SE460790B - Nya karbapenemderivat samt foerfarande foer framstaellning daerav - Google Patents

Nya karbapenemderivat samt foerfarande foer framstaellning daerav

Info

Publication number
SE460790B
SE460790B SE8301929A SE8301929A SE460790B SE 460790 B SE460790 B SE 460790B SE 8301929 A SE8301929 A SE 8301929A SE 8301929 A SE8301929 A SE 8301929A SE 460790 B SE460790 B SE 460790B
Authority
SE
Sweden
Prior art keywords
compounds according
formula
mmol
pharmaceutically acceptable
pyridinium
Prior art date
Application number
SE8301929A
Other languages
English (en)
Other versions
SE8301929D0 (sv
SE8301929L (sv
Inventor
C U Kim
Jr P F Misco
Original Assignee
Bristol Myers Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Co filed Critical Bristol Myers Co
Publication of SE8301929D0 publication Critical patent/SE8301929D0/sv
Publication of SE8301929L publication Critical patent/SE8301929L/sv
Publication of SE460790B publication Critical patent/SE460790B/sv

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/06—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring nitrogen atom
    • C07D213/16—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom containing only hydrogen and carbon atoms in addition to the ring nitrogen atom containing only one pyridine ring
    • C07D213/20—Quaternary compounds thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C321/00—Thiols, sulfides, hydropolysulfides or polysulfides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/24—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D213/28—Radicals substituted by singly-bound oxygen or sulphur atoms
    • C07D213/30—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/63—One oxygen atom
    • C07D213/65—One oxygen atom attached in position 3 or 5
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/70—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/72—Nitrogen atoms
    • C07D213/73—Unsubstituted amino or imino radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/66—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/84—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D477/00—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring
    • C07D477/10—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2
    • C07D477/12—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2 with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached in position 6
    • C07D477/16—Heterocyclic compounds containing 1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. carbapenicillins, thienamycins; Such ring systems being further condensed, e.g. 2,3-condensed with an oxygen-, nitrogen- or sulphur-containing hetero ring with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached in position 4, and with a carbon atom having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 2 with hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached in position 6 with hetero atoms or carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. an ester or nitrile radical, directly attached in position 3
    • C07D477/20—Sulfur atoms

