JP2002513645A - 止血化合物および生体吸収性ポリマーを含む組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 生体吸収性ポリマーおよび止血化合物を含有する固体で繊維状の生体吸収性止血組成物、該止血組成物を製造する方法および該止血組成物を使用する方法を開示する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】 発明の背景 本発明は、外科手術または外傷性の創傷からの失血を止めるまたは予防する場
合に有用な止血組成物に関する。

【０００２】 血管、体組織、器官または骨組織からの出血は、循環血液量減少に関係したシ
ョックおよび死をもたらす失血を引き起こすことがある。しかしながら、外傷医
療が進歩し続けているにもかかわらず、毎年、かなり多数の外傷犠牲者が、致命
的なまたは重症の出血を被っている。これら致命的状態の多くは、失血部位の管
理に適切な手段があったならば予防しうると考えられる。抗凝固性薬剤を与えら
れる血友病者および患者（例えば、心臓手術中および／または後の）もまた、急
激な失血の高い危険にさらされている。

【０００３】 出血を止めるためのおよび創傷を封鎖するための抗凝固性物質としてのフィブ
リンの使用は、広く認められている。概して、このような生物接着剤すなわち“
フィブリングルー”は、フィブリノーゲンおよびトロンビンの２成分系を基剤と
し、それらは、混合された場合、トロンビンの作用によってフィブリノーゲンが
切断されてフィブリンモノマーを形成し、それらが自然に重合してフィブリンの
立体的網様構造を形成することによってフィブリンクロットを形成する。例えば
、Tisseel^TMは、塩化カルシウムを含めた流動性トロンビン成分、およびXIII因
子、フィブロネクチン、アプロチニンおよびプラスミノーゲンを含めた幾分より
粘稠なフィブリノーゲン成分を含有する２成分キットである。それら二つの成分
は、２個の別々のシリンジ中に深冷凍結された状態で、または溶媒としてのカル
シウムおよびアプロチニンの溶液を伴う２種類の凍結乾燥粉末として供給される
。この方法を用いると、フィブリンモノマー凝集によってそれら二つの成分が混
合された場合、フィブリングルーは硬化する。その硬化速度は、トロンビン濃度
に依存し、数秒（高トロンビン濃度）〜数分（低トロンビン濃度）までである。

【０００４】 これら製剤の主な欠点は、それら成分の水様流動性が、それらの取扱いおよび
投与を難しくしていることである。これら組成物の投与を容易にするために、例
えば、米国特許第４，３５９，０４９号に記載のような二重シリンジアプリケー
ター、または米国特許第４，４２７，６５１号に記載のようなスプレーシステム
の開発によって様々な努力が為されてきているが、低粘度の根本的な問題が残っ
ている。

【０００５】 Wadstrom，米国特許第５，６３１，０１１号は、粘稠な水溶液を形成しうる生
体適合性ポリマーを加えることによってフィブリングルー組成物の粘度を増加さ
せる方法を記載している。このシステムの成分は、深冷凍結溶液としてまたは使
用前に適当な溶液を用いて希釈される凍結乾燥粉末として提供される。Wadstrom
によって考えられた主な投与経路は、２成分製剤による。したがって、Wadstrom
は、溶液の粘度を、従来の“水様”フィブリングルーより増加させる利点を強調
しているが、このシステムの成分はなお、使用時に追加の製剤を必要とする。Wa
dstromは、更に、フィブリン重合および組織への癒着が阻止されると考えられる
ことから、高粘度を有する組成物は避けられるはずであることを示している。

【０００６】 フィブリングルーの代わりに現在用いられているものは、生分解性コラーゲン
パッチ（“ＴＡＦパッチ”）である。例えば、Zimmerman および Schiele，米国
特許第４，４５３，９３９号は、フィブリノーゲンおよびトロンビンを含めた血
液凝固成分の混合物をコーティングされているフォーム、ウェブまたはフィルム
の形のコラーゲン担体を記載している。血液凝固成分を使用前に反応させないた
めに、それらは、はけ塗り、噴霧または浸漬によってコラーゲンに適用するため
の有機溶媒中懸濁液として与えられる。しかしながら、コラーゲン担体上への一
貫性のない活性成分の結合および安定性を生じるこの方法を用いて、固着操作に
最適のタイミングを得ることの難しさが報告されている。更に、この方法を用い
ると、コラーゲン担体の表面を越えた活性成分の浸透は不可能であるので、その
装置表面に利用可能な血液凝固成分の濃度が制限される。ＴＡＦパッチについて
のもう一つの問題は、用いられるコラーゲンフリース／フォームが、湿潤すると
充分な機械的支持を与えることがなく、それを創傷に適用しても、出血を止める
のをまたはパッチの貼り直しを助けるように指圧を加えることができないという
ことである。更に、外科医は、ＴＡＦパッチの非柔軟性のため、それらが適用さ
れる部位の輪郭にそれらを容易に合致させることができないと報告している。Ｔ
ＡＦパッチについてのなおもう一つの問題は、それらが、診療所または病院の環
境外での使用を妨げる冷蔵を必要とすることである。

【０００７】 ＷＯ９６／１７６３３号は、フィブリン包帯を含めた組織封鎖材を記載してい
る。その包帯を作成するのに用いられる方法では、活性成分を、閉塞性支持体に
よって支持されている別々の層中で凍結乾燥させる。したがって、それら活性成
分は、包帯全体に均一に混合されていない。

【０００８】 したがって、指圧に充分に耐えるように研究され、しかも特に、可能な限り速
やかに出血を止めることが臨界的でありうる生命を危うくする外傷のような緊急
の場合に、使用するのにあまり難しくない止血組成物が要求されている。

【０００９】 発明の概要 一つの態様において、本発明は、生体吸収性である繊維状固体の形の止血用生
体適合性組成物を特徴とする。その組成物は、生体吸収性ポリマーおよび１種類
またはそれ以上の止血化合物を含有する。好ましくは、その止血化合物はトロン
ビンであり、より好ましくは、その組成物は、トロンビンおよびカルシウム塩を
含有し、そして最も好ましくは、フィブリノーゲンも含む。本明細書中で用いら
れる“止血化合物または組成物”とは、創傷に適用したときに、血餅形成を促進
することによって失血を少なくするまたは止める物質または組成物である。本明
細書中で用いられる“繊維状”という用語は、天然のまたは合成の繊維を含む組
成物を意味する。“繊維”とは、布帛および他の織物構造の基本的な要素を形成
している天然かまたは人造の物質単位を意味する。繊維は、その直径または幅の
少なくとも１００倍の長さを有することを特徴とする。

【００１０】 本発明の止血組成物中に含有される生体吸収性ポリマーには、ポリアニオン多
糖、アルギン酸、キチン、キトサン、フィブリン、ポリグリコリド、ポリラクチ
ド、ポリカプロラクトン、デキストランおよびそれらのコポリマーが含まれる。
本明細書中で用いられる“ポリマー”とは、少なくとも２個、好ましくは、３個
以上の反復モノマーのより小さい単位（例えば、単糖、アミノ酸、ヌクレオチド
、アルケンまたは有機酸の単位）の反復結合によって作られる分子を意味する。
したがって、コポリマーという用語は、２個またはそれ以上の共重合したモノマ
ーまたはポリマー種の組合せによって形成されるポリマーを意味する。本明細書
中で用いられる“生体吸収性”という用語は、植込後に生体内で無毒性産物に分
解して、生体から排除されるまたは代謝される組織適合性材料の能力を意味する
（Barrows,“Synthetic Bioabsorbable Polymers,” High Performance from Bi
omaterials -A comprehensive Guide to Medical and Pharmaceutical Applicat
ions, Michael Szycher監修，Technomic Publishing, ランカスター，ＰＡ，199
1年中の243頁）。概して、本発明の止血組成物中で用いられる生体吸収性ポリマ
ーの濃度は、０．１〜５０ｍｇ／ｃｍ²の範囲内であり；好ましくは、生体吸収
性ポリマー濃度は、０．１〜３０ｍｇ／ｃｍ²の範囲内であり；そして最も好ま
しくは、生体吸収性ポリマー濃度は、０．１〜１０ｍｇ／ｃｍ²である。

