JP2002506864A

JP2002506864A - 細胞増殖の阻害のための置換ビスインドリルマレイミド類

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Publication number: JP2002506864A
Application number: JP2000536713A
Authority: JP
Inventors: ディングラ，ウルヴァシ・ホーダ; フリン，ドナ・メアリー; ケ，ジューン; ウェーバー，ジュセッペ・フェデリコ
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 1998-03-17
Filing date: 1999-03-10
Publication date: 2002-03-05
Anticipated expiration: 2019-03-10
Also published as: HK1036452A1; EP1064279A1; ATE243693T1; BR9908882A; HUP0101258A2; CN1293671A; CZ299068B6; RS49965B; CN1127500C; ID26353A; AU3409999A; CA2322689C; JP2010222366A; HRP20000585B1; AR018162A1; HU228831B1; ES2203111T3; IL138247A0; PL342964A1; SA99191295B1

Abstract

(57)【要約】式（I）〔式中、Ｒ¹は、水素であり、かつＲ²は、メチルであるか、又はＲ¹は、メチルであり、かつＲ²は、水素であるか、又はＲ¹は、ヒドロキシメチルであり、かつＲ²は、メチルである〕の置換ピロール、及びその薬剤学的に許容しうるプロドラッグ又は薬剤学的に許容しうる塩は、癌の治療に有用な抗増殖剤である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】本発明は、式（I）：

【０００２】

【化６】

【０００３】〔式中、Ｒ¹は、水素であり、かつＲ²は、メチルであるか、又はＲ¹は、メチルであり、かつＲ²は、水素であるか、又はＲ¹は、ヒドロキシメチルであり、かつＲ²は、メチルである〕で示される化合
物、及びその薬剤学的に許容しうるプロドラッグ又は薬剤学的に許容しうる塩に
関する。

【０００４】式（I）の化合物は、抗増殖活性を有しており、特に、これらは、細胞周期のＧ２／Ｍ相において細胞分裂を阻害し、そして一般に「Ｇ２／Ｍ相細胞周期」イ
ンヒビターと呼ばれる。

【０００５】式（I）の化合物は、ＵＳＰ５,０５７,６１４の式（I）に包含されるが、群と
して、又は個々に、具体的に開示されてはいない。更に、本発明の化合物の上述
の活性は、ＵＳＰ５,０５７,６１４ではどこにも開示されておらず、また明らか
にされてもいないため、これは驚くべきことである。

【０００６】上記式（I）は、以下の３つの化合物を含むことを特徴とする：

【０００７】

【化７】

【０００８】「薬剤学的に許容しうるプロドラッグ」という用語は、生理学的条件下で、又
は加溶媒分解（ソルボリシス）により、いずれかの式（I）の化合物又は該化合物の薬剤学的に許容しうる塩に変換しうる化合物を意味する。

【０００９】式（I）の化合物、及び該化合物の薬剤学的に許容しうる塩は、以下のスキームに表される反応により調製される。これらの化合物それぞれの合成は、実施例
１〜３にも記載される。

【００１０】化合物（I−１）は、（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ−アセチルクロリド（３）を〔１−（２，２−ジメチル−プロピオ
ニル）−１Ｈ−インドール−３−イル〕−３−エタンイミド酸１−メチル−エチ
ルエステル塩酸塩（７）と反応させて、反応生成物を塩基で処理することにより
調製できる。

【００１１】化合物（I−２）は、（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ −アセチルクロリド（１７）を〔１−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−６
−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル〕−３−エタンイミド酸１−メチル−エ
チルエステル塩酸塩（１９）と反応させて、反応生成物を塩基で処理することに
より調製できる。

【００１２】化合物（I−３）は、（１−メトキシメチル−１Ｈ−インドール−３−イル） −オキソ−アセチルクロリド（１０）を（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−イン
ドール−３−イル）−３−エタンイミド酸１−メチルエチルエステル塩酸塩（１
５）と反応させて、反応生成物を酸で処理することにより調製できる。

