HU216636B

HU216636B - Eljárás epesavszármazékok előállítására

Info

Publication number: HU216636B
Application number: HU9301716A
Authority: HU
Inventors: Alfons Enhsen; Heiner Glombik; Werner Kramer; Günther Weiss
Original assignee: Hoechst Ag.
Priority date: 1992-06-12
Filing date: 1993-06-11
Publication date: 1999-07-28
Also published as: IL105980A; CZ113493A3; CA2098256C; HUT64772A; US5428182A; DE59307759D1; HU9301716D0; ATE160783T1; ES2111092T3; NZ247827A; NO304653B1; KR100319562B1; SK280819B6; FI106801B; FI932659A; CA2098256A1; TW228004B; SK58593A3; CY2117B1; CZ285104B6

Abstract

A találmány tárgya eljárás új Z(–X–GS)n általánős képletűepesavszármazékők előállítására – e képletben n értéke 3 vagy 4, ésamennyiben Z jelentése (f) képletű csőpőrt, akkőr n=2, –GS jelentése(II) általánős képletű csőpőrt, amelyben E jelentése kémiai kötés, –O–vagy –NH– és Y jelentése OH– vagy C1–4-alkőxicsőpőrt, benzilőxi-csőpőrt, –O katiőn vagy (IV) általánős képletű csőpőrt és Z jelentéseNO2–C–, CH3–C–, tri- vagy tetra –CO– vagy –CONH-csőpőrttal rendelkezőciklőhexil-, ciklőbűtil-, pentil-, bűtil- vagy fenil-csőpőrt, és Xjelentése–C1–4-alkil-CO–NH–C1–4-alkil-,–(C1–4-alkőxi)s-C1–4-alkil–CO–,–(C1–4-alkőxi)s-C1–4-alkil–CO–NH–C1–4-alkil-,–NH–C1–8-alkil-,–NH–,–NH–(C –4-alkőxi)s-C1–4-alkil-,–NH–C1–5-alkil–CO–vagy–(CH2)r-csőpőrt, ahől s értéke 1 vagy 2 ésr értéke 1, 2, 3 vagy 4,azzal a feltétellel, hőgy a 2-(X–E–)n mőlekűlarész egy midkötésttartalmaz. A találmány szerinti vegyületek epesavmegkötő hatássalrendelkeznek. ŕ

Description

A találmány új epesavszármazékok előállítására vonatkozik.

Az epesavak a májban épülnek fel többenzimes lépésben, koleszterinből, az epehólyagban tárolódnak, és az epefolyadékkal együtt kiürülnek a vékonybélbe. Ott az emésztés folyamatában fontos fiziológiai szerepük van, például kofaktorként vagy a hasnyálmirigyben lipázként, valamint természetes detergensként a zsírok és a zsírban oldódó vitaminok felszívódásában. Aktív és passzív transzportfolyamatok eredményeként az epesavak legnagyobb része a portaérben áramló vérben visszakerül a vékonybélből a májba.

Epesavakat megkötő polimereket már régebben alkalmaznak a terápiában olyan betegségek esetén, ahol az epesav visszakerülésének gátlása kívánatos (EP 489423 és EP 559064 számú szabadalmi leírások). Emelt koleszterinszint esetén például a máj belső körfolyamatában lévő epesavak mennyiségének csökkentésével késztethető a máj arra, hogy fokozott mértékben termeljen epesavakat koleszterinből. Ennek során több LDL-koleszterin kerül a vérből a májba, az LDL-katabolizmus felgyorsul. Ennek hatására az aterogén LDLkoleszterin vérszintje csökken.

Az erre a célra használatos polimerek, például kolesztiramin vagy kolesztipol napi dózisa igen nagy: 12-30 g. Emellett a kellemetlen szag és íz nehezíti a gyógyszer elfogadását az orvos és a beteg részéről egyaránt. Csekély szelektivitásuk miatt az említett polimereknek mellékhatásai is vannak, például erősen kötődnek vitaminokhoz és párhuzamosan adagolt gyógyszerekhez, és megváltoztatják az epesav-összetételt az epében. Ezek a tulajdonságok különböző emésztési zavarokban (például székrekedés, szteatorrhoe), vitaminhiányban és epekőképződés fokozott rizikójában nyilvánulnak meg.

Meglepő módon olyan epesavszármazékokat találtunk, amelyek a fenti hátrányoktól mentesek.

A találmány szerint előállítható epesavszármazékok a Z(-X-GS)_n általános képletnek felelnek meg, amelyben n értéke 3 vagy 4, és amennyiben Z jelentése (f) képletű csoport, akkor n=2,

-GS jelentése (II) általános képletű csoport, amelyben

E jelentése kémiai kötés, -O- vagy -NH- és

Y jelentése OH- vagy C[ ₄-alkoxicsoport, benziloxi-csoport, —O kation vagy (IV) képletű csoport és

I I

Z jelentése NO₂-C-, CH₃-C-, (a), (b), (c), (d), (e),

I I (f), (g), (h) vagy (i) képletű csoport, és X jelentése

-C,_₄-alkil-CO-NH-C, _₄-alkil-,

- (C, _₄-alkoxi)_s-C j ₄-alkil-CO-,

- (C [ _₄-alkoxi)_s-C! _₄-aIkil-CO-NH-C, ₄-aIkiI-, -NH-C,__g-alkil-,

-NH-,

-NH - (C | ₄-alkoxi )_S-C] _ ₄-al kil-, -NH-Cj.-j-alkil-CO- vagy -(CH₂)_r-csoport, ahol s értéke 1 vagy 2 és r értéke 1,2,3 vagy 4, t értéke 0 vagy 1, azzal a feltétellel, hogy a

-Z-(X-E-)_n-molekularész egy amidkötést tartalmaz.

