抽出した。合わせた有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濃縮し、粗生成物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２，溶離剤としてＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ）を介してさらに精製した。
３−｛３−［（２，３−ジヒドロキシ−プロピル）−メチル−アミノ］−プロピル）−８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン収率：３１％［下記の表中の実施例番号９２］
３−｛２−［（２，３−ジヒドロキシ−プロピル）−メチル−アミノ］−エチル）−８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン収率：４６％［下記の表中の実施例番号１７８］
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛３−［（２−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−メチル−アミノ］−プロピル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号２９］収率：８０％（注意：合成において追加の塩基として炭酸カリウム（２．５当量）を用いた）
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛３−［（２−ヒドロキシ−３−モルホリン−４−イル−プロピル）−メチル−アミノ］−プロピル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号９３］収率：６５％

化合物（２３）を用いる置換反応：
一般に、置換は非プロトン性極性溶媒（例えばアセトニトリル、ジメチルスルホキシド又はＮ−ジメチルホルムアミド）中で以下の方法で行なわれた：
出発材料を適した溶媒中に溶解した。０．１当量のヨウ化ナトリウム及び２当量の塩基（例えば炭酸カリウム又はジイソプロピルエチルアミン）を反応フラスコ中に入れてからこの溶液に対応するアミン（２〜４当量）を加えた。反応混合物を加熱し、ＴＬＣ分析により監視した。標準的な水性の仕上げ法の後、残留物をカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２，溶離剤としてＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ）を介してさらに精製した。

文献の方法に従う光学的に純粋な出発材料の製造［Ｊ．Ｐｒａｋｔ．Ｃｈｅｍ．３２９，１９８７年，２３５］
２−メチルアミノ−シクロヘキサノール
シクロヘキセンオキシド（１４７ｇ，１．５モル）を８Ｍのエタノール性メチルアミン溶液（７５０ｍｌ）中に溶解し、４０℃で１６時間攪拌した。反応混合物を真空中で濃縮し、ラセミ２−メチルアミノシクロヘキサノールをわずかに褐色の油（１９５ｇ，１００％）として与えた。ＧＣ−分析に従うと、この生成物は純度９９^＋％であり、さらなる精製なしで用いられた。
（１Ｒ，２Ｒ）−２−メチルアミノ−シクロヘキサノール・（Ｒ）−マンデル酸塩及び（１Ｓ，２Ｓ）−２−メチルアミノシクロヘキサノール・（Ｓ）−マンデル酸
ラセミ２−メチルアミノ−シクロヘキサノール（１９５ｇ，最大で１．５モル）及び（Ｒ）−（−）−マンデル酸（２２８ｇ，１．５モル）を２−プロパノール（１．２リットル）に加え、還流温度に加熱した。溶液をゆっくり室温に冷まし、終夜攪拌した。生成する沈殿を濾過により集め、２−ブタノンで洗浄し、空気乾燥して白色の固体を与えた（１６０ｇ，エナンチオマー過剰率（ｅ．ｅ．）＝９２％）。母液を濃縮して褐色の油（２７５ｇ）を与え、それは放置すると固化した。白色の固体を２−ブタノン（１．７リットル）中で還流温度において１０分間加熱した。混合物を攪拌下で室温に冷まし、室温で１６時間攪拌した。沈殿を濾過により集め、空気乾燥して（１Ｒ，２Ｒ）−２−メチルアミノシクロヘキサノール・（Ｒ）−マンデル酸塩（１５１．５ｇ，５３８ミリモル，３６％）を、９９％のｅ．ｅ．を有する白色の固体として与えた。

