JP2005527563A - インドリルマレイミド誘導体 - Google Patents

Abstract

例えば、器官または組織の同種または異種移植片の急性または慢性拒絶、移植片対宿主病、アテローム性動脈硬化症、血管損傷による血管閉塞（血管形成など）、再狭窄、肥満、シンドロームＸ、耐糖能障害、多嚢胞性卵巣症候群、高血圧、心不全、慢性閉塞性肺疾患、ＣＮＳ疾患（アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症など）、癌、感染症（ＡＩＤＳ、敗血症ショックまたは成人呼吸窮迫症候群など）、虚血／再灌流損傷（例えば、心筋梗塞、卒中、腸虚血、腎不全または出血性ショック）、または外傷性ショック（例えば、外傷性脳損傷）などの、Ｔリンパ球および／またはＰＫＣにより媒介される疾患または障害の処置および／または予防に有用である、式Ｉの化合物を提供する。式Ｉの化合物はまた、例えば、リウマチ性関節炎、骨関節炎、全身性エリテマトーデス、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型またはＩＩ型糖尿病およびそれらに伴う障害（例えば、血管障害、糖尿病性増殖性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、腎障害、神経障害および暁現象）、呼吸器疾患（喘息または炎症性肺損傷）、炎症性肝臓損傷、炎症性糸球体損傷、免疫介在障害または疾病の皮膚症状、炎症性および過増殖性皮膚疾患（乾癬、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、刺激性接触皮膚炎およびさらなる湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎）、炎症性眼疾患（例えば、シェーグレン症候群、乾性角結膜炎またはブドウ膜炎）、炎症性腸疾患、クローン病または潰瘍性大腸炎などの、Ｔ細胞が介在する急性または慢性炎症性疾患または障害、または自己免疫病の処置および／または予防に有用である。
【化１】

Description

発明の詳細な説明

本発明は、インドリルマレイミド誘導体、それらの製造方法およびそれらを含有する医薬組成物に関する。

より詳しくは、本発明は式Ｉの化合物を提供する；

式中、
Ｒ_ａは、Ｈ；ＣＨ_３；ＣＨ_２−ＣＨ_３；またはイソプロピルであり、
Ｒ_ｂは、Ｈ；ハロゲン；Ｃ_１−６アルコキシ；またはＣ_１−６アルキルであり、そして、
Ｉ．Ｒは、式（ａ）

式中、
Ｒ_１は、位置３または４でＣＨ_３により置換されていることもあるピペラジン−１−イル；または４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イルであり；
Ｒ_２は、Ｃｌ；Ｂｒ；ＣＦ_３；またはＣＨ_３であり；そして、
Ｒ_３は、Ｈ；ＣＨ_３；またはＣＦ_３であり；Ｒ_３がＨであり、Ｒ_ａがＨまたはＣＨ_３であり、Ｒ_ｂがＨであり、そしてＲ_１が４−メチル−１−ピペラジニルであるとき、Ｒ_２はＣＨ_３またはＣｌ以外である；
の基であるか、または、
ＩＩ．Ｒは、式（ｂ）

式中、
Ｒ_４は、位置３および／または４でＣＨ_３により置換されている１−ピペラジニル；または４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イルであり；Ｒ_４が４−メチル−１−ピペラジニルであるとき、Ｒ_ａはＨまたはＣＨ_３以外である；
の基であるか、または、
ＩＩＩ．Ｒは、式（ｃ）

式中、
Ｒ_１４は、位置３および／または４でＣＨ_３により、または位置３でエチル、フェニル−Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルコキシ−Ｃ_１−４アルキルまたはハロゲノ−Ｃ_１−４アルキルにより置換されていることもある１−ピペラジニル；または４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イルであり；
Ｒ_１５は、ハロゲン；ＣＦ_３；またはＣＨ_３であり；Ｒ_１６がＣＨ_３であり、Ｒ_ａがＨまたはＣＨ_３であり、Ｒ_ｂがＨであり、そしてＲ_１４が４−メチル−１−ピペラジニルであるとき、Ｒ_１５はＣＨ_３以外であり；
Ｒ_１６は、Ｈ；ＣＨ_３；ＣＨ_２−ＣＨ_３；またはＣＦ_３であり；Ｒ_１５がＣｌであり、Ｒ_ａがＨまたはＣＨ_３であり、Ｒ_ｂがＨであり、そしてＲ_１４が４−メチル−１−ピペラジニルであるとき、Ｒ_１６はＨ以外である；
の残基であるか、または、
ＩＶ．Ｒは、式（ｄ）

式中、Ｒ_８は、１−ピペラジニル、３−メチル−ピペラジン−１−イルまたは４−ベンジル−ピペラジン−１−イルである；
の基であるか、または、
Ｖ．Ｒは、式（ｅ）

式中、Ｒ_９は４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル；または位置３でメチルまたはエチルにより置換され、そして位置４でメチルにより置換されていることもあるピペラジン−１−イルである、
の基である。

式Ｉの化合物は、遊離形で、または塩の形態（例えば、有機または無機酸（例えば、塩酸、酢酸、トリフルオロ酢酸）などとの付加塩）で存在し得る。

式Ｉの化合物は、光学異性体、ラセミ化合物またはジアステレオ異性体の形態で存在し得ることが認識されるであろう。例えば、ピペラジニル残基の位置３で置換基を有する環の炭素原子は、不斉であり、Ｒ−またはＳ−配置をとり得る。本発明が全エナンチオマーおよびそれらの混合物を包含することを理解すべきである。エナンチオマーは、ラセミ化合物よりも好ましい。同様の考察は、言及したような不斉炭素原子を呈示する出発物質に関して適用される。

アルキルまたはアルコキシは、直鎖または分枝であり得る。フェニル−Ｃ_１−４アルキルは、好ましくはベンジルまたはフェネチルである。Ｃ_１−４アルコキシ−Ｃ_１−４アルキルにおいては、該アルコキシ部分は、好ましくはメトキシまたはエトキシであり、該アルキル部分は、好ましくはメチルまたはエチルである；適切な例は、例えば、２−メトキシエチルである。ハロゲンは、Ｆ、Ｃｌ、ＢｒまたはＩであり得、好ましくはＦ、ＣｌまたはＢｒである。ハロゲノ−Ｃ_１−４アルキルは、１またはそれ以上のＨがハロゲン（例えば、ＣｌまたはＦ）により置換されているアルキル（例えば、ＣＨ_２Ｃｌ、ＣＨ_２ＦまたはＣＦ_３）である。

Ｒは、好ましくは、式（ａ）、（ｃ）または（ｅ）、好ましくは（ｅ）の基である。
式（ａ）または（ｃ）の基において、Ｒ_２またはＲ_１５は、好ましくは各々Ｒ_１またはＲ_１４に対してパラにある。Ｒ_３は、好ましくは、Ｒ_１に対してメタにある。式（ｅ）の基では、Ｒ_９は、好ましくは４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イルである；Ｒ_９が位置３で置換されているピペラジニルであるとき、それはＲまたはＳ配置である。

本発明はまた、式Ｉの化合物の製造方法を包含する。その方法は、式ＩＩ

式中、Ｒ_ａおよびＲ_ｂは、上記定義の通りである、
の化合物を、式ＩＩＩ
Ｒ−ＣＨ_２−ＣＯ−ＮＨ_２ （ＩＩＩ）
式中、Ｒは上記定義の通りである、
の化合物と反応させ、
そして、必要であれば、生じる遊離形で得られる式Ｉの化合物を塩の形態に適するように変換するか、またはその逆を行う、
ことを含む。

該方法は、強塩基（例えば、ｔ−ＢｕＯＫ）の存在下で、例えば、ＷＯ０２／３８５６１（その内容を出典明示により本明細書の一部とする）に開示のように、そして実施例に例示するように、好都合に実行し得る。

式ＩＩおよびＩＩＩの化合物は、既知方法に従って、例えば、ＷＯ０２／３８５６１（その内容を出典明示により本明細書の一部とする）に開示のように、そして実施例に例示するように、製造し得る。

出発物質の製造が特に記載されていない限り、その化合物は既知であるか、または当分野で既知の方法と同様に、もしくは後述の通りに、製造し得る。

以下の実施例は、本発明の例示説明であり、いかなる限定もしないものである。

実施例１：３−［２−クロロ−３−メチル−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２,５−ジオン

２−［２−クロロ−３−メチル−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−アセトアミド（２１１ｍｇ、０.７５ｍｍｏｌ）および３−インドールグリオキシラート（２７０ｍｇ、１.３５ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（５ｍＬ）に溶解する。ＴＨＦ（２.９８ｍＬ、４当量）中の１.０Ｍ ｔｅｒｔ−ＢｕＯＫの溶液を添加し、混合物を３５℃で終夜撹拌する。反応物をＡｃＯＥｔ（２０ｍＬ）で希釈し、Ｈ_２Ｏ（２０ｍＬ）および塩水（１０ｍＬ）で洗浄する。有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を蒸発させる。残渣をＦＣＣ（ＡｃＯＥｔ／ＡｃＯＨ／Ｈ_２Ｏ７：１：１）により精製し、酢酸塩の形態で表題化合物を得る。
¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 2.16 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.32-2.38 (m, 4H), 2.97-3.10 (m, 4H), 6.61 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.71-6.77 (m, 2H), 7.04 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 7.4, 7.2 Hz, 1H), 7.41 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 11.05 (br s, 1H), 11.90 (br s, 1H); ES-MS: 435 [M+H]⁺.

