JP2003149244A - 免疫反応におけるプロゾーン現象抑制方法及び免疫反応測定用試薬 - Google Patents
免疫反応におけるプロゾーン現象抑制方法及び免疫反応測定用試薬Info
- Publication number
- JP2003149244A JP2003149244A JP2001341838A JP2001341838A JP2003149244A JP 2003149244 A JP2003149244 A JP 2003149244A JP 2001341838 A JP2001341838 A JP 2001341838A JP 2001341838 A JP2001341838 A JP 2001341838A JP 2003149244 A JP2003149244 A JP 2003149244A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- immune reaction
- prozone phenomenon
- suppressing
- reagent
- reaction
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Abstract
(57)【要約】
【課題】 プロゾーン現象を抑制して、免疫反応液中に
抗原（又は抗体）がラテックスや金属コロイド等不溶性
担体粒子に結合させた抗体（又は抗原）に比し過剰に含
まれていても適切な測定値が得られるようにし、それに
より、広い濃度範囲にわたる抗原（又は抗体）の測定を
可能にする方法及び試薬を提供すること。 【解決手段】 アルキル硫酸エステル塩系、アルキルベ
ンゼンスルホン酸塩系、アルキルナフタレンスルホン酸
塩系、アルキルジフェニルエーテルスルホン酸塩系、ポ
リオキシエチレンアルキル硫酸エステル塩系、ポリオキ
シエチレンアルキルアリル硫酸エステル塩系及びアルカ
ンスルホン酸塩系等、硫酸エステル塩系及びスルホン酸
塩系の陰イオン性界面活性剤より選ばれる１種又は２種
以上の化合物よりなる、免疫反応測定用プロゾーン現象
抑制剤、及びこれを免疫反応におけるプロゾーン現象抑
制剤として含有することを特徴とする、免疫反応測定方
法及び試薬。
抗原（又は抗体）がラテックスや金属コロイド等不溶性
担体粒子に結合させた抗体（又は抗原）に比し過剰に含
まれていても適切な測定値が得られるようにし、それに
より、広い濃度範囲にわたる抗原（又は抗体）の測定を
可能にする方法及び試薬を提供すること。 【解決手段】 アルキル硫酸エステル塩系、アルキルベ
ンゼンスルホン酸塩系、アルキルナフタレンスルホン酸
塩系、アルキルジフェニルエーテルスルホン酸塩系、ポ
リオキシエチレンアルキル硫酸エステル塩系、ポリオキ
シエチレンアルキルアリル硫酸エステル塩系及びアルカ
ンスルホン酸塩系等、硫酸エステル塩系及びスルホン酸
塩系の陰イオン性界面活性剤より選ばれる１種又は２種
以上の化合物よりなる、免疫反応測定用プロゾーン現象
抑制剤、及びこれを免疫反応におけるプロゾーン現象抑
制剤として含有することを特徴とする、免疫反応測定方
法及び試薬。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は免疫凝集反応や免疫
沈降反応等の免疫反応において、被測定物質を広濃度範
囲にわたって測定しようとする際に障害となるプロゾー
ン現象を抑制する薬剤及び方法、これを利用した免疫測
定方法、及び免疫反応測定用試薬に関する。
沈降反応等の免疫反応において、被測定物質を広濃度範
囲にわたって測定しようとする際に障害となるプロゾー
ン現象を抑制する薬剤及び方法、これを利用した免疫測
定方法、及び免疫反応測定用試薬に関する。
【０００２】
【従来の技術】近年、臨床検査等の分野における各種検
査では、自動化及び測定時間の短縮が図られている。そ
れら検査において、免疫反応を利用する測定方法が、生
体試料中の微量物質を測定するために広く用いられてい
る。免疫測定方法には、ＲＩＡ法、ＥＩＡ法、免疫比濁
法、ラテックス凝集法、金属コロイド凝集法、イムノク
ロマト法等多くの方法があるが、その中でもラテックス
凝集法や金属コロイド凝集法は反応液の分離や洗浄を行
わないため、自動化に適している。
査では、自動化及び測定時間の短縮が図られている。そ
れら検査において、免疫反応を利用する測定方法が、生
体試料中の微量物質を測定するために広く用いられてい
る。免疫測定方法には、ＲＩＡ法、ＥＩＡ法、免疫比濁
法、ラテックス凝集法、金属コロイド凝集法、イムノク
ロマト法等多くの方法があるが、その中でもラテックス
凝集法や金属コロイド凝集法は反応液の分離や洗浄を行
わないため、自動化に適している。
【０００３】従来、生体試料中の被測定物質を免疫測定
する際、非イオン性、陰イオン性、陽イオン性または両
性界面活性剤を免疫反応液中に添加することにより、被
測定物質である抗原（又は抗体）の低濃度領域において
測定感度及び測定精度を改良できることが知られていた
（特開昭５８−１８７８０２号公報）。一方、免疫沈降
反応や免疫凝集反応などの免疫反応において、等量域よ
り抗原（又は抗体）が過剰に存在する場合、沈降物や凝
集塊が生成しにくくなって沈降物量が却って減少する現
象（「プロゾーン（prozone）現象」という。）が知ら
れている。このため、生体試料中の被測定物質である抗
原（又は抗体）が免疫反応液中に高濃度に存在する場合
等、ラテックスや金属コロイド等不溶性担体粒子に結合
させた抗体（又は抗原）に比して抗原（又は抗体）が過
剰に存在する場合、ラテックス凝集法や金属コロイド凝
集法で測定するとプロゾーン現象のために測定値が却っ
て小さくなり、このため測定に全く信頼が置けなくなる
場合があった。
する際、非イオン性、陰イオン性、陽イオン性または両
性界面活性剤を免疫反応液中に添加することにより、被
測定物質である抗原（又は抗体）の低濃度領域において
測定感度及び測定精度を改良できることが知られていた
（特開昭５８−１８７８０２号公報）。一方、免疫沈降
反応や免疫凝集反応などの免疫反応において、等量域よ
り抗原（又は抗体）が過剰に存在する場合、沈降物や凝
集塊が生成しにくくなって沈降物量が却って減少する現
象（「プロゾーン（prozone）現象」という。）が知ら
れている。このため、生体試料中の被測定物質である抗
原（又は抗体）が免疫反応液中に高濃度に存在する場合
等、ラテックスや金属コロイド等不溶性担体粒子に結合
させた抗体（又は抗原）に比して抗原（又は抗体）が過
剰に存在する場合、ラテックス凝集法や金属コロイド凝
集法で測定するとプロゾーン現象のために測定値が却っ
て小さくなり、このため測定に全く信頼が置けなくなる
場合があった。
【０００４】このような問題を改善する方法としては、
硫酸塩類および必要に応じてポリエチレングリコールを
含有させた免疫学的凝集反応試薬（特開平１１−３４４
４９２号公報）、又は特定量のジカルボン酸を含有させ
た免疫学的凝集反応試薬（特開平１１−３４４４９４号
公報）を用いる測定法等が提案されている。
硫酸塩類および必要に応じてポリエチレングリコールを
含有させた免疫学的凝集反応試薬（特開平１１−３４４
４９２号公報）、又は特定量のジカルボン酸を含有させ
た免疫学的凝集反応試薬（特開平１１−３４４４９４号
公報）を用いる測定法等が提案されている。
【０００５】しかしながら、これらの方法では、プロゾ
ーン現象を幾らかは抑制できるものの、ラテックス凝集
法や金属コロイド凝集法等の、自動化に適したホモジニ
アス測定系に用いるには、抑制効果が不十分であり、プ
ロゾーン現象の抑制のための新たな技術が切望されてい
た。
ーン現象を幾らかは抑制できるものの、ラテックス凝集
法や金属コロイド凝集法等の、自動化に適したホモジニ
アス測定系に用いるには、抑制効果が不十分であり、プ
ロゾーン現象の抑制のための新たな技術が切望されてい
た。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、上記背景の
もとで、プロゾーン現象を十分に抑制し、免疫反応液中
に被測定物質である抗原（又は抗体）が不溶性担体粒子
に結合させた抗体（又は抗原）に比して過剰に含まれて
いても適切な測定値が得られるようにし、それにより、
低濃度から高濃度まで、広い濃度範囲にわたる被測定物
質の測定を可能にする方法、これに用いるプロゾーン現
象抑制剤、またこれを用いた免疫反応測定用試薬、免疫
反応測定方法及びプロゾーン現象の抑制方法を提供する
ことを目的とする。
もとで、プロゾーン現象を十分に抑制し、免疫反応液中
に被測定物質である抗原（又は抗体）が不溶性担体粒子
に結合させた抗体（又は抗原）に比して過剰に含まれて
いても適切な測定値が得られるようにし、それにより、
低濃度から高濃度まで、広い濃度範囲にわたる被測定物
質の測定を可能にする方法、これに用いるプロゾーン現
象抑制剤、またこれを用いた免疫反応測定用試薬、免疫
反応測定方法及びプロゾーン現象の抑制方法を提供する
ことを目的とする。
【０００７】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、免疫測定
においてプロゾーン現象を抑制する新たな技術を求めて
検討した結果、被測定物質を含む免疫反応液中に、各種
の界面活性剤のうちスルホン酸塩型又は硫酸エステル塩
型の陰イオン性界面活性剤を含有させれば、意外にもプ
ロゾーン現象を抑制できることを見出し、本発明を完成
するに至った。
においてプロゾーン現象を抑制する新たな技術を求めて
検討した結果、被測定物質を含む免疫反応液中に、各種
の界面活性剤のうちスルホン酸塩型又は硫酸エステル塩
型の陰イオン性界面活性剤を含有させれば、意外にもプ
ロゾーン現象を抑制できることを見出し、本発明を完成
するに至った。
