HU220218B - NO-szintáz és ciklooxigenáz egyidejű gátlására alkalmas vegyületek és gyógyszerkészítmények és eljárás ezek előállítására - Google Patents

NO-szintáz és ciklooxigenáz egyidejű gátlására alkalmas vegyületek és gyógyszerkészítmények és eljárás ezek előállítására Download PDF

Info

Publication number
HU220218B
HU220218B HU9204173A HU9204173A HU220218B HU 220218 B HU220218 B HU 220218B HU 9204173 A HU9204173 A HU 9204173A HU 9204173 A HU9204173 A HU 9204173A HU 220218 B HU220218 B HU 220218B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
formula
compound
compounds
salt
coor
Prior art date
Application number
HU9204173A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT64047A (en
HU9204173D0 (en
Inventor
Serge Auvin
Pierre Braquet
Colette Broquet
Pierre-Etienne Chabrier De Lausseniere
Original Assignee
Société de Conseils de Recherches et D'Applications Scientifiques (S.C.R.A.S.)
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Société de Conseils de Recherches et D'Applications Scientifiques (S.C.R.A.S.) filed Critical Société de Conseils de Recherches et D'Applications Scientifiques (S.C.R.A.S.)
Publication of HU9204173D0 publication Critical patent/HU9204173D0/hu
Publication of HUT64047A publication Critical patent/HUT64047A/hu
Publication of HU220218B publication Critical patent/HU220218B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C65/00—Compounds having carboxyl groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups
    • C07C65/01—Compounds having carboxyl groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups containing hydroxy or O-metal groups
    • C07C65/03—Compounds having carboxyl groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups containing hydroxy or O-metal groups monocyclic and having all hydroxy or O-metal groups bound to the ring
    • C07C65/05—Compounds having carboxyl groups bound to carbon atoms of six—membered aromatic rings and containing any of the groups OH, O—metal, —CHO, keto, ether, groups, groups, or groups containing hydroxy or O-metal groups monocyclic and having all hydroxy or O-metal groups bound to the ring o-Hydroxy carboxylic acids
    • C07C65/10—Salicylic acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C211/00—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton
    • C07C211/01—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C211/02—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C211/03—Monoamines
    • C07C211/04—Mono-, di- or tri-methylamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C229/00—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C229/52—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C07C229/54—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino and carboxyl groups bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C07C229/56—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino and carboxyl groups bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring with amino and carboxyl groups bound in ortho-position
    • C07C229/58—Compounds containing amino and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton having amino and carboxyl groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton with amino and carboxyl groups bound to carbon atoms of the same non-condensed six-membered aromatic ring with amino and carboxyl groups bound in ortho-position having the nitrogen atom of at least one of the amino groups further bound to a carbon atom of a six-membered aromatic ring, e.g. N-phenyl-anthranilic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/04—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton
    • C07C279/14—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to acyclic carbon atoms of a carbon skeleton being further substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C279/00—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C07C279/30—Derivatives of guanidine, i.e. compounds containing the group, the singly-bound nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups having nitrogen atoms of guanidine groups bound to nitro or nitroso groups
    • C07C279/32—N-nitroguanidines
    • C07C279/36—Substituted N-nitroguanidines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C317/00—Sulfones; Sulfoxides
    • C07C317/44—Sulfones; Sulfoxides having sulfone or sulfoxide groups and carboxyl groups bound to the same carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C57/00—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C57/30—Unsaturated compounds having carboxyl groups bound to acyclic carbon atoms containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C69/00—Esters of carboxylic acids; Esters of carbonic or haloformic acids
    • C07C69/02—Esters of acyclic saturated monocarboxylic acids having the carboxyl group bound to an acyclic carbon atom or to hydrogen
    • C07C69/12—Acetic acid esters
    • C07C69/14—Acetic acid esters of monohydroxylic compounds
    • C07C69/145—Acetic acid esters of monohydroxylic compounds of unsaturated alcohols
    • C07C69/157—Acetic acid esters of monohydroxylic compounds of unsaturated alcohols containing six-membered aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/10—Indoles; Hydrogenated indoles with substituted hydrocarbon radicals attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/18—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C07D209/26—Radicals substituted by carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals with an acyl radical attached to the ring nitrogen atom
    • C07D209/28—1-(4-Chlorobenzoyl)-2-methyl-indolyl-3-acetic acid, substituted in position 5 by an oxygen or nitrogen atom; Esters thereof