第１の母液（２７５ｇ，０．９８モル）を水（８００ｍｌ）及びブライン（８００ｍｌ）中のＮａＯＨ（２００ｇ，５モル）の溶液に加えた。ジクロロメタン（４００ｍｌ）を加え、１５分間攪拌した後に層を分離させた。水層を再度ジクロロメタンで抽出した（３ｘ４００ｍｌ）。合わせたジクロロメタン層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して褐色の油（１１８．５ｇ，収率９３．５％）を与えた。この油をＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留し（ｐ＝０．３ミリバール，Ｔ＝７０〜８０℃）、６６％のｅ．ｅ．を有する（１Ｓ，２Ｓ）−２−メチルアミノシクロヘキサノール（１０５ｇ，８１３ミリモル，収率８３％）を与えた。この濃縮された材料を２−プロパノール（７００ｍｌ）中に溶解した。（Ｓ）−（＋）−マンデル酸（１２４ｇ，８１５ミリモル）を加え、混合物を還流温度に加熱した。得られる溶液をゆっくり室温に冷まし、その温度で１６時間攪拌した。生成する沈殿を濾過により集め、２−ブタノンで洗浄し、空気乾燥し、白色の固体（１７２ｇ）を与えた。この第１の塩を２−ブタノン（２．０リットル）中で１５分間加熱還流した。混合物（透明な溶液は生成しなかった）をゆっくり室温に冷まし、１６時間攪拌した。沈殿を濾過により集め、乾燥して（１Ｓ，２Ｓ）−２−メチルアミノシクロヘキサノール・（Ｓ）−マンデル酸塩（１６０ｇ，５６９ミリモル，３８％）を、ｅ．ｅ．＞９９％を有する白色の固体として与えた。
（１Ｒ，２Ｒ）−（−）−２−メチルアミノ−シクロヘキサノール［立体配置／旋光の関連性に関し、Ｊ．Ｐｒａｋｔ．Ｃｈｅｍ．３２９，１９８７年，２３５及びＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＡｓｙｍｍ．，１０，１９９９年，４６１９を参照されたい］
ＮａＯＨ（１０８ｇ，２．６９モル）を水（３５０ｍｌ）中に溶解した。臭素（４００ｍｌ）を加え、室温に冷却した。ジクロロメタン（３００ｍｌ）及び（１Ｒ，２Ｒ）−２−メチルアミノシクロヘキサノール・（Ｒ）−マンデル酸塩（１５１．５ｇ，５３８ミリモル）を加え、混合物を１０分間激しく攪拌した。層を分離させ、水層を再びジクロロメタン（３ｘ２００ｍｌ）で抽出した。（層の分離は時間のかかる方法である）。合わせたジクロロメタン層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して油（６７．７ｇ，収率９７％）を与えた。この油を２．３ｇ及び６．４ｇの他の２つのバッチ（両方ともｅ．ｅ．＝９９^＋％）とあわせ、Ｋｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留（ｐ＝０．５ミリバール，Ｔ＝８０〜９０℃）により精製し、ＧＣに従って純度が９４％の無色の油（７２．０ｇ，９２％）を与えた。この油を再びＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留し（ｐ＝０．３ミリバール）、画分：
画分１；Ｔ＝４０〜６０℃：ＧＣに従って純度が８９％の１１．６ｇ、
画分２；Ｔ＝６０〜６５℃：９９％の純度及び９９．５％のｅ．ｅ．を有する無色の油としての６０．１ｇのＧｌ０３０２−１
を含有する２つの生成物を与えた。［α］_６７０＝−５１．５（ｃ＝０．１４，メタノール）。
（１Ｓ，２Ｓ）−（＋）−２−メチルアミノ−シクロヘキサノール［立体配置／旋光の関連性に関し、Ｊ．Ｐｒａｋｔ．Ｃｈｅｍ．３２９，１９８７年，２３５及びＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＡｓｙｍｍ．，１０，１９９９年，４６１９を参照されたい］
ＮａＯＨ（１０８ｇ，２．６９モル）を水（４００ｍｌ）中に溶解した。臭素（４００ｍｌ）を加え、室温に冷却した。クロロホルム（３００ｍｌ）及び（１Ｓ，２Ｓ）−２−メチルアミノシクロヘキサノール・（Ｓ）−マンデル酸塩（１６０ｇ，５６９ミリモル）を加え、混合物を５分間激しく攪拌した。層を分離させ、水層を再びクロロホルム（３ｘ３５０ｍｌ）で抽出した。合わせたクロロホルム層を乾燥し（Ｎａ_２ＳＯ_４）、濃縮して油（６８ｇ，収率９３％）を与えた。この油をＫｕｇｅｌｒｏｈｒ蒸留（ｐ＝０．１ミリバール）により精製し、画分：
画分１；Ｔ＝４０〜５５℃：ＧＣに従って純度が９９％の無色の油としての１７．５ｇ、画分２；Ｔ＝５５〜６０℃：ＧＣに従って純度が９９．９％の無色の油としての４８．８ｇを含有する２つの生成物を与えた。両方の画分を合わせ、９９．９％のｅ．ｅ．を有する無色の油としての６６．２ｇ（５１２ミリモル，９０％）を与えた。［α］_６７０＝＋５３．６（ｃ＝０．１４，メタノール）。
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛３Ｒ−［（２Ｒ−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−メチル−アミノ］−プロピル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号３０］
２．５ｇの二環式クロロ−化合物（２３）を５ｍｌのアセトニトリル中に溶解した。この溶液に１．５ｇ（２当量）の炭酸カリウム、９０ｍｇ（０．１当量）のヨウ化ナトリウム、７８０ｍｇの１Ｒ，２Ｒ）−（−）−２−メチルアミノ−シクロヘキサノール及び最後に３滴のＨ_２Ｏを連続して加えた。この混合物を８時間加熱還流した。仕上げのために、反応混合物を酢酸エチルで希釈し、最初にクエン酸水溶液及び後に炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウム上で乾燥し、濃縮し、カラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２，溶離剤としてＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ）を介して残留物をさらに精製し、１．７５ｇ（５８％）の明黄色の油を与えた。
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛３Ｓ−［（２Ｓ−ヒドロキシ−シクロヘキシル）−メチル−アミノ］−プロピル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号３１］
化合物は立体異性体に関して上記で示された案に従って製造された。収率：明黄色の油として４８％。
ボロン−酸−マンニッヒ−反応：