【００１３】

【化８】

【００１４】

【化９】

【００１５】

【化１０】

【００１６】本発明の化合物の抗増殖活性は、以下に証明される。これらの効果は、本化合
物が、癌、特に固形腫瘍を処置するのに有用であることを示している。

【００１７】エストロゲン受容体陰性上皮乳癌株（ＭＤＡ−ＭＢ−４３５）をアメリカン・
タイプ・セル・カルチャー・コレクション（American Type Cell Culture Colle
ction）（ＡＴＣＣ；ロックヴィル、メリーランド州）から購入して、ＡＴＣＣが推奨する培地で増殖させた。これらの細胞の増殖に及ぼす試験化合物の効果の
分析のために、細胞を、９６ウェル組織培養プレート（「試験プレート」）中に
１ウェル当たり２０００細胞で培養し、５％ＣＯ₂にして３７℃で一晩インキュベートした。翌日、試験化合物を１００％ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に
溶解して、１０mMストック溶液を得た。各化合物を滅菌蒸留水で１mMに希釈し、
次に十分な量の培地を含む９６ウェル「マスタープレート」の三重測定ウェル（
triplicate well）に加えて、４０μMの最終濃度を得た。化合物は、「マスター
プレート」中で培地に連続希釈した。希釈化合物の１／４最終容量を二重測定「
試験プレート」（duplicate "test plates"）に移した。ＤＭＳＯを「対照細胞」の列に加えて、各ウェルのＤＭＳＯの最終濃度が、０．１％になるようにした
。「試験プレート」をインキュベーターに戻して、試験化合物添加の３日後、１
つの「試験プレート」を以下に記載されるように分析した。同様に、試験化合物
添加の５日後、第２の「試験プレート」も以下に記載されるように分析した。

【００１８】３−（４，５−ジメチルチアゾール−２−イル）−２，５−ジフェニル−２Ｈ
−テトラゾリウムブロミド（トリアゾリルブルー；ＭＴＴ）を各ウェルに加えて
、１mg/mlの最終濃度を得た。次にプレートを３７℃で３時間インキュベートした。次いでＭＴＴ含有培地を除去して、１００％エタノール５０μlを各ウェルに加えて、生じたホルマザン代謝物（formazan metabolite）を溶解した。完全な溶解を保証するために、室温で１５分間プレートを振とうした。吸光度は、マ
イクロタイタープレートリーダー（モレキュラー・ダイナミクス（Molecular Dy
namics））で６５０nmを参照しながら５７０nmの波長で読みとった。阻害パーセ
ントは、全てのウェルからブランクを差し引き、次に各試験三重測定の平均吸光
度を対照の平均で割ったものを１．００から差し引いて計算した。阻害濃度（Ｉ
Ｃ₅₀及びＩＣ₉₀）は、阻害パーセントに対する濃度の対数プロットの線形回帰か
ら決定した。

【００１９】結腸腺癌株ＳＷ４８０及び結腸癌株ＨＣＴ−１１６もＡＴＣＣから入手して、
以下の修飾を加えた、上に与えられたものと同じプロトコールにより試験した。
細胞株ＳＷ４８０は、１ウェル当たり１０００細胞で培養して、試験化合物添加
の６日後に分析した。細胞株ＨＣＴ−１１６は、１ウェル当たり７５０細胞で培
養して、試験化合物添加の４日後に分析した。ＭＴＴ分析に関しては、ＭＴＴ含
有培地の吸引の前にプレートを１０００rpmで５分間遠心分離して、１００％エタノール１００μlを使用してホルマザンを溶解した。

【００２０】前述のインビトロ試験の結果は、以下の表I〜IIIに示される。

【００２１】

【表１】

【００２２】

【表２】

【００２３】

【表３】

【００２４】細胞周期進行に及ぼす化合物の効果の分析のために、ＭＤＡ−ＭＢ−４３５細
胞（ＡＴＣＣ；ロックヴィル、メリーランド州）は、以下の増殖培地〔ＲＰＭＩ
１６４０＋１０％熱不活化ウシ胎児血清、２mM Ｌ−グルタミン及び５０U/mlペ
ン−ストレップ（pen-strep）（全てギブコ社（GIBCO/BRL）ゲーサーズバーグ、
メリーランド州：から）〕中で１０cmシャーレ当たり１×１０⁶細胞/１０mlで培
養した。細胞は、５％ＣＯ₂にして３７℃で一晩インキュベートした。翌日、１００％ＤＭＳＯ溶液中の試験すべき化合物それぞれ１０μlを、個々のシャーレに加えて、１／１０００×最終濃度のストック溶液を得た。更に、１００％ＤＭ
ＳＯ１０μlを対照シャーレに加えた。全てのプレート中のＤＭＳＯの最終濃度は、対照を含めて０．１％であった。プレートをインキュベーターに戻した。

