HU216332B - Eljárás L-izoleucin előállítására - Google Patents

Eljárás L-izoleucin előállítására Download PDF

Info

Publication number
HU216332B
HU216332B HU9203542A HU9203542A HU216332B HU 216332 B HU216332 B HU 216332B HU 9203542 A HU9203542 A HU 9203542A HU 9203542 A HU9203542 A HU 9203542A HU 216332 B HU216332 B HU 216332B
Authority
HU
Hungary
Prior art keywords
isoleucine
escherichia coli
producing
resistant
isole
Prior art date
Application number
HU9203542A
Other languages
English (en)
Other versions
HU9203542D0 (en
HUT63657A (en
Inventor
Kuniki Kino
Yoshiyuki Kuratsu
Original Assignee
Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. filed Critical Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd.
Publication of HU9203542D0 publication Critical patent/HU9203542D0/hu
Publication of HUT63657A publication Critical patent/HUT63657A/hu
Publication of HU216332B publication Critical patent/HU216332B/hu

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P13/00—Preparation of nitrogen-containing organic compounds
    • C12P13/04—Alpha- or beta- amino acids
    • C12P13/06—Alanine; Leucine; Isoleucine; Serine; Homoserine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C12R2001/185—Escherichia
    • C12R2001/19—Escherichia coli
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
    • Y10S435/848—Escherichia
    • Y10S435/849—Escherichia coli

Abstract

A találmány szerinti eljárással úgy állítanak elő L-izőleűcint, hőgyvalamilyen táptalajőn tenyésztenek őlyan, az Escherichia nemzetségheztartőzó mikrőőrganizműsőkat, amelyek izőleűcin-anal gőn-rezisztensenk,és képesek addig termelni L-izőleűcint, amíg az fel nem halmőzódik atáptalajban. Ezt követően kinyerik az L-izőleűcint a táptalajból. Atalálmány szerinti eljáráshőz megfelelő műtáns törzseketelőállíthatják őlyan módőn, hőgy szőkásős műtálással izőleűcin-analőgőn-rezisztenssé tesznek L-treőnin-termelésre képes, azEscherichia nemz tséghez tartőzó mikrőőrganizműsőkat. Főrdítőttmegőldást is alkalmazhatnak, vagyis izőleűcin-analőgőnőkkal, és adőttesetben arginin-hidrőxamáttal és/vagy etiőninnel szembenellenállóképes, az Escher chia nemzetség egyik vad törzséből származóműtáns törzseket tesznek képessé L-izőleűcin-termelésre. ŕ