A (II) általános képletű epesavmaradék 3-as helyzetben, a- vagy β-állásban kapcsolódik az X hídtaghoz.

A Z központi hídcsoportnak 3 vagy 4 -CO-csoportja van, amely NH-csoportokon keresztül kapcsolódik X-GS-hez.

Amennyiben a hídcsoportoknak különböző a térbeli konfigurációja lehet, a Z csoport fenti definíciója mind tartalmazza.

A találmány tárgya tehát eljárás a fenti vegyületek előállítására. A találmány szerint a vegyületeket úgy állítjuk elő, hogy

a) Z=(f) képletű csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállítása esetén (a’) képletű vegyületet egy GS-X-H képletű vegyülettel reagáltatunk - e képletben GS jelentése a fenti, X, jelentése -NH-(CH₂)|₈-, kémiai kötés, -NH-(C|_₄ alkoxi)] . ₂C,_₄ alkil- vagy -NH-(CH₂)]_₅-CO-csoport, vagy

b) Z=NO₂-C= CH₃-C> _a)-e) és g)-i) képletű csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállítása esetén egy Z-X₂-OH képletű vegyületet egy GS-X]-H általános képletű vegyülettel reagáltatunk, miközben X] és X₂ kovalens kötés kialakítása közben amidképzés mellett X tagot alkotja, Z és GS jelentése a fenti,

Xi jelentése a) pont alatti, és

X₂ jelentése -(C,_₄ alkil)-CO-, -(C,_₄ alkoxi),_₂C]_₄ alkil-CO- csoport vagy kémiai kötés, majd kívánt esetben a kapott észterből savat és ebből kívánt esetben sót képzünk.

Az alkalmazott oligokarbonsavak vagy az irodalomból ismertek, vagy hidroxivegyületek akrilnitrillel való addicionáltatásával és a nitrilcsoport elszappanosításával állíthatjuk elő őket.

Központi egységként alkalmas oligokarbonsavakat például anhidrid vagy savklorid képzésével aktiválhatunk. További aktiválási lehetőségek például: a) diciklohexil-karbodiimid/hidroxi-benzotriazol (DCC/HOBT), b) 2-etoxi-1 -(etoxi-karbonil)-1,2-dihidroizokinolin (EEDQ) vagy c) O-[(ciano-etoxi-karbonil-metilén)amino]-N,N,N’,N’-tetrametil-urónium-tetrafluorborát (TOTU).

Az aminoepesavak - részben védettek is - reagáltatása a reakciókészségtől függően -15 °C és 75 °C közötti hőmérsékleten történik, előnyösen közömbös oldószerben. Alkalmas oldószerek például: tetrahidrofurán, diklór-metán, dimetil-formamid vagy etil-acetát.

Az (I) általános képletű észtereket a szokásos módon, bázissal - illetve benzilészterek esetén hidrogenolitikusan - elszappanosítjuk, utána alkálifémsót képezhetünk.

A központi egységen különböző csoportokat hordozó vegyületek előállítására az „aktiválás” és „kondenzálás” lépéseket különböző amino-epesavszármazékokkal többszörösen végrehajthatjuk, például: a) anhidrid/savklorid képzése, b) 1. kondenzálás, c) megmaradt szabad karboxilcsoportok DCC/HOBT rendszerrel végzett aktiválása, d) 2. kondenzálás.

HU 216 636 Β

Az (I) általános képletű találmány szerinti vegyületeknek nagy affinitása van a vékonybél különleges epesavtranszport-rendszeréhez; az epesav újbóli felszívódását dózisfuggően és kompettitíve gátolják.

Az (I) általános képletű vegyületek maguk nem szívódnak fel és nem kerülnek a vérkeringésbe. Reverzibilis gátlás révén sokkal szelektívebb módon lehet beavatkozni az epesavak belső körfolyamatába. Vitaminhiány nem léphet fel, és az epesav-összetétel nem változik meg. A találmány szerinti vegyületekkel a szérum koleszterinszintjét az ismert mellékhatások nélkül csökkenthetjük. A találmány szerinti vegyületek továbbá a máj kolosztázzal végzett kezelése során alkalmazhatók, mert a kolosztázkörülmények között a májsejteket károsító, szövetelhalást előidéző epesavak recirkulációját az epe belső körfolyamatának megszakítása útján gátolják.