【００２５】次に、種々の時点で、各プレート中の培地を５０ml遠心分離管に取り出した。
次いでシャーレ中に残っている細胞層を、リン酸緩衝化食塩水（ＰＢＳ；ギブコ
社（GIBCO/BRL））５mlで洗浄した。ＰＢＳを取り出して、適切なチューブで培地と合わせた。細胞を３７℃で５分間トリプシン処理し、この溶液を回収して、
適切なチューブ中で培地及びＰＢＳと合わせた。次にチューブを１２００rpmで５分間遠心分離した。上清を除去し、チューブをたたいてペレットを分散させ、
次に穏やかに渦流撹拌しながら冷７０％エタノール５mlを加えることにより、細
胞を固定した。次いで細胞を−２０℃で２４時間以上貯蔵した。

【００２６】細胞含有チューブを冷凍庫から取り出して、室温で２０〜３０分間放置した。
このチューブを３０００rpmで５分間遠心分離した。上清を除去し、ペレットをＰＢＳ５mlで洗浄して、チューブを上記のように遠心分離した。続いて、上清を
除去して、ペレットをＰＢＳ０．５mlに再懸濁した。次に、ＲＮアーゼＡ（RNAs
eA）（ＰＢＳ中１mg/ml）０．５mlを各チューブに加えて、チューブを３７℃で１５分間インキュベートした。ヨウ化プロピジウム（propidium iodide）（シグ
マ（Sigma）、セントルイス、ミズーリ州）（ＰＢＳ中１mg/ml）１００μlを各チューブに加えて、次にチューブを室温で２〜３分間インキュベートした。それ
ぞれの生じた溶液は、フィルターキャップチューブ（ベクトンディッキンソン（
Becton Dickinson）、サノゼ、カリフォルニア州、＃２２３５）を通した。

【００２７】試料は、ファックソート（FACSort）装置（ベクトンディッキンソン（Becton
Dickinson））で、製造業者のセルクエスト（CellQUEST）プログラムを使用して
読み取り、製造業者のモードフィット（ModFIT）ソフトウェアで分析した。この
測定は、以下の相：Ｇ０／Ｇ１、ＤＮＡ合成（Ｓ）及びＧ２／Ｍ相のそれぞれに
おける、細胞のパーセントの指標を提供する。

【００２８】試験化合物I−１、I−２及びI−３添加の１日後に分析した細胞周期進行実験の結果は、以下の表IVに要約される。

【００２９】

【表４】

【００３０】上記表I〜IVに要約される結果は、化合物I−１、I−２及びI−３が、抗増殖活
性を有すること、具体的には、細胞周期のＧ２／Ｍ相における細胞の蓄積を引き
起こすことを証明している。

【００３１】上記式（I）のピロール及びそれらの前述の塩は、医薬として、例えば、医薬製剤の形態で使用することができ、これらは、例えば、錠剤、コーティング錠、
糖衣錠、硬若しくは軟ゼラチンカプセル剤、液剤、乳剤又は懸濁剤の形態で、経
口投与することができる。これらはまた、例えば、坐剤の形態で直腸内に、又は
例えば、注射液の形態で非経口的に投与することができる。

【００３２】医薬製剤の製造には、これらの化合物を、治療的に不活性な無機又は有機担体
と一緒にして処方することができる。乳糖、トウモロコシデンプン又はこれらの
誘導体、タルク、ステアリン酸又はその塩は、錠剤、コーティング錠、糖衣錠及
び硬ゼラチンカプセル剤用のそのような担体として使用することができる。軟ゼ
ラチンカプセル剤用の適切な担体は、植物油、ロウ、脂肪、半固体又は液体ポリ
オール類である。しかし、活性物質の性質に応じて、軟ゼラチンカプセル剤の場
合には一般に担体を必要としない。液剤及びシロップ剤の製造用の適切な担体は
、水、ポリオール類、サッカロース、転化糖及びグルコースである。注射用の適
切な担体は、水、アルコール類、ポリオール類、グリセリン、植物油、リン脂質
及び界面活性剤であり、坐剤用の適切な担体は、天然又は硬化油、ロウ、脂肪及
び半液体ポリオールである。

【００３３】本医薬製剤はまた、保存剤、可溶化剤、安定化剤、湿潤剤、乳化剤、甘味料、
着色料、香味料、浸透圧を変化させる塩、緩衝化剤、コーティング剤又は抗酸化
剤を含んでもよい。これらはまた、更に他の治療的に有用な物質を含んでもよい
。

