HU228831B1

HU228831B1 - Substituted bisindolylmaleimides, their use and pharmaceutical compositions containing them

Info

Publication number: HU228831B1
Application number: HU0101258A
Authority: HU
Inventors: Urvashi Hooda Dhingra; Donna Mary Huryn; June Ke; Giuseppe Weber
Original assignee: Hoffmann La Roche
Priority date: 1998-03-17
Filing date: 1999-03-10
Publication date: 2013-05-28
Also published as: PL195323B1; SA99191295B1; ZA992072B; CN1293671A; NO20004579L; MY121046A; RS49965B; PE20000340A1; CA2322689A1; IL138247A; PL342964A1; AR018162A1; CN1127500C; CO5070675A1; WO1999047518A1; KR20010041995A; AU3409999A; HRP20000585B1; ATE243693T1; HRP20000585A2

Description

(57) Kivonat

Az (I) általános képletű helyettesített pirrolok (mely képletben

R¹ jelentése hidrogénatom és R² jelentése metilcsoport; vagy

R¹ jelentése metilcsoport és R² jelentése hidrogénatom; vagy

R¹ jelentése hidroxi-metil-csoport és R² jelentése metilcsoport) és gyógyászatilag alkalmas sóik a rák kezelésénél felhasználható burjánzásgátló hatóanyagok.

fc ·*·

alapjául

VÁi;rO2AT

iíHelyettesített hisz~indolil~maleimidek_f alkalmazásuk,- és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények ♦ «·¥'. ♦ φ φ β * φ φ φ»«« *φ*« φ * * φ'

Találmányunk il·) általános képletű helyettesített pirtolokra (mely képletben.

port) és gyógyászatilag alkalmas sóikra vonatkozik.

Az (I) általános képletű vegyületek búrjánzásgátlé hatással rendelkeznek, közelebbről a. sejtciklus G2/M .fázisának sejtosztódását gátolják és általában G2/M fázis sejtciklus” inhibitoroknak nevetik Őket.

Az (1) általános képletű vegyületek az 5 05? €.14 sz. USA szabadalmi leírás (I) általános képlete alá esnek, azonban a találmány szerinti vegyületeket az említett USA szabadalmi leírásban sem mint csoportot, sem mint egyedi vegyületeket nem ismertették. Ezenkívül az (1) általános képletű vegyületek fenti hatása 32 5 057 Síé sz. USA szabadalmi leírásból nem vált ismertté vagy kézenfekvővé és ezért meglepő,

Az (1) általános képlet három vegyületet foglal magában, éspedig az (1-1), (1-2) és (1-3) képletű vegyületet.

Az (1) általános képlete vegyületeket és gyógyászatilag alkalmas sóikat az 1-3.. reakoiösémán feltüntetett módon állíthat'· . φ hí.

ν · ί”, «κ ·>

•ν' juk. elő. Az egyes vegyüietek szintézisét a.z 1-3. példában is bemutatjuk.

As (1-1) képletü vegyületet oly módon állíthatjuk elő, hogy a (3) képletü (1-metil~6~nitro-lü-indol-3-il)-oxo-aeetíl-kioridc-t a (7/ képletü ii~í2:,2~öimetíX-propíonil)-lH-indol-3-il}~3~

-ei án ~ imíds av~l-met ί X ~ et ΐI-é s zt er-h i drok lóri dda 1 re aga 1 tat j uk., és a reakciőterméket bázissal kezeljük.

Az (1-2) képlete, vegyületet oly módon állíthatjuk elő, hogy a. (17) képletü (.1-metil - IH - indol-3-11) -oxo-aoetí 1-kloridot a (19) képletü (2,2-dimetil-propioníl) -S~nitro~TH-indol~3-Íl] -3-etán.- imidsav- 1.-metil - etil - észter-hidrokl óráddal reagáltatjuk, és a reakciőterméket bázissal kezeljük.

Az (1-3) képletü vegyületet oly módon állíthatjuk elő, hogy a (lö) képletü [1-(metoxi-metil)-lH~indol~3-íl)-oxo-acetil-kloridot a (15) képletü (l~metíl~&-nitro~Ih~indol~3~ii)-3-etán-ímídsav~l~metil~etil-észter-hidrokXoríddal reagáltatjuk és a reakoióterméket savval beteljük.

A találmány szerinti vegyüietek burjánzáséilenes hatását az alábbi tesztekkel igazoljuk. Az adatokból. látható, hogy a találmány szerinti vegyüietek rák - különösen szolid tumorok - kezelésénél ha t e kony a k.

Az ősztrogén receptor negatív hám emlő karcinoma vonalat (MDA-MS~43^:5> az American Type Celi Cuiture Collectlon (ATCC; Rockville, dD) intézménytől szereztük be és az ATCC által javasolt táptalajon tenyésztjük. Vizsgáljuk a teszt-vegyüietek hatását a fentemlitett sejtek növekedésére. A teszt során a sejteket 96-mélyedéses s z öve tt enyészet lemezben (^!! teszt-lemez¹¹) mé<>

iyedésenként 2000 sejt koncentrációban szőlésztjük és 37 C~on • ·>

% szén-díoxiddal egy éjjelen át ínkubáljuk. Másnap a teszt-vegyült teket 100 %-os dímetil-szulfoxiáhan oldjuk ée 10 mM törzsoldatot készítünk. Minden vegyületet steril desztillált vízzel 1 ítM értékre hígítunk, majd 40 μΜ végső koncentrációhoz elegendő mennyiségű táptalajt tartalmazó $0-mélyedéséé “mestér-lemez .háromszoros mélyedéseibe adjuk. A teszt-vegyül etekből a mester-lemezben” a táptalajjal sorozathígítást készítünk. A hígított vegyüíetek végsó térfogatának egynegyedét a kétszeres teszt-lemezekre* visszük át. Sgy sor kontroll sejthez dimetíl-szulfoxidot adunk olyan mennyiségben, hogy minden mélyedés dimetíl-szulfoxid koncentrációja 0,1 % legyen. A teszt-lemezeket az inkubátorba vísszavisszük és a teszt-vegyület hozzáadása után .3 nappal egy teszt-lemezt az alábbiakban ismertetésre kerülő módon megelemzönk. Hasonlóképpen a teszt-vegyület hozzáadása után 5 nappal a második teszt-lemezt az alábbiakban. leírt módon megelemezzük,