【００１１】 一つの好ましい実施態様において、生体吸収性ポリマーはポリアニオン多糖で
ある。“ポリアニオン多糖”（ＰＡＳ）は、その用語が本明細書中で用いられて
いるように、非修飾のものも化学誘導体も含めた多糖であり、それは、２個以上
の陰電荷基（例えば、約４．０を越えるｐＨ値でカルボキシル基）を含有し、ナ
トリウムまたはカリウム塩、およびカルシウムまたはマグネシウム塩のようなア
ルカリ土類金属塩などのそれらの塩を含む。本発明の止血組成物中に含有される
好ましいポリアニオン多糖には、ヒアルロン酸（ＨＡ）、カルボキシメチルセル
ロース（ＣＭＣ）、カルボキシメチルアミロース（ＣＭＡ）、コンドロイチン−
６−硫酸、デルマタン硫酸、デルマタン−６−硫酸およびそれらの組合せが含ま
れるが、それらに制限されるわけではない。

【００１２】 最も好ましくは、ポリアニオン多糖は、水に不溶性の誘導体の形であるＨＡ、
ＣＭＣまたはＣＭＡである。“ポリアニオン多糖誘導体”は、その用語が本明細
書中で用いられているように、天然の形から化学修飾されている１種類またはそ
れ以上のポリアニオン多糖（ＰＡＳ）である。このような修飾には、官能基（例
えば、置換アミド基、エステル結合およびアミン基）の付加；ＰＡＳ分子を共有
結合によって架橋することにより、ＰＡＳの水への不溶性を増加させる反応；お
よび非共有結合相互作用によってＰＡＳの水への不溶性を増加させる反応が含ま
れうる。更に、止血組成物には、２種類若しくはそれ以上のポリアニオン多糖ま
たはそれらの水に不溶性の誘導体、例えば、ＨＡおよびＣＭＣまたはＨＡおよび
ＣＭＡが含まれうる。

【００１３】 もう一つの好ましい実施態様において、ポリアニオン多糖は、１種類またはそ
れ以上の疎水性生体吸収性ポリマーまたはコポリマーと組み合わされる。本明細
書中で用いられる“疎水性”とは、水への親和性を欠く化合物または組成物を意
味する。好ましくは、疎水性生体吸収性ポリマーは、ポリグリコリド、ポリラク
チド（Ｄ、ＬまたはＤＬ）、ポリジオキサノン、ポリエステルカーボネート、ポ
リヒドロキシアルコネート、ポリカプロラクトン（ポリラクトン）およびそれら
のコポリマーから成る群より選択される。より好ましくは、ポリグリコリド、ポ
リラクチド、またはポリグリコリド−ポリカプロラクトン、ポリグリコリド−ポ
リラクチドまたはポリラクチド−ポリカプロラクトンのコポリマーを、本発明の
組成物中で用いる。ポリアニオン多糖と組み合わせて用いられる疎水性生体吸収
性ポリマーの濃度は、好ましくは、０．１〜５０ｍｇ／ｃｍ²の範囲内である。

【００１４】 本発明のこの態様の好ましい実施態様において用いられるトロンビンは、動物
またはヒト由来でありうる。例えば、一つの哺乳動物種（例えば、ウシ、ブタ、
ヒツジ）から得られるトロンビンは、別の哺乳動物種、例えば、ヒトを治療する
のに用いられる本発明の組成物中に包含させることができる。より好ましくは、
組成物中で用いられるトロンビンは、その組成物が用いられる予定の同じ種に由
来する。本明細書中で用いられる“トロンビン”という用語には、動物またはヒ
ト血漿に由来する天然のトロンビン分子、および動物またはヒトにおいて凝固活
性を有効に維持する機能的に活性な類似体を含めた、組換えＤＮＡ技術によって
生産されるものなどの合成型が含まれる。トロンビンは、本発明の止血組成物中
に１〜１００Ｕ／ＣＭ²、好ましくは、１０〜５０Ｕ／ｃｍ²の濃度で存在する。
本明細書中で用いられるトロンビンの単位は、規格化された１ｍｌフィブリノー
ゲン（約２５０ｇ／ｍｌ）溶液を１５秒以内に凝固させるのに必要なトロンビン
の量として定義される。

【００１５】 本発明のこの態様の好ましい実施態様において用いられる塩化カルシウムの濃
度は、トロンビンを活性化させるのに充分である。典型的には、カルシウムの濃
度は、０．０１〜１０ｍｇ／ｃｍ²であろう。用いられるカルシウムの具体的な
濃度は、その組成物の具体的な目的に依るであろうが、本明細書中の内容を用い
て当業者が容易に決定することができる。

【００１６】 本発明のこの態様の他の好ましい実施態様において、止血組成物はフィブリノ
ーゲンを含む。そのフィブリノーゲンは、動物またはヒト由来でありうるが、好
ましくは、その組成物が用いられる予定の同じ種に由来する。本明細書中で用い
られる“フィブリノーゲン”という用語により、動物またはヒト血漿に由来する
天然のフィブリノーゲン分子、および動物またはヒトにおいて凝固活性を有効に
維持する機能的に活性な類似体を含めた、組換えＤＮＡ技術によって生産される
ものなどの合成型を含むことを意味する。本発明の組成物中で用いられるフィブ
リノーゲンは、高度に精製されうるし、少量のXIII凝固因子を含有しうるし、ま
たはXIII凝固因子を強化することができる。典型的には、その凝固性フィブリノ
ーゲンの量は、本発明の止血組成物中に約０．０５〜２０ｍｇ／ｃｍ²、好まし
くは、約１〜２０ｍｇ／ｃｍ²、より好ましくは、約５〜１５ｍｇ／ｃｍ²の濃度
で存在する。

【００１７】 更に別の血液凝固成分およびフィブリン溶解阻害剤も、本発明の組成物中に含
まれうる。例としては、XIII因子、フィブロネクチン、プラスミノーゲン、アプ
ロチニン、α−２−アンチプラスミン、α−２−マクログロブリン、α−１−ア
ンチトリプシン、ε−アミノカプロン酸、トラネキサム酸、またはプラスミン活
性化物質阻害剤、例えば、ＰＡＩ−１またはＰＡＩ−２が含まれるが、それらに
制限されるわけではない。

【００１８】 もう一つの実施態様において、本発明の止血組成物は、適用範囲の局所環境中
に存在するヘパリンを中和するのに有効な一定量の硫酸プロタミン剤も含有しう
る。硫酸プロタミンは、例えば、ヘパリンを用いた注射療法を受けている若干の
患者の血液中に存在するヘパリンまたはビタミンＫアンタゴニストを中和する。

【００１９】 本発明の組成物は、薬物を更に含むことができる。用いられる具体的な薬物は
、その組成物の予定の用途に依る選択の問題である。好ましい薬物には、増殖因
子、増殖因子阻害剤、抗体、非ステロイド系抗炎症性薬、抗生物質および細胞増
殖抑制剤が含まれるが、それらに制限されるわけではない。

【００２０】 本発明の止血組成物は、典型的には、約１５〜１００ｍｇ／ｃｍ²の質量／面
積（Ｍ／Ａ）、好ましくは、約２０〜６０ｍｇ／ｃｍ²のＭ／Ａ、より好ましく
は、約３０〜４０ｍｇ／ｃｍ²のＭ／Ａを有する。その組成物の寸法および形状
は、具体的な用途によって異なるであろう。例えば、若干の好ましい実施態様に
おいて、止血組成物は、救急用キット、傷病者の優先順位付けおよび外科手術で
一般的に用いられるもののような種々の標準的な角形または円形寸法で供給され
ることができ、それは、更に切断され且つ治療される特定の面積に寸法を合わせ
ることができる。或いは、その止血組成物は、球状、円錐形、立方形または円筒
形が含まれるがそれらに制限されるわけではない、体腔中に充填するのに有用で
ある種々の他の形状で提供されうる。