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

4150 7É90 resistenta mot Ö-laktamantibiotika.
Andra naturprodukter, som innehåller karbapenemkärnan, innefattar olivansyraderivat, så som antibiotikumet MM 13902 med formeln “aæ3 , 6/,l\\\ scH=cHNHcocH3 HO3S då N COOH som avslöjas i amerikanska patentet 4 113 856, antibio- tikumet MM 17880 med formeln CH: CH CH NHCOCH HO SO 2 2 3 F-N 6 coon som avslöjas i amerikanska patentet 4 162 304, antibio- tikumet MM 4550A med formeln ß 9 Ö,/i\\\ s-cn=cHNHcocH3 HOBS I 4*“'N I 0 coon som avslöjas i amerikanska patentet 4 172 129, och anti- biotikumet 890A9 med formeln CH3 o H ///l\\\ cH=cHNHccH3 Ho3so - 1 ; df"" N oon som avslöjas i amerikanska patentet 4 264 735. Förutom dessa naturprodukter avslöjas föreningen desacetyl-89OA1O med formeln 460 790 i amerikanska patentet 4 264 734 och framställs genom enzymatisk deacylering av motsvarande N~acetylförening.
Olika derivat av de naturligt förekommande olivansyrorna har även syntetiserats, exempelvis föreningar med formeln C33 6//L\\ S(O)n\\__-J/NHCOCH3 R2 E -“ 0 f'- N coznl vari CO2Ri är en fri, saltbunden eller förestrad karboxyl- grupp, n är 0 eller 1 och R2 är väte, en acylgrupp eller en grupp med formeln R3O3S, där R3 är en saltbildande jon eller en metyl- eller etylgrupp. Dessa föreningar av- slöjas i europa patentansökningen 8885.
Amerikanska patentet 4 235 922 (se även europapatent- ansökningen 2058) avslöjar karbapenemderivat med formeln medan brittiska patentansökningen 1 598 062 avslöjar iso- lering av föreningen o” N coon SCH2CH2NHCOCH3 från odlingsvätskan vid fermentering av Streptomyces.
Karbapenemer, som är osubstituerade i 6~ställningen, har även syntetiserats. Således avslöjar amerikanska pa- tentet 4 210 661 föreningar med formeln -Rz N COOH .Ls 460 790 vari R2 är fenyl eller osubstituerad fenyl, amerikanska patentet 4 267 177 avslöjar föreningar med formeln COOH vari R1 är en eventuellt substituerad pyridylgrupp, amerikanska patentet 4 255 441 avslöjar föreningar med 0%* N coon formeln vari R2 och R3 är väte eller alkyl och R4 är NH-CQnR6, där R6 är alkyl, fenyl eller substituerad fenyl och n är 1 eller 2, och amerikanska patentet 4 282 236 avslöjar föreningar med formeln /n ::H=cRIRZ // "' N ooH O vari R1 är väte eller alkyl och R2 är CN eller C02 3, där R3 är väte, alkyl, aryl eller aralkyl.
Karbapenemer med den allmänna formeln Rs 151m- N /f coon O vari R1 är väte eller acyl och R8 är väte eller substitue- rad eller osubstituerad alkyl, alkenyl, alkynyl, cyklo- alkyl, cykloalkylalkyl, alkylcykloalkyl, aryl, aralkyl, aralkenyl, aralkynyl; heteroaryl, heteroaralkyl, hetero- cyklyl eller heterocyklylalkyl, avslöjas i ameriakanska 460 790 patentet 4 218 463. Några heteroaralkylsubstituenter R8 GB __A,*_ vari A är alkylen och C) Û är en kvarterniserad, kvävehaltig aromatisk heterocykel, av typen avslöjas icke.
V Naturprodukten thienamycin har den absoluta konfigu- rationen 5R, 68, 8R. Denna isomer liksom de övriga sju thienamycinisomererna kan erhållas via den totalsyntes som avslöjas i amerikanska patentet 4 234 596. Total- syntesförfaranden för thienamycin avslöjas även exempel- vis i de amerikanska patenten 4 287 123, 4 269 772, 4 282 148, 4 273 709 och 4 290 947 och i europapantent- ansökningen 7973. En nyckelmellanprodukt vid de avslöjade syntesmetoderna är CO2pNBA vari pNB är p-nitrobensyl.
På grund av den exceptionella biologiska aktiviteten hos thienamycin har ett stort antal derivat framställts och avslöjats i litteraturen. Bland dessa kan nämnas (1) N-formimidoyl-thienamycin med formeln OH SCH2CH2N=?-NH2 H N coon som avslöjas i europapantentansökningen 6639; (Zl N-hetero- cykelderivat av thienamycin med formeln vari den bifunktionella ringen kan innehålla ytterligare omättnad i ringen och vari n är ett heltal 1-6; p är 0, 1 eller 2; R1 är väte, alkyl eller aryl; och Z är imino, oxo, väte, amino eller alkyl, avslöjas i amerikanska patentet 4 189 493; (3) substituerade Nëmetylenderivat av thienamycin med formeln SCH2CH2N=?sX Y N I \ O coon vari X ah Y är väte, R, OR, SR eller NR1R2, där R är substituerad eller osubstituerad alkyl, alkenyl, alkynyl, cykloalkyl, cykloalkylalkyl, aryl, aralkyl, heteroaryl, heteroaralkyl, heterocyklyl eller heterocyklylalkyl, och R1 och R2 är väte eller R, avslöjas i amerikanska patentet 4 194 047; (4) föreningar med formeln v 0123 l 2 Ä i scuzcnzznz R 0 4"" N "" coon I vari R3 och R2 är aryl, alkyl, acyl eller aralkyl och R1 oberoende av varandra är väte eller acyl (innefattande acyl av typen , «nm@,»a,-.,rM«:« wa-ráfâšmßwmimxmaflaaemmf-šfum en * ' W 460 790 O S . 'fàrRïí, där Rv! kvarternär ammoniumgrupp, exempelvis ff ® / \ ~C~CH2~ ) bland annat är alkyl substituerad med en avslöjas i amerikanska patentet 4 226 870; (5) föreningar med formeln 3 OR 1 2 SCH2C$2NR R 0 N COOH vari R3 är väte, acyl eller en envärd, eventuellt substi- tuerad kolvätegrupp; R1 är eventuellt substituerad alkyl, alkenyl, alkynyl, cykloalkyl, cykloalkenyl, cykloalkenyl- alkyl, cyckloalkylalkyl, aryl, aralkyl, heteroaryl eller är acyl (innefattande acyl av typen f? -C-R , där R är alkyl substituerad heteroaralkyl och R2 med en kvarternär ammoniumgrupp, exempelvis O g @ / \ _ -CH - N ) 2 __ avslöjas i brittiska patentet 1 604 276 (se även amerikanska patentet 4 235 917); (6) föreningar med formeln OH C) scH2cH2NR5R6R7 N coo Û vari R5, R6 och R7 oberoende av varandra är väte eller substituerade eller osubstituerade alkyl, alkenyl, alkynyl, cykloalkyl, cykloalkenyl, cykloalkenylalkyl, cykloalkyl- alkyl, aryl, aralkyl, heteroaryl eller heteroaralkyl, av- slöjas i amerikanska patentet 4 235 920; (7) föreningar med formeln 460 790 oR3 å e scn N-cflenlnz Q 2 2 16 A R o N cox vari R1 och R2 oberoende av varandra är en grupp av den för R definierade typen, en väteatom eller nitro, hydroxyl, C1_6-alkoxyl, amino, C1_6-alkylamino, di(C1_6-alkyl)-amino eller tri(C1_6-alkyl)-amino, varvid en exšra anjon är när- varande i sistnämnda fall, eller R och R tillsammans med den kväveatom till vilken de är bundna bildar en substituerad eller osubstituerad monocyklisk eller bi- cyklisk heteroaryl- eller heterocyklylgrupp innehållande 4-10 ringatomer, varav en eller flera kan vara en ytter- ligare heteroatom, som utgörs av syre, svavel eller väte; R är en cyanogrupp eller substituerad eller osubstituerad karbamoyl, karboxyl, (C1_1O-alkoxi)-karbonyl, C¶_10-alkyl, C2_10-alkenyl, C2_1O-alkynyl, C3_10-cykloalkyl, C4_12- cykloalkylalkyl, C5_12-cykloalkylalkenyl, C3_10-cyklo- alkenyl, C5_12-cykloalkenylalkenyl, C4_12-cykloalkenyl- alkyl, C6_1O-aryl, C7_16-aralkyl, C8_16-aralkenyl, C8_16- aralkynyl eller monocyklisk eller bicyklisk heteroaryl, heteroaralkyl, heterocycklyl eller heterocyklylalkyl med 4-10 ringatomer, varav en eller flera är en heteroatom, som utgörs av syre, svavel eller kväve och där alkylgruppen i heteroalkyl- eller heterocyklylalkylgruppen innehåller 1-6 kolatomer; varvid substituenten eller substituenterna på R, R1, R2 eller på den ring som bildas av R1 och R2 är klor; brom; jod; fluor; azido; C1_4-alkyl; merkapto; sulfo; fosfono; cyanotio (-SCN); nitro; cyano; amino; hydrazin; amino eller hydrazino med upp till tre C1_5- aíkylsubscituencer; hyåroxr; C1_6-aíkoxi; Cï_6-alkyltic; karboxyl; oxo; (C1_6-alkoxi)karbonyl; C2_10-acyloxi; karba- mßyl; (C1_4-alkyl) karbamoyl eller di(C1_4-alkyl) karbamoyl; R är en väteatom, en acylgrupp eller en grupp av den typ som har definierats för R4; R4 är C1*10-alkyl; Substie tuerad karbonylmctyl; C1;6-alkoxi)-(C1_6-alkyl), (C3“6- 46o 79o cykloalkoxi)-(Clñö_-alkyl); C2_12-alkanoyloxialkyl; par- tiellt eller fullständigt halogenerad C1_6-alkyl, där halogenen eller halogenerna är klor, brom eller fluor; aminoalkyl; C2_10-alkenyl; C2_10-alkynyl; acyl; C3_14- alkoxikarbonylalkyl; C4_21-dialkylaminoacetoxialkyl; C2_13-alkanoylaminoalkyl; ar-(C1_3-alkyl), där arylgruppen innehåller 6-10 kolatomer; monocyklisk eller bicyklisk heteroaralkyl eller heterocyklylalkyl med 4-10 ringatomer, 1-3 kolatomer i alkylgruppen och 1-4 heteroatomer, som ut- görs av syre, svavel och/eller kväve; i kärnan substituerad aralkyl eller heteroaralkyl, där substituenten är klor, fluor, brom, jod eller C1_6-alkyl; aryl eller i kärnan substituerad aryl innehållande 6-10 ringkolatomer och vari en eventuellt i kärnan närvarande substituent är hydroxi, C1_6-alkyl, klor, fluor eller brom; aralkoxi- alkyl; C2_12-alkyltioalkyl; C4_12cykloalkyltioalkyl; (C2_10-acyltio)-(C1_6-alkyl); eller fenylalkenyl, där alkenyl innehåller 2-6 kolatomer; RS är substituerad eller osubstituerad C1_10-alkyl; C2_10-alkenyl eller alkynyl; ringsubstituerad eller osubstituerad cykloalkyl, cykloalkenyl, cykloalkenylalkyl eller cykloalkylalkyl med 3-6 ringkolatomer och upp till 6 kolatomer i en eventuell kedja; C6_10-aryl; aralkyl med 6-10 ringkolatomer och 1-6 kolatomer i alkylkedjan; monocyklisk eller bicyklisk hetero- aryl eller heteroaralkyl innehållande 4-10 ringatomer, varav en eller flera är syre, kväve eller svavel, och 1-6 kolatomer i alkylkedjan; och ring- eller kedjesubsti- tuenten eller -substituenterna är klor, brom, jod, fluor, azido, cyano, amino, C1_6-alkylamino, di(C1_6-alkyl)amino eller tri(C1_6-alkyl) amino, varvid en extra anjon är närvarande i sistnämnda fall, hydroxi, C1_6-alkoxi, C¶_6- alkyltioalkyl; karboxyl; oxo, (C1_6-alkoxi)karbonyl; C2_10-acyloxi; karbamoyl; (C1_4-alkyl)karbamoyl; di(C1_4- alkyl)karbamoyl; cyanotio (-SCN) eller nitro; R är väte, hydroxi, merkapto, R, -OR, -SR eller NR1R2, där R, R1 och R2 har ovan angivna betvdelser; . . 4 X är hydroxi, merkapto, amino, acyloxi, -OR , -SR , 460 790 » -NHR4, ~N-R4, 114 -OM, -OQ eller, när föreningen föreligger i zwitterjonisk form, -O-, i vilket fall A- icke är närvarande; A, när föreningen icke föreligger i zwitterjonisk form, är en motjon; M är en farmaceutiskt godtagbar katjon; och Q är en blockerande grupp av angivet slag, avslöjas i brittiska patentet 1 604 275; och (8) föreningar med for- neln ///lïïé _ V G3? I I Üscnzczazwa-Ü i Äf- N cocß _ vari C) w bunden till aminokvävegruppen i thienamycin är en mono- eller polycyklisk Nehaltig heterocyklisk grupp och R är väte, substituerad eller osubstituerad alkyl, aryl, alke- nyl, heterocyklylalkenyl, aralkenyl, heterocyklylalkyl, aralkyl, -NR2, COOR, CONR -OR eller CN, avslöjas i z! europapatentansökningen 21082. Bland de föreningar som avslöjas i amerikanska patentet 4 235 920 kan nämnas //:ï:\\ /a- N O vari A är en farmaceutiskt godtagbar anjon. Ovannämnda COOH kvarternära aminderivat avslöjas även i Recent Advances in the Chemistry of ß-Lactam Antibiotics, Royal Society of Chemistry, London, 1981, sid 240-254, där dess anti~ bakteriella aktivitet anges i genomsnitt vara cirka 1/2 till 2/3 av aktiviteten hos thienamycin.
Karbapenemderivat med många olika 6~subsituenter 11 .460 790 förutom de ovan nämnda har även syntetiserats. Så exempel- vis avslöjar (1) europapatentansökningen 40408 föreningar med formeln ' R Il . SR ¿ o/r" N coon vari R1 är väte, metyl eller hydroxyl och R51 är en en- värd organisk grupp, som bland annat innefattar hetero- cyklometyl; (2) europapatentansökningen 8514 avslöjar föreningar med formeln vari R1 är en eventuellt substituerad pyrimidinylgrupp och R2 är väte eller en grupp CR3R4R5, där R3 är väte eller hydroxi, R4 är väte eller alkyl och R5 är väte, alkyl, bensyl eller fenyl eller R5 och R4 tillsammans bildar en karbocyklisk ring; (3) europapatentansökningen 38869 avslöjar föreningar med formeln R7 :as-___- IR Of/ N “c ooH 8 vari R6, R7 och R8 tuerad eller osubstituerad alkyl, alkenyl eller alkynyl med 1-10 kolatomer; cykloalkyl, cykloalkylalkyl eller alkylcykloalkyl med 3-6 kolatomer i cykloalkylringen och 1-6 kolatomer l alkylgrupperna, aryl så som fenyl; aralkyl, aralkenyl eller aralkynyl, där arylgruppen är fenyl och den alifatiska delen innehåller 1-6 kolatomer; heteroaryl heteroaralkyl, heterocyklyl eller heterocyklylalkyl; var- vid substituenten eller substituenterna med avseende på oberoende av varandra är väte, substi- 460 790 nämnda grupper utqörs av -x° na1o(k1or, brom, fluory -OH hydroxi I -OR1 alkoxi, aryloxi O V U 1 2 -OCNR R karbamoyloxi O “ 1 2 -CNR R karbamoyl ~NR1R2 amino NR1 / amidino R -NO nitro -N(R1)3 tri~substituerad amino (R1-gruppen) oberoende vald) R1 -C=NOR2 oximino -SR1 alkyl- och aryltiø 1 2 -SO2NR R sulfonamido O U 1 2 .
-NHCNR R ureldo ä? R1CNR2-amido -COZH karboxy fCO2R1 karboxylat O “1 -CR acyl H -OCR1 acyloxi -SH merkapto O I ~šR1 alkyl- och aryl-sulfinyl H ~ïR1 alkyl och aryl-sulfonyl ,-,_, 1 if." . z g 3 å: ...v V15 460 790 -CN cyano -N azido 3 där R1 och R2 oberoende av varandra är väte, alkyl, alkenyl eller alkynyl med 1-10 kolatomer; cykloalkyl, cykloalkyl- alkyl eller alkylcykloalkyl med 3-6 kolatomer i cykloalkyl- ! ringen och 1-6 kolatomer i alkylgrupperna; aryl så som fenyl; aralkyl, aralkenyl eller aralkynyl, där arylgruppen är fenyl och den alifatiska delen innehåller 1-6 kolatomer; heteroaryl, heteroaralkyl, heterocyklyl eller heterocyklyl- alkyl,_där heteroatomen eller -atomerna utgörs av 1-4 syre-, väte- eller svavelatomer och där alkylgrupperna innehåller 1-6 kolatomer. (Se även europapatentansökningarna 1627, 1628, 10317, 17992, 37080, 37081 och 37082); (4) europa- ¿ patentansökningen 24832 avslöjar föreningen med formeln day-r. _ a* 12 l «f N co H ^ f o _ 2 vari R1 är väte eller en grupp, som utgörs av OH, OSO3H eller ett salt eller C1_4-alkylester därav, OR2, SR3, 3 ocoR2, “ oco2R3 eller ocoNHR , där R2 är en c1_b- alkylgrupp eller en eventuellt substituerad bensylgrupp och R3 är en C1_6-alkylgrupp eller en eventuellt substii c- rad bensyl- eller fenylgrutpoch R12 är C1_6-alkyl, C2_6- alkenyl, C3_6-alkynyl, där trippelbindningen icke när- varande på denkolatom som är grannställd svavelatomen, aralkyl, C1_6-alkanoylíznralkanovl, aryloxialkanoyl eller arylkarbonyl, varvid R -grupperna eventuellt är substi- tuerade, som antibakteriella medel.
Europapatentansökningen 44 170 avslöjar karbapenem- derivat med formeln (O)n ' N=N när \\ '-x-~N“/ \N :l \,f cozn ” fr” N ”W ~ * 0 R 5 a...
Uï W4 790 vari R3 är väte eller en organisk grupp, som är bunden till karbapenemringen via en kolatom, n är 0 eller 1, X är en mättad eller omättad kolvätegrupp, som eventuellt är substituerad med brom eller klor, och R4 är C1-C6-alkyl, C2~C6-alkenyl, C1-C30-aralkyl eller aryl, varvid R even- tuellt är substituerad. Det finns emellertid icke något avslöjande om eventuella föreningar där tetrazolringen är bunden till X via en kvarterniserad kväveatomy det vill säga en positivt laddad kväveatom, som icke är bunden till en väteatom.
Ovannämnda europapatentansökan 38 869 avslöjar syntesen av karbapenemderivaten via mellanprodukten med de allmänna formeln 6 O R _._ // N o 1:2' O 2 vari RÖ och R7 har ovan angivna betydelser och R2' är en lätt avlägsningsbar knrboxylskyddsgrupp. Däri avslöjas även som mellanprodukter föreningar med formeln m7 N 2' R o C02 där X beskrivs som en utträdande grupp.
Medan den kända litteraturen beskriver karbapenem- derivat med en 2~5ubstituent med den allmänna formeln ~S~A-Het när R är en alkylengrupp och Het är en heteroaromatisk gïupp, avslöjas icke, så vitt vi känner till, några karhapnnemer, där Het är en grupp med formeln >\' /- MQM” w w-øvwd fšy/ \ 460 790 .är en eventuellt substituerad pyridiniumgrupp bunden till alkylen-_eller cykloalkylenkolet via den kvaternära kväveatomen. Så som nämns ovan har karbapenem~ derivat med ca /CHB ~S~CH2CH2N --CH3 CH 3 som 2-substituent även rapporterats.
Trots det stora antalet karbapenemderivat som har avslöjats i litteraturen föreligger fortfarande ett behov av nya karbapenemer, eftersom kända derivat kan förbättras med avseende på aktivitetsspektrum, potens, stabilitet och/eller toxiska biverkningar.
Föreliggande uppfinning avser en nya serie karbapenem- derivat, som utmärks av en 2-substituent med formeln ® ~S~~© vari A är en cyklopentylen- eller cyklohexyle grupp eller C2~C6-alkylen, eventuellt substituerad med en eller flera C1_4~alkylgrupper; och QO är en eventuellt substituerad pyridiniumgrupp. Föreliggande uppfinning avser närmare bestämt karbapenemderivat med formeln OOR2 16 460 790 vari R1 är väte, alkyl eller hydroxisubstituerad alkyl med 1¥10 kolatomer; R2 är väte, en anjonisk laddning eller en konventionell lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgrupp, under förut~ sättning att, när R2 är väte eller en skyddsgrupp, det även är närvarande en motanjon; R2 är väte; A är cyklopentylen, cyklohexylen eller C2-C6-alkylen, eventuellt substituerad med en eller flera C1-4 och -alkylgrupper; 69 är pyridinium eventuellt substituerad med en eller flera grupper valda från C1-C4~alkyl, C1-C4-alkyl substituerad med hydroxi, C1-C4-alkyltio, CT-C4-alkoxi och amino; och farmaceutiskt godtagbara salter därav.
Föreningarna med formeln I är potenta antibakteriella medel eller mellanprodukter användbara vid framställning av dylika medel.
Uppfinningen avser även ett förfarande för framställ~ ning av de nya, ovan beskrivna karbapenemderivaten.
De nya föreningarna med den allmänna formeln I ovan innehåller karbapenemkärnan I 2 O 4 3 och kan således benämnas 1~karba~2-penem~3-karboxylsyra~ derivat. Alternativt kan föreningarna anses ha grundstruk- turen 17 460 790 och benämns 7-oxo-1-azabicyklo(3.2.O)hept~2-en-2-karbqApl- syraderivat. Ehuru föreliggande uppfinning innefattar före- ningar, vari den relativa stereokemin hos 5,6~protonerna är Cis liksom trans, har de föredragna föreningarna 5R, 65 (trans)~stereokemin så som är :allot med tnionamycine Föreningarna med formeln ; kan vara osubstituerade 1 )..J ningen eller substituerade med substituentgrupper, __., “åtal CM som tidigare har avslöjats för andra karbapenemderivat.
R8 kan närmare bestämt vara väte och R1 kan vara väte eller hydroxisubstituerad alkyl med 1e1O kolatomer.
Uttrycket "konventionell lätt avlägsningsbar karboxyl- skyddsgrupp" avser kända estergrupper, som har använts för blockering av en karboxylgrupp under ovan beskrivna kemiska reaktionssteg och som lätt kan avlägsnas, om så önskas, medelst metoder, som icke resulterar i någon avsevärd nedbrytning av den övriga delen av molekylen, exempelvis genom kemisk eller enzymatisk hydrolys, behandling med kemiska reduktionsmedel under milda betingelser, bestrål- ning med ultraviolett ljus eller katalytisk hydrering.
Exempel på dylika esterskyddsgrupper innefattar benshydryl, p-nitrobensyl, 2-naftylmetyl, allyl, bensyl, trikloretyl, silyl så som trimetylsilyl, fenacyl, p-metoxibensyl, ace- tonyl, o-nitrobensyl, 4-pyridylmetyl och CT-C6-alkyl så som metyl, etyl eller t-butyl. Dylika skyddsgrupper inne- fattar även sådana som hydrolyseras under fysiologiska betingelser så som pivaloyloximetyl, acetoximetyl, ftali- dyl, indanyl och metoximetyl. Speciellt fördelaktiga kar- boxylskyddsgrupper är p-nitrobensyl, som lätt kan avlägs- nas genom katalytisk hydrering, och allyl, som lätt kan avlägsnas genom Pd(Pø3)4-katalyserad reaktion.
De farmacentiskt godtagbara salter som avses ovan innefattar ogiftiga syraadditionssalter, exempelvis salter med mineralsyror så som klorvätesyra, bromvätesyra, jod- vätesyra, fosforsyra, svavelsyra, etc. och salter med organiska syror så som maleinsyra, ättiksyra, citronsyra, bärnstensyra, bensoesyra, vinsyra, fumarsyra, mandelsyra, askorbinsyra, mjölksyra, glukonsyra och äppelsyra. Före~ ningar med formeln I i form av syraadditionssalterna kan 460 790 skrivas på följande sätt na H G9 Q »RL == s-A -N x 2 COOR R2 ä H eller skyddsgrupp där XC) är syraanjonen. Motjonen Xéå kan väljas så att man erhåller farmaceutiskt godtagbara salter för terapeutisk administrering men kan, när det gäller mellanprodukterna med formeln I, även vara en toxisk anjon. I ett dylikt fall kan jonen efteråt avlägsnas eller ersättas med en farmaceutiskt godtagbar anjon för framställning av en aktiv slutprodukt för terapeutiskt bruk. När sura eller basiska grupper är närvarande i R1-grupper eller på gruppen (ä kan föreliggande uppfinning även innefatta lämpliga bas- eller syrasalter av dessa funktionella grupper, exempelvis syraadditionssalter när det gäller en basisk grupp och metallsalter (exempelvis natrium-, kalium-, kalcium- och aluminiumsalter), ammoniumsalter och salter med ogiftiga aminer (exempelvis trialkylaminer, prokain, dibensylamin, 1-efenamin, N-bensylwÖ~fenetylamin, N,N'-dibensyletylen- diamin, etc) när det gäller en sur grupp.
Föreningar med formeln I, vari R2 är väte, en an- jonisk laddning eller en fysiologisk hydrolyserbar ester- gruPP, Och farmaceutiskt godtagbara salter därav är använd- 'bara som antibakteriella medel. Övriga föreningar med for- meln I är värdefulla mellanprodukter, som kan omvandlas till ovannämnda biologiskt aktiva föreningar. ' 460 790 En föredragen utföringsform av föreliggande uppfinning avser föreningar med formeln I, vari R8 är väte och R är väte, cH3cn2- CH CH ÛH OH 3\ 3¶| | ca-, //p- _ eller cH3cH~ /// CH CH3 3 Inom denna underklass är föredragna föreningar sådana, vari R1 är ?H CH3CH~ , varvid de mest föredragna föreningarna har den absoluta konfigurationen SR, 68, 8R.
Alkylen- eller cykloalkylensubstituenten A i före- ningarna med formeln I kan vara C2-CG-alkylen (rak kedja), eventuellt substituerad med en eller flera (företrädesvis 1 eller 2) C1-C4-alkylgrupp, eller kan vara cyklopentylen eller cyklohexylen. Alkylensubstituenten A är företrädes- vis rak- eller grenkedjigïalkylen med 2-6 kolatomer. En cykloalkylensubstituent A är företrädesvis cyklopentylen med formeln /, HC / \ I/ H C HT 21 H2C.__.CH2 eller cyklohexylen med formeln Hcf" / \ /, H C HC 2: I H C CH 2 2 \C/ H2 En föredragen utföringsform innefattar sådana föreningar, vari A är -CHCH - nn 2 C 3 eller "'(CH2)n“, där n är 2, 3 eller 4, och en speciellt föredragen utföringaform avser sådana föreningar vari A är WCHÄCHZW, “CH2CH2CH2~, ~%HCH2f eller CEÃB vari Û cazoa - N / (6) CH CH / \ (s) -crfz-cnzæzgcfia 2 2 / _ W \ (7) -cßzcnzæfl/-É-æazon (8) CH2CH2 QSCH 3 i / f \ (9) -cnzcrzzæu \ (10) -cnzcazæš š H à ' 3 é a š/ > f \ (ll) -šzacnzæu \ (12) -CHQCH æN C213 "V V CH3 R~ eller S~diastereoisomer 4eo 79o (l5) 'HNH SCH3 I (14) -Cflzcnzænzf _ Q / \ eller ® ,-N R-R- eller S-S-diastereoisomerer vid de \\ två asymmetriska kolatomerna i cyklo- hexylringen. f och R2 är väte, en anjonisk laddning eller en konventionell, lätt anspjälkningsbar karboxylskyddsgrupp, under förutsätt- ning att, när R2 väte eller en skyddsgrupp, även en mot- anjon är närvarande, och farmaceutiskt godtagbara syra- addit* nssalter därav. narbapenemderivaten med den allmänna formeln I fram- ställs utgående från utgångsmaterial med formeln a RB 'E : O RL.. of" N cooaz ' III vari R1 och RO har ovan angivna betydelser och vari R ' är en konventionell, lätt avspjälkningsbar karboxylskydds- grupp. Föreningar med formeln III har exempelvis avslöjats i europapatentansökningen 38 869 (förening 7) och kan fram- ställas medelst de däri beskrivna allmänna metoderna.
Ett förfarande för framställning av föreningarna I utgående från utgångsmaterialen III kan sammanfattas med följande reaktionsschema: l Wi* "k" u-"VWM V ' f' '"""' ' f* ,.*""'."' 'W .~« «~ -.-«- _ .. w .,. .., .\. fw "är ~ “ -f f f' *h >= W-»w « ü ~ ~~»f«-~Wf=~-~».««wwfßvrfi '” 22 460 790 -A-OH conz' e Eventuell avblockering Denna process kan beskrivas närmare som följer.
Utgångsmaterialet III omsätts i ett inert organiskt lös- ningsmedel så som metylenklorid, acetonitril eller dimetyl~ formamid med ungefärligen en ekvimolär mängd difenylklor~ fosfat i närvaro av en bas så som diisopropyletylamin, trietylamin, 4-dimetylaminopyridin eller liknande för erhållande av mellanprodukten IV. Den acylering som till- 24 460 790 handahâller den utträdande difenylfosforyloxigruppen i 2-ställningen i mellanprodukten III utförs med fördel vid en temperatur från -200 till +40°C, i synnerhet runt cirka 0°C. Mellanprodukten IV kan isoleras, om så önskas, men används lämpligen i efterföljande steg utan isolering eller rening.
Mellanprodukten IV omvandlas därefter till mellan- produkten V medelst en konventionell förträngningsreak- tion. Mellanprodukten IV kan således omsättas med ungefär- ligen en ekvimolär mängd av ett merkaptanreagens med formeln HS-A-OH vari A är cyklopentylen, cyklohexylen eller C2-C6-alkylen, eventuellt substituerad med en eller flera C1-C4-alkyl- grupper, i ett inert organiskt lösningsmedel så som dioxan, dimetylformamid, dimetylsulfoxid eller acetonitril och i närvaro av en bas så som diisopropyletylamin, trietylamin, natriumvätekarbonat, kaliumkarbonat eller 4-dimetylamino- ;>yridin. Temperaturen vid förträngningsreaktionen är icke kritisk men en fördelaktig temperatur är från -40OC till °C. Reaktionen utförs lämpligen under kylning, exempelvis runt OOC.
Mellanprodukten V acyleras därefter med metansulfonyl- klorid eller en funktionell acylerande ekvivalent därav, så som metansulfonsyraanhydrid i ett inert organiskt lös- ningsmedel och i närvaro av en bas för erhållande av den uttrâdande metansulfonyloxigruppen i mellanprodukten VI.
Acyleringen utförs i ett inert organiskt lösningsmedel så som tetrahydrofuran, metylenklorid, acetonitril eller di- metylformamid och i närvaro av en lämplig bas så som diiso- propyletylamin, trietylamin, 4-dimetylaminopyridin och lik- nande. Reaktionen kan utföras inom ett vitt temperaturinter- vall exempelvis från -40°C till +40°C, men utförs med för- del under kylning, exempelvis vid en temperatur från -30oC till -4o°c. A ' Mellanprodukten VI underkastas därefter en förträng- ningsreaktion så att man i mellanprodukten II erhåller den utträdande jodgruppen. Denna specielkagrupp har visat sig ,._....._.__,,...w...._,_._..flr.__..,f.. _....,.__, _, _ , . _ ,. ..- f....,......,.«.,........-......v.. . www» www., . 460 790 storligen förbättra framställningen av karbapenem-slut- produkterna med formeln I. De nya mellanprodukterna med den allmänna formeln II avser därför en föredragen ut- föringsform av föreliggande uppfinning.
Förträngningen av den utträdande metansulfonyloxi- gruppen utförs genom omsättning av mellanprodukten VI med en jodidjonkälla i ett inert organiskt lösningsmedel så som aceton, dimetylformamid eller dimetylsulfoxid. Vilken som helst förening som joniserar i det använda lösnings- medlet för tillhandahållande av jodidjoner kan användas, .exempelvis en alkalimetalljodid så som NaI eller KI. Tempe- raturen vid förträngningsreaktionen är icke kritisk meny temperaturer runt rumstemperatur eller däröver är synner- ligen fördelaktiga för uppnående av fullständig reaktion inom en rimlig tidsrymd. Jodidjonkällan används i en sådan mängd att man erhåller ungefärligen en ekvivalent eller ett överskott av jodidjoner med avseende på mellanproduk- ten VI. _ _* Framställningen av de önskade karbapenemderivaten med formeln I utförs genom nukleofil förträngning av den ut- trädande jodgruppen i mellanprodukten II med den önskade kvävehaltiga heteroaromatiska nukleofilen O Mellanprodukten II omsätts mednünst en ekvivalent, före- trädesvis ett överskott av det önskade heterarylreagenset i ett inert organiskt lösningsmedel och i närvaro av silver- joner. Lämpliga inerta lösningsmedel innefattar exempelvis tetrahydrofuran, dioxan, metylenklorid, diglym, dimetoxi- etan och liknande. Varje silverförening som joniserar i betydande utsträckning i lösningsmedlet för tillhandahål- lande av silverjoner och varje inert anjon kan användas som källa till silverjonerna, exempelvis AgClO4. I allmän- het är det föredraget att använda ungefärligen en ekviva- lent mängd (med avseende på mellanprodukten II) av silver- jonerna i syfte att underlätta förträngningsreaktionen. 'anwa-war wevussur awswwlfi fi 'i . -íí--__- -feéçf-g, _ , 1.., ,,.~»A=_:.-«,~.-.:_=. .-_. . «..f-...- f _. ell; y p , __ _ . , . . . . . .ßfl e « “__ , f. _. ß ._«,,..,= .- ~\. ._ __ ,_>__~«_»«»;_ ¿v_-.4=<_~.~__ _ __ - ,.« .- v, ~ 460 790 Reaktionen kan utföras inom ett vitt temperaturintervall, exempelvis från -250 till +25°C, men utförs företrädesvis runt OOC. Mellanprodukten I' har en associerad motjon (här- rörande från det använda silversaltet), som i detta skede kan ersättas med en annan motjon, exempelvis en som är farmaceutiskt godtagbar, medelst konventionella förfaranden.
Alternativt kan motjonen därefter avlägsnas under avblocke- ringssteget.
Avblockeringssteget för att avlägsna karbonylskydds- gruppen R2' i mellanprodukten I' utförs medelszkonventio- nella förfaranden så som solvolys, kemisk reduktion eller f hydrering. När en skyddsgrupp så som p-nitrobensyl, bensyl, benshydryl eller 2-naftylmetyl används, vilken kan avlägs- nas genom katalytisk hydrering, kan mellanprodukten I' be- handlas i ett lämpligt lösningsmedel så som dioxan-vatten- etanol, tetrahydrofuran-dikaliumvätefosfatvattenlösning -isopropanol eller liknande under ett vätetryck av 1-4 atmosfärer i närvaro av en hydreringskatalysator så som palladium på träkol, palladiumhydroxid, platinaoxid eller liknande vid en temperatur av O-SOOC under 0,24-4 timmar.
När Rzi är en grupp så som o-nitrohensyl kan fotolys även användas för avblockering. Skyddsgrupper så som 2,2,2- trikloretyl kan avlägsnas genom mild zinkreduktion. Allyl- skyddsgruppen kan avlägsnas med en katalysator, som inne- fattar en blandning av en palladiumförening och trifenyl- fosfin i ett aprotiskt lösningsmedel så som tetrahydrofuran, dietyleter eller metylenklorid. Likaledes kan andra kon- ventionella karboxylskyddsgrupper avlägsnas medelst meto- der, som är kända för fackmannen. Slutligen kan, så som nämnts ovan, föreningar med formeln I',där R2' är en fysio- logiskt hydrolyserbar ester, så som acetoximetyl, ftalidyl, indanyl, pivaloyloximetyl, metoximetyl, etc, administreras direkt till värddjuret utan avblockering, eftersom dylika estrar hydrolyseras in vivo under fysiologiska betingelser.
Ehuru ovan beskrivna förfarande är lämpligt för fram- ställning av föreningarna enligt föreliggande uppfinning, kan man även använda ett nytt förfarande för framställning av föreningar med formeln I, vari substituenten A är cyklo- 460 -790 pentylen eller cyklohexylen. Detta förfarande är det före- dragna förfarandet för framställning av ovannämnda klass av föreningar.