【００３４】上述のように、式（I）のピロール類及びそれらの前述の塩は、腫瘍学的疾患の治療又は制御において使用することができる。用量は、広い範囲内で変化させ
ることができ、当然ながら各特定症例における個々の要求に適合させる。一般に
、体重約７０kgの成人のヒトへの経口又は非経口投与のケースでは、約１０mg〜
約１０，０００mg、好ましくは約２００mg〜約５，０００mg、更に好ましくは約
１０００mgまでの１日用量が適しているが、必要があれば上限は超えてもかまわ
ない。この１日用量は、単回用量として、又は分割用量で投与することができる
か、あるいは非経口投与のためには、連続的な点滴として投与してもよい。

【００３５】以下の実施例により、本発明を説明する。

【００３６】実施例１３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−
インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（I−１）の調製Ａ．１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール（２）乾燥したジメチルホルムアミド（「ＤＭＦ」）３０ml中のＮａＨ（油中６０％
分散液）０．３３ｇ（８．３mmol）のスラリーに、市販の６−ニトロ−１Ｈ−イ
ンドール（１）０．９７３ｇ（６．００mmol）を０〜５℃で１０分間かけて加え
た。同温度で１時間撹拌後、ヨウ化メチル０．７５ml（１２．１mmol）を加えて
、混合物を同温度で３０分間、次に室温で１時間撹拌し、氷及び水中に注ぎ入れ
て、酢酸エチルで抽出した。有機相を食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して、濃縮し、１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール（２）０．８１４ｇ（７７
．５％）を黄色の固体として得た。この物質を精製することなく使用した。

【００３７】Ｂ．（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ−アセ
チルクロリド（３）エーテル４０ml中の１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール（２）１．３
３ｇ（７．５５mmol）の溶液に、塩化オキサリル１．５ml（１７．２mmol）を０
〜５℃でアルゴン下加えた。沈殿物が生成した。３時間撹拌後、生じた固体を濾
過し、エーテル少量で洗浄して、乾燥し、（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−イ
ンドール−３−イル）−オキソ−アセチルクロリド（３）１．９ｇ（９５％）を
黄色の固体として得た。この物質を精製することなく使用した。

【００３８】Ｃ．〔１−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−１Ｈ−インドール−３−イル
〕−アセトニトリル（６）上記サブパートＡの手順を用いる、ＤＭＦ１１５ml中での市販の（１Ｈ−イ
ンドール−３−イル）−アセトニトリル（５）１０．２ｇ（６５mmol）とトリメ
チルアセチルクロリド８．７ml（７１mmol）及び塩基としてのＮａＨ（油中６０
％分散液）３．４ｇとのＮ−アルキル化反応により、クロマトグラフィー精製後
、〔１−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−１Ｈ−インドール−３−イル〕
−アセトニトリル（６）６．６ｇ（３８．７％）を黄色の油状物として得た。

【００３９】Ｄ．〔１−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−１Ｈ−インドール−３−イル
〕−３−エタンイミド酸１−メチルエチルエステル塩酸塩（７）２−プロパノール１０５ml中の上記工程Ｃからの〔１−（２，２−ジメチル−
プロピオニル）−１Ｈ−インドール−３−イル〕−アセトニトリル（６）６．６
ｇ（２７．５mmol）のスラリーに、塩化アセチル４０ml（０．５６３mol）を０〜５℃で２０分間かけて滴下により加えた。反応混合物を室温で一晩撹拌し、濃
縮して、残渣を酢酸エチル約７５mlで希釈し、蒸気浴で１５分間加熱し、冷却し
て冷凍庫に入れた。沈殿物を濾過して、乾燥し、〔１−（２，２−ジメチル−プ
ロピオニル）−１Ｈ−インドール−３−イル〕−３−エタンイミド酸１−メチル
エチルエステル塩酸塩（７）６．０ｇ（６５．０％）を白色の固体として得た。

