MXPA02003667A - Pirroles sustituidos como agentes antiproliferativos para tratamiento del cancer. - Google Patents

Abstract

Se describen nuevos pirroles sustituidos que tienen la formula (I): (ver formula) Estos compuestos y sus sales farmaceuticamente aceptables son adecuadas para la administracion a pacientes como solucion para infusion continua y son utiles en el tratamiento y/o control de trastornos proliferativos celulares, en particular, del cancer. Tambien se describen composiciones farmaceuticas que contienen los compuestos anteriores y su empleo para el tratamiento y/o control del cancer.

Description

PIRRÓLES SUSTITUIDOS COMO AGENTES ANTIPROLIFERATIVOS PARA TRATAMIENTO DEL CÁNCER Breve Resumen de la Invención La presente invención se refiere a ciertos pirróles sustituidos, que son agentes antiproliferativos . Estos compuestos y sus sales farmacéuticamente aceptables son útiles en el tratamiento o control de trastornos proliferativos celulares, en particular del cáncer. La invención se refiere también a composiciones farmacéuticas que contienen tales compuestos y su empleo para el tratamiento y/o prevención del cáncer, en particular para el tratamiento o control de tumores sólidos.

Antecedentes de la Invención La proliferación celular incontrolada es el sello identificativo del cáncer. Las células tumorales cancerosas producen típicamente alguna forma de daño en los genes que directamente o indirectamente regulan el ciclo de división de la célula. Se ha consumido una gran cantidad de investigación en el estudio de los agentes antiproliferativos . A la vez que se han identificado muchos agentes con actividades anti-proliferativas, se ha encontrado que muchos de estos agentes presentan varios inconvenientes, incluyendo una pobre solubilidad, gran complejidad molecular, etc., que pueden REF 136929 convertirles bien en inadecuados o en no convenientes para el empleo terapéutico en pacientes humanos. En este campo continúa existiendo por lo tanto una necesidad de compuestos con una molécula sencilla que puedan sintetizarse fácilmente, que sean efectivas como agentes terapéuticos del cáncer y sean adecuadas para su administración por infusión continua a los pacientes. Es por lo tanto un objeto de esta invención proporcionar tales compuestos así como también ciertas composiciones farmacéuticas que contienen tales compuestos .

Definiciones Como se utilizan aquí, los siguientes términos tienen las siguientes definiciones: "Alquilo" significa una cadena lineal o ramificada de un hidrocarburo alifático saturado que tiene de 1 a 15, de preferencia de 1 a 10, átomos de carbono. Los grupos alquilo pueden estar sustituidos como se proporciona específicamente infra . Además, la cadena alquílica puede incluir uno o más heteroátomos en lugar de uno o más átomos de carbono. Se prefieren los grupos "alquilo inferior" que tienen de 1 a 6, de preferencia de 1 a 4, átomos de carbono. Grupos alquilo inferior típicos incluyen el metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, t-butilo, 2-butilo, pentilo, hexilo y similares.

*Alquenilo" significa un hidrocarburo alifático no saturado de cadena lineal o ramificada, que tiene de 1 a 15 átomos de carbono, de preferencia de 1 a 10 átomos de carbono, con mayor preferencia de 1 a 6 átomos de carbono. *Alcoxilo" significa un grupo alquilo que está unido al resto de la molécula mediante oxígeno (por ejemplo, RO-, tal como metoxilo, etoxilo, etc.) . 'Arilo" significa un anillo aromático que tiene de 5 a 10 átomos y que consiste de 1 ó 2 anillos, el cual puede incluir opcionalmente uno o más heteroátomos que son iguales o diferentes. Para la finalidad de esta definición, arilo incluye heteroarilo. Los heteroátomos preferidos incluyen el nitrógeno, azufre u oxígeno, individualmente o en alguna combinación, en lugar de uno o más de los carbonos. Ejemplos de grupos arilo dentro de esta definición son fenilo, piridina, imidazol, pirrol, triazol, furano, pirimidina. ^Cicloalquilo" significa un grupo hidrocarburo alifático cíclico, no aromático, parcial o completamente saturado, que tiene de 3 a 8 átomos. Ejemplos de grupos cicloalquilo incluyen ciclopropilo, ciclopentilo y ciciohexilo . *Cantidad efectiva" significa una cantidad de por lo menos un compuesto de Fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, que inhibe de forma significativa la proliferación y/o previene la diferenciación de una célula de un tumor humano, incluyendo las líneas celulares de tumores humanos. 15Heteroátomo" significa un átomo seleccionado entre nitrógeno, azufre y oxígeno. Los heteroátomos se seleccionan independientemente y pueden reemplazar uno o más átomos de carbono . 'Heterociclo" significa un grupo hidrocarburo parcial o completamente saturado, no aromático, de 3 a 10 miembros, que contiene por lo menos un heteroátomo. Tal sistema anular incluye morfolina, pirrolidina, piperidina, piperazina. IC5o" se refiere a la concentración de un compuesto particular de acuerdo con la invención, necesaria para inhibir el 50% de una actividad específica medida. El IC5o puede ser medido inter alia, como se describe en el ejemplo 26, infra . ''Sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a las sales de adición acida o sales de adición básica convencionales, que conservan la efectividad biológica y propiedades de los compuestos de fórmula I y están formadas de ácidos orgánicos o inorgánicos no tóxicos, adecuados, o bases orgánicas o inorgánicas. Ejemplos de sales de adición acida incluyen aquellas derivadas de ácidos inorgánicos tales como el ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido yodhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico y ácido nítrico, y aquellos derivados de ácidos orgánicos tales como el ácido acético, ácido tartárico, ácido salicílico, ácido metanosulfónico, ácido succínico, ácido cítrico, ácido málico, ácido láctico, ácido fumárico y similares. Ejemplos de sales de adición básica incluyen aquellos derivados de hidróxidos de amonio, potasio, sodio y amonio cuaternario tales como por ejemplo, el hidróxido de tetrametilamonio . "Farmacéuticamente aceptable" tal como un portador, un excipientes, etc., farmacéuticamente aceptable, significa farmacológicamente aceptable y sustancialmente no tóxico para el sujeto al cual se administra el compuesto particular. "Metabolito farmacéuticamente activo" significa un producto metabólico de un compuesto de fórmula I el cual es farmacéuticamente aceptable y efectivo. "Conversión en plasma" con respecto a los compuestos de fórmula I significa la degradación (enzimática y/o no enzimática) de tal compuesto en el plasma humano o plasma de roedor a 37°C, desde los 30 minutos hasta las 6 horas, para dar la 3- (l-metil-3-indolil) -4- (l-metil-6-nitro-3-indolil) -lH-pirrol-2, 5-diona, un metabolito farmacéuticamente activo de compuestos de fórmula I, así como también metabolitos farmacéuticamente activos del mismo. Esta conversión es dada típicamente como el por ciento de degradación durante un intervalo de tiempo especificado.

Grupos de "polietilenglicol" o "PEG" representan estructuras de fórmula general HO (CH2CH20) nR8, en donde n está en promedio, entre 2 y 1500, de preferencia 15 a 150, con un peso molecular promedio de 500 a 5000 Daltons, y en donde R8 es carboxilo o alquilo inferior, de preferencia metilo o etilo. Los grupos PEG pueden hacerse reaccionar con compuestos de acuerdo con esta invención para proporcionar compuestos peguilados dentro también del ámbito de esta invención. "Profármaco" se refiere a un compuesto que puede ser convertido bajo condiciones fisiológicas o mediante solvolisis a un compuesto farmacéuticamente activo. Un profármaco puede ser inactivo cuando se administra a un sujeto pero se convierte in vivo a un compuesto activo. "Estabilidad" es un análisis de conjunto sobre la capacidad de un compuesto de fórmula I para resistir la degradación en una solución típica empleada para la administración de fármacos por vía intravenosa. Específicamente se refiere a la capacidad de cualquier compuesto dado de fórmula I, para la liberación de la 3-(l-metil-3-indolil) -4- (l-metil-6-nitro-3-indolíl) -lH-pirrol-2, 5-diona, durante un período de 72 horas en una mezcla de acetonitrilo y solución salina o agua de dextrosa. La "estabilidad" de un compuesto de fórmula I es "muy buena" si se detecta menos del 1% de 3- (l-metil-3-indolil) -4- (l-metil-6-nitro-3-indolil) -lH-pirrol-2, 5-diona, "buena" si se detecta menos del 2.5% de 3- (l-metil-3-indolil) -4- (l-metil-6-nitro-3-indolil) -lH-pirrol-2, 5-diona, y "débil" si se detecta menos del 5% de 3- (l-metil-3-indolil) -4- (l-metil-6-nitro-3-indolil) -lH-pirrol-2, 5-diona, después de 72 horas de incubación a temperatura ambiente. "Sustituido", como en el alquilo sustituido, significa que la sustitución puede tener lugar en una o más posiciones y, a menos que se indique de otra manera, que los sustituyentes en cada sitio de sustitución están independientemente seleccionados entre opciones especificadas. "Amino sustituido" significa un grupo amino, el cual está mono- o di-sustituido con otro grupo, de preferencia alquilo inferior (por ejemplo metilo o etilo) .

