FI85283B - Foerfarande foer framstaellning av immobiliserade enzymer. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av immobiliserade enzymer. Download PDFInfo
- Publication number
- FI85283B FI85283B FI833614A FI833614A FI85283B FI 85283 B FI85283 B FI 85283B FI 833614 A FI833614 A FI 833614A FI 833614 A FI833614 A FI 833614A FI 85283 B FI85283 B FI 85283B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- carrier
- enzyme
- particles
- tower
- process according
- Prior art date
Links
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 85
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 52
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 52
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 42
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims description 21
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims description 21
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims description 21
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims description 21
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims description 21
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 claims description 18
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 16
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 108700040099 Xylose isomerases Proteins 0.000 claims description 13
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 13
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 claims description 11
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 10
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims description 7
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 7
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 claims description 6
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 claims description 6
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 claims description 6
- 239000003349 gelling agent Substances 0.000 claims description 5
- 239000003232 water-soluble binding agent Substances 0.000 claims description 5
- 241000193749 Bacillus coagulans Species 0.000 claims description 4
- 239000007921 spray Substances 0.000 claims description 4
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 claims description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 3
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 claims description 2
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 claims description 2
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 claims description 2
- 229940045110 chitosan Drugs 0.000 claims description 2
- 229940014259 gelatin Drugs 0.000 claims description 2
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 claims description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 45
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 20
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 19
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 10
- 229920003043 Cellulose fiber Polymers 0.000 description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 4
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 4
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 239000006229 carbon black Substances 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 4
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 4
- 239000010453 quartz Substances 0.000 description 4
- 239000001488 sodium phosphate Substances 0.000 description 4
- 229910000162 sodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K trisodium phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[O-]P([O-])([O-])=O RYFMWSXOAZQYPI-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 4
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 3
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000005909 Kieselgur Substances 0.000 description 3
- 108010059881 Lactase Proteins 0.000 description 3
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 108010073771 Soybean Proteins Proteins 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 229940054340 bacillus coagulans Drugs 0.000 description 3
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 3
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 3
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 3
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 3
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 3
- 229920001600 hydrophobic polymer Polymers 0.000 description 3
- 229940116108 lactase Drugs 0.000 description 3
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 3
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 3
- 229940001941 soy protein Drugs 0.000 description 3
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 3
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 108010076119 Caseins Proteins 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920000663 Hydroxyethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000004354 Hydroxyethyl cellulose Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 2
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 2
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 2
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920002873 Polyethylenimine Polymers 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 2
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 2
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 2
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 239000004927 clay Substances 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 235000019447 hydroxyethyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 2
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 229910044991 metal oxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000004706 metal oxides Chemical class 0.000 description 2
- 238000000465 moulding Methods 0.000 description 2
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 2
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 2
- 235000019422 polyvinyl alcohol Nutrition 0.000 description 2
- 239000003531 protein hydrolysate Substances 0.000 description 2
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 2
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 2
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 2
- 239000004576 sand Substances 0.000 description 2
- 238000012106 screening analysis Methods 0.000 description 2
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 229910052938 sodium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000011152 sodium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 239000012798 spherical particle Substances 0.000 description 2
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 2
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 2
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 2
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 2
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 2
- SXAMGRAIZSSWIH-UHFFFAOYSA-N 2-[3-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C1=NOC(=N1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2 SXAMGRAIZSSWIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910018072 Al 2 O 3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000033116 Asbestos intoxication Diseases 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- 241000194110 Bacillus sp. (in: Bacteria) Species 0.000 description 1
- 101100283604 Caenorhabditis elegans pigk-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 102000011632 Caseins Human genes 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000001856 Ethyl cellulose Substances 0.000 description 1
- ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N Ethyl cellulose Chemical compound CCOCC1OC(OC)C(OCC)C(OCC)C1OC1C(O)C(O)C(OC)C(CO)O1 ZZSNKZQZMQGXPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 108010068370 Glutens Proteins 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- VCUFZILGIRCDQQ-KRWDZBQOSA-N N-[[(5S)-2-oxo-3-(2-oxo-3H-1,3-benzoxazol-6-yl)-1,3-oxazolidin-5-yl]methyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C1O[C@H](CN1C1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1)CNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F VCUFZILGIRCDQQ-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 229920000388 Polyphosphate Polymers 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N Silane Chemical compound [SiH4] BLRPTPMANUNPDV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004115 Sodium Silicate Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940023476 agar Drugs 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 1
- 206010003441 asbestosis Diseases 0.000 description 1
- 239000000440 bentonite Substances 0.000 description 1
- 229910000278 bentonite Inorganic materials 0.000 description 1
- SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N bentoquatam Chemical compound O.O=[Si]=O.O=[Al]O[Al]=O SVPXDRXYRYOSEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011449 brick Substances 0.000 description 1
- 239000000378 calcium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052918 calcium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N calcium;dioxido(oxo)silane Chemical compound [Ca+2].[O-][Si]([O-])=O OYACROKNLOSFPA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 238000012824 chemical production Methods 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 239000013065 commercial product Substances 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 229910052593 corundum Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010431 corundum Substances 0.000 description 1
- 239000007822 coupling agent Substances 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- 229940079919 digestives enzyme preparation Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 229920001249 ethyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000019325 ethyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- YAGKRVSRTSUGEY-UHFFFAOYSA-N ferricyanide Chemical compound [Fe+3].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-].N#[C-] YAGKRVSRTSUGEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000000945 filler Substances 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 235000021312 gluten Nutrition 0.000 description 1
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 1
- 239000003979 granulating agent Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 229940071826 hydroxyethyl cellulose Drugs 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000391 magnesium silicate Substances 0.000 description 1
- 229910052919 magnesium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019792 magnesium silicate Nutrition 0.000 description 1
- ZADYMNAVLSWLEQ-UHFFFAOYSA-N magnesium;oxygen(2-);silicon(4+) Chemical compound [O-2].[O-2].[O-2].[Mg+2].[Si+4] ZADYMNAVLSWLEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229920000609 methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000001923 methylcellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010981 methylcellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 239000010451 perlite Substances 0.000 description 1
- 235000019362 perlite Nutrition 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000005498 polishing Methods 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000001205 polyphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011176 polyphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 1
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 239000012255 powdered metal Substances 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- -1 seine Proteins 0.000 description 1
- 238000005029 sieve analysis Methods 0.000 description 1
- 229910000077 silane Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 239000011863 silicon-based powder Substances 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- NTHWMYGWWRZVTN-UHFFFAOYSA-N sodium silicate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-][Si]([O-])=O NTHWMYGWWRZVTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052911 sodium silicate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002195 soluble material Substances 0.000 description 1
- 238000005563 spheronization Methods 0.000 description 1
- 229920002994 synthetic fiber Polymers 0.000 description 1
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 1
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 1
- XOLBLPGZBRYERU-UHFFFAOYSA-N tin dioxide Chemical compound O=[Sn]=O XOLBLPGZBRYERU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910001887 tin oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000009489 vacuum treatment Methods 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 230000004580 weight loss Effects 0.000 description 1
- 239000010457 zeolite Substances 0.000 description 1
- GFQYVLUOOAAOGM-UHFFFAOYSA-N zirconium(iv) silicate Chemical compound [Zr+4].[O-][Si]([O-])([O-])[O-] GFQYVLUOOAAOGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/02—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N11/00—Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
- C12N11/14—Enzymes or microbial cells immobilised on or in an inorganic carrier
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)
Description
1 85283
Menetelmä immobilisoitujen entsyymien valmistamiseksi
Keksintö kohdistuu menetelmään partikkelimaisen, immiboli-soidun entsyymivalmisteen tuottamiseksi, joka valmiste muodostuu kantajasta, jonka pinnalle entsyymi on kiinnittynyt. Kantajan pinta on tässä, huokoisen kantajan ollessa kyseessä, tulkittava sekä uiko- että sisäpinnaksi.
Immobilisoitujen entsyymien ja niiden kantajien käsittämä alue on nopeasti kasvamassa. Tavallisesti kantaja on pieninä, mahdollisesti punnittuina partikkeleina, joiden sisään entsyymi on tuotu, tai joiden pinnalle entsyymi on tarttunut tai kiinnittynyt. Viitteenä mainitaan US-patentit 4 266 029 ja 4 116 711 ja tanskalainen patentti 133 380, jotka ovat ainoastaan kolme esimerkkiä tunnetuista kantajista (joiden pinnalle tai sisään entsyymit ovat kiinnittyneet).
