DK170341B1 - Penem-derivater, fremgangsmåde til fremstilling heraf og farmaceutiske og veterinære præparater indeholdende disse forbindelser - Google Patents

Description

i DK 170341 B1

Den foreliggende opfindelse angår hidtil ukendte penem-forbindelser, fremgangsmåde til fremstilling heraf og i farmaceutiske og veterinære præparater indeholdende disse forbindelser.

5

De omhandlede forbindelser er kvaternære ammoniumcarboxy-later med den i krav 1 angivne formel I og deres farmaceutiske eller veterinære acceptable salte.

10 Den foreliggende opfindelse omfatter alle mulige geometriske og optiske isomere af forbindelserne med formlen I, enten i form af isomere blandinger eller i form af de enkelte adskilte isomere.

15 Som allerede nævnt omfatter opfindelsen også farmaceutisk eller veterinært acceptable salte af forbindelserne med formel I. Disse salte kan både være salte med syrer, som f.eks. med eddikesyre, citronsyre, vinsyre, fumarsyre eller methansulfonsyre og salte med baser, som f.eks. alka- 20 li- eller jordalkalimetalhydroxider, specielt natrium- og kaliumhydroxider eller med organiske baser, som f.eks. triethylamin, pyridin, benzylamin eller collidin, herunder aminosyrer, som f.eks. lysin eller procain.

25 Opfindelsen omfatter også indre salte, dvs. zwitterioner.

I den foreliggende beskrivelse med krav omfatter udtrykket "halogen" fortrinsvis fluor og chlor, men også iod-og bromatomer. 1 2 3 4 5 6

En beskyttet hydroxygruppe kan være en hydroxygruppe be 2 skyttet med en beskyttende gruppe, f.eks. valgt blandt en 3 eventuelt substitueret, specielt halogensubstitueret 4 acylgruppe, f.eks. acetyl, monochloracetyl, dichlorace- 5 tyl, trifluoracetyl, benzoyl eller p-bromphenacyl; og en 6 triarylmethylgruppe, specielt triphenylmethyl; en silyl-gruppe, specielt trimethylsilyl, dimethyl-tert-butylsi-lyl, diphenyl-tert-butylsilyl eller også en gruppe som DK 170341 B1 2 f.eks. tert-butoxycarbonyl, p-nitro-benzyloxycarbonyl, 2,2,2-trichlorethoxycarbonyl, allyloxycarbonyl, benzyl og pyranyl.

5 Foretrukne beskyttende grupper for hydroxyfunktionen er * p-nitrobenzyloxycarbonyl; dimethyl-tert-butylsilyl; di-phenyl-tert-butylsilyl; trimethylsilyl; allyloxy-carbo-nyl; benzyl; p-bromphenacyl; triphenylmethyl og pyranyl.

10 Særlige eksempler på foretrukne omhandlede forbindelser er angivet i nedenstående tabel; 15 V- A— CH2-Q( + ) j-N-\ o/ co2(-) 20

Forbindelse | -A- | -Q^ -1-1- 25 1 i j -?o CK3

I I

30 I I

1 \ 35 I I CH3

I I

DK 170341 B1 3

Forbindelse | -A- | -Q^ !-1-1- ! » j -<§>- j M©

I I

I I

ίο I I

I I

i -(Sy j -+t(oycom2

I I

I I

I I

I I

20 I I

I I ^ C2H5 * I -®- I ^ I I . CH3 25 I i 30 » j -<0>- I -«O» I I CH3

35 I I

4 DK 170341 B1

Forbindelse | -A- | -Q^+^ I I * 5 14 I Jjo). i —*(o) i i

I I

ίο I I

5 js) ! _(i0 I I I ch3

15 I I

I I

I I

I I

! φ i v

25 I I

» " ! J§L j -*<2>

I I

II * 35 5 DK 170341 B1

Forbindelse | -A- | -Q^ -|-J- | & | I I ch3

I I

I I

I I

ίο I I

• 1

31 I -ch2ch2- i —i\J

I I CH3

15 I I

I I

I I

20 25 1 35 6 DK 170341 B1

Forbindelse | -A- | -Q^+^ -1-1- I I * 5 35 | -CH CH CH- | —i/ i I © / N- I I CH.

I I ^ i i

ίο I I

I I

41 I -CHOC— i ©/N

41 I 2 || I -N

I 0 I i\/ 1 CH,^ 15 I I 3

I I

I I

I I

20 I I Θ 42 I -CH2CH2-OC- , —N\i^/

I 0 I

I I

I I

25 I I

I I

I I

! ! ©

43 1 “CH CH -0C- I —N I

30 I o I

I I

I I

35 7 DK 170341 B1

Forbindelse | -A- | -Q^ + ^ -1-1- 5 I /—V I (Me 54 I -\Of- I -fi(o) I I '^Me

I I

io i I

I I

„ “ i i ^

I I OH

I I

I I

I I

20 I I

55/a I I

I I

25 I I

I I

I I

I I

” “ i -©- i -s\^> I I ra2

I I

35 8 DK 170341 B1

De omhandlede forbindelser med formel 1 kan fremstilles ved en fremgangsmåde, der er ejendommelig ved, at man omsætter en forbindelse med formel II

5 ^R1 N R2 (II) ^R3

hvori R^, R2 og R^ betegner det ovenfor definerede, med 10 et penem-mellemprodukt med formlen III

j£. /S

N— a-ch2-l (ih) /'-N-^ 15 0 C02Z' hvori R" betegner en hydroxybeskyttende gruppe, og A betegner det ovenfor definerede, Z’ betegner en carboxybe-skyttende gruppe, og L betegner en fraspaltelig gruppe, 20 der er i stand til nucleofil ombytning med aminen med formlen II, og at man herefter fjerner de tilstedeværende beskyttende grupper og eventuelt adskiller en blanding af isomere i de enkelte isomere. 1 2 3 4 5 6 35

Den fraspaltelige gruppe L i forbindelsen med formlen III

2 kan f.eks. være en sulfonyloxygruppe -0S02R’, hvori R' 3 betegner en substitueret eller usubstitueret alkyl eller 4 arylgruppe eller et halogenatom som f.eks. iod, brom el 5 ler chlor.

6

En særlig foretrukken sulfonyloxygruppe er trifluorme-thansulfonyloxygruppen -OSO^F^.

Et særligt foretrukkent halogenatom er iod.

En carboxybeskyttende gruppe Z1 kan være en hvilken som helst gruppe, der sammen med -C02~gruppen danner en este- DK 170341 B1 9 rificeret carboxygruppe. Eksempler på carboxybeskyttende grupper er specielt C^-Cg-alkylgrupper, som f.eks. methyl, ethyl eller tert-butyl; halogen-substituerede C^-Cg-alkylgrupper, f.eks. 2,2,2-trichlorethyl; C2“C^-al-5 kenylgrupper, som f.eks. allyl; eventuelt substituerede arylgrupper, som phenyl og p-nitro-phenyl; eventuelt substituerede aryl-C^-Cg-alkylgrupper, som f.eks. benzyl, p-nitro-benzyl og p-methoxybenzyl; aryloxy-C^-Cg-alkylgrup-per, f.eks. phenoxyethyl, eller grupper som benzhydryl, 10 o-nitro-benzhydryl, acetonyl, trimethylsilyl, diphenyl- tert-butylsilyl og dimethyl-tert-butylsilyl eller grupper som pivaloyloxymethyl eller phthalidyl.

Særligt foretrukne carboxybeskyttende grupper er allyl, 15 p-nitrobenzyl, trimethylsilyl, dimethyl-tert-butylsilyl og trichlorethyl.

Den hydroxybeskyttende gruppe R" i forbindelsen med formlen III er specielt dimethyl-tert-butylsilyl.

20

Omsætningen mellem en forbindelse med formlen II og en forbindelse med formlen III kan udføres i et passende organisk, fortrinsvis aprotisk opløsningsmiddel, der f.eks. kan være tetrahydrofuran, dimethylformamid, acetone eller 25 en halogeneret carbonhydrid som dichlormethan.

Omsætningstemperaturen kan fortrinsvis variere mellem ca.

-100 °C og ca. +40 °C, fortrinsvis mellem -70 °C og +15 °C.

30

En forbindelse med formlen III, hvori L betegner en sul-fonyloxygruppe, kan fremstilles på kendt måde og ved almindelige metoder, ved omsætning af en carbinol-precursor med formlen IV 35 DK 170341 B1 10 OR" Λ-. a-ch2oh (IV )

I r I

o ^ co2z · 5 hvori R", A og Z’ betegner det ovenfor definerede, med det passende sulfonylanhydrid eller sulfonylhalogenid, fortrinsvis triflinsyreanhydrid, et triflinsyrechlorid i 10 nærvær af en nucleofil syreacceptor, der f.eks. kan være en organisk base som calcium eller lithiumcarbonat eller calciumoxid eller en organisk base, som f.eks. 2,6-luti- m din, eller også den samme forbindelse med formel II, der skal-omsættes i det efterfølgende trin.

15 .

Ifølge en foretrukken fremgangsmåde omsættes forbindelsen med formlen IV med det passende sulfonylanhydrid eller sulfonylhalogenid i nærvær af et overskud, sædvanligvis i en mængde lig med eller to gange den molære ækvivalente 20 mængde af den Ønskede forbindelse med formlen II: i dette tilfælde isoleres forbindelsen med formlen III endog ikke fra reaktionsblandingen, fordi den reagerer in situ med forbindelsen med formlen II.