Description

A találmány tárgya olyan eljárás, amellyel L-izoleucint lehet előállítani. Az esszenciális aminosavak egyike, az L-izoleucin táplálkozási szempontból fontos szerepet játszik embereknél és állatoknál egyaránt. Az L-izoleucint felhasználják gyógyszerek - például aminosavakat tartalmazó készítmények -, élelmiszerek, valamint állati tápok előállításához. Az elmúlt években állandóan növekedett az L-izoleucin iránti kereslet.
Az izoleucinnak négy optikai izomeije ismeretes, ezért olcsón nehéz önmagában előállítani az L-izoleucint kémiai szintetikus eljárásokkal vagy a kémiai szintézist enzimes elválasztással kombináló eljárással. Az L-izoleucint ezért többnyire fermentálással állítják elő ipari méretekben.
Az L-izoleucin előállítására különböző fermentációs eljárások ismeretesek. így például az egyik ismert megoldás szerint valamilyen L-izoleucin-elővegyületet - például DL-a-amino-vajsavat, α-keto-vajsavat vagy treonint - juttatnak valamilyen fermentációs közegbe vagy mikrobás reakcióelegybe, ahol az elővegyület L-izoleucinná alakul át. Ez a megoldás elővegyület-adagolásos módszerként vált ismertté (45347/60., 7091/63., 8709/68. és 29789/71. számú vizsgálatot követően közzétett japán szabadalmi bejelentések). Ezzel a megoldással kapcsolatban azonban meg kell jegyeznünk, hogy nem alkalmas az L-izoleucin ipari méretekben való előállítására, mert drága alapanyagokat igényel, alacsony a hozama, és instabilak az elővegyületek.
Másfelől ismeretesek a következő, indirekt fermentációs eljárások:
- a Serratia marcescens fajhoz tartozó, a-aminovaj savval és izoleucin-hidroxamáttal szemben ellenálló mikroorganizmussal végzett fermentálás [J. Bacteriology, 110, 761-763 (1972); Applied and Environmental Microbiology, 34, 647-653 (1977)];
- egy, a Brevibacterium nemzetséghez tartozó, aamino-P-hidroxi-valeriánsavval és o-metil-treoninnal szemben ellenálló mikroorganizmus alkalmazásával végzett fermentálás (93 586/74. számú, vizsgálat nélkül közzétett japán szabadalmi bejelentés);
- egy, a Corynebacterium nemzetséghez tartozó, fluor-piruvinsavval szemben érzékeny mikroorganizmus alkalmazásával végzett fermentálás (60 236/89. számú vizsgálat után közzétett japán szabadalmi bejelentés).
Mindezeken túlmenően ismertek a következő eljárások is:
- fermentálás egy, a Serratia marcescens fajhoz tartozó, mutáció és transzdukció kombinálásával tökéletesített mikroorganizmus alkalmazásával [J. General Microbiology, 119, 51-61 (1980)];
- fermentálás egy, az Escherichia vagy a Brevibacterium nemzetséghez tartozó mikroorganizmussal, amelynek rekombináns DNS-technológiával növelték az aktivitását a treonin-dezamináz vagy az acetohidroxisav-szintáz - vagyis az L-izoleucin szintézisében kulcsszerepet játszó enzimek működésének fokozására (458/90. és 42988/90.
számú, vizsgálat nélkül közzétett japán szabadalmi bejelentések).
A találmány szerinti eljárással úgy állítunk elő Lizoleucint, hogy valamilyen táptalajon tenyésztünk egy olyan, az Escherichia nemzetséghez tartozó mikroorganizmust, amely ellenállóképes izoleucin-analogonokkal szemben, és képes addig termelni L-izoleucint, amíg az fel nem halmozódik a táptalajban. Ezt követőleg az Lizoleucint kinyerjük a táptalajból.
A találmány szerinti eljárás megvalósításához minden, az Escherichia nemzetséghez tartozó, izoleucinanalogonokkal szemben ellenállóképes és L-izoleucin termelésére alkalmas mikroorganizmus felhasználható. A találmány szerint alkalmazott izoleucin-analogonok közé tartozik a tiaizoleucin és az izoleucin-hidroxamát.
A találmány szerint alkalmazott mikroorganizmusok az izoleucin-analogonokon kívül ellenállóképesek lehetnek arginin-hidroxamáttal és/vagy etioninnel szemben is.
A találmány szerinti eljáráshoz megfelelő mutáns törzseket előállíthatjuk olyan módon, hogy valamilyen szokásosan alkalmazott mutációs eljárással ellenállóképessé teszünk izoleucin-analogonokkal - úgymint tiaizoleucinnel vagy izoleucin-hidroxamáttal -, valamint adott esetben arginin-hidroxamáttal és/vagy etioninnel szemben olyan, az Escherichia nemzetséghez tartozó mikroorganizmusokat, amelyek képesek L-treonint termelni. Úgy is eljárhatunk, hogy fordított megoldással hozzuk létre a mutáns törzseket, azaz izoleucin-analogonokkal, és adott esetben arginin-hidroxamáttal és/vagy etioninnel szemben ellenállóképes, az Escherichia nemzetség egyik vad törzséből származó mutáns törzseket teszünk képessé L-izoleucin-termelésre a treoninanyagcsere-antagonistákkal szembeni ellenálló képesség kifejlesztésével.
Az L-izoleucin-termelő mikroorganizmusok közé tartozik például az Escherichia coli H-8271, az Escherichia coli H-8272, az Escherichia coli H-8273, az Escherichia coli H-8285 és az Escherichia coli H-8362.
A találmány szerint úgy lehet előállítani L-izoleucint, hogy a mikroorganizmust hagyományos módon tenyésztjük. Táptalajként bármilyen szintetikus vagy természetes közeg alkalmazható, amíg a felhasznált törzs szükségleteinek megfelelően tartalmaz szénforrásokat, nitrogénforrásokat, szervetlen vegyületeket és nyomnyi mennyiségekben más tápanyagokat.
