HU218108B - Imidazolinon-rezisztens AHAS-mutánsok - Google Patents

Imidazolinon-rezisztens AHAS-mutánsok Download PDF

Info

Publication number
HU218108B
HU218108B HU9202485A HU9202485A HU218108B HU 218108 B HU218108 B HU 218108B HU 9202485 A HU9202485 A HU 9202485A HU 9202485 A HU9202485 A HU 9202485A HU 218108 B HU218108 B HU 218108B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
ahas
nucleic acid
enzyme
imidazolinone
plant
Prior art date
Application number
HU9202485A
Other languages
English (en)
Other versions
HUT65483A (en
HU9202485D0 (en
Inventor
Gabriele Elfriede Dietrich
Original Assignee
American Cyanamid Co.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=24965568&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=HU218108(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by American Cyanamid Co. filed Critical American Cyanamid Co.
Publication of HU9202485D0 publication Critical patent/HU9202485D0/hu
Publication of HUT65483A publication Critical patent/HUT65483A/hu
Publication of HU218108B publication Critical patent/HU218108B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/52—Genes encoding for enzymes or proenzymes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/88—Lyases (4.)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
    • C12N15/8278—Sulfonylurea

Abstract

A találmány imidazolinonherbicidekkel szemben specifikusan rezisztensmutáns AHAS-enzimet kódoló egyszikű növényi génekre vonatkozik. Ilyengének például a kukorica-DNS-szekvenciák, amelyek a vad típusú AHAS-enzim 621-es helyzetében aminosavhelyettesítést tartalmazó enzimetkódolnak. A mutáns gént egyéb növényekben herbiciddel szembenirezisztencia kialakítására alkalmazhatjuk, ebből a szempontból atalálmány a fenti gént tartalmazó vektorokra és gazdasejtekre isvonatkozik, amely sejtek és vektorok a transzformálási eljárásbanalkalmazhatók. ŕ

