JP2001333733A - α−アミラーゼ阻害物質 - Google Patents

α−アミラーゼ阻害物質

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Abstract

(57)【要約】 【解決手段】 ゲットウ、アカメガシワ、ヒラミレモ
ン、クダモノトケイソウおよびストレリチア(極楽鳥
花)からなる群から選ばれた1種類以上の植物の乾燥粉
末または抽出物を有効成分とすることを特徴とするα−
アミラーゼ活性を阻害するための物質。 【効果】 α−アミラーゼ阻害作用を有し、肥満や糖尿
の治療、予防に効果的である。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【発明の属する技術分野】本発明は、α−アミラーゼ活
性を阻害するための物質に関し、特に特定の薬草の乾燥
粉末または抽出物を有効成分とするα−アミラーゼ阻害
物質に関する。
【0002】
【従来の技術】糖尿病の食事療法においては、インスリ
ン需要を軽減し、また合併症に至るリスクを予防すると
いう見地から、食後高血糖の回避の重要性が近年指摘さ
れている。α−アミラーゼ阻害物質は、デンプンの消化
・吸収を阻害することにより血糖値やインスリンの上昇
を抑制させ、肥満や糖尿病の予防または治療に有用であ
る。
【0003】一方、わが国も高齢化社会を迎え、肥満、
糖尿病をはじめとする成人病の増加、医療費の増大など
の問題がクローズアップされている。このため、病気を
治すことを目的とする薬の開発よりも、病気を予防する
機能性食品素材を開発することは今後の日本社会に大き
く貢献すると考えられようになってきた。この点に関連
して、沖縄県が日本一の長寿県であるにもかかわらず、
医療負担額は全国で最下位であることは注目に値する。
このことは長寿で病気が少ないことを意味しており、沖
縄県の伝統的な食事や食材の価値が見直されてきてきて
いる所以である。
【0004】
【発明が解決しようとする課題】本発明は上記の点に鑑
みてなされたもので、特に沖縄県産等の植物資源の中か
ら肥満や糖尿病を予防、治療することができるα−アミ
ラーゼ阻害物質を提供することを課題とする。
【0005】
【課題を解決するための手段】数多くの植物資源につい
て、鋭意検索を重ねた結果、特定の薬草すなわち、ゲッ
トウ、アカメガシワ、ヒラミレモン、クダモノトケイソ
ウおよびストレリチア(極楽鳥花)の乾燥粉末またはそ
れらの抽出物にα−アミラーゼ阻害活性を見出すことが
できた。
【0006】上記薬草は、乾燥粉末化したものを、単独
で用いるかまたは2種以上組み合わせて用いる。また、
上記植物を適当な溶媒により有効成分を抽出しその抽出
物を使用することができる。溶媒としては、有効成分を
効果的に抽出できるものであれば特に限定されず、例え
ば、水、エタノールを使用する。
【0007】本発明のα−アミラーゼ阻害物質は、常法
に従って、糖尿病や肥満症の予防剤、治療剤、食品、食
品添加物等として利用することができる。本発明のα−
アミラーゼ阻害物質を、例えば、食品添加物として使用
する場合、本発明の目的に沿う限り、食品の種類は限定
されないが、具体例としては、米飲料等の清涼飲料、ア
イスクリーム、クッキー、サーターアンダギー(揚げ菓
子)、スープ、麺類、シリアル、ソース類、ドレッシン
グ、パイ類が挙げられる。これらの食品に添加される上
記の乾燥粉末または抽出物の割合は、食品の種類によっ
て添加最適量が変動するので、限定されるものではない
が、例えば米飲料の場合、飲料の総重量当り、0.1〜5
重量%、好ましくは0.5〜1.5重量%含めることができ
る。
【0008】
【実施例】以下、本発明の実施例について説明する。 (実施例1)表1の各植物を、適当な大きさに切断し、
凍結乾燥させ、超遠心粉砕機(MRK-Retsch,ZM100)にて
破砕し0.5mmのメッシュを通過したものを各植物ごとに
抽出操作に供した。抽出操作は、高速溶媒抽出装置(日
本ダイオネクス社製、ASE-200)を使用した。すなわ
ち、乾燥重量で0.5g〜5gの各薬草乾燥粉末を5gのケイソ
ウ土とともに抽出セルに添加し、抽出溶媒;50%エタノ
ール、溶媒量;25ml、抽出温度;82℃、抽出時間;10
分、抽出回数;2回の条件で抽出操作を行った。抽出液
は0.45μmのメンブレンフィルターでろ過した。
【0009】(α−アミラーゼ阻害活性の測定)α-ア
ミラーゼ阻害活性の測定は、里山らの方法(里山ら、日
本農芸化学会誌、Vol.72,No.8,pp.933-936(1998))を改
変して行った。すなわち、α−アミラーゼ(Wako,From
Bacillus stearothermophilus 5200unit/mg)をトリス
−塩酸緩衝液(10mM,pH7.5)に溶解し、適宜希釈して使
用した。米デンプン(Sigma)をクエン酸緩衝液(0.1M,
pH6.0)に濃度1.0%(w/v)となるように懸濁しこれを沸
騰水中で5分加熱して糊化した。この糊化液と等量の3.