Szénforrásként fel lehet használni szénhidrátokat például glükózt, ffuktózt, laktózt, melaszokat, cellulózhidrolizátumot, nyerscukor-hidrolizátumot és keményítőhidrolizátumot -, valamint szerves savakat, úgymint piruvinsavat, ecetsavat, fumársavat, almasavat, tej savat stb. Az alkalmazásra kerülő mikroorganizmus asszimilálóképességétől függően alkoholokat - például glicerint és etanolt - is fel lehet használni.
Nitrogénforrásként fel lehet használni ammóniát, különböző szervetlen és szerves ammóniumsókat - például ammónium-kloridot, ammónium-szulfátot, ammónium-acetátot és ammónium-foszfátot -, aminokat és más, nitrogént tartalmazó vegyületeket, peptont, húski2
HU 216 332 Β vonatot, kukoricalekvárt, kazeinhidrolizátumot, szójaolaj kisajtolása után visszamaradt pogácsából előállított hidrolizátumot, különböző fermentált sejteket vagy azok digerációs termékeit stb.
Szervetlen vegyületként fel lehet használni káliumdihidrogén-foszfátot, dikálium-hidrogén-foszfátot, magnézium-foszfátot, magnézium-szulfátot, nátrium-kloridot, vas(II)-szulfátot, mangán-szulfátot, kalcium-karbonátot stb.
A tenyésztést aerob körülmények között lehet végrehajtani rázott immerziós kultúrában vagy levegőztetett és kevert kultúrában. A tenyésztési hőmérséklet 20-40 °C, célszerűen 25-38 °C. A közeg pH-értéke 5-9, célszerűen 7 körüli pH-η dolgozunk. A tenyésztés közben a pH-értéket célszerűen kalcium-karbonáttal, szervetlen és szerves savakkal, lúgoldattal, ammóniával, pufferolóanyagokkal stb. szabályozzuk. A rendszerint 2-7 napos tenyésztés folyamán L-izoleucin képződik és halmozódik fel a kultúrában.
A tenyésztés befejeződése után a kicsapódott anyagokat - például sejteket - eltávolítjuk a kultúrából. A felülúszó folyadékból különböző műveletekkel például ioncserével, bepárlással és kisózással - ki lehet nyerni az L-izoleucint.
A találmányt a következő példákkal mutatjuk be részletesebben.
1. példa
A találmány szerinti eljáráshoz szükséges mutáns törzs létrehozása
Escherichia coli H-4258 mikroorganizmusokat (FERM BP-985; diamino-pimelinsav-igény, metioninigény, ellenálló képesség a-amino-P-hidroxi-valeriánsawal és rifampicinnel szemben) 30 percen át kezeltünk 30 °C-on, 0,2 mg/ml mennyiségű N-metil-N’nitro-N-nitrozo-guanidinnel, hogy hagyományos módon mutáljuk őket. A sejteket szétterítettük egy olyan táptalajon, amely 7,2-es pH-jú minimáltáptalajból (0,5 m% glükóz, 0,2 m% NH4C1, 0,2 m% KH2PO4, 0,01 m% MgSO4x7H2O, 20 mg/1 FeSO4x7H2O, 50 mg/1 DL-metionin, 200 mg/1 diamino-pimelinsav, 2 m% agar-agar) és literenként 1 g tiaizoleucinból állt. A tenyésztést 2-6 napon keresztül végeztük 30 °C-on, majd összegyűjtöttük a táptalajon kialakult nagy, tiaizoleucin-rezisztens mutánsokból álló telepeket, és megvizsgáltuk az L-izoleucin-termelő képességüket. Kiválasztottunk egy mutánst, amelynek nagyobb volt az L-izoleucin-termelő képessége, mint az Escherichia coli H-4258 mikroorganizmusoké. így kaptuk meg az Escherichia coli H-8271 törzset.
Az Escherichia coli H-8271 törzset a Budapesti Szerződésnek megfelelően helyeztük letétbe 1991. 10. 29-én az Agency of Industrial Science and Technologyhoz tartozó Fermentation Research Institute-ban, FERM BP-3626 deponálási számon.
A tiaizoleucin-rezisztens mutáns létrehozása céljából alkalmazott eljárást megismételtük azzal az eltéréssel, hogy a táptalaj literenként 1,5 g izoleucin-hidroxamátot tartalmazott 1 g tiaizoleucin helyett. így kaptuk meg az Escherichia coli H-8272 törzset.
Az Escherichia coli H-8272 törzset 1991. 10. 29-én helyeztük letétbe FERM BP-3627 deponálási számon a Fermentation Research Institute-ban (Agency of Industrial Science and Technology), a Budapesti Szerződés szerint.
A H-8271 jelzésű tiaizoleucin-rezisztens mikroorganizmusokat a már ismertetett módon tovább mutáltuk, majd a sejteket szétterítettük literenként 0,3 g argininhidroxamátot tartalmazó minimáltáptalajon. A tenyésztést 2-6 napon keresztül végeztük 30 °C-on, majd összegyűjtöttük a táptalajon kialakult nagy, arginin-hidroxamát-rezisztens mutánsokból álló telepeket, és megvizsgáltuk az L-izoleucin-termelő képességüket. Kiválasztottunk egy mutánst, amelynek nagyobb volt az Lizoleucin-termelő képessége, mint az Escherichia coli H-8271 mikroorganizmusoké. így kaptuk meg az Escherichia coli H-8273 törzset.
Az Escherichia coli H-8273 törzset 1991. 10.29-én helyeztük letétbe FERM BP-3628 deponálási számon a Fermentation Research Institute-ban (Agency of Industrial Science and Technology), a Budapesti Szerződés szerint.