Description

A találmány az acetohidroxisav-szintetáz enzim (továbbiakban AHAS) új variáns formáit kódoló új DNS-szekvenciákra vonatkozik. Az AHAS-enzim egy kritikus enzim, amelyet számos növény és a mikroorganizmusok széles köre termel. A normális AHAS-funkciót az imidazolinonherbicidek gátolják, azonban a mutáns DNSszekvenciák által kódolt új AHAS-enzimek katalitikusán normálisan funkcionálnak még imidazolinonherbicidek jelenlétében is, ezért az azokat tartalmazó növényeknek vagy mikroorganizmusoknak herbicidek elleni rezisztenciát biztosítanak.
Az új DNS-szekvenciák kukoricából származnak, és a normális AHAS-szekvencia 621-es helyzetben tartalmaznak aminosavszubsztitúciót. Ez a szubsztitúció az AHAS-génszekvenciában teljesen fúnkcióképes enzimet eredményez, azonban az enzimet specifikusan rezisztenssé teszi különféle imidazolinonherbicidek gátlásával szemben. A fenti variáns szekvenciák segítségével különféle haszonnövényekbe imidazolinonherbicid elleni rezisztencia vihető be, ezenkívül ezek a szekvenciák más típusú genetikus transzformációs kísérletekben új, szelektív markerekként is alkalmazhatók.
A herbicidek mezőgazdasági alkalmazása napjainkban igen elterjedt. Noha számos olyan vegyület van, amely hatásosan elpusztítja a gyomokat, nem minden herbicid képes csak a nemkívánatos növények szelektív pusztítására a kultúrnövényekkel szemben úgy, hogy az állatokra nézve nem toxikus. Gyakran be kell érni olyan vegyületekkel, amelyek egyszerűen csak kevésbé toxikusok a kultúrnövényekre nézve, mint a gyomokra. A fenti probléma leküzdésére a mezőgazdasági kutatások fő célpontja a herbicidekkel szemben rezisztens kultúrnövények kifejlesztése lett.
A herbicidrezisztencia kifejlesztésének fő szempontja a herbicid hatáshelyének felderítése, azután az érintett biokémiai útvonal olyan módosítása a kultúrnövényben, amellyel az inhibitor hatást megkerüljük, mialatt a növény megtartja normális biológiai funkcióit. A herbicidek biokémiai hatásmechanizmusának felderítését legkorábban az imidazolinonok, a szulfonil-karbamidok és a triazolo-pirimidinek mint eltérő szerkezetű herbicid vegyületek körében végezték el. Napjainkban már ismeretes, hogy ezek a herbicidek mind a növényi növekedéshez szükséges alapvető enzim, az acetohidroxisav-szintetáz (AHAS, amelyet acetolaktát-szintetáznak vagy ALS-nek is neveznek) működésének megzavarásával gátolják a növény növekedését. [Shaner és munkatársai: Plánt Physiol. 76, 545-546 (1984); és 4 761 373 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás]. Az AHAS az izoleucin, leucin és valin aminosavak szintéziséhez szükséges.
Az AHAS-enzim ismert módon magasabb rendű növényekben, valamint számos mikroorganizmusban, például az élesztő Saccharomyces cerevisiae-ben és az enterobaktériumok közül az Escherichia coliban és Salmonella typhimuriumban is jelen van. A normális AHAS termelődésének genetikai alapja a fenti fajok közül számosban már jól ismert. így például mind az E. coliban, mind az S. typhimuriumban az AHAS-nak három izoenzimje létezik, ezek közül kettő érzékeny herbicidekre, míg a harmadik nem. A fenti izoenzimek mindegyike egy nagy és egy kis protein alegységet tartalmaz; és a géntérképen az IlvIH, IlvGM és IlvBN operonokhoz kötődik. Élesztőben az egyetlen AHAS izoenzim az ILv2 fókuszban található. Mindegyik esetben azonosították a szenzitív és rezisztens formákat, és meghatározták a különféle allélek szekvenciáit. [Friden és munkatársai: Nucl. Acid Rés. 13, 3979-3993 (1985); Lawther és munkatársai: PNAS USA 78, 922-928 (1982); Squires és munkatársai: Nucl. Acids Rés. 811, 5299-5313 (1983); Wek és munkatársai: Nucl. Acis Rés. 13, 4011-4027 (1985); Falco és Dumas: Genetics 109, 21-35 (1985); Falco és munkatársai: Nucl. Acids Rés. 13,4011-4027(1985)].
Dohányban az AHAS-fúnkciót két, egymással nem összekapcsolódó gén, a SuRA és SuRB kódolja. Alapvető azonosság van a két gén között az érett proteinben, mind az aminosavak, mind a nukleotidok szintjén, noha az N-terminális, feltehetően tranzitrégió lényegesebben különbözik [Lee és munkatársai: EMBO J., 7, 1241-1248 (1988)]. Az Arabidopsis viszont egyetlen AHAS-génnel rendelkezik, amelyet szintén teljes egészében szekvenáltak [Mazur és munkatársai: Plánt Physiol. 85, 1110-1117 (1987)]. A magasabb rendű növények AHAS-génjei szekvenciájának összehasonlítása a szekvencia bizonyos régióinak nagyfokú konzerválására utal, legalább tíz konzervált szekvenciarégió van. Korábban feltételezték, hogy ezek a konzervált régiók kritikusak az enzim funkciója szempontjából, és hogy a funkció megtartása az alapvető szekvencia konzerválásától függ.
Újabban kimutatták (5 013 659 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás), hogy a herbicidrezisztenciát mutató mutánsok a fenti konzervált régiók legalább egyikében, vagy többen is legalább egy aminosavmutációt hordoznak. Közelebbről, az AHAS proteinszekvenciában ezeken a specifikus helyeken a vad típusú aminosavak bizonyos aminosavval való szubsztitúciójáról kimutatták, hogy azt a növény tolerálja, és a fenti mutációt tartalmazó növény valóban herbicidrezisztenciát mutat, miközben a katalitikus funkció megmarad. A fenti irodalmi helyen leirt mutációk vagy keresztrezisztenciát kódolnak imidazolinonokra és szulfonil-karbamidokra, vagy specifikus szulfonil-karbamid-rezisztenciát kódolnak, de imidazolinonspecifikus mutációkat nem ismertetnek. Ezek a mutációk a vizsgálatok szerint a dohánynak mind a SuRA, mind a SuRB fókuszaiban végbemennek, hasonló mutációkat kimutattak az Arabidopsisban és élesztőben is.
Imidazolinonspecifikus rezisztenciát máshol is számos növényben kimutattak. A 4 761 373 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásban növényekben a herbicidrezisztencia alapjaként általánosan ismertetnek egy megváltozott AHAS-t, és specifikusan ismertetnek bizonyos imidazolinonrezisztens kukoricavonalakat. Haughn és munkatársai [Mól. Gén. Génét. 211, 266-271 (1988)] ismertetik egy hasonló fenotípus megjelenését Arabidopsisban. Sathasivan és munkatársai [Nucl. Acid Rés. 18, 2188 (1990)] felismerték, hogy az imidazolinonspecifikus rezisztencia Arabidopsisban
HU 218 108 Β a normális AHAS-szekvencia 653. helyzetében lévő mutáción alapul. A találmány értelmében izoláltuk az egyszikűekben imidazolinonspecifikus rezisztenciát kódoló gént, és kimutattuk, hogy az egyszikű vad típusú AHAS aminosavszekvencia egyetlen aminosavának szubsztitúciójához kapcsolódik.
A találmány tehát új nukleinsavszekvenciákra vonatkozik, amelyek imidazolinonherbicidekkel szemben nem érzékeny, működőképes egyszikű AHAS-enzimeket kódolnak. A találmány szerinti szekvenciák a kukorica AHAS-szekvenciájának 621. helyzetében lévő szerin aminosavat, vagy egy másik egyszikű szekvenciában az ennek megfelelő helyzetben lévő aminosavat kódoló kodonban tartalmaznak mutációt. Egyéb egyszikűek - például a búza - szintén ismert módon imidazolinon-specifikus mutációkat mutatnak (például az ATCC 40994-97 számú fajták). Kukoricában a vad típusú szekvencia szerint tartalmaz ebben a helyzetben. A találmány egyik előnyös megvalósítási módja szerint szerin helyett aszparagin van ebben a helyzetben, de a szerint azonos módon helyettesítheti például az aszparaginsav, glutaminsav, glutamin és triptofán is. Annak ellenére, hogy a találmány szerinti szekvenciák eredetileg egyszikűekből származnak, az új szekvenciák bármely típusú növényben alkalmazhatók imidazolinon-rezisztens sejtek előállítására. A fenti eljárások értelmében a kívánt növényi sejteket egy vagy több, találmány szerinti módosított szekvenciával transzformáljuk. A mutagenezist ezenkívül olyan növényi sejtek vagy magok mutánsainak előállítására is alkalmazhatjuk, amelyek imidazolinonnal szemben nem érzékeny AHAS-t kódoló nukleinsavszekvenciát tartalmaznak. Szövettenyészetből izolált mutáns növényi sejtek esetében az imidazolinonnal szemben rezisztens vagy nem érzékeny tulajdonsággal rendelkező növényeket azután regeneráljuk. A találmány ennek megfelelően olyan növényi sejtekre, baktériumsejtekre, gombasejtekre, növényi szövettenyészetekre, felnőtt növényekre és növényi magvakra is vonatkozik, amelyek egy mutáns nukleinsavszekvenciával rendelkeznek, és amelyek imidazolinon-rezisztens, működőképes AHAS-enzimeket expresszálnak.
Az ilyen új, herbicidrezisztens növények a növénytermesztés új módszereit jelentik imidazolinonok jelenlétében. A nem rezisztens növények ültetése helyett a művelendő területeket a találmány szerinti mutáns szekvenciákkal transzformált, vagy a találmány szerinti mutációval előállított rezisztens növényekkel telepíthetjük be, majd a termőterületet szokásos módon imidazolinonherbicidekkel kezelhetjük anélkül, hogy ez a kultúrnövényekben bármiféle károsodást okozna.
A találmány szerinti mutáns nukleinsavak új szelektálható markereket is jelentenek, amelyek transzformációs kísérletekben alkalmazhatók. A rezisztens AHAS-t kódoló nukleinsavszekvenciát egy másik, kívánt génhez kötjük a gazdasejtbe való átvitel előtt, és a teljes konstruktummal transzformáljuk a gazdasejtet. A feltehetőleg transzformált sejteket ezután a herbicid inhibitor mennyiségének jelenlétében tenyésztjük, a túlélő sejtek nagy valószínűséggel sikeresen megszerezték a kívánt másik gént is. Úgy is eljárhatunk, hogy a rezisztens
AHAS-gént a kérdéses génnel egy független plazmidban kotranszformáljuk, így az összes transzformált sejtek mintegy 50%-a várhatólag rendelkezik mind a két génnel.
A leírásban alkalmazott definíciókat az alábbiak szerint értelmezzük. Funkcionális vagy normális AHASenzim az az enzim, amely képes az izoleucin, leucin és valin mint eszenciális aminosav biokémiai szintézisének első lépését katalizálni. Vad típusú AHAS-szekvencia az a szekvencia, amely egy adott faj imidazolinonnal szemben érzékeny tagjában jelen van. Rezisztens növény az a mutáns, de fúnkcionális AHAS-enzimet termelő növény, amely képes elérni az érettséget, hogyha imidazolinon egyébként inhibitor koncentrációjának jelenlétében tenyésztjük. Rezisztens alatt a leírásban a toleráns növényeket értjük, azaz azokat a növényeket, amelyek fenotípusosan reagálnak az imidazolinonra, de ez a reakció nem letális.
A leírás ábráit az alábbiakban ismertetjük röviden.
1. ábra: AHAS-enzim aktivitása 10 napos kukoricamagoncokban (A619 vagy XI12 kukoricavonalak) imazetapir (PursuitR, ábra A része) vagy klór-szulfúron (OustR, ábra B része) jelenlétében. Az AHAS-aktivitás herbicidrezisztenciáját az inhibitor távollétében mért AHAS-aktivitás százalékaként fejezzük ki. A kísérletek közötti standard hiba 10%.
2. ábra: EMBL fág genomiális kiónok Southern biot analízise. A 12-1A (W22-ből), 12-7A, 18-8A, 12-11 és 12-17A (XI12-ből) fágokat Xbal-gyel vagy Sall-gyel emésztjük, 1%-os agarózgélen szétválasztjuk, nitrocellulóz-szűrőre visszük és AHAS cDNSfragmenssel mint próbával hibridizáljuk.
3. ábra: XI12, XA17, QJ22, A188 és B73 kukoricavonalakból származó genomiális DNS Southern biot analízise. A DNS-t Xbal-gyel emésztjük, 1%-os agarózgélen szétválasztjuk, nitro-cellulóz-szűrőre visszük, és próbaként AHAS cDNS-fragmenssel hibridizáljuk.
4. ábra: pCD8A plazmid restrikciós térképe. Az
XI 12-ből származó mutáns AHAS-gént 8 kb hosszúságú PstI fragmensként szubklónozzuk pKS(+) vektorba. Az AHAS-gén helyét és orientációját nyíllal jelöljük. A PstI, Xhol, HindlII, Xbal és Clal restrikciós helyeket szimbólumokkal jelöljük.
5. ábra: W22/4-4, B73/10-4 és XI12/8A AHASklónok nemkódoló szálának (A) és a kettős szálú DNS-szekvenciájának (B) nukleotid szekvenáló gél képe a 614-633. aminosavat kódoló régióban. A citozin - > timidin átmenet helyét egy nyíl jelöli.
6. ábra: az XI12/8A mutáns AHAS-gén nukleotidszekvenciája és az abból következtetett aminosavszekvencia.
7. ábra: az XI12/8A, B73/7-4 és W22/1A als2 gének nukleotidszekvenciájának összehasonlí3
HU 218 108 Β tása. (*) jelzi a mutációt okozó báziscserét a 621. helyzetben, (#) a B73/7-4 szekvenciától való eltéréseket és (>) a néma változásokat.
8. ábra: az XI12/8A, B73/7-4 és W22/1A als2 gének aminosavszekvenciáinak összehasonlítása. (*) jelzi a 621. helyzetben lévő mutációt, (#) jelzi a B73/7-4 szekvenciától való eltérést és (>) jelzi a néma mutációkat.
A leírást az alábbiakban részletesen ismertetjük.
A találmány szerinti gén XI12 kukoricavonalból izolálható (amelynek magját az American Type Culture Collectionnél helyeztük letétbe, letéti száma: 75051), és a pXI12/8A plazmidba van beillesztve (amelyet az American Type Culture Collectionnél 68643 számon helyeztünk letétbe). A találmány szerinti gén bármely egyéb, specifikusan imidazolinonherbicidre rezisztens mutánsból is izolálható, például a QJ22 kukoricavonalból (az American Type Culture Collectionnél 40129 számon letétbe helyezve, sejttenyészet formájában) vagy különféle búzanövényekből (amelyek magját az American Type Culture Collectionnél 40994, 40995,40996 és 40997 számon helyeztük letétbe). A genomiális DNS-könyvtárat például EMBL-3 fágban állítjuk elő az imidazolinon-rezisztens mutánsok egyikéből kapott DNS-sel, előnyösen egy olyan mutánssal, amely a rezisztencia jellemzőre nézve homozigóta, és a vad típusú AHAS-szekvencia egészét vagy annak egy részét tartalmazó nukleinsavpróbával szűrjük.
A kukoricában az AHAS-gén két helyen, az alsl és als2 lókuszon [Burr és Burr, Trends in Genetics 7, 5561 (1991)] található; a homológia a két lókusz között nukleotidszinten 95%. Az XI 12-ben a mutáció az als2 lókuszhoz kötődik az 5-ös kromoszómán, míg a nemmutáns gén az alsl lókuszon van a 4-es kromoszómán [Newhouse és munkatársai: Imidazolinone-resistant crops, in The Imidazolinone Herbicides (szerk. Shaner and O’Connor) CRC Press, Boca Raton, FL, nyomdában]. Southern biot analízissel kimutathatók a mutáns als2 gént tartalmazó bizonyos kiónok, és a nemmutáns alsl gént tartalmazó bizonyos kiónok. Mindkét típust szekvenálóvektorokba szubklónozzuk, és didezoxi szekvenáló módszer alkalmazásával szekvenáljuk.
A vad típusú és mutáns AHAS-gének szekvenálása és összehasonlítása eredményeként megállapítható, hogy egyetlen nukleotid különbözik csak a 621. helyzetű aminosavat kódoló kodonban (5. ábra). Közelebbről, a vad típusban szerint kódoló AGT kodon változik a mutáns AHAS-ban aszparagint kódoló ΑΛΤ-re (8. ábra). A mutáns AHAS-gén egyébként hasonló a vad típusú génhez, amely egy 638 aminosavból álló proteint kódol, ezekből az első 40 egy átmeneti peptidet kódol, amely minden bizonnyal a kloroplasztba való in vivő transzport során elhasítódik. Az XI 12-ből származó alsl nem-mutáns gén szekvenciája láthatólag azonos a B73-ból származó alsl génnel.
A találmány szerinti mutáns gének imidazolinonherbicidekkel szembeni rezisztenciát biztosítanak, de szulfonil-karbamid herbicidekkel szembeni rezisztenciát nem. Azok a herbicidek, amelyekkel szemben a találmány szerinti gén rezisztenciát biztosít, például a 4 188 487; 4 201 565; 4 221 586; 4 297 128; 4 554 013; 4 608 079; 4 638 068; 4 747 301; 4 650 514; 4 698 092; 4 701 208; 4 709 036; 4 752 323; 4 722 311 és 4 798 619 számú amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírásokban vannak ismertetve.
Szakember számára magától értetődő, hogy a 6. ábrán ismertetett nukleinsavszekvencia nem az egyetlen olyan szekvencia, amely imidazolinon-specifikus rezisztencia kialakítására alkalmazható. Azok a nukleinsavszekvenciák is a találmány tárgykörébe tartoznak, amelyek egy azonos proteint kódolnak, de amelyekben a genetikus kód degeneráltságának következtében a nukleotidszekvencia eltérő. A találmány azon génekre is vonatkozik, amelyek olyan AHAS szekvenciákat kódolnak, amelyekben a fenti mutáció jelen van, de amelyek egy vagy több néma aminosavcserét is kódolnak a molekula azon részeiben, amelyek nem játszanak szerepet a rezisztenciában vagy katalitikus funkcióban. A találmány tárgykörébe tartoznak továbbá az egyéb imidazolinonrezisztens egyszikűekből származó génszekvenciák is, amelyek a szekvenciák megfelelő régióiban tartalmaznak mutációt.
így például a találmány tárgykörébe tartoznak azok a változtatások is egy génszekvenciában, amelyek kémiailag ekvivalens aminosavak beépülését eredményezik egy adott helyre, így egy hidrofób aminosav, az alanin kodonja magától értetődően helyettesíthető egy másik hidrofób aminosavat, például glicint kódoló kodonnal, vagy egy még inkább hidrofób aminosavat, például valint, leucint vagy izoleucint kódoló kodonnal. Hasonlóképpen várhatóan biológiailag ekvivalens termékhez vezetnek azok a változtatások is, amelyek egy negatív töltésű maradék másik negatív töltésű maradékkal való helyettesítését eredményezik, például aszparaginsav cseréjét glutaminsavra, vagy egy pozitív töltésű maradék másik pozitív töltésű maradékkal való helyettesítését, például lizin cseréjét argininra. A találmány kiméra génekre is vonatkozik, amelyekben a kukorica AHAS-gén szubsztituált része más fajokból származó normális AHAS-gének változatlan részeivel vannak kombinálva. Ezért a leírásban, ahol tipikusan imidazolinonnal szemben rezisztens kukorica AHAS-gént említünk, ezek alatt értjük úgy a 6. ábra szerinti szekvenciát, mint a fent említett módokon módosított szekvenciákat.
A találmány szerinti izolált AHAS DNS-szekvenciákat a kívánt kultúrnövények transzformálására alkalmazhatjuk, ezáltal azoknak imidazolinonnal szembeni rezisztenciát biztosítunk. A magasabb rendű növények exogén DNS-sel való közvetlen vagy közvetett transzformálására jelenleg számos különféle technika ismert. A találmány tárgykörébe tartoznak mindazok a módszerek, amelyekkel az új szekvencia a gazda genomjába beépíthető úgy, hogy utódjaiban stabilan öröklődik. Az imidazolinonspecifíkus rezisztencia jellemző egyetlen domináns nukleáris génként öröklődik. Az imidazolinonrezisztencia szintje növekedik, ha a gén homozigóta állapotban van jelen, ilyen kukoricanövények például mintegy 1000-szeres rezisztenciaszinttel rendel4
HU 218 108 Β keznek a nemrezisztens növényekhez képest. A jellemzőre nézve heterozigóta növények azonban mintegy 50-500-szoros rezisztenciával rendelkeznek a nemrezisztens növényekhez képest.
