JP2000247998A - α１Ａアドレナリン受容体の変異体、当該変異体を用いた測定方法及び前立腺肥大に伴う排尿困難症治療剤 - Google Patents
α１Ａアドレナリン受容体の変異体、当該変異体を用いた測定方法及び前立腺肥大に伴う排尿困難症治療剤Info
- Publication number
- JP2000247998A JP2000247998A JP5116399A JP5116399A JP2000247998A JP 2000247998 A JP2000247998 A JP 2000247998A JP 5116399 A JP5116399 A JP 5116399A JP 5116399 A JP5116399 A JP 5116399A JP 2000247998 A JP2000247998 A JP 2000247998A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- inverse agonist
- variant
- kmd
- agonist activity
- adrenaline receptor
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Abstract
(57)【要約】
【目的】ヒトα1Aアドレナリン受容体の新規変異体、当
該変異体を用いたα1Aアドレナリン受容体アンタゴニス
トのインバースアゴニスト活性測定方法および実質的に
インバースアゴニスト活性を示さないα1Aアドレナリン
受容体アンタゴニストを有効成分として含有する前立腺
肥大に伴う排尿困難症治療剤を提供する。 【構成】第２７１アミノ酸のアラニンをスレオニンに置
換したヒトα1Aアドレナリン受容体の新規変異体。イン
バースアゴニスト活性は当該変異体発現細胞における薬
物処置によるα1Aアドレナリン受容体の増加量を指標と
して測定する。インバースアゴニスト活性を示さないα
1Aアドレナリン受容体アンタゴニストとしては、（−）
−（Ｒ）−１−（３−ヒドロキシプロピル）−５−〔２
−〔〔２−〔２−（２，２，２−トリフルオロエトキ
シ）フェノキシ〕エチル〕アミノ〕プロピル〕インドリ
ン−７−カルボキサミド及びその塩が例示できる。
該変異体を用いたα1Aアドレナリン受容体アンタゴニス
トのインバースアゴニスト活性測定方法および実質的に
インバースアゴニスト活性を示さないα1Aアドレナリン
受容体アンタゴニストを有効成分として含有する前立腺
肥大に伴う排尿困難症治療剤を提供する。 【構成】第２７１アミノ酸のアラニンをスレオニンに置
換したヒトα1Aアドレナリン受容体の新規変異体。イン
バースアゴニスト活性は当該変異体発現細胞における薬
物処置によるα1Aアドレナリン受容体の増加量を指標と
して測定する。インバースアゴニスト活性を示さないα
1Aアドレナリン受容体アンタゴニストとしては、（−）
−（Ｒ）−１−（３−ヒドロキシプロピル）−５−〔２
−〔〔２−〔２−（２，２，２−トリフルオロエトキ
シ）フェノキシ〕エチル〕アミノ〕プロピル〕インドリ
ン−７−カルボキサミド及びその塩が例示できる。
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、ヒトα1Aアドレナ
リン受容体の第２７１アミノ酸のアラニンをスレオニン
に置換したα1Aアドレナリン受容体の新規変異体、当該
α1Aアドレナリン受容体の変異体を用いたα1Aアドレナ
リン受容体アンタゴニストのインバースアゴニスト活性
の測定方法および当該測定方法においてインバースアゴ
ニスト活性を示さないα1Aアドレナリン受容体アンタゴ
ニストを有効成分として含有する前立腺肥大に伴う排尿
困難症治療剤に関するものである。
リン受容体の第２７１アミノ酸のアラニンをスレオニン
に置換したα1Aアドレナリン受容体の新規変異体、当該
α1Aアドレナリン受容体の変異体を用いたα1Aアドレナ
リン受容体アンタゴニストのインバースアゴニスト活性
の測定方法および当該測定方法においてインバースアゴ
ニスト活性を示さないα1Aアドレナリン受容体アンタゴ
ニストを有効成分として含有する前立腺肥大に伴う排尿
困難症治療剤に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】α1 アドレナリン受容体（以下α1 −Ａ
Ｒという）サブタイプについては、これまでに薬理学的
研究および受容体遺伝子のクローニングによりα1Aアド
レナリン受容体サブタイプ（以下α1A−ＡＲという）、
α1Bアドレナリン受容体サブタイプ（以下α1B−ＡＲと
いう）およびα1Dアドレナリン受容体サブタイプの３種
のアドレナリン受容体サブタイプの存在が確認されてい
る。
Ｒという）サブタイプについては、これまでに薬理学的
研究および受容体遺伝子のクローニングによりα1Aアド
レナリン受容体サブタイプ（以下α1A−ＡＲという）、
α1Bアドレナリン受容体サブタイプ（以下α1B−ＡＲと
いう）およびα1Dアドレナリン受容体サブタイプの３種
のアドレナリン受容体サブタイプの存在が確認されてい
る。
【０００３】種々の動物及びヒトの各種臓器におけるこ
れらのα1 −ＡＲサブタイプの局在及び機能について多
くの研究がなされ、ヒト前立腺組織にはα1A−ＡＲが優
位に存在し、α1A−ＡＲ選択的アンタゴニストがノルア
ドレナリン収縮を最もよく抑制することからヒト前立腺
はα1A−ＡＲを介して収縮すると考えられている。ま
た、ヒトの末梢血管はα1B−ＡＲを介して収縮すること
が報告されている（British Journal of Pharmacology,
Vol. 113, pp. 723-728 (1994))。更に、ヒト大網動脈
およびヒト腸間膜動脈もα1B−ＡＲを介するとされてい
る。
れらのα1 −ＡＲサブタイプの局在及び機能について多
くの研究がなされ、ヒト前立腺組織にはα1A−ＡＲが優
位に存在し、α1A−ＡＲ選択的アンタゴニストがノルア
ドレナリン収縮を最もよく抑制することからヒト前立腺
はα1A−ＡＲを介して収縮すると考えられている。ま
た、ヒトの末梢血管はα1B−ＡＲを介して収縮すること
が報告されている（British Journal of Pharmacology,
Vol. 113, pp. 723-728 (1994))。更に、ヒト大網動脈
およびヒト腸間膜動脈もα1B−ＡＲを介するとされてい
る。
【０００４】最近、αアドレナリン受容体、βアドレナ
リン受容体、ヒスタミンＨ受容体を始めとするＧ蛋白質
共役型受容体は、不活性型と活性型がある一定の平衡状
態で存在し、活性型のみがプロテインキナーゼＣなどの
細胞内情報伝達系を介した生理反応を引き起こすことが
報告されている。
リン受容体、ヒスタミンＨ受容体を始めとするＧ蛋白質
共役型受容体は、不活性型と活性型がある一定の平衡状
態で存在し、活性型のみがプロテインキナーゼＣなどの
細胞内情報伝達系を介した生理反応を引き起こすことが
報告されている。
【０００５】一方、これらの受容体に対するアゴニスト
およびアンタゴニストの作用についても研究が行われて
おり、アンタゴニストには不活性型と活性型の平衡状態
に影響しないニュートラルアンタゴニストと平衡状態を
不活性側に移動させるインバースアゴニストがあり、イ
ンバースアゴニスト活性の強いアンタゴニストを長期使
用した場合は、一過性に細胞内情報伝達系が抑制された
結果、代償性に受容体数が増加することが報告されてい
る。
およびアンタゴニストの作用についても研究が行われて
おり、アンタゴニストには不活性型と活性型の平衡状態
に影響しないニュートラルアンタゴニストと平衡状態を
不活性側に移動させるインバースアゴニストがあり、イ
ンバースアゴニスト活性の強いアンタゴニストを長期使
用した場合は、一過性に細胞内情報伝達系が抑制された
結果、代償性に受容体数が増加することが報告されてい
る。
【０００６】例えば、胃・十二指腸潰瘍治療剤として知
られているヒスタミンＨ2 受容体アンタゴニストのシメ
チジンやラニチジンはインバースアゴニストであるた
め、これらヒスタミンＨ2 受容体アンタゴニストを長期
連用するとヒスタミンＨ2 受容体数が増加し、その結
果、耐性発現（作用減弱）や使用中断により胃酸分泌亢
進などのリバウンド現象を起こすことが問題点として指
摘されている。このように、インバースアゴニストは耐
性発現やリバウンド現象により予期せぬ症状を引き起こ
すため、医薬品として使用するアンタゴニストはニュー
トラルアンタゴニストが望ましいとして種々の研究がな
されている。ヒスタミンＨ2 受容体の他にβ 2 アドレナ
リン受容体やα1B−ＡＲについても変異体を用いて種々
の研究が活発に行われており、アンタゴニストの性質が
受容体の活性を左右することが報告されている。（Pro
c. Natl. Acad. Sci. USA., Vol. 93, pp. 6802-6807
(1996);Biochem. J., Vol. 325, pp. 733-739 (1997))
しかしながら、α1A−ＡＲについてはこれまでニュート
ラルアンタゴニストかインバースアゴニストであるかを
判定する実験手段自体が開発されていなかったため、今
まで何ら報告がなされていない。
られているヒスタミンＨ2 受容体アンタゴニストのシメ
チジンやラニチジンはインバースアゴニストであるた
め、これらヒスタミンＨ2 受容体アンタゴニストを長期
連用するとヒスタミンＨ2 受容体数が増加し、その結
果、耐性発現（作用減弱）や使用中断により胃酸分泌亢
進などのリバウンド現象を起こすことが問題点として指
摘されている。このように、インバースアゴニストは耐
性発現やリバウンド現象により予期せぬ症状を引き起こ
すため、医薬品として使用するアンタゴニストはニュー
トラルアンタゴニストが望ましいとして種々の研究がな
されている。ヒスタミンＨ2 受容体の他にβ 2 アドレナ
リン受容体やα1B−ＡＲについても変異体を用いて種々
の研究が活発に行われており、アンタゴニストの性質が
受容体の活性を左右することが報告されている。（Pro
c. Natl. Acad. Sci. USA., Vol. 93, pp. 6802-6807
(1996);Biochem. J., Vol. 325, pp. 733-739 (1997))
しかしながら、α1A−ＡＲについてはこれまでニュート
ラルアンタゴニストかインバースアゴニストであるかを
判定する実験手段自体が開発されていなかったため、今
まで何ら報告がなされていない。
【０００７】ヒト前立腺の収縮はα1A−ＡＲを介し、ヒ
ト末梢血管の収縮はα1B−ＡＲを介する事が報告されて
いることより、起立性低血圧などの副作用を軽減するた
め前立腺肥大症治療剤として選択的α1A−ＡＲアンタゴ
ニストが開発されているが、当該アンタゴニストがイン
バースアゴニストの場合は耐性発現による増量を余儀な
くされることが懸念される。即ち、各臓器の主要な受容
体の活性化状態が異なると、インバースアゴニスト活性
を持つアンタゴニストの作用強度が臓器によって変化す
ることが考えられ、場合によっては起立性低血圧などの
副作用が強く発現するようになることが懸念される。
ト末梢血管の収縮はα1B−ＡＲを介する事が報告されて
いることより、起立性低血圧などの副作用を軽減するた
め前立腺肥大症治療剤として選択的α1A−ＡＲアンタゴ
ニストが開発されているが、当該アンタゴニストがイン
バースアゴニストの場合は耐性発現による増量を余儀な
くされることが懸念される。即ち、各臓器の主要な受容
体の活性化状態が異なると、インバースアゴニスト活性
を持つアンタゴニストの作用強度が臓器によって変化す
ることが考えられ、場合によっては起立性低血圧などの
副作用が強く発現するようになることが懸念される。
【０００８】特に、心臓においてもα1A−ＡＲが発現し
ていることが確認されており、α1−ＡＲ刺激により心
肥大が誘導されることが報告されている。α1A−ＡＲは
細胞内情報伝達経路の一つであるイノシトール１，４，
５−三リン酸（以下ＩＰ3 という）を産生してプロテイ
ンキナーゼＣを活性化させることが知られており、プロ
テインキナーゼＣ活性の亢進が心肥大誘導の一因を担っ
ているものと考えられる。それ故、心筋細胞においてα
1A−ＡＲが増加すると、心肥大が起こる危険性が増大す
る。（血管と内皮，Vol. 5, No. 6, pp. 81-86 (1995);
医学のあゆみ，Vol. 172, No. 3, pp.151-154 (1995)；
The Journal of Biological Chemistry,Vol. 271, No.