【０００８】すなわち、本発明は、硫酸エステル塩系及
びスルホン酸塩系の陰イオン性界面活性剤よりなる群よ
り選ばれる１種又は２種以上の化合物よりなる、免疫反
応測定用プロゾーン現象抑制剤を提供する。ここに、硫
酸エステル塩系及びスルホン酸塩系の陰イオン性界面活
性剤の好ましい例としては、アルキル硫酸エステル塩
系、アルキルベンゼンスルホン酸塩系、アルキルナフタ
レンスルホン酸塩系、アルキルジフェニルエーテルスル
ホン酸塩系、ポリオキシエチレンアルキル硫酸エステル
塩系、ポリオキシエチレンアルキルアリル硫酸エステル
塩系及びアルカンスルホン酸塩系の陰イオン性界面活性
剤が挙げられるが、これらに限定されない。
びスルホン酸塩系の陰イオン性界面活性剤よりなる群よ
り選ばれる１種又は２種以上の化合物よりなる、免疫反
応測定用プロゾーン現象抑制剤を提供する。ここに、硫
酸エステル塩系及びスルホン酸塩系の陰イオン性界面活
性剤の好ましい例としては、アルキル硫酸エステル塩
系、アルキルベンゼンスルホン酸塩系、アルキルナフタ
レンスルホン酸塩系、アルキルジフェニルエーテルスル
ホン酸塩系、ポリオキシエチレンアルキル硫酸エステル
塩系、ポリオキシエチレンアルキルアリル硫酸エステル
塩系及びアルカンスルホン酸塩系の陰イオン性界面活性
剤が挙げられるが、これらに限定されない。
【０００９】また本発明は、これらの化合物を免疫反応
におけるプロゾーン現象抑制剤として含有することを特
徴とする、免疫反応測定用試薬をも提供する。該免疫反
応測定用試薬は、該プロゾーン現象抑制剤を、免疫反応
液中の該プロゾーン現象抑制剤の濃度が０．００８〜４
％になる量で含有するものであることが好ましい。該免
疫反応測定用試薬は、更に好ましくは金コロイド凝集反
応によるものである。該免疫反応測定用試薬は、反応促
進剤を含有することが更に好ましい。
におけるプロゾーン現象抑制剤として含有することを特
徴とする、免疫反応測定用試薬をも提供する。該免疫反
応測定用試薬は、該プロゾーン現象抑制剤を、免疫反応
液中の該プロゾーン現象抑制剤の濃度が０．００８〜４
％になる量で含有するものであることが好ましい。該免
疫反応測定用試薬は、更に好ましくは金コロイド凝集反
応によるものである。該免疫反応測定用試薬は、反応促
進剤を含有することが更に好ましい。
【００１０】また本発明は、上記免疫反応測定用プロゾ
ーン現象抑制剤を含有する反応液中で免疫反応を行うこ
とにより、免疫反応におけるプロゾーン現象を抑制して
免疫反応を行わせることを特徴とする、免疫反応測定方
法をも提供する。該免疫反応測定方法においては、上記
免疫反応測定用プロゾーン現象抑制剤の含有量を０．０
０８〜４％とすることが好ましい。また、本発明におけ
る該免疫反応測定方法は、免疫凝集反応測定法によるも
のの場合特に効果的であり、金コロイド凝集反応測定法
は、特に好ましい免疫反応凝集測定法の一例である。ま
た、反応液中に反応促進剤を含有させることが更に好ま
しい。
ーン現象抑制剤を含有する反応液中で免疫反応を行うこ
とにより、免疫反応におけるプロゾーン現象を抑制して
免疫反応を行わせることを特徴とする、免疫反応測定方
法をも提供する。該免疫反応測定方法においては、上記
免疫反応測定用プロゾーン現象抑制剤の含有量を０．０
０８〜４％とすることが好ましい。また、本発明におけ
る該免疫反応測定方法は、免疫凝集反応測定法によるも
のの場合特に効果的であり、金コロイド凝集反応測定法
は、特に好ましい免疫反応凝集測定法の一例である。ま
た、反応液中に反応促進剤を含有させることが更に好ま
しい。
【００１１】本発明はまた、免疫反応液中に、硫酸エス
テル塩系及びスルホン酸塩系の陰イオン性界面活性剤よ
りなる群より選ばれる１種又は２種以上の化合物を含有
させることを特徴とする、免疫測定法におけるプロゾー
ン現象抑制方法をも提供する。ここに、硫酸エステル塩
系及びスルホン酸塩系の陰イオン性界面活性剤の好まし
い例としては、アルキル硫酸エステル塩系、アルキルベ
ンゼンスルホン酸塩系、アルキルナフタレンスルホン酸
塩系、アルキルジフェニルエーテルスルホン酸塩系、ポ
リオキシエチレンアルキル硫酸エステル塩系、ポリオキ
シエチレンアルキルアリル硫酸エステル塩系及びアルカ
ンスルホン酸塩系の陰イオン性界面活性剤が挙げられる
が、これらに限定されない。該プロゾーン現象抑制方法
において、該免疫反応液中の該化合物の濃度は、好まし
くは０．００８〜４％である。本発明における該プロゾ
ーン現象抑制方法は、免疫凝集反応測定法において特に
効果的であり、金コロイド凝集反応測定法は、特に好ま
しい免疫凝集反応測定法の一例である。また、反応液中
に反応促進剤を含有させることが更に好ましい。
テル塩系及びスルホン酸塩系の陰イオン性界面活性剤よ
りなる群より選ばれる１種又は２種以上の化合物を含有
させることを特徴とする、免疫測定法におけるプロゾー
ン現象抑制方法をも提供する。ここに、硫酸エステル塩
系及びスルホン酸塩系の陰イオン性界面活性剤の好まし
い例としては、アルキル硫酸エステル塩系、アルキルベ
ンゼンスルホン酸塩系、アルキルナフタレンスルホン酸
塩系、アルキルジフェニルエーテルスルホン酸塩系、ポ
リオキシエチレンアルキル硫酸エステル塩系、ポリオキ
シエチレンアルキルアリル硫酸エステル塩系及びアルカ
ンスルホン酸塩系の陰イオン性界面活性剤が挙げられる
が、これらに限定されない。該プロゾーン現象抑制方法
において、該免疫反応液中の該化合物の濃度は、好まし
くは０．００８〜４％である。本発明における該プロゾ
ーン現象抑制方法は、免疫凝集反応測定法において特に
効果的であり、金コロイド凝集反応測定法は、特に好ま
しい免疫凝集反応測定法の一例である。また、反応液中
に反応促進剤を含有させることが更に好ましい。
【００１２】
【発明の実施の形態】本発明のプロゾーン現象抑制剤と
しては、公知のスルホン酸塩型または硫酸エステル塩型
の陰イオン性界面活性剤の中から適宜選択して使用で
き、特にアルキルフェニルエーテルジスルホン酸ナトリ
ウム塩系〔例：ペレックスＳＳＨ；花王（株）、エレミ
ノールＭＯＮ２；三洋化成工業（株）〕、アルキルナフ
タレンスルホン酸ナトリウム塩系〔例：ペレックスＮＢ
Ｌ；花王（株）〕、アルカンスルホン酸ナトリウム塩系
〔例右：ラテムルＰＳ；花王（株）〕、ポリオキシエチ
レンラウリルエーテル硫酸ナトリウム塩系〔例：エマー
ルＥ７０Ｃ；花王（株）〕、高級アルキルエーテル硫酸
エステル塩系〔例：サンデットＥＮＭ；三洋化成工業
（株）〕、ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸エ
ステルナトリウム塩系〔例：サンデットＥＮ；三洋化成
工業（株）〕、アルキル硫酸エステル塩系、アルキルベ
ンゼンスルホン酸系、ポリオキシエチレンアルキルアリ
ル硫酸塩系の陰イオン性界面活性剤が好ましい。
しては、公知のスルホン酸塩型または硫酸エステル塩型
の陰イオン性界面活性剤の中から適宜選択して使用で
き、特にアルキルフェニルエーテルジスルホン酸ナトリ
ウム塩系〔例：ペレックスＳＳＨ；花王（株）、エレミ
ノールＭＯＮ２；三洋化成工業（株）〕、アルキルナフ
タレンスルホン酸ナトリウム塩系〔例：ペレックスＮＢ
Ｌ；花王（株）〕、アルカンスルホン酸ナトリウム塩系
〔例右：ラテムルＰＳ；花王（株）〕、ポリオキシエチ
レンラウリルエーテル硫酸ナトリウム塩系〔例：エマー
ルＥ７０Ｃ；花王（株）〕、高級アルキルエーテル硫酸
エステル塩系〔例：サンデットＥＮＭ；三洋化成工業
（株）〕、ポリオキシエチレンラウリルエーテル硫酸エ
ステルナトリウム塩系〔例：サンデットＥＮ；三洋化成
工業（株）〕、アルキル硫酸エステル塩系、アルキルベ
ンゼンスルホン酸系、ポリオキシエチレンアルキルアリ
ル硫酸塩系の陰イオン性界面活性剤が好ましい。
【００１３】本発明のプロゾーン現象抑制剤は、免疫測
定法に用いられる試薬中に添加して使用することができ
る。本発明の免疫反応測定用試薬は、プロゾーン現象抑
制剤を用いること以外は、公知の免疫測定法で通常用い
られる試薬を使用することで足りる。
定法に用いられる試薬中に添加して使用することができ
る。本発明の免疫反応測定用試薬は、プロゾーン現象抑
制剤を用いること以外は、公知の免疫測定法で通常用い
られる試薬を使用することで足りる。
【００１４】免疫反応液中のこれら陰イオン性界面活性
剤の濃度は０．００８〜４％（本発明において重量％を
表す。）であり、好ましくは０．００８〜１％、更に好
ましくは０．０１６〜０．４％である。
剤の濃度は０．００８〜４％（本発明において重量％を
表す。）であり、好ましくは０．００８〜１％、更に好
ましくは０．０１６〜０．４％である。
【００１５】更に免疫反応測定用試薬に反応促進剤を配
合することにより、プロゾーン現象を抑制したまま測定
感度を高めることができる。反応促進剤としては、測定
感度を上昇させるものであれば何れのものでもよく、ポ
リエチレングリコール、ポリアクリル酸、コンドロイチ
ン硫酸、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、
プルラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピリドン
等が挙げられるが、これらに限られない。
合することにより、プロゾーン現象を抑制したまま測定
感度を高めることができる。反応促進剤としては、測定
感度を上昇させるものであれば何れのものでもよく、ポ
リエチレングリコール、ポリアクリル酸、コンドロイチ
ン硫酸、カルボキシメチルセルロース、デキストラン、
プルラン、ポリビニルアルコール、ポリビニルピリドン
等が挙げられるが、これらに限られない。
【００１６】例えば、ポリエチレングリコールは、公知
のポリエチレングリコールのうちから適宜選択して使用
できる。その平均分子量は１０００〜５００００で、好