A növényi sejtek transzformálását vektorok alkalmazásával végezhetjük. A transzformálás kivitelezésére szokásosan alkalmazott módszer szerint Agrobacterium tumefacienst használunk idegen gén bevezetésére növényi célsejtbe. így például a mutáns AHAS-szekvenciát a Ti-plazmid T-DNS határolószekvenciáit tartalmazó plazmidvektorba inszertáljuk. A plazmidot ezután E. coliba transzformáljuk. Az így kapott törzs, az AHAS-t tartalmazó T-DNS-szekvenciák növényi célkromoszómákba való hatékony bejuttatásához szükséges virulenciaftjnkciókat tartalmazó gyengített Ti-plazmidot tartalmazó Agrobacterium törzs és egy másik, az AHAS-konstruktum E. coliból Agrobacteriumba való átviteléhez szükséges szekvenciákkal rendelkező plazmidot tartalmazó E. coli törzs között háromszülős párosítást hajtunk végre. A levélkorongok fertőzésére a növények transzformálásához szükséges szekvenciákat tartalmazó rekombináns Agrobacterium törzset alkalmazzuk. A korongokat szelekciós tápközegen neveljük, és a sikeresen transzformált regeneránsokat azonosítjuk. Az így nyert növények rezisztensek a herbicid hatásával szemben, ha annak jelenlétében tenyésztjük azokat. Az exogén DNS bevitelére növényi vírusok is megfelelő eszközt jelenthetnek.
A növényi sejtek direkt felvétele szintén alkalmazható. Jellegzetes módon a célnövény protoplasztjait tenyészetbe helyezzük a beviendő DNS és egy olyan szer jelenlétében, amely elősegíti a protoplasztok általi DNS-felvételt. A fenti célra alkalmazható szerek például a polietilénglikol és a kalcium-foszfát.
A DNS-felvételt elektroporálással is lehet stimulálni. Ezen eljárás szerint egy elektromos pulzus alkalmazásával átmenetileg pórusokat nyitunk a protoplaszt sejtmembránon, és a körülvevő oldatban lévő DNS ezután a pórusokon keresztül bejut a sejtbe. Hasonlóképpen mikroinjektálást is alkalmazhatunk a DNS közvetlen bejuttatására a sejtbe, előnyösen közvetlenül a sejt magjába.
A fent említett módszerek mindegyikében a transzformálás a növényi sejt tenyészetében megy végbe. A transzformálás lejátszódása után a növényi sejtet teljes növénnyé kell regenerálni. A kalluszokból vagy protoplasztokból az érett növény regenerálására vonatkozó módszerek jól ismertek számos különböző faj esetében (lásd például Handbook of Plánt Cell Culture, 1-5. kötet, 1983-1989 McMillan, N.Y.). Ily módon abban az esetben, ha a transzformálás már végbement, szakember kötelező tudásához tartozik az érett növény regenerálása a transzformált növényi sejtekből.
Újabban már ismertek olyan módszerek is, amelyek szerint nem kell szükségszerűen izolált sejteket, és ezután növényregenerálási technikákat alkalmazni a transzformálás elérésére. Ezeket általában ballisztikus vagy részecskegyorsító módszereknek nevezik, amelyekben DNS-sel bevont fémrészecskéket juttatnak be a növényi sejtekbe, vagy puskaportöltettel [Klein és munkatársai: Natúré 327, 70-73 (1987)], vagy elektromos kisüléssel (270 356 számú európai szabadalmi leírás). Ily módon a tenyészetben lévő növényi sejteket vagy növény reprodukálására szolgáló szerveket vagy sejteket - például pollent - stabilan transzformálhatjuk a kérdéses DNS-szekvenciával.
Bizonyos kétszikű és egyszikű növények esetén a transzformálás előnyös módszere a DNS direkt felvétele. így például kukoricában a tenyésztett sejtek sejtfalát egy vagy több sejtfalat emésztő enzimet, például cellulázt, hemicellulázt vagy pektinázt tartalmazó pufferben emésztjük, és ily módon életképes protoplasztokat izolálunk. Az enzimek eltávolítására a protoplasztokat néhányszor mossuk, majd a kérdéses gént tartalmazó plazmid vektorral összekeverjük. A sejteket vagy PEG-lal (például 20%-os PEG 4000), vagy elektroporációval transzformálhatjuk. A protoplasztokat nitro-cellulózszűrőre helyezzük, és táptenyészetként szolgáló beágyazott kukoricasejteket tartalmazó tápközegen tenyésztjük. 2-4 hét múlva a nitro-cellulóz-szűrőn lévő tenyészeteket mintegy 0,32 pmol/liter imidazolinont tartalmazó közegbe helyezzük, és 1 - 2 hónapon keresztül ebben a közegben tartjuk. A növényi sejteket tartalmazó nitro-cellulóz-szűrőket herbicideket és tápanyagsejteket tartalmazó friss közegbe visszük át hetenként. A nem transzformált sejtek növekedése megszűnik, és néhány hét után elpusztulnak.
A találmány szerinti megoldás nyilvánvalóan bármilyen típusú, mind egyszikű, mind kétszikű növény transzformálására alkalmazható. A herbiciddel szembeni rezisztencia transzformálását például az alábbi kultúrnövények esetében végezhetjük: kukorica, búza, rizs, köles, zab, árpa, cirok, napraforgó, édesburgonya, lucerna, cukorrépa, Brassica fajták, paradicsom, bors, szójabab, dohány, dinnye, sütőtök, burgonya, földimogyoró, borsó, gyapot vagy kakaó. Az új szekvenciákat dísznövényfajok, például rózsa, és fafajták, például fenyő és nyárfa transzformálására is alkalmazhatjuk.
A találmány szerinti új szekvenciák növénygenetikai kutatásokban szelektálható markerként is használhatók. így például a növények transzformálásánál az imidazolinonrezisztenciát kódoló szekvenciákat egy kívánt génhez köthetjük, amelyet imidazonilonnal szemben érzékeny célnövénysejtek transzformálására akarunk alkalmazni. Az imidazolinonrezisztenciát biztosító szekvenciát és a kérdéses gént egyaránt tartalmazó konstruktumot a növényi sejtbe bevisszük, és a növényi sejteket ez után az imidazolinon inhibitor mennyiségének jelenlétében tenyésztjük. Úgy is eljárhatunk, hogy a kérdéses második gént egy különálló plazmidban kotranszformáljuk a gazdasejtekbe. A kezelést túlélő növényi sejtek feltehetően megszerezték a rezisztenciagént és a kérdéses gént egyaránt, és csak a transzformánsok élik túl a herbiciddel végzett szelekciós eljárást. A sikeres transzformálás megerősítését és a két gén expresszálását a genomiális DNS Southern biot hibridizációjával, PCR-technikával vagy a gének fenotípusos expressziójának megfigyelésével erősíthetjük meg.
A találmányt közelebbről az alábbi példákkal ismertetjük a korlátozás szándéka nélkül.
HU 218 108 Β
1. példa
Teljes növény herbicidrezisztenciájának megerősítése XI12-ben
Az XI12 növényeket 10 napos koruktól a V3 leveles fejlődési szakaszig [4-5 levél, amelyek közül háromnak látható levélhártyája (ligulája) van] kezeljük a herbiciddel. Az imazetapirt 2000, 500, 250, 125 és 62,5 g/ha dózisban alkalmazzuk. A klór-szulfuront 32, 16, 8,4 és 2 g/ha dózisban alkalmazzuk. A növényeket posztemergens módon 400 1/ha permettérfogattal kezeljük. Permetezés után a növényeket üvegházba helyezzük további megfigyelés céljából.
XI12 növények nem reagáltak az imazetapir kezelésre egyetlen koncentrációban sem, azonban nem figyeltünk meg fokozott rezisztenciát klór-szulfuronnal szemben. így az XI12 szelektív rezisztenciát mutat imidazolinonnal szemben a teljes növény szintjén (lásd 1. ábra).
Azt is kimutattuk, hogy az XI 12-ben a rezisztencia egy sejtmagi gén egyetlen domináns alléljeként öröklődik. Heterozigóta rezisztens XI 12-t önbeporoztunk, és a beltenyésztett utódok a sejtmaggén egyetlen domináns alléljére várt 3 rezisztens: 1 érzékeny arányban váltak szét. Ebben a vizsgálatban a szegregálódó magoncokat posztemergens módon halálos dózisú imazetapirral (125 vagy 250 g/ha) permeteztük, a fent ismertetett permetezési eljárás szerint, hogy megállapítsuk a rezisztencia szétválását.
2. példa
AHAS-extrakció
Az XI12 magjait 80 °C nappali/éjszakai hőmérsékleten és 15 órás megvilágítási periódust biztosító üvegházban vetjük a talajba. A növényeket az ültetés után 2 héttel begyűjtjük. Az AHAS extrakciójára a hajtás bazális részét használjuk. 5 g szövetet cseppfolyós nitrogénben elporítunk, majd AHAS vizsgálati pufferben homogenizáljuk, amely 10 ml/1 piruvátot, 5 mmol/1 magnézium-kloridot, 5 mmol/1 EDTA-t, 100 pmol/l FAD-ot (flavin-adenin-dinukleotidot), 1 mmol/1 valint, 1 mmol/1 leucint, 10% glicerint és 10 mmol/1 ciszteint tartalmazó 100 mmol/1 koncentrációjú kálium-foszfátpufferből (pH 7,5) áll. A homogenizátumot 10 000 fordulat/perc sebességgel 10 percen keresztül centrifugáljuk, a felülúszó 3 ml-ét felvisszük egy ekvilibrált BioRad Econo-Desalting oszlopra (10 DG) és 4 ml AHAS vizsgálati pufferrel eluáljuk.
Az AHAS-aktivitást az acetolaktát termék meghatározásával mérjük, miután sav jelenlétében dekarboxilezéssel acetoinná alakítottuk. A standard reakcióelegy az enzimet 100 mmol/1 nátrium-piruvátot, 10 mmol/1 magnézium-kloridot, 1 mmol/1 tiamin-pirofoszfátot, 10 pmol/l FAD-ot és a különböző inhibitorok megfelelő koncentrációit tartalmazó 50 mmol/1 koncentrációjú kálium-foszfát-pufferben (pH 7,0) tartalmazza. Ezt az elegyet 37 °C-on 1 -3 órán keresztül inkubáljuk a kísérlettől függően. Az inkubációs periódus végén a reakciót kénsav hozzáadásával állítjuk le, amellyel a reakcióelegyben 0,85% kénsav végkoncentrációt állítunk be. A reakcióterméket 60 °C-on 15 percen keresztül dekarboxilezzük. A képződött acetoint 0,17% kreatinnal és 1,7% l-naftol/4 n nátrium-hidroxiddal végzett inkubálással határozzuk meg. A képződött színes komplex abszorpcióját 520 nm-en mérjük.
A B73, A619 vagy egyéb vad típusú kukoricavonalból származó AHAS-aktivitás erősen érzékeny az imazetapir (PURSUITR) általi gátlásra, az I50 koncentráció 1 pmol/1 (lásd 1. ábra). A fenti eredményekkel szemben az XI12 70-80%-os enzimaktivitást mutat még a legmagasabb (100 pmol/1) PURSUITR vagy ARSENALR (imazepir) koncentrációknál is, és 70% aktivitást SCEPTERR (imazekin) jelenlétében. Ezek az eredmények százszoros növekedést mutatnak XII2 AHAS-aktivitásának imazetapirral szembeni tűrőképességében az A619-ből származó in vitro AHAS-aktivitással összehasonlítva. A két vonalból származó AHAS-aktivitások érzékenysége szulfonil-karbamidokkal szemben eltérő képet mutat. OUSTR (szulfometuron-metil) 100 nmol/1 koncentrációjának jelenlétében az XI12 AHAS-aktivitása csak 15-20%. Az A619 AHAS-aktivitása OUSTR jelenlétében 5-10% és PURSUITR jelenlétében 15-20% (lásd 1. ábra).
3. példa
X112 AHAS-gének klónozása
Imidazolinonrezisztens kukorica szövettenyészet vonalból származó XI12 mutáns magjait elvetjük; az ezekből kapott növények láthatólag a mutáns AHAS fenotípusra szegregálódnak. Homozigótarezisztens maganyag előállítása céljából az XI12 mutáns növények populációját önbeporozzuk. Három egymást követő tenyésztési szezon során herbicidrezisztencia szempontjából szelektálva, a kapott magok a mutáns AHAS-génre nézve homozigóták. A homozigóta magokat összegyűjtjük s az AHAS-gén izolálására alkalmazott magoncok nevelésére használjuk.
A DNS-t a homozigóta XI12 7 napos elszíntelenedett magoncaiból extraháljuk. 60 g növényi szövetet cseppfolyós nitrogénben porítunk, és 108 ml DNSextrakciós puffer [1,4 mol/1 nátrium-klorid, 2,0% Ctab (hexadecil-trimetil-ammónium-bromid), 100 mmol/1 Tris-HCl, pH 8,0, 20 mmol/1 EDTA, 2% merkaptoetanol] és 54 ml víz elegyébe átvisszük. 50-60 °C-on 30 percen keresztül inkubáljuk a szuszpenziót, majd azonos térfogatú kloroformmal extraháljuk. A DNS-t azonos mennyiségű precipitációs puffer (1% Ctab, 50 mmol/1 Tris-HCl pH 8,0, 10 mmol/1 EDTA) hozzáadásával kicsapjuk. A genomiális DNS tisztítására nagy fordulatszámú centrifugálást végzünk 6,6 mol/1 céziumkloridban és etidium-bromidban (Ti80 rotor, 50 000 fordulat/perc, 20 °C, 24 óra). A tisztított DNS-t sóval telített butanollal extraháljuk, és 25 órán keresztül dializáljuk 1 liter dialízispufferrel (10 mmol/1 Tris-HCl, pH 8,0,1 mmol/1 EDTA, 0,1 mol/1 nátrium-klorid) szemben, háromszori cserével. Az XI12 genomiális DNS koncentrációja spektrofotometriás meghatározás szerint 310 mg/ml. A hozam 0,93 mg.
Az XII2 genomiális DNS-t alkalmazzuk genomiális könyvtár előállítására EMBL-3 fágban. A DNS-t részlegesen emésztjük Mbol-gyel, és a fragmenseket szacharózgradiensen választjuk szét 8 és 22 kb közötti
HU 218 108 Β méretekre az EMBL-3 BamHI helyére való klónozás előtt. 2,1 χ 106 egymástól független kiónt kapunk, majd a könyvtárat egyszer megsokszorozzuk. A könyvtár litere 9 x 10>°pfú/ml.
Az XI12 könyvtár analíziséhez próbák előállítására egy W22 (vad típus) cDNS-könyvtárat lambda-gtl 1ben (forgalmazza a Clontech Inc., CA) szűrünk egy 800 nukleotid hosszúságú BamHI próbával, amelyet Arabidopsis AHAS genomiális klónból izoláltunk. A fágokat 50 000 pfu/15 cm lemez sűrűséggel szélesztjük, nitro-cellulóz-szűrőkre visszük, és 0,2% SDS-t tartalmazó 6 x SSC-vel két órán keresztül előhibridizáljuk, majd az Arabidopsis AHAS-próbával hibridizáljuk 0,2% SDS-t tartalmazó 6 x SSC-ben, 1 éjszakán keresztül. Egy pozitív fágot azonosítunk, amelyet tovább tisztítunk, és egy 1,1 kb hosszúságú EcoRI fragmens szubklónozására használjuk. Az 1,1 kb hosszúságú EcoRI fragmenst pGemA-4-be szubklónozzuk, és próbaként használjuk az XI12 AHAS-gének azonosítására.
Az XI12 genomiális könyvtárat 12 db 15 cm-es lemezre szélesztjük 50 000 pfú/lemez koncentrációban és W22 AHAS cDNS próbával szüljük. A szűrőket 2 órán keresztül előhibridizáljuk, majd 1 éjszakán keresztül hibridizáljuk ChurcH pufferben (0,5 mol/1 nátrium-foszfát, 1 mmol/1 EDTA, 1% BSA, 7% SDS) 65 °C-on, és 65 °C-on mossuk, 0,2% SDS-t tartalmazó 2xSSC-vel, és 0,2% SDS-t tartalmazó 0,3xSSC-vel. Összesen 7,5xl05 megvizsgált telepből 12 pozitív plakkot kapunk, és 5 pozitív kiónt tovább tisztítunk és izolálunk Chisholm [BioTechniques 7, 21-23 (1989)] módszerével. A Southern biot analízis (2. ábra) azt mutatja, hogy a fágklónok két típusú AHAS kiónt képviselnek, az 1. típusú kiónok egy nagy Xbal fragmenst tartalmaznak (>6,5 kb), amely az AHAS cDNS próbával hibridizál, és a 2. típusú kiónok két, 2,7 és 3,7 kb hosszúságú Xbal fragmenst tartalmaznak, amelyek az AHAS cDNS próbával hibridizálnak. Az XI12 DNS genomiális Southern blotja azt bizonyítja, hogy a genomiális DNS emésztésével kapott Xbal fragmensek és az AHAS cDNS próbával való hibridizálással kapott Xbal fragmensek megfelelnek a XI12 fágklónokban azonosított Xbal ffagmenseknek (lásd 3. ábra). A restrikciós emésztés és Southern biot analízis azt is bizonyítja, hogy 5 AHAS-klón közül egy klón képviseli az als2 mutáns gént és 4 képviseli az alsl gént.
Az 5-ös kromoszómán elhelyezkedő mutáns lókusznak (12/8A klón) és a 4-es kromoszómán elhelyezkedő nemmutáns lókusznak (12/17A klón) megfelelő AHAS-géneket szubklónozzuk PstI fragmensként (12/8A klón) vagy Xbal fragmensként (12/17A) a pBluescript II KSml3(+) szekvenáló vektorba (pks+; Stratagene). A 12/17A fágból kapott 2,7 kb és 3,7 kb Xbal fragmensek közül mind a kettő egy teljes AHAS-gén kópiát tartalmaz, amelyeket azonosítottunk. A fragmensek szekvenciáját didezoxiszekvenálással (Pharmacia T7 szekvenálókészlet) határozzuk meg, az AHAS kódolószekvenciájával komplementer primereket alkalmazva.
A DNS extrahálását, a genomiális könyvtár klónozását és a könyvtár szűrővizsgálatát az XI12 genomiális DNS-re ismertetett módszerekkel végezzük. A B73 AHAS-géneket Xbal fragmensként szubklónozzuk a pKS-ι- szekvenálóvektorba és szekvenáljuk. A szekvenciát didezoxiszekvenálással határozzuk meg, az AHAS kódolószekvenciájával komplementer primerek alkalmazásával, az XI12 AHAS-génekre leírtak szerint.
Egy W22 genomiális könyvtárat EMBL3-ban (forgalmazza a Clontech Inc., CA) szűrünk. A fágokat 50 000 pfú/17,8 cm lemez sűrűséggel szélesztjük, nitro-cellulóz-szűrőkre visszük, és a W22 AHAS cDNS próbával hibridizáljuk a fent leírtak szerint (előhibridizálási és hibridizálási körülmények: 6xSSC, 0,5% SDS, 1 xDenhard-féle puffer, 100 mg/ml borjú thymus DNS, 65 °C; mosási körülmények: 3xSSC, 0,2% SDS 2 órán keresztül 65 °C-on és 0,3xSSC, 0,2% SDS 2 órán keresztül). Két pozitív fágot (12/1A és 12/4-4) azonosítunk és tovább tisztítunk.
A 12/1A W22 genomiális kiónt két 0,78 kb hosszúságú (pGemA-4) és 3,0 kb hosszúságú (pGemA-14; Promega) Sáli fragmensként szubklónozzuk a pGemA2 vektorba, és 6,5 kb Xbal fragmensként a pKS+ vektorba (pCD200). A W22 AHAS-gén kódolószálának szekvenciáját a 12-1A fág pGem A-14 és pGem A-4 szubklónjaiból készített beillesztett deléciók didezoxiszekvenálásával határozzuk meg. Ezt a szekvenciát alkalmazzuk az AHAS nemkódoló szálával komplementer oligonukleotidszekvenciák tervezésére. A nem-kódoló szál szekvenciáját a pCD200 klón didezoxiszekvenálásával kapjuk meg a kódolószállal komplementer primerek alkalmazásával. A W22 AHAS-gén szekvenálásának kiegészítése után mindkét DNS-szál primerjeit megtervezzük, és az XI12 és B73 genomiális könyvtárakból izolált AHAS-gének szekvenálására alkalmazzuk.
4. példa
QJ22 AHAS-gének klónozása
Az imidazolinonokkal szemben szelektíven rezisztens QJ22 kukoricavonalban az AHAS-t kódoló gének szekvenciáját szintén meghatározzuk. A QJ22 genomiális könyvtárát egy EMBL3 vektorban készítjük el. 800 000 fágból álló könyvtárat szűrünk egy 850 kb hosszúságú Sall/Clal nukleotidfragmenssel, amelyet a vad típusú W22 kukoricavonalból származó A4 AHASklónból izoláltunk. 5 pozitív fágot kiemelünk, és egy második szűrővizsgálatnak vetünk alá a fág részleges tisztítása céljából. A részlegesen tisztított fágot PCR-rel analizáljuk annak meghatározására, hogy van-e köztük olyan klón, amely a QJ22 alsl gént képviseli. Ezeket a kiónokat 3,7 kb hosszúságú Xbal fragmens formájában azonosítjuk, amely egyetlen génre specifikus Smal helyet tartalmaz 495-ös helyzetben. A második szűrővizsgálat azt jelzi, hogy egyetlen pozitív klón rendelkezik a fenti jellemzőkkel.
A PCR-terméket kereskedelmi forgalomban lévő készlettel (Magic PCR Preps, Promega) tisztítjuk, és a tisztított DNS-t Taq polimerázszekvenáló rendszerrel (fmol, Promega) szekvenáljuk. A QJ22 mutáns AHAS DNS mindkét szálának szekvenciaanalízise mutatja a
HU 218 108 Β
G -> A nukleotidcserét a 621-es aminosavat kódoló kodonban. Ez a mutáció azonos az XI 12-ben látható mutációval, és a szekvencia fennmaradó része az alsl génre jellemző.
A mutáns AHAS-gének szekvenciáját összehasonlítjuk a B73 és W22 vad típusú kukoricavonalakból kapott szekvenciákkal (7. ábra). Az XI12 mutáns gén (XI12/8A) és a QJ22 mutáns gén és a vad típusú gén mindenben megegyezik, kivéve a 621-es helyzetben lévő aminosav változását, melyet egyetlen nukleotid cseréje okoz, mégpedig az AGT cseréje AAT-re (lásd 8. ábrát). Az XI12 mutáns XI12/8A és a vad típusú B73/7-4 gén egy további különbséget is mutat 63-as helyzetben. Ezzel szemben az XI12/17A-ba klónozott nemmutáns XI12 AHAS-gén teljesen homológ a megfelelő B73/10-2-vel, az érett AHAS-proteint kódoló régióban (adatokat nem közölünk).
Az alábbi biológiai anyagokat az American Type Culture Collectionnél (12301 Parklawn Drive, Rockville, Maryland, 20857) helyeztük letétbe:
E. coli XLI Blue hordozóplazmid pX12/8A, 1991. július 3-án letétbe helyezve, letéti szám: ATCC 68643 és XI12 kukoricamag 1991. július 16-án letétbe helyezve, letéti szám: ATCC 75051.