Descripción Detallada de la Invención Específicamente, la invención se refiere a pirróles sustituidos que tienen la fórmula: y sales farmacéuticamente aceptables de compuestos precedentes, en donde R está seleccionado del grupo que consiste de -CE2QP03RLR¿ , -CH20H, -CH2OCORd, -CH2OC02RJ, -CH2OCONHRJ, y -CONHR3; R1 y R2 se seleccionan del grupo que consiste de H, Na y NH4 y son los mismos a no ser que o bien R1 o R2 sea H en cuyo caso el otro puede ser diferente, o alternativamente, R1 y R2 juntos, representan calcio. R3 se selecciona del grupo que consiste de alquilo, el cual opcionalmente puede estar sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de -C02R4, -NR5R6, polietilenglicol, -OP03R1R2, hidroxilo, alcoxilo y arilo; alquenilo, el cual puede estar opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de -C02R4, -NR5R6, polietilenglicol, -OPOsR^2, hidroxilo, alcoxilo y arilo/ cicloalquilo que opcipnalmente puede estar sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de -C02R4, -NR5R6, polietilenglicol, -OPO^R2, hidroxilo, alcoxilo y arilo; heterociclo, el cual cuando incluye N como un heteroátomo, N puede estar opcionalmente sustituido con alquilo inferior, y -COR7, arilo, el cual puede estar opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de C02R4, hidroxilo, alcoxilo, polietilenglicol, -OP03R1R2, y alquilo, el cual asimismo puede estar sustituido con hidroxi alcoxilo, carboxilo y amino sustituido, con la condición de que cuando arilo representa piridina, el nitrógeno puede estar sustituido con alquilo inferior; R4 se selecciona del grupo que consiste de H, Na y alquilo inferior; R5 y R6 están cada uno seleccionado independientemente del grupo que consiste de H, alquilo inferior y -COR7, o alternativamente, el grupo -NR5R6, juntos forman un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros; y R7 es alquilo inferior, el cual puede estar opcionalmente sustituido con carboxilo, polietilenglicol y amino sustituido. Los compuestos de fórmula I tienen actividad antiproliferativa, específicamente inhiben la división celular en la fase G2/M del ciclo celular y son referidos geeneralmente como inhibidores del "ciclo celular en la fase G2/M". Estos compuestos son profármacos solubles estables, de un agente terapéutico anticancerígeno, dentro de la Patente de los Estados Unidos 5,057,614 y son por lo tanto adecuados para administrar mediante infusión continua.

La presente invención se refiere además a composiciones farmacéuticas que comprenden una cantidad farmacéuticamente efectiva de uno cualquiera o varios de los compuestos descritos más arriba y un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable. La presente invención se refiere también al empleo de una cantidad efectiva de un compuesto de fórmula I y/o sus sales farmacéuticamente aceptables, para el tratamiento de tumores sólidos, en particular tumores de mama o colon. En una modalidad preferida de los compuestos de fórmula I, R se selecciona del grupo que consiste de -CH2OP03R1R2, -CH2OH, -CH2OCOR3, -CH2OC02R3, -CH20C0NHR3, y -CONHR3, de preferencia -C^OPO^R2, -CH2OCOR3, y -CONHR3, y de mayor preferencia -C^OPO^R2 y -CH2OCOR3. En otra modalidad preferida de los compuestos de fórmula I, R es -CH20C0-piridina en donde el átomo de N de la piridina se sustituye con alquilo inferior, de mayor preferencia metilo o etilo, con lo que se crea un átomo de nitrógeno cuaternario. En otra modalidad preferida de los compuestos de fórmula I, R1 y R2 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de H y Na . En otra modalidad preferida de los compuestos de fórmula I, R3 es un heterociclo que contiene por lo menos un átomo ..de nitrógeno que opcionalmente puede estar sustituido con -COR7. En otra modalidad preferida de los compuestos de fórmula I, R3 es arilo el cual está sustituido con -OP03R1R2, y R1 y R2 están independientemente seleccionados entre H o Na. En otra modalidad preferida de los compuestos de fórmula I, R3 es arilo el cual está sustituido por el grupo que consiste de -C02Na, políetilenglicol y -CH2CHN (CH2CH2) 2. En otra modalidad preferida de los compuestos de fórmula I, R3 es alquilo inferior el cual está sustituido con -C02Na. En otra modalidad preferida de los compuestos de fórmula I, el grupo NRR6 junto, forma un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros, de preferencia piperidina o pirrolidina. En otra modalidad preferida de los compuestos de fórmula I, R5 y R6 se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste de H, metilo y etilo. En otra modalidad preferida de los compuestos de fórmula I, R7 es etilo, el cual está sustituido con polietilenglicol . En otra modalidad preferida de los compuestos de fórmula I, el polietilenglicol tiene un peso molecular desde aproximadamente 750 hasta aproximadamente 5000 Daltons.

En otra modalidad preferida de los compuestos de fórmula I, R es -CH2OCOR3, en donde R3 es etilo el cual está sustituido con PEG que tiene un peso molecular desde aproximadamente 750 hasta aproximadamente 5000 Daltons. Los siguientes son ejemplos de compuestos preferidos de fórmula I: sal mono- [3- ( l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetil] -sódica del ácido fosfórico, O- [2- [ [2, 5-dihidro-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (1-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-il] metoxicarbonil] etil] -O' -metilpolietilenglicol 2000, sal sódica del éster mono- (4-{ [3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-carbonil] -amino}-butílico) del ácido fosfórico, trifluoroacetato de l-metil-3- [3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4 - (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-ilmetoxicarbonil] -piridinio, l-hidroximetil-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (1-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -pirrol-2, 5-diona; y O- [2- [ [ [2, 5-dihidro-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (1-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2,5-dioxo-lH-pirrol-l-il]metoxi] -carbonil] metil] -O' -metilpolietilenglicol 2000. Los compuestos descritos aquí y cubiertos o abarcados por las fórmulas de más arriba, pueden presentar tautomeris o o isomerismo estructural. Se pretende que la invención abarque cualquier forma isomérica tautomérica o estructural de estos compuestos o mezclas de tales formas, y no está limitada a cualquier forma isomérica tautomérica o estructural, utilizada dentro de las fórmulas mencionadas más arriba.

Sintesis de Compuestos de Acuerdo con la Invención Los compuestos de la invención pueden prepararse mediante procedimientos conocidos en la técnica. En los ejemplos, se proporcionan procedimientos adecuados para sintetizar estos compuestos. Generalmente, estos compuestos pueden prepararse de acuerdo con los siguientes esquemas de reacción de síntesis. Los compuestos de fórmula I, en los cuales R significa CH2OCOR3 y en los cuales R3 es como se ha descrito más arriba, pueden prepararse como se indica en el esquema de reacción I a continuación, con la condición de que si R3 contiene un hidroxilo, hidroxialquilo, amino, aminoalquilo, monoalquilamino o carboxilo, tal grupo se protege primero con un grupo protector convencional conocido por aquellos expertos en la técnica. El esquema de reacción I también es útil para preparar compuestos de fórmula I en donde R es -CH2OH.

Esquema de Reacción I Como se ha indicado en el esquema de reacción la, un éster de clorometilo preparado por reacción de un ácido carboxílico conocido o un ácido carboxílico preparado por métodos conocidos, con C1CH20S02C1 en cloruro de metileno y agua, en presencia de una base tal como el carbonato de sodio y un catalizador de transferencia de fase tal como el sulfato ácido de tetrabutilamonio, se hace reaccionar con 3- (l-metil- 3-indolil) -4- (l-metil-6-nitro-3-indolil) -lH-pirrol-2, 5-diona [preparado como se ejemplifica en la Patente EP 0 328 8026] . Alternativamente, se trata el 3- (l-metil-3-indolil) -4- (l-metil-6-nitro-3-indolil) -lH-pirrol-2, 5-diona [preparado como se ejemplifica en Davis, Patente de los Estados Unidos 5,057,614], con formaldehído para producir el producto intermedio hidroximetilo 2. A continuación, se esterifica este producto intermedio empleando procedimientos conocidos. Típicamente, el producto intermedio hidroxilo 2, se trata con un ácido carboxílico conocido o un ácido carboxílico preparado por métodos conocidos, en un disolvente tal como el cloruro de metileno en presencia de EDC y dimetilaminopiridina durante varias horas a temperatura ambiente. Alternativamente, el producto intermedio hidroxilo 2 puede tratarse con un cloruro de ácido conocido o un cloruro de ácido preparado a partir de métodos conocidos. Para preparar los compuestos de estructura 3 en donde R3 contiene un anillo heteroaromático, el heteroátomo tal como el N, puede ser modificado además mediante la reacción con un yoduro de alquilo tal como el CH I en un disolvente tal como el acetonitrilo. Alternativamente, los compuestos de estructura 3 en donde R3 contiene un hidroxilo protegido adecuado, hidroxialquilo, amino, aminoalquilo, monoalquilamino, puede ser modificado además eliminando primero el grupo protector mediante métodos conocidos. El grupo amino o hidroxilo puede a continuación modificarse en la amida o éster deseados, mediante métodos conocidos en la técnica. Los compuestos de la fórmula general I en la cual R significa CH20P03R1R2 y en donde R1 y R2 son como se ha definido más arriba, pueden prepararse mediante el siguiente esquema de reacción II.