Minden mélyedéshez 1 mg/ml végső koncentrációban. 3~(4,3-dimetil-tiazol-2- il)-2,S-difenil-2H-tetrazolíum-bromidot (tiazoo

Ilikék; MTT) adunk; a lemezt 37 G-on 3 órán át ínkubáljuk. Az MTT-tartalmú táptalajt eltávolítjuk és a képződő tormásán métabolit feloldása céljából minden lemezhez 50 μΐ 100 %-os etanolt adunk. A lemezeket a teljes feloldódás biztosítása céljából szobahőmérsékleten 15 percen át rázatjuk, Az abszorpciós értékeket mikrotiter lemez számlálóban (Molecular Dynamics.) 570 nm hullámhosszon, 650 nm referencia mellett leolvassuk. A százalékos gátlást oly módon számítjuk ki, hogy valamennyi mélyedésből a vakérteket levonjuk, majd minden háromszoros teszt átlagos ab.szo.rp* »1

44 dójának a kontroll átlagával képezett hányadosát .1,00 értékből levonjuk, A gátló koncentrációkat <XC₅0 és IC_Sq) a koncentráció logaritmusa függvényében ábrázolt százalékos gátlás görbe lineáris regressziójával határozzuk meg.

Az SW480 vastagbél adenokarcínosRa vonalat és a HCT-11S vastagbél karcinőma vonalat szintén az ATCC intézménytől szereztük

be	és a fenti jegy	főkönyvnek megfelel	ően	az alábbi	módosítások-
kai	teszteljük. Az	.SW4S0 sejtveealat	10 Oi	3 sejt/mély	edés konoent
rác	lóban szélesztj	ük és a teszt-vegye	üst	hozzáadása	után S nap-
pal	elemezzük. A H	CT-116 sejtvonalat	75 Ö	sejt/melye	áé s koncént-
rác	iöban széiesztj	ük és a teszt-vegye	:let	hozzáadása	után 4 nap-

pal elemezzük. Az ATT elemzéshez a lemezeket «ζ MTT~tartalmú táptalaj leszivatása előtt percenkénti 1000 fordulat mellett 5 percen át centrifugáljuk, és a formazán feloldásához 100 μΖ 100 %-os etanolt használunk,

A fent ismertetett in vifcro tesztek eredményeit az 1--11: táblázatban tüntetjük fel.

X......zabaázat

Búrjánzásgátlő aktivitás MDA-kü-435 sejtvonalban

Burjánzásgátló aktivitás 8CT-1K se* . /υπ.« l'bc

III. táblázat

Búrjánzáscátlő aktivitás SV-4B0 sejtvonalban

.& teszt-vegyüiet elmek a sejtciklus előrehaladására kifejtett hatásának elemzése céljából MDA-MB-435 sejteket (ATCC.;

{*.

Rockvílle,, KD) 1x10 sejt./10 ml/lü éra csésze koncentrációban, az alábbi táptalajban tenyésztünk< RPMI 1040 + 10 % hővel inaktivált magzati szarvasmarha szérum, 2 mM L-g.lutamin és 50 S/ml ^SÍpenstrep^i; (valamennyi terméket a GIBCO/BRL, Gaithersburg, HD, o cégtől szereztük be) . A sejteket 3? C~on S % szén-dioxiddal egy éjjelen át inkubáljuk. Másnap valamennyi teszt-vegyüiet 100- %-os dimetiI-szultcxiddal képezett oiőatáből 10 μΐ-t az egyes csészékhez adunk, és ily módon a tőrzsoldat végső koncentrációjának I/lö00-ed részét kapjuk. Ezenkívül a kontroll csészéhez 10 μ'1

100 %-os dítne-til-szulfoxidot adunk. A dímetil-szulfoxíd végső koncentrációja valamennyi lemezben - beleértve a kontrollt is 0,1 %, A lemezeket az inkubátorba visszahelyezzük.

Ezután különböző időpontokban a táptalajt minden lemezből eltávolítjuk és 50 ml-es eentrífugaesövekbe visszük át. A csészében visszamaradó sejtréteget S ml foszfáttal puffenolt konyhasó-oldattal (ABS; GIBCO/SRL) mossuk, A PBS-t eltávolít juk és a táptalajjal megfelelő kémcsőben egyesítjük. A sejteket 37 C-on 5 percen át tripszinízáljuk, az oldatot összegyűjt jük és a táptalajjal és a PBS-el megfelelő kémcsövekben egyesítjük. A kémcsövek tartalmát percenkénti 1300 fordulat mellett 5 percen át centrifugál juk. A sejteket a felűlűs'zó eltávolításával rögzítjük, a kémcsöveket a pellet eloszlatása céljából enyhén ütógetjük, majd enyhe örvénylő mozgás kifejtése mellett 5 ml hideg o %-os etanolt adunk, A sejteket -20 C-on 24 óránál hosszabb ideig tároljuk.

A sejteket, tartalmazó kémcsöveket a hűtőszekrényből kivesszük és szobahőmérsékleten 20-30 percen át állni hagyjuk. A kémcsöveket percenkénti 3000 fordulat mellett 5 percen át centrifugáljuk. A. felülüszőt eltávolítjuk, A pelletet 5 ml PBS-el mossuk és a kémcsöveket a fentiekben leírt módon centrifugáljuk. A felülüszőt eltávolítjuk és a pelletet 0,5 mi PBS-ben újra s-zuszpendáijuk, Ezután minden kémcsőhöz 0,5 mi RNSáz A-t adunk (1 mg/ml, PBS-ben) és a kémcsöveket 37 °G-on 15 percen át inkufoáljuk, Minden kémcsőhöz 1.00 μί propidiom-· jodidot [Sigma,

St, Louis, MO) (1 mg/ml in BBS)] és a kémcsöveket szobahőmérsékleten .2-3 percen át inkubáljuk. 'Minden kapott oldatot szűrőfejen vezetünk át (Becton Dickinson, San uose, CA, #2235),

A mintákat FACSort berendezésben (Bscton-Dickinson) , a gyártó üellQUSST program felhasználásával olvassuk le és a gyártó ModFIT szoftverje segítségével elemezzük.. A mérés eredménye alapján következtetni lehet a. sejtek %-ára az alábbi fázisokban: Gö/Gl, DBS szintézis (S) és G2/M.