A H-8271 jelzésű tiaizoleucin-rezisztens mutánst és a H-8273 jelzésű arginin-hidroxamát-rezisztens mutánst a már ismertetett módon tovább mutáltuk, majd a sejteket külön-külön szétterítettük literenként 10 g DL-etionint tartalmazó minimáltáptalajon. A tenyésztést 2-6 napon át végeztük 30 °C-on, majd összegyűjtöttük a táptalajon kialakult nagy, DL-etionin-rezisztens mutánsokból álló telepeket, és megvizsgáltuk az L-izoleucin-termelő képességüket. Kiválasztottunk külön-külön olyan mutánsokat, amelyeknek az L-izoleucin-termelő képessége nagyobb volt, mint az Escherichia coli H-8271, illetve az Escherichia coli H-8273 mikroorganizmusoké. így kaptuk meg az Escherichia coli H-8362 és az Escherichia coli H-8285 törzset.
Az Escherichia coli H-8362 és az Escherichia coli H-8285 törzset 1991. 10.29-én helyeztük letétbe FERM BP-3630, illetve FERM BP-3629 deponálási számon a Fermentation Research Institute-ban (Agency of Industrial Science and Technology), a Budapesti Szerződés szerint.
Az így kapott mutánsokat tiaizoleucin-, izoleucinhidroxamát-, arginin-hidroxamát- vagy DL-etionin-reezisztenciájuk vonatkozásában összehasonlítottuk a megfelelő szülői törzsekkel. Az összehasonlító vizsgálat során 24 óra hosszat tenyésztettük az egyes törzseket egy olyan, 7,5-ös pH-jú táptalajon, amely 1 m% triptont, 0,5 m% élesztőextraktumot, 1 m% nátrium-kloridot és 200 mg/1 mennyiségben diamino-pimelinsavat tartalmazott. A sejteket ezután sterilizált vízben szuszpendáltuk, majd a szuszpenziókat szétterítettük olyan minimáltáptalajokon, amelyek az 1. táblázatban feltüntetett mennyiségben tartalmaztak tiaizoleucint, izoleucin-hidroxamátot, arginin-hidroxamátot vagy DL-etionint. Az adott hatóanyaggal szembeni ellenálló képességet 30 °C-on végzett 72 órás tenyésztést követően határoztuk meg a szaporodás mértéke alapján. Az eredményeket az 1. táblázatban közöljük.
HU 216 332 Β
1. táblázat
Törzs Tiaizoleucin, g/1
0 0,3 1
H-4258 + ± -
H-8271 + + +
H-8362 + + +
H-8273 + + +
H-8285 + + +
Törzs Izoleucin-hidroxamát, g/1
0 0,5 1,5
H-4258 + ± -
H-8272 + + +
H-8271 + + +
Törzs Arginin-hidroxamát, g/1
0 0,1 0,3
H-8271 + ± -
H-8273 + + +
H-8285 + + +
Törzs DL-etionin, g/1
0 5 10
H-8271 ± -
H-8362 + + +
H-8273 ± -
H-8285 + + +
+: kielégítő szaporodás, ±: kismértékű szaporodás, -: nincs szaporodás
2. példa
L-Izoleucin-termelő képességi vizsgálat (1)
Az 1. példa szerint létrehozott Escherichia coli
H-8271, Escherichia coli H-8272, Escherichia coli H-8273, Escherichia coli H-8362 és Escherichia coli H-8285 mikroorganizmusokat, valamint Escherichia coli H-4258 mikroorganizmust külön-külön tenyésztettünk rázatás mellett, 16 órán keresztül, 30 °C-on egy olyan, 7,4-es pH-jú beoltóközegben, amely 2 m% glükózt, 1 m% peptont, 1 m% élesztőextraktumot, 0,25 m% nátrium-kloridot és 200 mg/1 mennyiségben diamino-pimelinsavat tartalmazott. Ezt követően az így keletkezett beoltótenyészetből 0,5 ml-t kivettünk, és a kivett mennyiséggel beoltottunk 20 ml 8,0-as pH-jú fermentációs közeget (6 m% glükóz, 1,6 m% ammóniumszulfát, 0,1 m% kálium-dihidrogén-foszfát, 100 mg/1 DL-metionin, 300 mg/1 diamino-pimelinsav, 0,2 m% kukoricalekvár, 4 m% magnézium-foszfát, 1 m% kalcium-karbonát) egy 300 ml-es Erlenmeyer-lombikban, majd 72 óra hosszat tenyésztettük a mikroorganizmusokat rázatás közben, 30 °C-on. A tenyésztés befejezése után nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás eljárással végrehajtott mennyiségi elemzéssel meghatároztuk az L-izoleucinból és az L-treoninból felhalmozódott mennyiségeket. Az eredményeket a 2. táblázat tartalmazza.
2. táblázat
Törzs L-izoleucin, g/1 L-treonin, g/1
H-4258 0 15,2
H-8271 2,7 12,7
H-8272 2,3 12,9
H-8362 5,8 3,0
H-8273 9,2 2,3
H-8285 12,5 0,2
3. példa
L-Izoleucin-termelő képességi vizsgálat (2)
A 2. példa szerint előállított 100 ml Escherichia coli H-8285 beoltótenyészettel beoltottunk 1 liter 7,4-es pH-jú fermentációs közeget [4 m% glükóz, 0,5 m% (NH4)2SO4, 0,1 m% KH2PO4, 0,01 m% MgSO4x7H2O, 0,5 m% kukoricalekvár, 0,35 g/1 DL-metionin, 0,9 g/1 diamino-pimelinsav] egy kétliteres fermentációs tartályban, majd 30 °C-on, 1 liter/perc levegő-térfogatáram biztosítása mellett, rázatás közben (800 fordulat/perc) tenyésztettük a mikroorganizmusokat. Tenyésztés közben vizes ammóniaoldatot adtunk a tenyészethez, majd a pHértéket 6,5 ±0,2-re állítsuk, továbbá nitrogénforrást biztosítsunk. A tenyészethez - szükség esetén - glükózt is agadoltunk. A tenyésztést 45 órán át folytattuk, majd befejeztük. Ilyen módon 26 mg/ml mennyiségű L-izoleucin halmozódott fel.
A H-8285 törzsnek az előző bekezdés szerinti tenyésztésekor kapott, L-izoleucint tartalmazó fermentációs közegből 1 liternyi mennyiséget 3000 fordulat/perc körsebességgel 10 percig centrifugáltunk, hogy eltávolítsuk belőle a sejteket és a többi szennyező anyagot. Az így kapott felülúszó folyadékot átengedtük egy olyan oszlopon, amely H+ típusú, erősen savas Diaion SK1B kationcserélő gyantával volt megtöltve, hogy adszorbeáltassuk az L-izoleucint. Az oszlopot ezután vízzel mostuk, majd 0,5 N vizes ammóniaoldattal eluáltuk. Az Lizoleucin-frakciókat összegyűjtöttük, bepároltuk, és etanol alatt hűtve tároltuk. Ilyen módon 19,3 g mennyiségben kaptunk legalább 98 m%-os tisztaságú L-izoleucinkristályokat.

