FI94534C - Menetelmä uusien hepariinijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents
Menetelmä uusien hepariinijohdannaisten valmistamiseksi Download PDFInfo
- Publication number
- FI94534C FI94534C FI892850A FI892850A FI94534C FI 94534 C FI94534 C FI 94534C FI 892850 A FI892850 A FI 892850A FI 892850 A FI892850 A FI 892850A FI 94534 C FI94534 C FI 94534C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- heparin
- sodium
- ppm
- process according
- nmr spectrum
- Prior art date
Links
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical class OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 45
- 239000002628 heparin derivative Substances 0.000 title claims abstract description 14
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 20
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 4
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 claims abstract description 53
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 claims abstract description 45
- -1 alkali metal salts Chemical class 0.000 claims abstract description 8
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 claims abstract description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 46
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M sodium hydroxide Inorganic materials [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 38
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims description 18
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 claims description 16
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 15
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 claims description 11
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical group C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 10
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 10
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 10
- 239000012279 sodium borohydride Substances 0.000 claims description 10
- 229910000033 sodium borohydride Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 8
- 239000002585 base Substances 0.000 claims description 8
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 8
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 239000011591 potassium Substances 0.000 claims description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 claims description 5
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 claims description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 4
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N barium atom Chemical compound [Ba] DSAJWYNOEDNPEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L barium dihydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[Ba+2] RQPZNWPYLFFXCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 claims description 3
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 claims description 3
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Inorganic materials [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 3
- 229910001863 barium hydroxide Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 claims description 2
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 claims description 2
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims 2
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 229910001626 barium chloride Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000001465 calcium Nutrition 0.000 claims 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 claims 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000011285 magnesium acetate Nutrition 0.000 claims 1
- 229940069446 magnesium acetate Drugs 0.000 claims 1
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000011147 magnesium chloride Nutrition 0.000 claims 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims 1
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M potassium chloride Inorganic materials [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M potassium hydroxide Inorganic materials [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 229910052939 potassium sulfate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000011151 potassium sulphates Nutrition 0.000 claims 1
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 claims 1
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 claims 1
- 230000002429 anti-coagulating effect Effects 0.000 abstract description 8
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 abstract description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 5
- 238000001644 13C nuclear magnetic resonance spectroscopy Methods 0.000 abstract description 3
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 abstract description 3
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 abstract description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 abstract description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 abstract description 2
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 abstract 2
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 abstract 2
- 230000003467 diminishing effect Effects 0.000 abstract 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 abstract 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 abstract 1
- 230000014508 negative regulation of coagulation Effects 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 26
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 23
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 19
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 12
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 11
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 11
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 10
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 10
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 9
- ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N heparin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](COS(O)(=O)=O)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](OS(O)(=O)=O)[C@@H](O[C@@H]3[C@@H](OC(O)[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H]3O)C(O)=O)O[C@@H]2O)CS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@H]1O ZFGMDIBRIDKWMY-PASTXAENSA-N 0.000 description 8
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 8
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 229960000583 acetic acid Drugs 0.000 description 7
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 7
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N glucosamine group Chemical group OC1[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 7
- 230000008859 change Effects 0.000 description 6
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 6
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 6
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 5
- 230000001858 anti-Xa Effects 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 3
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 3
- 229910021653 sulphate ion Inorganic materials 0.000 description 3
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical group Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZYYVLFIENYGQOT-IVMDWMLBSA-N O[C@H]1[C@]2([H])OC[C@@]1([H])OC(O)[C@@H]2N Chemical compound O[C@H]1[C@]2([H])OC[C@@]1([H])OC(O)[C@@H]2N ZYYVLFIENYGQOT-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 2
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- BDKLKNJTMLIAFE-UHFFFAOYSA-N 2-(3-fluorophenyl)-1,3-oxazole-4-carbaldehyde Chemical compound FC1=CC=CC(C=2OC=C(C=O)N=2)=C1 BDKLKNJTMLIAFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AWFYPPSBLUWMFQ-UHFFFAOYSA-N 2-[5-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-1,3,4-oxadiazol-2-yl]-1-(1,4,6,7-tetrahydropyrazolo[4,3-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C1=NN=C(O1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=C2 AWFYPPSBLUWMFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVZRAEYQIKYCPH-UHFFFAOYSA-N 3-(trimethylsilyl)propane-1-sulfonic acid Chemical compound C[Si](C)(C)CCCS(O)(=O)=O TVZRAEYQIKYCPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N Cu2+ Chemical compound [Cu+2] JPVYNHNXODAKFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 1
- 241001069925 Orestes Species 0.000 description 1
- 241001122767 Theaceae Species 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 206010053648 Vascular occlusion Diseases 0.000 description 1
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 150000001242 acetic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000012042 active reagent Substances 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N aldehydo-D-glucuronic acid Chemical group O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-QTBDOELSSA-N 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- ITHZDDVSAWDQPZ-UHFFFAOYSA-L barium acetate Chemical compound [Ba+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O ITHZDDVSAWDQPZ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 1
- XQKKWWCELHKGKB-UHFFFAOYSA-L calcium acetate monohydrate Chemical compound O.[Ca+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O XQKKWWCELHKGKB-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940067460 calcium acetate monohydrate Drugs 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 1
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- OKBPCTLSPGDQBO-UHFFFAOYSA-L disodium;dichloride Chemical compound [Na+].[Na+].[Cl-].[Cl-] OKBPCTLSPGDQBO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012362 glacial acetic acid Substances 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-LECHCGJUSA-N iduronic acid Chemical compound O=C[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-LECHCGJUSA-N 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 239000003055 low molecular weight heparin Substances 0.000 description 1
- 229940127215 low-molecular weight heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 229940087562 sodium acetate trihydrate Drugs 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 150000003467 sulfuric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 208000021331 vascular occlusion disease Diseases 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0075—Heparin; Heparan sulfate; Derivatives thereof, e.g. heparosan; Purification or extraction methods thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
- A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Hematology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Materials For Medical Uses (AREA)
Description
! 94534
Menetelmä uusien hepariinijohdannaisten valmistamiseksi Tämä keksintö koskee menetelmää uusien hepariini-johdannaisten valmistamiseksi käsittelemällä erilaista al-5 kuperää olevia hepariinejä emäksisessä väliaineessa mahdollisesti alkalimetallisuolojen ja pelkistlmen läsnäollessa. Keksinnön mukaisesti valmistetuilla hepariinijohdannaisilla on verisuonitukoksia estävä vaikutus ja myös pienentyneet verenvuoto- ja hyytymistä estävät vaikutuk-10 set.
On tunnettua, että hepariinin kaltaisia rakenten-telta voidaan muuttaa eri tavoin käsittelemällä niitä emäksisessä väliaineessa.
EP-patenttijulkaisussa 0133078 J. S. Mardiguian 15 depolymeroi hepariiniä oligosakkaridifraktioiksi, jotka sisälsivät 4-20 sakkaridiyksikköä, käsittelemällä hepariinin bentsyyliesteriä orgaanisen tai epäorgaanisen emäksen avulla konsentraation ollessa 0,1 - 0,6 M lämpötilassa 20 °C - 80 eC. Sellaisen depolymeroinnin seurauksena muo-20 dostuu uronihapon asemien 4 ja 5 välille kaksoissidos, joka voidaan havaita UV-absorptiona aallonpituudella 230 nm.