A sejtciklus előrehaladását, vizsgáié kísérlet eredményeit az (1-1), (1-2) és (1-3) teszt-vegyület hozzáadása után egy nappal elemezzük és az eredményeket a IV. táblázatban foglaljuk össze fiúsra

Tesz t -vegyü1et	Koncent-	Sejtek, %-a	az egyes s<	aj telkius ··
	ráció	fázisokban
		»»·, -X	c	Γ·^{: <}5 /'M
				vax» j x'i
Dimet i1-s zu1f oxid	0.1 %	43,93 %	41,08 %	14,99 %
(1-1) vegyület	0, 1 μΜ	8,27 %	25,21 %	66,52 %
: (1-1) vegyület	0,0 3 μΜ	45,30 %	34,67 %	20,03 %
(1-1) vegyület	0,01 UM	44,35 %	41,04 %	14; 00 %
(1-3) vegyület	0,3 μΜ	1,11 %	24,99 %	73,90 %
(1-2) vegyület	0,1 μΜ	15,54 %	24,06 %	60,4 0 %
(1-3) vegyület	0,03 μΜ	45,45 %	38,06' %	16,50 %
(1-2) vegyület	10 μΜ	10,41 %	32,25 %	54,34 %
(1-2) vegyület	3 μΜ	3,26 i	48,75 %	47,92 %
(1-2) vegyület	1 μΜ	27,2 2. %	30,19 %	42,60 %

Az I~IV. táblázatban összefoglalt adatok bizonyítják, hogy az (1-2.), (1-2) és (1-3) képletű vegyület búrjánzásgátlö aktivitássál rendelkezik; a teszt-vegyületek különösen a sejtciklus <32/14 szakaszában okozzák a sejtek felhalmozódását.

Találmányunk tárgya továbbá gyógyászati készítmény, amely hatóanyagként -valamely {1) általános képietü vegyületet vagy gyégyé#«eéiéetg-eáíkds®ee™eéégyégys«e5féé—fpwsetosg·).....-vagy- gyógyászatílag alkalmas sóját tartalmazza.

Az (1): általános képietü vegyületek és győgyászatilag alkalmas sóik a gyógyászatban szokásos gyógyászati, készítmények formájában .alkalmazhatók. A gyógyászati készítmények orálisan (pl. tabletták, bevonatos tabletták, drazsék, kemény- vagy lágyzselatinkapszulák, oldatok, emulziók vagy szuszpenziők), rektálisan (pl. kúpok) vagy parenterálisan (pl. injekciós oldatok) adagolhatok,

A találmány szerinti gyógyászati készítmények a hatóanyag mellett gyógyászatilag inért, szervetlen vagy szerves hordozóanyagokat tartalmaznak, A tabletták, bevonatos tabletták, drazsék és ke-ményzselatinkapszuiák készítéséhez hordozóanyagként pl. laktózt, kuko-ricakeményítőt vagy származékait, talkumot, sztearinsaVat vagy sóit stb. alkalmazhatunk.. A lágyzselatihkapszulák hordozóként pl. növényi olajokat, viaszokat, zsírokat, félszilárd vagy folyékony poi időket tartalmazhatnak; a lágyzse·· latinkapszuiák azonban - a hatóanyag jellegétől függően - általában hordozóanyag nélkül is elkészíthetők. Az oldatok vagy szirupok hordozóként pl. vizet, po-iiolokat, .szacharózt, invert cukrot vagy glükózt tartalmazhatnak. Az injekciós oldatok készítésénél hordozóként vizet, alkoholokat, poiiolokát, glicerint, növényi olajokat, foszfolipideket és felületaktív anyagokat alkalmazhatunk. A kúpok hordósként pl, természetes vagy keményített ♦ X olajokat, viaszokat, zsírokat és félfolyékony poliolokát tartalmaznak .

A találmány szerinti gyógyászati készítmények ezenkívül tartósító-,· szolubiiizálö-, stabilizáló-, nedvesítő-·, smulgeálő-, édesítőszereket , színezőanyagokat, ízesítőányagokat, az ozmózisnyomás megváltoztatására szolgáló sókat, puffereket, bevonőanyagokat vagy antioxidánsokat is tartalmazhatnak. A találmány szerinti gyógyászati készítmények, további gyógyászati hatóanyagokat is tartalmazhatnak.

Az (1) általános képietü pirrolok - mint már említettük onkológiai rendellenességek kezelésére vagy szabályozására alkalmazhatók, A hatőanyagdózis tág határokon beli változhat és természetesen mindenkor az. adott eset körülményeitől függ. Orális vagy parenterális adagolás esetén egy 70 kg test tömegű, felnőtt beteg napi dózisa általában kb. 10 mg és kb. 1.0 000 mg közötti érték, előnyösen, kb. 200 mg és kb. 5 000 mg közötti érték, különösen előnyösen kb. 1000 mg. A megadott felső határ szükség esetén túlléphető. A napi dózist egy vagy több részletben adhatjuk be, míg parenterális dózis esetén folyamatos dózist a1ka1mazhat nnk.

Találmányunk további részleteit az alábbi példákban ismertetjük, anélkül, hogy találmányunkat a példákra korlátoznánk.