ましくは４０００〜２００００である。測定時の免疫反
応液中のポリエチレングリコール濃度には、反応促進効
果を発揮させる上で特に明確な上限はないが、通常０．
０１〜５．０％、好ましくは０．１〜３．０％、特に好
ましくは０．２〜２．０％になるように、免疫反応測定
用試薬に配合すればよい。
のポリエチレングリコールのうちから適宜選択して使用
できる。その平均分子量は１０００〜５００００で、好
ましくは４０００〜２００００である。測定時の免疫反
応液中のポリエチレングリコール濃度には、反応促進効
果を発揮させる上で特に明確な上限はないが、通常０．
０１〜５．０％、好ましくは０．１〜３．０％、特に好
ましくは０．２〜２．０％になるように、免疫反応測定
用試薬に配合すればよい。
【００１７】また、本発明は、免疫反応測定用試薬に非
イオン性界面活性剤を配合することを妨げるものではな
い。非イオン性界面活性剤を配合する場合、公知の非イ
オン性界面活性剤の中から適宜選択すればよい。特に好
ましいのは、ポリオキシエチレンアルキルエーテル系、
ポリオキシエチレンアルキルアリルエーテル系、ポリオ
キシエチレン脂肪酸エステル系、ソルビタン脂肪酸エス
テル系、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル
系、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステル
系、グリセリン脂肪酸エステル系、ポリオキシエチレン
アルキルアミン系、アルキルアルカノールアミド系の非
イオン性界面活性剤である。非イオン性界面活性剤を配
合する場合、測定時の免疫反応液中の濃度が０．００１
〜３．０％、好ましくは０．０２〜２．０％になるよう
に免疫反応測定用試薬に配合すればよい。
イオン性界面活性剤を配合することを妨げるものではな
い。非イオン性界面活性剤を配合する場合、公知の非イ
オン性界面活性剤の中から適宜選択すればよい。特に好
ましいのは、ポリオキシエチレンアルキルエーテル系、
ポリオキシエチレンアルキルアリルエーテル系、ポリオ
キシエチレン脂肪酸エステル系、ソルビタン脂肪酸エス
テル系、ポリオキシエチレンソルビタン脂肪酸エステル
系、ポリオキシエチレンソルビトール脂肪酸エステル
系、グリセリン脂肪酸エステル系、ポリオキシエチレン
アルキルアミン系、アルキルアルカノールアミド系の非
イオン性界面活性剤である。非イオン性界面活性剤を配
合する場合、測定時の免疫反応液中の濃度が０．００１
〜３．０％、好ましくは０．０２〜２．０％になるよう
に免疫反応測定用試薬に配合すればよい。
【００１８】本発明の免疫反応測定用試薬を使用するの
に特に適した免疫測定法は、免疫凝集反応を伴うもので
ある。それらのうち、特に好ましいのは、ラテックス凝
集法及び金属コロイド凝集法である。金属コロイド凝集
法で用いられる金属コロイドとしては、金、銀、セレン
等のコロイドがあり、何れでもよいが、利用しやすいと
いう点からは、金コロイドが好ましい。
に特に適した免疫測定法は、免疫凝集反応を伴うもので
ある。それらのうち、特に好ましいのは、ラテックス凝
集法及び金属コロイド凝集法である。金属コロイド凝集
法で用いられる金属コロイドとしては、金、銀、セレン
等のコロイドがあり、何れでもよいが、利用しやすいと
いう点からは、金コロイドが好ましい。
【００１９】例えば、抗原（又は抗体）である被測定物
質を測定する場合、ラテックス凝集法、金属コロイド凝
集法では、被測定物質である抗原（又は抗体）に対応す
る抗体（又は抗原）を、担体のラテックスや金属コロイ
ドにあらかじめ結合させておく。その測定例として、金
コロイド凝集法の場合、あらかじめ金コロイドと結合さ
せた標識抗体（又は標識抗原）が、被測定物質である抗
原（又は抗体）を介して凝集する。その際に生じる色差
（色調変化）を光学的に測定し、抗原量または抗体量を
測定する。
質を測定する場合、ラテックス凝集法、金属コロイド凝
集法では、被測定物質である抗原（又は抗体）に対応す
る抗体（又は抗原）を、担体のラテックスや金属コロイ
ドにあらかじめ結合させておく。その測定例として、金
コロイド凝集法の場合、あらかじめ金コロイドと結合さ
せた標識抗体（又は標識抗原）が、被測定物質である抗
原（又は抗体）を介して凝集する。その際に生じる色差
（色調変化）を光学的に測定し、抗原量または抗体量を
測定する。
【００２０】本発明の免疫反応測定試薬にて測定される
被測定物質としては、タンパク質、脂質、糖類があり、
それには例えば、各種抗原、抗体、レセプター、酵素な
どが含まれる。具体的にはＣ反応性タンパク（ＣＲ
Ｐ）、繊維素分解産物（ＦＤＰ）、ヘモグロビン、ヘモ
グロビンＡ１ｃ，α−フェトプロテイン（ＡＦＰ）、シ
スタチンＣ、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＣＡ１９−９、
前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ペプシノーゲンＩおよびI
I、コラーゲン、血清アミロイドＡ（ＳＡＡ）、フェリ
チン、トランスフェリン、α１−マイクログロブリン、
α２−マクログロブリン、β２−マイクログロブリン、
α１−アンチキモトリプシン（ＡＣＴ）、ミオグロビン
などの血液中タンパク質や、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝
炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、ヘリコバクターピ
ロリ、およびこれらに対する抗体などの、感染症に関す
る抗原や抗体などが挙げられる。本発明によれば、免疫
測定反応におけるプロゾーン現象、取り分け抗原過剰に
よるプロゾーン現象が抑制され、これら被測定物質を、
広い濃度範囲にわたって測定することができる。
被測定物質としては、タンパク質、脂質、糖類があり、
それには例えば、各種抗原、抗体、レセプター、酵素な
どが含まれる。具体的にはＣ反応性タンパク（ＣＲ
Ｐ）、繊維素分解産物（ＦＤＰ）、ヘモグロビン、ヘモ
グロビンＡ１ｃ，α−フェトプロテイン（ＡＦＰ）、シ
スタチンＣ、癌胎児性抗原（ＣＥＡ）、ＣＡ１９−９、
前立腺特異抗原（ＰＳＡ）、ペプシノーゲンＩおよびI
I、コラーゲン、血清アミロイドＡ（ＳＡＡ）、フェリ
チン、トランスフェリン、α１−マイクログロブリン、
α２−マクログロブリン、β２−マイクログロブリン、
α１−アンチキモトリプシン（ＡＣＴ）、ミオグロビン
などの血液中タンパク質や、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝
炎ウイルス、ヒト免疫不全ウイルス、ヘリコバクターピ
ロリ、およびこれらに対する抗体などの、感染症に関す
る抗原や抗体などが挙げられる。本発明によれば、免疫
測定反応におけるプロゾーン現象、取り分け抗原過剰に
よるプロゾーン現象が抑制され、これら被測定物質を、
広い濃度範囲にわたって測定することができる。
【００２１】本発明において、免疫反応を過度に酸性又
はアルカリ性の条件下で行うことは好ましくない。反応
液のｐＨとしては４．５〜９．５の範囲とするのがよ
く、より好ましいのは５．５〜８．５の範囲である。ｐ
Ｈの維持のためには適当な緩衝剤、例えばリン酸緩衝
液、トリス塩酸緩衝液、コハク酸緩衝液、あるいはグリ
シルグリシン、ＭＥＳ（２−（Ｎ−モノホリノ）エタン
スルホン酸）、ＨＥＰＥＳ（Ｎ−２−ヒドロキシエチル
−ピペラジン−Ｎ'−エタンスルホン酸）、ＴＥＳ（Ｎ
−トリス（ヒドロキシメチル）メチル−２−アミノエタ
ンスルホン酸）、ＰＩＰＥＳ（ピペラジン−１，４−ビ
ス（２−エタンスルホン酸））、ＤＩＰＳＯ（３−
（Ｎ'Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ）−２
−ヒドロキシエチルプロパンスルホン酸）、Ｔｒｉｃｉ
ｎｅ（トリス（ヒドロキシメチル）メチルグリシン）、
ＴＡＰＳ（Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチル−３
−アミノプロパンスルホン酸）等のグッド緩衝液が好適
に用いられる。緩衝剤の使用濃度としては、測定時の免
疫反応液中における濃度が５〜１０００ｍＭになるよう
に、免疫反応測定用試薬に配合すればよく、より好まし
くは２０〜５００ｍＭの範囲になるようにすればよい。
はアルカリ性の条件下で行うことは好ましくない。反応
液のｐＨとしては４．５〜９．５の範囲とするのがよ
く、より好ましいのは５．５〜８．５の範囲である。ｐ
Ｈの維持のためには適当な緩衝剤、例えばリン酸緩衝
液、トリス塩酸緩衝液、コハク酸緩衝液、あるいはグリ
シルグリシン、ＭＥＳ（２−（Ｎ−モノホリノ）エタン
スルホン酸）、ＨＥＰＥＳ（Ｎ−２−ヒドロキシエチル
−ピペラジン−Ｎ'−エタンスルホン酸）、ＴＥＳ（Ｎ
−トリス（ヒドロキシメチル）メチル−２−アミノエタ
ンスルホン酸）、ＰＩＰＥＳ（ピペラジン−１，４−ビ
ス（２−エタンスルホン酸））、ＤＩＰＳＯ（３−
（Ｎ'Ｎ−ビス（２−ヒドロキシエチル）アミノ）−２
−ヒドロキシエチルプロパンスルホン酸）、Ｔｒｉｃｉ
ｎｅ（トリス（ヒドロキシメチル）メチルグリシン）、
ＴＡＰＳ（Ｎ−トリス（ヒドロキシメチル）メチル−３
−アミノプロパンスルホン酸）等のグッド緩衝液が好適
に用いられる。緩衝剤の使用濃度としては、測定時の免
疫反応液中における濃度が５〜１０００ｍＭになるよう
に、免疫反応測定用試薬に配合すればよく、より好まし
くは２０〜５００ｍＭの範囲になるようにすればよい。
【００２２】なお、本発明の免疫反応用試薬中には、動
物血清、γ−グロブリン、ヒトＩｇＧやＩｇＭに対する
特異抗体、アルブミン、またはそれらの変性物や分解
物、塩化ナトリウムやその他の無機塩類、糖類、アミノ