以下の実験案を用い、それぞれ化合物（４０）及び化合物（２４）を用いて出発して同じ方法でいくつかの化合物を合成した。
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛３−［（１−フラン−２−イル−２，３，４，５−テトラヒドロキシ−ペンチル）−メチル−アミノ］−プロピル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号５２］

３０ｍｌのＥｔＯＨ及び０．５ｍｌのＨ_２Ｏ中のアミン（２４）（２．６６ｇ，５．８７６ミリモル）及び２−フラニルボロン酸（９２０ｍｇ，８．２２ミリモル）の溶液を激しい攪拌下で４０℃に加熱する。この溶液に１．０６ｇ（７．０５ミリモル）のＤ−（＋）−キシロースを少しづつ、４０℃で１５分以内に加えた。
２．５時間後、反応混合物をＮａＨＣＯ_３水溶液中に注ぎ、水層をジクロロメタンで３回抽出した。合わせた有機層を濃縮し、酢酸エチル中に取り上げた。この有機層をクエン酸水溶液（１０％）で数回洗浄した。合わせた水層を次いでＮａＨＣＯ_３水溶液で中和し、中性の水層をＣＨ_２Ｃｌ_２で抽出した。合わせた有機抽出物を硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空中で濃縮して粗黄色油を与え、それをカラムクロマトグラフィー（ＳｉＯ_２，酢酸エチル／メタノール：２０／１から１０／１）により精製した。精製は表題化合物を非晶質の白色の固体として与えた（１．４０ｇ，２．１４ミリモル，３７％）。
代わりの仕上げ法：完全な転換の後（ＴＬＣ）、反応混合物を室温に冷却し、１ｍｌのトリフルオロ酢酸を加え、残る溶液を室温で１０分間攪拌した。真空中における濃縮に続き
、カラムクロマトグラフィーを介して粗生成物をさらに精製した。