Esquema de Reacción II Típicamente, el producto intermedio hidroximetilo 2 se copula o acopla con un fosfato adecuadamente protegido mediante una reacción mitsunobu empleando trifenilfosfina y dietilazodicarboxilato para dar un compuesto de estructura 4 en el cual Y representa un grupo protector adecuado. La eliminación de los grupos de protección puede efectuarse mediante cualquiera de los métodos estándar para dar el ácido fosfórico 5. En particular, cuando Y representa un grupo bencilo, los grupos de protección se eliminan empleando ciclohexadieno y paladio sobre carbón como un catalizador. El compuesto 5 puede a continuación ser convertido en su sal, tal como una sal monosódica 6, por métodos estándar. Los compuestos de fórmula I, en la cual R significa -CH20C02R3, y en la cual R3 es como se ha descrito más arriba, se prepararon de acuerdo con el esquema de reacción III a continuación.

Esquema de Reacción lll Típicamente, el producto intermedio hidroximetilo 2 se trata con un cloroformiato conocido o un cloroformiato preparado empleando procedimientos conocidos, en un disolvente tal como el THF a temperaturas de 5° a 20°C, en presencia de un dimetilaminopiridina y 1 , 5-diazobiciclo (4.3.0) -non-5-eno para proporcionar el carbonato deseado. Los compuestos de fórmula I, en la cual R significa -CH20C0NHR3, y en la cual R3 es como se ha descrito más arriba, se prepararon como se ha descrito en el esquema de reacción IV a continuación.

Esquema de Reacción IV Típicamente, el producto intermedio hidroximetilo 2 es desprotonizado empleando una base fuerte tal como la bis (trimetilsilil) amida de n-butil-litio o de litio en un disolvente tal como el THF a 0°C. El anión generado se trata a continuación, en el mismo disolvente, con bis (p-nitrofenil) -carbonato, seguido por una amina conocida o una amina preparada empleando procedimientos conocidos. Los compuestos de fórmula I, en la cual R significa -CONHR3, y en la cual R3 es como se ha definido más arriba, pueden prepararse como se ha indicado en el esquema de reacción V, a condición de que si R3 contiene un hidroxilo, hidroxialquilo, amino, aminoalquilo, monoalquilamino o carboxilo, tal grupo se proteja con un grupo protector convencional.

Esquema de Reacción V Típicamente, se desprotoniza la 3- (l-metil-3-indolil) -4- (l-metil-6-nitro-3-indolil) -lH-pirrol-2, 5-diona [preparada como se ejemplifica en la Patente EP 0 328 8026] en un disolvente aprótico tal como el THF a 0°C empleando una base fuerte tal como la bis (trimetilsilil) amida de n-butil-litio o de litio. El anión resultante se trata a continuación con bis (p-nitrofenil) carbonato, seguido de una amina conocida o una amina preparada por métodos conocidos en la técnica.

La conversión de un compuesto de reacción acida de fórmula I en una sai farmacéuticamente aceptable puede efectuarse por tratamiento con una base adecuada de una forma conocida. Sales adecuadas son aquellas derivadas no solamente de bases inorgánicas, por ejemplo, sales de sodio, potasio o calcio, sino también de bases orgánicas tales como etilendiamina, monoetanolamina o dietanolamina. La conversión de un compuesto básico de fórmula I en una sal farmacéuticamente aceptable puede efectuarse por tratamiento con un ácido conveniente, en una manera conocida. Sales adecuadas son aquellas descritas en la página 3.

Composiciones/Formulaciones En una modalidad alternativa, la presente invención se refiere a composiciones farmacéuticas que comprenden por lo menos un compuesto de fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Estas composiciones farmacéuticas pueden administrarse oralmente, por ejemplo, en forma de comprimidos, comprimidos recubiertos, cápsulas de gelatina dura o blanda, soluciones, emulsiones o suspensiones. Pueden también administrarse rectalmente, por ejemplo en forma de supositorios. En particular, sin embargo, los compuestos de la presente invención son adecuados para la administración parenteral, por ejemplo, en forma de soluciones para inyección.

Las composiciones farmacéuticas de la presente invención que comprenden los compuestos de fórmula I, profármacos de tales compuestos, o las sales de los mismos, pueden elaborarse en una forma que es conocida en la técnica, por ejemplo, por medio de un mezclado convencional, encapsulado, disolución, granulado, emulsionado, oclusión, confección de grageas o procedimientos de liofilización. Estas preparaciones farmacéuticas pueden formularse con portadores inorgánicos u orgánicos terapéuticamente inertes. Pueden utilizarse la lactosa, almidón de maíz o derivados del mismo, talco, ácido esteárico o sus sales, como tales portadores para comprimidos, comprimidos recubiertos, grageas y cápsulas de gelatina dura. Portadores adecuados para cápsulas de gelatina blanda incluyen aceites vegetales, ceras y grasas. Dependiendo de la naturaleza de la sustancia activa, no son generalmente necesarios portadores en el caso de cápsulas de gelatina blanda. Los portadores adecuados para la elaboración de soluciones y jarabes son el agua, polioles, sacarosa, azúcar invertido y glucosa. Los portadores adecuados para la inyección son el agua, alcoholes, polioles, glicerina, aceites vegetales, fosfolípidos y surfactantes. Portadores adecuados para supositorios son los aceites naturales o endurecidos, ceras, grasas y polioles semi-líquidos .

Las preparaciones farmacéuticas pueden también contener agentes conservantes, agentes solubilizantes, agentes estabilizantes, agentes humectantes, agentes emulsionantes, agentes edulcorantes, agentes colorantes, agentes saborizantes, sales para variar la presión osmótica, tampones, agentes de recubrimiento o antioxidantes. Pueden también contener otras sustancias terapéuticamente valiosas, incluyendo ingredientes activos adicionales distintos de aquellos de fórmula I.

Dosificaciones Como se ha mencionado más arriba, los compuestos de la presente invención son útiles para el tratamiento o control de los trastornos proliferativos celulares, en particular trastornos oncológicos. Estos compuestos y formulaciones que contienen los compuestos son particularmente útiles para el tratamiento o control de tumores sólidos, tales como, por ejemplo, tumores de mama y colon. Una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con esta invención, significa una cantidad de compuesto que es efectiva para prevenir, aliviar o mejorar los síntomas de la enfermedad o prolongar la supervivencia del sujeto que se está tratando. La determinación de una cantidad terapéuticamente efectiva está dentro de la práctica de la técnica.

La cantidad o dosificación terapéuticamente efectiva de un compuesto de acuerdo con esta invención pueden variar dentro de amplios límites y deberá ser ajustada a los requerimientos individuales de cada caso particular. En general, en el caso de la administración oral o parenteral a humanos adultos con un peso aproximado de 70 kg, una dosificación diaria de aproximadamente 10 mg hasta aproximadamente 10,000 mg, de preferencia desde aproximadamente 200 mg hasta aproximadamente 1,000 mg, debería ser apropiada, aunque el límite superior puede ser excedido cuando está indicado. La dosificación diaria puede administrarse con una dosis única o en dosis divididas o para la administración parenteral puede darse como una infusión continua.

Ejemplos Los compuestos de la presente invención pueden sintetizarse de acuerdo con las técnicas conocidas, tales como por ejemplo, los esquema de reacción generales proporcionados más arriba. Los siguientes ejemplos ilustran métodos preferidos para sintetizar los compuestos y formulaciones de la presente invención.

Ejemplo 1: Sal mono- [3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2 , 5-dioxo-2 ,5-dihidro-pirrol-l-ilme il] -sódica del ácido fosfórico a) Una suspensión que consistía de 0.5 g (1.25 mmoles) de 3- (l-metil-3-indolil) -4- (l-metil-6-nitro-3-indolil) -lH-pirrol-2, 5-diona (ver Davis Patente de los Estados Unidos No. 5,057,614), 4.0 ml de solución de formaldehído (37% p/p) y 2.0 ml de agua, se calentó a 125°C con agitación y con un condensador de reflujo unido o incorporado durante 14 horas. La mezcla de reacción se enfrió y se diluyó con agua. El sólido rojo se filtró, se lavó con agua y se secó. El sólido se purificó por cromatografía empleando gel de sílice y una mezcla de EtOAc/Hexano como eluyente, para proporcionar l-hidroximetil-3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -pirrol-2, 5-diona (p.f. - 209-211°C) . b) A una solución en frío (10°C) de THF que contenía 0.12 g (0.68 mmoles) de dietilazodicarboxilato, 0.20 g (0.46 moles) de l-hidroximetil-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (1-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-pirrol-2,5-diona (a partir del Paso a) de más arriba), y 0.40 g (1.43 mmoles) de dibencilfosfato, se agregaron gota a gota 5 ml de una solución que contenía 0.128 g (0.49 inmoles) de trifenilfosfina. La mezcla resultante se agitó durante 14 horas a 20°C. Se evaporó todo el disolvente y el residuo se purificó por cromatografía empleando gel de sílice y eluyendo con una mezcla de EtOAc/Hexanos, para proporcionar el éster dibencílico del ácido fosfórico, éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico, como un bloque sólido de color rojo (p.f. = 105-109°C) . c) Una solución de 35 mg (0.051 mmoles) del éster dibencílico del ácido fosfórico, éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-ilmetílico (a partir del paso b) de más arriba) en THF (5 ml) con 5 ml de etanol y 0.5 g de 1, 4-ciclohexadieno, se trató con 35 mg de paladio al 10%/carbón. La mezcla se calentó a 45 °C en cuyo punto tuvo lugar una ligera exotermia. Después de 10 minutos a 50°C, se filtró la reacción caliente a través de celite y la torta del filtro se lavó con THF. Todo el disolvente se evaporó y el residuo se redisolvió en THF, se filtró a través de celite y se trituró con hexano para dar 14 mg de ácido fosfórico mono- [3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-ilmetilo] . d) Una solución de 14 mg (0.029 mmoles) de ácido fosfórico mono- [3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetilo] (a partir del paso c) de más arriba) en 15 ml de agua, se trató con hidróxido de sodio diluido hasta que el pH de la solución fue de 7.1. Esta solución se filtró y liofilizó para producir la sal mono- [3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetilo] sódica del ácido fosfórico.