A találmány szerinti vegyületek biológiai hatásának kimutatására megvizsgáltuk, hogy milyen mértékben gátolják a [³H]-taurokolát házinyúl-illeumkefemembrán-vezikulumaiban történő felszívódását. A teszt az alábbiak szerint történt:

1. Kefeperemes membránvezikulumok kipreparálása házinyúl ileumából

A kefeperemes membránvezikulumokat az úgynevezett Mg²⁺-kicsapásos módszerrel preparáltuk ki. Hímnemű új-zélandi házinyulakat (2-2,5 kg testtömeg) 0,5 ml tetrakainoldat (2,5 mg tetrakain.HCl, 100 T 61^R és 25 mg mebezóniumjodid vizes oldata) intravénás beadásával megöltünk. A vékonybelet kivettük és jéghideg fiziológiai konyhasóoldattal öblítettük. A vékonybél terminális 7/10 részét (orális-rektális irányban mérve, azaz a terminális ileumot, amely az aktív, Na⁺-függő epesavtranszport-rendszert tartalmazza) használtuk. A beleket műanyag szatyorban -80 °C-on befagyasztottuk nitrogén alatt. A membránvezikulumok kipreparálására a fagyasztott beleket 30 °C-os vízfürdőn felolvasztottuk. A mukózát lekapartuk és 60 ml jéghideg 12 mM trisz/HCl-pufferben (pH 7,1) (300 mM mannit 5 mM EGTA, 10 mg/1 fenilmetilszulfonil-fluorid, 1 mg/1 tripszin inhibitor (szójababból, 32 U/mg), 0,5 mg/1 tripszin inhibitor (marhatüdőből, 193 U/mg), 5 mg/1 bacitracin) szuszpendáltuk. A szuszpenziót 300 ml jéghideg desztillált vízzel hígítjuk, majd turmixban (18 rúd, IKA cég, Staufen, NSZK) a maximális teljesítmény 75%-a mellett 3 percen át jeges hűtés mellett homogenizáljuk. 3 ml 1 M MgCl2-oldat adagolása után (10 mM végkoncentráció) az oldatot egy percen át 0 °C-on állni hagyjuk. Az Mg²⁺ hatására a sejtmembránok összetapadnak és kicsapódnak, kivéve a kefeperemes membránokat. A csapadékot 15 percen át centrifugáljuk 3000 g mellett (5000 perc¹, SS-34-rotor), utána a kefeperemes membránokat tartalmazó felülúszót elválasztjuk és további 30 percen át 26700 g mellett (15000perc~^l, SS-34-rotor) centrifugáljuk. A felülúszó részt kiöntjük, és a csapadékot 60 ml 12 mM trisz/HCl pufferben (pH 7,1, 60 mM mannit, 5 mM EGTA) Potter Elvejhem homogenizátorban (Braun, Melsungen, 900 perc ·, 10 löket) homogenizáljuk. 0,1 ml 1M MgCl2-oldat adagolása után az oldatot 0 °C-on inkubáljuk, utána újabb 15 percen keresztül 3000 g mellett centrifugáljuk.

A csapadékot 30 ml 10 mM trisz/hepes-pufferben (pH 7,4, 300 mM mannit) felvesszük és a Potter Elvejhem homogenizátor 20 löketével újra szuszpenzióba visszük. A szuszpenziót 48000 g mellett 30 percen át centrifugáljuk (20000 perc¹, SS-34-rotor), a csapadékot 0,5-2 ml trisz/hepes-pufferben (pH 7,4,280 mM mannit/végkoncentráció 20 mg/ml) felvesszük és tuberkulinfecskendő, valamint Gauge-tű segítségével újból szuszpenzióba visszük. A vezikulumokat részben transzportvizsgálatokhoz használjuk fel, részben -196 °C-on 4 mg-os adagokban folyékony nitrogénben tároljuk.

2. A Na⁺-függő [³H]taurokolát-felvétel az ileum kefeperemes membránvezikulumaiban

A szubsztrátumoknak a kefeperemes membránvezikulumokba való felvételét az úgynevezett membránszűrés technikája segítségével határoztuk meg. 10 μΐ vezikulumszuszpenziót (100 pg protein) cseppként polisztirolból készült inkubációs csövecske (11 χ 70) falára helyezünk; a csövecskében a megfelelő ligandumokat tartalmazó inkubációs közeg van (90 pl). Az inkubációs közeg az alábbiakat tartalmazza: 0,75 μ1=0,75 pCi [³H(G)]-taurokolát (fajlagos aktivitása: 2,1 Ci/mmol), 0,5 μΐ 10 mM taurokolát, 8,75 μΐ nátrium-transzport-puffer (10 mM trisz/hepes, pH 7,4), 100 mM mannit, 100 mM NaCl (Na-T-P), illetve 8,75 μΐ kálium-transzportpuffer (10 mM trisz/hepespuffer (pH 7,4), 100 mM mannit, 100 mM KC1 (K-T-P) és 80 μΐ az adott inhibitoroldatból, a kísérlettől függően Na-T-pufferben vagy K-T-pufferben oldva. Az inkubációs közeget polivinilidén-fluorid-membránszűrőn (SYHV LO 4NS, 0,45 pm, 4 mm 0, millipore, Eschbom, NSZK) szűrjük. A vezikulumokat az inkubációs közeggel összekeverve a transzportmérést beindítjuk. Az elegy taurokolátkoncentrációja 50 μΜ volt. A szokásos inkubációs idő (általában egy perc) elteltével a transzportot 1 ml jéghideg stopoldattal (10 mM trisz/hepes, pH 7,4; 150 mM KC1) megszakítjuk. Az elegyet azonnal 2500-3500 Pa vákuum mellett cellulóz-nitrátszűrőn (ME 25, 0,45 pm, 25 mm átmérő, Schleicher & Schuell, Dassell, NSZK) leszívatjuk. A szűrőt 5 ml jéghideg stopoldattal kimossuk.