Tämän keksinnön mukaisen menetelmän yhteydessä käytetty kantaja kuuluu sen tyyppisiin kantajiin, joiden pinnalle entsyymi kiinnittyy päinvastoin kuin kantajilla, joissa entsyymi kiinnittyy läpi kantajan koko tilavuuden.
Tyypillinen tunnettu kantaja, joka kuuluu tähän juuri osoitettuun ryhmään kantajia, joiden pinnalle entsyymi kiinnittyy, muodostuu gelatiinigranulaateista ja se on kuvattu julkaisussa Derwent 08061 C/5 (J 5 4156-892). Puhtaat gelatiini-partikkelit eivät kuitenkaan ole riittävän kovia käytettäväksi suurimittakaavaisissa kiintopetioperaatioissa, joissa vaaditaan erittäin suuria virtausnopeuksia. Puhtaat gelatiini-partikkelit ovat myöskin suhteellisen kalliita.
Samanlainen kantaja, joka myös kuuluu tähän ryhmään, ja jossa inertti ydin on peitetty gelatiinilla, voidaan valmistaa US-patentin n:o 4 266 029 mukaisesti. Vaikka tällä kantajalla on hyvät virtauskarakteristiikat, sen heikkoutena on, että kantajapartikkelien muotoa ja kokoa ei voida valita sen 2 85283 parhaaseen kolonnisuorituskykyyn liittyvien kriteerien perusteella, vaan raaka-aineena käytetyn tietyn hiekkajakeen tai muun tietyn tiiviin materiaalin jakeen perusteella. Edelleen, vaikka on helppoa valmistaa tätä kantajaa laboratoriomittakaavassa, on vaikeata tai ehkä mahdotonta valmistaa sitä teollisessa mittakaavassa.
Toinen tyypillinen tunnettu kantaja, joka kuuluu tähän ryh-r mään, on kuvattu julkaisussa Advances in Experimental Medicine and Biology, voi. 42, ss. 191-192, Immobilized Biochemicals and Affinity Cromatography. Tämä kantaja muodostuu lasi-helmistä, joissa on silaani yhdistävänä aineena. Näillä helmillä on erinomaiset virtausominaisuudet ja suhteellisen suuri kuormituskapasiteetti. Kuitenkin ne ovat hyvin kalliita ja, kuten kaikki epäorgaaniset kantajat, ollakseen sopivia immobilisoiduille entsyymeille niille on suoritettava vaativia kemiallisia käsittelyjä, joihin liittyy ei-toivot-tujen materiaalien käyttö.
Siten tämän keksinnön tarkoituksena on aikaansaada menetelmä immobilisoidun entsyymin valmistamiseksi, joka käsittää kantajan, jonka pinnalle entsyymi on kiinnittynyt, jolloin tällä kantajalla on kaikki yllä luetellut edulliset ominaisuudet, esimerkiksi riittävä kovuus, mahdollisuus valmistaa teollisesti ja yksinkertaisin kemiallisin menetelmin ja alhaisin tuotantokustannuksin.
Nyt on kehitetty menetelmä partikkelimaisen immobilisoidun entsyymivalmisteen tuottamiseksi, valmisteen käsittäessä kantajan, jonka pinnalle entsyymi on kiinnittynyt, jolloin kantaja on muodostunut kahden faasin kombinaatiosta, esimerkiksi a) vesiliukoisen sideaineen faasista, jossa aine ainakin osittain on liuenneena tai dispergoituneena vesipitoiseen väliaineeseen, ja b) epäjatkuvasta useiden diskreettien kovien ja inerttien partikkeleiden faasista, jossa partikke-leiden koko on riittävän pieni ollakseen vaikuttamatta kantajan muotoutumiseen, ja sidosaineesta, joka on liukenematon 3 85283 väliaineeseen, jossa entsyymiä mahdollisesti tullaan käyttämään mikäli tarpeen, ja jossa kantaja on kontaktissa kantajan pintaan kiinnittyneen entsyymin kanssa. Jos väliaine, jossa immobilisoitua entsyymiä lopulta tullaan käyttämään on vesipitoinen väliaine, on välttämätöntä saattaa (alkuperäinen) vesiliukoinen sidosaine liukenemattomaan muotoon kemiallisella tai fysikaalisella käsittelyllä esimerkiksi silloittamalla tai kuumentamalla. Jos väliaine, jossa immobilisoitua entsyymiä tullaan lopulta käyttämään, on vedetön väliaine, (alkuperäinen) vesiliukoinen sidosaine saattaa olla liukenematon tähän vedettömään väliaineeseen, ja siten tässä tapauksessa ei ehkä ole tarpeellista saattaa sidosainetta liukenemattomaan muotoon. Täydellisyyden vuoksi huomiota on kiinnitetty siihen, että kantaja voi sisältää myös muita komponentteja kuin yllä mainitut välttämättömät komponentit a) ja b), esimerkiksi täyteaineita ja/tai granuloivia apuaineita.
Keksinnön mukaisesti on yllättäen todettu, että keksinnön mukainen menetelmä täyttää yllä mainitut keksinnön päämäärät. Myöskin yllättäen on havaittu, että kantaja säilyttää erinomaisen fysikaalisen yhtenäisyytensä vielä kun inerttien partikkelien osuus on 98 paino-% suhteessa kantajan painoon. Tämä on hyvin tärkeätä, koska mitä korkeampi inerttien partikkelien osuus on (aina yllä mainitulle ylärajalle asti), sitä kovempaa kantaja on ja sitä pienemmät ovat kustannukset.
Jos immobilisoitu entsyymi on lipaasi, ja lipaasilla aiotaan esteröidä lipidejä petrolieetteriliuoksessa, silloin albumiinia, kaseiinia, soijaproteiinia, hydroksietyyliselluloo-saa, agaria, alginaattia, polyvinyylialkoholeja, tärkkelystä, metyyliselluloosaa tai karboksimetyyliselluloosaa voidaan käyttää sidosaineena, koska nämä materiaalit ovat liukenemattomia petrolieetteriin. Kantajan ja entsyymin välillä tarvitaan tässä tapauksessa ainoastaan heikko kiinnittyminen. Jos toisaalta entsyymi, jonka kanssa kantajaa mahdollisesti tullaan käyttämään, on amyloglukosidaasi, ja amyloglukosi-daasi on tarkoitettu pilkkomaan dekstriinejä vesipitoisessa 4 85283 liuoksessa, silloin on välttämätöntä saattaa (alkuperäinen) vesiliukoinen sidosaine liukenemattomaan muotoon. Tavallisesti amyloglukosidaasi tarttuu tai kiinnitetään kantajan pinnalle silloittumalla glutaraldehydin kanssa.
On selvää, että minkä tahansa entsyymin ja kumman tahansa kantajafaasin a) ja b) jokainen kombinaatio ei ole toimiva. Alan ammattimies tietää, että jotkut entsyymit eivät siedä joitakin kationeja, jotka saattavat vapautua pieninä määrinä faasista b), ja myöskin jos immobilisoitua entsyymiä on tarkoitus käyttää elintarviketeollisuudessa, jotkut faasin a) aineosat saattavat olla vähemmän toivottuja, koska haitallisia aineosia voi joutua entsyymireaktorin poistovirtaan.