【００４０】Ｅ．３−〔１−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−１Ｈ−インドール−３−
イル〕−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロ
ール−２，５−ジオン（４）塩化メチレン８０ml中の上記工程Ｂからの（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−
インドール−３−イル）−オキソ−アセチルクロリド（３）１．２５ｇ（４．６
９mmol）及び上記工程Ｄからの〔１−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−１
Ｈ−インドール−３−イル〕−３−エタンイミド酸１−メチルエチルエステル塩
酸塩（７）１．６ｇ（４．７５mmol）の溶液に、トリエチルアミン２．６ml（１
８．６５mmol）を０℃でアルゴン下に加えた。同温度で３０分間撹拌後、反応混
合物を次に室温で３．５時間撹拌して、更に塩化メチレンで希釈した。有機相を
水、０．５ＮＨＣｌ溶液、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して、濃縮し、泡状物３．０１ｇを得た。この物質をトルエン５０mlに溶解して、ｐ−トルエン
スルホン酸９８７．９mg（５．１９mmol）で０℃で処理した。室温で３時間撹拌
後、反応混合物を塩化メチレンで抽出した。有機相を飽和ＮａＨＣＯ₃溶液、食塩水で洗浄し、ＭｇＳＯ₄で乾燥して、濃縮し、粗生成物３．９ｇを得た。シリカゲルカラムのクロマトグラフィー精製によって、３−〔１−（２，２−ジメチ
ル−プロピオニル）−１Ｈ−インドール−３−イル〕−４−（１−メチル−６−
ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（４）１．
７ｇ（７７％）を橙色の固体（融点＞１４６℃、分解を伴う）として得た。ＭＳ
：（Ｍ⁺）、ｍ／ｚ４７０。

【００４１】Ｆ．３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１
Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（I−１）メタノール６０ml中の上記工程Ｅからの３−〔１−（２，２−ジメチル−プロ
ピオニル）−１Ｈ−インドール−３−イル〕−４−（１−メチル−６−ニトロ−
１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（４）１．７ｇ（３
．６１mmol）を、メタノール中のＮａＯＣＨ₃の１．６モル溶液５．６ml（８．９６mmol）で処理した。反応液を室温で１時間撹拌し、２Ｎ−ＨＣｌ／氷に注ぎ
入れて酢酸エチルで抽出した。有機抽出物を無水ＭｇＳＯ₄で乾燥して、濃縮し、クロマトグラフィー精製後、３−（１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１
−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジ
オン（I−１）３９４．７mg（２８％）を赤色の固体（融点＞２８０℃）として得た。ＭＳ：（Ｍ⁺）、ｍ／ｚ３８６。

【００４２】実施例２３−（１−ヒドロキシメチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチ
ル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（
I−３）の調製Ａ．１−メトキシメチル−１Ｈ−インドール（９）実施例１、工程Ａの手順を用いる、ＤＭＦ２２ml中での市販のインドール（
８）１．１７ｇ（１０mmol）とクロロメチルメチルエーテル１ml（１３．１mmol
）及び塩基としてのＮａＨ（油中６０％分散液）０．４８ｇ（１２mmol）とのＮ
−アルキル化反応により、クロマトグラフィー精製後、１−メトキシメチル−１
Ｈ−インドール（９）１．４ｇ（８６．９％）を無色の油状物として得た。

【００４３】Ｂ．（１−メトキシメチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ−アセチル
クロリド（１０）実施例１、工程Ｂの手順を用いる、エーテル３．５ml中での上記工程Ａからの
１−メトキシメチル−１Ｈ−インドール（９）０．２３ｇ（１．４３mmol）と塩
化オキサリル０．２５ml（２．８６mmol）との反応によって、（１−メトキシメ
チル−１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ−アセチルクロリド（１０）０．
１７４ｇ（４８．５％）を黄色の固体として生成した。この物質を精製すること
なく使用した。

【００４４】Ｃ．（６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−アセトニトリル（１３）アセトニトリル４５０ml中の６−ニトログラミン（１２）〔Jackson B. Heste
r J. Org. Chem., 29:1158 (1964)〕４４．２７ｇ（０．２０４mol）の撹拌溶液
に、ヨウ化メチル４４．５９ｇ（０．３１mol）を０〜５℃で１時間かけて加えた。反応混合物を室温で３時間撹拌し、次に水２２５ml中のシアン化ナトリウム
２６．６ｇ（０．５４３mol）の溶液を直ちに加えた。反応混合物を３２℃で一晩加熱し、室温に冷却して、生成物を酢酸エチル全部で８００mlで３回及び水３
００mlで抽出した。合わせた抽出物を水、１ＮＨＣｌ溶液、飽和重炭酸ナトリ
ウム溶液で洗浄して、ＭｇＳＯ₄で乾燥し、溶媒を真空で留去した。橙褐色の残渣（４１．３ｇ）を温酢酸エチル２００mlに溶解して、シリカゲルの小さいパッ
ドを通して、溶媒の留去後、（６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ア
セトニトリル（１３）２８．９ｇ（７０．４％）を黄色の固体として生成した。