Claims (6)

  1. SZABADALMI IGÉNYPONTOK
    1. Eljárás L-izoleucin előállítására, azzal jellemezve, hogy valamilyen tápközegben tenyésztünk olyan mikroorganizmusokat, amelyek az Escherichia nemzetséghez tartoznak, izoleucin-analogon-rezisztensek és Lizoleucin-termelőképesek, amíg az L-izoleucin fel nem
    HU 216 332 Β halmozódik a tenyészetben, majd a keletkezett L-izoleucint kinyerjük a tenyészetből.
  2. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy izoleucin-analogonként tiaizoleucint vagy izoleucin-hidroxamátot alkalmazunk.
  3. 3. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan mikroorganizmusokat alkalmazunk, amelyek ellenállóképesek arginin-hidroxamáttal és/vagy etioninnel szemben is.
  4. 4. Az 1-3. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan, az Escherichia nemzetségből származó mikroorganizmusokat alkalmazunk, amelyek képesek L-treonint termelni.
  5. 5. Az 1-4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy olyan mikroorganizmusokat alkalmazunk, amelyek az Escherichia coli fajhoz tartoznak.
    5 6. Az 5. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy Escherichia coli H-8271 (FERM BP-3626), Escherichia coli H-8272 (FERM BP-3627), Escherichia coli H-8273 (FERM BP-3628), Escherichia coli H-8285 (FERM BP-3629) vagy Escherichia coli
  6. 10 H-8362 (FERM BP-3630) mikroorganizmusokat alkalmazunk.
HU9203542A 1991-11-11 1992-11-11 Eljárás L-izoleucin előállítására HU216332B (hu)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP3294420A JP3036930B2 (ja) 1991-11-11 1991-11-11 発酵法によるｌ−イソロイシンの製造法

Publications (3)

Publication Number Publication Date
HU9203542D0 HU9203542D0 (en) 1993-01-28
HUT63657A HUT63657A (en) 1993-09-28
HU216332B true HU216332B (hu) 1999-06-28