Ejemplo 2 : Ester 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-n±tro-lH-indol-3-il) -2,5-dioxo-2 , 5-dihidro-pirrol-l-ilmetilico del ácido isonicotínico A una solución de dimetilaminopiridina (1.5 equivalentes) y clorhidrato de l-etil-3- (3-dimetilaminopropil ) -carbodiimida (1.5 equivalentes) en CH2C12 se agregó ácido 4-picolínico (1.2 equivalentes) y la mezcla de reacción se agitó unos pocos minutos. Se agregó l-hidroximetil-3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -pirrol-2,5-diona, preparado como en el ejemplo Ia, y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante varias horas. La mezcla se diluyó con diclorometano, se lavó con HCl acuoso, NaHC03 saturado, agua, se secó con MgS04 y se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía de columna para producir el éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-ílmetílico del ácido isonicotínico (rendimiento - 76%).

Ejemplo 3 Empleando el mismo procedimiento del ejemplo 2, se prepararon los siguientes compuestos: a) éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (1-metíl-ß-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido nicotínico (rendimiento - 76%); b) O- [2- [ [2, 5-dihidro-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-1-il] metoxicarbonil] etil] -0' -metilpolietilenglicol 2000 (rendimiento - 88%) ; c) éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihídro-pirrol-l-ilmetílico del ácido piridin-4-il acético (rendimiento - 39%) ; d) éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido piridin-3-il acético (rendimiento - 94%); e) éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido piridin-2-il acético (rendimiento - 65%) ; f) éster mono- [3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (1-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido succínico (empleados 3 equivalentes de EDC y DMAP y 2.4 equivalentes de ácido, purificado mediante CCF preparativa) (rendimiento - 89%); g) éster 3- ( l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido hexadec-9-enoico, (rendimiento - 53%) ; h) éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- ( l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido [2- [2- (2-carboximetoxi-etoxi) -etoxi] -etoxi] acético, purificado mediante cromatografía de columna de fase inversa (rendimiento - 61%) .

Ejemplo 4: éster mono- [3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (1-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-metílico] del ácido but-2-enodioico A una solución de l-hidroximetil-3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -pirrol-2, 5-diona, preparada como en el ejemplo Ia, en 1:4 de CH2C12: benceno, se agregó un gran exceso de cloruro de fumarilo y un exceso de diisopropiletilamina. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 20 minutos. Se agregaron acetona y agua. La mezcla de reacción se diluyó con CH2C12, se lavó con agua, NaHC03 frío saturado y se secó sobre Na2S04. El resultante éster mono- [3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-metílico] del ácido but-2-enodioico, se purificó mediante cromatografía instantánea (rendimiento 60%).

Ejemplo 5 : éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-metilico del ácido decanoico a) Se trató el ácido decanoico (0.2 g, 1.2 mmoles) con 4 equivalentes de NaC03, 0.1 equivalentes de Bu4NHS04 y 1.2 equivalentes de C1CH20S02C1 en 1:1 de CH2C12:H20. La reacción se agitó vigorosamente a 0°C durante 30 minutos y a continuación a temperatura ambiente ("TA") durante 3 horas. El tratamiento acuoso proporcionó el clorometildecanoato (rendimiento 100%) . b) Se disolvió 3- (l-metil-3-indolil) -4 - (1-metil-6-nitro-3-indolil)-lH-pirrol-2, 5-diona (20 mg, 0.05 mmoles) (ver Patente EP 0 328 8026) en DMF y se trató con Cs2C03 (49 mg, 0.15 mmoles) durante unos pocos minutos, se agregó el éster de clorometilo (33 mg, 0.15 mmoles) preparado en el paso anterior a) , y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. El tratamiento acuoso, seguido por la purificación mediante cromatografía instantánea proporcionó el éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- ( l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido decanoico (rendimiento - 58%) .

Ejemplo 6 Los siguientes compuestos se prepararon de manera similar al ejemplo 5b anterior: a) éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido [2- (2-metoxi-etoxi) -etoxi] -acético (el clorometilo de partida se preparó a partir del correspondiente ácido como se describe en el ejemplo 5a; se purificó mediante CCF preparativa (rendimiento - 38%) ; b) éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido 2, 2-dimetil-propiónico (el pivalato de clorometilo de partida se adquirió en Aldrich) (rendimiento - 91%) .

Ejemplo 7: Trifluoroacetato del óster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-1-ilmetilico del ácido 3-amino-ciclohexanocarboxilico a) Se preparó el clorometil-N-t-butiloxicarbonil-3-amino-ciclohexanocarboxilato, de manera similar (rendimiento 8%) como se describe en el ejemplo 5a a partir del ácido N-t-butiloxicarbonil-3-amino-ciclohexanocarboxílico, el cual a su vez se sintetizó mediante el procedimiento conocido de protección con BOC del ácido 3-amino-ciclohexano-carboxílico (Aldrich) . b) Se disolvió la 3- (l-metil-3-indolil) -4- (1-metil-6-nitro-3-indolil)-lH-pirrol-2, 5-diona (68 mg, 0.15 mmoles) (ver Patente EP 0 328 8026) en DMF y se trató con Cs2C0 (0.15 g, 0.45 mmoles) durante unos pocos minutos. Se agregó el éster de clorometilo (0.13 g, 0.45 mmoles) preparado en el paso a) anterior, y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 50 minutos. El tratamiento con agua seguido por purificación mediante cromatografía instantánea, produjo el éster 3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5- dihidro-pirrol-1-ilmetílico del ácido [N-a-butiloxi-3-amino- ciclohexanocarboxílico] (rendimiento - 95%) c) El grupo protector ter-butiloxi del compuesto del paso b) anterior, se eliminó mediante tratamiento con TFA en' CH2C12 a temperatura ambiente durante 50 minutos. El TFA y el CH2C12 se evaporaron empleando una corriente de nitrógeno. El residuo se purificó mediante CLAP para dar el trifluoroacetato del éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH- indol-3-il) -2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido 3-amino-ciclohexanocarboxílico (rendimiento - 57%) .

Ejemplo 8 Se prepararon los siguientes compuestos de manera similar al ejemplo 7a, b y c, descritos anteriormente: a) trifluoroacetato del éster 3- ( 1-metil-lH- indol-3-il) -4- ( l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5- • dihidro-pirrol-1-ilmetílico del ácido piperidin-4-carboxílico (preparado a partir del ácido N-t-butiloxicarbonil-piperidin- 4-carboxílico (Bachem) (rendimiento - 62%) ; b) trifluoroacetato del éster 3- (1-metil-lH- indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5- dihidro-pirrol-1-ilmetílico del ácido 2-amino-2-metil- propiónico (preparado a partir del ácido N-t-butiloxicarbonil- aminoisobutírico (Bachem) (rendimiento - 63%).

Ejemplo 9: Sal de acetato del éster 3- (l-metil-lH-indol-3-11) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-1-ilmetilico del ácido piperidin-4-carboxilico Se disolvió el trifluoroacetato del éster 3-(l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido piperidin-4-carboxílico, preparado como en el ejemplo 8a de más arriba, en acetato de etilo. La solución resultante se neutralizó con NaHC03 saturado frío. La capa de acetato de etilo se concentró y se suspendió en H20 y se acidificó con un exceso de HOAc y se liofilizó para dar el producto deseado (rendimiento - 97%) .

Ejemplo 10: Clorhidrato del éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-1-ilmetilico del ácido piperidin-4-carboxilico Se disolvió la sal de acetato del éster 3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido piperidin-4-carboxílico, preparado como en el ejemplo 9 de más arriba, en acetato de etilo. La solución de acetato de etilo se neutralizó con NaHC03 saturado en frío, se concentró y se trató con 1:5 de CH3CN:H20. La solución resultante se trató con 2 equivalentes de HCl acuoso 2N, y se purificó mediante CLAP para dar el producto deseado (rendimiento - 86%) .

Ejemplo 11: Clorhidrato del éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-1-ilmetilico del ácido 2-amino-2-metil-propiónico Este compuesto se preparó a partir del trifluoroacetato del éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido 2-amino-2-metil-propiónico, preparado como en el ejemplo 8b, empleando un procedimiento similar al descrito en el ejemplo 10 (rendimiento - 71%).