10, pp. 5839-5843 (1996))従って、α1A−ＡＲアンタ
ゴニストとして、インバースアゴニストを使用すると受
容体数が増加した場合、心肥大の危険性が増加すること
が予想される。
ていることが確認されており、α1−ＡＲ刺激により心
肥大が誘導されることが報告されている。α1A−ＡＲは
細胞内情報伝達経路の一つであるイノシトール１，４，
５−三リン酸（以下ＩＰ3 という）を産生してプロテイ
ンキナーゼＣを活性化させることが知られており、プロ
テインキナーゼＣ活性の亢進が心肥大誘導の一因を担っ
ているものと考えられる。それ故、心筋細胞においてα
1A−ＡＲが増加すると、心肥大が起こる危険性が増大す
る。（血管と内皮，Vol. 5, No. 6, pp. 81-86 (1995);
医学のあゆみ，Vol. 172, No. 3, pp.151-154 (1995)；
The Journal of Biological Chemistry,Vol. 271, No.
10, pp. 5839-5843 (1996))従って、α1A−ＡＲアンタ
ゴニストとして、インバースアゴニストを使用すると受
容体数が増加した場合、心肥大の危険性が増加すること
が予想される。
【０００９】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、連用
による耐性発現を抑え、また心肥大など他の臓器におけ
る副作用を回避することのできる前立腺肥大に伴う排尿
困難症治療剤を提供することである。
による耐性発現を抑え、また心肥大など他の臓器におけ
る副作用を回避することのできる前立腺肥大に伴う排尿
困難症治療剤を提供することである。
【００１０】
【発明の実施の形態】本発明者らは、α1A−ＡＲに関し
て鋭意研究を重ねた結果、インバースアゴニストとニュ
ートラルアンタゴニストの判定に適したα1A−ＡＲ変異
体を確立することができ、そのα1A−ＡＲ変異体を発現
させたＣｈｉｎｅｓｅ Ｈａｍｓｔｅｒ Ｏｖａｒｙ
（ＣＨＯ）細胞を用いる事により、α1A−ＡＲにおいて
もインバースアゴニストとニュートラルアンタゴニスト
が存在する事を見出した。更に、当該ＣＨＯ細胞を用い
た実験でインバースアゴニスト活性を示さないα1A−Ａ
Ｒ対するニュートラルアンタゴニストが前立腺肥大に伴
う排尿困難症治療剤として非常に優れた薬剤となり得る
ことを見出し、本発明を成すに至った。
て鋭意研究を重ねた結果、インバースアゴニストとニュ
ートラルアンタゴニストの判定に適したα1A−ＡＲ変異
体を確立することができ、そのα1A−ＡＲ変異体を発現
させたＣｈｉｎｅｓｅ Ｈａｍｓｔｅｒ Ｏｖａｒｙ
（ＣＨＯ）細胞を用いる事により、α1A−ＡＲにおいて
もインバースアゴニストとニュートラルアンタゴニスト
が存在する事を見出した。更に、当該ＣＨＯ細胞を用い
た実験でインバースアゴニスト活性を示さないα1A−Ａ
Ｒ対するニュートラルアンタゴニストが前立腺肥大に伴
う排尿困難症治療剤として非常に優れた薬剤となり得る
ことを見出し、本発明を成すに至った。
【００１１】本発明者らは、α1A−ＡＲの平衡状態を活
性型優位にすべく研究した結果、野生型α1A−ＡＲの２
７１番目であるアミノ酸のアラニンをスレオニンに置換
した４６６個のアミノ酸から構成されるα1A−ＡＲ変異
体をＣＨＯ細胞に発現させ、細胞内ＩＰ3 量を測定した
ところ、野生型に比べＩＰ3 量が顕著に上昇しており、
活性型が優位であるα1A−ＡＲ変異体の確立に成功した
（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ
ｕｎ．，Ｖｏｌ．１９５，Ｎｏ．２，ｐｐ．９０２−９
０９（１９９３）；ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，Ｖｏ
ｌ．４２，ｐｐ．２７９−２８３（１９９８））。
性型優位にすべく研究した結果、野生型α1A−ＡＲの２
７１番目であるアミノ酸のアラニンをスレオニンに置換
した４６６個のアミノ酸から構成されるα1A−ＡＲ変異
体をＣＨＯ細胞に発現させ、細胞内ＩＰ3 量を測定した
ところ、野生型に比べＩＰ3 量が顕著に上昇しており、
活性型が優位であるα1A−ＡＲ変異体の確立に成功した
（Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂｉｏｐｈｙｓ．Ｒｅｓ．Ｃｏｍｍ
ｕｎ．，Ｖｏｌ．１９５，Ｎｏ．２，ｐｐ．９０２−９
０９（１９９３）；ＦＥＢＳ Ｌｅｔｔｅｒｓ，Ｖｏ
ｌ．４２，ｐｐ．２７９−２８３（１９９８））。
【００１２】更に、本発明者らは、上記α1A−ＡＲ変異
体を発現させたＣＨＯ細胞を用いて実験することによ
り、細胞内ＩＰ3 量を減少させ、その結果としてα1A−
ＡＲ数を増加させるインバースアゴニスト活性を示すア
ンタゴニストと、細胞内ＩＰ3量およびα1A−ＡＲ数を
変化させないニュートラルアンタゴニストを判定する事
ができ、医薬品として有用なニュートラルアンタゴニス
トの開発が可能である事を見出した。
体を発現させたＣＨＯ細胞を用いて実験することによ
り、細胞内ＩＰ3 量を減少させ、その結果としてα1A−
ＡＲ数を増加させるインバースアゴニスト活性を示すア
ンタゴニストと、細胞内ＩＰ3量およびα1A−ＡＲ数を
変化させないニュートラルアンタゴニストを判定する事
ができ、医薬品として有用なニュートラルアンタゴニス
トの開発が可能である事を見出した。
【００１３】そして、上記実験でインバースアゴニスト
活性を示さないα1A−ＡＲアンタゴニストは長期投与で
耐性を発現せず、しかも心臓においてα1A−ＡＲ数を変
化させず好適な前立腺肥大に伴う排尿困難症治療剤とし
て期待できることを見出した。
活性を示さないα1A−ＡＲアンタゴニストは長期投与で
耐性を発現せず、しかも心臓においてα1A−ＡＲ数を変
化させず好適な前立腺肥大に伴う排尿困難症治療剤とし
て期待できることを見出した。
【００１４】即ち、本発明者らが確立した活性型が優位
にある上記α1A−ＡＲ変異体を発現させたＣＨＯ細胞を
用いた実験において、α1A−ＡＲに対して高親和性を示
すプラゾシンは細胞内ＩＰ3 量を３０％程度減少させ、
その結果α1A−ＡＲ数を約３倍に増加させたのに対し、
α1A−ＡＲに対して高親和性を示す選択的な尿道平滑筋
収縮抑制作用を有する排尿困難症治療剤として開発され
たインドリン誘導体（特開平６−２２００１５号公報）
の中の一化合物である（−）−（Ｒ）−１−（３−ヒド
ロキシプロピル）−５−〔２−〔〔２−〔２−（２，
２，２−トリフルオロエトキシ）フェノキシ〕エチル〕
アミノ〕プロピル〕インドリン−７−カルボキサミド
（以下ＫＭＤ−３２１３という）はＩＰ3 量には影響を
与えず、α1A−ＡＲ数も変化させなかった。以上の事か
ら、プラゾシンはα1A−ＡＲに対して強いインバースア
ゴニスト活性を示すアンタゴニスト（インバースアゴニ
スト）であり、一方、ＫＭＤ−３２１３はα1A−ＡＲに
対するインバースアゴニスト活性を示さないニュートラ
ルアンタゴニストであることが確認された。
にある上記α1A−ＡＲ変異体を発現させたＣＨＯ細胞を
用いた実験において、α1A−ＡＲに対して高親和性を示
すプラゾシンは細胞内ＩＰ3 量を３０％程度減少させ、
その結果α1A−ＡＲ数を約３倍に増加させたのに対し、
α1A−ＡＲに対して高親和性を示す選択的な尿道平滑筋
収縮抑制作用を有する排尿困難症治療剤として開発され
たインドリン誘導体（特開平６−２２００１５号公報）
の中の一化合物である（−）−（Ｒ）−１−（３−ヒド
ロキシプロピル）−５−〔２−〔〔２−〔２−（２，
２，２−トリフルオロエトキシ）フェノキシ〕エチル〕
アミノ〕プロピル〕インドリン−７−カルボキサミド
（以下ＫＭＤ−３２１３という）はＩＰ3 量には影響を
与えず、α1A−ＡＲ数も変化させなかった。以上の事か
ら、プラゾシンはα1A−ＡＲに対して強いインバースア
ゴニスト活性を示すアンタゴニスト（インバースアゴニ
スト）であり、一方、ＫＭＤ−３２１３はα1A−ＡＲに
対するインバースアゴニスト活性を示さないニュートラ
ルアンタゴニストであることが確認された。
【００１５】次に、本発明者らは、上記α1A−ＡＲに対
するインバースアゴニストであるプラゾシンとα1A−Ａ
Ｒに対するニュートラルアンタゴニストであるＫＭＤ−
３２１３をラットを用いてインバースアゴニスト活性と
耐性に関する相関性を確認すべく各被験薬物を４週間連
続経口投与した後、フェニレフリン誘発尿道内圧上昇に
対する阻害活性を各被験薬物の静脈内投与により検討し
たところ、プラゾシンは５０％阻害量（ＩＤ50値）とし
て対照群に比し約１．７倍の高値を示し、耐性を発現し
たのに対し、ＫＭＤ−３２１３は耐性を発現しなかっ
た。
するインバースアゴニストであるプラゾシンとα1A−Ａ
Ｒに対するニュートラルアンタゴニストであるＫＭＤ−
３２１３をラットを用いてインバースアゴニスト活性と
耐性に関する相関性を確認すべく各被験薬物を４週間連
続経口投与した後、フェニレフリン誘発尿道内圧上昇に
対する阻害活性を各被験薬物の静脈内投与により検討し
たところ、プラゾシンは５０％阻害量（ＩＤ50値）とし
て対照群に比し約１．７倍の高値を示し、耐性を発現し
たのに対し、ＫＭＤ−３２１３は耐性を発現しなかっ
た。
【００１６】また、同様にラットを用いて塩酸プラゾシ
ンおよびＫＭＤ−３２１３を２週間連続腹腔内投与し
て、心臓におけるα1A−ＡＲ発現に対する影響を調べた
ところ、プラゾシン連続投与群ではα1A−ＡＲ数は約
１．７倍に増加した。一方、ＫＭＤ−３２１３連続投与
群ではα1A−ＡＲ数は変化しなかった。
ンおよびＫＭＤ−３２１３を２週間連続腹腔内投与し