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

A találmány kettős biológiai aktivitással rendelkező, azaz mind az L-arginin/nitrogén-oxid (NO), mind a ciklooxigenáz folyamatok gátlására alkalmas vegyületekre és hatóanyagként ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítményekre és ezek előállítására vonatkozik.
Az NO-szintáz és a ciklooxigenáz jelentős szerepét figyelembe véve a fiziopatológiában, a találmány szerinti vegyületek előnyösen alkalmazhatók a következő betegségek kezelésében:
- kardio- és cerebrovaszkuláris betegségek, így például migrén, agyvérzés, infarktus, ischaemia, vérmérgezés, endotoxinos és hemorrhagiás sokkok, fájdalmak;
- különböző gyulladási folyamatok, így például akut rheumatikus láz, rheumatikus artritis vagy más típusú artritiszek, csontízületi gyulladás, asztma;
- immunbetegségek, így például virális vagy nem virális fertőzések, autoimmun-betegségek, drogfüggőség, rák és más egyéb patológiás elváltozások, ahol nitrogén-oxid és/vagy arahidonsav-metabolitok termelődnek feleslegben, humán és állat betegek esetében egyaránt.
A különböző gyulladásos folyamatok terápiájában széles körben alkalmazták a különböző ciklooxigenázinhibitorokat vagy aszpirinszerű vegyületeket, így például a következőket: acetil-szalicilsav és szalicilsav, metilezett indolszármazékok, így például indometacin [1(4-klór-benzoil)-5-metoxi-2-metil-lH-indol-3-ecetsav] és szulindak (5-fluor-2-metil-l-[[4-(metil-szulfinil)fenil]-metilén]-lH-indén-3-ecetsav), N-fenil-antranilsav-származékok (meklofenamát, fenamátok), propionsavszármazékok, így például ibuprofen (p-izobutilhidratropasav), naproxen és fenoprofen, amelyekről azonban megállapították, hogy különösen nagy dózisokban nemkívánatos mellékhatásaik vannak (R. Flower, S. Moncada és J. Vane, Mechanism of action of aspirinlike drugs - In the pharmacological basis of therapeutics Goodman and Gilman, 1985,29, 674-715). Ezeket a vegyületeket alkalmazták továbbá migrén akut és profilaktikus kezelésére egyaránt. Ezen hatóanyagok értéke kétségen felül áll, bár a terápiás válaszuk gyakran nem tökéletes, és emiatt bizonyos betegek esetében nem tekinthető a legmegfelelőbb kezelési eljárásnak. Ezen vegyületek gyulladásgátló, valamint vérlemezke-aggregációt gátló hatásuk alapján trombózis, valamint ödéma csökkentésére is alkalmazhatók agyischaemiás modellek esetén, és így alkalmasak infarktus, agyvérzés és cerebrovaszkuláris betegségek megelőzésére is (W. Armstrong Recent trends in research and treatment of stroke. SCRIP, PJB publications, 1991).
A nitrogén-oxid-szintáz inhibitorok biológiai aktivitását az utóbbi időben fedezték fel és potenciális terápiás alkalmazásuk éppen most kezdődik. Ezen anyagok, amelyek szerkezetét az L-arginin-analógokkal mutatják be és a 9028013.2 számú nagy-britanniai szabadalmi bejelentésben (=FR 2 656 220 számú szabadalmi irat) vannak ismertetve, a nitrogén-oxid- (NO) képződést gátolják. Az NO-val kapcsolatos jelenlegi ismereteinket 1991-ben Moncada és munkatársai foglalták össze (S. Moncada, R. M. J. Palmer, E. A. Higgs, Nitric oxide: Physiology, Pathophysiology and Pharmacology, Pharmacological reviews, 43, 2,109-142). Röviden, úgy tűnik, hogy az NO transzdukciós mechanizmusként szolgál az oldható guanilát-cikláz számára az érrendszerben, a vérlemezkékben és az idegrendszerben és a vektormolekula számos sejtben és szövetben beleértve a makrofágokat vagy neutrofíleket is - végbemenő immunológiai reakcióknál. Az NO enzimatikus úton, az NO-szintáz nevű enzim hatására L-argininből képződik. Ez az enzim két formában létezik: konstitutív és egy indukálható formában, mindkettőt az L-arginin-analógok - mint alább - gátolják. Számos patológiás folyamatban NO feleslegben képződik, mint azt például sokkos állapotok esetében kimutatták (lásd az előzőekben hivatkozott szabadalmi bejelentés). Ebben a vonatkozásban az NO-szintáz inhibitorok hatásosak ezen betegség vaszkuláris következményeinek és a halálozás megelőzésében, különösen ha ciklooxigenázinhibitorokkal, így például aszpirinnel, indometacinnal, meklofenamáttal kombináltan alkalmazzák. Ilyen előnyös hatása két aktív anyag kombinációjának egy azonos molekulában, feltehetően nagy valószínűséggel alkalmazható a humán betegek esetében, akik valamely következő betegségben szenvednek: migrén, agyvérzés, infarktus, agyi ischaemia, fájdalom, gyulladásos és különböző immunológiai betegségek. A nitrogén-oxidszintáz és ciklooxigenáz-inhibitorok együttes alkalmazását ismertetik az előbb említett FR 2 656 220 számú szabadalmi leírásban, sokkos állapotok kezelésére. Azt találtuk azonban, hogy az ilyen vegyületek kombinációja jobb szinergetikus hatást mutat, mint az együttes alkalmazás.
A fentiek alapján találmányunk AB általános képletű só- vagy amidformájú vegyületekre vonatkozik, amely képletben
A jelentése egy ciklooxigenáz-inhibitor, úgymint szalicilsav, acetil-szalicilsav, mefenaminsav, ibuprofen, indometacin vagy szulindak, amely vegyületek jól hozzáférhető, savas csoportot tartalmaznak, és amelyeket az RCOOH általános képlettel írunk le, amely képletben COOH jelentése a hozzáférhető, savas csoport, és R jelentése az említett, valamely ciklooxigenáz-inhibitor vegyület megfelelő maradék csoportja, és
B jelentése egy következő általános képletnek megfelelő, L formájú arginin-analóg r2n^ ^nh2 ^C-NH-(CH2)3-CH (I) r3 ^coor, amely képletben
R| jelentése hidrogénatom, metil- vagy etilcsoport, R2 jelentése hidrogénatom vagy nitrocsoport, és R3 jelentése amino-, metil-amino- vagy etil-aminocsoport, azzal a megkötéssel, hogy ha AB egy só, amelyben R2 jelentése hidrogénatom, akkor R3 jelentése aminocsoporttól eltérő.
A találmány szerinti eljárással az előállítást úgy végezzük, hogy lényegében ekvimoláris mennyiségekben, a megfelelő körülmények között egy fenti A vegyületet vagy annak sóját egy fentiek szerinti B vegyülettel vagy annak sójával reagáltatunk.
HU 220 218 Β
Közelebbről, ha a találmány szerinti eljárással Γ általános képletű
R2N NH3+ -OCR ^C-NH-(CH2)3-CH II (Γ)
R3 COOR, O sóvegyületet állítjuk elő - a képletben R, R,, R2 és R3 jelentése a fenti -, akkor egy fentiek szerinti, A jelentésénél megadott vegyületet vagy annak sóját vízben vagy víz és alkohol elegyében, szobahőmérséklet és a reakciókeverék forráspontja közötti hőmérsékleten reagáltatjuk egy valamely fenti, B jelentésénél megadott, 1 általános képletű vegyülettel vagy annak sójával. Az A jelentésénél megadott vegyület sója lehet például nátriumsó, a B jelentésénél megadott, I általános képletű vegyület sója lehet például acetát- vagy hidrokloridsó. A reakciónál felhasználásra kerülő vízzel elkeverhető oldószer például metanol vagy etanol.
Ha a találmány szerinti eljárással I” általános képletű amidvegyületet állítunk elő O
II r2n nh-c-r 'C-NH-(CH2)3-CH (I”)
R3 COOR, a képletben R, R,, R2 és R3 jelentése a fenti - akkor egy I általános képletű vegyületet vagy annak sóját acetonitrilben 0 °C és szobahőmérséklet közötti hőmérséklet között, bázis jelenlétében egy RCOX általános képletű vegyülettel, amely az A jelentésénél megadott valamely vegyület prekurzoija - a képletben R jelentése a fenti, és X jelentése halogénatom - reagáltatjuk. Az I általános képletű vegyület sója lehet például hidrokloridsó. A reakciót például bázisként trietil-amin jelenlétében végezhetjük.
A következő példákkal a találmány szerinti eljárást mutatjuk be közelebbről.
1. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, aholA=acetil-szalicilsav, B=N-omega-metilL-arginin (L-NMMA) mg (0,52 mmol) L-NMMA-t és 95 mg (0,52 mmol) acetil-szalicilsavat feloldunk 10 ml 95%os etanolban szobahőmérsékleten, és az oldatot ezen a hőmérsékleten 3 órán át keverjük. Az oldatot ezután szárazra pároljuk, és a visszamaradó anyagot 25 ml vízzel elkeverjük, majd liofilizáljuk, amikor is 190 mg kívánt vegyületet nyerünk fehér, szilárd anyag formájában, olvadáspont 170 °C.
H-NMR (100 MHz, D2O):
7,80-6,60 (m, 4H, aromás), 3,50 (t, 1H, CHCO2H),
3,10 (m, 2H, CH2-NH), 2,60 (s, 3H, CH3-NH),
2,15 (s, 3H, CH3-CO), 1,90-1,30 (m, 4H,
CH-CH-2-CH2).
2. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A = szalicilsav, B = N-omega-metil-Larginin (L-NMMA)
0,52 mmol N-omega-metil-L-arginin-acetátot és
0,52 mmol szalicilsav-nátriumsót vízben feloldunk szobahőmérsékleten, majd ezen a hőmérsékleten addig keverjük, amíg áttetsző lesz. A képződött nátrium-acetátot az oldattól elválasztjuk, majd a visszamaradó anyagot liofilizáljuk, ily módon 160 mg kívánt vegyületet nyerünk fehér, szilárd anyag formájában, olvadáspont 172-175 °C.
H-NMR (100 MHz, D2O):
7,75-6,70 (m, 4H, aromás), 3,55 (t, 1H,
CH-COOH), 3,00 (m, 2H, CH2-NH), 2,60 (s, 3H,
NH-CH3), 1,90-1,30 (m, 4H, CH2-CH2).
3. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A-acetil-szalicilsav, B=N-omega-nitroL-arginin (L-NO)