A radioaktívan jelzett taurokolát felvett mennyiségének a mérése céljából a membránszűrőt 4 ml Quickszint 361 szcintillátorfolyadékban (Zinsser Analytik GmbH, Frankfurt, NSZK) feloldjuk és a radioaktivitást folyadékszcintillációs méréssel határozzuk meg TriCarb 2500 (Canberra Packard GmbH, Frankfurt, NSZK) műszerrel. A mért értékeket etalonminták segítségével végzett hitelesítés, valamint esetleg meglévő kemoluminiszcenc korrigálása után dpm (decompositions per minute) alakjában kapjuk.

A kontra llértékeket Na-Τ-Ρ-, illetve K-T-P-pufferben határozzuk meg. Az Na-T-P-pufferben és a K-T-P-pufferben mért felvétel közötti különbség az Na⁺-függő transzportrészt adja. IC₅₀Na+-nak azt az inhibitorkoncentrációt nevezzük, amelynél az Na⁺-függő transzportrész a kontrolihoz viszonyítva 50%-kal csökkent.

A táblázat a [³H]-taurokolát házinyúlileum kefemembrán-vezikulumaiban történő felszívódásának gát3

HU 216 636 Β lását mutatja. Az IC₅₀, illetve IC₅₀Na-értékek arányát adjuk meg [etalonként használt taurokenodezoxi-kolát (TCDC): vizsgált vegyület].

Táblázat

Példa sorszáma	IC₅₀ (TCDC) ICjQ(anyag)	IC₅₀Na (TCDC) IC_S0Na (anyag)
7	0,29	0,34
10	0,24	0,26
11	0,29	0,36
16	0,37	0,31
18	0,85	0,76
20	0,43	0,86
21	0,29	0,59
31	1,26	0,93
33	0,77	1,04
45	0,32	0,23
47	0,24	0,23

A találmány az (I) általános képletű vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására is vonatkozik. E célból a vegyületeket alkalmas, fiziológiailag elviselhető szerves oldószerben oldjuk vagy szuszpendáljuk. Alkalmas oldószerek például az alábbiak; egy- vagy többértékű alkoholok, így etanol vagy glicerin, triacetin; olajok, például napraforgóolaj, csukamájolaj; éterek, például dietilén-glikol-dimetiléter vagy poliéterek, így polietilénglikol. További segédanyagként polimerhordozók, például polivinil-pirrolidon, keményítő, ciklodextrin vagy poliszacharidok jöhetnek számításba. A találmány szerint előállított vegyületek más gyógyászati hatóanyaggal kombináltan is adhatók.

Az (I) általános képletű vegyületek különböző adagolási egységgé alakíthatók, előnyös az orális adagolás tabletta, kapszula vagy folyadék alakjában. A napi dózis a testtömegtől és a beteg állapotától függ, és 3 mg-5000 mg, előnyösen 10 mg és 1000 mg közötti.

1. példa

Lásd (A) reakcióegyenletet

8,0 g (27,2 mmol) l,l,l-trisz(3-hidroxi-propoximetil)-etán 40 ml dioxán és 0,4 g vizes KOH elegyével készített szuszpenziójához szobahőmérsékleten lassan 14,5 ml (220 mmol) akrilnitrilt csepegtetünk. Az elegyet egy órán át 40 °C-on tartjuk, majd 1,0 g 40 t%-os vizes KOH adagolása után 70 °C-on még további 2 órán át keveijük. A reakció befejeztével 5 ml 2N sósavat adagolunk és az oldhatatlant kiszűrjük. Az oldószert bepároljuk és a maradékot diklór-metánban oldjuk. Az oldatot magnézium-szulfáttal szárítjuk és újból bepároljuk. A nyers terméket kovasavgélen kromatografáljuk ciklohexán és etil-acetát 1:2 tf-arányú elegyével. 7,4 g (16,3 mmol, 60%) (A) reakcióegyenlet szerinti terméket kapunk.

2. példa

Lásd (B) reakcióegyenlet

5,2 h (11,2 mmol) 1. példa szerinti termék 60 ml metanolos sósavval készített oldatát visszafolyató hűtő alatt 3 órán át forraljuk. A csapadékot kiszűijük és az oldószert elpárologtatjuk. A kapott maradékot 50 ml toluolban visszafolyató hűtő és vízelválasztó alatt 3 órán át forraljuk. Utána az oldatot vákuumban betöményítjük. Hozam: 4,0 g (63%, 7,2 mmol) (B) reakcióvázlatban szereplő vegyület. C₂₆H₄₈O,₂ (552), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 559 (M+LÍ+).