酸類、ＥＤＴＡ等のキレート剤、ＤＴＴ等のＳＨ試薬、
アジ化ナトリウム等を配合してもよい。これらの物質
は、通常この分野で使用される濃度範囲で含まれてよ
い。
物血清、γ−グロブリン、ヒトＩｇＧやＩｇＭに対する
特異抗体、アルブミン、またはそれらの変性物や分解
物、塩化ナトリウムやその他の無機塩類、糖類、アミノ
酸類、ＥＤＴＡ等のキレート剤、ＤＴＴ等のＳＨ試薬、
アジ化ナトリウム等を配合してもよい。これらの物質
は、通常この分野で使用される濃度範囲で含まれてよ
い。
【００２３】
【作用】本発明の試薬を用いれば、試料中に被測定物質
である抗原（又は抗体）が高濃度に存在するなど、ラテ
ックスや金属コロイド等不溶性担体粒子に結合させた抗
体（又は抗原）に比して過剰量の抗原（又は抗体）が存
在している場合でも、プロゾーン現象を抑制することが
でき、試料の希釈等により抗原と抗体の濃度バランスを
調節し直すことなしに、広い濃度範囲での被測定物質の
免疫反応測定が可能となる。
である抗原（又は抗体）が高濃度に存在するなど、ラテ
ックスや金属コロイド等不溶性担体粒子に結合させた抗
体（又は抗原）に比して過剰量の抗原（又は抗体）が存
在している場合でも、プロゾーン現象を抑制することが
でき、試料の希釈等により抗原と抗体の濃度バランスを
調節し直すことなしに、広い濃度範囲での被測定物質の
免疫反応測定が可能となる。
【００２４】
【実施例】以下、典型的な実施例として金コロイド凝集
反応に基づいて本発明を更に具体的に説明するが、本発
明がこれらによって限定されることは意図しない。な
お、実施例において以下の陰イオン性界面活性剤を使用
した。 ・ペレックスＳＳＨ： アルキルジフェニルエーテルジ
スルホン酸ナトリウム（花王（株）） ・ペレックスＮＢＬ： アルキルナフタレンスルホン酸
ナトリウム（花王（株）） ・ラテムルＰＳ： アルカンスルホン酸ナトリウム（花
王（株）） ・エマールＥ７０Ｃ： ポリオキシエチレンラウリルエ
ーテル硫酸ナトリウム（花王（株）） ・エレミノールＭＯＮ２： アルキルジフェニルエーテ
ルジスルホン酸ナトリウム（三洋化成工業（株）） ・サンデットＥＮＭ： 高級アルキルエーテル硫酸エス
テル塩（三洋化成工業（株）） ・サンデットＥＮ： ポリオキシエチレンアルキルエー
テル硫酸エステルナトリウム塩（三洋化成工業（株））
反応に基づいて本発明を更に具体的に説明するが、本発
明がこれらによって限定されることは意図しない。な
お、実施例において以下の陰イオン性界面活性剤を使用
した。 ・ペレックスＳＳＨ： アルキルジフェニルエーテルジ
スルホン酸ナトリウム（花王（株）） ・ペレックスＮＢＬ： アルキルナフタレンスルホン酸
ナトリウム（花王（株）） ・ラテムルＰＳ： アルカンスルホン酸ナトリウム（花
王（株）） ・エマールＥ７０Ｃ： ポリオキシエチレンラウリルエ
ーテル硫酸ナトリウム（花王（株）） ・エレミノールＭＯＮ２： アルキルジフェニルエーテ
ルジスルホン酸ナトリウム（三洋化成工業（株）） ・サンデットＥＮＭ： 高級アルキルエーテル硫酸エス
テル塩（三洋化成工業（株）） ・サンデットＥＮ： ポリオキシエチレンアルキルエー
テル硫酸エステルナトリウム塩（三洋化成工業（株））
【００２５】＜参考例１＞ 金コロイド液の調製
９５℃の蒸留水１Ｌに１０％塩化金酸溶液２ｍＬを撹拌
しながら加え、１分後に２％クエン酸ナトリウム溶液１
０ｍＬを加え、さらに２０分間撹拌した後３０℃に冷却
した。冷却後、０．１Ｍ炭酸カリウム溶液でｐＨ７．１
に調整した。
しながら加え、１分後に２％クエン酸ナトリウム溶液１
０ｍＬを加え、さらに２０分間撹拌した後３０℃に冷却
した。冷却後、０．１Ｍ炭酸カリウム溶液でｐＨ７．１
に調整した。
【００２６】＜参考例２＞ 抗シスタチンＣ抗体結合金
コロイド試薬の調製 抗シスタチンＣ抗体（ダコ・ジャパン株式会社）を、
０．０５％アジ化ナトリウムを含む１０ｍＭ ＨＥＰＥ
Ｓ ｐＨ７．１で希釈して５０μｇ／ｍＬの濃度に調整
した。この液１００ｍＬを上記参考例１で調製した金コ
ロイド液約１Ｌに加え、冷蔵条件下で２時間撹拌した。
次いでこれに５．４６％マンニトール、０．５％ＢＳＡ
及び０．０５％アジ化ナトリウムを含む、１０ｍＭ Ｈ
ＥＰＥＳｐＨ７．１を１１０ｍＬ添加し、３７℃で９０
分撹拌した。８，０００回転で４０分遠心し、上清を除
去した後、３％マンニトール、０．１％ＢＳＡ及び０．
０５％アジ化ナトリウムを含む、５ｍＭ ＨＥＰＥＳ
ｐＨ７．５（Ａ溶液）を約１Ｌ加え、抗体結合金コロイ
ドを分散させた後、８，０００回転で４０分遠心し、上
清を除去し、Ａ溶液で抗体結合金コロイドを分散させ全
量を１６０ｍＬとし、抗シスタチンＣ抗体結合金コロイ
ド試薬を調製した。
コロイド試薬の調製 抗シスタチンＣ抗体（ダコ・ジャパン株式会社）を、
０．０５％アジ化ナトリウムを含む１０ｍＭ ＨＥＰＥ
Ｓ ｐＨ７．１で希釈して５０μｇ／ｍＬの濃度に調整
した。この液１００ｍＬを上記参考例１で調製した金コ
ロイド液約１Ｌに加え、冷蔵条件下で２時間撹拌した。
次いでこれに５．４６％マンニトール、０．５％ＢＳＡ
及び０．０５％アジ化ナトリウムを含む、１０ｍＭ Ｈ
ＥＰＥＳｐＨ７．１を１１０ｍＬ添加し、３７℃で９０
分撹拌した。８，０００回転で４０分遠心し、上清を除
去した後、３％マンニトール、０．１％ＢＳＡ及び０．
０５％アジ化ナトリウムを含む、５ｍＭ ＨＥＰＥＳ
ｐＨ７．５（Ａ溶液）を約１Ｌ加え、抗体結合金コロイ
ドを分散させた後、８，０００回転で４０分遠心し、上
清を除去し、Ａ溶液で抗体結合金コロイドを分散させ全
量を１６０ｍＬとし、抗シスタチンＣ抗体結合金コロイ
ド試薬を調製した。
【００２７】＜参考例３＞ 抗ＡＦＰ抗体結合金コロイ
ド試薬の調製 抗ＡＦＰ抗体（ダコ・ジャパン株式会社）を、０．０５
％アジ化ナトリウムを含む１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ
７．１で希釈して５０μｇ／ｍＬの濃度に調整した。こ
の液１００ｍＬを上記参考例１で調製した金コロイド液
約１Ｌに加え、冷蔵条件下で２時間撹拌した。次いでこ
れに５．４６％マンニトール、０．５％ＢＳＡ及び０．
０５％アジ化ナトリウムを含む、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ
ｐＨ７．１を１１０ｍＬ添加し、３７℃で９０分撹拌
した。８，０００回転で４０分遠心し、上清を除去した
後、３％マンニトール、０．１％ＢＳＡ及び０．０５％
アジ化ナトリウムを含む、５ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ
７．５（Ａ溶液）を約１Ｌ加え、抗体結合金コロイドを
分散させた後、８，０００回転で４０分遠心し、上清を
除去し、Ａ溶液で抗体結合金コロイドを分散させ全量を
１６０ｍＬとし、抗ＡＦＰ抗体結合金コロイド試薬を調
製した。
ド試薬の調製 抗ＡＦＰ抗体（ダコ・ジャパン株式会社）を、０．０５
％アジ化ナトリウムを含む１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ
７．１で希釈して５０μｇ／ｍＬの濃度に調整した。こ
の液１００ｍＬを上記参考例１で調製した金コロイド液
約１Ｌに加え、冷蔵条件下で２時間撹拌した。次いでこ
れに５．４６％マンニトール、０．５％ＢＳＡ及び０．
０５％アジ化ナトリウムを含む、１０ｍＭ ＨＥＰＥＳ
ｐＨ７．１を１１０ｍＬ添加し、３７℃で９０分撹拌
した。８，０００回転で４０分遠心し、上清を除去した
後、３％マンニトール、０．１％ＢＳＡ及び０．０５％
アジ化ナトリウムを含む、５ｍＭ ＨＥＰＥＳ ｐＨ
７．５（Ａ溶液）を約１Ｌ加え、抗体結合金コロイドを
分散させた後、８，０００回転で４０分遠心し、上清を
除去し、Ａ溶液で抗体結合金コロイドを分散させ全量を
１６０ｍＬとし、抗ＡＦＰ抗体結合金コロイド試薬を調
製した。
【００２８】＜実施例１＞０〜５０μｇ／ｍＬの濃度の
シスタチンＣを含む血清３μＬに、０．２％ＥＤＴＡ・
２Ｎａ及び１％ＮａＣｌを含む０．２ＭのＭＥＳ緩衝液
（ｐＨ６．０）に、下記の何れかの陰イオン性界面活性
剤を、それぞれ示した濃度で添加することにより、又は
何れの陰イオン性界面活性剤も添加せずに、調製した各
Ｒ１試薬溶液を２４０μＬ加えた。 ペレックスＳＳＨ・・・・・・０．０３％（図１） ペレックスＮＢＬ・・・・・・０．１％（図１） ラテムルＰＳ・・・・・・・・０．０３％（図１） エマールＥ７０Ｃ・・・・・・０．０５％（図２） エレミノールＭＯＮ２・・・・０．０３％（図２） ラテムルＳ−１８０Ａ・・・・０．１％（図２） サンデットＥＮＭ・・・・・・０．２％（図３） サンデットＥＮ・・・・・・・０．２％（図３） 次いで、３７℃で５分後に、Ｒ２試薬溶液として参考例
２で調製した抗シスタチンＣ抗体結合金コロイド溶液を
６０μＬ添加し、３７℃で反応させ、日立７１５０型自
動分析装置により２７ポイントと５０ポイントにおける
吸光度差（主波長５４６ｎｍ副波長６６０ｎｍ）を測定
した。その結果を図１、２及び３に示す。図から明らか
なように、これらの陰イオン性界面活性剤を添加して製
した何れの反応液においても、プロゾーン現象は認めら
れなかった。これに対して陰イオン性界面活性剤無添加
の反応液では、プロゾーン現象が起こるのが認められ
た。
シスタチンＣを含む血清３μＬに、０．２％ＥＤＴＡ・
２Ｎａ及び１％ＮａＣｌを含む０．２ＭのＭＥＳ緩衝液
（ｐＨ６．０）に、下記の何れかの陰イオン性界面活性
剤を、それぞれ示した濃度で添加することにより、又は
何れの陰イオン性界面活性剤も添加せずに、調製した各
