JP2003529383A - 発酵タンパク加水分解物 - Google Patents
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Abstract
Description
料と炭水化物材料から発酵麹を調製し、ついでこの麹材料を乳酸菌の培養物の存
在下で加水分解することからなる、調味料の製造方法が開示される。調味料組成
物はモロミを生成せずに得られる。
料理用にプロセスフレーバ用ベースとして使用できる生物学的植物タンパク質加
水分解物は液体調味料用に発展してきた。
えば酵素(市販または発酵自己生産)により、HPPより製造費用が高いという
問題がある。
知である。小麦グルテン加水分解物(食品用酵素による)の開発上の重要な点は
、これらの酵素のコスト、加水分解物から高収量で固体の分別コスト、および加
水分解物の微生物的保護コストが主として高いことである。塩を使わないかまた
は低濃度で、ある腐敗微生物に許容可能な温度で行われるからである。 本発明はまた調味料をつくるのに天然のかつ「ソフトな技術」方法を供するこ
とを目的とし、この技術は昨今消費者に非常に強く望まれている。
プロセス製造の」MSG(グルタミン酸一ナトリウム)またはグルタミン酸を含
有する風味のよいベースの製造上相乗的活性を有することが分かった。本明細書
で、MSGはグルタミン酸一ナトリウムまたはグルタミン酸の意味で使われる。
選択した少なくとも1つの耐熱性乳酸菌株を併用してタンパク質含有材料を加水
分解することからなる、風味のよい発酵ベースの製造方法に関する。
ソーペプチダーゼおよび/またはプロテアーゼ、デアミナーゼ、トランスアミナ
ーゼまたはアミログルコシダーゼである。
の乳酸菌は通性ヘテロ発酵性ラクトバチルス属、ラクトバチルス・ラムノーサス
、ラクトバチルス・デルブルッキ、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・
パラカゼイ、ラクトバチルス種からなる群から選択することができる。
58)(CNCM I−2433)である。 酵素::乳酸菌比は成分の添加量%(w/w)に基づいて約1:1から約4:1
であるのが望ましい。
成する、または少なくとも20%のDHを有するのに十分な時間行うことができ
る。タンパク質含有材料の加水分解は少なくとも約30‐50℃の温度で行うの
がよい。pHは約5‐6に維持するのが望ましい。反応は少なくとも12時間行
うことができる。
して、原料ソースを得ることができる。望ましい態様では、加水分解物を殺菌し
、塩を加えついで加水分解物を濾過して、液相から固体を分離する。
る。これは全く生物的で、タンパク質材料の良好な加水分解が得られる。さらに
、現在まで記述されているどの生物的加水分解方法より短い。
り供される酵素との相乗効果を使用する。酵素のみにより得られる類似の加水分
解物と比較して、発酵加水分解物はかなりの加水分解度を示し、MSGの収量も
高い。
菌(LAB)に関する。選択された菌株はグルコースやマルトースのような還元
糖を除くことができる。LAB菌株はペプチド結合からプロリンやMSGまたは
グルタミン酸を高度に遊離することができる。
バチルスラムノーサス、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・パラカゼイ
およびラクトバチルス種からなる群から選ばれる。 最も望ましい態様では、乳酸菌菌株はラクトバチルス・ラムノーサス(NCC
858)(CNCM I-2433)である。
徴を有する耐熱性乳酸菌(LAB)の使用に関する。
、その結果、未調整のメイラード反応が減少し、製品のシェルフライフ安定性と
適用性を改善する。
の加水分解、MSGとグルタミン酸の高収量)。
れる菌数を表す。 また、すべての%は特に断らない限り、重量基準による。
DH)は、DH=(遊離α−アミノ態窒素×100/全窒素濃度)で表す。 さらに、「NCC」はネスレ・カルチャー・コレクション(スイス、ローザン
ヌのネスレ研究センター)を表す。
のである。植物タンパク質材料は例えば、小麦グルテン、脱脂大豆グリット、脱
脂大豆、コーングルテン、コメグルテン、ヒマワリ圧搾ケーキである。動物タン
パク質材料、例えば乳タンパク、チキンミール、ビーフまたはポークは本方法の
基質として使うことができる。タンパク質含有材料は乾燥、粉末状、あるいはグ