Det alternativa förfarandet för framställning av före- ningar med formeln I, vari A är cyklopentylen eller cyklohexylen, innebär att man omsätter en mellanprodukt med formeln R8 H g R{__ E P(OC6H5)2 d' conz ' IV vari R1 och R8 har de i samband med föreningarna med for- meln I angivna betydelserna och R2' lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgrupp, med en tiolföre- ning med formeln 9 HS--A--N X6 VII har i samband med föreningarna med formeln är en konventionell, ® vari A och I angivna betydelser och fö är en motanjon, i ett inert lösningsmedel och i närvaro av en bas för framställning av karbapenemprodukter med formeln 8 R H e RL z s-A-N w I X6 Ä i o” coon? I | vari R1, RB, R2', A, %ñ::>och fa har ovan angivna betydel- ser, och att man, om så önskas, avlägsnar karboxylskydds- gruppen R2' för erhållande av motsvarande avblockerade före- ninglmed formeln I eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav. “ _ A Ovan angivna alternativa förfarande utnyttjar mellan- produkten IV, som kan framställas så som beskrivits ovan i samband med det allmänna syntesförfarandet. Mellanpro- dukten IV framställs i allmänhet in situ utgående från Lv' \ \ A -.-x-_ ef. « _ :saft-f ~= mvllanproduktcn lll och används utan isolering eller rening. lïsffà-*fåsf vid del alternativa förfarandet omsätts karbapenem~ _ _.,y«â¿a-,r_ç_,f¿,¿~.^,l;êlo-ï_vr- muilanpfodukten lv med en kvarternär amintiol med formeln. e Hs--A--N _ xe VII _ vari A är cyklopentylen eller cyklohexylen Och X är en motjon associerad med en stark syra så som Cl-, CH3SO3_, cräsov" eller G) CH _ 3 S03 och Éjïsb har ovan angivna betydelse. Reaktionen utförs i ett inert lösningsmedel så som acetonitril, acetonitril-vatten, acetonitril-dimetylformamid eller aceton i närvaro av en bas. Beskaffenheten av basen är icke kritisk. Bästa resul- tat har emellertid uppnåtts när man använder en icke-nukleo- fil tertiär aminbas så som diisopropyletylamin, 1,8-diaza- bicyklo (5.4.0)undec~7~en, 1,5-diazabicyklo(4.3.0)non-5- en eller en tri(C1-C4)alkylamin så som trietylamin, tributyl~ g amin eller tripropylamin. Omsättning av mellanprodukten IV Å med tiolen VII kan utföras inom ett brett temperaturinter- , vall, exempelvis från -15OC upp till rumstemperatur, men utförs företrädesvis vid en temperatur inom intervallet från ~15OC till +15øC, i synnerhet runt OOC.
Den karbapenemprodukt som framställs genom omsättning av den kvarternära amintiolen VII med mellanprodukten IV har den därmed associerad motjon (dvs. (C6H5O)2PO2Cn Cfa eller den med den kvarternära tiolen associerade anjonen), som i detta skede kan ersättas med en annan motjon, exempel- vis en som är mera farmaceutiskt godtagbar, medelst konven- tionella förfaranden. Alternativt kan motjonen avlägsnas under det efterföljande avblockeringssteget. När den kvar- k ternärniserade karbapenemföreningen och motjonen bildar É en olöslig produkt kan produkten utkristallisera allt Q eftersom den bildas och tillvaratas genom filtrering.
...Wlwr v-.h--fwwwwa-fw www-names » 29 460 790 Efter bildning av den önskade karbapenemprodukten en- ligt ovan beskrivna reaktionssteg kan karboxylskyddsgruppen QRZ' i föreningen I' eventuellt avlägsnas medelst konventio- nella förfaranden, vilka har beskrivits ovan i samband med det allmänna syntesförfarandet.
Tionmellanprodukterna med formeln VII kan framställas genom omsättning av en sulfid med formeln S eller VIIIa VIIIb vari R10, R11, R12 och R13 oberoende av varandra är väte eller C1-C4-alkyl, med en heteroaromatisk amin (dvs en pyridin) med formeln O och en stark syra; Reaktionen kan utföras i närvaro eller frånvaro av ett inert organiskt lösningsmedel, som före- trädesvis är ett icke-polärt organiskt lösningsmedel så som metylenklorid, bensen, xylen, toluen eller liknande.
När aminen och sulfidreagensen är vätskor-eller när en fast amin är löslig i ett vätskeformigt sulfidreagens, är det föredraget att utföra reaktionen utan användning av ett ytterligare lösningsmedel. _... ._________..._ _ __ å* __.. ___.. ..__ _ _. ._ 460 790 WO Den speciella starka syra som används vid reaktionen är icke kritisk och kan exempelvis utgöras av sådana starka oorganiska eller organiska syror som klorvätesyra, brom- vätesyra, metansulfonsyra, p-toluensulfonsyra, trifluor- metansulfonsyra, etc.
Bildning av den kvarternära amintiolmellanprodukten VII kan utföras vid en temperatur inom intervallen från -20°C till 100oC. Föredragna temperaturer ligger i allmän- het inom intervallet 50-70°C.
Sulfidreagenset, den aromatiska aminen och syran an- vänds företrädesvis sâ att sulfiden och syran ingår i ungefärligen ekvimolära mängder, varvid aminen används i överskott, exempelvis två till tre mol amin per mol sulfid eller syra. _ ' Den kvarternära amintiolmellanprodukten har en där- med associerad motjon, som bestäms av den speciella syra ifråga som används. Det är naturligtvis möjligt att i detta skede ersätta denna med en annan motjon medelst w konventionella förfaranden för användning i efterföljande 4 reaktion med karbapenmellanprodukten IV.
Det torde anses att, när R1-substituenten eller den heteroaromatiska nukleofil som är bunden till ß substituent A innehåller en funktionell grupp, som kan g störa det avsedda reaktionsförloppet, en dylik grupp kan y skyddas medelst en konventionell blockeringsgrupp/och 460 790 därefter avblockeras för framställning av den önskade funk- tionella gruppen. Lämpliga.blockeringsgrupper och förfaran- den för införande och avlägsnande av dylika grupper är väl kända för fackmannen.
När det gäller vissa föreningar med formeln I med en cykloalkylen- eller grenad alkylensubstituent A kan en eller flera ytterligare asymmetriska kolatomer genereras, vilka resulterar i bildningen av diastereoisomerer. Före- liggande uppfinning innefattar blandningar av dylika dia- sgereoisomerer liksom de individuella renade diastereo- isomererna.
Så som är fallet vid andra 0-laktamantibiotika kan föreningarna med den allmänna formeln I medelst kända för- faranden omvandlas till farmaceutiskt godtagbara salter, »vilka för ändamâlen med föreliggande uppfinning är i huvud- sak ekvivalenta med de salt-fria föreningarna. Så exempel- vis kan man upplösa en förening med formeln I, vari R2 är en anjonisk laddning, i ett lämpligt inert lösningsmedel och därefter tillsätta en ekvivalent av en farmaceutiskt godtagbar syra. Det önskade syraadditionssaltet kan ut- vinnas medelst konventionella förfaranden, exempelvis lös- ningsmedelsutfällning, lyofilisering, etc. När andra basiska eller sura funktionella grupper är närvarande i föreningarna med formeln I kan farmaceutiskt godtagbara basadditions- salter oçh syraadditionssalter likaledes framställas medelst kända metoder.
En förening med formeln I, där R2 är väte eller en anjonisk laddning, eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav kan även medelst konventionella förfaranden omvandlas till en motsvarande förening, där R2 är en fysiologiskt hydrolyserbar estergrupp, eller också kan en förening med formeln I, där R2 är en konventionell karboxylskyddsgrupp, omvandlas till motsvarande förening, där R2 är väte, en anjonisk laddning eller en fysiologiskt hydrolyserbar estergrupp, eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav.
De nya karbapenemderivaten med den allmänna formeln I, vari R2 är väte, en anjonisk laddning eller en fysiolo- giskt hydrolyserbar karboxylskyddsgrupp, eller farmaceu-H i _ . l..,»»@~..\~.~;»- , 32 460 790 tiskt godtagbara salter därav är potenta antibiotiskt aktiva medel med avseende på olika grampositiva och gram- negativa bakterier och kan därför exempelvis användas som tillsatsmedel till djurfoder för att befrämja tillväxten, som konserveringsmedel i livsmedel, som baktericider vid industriellt bruk, exempelvis i vattenbaserad färg och i bakvattnet för papperbruk för att inhibera till- växten av skadliga bakterier och som desinfektionsmedel för att hämma eller inhibera tillväxten av skadliga bak- terier på medicinsk utrustning och tandläkarutrustning.
De är emellertid speciellt användbara för behandling av infektionssjukdomar hos människor och andra djur, vilka orsakas av grampositiva eller gramnegativa bakterier.
De farmaceutiskt aktiva föreningarna enligt före- liggande uppfinning kan användas separat eller beredas som farmaceutiska kompositioner, vilka förutom den aktiva karbapenembeståndsdelen innefattar en farmaceutiskt god- tagbar bärare eller utspädningsmedel. Föreningarna kan administreras på en mångfald olika sätt; de av princi- piellt intresse innefattar oral, lokal eller parenteral administrering (intravenös eller intramuskulär injektion).
De farmaceutiska kompositionerna kan föreligga i fast form så som kapslar, tabletter, pulver etc. eller i fly- tande form som lösningar, suspensioner eller emultioner.
Kompositioner för injektion, som är det föredragna ad- ministreringssättet, kan framställas i enhetsdosform i ampuller eller i multipeldosbehållare och kan innehålla sådana beredningsmedel som suspenderingsmedel, stabili- _ seringsmedel och dispergeringsmedel. Kompositionerna kan föreligga i användningsfärdig form eller i pulverform för rekonstituering vid administreringstillfället med en lämp- lig bärare så som sterilt vatten.
De administrerade dosen beror i stor utsträckning på den använda speciella föreningen ifråga, den speciella beredda kompositionen ifråga, administreringssättet, värd- djurets beskaffenhet och tillstånd och det speciella situs och den organism som behandlas..Valet av den speciella före- dragna doseringen och administreringssättet bestäms därför 460 790 av läkaren. I allmänhet kan emellertid föreningarna ad- ministreras parenteralt eller oralt till.värddäggdjur i en mängd av 5-200 mg/kg/dag. Administreringen utförs vanligen i avdelade doser, exempelvis tre till fyra gånger per dag.
I syfte att åskådliggöra den potenta antibakteriella bredspektrumaktiviteten hos karbapenemerna enligt före- liggande uppfinning, både in vitro och in vivo, och före- ningarnas låga toxicitet hänvisas till bifogade biologiska data, som avser förnärvarande föredragna karbapenemföre- ningar enligt föreliggande uppfinning Aktivitet in vitro Ett prov av karbapenemföreningen efter upplösning i vatten och spädning med näringslösning visade sig uppvisa följanë minsta inhiberande koncentrationen (MIK) i.M9'/ml med avseende på de angivna mikroorganismerna efter in- kubering över natten vid 37OC vid bestämning genom rör- utspädning. N-formimidoyl-thienamycin har införlivats som jämförelseförening.
Antibakteriell aktivitet in vitro hos karbapenemderivaten enligt exempel 1 MIK (EQ/ml) Ny förening N-formimidoyl-thienamycin 0.002 0,004 0.008 0.001 0,008 0,004 Organism S. pneumoniae A-9585 S. pyogenes A~9604 S. aureus A-9537 S. aureus 0.016 + 50% serum A-9537 0.03 S. aureus (Pen-res.) A-9606 0.016 0.008 S. aureus (Meth-res.) S. faecalis A15097 Azoßss 0,5 0.5 E. coli (10'4spädnlng A15119 0.03 0.016 E. coli <1o'3) A1s119 0.03 UAQÜQ-. _., 34 460 790 MIK (ug/ml) Organism Ny förening BN-formimidoyl-thienamycin E. 0011 . (1o'2), A1s119 0,06 0,06 E. coli V (10"¿) A20341-1 0,03 0,03 E. coli (10'3) A20341-1 ' 0,06 0,03 E. coli (10“2) A20341 0,13 0,13 K. Eneumoniae A-9664 0,13 0,13 K. Eneumoniae A20468 0,25 0,06 P. mirabilis A-9900 0,13 ' 0,06 P. vulgaris A21559i 0,03 0,03 P. morganii A15153 0,13 0,13 P. rettgeri A22424 0,5 0,25 S. marcescens A20019 0,06 0,03 E. cloacae A-9569 0,25 0,06 g¿_c1oacae A-9656 V 0,13 0,06 P. aeruoinosa A-9843A 2 1 P. aeruginosa A21213 0,13 0,25 H. influenzae A-9833 8 16 H. influenzae A20178 8 32 H. influenzae A21518 8 32 H. influenzae A21522 8 32 B. fragilis A22862 0,25 0,016 B. fragilis A22053 0,25 0 0,06 B. fragilis A22696 0,5 0,13 B. fragilis A22863 0,25 1 Aktivitet in vivo Den terapeutiska effektiviteten in vivo av föreningen enligt exempel 1 och N-formimidoyl-thienamycin efter intra- muskulär administrering till möss, vilka experimentellt hade infekterats med olika organismer, visas i följande tabell. PD50 (den dos i mg/kg som krävs för att skydda 50% av de infekterade mössen) anges. 460 790 .äm lnmm mnum> www mm©:m>cm mwßë m ~^mmflu>w mflfimv Hmñšflu m.m :OO F Hmfiflm ^mmmoN4 _~æwoN< .mmvwmá ~oomm< .mlßmfmfd _mmm«N<. cøfivxwwcfl Hmuww umššflw N :oo o øcummcficwumwuwwu wwâ uuwfinxmøšmuucfl mwwmfiwnmnwfl mmmä «v_N «N.N «ßo.o GH ONÉMCÜflSM |H>o©flEfiEnom|Z m æ_o «w_o m_m w.v ß.m m.N m~ «v.c «n~ß -.o F Hmmšmxw umfiflcm mcflcwumm \O\D\D\OLÛI\LÛKO OOOOOÖOÖOOOG r-r-'r-f-'w-x-r-r-w-x-v-'r- N N >< N X >< N X >< N X w- w r~ v w'~v M r~ m warn m vn ll Hmëwficmmuo MÜHDMHMHM Hmßñá "mâmzummmcfiflflømnwm øumw mMmfiHOumflm« mmmomd Pæwomá mmvæmrd mmmomd mv~m~4 N|ßo~mf< mmmwwd oommlá mmmmld vmwm|« m-m~4 mowmlá .mmwâ wømumwxwwcfl >m mcfifiøcmsmn Hwfiøxmøšmuucfl wfl> cmxHm>wU®æMm wmmfiwmwhlufl mmmmmmmmmmI4M mmmmwmmmmmlwm mcwummuuma .m mmmmmmmm|4m mfiummHø> .m mfiaflßmufiš .m ä, alm... flmwmfllfl Emflcmmuø 460 790 Toxicitet Toxiciteten hos föreningen enligt exempel 1 efter intrakranial administrering till möss bestämdes och visas tabellen nedan.
Toxicitet efter intrakranial - administrering till möss Högsta dos (mg/kg) utan *LD50 kliniska tecken på Förening (mg/kg toxicitet Förening enligt R exempel 1 >40 >40 ¶gVš N-formimidoyl- då thienamycin 32 5 ;š *I genomsnitt 25 möss/förening Blodnivåer hos möss efter intramuskulär administrering Blodnivåer och halveringstiden för föreningen enligt .Ä exempel 1 efter intramuskulär administrering av 20 mg/kg lg till möss återges i tabellen nedan.
Blodnivá (ng/ml) Förening 10 20 30 45 60 90 *tl/2 Minuter efter administrering (min) (ug.h/ml) **YUK Förening enl. exempel 1 15,5 11,6 6,5 1,9 0,7 N-formimidoyl~ thienamycin 12,6 9,9 7,3 2,6 0,7 <0,3 9 6 Föreningarna solubiliserades i 0,1 M fosfatbuffert pH 7. värdena avser ett enda försök; 4 möss användes per före- -+_.~.g.-.-_..,_.ssis , _ ning. “ tl/2 avser halveringstiden i minuter ** YUK avser ytarean under kurvan Utsöndring med urinen Utsöndringen av föreningen enligt exempel 1 med urinen efter intramuskulär administrering ( 20 mg/kg) till möss 1; visas i tabellen nedan. lg Förening Förening enligt exempel 1 N-formimidoyl- thienamycin 37 460 790 Utsöndring med urinen efter intramuskulär administrering av 20 mg/kg till möss Procentuell utvunnen dos 0-3 3-6 6-24 0-24 tim. efter administrering 23,3 0,5 0,4 “ 24,2i5,3 12,1 00,1 Föreningarna solubiliserades i 0,1 M fosfatbuffert pH 7. värdena avser ett enda försök; 4 möss per förening.
Ytterligare biologiska data Aktivitet in vitro Prover av nedan angivna karbapenemföreningar (iden- tifierade med hänvisning till utföringsexempel) efter upp- lösning i vatten och spädning med näringslösning visade sig uppvisa följande minsta inhiberande koncentrationer (MIK) i' M9/ml med avseende på de angivna mikroorganis- merna genom rörutspädning efter inkubering över natten vid 37°C. N-formimidoyl-thienamycin har införlivats som jämförelseförening. ¿ _ 2 ' ä; å *E å, 460 790 JVIIK Jung/ml) Förening (exempel nr) Orglninm Ex. k Ex. 5 Ex. 6 2:. T' Ex. B 'MK 075' B. pneunoniuc A-9505 0.03 0.03 0.03' 0.03 0.03 0.002 S. pyogennl A-960h 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.002 _s. tunn: 120686 0.5 0.5 1 0.5 0.5 0.5 _ S. Aureun A-9537 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.00L s. 101-601001 -u-u) 1-9537 0.03 0.06 0.13 0.03 0.06 0.016 S. nurcus (Pan-run) A-9606 0.5 0.03 0.03 0.03 0.06 0.006 S. Aurcu|(M:th-res) A15097 >63 >63 >63 >63 >63 Ä 1:. 0011 A1$119 0.06 0.06 0.03 0.03 0.13 0.016 E. 6611 1203111-1 0.06 0.06 0.03 0.03 0.13 0.03 x. pannan." 11-9661» 0.13 0.13 0.25 0.13 0.25 0.06 x. 166-066616- .420h6ß 0.25 0.25 0.5 0.13 0.5 0.13 n. 610.6" 19659 0.25 0.25 0.25 0.06 0.5 0.06 á z. 616.6.. 109656 0.25 0.25- 0.25 0.13 0.5 0.06 P. 611-161111 11-9900 0.25 0.13 0.06 0.03 0.13 0.06 P. vulglri: A21559 0.03 0.06 0.03 0.03 0.06 0.03 n. 66:51:01 115153 0.25 0.13 0.01 0.03 0.03 0.13 r. »nun 12mm. 0.5 0.25 0.25 0.13 0.25 0.13 s. 61.6.1620. 120019 0.13 0.13 0.06 0.03 0.25 0.03 'f F. ucruginoln A-95ü3A 32 2 L U 5 1 P. ncruginoln A21213 2 0.25 0.5 1 0.5 0.25 - n. :armen-- A-96a3 >32 >32 >32 >32 >32 16 n. anmmu.. 121510 >32 >32 >32 >32 >s2 32 s. rngnn 122662 0.06 0.06 0.06 0.06 0.06 °-°ï5 a. :ngnn 422696 0.25 0.5 0.5 0.5 0.25 0-15 ° I-foruinidoyl thiananycin Förening 'fexexnpel nr) (uy-r) MIK (nå/ml) 460 790 01-9011: xx. 9 n. 10 n. 11 2:. 15 2:. 12 -nx 0157' S. »nunnan 1-9505 0.002 0.002 0.001 0.001- 0.002 0.002 S. vyegenu 1-96011 0.001 0.002 0.001 0.001 0.002 0.002 s. tunn: 120685 0.25 0.25 0.25 2 0.25 0.25 sf annu: 1--9537 0.008 0.005 0.001: 0.016 0.008 o.0:2 S. nureu$(S0$ serum) A-9537 0.016 0.06 0.03 0.06 0.03 3.016 s. nureuuren-ru) 1-9606 0.008 0.016 0.008 0.06 0.016 0-001- S. uureu$(M:th-res) AISO97 r. 6611 115119 0.03 0.03 0.03 0.03 0.03 0.016 E. 6611 1203L1-1 0.03 0.06 0.03 0.03 0.016 0.016 K. yneunonine A~966h 0.13 0.06 0.06 0.06 0.06 0.06 1:. 666066616: 120165 0.25 0.25 0.13 0.13 0.13 0.06 1:. :la-ne 1-9659 0.23 0.1: 0.66 0.13 0.2; 0.06 E. cloncne A-9656 0.13 0.13 0.13 0.25 0.5 0.06 f. :intima 1-9900 0.06 0.13 0.13 0.13 0.06 0.03 p. vunna: 121559 0.016 0.06 0.03 0.03 0.03 0.016 n. 1101-51611 115153 0.13 0.13 0.13 0.13 0.06 0.03 F. :nun-i 122L2L 0.25 0.25 0.25 0.25 0.5 0.06 s. ...u-unna 120019 0.06 -0.13 0.06 0.06 0.06 0.03 P. 002031000: A-98b3A h L L 0 >32 l P. nerugiuoln 121213 2 1 1 1 16 0.13 B. influlnznc A-9833 E. influenzae AZISIB n. rngnu 122062 0.06 0.13 0.06 0.13 0.06 0.03 a. :ngszu ' 122696 0.13 0.25 0.13 0.25 0.25 0.13 ' I-forninidcyl thienaaycin 460 790 MlKJug/xçl) Förening (exempel nr) (för IIBII) ' Crgnainn BI. 15 Ex. lb 'MK 015] s. pmunanu. 1-9505 0.001 0.002 0.002 s. gyn-nu 11-9601- 0.001 0.00). 0.002 S. taIca11I A206Bß 0.5 0.5 0.25 S. uurtul Å-9537 0.00¥ 0.008 0.002 S. \urnux($0$ lnrun) A-9537 0.016 0.016 0.016 S. nurcu:(P0n-run) A-9606 0.016 0.008 0.000 S. curoua(N0:h-ren) 515097 0.03 0.008 0.000 I. :en 115119 0.008 0.03 0.016 S. :nu Azozu-l 0.016 0.03 0.016 X. pucunoninc A~966h 0.03 0.06 0.03 I. pneunonåne A20i65 0.06 0.13 0.11 2. clolcnc A-9659 0.06 0.1! 0.13 I. element A-9656 0.06 0.13 0.06 P. llrlbilil Å-9900 0.03 0.03 0.0] I P. nu; n 121559 0.016 0.016 0.016 N. morgnaii 115153 0.06 0.03 0.06 P. rann-y gzzhzh 0.06 0.13 0.13 . nnrcuuccnn 120019 0.03 0.06 0.03 P. ncruginesn A-98L3A 32 2 1 P. Acrugiaell A21213 l l 0.13 E. influenzae A-9033 E. influenzae 521518 3. 22151111 122862 3. trngilis A22696 ' I-f0rnil1d0y1 tbiaunnycin 460 790 Mix (uq/ml) FÖI-"ênzing (exempel nr) PBN) .för "An Orgmitn Ex. 18 Ex. I» 2:. 13 'rot 0137 S. pniullcnile Å-QSGS 0.002 0.004 - 0.001 0.002 ' S. pyoqcnu A-9604 0.004 0.004 0.002 0.002 S. farsan: 120680 5 4 0.5 0.25 S. lurcul 3-9537 0.13 0.06 0.008 0.002 s. ...ramsan ann; - A-sssv m1: mos 0.6: :mus S. lureuswen-rtl) Ä-SGOG 0.25 0.13 0.03 0.008 S. luxeusüâeth-rel) 115097 0.5 0.2f._ 0.1 0.008 E. :Gli Al51l9 0.25 0.06 0.03 0.016 E. coli ÅIDIHl-l 0.06 0.06 0.03 0.016 K. pnexmoninc A-SGGJ 0.13 0.13 0.13 0.03 K. paeumoniae A20468 0.5 0.25 0.25 0.1! E. :lo-tele 5-9659 0.5 0.25 0.25 0.13 E. clolcue A-9656 0.25 0.5 0.25 0.06 P. IlxiXl-bilil Å~9900 0.13 0.13 0.03 0.03 P. vlalglrit ÅJISSB 0.13 0.06 0.03 0.016 H. morçnnii 515153 0.5 0.13 0.13 0.06 P. ranger; LZNZI 4 4 0.25 0.13 S. narcclcnnl 120019 0.25 0.13 0.06 0.03 P. neruqinoln A-SNM 32 32 32 1 P. ccruçinosn A21213 B 2 2 0-13 E. influenzae A-9B33 E. influenzae A2151B n. fngilis AIZBGI B. fzngilis AZISBG n' H- fornimidoyl chicnnmycin ~~.,,_-u,,,,-,-_»_,. ~~ 1 '- f.. wgiæ, fluíš }”¶U Aktivitet in vivo Den terapeutiska effektiviteten in vivo av flera före- ningar enligt föreliggande uppfinning och N-formimidoyl- thicnamycin (MK 0787) efter intramuskulär administrering till möss, som hade infekterats experimentellt med olika à organismer, visas nedan. PD50 (den dos i mg/kg som krävs för att skydda 50% av de infekterade mössen) anges.
Skyddseffekt vid intramuskulär behandling .bw av infekterade möss PD50/behandling (mg/kg) Förening S. aureus P. mirabilis -P. aeruginosa examnel Nr.A A9e06 g V A9900 A9a43A ;A204s1 É Ex. 4 0,4 _ -22 5 >s ,; ri. s 0,5 22 0,9 0,0 š rx.e ~3 A46 0,9 0,6 Ex. 7 0,6 ~22 0,9 1,4 Ex. 8 0,8 N38 0,9 2,5 MK 0787 0,07 9 0,5 0,4 Behandlingsschema: Möss infekterades intraperitonealt med cirka 1 x 109 organismer (A9606), cirka 1 x 107 (A9900), cirka 5 x 104 (A9843) eller cirka 1 x 105 (A20481).
Testföreningarna administrerades intra- - muskulärt O och 2 timmar efter infektion (A9606) eller 1 och 3,5 timmar efter infek- tion för de övriga. A Den terapeutiska effektiviteten in vivo av flera före- ~ ningar enligt föreliggande uppfinning och N-formimidoyl- tnienamycin (MK 0707) efter intramuskulär administrering till möss, som hade infekterats experimentellt med olika organismer, visas nedan. PDSO (den dos i mg/kg som krävs för att skydda 50% av de infekterade mössen) anges även. ' 460 790 Skyddseffekt vid intramuskulär behandling av infekterade möss PD50/behandling (mg/kg)¿ P. aeruginosa Förening P. mirabilis (exemgel nr.) A9900 A9843A Ex. 9 - ' 3,1 Ex. 10 - 1,8 Ex. 11 - 2,4 Ex. 15 (för. “A") - - 3,1 Ex. 12 - >25 Ex. 14 5,4, 0,78 MK 0787 19 1 Behandlingsschema: Möss infekterades intraperítonealt med 4 x 1ø7 arganismer (A99oo) eller 8 x_1o (A9843A) och behandlades med testföre- ningarna intramuskulärt 0 och 2 timmar 4 efter infektion.
Blodnivâer och utsöndring med urinen Blodnivåer och halveringstiden för vissa föreningar enligt föreliggande uppfinning efter intramuskulår administ- rering av 20 mg/kg till möss visas nedan. Där visas även utsöndringen med urinen hos möss.
Farmakokinetiska parametetrar hos möss efter intramuskulär administrering av 20 mg/kg Blod ~ Utsöndring Förening Cmax *Tš **YUK med urinen (exempel nr) (ng/ml) (min) (n¶.H/ml) % Ex. 4 11,4 10,4 5,5 49 3 6 Ex. 6 15,2 10 7,7 38 ¿ 13 Ex. 7 15 11 7 49 3 9 Ex. 8 10,6 8,2 4,6 47 3 7 MK 0787 14,6 10 6 ' 33 ¿ 8 i T';,'T«_;7"-ššf»_-j_,f' 4, , 'wwmfw w m ' w--ïw-g vwuwæ' * 44 “~“'W'f'"~'f“' "Y-" ”W” 460 790 Föreningarna_sulubiliserades i 0,1 M fosfatbuffert pH 7. värdena är baserade på ett enda försök; 4 möss per före- ning med undantag av Ex. 7, som avser medelvärdet av två försök. _ *Ti avser halveringstiden i minuter **YUK avser ytarean under kurvan.
Uppfinningen åskådliggörs närmare medelst följande utföringsexempel.
Exemgel 1 _ Framställning av 3-(2-(1-pyridinium)etyltio)-6&- (1-(R)-hydroxietyl)-7-oxo-$azabicyk1o(3.2.0)-hept- 2-en-2-karboxylat / \ 'Cazcñzg A. p-nitrobensyl-3-(2-hydroxietyltiø)-6a-(1-(R)-hydroxi- etyl)-7-oxo-1-azabicyklo (3.2.0) hept-2-en-2-karboxylat OH PNB 3 “mig ;v-r:--,- -m4a ~~vggvfwfwv' n~wuwr,-c -fewfzz ~a~w~qïg~~fifyfv Åïí 1 J Y \ M í _ “æfsf «, - ~. -~,«~,_.«,==;..«;-.,> .mr 460 790 En lösning av 1,69 g (4,85 mmol p-nitrobensyl-6G~ (1-(R)-hydroxietyl)-3,7-dioxo-1-azabicyklo (3.2.0)hept-2- en-2-karbøxylat c1)_i 20 mi acetonitril kyiaes till o°c under kväveatmosfär. En lösning av 726 mg (7,18 mmol) diisopropyletylamin i 2 ml acetonitril tillsattes, följt av droppvis tillsats av 1,51 g (5,6O mmol) difenylklor- fosfat i 12 ml acetonitril under en tidsrymd av 3 minuter.
Den erhållna lösningen omrördes vid OO under 20 minuter för erhållande av p-nitrobensyl-3-(difenylfosforyloxi)- ax-(1-(ni-nyaroxiety1>-7-oxo-1-azabicyklo (3.2.0>hept-2- 'en-2-karboxylat. Till denna lösning sattes en lösning av 726 mg (7,18 mmol) diisopropyletylamin i 2 ml acetonitril, följt av en lösning av 439 mg (5,63 mmol) 2-merkaptoetanol li 2 ml acetonitril. Reaktionslösningen omrördes 3 timmar vid OOC och späddes därefter med 200 ml etylacetat och tvättades med 200 ml vatten, 100 ml av en 20 2-ig vatten-' lösning av fosforsyra och saltlösning. Indunstning av den över magnesiumsulfat torkade lösningen gav ett hàlvfast material, som triturerades med metylenklorid och filtre- rades för erhållande av 1,2 g (61% utbyte) av den i rub- riken angivna produkten (2) som ett vitt, amorft fast material.
NMR (nmso-d6><š=1,2o (sn, a, J=s,0 Hz), 2,9-3,2 (9n,m). ,22 (1H, d, J=8,5 Hz) och 8,23 (2H, d, J=8,5 Hz); IR (KBr)y max; 3500, 1770 een 1700 cm"1; Analys beräknat för C18H20N2O7S: C, 52,93; H, 4,94; N, 6,86; S, 7,85. Funnet: C, 52,83; H, 4,90; N, 6,42; S, 8,31.
B. p-nitrobensyl 3-(2-metansulfonyloxietyltio)-6&(1~ (R)-hydroxietyl)-7~oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept¥2-en- 2-karboxylat V35 Till en lösning av 4,2 g (10,3 mmol) av föreningen 2 i 200 ml tetrahydrofuran sattes vid -40°C 1,3 g (11,3 mmol) metansulfonylklorid, följt av droppvis tillsats av 1,26 g (12,4 mmol) trietylamin i 5 ml tetrahydrofvran. Reaktions-V blandningen omrördes 5 timmar vid -40OC, omrördes där- efter 2 timmar vid -30°C under kväveatmosfär och hälldes därefter i en blandning av 700 ml etylacetat och 1000 ml av en 5 %-ig vattenlösning av fosforsyra. Det organiska skiktet tvättades med saltlösning, torkades över magnesium- sulfat, filtrerades och koncentrerades till en sirap. Detta material renades genom silikagelkolonnkromatografering (eluering med metylenklorid-etylacetr* 1 ett volymför- hållande av 3:1) för erhållande av 3.55 g (75 % utbyte) av den i rubriken angivna föreningen son ett vitt, amorft fast material. _ NMR (CDCl3) Ä : 1,25 (3H, d, J=6,0 Hz), 3,05 (3H, s), 3,06- 3,40 (SH, m), 4,05-4,40 (4H, m), 5,25 (1H, d, J=14,0 Hz), ,50 (1H, d, J=14,0 Hz), 7,70 (2H, d, J=8,5 Hz) och 8,23 (zu, a, J=s,s 112); IR (Klar) ymax; 3400, 1770 coh 1soo cmq.
Analys beräknat för C19H22N2O9S2: C, 46,90; H, 4,56; N, ,76, Funnet: C, 46,52; H, 4,32; N, 5,91.
C p-nitrobensyl-3-(2-jodetyltio)~6«-(1-(R)-hydroxietyl)- 7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat '20 3 och 216 mg (1,4 mmol) natriumjodid i 20 ml aceton âtlopps- “°C02pNB 460 790 En lösning av 350 mg (O,72 mmol) av mellanprodukten kokades 4 timmar. Avdrivning av acetonet gav ett vitt, amorft fast material, som suspenderades i 10 ml eter- 10 ml vatten. Filtrering av det vita fasta materialet och vakuum- torkning gav 300 mg (80% utbyte) av den i rubriken angivna föreningen 4 som ett vitt amorft pulver.
NMR (nmso-d6)¿'= 1,18 (sn, 0, J=6,0 Hz), 3,20-3,60 (vn, m), 3,80-4,25 (2H, m), 5,10 (1H, d, J=5,5 H2), 5,25 ,45 (1H, d, J=12,0 Hz), Hz) och 8,27 (ZH, d, J=8,5 Hz); d, J=12,0 Hz), øch 1700 cm'1; Analys beräknat för c18n19 H, 3,70; N, 5,41; I, 24,48. Funnet: C, 42,10; H, 3,75; N, 5,97; I, 23,20.
D. 3-(2-(1-pyridin1um)etyit1Q)-s«-(1-(R)~hyaroxiety1)-7? IR (KBr)ï'max: N206I: C, oxo-1-azabioyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat O ššç SCHZCHZI cozpns --«-9 (1H, 7170 d] J"'8{5 3500, 1768 41,71; _' ' . , ».,.~,__> -.,. ,-..;, :vu ~_ ”z ,_»-,,-__-,¿- 0 _ '-.,-.-.,- uu-çgf , Till en lösning av 327 mg 10,63 mmol) av mellanpro- dukten 4 i 20 ml tetrahydrofuran sattes vid OOC 100 mg (1,26 mmol) pyridin, följt av en lösning av 139 mg (0,67 mmol) silverperklorat i 1 ml tetrahydrofuran. Blandningen omrördes 1 timme vid OOC och därefter 2 timmar vid rums-_ temperatur. Lösningsmedlet avdrevs i vakuum, vilket gavi föreningen 5 som ett ljusgult gummi, som utrördes med 300 mg CELITE för erhållande av ett amorft fast material.
IR (KBr)X'max: 3400, 1770, 1700 och 1100 cm_1. Utan ytter- ligare rening hydrerades föreningen 5. A Till en suspenderad blandning av föreningen 5 i 50 ml eter och 50 ml tetrahydrofuran sattes således en lös- ning av 126 mg (1,26 mmol) kaliumbikarbonat och 110 mg (0,63 mmol) dibasiskt kaliumfosfat i 50 ml vatten. Därefter tillsattes 350 mg 10% palladium på träkol och blandningen hydrerades vid 40 psi i en Parr-skakapparat under 60 minu~ ter. Blandningen filtrerades därefter och katalysatorn tvättades med 2 x 10 ml vatten. Kombinationen av filtrat och tvättvätskor extraherades med 2 x 100 ml eter och lyo- filiserades därefter för erhållande av ett gult pulver.
Det orena gula pulvret renades på en C18 BONDAPAK revers- faskolonn (g) (Waters Associates) under eluering med vatten under ett tryck av 8 nsi. Varje fraktion om 15 ml analy~ serades medelst högtrycksvätskekromatografi och fraktioner 300 nm tillvaratogs max och lyofiliserades för erhâllnade av 40 mg (19% utbyte med en ultraviolett absorption vid 460 790 _baserat på förening 4) av den 1 rubriken angivna produkten 6 som ett vitt, amorft fast material. , _ Nnnuäp) J; 1,20 (sn, d, a=e,o az), 2,90-3,70 (vn, m), 3,75-4,20 (zu, m) men-7,10-8,80 (sn, m), In_(xBr)1fmax= 3400, 1760 och 1590 cm'1; Analys beräknat för c16n18N2 04S.2H2O: C, 51,89; H, 5,40; N, 7,56. Funnet: C, 49,91; H, 5,08; N, 7,11. U\'}ma¿ (CH3CH2OH) 296 nm (6=7696).
Exemgel 2 Framställning av 3-(2-(1-pyridinium)propyltio)-61- (1-(R)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept- 2-en-2-karboxylat A. p-nitrobensyl 3-(2-hydroxipropyltio)-6«-(1-(R)-hydroxi- etyl)-7-øxo~1-azabicyklo<3.2.o>-nept-2-en~2-karboxylat o 1)<&p> gel 2)HSCH2CH2CH2OH i» U 460 790 .En lösning av 926 mg (2,66 mmol) p-nitrobensyl-6- (1-(R)-hydroxietyl)-3,7-dioxo-1~azabicyklo(3.2.0)-hept-' 2-en*2-karboxylat (2) i JS ml acetonitril kyldes till -10°C under kväveatmosfär. En lösning av 349 mg (2,7 mmol) diisopropyletylamin i 1 ml acetonitril tillsattes, följt av droppvis tillsats av 725 mg (2,0 mmol) difenylklor- fosfat i 0,7 ml acetonitril under en tidsrymd av 2 minu- (ter. Den erhållna lösningen omrördes vid -10°C under 15 minuter för erhållande av p-nitrobensyl-3-(difenyl- fosforyloxi)-6ä-(1-(R)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo- (3.2.0)-hept-2-en~2-karboxylat. Till denna lösning sattes en lösning av 326 mg (2,8 mmol) diisopropyletylamin i 1 ml acetonitril, följt av en lösning av 275 mg (3,0 mmol) 3~merkaptopropanol i 0,5 ml acetonitril. Reaktionsbland- ningen omrördes 5 timmar vid rumstemperatur och därefter vid SOC över natten. Reaktionsblandningen späddes med 100 ml etylacetat och tvättades med 100 ml vatten och därefter med saltlösning. Koncentrering av den över mag- nesiumsulfat torkade lösningen till cirka 5 ml volym gav vita kristaller, som tvättades med eter för erhållande av 830 mg (74%) av den i rubriken angivna föreningen 3 som vita kristaller med smältpunkten 142-144OC. _ NMR (DMso-dö) ¿= 1,20 (3H, d, J=6,0 Hz) \,5-2,0(2H, m), 2,8-3,6(7H, m), 4,60(1H, t, J=5,0 och 5,0 Hz), 5,1(1H, d, J=5,0 Hz), 5,25(1H, d, J=14,0 Hz), 5,50(lH, d, J=14,0 Hz) 7,70(2H, d, J=8,5 Hz) och 8,23(2H, d, J=8,5 Hz); IR (kBr) fmax; 3400, 1770 och 1600 cm”.