25 Den foretrukne fremgangsmåde udføres sædvanligvis under anvendelse af tør dichlormethan som opløsningsmiddel ved temperaturer fra ca. -70 °C til +25 °C.

Når en forbindelse med formlen II omsættes med en forbin-30 delse med formlen III, hvor L betegner halogen, kan tilstedeværelsen af et sølvsalt, specielt et som er opløseligt i reaktionsmediet, f.eks. AgC104, være en fordel.

En forbindelse med formlen III, hvori L betegner halogen, 35 kan fremstilles ud fra den tilsvarende carbinol-precursor med formlen IV efter en modificeret Mitsunobu-reaktion, hvor carbinolen omsættes med organisk aminhydrohalogenid DK 170341 B1 11 som f.eks. methoxyaminhydrochlorid, pyridinhydrochlorid, pyridinhydrobromid og det foruddannede kompleks opnået ud fra diethylazodicarboxylat og triphenylphosphin, idet omsætningen udføres f.eks. i tetrahydrofuran eller methy-5 lenchlorid, fortrinsvis omkring stuetemperatur.

Alternativt kan ved en modificeret Mitsunobu-reaktion et zinkhalogenid, som f.eks. zinkchlorid, zinkbromid og zinkiodid, anvendes i stedet for det organiske aminhydro-10 halogenid under betingelser, der i det væsentlige svarer til de, der er beskrevet i J. Org. Chem., 1984, 49, 3027.

Alternativt kan en forbindelse med formlen III, hvori L betegner halogen, fås ud fra carbinolen med formel IV ved 15 mere almindelig metoder, der indebærer omsætning med uorganiske halogenider som f.eks. S0C12, PClg, PC13, PBr3, P0C13, P0Br3.

En yderligere metode, der er velkendt i litteraturen, 20 nemlig omsætningen med PPhg i CCl^, kan anvendes til fremstilling af forbindelsen med formel III, hvori L betegner chlorid.

En forbindelse med formlen III, hvor L betegner iod, kan 25 fremstilles ved en halogenid-ombytningsreaktion ud fra en forbindelse med formel III, hvor L betegner chlor eller brom og natriumiodid, idet denne omsætning fortrinsvis udføres med acetone ved temperaturer fra 0 °C til +60 °C (tilbagesvalingstemperatur).

30

Visse mellemprodukter med formel III, fortrinsvis dersom L betegner chlor, og mellemprodukter med formel IV, enten som sådan eller i form af deres beskyttede derivater, er kendte forbindelser eller kan fremstilles ud fra kendte 35 forbindelser ved følgende almene metoder. Disse omfatter f.eks.

12 DK 170341 B1

A) termisk ringslutning af en forbindelse med formel V

°/ 5 — a-ch2w I x (V) )/-NNffPh3 0 C02Z' 10 hvori R", A og z1 betegner det ovenfor definerede, X betegner svovl eller oxygen, og W er en fri eller beskyttet OH-gruppe, eller halogen, fortrinsvis chlor, således som f.eks. beskrevet i J. Am. Chem. Soc., 15 1978, 100, 8214 og Chem. Pharm. Bull., 1981, 29, 3258;

B) termisk ringslutning af en forbindelse med formel VI

20 O# • a-ch2w ' II (VI) cr Νγο •C02Z' 25 hvori R", X, A og Z' betegner det ovenfor definerede, og W betegner en fri eller beskyttet 0H-gruppe; denne ringslutning udføres i nærværelse af et organisk phosphit, 30 fortrinsvis trimethyl- eller triethylphosphit, således som f.eks. beskrevet i Chem. Pharm. Bull., 1983, 31, 768 og Tetrahedron Lett., 1984, 25, 2395; 35 DK 170341 B1 13 C) omsætning af en forbindelse med formel VII OR"

5 A-°H

I_I (VXD

S*-N ^C02Z' 10 hvori R", X, A og Z' betegner det ovenfor definerede, med en carboxylsyre med formel VIII eller et aktiveret derivat heraf ψ HOC - CH-W (VIII) 15 o hvori W betegner det ovenfor definerede, således som f.eks. beskrevet i engelsk patentansøgning nr.

2 118 181A.

20

Specielt kan fremgangsmåde C anvendes til fremstilling af mellemprodukter med formel III og IV, hvori -A- betegner en gruppe 25 -Z-0-C0- hvori Z betegner C1_4~alkylen; metode B kan anvendes til

fremstilling af forbindelser med formel IV, og metode A

kan anvendes til at fremstille mellemprodukter med formel III og IV.

30

Fjernelse af de beskyttende grupper kan udføres ved kendte metoder; f.eks. kan silylgrupper fjernes under milde sure betingelser eller med fluoridioner, f.eks. med te- trabutylammoniumfluorid; p-nitrobenzylgruppen kan fjernes 35 ved reduktion, f.eks. ved katalytisk hydrogenering eller DK 170341 B1 14 med metaller som f.eks. Fe og Zn; allylcarboxylater kan spaltes ved transallylering med en organisk syre eller et salt heraf som f.eks. eddikesyre, 2-ethylhexansyre og deres natrium- og kaliumsalte, idet denne omsætning kataly-5 seres med et triphenylphosphin-palladium-kompleks, fortrinsvis med tetrakis-triphenylphosphin-Pd0.

Den eventuelle saltdannelse af en fremstillet forbindelse og adskillelsen af en blanding af isomere i de enkelte 10 isomere kan udføres på kendte måder.

Forbindelserne med formel II, V, VI, VII og VIII er kendte forbindelser og kan fremstilles ud fra kendte forbindelser på kendte måder.

15

De omhandlede forbindelser med formel I er kraftige, bredspektrede antibakterielle midler. I forhold til andre penem-forbindelser, f.eks. natriumsaltene af penem-forbindelser med formlen IV eller forbindelserne med formel 20 ir hvori Q betegner en amin i stedet for kvaternært ammonium, er de sædvanligvis i besiddelse af betydelig forøget in vitro aktivitet over for både Gram-positive og .Gram-negative stammer.

25 Herudover udviser de i forhold til andre penem-forbindelser usædvanlige forlængede plasmaniveauer og, dersom de afprøves in vivo efter parenteral administrering, udviser de en særdeles høj terapeutisk effektivitet ved behandling af infektioner, der er forårsaget af både Gram-posi-30 tive og Gram-negative bakterier, idet deres toxicitet på den anden side er ganske ringe.

Tabel I viser in vitro virkning af en typisk forbindelse med formel I, nemlig forbindelsen 5 fra de tidligere 35 eksempler, i forhold til en klassisk penem-forbindelse nemlig FCE 21420 (J. Antibiotics, 1982, 3j5, 1248) og det tredie generations cephalosporin Cefotaxim.

15 DK 170341 B1

Tabel II viser in vivo aktiviteten af forbindelsen 5.

TABEL I

In vitro-bakteriel aktivitet (r/ml) over for Gram-positi-5 ve og Gram-negative bakterier bestemt ved agar-fortyndingsmetoden

Forbin-., FCE 100,00 Organisme delse 5 ' 21420 ' Cefotaxim 10----

Staphylococcus aureus Smith 0,011 0,046 0,77 S. aureus 209 P 0,005 0,046 1,56 S. epidermidis 0,19 0,76 6,25

Streptococcus faecalis (4 stammer) 0,06 0,1 10 S. pyogenes ATCC 12384 0,001 0,022 1,25

Klebsiella aerogenes 1522 E 0,38 1,55 0,095 15 K. aerogenes 1082 E 0,38 0,76 6,25

Escherichia coli 026:B6 0,19 0,76 0,38 E. coli 026:B6 cef R (IV) 0,38 3,12 1,25

Proteus morganii ATCC 25830 0,38 1,52 0,037 P. rettgeri ATCC 9250 0,38 1,52 0,018

Citrobacter freundii ATCC 8090 0,19 1,52

Serratia marcescens ATCC 2902 0,76 3,12 20 Pseudomonas aeruginosa 2598 25 100 25 25 1 35 16 DK 170341 B1 1) Forbindelse 5: /\ λ +/ \ i-N-_ 0 ^2 2) FCE 21420:

10 °JHH

^ Y^0C0CH3

15 TABEL II

In vivo-resultater for forbindelse 5 t 1/2« t 1/2& (minutter) 20 Plasma-halveringstid^ 5 15 o}

Eksperimentel infektion i mus ' 1 2 3 4 5 6 35 -- 2 ED50 (mg/kg, op- 3

Organisme summeret dosis) 4

Staphylococcus aureus Smith 0,006 5

Escherichia coli 6 0,5 6

Klebsiella pneumoniae FI 5724 0,8 17 DK 170341 B1 1) Bestemt efter en enkel intravenøs dosis (10 mg/kg) i mus; plasmakoncentrationen mod tidsresultaterne kunne bedst beskrives efter en todelt åben model med den angivne t 1/2 5 2) Intraperitoneal infektion i mus med en 3 x LD^q belastning; behandling ved 30, 90 og 360 minutter efter infektion.

10 På grund af deres høje antibakterielle virkning er de omhandlede forbindelser f.eks. af værdi ved behandling af luftvejsinfektioner som f.eks. bronchitis, bronchopneumo- 0 nia, pleuritis, hepatobililære og abdominale infektioner, septicemia; urinvejsinfektioner som f.eks. pyelonephri-15 tis, cystitis; obstetriske og gynækologiske infektioner som cervicitis, endometritis; øre-, næse- og svælginfektioner som f.eks. otitis, sinusitis og parotisis.