S. Hirano et ai. (Conn. Tissue Res. 3 (1975) 73-79) depolymeroivat hepariiniä ja muita glykosaminoglykaa-25 ne ja voimakkaasti emäksisessä väliaineessa käyttäen nat rium- tai bariumhydroksidin konsentraatioita 2 - 10 M lämpötilassa yli 80 °C. Näin he saavat aikaan voimakkaan depolymeroi tumi sen, jonka seurauksena glukosidisidos glukos-amiiniyksiköiden aseman 1 ja kyseessä olevan uroniyksiköi-30 den aseman 4 välillä purkaantui, ja lisäksi sellaiseen ' ’ depolymeroitumiseen liittyy kaksoissidoksen muodostuminen uronihapon asemien 4 ja 5 välille, mikä voidaan havaita UV-spektrissä aallonpituudella 225 - 230 nm esiintyvänä absorptiona.
35 P. Sampson ja K. Meyer (Proc. Nat. Acad. Sei. USA
68 (1971) 2329-2331) havaitsivat rakenteellisen muutoksen glukosamiiniyksikössä 3,6-anhydroglukosamiinin muodostu- 2 94534 essa käsiteltäessä hepariinia 1 M natriumhydroksidilla natriumboorihydridin läsnäollessa 7 tunnin ajan lämpötilassa 80 °C.
Tämän keksinnön mukaisesti valmistetut hepariini-5 johdannaiset eroavat täysin viitejulkaisuissa kuvatuista.
Itse asiassa niillä ei ole J. S. Mardiguianin ja S. Hira-non et ai. havaitsemien yhdisteiden kemiallis-fysikaalisia ominaisuuksia, kuten on osoitettu keskimääräisen molekyy-lipainon avulla, joka jää olleellisesti muuttumattomaksi 10 ja siten osoittaa depolymerointumisen puutteen, ja aallonpituudella 225 - 230 nm esiintyvän UV-absorption puutteena ja kaksoissidoksen resonanssin piikkien puuttumisena 13C-NMR-spektrissä, mikä tarkoittaa kaksoissidoksen puuttumista uronihapon asemien 4 ja 5 väliltä. Niillä ei myöskään 15 ole P. Sampsonin ja K. Meyerin eristämien yhdisteiden kemiallis-fysikaalisia ominaisuuksia, koska keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden 13C-NMR-spektrin avulla voidaan todeta glukosamiinin asemassa 6 olevan hiiliatomin asema ja intensiteetti muuttumattomiksi ja osoittaa £0 muuttumattomaksi 6-sulfatoidun hiiliatomin ja 6-desulfa-toidun hiiliatomin intensiteettisuhde, joka muuttuisi, jos kyseessä olisi 3,6-anhydroglukosamiinin muodostuminen, jolloin 6-sulfatoitu hiiliatomi ottaisi osaa anhydrojoh-dannaisen muodostumiseen.
25 Keksintö koskee menetelmää uusien hepariinijohdan- naisten valmistamiseksi, joiden 13C-NMR-spektrissä on signaalit kohdassa noin 53 ja noin 54 ppm, ominaiskiertokyky vesiliuoksessa on noin +50° - +90°, rikkipitoisuus on noin 8 - 11 % ja sulfaatti/karboksyylisuhde on noin 1,50 -30 2,20. Menetelmälle on tunnusomaista, että hepariiniainek- ** ‘ sen vesiliuosta käsitellään alkali- tai maa-alkalimetalli-emäksellä, jonka konsentraatio on noin 0,04 - 1 N, jolloin läsnä on alkali- tai maa-alkalimetallin suolaa konsentraa-tiona 0 - noin 1 N ja mahdollisesti katalyyttinen määrä 35 pelkistintä, 50 minuutin - 24 tunnin ajan lämpötilassa noin 42 - 60 °C, reaktioseos puhdistetaan mahdollisesti valuttamalla ioninvaihtohartsin läpi tai dialysoimalla ja 3 94534 näin muunnetun rakenteen omaavat yhdisteet saostetaan lisäämällä noin 2 - 4-kertainen tilavuus alkoholia, jossa on 1-3 hiiliatomia, pH:n ollessa noin neutraali.
Uusilla yhdisteillä, joilla on muunnettu hepariini-5 rakenne, on kemiallis-fysikaalisia ominaisuuksia kuten ominaiskiertokyky ja 13C-NMR-piikit, jotka ovat erilaisia kuin lähtöaineilla, ja niillä on lisäksi erilainen biologinen vaikutus, koska niillä on parempi toimintaspesifi-syys ja koska ne pysyvät käytännöllisesti katsoen muuttu-10 mattomina, tukkeumia estävä vaikutus, kun taaas verenvuo-tovaikutus ja hyytyrnisenestoteho ovat alentuneet. Erityisesti niille on tunnusomaista se, että niillä on kaksi uutta signaalia 13C-NMR-spektrissä aallonpituuksilla noin 53 ja 54 ppm ja niiden ominaiskiertokyky on kohonnut ar-15 voon noin +50° - noin +90* lähtöaineena käytettyyn hepa-riiniin nähden, kun käytetään vesiliuosta.
Hepariinirakenteen kemiallinen muuttuminen havaitaan vesiliuoksessa pH-arvoilla, jotka ovat neutraalin liuoksen arvoa suuremmat, emäksen, edullisesti alkali- tai 20 maa-alkalimetallisuolan, ja pelkistimen, edullisesti nat-riumboorihydridin, läsnäollessa.
Reaktio toteutetaan 50 minuutin - 24 tunnin aikana lämpötilassa noin 42 - 60 °C käyttäen emäskonsentraatioi-ta noin 0,04 N - 1 N ja suolakonsentraatioita 0 - noin 1 N 25 mahdollisesti pelkistimen, kuten esimerkiksi natriumboori-hydridin, läsnäollessa.
Menetelmässä käytetään alkali- tai maa-alkalimetal-liemäksiä ja -suoloja, pääasiassa natriumin, kaliumin, kalsiumin, magnesiumin ja bariumin.
30 Natriumin, kaliumin ja bariumin hydroksidit ovat emäksiä, joita voidaan käyttää edullisesti.
Natriumin, kaliumin, bariumin, kalsiumin ja magnesiumin asetaatit ja kloridit ja natriumin, kaliumin ja magnesiumin sulfaatit ovat suoloja, joita voidaan käyttää 35 edullisesti.
Menetelmä hepariinirakenteen muuttamiseksi toteutetaan liuottamalla hepariinimateriaali alkali- tai maa-al- 4 94534 kaliemäksen OH:n suhteen noin 0,04 N - 1 N vesiliuokseen, niin että läsnä on mahdollisesti alkali- tai maa-alkalime-tallisuolaa konsentraationa 1 N tai sen alle ja katalyyttinen määrä pelkistintä, ja termostoimalla liuos läm-5 pötilaan noin 42 - 60 °C aikaväliksi noin 50 minuuttia -24 tuntia.
Reaktion päätyttyä liuos jäähdytetään huoneenlämpö-tilaan, tehdään neutraaliksi ja mahdollisesti puhdistetaan esimerkiksi ioninvaihtohartsin tai dialyysin avulla ja lo-10 puksi muutettu hepariinijohdannainen seostetaan lisäämällä noin 2 - 4-kertainen tilavuus, edullisesti 2,5-kertainen tilavuus alkoholia, joka sisältää 1-3 hiiliatomia, kuten etyylialkoholia.