Analys beräknat för C19H22N2O7S~1/2H2O: C, 52,90; H, 5,33; N, 6,49; S, 7,42.
Funnet : C, 53,10; H, 5,08; A N, 6,61: S, 7,65.
B. p-nitrobensyl-3-(2-jodpropyltio)-6fl-(1-(R)-hydr0xi- etyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3_2.0)hept~2-en-2-karboxylat *å mlm CO o . :PNB scazcazcazosoz-G- CHB 460 790 f ß '“-T”/\\ïF-scnzcazcazz aozpmß NaI E [UI Till en lösning av 810 mg (1,91 mmol) av föreningen '3 i 20 ml torr tetrahydrofuran sattes 400 mg (2,1O mmol) p-toluensulfonylklorid följt av 268 mg (2,20 mmol) di- metylaminopyridin och blandningen omrördes två timmar vid rumstemperatur under kväveatmosfär. Reaktionsbland- ningen hälldes därefter i etylacetat-isvatten. Det orga- niska skiktet tvättades med 40 %-ig salpetersyra och tor- kades därefter över magnesiumsulfat. Avdrivning av torkade lösningsmedel gav tosylatet 4 som en gul olja, som omvand- lades till jodföreningen 5 utan ytterligare rening. Râpro- dukten 4 upplöstes i 30 ml aceton, 1,5 g (10 mmol) natrium- jodid tillsattes och blandningen omrördes 16 timmar vid rumstemperatur. Reaktionsblandningen hälldes därefter i etylacetat-vatten. Avdrivning av det över magnesiumsulfat torkade lösningsmedlet gav en gul sirap, som renades medelst silikagelkolonnkromatografering (eluering med metylenklorid- etylacetat i volymförhållandet 9:1) för erhållande av 1420 mg (18,5 % utbyte) av den i rubriken angivna föreningen som ett vitt amorft pulver.
NMR (aceton-a6)¿ =1,25(3n, a, J=e,o az), 2,7-3,s(7u, m), 4,0-4,4(2H, m), 5,30(1H, d, J=14,0 Hz), 5,65(1H, d, J=14,o Hz), 7,s0(2n, a, J=s,5 az), s,30(2H, a, J=s,5 Hz); IR (xßr)-ymax= 3500, 1770 och 1600 cm"1.
C. 3-(2-(1-pyridinium)propyltio)-6“-(1-(R)-hydroxietyl)- 7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)-hept-2-en-2-karboxylat |m Å .
\. ~ L c _ M Å å à f? ,: E' É šï i 460 790 on J* E .sca cs cs gu/ \ H 2 2 2 2 I *- ~ e PÖ/C 0 N 02 2.
Till en lösning av 140 mg (0,3 mmol) av jodföreningen i 5 ml torr tetrahydrofuran sattes 50 mg (0,6 mmol) pyri- din, följt av en lösning av 100 mg (0,5 mmol) silverper- klorat i 1 ml tetrahydrofuran. Blandningen omrördes två timmar vid rumstemperatur och därefter avdrevs lösnings- medlet i vakuum, vilket gav föreningen 6 som ett gulaktigt gummi. _ IR (mar) ymax; 3400, 1770, 1600 och 1100 m4. Utan ytteré ligare rening hydrerades förening 6. * Till en suspenderad blandning av föreningen 6 i 20 ml eter och 20 ml tetrahydrofuran sattes således en lösning av 30 mg (0,3 mmol) kaliumbikarbonat och 52 mg (0,3 mmol) dibasiskt kaliumfosfat i 20 ml vatten. Därefter tillsattes 100 mg 10% palladium på träkol och blandningen hydrerades vid 40 psi i en Parr-skakanordning under 60 minuter. Bland- ningen filtrerades och katalysatorn tvättades med 2 x 5 ml vatten. Kombinationen av filtrat och tvättvätskor extra- herades med 2 x 5 ml eter och lyofiliserades därefter för erhållande av ett gult fast material. Råmaterialet renades på en C18 BONDAPAK reversfaskolonn (8g) (Waters Associates) under eluering med vatten under ett tryck av 8 psi. Varje fraktion om 10 ml analyserades med högtrycksvätskekromato- grafi och fraktioner med en ultraviolett absorption vid lnmx 300 nm tillvaratogs och lyofiliserades för erhållande av 8 mg av den i rubriken angivna föreningen som ett ljus- gult glasartat pulver.
NMR (D20) 8 =1,2s(3H, a, J=6,5 Hz), 1,5-1,8(2H, m), 2,2-3,70(7H, m), 4,0-4,3(2H, m), 7,9-8,9(m, 5H); IR (KBr) ymax= 3400, 1760 och 1590 cm”. uv »max (H20) 294 mn .§}082), 265 nm (E=6,317). - ï-'fiäfl-:rzfu *<- .a J .' ' ~^~ï ewaqw-aàweflw. a.. -_ f, .~__¿¿__.¿__ , _, ' "' fíiwwa-we-.aswmwnïïr 53 460 790 Exemgel 3 Framställning av 3*(2-(1-pyridinium)etyltio)-6Q-(1- (R)-hydroxietyl)-7-oxo~1-azabicyklo(3.2.0)-hept-2- en-2-karboxylat (föredraget förfarande) - A. 2(trifenylmetyltio)etanol Metod A ZEÄ + ïrSH_ ntouá, tron - vo'c, 2 h :rs/”\/"OH Till en suspension av 2,74 g (0,010 mol) trifenyl- metylmerkaptan i 10 ml etanol sattes 0,25 ml av en 4N vattenlösning av natriumhydroxid (1,0 mmol). Blandningen lomrördes 5 minuter, behandlades med 0,75 ml (0,015 mol) etylenoxid, omrördes 15 minuter och upphettades 2 timmar vid 70oC. Efter kylning till 35OC neutraliserades reak- tionsblandningen med rexyn-102 H+ och filtrerades. Filt- ratet koncentrerades till en sirap, som kristalliserade då den fick stå. Triturering av det fasta materialet i hexan gav efter filtrering 3,20 g (100%) med smältpunkten 102-BOC (smältpunkt 114-115oC enligt C.C. Culvenor, W.
Davies och W.E. Savige, J. Chem. Soc. (1952) 4480). Ett analytiskt prov erhållet efter omkristallisation i diklor- metan-hexan hade smältpunkten 108-10°C.
IR (KBr) gmax: 3340 (br OH), 1590 (aromatisk), 1483, 1445, 1439, 1182, 1060, 1035, 1010, 751, 738, 695 Cm_1, -1Hmr (cnc13) 3=°'1,61 (m, s, om, 2,48 (211, t, _q=6,1 Hz, H-2), 3,39 (ZH, t, §=6,1 Hz, H~1), 6,7-7,7 115H, m, fenyl).
Metod B . OH r:oNa,s:oa _ - g/,\~/Vox . ~ ' _ T: TIC* * hs/V Återflöae 1,5 h 460 790 ' Till en lösning av natriumetoxid i etanol (framställd utgående från 3,4 g 0,085 mol) natriumhydroxid i 35 ml etanol) sattes 5,6 ml (0,080 mel) 2-merkaptoetanol och 23,4 g (0,084 mol) trifenylmetylklorid med en sådan hastig- het att temperaturen hölls vid 45-eo°c. Reektlensblena- ningen åtloppskokades 1,5 timmar, kyldes till 30°C och filtrerades. Det fasta materialet tvättades med 3 x 30 ml eter. Filtratet koncentrerades till en sirap, som upplös- tes i 150 ml eter. Den organiska lösningen tvättades med vatten, utspädd ättiksyra och vatten, torkades över mag- nesiumsulfat- och magnesiumoxid och koncentrerades under E reducerat tryck till en sirap, som solubiliserades i enl Û 1:1-blandning av diklormetan och hexan. Filtrering av kristallerna gav 5,7 g (22%) med smältpunkten 109-10°C (smältpunkt enligt det under metod A angivna litteratur- stället 114-115°C), av den i rubriken angivna föreningen.
Filtratet renades medelst kromatografering (silikagel 60, 70-230 mesh, 240 g). De lämpliga fraktionerna ifråga kom- binerades och koncentrerades till en sirap, av vilken 4,61 g (18%) med smältpunkten 107-9OC erhölls genom kristallisation (diklormetan-hexan) i ett totalutbyte Q av 40%. Analysdata var identiska med de som har angivits för den under metod A framställda föreningen.
B 2-(trifenylmetyltio)etylmetansulfonat L ' MSCL hit' 'Ii-NH TIS /\/oš.cx3 Qí2 Cl 2 r Till en lösning av 2,66 g 18,30 mmol) 2-(trlfenyl- ß metyltio)etanol i 39 ml kall (OÛC) diklormetan, som hölls É under kväveatmosfär, sattes 0,704 ml (9,10 mmol) metan- sulfonylklorid; den erhållna hlandningen behandlades dropp- vis (15 minuter) med 1,34 ml (9,6 mmol) trietylamin. Efter omröring 15 minuter avlägsnades kylbadet och reaktionsbland- ningen omrördes 7 timmar och tvättades därefter i tur och ordning med 10 ml.vatten, 10 ml O,5N citronsyra, 10 ml vatten, mättat natriumbikarbonat och vatten. De organiska Rygg.. . - 460 790 extrakten torkades över magnesiumsulfat~magnesiumoxid och koncentrerades under reducerat tryck till en tjock sirap, som kristalliserade då den fick stå. Triturering av kristallerna i eter gav 2,1 g (63%) av ett vitt fast material med smältpunkten 95-8°C; IR (KBr) vmax: 1580, 1565 (fenyl), 1350, 1175, 1165 cm*1 (sulfonat): ümr (CDCl3):2,S1 (2H, t, §=6,6 Hz, CH2S), 3,07 (BH, s, CH3SO3), 3,87 (2H, t, §=6,6 Hz, CH2O), 7,54 (15H, m, fenyl).
C. 1-(2-trifenylmetvltioetyl)pyridiniummetansulfonat ïïsNN ® > HSÛ .rzs/\/ °fcH3 Pyridin _ _ o I nBu4NI, A En blandning av 0,598 g (1,5O mmol) 2-(trifenyl~' metyltio)etylmetansulfonat, 0,020 g tetra-n-butylammonium- jodid och 1,2 ml (15,0 mmol) pyridin upphettades 3 timmar vid 9OOC under kväveatmosfär. Efter kylning till ZSOC av- drevs pyridinet under reducerat tryck till ett vitt fast material, som triturerades i eter och filtrerades, var- vid man erhöll 0,66 g (92%) med smaltpunktea 135-5o°c under sönderdelning.
IR (KBr) Vmaxz 1628 (pyridinium), 1590, 1575 (fenylx 1190 cmf1 (sulfonat), 1Hmr (DMSO-d6) Ä: 2,31 cH3soš), 2,82 (zu, m, cnz 1, 4,40 (za, m, cH2N*), 7,28 (15H, m, fenyl), 8,12 (2H, m, Hm från pyridinium), 8,59, (1H, m, Hp från pyridinium), 8,84-8,85 (2H, dd, 1=1,3 Hz, g_6,7 Hz, Ho från pyridinium). Analys beräknat för (3H, s, C27H37N03S2-H20: C 65,43, H 5,90, N 2,83, S 12,94; Funnet: C 65,77, H 5,81, N 3,25, S 12,55. , D 1-(2-merkaptoetyl)pyridiniummetansulfonat Metod'A '+ NO '+ man ”-'_-+' nsfvnq®> MSC- ' . 55°C, 16 h nwwmwawasrvrawfux-næaëfløiefe» 1:.,<4v,:«»:»».s1a,,.-.-. _» (i 460 790 Till en suspension av pyridiniummetansulfonat i pyridin (framställd genom droppvis tillsats av 1,95 ml, (0,03 mol) metansulfonsyra till 8,0 ml (0,099 mol) pyridln sattes under kylning 1,96 ml (0,033 mol) etylensulfid. Den erhållna blandningen omrördes vid SSOC under 16 timmar och koncentrerades under reducerat tryck till en tjock sirap, som blandades med några ml vatten. Lösningen hälldes på Vtoppen av en kolonn (40 x 16 cm) avg;-bondapak C-18, som eluerades med vatten. Lyofilisering av de lämpliga frak- tionerna ifråga gav 6,5 g (91%) av en färglös sirap. IR (film) vmax: 2300-2600 (br, SH), 1635 (pyridinium), 1490, 1200 (suifonat), 1068, 1060, 1045, 791, 780 cm'1, 1nmr (nmso-as) 5 = 2,32 <3a, S, cu3so;), 2,61, 2,70, 2,73, 2,82 (1H, B del av AZB-system, SH), 3,07 (2H, m (med D20, 3,08 (2H, t, §=6,5 Hz)), CHZS), 4,76 (2H, t, å=6,5 Hz, cH2N*>, 0,19 (za, m, am från pyridinium), 0,6 <1n, m Ho från pyridinium), 9,08 (ZH, dd, §=6,8 Hz, §=1,4 Hz, H0 från pyriainium), uv (H20) ¿max= 206 (aszao), 258 (63760) mp.
Metod B Bsü En lösning av 0,477 g (1,0 mmol) 1-(2-trifeny1mety1- tioetyl)pyridiniummetansulfonat i 25 ml metanol behandlades med 0,335 g (1,05 mmol) kvicksilveracetat och omrördes 2 timmar vid 25OC. Blandningen koncentrerades under redu- cerat tryck och återstoden triturerades med 30 ml eter för erhållande av ett vitt fast material efter filtrering.
En suspension därav i 25 ml diklormetan behandlades vid 25OC med gasformig vätesulfid under 1,75 timmar och filtre- rades. Filtratet koncentrerades under reducerat tryck och återstoden späddes med vatten och applicerades på toppen av en kolonn (1,5 x 6,0 cm)(J-bondapak C-18. Eluering av kolonnen med en blandning av 15% acetonitril och 85% vatten i 460 790 gav efter lyofilisering av de lämpliga fraktionerna ifråga 0,179 g (76%) av en färglös tjock sirap. Analysdata var identiska med de som har angivits ovan för den under metod A framställda föreningen.
E. 1-(2-merkaptoetyl)Pyridiniumklorid Metød A: _ _ lagt pemucits-i <1' _ .__ evo --e wfi> m AEn vattenlösning av 9,4 g (0,04 mol) orent 1-(2- merkaptoetyl)pyridiníummetansulfonat hälldes på toppen av en kolonn (2,5 x 41 cm) permutit S-a Cl”. Kolonnen eluera- des med vatten med en hastighet av 0,5 ml per minut och de lämpliga fraktionerna ifråga kombinerades och lyofili- serades för erhållande av 7,0 g (100%) av en gulaktig_ sirap, som användes som sådan i efterföljande steg. 1Hmr (n2o)¿= 3,22 (za, m, cuzs), 4,88 (m, cnzrï), 8,18 (211, m, Hm från pyridinium), 8,7 (1H, m, Hp från pyridinium), 9,0 ppm (ZH, m, HO från pyridinium).
Metod B: ß + -» Till 5,6 ml (70 mmol) i förväg kyld (isbad) pyridin sattes 4,05 g (35 mmol) pyridinhydroklorid och 2,1 ml (35 mmol) etylensulfid. Blandningen upphettades vid 65°C och omrördes 75 minuter för erhållande av ett tvåfassystem.
Den lättare fasen avlägsnades. Den kvarvarande oljan tvät- tades med 5 x 10 ml eter och pumpades under högvakuum för erhållande av den i rubriken angivna föreningen (90-100%), som användes som sådan i efterföljande steg. 460 790 fin» w ; 2- c1g19Pn)2 o * _ _ ¥ -_ . ' 3* K&/“»/ Cl 'b _ _ “F. P6ran1t:obensy1-3-(2-(1-pyr1a1nium)euy1ti6)-66- (1-(R)~hyar6x1e6y1)-7-øxø-1-azabicyxiø(3,2.o)nept-2- en-2-karboxylatklorid_' ' 1' 1-xuxcnnñz 'guumæ ¿_ ÉECÜIT, _ En lösning av 6,09 g (17,5 mmol) p-nitrobensyl-6a- (1-(R)-hydroxietyl)-3,7-dioxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept- 2-en-2~karb0xylat i 20 ml acetonitril kyldes till +5°C under kväveatmosfär och behandlades i tur och ordning med 1 3,65 ml (21,0 mmol) diisopropyletylamin och 4,34 ml (21,0 mmol) difenylklorfosfat. Den erhållna blandningen omrördes minuter vid 5°C, kyldes till -5°C och behandlades i tur och ordning med en lösning av 4,3 g (24 mmol) oren 1-(2-merkaptoetyl)pyridiniumklorid i 1,0 ml N,N-dimetyl- formamid och droppvis med 3,65 ml (21,0 mmol) diisopropyl- etylamin. Reaktionsblandningen omrördes 1 timme vid OOC, kyldes till -30°C och omrördes ytterligare 15 minuter.
Det fasta materialet avfiltrerades och tvättades med kall (-3o°c) acetonitril 5,77 g (65%), IR (nujol) vmax=Å33oø (OH), 1775 (C=O frân.ß-laktam), 1690 (C=Ofrån PNB-ester), 1630 (pyridinium), 1605 (fenyl från PNB-ester), 1515 (N02), ' h 1335 cm'1 (N02), 1umr (nmso-66) 5: 1,17 (sn, 6, ¿=6,1 Hz, C§3CHOH), 3,2-3,75 (5H, H-4, H-6, CHZS), 3,75-4,5 (2H, M H-5. cH3c§oH), 4,92 (za, brt,.g=6,5 Hz, cH2N+), 5,18 (1H, f d, Q=4,9 Hz,OH), 5,37 (centrum av ABq, Ja'b=14,2 Hz, CH2 F från PNB), 7,69.(2H, d, §=8,7 Hz, Ho från PNB), 8,24 (d, ¿=s,7 Hz, Hm från PNB, 6,0-8,4 (4H, Hm från PNB, um från ß pyriainiuma, 8,66 (16, m, Hp från pyriainium), 9,11 (26, brd, §=5,5 Hz, Ho från pyridinium). Filtratet och tvätt- vätskorna kombinerades och späddes med 150 ml eter. Den överliggande vätskan dekanterades och gummit upplöstes i 40 ml vatten, som innehöll tillräckligt med acetónitril för att ge en lösning, som hälldes på toppen av en kolonn OH }"\ O , 460 790 (3 x 10 cm)11-bondapak C-18. Kolonnen eluerades med 150 ml % acetonitril - 90% vatten och 100 ml 50% acetonitril - 50% vatten. De lämpliga fraktionerna ifråga kombinerades 0 och lyofiliserades efter det att acetonitrilen hade av- lägsnats i vakuum, varvid man erhöll ett gulaktigt pulver.
NMR av pulvret visade närvaron av den i rubriken angivna föreningen blandad med viss mängd p+nitrobensy1-3-(2-(1- pyridinium)etyltio)-6u(1-(3)~hydroxietyl)~7-oxo-1-aza- bicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat-difenylfosfat (2:1).
Pulvret upplöstes i vatten (minsta möjliga mängd) och fick passera en kolonn (1,5 x.21 cm) permutit S-1Cl_ med vatten.
Lyofilisering av de lämpliga fraktionerna ifråga gav 1,8 g (20%) av den i rubriken angivna föreningen. ' G. Paranitrobensyl-3-(2-(1-pyridinium)etyltio)-6a-(1- (R)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2- en-2-karboxylat~difenylfosfat 1) :æuipnz- _ - OH- V W , ' 2) cxgwmnz g ' i I' ' 0 - _- SA (i) u 3, m» W v Ö ”WWW OOPNB (Pno)'2go' 4; mama-q: En lösning av 0,174 g (0,5O mmol) pfnitrobensyl-6&- (1-(§)-hydroxietyl)-3,7-dioxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2- en-2-karboxylat i,2 ml acetonitril kyldes_till OOC under kväveatmosfär och behandlades i tur och ordning med 0,105 ml (0,60 mmol) diisopropyletylamin och 0,124 ml (0,60 mmol) difenylklorfosfat. Den erhållna lösningen omrördes 30 minu- ter vid 0°C och behandlades i tur och ordning med en lös- ning av 0,170 g (0,72 mmol) 1-(2-merkaptoetyl)pyridinium- metansulfonat i 0,6 ml acetonitril och 0,105 ml (0,60 mmol) diisopropylamin. Reaktionsblandningen omrördes 15 - minuter vid OOC, späddes med 7 ml kallt (OOC) vatten och hälldes på toppen av en kolonn (1,5 x 6,4 cm) U-bondapak C~18. Kolonnen eluerades med en blandning av acetonitril, 460 790 \,_§ 60 (25%-50%) i vatten (75%-50%). De lämpliga fraktionerna ifråga kombinerades och lyofiliserades efter det att aceto- nitrilen hade avlägsnats i vakuum, varvid maneerhöll ett gulaktigt pulver. 0,33 g 192%), :R (xnr) vm¿x= 3600-aooo (OH), 1765 (C=O från (3-laktam), 1690 (C=O från PNB-ester), 1625 (pyridinium), 1585 (fenyl), 1510) (N02), 1330 (N02), 1 ess cm' (uo,), 1nmr (nmso-as) 5; 1,16 (sn, d, g=e,2 az, gg3cnon), 4,87 (za, bre, g=s,s Hz, cu2s>, 5,37 (centrum av Aßq, ga b=14,3 Hz, CH2 från PNB), 6,7-7,5 (fenyl), I _ ' 7,68 fa, ¿§s,a az, no från PNB), 8,23 (d, ¿=a,e Hz, am från PNB), 8,0-8,3 (m, Hm från pyriainiu), 8,4-8,8 <1n, _Hp från pyridinium), 9,09 (ZH, dd, §=6,7 Hz, g=1,3 Hz, Ho från pyridinium).
H. 3-(2-(1-pyridinium)etyltio)~6N-(1-(§)-hydroxietyl)- 7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hent-2-en-2-karboxylat io: Pa/c, H2 . i . I; THF, Eter Till en lösning av 0,16 g (O,22 mmol) p-nitrobensyl-3- (2-(1-pyridinium)etyltioy-ea-<1-(g)-hyamxiety1)-7-ox°-1- azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-karboxylat-difenylfosfat i 10 ml fuktig tetrahydrofuran sattes 10 ml eter, 16 ml (0,05 M) enbasiskt kaliumfosfat-natriumhydroxid-buffert pH 7,4 och 0,16 g 10% palladiumpâ träkol. Den erhållna blandningen hydrerades under 40 psi 1 timme vid 25°C. De två faserna separerades och den organiska fasen extraherades med 2 x 3 ml vatten. Vattenlösningarna kombinerades, tvättades med 2 x 10 ml eter och hälldes på toppen av en kolonn (1,5 x 6,2 cm) avll-bondapak C-18 efter det att spåren av organiskt lösningsmedel hade avlägsnats i vakuum. Elue- ring av kolonnen med vatten gav efter lyofilisering av de lämpliga fraktionerna ifråga 0,062 g (84%) av ett gul? aktigt' pulver. IR (xBr) vmax: 37o0-3oo0(oH), 1755 (c-o .M».-«,~._._.-_..... ._ .,___,__Y_ g 01 460 790 från ß-laktam), 1630 (pyridinium), 1590 cm“1 (karboxylat), “am (1120): 1,22 (an, a, _q=§,4 Hz, cggacnon), 2,92 (a, §=9,1 H2, H-4), 2,97 (Ö, g=Q,1 H2, H”4), 3,20 (dä, §=2,5 H2, g=6,1 BZ, H-6), 3,44 (Ü, ¶=6,0 Hz, CH2S), 3,93 (åd, š=- s 9,1 az, g=2,s az, 11-5), 4,82 (t, g_=6,o nz, cnzzf), 8,114 g (m, Hm från pyridinium), 8,5 (m, Hp från pyridinium), 8,82 (dd, ¶=3,2 Hz, §=1,1 Hz Ho från pyridinium), UV (H20) ) ~ 259 (E5800), 296 (E7030) mut¿=13,5 h (uppmätt vid max' _ ett koncentration av 10 4M i fosfatbuffert pH 7,4 vid 3s.8°c>.
Metod B buffert '7,2 o _ PNB V - ' . C00 »toa ' 7 _ _ /ga “ _Å~ A/NQ ci ioa Pa/cnaz _ _-,,, g/VN G _ p 5 V THF,-eter - N o ' - - _ ~ coo - » Till en lösning av 5,77 g (11,4 mmol) p-nitrobensyl- 3-(2-(1-pyridinium)etyltio)-6«-(1 (B)-hydroxietyl)-7-oxo-1- azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat-klorid i 170 ml (0,2 M) enbasiskt kaliumfosfat-natriumhydroxid-buffert pH 7,22 sattes 30 ml tetrahydrofuran, 30 ml eter och 5,7 g % palladium1å_träkol. Den erhållna blandningen hydrera- des 1 timme vid 22°C under 40 psi och filtrerades på en Celite-dyna. Dynan tvättades med 2 x 15 ml. Filtratet och tvättvätskorna kombinerades och späddes med 100 ml eter.
Vattenfasen separerades, tvättades med 3 x 100 ml eter och hälldes på toppen av en kolonn (4,5 x 20 cm) av p-bondapak C-18 efter det att de organiska lösningsmedlen hade avlägsnats i vakuum. Eluering av kolonnen med vatten, flöljt av en blandning av 1% acetonitril i vatten, gav efter lyofilisering av de lämpliga fraktionerna ifråga 2,48 g (65%) av den i rubriken angivna föreningen som ett gulaktigt pulver. Analysdata var identiska med de som har angivits ovan för den under metod A angivna före- ningen. 460 790 Exempel 4 .
Framställning av-3-(2f(1-(3,5-dimetylpyridinium)- etyltiol)-6d-(1-(R)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo- (3.2.0)hept-2-en-2+karboxylat “ A. 1-(2-merkaptoetyl)-3,5-dimetylpyridiniummetansulfonat q + ND. -snson '___-n i Hs/\/" 555.
Till en suspension av 3,5-lutidinium-metansulfonat i 3,5-lutidin framställd genom tillsats av 0,65 ml (0,010 mol)_metansu1fonsyra till 2,51 ml (0,022 mol) 3,5~luti- din sattes 0,655 ml (0,011 mol) etylensulfid. Den erhållna blandningen omrördes under kväveatmosfär 24 timmar vid ss°c, kylaes till 23°c och spädaes med s ml vatten s ml eter. Det organiska skiktet separerades och vattenlös- ningen tvättades med 6 x 4 ml eter. Spåren av eter av- lägsnades i vakuum och lösningen applicerades på toppen av en kolonn (2,5 x 6,0 cm) avxl-bondapak C-18. Kolonnen eluerades med vatten och lyofilisering av de lämpliga fraktionerna ifråga gav 2,4 g (91%) av en färglös sirap.
IR (film) vmax= 2520 (su), 1628 1495, 1325, 1305, 1283, 1200 (sulfonat),1040, 938, 765, san cm'1; 1Hmr (nnso de) 6; 2,31 (sn, S, cH3so3'), 2,47 (6H, s, CH3 från pyridinium), 2,57, 2,66, 2,69, 2,78 (1H, B del av A2B-system, SH), 3,06 (2H, m (med D20 till- Satt (2H, t,__._]'_=6,5 H21), CHZS), 4,65 (ZH, t, =_J'_=6,5 Hz, v» ß' 201 . ' l\ .- __. 2% 1 '% _ N Mao' COOPNB 3) .H5ff\\/' <3 _ - 460 790 cH2N*>, 8,34 (1H, s, ap från pyrlalnlum), 8,79 (zu, S, Ho från pyridinium): UV (H20) )¿ax: 271 (E4860)flUIAnalys beräknat för C10H17NO3S2'0,5H20: C 44,09, H 6,66, N 5,14,, S 23,54; Funnet: C 44,26, H 6,49, N 5,17, S 24,18.
B. Paranitrobensyl-3-(2-(1-(3,5-dimetylpyridinium)) etyltio)-64:(1-(R)-hydroxietyl)-7-oxo-azabicyklo (3.2.0)hgpt-2~en-2-karboxylat-difenylfosfat SMG; f" " COÛPNB ' 1) N2t(iPr)2 '2)«c1g(oæn)2 45 nsuzlrzyz 5?”°);â°_ Till en kall (o°c) lösning av 0,523-g 11,50 mmol) p-nitrobensyl-6«~<1-(R)-hyar6x1etyl>~3,7-aioxø-1-aza- V bicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat i 6,0 ml acetonitril, sattes 0,314 ml (1,8 mmol) (1,8 mmol) difenyl- som hölls under kväveatmosfär, diisopropyletylamin, följt av 0,373 ml klorfosfat. Reaktionsblandningen omrördes 30 minuter och behandlades med en lösning av 0,493 g (1,87 mmol) 1-(2- merkaptoetyl)-3,5-dimetylpyridiniummetansulfonat i 1,9 ml acetonitril följt av 0,314 ml (1,8 mmol) diisopropyletyl- amin. Reaktionsblandningen omrördes 1 timme vid OQC, späd- - des med 26 ml kallt (OOC) vatten och hälldes på toppen av en kolonn Z0 x 3,5 cm) av U-bondapak C-18. Eluering av kolonnen med en blandning av 25-50% acetonitril och 75-50% vatten gav efter lyofilisering av de lämpliga fraktionerna ifråga 1,01 g (90%) av den i rubriken an- givna föreningen som ett gulaktigt pulver. IR (KBr) v = 3790-31oo (on), 1778 (c=o från ß-1aktam),17oo (c=o max från PRB-ester), 1635 (pyridinium), 1595 (fenyl), 1521 Hmr (nnso dö) 8; 1,16 , 1335 (No2), 895 cm'1 (N02), (3H, d, §=6,1 Hz, C§3CHOH), 2,43 (s, CH3 från pyridinium), 4,75 (2H, m, CH2N+), 5,38 (centrum av ABq, ga b=14,3 Hz, I 1 ß h -3 460 790 CH2 från PNB), 6,6~7,5 (10H, m, fenyl), 7,70 (ZR, d Q= 8,7 Hz, Hp från PNB), 8,0-8,5 (3H, m, Hp från pyridinium, Hm från PNB), 8,82 (2H, s, Ho från pyridinium), UV (H2O)' )max: 270_(¿11570), 306 (¿7343) mp. Analys beräknat för C37H38N3O10SP'H20: C 58,03, H 5,26, N 5,48, S 4,18; Funnet: C 57,98, H 5,05, N 5,22, S 4,34. V C 3-(2~(J-(3,5~dimetylpyridinium))etyltio)~6-(1-(R)- nyaroxietyl)-1-oxo-1-azabicyklø(3.2.o)hept-2-en-2- A karboxylat " TÜF, efier, buffert _ V :(Pho)2§o* Till en lösning av 0,600 g (0,80 mmol) p-nitrobensyl- 3-(2-(1-(3,5-dimetylpyridinium))-etyltio)~6i-(1-(R)-hydroxi- etyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat-di- fenylfosfat i 36 ml fuktig tetrahydrofuran sattes 36 ml eter, 44 ml (0,05 M) enbasiskt kaliumfosfat-natriumhydroxid- buffert pH 7,4 och 0,60 g 10% palladium på träkol. Den erhållna blandningen hydrerades 1,25 timmar vid 23OC under 40 psi. Det organiska skiktet separerades och extrahera* des med 2 x 5 ml buffert. Vattenskikten kombinerades, filtrerades genom en Celite-dyna, tvättades med 40 ml eter, pumpades för eliminering av spår av organiska lösningsmedel och hälldes på toppen av en kolonn (2,5 x ,0 cm) av|)-bondapak C~18. Eluering av kolonnen med vatten och lyofilisering av de lämpliga fraktionerna ifråga gav 0,186 g (64%) av den i rubriken angivna före- ningen som ett gulaktigt pulver. IR (KBr) vmâ¥: 3700- 3100 (OH), 1760 (C=O från B-laktam), 1595 cm (karboxy- lat), ïnmr (D20) 5": 1,21 (sn, d, ¿=6,3 Hz, cg3cHøH>, 460 790 2,45 (6H, s, CH3 från pyridinium), 2,81 id, §=9,2 Hz, B-4), 2,96 (a, ¿;a,2 az. H-4), 3.22 (aa. g;2,6 az, g = 6.2 az, H-6), 3,4o (t, ¿=s,2 Hz, cuzs), 3,84 (aa, ¿=9,2 Hz, g=2,6 az, H-5, 4,15 (m, cn3cgoH), 4,71 (t, g= s 6,2 az, cu2N*), 8,21 <1u, S, up från pyrlainium), 8,46 (2H, s, Ho från pyridinium), UV (H20) )max: 279 (E8345), 296 (E7714) m, (00 + 40,7 (E.0,53, H20), Tš = 16,9 h (uppmätt vid en koëcentration av 10-4 .M iffosfatbüffert pa 7,4 vid 3s,a°c). ' Exemgel 5 Framställning av (5§,6§)-3-((2-(3-hydroximetyl- pyr1ain1o)ety1)ti0>¿e-((3)-1-hyaroxiety1-7-0xo-1- 9 azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2~karboxylat_ -15 C32OH A. 3-hydroximetyl~1-(2-merkaptoetyl)pyridinium-trifluor- metansulfonat (3205 CW f; “DO N-®_ + cv3so3x-x + , -"_""'-'+ Hsæzæzn \e__J ' _ C) EÄBSOB 1,327 ml (0,015 mol) trifluormetansulfonsyra sattes droppvis till 2,91 ml (0,030 mol) 3-pyridinmetanol, följt av 0,89 ml (0,015 mol) etylensulfid. Den erhållna homogena blandningen uppvärmdes (oljebad) 20 timmar vid 50-70°C under kväve. Reaktionsblandningen upptogs därefter i 15 ml vatten och extraherades med 5 x 5 ml CHZCI2. Vattenfasen koncentrerades i vakuum och applicerades därefter på en C18 reversfaskolonn. Eluering med vatten följt av indunst- ning av de lämpliga fraktionerna ifråga, gav en blekgul olja. Detta material återkromatograferades för erhållande (j 6 460 790 av en nära nog färglös oljan Efter torkning i vakuum (P205) erhölls 4,50 g (94%) produkt som en viskös olja. 1 1 IR (finn) vmax: 3450 (s, en), zseo (Sv. sm em' ; mur (ds-aceton)$': 9,10-8,05 (m, 4H, aromatisk), 5,01 (t, §=5,5 Hz, 2H, N~CH2),,4,93 (S, ZH, ~CH2OH), 4,43 (br S, 1H, ~OH), 3,43-3,18 (m, 2H, S-CH2),V2,34-2,10 (m, 1H, SH). - B. p-nitrobensyl~(5§,6§)-3-(2-(3~hydroximety1pyridino) ety1tio)-s-A(1-(3) -nyaroxietyn -7-Qxo4-1-azabicyk1o (3.2.0)hept-2-en-2~karboxylat-difenylfosfat Till en lösning av 0,174 g (0,50 mmol) p-nitrobensyl- (53, 6§)-6-(1-(§)~hydroxietyl)-3,7-dioxo-1-azabicyklo (3.2.0)heptan¥2-karboxylat i 2 ml torr acetonitril sattes 0,096 ml (0,55 mmol) diisopropyletylamin vid OQC under kväve. 0,114 ml (0,55 mmol) difenylklorfosfat tillsattes därefter droppvis och reaktionsblandningen omrördes 30 minuter vid OOC. En lösning av 0,223 g (O,7O mmol) 3~ hydroximetyl~1-(2-merkaptoetyl)pyridinium-trifluormetan- smíonat i 0,50 ml acetonitril tillsattes, förljt av 0,122 ml (0,70 mmol) diisopropyletylamin. Efter det att reak- tionsblandningen hade fått stå 30 minuter vid OQC koncentre- rades den i vakuum och det resterande gula gummit upptogs i vatten (en tillräcklig mängd acetonitril tillsattes för att upplösa gummit). Denna lösning applicerades på en C18 reversfaskolonn, som eluerades med 15% acetonitril- vatten. Lyofilisering av de lämpliga fraktionerna ifråga gav 0,305 g (81%) av produkten som ett beigefärgat fast material, :R (Kax) vmax; 3420 (br, don), 1775 (ß-iaktam CO), 1695 t-cozpms) C151; 11mm m6- acetonw: 9,44~7,72 (m, 8H, aromatisk),7,22-6,91 (m, 10H, difenylfosfat), 5,53 460 790 ,27 (Aßq, §=14 Hz, 2R, bensylisk), 5,04 (t, Q=7,4 Hz, 2H, N~CH2), 4,75 (S, 2H, CHZOH), 4,5-3,1 (m, 8H), 1,21 (d, §=6,3 Hz, 3H, Cflwa).
C. (5§,6§)-3-(2-(3-hydroximetylpyridinkfietyltio)-6» (1-(g)-hydroxietyl)~7foxo-1-azabicyklo(3-2.0)hept~ 2-en-2~karboxylat Till en lösning av 0,145 g (0,194 mmol) p-nitrobensyl- (5§,6§)-3-(2-(3-hydroximetylpyridinüfletyltio)-6-(1-(§)- hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)-hept-2-en-2-karboxy- lat-difenylfosfat i 10 ml THF, som innehöll 5 droppar vat-~a ten, sattes 6,0 ml (0,05 M) fosfatbuffert pH 7,4, 0,145 g (10%) palladium på träkol och 10 ml eter. Blandningen hyd- rerades (Parr) vid 40 psi under 1 timme och filtrerades därefter genom en Celite-dyna. Filterkakan tvättades med en liten mängd vatten och eter och vattenfasen separera- des och extraherades med eter tre gånger. Vattenlösningen kyldes därefter till OOC och pH inställdes på 7,0 med buffert pH 7,4. Efter avlägsnande av resterande flyktiga material i vakuum applicerades vattenlösningen på en C18 reversfaskolonn, som eluerades med vatten. Lyofili- sering av de lämpliga fraktionerna ifråga gav 36 mg pro- dukt (51%) som ett ljusgnlt fast material. Ytterligare rening genom reversfas-hnlc gav 31 mg (41%) av den rena produkten som ett fast material. IR (KBr) Vmax: 3300 (br, OH), 1755 ( ß-laktam CO), 1590 (-C02_) cm-1; Hnmr (Dzmä: a,7s-7,94 (m, an, arom-etisk), 4,83 (t, ¿=e,o az, za, N-caz), 4,83 (s, 2H, CHZOH), 4,16 (d av q, __=_'=6,2 Hz, 1H, H-1'), 3,98 (d, av t, §=9,1 Hz,Jfi2,6 Hz, 1H, H-5), “ ~ 4-60 790 3,75-3,20 (m, 3H), 3,2Û~2,65 (m, ZH), 1,22 (d, §=6,4 Hz, SH, CH§e); UV (H30) Ämaxz 294 (E7614), 266 (E6936) nm; tš (pa 7,4, 36,8 c) 14,0 n.
ExemEel_§_ Framställnlng av (53, 6§)~3-(2*(4-hydroximetylpyri- dini0ktyltio)-6-(1-(B)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabi- cyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat A. 4-hydroximetyl-1-(2~merkaptoetyl)pyridiniumtrifluor~ metansulfonat 13 -----> :#0 .caoa + crf-son + s d ' x-zscs cneâ os 2 3 _3_ « 2 2 2_ CF SO 3 3 Till en lösning av 1,635 g (0,015 mol) 4-pyridinmeta- nol i 10 ml CH2Cl2 vid OOC under kväve sattes droppvis 1,327 ml (0,015 mol) trifluormetansulfonsyra. En gulbrun olja avskildes snabbt. En ytterligare ekvivalent 4-pyri- dinmetan (1,635 g; 0,015 mol) sattes till denna blandning och lösningsmedlet avlägsnades under reducerat tryck för erhållande av en olja. Till denna olja sattes 0,891 ml (0,015 mol) etylensulfid och den erhållna homogena bland- ningen upphettades (oljebad) under 3 timmar vid cirka 60°C.
Reaktionsblandningen upptogs därefter i 15 ml.vatten och vattenlösningen tvättades med 5 x 5 ml CH2Cl2. Efter av- lägsnande av resterande organiska lösningsmedel i vaknum applicerades vattenlösningen på en C18 reversfaskolonn. 01 460 790 Eluering med vatten och efterfölgande indunstning av de lämpliga fraktionerna ifråga gav en olja, som torkade: ytterligare i vakuum över fosforpentoxid för erhållande av 4,64 g (97%) av produkten som en färglös olja. IR (fi1m)vmax= 3455 (s, oz«1_>,"2ses, (Sv. sa) cxfl; “nnmr (dö-aceton) 8: 9,07, 8,18 (ABq, §=6,8 Hz, 4H, aromatisk), ,03 (5, 2H, CH2OH), 4,96 (t, 1=6,5 Hz, 2H, N-CH2), 4,09 (br s, 1H, -OH), 3,5-3,1 (m, 2H, S-CH2), 2,25 (brs, 1H, -SH) B. p-nitrobensyl-(5§,6§)-3-(Z-(4-hydroximetylpyridnño)~V etyltio)-6-(1-(§)“1-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo (3.2.0)-hept-2-en-e-karboxylat-difenylfosfat OH _.' _ _ _ _ I ' ' f C) ,;L“___ï,f\\h_o_ /lm” _ S//\\//é3::â>»-CE2Oš n _ : ga å, O PNB 2 .