* *

I. példa

Ak...........1 :ζ3οΑ1ΰ-4.-7,1.~θ^ρ11^^ηί.ΡΓΡζ1η.::.ί.η0ο1^ nlriIi.cpjxio.i..-.2^..Smiian...g;lőal.l,Xiá.aa (2) képletű l~met.il-S-nítro-lH-indol

033 g (3,3 millimől 60 %-os ásványolajos nátrium-hidrid diszperzió- 30 ml vízmentes dimetil-formamiddal képezett szusz, o penziójához lö perc alatt 0-5 C-on 0/373 g (6,0 millimől) kereskedelmi forgalomban levő (1) képletű S-nitro-IH-indóit adunk. Az elegyet ezen. a .hőmérsékelten egy órán ét keverjük, majd 0,75 ml (12,1 millimől) metil-jódidőt adunk hozzá. A reakcióelegyet ezen a hőmérsékleten. 30 percen át, majd szobahőmérsékleten egy órán keresztül keverjük, jég és víz elegyébe öntjük és etil-acetáttal extránáljuk. A szerves fázist konyhasó-oldattal mossuk, magnézium-szulfát felett szárítjuk, és bepároljuk. Sárga szilárd anyag alakjában 0,-814 g (2) képletű l-netil-S-nitrc-lH-indoit kapunk. Kitermelés 77,5 %. A terméket tisztítás nélkül használjuk fel.

Belépés (3) képi etu (l-met ί1~ € - nit ro-IH-indol-3 -i1) -oxo-acet i1-k l óríd

1,33 g (7,55 millimől) (2) képletű I-metíl-S-nitro-IH-indol és 40 ml éter oldatához 0-5 ’c-on argon-atmoszférában 1,5 ml (17.2 millimől) oxalil-kloridot. adunk. Csapadék képződik. A kiváló szilárd anyagot 3 őrás keverés után leszűrjük, kevés éterrel mossuk és szárítjuk. Sárga szilárd anyag alakjában 1,3 g (3.) képletű (1-met.il-5-nitro-IH-indol-3-11) -oxo-acetil-kloridot kapunk. Kitermelés 35 %. A terméket tisztítás nélkül használjuk fel *

€-lépés (6) képletü [1 - (2,2-dimetil-propionil)-IH-ίηάο1~3-11] -acetonítril

Az A-lépésnél ismertetett N-alkílezés szerint 10,2 g (65 millimől) kereskedelmi forgalomban levő (5) képletü (IH-índol-ΙΑ 1} -acetonitrilt 8,7 ml (71 miliimöl; fcrimetil-acetii-kloriddal és bázisként 3,4 g (85 miliimöl) 60 %-os ásványolajos nátrium-hidrid-diszperzíőval 115 mi dlmetii-iormamidban reagálhatunk. Kromatográfiás tisztítás után 6,6 g (6) képletü [1--(2,2 -dimetil ~ -propionil}-IH-índol-3-Íl]-acetonicriit kapunk, Kitermelés

38,7 %.

(7) képletü (1-(2,2-dimetil-propioní1}-IK-indol-3-iij-etán-imi.dsaν-1 -met i1-e t i1~é s zt e r-hiároklórid

6,6 g (27,5 millimől;, a C-Iépés szerint kapott (6) képletü (1-(2,2-dimetil-propionil)--lH-ináol-3-il]-aeetonítril 105 ml o

2-propan.ollai képezett szuszpenziójához G-5 C-on 20 perc alatt 40 ml (0,563 miliimöl} acetii-kioridot csepegtetünk, A reakciőelegyet szobahőmérsékleten egy éjjelen át keverjük, bepároljuk, a maradékot kb. 7.5 ml etil-acetáttai hígítjuk, 15 percen át gőzfürdőn hevítjük, lehűtjük és hűtőszekrénybe helyezzük. A kiváló csapadékot szűrjük és szárítjuk, Fehér szilárd anyag alakjában 6,0 g (7? képletü (1-(2,2-dimetil~propion.il)-1 -índoi-3-il] -étén-imidsav-i-metil-etil-észter-hidrokioridőt kapunk. Kitermelés 65,0 %.

fclápás (4) képletü 3-[1~ (2,2-dimetil-propionil)-IH-indoi-3-11] -4- (I - metil -6-nitro-l.H-indoX-3-il] -pírról-2,5-dión *♦** * :«· ♦ Φ*

1,25 g (4,69 raillimól), a δ-lépés szerint kapott (3) képletű íl-metil-6-nitro~lH~indol~3-iI) -oxo·-acetíl-klorid és 1,6 g (4,75 millimől), a D-lépés szerint kapott (7) képletű (1-(2,2-dimet! I - p rop ion i 1} - lh - indol - 3 - i 1 ] - e t án - i mi ás a v -1 - ma t i 1 - e t í 1 -észter-hidrokloríd 80 ml metilén-klórláda1 képezett oldatéhoz 0 o

C-on argon-atmoszférában 2,6 ml (18,65 millioől) trietrí-amint adunk, A reakeióelegyet ezen a hőmérsékleten 30 percen át, maid szobahőmérsékleten 3,5 órán keresztül keverjük és metilén-kloriddal hígítjuk, A szerves fázist vízzel, 0,5 n sósavval és konyhasó-oldattal mossuk, magnézium-szulfát felett szárítjuk és bepároljuk. 3,01 g hab marad vissza, amelyet 50 ml to.luol.ban olo dunk és 0 C-on 9-87,0 g (5,19 millimől] p-toluolszulfonsavat adunk hozta, A reakcióéiegyet 3 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd metilén-kloríödal extraháljuk. A szerves fázist telített .nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal és konyhasó-oldattal mossuk, magnézium-szulfát felett szárítjuk és sepároljuk, A kapott nyerst érmékét (3,9 g] sziiíkagél-oszlopon kromatografáijuk, Narancssárga szilárd anyag alakjában 1,7 g (4) képletű 3-(1-(2,2-dimetil-prppionil) - In-indol-3 - il] -4 - íl-metil-6-nitro~iH~indol-3~ilj-pirrol-2,5-diont kapunk. Kitermelés 77 %, op . : >146 (bomlás), MS.: (M ] , m/z 470 .