出発物質として使用される２−［２−クロロ−３−メチル−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−アセトアミド

は、以下の通りに製造し得る：
（５−ブロモ−２−クロロ−３−メチル−フェニル）−酢酸メチルエステル（２.０ｇ、７.２ｍｍｏｌ）、Ｎ−メチルピペラジン（９６０μＬ、８.６ｍｍｏｌ）およびＣｓ_２ＣＯ_３（３.３ｇ、１０.１ｍｍｏｌ）を、トルエン（８０ｍＬ）に懸濁する。Ｐｄ（ＯＡｃ）_２（８１ｍｇ、０.３６ｍｍｏｌ）およびＢＩＮＡＰ（２２４ｍｇ、０.３６ｍｍｏｌ）を添加し、反応物を１００℃で終夜撹拌する。セライトを通して混合物を濾過し、溶媒を蒸発させる。残渣をＦＣＣ（ＡｃＯＥｔ／ＡｃＯＨ／Ｈ_２Ｏ６０：１５：１５）により精製し、２−［２−クロロ−３−メチル−５−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−フェニル］−酢酸メチルエステルを得る。エステルをＮＨ_４ＯＨ２５％（６０ｍＬ）に懸濁する。混合物を終夜室温で撹拌し、沈殿を濾過し、アミドを得る。¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 2.20 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 2.40-2.45 (m, 4H), 3.07-3.13 (m, 4H), 3.48 (s, 2H), 6.78 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.91 (br s, 1H), 7.34 (br s, 1H).

ＣｕＣｌ_２（８.０ｇ、０.０６ｍｏｌ）およびｔｅｒｔ−ブチルニトリル（８.９ｍＬ、０.０７４ｍｏｌ）をアセトニトリル（６０ｍＬ）に懸濁する。１,１−ジクロロエチレンを２０℃で滴下して添加する。アセトニトリル（６０ｍＬ）に溶解した５−ブロモ−２−クロロ−３−メチル−フェニルアミン（１１.０ｇ、０.０５ｍｏｌ）を添加し、反応物を室温で３時間撹拌する。混合物を水性２０％ＨＣｌ（１５０ｍＬ）に注ぎ、水相をＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｘ１５０ｍＬ）で抽出する。有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を蒸発させる。残渣をＦＣＣ（ヘキサン／ＣＨ_２Ｃｌ_２９：１）により精製し、５−ブロモ−２−クロロ−１−メチル−３−（２,２,２−トリクロロ−エチル）−ベンゼンを得る。この中間体をＭｅＯＨ（８０ｍＬ）に再溶解し、７０℃に加熱する。ＭｅＯＨ（２８.４ｍＬ）中の５.４Ｍ ＮａＯＭｅの溶液を滴下して添加し、反応物を７０℃で３時間撹拌する。反応物を室温に冷却し、濃Ｈ_２ＳＯ_４（１０ｍＬ）を添加する。反応物を還流で１時間撹拌する。混合物をＨ_２Ｏ（２００ｍＬ）で希釈し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２ｘ２００ｍＬ）で抽出する。合わせた有機相をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を蒸発させる。残渣をＦＣＣ（ヘキサン／ＣＨ_２Ｃｌ_２９：１から１：１へ）により精製し、（５−ブロモ−２−クロロ−３−メチル−フェニル）−酢酸メチルエステルを得る。¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 2.26 (s, 3H), 3.61 (s, 3H), 3.63 (s, 2H), 7.15 (s, 1H), 7.21 (s, 1H).

実施例１の方法に従い、しかし適切な出発物質を使用して、下表１に示す通り、Ｒが式（ａ）の残渣である式Ｉの化合物を得ることができる。

実施例２０：３−［３−（４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−ナフタレン−１−イル］−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２,５−ジオン

２−［３−（４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−ナフタレン−１−イル］−アセトアミド（１００ｍｇ、０.３０ｍｍｏｌ）および（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ−酢酸メチルエステル（９７ｍｇ、０.４４ｍｍｏｌ）を、乾燥ＴＨＦと３回共沸し、次いで乾燥ＴＨＦ（３ｍｌ）に溶解する。ＴＨＦ（１.２ｍｌ）中の１.０Ｍ ＫＯｔＢｕの溶液を、２０分間かけて室温で滴下して添加する。５分後、ＴＬＣ分析は、出発物質の完全な変換を示す。反応を水（５ｍｌ）の添加によりクエンチする。混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、飽和水性ＮＨ_４Ｃｌで２回洗浄する。水層をＥｔＯＡｃで２回逆抽出する。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を蒸発させる。残渣をＦＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ／Ｈ_２Ｏ８００：５５：４５）により精製し、表題化合物を酢酸塩として得る。化合物をＭｅＯＨ／ＴＦＡに溶解し、溶媒を除去し、表題化合物をトリフルオロ酢酸塩として得る。¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 0.95 (M, 4H), 3.39 (br, 4H), 3.49 (br, 2H), 3.86 (s, 3H), 6.16 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.46 (dd, J = 6.6 / 7.9 Hz, 1H), 7.00 (dd, J = 6.6 / 7.9 Hz, 1H), 7.13 (dd, J = 7.6 / 7.6 Hz, 1H), 7.40 (m, 4H), 7.55 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.14 (s, 1H), 9.10 (br, 2H), 11.17 (s, 1H); ES-MS: 463 [M+H]⁺.

出発物質として使用する２−［３−（４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−ナフタレン−１−イル］−アセトアミドは、以下の通りに製造し得る：

ａ）２−［３−（４−ベンジル−４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−ナフタレン−１−イル］−アセトアミド（２８０ｍｇ、０.７３ｍｍｏｌ）を、１.２５ＭＨＣｌのＭｅＯＨ溶液と２回共沸する。残渣をＥｔＯＨ（１０ｍｌ）に溶解する。パラジウム／炭素（１０％、７７ｍｇ）を添加し、混合物を水素雰囲気（１ａｔｍ）下、室温で１４時間、そして５０℃で２時間撹拌する。混合物を濾過し、濾液を濃縮する。残渣をＦＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ／Ｈ_２Ｏ７５０：８３：６８から６００：１５０：１５０へ）により精製し、０.７当量のＡｃＯＨを含有する表題化合物を得る。¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 0.53 (m, 4H), 1.78 (s, AcOH), 2.93 (ddd, 2H), 3.04 (s, 2H), 3.16 (ddd, 2H), 3.76 (s, 2H), 6.94 (br, 1H), 6.99 (s, 1H), 7.25 (dd, 1H), 7.26 (s, 1H), 7.35 (dd, J = 6.7 / 7.8, 1H), 7.49 (br, 1H), 7.69 (d, J = 7.8, 1H), 7.88 (d, J = 10.0, 1H); ES-MS: 296 [M+H]⁺.

ｂ）２−［３−（４−ベンジル−４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−ナフタレン−１−イル］−アセトアミド
［３−（４−ベンジル−４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−ナフタレン−１−イル］−酢酸エチルエステル（３４７ｍｇ、０.８４ｍｍｏｌ）およびホルムアミド（１２６ｍｇ、２.８０ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下でＤＭＦ（１ｍｌ）に溶解する。溶液を１０５℃に加熱し、ＮａＯＭｅ（５.４Ｍ ＭｅＯＨ溶液１５５μＬ、４５ｍｇ、０.８４ｍｍｏｌ）を、１５分間で滴下して添加する。１０５℃で３０分後、ＴＬＣ分析は、出発物質の完全な消費を示す。反応混合物を室温に冷却し、水で希釈し、ＥｔＯＡｃで抽出する。ＥｔＯＡｃ層を水で２回洗浄する。溶媒の除去およびＦＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ９８：２から９６：４、９０：１０へ）による精製により、表題化合物を得る。¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 0.71 (ddd, 2H), 0.89 (ddd, 2H), 3.10 (ddd, 2H), 3.16 (s, 2H), 3.31 (ddd, 2H), 3.93 (s, 2H), 3.99 (s, 2H), 5.33 (br, 1H), 5.42 (br, 1H), 7.11 (s, 1H), 7.23 (d, J = 2.0, 1H), 7.32 (m, 5H), 7.37 (dd, J = 6.7 Hz, 1H), 7.45 (dd, J = 6.7 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 8.9 Hz, 1H); ES-MS: 386 [M+H]⁺.