Herudover blev den antibakterielle aktivitet af en række 20 udvalgte penem-forbindelser ifølge opfindelsen sammenlignet med to kendte forbindelser. Forbindelserne ifølge opfindelsen var forbindelse nr. (1), (2), (5), (7), (12), (22), (23), (31), (41), (54), (55) og (55/a), der er angivet i tabellen og følgende fem yderligere derivater: 25 ? H nU) 30 ,_i_[ _ 35 DK 170341 B1 18

Forbindelse -A- -Q^ + ^ 5 FCE 24390 -(°¾½- ^ 10 FCE 25133 —^ Q ^— «. ^ Q ^— CO^Na /HgOOjte 15 FCE 25165 _^£^- ^K^O/ 20 FCE 25226 -/ o V" p ^OOjNa 25 FCE 25409 3

Som referenceforbindelser, er den først anvendte generisk 30 omfattet af EP-A-0110826. Denne penem-forbindelse er (5R, 6S)-6-[(lR)hydroxyethyl]-2-(5-ethoxycarbonyl-l,2,3-triazol-l-yl)-methylpenem-3-carboxylat, natriumsalt. Forbindelsen er karakteristisk ved at have en N-hetero-cyclisk gruppe, der ikke bærer en positiv ladning, 35 knyttet til penem skelettet.

19 DK 170341 B1 OH Ji—»

5 AL·8 ^ - NO

jXjC ^ yy \co Na 0 2 10 Den anden penem-forbindelse er omtalt side 51, eksempel 28 C i GB-A-2 042 515. Forbindelsens kemiske navn er (5R,S)-2-trimethylammoniumpropyl]penem-3-carboxylat.

9 15 H , © H_I_ J- 20

Resultaterne er angivet i efterfølgende tabel. De viser klart fordelene ved forbindelserne ifølge opfindelsen. De hidtil kendte forbindelser udviser klart mindre antibak-25 teriel aktivitet end forbindelserne ifølge opfindelsen. 1 35 20 DK 170341 B1 TABEL - In vitro antibakteriel aktivitet S.f. E.c.+ C.f

Forbin- S.a. ' ATCC B cef E.cl. K.a. ATCC 5 delse Smith 8043 R P 99 1082 E 8090 (1) 0,045 6,25 1,56 6,25 0,78 0,78 (2) 0,011 1,55 0,76 1,55 0,38 0,19 (5) 0,011 1,55 0,76 1,55 0,38 0,19 (7) 0,011 1,56 0,19 0,78 0,39 0,19 (12) 0,022 6,25 0,39 1,56 0,39 0,39 in (22) 0,011 3,12 0,78 0,78 0,78 0,78 1U (23) 0,045 3,12 1,56 3,12 1,56 0,78 (31) 0,045 n.d.(3) 3,12 3,12 3,12 6,25 (41) 0,045 12,5 3,12 3,12 6,25 3,12 (54) 0,09 3,12 1,56 6,25 1,56 0,78 (55) 0,022 3,12 3,12 6,25 0,78 0,19 (55/a) 0,09 6,25 6,25 6,25 0,78 0,78 15 FCE 24390 0,045 12,5 1,56 1,56 3,12 1,56 FCE 25133 0,09 6,25 0,78 3,12 0,39 0,78 FCE 25165 0,09 0,78 0,39 3,12 0,12 0,39 FCE 25226 0,09 6,25 0,19 3,12 0,19 0,19 FCE 25409 0,09 12,5 0,39 6,25 0,78 1,56

Reference- forbindelser 20 _______ EP-A- 0 110 826 0,18 n.d. 25 >50 >50 25 GB-A- 2 042 515 0,18 n.d. 6,25 >50 n.d. 12,5 25 1 35 DK 170341 B1 21 (1) Minimum hæmmende koncentrationer (MIC , ug/ml) blev

S

fastlagt ved standard to-fold agar fortyndingsmetoden i Bacto Antibiotic Medium [Difco (R)].

5 (2) Organismer anvendt i forbindelse med tabeller er: S.a. = Staphylococcus aureus S.f. = Streptococcus faecalis E.c.+ = Escherichia coli 5-lactamase producent 10 E.cl♦+ = Enterobacter cloacae b-lactamase producent K.a. = Klebsiella aerogenes, b-lactamase producent C.f. = Citrobacter freundii (3) n.d. = ikke bestemt 15

De omhandlede forbindelser kan administreres enten til mennesker eller dyr i en hel række dosisformer f.eks. peroralt i form af tabletter, kapsler, drop eller sirupper; rektalt i form af suppositorier; parenteralt f.eks.

20 intravenøst eller intramuskulært (som opløsninger eller suspensioner), idet den intravenøse administreringsmåde foretrækkes i alvorlige situationer; ved inhalation i form af aerosoler eller opløsninger til tågedannelse; in-travaginalt i form f.eks. af stave eller topisk i form af 25 lotioner, cremer og salver. De farmaceutiske eller veterinære præparater, der indeholder de omhandlede forbindelser med formlen I, der også falder inden for den foreliggende opfindelses rammer, kan fremstilles på almindelig måde, idet der anvendes almindelige bærestoffer eller 30 fortyndingsmidler, der f.eks. anvendes til cephalosporin-er.

Almindelige bærestoffer eller fortyndingsmidler er f.eks. vand, gelatine, lactose, stivelsesarter, magnesiumstea-35 rat, talkum, vegetabilske olier, cellulose og lignende.

Den daglige dosis ligger i området fra ca. 0,5 til ca.

100 mg pr. kg legemsvægt, idet er tages hensyn til dyre- DK 170341 Bl 22 arten, til alderen, vægten og tilstanden af den patient, der skal behandles, og af hyppigheden og administreringsvejen.

5 En foretrukken administreringsmåde for de omhandlede forbindelser er den parenterale: i dette tilfælde administreres forbindelserne f.eks. til voksne mennesker i en mængde på fra ca. 250 mg til ca. 1000 mg pr. dosis, fortrinsvis ca. 500 mg pr. dosis i 1 til 4 gange om dagen, 10 idet forbindelsen er opløst i et passende opløsningsmiddel som f.eks. sterilt vand eller lidocain-hydrochlorid-opløsning til intramuskulære injektioner, og sterilt vand, fysiologisk saltvand, dextroseopløsning eller almindelige intravenøse væsker eller elektrolyter til in-15 travenøse injektioner. Yderligere kan de omhandlede forbindelser administreres profylaktisk, dvs. som rensende eller overfladedesinficerende præparater f.eks. i en koncentration på ca. 0,2 til 1 vægt-% af forbindelsen blandet med, suspenderet eller opløst i et almindeligt inert 20 tørt eller vandigt bærestof, der anvendes til afvaskning eller spray.

De kan også anvendes som fodertilskud til dyrefoder.

25 Følgende eksempler illustrerer opfindelsen nærmere, idet dog eksemplerne 10 og 11 illustrerer fremstilling af mellemprodukter .

EKSEMPEL 1 30 (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-[4-(N-methylpyrrolidino-methyl)phenyl]-penem-3-carboxylat (forbindelse 1)

En opløsning af (3S)-[(lR)-tert-butyldimethylsilyloxy-35 ethyl]-(4R)-[4-(tert-butyldiphenylsilyloxyraethyl)-phe nyl] -acetylthio-1-[(a-triphenylphosphoranyliden)allyloxy-carbonylmethyl]azetidin-2-on (1,6 g) i tør destilleret DK 170341 B1 23 tetrahydrofuran (16 ml) behandles med eddikesyre (0,95 ml) og tetrabutylammoniumfluoridtrihydrat (1,25 g).

Efter 6 timers omrøring ved stuetemperatur fjernes opløs-5 ningsmidlet i vakuum, og remanensen udrystes mellem fortyndet vandig NaHCO^ og ethylacetat.

Remanensen fra det organiske lag renses ved Si02~kromatograf i, hvilket giver (3S)-[(lR)-tert-butyldimethylsilyl-10 oxyethyl]-(4R)-[4-(hydroxymethyl)phenyl]-acetylthio-Ι Ε (a-triphenylphosphoranyliden)allyloxycarbonylmethyl]aze-tidin-2-on (1,0 g) som et skum.

En opløsning af dette materiale i toluen (30 ml) opvarmes 15 7 timer med tilbagesvaling; opløsningsmidlet fjernedes herefter, og remanensen hældtes gennem en SK^-søjle (EtOAc-cyclohexan som elueringsmidler). Der opnåedes al-lyl (5R,6S)-6-[(IR)-tert-butyldimethylsilyloxyethyl]-2- [4-(hydroxymethyl)phenyl]-penem-3-carboxylat (375 mg) som 20 voksagtig substans; IR; » (CH„C10) 1790, 1710 cm-"*·; NMR (60 MHz, CDClg + D20) = δ 0,08 (6H, s, SiMe2), 0,88 (9H, s, SiBu1), 1,28 (3H, d, J = 6 Hz, CH3-CH), 3,68 (IH, dd, J = 1,5 og 6 Hz, H-6), 4,2 (IH, m; CH^CH), 4,5-4,7 (4H, m, ArCH2 + C02CH2), 5,2 og 5,35 (2H, hvert m, =CH2), 25 5,65 (IH, d, J - 1,5 Hz, H-5), 5,9 (IH, m, CHgCH-CHg), 7- 7,5 (4H, m, Ar) ppm.