【００４５】Ｄ．（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−アセトニトリ
ル（１４）粉末炭酸カリウム６５．５ｇ（０．４７４mol）を、ジメチルホルムアミド２３０ml中の上記工程Ｃからの（６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ア
セトニトリル（１３）２８．９ｇ（０．１４３mol）の溶液に室温で加えた。懸濁液を４０分間撹拌し、次にヨウ化メチル２５．４８ｇ（０．１７９mol）を６５分間で滴下により加えた。室温で一晩撹拌後、反応混合物を冷却して、水全部
で６００ml中に注ぎ入れた。沈殿物を濾過し、水少量で洗浄して、一定重量に達
するまで無水リン酸で乾燥した。この手順により、（１−メチル−６−ニトロ−
１Ｈ−インドール−３−イル）−アセトニトリル（１４）３０．４ｇ（９５．４
％）を得て、これを更に精製することなく使用した。

【００４６】Ｅ．（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−３−エタンイ
ミド酸１−メチルエチルエステル塩酸塩（１５）ＨＣｌガス流を、２−プロパノール１０００ml中の上記工程Ｄからの（１−メ
チル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−アセトニトリル（１４）８
２ｇ（０．３８２mol）の撹拌懸濁液中に０〜１０℃でバブリングした。ＨＣｌ約３５０ｇを添加後、沈殿物が生成するまでエーテルを反応混合物に加えた。固
体を回収し、エーテルで洗浄して真空で乾燥し、（１−メチル−６−ニトロ−１
Ｈ−インドール−３−イル）−３−エタンイミド酸１−メチルエチルエステル塩
酸塩（１５）１０２ｇ（８５．７％）を得た。

【００４７】Ｆ．３−（１−メトキシメチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メ
チル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン
（１１）実施例１、工程Ｅの手順を用いる、塩化メチレン９５ml中での上記工程Ｂから
のオキソアセチルクロリド（１０）１．３ｇ（５．１７mmol）と上記工程Ｅから
の（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−３−エタンイミ
ド酸１−メチルエチルエステル塩酸塩（１５）１．７ｇ（５．４５mmol）との縮
合反応により、３−（１−メトキシメチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４
−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，
５−ジオン（１１）１．０８ｇ（４８．５％）を橙色の固体（融点＞２５０℃、
分解を伴う）として得た。ＭＳ：（Ｍ⁺）、ｍ／ｚ４３０。

【００４８】Ｇ．３−（１−ヒドロキシメチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−
メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオ
ン（I−３）ＴＨＦ６５ml中の上記工程Ｆからの３−〔１−（メトキシメチル）−１Ｈ−
インドール−３−イル〕−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−
３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（１１）７２７．５mgの溶液を、２Ｎ
ＨＣｌ約４０mlで処理した。反応混合物を５時間還流し、冷却して、生成物を酢
酸エチルで抽出した。有機相をＭｇＳＯ₄で乾燥して、溶媒を留去し、橙色の固体を得た。この物質のクロマトグラフィー精製により、３−（１−ヒドロキシメ
チル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（１−メチル−６−ニトロ−１Ｈ−
インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（I−３）１２３．３mgを赤色の固体（融点２１０〜２１３℃）として得た。ＭＳ：（Ｍ⁺）、ｍ／ｚ４１６。

【００４９】実施例３３−（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（６−ニトロ−１Ｈ−
インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（I−２）の調製Ａ．（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ−アセチルクロリド
（１７）実施例１、工程Ｂの手順を用いる、エーテル１２０ml中での市販の１−メチル
−１Ｈ−インドール（１６）６ml（４７mmol）と塩化オキサリル８ml（９２mmol
）との反応により、（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−オキソ−ア
セチルクロリド（１７）７．６ｇ（７３．２％）を黄色の固体として生成した。
この物質を精製することなく使用した。

【００５０】Ｂ．〔１−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−６−ニトロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル〕−アセトニトリル（１８）実施例１、工程Ａの手順を用いる、ＤＭＦ８ml中での実施例２、工程Ｃから
の６−ニトロ−１Ｈ−インドリル−３−アセトニトリル（１３）とトリメチルア
セチルクロリド０．３ml（２．４４mmol）及び塩基としてのＮａＨ（油中６０％
分散液）７０．８mg（１．７７mmol）とのＮ−アルキル化反応により、クロマト
グラフィー精製後、〔１−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−６−ニトロ−
１Ｈ−インドール−３−イル〕−アセトニトリル（１８）２８７．７mg（４３．
２％）を黄色の油状物として得た。