Ｒ１試薬溶液を２４０μＬ加えた。 ペレックスＳＳＨ・・・・・・０．０３％（図１） ペレックスＮＢＬ・・・・・・０．１％（図１） ラテムルＰＳ・・・・・・・・０．０３％（図１） エマールＥ７０Ｃ・・・・・・０．０５％（図２） エレミノールＭＯＮ２・・・・０．０３％（図２） ラテムルＳ−１８０Ａ・・・・０．１％（図２） サンデットＥＮＭ・・・・・・０．２％（図３） サンデットＥＮ・・・・・・・０．２％（図３） 次いで、３７℃で５分後に、Ｒ２試薬溶液として参考例
２で調製した抗シスタチンＣ抗体結合金コロイド溶液を
６０μＬ添加し、３７℃で反応させ、日立７１５０型自
動分析装置により２７ポイントと５０ポイントにおける
吸光度差（主波長５４６ｎｍ副波長６６０ｎｍ）を測定
した。その結果を図１、２及び３に示す。図から明らか
なように、これらの陰イオン性界面活性剤を添加して製
した何れの反応液においても、プロゾーン現象は認めら
れなかった。これに対して陰イオン性界面活性剤無添加
の反応液では、プロゾーン現象が起こるのが認められ
た。
【００２９】＜実施例２＞免疫反応液に非イオン性界面
活性剤を添加して、プロゾーン現象の抑制効果の有無
を、陰イオン性界面活性剤ペレックスＳＳＨ添加の場合
と比較した。非イオン性界面活性剤としてＴｒｉｔｏｎ
Ｘ１００、Ｔｗｅｅｎ８０及びレオドール−ＴＷ?Ｌ１
２０を用い、それらの何れかを濃度０．２％で含有す
る、０．２％ＥＤＴＡ・２Ｎａ及び１％ＮａＣｌを含む
０．２ＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ６．０）を各Ｒ１試薬溶
液とし、それを用いて実施例１と同様にシスタチンＣを
測定した。同時に、ペレックスＳＳＨを０．０３％の濃
度になるように添加した、０．２％ＥＤＴＡ・２Ｎａ及
び１％ＮａＣｌを含む０．２ＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ
６．０）をＲ１試薬溶液とし、それを用いて実施例１と
同様にシスタチンＣを測定した。その結果を図４に示
す。図から明らかなように、非イオン性界面活性剤に
は、プロゾーン現象の抑制効果は認められなかった。
活性剤を添加して、プロゾーン現象の抑制効果の有無
を、陰イオン性界面活性剤ペレックスＳＳＨ添加の場合
と比較した。非イオン性界面活性剤としてＴｒｉｔｏｎ
Ｘ１００、Ｔｗｅｅｎ８０及びレオドール−ＴＷ?Ｌ１
２０を用い、それらの何れかを濃度０．２％で含有す
る、０．２％ＥＤＴＡ・２Ｎａ及び１％ＮａＣｌを含む
０．２ＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ６．０）を各Ｒ１試薬溶
液とし、それを用いて実施例１と同様にシスタチンＣを
測定した。同時に、ペレックスＳＳＨを０．０３％の濃
度になるように添加した、０．２％ＥＤＴＡ・２Ｎａ及
び１％ＮａＣｌを含む０．２ＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ
６．０）をＲ１試薬溶液とし、それを用いて実施例１と
同様にシスタチンＣを測定した。その結果を図４に示
す。図から明らかなように、非イオン性界面活性剤に
は、プロゾーン現象の抑制効果は認められなかった。
【００３０】＜実施例３＞特開平１１−３４４４９２号
には、硫酸塩によるプロゾーン現象の抑制効果が記載さ
れている。そこで、硫酸ナトリウムを添加した免疫反応
液を調製し、プロゾーン現象の抑制効果につき、硫酸エ
ステル基を含む陰イオン性界面活性剤ペレックスＳＳＨ
を添加した免疫反応液と比較した。硫酸ナトリウムをそ
れぞれ０、２．０、５．０又は９．０％の濃度で含有さ
せた、０．２％ＥＤＴＡ・２Ｎａ及び１％ＮａＣｌを含
む０．２ＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ６．０）をＲ１試薬溶
液とし、これらを用いて実施例１と同様にシスタチンＣ
を測定した。同時に、ペレックスＳＳＨを０．０３％の
濃度になるように添加した、０．２％ＥＤＴＡ・２Ｎａ
及び１％ＮａＣｌを含む０．２ＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ
６．０）をＲ１試薬溶液とし、これを用いて実施例１と
同様にシスタチンＣを測定した。結果を図５に示す。図
より明らかなとおり、硫酸ナトリウム添加では、シスタ
チンＣの高濃度５０μｇ／ｍＬにおける測定値が、シス
タチンＣ濃度４μｇ／ｍＬにおける測定値を下回ってお
り、プロゾーン現象は全く解消されていなかった。これ
に対し、ペレックスＳＳＨ０．０３％添加では、シスタ
チンＣの高濃度５０μｇ／ｍＬにおける測定値がこれよ
り低濃度域における測定値を下回ることがなく、プロゾ
ーン現象は完全に解消された。
には、硫酸塩によるプロゾーン現象の抑制効果が記載さ
れている。そこで、硫酸ナトリウムを添加した免疫反応
液を調製し、プロゾーン現象の抑制効果につき、硫酸エ
ステル基を含む陰イオン性界面活性剤ペレックスＳＳＨ
を添加した免疫反応液と比較した。硫酸ナトリウムをそ
れぞれ０、２．０、５．０又は９．０％の濃度で含有さ
せた、０．２％ＥＤＴＡ・２Ｎａ及び１％ＮａＣｌを含
む０．２ＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ６．０）をＲ１試薬溶
液とし、これらを用いて実施例１と同様にシスタチンＣ
を測定した。同時に、ペレックスＳＳＨを０．０３％の
濃度になるように添加した、０．２％ＥＤＴＡ・２Ｎａ
及び１％ＮａＣｌを含む０．２ＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ
６．０）をＲ１試薬溶液とし、これを用いて実施例１と
同様にシスタチンＣを測定した。結果を図５に示す。図
より明らかなとおり、硫酸ナトリウム添加では、シスタ
チンＣの高濃度５０μｇ／ｍＬにおける測定値が、シス
タチンＣ濃度４μｇ／ｍＬにおける測定値を下回ってお
り、プロゾーン現象は全く解消されていなかった。これ
に対し、ペレックスＳＳＨ０．０３％添加では、シスタ
チンＣの高濃度５０μｇ／ｍＬにおける測定値がこれよ
り低濃度域における測定値を下回ることがなく、プロゾ
ーン現象は完全に解消された。
【００３１】＜実施例４＞ペレックスＳＳＨ又はエマー
ルＥ７０Ｃを０、０．０１、０．０２又は０．０３％の
濃度になるように添加した、０．２％ＥＤＴＡ・２Ｎａ
及び１％ＮａＣｌを含む０．２ＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ
６．０）をＲ１試薬溶液とし、これらを用いて実施例１
と同様にシスタチンＣを測定した。その結果を図６、７
に示す。図６より明らかなとおり、ペレックスＳＳＨの
濃度０．０１％を添加した場合、シスタチンＣの高濃度
５０μｇ／ｍＬにおける測定値が、無添加の場合に比し
て上昇することが認められた。ペレックスＳＳＨの濃度
０．０３％の添加では、シスタチンＣの高濃度５０μｇ
／ｍＬにおける測定値が、それより低濃度域におけるシ
スタチンＣの測定値を下回ることがなく、プロゾーン現
象は完全に解消された。
ルＥ７０Ｃを０、０．０１、０．０２又は０．０３％の
濃度になるように添加した、０．２％ＥＤＴＡ・２Ｎａ
及び１％ＮａＣｌを含む０．２ＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ
６．０）をＲ１試薬溶液とし、これらを用いて実施例１
と同様にシスタチンＣを測定した。その結果を図６、７
に示す。図６より明らかなとおり、ペレックスＳＳＨの
濃度０．０１％を添加した場合、シスタチンＣの高濃度
５０μｇ／ｍＬにおける測定値が、無添加の場合に比し
て上昇することが認められた。ペレックスＳＳＨの濃度
０．０３％の添加では、シスタチンＣの高濃度５０μｇ
／ｍＬにおける測定値が、それより低濃度域におけるシ
スタチンＣの測定値を下回ることがなく、プロゾーン現
象は完全に解消された。
【００３２】図７のエマールＥ７０Ｃ添加においても、
濃度０．０１％の添加でシスタチンＣの高濃度５０μｇ
／ｍＬにおける測定値が無添加の場合に比して上昇する
ことが認められた。エマールＥ７０Ｃの濃度０．０２％
の添加では、シスタチンＣの高濃度５０μｇ／ｍＬにお
ける測定値が、それより低濃度域におけるシスタチンＣ
の測定値を下回ることがなく、プロゾーン現象は完全に
解消された。
濃度０．０１％の添加でシスタチンＣの高濃度５０μｇ
／ｍＬにおける測定値が無添加の場合に比して上昇する
ことが認められた。エマールＥ７０Ｃの濃度０．０２％
の添加では、シスタチンＣの高濃度５０μｇ／ｍＬにお
ける測定値が、それより低濃度域におけるシスタチンＣ
の測定値を下回ることがなく、プロゾーン現象は完全に
解消された。
【００３３】これらのことから、ペレックスＳＳＨ又は
エマールＥ７０Ｃには、０．０１％の低濃度でもプロゾ
ーン現象の抑制効果があるあることが判る。
エマールＥ７０Ｃには、０．０１％の低濃度でもプロゾ
ーン現象の抑制効果があるあることが判る。
【００３４】＜実施例５＞非イオン性界面活性剤共存下
での陰イオン性界面活性剤のプロゾーン現象抑制効果つ
いて検討した。非イオン性界面活性剤としてＴｗｅｅｎ
８０を０．２％の濃度になるように添加した、０．２％
ＥＤＴＡ・２Ｎａ及び１％ＮａＣｌを含む０．２ＭのＭ
ＥＳ緩衝液（ｐＨ６．０）に、陰イオン性界面活性剤と
してペレックスＮＢＬを濃度がそれぞれ０、０．２、
０．３、０．４、０．５％になるように添加し、Ｒ１試
薬溶液とした。これらを用いて実施例１と同様にシスタ
チンＣを測定した。その結果を図８に示す。ペレックス
ＮＢＬの濃度０．３％で、シスタチンＣの高濃度５０μ
ｇ／ｍＬにおける測定値が、それより低濃度領域のシス
タチンＣの測定値を下回ることがなく、プロゾーン現象
は完全に解消された。ペレックスＮＢＬの濃度を０．３
％より高めると、全体的に測定値の低下が認められる
が、プロゾーン現象は抑制されたままであった。このこ