En opløsning af ovennævnte mellemprodukt (225 mg) i tør ethanolfri dichlormethan (10 ml), afkølet ved -50 °C un-30 der argon, behandledes efter hinanden med N-methylpyrro-lidin (0,25 ml) og trifluormethansulfonsyreanhydrid (0,125 ml). Man lod reaktionsblandingens temperatur stige til -20 °C, og efter 20 minutters forløb bratkøledes med 0,1 M vandig saltsyre. Det organiske lag fraskiltes, der 35 vaskedes med saltvand, tørredes og inddampedes til en remanens, der tritureredes i ethylacetat-ethylether-blan-dinger, hvorved opnåedes allyl (5R,6S)-6-[(lR)-tert-bu- DK 170341 B1 24 tyldimethylsilyloxyethyl]-2-[4-(N-methylpyrrolidinome-thyl)phenyl]-penem-3-carboxylat som et pulver (150 mg); IR: » „ (CHClo film) 1785, 1710 cm-1.

luaX o 5 Dette materiale optoges i tetrahydrofuran (9 ml) og eddikesyre (0,18 ml), og tetrabutylammoniumfluoridtrihydrat (0,3 g) tilsattes. Den klare opløsning henstod 30 timer ved stuetemperatur, hvorefter den koncentreredes og ledtes gennem en silicagel-søjle pakket med CH2C12.

10

Ammoniumsaltene elueredes med en gradient af MeCN i CH2C12; herefter elueredes forbindelsen med vandig MeCN.

De produktholdige fraktioner udsaltedes (NaCl), og den fraskilte vandige fase ekstraheredes med frisk MeCN.

15 MeCN-fasen og MeCN-ekstrakterne opsamledes, der tørredes (MgS04) og inddampedes til opnåelse af salte (Cl-, acetat) af allyl (5R,6S)-6-[(lR)-hydroxyethyl]-2-[4-(N-me-thyl-N-pyrrolidinomethyl)phenyl]-penem-3-carboxylat (90 mg); IR »max (film) 3400-3200, 1785, 1710 cm-1).

20

Ovennævnte forbindelse (90 mg) i en 1:1 tetrahydrofuran-dichlormethan-blanding (6 ml) behandledes efter hinanden med eddikesyre (0,03 ml), triphenylphosphin (9 mg) og te-trakis (triphenylphosphin) Pd(0) (9 mg).

25

Efter 10 minutters omrøring gentoges tilsætningen af HOAc, PPhg og katalysatoren, og efter yderligere 15 minutters forløb fjernedes opløsningsmidlet i vakuum. Remanensen opløstes i demineraliseret vand og rensedes ved 30 omvendt fasekromatografi (LiChroprep RP-18 Merck), der først elueredes med vand, herefter med en gradient i MeCN (fra 95:5 til 1:1) og til slut med H20-MeCN-Et0H (4:6:1).

De passende fraktioner (TLC på Si02, i-Pr0H/H20/H0Ac 5:1:1, langsomt løbende plet) blev slået sammen og fryse-35 tørret, hvorved der opnåedes 40 mg af titelforbindelsen; IR: (KBr) 3400, 177°. 1620 cm”1? NMR (20° MH2/ Do0): lucLX Z 1 1,31 (3H, d, J = 6,3 Hz, CH3CH), DK 170341 B1 25 αΗ + ), 2,95 (3H, s, CHgN), 3,3-3,7 H-v 5 (4H, m, formel ^ | 4,00 (IH, dd, J = 1,6 og 6,0 Hz,

H

H-6), 4,27 (IH, dq, J = 6,0 og 6,3 Hz, CH3-CH), 4,51 (2H, 10 + S, CH2N), 5,80 (IH, d, J = 1,5 Hz, H-5), 7,53 (4H, s, Ph) ppm, UV - λ (Η,,Ο): 250 og 330 nm.

ITloX /* 9 EKSEMPEL 2 15 (5R,6S)-6-[(lR)-hydroxyethyl]-2-[4-(pyridinomethyl)phenyl ] -penem-3-carboxylat (forbindelse 5)

En opløsning af allyl (5R,6S)-[tert-butyldimethylsilyl-20 oxyethyl]-2-[4-(hydroxymethyl)phenyl]-penem-3-carboxylat (300 mg) fremstillet som beskrevet i eksempel 1 i tør, ethanolfri dichlormethan (16 ml) behandledes med pyridin (1,4 ml) og trifluormethansulfonsyreanhydrid (0,8 ml) ved -40 °C under nitrogen. Efter 30 minutters forløb tilsat-25 tes 0,1 M vandig saltsyre (10 ml), det organiske lag fraskiltes, vaskedes med en yderligere mængde 0,1 N saltsyre, tørredes og inddampedes.

Den fremkomne remanens (410 mg) opløstes i tetrahydrofu-30 ran (20 ml) og omrørtes 24 timer ved stuetemperatur i nærvær af eddikesyre (1 ml) og tetrabutylammoniumfluorid-trihydrat (1,6 g). Fjernelse af opløsningsmidlet og rensning ved hjælp af silicagel-søjlekromatografi (C^C^, derefter C^C^-MeCN, dernæst MeCN-^O) gav ally lesteren 35 af titelforbindelsen (250 mg); IR: » (KBr): 3400, « mox 1780, 1705 cm ? UV: (EtOH) 256 og 336 um.

max DK 170341 B1 26

Dette materiale opløstes i en 1:1 tetrahydrofuran-di-chlormethan-blanding og omrørtes under argon i nærvær af eddikesyre (0,25 ml), PPh3 (25 mg) og tetrakis (triphe-nylphosphin) Pd(0) (25 mg).

5

Mere katalysator tilsattes med 10 minutters mellemrum (4 x 25 mg), indtil reaktionen blev bedømt som værende løbet til ende ved hjælp af TLC (C6H6-Et0Ac-H0Ac-H20 9:9:15:5).

10 Efter inddampning i vakuum opløstes remanensen i vand og rensedes ved omvendt fasekromatografi.

Frysetørring af de sidst eluerede fraktioner gav titelforbindelsen (100 mg); IR: v (KBr) 3400, 1770, 1600 15 cm-1, NMR (200 MHz, D20): δ 1,29 (3H, d, J « 6,4 Hz, CH3CH), 3,94 (IH, dd, J = 1,6 og 6,0 Hz, H-6), 4,24 (IH, dg, J = 6,0 og 6,4 Hz, CH3CH), 5,74 (IH, d, J - 1,6 Hz, +

H-5), 5,80 (2H, s, N), 7,43 (4H, m, Ph), 8,05 (2H, dd, J

20 .— - 6,5 og 7,7 Hz, \Q ) ), 8,55 (IH, t, J « 7,7 Hz, 'h 25 Ν.^Ο^ϋ ), 8,90 (2H, d, J = 6,5 Hz, S ) ppm?

H

UV: λ (Ho0): 254 og 330 nm. max & 30 EKSEMPEL 3 (5R,6S)-6-C(IR)-hydroxyethyl]-2-[2-pyridinomethyl)phe-nyl]-penem-3-carboxylat (forbindelse 14) 1

En blanding af kalium-2-hydroxymethylbenzoat (9,45 g) og chloracetone (5 ml) i tør dimethyl formamid (100 ml) omrørtes 3 timer ved stuetemperatur. Ethylacetat og saltop- DK 170341 B1 27 løsning sattes derefter til, og det organiske lag tørredes efter yderligere vask med vand og inddampedes, hvorved acetonyl-2-hydroxymethylbenzoat (10 g) opnåedes som et hvidt pulver. En opløsning af dette materiale (1 g) i 5 dimethylformamid (20 ml) omrørtes 3 timer i nærværelse af tert-butyldiphenylsilylchlorid (2,32 ml) og imidazol (0,864 g).

Reaktionsblandingen udrystedes mellem ethylacetat og van-10 dig saltsyre; den tørrede organiske fase inddampedes, og remanensen tritureredes i N-hexan, hvorved der opnåedes 2-(tert-butyldiphenylsilyloxymethyl)benzoat (0,94 g), som et hvidt fast stof. IR; » (CHC1«) 1740 sh, 1725 cm""·*·;

IllaX O .

NMR (60 MHz, CDC13) 6 1,15 (9H, s, SiBu ), 2,15 (3H, s, 15 CH3), 4,70 (2H, s, CH2CO), 5,20 (2H, s, PhCH20), 7,2-8,2 (14H, m, Ar) ppm.

Til denne forbindelse (0,78 g) opløst i acetonitril (25 ml) sattes en opløsning af N/10 NaOH (26,3 ml). Den frem-20 stillede blanding koncentreredes i vakuum til halvdelen af det oprindelige rumfang, og der tilsattes ethylacetat. Blandingen syrnedes med fortyndet saltsyre under omrøring, det organiske lag fraskiltes, vaskedes 2 gange med saltopløsning, tørredes og inddampedes.

25

Den faste remanens tritureredes i n-hexan og filtreredes, hvorved der opnåedes 2-(tert-butyldiphenylsilyloxyme-thyl)benzoesyre (0,54 g) som et hvidt fast stof med smeltepunkt 130-132 °C.

30

Denne forbindelse, der opløstes i tør ethanolfri dichlor-methan (30 ml), omrørtes 6 timer ved stuetemperatur i nærværelse af thionylchlorid (0,5 ml). Reaktionsblandingen inddampedes i vakuum fra benzen (2 gange), hvorved 35 der opnåedes 2-(tert-butyldiphenylsilyloxymethyl)benzoyl-chlorid, der straks anvendtes i det efterfølgende trin.

