JP2001526058A5 - - Google Patents

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【特許請求の範囲】
【請求項１】 ドウおよび／またはドウから作られるベークド製品の製造方法であって、基質としての重合度２以上のオリゴ糖において対応する単糖におけるより高い活性を有する糖質酸化酵素をドウに添加することを包含する方法。
【請求項２】 糖質酸化酵素が10mM以下の基質濃度でグルコースにおけるより２〜６の重合度を有するマルトオリゴ糖（特にマルトース、マルトトリオースまたはマルトテトラオース）においてより高い活性を有する請求項１の方法。
【請求項３】 糖質酸化酵素がミクロドチウム属またはアクレモニウム属の菌株から得られる請求項１または２の方法。
【請求項４】 糖質酸化酵素が、M.ニバーレ（nivale）の菌株から得られる請求項３の方法。
【請求項５】 糖質酸化酵素が、CBS 100236から得られる請求項４の方法。
【請求項６】 対応する単糖におけるよりも基質としての重合度２以上のオリゴ糖においてより高い活性を有する糖質酸化酵素を包含する粉、ドウまたはベークド製品。
【請求項７】 以下の：
ａ）対応する単糖におけるよりも基質としての重合度２以上のオリゴ糖においてより高い活性を有する糖質酸化酵素、および
ｂ）アミラーゼ、セルラーゼ、ヘミセルラーゼ、リパーゼおよびホスホリパーゼから成る群から選択される二次酵素
を包含するドウおよび／またはパン改良添加剤。
【請求項８】 二次酵素がデンプンを加水分解して主生成物としてオリゴ糖を生成するアミラーゼである請求項７の添加剤。
【請求項９】 アミラーゼがバシラス・ステアロサーモフィルス（Bacillus stearothermophilus ）のマルトース生成性α−アミラーゼ、アスペルギルス・オリザエ（Aspergillus oryzae）のα−アミラーゼまたはβ−アミラーゼである請求項８の添加剤。
【請求項１０】 対応する単糖におけるよりも基質としての重合度２以上のオリゴ糖においてより高い活性を有する糖質酸化酵素活性を包含する、粒状または集塊化粉末の形態のドウおよび／またはパン改良添加剤。
【請求項１１】 95％（質量で）以上が25〜500 μm の粒子サイズを有する請求項１０の添加剤。
【請求項１２】 以下の：
ａ）ミクロドチウム・ニバーレ（Microdochium nivale）CBS 100236により産生されるポリペプチド、または
ｂ）大腸菌NRRL B-30034中に存在するプラスミド中にクローン化されたＤＮＡ配列の糖質酸化酵素コード部分によりコードされるポリペプチド、または
ｃ）配列番号２で示されるアミノ酸配列を有するポリペプチド、または
ｄ）以下の：
ｉ）前記ポリペプチドと少なくとも50％の同一性を有し、または
ii）精製形態の前記ポリペプチドに対して生じた抗体と免疫学的に反応性であり、または
ｉｉｉ）前記ポリペプチドの対立遺伝子変異体であり、または
ｉｖ）糖質酸化酵素活性を有する前記ポリペプチドの断片である
（ａ）、（ｂ）または（ｃ）で定義されたポリペプチドの類似体、または
ｅ）低ストリンジェンシーの条件下で以下の：
ｉ）配列番号１の67位〜1550位に示されるＤＮＡ配列、または
ｉｉ）相補鎖、または少なくとも100 ヌクレオチドのそのサブシークエンス
とハイブリダイズする核酸配列によりコードされるペプチド
である糖質酸化酵素。
【請求項１３】 ミクロドチウム属の菌株から得られる請求項１２の糖質酸化酵素。
【請求項１４】 M.ニバーレ（nivale）の菌株から得られる請求項１３の糖質酸化酵素。
【請求項１５】 ミクロドチウム属の菌株から得られ、0.83mMの基質濃度でグルコースにおける酸化活性の少なくとも２倍のマルトテトラオースにおける酸化活性を有する糖質酸化酵素。
【請求項１６】 M. ニバーレ（nivale）の菌株から得られる請求項１５の糖質酸化酵素。
【請求項１７】 M.ニバーレ（nivale）CBS 100236株から得られる請求項１６の糖質酸化酵素。
【請求項１８】 糖質酸化酵素の製造方法であって、適切な栄養培地中でミクロドチウムの糖質酸化酵素産生菌株を培養し、その後糖質酸化酵素を回収する工程を包含する方法。
【請求項１９】 前記菌株がM.ニバーレ（nivale）の菌株である請求項１８の方法。
【請求項２０】 前記菌株がCBS 100236である請求項１９の方法。
【請求項２１】 請求項１２〜１７のいずれかの糖質酸化酵素をコードする核酸配列を包含する核酸配列。
【請求項２２】 以下の：
ａ）大腸菌NRRL B-30034中に存在するプラスミド中にクローン化されたＤＮＡ配列の糖質酸化酵素コード部分、または
ｂ）配列番号１の67位〜1550位に示されるＤＮＡ配列、または
ｃ）ｉ）前記ＤＮＡ配列と少なくとも50％の同一性を有し、または
ii）低ストリンジェンシーで前記ＤＮＡ配列、その相補鎖またはそのサブシークエンスとハイブリダイズする
ａ）またはｂ）で定義されたＤＮＡ配列の類似体
を包含する糖質酸化酵素コード核酸配列。
【請求項２３】 適切な発現宿主中での糖質酸化酵素の発現を指図し得る１以上の制御配列と操作可能に連結される請求項２１または２２の核酸配列を包含する核酸構築物。
【請求項２４】 請求項２３の核酸構築物、プロモーター、ならびに転写および翻訳停止シグナルを包含する組換え発現ベクター。
【請求項２５】 請求項２３の核酸構築物を包含する組換え宿主細胞。
【請求項２６】 糖質酸化酵素の製造方法であって、糖質酸化酵素の発現を促す条件下で請求項２５の宿主細胞を培養し、糖質酸化酵素を回収する工程を包含する方法。
【請求項２７】 糖質酸化酵素の製造方法であって、以下の：
ａ）ミクロドチウムの糖質酸化酵素産生菌株からの糖質酸化酵素をコードするＤＮＡ配列を単離し、
ｂ）適切なベクター中でＤＮＡ断片を適切な発現シグナル（単数または複数）と組合せて、
ｃ）適切な異種宿主生物体をベクターで形質転換し、
ｄ）脂肪分解酵素の発現をもたらす条件下で形質転換化宿主生物を培養し、そして
ｅ）培地から糖質酸化酵素を回収する
工程を包含する方法。
【請求項２８】 請求項１２〜１７のいずれかの糖質酸化酵素を発現し得るミクロドチウム属の菌株。
【請求項２９】 M.ニバーレ（nivale）である請求項２８の菌株。
【請求項３０】 菌株CBS 100236である請求項２９の菌株。
【請求項３１】 身体ケア製品のための請求項１２〜１７のいずれかの糖質酸化酵素の使用方法。
【請求項３２】 還元糖の量を確定するための分析試薬としての請求項１２〜１７のいずれかの糖質酸化酵素の使用方法。
【請求項３３】 デンプンまたはセルロース加水分解の連続測定を提供するための電極中の分析試薬としての請求項１２〜１７のいずれかの固定化糖質酸化酵素の使用方法。
【請求項３４】 ラクトースからラクトビオン酸を生成するための請求項１２〜１７のいずれかの糖質酸化酵素の使用方法。