とから、陰イオン性界面活性剤を非イオン性界面活性剤
と共に用いても、陰イオン性界面活性剤のプロゾーン現
象抑制効果は損なわれないことが判る。
での陰イオン性界面活性剤のプロゾーン現象抑制効果つ
いて検討した。非イオン性界面活性剤としてＴｗｅｅｎ
８０を０．２％の濃度になるように添加した、０．２％
ＥＤＴＡ・２Ｎａ及び１％ＮａＣｌを含む０．２ＭのＭ
ＥＳ緩衝液（ｐＨ６．０）に、陰イオン性界面活性剤と
してペレックスＮＢＬを濃度がそれぞれ０、０．２、
０．３、０．４、０．５％になるように添加し、Ｒ１試
薬溶液とした。これらを用いて実施例１と同様にシスタ
チンＣを測定した。その結果を図８に示す。ペレックス
ＮＢＬの濃度０．３％で、シスタチンＣの高濃度５０μ
ｇ／ｍＬにおける測定値が、それより低濃度領域のシス
タチンＣの測定値を下回ることがなく、プロゾーン現象
は完全に解消された。ペレックスＮＢＬの濃度を０．３
％より高めると、全体的に測定値の低下が認められる
が、プロゾーン現象は抑制されたままであった。このこ
とから、陰イオン性界面活性剤を非イオン性界面活性剤
と共に用いても、陰イオン性界面活性剤のプロゾーン現
象抑制効果は損なわれないことが判る。
【００３５】＜実施例６＞実施例５においてペレックス
ＮＢＬの濃度を０．５％になるように添加したとき、シ
スタチンＣの測定値は全体的に著しく低下した（図
５）。そこで、反応促進剤共存下での陰イオン性界面活
性剤のプロゾーン現象の抑制効果ついて検討した。反応
促進剤としてポリエチレングリコール２００００を用
い、濃度がそれぞれ０、０．５、０．７５、１．０又は
１．２５％になるように、実施例５のペレックスＮＢＬ
を０．５％含有するＲ１試薬溶液に添加して、実施例１
と同様にシスタチンＣを測定した。同時に、ペレックス
ＮＢＬ無添加のＲ１試薬溶液に０．５％になるようにポ
リエチレングリコール２００００を添加して、実施例１
と同様にシスタチンＣを測定した。結果を図９に示す。
ペレックスＮＢＬ無添加のＲ１試薬溶液にポリエチレン
グリコール２００００を添加した場合、ポリエチレング
リコールによる反応促進効果により測定値は上昇する
が、シスタチンＣの全濃度域で単に均一に上昇するため
に、ポリエチレングリコールのみの添加ではプロゾーン
現象の抑制効果は認められない。これに対し、ペレック
スＮＢＬを０．５％含有するＲ１試薬溶液にポリエチレ
ングリコール２００００を添加した場合、プロゾーン現
象を抑制したまま、測定値が上昇した。しかも、このポ
リエチレングリコールの効果は、試験した濃度に対応し
て一貫して高まり、その効果が頭打ちとなる明確な上限
濃度は認められなかった。このことから、陰イオン性界
面活性剤添加でプロゾーン現象を抑制した際に測定値が
全体的に低下しても、ポリエチレングリコールなどの反
応促進剤を適宜の量添加することでプロゾーン現象を抑
制したまま測定値を上昇させ、自由に測定感度を設定で
きることが判る。
ＮＢＬの濃度を０．５％になるように添加したとき、シ
スタチンＣの測定値は全体的に著しく低下した（図
５）。そこで、反応促進剤共存下での陰イオン性界面活
性剤のプロゾーン現象の抑制効果ついて検討した。反応
促進剤としてポリエチレングリコール２００００を用
い、濃度がそれぞれ０、０．５、０．７５、１．０又は
１．２５％になるように、実施例５のペレックスＮＢＬ
を０．５％含有するＲ１試薬溶液に添加して、実施例１
と同様にシスタチンＣを測定した。同時に、ペレックス
ＮＢＬ無添加のＲ１試薬溶液に０．５％になるようにポ
リエチレングリコール２００００を添加して、実施例１
と同様にシスタチンＣを測定した。結果を図９に示す。
ペレックスＮＢＬ無添加のＲ１試薬溶液にポリエチレン
グリコール２００００を添加した場合、ポリエチレング
リコールによる反応促進効果により測定値は上昇する
が、シスタチンＣの全濃度域で単に均一に上昇するため
に、ポリエチレングリコールのみの添加ではプロゾーン
現象の抑制効果は認められない。これに対し、ペレック
スＮＢＬを０．５％含有するＲ１試薬溶液にポリエチレ
ングリコール２００００を添加した場合、プロゾーン現
象を抑制したまま、測定値が上昇した。しかも、このポ
リエチレングリコールの効果は、試験した濃度に対応し
て一貫して高まり、その効果が頭打ちとなる明確な上限
濃度は認められなかった。このことから、陰イオン性界
面活性剤添加でプロゾーン現象を抑制した際に測定値が
全体的に低下しても、ポリエチレングリコールなどの反
応促進剤を適宜の量添加することでプロゾーン現象を抑
制したまま測定値を上昇させ、自由に測定感度を設定で
きることが判る。
【００３６】＜実施例７＞陰イオン性界面活性剤のプロ
ゾーン現象抑制効果を、シスタチンＣ以外の測定試薬で
あるＡＦＰ測定試薬について検討した。０〜２５０μｇ
／ｍＬの濃度のＡＦＰを含む血清３μＬに、０．２％Ｔ
ｒｉｔｏｎＸ１００、０．２％ＥＤＴＡ・２Ｎａ及び１
％ＮａＣｌを含む、０．２ＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ６．
０）をＲ１試薬溶液として２４０μＬ加えた。次いで３
７℃で５分後に、Ｒ２試薬溶液として参考例３で調製し
た抗ＡＦＰ抗体結合金コロイド溶液を６０μＬ添加し、
３７℃で反応させ、日立７１５０型自動分析装置により
２７ポイントと５０ポイントにおける吸光度差（主波長
５４６ｎｍ副波長６６０ｎｍ）を測定した。前記Ｒ１試
薬溶液に、陰イオン性界面活性剤としてペレックスＳＳ
Ｈを０．１％濃度で添加し、同様にしてＡＦＰを測定
し、陰イオン性界面活性剤のプロゾーン現象抑制効果に
ついて検討した。結果を図１０に示す。ＡＦＰ測定試薬
においても、陰イオン性界面活性剤ペレックスＳＳＨ添
加により、プロゾーン現象の抑制効果が認められた。
ゾーン現象抑制効果を、シスタチンＣ以外の測定試薬で
あるＡＦＰ測定試薬について検討した。０〜２５０μｇ
／ｍＬの濃度のＡＦＰを含む血清３μＬに、０．２％Ｔ
ｒｉｔｏｎＸ１００、０．２％ＥＤＴＡ・２Ｎａ及び１
％ＮａＣｌを含む、０．２ＭのＭＥＳ緩衝液（ｐＨ６．
０）をＲ１試薬溶液として２４０μＬ加えた。次いで３
７℃で５分後に、Ｒ２試薬溶液として参考例３で調製し
た抗ＡＦＰ抗体結合金コロイド溶液を６０μＬ添加し、
３７℃で反応させ、日立７１５０型自動分析装置により
２７ポイントと５０ポイントにおける吸光度差（主波長
５４６ｎｍ副波長６６０ｎｍ）を測定した。前記Ｒ１試
薬溶液に、陰イオン性界面活性剤としてペレックスＳＳ
Ｈを０．１％濃度で添加し、同様にしてＡＦＰを測定
し、陰イオン性界面活性剤のプロゾーン現象抑制効果に
ついて検討した。結果を図１０に示す。ＡＦＰ測定試薬
においても、陰イオン性界面活性剤ペレックスＳＳＨ添
加により、プロゾーン現象の抑制効果が認められた。
【図１】 陰イオン性界面活性剤のプロゾーン現象抑制
効果を示すグラフ（シスタチンＣ）。
効果を示すグラフ（シスタチンＣ）。
【図２】 陰イオン性界面活性剤のプロゾーン現象抑制
効果を示すグラフ（シスタチンＣ）。
効果を示すグラフ（シスタチンＣ）。
【図３】 陰イオン性界面活性剤のプロゾーン現象抑制
効果を示すグラフ（シスタチンＣ）。
効果を示すグラフ（シスタチンＣ）。
【図４】 非イオン性界面活性剤添加でのプロゾーン現
象を示すグラフ（シスタチンＣ）。
象を示すグラフ（シスタチンＣ）。
【図５】 プロゾーン現象抑制における硫酸ナトリウム
と陰イオン性界面活性剤との比較を示すグラフ（シスタ
チンＣ）。
と陰イオン性界面活性剤との比較を示すグラフ（シスタ
チンＣ）。
【図６】 ペレックスＳＳＨの濃度とプロゾーン現象抑
制効果との関係を示すグラフ（シスタチンＣ）。
制効果との関係を示すグラフ（シスタチンＣ）。
【図７】 エマール７０Ｃの濃度とプロゾーン現象抑制
効果との関係を示すグラフ（シスタチンＣ）。
効果との関係を示すグラフ（シスタチンＣ）。
【図８】 非イオン性界面活性剤共存下での陰イオン性
界面活性剤のプロゾーン現象抑制効果を示すグラフ（シ
スタチンＣ）。
界面活性剤のプロゾーン現象抑制効果を示すグラフ（シ
スタチンＣ）。
【図９】 非イオン性界面活性剤及び反応促進剤の共存
下での陰イオン性界面活性剤のプロゾーン現象抑制効果
を示すグラフ（シスタチンＣ）。
下での陰イオン性界面活性剤のプロゾーン現象抑制効果
を示すグラフ（シスタチンＣ）。
【図１０】 陰イオン性界面活性剤のプロゾーン現象抑
制効果を示すグラフ（ＡＦＰ）。
制効果を示すグラフ（ＡＦＰ）。
Ａｂｓ＊１０００＝吸光度×１０００
Ｃｙｓ．Ｃ＝シスタチンＣ
Claims (16)
- 【請求項１】 硫酸エステル塩系及びスルホン酸塩系の
陰イオン性界面活性剤よりなる群より選ばれる１種又は
２種以上の化合物よりなる、免疫反応測定用プロゾーン
現象抑制剤。 - 【請求項２】 硫酸エステル塩系及びスルホン酸塩系の
陰イオン性界面活性剤よりなる群より選ばれる１種又は
２種以上の化合物を免疫反応におけるプロゾーン現象抑
制剤として含有することを特徴とする、免疫反応測定用
試薬。 - 【請求項３】 該プロゾーン現象抑制剤を、免疫反応液
中の該プロゾーン現象抑制剤の濃度が０．００８〜４％
になる量で含有することを特徴とする、請求項２に記載
の免疫反応測定用試薬。 - 【請求項４】 該免疫反応が、免疫凝集反応である、請
求項２又は３に記載の免疫反応測定用試薬。 - 【請求項５】 該免疫反応が、金コロイド凝集反応であ
る、請求項２ないし４の何れかに記載の免疫反応測定用
試薬。 - 【請求項６】 反応促進剤を更に含有することを特徴と
する、請求項２ないし５の何れかに記載の免疫反応測定
用試薬。 - 【請求項７】 硫酸エステル塩系及びスルホン酸塩系の
陰イオン性界面活性剤よりなる群より選ばれる１種又は
２種以上の化合物を免疫反応用プロゾーン現象抑制剤と
して免疫反応液中に含有させることにより、免疫反応に