て、心臓におけるα1A−ＡＲ発現に対する影響を調べた
ところ、プラゾシン連続投与群ではα1A−ＡＲ数は約
１．７倍に増加した。一方、ＫＭＤ−３２１３連続投与
群ではα1A−ＡＲ数は変化しなかった。
【００１７】従って、α1A−ＡＲ変異体発現ＣＨＯ細胞
でインバースアゴニスト活性を示さないα1A−ＡＲに対
するニュートラルアンタゴニストは、連続投与によりフ
ェニレフリン誘発尿道内圧上昇の阻害活性を減弱させな
いため、耐性が生じることなく、また薬物使用中断によ
るリバウンド現象を示すことがなく、前立腺肥大に伴う
排尿困難症治療剤として極めて有用である。
でインバースアゴニスト活性を示さないα1A−ＡＲに対
するニュートラルアンタゴニストは、連続投与によりフ
ェニレフリン誘発尿道内圧上昇の阻害活性を減弱させな
いため、耐性が生じることなく、また薬物使用中断によ
るリバウンド現象を示すことがなく、前立腺肥大に伴う
排尿困難症治療剤として極めて有用である。
【００１８】更に、上記α1A−ＡＲに対するインバース
アゴニスト活性を示さないニュートラルアンタゴニスト
は、心肥大との関連性が示されている心臓におけるα1A
−ＡＲ数に関しても何ら影響を示さないことから、薬物
使用中の耐性獲得および使用中断によるリバウンド現象
などα1A−ＡＲ数増加に起因する心臓に対する副作用を
回避できる。
アゴニスト活性を示さないニュートラルアンタゴニスト
は、心肥大との関連性が示されている心臓におけるα1A
−ＡＲ数に関しても何ら影響を示さないことから、薬物
使用中の耐性獲得および使用中断によるリバウンド現象
などα1A−ＡＲ数増加に起因する心臓に対する副作用を
回避できる。
【００１９】このように、本発明のα1A−ＡＲ変異体を
用いる事により、このような前立腺肥大に伴う排尿困難
症治療剤として有用なインバースアゴニスト活性を示さ
ないα1A−ＡＲに対するニュートラルアンタゴニストを
開発することができる。
用いる事により、このような前立腺肥大に伴う排尿困難
症治療剤として有用なインバースアゴニスト活性を示さ
ないα1A−ＡＲに対するニュートラルアンタゴニストを
開発することができる。
【００２０】本発明において、有効成分として含有され
るインバースアゴニスト活性を示さないα1A−ＡＲに対
するアンタゴニストとは、全くインバースアゴニスト活
性を示さないニュートラルアンタゴニストに限定される
ものではなく、４６６個のアミノ酸から構成されるα1A
−ＡＲ変異体を用いた本発明のインバースアゴニスト活
性測定方法におけるプラゾシンによるα1A−ＡＲ数の増
加量をインバースアゴニスト活性１００％とした場合、
実質的にα1A−ＡＲに対する影響がないと考えられるイ
ンバースアゴニスト活性が概ね３０％以下のアンタゴニ
ストであればよく、概ね１０％以下のアンタゴニストで
あれば更に好適である。ＫＭＤ−３２１３のインバース
アゴニスト活性は０％であり、極めて優れたニュートラ
ルアンタゴニストとして挙げられる。
るインバースアゴニスト活性を示さないα1A−ＡＲに対
するアンタゴニストとは、全くインバースアゴニスト活
性を示さないニュートラルアンタゴニストに限定される
ものではなく、４６６個のアミノ酸から構成されるα1A
−ＡＲ変異体を用いた本発明のインバースアゴニスト活
性測定方法におけるプラゾシンによるα1A−ＡＲ数の増
加量をインバースアゴニスト活性１００％とした場合、
実質的にα1A−ＡＲに対する影響がないと考えられるイ
ンバースアゴニスト活性が概ね３０％以下のアンタゴニ
ストであればよく、概ね１０％以下のアンタゴニストで
あれば更に好適である。ＫＭＤ−３２１３のインバース
アゴニスト活性は０％であり、極めて優れたニュートラ
ルアンタゴニストとして挙げられる。
【００２１】また、ＫＭＤ−３２１３はＳＤ系ラットで
の単回経口投与による毒性試験において、５０％致死量
（ＬＤ50値）が雌雄共に８７８ｍｇ／ｋｇであり、特に
重篤な副作用もなく、安全な化合物である。
の単回経口投与による毒性試験において、５０％致死量
（ＬＤ50値）が雌雄共に８７８ｍｇ／ｋｇであり、特に
重篤な副作用もなく、安全な化合物である。
【００２２】従って、インバースアゴニスト活性を示さ
ないα1A−ＡＲアンタゴニスト、例えば、ＫＭＤ−３２
１３またはその薬理学的に許容される塩を活性成分とし
て含有させることにより、連用による耐性発現を抑え、
また使用中断後の心肥大などの他の臓器における副作用
を回避することのできる極めて好適な前立腺肥大に伴う
排尿困難症治療剤を得る事が出来る。
ないα1A−ＡＲアンタゴニスト、例えば、ＫＭＤ−３２
１３またはその薬理学的に許容される塩を活性成分とし
て含有させることにより、連用による耐性発現を抑え、
また使用中断後の心肥大などの他の臓器における副作用
を回避することのできる極めて好適な前立腺肥大に伴う
排尿困難症治療剤を得る事が出来る。
【００２３】本発明の排尿困難症治療剤の活性成分の一
つであるＫＭＤ−３２１３およびその薬理学的に許容さ
れる塩は公知化合物であり、文献記載の方法により製造
することができる（特開平６−２２００１５号公報）。
つであるＫＭＤ−３２１３およびその薬理学的に許容さ
れる塩は公知化合物であり、文献記載の方法により製造
することができる（特開平６−２２００１５号公報）。
【００２４】本発明の排尿困難症治療剤において活性成
分として含有される化合物は遊離体のままで使用しても
よく、薬理学的に許容される塩として使用してもよい。
例えば、ＫＭＤ−３２１３の薬理学的に許容される塩と
しては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、メタンスルホン酸、
ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酢酸、
クエン酸、コハク酸、酒石酸、２，４−ジメチルベンゼ
ンスルホン酸、２，５−ジメチルベンゼンスルホン酸、
２，４，６−トリメチルベンゼンスルホン酸、（＋）−
カンファースルホン酸、（−）−カンファースルホン
酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンス
ルホン酸、１−ブタンスルホン酸、フマル酸、グルタミ
ン酸、アスパラギン酸等とのモノまたはジ酸付加塩等を
挙げることが出来る。
分として含有される化合物は遊離体のままで使用しても
よく、薬理学的に許容される塩として使用してもよい。
例えば、ＫＭＤ−３２１３の薬理学的に許容される塩と
しては、塩酸、臭化水素酸、硫酸、メタンスルホン酸、
ベンゼンスルホン酸、ｐ−トルエンスルホン酸、酢酸、
クエン酸、コハク酸、酒石酸、２，４−ジメチルベンゼ
ンスルホン酸、２，５−ジメチルベンゼンスルホン酸、
２，４，６−トリメチルベンゼンスルホン酸、（＋）−
カンファースルホン酸、（−）−カンファースルホン
酸、４−クロロベンゼンスルホン酸、２−ナフタレンス
ルホン酸、１−ブタンスルホン酸、フマル酸、グルタミ
ン酸、アスパラギン酸等とのモノまたはジ酸付加塩等を
挙げることが出来る。
【００２５】また、本発明の排尿困難症治療剤において
活性成分として含有される化合物には、上記の塩の他、
水和物やエタノール等の医薬品として許容される溶媒と
の溶媒和物も含まれる。
活性成分として含有される化合物には、上記の塩の他、
水和物やエタノール等の医薬品として許容される溶媒と
の溶媒和物も含まれる。
【００２６】本発明の医薬品組成物を実際の治療に用い
る場合、用法に応じ種々の剤型のものが使用される。こ
のような剤型としては例えば、散剤、顆粒剤、細粒剤、
ドライシロップ剤、錠剤、カプセル剤などの経口投与
剤、注射剤、貼付剤あるいは坐剤などの非経口投与剤を
挙げることができる。
る場合、用法に応じ種々の剤型のものが使用される。こ
のような剤型としては例えば、散剤、顆粒剤、細粒剤、
ドライシロップ剤、錠剤、カプセル剤などの経口投与
剤、注射剤、貼付剤あるいは坐剤などの非経口投与剤を
挙げることができる。
【００２７】これらの医薬品組成物は、その剤型に応じ
調剤学上使用される手法により、適当な賦形剤、崩壊
剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤、緩衝剤、等張化剤、防腐
剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補助剤な
どの医薬品添加物と適宜混合または希釈・溶解し、常法
に従い調剤することにより製造することができる。
調剤学上使用される手法により、適当な賦形剤、崩壊
剤、結合剤、滑沢剤、希釈剤、緩衝剤、等張化剤、防腐
剤、湿潤剤、乳化剤、分散剤、安定化剤、溶解補助剤な
どの医薬品添加物と適宜混合または希釈・溶解し、常法
に従い調剤することにより製造することができる。
【００２８】例えば、散剤は活性成分、例えば、ＫＭＤ
−３２１３またはその薬理学的に許容される塩に、必要
に応じ、適当な賦形剤、滑沢剤等を加えよく混和して散
剤とする。
−３２１３またはその薬理学的に許容される塩に、必要
に応じ、適当な賦形剤、滑沢剤等を加えよく混和して散
剤とする。
【００２９】錠剤は、活性成分、例えば、ＫＭＤ−３２
１３またはその薬理学的に許容される塩に、必要に応
じ、適当な賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤等を加え常
法に従い打錠して錠剤とする。錠剤はまた必要に応じ、
コーティングを施し、フィルムコート錠、糖衣錠等にす
ることができる。
１３またはその薬理学的に許容される塩に、必要に応