Tanskalaisessa patenttihakemuksessa n:o 1592/78 (Standard Brands), joka vastaa US-patenttia 4 110 164 ja BE-patenttia 865 900, on kuvattu immobilisoitua glukoosi-isomeraasia, joka on kiinnittynyt ioninvaihdolla kantajaan, joka käsittää kuitumaisen hydrofiilisen polymeeriin yhdistetyn ioneja vaihtavan selluloosan ja joka mahdollisesti sisältää paksun-nosainetta, kuten jauhemaisia metallioksideja. Kantaja valmistetaan sulattamalla hydrofobinen polymeeri ja sekoittamalla selluloosa ja paksunnosaine sulaan polymeeriin. Tähän menetelmään liittyy kuitenkin joukko haittoja. Ensinnäkin tällaisten hydrofobisten polymeerien hinta on suhteellisen korkea, ja toiseksi on paljon helpompaa työskennellä keksinnön mukaisten sidosaineiden vesiliuosten ja suspensioiden kuin sulien hydrofobisten polymeerien kanssa. Myöskin tanskalaisessa patenttihakemuksessa 1592/78 kuvattu menetelmä on tarkoin rajoitettu entsyymeihin, jotka on immobilisoitu ioninvaihtohartseilla, ts. yksimolekyylisiin entsyymikerrok-siin, kun taas esillä oleva keksintö soveltuu kaikkiin entsyymin kiinnityssyteemeihin, ja yksimolekyylisiin entsyymi-kerroksiin yhtä hyvin kuin monimolekyylisiin kerroksiin. Siksi esimerkiksi glukoosi-isomeraasitapauksessa, johtuen entsyymikerroksen paksuuden vapaasta valinnasta, on mahdollista aikaansaada erittäin korkeat spesifisen aktiivisuuden 5 85283 arvot tämän keksinnön yhteydessä, kun taas maksimi arvo (tanskalaisessa patenttihakemuksessa n:o 1592/78 kuvatun) immobilisoidun glukoosi-isomeraasin spesifiselle aktiivisuudelle on suhteellisen pieni ja erityisesti liian pieni teolliselle sovellutukselle.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä kahden faasin kombinaatiossa jatkuva ja epäjatkuva faasi sekoitetaan keskenään, jonka jälkeen seos muokataan partikkelimuotoiseksi kantajaksi, edullisesti pallomaiseksi. Tällä tavoin saadaan halpoja ja helposti valmistettavia kantajapartikkeleita.
Aikaisemmin tunnetut gelatiinirakeiden tai pallomaisten gelatiinipartikkelien valmistusmenetelmät ovat melko kalliita ja vaivalloisia. Esimerkkinä on tanskalainen patentti 133 380, jossa on kuvattu tällaisten gelatiinipartikkelien valmistusta lisäämällä gelatiinin (ja entsyymin) vesiliuos n-butanoliin ja erottamalla muodostuneet pisaranmuotoiset partikkelit. Keksinnön mukaisesti on kuitenkin havaittu, että sidosaineen ja inertin materiaalin seoksen muodostavat rakeet tai pallomaiset partikkelit voidaan valmistaa paljon halvemmalla tavalla, esimerkiksi Marumerizer-laitteen avulla (kts. esim. US-patentti 3 277 520) tai erityisen granuloimis-laitteen avulla (kts. esim. US-patentti 4 106 991). Edelleen useiden pienten kovien partikkelien lisääminen tekee kanta-japartikkelit hyvin koviksi parantaen siten niiden virtaus-ominaisuuksia ja tehden ne sopiviksi suuren mittakaavan kolonnioperaatioihin suurilla virtaamilla.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä muovaus tarkoittaa saattamista pallomaiseen muotoon granulointilait-teessa, jota on kuvattu US-patentissa 4 106 991. Tällä tavoin voidaan tuottaa erittäin halpoja palloja, joilla on erinomaiset fysikaaliset ominaisuudet.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä jatkuvaan faasiin lisätään geeliä muodostavaa ainetta ennen sekoittamista epäjatkuvaan faasiin, sen aikana tai sen jälkeen, jonka 6 85283 jälkeen siten saatu massa ekstruoidaan tai tiputetaan väliaineeseen jolloin silloittava aine voidaan lisätä missä tahansa näistä vaiheista. Tällöin saadaan partikkeleita, joilla on erittäin säännölliset muodot.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä geelin muodostava aine on gelatiini, alginaatti, karragenan tai kito-saani. Tällöin saadaan partikkeleita, joilla on erittäin säännölliset muodot ja erinomainen koheesio.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä väliaine on liuos, joka sisältää Ca++:a, Ba++:a, K+:a, polyfosfaattia tai ferrisyanidia tai kylmää vettä tai kylmän ilmavirran. Tällöin saadaan partikkeleita, joilla on hyvin säännölliset muodot ja erinomainen koheesio.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä jatkuva faasi on vesiliukoinen proteiini, erityisesti gelatiini, soijaprote-iini, kaseiini, albumiini, seiini, gluteeni tai proteiini-hydrolysaatti, tai polysakkaridi, erityisesti agar, alginaatti tai muut kumit, jauho, tärkkelys tai kitosaani tai synteettinen materiaali, karboksimetyyliselluloosa, metyylisel-luloosa, etyyliselluloosa, hydroksietyyliselluloosa, hydroksi-propyyliselluloosa, polyvinyylialkoholi, polyvinyylipyrroli-doni; tai natriumsilikaatti. Jatkuva faasi voi olla mikä tahansa keksinnössä käytettävä sidosaineiden seos, esimerkiksi mikä tahansa yllä mainittujen materiaalien seos. Näillä sidosaineilla on mahdollista aikaansaada kantaja, jolla on erinomaiset fysikaaliset ominaisuudet, jopa hyvin pieninä suhteina epäjatkuvaan faasiin.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä epäjatkuva faasi on piimaata, murskattua hiekkaa, tiilipölyä, savea, nailonjauhetta, liukenemattomia metallioksideja tai liukenemattomia metallisuoloja, piijauhetta, aerosilia, alumiini-jauhetta, korundia, lasijauhetta, piikivijauhetta, kvartsi-jauhetta, grafiittijauhetta, alumiinifosfaattia, kaoliinia, 7 85283 bentoniittia, perliittiä, zeoliittejä, kalsiumsilikaattia, mikrosolusuodattajaa, murskattua magnesiumsilikaattia, talkkia, asbestoosia, sarvivälkelastuja, titaanidioksidia, tina-oksidia, kiillotusjauhetta, jauhettua zirkoniumsilikaattia, hiilimustaa,aktiivihiiltä, luujauhoa, lentotuhkaa, tai metal-lijauhetta. Epäjatkuva faasi voi olla mikä tahansa diskreettien, kovien ja inerttien keksinnössä käytettävien partikke-leiden seos, esimerkiksi mikä tahansa yllä mainittu materiaalien seos. Nämä materiaalit ovat halpoja ja parantavat kantajan mekaanisia ominaisuuksia.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä epäjatkuvan faasin määrä on välillä n. 10 ja 98 paino-% suhteessa kantajan kokonaispainoon, edullisesti välillä 50 ja 95 paino-%. Tällä tavoin yhdistyvät alhaiset kustannukset ja kantajan erinomaiset fysikaaliset ominaisuudet.
Keksinnön mukaisessa edullisessa menetelmässä yksittäisen inertin partikkelin lineaarinen koko epäjatkuvassa faasissa, laskettuna sellaisen pallon halkaisijana, jolla on sama tilavuus kuin yksittäisellä inertillä partikkelilla, on alle 1/5 kantajapartikkelin halkaisijasta, edullisesti alle 1/20. Inerttien partikkeleiden dimensoiden ollessa tällaisia muovaus voidaan suorittaa ilman vaikeuksia.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä jatkuva faasi on saatettu liukenemattomaan muotoon silloittamalla sopivan silloittavan aineen, edullisesti glutaraldehydin kanssa. Tällä tavoin kantajapartikkeleiden mekaaninen kestävyys edelleen paranee.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä kantajan muoto on pallomainen, ja kantajan keskihalkaisija on välillä 0,1 ja 5 mm, edullisesti välillä 0,2 ja 2 mm, erittäin edullisesti välillä 0,2 ja 1 mm. Tällä tavoin aikaansaadaan kantaja, jossa on tehty hyvä kompromissi virtausominaisuuksien ja pinta-alan välillä.
8 85283
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä kantajaa käsitellään entsyymiliuoksella ja silloittavalla aineella. Tällöin saadaan erinomainen adheesio kantajan ja entsyymin välillä ja siten immobilisoitu entsyymi, jolla on erittäin hyvä fysikaalinen stabiilisuus.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä kantaja tuodaan torniin fluidisoituna massana ja liukoisen entsyymin liuos tuodaan torniin suihkuna, jonka jälkeen siten aikaansaatu massa poistetaan tornista ja käsitellään silloittavalla aineella. Tällä tavoin voidaan valmistaa keksinnön mukainen immobilisoitu entsyymi, jossa kantajaan kohdistuva entsyymi-kuorma on erittäin suuri.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä kantaja tuodaan torniin fluidisoituna massana ja liukoisen entsyymin liuoksen ja silloittavan aineen seos tuodaan torniin suihkuna, jonka jälkeen täten saatu massa poistetaan tornista.
