FI76801B - Foerfarande foer framstaellning av ett antibiotiskt aktivt karbapenemderivat vilken aer substituerad i 2-staellningen med en grupp innehaollande en kvaternaer kvaeveheterocyklisk ring. - Google Patents

Foerfarande foer framstaellning av ett antibiotiskt aktivt karbapenemderivat vilken aer substituerad i 2-staellningen med en grupp innehaollande en kvaternaer kvaeveheterocyklisk ring. Download PDF

Info

Publication number
FI76801B
FI76801B FI831170A FI831170A FI76801B FI 76801 B FI76801 B FI 76801B FI 831170 A FI831170 A FI 831170A FI 831170 A FI831170 A FI 831170A FI 76801 B FI76801 B FI 76801B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
compound
formula
pyridinium
mmol
process according
Prior art date
Application number
FI831170A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI831170L (fi
FI831170A0 (fi
FI76801C (fi
Inventor
Choung Un Kim
Jr Peter Francis Misco
Original Assignee
Bristol Myers Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Co filed Critical Bristol Myers Co
Publication of FI831170A0 publication Critical patent/FI831170A0/fi
Publication of FI831170L publication Critical patent/FI831170L/fi
Priority to FI855056A priority Critical patent/FI76802C/fi
Publication of FI76801B publication Critical patent/FI76801B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI76801C publication Critical patent/FI76801C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/06—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring nitrogen atom
    • C07D213/16—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring nitrogen atom containing only one pyridine ring
    • C07D213/20—Quaternary compounds thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C321/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/28—Radicals substituted by singly-bound oxygen or sulphur atoms
    • C07D213/30—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/63—One oxygen atom
    • C07D213/65—One oxygen atom attached in position 3 or 5
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/70—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/73—Unsubstituted amino or imino radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/66—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/84—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D477/00—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring
    • C07D477/10—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2
    • C07D477/12—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2 with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached in position 6
    • C07D477/16—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2 with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached in position 6 with hetero atoms or carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 3
    • C07D477/20—Sulfur atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