500 mg (2,28 mmol) N-omega-nitro-arginint és 411 mg (2,28 mmol) acetil-szalicilsavat feloldunk etanol/víz elegyben (100 ml/70 ml) melegítés közben, majd az anyagot visszafolyatás közben 1 órán át keverjük. Az így nyert oldatot ezután szárazra pároljuk, a visszamaradó anyagot vízzel elkeverjük, liofilizáljuk, amikor is 900 mg kívánt vegyületet nyerünk fehér, szilárd anyag formájában, olvadáspont >260 °C.
H-NMR (100 MHz, D2O):
7,85-6,70 (m, 4H, aromás), 3,70 (t, 1H,
CH-COOH), 3,10 (m, 2H, CH2-NH), 2,16 (s, 3H,
CH3), 1,90-1,35 (m, 4H, CH2-CH2).
4. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A = szalicilsav, B = N-omega-nitro-Larginin (L-NO)
500 mg (2,28 mmol) N-omega-nitro-L-arginint és 315 mg (2,28 mmol) szalicilsavat feloldunk etanol/víz elegyben (100 ml/70 ml) melegítés közben, majd az anyagot 1 órán át, visszafolyatás közben melegítjük. Az oldatot ezután szárazra pároljuk, a visszamaradó anyagot 100 ml vízzel elkeverjük, liofilizáljuk, amikor is 810 mg kívánt vegyületet nyerünk fehér, szilárd anyag formájában, olvadáspont >260 °C.
H-NMR (100 MHz, D2O):
7,78-6,71 (m, 4H, aromás), 3,53 (t, 1H,
CH-COOH), 3,11 (m, 2H, CH2-NH), 2,00-1,30 (m, 4H, CH2-CH2).
5. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A = acetil-szalicilsav, B=N-omega-nitroL-arginin-metil-észter (L-NAME)
Acetil-szalicilsavat és N-omega-nitro-L-argininmetil-észtert ekvimoláris mennyiségben elkeverünk a
3. példában leírtak szerint, amikor is 98,7%-os kihozatallal nyerjük a kívánt vegyületet, olvadáspont >260 °C.
H-NMR (100 MHz, D2O):
7,8-6,70 (m, 4H, Ph), 3,80 (t, 1H, CH-CO2H),
3,65 (s, 3H, CO2CH3), 3,10 (m, 2H, CH2NH),
2,11 (s, 3H, CH3CO), 1,90-1,35 (m, 4H,
CH2-CH2).
HU 220 218 Β
6. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A = indometacin, B=N-omega-nitro-Larginin (L-NO)
A 3. példában leírtak szerint járunk el, indometacint és N-omega-nitro-L-arginint ekvimoláris mennyiségben elkeverünk, 97,8%-os kihozatallal nyerjük fehér, szilárd anyag formájában a kívánt vegyületet, olvadáspont >260 °C.
•H-NMR (100 MHz, D2O):
7,70-6,35 (m, 7H, aromás), 3,95 (m, 1H,
CH-COOH), 3,62 (s, 3H, CH3O), 3,35 (s, 2H,
CH2-COOH), 3,08 (m, 2H, CH2NH), 2,10 (2s, 3H,
CH3-C=), 1,72-1,30 (m, 4H, CH2-CH2).
7. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A=szulindak, B = N-omega-metil-Larginin (L-NMMA)
A 2. példában leírtak szerint eljárva szulindak-nátriumsót és N-omega-metil-L-arginin-acetátot ekvimoláris mennyiségben elkeverve nyerjük 98%-os kihozatallal a kívánt vegyületet narancssárga, szilárd anyag formájában, olvadáspont >260 °C.
•H-NMR (100 MHz, D2O):
7,45 (m, 4H, Ph-SO), 6,95-6,60 (m, 3H, Ph-F),
6,29 (m, 1H, -C-H), 3,15 (m, 5H, CH-COOH,
CH2-COOH, CH2NH), 2,72 (s, 3H, CH3-NH),
2,60 (s, 3H, CH3-SO), 1,83 (2s, 3H, CH3-C-),
1,40 (m, 4H, CH2-CH2).
8. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A = ibuprofen, B = N-omega-nitro-Larginin (L-NO)
A 3. példában leírtak szerint eljárva ibuprofent és N-omega-nitro-L-arginint ekvimoláris mennyiségben elkeverve 99%-os kihozatallal nyerjük a kívánt vegyületet fehér, szilárd anyag formájában, olvadáspont >260 °C.
•H-NMR (100 MHz, D2O):
(m, 4H, aromás), 3,6-3,3 (m, 2H, 2CHCO2H),
3,05 (m, 2H, CH2N), 2,35 (d, 2H, CH2 Ph),
1,8-1,3 [m, 5H, CH2-CH2 és CH(CH3)2], 1,2 (d,
3H, CH-CH3), 0,9 (d, 6H, 2CH3).
9. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A=mefenaminsav, B=N-omega-nitro-Larginin (L-NO)
A 3. példában leírtak szerint eljárva mefenaminsavat és N-omega-nitro-L-arginint ekvimoláris mennyiségben elkeverve nyerjük a kívánt vegyületet 98%-os kihozatallal fehér, szilárd anyag formájában, olvadáspont >260 °C.
•H-NMR (100 MHz, D2O):
(m, 1H, H aromás CO2H), 7,3-6,5 (m, 6H, aromás), 3,6 (t, 1H, CHCO2H), 3,3 (m, 2H, CH2NH),
2,2 és 2,3 (2s, 6H, 2CH3), 1,85-1,6 (m, 4H, CH2-CH2).
10. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A = indometacin, B = N-omega-metil-Larginin (L-NMMA)
A 2. példában leírtak szerint eljárva ekvimoláris mennyiségen indometacin-nátriumsót és N-omegametil-L-arginin-acetátot elkeverve nyerjük a kívánt vegyületet 99%-os kihozatallal sárga, szilárd anyag formájában, olvadáspont >260 °C.
•H-NMR (100 MHz, D2O):
7,70-6,35 (m, 7H, aromás), 3,67 (2s, 3H, CH3O),
3,47 (m, 1H, CH-COOH), 3,35 (s, 2H,
CH2-COOH), 2,97 (m, 2H, CH2-NH), 2,57 (s, 3H,
CH3-NH), 2,05 (2s, 3H, CH3-C=), 1,72-1,30 (m,
4H, CH2-CH2).
11. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A=szulindak, B = N-omega-nitro-Larginin-metil-észter (L-NAME)
A 2. példában leírtak szerint eljárva ekvimoláris mennyiségben szulindak-nátriumsót és N-omega-nitro-Larginin-metil-észter-hidrokloridot elkeverve metanolban nyerjük 98,6%-os kihozatallal a kívánt vegyületet narancssárga, szilárd anyag formájában, olvadáspont >260 °C.
•H-NMR (100 MHz, D2O):
7,30 (m, 4H, Ph-SO), 6,70 (m, 3H, Ph-F), 6,11 (m, 1H, =C-H), 3,78 (m, 1H, CH-COOH), 3,62 (s,
3H, O-CH3), 3,18 (bs, 2H, CH2-COOH), 3,00 (m,
2H, CH2-NH), 2,61 (s, 3H, CH3-SO), 1,83 (bs,
3H, CH3-C=), 1,90-1,30 (m, 4H, CH2-CH2).
12. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A=mefenaminsav, B=N-omega-metil-Larginin (L-NMMA)
A 3. példában leírtak szerint eljárva ekvimoláris mennyiségben mefenaminsavat és N-omega-metil-L-arginint elkeverve nyerjük 99%-os kihozatallal a kívánt vegyületet fehér, szilárd anyag formájában, olvadáspont >260 °C.
•H-NMR (100 MHz, CD3OD):
(m, 1H, H aromás CO2H), 7,3-6,5 (m, 6H, Ph),
3,56 (t, 1H, CHCO2H), 3,2 (m, 2H, CH2NH),
2,85 (s, 3H, CH2NH), 2,2 és 2,3 (2s, 6H, 2CH3),
1,8-1,6 (m,4H, CH2-CH2).
13. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A=szulindak, B = N-omega-nitro-Larginin (L-NO)
A 3. példában leírtak szerint eljárva ekvimoláris mennyiségben szulindakot és N-omega-nitro-L-arginint elkeverve nyerjük a kívánt vegyületet 98%-os kihozatallal narancssárga, szilárd anyag formájában, olvadáspont >260 °C.
•H-NMR (100 MHz, D2O):
7,30 (m, 4H, Ph-SO), 6,70 (m, 3H, Ph-F),
6,11 (m, 1H, =C-H), 3,78 (m, 1H, CH-COOH),
3,18 (bs, 2H, CH2COOH), 3,00 (m, 2H, CH2-NH),
HU 220 218 Β
2,61 (s, 3H, CH3-SO), 1,83 (bs, 3H, CH3-C=),
1,90-1,30 (m, 4H, CH2-CH2).
14. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A = szalicilsav, B = N-omega-nitro-Larginin-metil-észter (L-NAME)
A 2. példában leírtak szerint eljárva ekvimoláris mennyiségben szalicilsav-nátriumsót és N-omega-nitroL-arginin-metil-észter-hidrokloridot elkeverve 97,8%-os kihozatallal nyerjük a kívánt vegyületet fehér, szilárd anyag formájában, olvadáspont >260 °C.
H-NMR (100 MHz, D2O):
7.70- 6,68 (m, 4H, Ph), 4,00 (t, 1H, CH-COOH),
3,65 (s, 3H, COOCH3), 3,11 (m, 2H, CH2-NH),
2,00-1,30 (m, 4H, CH2-CH2).
15. példa
AB általános képletű vegyület sóformájának előállítása, ahol A = indometacin, B = N-omega-nitro-Larginin-metil-észter (L-NAME)
A 2. példában leírtak szerint eljárva ekvimoláris mennyiségben indometacin-nátriumsót és N-omeganitro-L-arginin-metil-észtert elkeverve nyerjük a kívánt vegyületet 98,5%-os kihozatallal sárga, szilárd anyag formájában, olvadáspont >260 °C.
H-NMR (100 MHz, D2O):
7.70- 6,35 (m, 7H, aromás), 3,95 (m, 1H,
CH-COOH), 3,67 (bs, 6H, CH3O, COOCH3),
3,35 (s, 2H, CH2-COOH), 3,08 (m, 2H, CH2-NH),
2,10 (2s, 3H, CH3-C=), 1,72-1,30 (m, 4H,
CH2-CH2).
16. példa
AB általános képletű vegyület amidformájának előállítása, ahol A = acetil-szalicilsav, B=N-omeganitro-L-arginin-metil-észter (L-NAME)
675 mg (2,5 mmol) N-omega-nitro-L-arginin-metilészter-hidrokloridot 15 ml vízmentes acetonitrilben szuszpendálunk, majd hozzáadunk keverés közben 0,7 ml (5 mmol) trietil-amint. A kapott, áttetsző folyadékot 0 °C-ra lehűtjük, majd hozzáadunk 0,5 g (2,5 mmol) acetil-szalicoil-kloridot 8 ml acetonitrilben, amikor is csapadék képződik. A kapott keveréket 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük, majd a csapadékot szűrjük, és a szűrletet szárazra pároljuk. A visszamaradó anyagot szilikagélen kromatografáljuk (CHCl3/MeOH=95/5), amikor is 73%-os kihozatallal nyerjük a cím szerinti vegyületet fehér, szilárd anyag formájában, olvadáspont 180 °C.
H-NMR (100 MHz, CDC13/D2O):
8,10-6,90 (m, 4H, Ph), 4,85 (m, 1H, CH-COOH),
3,82 (s, 3H, OCH3), 3,40 (m, 2H, CH2-NH), 2,40 (s, 3H, CH3-CO), 2,20-1,50 (m, 4H, CH2-CH2).
17. példa
AB általános képletű vegyület amidformájának előállítása, ahol A = szulindak, B=N-omega-nitro-Larginin-metil-észter (L-NAME)
A 16. példában leírtak szerint járunk el, szulindakklorid és N-omega-nitro-L-arginin-metil-észter alkalmazásával, így nyerjük a cím szerinti vegyületet 70%-os kihozatallal sárga, szilárd anyag formájában, olvadáspont: 154-156°C.
H-NMR (100 MHz, CDC13/D2O):
7,30 (m, 4H, Ph-SO), 6,70 (m, 3H, Ph-F),
6,11 (m, 1H, =C-H), 3,60 (s, 3H, OCH3),
3,15-3,05 (m, 5H, CH2CON, CHCO2CH3,
CH2NH), 2,61 (s, 3H, CH3SO), 2,05 (2s, 3H,
CH3-C=), 1,8-1,3 (m, 4H, CH2-CH2).
18. példa
AB általános képletű vegyület amidformájának előállítása, ahol A = ibuprofen, B=N-omega-nitro-Larginin-metil-észter (L-NAME)