上記と同じ方法を用い、以下の実施例を合成した：
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛３−［メチル−（２，３，４，５−テトラヒドロキシ−１−チオフェン−２−イル−ペンチル）−アミノ］−プロピル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号５９］収率：８０％（出発材料としてＤ−キシロース及び２−チオフェニルボロン酸）
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛２−［メチル−（２，３，４，５−テトラヒドロキシ−１−チオフェン−２−イル−ペンチル）−アミノ］−エチル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号５８］収率：１３％（出発材料としてＤ−キシロース及び２−チオフェニルボロン酸）
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛２−［（１−フラン−２−イル−２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシ−ヘキシル）−メチル−アミノ］−エチル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号５５］収率：７５％（出発材料としてＤ−グルコース及び２−フラニルボロン酸）
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛２−［（１−フラン−２−イル−２，３，４，５−テトラヒドロキシ−ペンチル）−メチル−アミノ］−エチル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号５３］収率：４２％（出発材料としてＤ−キシロース及び２−フラニルボロン酸）
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛２−［（１−フラン−２−イル−２，３，４，５−テトラヒドロキシ−ペンチル）−メチル−アミノ］−エチル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号５２］収率：６０％（出発材料としてＬ−キシロース及び２−フラニルボロン酸）
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛２−［（１−フラン−２−イル−２，３−ジヒドロキシ−プロピル）−メチル−アミノ］−エチル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号４９］収率：６６％（出発材料としてＤ，Ｌ−グリセリンアルデヒド及び２−フラニルボロン酸）
３−｛２−［（２，３−ジヒドロキシ−１−チオフェン−３−イル−プロピル）−メチル−アミノ］−エチル｝−８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン
［下記の表中の実施例番号４７］収率：３９％（出発材料としてＤ，Ｌ−グリセリンアルデヒド及び３−チオフェニルボロン酸）
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛２−［メチル−（２，３，４，５−テトラヒドロキシ−１−チオフェン−３−イル−ペンチル）−アミノ］−エチル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号４８］収率：２８％（出発材料としてＬ−アラビノース及び２−チオフェニルボロン酸）
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］−３−｛２−［メチル−（２，３，４，５−テトラヒドロキシ−１−チオフェン−３−イル−ペンチル）−アミノ］−エチル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号５５］収率：２１％（出発材料としてＬ−キシロース及び３−チオフェニルボロン酸）
８−［２−（６，６−ジメチル−ビシクロ［３．３．１］ヘプト−２−イル）−エチル］
−３−｛２−［メチル−（２，３，４，５，６−ペンタヒドロキシ−１−チオフェン−３−イル−ヘキシル）−アミノ］−エチル｝−１−フェニル−１，３，８−トリアザ−スピロ［４．５］デカン−４−オン［下記の表中の実施例番号５４］収率：１６％（出発材料としてＤ−グルコース及び３−チオフェニルボロン酸）

下記の表に挙げられ、一般式（１）及び（２）により示される以下の特定の実施例（より詳細に本発明をさらに例示することのみが意図されており、従っていかようにも本発明の範囲を束縛するつもりはない）により本発明をさらに例示する：

下記の表中で「立体化学」の見出しの下に化合物の名前が示されている場合（例えば（−）−シス−ヒドロノポール又はＤ−キシロース）、それは問題の化合物が最後の反応段階で用いられたことを意味する。

上記の表中で示される実施例の分析データを下記の表中に示す。この表中に挙げられる分析法、すなわち「ＢＡＳＩＳ」、「ＳＴＡＮＤＡＲＤ」、「ＣＵＲＶＥ４」、「ＡＭＡＰ２」及び「ＡＭＡＰ３」の詳細は下記に説明される。