Claims (14)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Nukleinsavszekvencia, amely egyszikű növényekben funkcionális AHAS-enzimet kódol, azzal jellemezve, hogy az enzim a vad típusú egyszikű AHASenzimhez viszonyítva egyetlen aminosavhelyettesítést tartalmaz, amely a kukorica-AHAS-enzimben 621-es helyzetben, az egyéb egyszikű AHAS-enzimekben az ennek megfelelő helyzetben van, amely aminosavhelyettesítés az enzimnek imidazolinon-speciftkus rezisztenciát biztosít.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti nukleinsavszekvencia, azzal jellemezve, hogy az egyszikű növény a kukorica, és a helyettesítés a vad típusú kukorica AHAS-enzim 621-es helyzetében van.
  3. 3. A 2. igénypont szerinti nukleinsavszekvencia, azzal jellemezve, hogy a helyettesített aminosav az aszparagin.
  4. 4. Egyszikű növényekben funkcionális AHAS-enzim, azzal jellemezve, hogy a vad típusú egyszikű
    AHAS-enzimhez viszonyítva egyetlen aminosavhelyettesítést tartalmaz, amely a kukorica AHAS-enzimben a 621-es helyzetben, az egyéb egyszikű AHAS-enzimekben az ennek megfelelő helyzetben van, amely aminosavhelyettesítés az enzimnek imidazolinon-specifikus rezisztenciát biztosít.
  5. 5. A 4. igénypont szerinti enzim, azzal jellemezve, hogy az egyszikű növény a kukorica, és a helyettesítés a vad típusú kukorica AHAS-enzim 621-es helyzetében van.
  6. 6. Az 5. igénypont szerinti enzim, azzal jellemezve, hogy a helyettesített aminosav az aszparagin.
  7. 7. Transzformálóvektor, azzal jellemezve, hogy egy 1. igénypont szerinti nukleinsavszekvenciát tartalmaz.
  8. 8. Gazdasejt, azzal jellemezve, hogy egy 1. igénypont szerinti nukleinsavszekvenciát vagy egy 7. igénypont szerinti vektort tartalmaz.
  9. 9. A 8. igénypont szerinti gazdasejt, azzal jellemezve, hogy az növényi sejt vagy bakteriális sejt.
  10. 10. Specifikusan imidazolinonrezisztens transzgenikus érett növény, vagy annak magja vagy pollenje, azzal jellemezve, hogy egy 1. igénypont szerinti nukleinsavszekvenciát tartalmaz.
  11. 11. Eljárás specifikus imidazolinonrezisztencia kialakítására növényi sejtekben, azzal jellemezve, hogy a növényi sejtbe egy 1. igénypont szerinti nukleinsavszekvenciát viszünk be.
  12. 12. Eljárás specifikusan imidazolinonrezisztens transzgenikus növények tenyésztésére, azzal jellemezve, hogy a géntranszformációs események eredményeként a 4. igénypont szerinti enzimet termelő növényt imidazolinon inhibitorkoncentrációjának jelenlétében tenyésztjük.
  13. 13. Eljárás egy kívánt génnel sikeresen transzformáit gazdasejtek szelektálására, azzal jellemezve, hogy a gazdasejtekbe a kívánt gént egy 1. igénypont szerinti nukleinsavszekvenciához kötötten, vagy ahhoz nem kötötten, de egy 1. igénypont szerinti nukleinsavszekvencia jelenlétében transzformáljuk, a sejteket imidazolinon inhibitorkoncentrációjának jelenlétében tenyésztjük, és a túlélő sejteket mint a kívánt gént tartalmazó sejteket azonosítjuk.
  14. 14. Nukleinsavszerkezet, azzal jellemezve, hogy egy 1. igénypont szerinti nukleinsavszekvenciát tartalmaz egy mezőgazdaságilag hasznos jellemzőt kódoló génhez kötve.
HU9202485A 1991-07-31 1992-07-30 Imidazolinon-rezisztens AHAS-mutánsok HU218108B (hu)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US07/737,851 US5731180A (en) 1991-07-31 1991-07-31 Imidazolinone resistant AHAS mutants