【００２１】 更に関連の実施態様において、止血組成物は、汚染を伴うことなく組成物の取
り出しを容易にする密封された防水滅菌包装中に含有される。好ましい防水包装
材料には、例えば、アルミニウム箔、プラスチック、または容易に滅菌される他
の慣用的な材料が含まれる。滅菌は、例えば、包装された組成物を放射線、例え
ば、γ線またはＥビームに当てることによって、またはエチレンオキシドを用い
た処理によって行うことができる。

【００２２】 もう一つの態様において、本発明は、固体で繊維状の生体吸収性止血組成物を
製造する方法であって、生体吸収性ポリマーおよび１種類またはそれ以上の止血
化合物を非水性溶媒の存在下において混合し、その組合せに製紙処理を施して、
固体の生体吸収性止血組成物を製造する工程を含む上記方法を特徴とする。

【００２３】 本発明のこの態様の一つの好ましい実施態様において、その方法は、止血組成
物の成分を、非水性溶媒中に別々にかまたは一緒に沈殿させ、それら沈殿した成
分を、繊維状パルプを形成するのに充分な条件下で混合した後、繊維状パルプを
集め、プレスし、乾燥させて、固体の生体吸収性止血組成物を製造することを含
む。

【００２４】 本発明の方法で用いることができる有機溶媒の例には、直鎖または分岐状のＣ ₁ 〜Ｃ₅アルコール、特に、ｎ−プロパノール、イソプロパノール、ｎ−ブタノー
ル、イソブタノールおよびエタノール；ケトン、例えば、アセトンまたはメチル
エチルケトン；脂肪族または環状脂肪族エーテル、例えば、ジメチルエーテルま
たはジエチルエーテル、テトラヒドロフランまたはジオキサン；エステル、例え
ば、酢酸エチル；ニトリル、例えば、アセトニトリル；および脂肪族ハロゲン化
炭化水素、例えば、四塩化炭素、塩化メチレンおよびクロロホルムが含まれる。

【００２５】 本発明の方法の好ましい実施態様において、成分の混合は、有機溶媒中にそれ
ら材料を均等に分散させる高剪断条件下で行われる。繊維状パルプを集める一つ
の好ましい方法は、成形用布帛を用いる。“成形用布帛”という用語は、繊維を
保持しながらパルプ溶液を排水させる紙生成中に用いられる材料を意味し、機械
的支持を与え、プレスおよび乾燥中に表面特性を与え、そして乾燥した紙製品か
ら剥離される。その成型用布帛は、テフロンまたはステンレス鋼製メッシュスク
リーンが含まれるがそれらに制限されない種々の材料でありうるが、好ましくは
、ポリエステル織布である。他の好ましい実施態様において、繊維状パルプは、
真空条件下において成型用布帛上に集められ；集められたその湿潤パルプに熱圧
縮を施し；そして室温で自然乾燥させる、または好ましくは、加熱条件下で、例
えば、８０〜１４０゜Ｆ、最も好ましくは、１００〜１３５゜Ｆで乾燥させる。

【００２６】 本発明のこの態様の関連の実施態様において、本発明の方法は、止血化合物が
組成物全体に均等に分散している、または例えば、ある範囲の所望の濃度の１種
類または複数の止血化合物を含有する繊維状パルプを、プレスおよび乾燥工程の
前に交互に集めることによって勾配として供給される止血組成物を製造すること
ができる。或いは、本発明の方法は、多層止血組成物を製造するのに用いること
ができる。例えば、生体吸収性ポリマーの一つの層および１種類またはそれ以上
の止血組成物を含有するもう一つの層を含有する二層組成物は、止血化合物の繊
維状パルプの採集後に生体吸収性ポリマーの繊維状パルプを集め、次に、それら
パルプを層に組み合わせた後、プレスおよび乾燥工程を行うことによって製造す
ることができる。三層組成物も、例えば、生体吸収性ポリマーを含有するコアの
両面に止血化合物を有して製造することができる。

【００２７】 なおもう一つの実施態様において、本発明は、創傷からの失血を阻止するまた
は止める方法であって、その創傷に、生体吸収性ポリマーおよび１種類またはそ
れ以上の止血化合物を含有する固体止血組成物を適用することによる方法を含む
。好ましくは、その組成物は創傷と、好ましくは、軽圧（例えば、指圧）を用い
て、その組成物と創傷との間の界面で血液凝固が起こり且つ出血が実質的に止ま
る充分な時間、接触した状態で維持される。概して、止血組成物は、創傷表面と
約２０秒間〜１０分間、好ましくは、約２０秒間〜５分間、より好ましくは、約
２０秒間〜２分間接触した状態で維持される。その組成物は、単独で創傷に直接
的に適用することができるし、またはガーゼのような乾燥滅菌材料によって適所
に保持することができる。創傷の場所に依っては、創傷部位を圧迫するように、
弾性のある包帯を含めた包帯を、そのパッチの周囲に巻き付けることができる。

【００２８】 本発明のこの態様の好ましい実施態様は、外傷または外科手術による創傷の出
血を阻止するまたは止める局所治療のための止血組成物の使用を含む。更に別の
好ましい実施態様において、本発明の方法は、肝、腎、脾臓、膵臓または肺など
の実質器官の出血を阻止するまたは止めるために止血組成物を用いる。或いは、
それら方法は、腹部、血管、泌尿器、婦人科、甲状腺、神経外科、組織移植およ
び歯科手術が含まれるがそれらに制限されるわけではない外科手術中に、出血ま
たは失血を阻止するまたは止めることを含む。

【００２９】 もう一つの実施態様において、止血組成物は、例えば外科手術中に切断されて
いる血管または他の体内腔の両端を吻合するまたは融合するのに用いるためにも
提供されうる。この実施態様において、止血組成物は、血管プロテーゼの両端に
容易に適合する形で提供される。血管プロテーゼが、Dacron移植片のような合成
品である場合、止血組成物は、その移植片の両端まで容易に適合する大きさの形
（例えば、円筒形）で提供されうる。したがって、更に提供されるのは、血管プ
ロテーゼおよびそのプロテーゼの両端と適合するように設計された本発明の止血
組成物を含有するキットである。或いは、予め寸法を合わせることができない場
合（例えば、天然の移植片）、止血組成物は、使用直前にプロテーゼの周囲に容
易に巻き付けられる形で提供されうる。

【００３０】 更に、局所適用に予定されている本発明による止血組成物は、接着テープを用
いて適用することができるし、またはバンドエイド型の接着剤支持体に付着させ
ることができる。用いられる接着剤の種類は、医学的に許容しうる接着剤のいず
れの種類でもありうる。好ましくは、用いられる接着剤は、皮膚と接触している
範囲に酸素を拡散させるように多孔性である。

【００３１】 本発明により、止血組成物の上記実施態様のいずれかを含むキットも提供され
る。例えば、そのキットは、好ましくは、それぞれ別々の防水滅菌包装中で提供
される多数の止血組成物を含有しうる。更に、緊急用または軍隊用に設計された
キットは、はさみ、メス、鉗子、止血帯、弾性または非弾性包帯等のような使い
捨ての予め滅菌された器具も含有しうる。

【００３２】 本発明の止血組成物の重要な利点は、その組成物の機械的一体性が、体液と接
触後も維持されて、指圧を加えて失血の停止を促すことができるし、必要な場合
は組成物の貼り直しが可能であるということである。先行技術組成物とは更に対
照的に、止血を促すのに必要な活性成分は、組成物全体に分散しているので、層
に分離する問題が無く、そのため、それら組成物を切断したり、治療される特定
の創傷に寸法を合わせたりすることができる。