DK 170341 B1 28

En opløsning af sølv (3S)-[(lR)-tert-butyldimethylsilyl-oxyethyl]-1-[(β-triphenylphosphoranyliden)allyloxycarbo-nylmethyl]-2-oxoazetidinyl-4-thiolat (0,7 g) i tør di-chlormethan (25 ml) omsattes med ovenfor beskrevne acyl- 5 chlorid (0,55 g) og pyridin (0,08 ml) i 30 minutter ved β stuetemperatur. Efter tilsætning af Celite og aktivt kul, omrørtes blandingen yderligere 10 minutter, der fil- ø treredes gennem Celite og vaskedes herefter med 4% vandig saltsyre, med saltopløsning og med vandig natriumbi-10 carbonat. Flashkromatografi gav (3S)-[(lR)-tert-butyldi-methylsilyloxyethyl]-(4R)-[2-(tert-butyldiphenylsilyloxy-methyl)phenyl]-acetylthio-1-[(a-triphenylphosphoranyli-den)allyloxycarbonylmethyl]azetidin-2-on (0,8 g) som skum; IR: i» (CHCl«) 1740, 1660, 1610 cm-1.

maX O

15

Dette mellemprodukt opløstes i tør xylen og opvarmedes 7 timer med tilbagesvaling i nærvær af en katalytisk mængde hydroquinon (20 mg). Den afkølede reaktionsblanding ledtes gennem en Si02~søjle, hvorved der opnåedes allyl 20 (5R,6S)-6-[(IR)-tert-butyldimethylsilyloxyethyl]-2-[2- (tert-butyldiphenylsilyloxyraethyl)phenyl]penem-3-carboxy-lat (0,4 g); IR: * „ (film) 1790, 1710 cm-1; NMR (60 MHz, CDClg): 6 0,006 (6H, s, SiMe2), 0,8 (9H, s, SiBur), 1,1 (9H, s, SiBut), 1,25 (3H, d, J » 6,5 Hz, CHgCH), 3,6 25 (IH, dd, J = 1,5 og 4,5 Hz, H-6), 4,3 (IH, m, CHgCH), 4,5 (2H, d, CH2CH=CH2), 4,7 (2H, s, ArCH20), 4,9 (2H, m, CH=CH2), 5,5 (IH, d, J - 1,5 Hz, H-6), 5,7 (IH, m, CH2~ CH=CH2), 7,1-7,7 (14H, m, Ar) ppm. 1 2 3 4 5 6

Til en opløsning af dette materiale (400 mg) i tør tetra- 2 hydrofuran (20 ml) sattes eddikesyre (0,7 ml) og tetrabu- 3 tylammoniumfluoridtrihydrat (500 mg). Blandingen omrørtes 4 5 timer, opløsningsmidlet fjernedes i vakuum, og remanen 5 sen rensedes ved flashkromatografi (EtOAc-cyclohexan- 6 blandinger), hvorved der opnåedes allyl (5R,6S)-6-[(lR)-butyldimethylsilyloxyethyl]-2-[2-(hydroxymethyl)phenyl]-penem-3-carboxylat som hvidt skum (250 mg); IR: vmax DK 170341 B1 29 (film): 3400, 1790, 1705 cm-1; NMR (60 MHz, CDClg): δ 0,05 (6H, s, SiMe2), 0,9 (9H, s, SiBut), 1,25 (3H, d, CH3CH), 2,3 (IH, br, s, OH), 3,8 (IH, dd, J = 1,8 og 5 Hz, H-6), 4,3 (IH, m, CHgCH), 4,52 (2H, d, J * 5Hz, 5 CH2CH=CH2), 4,65 (2H, s, ArCH2), 5,2 (2H, m, CH2=CH2), 5,5-5,9 (IH, m, CH2-CH-CH2), 5,85 (IH, d, J = 1,8 Hz, H- 5), 7,2-7,8 (4H, m, Ar) ppm.

Pyridin (0,1 ml) og trifluormethansulfonsyreanhydrid (0,1 10 ml) sattes til en opløsning af nævnte mellemprodukt (100 mg) i tør CH2C12 (2 ml) ved -60 °C under nitrogen. Efter , 15 minutters omrøring ved -40 °C bratkøledes reaktionsblandingen med 4% saltsyre og saltvand.

15 Det organiske lag fraskiltes, vaskedes 2 gange med saltopløsning og inddampedes, hvorved der opnåedes en remanens, der tritureredes med ethylether, hvorved der opnåedes allyl (5R,6S)-6-[(lR)-tert-butyldimethylsilyloxy-ethyl)-2-[2-(pyridinomethyl)phenyl]-penem-3-carboxylat, 20 chlorid, som et hvidt krystallinsk stof; IR: (KBr)

> IuaX

1795, 1705 cm" ; NMR (200 MHz, acetone άβ, 45 °C): δ 0,11 (6H, s, SiMe2), 0,91 (9H, s, SiBut), 1,28 (3H, d, J * 6,4 Hz, CH3CH), 4,07 (IH, m, H-6), 4,3-4,4 (3H, m, 0CH2CH-CH2 og CH3CH), 5,10 og 5,18 (hvert IH, m, CH=CH2), 5,68 (IH, ' 25 m, CH2CH=CH2), 5,95 (IH, d, J = 1,7 Hz, H-5), 6,10 (2H, m, PhCH2N+), 7,4-7,8 (4H, m, Ph), 8,19 (2H, dd, J = 5,7 og 7,8 Hz,—N O/ ), 8,72 (IH, t, J = 7,8 Ηζ,3ϊ'θΥ* ) 30 og 9,05 (2H, d, J * 5,7 Hz, —j/q\ ) PPm* H 1

Ved behandling efter hinanden af denne forbindelse med tetrabutylammoniumfluorid og til sidst med H0Ac/PPh3/(PPh3)4Pd under samme betingelser som angivet i DK 170341 B1 30 eksempel 2 opnåedes en prøve (25 mg) af titelforbindelsen. IR: V (KBr) 3400, 1765, 1590 cm"1; UV: λ (Ho0) max max 2 330 nm.

5 EKSEMPEL 4

Ved at arbejde som beskrevet i de tidligere eksempler fremstilledes følgende eksempler på analog måde: 10 (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl3-2—[4—(N-methylpyrrolidino- methyl)phenyl]-penem-3-carboxylat (2); (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(4-carbamoylpyridi-no)methyl]phenyl}penem-3-carboxylat (7); 15 (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(5-ethyl-2-methylpy-ridino)methyl]phenyl}penem-3-carboxylat (8); (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(1-methylpiperazino)-20 methyl]phenyl}penem-3-carboxylat (12); (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-[2-(N-methylpyrrolidino-methyl)phenyl]penem-3-carboxylat (20); 25 (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-[2-(N-methylpiperidinome- thyl)phenyl]penem-3-carboxylat (21); (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-[3-(pyridinomethyl)phenyl] penem-3-carboxylat (22); 30 (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-[3-(N-methylpyrrolidino-methyl)phenyl]penem-3-carboxylat (23).

35 DK 170341 B1 31 EKSEMPEL 5 (5R,6S)—6—[(IR)-hydroxyethy1]-2-[(N-methylpyrrolidino)-acetoxymethy1]-penem-3-carboxylat (forbindelse 41) 5

En opløsning af allyl (5R,6S)-6-[(IR)-tert-butyldimethyl-silyloxyethyl]-2-(hydroxymethyl)penem-3-carboxylat (480 mg) i tør dichlormethan (15 ml) behandledes efter hinanden triphenylphosphin (790 mg), tert-butyldiphenylsilyl-10 oxyeddikesyre (420 mg) og diethylazodicarboxylat (0,475 ml). Der skete svag exoterm reaktion, der hurtigt ophørte. Opløsningsmidlet fjernedes, og remanensen rensedes ved hjælp af silicagelsøjlekromatografi, hvorved der opnåedes allyl (5R,6S)-6-[(lR)-tert-butyldimethylsilyloxy-15 ethyl]-2-[(tert-butyldiphenylsilyloxy)acetoxymethyl]pe- nem-3-carboxylat (700 mg); IR: » (CHClo): 1780, 1740,

1 ITlcLX O

1710 cm .

Dette materiale opløstes i en tetrahydrofuranopløsning 20 (30 ml) af tetrabutylammoniumfluoridtrihydrat (630 mg) og eddikesyre (0,92 ml). Efter 1 times henstand ved stuetemperatur afdampedes opløsningsmidlet, og remanensen rensedes ved silicagelsøjlekromatografi, hvorved der opnåedes allyl (5R,6S)-6-[(lR)-tert-butyldimethylsilyloxyethyl]-2-25 [(hydroxymethyl)acetoxymethyl]penem-3-carboxylat som en gullig olie (250 mg); IR: * (CHC1Q): 1785, 1745, 1705 «I luaX o cm ; NMR (60 MHz, CDC12): δ 0,1 (6H, s, SiMe2), 0,9 (9H, s, SiBu*), 1,25 (3H, d, J = 6 Hz, CH3CH), 3,70 (IH, dd, J = 1,5 og 4,5 Hz, H-6), 4,2 (3H, m, C0CH20 + CH3CH), 4,75 30 (2H, m, C02CH2), 5,2 og 5,4 (2H, hvert m, = CH2), 5,35 (2H,ABq, J = 15 Hz, 2-CH20), 5,6 (IH, d, J = 1,5 Hz, H- 5), 5,8-6,2 (IH, m, CH-CH2) ppm.