A 16. példában leírtak szerint eljárva ibuprofenbromid és N-omega-nitro-L-arginin-metil-észter felhasználásával nyerjük, 78%-os kihozatallal a cím szerinti vegyületet fehér, szilárd anyag formájában, olvadáspont 213 °C.
H-NMR (100 MHz, CDC13/D2O):
(m, 4H, Ph), 3,6 (s, 3H, OCH3), 3,5-3,3 (m, 2H,
CHCON, CHCO2CH3), 3,10 (t, 2H, CH2N),
2,35 (d, 2H, CH2, Ph), 1,8-1,3 [m, 5H, CH2-CH2,
CH(CH3)2], 1,2 (d, 3H, CH-CH3), 0,8 (d, 6H,
2CH3).
A találmány szerinti vegyületeket biológiai vizsgálatoknak vetettük alá in vitro és in vivő a kívánt aktivitás, azaz a nitrogén-oxid-szintáz (konstitutív és indukálható) és a ciklooxigenáz-inhibíciós hatás bizonyítására. Megállapítottuk, hogy a találmány szerinti kombináció biológiailag sokkal aktívabb, mint a két aktív hatóanyag egyszerű keveréke. A hatóanyagok aktivitását állatoknál patológiai modelleken szintén bizonyítottuk, összehasonlítottuk referenciaanyagként aszpirinnal, indometacinnal és L-N°-mono-metil-argininnal (L-NMMA), valamint ezen vegyületek egyszerű keverékével. A keverékekben az összetevőket minden esetben ekvimoláris mennyiségnek megfelelő mennyiségekben alkalmaztuk.
1) Konstitutív NO-szintázra kifejtett in vitro hatás izolált patkányaortán
Az izolált patkányaorta+endotélium-készítményt az irodalomban ismertetett módon állítottuk elő (M. August, S. Delaflotte, P. e. Chabrier és P. Braquet Comparative effects of andothelium nad phorbol 12-13 dibutyrate in rat aorta, Life Sciences, 1989, 45, 2051-2059).
270-360 g tömegű hím, Sprague Dawley (Charles River, Párizs) patkányokat nyaki metszéssel leöltünk, eltávolítottuk a mellkasi aortát és kitisztítottuk a környező szövetektől. A 2 mm széles gyűrűket szervfurdóben függesztettük, amely fürdő 10 ml fiziológiás oldatot tartalmaz (az összetételt lásd alább), 2 g terhelés mellett és 37 °C hőmérsékleten O2/CO2=95%/5% gázeleggyel öblítettük. Mértük az összehúzódási válaszokat elmozdító, erőátvivő (Statham UC2) segítségével, amelyet Gould 8000 S poligráfhoz kapcsoltunk. Egy 1 órás kiegyensúlyozási periódust tartottunk a mérések megkezdése előtt. A normál fiziológiai oldat összetétele a következő (mmol): 118 NaCl, 4,7 KC1, 2,5 CaCl2,
1,2 KH2PO4, 0,6 MgSO4, 25 NaHCO3 és 11 glükóz.
HU 220 218 Β
A normál, közegben való kiegyensúlyozás után a preparátumokhoz közel maximális dózisú (körülbelül 95%) fenilefrint (Pe, 1 pmol) adagoltunk. Amikor a kontrakció stabil lett, karbacholt (10 pmol) vizsgáltunk annak megállapítására, hogy endotélium van jelen vagy nincs.
Ezután a készítményeket átmostuk, egy további 45 perces kiegyensúlyozási periódust tartottunk, majd a preparátumokhoz 1 pmol Pe-t és 10 pmol karbacholt adagoltunk a maximális relaxáció kialakításához. Az antagonistákat ezután kumulatív dózis módon vizsgáltuk, és meghatároztuk a karbachol relaxációs hatásának megfordításához szükséges IC50 (az inhibíciós koncentráció 50%-a) értékeket. A kapott eredményeket a következő táblázat első oszlopában foglaljuk össze, amelynek a címe konstitutív NO-szintáz vizsgálata.
2) In vitro hatás indukálható NO-szintázon izolált patkányaortán
A vegyületeket irodalomban ismertetett módon vizsgáltuk sokkolt állatokból nyert, izolált patkányaortán (M. Auguet, J. M. Guillon, S. Delaflotte, E. Etiemble, P. E. Chabrier és P. Braquet - Endothelium independent protective effect of NG-Monometil-L-Arginin on endotoxin-induced alterations of vascular reactivity, Life Sciences, 1991,48, 189-193). 240-320 g tömegű, hím Sprague Dawley-patkányoknak intraperitoneálisan 10 mg/kg dózisban endotoxint vagy oldószert (sóoldat, 1 mg/kg) adagoltunk. 3 óra elteltével az endotoxinnal kezelt állatoknál az endotoxémia jelei mutatkoztak, szőrmeredezés, hasmenés és letargia formájában. A patkányokat ezután nyaki metszéssel leöltük, eltávolítottuk a mellkasi aortát és megtisztítottuk a környező szövetektől, 2 g terhelés mellett a 2 mm szélességű gyűrűket szervfiírdőben függesztettük, amely 10 ml következő összetételű Krebs-Henseleit-oldatot tartalmazott (mmol): 118 NaCl, 4,7 KC1, 2,5 CaCl2, 1,2 KH2PO4,
1,2 MgSO4,25 NaHCO3,11 glükóz. Az oldatot folyamatosan öblítettük O2/CO2=95%/5% gázeleggyel. Az endotéliumot mechanikusan összetörtük a gyűrűk luminális felületén, egy kis csipesz enyhe mozgatásával. Egy 90 perces kiegyensúlyozási periódus után kontrakciót indukáltunk maximális koncentrációjú fenilefrin (PE, 1 pmol) adagolásával. Amikor a kontrakció-tanulmányozást befejeztük, 10 pmol karbacholt adagoltunk, bizonyítandó az endotélium integritását. Az antagonistákat a fürdőbe 45 perccel a PE alkalmazása előtt adagoltuk, és számoltuk az IC50 értékeket. A kapott eredményeket a következő táblázat második oszlopa tartalmazza, amelynek a címe indukálható NO-szintáz vizsgálata.
Vegyület Konstitutív NO-szintáz vizsgálat IC50(M) Indukálható NO-szintáz vizsgálat ICSfí(M)
L-NMMA 2.10-5 2.10 5
aszpirin NA NA
indometacin NA NA
1. példa 10-5 2.10-5
2. példa 3.10-6 9.10 5
3. példa 6.10-6 6.10-5
4. példa 2.10-5 10-5
5. példa 10-5 5.10-5
Vegyület Konstitutív NO-szintáz vizsgálat ic50(M) Indukálható NO-szintáz vizsgálat ICS0(M)
6. példa 8.10-5 8.10-5
8. példa 4.10-5 10-5
10. példa 5.10-5 6.10-5
12. példa 10-5 4.10-5
13. példa 3.10-5 10-5
16. példa 9.10-5 4.10-5
17. példa 5.10-5 5.10-5
NA=nem aktív
3) Indukálható NO-szintázra kifejtett in vitro hatás lipopoliszacharidokkal (LPS) kezelt vaszkuláris simaizomsejteken
Bizonyos találmány szerinti vegyületeket vizsgáltunk tápközegben simaizomsejteken is, ahol az NOszintázt LPS-sel váltottuk ki (M. Auguet, Μ. O. Lonchampt, S. Delaflotte, P. E. Chabrier és P. Braquet - FEBS Letters, 1992).
A simaizomsejteket patkány mellkasi aorta enzimatikus (elasztáz és kollagenáz) emésztésével izoláltuk (P. E. Chabrier, P. Roubert, Μ. O. Lonchampt, P. Plas és P. Braquet - J. Bioi. Chem., 1988, 263, 13 199—13 202). A sejteket 4 napon át DMEM tápközegben tenyésztettük, amely még 10% magzati birkaszérumot is tartalmazott, és a 3 és 7 passzázs közöttieket alkalmaztuk. A sejtmonorétegeket mostuk, és a tápközeget 2 ml DMEM tápközeggel helyettesítettük, amely 2 mmol glutamint, antibiotikumot, 0,1 mmol izobutilxantint (IBMX) tartalmazott, valamint vagy tartalmazott LPS-t (Escherichia Coli) vagy nem. 24 óra elteltével a cGMP-t a sejtektől extrakcióval elválasztottuk, a tápközeg gyors leszí vatásával, és minden lyukhoz 1 ml 0,1 n HCl-t adagoltunk. A kapott mintákat a cGMP-meghatározásig lefagyasztottuk, majd a meghatározást radioimmun vizsgálattal (NEN kit) végeztük. Az inhibíciós vizsgálat tanulmányozásához a sejteket 24 órán át RPMI 1640 közegben inkubáltuk (az L-arginin koncentrációja
1,2 mmol), amely közeg vagy tartalmazott LPS-t (0,1 pg/ml) vagy nem. A cGMP extrakcióját megelőzően 30 perccel 0,1 mmol IBMX-et adagoltunk 10~4 mól vizsgálandó oldat jelenlétében vagy anélkül. A CGMPtermelés csökkenését mértük, és a kapott eredményeket a következő táblázatban foglaljuk össze.
Kontroll cGMP-kihozatal csökkenés (%) 0
L-NMMA 35
1. példa 30
2. példa 35
3. példa 25
4. példa 25
5. példa 35
6. példa 35
8. példa 25
13. példa 25
17. példa 30
4) Az arachidonsav-indukált vérlemezke-aggregációra kifejtett in vitro hatás mosott nyúlvérlemezkék esetén
HU 220 218 Β
Ezt a vizsgálatot alkalmaztuk a vegyületek ciklooxigenázra kifejtett hatásának meghatározására. A vérlemezke-aggregáció meghatározását Cazenave és munkatársai módszere szerint végeztük (Ann. Bioi. Chem., 1983,41,167-179). Hím, New Zealand nyulak (2,5 kg átlagos testtömeg) füli artériájából vettük a vérmintákat, antikoagulánsként ACD (citromsav/nátrium-acetát/dextróz) alkalmazásával. Mosott vérlemezkéket készítettünk, majd ezeket egy aggregométer (Cronolog aggregometer Coultronics) küvettájába adagoltuk. Ezután a küvettákba antagonistákat és arachidonsavat adagoltunk (0,5 mmol), és mértük az aggregációnak (vagy gátlásának) megfelelő transzmissziós, százalékos értékeket, és ezekből meghatároztuk az IC50 értékeket. A kapott eredményeket a következő táblázatban foglaljuk össze, az „NA” jelentése nem aktív.
Vegyület ICS0 (M) aszpirin 2.10~4 indometacin 2.105
L-NMMA NA
1. példa 3.10-4
2. példa >5.10~4
3. példa 2.10-4
4. példa >5.10~4
5. példa 5.10~4
6. példa 4.10~5
5) LPS+lNFgamma által kiváltott nitrittermelésre kifejtett in vitro hatás J774Aj monocita/makrofág sejtvonalon
A makrofág típusú sejtek, így például a J774 A, sejtvonalak vizsgálata igen érdekes, mivel ezek a sejtek igen fontos szerepet játszanak a gyulladási folyamatokban és nagy mennyiségű NO- (az NO-szintáz indukáló hatása révén) és ciklooxigenáz-terméket expresszálásnak. A sejteket lipopoliszachariddal (LPS) aktiváltuk interferon gamma (IFNgamma) jelenlétében. Ezt a vizsgálatot használtuk a találmány szerinti vegyületek, valamint a két kiindulási vegyület keverékének összehasonlítására.