Tämän menetelmän mukaisesti valmistetuilla muunne-15 tuilla hepariineillä on joitakin tyypillisiä kemiallis-fysikaalisia ominaisuuksia, jotka ovat täysin erilaisia kuin viitejulkaisuista tunnettujen emäskäsittelyjen avulla saadut. Tämä johtuu tässä keksinnössä käytetyistä reaktio-olosuhteista, joissa parametrien arvot, ennen kaikkea e-20 mäskonsentraatio, lämpötila ja mahdollinen suolan mukana olo, poikkeavat merkittävästi edellä käytetyistä.
Uusien hepariinijohdannaisten rakenteelliset muutokset on periaatteessa osoitettu 13C-NMR-spektrin resonanssien aseman ja suhteellisen intensiteetin avulla ja 25 myös elektroforeettisen käyttäytymisen perusteella, omina! skiertokyvin arvojen kohoamisena ja rikkipitoisuuden ja sulfaatti/karboksyyli-suhteen pienenemisenä, kun karbok-syylin määrä pysyy muuttumattomana.
Vielä tyypillisemmät muutokset uusien hepariinijoh-30 dannaisten rakenteessa on todettu tutkimalla perinpohjai-** siä muutoksia, joita esiintyy 13C-NMR-spektrissä. Nämä muu- tokset koskevat joitakin erityisiä spektrin vyöhykkeitä, ja niihin kuuluu sekä uusien piikkien ilmestyminen että muiden piikkien muuntuminen. Huomionarvoista on kahden 35 uuden signaalin ilmestyminen arvoille noin 53 ja noin 54 ppm ja iduroni- ja glukosamiiniyksikön hiiliatomia 1 vastaavien piikkien siirtyminen vyöhykkeellä 92 ppm - 5 94534 102 ppm. Uusien yhdisteiden ja lähtöaineina käytettyjen yhdisteiden 13C-NMR-spektrien vertailu tekee mahdolliseksi vahvistaa, että jotkin spektrin osat ovat muuttumattomia ja että sen perusteella jotkin osat hepariinin rakenteesta 5 eivät ole muuttuneet lainkaan. Erityisesti sulfatoidun tai desulfatoidun glukosamiiniyksikön asemaa 6 vastaavat signaalit eivät ole muuttuneet. Lisäksi sulfatoitujen tai asyloitujen glukosamiiniyksiköiden asemaa 2 vastaavat piikit, iduronihapon karboksyyliryhmää vastaavaat piikit ja 10 glukuronihappoyksikköjä, jotka hepariinissa muodostavat keskimäärin 20 % uroniryhmistä, vastaavat piikit ovat muuttumattomia.
Mitä enemmän muuttuneita ovat uusien hepariinijohdannaisten kemiallis-fysikaaliset ominaisuudet, sitä voi-15 makkaammin vaikuttavia ovat reaktio-olosuhteet, kuten voidaan päätellä jäljempänä esitetyistä esimerkeistä. Sen vuoksi reaktion parametrien muuntaminen tekee mahdolliseksi valmistaa yhdisteitä, joiden rakenne on muuttunut enemmän tai vähemmän.
2C Kemiallisen muuttumisen määrä voidaan laskea mää rittämällä suhde summalle, joka saadaan laskemalla yhteen arvoilla noin 53 ppm ja noin 54 ppm esiintyvien piikien integraalit, ja summalle, joka saadaan laskemalla yhteen glukosamiiniyksikön arvoilla noin 62,5 ppm ja noin 69 ppm 25 esiintyvien piikkien integraalit, joista jälkimmäisiä pidetään sopivina referenssiarvoina, koska niiden intensiteetti pysyy vakiona ja koska ne ovat spektrivyöhykkeellä, jossa ei ole muita piikkejä. Samanaikaisesti kun resonanssit arvoilla noin 53 ppm ja noin 54 ppm kohoavat, tapah-30 tuu myös kiertokyvyn kasvu aallonpituudella 589 nm (nat- [ riumin D-viiva), ja sen vuoksi ominaiskiertokyvyn mittaus-» ta voidaan suoraan käyttää hepariinin rakenteessa tapahtuvan kemiallisen muutoksen asteen määrittämiseen. Koska mahdollisia aktiivisia reagensseja ei reaktioväliaineessa 35 käytetä, kiertokyvyn mittausta voidaan suoraan käyttää reaktion kulun tarkasteluun.
6 94534
Sekä 13C-NMR-spektrin piikkien integraalien suhde että ominaiskiertokyvyn kasvu lähtöaineeseen verrattuna on esitetty seuraavassa taulukossa 1.
Taulukko 1 5
Esimerkki Piikkien pinta-ala Muutettujen ja alkuperäis-arvoilla 53 ja 54 ppm ten hepariinien ominais-Piikkien pinta-ala kiertokyvyn ero [a]D20 arvoilla 62,5 ja 69 ppm 10 5 0,15 + 5° 6 0,25 + 7° 7 0,30 + 7° 4 0,45 +10° 1 0,55 +18° 15 2 0,75 +22° 3 1,20 +29° Nämä muunnetut hepariinit ovat lisäksi tunnettuja siitä, että niillä on erilainen elektroforeettinen käyt-20 täytyminen kuin lähtöaineina käytetyillä yhdisteillä, tunnettuja suuremmasta liikkuvuudesta 0,1 M bariumasetaat-tipuskurissa pH-arvolla 5,8 [P. Oreste, G.Torri, J. Chrom.
195 (1980) 398] ja siitä, että niiden rikkipitoisuus on noin 8 % - noin 11 %, sulfaatti/karboksyyli-suhde noin 25 1,50 - 2,20 ja ominaiskiertokyky [a]D20 noin +50° - noin +90°, kuten käy ilmi seuraavasta taulukosta 2, jossa suluissa on esitetty vastaavien lähtöaineina käytettyjen yhdisteiden arvot.
• ► .
»
il IU L Hill Hill I
7 94534
Taulukko 2
Esimerkki % sulfaatteja Sulfaattl/karbok- [a]D20 syylisuhde 5 5 10,31 (11,40) 2,17 (2,27) +50° (+45°) 6 10,69 (11,60) 2,15 (2,32) +54“ (+47“) 7 9,70 (11,00) 1,90 (2,00) +51“ (+44“) 4 9,65 (10,56) 2,03 (2,30) +57“ (+47“) 1 8,95 (10,56) 1,94 (2,20) +57° (+47“) 10 2 8,42 (10,09) 1,64 (2,13) +65“ (+43“) 3 8,12 (10,09) 1,56 (2,13) +72“ (+43°)
Uusilla hepariinijohdannaisilla on selvä tukkeumia estävä vaikutus yhdessä alentuneen hyytymiä estävän vaiku-15 tuksen kanssa lähtöaineena käytettyyn hepariiniin verrattuna. Niiden biologista aktiivisuutta määritettiin käyttäen monia tyypillisiä hepariinin testejä; suoritettiin anti-Xa-tekijätesti, APTT-testi, verenvuotoaikatesti ja kokeelliselta verisuonitukokselta suojaamistesti. APTT-20 aktiivisuus määritettiin M. J. Larrieun ja G. Weilandin julkaisussa Rev. Hematol. 12 (1957) 199 esittämän menetelmän mukaisesti, kun taas anti-Xa-aktiivisuus määritettiin E. T. Yinin ja S. Wesslerin julkaisussa Biochem. Biophys.
Acta 201 (1970) 387 esittämän menetelmän mukaisesti.