F- lépes (1-1.) képletű 3- (lH-indol-3-il) -4-(1 -metil-6-nitro-IH-indol-3-11}-pírról-2,5-dión

1,7 g (3,61 millimőlí, az E-lépés szerint kapott (4) képletű 3-(I- (2,2-dímetil-propionil)-IH-indol-3-ilj-4 -(l-metíl- 6-nitro-lü-indol-3 - 11}-pirrol-2,5-diont 60 mi. metanolban 5,6 ml (8,96 millimől} 1,6 mólos metanoios nátrium-metíiát-oldattal

Λ- ** Φ

Φ Φφ reagáltatunk. A reakciőelegyet szobahőmérsékleten egy órán át keverjük, 2 n sósav és jég elegyebe öntjük és éti1-acetáttal extraháljuk.. A szerves extraktumot vízmentes magnézium-szulfát.

felet	t száritjuk		bepároljuk.
vörös	szilárd an	yag	alakjában 39
dől - 3	· 11)-4 - (1 - m.	etil	L-S-nitro-ld-
púnk.	Kitermelés	2S	Avs. „ ·\Ο^:ΡΛ 0- .· ·νν · ·» ··· Λ ^{p \/

(Si	képletű 1-	(metoxi-metil)-1H-
Az	1. példa A-	lépésénél ismertet
rint	1,17 g (10	milllmól) ke.resk.ed.
t” · ’	indolt 1 ml	(.13,1 minimál) (
0,48	g (12 miIli	mól) 60 %-os ásván
Z-pSi	?zlóval mint	bázissal 22 ml di'

.reagáltatunk. Kromatográfiás tisztítás után színtelen olaj alakjában. 1,4 g (9) képleté ΐ-(metoxi-metil) - IH-indol t kapunk. Kitermelés 86,9 %.

B »♦ .1 éoét s (10) képletű Q- (metoxi-metil) - 1K-indol-3-il] -oxo-acefcil-kiorid

Az l. példa s-lépésénél ismertetett eljárás szerint 0,23 g (1,43 miIliméi), as A-lépés szerint kapott (9) képleté 1-(metoxi -metil)-1-indol 3,5 ml éterben 0,25 ml (2,S6 miIliméi) oxalil-kloriddal reagáltatunk. Sárga szilárd anyag alakjában * * * * * <, ♦ φ φ-φ

0,174 g (10) képleté. (1-(metoxi-netil)-lH-indol-3-íl] -oxo-ace· til-kioridot kapunk. Kitermelés 48,5 %. A terméket tisztítás nélkül használjuk fel.

.''“'t A _ , 'a.:

(13) képietü {0-nitro-2Π-indöl.-3-ii) -acetonitríl

44,..27 g (0,204 miilimől) (12) képietü 6-nitro-gramín

Jackson B.	Hester: J. Org.	Cm	ao,, 2 9 .	, 1158	(1964)j 450 ml ace
onítri1lel	képezett oldaté	hoz	keverés	közben	o 0-5 C-on egy óra
lett 44,59	g {0,31 mől) m.e	til·	•jodidot	adunk.	A reakcióelegyet

szobahőmérsékleten .3 órán. át keverjük, majd 20,6 g (0.543 mől) nátrium-oianíd 225 ml viszel képezett oldatét adjuk egyszerre hozzá. A reakcióelegyet 32 °C’-on egy éjjelen át keverjük, szobahőmérsékletre hűtjük és a terméket háromszor, összesen 300 ml etil-acetáttal és 3Ö0 ml vízzel extraháljuk. As egyesített extraktumokat vízzel, 1 n sósavval és telített nátrium-hidrogén-karbonét-oldattal mossuk, magnézium-szulfát felett szárítjuk és az oldószert vákuumban eltávolítjuk. A naranesbarna maradékot (41,3 g) 200 ml meleg etil-aoetátban oldjuk és kis szilikagélágyon átvezetjük. Az oldószer eltávolítása után sárga szilárd anyag alakjában 23,8 g (13) képietü (6~nítro-lü~indoi-3il)-aoetonitrilt kapunk. Kitermelés 70,4

B-lépés (14) képietü íl-metíl-6-nitro-lR~indol~3~il) -acetonítril 65,5 g (0,474 mől) porított kálium-karbonátot szobahőmérsékleten 28,9 g (0,143 mől), a ü-lépéa szerint kapott (13) képletű (S-nitro-lü-índol - 3-11)-acetonitrii 230 ml dimetil-formamiddal képezett oldatához adunk. A szuszpenziőt 40 percen át keverjük, majd 65 perc alatt 25,48 g (0,175 mól) metil-jodidot csepegte16

4* 0< « V * 0 «0 0 * * 0 0* fc»0 tünk hozzá. A reakcióeíegyet szobahőmérsékleten egy éjjelen. St keverjük, lehűtjük és összesen SCO ml vízbe öntjük. A kiváló csapadékot szűrjük, kevés vízzel mossuk és foszforsavanhidríd: felett állandó -súlyig szárítjuk. 3.0,4 g {14} képletű (l-metil-ű-nitro-IH- i.ndol~3 - il) -acetonitri it kapunk, Kitermelés 95,4 %.

A terméket további tisztítás nélkül használjuk fel.

firlépés (155 képletű {l-metil-ű-nitro-lK-indol-B-íl} -3-etán-imidsav- 1-metii·· etil --észter “hidroklorid g (0,332 mól), a D-lépés szerint kapott (14) képletű (1 -metil-S-nitro-lH-indol --3-11) --acetonitril 1000 ml 2--propanolo lal képezett oldatába 0-10 C-on keverés közben hidrogén-kiorid gázáramot vezetünk. Kh. 350 g hidrogén-kiorid bevezetése után a reakcióslégyhez csapadék képződéséig étert adunk. A szilárd anyagot összegyűjtjük, éterrel mossuk és vákuumban szárítjuk,

102 g (15; képletű (1-metil~ö--nitro-lü-indol·-3 -11) -3-etán-Ímidsav-1-metii-etil-észter-hidroklorídot kapunk. Kitermelés 85,7 %.

belépés {11} képletű 3- [1- (metoxi-meti1; -IH-índol -3-ii] -4 - {.í-metil-5-nitro-lH-í n do 1 - 3 -- i .11 - p i r r ο 1 - 2,5 - dl on

Az 1. példa E-lépésénél ismertetett eljárás szerint 1,3 g (5,17 miliimói), a B-iépés szerint kapott (10; képletű oxo-acetil-kioridot 95 ml metilén-klorídfean 1,7 g (5,45 míllimől), az E-lépés szerint kapott (15} képletű {X-metil-e-nitro-lH-indo.l-3~ ί 15 - 3 - e tán - imi dsav -1 - met i 1 -etil -és ster-hidroklóriddal kondenzálunk. Narancsszínű szilárd anyag alakjában 1,08 g (Ili képletű 3- [1- (metoxi-metii) -lH-í.ndoi~3-il] -4- (i-met.il-6-nitro~lH~indol ·.: *

1?