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU9202485D0 HU9202485D0 (en) 1992-10-28
HUT65483A HUT65483A (en) 1994-06-28
HU218108B true HU218108B (hu) 2000-06-28

Family

ID=24965568

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9202485A HU218108B (hu) 1991-07-31 1992-07-30 Imidazolinon-rezisztens AHAS-mutánsok

Country Status (27)

Country Link
US (3) US5731180A (hu)
EP (1) EP0525384B1 (hu)
JP (1) JP3523657B2 (hu)
KR (1) KR100243996B1 (hu)
AT (1) ATE197475T1 (hu)
AU (3) AU2069492A (hu)
BG (1) BG61276B1 (hu)
BR (1) BR9202950A (hu)
CA (1) CA2074854C (hu)
CZ (1) CZ238592A3 (hu)
DE (1) DE69231551T2 (hu)
DK (1) DK0525384T3 (hu)
ES (1) ES2153352T3 (hu)
FI (1) FI114922B (hu)
GR (1) GR3035395T3 (hu)
HU (1) HU218108B (hu)
IE (1) IE922504A1 (hu)
IL (1) IL102673A (hu)
MX (1) MX9204420A (hu)
NO (1) NO311095B1 (hu)
NZ (1) NZ243693A (hu)
PL (1) PL170616B1 (hu)
PT (1) PT525384E (hu)
RO (1) RO114348B1 (hu)
SK (1) SK238592A3 (hu)
TW (1) TW239161B (hu)
ZA (1) ZA925734B (hu)