25 Jokainen tutkittu yhdiste liuotettiin paastonneiden rottien plasmaan ja sen jälkeen suoritettiin laimennukset menetelmän edellyttämien pitoisuuksien saavuttamiseksi. Suoritettiin kymmenen määritystä kunkin yhdisteen molemmille aktiivisuuksille ja määrä, joka aiheuttaa erittäin 30 merkittävän muutoksen vastaavassa testissä, laskettiin ,· yksiköinä pg/ml. Erityisesti kunkin tuotteen aktiivisuus määritettiin konsentraationa, joka vastaavasti kaksinkertaistaa APTT-ajan ja joka suurentaa anti-Xa-arvoa 30 %, käyttäen yksiköinä pg/ml. Näissä kahdessa testissä saadut β 94534 arvot (ks. taulukko 3) osoittavat, että uudet yhdisteet pienentävät hyytymistä estävää vaikutusta.
Verenvuotoaika määritettiin rottien avulla käyttäen menetelmää, jonka E. Denaja et ai. ovat esittäneet julkai-5 sussa Thromb. Haemost. 48 (1982) 108, ja tulos määritettiin laskemalla prosentuaalinen verenvuotoajan piteneminen rotilla, joille oli annettu uusia hepariinejä, verrattuna verenvuotoajan pitenemiseen rotilla, jotka ovat saaneet vastavaa lähtöaineena käytettyä hepariinia, kun jälkim-10 mäisten arvoksi on merkitty 100 %. Kaikilla muunnetun he-pariinirakenteen omaavilla uusilla johdannaisilla, on u-sein hyvin merkittävä verenvuotoajan lyheneminen verrattuna vastaaviin lähtöaineina käytettyihin hepariineihin.
Tukoksia estävää vaikutusta tutkittiin käyttäen 15 laskimotukostilatestiä, jonka S. Reyers et ai. ovat esittäneet julkaisussa Thromb. Res. 18 (1980) 669-674. Uusilla yhdisteillä aikaan saatu suoja laskettiin prosentteina antamalla arvo 100 tukoksia estävälle vaikutukselle, joka on lähtöaineina käytetyillä hepariineillä.
20 Saadut tulokset osoittavat kahden hepariinisarjan tulosten samanlaisuutta tässä tukoksia estävän vaikutuksen testissä.
Edellä kuvattujen biologisten testien arvot on esitetty seuraavassa taulukossa 3, jossa vastaavien lähtöai-25 neina käytettyjen hepariinien anti-Xa- ja APTT-arvot on esitetty suluissa.
• « · · «·*.* !*«· l*i rn-m . i 9 94534
Taulukko 3
Anti-Xa-aktii- APTT-aktiivi- Vuotoaika; Antitrom-visuus; Yhdis- suus; Yhdis- % pidenty- bootti- 5 teen teen määrä, nen hepa- nen suo-
Esim. määrä, joka joka kaksin- riiniläh- jaus-% lisää anti-Xa- kertaistaa töaineen heparii- arvoa APTT-ajan suhteen nilähtö- 30 % (yg/ml) (pg/ml) aineeseen 10 verrattuna 1 30,2 (20,6) 4,2 (1,7) 22 100 2 33,7 (18,6) 8,9 (1,9) 83 117 3 43,5 (18,6) 16,3 (1,9) 11 53 15 4 18,1 (20,6) 4,8 (1,7) 60 75 5 21,0 (16,5) 11,5 (10,8) 9 113 6 44,0 (40,6) 8,8 (8,5) 30 113 7 19,6 (18,2) 2,6 (2,0) 30 88 : 20 Edellä havainnolistettujen farmakologisten ominai suuksien kannalta näitä uusia hepariinijohdannaisia voidaan käyttää hoidettaessa verisuonitukossairauksia. Edulliset antotavat ovat parenteraalinen ja ihonalainen antotapa steriilinä vesiliuoksena, joka mahdollisesti sisäl-25 tää myös joitakin suoloja liuoksen saattamiseksi isotoni-* seksi ja joitakin säilöntäaineita.
Annostelualue riippuu käytetyistä farmaseuttisista koostumuksista ja potilaan tilasta; edullisesti heparii-nijohdannaista annetaan määrä, joka vastaa 5000 - 20000 30 yksikköä anti-Xa-tekijää (U.A. Xa), kerran tai useammin päivässä.
Lähtöaineina voidaan käyttää eri alkuperää olevia hepariinimateriaaleja. Esimerkiksi kaupallisia hepariineja ja hepariineja, joita on saatu puhdistamalla kaupallisia 35 hepariineja, sekä pienen molekyylipainon omaavia hepariineja, joita saadaan depolymeroimalla alalla tunnettuja menetelmiä käyttäen, käytettiin nyt kuvattujen muunnettujen hepariinien valmistamiseksi. Seuraavassa esitetään 10 94534 tässä keksinnössä lähtöaineina käytettyjä hepariinimate-riaaleja.
Natriumhepariini ALFA 87-78 25 g kaupallista natriumhepariinia liuotetaan 2000 5 ml:an vettä ja kaadetaan noin 30 min:n aikana liuokseen, joka sisältää 111,2 g kalsiumasetaatti-monohydraattia 2000 ml:ssa vettä, 57 ml etikkahappoa ja 600 ml etyylialkoholia, niin että lämpötila pysyy arvossa noin 8 - 10 °C. Saatu suspensio suodatetaan 15 tunnin kuluttua lämpötilas-10 sa 5 "C ja suodos lisätään 1000 ml:an etyylialkoholia ja 3 tunnin kuluttua lämpötilassa 5 °C saatu saostuma suodatetaan. Sen jälkeen saostuma liuotetaan 200 ml:an vettä, liuoksen pH säädetään arvoon 7,0 1 M natriumhydroksidin avulla ja käsitellään sen jälkeen 100 ml:11a natriummuo-15 dossa olevaa hartsia Dowex 50W X8 ja 70 ml:11a vettä 20 min:n ajan. Liuos ja hartsi siirretään kromatografointi-pylvääseen (halk. 1,6 cm, h = 10 cm), joka sisältää 80 ml samaa hartsia. Kun liuos on valunut massan läpi ja massaa on eluoitu tislatulla vedellä, kunnes liuoksen kokonaisti-*20 lavuus on 400 ml, mainittu liuos lisätään 12 g:an natrium-asetaatti-trihydraattia ja 1000 ml:an etyylialkoholia. Saostuma suodatetaan ja kuivataan alennetussa paineessa, jolloin saadaan 19,2 g puhdistettua natriumhepariinia ALFA 87-78, jolla on seuraavat kemiallis-fysikaaliset ominai-.25 suudet: S = 10,09 %, sulfaatti/karboksyyli-suhde = 2,13, [a]D20 = +43° (C - 1 % vedessä) 13C-NMR-spektri (ppm): 177,3; 104,7; 102,0; 99,4; 80,0; 78,6; 72,3; 71,9; 69,0; 62,5; 60,6.
30 Natriumhepariini ALFA 87-81 l. Tuotetta saatiin käyttäen samaa puhdistusmenetelmää kuin tuotteelle ALFA 87-78 ja käyttäen lähtöaineena 50 g kaupallista hepariinia.
Saatiin 36,5 g puhdistettua hepariinia, jolla oli 35 seuraavat fysikaalis-kemialliset ominaisuudet: 11 94534 S = 10,56 %; sulfaatti/karboksyyli-suhde * 2,20 [α]30 = +47° (C - 1 % vedessä) 13C-NMR-spektri (ppm): 177,3; 104,7; 102,0; 99,5; 80,1; 78,6; 72,4; 72,0; 69,1; 62,7; 60,7.