Nævnte mellemprodukt (200 mg) blev opløst i tør CH2C12 35 (10 ml) og den afkølede opløsning (-70 °C, nitrogenatmos fære) behandledes efter hinanden med N-methylpyrrolidin (0,22 ml) og trifluormethansulfonsyreanhydrid (0,17 ml).

DK 170341 B1 32

Efter 10 minutters forløb fortyndedes reaktionsblandingen med yderligere CH2C12, der vaskedes med 4% vandig saltsyre, derefter med vand, tørredes og inddampedes.

5 Den olieagtige remanens omrørtes 20 timer i en tetrahy-drofuranopløsning (8 ml) indeholdende eddikesyre (0,5 ml) og tetrabutylammoniumfluoridtrihydrat (470 mg).

Herefter fjernedes opløsningsmidlet, og remanensen an-10 bragtes på en Si02~søjle pakket i dichlormethan. Eluering efter hinanden med CH2C12, CH2Cl2-EtOH 1:1, EtOH-MeCN gav visse urenheder, medens de ønskede salte af allyl (5R,6S)-6-[(lR)-hydroxyethyl]-2-[(N-methylpyrrolidino)-acetoxymethyl]penem-3-carboxylat opsamledes ved at eluere 15 med 35% vandig MeCN.

De produktholdige fraktioner opsamledes, mættedes med NaCl og ekstraheredes med MeCN.

20 De organiske ekstrakter tørredes og inddampedes; remanensen optoges i tør CH2C12 (10 ml) indeholdende HOAc (0,2 ml) og triphenylphosphin (50 mg) efterfulgt af tetrakis-(triphenylphosphin) Pd(0) (40 mg).

25 Efter 30 minutters omrøring ved stuetemperatur frafiltrerede katalysatoren, og efter fjernelse af opløsningsmidlet opløstes den urensede forbindelse i vand og rensedes ved omvendt fasekromatografi (LiChroprep RP-17 Merck, vand).

30

Titelforbindelsen elueredes med H20-MeCN og frysetørredes; hvidt pulver, 40 mg; IR; (KBr) 3400, 1765, 1610 cm ; UV: (Ho0) 258 og 308 nm, NMR (200 MHz, Do0) * XUO-X / m 1 35 1,29 (3H, j, J = 6,4 Hz, CHgCH), 2,24 (4H, m, DK 170341 B1 33 3,27 (3H, s, +NCH3), 3,6-3,9 (4H, m, N\_J )r 3,92 (IH, dd, J - 1,4 og 5,9 Hz, H-6), 4,24 (IH, dg, J = 5,9 5 og 6,4 Hz, CH3-CH), 4,45 (2H, s, CH2N+), 5,22 og 5,63 (2H, ABq, J = 14,0 Hz, 2-0¾), 5,68 (IH, d, J - 1,4 Hz, H-5) ppm.

EKSEMPEL 7 10 (5R, 6S) - 6- [ (IR) -hydroxyethyl] - 2- [3 - (N-methylpyrrolidino) -propyl]penem-3-carboxylat (forbindelse 31) METODE A 15

Til en opløsning af allyl (5R,6S)-6-[(lR)-tert-butyldime-thylsilyloxyethyl] -2- (3-hydroxypropyl )penem-3-carboxylat (400 mg) i tør ethanolfri dichlormethan (15 ml) afkølet ved -30 °C under nitrogen sattes efter hinanden N-methyl-20 pyrrolidin (0,47 ml) og trifluormethansulfonsyreanhydrid (0,36 ml).

Badet fjernedes, og reaktionsblandingen hens tod ved stuetemperatur, indtil det meste af udgangsmaterialet var 25 forsvundet (kontrol med TLC). Yderligere dichlormethan og 0,1 M vandig saltsyre tilsattes under omrøring, og den fraskilte organiske fase vaskedes med saltopløsning, tørredes og inddampedes, hvorved der opnåedes en olieagtig remanens, der for det meste bestod af salte (chlorid, 30 triflag) af allyl (5R,6S)-6-[(lR)-tert-butyldimethylsi- lyloxyethyl] - 2- [3 - (N-methylpyrrolidinopropyl ] -penem-3-carboxylat.

Uden rensning sattes dette materiale til en opløsning af 35 tetrabutylammoniumfluoridtrihydrat (1,8 g) i tetrahydro- furan (15 ml) og eddikesyre (1 ml), og desilyleringen kontrolleredes med TLC. Når omsætningen var løbet til en DK 170341 B1 34 de, fjernedes opløsningsmidlet i vakuum, og remanensen rensedes ved flashkromatografi (CHC^-MeCN og derefter MeCN-H20).

5 Den fremstillede forbindelse (0,27 g), allylesteren af titelforbindelsen, omrørtes 30 minutter under nitrogen i en blanding af triphenylphosphin (50 mg) og tetrakis (triphenylphosphin) palladium (50 mg) i dichlormethan-te-trahydrofuran (7 ml + 7 ml) og eddikesyre (0,5 ml).

10

Katalysatoren frafiltreredes, og opløsningen ledtes efter fjernelse af opløsningsmidlet gennem en søjle pakket med LiChroprep RP-18 Merck ved at elueres med vand og herefter med 10% MeCN i vand. Frysetørring af de korrekte 15 fraktioner gav titelforbindelsen (70 mg); IR: » (KBr) « ΠΙβΙΧ 3400, 1765, 1605 cm-·1·; UV: (Ho0) 304 nm.

luctX Z

METODE B

20 Allyl (5R,6S)-6-[(lR)-tert-butyldimethylsilyloxyethyl]-2- (3-chlorpropyl)penem-3-carboxylat (270 mg) og natrium-iodid opvarmedes med tilbagesvaling under argon i tør acetone, indtil reaktionen bedømtes løbet til ende ved hjælp af TLC. Det meste af opløsningsmidlet fjernedes i 25 vakuum, og remanensen udrystedes mellem ethylacetat og vand.

Det tørrede organiske lag koncentreredes til opnåelse af en remanens, der rensedes ved kortvejs-flashkromatografi, 30 hvorved man opnåede allyl (5R,6S)-6-[(lR)-tert-butyldime- thylsilyloxyethyl]-2-(3-iodpropyl)penem-3-carboxylat som en sirup (220 mg); IR: » (film) 1790, 1710 og 1580 ^ ΙΠοΧ cm . Til en opløsning af ovennævnte materiale i tør te-trahydrofuran (30 ml) sattes N-methylpyrrolidin (0,1 ml) 35 og sølvperchlorat (165 mg). Reaktionsblandingen omrørtes 6 timer ved 0 °C, og herefter lod man temperaturen stige til stuetemperatur i en nitrogenatmosfære i mørke. Opløs- DK 170341 B1 35 ningsmidlet fjernedes, og remanensen udrystedes mellem dichlormethan og 0,1 N saltsyre ved 5 °C. Det organiske lag fraskiltes, filtreredes og inddampedes, hvorved der opnåedes en remanens, der bestod af salte (hovedsageligt 5 chlorid) af allyl (5R,6S)-6-[(lR)-tert-butyldimethylsi-lyloxyethyl]-2-[3-(N-methylpyrrolidino)propyl]penem-3-carboxylat.

Dette mellemprodukt oparbejdedes ved desilylering og de-10 allylering som beskrevet under fremgangsmåde A ovenfor, hvorved der opnåedes en identisk prøve af titelforbindelsen.

EKSEMPEL 8 15

Ved at arbejde som beskrevet foran fremstilledes følgende forbindelse: (5R,6S)-6-[(lR)-hydroxyethyl]-2-[3-(l-methylpiperazino)-20 propyl]penem-3-carboxylat, hydrochlorid (FCE 24390).

PMR (200 MHz, D20), 5,65 (d, J = 1,6 Hz, IH, H5), 4,24 (dq, J = 6,0, 6,4 Hz, IH, H8), 3,89 (dd, J = 1,6, 6,0 Hz, IH, H6), 3,78, 3,73 (m, 8H, piperazino), 3,7-3,5 (m, 2H, 25 -CH2-N+), 3,28 (S, 3H, N+—CH3), 3,1-2,8 (m, 2H, CH2-), 2,2-2,1 (m, 2H, CH2-CH2-), 1,30 (d, J = 6,4 Hz, 3H, CHqCH), UV: (H-0) hmaxr 261 nm, 303 nm, IR: 1600 cm"1, 1765 cm .

30 EKSEMPEL 9 (5R,6S)-6-[(lR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(3,5-dimethylpyridi-no)methyl]phenyl}penem-3-carboxylat (forbindelse 54) 1

Ved at arbejde som beskrevet i eksempel 2 men anvende

3,5-dimethylpyridin i stedet for pyridin opnåedes titelforbindelsen (700 mg); UV: (Ho0) λ 328, 268 nm; NMR

z max DK 170341 B1 36 (200 MHz, D20) 6 ppm 1,30 (3H, d, J *= 6,2 Hz), 2,47 (6H, s), 3,93 (IH, d, J - 1,6 og 5,8 Hz), 4,25 (IH, dg, J = 5,8 og 6,2 Hz), 5,68 (2H, s), 5,73 (IH, d, J = 1,6 Hz), 7,3-7,4 (4H, m), 8,19 (IH, m), 8,55 (2H, m).