Till en lösning av 0,348 g (1,0 mmol) p-nitrobensyl- (5§,6§)-6-)1-(§)-1-hydroxietyl)-3,7-dioxo-1-azabicyklo (3.2.0)heptan-2-karboxylat i 5 ml torr acetonitril sattes droppvis vid OOC under kväve 0,191 ml (1,1 mmol) diiso- propyletylamin, följt av 0,228 ml (1,1 mmol) difenylklor- fosfat. Den erhållna gyllengula lösningen omrördes 40 minuter vid OOC. Till denna lösning sattes en lösning av 0,447 g (1,4 mmol) 4-hydroximetyl-1-(2-merkaptoetyl) pyridinium-trifluormetansulfonat i 1 ml acetonitril, följt av 0,19! ml (1,1 mmel) díianpïepyiptylamáfi. Ett födak(Jg( svart gummi utföll ur reaktionsblandningen. Efter 20 minu- ter vid OOC filtrerades reaktionsblandningen och koncentre- rades i vakuum. Aterstoden upptogs i minsta möjliga volym acetonitril-vatten (1:1) och applicerades på en C18 revers- faskolonn. Eluering med 25% acetonitril-vatten och efter- följande lyofilisering av de lämpliga fraktionerna ifråga gav 0,353 g (47%) av produkten som ett gräddfärgat fast 70 material. IR (ma) vmaëâ :_1240 (br, om, 11175 (ß-iaktam Aco), 1695 v-cozvna) cm ; :anar (ns-acatønxß anala-maa (m, H, aromatisk), 7,4-6,9 im, 10H, difenylfosfat), 5,52, ,24 (AEq, J=14 Hz, 23, bensylisk), 5,15- 4,80 (m, 4H), 4,45-3,05 im, ?H, 1,35 (d,gä6,6 H2, BH, CHMe).
C (5§,6§)-3-(2-(4-hydroximetylpyridimrfletyltio)-6- (1-(§)-1-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0) hept-2-en-2-karboxylat ,/\\Egåš::â>»-caåoa o* (age ¿ i g 2 08 /10 \ CO ? - gzßß En blandning av 0,348 g (O,465 mmol) p-nitrobensyl- (5§, 6§)-3-((2-(4-hydroximetylpyridinidetyltio)-6-(1~(§)- 1~hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karb- oxylat-difenylfosfat och 0,35 g 10% palladium på träkol i 11 ml fosfatbuffert (0,05 M; pH 7,4), 5 ml THF och 10 ml eter hydrerades under 1,25 timmar vid 40 psi. Blandningen filtrerades därefter genom en Celite-dyna och vattenfasen tvättades tre gånger med eter. Vattenlösningens pH-värde inställdes därefter på 7,0 under användning av ytterligare buffert pH 7,4. Efter avlägsnande av resterande flyktiga material i vakuum applicerades vattenlösningen på en C18 reversfaskolonn. Eluering med 2% acetonitril-vatten och lyofilisering gav ett gulbrunt fast material. återkromatograferades (C18 reversfas/vatten) av 0,060 g (36%) av den önskade produkten för erhållande som ett ljusgult fast material. IR (KBr)\;max: 3400 -1 1 (br, on), 1755 (ß-iaktam co), 1590 (~co2“) am ; Hama (D20)S : 8,73, 7,96 (ABq, J=6,8 Hz, 4H, aromatisk), 4,93 (sy ZH; g_=6yo Hz; 2H/ av därpå följande Detta material q, ¿=¿'=6,3 Hz, m, H-w), 3,96 (d av t, ¿=9,2 Hz, g_'=2,6 Hz] 1 1 f (m1 y (m) V; (d, ¿=6,3 Hz, 3:a, cHMen UV (H20) Max; 295 (26880), 256 v - > Q 1 i , s gyn, mo t ' ~ 460 790 (åsses), 224 (¿a111> nm; tš (pa 7,4, 3e,s°c> 14,5 n. É Exempel 7 i Framställning av 3-(2~(1-(2-metylpyridinium))-etyl- i tio)-G¥-(1-g)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0) hept-2-en-karboxylat ( i. SNNGs a-N _ o coo C33 A. 1-(2-merkaptoetyl)-2-metylpyridinium-metansulfonat Ä ~ + NO fwsog __________> Hs/V»® »sm _ 55°C, 21 h Till en suspension av 2-metylpyridinium-metansulfonat i 2 -metylpyridin, framställd genom tillsats av 0,65 ml (0,010 mol) metansulfonsyra till 2,17 ml (0,022 mol) kall 2-metylpyridin sattes 0,655 ml (0,011 mol) etylensulfid.
Reaktionsblandningen omrördes 21 timmar vid 55°C under ' kväveatmosfär, kyldes till 23°c och späaaes med 5 m1 f vatten. Vattenlösningen tvättades med U x 4 ml eter, pumpades för avlägsnande av spår av organiska lösnings- medel och hälldes på toppen av en kolonn (2,5 x 10,0 cm) av'flßbondapak C18. Kolonnen eluerades med vatten och lyo- filisering av de lämpliga fraktionerna ifråga gav 2,13 g (85%) av den i rubriken angivna föreningen. IR (film) vmax: 2520 (SH), 1623 (Pyridinium) 1574, 1512, 1485, 1412, 1195 (suifonata, 1038 cm'1, 1Hmr (nmso-a6 + n2o)«§= 2,37 (sa, S, cH3so3"), 2,83 (sn, S, cH3 från pyriainiuï), 3,09 _ (2H, Q=6,9 Hz, CHZS), 4,71 (ZH, t, §=6,9 Hz, CHZN ), 7,93 § (2H, m, Hm från pyridinium), 8,44 (1H, m, Hp från pyridi- ' nium), a,ss (1n, m, go från pyridinium, uv (H2o)1max= 266 (¿3550) mp. 4150 »15 7É9O Paranicrøbensy1~3-(2-(1-(2-menylpyriainium)etyitlo)- 6«~(1~ (3)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0) V hept~2-en-2-karboxylat-difenylfosfat BI 1) xæuirnz 4 p 2) cig(øPn)2 I N (::> .r-q å" "s/\/ 3) BW my. _ . g- , cozmæ _ (Phcnz o _ 1) næ=2 _ Till en kall (o°c) lösning av 0,523 g (1,so mmol) p-nitrobensyl-ößf(1-(§)-hydroxietyl)-3,7-dioxo-1-azabi- cyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylati.6 ml acetonitril, som hölls under kväveatmosfär, sattes 0,314 ml (1,8O mmol) di- fenylklorfosfat. Reaktionsblandningen omrördes 30 minuter vid OOC och behandlades med en lösning av 0,530 g (2,16 mmol) 1~(2-merkaptoetyl)-2-metylpyridinium-metansulfonat i 18 ml acetonitril, följt av 0,314 ml (1,8 mmol diiso- propyletylamin. Reaktionsblandningen omrördes 1 timme vid 0°C, späddes med 26 ml kallt (OOC) vatten och hälldes - på toppen av en kolonn (3,5 x 7,0 cm) av U-bondapak C-18. ä Eluering av kolonnen med 25%Vacetonitril-75% vatten och med 50% acetonitril ~ 50% vatten gav efter lyofilisering av de lämpliga fraktionerna ifråga 1,06 g (96%) av den i rubriken angivna föreningeusom ett gulaktigt pulver.
IR (xsr>~)max= 36so-3100 xou), 177ø (c=o fràn.ß-1aktam>, 1695 och 1690 (C=O från PNB ester), 1630 (pyridinium), 1595 (fenyi), 1s1s (noz), 1335 (N02), 890 cm"1 (N02), ïnmr (nmso, da) 8; '1,15“(35, a, ¿=6,1 Hz, cg3cHoH), 2,87, (s, CH3 från pyridinium), 3,6-4,4 (2H, m, H-5, CH3C§OH), 4,75 (ZH, m, CH2N+)l 5,37 (centrum av ABq, §=14 Hg, CH2 från PNB), 6,5-7,4 (105, m, fenyl), 7,70 (2H, d, §=8,8 Hz, Ho från PNB), 8,0 (2H, m,.Hm från pyridinium), 8,24 (2H, d, §=8,8 Hz, Hm från PNB), 8,50 8,95 (1H, brd, Q=6,1 Hz, Ho från pyridinium), UV (H20) Åmax: 265 (&11990), 314 (E8020)my. (1H, m, Hp från pyridinium), 460 790 C. 1 3~(2-(1-(2-metylpyridiniumßetyltio)-6M-(1-(§)-hydr- oxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-karboxy lat _ _ i m: - P 1' s/VNQ ß a/c. a? à THF, ether, buffer - (Phox g " dâF_N cooPNB )2_o g __ . coo- Till en lösning av 0,66 g (0,9O mmol) p-nitrobensyl- 3-(2-(1-(2-metylpyridinium))etyltio)-6d-(1-(R)-hydroxi- etyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat- V difenylfosfat i 34 ml fuktig tetrahydrofuran sattes 34 ml eter, 16,5 ml (0,15 M) enbasiskt kaliumfosfat-natrium- hydroxid-buffert pH 7,22 och 0,66 g _10% träkol. Den erhållna blandningen hydrerades 1,25 timmar vid 23°C under 40 psi. Det organiska skiktet avskildes och extraherades med 2 x 6 ml buffert. Vattenskikten kom- binerades, filtrerades genom en Celite-dyna, tvättades med 40 ml eter, pumpades för eliminering av spår av orga- niska lösningsmedel och hälldes på toppen av en kolonn (2,5 x 10 cm)Lhbondapak C-18. Eluering av kolonnen med -palladium på vatten och lyofilisering av de lämpliga fraktionerna i fråga gav 0,098 g av den i rubriken angivna föreningen (31%) som ett gulaktigt pulver. IR (KBr)\)maX: 3650-3100 (OH), 1755 (C=O från P-laktam), 1630 (pyridinium), 1595 cm'1 (karboxyiat), 1umr (n2o)¿“= 1,2o (sn, a, g=6,3 Hz, C§3CHOH) , 2,83 (s, CH3 H-4, CH3 från pyridinium), 3,1~3,7 (BH, m, CHZS, H-6), 3,90 (dd, §=9,1 Hz, Q=2,6 Hz, H-5), 3,1 (m, CH3C§OH)f från pyridinium), 2,7-3,1 (SH, 4,78 (t, ¿=e,2 Hz, cn2N*>, 7,8 (zu, m, um från pyriain1um;, 8,3 (1H, m, Hp från pyridinium), 8,65 (1H, m, Ho från pyridinium), UV (H2O)1max: 268 (29350), 296 (88840), mp, (a)D23 +41° (9 o,s, Hzo), Tš = 15,0 h uppmätt via en koncentration av 10-4M i fosfatbuffert pH 7,4 vid 36,8OC). 74 460 790 Exempel 8 Framställning av 3-(2-(1-(4-metylpyridinium))-etyl- tio)-6N-(1(R)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0) v. hept-2-en-2-karboxylat Km k; og-N A. 1-(2-merkaptoetyl)-4-metylpyridinium)metansulfonat vad Till en suspension av 4-pikoliniummetansulfonat i 4- pikolin, framställd genom tillsats av 0,65 ml (0,01O mol) metansulfonsyra till 2,14 ml (0,022 mol) 4-pikolin under kylning, sattes 0,655 ml (0,011 mol) etylensulfid. Reak- tionsblandningen omrördes under kväveatmosfär 24 timmar vid SSOC, kyldes till 23oC och späddes med 5 ml vatten och 10 ml eter. Det organiska skiktet avskildes och vatten- * i skiktet tvättades med 5 x 5 ml eter och applicerades på 1 toppen av en kolonn (2,5 x 10 cm) av U-bondapak C-18 efter det att spår av eter hade avlägsnats under reducerat tryck.
HSO - . Ä ' + 'Pnsca _ss°c. 24 n' Eluering av kolonnen med en blandning av 15% acetonitril och 85% vatten gav efter lyofilisering av de lämpliga frak- tionerna ifråga 2,66 g (100%) av en färglös sirap. IR (film) vmax: 2500 (SH), 1640 (PY¥idinium), 1572; 1520, 1478, 1200 (sulfonat), 1040, 833 ohh 768 cm , Hmr (DMso-d6)¿= 2,31 (3H, s, cn3so3'), 2,62 (s, cH3 på pyri- dinium), 2,2-2,9(4H, SH, CH3 på pyridinium), 3,04 (2H, V m, CHZS), 4,68 (2H, t, §=6,4 Hz, CHZN ), 8,01 (2H, d, Q = 6,6 Hz, Hm från pyridinium), 8,89 (2H, d, §= 6,6 Hz, Ho 460 790 från pyridiniumu, uv (nzo) ¿max= 256 mufi B. 1-(2-merkaptoetyl)-4-metylpyridiniumfp-toluensulfonat Äfš. + áš::â>- + PTSOH _-______* 35)^\,fé3::š>”__~ PT30_ Till en suspension av 1,72 g (0,01 mol) p-toluensulfon- syra i 6,5 ml bensen sattes 1,17 ml (0,012 mol) 4-pikolin.
Den erhållna blandningen omrördes=30flminuter vid 23°C under kväveatmosfär, behandlades med 0,65 ml (0,011 mol) etylen- sulfid och omrördes 24 timmar vid 750C. Ytterligare etylen- sulfid (0,65 ml; 0,011 mol) tillsattes och omröringen fort- sattes ytterligare 24 timmar vid 75oC. Reaktionsblandningen kyldes till 23°C och späddes med 5 ml vatten och 8 ml eter.
Vattenskiktet separerades och tvättades med 3 x 8 ml eter.
Spår av organiska lösningsmedel avlägsnades i vakuum och föreningen kromatograferades på U-bondapak C-18 med vatten som elueringslösningsmedel för erhållande av 2,94 g (90%) av den i rubriken angivna föreningen som en färglös sirap.
IR (film) Vmax: 2510 (SH) 1640 (pyridinium), 1595, 1582, 3 1474, 1200 (sulfonat), 1031, 1010, 818 cm , Hmr (DMSO, å a6)8= 2,29 (3H, S, CH3 på pyridinium), 2,61 (s, cg3 Ph), 2,4-2,8 (4H, SH, Q§3Ph), 3,03 (2H, m (tillsats av D20 gav+ t, _q=6,4 Hz vid 3,04), cuzs), 4,68 (211, t, ¿=6,4 Hz, CHZN ), 7,11, 7,49 (4H,2d, J=7,9 Hz, fenyl), 8,00 (2H, d, §=6,5 Hz, Hm från pyridinium), 8,89 (2H, d, §=6,5 Hz, Ho från pyridinium), UV (H20) lmax: 256 (E4315), 222(E17045) mp.
C. Paranitrobensyl-3~(2-(1-(4-metylpyridinium))etyltio) 6%-(1-(g)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept- fm., 1 2-en-2-karboxylat-difenylfosfat _ A m 76 460 790 l) n:š¿1r:)2 _ ' 4/fa ~ _ 5 * _ 2) cl (orm) , “~ ~' 2 -å .._ ,. x _ , 9 3) as/**~/'<::>*- 450 O 7 cooêfià _ (Ph0)2Po 4) uæ:(lr=)2. 1 - will en kall (0°c) lösning av 0,522 g (1,spmmQl) p-nltrobensyl-su-(1-(5)-hyaroxleçyl)-3,7+alox0-1-azabi- cyklo(3.2.0)hept-2-en~karboxylat i 6 ml acetonitril, som hölls under kväveatmosfär, sattes 0,314 ml (1,8 mmol) diisopropyletylamin, följt av 0,373 ml (1,9 mmol) difenyl- klorfosfat. Reaktionsblandningen omrördes 45 minuter och behandlades droppvis med en lösning av 0,539 9 (2,16 mmol) 1-(2-merkaptoetyl)-4-metylpyridinium-metansulfonat i 1,8 ml acetonitril, följt av 0,314 ml (1,8 mmol) diisopropyl- etylamin. Reaktionsblandningen omrördes 1 timme vid OOC, späddes med 24 ml kallt (OOC) vatten och hälldes på toppen av en kolonn (2,5 x 8,5 cm) av Lßbondapak C-18. Eluering av kolonnen först med 100 ml av en blandning av 25% aceto- nitril och 75% vatten och därefter med 100 ml av en bland- ning av 50% acetonitril och 50% vatten gav efter lyofili- sering av de lämpliga fraktionerna ifråga 0,91 g (83%) av den i rubriken angivna föreningen som ett gulaktigt pulver.IR (KBr) Vnmx: 3700-2800 (OH), 1770 (C=O från ß-laktam), 1700 (C=O från PNB-ester), 1640 (pyridinium), 1595 (fenyl), 1520 (N02), 1340 (N02), 890 cm'1 (N02), 'Hmr (0Ms0, a6)¿ = 1,16 (30, d, ¿=6,2 Hz, cg3cH0H), 2,61 (s, CH3 på pyridinium), 3,1-3,7 (3H, m, H-6, CH2S), 3,7~+ 4,4 (211, m, H-S, cn3cgofl), 4,79 (2H, brt, g_=6,3 Hz, CHZN ), ,17 (d, §=4,9 Hz, OH), 5,37 (centrum av Aßq, §=14,1 Hz, CH2 från PNB), 6,7-7,4 (10H, m, fenyl), 7,69 (2H, d, §= 8,8 Hz, Ho från Pnb), 8,00 (2H, d, Q=6,5 Hz, Hm från pyri- ainlum), 0,23 (za, a, ¿=s,s Hz, Hm från PNB), 8,92 (za, a, §=6,5 Hz, Ho från pyridinium), UV (H20)Å}max: 262 (E10835), 311 (E9670) mp. Analys beräknat för C36H36N301oSP°1,5H2O: C 56,84, H 5,17, N 5,52, S 4,21; Funnet; C 56, 89, H 5,13, N 5,19, S 4,41. ?7 460 790 D 3-(2-(1-(4-menyipyeiainium))ety1t1q)-s«-<)«(g)-hyar- oxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karb- oxylat f--4i(::) lä* På/C' H2 L' S 0 THF. eumr, buffé u - _ '_ g Till en lösning av 0,567 g (0,80 mmol) p-nitrobensyl- 3-(2-(1-(4-metylpyridinium))-etyltio)-6M-(1-(§)-hydroxi- etyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat~di- fenylfosfat i 30 ml fuktig tetrahydrofuran sattes 30 ml eter, 14,7 ml (0,15 M) monobasiskt kaliumfosfat-natrium- hydroxid-buffert pH 7,22 och 0,59 g 10% palladium på trä- kol. Den erhållna blandningen hydrerades 1,25 timmar vid* 23øC under 40 psi. Det organiska skiktet separerades och extraherades med 2 x 6 ml buffert. Vattenextrakten kombi- nerades, filtrerades genom en Celite-dyna, tvättades med 3 x 20 ml eter, pumpades för avlägsnande av spår av orga- niska lösningsmedel och hälldes på toppen av en kolonn (2,5 x 10 cm) U-bondapak C-18. Eluering av kolonnen med vatten och lyofilisering av de lämpliga fraktionerna i fråga gav 0,136 g (49%) av den i rubriken angivna före- ningen som ett gulaktigt pulver. IR (KBr) Vnßx: 3700-3000 (OH), 1770 (C=O frånß -laktam), 1642 (pyridinium) 1592 cm'1 (karbøxylat), 1nmr (n2o)¿'= 1,19 (sn, t, ¿=6,3 Hz, cg3cHoH), 2,59 (3H, s, cH3på pyridinium), 2,84 (d, g= 9,1 Hz, H-4), 2,90 (d, §=9,1 Hz, H-4), 3,0-3,6 (3H, m, CHZS, H-6), 3,86 (dd, J=9,1 Hz, J=2,6 Hz, H-5), 4,12 (m, cH3cgou), 4,5-4,9 d, §= 6,6 Hz, Hm från pyridinium), 8,58 (2H, d, §=6,6 Hz, Ho från pyridinium), uv (H20) ;max= 256 (gss1o), 262 (Essen), 296 <¿7o5o) m, (C-)D23 +2o,s° (c 0,48, ago), Tš=12,8 h (uppmätt vid en koncentration av 10-4 M i fos- fatbuffert pa 7,4 vid 3e,s°c). /8 460 790 ezo ,Exempel 9 A - i"»Eramställning av (5§)-3-(2-(4-mety1tiopyridinio)~a I efl§ltio)-(6§)-((13)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo- '(3;2.0)nept-2~en-2-karboxylat “ ;/\lEšåÉ::š>»-sca3 A. 4-metyltiopyridin* _ 1) MeI/EtOñ ' »o H a' ©sfle 2) NaOH « ' _ - ,55 g (50,0 mmol) 4-merkaptopyridin (Aldrich) upp- löstes i 50 ml kokande absolut etanol. Det olösliga mate- rialet avlägsnades genom filtrering över Celite. Filtra~ tet upphettades till återupplösning och när det hade kylts till cirka 5o°c tillsattes 1 en portian 3,17 ml (s1,0 mmol) metyljodid (AldrichL Blandningen kyldes för att kristalli- sera. Filtrering av det fasta materialet gav 6,77 g (26,7 mmol ; utbyte 53,5%) av den i rubriken angivna föreningen som hydrojodiden: 1Hmr (D2O)Å : 2§70 (3H, s, -SCH3) och 7,65-7,77-8,35~8,48 ppm (4H, A282-type, aromatisk-Hs); IR (uujoi) vmax= 1615, 1585 (aramatisk) aan 780 cm'1; uv (H20) >max= 227 (e2,02 X 104) och 298 nm 1¿1,64 x 104). 6,33 g (25,0 mmol) av hydrojodiden upplöstes i 40 ml vatten och det olösliga materialet avlägsnades och tvätta- des med 10 ml vatten. Till fiitratet sattes vid 0+s°c sg NaOH~pelleter och extraherades med 3 x 25 ml Et2O, varvid vattenskiktet mättades med natriumklorid. De kombinerade organiska extrakten tvättades två gånger med saltlösning, torkades över magnesiumsulfat och indunstades, varvid man 'ßmmmwwmwfiwmawmmmwwwmmmæwwwmmm v »o 400 790 erhöll 2,92 g (23,4 mmoi; totaiutbyta 502) av aan 1 run» riken angivna föreningen som en olja: 1Hmri(CDC13)& : 2,48 (sa, s, -scfl3) och 7,03-7,13-8,38-0,48 ppm (4n, A232-typ, aromatis-ns), in (film) vmax= 1580 aan 800 cm"1.
*Framställning av denna förening har rapporterats av King och Ware, J. Chem. Soc. (1939) 837. Det i denna hänvis- ning angivna förfarandet följdes. V B 4-metyltio-N-(2-merkaptoetyl)pyridinium~metansulfonat ca sozå - 'y - .__i_¿____, C¿Eïí> Mg- Hs/VL/-fi- o _ ca so3 50-60' 2,75 g (22,0 mmol) 4-metyltiopyridin sattes långsamt till 0,65 ml (10,5 mmol) metansulfonsyra (dessa reagens destillerades före användning) genom kylning i isbad. Till det fasta materialet sattes 0,66 ml (11,0 mmol) etylen- sulfid (Aldrich; detta reagens destillerades före använd- ning) och blandningen upphettades 21 timmar vid 50-60°C, Allteftersom reaktionen fortskred gick det fasta materia- let till lösning. Efter kylning upplöstes reaktionsbland- ningen i 5 ml vatten och tvattades med 5 x 4 ml Et2O. Det grumliga vattenskiktet filtmaædes över Celite och filtra- tet renades genom reversfas-silikagelkolonnkromatografe- ring (C18¿pbondapak 10 g) under eluering med vatten. Varje fraktion om 10 ml tillvaratogs. Fraktionerna 2 och 3 kom- binerades och återrenades på reversfaskolonnen. Fraktion 2 gav 1,258 g (4,48 mmol; utbyte 42,6%) av den i rubriken angivna föreningen som en viskös olja: 1Hmr (DMSO-d6, car-2016 = 2.32 (sn, S, Mesoša), 2,72 (sn, S, -sme), 2,68 (1n (1H, m, SH), 2,9-3,2 (3H, m, -cH2s-). 4,59 (2H, 3.
J=6,4 Hz, -caznæ), 7,97 (za, "d", ¿=7,2 Hz, aromatisk-ns) och 8,72 ppm (2H, "d", g=7,2 Hz, aromatisk-Hs); IR (rent) 0max= 1630, 1200 (br, -sø3C3, 7,85 och 770 cm'1. ' ff 2 .o ..._ et., -_, i....._r-v._...-........ .. 460 790 _cFT-2o)<§= 1.16 (an, a, ¿=s,1 Hz, 1'-CH3), 2,72 (sn, 5,' C. .(5§%1rnitnflxmsyl-3-(2~(4-metyltiopyridino)etyltio)- (6§)-((1§)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0) hept-2-en-2-karboxylat-klorid li clPo Éozpua V “S63 Till en lösning av 475 mg (1,36 mmol) bensyl-3,7-dioxo-(6§)-((13)-hydroxietyl)-1-azabicyklo (3.2.0)heptan-(23)-karboxylat och 0,24 ml (1,4 mmol) di- isopropyletylamin i S ml CHBCN sattes vid 0-SOC under kväve- atmosfär 0,29 ml (1,41 mmol) dlfenylkloríosfat. Bland- ningen omrördes 30 minuter vid 0-SCC. Till denna bland- (5§)~p~nitro- ning sattes långsamt en oljig suspension av 678 mg (1,45 mmolg 60% renhet) 4-metyltlo-N-(2-merkaptoetyl)pyridinium- metansulfonat l 1,5 ml cH3cN, följt av 0,24 ml (1,4 mmpl) diisopropyletylamin. Blandningen omrördes 1 timme vid 0-SOC. Omedelbart efter tillsats av basen bildades en gulaktig fällning. Fällningen avfiltrerades och tvättades med 3 ml kall CHBCN, varvid man erhöll 314 mg av ett gul- aktigt fast material. Detta triturerades med 5 ml 10% metanol i vatten för erhållande av 341 mg (0,618 mmol; utbyte 45,4%) av den i rubriken angivna föreningen som vita kristaller med smältpunkten 118-12o°c. ïnmr (omso-dö, -CH3), 3,1-3,7 èfih, m), 3,7-4,3)~2H, m), 4,71 (2H, t, §=6,3 Hz, -CHZN ), 5,15 (1H, d, §=4,9 Hz, Oh), 5,20+5,35- ,40-5,55 (2H, ABq, COZCHZ-Ar), 7,70 (2H, "d" §=8,8 Hz. nitrofenyl-Hs), 7,97 (ZH, "d", §=7,0 Hz, pyridinio-Hs), 8,25 (ZH, "d", §=8,8 Hz, nitrofenyl~Hs) och 8,76 ppm (ZH, "d", g=7,1 Hz, pyridinio-Hs); IR (Nujol)\Jma : 3250 (OH), 1775 (B -laktam), 1700 (ester) och 1625 cm (pyrå- dinio); UV (abs. EtOH lmax: 308 nm ( 4,47 x 10); (u)š3 + 24,8 (g 0,5, MeoH); Analys beräknat för c24H26N3o6sšcl- H O: C 50,56, H 4,95, N 7,37; Funnet: C S0, 63, H 4,72, 2 N 6,89. '“ “f E* »e 'Y ' "'^ “ ï"_"ï'.1vf~””:“,_".~=ïr.;==._ J, . ~. ~ . ' . ., , . i 4 . . _. _ . » .-.«:.>.-_-_, 11. _. <' ~:~.,,a ^-. _. _ . a* ~ s M - > l 4 i ~ -~ ' ~< -- -a w* -=. x v 1,13 I »_-\._ -.«».«_v-.a. :<1 ., .mig , w. _ v _ a 4 . -_ ~ . . : lfya, a ~ ~ -4 «- - v - «-f« - .- .ß ,,- -.- , ; -« .- - z »_ L' fr: »n i »l- x. _,~..,«'«.-! »:-_,,s.-¿=¿-_,- “-.'~'-'_.,.1 460 790 D. (5§)-3-(2-(4-metyltiopyridino)etyltio-(6§)-((1§)- hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3¿2.0)hept-2-en-2- karboxylat ox _' - . GB _ 3 ' .
JW, Y Û Hg/Pd-c. »g ' . t al. SN* . ”° °2PNB _ C19 : ' oc? _ 380 ml (0,688 mmol) (5§)-p-nitrobensyl-3-(2-(4-metyl- tiopyridino)etyltio)-(6§)-((1§)-hydroxietyl)-7-oxo-1-aza- bicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat-klorid upplöstes i V 31,5 mi THF och 31,5 ml (Fischer) och späddes med 31,5 ml Et2O. Denna lösning blandades med 380 mg 10% Pd-C (Engelhard) och hydrerades vid 35 psi 1 timme vid rumstemperatur i en Parr-skakanord- ning. Vattenskiktet filtrerades över Celite för avlägs- nande av katalysatorn och tvättades med 2 x 5 ml vatten. 3 Filtratet och tvättvätskorna kombinerades och tvättades med 2 x 30 ml Et2O. Vattenskiktet avpumpades för avlägs- nande av eventuella organiska lösningsmedel och renades medelst reversfaskolonnkromatografering (C18¿pbondapak, 13 g Waters Associates) under eluering med vatten. Frak- tioner med en UV-absorption vid 307 nm tillvaratogs (cirka 1 liter) och lyofiliserades för erhållande av 127 mg (O,334 mmol; utbyte 48,5%) av den i rubriken angivna föreningen som ett gulaktigt pulver: 1Hmr (D2), CFT-20) 6; 1,20 (sn, d, ¿=6,4 Hz, 1'-CH3), 2,64 (BH, s, ~scH3), 2,81 (2H, m, ~SCH2-), 3,19 (1H, dd, §6_1,=6,1 Hz, Q6_5= 2,6 Hz, 6-H), 3,32 (2H, dd, g=11 Hz, §=5,5 Hz, 4Hs), 3,92 (1H, dt, §=9,2 Hz, §5_6=2,6 Hz, 5-H), 4,1 (1H, m, 1'-H), 4,61 (zu, t, ¿=s,9 Hz, -cnznæ), 7,70 (zu, "d", ¿=7,1 Hz, aromatisk-Hs), och 8,40 ppm (ZH, "d", §=7,1 Hz, aromatisk- as), :R (xbr, skiva vma = 3400 (om, 1750 (ß-laktamh X 1630 (pyridinium och 1590 cm-1 (karboxylat): gv (HZQ) Amax: 231 (29800) och 307 nm (E25000); (d)2š + 3,14 i I - ff 460 790 _10 0,5, H20).
Exempel 10 Framställníng av 3-(2-(3-metoxi-1-pyridinium)etyl- tio)-6*-(1'-(§)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo- làrëlälbertzz:enfâäkëæbçxylêt A. 1-(2-merkaptoetyl)-3-metoxipyridinium-metansulfonat Till ses mg (6,4 mmol) 1 förväg kyld (s°c) 3-metox1- pyridin sattes droppvis 0,216 ml (3,05 mmol) metansulfon- syra och 0,19 ml (3,2 mmol) etylensulfid. Blandningen upp- nettaaes 18 timmar vid sooc, kylaes till 2o°c, spädaes med 10 ml vatten och tvättades med 3 x 10 ml eter. Vatten- fasen pumpades i högvakuum under 15 minuter och hälldes på en Cla-reversfaskolonn. Den i rubriken angivna föreningen eluerades med vatten. De lämpliga fraktionerna ifråga kombinerades och indunstades i högvakuum för erhållande av 61,6 mg (utbyte 76,3%) av den önskade tiolen; IR_ (CH2CL2)\)max: 2650 (sv. SH) och 1620, 1600, 1585 cm- (m, aromatisk); Hmr (DMSO d6)Å : 8,90-7,90 (4H, m, aro- matisk c-H), 4,72 (za, t, ¿=6,s Hz, cH2N*>, 4,01 (an, S, OCH3), 3,5-3,0 (m, dold C§2S), 2,66 (1H, dd, §=9,5 Hz, §=7,5 Hz, SH) och 2,31 ppm (3H, s, CH3SO3). 1 å 11.1 460 790 B. para-nitrobensyl~3(2-(3-metoxi-1~pyridinium-klorid1r etyltio)-GQJ1'-(g)-hydroxietyl)-7-oxo-1-a2abicyklo- (3.2.0)~hept~2~en-2-karboxylat 1) ang-Q, 2) clPo(oç)2 En kall (o°c> lösning av 1,04 g <3 mmol) p-nltr0- bensyl-QX-(1'-(B)-hydroxietyl)-3,7-dioxo-1-azabicyklo- (3.2.0)-heptan-2-karboxylat i 12 ml acetonitril behandla~ des droppvis med 0,63 ml (3,6 mmol) diisopropyletylamin och 0,75 ml (36 mmol) difenylklorfosfat och omrördes 30 minuter vid OOC. Det erhållna enolfosfatet behandlades med 1,14 g (4,30 mmol) 1-(2-merkaptoetyl)-3-metoxipyri- dinium-metansulfonat i 7 ml CH3CN och 0,63 ml (4,30 mmol) diisopropyletylamin, omrördes30 minuter och kyldes 30 vid -1OOC. Det fasta material som utföll ur blandningen filtrerades, tvättades med 2 ml kall acetonitril och tor- kades för erhållande av 1,32 g (utbyte 82%) av den i rubriken angivna föreningen; IR (nujol) vmax 3320 (m, OH), 1780, 1765 (s,ß -laktam C=O), 1700, 1695 (m, ester c=o) och 1s2o cm'1 (S, No2); ïamr (nmso d6)6 = 9,o1 (1H, bs, H-3 aromatisk), 8,75 (1H, bd, §=5,4 Hz, H-6 aromatisk), 8,35-7,95 (4H, m, H-aromatisk), 7,70 (2H, d, J=7,7 Hz, H-aromatisk), 5,37 (ZH, centrum av ABq, g=13 Hz, CHZPÉB), ,17 (1H, d, §=4,9 Hz, OH), 4,87 (2H, t, §=6,3, CH2- , 4,35-3,75 (2H, m, H-5 och H-1'), 4,00 (3H, s, OCH3), 3,56 (del av en t, §=6,3 Hz, CHZS), 3,5-3,20 (3H, m, H~6, H-3) och 1,16 ppm (3H, d, J=6,1 Hz, C§3CHO). 84 C. 3~(2-(3-metoxi-1-pyridiniumletyltio)-66-(1'-(§)- hydroxietyl)-7~oxo-1-azabicyklo(3.2.0)-hept-2-en- 2-karboxylat å” -^ SN,@§°"_§__, N32 w _ _ En lösning av 600 mg (1,12 mmol) para~nitrobensyl- 3(2-(3-metoxi-1-pyridinium-klorid)etyltio)-6ür(14(§)- hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)-hept-2-en-2- karboxylat i 25 ml THF, 25 ml eter och 25 ml (0,1 M) fosfatbuffert 7,4 hydrerades i en Parr-skakanordning över 10% Pd/C (1,1 g) under 1 timme vid 40 psi. Bland- ningen späddes med eter och ñattefasen filtrerades genom ett härdat filterpapper nummer 52. Vattenskiktet tvätta- des med 2 x 20 ml eter, pumpades under vakuum och häll- des på en silikagel-reversfaskolonn. Den i rubriken an- givna föreningen eluerades med vatten, som innehöll 2 och 5% acetonitril. De lämpliga fraktionerna ifråga kom- binerades och lyofiliserades för erhållande av ett gult fast material, som renades ånyo medelst hplc för erhållan- de av 150 mg (38%) av penemkarboxylatet; IR (nujol) Vmax 1750 (s,ß ~laktam C=O) och 1580 cm_1 (s, karboxylat); “Hmr (n2o)¿= s,s5-s,3o (zu, m, 14-2, H-s aromatisk), 8,17-7,75 (ZH, m, H-3, H-4 aromatisk), 4,77 (2H, t, §= ,9 Hz, Cñzfs), 4,10 (1H, del av 5 linjer, §=6,3 Hz, H-1%, 3,97 (3H; S, OCH3), 3,85, 3,82 (2 linjer, del av dt, §=2,6 Hz, del av H-5), 3,42 (ZH, t, Q=5,9 Hz, CH2-S), 3,25 (1H, dd, Q=6,1 Hz, §=2,6 Hz, H-6), 2,99-2,60 (ZH, 6 linjer, del av H-3) och 1,20 ppm (3H, d, §=6,4 Hz, CH3): UV (H20, c 0,05) ämax: 290 (E10517), 223 (¿6643): Tš (0,1 M pH 7,4 fosfatbuffert, 37°C) 20 h. 1 f- 11,1-, e-,;,'-.-:..',-;e-__.;- _. -pt 4:. -._ ., 1460 790 Exemgel 11 Framställning av (5§¿6§)~3~((2-(3~metyltiopyridinnfi- etyltio)-6-(1-(3)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo- (3.2.0)hgpt-2-en-2-karboxylat ~ z .Gu Säe , ; ' gå) _ )\ sê/m 0 0%- n 9 CD2 A. 3-metyltio-1-(2-merkaptoetyl[pyridiniumklorid S32' _ _ <5 Å --------+ sscæzæzznø C19 She N<::> e BCI + Till en lösning av 2,00 g (ø,o1e moi) 3-mety1c1o- pyridin (framställd medelst förfarandet enligt J.A.
Zoltewies och C. Nisi, J. Org. Chem. 34 (1969) 765.) i 19 ml eter sattes 15 ml 1N HCl och blandningen skakades väl. Vattenfasen separerades, tvättades med 10 ml eter och indunstades därefter. Den resterande hydrokloriden torkades därefter i vakuum över fosforpentoxid för er- hållande av ett vitt fast material. Till denna fasta hydroklorid sattes 1,88 g (0,015 mol) 3-metyltiopyridin och 0,89 ml (0,015 mol) etylensulfid och den erhållna blandningen upphettades (oljebad) 15 timmar vid 55-65°C under kväve. Wetta gav en lätt grumlig olja, som upp- togs i 125 ml vatten och tvättades med CH2Cl2. Vatten- lösningen koncentrerades till en volym om cirka 25 ml och därefter tillsattes några droppar acetonitril för att göra blandningen homogen. Den erhållna vattenlösningen applicerades på en C18-reversfaskolonn. Eluering med vatten och därpå följande indunstning av de lämpliga fraktionerna 460 790 ifråga gav 2,66 g (80%) av produkten som en blekgul viskös olja. ln (film) vmx= 2410 (br, »sm GIF; 1nnmr (as- xmsowzo) 8 = sms-Las (m, 4:a, aromatlsk), 4,7o (t. _q_=e,s Hz, 2H, N~CH2), 3,08 (snedvriden t, §=6,5 Hz, 2H, s-CH2), 2,64 (s, BH, S-Me).
B. p-nitrobensyl~(5§,6$)-3-(2-(3-metyltiopyridino)etyl- tio)-6-(1-(g)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)- hept-2-en-2-karbogylat~klorid " .9 9 S/V“Û '°1 -------> O; CO lå 221m _ _ En lösning av 0,522 g (1,5O mmol) p-nitrobensyl-(S3, 6§)-6-(1-(ß)-hydroxietyl)-3,7-dioxo-1-azabicyklo(3.2.0)- heptan-2-karboxylat i 7 ml torr acetonitril kyldes vid w o°c aan därefter tillsattes droppvls 0,287 ml 11,65 mmol) diisopropyletylamin. Till den erhållna gulbruna lösningen sattes droppvis 0,342 ml( 1,65 mmol) difenylklorfosfat och reaktionsblandningen hölls30 minuter vid OOC. 0,313 ml (1,8O mmol) diisopropyletylamin tillsattes därefter,V A lá följt av en lösning av 0,398 g (1,so mmol) s-metyltlo-w å" (2-merkaptoetyl)pyridiniumklorid i 0,70 ml torr DMF. ffi Cirka 1 minut efter fullbordad tillsats utföll en fäll- ' ning ur reaktionsblandningen och ytterligare kylning vid -10oC under 10 minuter gav en fast organgefärgad massa. Detta fasta material triturerades därefter med acetonitril och återstoden tillvaratogs genom filtrering.
Aterstoden tvättades med acetonitril och därefter med aceton och torkades slutligen i vakuum för erhållande 0 av 0,455 g (55%) av produkten som ett gräddfärgat fast QÄ naterial. De kombinerade filtraten indunstades för er- hållande av en gul olja, som upptogs i.en minsta möjliga, volym acetonitril och kyldes 30 minuter vid OOC. Fi1tre~ 130 *wW=-““W=f%ffi= <= "' 87 460 790 ring av denna blandning gav ytterligare 0,139 g av produk- ten som ett ljusgult fast material. Det kombinerade ut- bytet var o,s94 g (72%). IR (xßr) vmax= 3345 (br, -ou), 177o_1 ß~iaxtam co), 1680 (-cozvua) cm"'; 'nnmr (as-nnso) = 8,98-7.96 (m, 4n, pyriainium, aramatisk), 8,20-7,65 (ABq, J=7,0 Hz, 4H, PNB aromatisk), 5,53-4,80 (m, 4H), 4,3-3,? (m, 2H), 3,6-3,25-(m, 6H), 2,66 (s, BH, S-Me). 1,16 (d, ¿=6,o az, an, came). _ C. (S§,6§)-3-(2-(3-metyltiopyrididkfletyltio)-6-(1-(§)- hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2- karboxylat She NB i a, ~ J., i F-(S âQÅÜ ce "Må Q) O 02? _ w _ _- CDÉQ Till en blandning av 0,551 g (1,0 mmol) p-nitrobensyl- V(5§,6§)-3-(2-(3-metyltiopyridiniobtyltio)-6-(1-(B)~hydroxi- etyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)-hept-2-en-2-karboxylat- klorid och 0,55 g 10% palladium på träkol i 25 ml (0,05 M) fosfatbuffert pH 7,4 sattes 5 ml THF och 25 ml eter.
Blandningen hydrerades (Parr) 1 timme vid 40 psi. Reak- tionsblandningen filtrerades därefter genom Celite och filterkakan tvättades med vatten och eter. Vattenfasen separerades och tvättades ytterligare tre gånger med eter. Efter avlägsnande av resterande organiska lösnings- medel i vakuum kyldes vattenlösningen till OOC och pH- värdet inställdes på 7,0 med en mättad vattenlösning av natriumbikarbonat. Denna lösningen applicerades omedelbart på en C18-reversfaskolonn. Eluering med vatten och därpå följande lyofilisering av de lämpliga fraktionerna ifråga gav 0,25 g av en ljusgul olja. Detta material renades ånyo genom reversfas-hplc för erhållande av 0,210 g (55%) av produkten som ett ljusgult fast material. IR (KBr) vmax= 3400 (br, -on), 1755 (B-iaktam co), 1s9o (fco2') wwfsqeaeï-z-Iflß Me gå 460 790 Cm*1, lamm; )p20) S; 8,60-7,76 (m, 4n, aromatisk), 4,76 (t, §=5,8 Hz, ZH, N-CH2), 4,13 (d av q, J=J'=6,3 Hz, 1H H-1'), 3,95 (d av t, ¿=9,o az, g'=2,a az, 1u, H-5), 3,4s= 2,75 tm, su). 2,59 ts, an, s-Me), 1,20 (a, g=s,4 az, an, came), uv (azo) 1 - 296 (assos), 273 (e13oos), 231 max' O (e11576) nm; ti (pH 7,4, 36,8 C) 20 h.