【００３３】 したがって、本発明の止血組成物は、成分の可溶化および混合に関係した時間
の遅れを伴うことなく、外傷犠牲者および外科手術患者の出血を速やかに減少さ
せる手段を提供する。それら止血組成物は、熟練していない者も医療職員も容易
に用いることができる。これら特性は、兵隊、救助隊員、救急車／救急医療チー
ム、消防隊員のための外傷用パックのような野外用途において、および緊急治療
室職員によって、および一般大衆用の救急キットにおいて、これら組成物の使用
を可能にする。したがって、本発明の止血組成物の利用は、外傷による致命的状
態を減少させるであろうし、苛酷な天災または人為災害の最中に利用可能な血液
供給への需要も減少させるであろう。

【００３４】 特に断らない限り、本明細書中で用いられる専門用語および科学術語は全て、
本発明が関係する当該技術分野における業者によって一般的に理解されるのと同
じ意味を有する。本明細書に記載されたのと同様のまたは同等の方法および材料
はいずれも、本発明の実施または試験において用いることができるが、ここでは
、好ましい方法および材料を記載する。以下に記述される文献は全て、本明細書
中に援用される。特に断らない限り、本明細書中で用いられるまたは考えられる
技法は、当業者に周知の標準的な方法である。それら材料、方法および実施例は
、単に例示するものであり、制限するためのものではない。

【００３５】 本発明の他の特徴および利点は、次の説明および請求の範囲から明らかであろ
う。 発明の詳細な記述 トロンビン、またはトロンビンおよびフィブリノーゲンの組合せが含まれるが
それらに制限されるわけではないタンパク質、および塩化カルシウムに制限され
るわけではないがそのような塩を、１種類またはそれ以上の生体吸収性ポリマー
との組合せで含有する固体の繊維状止血組成物を製造する方法を記載する。

【００３６】 材料 本発明において用いるためのフィブリノーゲンおよびトロンビンは、多数の市
販元（例えば、Sigma, CalBiochem, American Diagnostics,Inc.）から容易に入
手することができる。或いは、これらタンパク質は、いずれか望ましい種の血漿
に由来しうるし、または組換えＤＮＡ法を用いて製造することができる（例えば
、Prunkardら，Nature Biotechnology 14:867-871,1996；Velander, ＷＯ９５／
２２２４９；Kargesおよび Metzner, Seminars in Thrombosis and Hemostasis,
22:427-436,1996；Lewis ら，Biochemistry 36:995-1002,1997；Lai ら，J.Bio
l.Chem. 269:24596-24601,1994；Fischer ら，Thrombosis Res. 81:157-162,199
6；Lordら，Blood Coagulation and Fibrinolysis 4:55-59,1993；DiBella ら，
J.Biol.Chem. 270:163-169,1995；Roy ら，J.Biol.Chem. 270:163-169,1995）。

【００３７】 好ましくは、用いられるフィブリノーゲンおよびトロンビンは、ウシまたはヒ
ト由来である。組成物をヒトにおいて用いる予定の場合、フィブリノーゲンおよ
びトロンビンは、最も好ましくは、ヒト由来である。更に、フィブリノーゲンが
ヒト血漿に由来する場合、好ましくは、当業者に周知の且つ存在するかもしれな
いウイルスを全て失活させるための熱失活法、またはなおより好ましくは、溶媒
デタージェント法をそれに施す（例えば、Radosevichら，“Fibrin Sealant: Sc
ientific rationale, production methods, properties, and current clinical
use,”Vox Sang 2:133-143,1997 を参照されたい）。

【００３８】 本発明の組成物中で用いるための生体吸収性バイオポリマーは、いろいろな標
準的な市販元（例えば、Genzyme Corp., Aqualon, Birmingham Polymers, Dekna
tel）から入手することができる。水に不溶性のポリアニオン多糖組成物は、本
発明において用いるための多数の方法によって製造することができる。例えば、
誘導体は、以前に記載されたように、共有結合鎖内および鎖間架橋の形成によっ
て生じることができる（例えば、Sparerら，1983, Roseman ら，Controlled Rel
ease Delivery Systems, Marcel Dekker,Inc.,ニューヨーク中の６章，107-119
頁；DeBelderら，ＰＣＴ公開第ＷＯ８６／００９１２号；Balazsら，1986，米国
特許第４，５８２，８６５号；Malsonら，1986，ＰＣＴ公開第ＷＯ／８６／００
０７９号；および Prestwichら，ＥＰ公開第０４１６２５０Ａ２号，1991を参照
されたい）。ポリアニオン多糖分子とポリアニオン多糖を含有する組成物との間
に共有結合架橋を含有しない水に不溶性の組成物は、Hamiltonら，米国特許第４
，９３７，２７０号、Burns ら，米国特許第５，０１７，２２９号、ＵＳＳＮ０
７／０３，２５４号、０７／８３３，９７３号に記載の方法を用いて形成されう
るし、ポリアニオン多糖および疎水性ポリマーまたはコポリマーの組合せを含有
する組成物は、ＵＳＳＮ０８／３１８，９８７号に記載されている（上記はいず
れも本明細書中に援用される）。

【００３９】 止血組成物の製造 概して、本発明による組成物は、エタノール、イソプロパノール、ブタノール
またはそれらの組合せを含有する急速撹拌されている非水性溶媒凝固浴中に、シ
リンジを用いてトロンビン水溶液を注入することによってトロンビン（バイオポ
リマーおよび塩化カルシウム含有または不含）を沈殿させることにより形成され
る。トロンビンおよびフィブリノーゲンの組合せを含有する組成物中において、
フィブリノーゲンを含有する第二の水溶液（バイオポリマーおよび塩化カルシウ
ム含有または不含）も、非水性溶媒を用いて同様に沈殿させて繊維にする。次に
、１種類またはそれ以上の繊維状沈殿を、その非水性溶媒を用いて洗浄して精製
し且つ脱水する。

【００４０】 所望の繊維状沈殿または沈殿組合せ（例えば、トロンビンおよびバイオポリマ
ー；トロンビン、フィブリノーゲンおよびバイオポリマー；トロンビン／バイオ
ポリマー；トロンビン／バイオポリマーおよびフィブリノーゲン；トロンビンお
よびフィブリノーゲン／バイオポリマー；トロンビン／バイオポリマーおよびフ
ィブリノーゲン／バイオポリマー）を、高剪断混合して、非水性溶媒中の繊維状
パルプ溶液を形成する。次に、そのパルプ溶液を集め、既存の製紙技術（例えば
、Handbook for Pulp & Paper Technologists, Smook,G. 第２版，Angus Wilde
Pulications Inc., 1994を参照されたい）を用いて且つ次の実施例に記載のよう
にプレスし、乾燥させる。得られた紙様構造は、乾燥したトロンビン、またはト
ロンビンおよびフィブリノーゲンと、１種類またはそれ以上のバイオポリマーと
の組合せから成り、カルシウムおよび／または本明細書中に記載の他の物質を更
に含有しうる。沈殿、混合および製紙工程は全て、非水性溶媒中であり、水中で
はないので、トロンビンは、処理中にフィブリノーゲンを活性化することがない
。得られた固体で繊維状の乾燥組成物は、その紙様材料全体に分布する止血成分
を含有しうる。或いは、例えば、いろいろな濃度の止血成分を含有する繊維状パ
ルプを圧縮および乾燥の前に集めることにより、望ましい止血成分の濃度勾配を
有する紙様組成物を生じることができる。血液、体液、生理食塩水または水によ
る活性化により、その組成物は止血パッチとして作用する。