A patkány monocita/makrofág sejteket Dubecco által módosított Eagle-közegben 37 °C hőmérsékleten tenyésztettük. A sejteket 24 lyukú tenyésztőlemezbe helyeztük 2xl05 sejt/lemez mennyiségben. A sejteket LPS-sel (1 pg/ml, E. coli, SO55:B5) és patkány rekombináns IFNgamma-val (50 U/ml) aktiváltuk, majd inkubáltuk a vegyületekkel vagy a vegyületek nélkül. 48 óra elteltével meghatároztuk a nitrit- (NO2) mennyiséget, amely összefüggésben van az NO-szintáz-aktivációval, Green és munkatársai kolorimetriás módszere szerint (L. Green, D. Wagner, J. Glogowski, P. Skipper, J. Wishwok és S. Tannenbaum, Analysis of nitráté, nitrite and [15N] nitráté in biological fluids. Analytical Biochemistry, 126,131-138,1982).
Az NO2-termelés nem volt kimutatható a vegyületekkel vagy a vegyületek nélkül, ha a sejtek nem voltak aktiválva, Az aktivált sejtekben az IC50 érték L-NMMA, L-NO és L-NAME esetében 8 χ 10 6,1,5 χ 105 mól, illetve 10-3 mól érték volt, míg a ciklooxigenáz-inhibitor szalicilsav, acetil-szalicilsav, indometacin, meklofenamát része látszólag inaktív, mivel ezek inhibíciós értékei 0,5-5% közöttiek.
A találmány szerinti vegyületek, valamint az ezeket alkotó vegyületek keverékeinek összehasonlítására az értékeket a következő táblázatban foglaljuk össze, amely táblázat a nitrittermelés százalékos gátlásértékeit foglalja össze, amely nitrittermelést LPS+INF adagolásával indukáltunk J774 sejtvonalon:
Vegyület %-os gátlás Koncentráció (M)
106 IO3 10-4
L-NMMA+acetil-
szalicilsav 8% 27% 29%
1. példa 43% 48% 67%
L-NMMA+szalicilsav 11% 29% 33%
2. példa 53% 61% 75,5%
L-NO+acetil-szalicilsav 2% 44% 40%
3. példa 46% 49% 76%
L-NMMA+indometacin 15% 34% 29%
10. példa 51% 63% 66%
L-NO+szulindak 21% 37% 40%
13. példa 56% 63% 71%
L-NAME+szulindak 7% 24% 29%
17. példa 49% 57% 73%
A fenti eredményekből látható, hogy a találmány szerinti vegyületek sokkal aktívabbak azonos koncentrációban, mint az ezeket alkotó vegyületek keveréke. Az adatokból látható az NO-szintáz, valamint ciklooxigenázinhibitorok kombinációjának hatásfokozó hatása is.
6) LPS-IFNgamma adagolásával kiváltott prosztaglandin-termelésre kifejtett in vitro hatás J774 Aj monocita/makrofág sejtvonalon
Az előző példában leírt kísérletet végeztük el, összehasonlítottuk a találmány szerinti vegyületek, valamint a keverékek hatását a ciklooxigenáz-termékek kialakulására annak bizonyítására, hogy a vegyületek aktivitásának növekedése összefügg a ciklooxigenáz inhibíciójával.
Meghatároztuk a J774 A( sejtvonal által termelt egyik fő ciklooxigenáz-terméket (azaz 6 keto PGFla), ami a PGI2 stabil metabolitja, specifikus radioimmun vizsgálattal (NEN, Kit NEK 025) a tenyészközegben.
Először megfigyeltük, hogy a 6 keto PGFla felszabadulását a tenyészközegben nem befolyásolta az L-NMMA, L-NAME vagy L-NO, de hatással volt rá dózisfüggő módon az indometacin és az aszpirin, a megfelelő IC50 értékek IO-6 mól, illetve 10-5 mól.
A következő táblázatban összefoglaljuk az LPS+INF által indukált 6 keto PG FI-termelés inhibíciójának százalékos értékét J774 Aj sejtvonal esetében, amelyekből kitűnik a találmány szerinti vegyületek nagyobb aktivitása a keverékekhez viszonyítva.
Vegyület %-os gátlás
Koncentráció (M)
L-NO+acetil- IO-7 10-6 10 5 IO4
szalicilsav - 30% 58% 74%
3. példa L-NMMA+ — 58,5% 78,5% 91,5%
indometacin 55% 85% 84% -
10. példa 94% 97% 100% -
L-NAME+szulindak - 37% 48% 63%
17. példa - 74% 83% 92%
HU 220 218 Β
7) A nitrittermelésre kifejtett in vitro hatás patkány aktivált makrofágok esetén
A J774 sejtvonalak esetében mutatott eredmények bizonyítására, amely szerint a találmány szerinti, szintetizált vegyületek hatása felülmúlja a ciklooxigenáz és NO-szintáz inhibitorok keverékének hatását, hasonló kísérleteket végeztünk patkány aktivált makrofágokon is.
Peritoneális makrofágokat nyertünk nőstény BBA/2 egerek peritoneális üregéből (7-8 hetes állatok) 3 nappal a tioglikolát-injekció beadagolása után (3%, 1,5 ml/egér). A makrofágokat (2xl05 sejt/lyuk) 37 °C hőmérsékleten LPS-sel (E. coli: 0111B4, 0,1 pg/ml) és patkány rekombináns INFgamma-val (100 U/ml) aktiváltuk, 96 lyukú mikrolemezek lyukaiban 20 órán át, RPMI 1640,10% FBS tápközeg alkalmazásával, majd mostuk, majd további 24 órán át folytattuk az inkubálást. A sejtek inkubálását a különböző vegyületek jelenlétében vagy azok nélkül végeztük, a nitritmennyiségeket a tápközegben a már ismertetett módon határoztuk meg.
A vizsgálatok eredménye szerint az indometacin és L-NMMA találmány szerinti kombinációja (lásd 10. példa) 56%-os, az indometacin és L-NMMA keveréke 32%-os, és a vegyületek külön-külön kevesebb, mint 30%-os hatást mutatnak. A 15. példa szerinti indometacin és L-NAME kombináció esetén a százalékos érték 48%, indometacin esetében 25% és kevesebb, mint 15% L-NAME és a kettő keverékének esetében.
8) NMDA-val (N-metil-D-aszpartát) indukált halálozásra kifejtett in vitro hatás
A glutamát és aszpartát igen fontos neuroexcitotixközvetítők, amelyeknek szerepe van az agyi ischaemiában. A hatásukat az NMDA-receptor aktiválása közvetíti. Nagy dózisú NMDA (iv) injekciójával egerek esetében kevesebb, mint 30 mp alatt halál következik be. Minden olyan vegyület, amely a halálozás bekövetkezését késlelteti, potencionális antiischaemiás hatású vegyületnek tekinthető, mivel a glutamát vagy aszpartát hatását feltehetően egy megnövekedett NO-felszabadulás közvetíti, a kísérletet a vegyületek felszabadítására is alkalmaztuk, továbbá arra is, hogy in vivő különbséget tegyünk a találmány szerinti kombinációk és külön vegyületek keverékének hatása között.
Hím OF1 egereknek (20-22 g, Charles River) 250 mg/kg NMDA-t adagoltunk (iv), 1 órával az anyagok orális adagolása után. Mértük a túlélési időket.
A kapott eredmények szerint a találmány szerinti kombinációk sokkal aktívabbak a külön vegyületeknél vagy azok keverékénél. Az eredmények a találmány szerinti kombinációk szinergetikus hatását is bizonyítják.
Vegyület Dózis (mg/kg IP) %-os védelem
Szalicilsav 4 -
L-NMMA 5,7 6
Szalicilsav+L-NMMA (4,0+5,7) 6
2. példa 10,0 66
Szalicilsav 0,4 -
L-NMMA 0,57 3
Szalicilsav+L-NMMA (0,4+0,57) 3
2. példa 1 63
Szulindak 6,4 18,2
Vegyület Dózis (mg/kg IP) %-os védelem
L-NMMA 3,4 5,4
Szulindak+L-NMMA (6,4+3,4) 20
7. példa 10 54,5
Indometacin 6,55 -
L-NMMA 3,40 4,5
Indometacin+L—NMMA (6,55+3,40) 4,5
10. példa 10 33,5
Szalicilsav 3,7 -
L-NAME 6,3 5
Szalicilsav+L-NAME (3,7+6,3) 5
14. példa 10 26
9) In vivő hatás vizsgálata az idegsejtek pusztulására fokális agyi ischaemia után egereknél
Hím Swiss egereknek (20-22 g) szisztémás IP-adagolással a találmány szerinti vegyületeket adagoltuk 5 órával a kortikális infarktus után, amelyet a középső agyi artéria elzáródása váltott ki (Duverger és munkatársai, Pharmacology of cerebral ischemia in Krieglstein and Oberpichler, Wisseschaftliche Verlagsgesellschaft, Stuttgart, 1990, 409-413). 4 nappal később az egereket lefejeztük, az agyukat eltávolítottuk, lefagyasztottuk és 10 pm vastagságú, koronális lemezeket vágtunk belőle. Képanalízissel vizsgáltuk a területi infarktust. Az infarktust szenvedett térfogatok csökkenését meghatároztuk, és összehasonlítottuk a nem kezelt állatokéval. A megadott százalékos értékek jelzik az átlagos redukciót, az infarktus átlagos csökkenését, hat állatból álló csoport esetén.
Kontrollként NMDA-antagonistát (MK 801) alkalmaztunk. A kapott eredmények a következők:
Infarktuscsökkenés
MK801 (3 mg/kg) -51%
1. példa (3 mg/kg) -68%
2. példa (3 mg/kg) -55%
3. példa (3 mg/kg) -70%
10. példa (3 mg/kg) -64%
17. példa (3 mg/kg) - 69%
10) In vivő hatás endotoxinnal kezelt, agyroncsolt patkányoknál
Mint már korábban leírták (lásd 9028013.2 számú nagy-britanniai szabadalmi bejelentés), az NO-szintázgátlók és ciklooxigenáz-gátlók keveréke szinergetikus hatással van a vérnyomás, valamint a vaszkuláris reaktivitás helyreállítására, endotoxinos és szeptikus állatok esetében.
280-320 g hím Sprague Dawley patkányokat agyroncsoltunk. 1 órával a beavatkozás után az állatoknak endotoxint adagoltunk (EDTX Escheria Coli, lipopoliszacharid Ο III B4=300 pg/kg/óra) 60 percen át. Ez az adagolás magas vérnyomást váltott ki, valamint csökkentett vaszkuláris reaktivitást okozott vazopresszor szerekkel, így például metoxaminnal szemben. 60 perccel a vegyületek és az endotoxin perfúziója után a metoxaminra dózisválaszgörbét szerkesztettünk kumulatív módon, és meghatároztuk az ED50 értékeket (a hatásos dózis 50%-a, amely szükséges a metoxaminnal szembeni, normál aktivitás helyreállításához) regressziós analízis segítségével minden állat esetében. A kapott eredmények a következők :
HU 220 218 Β
Vegyület Dózis Metoxaminnal szembeni vaszkuláris reaktivitás
mg/kg/h DES0 (vg/kg)
Kontroll 79±9
EDTX-el kezelt állat 278±34
L-NMMA 50 189±15
Aszpirin 150 136±29
1. példa 30 82±18
2. példa 30 98±35
3. példa 30 76±12
4. példa Toxikológia: 30 72±11
A termékeket orálisan vagy intraperitoneálisan adagoltuk 10 egérből álló csoportoknak, növekvő dózisban. Az LD50 érték (a halálos dózis 50%-a) 100 és 1000 orális adagolás és 150-500 ip. adagolás esetén.
Adagolás :
A találmány szerinti vegyületeket 1-300 mg/mennyiségű dózisban adagoljuk.