- Exempel 12 Framställning av 3-(2-(1-(2,6-dimetylpyridinium)- etyltio)-6d-(1-(§)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo- (3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat dg-N 1-(2~merkaptoetyl)-2,6-dimetylpyridiniummetansulfonat __________§ Bs/”\v/Iš<::>> _ n _ nso A. f; rnçgyfisw En blandning av 19,2 ml (0,165 mol) 2,6-dimetylpyri- din och 3,27 ml (0,05O mol) metansulfonsyra omrördes15 minuter, behandlades med 4,17 ml (0,070 mol) etylensul- fid och omrördes 42 timmar vid 100°C under kväveatmosfär.
Efter kylning till 25°C späddes reaktionsblandningen med 45 ml eter och 30 ml vatten. De två skikten separerades och det organiska skiktet extraherades med 2 x 5 ml vatten.
Vatterskikten kombinerades, filtrerades genom en Celite- dyna, tvättades med 2 x 15 ml eter, pumpades för att av- lägsna spåren av organiska lösningsmedel och hälldes på toppen av en kolonn (3,0 x 12 cm) av;hbondapak C18. Elue- ring med en blandning av 3% acetonitril och 97% vatten ioofc, 42-n ”Kåsfl- OH J, o o N Q 460 790 ,gav efter lyofilisering av de lämpliga fraktionerna i fråga 2,5 g av den i rubriken angivna orena föreningen som en sirap. Den renades ånyo medelst hplc (ßbondapak C18) för erhållande av 0,90 g (7%) av den i rubriken 2520 (SH), 1640 och (sulfonat), angivna föreningen. IR (film Vmax: 1625 lpyriainium), 1585. 1490, 1200 cm'1 ïnmr (nnso-d + n2o)8 = 2,36 (BH, s, cu3so3'), 4,62 (2H, m, CHZN ), 7,74 (2H, m, Hm från pyridinium), 8,24 (18, m, Hp från pyridinium), UV (H20) max: 272 ( 4080)mp.
B Paranitrobensyl-3-(2-(1-(2,6-dimetylpyridinium)- :Q etyltio)-6Q-(1-(3)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo- f (3.2.0)hept-2-en-karboxylat-difenylfosfat goa 2) clšwrnä ' J” 3) gg/“\,nåšä> \ ' - 'ÖÄ ' Mso' _ . 4) N2t(iP:)2 1) NEt(iPr)å *toorna T111 en kall (o°c) lösning av 0,658 g (1,s9 mmol) p-nitrobensyl-6N-(1-(3)-hydroxietyl)-3,7-dioxo-1-azabi- cyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat i 6 ml acetonitril, som hölls under kväveatmosfär, sattes 0,394 ml (2,26 mmol) diisopropyletylamin och 0,468 ml (2,26 mmol) dl- fenylklorfosfat. Reaktionsblandningen omrördes 30 mlnu- ter och behandlades med en lösning av 0,720 g (2,73 mmol) 1-(2-merkaptoetyl)-2,6-dimetylpyridiunium-metansulfonat i 3 ml acetonitril, följt av 0,394 ml (2,26 mmol) diiso- propyletylamin. Reaktionsblandningen omrördes 2 timmar vid o°c, späades maa 27 m1 kallt des på toppen av en kolonn (2,5 x 9,0 em) aybßbondapak C18. Eluering med blandningar av acetonitril och vatten och lyofilisering av de lämpliga fraktionerna ifråga gav 0,92 g (65%) av den i rubriken angivna föreningen. IR (KBr) Vmax: 3700-3000 (OH), 1765 (C=O frånI3-laktam), 1690 (C=O från PNB-ester), 1620 Epïrldinium, 1590 (fenyl), x “.1..«._..* “ ; -; ~ 90 460 790 1 1 1s1v (No2>, 1330 (N02), sso cm' (N02), 8; 1,15 (au, a, ¿=s,2 az, cg3cnou), 2,7-3,7 111 H, ca Hmr (nMso, dö) i ' 2-CH3 på pyridinium, H-4, H-6), 3,7-4,4 (2H, CHBCQOH, H-5), 4,7 (za, m. cn2N*), 5,14 (1n, a, g=4,s az, ou), 5,37 (centrum av ABq, §=13,2 Hz, CH2 från PNB), 6,7-7,5 (10H, m, fenyl), 7,5-8,7 (78, pyridinium, H's från PNB), UV (H20) Xmax: 274 (E14150), 319 (E9445) mp C. 3-(2-(1*(2,6~dimetylpyridinium)etyltio)~6d-(1-(§)- hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2- karboxylat % Pd/C, H2 THF, ether, buffer ~r s/g/NG).
COOÉNB (Pno) 2:0' Till en lösning av 0,80 g (1,07 mmol) p-nitrobensyl- 3~(2-(1-(2,6-dimetylpyridinium)1-etyltio)~6«?(1-(§)-hydr- oxietyl)-7-oxo-1~azabicyklo(3.2.0)hept~2-en-2-karboxylat- difenylfosfat i 42 ml fuktig tetrahydrofuran sattes 42 ml eter, 21 ml (0,15 M) monobasiskt kaliumfosfat-natrium- hydroxid-buffert pH 7,22 och 0,80 g träkol. Den erhållna blandningen hydrerades 1 timme under % palladium pâ 40 psi vid 23°C och filtrerades genom en Celite-dyna. De två skikten separerades och det organiska skiktet extra- herades med 3 x 8 ml buffert. Vattenfaserna kombinerades, tvättades med 50 ml eter, pumpades för att avlägsna spår av organiskt lösningsmedel och hälldes på toppen av en kolonn (3,0 x 10,2 cm) fl~bondapak C18. Eluering av kolon- nen med en blandning av 5% acetonitril och 95% vatten och lyofilisering av de lämpliga fraktionerna ifråga gav 0,246 3 (63%) av den i rubriken angivna föreningen som ett gulaktigt pulver. IR (KBr) Qmax: 3700-2800 (OH), 1750 (C=O från.ß-laktam), 1620 (pyridinium), 1585 cm_1 (karb- oxylat), ïnmr (D20) 6; 1,23 (3n, d, ¿=e,4 Hz, c§3cnon> 2,5-3,5 (11H, H-4, H-6, CHZS, ZCH3 på pyridinium), 3,8- *f 'WW w., ~ = -- »m 'www n”. _, n m» ...W ”ß” _ 91 460 790 4,4 (za, cu3c§oa, n-s), 4,5-4,91cn2N*, non), 7,64 och 7,74 (2H, A del av A28-system, Hm från pyridinium), 8,07, 8,16, 8,18 och 8,27 (1H,_B-del av A23-system, Hp från pyridinium), UV (H20)'lmax: 277 (¿9733), 300 (EBZ71) my, (qyzš +so,7°(c 0,48, H20), Analys beräknat för c18u22 N2o4s*1,s a2o= c ss,s1, H 6,47, N 7,19: Funnet= c 55,14, H 6,23, N 6,46.
Exemgel 13 , Framställning av (SE, 6§)-3-(2-(2-metyltiO-3-metyl- imidazolio)etyltio)~6-(1-(3)-hydroxietyl)-7-oxo-1- azabicyklo(3.2.0)hept~2-en-2-karboxylat OH Me' 1~ Å $ SM N-Me /j-*N / 0 e C02 A. 2-metyltio-3-metyl-1-(2-merkaptoetyl)imidazolium- trifluormetansulfonat V SM (1 I' f; e + cr ° I 35035 + ____á; HSCH2CE2 N N_Me N SMB { i M e CFBSO3 1,38 ml (0,015 mol) trifluormetansulfonsyra sattes droppvis till 4,0 g (0,03 mol) 2-metyltio-1-metylimidazol (framställd enligt A. Wohl och W. Marckwald, Chem, Ber. 22 (1889) 1353) vid OOC under kväve. 0,9 ml (0,015 moll etylensulfid tillsattes därefter och blandningen upp- hettades 24 timmar vid 5590 under kväve. Reaktionsbland- ningen triturerades tre gånger med eter och återstoden upptogs i aceton, filtrerades och indunstades. Detta gav 4,2 g (82%) av produkten som etfhalvkristallínt fast material, som användes som sådant utan ytterligare rening. IR (film) v = 2550 (w, sk) =m'1; 1Hnmr (dö-aceton>8 = 7,97 (S, zu), IBEX 4650 7É90 4,66 (E, J=7 Hz, 25, metylen), 4,17 (s, 3H, N-Me), 3,20 (d av t, §=7 H2, '=9 Hz, 2E, metylen), 2,72 (s, 3H, S- Me), 2,20 (t, §=9 Hz, 1H, -SH).
B. p-nitrobensyl~(5§, 6§)-3-(2-(2-metyltio-3-metyl- im1dazo1io)ety1tio>»a-(1~(3)-nyar0xiety1)-7-ox0-1- azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat-difenylfosfat \__/ Me S//\\,ffi CO2PNE Till en lösning av 1,40 g (4,0 mmol) p-nitrobensyl- (S3, 6§)-6-(1-(§)-hydroxietyl)-3,7-dioxo-1-azabicyklo- (3.2.0)heptan-2-karboxylat i 50 ml torr acetonitril sattes droppvis vid OOC under kväve 0,76 ml (4,4 mmol) diisopropyl- etylamin, följt av 0,91 ml (4,1 mmol) difenylklorfosfat.
Efter omröring av reaktionsblandningen vid rumstemperatur under 1 timme tillsattes 0,76 ml (4,4 mmol) diisopropy1~ etylamin och därefter en lösning av 2,0 g (5,9 mmol) 2- metyltio-3-metyl-1-(2-merkaptoetyl)imidazolium-trifluor- metansulfonat i 5 ml acetonitril droppvis. Reaktionsbland- ningen hölls 1,5 timmar vid rumstemperatur och koncentrera- des därefter i vakuum till ett gummi. Detta gummi upptogs i vatten och applicerades på en C18-reversfaskolonn. Blue- ring med vatten, därefter med 20% acetonitril-vatten och slutligen med 30% acetonitril-vatten, följt av lyofilise- ring av de lämpliga fraktionerna ifråga, gav 0,90 g (30%) av produkten som ett ljusgult fast material. IR (KBr) vmax= 3380 (br, ou), 1770 (ß-laktam co) cm'1 'Hnmr (d6- acetøn>5 = 8,35 (br s, 1u>, 8,24, 7,78 (AB q, J=s,a Hz, 7,89 (br s, 1H), 7,25-6,91 (m, 10H, difenyl~ fosfat), 5,50, 5,25 (ABq, J=12 Hz, 2H, bensylisk), 4,75- 4,27 (m, 3H), 4,03 3H, N-Me), 4,15-2,75 8H), 2,53 (S, 3H, s-Me), 1,22 (a, ¿=6,2 Hz, za, -came). o I 4H, aromatisk), (5: (m: / 460 790 c. rsg, 6§)-3-(2-(2-mety1t1o-3-metyiimiaazoiin)ecyltlo)- 6-<1-(3)-hyaroxietyix-7-Qxo-1-azabicykio(3.2.o)nept- 2-en-2-karboxylat Me '?çE sn_ E e /f ” ,//*\\ SM N-Me ___? . SZÜN / N-M i / \u::;/ 9 G 47-N /' \___/ co PNB ($°) P° O co ° 2 2 _ 2 Till en lösning av 1,20 g (1,56 mmol) p-nitrobensyl- (53, 6§)-3-(2-(2-metyltio-3-metylimidazolio)etyltio\-6-(1- (3)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2- karboxylat-difenylfosfat i en blandning av 70 ml THF, 70 ml eter och 31 ml fosfatbuffert (0,05 M, pH 7,4) sattes 1,2 g % palladium på träkol. Denna blandning hydrerades (Parr) vid 35 psi under 55 minuter. Reaktionsblandningen filtre- rades därefter genom Celite och filterkakan tvättades med _ fi@L vatten och eter. Vattenfasen separerades och kyldes till OOC och pH-värdet inställdes på 7,0 med en mättad vatten- lösning iv natriumbikarbonat. Efter avlägsnande av reste- rande organiska lösningsmedel i vakuum applicerades vatten- lösningen på en C '-reversfaskolonn. Eluering med va'.:ten och 18 därefter med 8% acetonitril-vatten och slutligen lyofili- sering av de lämpliga fraktionerna ifråga gav 0,25 g av ett fast material. Detta material renades ånyo medelst reversfas-hplc för erhållande av 0,114 g (19%) av produk- ten som ett gråvitt fast material. IR (KBr) Vmaxz 3420 (ofl), 1750 (ß-laktam co), 1590 (-cogê) cm'1; 'Hnmr (D20) 8; 7,58 (S, zv), 4,52 (t, ¿=e Hz, zu), 4,28-3,82 (m, zu), 3190 3H' n_ME)/ 3|40~2|87 (m, 5H)y 2|40 (Sf 3H|'S_Me)] 1,20 (a, J=s,4 Hz, sa, -cnMe); uv (H20) )maX= 297 (evsvzy, 262 (&6259); 222 (&7955) nm.
(S, (h: 460 790 Exempel 14 Framställning av (53, 6§)~3-(2-(3-aminopyridinio)- etyltio)-6-(1-(3)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo- (3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat A. < 3-amino-1-(2-merkaptoetyl)pyridiniumklorid NE GB/\ HN EN + ¿ 3 __) Hscszcaé N 2 \\ 4- 2 I \\ N/- Hcl \1( Cfa 1,50 g (0,016 mmol) idin upptogs i 15 ml 1N metanoliskt HCl och den erhållna lösningen indunsta- des för erhållande av hydrkloriden som en olja. Till denna olja sattes 1,32 g (0,015 mmol) 3-aminopyridin och 0,89 ml (0,015 mmol) etylensulfid och den erhållna blandningen upphettades (oljebad) 2 timmar vid 60-65°C under kväve.
Ytterligare en ekvivalent etylensulfid (0,89 ml; 0,015 mmol) tillsattes och upphettningen fortsattes 65 timmar vid 55-65°C. Reaktionsblandningen tvättades med CH2Cl2 och upptogs därefter i 25 ml vatten. Vattenlösningen applicerades på en C18-reversfaskolonn,.som eluerades med vatten. Indunstning av de lämpliga fraktionern ifråga gav 1,26 g (44%) av produkten som en färglös.viskös olja.
IR- (fi1m)\,max= 3180 (Mraz) Cnfï; 'Hnmr (ae-maso) 6 = 8,19- 7,59 (m, 4H, aromatisk), 4,59 (t, §=6,2 Hz, 2H, N-CH2), 3,5 (brs, 2H, -NH2), 3,20-2,77 (m, BH). 3-aminc; 2 . - - . ßwgfæzggmkqwmffi-âå-fi,~å~~ -fl ~ 9 få vil»flf-»l,=,-,fàwsexm~~§,,,,- _. . 460 790 B. p-nitrobensyl (SE, 6§)-3-(2-(3-aminopyridinio)etyl- tio)-6-(1-(§)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)- hept-2-en-2-karboxylat-difenylfosfat ' ' na s /efl y a _- 2 u * 'I N ' v E s/\/ \ / i Är* N //'- N / - 0 0 0 lag) Å Coepyg coerna (¿0)2P 5 T111 en lösning av 0,696 g (2,ø mmol) p-nitrobenšy1- Ä (SE, 6§)-6-(1-(§)-hydroxietyl)-3,7-dioxo-1-azabicyklo- (3.2.0)heptan-2-karboxylat i 10 ml torr acetonitril sattes vid OOC under kväve droppvis 0,382 ml (2,2 mmol) diiso- propyletylamin, följt av 0,457 ml (2,2 mmol) difenylklor- fosfat. Efter omröring 30 minuter vid OOC tillsattes en É lösning av 0,475 g (2,5 mmol) 3-amino-1-(2-merkaptoety1)- pyridiniumklorid i 1 ml torr DMF, följt av ytterligare diisopropyletylamin (0,435 ml; 2,5 mmol). Reaktionsbland- ningen hölls 1,5 timmar vid 0°C och koncentrerades där- 1; efter i vakuum. Det erhållna gummit upptogs i acetonitril- “2*ten 1111) o E a li, ales nå en C, -re e sia '01 nn; t/Äfâlåer; (3511 G55? 11:? län? ef, reffßšbuf inn i* Eluering med vatten, följt av 20% acetonitril-vatten och därpå följande lyofilisering av de lämpliga fraktionerna 1 ifråga, gav 0,730 g (50%) av produkten som ett beigefär- gat fast material. IR (KBr) Umax: 3330 (br, OH),_?18O p (br, NH2), 1770 (ß -lakcam co), 1690 (-co2PNß)cm , 'Hnmr _¿ (d6fDMSO)8 : 8,29-7,63 (m, 8H, aromatisk), 7,2-6,7 (m, 1OH, difenylfosfat), 5,47, 5,18 (Aßq, §=14 Hz, ZH, bensy- lisx), 4,73~4,4s (m, su), 4,2-3,8 (m, 1H). 3.6-2.6 (m, -§ BH), 1,15 (d, J=6,2 Hz, 3H, came). *lg C. (5§, 6§)~3-(2-(3-aminopyridinio)etyltio)-6-1-(§)- hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hêpt-2-Bh-2- karbogylat ïß ß @ - v/VÜ / /,--_n / g ° e ,°°2 Till en blandning av 0,730 g (1,0 mmol) p-nitro- bensyl-(S§, 6§)-3-(2-(3-aminøpyridinio)etyltio)-6-(1- (§)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2- karboxylat-difenylfosfat och 0,7 g 10% palladium på trä- kol i 25 ml av en fosfatbuffert (0,05 M, pH 7,4) sattes 8 ml THF och 20 ml eter. Denna blandning hydrerades där- efter (Parr) 1 timme vid 40 psi. Den erhållna blandningen filtrerades genom en dyna av Celite och filterkakan tvät- tades med vatten och eter. Vattenfasen separerades, tvät- tades två gånger med eter och därefter avlägsnades reste- rande flyktigt material i vakuum. Vattenlösningen appli- cerades omedelbart på ett C18-reversfaskolonn, som elue- rades med vatten. Lyofilisering av de lämpliga fraktio- _nerna ifråga gav 0,45 g av ett gråvitt fast material. Detta material renades ånyo medelst reversfas-hplc för erhållande av 0,123 g (35%) av den önskade produkten som ett elfenbens- färgat fast material.IR (KBr) Vmax: 3340 (br), 1750 (br,ß -laktam CO), 1580 (br, -C020) cm_1; 'Hnmr (D2O)à : 8,07-7,59 (m, 4H, aromatisk), 4,61 (t, §=5,8 Hz, 2H, N- CH2), 4,14 (d av q, §=Q'=6,3 Hz, 1H, H-1'), 3,97 (d av t, Q*9,2 Hz, g'=2,6 Hz, 1H, H-5), 3,38 (t, §=5,8 Hz, 2H, Sfiüíá), 3,24 0:13 av Q, ff e* 6,0 H2, J' M 2,16 Iïz IH, H-6), 3,17-2,57 (m, ZH, H-4), 1,21 (d, g=6,3 Hz, 3H, CHMe); uvanšo) Amax= 299 (e7949>, 256 (asszz) nm; tš (pa 7,4, 36,8 C) 18,5 h. “'~\_,.,=- _, _ OH N32 460 790 Exemgel 15 Framställning av GH ”L” t (53, 6§)3-(1-(§)~metyl-2-(1-pyrídinium)etylti0)-6-(1- 3)-hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2- karboxylat och \\-< \ ä Un Å ¿L_ N s'/\~/Åå<::>> (5§.6§\3-(1-i)-metyl-2-(1-pyridinium)etyltiO)-6-(1-(§)- V hydroxietyl)-7-oxo-1-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karb- oxylat A. dl-1-(2-merkapto-2-metyletyl)pyridinium-metansulfonat dl-1-(2-merkapto-1-metyletylëpyridinium-metansulfonat t ES,¿,@MS ¿fä¿ + in N<::> + nsoa.
Sw 1,95 ml (0,03O mol) metansulfonsyra sattes långsamt +æï1 “,fl= mä {fi.flfi? mnïä kaíï wxfifiin och den erhållna ~ 1 's . _ . . - v ~ . . ,- šï» Wi: æaxëvš'vzs~.a~ffifxa x-»äïeifl vfifëflä-æß. w fšflrïaäxäeßavfa wav-z w: \ «-, bwaxwxäaàæës mi: 9$%Q ml (G,33 mel; d1~propy}ensulfid øch onrördes 90 timmar vid GOOC under kväveatmosfär. Pyridiner avlägsnades 1 4 WW; ~X'æ*"'”'»~'* 98 460 790 vakuum, àterstodexzblandas med vatten och :enades medelst kromatograferixg (hplc, Bordapak C-18). De lämpliga frak~ tionerna ifråga kombinerades och l§ofiliseràdes för er- hållande av dlr1-(2-merkapto-2-metyletyl)pyridinium-metan- sulfonat i en mäxgd av 1,14 g (15%) som en färglös sirap; IR (film)\Jmax: 2520 (SH), 1640 (Påïiåiníum), 1180 (s, ca3so3"), 1040 1ca3so3') cm'1, 1nmr (nuso 0616 = 1,35 ta, g=s,s az, sn, cg3çus),;,a0 (S, sa, cu3so3'), 2,90 (d, J=8,S Hz, 18, SH), 3,2-3,7 (m, CÉSH), 4,52 (dd, šgem= 12.9 az, g=0,4 az, cncg2N*), 4,07 (aa, ¿gem§12,9 az, g= 6,0 az, cncg2n*), 8,0-8,4 (m, zu, am från pyridinium), 8,5-8,8 (m, 1H, Hp från pyridinium), 9,04 (dd, §=1,4 Hz, §=6,7 Hz, 2H, Ho från pyridinium), UV (H20) )max: 208 (¿5257), 259 (¿3338), Analys beräknat för C9H15N03S2' 2020; c 37,88, H 6,71, N 4,91, s 22,47; rummet; c 37,49, H 6,85, N 4,86, S 22,09 och dl-1-(2-merkapto-1-metylety1)- pyridinium4metansulfonat i en mängå av (L82g(11%) som en färglös sirap: IR (filnü Vmax: 2500 (SH), 1628 (pyridi- nium), 1180 (sulfonat, 1035 1su1fonat) cm"1, ïnmr (omso- 0613; 1,69 (a, ¿=e,s Hz, sn, cg3cHNÜ, 2,31 (S, an, ca3so3"), 3,0-3,3 (m, za, cn2s>, 4,2-5,2 zm, 10, cHN*, 8,0-8,4 (m, ZH, Hm från pyridinium), 8,5-8,8 (m, 1H, Hp från pyridinium), 9,0-9,2 (m, 2H, Ho från pyridinium), UV (H2O)')nEX: 209 (E4987), 258 (¿3838). Analys beräk- nat för c9H15No3s2-1,5 H20; c 39,11, H 6,56, N 5,07; Funnet: C 39,13, H 5,92, N 5,20.
B. (5§,6§) paranitrobensyl-3-(l-(§,§)metyl-2-(l-pyri- dinium)etyltio)-6-(l-(E)-hydroxietyl)-7-0XO'l~â2a“ _ bicyklo(3.2.0)hept~2-en-2-karboxylat-difenylfosfat OH 1) NErJíPQZ , Jos - - flïíx; 4, sw=<®> . _ o¿"“ “ ,J\~/*ácä>"”S° coornß - 'cooPma 3) ns . . 0110): 0 4) NEt(iPI)2 m., ~ -eH--vfm ,,,»-«w,.d ...www *WW ÛÛÉÜ H” “Å OH va* 04-7" 99 450 790 11111 en kall (o°c) mening ev 0,523 g(1,5 mme1) (53,6§)paranitrobensyl-6-(1-(3)-hydroxietyl)-3,7-dioxo- 1-azabicyk1o(3;2.0)hept-2-en-2-karboxylat 1 6~ml aceto- nitril, som hölls under kväveatmosfär, sattes 0,314 ml (1,8 mmol) diisopropyletylamin, följt av 0,373 ml (1,8 mmol) difenylklorfosfat. Reaktionsblandningen omrördes minuter och behandadels med en lösning av 0,539 g (2,16 mmol) d1-l-(2-merkapto-2-metyletyl)pyridinium- metansulfonat i 2 ml acetonitril och 0,314 ml (1,8 mmol) diisopropyletylamin. Reaktionsblandningen omrördes 1 timme vid o°c, späddes med 24 m1 kan: (o°c) vatten den kromatograferades över en bondapak C-18-kclonn (2,5 x 8,5 cm) med 25-50% acetonitril i vatten som eluerande lösningsmedel, varvid man erhöll 1,07 g (97%) av den i rubriken angivna föreningen som ett gulaktigt pulver efter lyofilisering; IR (KBr)\)max: 3700-3100 (OH), V 1770 (c=o fråmß-lekeem), 1595 (c=o från PNB-ester), 1630 (pyridinium), 1590 (fenyl), 1518 (N02), 1348 (N02), sas (N02) em'l. lnmr (nnso dö) S; 1.14 (d, ._1_=6,1 Hz, 3H, cg3cHo), 1,33 (d, g_=6,3 Hz, 3H, cg3cns), 4,6-5,0 (m, CHZNÜ, 5,14 (d, g_=s,2 Hz, 1H, oH), 5,37 (centrum av ABq, §=l2,4 Hz, 2H, CH2 från PNB), 6,6-7,5 (m, l0H, fenyl från føsfat), 7,69 (d, §=8,7 Hz, 2H, Ho från PNB), 8,0-8,4 (m, 4H, Hm från PNB, Hm från pyridinium), 8,4- 8,8 (m, 1H, Hp från pyridinium), 9,08 (d, §=5,6 Hz, 2H, Ho från pyridinium), UV (H2O)'Ämax: 263 (il332S), 308 (E8915). Analys beräknat för C36H36N3Ol0SP'H2O: C 57,52, H 5,10, H 5,10, N 5,59, S 4,27; Funnet: C 57,76, H 4,96, N 5,36, S 4,35. 3 C. (5§.6§)3-(l-(§ och §)¥metyl-2-(l-pyridinium)etyltio)- s- (1- (5) -Hydrdxieeyi-v-exe-l-ezebicyklo (3 . 2.0) hept- 2-en-2-karboxylat H ja” s/k/ THF, ether, buffer COOPNB (sno) 2.35 ...Hand dwnmxwf-wmw m3. , .. .æuwiíflw .ïvwnvvwifiiiirwfwl, Wen. Uwe, ,w.æfi.,-m,vfi¿we _r\,»f~~@ 100 460 790 Till en lösning av 0,60 g (0182 mmol) (5§,6§)- paranitrobensyl~3-(l-(§,§)metyl-2-(l-pyridinium)etyl- tio)-6-(l-(3)-hydroxietyl)-7-oxo-l-azabicyklo(3.2.0)- hept-2~en-2-karboxylat-difenylfosfat 1 33 ml fuktig tetrahydrofuran sattes 33 ml eter, 17 ml (0,l5 N) mono- basiskt kaliumfosfat-natriumhydroxid-buffert pH'l,22 och 0,60 g 10% palladium pâ träkol, Den erhållna bland- ningen hydrerades l timme under 40 psi vid 23°C. De två skikten separerades och det organiska skiktet extrahera- des med 3 x 7 ml vatten. Vattenskikten kombinerades, filtrerades genom en Celite-dyna, tvättades med 3 x 20 ml vatten och kromatograferades på en prep. bondapak C-l8- kolonn (2,5 x 9,5 cm) med vatten som eluerande lösnings- medel för erhållande av 0,18 g (63%) av en blandning av diastereoisomererna. De tvâ diastereoisomererna separe- rades medelst hplc (prep, bondapak C-l8) med vatten som eluerande lösningsmedel: isomer med lägre retentionstid, 0,068 g (23%) förening "B", :m (xar>vmax= 1770 (c=o frånß-iakçam), 1633 (pyn- ainium), 1593 (karboxylat) cnfl, lnmr (D2o)(§= 1,20 (a, §;6,3 Hz, 3H, C§3CH0), 1,42 (d, Q;6,9 Hz, 3H, CH3CHS), 2,33-3,2 (m, an, n-4, n-e), 3,5-3,9 (m, m, scn), 3,9- 4,2 (m, za, 11-5, cu3cg0), 4,3-5,1 (m, cuznfi, 7,a-a,2 (m, 2H, Hm från pyridnium), 8,4-8,7 (m, lH, Hp från pyri- dinium), 8,7-9,0 (m, 2H, Ho från pyridinium), UV (H20) lmax 260 (as727), 300 (gszßzs), (ouzš ~39,3° (så H20).
Tl/2=l2,6 H (uppmätt vid en koncentration av 10 M i fosfatbuffert pH 7,4 vid 36,8°C); isomer med högre ; retentionstid, 0,081 g (28%), förening "A": IR (KBr) max; 1755 (c=o från ß-laktam), 1630 (pyriainium), 1590 (karbaxylat) cm"l, lnmr (nzonš = 1,18 (d, g_=6,3 Hz, 3:1, cg3cno), 1,40 (d, g_=7,o Hz, BH, cg3cns), 2,84 (d, §=9,3 Hz, 2H, H-4), 3,26 (dd, §=2,7 Hz, g;5,9 Hz, m, 11-6), 3,4-4,z (m, an, sca, cn3cgø; 11-5), 4,2-5,1 (m, CH2N+), 7,7-8,1 (m, 2H, Hm från pyridinium), 8,3- 8,65 (m, lH, Hp från pyridinium), 8,65-8,9 (m, 2H, Ho 259 (¿5694), 296 från pyridinium), UV (H2O)'Ämax: â- x \/" 460 790 (sasse), (uyzš +96,9° (5 0,56, H20), :v (uppmätt vid efi koncentration av 10' pa 7,4 vid 36,a°c), Exemgel 16 Framställning av 1/2 = 15,6 H M i fosfatbuffert OH Jm- _ o å* s E i (5§.6§)-3-(2-((§)-(l-pyridinium))-l-(§)-cyklohexyltio)- 6-(l-(3)-hydroxietyl)-7-oxo-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2- en-2-karboxylat och OH å. __T::l>F_s“m Isf-W _ N °°° @J (5§,6§)-3-(2-((3)-(1-pyridinium))-l-(§)-cyklohexy1tio)- . 6-(1-(3)~hydroxietyl-7-oxo-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2- en-2-karboxylat.
A.. dl-l-(2-merkapto-l-cyklohexyl)pyridinium-metan- sulfonat . ~ SH ." - ' í> +>-flßßß ---~ (I I OH 0,.. 460 790 _1:>=Q 0,65 ml (0,0l mol) metansulfonsyra sattes droppvis till 2,42 ml (0,03 mol) pyridin under kylning. Bland- ningen omrördes 10 minuter under kväveatmosfär, behand- - lades med 1,377 g (0,0l02 mol; 85% renhet) dl-cyklo- hexansulfid och omrördes 25 timmar vid 72°C. Överskottet pyridin avlägsnades i vakuum och spår därav samdestille- rades med vatten. Återstoden blandades med vatten och kromatograferades genom en prep. bondapak C-18-kolonn (5 x 13 cm) med 0-2% acetonitril i vatten som eluerings- lösningsmedel, varvid! man efter lyofilisering erhöll 1,57 g (53%) av en färglös sirap. IR (film)'Qmax: 2500 (SH), lszs (pyrldlnium), lleo (sø3"), lnmr (nnso döïg = 1,2- 2,5 (m, sn, eyklenexyl H), 2,32 (s, sn cH3so3'), 2,82 (d, §ä9,8 Hz, SH), 3,0-3,5 (m, lH, C§SH), 4,2-4,9 (m, ln, cHN*), 8,0-8,3 (m, za från pyrlalnium), 8,4-8,8 (m, lH, Hp från pyridinium), 8,9f9,3 (m, 2H, Ho från max. 2l4' Analys beräknat för Cl2Hl9NO3S2°H2O: C 46,88, H 6,88,» N 4,56; Funnet: C 46.61, H 6,46, N 4,65.
B. (5§,6§)paranitrobensyl'-3-(2-((§ eller §)-l~(l- pyrlalnium))-l-<5 eller §)-eyklehexylele>-6-(l- (g)-hydroxietyl)-7-oxo-l-azabicyklo(3,2.0)hept- 2~en-2-karboxylat-difenylfosfat pyridinium), UV (H20) Ä - 1) nzezirnz OH JO," 9 2) clP(oPh)2 s _ “ æ*- . _ . 3) Mso ° ~ i f? _ ämm å coomß G u>ho>2m (CD) V 4) N::2 f Till en kall (53,6§)paranitrobensyl-6-(1-(§)-hydroxietyl)-3,7*di0X0' l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat i 15 ml aceto- nitril, som hölls under kväveatmosfär, sattes 0,822 ml (4,7 mmol) diisopropyletylamin och 0,979 ml (4,7 mmol) OH J., 460 790 difenylklorfosfat. Den erhållna lösningen omrördes 30 minuter och behandlades med en lösning av 1,64 g (5,66 mmol) dl-l-(2~merkapto-1-cyklohexyl)pyridinium-metan- sulfcnat i 4,7 ml acetonitril, följt av 0,822 ml (4,7 mmol) diisoprcpyletylamin. Reaktionsblandningen omf- raraee 1 timme via o°c, spädaee med 75 m1 kallt (o°c> vatten øch kromatograferades på prep.bondapak C-18 med -50% acetonitril i vatten som-èlueringslösningsmedel, varvid man efter lyofilisering av de lämpliga fraktio- nerna ifråga erhöll 1,9 g (53%) av denLi"rubriken an- givna föreningen. IR (nar) vmax= 3790-3ooo(on),-1770 (c=o frånlšflakeem), 1700 (c=o från PNB-estery, 1628 (pyriain1um),:1s9o (fenyl), 1515 (N02), 1345 (N02), aao (N02) em'1, lnmr (n2o)8 = 1,13 (d, g=e,1 Hz, an, C§3CHO), 1,2-2,5 (m, 8H, cyklohexyl H), 2,7-3,5 (m, 4n, n-4, H-6, cïsï, 3,5-4,4 (m, zu, cn3cgo, H-5), 4,4- ,0 (m, lH, CHN ), 5,30 (centrum av ABq, §=l2,8 Hz, CH2 från PNB), 6,7-7,4 (m, l0H, fenyl), 7,65 (d, g=8,6 Hz, 28, H0 från PNB), 7,9-8,4 (m, 4H, Hm från PNB, Hm från pyridinium), 8,4-8,8 (m, lH, Hp från pyridi- nium), 9,0-9,4 (m, 2H, Ho från pyridnium), UV (H20) 263 (¿9038), 309 (E6394). Analys beräknat för C39H40N3OloSP-H20: C 59,16, H 5,35, N 5,31; Funnet: C 58, 95, H 5,15, N 5,57.
C. (5§,6§)-3-(2-((R eller S)-(1-pyridinium))-1-(3 eller §)-cyklohexyltmö-6-(l-(§)-hydroxietyl)-7- oxo-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat lmâXz 4 - OH s AG' THF, ether, puffe; O PNB N n 460 790 Till en lösning av 1,85 g (2,34 mmol) (5§,6§)- paranitrobensyl-3-(2-((§ eller §)-(1-pyridinium)-l- (§ eller §]-cyklohexyltio)-6-(l-(§)-hydroxietyl)-7- oxofl-azabicyklo(3.2;0)hept-2-en-2-karboxylat-difenyl- > fosfat i 96 ml fuktig tetrahydrofuran sattes 96 ml eter, 50 ml (0,l5 M) monobasiskt kaliumfosfat-natriumhydroxid- buffert pH 7,22 och 1,9 g 10% palladium på träkol. Den erhållna blandningen hydrerades l,25 timmar vid 23°C under 40 psi. Det organiska skitet separerades och tvättades med 3 x 20 ml vatten. Vattenlösningarna filtre- rades genom en Celite-dyna, tvättades med 2 x 60 ml eter, pumpades för avlägsnande av spår av organiska lösnings- medel och kromatograferades på en prep, bondapak C-18- kolonn (4,5 x 9 cm) med O-5% acetonitril i vatten som elueringslösningsmedel, varvid man efter lyofilisering erhöll 0,705 g (76%) av en blandning av diastereoisome- rer, Separationen av diastereoisomererna utfördes med hplc (prep. bondapak C-18) med 4% acetonitril i vatten som elueringslösningsmedel; diastereoisomer med lägre retentionstid, förening "A" (0,29 g; 3l%); IR (KBr)'9maX: 1750 (C=O frånlï-laktam), 1620 (sk, pyridinium), 1685 (karboxylat) cm_l, lflmr (D2O)Ä : 1,21 (d,'§=6,3 Hz, 3H, C§3CHO), 1,4-2,5 (m, 8H, cyklohexyl H), 2,5-3,05 (m, 2H, H-4), 3,05-3,25 (m, lH, H-6), 3,3-3,7 (m, lH, css), 3,9-4,3 (m, zn, H-5, cH3cgo), 4,3-4,8 (m, cHN*), 7,8-8,2 (m, ZH, Hm från pyridinium), 8,3~8,7 (m, lH, Hp från pyridinium), 8,8-9,1 (m, 2H, Ho från pyridinium), Uv (H2o>'xmax= zso (avizs), :oo (¿a6as>, <«)ÉÉ +s,2° E 0,63, H20), Tl/2=l6,6 H (uppmätt vid en koncentration av lO_4M i fosfatbuffert pH 7,4 vid 36,8°C); Analys beräknat för C2OH24N2O4S 2H2O: C 56,59, H 6,65, N 6,60, S 7,55; Funnet: C 56,83, H 6,47, N 6,59,~S 7,43; diastereo- isomer med längre retentionstid, förening “B“, (0.35 g; 38%» m (xßnvmax: 1750 (c=o frånß-iíktïm), 1622 (sk, pyridinium), 1588 (karboxylat) cm , Hmr (D20) §: l,l9 (Ö, §=6,4 Hz, 33, CH3CHQ),l,3-2,5 (m, 8H, cyklo- hexyl H), 2,5-3,1 (m, 2H, H-4), 3,1-3,3 (m, lH, H-6), 105 460 790 3,3-3,8 (m, 2H, H-S, CHS), 4,1 (centrum av m, lH, CH3C§Q), 4,2s-4,v (m, in, cmï), v,e-.e,1 (m. za, mn från pyriai- nium), 8,3-8,7 (m, lH, Hp från pyridinium), 8,75-9,0 (m, 2H, Ho från âåršidiniuxåx), UV (H20) Xmax: 259 (5 5992) , S 296 (amma). (då +ss,3 (g 0,43, nzo) TV2 =2o,2 n i (uppmätt vid en'koncentration av l0“4M i fosfatbuffert pa 1,4 vid 3ß,s°c.
Exempel 17 A. (Så)-allyl-3-((2-pyridinioetyl)ti0)-(6§)-((l§)-hydr- l0 oxietyl)-7-oxo-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karb- oxylat-difenylfosfat roa _ OH “ %r/]3\Q~ _* I) CIPOHWZ V i (Då-Na ~2> ß'@@ _°¿ -Sl êozß/ ns c1 C02 /\æ 901,0 “m2 Till en lösning av 473 mg (l,87 mmol) (5§)-allyl- 3,7-dioxo{6§)-((lg)-hydroxietyl)-l-azabicyklo(3.2.0) heptan-(23)-karboxylat i 6 ml CH3CN sattes vid cirka -l0oC under kväveatmosfär 0,42 ml (2,4 mmol) diisopropyl- etylamin, följt av 0,50 ml (2,4 mmol) difenylklorfosfat.
Blandningen omrördes 30 minuter vid OOC och kyldes där- efter till -l5°C. Till denna sattes en oljig suspension av 527 mg (3,00 mmol) N-(2-merkaptoetyl)-pyridiniumklorid i l ml CHBCN, innehållande 5 droppar DMF, följt av 0,42 ml (2,4 mmol) diisopropyletyíamin Blandningen omrördes minuter vid -l5°C och späddes därefter med 20 ml vat- ten. Denna blandningen renades direkt på en reversfas- silikagelkolonn (C18 PrepPAK, 12 g Waters Associates) under eluering med 200 ml vatten, 10% CH3CN/H20 (100 ml), % CHBCN/H20 (100 ml), 30% CH3CN/H20 (100 ml) och där- efter 40% CH3CN/H20 (100 ml). De lämpliga fraktionerna ifråga tillvaratogs och det organiska lösningsmedlet av- lägsnades medelst en vakuum pump och det resterande mate- rialet lyofiliserades för erhållande av 786 mg (l,26 mmol; utbyte 67,3%) av den i rubriken angivna föreningen OH J... 04-60 0 C) 51/\\/'N Pd(P$3)4 I ...N _ _ vsom ett brunaktigt pulver: C02/c\ø* Cl 106 79:: lamr (nuso-dö, cPT~2o)8 = 1,16 (aa, a, gas az, 1*-cn3), 2,6-3,1 (m), 3,15-4,3 (2H, m, S-H och 1'-H), 4,65 (2H, m, -C02CH2-), 4,87 (za, t, gas az, -caz-N*), s-6,2 (sn, m, oiefiniska protoner), 6,6~7,4 (m, aromatiska protoner), 8,15 (2H, "t", g=7 Hz, aromatiska protoner meta i förhållande till kväve), 8,63 (lH, “t", §=fl Hz, aromatiska protoner para i förhållande till kväve och 9.07 ppm (23, “d“, Ag=7, aromatiska protoner orto i förhållande till kväve); IR (film)v : 3400 (OH), 1770 (3-laktam), 1690 (ester), 1625 (pyridinio)- . _ B. (5§)-3-((2-pyridinioetyl)tio)-(6§)-((l§)~hydroxi- etyl)-7-oxo-l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karb~ oxylat P03 Pø«m>2 Till en lösning av 156 mg (0,25 mmol) (5§)-allyl- 3-((2-pyridinioetyl)tio)-(6§)-((l§)-hydroxietyl)-7-oxo-A l-azabicyklo(3.2.0)hept-2-en-2-karboxylat-difenylfosfat i 2 ml CHBCN sattes i tur och ordning vid cirka_22°C en lösning av 0,6 ml (0,3 mmol) 0,5 M kalium-2-etylhexanoat i etylacetat, 15 mg (0,057 mmol) trifenylfosfin och 15 mg (0,0l3 mmol) tetrakistrifenylfosfin-palladium, Bland- xüngen omrördes 2 timmar vid cirka 22°C under kväveatmo- sfär. Efter tillsats av 7 ml vattenfri Et2O filtrerades fällningen, tvättades med 7 ml vattenfri Et2O och tor- kades i vakuum för erhållande av l0l mg av ett brunaktigt fast material. Detta renades genom reversfas-kolonnkroma- tografering (C18 PrepPAK, 12 g, Waters Associates) under eluering med vatten. De lämpliga fraktionerna ifråga 107 460 790 (fraktionerna 7-12, vardera 20 ml) tillvaratogs och lyo- filiserades för erhållande av53 mg (0,l6 mmol; utbyte 64%) av den i rubriken angivna föreningen som ett gul- akt.gt pulver, Detta material var förorenat med kalium- difenylfosfat och kalium-2-etylhexanoat: lflmr (D20, CFT-ZÛXÄ : 0,80 (t, J=6,å Hz, Me från etylhexanoat), 1,21 (sa, a, ¿=s,3 az, 1'-Me), 2,93 (za, ad, gl_4=9 az, ggemff Hz), 3,28 (lH, dd, §6_l,=6,2 Hz, §6_5=2,S Hz, 6-H), 3,42 (2H, t, åäö Hz, -C828), 3,98 (lH, td, §5_l= 9 Hz, g5_6=2,5 Hz, 5-H), 4,15 (lH, q. g;6,2 Hz, 1'-H), 4,aø (za, t, g;6,o Hz, -cH2N*>, 7-1,5 (m, feny1-proto- ner från difenylfosfat), 8,03 (2H, m, Hm från pyridi- nium), 8,56 (lH, m, Hp från pyridinium) och 8,81 ppm (2H, "d", J26,5 Hz, Ho från Pyridinium).
Exempel 18 Föreningarna enligt exemplen 4-17 kan även fram- ställas medelst förfarandet enligt exempel l eller 2 genom omsättning av den lämpliga mellanprodukten ifråga med formeln S-A-I 7--N I C02-p-nitrobenëyl med den lämpliga heteroaromatiska nukleofilen ifråga o och därefter avlägsnande av p-nitrobensylkarboxylskydds- gruppen genom katalytisk hydrering.