5 Kaupallinen natriumheparlini
Kyseessä on hepariini, jolla on seuraavat kemiallis- fysikaaliset ominaisuudet: S « 11,0 %; sulfaatti/karboksyyli-suhde * 2 [a]30 - +44* (C - 1 % vedessä) 10 13C-NMR-spektri (ppm): 177,4; 104,6; 101,9; 99,8; 79,9; 78,6; 72,2; 71,8; 69,0; 62,6; 60,6.
Pienen molekyylipainon omaava natriumheparlini LMW ALFA 86-02
Pienen molekyylipainon omaava natriumheparlini LMW 15 ALFA 86-02 valmistettiin depolymeroimalla vetyperoksidilla kupari(II)-ionien läsnä ollessa käyttäen menetelmää, joka on esitetty kansainvälisessä patenttijulkaisussa W0 86/ 06729.
Tuotteella on seuraavat kemiallis-fysikaaliset omi-20 naisuudet: keskimääräinen molekyylipaino: 4200 daltonia S = 11,40 %; sulfaatti/karboksyyli-suhde = 2,27 20 [a]£ = +45° (C » 1 % vedessä) 13C-NMR-spektri (ppm): 177,4; 104,5; 101,9; 99,8; 25 79,9; 78,6; 72,2; 71,9; 69,1; 62,7; 60,7.
Pienen molekyylipainon omaava natriumheparlini LMW ALFA 87-198
Pienen molekyylipainon omaava natriumheparlini LMW ALFA 87-198 valmistettiin depolymeroimalla LMW 86-02:n 30 valmistamiseksi esitetyn menetelmän mukaisesti.
.* Tuotteella on seuraavat kemiallis-fysikaaliset omi naisuudet: S = 11,60 %; sulfaatti/karboksyyli-suhde = 2,32 [a]p® = +47° (C = 1 % vedessä) 35 13C-NMR-spektri (ppm): 177,7; 104,8; 102,0; 99,6; 12 94534 80,2; 78,6; 72,4; 71,9; 69,2; 62,7; 60,6.
Ominaiskiertokyvyn [a]D20 arvojen määritykset suoritettiin 1-prosenttisessa vesiliuoksessa.
Sulfaatti/karboksyyli-suhteen määritys suoritettiin 5 potentiometrisesti.
Rikin määrä prosentteina määritettiin sekä potentiometrisesti että Schoenigerin menetelmää käyttäen.
13C-NMR-spektrit määritettiin taajuudella 75,47 MHz spektrometrillä Varian CFT-75 käyttäen liuottimena D20:ta 10 ja sisäisenä vertailuaineena 3-trimetyylisilyylipropaani- sulfonaattia.
Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä.
Esimerkki 1 1.8 g hepariinia ALFA 87-81 lisätään 45 mitan vesi-15 liuosta, joka sisältää 0,4 g natriumhydroksidia (0,225 N), 2,3 g natriumasetaattia (0,625 N) ja 10 mg natriumboori-hydridiä. Saatua liuosta pidetään 3,5 tunnin ajan lämpötilassa 60 °C, sen jälkeen se jäähdytetään huoneen lämpöti-.. laan, tehdään neutraaliksi jääetikalla ja sekoitetaan 2,5- *20 kertaiseen tilavuuteen etanolia. Saostuma suodatetaan, pestään suodattimena käyttäen etanolin ja veden seosta (6:1) ja kuivataan. Saadaan 1,7 g tuotetta, jolla on 13C-NMR-spektri, jossa on karakteristiset viivat seuraavilla δ-arvoilla (ppm): 177,3; 104.3; 101,9; 99,4; 98,4; 97,2; 25 96,8; 79,7; 79,1; 78,5; 72,1; 71,8; 71,2; 68,8; 62,4; 60,6; 60,3; 54,1; 53,1.
Esimerkki 2 1.8 g hepariinia ALFA 87-78 lisätään 45 ml:an vesi-liuosta, joka sisältää 0,4 g natriumhydroksidia (0,225 N), 3C 2,3 g natriumasetaattia (0,625 N) ja 10 mg natriumboori-hydridiä. Saatua liuosta pidetään 15 tunnin ajan lämpötilassa 60 °C, sen jälkeen se tehdään neutraaliksi etikkaha-polla ja sitten se valutetaan kolonnin (halk. 1,2 cm, h = 8 cm) läpi, joka sisältää anionihartsin Dowex 1x2 klori- 13 94534 dimuotoa. Läpi mennyt liuos ja pesuliuokset kootaan yhteen ja lisätään 2,5-kertainen tilavuus etanolia. Saostuma suodatetaan, pestään suodattimena käyttäen etanolin ja veden seosta (6:1) ja kuivataan. Saadaan 1,65 g tuotetta, jolla 5 on 13C-NMR-spektri, jossa on karakteristiset viivat seu-raavilla δ-arvoilla (ppm): 177,4; 104,6; 101,8; 98,6; 97,2; 96,8; 79,1; 78,9; 72,2; 71,5; 71,2; 68,8; 62,5; 60,3; 54,1; 53,1.
Esimerkki 3 10 1,8 g hepariinia ALFA 98-78 lisätään 120 ml:an ve siliuosta, joka sisältää 4,8 g (1 N) natriumhydroksidia. Liuosta pidetään 3,5 tunnin ajan lämpötilassa 60 °C, tehdään neutraaliksi etikkahapolla ja seosta dialysoidaan yön ajan virtaavalla vedellä ja 6 tunnin ajan tislatulla ve-15 dellä. Sen jälkeen liuokseen sekoitetaan 3,5 g natriumase-taattia, tehdään neutraaliksi etikkahapolla ja sekoitetaan 2,5-kertaiseen tilavuuteen etanolia. Saostuma suodatetaan, pestään käyttäen etanolin ja veden seosta (6:1) ja kuivataan. Saadaan 1,7 g tuotetta, jolla on 13C-NMR-spektri, ‘20 jossa on karakteristiset viivat seuraavilla 6-arvoilla (ppm): 177,4; 104,6; 101,7; 98,6; 98,4; 97,2; 96,8; 79,7; 79,1; 78,6; 73,5; 72,5; 72,3; 72,1; 71,5; 68,8; 62,6; 60,4; 60,2; 54,0; 53,1.
Esimerkki 4 , 25 4 g hepariinia ALFA 87-81 lisätään 120 ml:an vesi- liuosta, joka sisältää 4,8 g natriumhydroksidia (IN), 6,2 g natriumasetaattia (0,625 N) ja 25 mg natriumboorihydri-diä. Reaktioseosta pidetään 3,5 tunnin ajan lämpötilassa 60 °C, sen jälkeen se tehdään neutraaliksi etikkahapolla, 30 dialysoidaan 24 tunnin ajan virtaavalla vedellä ja valute-: taan kolonnin (halk. 1,6 cm, h - 15 cm) läpi, joka sisäl tää anionihartsin Dowex 1x4 kloridimuotoa. Läpi mennyt liuos ja pesuliuokset sekoitetaan 4 g:n kanssa natriumasetaattia ja 2,5-kertaisen tilavuuden kanssa etanolia. Saos-35 tuma suodatetaan ja pestään suodattimena käyttäen etano- 1Λ 94534 14
Iin ja veden seosta (6:1) ja kuivataan. Saadaan 3,55 g tuotetta, jolla on 13C-NMR-spektri, jossa on karakteristiset viivat seuraavilla 6-arvoilla (ppm): 177,4; 104,5; 101,8; 99,4; .98,7; 97,1; 79,5; 78,6; 73,5; 71,8; 68,8; 5 62,4; 60,3; 54,0; 53,1.