Tällä tavoin voidaan valmistaa keksinnön mukainen immobilisoitu entsyymi, jossa kantajaan kohdistuva entsyymikuorma on erittäin suuri.
Mitä tulee kahdessa edellisessä kappaleessa kuvattuihin edullisiin sovellutusmuotoihin, on otettava huomioon, että kantaja, silloittava aine, entsyymi ja lisäaineet, mikäli niitä on läsnä, voidaan yhdistää missä tahansa halutussa järjestyksessä. Tällaiset lisäaineet voivat olla esimerkiksi granuloivia aineita (esim. selluloosakuituja tai kapipaleita, kovia ja inerttejä partikkeleita), liukoisia materiaaleja, jotka toimivat huokoisuutta lisäävänä aineena (esim. NaCl), tai muita proteiineja.
Edullisessa keksinnön mukaisessa menetelmässä entsyymi on glukoosi-isomeraasi, joka edullisesti on peräisin lajista Bacillus coagulans. On havaittu, että tällä tavoin valmistetulla glukoosi-isomeraasilla voi olla erinomainen aktiivi-' suus ja paremmat ominaisuudet jatkuvassa kolonnityöskente- lyssä.
9 85283
Keksinnön mukainen immobilisoitu entsyymivalmiste voidaan tuoda kolonniin kerroksena, jonka jälkeen entsyymin sub-straattiliuos ajetaan mainitun kerroksen läpi sellaisella nopeudella, että ainakin osa substraatista muuttuu entsyymin vaikutuksesta.
Seuraavat esimerkit kuvaavat keksinnön mukaista menetelmää. Joissakin esimerkeissä on kuvattu ainoastaan kantajan valmistusta. Kaikissa näissä esimerkeissä kantaja on käsitelty samalla entsyymiliuoksella kuin esimerkissä 12 edelleenkä-sitellyn immobilisoidun entsyymin valmistamiseksi.
Seuraavassa viitataan erilaisiin NOVO-kirjallisuusreferaat-teihin. Näistä kaikista referaateista on saatavana kopiot osoitteesta NOVO Industri A/S, Novo Α11δ, 2880 Bagsvaefd, Tanska.
Joissakin esimerkeissä on osoitettu painehäviön (fysikaalinen lujuus) arvo kolonnioperaation aikana. Tämä arvo määritetään menetelmän AF 166/2 mukaisesti, mikä on NOVO-laboratorion määritysmenetelmä. Joitakin teoreettisia seikkoja, jotka ovat yhteydessä tähän painehäviön määritykseen on kuvattu julkaisussa Starch/Stärke 31 (1979) n:o 1, sivut 13-16. Verrattaessa joihinkin kaupallisiin tuotteisiin, on mainittava, että parhaat painehäviön arvot immobilisoidulle glukoosi-isomeraasivalmisteelle SWEETZYME ovat n. 10 g/cm^. Esimerkeistä ilmenee, että painehäviöt keksinnön mukaisella menetel-mällä valmistetuilla immob il isoiduilla entsyymipreparaa-teilla voivat olla jopa 2 g/cm^ ja että kaikki arvot ovat huomattavasti alempia kuin 10 g/cm , jolloin keksinnön tek-ninen hyöty on selvästi osoitettu.
Esimerkki 1 10 g gelatiinia Bloom 260 dispergoitiin 60 ml:aan H20, lisättiin 33 g 6-prosenttista paino/tilavuus Na-alginaattia, seosta kuumennettiin 60°C:een gelatiinin liuottamiseksi, sen jälkeen lisättiin 10 g Hyflo Celite'ä (piimaata), koko 10 85283 seosta sekoitettiin 10 min 55°C:ssa ja pumpattiin tärisevän ruiskun läpi hyvin pienien pisaroiden saamiseksi, joiden pisaroiden annettiin pudota 2-prosenttiseen paino/tilavuus CaCl2 · Sl^O-liuokseen, joka oli 5-asteista. Valmistettuja pallomaisia partikkeleita sekoitettiin CaC^-liuoksessa muutaman minuutin ajan, ja poistettiin sen jälkeen liuoksesta, pestiin deionisoidulla vedellä ja annettiin kuivua 2 päivää huoneen lämpötilassa. Partikkeleita sekoitettiin sen jälkeen varovasti tunnin ajan 200 mlrssa 1-prosenttista paino/tilavuus glutaraldehydiliuosta pH-arvossa 8,5, poistettiin, pestiin deponoidulla vedellä ja annettiin jälleen kuivua. Tällä tavoin saatiin pallomaisia ja äärimmäisen kovia ja koossapysyviä partikkeleita, joiden halkaisija oli n. 2 mm ja joilla oli erinomaiset virtausominaisuudet. Paine-häviö oli 2 g/cm . Partikkeleita käsiteltiin haluttaessa sitraatilla tai fosfaatilla Ca++-ionien ja alginaatin poistamiseksi ilman negatiivista vaikutusta partikkeleihin.
Esimerkki 2
Esimerkissä 1 kuvattu menetelmä toistettiin, paitsi että käytettiin vain puolet gelatiinimäärästä, joka on 5 g, ja kaksi kertaa Hyflo Celite-määrä, joka on 20 g, eikä partikke-leiden annettu kuivua ennenkuin ne käsiteltiin glutaralde-hydilla. Saatiin oleellisesti identtisiä partikkeleita, joiden kovuus oli jonkin verran alentunut, mutta joilla kuitenkin oli lähes samat erinomaiset virtausominaisuudet.
Λ
Paineen lasku oli 3 g/cm .
Esimerkki 3
Esimerkissä 2 kuvattu menetelmä toistettiin paitsi että käytettiin gelatiinia Bloom 200 ja että sen määrä aleni 4 g:aan. Glutaraldehydin konsentraatio aleni myöskin 0,2 prosenttiin paino/tilavuus. Tällä tavoin saatiin partikkeleita, joilla oli oleellisesti identtiset ominaisuudet.
Esimerkki 4 Tässä esimerkissä käytettiin pilot-plant-laitteistoa. Täten n 85283 sekoittajassa, joka oli tyyppiä Lödige FM 130 D sekoitettiin 0,7 kg selluloosakuituja tyyppiä Arbocel BC 200, 2,8 kg Clarcel Celite'ä (piimaata) ja 4 kg 20 %:sta paino/paino gelatiini Bloom 200-liuosta, kaikki 60°C:ssa, ja näin saatu paksu massa ekstruoitiin ekstruuderilla, jossa oli 1,5 mm:n suutin ja sitten saatettiin pallomaisiksi rakeiksi Marume-rizei®-laitteella tavalla, jota on kuvattu US-patentissa n:o 3 277 520. Ekstruuderi oli kaksoissuutintyyppinen malli EXDC-100, ja rakeistaja oli mallia Q-400. Näin saadut partikkelit kuivattiin leijupetitornissa (Glatt tyyppi WSG 15) ja seulottiin, jae 1,2-2,0 mm otettiin talteen, jäännös uudel-leenkierrätettiin. 10 g:n näyte käsiteltiin 3 tunnin ajan huoneen lämpötilassa 100 ml :11a 1-prosenttista paino/tilavuus glutaraldehydiliuosta, joka oli säädetty happamuuteen pH 7,0, poistettiin liuoksesta ja pestiin huolellisesti deionisoi-dulla vedellä. Jopa kuivaamatta näin valmistetut partikkelit olivat äärettömän kovia ja koossapysyviä ja niillä oli erin- 2 omaiset virtausominaisuudet. Painehäviö oli 2 g/cm . Tässä esimerkissä epäjatkuva faasi muodostui 65 painoprosenttises-ti partikkeleista.