ο

-3-il]-pirrol-2,5-diont kapunk. Kitermelés 48,5 %. Op. : >258 C (bomlás) , MS: (M ), m/z 430.

(1-3) képietü 3- [1- (hidroxi-metil) -lH-índol-3-il] -4- (1-metil-6-nítro-XH-índol-3-il] -pirrol-2,'5-dión

727,5 mg, as F-lépés szerint kapott (11) képietü 3-(1-(metoxi -metil) - IH - indul -3 - il] -4 - (1·· metil-S-nitro-IH - indol-3 - il ) -pírról-2,5-dión 55 ml tetrahidrofuránnal képezett oldatéhoz kb, 4 0 ml 2 n sósavat adunk. A reakeiőelegyet 5 órán át visszafoiyafco hűtő alkalmazása mellett forraljuk, lehűtjük és a terméket etil~a.cetáttal extraháljuk, A szerves fázist magnézium-szulfát felett szárítjuk és az oldószert eltávolítjuk. A narancssárga szilárd maradék kromatográfiás tisztítása után vörös szilárd anyag alakjában 123,3 mg (1-3) képietü 3- [1-(hidroxi-metil)-lH-indol~3~ -il)-4-(l-metil-€~nitro-lH~indol-3-ii| -pirrol-2,5-dionfc kapunk. Gp.; 210-213 ^&C. MS; (M*) , m./z 416,

Az. Π-2) képietü 3 -(1-metll-lH-indol-3

A-lépá^

IH -indol (17) képietü (l~metil-lH-indol~3-íX) -acetil-kioríd

Az 1, példa B-Iépesénél ismertetett eljárás szerint 6 ml (47 milümól) kereskedelmi forgalomban levő (16) kápletű 1-metil -IK-indolfc 120 ml éterben 8 ml (32 millimől) oxalil-kloríddal reagáltatunk. Sárga szilárd anyag alakjában 7,5 g (17) képietü (l-metíl-IH-indol-3-il)-aoetil-kioridot kapunk. Kitermelés 73,2 %. A terméket tisztítás nélkül használjuk fel.

» φ φ φφΑ * ♦ ♦ k « φ « y * ·».♦♦ » * ΜΧ (1.8) képletű [1- ;2,2-dímetil-propíonil) -6-nítro-IH-indol--3--11j-acetonitril

As 1. példa A-lépésénél ismertetett N-alkilezési eljárás szerint 346,6 mg (1,72 millímől), a 2. példa C-lépése szerint kapott (13) képleté 6-nítro-lH-índolii-3-aeetonitrilt 0,3 ml (2,44 millimoi) trímetí1-acetil-kloriddal és 70,8 g (1,77 millímől) 60 %-os ásványolajos nátrium-hidrád diszperzióval mint bázissal S mi dimetil-formamídban reagáltatunk- Sárga olaj alakjában 287,7 mg (18) képletű [1-(2,2-dimetiI-propíonil) -~6-nitro-1H-indol-3-il]-aoetondtríIt kapunk. Kitermelés 43,2 %.

áiuLébUS (19) képletű [1- (2,2.-d-ímetíi-propionil)-6-nitro-IH-índol -3 -i1]-3 - et án- imidsav-1-met il-etil-észter-hidroklórid

1,45 g (5,08 miilimdi), a B-lépés szerint kapott (18) képletű [1-(.2,2-dimetii-propionil.~S-n±tro~lH~ináoi~3-íl]-ace.tonitrí'l 90 ml 2-propanollal képezett -oldatába 0-5 C-on hidrogén-klorid gázáramét vezetünk. A reakciőelegyet szobahőmérsékleten 21 érán át keverjük- Az oldószert vákuasűzan eltávolítjuk. Sárga szilárd anyag alakjában 1,95 g (19) képletű (l-(2,2--dimetil-propioni!)- 6-nitro-IH-indcl- 3-ill-3 -etán-imidsav-1-metil-etil-észter-hidrokloridot kapunk. Kitermelés 100 %. A terméket további tisztítás nélkül használjuk fel.

D-lépés (20) képletű 3- [1-(2,2-dimetíl-propíonil)~6-nitro-lK-indol-3-iij -4-(1-metil-IH-índol-3-il)-pirrol-2,5-díon

Az 1. példa B-lépésénél ismertetett eljárás szerint 1,1 g (4,96 míliimől), az A-lépés szerint kapott (17) képletű oxo-ace19

Μ*

Μ·μ-> φφφφ til-kloridot 1,95 g (5,08 millimol) , ά C-lépés szerint kapott (19) képletü H-(2,2-dimetil-propioníl) S-nícro-lH-indol-S-il]~ 3-étén-ímidsav-1-metál-etil-észter-hiároklcríddal és 2,1 mi (17,94 miiiáméi) tráetil-aminnal 1.20 ml metii én.-kioridban reagáltatunk, A kapott terméket 80 mi toluoiban 1,1 g (5,78 miülmöl) p~toluolssulfonsawal reagáltatjuk, Narancsszínű szilárd anyag alakjában 1,3 g (20) képletü 2- fi- (2,2-d.imetI.l-pxopionil) ·

- 6 - nitro - IH - indol -- 3 -· i 1 ] - 4 - (1 - met il - IH-indol - 3 - i 1) -pi rx cl -2,5 -diont kapunk. Kitermelés 82,1 %. Op,; >245 '0 (bomlás), KS:

(hf) , m/z 4 7 0 .

Pal.Pl:é.3, (1-2) képietű 3- (i-metil-lH-indoI-3-íi) -4- (6-nitro~IH-indol-3-ál) -pirrol-2,5-dión.