Family

ID=17807530

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
HU9203542A HU216332B (hu) 1991-11-11 1992-11-11 Eljárás L-izoleucin előállítására

Country Status (8)

Country Link
US (1) US5362637A (hu)
EP (1) EP0542487B1 (hu)
JP (1) JP3036930B2 (hu)
KR (1) KR960016135B1 (hu)
CA (1) CA2082347C (hu)
DE (1) DE69226844T2 (hu)
HU (1) HU216332B (hu)
MX (1) MX9206450A (hu)

Families Citing this family (61)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5998178A (en) * 1994-05-30 1999-12-07 Ajinomoto Co., Ltd. L-isoleucine-producing bacterium and method for preparing L-isoleucine through fermentation
JP3510331B2 (ja) 1994-06-30 2004-03-29 協和醗酵工業株式会社 発酵法によるｌ−アミノ酸の製造法
JP3717970B2 (ja) * 1995-05-31 2005-11-16 協和醗酵工業株式会社 発酵法によるｌ−イソロイシンの製造法
JPH09285294A (ja) * 1996-04-23 1997-11-04 Ajinomoto Co Inc 発酵法によるｌ−グルタミン酸の製造法
JP4380305B2 (ja) * 2003-11-21 2009-12-09 味の素株式会社 発酵法によるｌ−アミノ酸の製造法
US20070004014A1 (en) * 2005-06-29 2007-01-04 Yuichiro Tsuji Method for producing l-threonine
JP2009118740A (ja) 2006-03-03 2009-06-04 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸の製造法
EP2351830B1 (en) 2006-03-23 2014-04-23 Ajinomoto Co., Inc. A method for producing an L-amino acid using bacterium of the Enterobacteriaceae family with attenuated expression of a gene coding for small RNA
JP2009165355A (ja) 2006-04-28 2009-07-30 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸を生産する微生物及びｌ−アミノ酸の製造法
JP2010017082A (ja) 2006-10-10 2010-01-28 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸の製造法
RU2006143864A (ru) 2006-12-12 2008-06-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) (RU) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE, В КОТОРОЙ ОСЛАБЛЕНА ЭКСПРЕССИЯ ГЕНОВ cynT, cynS, cynX, ИЛИ cynR, ИЛИ ИХ КОМБИНАЦИИ
JP2010041920A (ja) 2006-12-19 2010-02-25 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸の製造法
JP5540504B2 (ja) 2007-01-22 2014-07-02 味の素株式会社 Ｌ−アミノ酸を生産する微生物及びｌ−アミノ酸の製造法
JP2010088301A (ja) 2007-02-01 2010-04-22 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸の製造法
JP2010110216A (ja) 2007-02-20 2010-05-20 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸または核酸の製造方法
JP2010110217A (ja) 2007-02-22 2010-05-20 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸生産菌及びｌ−アミノ酸の製造法
EP2192170B1 (en) 2007-09-04 2017-02-15 Ajinomoto Co., Inc. Amino acid-producing microorganism and method of producing amino acid
DE102007044134A1 (de) 2007-09-15 2009-03-19 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur Herstellung von L-Aminosäuren unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae
RU2396336C2 (ru) 2007-09-27 2010-08-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ, ПРИНАДЛЕЖАЩЕЙ К РОДУ Escherichia
DE102007052270A1 (de) 2007-11-02 2009-05-07 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur Herstellung von L-Aminosäuren unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae
EP2060636A1 (de) 2007-11-14 2009-05-20 Evonik Degussa GmbH Verfahren zur Herstellung von L-Aminosäuren unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae
RU2395580C2 (ru) 2007-12-21 2010-07-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) Способ конструирования бактерии-продуцента (2s,3r,4s)-4-гидрокси-l-изолейцина, бактерия-продуцент (2s,3r,4s)-4-гидрокси-l-изолейцина и способ продукции (2s,3r,4s)-гидрокси-l-изолейцина или его соли
JP2011067095A (ja) 2008-01-10 2011-04-07 Ajinomoto Co Inc 発酵法による目的物質の製造法
KR20100120663A (ko) 2008-01-23 2010-11-16 아지노모토 가부시키가이샤 Ｌ-아미노산의 제조법
RU2008105793A (ru) 2008-02-19 2009-08-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) (RU) Способ конструирования оперонов, содержащих трансляционно сопряженные гены, бактерия, содержащая такой оперон, способ продукции полезного метаболита и способ мониторинга экспрессии гена
EP2098597A1 (de) 2008-03-04 2009-09-09 Evonik Degussa GmbH Verfahren zur Herstellung von L-Aminosäuren unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae
DE102008002309A1 (de) 2008-06-09 2009-12-10 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur Herstellung von L-Aminosäuren unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae
DE102008044768A1 (de) 2008-08-28 2010-03-04 Evonik Degussa Gmbh Verfahren zur Herstellung von organisch-chemischen Verbindungen unter Verwendung von verbesserten Stämmen der Familie Enterobacteriaceae
JP5598329B2 (ja) 2008-09-08 2014-10-01 味の素株式会社 Ｌ−アミノ酸を生産する微生物及びｌ−アミノ酸の製造法
JP2012029565A (ja) 2008-11-27 2012-02-16 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸の製造法