じ、適当な賦形剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤等を加え常
法に従い打錠して錠剤とする。錠剤はまた必要に応じ、
コーティングを施し、フィルムコート錠、糖衣錠等にす
ることができる。
【００３０】カプセル剤は、活性成分、例えば、ＫＭＤ
−３２１３またはその薬理学的に許容される塩に、必要
に応じ、適当な賦形剤、滑沢剤等を加えよく混和した
後、適当なカプセルに充填してカプセル剤とする。ま
た、常法により顆粒あるいは細粒とした後あるいは分散
剤、乳化剤、安定化剤、溶解補助剤などを加え液状とし
た後充填してもよい。
−３２１３またはその薬理学的に許容される塩に、必要
に応じ、適当な賦形剤、滑沢剤等を加えよく混和した
後、適当なカプセルに充填してカプセル剤とする。ま
た、常法により顆粒あるいは細粒とした後あるいは分散
剤、乳化剤、安定化剤、溶解補助剤などを加え液状とし
た後充填してもよい。
【００３１】また、本製剤は徐放性製剤として投与して
もよい。通常の徐放性製剤として錠剤もしくは顆粒中に
徐放性基剤を配合したマトリックス型徐放性製剤、ある
いは常法により得た錠剤または顆粒またはマトリックス
型徐放性製剤を徐放性基剤によりコーティングした皮膜
制御型徐放性製剤として経口投与することができる。徐
放性基剤としては、硬化油、ステアリルアルコール、セ
チルアルコール、パラフィン、脂肪酸モノグリセリン等
のワックス、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒ
ドロキシプロピルセルロース、エチルセルロース、カル
ボキシビニルポリマー、酢酸ビニル樹脂、アクリル酸エ
チルメタクリル酸メチルコポリマー、アミノアルキルメ
タアクリレートコポリマー、メタアクリル酸コポリマー
などを挙げることが出来る。
もよい。通常の徐放性製剤として錠剤もしくは顆粒中に
徐放性基剤を配合したマトリックス型徐放性製剤、ある
いは常法により得た錠剤または顆粒またはマトリックス
型徐放性製剤を徐放性基剤によりコーティングした皮膜
制御型徐放性製剤として経口投与することができる。徐
放性基剤としては、硬化油、ステアリルアルコール、セ
チルアルコール、パラフィン、脂肪酸モノグリセリン等
のワックス、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ヒ
ドロキシプロピルセルロース、エチルセルロース、カル
ボキシビニルポリマー、酢酸ビニル樹脂、アクリル酸エ
チルメタクリル酸メチルコポリマー、アミノアルキルメ
タアクリレートコポリマー、メタアクリル酸コポリマー
などを挙げることが出来る。
【００３２】本発明の医薬品組成物を実際の治療に用い
る場合、その活性成分であるインバースアゴニスト活性
を示さないα1A−ＡＲアンタゴニストの投与量は対象と
なる患者の性別、年齢、体重、症状の度合などによって
適宜決定されるが、例えば活性成分としてＫＭＤ−３２
１３またはその薬理学的に許容される塩を用いる場合、
経口的に、概ね成人１日当たり０．１〜１００mg、非経
口的に、概ね成人１日当たり０．０１〜１００mgの範囲
内で投与される。
る場合、その活性成分であるインバースアゴニスト活性
を示さないα1A−ＡＲアンタゴニストの投与量は対象と
なる患者の性別、年齢、体重、症状の度合などによって
適宜決定されるが、例えば活性成分としてＫＭＤ−３２
１３またはその薬理学的に許容される塩を用いる場合、
経口的に、概ね成人１日当たり０．１〜１００mg、非経
口的に、概ね成人１日当たり０．０１〜１００mgの範囲
内で投与される。
【００３３】
【実施例】本発明の内容を以下の試験例および処方例で
さらに詳細に説明するが、本発明はその内容に限定され
るものではない。
さらに詳細に説明するが、本発明はその内容に限定され
るものではない。
【００３４】試験例１ α1A−ＡＲ変異体発現ＣＨＯ細胞における細胞内ＩＰ3
の定量及びα1A−ＡＲ数の測定 目的 ヒトα1A−ＡＲ変異体（ヒトα1A−ＡＲの第３細胞内ル
ープにある第２７１番目のアラニンをスレオニンに置換
した４６６個のアミノ酸から構成される受容体）を発現
したＣＨＯ細胞を用いて、塩酸プラゾシンおよびＫＭＤ
−３２１３のα 1A−ＡＲ活性に対する影響を細胞内ＩＰ
3 量および受容体発現量を指標として検討した。
の定量及びα1A−ＡＲ数の測定 目的 ヒトα1A−ＡＲ変異体（ヒトα1A−ＡＲの第３細胞内ル
ープにある第２７１番目のアラニンをスレオニンに置換
した４６６個のアミノ酸から構成される受容体）を発現
したＣＨＯ細胞を用いて、塩酸プラゾシンおよびＫＭＤ
−３２１３のα 1A−ＡＲ活性に対する影響を細胞内ＩＰ
3 量および受容体発現量を指標として検討した。
【００３５】方法 ヒト前立腺ｃＤＮＡライブラリーに対してウシα1A−Ａ
Ｒ遺伝子（３３３ｂｐ）をプローブとしてスクリーニン
グを行い、全長１．５ｋｂｐのヒトα1A−ＡＲｃＤＮＡ
断片（５’非翻訳領域７ｂｐおよび３’非翻訳領域≦１
００ｂｐも含む）を単離した。また、α1A−ＡＲ変異体
はｍｏｄｉｆｉｅｄ ｓｉｔｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｐ
ＣＲ法を用いて、得られたヒトα1A−ＡＲ（野生型）の
第２７１アミノ酸のアラニンをスレオニンに置換するこ
とにより作製した。α1A−ＡＲ遺伝子は制限酵素Ｅｃｏ
ＲＩを用いて哺乳類発現ベクターｐＣＲ３に挿入し、リ
ポフェクトアミン（ＧＩＢＣＯ社製）を用いてＣＨＯ細
胞に導入した。細胞は、５００μｇ／ｍｌのＧ−４１８
の存在下、αＭＥＭ（１０％ウシ胎児血清，１００ｕｎ
ｉｔｓ／ｍｌペニシリンＧ，１００μｇ／ｍｌ硫酸スト
レプトマイシンを含む）を用いて３７℃で培養し、恒常
的にα1A−ＡＲを発現する細胞を得た。
Ｒ遺伝子（３３３ｂｐ）をプローブとしてスクリーニン
グを行い、全長１．５ｋｂｐのヒトα1A−ＡＲｃＤＮＡ
断片（５’非翻訳領域７ｂｐおよび３’非翻訳領域≦１
００ｂｐも含む）を単離した。また、α1A−ＡＲ変異体
はｍｏｄｉｆｉｅｄ ｓｉｔｅ−ｓｐｅｃｉｆｉｃ Ｐ
ＣＲ法を用いて、得られたヒトα1A−ＡＲ（野生型）の
第２７１アミノ酸のアラニンをスレオニンに置換するこ
とにより作製した。α1A−ＡＲ遺伝子は制限酵素Ｅｃｏ
ＲＩを用いて哺乳類発現ベクターｐＣＲ３に挿入し、リ
ポフェクトアミン（ＧＩＢＣＯ社製）を用いてＣＨＯ細
胞に導入した。細胞は、５００μｇ／ｍｌのＧ−４１８
の存在下、αＭＥＭ（１０％ウシ胎児血清，１００ｕｎ
ｉｔｓ／ｍｌペニシリンＧ，１００μｇ／ｍｌ硫酸スト
レプトマイシンを含む）を用いて３７℃で培養し、恒常
的にα1A−ＡＲを発現する細胞を得た。
【００３６】上述した方法によりα1A−ＡＲを発現させ
たＣＨＯ細胞を各被験薬物（１０-7Ｍ）存在下で３７℃
で１６時間培養し、培養終了３０分前に細胞をＰＢＳで
洗浄し、血清除去培地に交換した。その後、ＣＨＯ細胞
に０．８Ｍ過塩素酸処理を施し、氷上で３０分間放置
後、６０ｍＭのＨＥＰＥＳ、６０ｍＭのＥＤＴＡを含む
４Ｍ水酸化ナトリウムで中和し、遠心分離を行い沈渣を
除去した。得られた細胞抽出液を用いてＩｎｏｓｉｔｏ
ｌ−１，４，５−ｔｒｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ〔3Ｈ〕
Ｒａｄｉｏｒｅｃｅｐｔｏｒ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（Ｎ
ＥＮ社製）により細胞内ＩＰ3 量を測定した。一方、受
容体発現量を検討する実験においては、α 1A−ＡＲ変異
体を発現させたＣＨＯ細胞を各被験薬物（１０-12 〜１
０-7Ｍ）の存在下で４８時間３７℃で培養した。その
後、Ａｓｓａｙ ｂｕｆｆｅｒ（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ５
０ｍＭ，ＥＤＴＡ １ｍＭ，ｐＨ７．４）にて細胞を回
収し、Ｓｏｎｉｃａｔｏｒを用いて破砕し、８００００
ｘｇで３０分間遠心分離後、得られた沈渣をＡｓｓａｙ
ｂｕｆｆｅｒで懸濁して膜分画とした。膜分画（１０
μｇ ｐｒｏｔｅｉｎ／ｔｕｂｅ）を〔 3Ｈ〕−プラゾ
シン（１０〜２０００ｐＭ）共存下４５分間３０℃でイ
ンキュベーション後、Ｃｅｌｌ ｈａｒｖｅｓｔｅｒ
（Ｍ−３０Ｔ，Ｂｒａｎｄｅｌ社製）を用いて膜分画を
ＧＦ／Ｃフィルター（Ｗｈａｔｍａｎ社製）上に回収
し、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ
７．４）で数回洗浄後、液体シンチレーションカウンタ
ーを用いて結合量を測定した。非特異的結合は１μＭ塩
酸タムスロシン存在下での結合とした。得られた実験結
果を非線形近似プログラムＰＲＩＳＭ（登録商標）（Ｇ
ｒａｐｈｐａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ社製）を用いて解析
し、受容体量を算出した。
たＣＨＯ細胞を各被験薬物（１０-7Ｍ）存在下で３７℃
で１６時間培養し、培養終了３０分前に細胞をＰＢＳで
洗浄し、血清除去培地に交換した。その後、ＣＨＯ細胞
に０．８Ｍ過塩素酸処理を施し、氷上で３０分間放置
後、６０ｍＭのＨＥＰＥＳ、６０ｍＭのＥＤＴＡを含む
４Ｍ水酸化ナトリウムで中和し、遠心分離を行い沈渣を
除去した。得られた細胞抽出液を用いてＩｎｏｓｉｔｏ
ｌ−１，４，５−ｔｒｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ〔3Ｈ〕
Ｒａｄｉｏｒｅｃｅｐｔｏｒ Ａｓｓａｙ Ｋｉｔ（Ｎ
ＥＮ社製）により細胞内ＩＰ3 量を測定した。一方、受
容体発現量を検討する実験においては、α 1A−ＡＲ変異