Esimerkki 5 Tässä esimerkissä käytettiin samaa Marurnerizer-laitetta kuin esimerkissä 4, paitsi että ekstruuderia ei käytetty. Edelleen epäjatkuvan faasin sisältö nostettiin 94 prosenttiin paino/-paino kantajan kokonaispainosta. Siten 1,5 kg Skamol-savipartikkeleita, joiden partikkelikoko oli 0,7-1,0 mm lastattiin rakeistajaan ja 0,4 kg Hyflo Celite'ä ja 1,15 kg 10-prosenttista paino/paino gelatiini-Bloom 80-liuosta lisättiin 60°C:ssa vaihdellen niin, että estettiin paakkujen syntyminen. Niin saadut partikkelit käsiteltiin kuten esimerkissä 4, jolloin saatiin kovia partikkeleita, joilla on erittäin hyvät virtausominaisuudet. Painohäviö oli 5 g/cm^.
Esimerkki 6 Tässä esimerkissä lastattiin rakeistaja, jossa oli auran vannastyyppinen sekoittaja Lödige FM 50 ja suurinopeuksinen leikkuri, jollainen on kuvattu US-patentissa 4 106 991, i2 85283 5 kg:lla Clarcel Celite'a, ja 5,95 kg 16-prosenttista gelatiinia Bloom 200 ruiskutettiin siihen, jolloin käsittelyaika ja sekoittajan ja leikkurin pyörimisnopeudet valittiin siten, että partikkelikoko oli 0,7-1,5 mm. Nämä partikkelit käsiteltiin kuten esimerkissä 4, jolloin saatiin kantajapartik- keleita, joilla oli oleellisesti samat ominaisuudet kuin 2 esimerkissä 4. Painehäviö 4 g/cm .
Esimerkki 7 1 kg selluloosakuituja, 4 kg Clarcel Celite'ä ja 10 kg tämän esimerkin mukaisesti valmistettua uudelleenkierrätet-tyä materiaalia ruiskutettiin yhdessä 10,5 kg:n 10-prosent-tista paino/paino gelatiinia Bloom 200 kanssa Lödige-sekoit-tajaan tyyppiä FM 130 D, jolloin saatiin pyöreitä partikkeleita, joiden koko vaihteli. Kaikkien yllä kuvattujen toimintojen aikana sekä ainesosat että laitteisto pidettiin 55°C:ssa. Pyöreät partikkelit kuivattiin leijukerrostornissa ja seulottiin ja jae 0,5-0,7 mm, joka käsitti 32 %, otettiin talteen. Jäte, joka käsitti karkeammat partikkelit, jotka jauhettiin, ja erittäin hienot partikkelit, jotka käytettiin sellaisenaan, kierrätettiin uudelleen kuten tämän esimerkin alussa on kuvattu.
Esimerkki 3
Sama sekoittaja kuin esimerkissä 4, ts. Lödige FM 130 D, täytettiin 3 kg:11a selluloosakuituja, 10,5 kg:11a Clarcel Celite'a ja 1,5 kg:11a albumiinia sopivassa lämpötilassa ja ruiskutettiin 15,2 kg:n kanssa vettä. Käsittelyaika ja sekoittajan ja leikkurin pyörimisnopeudet valittiin sellaisella tavalla, että saatiin halutun kokoisia partikkeleita. Partikkelit kuivattiin leijukerroksessa ja kuivattujen partikke-leiden seula-analyysi osoitti seuraavan partikkelikokoja-kautuman: >1000 ^um 19,7 % > 850 - 35,6 % > 707 - 58,8 % > 600 - 78,2 % > 500 - 92,1 % -I < 420 - 1,1 % i3 85283
Esimerkki 9
Esimerkin 8 menetelmä toistettiin paitsi että 1,5 kg iso-elektrisellä soijaproteiinihydrolysaatilla korvattiin albumiini ja että veden määrä oli 14,8 kg. Kuivien partikkelei-den seula-analyysi osoitti seuraavat partikkelikokojakautuman: > 1000 yum 24,2 % > 850 - 43,2 % > 707 - 66,1 % > 600 - 84,4 % > 500 - 95,2 % < 420 - 1,0 %
Esimerkki 10
Sama sekoittaja kuin esimerkissä 6, ts. Lödige FM 50, täytettiin 11,3 kg:11a A^O^a ja 3,0 kg:11a selluloosakuituja ja ruiskutettiin 650 g:n gelatiinia Bloom 200 kanssa 4,55 kg:aan vettä. Lämpötila pidettiin 55°C:ssa. Partikkelit, jotka muodostettiin sekoittajan ja leikkurin rotaatiolla, kuivattiin leijukerroksessa. Seula-analyysi osoitti seuraavan partikkelikokojakautuman.
> 1000 yum 8,5 % > 850 - 16,1 % > 707 - 31,2 % > 600 '- 46,2 % > 500 - 65,3 % < 420 - 15,6 %
Esimerkki 11 Lödige FM 130 D-sekoittaja täytettiin 2,1 kg:11a selluloosa-kuituja, 8,4 kg:lla Clarcel Celite‘ä ja 4,5 kg:lla natrium-kloridia ja ruiskutettiin 11,0 kg:n 10-prosenttista (paino/ paino) gelatiinia Bloom 200 kanssa. Lämpötila oli 55°C. Partikkelit muodostettiin ja kuivattiin. Seula-analyysi osoitti seuraavan partikkelikoko jakautuman.
i4 85283 > 1000 ^um 14,2 % > 850 - 23,7 % > 707 - 40,1 % > 600 - 59,1 % > 500 - 79,1 % < 420 - 5,8 %
Esimerkki 12 Tämä esimerkki kuvaa keksinnön mukaista immobilisoidun entsyymivalmisteen valmistusmenetelmää. Tällöin 4,5 kg esimerkin 4 tavalla valmistettuja, glutaraldehydillä pestyjä ja kuivattuja kantajapartikkeleita leijutettiin pilot-plant-leijupetilaitteistossa (Glatt tyyppi WSG 15), ja 9,3 kg 19-prosenttista paino/paino osittain puhdistettua glukoosi-isomeraasia lajista Bacillus coagulans NRRL 5650 (aktiivisuus 3240 yksikköä/g kuiva-ainetta, aktiivisuusyksikkö määritetty julkaisussa NOVO Analyseforskrift AF 189/1), ruiskutettiin partikkelien päälle 50-55°C:ssa, ja partikkelien annettiin kuivua. Tällä tavoin valmistettu tuote sisälsi 28 paino-% osittain puhdistettua glukoosi-isomeraasia, jossa entsyymin aktiivisuus oli 85 %. 20 g näistä partikkeleista käsiteltiin sen jälkeen 500 mlrssa liuosta, joka sisälsi 0,06 M NaH2P04 · 2H20, 1,4 M Na2S04 ja 0,1 % paino/tilavuus glutaraldehydiä ja jonka pH oli säädetty arvoon 7,0 IN NaOH:lla. Tunnin kuluttua huoneen lämpötilassa partikkelit poistettiin ja pestiin huolellisesti 0,06 M natriumfosfaa-tilla, jonka pH oli 7,0, ja sen jälkeen pinnalta deionisoi-dulla vedellä, ja osan niistä annettiin kuivua. Sekä märillä että kuivilla partikkeleilla oli samat erinomaiset virtaus-ominaisuudet kuin alkuperäisellä kantajalla, eikä aktiivi-suusvuotoja voitu havaita. Kuitenkin märkien partikkeleiden entsyymiaktiivisuus oli 70 %, kun se kuivilla partikkeleilla oli ainoastaan 48 %.