BRPI1007069A2 (pt) 2009-01-23 2015-08-25 Ajinomoto Kk Método para produzir um l-aminoácido.
CN102471790B (zh) 2009-07-29 2014-10-29 味之素株式会社 产生l-氨基酸的方法
JP5875869B2 (ja) * 2009-12-17 2016-03-02 Ｍｃフードスペシャリティーズ株式会社 アルギニン高含有酵母エキスおよびその製造方法
RU2460793C2 (ru) 2010-01-15 2012-09-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) Способ получения l-аминокислот с использованием бактерий семейства enterobacteriaceae
JP2013074795A (ja) 2010-02-08 2013-04-25 Ajinomoto Co Inc 変異型ｒｐｓＡ遺伝子及びＬ−アミノ酸の製造法
RU2471868C2 (ru) 2010-02-18 2013-01-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) Мутантная аденилатциклаза, днк, кодирующая ее, бактерия семейства enterobacteriaceae, содержащая указанную днк, и способ получения l-аминокислот
RU2501858C2 (ru) 2010-07-21 2013-12-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТЫ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА Enterobacteriaceae
RU2482188C2 (ru) 2010-07-21 2013-05-20 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт "Аджиномото-Генетика" (ЗАО АГРИ) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АРГИНИНА С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИЙ РОДА Escherichia, В КОТОРОЙ ИНАКТИВИРОВАН ОПЕРОН astCADBE
JP2014036576A (ja) 2010-12-10 2014-02-27 Ajinomoto Co Inc Ｌ−アミノ酸の製造法
AT510765B1 (de) 2010-12-15 2012-09-15 Wolfgang Dipl Ing Vogl Vorrichtung zur photometrischen bzw. spektrometrischen untersuchung einer flüssigen probe
RU2011134436A (ru) 2011-08-18 2013-10-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") Способ получения l-аминокислоты с использованием бактерии семейства enterobacteriaceae, обладающей повышенной экспрессией генов каскада образования флагелл и клеточной подвижности
RU2012112651A (ru) 2012-04-02 2013-10-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") САМОИНДУЦИРУЕМАЯ ЭКСПРЕССИОННАЯ СИСТЕМА И ЕЕ ПРИМЕНЕНИЕ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПОЛЕЗНЫХ МЕТАБОЛИТОВ С ПОМОЩЬЮ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА Enterobacteriaceae
RU2013118637A (ru) 2013-04-23 2014-10-27 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE, В КОТОРОЙ РАЗРЕГУЛИРОВАН ГЕН yjjK
CA2915389C (en) * 2013-06-11 2019-06-04 Cj Cheiljedang Corporation L-isoleucine-producing corynebacterium glutamicum strain and method of producing l-isoleucine therefrom
JP2016165225A (ja) 2013-07-09 2016-09-15 味の素株式会社 有用物質の製造方法
RU2013140115A (ru) 2013-08-30 2015-03-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА Enterobacteriaceae, В КОТОРОЙ НАРУШЕНА ЭКСПРЕССИЯ КЛАСТЕРА ГЕНОВ znuACB
JP2016192903A (ja) 2013-09-17 2016-11-17 味の素株式会社 海藻由来バイオマスからのｌ−アミノ酸の製造方法
RU2013144250A (ru) 2013-10-02 2015-04-10 Закрытое акционерное общество "Научно-исследовательский институт Аджиномото-Генетика" (ЗАО "АГРИ") СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА Enterobacteriaceae, В КОТОРОЙ ОСЛАБЛЕНА ЭКСПРЕССИЯ ГЕНА, КОДИРУЮЩЕГО ФОСФАТНЫЙ ТРАНСПОРТЕР
BR112016007286B1 (pt) 2013-10-02 2021-07-20 Ajinomoto Co., Inc Métodos de controle de amônia e para produção de uma substância alvo, e, aparelho para controle de amônia
WO2015060314A1 (ja) 2013-10-21 2015-04-30 味の素株式会社 Ｌ－アミノ酸の製造法
RU2014105547A (ru) 2014-02-14 2015-08-20 Адзиномото Ко., Инк. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ L-АМИНОКИСЛОТ С ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ БАКТЕРИИ СЕМЕЙСТВА ENTEROBACTERIACEAE, ИМЕЮЩЕЙ СВЕРХЭКСПРЕССИРУЕМЫЙ ГЕН yajL
RU2015114955A (ru) 2015-04-22 2016-11-10 Аджиномото Ко., Инк. Способ получения L-изолейцина с использованием бактерии семейства Enterobacteriaceae, в которой сверхэкспрессирован ген cycA
RU2015120052A (ru) 2015-05-28 2016-12-20 Аджиномото Ко., Инк. Способ получения L-аминокислоты с использованием бактерии семейства Enterobacteriaceae, в которой ослаблена экспрессия гена gshA
BR112018017227A2 (pt) 2016-02-25 2019-02-05 Ajinomoto Kk método para produzir um l-aminoácido
JP7071987B2 (ja) 2017-02-23 2022-05-19 フォセオン テクノロジー， インコーポレイテッド 液体クロマトグラフィー用の統合型照明検出フローセル
JP7066977B2 (ja) 2017-04-03 2022-05-16 味の素株式会社 Ｌ－アミノ酸の製造法
EP3608409A1 (en) 2018-08-09 2020-02-12 Evonik Operations GmbH Process for preparing l amino acids using improved strains of the enterobacteriaceae family
WO2020071538A1 (en) 2018-10-05 2020-04-09 Ajinomoto Co., Inc. Method for producing target substance by bacterial fermentation
JP2022521544A (ja) 2019-02-22 2022-04-08 味の素株式会社 ｙｄｉＪ遺伝子を過剰発現する腸内細菌科に属する細菌を用いたＬ－アミノ酸の製造方法
BR112021017870A2 (pt) 2019-04-05 2021-12-07 Ajinomoto Kk Método para produzir um l-aminoácido
JP2022550084A (ja) 2019-09-25 2022-11-30 味の素株式会社 細菌の発酵によるｌ－アミノ酸の製造方法