3. példa

Lásd (C) reakcióvázlat

4,0 g (7,2 mmol) 2. példa szerinti vegyületet 40 ml 2N vizes nátrium-hidroxid-oldattal szobahőmérsékleten elszappanosítjuk. Feldolgozáskor az elegyet 2N sósavval savanyítjuk és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist szárítjuk, majd betöményítjük. A nyers terméket rövid kovasavgél oszlopon kloroform és metanol 4:1 tf-arányú elegyével tisztítjuk. Hozam: 3,0 g (5,9 mmol, 82%) (C) reakcióvázlat szerinti vegyület. C₂₃H₄₂O₁₂ (510), MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 517 (M+Li+).

4. példa

Lásd (D) reakcióvázlat

218 g (1,56 mól) pentaeritrit és 5,3 g (0,13 mól) nátrium-hidroxid 250 ml vízzel készített oldatához lassan 525 ml (8 mól) akrilnitrilt csepegtetünk. Az elegyet 50 °C-on 12 órán át keverjük, utána sósavval semlegesítjük és kovasavgélen át szűrjük (etil-acetát). Hozam: 345 g (0,99 mól, 63%) (D) reakcióvázlat szerinti vegyület.

C_I7H₂₄N₄O₄ (348) MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 355 (M+Li⁺)

5. példa

Lásd (E) reakcióvázlat

100 g (287 mmol) 4. példa szerinti vegyület 500 ml tömény sósavval készített elegyét visszafolyató hűtő alatt 1 órán át forraljuk. Lehűlés után az elegyet nátrium-kloriddal telítjük és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist szárítjuk és betöményítjük, és a maradékot kovasavgélen keresztül szűrjük (etil-acetát). Hozam: 83,5 g (197 mmol, 69%) (E) reakcióvázlat szerinti vegyület.

C₁₇H₂₈O₁₂ (424) MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 431 (M+Li+)

6. példa (6) képletű vegyület előállítása

200 mg (0,72 mmol) trisz-(2-karboxi-etil)-nitrometán 20 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához 0 °C-on először 0,59 ml (4,3 mmol) trietil-amint, majd 0,2 ml (2,1 mmol) klór-hangyasav-etil-észtert adunk. 30 perc elteltével, 0 °C-on 1,16 g (2,1 mmol) 3β-(2amino-etoxi)-7a, 12a-dihidroxi-kolánsav-benzil-észter 5 ml tetrahidrofuránnal készített oldatát adjuk az elegyhez. A reagáltatást 0 °C-on 3 órán át, majd szo4

HU 216 636 Β bahőmérsékleten még 2 órán át folytatjuk, utána az elegyet betöményítjük és kovasavgélen diklór-metán és metanol 9:1 tf-arányú elegyével kromatografáljuk. Hozam: 780 mg (0,42 mmol, 59%) (6) képletű vegyület.

Cio9Hi62N₄0₂o (1847) MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 1854(M+Li⁺).

7. példa (7) képletű vegyület előállítása

200 mg (0,108 mmol) 6. példa szerinti vegyület 15 ml metanollal készített oldatát 10 mg csontszenes palládiumkatalizátor jelenlétében légköri nyomás mellett hidrogénezzük. A katalizátort kiszűijük és az oldószert eltávolítjuk. 150 mg (0,095 mmol, 88%) (7) képletű vegyületet kapunk.

C₈₈H,₄₄N₄O₂₀ (1577) MS (FAB, 3-NBA/LiJ): 1584 (M+LÍ+).

8. példa (8) képletű vegyület előállítása

300 mg (0,59 mmol) l,l,l-trisz-(2-karboxi-etoximetil)-etán 30 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához 0 °C-on 0,56 ml (4,0 mmol) trietil-amint és 0,26 ml (2,72 mmol) klór-hangyasav-etil-észtert adunk. Az elegyet 0 °C-on 15 percen át reagáltatjuk, utána -10 °C-on 1,8 g (3,52 mmol) 3 β-amino7a,12a-dihidroxi-kolánsav-metil-észter 10 ml tetrahidrofuránnal készített oldatát adjuk a reakcióelegyhez. A keverést -10 °C-on még 1 órán át, szobahőmérsékleten még 30 percen át folytatjuk, utána az elegyet betöményítjük. A maradékot kovasavgélen etilacetát, metanol és trietil-amin 5:1:1 tf-arányú elegyével kromatografáljuk. Hozam: 900 mg (5,23 mmol, 89%) (8) képletű vegyület.

C₈₉H,₄₇N₃O₁₈ (1546), MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 1553 (M+LÍ+).

9. példa (9) képletű vegyület előállítása

500 mg (0,29 mmol) 8. példa szerinti vegyületet 2 ml vizes nátrium-hidroxid-oldat és 10 ml etanol elegyében elszappanosítunk. Az elegyet vízzel hígítjuk, az etanolt eltávolítjuk, a maradékot sósavval savanyítjuk és etil-acetáttal extraháljuk. Az oldatot szárítjuk, az oldószert elpárologtatjuk és a maradékot kovasavgélen kloroform és metanol 4:1, majd 1:1 tf-arányú elegyével kromatografáljuk. Hozam: 260 mg (0,15 mmol, 53%) (9) képletű vegyület.

C₈₆H₁₄₁N₃O₁₈ (1504), MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 1511 (M+LH).

