JP2001333733A - α−アミラーゼ阻害物質 - Google Patents
α−アミラーゼ阻害物質Info
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Abstract
ン、クダモノトケイソウおよびストレリチア(極楽鳥
花)からなる群から選ばれた1種類以上の植物の乾燥粉
末または抽出物を有効成分とすることを特徴とするα−
アミラーゼ活性を阻害するための物質。 【効果】 α−アミラーゼ阻害作用を有し、肥満や糖尿
の治療、予防に効果的である。
Description
性を阻害するための物質に関し、特に特定の薬草の乾燥
粉末または抽出物を有効成分とするα−アミラーゼ阻害
物質に関する。
ン需要を軽減し、また合併症に至るリスクを予防すると
いう見地から、食後高血糖の回避の重要性が近年指摘さ
れている。α−アミラーゼ阻害物質は、デンプンの消化
・吸収を阻害することにより血糖値やインスリンの上昇
を抑制させ、肥満や糖尿病の予防または治療に有用であ
る。
糖尿病をはじめとする成人病の増加、医療費の増大など
の問題がクローズアップされている。このため、病気を
治すことを目的とする薬の開発よりも、病気を予防する
機能性食品素材を開発することは今後の日本社会に大き
く貢献すると考えられようになってきた。この点に関連
して、沖縄県が日本一の長寿県であるにもかかわらず、
医療負担額は全国で最下位であることは注目に値する。
このことは長寿で病気が少ないことを意味しており、沖
縄県の伝統的な食事や食材の価値が見直されてきてきて
いる所以である。
みてなされたもので、特に沖縄県産等の植物資源の中か
ら肥満や糖尿病を予防、治療することができるα−アミ
ラーゼ阻害物質を提供することを課題とする。
て、鋭意検索を重ねた結果、特定の薬草すなわち、ゲッ
トウ、アカメガシワ、ヒラミレモン、クダモノトケイソ
ウおよびストレリチア(極楽鳥花)の乾燥粉末またはそ
れらの抽出物にα−アミラーゼ阻害活性を見出すことが
できた。
で用いるかまたは2種以上組み合わせて用いる。また、
上記植物を適当な溶媒により有効成分を抽出しその抽出
物を使用することができる。溶媒としては、有効成分を
効果的に抽出できるものであれば特に限定されず、例え
ば、水、エタノールを使用する。
に従って、糖尿病や肥満症の予防剤、治療剤、食品、食
品添加物等として利用することができる。本発明のα−
アミラーゼ阻害物質を、例えば、食品添加物として使用
する場合、本発明の目的に沿う限り、食品の種類は限定
されないが、具体例としては、米飲料等の清涼飲料、ア
イスクリーム、クッキー、サーターアンダギー(揚げ菓
子)、スープ、麺類、シリアル、ソース類、ドレッシン
グ、パイ類が挙げられる。これらの食品に添加される上
記の乾燥粉末または抽出物の割合は、食品の種類によっ
て添加最適量が変動するので、限定されるものではない
が、例えば米飲料の場合、飲料の総重量当り、0.1〜5
重量%、好ましくは0.5〜1.5重量%含めることができ
る。
凍結乾燥させ、超遠心粉砕機(MRK-Retsch,ZM100)にて
破砕し0.5mmのメッシュを通過したものを各植物ごとに
抽出操作に供した。抽出操作は、高速溶媒抽出装置(日
本ダイオネクス社製、ASE-200)を使用した。すなわ
ち、乾燥重量で0.5g〜5gの各薬草乾燥粉末を5gのケイソ
ウ土とともに抽出セルに添加し、抽出溶媒;50%エタノ
ール、溶媒量;25ml、抽出温度;82℃、抽出時間;10
分、抽出回数;2回の条件で抽出操作を行った。抽出液
は0.45μmのメンブレンフィルターでろ過した。
ミラーゼ阻害活性の測定は、里山らの方法(里山ら、日
本農芸化学会誌、Vol.72,No.8,pp.933-936(1998))を改
変して行った。すなわち、α−アミラーゼ(Wako,From
Bacillus stearothermophilus 5200unit/mg)をトリス
−塩酸緩衝液(10mM,pH7.5)に溶解し、適宜希釈して使
用した。米デンプン(Sigma)をクエン酸緩衝液(0.1M,
pH6.0)に濃度1.0%(w/v)となるように懸濁しこれを沸
騰水中で5分加熱して糊化した。この糊化液と等量の3.