ｃ）［３−（４−ベンジル−４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−ナフタレン−１−イル］−酢酸エチルエステル
（３−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−ナフタレン−１−イル）−酢酸エチルエステル（５００ｍｇ、１.３８ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下で乾燥ＴＨＦ（１０ｍｌ）に溶解する。４−ベンジル−４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクタン（３２５ｍｇ、１.６１ｍｍｏｌ）を添加し、続いてＫ_３ＰＯ_４（４１０ｍｇ、１.９３ｍｍｏｌ）、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（６２ｍｇ、０.０６９ｍｍｏｌ）およびビフェニル−２−イル−ジ−ｔｅｒｔ−ブチル−ホスファン（２１ｍｇ、０.０６９ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を８０℃に加熱する。４時間後、ＴＬＣ分析は、出発物質の完全な消費を示す。反応混合物を室温に冷却し、濾過し、濃縮する。残渣をＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ１００：０から９０：１０、８０：２０、７０：３０、０：１００へ）により精製し、表題化合物を得る。¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 0.69 (ddd, 2H), 0.86 (ddd, 2H), 1.24 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 3.09 (ddd, 2H), 3.19 (s, 2H), 3.31 (ddd, 2H), 3.93 (s, 2H), 4.02 (s, 2H), 4.17 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 7.08 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.33 (m, 6H), 7.42 (dd, J = 8.8 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.8 Hz, 1H); ES-MS: 415 [M+H]⁺.

ｄ）（３−トリフルオロメタンスルホニルオキシ−ナフタレン−１−イル）−酢酸エチルエステル

（３−ヒドロキシ−ナフタレン−１−イル）−酢酸エチルエステル（１.６７ｇ、７.２５ｍｍｏｌ）を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（２０ｍｌ）にアルゴン雰囲気下で溶解する。ピリジン（１.１７ｍｌ、１.１５ｇ、１４.５０ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を０℃に冷却し、その上にトリフルオロメタンスルホン酸無水物（１.７９ｍｌ、３.０７ｇ、１０.８８ｍｍｏｌ）を滴下して添加する。反応混合物を室温に温め、室温で１時間後、ＴＬＣ分析は出発物質の完全な消費を示す。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ_２Ｏで２回洗浄する。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を除去し、残渣をＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ１００：０から９７：３、９５：５、９３：７、９０：１０へ）により精製し、表題化合物を得る。¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 1.19 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 4.11 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.38 (s, 2H), 7.60 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.70 (m, 2H), 8.03 (m, 1H), 8.12 (m, 2H); ES-MS: 362 [M+H]⁺.

ｅ）（３−ヒドロキシ−ナフタレン−１−イル）−酢酸エチルエステル
（３−ベンジルオキシ−ナフタレン−１−イル）−酢酸エチルエステル（２.４３ｇ、７.５８ｍｍｏｌ）をＭｅＯＨ（５０ｍｌ）に溶解する。炭上のパラジウム（８０７ｍｇ）を添加し、反応混合物を室温、水素雰囲気（１ａｔｍ）下で、１４時間撹拌する。反応混合物を濾過する。濃縮し、純粋な表題化合物を得る。¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 1.18 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 4.05 (s, 2H), 4.10 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 7.04 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 1.8, 1H), 7.30 (t, J = 7.8, 1H), 7.40 (t, J = 7.8, 1H), 7.70 (d, J = 7.8, 1H), 7.80 (d, J = 7.8 Hz, 1H); ES-MS: 230 [M+H]⁺.

ｆ）（３−ベンジルオキシ−ナフタレン−１−イル）−酢酸エチルエステル
３−ベンジルオキシ−１−ブロモ−ナフタレン（５.６４ｇ、１８.０１ｍｍｏｌ）をアルゴン雰囲気下で乾燥ＤＭＦ（１００ｍｌ）に溶解する。トリブチルスタンナニル−酢酸エチルエステル（７.４７ｇ、１９.８１ｍｍｏｌ）、並びに［ビス（トリ−オルト−トリル−ホスフィン）］パラジウム（ＩＩ）二塩化物（２.８３ｇ、３.６０ｍｍｏｌ）および臭化亜鉛（ＩＩ）（５.２７ｇ、２３.４１ｍｍｏｌ）を添加する。反応混合物を８０℃に３時間加熱する。反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、希釈塩水で２回洗浄する（逆抽出する）。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を除去し、残渣をＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ１００：０から９７.５：２.５、９５：５、９０：１０へ）により精製する。生じる依然としてスズ残渣を含有している油状物を、ＥｔＯＡｃ／１Ｎ ＮａＯＨの１：１混合物（２００ｍｌ）中で１時間撹拌する。混合物をＥｔＯＡｃで２回抽出する。合わせた有機層をＨ_２Ｏで２回洗浄し（逆抽出し）、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮する。残渣をＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ１００：０から９７：３、９５：５、９３：７、９２：８、９０：１０へ）により精製し、表題化合物を得る。¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 1.18 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 4.10 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.11 (s, 2H), 5.25 (s, 2H), 7.21 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 7.41 (m, 8H), 7.53 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 7.84 (dd, J = 7.2 Hz, 1H); ES-MS: 320 [M+H]⁺.

ｇ）３−ベンジルオキシ−１−ブロモ−ナフタレン
４−ブロモ−ナフタレン−２−オール（５.０ｇ、２２.４１ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦ（５０ｍｌ）にアルゴン雰囲気下で溶解する。水素化ナトリウム（鉱物油中の６０％懸濁液９８６ｍｇ、５９２ｍｇ、２４.６５ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で１時間撹拌する。室温に再冷却した後、臭化ベンジル（３.４６ｍｌ、４.９８ｇ、２９.１４ｍｍｏｌ）およびテトラブチルアンモニウムヨウ化物（８２８ｍｇ、２.２４ｍｍｏｌ）を添加する。室温で１６時間後、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈する。溶液を半濃縮塩水（semi-concentrated brine）で２回洗浄する（逆抽出する）。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を除去し、残渣をＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ１００：０から９５：５、９０：１０へ）により精製し、表題化合物を得る。¹H NMR (CDCl₃, 400 MHz) δ 5.22 (s, 2H), 7.25 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.45 (m, 7H), 7.64 (d, J = 2.4, 1H), 7.75 (d, J = 7.8, 1H), 8.17 (d, J = 7.8, 1H); ES-MS: 312 [M+H]⁺.

実施例２０の方法に従い、表２に示す通り、Ｒが式（ｂ）の残渣である式Ｉの化合物を得ることができる。

上記またはＷＯ０２／３８５６１の実施例５６で開示された方法に従い、しかし適切な出発物質を使用して、下表３に示す通り、Ｒが式（ｃ）の残渣である式Ｉの化合物を得ることができる。

上記またはＷＯ０２／３８５６１の実施例１６３で開示された方法に従い、しかし適切な出発物質を使用して、下表４に示す通り、Ｒが式（ｄ）の残渣である式Ｉの化合物を得ることができる。

実施例６９：３−［３−（４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２,５−ジオン

２−［３−（４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−アセトアミド（４.９５ｇ、１６.７０ｍｍｏｌ）および（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ−酢酸メチルエステル（５.４４ｇ、２５.０５ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦで２回共沸する。次いで乾燥ＴＨＦ（１００ｍｌ）を添加し、アルゴン雰囲気下でＫＯｔＢｕ（ＴＨＦ中１.０Ｍ、５０ｍｌ、５０ｍｍｏｌ）を滴下して２０分間で添加する。さらに９０分後、ＴＬＣ分析は、出発物質の完全な変換を示す。反応混合物をＨ_２Ｏで希釈し、ＥｔＯＡｃで２回抽出する。合わせた有機層を飽和ａｑＮＨ_４Ｃｌ溶液で２回洗浄し（逆抽出し）、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮する。ＦＣＣ（ＣＨ_２Ｃｌ_２／ＭｅＯＨ１００：０から９８：２、９６：４、９４：６、９２：８、９０：１０へ）により精製し、表題化合物を得る。それを、ＥｔＯＨ／ＡｃＯＨ溶液の濃縮により、その酢酸塩に変換する。¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 0.26 - 053 (br, 4 H), 1.89 (s, 3H, CH₃COOH), 2.36 (s, 3H), 2.80 (br m, 2 H), 3.15 - 3.48 (br m, 2H), 6.14 (d, J = 8.2 HZ, 1H), 6.44 (dd, J = 8.2 / 7.4 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 7.02 (dd, J = 8.2 / 8.2 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 8.2 / 8.2 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 11.04 - 11.21 (br, 1H), 11.86 (d, J = 2.9 Hz, 1H); ES-MS: 464 [M+H]⁺.