5 EKSEMPEL 10 (5R,6S)-6-C(lR)-tert-butyldimethylsilyloxyethyl]-2-[4-(brommethyl)phenyl3 penem-3-carboxylat 10

Trin A

En opløsning af (3S)-[(lR)-tert-butyldimethylsilyloxy-ethyl]-(4R)-triphenylmethylthio-1-(1-allyloxycarbonyl-l-15 triphenylphosphoranylidenmethyl)azetidin-2-on (5 g) og imidazol (0,75 g) i methanol (15 ml) sattes til en omrørt suspension af pulveriseret sølvnitrat (1,97 g) i samme opløsningsmiddel (20 ml) under nitrogen i mørke. Efter 15 minutters forløb tilsattes dichlormethan (250 ml); det 20 organiske lag vaskedes med vand (2 x 200 ml), tørredes (Na2S04 og inddampedes, hvorved opnåedes 4,7 g urenset sølv-(3S)-[(IR)-tert-butyldimethylsilyloxyethyl]-1-(1-al-lyloxycarbonyl-l-triphenylphosphoranylidenmethyl)-2-oxo-azetidinyl-4-thiolat som et brunt skum.

25

Trin B

En opløsning af e-bromtoluensyre (1,08 g) i tør benzen (10 ml) omrørtes 2 timer med thionylchlorid (0,73 ml) og 30 tør DMF (5 dråber). Reaktionsblandingen inddampedes til tørhed, optoges i toluen og inddampedes atter. Den uren-sede forbindelse omkrystalliseredes med n-hexan (10 ml, aktivt kul), hvorved der opnåedes ren a-bromtoluensyre-chlorid (0,95 g) som hvide små blade.

Forbindelsen sattes til en opløsning af sølvthiolat fra trin A ovenfor (2,2 g) i tør dichlormethan. Efter 25 mi- 35 DK 170341 B1 37 nutters forløb frafiltreredes det udfældede AgCl, og den organiske opløsning vaskedes med saltopløsning og med vandig natriumbicarbonat.

5 Remanensen, der blev tilbage efter fjernelse af opløsningsmidlet, rensedes med SiC^-kromatograf i, hvorved der opnåedes (3S)-[(lR)-tert-butyldimethylsilyloxyethyl]-(4R)-[4-(brommethyl)phenyl]thio-1-(l-allyloxycarbonyl-l-triphenylphosphoranylidenmethyl)azetidin-2-on (2 g) som 10 et skum; IR; (CHC1Q) 1750, 1660, 1605 cm-1.

ό max

Trin C

Forbindelsen fra trin B ovenfor opløstes i tør toluen og 15 opvarmedes i et oliebad (100 °C) i 12 timer under nitrogen og i nærvær af en katalytisk mængde hydroquinon. Si-licagelkromatografi (cyclohexan-ethylacetat) gav titelforbindelsen (1,3 g) som små hvide blade; IR: (CHClg) * „ 1785, 1705 cm"1; NMR (90 MHz, CDC10) 6 ppm 0,005 og max o 20 0,12 (hver 3H, s), 0,82 (9H, s), 1,20 (3H, d, J * 6,5

Hz), 3,66 (IH, dd, J = 1,5 og 4,5 Hz), 4,2 (IH, m), 4,35 (2H, s), 4,45 (2H, m), 5,0-5,2 (2H, m), 5,60 (IH, d, J = 1,5 Hz), 5,5-5,9 (IH, m), 7,35 (4H, m).

25 EKSEMPEL 11

Allyl (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-[4-(brommethyl)phe-nyl]-penem-3-carboxylat

30 Trin A

Vandig 2 N saltsyre (80,3 ml) sattes til en opløsning af (3S)-[(IR)-tert-butyldimethylsilyloxyethyl]-(4R)-triphe-nylmethylthio-1-(1-allyloxycarbonyl-l-triphenylphosphora-35 nylidenmethyl)azetidin-2-on (34,62 g) i THF (346 ml).

DK 170341 B1 38

Efter henstand natten over fjernedes det meste af opløsningsmidlet i vakuum, og den tilbageblevne blanding ud-rystedes mellem EtOAc og saltopløsning. Det organiske lag vaskedes to gange med vandig NaHCOg, tørredes og inddam-5 pedes, hvorved der opnåedes urenset (3S)-[(IR)-hydroxy-ethyl]-(4R)-triphenylmethylthio-1-(1-allyloxycarbonyl-l-triphenylphosphoranylidenmethyl)azetidin-2-on som et skum i kvantitativt udbytte.

10 Trin B

En mættet opløsning af AgNOg (8,5 g) i methanol (333 ml) under nitrogen og i mørke behandledes ved 20 °C med en opløsning af materialet fra trin A ovenfor og imidazol 15 (2,7 g) i methanol (100 ml). Efter 5 minutters forløb fjernedes det meste af opløsningsmidlet i vakuum, og remanensen optoges i EtOAc. Det organiske lag vaskedes med vand (3 x), tørredes (MgSO^), koncentreredes til 150 ml og behandledes under omrøring med ethylether (300 ml).

20 Efter yderligere 10 minutters omrøring opsamledes bundfaldet sølv (3S)-[(lR)-hydroxyethyl]-l-(l-allyloxycarbo- nyl-l-triphenylphosphoranylidenmethyl)-2-oxoazetidinyl-4-thiolat i kvantitativt udbytte (24,5 g); IR: (CHCl«) v

i sj IuaX

1740, 1615 cm'.

25

Trin C

Materialet fra trin B ovenfor (24 g) omsattes med a-brom-toluensyrechlorid (11,7 g) som beskrevet i eksempel 10, 30 trin B.

Oparbejdelse og kromatografi gav (3S)-[(lR)-hydroxy- ethyl]-(4R)-[4-(brommethyl)phenyl]thio-1-(1-allyloxycar- bonyl-l-triphenylphosphoranylidenmethyl)azetidin-2-on 35 (20,6 g) som et skum? IR: (CHC1«) v 1750, 1600, 1605 m o max cm' .

DK 170341 B1 39

Trin D

Materialet fra trin C ovenfor opvarmedes 10 timer i en toluenopløsning ved 90 °C under nitrogen og i nærværelse 5 af hydroquinon.

Silicagelkromatografi gav først noget allyl-5-[4-(bromme-thyl)phenyl]-l,3-thiazol-4-carboxylat og herefter titelforbindelsen (8,65 g) som hvide nåle (fra ethylether) med 10 smeltepunkt 121-122 °C.

NMR (200 MHz, CDC13) 1,36 (3H, d, J = 6,3 Hz), 3,81 (IH, dd, J = 1,5 og 6,6 Hz), 4,27 (IH, dq, J = 6,3 og 6,6 Hz), 4,47 (2H, s), 4,57 (2H, m), 5,14 (IH, d, J = 10,0 Hz), 15 5,15 (IH, d, J = 17,0 Hz), 5,7-5,9 (IH, m), 5,71 (IH, d, J = 1,5 Hz), 7,4-7,5 (4H, m).

EKSEMPEL 12 20 (5R,6S)-6-[(lR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(3-hydroxypyridino)- methyl]phenyl}penem-3-carboxylat (forbindelse 55)

En blanding af allyl (5R,6S)-6-[(lR)-tert-butyldimethyl-silyloxyethyl]-2-[4-(brommethyl)phenyl]penem-3-carboxylat 25 (110 mg) og 3-(tert-butyldimethylsilyloxy)pyridin (125 mg) i DMF (2 ml) omrørtes natten over ved stuetemperatur.

Herefter fjernedes opløsningsmidlet i vakuum, ether tilsattes, og suspensionen omrørtes 1 time ved stuetempera-30 tur.

Det gule faste materiale opsamledes herefter, hvilket gav 100 mg allyl (5R,6S)-6-[(lR)-tert-butyldimethylsilyloxy-ethyl]-2-{4-[3-hydroxypyridino)methyl]phenyl}penem-3-oar-35 boxylat, bromidsalt; NMR (90 MHz, CDCl^) δ ppm 0,12 (6H, S), 0,82 (9H, s), 1,20 (3H, d, J = 6,0 Hz), 3,70 (IH, dd, J = 1,6 og 5,0 Hz), 4,18 (IH, dd, J = 5,0 og 6,0 Hz), DK 170341 B1 40 4,45 (2H, m), 5,02 (IH, d, J « 10,0 Hz), 5,14 (IH, d, J = 17,0 Hz), 5,61 (IH, d, J = 1,6 Hz), 5,5-5,7 (IH, m), 5,82 (2H, s), 7,50 (4H, s), 7,4-7,7 (IH, m), 7,8-8,0 (IH, m), 8,2-8,4 (IH, m), 8,68 (IH, m), 9,26 (IH, br, s).

5

Denne forbindelse opløstes i tør TMF og omrørtes natten over i nærværelse af eddikesyre (100 ml) og tetrabutylam-moniumfluoridtrihydrat (125 mg).

10 Reaktionsblandingen inddampedes herefter i vakuum og rensedes delvis på silicagel, der elueredes med acetoni-tril/vand-blandinger. Opløsningen inddampedes herefter i vakuum, hvilket gav allyl (5R,6S)-6-[(lR)-hydroxyethyl]- 2-{4-[(3-hydroxypyridino)methyl]phenyl}penem-3-carboxy-15 lat, bromidsalt som en gul olie (80 mg).

Denne forbindelse opløstes i THF/C^Cl.

Eddikesyre (0,8 ml), triphenylphosphin (80 mg) og heref-20 ter (PhgP)4Pd (30 mg) tilsattes herefter efter hinanden.