10. példa (10) képletű vegyület előállítása l,l,l-trisz-(2-karboxi-etoxi-metil)-etánból és 3β-(2amino-etoxi)-7a, 12a-dihidroxi-kolánsav-metil-észterből állítjuk elő a (10) képletű vegyületet a 8. és 9. példában leírtak szerint.

C₉₂H₁₅₃N₃O₂₁ (1636), MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 1643 (M+LÍ+).

11. példa (11) képletű vegyület előállítása

A 3. példa szerinti vegyületből és 3P-amino7α, 12a-dihidroxi-kolánsavból állítjuk elő a (11) képletű vegyületet a 8. és 9. példában leírtak szerint. C₉₅H₁₅₉N₃O₂₁ (1678), MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 1678 (M+LÍ+).

12. példa (12) képletű vegyület előállítása

A 3. példa szerinti vegyületből és 3|3-(2-aininoetoxi)-7a, 12a-hidroxi-kolánsav-metil-észterből állítjuk elő a (12) képletű vegyületet a 8. és 9. példában leírtak szerint.

C,₀₁H₁₇₁N₃O₂₄ (1810), MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 1817 (M+LÍ+).

13. példa (13) képletű vegyület előállítása

0,5 g (1,12 mmol) 5. példa szerinti vegyület és 3,0 g (6,45 mmol) 3β-(2-3ΐηίηο-εΙοχί)-7α,12α4ω1έη53ν-ιηεtil-észter 20 ml vízmentes etil-acetáttal készített oldatához 1,36 g (5,50 mmol) 2-etoxi-1-etoxi-karbonil-1,2dihidro-kinolint adunk és az elegyet visszafolyató hűtő alatt 20 órán át forraljuk. A reakció befejeztével az oldószert elpárologtatjuk és a maradékot kovasavgélen kloroform és metanol 10:1 tf-arányú elegyével kromatografáljuk. 1,40 g (0,63 mmol, 54%) (13) képletű vegyületet kapunk.

Ci₂₅H₂₀₈N₄O₂₈ (22 1 3) MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 2220 (M+LÍ+).

14. példa

A 13. példa szerinti vegyületet a 9. példában leírtak szerint (14) képletű vegyületté elszappanosítjuk. A nyers terméket RP-8 kovasavgélen metanol és víz 95:5 tf-arányú elegyével kromatografáljuk.

C,2,H₂₀N₄O,₈ (2157), MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 2164 (M+LÍ+)

15. példa

Lásd (F) reakcióvázlatot

2,58 g (0,01 mól) Kemp-féle trisav (a”), 16,5 g (0,03 mól) amin (b”) és 4,46 g (0,033 mól) hidroxibenzotríazol (HOBT) 300 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához 0 °C-on 6,8 g (0,033 mól) diciklohexilkarbodiimidet (DCC) adunk. Az oldatot 0 °C-on 30 percen át, majd szobahőmérsékleten 20 órán át keverjük. A reakció teljessé tétele érdekében még 1,12 g HOBT és 1,7 g DCC adagolása után az elegyet további 20 órán át keveijük. Utána a keletkezett csapadékot kiszűrjük, a szűrletet bepároljuk, a maradékot etil-acetátban felvesszük és az oldatot 2N citromsavval, utána vízzel, majd telített NaHCO₃-oldattal, végül újból vízzel mossuk. A szárítás és bepárlás után kapott maradékot kovasavgélen kromatografáljuk etil-acetát és metanol 10:1 tf-arányú elegyével. 16,8 g (95%) (F) reakcióvázlat szerinti terméket kapunk.

C₁₀₅H,₇₇N₃O₁₈ (1768) MS (FAB, 3-NBA/LiCl): 1775 (M+LÍ+).

HU 216 636 Β

16. példa

Lásd (G) reakcióvázlat

16,8 g 15. példa szerinti vegyület 200 ml dioxánnal készített oldatához 0 °C-on 100 ml féltömény nátriumhidroxid-oldatot adunk. Az elegyet 2 órán át szobahőmérsékleten keverjük, utána 300 ml vízzel hígítjuk és szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Ezt követően további 500 ml vizet adagolunk, az elegyet híg sósavoldattal savanyítjuk és jeges fürdőn egy órán át keveijük. A kapott csapadékot leszívatjuk, vízzel mossuk, vizes etanolból átkristályosítjuk, majd vákuumban szárítjuk. 15,1 g (92%) (G) reakcióvázlat szerinti terméket kapunk mikrokristályos formában.

C|₀₂H₁₇₁N₃O₁₈ (1727), MS (FAB, AcOH, NBA): 1728 (M+Li⁺). Op.: 168 °C.

17. példa

345 mg (0,2 mmol) 16. példa szerinti vegyület 5 ml vízmentes metanollal készített oldatához 1 ml 0,2 N metanolos nátrium-hidroxid-oldatot adunk. A nátriumsót 50 ml vízmentes éterrel, 0 °C-on végzett egyórás keveréssel csapjuk ki. A sót leszívatjuk, hideg éterrel mossuk, majd vákuumban szárítjuk. 310 mg (87%) (H) reakcióvázlat szerinti terméket kapunk.

C,o2Hi68N₃Na₃0₁₈ (1792), MS (FAB, NBA), 1728 (M.3Na⁺ + 4H+); op.: 201-203 °C.