2%(w/v)寒天溶液を60℃で混合し、マイクロプレートウ
ォッシャーで96孔マイクロプレートの各ウェルに200μl
ずつ分注し、放冷固化して基質プレートを作成した。
アミラーゼ溶液の1/10量の被検液を混合した溶液(α-
アミラーゼの濃度は最終的に10unitとなる)を調整し、
37℃で10分間プレインキュベートした基質プレートの各
ウエルに添加し、37℃で5分間インキュベートした後、
マイクロプレートリーダーで655nmの吸光度A0を測定し
た。さらに1時間37℃でインキュベートし同様に吸光度
A1を測定した。縦軸に5分後と1時間後の吸光度の差
の対数(log(ΔA=A0−A1))をとり、横軸にα-アミ
ラーゼ活性(units/ml)をとってグラフにプロットする
と両者は良好な相関関係を示し、吸光度の変化量ΔAを
測定することによりα-アミラーゼ活性を測定した。た
だし、プレート間では近似曲線の傾きが有意に異なるこ
とから、各プレートで0.1,1,10unit/mlに調製したα−
アミラーゼ溶液を添加した区を検量区間として設け、残
りの9区間について被検液の活性を求めた。表1は、10
unitのα−アミラーゼ活性を100%として、それに対す
る被検液を添加した場合の活性(%)±標準偏差(n=
8)を示す。
よる活性の変化および水抽出と100%エタノール抽出
における活性の違いを測定したところ、それぞれ表2,
3の結果が得られた。
葉、茎)、ゲットウ、アカメガシワにおいて、限外ろ過
膜を通過した画分すなわち分子量10,000以下の画分にお
いて活性が高いことが認めれ、これらの被検液中の活性
物質が分子量10kDa以下であることが示唆された。
出のいずれにおいても高い阻害活性が認められるが、ア
カメガシワ、ヒラミレモン(実)、クダモノケイトソ
ウ、ストレリチア(茎)ではエタノール抽出のほうが阻
害活性がより高いことが認められた。
粉末を添加した。原料米を洗米後、十分な水に浸し6時
間静置して米に水を吸収させ、笊上げを行ない軽く水気
を切って吸水率を20%にし、オートクレーブ(120℃、2
0分)により、米デンプンのα化を行なった。その後、9
5℃で一晩乾燥させ0.5mmメッシュの超遠心粉砕機で粉
砕し、α化米粉を調製し、このα化米粉300gを60℃のデ
ンプン分解酵素(アミラーゼ)溶液に懸濁させて液化し
た。アミラーゼの添加量は米重量に対して0.2%、反
応時間は2時間とした。続いて、タンパク質分解酵素
(プロテアーゼ)を添加し、50℃で米タンパク質の加水
分解を行なった後、沸騰水中で15分間加熱して酸素を失
活させた。プロテアーゼの添加量は米重量に対して0.1
%、反応時間2時間とした。
燥した後、粉砕機で粉砕し、その冷凍乾燥物40gにゲッ
トウ由来の粉末1gを添加して混合し、蒸留水80mlを添
加して、70℃で30分保持して、懸濁・再溶解を行い本発
明のα−アミラーゼ阻害物質入り米飲料を調製した。
料について実施例1と同じ方法でα−アミラーゼ阻害活
性を測定しところ、α−アミラーゼ阻害活性が認められ
た。
−アミラーゼ阻害活性が高いとともに、安全であり、し
たがって医薬、機能性食品、食品添加物として使用する
ことにより、肥満や糖尿の治療、予防にきわめて有効で
ある。
Claims (3)
- 【請求項1】 ゲットウ、アカメガシワ、ヒラミレモ
ン、クダモノトケイソウおよびストレリチアからなる群
から選ばれた1種類以上の植物の乾燥粉末または抽出物
を有効成分とすることを特徴とするα−アミラーゼ活性
を阻害するための物質。 - 【請求項2】 ゲットウ、アカメガシワ、ヒラミレモ
ン、クダモノトケイソウおよびストレリチアからなる群
から選ばれた1種類以上の植物の乾燥粉末または抽出物
を有効成分とすることを特徴とするα−アミラーゼ阻害
活性をもたらすための食品添加物。 - 【請求項3】 請求項2記載の食品添加物を含有する米
飲料。
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