Families Citing this family (330)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5731180A (en) * 1991-07-31 1998-03-24 American Cyanamid Company Imidazolinone resistant AHAS mutants
US5750866A (en) * 1994-09-08 1998-05-12 American Cyanamid Company AHAS promoter useful for expression of introduced genes in plants
US5633437A (en) * 1994-10-11 1997-05-27 Sandoz Ltd. Gene exhibiting resistance to acetolactate synthase inhibitor herbicides
EP0821729B1 (en) * 1995-04-20 2006-10-18 Basf Aktiengesellschaft Structure-based designed herbicide resistant products
US5853973A (en) * 1995-04-20 1998-12-29 American Cyanamid Company Structure based designed herbicide resistant products
US5773704A (en) 1996-04-29 1998-06-30 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Herbicide resistant rice
US6492578B1 (en) 1998-07-10 2002-12-10 Calgene Llc Expression of herbicide tolerance genes in plant plastids
US7019196B1 (en) * 1998-11-05 2006-03-28 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Herbicide resistant rice
ES2222745T3 (es) 1998-11-05 2005-02-01 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Arroz resistente a herbicidas.
US7612255B2 (en) * 1999-02-03 2009-11-03 Jonathan Gressel Transgenic plants for mitigating introgression of genetically engineered genetic traits
MX233208B (es) * 2000-04-28 2005-12-20 Basf Ag Uso del gen mutante ahas 2 del maiz xi12 y herbicidas de imidazolinona para la seleccion de plantas de maiz, arroz y trigo, monocotiledoneas transgenicas, resistentes a los herbicidas de imidazolinona.
WO2001085970A2 (en) * 2000-05-10 2001-11-15 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Resistance to acetohydroxyacid synthase-inhibiting herbicides
US20030097692A1 (en) * 2000-12-21 2003-05-22 Georg Jander Plants with imidazolinone-resistant ALS
AU2002236880A1 (en) * 2001-01-25 2002-08-06 Basf Plant Science Gmbh Transgenic trees having increased resistance to imidazolinone herbicides
USRE45340E1 (en) 2001-05-14 2015-01-13 University Of Saskatchewan Lentil plants having increased resistance to imidazolinone herbicides
GB0118928D0 (en) * 2001-08-02 2001-09-26 Syngenta Participations Ag DNA molecules conferring tolerance to herbicidal compounds
AU2012203652B2 (en) * 2001-08-09 2015-05-28 Northwest Plant Breeding Company Wheat plants having increased resistance to imidazolinone herbicides
RU2337532C2 (ru) * 2001-08-09 2008-11-10 Юниверсити Оф Саскачеван Растения пшеницы с повышенной устойчивостью к имидазолиноновым гербицидам
BRPI0211809B1 (pt) * 2001-08-09 2019-04-24 University Of Saskatchewan Método para o controle de ervas daninhas nas vizinhanças de uma planta de trigo ou triticale, método para modificar a tolerância de uma planta de trigo ou triticale a um herbicida de imidazolinona e método de produção de uma planta de trigo ou triticale transgênica tendo resistência aumentada a um herbicida de imidazolinona
RU2004106631A (ru) * 2001-08-09 2005-05-10 Нортвест Плант Бридинг Компани (Us) Растения пшеницы с повышенной устойчивостью к имидозалиновым гербицидам
EP1521835B1 (en) 2002-07-09 2010-03-10 BASF Plant Science GmbH Use of ahas mutant genes as selection marker in potato transformation
EP1551218B1 (en) 2002-07-10 2017-05-17 The Department of Agriculture, Western Australia Wheat plants having increased resistance to imidazolinone herbicides
SG155063A1 (en) 2003-04-29 2009-09-30 Pioneer Hi Bred Int Novel glyphosate-n-acetyltransferase (gat) genes
JP2007501634A (ja) * 2003-05-07 2007-02-01 レネッセン リミテッド ライアビリティ カンパニー １以上のアミノ酸レベルが増加した植物
EP1633875B1 (en) 2003-05-28 2012-05-02 Basf Se Wheat plants having increased tolerance to imidazolinone herbicides
BRPI0413917B1 (pt) 2003-08-29 2018-09-25 Instituto Nacional De Tech Agropecuaria ácido nucleico ahas de arroz mutagenizado não transgênico, polipeptídeo ahas isolado, e, método de controle de ervas daninhas dentro da vizinhança de uma planta de arroz
WO2005072186A2 (en) * 2004-01-21 2005-08-11 Omega Genetics, Llc Glyphosate tolerant plants and methods of making and using the same
MXPA06012634A (es) 2004-04-30 2007-02-08 Dow Agrosciences Llc Nuevos genes con resistencia a los herbicidas.
CA2570298A1 (en) * 2004-06-16 2006-01-19 Basf Plant Science Gmbh Polynucleotides encoding mature ahasl proteins for creating imidazolinone-tolerant plants
US7355098B2 (en) * 2004-06-22 2008-04-08 Saskatchewan Wheat Poo1 Brassica AHAS genes and gene alleles that provide resistance to imidazolinone herbicides
WO2006024351A1 (en) * 2004-07-30 2006-03-09 Basf Agrochemical Products B.V. Herbicide-resistant sunflower plants, plynucleotides encoding herbicide-resistant acetohydroxy acid synthase large subunit proteins, and methods of use
US20100029485A1 (en) 2005-03-02 2010-02-04 Instituto Nacional De Tecnologia Agropecuaria Herbicide-resistant rice plants, polynucleotides encoding herbicide-resistant acetohydroxyacid synthase large subunit proteins, and methods of use
EP1889902B1 (en) 2005-05-09 2011-10-12 Kumiai Chemical Industry Co., Ltd. Method for transformation using mutant acetolactate synthase gene
US7994399B2 (en) 2005-06-23 2011-08-09 Basf Plant Science Gmbh Methods for the production of stably transformed, fertile Zea mays plants
EA201301103A1 (ru) 2005-07-01 2014-02-28 Басф Се Резистентные к гербицидам растения подсолнечника, полинуклеотиды, кодирующие резистентные к гербицидам большие субъединицы белков ацетогидроксикислотной синтазы, и применение растений и полинуклеотидов
KR20080052606A (ko) * 2005-08-24 2008-06-11 파이어니어 하이 부렛드 인터내쇼날 인코포레이팃드 다수 제초제에 대해 내성을 제공하는 조성물 및 이의 이용방법
NZ567807A (en) 2005-10-28 2011-09-30 Dow Agrosciences Llc Novel herbicide (2,4-D and pyridyloxyacetate) resistance genes with aryloxyalkanoage dioxygenase activity
NZ571115A (en) 2006-03-02 2011-11-25 Athenix Corp Method and compositions for improved enzyme activity in transgenic plant
BRPI0712398A2 (pt) 2006-05-17 2012-10-16 Pioneer Hi-Bred International minicromossomo artificial de planta, planta de milho, polinucleotìdeo isolado, construção recombinante, planta transgênica de milho e método para produzir uma planta transgênica de milho compreendendo um minicromossomo artificial de planta tendo centrÈmero funcional
WO2007149069A2 (en) * 2006-06-15 2007-12-27 Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Resistance to acetolactate synthase-inhibiting herbicides
US7951995B2 (en) 2006-06-28 2011-05-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean event 3560.4.3.5 and compositions and methods for the identification and detection thereof
SI2511373T1 (sl) * 2006-12-07 2017-12-29 Kansas State University Research Foundation Acetolaktat sintaza proti herbicidu odporen sirek
UA108733C2 (uk) 2006-12-12 2015-06-10 Толерантна до гербіциду рослина соняшника
CL2007003743A1 (es) * 2006-12-22 2008-07-11 Bayer Cropscience Ag Composicion que comprende fenamidona y un compuesto insecticida; y metodo para controlar de forma curativa o preventiva hongos fitopatogenos de cultivos e insectos.
CL2007003744A1 (es) * 2006-12-22 2008-07-11 Bayer Cropscience Ag Composicion que comprende un derivado 2-piridilmetilbenzamida y un compuesto insecticida; y metodo para controlar de forma curativa o preventiva hongos fitopatogenos de cultivos e insectos.
US7777102B2 (en) * 2007-02-08 2010-08-17 University Of Tennessee Research Foundation Soybean varieties
WO2008110281A2 (de) * 2007-03-12 2008-09-18 Bayer Cropscience Ag 3,4-disubstituierte phenoxyphenylamidine und deren verwendung als fungizide
EP1969929A1 (de) 2007-03-12 2008-09-17 Bayer CropScience AG Substituierte Phenylamidine und deren Verwendung als Fungizide
EP1969930A1 (de) * 2007-03-12 2008-09-17 Bayer CropScience AG Phenoxyphenylamidine und deren Verwendung als Fungizide
BRPI0808846A2 (pt) * 2007-03-12 2019-09-24 Bayer Cropscience Ag fenoxifenilamidinas 3-substituídas e seu uso como fungicidas
EP1969931A1 (de) * 2007-03-12 2008-09-17 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Fluoalkylphenylamidine und deren Verwendung als Fungizide
WO2008110279A1 (de) * 2007-03-12 2008-09-18 Bayer Cropscience Ag Dihalogenphenoxyphenylamidine und deren verwendung als fungizide
EP1969934A1 (de) 2007-03-12 2008-09-17 Bayer CropScience AG 4-Cycloalkyl-oder 4-arylsubstituierte Phenoxyphenylamidine und deren Verwendung als Fungizide
US10017827B2 (en) 2007-04-04 2018-07-10 Nidera S.A. Herbicide-resistant sunflower plants with multiple herbicide resistant alleles of AHASL1 and methods of use
UA126227C2 (uk) 2007-04-04 2022-09-07 Басф Плант Саєнс Гмбх Злакова рослина, толерантна до імідозолінону або сульфонілсечовини
WO2009031031A2 (en) 2007-04-04 2009-03-12 Basf Se Herbicide-resistant brassica plants and methods of use
US8168567B2 (en) 2007-04-19 2012-05-01 Bayer Cropscience Ag Thiadiazolyl oxyphenyl amidines and the use thereof as a fungicide
WO2008141154A2 (en) 2007-05-09 2008-11-20 Dow Agrosciences Llc Novel herbicide resistance genes
DE102007045957A1 (de) 2007-09-26 2009-04-09 Bayer Cropscience Ag Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akarziden Eigenschaften
DE102007045922A1 (de) * 2007-09-26 2009-04-02 Bayer Cropscience Ag Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften
DE102007045956A1 (de) * 2007-09-26 2009-04-09 Bayer Cropscience Ag Wirkstoffkombination mit insektiziden und akariziden Eigenschaften
DE102007045953B4 (de) 2007-09-26 2018-07-05 Bayer Intellectual Property Gmbh Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften
DE102007045920B4 (de) 2007-09-26 2018-07-05 Bayer Intellectual Property Gmbh Synergistische Wirkstoffkombinationen
DE102007045919B4 (de) 2007-09-26 2018-07-05 Bayer Intellectual Property Gmbh Wirkstoffkombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften
BRPI0818691A2 (pt) * 2007-10-02 2014-09-30 Bayer Cropscience Ag Métodos para melhorar o crescimento vegetal.
EP2090168A1 (de) 2008-02-12 2009-08-19 Bayer CropScience AG Methode zur Verbesserung des Pflanzenwachstums
EA026107B1 (ru) * 2007-10-05 2017-03-31 СИБАС ЕУРОП Би.Ви. СОДЕРЖАЩИЕ МУТАЦИИ ГЕНЫ СИНТАЗЫ АЦЕТОГИДРОКСИКИСЛОТ РАСТЕНИЯ Brassica И ИХ ПРИМЕНЕНИЕ
US8097712B2 (en) 2007-11-07 2012-01-17 Beelogics Inc. Compositions for conferring tolerance to viral disease in social insects, and the use thereof
EP2072506A1 (de) 2007-12-21 2009-06-24 Bayer CropScience AG Thiazolyloxyphenylamidine oder Thiadiazolyloxyphenylamidine und deren Verwendung als Fungizide
EP2113172A1 (de) * 2008-04-28 2009-11-04 Bayer CropScience AG Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
US8748695B2 (en) * 2008-07-23 2014-06-10 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Molecular markers linked to PPO inhibitor tolerance in soybeans
US8697941B2 (en) 2008-07-23 2014-04-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Molecular markers linked to PPO inhibitor tolerance in soybeans
US8952222B2 (en) 2008-07-31 2015-02-10 Anglo Netherlands Grain B.V. Herbicide resistant sunflower plants derived from RW-B cultivar
EP2168434A1 (de) 2008-08-02 2010-03-31 Bayer CropScience AG Verwendung von Azolen zur Steigerung der Resistenz von Pflanzen oder Pflanzenteilen gegenüber abiotischem Stress
MX2011001427A (es) 2008-08-08 2011-06-20 Bayer Bioscience Nv Metodos para la caracterizacion e identificacion de fibras vegetales.
PE20110672A1 (es) 2008-08-14 2011-09-25 Bayer Cropscience Ag 4-fenil-1-h-pirazoles insecticidas
DE102008041695A1 (de) 2008-08-29 2010-03-04 Bayer Cropscience Ag Methoden zur Verbesserung des Pflanzenwachstums
US8367392B2 (en) * 2008-09-05 2013-02-05 Transalgae Ltd. Genetic transformation of algal and cyanobacteria cells by microporation
PL2733212T3 (pl) 2008-09-26 2019-06-28 Basf Agrochemical Products, B.V. Mutanty ahas odporne na herbicyd i sposoby ich zastosowania
EP2201838A1 (de) 2008-12-05 2010-06-30 Bayer CropScience AG Wirkstoff-Nützlings-Kombinationen mit insektiziden und akariziden Eigenschaften
EP2198709A1 (de) 2008-12-19 2010-06-23 Bayer CropScience AG Verfahren zur Bekämpfung resistenter tierischer Schädlinge
EP2381781B1 (de) 2008-12-29 2016-06-08 Bayer Intellectual Property GmbH Verfahren zur verbesserten nutzung des produktionspotentials genetisch modifizierter pflanzen
EP2204094A1 (en) 2008-12-29 2010-07-07 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants Introduction
EP2223602A1 (de) 2009-02-23 2010-09-01 Bayer CropScience AG Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials genetisch modifizierter Pflanzen
EP2039770A2 (en) 2009-01-06 2009-03-25 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants
EP2039772A2 (en) 2009-01-06 2009-03-25 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants introduction
EP2039771A2 (en) 2009-01-06 2009-03-25 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants
KR20110106448A (ko) 2009-01-19 2011-09-28 바이엘 크롭사이언스 아게 사이클릭 디온 및 살충제, 살비제 및/또는 살진균제로서의 그의 용도
EP2227951A1 (de) 2009-01-23 2010-09-15 Bayer CropScience AG Verwendung von Enaminocarbonylverbindungen zur Bekämpfung von durch Insekten übertragenen Viren
CN102300852B (zh) 2009-01-28 2015-04-22 拜尔农科股份公司 杀真菌剂 n-环烷基-n-双环亚甲基-羧酰胺衍生物
AR075126A1 (es) * 2009-01-29 2011-03-09 Bayer Cropscience Ag Metodo para el mejor uso del potencial de produccion de plantas transgenicas
EP2218717A1 (en) 2009-02-17 2010-08-18 Bayer CropScience AG Fungicidal N-((HET)Arylethyl)thiocarboxamide derivatives
BRPI1006006B1 (pt) 2009-02-17 2018-05-22 Bayer Intellectual Property Gmbh Compostos, composição fungicida e método para o controle de fungos fitopatogênicos de culturas
TW201031331A (en) 2009-02-19 2010-09-01 Bayer Cropscience Ag Pesticide composition comprising a tetrazolyloxime derivative and a fungicide or an insecticide active substance
DE102009001469A1 (de) 2009-03-11 2009-09-24 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
DE102009001681A1 (de) 2009-03-20 2010-09-23 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
DE102009001728A1 (de) 2009-03-23 2010-09-30 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
DE102009001730A1 (de) 2009-03-23 2010-09-30 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
DE102009001732A1 (de) 2009-03-23 2010-09-30 Bayer Cropscience Ag Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
EP2232995A1 (de) 2009-03-25 2010-09-29 Bayer CropScience AG Verfahren zur verbesserten Nutzung des Produktionspotentials transgener Pflanzen
MX2011009916A (es) 2009-03-25 2011-10-06 Bayer Cropscience Ag Combinaciones de principios activos con propiedades insecticidas y acaricidas.
US8828906B2 (en) 2009-03-25 2014-09-09 Bayer Cropscience Ag Active compound combinations having insecticidal and acaricidal properties
AP3073A (en) 2009-03-25 2014-12-31 Bayer Cropscience Ag Active ingredient combinations with insecticidal and acaricidal properties
MX2011009732A (es) 2009-03-25 2011-09-29 Bayer Cropscience Ag Combinaciones de principios activos sinergicas.
JP5462354B2 (ja) 2009-03-25 2014-04-02 バイエル・クロップサイエンス・アーゲー 殺虫特性及び殺ダニ特性を有する活性成分組合せ
EP2239331A1 (en) 2009-04-07 2010-10-13 Bayer CropScience AG Method for improved utilization of the production potential of transgenic plants
BRPI1015543A8 (pt) 2009-05-06 2016-05-24 Bayer Cropscience Ag Compostos de ciclopentanodiona e seu uso como inseticidas, acaricidas e/ou fungicidas.
EP2251331A1 (en) 2009-05-15 2010-11-17 Bayer CropScience AG Fungicide pyrazole carboxamides derivatives
AR076839A1 (es) 2009-05-15 2011-07-13 Bayer Cropscience Ag Derivados fungicidas de pirazol carboxamidas
EP2255626A1 (de) 2009-05-27 2010-12-01 Bayer CropScience AG Verwendung von Succinat Dehydrogenase Inhibitoren zur Steigerung der Resistenz von Pflanzen oder Pflanzenteilen gegenüber abiotischem Stress
CN105165832B (zh) 2009-06-02 2019-08-13 拜耳知识产权有限责任公司 琥珀酸脱氢酶抑制剂在控制核盘菌属真菌中的应用
MX2011013224A (es) 2009-06-09 2012-06-01 Pioneer Hi Bred Int Promotor de endospermo temprano y metodos de uso.
WO2011006603A2 (de) 2009-07-16 2011-01-20 Bayer Cropscience Ag Synergistische wirkstoffkombinationen mit phenyltriazolen
WO2011015524A2 (en) 2009-08-03 2011-02-10 Bayer Cropscience Ag Fungicide heterocycles derivatives
EP2292094A1 (en) 2009-09-02 2011-03-09 Bayer CropScience AG Active compound combinations
US20110081706A1 (en) * 2009-10-02 2011-04-07 TransAlgae Ltd Method and system for efficient harvesting of microalgae and cyanobacteria
US8962584B2 (en) 2009-10-14 2015-02-24 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem, Ltd. Compositions for controlling Varroa mites in bees
CA2775146A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Somatic ovule specific promoter and methods of use
EP2319872A1 (en) 2009-11-04 2011-05-11 BASF Plant Science GmbH Amylopectin type starch with enhanced retrogradation stability
EP2343280A1 (en) 2009-12-10 2011-07-13 Bayer CropScience AG Fungicide quinoline derivatives
US20130012546A1 (en) 2009-12-28 2013-01-10 Christian Beier Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives
TW201138624A (en) 2009-12-28 2011-11-16 Bayer Cropscience Ag Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives
KR20120102142A (ko) 2009-12-28 2012-09-17 바이엘 크롭사이언스 아게 살진균제 히드록시모일-헤테로사이클 유도체
BR112012018108A2 (pt) * 2010-01-22 2015-10-20 Bayer Ip Gmbh combinações acaricidas e/ou inseticidas de ingredientes ativos
US9611485B2 (en) 2010-01-26 2017-04-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Polynucleotide and polypeptide sequences associated with herbicide tolerance
ES2523503T3 (es) 2010-03-04 2014-11-26 Bayer Intellectual Property Gmbh 2-Amidobencimidazoles sustituidos con fluoroalquilo y su uso para el aumento de la tolerancia al estrés en plantas
SG183407A1 (en) 2010-03-08 2012-09-27 Monsanto Technology Llc Polynucleotide molecules for gene regulation in plants
BR112012023551A2 (pt) 2010-03-18 2015-09-15 Bayer Ip Gmbh aril e hetaril sulfonamidas como agentes ativos contra estresse abiótico em plantas
BR112012025714A2 (pt) 2010-04-06 2015-09-08 Bayer Ip Gmbh uso de ácido 4-fenilbutírico e/ou sais do mesmo para aumentar a tolerância a estresse de plantas
CN102933083B (zh) 2010-04-09 2015-08-12 拜耳知识产权有限责任公司 (1-氰基环丙基)苯基次膦酸或其酯的衍生物和/或其盐提高植物对非生物胁迫耐受性的用途
CN102985419A (zh) 2010-04-28 2013-03-20 拜尔农科股份公司 杀真菌剂肟基-杂环衍生物
BR112012027558A2 (pt) 2010-04-28 2015-09-15 Bayer Cropscience Ag ''composto da fórmula (i), composição fungicida e método para o controle de fungos fitogênicos de colheitas''
WO2011134911A2 (en) 2010-04-28 2011-11-03 Bayer Cropscience Ag Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives
UA110703C2 (uk) 2010-06-03 2016-02-10 Байєр Кропсайнс Аг Фунгіцидні похідні n-[(тризаміщений силіл)метил]-карбоксаміду
AU2011260333B2 (en) 2010-06-03 2014-07-24 Bayer Cropscience Ag N-[(het)arylalkyl)] pyrazole (thio)carboxamides and their heterosubstituted analogues
US9232799B2 (en) 2010-06-03 2016-01-12 Bayer Intellectual Property Gmbh N-[(het)arylethyl)] pyrazole(thio)carboxamides and their heterosubstituted analogues
SG185668A1 (en) 2010-06-09 2012-12-28 Bayer Cropscience Nv Methods and means to modify a plant genome at a nucleotide sequence commonly used in plant genome engineering
WO2011154158A1 (en) 2010-06-09 2011-12-15 Bayer Bioscience N.V. Methods and means to modify a plant genome at a nucleotide sequence commonly used in plant genome engineering
EP2595961B1 (en) 2010-07-20 2017-07-19 Bayer Intellectual Property GmbH Benzocycloalkenes as antifungal agents
US9187762B2 (en) 2010-08-13 2015-11-17 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Compositions and methods comprising sequences having hydroxyphenylpyruvate dioxygenase (HPPD) activity
PL2611300T3 (pl) 2010-09-03 2016-10-31 Podstawione skondensowane pochodne dihydropirymidynonów
EP2618667A2 (en) 2010-09-22 2013-07-31 Bayer Intellectual Property GmbH Use of biological or chemical control agents for controlling insects and nematodes in resistant crops
EP2460406A1 (en) 2010-12-01 2012-06-06 Bayer CropScience AG Use of fluopyram for controlling nematodes in nematode resistant crops
EP2624699B1 (en) 2010-10-07 2018-11-21 Bayer CropScience Aktiengesellschaft Fungicide composition comprising a tetrazolyloxime derivative and a thiazolylpiperidine derivative
EP2630135B1 (en) 2010-10-21 2020-03-04 Bayer Intellectual Property GmbH 1-(heterocyclic carbonyl) piperidines
JP2013541554A (ja) 2010-10-21 2013-11-14 バイエル・インテレクチユアル・プロパテイー・ゲー・エム・ベー・ハー Ｎ−ベンジルヘテロ環式カルボキサミド類
UA109460C2 (uk) 2010-11-02 2015-08-25 Байєр Інтелекчуал Проперті Гмбх N-гетарилметилпіразолілкарбоксаміди
BR112013012082A2 (pt) 2010-11-15 2016-07-19 Bayer Ip Gmbh 5-halogenopirazolcarboxamidas
CN103313971B (zh) 2010-11-15 2015-12-02 拜耳知识产权有限责任公司 N-芳基吡唑（硫代）甲酰胺
MX2013005410A (es) 2010-11-15 2013-07-03 Bayer Ip Gmbh 5-halopirazol (tio)carboxamidas).
EP2643464B1 (en) 2010-11-24 2018-12-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Brassica gat event dp-073496-4 and compositions and methods for the identification and/or detection thereof
CA2818918A1 (en) 2010-11-24 2012-05-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Brassica gat event dp-061061-7 and compositions and methods for the identification and/or detection thereof
EP2460407A1 (de) 2010-12-01 2012-06-06 Bayer CropScience AG Wirkstoffkombinationen umfassend Pyridylethylbenzamide und weitere Wirkstoffe
EP2645856A1 (en) 2010-12-01 2013-10-09 Bayer Intellectual Property GmbH Use of fluopyram for controlling nematodes in crops and for increasing yield
TWI667347B (zh) 2010-12-15 2019-08-01 瑞士商先正達合夥公司 大豆品種ｓｙｈｔ０ｈ２及偵測其之組合物及方法
EP2474542A1 (en) 2010-12-29 2012-07-11 Bayer CropScience AG Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives
EP2658853A1 (en) 2010-12-29 2013-11-06 Bayer Intellectual Property GmbH Fungicide hydroximoyl-tetrazole derivatives
EP2471363A1 (de) 2010-12-30 2012-07-04 Bayer CropScience AG Verwendung von Aryl-, Heteroaryl- und Benzylsulfonamidocarbonsäuren, -carbonsäureestern, -carbonsäureamiden und -carbonitrilen oder deren Salze zur Steigerung der Stresstoleranz in Pflanzen
EP2494867A1 (de) 2011-03-01 2012-09-05 Bayer CropScience AG Halogen-substituierte Verbindungen in Kombination mit Fungiziden
WO2012120105A1 (en) 2011-03-10 2012-09-13 Bayer Cropscience Ag Use of lipochito-oligosaccharide compounds for safeguarding seed safety of treated seeds
CN103502238A (zh) 2011-03-14 2014-01-08 拜耳知识产权有限责任公司 杀真菌剂肟基-四唑衍生物
BR112013025871A2 (pt) 2011-04-08 2016-07-26 Bayer Ip Gmbh composto de fórmula (i) e sua utilização, composição para o controle dos fungos nocivos fitopatogênicos, método para o controle de fungos fitopatogênicos das culturas e processo para a produção das composições
AR090010A1 (es) 2011-04-15 2014-10-15 Bayer Cropscience Ag 5-(ciclohex-2-en-1-il)-penta-2,4-dienos y 5-(ciclohex-2-en-1-il)-pent-2-en-4-inos sustituidos como principios activos contra el estres abiotico de las plantas, usos y metodos de tratamiento