Claims (39)

10 15 20 25 30 35 460.790 108 PATENTKRBV.
1. Föreningar med formeln vari R* år väte, alkyl eller nydroxisubstituerad alkyl med 1-10 kolatomer; R* är väte, en anjonisk laddning eller en konventionell lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgrupp, under förutsättning att, när R' är väte eller en akyddogruPP- det aven lr närvarande en motanjon; R' är väte; A är cyklopentylen, cyklonexylen eller C.-C.-alkylen. eventuellt substituerad med en eller flera C;-a-alkylgrupper; är pyridinium eventuellt substituerad med en eller flera grupper valda från C;-C.-alkyl, C;-C.-alkyl subatituerad med nydroxi. C;-C.-alkyltio, C;-Ca-alkoxi och amino; och farmaceutiskt godtagbara salter därav. och
2. Föreningar enligt krav 1, k 8 n n e t e c k n a d e därav, att R* är väte, CH;CH=~. _ CH: CH: ?H ?H ca- , \ c - eller cmca- // ,// CH: CH: 10¶ 15 20 25 30 35 wa - 460 790
3. Föreningar enligt krav 2, k E n n e t e c.k n a d e därav, att R* är Cfiacfi* är SR. GS, BR.
4. Föreningar enligt nagot av kraven 1-3. k 5 n n e t e c k- n a d e därav, att A är -CH;CH,-, -CH=CH=CH=-, -CHCH;- eller CH:
5. S. Föreningar enligt krav l med formeln . nl___ I ' f” i* ~ coon: vari R*, R”. R' och A har i kravet 1 angivna betydelser; och farmaceutiskt godtagbara salter därav.
6. Föreningar enligt krav 1 med formeln GB. vari R* har den i kravet 1 angivna betydelsen.
7. Föreningar enligt krav 6, k à n n e t e c k n a d e därav, att R' år allyl eller p-nitrobenayl.
8. Föreningar enligt krav 1 med formeln ?ß och att den absoluta konfigurationen - 10 15 20 25 30 35 460 790 110 s-cazcazcnzfif/ \> oonz 4"* vari R* har den i kravet 1 angivna betydelsen, och farmaceutiskt godtagbara salter därav.
9. Föreningar enligt krav 8, k 8 n n e t e c k n a d e därav, att R* år p-nitrobensyl.
10. Föreningar enligt krav 1 med formeln ' on m, /Lu å aaz-.íj . | ca, 2 R FÉÅ ___- ..--.. ï--a 1.- vari R* har den i kravet 1 angivna betydelsen, och farmaceutiskt godtagbara salter därav. '
11. Diaatereoisomerer av föreningarna enligt krav 10 med R- konfiguration vid den med en asterisk utmärkta kolatomen.
12. Diastereoisomerer av föreningarna enligt krav 10 med S- konfiguration vid den med en asterisk utmärkta kolatomen.
13. Föreningar enligt nagot av kraven 10-12, k ä n n e - t e c k n a d e därav, att R* är p-nitrobensyl.
14. Föreningar enligt krav 1 med formeln 10 15 26 25 30 35 fi1 460 790 óv-_- 1 CÛOR? : '~; ~'_ ;_ -..i ___..- -aug-...s - -*~-~-~~ "'._- vari R' har den i kravet 1 angivna betydelsen, ocn farmaceutiakt godtagbara salter därav.
15. Föreningar enligt krav 14, k ä n n e t e c k n a d e därav, att R” är p-nitrobensyl.
16. Föreningar enligt krav 1 med formeln CE H å' o / \ (m o, E I scflzCflz N _ o/JI-INQ V _. ' ___. vari R* har den i kravet 1 angivna betydelsen, och farmaceutiskt godtagbara salter därav.
17. Föreningar enligt krav 16, k ä n n e t e c k n a d e därav. att R* är p-nitrobensyl.
18. Föreningar enligt krav 1 med formeln " 2 6r_- . _> C°QR_w”fluLÅ~4_ GB II' (R) ' vari R' har den i kravet 1 angivna betydelsen, och farmaceutiskt godtagbara salter därav. 10 15 20 25 30 35 460 790 W H2
19. Föreningar enligt krav la. k 5 n n e t e c x n a d e därav, att R* är p-nitrobenayl.
20. Föreningar enligt krav 1 med formeln OH g 205 (R) 'W É SCB CH eN4, I 2 2 4”-*N 0 . cooaz. _ vana-ae., J. ..- J.. an... J- .;.1_-- ___, vari R” har den i kravet 1 angivna betydelsen, och farmaceutiskt godtagbara salter därav.
21. Föreningar enligt krav 20, k 5 n n e t e c k n a d e* därav, att R* år p-nitrobensyl.
22. Föreningar enligt krav 1 med formeln H : Ö 2 u., jï. vari R” har den i kravet 1 angivna betydelsen, och farmaceutiskt godtagbara salter därav.
23. Föreningar enligt krav 22, därav, att R' är p~nitrobensyl. k 3 n n e t e c k n a d e
24. Föreningar enligt krav 1 med formeln \ 4 _ _... coon: v . -..--...... Wïfa~,qy;w m«aywfflw, n._w.,a.ï..l.w,ww,,v,..ürf . w wnrwfltaï ..,¶.1¿¿._.,»;. Mâwwfiækw-ïkw. nåïz.. vari R' har den i kravet 1 angivna betydelsen. och farmaceutiakt godtagbara salter därav. k ä n n¿e t e c k n a_d e S
25. Föreningar enligt krav 24, därav. att R* är p-nitrobensyl.
26. Föreningar enligt krav 1 med formeln 10 ~ * (n, j; f i scnzcaao ' I 2 /J-”N is 0..____,.-.-t..- ._ Coon ___. _; vari R” har den i kravet 1 angivna betydelsen, och farmaceutiskt godtagbara salter därav. 20
27. Föreningar enligt krav 26. k 5 n n e t e cvk n a d e därav, att R' är p-nitrobenayl.' _
28. Föreningar enligt krav 1 med formeln 25 'on ' ° caa H / (ny/Lu a ca ca 'u \ 2 2 \\ ofr- u coon: 30 _ vari R* har den i kravet 1 angivna betydelsen, och farmaceutiskt godtagbara salter därav. k ä n n e t e c k n a d e 35
29. Föreningar enligt krav 28, därav, att R” är p-nitrobensyl.
30. Föreningar enligt krav 1 med formeln 10 15 20 25 30 35 vari R* nar den 1 kravet 1 angivna betydelsen, och farmaceutiskt godtagbara salter därav.
31. Föreningar enligt krav 30, k ä n n e t e c k n a d e därav, att R' är p-nitrobensyl. i
32. Föreningar enligt krav 1 med formeln _03 vari R' har den 1 kravet 1 angivna betydelsen, och farmaceutiskt godtagbara salter därav.
33. Föreningar enligt krav 32, k ä n n e t e c k n a d e därav, att R” är p-nitrobensyl.
34. Föreningar enligt krav 1 med formeln GB B '(3) XL* 8 I ' I 04%” 2 5' I C003 vari R* har den i kravet 1 angivna betydelsen, och farmaceutiskt godtagbara salter därav. 10 15 20 25 30 35 115 I 460 790
35. Föreningar enligt krav 34, k ä n n e t e c k n a d e därav, att R' är p-nitrobensyl.
36. Diaatereoisomererna av föreningarna enligt krav 34 med R,R-konfiguration vid de tva asymmetriska kolatomerna i cyklonexylringen.
37. Diaatereoisomererna av föreningarna enligt krav 34 med 8,5-konfiguration vid de tva aaymmetriaka kolatomerna i cyklobexylringen. V
38. Förfarande för framställning av föreningarna enligt krav 1 med formeln :_ g i Q R1____í/\..-s-a- 1G “cooaz ° vari R*. R?, R' och A har i kravet 1 angivna betydelser, och farmaceutiskt godtagbara salter därav, k ä n n e t e c k - n a t därav, att man underkastar en mellanprodukt med» formeln vari R*, R' och A har ovan angivna betydelser och R”' är en konventionell lätt avlägsningabar karboxylskyddsgrupp, nukleofil förträngning i ett inert organiskt lösningsmedel och i närvaro av ailverjoner med en kvävenaltig hetero- aromatisk nukleofil med formeln 'mf "uunu»v~f~~~~' ~ 10 15 20 25 30 35 460 790 116 Oï så att iodgruppen i mellanprodukten II utbytes mot gruppen _! u I. under bildning av en förening med formeln 31 š in-e ' me. kJ! l| cm, u II vari X9 är en motanjon och R*, R', A, QO~ och R°' har ovan och i kravet 1 angivna betydelàer. och att man, om aa önskas, avlägsnar karboxylskyddsgruppen R°' för erhållande av motsvarande avblockerade förening med formeln I eller ett farmaceutiskt godtagbart salt därav.
39. Förfarande enligt krav 38, k ä n n e t e c k n a t därav, att man (1) omsätter en mellanprodukt med formeln n å. RI R : 0 a t! ' 4-11 __ coon* a .....-._...._~..__.um.««»..... 10 15 20 25 30 35 mn? ' V _46Û 790 vari R* och R' har i kravet l angivna betydelser och Rfi' är en konventionell lätt avlägsningsbar karboxylskyddsgrupp, i ett inert organiskt lösningsmedel med difenylklorfosfat i närvaro av en bas för erhållande av en mellanprodukt med 'formeln vari R*, R' och R°' har ovan angivna betydelser; (2) omsätter mellanprodukten IV~i ett lnert organiskt lösningsmedel och i närvaro av en bas med ett merxaptan- reagens med formeln A _-.- HS-A-OH vari A har i kravet 1 angiven betydelse, för erhållande av en mellanprodukt med formeln vari R*, R', A och R“' har ovan angivna betydelser; (3) omsätter mellanprodukten V i ett inert organiskt lösningsmedel och i närvaro av en bas med metansulfonyl- klorld eller en funktionell acylerande ekvivalent därav för erhållande av en mellanprodukt med formeln n” à RI . -a-osozcsa coon: ° ,<-:\«~,»§¶.§,W...ü~ W, .W,_W.¿w_.,_._. Lv__}__w__>_[__ _* __ 460 i 790 118 vari R*, R', A och Ra' har ovan angivna betydelser; <4) omsätter mellanprodukten VI i ett inert organiskt lös- ningsmedel med en jodidjonkâlla sa att metanaulfonyloxi- gruppen utbyta med en jodgrupp under bildning av en mellan- 8 produkt med formeln R 3 'å - -I R1___ I S Ä 10 ~ 11-1* ooa °_ Å n vari R*, R°, A och H2' har ovan angivna betydelser; och (S) omsätter mellanprodukten II i enlighet med förfarandet 15 enligt krav 38.
SE8301929A 1982-04-09 1983-04-07 Nya karbapenemderivat samt foerfarande foer framstaellning daerav SE460790B (sv)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US36691082A 1982-04-09 1982-04-09
US06/471,379 US4552696A (en) 1982-04-09 1983-03-08 Carbapenem antibiotics