Ejemplo 12 : Trifluoroacetato de l-metil-3- [3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-1-ilmetoxicarbonilo] -piridinio Una solución del éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-ilmetilico del ácido nicotínico, en CH3CN, preparado como se describe en el ejemplo 3a, se trató con 2 equivalentes de NaBPH4, y 6 equivalentes de Mel. La reacción se agitó a reflujo durante 7 horas. El disolvente se evaporó y el residuo se purificó mediante CLAP para producir el trifluoroacetato de l-metil-3- [3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-?irrol-l-ilmetoxi-carbonil] -1-piridinio (rendimiento 52%).

Ejemplo 13: O- [2- [ [4- [ [ [2 ,5-dihidro-3- (l-metil-lH-indol-3-11) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-lH-pirrol-1-11]metoxi] carbonil] -1-piperidinil] carbonil] etil] -O' -metil-polietilenglicol 1000 Se disolvió el trifluoroacetato de 3- (l-metil-3-indolil) -4- (l-metil-6-nitro-3-indolil) -1- (4-piperidincarboxi-metil) -lH-pirrol-2, 5-diona, preparado como en el ejemplo 8a, en acetato de etilo. La solución resultante se neutralizó con NaHC0 saturado frío. La capa de acetato de etilo se concentró y el residuo se trató con CHCN. La solución se agregó gota a gota a una solución de cloruro de ácido 0-(2-carboxietil) -O'-metilpolietilenglicol 1000 (preparado a partir de ácido O- (2-carboxietil) -0' -metilpolietilenglicol 1000, empleando el procedimiento estándar) en CH3CN . La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora. El disolvente se evaporó y el residuo se purificó mediante CLAP (rendimiento 70%) .

Ejemplo 14: Sal monosódica del éster 3- (l-metil-lH-indol-3-11) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-1-ilmetilico del ácido 4-fosfonooxi-benzoico a) Se agregó gota a gota, t-BuOK (9.6 ml, 9.6 mmoles, 1M en THF) , a una solución de 4-hidroxibenzaldehído (1.10 g, 9 mmoles) en THF (40 ml) . La mezcla se calentó a 70°C y se agregó pirofosfato de tetrabencilo (5.05 g, 9.37 mmoles) en THF (20 ml) . Después de 1 hora, se agregó THF (100 ml) y hexanos (200 ml) . La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se evaporó. La cromatografía del residuo sobre sílice empleando 2%-5%-10% de metanol-CH2Cl2 proporcionó el éster 4-formil-fenílico del éster dibencílico del ácido fosfórico (3.38 g, 98%). b) Fosfato diácido de sodio monohidrato (79 mg, 0.57 mmoles) en agua (1 ml) se agregó a una solución del éster 4-formil-fenílico del éster dibencílico del ácido fosfórico (0.89 g, 2.32 mmoles) (a partir del paso a) de más arriba) en MeCN (10 ml) a 0°C. Se agregó peróxido de hidrógeno (0.24 ml, 30% en agua, 2.4 minóles) , seguido por clorito de sodio (315 mg, 3.5 mmoles) en agua (2 ml) . La mezcla de reacción se agitó a 0°C durante 1 hora, a continuación se calentó a temperatura ambiente durante 2 horas. Se agregó tiosulfato de sodio (100 mg) y la mezcla de reacción se agitó vigorosamente durante 15 minutos. Se agregó agua y la mezcla se extrajo con EtOAc. Los extractos orgánicos se lavaron con agua, se secaron (MgS04) , se filtraron y se concentraron para dar el éster 4-carboxil-fenílico del éster dibencílico del ácido fosfórico (880 mg, 94%) como un sólido ceroso de color amarillo pálido. c) Una solución del éster 4-carboxil-fenílico del éster dibencílico del ácido fosfórico (205 mg, 0.5 mmoles) (del paso b) de más arriba) en CH2C12 (2 ml) , se agregó a una solución de clorhidrato de l-etil-3- (3-dimetilaminopropil) - carbodiimida (149 mg, 0.78 mmoles) (Aldrich) y dimetilaminopiridina (139 mg, 1.13 mmoles) en CH2C12 (5 ml) . Después de 5 minutos, se agregó l-hidroximetil-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-pirrol-2, 5-diona (215 mg, 0.5 inmoles), preparada como en el ejemplo la, en CH2C12 (2 ml) , y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. La mezcla resultante se dividió entre CH2C12 y agua y los extractos orgánicos se lavaron con agua. La capa acuosa se extrajo con CH2C12. Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron (MgS04) y se concentraron. La cromatografía del residuo sobre gel de sílice empleando 5% - 10% de EtOAc - CH2C12 proporcionó el éster 3- (1, 6-dimetil-lH-indol-3-il) -4- (1-metil-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido 4- (bis-benciloxi-fosforiloxi) -benzoico (179 mg, 44%) como una espuma de color naranja. d) Se agregó 1, 4-ciclohexadieno (0.12 ml, 1.26 inmoles) (Aldrich) a una mezcla del éster 3- (1, 6-dimetil-lH-indol-3-il) -4- ( 1-metil-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-1-ilmetílico del ácido 4- (bis-benciloxi-fosforiloxi) -benzoico (100 mg, 0.12 mmoles) (a partir del paso c) de más arriba) y Pd/C (37 mg, 10%) en una mezcla de THF (6 ml) y etanol (0.3 ml) . La mezcla de reacción se calentó a 55°C durante 20 minutos. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se filtró a través de celite, se lavó con cloruro de metileno y se concentró. El residuo se disolvió en MeCN y agua a 0°C. se agregó hidróxido de sodio 1N (2.4 ml, 2.4 mmoles) y la mezcla se liofilizó. La mezcla resultante se purificó además mediante CLAP con 5 a 50% de MeCN - agua. La liofilización proporcionó la sal monosódica del éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido 4-fosfonooxi-benzoico (60 g, 74%) como un polvo de color naranja .

Ejemplo 15: [ [3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2 , 5-dioxo-2 , 5-dihidro-pirrol-l-il]metoxicarbonil] -4-fenil-O-metilpolietilenglicol 500 a) PEG-500 monometiléter seco (18.36 g, 33 inmoles), 4-hidroxibenzoato de etilo (5.0 g, 30 mmoles) y trifenilfosfina (17.34 g, 66 mmoles), se disolvieron en THF seco (100 ml) y se enfriaron a 0°C en atmósfera de argón. A esta solución se agregó lentamente dietilazodicarboxilato (12.95 ml, 83 mmoles) en THF seco (10 ml) . La mezcla resultante se calentó a continuación a 50 °C durante 16 horas. La mezcla se enfrió a 0°C en atmósfera de argón y se agregó dietilazodicarboxilato (6 ml) en THF seco (5 ml) . Se calentó la mezcla a 50 °C durante 24 horas. La evaporación de los disolventes y la cromatografía del residuo sobre gel de sílice usando 1 : 1 de CH2Cl2-hexanos, CH2C12, éter al 50%/CH2Cl2 y éter, proporcionó 9 g de benzoato de etil-4-O-metil- polietilenglicol 500 crudo, como un aceite, 5.4 g de un aceite de color naranja (3/2 % en moles de trifenilfosfina/-producto) , y 4.9 g (~ 58% de rendimiento total) de un aceite de color naranja (5/4 % en moles de trifenilfosfina/producto) . b) A una solución del benzoato de etil-4-O-metil-polietilenglicol 500 crudo (4.90 g, 5/4 % en moles de trifenilfosfina/producto) (a partir del paso a) anterior) en metanol (10 ml) y agua (15 ml) , se agregó NaOH 6N (13.8 ml, 83 inmoles), y la solución resultante se calentó a 65°C durante 2 horas. La solución se concentró y se dividió entre CH2C1 al 30%/acetato de etilo y agua. La capa acuosa se enfrió a 0°C y se acidificó a pH 3.0 con HCl 1N. La mezcla se extrajo con CH2C12 y los extractos orgánicos se secaron (MgS04) . La evaporación de los disolventes orgánicos proporcionó el ácido 4-0-metilpolietilenglicol 500 benzoico crudo (2.3 g, 49%) como un residuo ceroso de color amarillo (la muestra contenía un 20-30% molar en exceso de PEG 500) . c) Una solución del ácido 4-O-metilpoli-etilenglicol 500 benzoico crudo (679 mg, 1 mmol) (a partir del paso b) de más arriba) en CH2C12 seco (5 ml) , se agregó a temperatura ambiente, a una solución de clorhidrato de 1-etil-3- (3-dimetilaminopropil) carbodiimida (300 mg, 1.56 mmoles) (Aldrich) y dimetilaminopiridina (279 mg, 2.28 mmoles) en CH2C1 seco (5 ml) . Después de 5 minutos, se agregó l-hidroximetil-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-pirrol-2, 5-diona (430 mg, 1 mmol), preparado como en el ejemplo la. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. Se agregó agua y la mezcla se extrajo con CH2C12. Los extractos orgánicos se lavaron con agua, se secaron (MgS04) y se concentraron. El residuo se purificó mediante CLAP con MeCN/agua para dar [ [3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-il] metoxicarbonil] -4-feni1-0-metilpolietilenglicol 500 (490 mg, 47%) como un aceite de color naranja.