【００５１】Ｃ．〔１−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−６−ニトロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル〕−３−エタンイミド酸１−メチルエチルエステル塩酸塩（１９）ＨＣｌガス流を、２−プロパノール９０ml中の上記工程Ｂからの〔１−（２，
２−ジメチル−プロピオニル）−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル〕−
アセトニトリル（１８）１．４５ｇ（５．０８mmol）の一定撹拌懸濁液中に０〜
５℃でバブリングした。反応混合物を室温で２１時間撹拌した。溶媒を真空で留
去して、黄色の固体（１９）１．９５ｇ（１００％）を得た。この物質を更に精
製することなく使用した。

【００５２】Ｄ．３−〔１−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−６−ニトロ−１Ｈ−イン
ドール−３−イル〕−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロ
ール−２，５−ジオン（２０）実施例１、工程Ｅの手順を用いて、上記工程Ａからのオキソアセチルクロリド
（１７）１．１ｇ（４．９６mmol）を、塩化メチレン１２０ml中で上記工程Ｃか
らの〔１−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−６−ニトロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル〕−３−エタンイミド酸１−メチルエチルエステル塩酸塩（１９）
１．９５ｇ（５．０８mmol）及びトリエチルアミン２．１ml（１７．９４mmol）
と反応させて、生じた生成物をトルエン８０ml中のｐ−トルエンスルホン酸一水
和物１．１ｇ（５．７８mmol）で処理して、３−〔１−（２，２−ジメチル−プ
ロピオニル）−６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル〕−４−（１−メチル
−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（２０）１．３ｇ
（６２．１％）を橙色の固体（融点＞２４５℃、分解を伴う）として得た。ＭＳ
：（Ｍ⁺）、ｍ／ｚ４７０。

【００５３】Ｅ．３−（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４−（６−ニトロ−１
Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（I−２）実施例１、工程Ｆの手順を用いる、メタノール６５ml中での上記工程Ｄからの
３−〔１−（２，２−ジメチル−プロピオニル）−６−ニトロ−１Ｈ−インドー
ル−３−イル〕−４−（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール
−２，５−ジオン（２０）１．３ｇ（２．７６mmol）とＮａＯＣＨ₃の１．６モル溶液４．３ml（６．８８mmol）とのＮ−脱保護反応により、酢酸エチル及びヘ
キサンからの結晶化後、３−（１−メチル−１Ｈ−インドール−３−イル）−４
−（６−ニトロ−１Ｈ−インドール−３−イル）−ピロール−２，５−ジオン（
I−２）３００．６mg（２８．１％）を赤色の固体（融点＞２６０℃）として得た。ＭＳ：（Ｍ⁺）、ｍ／ｚ３８６。

【００５４】実施例４錠剤処方

【００５５】

【表５】

【００５６】製造法：１．品目１、２及び３を適切なミキサーで１５分間混合した。２．工程１からの混合粉末を２０％ポビドンＫ３０溶液（品目４）で造粒した。３．工程２からの顆粒を５０℃で乾燥した。４．工程３からの顆粒を適切な粉砕装置に通した。５．工程４の粉砕した顆粒に品目５を加えて、３分間混合した。６．工程５からの顆粒を適切な圧力で圧縮した。

【００５７】実施例５カプセル剤処方

【００５８】

【表６】

【００５９】製造法：１．品目１、２及び３を適切なミキサーで１５分間混合した。２．品目４及び５を加えて、３分間混合した。３．適切なカプセルに充填した。

【００６０】実施例６注射用液剤／乳剤の調製

【００６１】

【表７】

【００６２】製造法：１．品目１を品目２に溶解した。２．品目３、４及び５を品目６に加えて、分散するまで混合し、次いで均質化し
た。３．工程１からの溶液を工程２からの混合物に加えて、分散液が半透明になるま
で均質化した。４．０．２μmフィルターで無菌濾過して、バイアルに充填した。