体を発現させたＣＨＯ細胞を各被験薬物（１０-12 〜１
０-7Ｍ）の存在下で４８時間３７℃で培養した。その
後、Ａｓｓａｙ ｂｕｆｆｅｒ（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ５
０ｍＭ，ＥＤＴＡ １ｍＭ，ｐＨ７．４）にて細胞を回
収し、Ｓｏｎｉｃａｔｏｒを用いて破砕し、８００００
ｘｇで３０分間遠心分離後、得られた沈渣をＡｓｓａｙ
ｂｕｆｆｅｒで懸濁して膜分画とした。膜分画（１０
μｇ ｐｒｏｔｅｉｎ／ｔｕｂｅ）を〔 3Ｈ〕−プラゾ
シン（１０〜２０００ｐＭ）共存下４５分間３０℃でイ
ンキュベーション後、Ｃｅｌｌ ｈａｒｖｅｓｔｅｒ
（Ｍ−３０Ｔ，Ｂｒａｎｄｅｌ社製）を用いて膜分画を
ＧＦ／Ｃフィルター（Ｗｈａｔｍａｎ社製）上に回収
し、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ ｂｕｆｆｅｒ（ｐＨ
７．４）で数回洗浄後、液体シンチレーションカウンタ
ーを用いて結合量を測定した。非特異的結合は１μＭ塩
酸タムスロシン存在下での結合とした。得られた実験結
果を非線形近似プログラムＰＲＩＳＭ（登録商標）（Ｇ
ｒａｐｈｐａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ社製）を用いて解析
し、受容体量を算出した。
【００３７】結果 野生型と比べて変異体を発現した細胞は細胞内ＩＰ3 量
が上昇しており、α1A−ＡＲ変異体では活性型が優位で
あることが確認された。この様なα1A−ＡＲ変異体を用
いた実験において、塩酸プラゾシン処置は細胞内ＩＰ3
量を減少させ、受容体発現量を増加させたが、ＫＭＤ−
３２１３処置では細胞内ＩＰ3 量および受容体量いずれ
においても影響が認められなかった。また、ＫＭＤ−３
２１３は塩酸プラゾシンのＩＰ3 減少作用に拮抗した。
このことから、α1A−ＡＲにおいてプラゾシンはインバ
ースアゴニストとして、ＫＭＤ−３２１３はニュートラ
ルアンタゴニストとして作用していることが判明した。
が上昇しており、α1A−ＡＲ変異体では活性型が優位で
あることが確認された。この様なα1A−ＡＲ変異体を用
いた実験において、塩酸プラゾシン処置は細胞内ＩＰ3
量を減少させ、受容体発現量を増加させたが、ＫＭＤ−
３２１３処置では細胞内ＩＰ3 量および受容体量いずれ
においても影響が認められなかった。また、ＫＭＤ−３
２１３は塩酸プラゾシンのＩＰ3 減少作用に拮抗した。
このことから、α1A−ＡＲにおいてプラゾシンはインバ
ースアゴニストとして、ＫＭＤ−３２１３はニュートラ
ルアンタゴニストとして作用していることが判明した。
【００３８】
【図１】
【００３９】
【図２】
【００４０】試験例２ ラットの尿道内圧に対するα1 −ＡＲアンタゴニストの
影響 目的 ＳＤ系雄性ラットを用いたフェニレフリン誘発尿道内圧
上昇に対するＫＭＤ−３２１３及び塩酸プラゾシンの抑
制作用の程度を各被験薬物非投与群と４週間連続投与群
で比較検討した。
影響 目的 ＳＤ系雄性ラットを用いたフェニレフリン誘発尿道内圧
上昇に対するＫＭＤ−３２１３及び塩酸プラゾシンの抑
制作用の程度を各被験薬物非投与群と４週間連続投与群
で比較検討した。
【００４１】方法 最低６日間の検疫後、ＫＭＤ−３２１３及び塩酸プラゾ
シンを０．５％メチルセルロース水溶液に懸濁または溶
解し、各３００μｇ／ｋｇの用量で２８日間連続経口投
与した。また、それぞれの被験薬物投与群（ＫＭＤ−３
２１３連続投与群，プラゾシン連続投与群）に対して
０．５％メチルセルロース水溶液のみを投与した対照群
を設けた。最終投薬日の２日後、ラットをウレタン
（１．２５ｇ／ｋｇ，腹腔内投与）で麻酔した。下腹部
切開を施し、尿道に沿って恥骨結合部を切開した。膀胱
頂部より生理的食塩水を満たしたカニューレ（ポリエチ
レンチューブＮｏ．５，ヒビキ社製）を挿入し、先端部
を前立腺部尿道に位置するよう留置した。さらに、膀胱
頸部および遠位尿道部を結紮した。尿道内圧はカニュー
レ後端に接続した圧力トランスデューサー（ＤＴ−Ｘ
Ｘ，オメダ株式会社製）および変換器増幅ユニット（１
８２９，日本電気三栄株式会社製）を介して測定し、レ
コーダー（ＲＥＣＴＩ−ＨＯＲＩＺ−８Ｋ又はＲＴ−３
２００Ｎ，日本電気三栄株式会社製）上に記録した。尿
道内圧上昇は、塩酸フェニレフリン（３０μｇ／ｋｇ）
を左大腿部静脈よりシリンジポンプ（Ｍｏｄｅｌ １０
０，室町機械株式会社製）を用いて３６ｍｌ／ｈｒの速
度で注入する事により惹起した。
シンを０．５％メチルセルロース水溶液に懸濁または溶
解し、各３００μｇ／ｋｇの用量で２８日間連続経口投
与した。また、それぞれの被験薬物投与群（ＫＭＤ−３
２１３連続投与群，プラゾシン連続投与群）に対して
０．５％メチルセルロース水溶液のみを投与した対照群
を設けた。最終投薬日の２日後、ラットをウレタン
（１．２５ｇ／ｋｇ，腹腔内投与）で麻酔した。下腹部
切開を施し、尿道に沿って恥骨結合部を切開した。膀胱
頂部より生理的食塩水を満たしたカニューレ（ポリエチ
レンチューブＮｏ．５，ヒビキ社製）を挿入し、先端部
を前立腺部尿道に位置するよう留置した。さらに、膀胱
頸部および遠位尿道部を結紮した。尿道内圧はカニュー
レ後端に接続した圧力トランスデューサー（ＤＴ−Ｘ
Ｘ，オメダ株式会社製）および変換器増幅ユニット（１
８２９，日本電気三栄株式会社製）を介して測定し、レ
コーダー（ＲＥＣＴＩ−ＨＯＲＩＺ−８Ｋ又はＲＴ−３
２００Ｎ，日本電気三栄株式会社製）上に記録した。尿
道内圧上昇は、塩酸フェニレフリン（３０μｇ／ｋｇ）
を左大腿部静脈よりシリンジポンプ（Ｍｏｄｅｌ １０
０，室町機械株式会社製）を用いて３６ｍｌ／ｈｒの速
度で注入する事により惹起した。
【００４２】ＫＭＤ−３２１３連続投与群では静脈内投
与のＫＭＤ−３２１３の尿道内圧上昇抑制作用、プラゾ
シン連続投与群では静脈内投与の塩酸プラゾシンの尿道
内圧上昇抑制作用を検討した。被験薬物を右大腿静脈よ
り用量増加法により１時間ごとに投与（ＫＭＤ−３２１
３：０．３，１，３および１０μｇ／ｋｇ；塩酸プラゾ
シン：１，３，１０および３０μｇ／ｋｇ）し、各用量
投与５分後に尿道内圧上昇を惹起して被験薬物投与前の
尿道内圧上昇値と比較した。これより、各投与用量の尿
道内圧上昇抑制率を算出し、その用量−抑制曲線よりＩ
Ｄ50値（被験薬物投与前の尿道内圧上昇反応を５０％抑
制する被験薬物の投与用量）を算出して、それぞれの対
照群におけるＩＤ50値と比較した。尚、ＫＭＤ−３２１
３連続投与群およびその対照群はＫＭＤ−３２１３二臭
化水素酸塩を乳酸リンゲル液に溶解して静脈内投与し、
プラゾシン連続投与群およびその対照群は塩酸プラゾシ
ンを生理食塩水に溶解して静脈内投与した。
与のＫＭＤ−３２１３の尿道内圧上昇抑制作用、プラゾ
シン連続投与群では静脈内投与の塩酸プラゾシンの尿道
内圧上昇抑制作用を検討した。被験薬物を右大腿静脈よ
り用量増加法により１時間ごとに投与（ＫＭＤ−３２１
３：０．３，１，３および１０μｇ／ｋｇ；塩酸プラゾ
シン：１，３，１０および３０μｇ／ｋｇ）し、各用量
投与５分後に尿道内圧上昇を惹起して被験薬物投与前の
尿道内圧上昇値と比較した。これより、各投与用量の尿
道内圧上昇抑制率を算出し、その用量−抑制曲線よりＩ
Ｄ50値（被験薬物投与前の尿道内圧上昇反応を５０％抑
制する被験薬物の投与用量）を算出して、それぞれの対
照群におけるＩＤ50値と比較した。尚、ＫＭＤ−３２１
３連続投与群およびその対照群はＫＭＤ−３２１３二臭
化水素酸塩を乳酸リンゲル液に溶解して静脈内投与し、
プラゾシン連続投与群およびその対照群は塩酸プラゾシ
ンを生理食塩水に溶解して静脈内投与した。
【００４３】結果 α1A−ＡＲに対するニュートラルアンタゴニストである
ＫＭＤ−３２１３連続投与群のＩＤ50値は対照群に比し
増加は示さなかった。一方、α1A−ＡＲに対するインバ
ースアゴニストであるプラゾシン連続投与群では対照群
に比し約１．７倍の高値を示した。
ＫＭＤ−３２１３連続投与群のＩＤ50値は対照群に比し
増加は示さなかった。一方、α1A−ＡＲに対するインバ
ースアゴニストであるプラゾシン連続投与群では対照群
に比し約１．７倍の高値を示した。
【００４４】
【表１】
【００４５】試験例３ ラット心臓のα1A−ＡＲ発現に対するα1 −ＡＲアンタ
ゴニストの影響 目的 ラット心臓におけるα1A−ＡＲ発現量に対する塩酸プラ
ゾシンおよびＫＭＤ−３２１３投与の影響を被験薬物非
投与群と２週間連続投与群で比較検討した。
ゴニストの影響 目的 ラット心臓におけるα1A−ＡＲ発現量に対する塩酸プラ
ゾシンおよびＫＭＤ−３２１３投与の影響を被験薬物非
投与群と２週間連続投与群で比較検討した。
【００４６】方法 Ｗｉｓｔａｒ系雄性ラット（７週齢）に各被験薬物２ｍ
ｇ／ｋｇを１４日間腹腔内投与した。投与終了から２４
時間後、心臓を摘出し、ｂｕｆｆｅｒ（Ｔｒｉｓ−ＨＣ
ｌ ５０ｍＭ，ＮａＣｌ １００ｍＭ，ＥＤＴＡ ２ｍ
Ｍ，ｐＨ７．４）内で細断後、Ｐｏｌｙｔｒｏｎを用い
てホモジナイズし、ガーゼでろ過した。ろ過した上清は
８００００ｘｇで３０分間遠心分離後、沈渣をＡｓｓａ
ｙ ｂｕｆｆｅｒ（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ５０ｍＭ，ＥＤ
ＴＡ １ｍＭ，ｐＨ７．４）に懸濁して再び８００００
ｘｇで３０分間遠心分離し、得られた沈渣をＡｓｓａｙ
ｂｕｆｆｅｒで再懸濁して膜分画とした。〔 3Ｈ〕−Ｋ
ＭＤ−３２１３（１０〜２０００ｐＭ）および膜分画
（２００μｇ ｐｒｏｔｅｉｎ／ｔｕｂｅ）を３０℃で
４５時間インキュベーション後、Ｃｅｌｌ ｈａｒｖｅ