1 76301
Menetelmä antibioottisesti aktiivisten 2-asemassa kvater-näärisen typpiheterosyklisen renkaan sisältävällä ryhmällä substituoitujen karbapeneemijohdannaisten valmistamiseksi 5 Tämä keksintö koskee menetelmää uusien antibiootti sesti aktiivisten karbapeneemijohdannaisten valmistamiseksi, joilla on kaava (I)
OH H H
io ch3-(!:h--^ γ5-Α- I M (I)
Or XOOR2 15 jossa A on sykloheksyleeni- tai C2_6-alkyleeniryhmä, joka voi olla substituoitu yhdellä tai useammalla C3_4-alkyylil-
O
lä, R on vety, anxoninen varaus tai tavallinen helposti poistettavissa oleva karboksyylin suojaryhmä, edellyttäen,
O
että kun RÄ on vety tai suojaryhmä, läsnä on myös vasta-20 anioni; ja ryhmä '0 " on pyridinium- tai imidatsoliniumryhmä, joka on liittynyt 25 ryhmään A rengastypestä ja joka voi olla substituoitu yhdellä tai kahdella C1_4-alkyylillä, C^_4-alkoksilla, hydr-oksisubstituoidulla C3_4-alkyylillä, C3_4-alkyylitiolla aminolla tai niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen valmistamiseksi.
30 Kirjallisuudesta tunnetaan lukuisia /i-laktaamijoh dannaisia, joissa on karbapeneemirunko 6_ 35 ' | J—9-'3 0 4 2 76801 Näiden karbapeneemijohdannaisten on ilmoitettu olevan käyttökelpoisia bakteerienvastaisina aineina ja/tai ^-lakta-maasi-inhibiittoreina.
Ensimmäiset karbapeneemiyhdisteet olivat luonnon-5 tuotteita kuten tienamysiini, jonka kaava on
0H H
10 N xooh jota on saatu käyttämällä kantaa Streptomyces cattleya (US-patentti 3 950 357). Tienamysiini on poikkeuksellisen 15 tehokas laajaspektrinen antibiootti, joka on huomattavan aktiivinen erilaisia Pseudomonas-lajeja vastaan, jotka tunnetusti ovat olleet vastustuskykyisiä /3-laktaamiantibioot-tien suhteen.
Tienamysiinin ja sille läheisten, luonnossa esiinty-20 vien karbapeneemijohdannaisten poikkeuksellisen biologisen aktiivisuuden vuoksi on valmistettu suuri määrä tienamysiinin johdannaisia. Näitä on kuvattu mm. EP-patenttijulkaisuissa 6639, 21082, 24832 ja 44170; US-patenttijulkaisuissa 4 189 493, 4 194 047, 4 226 870 ja 4 235 920; GB-patentti-25 julkaisuissa 1 604 275 ja 1 604 276 ja DE-hakemusjulkaisuissa 2 652 674 - 2 652 681, 2 724 560, 2 819 453 ja 2 819 479. Näihin tunnettuihin yhdisteisiin sisältyy myös yhdisteitä, joissa 2-aseman substituentissa on kvaternää-rinen ammoniumryhmä. Esim. US-patenttijulkaisun 4 226 870 30 mukaan 2-aseman substituentti voi olla mm.
S
-s-ch2ch2-nh-c-ch2-®n )
II
35 3 76801 ja US-patenttijulkaisussa 4 235 920 on kuvattu yhdisteitä, joilla on kaava
OH
I Φ 5 ^-SCH2CH2NR5R6R7 a- N -[_COO® or 10 jossa R^, R® ja R^ ovat toisistaan riippumatta H tai subs-tituoitu tai substituoimaton alkyyli, alkenyyli, alkinyyli, sykloalkyyli, sykloalkenyyli, sykloalkenyylialkyyli, syklo-alkyylialkyyli, aryyli, aralkyyli, heteroaryyli tai hetero-aralkyyli.
15 EP-patenttijulkaisussa 21082 on kuvattu yhdisteitä, joilla on kaava
X I
.20 ' I O
J- N --L v—s cooö jossa
R
25 ef
O
joka on sitoutuneena tienamysiinin aminotyppiryhmään, mer-30 kitsee mono- tai polysyklistä N-pitoista heterosyklistä ryhmää ja R on H tai substituoitu tai substituoimaton alkyyli, aryyli, alkenyyli, heterosyklyylialkenyyli, aralkenyy-li, heterosyklyylialkyyli, aralkyyli, -NR2, COOR, CONR2r -OR tai CN.
35 Yhdistettä 4 76301
OH
I ® θ
^^Xp-SCHpCHoNtCHT) A
5 (f N ^ COOH
jossa A on farmaseuttisesti hyväksyttävä anioni, on selostettu myös artikkelissä Recent Advances in the Chemistry 10 of ^-Lactam Antibiotics, Royal Society of Chemistry, London, 1981, s. 240-254, jossa sen bakteerienvastaiseksi aktiivisuus-keskiarvoksi ilmoitetaan suunnilleen 1/2-2/3 tienamy-siinin aktiivisuudesta.
Vaikkakin edellä mainituissa julkaisuissa on selos-15 tettu karbapeneemijohdannaisia, joissa on 2-substituenttina ryhmä -S-A-Het, jossa A merkitsee alkyleeniryhmää ja Het merkitsee hetero-20 aromaattista ryhmää, niissä ei ole kuvattu karbapeneemijohdannaisia, joissa Het olisi radikaali, jonka kaava on
O
jossa merkitsee kvaternoitua typpipitoista aromaattista hetero-30 syklistä ryhmää, joka on sitoutunut alkyleeni- tai syklo-alkyleeni-hiileen kvaternäärisen typpiatomin välityksellä. Huolimatta hyvin lukuisista kirjallisuudessa kuvatuista karbapeneemijohdannaisista esiintyy yhä tarvetta uusista karbapeneemiyhdisteistä, jotka olisivat aktiivisuusspektrin, 35 tehokkuuden, stabilisuuden ja/tai toksisten sivuvaikutusten osalta edullisempia kuin tunnetut karbapeneemijohdannaiset.
Il 5 76801 Tämän keksinnön mukaisesti valmistetuille uusille karbapeneemijohdannaisille on tyypillistä, että niissä on 2-substituentti, jonka kaava on 5 _s_a_?«0) jossa 10 on edellä kaavan I yhteydessä määritelty kvaternäärinen heteroaromaattinen ryhmä.
15 Keksinnön mukaisesti valmistetut kaavan I mukaiset yhdisteet ovat tehokkaita bakteerien vastaisia aineita.
Uusissa kaavan I mukaisissa yhdisteissä on karbape-neemi-ydin 20 Λ-N -- 3 O 4 25 ja täten niitä voidaan nimittää l-karba-2-peneemi-3-karbok-syylihappo-johdannaisiksi. Vaihtoehtoisesti yhdisteiden voidaan katsoa omaavan perusrakenteen 30 1 P- »-12 0 1 ja siten niitä voidaan nimittää 7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)-hept-2-eeni-2-karboksyylihappojohdannaiseksi. Vaikkakin kaa-35 van I mukaisten yhdisteiden 5,6-protonien suhteellinen ste-reokemiallinen rakenne voi vastata joko cis- tai trans-muo- 6 76301 toa niin edullisten yhdisteiden stereokemiallinen rakenne on 5R,6S(trans)-konfiguraatio kuten tienamysiinilläkin.
Termi "tavallinen helposti poistettavissa oleva kar-boksyylin suojaryhmä" tarkoittaa tunnettua esteriryhmää, 5 jota voidaan käyttää karboksyyliryhmän suojaamiseen alla selostettujen kemiallisten reaktiovaiheiden aikana ja jotka voidaan poistaa menetelmin, jotka eivät aiheuta huomattavaa jäljellä olevan molekyyliosan pilkkoutumista, esim. hydrolysoimalla kemiallisesti tai entsymaattisesti, käsit-10 telemällä kemiallisten pelkistysaineiden kanssa lievissä olosuhteissa, säteilyttämällä ultraviolettivalolla tai hyd-raamalla katalyyttisesti. Esimerkkejä tällaisista esteri-suo jaryhmistä ovat bentshydryyli, p-nitrobentsyyli, 2-naftyylimetyyli, allyylibentsyyli, trikloorietyyli, silyyli 15 kuten trimetyylisilyyli, fenasyyli, p-metoksibensyyli, asetonyyli, o-nitrobentsyyli, 4-pyridyylimetyyli ja C^-Cg-alkyyli kuten metyyli, etyyli tai t-butyyli. Tällaisia suo-jaryhmiä ovat edelleen ryhmät, jotka hydrolysoituvat fysiologisissa olosuhteissa kuten pivaloyylioksimetyyli, asetok-20 simetyyli, ftalidyyli, indanyyli ja metoksimetyyli. Erityisen edullisia karboksyylin suojaryhmiä ovat p-nitrobent-syyli, joka voidaan poistaa helposti hydrogenolysoimalla katalyyttisesti, ja allyyli, joka voidaan poistaa PdiPflg)^-katalysoidun reaktion avulla.
25 Edellä mainittuja farmaseuttisesti hyväksyttäviä suo loja ovat toksittomat happoadditiosuolat, esim. suolat epäorgaanisten happojen kuten kloorivety-, bromivety-, jodive-ty-, fosfori-, rikki- jne. happojen kanssa ja suolat orgaanisten happojen kuten maleiini-, etikka-, sitruuna-, meri-30 pihka-, bentsoe-, viini-, fumaari-, manteli-, aksorbiini-, maito-, glukoni- ja omenahapon kanssa. Happoadditiosuolojen muodossa olevat kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan esittää kaavana
II
7 76801 R8 Η Λ χθ 5 $ Ν ^"COOR2 jossa R2 = H tai suojaryhmä ja jossa Χθ merkitsee hapon amonia. Vasta-amom Χσ voidaan valita siten, että saadaan 10 terapeuttiseen antoon soveltuvia farmaseuttisesti hyväksyt-täviä suoloja, mutta Χσ voi olla myös toksinen anioni, joka voidaan sen jälkeen poistaa tai korvata farmaseuttisesti hyväksyttävällä anionilla terapeuttiseen käyttöön soveltuvan aktiivisen lopputuotteen muodostamiseksi. Kun radikaa-15 lissa Ό 20 on happamia tai emäksisiä funktionaalisia ryhmiä, ne voidaan muuttaa emäs- tai happosuoloiksi, esim. happoadditio-suoloiksi kun on kyseessä emäksinen ryhmä, ja metallisuo-loiksi (esim. natrium, kalium, kalsium ja aluminium), ammo-niumsuoloiksi tai toskittomien amiinien (esim. trialkyyli-25 amiinien, prokaiinin, dibentsyyliamiinin, 1-efenamiinin, N-bentsyyli-p-fenetyyliamiinin, Ν,Ν'-dibentsyylietyleeni- diamiinin, jne.) suoloiksi, kun kyseessä on hapan ryhmän.
. . . 7
Kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa R on vety, anio-ninen varaus tai fysiologisesti hydrolysoituva esteriryhmä, 30 yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojensa kanssa, ovat käyttökelpoisia bakteerien vastaisina aineina. Muut kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan muuttaa edellä mainituiksi biologisesti aktiivisiksi yhdisteiksi tavanomaisin menetelmin.
35 Edullisten kaavan I mukaisten yhdisteiden absoluutti nen konfiguraatioon 5R, 6S, 8R.
8 76801
Ryhmä A on edullisesti -CH2CH2-, -CH2CH2CH2-, -CHCH,-, tai ,_t -D.
5
Edullisempia kaavan I mukaisia yhdisteitä ovat yhdisteet, joilla on kaava:
0H H
ίο Γ I W
(f N ^COOR2 15 jossa -A-lX^ merkitsee ryhmää (I) -ch2ch2®itA (2) -ch2ch2ch2®/“\ X=XXch3 (3) -CHjCHjV7 \ (4) -CH2CH2®ir\
20 x ' CH3 \=/ Ch2oH
(5) -CH2CH2®!^~^-CH3 (6) -CH2CH2®t^A
(7) -CH2CH2®lf_\—CH2OH (8) -CH2CH2®1^"”\--SCH3 och3 tLsCHj 25 (9) -CH2CH2®lfA (10) -Cf^Cf^V^n
H3c<~Z
(II) -fHCH2®/3 (12) -CH.CH,®/^ 3 AViH2 CH3 SCH3 30 (13) -CH2CH2®N Λ (14) -CH2CH2®p=^ “ N_CH3 XX tai (15) R,R- tai S,S-diastereoisomeerit syklo- 35 heksyyli-renkaan kahden epäsymmetrisen v. hiilen kohdalla
O
II
9 76301 ja R on vety, aniomnen varaus tai tavallinen helposti poistettavissa oleva karboksyyli-suojaryhmä, edellyttäen,
O
että kun R on vety tai suojaryhmä, läsnä on myös vasta-.anioni, ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävät happoad-5 ditiosuolat.
Kaavan I mukaisia karbapeneemijohdannaisia valmistetaan keksinnön mukaisesti siten, että a) yhdisteelle, jolla on kaava (II) 10 ?H"
CH3-CH--Y \-6-A-I
,_N I (II) υ XOOR2' 15 Λ · jossa A on edellä määritelty ja R^ on tavallinen helposti poistettavissa oleva karboksyylin suojaryhmä, suoritetaan nukleofiilinen korvausreaktio inertissä orgaanisessa liuot-timessa ja hopeaionin läsnäollessa heteroaromaattisella 20 yhdisteellä, jonka kaava on
O
25 siten, että kaavan II mukaisen yhdisteen jodiatomi korvautuu ryhmällä
•Q
30 ja muodostuu yhdiste, jolla on kaava (I1) ch^h—KYs-A-°0 χβ J- N - ° COOR^ 10 76301 ft ...
jossa Χσ on vasta-anioni ja A,
O
5 ?' ]a R ovat edellä määritellyt, ja haluttaessa poistetaan n i karboksyylin suojaryhmä R* , jolloin saadaan vastaava suojaamaton kaavan I mukainen yhdiste, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola, tai 10 b) (1) yhdiste, jolla on kaava (III)
OH „ H
ch3-ch I (III) 15 CT N >COOR1' 2 1 jossa R on edellä määritelty, saatetaan reagoimaan iner-tissä orgaanisessa liuottimessa difenyylikloorifosfaatin 20 kanssa emäksen läsnäollessa, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (IV)
OH H H J
CH3-CH--*/\^OP(OCgH5) 2 25 1 | (IV) g N ^COOR1'
II
jossa R on edellä määritelty; 30 (2) kaavan IV mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan inertissä orgaanisessa liuottimessa emäksen läsnäollessa merkaptaaniyhdisteen kanssa, jolla on kaava
HS-A-OH
35 jossa A on edellä määritelty, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (V) n 76301 9H h a
CH3-CH--\y-S-A-OH
I (V) , J— N -ii 5 <T ''COOR^ jossa A ja R2 ovat edellä määritellyt; (3) kaavan V mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan 10 inertissä orgaanisessa liuottimessa emäksen läsnäollessa metaani- tai p-tolueenisulfonyylikloridin tai niiden funktionaalisen asyloivan ekvivalentin kanssa, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (VI)
15 OH H H
CH3-CH--S-A-0S02R
I I (VI) (/— N ^OOR2' 20 jossa A ja R ovat edellä määritellyt ja R on metyyli tai p-tolyyli; (4) kaavan VI mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan inertissä orgaanisessa liuottimessa jodidi-ionilähteen kans- 25 sa siten, että metaani- tai p-tolueenisulfonyylioksiryhmä korvautuu jodilla ja saadaan yhdiste, jolla on kaava (II)
OH H H
CH3-CH--I^N^s-a-i 30 I (H) - N -—COOR2' 1 jossa A ]a R ovat edellä määritellyt; 35 ja saatua kaavan II mukaista yhdistettä käsitellään edelleen edellä kohdassa a) esitetyllä tavalla kaavan I mukai- 12 7 6801 sen yhdisteen tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan saamiseksi; tai c) yhdiste, jolla on kaava (IV)
5 OH H H
CH3-CH--|^^NsSp^op(°c6H5) 2 I (IV) cr N coor2 ' 10 21 jossa R on edellä määritelty, saatetaan reagoimaan tioli-yhdisteen kanssa, jolla on kaava (VII) 15 HS — A—N ) (VII) χθ jossa A, ja X® ovat edellä määritellyt, karbapenee- 20 miyhdisteen saamiseksi, jolla on kaava (I1)
OH H H
CHj-CH-I-p^XpS-A-SQ K® (r) 25 f—N-S:oor2' ja haluttaessa poistetaan karboksyylin suojaryhmä R , jolloin saadaan vastaava suojaamaton kaavan I mukainen yhdiste. 30 Kaavan III mukaisia lähtöaineina käytettäviä yhdis teitä on kuvattu esimerkiksi eurooppalaisessa patenttihakemuksessa 38 869 (yhdiste 7) ja niitä voidaan valmistaa siinä selostetuin yleisin menetelmin.
Menetelmävaihtoehdossa b) kaavan III mukaisen yhdis-35 teen annetaan reagoida inertissä orgaanisessa liuottimessa kuten metyleenikloridissa, asetonitriilissä tai dimetyyli-
II
13 76801 formamidissa suunnilleen ekvimoolimäärän kanssa difenyyli-kloorifosfaattia emäksen kuten di-isopropyylietyyliamiinin, trietyyliamiinin, 4-dimetyyliamiinipyridiinin tai näiden kaltaisen emäksen läsnäollessa, jolloin saadaan kaavan IV 5 mukaista yhdistettä. Asylointi poistuvan difenyylifosforyy-lioksi-ryhmän saamiseksi kaavan III mukaisen yhdisteen 2-asemaan on edullista suorittaa lämpötilassa noin -20 -+40°C, edullisimmin noin 0°C:ssa. Kaavan IV mukainen yhdiste voidaan haluttaessa eristää, mutta mukavuussyistä sitä 10 yleensä käytetään seuraavassa vaiheessa eristämättä tai puhdistamatta.
Kaavan IV mukainen yhdiste muutetaan kaavan V mukaiseksi yhdisteeksi tavallisella korvausreaktiolla. Tällöin kaavan IV mukaisen yhdisteen voidaan antaa reagoida suun-15 nilleen ekvimoolimäärän kanssa merkaptaaniyhdisteellä, jolla on kaava
HS-A-OH
inertissä orgaanisessa liuottimessa kuten dioksaanissa, di-20 metyyliformamidissa, dimetyylisulfoksidissa tai asetonitrii-lissä ja emäksen kuten di-isopropyylietyyliamiinin, trietyy-liamiinin, natriumvetykarbonaatin, kaliumkarbonaatin tai 4-dimetyyliaminopyridiinin läsnäollessa. Korvausreaktion kannalta lämpötilassa ei ole ratkaisevaa merkitystä, mutta 25 edullinen lämpötila-alue on välillä noin -40°C - +25°C. Tarkoituksenmukaisimmin reaktio suoritetaan jäähdyttäen, esim. noin 0°C:ssa.
Kaavan V mukainen yhdiste asyloidaan sitten metaani-tai p-tolueenisulfonyylikloridilla, tai sitä vastaavalla 30 reaktiokykyisellä asyloivalla aineella kuten vastaavalla sulfonihappoanhydridillä, inertissä orgaanisessa liuottimessa ja emäksen läsnäollessa, jolloin siihen saadaan kaavan VI mukaisen yhdisteen poistuva metaani- tai p-tolueeni-sulfonyylioksiryhmä. Asylointi suoritetaan inertissä orgaa-35 nisessa liuottimessa kuten tetrahydrofuraanissa, metyleeni-kloridissa, asetonitriilissä tai dimetyyliformamidissa ja 14 7 6 8 01 sopivan emäksen kuten di-isopropyylietyyliamiinin, trietyy-liamiinin, 4-dimetyyliaminopyridiinin ja näiden kaltaisen emäksen läsnäollessa. Reaktio voidaan suorittaa laajalla lämpötila-alueella, esim. välillä -40°C - +40°C, mutta 5 edullisinta on sen suorittaminen jäähdyttämällä, esim. noin -30° - -40°C:ssa.
Seuraavaksi kaavan VI mukaiselle yhdisteelle suoritetaan korvausreaktio siten, että saadaan kaavan II mukainen yhdiste, jossa on poistuva jodisubstituentti. Näistä kaavan 10 II mukaisista uusista välituotteista voidaan helposti valmistaa kaavan I mukaisia lopputuotteita.
Poistuvan metaani- tai p-tolueenisulfonyylioksiryhmä korvataan jodilla antamalla kaavan VI mukaisen yhdisteen reagoida jodidi-ionilähteen kanssa inertissä orgaanisessa 15 liuottimessa kuten asetonissa, dimetyyliformamidissa tai di-metyylisulfoksidissa. Tällöin voidaan käyttää mitä tahansa yhdistettä, joka ionisoituu käytettävässä liuottimessa tuottaen jodidi-ioneja, esim. alkalimetallimetallijodidia kuten NaJ:a tai KJ:a. Korvausreaktion lämpötilalla ei ole ratkai-20 sevaa merkitystä, mutta huoneen lämpötila tai sen yläpuolella olevat lämpötilat ovat edullisempia reaktion saattamiseksi tapahtumaan täydellisesti kohtuullisessa ajassa. Jodidi-ionilähdettä käytetään sellaisin määrin, että jodi-di-ioneja saadaan muodostumaan suunnilleen ekvivalentein 25 määrin tai ylimäärin kaavan VI mukaiseen yhdisteeseen nähden .
Haluttuja kaavan I mukaisia karbapemeemijohdannaisia valmistetaan kaavan II mukaisista yhdisteistä korvaamalla näiden jodisubstituentti halutulla typpipitoisella hetero-30 aromaattisella nukleofiilisellä ryhmällä O -
Kaavan II mukaisen yhdisteen annetaan tällöin reagoida ek-vivalenttimäärän, ensisijaisesti ylimäärän kanssa haluttua 35 heteroaryyli-reagenssia inertissä orgaanisessa liuottimessa ja hopeaionin läsnäollessa. Sopivia inerttejä orgaanisia
II
is 76801 liuottimia ovat esimerkiksi tetrahydrofuraani, dioksaani, metyleenikloridi, diglyme, dimetoksietaani, ja näiden kaltaiset liuottimet. Hopeaionilähteenä voidaan käyttää mitä tahansa hopeayhdistettä, joka ionisoituu oleellisesti 5 liuottimessa muodostaen hopeaioneja ja inerttiä anionia, esim. AgClO^sa. Tavallisesti on edullista käyttää kaavan II mukaisen yhdisteen suhteen suunnilleen ekvivalenttimää-rin hopeaioneja korvausreaktion helpottamiseksi. Reaktio voidaan suorittaa laajalla lämpötila-alueella, esim. välil-10 lä noin -25° - noin +25°C, mutta edullisinta on suorittaa se noin 0°C:ssa. Kaavan 1' mukaisessa yhdisteessä on siihen liittyneenä vasta-anioni (peräisin käytetystä hopeasuolas-ta), joka voidaan tässä vaiheessa korvata tavallisin menetelmin erilaisella vasta-anionilla, esim. anionilla, joka 15 on farmaseuttisesti hyväksyttävä. Vaihtoehtoisesti vasta-ioni voidaan sen jälkeen poistaa suojaryhmän lohkaisuvai-heen aikana.
Lohkaisuvaihe karboksyylisuojaryhmän R poistamiseksi kaavan 1' mukaisesta yhdisteestä suoritetaan tavallisin 20 menetelmin kuten solvolyysin, kemiallisen pelkistyksen tai hydrauksen avulla. Käytettäessä sellaista suojaryhmää kuten p-nitrobentsyyli, bentsyyli, bentshydryyli tai 2-naftyyli-metyyli, joka voidaan poistaa hydraamalla katalyyttisesti, kaavan 1' mukaista yhdistettä voidaan käsitellä sopivassa 25 liuottimessa kuten dioksaani-vesi-etanoliseoksessa, seoksessa tetrahydrofuraani-vesipitoinen dikaliumvetyfosfaatti-isopropanoli tai näiden kaltaisessa systeemissä, vetypai-neen ollessa 1-4 ilmakehää, hydrauskatalyytin kuten palladium-puuhiilen, palladiumhydroksidin, platinaoksidin tai 30 näiden kaltaisen hydrauskatalyytin läsnäollessa lämpötilan ollessa 0-50 C noin 0,24-4 tunnin ajan. Kun R on sellainen ryhmä kuten o-nitrobentsyyli, lohkaisuun voidaan käyttää myös fotolyysiä. Sellaiset suojaryhmät kuten 2,2,2-trikloorietyyli voidaan poistaa miedon sinkkipelkistyksen 35 avulla. Allyyli-suojaryhmä voidaan poistaa katalyytillä, joka sisältää seoksena palladium-yhdistettä ja trifenyyli- ie 76801 fosfiinia aproottisessa liuottimessa kuten tetrahydrofuraa-nissa, dietyylieetterissä tai metyleenikloridissa. Samalla tavalla muu tavalliset karboksyylin suojaryhmät voidaan poistaa alan asiantuntijain tuntemin menetelmin. Lopuksi, 5 kuten edellä on mainittu, kaavan 1' mukaisia yhdisteitä, joissa R on fysiologisesti hydrolysoituva esteri kuten asetoksimetyyli, ftalidyyli, indanyyli, pivaloyylioksi-metyyli, metoksimetyyli, jne., voidaan käyttää bakteerien vastaisina aineina suoraan suojausta poistamatta, koska 10 tällaiset esterit hydrolysoituvat in vivo fysiologisissa olosuhteissa.
Menetelmävaihtoehdossa c) tapahtuva kaavan IV mukaisen yhdisteen reaktio kaavan VII mukaisen tioliyhdisteen kanssa voidaan toteuttaa inertissä liuottimessa ja emäksen 15 läsnäollessa, jolloin saadaan kaavan 1' mukainen yhdiste.
Kaavan IV mukainen yhdiste voidaan valmistaa kuten edellä menetelmävaihtoehdon b) yhteydessä on kuvattu. Se valmistetaan tavallisesti in situ kaavan III mukaisesta yhdisteestä ja sitä käytetään eristämättä tai puhdistamat-20 ta. Kaavan III mukaisessa tioliyhdisteessä vasta-ioni X® on vahvan hapon anioni, kuten Cl-, Br”, CH3SO3-, CF3S03~ tai c*r-f^y- so3_ tai V""') .
25 '-'
Kaavan IV ja kaavan VII mukaisten yhdisteiden välinen reaktio suoritetaan inertissä liuottimessa kuten asetonitrii-lissä, asetonitriili-I^O-seoksessa, asetonitriili-dimetyyli-30 formamidi-seoksessa tai asetonissa emäksen läsnäollessa. Emäksen luonteella ei ole ratkaisevaa merkitystä. Parhaat tulokset on kuitenkin saatu käytettäessä ei-nukleofiilistä tertiääristä amiini-emästä kuten di-isopropyylietyyliamii-nia, 1,8-diatsabisykloZ3»4,ö7undek-7-eeniä, 1,5-diatsabi-35 syklo^4,3,Q7non-5-eenia tai tri(C^-C^)alkyyliamiinia kuten trietyyliamiinia, tributyyliamiinia tai tripropyyliamiinia.
Il I? 76301 Tämä reaktio voidaan suorittaa laajalla lämpötila-alueella, esim. -15°C:n ja huoneen lämpötilan välillä, mutta edullisesti se suoritetaan lämpötilan ollessa alueella -15°C -+15°C, edullisimmin noin 0°C.
5 Kaavan VII mukaisen kvaternäärisen amiini-tiolin ja kaavan IV mukaisen yhdisteen välisessä reaktiossa muodostuneessa karbapeneemituotteessa on vasta-ioni (s.o.
A ö (CgHgO)2p02 · Cl tai anioni, joka on liittyneenä kvater-nääriseen tioliin), joka voidaan tässä vaiheessa korvata 10 tavallisin menetelmin erilaisella vasta-anionilla, esim. anionilla, joka on farmaseuttisesti hyväksyttävämpi. Vaihtoehtoisesti vasta-anioni voidaan poistaa seuraavan suo-jauksenpoistovaiheen aikana. Kvaternoidun karbapeneemiyh-disteen ja vasta-anionin muodostaessa liukenemattoman tuot-15 teen, tuote voidaan kiteyttää erilleen sellaisena kun se muodostuu ja koota talteen puhtaana suodattamalla.
Edellä selostetun reaktiovaiheen mukaisesti tapahtuneen halutun karbapeneemituotteen muodostamisen jälkeen yh-disteen 1' karboksyylisuojaryhmä R voidaan haluttaessa 20 poistaa tavallisin menetelmin, kuten edellä on selostettu.
Kaavan VII mukaisia tioliyhdisteitä voidaan valmistaa antamalla sulfidin, jonka kaava on 25 (3 villa VHIb s 30 R^C \—R12 / \ R11 R13 vine jossa R10, R11, R12 ja R13 ovat kukin toisistaan riippumat-35 ta vety tai C1-C4~alkyyli, reagoida edellä määritellyn he-teroaromaattisen amiinin, jonka kaava on ie 76301 o ja vahvan hapon kanssa. Reaktio voidaan suorittaa inertin 5 orgaanisen liuottimen läsnäollessa tai ilman sitä, joka liuotin on ensisijaisesti polaariton orgaaninen liuotin kuten metyleenikloridi, bentseeni, ksyleeni, tolueeni tai näiden kaltainen liuotin. Amiini- ja sulfidireagenssien ollessa nesteitä tai kiinteän amiinin liuetessa nestemäi-10 seen sulfidireagenssiin, reaktio suoritetaan edullisesti käyttämättä lisäliuotinta.
Reaktiossa kulloinkin käytettävällä vahvalla hapolla ei ole ratkaisevaa merkitystä ja näitä voivat olla esimerkiksi vahvat epäorgaaniset tai orgaaniset hapot kuten kloo-15 rivetyhappo, bromivetyhappo, metaanisulfonihappo, p-toluee-nisulfonihappo, trifluorimetaanisulfonihappo, jne.
Kaavan VII mukaisen kvaternäärisen amiinitioliyhdis-teen VII muodostaminen voidaan suorittaa lämpötilan ollessa alueella noin -20°C - noin +100°C. Edullinen lämpötila on 20 yleensä alueella noin 50-70°C.
Sulfidireagenssia, aromaattista amiinia ja happoa käytetään edullisesti siten, että sulfidia ja happoa käytetään suunnilleen ekvimoolimäärin ja amiinia ylimäärin, esim. kaksi-kolme moolia amiinia moolia kohden sulfidia tai 25 happoa.
Kvaternäärisessä amiinitioliyhdisteessä on siihen sitoutuneena vasta-anioni, joka määrätyy käytettävän hapon mukaisesti. On luonnollisesti mahdollista, että tässä vaiheessa suoritetaan substituointi erilaisella vasta-anionil-30 la tavallisin menetelmin käytettäväksi. On selvää, että silloin kun substituenttiin A sitoutuneena heteroaromaattises-sa nukleofiilisessa osassa on funktionaalinen ryhmä, joka voi häiritä reaktion aiottua kulkua, tällainen ryhmä voidaan suojata tavallisella suojaryhmällä ja sen jälkeen suo-35 jaryhmä voidaan poistaa halutun funktionaalisen ryhmän re-generoimiseksi. Alan asiantuntijat ovat hyvin perillä sopi- 19 76301 vista suojaryhmistä ja menetelmistä, joilla sellaisia ryhmiä liitetään ja poistetaan.
Kun kyseessä ovat kaavan I mukaiset yhdisteet, joissa on sykloheksyleeni- tai sivuketjuinen alkyleenisubstituent-5 ti A, voi syntyä yksi tai useampia muita epäsymmetrisiä hiiliatomeja, mikä johtaa diastereoisomeerien muodostumiseen. Tämän keksinnön piiriin sisältyvät sellaisten diastereoisomeerien seokset samoin kuin yksityiset puhdistetut diastereoisomeerit.
10 Samoin kuin muidenkin /3-laktaami-antibioottien ol lessa kysymyksessä, yleiskaavan I mukaiset yhdisteet voidaan muuttaa tunnetuin menetelmin farmaseuttisesti hyväksyttäviksi suoloiksi, jotka ovat tämän keksinnön tarkoituksiin yleensä samanarvoisia kuin vapaat kaavan I mukaiset 15 yhdisteet. Täten esimerkiksi kaavan I mukainen yhdiste, . 2 ]ossa R on anionmen varaus, voidaan liuottaa sopivaan neutraaliin liuottimeen ja sen jälkeen lisätään ekvivalent-timäärä farmaseuttisesti hyväksyttävää happoa. Haluttu hap-poadditiosuola voidaan ottaa talteen tavallisin menetelmin, 20 esim. saostamalla liuottimena, kylmäkuivaamalla. jne. Kun kaavan I mukaisessa yhdisteessä on muita emäksisiä tai happamia funktionaalisia ryhmiä, tunnetuin menetelmin voidaan samalla tavalla valmistaa farmaseuttisesti hyväksyttäviä emäsadditiosuoloja ja happoadditiosuoloja.
Λ 25 Kaavan I mukainen yhdiste, jossa R on vety tai anio- ninen varaus, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola, voidaan myöskin muuttaa tavallisin menetelmin vastaavaksi 2 yhdisteeksi, jossa R on fysiologisesti hydrolysoituva es-tenryhma, tai kaavan I mukainen yhdiste, jossa R on ta-30 vallinen karboksyylin suojaryhmä, voidaan muuttaa vastaa-vaksi yhdisteeksi, jossa R on vety, anionmen varaus tai fysiologisesti hydrolysoituva esteriryhmä, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttäväksi suolaksi.
Uudet kaavan I mukaiset karbapeneemijohdannaiset, 35 joissa R on vety, anioninen varaus tai fysiologisesti hydrolysoituva karboksyylin suojaryhmä, ja niiden farmaseutti- 20 7 6 3 01 sesti hyväksyttävät suolat ovat tehokkaita antibioottisia aineita, joilla on erilaisten gram-positiivisten ja gram-negatiivisten bakteerien vastainen vaikutus ja niitä voidaan käyttää esim. eläinten rehulisäaineina kasvun edistä-5 miseksi, suoja-aineina elintarvikkeissa, bakteerimyrkkyinä teollisissa sovellutuksissa, esim. vesipohjaisessa maalissa ja paperitehtaiden kiertovedessä ehkäisemään haitallisten bakteerien lisääntymistä ja desinfioimisaineina haitallisten bakteerien tuhoamiseksi tai kasvun ehkäisemiseksi lää-10 ketieteellisissä ja hammaslääketieteellisissä laitteistoissa. Erityisen käyttökelpoisia ne ovat kuitenkin hoidettaessa ihmisten ja muiden elollisten olentojen infektiosairautta, jonka ovat aiheuttaneet gram-positiiviset tai gram-ne-gatiiviset bakteerit.
15 Kaavan I mukaisia farmaseuttisesti aktiivisia yhdis teitä voidaan käyttää yksinään tai formuloituina farmaseuttisiksi koostumuksiksi, jotka sisältävät aktiivisen karba-peneemi-aineosan lisäksi farmaseuttisesti hyväksyttävää kantajaa tai laimenninta. Yhdisteitä voidana antaa erilai-20 sin tavoin; pääasiallisesti kiinnostavia tapoja ovat anto suun kautta, paikallisesti tai parenteraalisesti (laskimon-sisäisenä tai lihaksensisäisenä ruiskeena). Farmaseuttiset koostumukset voivat olla kiinteässä muodossa kuten kapseleina, tabletteina, jauheina, jne., tai nestemäisessä muo-25 dossa kuten liuoksina, suspensioina tai emulsioina. Koostumuksia, jotka on tarkoitettu ruiskeena anenttaviksi, mikä on ensisijainen antomuoto, voidaan valmistaa annosyksikkö-muotoon ampulleihin tai moniannoksiin säiliöihin ja ne voivat sisältää formulointiaineita kuten suspendointi-, sta-30 bilointi- ja dispergointiaineita. Koostumukset voivat olla valmiissa käyttömuodossa tai jauhemuodossa, joka soveltuu uudelleen seostettavaksi antoa varten sopivan väliaineen kuten steriilin veden kanssa.
Annettava annos riippuu suuressa määrin käytettävästä 35 tietystä yhdisteestä, tietystä seostetusta koostumuksesta, antotiestä, saajan luonteesta ja tilasta ja tietystä hoi- il 2i 76801 dettavan kohdan sijainnista ja elimistöstä. Tietyn edullisen annoksen ja antotavan valinta jätetään siten hoitohenkilön harkinnan varaan. Yleensä yhdisteitä kuitenkin voidaan antaa parenteraalisesti tai suun kautta nisäkäs-saajille 5 määrinä noin 5-200 mg/kg/päivä. Anto suoritetaan tavallisesti jaettuina annoksina, esim. kolme-neljä kertaa päivässä.
Keksinnön mukaisesti valmistetut kaavan I mukaiset karbapeneemijohdannaiset ovat kestävämpiä dehydropeptidaa-10 sientsyymin DHP-I aiheuttamaa hajoamista vastaan kuin ennestään tunnetut tienamysiiniyhdisteet. Niitä voidaan sen vuoksi käyttää ilman DHP-I-inhibiittoria, jonka käyttö on tarpeen tunnettujen tienamysiiniyhdisteiden kanssa, koska nämä hajoavat DHP-I-entsyymin vaikutuksesta.
15 Keksinnön mukaisesti valmistettujen karbapeneemien tehokkaan laajaspektrisen bakteerien vastainen vaikutus (sekä in vitro että in vivo annettuna) ja yhdisteiden alhainen toksisuus käy ilmi seuraavassa esitetyistä biologisista arvoista, jotka liittyvät edullisiin keksinnön mu-20 kaisesti valmistettuihin karbapeneemiyhdisteisiin.
Aktiivisuus in vitro
Keksinnön mukaisesti valmistetun kaavan I mukaisen karbapeneemiyhdisteen näytteen todettiin veteen liuotettuna ja ravintoliuoksella laimennettuna antavan seuraavat 25 minimiestokonsentraatiot (M.I.C) arvoina mcg/ml mainittuja mikro-organismeja vastaan määritettynä inkuboimalla yli yön 37°C:ssa putkilaimennusmenetelmällä. Vertailuyhdisteenä käytettiin N-formimidoyylitienamysiiniä.