AR085585A1 (es) 2011-04-15 2013-10-09 Bayer Cropscience Ag Vinil- y alquinilciclohexanoles sustituidos como principios activos contra estres abiotico de plantas
EP2511255A1 (de) 2011-04-15 2012-10-17 Bayer CropScience AG Substituierte Prop-2-in-1-ol- und Prop-2-en-1-ol-Derivate
AR085568A1 (es) 2011-04-15 2013-10-09 Bayer Cropscience Ag 5-(biciclo[4.1.0]hept-3-en-2-il)-penta-2,4-dienos y 5-(biciclo[4.1.0]hept-3-en-2-il)-pent-2-en-4-inos sustituidos como principios activos contra el estres abiotico de las plantas
BR112013027091B1 (pt) 2011-04-22 2020-12-01 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft combinação de composto ativo, composição para controle de fungos nocivos fitopatogênicos, método para controle de fungos nocivos fitopatogênicos, processo para produção de composições para controle de fungos nocivos fitopatogênicos e usos de uma combinação de composto ativo
ES2657825T3 (es) 2011-06-06 2018-03-07 Bayer Cropscience Nv Métodos y medios para modificar el genoma de una planta en un sitio preseleccionado
JP2014520776A (ja) 2011-07-04 2014-08-25 バイエル・インテレクチユアル・プロパテイー・ゲー・エム・ベー・ハー 植物における非生物的ストレスに対する活性薬剤としての置換されているイソキノリノン類、イソキノリンジオン類、イソキノリントリオン類およびジヒドロイソキノリノン類または各場合でのそれらの塩の使用
CN103717076B (zh) 2011-08-10 2016-04-13 拜耳知识产权股份有限公司 含有特定特特拉姆酸衍生物的活性化合物组合物
BR112014002988A2 (pt) 2011-08-12 2017-03-01 Bayer Cropscience Nv expressão específica de célula de proteção de transgenes em algodão
CN103748092A (zh) 2011-08-22 2014-04-23 拜耳知识产权有限责任公司 杀真菌剂肟基-四唑衍生物
CN103981149A (zh) 2011-08-22 2014-08-13 拜尔作物科学公司 修饰植物基因组的方法和手段
EP2561759A1 (en) 2011-08-26 2013-02-27 Bayer Cropscience AG Fluoroalkyl-substituted 2-amidobenzimidazoles and their effect on plant growth
WO2013034621A1 (en) 2011-09-09 2013-03-14 Bayer Intellectual Property Gmbh Acyl-homoserine lactone derivatives for improving plant yield
MX347562B (es) 2011-09-12 2017-05-03 Bayer Ip Gmbh Derivados fungicidas de 3-fenil[(heterociclilmetoxi)imino]metil}-1 ,2,4-oxadiazol-5(4h)-ona sustituidos en 4.
MX350774B (es) 2011-09-13 2017-09-15 Monsanto Technology Llc Métodos y composiciones para el control de malezas.
US9840715B1 (en) 2011-09-13 2017-12-12 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for delaying senescence and improving disease tolerance and yield in plants
CN103957696B (zh) 2011-09-13 2019-01-18 孟山都技术公司 用于杂草控制的方法和组合物
WO2013040116A1 (en) 2011-09-13 2013-03-21 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
EP2755987B1 (en) 2011-09-13 2018-06-06 Monsanto Technology LLC Methods and compositions for weed control
US10829828B2 (en) 2011-09-13 2020-11-10 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
US10806146B2 (en) 2011-09-13 2020-10-20 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
EP2756086B1 (en) 2011-09-13 2018-02-21 Monsanto Technology LLC Methods and compositions for weed control
WO2013040049A1 (en) 2011-09-13 2013-03-21 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
US10760086B2 (en) 2011-09-13 2020-09-01 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
AU2012308818B2 (en) 2011-09-13 2018-06-21 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
US9920326B1 (en) 2011-09-14 2018-03-20 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for increasing invertase activity in plants
CN107897194A (zh) 2011-09-16 2018-04-13 拜耳知识产权有限责任公司 5‑苯基‑或5‑苄基‑2‑异噁唑啉‑3‑甲酸酯用于改善植物产量的用途
AR087874A1 (es) 2011-09-16 2014-04-23 Bayer Ip Gmbh Uso de acilsulfonamidas para mejorar el rendimiento de las plantas
US20140302991A1 (en) 2011-09-16 2014-10-09 Bayer Intellectual Property Gmbh Use of phenylpyrazolin-3-carboxylates for improving plant yield
JP2014527973A (ja) 2011-09-23 2014-10-23 バイエル・インテレクチユアル・プロパテイー・ゲー・エム・ベー・ハー 非生物的な植物ストレスに対する作用剤としての４−置換１−フェニルピラゾール−３−カルボン酸誘導体の使用
CA2844868A1 (en) 2011-10-04 2013-04-11 Bayer Intellectual Property Gmbh Rnai for the control of fungi and oomycetes by inhibiting saccharopine dehydrogenase gene
WO2013050324A1 (de) 2011-10-06 2013-04-11 Bayer Intellectual Property Gmbh Abiotischen pflanzenstress-reduzierende kombination enthaltend 4- phenylbuttersäure (4-pba) oder eines ihrer salze (komponente (a)) und eine oder mehrere ausgewählte weitere agronomisch wirksame verbindungen (komponente(n) (b)
KR20140102238A (ko) 2011-11-21 2014-08-21 바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하 살진균제 n-[(트리치환실릴)메틸]-카르복사미드 유도체
JP2015504442A (ja) 2011-11-30 2015-02-12 バイエル・インテレクチユアル・プロパテイー・ゲー・エム・ベー・ハー 殺菌性ｎ−ビシクロアルキルおよびｎ−トリシクロアルキル（チオ）カルボキサミド誘導体
WO2013092519A1 (en) 2011-12-19 2013-06-27 Bayer Cropscience Ag Use of anthranilic acid diamide derivatives for pest control in transgenic crops
WO2013096810A1 (en) 2011-12-21 2013-06-27 The Curators Of The University Of Missouri Soybean variety s05-11482
WO2013096818A1 (en) 2011-12-21 2013-06-27 The Curators Of The University Of Missouri Soybean variety s05-11268
KR102028893B1 (ko) 2011-12-29 2019-10-07 바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하 살진균 3-[(1,3-티아졸-4-일메톡시이미노)(페닐)메틸]-2-치환-1,2,4-옥사디아졸-5(2h)-온 유도체
TWI557120B (zh) 2011-12-29 2016-11-11 拜耳知識產權公司 殺真菌之３－［（吡啶－２－基甲氧基亞胺）（苯基）甲基］－２－經取代之－１，２，４－二唑－５（２ｈ）－酮衍生物
EP2800816A1 (en) 2012-01-06 2014-11-12 Pioneer Hi-Bred International Inc. Ovule specific promoter and methods of use
WO2013103365A1 (en) 2012-01-06 2013-07-11 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Pollen preferred promoters and methods of use
NZ628308A (en) 2012-02-22 2017-02-24 Bayer Ip Gmbh Use of succinate dehydrogenase inhibitors (sdhis) for controlling wood diseases in grape.
DK2819518T3 (en) 2012-02-27 2017-12-11 Bayer Ip Gmbh COMBINATIONS OF ACTIVE COMPOUNDS CONTAINING A THIAZOYLISOXAZOLINE AND A FUNGICIDE
WO2013139949A1 (en) 2012-03-23 2013-09-26 Bayer Intellectual Property Gmbh Compositions comprising a strigolactame compound for enhanced plant growth and yield
RU2658604C2 (ru) 2012-04-05 2018-06-21 Адванта Интернэшнл Бв Растения сорго, имеющие мутантный полинуклеотид, кодирующий большую субъединицу мутированной синтазы ацетогидроксикислот, и повышенную устойчивость к гербицидам
WO2013153143A1 (en) 2012-04-12 2013-10-17 Bayer Cropscience Ag N-acyl- 2 - (cyclo) alkylpyrrolidines and piperidines useful as fungicides
MX2014012449A (es) 2012-04-20 2015-01-19 Bayer Cropscience Ag Derivados de n-cicloalquil-n-[(heterociclilfenil)metilen]-(tio) carboxamida.
JP2015516396A (ja) 2012-04-20 2015-06-11 バイエル・クロップサイエンス・アーゲーＢａｙｅｒ Ｃｒｏｐｓｃｉｅｎｃｅ Ａｇ Ｎ−シクロアルキル−ｎ−［（三置換シリルフェニル）メチレン］−（チオ）カルボキサミド誘導体
US11518997B2 (en) 2012-04-23 2022-12-06 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Targeted genome engineering in plants
EP2662363A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole biphenylcarboxamides
EP2662361A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazol indanyl carboxamides
EP2662362A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole indanyl carboxamides
BR112014027643B1 (pt) 2012-05-09 2019-04-24 Bayer Cropscience Ag Pirazole-indanil-carboxamidas.
EP2662360A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole indanyl carboxamides
WO2013167544A1 (en) 2012-05-09 2013-11-14 Bayer Cropscience Ag 5-halogenopyrazole indanyl carboxamides
EP2662364A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG Pyrazole tetrahydronaphthyl carboxamides
EP2662370A1 (en) 2012-05-09 2013-11-13 Bayer CropScience AG 5-Halogenopyrazole benzofuranyl carboxamides
AR091104A1 (es) 2012-05-22 2015-01-14 Bayer Cropscience Ag Combinaciones de compuestos activos que comprenden un derivado lipo-quitooligosacarido y un compuesto nematicida, insecticida o fungicida
CA2873828A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 A.B. Seeds Ltd. Naked dsrna for silencing target molecules in plant seeds
BR112014031260A2 (pt) 2012-06-15 2019-08-20 Du Pont métodos e composições que envolvem variantes de als com preferência de substrato nativo
EP2871958A1 (en) 2012-07-11 2015-05-20 Bayer CropScience AG Use of fungicidal combinations for increasing the tolerance of a plant towards abiotic stress
AU2013311826A1 (en) 2012-09-05 2015-03-26 Bayer Cropscience Ag Use of substituted 2-amidobenzimidazoles, 2-amidobenzoxazoles and 2-amidobenzothiazoles or salts thereof as active substances against abiotic plant stress
US20140109259A1 (en) 2012-10-11 2014-04-17 Pioneer Hi Bred International Inc Guard Cell Promoters and Uses Thereof
CN104870647A (zh) 2012-10-18 2015-08-26 孟山都技术公司 用于植物害虫控制的方法和组合物
EA025862B1 (ru) 2012-10-19 2017-02-28 Байер Кропсайенс Аг Способ повышения устойчивости к абиотическому стрессу в растениях с использованием производных карбоксамида или тиокарбоксамида
WO2014060520A1 (en) 2012-10-19 2014-04-24 Bayer Cropscience Ag Method for treating plants against fungi resistant to fungicides using carboxamide or thiocarboxamide derivatives
EP2908639A1 (en) 2012-10-19 2015-08-26 Bayer Cropscience AG Active compound combinations comprising carboxamide derivatives
US20150259294A1 (en) 2012-10-19 2015-09-17 Bayer Cropscience Ag Method of plant growth promotion using carboxamide derivatives
WO2014079957A1 (de) 2012-11-23 2014-05-30 Bayer Cropscience Ag Selektive inhibition der ethylensignaltransduktion
EP2735231A1 (en) 2012-11-23 2014-05-28 Bayer CropScience AG Active compound combinations
CN104837351A (zh) 2012-11-30 2015-08-12 拜耳作物科学股份公司 二元杀真菌或杀虫混合物
CA3105365A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Bayer Cropscience Ag Binary fungicidal mixtures
CA2892701A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Bayer Cropscience Ag Binary pesticidal and fungicidal mixtures
CA2892712A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Bayer Cropscience Ag Ternary fungicidal and pesticidal mixtures
BR122020019349B1 (pt) 2012-11-30 2021-05-11 Bayer Cropscience Ag composição, seu processo de preparação, método para controlar um ou mais microrganismos nocivos, semente resistente a microorganismos nocivos e seu método de tratamento
EP2928296A1 (de) 2012-12-05 2015-10-14 Bayer CropScience AG Verwendung substituierter 1-(arylethinyl)-, 1-(heteroarylethinyl)-, 1-(heterocyclylethinyl)- und 1-(cyloalkenylethinyl)-cyclohexanole als wirkstoffe gegen abiotischen pflanzenstress
EP2740720A1 (de) 2012-12-05 2014-06-11 Bayer CropScience AG Substituierte bicyclische- und tricyclische Pent-2-en-4-insäure -Derivate und ihre Verwendung zur Steigerung der Stresstoleranz in Pflanzen
EP2740356A1 (de) 2012-12-05 2014-06-11 Bayer CropScience AG Substituierte (2Z)-5(1-Hydroxycyclohexyl)pent-2-en-4-insäure-Derivate
WO2014090765A1 (en) 2012-12-12 2014-06-19 Bayer Cropscience Ag Use of 1-[2-fluoro-4-methyl-5-(2,2,2-trifluoroethylsulfinyl)phenyl]-5-amino-3-trifluoromethyl)-1 h-1,2,4 tfia zole for controlling nematodes in nematode-resistant crops
US20140173775A1 (en) 2012-12-13 2014-06-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods and compositions for producing and selecting transgenic plants
AR093996A1 (es) 2012-12-18 2015-07-01 Bayer Cropscience Ag Combinaciones bactericidas y fungicidas binarias
BR112015014307A2 (pt) 2012-12-19 2017-07-11 Bayer Cropscience Ag difluorometil-nicotínico- tetrahidronaftil carboxamidas
US20150351390A1 (en) 2012-12-21 2015-12-10 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Compositions and methods for auxin-analog conjugation
EA032406B1 (ru) 2013-01-01 2019-05-31 Эй.Би. СИДЗ ЛТД. СПОСОБЫ ВВЕДЕНИЯ дсРНК В СЕМЕНА РАСТЕНИЙ ДЛЯ МОДУЛЯЦИИ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ
US10683505B2 (en) 2013-01-01 2020-06-16 Monsanto Technology Llc Methods of introducing dsRNA to plant seeds for modulating gene expression
US10000767B2 (en) 2013-01-28 2018-06-19 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for plant pest control
TW201446759A (zh) 2013-03-07 2014-12-16 Bayer Cropscience Ag 殺真菌之３－｛苯基［（雜環基甲氧基）亞胺］甲基｝－雜環衍生物
CN105473722A (zh) 2013-03-11 2016-04-06 先锋国际良种公司 用于改善植物中化学信号扩散的方法及组合物
BR112015022742A2 (pt) 2013-03-11 2018-11-27 Pionner Hi Bred Int Inc métodos e composições que empregam um domínio de estabilização dependente de sulfonilureia
CA2905104A1 (en) 2013-03-13 2014-10-09 Monsanto Technology Llc Control of lolium species by topical application of herbicidal composition comprising dsrna
AU2014241045B2 (en) 2013-03-13 2017-08-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Glyphosate application for weed control in brassica
WO2014164761A1 (en) 2013-03-13 2014-10-09 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
US20140289906A1 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Compositions Having Dicamba Decarboxylase Activity and Methods of Use
AU2014236162A1 (en) 2013-03-14 2015-09-17 Arzeda Corp. Compositions having dicamba decarboxylase activity and methods of use
US20140283211A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Monsanto Technology Llc Methods and Compositions for Plant Pest Control
CA2902002C (en) 2013-03-14 2023-08-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Compositions and methods to control insect pests
RU2015143825A (ru) 2013-03-15 2017-04-26 Пайонир Хай-Бред Интернэшнл, Инк. Полипептиды phi-4 и способы их применения
US10568328B2 (en) 2013-03-15 2020-02-25 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control
US20160053274A1 (en) 2013-04-02 2016-02-25 Bayer Cropscience Nv Targeted genome engineering in eukaryotes
WO2014167008A1 (en) 2013-04-12 2014-10-16 Bayer Cropscience Ag Novel triazolinthione derivatives
EA028812B1 (ru) 2013-04-12 2018-01-31 Байер Кропсайенс Акциенгезельшафт Триазольные производные
WO2014170364A1 (en) 2013-04-19 2014-10-23 Bayer Cropscience Ag Binary insecticidal or pesticidal mixture
CN105555135B (zh) 2013-04-19 2018-06-15 拜耳作物科学股份公司 涉及邻苯二甲酰胺衍生物应用的用于改善对转基因植物生产潜能的利用的方法
TW201507722A (zh) 2013-04-30 2015-03-01 Bayer Cropscience Ag 做為殺線蟲劑及殺體內寄生蟲劑的ｎ－（２－鹵素－２－苯乙基）－羧醯胺類
WO2014177514A1 (en) 2013-04-30 2014-11-06 Bayer Cropscience Ag Nematicidal n-substituted phenethylcarboxamides
WO2014206953A1 (en) 2013-06-26 2014-12-31 Bayer Cropscience Ag N-cycloalkyl-n-[(bicyclylphenyl)methylene]-(thio)carboxamide derivatives
US20160150782A1 (en) 2013-07-09 2016-06-02 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Use of selected pyridone carboxamides or salts thereof as active substances against abiotic plant stress
CA2918387C (en) 2013-07-19 2021-11-02 Monsanto Technology Llc Compositions and methods for controlling leptinotarsa
US9850496B2 (en) 2013-07-19 2017-12-26 Monsanto Technology Llc Compositions and methods for controlling Leptinotarsa
CA2918909A1 (en) 2013-07-25 2015-01-29 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Method for producing hybrid brassica seed
EP2837287A1 (en) 2013-08-15 2015-02-18 Bayer CropScience AG Use of prothioconazole for increasing root growth of Brassicaceae
EA030896B1 (ru) 2013-08-16 2018-10-31 Пайонир Хай-Бред Интернэшнл, Инк. Инсектицидные белки и способы их применения
BR122021005579B1 (pt) 2013-09-13 2022-11-29 Pioneer Hi-Bred International, Inc Construto de dna, método de obtenção de planta transgênica, proteína de fusão, método para controlar uma população de praga de inseto, método para inibir o crescimento ou matar uma praga de inseto
BR112016005859A2 (pt) 2013-09-24 2017-09-19 Basf Se Heterotransglicosilase e usos da mesma
WO2015057600A1 (en) 2013-10-18 2015-04-23 E. I. Du Pont De Nemours And Company Glyphosate-n-acetyltransferase (glyat) sequences and methods of use
MX2016005778A (es) 2013-11-04 2016-12-20 Monsanto Technology Llc Composiciones y metodos para controlar infestaciones de plagas y parasitos de los artropodos.
TW201609661A (zh) 2013-12-05 2016-03-16 拜耳作物科學公司 Ｎ－環烷基－ｎ－｛［２－（１－經取代環烷基）苯基］亞甲基｝－（硫代）甲醯胺衍生物
WO2015082587A1 (en) 2013-12-05 2015-06-11 Bayer Cropscience Ag N-cycloalkyl-n-{[2-(1-substitutedcycloalkyl)phenyl]methylene}-(thio)carboxamide derivatives
UA119253C2 (uk) 2013-12-10 2019-05-27 Біолоджикс, Інк. Спосіб боротьби із вірусом у кліща varroa та у бджіл
AU2015206585A1 (en) 2014-01-15 2016-07-21 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for weed control using EPSPS polynucleotides
CN106232620B (zh) 2014-02-07 2022-05-13 先锋国际良种公司 杀昆虫蛋白及其使用方法
EP3705489A1 (en) 2014-02-07 2020-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
CN110506752B (zh) 2014-04-01 2022-02-18 孟山都技术公司 用于控制虫害的组合物和方法
CN106795515B (zh) 2014-06-23 2021-06-08 孟山都技术公司 用于经由rna干扰调控基因表达的组合物和方法
US11807857B2 (en) 2014-06-25 2023-11-07 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for delivering nucleic acids to plant cells and regulating gene expression
AR101214A1 (es) 2014-07-22 2016-11-30 Bayer Cropscience Ag Ciano-cicloalquilpenta-2,4-dienos, ciano-cicloalquilpent-2-en-4-inas, ciano-heterociclilpenta-2,4-dienos y ciano-heterociclilpent-2-en-4-inas sustituidos como principios activos contra el estrés abiótico de plantas
AU2015296700B2 (en) 2014-07-29 2021-10-21 Monsanto Technology Llc Compositions and methods for controlling insect pests
WO2016022516A1 (en) 2014-08-08 2016-02-11 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Ubiquitin promoters and introns and methods of use
WO2016044092A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Pioneer Hi Bred International Inc Compositions and methods to control insect pests
EP3207143B1 (en) 2014-10-16 2023-11-22 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
AR103024A1 (es) 2014-12-18 2017-04-12 Bayer Cropscience Ag Piridoncarboxamidas seleccionadas o sus sales como sustancias activas contra estrés abiótico de las plantas
WO2016099916A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 E. I. Du Pont De Nemours And Company Polylactic acid compositions with accelerated degradation rate and increased heat stability
UA124255C2 (uk) 2015-01-22 2021-08-18 Монсанто Текнолоджі Елелсі Інсектицидна композиція та спосіб боротьби з leptinotarsa
US10214510B2 (en) 2015-04-13 2019-02-26 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft N-cycloalkyl-N-(biheterocyclylethylene)-(thio)carboxamide derivatives
CA2985198A1 (en) 2015-05-19 2016-11-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
AU2016270870A1 (en) 2015-06-02 2018-01-04 Monsanto Technology Llc Compositions and methods for delivery of a polynucleotide into a plant
WO2016196782A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 Monsanto Technology Llc Methods and compositions for introducing nucleic acids into plants
EP3310803A1 (en) 2015-06-16 2018-04-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Compositions and methods to control insect pests
MX2018001523A (es) 2015-08-06 2018-03-15 Pioneer Hi Bred Int Proteinas insecticidas derivadas de plantas y metodos para su uso.
KR20180059535A (ko) 2015-10-20 2018-06-04 파이어니어 하이 부렛드 인터내쇼날 인코포레이팃드 마커-프리 게놈 변형을 위한 방법 및 조성물
US20180325119A1 (en) 2015-12-18 2018-11-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
CA3004056C (en) 2015-12-22 2024-01-23 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Tissue-preferred promoters and methods of use
WO2017192560A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins and methods for their use
EP3472323A1 (en) 2016-06-16 2019-04-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Compositions and methods to control insect pests
EP4083215A1 (en) 2016-06-24 2022-11-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Plant regulatory elements and methods of use thereof
CA3029271A1 (en) 2016-06-28 2018-01-04 Cellectis Altering expression of gene products in plants through targeted insertion of nucleic acid sequences
EP3478052B1 (en) 2016-07-01 2021-08-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Insecticidal proteins from plants and methods for their use
WO2018013333A1 (en) 2016-07-12 2018-01-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Compositions and methods to control insect pests
US20190159451A1 (en) 2016-07-29 2019-05-30 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Active compound combinations and methods to protect the propagation material of plants
WO2018054829A1 (en) 2016-09-22 2018-03-29 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Novel triazole derivatives and their use as fungicides
BR112019005668A2 (pt) 2016-09-22 2019-06-04 Bayer Ag novos derivados de triazol
US20190225974A1 (en) 2016-09-23 2019-07-25 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Targeted genome optimization in plants
WO2018077711A2 (en) 2016-10-26 2018-05-03 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Use of pyraziflumid for controlling sclerotinia spp in seed treatment applications
BR112019008800A2 (pt) 2016-11-01 2019-07-16 Pioneer Hi Bred Int polipeptídeo inseticida, composição inseticida, polinucleotídeo recombinante, construto de dna, célula de planta ou planta transgênica, método para inibir o crescimento ou exterminar uma população de praga de inseto agrícola, método para inibir o crescimento ou exterminar uma praga de inseto, método para controlar infestação de inseto lepidoptera e/ou coleoptera em uma planta transgênica e fornecer gerenciamento de resistência de inseto e uso de pelo menos um polipeptídeo inseticida
BR112019011616A2 (pt) 2016-12-08 2019-10-22 Bayer Ag uso de inseticidas no controle de larvas
EP3332645A1 (de) 2016-12-12 2018-06-13 Bayer Cropscience AG Verwendung substituierter pyrimidindione oder jeweils deren salze als wirkstoffe gegen abiotischen pflanzenstress
WO2018108627A1 (de) 2016-12-12 2018-06-21 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Verwendung substituierter indolinylmethylsulfonamide oder deren salze zur steigerung der stresstoleranz in pflanzen
CN107267480A (zh) * 2017-07-13 2017-10-20 未名兴旺系统作物设计前沿实验室（北京）有限公司 抗除草剂蛋白及其基因在植物育种中的应用
WO2019025153A1 (de) 2017-07-31 2019-02-07 Bayer Cropscience Aktiengesellschaft Verwendung von substituierten n-sulfonyl-n'-aryldiaminoalkanen und n-sulfonyl-n'-heteroaryldiaminoalkanen oder deren salzen zur steigerung der stresstoleranz in pflanzen
CN111373046A (zh) 2017-09-25 2020-07-03 先锋国际良种公司 组织偏好性启动子和使用方法
US11702668B2 (en) 2018-05-22 2023-07-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Plant regulatory elements and methods of use thereof
WO2019233863A1 (de) 2018-06-04 2019-12-12 Bayer Aktiengesellschaft Herbizid wirksame bizyklische benzoylpyrazole
WO2020005933A1 (en) 2018-06-28 2020-01-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods for selecting transformed plants
EP3826466A1 (en) 2018-07-26 2021-06-02 Bayer Aktiengesellschaft Use of the succinate dehydrogenase inhibitor fluopyram for controlling root rot complex and/or seedling disease complex caused by rhizoctonia solani, fusarium species and pythium species in brassicaceae species
CN112714614A (zh) 2018-09-17 2021-04-27 拜耳公司 杀真菌剂异氟普仑用于在谷物中防治麦角菌和减少菌核的用途
EP3852531A1 (en) 2018-09-17 2021-07-28 Bayer Aktiengesellschaft Use of the succinate dehydrogenase inhibitor fluopyram for controlling claviceps purpurea and reducing sclerotia in cereals
KR20210084482A (ko) 2018-10-31 2021-07-07 파이어니어 하이 부렛드 인터내쇼날 인코포레이팃드 오크로박테륨 매개된 식물 형질전환을 위한 조성물 및 방법
CN115867564A (zh) 2020-07-14 2023-03-28 先锋国际良种公司 杀昆虫蛋白及其使用方法