分析法（ＧＣ−ＭＳ）
ＢＡＳＩＳ法
ＡＰＩ１００９５：ＭａｓｓＣｈｒｏｍ
溶媒：
Ａ％９５％ＮＨ_４ＯＡｃ緩衝液＋５％アセトニトリル
Ｂ％１００％アセトニトリル
フローランプ（ＦｌｏｗＲａｍｐ）５．００
流量（ｍｌ／分）１．０００
停止時間（分）２０．００
最低圧（Ｐｓｉ）０
最高圧（Ｐｓｉ）６１００
ＬＣ−２００ＱｕａｄＰｕｍｐ（ｖｅｒｓｉｏｎ１．０８）
カラム：ＸＴｅｒｒａ（２．５μｍ，４．５ｘ５０ｍｍ）カラム温度（℃）２０
カラム温度限界（Ｌｉｍｉｔ）（℃）２０
勾配時間表：０．００＝アイソクラチック，１．００＝線状
段階時間（分）持続時間（分）Ａ％Ｂ％流量（ｍｌ／分）勾配
０ −０．１００．１０１０００１．００００．００
１０．００１０．００５９５１．０００１．００
２１０．００２．００５９５１．００００．００
３１２．０００．５０１０００１．０００１．００
４１２．５０２．５０１０００１．００００．００
チャンネルの数：２
サンプリング速度：チャンネル当たりに秒当たり０ポイント
電圧範囲：０〜０．１ボルト
極性：単極（ＵＮＩＰＯＬＡＲ）
チャンネルＡ：（Ａ）ＵＶ２２５ｎｍ
チャンネルＢ：（Ｂ）ＥＬＳＳｅｄｅｘ７５（温度３７℃）
ＳＴＡＮＤＡＲＤ法
ＷａｔｅｒｓＡｌｌｉａｎｃｅ２７９０ＬＣ移動相
溶媒：
Ｃ％９５％ＮＨ_４ＯＡｃ緩衝液＋５％ＡＣＮ（ｐＨ＝±５）Ｄ％１００％アセトニトリル（ＡＣＮ）
フローランプ５．００
流量（ｍｌ／分）１．０００
停止時間（分）１１．００
最低圧（バール）０
最高圧（バール）３００
脱ガス器ＯｎＳｔｒｏｋｅＬｅｎｇｔｈ自動
ＷａｔｅｒｓＡｌｌｉａｎｃｅ２７９０ＬＣカラム
カラム位置カラム１平衡化時間（分）０．００
カラム温度（℃）２０
カラム温度限界（℃）２０
ＷａｔｅｒｓＡｌｌｉａｎｃｅ２７９０ＬＣ急速平衡化
システムパスオフシステム流量（ＳｙｓｔｅｍＰａｔｈＯｆｆＳｙｓｔｅｍＦｌｏｗ）（ｍｌ／分）０．００
システム時間（分）０．００
再−平衡化時間（分）０．００
予備カラム体積（μｌ）０．００
ＷａｔｅｒｓＡｌｌｉａｎｃｅ２７９０Ｉ／Ｏ
スィッチ１：変更なし；スィッチ２：変更なし；スィッチ３：変更なし；スィッチ４：変更なし
アナログ出力設定：流量
ＷａｔｅｒｓＡｌｌｉａｎｃｅ２７９０ＬＣ勾配時間表
勾配時間表は６個の記載事項を含有し、それらは：
時間（分）Ｃ％Ｄ％流量（ｍｌ／分）カーブ（Ｃｕｒｖｅ）
０．００１００．００．０１．０００１
１．００１００．００．０１．０００６
７．０００．０１００．０１．０００６
８．０００．０１００．０１．０００６
８．５０１００．００．０１．０００６
１１．０１００．００．０１．０００６
である。
開始波長（ｎｍ）２２５．００
停止波長（ｎｍ）２６０．００
分解能（ｎｍ）１．２
サンプリング速度（スペクトル／秒）１．０００
フィルター応答１
露出時間（ミリ秒）自動内挿６５６
ＹｅｓＡｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ停止時間（分）１０．７５
Ｗａｔｅｒｓ９９６ＰＤＡアナログチャンネル１
ＥＬＳＰＬＥＬＳ１０００（温度８０℃）
ＣＵＲＶＥ４法
ＷａｔｅｒｓＡｌｌｉａｎｃｅ２７９０ＬＣ移動相
溶媒：
Ｃ％９５％ＮＨ_４ＯＡｃ緩衝液＋５％ＡＣＮ（ｐＨ＝±５）Ｄ％１００％アセトニトリル
フローランプ５．００
流量（ｍｌ／分）１．０００
停止時間（分）１１．００
最低圧（バール）０
最高圧（バール）３２０
脱ガス器ＯｎＳｔｒｏｋｅＬｅｎｇｔｈ自動
ＷａｔｅｒｓＡｌｌｉａｎｃｅ２７９０ＬＣカラム
カラム位置カラム１平衡化時間（分）０．００
カラム温度（℃）２０
カラム温度限界（℃）２０
ＷａｔｅｒｓＡｌｌｉａｎｃｅ２７９０ＬＣ急速平衡化
システムパスオフシステム流量（ｍｌ／分）０．００
システム時間（分）０．００
再−平衡化時間（分）０．００
予備カラム体積（μｌ）０．００
ＷａｔｅｒｓＡｌｌｉａｎｃｅ２７９０Ｉ／Ｏ
スィッチ１変更なしスィッチ２変更なしスィッチ３変更なしスィッチ４変更なしアナログ出力設定流量
ＷａｔｅｒｓＡｌｌｉａｎｃｅ２７９０ＬＣ勾配時間表
勾配時間表は６個の記載事項を含有し、それらは：
時間（分）Ｃ％Ｄ％流量カーブ
０．００１００．００．０１．０００１
１．００１００．００．０１．０００４
７．０００．０１００．０１．０００４
８．０００．０１００．０１．０００６
９．００１００．００．０１．０００６
１１．０１００．００．０１．０００６
である。
開始波長（ｎｍ）２０５．００
停止波長（ｎｍ）３５０．００
分解能（ｎｍ）１．２
サンプリング速度（スペクトル／秒）１．０００
フィルター応答１
露出時間（ミリ秒）自動内挿６５６
ＹｅｓＡｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎ停止時間（分）１０．７５
Ｗａｔｅｒｓ９９６ＰＤＡアナログチャンネル１
ＥＬＳＰＬＥＬＳ１０００（温度８０℃）