ｓｔｅｒ（Ｍ−３０Ｔ，Ｂｒａｎｄｅｌ社製）を用いて
膜分画をＧＦ／Ｃフィルター（Ｗｈａｔｍａｎ社製）上
に回収し、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ ｂｕｆｆｅｒ
（ｐＨ７．４）で数回洗浄後、液体シンチレーションカ
ウンターを用いて結合量を測定した。非特異的結合は１
μＭ塩酸タムスロシン存在下での結合とした。得られた
実験結果を非線形近似プログラムＰＲＩＳＭ（登録商
標）（Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ社製）を用
いて解析し、α1A−ＡＲ数を算出した。
ｇ／ｋｇを１４日間腹腔内投与した。投与終了から２４
時間後、心臓を摘出し、ｂｕｆｆｅｒ（Ｔｒｉｓ−ＨＣ
ｌ ５０ｍＭ，ＮａＣｌ １００ｍＭ，ＥＤＴＡ ２ｍ
Ｍ，ｐＨ７．４）内で細断後、Ｐｏｌｙｔｒｏｎを用い
てホモジナイズし、ガーゼでろ過した。ろ過した上清は
８００００ｘｇで３０分間遠心分離後、沈渣をＡｓｓａ
ｙ ｂｕｆｆｅｒ（Ｔｒｉｓ−ＨＣｌ ５０ｍＭ，ＥＤ
ＴＡ １ｍＭ，ｐＨ７．４）に懸濁して再び８００００
ｘｇで３０分間遠心分離し、得られた沈渣をＡｓｓａｙ
ｂｕｆｆｅｒで再懸濁して膜分画とした。〔 3Ｈ〕−Ｋ
ＭＤ−３２１３（１０〜２０００ｐＭ）および膜分画
（２００μｇ ｐｒｏｔｅｉｎ／ｔｕｂｅ）を３０℃で
４５時間インキュベーション後、Ｃｅｌｌ ｈａｒｖｅ
ｓｔｅｒ（Ｍ−３０Ｔ，Ｂｒａｎｄｅｌ社製）を用いて
膜分画をＧＦ／Ｃフィルター（Ｗｈａｔｍａｎ社製）上
に回収し、５０ｍＭのＴｒｉｓ−ＨＣｌ ｂｕｆｆｅｒ
（ｐＨ７．４）で数回洗浄後、液体シンチレーションカ
ウンターを用いて結合量を測定した。非特異的結合は１
μＭ塩酸タムスロシン存在下での結合とした。得られた
実験結果を非線形近似プログラムＰＲＩＳＭ（登録商
標）（Ｇｒａｐｈｐａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ社製）を用
いて解析し、α1A−ＡＲ数を算出した。
【００４７】結果 塩酸プラゾシン２週間連続投与はラット心臓におけるα
1A−ＡＲ数を１．７倍に増加させたのに対し、ＫＭＤ−
３２１３連続投与はα1A−ＡＲ数に影響を与えなかっ
た。
1A−ＡＲ数を１．７倍に増加させたのに対し、ＫＭＤ−
３２１３連続投与はα1A−ＡＲ数に影響を与えなかっ
た。
【００４８】
【表２】
【００４９】試験例４ 単回投与毒性試験 方法 １群当たり５週齢のＳＤ系ラット、雌雄各５匹を用い、
それぞれに４００、８００および１６００ｍｇ／ｋｇを
単回経口投与した後、１４日間観察した。
それぞれに４００、８００および１６００ｍｇ／ｋｇを
単回経口投与した後、１４日間観察した。
【００５０】結果 死亡率は、雌雄とも４００ｍｇ／ｋｇ投与群で５例中
０、８００ｍｇ／ｋｇ投与群で５例中３例、１６００ｍ
ｇ／ｋｇ投与群で５例中４例であり、５０％致死量（Ｌ
Ｄ50）は雌雄とも８７８ｍｇ／ｋｇ、最小致死量は雌雄
とも８００ｍｇ／ｋｇであった。
０、８００ｍｇ／ｋｇ投与群で５例中３例、１６００ｍ
ｇ／ｋｇ投与群で５例中４例であり、５０％致死量（Ｌ
Ｄ50）は雌雄とも８７８ｍｇ／ｋｇ、最小致死量は雌雄
とも８００ｍｇ／ｋｇであった。
【００５１】処方例 以下に処方例の１例として、活性成分としてＫＭＤ─３
２１３を含有させたカプセル製剤の１処方例を示す。
２１３を含有させたカプセル製剤の１処方例を示す。
【００５２】 ＫＭＤ−３２１３ １．０ｍｇ含有カプセル製剤 処方 ＫＭＤ−３２１３ １．０ｇ Ｄ−マンニトール ４６．０ｇ コーンスターチ ２．５ｇ ステアリン酸マグネシウム ０．５ｇ ───────────────────────── 合計 ５０．０ｇ 以上をよく混和し、１カプセル中ＫＭＤ−３２１３を
１．０ｍｇ含有するように充填し、ＫＭＤ−３２１３の
１．０ｍｇ含有カプセル製剤を製する。
１．０ｍｇ含有するように充填し、ＫＭＤ−３２１３の
１．０ｍｇ含有カプセル製剤を製する。
【図１】α1A−ＡＲ（変異体および野生型）発現ＣＨＯ
細胞の薬物非処置群およびα1A−ＡＲ変異体発現細胞の
各被験薬物投与群（単独または併用）における細胞内Ｉ
Ｐ3 量を示したグラフである。縦軸は細胞内ＩＰ3 量
（ｐｍｏｌ／１０6 細胞）を示す。横軸は使用したα1A
−ＡＲおよび使用薬物の種類を示す。
細胞の薬物非処置群およびα1A−ＡＲ変異体発現細胞の
各被験薬物投与群（単独または併用）における細胞内Ｉ
Ｐ3 量を示したグラフである。縦軸は細胞内ＩＰ3 量
（ｐｍｏｌ／１０6 細胞）を示す。横軸は使用したα1A
−ＡＲおよび使用薬物の種類を示す。
【図２】α1A−ＡＲ変異体発現ＣＨＯ細胞における受容
体発現量に対する各被験薬物の濃度−反応曲線を示した
グラフである。縦軸は薬物非処置時の受容体数を１００
％とした場合の薬物処置後のα1A−ＡＲ数の変化（％）
を示す。横軸は被験薬物処置濃度（Ｌｏｇ〔Ｍ〕）を示
す。尚、−○−は塩酸プラゾシンを示し、−●−はＫＭ
Ｄ−３２１３を示す。
体発現量に対する各被験薬物の濃度−反応曲線を示した
グラフである。縦軸は薬物非処置時の受容体数を１００
％とした場合の薬物処置後のα1A−ＡＲ数の変化（％）
を示す。横軸は被験薬物処置濃度（Ｌｏｇ〔Ｍ〕）を示
す。尚、−○−は塩酸プラゾシンを示し、−●−はＫＭ
Ｄ−３２１３を示す。
フロントページの続き (51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ テーマコート゛(参考） Ｃ１２Ｎ 15/09 Ｃ１２Ｎ 15/00 Ａ (72)発明者 秋山 克良 長野県南安曇郡穂高町大字穂高1090−２ Ｆターム(参考） 4B024 AA01 AA11 BA63 CA04 DA02 EA04 GA13 GA18 HA01 4C086 AA01 AA02 BC10 MA01 MA04 NA05 NA06 NA14 ZA81 ZC42 ZC78 4C204 BB01 CB03 DB01 EB01 FB17 GB13 GB22 4H045 AA10 AA30 CA44 DA50 EA26 EA50 FA72 FA74 GA15
Claims (4)
- 【請求項１】ヒトα1Aアドレナリン受容体において第２
７１アミノ酸のアラニンをスレオニンに置換したα1Aア
ドレナリン受容体の変異体。 - 【請求項２】請求項１記載のα1Aアドレナリン受容体の
変異体を用いたα1Aアドレナリン受容体アンタゴニスト
のインバースアゴニスト活性の測定方法。 - 【請求項３】請求項２記載の測定方法においてインバー
スアゴニスト活性を示さないα1Aアドレナリン受容体ア
ンタゴニストを有効成分として含有する前立腺肥大に伴
う排尿困難症治療剤。 - 【請求項４】α1Aアドレナリン受容体アンタゴニストが
（−）−（Ｒ）−１−（３−ヒドロキシプロピル）−５
−〔２−〔〔２−〔２−（２，２，２−トリフルオロエ
トキシ）フェノキシ〕エチル〕アミノ〕プロピル〕イン
ドリン−７−カルボキサミドまたはその薬理学的に許容
される塩である請求項３記載の前立腺肥大に伴う排尿困
難症治療剤。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP05116399A JP4324266B2 (ja) | 1999-02-26 | 1999-02-26 | α１Ａアドレナリン受容体の変異体、当該変異体を用いた測定方法及び前立腺肥大に伴う排尿困難症治療剤 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP05116399A JP4324266B2 (ja) | 1999-02-26 | 1999-02-26 | α１Ａアドレナリン受容体の変異体、当該変異体を用いた測定方法及び前立腺肥大に伴う排尿困難症治療剤 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JP2000247998A true JP2000247998A (ja) | 2000-09-12 |
| JP4324266B2 JP4324266B2 (ja) | 2009-09-02 |
Family
ID=12879168
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP05116399A Expired - Lifetime JP4324266B2 (ja) | 1999-02-26 | 1999-02-26 | α１Ａアドレナリン受容体の変異体、当該変異体を用いた測定方法及び前立腺肥大に伴う排尿困難症治療剤 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP4324266B2 (ja) |
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002062389A1 (fr) * | 2001-02-08 | 2002-08-15 | Ono Pharmaceutical Co., Ltd. | Remedes pour des maladies urinaires contenant des agents de regulation du recepteur de lpa |
| JP2002265444A (ja) * | 2001-03-08 | 2002-09-18 | Kissei Pharmaceut Co Ltd | １−（３−ベンジルオキシプロピル）−５−（２−置換プロピル）インドリン誘導体およびその使用方法 |