22 76801
Esimerkissä 1 valmistetun karbapeneemi johdannaisen bakteerienvastainen aktiivisuus in vitro MIC (mog/ml) N-formidioyylitiena-
Organismi Uusi yhdiste mysiini __ S. pneumoniae A-9585 0,002 0,004 S. pyogenes A-9604 0,008 0,001 S. aureus . A-9537 0,008 0,004 S. aureus + 50% serum A-9537 0,03 0,016 S. aureus (Pen-res.) A-9606 0,016 0,008 S. aureus (Meth-res.) A15097 4 0,5 S. faecalis A20688 0,5 0,5 E. coli (10~4 dii.) A15119 0,03 0,016 E. coli (ΙΟ"3) A15119 0,06 0,03 E. coli (10’2) A15119 0,06 0,06 E. coli (1θ“4) A20341-1 0,03 0r03
II
23 76801
Esimerkissä 1 valmistetun karbapeneemijohdannaisten bak-teerienvastainen aktiivisuus in vitro, jatkoa MIC (mcg/ml
Organismi Ulasi yhdiste f-tormimidoyylitiena- E. coli mysiini- (1θ“3) A20341-1 0,06 0,03 E. coli (ΙΟ-2) A20341-1 0,13 0,13 K. pneurooniae A-9664 0^13 0,13 K. pneumoniae A20 46.8 0,25 0^06 P. mirabilis A-9900 0,13 0,06 P. vulgaris A21559 0,03 0,03 P. moraani! A15153 0,13 0,13 P. rettgeri A22424 0,5 0,25 S. marcescens A20019 0,06 0,.03 E. cloacae A-9569 0f25 0,06 E. cloacae A-9656 0,13 0,06 ’"P. aeruginosa A-9843A 2 1 P. aeruginosa A21213 0.13 0^25 H. influenzae A-9833 8 16 H. influenzae A20178 8 32 H. influenzae A21518 8 32 H. influenzae A21522 8 32 B. fragilis A22862 0,25 0,016 B. fragilis A22053 0f25 0,06 B. fragilis A22696 0,5 0,13 B. fragilis A22863 0,25 1 24 76 801
Aktiivisuus in vivo
Esimerkissä 1 valmistetun yhdisteen ja N-formimido-yylitienamysiinin terapeuttinen teho in vivo määritettiin antamalla yhdisteitä lihaksensisäisesti hiirille, jotka oli 5 koetta varten infektoitu erilaisilla organismeilla. Tulokset on esitetty seuraavassa taulukossa, jossa on mainittu PDsQ-arvot (annos, mg/kg), jotka tarvitaan antamaan suoja 50 %:lle infektoiduista hiiristä.
Il 25 76801
* tO
Ί>, O' δ-d 8 ffi ·§ .a § t ^ * * s * μ % s .y -a & o in- ,·<τ \ σ> - m «C [0 -3 h B i * " - ' * t «-ti - -1 oo^ si o c o n n n vo oo o ·£ - g ϊΰ a § 5 •3 S' ito S S 4? § Λ ä >, g « d 4d H nj - 0 q « a o g •3 +J iH JÄ O 10 P Τη n\ 01
«0 -H C £ m S
to to -3 „ il<d •η ΐχ "B +J ή I r· m r- m co co [Z1 - § > qj u) * -—σι·-·. — ».·»·- An®
Ih in -¾¾° f^OfHfNin^rtnoon h > 3 js al 5 s s I g a n as 5 s I a
S 'ä^i^^^^^Lnr-inio-c-TT·^ -3 -ft H
« inS'q^oooooooooooo •3 -H XXXXXXXXX XXX ^§ "Hin
3 h Od 'H'^p-TJ-^-rrnr-cr.rnfncn ö ä -h -S
Φ - < — rH -H H -P -H
1 -d 1-1 8 p
g i s« J
Ή ·Η C *. OT
CQ <N :$ -5 ^ *
3 I It i O Iti O
P νοσι·^·σ>οσιΓ^σ»ιηΓη<-ΐσ\ -Η ·η to 5 O'HVOlOOiniD^'rO'TCDCN ?3 ti _ι ni 5 «Jr-tiom^in-Hr-inooTrin P m ^ Φ 3 σ\ιηο%σιο><—(ιηιηοσιοο ·Ρ Ή ·η .2 > L Ί L L 1 «Nr-tr^m I IN N H G f0 Ο Λ <<<<<<<<<<<< p sd ·ΡΙ .£ * Ϊ0 Φ CO (0 to nj L jj
[0 <3u) c tn to w td S
'P *H ‘HW-H-POJOOOjj'S
2 c a» ή -w ρ -m υ c c c »o -o Ö) w O 0} -H P <0 C 10 ·Η *W ·Η
•H 3 EOjDfOD'tO<UD,'t7'D' aOO
g ai-HSfltocrjJcroasa p >1 w PrHtyOPrHjJUUI-lPW ti -p
P 3OCiH*H30)O(0a)Q)<U PS
g «uao£>pg.E(otonj ή -p S............ ä « ° couucu&a.Q.SioaiC^ai «k 26 7 6 801
Toksisuus Määritettiin esimerkissä 1 valmistetun yhdisteen toksisuus, kun yhdistettä annettiin hiirille kallonsisäisestä. Tulokset on esitetty seuraavassa taulukossa.
5 Toksisuus (annettu hiirille kallonsisäisesti) t Suurin annos (mg/kg) LD50 kliinisten toksisuus-
Yhdiste (mg/kg) oireiden ilmaantumatta
Esimerkin 1 10 yhdiste 40 40 N-formimidoyyli- tienamysiini 32 5 *Keskiarvo 25 hiirellä/yhdiste 15 Veriarvot hiirillä lihaksensisäisen annon jälkeen Esimerkissä 1 valmistetun yhdisteen veriarvot ja puoliintumisaika sen jälkeen, kun sitä oli annettu hiirille lihaksensisäisesti 20 mg/kg, on esitetty alla olevassa tau-20 lukossa.
Veriarvo Qug/ml)
Yhdiste 10 20 30 45 60 90 *tl/2 **AUC
minuuttia annon jälkeen (min) Oug.h/ml)
Esimerkin 1 25 yhdiste 15,5 11,6 6,5 1,9 0,7 <0,6 9 6,4 N-formimi-doyylitie- namysiini 12,6 9,9 7,3 2,6 0,7 <0,3 9_6
Yhdisteet liuotettiin 0,1-mol. fosfaattipuskuriin 30 pH 7. Arvot ovat yhden kokeen arvoja; yhdistettä kohden käytettiin 4 hiirtä.
*tl/2 tarkoittaa puoliintumisaikaa minuutteina **AUC tarkoittaa käyrän alapuolista aluetta
II
27 76801
Palaute virtsasta
Virtsasta takaisin saatu esimerkissä 1 valmistetun yhdisteen määrä sen jälkeen, kun sitä oli annettu hiirille lihaksensisäisesti (20 mg/kg), on esitetty seuraavassa tau-5 lukossa.
Palaute virtsasta; annettu hiirille lihaksensisäisesti 20 mg/kg_
Takaisin saatu määrä, % annoksesta 10 0-3 3-6 6-24 0-24
Yhdiste tunnin kuluttua annoksen antamisesta
Esimerkin 1 yhdiste 23,3 0,5 0,4 24,2+5,3 N-formimidoyy- 15 litienamysiini 12,1 12,1 0,1_<0,1_12,2+3,6_
Yhdisteet liuotettiin 0,1-mol. fosfaattipuskuriin pH 7. Arvot ovat yhden kokeen arvoja; 4 hiirtä yhdistettä kohden.
Muita biologisia arvoja 20 Aktiivisuus in vitro
Alla mainittujen karbapeneeminäytteiden (identifioitu esimerkkien numeroin) todettiin antavan seuraavat minimi-estokonsentraatiot (M.I.C.) arvoina mcg/ml mainittuja mikro-organismeja vastaan, kun ne liuotettiin veteen, laimen-25 nettiin ravintoliuoksella, inkuboitiin yli yön 37°C:ssa ja määritys suoritettiin putkilaimennusmenetelmällä. Vertailu-yhdisteenä käytettiin N-formimidoyylitienamysiiniä.
28 7 6 8 01 ___KIC (y«/»i)_
Organismi Yhdiste (esimerkki no.) ---Esim· 4 . ss3m^_b_Esim.7 Esim.8 *MKQ7«7 _ 8. pntusoali· A-9585 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,002 S. profto·· A-960k 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0f002 S. futtlll Α20ίββ 0,5 0,5 1 0,5 0,5 0,5 S· ‘Ur,u* A-953T °lOJ 0,03 0,03 0,03 0,03 0,001 S. »ur«u»(50J *trum) A-9537 0,03 0,06 0,13 0,03 0,06 0,016 S. .ur.„. <P.n-r..) A-9606 0,5 0f03 0,03 0,03 0,06 0,006 S. aur*s*(M<tb-r*t) Λ1509Τ >63 >63 >63 >63 >63 k £- coli A1J119 0,06 0,06 0,03 0,03 0,13 0,0l6 E· co11 A203U-1 0,06 0,06 0,03 0,03 0,13 0,03 K. pD.u.onl.· A-966I 0,13 0,13 0,25 0,13 0,25 0,06 K. pn.u.ODl». A20468 0,25 0,25 0,5 0,13 0,5 0yl3 E· elo,e“ *9659 0,25 0,25 0,25 0,06 o,5 0*06 l. Clo.c. A-9656 0,25 0,25 0,25 0,13 0,5 o|o6 t. Bir.billi A-9900 0,25 0,13 0,06 o 03 0,13 0,06 P. Tulc.rlt A21559 0,03 0,06 0,03 0,03 0,06 0,03 M. »orSn.ll A15153 0,25 0,13 0,03 0,03 0,03 0,13 P. r«tt*«rl A22U21. 0,5 0,25 0,25 0,13 0,25 0,13 8. a.rc*«e«n· A20019 0,13 0,13 0,06 0,03 0,25 0,03 P. »«rotlaoi» A-9843A 32 2 4 18 1 P. ..rufl.o.» A21213 2 0,25 0,5 1 0,5 0,25 H. lnflu.nt.. A-9833 »32 >32 >32 >32 >32 16 8. lnflutm»· A2151S >32 >32 >32 >32 >32 32 8. fr.,111· A22862 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 0,0l6 B. fr»,111· A22696 0,25 0,5 0,5 0,5 0,25 °,13 * N-formimidoyylitienamysiini
II
29 7 6 3 01 -----—-_mc (μ«/»Ι) _ _ . . _ Yhdiste (esimerkki no.) lesim."A")
Organismi Esim.9 Esim. 10_Esim. 11 Esim. 11 esim. 15 Esim. 12 __!*K078I_ S. pntuaonl at *-9585 0,002 0,002 0,001 . 0,00k 0f002 0,002 S. pyoiteta A* 960 k 0,001 0,002 0,001 0,00k 0,002 0.002 s· Α2068Θ 0,25 0,25 0,25 2 0 25 0,25 s: »“'·'» A-953T 0,008 0,008 0,00k 0,0l6 ο,οοβ θ!θ02 8. aur.ua<50* »*ru.) A-953T 0,016 0,06 0,03 0,06 0.03 0,0i6 S. aurtua(Ptn-rea) A-9606 0,008 0,016 0,008 0,06 0*016 0,00k S. turtui(Mttb-rt») A15097 E· co£* A15129 0,03 0,03 0,03 0,03 0,03 0,016 1 coli A20 3k1-1 0,03 0,06 0,03 0,03 0,016 0,01i K. pneumoniaa A-966k o,13 0,06 0,06 0,06 0,06 0,06 T. pa.usealta A20k68 0,25 0,25 0,,13 0,13 0,13 0,06 £· «1»»*»· A-9659 0,25 0,13 0,06 0,13 0,25 0.06 Ε· A-9656 0,23 0,13 0T13 0,25 0, 5 0,06 P. Blrtbill. A-9900 0,06 0,13 0,13 0,13 0,06 0,03 P. vuliarli A21559 0,016 0,06 0,03 0,03 0,03 0^016 K. aorfaall A15153 0,13 0,13 0,13 0,13 0,06 0,03 P. rttt,.rl A22k2k 0,25 0,25 0,25 0,25 0,5 0,06 S. Btrcttetat A20019 0,06 0,13 0,06 0,06 0,06 0,03 P. atruflBOta A-98k3A k 1, 1 g >32 χ P. atruilaoaa A21213 2 1 1 1 16 0 13 1. la fluta taa A-9833
B. lafluaataa A2151S
*· >22862 0,06 0^3 0,06 0,13 0*06 0,03 * A22696 0,13 0,25 0,13 0,25 0,25 0,13 ;k N-formimidoyylitienamysiini 30 76301 _KIC (Pg/.l)_
Organismi (Yhdiste (esimerkki no.) ___j^.iSP Esim, 14 1MK0787 S. potueoulst A-9585 0,001 0,002 0,002 S. pyogtnti A-9601 0,C01 0,001 0,002 S. fatctll· A20688 0,5 0,5 0,25 S. auraus A-9537 0,00l 0,008 0,002 S. surtua(501 lirua) A-9537 0,0l6 0,016 0,016 S. surtua(Ptn-rai) A-9606 0,0l6 0,008 0,008 S. surtua(Mtth-raa) A15097 0,03 0,008 0,008 E. coll A15119 0,008 0,03 0,016 I. coll A203H-1 0,016 0,03 0,0l6 S. poauaonlsa A— 966b 0,03 0,06 0,03 T. . potuao&lst A20166 0,06 0,13 0,13 E. closest 1-9659 0,06 0,13 0,13 E. closest A-9656 0,06 0,13 0,06 ?. alrsbllla A-9900 0,03 0,03 0,03 ?. Tulgsrla A21559 0,0l6 0,016 0,016 M. Borgsoll A15153 0,06 0,03 0,06 P. rttt|trl A22121 0,06 0,13 0,13 S. asretactoa A20019 0,03 0,06 0,03 ?. saruglnots A-98U3A 32 21 P. struglnoas A21213 1 1 0,13 H. lnflutaist A-9833 H· loflutaxst A21518 3. f mills A22862 3. frsillll A22696
II
N-formimidoyylitienamysiini 31 76801 ___ MIC (ua/iiil)________
Yhdiste (esimerkki no)
Organismi (yhd. "B") (Tyhd. "A") -___Thim.lfi Esim. 16 Esim.13 *MK 0787 S. pneumoniae A-9585 0,002 , 0>004 · 0,001 0,002 S. pyogenes A-9604 0,004 0,004 0,002 0.002 S. faecalis A206S8 8 4 0,5 0 25 S. aureus A-9537 0,13 0,06 0,008 0,002 S. aureus(50* serum) A-9537 0,13 0,06 0,03 0,016 S. aureus(Pen-res) A-9606 0,25 0,13 0,03 0,008 S. aureus(Meth-res) A15097 0,5 0,25 0,13 0,008 E· A15119 0,25 0,06 0,03 0,016 E. COli A20341-1 0,06 0,-06 0,03 0,016 K. pneumoniae A-9664 0,13 0,13 0,13 0,03 A. pneumoniae A20468 0,5 0,25 0,25 0,13 E. cloacae A-9659 0,5 0,25 0,25 0,13 E. cloacae A-96S6 0,25 0,5 0,25 0,06 P. sdrabilis A-9900 0, 13 0,13 0,03 0,03 P. vulgaris A21559 0,13 0,06 0,03 0,.016 M. Dorganil A15153 0,5 0,13 0,13 0,06 P. rettgeri A22424 4 4 0,25 0,13 S. naxcescens A20019 0,25 0,13 0,06 0,03 P. aeruginosa A-9843A 32 32 32 1 P. aeruginosa A21213 * 2 2 0,13 B. influenzae A-9833 B. influenzae A21518 B. fragilis A22862 B. fragilis A22696 N-rormimidoyylitienamysiini 32 7 6 8 01
Aktiivisuus in vivo
Useiden tämän keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden ja N-formimidoyylitienamysiinin (MK 0787) terapeuttinen teho määritettiin in vivo antamalla niitä lihak-5 sensisäisesti hiirille, jotka oli koetta varten infektioi-tu erilaisilla organismeilla. Tulokset on esitetty seuraa-vassa taulukossa, jossa on mainittu PD^-arvot (annos mg/kg), jotka tarvitaan antamaan suoja 50 %:lle infektoi-duista hiiristä.
10 Suojaava vaikutus lihaksensisäisesti käsitellyissä infektoiduissa hiirissä PD^Q/käsittely (mg/kg)
Yhdiste .c (esimerk- S. aureus P. mirabilis P. aeruginosa ki no.) A9606 A9900_ A 9843A A20481
Esim. 4 0,4 Λ- 22 5 >5
Esim. 5 0,5 22 0,9 0,8
Esim. 6 *3 ~16 0,9 0,6
Esim. 7 0,6 ^22 0,9 1,4 20
Esim. 8 0,8 λ*38 0,9 2,5 MK 0787 0,07 9 0,5 0,4 Käsittelyohjelma: Hiiret infektoitiin vatsaontelonsisäisesti käyttämällä 1 x 109 organismia (A9606),
25 7 A
1 x 10 organismia (A9900), 5 x 10* organismia (A9843), tai 1 x 10^ organismia (A20481). Yhdisteitä annettiin lihaksensisäisesti 0 ja 2 tuntia infektoinnin jälkeen (A9606) tai 1 ja 3,5 tuntia muilla organismeilla infektoinnin jälkeen.
Il 33 7 6301
Useiden tämän keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden ja N-formimidoyylitienamysiinin (MK 0787) terapeuttinen teho määritettiin in vivo antamalla niitä lihaksensisäisesti hiirille, jotka oli koetta varten infektoitu 5 erilaisilla organismeilla. Tulokset on esitetty seuraavas-sa taulukossa. Tällöin on mainittu PD50-arvot (annos, mg/kg), jotka tarvitaan antamaan suoja 50 %:lle infektoi-duista hiiristä.
Suojaava vaikutus lihaksensisäisesti 10 käsittellyissä infektoiduissa hiirissä PD^Q/käsittely (mg/kg)
Yhdiste P. mirabilis P. aeruginosa (Esimerkki no.) A9900_ A9843A_ 15 Esim. 9 - 3,1
Esim. 10 - 1,8
Esim. 11 - 2,4
Esim. 15 (yhd.
"A") - 3,1 20 Esim. 12 - >25
Esim. 14 5,4 0,78 MK 0787 19 1 Käsittelyohjelma: Hiiret infektoitiin vatsaontelonsisäisesti 4 x 107 organismilla (A9900), tai 8 x 10* 25 organismilla (A9843A), ja käsiteltiin yh disteillä lihaksensisäisesti 0 ja 2 t in-fektoinnin jälkeen.
34 7 6 3 01
Veriarvot ja palaute virtsasta
Eräiden tämän keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden veriarvot ja puoliintumisaika sen jälkeen kun niitä oli annettu hiirille lihaksensisäisesti 20 mg/kg, on 5 esitetty alla. Tällöin on esitetty myös hiirillä virtsasta takaisin saatu määrä.
Farmakokineettiset parametrit hiirillä lihaksensi- säisen annon oltua 20 mg/kg_
Veri Virtsa 10 Yhdiste C aks *Tl/2 **AUC Palaute (esimerkki -- (min.) (juq.h/ml) % no.)_
Esim. 4 11,4 10,4 5,5 49+6
Esim.6 15,2 10 7,7 38 ± 13
Esim. 7 15 11 7 49 ± 9
Esim. 8 10,6 8,2 4,6 47 ± 7 MK 0787 14,6 10 6 33 ± 8
Yhdisteet liuotettiin 0,1-mol. fosfaattipuskuriin pH 7.
2g Arvot perustuvat yhteen kokeeseen; 4 hiirtä yhdistet tä kohden, lukuunottamatta esim. 7, joka on kahden kokeen keskiarvo.
*Tl/2 tarkoittaa puoliintumisaika minuutteina **AUC tarkoittaa käyrän alapuolista aluetta.
25 Seuraavat esimerkit valaisevat tätä keksintöä.
Il 35 7 6 3 O 1
Esimerkki 1 3-^2- (1-pyridiinium) etyylitiq7-6Ui-^l- (R) -hydroksi-etyyli7-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)-hept-2-eeni-2- karboksylaatin valmistus_ 5 OH _ 10 i—N——^-CO© A. p-nitrobentsyyli-3-(2-hydroksietyylitio) -6*lr 0-~ (R) -hydroksietyyli,7-7-okso-*l-atsabisyklo- (3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaatti 15
OH
1 ^ 20 “'r—^
J—n-L
0 COjDNB
25 OH
J" ^X^v^r,SCH2CH2OH
-N-L
Cf C02pNB
30 2 pNB = -CH2h(3-02 36 76301
Liuos, jossa oli 1,69 g (4,85 mmoolia) p-nitro-bentsyyli-6 (R) -hydroksietyyl0,7-3,7-diokso-l-atsa- bisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaattia (1) 20 ml:ssa asetonitriiliä, jäähdytettiin typpiatmosfäärin suojaa-5 mana 0°C:seen. Lisättiin liuos, jossa oli 726 mg (7,18 mmoolia) di-isopropyylietyyliamiinia 2 ml:ssa asetonitriiliä ja sen jälkeen lisättiin tiputtamalla 3 minuutin kuluessa 1,51 g (5,60 mmoolia) difenyylikloorifosfaat-tia 12 ml:ssa asetonitriiliä. Saatua liuosta sekoitet-10 tiin 0°:ssa 20 minuuttia, jolloin saatiin p-nitrobent- syyli-3-(difenyylifosforyylioksi)-6«6-^l-(R)-hydroksi-etyyli7-7-okso-l-atsabisyklo^3,2,0}hept-2-eeni-2-karbok-sylaattia. Tähän liuokseen lisättiin liuos, jossa oli 726 mg (7,18 mmoolia) di-isopropyylietyyliamiinia 15 2 ml:ssa asetonitriiliä ja sen jälkeen liuos, jossa oli 439 mg (5,63 mmoolia) 2-merkaptoetanolia 2 ml:ssa asetonitriiliä. Reaktioliuosta sekoitettiin 0°C:ssa 3 tuntia ja sitten laimennettiin 200 ml:11a etyyliasetaattia ja pestiin 200 ml :11a vettä, 100 ml:11a 20 %:ista 20 H^PO^n vesiliuosta, ja suolaliuoksella. Haihduttamalla kuivattu (MgSO^) liuos kuiviin saatiin puolikiinteätä ainetta, jota trituroitiin metyleenikloridin kanssa ja suodatettiin, jolloin saatiin 1,2 g (saanto 61 %) otsikon tuotetta 2 valkeana amorfisena kiinteänä aineena.
25 NMR (DMS0-d6) <5:1,20 (3H, d, J=6,0 Hz), 2,9-3,2 (9H, m), 5,22 (1H, d, J=8,5 Hz) ja 8,23 (2H, d, J=8,5 Hz); IR (KBr) fmaks: 3500, 1770 ja 1700 cm Analyysi, laskettu yhdisteelle C^gH^^O.^: C, 52,93; H, 4,94; N, 6,86; S, 7,85; 30 saatu: C, 52,83; H, 4,90; N, 6,42; S, 8,31.
Il 37 76301 B. p-nitrofenyyli-3-(2-metaanisulfonyylioksietyyli- tio) (R) -hydroksietyyli,7-7-okso-l-atsabi- syklo f3,2,03hept-2-eeni-2-karboksylaatti_ 5
OH
J H
-^__V^\p-SCH2CH2OH __
10 <f N C02pNB
•2. OH -
I H
' . f/^v^SCHoCH.OSO^CH,
Π T
A-N--k.
15 q COjpNB
Liuokseen, jossa oli 4,2 g (10,3 mmoolia) yhdistettä 2 200 ml:ssa tetrahydrofuraania, lisättiin -40°C: 20 ssa 1,3 g (11,3 mmoolia) metaanisulfonyylikloridia ja sen jälkeen lisättiin tiputtamalla 1,26 g (12,4 mmoolia) trietyyliamiinia 5 ml:ssa tetrahydrofuraania. Reaktio-seosta sekoitettiin 5 tuntia -40°C:ssa, sitten sekoitettiin 2 tuntia -30°C:ssa typpiatmosfäärin suojaamana ja 25 sitten se kaadettiin seokseen, jossa oli etyyliasetaat tia (700 ml) ja 5 %:ista fosforihapon vesiliuosta (1000 ml). Orgaaninen kerros pestiin suolaliuoksella, kuivattiin MgS0^:lla, suodatettiin ja kondensoitiin siirapiksi. Tämä aine puhdistettiin silikageelikolonnis-30 sa kromatografioimalla /eluointi metyleenikloridi-etyy- liasetaattiseoksella (til.suhde 3:1).7, jolloin saatiin 3,55 g (saanto 75 %) otsikon yhdistettä valkeana amorfisena kiinteänä aineena.
NMR (CDC13) J: 1,25 (3H, d, J=6,0 Hz), 3,03 (3H, s), 35 3,06-3,40 (5H, m), 4,05-4,40 (4H, m), 5,25 (1H, d, J=14,0 Hz), 5,50 (1H, d, J=14,0 Hz), 7,70 (2H, d, 38 7 6 301 J=8,5 Hz) ja 8,23 (2H, d, J=8,5 Hz); IR (KBr) /maks: 3400, 1770 ja 1600 cm ^.
Analyysi, laskettu yhdisteelle C19H22N2°9S: C, 46,90; H, 4,56; N, 5,76; 5 saatu: C, 46,52; H,'4,32; N, 5,91.
C. p-nitrobentsyyli-3- (2-jodietyylitio) -6^^1- (R) - hydroksietyyli^-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept- 2-eeni-2-karboksylaatti_____
OH
10 I H
5^/^s^SCH2CH;!0S02CH3 i T —> ·
0* N COj^NB
15 i 2o ΓΤ · i 2 2 X-N-U.
-C02pNB
£
Liuosta, jossa oli 350 mg (0,72 mmoolia) väliyh-25 distettä 3 ja 216 mg (1,4 mmoolia) natriumjodidia 20 ml: ssa asetonia, lämmitettiin kiehuttaen 4 tuntia. Haihduttamalla asetoni pois saatiin valkeata amorfista kiinteätä ainetta, joka suspendoitiin eetterin (10 ml) ja veden (10 ml) seokseen. Suodattamalla valkea kiinteä 30 aine erilleen ja kuivaamalla vakuumissa saatiin 300 mg (saanto 80 %) otsikon yhdistettä 4 valkeana amorfisena j auheena.
NMR (DMS0-d6) 1,18 (3H, d, J=6,0 Hz), 3,20-3,60 (7H, m), 3,80-4,25 (2H, m), 5,10 (1H, d, J=5,5 Hz), 35 5,25 (1H, d, J=12,0 Hz), 5,45 (1H, d, J=12,0 Hz); 39 7 6 3 01 7/70 (2H, d, J=8,5 Hz), ja 8,27 (2H, d, J=8,5 Hz); IR (KBr) f maks: 3500, 1768 ja 1700 cm-1.
Analyysi, laskettu yhdisteelle ci8H19N2°6Ji C, 41,71; H, 3,70; N, 5,41; J, 24,48; 5 saatu :C, 42,10; H, '3,75; N, 5,97; J, 23,20.
D. 3-^2- (1-pyridiinium)etyylitiq7-6Jt-/,L- (R) -hydroksi-etyyli7-7-okso-l-atsabisyklo£3,2,0} hept-2-eeni- 2-karboksylaatti_
10 H
λ ^
N C02pNB
15 4 sch2ch 20 Π I >
V N' ””i^t:0,pNB
0 2 5
; 25 OH
J" ' . CH-,CH^N^ \ rJ_JL e 30 6 40 76301
Liuokseen, jossa oli 327 mg (0,63 mmoolia) väli-yhdistettä 4 20 ml:ssa tetrahydrofuraania, lisättiin 0°C:ssa 100 mg (1,26 mmoolia) pyridiiniä ja sen jälkeen liuos, jossa oli 139 mg (0,67 mmoolia) hopea-5 perkloraattia 1 ml:ssa tetrahydrofuraania. Seosta sekoi tettiin tunnin ajan 0°C:ssa ja sitten 2 tuntia huoneen lämpötilassa. Liuotin haihdutettiin pois vakuumissa, jolloin saatiin yhdistettä 5 hieman kellertävänä hartsina, jota digeroitiin 300 mg:n kanssa Celite'ä, jolloin 10 saatiin amorfista kiinteätä ainetta. IR (KBr) ^"maks: 3400, 1770, 1700 ja 1100 cm ^. Yhdiste 5 hydrat-tiin enempää puhdistamatta.
Sitten suspendoituun seokseen, jossa oli yhdistettä 5 50 ml:ssa eetteriä ja 50 ml:ssa tetrahydrofuraa-15 nia, lisättiin liuos, jossa oli 125 mg (1,26 mmoolia kaliumvetykarbonaattia ja 110 mg (0,63 mmoolia) kaksi-emäksistä kaliumfosfaattia 50 ml:ssa vettä. Sitten lisättiin 350 mg 10 %:ista palladium-puuhiiltä ja seosta hydrattiin 40 psi:n paineessa Parr'in ravistimessa 60 20 minuuttia. Sitten seos suodatettiin ja katalyytti pes tiin vedellä (2 x 10 ml). Yhdistetyt suodos ja pesunesteet uutettiin eetterillä (2 x 100 ml) ja sitten kylmä-kuivattiin, jolloin saatiin keltaista jauhetta. Raaka keltainen jauhe puhdistettiin C^g BONDPAK-käänteisfaasi-25 kolonnissa (8 g) Waters Associates), eluoimalla vedel lä 8 psi:n paineessa. Kukin 15 ml:n fraktio analysoitiin suurpaine-nestekromatografiaa käyttäen, ja fraktiot, joiden ultravioletti-absorptio Amaks nm, yhdistettiin ja kylmäkuivattiin, jolloin saatiin 40 mg 30 (saanto yhdisteestä 4 laskien 19 %) otsikon tuotetta 6 valkeana amorfisena kiinteänä aineena.
NMR (D20) £ : 1,20 (3H, d, J=6,0 Hz), 2,90-3,70 (7H, m), 3,75-4,20 (2H, m), ja 7,70-8,80 (5H, m); IR (KBr) jfmaks: 3400, 1760 ja 1590 cm 35 Analyysi, laskettu yhdisteelle C 16H18N2°4S-2H20: C, 51,89; H, 5,40; N, 7,56; saatu: C, 49,91; H, 5,08; N, 7,11. 1 4i 7 6 8 01 UV λ-maks (CH3CH20H) 296 nm (£=7696).
Esimerkki 2 3-^*2- (l-pyridiinium)propyylitiq7-6g£-^l-(R) -hydroksietyylj*7-7-okso-l-atsabisyklo (3,2,0) hept-5 2-eenl-2-karboksylaatin valmistus_
OH
I H . © f[ \ -5/\p-S-CH2CH2CH2—Ηχ^> , 10 0 N ^-COj A. p-nitrobentsyyli-3- (2-hydroksipropyylitio) -6*L- {Ϊ-(R)-hydroksietyyli7-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)-15 hept-2-eeni-2-karboksylaatti_ °H H 0
20 1) oap) ?PC1 X
1 2)HSCH2CH2CH2OH
0 ,,,/C02pNB
2
25 OH
1 H
f/\^SCH2CH2CH2OH
/{’-N -\
o CO-pNB
30 2 3 42 7 6 3 01
Liuos, jossa oli 926 mg (2,66 mmoolia) p-nitro-bentsyyli-6^1-(R)-hydroksietyyH7“3,7-diokso-l-atsabi-syklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaattia (2) 15 mlsssa asetonitriiliä jäähdytettiin typpiatmosfäärin suojaamana 5 -10°:seen. Lisättiin liuos, jossa oli 349 mg (2,7 mmoo lia) di-isopropyylietyyliamiinia 1 ml:ssa asetonitriiliä ja sen jälkeen lisättiin tiputtamalla 2 minuutin kuluessa 725 mg (2,0 mmoolia) difenyylikloorifosfaat-tia 0,7 ml:ssa asetonitriiliä. Saatua liuosta sekoitet-10 tiin -10°:ssa 15 minuuttia, jolloin saatiin p-nitrobent- syyli-3- (difenyylifosforyylioksi) -6«*r-/l- (R) -hydroksi-etyyli7-7-okso-l-atsabisyklo£i,2,0/hept-2-eeni-2-karbok-sylaattia. Tähän liuokseen lisättiin liuos, jossa oli 326 mg (2,8 mmoolia) di-isopropyylietyyliamii-15 nia 1 ml:ssa asetonitriiliä ja sen jälkeen liuos, jossa oli 273 mg (3,0 mmoolia) 3-merkaptopropanolia 0,5 ml:ssa asetonitriiliä. Reaktioseosta sekoitettiin viisi tuntia huoneen lämpötilassa ja sitten yön ajan 5°:ssa. Reaktio-seos laimennettiin 100 ml :11a etyyliasetaattia ja pes-20 tiin 100 ml:11a vettä ja sitten suolaliuoksella. Kon- densoimalla kuivattu (MgSO^) liuos tilavuudeltaan noin 5 ml:ksi saatiin valkeita kiteitä, jotka pestiin eetterillä, jolloin saatiin 830 mg (74 %) otsikon yhdistettä (3) valkeina kiteinä? sp. 142-144°C.
25 NMR (DMSO-dg) S: 1,20 (3H, d, J=6,0 Hz), 1,5-2,0 (2H, m), 2,8-3,6 (7H, m), 4,60 (1H, 5, J=5,0 ja 5,0 Hz), 5,1 (1H, d, J=5,0 Hz), 5,25 (1H, d, J=14,0 Hz), 5,50 (1H, d, J=14,0 Hz), 7,70 (2H, d, J=8,5 Hz) ja 8,23 (2H, d, J=8,5 Hz); 30 IR (KBr) tmaks: 3400, 1770, ja 1600 cm”1.
Analyysi, laskettu yhdisteelle ci9H22N2^7S1/2H2®: C, 52,90; H, 5,33; N, 6,49? S, 7,42; saatu: C, 53,10; H, 5,08; N, 6,61; S, 7,65.
Il 43 76301 B. p-nitrobentsyyli-3-(2-jodipropyylitio) (R) - hydroksietyyli^-7-okso-1-atsabisyklo(3,2,0)-hept- 2-eenl-2-karboksylaatti_ 5 j* sch2ch2ch2oso2—/-^-CHj
TsCl v I \ I
J--N -L.C0,pNB
0 1 10 i
?H H
_t^^^SCH-CH-CH-I
as*-> Q I
15 i-11-S;o2P® 5
Liuokseen, jossa oli 810 mg (1,91 mmoolia) yhdistettä 3 20 mlsssa kuivaa tetrahydrofuraania, lisät-20 tiin 400 mg (2,10 mmoolia) p-tolueenisulfonyylikloridia ja sen jälkeen 268 mg (2,20 mmoolia) dimetyyliaminopyri-diiniä ja seosta sekoitettiin kaksi tuntia huoneen lämpötilassa typpiatmosfäärin suojaamana. Reaktioseos kaadettiin sitten etyyliasetaatti-jäävesi-seokseen. Orgaa-25 ninen kerros pestiin 40 %:sella H^PO^illä ja kuivattiin sitten MgS0^:lla. Haihduttamalla kuivatut liuottimet pois saatiin tosylaattia 4 keltaisena öljynä, joka muutettiin jodiyhdisteeksi 5 enempää puhdistamatta. Raaka yhdiste 4 liuotettiin 30 ml:aan asetonia, lisättiin 30 1,5 g (10 mmoolia) natriumjodidia ja seosta sekoitettiin kuusitoista tuntia huoneen lämpötilassa. Reaktioseos kaadettiin etyyliasetaatti-vesi-seokseen. Haihduttamalla kuivattu (MgSO^) liuotin pois saatiin keltaista siirappia, joka puhdistettiin silikageeli-kolonnissa kromato-35 grafioimalla ^eluointi metyleenikloridi-etyyliasetaatti- seoksella (til.suhde 9:1)^, jolloin saatiin 142 mg 44 76801 (saanto 18,5 %) otsikon yhdistettä valkeana amorfisena jauheena.
NMR (asetoni-dg) : 1,25 (3H, d, J=6,0 Hz), 2,7-3,5 (7H, m), 4,0-4,4 (2H, m), 5,30 (1H, d, J=14,0 Hz), 5 5,65 (1H, d, J=14,0 Hz), 7,80 (2H, d, J=8,5 Hz); 8,30 (2H, d, J=8,5 Hz); IR (KBr) fmaks: 3500, 1770 ja 1600 cm"1.
C. 3-^*2-(l-pyridiinium)propyylitio7-6^-^l-(R) - hydroksietyy1^7-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-10 2-eeni-2-karboksylaattl_ ^ * 15 C104® r% 20 AgClO. 6 -— c,!H h e ff \ |/^SsV'SCH2CH2CH2 N\ ) 25 h2 ^ 1 * iT \=y A/r ^ J N -
Pd/C O 2 7 30 Liuokseen, jossa oli 140 mg (0,3 mmoolia) jodi- yhdistettä 5 5 ml:ssa kuivaa tetrahydrofuraania, lisättiin 50 mg (0,6 mmoolia) pyridiiniä ja sen jälkeen liuos, jossa oli 100 mg (0,5 mmoolia) hopeaperkloraattia 1 ml: ssa tetrahydrofuraania. Seosta sekoitettiin kaksi tuntia 35 huoneen lämpötilassa ja sitten liuotin haihdutettiin tl 45 7 6 8 01 pois vakuumissa, jolloin saatiin yhdistettä 6 lievästi keltaisena hartsina.
IR (KBr) V"maks: 3400, 1770, 1600 ja 1100 cm Yhdiste 6 hydrattiin enempää puhdistamatta.
5 Sitten suspendoituun seokseen, jossa yhdiste 6 oli 20 ml:ssa eetteriä ja 20 ml:ssa tetrahydrofuraania, lisättiin liuos, jossa oli 30 mg (0,3 mmoolia) kalium-vetykarbonaattia ja 52 mg (0,3 mmoolia) kaksiemäksistä kaliumfosfaattia 20 mlsssa vettä. Sitten lisättiin 100 mg 10 10 %:ista palladium-puuhiiltä ja seosta hydrattiin 40 psi:n paineessa Parr'in ravistimessa kuusikymmentä minuuttia. Sitten seos suodatettiin ja katalyytti pestiin vedellä (2x5 ml). Yhdistetyt suodos ja pesunesteet uutettiin eetterillä (2x5 ml) ja sitten kylmäkuivat-15 tiin, jolloin saatiin keltaista kiinteätä ainetta. Raaka aines puhdistettiin C^g BONDAPAK-käänteisfaasi-kolonis-sa (8 g) (Waters Associates), eluoimalla vedellä 8 psi:n paineessa. Kukin 10 ml:n fraktio analysoitiin suur-paine -nestekromatogr af iaa käyttäen ja fraktiot, joiden 20 ultraviolettiabsorptio /Imaks ol* 800 nIn, Ylistettiin ja kylmäkuivattiin, jolloin saatiin 8 mg otsikon yhdistettä lievästi keltaisena lasimaisena jauheena.
NMR (D20) £:1,25 (3H, d, J=6,5 Hz), 1,5-1,8 (2H, m), 2,2-3,70 (7H, m); 4,0-4,3 (2H, m), 7,9-8,9 (m, 5H); 25 IR (KBr) jfmaks: 3400, 1760, ja 1590 cm W^maks (H20) 294 ™ <E=6'082>» 265 nm (E=6,317) .
Esimerkki 3 3-^*2- (l-pyridiinium)etyyliti<a?-6/-/l (R) -hydroksi-etyyli7~7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni- 30 2-karboksylaatin valmistus___ (Ensisijainen menetelmä) 4« 76801
A. 2-(trifenyyllmetyylitlo)etanoli Menetelmä A
A + ICSH — —°*ί*' K0H > , rrs/^011 . 70*C, 2 h
Suspensioon, jossa oli trifenyylimerkaptaa-nia (2,74 g, 0,010 moolia) etanolissa (10 ml), lisättiin natriumhydroksidin vesiliuosta (0,25 ml, 4-norm.
10 1,0 mmoolia). Seosta sekoitettiin 5 minuuttia, käsitel tiin etyleenioksidin (0,75 ml, 0,015 moolia) kanssa, sekoitettiin 15 min. ja lämmitettiin 70°C:ssa 2 tuntia. 35°C:seen jäähdyttämisen jälkeen reaktioseos neutraloitiin rexyn-102 H+ -valmisteella ja suodatettiin.
15 Suodos konsentroitiin siirapiksi, joka kiteytyi paikoil laan ollessaan. Trituroimalla kiinteätä ainetta heksaa-nin kanssa saatiin suodattamisen jälkeen 3,20 g (100 %) tuotetta, sp. 102-8°C (kirj. (1) sp. 114-115°C). Di-kloorimetaaniheksaani-seoksessa uudelleen kiteyttämisen 20 jälkeen saatiin analyyttinen näyte, sp. 18-110°C.
IR (KBr)^ maks: 3340 (br OH), 1590 (aromaattinen), 1483, 1445, 1439, 1182, 1060, 1035, 1010, 751, 738, 695 cm"1.
1Hmr (CDC13) Si 1,61 (1H, s, OH), 2,48 (2H, t, J=6,l 25 Hz, H-2), 3,39 (2H, t, J=6,l Hz, H-l), 6,7-7,7 (15H, m, fenyyli).
II
47 76801
Menetelmä B
, OH EtONa, EtOH 0H
TrCl + -V 1 TrS/^-^ 5 Reflux, 1.Sh 1
Liuokseen, jossa oli natriumetylaattia etanolissa /valmistettu natriumhydroksidista (3,4 g, 0,085 moolia) etanolissa (35 ml),/, lisättiin 2-merkaptoetano-10 lia (5,6 ml, 0,080 moolia) ja trifenyylimetyyliklori- dia (23,4 g, 0,084 moolia) sellaisella nopeudella, että lämpötila saatiin pysymään välillä 45-60°C. Reaktioseos-ta kiehutettiin 1,5 tuntia, jäähdytettiin 30°C:seen ja suodatettiin. Kiinteä aine pestiin eetterillä (3 x 30 ml). 15 Suodos konsentroitiin siirapiksi, joka liuotettiin eet teriin (150 ml). Orgaaninen liuos pestiin vedellä, laimennetulla etikkahapolla ja vedellä, kuivattiin (MgS0^-Mg0) ja konsentroitiin vakuumissa siirapiksi, joka liukeni dikloorimetaani-heksaani-seoksessa (1:1).
20 Suodattamalla kiteet erilleen saatiin 5,7 g (22 %), sp. 109-110°C (kirj. (1),( sp. 114-115°C) otsikon yhdistettä. Suodos puhdistettiin kromatograafisesti (sili-kageeli 60, 70-230 mesh'iä, 240 g). Sopivat fraktiot yhdistettiin ja konsentroitiin siirapiksi, josta saa-25 tiin kiteyttämällä (dikloorimetaani-heksaani-seoksesta) 4,61 (18 *), sp. 107-109°C, tuotetta, kokonaissaannon ollessa 40 %. Analyyttiset arvot olivat identtiset arvojen kanssa, jotka on ilmoitettu menetelmällä A valmistetun yhdisteen osalta.
30 ^C.C. Culvenor, W. Davies ja W.E. Savige, J. Chem.
Soc.4480 (152) 48 7 6 3 01 B. 2-(trifenyyllmetyylltlo)etyyll-metaanlsulfonaatti *
Liuokseen, jossa oli typpiatmosfäärin suojaamana 2-(trifenyylimetyylitio)etanolia (2,66 g, 8,30 mmoolia) kylmässä (0°C) dikloorimetaanissa (39 ml), lisättiin melo taanisulfonyylikloridia (0,704 ml, 9,10 mmoolia); saa tuun seokseen lisättiin tiputtamalla (15 min.) trietyy-liamiinia (1,34 ml, 9,6 mmoolia). Kun oli sekoitettu 15 minuuttia, jäähdytyshaude poistettiin ja reaktio-seosta sekoitettiin 7 tuntia, minkä jälkeen pestiin pe-15 räkkäin vedellä (10 ml), 0,5-norm. sitruunahapolla (10 ml), vedellä (10 ml), kyllästetyllä natriumvetykarbonaatti-liuoksella ja vedellä. Orgaaniset uutteet kuivattiin (MgS0^-Mg0) ja konsentroitiin vakuumissa paksuksi siirapiksi, joka kiteytyi paikoillaan ollessaan. Trituroi-20 maila kiteitä eetterissä saatiin valkeata kiinteätä ainetta 21,1 g (63 %), sp. 95-8°C; IR (KBr) Vmaks! 1580' 1565 (fenyyli), 1350, 1175, 1165 cm ^ (sulfonaatti); ^Hmr (CDCl^): 2,51 (2H, 5, J=6,6 Hz, CH2S), 3,07 (3H, s, CH3S03"), 3,87 (2H, t, 25 J=6,6 Hz, CH20), 7,34 (15H, m, fenyyli).
li 49 7 6 8 01 C. 1-(2-trifenyylimetyylitioetyyli)pyridiinium-metaanisulfonaatti_
~ . OSCH. /N l + ) / MsO
5 Ϊ 3 Byrir11.1n1-y TrS^^"^ y~-y 0 nBu.iil, Δ 4
Seosta, jossa oli 2-(trifenyylimetyylitio)etyy-li-metaanisulfonaattia (0,598 g, 1,50 mmoolia), tetra-10 n-butyyliamjoniumjodidia (0,020 g) ja pyridiiniä (1,2 ml, 15,0 mmoolia), lämmitettiin 90°C:ssa typpi-atmosfäärin suojaamana 3 tuntia. Kun oli jäähdytetty 25°C:seen, pyridiini haihdutettiin pois vakuumissa, jolloin saatiin valkeata kiinteätä ainetta, jota tri-15 turoitiin eetterissä ja suodatettiin, 0,66 g (92 %), sp. 135-150°C hajoten.
IR (KBr) 'ima]cs* 1628 (pyridiinium) , 1590, 1575 (fenyyli) , 1190 cm-1 (sulfonaatti); 1Hmr (DMS0-dg) £ : 2,31 (3H, s, CH3S03"), 2,82 (2H, m, CH2S), 4,40 (2H, m, CH2N+), 7,28 20 (15H, m, fenyyli), 8,12 (2H, m, pyridiiniumin Hm), 8,59 (1H, m, pyridiiniumi^n Hp) , 8,84-8,85 (2H, dd, J=l,3 Hz, J=6,7 Hz, pyridiiniumin Ho).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C2yH37N03S2.H20: C, 65,43; H, 5,90; N, 2,83; S, 12,94; 25 saatu: C, 65,77; H, 5,81; N, 3,25; S, 12,55.
50 76801
D. l-(2-merkaptoetyyli)pyridiinium-metaanisulfonaatti Menetelmä A
i "v N MsO
5 Δ + + ^011 . 55*c, 16 h* HS 'N-'
Suspensioon, jossa oli pyridiiniummetaanisulfo-naattia pyridiinissä, jota oli valmistettu lisäämällä 10 tiputtamalla ja jäähdyttämällä metaanisulfonihappoa (1,95 ml, 0,03 moolia) pyridiiniin (8,0 ml, 0,099 moolia), lisättiin etyleenisulfidia (1,96 ml, 0,033 moolia). Saatua seosta sekoitettiin 55°C:ssa 16 tuntia ja konsentroitiin vakuumissa paksuksi siirapiksi, jota sekoi-15 tettiin muutaman ml:n kanssa vettä. Liuos kaadettiin kolonnin (40 x 16 cm) yläpäähän, jossa oli valmistettu ^u-bondapak C-18, ja joka eluoitiin vedellä. Kylmä kuivaamalla sopivat fraktiot saatiin väritöntä siirappia 6,5 g (91 %); IR (kalvo) ^ ^ : 2300-2600 20 (br, SH), 1635 (pyridiinium), 1490, 1200 (sulfonaat- ti), 1068, 1060, 1045, 791, 780 cm-1; ^mr (DMS0-dg)
Si 2,32 (3H, s, CH3S03_), 2,61, 270, 2,73, 2,82 (1H, B A2B-systeemin osa, SH) 3,07 (2H, m /D20:n kanssa, 3,08 (2H, t, J=6,5 Hz), CH2S), 4,76 (2H, t, J=6,5 Hz, 25 CH2N+), 8,19 (2H, m, pyridiiniumin Hm), 8,6 (1H, py- ridiiniumin Ho), 9,08 (2H, dd, J=6,8 Hz, J=l,4 Hz, pyridiiniumin Ho); uv (H20) g: 206 (E 5230), 258 (E 3760) m^u.
< si 76801
Menetelmä B
Jn\ J!i^_ 5 .../VM HeOH 2
TrS \ Rs0
Liuokseen, jossa oli 1-(2-trifenyyliraetyylitio-etyyli)pyridiinium-metaanisulfonaattia (0/477 g, 1/0 mmoolla) metanolissa (25 ml), lisättiin merkuriasetaat-10 tia (0,355 g, 1,05 mrooolia) ja sekoitettiin 25°C:ssa 2 tuntia. Seos haihdutettiin kuiviin vakuumissa ja jäännöstä trituroitiin eetterissä (30 ml), jolloin suodattamisen jälkeen saatiin valkeata kiinteätä ainetta. Siitä valmistettua suspensiota dikloorimetaanlssa (25 ml) 15 käsiteltiin 25°Csssa kaasumaisen rikkivedyn kanssa 1,75 tuntia ja suodatettiin. Suodos haihdutettiin kuiviin vakuumissa ja jäännös laimennettiin vedellä ja pantiin kolonnin yläpäähän (1,5 x 6,0 cm), jossa oli valmistettu ^u-bondpak C-18. Eluoimalla kolonni seoksella, jos-20 sa oli 15 % asetonitriiliä ja 85 % vettä, saatiin sopi vien fraktioiden kylmäkuivauksen jälkeen väritöntä paksua siirappia 0,179 g (76 %). Analyyttiset arvot olivat identtiset arvojen kanssa, jotka on ilmoitettu menetelmällä A valmistetun otsikon yhdisteen osalta.
25 52 76801 E. 1-(2-merkaptoetyyli)pyrldiniumkloridi
Menetelmä A:
Vesiliuos/ jossa oli raakaa 1-(2-merkaptoetyyli )pyridiinium-metaanisulfonaattia (9,4 g, 0,04 moolia), 10 kaadettiin kolonnin yläpäähän (2,5 x 41 cm), jossa oli valmistettu permutit S-l . Kolonni eluoitiin vedellä nopeudella 0,5 ml/min. ja sopivat fraktiot yhdistettiin ja kylmäkuivattiin, jolloin saatiin kellertävää siirappia 7,0 g (100 %), jota käytettiin sellaisenaan 15 seuraavassa vaiheessa; 1Hmr (D20) <S: 3,22 (2H, m, CHjS), 4,88 (m, CH2N+), 8,18 (2H, m, pyridiiniumin Hm), 8,7 (1H, m, pyridii-niumin Hp), 9,0 ppm (2H, pyridiiniumin Ho).
20 Menetelmä B; 25 ^ + a‘
Cl’
Esijäähdytettyyn (jäähaude) pyridiiniin (5,6 ml, 70 mmoolia) lisättiin pyridiinihydrokloridia (4,05 g, 30 35 mmoolia) ja etyleenisulfidia (2,1 ml, 35 mmoolia).
Seosta lämmitettiin 65°C:ssa ja sekoitettiin 75 minuuttia, jolloin saatiin kaksifaasista seosta. Kevyempi faasi poistettiin. Jälelle jäänyt öljy pestiin eetterillä (5 x 10 ml) ja imettiin suurvakuumipumpulla jolloin saa-35 tiin otsikon yhdistettä (90-100 %), jota käytettiin
II
53 7 6 8 01 sellaisenaan seuraavassa vaiheessa.
F. Paranitrobentsyyli-3-^2-(1-pyridiinium)etyylitio)- 6Α.-/Ί- (R) -hydroksietyyli,7-7-okso-l-atsabisyklo- (3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaattikloridl_ 5
1- NEt (iPr) 2 OH
10 o — NCOOPNB Cl ' COOPNB 4- NEt(iPr)^
Liuos, jossa oli p-nitrobentsyyli-6«£-^l-(R) - hydroksietyyl^7-3,7-diokso-l-atsabisyklo/3,2,0)hept-2- eeni-2-karboksylaattia (6,09 g, 17,5 mmoolia) asetonit-15 rillissä (20 ml), jäähdytettiin typpiatmosfäärin suojaamana +5°C:seen ja käsiteltiin peräkkäin di-isopropyyli-etyyliamiinin (3,65 ml, 21,0 mmoolia) ja difenyylikloo-rifosfaatin (4,34 ml, 21,0 mmoolia) kanssa. Saatua seosta sekoitettiin 30 minuuttia 5°C:ssa, jäähdytettiin 20 -5°C:seen ja käsiteltiin peräkkäin liuoksen kanssa, jossa oli raakaa 1-(2-merkaptoetyyli)pyridiiniumklori-dia (4,3 g, 24 mmoolia) N,N-dimetyyliformamidissa (1,0 ml) ja tiputtamalla lisätyn di-isopropyylietyyliamiinin kanssa (3,65 ml, 21,0 mmoolia). Reaktioseosta sekoitet-25 tiin 0°C:ssa tunnin ajan, jäähdytettiin -30°C:seen ja sekoitettiin vielä 15 minuuttia. Kiinteä aine suodatettiin erilleen ja pestiin kylmällä (-30°C) asetonitrii-lillä, 5,77 g (65 %)? IR (nujoli) <makg** 3300 (OH), 1775 (fi-laktaamin C=0) , 30 1690 (PNB-esterin C=0), 1630 (pyridiinium), 1605 (PNB-esterin fenyyli), 1515 (N02)r 1335 cm ^ (N02); 1Hmr (DMSO-dg) <5} i 1,17 (3H, d, J=6,l Hz, CH^CHOH) , 3,2-3,75 (5H, H-4, H-6, CH2S), 3,75-4,5 (2H, H-5, CH3CHOH), 4,92 (2H, brt, J=6,5 Hz, CH2N+), 5,18 (1H, d, 35 54 76301 J=4,9 Hz, OH), 5,37 (ABq:n keskus, Ja ^=14,2 Hz, PNB:n CH2), 7,69 (2H, d, J=8,7 Hz, PNB:n Ho), 8,24 (d, J=8,7 Hz, PNB:n Hm, 8,0-8,4 (4H, PNB:n Hm, pyridiiniumin Hm), 8,66 (1H, m, pyridiiniumin Hp), 9,17 (2H, brd, J=5,5 5 Hz, pyridiiniumin Ho). Suodos ja pesunesteet yhdistet tiin ja laimennettiin eetterillä (150 ml). Pinnalla oleva neste dekantoitiin pois ja hartsi liuotettiin veteen (40 ml), jossa oli liuoksen saamiseksi riittävä . määrä asetonitriiliä, joka liuos kaadettiin kolonnin 10 (3 x 10 cm) yläpäähän, jossa oli valmistettu ^u-bondapak C-18. Kolonni eluoitiin seoksilla 10 % asetonitriiliä - 90 % vettä (150 ml) ja 50 % asetonitriiliä - 50 % vettä (100 ml). Sopivat fraktiot yhdistettiin ja kylmä-kuivattiin, sen jälkeen kun asetonitriili oli poistettu 15 vakuumissa, jolloin saatiin kellertävää jauhetta. Sen NMR-analyysi osoitti siinä olevan otsikon yhdistettä seoksena pienen määrän kanssa p-nitrobentsyyli-3-£2-(l-pyridiinium)etyylitiq7-6,t-/l-(R) -hydroksietyylj^- 7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaat-20 ti-difenyylifosfaattia (2:1). Jauhe liuotettiin veteen (minimimäärään) ja laskettiin veden kanssa kolonnin (1,5 x 21 cm) läpi, jossa oli valmistettu permutit S-lCl . Kylmäkuivaarnalla sopivat fraktiot saatiin 1,8 g (20 %) otsikon yhdistettä.
25
II
55 76801 G. Paranitrobentsyyli-3-^2-(l-pyridiinium)etyylitiq7-6·4-/l-(R) -hydroksietyylj,/-7-okso-l-atsabisyklo- (3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaattidifenyylifos- faatti___· _ · _ ____ 5 1) NEt(iPr)« ·
OB ' ϊ I
I 2) cii(OPh) —r—-\ /- .XO·1
Veana Wi„_ \oopnb .9.
10 4) NEttiTDj 1^0)2io
Liuos, jossa oli p-nitrobentsyyli-6 etA-(R)-hydroksietyyli7-3,7-diokso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaattia (0,174 g, 0,50 mmoolia) aseto-nitriilissä (2 ml), jäähdytettiin typpiatmosfäärin suojaamana 0°C:seen ja käsiteltiin peräkkäin di-isopro-pyylietyyliamiinin (0,105 ml, 0,60 mmoolia) ja dife-nyylikloorifosfaatin (0,124 ml, 0,60 mmoolia) kanssa.
Saatua liuosta sekoitettiin 30 minuuttia 0°C:ssa ja kä-. 20 siteltiln peräkkäin liuoksen kanssa, jossa oli l-(2-mer- kaptoetyyli)pyridiinium-metaanisulfonaattia (0,170 g, 0,72 mmoolia) asetonitriilissä (0,6 ml) ja di-isopropyy-lietyyliamiinin (0,105 ml, 0,60 mmoolia) kanssa. Reaktio-seosta sekoitettiin 0°C:ssa 15 minuuttia, laimennet-25 tiin kylmällä (0°C) vedellä (7 ml) ja kaadettiin kolon nin (1,5 x 6,4 cm) yläpäähän, jossa oli valmistettu ^u-bondapak C-18. Kolonni eluoitiin seoksella, jossa oli asetonitriiliä (25 % - 50 %) vedessä (75 % - 50 %). Sopivat fraktiot yhdistettiin ja kylmäkuivattiin vakuumis-30 sa suoritetun asetonitriilin poistamisen jälkeen, jol loin saatiin kellertävää jauhetta 0,33 g (92 %); IR (KBr) maks: 3600"3000 <0H> / 1765 (fö -laktaamin OO) , 1690 (PNB-esterin C=0), 1625 (pyridiinium), 1585 (fenyyli), 1510 (N02), 1330 (N02), 885 cm-1 (N02); 35 1Hmr (DMS0-dg) : 1,16 (3H, d, J=6,2 Hz, CH3CH0H) , 4,87 (2H, brt, J=6,6 Hz, CH2S), 5,37 (ABq:n keskus, 56 7 6 8 01 j ,=14,3 Hz, PNBsn CH-), 6,7-7,5 (fenyyli), 7,68 SL f O & (d, J=8,8 Hz, PNB:n Ho), 8,23, d, J=8,8 Hz, PNB:n Hm), 8,0-8,3 (m, pyridiiniumin Hm), 8,4-8,8 (1H, pyridiiniumin Hp), 9,09 (2H, dd, J=6,7 Hz, J=l,3 Hz, pyridiiniumin 5 Ho) .
H. 3-^2- (l-pyridiinium)etyylitiq7-6e^-/i- (R) -hydrok- sietyyli^-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2- eeni-2-karboksylaatti_^__
Menetelmä A
COOPNB
15
Liuokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-3-^2-(1-pyridiinium) etyylitiq7-6*Cr^I- (R) -hydroksietyyli^-7-okso- 1-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-karboksylaatti-difenyy-lifosfaattia (0,16 g, 0,22 mmoolia) märässä tetrahydro-20 furaanissa (10 ml), lisättiin eetteriä (10 ml), yksi- emäksistä kaliumfosfaattia natriumhydroksidi-puskuria pH 7,4 (16 ml, 0,05 mol) ja 10 %:ista palladium-puuhiiltä (0,16 g). Saatua seosta hydrattiin 40 psi:n paineessa tunnin ajan 25°C:ssa. Saadut kaksi faasia eroitet-25 tiin ja orgaanista faasia uutettiin veden (2x3 ml) kanssa. Vesiliuokset yhdistettiin, pestiin eetterillä (2 x 10 ml) ja kaadettiin, sen jälkeen kun orgaanisten liuottimien jäännökset oli poistettu vakuumissa, kolonnin (1,5 x 6,2 cm) yläpäähän, jossa oli valmistettu 30 yU-bondapak C-18. Eluoimalla kolonni vedellä sopivien fraktioiden kylmäkuivauksen jälkeen saatiin kellertävää jauhetta 0,062 g (84 %);
II
57 76801 IR 3700-3000 (OH), 1755 (y3-laktaamin C-0), 1630 (pyridiinium) 1590 an ^ (karboksylaatti); 1Hmr (D20); 1,22 (3H, d, J=6,4 Hz, CH-jCHOH) , 2,92 (d, J=9,1 Hz, H-4), 2,97 (d, J=9,l Hz, H-4), 3,20 (dd, 5 J=2,5 Hz, J=6,1 Hz, H-6), 3,44 (t, J=6,0 Hz, CH2S), 3,93 (dd, J=9,1 Hz, J=2,5 Hz, H-5), 4,82 (t, J=6,0 Hz, CH2N+), 8,04 (m, pyridiiniumin Hm), 8,5 (m, pyridiiniumin Hp), 8,82 (dd, J=3,2 Hz, J=l,l Hz, pyridiiniumin Ho); UV (H20) ^fnakss 259 (£ 5800) , 296 (£ 7030) ni/U; t±/2 = 10 13,5 tuntia (mitattu konsentraation ollessa 10 ^ mol.
fosfaattipuskurissa pH 7,4 36,8°C:ssa).
Menetelmä B
OH _ Ψ j.
jzXVs'^v/'N·^ cr” N*"'\ THF, esteri> 0 \ -
N COOPNB puskuri 7.2 COO
20 Liuokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-3-£2-(1- pyridiinium) etyylitiq7-6dir^l- (R) -hydroksietyyli,7-7-okso- 1-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaattiklori-dia (5,77 g, 11,4 mmoolia) yksiemäksisessä kaliumfos-faatti-natriumhydroksidi-puskurissa (170 ml, 0,2 mol., 25 pH 7,22), lisättiin tetrahydrofuraania (30 ml), eette riä (30 ml) ja 10 %:ista palladium-puuhiiltä (5,7 g).
Saatua seosta hydrattiin 22°C:ssa 40 psi:n paineessa tunnin ajan ja suodatettiin Celite-patjan läpi. Patja pestiin vedellä (2 x 15 ml). Suodos ja pesunesteet yh-30 distettiin ja laimennettiin eetterillä (100 ml). Vesi- faasi erotettiin, pestiin eetterillä (3 x 100 ml) ja kaadettiin, sen jälkeen kun orgaaniset liuottimet oli poistettu vakuumissa, kolonnin (4,5 x 20 cm) yläpäähän, jossa oli valmistettu ^u-bondapak C-18. Eluoimalla kolon-35 ni vedellä ja sen jälkeen 1 % asetonia sisältävällä vedellä, sopivien fraktioiden kylmäkuivauksen jälkeen,
_____ - I
58 7 6 8 01 saatiin 2,48 g (65 %) otsikon yhdistettä kellertävänä jauheena. Analyyttiset arvot olivat identtiset arvojen·' kanssa, jotka on ilmoitettu menetelmällä A valmistetun yhdisteen osalta.
5 Esimerkki 4 3-^2-(1-(3,5-dimetyylipyridiinium)etyylitiq^-öp^· ^1-(R)-hydroksietyyld^-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)-hept-2-eeni-2-karboksylaatin valmistus_ 10 T /CH3 ' IcQ—^ coo" ch3 ^ A. l-(2-merkaptoetyyli)-3,5-dimetyylipyridiinium- metaanisulfonaatti_ / \ + + MsOH -HS (0^ MS°
Suspensioon, jossa oli 3,5 lutidiniummetaanisul-25 fonaattia 3,5-lutidiinissa, jota oli valmistettu lisää mällä metaanisulfonihappoa (0,65 ml, 0,010 moolia) kylmään 3,5-lutidiiniin (2,51 ml, 0,022 moolia), lisättiin etyleenisulfidia (0,655 ml, 0,011 moolia). Saatua seosta sekoitettiin typpiatmosfäärin suojaamana 55°C:ssa 30 24 tuntia, jäähdytettiin 23°C:seen ja laimennettiin vedellä (5 ml) ja eetterillä (5 ml). Orgaaninen kerros erotettiin ja vesiliuos pestiin eetterillä (6x4 ml). Eetteritähteet poistettiin vakuumissa ja liuos pantiin kolonnin (2,5 x 6,0 cm) yläpäähän, jossa oli valmis-35 tettu ^u-bondapak C-18. Kolonni eluoitiin vedellä ja kylmäkuivaamalla sopivat fraktiot saatiin väritöntä sii- 59 7 6 8 01 rappia 2,4 g (91 %) ; IR (kalvo) mak.S: 2520 (SH) , 1628 (pyridiinium) , 1600, 1495, 1325, 1305, 1283, 1200 (sulfonaatti; 1040, 938, 765, 680 cm-1; 5 1Hmr (DMSO-dg) &: 2,31 (3H, s, CH-jSO^) , 2,47 (6H, s, pyridiiniumin CH3), 2,57, 2,66, 2,69, 2,78 (1H, A2B-systeemin B-osa, SH), 3,06 (2H, m ^lisätty D20:ta (2H, t, J=6,5 Hz)_7,CH2S), 4,65 (2H, t, J=6,5 Hz, CH2N+) , 8,34 (1H, s, pyridiiniumin Hp), 8,79 (2H, s pyridiiniumin 10 Ho); m <H20) Amaks: 271 <£ 4860» "/“·
Analyysi, laskettu yhdisteelle cioH17N03S2'5H2°: C 44,09; H, 6,66; N, 5,14; S, 23,54; saatu: C 44,26; H, 6,49; N, 5,17; S, 24,18.
15 B. Paranitrobentsyyli-3-^-(1-(3,5-dimetyylipyri- diinium) etyylitig7-6^-/l.- (R) -hydroksietyyli7~7-okso-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksy-laatti-difenyylifosfaatti_ ; 20 T°H 1] / •’COOPMB^ VoOPHB ' :: 25 4)HEt(lPr)2 . jio'
Kylmään (0°C) liuokseen, jossa oli p-nitrobent-syyli-6%4 (1-(R)-hydroksietyyli)-3,7-diokso-l-atsabisyk-lo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaattia (0,523 g, 1,50 30 mmoolia) asetonitriilissä (6,0 ml) ja jota pidettiin typpiatmosfäärin suojaamana, lisättiin di-isopropyyli-etyyliamiinia (0,314 ml, 1,8 mmoolia) ja sen jälkeen difenyylikloorifosfaattia (0,373, 1,8 mmoolia). Reaktio-seosta sekoitettiin 30 minuuttia ja sitä käsiteltiin 35 liuoksen kanssa, jossa oli 1-(2-merkaptoetyyli)-3,5-di- 60 7 6 8 01 metyylipyridiinium-metaanisulfonaattia (0,493 g, 1,87 mmoolia) asetonitriilissä (1,9 ml) ja sen jälkeen di-isopropyylietyyliamiinin (0,314 ml, 1,8 mmoolia) kanssa. Reaktioseosta sekoitettiin 0°C:ssa tunnin ajan, laimen-5 nettiin kylmällä (0°C) vedellä (26 ml) ja kaadettiin kolonnin (7,0 x 3,5 cm) yläpäähän, jossa oli valmistettu ^u-bondapak C-18. Eluoimalla kolonni seoksella 25-50 % asetonitriiliä - 75-50 % vettä, sopivien fraktioiden kylmäkuivauksen jälkeen saatiin 1,01 g (90 %) otsikon 10 yhdistettä kellertävänä jauheena; IR (KBr) 0maks: 3700-3100 (OH), 1778 (/£ -laktaamin C=0) , 1700 (PNB-esterin C=0), 1635 (pyridiinium), 1595 (fe-nyyli), 1521 (N02), 1335 (N02), 895 cm"1 (N02); 1Hmr (DMS0-d6) ' 1^16 (3H, d, J=6,l Hz, CHjCBOH), 15 2,43 (s, pyridiiniumin CH^), 4,75 (2H, m, CH2N+), 5,38 (ABq:n keskus, Ja ^=14,3 Hz, PNB:n CH2), 6,6-7,5 (10H, m, fenyyli), 7,70 (2H, d, J=8,7 Hz, PNB:n Ho, 8,0-8,5 (3H, m, pyridiiniumin Hp, PNB:n Hm), 8,82 (2H, s, pyridiiniumin Ho) ; 20 UV (H20) Xmakss 270 (£ 11570), 306 (£ 7343) ni/U.
Analyysi, laskettu yhdisteelle C^^H^qN^O^qSP.HjO: C, 58,03; H, 5,26; N, 5,48; S, 4,18; saatu: C, 57,98; H, 5,05; N, 5,22; S, 4,34.
C. 3-/Ϊ2- (1-(3,5-dimetyylipyridiinium)) etyylitiq7“ 25 6o£-^1- (R) -hydroksietyyli7-7“Okso-l-atsabisyklo- (3,2,0) hept^-eeni^-karboksylaatti__
OH
f /^< 10»M/c^. A.___k /p=s o · o coo" COOPNB (PhO)2PO_
Liuokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-S-/^-(1-35 (3,5-dimetyylipyridiinium)) etyylitiq?-6«£-^l-(R) -hydroksi- 6i 76801 etyyl^7-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karbok-sylaatti-difenyylifosfaattia (0,600 g, 0,80 mmoolia) märässä tetrahydrofuraanissa (36 ml), lisättiin eetteriä (36 ml), yksiemäksistä kaliumfosfaatti-natrium-5 hydroksidi-puskuria (0,05 mol., pH 7,4, 44 ml) ja 10 %:ista palladium-puuhiiltä (0,60 g). Saatua seosta hydrattiin 40 psi:n paineessa 23°C:ssa 1,25 tuntia. Orgaaninen kerros erotettiin ja uutettiin puskurilla (2x5 ml). Vesikerrokset yhdistettiin, suodatettiin 10 Celite-patjän läpi, pestiin eetterillä (40 ml), imettiin vakuumipumpulla orgaanisten liuottimien tähteiden poistamiseksi ja kaadettiin kolonnin (2,5 x 10,0 cm) yläpäähän, jossa oli valmistettu ^u-bondapak C-18. Eluoi-malla kolonni vedellä ja kylmäkuivaamalla sopivat frak-15 tiot saatiin otsikon yhdistettä 0,186 g (64 %) keller tävänä jauheena; IR (KBr) ^maks! 3700-3100 (OH), 1760 -laktaamin C=0), 1595 cm”^ (karboksylaatti): 1Hmr (D20) J : 1,21 (3H, d, J=6,3 Hz, CH3CHOH), 2,45 -20 (6H, s, pyridiiniumin CH^), 2,81 (d, J=9,2 Hz, H-4), 2,96 (d, J=9,2 Hz, H-4), 3,22 (dd, J=2,6 Hz, J=6,2 Hz, H-6), 3,40 (t, J=6,2 Hz, CH2S), 3,84 (dd, J=9,2 Hz, J=2,6 Hz, H-5) , 4,15 (ml CH-jCHOH) , 4,71 (t, J=6,2 Hz, CH2N+) , 8,21 (1H, s, pyridiiniumin Hp), 8,46 (2H, s, pyridiiniumin Ho); UV {H20) Amaks: 279 (£ 8345)' 196 <€7714) m; /¾^23 + 40,7 (c 0,53, H20); t,/2 = 16,9 tuntia (mitattu konsentraation ollessa 10 4 mol. fosfaattipuskurissa pH 7,4 36,8°C:ssa).
30 62 76301
Esimerkki 5 (5R,6S)-3-^/2-(3-hydroksimetyylipyridiinio)-etyyli^tiq^-e-/"(R) -l-hydroksietyyli,7“7-okso-l-atsabisyklo/3,2,O^hept-2-eeni-2-karboksylaatin 5 valmistus___
OH / CH OH
10 A ^ 15 A. 3-hydroksimetyyli-l-(2-merkaptoetyyli)pyridii- nlum-trif luorimetaanisulfonaatti___ _ch2oh _^ch2oh 20 ^(3/ + CT3S03H + Δ -> HSCHjCrt 9 (^)\ σ3503Θ
Trifluorimetaanisulfonihappoa (1,327 ml, 0,015' moolia) lisättiin tiputtamalla 3-pyridiiniraetanolin 25 (2,91 ml, 0,030 moolia) joukkoon, ja sen jälkeen lisät tiin etyleenisulfidia (0,89 ml, 0,015 moolia). Saatua homogeenista seosta lämmitettiin (öljyhaude) 50-70°C:ssa N2:n suojaamana 20 tuntia. Sitten reaktioseos liuotettiin H20:hon (15 ml) ja uutettiin CH2Cl2;lla (5x5 ml).
30 Vesifaasi konsentroitiin vakuumissa ja pantiin sitten C^g~käänteisfaasi-kolonniin. Eluoimalla H20:lla ja haihduttamalla sen jälkeen merkittävät fraktiot kuiviin saatiin vaaleankeltaista öljyä. Tämä aine kromatografi-oitiin uudelleen, jolloin saatiin lähes väritöntä öljyä.
35 Vakuumissa kuivaamisen jälkeen (^2^5^ tästä saatiin
II
63 7 6 8 01 tuotetta (4,50 g, 94 %) viskoosisena öljynä.
IR (kalvo) Ψ maks! (s, OH), 2560 (w, SH) cm ^Hmr (dg-asetoni) 9,10-8,05 (m, 4H, aromaattinen), 5,01 (t, J=5,5 Hz, 2H, N-CH2), 4,93 (s, 2H, -CH20H), 5 4,43 (br S, 1H, -OH), 3,43-3,18 (m, 2H, S-CH2), 2,34-2,10 (m, 1H, SH).
B. p-nitrobentsyyli- (5R, 6S)-3-^*2-(3-hydroksimetyy- lipyridiinio)etyylitio7-6-^i-(R)-hydroksietyyli^- 7-okso-l-atsabisyklo/3,2,07hept-2-eeni-2-karbok-10 sylaatti-difenyylifosfaatti_
CH-OH
15 PH ,_S 2 fK X ®/ry\ ° "V» 20
Liuokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-(l- (R) -hydroksietyyli7~3,7-diokso-l-atsabisyklo^3, 2,0,7-heptaani-2-karboksylaattia (0,174 g, 0,50 mmoolia) 2 ml:ssa kuivaa asetonitriiliä, lisättiin 0°C:ssa N2:n 25 suojaamana di-isopropyylietyyliamiinia (0,095 ml, 0,55 mmoolia). Sitten lisättiin tiputtamalla difenyylikloori-fosfaattia (0,114 ml, 0,55 mmoolia) ja reaktioseosta sekoitettiin 0°C:ssa 30 minuuttia. Sitten lisättiin liuos, jossa oli 3-hydroksimetyyli-l-(2-merkaptoetyyli)pyri-30 diinium-trifluorimetaanisulfonaattia (0,223 g, 0,70 mmoo lia) 50 ml:ssa asetonitriiliä, ja sen jälkeen di-isopro-pyylietyyliamiinia (0,122 ml, 0,70 mmoolia). Sen jälkeen kun reaktioseosta oli pidetty 30 minuuttia 0°C:ssa, se konsentroitiin vakuumissa, ja jälelle jäänyt keltainen 35 hartsi liuotettiin H20:hon (hartsin liuottamisen helpot tamiseksi lisättiin riittävästi asetonitriiliä). Tämä t t 64 7 6 8 01 liuos pantiin C^g-käänteisfaasi-kolonniin, joka eluoi- tiin 15 % asetonitriiliä sisältävällä H20:lla. Kylmä kuivaamalla asianmukaiset fraktiot saatiin tuotetta (0/305 g, 81 %) beigevärisenä kiinteänä aineena.
5 IR (KBr) 9maks* 3420 (br, OH), 1775 (,6-laktaami-O) , 1695 (-CO^PNB); 1 ^
Hmr (dg-asetoni) if: 9,44-7,72 (m, 8H, aromaattinen), 7,22-6,91 (m, 10H, difenyylifosfaatti), 5,53, 5,27 (ABq, J=14 Hz, 2H, bentsyylinen), 5,04 (t, J=7,4 Hz, 10 2N, N-CH2), 4,75 (s, 2H, CH20H), 4,5-3,1 (m, 8H), 1,21 (d, J=6,3 Hz, 3H, CHMe).
C. (5R,6S)-3-/2-(3-hydroksimetyylipyridiinio)etyy- litio?-6-/l-(R)-hydroksietyyli7“7-okso-l-atsabi- sykloZ3,2,07hept-2-eeni-2-karboksylaatti__ 15
OH _/*2™ CH2OH
20 9© o \„Θ rOjPNB · (φΟ)2$σ-'' C02
Liuokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-3-(2-(3-hydroksimetyylipyridiinio)etyylitiq7-6-/l-(R)-:25 hydroksietyyl^7-7-okso-l-atsabisyklo£3,2,Q7hept-2-eeni- 2-karboksylaatti-difenyylifosfaattia (0,145 g, 0,194 mmoolia) 10 mlsssa THF:a, jossa oli 5 pisaraa H20:ta, lisättiin 6,0 ml fosfaattipuskuria (0,05 mol. pH 7,4), 0,145 g 10 %:ista palladium-puuhiiltä ja 10 ml eetteriä.
30 Seosta hydrattiin (Parr) 40 psi:n paineessa tunnin ajan ja sitten suodatettiin Celite-patjän läpi. Suoda-tinkakku pestiin pienellä määrällä H20:ta ja eetteriä ja vesifaasi erotettiin ja uutettiin eetterillä (3 x). Vesiliuos jäähdytettiin sitten 0°C:seen ja pH säädet-35 tiin arvoon 7,0 pH 7,4-puskurilla. Sen jälkeen kun jälel- le jääneet haihtuvat aineet oli poistettu vakuumissa,
II
7 6 3 01 65 vesiliuos pantiin C^g-käänteisfaasi-kolonniin, joka elu-oitiin IVOilla. Kylmäkuivaamalla asianmukaiset fraktiot saatiin tuotetta (36 mg, 51 %) vaaleankeltaisena kiinteänä aineena. Puhdistamalla edelleen käänteisfaasi-5 hplc-kromatografiaa käyttäen saatiin puhdasta tuotet ta (31 mg, 41 %) kiinteänä aineena.
IR (KBr) Vjmaks: 3 300 (br, OH), 1755 (yö -laktaami CO), 1590 (-C02“) cm"1; 1Hnmr (D~0) 8,78-7,94 (m, 4H, aromaattinen), 4,83 10 1 (t, J=6,0 Hz, 2H, N-CH2), 4,83 (s, 2H, CH20H), 4,16 (q:n d, J=J'=6,2 Hz, 1H, H-l'), 3,98 t:n d, J=9,l Hz, J'=2,6 Hz, 1H, H-5), 3,75-3,20 (m, 3H), 3,20-2,65 (m, 2H), 1,22 (d, J=6,4 Hz, 3H, CHMe); UV (H2°) 294 (6 7614), 266 (£ 6936) nm; t1/2 15 (pH 7,4, 36,8 C) 14,0 tuntia.
Esimerkki 6 (5R,6S)-3-^2-(4-hydroksimetyylipyridiinio)etyy-litig7“6-/l- (R) -hydroksietyyli^^-okso-l-atsa-blsyklo/3,2, o7hept-2-eeni-2-karboksylaatin valmistus 20 OH· —r—Λ ©//—Λ
j0H
V© 25 A. 4-hydroksimetyyli-l-(2-merkaptoetyyli)pyridiinium- trifluorimetaanlsulfonaatti_ 3o «O)-'3!011 + ‘VV. + Δ —►
Liuokseen, jossa oli 4-pyridiinimetanolia (1,635 g, 35 0,015 moolia) 10 ml:ssa CH2Cl2:a 0°C:ssa N2:n suojaama na, lisättiin tiputtamalla trifluorimetaanisulfonihap- 66 7 6 8 01 poa (1,327 ml, 0,015 moolia). Erottui nopeasti keltai-senruskeata öljyä. Tähän seokseen lisättiin vielä ekvivalenttimäärä 4-pyridiinimetanolia (1,635 g, 0,015 moolia) ja liuotin poistettiin vakuumissa, jolloin saa-5 tiin öljyä. Tähän öljyyn lisättiin etyleenisulfidia (0,981 ml, 0,015 moolia) ja saatua homogeenista seosta lämmitettiin (öljyhaude) noin 60°C:ssa 3 tuntia. Reak-tioseos liuotettiin sitten 15 ml:aan IVOsta ja vesi-liuos pestiin CH2Cl2:lla (5x5 ml). Kun jälellä oleva 10 orgaaninen liuotin oli poistettu vakuumissa, vesiliuos pantiin C^g-käänteisfaasi-kolonniin. Eluoimalla 1^0:11a ja haihduttamalla sen jälkeen asianomaiset fraktiot kuiviin, saatiin öljyä, jota kuivattiin edelleen vakuumissa P20(-:n päällä, jolloin saatiin tuotetta (4,64 g, 15 97 %) värittömänä öljynä.
IR (kalvo) ^maks: 3455 (s, OH), 2565 (w, SH) cm-1; ^Hnmr (dg-asetoni) £: 9,07, 8,18 (ABq, J=6,8 Ha, 4H, aromaattinen), 5,03 (s, 2H, CHjOH), 4,96 (5, J=6,5 Hz, 2H, N-CH2), 4,09 (br s, 1H, -OH), 3,5-3,1 (m, 2H, S-CH2), 20 2,25 (brs, 1H, -SH).
B. p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-3-^2-(4-hydroksimetyy- lipyridiinio)etyylitio7-6-/l-(R)-1-hydroksietyy-1^7-7-okso-l-atsabisyklo^3,2, o7hept-2-eeni-2-karboksylaatti-difenyylifosfaatti_ 25
OH OH
'CO.PNB CO PNB (φθ) RT
ju 2 2 *
Liuokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-^1- (R) -l-hydroksietyyli,7-3,7-diokso-l-atsabisyklo^5,2,0j-heptaani-2-karboksylaattia (0,348 g, 1,0 mmoolia) 5 ml:ssa 35 kuivaa asetonitriiliä 0°C:ssa N2:n suojaamana, lisät-
A
li 67 7 6 8 01 tiin tiputtamalla di-isopropyylietyyliamiinia (0,191 ml, 1,1 mmoolia) ja sen jälkeen difenyylikloorifosfaat-tia (0,228 ml, 1,1 mmoolia). Saatua kullankeltaista liuosta sekoitettiin 0°C:ssa 40 minuuttia. Tähän liuok-5 seen lisättiin liuos, jossa oli 4-hydroksimetyyli-(2-mer- kaptoetyyli)pyridiiniumtrifluorimetaanisulfonaattia (0,447 g, 1,4 mmoolia) 1 ml:ssa asetonitriiliä, ja sen jälkeen di-isopropyylietyyliamiinia (0,191 ml, 1,1 mmoolia). Reaktioseoksesta erottui punaisenmustaa hartsia.
10 Reaktioseoksen oltua 20 min. 0°C:ssa se suodatettiin ja konsentroitiin vakuumissa. Jäännös liuotettiin tilavuudeltaan minimimäärään asetonitriili-H20-seosta (1:1) ja pantiin C^g-käänteisfaasi-kolonniin. Eluoimalla 25 %:isella asetonitriili-H20-seoksella ja kylmäkui-15 vaarnalla sen jälkeen asianmukaiset fraktiot saatiin tuo tetta (0,353 g, 47 %) kermanvärisenä kiinteänä aineena.
IR (KBr) 9 maks: 3^40 (br, OH), 1775 (/£-laktaami CO), 1695 (-C02PNB) cm"1; 1Hnmr (dg-asetoni) : 9,24-7,84 (m, H, aromaattinen), 20 7,4-6,9 (m, 10H, difenyylifosfaatti), 5,52, 5,24 (ABq, J=14 Hz, 2H, bentsyylinen), 5,15-4,80 (m, 4H), 4,45- 3,05 (m, 7H), 1,35 (d, J=6,6 Hz, 3H, CHMe).
C. (5R,6S)-3-^2-(4-hydroksimetyylipyridiinio)etyy- litiq7-6-/l- (R) -l-hydroksietyyli<7-7-okso-l-25 atsabisyklo/3,2, Q^hept-2-eeni-2-karboksylaatti OH _ - CO PNB <*»2*^ 2
Seosta, jossa oli p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-3-(2-(4-hydroksimetyylipyridiinio)etyylitio7-6-/l-(R) -1- 68 76801 hydroksietyyli,7-7 -okso-l-atsabisyklo^5,2, o7hept-2 -eeni- 2-karboksylaatti-difenyylifosfaattia (0,348 g, 0,465 mmoolia) ja 10 %:ista palladium-puuhiiltä (0,35 g) 11 mlsssa fosfaattipuskuria (0,05-mol. pH 7,4), 5 ml 5 THF:a ja 10 ml eetteriä, hydrattiin 40 psi:n painees sa 1,25 tuntia. Sitten seos suodatettiin Celite-patjän läpi ja vesifaasi pestiin eetterillä (3 x). Vesiliuoksen pH säädettiin sitten arvoon 7,0 käyttämällä lisää pH-7,4 -puskuria. Kun jälellä olevat haihtuvat aineet 10 oli poistettu vakuumissa, vesiliuos pantiin C^g-kään- teisfaasi-kolonniin. Eluoimalla 2-prosenttisella aseto-nitriili-H20-seoksella ja kylmäkuivaamalla sen jälkeen, saatiin kellanruskeata kiinteätä ainetta. Tämä aine kro-matografioitiin uudelleen (Ci8_käänteisfaasi/H20), jol-15 loin saatiin haluttua tuotetta (0,060 g, 36 %) vaalean keltaisena kiinteänä aineena.
IR (KBr)Vjnaks: ^r' 0H) ' 1755 (^-laktaami CO), 1590 (-C02“) cm"1; ^Hnmr (D20) 8,73, 7,96 (ABq, J=6,8 Hz, 4h, aromaat- 20 tinen), 4,93 (s, 2H, CHjOH), 4,77 (t, J=6,0 Hz, 2H, N-CH2), 4,15 (q;n d, J=J’=6,3 Hz, 1H, H-1‘), 3,96 (t:n d, J=9,2 Hz, J'=2,6 Hz, 1H, H-5), 3,65-3,20 (m, 3H), 3,13-2,62 (m, 2H), 1,21 (d, J=6,3 Hz, 3H, CHMe); 25 UV (H20)^maks: 295 (£6880), 256 (f 5595), 224 (£8111) nm; t^y2 (pH 7,4, 36,8°C) 14,5 tuntia.
Il «9 76801
Esimerkki 7 3-,(2- (1- (2“metyylipyridiinium)etyylitiq7-6ei-/Ϊ-(R)-hydroksietyyli7-7-okso-l-atsabisyklo- (3,2,0)hept-2-eeni-karboksylaatin valmistus 5
OH
0 10 'coo CH3 A. 1-(2-merkaptoetyyli)-2-metyylipyridiinium- metaanisulfonaattl_ 15 ‘
Δ + N (jS + MSOH -:-W
yry 55 *c, 21 h / 20
Suspensioon, jossa oli 2-metyylipyridiinium-metaanisulfonaattia 2-metyylipyridiinissä, jota oli valmistettu lisäämällä metaanisulfonihappoa (0,65 ml, 0,010 moolia) kylmään 2-metyylipyridiiniin (2,17 ml, 0,022 moolia), lisättiin etyleenisulfidia (0,655 ml, 0,011 moo- 25 lia). Reaktioseosta sekoitettiin typpiatmosfäärin suo jaamana 55°C:ssa 21 tOntia, jäähdytettiin 23°C:seen ja laimennettiin vedellä (5 ml) . Vesiliuos pestiin eetterillä (6x4 ml), imettiin pumpulla orgaanisten liuottimien jäännösten poistamiseksi ja kaadettiin ko- 30 lonnin (2,5 x 10,0 cm) yläpäähän, jossa oli valmistet ta ^u-bondapak C-18. Kolonni eluoitiin vedellä ja kylmä-kuivaamalla sopivat fraktiot saatiin 2,13 g (85 %) otsikon yhdistettä; 70 7 6 3 01 IR (kalvo)^ maks: 2520 (SH)f 1623 (pyridiinium), 1574, 1512, 1485, 1412, 1195 (sulfonaatti, 1038 cm"1? 1Hmr (DMSO-dg + D20) $: 2,37 (3H, s, CH3S03") , 2,83 (3H, s, pyridiiniumin CH3), 3,09 (2H, J=6,9 Hz, CH2s), 5 4,71 (2H, t, J=6,9 Hz, CH2N+), 7,93 (2H, m, pyridii niumin Hm), 8,44 (1H, m, pyridiiniumin Hp), 8,89 (1H, m, pyridiiniumin Ho); (h20) Xmaks1 266 It3550' “/“· B. Paranitrobentsyyli-3-^2-(1-(2-metyylipyridiinium)- 10 etyylitio7(R) -hydroksietyyl:i*7-7-okso-l- atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaatti-difenyyli fosfaatti___ 1) NEt(iPr) 0
15 2) cJ(OPh)2 A
' . X. (PhO, L-
MsO '2 4) NEt(iPr)2 20 Kylmään (0°C) liuokseen, jossa oli p-nitrobent- syyl (R) -hydroksietyyl0*7-3,7-diokso-l-atsabi- syklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaattia (0,523 g, 1,50 mmoolia) asetonitriilissä (6 ml) ja jota pidettiin typpiatmosfäärin suojaamana, lisättiin di-isopropyyli-25 etyyliamiinia (0,314 ml, 1,80 mmoolia) ja sen jälkeen difenyylikloorifosfaattia (0,273 ml, 1,80 mmoolia). Reak-tioseosta sekoitettiin 30 minuuttia 0°C:ssa ja käsiteltiin liuoksen kanssa, jossa oli 1-(2-merkaptoetyyli)-2-metyylipyridiinium-metaanisulfonaattia (0,530 g, 2,16 mmoo-30 lia) asetonitriilissä (18 ml) ja sen jälkeen di-isopro- pyylietyyliamiinin kanssa (0,314 ml, 1,8 mmoolia). Reak-tioseosta sekoitettiin 0°C:ssa tunnin ajan, laimennettiin kylmällä (0°C) vedellä (26 ml) ja kaadettiin ko- · lonnin (3,5 x 7,0 cm) yläpäähän, jossa oli valmistetta 35 ^u-bondapak C-18. Eluoimalla kolonni seoksin 25 % aseto-
II
71 76801 nitriiliä- 75 % vettä ja 50 % asetonitriiliä - 50 % vettä, saatiin sopivien fraktioiden kylmäkuivauksen jälkeeno.l,06 g (96 %) otsikon yhdistettä kellertävänä jauheena; 5 IR (KBr) 9 maks: 3650-3100 (OH), 1770 (/^-laktaamin C=0) , 1695 ja 1690 (PNB-esterin 00) , 1630 (pyridiinium) , 1595 (fenyyli), 1518 (N02), 1335 (N02), 890 cm-1 (N02); 1Hmr (DMS0, dg) 1,15 (3H, d, J=6,l Hz, CH3CH0H), 2,87 (s, pyridiiniumin CH3), 3,6-4,4 (2H, m, H-5, 10 CH3CH0H), 4,75 (2H, m, CH2N+), 5,37 (ABq:n keskus, J=14 Hz, PNB:n CH2), 6,5-7,4 (10H, m, fenyyli), 7,70 (2H, d, J=8,8 Hz, PNB s n Ho), 8,0 (2H, ra, pyridiiniumin Hm), 8,24 (2H, d, J=8,8 Hz, PNB:n Hm), 8,50 (1H, m, pyridiiniumin Hp) , 8,95 (1IJ, brd, J=6,l Hz, pyridiiniumin 15 Ho); UV (H20)Amaks: 265 (£11990)' 314 (£8020) nyu.
C. 3-fö- (1- (2-metyylipyridiinium))etyylitiq7~6 «t- [l-(R)-hydroksietyyli?-7-okso-l-atsabisyklo-2Q (3,2,0)hept-2-eeni-karboksylaatti___ 0H ^ 0H.
A..——K W/C-H? 1 I y—sf YHF, eetteri, 1 j \— 25 n _ puskuri f 'COOPNB (PhO)^rO ' COO* .·. Liuokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-3-^2-(1- (2-metyylipyridiinium)) -etyylitiq7”6^-^l- (R) -hydroksi-30 etyyl^?-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karbok- sylaatti-difenyylifosfaattia (0,66 g, 0,90 ramoolia) märässä tetrahydrofuraanissa (34 ml), lisättiin eetteriä (34 ml), yksiemäksistä kaliumfosfaatti-natriumhydroksi-di-puskuria (0,15 mol., 16,5 ml, pH 7,22) ja 10 %:ista .. 35 palladium-puuhiiltä (0,66 g). Saatua seosta hydrattiin 40 psi:n paineessa 23°C:ssa 1,25 tuntia. Orgaaninen ker- ___ . τ~ 72 7 6 8 01 ros erotettiin ja uutettiin puskurilla (2x6 ml). Ve-sikerrokset yhdistettiin, suodatettiin Celite-patjan läpi, pestiin eetterillä (40 ml), imettiin pumpulla orgaanisten liuotintähteiden poistamiseksi ja kaadettiin 5 kolonnin (2,5 x 10 cm) yläpäähän, jossa oli valmistet ta ^ubondapak C-18. Eluoimalla kolonni vedellä ja kylmä-kuivaamalla sopivat fraktiot saatiin otsikon yhdistettä 0,098 g (31 %) kellertävänä jauheena; IR (KBr) ^ maks: 3650-3100 (°H), 1755 (^-laktaamin 10 C=0), 1630 (pyridiinium), 1595 cm ^ (karboksylaatti; 1Hmr (Ώ20) ξ ·. 1,20 (3H, d, J=6,3 Hz, CH3CHOH) , 2,83 (s, pyridiiniumin CH3), 2,7-3,1 (5H, H-4, pyridiiniumin CH3), 3,1-3,7 (3H, m, CH2S, H-6), 3,90 (dd, J=9,l Hz, J=2,6 Hz, H-5), 3,1 (m, CH3CH0H), 4,78 (t, J=6,2 Hz, 15 CH2N+), 7,8 (2H, m, pyridiiniumin Hm), 8,3 (1H, m, pyridiiniumin Hp), 8,65 (1H, m, pyridiiniumin Ho); UV (H20) xmaks: 268 (£9350), 296 (£ 840), nyu; +41° (c 0,5, H20) ; tjy2 = 15,0 tuntia (mitattu konsentraation ollessa 10”^ mol. fosfaattipuskurissa 20 pH 7,4 36,8°C:ssa).
N
73 7 6 8 01
Esimerkki 8 3-/2- (1- (4-metyylipyridiinium)) -etyyliti9^-6*4· /Ϊ(R)-hydroksietyyli^-7-okso-l-atsabisyklo- (3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaatin valmistus 5 10 -;?· cocf A. 1-(2-merkaptoetyyli) -4-metyylipyridiini,um)me- taanisulfonaatti_ A . + Qh +Ms0H 55-C, 24 h '
Suspensioon, jossa oli 4-pikolinium-metaanisulfo-20 naattia 4-pikoliinissa, jota oli valmistettu lisäämällä metaanisulfonihappoa (0,65 ml, 0,010 moolia) jäähdyttäen 4-pikoliiniin (2,14 ml, 0,022 moolia), lisättiin etylee-nisulfidia (0,655 ml, 0,011 moolia). Reaktioseosta sekoitettiin typpiatmosfäärin suojaamana 55°C:ssa 24 tun-25 tia, jäähdytettiin 23°C:seen ja laimennettiin vedellä (5 ml) ja eetterillä .(10 ml) . Orgaaninen kerros erotettiin ja vesikerros pestiin eetterillä (5 x 5 ml) ja pantiin, sen jälkeen' kun eetteritähteet oli poistettu vakuumissa, kolonnin yläpäähän (2,5 x 10 cm), jossa oli 30 valmistettu ^u-bondapak C-18. Eluoimalla kolonni seok sella, jossa oli 15 % asetonitriiliä ja 85 % vettä, sopivien fraktioiden kylmäkuivauksen jälkeen saatiin väritöntä siirappia 2,66 g (100 %); IR (kalvo) 2500 (SH), 1640 (pyridiinium), 1572, 35 1520, 1478, 1200 (sulfonaatti), 1040, 833 ja 768 cm 74 7 68 01 1Hmr (DMS0-d6) £: 2,31 (3H, s, CH3S03~) , 2,62 (s, pyridiiniumin CH3), 2,2-2,9 (4H, SH, pyridiiniumin CH3), 3,04 (2H, m, CH2S), 4,68 (2H, t, J=6,4 Hz, CH2N+), 8,01 (2H, d, J-6,6 Hz, pyridiiniumin Hm), 5 8,89 (2H, d, J=6,6 Hz, pyridiiniumin Ho); UV (H20) ^makg s 256 ( £ 4100) , 221 K 7544) nyu.
B. 1-(2-merkaptoetyyli)-4-metyylipyridiinium-p- tolueenisulfonaatti_ 10 ^ + + pTsOH -V PTS°' 15
Suspensioon, jossa oli p-tolueenisulfonihap-poa (1,72 g, 0,01 moolia) bentseenissä (6,5 ml), lisättiin 4-pikoliinia (1,17 ml, 0,012 moolia). Saatua seosta sekoitettiin typpiatmosfäärin suojaamana 23°C;ssa 20 30 minuuttia, käsiteltiin etyleenisulfidin (0,65 ml, 0,011 moolia) kanssa ja sekoitettiin 24 tuntia 75°:ssa. Lisättiin vielä etyleenisulfidia (0,65 ml, 0,011 moolia) ja sekoittamista jatkettiin 75°C:ssa vielä 24 tuntia. Reaktioseos jäähdytettiin 23°C:seen ja laimennet-25 tiin vedellä (5 ml) ja eetterillä (8 ml). Vesikerros l erotettiin ja pestiin eetterillä (3x8 ml). Orgaanisten liuottimien tähteet poistettiin vakuumissa ja yhdiste kromatografioitiin ^u-bondapak C-18-valmisteella veden ollessa eluointiliuottimena, jolloin saatiin 2,94 g 30 (90 %) otsikon yhdistettä värittömänä siirappina; IR (kalvo) V^maks5 ^510 (SH), 1640 (pyridiinium) , 1595, 1582, 1475, 1200 (sulfonaatti), 1031, 1010, 818 cm"1; 1Hmr (DMS0, dg) £·. 2,29 (3H, s, pyridiiniumin CH3) , 2,61 (s, CH-jPh), 2,4-2,8 (4H, SH, CH^Ph), 3,03 (2H, m 35 * *
II
75 76 801 ^b20:n lisäys antoi t:n, J=6,4 Hz, kohdalla 3,04.7/ CH2S, 4,68 (2H, t, J=6,4 Hz, CH2N+), 7,11, 7,49 (4H, 2d, J=7,9 Hz, fenyyli), 8,00 (2H, d, J=6,5 Hz, pyridii-niumin Hm), 8,89 (2H, d, J=6,5 Hz, pyridiiniumin Ho); 5 UV (H20) Xmaks: 256 (£4315), 222 (£17045) nyi.
C. Paranitrobentsyyli-3-^2-(1-(4-metyylipyridiinium))— etyylitio7-6di~71” (R) -hydroks ie tyyli,?-7-okso-l-atsobisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaatti-difenyylifosfaatti___ 10 oa l) Nrt(ipr)2 on 15 οΠθ=°3) O'
'•COOPNB HS'COOPNB (PhOJ^O
4) NEt(iPr)2.
20 Kylmään (0°C) liuokseen, jossa oli p-nitrobent- syyli-6dC-,£l- (R)-hydroksietyyl^7-3,7-diokso-l-atsabisyk-lo(3,2,0)hept-2-eeni-karboksylaattia (0,522, 1,5 mmoo-lia) asetonitriilissä (6 ml) ja jota pidettiin typpi-atmosfäärin suojaamana, lisättiin di-isopropyylietyyli-.25 amiinia (0,314 ml, 1,8 mmoolia) ja sen jälkeen difenyy- likloorifosfaattia (0,373 ml, 1,9 mmoolia). Reaktio-seosta sekoitettiin 45 minuuttia ja lisättiin tiputtamalla liuos, jossa oli 1-(2-merkaptoetyyli)-4-metyylipyri-diinium-metaanisulfonaattia (0,539, 2,16 mmoolia) aseto- 30 nitriilissä (1,8 ml), ja sen jälkeen di-isopropyyli- etyyliamiinia (0,314 ml, 1,8 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin 0°C:ssa tunnin ajan, laimennettiin kylmällä (0°C) vedellä (24 ml) ja kaadettiin kolonnin (2,5x8,5 cm) yläpäähän, jossa oli valmistettu /u-- 35 bondapak C-18. Eluoimalla kolonni ensin seoksella 25 % -TT- ™ 76801 vettä (100 ml) ja sitten seoksella 50 % asetonitrii-liä - 50 % vettä (100 ml) sopivien fraktioiden kylmä-kuivauksen jälkeen saatiin 0,91 g (83 %) otsikon yhdistettä kellertävänä jauheena; 5 IR (KBr) ^maks: 3700-2800 (OH), 1770 (^-laktaarnin C=0), 1700 (PNB-esterin C=0), 1640 (pyridiinium), 1595 (fenyyli), 1520 (N02), 1340 (N02), 890 cm"1 (n02) ; 1Hmr (DMS0, dg) 1,16 (3H, d, J=6,2 Hz, OtjCHOH) , 2,61 (s, pyridiiniumin CH^), 3,1-3,7 (3H, m, H-6, 10 CH2S), 3,7-4,4 (2H, m, H-5, CHgCHOH), 4,79 (2H, brt, J=6,3 Hz, CH2N+), 5,17 (d, J=4,9 Hz, OH), 5,37 (ABq:n keskus, J=14,l Hz, PNB:n CH2), 6,7-7,4 (10H, m, fenyyli), 7,69 (2H, d, J=8,8 Hz, PNB:n Ho), 8,00 (2H, d, J=6,5 Hz, pyridiiniumin Hm), 8,23 (2H, d, J=8,8 Hz, PNB:n Hm), 15 8,92 (2H, d, J=6,5 Hz, pyridiiniumin Ho); UV <H20)Xmaks: 262 (00835), 311 K 9670) nyi.
Analyysi, laskettu yhdisteelle C^gH^gN^O^gSP.^S^O: C, 56,84; H, 5,17; N, 5,52; S, 4,21; saatu: C, 56,89; H, 5,13; N, 5,19; S, 4,41.
20 D. 3-^2-(1-(4-metyylipyridiinium)etyylitiq?-6^-^1- (R)-hydroksietyyli^-7-okso-l-atsabisyklo- (3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaatti___
OH
25 s104 A^—, /Χ/«θ) j \——4) 1HF, eetteri, J—. n \—/ * tI,h0) μ0-puskuri ° \ - '
COOPNB 2 COO
Liuokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-3-^2-(1-(4-30 metyylipyridiinium)) etyylitici?-6o£-^l- (R) -hydroksietyy- li^-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksy-laatti-difenyylifosfaattia (0,587 g, 0,80 mmoolia) märässä tetrahydrofuraanissa (30 ml), lisättiin eetteriä (30 ml), 77 7 6 8 01 lisättiin eetteriä (30 ml), yksiemäksistä kaliumfosfaatti -natriumhydr oksidi-puskuria (0,15 mol., 14,7 ml, pH 7,22) ja 10 %:ista palladium-puuhiiltä (0,59 g). Saatua seosta hydrattiin 40 psi:n paineessa 23°C:ssa 1,25 5 tuntia. Orgaaninen kerros erotettiin ja uutettiin pus kurilla (2x6 ml). Vesiuutteet yhdistettiin, suodatettiin Celite-patjän läpi, pestiin eetterillä (3 x 20 ml), imettiin pumpulla orgaanisten liuotintähteiden poistamiseksi ja kaadettiin kolonnin (2,5 x 10 cm) yläpäähän, 10 jossa oli valmistettu ^,u-bondapak C-18. Eluoimalla kolonni vedellä ja kylmäkuivaamalla sopivat fraktiot saatiin 0,136 g (49 %) otsikon yhdistettä kellertävänä jauheena; IR (KBr) Vmaks: 3700-3000 (OH), 1770 ψ -laktaamin 15 C=0), 1642 (pyridiinium), 1592 cm ^ (karboksylaatti; 1Hmr (D20) £ : 1,19 (3H, t, J=6,3 Hz, CH3CH0H), 2,59 (3H, s, pyridiiniumin CH-j), 2,84 (d, J=9,l Hz, H-4), 2,90 (d, J=9,1 Hz, H-4), 3,0-3,6 (3H, m, CH2S, H-6), 3,86 (dd, J=9,1 Hz, J=2,6 Hz, H-5) , 4,12 (m, CH-jCHOH) , 20 4,5-4,9 (CH2N+, H0D:n peittämä), 7,80 (2H, d, J=6,6
Hz, pyridiiniumin Hm), 8,58 (2H, d, J=6,6 Hz, pyridiiniumin Ho) ; UV (H20) Xmaks- 256 (C 5510) , 262 (¢ 5360), 296 (£ 7050) m; 3 +20,8° (C 0,48, H20); t1/2 = 12,8 25 tuntia (mitattu konsentraation ollessa 10-4 mol. fos faattipuskurissa pH 7,4 36,8°C:ssa).
78 76301
Esimerkki 9 (5R) -3-/*2- (4-metyylitiopyridiinio) -etyylitiq?-(6S) -/"(lR) -hydroksietyyli,7-7-okso-l-atsabisyklo- /3,2,Q7hept-2-eeni-2-karboksylaatin valmistus_ 5
Vrv· 10 o © C02 A. 4-metyylitiopyridiini* 15
/—\ 1) Mel/EtOH
77777-- O*5"6 20 4-merkaptopyridiini (5,55 g, 50,0 mmoolia;
Aldrich) liuotettiin kiehuvaan absoluuttiseen etanoliin (50 ml). Liukenematon aine poistettiin suodatta-25 maila Celite'n läpi. Suodosta lämmitettiin uudelleen liuottamista varten, ja sen jäähdyttyä noin 50°C:seen lisättiin kerralla metyylijodidia (3,17 ml, 51,0 mmoolia; Aldrich). Seos jäähdytettiin kiteyttämistä varten. Suodattamalla kiinteä aine erilleen saatiin 6,77 g 30 (26,7 mmoolia, saanto 53,5 %) otsikon yhdistettä hydro- jodidina; 1Hmr (D10) £: 2,70 (3H, s, -SCH3) ja 7,65-7,77-8,35- 8,48 ppm (4H, Ä2B2~tyyppiä, aromaattinen Hs);
IR (nujoli) 1615, 1585 (atomaattinen) ja 780 cm X
11 35 79 76801 UV (H20) ^maks: 227 (£ 2,02 x 104) ja 298 nm (£ 1,64 x 104).
Hydrojodidi (6,33 g, 25,0 nunoolla) liuotettiin HjOshon (40 ml) ja liukenematon aine poistettiin ja pes-5 tiin IVOille (10 ml). Suodokseen lisättiin 0-5°:ssa
NaOH-tabletti (5 g) ja uutettiin Et20:lla (3 x 25 ml), kyllästeämällä vesikerros NaClrlla. Yhdistetyt orgaaniset uutteet pestiin suolaliuoksella (2 x), kuivattiin (MgSO^) ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin 2,92 g 10 (23,4 mmoolia, kokonaissaanto 50 %) otsikon yhdistettä öljynä; 1Hmr (CDCl3) £: 2,48 (3H, s, -SCH3) ja 7,03-7,13-8,38- 8,48 ppm (4H, A2B2“tyyppiä, aromaattinen Hs); IR (kalvo) Vmaks: 1580 ja 800 cm ^ *Tämän yhdisteen valmistuksesta on ilmoitettu artikke lissa King ja Ware, J. Chem. Soc., 873 (1939). Noudatettiin tässä viitteessä selostettua menetelmää.
B. 4-metyylitio-N-(2-merkaptoetyyli)pyridiinium- metaanisulfonaatti 20 ' ---- ^ “ v · ©- 3 3 .
25 ' 4-metyylitiopyridiiniä (2,75 g, 22,0 mmoolia) lisättiin hitaasti metaanisulfonihappoon* (0,65 ml, 10,5 mmoolia) jäähdyttämällä jäähauteessa, Tähän kiinteään aineeseen lisättiin etyleenisulfidia* (0,66 ml, 30 11,0 mmoolia, Aldrich) ja seosta lämmitettiin 50-60°C:ssa 21 tuntia. Reaktion edistyessä kiinteä aine meni liuokseen. Jäähdyttämisen jälkeen reaktioseos liuotettiin H20:hon (5 ml) ja pestiin Et20:lla (5x4 ml). Samea vesikerros suodatettiin Celite'n läpi ja suodos puhdis-35 tettiin käänteisfaasi-silikageeli-kolonnissa kromatogra- so 76801 fioimalla (C^g micro bondapack 10 g) eluoimalla H20:lla. Koottiin 10 ml:n fraktioita. Fraktiot 2 ja 3 yhdistettiin ja puhdistettiin uudelleen käänteisfaasi-kolonnis-sa. Fraktiosta 2 saatiin 1,258 g (4,48 mmoolia, saan-5 to 42,6 %) otsikon yhdistettä viskoosisena öljynä; 1Hmr (DMSO-dg, CFT-20) 2,32 (3H, s, MeSOg®), 2,72 (3H, s, -SMe), 2,68 (1H, m, SH), 2,9-3,2 (3H, m, -CHjS-), 4,59 (2H, t,J=6,4 Hz, -CH2N®), 7,97 (2H, "d", J=7,2 Hz, aromaattinen Hs) ja 8,72 ppm (2H, "d", J=7,2 Hz, aro-10 maattinen Hs); IR (pelkkä)majis: 1630, 1200 (br, -SO^®) , 785 ja 770 cm-1.
*Nämä reagenssit tislattiin ennen käyttöä.
C. (5R)-p-nitrobentsyyli-3-/2-(4-metyylitiopyri- 15 diino)etyylitiq7-(6S) -/"(IR) -hydroksietyyli7-7- okso-l-atsabisyklo/’S ,2 ,(j7hept-2-eeni-2-karboksylaatti-kloridi___ °H OH __.
/···-.--r^\ ' 1) ΟΙΡΟ(Οφ) , x**._,--V SM· Π r° ——* ΓΤ y~% vt/ σ'-"-f cp
e02rKS MsP COjPNB
Liuokseen, jossa oli (5R)-p-nitrobentsyyli-3,7-25 diokso- (6S) -/11R) -hydroksietyyli7-l-atsabisyklo/3,2,q7~ heptaani-(2R)-karboksylaattia (475 mg, 1,36 mmoolia) ja di-isopropyylietyyliamiinia (0,24 ml, 1,4 mmoolia) CHgCNrssa (5 ml), lisättiin 0-5°C:ssa typpiatmosfäärin suojaamana difenyylikloorifosfaattia (0,29 ml, 1,41 mmoo-30 lia). Seosta sekoitettiin 0-5°C:ssa 30 minuuttia. Tähän seokseen lisättiin öljyinen suspensio, jossa oli 4-me-tyylitio-N-(2-merkaptoetyyli)pyridiinium-metaanisulfo-naattia (678 mg, 1,45 mmoolia; puhtaus 60 %) CHgCN:ssä (1,5 ml) ja sen jälkeen di-isopropyylietyyliamiinia 35 (0,24 ml, 1,4 mmoolia). Seosta sekoitettiin 0-5°C:ssa tunnin ajan. Heti emäksen lisäämisen jälkeen muodostui
II
ei 76801 kellertävää sakkaa. Sakka suodatettiin erilleen ja pestiin kylmällä CH^CNslla (3 ml), jolloin saatiin 314 mg kellertävää kiinteätä ainetta. Tätä trituroitiin seoksessa, jossa oli 10 % metanolia H20:ssa (5 ml), jolloin 5 saatiin 341 mg (0,618 mmoolia, saanto 45,4 %) otsikon yhdistettä valkeina kiteinä; sp. 118-120°C; 1Hmr (DMSO-dg, CFT-20) g: 1,16 (3H, d, J=6,l Hz, l'-CH3), 2,72 (3H, s, -CH-j), 3,1-3,7 (5H, m), 3,7-4,3 (2H, m), 4,71 (2H, t, J=6,3 Hz, -CH2N®), 5,15 (1H, 10 d, J=4,9 Hz, OH), 5,20-5,35-5,40-5,55 (2H, ABq, C02CH2-Ar), 7,70 (2H, "d” J=8,8 Hz, nitrofenyyli-Hs), 7,97 (2H, "d", J=7,0 Hz, pyridiinio-Hs), 8,25 (2H, "d", J=8,8 Hz, nitrofenyyli-Hs), ja 8,76 ppm (2H, "d", J=7,l Hz, pyridiinio-Hs); 15 IR (nujoli) 9maks: 3250 (0H) ' 1775 -laktaami), 1700 (esteri) ja 1625 cm 1 (pyridiinio) ; UV (abs. EtOH) ^maks*· 308 nm (¢4,47 x 10); #>23° +24,8 (c 0,5, Me OH) .
Analyysi, lasketty yhdisteelle C24H26N306C1.H20: 20 C, 50,56; H, 4,95; N, 7,37; saatu: C, 50,63; H, 4,72; n, 6,89.
D. (5R)-3-^2-(4-metyylitiopyridiinio)etyylitio7- (6S)~C(1R)-hydroksietyyli7-7-okso-l-atsabisyklo- (3,2,07hept-2-eeni-2-karboksvlaatti__ 25 OH OH _ 30 2 2 (5R)-p-nitrobentsyyli-3-^2-(4-metyylitiopyridii-nio)etyylitiq/-(6S) -£*(1R) -hydroksietyyl47~7-okso-l-atsabisyklo/*3,2, O^hept—2 -eeni—2— karboksy 1 aa t tik lori -di (380 mg, 0,688 mmoolia) liuotettiin THF:iin (31,5 ml) 35 ja pH 7,40-fosfaattipuskuriin (31,5 ml; 0,05 mol. Fisher) 82 7 6 3 01 ja laimennettiin EHOilla (31,5 ml). Tämä liuos sekoitettiin 10 %:isen Pd-C:n (370 mg, Engelhard) kanssa ja hydrat-tiin 35 psi:n paineessa Parr'in ravistimessa huoneen lämpötilassa tunnin ajan. Vesikerros suodatettiin 5 Celite'n läpi katalyytin poistamiseksi ja pestiin IVOilla (2x5 ml). Suodos ja pesunesteet yhdistettiin ja pestiin Et20:lla (2 x 30 ml). Vesikerrosta imettiin pumpulla orgaanisten liuottimien poistamiseksi ja puhdistettiin käänteisfaasi-kolonnissa kromatograafisesti 10 (^18 micr°b°ndaPak' 13 g, Waters Associates) eluoimalla
HjOslla. Fraktiot, joiden uv-absorptio oli kohdalla 307 nm, kerättiin talteen (noin 1 litra) ja kylmä-kuivattiin, jolloin saatiin 127 mg (0,334 mmoolia, saanto 48,5 %) otsikon yhdistettä kellertävänä jauheena; 15 1Hmr (D20, CFT-20) £ : 1,20 (3H, d, J=6,4 Hz, l'-CH-j), 2,64 (3H, s, -SCH3), 2,81 (2H, m, -SCH2-), 3,19 (1H, dd, J6_1=6,l Hz, J6_5=2,6 Hz, 6-H), 3,32 (2H, dd, J=ll Hz, J=5,5 Hz, 4-Hs), 3,92 (1H, dt, J=9,2 Hz, t5_6=2,6 Hs» 5“h>' tlR, m, 1'-H), 4,61 (2H, t, 20 J=5,9 Hz, -CH2N®), 7,70 (2H, "d", J=7,l Hz, aromaatti nen Hs), ja 8,40 ppm (2H, "d", J=7,l Hz, aromaattinen Hs); IR (KBr, levy) ^makss 3400 (OH), 1750 (A -laktaami) , 1630 (pyridiinium) ja 1590 cm"*^ (karboksylaatti; 25 UV (H20) ^maks: 231 (i 9800) ja 307 nm (£25000); (d)^3°+ 3,14 (c 0,5, H20).
Il 83 7 6 8 01
Esimerkki 10 3-^2-(3-metoksi-l-pyridiinium) etyylitig^-6o6“ ' - (R) -hydroksietyyl4.?"7-okso-l-atsabisyklo- (3,2,0)hept-2-eenl-2-karboksylaatin valmistus 5 'oh A. 1-(2-merkaptoetyyli)-3-metoksipyridiinium- metaanisulfonaattl __ _ 15 _ _ hs£> --Δ
Esijäähdytettyyn (5°C) 3-metoksipyridiiniin 20 (698 mg, 6,4 mmoolia) lisättiin tiputtamalla metaani- sulfonihappoa (0,216 ml, 3,05 mmoolia) ja etyleeni-sulfidia (0,19 ml, 3,2 mmoolia). Seosta lämmitettiin sitten 60°C:ssa 18 tuntia, jäähdytettiin 20°C:seen, laimennettiin vedellä (10 ml) ja pestiin eetterillä 25 (3 x 10 ml). Vesifaasia imettiin suurtyhjöpumpulla 15 mi nuuttia ja kaadettiin C^g-käänteisfaasi-kolonniin. Otsikon yhdiste eluoitiin vedellä. Sopivat fraktiot yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin suurtyhjössä, jolloin saatiin haluttua tiolia (61,6 mg, saanto 76,3 %); 30 IR (CH2C12) V maks: 2550 (w' SH) 1620' 1600 * 1585 cm”1 (m, aromaattinen); 1Hmr (DHS0 dg) S·. 8,90-7,90 (4H, m, aromaattinen C-H) , 4,72 (2H, t, J=6,6 Hz, CH2N+), 4,01 (3H, s, OCH3), 3,5-3,0 (m, peittynyt CH2S), 2,66 (1H, dd, J=9,5 Hz, 35 J=7,5 Hz, SH) ja 2,31 ppm (3H, s, CH3S03).
84 7 6 8 01 B. Para-nitrobentsyyli-3-^2-(3-metoksi-l-pyridii- niumkloridDetyylitic^-e^^i' - (R) -hydroksietyyli^-7-okso-l-atsabisyklo (3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksy-laatti_ _ ^___ 5 f l)EtNK)2 " ' <f ' cP OMe CO PNB . φ—/ MOO CO PN3 10 · 4> EtNtK)2
Kylmää (0°C) liuosta, jossa oli p-nitrobentsyy-li-6oir^l1 (R) -hydroksietyylj^-3,7-diokso-l-atsabisyklo- (3,2,0)heptaani-2-karboksylaattia (1,04 g, 3 mmoolia) 15 asetonitriilissä (12 ml), käsiteltiin lisäämällä tiput tamalla di-isopropyylietyyliamiinia (0,63 ml, 3,6 mmoolia) ja difenyylikloorifosfaattia (0,75 ml, 36 mmoolia) ja sekoitettiin 0°C:ssa 30 minuuttia. Saatua enolifos-faattia käsiteltiin 1-(2-merkaptoetyyli)-3-metoksipyri-20 dinium-metaanisulfonaatin kanssa (1,14 g, 4,30 mmoolia) CH^CNsssa (7 ml), ja di-isopropyylietyyliamiinin (0,63 ml, 4,30 mmoolia) kanssa, sekoitettiin 30 minuuttia, ja jäähdytettiin -10°C:ssa 30 minuuttia. Seoksesta erilleen saostunut kiinteä aine suodatettiin erilleen, pestiin 25 kylmällä asetonitriilillä (2 ml) ja kuivattiin, jolloin saatiin otsikon yhdistettä (1,32 g, saanto 82 %); IR (nujoli) ^maks: 3320 (m' 0H) ' 1780' 1765 <s' / “lataamin C=0), 1700, 1695 (m, esterin C=0) ja 1520 cm ^ (s, N02); 30 ^Hmr (DMS0 dg) g s 9,01 (1H, bs, H-3 aromaattinen), 7,75 (1H, bd, J=5,4 Hz, H-6 aromaattinen), 8,35-7,95 (4H, m, H-aromaattinen), 7,70 (2H, d, J=7,7 Hz, H-aro-maattinen), 5,37 (2H, ABq:n keskus, J=13 Hz, CHjPNB), 5,17 (1H, d, J=4,9 Hz, OH), 4,87 (2H, t, J=6,3, CHj-N*), 35 4,35-3,75 (2H, m, H-5 ja H-l' ), 4,00 (3H, s, 0CH3), 11 85 76801 3/56 (t:n osa, J=6,3 Hz, C^S) , 3,5-3,20 (3H, m, H-6, H-3) ja 1,16 ppm (3H, d, J=6,l Hz, CH3CHO).
C. 3-^2- (3-metoksi-l-pyridiinium)etyyliti<j?-6o4-£L' -(R) -hydroksietyyli7-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)-5 hept-2-eenl-2-karboksylaatti __ t OH . f OMe C02PN3 2
Liuosta, joss oli para-nitrobentsyyli-3-^2-(3-15 metoksi-l-pyridiiniumkloridi) etyyli tio7“6ok*^l '-(R)- hydroksietyyli7-7-okso-1-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni- 2-karboksylaattia (600 mg, 1,12 mmoolia) THFsssa (25 ml), eetteriä (25 ml) ja pH 7,4-fosfaattipuskuria (0,1 mol.
25 ml), hydrattiin Parr'in ravistimessa 20 %:isella 20 Pd/C:llä (1,1 g) tunnin ajan 40 psi:n paineessa. Seos laimennettiin eetterillä ja vesifaasi suodatettiin kovetetun suodatinpaperin #52 läpi. Vesikerros pestiin eetterillä (2 x 20 ml), imettiin vakuumipumpulla ja kaadettiin silikageelikäänteisfaasi-kolonniin. Otsikon 25 yhdiste eluoitiin vedellä, jossa oli 2 ja 5 % asetonit- riiliä. Sopivat fraktiot yhdistettiin ja kylmäkuivat-tiin, jolloin saatiin keltaista kiinteätä ainetta, joka puhdistettiin uudelleen hplc-kromatografiointia käyttäen, jolloin saatiin peheemikarboksylaattia (150 mg, 38 %); 30 IR (nujoli) 1750 (s, ^-laktaamin C=9 ja 1580 cm ^ (s, karboksylaatti; ^Hmr ^20)^: 8,55-8,30 (2H, m, H-2, H-6 aromaattinen), 7,17-7,75 (2H, m, H-3, H-4 aromaattinen), 4,77 (2H, t, J=5,9 Hz, CH2N®), 4,10 (1H, osa 5:stä viivasta, 35 J=6,3 Hz, H-l'), 3,97 (3H, s, 0CH3), 3,85, 3,82 (2 vii vaa, dt:n osa, J=2,6 Hi, H-5:n osa) 3,42 (2H, t, J=5,9 86 7 6801
Hz, CH2-S), 3,25 (1H, dd, J=6,l Hz, J=2,6 Hz, H-6), 2,99-2,60 (2H, 6 viivaa, H-3:n osa) ja 1,20 ppm (3H, d, J=6,4 Hz, CH3); UV (H20, c 0,05) ^maks: 290 (£ 10517), 223 (£ 6643); 5 Tl/2 ^,1 mo1·' PH fosfaattipuskuri, 37°C) 20 tuntia.
Esimerkki 11 (5R,6S)-3- Φ -O-metyylitiopyridiinioJetyylJ^-tiq7~6-^l-(R)-hydroksietyyli7“7-okso-l-atsabi-syklo^3,2,0,/hept-2-eeni-2-karboksylaatin 10 valmistus ____ · SMe 15 A. 3-metyylitio-l-(2-merkaptoetyyli)pyridiinium- kloridi_____ _ _ ,SMe + Bd * A -V αΘ
Liuokseen, jossa oli 3-metyylitiopyridiiniä^ 25 (2,00 g, 0,016 moolia) 10 ml:ssa eetteriä, lisättiin 15 ml 1-norm. HCl:a ja seosta ravisteltiin. Vesifaasi eroitettiin, pestiin 10 ml:11a eetteriä ja haihdutettiin sitten kuiviin. Jälelle jäänyt hydrokloridi kuivattiin sitten vakuumissa (P205), jolloin saatiin valkeata 30 kiinteätä ainetta. Tähän kiinteään hydrokloridiin lisät tiin 3-metyylitiopyridiiniä (1,88 g, 0,015 moolia) ja etyleenisulfidia (0,89 ml, 0,015 moolia) ja saatua seosta lämmitettiin (öljyhaude) 55-65°C:ssa N2:n suojaamana 15 tuntia. Tällöin saatiin lievästi sameata öljyä, 35 joka liuotettiin 125 ml:aan H20:ta ja pestiin CH2Cl2:ira.
Vesiliuos konsentroitiin noin 25 ml:ksi ja sitten lisättiin muutama tippa asetonitriiliä seoksen homogenoimisek-
II
87 76801 si. Saatu vesiliuos pantiin C^g-käänteisfaasi-kolonniin. Eluoimalla 1^0:11a ja haihduttamalla sen jälkeen kuiviin asianmukaiset fraktiot saatiin tuotetta (2,66 g, 80 %) vaaleankeltaisena viskoosisena öljynä.
5 IR (kalvo) 9maks: (br, -SH) cm 1 Hnmr (Dg-DMS0+D20) £: 8,88-7,88 (m, 4H, aromaattinen), 4,70 (t, J=6,5Hz, 2H, N-CH2), 3,08 (vino t, J=6,5 Hz, 2H, S-CH2), 2,64 (s, 3H, S-Me).
1) Valmistettu menetelmällä J.A. Zoltewiez ja C. Nisi, 10 J. Org. Chem. 34, 765 (1969).
B. p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-3-/2-(3-metyylitiopy- ridiinio) etyylitiq/-6-/l- (R) -hydroksietyyli,?-7-okso-l-atsabisyklo/3,2, Q/hept-2-eeni-2-karboksy- laatti-kloridi___ 15 DH · OH _>SMe xo.pnb 2 . CO^pnb 25 Liuos, jossa oli p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-6- /1- (R) -hydroksietyylJj7-3,7-diokso-l-atsabisyklo/*3,2,0j-heptaani-2-karboksylaattia (0,522 g, 1,50 mmoolia) 7 mlsssa kuivaa asetonitriiliä, jäähdytettiin 0°C:seen ja sitten lisättiin'tiputtamalla di-isopropyylietyyli-30 amiinia (0,287 ml, 1,65 mmoolia). Saatuun keltaisenrus- keaan liuokseen lisättiin tiputtamalla difenyylikloori-fosfaattia (0,342 ml, 1,65 mmoolia) ja reaktioseosta pidettiin 0°C:ssa 30 minuuttia. Sitten lisättiin di-iso-propyylietyyliamiinia (0,313 ml, 1,80 mmoolia), ja sen 35 m 76801 jälkeen liuos, jossa oli 3-metyylitio-l-(2-merkapto-etyyli)pyridiniumkloridia (0,398 g, 1,80 mmoolia) 0,70 mlrssa kuivaa DMF:a. Noin minuutin kuluttua lisäyksen päättymisestä reaktioseoksesta erottui sakkaa ja jääh-5 dytettäessä edelleen -10°C:ssa 10 minuuttia saatiin kiin teätä oranssinväristä massaa. Tätä kiinteätä ainetta trituroitiin sen jälkeen asetonitriilin kanssa ja jäännös otettiin talteen suodattamalla. Jäännös pestiin ase-tonitriilillä, sitten asetonilla ja lopuksi kuivattiin 10 vakuumissa, jolloin saatiin tuotetta (0,455 g, 55 %) kermanvärisenä kiinteänä aineena. Yhdistetty suodos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin keltaista öljyä, joka liuotettiin tilavuudeltaan minimimäärään asetonit-riiliä ja jäähdytettiin 0°C:ssa 30 minuuttia. Suodat-15 tamalla tämä seos saatiin vielä 0,139 g tuotetta vaa leankeltaisena kiinteänä aineena. Kokonaissaanto oli 0,594 g (72 %).
IR (KBr) ^maks: 3345 (br, -OH), 1770 {fr -laktaamin CO), 1680 (-C02PNB) cm"1; 20 ^'Hnmr (dg-DMS0) 8,98-7,96 (m, 4H, pyridinium aro maattinen), 8,20-7,65 (ABq, J=7,0 Hz, 4H, PNB aromaattinen), 5,53-4,80 (m, 4H), 4,3-3,7 (m, 2H), 3,6-3,25 (m, 6H), 2,66 (s, 3H, S-Me), 1,16 (d, J=6,0 Hz, 3H, CHMe).
25 tl 89 76801 C. (5R,6S)-3-^2-(3-metyylitiopyridiinio)etyylitiq7- 6-^1-(R)-hydroksietyyli^-7-okso-l-atsabisyklo-/3 #2#0j'hept-2-eeni-*2^~karboksylaatti_ 5 OH ^SMe
JI
J·—^λ CO V
10 0 \o2psb
Seokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-3-ζ2-(3-metyylitio-pyridiinio)etyylitio7-6-£L-(R)-hydroksi-etyyli7“7-okso-l-atsabisyklo/3,2,0/hept-2-eeni-2-karbok-sylaatti-kloridia (0,551 g, 1,0 mmoolia) ja 10 %:ista palladium-puuhiiltä (0,55 g) 25 ml:ssa fosfaattipuskuria (0,05 mol., pH 7,4), lisättiin 5 ml THFsa ja 25 ml eetteriä. Tätä seosta hydrattiin (Parr) 40 psi:n paineessa tunnin ajan. Sitten reaktioseos suodatettiin 20 Celite'n läpi ja suodatinkakku pestiin H20:lla ja eet terillä. Vesifaasi erotettiin ja pestiin vielä eetterillä (3 x). Sen jälkeen kun jälelle jääneet orgaaniset liuottimet oli poistettu vakuumissa vesiliuos jäähdytettiin 0°C:seen ja pH säädettiin kyllästetyllä NaHCO^rn 25 vesiliuoksella arvoon 7,0. Tämä liuos pantiin heti C^g-käänteisfaasi-kolonniin. Eluoimalla H20:lla ja kyl-mäkuivaamalla sen jälkeen asianmukaiset fraktiot saatiin 0,25 g kirkkaankeltaista kiinteätä ainetta. Tämä aine puhdistettiin uudelleen käänteisfaasi-hplc-kroma-30 tografiaa soveltaen, jolloin saatiin tuotetta (0,210 g, 55 %) vaaleankeltaisena kiinteänä aineena.
IR (KBr) ^maksi 3400 (br, -OH), 1755 -laktaamin CO), 1590 (-C0·,-) cm 1 z
Hnrar (DjO) 8,60-7,76 (m, 4H, aromaattinen), 4,76 35 (t, J=5,8 Hz, 2H, N-CH2), 4,13 (q:n d, J=J'=6,3 Hz, 90 7 6801 1H, H-l*), 3,95 (t:n d), J=9,0 Hz, J'= 2,8 Hz, 1H, H-5), 3,45-2,75 (m, 5H), 2,59 (s, 3H, S-Me), 1,20 (d, J=6,4 Hz, 3H, CHMe); UV (H20) \maks: 296 (6 8509), 273 (£13005), 231 5 (£ 11576) run; t-^2 (pH 7,4, 36,8°C) 20 tuntia.
Esimerkki 12 3-^2- (1-(2,6-dimetyylipyridiinium)etyylitiq7“6«£· (l-(R) -hydroksietyyli,7“7-okso-l-atsabisyklo- (3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaatin valmistus 10 CH-/ \ 15 coo” CH·} A. 1-(2-merkaptoetyyli)-2,6-dimetyylipyridiinium- metaanisulfonaatti______ 20 Δ + + MS0H ' * HS \Q/ \VV/ 100*c, 42 h - 25
Seosta, jossa oli 2,6-dimetyylipyridiiniä (19,2 ml, 0,165 moolia) ja metaanisulfonihappoa (3,27 ml, 0,050 moolia) , sekoitettiin 15 minuuttia, käsiteltiin etyleeni-2o sulfidin (4,17 ml, 0,070 moolia) kanssa ja sekoitettiin 100°C;ssa 42 tuntia typpiatmosfäärin suojaamana. 25°C:seen jäähdyttämisen jälkeen reaktioseos laimennettiin eetterillä (45 ml) ja vedellä (30 ml). Kerrokset erotettiin ja orgaaninen kerros uutettiin vedellä (2x5 ml).
35 Vesikerrokset yhdistettiin, suodatettiin Celite-patjän
II
91 76801 läpi, pestiin eetterillä, imettiin pumpulla orgaanisten liuotinjäännösten poistamiseksi ja kaadettiin kolonnin (3,0 x 12 cm) yläpäähän, jossa oli valmistetta ^u-bondapak C-18. Eluoimalla seoksella, jossa oli 3 % 5 asetonitriiliä ja 97 % vettä saatiin, sopivien frakti oiden kylmäkuivauksen jälkeen, 2,5 g epäpuhdasta otsikon yhdistettä siirappina. Se puhdistettiin uudelleen 0,90 g (7 %) otsikon yhdistettä.
IR (kalvo) \)maks: 2520 (SH), 1640 ja 1625 (pyridinium) , 10 1585, 1490, 1200 cm ^ (sulfonaatti); 1Hmr (DMSO-d^ + d20)g : 2,36 (3H, s, CH3S03"), 4,62 (2H, m, CH2N ), 7,74 (2H, m, pyridiiniumin Hm), 8,24 (1H, m, pyridiiniumin Hp); W (H20) *maks‘ 272 (i 40801 “Λ' 15 B. Paranitrobentsyyli-3-^2-(1-(2,6-dimetyylipyri- diniinium) ) etyylitiq7-6o4-/l- (R) -hydroksi- etyyli7-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni- karboksylaatti-difenyylifosfaatti ^_____
OH
20 J 1) NEt(iPr)2 PH \_ 2) Ci?(OPhlp· '"'(- 0 3) O · / 9 _ 'COOPNB / C00PN3 (PhO^Pcf 4) NEt(iPr)2 25
Kylmään (0°C) liuokseen, jossa oli p-nitrobent-syyli-6o(-^l- (R) -hydroksietyyli7-3,7-diokso-l-atsabisyk-lo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaattia (0,658 g, 1,89 mmoolia) asetonitriilissä (6 ml), jota pidettiin typpi-30 atmosfäärin suojaamana, lisättiin di-isopropyylietyyli- amiinia (0,394 ml, 2,26 mmoolia) ja difenyylikloorifos-faattia (0,468 ml, 2,26 mmoolia). Reaktioseosta sekoitettiin 30 minuuttia ja sitä käsiteltiin liuoksen kanssa, jossa oli 1-(2-merkaptoetyyli)-2,6-dimetyyli-35 pyridiinium-metaanisulfonaattia (0,720 g, 2,73 mmoolia) 92 7 6 8 01 asetonitriilissä (3 ml), ja sen jälkeen di-isopropyyli-etyyliamiinin (0,394 ml, 2,26 mmoölia) kanssa. Reak-tioseosta sekoitettiin 0°C:ssa 2 tuntia, laimennettiin kylmällä (0°C) vedellä (27 ml) ja kaadettiin kolon-5 nin (2,5 x 9,0 cm) yläpäähän, jossa oli valmistetta ^u-bondapak C-18. Eluoimalla asetonitriili-vesi-seoksin ja kylmäkuivaamalla sopivat fraktiot saatiin 0,92 g (65 %) otsikon yhdistettä; IR (KBr) 3700-3000 (OH), 1765 (/J-laktaamin 10 C=0) , 1690 (PNB-esterin C=0), 1620 (pyridiinium) , 1590 (fenyyli), 1517 (N02), 1330 (N02), 880 cm"1 (N02); 1Hmr (DMS0, dg) <$ ' 1>15 OH, d, J=6,2 Hz, CH3CH0H) , 2,7-3,7 (11H, CH2S, pyridiiniumin 2-CH3, H-4, H-6), 15 3,7-4,4 (2H, CH3CH0H, H-5), 4,7 (2H, m, CH2N+), 5,14 (1H, d, J=4,5 Hz, Hz, OH), 5,37 (ABq:n keskus, J=13,2 Hz, PNB:n CH2), 6,7-7,5 (10H, m, fenyyli), 7,5-8,7 (7H, pyridiinium, PNB:n H:t); UV (H20)^ma]<s: 274 (£14150), 319 (£ 9445) iryu.
C. 3-^2-(1-(2,6-dimetyylipyridiinium))etyylitiq^- —(R)-hydroksietyyli7-7-okso-l-atsabisyklo- (3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaatti_ \ OH ' .
2 5 f 10% M/C'H2 Λ ^ /7=Z\ "Ί-1—\ /v/n:00) THE, eet- * "Γ~η +
J_teri, puskuri /T""S
^"^COOPNB (Ph0)2^0“ COO
30 Liuokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-3-^"2- (1-(2,6-dimetyylipyridiinium) ) etyylitiq7-6e^-£l - (R) -hydroksietyyli^-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaatti-difenyylifosfaattia (0,80 g, 1,07 mmoolia) märässä tetrahydrofuraanissa (42 ml), 35 lisättiin eetteriä (42 ml), yksiemäksistä kaliumfosfaat- tia-natriumhydroksidi-puskuria (0,15 mol. pH 7,22, 21 ml) 93 76801 ja 10 %;ista palladium-puuhiiltä (0,80 g). Saatua seosta hydrattiin tunnin ajan 40 psi:n paineessa 23°C:ssa ja suodatettiin Celite-patjän läpi. Kerrokset erotettiin ja orgaaninen kerros uutettiin puskurilla 5 (3 x 8 ml). Vesifaasit yhdistettiin, pestiin eetteril lä (50 ml), imettiin pumpulla orgaanisen liuotintäh-teen poistamiseksi ja kaadettiin kolonnin (3,0 x 10,2 cm) yläpäähän, jossa oli valmistettu ^u-bondapak C-18. Eluoimalla kolonni seoksella, jossa oli 5 % asetonit-10 riiliä ja 95 % vettä ja kylmäkuivaamalla sopivat frak tiot saatiin otsikon yhdistettä 0,246 g (63 %) kellertävänä jauheena; IR (KBr) maks: 3700-2800 (OH), 1750 (yfc-laktaamin C=0), 1620 (pyridiinium), 1585 cm-^ (karboksylaatti; 15 1Hmr (D20) g: 1,23 (3H, d, J=6,4 Hz, CH3CH0H) , 2,5-3,5 (11H, H-4, H-6, CH2S, pyridiiniumin 2CH3), 3,8-4,4 (2H, CHjCHOH, H-5), 4,5-4,9 (CH2N+, H0D), 7,64 ja 7,74 (2H, A2B-systeemin A-osa, pyridiiniumin Hm), 7,07, 8,16, 8,18 ja 8,27 (1H, A2B-systeemin B-osa, pyridii-20 niumin Hp); UV (H20) ^maks: 277 (£ 9733), 300 (¢ 8271) nyu; (cijl3 +50,7° (C 0,48, H20).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C18H22N2°4S*1,5 H20: C, 55,51; H, 6,47; N, 7,19; 25 saatu: C, 55,14; H, 6,23; N, 6,46.
94 7 6 3 01
Esimerkki 13 (5R,6S)-3-^2-(2-metyylitio-3-metyyli-imidatsolia) etyyli-tio7”6-/l·· (R) -hydroksietyyli^-7-okso-l-atsabisyklo/3,2,07hept-2-eeni-2-karboksylaatin 5 valmistus__ SMe'
0H T
Λ-X\ ./Oh Λ - m S
" JT, 0 >02e A. 2-metyylitio-3-metyyli-l-(2-merkaptoetyyli)imidat- solium-trifluorimetaanisulfonaatti --SMe 15 1 j-H S 9 \ |\ + CF3S03H + ΖΛ _.) HSCH2CH2 N N-Me
\N X^SMe \—J
I CF.SO,
Me 3 3 20 Trifluorimetaanisulfonihappoa (1,38 ml, 0,015 moolia) lisättiin tiputtamalla 2-metyylitio-l-metyyli-imidatsoliin^ (4,0 g, 0,03 moolia) 0°C:ssa N2:n suojaamana. Sitten lisättiin etyleenisulfidia (0,9 ml, 0,015 moolia) ja seosta lämmitettiin 55°C:ssa N2:n 25 suojaamana 24 tuntia. Reaktioseosta trituroitiin eet terin kanssa (3 x) ja jäännös liuotettiin asetoniin, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Täten saatiin tuotetta (4,2 g, 82 %) puolikiteisenä kiinteänä aineena, jota käytettiin sellaisenaan enempää puhdistamatta.
30 Ir (kalvo) 2550 (w, sh) cm
Hnmr (dg-asetoni) 7,97 (s, 2H), 4,66 (t, J=7 Hz, 2H, metyleeni), 4,17 (s, 3H, N-Me), 3,20 (t:n d, J=7 Hz, 1) Valmistettu A. Wohl'in ja W. Marckwald'in mukaisesti, 35 Chem. Ber. 22 1353 (1889) .
Il 95 7 6 8 01 2H, metyleeni), 2,72 (s, 3H, S-Me), 2,20 (t, J=9 Hz, 1H, -SH).
B. p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-3-/2-(2-metyylitio-3- metyyli-imidatsolo) -etyylitic^-e-^O.- (R) -hydroksi-5 etyyli^-T-okso-l-atsabisyklo^ ,2,0/hept-2-eeni-2- karboksylaatti-difenyylifosfaatti_ SMe OH A.
}"\—r^\ Λ—N"Me i° 7 I V° —$ n o i N'^Y (φθ) PO® o C0oPNB · υ C0„?NB Y 2 £ £
Liuokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-6-15 ^1-(R)-hydroksietyyl^7-3,7-diokso-l-atsabisyklo/3,2,0/- heptaani-2-karboksylaattia (1,40 g, 4,0 nimoolia) 50 ml:ssa kuivaa asetonitriiliä 0°C:ssa ^in suojaaman, lisättiin tiputtamalla di-isopropyylietyyliamiinia (0,76 ml, 4,4 mmoolia) ja sen jälkeen difenyylikloorifosfaattia (0,91 ml, 20 4,1 mmoolia). Sen jälkeen kun reaktioseosta oli sekoitet tu huoneen lämpötilassa tunnin ajan, lisättiin di-isopropyylietyyliamiinia (0,76 ml, 4,4 mmoolia) ja sitten lisättiin tiputtamalla liuos, jossa oli 2-metyylitio-3-metyyli-1-(2-merkaptoetyyli)-imidatsolium-trifluorime-25 taanisulfonaattia (2,0 g, 5,9 mmoolia) 5 mlsssa aseto- nitriiliä. Reaktioseosta pidettiin huoneen lämpötilassa 1,5 tuntia ja sitten haihdutettiin kuiviin vakuumissa, jolloin saatiin Hartsia. Tämä hartsi liuotettiin H2O:hon ja pantiin C^g-käänteisfaasi-kolonniin. Eluoimalla H20:lla, 30 sitten 20 %:isella asetonitriili-^O-seoksella ja lopuk si 30 %:isella asetonitriili-H20-seoksella, ja kylmä-kuivaamalla sen jälkeen sopivat fraktiot, saatiin tuotetta (0,90 g, 30 %) vaaleankeltaisena kiinteänä aineena.
IR (KBr) ^maksJ 3380 (br, OH), 1770 (/>-laktaami CO) cm-1 ; ^ ^Hnmr (dg-asetoni) £: 8,35 (br s, 1H), 8,24, 7,78 (AB q, 96 7 6 8 01 J=8,8 Hz, 4H, aromaattinen), 7,89 (br s, 1H), 7,25-6,91 (m, 10H, difenyylifosfaatti), 5,50, 5,25 (ABq, J=12 Hz, 2H, bentsyylinen), 4,75-4,27 (m, 3H), 4,03 (s, 3H, N-Me), 4,15-2,75 (m, 8H), 2,53 (s, 3H, S-Me), 1,22 5 (d, J=6,2 Hz, 3H, -CHMe).
C. (5R,6S)-3-^2-(2-metyylitio-3-metyyli-imidatsolio)- etyylitio7-6-/l-(R)-hydroksietyyli7-7-okso-l-atsabisyklo/3,2,0t7hept-2-eeni-2-karboksylaattl 10 OH OH ^Me ^πΓ\_8^οι A-h.
i— 8 e—:’ i— W
0 ( (t)0) P0% 0 Q
15 C02?KB C02
Liuokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-3-& - (2-metyylitio-3-metyyli-imidatsolio)etyylitio7-6-2q ^1- (R) -hydroksietyyli,?-7-okso-l-atsabisyklq/3,2, 0,/hept- 2-eeni-2-karboksylaatti-difenyylifosfaattia (1,20 g, 1,56 mmoolia) seoksessa, jossa oli 70 ml THF:a, 70 ml eetteriä ja 31 ml fosfaattipuskuria (0,05 mol. pH 7,4), lisättiin 1,2 g 10 %:ista palladium-puuhiiltä. Tätä seosta 25 hydrattiin (Parr) 35 psi:n paineessa 55 minuuttia. Sit ten reaktioseos suodatettiin Celite'n läpi ja suodatin-kakku pestiin ^Oslla ja eetterillä. Vesifaasi erotettiin, jäähdytettiin 0°C:seen ja pH säädettiin arvoon 7,0 kyllästetyllä NaHCO^jn vesiliuoksella. Sen jälkeen kun 30 jälellä olevat orgaaniset liuottimet oli poistettu va- kuumissa, vesiliuos pantiin C^g-käänteisfaasi-kolonniin. Eluoimalla H20:lla ja sitten 8 %:isella asetonitriili-H20-seoksella ja kylmäkuivaamalla sen jälkeen asianmukaiset fraktiot, saatiin 0,25 g kiinteätä ainetta. Tämä 35 aine puhdistettiin uudelleen käänteisfaasi-hplc-kroma-
II
97 76801 tografiointia käyttäen, jolloin saatiin tuotetta (0,114 g, 19 %) harmahtavan valkeana kiinteänä aineena; IR (KBr) ^maks: 3420 (OH), 1750 -laktaami CO), 1590 (-C02®) cm“l» 5 1Hnmr (D20) £ ; 7,58 (s, 2H, 4,52 (t, J=6 Hz, 2H), 4,28-3,82 (m, 2H), 3,90 (s, 3H, n-ME), 3,40-2,87 (m, 5H), 2,40 (s, 3H, S-Me), 1,20 (d, J=6,4 Hz, 3H, -CHMe); UV (H20) Xmaks: 297 (i 7572), 262 (£. 6259), 222 (£ 7955) nm.
10 Esimerkki 14 (5R,6S)-3-/2-(3-aminopyridiinio)etyylitio/-6-/l- (R) -hydroksietyyli^-^-okso-l-atsabisyklo-/3,2,o7hept-2-eeni-2-karboksylaatin valmistus
0 ""<<V
A. 3-amino-1-(2-merkaptoetyyli)pyridiiniumkloridi . 20 25 3-aminopyridiiniä (1,50 g, 0,016 mmoolia) liuotettiin 15 ml:aan 1-norm. HCl;n metanoliuosta ja saatu liuos haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin hydrokloridia öljynä. Tähän öljyyn lisättiin 3-aminopyridiiniä (1,32 g, 0,015 mmoolia) ja etyleenisulfidia (0,89 ml, 0,015 mmoo-30 lia) ja saatua seosta lämmitettiin (öljyhaude) 60-65°C:ssa N2:n suojaamana 2 tuntia. Lisättiin vielä toinen ekviva-lenttimäärä etyleenisulfidia (0,89 ml, 0,015 mmoolia) ja lämmittämistä jatkettiin 55-65°C:ssa 65 tuntia. Reaktioseos pestiin CH2Cl2:lla ja liuotettiin sitten 35 H20:hon (25 ml). Vesiliuos pantiin C^g-käänteisfaasi- 98 7 6 3 01 kolonniin, joka eluoitiin H20:lla. Haihduttamalla asianmukaiset fraktiot kuiviin saatiin tuotetta (1,26 g, 44 %) värittömänä viskoosisena öljynä.
IR (kalvo) ^maks: 3180 (NH2) cm-1; 5 'Hnmr (dg-DMSO) 8,19-7,59 (m, 4H, aromaattinen), 4,59 (t, J=6,2 Hz, 2H, N-CH2), 3,5 (brs, 2H, -NH2), 3,20-2,77 (m, 3H).
B. p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-3-(2-(3-aminopyridii- nio)etyylitio)-6-(l-(R)-hydroksietyyli)-7-okso-10 1-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksy- laatti-difenyylifosfaatti__ OH f “ Λ—r~v — y C02?NB tu2 2 20 Liuokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-6- (1-(R)-hydroksietyyli)-3,7-diokso-l-atsabisyklo(3,2,0)-heptaani-2-karboksylaattia (0,696 g, 2,0 mmoolia) 10 ml:ssa kuivaa asetonitriiliä 0°C:ssa N2:n suojaamana, lisättiin tiputtamalla di-isopropyylietyyliamiinia (0,382 ml, 25 2,2 mmoolia) ja sen jälkeen difenyylikloorifosfaat- tia (0,457 ml, 2,2 mmoolia). Kun oli sekoitettu 0°C:ssa 30 minuuttia lisättiin liuos, jossa oli 3-amino-l-(2-mer-kaptoetyyli)pyridiiniumkloridia (0,475 g, 2,5 mmoolia) 1 ml:ssa kuivaa DMFsa, ja sen jälkeen lisää di-isopropyy-30 lietyyliamiinia (0,435 ml, 2,5 mmoolia). Reaktioseosta pidettiin 0°C:ssa 1,5 tuntia ja konsentroitiin sitten kuiviin vakuumissa. Saatu hartsi liuotettiin asetonitrii-li-H20-seokseen (1:1) ja pantiin C^g-käänteisfaasi-ko-lonniin. Eluoimalla H20:lla ja sen jälkeen 20 %:isella 35 asetonitriili-H20-seoksella ja kylmäkuivaamalla tämän li 99 76801 jälkeen asianmukaiset fraktiot saatiin tuotetta (0,730 g, 50 %) beige-värisenä kiinteänä aineena.
IR <KBr> 0maks: 3330 0», 0H>/ 3180 (br, NH2), 1770 (y£-laktaami CO), 1690 (-C02PNB) cm”^; 5 'Hnmr (dg-DMSO) 8,29-7,63 (m, 8H, aromaattinen), 7.2- 6,7 (m, 10H, difenyylifosfaatti), 5,47, 5,18 (ABq, J=14 Hz, 2H, bentsyylinen), 4,73-4,45 (m, 3H), 4.2- 3,8 (m, 1H), 3,6-2,6 (m, 8H), 1,15 (d, J=6,2 Hz, 3H, CHMe).
10 C. (5R,6S)-3-((2-(3-aminopyridiinio)etyyli)tio)-6- 1-(R)-hydroksietyyli)-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)-hept-2-eenl-2-karboksylaatti_ „„ OH _^liH2 11 e 0 co® 0 COgPNB C 90)2P0 20
Seokseen, jossa oli p-nitrobentsyyli-(5R,6S)-3-(2-(3-aminopyridiinio)etyylitio)-6-(1-(R)-hydroksietyyli )-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksy-laatti-difenyylifosfaattia (0,730 g, 1,0 mmoolia) 25 ja 10 %:ista palladium-puuhiiltä (0,7 g) 25 ml:ssa fos faattipuskuria (0,05 mol. pH 7,4), lisättiin 8 ml THF:a ja 20 ml eetteriä. Tätä seosta hydrattiin sitten (Parr) 40 psi:n paineessa tunnin ajan. Saatu seos suodatettiin Celite-patjän läpi ja suodatinkakku pestiin H^jlla 30 ja eetterillä. Vesifaasi erotettiin, pestiin eetteril lä (2 x) ja sitten jälellä olevat haihtuvat ainekset poistettiin vakuumissa. Vesiliuos pantiin heti C^g-käänteisfaasi-kolonniin, joka eluoitiin H20:lla. Kylmä-kuivaamalla asianmukaiset fraktiot saatiin 0,45 g har-35 mahtavan valkeata kiinteätä ainetta. Tämä aine puhdis tettiin uudelleen käänteisfaasi-hplc-kromatografiaa käyt- loo 7 6 8 01 täen, jolloin saatiin haluttua tuotetta (0,123 g, 35 %) norsunluun värisenä aineena.
IR (KBr) ^ ks: 3340 (br) , 1750 (br, β -laktaami CO), 1580 (br, -C02^) cm 5 1Hnmr (D20)g : 8,07-7,59 (m, 4H, aromaattinen), 4,61 (t, J=5,8 Hz, 2H, N-CH2), 4,14 (q:n d, J=J'=6,3 Hz, 1H, H-l1), 3,97 (t:n d, J=9,2 Hz, J'=2,6 Hz, 1H, H-5), 3,38 (t, J=5,8 Hz, 2H, S-CH2), 3,24'd:n d, J=6,0 Hz, J1=2,6 Hz, 1H, H-6), 3,17-2,57 (m, 2H, H-4), 1,20 10 (d, J=6,3 Hz, 3H, CHMe); UV (H20) ^maksO 299 (£ 7949), 256 (£ 8822) nm; ti/2 (pH 7,4, 36,8°C) 18,5 tuntia.
Esimerkki 15 Yhdisteen 15 OH _ m-·'1-# coo^ 20 (5R,6S)-3-£L- (S)-metyyli-2-(l-pyridiinium)etyylitio7-6- ^1-(R)-hydroksietyyli^-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)- hept-2-eeni-2-karboksjylaatti _ ja OH --- ΛΠ>·^ ° 30 (5R,6S)-3-£l-(R)-metyyli-2- (l-pyridiiniumjetyylitic^- ö-^l- (R)-hydroksietyyll7“7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)-hept-2-eeni-2-karboksylaatti___
II
ιοί 76301 A. dl-1-(2-merkapto-2-metyylietyyli)pyridiinium-raetaanisulfonaatti dl-1-(2-merkapto-l-metyylietyyli)pyridiinium-metaanisulfonaatti____ _____ χ,φ--
Metaanisulfonihappoa (1,95 ml, 0,030 moolia) lisättiin hitaasti kylmään pyridiiniin (7,83 ml, 0,097 moolia) ja saatua seosta sekoitettiin 40°C:ssa 15 mi-15 nuuttia, käsiteltiin dl-propyleenisulfidin (2,59 ml, 0,033 moolia) kanssa ja sekoitettiin 60°C:ssa typpiatmos-fäärin suojaamana 90 tuntia. Pyridiini poistettiin vakuumissa; jäännös sekoitettiin veden kanssa ja puhdistettiin kromatograafisesti (hplc, Prep. Bondapak C-18).
20 Sopivat fraktiot yhdistettiin ja kylmäkuivattiin, jol loin saatiin dl-1-(2-merkapto-2-metyylietyyli)pyridii-nium-metaanisulfonaattia 1,14 g (15 %) värittömänä siirappina; IR (kalvo) maks * 2520 (SH), 1640 (pyridiinium) , 1180 25 (s, CH3S03“), 1040 (CH3S03“) cm-1; 'Hmr (DMS0 dg) 1,35 (d, J=6,8 Hz, 3H, CH3CHS) , 2,30 (s, 3H, CH3S03_), 2,90 (d, J=8,5 Hz, 1H, SH), 3,2-3,7 (m, CHSH), 4,52 (dd, Jgem=12,9 Hz, J=8,4 Hz, CHCH-N+), 4,87 (dd, J =12,9 Hz, J=6,0 Hz, CHCH~N+), £ gem * 30 8,0-8,4 (m, 2H, pyridiiniumin Hm), 8,5-8,8 (m, 2H, pyridiiniumin Hp), 9,04 (dd, J=l,4 Hz, J=6,7 Hz, 2H, pyridiiniumin Ho); UV (Η2°) 7Unaks: 208 (C 5267>' 259 (C 3338) .
Analyysi, laskettu yhdisteelle cgH^gN03S2 .2^0 : 35 C, 37,88; H, 6,71; N, 4,91; S, 22,47; saatu: C, 37,49; H, 6,85; N, 4,86; S, 22,09.
102 7 6 801 ja dl-1-(2-merkapto-l-metyylietyyli)pyridiinium-metaa-nisulfonaattia 0,82 g (11 %) värittömänä siirappina; IR (kalvo) Vmaks: 2500 (SH), 1628 (pyridiinium) , 1180 (sulfonaatti), 1035 (sulfonaatti) cm 5 1Hmr (DMSO dg) «S: 1,69 (d, J=6,8 Ha, 3H, CH3CHN+) , 2,31 (s, 3H, CH3S03”),3,0-3,3 (m, 2H, CH2S), 4,2-5,2 (m, 1H, CHN+), 8,0-8,4 (m, 2H, pyridiiniumin Hm), 8,5-8,8 (m, 1H, pyridiiniumin Hp), 9,0-9,2 (m, 2H, pyridiiniumin Ho) ; 10 UV (H20) ^maks: 209 (£ 4987), 258 (6 3838).
Analyysi, laskettu yhdisteelle CgH^^N03S2.1,5 H20: C, 39,11; H, 6,56; N, 5,07; saatu:C, 39,13; H, 5,92; N, 5,20.
B. (5R,6S)-paranitrobentsyyli-3-/l-(R,S)-metyyli- 15 2-(1-pyridiinium)etyylitiq/-6-£L-(R)-hydroksi- etyyli/-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni- 2-karboksylaatti-difenyylifosfaatti_
OH 1) NEt.(iPx) 2 OH
- '"xo·· w·*'® ''coophb^hsA^·^ “° ^coophb (ph0) l0- 4)- NEt(iPr)o 2
Kylmään (0°C) liuokseen, jossa oli (5R,6S)para- nitrobentsyyli-6-^1-(R)-hydroksietyyli7~3,7-diokso-l- 25 atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaattia (0,523 g, 1,5 mmoolia) asetonitriilissä (6 ml) ja jota pidettiin typpiatmosfäärin suojaamana, lisättiin di-isopropyyli- etyyliamiinia (0,314 ml, 1,8 mmoolia) ja sen jälkeen difenyylikloorifosfaattia (0,373 ml, 1,8 mmoolia). Reak- 30 tioseosta sekoitettiin 30 minuuttia ja sitä käsiteltiin liuoksen kanssa, jossa oli dl-1-(2-merkapto-2-metyyli- etyyli)pyridiiniummetaanisulfonaattia (0,539 g, 2,16 mmoolia) asetonitriilissä (2 ml) ja di-isopropyylietyy- liamiinia (0,314 ml, 1,8 mmoolia). Reaktioseosta sekoi- 35 103 76801 tettiin 0°C:ssa tunnin ajan, laimennettiin kylmällä (0°C) vedellä (24 ml) ja kromatografioitiin kolonnissa (2,5 x 8,5 cm) käyttämällä valmistetta prep bondapak C-18 ja eluointiliuottimina 25-50 %:isia asetonitriilin 5 vesiliuoksia, jolloin kylmäkuivauksen jälkeen saa tiin 1,07 g (97 %) otsikon yhdistettä kellertävänä jauheena; IR (KBr) k : 3700-3100 (OH), 1770 (/$ -laktaamin C=0), 1695 (PNB-esterin C=0), 1630 (pyridiinium), 10' 1590 (fenyyli), 1518 (N02), 1348 (N02), 885 (N02) cm"1; 1Hmr (DMS0 dg) 1,14 (d, J=6,l Hz, 3H, CH3CH0), 1,33 (d, J=6,3 Hz, 3H, CH3CHS), 4,6-5,0 (m, CH2N+), 5,14 (d, J=5,2 Hz, 1H, OH), 5,37 (ABq:n keskus, J=12,4 Hz, 2H, PNB;n CHj), 6,6-7,5 (m, 10H, fosfaatin fenyyli), 15 7,69 (d, J=8,7 Hz, 2H, PNB:n Ho), 8,0-8,4 (m, 4H, PNB:n Hm, pyridiiniumin Hm), 8,4-8,8 (m, 1H, pyridiiniumin Hp), 9,08 (d, J=5,6 Hz, 2H, pyridiiniumin Ho) ; UV (H20)^maks: 263 (£13325), 308 (ί 8915).
20 Analyysi, laskettu yhdisteelle C3gH3gN30-^QSP.H20 : C, 57,52; H, 5,10; N, 5,59; S, 4,27; saatu: C, 57,76; H, 4,96; N, 5,36; S, 4,35.
C. (4R,6S)-3-^1- (R ja S)-metyyli-2-(1-pyridiinium)- etyyliticj7-6-/l- (R) -hydroksietyyld,7-7-okso-l-2 5 atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaatti
OH OH
COOPNB (PhO)2?o" coo"
Liuokseen, jossa oli (5R,6S)-paranitrobentsyyli- 3-^1-(R,S)-metyyli-2-(1-pyridiinium)etyylitiq7-6-£l-35 (R)-hydroksietyyl47-7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2- eeni-2-karboksylaatti-difenyylifosfaattia (0,60 g, 0,82 mmoo- 104 7 6 8 01 lia) märässä tetrahydrofuraanissa (33 ml), lisättiin eetteriä (33 ml), yksiemäksistä kaliumfosfaatti-nat-riumhydroksidi-puskuria (17 ml, 0,15-norm. pH 7,22) ja 10 %:ista palladium-puuhiiltä (0,60 g). Saatua seos-5 ta hydrattiin tunnin ajan 40 psi:n paineessa 23°C:ssa.
Kerrokset erotettiin ja orgaaninen kerros uutettiin vedellä (3x7 ml). Vesikerrokset yhdistettiin, suodatettiin Celite-patjän läpi, pestiin eetterillä (3 x 20 ml) ja kromatografioitiin valmistetta prep bondapak C-18 10 sisältävässä kolonnissa (2,5 x 9,5 cm) veden ollessa eluointiliuottimena, jolloin saatiin 0,18 g (63 %) diastereoisomeerien seosta. Diastereoisomeerit erotettiin hplc-kromatografiointia (valmiste prep bondapak C-18) käyttäen veden ollessa eluointiliuottimena: iso-15 meeri, jonka retentioaika oli pienempi, 0,068 g (23 %), yhdiste "B": IR (KBr) V^niaks! 1^70 (/δ-laktaarnin C=0), 1633 (pyri-diinium), 1593 (karboksylaatti) cm 1Hmr (D20) 1,20 (d, J=6,3 Hz, 3H, CH-jCHO) , 1,42 20 (d, J=6,9 Hz, 3H, CH3CHS), 2,3-3,2 (m, 3H, H-4, H-6), 3,5-3,9 (m, 1H, SCH), 3,9-4,2 (m, 2H, H-5, CH3CH0), 4.3- 5,1 (m, CH2N+), 7,8-8,2 (m, 2H, pyridiiniumin Hm), 8.4- 8,7 (m, 1H, pyridiiniumin Hp), 8,7-9,0 (m, 2H, pyridiiniumin Ho) ; 25 UV (H20)^maks: 260 (£ 6727), 300 (£8245); -39,3° (c, H20); t^ = 12,6 tuntia (mitattu konsentraation ollessa 10 mol. fosfaattipuskurissa pH 7,4 36,8°C:ssa); isomeeri, jonka retentioaika oli suurempi, 0,081 g 30 (28 %), yhdiste "A": IR (KBr)^ ks: 1755 (/5-laktaarnin C=0), 1630 (pyri- diinium), 1590 (karboksylaatti) cm 1Hmr (°20)£ : 1,18 (d, J=6,3 Hz, 3H, CH3CH0), 1,40 (d, J=7,0 Hz, 3H, CH3CHS), 2,84 (d, J=9,3 Hz, 2H, H-4), 35 3,26 (dd, J=2,7 Hz, J=5,9 Hz, 1H, H-6), 3,4-4,2 (m, 3H,
II
105 7 6 8 01 SCH, CH3CHO, H-5), 4,2-5,1 (m, CH2N+), 7,7-8,1 (m, 2H, pyridiiniumin Hm), 8,3-8,65 (m, 1H, pyridiiniumin Hp) , 8,65-8,9 (m, 2H, pyridiiniumin Ho); UV <H20)Amaks! 259 ^5694), 296 (£6936), [dj2* 5 +96,9° (c 0,56, H20); t·^ = tuntia (mitattu konsentraation ollessa 10”4 mol. fosfaattipuskurissa pH 7,4 36,8°C;ssa).
Esimerkki 16 10 Yhdisteen OH ..
"· p 20 (5R,6S)-3-/2-^(S)-(1-pyridiinium)-1-(S)-sykieheksyyli- tiq7~6-/l-(R)-hydroksietyyli/“7-okso-l-atsabisyklo- (3.2.0) hept-2-eeni-2-karboksylaatti __ ja yhdisteen 25
OH
: » »-V
(5R,6S) -3-/2-/"(R) -(l-pyridiinium^-l- (R)-sykloheksyyli-tiq7-6-/l-(R)-hydroksietyyli7~7-okso-l-atsabisyklo- (3.2.0) hept-2-eeni-2-karboksylaatti valmistus_ 106 7 6 8 01 A. d1-1- /2 -me rkapto-1-syk1oheksyy1 i7pyr idi inium- metaanisulfonaatti_ 0> * @ *“ —* CC^ ~ 10 Metaanisulfonihappoa (0,65 ml, 0,01 moolia) li sättiin tiputtamalla pyridiiniin (2,42 ml, 0,03 moolia), jota jäähdytettiin. Seosta sekoitettiin typpiatmosfäärin suojaamana 10 minuuttia, käsiteltiin dl-syklohek-seenisulfidin /1,377 g (puhtaus 85 %), 0,0102 mooli^ 15 kanssa ja sekoitettiin 72°C:ssa 25 tuntia. Ylimääräinen pyridiini poistettiin vakuumissa ja tähteet tislattiin veden kanssa. Jäännös sekoitettiin veteen ja kromato-grafioitiin valmistetta prep bondapak C-18 sisältävän kolonnin (5 x 13 cm) läpi käyttämällä eluointiliuotti- 20 mena 0-2 % asetonitriiliä sisältävää vettä, jolloin saa tiin kylmäkuivauksen jälkeen väritöntä siirappia 1,57 g (53 %) ; IR (kalvo) ,^majcs! 2500 (SH), 1625 (pyridiinium) , 1190 (S03“); 25 ^Hmr (DMSO dg) ^ : 1,2-2,5 (m, 8H, sykloheksyyli H), 2,32 (s, 3H, CH3S03"), 2,82 (d, J=9,8 Hz, SH), 3,0-3,5 (m, 1H, CHSH), 4,2-4,9 (m, 1H, CHN+), 8,0-8,3 (m, 2H, pyridiiniumin Hm), 8,4-8,8 (m, 1H, pyridiiniumin Hp), 8,9-9,3 (m, 2H, pyridiiniumin Ho); 30 UV (H20)Xmaks! 214 <£5365>* 258 (6 3500).
Analyysi, laskettu yhdisteelle C12H19N03S2'H20: C, 46,88; H, 6,88; N, 4,56; saatu: C, 46,61; H, 6,46; N, 4,65.
35
II
107 7 6 801 B. (5R,6S)-paranitrobentsyyli-3-/2-£(R tai S)-(l- pyridiinium)7"l“(R tai S)-sykloheksyylitiq7"6-(1-(R)-hydroksietyyli/”7-okso-l-atsabisyklo- (3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaatti-difenyyli~ 5 fosfaatti_ ___
OH 1( NEttiPrJj OH
ΛΓΤ>021 Λ]Χ}~·»-CJ
10 0 ” "ΐοΟΡΝΗ3’ HSX) 0 ' COOPHB^L (Ph0)j?0- 4) NEt(iPr)2 15
Kylmään (0°C) liuokseen, jossa oli (5R,6S)-parani trobentsyyli-6-^1-(R)-hydroksietyyli,?-3,7-diokso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaattia (1,37 g, 3,93 mmoolia) asetonitriilissä (15 ml) ja jota 2o pidettiin typpiatmosfäärin suojaamana, lisättiin di- i s opr opyylietyyyliamiinia (0,822 ml, 4,7 mmoolia) ja difenyylikloorifosfaattia (0,979 ml, 4,7 mmoolia). Saatua liuosta sekoitettiin 30 minuuttia ja käsiteltiin liuoksen, kanssa, jossa oli dl-1-(2-merkapto-l-syklohek-25 syyli)pyridiinium-metaanisulfonaattia (1,64 g, 5,66 mmoo lia) asetonitriilissä (4,7 ml) ja sen jälkeen di-iso-propyylietyyliamiinin (0,822 ml, 4,7 mmoolia) kanssa. Reaktioseosta sekoitettiin 0°C:ssa tunnin ajan, laimennettiin kylmällä (0°C) vedellä (75 ml) ja kromatogra-30 fioitiin valmisteella prep bondapak C-18 käyttämällä eluointiliuottimena 25-50 % asetonitriiliä sisältävää vettä, jolloin sopivien fraktioiden kylmäkuivauksen jälkeen saatiin 1,9 g (53 %) otsikon yhdistettä; IR <KBr>Vmaks: 3700"3000 (°H)» 1770 (/$ -laktaamin C=0), 35 1700 (PNB-esterin C=0), 1628 (pyridiinium), 1590 (fe- nyyli), 1515 (N02), 1345 (N02), 880 (N02) cm"1; 108 76801 1Hmr (D,0) S · 1*13 (d, J»6,l Hz, 3H, CHjCHO) , 1,2-2,5 (m, 8H, sykloheksyyli H), 2,7-3,5 (m, 4H, H-4, H-6, CHS), 3,5-4,4 (m, 2H, CH3CH0, H-5), 4,4-5,0 (m, 1H, CHN+), 5,30 (ABqsn keskus, J=12,8 Hz, PNB:n C^) , 5 6,7-7,4 (m, 10H, fenyyli), 7,65 (d, J=8,6 Hz, 2H, PNB:n Ho), 7,9-8,4 (m, 4H, PNB:n Hm, pyridiiniumin Hin) , 8,4-8,8 (m, 1H, pyridiiniumin Hp), 9,0-9,4 (m, 2H, pyridiiniumin Ho); UV (H20) /tmaks: 263 (£ 9038>' 309 (€ 6394).
10 Analyysi, laskettu yhdisteelle C39H4oN38iosp,H28: C, 59,16; H, 5,35; N, 5,31; saatu: C, 58,95; H, 5,15; N, 5,57.
C. (5R,6S)-3-/2-/"(R tai S) - (l-pyridiinium),?-l-(R
tai S) -sykloheksyylitio^-e-O- (R) -hydroksietyyli^-15 7-okso-l-atsabisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karbok- sylaatti_____ OH OH y-v JL ^ Π 10% Pd/C, h2 —r^*V s 1 0^" M I o puskuri 'coo' -. (©) 25
Liuokseen, jossa oli (5R,6S)-paranitrobentsyy-11-3-/2-/^ tai S)-(l-pyridiinium)^-l-(R tai S)-syklo-heksyylitiQ?-6-/1-(R)-hydroksietyyli7-7-okso-l-atsa-bisyklo(3,2,0)hept-2-eeni-2-karboksylaatti-difenyyli-30 fosfaattia (1,85 g, 2,34 mmoolia) märässä tetrahydro- furaanissa (96 ml), lisättiin eetteriä (96 ml), yksi-emäksistä kaliumfosfaatti-natriumhydroksidi-puskuria (0,15 mol., pH 7,22, 50 ml) ja 10 %:ista palladium-puuhiiltä (1,9 g). Saatua seosta hydrattiin 23°:ssa 35 40 psi:n paineessa 1,25 tuntia. Orgaaninen kerros ero tettiin ja pestiin vedellä (3 x 20 ml). Vesiliuokset
II
109 7 6 8 01 suodatettiin Celite-patjan läpi, pestiin eetterillä (2 x 60 ml), imettiin pumpulla orgaanisten liuottimien jäännösten poistamiseksi ja kromatografioitiin valmisteella prep bondapak C-18 kolonnissa (4,5 x 9 cm) käyttämällä elu-5 ointiliuottimena 0-5 % asetonitriiliä sisältävää vettä, jolloin kylmäkuivauksen jälkeen saatiin 0,705 g (76 %) diastereoisomeerien seosta. Diastereoisomeerien erottaminen suoritettiin hplc-kromatografiointia (prep bondapak C-18) käyttäen ja eluointiliuottimen ollessa 4 % aseto-10 nitriiliä sisältävä vesi; diastereoisomeeri, jonka retentioaika oli pienempi, yhdiste "A" (0,29 g, 31 %) : IR (KBr)^mak : 1750 (/& -laktaamin C=0) , 1620 (sh, pyridiinium), 1685 (karboksylaatti) cm 15 1Hmr (D20) £: 1,21 (d, J=6,3 Hz, 3H, CH-jCHO), 1,4-2,5 (m, 8H, sykloheksyyli H), 2,5-3,05 (m, 2H, H-4), 3,05- 3,25 (m, 1H, H-6), 3,3-3,7 (m, 1H, CHS), 3,9-4,3 (m, 2H, H-5, CH3CH0), 4,3-4,8 (m, CHN+), 7,8-8,2 (m, 2H, pyridiiniumin Hm), 8,3-8,7 (m, lH, pyridiiniumin Hp), 20 8,8-9,1 (m, 2H, pyridiiniumin Ho); UV (H20)^maks: 260 (€ 7123), 300 (£ 8685); +6,2° (c 0,63, H20); tjy2 = 16,6 tuntia (mitattu konsentraation ollessa 10 ^ mol. fosfaattipuskurissa pH 7,4 36,8^C;ssa).
25 Analyysi, laskettu yhdisteelle C20H24N2°4S*2H20: C, 56,59; H, 6,65; N, 6,60; S, 7,55; saatu: C, 56,83; H, 6,47; N, 6,59; S, 7,43; diastereoisomeeri, jonka retentioaika oli suurempi, yhdiste "B", (0,35 g, 38 %): 30 IR (KBr)^ maks: 1750 (/0-laktaamin C=0), 1622 (sh, pyridiinium), 1588 (karboksylaatti) cm~^; ^Hmr (D20)^»: 1,19 (d, J=6,4 Hz, 3H, CH3CH0), 1,3-2,5 (m, 8H, sykloheksyyli H), 2,5-3,1 (m, 2H, H-4), 3,1-3,3 (m, 1H, H-6), 3,3-3,8 (m, 2H, H-5, CHS), 4,1 (m:n 35 keskus, 1H, CH3CH0), 4,25-4,7 (m, 1H, CHN+), 7,8-8,1 110 76801 (m, 2H, pyridiiniumin Hm), 8,3-8,7 (m, 1H, pyridiiniumin Hp), 8,75-9,0 (m, 2H, pyridiiniumin Ho); m (H20,Xmaks! 259 «f 5992»' 296 (£7646); +65,3 (c 0,43, H2O); = 20,2 tuntia (mitattu 5 konsentraation ollessa 10"* mol. fosfaattipuskurissa pH 7,4 36,8°C:ssa).
Esimerkki 17 A. (5R) -allyyli-3-^’(2-pyridiinioetyyli) tiq/- (6S) - /71R) -hydr oksietyy 1^-7-okso-1 -at sabisyklo-10 £3,2,Q7hept-2-eeni-2-karboksylaatti-difenyyli- fosfaatti____:___ OH ^ „ ΛΓΓ%» “ °”MI'»—.'TOt··'·'··5© 0J~ 2) <§fo) Θ I Θ ° : HS^^V-/C]U CO υ0Ρ0(0φ) CO^ 2 2
Liuokseen, jossa oli (5R)-allyyli-3,7-diokso-20 (6S)-/"(1R)-hydroksietyyli^-l-atsabisyklo/^ , 2,07hep- taani-(2R)-karboksylaattia (473 mg, 1,87 mmoolia) CH3CN:ssa (6 ml), lisättiin noin -10°C:ssa typpiatmos-fäärin suojaamana di-isopropyylietyyliamiinia (0,42 ml, 2,4 mmoolia) ja sen jälkeen difenyylikloorifosfaattia 25 (0,50 ml, 2,4 mmoolia). Seosta sekoitettiin 0°C:ssa 30 minuuttia, ja sitten jäähdytettiin -15°C:seen. Tähän lisättiin öljyistä N-(2-merkaptoetyyli)-pyridiiniumklo-ridin (527 mg, 3,00 mmoolia) suspensiota CH^CNtssa (1 ml), jossa oli 5 pisaraa DMF:a, ja sen jälkeen 30 di-isopropyylietyyliamiinia (0,42 ml, 2,4 mmoolia).
Seosta sekoitettiin -15°jssa 30 minuuttia ja sitten laimennettiin H20:lla (20 ml). Tämä seos puhdistettiin suoraan käänteisfaasi-silikageelillä (C1g prepPax 12 g,
Waters Associates) eluoimalla ^Oslla (200 ml), 10 %:isel-35 la CH3CN/H20-seoksella (100 ml), 20 %:isella CHgCN/HjO- seoksella (100 ml), 30 %:isella CH3CN/H20-seoksella
II
111 76801 (100 ml) ja sitten 40 %:isella CH^CN/HjO-seoksella (100 ml). Sopivat fraktiot koottiin yhteen, orgaaninen liuotin poistettiin imemällä vakuumipumpulla ja kylmäkuivattiin, jolloin saatiin 786 mg (1,26 mmoolia), saanto 67,3 %) 5 otsikon yhdistettä ruskehtavana jauheena: ^Hmr (DMSO-dg, CFT-20) 1,16 (3H, d, J=6 Hz, 1'-CH3), 2,6-3,7 (m), 3,75-4,3 (2H, m, 5-H ja l'-H), 4,65 (2H, m, -C02CH2-), 4,87 (2H, t, J~6 Hz, -CH2-N+), 5,6,2 (3H, m, olefiiniset protonit), 6,6-7,4 (m, aromaattiset 10 protonit), 8,15 (2H, "t", J^7 Hz, aromaattiset proto- nit meta-asemassa typpeen nähden), 8,63 (1H, "t", J=7 Hz, aromaattiset protonit para-asemassa typpeen nähden) ja 9,07 ppm (2H, "d", J=7 Hz, aromaattiset protonit orto-asemassa typpeen nähden); 15 IR (kalvo)3400 (OH), 1770 (^ -laktaami), 1690 (esteri), 1625 (pyridiinio).
B. (5R) 3-^(2-pyridiinioetyyli) ti<j7- (6S) ->HlR) - hydroksietyyli.7-7 -okso-l-atsabisyklo£3,2, O^/hept-2-eeni-2-karboksylaatti 20 oh OH » _ ° Π ^ © ^^C°2K CO® Μ3Κ>(Οφ)2 T 2
Liuokseen, jossa oli (5R)-alkyyli-3-/’(2-pyri-diinioetyyli)tiq/-(6S)-^(1R)-hydroksietyyli7-7-okso-l-atsabisyklo^3,2,0<7hept-2-eeni-2-karboksylaattidifenyy-lifosfaattia (156 mg, 0,25 mmoolia) CH^CNjssa (2 ml), 30 lisättiin peräkkäin noin 22°C:ssa liuos, jossa oli kalium-2-etyyliheksanoaattia etyyliasetaatissa (0,5 mol.
0,6 ml, 0,3 mmoolia), trifenyylifosfiinia (15 mg, 0,057 mmoolia) ja tetrakistrifenyylifosfiini-palladiumia (15 mg, 0,013 mmoolia). Seosta sekoitettiin noin 22°C:ssa 35 112 76301 typpiatmosfäärin suojaamana 2 tuntia. Kun oli lisätty vedetöntä Et20:a (7 ml), sakka suodatettiin erilleen, pestiin kuivalla Et20:lla (7 ml) ja kuivattiin vakuu-missa, jolloin saatiin 101 mg ruskehtavaa kiinteätä 5 ainetta. Tämä puhdistettiin käänteisfaasikromatografiaa käyttäen kolonnissa (C^g PrepPAK, 12 g, Waters Associates) eluoimalla IVOilla. Sopivat fraktiot (fraktiot 7-12, kukin 20 ml) koottiin yhteen ja kylmäkuivattiin, jolloin saatiin 53 mg (0,16 mmoolia, saanto 64 %) otsikon 10 yhdistettä kellertävänä jauheena. Tässä aineessa oli epäpuhtautena kaliumdifenyylifosfaattia ja kalium-2-etyyliheksanoaattia: 1Hmr (D20, CFT-20) £ : 0,80 (t, J=6,4 Hz, Me etyyli-heksanoaatista), 1,21 (3H, d, J=6,3 Hz, l'-Me), 2,93 15 (2H, dd, J1-4=9 Hz, Jgem=4 Hz, 1-Hs), 3,28 (1H, dd, J6_1,=6,2 Hz, J6_5=2,5 Hz, 6-H), 3,43 (2H, t, J=6Hz, -CH2S) , 3,98 (1H, td, ^^=9 Hz, J5_6=2,5 Hz, 5-H) , (1H, q, J=6,2 Hz, l'-H), 4,80 (2H, t, J=6,0 Hz, -CH2N+), 7-7,5 (m, fenyyli-protonit difenyylifosfaatis-20 ta), 8,03 (2H, m, pyridiiniumin Hm), 8,56 (1H, m, py- ridiiniumin Hp) ja 8,81 ppm (2H, "d", J^6,5 Hz, pyridiiniumin Ho) .
Il 113 768 01
Esimerkki 18
Esimerkkien 4-17 yhdisteitä voidaan valmistaa myös esimerkin 1 tai 2 menetelmällä antamalla sopivan välituotteen, jolla on kaava
5 OH H
y··. ixv^s-a-i i-N - q/ C02_P_nitrobentsyyli 10 reagoida sopivan heteroaromaattisen nukleofiilisen yhdisteen
O
15 kanssa ja poistamalla sitten p-nitrobentsyyli-karboksyy- li-suojaryhmä hydraamalla katalyyttisesti.

Claims (22)

114 76801
1 I (IV)
0. N ^COOR2' 10 0 jossa R2' on edellä määritelty; (2) kaavan IV mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan inertissä orgaanisessa liuottimessa emäksen läsnäollessa 15 merkaptaaniyhdisteen kanssa, jolla on kaava HS-A-OH jossa A on edellä määritelty, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (V) 20 OH u u 1 " S /\ CH3-CH--Y >γ-6-Α-0Η | (V)
25. N ~^COOR2' , 9 I jossa A ja R ovat edellä määritellyt; (3) kaavan V mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan inertissä orgaanisessa liuottimessa emäksen läsnäollessa 30 metaani- tai p-tolueenisulfonyylikloridin tai niiden funktionaalisen asyloivan ekvivalentin kanssa, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (VI) II 117 76801 OH H H .. Ch ch--s"A“OS02R 1 | (VI) 5 cf N ^COOR2’ * . o1 jossa A ja R ovat edellä määritellyt ja R on metyyli-tai p-tolyyli; 10 (4) kaavan VI mukainen yhdiste saatetaan reagoimaan inertissä orgaanisessa liuottimessa jodidi-ionilähteen kanssa siten, että metaani- tai p-tolueenisulfonyylioksi-ryhmä korvautuu jodilla ja saadaan yhdiste, jolla on kaava (II) 15 OH H H CH3-CH--Ψ' γ8"*·! J N _1 <H> XOOR2' 20 jossa A ja R2 ovat edellä määritellyt; ja saatua kaavan II mukaista yhdistettä käsitellään edelleen edellä kohdassa a) esitetyllä tavalla kaavan I mukai-25 sen yhdisteen tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan saamiseksi; tai c) yhdiste, jolla on kaava (IV) ™ OH H H il
30 CH3-CH--^\^<°c6h5)2 _N _[I t (IV) fy OOOR2' 2 * 35 jossa R^ on edellä määritelty, saatetaan reagoimaan tioli-yhdisteen kanssa, jolla on kaava (VII) 118 76301 HS"A'*0 χβ jossa A, O. ja Χθ ovat edellä määritellyt, karbapenee-miyhdisteen saamiseksi, jolla on kaava (I') 10 *H H X® CH3-CH--Y |^S-A- __J X (T N COOR2' ^ ^ 15 ja haluttaessa poistetaan karboksyylin suojaryhmä R2', jolloin saadaan vastaava suojaamaton kaavan I mukainen yhdiste .
1 I (I) CY~ N COOR2 jossa A on sykloheksyleeni- tai C2_g-alkyleeniryhmä, joka 15 voi olla substituoitu yhdellä tai useammalla Ci_4-alkyylil- O lä, R*- on vety, anioninen varaus tai tavallinen helposti poistettavissa oleva karboksyylin suojaryhmä edellyttäen, että kun R on vety tai suojaryhmä, läsnä on myös vasta-anioni; ja ryhmä 20 O on pyridinium- tai imidatsoliniumryhmä, joka on liittynyt 25 ryhmään A rengastypestä ja joka voi olla substitoitu yhdellä tai kahdella C-^^-alkyylillä, C1_4-alkoksilla, hydroksi-substituoidulla C1_4-alkyylillä, C1_4-alkyylitiolla tai aminolla tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 30 a) yhdisteelle, jolla on kaava (II) CH3-CH—1- ' I UI)
35 N ^COOR2' II 115 76801 jossa A on edellä määritelty ja R2 on tavallinen helposti poistettavissa oleva karboksyylin suojaryhmä, suoritetaan nukleofiilinen korvausreaktio inertissä orgaanisessa liuot-timessa ja hopeaionin läsnäollessa heteroaromaattisella yh-5 disteellä, jonka kaava on O 10 siten, että kaavan II mukaisen yhdisteen jodiatomi korvautuu ryhmällä O 15 ja muodostuu yhdiste, jolla on kaava (I') 20 ch3-£h--Ργ--·0 CT ^COOR2' (I,) ft jossa on vasta-ioni ja A, 25 O • 21 ja R ovat edellä määritellyt, ja haluttaessa poistetaan 30 karboksyylin suojaryhmä RA , jolloin saadaan vastaava suojaamaton kaavan I mukainen yhdiste, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola, tai b) (1) yhdiste, jolla on kaava (III) 0H h h ^
35. H O CH-j-CH--Y ' (III) N ^COOR2' 11« 76301 jossa on edellä määritelty, saatetaan reagoimaan iner- tissä orgaanisessa liuottimessa difenyylikloorifosfaatin kanssa emäksen läsnäollessa, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (IV) 5 0H H Η Ϊ CH3-CH—1-f/\r'0P(0C6H5)2
1. Menetelmä antibioottisesti aktiivisen, 2-asemassa kvaternäärisen typpiheterosyklisen renkaan sisältävällä 5 ryhmällä substituoidun karbapeneemijohdannaisen valmistamiseksi, jolla on kaava (I) T H 10 ch3-ch--Y [f V_y
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetun yhdisteen absoluuttinen 20 konfiguraatio on 5R, 6S, 8R.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka kaava on OH _ 25 <R>. J-.. 1^-·,«·, S .- N-- - , ^ COOR o' 2 30 jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka kaava on OH L^.ch2ch2c^ J-N-\ 2 QV COOR II 2 119 76801 jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
5 OH I H * m schch2 θ^/\ν O _J ^ W 10 o' ^ COOR2 2 jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka kaava on
6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että tähdellä merkityn hiiliatomin subs- 15 tituentit ovat R-konfiguraatiossa.
7. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka kaava on OH yCH3 20 (R>^V_Jj^\)-'SCH2CH2 t3 -1 2 O' COOR^ 2 25 jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
8. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka kaava on ΟΠ CH-
30 I ©£~Λ (R)/<% i^|p-SCH2CH2 \_J O ^COOR2 35 2 jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola. 120 7 6 8 01
9. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka kaava on CH2OH 5 l, f/— 5Ch2ch, \ 2. v=y c/-N ^ coor1 2 10 jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka kaava on OH
11. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka 25 kaava on OH (RuA_=-^'\r^CH2CH2 SCH3 LL _il
30. COOR1 w jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
12. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka kaava on 121 76301 OH ^OCH3 5 | -f-" -k 2 O COOR 2 jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen 10 farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
13. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka kaava on OH
14. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka 25 kaava on : OH H-C <r>A_P^\^ch2ch2 W ') Π 1
30 -N-N. 2 3 O ^ xCOOR ' 2 jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola. ^ 35 15. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka kaava on 122 7 6 801 OH NH2 (B)/Lp-j/\--SCH2CH2 o J—» kcooR2 2 jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
15 SCH3 <R)^Y_p\^ SCH2CH2 ®/j) A-N-2 coor 20 2 jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
15 I (R>/% |/\^SCH2CH2 «o- CH2OH \oOR1 20 2 jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
16. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka kaava on COOR 20 2 jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.
17. Patenttivaatimuksen 16 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sykloheksyylirenkaan kahden 25 asymmetrisen hiiliatomin substituentit ovat R,R-konfigu-raatiossa.
18. Patenttivaatimuksen 16 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sykloheksyylirenkaan kahden asymmetrisen hiiliatomin substituentit ovat S,S-konfigu- 30 raatiossa.
19. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste, jonka kaava on 35 II 123 76801 OH m/L_^Y«^2 W- **3 5 jr—·-'k 2 ^N-CH3 ^ ^ COOR 2 jossa R on patenttivaatimuksessa 1 määritelty, tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola. 124 76801
FI831170A 1982-04-09 1983-04-06 Foerfarande foer framstaellning av ett antibiotiskt aktivt karbapenemderivat vilken aer substituerad i 2-staellningen med en grupp innehaollande en kvaternaer kvaeveheterocyklisk ring. FI76801C (fi)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI855056A FI76802C (fi) 1982-04-09 1985-12-18 3-jodcyklohexylentio- och 3-jodalkylentio-7-oxo-1-azabicyklo/3.2.0/hept-2-en-2-karboxylsyraderivat och foerfarande foer deras framstaellning.