Claims (8)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. (AB) általános képletnek megfelelő só- vagy amidformájú vegyületek - a képletben
    A jelentése egy ciklooxigenáz-inhibitor, úgymint szalicilsav, acetil-szalicilsav, mefenaminsav, ibuprofen, indometacin vagy szulindak, amely vegyületek jól hozzáférhető, savas csoportot tartalmaznak, és amelyet az RCOOH általános képlettel írunk le, amely képletben COOH jelentése a hozzáférhető, savas csoport, és R jelentése az említett, valamely ciklooxigenáz-inhibitor vegyület megfelelő, maradék csoportja, és
    B jelentése egy következő általános képletnek megfelelő, L formájú arginin-analóg r2n^ ^nh2 'C-NH-(CH2)3-CH (I)
    R,' 'COOR, amely képletben
    Rí jelentése hidrogénatom, metil- vagy etilcsoport, R2 jelentése hidrogénatom vagy nitrocsoport, és R3 jelentése amino-, metil-amino- vagy etil-aminocsoport, azzal a megkötéssel, hogy ha AB egy só, amelyben R2 jelentése hidrogénatom, akkor R3 jelentése aminocsoporttól eltérő.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti (AB) általános képletnek megfelelő (Γ) általános képletű só
    R2N^ /.NH3 + -OCR
    C-NH-(CH2)3-CH || (F)
    R, ''COOR, O a képletben R, R,, R2 és R3 jelentése az 1. igénypont szerinti.
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti (AB) általános képletnek megfelelő (I”) általános képletű amid
    O
    II
    R2N^ ^.NH-C-R 'C-NH-(CH2)3-CH (I”)
    Rj' 'COOR, a képletben R, R,, R2 és R3 jelentése az 1. igénypont szerinti.
  4. 4. Eljárás (AB) általános képletű só- vagy amidformájú vegyületek előállítására - a képletben
    A jelentése egy ciklooxigenáz-inhibitor, úgymint szalicilsav, acetil-szalicilsav, mefenaminsav, ibuprofen, indometacin vagy szulindak, amely vegyületek jól hozzáférhető, savas csoportot tartalmaznak, és amelyet az RCOOH általános képlettel írunk le, amely képletben COOH jelentése a hozzáférhető, savas csoport, és R jelentése az említett, valamely ciklooxigenáz-inhibitor vegyület megfelelő, maradék csoportja, és
    B jelentése egy következő általános képletnek megfelelő, L formájú arginin-analóg
    R2N^ ^,nh2 'C-NH-(CH2)3-CH (I)
    R,' 'COOR, amely képletben
    R, jelentése hidrogénatom, metil- vagy etilcsoport, R2 jelentése hidrogénatom vagy nitrocsoport, és R3 jelentése amino-, metil-amino- vagy etil-aminocsoport, azzal a megkötéssel, hogy ha AB egy só, amelyben R2 jelentése hidrogénatom, akkor R3 jelentése aminocsoporttól eltérő azzal jellemezve, hogy
    a) a sóformájú vegyületek előállítására, amelyeket az (F) általános képlettel írunk le
    R2N NH3 + -OCR 'C-NH-(CH2)3-CH II (F)
    R3' COOR, O
    - a képletben R, R,, R2, R3 jelentése a fenti - lényegében ekvimoláris mennyiségben egy 1. igénypont szerint említett, RCOOH általános képletű vegyületet
    - a képletben R jelentése az 1. igénypont szerinti vagy sóját egy (I) általános képletű vegyülettel vagy sójával r2n^ ^,NH2 'C-NH-(CH2)3-CH (I)
    R3 COOR, reagáltatjuk, vagy
    b) az amidformájú vegyületek előállítására, amelyeket az (I”) általános képlettel írunk le O
    II r2n^ ^nh-c-r 'C-NH-(CH2)3-CH (I”)
    R3' 'COOR, a képletben R, R,, R2 és R3 jelentése a fenti - egy RCOX általános képletű vegyületet - a képletben R jelentése az 1. igénypont szerinti, és X jelentése halogénatom - egy (I) általános képletű vegyülettel r2n^ ^nh2 '^C-NH-ÍCH^-CH (I)
    R3'COOR, reagáltatunk.
  5. 5. A 4. igénypont szerinti a) eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakciót vízben vagy víz és alkohol elegyé9
    HU 220 218 Β ben végezzük, szobahőmérséklet és a reakciókeverék forráspontja közötti hőmérsékleten.
  6. 6. A 4. igénypont szerinti b) eljárás, azzal jellemezve, hogy a reakciót acetonitrilben végezzük 0 °C és szobahőmérséklet között, bázis jelenlétében.
  7. 7. Gyógyszerkészítmény, amely valamely, 1-3. igénypontok bármelyike szerinti vegyületet tartalmaz, gyógyszerészetileg elfogadható hordozó- és/vagy hígítóanyaggal együtt.
  8. 8. Eljárás gyógyszerkészítmény előállítására, azzal jellemezve, hogy valamely, a 4. igénypont szerint előál5 lított vegyületet gyógyszerészetileg elfogadható, hordozó- és/vagy hígítóanyaggal elkeverünk.
HU9204173A 1992-01-04 1992-12-30 NO-szintáz és ciklooxigenáz egyidejű gátlására alkalmas vegyületek és gyógyszerkészítmények és eljárás ezek előállítására HU220218B (hu)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB929200114A GB9200114D0 (en) 1992-01-04 1992-01-04 Dual inhibitors of no synthase and cyclooxygenase