| WO2003006061A1 (fr) * | 2001-07-13 | 2003-01-23 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | Compositions de medicaments pour usage ophtalmologique |
| WO2004022538A1 (ja) * | 2002-09-06 | 2004-03-18 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | 経口用固形医薬用結晶およびそれを含む排尿障害治療用経口用固形医薬 |
| WO2004054574A1 (ja) * | 2002-12-16 | 2004-07-01 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | 経口固形医薬 |
| WO2005085195A1 (ja) | 2004-03-05 | 2005-09-15 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | 神経障害に伴う過活動膀胱の予防または治療用医薬組成物 |
| WO2006038611A1 (ja) * | 2004-10-05 | 2006-04-13 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | 下部尿路閉塞疾患に伴う蓄尿障害の予防及び／又は治療剤 |
| WO2007060974A1 (ja) * | 2005-11-24 | 2007-05-31 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | 尿管結石症の治療用医薬 |
| JP2008044960A (ja) * | 2002-12-16 | 2008-02-28 | Kissei Pharmaceut Co Ltd | 経口固形医薬 |
| JP2013504563A (ja) * | 2009-09-12 | 2013-02-07 | サンド・アクチエンゲゼルシヤフト | インドリン誘導体の調製方法およびこれらの中間体 |
| US10457668B2 (en) | 2015-09-23 | 2019-10-29 | Biocon Limited | Crystalline forms of posaconazole intermediate and process for the preparation of amorphous posaconazole |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2595607A2 (de) * | 2010-07-23 | 2013-05-29 | Ratiopharm GmbH | Arzneimittel zur oralen verabreichung umfassend ein gemisch aus silodosin und einem basischen copolymer |
-
1999
- 1999-02-26 JP JP05116399A patent/JP4324266B2/ja not_active Expired - Lifetime
Cited By (30)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2002062389A1 (fr) * | 2001-02-08 | 2002-08-15 | Ono Pharmaceutical Co., Ltd. | Remedes pour des maladies urinaires contenant des agents de regulation du recepteur de lpa |
| US7288558B2 (en) | 2001-02-08 | 2007-10-30 | Ono Pharmaceuticals Co., Ltd. | Pharmaceutical composition for treatment for urinary diseases comprising LPA receptor regulator |
| JP2002265444A (ja) * | 2001-03-08 | 2002-09-18 | Kissei Pharmaceut Co Ltd | １−（３−ベンジルオキシプロピル）−５−（２−置換プロピル）インドリン誘導体およびその使用方法 |
| WO2003006061A1 (fr) * | 2001-07-13 | 2003-01-23 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | Compositions de medicaments pour usage ophtalmologique |
| CN1321111C (zh) * | 2002-09-06 | 2007-06-13 | 橘生药品工业株式会社 | 口服固体药用晶体及治疗排尿困难的包含它的口服固体药 |
| WO2004022538A1 (ja) * | 2002-09-06 | 2004-03-18 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | 経口用固形医薬用結晶およびそれを含む排尿障害治療用経口用固形医薬 |
| HRP20050214B1 (hr) * | 2002-09-06 | 2013-09-30 | Kissei Pharmaceutical Co.Ltd. | Opis kristala za oralni äśvrsti lijek i oralni äśvrsti lijek za tretiranje disurije koji sadržava isti |
| JPWO2004022538A1 (ja) * | 2002-09-06 | 2005-12-22 | キッセイ薬品工業株式会社 | 経口用固形医薬用結晶およびそれを含む排尿障害治療用経口用固形医薬 |
| JP4532274B2 (ja) * | 2002-09-06 | 2010-08-25 | キッセイ薬品工業株式会社 | 経口用固形医薬用結晶およびそれを含む排尿障害治療用経口用固形医薬 |
| AU2003264385B2 (en) * | 2002-09-06 | 2009-12-17 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | Crystal for oral solid drug and oral solid drug for dysuria treatment containing the same |
| EP2402010A1 (en) * | 2002-12-16 | 2012-01-04 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | Solid drug for oral use |
| KR101072909B1 (ko) * | 2002-12-16 | 2011-10-17 | 깃세이 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 | 경구고형의약 |
| CN100339078C (zh) * | 2002-12-16 | 2007-09-26 | 橘生药品工业株式会社 | 固体口服剂型药物 |
| EA008196B1 (ru) * | 2002-12-16 | 2007-04-27 | Киссеи Фармасьютикал Ко., Лтд. | Твердая лекарственная форма для перорального применения |
| JP2008044960A (ja) * | 2002-12-16 | 2008-02-28 | Kissei Pharmaceut Co Ltd | 経口固形医薬 |
| JPWO2004054574A1 (ja) * | 2002-12-16 | 2006-04-20 | キッセイ薬品工業株式会社 | 経口固形医薬 |
| HRP20050544B1 (hr) * | 2002-12-16 | 2017-12-01 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | Čvrsti oblik za oralnu upotrebu |
| EP1574215B1 (en) | 2002-12-16 | 2015-07-15 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | Solid drug for oral use |
| JP4633469B2 (ja) * | 2002-12-16 | 2011-02-16 | キッセイ薬品工業株式会社 | 経口固形医薬 |
| WO2004054574A1 (ja) * | 2002-12-16 | 2004-07-01 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | 経口固形医薬 |
| KR101077061B1 (ko) * | 2002-12-16 | 2011-10-26 | 깃세이 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 | 경구고형의약 |
| WO2005085195A1 (ja) | 2004-03-05 | 2005-09-15 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | 神経障害に伴う過活動膀胱の予防または治療用医薬組成物 |