出発物質として使用する２−［３−（４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−アセトアミドは、以下の通りに製造し得る：

ａ）２−［３−（４−ベンジル−４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−アセトアミド（４９０ｍｇ、１.２７ｍｍｏｌ）を無水ＭｅＯＨ（５ｍｌ）に溶解する。Ｐｄ／炭素（１４０ｍｇ）、並びに蟻酸アンモニウム（２００ｍｇ、３.１７ｍｍｏｌ）を添加する。１時間還流した後（Ｔ＝７５℃）、さらなる蟻酸アンモニウム（２００ｍｇ、３.１７ｍｍｏｌ）を添加する。１時間後、ＴＬＣ分析は、出発物質の完全な変換を示す。濾過および濃縮の後、残渣をＣＨ_２Ｃｌ_２に溶かし、水（２Ｎ ＮａＯＨの添加により、ｐＨ１０）で洗浄する。有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を除去する。ＦＣＣ（ＥｔＯＡｃ／ＡｃＯＨ／Ｈ_２Ｏ７５０：８３：６８から７００：１１０：９０、６５０：１３０：１２０、６００：１５０：１５０へ）により精製し、表題化合物をそのビス酢酸塩として得る。¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 0.46 - 0.52 (m, 4H), 2.88 (t, J = 5.5, 2H), 3.35 (s, 2H), 3.49 (t, J = 5.5, 2H), 3.94 (s, 2H), 6.77 (s, 1H), 7.00 (br s, 1H), 7.18 - 7.25 (m, 1H), 7.45 - 7.56 (m, 2H), 7.60 - 7.65 (m, 1H), 7.95 (d, J = 9.9, 1H). ES-MS: 297 [M+H]⁺.

ｂ）２−［３−（４−ベンジル−４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−アセトアミド
［３−（４−ベンジル−４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−酢酸エチルエステル（７００ｍｇ、１.６８ｍｍｏｌ）を乾燥ＤＭＦにアルゴン雰囲気下で溶解する。ホルムアミド（２２４μｌ、２５４ｍｇ、５.６４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を１０５℃に加熱する。この温度で、ＮａＯＭｅ（５.４Ｍ ＭｅＯＨ溶液３１２μｌ、９１ｍｇ、１.６８ｍｍｏｌ）を滴下して２０分間で添加する。１０５℃で３０分後、ＴＬＣ分析は、出発物質の完全な変換を示す。反応混合物を室温に冷却し、続いて水を添加し、ＥｔＯＡｃで抽出する。有機層をＨ_２Ｏで洗浄し（２回）、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮する。残渣をＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ１：１から１：３、０：１００、ＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ９８：２へ）により精製し、表題化合物を得る。¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 0.68 - 0.70 (m, 2H), 0.82 - 0.88 (m, 2H), 3.08 (t, J = 4.4, 2H), 3.45 (s, 2H), 3.58 (t, J = 4.4, 2H), 3.96 (s, 2H), 4.27 (s, 2H), 5.3 - 5.5 (br, 1H), 6.55 - 6.7 (br, 1H), 6.72 (s, 1H), 7.26 - 7.36 (m, 6H), 7.51 (t, J = 8.8, 1H), 7.60 d, J = 9.9, 1H), 8.02 (d, J = 9.9, 1H); ES-MS: 387 [M+H]⁺.

ｃ）［３−（４−ベンジル−４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−酢酸エチルエステル
（３−クロロ−イソキノリン−１−イル）−酢酸エチルエステル（２.５０ｇ、１０.０１ｍｍｏｌ）、４−ベンジル−４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクタン（２.２３ｇ、１１.０１ｍｍｏｌ）、ＮａＯｔＢｕ（１.０６ｇ、１１.０１ｍｍｏｌ）、ＢＩＮＡＰ（２４９ｍｇ、０.４０ｍｍｏｌ）およびパラジウム（ＩＩ）−アセタート（１８０ｍｇ、０.８０ｍｍｏｌ）をアルゴン下で混合する。脱気乾燥ジオキサン（３６ｍｌ）の添加後、懸濁液を８５℃に加熱する。８５℃で２５分後、ＨＰＬＣ分析は、７１％の変換を示す。混合物を室温に冷却し、ＥｔＯＡｃで希釈し、Ｈ_２Ｏおよび飽和水性ＮＨ_４Ｃｌで洗浄する（逆抽出する）。合わせた有機層をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、溶媒を除去し、残渣をＦＣＣ（ヘキサン／ＥｔＯＡｃ１００：０から９６：４、９３：７、９０：１０、８５：１５へ）により精製し、表題化合物を得る。¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 0.58 - 0.61 (m, 2H), 0.70 - 0.73 (m, 2H), 1.18 (t, J = 8.8, 3H), 2.98 (t, J = 5.5, 2H), 3.39 (s, 2H), 3.49 (t, J = 5.5, 2H), 3.86 (s, 2H), 4.12 (s, 2H), 4.12 (q, J = 8.8, 2H), 5.59 (s, 1H), 7.14 - 7.19 (m, 6H), 7.39 (t, J = 8.8, 1H), 7.51 (d, J = 9.9, 1H), 7.78 (d, J = 9.9, 1H); ES-MS: 417 [M+H]⁺.

ｄ）（３−クロロ−イソキノリン−１−イル）−酢酸エチルエステル
１,１,１,３,３,３−ヘキサメチル−ジシラザン（２７.４ｍｌ、２０.３７ｇ、１２６.２ｍｍｏｌ）を乾燥トルエン（１５０ｍｌ）に溶解する。−７８℃に冷却後、ｎ−ＢｕＬｉ（１.６Ｍヘキサン溶液７９ｍｌ、１２６.２ｍｍｏｌ）を２０分間でゆっくりと添加する。白色懸濁液を−７８℃で１５分間、室温で１５分間撹拌する。その後、透明な明るい黄色の溶液を得る。この溶液を、Ｐｄ_２（ｄｂａ）_３（１.３９ｇ、１.５１ｍｍｏｌ）および（２'−ジシクロヘキシルホスファニル−ビフェニル−２−イル）−ジメチル−アミン（１.２５ｇ、３.１８ｍｍｏｌ）を有する第２の２口フラスコにカニューレ注入する。室温で１０分間撹拌した後、透明な暗赤色溶液を−１０℃に冷却する。酢酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１５.７ｍｌ、１３.５ｇ、１１６.１ｍｍｏｌ）を５分間で添加する。−１０℃で１０分後、１,３−ジクロロ−イソキノリン（１０.０ｇ、５０.４９ｍｍｏｌ）を一度に添加する。この暗赤色溶液を放置して室温に温める。室温で３０分後、ＴＬＣ分析は、出発物質の完全な変換を示す。反応混合物をシリカの２−ｃｍパッドを通して濾過し、それをＥｔＯＡｃ／ＭｅＯＨ９８：２ですすぐ。濃縮後、残渣をＦＣＣ（トルエン／ＣＨ_２Ｃｌ_２２：１からトルエン／ＥｔＯＡｃ１００：０、９９：１、９８：２、９７：３、９６：４、９４：６、９０：１０へ）により精製し、（３−クロロ−イソキノリン−１−イル）−酢酸ｔｅｒｔ.−ブチルエステルを得る。この化合物をＨＣｌの飽和エタノール溶液（２００ｍｌ）に溶解し、１５分間還流する。濃縮し、定量的収量で表題化合物を得る。¹H NMR (DMSO, 400 MHz) δ 1.17 (t, J = 8.8, 3H), 4.11 (q, J = 8.8, 2H), 4.28 (s, 2H), 7.51 - 7.57 (m, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.61 - 7.66 (m, 1H), 7.72 (d, J = 8.8, 1H), 7.98 (d, J = 8.8, 1H); ES-MS: 250 [M+H]⁺.