Az 1. példa F-lépésénél ismertetett N-védocsoport eltávolítasi eljárás szerint 1,3 g (2,76 miiiimói), a D-lépés szerint kapott (20) képietű 3-fi-(2,2-dimet11-propioni1} --íS -nitro-lH-índol-3-il]-4-(1-metíl-lH-indol-3-il)-pirrol-2,5-diont 4,3 ml (5,88 miilimől) 85 ml 1,8 mólos metanolom nátrium-metálát-oldat tál reagáltatunk, Stil-aoetátbol és hexánból történő kristályosítás után vörös szilárd anyag alakjában .2 00.,5 mg (1-3) képletü 3- (1-metál-lH-in.dol-3 - ÍI) -4- (6-nitro-IK-· indol-3-íl) -pírroi-2,5- diont. kapunk. Kitermelés 28,1 %. Op,: >280 'C. MS: (M), m/z

388.

iübletták...kés.aitéaé

Alábbi össstételű tablettákat készítünk:

.fc- Μ * ’Φν.

Sorszám	Komponens	Mennyiség, mg/'tabletta
1.	A-vegyület*	5	25	100	250	500	750
2 .	Vízmentes laktőz	103	83	35	19	.3 5	57
3 .	Kroszkarmellőz-nátrium	6	6	8	16	32	48
4 .	Povidone K30	s	5	6	12	24	36 ;
5.	Magnéziura-sz teafát	1	1	1	3	6	9
	Ossztömeg	120	120	150	3 00	600	900

* ~ Az A-vegyűlet valamely találmány szerinti vegyület Gyártás.l.^liaras

1. As l.₍ 2, és 3, sz. komponenst megfelelő keverőberendazésben 3.5 percen át keverjük.

2. As 1. lépésnél kapott porkeveréket 20 %-os Povidone K30 oldattal (4.. sz. komponens) granuláljuk.

c

3. A 2. lépésnél kapott granulátumot 50 C-on -szárítjuk..

4. A 3. lépésnél kapott granulátumot megfelelő őrlőberendezésen átvezetjük.

5. A 4. lépésnél kapott őrölt granulátumhoz az 5. sz. komponenst hozzáadjuk, és 3 percen át keverjük,

6. Az 5, lépésnél kapott granulátumot megfelelő berendezésben préseljük.

kjÁiÜS ^P§.aiIák..kéea,í,tébS

Alábbi összetételű kapszulákat készítünk:

Sorszám	Komponens	Mennyiség, mg/'kapszula
1,	A-vegyület*	5	25	100	250 500
·-> á. .	Vízmentes laktóz	155	12.3	148
2 .	Kuko r icakeményítő	25	35	40	35 70
4 .	Talkum	10	15	10	12 24
5,	Magnéz i um-szteará t	1	2	2	3 δ
	Te1jes töltőtömeg	200	200	300	300 ÜGO

* ~ Az A-vegyület valamely találmány szerinti vegyület

1. Az I., 2. és 3. sz. komponenst megfelelő ke ver őberende zésben 15 percen át keverjük.

2. A 4. és 5. sz. komponenst hozzáadjuk és 3 percen át keverjük,

3. A keveréket megfelelő kapszulákba töltjük.

%„...föélds .DH.úkeias...el.deAZ^mAlzi.4JsÉ^gllláiae Alábbi összetételű készítményt állítunk elő.:

Sorszám

Komponens

Menny i s ég, mg/ ml

1.

A-vegyület* mg

2.

P.EG 4 00

10-50 mg .

Leeitin

G ·· 5 0 mg .

Szójaolaj

1-5 mg

5.

Glicerin

Claims

3-12 mg ,

Víz q.s.

ml * - Az A···vegyület valamely találmány szerinti vegyület ♦ ·* »' ♦ A »♦« gyártási eljárás:

1. Az 1. sz, komponenst a 2, sz. komponensben oldjuk.
2. A 3., 4. és 5, sz, komponenst a S. sz. komponenshez adjuk, díszpergálődásig keverjük, majd homogenizáljuk.
3. Az l, lépésnél kapott oldatot a 2, lépésnél nyert keverékhez adjuk és átlátszó diszperzió képződéséig homogenizáljuk.
4. A 3, lépésnél kapott diszperziót 0,2 μηΐ-es szűrőn átszűrjük és ampullákba töltjük.

.2..-......páidü

Alábbi összetételű készítményt állítunk elő:

Sorszám 'komponens

Mennyiség, mg/ml

1.

A-vegyűlet* og

Glükafúrói

10-50 mg .

ijíüCXtxn

20-50 mg .

Szójaolaj

1-5 mg

Glicerin

8~12 mg δ .

Viz g.s.

ml * « Az A-vegyület valamely találmány szerinti vegyület

1. Az 1. sz. komponenst a 2. sz. komponensben, oldjuk.

2. A 3., 4. és 5. sz. komponenst a S. sz. komponenshez adjuk, di szpergálódás-ig keverjük, majd homogenizál juk.

3. Az 1. lépésnél kapott oldatot a 2. lépésnél nyert keverékhez adjuk és átlátszó diszperzió képződéséig homogenizáljuk.

4. A 3. lépésnél kapott diszperziót ö,2 pm-es szűrőn átszűrjük és .ampullákba töltjük.

1. (1) általános képletű vegyüietek (mely képletben

2 R jelentése hidrogénatom és R jelentése metiiesoport; vagy k jelentése metiiesoport és k jelentése hidrogénatom; vagy

2 k jelentése hidroxi-metil-csoport és k jelentése metileső port) és gyógyászatilag alkalmas sóik,

2. At X. igénypont sserinti (1-i) képletö vegyület és győés gyógyászatilag alkalmas sói.

3. At 1, igénypont sserinti (1-2) képletö vegyület és gyö-és gyógyászatilag alkalmas sói.

4. At 1, igénypont sserinti <X~3> képletö vegyület éa győés gyógyászatilag alkalmas sói,
5. Gyógyászati készítmény, amely valamely (1) általános képletö vegyüietet (mely képletben.

k jelentése hidrogénatom és k' jelentése metiiesoport; vagy k jelentése metiiesoport és k jelentése hidrogénatom; vagy k jelentése hidroxi-metil-csoport es k jelentése metileső port) vagy gyógyászatilag alkalmas sóját és gyógyászatilag alkalmas hordozóanyagot tartalmaz,

S. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti vegyüietek, tnmox-ellenes gyógyszerként történő felhasználásra,
7. Az 1--4. igénypontok bármelyike szerinti vegyuletek fel. használása elsősorban szolid tumorok kezelésére szolgáló gyógyászati készítmények előállítására.