Esimerkki 13 20 g kuivia esimerkin 4 tavalla valmistettuja partikkeleita fluidisoitiin Lab-tyyppiseen leijupetiin. 45,8 g 11-prosent- tista paino/paino homogenisoitua solulietettä (fermentoitu is 85283 kuten tanskalaisessa patenttihakemuksessa n:o 5190/79 esimerkissä 1 on esitetty, liete valmistettu kuten osoitettu esimerkissä 4 tanskalaisessa patenttihakemuksessa n:o 5190/79) , joka sisälsi 80,1 U/g termofiilistä laktaasia lajista Bacillus sp. NRRL B-11.229 ruiskutettiin kantajapar-tikkelien päälle 30-40°C:ssa ja päällystettyjen partikke-leiden annettiin kuivua. Laktaasin aktiivisuusyksikkö määritettiin laktaasimääränä, joka hajottaa 1 ^umoolia laktoo-sia/minuutti seuraavissa reaktio-olosuhteissa: substraatti-pitoisuus = 10 % laktoosia, lämpötila = 60°C, pH = 6,5 ja reaktioaika =30 min. Entsyymiaktiivisuus oli 79,8 %. 10 g päällystettyjä palloja käsiteltiin sitten 250 ml:11a liuosta, joka sisälsi 0,06 M Na2HPO^, 1,4 M Na2SO^ ja 0,1 % paino/tilavuus glutaraldehydiä pH-arvossa 7,5. Tunnin kuluttua huoneen lämpötilassa partikkelit poistettiin ja pestiin huolellisesti 0,06 M ^HPO^llä pH-arvossa 7,5. Entsyymiaktiivisuus suhteessa silloittumisvaiheeseen oli 17,2 %.
Esimerkki 14 24 g kuivia esimerkin 4 mukaisesti valmistettuja kantaja-partikkeleita ravistettiin 20,2 g:ssa 39,6-prosenttista paino/paino osittain puhdistettua lajista A. niger kaupallisen tuotteen AMG 200 L ultrasuodatuksella valmistettua amylo-glukosidaasia (kuvattu NOVO-esitteessä AMG, B 020 g - GB 2500 heinäkuu 1982) pienimolekyylisten ainesosien poistamiseksi kuiva-ainepitoisuuteen 39,6 % paino/paino (aktiivisuus 2610 IAG/g, aktiivisuusyksikkö määritelty julkaisussa NOVO Analyseforskrift AF 159/2). Vakuumia pidettiin tunnin ajan. Mäin saatu tuote sisälsi 25 paino-% entsyymikuiva-äinetta, jossa oli 77,9 prosentin entsyymiaktiivisuus.
20 g partikkeleita, joiden kuiva-aine oli 71,8 % käsiteltiin sitten 1600 ml:11a liuosta: 1 % paino/tilavuus NaHjPO^, 20 % paino/tilavuus Na2SO^ ja 0,2 % glutaraldehydiä pH-ar-vossa 4,5. Tunnin kuluttua partikkelit poistettiin suodattamalla ja pestiin 1-prosenttisella Na^PO^llä, pH = 4,5.
Entsyymiaktiivisuus suhteessa silloittumisvaiheeseen oli 55,1 %.
ie 85283
Esimerkki 15 40 g kantajapartikkeleita, jotka oli valmistettu esimerkissä 4 kuvatulla tavalla ja joiden kuiva-ainepitoisuus oli 98,8 %, ja 24 g vakuumihaihdutettua, osittain puhdistettua Bacillus coagulans glukoosi-isomeraasi-(NRRL 5650)-konsen-traattia, johon oli lisätty 5 % glukoosia ja 8 % natrium-sulfaattia (kuiva-aine 41,8 %) sekoitettiin keskenään ja neste syrjäytti vakuumikäsittelyn kautta partikkelien huokosissa olleen ilman. Paino sekoituksen jälkeen oli 63,22 g. Kuiva-aine oli 79,2 %.
18 g tätä valmistetta ( ~ 14 g kuiva-ainetta) käsiteltiin tunnin ajan huoneen lämpötilassa 375 ml:n kanssa liuosta, joka sisäksi kaikissa tapauksissa 22 % natriumsulfaattia, 5 % glukoosia ja 1 % natriumfosfaattia säädettynä pH-arvoon 7,5 ja edelleen joko 0,1 tai 0,2 tai 0,3 % glutaraldehydiä.
Tämän käsittelyn jälkeen valmisteet pestiin viisi kertaa n. 150 ml:lla 1 %:sta natriumfosfaattia, pH 7,5.
Entsyymiaktiivisuus määritettiin menetelmän AF 189/1 mukaisesti valuttaen neste partikkeleista. Myöskin kuiva-aine määritettiin valutetuista partikkeleista.
% kuiva- U/g U/g Saanto, Iitmobil.
ainetta märkä kuiva %_ saanto, %
Entsyymi- 41 3 1415 3385 - konsentraatti ' i4ib J,:5öb
Entsyymikon- sentraatti + 79,2 463 585 86 kantaja
Iranobilisoitu c .. co AO, Q, 0,1 »:11a GA 32'5 158 486 72 83
Iiimobilisoitu Q .... _co 0,2 »:11a GA 38'9 141 362 53 62
Inmobilisoitu .Q - 0,3'%:11a GA " 11' b/ i7 85283 Näytteet, jotka olivat ekvivalentit 5 g:lie kuiva-ainetta testattiin painehäviön suhteen.
Immobilisoinnissa käytetty Painehäviö glutaraldehydikonsentraatio 25 h 50 h 0,1 % 3 5 0,2 % 1 3 0,3 % 2 3
Es imorkk i 10
Sama sekoittaja kuin esimerkissä 4, ts. Lödige FM 130 D, täytettiin 3 kgrlla selluloosakuituja ja 13,5 kg:lla Clarcel Celite'ä ja ruiskutettiin 15 kg:n kanssa 10 %:sta paino/tila-vuus polyetyleeni-imiiniä PEI 15 T, Taihei Sangyo Kaisha Ltd., sopivassa lämpötilassa, sen jälkeen 3,0 kg:n kanssa vettä ja lopuksi 2 kg:n kanssa 50 %:sta paino/tilavuus glutaralde-hydiä. Käsittelyaika ja sekoittajan ja leikkurin pyörimisnopeus oli valittu siten, että saatiin halutun kokoisia partikkeleita. Partikkelit kuivattiin leijupedissä.
Esimerkki 17
Sama sekoittaja kuin esimerkissä 4, ts. Lödige FM 130 D, täytettiin 3 kg:lla selluloosakuituja ja 12,0 kg:lla aktiivi-hiiltä Pecactif FGV (valmistajalta Peca S.A., Levallois,
Cedex, Ranska) ja ruiskutettiin 20,0 kg:n kanssa 10 %:sta paino/paino gelatiiniliuosta Bloom 200 ja lopuksi 4,5 kg:n kanssa vettä. Käsittelyaika ja sekoittajan ja leikkurin pyörimisnopeudet valittiin siten, että saatiin halutun kokoisia partikkeleita. Partikkelit kuivattiin leijukerroksessa.
Keksinnön mukaisesti valmistetun immobilisoidun entsyymituot-teen käyttökelpoisuus ilmenee seuraavasta sovellutuskokeesta. Immobilisoitu glukoosi-isomeraasituote valmistettiin kuten esimerkissä 12. Tuote sisälsi 32,6 paino-% osittain puhdistettua glukoosi-isomeraasia ja silloittaminen suoritettiin kuten esimerkissä 12.
27,6 g:lla kosteita partikkeleita, sen jälkeen kun ne oli is 85283 pesty 1 %: sella paino/tilavuus natrimnfosfaatilla (pH = 7,0) ja jotka vastasivat 10 g:aa partikkelikuiva-ainetta, täytettiin vesivaipallinen kolonni, jonka halkaisija oli 1,5 cm. Kolonni pidettiin 65°C:ssa ja 45 % paino/paino glukoosisii-rappia pH:ssa 7,8 (säädettiin ^200^:113) pumpattiin jatkuvasti entsyymikerroksen läpi nopeudella, jolla saatiin 40-42 %:n konversio glukoosista fruktoosiksi. Alkuaktiivisuus oli 538 IGIC/g valmisteen kuiva-ainetta (aktiivisuus laskettiin julkaisun N0V0 Analyseforskrift AF 147/6 mukaisesti) ja aktiviteettipuoliaika määritettiin 450 tunniksi. Poistu-mis-pll oli 7,4-7,5.
Vertailun vuoksi voidaan mainita, että laajasti käytetyllä (S) kaupallisella immobilisoidun glukoosi-isomeraasin Sweetzyme** aktiivisuus on 225-300 IGIC/g ja sama aktiviteettipuoliaika, ja poistumis-pH:n saamiseksi Sweetzyme'llä arvoon 7,4-7,5 yllä osoitetuissa olosuhteissa, ts. 65°C:ssa ja 45-prosentti-sella paino/paino glukoosisiirapilla, syöttöhappamuuden tulee olla pH 8,2.