リットとして使用するのがよい。
。生成したスラリーは少なくとも1つの酵素とグルタミナーゼ活性を供する能力
について選択した少なくとも1つの耐熱性乳酸菌を併用して加水分解に供する。
ランスアミナーゼ、グルタミナーゼまたはアミログルコシダーゼでよい。Flavor
zyme(登録商標)、Alcalase(登録商標)、Dextrozyme(登録商標)、AMG(登
録商標)を使うのが望ましい。これらの酵素はノボザイムス・ノルディスク・フ
ァーメント社(スイス)から提供を受けた。本酵素は単独でもあるいは併用もで
きる。酵素の使用量は使用する酵素により変わりうる。プロテアーゼを使用する
場合、使用量は小麦グルテンを基準にして、少なくとも1重量%であり、約1%か
ら約4%が望ましい。カルボヒドラーゼを使用する場合、小麦グルテンに基づい
て少なくとも約0.01%が望ましい。
既述した特徴を有する。通性ヘテロ発酵性ラクトバチルス属、ラクトバチルス・
デルブルッキ、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・パラカゼイおよびラ
クトバチルス・ラムノーサスからなる群から選択され、最も望ましいのはラクト
バチルス・ラムノーサス(NCC858)(CNCM I-2433)である。
水分解中約104〜約107cfu/gの力価を有する。このスターターは加水分解反
応物に少なくとも0.1%(v/v)の量、望ましくは約0.5〜2%(v/v)あ
るいは初期の加水分解反応物中の量が望ましくは約5×105〜2×106cfu/g
となる量で添加することができる。 酵素:乳酸菌比は成分の添加量%(w/w)に基づいて、約1:1〜約4:1が望
ましい。
の水にタンパク質含有材料15−30%を加えて、スラリーを得、ついでこのス
ラリーに少なくとも1つの酵素を約1.0%〜約4.0%(小麦グルテンに基づい
て)および約109〜1011cfu/g(濃縮スターター培養物において)の力価を有
する少なくとも1つの乳酸菌株のスターター(接種物)を約0.1%〜約1%加え
ることにより行う。%は全反応物に基づき重量で示す。
5〜約48℃で行うことができる。pHは約5−6である。酢酸塩緩衝pHまた
は炭酸カルシウムを加えて、例えばpH5−6に維持することができる。
のグルタミン酸一ナトリウムかグルタミン酸を生成し、あるいは加水分解度(D
H)が少なくとも20%になるのに十分な時間行う。 望ましい態様では、加水分解は少なくとも12時間、最も望ましくは約15〜
約24時間行うことができる。
元糖が遊離される。還元糖はメイラード反応の反応パートナーであり、貯蔵中に
褐変と苦味の発現となりうる。耐熱性である選択された乳酸菌はグルコースとマ
ルトースを排除するが、プロセス酵素の機能を阻害しないしあるいは異臭を発現
しない。糖類を除くことにより、乳酸菌株は保護培養物として機能し、グラム陰
性および陽性菌の殺菌活性を有する。ついで得られた加水分解物は還元糖が低い
。グルコースは加水分解中に完全に除くことができ、マルトース濃度は部分的に
減ずることができる。 ついで、加水分解物はいろいろなやり方で処理して、周知の液体、ペーストま
たは粉末を得ることができる。
くとも3時間乾燥(真空乾燥)し、あるいは140−180℃の入口空気温度と
約90℃の出口空気温度でナイロ噴霧乾燥機にて噴霧乾燥して、少なくとも98
%の乾燥物含量の粉末を得る。得られた風味のよいベースは例えば、プロセスフ
レーバの用途に使用でき、別には加水分解物は液体調味料に使用できる。
分解物を約90℃まで加熱し、この温度で約10分間維持して酵素および微生物
代謝活性を不活性化する(低温殺菌)。
プレートフィルターとフレームフィルターで濾過し、別法として、ホッシュフィ
ルタープレスを使って濾過する。濾過後、TS30−35%の澄明な原料ソース
が得られる。
を添加し、ついで混合物を95℃−110℃で1−5時間加熱処理して反応させ
ることができる(米国特許第5,480,663号明細書参照)。
ボディ付与能、および低含量の還元糖を有する加水分解物が得られる。 さらに、低レベルの還元糖により、未調整のメイラード反応が減じ、製品のシ
ェルフライフ安定性が改善される。
元物質を含有しかつ発酵加水分解中に生成される乳酸塩を欠くことが分かった。
本発明による発酵加水分解物は高度の加水分解を示し、かつ高収量のMSGまた
はグルタミン酸が得られる。この発酵タンパク質加水分解法は自己調整系である
ようであり、パラメーター酵素濃度、接種物の添加量、微生物の代謝活性、反応
のpHおよび温度は互いに動的平衡にある。 本発明の加水分解物はプロセスフレーバや料理用途においてボディ付与剤の良
好な候補である。
ば、料理用製品のセイボリ型フレーバを促進または付与する。液状の量はフレー
バの所望の程度により、料理用製品またはペットフード製品kg当たり約0.0
5〜750gが望ましい。乾燥型のフレーバ付与剤は製品kg当たり0.2〜2
50gで使用することができる。
質や物理的パラメータ:食用、GRASの状態、グルコースとマルトースの代謝
可能性、40℃と55℃の間で耐熱性によりスクリーンした。
℃で生育)でかつ生育し、植物から単離される。これらはまたグルコースやマル
トースの代謝能を有する。プロセス酵素の機能、加水分解物のボディ付与性およ
び呈味性を阻害しないし、異臭を生成しない。
バチルス・ラムノーサス、ラクトバチルス・デルベッキ、ラクトバチルス・カゼ
イ、ラクトバチルス・パラカゼイその他のラクトバチルス種からなる群から選択
される。 さらに望ましい態様では、LABはラクトバチルス・ラムノサスNCC858
(CNCM I-2433)である。
国立微生物カルチャー・コレクション(CNCM)、パスツール研究所(パリ)
に2000年4月5日にCNCM I-2433として寄託した。
でまたは短鎖状で生じる。 ・通性ヘテロ発酵生代謝の微好気性菌、L(+)乳酸を産生。 ・カタラーゼ陰性、通性CO2を産生。 ・糖の発酵:アミグダリン(+)、アラビノース(+/−)、セロビオース(+
)、エスクリン(+)、グルコン酸塩(+)、マンニトール(+)、メレシトー
ス(+)、メリビオース(−)、ラフィノース(−)、リボース(+)、ソルビ
トール(+)、シュクロース(+)、キシロース(+)。 ・48℃まで生育可能。
する耐熱性乳酸菌(LAB)株の使用に関する。選択されたLABは例えば、上
記の風味のよいベースの製造方法に使うことができる。例えば、ラクトバチルス
・ラムノサスNCC858を使って培養するのは、グルタミンをグルタメートに
変換するための工業用グルタミナーゼの使用を除くことができることを見出した
。さらに、NCC858も若干のタンパク分解活性を示す。
や味の改善に寄与する(加水分解度が高く、MSGやグルタミン酸の収量も高い
)。LAB菌株はフレーバ付与プロセスの微生物学的保護を供し、かつ未調整の
メイラード反応を減じる還元等を有意に除き、製品のシェルフライフ安定性を改
善する。 つぎの例は説明のためにのみ示すものであり、本発明の主題を限定するもので
はない。
。最初の試験では、反応のpHは系にNaOHを添加して5.8に維持した。反
応はつぎのレシピによった。 成分 全反応物に基づく%(w/w) 小麦グルテン 22 水 76.25 Flavorzyme(登録商標)(小麦グルテンベース) 1 Glutaminase C200(登録商標) (小麦グルテンベース) 0.1 酢酸塩バッファーpH5.8 0.25 LABスターター 5.105cfu/g(0.4%) 表1はNCC858による生育試験の結果を要約し、発酵小麦グルテン加水分
解物プロセスにおける最適の生育、反応温度を見出すものである。 45℃では、16時間の加水分解中微生物の発育は良好であることを結果は明
瞭に示す(cfuと糖濃度)。しかし、47℃までの温度にNCC858菌株は耐
えられることを、つづく加水分解が示している。加水分解度のモニタリングによ
れば、酵素の加水分解効率は45℃で有効であり、55℃ではそのままである。 ・発酵小麦グルテン加水分解物プロセスにおけるNCC858スターターの可能
な添加量範囲の測定 1.104cfu/gと1.106cfu/g間の接種物の添加範囲は加水分解にネガティ
ブな影響を及ぼさないことを示した。大腸菌、AMCおよびAMSの微生物学的
モニタリングは、全体の添加範囲ではNCC858により良好な保護が示された
ことを示した。1.104cfu/gより低い添加量は試みなかった。これらの場合、
接種物には原料中にコンタミフローラは優先しないからである。 ・唯一の酵素としてFlavorzyme(登録商標)/Alcalase(登録商標)による発酵 加水分解プロセス 1−3%のFlavorzyme(登録商標)の添加範囲をこのシリーズで試験した。す
べての試験でAlacalase(登録商標)を0.1%で加えた。加水分解物のレシピは
既述したものと同じである。 表2は、上記試験の分析値の比較、小麦グルテン加水分解物の酵素バージョン
を示す。対照値として、2%Flavorzyme(登録商標)、0.1%Alcalase(登録商
標)および4%Flavorzyme(登録商標)、1%GlutaminaseC200(登録商標)、0
.1%Alcalase(登録商標)を使用した。 2%だけのFlavorzyme(登録商標)とNCC858スターターのみで作った加
水分解物は良質マーカーのMSGまたはグルタミン酸およびDHを生産したこと
を表2は明瞭に示す。このデータは、加水分解物を2%Flavorzyme(登録商標)
と0.75%グルタミナーゼ(GlutaminaseC200(登録商標))およびスターター
NCC858(データは示してない)で作ったプロセス条件に匹敵する。換言す
れば、市販のグルタミナーゼの添加はMSGまたはグルタミン酸の収量あるいは
発酵方法における加水分解度を改善しない。 2%のみのFlavorzymeおよび0.1%Alcalaseしかしスターターなしを使う方法
では、有意に低度の加水分解となり、MSGまたはグルタミン酸のベースレベル
のみを示す。 3%Flavorzyme、0.1%AlcalaseおよびNCC858スターターを使うプロセ
ス条件は、4%Flavorzyme、0.1%Alcalaseおよび1%GlutaminaseC200を使用し
たものと匹敵する結果を示す。要するに、加水分解系にスターターNCC858
を添加すると、Flavorzyme(登録商標)の量を減ずるのに役立ち、かつ発酵小麦
グルテン加水分解物の製造から市販のグルタミナーゼを除くことができる。
.65%の水に混合して、スラリーを得る。得たスラリーを、1%Flavorzyme(登
録商標)(小麦グルテンを基準)および5×105cfu/gの力価を有する1%ラク
トバチルス・ラムノサス(NCC858)(CNCM I-2433)のスターターを
添加して加水分解する。 加水分解のpHは酢酸塩バッファー0.25%(w/w)を添加して約5.8に維持
し、反応を16時間45‐48℃で行い、発酵加水分解物を得る。 ついで、加水分解物を66℃、約15−4ミリバールで≧3時間真空乾燥し、
粉末を得る。この粉末の乾燥重量は少なくとも98%である。この粉末を例5に
記載のように使用することができる。
lを加える。ついで加水分解物を約90℃まで加熱し、この温度で約10分間維
持し、酵素と微生物代謝活性を不活性化する(低温殺菌)。 この不活性化した加水分解物を冷却し、約55℃に維持し、ホッシュフィルタ
ープレスを使って濾過する。濾過後、TS30−35%の澄明な原料ソースを得
る。この原料ソースは調味料の製造に使用することができる(例4参照)。 原料ソースを蒸発させ、真空乾燥し、ついでミルにかけ粉末にすることができ
る。この粉体を例5および6に記載のように、料理用およびフレーバ用に使うこ
とができる。
に褐色ビンに移す。
に調製した発酵加水分解物粉体の使用を立証する。スープはつぎの組成からなる
。 成分 〔%〕 オニオンパウダー 0.5 酵素〔粉末〕による発酵小麦グルテン加水分解物 13.6 加工澱粉 12.0 脱脂乳粉末 11.4 小麦粉 13.0 塩 2.4 マッシュルーム粉末 6.5 非乳脂クリーマー 11.6 マルトデキストリン 18.0 脂肪 11 全ての成分を常法のミキサーにて混合する。スープは乾燥料理粉末である。1
00gの粉末を800mlの水と200mlの部分脱脂乳と混合しついで5分間
加熱する(シンメリング)。
、8%の水、および例2にて記載した0.2%の液状発酵加水分解物、ビタミンお
よび無機塩から調製する。 この混合物を12℃で乳化し、プリンの形に押出し、ついでこれを90℃の温
度で加熱する。これを30℃に冷却し、チャンク型に切断する。これらのチャン
ク45%を、98%の水、1%の着色料、および1%のグアーガムから調製したソー
ス55%と混合する。スズめっきの缶に充填し、125℃で40分間滅菌する。 このペットフードは試料を嗅いで分かるように、素敵なフレーバを有する。
Claims (22)
- 【請求項1】 タンパク含有物質を、少なくとも1つの酵素とグルタミナー
ゼ活性能で選んだ少なくとも1つの耐熱性乳酸菌菌株を併用して加水分解するこ