Ejemplo 16: Ester 3- (l-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetilico del éster áulico del ácido carbónico Una solución de 200 mg (0.47 mmoles) de 1-hidroxi-metil-3- ( 1-metil-lH-indol-3-il) -4- (1-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -pirrol-2, 5-diona, preparada como en el ejemplo la, se disolvió en 90 ml de THF y se trató con 300 mg (2.5 mmoles) de -dimetilaminopiridina (DMAP) . A esta solución a 5°C se agregaron 90 mg (0.75 inmoles) de cloroformiato de alilo. Manteniéndolo frío, se agregaron gota a gota, 300 mg (2.4 mmoles) de 1, 5-diazabiciclo (4.3.0) non-5-eno (DBN) (Aldrich). Se agitó la mezcla durante 14 horas a 20°C. El disolvente se evaporó y la mezcla se purificó mediante cromatografía empleando gel de sílice y eluyendo con una mezcla de EtOA/-hexano para proporcionar el éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-ilmetílico del éster alílico del ácido carbónico, como un sólido de color rojo (p.f. 191-194°C).

Ejemplo 17: Éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2,5-dxoxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido (2-dimetilamino-etil) -carbámico Se disolvió la l-hidroximetil-3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -pirrol-2, 5-diona (200 mg, 0.47 mmoles), preparada como en el ejemplo la, en THF (10 ml) . La solución resultante de color rojo se enfrió en un baño de hielo. Se agregó gota a gota bis (trimetilsilil) -amida de litio (0.56 ml, 0.56 mmoles, 1 M en THF), a la solución para dar una suspensión de color rojo. Después de 10 minutos, se agregó el bis (p-nitrofenil) carbonato (200 mg, 0.66 mmoles). La solución resultante se agitó a 0°C durante 20 minutos. Se agregó dietilaminoetilamina (90 mg, 0.78 mmoles) en THF (2 ml) . Se continuó la agitación durante 2 horas. La mezcla se evaporó y el residuo se purificó mediante cromatografía instantánea para dar el éster 3-(l-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-1-ilmetílico del ácido (2-dimetilaminoetil) -carbámico (124 mg, 46%).

Ejemplo 18 : Éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido [2- (2-hidroxi-etoxi) -etil] -carbámico Este compuesto se preparó a partir del l-amino-2-etoxi-etanol (Aldrich) , empleando el mismo procedimiento como en el ejemplo 17 (45 mg, 17%) .

Ejemplo 19: Éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetilico del ácido (2-hidroxi-etil) -carbámico Se agregó n-BuLi (0.96 ml, 1.54 mmoles, 1.6 M en hexanos) gota a gota a una solución de l-hidroximetil-3- (1-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -pirrol-2,5-diona (600 mg, 1.54 mmoles), preparada como en el ejemplo la, en THF (30 ml) a 0°C. Después de 10 minutos se agregó bis (p-nitrofenil) carbonato (600 mg, 1.96 mmoles). La solución se agitó a 0°C durante 20 minutos. Se agregó una solución de 1-aminoetanol (128 mg, 2.10 mmoles). La mezcla resultante se agitó a 0°C durante 30 minutos. Se agregó NH4C1 acuoso y la mezcla se extrajo con EtOAc. El extracto orgánico se lavó con salmuera y se secó sobre MgS04. La evaporación de los disolventes y la cromatografía del residuo sobre gel de sílice empleando 1:1 - 3:2 de EtOAc/hexanos, proporcionó el éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol- 3-il) -2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido (2-hidroxi-etil) -carbámico (339 mg, 47%).

Ejemplo 20: Ester 3- (l-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetilico del ácido (2-fosfonooxi-etil) -carbámico a) Se agregaron trifenilfosfina (95 mg, 0.36 mmoles) y fosfato de dibencilo (101 mg, 0.36 mmoles), a una solución de éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido (2-hidroxi-etil) -carbámico, preparado como en el ejemplo 19 (150 mg, 0.289 mmoles) en THF (6 ml). La mezcla se enfrió a -78°C. Se agregó azodicarboxilato de dietilo (0.057 ml, 0.36 mmoles) gota a gota durante 5 minutos. Se quitó el baño de enfriamiento y la mezcla se agitó durante la noche. A continuación, se evaporó la mezcla. La cromatografía del residuo sobre gel de sílice empleando 2:1 - 4:1 de EtOAc/hexanos proporcionó el éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-ilmetílico del ácido [2-bis-benciloxi-fosforiloxi) -etil] -carbámico (121 mg, 54%) . b) Se agregaron Pd/C (33 mg, 10%) y 1,4-ciclo-hexadieno (0.12 ml, 1.27 inmoles), a una solución de éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido [2-bis-benciloxi-fosforiloxi) -etil] -carbámico (115 mg, 0.148 mmoles) en una mezcla de THF (5 ml) y EtOH (0.25 ml) . La mezcla se calentó a 50-55°C durante 30 minutos. La mezcla resultante se filtró a través de celite, se lavó con THF y el filtrado se evaporó. El residuo se disolvió en una mezcla de EtOH (10 ml) y CH3CN (10 ml) . Se agregó NaOH 0.1 N y el pH se ajustó a 8.2. Se agregó agua (10 ml) para disolver el precipitado. Los disolventes orgánicos se eliminaron bajo vacío y la liofilización de la solución de color rojo dio el éster 3-(l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido (2-fosfonooxi-etil) -carbámico (59 mg, 62%) como un polvo de color naranja.

Ejemplo 21: (2-dietilamino-etil) -amida del ácido 3- (1-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-1-carboxílico A una solución en frío de la 3- (l-metil-3-indolil) -4- (l-metil-6-nitro-3-indolil) -lH-pirrol-2, 5-diona (200 mg, 0.5 mmoles) (ver Patente EP 0 328 8026) en THF (7 ml) se agregó gota a gota, bis (trimetilsilil) amida de litio (0.55 mmoles, 0.55 ml, 1M en THF) . La suspensión resultante de color rojo se agitó durante 15 minutos. Se agregó bis (p-nitrofenil) carbonato (213 mg, 0.7 mmoles). La solución se agitó a 0°C durante 0.5 horas. Se agregó dietilaminoetilamina (69.7 mg, 0.6 mmoles) en THF (2 ml) , y se continuó agitando durante 2 horas. El disolvente se evaporó y el residuo se purificó mediante cromatografía instantánea para dar la (2-dietilamino-etil) -amida del ácido 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-carboxílico (28 mg, 10%) .

Ejemplo 22 : (6-dimetilamino-hexil) -amida del ácido 3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-carboxílico Este compuesto se preparó a partir de la dimetil-aminohexilamina de acuerdo con el procedimiento descrito en el ejemplo 21 (67 mg, 24%) .

Ejemplo 23 : (4-hidroxibutil) -amida del ácido 3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2 , 5-dioxo-2 , 5-dihidro-pirrol-1-carboxílico A una solución en frío de la 3- (l-metil-3-indolil) -4- (l-metil-6-nitro-3-indolil) -lH-pirrol-2, 5-diona (500 mg, 1.25 mmoles) (ver Patente EP 0 328 8026) en THF (7 ml) se agregó gota a gota, n-butil-litio (0.86 ml, 1.375 inmoles, 1.6 M en hexano). La suspensión resultante de color rojo se agitó durante 15 minutos. A continuación, se agregó bis (p-nitrofenil) carbonato (532 mg, 1.75 mmoles). La solución resultante se agitó a 0°C durante 1 hora. Se agregó 4-amino-butanol (167 mg, 1.875 mmoles) en THF (4 ml) , y se continuó agitando durante 2 horas. El disolvente se evaporó y el residuo se purificó mediante cromatografía instantánea para producir la (4-hidroxibutil) -amida del ácido 3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-carboxílico (280 mg, 43%), como un sólido color naranja.

Ejemplo 24: Sal sódica del éster mono- (4-{ [3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2 , 5-dioxo-2 , 5-dihidro-pirrol-1-carbonil] -amino} -butílico del ácido fosfórico a) Se agregaron trifenilfosfina (0.86 g, 3.29 inmoles) y fosfato de dibencilo (0.91 g, 3.29 mmoles) a una solución de la (4-hidroxibutil) -amida del ácido 3-(l-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-carboxílico, (preparada como en el ejemplo 23, 1.41 g, 2.74 inmoles) en THF (50 ml) . La mezcla se enfrió a -78 °C. Se agregó azodicarboxilato de dietilo (0.52 ml, 3.29 mmoles) gota a gota durante 5 minutos. Se quitó el baño de enfriamiento y después de 2 horas, se evaporó la mezcla. La cromatografía del residuo sobre gel de sílice empleando 2:1 de EtOAc/hexano, a continuación EtOAc, proporcionó el éster 4-{ [3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-carbonil] -amino} -butílico del éster dibencílico del ácido fosfórico (1.76 g, 83%) . b) Se agregaron Pd/C (0.5 g, 10%) y 1,4-ciclo-hexadieno (1.84 ml, 19 mmoles), a una solución de éster 4- { [3-(l-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-carbonil] -amino} -butílico del éster dibencílico del ácido fosfórico (1.76 g, 2.27 mmoles) (a partir del paso a) de más arriba) en una mezcla de THF (75 ml) y EtOH (3.8 ml) . La mezcla resultante se calentó a 50-55°C durante 30 minutos. La CCF (EtOAc) mostró solamente la existencia de trazas del éster 4-{ [3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-carbonil] -amino}-butílico del éster dibencílico del ácido fosfórico. La mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se evaporó. El residuo se disolvió en una mezcla de EtOH (100 ml) y CHCN (100 ml) y se basificó con NaOH (0.2 N) hasta pH = 8.2. Se agregó agua (50 ml) para disolver el precipitado. Los disolventes orgánicos se eliminaron bajo vacío y la liofilización de la solución de color rojo proporcionó el producto crudo (1.2 g) . La purificación del residuo empleando la CLAP (10% - 90% de CH3CN - H20) proporcionó la sal de sodio del éster mono- (4-{ [3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-carbonil] -amino} -butílico del ácido fosfórico (0.49 g, 34%) como un polvo color rojo.