おけるプロゾーン現象を抑制して免疫反応を行わせるこ
とを特徴とする、免疫反応測定方法。 - 【請求項８】 該プロゾーン現象抑制剤を０．００８〜
４％の濃度に含有させるものである、請求項７に記載の
免疫反応測定方法。 - 【請求項９】 免疫凝集反応測定法によるものである、
請求項７又は８に記載の免疫反応測定方法。 - 【請求項１０】 金コロイド凝集反応測定法によるもの
である、請求項７ないし９の何れかに記載の免疫反応測
定方法。 - 【請求項１１】 反応液中に反応促進剤を更に含有させ
ることを特徴とする、請求項７ないし１０の何れかに記
載の免疫反応測定方法。 - 【請求項１２】 免疫反応液中に、硫酸エステル塩系及
びスルホン酸塩系の陰イオン性界面活性剤よりなる群よ
り選ばれる１種又は２種以上の化合物を含有させること
を特徴とする、免疫測定法におけるプロゾーン現象の抑
制方法。 - 【請求項１３】 該免疫反応液中の該化合物の濃度が
０．００８〜４％である、請求項１２に記載の、免疫測
定法におけるプロゾーン現象の抑制方法。 - 【請求項１４】 該免疫測定法が免疫凝集反応測定法に
よるものである、請求項１２又は１３に記載の、免疫測
定法におけるプロゾーン現象の抑制方法。 - 【請求項１５】 該免疫測定法が金コロイド凝集反応測
定法によるものである、請求項１２ないし１４の何れか
に記載の免疫測定法におけるプロゾーン現象の抑制方
法。 - 【請求項１６】 該免疫反応液中に反応促進剤を更に含
有させることを特徴とする、請求項１２ないし１５の何
れかに記載の、免疫測定法におけるプロゾーン現象の抑
制方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001341838A JP3851807B2 (ja) | 2001-11-07 | 2001-11-07 | 免疫反応におけるプロゾーン現象抑制方法及び免疫反応測定用試薬 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2001341838A JP3851807B2 (ja) | 2001-11-07 | 2001-11-07 | 免疫反応におけるプロゾーン現象抑制方法及び免疫反応測定用試薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2003149244A true JP2003149244A (ja) | 2003-05-21 |
| JP3851807B2 JP3851807B2 (ja) | 2006-11-29 |
Family
ID=19155800
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2001341838A Expired - Fee Related JP3851807B2 (ja) | 2001-11-07 | 2001-11-07 | 免疫反応におけるプロゾーン現象抑制方法及び免疫反応測定用試薬 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3851807B2 (ja) |
Cited By (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1496361A1 (en) * | 2003-07-07 | 2005-01-12 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Immunoassay method and immunoassay system using a Fourier transformation to judge the occurrence of zone phenomena. |
| JP2005091111A (ja) * | 2003-09-16 | 2005-04-07 | Godo Shusei Co Ltd | 尿中総ヘモグロビン定量試薬 |
| WO2005086594A3 (ja) * | 2004-02-26 | 2005-11-24 | Denka Seiken Kk | 免疫測定法用測定値低下抑制剤及びそれを用いた免疫測定法 |
| JP2006105910A (ja) * | 2004-10-08 | 2006-04-20 | Fujikura Kasei Co Ltd | 標的物質の測定方法および測定試薬 |
| WO2010021399A1 (ja) | 2008-08-22 | 2010-02-25 | デンカ生研株式会社 | シスタチンｃ吸着抑制剤 |
| JP2010117244A (ja) * | 2008-11-13 | 2010-05-27 | Alfresa Pharma Corp | ヘモグロビンの測定方法および測定用キット |
| WO2010113943A1 (ja) * | 2009-03-31 | 2010-10-07 | デンカ生研株式会社 | 免疫分析方法及びそのための試薬 |
| JP2011209140A (ja) * | 2010-03-30 | 2011-10-20 | Sekisui Medical Co Ltd | ヒトｃ反応性タンパク質（ｃｒｐ）測定用イムノクロマト試薬 |
| JP2014062820A (ja) * | 2012-09-21 | 2014-04-10 | Toyo Roshi Kaisha Ltd | イムノクロマトグラフ試験ストリップ用メンブレン、試験ストリップ及び検査方法 |
| CN110462402A (zh) * | 2017-03-27 | 2019-11-15 | 日本火腿株式会社 | 防止因体液引起的抗原抗体反应阻碍的物质 |
| EP3951390A4 (en) * | 2019-03-25 | 2022-12-14 | Sekisui Medical Co., Ltd. | IMMUNOCHROMATOGRAPHIC ANALYTICAL PROCEDURE AND TEST STRIPS FOR USE IN THIS PROCEDURE |
| JP7308148B2 (ja) | 2017-01-30 | 2023-07-13 | ゾエティス サービシズ リミテッド ライアビリティ カンパニー | 溶液ベースのプラズモン特異的結合パートナーアッセイおよび金属ナノ構造体 |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR102593221B1 (ko) | 2017-09-08 | 2023-10-24 | 알프레사 파마 가부시키가이샤 | 분석 장치 및 분석 방법 |
-
2001
- 2001-11-07 JP JP2001341838A patent/JP3851807B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (30)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1496361A1 (en) * | 2003-07-07 | 2005-01-12 | Matsushita Electric Industrial Co., Ltd. | Immunoassay method and immunoassay system using a Fourier transformation to judge the occurrence of zone phenomena. |
| JP2005091111A (ja) * | 2003-09-16 | 2005-04-07 | Godo Shusei Co Ltd | 尿中総ヘモグロビン定量試薬 |
| JP4515733B2 (ja) * | 2003-09-16 | 2010-08-04 | 合同酒精株式会社 | 尿中総ヘモグロビン定量試薬 |
| US8524452B2 (en) | 2004-02-26 | 2013-09-03 | Denka Seiken Co., Ltd. | Measurement value lowering inhibitor for immunoassay method and immunoassay method using the same |
| WO2005086594A3 (ja) * | 2004-02-26 | 2005-11-24 | Denka Seiken Kk | 免疫測定法用測定値低下抑制剤及びそれを用いた免疫測定法 |
| KR101153249B1 (ko) | 2004-02-26 | 2012-06-05 | 덴카 세이켄 가부시키가이샤 | 면역측정법용 측정값 저하 억제제를 이용한 면역측정법 |
| AU2005220672B2 (en) * | 2004-02-26 | 2012-01-19 | Denka Company Limited | Measurement value lowering inhibitor for immunoassay method and immunoassay method using the same |
| JP2006105910A (ja) * | 2004-10-08 | 2006-04-20 | Fujikura Kasei Co Ltd | 標的物質の測定方法および測定試薬 |
| JP4556605B2 (ja) * | 2004-10-08 | 2010-10-06 | 藤倉化成株式会社 | 標的物質の測定方法および測定試薬 |
| KR101665999B1 (ko) | 2008-08-22 | 2016-10-13 | 덴카 세이켄 가부시키가이샤 | 시스타틴 ｃ 흡착 억제제 |
| KR20110042182A (ko) | 2008-08-22 | 2011-04-25 | 덴카 세이켄 가부시키가이샤 | 시스타틴 ｃ 흡착 억제제 |