Claims (12)
1. Menetelmä partikkelimaisen, immobilisoidun entsyymi-valmisteen tuottamiseksi, valmisteen käsittäessä kantajan, jonka pinnalle entsyymi on kiinnittynyt, tunnettu siitä, että kantaja on valmistettu yhdistämällä kaksi faasia, ts. a) jatkuva vesiliukoisen sidosaineen faasi, jossa sidosaine ainakin osittain on liuenneena tai dispergoituneena vesipitoiseen väliaineeseen, ja b) epäjatkuva useiden erillisten, kovien ja inerttien partikkeleiden faasi, jossa partikkelien koko on riittävän pieni ollakseen vaikuttamatta kantajan muotoutumiseen, ja saattamalla sidosaine liukenemattomaksi väliaineeseen, jossa entsyymiä entyymivalmisteen tuottamisen jälkeen tullaan käyttämään, mikäli välttämätöntä, ja jossa kantaja on kosketuksissa sen entsyymin kanssa, joka on kiinnittynyt kantajan pintaan.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kahden komponentin yhdistelmä on jatkuvan ja epäjatkuvan faasin seos, ja että seos muovataan partikkeli-muotoiseksi, edullisesti pallomuotoiseksi kantajaksi.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sidosaine muodostuu geelin muodostavasta aineesta tai sisältää sitä ja että seos ekstruoidaan ja tiputetaan geeliä muodostavaan väliaineeseen, jolloin silloitava aine voidaan lisätä missä tahansa näistä vaiheista.
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että geeliyttävä aine on gelatiini, alginaatti, karrageenan tai kitosaani.
5. Patenttivaatimusten 1-4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että epäjatkuvan faasin määrä on n. 10 - n. 98 pai-no-% kantajan kokonaispainosta, edullisesti 50-95 paino-% kantajan kokonaispainosta.
6. Patenttivaatimusten 1-5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että yksittäisen inertin partikkelin lineaarinen 20 85283 koko epäjatkuvassa faasissa, laskettuna yksittäisen inertin partikkelin kanssa saman tilavuuden omaavan pallon halkaisijana, on alle 1/5 kantajapartikkelin halkaisijasta, edullisesti alle 1/20 kantajapartikkelin halkaisijasta.
7. Patenttivaatimusten 1-6 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että jatkuva faasi on saatettu liukenemattomaksi silloittamalla sopivan silloittavan aineen, edullisesti glutaraldehydin avulla.
8. Patenttivaatimusten 1-7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kantajan muoto on pallomainen, ja että kantajan keskihalkaisija on välillä 0,1 ja 5 mm, edullisesti välillä 0,2 ja 2 mm, edullisimmin välillä 0,2 ja 1 mm.
9. Patenttivaatimusten 1-8 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kantajaa käsitellään entsyymiliuoksella ja silloittavalla aineella.
10. Patenttivaatimuksen 9 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kantaja viedään torniin fluidisoituna massana ja että liukoisen entsyymin liuos viedään torniin suihkuna, minkä jälkeen näin saatu massa poistetaan tornista ja käsitellään silloittavalla aineella.
11. Patenttivaatimuksen 9 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kantaja viedään torniin fluidisoituna massana ja että liukoisen entsyymiliuoksen ja silloittavan aineen seos viedään torniin suihkuna, minkä jälkeen näin saatu massa poistetaan tornista.
12. Patenttivaatimusten 1-11 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että entsyymi on glukoosi-isomeraasi, joka edullisesti on peräisin lajista Bacillus coagulans. 2i 85283
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DK443082 | 1982-10-06 | ||
| DK443082 | 1982-10-06 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI833614A0 FI833614A0 (fi) | 1983-10-05 |
| FI833614L FI833614L (fi) | 1984-04-07 |
| FI85283B true FI85283B (fi) | 1991-12-13 |
| FI85283C FI85283C (fi) | 1992-03-25 |
Family
ID=8133444
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI833614A FI85283C (fi) | 1982-10-06 | 1983-10-05 | Foerfarande foer framstaellning av immobiliserade enzymer. |
Country Status (14)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4572897A (fi) |
| JP (1) | JPS5985291A (fi) |
| KR (1) | KR840006366A (fi) |
| AR (1) | AR241793A1 (fi) |
| BE (1) | BE897925A (fi) |
| CA (1) | CA1209936A (fi) |
| DE (1) | DE3336235A1 (fi) |
| DK (1) | DK149079C (fi) |
| ES (1) | ES8600392A1 (fi) |
| FI (1) | FI85283C (fi) |
| FR (1) | FR2541305B1 (fi) |
| IE (1) | IE56080B1 (fi) |
| IT (1) | IT1163946B (fi) |
| NL (1) | NL8303414A (fi) |
Families Citing this family (31)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DK149079C (da) * | 1982-10-06 | 1986-06-23 | Novo Industri As | Fremgangsmaade til fremstilling af et immobiliseret enzympraeparat |
| US4916068A (en) * | 1983-10-20 | 1990-04-10 | Kraft, Inc. | Bioconversion production of ascorbic acid with L-galactono-1,4-oxidase |
| JPS60231613A (ja) * | 1984-04-28 | 1985-11-18 | Terumo Corp | Ｔ細胞とｂ細胞の分離方法およびその分離材ならびにその分離装置 |
| JPS6192570A (ja) * | 1984-10-12 | 1986-05-10 | Showa Denko Kk | 酵素造粒法 |
| JPS61104792A (ja) * | 1984-10-26 | 1986-05-23 | Kawasaki Heavy Ind Ltd | 固定化菌体を用いる発酵方法 |
| BR8506634A (pt) * | 1984-12-20 | 1986-09-09 | Rhone Poulenc Sante | Composicoes para o revestimento de aditivos alimentares destinados aos ruminantes e granulados sob forma de microcapsulas assim revestidos |
| US4675292A (en) * | 1985-03-04 | 1987-06-23 | The Dow Chemical Company | Stabilization of glucose isomerase |
| US4743550A (en) * | 1985-04-29 | 1988-05-10 | Union Carbide Corporation | Method for improving the partition coefficient in enzyme-containing systems having at least two phases |
| DE3525648A1 (de) * | 1985-07-18 | 1987-01-29 | Bokel Heinz Hermann Dr | 1-oxa-2-oxo-2-r-3-aza-5-z-cyclopentanderivate |
| US4940665A (en) * | 1985-12-27 | 1990-07-10 | Showa Denko K. K. | Method for granulation of enzyme |
| US5009994A (en) * | 1986-03-24 | 1991-04-23 | Em Diagnostic Systems, Inc. | Particles containing mannitol suitable for tabletting into diagnostic reagents |
| US4820627A (en) * | 1986-03-24 | 1989-04-11 | Em Diagnostic Systems, Inc. | Method of preparing particles suitable for tabletting into diagnostic reagents |
| DE3704478C1 (de) * | 1987-02-13 | 1988-07-28 | Metallgesellschaft Ag | Kugelfoermiger Biokatalysator und Verfahren zu seiner Herstellung |
| GB8705464D0 (en) * | 1987-03-09 | 1987-04-15 | Atomic Energy Authority Uk | Composite material |
| US5073491A (en) * | 1988-12-23 | 1991-12-17 | Hoffman-La Roche Inc. | Immobilization of cells in alginate beads containing cavities for growth of cells in airlift bioreactors |
| US5208154A (en) * | 1991-04-08 | 1993-05-04 | The United States Of America As Represented By The Department Of Energy | Reversibly immobilized biological materials in monolayer films on electrodes |
| US5336614A (en) * | 1991-08-14 | 1994-08-09 | Quality Biological, Inc. | Soft agar assay and kit |
| EP0567661A1 (fr) * | 1992-04-25 | 1993-11-03 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Lipase modifiée, procédé de modification et utilisations |