Ejemplo 25 : O- [2- [ [ [2 , 5-dihidro-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2 , 5-dioxo-2 , 5-dihidro-pirrol-1-11]metoxi] carbonil]metil] -O' -metilpolietilenglicol 2000 Se calentó poli (etilenglicol) metil éter de peso molecular promedio aproximado 2000 (Aldrich) (4.4 g, 2.2 mmoles) en tetrahidrofurano (120 ml) a aproximadamente 35-40°C y al mismo se agregó hidruro de sodio (0.6 g de 60%, 15 mmoles) , y la mezcla se agitó durante unos 15 minutos adicionales. En dos porciones durante 5 minutos, se agregó bromoacetato de ter-butilo (1.2 g, -6.2 mmoles) y la mezcla se calentó a 45-50°C durante 4 horas. La mezcla se enfrió a aproximadamente 30°C, se diluyó con éter etílico (100 ml) , se filtró en caliente a través de celite y la torta del filtro se lavó con tetrahidrofurano: Los disolventes orgánicos se eliminaron por evaporación y el residuo se sometió a cromatografía sobre gel de sílice. El éster ter-butílico purificado similarmente preparado (12.5 g) se trató con ácido trifluoroacético (75 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante 90 minutos. La evaporación de la solución y cristalización a partir del éter etílico frío proporcionaron 9.0 gramos de ácido metoxi PEG 2000 etanoico.

Una solución de ácido metoxi PEG 2000 etanoico (9.0 g, 4.5 mmoles) en diclorometano (50 ml) se trató con cloruro de oxalilo (10 ml) , se calentó suavemente a reflujo durante 15 minutos y se continuó con la adición de trazas de dimetilformamida (0.1 ml) . El reflujo se continuó durante unos 15 minutos adicionales y se agregó tolueno (50 ml) y los materiales volátiles se eliminaron por evaporación. El residuo se disolvió en diclorometano (50 ml) y se agregó a una suspensión de l-hidroximetil-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -pirrol-2, 5-diona (1.93 g, 4.5 inmoles) (preparado como en el Ejemplo la) y 4-dimetílamino-piridina (1.1 g, 9 mmoles) en diclorometano (25 ml) a -50°C. El baño de enfriamiento se eliminó y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas y se vertió sobre gel de sílice (200 g) en diclorometano. La purificación mediante cromatografía y cristalización del residuo a partir del tetrahidrofurano-éter etílico proporcionó el O- [2- [[2,5-dihidro-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-il]metoxicarbonil]metil-O' -metil-polietilenglicol 2000 como un sólido color rojo (rendimiento 63%) .

Ejemplo 26: Actividad Antiproliferativa La actividad antiproliferativa de los compuestos de la invención se demuestra a continuación. Estos efectos indican que los compuestos de la presente invención son útiles en el tratamiento del cáncer, en particular tumores sólidos tales como los tumores de mama y de colon.

Ensayo Basado en las Células MDAMB-435 La línea celular de carcinoma de mama epitelial (MDAMB-435) se adquirió de ATCC (American Type Cell Culture Collection) ("Colección de Cultivos Celulares Tipo Americana") y se hizo crecer en cultivo en un medio siguiendo las recomendaciones de ATCC. Para el análisis del efecto de varios compuestos de fórmula I sobre el crecimiento de estas células, las células se plaquearon a una concentración de 1500 células/pozo en una placa de cultivo tisular de 96 pozos ("placa de ensayo") . El día después de que las células fueron plaqueadas, los compuestos que debían ser analizados se disolvieron en 100% de DMSO (sulfóxido de dimetilo) para producir una solución de stock o madre 10 mM. Cada compuesto se diluyó en H20 hasta 1 mM y se agregó por triplicado a pozos en la primera fila de una placa maestra de 96 pozos que contenía un medio para proporcionar una concentración final de 40 µM. A continuación, los compuestos se diluyeron en una serie, en un medio en la "placa maestra". El (los) compuesto (s) diluido (s) se transfirió (eron) a continuación a placas de ensayo conteniendo las células. Una fila de vehículo "células de control" recibió DMSO. La concentración final de DMSO en cada pozo fue de 0.1%. 5 días después de la adición del fármaco, la placa fue analizada como se describe más adelante. A cada pozo se agregó MTT (bromuro de 3- (4-5 etil-tiazol-2-il) -2, 5-difenil tetrazolio; azul de tiazolilo) hasta proporcionar una concentración final de 1 mg/ml. A continuación, se incubó la placa a 37 °C durante 2 ^ -3 horas. El medio conteniendo MTT se eliminó a continuación y se agregaron 50 µl de etanol al 100% a cada pozo para disolver el formazano. A continuación, se leyeron las absorbancias empleando un lector de placas automático (lector Bio-tek de microplacas) . Se calcularon los IC50 empleando la ecuación de Reed and Munsch, ver Am. J. Hygiene vol. 27, páginas 493-497, 1938. Los resultados de los experimentos in vi tro anteriores están resumidos en la Tabla I a continuación. Cada uno de los compuestos de la Tabla I dio un IC50 < 1.00 µM.

TABLA I 25 25 Las mediciones de la conversión del plasma de compuestos representativos de fórmula I indican que estos compuestos producen en efecto metabolitos farmacéuticamente activos dentro de los marcos de tiempo apropiados para el empleo terapéutico. Además, las mediciones de estabilidad también para ciertos compuestos representativos de fórmula I muestran adicionalmente que estos compuestos tienen una mediana a buena estabilidad en los tipos de soluciones empleadas típicamente para administrar los fármacos terapéuticos por vía intravenosa. Los resultados de estas mediciones de conversión del plasma y de la estabilidad están resumidos en la Tabla II a continuación. De esta forma, estos compuestos son adecuados para la administración a los pacientes mediante infusión continua.

TABLA II * N/D = No desarrollada Ejemplo 27: Formulación para Tabletas * El compuesto A representa un compuesto de la invención.

Procedimiento de Elaboración: 1. Mezclar los productos 1, 2 y 3 en un mezclador adecuado durante 15 minutos. 2. Granular la mezcla de polvo del paso 1 con solución al 20% de Povidone K30 (producto 4) . 3. Secar el granulado del paso 2 a 50°C. 4. Pasar el granulado del paso 3 a través de un equipo adecuado de molienda. 5. Agregar el producto 5 al granulado molido del paso 4 y mezclar durante 3 minutos. 6. Comprimir el granulado del paso 5 sobre una prensa adecuada.

Ejemplo 28: Formulación de Cápsulas * El compuesto A representa un compuesto de la invención.

Procedimiento de Elaboración: 1. Mezclar los productos 1, 2 y 3 en un mezclador adecuado durante 15 minutos. 2. Agregar los productos 4 y 5 y mezclar durante 3 minutos. 3. Introducir en una cápsula adecuada.

Ejemplo 29: Preparación de Solución/Emulsión para Inyección El compuesto A representa un compuesto de la invención.

Procedimiento de Elaboración: 1. Disolver el producto 1 en el producto 2. 2. Agregar los productos 3, 4 y 5 al producto 6 y mezclar hasta dispersión; a continuación, homogeneizar. 3. Agregar la solución del paso 1 a la mezcla del paso 2 y homogeneizar hasta que la dispersión sea traslúcida. 4. Filtrar estéril a través de un filtro de 0.2 µm y llenar en frascos pequeños o viales.

Ejemplo 30: Preparación de Solución/Emulsión para Inyección * El compuesto A representa un compuesto de la invención.

Procedimiento de Elaboración: 1. Disolver el producto 1 en el producto 2. 2. Agregar los productos 3, 4 y 5 al producto 6 y mezclar hasta dispersión, a continuación, homogeneizar. 3. Agregar la solución del paso 1 a la mezcla del paso 2 y homogeneizar hasta que la dispersión sea traslúcida. 4. Filtrar estéril a través de un filtro de 0.2 µm y llenar en frascos pequeños o viales. Mientras la invención ha sido ilustrada mediante referencia a modalidades específicas y preferidas, aquellos expertos en la técnica entenderán que pueden hacerse variaciones y modificaciones a través de la experimentación de rutina y práctica de la invención. De esta forma, la invención se pretende que no esté limitada por la precedente descripción sino que esté definida mediante las reivindicaciones anexadas y sus equivalentes. Se hace constar que con relación a esta fecha, el mejor método conocido por la solicitante para llevar a la práctica la citada invención, es el convencional para la manufactura de los objetos o productos a que la misma se refiere.