A 15. és 16. példához analóg módon a megfelelő karbonsavakból és aminokból az alábbi anyagokat állítjuk elő.

18. példa (18) képletű vegyület

C₈₇H₁₃₅N₃O,5 (1462) MS (FAB, 3-NBA): 1463 (M+H⁺).

19. példa (19) képletű vegyület

C₈₇H₁₃₅N₃O₁₈ (1510) MS (FAB, 3-NBA): 1511 (M+H+)

20. példa (20) képletű vegyület

C₉₆H₁₅₃N₃O₁₈ (1636) MS (FAB, 3-NBA): 1637 (M+H+)

21. példa (21) képletű vegyület

C₉₉H₁₅₉N₃O₁₈ (1678) MS (FAB, 3-NBA): 1639 (M+H+)

22. példa (22) képletű vegyület c,65H₂64N₆O₂4 (2714) MS (FAB, 3-NBA, AcOH): 2737 (M+Na⁺)

23. példa (23) képletű vegyület

C₈₇H₁₄,N₃O,5 (1468) MS (FAB, 3-NBA): 1469 (M+H+)

24. példa (24) képletű vegyület

C₈₇H,4,N₃O₁₈ (1516) MS (FAB, 3-NBA): 1517 (M+H+)

25. példa (25) képletű vegyület

C₉9H₁₆₅N₃O₁₈ (1684) MS (FAB, 3-NBA): 1685 (M+H+)

26. példa (26) képletű vegyület

Cii2H₁₈₂N₄O₂₀ (1903) MS (FAB, 3-NBA): 1904 (M+H+)

27. példa (27) képletű vegyület

Ci2sH₂₁₄N₄O₂4 (2192) MS (FAB, 3-NBA): 2193 (M+H+)

28. példa (28) képletű vegyület

C₉₈H₁₆₅N₃O₁₈ (1672) MS (FAB, 3-NBA): 1673 (M+H+)

29. példa (29) képletű vegyület

C₉₀H₁₄₇N₃O₁₅ (1510) MS (FAB, 3-NBA): 1511 (M+H+)

30. példa (30) képletű vegyület

C₉₀H₁₄₇N₃O₁₈ (1558) MS (FAB, 3-NBA): 1559 (M+H+)

31. példa (31) képletű vegyület

C₉₉H₁₆₅N₃O₁₈ (1684) MS (FAB, 3-NBA): 1685 (M+H⁺)

32. példa (32) képletű vegyület

C₉₀H,₄₇N₃O₁₅ (1510) MS (FAB, 3-NBA): 1511 (M+H+)

33. példa (33) képletű vegyület

C₈₄H₁₃₅N₃O₁₅ (1426) MS (FAB, 3-NBA): 1427 (M+H+)

34. példa (34) képletű vegyület

C₉₆H₁₅₉N₃O₂₁ (1690) MS (FAB, 3-NBA): 1713 (M+Na⁺)

35. példa (35) képletű vegyület

Ci₀₂H₁₇iN₃O,₄ (1822) MS (FAB, 3-NBA): 1823 (M+H⁺)

HU 216 636 Β

36. példa (36) képletű vegyület

C,o2Hi68N₆0₁₈ (1765) MS (FAB, 3-NBA): 1766 (M + H-)

7. példa (37) képletű vegyület

C₁₀₂H_17lN₃O₁₈ (1726) MS (FAB, 3-NBA): 1727 (M+H+)

38. példa

Lásd (I) reakcióvázlat

5,18 g (0,02 mól) (a’) jelű savszármazék 350 ml vízmentes diklór-metánnal és 6 ml trietil-aminnal készített oldatához jeges hűtés mellett 21 g (0,04 mól) (/>’) jelű amin 150 ml diklór-metánnal készített oldatát adjuk. Az adagolás befejezte után az elegyet még 6 órán át szobahőmérsékleten keverjük. A kivált sót kiszűrjük, a szűrletet 2N citromsavval, majd vízzel többszörösen kirázzuk, szárítjuk, majd bepároljuk. A maradékot kovasavgélen át szűrve tisztítjuk. 15,9 g (63%) (c’) jelű vegyületet kapunk.

C₇₄H₁₂₄N₂O₁₄ (1265) MS (FAB, 3-NBA): 1266 (M+H+)

39. példa

Lásd (J) reakcióvázlat

633 mg (0,5 mmol) 38. példa szerinti c jelű vegyület 30 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához 70 mg (0,52 mmol) hidroxi-benzotriazolt és 110 mg (0,53 mmol) diciklohexil-karbodiimidet, majd 243 mg (0,52 mmol) a jelű amint adunk, és az elegyet egy éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük. Az elegyet a 15. példa szerint dolgozzuk fel. Kromatográfiás tisztítás után 582 mg (68%) b jelű terméket kapunk.

C_10lH₁₆₉N₃O₁₈ (1712) MS (FAB, 3-NBA): 1713 (M+H+)

40. példa

A (40) képletű vegyületet a 39. példa szerinti terméket a 16. példa szerint elszappanosítva állítjuk elő (n=6 esetén R, n=2 esetén R’)

C₉₈H₁₆₃N₃O₁₈ (1670) MS (FAB, 3-NBA): 1671 (M+H+)

41. példa

A (41) képletű vegyületet a 40. példa szerint állítjuk elő az R’-nek megfelelő dimer amin felhasználásával.

Ci3iH₂₂₂N₄O₂₂ (2216) MS (FAB, 3-NBA): 2217 (M+H+)

Az alábbi vegyületeket a 15. és 16. példában leírtak szerint állítottuk elő a megfelelő oligokarbonsavak és aminok felhasználásával.

42. példa (42) képletű vegyület

Cn₂H₁₈₀N₄O₂₄ (1965) MS (FAB, 3-NBA): 1966 (M+H+)

43. példa (43) képletű vegyület

C₁₂₈H₂₁₂N₄O₂₄ (2190) MS (FAB, 3-NBA): 2191 (M+H+)

44. példa

Lásd (K) reakcióvázlat

Ha az ε-truxillsav transz,transz,transz-ciklobután1,2,3,4-tetrakarbonsavvá [Chem. Bér. 83, 2521 (1960)] történő átalakítása során az ozonolízist korán szakítjuk félbe, feldolgozás után termékelegyet kapunk, amely kromatográfiásan (kovasavgél, CHCl₃/MeOH 6:1) szétválasztható. Első frakcióként az új, (a) jelű 4-fenilciklobután-l,2,3-trikarbonsavat MS (FAB, 3-NBA) C₁₃H₁₂O₆ (264): 265 (M + L⁺), második frakcióként ciklobután-l,2,3,4-tetrakarbonsavat (b) kapunk.

45. példa (45) képletű vegyület

C₉₁H₁₄₁N₃O₁₈ (1564) MS (FAB, 3-NBA): 1565 (M+H+)

46. példa (46) képletű vegyület

Cio3H₁₆₅N₃0₁₈ (1732) MS (FAB, 3-NBA): 1733 (M+H+)

47. példa (47) képletű vegyület

Ci,₂H₁₈oN₄0₂₄ (1965) MS (FAB, 3-NBA): 1966 (M+H+)

48. példa (48) képletű vegyület

Ci2₈H₂,₂N₄O₂₄ (2190) MS (FAB, 3-NBA): 2191 (M+H+)

Claims

SZABADALMI IGÉNYPONT

Eljárás Z(-X-GS)_n általános epesavszármazékok előállítására - e képletben n értéke 3 vagy 4, és amennyiben Z jelentése (f) képletű csoport, akkor n=
2,

-GS jelentése (II) általános képletű csoport, amelyben

E jelentése kémiai kötés, -O- vagy -NH- és

Y jelentése -OH- vagy C|_₄-alkoxicsoport, benziloxi-csoport, -O-kation vagy (IV) általános képletű csoport és

I I

Z jelentése NO₂-C-, CH₃-C-, (a), (b), (c), (d), (e),

I I (f), (g), (h) vagy (i) képletű csoport, és X jelentése

- C, _₄-alkil-CO-NH-C [ _₄-alkil-,

- (C, _₄-alkoxi)_s-C, ₄-alki 1—CO -,

- (C! ₄-alkoxi)_s-C | _₄-alkil-CO -NH-C _t_₄-alki 1-,

HU 216 636 Β

-ΝΗ-C^g-alkil-,

-ΝΗ-,

-ΝΗ - (C ] _₄-alkoxi)_s-C [ _₄-alkil-, -NH-C,_₅-alkil-CO- vagy -(CH₂)_r-csoport, ahol s értéke 1 vagy 2 és r értéke 1, 2,
3 vagy
4, azzal a feltétellel, hogy a Z-(X-E-)_n molekularész egy amidkötést tartalmaz azzal jellemezve, hogy

a) Z helyén (f) képletű csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállítására az (a’) képletű vegyületet egy GS-Χ,-Η általános képletű vegyülettel - e képletben

X) jelentése -NH-(CH₂)_n- képletű csoport, ahol n értéke 1-8, vagy kémiai kötés vagy

-NH - (C, _₄-alkoxi) i _₂ - C i _₄-alkilcsoport vagy -NH-(CH₂)| _₅-CO- képletű csoport és

GS jelentése a tárgyi körben megadott - reagáltatjuk, vagy

b) Z helyén NO₂-C=, CH₃-C=, (a), (b), (c), (d), (e), (g), (h) vagy (i) képletű csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületek előállítására egy Z-X₂-O-H általános képletű vegyületet egy
5 GS-X^H általános képletű vegyülettel reagáltatunk, miközben X₂ és X[ kovalens kötés kialakulása közben együttesen amidképződés mellett az X tagot alkotja, és a képletekben

Z és GS jelentése a tárgyi körben megadott,
10 X[ jelentése az a) eljárásban megadott és

X₂ jelentése -(Ci-C₄-alkil)-CO-csoport, -(C[-C₄-alkoxi)i_₂-C₁-C₄-alkil-CO-csoport vagy kémiai kötés, majd kívánt esetben

i) Y helyén C^-Q-alkoxi- vagy benzil-oxi-csopor15 tót tartalmazó (I) általános képletű vegyületet Y helyén

OH-csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületté alakítunk, ii) és Y helyén OH-csoportot tartalmazó (I) általános képletű vegyületből bázissal sót képzünk.