2%(w/v)寒天溶液を60℃で混合し、マイクロプレートウ
ォッシャーで96孔マイクロプレートの各ウェルに200μl
ずつ分注し、放冷固化して基質プレートを作成した。
【0010】阻害活性の測定は、11unitに調整したα-
アミラーゼ溶液の1/10量の被検液を混合した溶液(α-
アミラーゼの濃度は最終的に10unitとなる)を調整し、
37℃で10分間プレインキュベートした基質プレートの各
ウエルに添加し、37℃で5分間インキュベートした後、
マイクロプレートリーダーで655nmの吸光度A0を測定し
た。さらに1時間37℃でインキュベートし同様に吸光度
1を測定した。縦軸に5分後と1時間後の吸光度の差
の対数(log(ΔA=A0−A1))をとり、横軸にα-アミ
ラーゼ活性(units/ml)をとってグラフにプロットする
と両者は良好な相関関係を示し、吸光度の変化量ΔAを
測定することによりα-アミラーゼ活性を測定した。た
だし、プレート間では近似曲線の傾きが有意に異なるこ
とから、各プレートで0.1,1,10unit/mlに調製したα−
アミラーゼ溶液を添加した区を検量区間として設け、残
りの9区間について被検液の活性を求めた。表1は、10
unitのα−アミラーゼ活性を100%として、それに対す
る被検液を添加した場合の活性(%)±標準偏差(n=
8)を示す。
【0011】
【表1】 (各被検液添加後のα−アミラーゼ阻害活性) 被検液 添加後の活性(%) ゲットウ(葉) 0.1±0.1 ストレリチア(花) 0.2±0.2 ストレリチア(葉) 1.2±0.2 アカメガシワ(樹皮) 1.3±1.1 ストレリチア(茎) 4.0±0.2 ヒラミレモン(実) 15.1±0.1 クダモノトケイソウ 30.2±0.8
【0012】さらに、限外ろ過(分画分子量10,000)に
よる活性の変化および水抽出と100%エタノール抽出
における活性の違いを測定したところ、それぞれ表2,
3の結果が得られた。
【0013】
【表2】 (限外ろ過前後の被検液の活性) 被検液 限外ろ過前の活性(%) 限外ろ過後の活性(%) 活性比 クダモノトケイソウ 22.3±0.1 31.9±0.1 1.4 ヒラミレモン(実) 38.8±0.1 59.0±0.1 1.5* ストレリチア(葉) 3.24±0.10 26.2±0.1 8.0* ストレリチア(茎) 5.20±0.10 61.4±0.1 11.8* ストレリチア(花) 1.77±0.38 50.9±0.1 28.7* ゲットウ(葉) 7.05±0.79(×10-1) 60.8±0.1 86.2* アカメガシワ(樹皮) 9.02±11.1(×10-2) 52.5±0.1 582.0* *活性比のアスタリスクは、限外ろ過の前後において有意差(n=8,P=0.05)が認め られたことを示す。
【0014】ヒラミレモン(実)、ストレリチア(花、
葉、茎)、ゲットウ、アカメガシワにおいて、限外ろ過
膜を通過した画分すなわち分子量10,000以下の画分にお
いて活性が高いことが認めれ、これらの被検液中の活性
物質が分子量10kDa以下であることが示唆された。
【0015】
【表3】 (水抽出と100%エタノール抽出法の比較) 被検液名 エタノール抽出時活性(%) 水抽出時活性(%) 活性比 ストレリチア(花) 76.9±0.1 80.3±0.1 1.04* ゲットウ 58.4±0.1 63.2±0.1 1.08 アカメガシワ(樹皮) <1×10-1 1.32±0.69(×10-1) 1.89* ヒラミレモン(実) 45.1±0.1 107.0±0.1 2.37* ストレリチア(茎) 4.24±0.07 11.4±0.1 2.68* クダモノトケイソウ 11.5±0.1 94.6±0.1 8.22* *活性比のアスタリスクは、抽出法の違いにより有意差(n=8,P=0.05)が認められ たことを示す。