【００６３】実施例７注射用液剤／乳剤の調剤

【００６４】

【表８】

【００６５】製造法：１．品目１を品目２に溶解した。２．品目３、４及び５を品目６に加えて、分散するまで混合し、次いで均質化し
た。３．工程１からの溶液を工程２からの混合物に加えて、分散液が半透明になるま
で均質化した。４．０．２μmフィルターで無菌濾過して、バイアルに充填した。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (81)指定国ＥＰ(ＡＴ，ＢＥ，ＣＨ，ＣＹ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＳ，ＦＩ，ＦＲ，ＧＢ，ＧＲ，ＩＥ，ＩＴ，ＬＵ，ＭＣ，ＮＬ，ＰＴ，ＳＥ)，ＯＡ(ＢＦ，ＢＪ，ＣＦ，ＣＧ，ＣＩ，ＣＭ，ＧＡ，ＧＮ，ＧＷ，ＭＬ，ＭＲ，ＮＥ，ＳＮ，ＴＤ，ＴＧ)，ＡＰ(ＧＨ，ＧＭ，ＫＥ，ＬＳ，ＭＷ，ＳＤ，ＳＬ，ＳＺ，ＵＧ，ＺＷ)，ＥＡ(ＡＭ，ＡＺ，ＢＹ，ＫＧ，ＫＺ，ＭＤ，ＲＵ，ＴＪ，ＴＭ)，ＡＥ，ＡＬ，ＡＭ，ＡＴ，ＡＵ，ＡＺ，ＢＡ，ＢＢ，ＢＧ，ＢＲ，ＢＹ，ＣＡ，ＣＨ，ＣＮ，ＣＵ，ＣＺ，ＤＥ，ＤＫ，ＥＥ，ＥＳ，ＦＩ，ＧＢ，ＧＤ，ＧＥ，ＧＨ，ＧＭ，ＨＲ，ＨＵ，ＩＤ，ＩＬ，ＩＮ，ＩＳ，ＪＰ，ＫＥ，ＫＧ，ＫＰ，ＫＲ，ＫＺ，ＬＣ，ＬＫ，ＬＲ，ＬＳ，ＬＴ，ＬＵ，ＬＶ，ＭＤ，ＭＧ，ＭＫ，ＭＮ，ＭＷ，ＭＸ，ＮＯ，ＮＺ，ＰＬ，ＰＴ，ＲＯ，ＲＵ，ＳＤ，ＳＥ，ＳＧ，ＳＩ，ＳＫ，ＳＬ，ＴＪ，ＴＭ，ＴＲ，ＴＴ，ＵＡ，ＵＧ，ＵＺ，ＶＮ，ＹＵ，ＺＷ (72)発明者フリン，ドナ・メアリーアメリカ合衆国、ニュージャージー 08501、アレンタウン、タイラー・コート８ (72)発明者ケ，ジューンアメリカ合衆国、ニュージャージー 07043、モンクレア、カールトン・ドライブ５ (72)発明者ウェーバー，ジュセッペ・フェデリコアメリカ合衆国、ニュージャージー 07009、シーダー・グローブ、アンダーソン・パークウェイ 192 Ｆターム(参考） 4C063 AA03 BB01 CC06 DD04 EE01 4C086 AA01 AA02 AA03 BC13 GA07 MA01 NA14 NA15 ZB26

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】式（I）：【化１】〔式中、Ｒ¹は、水素であり、かつＲ²は、メチルであるか、又はＲ¹は、メチルであり、かつＲ²は、水素であるか、又はＲ¹は、ヒドロキシメチルであり、かつＲ²は、メチルである〕で示される化合
物、又はその薬剤学的に許容しうるプロドラッグ若しくは薬剤学的に許容しうる
塩。
【請求項２】式（I−１）：【化２】で示される請求項１の化合物、又は該化合物の薬剤学的に許容しうるプロドラッ
グ若しくは薬剤学的に許容しうる塩。
【請求項３】式（I−２）：【化３】で示される化合物、又は該化合物の薬剤学的に許容しうるプロドラッグ若しくは
薬剤学的に許容しうる塩。
【請求項４】式（I−３）：【化４】で示される化合物、又は該化合物の薬剤学的に許容しうるプロドラッグ若しくは
薬剤学的に許容しうる塩。
【請求項５】式（I）：【化５】〔式中、Ｒ¹は、水素であり、かつＲ²は、メチルであるか、又はＲ¹は、メチルであり、かつＲ²は、水素であるか、又はＲ¹は、ヒドロキシメチルであり、かつＲ²は、メチルである〕で示される化合
物、又は該化合物の薬剤学的に許容しうる塩若しくはプロドラッグ、及び薬剤学
的に許容しうる担体を含むことを特徴とする医薬組成物。
【請求項６】抗腫瘍薬剤として使用するための、請求項１〜４のいずれか
１項記載の化合物。
【請求項７】固形腫瘍の処置又は医薬組成物の調製のための、請求項１〜
４のいずれか１項記載の化合物の使用。
【請求項８】本明細書に記載の化合物、組成物、プロセス及び使用。