| CN102187221A (zh) * | 2008-08-22 | 2011-09-14 | 电化生研株式会社 | 半胱氨酸蛋白酶抑制剂c吸附抑制剂 |
| US9046517B2 (en) | 2008-08-22 | 2015-06-02 | Denka Seiken Co., Ltd. | Cystatin C adsorption inhibitor |
| WO2010021399A1 (ja) | 2008-08-22 | 2010-02-25 | デンカ生研株式会社 | シスタチンｃ吸着抑制剤 |
| JP2010117244A (ja) * | 2008-11-13 | 2010-05-27 | Alfresa Pharma Corp | ヘモグロビンの測定方法および測定用キット |
| CN102369441A (zh) * | 2009-03-31 | 2012-03-07 | 电化生研株式会社 | 免疫分析方法及用于该方法的试剂 |
| WO2010113943A1 (ja) * | 2009-03-31 | 2010-10-07 | デンカ生研株式会社 | 免疫分析方法及びそのための試薬 |
| JP5426661B2 (ja) * | 2009-03-31 | 2014-02-26 | デンカ生研株式会社 | 免疫分析方法及びそのための試薬 |
| KR101675412B1 (ko) * | 2009-03-31 | 2016-11-11 | 덴카 세이켄 가부시키가이샤 | 면역 분석 방법 및 그것을 위한 시약 |
| CN102369441B (zh) * | 2009-03-31 | 2014-10-15 | 电化生研株式会社 | 免疫分析方法及用于该方法的试剂 |
| KR20110137370A (ko) * | 2009-03-31 | 2011-12-22 | 덴카 세이켄 가부시키가이샤 | 면역 분석 방법 및 그것을 위한 시약 |
| US9075049B2 (en) | 2009-03-31 | 2015-07-07 | Denka Seiken Co., Ltd. | Immunoassay method and reagent therefor |
| JP2011209140A (ja) * | 2010-03-30 | 2011-10-20 | Sekisui Medical Co Ltd | ヒトｃ反応性タンパク質（ｃｒｐ）測定用イムノクロマト試薬 |
| JP2014062820A (ja) * | 2012-09-21 | 2014-04-10 | Toyo Roshi Kaisha Ltd | イムノクロマトグラフ試験ストリップ用メンブレン、試験ストリップ及び検査方法 |
| JP7308148B2 (ja) | 2017-01-30 | 2023-07-13 | ゾエティス サービシズ リミテッド ライアビリティ カンパニー | 溶液ベースのプラズモン特異的結合パートナーアッセイおよび金属ナノ構造体 |
| US11977072B2 (en) | 2017-01-30 | 2024-05-07 | Zoetis Services Llc | Solution-based plasmonic specific-binding partner assays using metallic nanostructures |
| CN110462402A (zh) * | 2017-03-27 | 2019-11-15 | 日本火腿株式会社 | 防止因体液引起的抗原抗体反应阻碍的物质 |
| EP3605097A4 (en) * | 2017-03-27 | 2021-01-20 | NH Foods Ltd. | SUBSTANCE PREVENTING INHIBITION OF ANTIGEN-ANTIBODY REACTION BY BODY FLUID |
| US11719695B2 (en) | 2017-03-27 | 2023-08-08 | Nh Foods Ltd | Immunoassay method to prevent inhibition of antigen-antibody binding interactions in mucosal fluids |
| EP3951390A4 (en) * | 2019-03-25 | 2022-12-14 | Sekisui Medical Co., Ltd. | IMMUNOCHROMATOGRAPHIC ANALYTICAL PROCEDURE AND TEST STRIPS FOR USE IN THIS PROCEDURE |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3851807B2 (ja) | 2006-11-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2003149244A (ja) | 免疫反応におけるプロゾーン現象抑制方法及び免疫反応測定用試薬 | |
| JP3887340B2 (ja) | ノロウイルス又はサポウイルス検体用希釈液及びウイルス検出試薬 | |
| JP5362797B2 (ja) | 凝集反応安定化方法 | |
| JP2007114129A (ja) | 反応性物質が結合した微小粒子の沈降抑制方法および該微小粒子含有試薬 | |
| JP5653216B2 (ja) | シスタチンｃ吸着抑制剤 | |
| JP5364310B2 (ja) | 反応性物質が結合した微小粒子の安定化方法および該微小粒子含有試薬 | |
| WO2014021387A1 (ja) | ラテックス凝集阻害免疫法 | |
| EP0556294A1 (en) | Diluent buffer and method for using same | |
| JPH06300761A (ja) | 免疫比濁測定試薬及び測定方法 | |
| JPWO2012161226A1 (ja) | Ｐｉｖｋａ−ｉｉ測定試薬における非特異反応の抑制方法 | |
| JP3266960B2 (ja) | 金コロイド粒子を用いた免疫分析法 | |
| JP2011257243A (ja) | 試料中のｃ反応性蛋白質の測定試薬、測定方法及び測定範囲の拡大方法 | |
| JP2016075645A (ja) | 免疫分析方法及び試薬 | |
| KR20140145121A (ko) | 면역분석 방법 및 시약 | |
| WO2006027990A1 (ja) | 免疫比濁法及びそのための試薬 | |
| EP1233269B1 (en) | Agent for the removal of turbidity in biological samples | |
| JP6931673B2 (ja) | 免疫分析方法及び試薬 | |
| JP2022033286A (ja) | ヘモグロビンの測定試薬、測定キット及び測定方法 | |
| JP7084590B2 (ja) | 脂質異常症治療が必要な被検者の選別方法及び選別用試薬 | |
| JP7268306B2 (ja) | 生体試料中の測定対象物質を免疫学的に測定する方法 | |
| JP2001330616A (ja) | 抗原結合固相の製造方法 | |
| JP2012078161A (ja) | 試料中の測定対象物質の測定方法、測定試薬及び測定値差の改善方法 | |
| JP2001296296A (ja) | 抗原抗体反応による被検物質の測定法及び試薬 | |
| JP4585708B2 (ja) | 複合体を形成する物質の測定方法及び測定試薬 | |
| JPH085637A (ja) | Ｈａｖ抗原及びその抗原と免疫学的に反応性の抗体の測定法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20041026 |
|
| A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20060124 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20060131 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20060329 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20060829 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20060904 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 3851807 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090908 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100908 Year of fee payment: 4 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110908 Year of fee payment: 5 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120908 Year of fee payment: 6 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130908 Year of fee payment: 7 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |