FI89912B

FI89912B - Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt anvaendbara kinazolinderivat

Info

Publication number: FI89912B
Application number: FI871139A
Authority: FI
Inventors: Leslie Richard Hughes
Original assignee: Ici Plc; Nat Res Dev
Priority date: 1986-03-27
Filing date: 1987-03-16
Publication date: 1993-08-31
Also published as: DK155087D0; GR3003282T3; US4992550A; GB8706948D0; HU197317B; NO871266D0; ES2038170T3; GB2188319A; EP0239362B1; EP0239362A2; JPH0657699B2; NL970024I1; GB8607683D0; NO871266L; DK166621B1; NO173545C; FI871139A0; FI871139A; IL81924A; ZA871998B

Description

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten kinatsoliini- johdannaisten valmistamiseksi 1 89912

Keksintö koskee uusien, kasvaimia torjuvien kinat-5 soliinijohdannaisten valmistamista.

Eräs ryhmä kasvaimia torjuvia aineita käsittää antimetaboliitteja, jotka ovat foolihapon antagonisteja, kuten aminopteriinin ja metotreksaatin. Eräs uudempi tämän tyyppinen yhdiste, joka vaikutti huomattavan lupaa-10 valta kliinisissä kokeissa, tunnetaan merkinnällä CB3717 ja sitä on kuvattu GB-patenttijulkaisussa 2065653B. Lupauksestaan huolimatta CB3717 osoittaa kuitenkin myr-kyllisyysoireita ihmisissä, erityisesti maksan ja munuaisten suhteen.

15 Tämän tyyppisten yhdisteiden uskotaan vaikuttavan kasvaimia torjuvina aineina ehkäisemällä tymidylaattisyn-tetaasientsyymiä. Niiden kasvaimia torjuvaa aktiviteettia voidaan arvioida in vitro määrittämällä niiden ehkäisy-vaikutus tähän entsyymiin nähden, ja soluviljelmissä nii-20 den ehkäisyvaikutuksen perusteella solulinjan L1210 suhteen.

Olemme nyt todenneet, että määrätyt kinatsoliini-johdannaiset ovat huomattavasti aktiivisempia kuin CB3717 ja sitäpaitsi ne ovat liukoisempia veteen kuin tämä yh-25 diste, mikä saattaa olla kliinisesti tärkeätä suurentamalla niiden kykyä kulkeutua munuaisten läpi vähentäen siten myrkyllisyysoireita.

Keksinnön mukaisesti valmistetaan kinatsoliinijohdannaisia, joiden kaava on 30 0 /Sv ^ CH9-N-Ar-CONHR3 H yT 1 2 JU J R (I)

: 35 R

2 89912 jossa R1 on alkyyli, alkoksi tai alkyylitio, joissa jokaisessa on enintään 4 hiiliatomia; fenyyli tai fenoksi; halogeeni, hydroksi, merkapto tai pyrimidinyylitio; alkyyli, jossa on enintään 3 hiiliatomia ja johon on liit-5 tynyt yksi substituentti valittuna seuraavista: hydroksi, pyrimidinyylitio ja alkanoyyliamino, joissa jokaisessa on enintään 4 hiiliatomia tai jossa on yksi, kaksi tai kolme fluorisubstituenttia; tai alkoksi, jossa on enintään 3 hiiliatomia ja johon on liittynyt substituentti valittuna 10 seuraavista: hydroksi ja alkoksi, jossa on enintään 4 hiiliatomia; R2 on vety, alkyyli, alkenyyli, alkynyyli, hydroksialkyy-li, alkoksialkyyli, fluorialkyyli, syanoalkyyli, aminoal-kyyli, alkanoyylialkyyli, karboksialkyyli tai karbamoyy-15 lialkyyli, joissa jokaisessa on enintään 5 hiiliatomia;

Ar on sellainen 1,4-fenyleeni, joka on substituoimaton tai johon on liittynyt yksi substituentti valittuna seu-raavasta: nitro, hydroksi ja amino ja alkyyli, alkoksi, fluorialkyyli ja alkanoyyliamino, joissa jokaisessa on 20 enintään 4 hiiliatomia, tai yksi tai useampia halogeeni-substituentteja, tai Ar on sellainen tien-2,5-diyyli, py-rid-2,5-diyyli tai tiatsol-2,5-diyyli, joka on substituoimaton tai johon on liittynyt halogeenisubstituentti; ja 25 R3 on sellainen, että R3-NH2 on aminohappo; tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja tai estereitä.

Sopiva arvo symbolille R1 tai R2, jos se on alkyyli, tai alkyylisubstituentille Arissa on esimerkiksi metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, isobutyyli, tert-.30 butyyli, pentyyli tai heksyyli.

Sopiva arvo symbolille R2, jos se on alkenyyli, on esimerkiksi prop-2-enyyli, but-2-enyyli, but-3-enyyli, 2-metyyliprop-2-enyyli, heks-2-enyyli, heks-5-enyyll tai 2,3-dimetyylibut-2-enyyli.

: 35 Sopiva arvo symbolille R2, jos se on alkynyyli, on esimerkiksi prop-2-ynyyli, but-2-ynyyli, but-3-ynyyli, I.

3 89912 pent-2-ynyyli, 3-metyylipent-4-ynyyli, heks-2-ynyy1i tai heks-5-ynyyli.

Sopiva arvo symbolille R1, jos se on alkoksi tai alkyylitio, tai alkoksi- tai alkyylitiosubstituentille 5 Arissa, on esimerkiksi metoksi, etoksi, isopropoksi, hek-syylioksi, metyylitio, isopropyylitio tai heksyylitio.

Sopiva arvo symbolille R1, jos se on halogeeni, on esimerkiksi fluori, kloori, bromi tai jodi.

Sopiva arvo symbolille R1, jos se on substituoitu 10 alkyyli, on esimerkiksi fluorimetyyli, difluorimetyyli, trifluorimetyyli, 2-fluorietyyli, 3-fluoripropyyli, hyd-roksimetyyli, 2-hydroksietyyli, 3-hydroksipropyyli, pyri-midin-2-yylitiometyyli, asetamidometyyli, 3-asetamidopro-pyyli, propionamidometyyli, bentsoyylioksimetyyli tai 15 bentsamidometyyli.

Sopiva arvo symbolille R1, jos se on substituoitu alkoksi, on esimerkiksi 2-hydroksietoksi, 4-hydroksibut-oksi, 3-hydroksi-2-metyylipropoksi, 2-metoksietoksi, 3-metoksipropoksi tai 2-etoksietoksi.

20 Sopiva arvo symbolille R2, jos se on hydroksial- kyyli tai alkoksialkyyli, on esimerkiksi 2-hydroksietyyli, 3-hydroksipropyyli, 2-metoksietyyli, 2-etoksietyyli, 3-metoksipropyyli, 2-metoksipropyyli.

Sopiva arvo symbolille R2, jos se on fluorialkyy-’’ 25 li, syanoalkyyli tai aminoalkyyli, on esimerkiksi 2-fluo rietyyli, 3-fluoripropyyli, syanometyyli, 2-syanoetyyli, 3-syanopropyyli, 2-aminoetyyli, 3-aminopropyyli tai 3-amino-2-metyylipropyyli.

Sopiva arvo symbolille R2, jos se on alkanoyylial-30 kyyli, karboksialkyyli tai karbamoyylialkyyli, on esimerkiksi asetonyyli, 2-asetyylietyyli, propionyylimetyyli, 2-propionyylietyyli, 3-asetyylipropyyli, 4-asetyylibutyy-li, karboksimetyyli, 2-karboksietyyli tai karbamoyylime-tyyli.

: 35 Sopiva arvo symbolille R3 on sellainen, että R3-NH2 on luonnossa esiintyvä aminohappo, kuten L-aspara- 4 39912 giinihappo, L-glutamiinihappo, L-alaniini, L-fenyyliala-niini, L-seriini, glysiini tai L-ornitiini. Vaihtoehtoisesti R3 voi olla sellainen, että R3-NH2 on L-2-aminovoi-happo tai poly-L-glutamiinihappo. Symbolilla R3 voi täl-5 löin olla esimerkiksi jokin seuraavista kaavoista:

-CH-COOH -CH-COOH

I I

CH2-COOH CH2CH2-COOH

10 -CH-COOH Γ

CH„-CH„-CO--NH-CH-COOH

Z Z I

CH2-CH2-CO--OH

- —Im 15 jossa m on kokonaisluku 1-10, tai kaava:

-CH-COOH -CH-COOH

I I

CH3 tai ch2CH3 20

Sopiva keksinnön mukaisen kinatsoliinin farmaseuttisesti hyväksyttävä suola on esimerkiksi happoadditio-suola, esimerkiksi epäorgaanisten tai orgaanisten happojen, esimerkiksi kloorivetyhapon, bromivetyhapon, tri-25 fluorietikkahapon tai maleiinihapon kanssa; tai alkali-metalli-, esimerkiksi natrium-, maa-alkalimetalli- tai ammonium-, esimerkiksi tetra(2-hydroksietyyli)-ammonium-suola.

Sopiva keksinnön mukaisen kinatsoliinin farmaseut-30 tisesti hyväksyttävä esteri on esimerkiksi esteri ali- faattisen alkoholin kanssa, jossa on enintään 6 hiiliatomia, esimerkiksi metyyli-, etyyli- tai tert-butyylieste-ri.

On ymmärrettävä, että jos R3 sisältää kaksi kar-35 boksyylihappotähdettä, se on, jos se on johdettu esimer- i 5 89912 kiksi asparagiini- tai glutamiinihaposta, voi suola tai esteri olla mono-happo-mono-suola tai -esteri tai se voi olla di-suola tai -esteri.

Eräällä edullisella keksinnön mukaisella kinatso-5 liinilla on edellä esitetynlainen kaava, jossa R1 on metyyli, etyyli, metoksi, metyylitio, fenyyli, fluorimetyy-li, difluorimetyyli, trifluorimetyyli, hydroksimetyyli tai asetamidometyyli; ja jossa R2 on vety, metyyli, etyyli, propyyli, prop-2-enyyli, prop-2-ynyyli, 2-metoksi-10 etyyli, 2-aminoetyyli, 2-bromietyyli tai asetyyli; ja jossa Ar on sellainen 1,4-fenyleeni tai tien-2,5-diyyli, joka on ei-substituoitu tai johon on liittynyt yksi subs-tituentti, valittuna ryhmästä, johon kuuluvat metyyli, metoksi tai trifluorimetyyli; ja jossa R3 on sellainen, 15 että R3-NH2 on L-alaniini, L-glutamiinihappo tai L-aspa-ragiinihappo.

Vielä eräällä edullisella keksinnön mukaisella ki-natsoliinilla on edellä esitetynlainen kaava, jossa R1 on metyyli, etyyli, isopropyyli, syklopropyyli, sykloheksyy-20 li, metoksi, etoksi, fenoksi, fluori, kloori, hydroksi, merkapto, pyrimidin-2-yylitio, pyrimidin-2-yylitio-metyy-li, 2-hydroksietoksi tai 2-metoksietoksi; ja jossa R2 on vety, metyyli, etyyli, prop-2-ynyyli, 3-hydroksipropyyli, 3-metoksipropyyli, 2-fluorietyyli, sya-25 nometyyli, asetonyyli, karboksimetyyli tai karbamoyylime-tyyli; ja jossa Ar on sellainen 1,4-fenyleeni, tien-2,5-diyyli, pyrid-2,5-diyyli, tai tiatsol-2,5-diyyli tai joka on ei-substituoitu tai johon on liittynyt yksi substituentti : 30 valittuna ryhmästä, johon kuuluvat fluori, kloori, nitro, hydroksi tai amino; ja jossa R3 on sellainen, että R3-NH2 on L-glutamiinihappo, glysiini, L-fenyylialaniini, L-seriini, L-ornitiini tai L-asparagiinihappo.

6 89912

Eräällä erityisen edullisella keksinnön mukaisella kinatsoliinilla on edellä esitetynlainen kaava, jossa R1 on metyyli, etyyli, metoksi, fluorimetyyli tai hydroksi-metyyli; 5 ja jossa R2 on vety, metyyli, etyyli, propyyli, pro-2-enyyli, prop-2-ynyyli tai 2-hydroksietyyli; ja jossa Ar on 1,4-fenyleeni tai tien-2,5-diyyli; ja jossa R3 on sellainen, että R3-NH2 on L-glutamiinihap-po.

10 Vielä eräällä erityisen edullisella keksinnön mu kaisella kinatsoliinilla on edellä esitetynlainen kaava, jossa R1 on metyyli, metoksi, fluorimetyyli tai hydroksi-metyyli; ja jossa R2 on vety, metyyli, etyyli, prop-2-ynyyli, 3-15 hydroksipropyyli, 2-fluorietyyli tai asetonyyli; ja jossa Ar on 1,4-fenyleeni, tien-2,5-diyyli, pyrid-2,5-diyyli tai 2-fluori-l,4-fenyleeni; ja jossa R3 on sellainen, että R3-NH2 on L-glutamiinihappo.

Aivan erityisen edullisiin keksinnön mukaisiin yh-20 disteisiin kuuluu seuraavien yhdisteiden ryhmä: N-p-[N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylime-tyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino]bentsoyyli-L-glutamiinihap-po, N-p-[N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylime-25 tyyli)-N-metyyliamino]bentsoyyli-L-glutamiinihappo, N-p-[N-(2-etyyli-3,4-dihydro-4-oksokinatsolin-6-yylime-tyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino]bentsoyyli-L-glutamiinihap-po, N-p-[N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylime-30 tyyli)-N-metyyliamino]-o-fluoribentsoyyli-L-glutamiini- happo, N-p-[N-( 3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylime-tyyli)-N-etyyliamino]-o-fluoribentsoyyli-L-glutamiinihap-po, 35 N-p-[N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylime- tyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino]-o-fluoribentsoyyli-L-glu-tamiinihappo; i 7 *9912 N-{5-[N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yyli-metyyli)-N-metyyliamino]-2-tenoyyli}-L-glutamiinihappo, N-{5-[N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yyli-metyyli)-N-etyyliamino]-2-tenoyyli}-L-glutamiinihappo, 5 N-p-[N—(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylime-tyyli)-N-(2-fluorietyyli)amino]bentsoyyli-L-glutamiini-happo, N-p-[N-(3,4-dihydro-2-metoksi-4-oksokinatsolin-6-yylime-tyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino]bentsoyyli-L-glutamiini-10 happo, N-p-[N-(3,4-dihydro-2-hydroksimetyyli-4-oksokinatsolin- 6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino]bentsoyyli-L-gluta-miinihappo, N-p-[N-(3,4-dihydro-2-hydroksimetyyli-4-oksokinatsolin-15 6-yylimetyyli)-N-etyyliamino]bentsoyyli-L-glutamiinihap- po, N-p-[N-(2-fluorimetyyli-3,4-dihydro-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino]bentsoyyli-L-gluta-miinihappo ja 20 N-p-[N-(2-fluorimetyyli-3,4-dihydro-4-oksokinatsolin-6- yylimetyyli)-N-etyyliamino]bentsoyyli-L-glutamiinihappo.

Keksinnön mukaista kinatsoliinia voidaan valmistaa millä tahansa tunnetulla menetelmällä, joka on sovellettavissa kemiallisesti vastaavanlaisten yhdisteiden val-25 mistukseen.

Keksinnölle on tunnusomaista, että a) yhdiste jonka kaava on : . . 30 , 0 . 35 8 *9912 jossa symboli R1 tarkoittaa samaa kuin edellä edellyttäen, että jos R1 on hydroksialkyyli, tai hydroksialkok-si, niin hydroksiryhmät suojataan tavanomaisella suoja-ryhmällä, R4 on vety tai suojaryhmä ja Z on korvatta-5 vissa oleva ryhmä, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on HNR2-Ar-CONHR3 10 jossa R2, Ar ja R3 tarkoittavat samaa kuin edellä, edellyttäen, että jos R2 on hydroksialkyyli aminoalkyyli, tai karboksialkyyli, jos Ar:ssa on amino- tai hydroksiryhmä tai jos R3:ssa on amino-, hydroksi- tai karboksiryhmä, niin jokainen amino- ja karboksiryhmä suojataan tavan-15 omaisella suojaryhmällä ja jokainen hydroksiryhmä voidaan suojata tavanomaisella suojaryhmällä tai vaihtoehtoisesti mitään hydroksiryhmää ei tarvitse suojata; jonka jälkeen poistetaan jokainen ei-toivottu suojaryhmä symboleissa R1, R2, R3 ja Ar.

20 Sopiva suojaryhmä hydroksiryhmälle on esimerkiksi esteröivä ryhmä, esimerkiksi asetyyli- tai bentsoyyliryh-mä, joka voidaan poistaa hydrolysoimalla emäksen, esimerkiksi natriumhydroksidin avulla, tai edellyttäen, että R1 ja R2 eivät sisällä alkenyyli- tai alkynyyliryhmää, suo-25 jaryhmä voi olla esimerkiksi α-aryylialkyyliryhmä, esimerkiksi bentsyyliryhmä, joka voidaan poistaa hydraamalla katalysaattorin, esimerkiksi hiilellä olevan palladiumin avulla.

Sopiva suojaryhmä merkaptoryhmälle on esimerkiksi - 30 esteröivä ryhmä, esimerkiksi asetyyliryhmä, joka voidaan poistaa hydrolysoimalla emäksen, esimerkiksi natriumhydroksidin avulla.

Sopiva suojaryhmä aminoryhmälle voi olla esimerkiksi alkoksikarbonyyliryhmä, esimerkiksi tert-butyyli-35 oksikarbonyyliryhmä, joka voidaan poistaa käsittelemällä I, 9 3 9 91 2 orgaanisen hapon, esimerkiksi trifluorietikkahapon kanssa; tai se voi olla esimerkiksi bentsyylioksikarbonyyli-ryhmä, joka voidaan poistaa käsittelemällä Lewis-hapon, esimerkiksi booritris(trifluoriasetaatin) kanssa.

5 Sopiva vaihtoehtoinen suojaryhmä primääriselle aminoryhmälle on esimerkiksi ftaloyyliryhmä, joka voidaan poistaa käsittelemällä alkyyliamiinin, esimerkiksi dime-tyyliaminopropyyliamilnin tai hydratsiinin kanssa.

Sopiva suojaryhmä karboksiryhmälle voi olla este-10 röivä ryhmä, esimerkiksi metyyli- tai etyyliryhmä, joka voidaan poistaa hydrolysoimalla emäksen, esimerkiksi nat-riumhydroksidin avulla; tai esimerkiksi tert-butyyliryh-mä, joka voidaan poistaa käsittelemällä orgaanisen hapon, esimerkiksi trifluorietikkahapon kanssa.

15 Sopiva arvo symbolille R4, jos se on suojaryhmä, on esimerkiksi pivaloyylioksimetyyliryhmä, joka voidaan poistaa hydrolysoimalla emäksen, esimerkiksi natriumhydr-oksidin avulla.

Z voi olla esimerkiksi halogeeni tai sulfonyyliok-20 siryhmä, esimerkiksi kloori, bromi, metaanisulfonyyliok-si- tai tolueeni-p-sulfonyylioksiryhmä.

Suojaryhmänä R3:ssa oleville eri karboksiryhmille voivat olla sellaiset esteröivät ryhmät, jotka sallivat tuotteen muodostuvan, mahdollisen suojaryhmän R4 ja sym-25 boleissa R1, R2, R3 tai Ar olevien kaikkien ei-toivottujen suojaryhmien poistamisen jälkeen, keksinnön mukaisen kin-atsoliinin määritelmän puitteisiin. Tässä tapauksessa voidaan R3:ssa olevat, karboksia suojaavat ryhmät poistaa tai ne voivat jäädä paikoilleen. Vaihtoehtoisesti voidaan 30 käyttää erilaista suojaryhmää, joka poistetaan; b) happo, jonka kaava on 4 0 R* Jl

^N'^rr^V^H2-N-Ar~C02H

10 3 9 91 2 tai sen reaktiivinen johdannainen saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on r3-nh2 5 jolloin, R1, R2, R3, R4 ja Ar tarkoittavat samaa kuin edellä ja jokainen merkapto-, amino- ja karboksiryhmä symboleissa R1, R2, R3 ja Ar suojataan tavanomaisella suo-jaryhmällä, Ja jokainen hydroksiryhmä symboleissa R1, R2, 10 R3 ja Ar voidaan suojata tavanomaisella suojaryhmällä, tai vaihtoehtoisesti mitään hydroksiryhmää ei tarvitse suojata; jonka jälkeen suojaryhmät poistetaan tavanomaisella tavalla.

Edellä esitetyn kaavan mukaisen hapon sopiva reak-15 tiivinen johdannainen voi olla esimerkiksi asyylihaloge- nidi, esimerkiksi asyylikloridi muodostettuna hapon ja epäorgaanisen happokloridin välisen reaktion avulla, esimerkiksi tionyylikloridi; seka-anhydridi, esimerkiksi sellainen anhydridi, joka on muodostettu hapon ja kloori-20 formiaatin välisen reaktion avulla, kuten isobutyylikloo- riformiaatti; asyyliatsidi, esimerkiksi sellainen atsidi, joka on muodostettu hapon ja atsidin välisen reaktion avulla, kuten difenyylifosforyyliatsidi; tai hapon ja karbodi-imidin välisen reaktion tuote, esimerkiksi disyk-25 loheksyylikarbodi-imidi.

Lähtöaineena käytettyä karboksyylihappoa voidaan saattamalla yhdiste, jolla on kaava 30 r4 0 35 11 8991 2 jossa symboleilla R1, R4 ja Z on edellä esitetyt merki tykset, reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava HNR2-Ar-C02R5 5 jossa symboleilla R2 Ja Ar on edellä esitetyt merkitykset ja R5 on suojaryhmä, joka voidaan poistaa karboksyyliha-pon saamiseksi.

R5 voi olla esimerkiksi metyyli- tai etyyliryhmä, 10 joka voidaan poistaa hydrolysoimalla emäksen, esimerkiksi natriumhydroksldin avulla, tai R5 voi olla esimerkiksi tert-butyyliryhmä, joka voidaan poistaa lohkaisemalla orgaanisen hapon, esimerkiksi trifluorietikkahapon avulla. Suojaryhmä karboksiryhmälle R5:ssä voi olla esi-15 merkiksi esteröivä ryhmä, joka voidaan poistaa, vaikka jokaisen merkapto-, amino-, karboksi- ja hydroksiryhmän suojaryhmä symboleissa R1, R2 ja Ar säilytetään; c) keksinnön mukaisen kinatsoliinin valmistamiseksi, jossa R1 on alkoksi, aryylioksi tai alkoksi, jossa on 20 enintään 3 hiiliatomia ja johon on liittynyt yksi tai useampi substituentti, joiksi on valittu hydroksi tai alkoksi, yhdiste, jonka kaava on R1 25 i .· r1AnA^ 30 jossa R1 on alkoksi, fenoksi tai alkoksi, jossa on enintään 3 hiiliatomia ja johon on liittynyt yksi tai usampi substituentti, joiksi on valittu hydroksi tai alkoksi, edellyttäen, että jos R1:ssa on hydroksisubstituentti, se 35 suojataan tavanomaisella suojaryhmällä, ja Z on korvatta- 12 9 9 912 vlssa oleva ryhmä, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on HNR2-Ar-CONHR3 5 jossa R2, R3 ja Ar tarkoittavat samaa kuin eedellä edellyttäen, että jos R2 on hydroksialkyyli, aminoalkyyli tai karboksialkyyli, jos Ar:ssa on amino- tai hydroksiryhmä, tai jos R3:ssa on amino-, hydroksi- tai karboksiryhmä, 10 niin jokainen amino- ja karboksiryhmä suojataan tavanomaisella suojaryhmällä, ja jokainen hydroksiryhmä voidaan suojata tavanomaisella suojaryhmällä, tai vaihtoehtoisesti mitään hydroksiryhmää ei tarvitse suojata; jonka jälkeen suojaryhmät poistetaan tavanomaisella tavalla, ja 15 kinatsoliinirenkaan 4-asemassa oleva R1-ryhmä poistetaan hydrolysoimalla emäksen avulla; d) keksinnön mukaisen kinatsoliinin valmistamiseksi, jossa R1 on merkapto, alkyylitio, pyrimidinyylitio tai pyrimidinyylitioalkyyli, saatetaan kinatsoliini, jon-20 ka kaava on R4 ° ^CH9-N-Ar-CONHR3

Rl>sXX

jossa R1 on halogeeni tai halogeenialkyyli ja symbolit 30 R2, R3, R4 ja Ar tarkoittavat samaa kuin edellä edellyt täen, että jos R2 on hydroksialkyyli, aminoalkyyli tai karboksialkyyli, jos Ar:ssa on amino- tai hydroksiryhmä, tai jos R3:ssa on amino-, hydroksi- tai karboksiryhmä, niin jokainen amino-, karboksi- ja hydroksiryhmä voidaan 35 suojata tavanomaisella suojaryhmällä, tai vaihtoehtoises- li 13 ί<. 9 91 2 ti mitään amino-, karboksi- ja hydroksiryhmää ei tavitse suojata; saatetaan reagoimaan tiourean kanssa yhdisteen saamiseksi, jossa R1 on merkapto; tai alkyyli- tai pyri-5 midinyylitiolin kanssa yhdisteen saamiseksi, jossa R1 on alkyylitio, pyrimidinyylitio, tai pyrimidinyylitioalkyy-li; jonka jälkeen suojaryhmät poistetaan tavanomaisella tavalla; tai e) keksinnön mukaisen kinatsoliinin valmistamisek-10 si, jossa R1 on alkyylitio, saatetaan kinatsoliini, jonka kaava on

R4 U

\N^\_^vv^CH2-N-Ar-C0NHR3 20 jossa R1 on merkapto ja symbolit R2, R3, R4 ja Ar tarkoittavat samaa kuin edellä edellyttäen, että jos R2 on hyd-roksialkyyli, aminoalkyyli tai karboksialkyyli, jos Arissa on amino- tai hydroksiryhmä tai jos R3:ssa on amino-, hydroksi- tai karboksiryhmä, niin jokainen amino-, 25 karboksi- ja hydroksiryhmä voidaan suojata tavanomaisella suojaryhmällä, tai vaihtoehtoisesti mitään amino-, kar-____ boksyyli-, ja hydroksiryhmää ei tarvitse suojata; saatetaan reagoimaan emäksen kanssa ja saatu tiolaattisuola alkyloidaan alkyylihalogenidin kanssa yhdisteen saamisek-30 si, jossa R1 on alkyylitio; jonka jälkeen mahdolliset suojaryhmät poistetaan tavanomaisella tavalla.

Kuten edellä todettiin, keksinnön mukaisella kin-atsoliinilla on kasvaimia torjuvaa tehoa ja se voi itse olla tällöin aktiivinen tai se voi olla lääkkeen esiaste, 35 joka muuttuu in vivo aktiiviseksi yhdisteeksi. Keksinnön 14 8 9 91 2 mukaiset edullisest kinatsoliinit ovat 50-500 kertaa tehokkaampia kuin CB3717 L1210-solu-linjan kasvun ehkäisyssä. L1210 on hiiren leukemian solulinja, jota voidaan kasvattaa kudosviljelmässä (brittiläinen patenttijulkaisu 5 nro GB 2065653B).

Seuraavassa on esitetty keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden aktiivisuudet verrattuna tunnet-tun tekniikkaan, CB 3717/FI-patentti 76791 ja CB 3804/FI-hakemus 862303.

1= is 89 91 2 o HN^^>f^:Nr'CH2'N-Ar-C0NH\ ^-co9h 1 il j '2 r

R’ N CH2CH2C02H

1 2

Esim. R R Ar Suhteellinen aktiivisuus nro LI210 MCF-7 CB3717 amino prop-2- 1,4-fenyleenl 1,0 1,0 ynyyli (3,4μΜ) (0,35μΜ) CB3804 vety prop-2- 1,4-fenyleeni 0,12 0,25 ynyyli 1 metyyli prop-2- 1,4-fenyleeni 0,026 0,017 ynyyli 2(1) metyyli etyyli 1,4-fenyleeni 0,1 0,006 3 metyyli metyyli 1,4-fenyleeni 0,03 0,01 4(1) metyyli hydro- 1,4-fenyleeni 0,02 0,01 geeni 4(2) metyyli prop-2- 1,4-fenyleeni 0,05 0,03 enyyli 4(3) metyyli 3-hyd- 1,4-fenyleeni 0,36 0,25 roksi- propyyli 4(4) metyyli 2-fluori- 1,4-fenyleeni 0,12 0,11 etyyli 4(5) metyyli 2-hydrok- 1,4-fenyleeni 0,07 0,1 sietyyli 4(8) metyyli asetonyy- 1,4-fenyleeni 0,35 0,8 li 4(9) etyyli prop-2- 1,4-fenyleeni 0,73 0,75 ynyyli 4(14) hydrok- prop-2- 1,4-fenyleeni 1,5 0,33 sime- ynyyli tyyli 5(1) fluori- prop-2- 1,4-fenyleeni 0,1 0,1 metyyli ynyyli 6 metyyli metyyli 2-fluoro-1,4- 0,006 0,01 fenyleeni 7(2) metyyli etyyli 2-fluoro-l,4- 0,019 0,01 fenyleeni 7(8) metyyli metyyli tien-2,5-di- 0,002 0,002 yyii 7(10) metyyli propyyli tien-2,5-di- 0,12 0,25 yyii 7(12) metyyli prop-2- pyrid-2,5-di- 0,016 0,1 ynyyli yyii 9(3) metoksi prop-2- 1,4-fenyleeni 0,56 5 ynyyli 9(11) metoksi etyyli tien-2,5-di- 0,7 2 yyii 16 8 9 912

Keksinnön mukaista kinatsollinla voidaan antaa lämminveriselle elävälle olennolle, Ihminen mukaanlukien, farmaseuttisen ainekoostumuksen muodossa, joka käsittää kintasoliinia yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävän lai-5 mennus- ja kantaja-aineen kanssa.

Ainekoostumus voi olla sopivassa muodossa oraalista lääkkeenantoa varten, kuten tablettina tai kapselina, tai erityisesti parenteraalista injektiota varten, kuten steriilinä liuoksena, suspensiona tai emulsiona, tai pai-10 kallista antamista varten, kuten voiteena tai kermana, tai rektaalista antamista varten suppositoriona.

Ainekoostumus voi sisältää keksinnön mukaisen ki-natsoliinin lisäksi yhtä tai useampaa muuta kasvaimia torjuvaa ainetta, jotka on valittu esimerkiksi seuraavis-15 ta: mitoosin estäjät, esimerkiksi vinblastiini; alkyloi-misaineet, esimerkiksi cis-platiini, karboplatiini ja syklofosfamidi; muut antimetaboliitit, esimerkiksi 5-fluorourasiili, sytosiiniarabinosidi ja hydroksiurea; in-terkalatoivat antibiootit, esimerkiksi adriamysiini ja 20 bleomysiini; entsyymit, esimerkiksi asparaginaasl; topo-isomeraasin ehkäisyaineet, esimerkiksi etoposldi ja biologisen vastauksen muuttajat, esimerkiksi interferoni.

Kinatsollinla annetaan tavallisesti lämminveriselle elolliselle annoksena, joka on välillä 50-5000 mg 25 elollisen olennon kehon pinta-alan neliömetriä kohti.

Keksintöä valaistaan seuraavien esimerkkien avulla, mutta se ei ole rajoitettu niihin.

Keksinnön kaikkien yhdisteiden rakenteet vahvistettiin protonimagneettisen resonanssin ja massaspektro-30 skopian sekä alkuaineanalyysin avulla. Protonimagneetti-set resonanssispektrit määritettiin käyttämällä Joel FX 900-laitetta tai Bruker AM200 spektrometriä käyttäen kenttävoimakkuutena 200 MHz. Kemialliset muutokset ilmoitetaan miljoonasosina sisäisenä standardina kätytetystä 35 tetrametyylisiläänin antamasta arvosta eteenpäin (6-mit- takaava) ja tällöin huippujen monikerroista käytetään merkintöjä s, singletti; d, dubletti; d of d's, duplet- li 17 89 91 2 tien dubletti; t, tripletti; m, multipletti. Nopeilla atomeilla pommittaen (FAB) saadut massaspektraalitulok-set saatiin käyttämällä VG Analytical MS9-spektrometriä ja ksenon-kaasua ja milloin oli tarkoituksen mukaista, 5 koottiin joko positiivisilla ioneilla pommittaen saadut tulokset tai negatiivisilla ioneilla pommittaen saadut tulokset.

Pylväskromatografia suoritettiin käyttämällä toiminimen Merck Art 9385-piihappogeeliä.

10 Esimerkki 1

Seosta, joka sisälsi 0,3 g 6-bromimetyyli-3,4-di-hydro-2-metyyli-3-pivaloyylioksimetyylikinatsolin-4-onia, 0,295 g dietyyli-N-(p-prop-2-ynyyliaminobentsoyyli)-L-glutamaattia (brittiläinen patenttijulkaisu GB 2065653B), 15 0,491 g kalsiumkarbonaattia ja 10 ml dimetyyliformamidia, hämmennettiin 50°C:ssa 18 tuntia, jäähdytettiin ja suodatettiin suodatuksen apuaineen läpi. Suodos haihdutettiin kuiviin ja jäljelle jäänyt öljy puhdistettiin kromatogra-fian avulla käyttämällä piihappogeeliä (Merck 9385) ja 20 eluenttina metyleenikloridin ja etyyliasetaatin (3:1 til/til)-seosta.

Seosta, joka sisälsi 0,306 g tuotetta, 5 ml etanolia ja 1,42 ml lN-natriumhydroksidin vesiliuosta, hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 18 tuntia, hapotettiin 25 etikkahapolla ja joukkoon lisättiin 0,5 ml 2N kloorivety-hapon vesiliuosta. Seos sentrifugoitiin ja kiinteä jäännös pestiin 3 kertaa kulloinkin sekä vedellä että dietyy-lieetterillä (10 ml joka kerta) ja kuivattiin. Tällöin saatiin 70 mg N-p-[N—(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinat-30 solin-6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino]bentsoyyli- L-glutamiinihappoa, sp (jauhemainen-lasimainen) 165°C. NMR-spektri: (CD3SOCD3) 2,0 (m, 2H, CH2), 2,35 (leveä t, 2H, CH2C02H), 2,35 (s, 3H, CH3), 3,15 (t, 1H, C^CH, J=2 Hz), 4,3 (m, 3H, NHCH ja CH2ChCH), 4,8 (s, 2H, CH2N), 35 6,83 (d, 2H, aromaattinen, J=9 Hz), 7,52 (d, 1H, 8-H, J=9

Hz), 7,68 (d of d's, 1H, 7-H, J=2 ja 9 Hz), 7,75 (d, 2H, ΐθ ”9912 aromaattinen, J=9 Hz), 7,97 (d, 1H, 5-H, J=2 Hz), 8,18 (d, 1H, NH, J=8 Hz), 12,15 (leveä s, 1H, NH);

Massaspektri: (FAB positiivisilla Ioneilla) m/e 477 (P+i); 5 Alkuaineanalyysi: saadut arvot C 58,9, H 5,1, N 10,9 % C25H24N406·2H20 edellyttää arvoja C 58,6, H 5,5, N 10,9 %.

Lähtöaineena käytettyä kinatsolinonia saatiin seu-raavalla tavalla: 1,08 g natriumhydridiä lisättiin hämmennettyyn 10 suspensioon, joka sisälsi 3,0 g 3,4-dihydro-2,6-dimetyy-likinatsolin-4-onia (J. Indian Chem. Soc., 1962, 39, 369) 50 ml:ssa dimetyyliformamidia, ja seosta hämmennettiin laboratoriolämpötilassa tunnin ajan. Joukkoon lisättiin liuos, joka sisälsi 3,36 g kloorimetyylipivalaattia 10 15 ml:ssa dimetyyliformamidia, ja seosta hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 18 tuntia ja sen jälkeen kaadettiin 200 ml:aan natriumklorldin kyllästettyä vesiliuosta. Seos uutettiin neljästi dietyylieetterillä (50 ml joka kerta) ja yhdistetyt uutokset kuivattiin ja haihdutettiin kui-20 viin. Jäännös puhdistettiin kromatografian avulla käyttä mällä piihappogeelipylvästä ja eluenttina metyleeniklori-din ja etyyliasetaatin (9:1 til/til)-seosta. Tuote kiteytettiin petrolieetteristä (kp 60-80°C) ja tällöin saatiin 0,92 g 3,4-dihydro-2,6-dimetyyli-3-pivaloyylioksimetyyli-25 kinatsolin-4-onia, sp 98-100°C.

Seosta, joka sisälsi 0,92 g edellä saatua yhdistettä, 0,624 g N-bromisukkinimidiä, 0,025 g bentsoyylipe-roksidia ja 50 ml hiilitetrakloridia, kuumennettiin palautus jäähdy ttä jää käyttäen 2 tuntia, jäähdytettiin ja 30 kaadettiin florisilin muodostaman pylvään (25 g) läpi.

Pylväs eluoitiin hiilitetrakloridilla ja eluaatti haihdutettiin kuiviin. Tällöin saatiin kiinteänä jäännöksenä 1,16 g 6-bromimetyyli-3,4-dihydro-2-metyyli-3-pivaloyyli-oksimetyyli-kinatsolin-4-onia, sp 144-145°C.

35 Esimerkki 2

Esimerkin 1 menetelmä toistettiin käyttämällä lähtöaineena dietyyli-N-(p-etyyliaminobentsyyli)-L-gluta- 19 8 9 912 maattla (British Journal of Cancer, 1979, 40, 318) prop- 2-ynyyliaminoyhdisteen sijasta. Tällöin saatiin N-p-[N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-etyyliamino]bentsoyyli-L-glutamiinihappoa, sp 221-5 225°C.

Esimerkin 1 menetelmä toistettiin myös käyttämällä lähtöaineena 6-bromimetyyli-3,4-dihydro-3-pivaloyylioksi-metyyli-2-trifluorimetyylikinatsolin-4-onia 6-bromimetyy-li-2-metyylikinatsolin-4-onin sijasta. Tällöin saatiin N-10 p-[N-(3,4-dihydro-4-okso-2-trifluorimetyyli-kinatsolin- 6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino]bentsoyyli-L-gluta-miinihappoa, sp 110-115°C.

Lähtöaineena käytettyä 3,4-dihydro-6-metyyli-2-trifluorimetyylikinatsolin-4-onia valmistettiin reagoit-15 tamalla keskenään trifluoriasetamidia ja 2-amino-5-metyy- libentsoehappoa käyttäen menetelmää, joka on esitetty julkaisussa "The Chemistry of Heterocyclic Compounds", voi. 24, s 74.

Esimerkki 3 20 Seosta, Joka sisälsi 5,1 g 6-bromimetyyli-3,4-di- hydro-2-metyylikinatsolin-4-onia, 6,7 g dietyyli-N-(p-me-tyyliaminobentsoyyli)-L-glutamaattia (Journal of Heterocyclic Chemistry, 1975, 12, 1283;), 7 ml 2,6-lutidiinia ja 40 ml kuivaa dimetyyliformamidia, hämmennettiin 25 80°C:ssa argon-atmosfäärin alaisena 18 tuntia. Seos jääh dytettiin, kaadettiin 300 ml:aan vettä ja uutettiin etyyliasetaatilla (4 x 150 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin vedellä (2 x 200 ml), kyllästetyllä natriumkloridin vesi-liuoksella (2 x 100 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatin 30 avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin kromatografian avulla käyttäen piihappogeelipylväs-tä ja eluenttina etyyliasetaattia.

Seosta, joka sisälsi 4,1 g tuotetta, 25 ml etanolia ja 24,3 ml natriumhydroksidin 1-normaalista vesi-35 liuosta, hämmennettiin laboratoriolämpötilassa argon-at mosfäärin alaisena 3 tuntia. Seos haihdutettiin kuiviin, jäännös liuotettiin de-ionisoituun veteen ja liuos hapo- 20 8 9 91 2 tettiin pH-arvoon 2 lisäämällä 2N kloorivetyhappoliuosta. Seos sentrifugoitiin ja kiinteä jäännös pestiin kolmasti vedellä, dietyylieetterillä ja asetonilla (20 ml joka kerta) ja kuivattiin. Tällöin saatiin 3 g N-p-[N-(3,4-di-5 hydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-metyy- liamino]bentsoyyli-L-glutamiinihappoa (sisälsi 0,75 ekvivalenttia vettä), sp 254-257°C (hajoaa).

NMR-spektri: (CD3SOCD3), 2,0 (m, 2H, CH2), 2,35 (leveä t, 2H, CH2C02H), 2,35 (s, 2H, CH3), 3,12 (s, 3H, CH3N), 4,38 10 (m, 1H, NHCH, 4,78 (s, 2H, CH2N), 6,77 (d, 2H, aromaatti nen, J=9 Hz), 7,53 (d, 1H, 8-H, J-9 Hz), 7,62 (d of d's, 1H, 7-H, J=2 ja 9 Hz), 7,73 (d, 2H, aromaattinen, J=9 Hz), 7,88 (d, 1H, 5-H, J=2 Hz), 8,15 (d, 1H, NH, J=8 Hz), 12,2 (s, 1H, NH); 15 Massaspektri; (FAB positiivisilla ioneilla) m/e 453 (P+l);

Alkuaineanalyysi: saadut arvot: C 59,1, H 5,2, N 11,9 % C23H24N406·0,75 H20 edellyttää arvoja: C 59,3,H 5,5, N,12,0 %.

20 Lähtöaineena käytettyä kinatsolinonia saatiin seu- raavalla tavalla:

Seosta, joka sisälsi 20 g 3,4-dihydro-2,6-dimetyy-likinatsolin-4-onia, 21,3 g N-bromisukkinimidiä, 100 mg bentsoyyliperoksidia ja 600 ml kloroformia, kuumennettiin 25 50°C:ssa 6 tuntia, jona aikana seosta valotettiin 250 wa-tin valolähteen valolla. Seos jäähdytettiin. Saostunut tuote erotettiin suodattamalla seos, pestiin kloroformilla (2 x 50 ml) ja kuivattiin. Tällöin saatiin 6-bromime-tyyli-3,4-dihydro-2-metyylikinatsolin-4-onia, sp > 330°C. 30 Esimerkki 4

Esimerkissä 3 esitetty menetelmä toistettiin käyttämällä lähtöaineina sopivaa 6-bromimetyyli-3,4-dihydro-kinatsolin-4-onia ja sopivaa dietyyli-p-aminobentsoyyli-L-glutamaattia. Tällöin saatiin seuraavassa taulukossa 35 esitetyt yhdisteet, joiden rakenteet vahvistettiin proto-nimagneettisen resonanssin ja massaspektroskopian avulla sekä alkuaineanalyysin avulla.

Il 2i 8991 2 U^CNJC'jLT'OOOLn

»H f—I rH p*-9 f—( tH i-H O

/—. , /—V /—s *«“> ·Γ-> -Ο ·Ι“) ·Γ-} u<OfOU(dcdcauu o x: χ: ο χ: χ: χ: ο ο ι-Η w*· s—' O ' V-^ Γ"·· Γ-- O i-H IA ΙΛ - CSUUCSUOUr-(i-l

a* I O O I O O O I I

1/3 r^-coor^ocoomo

^00OOO<TvOiAm t—» t—I CO Γ-4 fO C-J C-J .H «—I

/N /N

•H

O rH -H

CO ^ -H t—l f? >s rH ·Η >s 5 a ^ >,

. -H O -H CX -H

m 1—♦ V-l rH O t-H

>s Ή >, -H 0) CX -H ^ i< c^l e eft v> en -h -h i-* e 'f. os W<u,Ma>.*:tocoi*,>,

£9 I O -H O Ji J* ►> I

", Λ rgt-iMMOoc<M

19 ~r, I Ό O -Ö -U 4J O I

HJ9 ο.?*3>%<υα)«ο.

uFs oj=«-ixeea)o XJ Vj I I I I I to u ftcOcScgcNro ta a „ Z X to

O ^ /—v *-- ,-. r-' ,--X <-—,—N i~V

U !-> f^r-lt-lt-ICMNCMCMn -H ^ *·—^ -W- «w" ' s—✓ ·--- 'w' 'w' Φ. 1 Z- cti

. - <N

- - Ä

O pH

____Γ V OS

* * / " \ «H ·Η -H Ή -H -H -H -H

- - // \\ rH rH r—I pH rH rH «H tH -H

(’ / £>** ^*v \ / 4->4-)4->4->4J4J4J4-l>» \ / ο)θ)<υα)φαί<ΐ)α>Η» \-/ eeeeeeeEoj h / \ X \ // 2 λ; 1_/ * « • · 0 2 \ i-i 4-» / X 0) tn p-tcNro-^rmOr^oocr.

« Ä \ E -H

2 \_ ·Η Ό O

(o ·“< tn £ n H PS « ^ c 22 P 9 91 2 ΙΤ\ ΙΛ ΙΛ ^ CSCMOt-iCN)i-fi-<r-tr^Or-4Cn

υοουοουουουο oooooooooooo n ^OOOOroOOr**mcMOO

•jr4 ΌΐΛΝ^<\£)ΐΛΟ\ΐΛΜ^νΟ

W t—I t—H t—4 r—< »—< t—I I—4 p—I CsJ CN I—I

» I 1 I I I I I I I I

sO CO mr^OO^tOu^CTNvO

<f ίΟ^ΙΐΛ^^ίΛΗΝίΛ i“H r“4 f-H t-H i—I i-M CNJ CNj ,-4

•H

I—I

>> -H

•Η ·Η *H *H *H £*> rH ·Η ·Η

γΗρΗγΗγ—li—I 4-) }>·, rH rH

Φ >> >^ >> -H «U >> >, *cpccc (oajcc ,* -h ;>> >,

iiiii -H O VJ I I

M N M N Μ ·Η i—l VJ OCMCN)

tN I I I I 1 ·—< Ό P I I

(V oaoaa>,fc^!>,.Hao w oooooSj->,c<woo

Vj VJ Vj VJ Vj J-> QJ I I VjVj o o o o o <υ e n n α,ο.

^ ^ <—^ /—N *—' <—'S /"N /*V /"S /—S /—\ ✓—S

rnco-vj-^u^u^irNirNirvm^Dr-^ 'w' V-/ V-/ -w* ^ 'W ·«. · 'w' 'w' s__ \_^

Ui >1

-P

•H

rH

<D ·η

. W *H Ή ·Η ·Η *H *H *H iH

. " »—liHfHrHiHrH»H

» - ^ p*>

•H 4J4->4J4-^4J4J4->(U

i—i α>ω<υ<υ<υ<υα>Ε |*EEE6EEEO Pn ·Η ·Η Ή ·Η ·Η ·Η ·Η Ό _ _i Ο·ι-ΙΟΜΜΜ0101ΐη·Η n- -H ° Ή O .* Ai .* Ji Ji .* E ·Η 5 K 'HVj^POOOOOOcOVj

O >*0>^i-IVjVjVjVjVjVjJ-iO

X Ρ^ΟΟ'Μ'Ο’ΌΌΌ'Ό'σωΟ 4J j->B>ai-H>,>,>,i>s>,>>ie,-i „5 αι·Η(Μχ)£χ;χ:χ;Λχ|α3^ η

•*J> O

H VJ

•H G

O x X X CD O—iCMcn<Tir\\or^oOty>Oi-i

X Vj 4-1 —*r-JrH—*T—J—Jr-Jr-Jt-Jr—ICNJC^J

3 <D tn

r-t g -H

3 -HO

fö tn .G

eh ω >i li 23 Q 9 912

Selitys (1): Sopivaa dietyyli-p-aminobentsoyyli-L-gluta-maattia saatiin kirjallisuudessa esitetyllä tavalla (Journal of Medicinal Chemistry, 1985, 28, 1468 tai the European Journal of Cancer, 1981, 17, 11).

5 Selitys (2): Tarvittua dietyyliglutamaattia valmistettiin reagoittamalla dietyyli-p-aminobentsoyyli-L-glutamaattia alkyloimisaineiden, 2-asetoksietyylibromidin, 2-metoksi-etyylibromidin, 3-metoksipropyylibromidin ja 1-bromiase-tonin kanssa kirjallisuudessa esitetyn menetelmän kanssa K) analogisella menetelmällä (Journal of Medicinal Chemistry 1985, 28, 1468).

Selitys (3): Tarvittuja kinatsoliineja saatiin käyttämällä menetelmää, joka on selostettu julkaisussa "The Chem. of Heterocyclic Compounds" voi. 24, sivulla 74, käyttä-15 mällä lähtöaineena vastaavasti propionamidia ja isobutyr-amidia asetamidin sijasta.

Selitys (4): Tarvittuja kinatsolinoneja valmistettiin kirjallisuudessa kuvatulla menetelmällä (J. Amer. Chem. Soc. 1946, 68, 1299 ja GB-patenttijulkaisu nro 1410178) .

20 Selitys (5): 2-asetoksimetyyli-3,4-dihydro-6-metyylikinat- solin-4-onia (Dissertationes Pharmaceuticae et Pharma-cologicae 1968, 20, 29) ja sopivaa dietyyli-p-aminobent-soyyli-L-glutamaattia saatiin esimerkissä 3 kuvatulla menetelmällä. Emäksinen hydrolyysi lohkaisi glutamaatties-25 terit ja asetoksiryhmän.

Selitys (6): 2-kloorimetyyli-3,4-dihydro-6-metyylikinatso-lin-4-onia (Dissertationes Pharmaceuticae et Pharmacolo-gicae 1968, 20, 29) käsiteltiin ammoniakin kyllästetyn vesiliuoksen kanssa laboratoriolämpötilassa 20 tuntia.

30 Liuotin poistettiin ja tuote asetyloitiin, jolloin saatiin 2-asetamidometyyli-3,4-dihydro-6-metyylikinatsolin-4-onia, jota käytettiin lähtöaineena esimerkissä 3 esitetyssä jaksossa.

Selitys (7): 2-kloori-3,4-dihydro-6-metyylikinoatsolin-35 4-onia saatiin US-patentissa nro 4 085 213 kuvatulla tavalla.

24 9 9 9 1 2

Esimerkki 5

Seosta, joka sisälsi 0,62 g 6-bromimetyyli -2-fluorimetyyli-3,4-dihydrokinatsolin-4-onia, 1,2 g di-tert-butyyli-N-(p-prop-2-ynyyli-aminobentsoyyli)-L-glu-5 tamaattia (valmistettu reagoittamalla di-tert-butyyli-N-p-aminobentsoyyli-L-glutamaattia, joka tunnetaan julkaisusta Journal of Medicinal Chemistry, 1985, 28, 1468, prop-2-ynyylibromidin kanssa käyttämällä menetelmää, joka on selostettu julkaisussa European Journal of Cancer 10 198i, 17, 11), 1,5 g 2,6-lutidiinia ja 20 ml kuivaa di- metyyliformamidia, hämmennettiin 60°C:ssa 18 tuntia argon-atmosfäärin alaisena. Seos jäähdytettiin, liuotin haihdutettiin ja jäljelle jäänyt öljy puhdistettiin kro-matografian avulla käyttäen florisilpylvästä ja eluent-15 tina metyylikloridin ja etyyliasetaatin (2:1 til/til)- seosta.

Seosta, joka sisälsi 0,6 g tuotetta, 2 ml tri-fluorietikkahappoa ja 6 ml kloroformia, hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 4 tuntia. Seos kaadettiin 40 ml: 20 aan dietyylieetteriä ja hämmennettiin 10 minuuttia. Saostunut kiinteä aine erotettiin suodattamalla seos ja kiinteä aine pestiin eetterillä (3 x 10 ml) ja kuivattiin. Tällöin saatiin 0,3 g N-p-^N-(2-fluorimetyyli-3,4-dihyd-ro-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)-25 amino/-bentsoyyli-L-glutamiinihappoa dihydraatti-trifluo- rietikkahapposuolana, sp 126-131°C.

NME-spektri: (CD3SOCD3) 2,0 (m, 2H, CH2), 2,3 (t, 2H, CH2C02H, J=6,5 Hz), 3,18 (t, 1H, C=CH, J=2 Hz), 4,15 (m, 3H, NHCH ja CH2C=CH), 4,8 (s, 2H, CH2N), 5,27 (d, 3Q 2H, FCH2, J=47 Hz), 6,84 (d, 2H, aromaattinen, J=9 Hz), 7,66 (d, 1H, 8pH, J=9 Hz), 7,75 (m, 3H, aromaattinen ja 7-H), 8,04 (d, 1H, 5-H, J=2 Hz), 8,21 (d, 1H, NH, J=8 Hz) .

Massaspektri: (FAB negatiivisilla ioneilla) M/e 493 (P-l) 35 Alkuaineanalyysi: saadut arvot: C 50,5, H 4,1, N 9,2 % ^25^2 3FN4°6 ^3^2^'^H2® edellyttää arvoja: C 50,3, H 4,3, N 8,7 % 25 89912 Lähtöaineena käytettyä kinatsolinonia saatiin seuraavalla tavalla:

Seosta, joka sisälsi 20 g 2-amino-5-metyylibentsoe-happoa ja 40 g fluoriasetamidia, kuumennettiin 120°C:ssa 5 tunnin ajan, 140°C:ssa 90 minuuttia ja 180°C:ssa 90 minuuttia. Seos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja jäännös puhdistettiin kromatografian avulla käyttäen piihappo-geelipylvästä ja eluenttina metyleenikloridin ja etyyliasetaatin (1:1 til/til)-seosta.

10 Seosta, joka sisälsi 2 g näin saatua 2-fluorimetyy- li-3,4-dihydro-6-metyylikinatsolin-4-onia, 1,8 g N-bromi-sukkinimidiä, 10 mg bentsoyyliperoksidia ja 50 ml kloroformia, kuumennettiin palautusjäähdyttäjää käyttäen 4 tuntia, jäähdytettiin ja haihdutettiin. Tuotetta, 6-bromi-15 metyyli-2-fluorimetyyli-3,4-dihydrokinatsolin-4-onia käy tettiin sitä enempää puhdistamatta.

Edellä esitetty menetelmä toistettiin käyttämällä prop-2-ynyyliaminoyhdisteen sijasta tert-butyyli-N-(p-etyyliaminobentsoyyli)-L-glutamaattia (valmistettu rea-20 goittamalla di-tert-butyyli-N-p-aminobentsoyyli-L-gluta- maattia etyylijodidin kanssa käyttämällä edellä tämän esimerkin ensimmäisessä kappaleessa kuvattua menetelmää). Tällöin saatiin N-p-^/N- (2 — f luorimetyyli-3,4-dihydro-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-etyyliaminq7~bentso- ____ 25 yyli-L-glutamiinihappoa hemi-trifluorietikkahapposuolana, sp 162-16 7°C.

Esimerkki 6

Seosta, joka sisälsi 0,38 g 6-bromimetyyli-3,4-di-hydro-2-metyylikinatsolin-4-onia (valmistettu edellä esi-30 merkissä 3 kuvatulla tavalla), 0,7 g dietyyli-N-(2-fluori- 4-metyyliaminobentsoyyli)-L-glutamaattia (valmistettu rea-goittamalla dietyyli-N-(4-amino-2-fluoribentsoyy1i)-L-glutamaattia joka on tunnettu GB-patenttijulkaisusta nro 2175903, metyylijodidin kanssa käyttämällä julkaisussa 35 "European Journal of Cancer, 1981, 17, 11"; kuvattua me- 26 O 9 91 2 netelmää), 0,3 g jauhettua kalsiumkarbonaattia ja 2,7 ml kuivaa dimetyyliformamidia, hämmennettiin 100°C:ssa 7 tuntia. Seos haihdutettiin ja jäännös puhdistettiin kromato-grafian avulla käyttäen piihappogeelipylvästä ja eluent-^ tina metyleenikloridin ja etanolin (20:1 til/til)-seosta.

Seosta, joka sisälsi 0,54 g tuotetta, 10 ml etanolia, 10 ml vettä ja 6,2 ml IN natriumhydroksidin vesiliuosta, hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 7 tuntia. Seos haihdutettiin 5 ml:n tilavuuteen, suodatettiin ja hapo-tettiin pH-arvoon 3 lisäämällä 2N kloorivetyhappoliuosta. Saostunut kiinteä aine eristettiin sentrifugoimalla, pestiin vedellä (4 x 30 ml) ja kuivattiin. Tällöin saatiin 0,41 g N-p-/N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-okso-kinatsolin-6-yylimetyyli)-N-metyyliamino/-o-fluoribentsoyyli-L-gluta-miinihappomonohydraattia, sp 224-226°C.

Esimerkki 7

Esimerkissä 6 esitetty menetelmä toistettiin käyttämällä lähtöaineena sopivaa dietyyli-L-glutamaat-tia. Tällöin saatiin seuraavassa taulukossa selostettuja 2Q yhdisteitä, joiden rakenteet vahvistettiin protonimag- neettisen resonanssin ja massaspektroskopian avulla sekä alkuaineanalyysin perusteella.

' ' Taulukko II

0

i 25 H II CHj-N-Ar- C0NH C02H

I σ',

I II I R2 h CH2CH2CO2H.XH2O

Me 30 l· 2 27 3991 2

Esimerkki 7 R (Selitys) Ar x Sp °C

yhdiste nro 1 H (1) 1 190-194 2 etyyli (2) 0,75 214-217

F

3 prop-2-ynyyli (2) —1 228-230 4 HOCH2CH2 (2) ° 190-196 5 FCH-CH- (2) _/F 0,7 220-225

-O

6 H0NCOCH0 (3) /F 1 170-185

-O

7 prop-2-ynyyli (4) tien-2,5-di- 0,5 215-225 yyii 8 metyyli (5) tien-2,5-di- 1 180-184 yy11 9 etyyli (5) tien-2,5-di- 0,75 162-167 yyii 10 n-propyyli (5) tien-2,5-di- 2 184-185 yyii 11 metyyli (6) 0,75 203-205

N

12 prop-2-ynyyli (7) —J)— 0,5 240-248

'"N

13 metyyli (8) 2»5 200-204 N-' .. . Selitys (1) : Dietyyli— N— (4—amino—2—fluoribentsoyyli) — L— glutamaatin valmistusta selostetaan GB-patenttijulkaisussa nro 2175903.

: Selitys (2): Sopivaa dietyyliglutamaattia valmistettiin reagoittama11a dietyyli-N-(4-amino-2-fluoribentsoyyli)-. L-glutamaatti (GB-pat.julkaisu nro 2175903) vastaavasti 28 3 9 912 etyylijodidin, propargyylibromidin, 2-asetoksietyyli-broraidin tai 2-fluorietyylibromidin kanssa käyttämällä menetelmää, joka on esitetty julkaisussa "Journal of Medicinal Chemistry, 1985, 28, 1468".

5 Selitys (3): Dietyyli-N-p-(N-syanometyyliamino)-o-fluori- bentsoyyli-L-glutamaattia valmistettiin menetelmällä, joka on esitetty edellä selityksessä (2), käyttämällä alkyloi-misaineena klooriasetonitriiliä. Esimerkissä 6 selostetun menetelmän loppuvaiheen aikana hydrolysoitiin N-syanome-10 tyyliaminoryhmä N-karbamoyylimetyyliaminoryhmäksi.

Selitys (4): 2,6-lutidiinia käytettiin kalsiumkarbonaatin sijasta. Lähtöaineena käytettyä dietyyli-N-/5-(prop-2-ynyyliamino)-2-tenoyyli7-L-glutamaattia saatiin seuraa-valla tavalla: 15 1,5 g pyridiiniä lisättiin seokseen, joka sisälsi 3 g 5-nitro-2-tenoyylikloridia ja 4,2 g dietyyli-L-glutamaat-tihydrokloridia 50 ml:ssa tolueenia. Seosta hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 72 tuntia, kaadettiin 200 ml:aan vettä ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 100 ml). Yhdis-20 tetyt uutokset pestiin vedellä (2 x 500 ml) ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella (1 x 50 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös puhdistettiin kromatografian avulla käyttäen piihappogeelipylvästä ja eluenttina mety-25 leenikloridin ja etyyliasetaatin (9:1 til/til)-seosta.

Seosta, joka sisälsi 3,4 g tuotetta, 15 ml etanolia ja natriumditioniitin vesiliuosta (6,2 g dihydraatti-suolaa 30 ml:ssa vettä), hämmennettiin 50°C:ssa tunnin ajan, kaadettiin 100 ml:aan vettä ja uutettiin etyyli-3Q asetaatilla (3 x 50 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella (1 x 50 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös puhdistettiin kromatografian avulla käyttämällä piihappogeelipylvästä ja eluenttina 35 metyleenikloridin ja etyyliasetaatin (7:3 til/t.i 1)-seosta.

i 29 89 9 1 2 Tällöin saatiin 1 g dietyyli-5-amino-2-tenoyyli-L-glu-tamaattia.

Seosta, joka sisälsi 1 g:n tuotetta, propargyyli-bromidia (0,66 g, 80 %:sta tolueeniliuosta), 0,5 g 5 2,6-lutidiinia ja 25 ml dimetyyliformamidia, hämmennet tiin 50°C:ssa 24 tuntia, jäähdytettiin, kaadettiin 25 ml: aan vettä ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 50 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin vedellä (2 x 25 ml) ja kyllästetyllä natriumkloridin vesiliuoksella (25 ml), kui-10 vattiin magnesiumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen piihappogeelipylvästä ja eluenttina mety-leenikloridin ja etyyliasetaatin (7:3 til/til)-seosta. Tällöin saatiin 0,6 g dietyyli-N-/3-(prop-2-ynyyliamino)-15 2-tenoyyli/’-L-glutamaattia.

Selitys (5): 2,6-lutidiinia käytettiin kalsiumkarbonaatin sijasta. Sopivaa dietyyli-L-glutamaattia saatiin käyttämällä edellä selityksen (4) viimeisessä kappaleessa kuvatussa menetelmässä lähtöaineena dietyyli-5-amino-2-20 tenoyyli-L-glutamaattia paitsi, että propargyylibromidin sijasta käytettiin vastaavasti metyylijodidia, etyylijo-didia ja n-propyylijodidia.

Selitys (6): Lähtöaineena käytettyä dietyyli-N-^5- (metyy-liamino)pikolinoyyli7-L-glutamaattia valmistettiin seu-25 raavalla tavalla: Seosta, joka sisälsi 1,13 g metyyli-5-(N-tert-butoksikarbonyyli-N-metyyliamino)pikolinaattia (valmistettu käyttämällä menetelmää, joka on esitetty julkaisussa "Journal of Medicinal Chemistry, 1980, 23, 1405", paitsi että käytettiin metyylijodidia 3-trifluo-30 rimetyylibentsyylikloridin sijasta), 8,5 ml IN natrium- hydroksidin vesiliuosta, 21 ml vettä ja 15 ml etanolia, hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 16 tuntia. Seos haihdutettiin 5 ml:n tilavuuteen, hapotettiin pH-arvoon 4 2N kloorivetyhappoliuoksella ja uutettiin etyyliasetaatilla 35 (2 x 40 ml). Yhdistetyt uutokset kuivattiin magnesiumsul- 30 9 91 2 faatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin saatiin 0,8 g 5- (N-tert-butoksikarbonyyli-N-metyyliamino)-pikoliinihappoa.

Seosta, joka sisälsi 0,74 g happoa, 0,38 ml oksa-^ lyylikloridia, 8 ml metyleenikloridia ja dimetyyliform-amidia, hämmennettiin laboratoriolämpötliassa 45 minuuttia ja haihdutettiin kuiviin. Jäännöksen liuos metyleeni-kloridissa (10 ml) lisättiin seokseen, joka sisälsi 0,77 g dietyyli-L-glutamaattihydrokloridia, 0,65 ml 2,6-lutidii-10 nia ja 10 ml metyleenikloridia. Seosta hämmennettiin la-boratoriolämpötilassa 16 tuntia, pestiin IN kloorivety-happoliuoksella, natriumbikarbonaatin kyllästetyllä vesi-liuoksella ja natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, suodatettiin 15 ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös puhdistettiin kromato- gräfian avulla käyttämällä piihappogeelipylvästä ja elu-enttina metyleenikloridin ja etyyliasetaatin (10:1 til/-til)-seosta. Tällöin saatiin 0,48 g dietyyli-N-/5-(N-tert-butoksikarbonyyli-N-metyyliamino)pikolinoyyli7-L-glu-20 tamaattia.

Seosta, joka sisälsi tämän esterin ja 10 ml tri-fluorietikkahappoa, hämmennettiin 0°C:ssa tunnin ajan ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös pestiin dietyylieette-rillä ja kuivattiin. Tällöin saatiin 0,4 g dietyyli-N-,/5-25 (metyyliamino)pikolinoyyli7-L-glutamaattia hartsimaisena aineena, jota käytettiin ilman enempää puhdistamista. Selitys (7): selityksessä (6) selostettu menetelmä toistettiin paitsi, että käytettiin metyyli-5-/N-tert-butoksi-karbonyyli-N-(prop-2-ynyyli)amino/pikolinaattia (valmis-30 tettu käyttämällä julkaisussa "Journal of Medicinal Che- roistry 1980, 23, 1405, esitettyä menetelmää, paitsi että käytettiin propargyylibromidia 3-trifluorimetyylibents-yylikloridin sijasta) vastaavan metyyliaminopikolinaatin sijasta. Tällöin saatiin dietyy1Ϊ-Ν-/5-/Ν-(prop-2-ynyyli)-35 amino/pikolinoyyli^-L-glutamaattia hartsimaisena aineena.

li 3i 8 9 91 2

Selitys (6): Saatiin glutamiinihapon mono-natriumsuolaa.

Lähtöaineena käytettyä dietyyli-N-^6-(metyyliamino)niko-tinoyyli/-L-glutamaattia valmistettiin seuraavalla tavalla: Seosta, joka sisälsi 8,27 g 6-kloorinikotiinihap-5 poa, 5,63 ml oksalyylikloridia, 70 ml metyleenikloridia ja 0,25 ml dimetyyliformamidia, hämmennettiin laborato-riolämpötilassa 16 tuntia ja haihdutettiin kuiviin. Jäännöksen liuos 100 ml:ssa metyleenikloridia lisättiin seokseen, joka sisälsi 13,6 g dietyyli-L-glutamaattihydro-10 kloridia, 22 ml trietyyliamiinia ja 100 ml metyleenikloridia. Seosta hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 16 tuntia, pestiin vedellä (100 ml), kuivattiin natriumsul-faatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä piihappogee-15 lipylvästä ja eluenttina metyleenikloridin ja etyyliasetaatin (4:1 til/til)-seosta. Tällöin saatiin 17 g dietyy-li-N- (6-kloorinikotinoyyli)-L-glutamaattia öljynä.

Seosta, joka sisälsi 0,53 g tätä tuotetta, 0,49 ml N-bentsyyli-N-metyyliamiinia ja 2 ml N-metyylipyrrolidin-20 2-onia, hämmennettiin ja kuumennettiin 100°C:ssa 16 tuntia argon-atmosfäärin alaisena. Seos haihdutettiin ja jäännös jaettiin etyyliasetaatin ja natriumbikarbonaatin kyllästetyn vesiliuoksen kesken. Orgaaninen kerros kuivattiin natriumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdu-25 tettiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttäen piihappogeelipylvästä ja eluenttina metyleenikloridin ja etyyliasetaatin (4:1 til/til)-seosta. Tällöin saatiin 0,57 g dietyyli-N-/^5-(N-bentsyyli-N-metyyliamino)-nikotinoyyli7-L-glutamaattia öljynä.

30 Seosta, joka sisälsi 0,3 g tätä tuotetta, 1 ml:n trifluorietikkahappoa, palladium/hiilellä-katalysaattoria (10 %:nen, 0,05 g) ja 2 ml etanolia, hämmennettiin 60°C: ssa 2 tuntia. Seos suodatettiin ja suodos haihdutettiin. Jäännös jaettiin etyyliasetaatin ja natriumbikarbonaatin 35 kyllästetyn vesiliuoksen kesken. Orgaaninen kerros kuivat- 32 8 9 91 2 tiin natriumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Tällöin saatiin 0,22 g dietyyli-N-,/6- (metyyli-amino)nikotinoyyli7-L-glutamaattia, jota käytettiin sitä enempää puhdistamatta.

5 Esimerkki 8

Esimerkin 3 ensimmäisessä kappaleessa esitetty menetelmä toistettiin paitsi, että 6-bromimetyyli-3,4-di-hydro-2-metyylikinatsolin-4-onin sijasta käytettiin 6-bro-mimetyyli-2,4-dimetoksikinatsoliinia.

1Q Seosta, joka sisälsi 1,8 g tuotetta, 20 ml etano lia, 26,9 ml IN natriumhydroksidin vesiliuosta ja 20 ml vettä, hämmennettiin 60°C:ssa 16 tuntia. Seos haihdutettiin kiertohaihduttimessa noin 10 ml:n tilavuuteen, suodatettiin ja hapotettiin pH-arvoon 3 lisäämällä 2N kloori-15 vetyhappoliuosta. Seos sentrifugoitiin ja kiinteä jäännös pestiin vedellä (4 x 30 ml) ja kuivattiin. Tällöin saatiin 0,55 g N-p-/N-(3,4-dihydro-2-metoksi-4-oksokinatso-lin-6-yylimetyyli)-N-metyyliamino7bentsoyyli-L-glutamii-nihappoa (sisälsi 2,5 ekvivalenttia vettä), sp 240-245°C. 20 NMR-spektri: (CD3SOCD3) 2,0 (m, 2H, CH2), 2,32 (t, 2H, CH2C02H), 3,09 (s, 3H, CH3N), 3,93 (s, 3H, CH30), 4,45 (m, 1H, NHCH), 4,75 (s, 2H, CH2N), 6,77 (d, 2H, aromaattinen, J=9 Hz), 7,44 (d, 1H, 8-H, J=9 Hz) (d of d's, 1H, 7-H, J=2 ja 9 Hz), 7,74 (d, 2H, aromaattinen, J=9 Hz), 25 7,84 (d, 1H' 5~H' J=2 Hz) , 8/17 (d, 1H, NH, J=8 Hz);

Massaspektri: (FAB negatiivisilla ioneilla) m/e 467 (P-l)

Alkuaineanalyysi: saadut arvot C 53,8, H 4,8, N 10,7 % C23H24N4O7'2,5 H20 edellyttää arvoja C 53,8, H 5,65, N 10,9 % 30 Lähtöaineena käytettyä bromimetyylikinatsoliinia saatiin seuraavalla tavalla:

Seosta, joka sisälsi 8,2 g 2,4-dimetoksi-6-metyyli kinatsoliinia, 7,9 g N-bromisukkinimidiä, 0,19 g bentso-yyliperoksidia ja 200 ml hiilitetrakloridia, kuumennet-35 tiin palautusjäähdyttäjää käyttäen 2 tuntia. Lämmin liuos h 33 89 912 suodatettiin ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 11,7 g 6-bromimetyyli-2,4-dimetoksikinatsoliinia, sp 138-143°C.

Esimerkki 9 ^ Esimerkissä 8 esitetty menetelmä toistettiin pait si, että dietyyli-N-(p-metyyliaminobentsoyyli)-L-gluta-maatin sijasta käytettiin sopivaa dietyyli- tai di-tert-butyyli-L-glutamaattia. Tällöin saadut yhdisteet on esitetty seuraavassa taulukossa ja näiden rakenteet vahvis-tettiin protonimagneettisen resonanssin ja massaspektroskopian avulla sekä alkuaineanalyysin perusteella.

Taulukko III 0

15 h || CH2—N—Ar-CONH C02H

I II I r2 h ,xH20

MeO

20 --_____-- ! 1 2 l ii ,Esimerkki 9 i R (selitys) Ar ' x s.p.

1 lii I yhdiste nro t , I , I-1--1-1-1 ' 11 : - | 1 | H | 1,4-fenyleeni | 1 | 150-160°C | 25 , ,

2 | etyyli I 1,4-fenyleeni | 1 ' 140-146°C

- ' I i

| 3 I prop-2-ynyyli | 1,4-fenyleeni | 1 155-165°C

: : : 4 ^ prop-2-enyyli | 1,4-fenyleeni ^ 1 ^ 130-134°C

3Q 5 2-hydroksietyyli | 1,4-fenyleeni 1,25 ^ 150-175°C

• I 6 ' 3-hydroksipropyyli | 1,4-fenyleeni 1,5 | 145-155°C , :T: i ! o

I 7 2-fluorietyyli | 1,4-fenyleeni 1,25 J 141-145 C

... ' 8 karboksimetyyli (1) ; 1,4-fenyleeni = 2 . 165-185°C

I * i i I -

35 I g 2-aminoetyyli (2) j 1,4-fenyleeni j 0,75 217-220°C

Λ.: ,| I ' I

34 09 91 2

Taulukko III (jatkoa) 2

Esim. 9 R (selitys) x Sp yhdisteen nro s 1 i , i ;

j I . / I I

I 10 | etyyli 0,5 1A0-1A5°C

ii ' 1 : i ' 11 I etyyli l tien-2,5-di- j 1,25 132-135 C i I I ' yyli i !

10 !_:_l_j_!_L

Selitys (1): Tämän yhdisteen valmistuksessa käytettyä dietyyli-p-(karboetoksimetyyliamino)bentsoyyli-L-gluta-maattia on selostettu kirjallisuudessa (Journal of Medi-cinal Chemistry, 1985, 28, 1468).

Selitys (2): Di-tert-butyyli-N-^p-(2—ftaali-imidoetyyli)-aminobentsoyyli7-L-glutamaatti reagoitettiin 6-bromime-tyyli-2,4-dimetoksikinatsoliinin kanssa käyttämällä esimerkin 3 ensimmäisessä kappaleessa selostettua menetel- 20 mää. Seosta, joka sisälsi 2,1 g tuotetta, 2,12 ml 3-di-metyyliaminopropyyliamiinia, 0,98 ml di-isopropyylietyyli-amiinia ja 18 ml metanolia, kuumennettiin palautusjääh-: : dyttäjää käyttäen 11 tuntia ja haihdutettiin kuiviin.

Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä . piihappogeelipylvästä ja eluenttina metyleenikloridin ja metanolin (20:1 til/til)-seosta. Tällöin saatiin 0,7 g di-tert-butyyli-N-p-^N-(2-aminoetyyli)-N-(2,4-dimetoksi-. . kinatsolin-6-yylimetyyli)amino7bentsoyyli-L-glutamaattia.

Tämä di-esteri hydrolysoitiin käyttämällä olosuhteita, 30 jotka on esitetty esimerkin 8 toisessa kappaleessa, jolloin saatiin N-p-/N-(2-aminoetyyli)-N-(3,4-dihydro-2-metoksi-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)amino7bentsoyyli-L-glutamiinihappoa.

Lähtöaineena käytettyä di-tert-butyyliesteriä saa-35 tiin seuraavalla tavalla: t> 35 3 9 9 1 2

Seosta, joka sisälsi 5,1 g di-tert-butyyli-N-(p-aminobentsoyyli-L-glutamaattia (Journal of Medicinal Chemistry 1985, 28, 1468), 20,4 g N-(2-bromietyyli)ftaali-imidiä, 9,4 ml 2,6-lutidiinia ja 20 ml N,N-dimetyyliaset-5 amidia, kuumennettiin 100°C:ssa 18 tuntia argon-atmosfäärin alaisena. Seos jäähdytettiin, kaadettiin 110 ml:aan IN rikkihapon vesiliuosta ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 70 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella (3 x 50 ml), kuivattiin mag-10 nesiumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin.

Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä piihappogeelipylvästä ja eluenttina metyleenikloridin ja etyyliasetaatin (10:1 til/til)-seosta. Tällöin saatiin 5,3 g di-tert-butyyli-N-/p-(2-ftaali-imidoetyyli)amino-15 bentsoyyli/-L-glutamaattia, sp 157-158°C.

Esimerkki 10

Esimerkissä 8 esitetty menetelmä toistettiin käyttämällä dietyyli-N-^p-(prop-2-ynyyli)aminobentsoyyli/-L-glutamaattia ja sopivaa 2,4-dialkoksi- tai 2,4-diaryyli-20 oksi-6-bromimetyylikinatsoliinia. Tällöin saatiin seuraa- vassa taulukossa esitetyt yhdisteet, joiden rakenteet vahvistettiin protonimagneettisen resonanssin ja massaspekt-·:·. roskopian avulla ja alkuaineanalyysin perusteella.

25 Taulukko IV

h II eh2-n-<a Λ-conh. co2h 30 ^-' V'/

Il I ch2c=ch h ch2ch2co2h r! x H20 36 8991 2

Esimerkki 10 (Selitys) x Sp (°C)

Yhdiste nro 1 etoksi (1) 2 134-136 2 2-metoksietoksi (2) 1 134-140 5 3 2-hydroksietoksi (3) 2 145-149 4 fenoksi (4) 3 159-164

Selitys (1): Lähtöaineena käytettyä bromimetyyliyhdis-tettä saatiin seuraavalla tavalla: 10 Seosta, joka sisälsi 3 g 2,4-dikloori-6-metyyli- kinatsoliinia ja natriumetoksidin liuosta ^valmistettu lisäämällä 1,07 g natriummetallia 100 ml:aan etanolia7/ kuumennettiin palautus jäähdyttämää käyttäen 4 tuntia, jäähdytettiin, kaadettiin 100 ml:aan natriumkloridin kyl-15 lästettyä vesiliuosta ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 90 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin vedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä piihappogeelipylvästä ja eluenttina 20 metyleenikloridin ja etyyliasetaatin (10:1 til/til)-seosta. Tällöin saatiin 1,9 g 2,4-dietoksi-6-metyylikinatso-liinia, sp 60-62°C, joka muutettiin 6-bromimetyylijohdannaiseksi käyttämällä esimerkin 8 viimeisessä kappaleessa selostettua menetelmää.

25 Selitys (2): Lähtöaineena käytettyä bromimetyyliyhdistet-tä saatiin käyttämällä edellä kuvattua menetelmää ja lähtemällä 2,4-dikloori-6-metyylikinatsoliinista mutta käyttämällä natriumetoksidin sijasta 2-metoksietanolin nat-riumsuolaa.

30 Selitys (3): Lähtöaineena käytettyä bromimetyyliyhdis-tettä saatiin seuraavalla tavalla: 30 ml etyleeniglykolia lisättiin natriumhydridin (2,4 g 50 %:sta dispersiota öljyssä, joka oli pesty hek-saanilla argon-atmosfäärin alaisena). Joukkoon lisättiin 35 liuos, joka sisälsi 2,06 q 2,4-dikloori-6-metyylikinatso- 1: 37 8991 2 liinia 5 inl:ssa dimetyyliformaraidia, ja seosta hämmennettiin 100°C:ssa 16 tuntia, jäähdytettiin, kaadettiin 100 ml:aan vettä ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 200 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin natsiumkloridin kyl-5 lästetyllä vesiliuoksella, kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Seosta, joka sisälsi 2 g tuotetta, 20 ml vedetöntä pyridiiniä ja 1,9 ml bentsoyylikloridia, hämmennettiin laboratoriolampötiIässä 16 tuntia, kaadettiin veteen (100 ml) ja uutettiin me-10 tyleenikloridilla (3 x 70 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin natriumbikarbonaatin kyllästetyllä vesiliuoksella (100 ml) ja vedellä (50 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin kro-matografian avulla käyttämällä piihappogeelipylvästä ja 15 eluenttina metyleenikloridin ja etyyliasetaatin (20:1 til/til)-seosta. Tällöin saatiin 1,3 g 2,4-di-(2-bentso-yylioksietoksi)-6-metyylikinatsoliinia, joka muutettiin 6-bromimetyylijohdannaiseksi käyttämällä esimerkin 8 viimeisessä kappaleessa selostettua menetelmää.

20 Tämän jälkeen toistettiin esimerkissä 8 selostet tu menetelmä ja lopuksi käytettiin hydrolyysiä emäksisessä vesiliuoksessa bentsoyylisuojaryhmien poistamiseksi. Selitys (4): Lähtöaineena käytettyä bromimetyyliyhdistet-tä saatiin seuraavalla tavalla: 25 Seosta, joka sisälsi natriumfenoksidin liuosta sulassa fenolissa (saatu lisäämällä 0,8 g natriummetallia 30 g:aan sulaa fenolia 80°C:ssa) ja 3,2 g 2,4-dikloori-6-metyylikinatsoliinia, kuumennettiin 180°C:ssa tunnin ajan. Lämmin seos kaadettiin 200 ml:aan vettä ja joukkoon li-30 sättiin 5 ml 10N natriumhydroksidin vesiliuosta ja sen jälkeen jääetikkaa seoksen happamuuden saamiseksi pH-ar-voon 6. Kiinteä aine erotettiin suodattamalla, pestiin vedellä, liuotettiin metyleenikloridiin ja kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla. Liuos johdettiin piihappogeeli-35 pylvään läpi käyttäen eluenttina lisää metyleenikloridia.

38 9 9 912 Tällöin saatiin 4,6 g 2,4-difenoksi-6-metyylikinatsolii-nia, sp 184-185°C, joka yhdiste muutettiin 6-bromimetyy-lijohdannaiseksi käyttämällä esimerkin 8 viimeisessä kappaleessa selostettua menetelmää.

5 Esimerkki 11 0,44 g difenyylifosforyyliatsidia ja 0,67 ml tri-etyyliamiinia lisättiin peräkkäin seokseen, joka sisälsi p-^N- (3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyy-li)-N-(prop-2-ynyyli)amino/bentsoehappoa (sen trifluori-10 etikkahapposuolana; 0,5 g), L-alaniinietyyliesteriä (sen hydrokloridisuolana; 0,27 g) ja 20 ml dimetyyliformamidia, joka seos jäähdytettiin jääkylvyssä 0°C:seen. Seosta hämmennettiin 0°C:ssa 5 tuntia ja laboratoriolämpötilassa 48 tuntia, kaadettiin jään ja veden seokseen (100 ml) ja 15 sentrifugoitiin. Kiinteä jäännös pestiin vedellä (3 x 10 ml) ja kuivattiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä piihappopylvästä ja eluenttina mety-leenikloridin ja etanolin (24:1 ti1/til)-seosta.

Seosta, joka sisälsi 0,11 g tuotetta, 4 ml etano-20 lia, 4 ml vettä ja 0,64 ml IN natriumhydroksidin vesiliuosta, hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 2 tuntia, ha-potettiin pH-arvoon 3 0,2N kloorivetyhapon vesiliuoksella ja sentrifugoitiin. Kiinteä jäännös pestiin vedellä (5 x 10 ml) ja kuivattiin. Tällöin saatiin 0,08 g N-p-/N-(3,4-25 dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino7bentsoyyli-L-alaniinia monohydraattina, sp 165-170°C.

NMR-spektri: (CD3SOCD3) 1,32 (d, 3H, CH3; J=7 Hz), 2,31 (s, 3H, CH3), 3,18 (t, 1H, C=CH, J=2 Hz), 4,3 (m, 3H, 30 NHCH ja CH2C=CH), 4,78 (s, 2H, CH2N), 6,33 (d, 2H, aromaattinen, J=9 Hz), 7,52 (d, 1H, 8-H, J=8,5 Hz), 7,68 (d of d's, 1H, 7-H, 7-H, J=2 ja 8,5 Hz), 7,72 (d, 2H, aromaattinen, J=9 Hz), 7,96 (d, 1H, 5-H, J=2Hz), 8,21 (d, 1H, NH, J=6,5 Hz), 12,13 (s, 1H, NH); 35 Massaspektri: (FAB negatiivisilla ioneilla) m/e 418 (P-l); li 39 9 9 912

Alkuaineanalyysi; saadut arvot: C 63,0, H 5,3, N 12,3 % C23H22N4°4 *H2® edellyttää arvoja: C 63,3, H 5,5, N 12,8 %

Esimerkissä 11 esitetty menetelmä toistettiin käyttämällä alaniinietyyliesterin sijasta vastaavasti L-fenyy-5 lialaniinietyyliesteriä, L-seriinimetyyliesteriä ja L-asparagiinihapon dimetyyliesteriä. Tällöin saatiin N-p-/N- (3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N- (prop-2-ynyyli)amino/bentsoyyli-L-fenyylialaniinia mono-hydraattina, sp 152-155°C, vastaavaa bentsoyyli-L-seriiniä 10 hemihydraattina, sp 200-204°C, ja vastaavaa bentsoyyli-L-asparagiinihappoa (sisälsi 1,25 ekvivalenttia vettä), sp 180-190°C (hajoaa).

Esimerkin 11 ensimmäisessä kappaleessa esitetty menetelmä toistettiin myös käyttämällä alaniinietyyli- 5 15 esterin sijasta N -bentsyylioksikarbonyyli-L-ornitiini-tert-butyyliesteriä.

Boori-tris(trifluoriasetaattia) (1 ml 1-molaarista trifluorietikkahappoliuosta) lisättiin liuokseen, joka sisälsi 0,1 g tuotetta 1 ml:ssa trifluorietikkahappoa ja 2o joka oli jäähdytetty -10°C:seen. Seosta hämmennettiin 5°C: ssa 3 tuntia, siihen lisättiin 2 ml metanolia ja seos haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin kromatografian avul-• la käyttämällä preparatiivista ohutkerroskromatografiale- vyä ja liuottimena etanolin ja ammoniakin (väkevän) vesi-25 liuoksen (4:1 til/til)-seosta. Tällöin saatiin 15 mg N-p~/N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-okso-kinatsolin-6-yyli-metyyli) -N-(prop-2-ynyyli)amino7bentsoyyli-L-ornitiinia monohydraattina, sp 210-215°C (hajoaa).

Lähtöaineena käytettyä p-/.N-( 3,4-dihydro-2-metyy-30 li-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-(prop-4-ynyyli)ami-no/bentsoehappoa saatiin seuraavalla tavalla:

Seosta, joka sisälsi 10,5 g tert-butyyli-p-amino-bentsoaattia (Synth. Commun., 1984, 14, 921), propargyyli-bromidia (7,3 ml 80 %:sta tolueeniliuosta), 7,5 g kalium-35 karbonaattia ja 85 ml N,N-dimetyyliasetamidia, kuumennet- 40 8 9 91 2 tiin 50°C:ssa 24 tuntia, jäähdytettiin, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä piihappogeelipylvästä ja eluenttina hek-saanin ja etyyliasetaatin (6:1 ti1/til)-seosta.

5 Seosta, joka sisälsi 7,3 g tuotetta, 8 g 6-bromi- metyyli-3,4-dihydro-2-metyylikinatsolin-4-onia (valmistettu edellä esimerkissä 3 kuvatulla tavalla), 3,2 g kalsium-karbonaattia ja 100 ml dimetyyliformamidia, hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 65 tuntia, suodatettiin ja haih-PO dutettiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä piihappogeelipylvästä ja eluenttina etyyliasetaattia .

Seosta, joka sisälsi 2,5 g tuotetta ja 25 ml tri-fluorietikkahappoa, hämmennettiin laboratoriolämpötilas-P5 sa 10 minuuttia ja haihdutettiin, jolloin saatiin 2,5 g p-aminobentsoehappoa sen trifluorietikkahapposuolana.

Esimerkki 12

Seosta, joka sisälsi 1,24 g 6-bromimetyyli-3,4-di-hydro-2-metyylikinatsolin-4-onia, 1,2 g metyyli-N-/p-20 (prop-2-ynyyli)aminobentsoyyli7~glysiiniä (valmistettu menetelmällä, joka on esitetty julkaisussa "Journal of Medicinal Chemistry, 1986, 29, 1117", 0,5 g kalsiumkar-bonaattia ja 12 ml dimetyyliformamidia, hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 72 tuntia, suodatettiin ja haihdu-25 tettiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä piihappogeelipylvästä ja eluenttina etyyliasetaatin ja metanolin (9:1 til/til)-seosta.

Osa tuotteesta (0,17 g) hydrolysoitiin emäksisissä olosuhteissa noudattamalla esimerkin 11 toisessa kap-30 paleessa selostettua menetelmää. Tällöin saatiin 0,09 g N-p-^N-(3,4-dihydro-2-metyy1i-4-oksokinatsolin-6-yyli-metyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino/bentsoyyliglysiiniä (sisälsi 1,5 ekvivalenttia vettä), sp 240-250°C (hajoaa).

Esimerkki 13 35 Esimerkin 3 toisessa kappaleessa esitetty menetel mä toistettiin paitsi että lähtöaineena käytettiin dietyy- t; 4i 89 91 2 li-Ν-ρ-,/Ν- (3,4-dihydro-2-metyylitio-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino7-bentsoyyli-L-gluta-maattia. Tällöin saatiin N-p-/N- ( 3,4-dihydro-2-metyyli-tio-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)-5 amino7-bentsoyyli-L-glutamiinihappoa (sisälsi 0,75 ekvi valenttia vettä), sp 157-163°C.

Lähtöainetta saatiin seuraavalla tavalla:

Seosta, joka sisälsi 0,75 g dietyyli-N-p-/N-(2-kloori-3,4-dihydro-4-oksokinatsolin-6-yyliinetyyli) -n- (prop-10 2-ynyyli)amino7bentsoyyli-L-glutamaattia (saatu käyttä mällä esimerkissä 4 selostettua menetelmää), 0,125 g tio-ureaa, 0,05 ml muurahaishappoa ja 20 ml vettä, kuumennettiin palautusjäähdyttäjää käyttäen 15 minuuttia, jäähdytettiin ja haihdutettiin kuiviin. Jäännös puhdistettiin 15 kromatografiän avulla käyttämällä piihappogeelipylvästä ja eluenttina metyleenikloridin ja etyyliasetaatin (10:3 til/til)-seosta. Tällöin saatiin dietyyli-N-p-/N-(4-okso- 1,2,3,4-tetrahydro-2-tioksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino/bentsoyyli-L-glutamaattia, sp 92-94°C. 20 Seosta, joka sisälsi 0,19 g tätä tuotetta, 12,8 ml vettä, 9,5 ml etanolia ja ammoniakin vesiliuosta (3,2 ml liuosta, jonka ominaispaino oli 0,88 g ml-1), hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 10 minuuttia. 0,13 ml metyy-likloridia lisättiin ja seosta hämmennettiin tunnin ajan.

25 Saostunut kiinteä aine erotettiin suodattamalla, pestiin veden ja etanolin (1:1 til/til)-seoksella ja kuivattiin. Tällöin saatiin 0,16 g dietyyli-N-p-/N-(3,4-dihydro-2-metyylitio-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyy-li)amino7bentsoyyli-L-glutamaattia (sisälsi 0,75 ekviva-3q lenttia vettä), sp 230-233°C.

Lähtöaineiden valmistusta edellä koskeneessa ensimmäisessä kappaleessa esitetty tuote voidaan vaihtoehtoisesti hydrolysoida emäksellä käyttämällä esimerkin 3 toisessa kappaleessa kuvattua menetelmää. Tällöin saatiin 35 N-p-/N-(N-okso-1,2,3,4-tetrahydro-2-tioksokinatsolin-6- 42 8991 2 yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)aminq/bentsoyyli-L-gluta-miinihappoa monohydraattina, sp 161-166°C.

Esimerkki 14

Esimerkin 3 toisessa kappaleessa esitetty raene-5 telmä toistettiin paitsi, että lähtöaineena käytettiin die tyyli-N-p-^N-,/3,4-dihydro-4-okso-2- (pyrimidin-2-yy li-tio)kinatsolin-6-yylimetyyIi7-N-(prop-2-ynyyli)amino;bent-soyyli-L-glutamaattia . Tällöin saatiin N-p- N-,/3,4-dihyd-ro-4-okso-2-(pyrimidin-2-yylitio)kinatsolin-6-yylimetyy-10 Ii7-N-(prop-2-ynyyli)amino,bentsoyyli-L-glutamiinihappoa (sisälsi 0,5 ekvivalenttia vettä), sp 143-147°C.

Lähtöaineena käytettyä dietyyli-p-aminobentsoyyli-L-glutamaattia saatiin seuraavalla tavalla:

Seosta, joka sisälsi 0,35 g dietyyli-N-p-,/fi- (2-kloo-15 ri-3,4-dihydro-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-(prop-2- ynyyli)amino/bentsoyyli-L-glutamaattia (saatu käyttämällä esimerkissä 4 esitettyä menetelmää), 0,21 g 2-merkaptopyri-midiiniä ja 5 ml N-metyylipyrrolid-2-onia, hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 16 tuntia, kaadettiin veteen (20 ml) 20 ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 20 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin vedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä piihappogeeli-pylvästä ja eluenttina metyleenikloridin ja etyyliasetaa-25 tin (3:2 til/til)-seosta. Tällöin saatiin 0,19 g dietyyli-N-p-^N-/3,4-dihydro-4-okso-2- (pyrimidin-2-yylitio)kinat-solin-6-yylimetyyliJ^-N-(prop-2-ynyyli)amino/bentsoyyli-L-glutamaattia monohydraattina, sp 163-165°C.

- Esimerkki 15 30 Seosta, joka sisälsi 0,56 g dietyyli-N-p-/N-2-kloo- rimetyyli-3,4-dihydro-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino7bentsoyyli-L-glutamaattia, 0,11 g 2-merkaptopyr.i.midiiniä, natriumhydridiä (0,047 g 50 %:sta dispersiota öljyssä, joka oli pesty heksaanilla) ja 10 ml 35 dimetyyliformamidia, hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 43 8 9 91 2 16 tuntia, kaadettiin veteen (50 ml) ja uutettiin etyyliasetaatilla (4 x 25 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin vedellä (2 x 25 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin 5 kromatogtafiän avulla käyttämällä piihappogeelipylvästä ja eluenttina etyyliasetaattia.

Tuote hydrolysoitiin emäksellä käyttämällä esimerkin 3 toisessa kappaleessa selostettua menetelmää. Tällöin saatiin 0,32 g N-p-^N-/3,4-dihydro-4-okso-2-(pyrimidin-2-10 yylitiometyyli)-kinatsolin-6-yylimetyyli7~N-(prop-2-ynyy- li)amino^bentsoyyli-L-glutamiinihappoa (sisälsi 1,5 ekvivalenttia vettä), sp 151-153°C.

Lähtöaineena käytettyä dietyyli-L-glutamaattia saatiin seuraavalla tavalla: 25 Esimerkin siinä kappaleessa esitetty menetelmä, joka koski lähtöaineiden valmistusta, toistettiin paitsi, että 3,4-dihydro-2,6-dimetyylikinatsolin-4-onin sijasta käytettiin 2-kloorimetyyli-3,4-dihydro-6-metyylikinatso-lin-4-onia (Dissertationes Pharmaceuticae et Pharmacolo-20 gicae 1968, 20, 29). Tällöin saatiin 6-bromimetyyli-2- kloorimetyyli-3,4-dihydrokinatsolin-4-onia.

Esimerkin ensimmäisessä kappaleessa esitetty mene-telmä toistettiin paitsi, että lähtöaineina käytettiin 6-bromimetyyli-2-kloorimetyyli-3,4-dihydrokinatsolin-4-25 onia ja dietyyli-N-p-(prop-2-ynyyli) aminobentsoyyli-L- glutamaattia. Tällöin saatiin dietyyli-N-p-/N-(2-kloori-metyyli-3,4-dihydro-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)aminq7”bentsoyyli-L-glutamaattia.

Esimerkki 16 30 Seosta, joka sisälsi 5,1 g 6-bromimetyyli-3,4-di- hydro-2-metyylikinatsolin-4-onia, 1,1 g dietyyli-N-p-(prop—2-ynyyli)amino-o-trifluorimetyylibentsoyyli-L-glu-;· tamaattia, 0,12 g magnesiumoksidia ja 30 ml N,N-dimetyy- liasetamidia, hämmennettiin ja kuumennettiin 80°C:ssa 35 19 tuntia. Seos jäähdytettiin, kaadettiin jäihin (100 ml) 44 3991 2 ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 200 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin vedellä (2 x 100 ml), kuivattiin nat-riumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä 5 piihappogeelipylvästä ja eluenttina metyylikloridin ja metanolin (50:1 til/til)-seosta. Tällöin saatiin 0,96 g dietyyli-N-p-/N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin- 6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino7~o-trifluorimetyyli-bentsoyyli-L-glutamaattia, sp 191°C.

10 Seosta, joka sisälsi 0,49 g tätä tuotetta, 15 ml etanolia, 15 ml vettä ja 2,5 ml IN natriumhydroksidin vesiliuosta, hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 17 tuntia. Seos suodatettiin ja suodos hapotettiin pH-arvoon 4 lisäämällä IN kloorivetyhapon liuosta. Seos sentrifugoi-15 tiin ja kiinteä jäännös pestiin kolmesta vedellä ja kuivattiin. Tällöin saatiin 0,38 g N-p-/N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)-amino7~o-trifluorimetyylibentsoyyli-L-glutamiinihappoa (hemihydraattina), sp 197°C.

20 Lähtöaineena käytettyä dietyyliglutamaattia saa tiin seuraavalla tavalla:

Seosta, joka sisälsi 5,6 g 4-nitro-2-trifluori-metyylibentsonitriiliä (J. Amer. Chem. Soc. 1954, 76, 1051), 20 ml jääetikkaa ja 30 ml väkevää rikkihappoa, häm-25 mennettiin ja kuumennettiin 130°C:ssa 45 minuuttia. Seos jäähdytettiin, kaadettiin jäihin (100 ml) ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 150 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin 0,05N kloorivetyhapon vesiliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin.

30 Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä piihappogeelipylvästä ja eluenttina etyyliasetaattia. Tällöin saatiin 5,16 g 4-nitro-2-trifluorimetyylibentsamidia, sp 192°C.

Seosta, joka sisälsi 1,82 g tätä tuotetta, 50 ml 35 vettä, 2 g natriumhydroksidia ja 10 ml 30 %:sta vetyper- I: 45 8 9 91 2 oksidia, hämmennettiin ja kuumennettiin 70°C:ssa 4 tuntia, jonka ajan kuluessa lisättiin yksi lisäerä natriumhydrok-sidia (2 g) ja kaksi lisäerää vetyperoksidia (30 %:sta, 10 ml kummallakin kerralla). Seosta kuumennettiin 70°C: 5 ssa 3 päivää, jäähdytettiin, hapotettiin IN kloorivety-hapon vesiliuoksella ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 100 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin 0f05N kloorivetyha-pon vesiliuoksella, kuivattiin natriumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin jäljelle jäi 1,76 g 10 4-nitro-2-trifluorimetyylibentsoehappoa vaaleanruskeana kiinteänä aineena, sp 128-129°C (J. Amer. Chem. Soc., 1954, 76, 1051, sp 137-140°C).

Seosta, joka sisälsi 0,79 g tätä tuotetta, 50 ml tolueenia ja 2 ml tionyylikloridia, kuumennettiin palau-15 tusjäähdyttäjää käyttäen 5 tuntia, jäähdytettiin ja haih dutettiin. Jäännöksen liuos etyleenikloridissa (50 ml) lisättiin hämmennettyyn seokseen, joka sisälsi 0,68 q di-etyyli-L-glutamaattihydrokloridia, 0,75 g trietyyliamiinia ja 100 ml metyleenikloridia ja joka jäähdytettiin 4°C:seen. 20 Seosta hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 2 tuntia, pestiin vedellä (4 x 100 ml), kuivattiin natriumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä piihappogeelipyl-västä ja eluenttina metyleenikloridin ja etyyliasetaatin 25 (9:1 til/til)-seosta. Tällöin saatiin 1,23 g dietyyli-N- p-nitro-o-trifluorimetyylibentsoyyli-L-glutamaattia, sp 105°C (kiteytettynä uudelleen etanoliliuoksesta).

Sen jälkeen kun edellä esitetyt reaktiot oli toistettu suuremmassa mittakaavassa, hämmennettiin seosta, jo-30 ka sisälsi 12,5 g tätä tuotetta, 1 litran etanolia ja 1 gramman palladium/hiilellä-katalysaattoria (10 %:nen), vetyätmosfäärin alaisena siksi kunnes laskettu tilavuus vetyä oli kulunut. Seos suodatettiin ja haihdutettiin, jolloin jäljelle jäi öljyä, joka seistessään kiteytyi. Täl-35 löin saatiin 11,6 g dietyyli-N-p-amino-o-trifluorimetyyli-bentsoyyli-L-glutamaattia, sp 95°C.

46 3 9 9 1 2

Seosta, joka sisälsi 10,2 g tätä tuotetta, 8,5 g propargyylibromidia (80 %:sena tolueeniliuoksena), 7,2 g kaliumkarbonaattia ja 150 ml kuivaa dimetyyliformamidia, hämmennettiin ja kuumennettiin 100°C:ssa 100 minuuttia. Seos jäähdytettiin, kaadettiin jäihin (100 ml) ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 200 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin vedellä (2 x 200 ml), kuivattiin natriumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä piihappogeelipy1-västä ja eluenttina petrolieetterin (kp 60-80°C) ja etyyliasetaatin (2:1 til/til)-seosta. Tällöin saatiin 7,3 g dietyyli-N-p-(prop-2-ynyyli)-amino-o-trifluorimetyyli-bentsoyyli-L-glutamaattia, sp 91°C.

Esimerkki 17

Esimerkissä 3 esitetty menetelmä toistettiin käyttämällä 6-bromimetyyli-3,4-dihydro-2-metyylikinatsolin-4-onia (valmistettu esimerkissä 3 esitetyllä tavalla) sopivana kinatsolinonina; sopivaa dietyyli-L-glutamaattia ja sopivaa orgaanista tai epäorgaanista emästä ensimmäisessä 2Q vaiheessa. Tällöin saatiin seuraavassa taulukossa esitettyjä yhdisteitä, joiden rakenteet vahvistettiin proto-nimagneettisen resonanssin ja massaspektroskopian avulla sekä alkuaineanalyysin perusteella. 1 47 39 912

Taulukko V 0

H CH2—N—Ar— CONH. COoH

5 i iTV k R2 H cH2CH2C02H.xH20

Me

Esimerkki 17 (selitys) Ar x Sp yhdiste nro l I ,ΟΜβ I > 1 1 etyyli l (1) I ~ζϊ~ν 1 * 1 ^52-157°C l I I ^OMe I I 1 2 prop-2-ynyyli i (2) l 1 2,5 l 175—180°C i

1 1 sNHCOMel I I

etyyli I (3) l ' 1 1 211°C(dec)l I I F « · '

4 prcp-2-ynyyli i (4) I 1 * 1 156—160°C I

II OH I I > 20 / 5 prop-2-ynyyli i (5) l 1 1 1 210°C(dec)l

Il Cl I I I

6 etyyli l (6) ' -& 11 I 201-207°C I

I I Cl I I ·

: ^ 7 prop-2-ynyyli I (6) I I 0,5 I 162—164°C I

. Selitys (1): Dietyyli-N-(4-etyyliamino-2-metoksibentso- · yyli)-L-glutamaattia saatiin käyttämällä esimerkin 16 3Q sen osan kolmessa viimeisessä kappaleessa selostettua : menetelmää, joka koski lähtöaineiden valmistusta paitsi, että 4-nitro-2-trifluorimetyylibentsoehapon sijasta käy-:· tettiin 2-metoksi-4-nitrobentsoehappoa (Journal of the

Chemical Society, 1917, 111, 232) ja propargyylibromidin 35 sijasta käytettiin etyylijodidia.

48 8 9912

Selitys (2): Dietyyli-N-/2-metoksi-4-(prop-2-ynyyli)ami-nobentsoyyli/-L-glutamaattia saatiin käyttämällä esimerkin 16 sen osan kolmessa viimeisessä kappaleessa selostettua menetelmää, joka koski lähtöaineiden valmistusta 5 paitsi, että 4-nitro-2-trifluorimetyylibentsoehapon sijasta käytettiin 2-metoksi-4-nitrobentsoehappoa (Journal of the Chemical Society, 1917, 111, 232).

Selitys (3): Dietyyli-N- (2-asetamido-4-etyyliaminobentso-yyli)-L-glutamaattia saatiin käyttämällä esimerkin 16 sen 10 osan kolmessa viimeisessä kappaleessa selostettua menetelmää, joka koski lähtöaineiden valmistusta paitsi, että 4-nitro-2-trifluorimetyylibentsoehapon sijasta käytettiin 2-asetamido-4-nitrobentsoehappoa (Journal of the Chemical Society, 1925, 127, 1795) ja propargyylibromidin sijasta 15 käytettiin etyylijodidia.

Selitys (4): Naftaleeni-1,8-diamiinia käytettiin emäksenä 2,6-lutidiinin sijasta. Dietyyli-N-/3-fluori-4-(prop-2-ynyyli)aminobentsoyyli7-L-glutamaattia saatiin käyttämällä esimerkin 16 sen osan kolmessa viimeisessä kappaleessa se-20 lostettua menetelmää, joka koski lähtöaineiden valmistusta paitsi, että 4-nitro-3-trifluorimetyylibentsoehapon sijasta käytettiin 3-fluori-4-nitrobentsoehappoa (Journal of the American Chemical Society, 1944, 66, 1631).

Selitys (5): DietyyΙϊ-Ν-,/2-asetoksi-4-(prop-2-ynyyli) -25 aminobentsoyyli/-L-glutamaattia saatiin käyttämällä esimerkin 16 sen osan kolmessa viimeisessä kappaleessa selostettua menetelmää, joka koski lähtöaineiden valmistusta paitsi, että 4-nitro-3’-trifluoribentsoehapon sijasta käytettiin 2-asetoksi-4-nitrobentsoehappoa /valmistettu rea-30 goittamalla 2-hydroksi-4-nitrobentsoehappoa (The Dictionary of Organic Compounds, voi. 3, sivu 3169; Chapman and Hall, 1982) etikka-anhydridin kanssa laboratoriolämpö-tilassa7.

Esimerkissä 3 esitetyn menetelmän viimeisen vai-35 heen olosuhteet, se on, sopivan dietyyliglutamaatin hydro- 49 a 9 91 2 lyysi emäksisissä olosuhteissa johti 2-asetoksiryhmän hydrolyysiin. Tällöin saatiin N-p-/N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N- (prop-2-ynyyli)-amino7-o-hydroksibentsoyyli-L-glutamiinihappoa· 5 Selitys (6): Dietyyli-N-/2-kloori-4-(prop-2-ynyyli)amino- bentsoyyli7-L-glutamaattia valmistettiin dietyyli-N- (4-ami-no-2-klooribentsoyyli)-L-glutamaatista (Journal of Medicinal Chemistry, 1986, 29, 468). Vastaavaa 4-etyyliaminobent-soyyli-L-glutamaattia valmistettiin 4-aminojohdannaisesta 2q käyttämällä menetelmää, joka on selostettu julkaisussa "European Journal of Cancer, 1981, 17, 11".

Esimerkki 18

Seosta, joka sisälsi 2,5 g p-/N-( 3,4-dibydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylime tyyli)-N-etyy1iamino/-o-25 nitrobentsoehappo, 0,93 g oksalyylikloridia, 200 ml tetrn-hydrofuraania ja 1 tipan dimetyyliformamidia, hämmennetään laboratoriolämpötilassa 18 tuntia ja haihdutettiin. Jäännöksen liuos 200 ml:ssa tetrahydrofuraania lisättiin hämmennettyyn seokseen, joka sisälsi 1,77 g dietyyli-L-glu-20 tamaattia, 10 ml trietyyliamiinia ja 25 ml tetrahydrofu-raania. Seosta hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 2 tuntia, pestiin vedellä (2 x 50 ml), natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella (50 ml), kuivattiin magnesium-sulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös 25 puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä piihappo-geelipylvästä ja eluenttina etyyliasetaatin ja metanolin (10:1 til/til)-seosta. Tällöin saatiin 0,64 g dietyyli-N-p-/N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyy-li)-N-etyyliamino7~o-nitrobentsoyyli-L-glutamaattia.

30 Seosta, joka sisälsi 0,64 g tätä tuotetta ja 10 ml IN natriumhydroksidin vesiliuosta, hämmennettiin laboratoriolämpötilassa 2 tuntia ja sen jälkeen se hapotettiin pH-arvoon 4 lisäämällä 2N kloorivetyhapon vesiliuosta. Seos sentrifugoitiin ja kiinteä jäännös pestiin vedellä (4 x 35 10 ml) ja asetonilla (10 ml) ja kuivattiin. Tällöin saa- so i 9 912 tiin 0,13 g N-p-/N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatso-lin-6-yylimetyyli)-N-etyy1iamino/-o-nitrobentsoyyli-L-glutamiinihappoa monohydraattina, sp 192-200°C (hajoaa).

Lähtöaineena käytettyä bentsoehappoa saatiin seu-5 raavalla tavalla:

Seosta, joka sisälsi 1 g:n metyyli-p-amino-o-nit-robentsoaattia (The Dictionary of Organic Compounds, voi. 1, sivu 285; Champman and Hall, 1982), 0,8 g etyylijodi-dia, 2,7 g 2,6-lutidiinia ja 5 ml dimetyyliformamidia, 1Q hämmennettiin ja kuumennettiin 80°C:ssa 18 tuntia, jäähdytettiin ja haihdutettiin. Seosta, joka sisälsi jäännöksen, 2,7 g 2,6-lutidiinia, 1,3 g 6-bromimetyyli-3,4-di-hydro-2-metyylikinatsolin-4-onia ja 10 ml dimetyyli form-amidia, hämmennettiin 85°C:ssa 5 tuntia, jäähdytettiin, ^5 kaadettiin veteen (100 ml) ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 70 ml). Yhdistetyt uutokset pestiin natriumkloridin kyllästetyllä vesiliuoksella (70 ml), kuivattiin magnesiumsulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin kromatografiän avulla käyttämällä 2q piihappogeelipylvästä ja eluenttina etyyliasetaatin ja metanolin (50:1 ti1/ti1)-seosta. Tällöin saatiin 0,35 g metyyli-p-/N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-etyyliamino/-o-nitrobentsoaattia.

Seosta, joka sisälsi 0,35 g tätä tuotetta ja 10 ml 25 IN natriumhydroksidin vesiliuosta, hämmennettiin labora- toriolämpötilassa 4 tuntia. Seos hapotettiin pH-arvoon 4 lisäämällä 2N kloorivetyhapon vesiliuosta. Saostunut kiinteä aine erotettiin suodattamalla ja kuivattiin. Tällöin saatiin 0,3 g p-/N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-okso-3Q kinatsolin-6-yylimetyyli)-N-etyyliamino7~o-nitrobentsoe- happoa.

Esimerkki 19

Esimerkissä 3 esitetty menetelmä toistettiin käyttämä 1 lä 2-asctoksimetyy1i-6-bromimetyy1i-3,4-dihydrokin-25 atsolin-4-onia (valmistettu 6-metyyliyhdisteestä, jota li si 3991 2 selostetaan esimerkin 4 selityksessä (5), käyttämällä esimerkin 3 siinä osassa selostettua menetelmää, joka koskee lähtöaineiden valmistusta) 6-bromimetyyli-3,4-di-hydro-2-metyylikinatsolin-4-onin sijasta ja vuorostaan 5 dietyyli-N-(5-metyyliamino-2-tenoyyli)-L-glutamaattia ja dietyyli-N-(5-etyyliamino-2-teonyyli)-L-glutamaattia (jotka kummatkin valmistettiin esimerkin 7 selityksessä (5) kuvatulla tavalla) dietyyli-N-(p-metyyliaminobentsoyyli)-L-glutamaatin sijasta. Tällöin saatiin N-{5-/n-(3,4-dihyd-30 ro-2-hydroksimetyyli-4-okso-kinatsolin-6-yylimetyyli) -N- metyyliaminö)-2-tenoyyli3-L-glutamiinihappoa sen monohyd-raattina, sp 180-190°C, ja N-^5-^N-(3,4-dihydro-2-hydrok-simetyy li-4-oksokinatsolin-6-yy lime tyyli) -N-e tyyli aminof-2-tenoyylijr-L-glutamiinihappoa sen monohydraattina, sp 15 148-15 3°C.

Esimerkki 20

Esimerkissä 11 esitetty menetelmä toistettiin paitsi, että käytettiin 2-/N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-etyyliamino7tiatsoli-5-20 karboksyylihappoa bentsoehapon sijasta ja käytettiin di- etyyli-L-glutamaattia, sen hydrokloridisuolana, L-ala-niinietyyliesterin sijasta. Tällöin saatiin N-^2-/N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-etyy-liamino7tiatsoli-5-karbonyyl^-L-glutamiinihappoa sen 25 hemihydraattina, sp 160-170°C.

Lähtöaineena käytettyä tiatsoli-5-karboksyylihappoa saatiin seuraavalla tavalla:

Seosta, joka sisälsi 10 g 6-bromimetyyli-3,4-di-hydro-2-metyylikinatsolin-4-onia (valmistettu esimerkis-30 sä 3 esitetyllä tavalla), 7,9 ml vedetöntä etyyliamiinia ja 250 ml asetonitriiliä, hämmennettiin nopeasti labora-toriolämpötilassa 4 tuntia. Seos haihdutettiin kuiviin, jäännös liuotettiin veteen, suodatettiin ja suodos haihdutettiin. Jäännös jauhettiin hienoksi asetonissa, jol-... 35 loin saatiin 8,5 g N- (3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinat- 52 -:9912 solin-6-yylimetyyli)-N-etyyliamiinia sen hydrobromidi-suolana, sp > 260°C.

Seosta, joka sisälsi 6,1 g tätä tuotetta, 2,75 ml bentsoyyli-isotiosyanaattia ja 25 ml asetonia, hämmennet-5 tiin ja kuumennettiin 50°C:ssa 2 tuntia. Seos kaadettiin veteen (250 ml) ja tuote suodatettiin erilleen ja kuivattiin. Seosta, joka sisälsi tämän kiinteän aineen, 80 ml väkevää kloorivetyhapon vesiliuosta ja 48 ml isopropanolia, hämmennettiin ja kuumennettiin 100°C:ssa 30 minuut-j_q tia. Seos haihdutettiin ja jäännös jauhettiin hienoksi etyyliasetaatissa, jolloin saatiin 5,3 g N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-etyylitioureaa (5,3 g), sp 186-187°C.

Seosta, joka sisälsi 4,67 g tioureaa, 2,55 g etyy-25 liformyyliklooriasetaattia (Archiv der Pharmazie, 1953, 286, 494) ja 25 ml dimetyyliformamidia, hämmennettiin ja kuumennettiin 100°C:ssa tunnin ajan. Seos jäähdytettiin, suodatettiin ja suodos haihdutettiin. Jäännös jaettiin metyleenikloridin ja natriumbikarbonaatin kyllästetyn 2q vesiliuoksen kesken. Orgaaninen liuos kuivattiin natrium-sulfaatin avulla, suodatettiin ja haihdutettiin. Jäännös puhdistettiin jauhamalla hienoksi etyyliasetaatissa, jolloin saatiin 1,37 g etyyli-2-,/Ν- (3,4-dihydro-2-metyy-li-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-etyyliamino7-tiatso-25 li-5-karboksylaattia, sp 188-192°C.

Seosta, joka sisälsi 1,3 g tätä esteriä ja 10,5 ml IN natriumhydroksidin vesiliuosta, kuumennettiin 48°C:ssa tunnin ajan. Seos jäähdytettiin ja hapotettiin pH-arvoon 4 lisäämällä 2N kloorivetyhapon vesiliuosta. Hartsimainen 3Q sakka eristettiin sentrifugoimalla ja jauhettiin hienoksi vedessä, jolloin saatiin 1,05 g tiatsoli-5-karboksyyli-happoa, jota käytettiin edellä lähtöaineena.

Esimerkki 21

Esimerkissä 3 esitetty menetelmä toistettiin pait-35 si, että 6-bromimetyyli-l,2,3,4-tetrahydrokinatsolin-2,4- li 53 8 9 91 2 dionia käytettiin 6-bromimetyyli-3,4-dihydro-2-metyyli-kinatsolin-4-onin sijasta ja dietyyli-N-(p-etyyliamino-bentsoyyli)-L-glutamaattia käytettiin p-etyyliaminobentso-5 yylijohdannaisen sijasta. Tällöin saatiin N-p-^N-etyyli-N- (1,2,3,4-tetrahydro-2,4-dioksokinatsolin-6-yylimetyyli)ami-no7bentso-yyli-L-glutamiinihappoa hemihydraattina, sp 205-2]1°C.

Lähtöaineena käytettyä 6-bromimetyyli-l,2,3,4-tet-j^q rahydrokinatsolin-2,4-dionia saatiin 1,2,3,4-tetrahydro- 6-metyylikinatsolin-2,4-dionista (Journal of Heterocyclic Chemistry, 1984, 21, 5) käyttämällä esimerkin 5 sen osan toisessa kappaleessa selostettua menetelmää, joka koskee lähtöaineiden valmistusta.

Claims

54 8 9 912

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten ki-natsoliinijohdannaisten valmistamiseksi, joiden kaava on 5 0 .,../91 ^CHn-N-Ar-CONHR3 10 aaj *2 <*> jossa R1 on alkyyli, alkoksi tai alkyylitio, joissa jo-15 kaisessa on enintään 4 hiiliatomia; fenyyli tai fenoksi; halogeeni, hydroksi, merkapto tai pyrimidinyylitio; alkyyli, jossa on enintään 3 hiiliatomia ja johon on liittynyt yksi substituentti valittuna seuraavista: hydroksi, pyrimidinyylitio ja alkanoyyliamino, joissa jo-20 kaisessa on enintään 4 hiiliatomia tai jossa on yksi, kaksi tai kolme fluorisubstituenttia; tai alkoksi, jossa on enintään 3 hiiliatomia ja johon on liittynyt substituentti valittuna seuraavista: hydroksi ja alkoksi, jossa on enintään 4 hiiliatomia;

25 R2 on vety, alkyyli, alkenyyli, alkynyyli, hydroksialkyy-li, alkoksialkyyli, fluorialkyyli, syanoalkyyli, aminoal-kyyli, alkanoyylialkyyli, karboksialkyyli tai karbamoyy-lialkyyli, joissa jokaisessa on enintään 5 hiiliatomia; Ar on sellainen 1,4-fenyleeni, joka on substituoimaton 30 tai johon on liittynyt yksi substituentti valittuna seu-raavasta: nitro, hydroksi ja amino ja alkyyli, alkoksi, fluorialkyyli ja alkanoyyliamino, joissa jokaisessa on enintään 4 hiiliatomia, tai yksi tai useampia halogeeni-substituentteja, tai Ar on sellainen tien-2,5-diyyli, py-35 rid-2,5-diyyli tai tiatsol-2,5-diyyli, joka on substi- li 55 8 991 2 tuoimaton tai johon on liittynyt halogeenisubstituentti; ja R3 on sellainen, että R3-NH2 on aminohappo; tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola tai esteri; tunnet-5 t u siitä, että a) yhdiste, jonka kaava on 0

10 R4VJLv^r'-CH2'z 15 jossa symboli R1 tarkoittaa samaa kuin edellä edellyttäen, että jos R1 on hydroksialkyyli tai hydroksialkoksi, niin hydroksiryhmät suojataan tavanomaisella suojaryhmäl-lä, R4 on vety tai suojaryhmä ja Z on korvattavissa oleva ryhmä, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava 20 on HNR2-Ar-CONHR3 jossa R2, Ar ja R3 tarkoittavat samaa kuin edellä, edel-25 lyttäen, että jos R2 on hydroksialkyyli aminoalkyyli, tai karboksialkyyli, jos Arissa on amino- tai hydroksiryhmä tai jos R3:ssa on amino-, hydroksi- tai karboksiryhmä, niin jokainen amino- ja karboksiryhmä suojataan tavanomaisella suojaryhmällä ja jokainen hydroksiryhmä voi-30 daan suojata tavanomaisella suojaryhmällä tai vaihtoehtoisesti mitään hydroksiryhmää ei tarvitse suojata; jonka jälkeen poistetaan jokainen ei-toivottu suojaryhmä symboleissa R1, R2, R3 ja Ar; b) happo, jonka kaava on 56 8 9 91 2 o r4 it ^-CHn-N-Ar-CO-pH l Π '2

5 A; A A iX N R tai sen reaktiivinen johdannainen saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, jonka kaava on 10 r3-nh2 jolloin, R1, R2, R3, R4 ja Ar tarkoittavat samaa kuin edellä ja jokainen merkapto-, amino- ja karboksiryhmä 15 symboleissa R1, R2, R3 ja Ar suojataan tavanomaisella suo-jaryhmällä, ja jokainen hydroksiryhmä symboleissa R1, R2, R3 ja Ar voidaan suojata tavanomaisella suojaryhmällä, tai vaihtoehtoisesti mitään hydroksiryhmää ei tarvitse suojata; jonka jälkeen suojaryhmät poistetaan tavanomai-20 sella tavalla; c) kaavan I mukaisen kinatsoliinin valmistamiseksi, jossa R1 on alkoksi, fenoksi tai alkoksi, jossa on enintään 3 hiiliatomia ja johon on liittynyt yksi tai useampi substituentti, joiksi on valittu hydroksi tai al-25 koksi, yhdiste, jonka kaava on R1 jossa R1 on alkoksi, fenoksi tai alkoksi, jossa on enintään 3 hiiliatomia ja johon on liittynyt yksi tai useampi h 57 >3 9 912 substituentti, joiksi on valittu hydroksi tai alkoksi, edellyttäen, että jos Forssa on hydroksisubstituentti, se suojataan tavanomaisella suojaryhmällä, ja Z on korvattavissa oleva ryhmä, saatetaan reagoimaan yhdisteen kanssa, 5 jonka kaava on HNR2-Ar-CONHR3 jossa R2, R3 ja Ar tarkoittavat samaa kuin edellä edel-10 lyttäen, että jos R2 on hydroksialkyyli, aminoalkyyli tai karboksialkyyli, jos Ar:ssa on amino- tai hydroksiryhmä, tai jos R3:ssa on amino-, hydroksi- tai karboksiryhmä, niin jokainen amino- ja karboksiryhmä suojataan tavanomaisella suojaryhmällä, ja jokainen hydroksiryhmä voi-15 daan suojata tavanomaisella suojaryhmällä, tai vaihtoeh toisesti mitään hydroksiryhmää ei tarvitse suojata; jonka jälkeen suojaryhmät poistetaan tavanomaisella tavalla, ja kinatsoliinirenkaan 4-asemassa oleva R1-ryhmä poistetaan hydrolysoimalla emäksen avulla; 20 d) kaavan I mukaisen kinatsoliinin valmistamisek si, jossa R1 on merkapto, alkyylitio, pyrimidinyylitio, tai pyrimidinyylitioalkyyli, saatetaan kinatsoliini, jonka kaava on :: 25 R4 ° ^N^^^^CH2~^~Ar~CONHR3 • Λ Λ 30 jossa R1 on halogeeni tai halogeeniaikyyli ja symbolit R2, R3, R4 ja Ar tarkoittavat samaa kuin edellä edellyt-35 täen, että jos R2 on hydroksialkyyli, aminoalkyyli tai 58 8991 2 karboksialkyyli, jos Arissa on amino- tai hydroksiryhmä, tai jos R3:ssa on amino-, hydroksi- tai karboksiryhmä, niin jokainen amino-, karboksi- ja hydroksiryhmä voidaan suojata tavanomaisella suojaryhmällä, tai vaihtoehtoises-5 ti mitään amino-, karboksi- ja hydroksiryhmää ei tavitse suojata; saatetaan reagoimaan tiourean kanssa yhdisteen saamiseksi, jossa R1 on merkapto; tai alkyyli- tai pyri-midinyylitiolin kanssa yhdisteen saamiseksi, jossa R1 on 10 alkyylitio, pyrimidinyylitio tai pyrimidinyylitioalkyyli; jonka jälkeen suojaryhmät poistetaan tavanomaisella tavalla; tai e) kaavan I mukaisen kinatsoliinin valmistamiseksi, jossa R1 on alkyylitio, saatetaan kinatsoliini, jonka 15 kaava on R4 ° CH2-N-Ar-CONHR3 ,ΛνΑ^ R1 25 jossa R1 on merkapto ja symbolit R2, R3, R4 ja Ar tarkoittavat samaa kuin edellä edellyttäen, että jos R2 on hyd-roksialkyyli, aminoalkyyli tai karboksialkyyli, jos Ar:s-sa on amino- tai hydroksiryhmä tai jos R3:ssa on amino-, hydroksi- tai karboksiryhmä, niin jokainen amino-, kar-30 boksi- ja hydroksiryhmä voidaan suojata tavanomaisella suojaryhmällä, tai vaihtoehtoisesti mitään amino-, kar-boksyyli-, ja hydroksiryhmää ei tarvitse suojata; saatetaan reagoimaan emäksen kanssa ja saatu tiolaattisuola alkyloidaan alkyylihalogenidin kanssa yhdisteen saamisek-35 si, jossa R1 on alkyylitio; jonka jälkeen mahdolliset suojaryhmät poistetaan tavanomaisella tavalla. li 59 8 9 912

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan N-p-[N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-(prop-2-ynyyli)amino]bentsoyyli-L-glutamiinihappo.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan N-p-[N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-etyy-liamino]-o-fluoribentsoyyli-L-glutamiinihappo.

4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 10 tunnettu siitä, että valmistetaan N-{5-[N-(3,4-dihydro-2-metyyli-4-oksokinatsolin-6-yylimetyyli)-N-me-tyyliamino]-2-tenoyyli}-L-glutamiinihappo. 60 j 9 912