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4761373A (en) * 1984-03-06 1988-08-02 Molecular Genetics, Inc. Herbicide resistance in plants
ATE100141T1 (de) * 1984-03-06 1994-01-15 Mgi Pharma Inc Herbizide resistenz in pflanzen.
EP0360750A3 (en) * 1988-09-22 1991-01-02 Ciba-Geigy Ag Novel herbicide tolerant plants
ES2080826T3 (es) * 1989-05-17 1996-02-16 Zeneca Ltd Maiz resistente a los herbicidas.
GB9024728D0 (en) * 1990-11-14 1991-01-02 Ici Plc Herbicide resistant plants
US5731180A (en) * 1991-07-31 1998-03-24 American Cyanamid Company Imidazolinone resistant AHAS mutants

Also Published As

Publication number Publication date
BG96699A (bg) 1994-06-30
DE69231551D1 (de) 2000-12-14
SK238592A3 (en) 1995-07-11
IL102673A0 (en) 1993-01-14
ATE197475T1 (de) 2000-11-11
NZ243693A (en) 1993-06-25
EP0525384A3 (en) 1993-06-23
US6444875B1 (en) 2002-09-03
AU2069492A (en) 1993-02-04
FI114922B (fi) 2005-01-31
PL170616B1 (pl) 1997-01-31
JP3523657B2 (ja) 2004-04-26
PL295470A1 (en) 1993-05-31
BR9202950A (pt) 1993-03-30
FI923444A (fi) 1993-02-01
US5767361A (en) 1998-06-16
ES2153352T3 (es) 2001-03-01
AU4335296A (en) 1996-05-02
EP0525384B1 (en) 2000-11-08
FI923444A0 (fi) 1992-07-30
NO923017D0 (no) 1992-07-30
NO311095B1 (no) 2001-10-08
NO923017L (no) 1993-02-01
DK0525384T3 (da) 2000-11-27
RO114348B1 (ro) 1999-03-30
IE922504A1 (en) 1993-02-10
PT525384E (pt) 2001-04-30
IL102673A (en) 2003-07-06
HUT65483A (en) 1994-06-28
MX9204420A (es) 1993-02-01
CA2074854C (en) 2006-09-19
KR100243996B1 (ko) 2000-02-01
GR3035395T3 (en) 2001-05-31
DE69231551T2 (de) 2001-03-15
BG61276B1 (bg) 1997-04-30
TW239161B (hu) 1995-01-21
KR930002512A (ko) 1993-02-23
CZ238592A3 (en) 1994-03-16
ZA925734B (en) 1993-04-28
AU9046098A (en) 1999-01-14
CA2074854A1 (en) 1993-02-01
JPH05227964A (ja) 1993-09-07
EP0525384A2 (en) 1993-02-03
HU9202485D0 (en) 1992-10-28
US5731180A (en) 1998-03-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5767361A (en) Imidazolinone resistant AHAS mutants
IE83282B1 (en) Imidazolinone resistant ahas mutants
JP7354205B2 (ja) 変異したプロトポルフィリノーゲンｉｘオキシダーゼ（ｐｐｘ）遺伝子
US6348643B1 (en) DNA sequences encoding the arabidopsis acetohydroxy-acid synthase small subunit and methods of use
KR100954975B1 (ko) 아세토락테이트 합성효소를 암호화하는 유전자
US20220298525A1 (en) Mutated protoporphyrinogen ix oxidase (ppx) genes
MXPA06002155A (es) Plantas de arroz que tienen una tolerancia incrementada a los herbicidas de imidazolinona.
WO2006121178A1 (ja) 変異型アセト乳酸シンターゼ遺伝子を用いた形質転換方法
EP3682731A1 (en) Acetyl co-enzyme a carboxylase herbicide resistant plants
EP0492113A2 (en) Herbicide resistant AHAS deletion mutants
AU767828B2 (en) Imidazolinone resistant AHAS mutants
AU2018200176B2 (en) Mutated protoporphyrinogen IX oxidase (PPX) genes
EP2534250B1 (en) Improvement of the grain filling of a plant through the modulation of nadh-glutamate synthase activity
CN114703210A (zh) 突变的丙二烯氧合酶2(aos2)基因
EP0813602A1 (en) Herbicide resistant plants
AU2011212138B2 (en) Improvement of the grain filling of a plant through the modulation of NADH-glutamate synthase activity

Legal Events

Date Code Title Description
DFD9 Temporary protection cancelled due to non-payment of fee
DNF4 Restoration of lapsed final protection