【0016】以上のように、水抽出およびエタノール抽
出のいずれにおいても高い阻害活性が認められるが、ア
カメガシワ、ヒラミレモン(実)、クダモノケイトソ
ウ、ストレリチア(茎)ではエタノール抽出のほうが阻
害活性がより高いことが認められた。
【0017】(実施例2)米飲料に本発明の薬草の乾燥
粉末を添加した。原料米を洗米後、十分な水に浸し6時
間静置して米に水を吸収させ、笊上げを行ない軽く水気
を切って吸水率を20%にし、オートクレーブ(120℃、2
0分)により、米デンプンのα化を行なった。その後、9
5℃で一晩乾燥させ0.5mmメッシュの超遠心粉砕機で粉
砕し、α化米粉を調製し、このα化米粉300gを60℃のデ
ンプン分解酵素(アミラーゼ)溶液に懸濁させて液化し
た。アミラーゼの添加量は米重量に対して0.2%、反
応時間は2時間とした。続いて、タンパク質分解酵素
(プロテアーゼ)を添加し、50℃で米タンパク質の加水
分解を行なった後、沸騰水中で15分間加熱して酸素を失
活させた。プロテアーゼの添加量は米重量に対して0.1
%、反応時間2時間とした。
【0018】以上のようにして調製した米飲料を凍結乾
燥した後、粉砕機で粉砕し、その冷凍乾燥物40gにゲッ
トウ由来の粉末1gを添加して混合し、蒸留水80mlを添
加して、70℃で30分保持して、懸濁・再溶解を行い本発
明のα−アミラーゼ阻害物質入り米飲料を調製した。
【0019】本発明のα−アミラーゼ阻害物質入り米飲
料について実施例1と同じ方法でα−アミラーゼ阻害活
性を測定しところ、α−アミラーゼ阻害活性が認められ
た。
【0020】
【発明の効果】本発明のα−アミラーゼ阻害物質は、α
−アミラーゼ阻害活性が高いとともに、安全であり、し
たがって医薬、機能性食品、食品添加物として使用する
ことにより、肥満や糖尿の治療、予防にきわめて有効で
ある。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 FI テーマコート゛(参考) A61P 3/10 A61P 3/10 C12N 9/99 C12N 9/99 // A23L 2/00 A23L 2/00 G (72)発明者 平敷 兼清 沖縄県浦添市勢理客456番地 沖縄食糧株 式会社内 Fターム(参考) 4B017 LC04 LE08 LG15 LP01 LP03 4B018 LB08 LE03 LE05 MD61 ME01 MF01 MF07 4C088 AB12 AB46 AB62 AB81 BA07 BA08 MA52 NA14 ZA70 ZC35

Claims (3)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 ゲットウ、アカメガシワ、ヒラミレモ
    ン、クダモノトケイソウおよびストレリチアからなる群
    から選ばれた1種類以上の植物の乾燥粉末または抽出物
    を有効成分とすることを特徴とするα−アミラーゼ活性
    を阻害するための物質。
  2. 【請求項2】 ゲットウ、アカメガシワ、ヒラミレモ
    ン、クダモノトケイソウおよびストレリチアからなる群
    から選ばれた1種類以上の植物の乾燥粉末または抽出物
    を有効成分とすることを特徴とするα−アミラーゼ阻害
    活性をもたらすための食品添加物。
  3. 【請求項3】 請求項2記載の食品添加物を含有する米
    飲料。
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