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU9204173D0 HU9204173D0 (en) 1993-04-28
HUT64047A HUT64047A (en) 1993-11-29
HU220218B true HU220218B (hu) 2001-11-28

Family

ID=10708115

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9204173A HU220218B (hu) 1992-01-04 1992-12-30 NO-szintáz és ciklooxigenáz egyidejű gátlására alkalmas vegyületek és gyógyszerkészítmények és eljárás ezek előállítására

Country Status (34)

Country Link
US (2) US5480999A (hu)
JP (1) JP2984498B2 (hu)
KR (1) KR100287539B1 (hu)
AT (1) AT401054B (hu)
AU (1) AU664399B2 (hu)
BE (1) BE1006227A3 (hu)
CA (1) CA2085555C (hu)
CH (1) CH685629A5 (hu)
DE (1) DE4244539B4 (hu)
DK (1) DK157592A (hu)
DZ (1) DZ1657A1 (hu)
ES (1) ES2052452B1 (hu)
FI (1) FI925883A (hu)
FR (2) FR2685869B1 (hu)
GB (2) GB9200114D0 (hu)
GR (1) GR1001443B (hu)
HK (1) HK22296A (hu)
HU (1) HU220218B (hu)
IE (1) IE71675B1 (hu)
IT (1) IT1256761B (hu)
LU (1) LU88208A1 (hu)
MA (1) MA22753A1 (hu)
MY (1) MY109846A (hu)
NL (1) NL194889C (hu)
NO (1) NO302943B1 (hu)
NZ (1) NZ245499A (hu)
OA (1) OA10050A (hu)
PL (1) PL169432B1 (hu)
PT (1) PT101165B (hu)
RU (1) RU2104999C1 (hu)
SE (1) SE511568C2 (hu)
TN (1) TNSN93001A1 (hu)
TW (1) TW267152B (hu)
ZA (1) ZA9210080B (hu)

Families Citing this family (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5807886A (en) * 1994-05-07 1998-09-15 Astra Aktiebolag Bicyclic amidine dervatives as inhibitors of nitric oxide synthetase
AU704059B2 (en) * 1994-05-11 1999-04-15 Jes Olesen Use of no scavengers, inhibitors or antagonists in the treatment of migraine
US6066333A (en) * 1994-09-22 2000-05-23 William Harvey Research Limited Pharmaceutical control of inflammation
CA2132690A1 (en) * 1994-09-22 1996-03-23 Dean Willis Control and modulation of inflammatory response in humans in need of such control and modulation
FR2727111B1 (fr) * 1994-11-21 1997-01-17 Hoechst Lab Nouveaux analogues soufres d'aminoacides, leur procede de preparation et leurs applications comme medicaments
PT793646E (pt) 1994-11-23 2002-03-28 Biovitrum Ab Carboxilatos de aminoguanidina destinados ao tratamento de diabetes mellitus nao-insulinodependente
JPH08333258A (ja) 1994-12-14 1996-12-17 Japan Tobacco Inc チアジン又はチアゼピン誘導体及びそれら化合物を含有してなる一酸化窒素合成酵素阻害剤
ES2096524B1 (es) * 1994-12-22 1997-11-16 Sanchez Manuel Guerra Uso de la ng-monometil-l-arginina, para aumentar la capacidad de hacer ejercicio fisico.
FR2730930B1 (fr) 1995-02-27 1997-04-04 Oreal Utilisation d'inhibiteurs de no-synthase pour diminuer l'effet irritant cutane de produits utilises dans le domaine cosmetique ou pharmaceutique
GB9504350D0 (en) * 1995-03-04 1995-04-26 Sod Conseils Rech Applic Arginine derivatives
US5703073A (en) * 1995-04-19 1997-12-30 Nitromed, Inc. Compositions and methods to prevent toxicity induced by nonsteroidal antiinflammatory drugs
GB9514518D0 (en) * 1995-07-15 1995-09-13 Sod Conseils Rech Applic Guanidine salt inhibitors of NO synthase and cyclooxygenase
JP2000506852A (ja) * 1996-03-05 2000-06-06 チルドレンズ ホスピタル メディカル センター シクロオキシゲナーゼの阻害剤としてのメルカプト誘導体
US5955617A (en) * 1996-05-21 1999-09-21 Pharmacia & Upjohn Company Aminoguanidine carboxylate lactams for the treatment of non-insulin-dependent diabetes mellitus
US5872145A (en) * 1996-08-16 1999-02-16 Pozen, Inc. Formulation of 5-HT agonist and NSAID for treatment of migraine
US8022095B2 (en) * 1996-08-16 2011-09-20 Pozen, Inc. Methods of treating headaches using 5-HT agonists in combination with long-acting NSAIDs
US6586458B1 (en) 1996-08-16 2003-07-01 Pozen Inc. Methods of treating headaches using 5-HT agonists in combination with long-acting NSAIDs
US5789395A (en) * 1996-08-30 1998-08-04 The Research Foundation Of State University Of New York Method of using tetracycline compounds for inhibition of endogenous nitric oxide production
IT1288123B1 (it) * 1996-09-04 1998-09-10 Nicox Sa Uso di nitroderivati per l'incontinenza urinaria
US6066092A (en) * 1997-11-06 2000-05-23 Cady; Roger K. Preemptive prophylaxis of migraine device and method
IT1301966B1 (it) 1998-07-30 2000-07-20 Zambon Spa Composizioni farmaceutiche ad attivita' analgesica
US6207700B1 (en) * 1999-01-07 2001-03-27 Vanderbilt University Amide derivatives for antiangiogenic and/or antitumorigenic use
US7345051B2 (en) * 2000-01-31 2008-03-18 Genaera Corporation Mucin synthesis inhibitors
AU2001234671B2 (en) * 2000-01-31 2006-05-18 Genaera Corporation Mucin synthesis inhibitors
AU2003247792B2 (en) * 2002-07-03 2009-09-24 Nicox S.A. Nitrosated nonsteroidal antiinflammatory compounds, compositions and methods of use
CA2493156A1 (en) * 2002-07-29 2004-02-05 Nitromed, Inc. Cyclooxygenase-2 selective inhibitors, compositions and methods of use
US7332183B2 (en) * 2002-12-26 2008-02-19 Pozen Inc. Multilayer dosage forms containing NSAIDs and triptans
WO2004110492A2 (en) * 2003-06-06 2004-12-23 Glaxo Group Limited Composition comprising triptans and nsaids
CN1835942A (zh) * 2003-06-19 2006-09-20 金纳莱公司 粘蛋白合成抑制剂
CA2530408A1 (en) * 2003-06-25 2005-01-06 Vanderbilt University Cox-2-targeted imaging agents
JP2007534702A (ja) * 2004-04-26 2007-11-29 バンダービルト・ユニバーシティ 胃腸毒性の低い治療薬としてのインドール酢酸、及びインデン酢酸誘導体
AU2006204523A1 (en) * 2005-01-04 2006-07-13 Novartis Ag X-ray structure of human FPPS and use for selecting FPPS binding compounds
CN101528222A (zh) * 2006-06-19 2009-09-09 范德比尔特大学 用于诊断性和治疗性靶向cox-2的方法和组合物
WO2013059245A1 (en) 2011-10-17 2013-04-25 Vanderbilt University Indomethacin analogs for the treatment of castrate-resistant prostate cancer
TWM469254U (zh) 2013-08-29 2014-01-01 J D Components Co Ltd 自行車之三件式豎管