| JP5004215B2 (ja) * | 2004-03-05 | 2012-08-22 | キッセイ薬品工業株式会社 | 神経障害に伴う過活動膀胱の予防または治療用医薬組成物 |
| WO2006038611A1 (ja) * | 2004-10-05 | 2006-04-13 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | 下部尿路閉塞疾患に伴う蓄尿障害の予防及び／又は治療剤 |
| KR100965205B1 (ko) | 2004-10-05 | 2010-06-24 | 깃세이 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 | 하부요로 폐색 질환에 따른 축뇨장해의 예방 및/또는치료제 |
| EA016008B1 (ru) * | 2005-11-24 | 2012-01-30 | Киссеи Фармасьютикал Ко., Лтд. | Применение силодозина для лечения уретеролитиаза |
| WO2007060974A1 (ja) * | 2005-11-24 | 2007-05-31 | Kissei Pharmaceutical Co., Ltd. | 尿管結石症の治療用医薬 |
| JP2013504563A (ja) * | 2009-09-12 | 2013-02-07 | サンド・アクチエンゲゼルシヤフト | インドリン誘導体の調製方法およびこれらの中間体 |
| US10457668B2 (en) | 2015-09-23 | 2019-10-29 | Biocon Limited | Crystalline forms of posaconazole intermediate and process for the preparation of amorphous posaconazole |
| US10927102B2 (en) | 2015-09-23 | 2021-02-23 | Biocon Limited | Crystalline forms of posaconazole intermediate and process for the preparation of amorphous posaconazole |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP4324266B2 (ja) | 2009-09-02 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Roehrborn et al. | α1-Adrenergic receptors and their inhibitors in lower urinary tract symptoms and benign prostatic hyperplasia | |
| WO2000016798A1 (en) | Use of non-peptidyl compounds for the treatment of insulin related ailments | |
| JP2000247998A (ja) | α１Ａアドレナリン受容体の変異体、当該変異体を用いた測定方法及び前立腺肥大に伴う排尿困難症治療剤 | |
| JPH09505809A (ja) | ヒドロキシカルバゾール化合物類による平滑筋移動および増殖の阻害 | |
| JP2002526117A (ja) | 細胞外新規ｒａｇｅ結合タンパク質（ｅｎ−ｒａｇｅ）及びその使用 | |
| US11963949B2 (en) | Method for treating obesity, diabetes, cardiovascular and kidney diseases by regulating GPR30/GPER activity | |
| JP2013545792A (ja) | 眼疾患の処置および防止方法 | |
| RU2139053C1 (ru) | Способ повышения мочеотделения у человека | |
| CZ120498A3 (cs) | Použití imidazolového derivátu a farmaceutický přípravek ho obsahující | |
| WO2019038361A1 (en) | MEDICAMENTS FOR THE TREATMENT OF DISEASES OR DISORDERS RELATED TO VASOCONSTRICTION | |
| EP1244693B1 (en) | Compositions for treating abnormalities in glomerular filtration, patent ductus arteriosus and osteoporosis | |
| KR20030016222A (ko) | 수술후 스트레스 예방ㆍ치료제 | |
| CZ59199A3 (cs) | Způsob pro inhibici exprese Fas | |
| Liu et al. | Macrophage depletion improves endothelial insulin resistance and protects against cardiovascular injury in salt-sensitive hypertension | |
| US6933272B1 (en) | Use of non-peptidyl compounds for the treatment of insulin related ailments | |
| TW200530218A (en) | Drug for inhibiting vascular intimal hyperplasia | |
| US11730741B2 (en) | 6-chromanol derivatives for use as a medicament | |
| JP2021504494A (ja) | アデノシン誘導体を含む網膜疾患または視神経疾患の予防及び治療用薬学的組成物 | |
| JP5424960B2 (ja) | Ｃｃｒ２ｂまたはｃｃｒ５とフロントタンパク質との相互作用の阻害剤 | |
| JP2009196932A (ja) | ヒスタミンＨ４受容体拮抗作用を有するピラゾロ［３，４−ｂ］ピリジンアミド化合物 | |
| WO2000037082A1 (en) | Use of 5-ht7 receptor antagonists for treating neuronal degeneration resulting from ischemic events | |
| JP2023542730A (ja) | スフィンゴシン－１－リン酸受容体アゴニストの使用 | |
| JP2010024219A (ja) | 視神経障害治療剤 | |
| WO2021028346A1 (en) | Tshr ligand binding domain and methods using said domain | |
| EP1415666A1 (en) | Medicinal compositions for opthalmic use |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20051209 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20080930 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20081127 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20090317 |
|
| A521 | Written amendment |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20090327 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20090602 |
|
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20090608 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120612 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120612 Year of fee payment: 3 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130612 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130612 Year of fee payment: 4 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20140612 Year of fee payment: 5 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
| EXPY | Cancellation because of completion of term |