【００４１】 本発明のもう一つの変更においては、タンパク質および塩を、バイオポリマー
を含有する非水性スラリーに加えることができる。例えば、商業的に入手可能な
凍結乾燥されたフィブリノーゲン、トロンビンおよび塩化カルシウムの粉末を、
エタノール中の生体吸収性ポリマー（例えば、ＨＡ／ＣＭＣおよび／またはＰＧ
Ａ）繊維に加えることができる。次に、その混合物を、既存の製紙技術にしたが
って集め、プレスし、乾燥させて、その厚み全体に均一に分散した止血成分を含
む紙様構造を形成することができる。この紙様構造は、先行技術材料と比較して
優れた機械的性質を有する。更に、沈殿、混合および製紙工程は全て、非溶媒中
であり、水中ではないので、トロンビンは、処理中にフィブリノーゲンを活性化
することがない。

【００４２】 二層組成物は、止血剤を含有する一つの面および非止血性且つ非癒着形成性（
non-adhesiogenic）であるもう一つの面を含んで製造することもできる。例えば
、その止血面は、フィブリノーゲン、トロンビンおよび塩化カルシウムを含有し
うるが、非癒着形成性面は、ＨＡ／ＣＭＣを含有しうる。或いは、止血面は、本
明細書中に記載の１種類またはそれ以上の生体吸収性ポリマーを更に含有しうる
が、非癒着形成性面は、止血成分不含の生体吸収性ポリマーを含有すると考えら
れる。ＨＡ／ＣＭＣは、外科手術後の癒着形成を減少させることが示されている
（例えば、Beckerら，British J.Surg. 82: 補遺１，1995）。したがって、止血
成分を含有する面は、止血をもたらすであろうが、生体吸収性ポリマー、例えば
、ＨＡ／ＣＭＣを含有する面は、癒着を防止すると考えられる。二層組成物の各
面は、例えば、リボフラビンのような生体適合性色素をそれら二層の一方に加え
ることによって、適当な配置のために印を付けることができる。

【００４３】 本明細書中に記載の方法によって生じる紙様組成物は、単独でも、またはＵＳ
ＳＮ０８／３１８，９８７号に記載されたような三層積層技術との組合せでも用
いることができる。三層複合材料は、止血用の紙様膜を、ポリグリコリド、ポリ
ラクチド、ポリカプロラクトンまたはそれらのコポリマーのような疎水性生体吸
収性ポリマーコアに積層することによって製造することができる。その三層組成
物は、コアの両側に積層された止血成分を有することができ、それが両面に止血
活性を与えるが、コアポリマーを加えることでその装置の強度および in vivo滞
留時間が増加すると考えられる。或いは、それら止血成分は、コアの一方の面に
積層されうるが、もう一方の面にＨＡ／ＣＭＣなどの非癒着形成性材料を積層す
ることによって、一つの止血面と一つの非癒着形成性面を有する装置を製造する
ことができる。

【００４４】 追加成分 止血剤に加えて、本発明の組成物は、創傷治癒を促し且つ感染を防止する、ポ
リペプチド増殖因子、非ステロイド系抗炎症性剤、抗生物質および細胞増殖抑制
剤に制限されないがこのような成分を更に含有しうる。１種類または複数の追加
成分濃度は、所望の目的に依って異なるであろうが、それらが用いられる具体的
な目的を達成するのに充分な濃度にすべきである。それぞれの成分の量は、当業
者によって、例えば、いろいろな濃度を経験的に試験し且つ予定の目的におよび
適用部位に有効である濃度を選択することによって容易に決定されうる。

【００４５】 治癒において役割を果たすことが知られているポリペプチド増殖因子の例には
、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）；インスリン結合性増殖因子−１（ＩＧＦ−
１）；インスリン結合性増殖因子−２（ＩＧＦ−２）；上皮増殖因子（ＥＧＦ）
；トランスフォーミング増殖因子−α（ＴＧＦ−α）、トランスフォーミング増
殖因子−β（ＴＧＦ−β）；血小板第４因子（ＰＦ−４）；繊維芽細胞増殖因子
（ＦＧＦ）；およびヘパリン結合性増殖因子１および２（ＨＢＧＦ−１およびＨ
ＢＧＦ−２）が含まれるが、それらに制限されるわけではない。増殖因子または
その混合物は、当業者に知られているいずれの方法によっても製造することがで
きるし、またはいろいろな市販元から購入することができる。用いられる１種類
または複数の具体的な増殖因子の選択は、所望の用途に依るであろうが、当業者
が容易に決定することができる。

【００４６】 本発明を、次の実施例に更に詳細に記載する。これら実施例は、例示として与
えられており、請求の範囲に記載されている以外は、発明を制限するためのもの
ではない。

【００４７】 実施例１ ３７ミリリットルのフィブリノーゲン水溶液（４０ｍｇ／ｍｌ）を、シリンジ
を用いて約７００ｍｌの９５％エタノール中に撹拌しながら注入した。得られた
繊維状沈殿を、エタノール中で一晩貯蔵した。そのエタノールの一部分を傾瀉し
、そして５４０ｍｌの９５％エタノール中のフィブリノーゲン沈殿（１．４８ｇ
）を全て、Ultra-TurraxＴ５０ホモジナイザーを用いて４０００ｒｐｍで３０秒
間高剪断混合した。得られたパルプ溶液を９５％エタノール中で貯蔵した。

【００４８】 ４０ミリリットルのフィブリノーゲンパルプ溶液を、２００ｍｌの９５％エタ
ノールを用いて希釈した。この得られた溶液に、２０ｍｇのトロンビン粉末およ
び８０ｍｇの塩化カルシウムを加えた。その試料を、Millipore フィルターハウ
ジング（直径＝７．４ｃｍ）を用いて成型用布帛上に集めた。その湿潤試料を２
メートルトンで１５秒間プレスし、自然乾燥させて、極めて薄い膜を生じた。

【００４９】 実施例２ 実施例１に記載のように調製された１２０ミリリットルのフィブリノーゲンパ
ルプ溶液を、２００ｍｌの９５％エタノールを用いて希釈した。この得られた溶
液に、４０ｍｇのトロンビン粉末、１６０ｍｇの塩化カルシウム、およびカルボ
ジイミドで修飾されたＨＡ／ＣＭＣ（米国特許第５，０１７，２２９号に記載の
ように修飾される）をエタノール中に沈殿させることによって得られる２０ｍｌ
の修飾ヒアルロン酸／カルボキシメチルセルロースパルプ溶液を加え、得られた
繊維状沈殿を高剪断して、パルプ様エタノールスラリーにした。その混合物を、
実施例１に記載のように、Millipore フィルターを用いて真空補助下において標
準的な成型用布帛上に集め、２メートルトンで１５秒間プレスし、自然乾燥させ
た。紙様膜が得られた。

【００５０】 実施例３ ３ミリリットルのフィブリノーゲン水溶液（４０ｍｇ／ｍｌ）を、シリンジを
用いて約１００ｍｌの１００％エタノール中に撹拌しながら注入した。得られた
繊維状沈殿を、ポリエステルフィルター上に集めた。その乾燥材料の少量の試料
（約１ｃｍ²）を、３０ｍｌの脱イオン水中に、５ｍｇのトロンビンおよび１０
０ｍｇの塩化カルシウムと一緒に加えた。その材料は、フィブリンクロットを直
ちに形成した。

【００５１】 実施例４ ０．２２ｇの凍結乾燥されたフィブリノーゲン粉末を、６５ｍｌのＨＡ／ＣＭ
Ｃパルプ（１００％エタノール中に０．２２ｇＨＡ／ＣＭＣ）に加えた。この溶
液に更に加えられたのは、２８ｍｇの塩化カルシウム粉末および３．３ｍｇのト
ロンビン粉末であった。その混合物を、追加の３４０ｍｌの１００％エタノール
を用いて希釈し、Ｇ４５Ｆ分散ヘッドを含む Ultra-Turrax Ｔ５０を用いて５，
０００ｒｐｍで４５秒間高剪断混合した。次に、その混合物を、Millipore フィ
ルターハウジング（直径＝７．４ｃｍ）を用いて成型用布帛上に集めた。その湿
潤試料を、ロールプレスを用いて１０ｐｓｉで２回プレスし、自然乾燥させた。
以下の実施例８で製造されるのと同様の紙様膜が得られた。