ＡＭＡＰ２法
ＬＣ−ＭＳシステムは２個のＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒシリーズ２００マイクロポンプ（ｍｉｃｒｏｐｕｍｐｓ）から成る。ポンプは５０μｌのティーミキサーにより互いに連結されている。ミキサーはＧｉｌｓｏｎ２１５オートサンプラーに連結されている。

ＬＣ法は：
段階合計時間流量（μｌ／分）Ａ（％）Ｂ（％）
００２３００９５５
１１．６２３０００１００
２１．８２３０００１００
３１２３００９５５
４２．２２３００９５５
である。
Ａ＝０．０２５％のＨＣＯＯＨ及び１０ミリモルのＮＨ_４ＨＣＯＯを含有する１００％水
ｐＨ＝±３
Ｂ＝０．０２５％のＨＣＯＯＨを含有する１００％ＡＣＮ

オートサンプラーは２μｌの注入ループを有する。オートサンプラーは、３ｕｍの粒子を有するＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＣ１８（２）３０＊４．６ｍｍカラムに連結される。カラムはＰｅｒｋｉｎＥｌｍｅｒシリーズ２００カラムオーブンにおいて４０℃で温度調節される。カラムは、２．７μｌのフローセルを有するＡｐｐｌｉｅｄｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓＡＢＩ７８５ＵＶメーターに連結される。波長は２５４ｎｍに設定される。ＵＶメーターはＳｃｉｅｘＡＰＩ１５０ＥＸ質量分析計に連結される。質量分析計は以下のパラメーターを有する：
走査範囲：１５０〜９００Ａｍｕ
極性：正
走査様式：プロファイル（ｐｒｏｆｉｌｅ）
分解能Ｑ１：ＵＮＩＴ
ステップサイズ：０．１０ａｍｕ
走査当たりの時間：０．５００秒
ネブライザー（ＮＥＢ）：１０
カーテンガス（ＣＵＲ）：１０
イオン源（ＩＳ）：５２００ボルト
温度（ＴＥＭ）：３２５℃
デフレクター（ＤＦ）：３０ボルト
焦点電位（ｆｏｃｕｓｓｉｎｇｐｏｔｅｎｔｉａｌ）（ＦＰ）：２２５ボルト
入り口電位（ＥＰ）：１０ボルト

光散乱検出器をＳｃｉｅｘＡＰＩ１５０に連結する。光散乱検出器は、５０℃及び３バールＮ_２圧において運転されるＳｅｄｅｒｅＳｅｄｅｘ５５である。完全なシステムは、ＷｉｎｄｏｗｓＮＴの下で働くＤｅｌｌｏｐｔｉｐｌｅｘＧＸ４００コンピューターにより制御される。

ＡＭＡＰ３法
ＬＣ法に関する以外はＡＭＡＰ２法と同じであり、ＬＣ法は：
段階合計時間流量（μｌ／分）Ａ（％）Ｂ（％）
００２３００９５５
１１．８２３０００１００
２２．５２３０００１００
３２．７２３００９５５
４３．０２３００９５５
である。

動物研究において用いられる化合物の調剤の実施例
経口的（ｐ．ｏ．）投与のために、所望の量（最高で２０μモル）の固体の実施例１を、水中の１％（ｗ／ｖ）のメチルヒドロキシエチルセルロース及び０．１％（ｗ／ｖ）のポロキサマーの１ｍｌに加えた。１０分間渦動させることにより、化合物を懸濁させた。