Claims (25)

REIVINDICACIONES Habiéndose descrito la invención como antecede, se reclama como propiedad lo contenido en las siguientes reivindicaciones :

1. Un compuesto que tiene la fórmula: y sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos, caracterizado porque R está seleccionado del grupo que consiste de -CH2OP03R1R2, -CH2OH, -CH2OCOR3, -CH2OC02R3, -CH2OCONHR3, y -CONHR3; R1 y R2 se seleccionan del grupo que consiste de H, Na y NH4 y son los mismos a no ser que o bien R1 o R2 sea H en cuyo caso el otro puede ser diferente, o alternativamente, R1 y R2 juntos, representan calcio. R3 se selecciona del grupo que consiste de alquilo, el cual opcionalmente puede estar sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de -C02R , -NR5R6, polietilenglicol, -OP03R1R2, hidroxilo, alcoxilo y arilo; alquenilo, el cual puede estar opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de -C02R4, -NR5R6, polietilenglicol, -OP03RxR2, hidroxilo, alcoxilo y arilo; cicloalquilo que opcionalmente puede estar sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de -C02R4, -NR5R6, polietilenglicol, -OPO^R2, hidroxilo, alcoxilo y arilo; heterociclo, el cual cuando incluye N como un heteroátomo, el N puede estar opcionalmente sustituido con el grupo que consiste de alquilo inferior, y -COR7, arilo, el cual puede estar opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de C02R4, hidroxilo, alcoxilo, polietilenglicol, -0P03R1R2, y alquilo, el cual asimismo puede estar sustituido con hidroxi alcoxilo, carboxilo y amino sustituido, con la condición de que cuando arilo representa piridina, el nitrógeno puede estar sustituido con alquilo inferior; R4 se selecciona del grupo que consiste de H, Na y alquilo inferior; R5 y R6 están cada uno seleccionado independientemente del grupo que consiste de H, alquilo inferior y -COR7, o alternativamente, el grupo -NR5R6, juntos forman un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros; y R' es alquilo inferior, el cual puede estar opcionalmente sustituido con carboxilo, polietilenglicol y amino sustituido.

2. Un compuesto que tiene la fórmula y sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos, caracterizado porque: R está seleccionado del grupo que consiste de -CH^OPO^R2, -CH2OCOR3, -CH2OC02R3, -CH2OCONHR3, y -CONHR3; R1 y R2 se seleccionan del grupo que consiste de H, Na y NH4 y son los mismos a no ser que o bien R1 o R2 sea H en cuyo caso el otro puede ser diferente, o alternativamente, R1 y R2 juntos, representan calcio. R3 se selecciona del grupo que consiste de alquilo, el cual opcionalmente puede estar sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de -C02R , -NR5R6, polietilenglicol, -0P03R1R2, hidroxilo, alcoxilo y arilo; alquenilo, el cual puede estar opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de -C02R4, -NR5R6, polietilenglicol, -OP03R1R2, hidroxilo, alcoxilo y arilo; cicloalquilo que opcionalmente puede estar sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de -C02R4, -NR5R6, polietilenglicol, -OPO^R2, hidroxilo, alcoxilo y arilo; heterociclo, el cual cuando incluye N como un heteroátomo, el N puede estar opcionalmente sustituido con el grupo que consiste de alquilo inferior, y -COR7, arilo, el cual puede estar opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes seleccionados del grupo que consiste de C02R4, hidroxilo, alcoxilo, polietilenglicol, -OP03R1R2, y alquilo, el cual asimismo puede estar sustituido con hidroxi alcoxilo, carboxilo y amino sustituido, con la condición de que cuando arilo representa piridina, el nitrógeno puede estar sustituido con alquilo inferior; R4 se selecciona del grupo que consiste de H, Na y alquilo inferior; R5 y R6 están cada uno seleccionado independientemente del grupo que consiste de H, alquilo inferior y -COR7, o alternativamente, el grupo -NR5R6, juntos forman un anillo heterociclico de 5 ó 6 miembros; y R7 es alquilo inferior, el cual puede estar opcionalmente sustituido con carboxilo, polietilenglicol y airiino sustituido.

3. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R se selecciona del grupo que consiste de -CH2OP03R1R2 y -CH2OCOR3.

4. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R es -CH2OCO-piridina, en donde el átomo de N en la piridina es sustituido con alquilo inferior.

5. El compuesto de conformidad con la reivindicación 4, caracterizado porque el átomo de N en la piridina es sustituido con metilo o etilo.

6. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R1 y R2 se seleccionan independientemente del grupo que consiste de H y Na.

7. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R3 es heterociclo que contiene al menos un átomo de nitrógeno que opcionalmente puede estar sustituido con -COR7.

8. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R3 es arilo el cual está sustituido con -OP03R1R2, y R1 y R2 se seleccionan independientemente de H y Na.

9. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R3 es arilo que está sustituido por el grupo que consiste de -C02Na, polietilenglicol y -CH2CH2N (CH2CH2) 2.

10. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R3 es alquilo inferior que está sustituido con -C02Na.

11. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el grupo NR5R6 juntos forman un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros.

12. El compuesto de conformidad con la reivindicación 11, caracterizado porque el grupo NR5R6 se selecciona de piperidina o pirrolidina.

13. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R5 y R6 se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste de H, metilo y etilo.

14. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R7 es etilo que está sustituido con polietilenglicol.

15, El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque R es -CH2OCOR3 y R3 es etilo que está sustituido con polietilenglicol que tiene un peso molecular desde aproximadamente 750 a aproximadamente 5000 Daltons.

16. El compuesto de conformidad con la reivindicación 2, caracterizado porque el polietilenglicol tiene un peso molecular desde aproximadamente 750 a aproximadamente 5000 Daltons.

17. Un compuesto, caracterizado porque se selecciona del grupo que consiste de: Sal mono- [3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetil] -sódica del ácido fosfórico, l-Hidroximetil-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (1-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -pirrol-2, 5-diona, Éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido isonicotínico, Éster mono- [3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- ( l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico] del ácido but-2-enodioico, éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-metílico del ácido decanoico, Trifluoroacetato del éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-ilmetílico del ácido 3-amino-ciclohexanocarboxílico, Sal de acetato del éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) - 4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-ilmetílico del ácido piperidin-4-carboxílico, Clorhidrato del éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-ilmetílico del ácido piperidin-4-carboxílico, Clorhidrato del éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-ilmetílico del ácido 2-amino-2-metil-propiónico, Trifluoroacetato de l-metil-3- [3- (1-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-1-ilmetoxicarbonilo] -piridinio, y 0- [2- [ [4- [ [ [2, 5-dihidro-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-lH-pirrol-l-iljmetoxi] carbonil] -1-piperidinil] carbonil] etil] -0' -metil-polietilenglicol 1000.

18. Un compuesto, caracterizado porque se selecciona del grupo que consiste de: Sal monosódica del éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-1-ilmetílico del ácido 4-fosfonooxi-benzoico, [ [3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-il]metoxi-carbonil] -4-fenil-0-metilpolietilenglicol 500, Éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del éster alílico del ácido carbónico, Éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il)-4-(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido (2-dimetilamino-etil) -carbámico, Éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihídro-pirrol-l-ilmetílico del ácido [2- (2-hidroxi-etoxi) -etil] -carbámico, Éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido (2-hidroxi-etil) -carbámico, Éster 3- (l-metil-lH-indol-3-il)-4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetílico del ácido (2-fosfonooxi-etil) -carbámico, (2-dietilamino-etil) -amida del ácido 3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (1-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2,5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-carboxílico, ( 6-dimetilamino-hexil) -amida del ácido 3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-carboxílico, (4-hidroxibutil) -amida del ácido 3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-carboxílico, y Sal sódica del éster mono- (4-{ [3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-1-carbonil] -amino} -butílico del ácido fosfórico.

19. Un compuesto, caracterizado porque se selecciona del grupo que consiste de: Sal mono- [3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-ilmetil] -sódica, O- [2- [ [2, 5-dihidro-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4-.(l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-íl]metoxicarbonil] etil] -O' -metilpolietilenglicol 2000, Sal sódica del éster mono- (4-{ [3- (1-metil-lH-indol-3-il) -4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-carbonil]-amino}-butílico del ácido fosfórico, Trifluoroacetato de l-metil-3- [3- (1-metil-lH-indol-3-il)-4- (l-metil-6-nitro-lH-indol-3-il)-2,5-dioxo-2,5-dihidro-pirrol-l-ilmetoxicarbonil] -piridinio, y O- [2- [ [ [2, 5-dihidro-3- (l-metil-lH-indol-3-il) -4- (1-metil-6-nitro-lH-indol-3-il) -2, 5-dioxo-2, 5-dihidro-pirrol-l-il]metoxi] carbonil]metil] -O' -metilpolietilenglicol 2000.

20. Una composición farmacéutica, caracterizada porque comprende como un ingrediente activo una cantidad efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1 y un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable.

21. La composición farmacéutica de conformidad con la reivindicación 20, caracterizada porque es adecuada para la administración parenteral.

22. Uso de una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de conformidad con la reivindicación 1, para el tratamiento de un trastorno proliferativo celular.

23. El uso de conformidad con la reivindicación.22, caracterizado porque el trastorno proliferativo celular es el cáncer.

24. El uso de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el cáncer es un tumor sólido.

25. El uso de conformidad con la reivindicación 23, caracterizado porque el cáncer es un cáncer de mama, colon o pulmón.