【００５２】 実施例５ ６５ミリリットルのＨＡ／ＣＭＣパルプ（１００％エタノール中に０．２２ｇ
ＨＡ／ＣＭＣ）を、３４０ｍｌの１００％エタノールを用いて希釈し、Millipor
e フィルターハウジング（直径＝７．４ｃｍ）を用いて成型用布帛上に集めた。
次に、６５ｍｌのＨＡ／ＣＭＣパルプ、０．２２ｇの凍結乾燥されたフィブリノ
ーゲン粉末、２９ｍｇの塩化カルシウム粉末および３．８ｍｇのトロンビンを含
有する溶液を、３４０ｍｌの１００％エタノールを用いて希釈し、ＨＡ／ＣＭＣ
湿潤ケーキの上に集めた。その湿潤試料を、ロールプレスを用いて１０ｐｓｉで
２回プレスし、ドラム乾燥機を用いて１００゜Ｆで乾燥させた。層全体に分散し
た活性フィブリノーゲン／トロンビンを一方の面におよびもう一方の面に非癒着
形成性ＨＡ／ＣＭＣを強化された厚い二層紙様膜が得られた。

【００５３】 実施例６ ０．６７ｇの細断したＰＧＡ繊維（Deknatel,Inc.）を、４００ｍｌの１００
％エタノールに加えた。０．６４ｇのフィブリノーゲン、２２ｍｇのトロンビン
および１００ｍｇの塩化カルシウムをそのエタノールスラリーに加え、Millipor
e フィルターハウジング（直径＝７．４）を用いてテフロン成型用布帛上に集め
た。その湿潤試料を、ロールプレスを用いて１０ｐｓｉで１回プレスし、ドラム
乾燥機を用いて１２０〜１２５゜Ｆで乾燥させた。３６．６ｍｇ／ｃｍ²のＭ／
Ａを有する厚い紙様膜が得られた。その止血紙は、極めて吸収性であり、水に浸
漬された場合、フィブリンクロットを形成した。

【００５４】 実施例７ ２．０ｇのＰＧＡ繊維（Deknatel,Inc.）を、約５〜１０ｍｍセグメントに細
断し、６００ｍｌのエタノールに加えた。別の容器中において、２．６ｇの凍結
乾燥されたウシフィブリノーゲン（７７％タンパク質、９０％凝固性）、６７ｍ
ｇのウシトロンビンおよび０．３ｇの塩化カルシウム粉末を、９００ｍｌの１０
０％エタノールに加え、そしてＧ４５Ｇ分散ヘッドを含む Ultra-Turrax Ｔ５０
を用いて５０００ｒｐｍで３０秒間高剪断混合した。それら材料を混合し、４．
２５ｘ４．２５インチヘッドボックス中のテフロン成型用布帛上に集めた。その
材料を、真空補助を用いることなく約１０秒以内に排水させた。繊維状ケーキを
、ロールプレスを用いて１０ｐｓｉで１回プレスし、１２５〜１３５゜Ｆで約３
０分間乾燥させた。３１．８ｍｇ／ｃｍ²のＭ／Ａを有する１１．３ｃｍｘ１１
．４ｃｍの軟質紙が得られた。

【００５５】 実施例８ ４１０ｍｌのＨＡ／ＣＭＣパルプ（１００％エタノール中に１．８ｇＨＡ／Ｃ
ＭＣ）を、５９０ｍｌの１００％エタノールを用いて希釈し、２．６ｇの凍結乾
燥されたウシフィブリノーゲン（７７％タンパク質、９０％凝固性）、６７ｍｇ
のウシトロンビンおよび０．３ｇの塩化カルシウムを加え、そしてＧ４５Ｇ分散
ヘッドを含む Ultra-Turrax Ｔ５０を用いて５０００ｒｐｍで１５秒間高剪断混
合した。次に、その混合物を、４．２５ｘ４．２５インチヘッドボックス中のテ
フロン成型用布帛上に集めた。その材料を、真空補助を用いることなく６０秒間
および真空補助を用いて１３５秒間排水させた。得られた繊維状ケーキを、ロー
ルプレスを用いて１０ｐｓｉで１回プレスし、１２５〜１３５゜Ｆで約３０分間
乾燥させた。３１ｍｇ／ｃｍ²のＭ／Ａを有する１１．２ｘ１２．８ｃｍの紙が
得られた。

【００５６】 実施例９ 実施例４および８によって製造された材料の試料を、Wagnerら，J.Surg.Res.
66:100-108(1996)によって記載の血小板凝集検定において、Coulter Counter Mo
del Ｊ．Ｔ．（Coulter Corp.）を用いて試験した。これら材料は両方とも、血
小板計数を、Gelfoam（登録商標）（吸収性ゼラチンスポンジ，Upjohn）、Avite
ne（登録商標）（ミクロフィブリルコラーゲン止血剤，Davol）およびActifoam^{T M} （吸収性コラーゲン止血スポンジ，MedChem Products）のそれぞれ９．５％、
１３％および２３％と比較して、４５％まで減少させた。

【００５７】 実施例１０ 実施例８に記載の方法によって製造された試料を、ウサギ大静脈モデルにおい
て封鎖／止血性について評価した。２６羽の麻酔されヘパリン処理された（１５
０ＩＵ／ｋｇ）４〜５ｋｇのニュージーランドホワイトウサギの大静脈に、１６
ゲージ針を用いてそれぞれ穿刺した。実施例８からの試料、Avitene（登録商標
）、TachoComb（登録商標）または外科手術用ガーゼの１ｃｍ²片を、軽い指圧を
用いてその穿刺上に直接２０秒間あてた。２０秒後に指圧をはずし、突破出血を
認めた。出血がそれ以上認められない場合、観察を１０分間続け、止血を確認し
た。突破出血の場合、もう一つの１ｃｍ²片を、軽い指圧を用いて最初の片上に
更に２０秒間あてた。連続した出血の場合、合計１０分間が経過するまでそれら
の使用を続けた。この実験の結果を表１に示す。

【００５８】

【表１】

【００５９】 この実験の結果は、ヘパリン処理された動物において、本発明の方法によって
製造されたＨＡ／ＣＭＣ／フィブリノーゲン／トロンビン紙の、Avitene（登録
商標）および TachoComb（登録商標）と比較して統計学的に優れた止血活性を示
している。止血までの時間は、Avitene（登録商標）と比較して４８％までおよ
び TachoComb（登録商標）と比較して１４倍減少した。それら結果は、本発明の
組成物が、Avitene（登録商標）よりも TachoComb（登録商標）よりも少数回し
か使用する必要がなかったことを更に示している。

【００６０】 実施例１１ 実施例８に記載の標品を、実施例１０に記載のウサギ大静脈穿刺モデルにおい
て、剥離性について評価した。最初に、その試験品を創傷上に置き、約２０秒以
内で止血を行った。その創傷を更に１０分間監視して、完全に止血したことを確
認した。次に、試験組成物を、鉗子を用いて大動脈からひとまとめに除去し、出
血を再開させた。次に、前に用いられた試験組成物を創傷上に戻して、再度、約
２０秒以内で止血を行った。

【００６１】 TachoComb（登録商標）（フィブリノーゲンおよびトロンビンの薄層をコーテ
ィングされたコラーゲンスポンジ，Nycomed,オーストリア）および Avitene（登
録商標）も、このモデルにおいて貼り直しおよび剥離性について試験した。Tach
oComb（登録商標）は、ひとまとめに除去し得ないと考えられ、コラーゲン層は
フィブリノーゲンおよびトロンビン層から分離した。Avitene（登録商標）は、
ひとまとめに除去されることも創傷上に貼り直しすることもできなかった。

【００６２】 この実験結果は、本発明の組成物が、TachoComb（登録商標）にも Avitene（
登録商標）にもまさる改良された物理機械的性質を有することを示している。し
たがって、本発明の組成物は、先行技術止血組成物にまさる有意の利点である止
血または封鎖能力を減少させることなく、使用中に除去し且つ貼り直しすること
ができる。

【００６３】 実施例１２ 実施例８に記載の標品を、ウサギ大静脈穿刺モデルにおいて、過剰量の血液の
存在下で機能する能力についても試験した。大動脈に１６ゲージ針を用いて穿刺
し、腹腔内に血液を充満させた。実施例８の止血組成物の１ｃｍ²片を、無作為
にその創傷に指圧を用いて２０秒間あて、過剰の血液を除去した。止血は、２０
秒以内で１回の使用で達せられた。対照的に、Avitene（登録商標）は、充血し
た腹腔中に挿入された場合、崩壊した。

【００６４】 実施例１３ 実施例８で製造された止血組成物を、γ線照射（２．５Ｍラド）によって滅菌
し、ウサギ大静脈穿刺モデルにおいて評価した。止血は、試験された３羽の動物
全部において、２０秒間で１回の使用で達せられた。

【００６５】 実施例１４ １．８ｇのＰＧＡ繊維（Deknatel,Inc.）を、約５〜１０ｍｍセグメントに細
断し、４００ｍｌの１００％エタノールに加えた。別の容器中において、２．５
ｇの凍結乾燥されたウシフィブリノーゲン（７７％タンパク質、９０％凝固性）
、６７ｍｇのウシトロンビン、０．３ｇの塩化カルシウムおよび１４０ｍｌのＨ
Ａ／ＣＭＣパルプ（１００％エタノール中に０．６ｇＨＡ／ＣＭＣ）を、１００
０ｍｌの１００％エタノールに加え、そしてＧ４５Ｇ分散ヘッドを含む Ultra-T
urrax Ｔ５０を用いて５０００ｒｐｍで１５秒間高剪断混合した。それら材料を
混合し、４．２４ｘ４．２５インチヘッドボックス中のテフロン成型用布帛（１
５０ｇ）上に集めた。その材料を、真空補助を用いることなく６０秒間排水させ
た。得られた繊維状ケーキを、ロールプレスを用いて１０ｐｓｉで１回プレスし
、１２５〜１３５゜Ｆで約１５分間乾燥させた。３５ｍｇ／ｃｍ²のＭ／Ａを有
する１１．４ｘ１１．４ｃｍの軟質紙が得られた。

【００６６】 実施例１５ ６７ｍｇのウシトロンビンおよび０．３ｇの塩化カルシウムを、４５０ｍｌの
１００％エタノールに加え、Ｇ４５Ｇ分散ヘッドを含む Ultra-Turrax Ｔ５０を
用いて４０００ｒｐｍで１５秒間高剪断混合した。２．５ｇの凍結乾燥されたウ
シフィブリノーゲン（７７％タンパク質、９０％凝固性）をその混合物に加え、
Ｇ４５Ｇ分散ヘッドを含む Ultra-Turrax Ｔ５０を用いて４０００ｒｐｍで１５
秒間高剪断混合した。１．８ｇのＰＧＡ繊維（Deknatel）を約１０ｍｍセグメン
トに細断し、３５０ｍｌの１００％エタノールに加えた後、フィブリノーゲン／
トロンビン／塩化カルシウム混合物に加えた。

【００６７】 １４０ｍｌのＨＡ／ＣＭＣパルプ（１００％エタノール中に０．６ｇＨＡ／Ｃ
ＭＣ）を、８６０ｍｌの１００％エタノールを用いて希釈し、４．２４ｘ４．２
５インチヘッドボックス中のテフロン成型用布帛（１５０ｇ）上に集めた。その
材料を、残りのエタノールレベルが、沈降したＨＡ／ＣＭＣ材料の上にｚＩイン
チとなるまで（約１５０秒間）排水させた。

【００６８】 次に、ＰＧＡ／フィブリノーゲン／トロンビン／塩化カルシウム混合物を、そ
のＨＡ／ＣＭＣ材料上に徐々に加えた。その材料を、真空補助を用いて６０秒間
排水させた。二つの異なった層は、得られた繊維状ケーキで区別されうる。その
ケーキを、ロールプレスを用いて１０ｐｓｉで１回プレスし、１２５〜１３２゜
Ｆで約２０分間乾燥させた。３１ｍｇ／ｃｍ²のＭ／Ａを有する１１．２ｃｍｘ
１１．２ｃｍの二層紙が得られ、癒着防止用のＨＡ／ＣＭＣ層および止血用のＰ
ＧＡ／フィブリノーゲン／トロンビン／塩化カルシウム層は、目視によって区別
された。

【００６９】 実施例１６ 実施例６によって製造された材料の試料を、Wagnerら，上記によって記載の血
小板凝集検定において、Multisizer Model０２１７（Coulter Corp.）を用いて
試験した。これら材料は、血小板領域の体積（２〜４．５μｍ）を、TachoComb
（登録商標）（Nycomed）、Gelfoam（登録商標）（Upjohn）および Novacol（登
録商標）（Datascope）についての０％、Avitene（登録商標）（Davol）につい
ての１１％および Actifoam^TM（MedChem Products）についての１９％に比べて
、２７％まで減少させた。

【００７０】 実施例１７ １．８ｇのＰＧＡ繊維（Deknatel）を、約５〜１０ｍｍセグメントに細断し、
３００ｍｌの１００％エタノールに加えた。別の容器中において、１２１ｍｇ（
３６３０Ｕ）のウシトロンビンおよび０．３ｇの塩化カルシウムを、７００ｍｌ
の１００％エタノールに加え、そしてＧ４５Ｇ分散ヘッドを含む Ultra Turrax
Ｔ５０を用いて５０００ｒｐｍで１５秒間高剪断混合した。混合の最後の５秒間
に、７０ミリリットルのＨＡ／ＣＭＣパルプ（１００％エタノール中に０．３ｇ
ＨＡ／ＣＭＣ）を加えた。それら材料を混合し、撹拌し、４．２５ｘ４．２５イ
ンチヘッドボックス中のテフロン成型用布帛（１５０μｍ）上に集めた。その材
料を、真空補助を用いることなく２０秒以内に排水させた。その繊維状ケーキを
、ロールプレスを用いて１０ｐｓｉで１回プレスし、１２５〜１４５゜Ｆで約１
０分間乾燥させた。１７．９ｍｇ／ｃｍ²のＭ／Ａを有する１１．２ｘ１１．２
ｍの軟質紙が得られた。

【００７１】 実施例１８ 実施例７、８および１４によって製造された試料を、常態および湿潤機械的性
質について評価し、Avitene（登録商標）およびTachoComb（登録商標）と比較し
た。それぞれの材料の１０ｍｍｘ５０ｍｍ片を、Instron Model ４２０１のグリ
ップ中に入れた。初期ガーゼ長さは２５ｍｍであった。それぞれの材料を、乾燥
条件下において２ｍｍ／分のクロスヘッド速度で試験した。湿潤強度を調べるた
めに、材料を３０ｍｌのＰＢＳ，ｐＨ７．２中に３７℃で１５分間入れ、そして
そのＰＢＳから取り出した直後に、２３℃において５ｍｍ／分のクロスヘッド速
度で測定値を得た。材料が破壊する前の最大荷重は、その材料の強度を示すもの
である。この実験結果（表II）は、本発明の止血組成物が、Avitene（登録商標
）にも TachoComb（登録商標）にもまさる、統計学的に有意に増加した常態およ
び湿潤強度を有することを示している。