Esimerkki 5 1,8 g hepariinia LMW ALFA 86-02 lisätään 50 ml:an vesiliuosta, joka sisältää 0,08 g natriumhydroksidia (0,04 N), 2,6 g natriumasetaattia (0,625 N) ja 10 mg nat-10 riumboorihydridiä. Saatua liuosta pidetään 210 minuutin ajan lämpötilassa 60 "C, sen jälkeen se jäähdytetään huoneenlämpötilaan ja valutetaan ensin kolonnin (halk. 1,2 cm, h = 10 cm) läpi, joka sisältää anionihartsin Dowex 1 x 4 OH-muotoa ja sen jälkeen kolonnin läpi, joka sisältää 15 kationihartsin Dowex 50 WX8 H1-muotoa (halk. 1,2 cm, h = 10 cm). Läpi mennyt liuos ja pesuliuokset neutraloidaan käyttäen natriumhydroksidin 2 N vesiliuosta ja sen jälkeen sekoitetaan 4 g:n kanssa natriumasetaattia ja 2,5-kertai-sen tilavuuden kanssa etanolia. Saatu saostuma pestään ‘20 käyttäen etanolin ja veden seosta (6:1) ja kuivataan. Saadaan 1,4 g tuotetta, jolla on 13C-NMR-spektri, jossa on karakteristiset viivat seuraavilla δ-arvoilla (ppm): 177,4; 104,6; 101,9; 98,6; 98,4; 97,2; 96,8; 79,9; 78,6; 72,3; 71,9; 68,8; 62,6; 60,3; 54,1; 53,1.
25 Esimerkki 6 10 g hepariinia LMW ALFA 87-198 lisätään 300 ml:an vesiliuosta, joka sisältää 2,7 g natriumhydroksidia (0,225 N), 15 g natriumasetaattia (0,625 N) ja 60 mg nat-riumboorihydridiä. Saatua liuosta pidetään 50 minuutin 30 ajan lämpötilassa 60 °C, jäähdytetään huoneenlämpötilaan, *. laimennetaan 500 ml:ksi tislatulla vedellä ja valutetaan ensin kolonnin (halk. 2 cm, h = 15 cm) läpi, joka sisältää anionihartsin Dowex 1x2 0H-muotoa, ja sen jälkeen kolonnin läpi, joka sisältää kationihartsin Dowex 50 WX8 35 H1-muotoa (halk. 2 cm, h = 15 cm). Läpi mennyt liuos ja I ift-i- Kili I ! 4 #1 is 94534 pesuliuokset neutraloidaan käyttäen 4 M natriumhydroksidin vesiliuosta ja sen jälkeen sekoitetaan 20 g:n kanssa nat-* riumasetaattia ja 2,5-kertaisen tilavuuden kanssa etano lia. Saatu saostuma pestään käyttäen etanolin ja veden 5 seosta (6:1) ja kuivataan. Saadaan 9,1 g tuotetta, jolla on 13C-NMR-spektri, jossa on karakteristiset viivat seu-raavilla δ-arvoilla (ppm): 177,4; 104,6; 101,9; 99,8; 98,6; 98,4; 97,2; 96,8; 79,6; 78,6; 72,2; 71,8; 68,9; 62,5; 60,3; 54,1; 53,1.
10 Esimerkki 7 15 g kaupallista hepariinia lisätään 600 ml: an vesiliuosta, joka sisältää 5,4 g natriumhydroksidia (0,225 N), 30 g natriumasetaattia (0,625 N) ja 120 mg natriumboo-rihydridiä. Liuosta pidetään 4 tunnin ajan lämpötilassa 15 42 °C, jäähdytetään huoneenlämpötilaan ja tehdään neut raaliksi etikkahapolla. Liuosta dialysoidaan yön ajan vir-taavalla vedellä ja sen jälkeen valutetaan kolonnin (halk.
2,8 cm, h s 15 cm) läpi, joka sisältää anionihartsin Dowex 1x2 kloridimuotoa. Läpi mennyt liuos ja pesuliuokset se-20 koitetaan 10 g:n kanssa natriumasetaattia, pH säädetään arvoon 7 käyttäen natriumhydroksidin 2 N vesiliuosta ja sekoitetaan 2,5-kertaisen tilavuuden kanssa etanolia.
Saatu saostuma pestään käyttäen etanolin ja veden seosta (6:1) ja kuivataan. Saadaan 13,9 g tuotetta, jolla on “οι 25 NMR-spektri, jossa on karakteristiset viivat seuraavilla δ-arvoilla (ppm): 177,3; 104,6; 101,9; 99,8; 98,6; 98,4; 97,2; 96,8; 79,9; 78,6; 72,2; 71,8; 69,0; 62,5; 60,3; 54,1; 53,1.
Esimerkki 8 30 Parenteraaliseen käyttöön tarkoitettu lääke sisäl- : tää: - esimerkin 1 mukaisesti muunnettua hepariinia 10 000 U.A.Xa - F.U. natriumkloridia F.U. 5 mg 35 - B.P. bentsyylialkoholia 8 mg - kahdesti tislattua steriiliä vettä 1 ml
Claims (6)
16 94534
1. Menetelmä uusien hepariinijohdannaisten valmistamiseksi, joiden 13C-NMR-spektrissä on signaalit kohdassa 5 noin 53 ja noin 54 ppm, ominaiskiertokyky vesiliuoksessa on noin +50® - +90°, rikkipitoisuus on noin 8 - 11 % ja sulfaatti/karboksyylisuhde on noin 1,50 - 2,20, tunnettu siitä, että hepariiniaineksen vesiliuosta käsitellään alkali- tai maa-alkalimetalliemäksellä, jonka kon- 10 sentraatio on noin 0,04 - 1 N, jolloin läsnä on alkali-tai maa-alkalimetallin suolaa konsentraationa 0 - noin 1 N ja mahdollisesti katalyyttinen määrä pelkistintä, 50 minuutin - 24 tunnin ajan lämpötilassa noin 42 - 60 °C, reaktioseos puhdistetaan mahdollisesti valuttamalla ionin- 15 vaihtohartsin läpi tai dialysoimalla ja näin muunnetun rakenteen omaavat yhdisteet saostetaan lisäämällä noin 2 -4-kertainen tilavuus alkoholia, jossa on 1 - 3 hiiliatomia, pH:n ollessa noin neutraali. .. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n- "20 n e t t u siitä, että emäs on natrium-, kalium- tai ba-riumhydroksidi.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että suola on natrium-, kalium-, barium-, kalsium- tai magnesiumkloridi tai -asetaatti tai 2. natrium-, kalium- tai magnesiumsulfaatti.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että pelkistin on natriumboorihydridi.