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR6838M (hu) * 1967-12-08 1969-03-31
ES423794A1 (es) * 1974-03-01 1976-05-01 Medicinales S A Promesa Prod Procediemiento de obtencion de una nueva sal soluble de acido acetilsalicilico.
FR2320759A1 (fr) * 1975-08-11 1977-03-11 Union Pharma Scient Appl Solution d'acide acetylsalicylique extemporanee injectable
IT1127274B (it) * 1979-12-04 1986-05-21 Selvi & C Spa Sali dell'acido 5-fluoro-2-metil-1-(p-(metilsulfinil)-benzilidene)-indene-3-acetico
JPS5781409A (en) * 1980-11-10 1982-05-21 Toko Yakuhin Kogyo Kk External plaster
CA1213888A (en) * 1983-09-28 1986-11-12 Warner-Lambert Company L-arginine isoxicamate
US5081184A (en) * 1985-08-02 1992-01-14 General Electric Company Solvent-resistant, compatible blends of polyphenylene ethers and linear polyesters
JPS6393718A (ja) * 1986-10-07 1988-04-25 Green Cross Corp:The 注射剤
US5059712A (en) * 1989-09-13 1991-10-22 Cornell Research Foundation, Inc. Isolating aminoarginine and use to block nitric oxide formation in body
US5028627A (en) * 1989-09-13 1991-07-02 Cornell Research Foundation, Inc. Method of using arginine derivatives to inhibit systemic hypotension associated with nitric oxide production or endothelial derived relaxing factor
DK0424028T3 (da) * 1989-10-17 1996-01-29 Merck & Co Inc S(+)-ibuprofen-L-aminosyre og S(+)-ibuprofen-D-aminosyre som et forbedret smertestillende middel med fremskyndet indtrædelse
GB8929076D0 (en) * 1989-12-22 1990-02-28 Scras Treatment of shock by blocking agents of edrf effect or formation
US5468476A (en) * 1994-03-16 1995-11-21 Ahluwalia; Gurpreet S. Reduction of hair growth

Also Published As

Publication number Publication date
ITMI922953A1 (it) 1994-06-23
AU3049892A (en) 1993-07-08
PT101165A (pt) 1994-02-28
IE922954A1 (en) 1993-07-14
US5480999A (en) 1996-01-02
ES2052452B1 (es) 1995-02-01
CH685629A5 (fr) 1995-08-31
ATA256092A (de) 1995-10-15
DK157592A (da) 1993-07-05
HK22296A (en) 1996-02-16
JP2984498B2 (ja) 1999-11-29
NL194889C (nl) 2003-06-04
BE1006227A3 (fr) 1994-06-14
JPH05286916A (ja) 1993-11-02
ES2052452A1 (es) 1994-07-01
GB9200114D0 (en) 1992-02-26
NL9300001A (nl) 1993-08-02
GB9227026D0 (en) 1993-02-17
NO302943B1 (no) 1998-05-11
FR2685869B1 (fr) 1995-06-09
AT401054B (de) 1996-06-25
NZ245499A (en) 1995-07-26
HUT64047A (en) 1993-11-29
ZA9210080B (en) 1993-08-02
PT101165B (pt) 1999-09-30
US5360925A (en) 1994-11-01
DE4244539A1 (hu) 1993-07-08
NO924835L (no) 1993-07-05
GB2263111B (en) 1995-08-16
GB2263111A (en) 1993-07-14
IE71675B1 (en) 1997-02-26
FI925883A0 (fi) 1992-12-28
SE9203825L (sv) 1993-07-05
MA22753A1 (fr) 1993-07-01
FR2685869A1 (fr) 1993-07-09
LU88208A1 (fr) 1993-04-15
TW267152B (hu) 1996-01-01
TNSN93001A1 (fr) 1994-03-17
FR2685916A1 (fr) 1993-07-09
KR930016389A (ko) 1993-08-26
AU664399B2 (en) 1995-11-16
DE4244539B4 (de) 2006-10-26
HU9204173D0 (en) 1993-04-28
DK157592D0 (da) 1992-12-30
FI925883A (fi) 1993-07-05
NL194889B (nl) 2003-02-03
KR100287539B1 (ko) 2001-04-16
OA10050A (fr) 1996-10-14
GR1001443B (el) 1993-12-30
NO924835D0 (no) 1992-12-14
SE511568C2 (sv) 1999-10-18
PL297247A1 (en) 1993-09-06
PL169432B1 (pl) 1996-07-31
SE9203825D0 (sv) 1992-12-18
DZ1657A1 (fr) 2002-02-17
FR2685916B1 (fr) 2001-09-28
CA2085555C (en) 2004-07-20
RU2104999C1 (ru) 1998-02-20
CA2085555A1 (en) 1993-07-05
MY109846A (en) 1997-08-30
IT1256761B (it) 1995-12-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU220218B (hu) NO-szintáz és ciklooxigenáz egyidejű gátlására alkalmas vegyületek és gyógyszerkészítmények és eljárás ezek előállítására
ES2259379T3 (es) Inhibidores hidrazino carbociclicos de la amina oxidasas que contienen cobre.
PT99809A (pt) Processo de preparacao de sistemas de aneis biciclicos substituidos 5,6-di-hidro-7h-pirrolo{1,2-a}imidazol-7-01 e 7-ona e de composicoes farmaceuticas que os contem
JPH09512798A (ja) 消炎、鎮痛および抗血栓活性を有するニトロ化合物およびそれらの組成物
RU2167856C2 (ru) Соли производных амидина и ингибитора циклооксигеназы, способ их получения и фармацевтические композиции на их основе
PT1802291E (pt) Miméticos conformacionais de péptidos à base de calixareno, métodos de utilização e métodos de preparação
PT1626716E (pt) Derivados de nitrooxi de fluvastatina, pravastatina, cerivastatina, atorvastatina e rosuvastatina como agentes de redução do colesterol com actividade anti-inflamatória, antitrombótica e antiplaquetária melhorada.
AU737454B2 (en) Method for inhibiting the growth of mammalian cells
BRPI0211025B1 (pt) um novo composto para o tratamento da impotência
CZ20032260A3 (cs) Nové deriváty 5-kyano-1H-indolových antagonistů receptorů interleukinu-8
TW202402288A (zh) 用於治療急性炎症之嘧啶酮化合物
JPH02243625A (ja) 腫瘍転移抑制剤
KR20120132657A (ko) 히스톤 디아세틸라제 저해 활성을 갖는 신규 히드록삼산 및 이를 포함하는 항암용 약제학적 조성물
KR20000053379A (ko) 신규의 치환 알킬테트라아민 유도체
JPH02247122A (ja) 抗炎症剤

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of definitive patent protection due to non-payment of fees