皮下（ｓ．ｃ．）投与のために、所望の量（最高で１５μモル）の固体の実施例１を１ｍｌの食塩水中に溶解するか、又は懸濁させた。

Claims

一般式（１）

［式中：
Ｒ_１は水素、ハロゲン、ＣＦ_３、アルキル（１−６Ｃ）、シクロアルキル（３−６Ｃ）、フェニル、アミノ、アルキル（１−３Ｃ）アミノ、ジアルキル（１−３Ｃ）アミノ、ヒドロキシ、ヒドロキシアルキル（１−３Ｃ）、（１−３Ｃ）アルコキシ、ＯＣＦ_３、カルボキシル、アミノカルボニル又は（１−３Ｃ）アルキルスルホニルを示し、
ｍは１〜４の整数であり、但しｍが２、３又は４である場合、Ｒ_１置換基は同一又は異なることができ、
Ｒ_２は水素、場合により置換されていることができるアルキル（１−６Ｃ）、シクロアルキル（３−６Ｃ）、−ＣＨ_２ＯＨ、−ＣＨ_２ＯＣＨ_３、カルボキシル、アセチル、場合により置換されていることができるベンジル又は以下の構造（２）：

の基Ｑを示し、
ここで：
［］_ｎは−（ＣＨ_２）_ｎ−を表し、ここでｎは０〜７の整数であり、
Ｒ_３は水素又はアルキル（１−３Ｃ）を示し、
Ｒ_４は水素、場合により置換されていることができるアルキル（１−６Ｃ）、飽和された、不飽和のもしくは部分的に飽和された単−、二−もしくは三環式の場合により置換されていることができる環、あるいは飽和された、不飽和のもしくは部分的に飽和された、場合により置換されていることができ、場合により１個もしくはそれより多いへテロ原子を含有することができる５もしくは６−員環で置換されたアルキル（１−３Ｃ）基を示すか、あるいは
（Ｒ_３＋Ｒ_４）は、それらが結合する窒素原子と一緒になって、飽和された、不飽和のもしくは部分的に飽和された単−、二−もしくは三環式の場合により置換されていることができる環を示す］
の化合物、すべての立体異性体ならびに薬理学的に許容され得る塩及びプロドラッグ、投与の後に容易に除去される基が存在する式（１）を有する化合物の誘導体、例えばアミジン、エナミン、マンニッヒ塩基、ヒドロキシル−メチレン誘導体、Ｏ−（アシルオキシメチレンカルバメート）誘導体、カルバメート又はエナミノン。
Ｒ_１が水素、ハロゲン、ＣＦ_３、アルキル（１−６Ｃ）、ヒドロキシル、（１−３Ｃ）アルコキシ又はＯＣＦ_３を示し、ｍ＝１であり、他のすべての記号が請求項１に示される通りの意味を有する一般式（１）の請求項１に記載の化合物。
Ｒ_２が一般式（２）を有する基Ｑを示し、他のすべての記号が請求項２に示される通りの意味を有する一般式（１）の請求項２に記載の化合物。
Ｒ_３がメチル基を示し、Ｒ_４が飽和され、場合により置換されていることができ、場合により１個もしくはそれより多いへテロ原子を含有することができる６−員環で置換されたアルキル（１−３Ｃ）基を示し、他のすべての記号が請求項３に示される通りの意味を有する一般式（１）の請求項３に記載の化合物。
Ｒ_４が場合により置換されていることができるピペリジン環で置換されたメチレン基を示し、他のすべての記号が請求項４に示される通りの意味を有する一般式（１）の請求項４に記載の化合物。
薬剤において用いるための、そのすべての立体異性体、製薬学的に許容され得る塩及びプロドラッグを含む請求項１〜５のいずれかに従う化合物。
請求項１〜５のいずれかに記載の化合物の少なくとも１種の薬理学的に活性な量を活性成分として含有する製薬学的組成物。
ＯＲＬ１受容体が含まれるか、あるいはそれらの受容体の操作（ｍａｎｉｐｕｌａｔｉｏｎ）を介して処置され得る障害の処置用の製薬学的組成物の調製のための、請求項１〜５のいずれかに記載の化合物の使用。
該障害が急性及び慢性の痛みの状態、神経性食欲不振及び神経性過食症のような代謝障害、肥満；胃−腸障害、特に過敏性腸症候群、炎症性腸疾患（クローン病及び潰瘍性大腸炎）、下痢、便秘、内臓痛、尿路炎症、水の保持／排泄又は塩排泄の不均衡を特徴とする腎臓障害；心臓血管障害、例えば心筋梗塞、不整脈、高血圧、血栓症、貧血、動脈硬化症、狭心症、緑内障のような眼科学的障害；慢性閉塞性肺疾患、気管支炎及び嚢胞性線維症を含む呼吸障害；免疫系の疾患ならびにウイルス感染であることを特徴とする請求項８に記載の使用。