5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yhdisteet saostetaan lisäämällä 30 noin 2,5-kertainen tilavuus etyylialkoholia. i
91 IN t I ! Hft i 17 94534
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT350488 | 1988-06-10 | ||
| IT8803504A IT1234508B (it) | 1988-06-10 | 1988-06-10 | Derivati eparinici e procedimento per la loro preparazione |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI892850A0 FI892850A0 (fi) | 1989-06-09 |
| FI892850L FI892850L (fi) | 1989-12-11 |
| FI94534B FI94534B (fi) | 1995-06-15 |
| FI94534C true FI94534C (fi) | 1995-09-25 |
Family
ID=11108618
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI892850A FI94534C (fi) | 1988-06-10 | 1989-06-09 | Menetelmä uusien hepariinijohdannaisten valmistamiseksi |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5010063A (fi) |
| EP (1) | EP0347588B1 (fi) |
| JP (1) | JPH0739442B2 (fi) |
| KR (1) | KR960015110B1 (fi) |
| AT (1) | ATE109164T1 (fi) |
| CA (1) | CA1309402C (fi) |
| DE (2) | DE347588T1 (fi) |
| DK (1) | DK173818B1 (fi) |
| ES (1) | ES2012748T3 (fi) |
| FI (1) | FI94534C (fi) |
| GR (1) | GR900300018T1 (fi) |
| IE (1) | IE64830B1 (fi) |
| IL (1) | IL90411A (fi) |
| IT (1) | IT1234508B (fi) |
| NO (1) | NO174259C (fi) |
| NZ (1) | NZ229212A (fi) |
| PT (1) | PT90817B (fi) |
| ZA (1) | ZA893882B (fi) |
Families Citing this family (46)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IT1234508B (it) * | 1988-06-10 | 1992-05-19 | Alfa Wassermann Spa | Derivati eparinici e procedimento per la loro preparazione |
| IT1234826B (it) * | 1989-01-30 | 1992-05-29 | Alfa Wassermann Spa | Derivati eparinici e procedimento per la loro preparazione |
| US5232040A (en) * | 1990-07-12 | 1993-08-03 | Lanxide Technology Company, Lp | Method for reducing metal content of self-supporting composite bodies and articles formed thereby |
| IT1243987B (it) * | 1990-10-29 | 1994-06-28 | Derivati Organici Lab | Procedimento per la preparazione di epossi-eparidi prodotti ottenuti ecomposizioni farmaceutiche che li contengono |
| IT1254216B (it) * | 1992-02-25 | 1995-09-14 | Opocrin Spa | Derivati polisaccaridici di eparina, eparan solfato, loro frazioni e frammenti, procedimento per la loro preparazione e composizioni farmaceutiche che li contengono |
| IT1260136B (it) * | 1992-04-17 | 1996-03-28 | Alfa Wassermann Spa | Glicosaminoglicani semisintetici contenenti acido alfa-l-galatturonicosostituito con radicali nucleofili in posizione 3 |
| IT1260137B (it) * | 1992-04-17 | 1996-03-28 | Alfa Wassermann Spa | Glicosaminoglicani semisintetici a struttura eparinica od eparanica modificati nella posizione 2 dell'acido alfa-l-iduronico-2-0-solfato |
| US6750207B1 (en) * | 1992-05-01 | 2004-06-15 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Compositions for the regulation of cytokine activity |
| US5861382A (en) * | 1992-05-01 | 1999-01-19 | Yeda Research And Development Co. Ltd. | Methods for regulation of active TNF-α |
| US5696100A (en) * | 1992-12-22 | 1997-12-09 | Glycomed Incorporated | Method for controlling O-desulfation of heparin and compositions produced thereby |
| US5296471A (en) * | 1992-12-22 | 1994-03-22 | Glycomed Incorporated | Method for controlling o-desulfation of heparin and compositions produced thereby |
| IT1264101B1 (it) * | 1993-03-29 | 1996-09-10 | Alfa Wassermann Spa | Processo per la sintesi di glicosaminoglicani semisintetici a struttura eparinica od eparanica modificati nella posizione 2 |
| IT1264102B1 (it) * | 1993-03-29 | 1996-09-10 | Alfa Wassermann Spa | Processo per la sintesi di glicosaminoglicani semisintetici contenenti acido alfa-l-galatturonico sostituito con radicali |
| US20020055710A1 (en) | 1998-04-30 | 2002-05-09 | Ronald J. Tuch | Medical device for delivering a therapeutic agent and method of preparation |
| FR2723847A1 (fr) * | 1994-08-29 | 1996-03-01 | Debiopharm Sa | Compositions antithrombotiques et non hemorragiques a base d'heparine, procede pour leur preparation et applications therapeutiques. |
| US5763427A (en) * | 1995-03-31 | 1998-06-09 | Hamilton Civic Hospitals Research Development Inc. | Compositions and methods for inhibiting thrombogenesis |
| US6001820A (en) * | 1995-03-31 | 1999-12-14 | Hamilton Civic Hospitals Research Development Inc. | Compositions and methods for inhibiting thrombogenesis |
| US5744457A (en) * | 1995-03-31 | 1998-04-28 | Hamilton Civic Hospitals Research Development Inc. | Compositions and methods for inhibiting thrombogenesis |
| WO1997016556A1 (en) | 1995-10-30 | 1997-05-09 | Massachusetts Institute Of Technology | Rationally designed polysaccharide lyases derived from heparinase i |
| US5767269A (en) * | 1996-10-01 | 1998-06-16 | Hamilton Civic Hospitals Research Development Inc. | Processes for the preparation of low-affinity, low molecular weight heparins useful as antithrombotics |
| IL129877A (en) * | 1996-11-27 | 2004-08-31 | Aventis Pharm Prod Inc | A pharmaceutical preparation containing a component having an Xa antagonist activity and an antifouling agent |
| US6106454A (en) * | 1997-06-17 | 2000-08-22 | Medtronic, Inc. | Medical device for delivering localized radiation |
| US6203536B1 (en) | 1997-06-17 | 2001-03-20 | Medtronic, Inc. | Medical device for delivering a therapeutic substance and method therefor |
| US6013099A (en) * | 1998-04-29 | 2000-01-11 | Medtronic, Inc. | Medical device for delivering a water-insoluble therapeutic salt or substance |
| EP1109919A2 (en) * | 1998-08-27 | 2001-06-27 | Massachusetts Institute Of Technology | Rationally designed heparinases derived from heparinase i and ii |
| US7056504B1 (en) | 1998-08-27 | 2006-06-06 | Massachusetts Institute Of Technology | Rationally designed heparinases derived from heparinase I and II |
| WO2000065521A2 (en) * | 1999-04-23 | 2000-11-02 | Massachusetts Institute Of Technology | System and method for polymer notation |
| EP1192187A1 (en) * | 1999-06-30 | 2002-04-03 | Hamilton Civic Hospitals Research Development, Inc. | Heparin compositions that inhibit clot associated coagulation factors |
| AU2001243512C1 (en) | 2000-03-08 | 2008-04-17 | Massachusetts Institute Of Technology | Heparinase III and uses thereof |
| US7259152B2 (en) | 2000-06-07 | 2007-08-21 | Alfa Wasserman, Inc. | Methods and compositions using sulodexide for the treatment of diabetic nephropathy |
| US20040038932A1 (en) * | 2000-09-08 | 2004-02-26 | Jack Hirsh | Antithrombotic compositions |
| DK1319183T3 (da) | 2000-09-12 | 2009-05-18 | Massachusetts Inst Technology | Fremgangsmåder og produkter relateret til heparin med lav molekylvægt |
| EP1328260A2 (en) * | 2000-10-18 | 2003-07-23 | Massachusetts Institute Of Technology | Methods and products related to pulmonary delivery of polysaccharides |
| US7285536B2 (en) * | 2001-12-05 | 2007-10-23 | Yeda Research And Development Co., Ltd. | Anti-cancer therapeutic compounds |
| JP4828795B2 (ja) | 2002-03-11 | 2011-11-30 | モメンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド | 硫酸化多糖類の分析 |
| ITMI20031679A1 (it) * | 2003-08-29 | 2005-02-28 | Opocrin Spa | Processo per la produzione di eparine a basso peso |
| EP1582531A1 (en) | 2004-03-24 | 2005-10-05 | Aventis Pharma S.A. | Process for oxidizing unfractionated heparins and detecting presence or absence of glycoserine in heparin and heparin products |
| US7608246B2 (en) * | 2005-09-02 | 2009-10-27 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Apolipoprotein E as an adjuvant for lipid antigens |
| ATE552004T1 (de) | 2005-11-30 | 2012-04-15 | Istituto G Ronzoni | Oral verabreichbare heparinderivate |
| US9139876B1 (en) | 2007-05-03 | 2015-09-22 | Momenta Pharmacueticals, Inc. | Method of analyzing a preparation of a low molecular weight heparin |
| US8435795B2 (en) * | 2010-01-19 | 2013-05-07 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating heparin preparations |
| CA3020369C (en) * | 2010-09-14 | 2019-11-26 | Fuso Pharmaceutical Industries, Ltd. | High purity heparin and production method therefor |
| WO2012115952A1 (en) | 2011-02-21 | 2012-08-30 | Momenta Pharmaceuticals, Inc. | Evaluating heparin preparations |
| RU2639574C2 (ru) * | 2016-05-23 | 2017-12-21 | Алексей Георгиевич Александров | Способ получения низкомолекулярного гепарина |
| WO2022015794A1 (en) | 2020-07-14 | 2022-01-20 | Optimvia, Llc | Methods for synthesizing non-anticoagulant heparan sulfate |
| EP3997238A1 (en) | 2019-07-09 | 2022-05-18 | Optimvia, LLC | Methods for synthesizing anticoagulant polysaccharides |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB863235A (en) * | 1958-07-05 | 1961-03-22 | Roussel Uclaf | Improvements in or relating to organic compounds related to heparin |
| US3016331A (en) * | 1960-01-28 | 1962-01-09 | Ormonoterapia Richter Spa | Purification of heparin |
| IT1083903B (it) * | 1977-08-09 | 1985-05-25 | Lobo Srl | Oligo-eteropolisaccaridi con attivita' eparinosimili,procedimento per il loro ottenimento e relative composizioni terapeutiche |
| IT1195497B (it) * | 1983-03-08 | 1988-10-19 | Opocrin Spa | Procedimento per la preparazione di frazioni oligosaccaridiche dotate di proprieta' farmacologiche per degradazione chimica di eparina |
| DE3422518A1 (de) * | 1984-06-16 | 1985-12-19 | B. Braun Melsungen Ag, 3508 Melsungen | Heparin-derivate, verfahren zu ihrer herstellung, diese enthaltende arzneimittel und ihre verwendung bei der behandlung von fettstoffwechselstoerungen |
| ES2003197A6 (es) * | 1987-01-05 | 1988-10-16 | Rovi Lab Farmaceut Sa | Procedimiento de despolimerizacion de la heparina para la obtencion de una heparina de bajo peso molecular dotada de actividad antitrombotica |
| IT1234508B (it) * | 1988-06-10 | 1992-05-19 | Alfa Wassermann Spa | Derivati eparinici e procedimento per la loro preparazione |
-
1988
- 1988-06-10 IT IT8803504A patent/IT1234508B/it active
-
1989
- 1989-05-19 DE DE198989109030T patent/DE347588T1/de active Pending
- 1989-05-19 EP EP89109030A patent/EP0347588B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-05-19 ES ES89109030T patent/ES2012748T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1989-05-19 DE DE68917040T patent/DE68917040T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1989-05-19 AT AT89109030T patent/ATE109164T1/de not_active IP Right Cessation
- 1989-05-22 NZ NZ229212A patent/NZ229212A/xx unknown
- 1989-05-23 ZA ZA893882A patent/ZA893882B/xx unknown
- 1989-05-26 US US07/357,548 patent/US5010063A/en not_active Expired - Lifetime
- 1989-05-26 IL IL90411A patent/IL90411A/xx not_active IP Right Cessation
- 1989-06-09 PT PT90817A patent/PT90817B/pt not_active IP Right Cessation
- 1989-06-09 DK DK198902850A patent/DK173818B1/da not_active IP Right Cessation
- 1989-06-09 JP JP1148211A patent/JPH0739442B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1989-06-09 CA CA000602338A patent/CA1309402C/en not_active Expired - Fee Related
- 1989-06-09 NO NO892366A patent/NO174259C/no not_active IP Right Cessation
- 1989-06-09 KR KR1019890007930A patent/KR960015110B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1989-06-09 FI FI892850A patent/FI94534C/fi active IP Right Grant
- 1989-06-12 IE IE176289A patent/IE64830B1/xx not_active IP Right Cessation
-
1991
- 1991-06-07 GR GR90300018T patent/GR900300018T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI94534C (fi) | Menetelmä uusien hepariinijohdannaisten valmistamiseksi | |
| FI96425B (fi) | Menetelmä uusien hepariinijohdannaisten valmistamiseksi | |
| KR910008329B1 (ko) | 해중합된 과황산염 헤파린의 제조방법 | |
| US5039529A (en) | Novel heparin derivatives | |
| JPH02206601A (ja) | 抗トロンビン作用を有するオリゴサッカライドフラクションの製法 | |
| RU2332424C2 (ru) | Смесь полисахаридов, являющихся производными гепарина, их получение и фармацевтические композиции, их содержащие | |
| DE68921633T2 (de) | Oligosaccharide mit antiatherosclerotischer wirkung. | |
| CA2285383C (en) | Glycosaminoglycans having high antithrombotic activity | |
| EP2985298B1 (en) | Low-molecular-weight fucosylated glycosaminoglycan derivative containing terminal 2,5-anhydrated talose or derivative thereof | |
| EP3398971A1 (en) | Sulfated heparin oligosaccharide and preparation method and application thereof | |
| EP0483733A1 (en) | Process for preparing epoxy-heparides, the products obtained and pharmaceutical compositions containing them | |
| DE69218438T2 (de) | Dermatansulfatoligosaccharide, Verfahren zu ihrer Herstellung und diese enthaltende phamazeutische Zusammensetzungen | |
| JP5053512B2 (ja) | 非常に大きい硫酸化度を持つｋ５多糖体のエピマー化誘導体 | |
| EP2980103B1 (en) | Low molecular weight glycosaminoglycan derivative, pharmaceutical composition thereof, preparation method therefor and use thereof | |
| CA2026992C (en) | Sulfated polysaccharide, pharmaceutically acceptable salt thereof, process for preparing same and medicament containing same as effective component | |
| Vijayabaskar et al. | Low-molecular weight molluscan glycosaminoglycan from bivalve Katelysia opima (Gmelin) | |
| WO1994029352A1 (en) | Polysaccharides having high antithrombotic and anticoagulant activity | |
| JPH11166001A (ja) | 過硫酸化コンドロイチン硫酸、その製造方法及びそれを有効成分として含有する抗血液凝固剤 | |
| KR20050061527A (ko) | 헤파린으로부터 유도된 다당류의 혼합물, 이의 제조방법 및이를 함유하는 약제학적 조성물 | |
| Wang | Preparation and characterization of heparin-derived oligosaccharides and their applications |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB | Publication of examined application | ||
| FG | Patent granted |
Owner name: ALFA WASSERMANN S.P.A. |