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US36691082A 1982-04-09 1982-04-09
US36691082 1982-04-09
US06/471,379 US4552696A (en) 1982-04-09 1983-03-08 Carbapenem antibiotics
US47137983 1983-03-08

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI831170A0 FI831170A0 (fi) 1983-04-06
FI831170L FI831170L (fi) 1983-10-10
FI76801B true FI76801B (fi) 1988-08-31
FI76801C FI76801C (fi) 1988-12-12

Family

ID=27003573

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI831170A FI76801C (fi) 1982-04-09 1983-04-06 Foerfarande foer framstaellning av ett antibiotiskt aktivt karbapenemderivat vilken aer substituerad i 2-staellningen med en grupp innehaollande en kvaternaer kvaeveheterocyklisk ring.

Country Status (23)

Country Link
US (1) US4552696A (fi)
KR (1) KR880001069B1 (fi)
AT (1) AT382620B (fi)
AU (1) AU572090B2 (fi)
BE (1) BE896418A (fi)
CA (2) CA1283659C (fi)
CH (2) CH666272A5 (fi)
DE (1) DE3312533A1 (fi)
DK (1) DK157083A (fi)
ES (2) ES521293A0 (fi)
FI (1) FI76801C (fi)
FR (1) FR2524890B1 (fi)
GB (2) GB2119371B (fi)
GR (1) GR78185B (fi)
HU (1) HU190083B (fi)
IE (1) IE54769B1 (fi)
IL (1) IL68148A0 (fi)
IT (1) IT1200926B (fi)
LU (1) LU84740A1 (fi)
NL (1) NL8301212A (fi)
OA (1) OA07390A (fi)
PT (1) PT76525B (fi)
SE (2) SE460790B (fi)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1198440A (en) * 1982-04-08 1985-12-24 Choung U. Kim Carbapenem antibiotics
US4642341A (en) * 1982-04-09 1987-02-10 Bristol-Myers Company Carbapenem antibiotics
US4536335A (en) * 1982-06-18 1985-08-20 Bristol-Myers Company Carbapenem antibiotics
DK140584A (da) * 1983-03-08 1984-09-09 Bristol Myers Co Fremgangsmaade til fremstilling af carbapenemderivater
CA1285940C (en) * 1984-07-02 1991-07-09 Merck & Co., Inc. Carbapenems having a 2-quaternary heteroarylalkylthio substituent
IE851586L (en) * 1984-07-02 1986-01-02 Interchem Internat S A I methylcarbapenems having a 2-quaternary¹heteroarylalkylthio substituent
US4729993A (en) * 1984-12-13 1988-03-08 Merck & Co., Inc. Carbapenems and 1-methylcarbapenems having an externally alkylated mono- or bicyclic 2-quaternary heteroarylalkyl substituent
US4680292A (en) * 1984-12-13 1987-07-14 Merck & Co., Inc. Carbapenems and 1-methylcarbapenems having a 2-heteroaryliumaliphatic substituent
US4725594A (en) * 1984-12-13 1988-02-16 Merck & Co., Inc. Carbapenems having an internally or externally alkylated mono- or bicyclic 2-quaternary heteroarylalxyl heteromethyl substituent
US4952397A (en) * 1985-06-17 1990-08-28 Merck & Co., Inc. 2-quaternary heteroarylalkylthio carbapenems having an acid moiety substituent
US4665169A (en) * 1985-09-11 1987-05-12 Bristol-Myers Company Carbapenem antibiotics
US4880922A (en) * 1985-11-22 1989-11-14 Bristol-Myers Company Carbapenems with quaternized heterothioalkylthio substitution at position 2
US4894450A (en) * 1987-05-11 1990-01-16 Merck & Co., Inc. Process for 2-(aminoalkylthio) carbapenems

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4235920A (en) * 1975-11-21 1980-11-25 Merck & Co., Inc. N-Alkylated derivatives of thienamycin
NL7612937A (nl) * 1975-11-21 1977-05-24 Merck & Co Inc Thienamycinederivaten en farmaceutische prepa- raten alsmede werkwijze voor het bereiden daarvan.
US4235917A (en) * 1977-05-05 1980-11-25 Merck & Co., Inc. N-Alkyl-N-acyl derivatives of thienamycin
US4189493A (en) * 1977-12-28 1980-02-19 Merck & Co., Inc. N-heterocyclic derivatives of thienamycin
AR228726A1 (es) * 1978-05-26 1983-04-15 Glaxo Group Ltd Procedimiento para la preparacion del antibiotico(6r,7r)-7-((z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-(2-carboxiprop-2-oxiimino)acetamido)-3-(1-piridiniometil)cef-3-em-4-carboxilato
JPS5625110A (en) * 1978-12-18 1981-03-10 Bristol Myers Co Antibacterial
EP0082133A3 (en) * 1979-04-19 1983-07-20 Merck & Co. Inc. A process for preparing intermediates useful for preparing 2-substituted-6-substituted-1-carbadethiapen-2-em-3-carboxylic acids
US4376774A (en) * 1979-05-29 1983-03-15 Merck & Co., Inc. Antibiotic N-heterocyclyl thienamycin
DE3169321D1 (en) * 1980-03-27 1985-04-25 Merck & Co Inc Process for the preparation of 1-carbapenems and intermediates via silyl-substituted dithioacetals
EP0038869A1 (en) * 1980-04-30 1981-11-04 Merck & Co. Inc. Process for the preparation of 1-carbapenems, and intermediates for their preparation
EP0044170A1 (en) * 1980-07-11 1982-01-20 Beecham Group Plc Beta-lactam antibiotics, their preparation and use
WO1983000867A1 (en) * 1981-09-09 1983-03-17 Takeda Chemical Industries Ltd 5,6-cis-carbapenem-3-carboxylic acid derivatives and process for their preparation
EP0074599A1 (en) * 1981-09-09 1983-03-23 Takeda Chemical Industries, Ltd. 5,6-cis-Carbapenem derivatives, their production and use
WO1983002614A1 (en) * 1982-02-02 1983-08-04 Takeda Chemical Industries Ltd 5,6-cis-carbapenem-3-carboxylic acid derivatives and process for their preparation
CA1198440A (en) * 1982-04-08 1985-12-24 Choung U. Kim Carbapenem antibiotics
US4536335A (en) * 1982-06-18 1985-08-20 Bristol-Myers Company Carbapenem antibiotics
DK140584A (da) * 1983-03-08 1984-09-09 Bristol Myers Co Fremgangsmaade til fremstilling af carbapenemderivater

Also Published As

Publication number Publication date
ATA125683A (de) 1986-08-15
ES8405799A1 (es) 1984-06-16
SE8301929D0 (sv) 1983-04-07
NL8301212A (nl) 1983-11-01
HU190083B (en) 1986-08-28
OA07390A (fr) 1984-11-30
SE8301929L (sv) 1983-12-02
GB2119371A (en) 1983-11-16
KR840004430A (ko) 1984-10-15
IT1200926B (it) 1989-01-27
GB2119371B (en) 1986-07-09
ES521293A0 (es) 1984-06-16
CA1284500C (en) 1991-05-28
GB8309566D0 (en) 1983-05-11
GB8515162D0 (en) 1985-07-17
PT76525A (en) 1983-05-01
CH657854A5 (fr) 1986-09-30
AU572090B2 (en) 1988-05-05
DE3312533C2 (fi) 1991-08-14
AT382620B (de) 1987-03-25
IT8348068A0 (it) 1983-04-08
SE460790B (sv) 1989-11-20
PT76525B (en) 1986-02-06
SE8901032L (sv) 1989-03-22
IE830806L (en) 1983-10-09
CA1283659C (en) 1991-04-30
GB2159818B (en) 1986-07-23
FI831170L (fi) 1983-10-10
GB2159818A (en) 1985-12-11
BE896418A (fr) 1983-10-10
LU84740A1 (fr) 1983-12-05
DK157083A (da) 1983-10-10
DK157083D0 (da) 1983-04-08
FR2524890A1 (fr) 1983-10-14
ES528079A0 (es) 1985-11-01
ES8601118A1 (es) 1985-11-01
KR880001069B1 (ko) 1988-06-20
CH666272A5 (fr) 1988-07-15
AU1272683A (en) 1983-10-13
FI831170A0 (fi) 1983-04-06
IE54769B1 (en) 1990-01-31
US4552696A (en) 1985-11-12
FI76801C (fi) 1988-12-12
FR2524890B1 (fr) 1987-08-28
GR78185B (fi) 1984-09-26
IL68148A0 (en) 1983-06-15
DE3312533A1 (de) 1983-10-13
SE8901032D0 (sv) 1989-03-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0072710B1 (en) Carbapenem derivatives, their preparation and compositions containing them
US5102997A (en) 2-(1-acetimidoyl-5-carbamoylpyrrolidin-3-ylthio-6-(1-hydroxyethyl)-1-methylcarbapen-2-em-3-carboxylic acid
KR0133071B1 (ko) 2-(헤테로시클릴티오)카르바페넴 유도체, 그의 제조방법 및 항생제로서의 그의 용도
FI76801B (fi) Foerfarande foer framstaellning av ett antibiotiskt aktivt karbapenemderivat vilken aer substituerad i 2-staellningen med en grupp innehaollande en kvaternaer kvaeveheterocyklisk ring.
DE69523574T2 (de) Carbapenem-derivate
FI77036C (fi) Foerfarande foer framstaellning av antibiotiskt aktiva, med en kvaternaer kvaeveheterocyklisk ring substituerade 2-etyltiokarbapen-2-emderivat.
EP0186525B1 (en) Carbapenem compounds, their preparation and use
SK132193A3 (en) Antibiotic compounds
JPH06179674A (ja) カルバペネム、それを含有する抗生物質医薬組成物及びその製法及びその製造中間体
JPS60233077A (ja) １‐テヘロ‐６‐〔１‐ヒドロキシエチル〕‐２‐ｓｒ↑８‐１‐カルバデチアペン‐２‐エム‐３‐カルボン酸
KR890002228B1 (ko) 카르바페넴 유도체 및 그의 제조방법
DK170341B1 (da) Penem-derivater, fremgangsmåde til fremstilling heraf og farmaceutiske og veterinære præparater indeholdende disse forbindelser
HU193895B (en) Process for preparing carbapenem derivatives
JPWO2004089954A1 (ja) 新規なカルバペネム化合物
CZ342098A3 (cs) 1-Methylkarbapenemové deriváty
FI83323B (fi) Foerfarande foer framstaellning av terapeutiskt aktiva karbapenemderivat som substituerats i 2-staellningen med en heterotioalkyltiogrupp.
CZ150193A3 (en) Aminoalkyl pyrrolidinylthiocarbapenem derivatives
US4710568A (en) Carbapenem antibiotics
JPH08134075A (ja) 新規なカルバペネム誘導体
US4642341A (en) Carbapenem antibiotics
CS247195B2 (cs) Způsob výroby karbapenemderivátů
KAWANO et al. Synthesis and Antibacterial Activity of 3-Acylamin0-2-azetidin0ne-1-sulfonic Acid Derivatives” TAISUKE MATSUO (the late), TQHRU SUGAWARA, HIROTOMO MASUYA
WO1994005667A1 (en) Carbapenem derivatives and processes for preparing the same
JP2000143512A (ja) メタロ―β―ラクタマ―ゼ阻害剤
CS250658B2 (cs) Způsob výroby karbapenemových derivátů

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed
MM Patent lapsed

Owner name: BRISTOL-MYERS CO