実施例６９の方法に従い、しかし適切な出発物質を使用して、下表５に示す通り、Ｒが式（ｅ）の残渣である式Ｉの化合物を得ることができる。

遊離形または医薬的に許容し得る塩の形態の式Ｉの化合物は、価値ある薬理特性を示す。例えば、インビトロおよびインビボ試験で示されるように、例えば、タンパク質キナーゼＣ（ＰＫＣ）（例えば、α、β、δ、ε、ηまたはθ活性などのＰＫＣアイソフォーム）を阻害し、Ｔ細胞の活性化と増殖を阻害する（例えば、Ｔ細胞による生産またはサイトカイン（例えば、ＩＬ−２）を阻害することにより、サイトカイン（例えば、ＩＬ−２）に対するＴ細胞の増殖性応答を阻害することにより）。従って、それらは治療用に指示される。

Ａ．インビトロ
１．タンパク質キナーゼＣアッセイ
式Ｉの化合物を、公表されている方法（D. Geiges et al. Biochem. Pharmacol. 1997;53:865-875）に従い、様々なＰＫＣアイソフォームに対する活性について試験する。アッセイは、９６ウェルのポリプロピレンマイクロタイタープレート（Costar 3794）で実施し、それは、Sigmacote (Sigma SL-2）で事前にシリコン化しておく。反応混合物（５０ｍｌ）は、関連するＰＫＣアイソザイム１０μｌを、試験化合物２５μｌ、並びに混合溶液（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ−緩衝液ｐＨ７.４＋０.１％ＢＳＡ中に、２００μｇ／ｍｌプロタミン硫酸塩、１０ｍＭ Ｍｇ（ＮＯ_３）_２、１０ｍＭ ＡＴＰ（Boehringer 519987）および^３３Ｐ−ＡＴＰ（Hartmann Analytic SFC301, 110TBq/mmol）３７５０Ｂｑを含有する）１５μｌと共に、含有する。１５分間、３２℃、マイクロタイタープレート震盪インキュベーター（Biolabo Scientific Instruments）中で、インキュベートを実施する。１０μｌの０.５Ｍ Ｎａ_２ＥＤＴＡ、ｐＨ７.４を添加して反応を停止する。混合物５０μｌを予め湿らせたホスホセルロース紙（Whatmann 3698-915）の上に、穏やかな圧力下でピペットする。組み込まれなかったＡＴＰを二重蒸留したＨ_２Ｏ１００μｌで洗い流す。その紙を０.５％Ｈ_３ＰＯ_４で１５分間、２回洗浄し、続いてＥｔＯＨで５分間洗浄する。その後紙を乾燥させ、オムニフィルター（omnifilter）（Packard 6005219）に置き、１０μｌ／ウェルの Microscint-O (Packard 6013611）を重ね、その後、Topcount 放射能カウンター（Packard）でカウントする。１ないし１０００μＭの範囲で阻害剤を連続希釈してインキュベートすることにより、上記の方法に従って、ＩＣ_５０測定を日常的なやり方で実施する。Ｓ字曲線に当てはめ、グラフからＩＣ_５０値を算出する。

２．タンパク質キナーゼＣθアッセイ
ヒト組換えＰＫＣθを上記のアッセイ条件下で使用する。このアッセイでは、式Ｉの化合物は、ＰＫＣθをＩＣ_５０ ＜１μＭで阻害する。実施例３３および６９の化合物は、このアッセイにおいて、ＰＫＣθを各々ＩＣ_５０６.８および１２.１ｎＭで阻害する。

３．タンパク質キナーゼＣαアッセイ
ヒト組換えＰＫＣαを Oxford Biomedical Research より入手し、上記Ａ.１節で記載した通りのアッセイ条件下で使用する。このアッセイでは、式Ｉの化合物は、ＰＫＣθをＩＣ_５０ ＜１μＭで阻害する。実施例２９の化合物は、このアッセイにおいて、ＰＫＣαをＩＣ_５０４.３ｎＭで阻害する。

４．タンパク質キナーゼＣβ１アッセイ
ヒト組換えＰＫＣβ１を Oxford Biomedical Research より入手し、上記Ａ.１節で記載した通りのアッセイ条件下で使用する。このアッセイでは、式Ｉの化合物は、ＰＫＣθをＩＣ_５０ ＜１μＭで阻害する。実施例３３の化合物は、このアッセイにおいて、ＰＫＣβ１をＩＣ_５０１９.６ｎＭで阻害する。

５．タンパク質キナーゼＣδアッセイ
ヒト組換えＰＫＣδを Oxford Biomedical Research より入手し、上記Ａ.１節で記載した通りのアッセイ条件下で使用する。このアッセイでは、式Ｉの化合物は、ＰＫＣθをＩＣ_５０ ＜１μＭで阻害する。実施例２９の化合物は、このアッセイにおいて、ＰＫＣδをＩＣ_５０２０ｎＭで阻害する。

６．タンパク質キナーゼＣεアッセイ
ヒト組換えＰＫＣεを Oxford Biomedical Research より入手し、上記Ａ.１節で記載した通りのアッセイ条件下で使用する。このアッセイでは、式Ｉの化合物は、ＰＫＣθをＩＣ_５０ ＜１μＭで阻害する。実施例６９の化合物は、このアッセイにおいて、ＰＫＣεをＩＣ_５０１８ｎＭで阻害する。

７．タンパク質キナーゼＣηアッセイ
ヒト組換えＰＫＣηを PanVera より入手し、上記Ａ.１節で記載した通りのアッセイ条件下で使用する。このアッセイでは、式Ｉの化合物は、ＰＫＣθをＩＣ_５０ ＜１μＭで阻害する。実施例２９の化合物は、このアッセイにおいて、ＰＫＣηをＩＣ_５０２７.４ｎＭで阻害する。

８．ＣＤ２８共刺激アッセイ
このアッセイは、Baumann G らによる Transplant.Proc. 1992;24:43-8に記載の通りに構築された、ヒトインターロイキン−２プロモーター／レポーター遺伝子を形質移入した Jurkat 細胞で実施する。β−ガラクトシダーゼレポーター遺伝子は、ルシフェラーゼ遺伝子で置き換えられている（de Wet J., et al., Mol. Cell Biol. 1987, 7(2), 725-737）。細胞を固相結合抗体またはフォルボールミリスチン酸アセタート（ＰＭＡ）およびＣａ^＋＋イオノフォアのイオノマイシンにより以下の通りに刺激する。抗体介在性刺激のために、Microlite TM1 マイクロタイタープレート (Dynatech）を、１ウェルにつきリン酸緩衝塩水（ＰＢＳ）５５μｌ中の３μｇ／ｍｌヤギ抗マウスＩｇＧ Ｆｃ抗体（Jackson）により、３時間室温で被覆する。抗体を除去した後、ＰＢＳ中の２％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）（１ウェルにつき３００μｌ）で２時間室温でインキュベートすることにより、プレートをブロックする。１ウェル当たり３００μｌのＰＢＳで３回洗浄した後、２％ＢＳＡ／ＰＢＳ５０μｌ中の１０ｎｇ／ｍｌの抗Ｔ細胞受容体抗体（WT31、Becton & Dickinson）および３００ｎｇ／ｍｌの抗ＣＤ２８抗体（１５Ｅ８）を刺激抗体として添加し、終夜４℃でインキュベートする。最後にプレートを１ウェルにつき３００μｌのＰＢＳで３回洗浄する。アッセイ培地（５０μＭ２−メルカプトエタノール、１００ユニット／ｍｌペニシリンおよび１００μｇ／ｍｌストレプトマイシンを含有する、ＲＰＭＩ１６４０／１０％ウシ胎児血清（ＦＣＳ））中で、試験化合物の３倍連続希釈物７個を２部で別々のプレートに調製し、形質移入した Jurkat 細胞（クローンＫ２２２９０＿Ｈ２３）と混合し、３０分間、３７℃、５％ＣＯ_２中でインキュベートする。１ｘ１０^５細胞を含有するこの混合物１００μｌを、次いで抗体被覆アッセイプレートに移す。並行して１００μｌを４０ｎｇ／ｍｌＰＭＡおよび２μＭイオノマイシンとインキュベートする。５.５時間、３７℃、５％ＣＯ_２中でインキュベートした後、ルシフェラーゼレベルを生物発光測定により判定する。プレートを１０分間５００ｇで遠心分離し、上清を振り落として除去する。２５ｍＭ Ｔｒｉｓ−リン酸塩、ｐＨ７.８、２ｍＭ ＤＴＴ、２ｍＭ１.２−ジアミノシクロヘキサン−Ｎ,Ｎ,Ｎ',Ｎ−テトラ酢酸、１０％（ｖ／ｖ）グリセロールおよび１％（ｖ／ｖ）ＴｒｉｔｏｎＸ−１００を含有する溶解緩衝液を添加する（１ウェルにつき２０μｌ）。プレートを室温で１０分間、常に震盪しつつインキュベートする。２０ｍＭトリシン、１.０７ｍＭ（ＭｇＣＯ_３）_４Ｍｇ（ＯＨ）_２ｘ５Ｈ_２Ｏ、２.６７ｍＭ ＭｇＳＯ_４、０.１ｍＭ ＥＤＴＡ、３３.３ｍＭ ＤＴＴ、２７０μＭ補酵素Ａ、４７０μＭルシフェリン（Chemie Brunschwig AG）、５３０μＭ ＡＴＰ、ｐＨ７.８を含有するルシフェラーゼ反応緩衝液を１ウェルにつき５０μｌ自動的に添加した後、ルシフェラーゼ活性を生物発光読取り機（Labsystem, Helsinki, Finland）で評価する。遅延時間は０.５秒であり、総測定時間は１または２秒である。低い対照値は抗Ｔ細胞受容体またはＰＭＡにより刺激された細胞からの発光単位であり、高い対照値は、試験サンプル無しで抗Ｔ細胞受容体／抗ＣＤ２８またはＰＭＡ／イオノマイシンで刺激された細胞からのものである。低い対照は、全値から差し引く。試験化合物の存在下で得られる阻害を、高い対照の阻害パーセントとして算出する。５０％阻害（ＩＣ_５０）をもたらす試験化合物の濃度を、用量反応曲線から決定する。このアッセイでは、式Ｉの化合物は、抗Ｔ細胞受容体／抗ＣＤ２８およびＰＭＡ／イオノマイシンで刺激される Jurkat 細胞を、ＩＣ_５０ ＜１μＭで阻害する。実施例２９の化合物は、このアッセイでＩＣ_５０２０ｎＭである。

９．同種混合リンパ球反応（ＭＬＲ）
双方向（two-way）ＭＬＲを標準方法に従って実施する（J. Immunol. Methods, 1973, 2, 279 and Meo T. et al., Immunological Methods, New York, Academic Press, 1979, 227-39）。簡単に説明すると、ＣＢＡおよびＢＡＬＢ／ｃマウス由来の脾臓細胞（平底組織培養マイクロタイタープレート中、１ウェルにつき各系統から１.６ｘ１０^５細胞、全部で３.２ｘ１０^５）を、ＲＰＭＩ培地（１０％ＦＣＳ、１００Ｕ／ｍｌペニシリン、１００μｇ／ｍｌストレプトマイシン（Gibco BRL, Basel, Switzerland）、５０μＭ ２−メルカプトエタノール（Fluka, Buchs, Switzerland）および連続希釈した化合物を含有する）中でインキュベートする。各試験化合物につき７回の３倍希釈段階を２部実施する。４日間のインキュベーションの後、１μＣｉの^３Ｈ−チミジンを添加する。さらに５時間インキュベーションした後、細胞を回収し、組み込まれた^３Ｈ−チミジンを標準方法に従って測定する。ＭＬＲのバックグラウンド値（低い対照）は、ＢＡＬＢ／ｃ細胞単独の増殖である。低い対照は、全値から差し引く。いかなるサンプルも用いない高い対照を、１００％増殖とする。各サンプルによるパーセント阻害を算出し、５０％阻害に必要とされる濃度（ＩＣ_５０値）を判定する。このアッセイでは、実施例２９の化合物はＩＣ_５０２８ｎＭである。式Ｉの化合物も、ヒトＭＬＲで試験するとｎＭ範囲のＩＣ_５０値を示す。

１０．ＧＳＫ−３βの阻害
ＧＳＫ−３β結合アッセイを、９６ウェルのポリプロピレンプレート中、５０μｌの反応物で実施する。各反応物は、２０ｍＭ塩化マグネシウム、４０μＭ ＡＴＰ、２ｍＭ ＤＴＴ、８８.５μＭビオチン化およびリン酸化ＣＲＥＢペプチド基質（ビオチン−ＫＲＲＥＩＬＳＲＲＰＳ（ＰＯ_４）ＹＲ−ＯＨ；Q. M. Wang et al., J. Biol. Chem. 269, 14566-14574, 1994）、［γ−^３３Ｐ］ＡＴＰ（１μＣｉ）およびＤＭＳＯ中の試験すべき化合物２μｌ（様々な濃度）を含有する。ＧＳＫ−３β（様々な濃度）１５μｌを添加し、混合物を３０℃で１時間インキュベートする。混合物２５μｌを、１.８５％リン酸１３０μｌを含むホスフォセルロースプレートに移すことにより、反応を停止する。メンブレン中の遊離放射性ヌクレオチドを減圧下で１.８５％リン酸により洗い流す（５回）。最後の洗浄の後、プレートをアダプタープレートに移し、シンチレーションカクテル５０μｌ（Microscint-20, Packard, cat. _# 20-133）を各ウェルに添加し、トップカウンター（top counter）で放射能の量をカウントする。式Ｉの化合物は、このアッセイで活性である。式Ｉの化合物は、例えば市販されているような他の基質を使用して、他の標準的なＧＳＫ−３β結合アッセイで試験してもよい。

Ｂ．インビボ
ラット心臓移植
使用した系統の組合せ：雄Ｌｅｗｉｓ（ＲＴ^１ハプロタイプ）およびＢＮ（ＲＴ^１ハプロタイプ）。吸入のイソフルランを使用して、動物を麻酔する。腹部の下大静脈を通してドナーラットをヘパリン化し、同時に大動脈から全採血し、続いて、胸部を切開し、心臓を急速に冷却する。大動脈を結紮し、最初の分枝の遠位で切断し、腕頭動脈を最初の二分枝で切断する。左肺動脈を結紮し、切離し、右側は切離するが開口のままにする。他の全血管を切り離して遊離させ、結紮し、切断し、ドナーの心臓を氷冷塩水に移す。

レシピエントを開腹し、腎臓下の腹大動脈と大静脈をクロスクランプ（cross-clamp）して準備する。１０／０単繊維縫合糸（monofilament suture）を使用して、ドナーの腕頭動脈とレシピエントの動脈との間、およびドナーの右肺動脈からレシピエントの大静脈へ、移植片を端々吻合で移植する。鉗子を取り除き、移植片を腹部後方に繋留し、腹部の内容物を温かい塩水で洗浄し、術創を閉じて加熱灯下で回復させる。鼓動しているドナーの心臓を、腹壁を通して毎日触診することにより、移植片の生存をモニターする。心臓の鼓動が停止したとき、拒絶が完了したとみなす。一日二回、一日量１ないし３０ｍｇ／ｋｇの経口投与により式Ｉの化合物で処置した動物において、移植片生存の増大が得られる。

移植片対宿主モデル
Wistar/F ラット由来の脾臓細胞（２ｘ１０^７）を、(Wistar/F x Fischer 344）Ｆ_１ハイブリッドラットの右後肢の足蹠に皮下注射する。左足蹠は処理せずにおく。動物を４日続けて（０−３）試験化合物で処置する。膝窩リンパ節を７日目に取りだし、２つの相応するリンパ節の重量差を測定する。結果は、実験群のリンパ節重量差を、試験化合物で処置しなかった動物群由来の相応するリンパ節間の重量差と比較して、リンパ節拡大の阻害として表す（パーセント表示）。このアッセイでは、実施例２９の化合物を３０ｍｇ／ｋｇ／日の用量で一日二回投与するときに、１００％の阻害が得られる。

式Ｉの化合物は、従って、Ｔリンパ球および／またはＰＫＣにより媒介される疾患または障害の処置および／または予防に有用である。例えば、器官または組織の同種または異種移植片の急性または慢性拒絶、移植片対宿主病、アテローム性動脈硬化症、血管損傷による血管閉塞（血管形成など）、再狭窄、肥満、シンドロームＸ、耐糖能障害、多嚢胞性卵巣症候群、高血圧、心不全、慢性閉塞性肺疾患、ＣＮＳ疾患（アルツハイマー病または筋萎縮性側索硬化症など）、癌、感染症（ＡＩＤＳ、敗血症ショックまたは成人呼吸窮迫症候群など）、虚血／再灌流損傷（例えば、心筋梗塞、卒中、腸虚血、腎不全または出血性ショック）、または外傷性ショック（例えば、外傷性脳損傷）である。式Ｉの化合物はまた、Ｔ細胞が介在する急性または慢性炎症性疾患または障害、または自己免疫病の処置および／または予防に有用である。例えば、リウマチ性関節炎、骨関節炎、全身性エリテマトーデス、橋本甲状腺炎、多発性硬化症、重症筋無力症、Ｉ型またはＩＩ型糖尿病およびそれらに伴う障害（例えば、血管障害、糖尿病性増殖性網膜症、糖尿病性黄斑浮腫、腎障害、神経障害および暁現象）、呼吸器疾患（喘息または炎症性肺損傷）、炎症性肝臓損傷、炎症性糸球体損傷、免疫介在障害または疾病の皮膚症状、炎症性および過増殖性皮膚疾患（乾癬、アトピー性皮膚炎、アレルギー性接触皮膚炎、刺激性接触皮膚炎およびさらなる湿疹性皮膚炎、脂漏性皮膚炎）、炎症性眼疾患（例えば、シェーグレン症候群、乾性角結膜炎またはブドウ膜炎）、炎症性腸疾患、クローン病または潰瘍性大腸炎である。上記の使用のために、必要な用量は、当然、投与様式、処置すべき特定の症状および所望の効果によって変動する。一般に、約０.１ないし約１００ｍｇ／ｋｇ体重の一日量で、満足な結果が全身的に得られると示されている。大型哺乳類（例えば、ヒト）で指示される一日量は、約０.５ｍｇないし約２０００ｍｇの範囲にあり、例えば、１日に４回までの投薬に分割するか、または遅延形態で、好適に投与される。

式Ｉの化合物は、従来のいかなる経路でも投与し得る。特に、経腸で（例えば、錠剤またはカプセル剤などの形態で経口により）または非経腸で（例えば、注射可能液剤または懸濁剤の形態で）、局所的に（例えば、ローション、ゲル、軟膏またはクリームの形態で）、または鼻腔もしくは坐剤形態においてである。医薬的に許容し得る担体または希釈剤と混合することにより、式Ｉの化合物を遊離形または医薬的に許容し得る塩形態で、少なくとも１の医薬的に許容し得る担体または希釈剤と共に含む、医薬組成物を製造し得る。経口投与用の単位投与形は、例えば、約０.１ｍｇないし約５００ｍｇの活性物質を含有する。

局所投与は、例えば、皮膚へのものである。さらなる局所投与形態は、眼へのものである。
式Ｉの化合物は、遊離形または医薬的に許容し得る塩の形態（例えば、上記の通り）で投与し得る。かかる塩は、常套方法で製造し得、遊離化合物と同等の活性を示し得る。

上記に従い、本発明はさらに、以下のものを提供する：
１.１ Ｔリンパ球および／またはＰＫＣもしくはＧＳＫ−３βが介在する障害または疾患（例えば上記の通り）の予防または処置方法であって、かかる処置を必要としている対象において、該対象に有効量の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容し得る塩を投与することを含む方法；
１.２ 急性または慢性移植拒絶、またはＴ細胞介在性炎症もしくは自己免疫疾患（例えば上記の通り）の予防または処置方法であって、かかる処置を必要としている対象において、該対象に有効量の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容し得る塩を投与することを含む方法；
２．医薬として使用するための（例えば、上記１.１および１.２で示す方法のいずれかにおいて）、遊離形または医薬的に許容し得る塩の形態の式Ｉの化合物；
３．遊離形または医薬的に許容し得る塩の形態の式Ｉの化合物を、医薬的に許容し得る希釈剤または担体と共に含む、医薬組成物（例えば、上記１.１および１.２の方法のいずれかにおいて使用するためのもの）；
４．上記１.１および１.２の方法のいずれかにおいて使用するための医薬組成物の製造において使用するための、式Ｉの化合物またはその医薬的に許容し得る塩。

式Ｉの化合物は、単独の有効成分として、または免疫調節投薬法における他の薬物もしくは他の抗炎症剤（例えば、同種または異種移植片の急性または慢性拒絶、または炎症または自己免疫障害の処置または予防のためのもの）と共に投与し得る。例えば、以下のものと組み合わせて使用し得る；シクロスポリン類またはアスコマイシン類またはそれらの免疫抑制性類似体または誘導体（例えば、シクロスポリンＡ、ＩＳＡＴｘ２４７、ＦＫ−５０６、ＡＢＴ−２８１、ＡＳＭ９８１）；ｍＴＯＲ阻害剤（例えば、ラパマイシン、４０−Ｏ−（２−ヒドロキシ）エチル−ラパマイシン、ＣＣＩ７７９、ＡＢＴ５７８またはラパログ（rapalog）（例えば、ＡＰ２３５７３）など）；コルチコステロイド；シクロホスファミド；アザチオプリン；メトトレキセート；リンパ球ホーミングを加速する特性を有するＥＤＧ受容体アゴニスト（例えば、ＦＴＹ７２０またはその類似体）；レフルノミドまたはその類似体；ミゾリビン；ミコフェノール酸；ミコフェノール酸モフェチル；１５−デオキシスペルグアリン（deoxyspergualine）またはその類似体；免疫抑制性モノクローナル抗体（例えば、白血球受容体（例えば、ＭＨＣ、ＣＤ２、ＣＤ３、ＣＤ４、ＣＤ１１ａ／ＣＤ１８、ＣＤ７、ＣＤ２５、ＣＤ２７、Ｂ７、ＣＤ４０、ＣＤ４５、ＣＤ５８、ＣＤ１３７、ＩＣＯＳ、ＣＤ１５０（ＳＬＡＭ）、ＯＸ４０、４−１ＢＢ）またはそれらのリガンド（例えば、ＣＤ１５４）に対するモノクローナル抗体）；またはその他の免疫調節化合物（例えば、ＣＴＬＡ４またはその変異体の細胞外ドメインの少なくとも一部を有する組換え結合分子（例えば、非ＣＴＬＡ４タンパク質配列に連結した、ＣＴＬＡ４またはその変異体の少なくとも細胞外部分（例えば、ＣＴＬＡ４Ｉｇ（ＡＴＣＣ６８６２９に指定されているものなど）またはその変異体（例えば、ＬＥＡ２９Ｙ））、またはその他の接着分子阻害剤（例えば、ｍＡｂｓ、またはＬＦＡ−１アンタゴニスト、セレクチンアンタゴニストおよびＶＬＡ−４アンタゴニストを含む、低分子量阻害剤））。式Ｉの化合物はまた、例えば、癌の処置に使用される、化学療法剤などの抗増殖性薬物（アロマターゼ阻害剤、抗エストロゲン剤、トポイソメラーゼＩ阻害剤、トポイソメラーゼＩＩ阻害剤、微小管活性物質、アルキル化剤、ヒストンデアセチラーゼ阻害剤、ファルネシルトランスフェラーゼ阻害剤、ＣＯＸ−２阻害剤、ＭＭＰ阻害剤、ｍＴＯＲ阻害剤、抗悪性腫瘍性抗代謝剤、白金化合物、タンパク質キナーゼ活性を低減させる化合物、およびさらなる抗血管形成化合物、ゴナドレリンアゴニスト、抗アンドロゲン剤、ベンガミド類、ビスホスホン酸塩、抗増殖性抗体およびテモゾロマイドを含むが、これらに限定されるものではない）と共に、または、糖尿病の治療における抗糖尿病薬、インシュリン分泌促進物質またはインシュリン分泌増強剤（例えば、スルホニル尿素（例えば、トルブタミド、クロロプロパミド、トラザミド、アセトヘキサミド、４−クロロ−Ｎ−［（１−ピロリジニルアミノ）カルボニル］−ベンゼンスルホンアミド（グリコピラミド）、グリベンクラミド（グリブリド）、グリブリン酸、１−ブチル−３−メタニリル尿素、カルブタミド、グリボヌリド（glibonuride）、グリピジド、グリキドン、グリソキセピド（glisoxepid）、グリブチアゾール（glybuthiazole）、グリブゾール、グリヘキサミド（glyhexamide）、グリミジン、グリピナミド（glypinamide）、フェノブタミド（phenbutamide）またはトリシクラミド（tolylcyclamide））、経口インシュリン分泌剤誘導体（例えば、短期作用インシュリン増強剤（例えば、メグリチニド）、レパグリニド、フェニル酢酸誘導体（例えば、ナテグリニド））、ＤＰＰ ＩＶ阻害剤（例えば、１−｛２−［（５−シアノピリジン−２−イル）アミノ］エチルアミノ｝アセチル−（２Ｓ）−シアノ−ピロリジンジヒドロクロリド、ＬＡＦ２３７、ＧＬＰ−１またはＧＬＰ−１アゴニスト類似体）、またはインシュリン増感剤（例えば、ペルオキシソーム増殖因子活性化受容体γアゴニスト（ＰＰＡＲγ）（例えば、グリタゾン、非グリタゾン型（Ｎ−（２−ベンゾイルフェニル）−Ｌ−チロシン類似体（例えば、ＧＩ−２６２５７０）など）、またはオキソリジンジオン（例えば、ＪＴＴ５０１））、二重ＰＰＡＲγ／ＰＰＡＲαアゴニスト（例えば、ＤＲＦ−５５４１５８、ＮＣ−２１００またはＮＮ−６２２）、レチノイドＸ受容体アゴニストまたはレキシノイド（２−［１−（３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル）−シクロプロピル］−ピリジン−５−カルボン酸、４−［（３,５,５,８,８−ペンタメチル−５,６,７,８−テトラヒドロ−２−ナフチル）−２−カルボニル］−安息香酸、９−シスレチノイン酸、またはそれらの類似体、誘導体または医薬的に許容し得る塩）と共にも、投与し得る。

上記に従い、本発明は、さらなる態様で以下を提供する：
５．治療的有効量のＧＳＫ−３β阻害剤、ＰＫＣ阻害剤、またはＴ細胞活性化および増殖阻害剤（例えば、遊離形または医薬的に許容し得る塩の形態の式Ｉの化合物）、および第２の薬物を、同時にまたは連続して共に投与することを含み、該第２の薬物が、免疫抑制性、免疫調節性、抗炎症性、抗増殖性または抗糖尿病性の薬物（例えば、上記の通り）である、上記定義の方法。
６．ａ）ＧＳＫ−３β阻害剤、ＰＫＣ阻害剤、またはＴ細胞活性化および増殖阻害剤（例えば、遊離形または医薬的に許容し得る塩の形態の式Ｉの化合物）およびｂ）免疫抑制性、免疫調節性、抗炎症性、抗増殖性または抗糖尿病性の薬物から選択される少なくとも１の第２の物質を含む、治療用組合せ物（例えば、キット）。成分ａ）および成分ｂ）は、同時にまたは連続して使用し得る。キットは、投与の指示書を含み得る。

ＧＳＫ−３β阻害剤、ＰＫＣ阻害剤、またはＴ細胞活性化および増殖阻害剤（例えば、式Ｉの化合物）が、他の免疫抑制性／免疫調節性、抗炎症性、抗増殖性または抗糖尿病性治療剤と共に投与される場合（例えば、上記で特定されるような急性または慢性移植片拒絶または炎症または自己免疫障害の予防または処置のために）、共に投与される免疫抑制性、免疫調節性、抗炎症性、抗増殖性または抗糖尿病性化合物の用量は、当然、共に用いる薬物のタイプ（例えば、ステロイドであるのか、またはシクロスポリンであるのか）、用いる特定の薬物、処置される症状などによって変動する。

式Ｉの化合物は、興味深い薬物動態的プロファイルおよび興味深いインビトロおよびインビボでの活性を有する。

Claims (10)

1. 式Ｉ
   

   

   式中、
   Ｒ_ａは、Ｈ；ＣＨ_３；ＣＨ_２−ＣＨ_３；またはイソプロピルであり、
   Ｒ_ｂは、Ｈ；ハロゲン；Ｃ_１−６アルコキシ；またはＣ_１−６アルキルであり、そして、
   Ｉ．Ｒは、式（ａ）
   

   

   式中、
   Ｒ_１は、位置３または４でＣＨ_３により置換されていることもあるピペラジン−１−イル；または４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イルであり；
   Ｒ_２は、Ｃｌ；Ｂｒ；ＣＦ_３；またはＣＨ_３であり；そして、
   Ｒ_３は、Ｈ；ＣＨ_３；またはＣＦ_３であり；Ｒ_３がＨであり、Ｒ_ａがＨまたはＣＨ_３であり、Ｒ_ｂがＨであり、そしてＲ_１が４−メチル−１−ピペラジニルであるとき、Ｒ_２はＣＨ_３またはＣｌ以外である；
   の基であるか、または、
   ＩＩ．Ｒは、式（ｂ）
   

   

   式中、
   Ｒ_４は、位置３および／または４でＣＨ_３により置換されているピペラジン−１−イル；または４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イルであり；Ｒ_４が４−メチル−１−ピペラジニルであるとき、Ｒ_ａはＨまたはＣＨ_３以外である；
   の基であるか、または、
   ＩＩＩ．Ｒは、式（ｃ）
   

   

   式中、
   Ｒ_１４は、位置３および／または４でＣＨ_３により、または位置３でエチル、フェニル−Ｃ_１−４アルキル、Ｃ_１−４アルコキシ−Ｃ_１−４アルキルまたはハロゲノ−Ｃ_１−４アルキルにより置換されていることもあるピペラジン−１−イル；または４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イルであり；
   Ｒ_１５は、ハロゲン；ＣＦ_３；またはＣＨ_３であり；Ｒ_１６がＣＨ_３であり、Ｒ_ａがＨまたはＣＨ_３であり、Ｒ_ｂがＨであり、そしてＲ_１４が４−メチル−１−ピペラジニルであるとき、Ｒ_１５はＣＨ_３以外であり；
   Ｒ_１６は、Ｈ；ＣＨ_３；ＣＨ_２−ＣＨ_３；またはＣＦ_３であり；Ｒ_１５がＣｌであり、Ｒ_ａがＨまたはＣＨ_３であり、Ｒ_ｂがＨであり、そしてＲ_１４が４−メチル−１−ピペラジニルであるとき、Ｒ_１６はＨ以外である；
   の残基であるか、または、
   ＩＶ．Ｒは、式（ｄ）
   

   

   式中、Ｒ_８は、１−ピペラジニル、３−メチル−ピペラジン−１−イルまたは４−ベンジル−ピペラジン−１−イルである；
   の基であるか、または、
   Ｖ．Ｒは、式（ｅ）
   

   

   式中、Ｒ_９は４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル；または位置３でメチルまたはエチルにより置換され、そして位置４でメチルにより置換されていることもある１−ピペラジニルである、
   の基である、
   の化合物、またはそれらの塩。
2. ３−［５−クロロ−６−メチル−２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−ピリミジン−４−イル］−４−（１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２,５−ジオン、３−［３−（４,７−ジアザ−スピロ［２.５］オクト−７−イル）−イソキノリン−１−イル］−４−（７−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２,５−ジオンおよび３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−［２−（４−メチル−ピペラジン−１−イル）−５−トリフルオロメチル−ピリミジン−４−イル］ピロール−２,５−ジオンから選択される請求項１に記載の化合物またはそれらの塩。
3. 請求項１に記載の式Ｉの化合物の製造方法であって、式ＩＩ
   

   

   式中、Ｒ_ａおよびＲ_ｂは、請求項１で定義の通りである、
   の化合物を、式ＩＩＩ
   Ｒ−ＣＨ_２−ＣＯ−ＮＨ_２ （ＩＩＩ）
   式中、Ｒは請求項１で定義の通りである、
   の化合物と反応させ、
   そして、必要であれば、生じる遊離形で得られる式Ｉの化合物を塩の形態に適するように変換するか、またはその逆を行う、
   ことを含む、方法。
4. 医薬として使用するための、遊離形または医薬的に許容し得る塩の形態の請求項１または請求項２に記載の式Ｉの化合物。
5. 医薬的に許容し得る希釈剤または担体と共に、請求項１または請求項２に記載の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容し得る塩を含む、医薬組成物。
6. Ｔリンパ球および／またはＰＫＣもしくはＧＳＫ−３βが介在する障害または疾患の処置または予防で使用するための医薬組成物の製造において使用するための、請求項１または請求項２に記載の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
7. 免疫抑制性、免疫調節性、抗炎症性、抗増殖性または抗糖尿病性の薬物と組み合わせて使用するための、請求項１または請求項２に記載の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容し得る塩。
8. ａ）遊離形または医薬的に許容し得る塩の形態の式Ｉの化合物、およびｂ）免疫抑制性、免疫調節性、抗炎症性、抗増殖性および抗糖尿病性の薬物から選択される少なくとも１の第２の物質、を含む、組合せ物。
9. Ｔリンパ球および／またはＰＫＣもしくはＧＳＫ−３βが介在する障害または疾患の予防または処置方法であって、かかる処置を必要としている対象において、該対象に有効量の請求項１または請求項２に記載の式Ｉの化合物またはその医薬的に許容し得る塩を投与することを含む方法。
10. 治療的有効量の遊離形または医薬的に許容し得る塩の形態の式Ｉの化合物、および第２の薬物物質を、同時にまたは連続して共に投与することを含み、該第２の薬物物質が、免疫抑制性、免疫調節性、抗炎症性、抗増殖性または抗糖尿病性の薬物である、請求項９に記載の方法。