A bejelentő helyett a meghatalmazott:

<A itfífe y4’^u ^Líf; MsSí ««.·> .

^!K! * ^!ϊ^«8 Psx: 23$^ «« χ Φ Φ κ Φ > φ

Φ Α Φ

Φ ΦΛχ *Φφ

Φ Φ « * V

ΦΦΦΦ * χ «Φ φ φφφ .<·» φφ

Η ,Μ

V.

φφ Α φ ! ΐ ΐ \\

Λ ,Χ η v ν>- ν \χ 'χ

..- Vx

Ο,,Ν (Μ

X I ΐ \ χ rt V írt φ <

X Λ -χχχχχχχ.χ. χ, “Λ j >~ .«--χ w

4\ //

V

Χ/χ <\ V' /

χ\

Ν \ -χ zFX X i J J

Ν' j

Ö,N

xv7 h X w

U ! W // j i i

Λ/Μ rt ^X Λ ,·;

N' w

^l'OH í í~2 } ( I~3 }

185/“™

On 'Tóih~ürbáo Láoté

OOVvM í 093 üíiŐspőA X'X- Ajéi.síysgOg -, V nntSíZSiV * ΐ m ?*>^X!>·<w

OTP xsVsiVzmm 0705005-20145419 * .«fcfcfc fcfcfcfc fcfc fcfcfc·* fcfc fcfcfc fcfc fcfcfc fc fcfc-fc fcfcfc fcfcfcfc fcfc fcfc * fc v fcfcfc fc* fcfc fcfc*

X-;V^: · '> ' 5. Λ· ? >

S> .í, ií · ^:5 < .J.·· ; v,í.,ri/V\ >

1. reakcióséma

Xto, y\

OUT

Ν' (Ό (5) <v

V.·· ί\ ζΝ\ ,''to η Kt

Χ.Λ·.; \·

Ul

χ..··' toX xCi

Ο., Ν' ;

.,Χ ?' ,ο,

-νΙΟ U>-- _ΊχΓM‘J > fc : ί

HCi

U)

U,.Pi ü

ii ; 11 .--O^ ....--'Χ to·· > 'fc t θ' 1

Ki \, /---0 \

Vto to

Κι \X íéGtoÜrháss LteM \

to,\ >, _s>. χ < -K ' k •·\·<'ϊ\ ;. s..^ < ' :<«·<· «·<·<; OS A A Λ <> <

\Hí .' A .· \'\.to.'\íA>'.fcA.'x'.to\Axfc ;

2, r^hoőséma χχ X ί! ( !

Χί''Χ1 ΐ \

Νχχχκ χί

Υχ. χ*χ. ,Χ XX Η) ϊ\

Ο .Ν' x-χχ Ζ\ ..- χ..- _Ν· /< ·χ ^!, ! Χ* χΧ X

X x'^AX. χ·'' Η i'SA χί X

Τ.Μ \χ> φ

L_wq | Η

X,

ΧνΧ %/^Χχ>

Ο (W)

-S χΧ /\. χ Ο.,Ν Ν χΤχ*

Ν·Χ ,χ Χχ χΧχ X ΦΓ X- Μ ν,.'-,χ Η

Χ\ ί ΐ,Άΐ ί'Χ,-1

1χ-Χ.χ0χ χθχ „Οχ χ Η Ο.Ν' ·-' 'Ν' _ΧΝ_Χ * ./ j / 5; •••••'••••f.v

ΝΗ (15)

V-SSSXxkX.^.

χ'Χ\ πν*

Ο χ·>* · X <χ Ν

Χ'Χ

XX χ—χ 1 ^sssssss^' \

χ^χ οχ

ΤΓ

X -' \ X-··

X' χτ

Οκ TMMJrbá® LsbNé Ü$XVV&á

ΝΤΕ xdx&Xx: Ι ΓΧΧΧΧ20Η54Χ (1S) (17) /Υγ,₍ ! ί \ !

ί

χ..

χΑ^Ν ίθ >Υ 'π

Υ, τ

χ^-Ν⁷ ?>· λ Χ·.’

Υ reakdóséma

Α

Χς,_ζ

OJY / Ν. /

Λ F1

A—* Ά χ ί\ .Ν·

Φφφ'Χ?φ ^·φ φ φ * * * -φ

Κ ΦΦ.φ Φ Φφ,φ φφφ, »· »♦ Φ » Φ Κ φ Φ * φφφ *« Φτ* ΦΧ* /\ ζ NXi -Ον Κ·-ϊ\

X Yy.-···' ><\

Π Ί Α

Ζ-^Λ\ ,·ζ>^:-~^ '·

ΟλΝ' ^χ-- h ζ

Ο Υ ν·'.γ> <ί

Ο,Ν \ / f***XS*A*V* // W >

Α Α-- ι ; t 1 i _ΖΑ

χ.'Ζ (13)

Η .Ν γχ-ν ·,ζ ~—<

VJ

ΥΛ

Ζ<Υ

Αν f-ί δ\ < i ν,!

Ν θ' \

ζχ

-'‘'Χ

Y'^y-Υξ *~Ά \\ /Α

ΥγΧ'Α

Υ~0

IX

20)

Ni

ΠΥ t-JOj ? ί\-'!

\\

Ε2 \ ...-··Ni i>r, Tstá-Ürbfe bibidé iigyvcd

IKK u. 2.4.1. Ko , Υ ιγ Yf tYHUYiiKád3sS \z ·. r '- i ' wó>.'viW.í —ϊ,Κγ j v