| DK0577162T3 (da) * | 1992-04-29 | 2003-04-22 | Genencor Int | Enzym, der er immobiliseret på en bærer af krydsbundet gelatine og aktivt carbon |
| US5846762A (en) * | 1992-08-26 | 1998-12-08 | Lockheed Martin Energy Research Systems, Inc. | Structurally stable gel bead containing entrapped enzyme and method for manufacture thereof |
| JP2735458B2 (ja) * | 1993-06-18 | 1998-04-02 | 日本碍子株式会社 | 生体触媒用担体 |
| AU1240900A (en) * | 1998-10-27 | 2000-05-15 | Genencor International, Inc. | Matrix granule |
| US7166451B1 (en) * | 2003-02-24 | 2007-01-23 | The Ohio State University | Immobilization of enzyme on a fibrous matrix |
| WO2004081220A2 (en) * | 2003-03-07 | 2004-09-23 | Novus International Inc. | A process for enzymatically resolving an enantiomeric mixture of alpha-hydroxy acids |
| KR100645019B1 (ko) * | 2004-06-03 | 2006-11-14 | 주식회사 리젠 바이오텍 | 비수용성 무기화합물이 포집되어 있는 고분자 비드, 이의제조방법 및 용도 |
| CN101636480B (zh) | 2007-01-11 | 2014-04-09 | 诺维信公司 | 包含活性化合物的颗粒 |
| WO2009113030A2 (en) * | 2008-03-12 | 2009-09-17 | Tata Chemicals Ltd. | Process for the production of galactooligosaccharides by free cells |
| CN111378643A (zh) * | 2018-12-29 | 2020-07-07 | 丰益(上海)生物技术研发中心有限公司 | 固定化酶组合物及其制备方法和用途 |
| CN110357248B (zh) * | 2019-07-12 | 2021-10-22 | 吉林建筑大学 | 一种水处理填料及其制备方法 |
| CN114196663B (zh) * | 2021-12-14 | 2024-01-23 | 中国科学院合肥物质科学研究院 | 一种土壤激发菌剂固定化微球及其制备方法 |
| CN117305614B (zh) * | 2023-09-27 | 2024-06-14 | 浙江大学 | 一种利用生物吸附剂从电子废弃物中选择性回收金的方法 |
Family Cites Families (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1362365A (en) * | 1970-07-28 | 1974-08-07 | Novo Terapeutisk Labor As | Production of enzyme preparations |
| US3873521A (en) * | 1970-09-17 | 1975-03-25 | Astra Laekemedel Ab | Esters of {60 -amino penicillins |
| US4141857A (en) * | 1976-04-30 | 1979-02-27 | Uop Inc. | Support matrices for immobilized enzymes |
| US4116771A (en) * | 1976-07-02 | 1978-09-26 | Novo Industri A/S | Immobilized saccharifying enzyme product and process for preparation thereof |
| GB1571987A (en) * | 1976-07-02 | 1980-07-23 | Novo Industri As | Enzyme products |
| GB1590432A (en) * | 1976-07-07 | 1981-06-03 | Novo Industri As | Process for the production of an enzyme granulate and the enzyme granuate thus produced |
| JPS5312992A (en) * | 1976-07-21 | 1978-02-06 | Mitsubishi Monsanto Chem Co | Preparation of polyphenylene oxides |
| JPS6015317B2 (ja) * | 1976-10-05 | 1985-04-18 | アボツク ラボラトリ−ズ | 生体重合体とカップリングさせて使用するための組成物 |
| US4110164A (en) * | 1977-04-19 | 1978-08-29 | Standard Brands Incorporated | Agglomerated fibrous cellulose |
| DK146481C (da) * | 1978-08-14 | 1984-03-26 | Novo Industri As | Fremgangsmaade til fremstilling af et immobiliseret enzymprodukt |
| FR2446317A1 (fr) * | 1979-01-12 | 1980-08-08 | Solvay | Granules complexes contenant des substances proteiniques actives et procedes pour leur fabrication, leur utilisation, et leur regeneration |
| JPS5836959B2 (ja) * | 1980-08-21 | 1983-08-12 | 三井製糖株式会社 | 固定化α−グルコシルトランスフエラ−ゼによるパラチノ−スの製造法 |
| DK149079C (da) * | 1982-10-06 | 1986-06-23 | Novo Industri As | Fremgangsmaade til fremstilling af et immobiliseret enzympraeparat |
-
1983
- 1983-09-28 DK DK442783A patent/DK149079C/da not_active Application Discontinuation
- 1983-10-05 IT IT23148/83A patent/IT1163946B/it active
- 1983-10-05 DE DE19833336235 patent/DE3336235A1/de active Granted
- 1983-10-05 NL NL8303414A patent/NL8303414A/nl not_active Application Discontinuation
- 1983-10-05 AR AR83294452A patent/AR241793A1/es active
- 1983-10-05 ES ES526246A patent/ES8600392A1/es not_active Expired
- 1983-10-05 US US06/539,305 patent/US4572897A/en not_active Expired - Fee Related
- 1983-10-05 KR KR1019830004716A patent/KR840006366A/ko not_active Ceased
- 1983-10-05 BE BE6/47881A patent/BE897925A/fr not_active IP Right Cessation
- 1983-10-05 FI FI833614A patent/FI85283C/fi not_active IP Right Cessation
- 1983-10-05 IE IE2346/83A patent/IE56080B1/en not_active IP Right Cessation
- 1983-10-06 CA CA000438526A patent/CA1209936A/en not_active Expired
- 1983-10-06 FR FR8315915A patent/FR2541305B1/fr not_active Expired
- 1983-10-06 JP JP58186081A patent/JPS5985291A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK149079C (da) | 1986-06-23 |
| ES526246A0 (es) | 1985-10-01 |
| DK442783D0 (da) | 1983-09-28 |
| FR2541305A1 (fr) | 1984-08-24 |
| DK149079B (da) | 1986-01-13 |
| JPS5985291A (ja) | 1984-05-17 |
| FR2541305B1 (fr) | 1987-04-10 |
| DE3336235C2 (fi) | 1992-01-30 |
| FI833614A0 (fi) | 1983-10-05 |
| FI85283C (fi) | 1992-03-25 |
| ES8600392A1 (es) | 1985-10-01 |
| KR840006366A (ko) | 1984-11-29 |
| NL8303414A (nl) | 1984-05-01 |
| FI833614L (fi) | 1984-04-07 |
| DE3336235A1 (de) | 1984-04-12 |
| DK442783A (da) | 1984-04-07 |
| CA1209936A (en) | 1986-08-19 |
| AR241793A1 (es) | 1992-12-30 |
| IT8323148A0 (it) | 1983-10-05 |
| IE56080B1 (en) | 1991-04-10 |
| IE832346L (en) | 1984-04-06 |
| BE897925A (fr) | 1984-04-05 |
| IT1163946B (it) | 1987-04-08 |
| US4572897A (en) | 1986-02-25 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI85283C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av immobiliserade enzymer. | |
| AU659090B2 (en) | Substance carrying conglomerate | |
| CA1254528A (en) | Process for encapsulation and encapsulated active material system | |
| US4839419A (en) | Method for immobilizing dissolved proteins | |
| AU6970594A (en) | Process for dust-free enzyme manufacture | |
| WO1994026883A9 (en) | Process for dust-free enzyme manufacture | |
| GB1575700A (en) | Porous cellulose beads | |
| US4110164A (en) | Agglomerated fibrous cellulose | |
| JPS62503097A (ja) | シリカ構造体 | |
| Štamberg | Bead cellulose | |
| US4421850A (en) | Immobilization of enzymes | |
| CA1299124C (en) | Biological support | |
| GB2128620A (en) | Method for production of an immobilized enzyme preparation | |
| US4168250A (en) | Agglomerated fibrous ion exchange cellulose | |
| EP0252472B1 (en) | Packing material for liquid chromatography and process for producing the same | |
| CA2056397C (en) | Particulate material | |
| JPH0327196B2 (fi) | ||
| CA1258450A (en) | Process for the preparation of catalyst supports and materials produced thereby | |
| NO144633B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av 6-aminopenicillansyre | |
| JPH02180706A (ja) | リン酸化合物粒子集合体及びその製造方法 | |
| GB2085449A (en) | Process for preparing agglomerated fibrous cellulose ion exchange composites | |
| WO1989008705A1 (en) | Supports for proteins and amino acids | |
| JPS6279785A (ja) | 酵素固定用担体 | |
| AU647023C (en) | Particulate material | |
| AU637714B2 (en) | Inorganic-based enzyme carriers and carrier-bound enzymes |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: NOVO NORDISK A/S |