Omsætningen, der udførtes som angivet i de tidligere eksempler, gav 20 mg af titelforbindelsen; IR; » (KBr)

« IUoX

3400, 1770, 1600 cm ; UV: k (Ho0) 326, 250 nm.

25 EKSEMPEL 13 (5R,6S)-6-[(lR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(4-ethansulfonat-1-pyridino)methyl]phenyl}penem-3-carboxylsyre (forbindelse 30 55/a)

En blanding af allyl (5R,6S)-6-[(lR)-hydroxyethyl]-2-[4-(brommethyl)phenyl]penem-3-carboxylat (100 mg) og natri-um-4-pyridinethansulfonat (145 mg) i tør DMF omrørtes i 35 48 timer ved stuetemperatur.

DK 170341 B1 41

Herefter inddampedes blandingen i vakuum, og remanensen rensedes ved omvendt fasekromatografi, hvorved der efter frysetørring opnåedes allyl (5R,6S)-6-[(lR)-hydroxy-ethyl]-2-{4-[(4-ethansulfonat-1-pyridino)methyl]phenyl}-5 penem-3-carboxylat; IR (KBr): 3400, 1790, 1710 cm"1; UV (H20/10% CHgCN): 336 nm; NMR (200 MHz, D20) 6 ppm 1,30 (3H, d, J = 6,4 Hz), 3,34 (4H, m), 4,05 (IH, dd, J = 1,5 og 5,6 Hz), 4,26 (IH, dq, J = 5,6 og 6,4 Hz), 5,04 (IH, d, J = 16,2 Hz), 5,6-5,8 (IH, m), 5,78 (2H, s), 5,80 (IH, 10 d, J = 1,5 Hz), 7,46-7,54 (4H, ABq, J = 8,4 Hz), 7,98 (2H, d, J = 6,7 Hz), 8,77 (2H, d, J = 6,7 Hz).

Behandling af denne forbindelse med HOAc/Ph^P/(Ph^P)^Pd under samme betingelser som angivet i eksempel 2 gav en 15 prøve (20 mg) af titelforbindelsen. IR (KBr): 3400, 1775, 1700 cm"1; UV (H20): 330, 252 nm; NMR (200 MHz, D20, t = 45 °C) δ ppm 1,56 (3H, d, J = 6,5 Hz), 3,60 (4H, m), 4,27 (IH, dd, J = 1,5 og 5,8 Hz), 4,51 (IH, dq, J = 5,8 og 6,5 Hz), 6,02 (2H, s), 6,05 (IH, d, J - 1,5 Hz), 7,69-7,79 20 (4H, ABq, J * 8,3 Hz), 8,24 (2H, d, J - 6,8 Hz), 9,00 (2H, d, J = 6,8 Hz).

EKSEMPEL 14 25 Ved at arbejde som beskrevet ovenfor i eksempel 13 og erstatte natrium-4-pyridinethansulfonat med 3-aminopyridin og natrium-4-pyridinmethancarboxylat fremstilledes henholdsvis : 1 (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(3-amino-pyridino)me- thyl]phenyl}-penem-3-carboxylat (forbindelse 65) IR (KBr): 3400 (bred), 1765 cm"1 og 35 (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(4-methancarboxylat- 1-pyridino)methyl]phenyl}penem-3-carboxylsyre (forbindelse 77) DK 170341 B1 42 IR (KBr): 3400, 1765, 1735 cm"1.

EKSEMPEL 15 5 (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-[4-(3-carboxymethylpyri- , dino)methylphenyl]-penem-3-carboxylat

Ved at arbejde som beskrevet i eksempel 2, og erstatte pyridin med med 3-allyloxycarbonylmethyl-pyridin opnåedes 10 titelforbindelsen.

UV: (Ho0) 260, 331 nm (FCE 25165).

Z ΙΠαΧ EKSEMPEL 16 15

Natrium (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-[4-(4-carboxypy-ridino)methylphenyl]-penem-3-carboxylat

Ved at arbejde som beskrevet i eksempel 2, og erstatte 20 pyridin med 4-allyloxycarbonylpyridin opnåedes titelforbindelsen.

UV: (Ho0) 258 (sh), 330 nm (FCE 25133A).

Z ΙΩοΧ 25 EKSEMPEL 17 (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-(4-(N-carboxymethyl-N-pyrrolidino)methylphenyl]-penem-3-carboxylat 30 Ved at arbejde som beskrevet i eksempel 1 og erstatte N-methylpyrrolidin med N-allyloxycarbonylmethyl-pyrrolidin opnåedes titelforbindelsen.

IR (KBr) 1780, 1690, 1630 cm"1 (FCE 25226).

35

Claims (5)

1. Penem-forbindelser med den almene formel I med 5 (5R,6S)-konfiguration OH JL /V XV--T ?/- A-CH?-Q+

10 CR) jr 2 (I) f-N ( 0 co2<-> 0 15 hvori A betegner phenylen, 0Λ . alkylen eller Cn . alky-, (+ ) lenoxycarbony1, og Q' ' betegner en /r1 + / 2 —R - gruppe, hvori 20 ^R3 (i) R1 betegner C^_4 alkyl eventuelt substitueret med en carboxygruppe, og R2 og R^ sammen med nitrogenatomet betegner en pyrrolidinyl-, piperidinyl- el- 25 ler piperazinylgruppe; eller (ii) R^, R2 og Rg betegner sammen med nitrogenatomet en eventuelt substitueret pyridylgruppe, hvor substi-tuenteme er en eller to C^_4 alkylgrupper eller en 30 carbamoyl-, hydroxy-, amino-, carboxy-, carboxyme- thyl-, hydroxymethansulfonat- eller ethansulfonat-gruppe; forudsat at når A betegner C1-C4 alkylen, betegner R^, R2 35 ©S R3 sammen med nitrogenatomet ikke en pyridylgruppe, eller et farmaceutisk eller veterinært acceptabelt salt DK 170341 B1 44 heraf.

2. Forbindelse ifølge krav 1, kendetegnet ved, at den er valgt blandt 5 (5R,6S)-6-[(lR)-hydroxyethyl]-2-[4-(pyridinomethyl)phenyl] -penem-3-carboxylat, (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(4-carbamoylpyridi-10 no)methyl]phenyl}penem-3-carboxylat; (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(5-ethyl-2-methylpy-ridino)methyl]phenyl}penera-3-carboxylat; 15 (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-[2-(pyridinomethyl)phe- nyl]-penem-3-carboxylat; (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(3,5-dimethylpyridi-no)methyl]phenyl}penem-3-carboxylat; 20 (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(3-hydroxypyridino)-methyl]phenyl}penem-3-carboxylat; (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(4-ethansulfonat-l- 25 pyridino)methyl]phenyl}penem-3-carboxylsyre; (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(3-amino-pyridino)me-thyl]phenyl}penem-3-carboxylat; 30 (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-[4-(N-methylpyrrolidino- methyl)phenyl]-penem-3-carboxylat; (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-[4-(N-methylpiperidinome-thyl)phenyl]-penem-3-carboxylat; (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-{4-[(1-methylpiperazino)-methyl]phenyl}penem-3-carboxylat; 35 DK 170341 B1 45 (5R, 6S) -6- [ (IR) -hydroxyethyl] -2- [2- (N-methylpyrrolidino-methyl)phenyl]-penem-3-carboxylat; (5R, 6S) -6- [ (IR) -hydroxyethyl] -2- [ 2- (N-methylpiperidinome-5 thyl)phenyl]-penem-3-carboxylat; (5R,6S)-6-[(IR)-hydroxyethyl]-2-[3-(N-methylpyrrolidino-methyl)phenyl]-penem-3-carboxylat; 10 (5R,6S)-6-[(lR) - hydroxyethyl] - 2- [3 - (N-methylpyrrolidino) - propyl]-penem-3-carboxylat; (5R, 6S)-6 -[ (IR)-hydroxyethyl] - 2- [ (N-methylpyrrolidino)-acetoxymethyl]penem-3-carboxylat. 15

3. Fremgangsmåde til fremstilling af en forbindelse med formel (I) ifølge krav 1, kendetegnet ved, at man omsætter en forbindelse med formel (II) 20 /S n\~R2 UD ^R1 hvori R^, R£ og R^ er som defineret i krav 1, med et pe-25 nem-mellemprodukt med formel (III) OR” - l -r \pA-CH2-L 30 i»-»-(III)

0 C02Z' hvori R" betegner en hydroxybeskyttende gruppe og A er 35 som defineret i krav 1, 1' betegner en carboxybeskyttende gruppe, og L betegner en fraspaltelig gruppe, der er i stand til nucleofil ombytning med aminen med formel (II), DK 170341 B1 46 og at man herefter fjerner de tilstedeværende beskyttende grupper og eventuelt omdanner en fremstillet forbindelse til et salt heraf.

4. Fremgangsmåde ifølge krav 4, kendetegnet ; ved, at mellemproduktet med formel (III) er fremstillet ved omsætning af en carbinol-precursor med formel (IV) 95”. ^A-CHoOH 10 s]—* if f-N-k o C02z· (iv) 15 hvori R", A og Z* er som defineret i krav 3, med et sul-fonylanhydrid eller et sulfonylhalogenid i nærvær af et overskud af forbindelsen med formel (II) uden at isolere forbindelsen med formel (III) fra reaktionsblandingen. 20

5. Farmaceutisk eller veterinært præparat, kende -tegnet ved, at det indeholder et passende bærestof og/eller fortyndingsmiddel og en forbindelse ifølge krav 1. 25 1 35 \