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS524629B2 (hu) * 1974-01-18 1977-02-05
JPS5835079B2 (ja) * 1976-11-30 1983-07-30 日本化薬株式会社 Ｌ−イソロイシンの製造法
US4411991A (en) * 1980-10-07 1983-10-25 Kanegafuchi Chemical Industry Company, Limited Process for fermentative production of amino acids
EP0213536B1 (en) * 1985-08-23 1992-03-18 Toray Industries, Inc. Process for producing l-threonine by fermentation
US5017483A (en) * 1986-02-20 1991-05-21 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for producing L-threonine
JP2748418B2 (ja) * 1988-08-03 1998-05-06 味の素株式会社 組換えｄｎａ、該組換えｄｎａを有する微生物
JP2578492B2 (ja) * 1988-11-10 1997-02-05 協和醗酵工業株式会社 発酵法によるｌ−スレオニンの製造法

Also Published As

Publication number Publication date
EP0542487B1 (en) 1998-09-02
HU9203542D0 (en) 1993-01-28
KR930010185A (ko) 1993-06-22
EP0542487A2 (en) 1993-05-19
CA2082347A1 (en) 1993-05-12
CA2082347C (en) 2002-05-28
JP3036930B2 (ja) 2000-04-24
US5362637A (en) 1994-11-08
KR960016135B1 (ko) 1996-12-04
MX9206450A (es) 1993-05-01
JPH05130882A (ja) 1993-05-28
DE69226844T2 (de) 1999-02-11
HUT63657A (en) 1993-09-28
DE69226844D1 (de) 1998-10-08
EP0542487A3 (hu) 1994-04-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
HU216332B (hu) Eljárás L-izoleucin előállítására
EP0530803B1 (en) Process for producing L-threonine
US5474918A (en) Process for the production of L-threonine and L-isoleucine by fermentation of Escherichia coli
JP3698758B2 (ja) 発酵法によるｌ−ロイシンの製造法
US4996147A (en) Process for producing L-threonine by fermentation
HU225737B1 (en) Process for producing l-amino acids by fermentation
JP3717970B2 (ja) 発酵法によるｌ−イソロイシンの製造法
EP0595163B1 (en) Process for producing L-isoleucine
CA2152885C (en) Process for producing l-leucine
US5087566A (en) Process for producing l-threonine
JP2877414B2 (ja) 発酵法によるｌ―スレオニンの製造法
EP0445830A2 (en) Process for producing L-threonine
JP3510331B2 (ja) 発酵法によるｌ−アミノ酸の製造法
KR0146493B1 (ko) 발효법에 의한 l-알라닌의 제조 방법
HU215248B (hu) Eljárás L-lizin előállítására
KR960016870B1 (ko) 발효에 의한 l-이소로이신의 제조방법
HU207536B (en) Process for producing 1-threonine with fermentation