【００７２】

【表２】

【００７３】 他の実施態様 上の説明から、当業者は、本発明の本質的な特性を容易に確認することができ
るし、そして本発明の精神および範囲から逸脱することなく、発明の様々な変化
および変更を行って、いろいろな用途および条件にそれを適合させることができ
る。例えば、可塑剤、ポリエチレングリコール、グリセロールおよびアルブミン
が含まれるがそれらに制限されるわけではない成分も、本発明の組成物中に包含
されて、追加の安定性、機械的強度および柔軟性を与えることができる。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 キース・イー・グリーナウォルト アメリカ合衆国マサチューセッツ州02186， ミルトン，セント・マリーズ・ロード 52 (72)発明者 ジュリア・ビー・ジェレシュコヴィッチ アメリカ合衆国マサチューセッツ州02173， レキシントン，ファイブ・バイルズ・ロー ド Ｆターム(参考） 4C081 AC04 BA16 CA161 CA201 CD011 CD021 CD031 CD041 CD081 CD091 CD171 CD20 CE02 CE06 DA11 DA15

Claims (44)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 固体で繊維状の生体吸収性止血組成物であって、生体吸収性
   ポリマーおよび止血化合物を含み、該止血化合物が該止血組成物全体に分散して
   いる上記組成物。
2. 【請求項２】 生体吸収性ポリマーが、ポリアニオン多糖、アルギン酸、キ
   チン、キトサン、フィブリン、ポリグリコリド、ポリラクチド、ポリカプロラク
   トン、デキストランおよびそれらのコポリマーから成る群より選択される請求項
   １に記載の組成物。
3. 【請求項３】 生体吸収性ポリマーがポリアニオン多糖である請求項１に記
   載の組成物。
4. 【請求項４】 ポリアニオン多糖が水に不溶性の誘導体の形である請求項３
   に記載の組成物。
5. 【請求項５】 ポリアニオン多糖が、カルボキシメチルセルロース、カルボ
   キシメチルアミロースおよびヒアルロン酸から成る群より選択される請求項３ま
   たは４に記載の組成物。
6. 【請求項６】 止血組成物が、２種類またはそれ以上のポリアニオン多糖を
   含む請求項３または４に記載の組成物。
7. 【請求項７】 疎水性生体吸収性ポリマーを更に含む請求項３または４に記
   載の組成物。
8. 【請求項８】 疎水性生体吸収性ポリマーが、ポリグリコリド、ポリラクチ
   ド、ポリジオキサノン、ポリエステルカーボネート、ポリヒドロキシアルコネー
   ト、ポリラクトンおよびそれらのコポリマーから成る群より選択される請求項７
   に記載の組成物。
9. 【請求項９】 止血化合物がトロンビンである請求項１に記載の組成物。
10. 【請求項１０】 トロンビンが、約１Ｕ／ｃｍ²〜１００Ｕ／ｃｍ²の濃度で
    存在する請求項９に記載の組成物。
11. 【請求項１１】 止血化合物がフィブリノーゲンである請求項１に記載の組
    成物。
12. 【請求項１２】 フィブリノーゲンが、約０．０５ｍｇ／ｃｍ²〜２０ｍｇ
    ／ｃｍ²の濃度で存在する請求項１１に記載の組成物。
13. 【請求項１３】 カルシウム塩を更に含む請求項９または１１に記載の組成
    物。
14. 【請求項１４】 カルシウム塩が塩化カルシウムである請求項１３に記載の
    組成物。
15. 【請求項１５】 カルシウム塩が、約０．０１ｍｇ／ｃｍ²〜１０ｍｇ／ｃ
    ｍ²の濃度で存在する請求項１３に記載の組成物。
16. 【請求項１６】 フィブリノーゲンを更に含む請求項９に記載の組成物。
17. 【請求項１７】 フィブリノーゲンが、約０．０５ｍｇ／ｃｍ²〜２０ｍｇ
    ／ｃｍ²の濃度で存在する請求項１４に記載の組成物。
18. 【請求項１８】 XIII因子、フィブロネクチン、プラスミノーゲン、アプロ
    チニン、α−２−アンチプラスミン、α−２−マクログロブリン、α−１−アン
    チトリプシン、ε−アミノカプロン酸、トラネキサム酸、プラスミン活性化物質
    阻害剤またはそれらの組合せを更に含む請求項１に記載の組成物。
19. 【請求項１９】 硫酸プロタミンを更に含む請求項１に記載の組成物。
20. 【請求項２０】 薬物を更に含む請求項１に記載の組成物。
21. 【請求項２１】 薬物が、増殖因子、増殖因子阻害剤、抗体、非ステロイド
    系抗炎症性剤、抗生物質およびサイトカインから成る群より選択される請求項２
    ０に記載の組成物。
22. 【請求項２２】 約１５ｍｇ／ｃｍ²〜５０ｍｇ／ｃｍ²の質量／面積を有す
    る請求項１に記載の組成物。
23. 【請求項２３】 組成物が、防水滅菌包装中で提供される請求項１に記載の
    組成物。
24. 【請求項２４】 医学的に許容しうる接着剤支持体を更に含む請求項１に記
    載の組成物。
25. 【請求項２５】 組成物が、血管プロテーゼの両端に適合するように形成さ
    れている請求項１に記載の組成物。
26. 【請求項２６】 請求項１に記載の止血組成物を含むキット。
27. 【請求項２７】 止血化合物が組成物全体に均等に分散している請求項１に
    記載の組成物。
28. 【請求項２８】 止血化合物が勾配として存在している請求項１に記載の組
    成物。
29. 【請求項２９】 非癒着形成性層を更に含む請求項１に記載の組成物。
30. 【請求項３０】 固体で繊維状の生体吸収性止血組成物を製造する方法であ
    って、 （ａ）生体吸収性ポリマーおよび止血化合物を非水性溶媒の存在下において混
    合して繊維状パルプを形成し；そして （ｂ）該繊維状パルプに製紙処理を施す工程を含む上記方法。
31. 【請求項３１】 非水性溶媒が、直鎖または分岐状のＣ₁〜Ｃ₅アルコール、
    ケトン、脂肪族エーテル、環状脂肪族エーテル、エステル、ニトリルおよび脂肪
    族ハロゲン化炭化水素から成る群より選択される請求項３０に記載の方法。
32. 【請求項３２】 非水性溶媒がアルコールである請求項３１に記載の方法。
33. 【請求項３３】 アルコールがエタノールである請求項３２に記載の方法。
34. 【請求項３４】 アルコールが９５％〜１００％エタノールである請求項３
    ２に記載の方法。
35. 【請求項３５】 生体吸収性ポリマーおよび止血化合物を高剪断条件下で混
    合する請求項３０に記載の方法。
36. 【請求項３６】 製紙処理が、 （ａ）繊維状パルプを非水性溶媒から集め； （ｂ）集められた繊維状パルプをプレスし；そして （ｃ）プレスされたパルプを乾燥させる工程を含む請求項３０に記載の方法。
37. 【請求項３７】 繊維状パルプを成型用布帛上に集める請求項３６に記載の
    方法。
38. 【請求項３８】 成型用布帛が、テフロンメッシュ、ステンレス鋼製メッシ
    ュおよびポリエステル布帛から成る群より選択される請求項３７に記載の方法。
39. 【請求項３９】 成型用布帛がポリエステル布帛である請求項３７に記載の
    方法。
40. 【請求項４０】 集められた繊維状パルプに熱圧縮を施す請求項３６に記載
    の方法。
41. 【請求項４１】 創傷からの失血を阻止するまたは止める方法であって、該
    創傷と、生体吸収性ポリマーおよび止血化合物を含む固体で繊維状の生体吸収性
    止血組成物とを、血液凝固が起こるのを促進するために充分な時間接触させるこ
    とを含む上記方法。
42. 【請求項４２】 創傷との接触後、止血組成物に指圧を加えることを更に含
    む請求項４１に記載の方法。
43. 【請求項４３】 創傷が事故外傷に起因する請求項４１に記載の方法。
44. 【請求項４４】 創傷が外科手術に起因する請求項４１に記載の方法。