とからなる、風味のよい発酵ベースの製造方法。 - 【請求項2】 加水分解はさらに熱不活性化、濾過および/または遠心分離
により末端で加工して、原料ソースを得る、請求項1記載の方法。 - 【請求項3】 タンパク含有材料は植物または動物起源である、請求項1ま
たは2記載の方法。 - 【請求項4】 タンパク含有材料は小麦グルテン、こめタンパク、大豆、コ
ーングルテン、ヒマワリ圧搾ケーキ、乳タンパクおよび動物タンパクである、請
求項3記載の方法。 - 【請求項5】 酵素:乳酸菌株比は、成分の添加量%(w/w)に基づいて約
1:1から4:1である、請求項1から4のいずれか1項記載の方法。 - 【請求項6】 酵素はエキソーまたはエンドープロテアーゼ、デアミナーゼ
、カルボヒドラーゼまたはアミログルコシダーゼである、請求項1から5のいず
れか1項記載の方法。 - 【請求項7】 酵素はFlavorzyme(登録商標)、Alcalase(登録商標)、De
xtrozyme(登録商標)又はAMG(登録商標)、glutaminaseC200(登録商標)であ
る、請求項6記載の方法。 - 【請求項8】 酵素は全反応物に基づいて、少なくとも0.2重量%(プロ
テアーゼ)、または0.05重量%(カルボヒドラーゼ)の量で使われる、請求
項1から7のいずれか1項記載の方法。 - 【請求項9】 耐熱性乳酸菌は通性ヘテロ発酵性ラクトバチルス属、ラクト
バチルス・ラムノーサス、ラクトバチルス・デルブルッキ、ラクトバチルス・カ
ゼイ、ラクトバチルス・パラカゼイまたはラクトバチルス種からなる群から選択
される、請求項1から8のいずれか1項記載の方法。 - 【請求項10】 乳酸菌はラクトバチルス・ラムノーサス(NCC858)
CNCM I−2433である、請求項1から9のいずれか1項記載の方法。 - 【請求項11】 乳酸菌は少なくとも0.1から0.5%(w/w)の量で、
約1.108から1.1011cfu/gの力価を有するスターターの形で添加する、請
求項1から10のいずれかいl項記載の方法。 - 【請求項12】 加水分解は、乳酸菌が2‐3対数まで生育する、または加
水分解物中にグルタミン酸一ナトリウム(MSG)1−4%を生成する、または
加水分解度(DH)が少なくとも20%になるのに十分な時間行う、請求項1か
ら11のいずれか1項記載の方法。 - 【請求項13】 加水分解は43℃から48℃、pH5−6で、少なくとも
12時間行う、請求項1から12のいずれか1項記載の方法。 - 【請求項14】 15−30%のタンパク質含有材料と65−80%の水を含
むスラリーを、Flavorzyme(登録商標)のような少なくとも1つの酵素1−4%
と、少なくとも0.1から0.5%(w/w)の量で、約1.105から1.106 cfu/gの力価を有する乳酸菌スターター0.5から2%と併用して加水分解する、
請求項1から13のいずれか1項記載の方法。 - 【請求項15】 プロセスフレーバのボディー付与剤として、請求項1から
14のいずれか1項の方法により調製した風味のよいベースの使用。 - 【請求項16】 調味料、フレーバおよび料理製品またはペットフード製品
の製造のために、請求項1から14のいずれか1項記載の方法により調製した風
味のよいベースの使用。 - 【請求項17】 グルタミナーゼ活性能について選択した単離耐熱性乳酸菌
菌株。 - 【請求項18】 通性ヘテロ発酵性ラクトバチルス属、ラクトバチルス・デ
ルブルッキ、ラクトバチルス・カゼイ、ラクトバチルス・パラカゼイおよびラク
トバチルス・ラムノーサスからなる群から選択される、請求項17記載の単離菌
株。 - 【請求項19】 ラクトバチルス・ラムノーサス(NCC858)CNCM
I-2433である、請求項17または18記載の単離菌株。 - 【請求項20】 調味料、フレーバおよび料理製品またはペットフード製品
の製造のためにプロセス微生物として、請求項17から19のいずれか1項記載
の乳酸菌単離菌株の使用。 - 【請求項21】 少なくとも1つの酵素と併用する、請求項20記載の単離
菌株の使用。 - 【請求項22】 酵素:乳酸菌株比が成分の添加量%(w/w)にもとづいて
約1:1から4:1の量である、請求項20記載の単離菌株の使用。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
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