Publications (3)

Publication Number Publication Date
SE8301929D0 SE8301929D0 (sv) 1983-04-07
SE8301929L SE8301929L (sv) 1983-12-02
SE460790B true SE460790B (sv) 1989-11-20

Family

ID=27003573

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SE8301929A SE460790B (sv) 1982-04-09 1983-04-07 Nya karbapenemderivat samt foerfarande foer framstaellning daerav
SE8901032A SE8901032L (sv) 1982-04-09 1989-03-22 Mellanprodukter foer framstaellning av karbapenemderivat

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SE8901032A SE8901032L (sv) 1982-04-09 1989-03-22 Mellanprodukter foer framstaellning av karbapenemderivat

Country Status (23)

Country Link
US (1) US4552696A (sv)
KR (1) KR880001069B1 (sv)
AT (1) AT382620B (sv)
AU (1) AU572090B2 (sv)
BE (1) BE896418A (sv)
CA (2) CA1283659C (sv)
CH (2) CH666272A5 (sv)
DE (1) DE3312533A1 (sv)
DK (1) DK157083A (sv)
ES (2) ES521293A0 (sv)
FI (1) FI76801C (sv)
FR (1) FR2524890B1 (sv)
GB (2) GB2119371B (sv)
GR (1) GR78185B (sv)
HU (1) HU190083B (sv)
IE (1) IE54769B1 (sv)
IL (1) IL68148A0 (sv)
IT (1) IT1200926B (sv)
LU (1) LU84740A1 (sv)
NL (1) NL8301212A (sv)
OA (1) OA07390A (sv)
PT (1) PT76525B (sv)
SE (2) SE460790B (sv)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA1198440A (en) * 1982-04-08 1985-12-24 Choung U. Kim Carbapenem antibiotics
US4642341A (en) * 1982-04-09 1987-02-10 Bristol-Myers Company Carbapenem antibiotics
US4536335A (en) * 1982-06-18 1985-08-20 Bristol-Myers Company Carbapenem antibiotics
DK140584A (da) * 1983-03-08 1984-09-09 Bristol Myers Co Fremgangsmaade til fremstilling af carbapenemderivater
CA1285940C (en) * 1984-07-02 1991-07-09 Merck & Co., Inc. Carbapenems having a 2-quaternary heteroarylalkylthio substituent
IE851586L (en) * 1984-07-02 1986-01-02 Interchem Internat S A I methylcarbapenems having a 2-quaternary¹heteroarylalkylthio substituent
US4729993A (en) * 1984-12-13 1988-03-08 Merck & Co., Inc. Carbapenems and 1-methylcarbapenems having an externally alkylated mono- or bicyclic 2-quaternary heteroarylalkyl substituent
US4680292A (en) * 1984-12-13 1987-07-14 Merck & Co., Inc. Carbapenems and 1-methylcarbapenems having a 2-heteroaryliumaliphatic substituent
US4725594A (en) * 1984-12-13 1988-02-16 Merck & Co., Inc. Carbapenems having an internally or externally alkylated mono- or bicyclic 2-quaternary heteroarylalxyl heteromethyl substituent
US4952397A (en) * 1985-06-17 1990-08-28 Merck & Co., Inc. 2-quaternary heteroarylalkylthio carbapenems having an acid moiety substituent
US4665169A (en) * 1985-09-11 1987-05-12 Bristol-Myers Company Carbapenem antibiotics
US4880922A (en) * 1985-11-22 1989-11-14 Bristol-Myers Company Carbapenems with quaternized heterothioalkylthio substitution at position 2
US4894450A (en) * 1987-05-11 1990-01-16 Merck & Co., Inc. Process for 2-(aminoalkylthio) carbapenems

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2332014A1 (fr) * 1975-11-21 1977-06-17 Merck & Co Inc Derives n-alcoyles de thienamycine utiles en tant qu'antibiotiques
US4235920A (en) * 1975-11-21 1980-11-25 Merck & Co., Inc. N-Alkylated derivatives of thienamycin
US4235917A (en) * 1977-05-05 1980-11-25 Merck & Co., Inc. N-Alkyl-N-acyl derivatives of thienamycin
US4189493A (en) * 1977-12-28 1980-02-19 Merck & Co., Inc. N-heterocyclic derivatives of thienamycin
AR229883A1 (es) * 1978-05-26 1983-12-30 Glaxo Group Ltd Procedimiento para la preparacion de antibiotico(6r,7r)-7-((z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-(2-carboxiprop-2-oxiimino)-acetamido)-3-(1-piridinometil)-cef-3-em-4-carboxilato
JPS5625110A (en) * 1978-12-18 1981-03-10 Bristol Myers Co Antibacterial
EP0017992A1 (en) * 1979-04-19 1980-10-29 Merck & Co. Inc. 2-Substituted-6-substituted-1-carbadethiapen-2-em-3-carboxylic acids, processes for preparing them, antibiotic pharmaceutical compositions containing same and process for preparing intermediates
US4376774A (en) * 1979-05-29 1983-03-15 Merck & Co., Inc. Antibiotic N-heterocyclyl thienamycin
DE3169321D1 (en) * 1980-03-27 1985-04-25 Merck & Co Inc Process for the preparation of 1-carbapenems and intermediates via silyl-substituted dithioacetals
EP0038869A1 (en) * 1980-04-30 1981-11-04 Merck & Co. Inc. Process for the preparation of 1-carbapenems, and intermediates for their preparation
EP0044170A1 (en) * 1980-07-11 1982-01-20 Beecham Group Plc Beta-lactam antibiotics, their preparation and use
WO1983000867A1 (en) * 1981-09-09 1983-03-17 Takeda Chemical Industries Ltd 5,6-cis-carbapenem-3-carboxylic acid derivatives and process for their preparation
EP0074599A1 (en) * 1981-09-09 1983-03-23 Takeda Chemical Industries, Ltd. 5,6-cis-Carbapenem derivatives, their production and use
WO1983002614A1 (en) * 1982-02-02 1983-08-04 Takeda Chemical Industries Ltd 5,6-cis-carbapenem-3-carboxylic acid derivatives and process for their preparation
CA1198440A (en) * 1982-04-08 1985-12-24 Choung U. Kim Carbapenem antibiotics
US4536335A (en) * 1982-06-18 1985-08-20 Bristol-Myers Company Carbapenem antibiotics
DK140584A (da) * 1983-03-08 1984-09-09 Bristol Myers Co Fremgangsmaade til fremstilling af carbapenemderivater

Also Published As

Publication number Publication date
DE3312533A1 (de) 1983-10-13
FI831170L (fi) 1983-10-10
AT382620B (de) 1987-03-25
ATA125683A (de) 1986-08-15
CA1284500C (en) 1991-05-28
IE830806L (en) 1983-10-09
KR840004430A (ko) 1984-10-15
ES8601118A1 (es) 1985-11-01
SE8301929D0 (sv) 1983-04-07
DE3312533C2 (sv) 1991-08-14
FI76801C (sv) 1988-12-12
BE896418A (fr) 1983-10-10
GB2159818A (en) 1985-12-11
GB2159818B (en) 1986-07-23
PT76525A (en) 1983-05-01
FR2524890A1 (fr) 1983-10-14
LU84740A1 (fr) 1983-12-05
IT8348068A0 (it) 1983-04-08
US4552696A (en) 1985-11-12
ES528079A0 (es) 1985-11-01
CA1283659C (en) 1991-04-30
AU1272683A (en) 1983-10-13
GB2119371B (en) 1986-07-09
GB2119371A (en) 1983-11-16
DK157083A (da) 1983-10-10
SE8901032D0 (sv) 1989-03-22
FI831170A0 (fi) 1983-04-06
CH666272A5 (fr) 1988-07-15
PT76525B (en) 1986-02-06
SE8901032L (sv) 1989-03-22
OA07390A (fr) 1984-11-30
DK157083D0 (da) 1983-04-08
GB8309566D0 (en) 1983-05-11
GB8515162D0 (en) 1985-07-17
CH657854A5 (fr) 1986-09-30
GR78185B (sv) 1984-09-26
AU572090B2 (en) 1988-05-05
KR880001069B1 (ko) 1988-06-20
ES8405799A1 (es) 1984-06-16
IL68148A0 (en) 1983-06-15
SE8301929L (sv) 1983-12-02
NL8301212A (nl) 1983-11-01
IT1200926B (it) 1989-01-27
FR2524890B1 (fr) 1987-08-28
IE54769B1 (en) 1990-01-31
FI76801B (fi) 1988-08-31
ES521293A0 (es) 1984-06-16
HU190083B (en) 1986-08-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US4168314A (en) 6-(1&#39;-Hydroxyethyl)-2-aminoethylthio-pen-2-em-3-carboxylic acid
EP0001628B1 (en) 3-substituted-6-substituted-7-oxo-1-azabicyclo (3.2.0)-hept-2-ene-2-carboxylic acid, its preparation and pharmaceutical compositions containing it
US4536335A (en) Carbapenem antibiotics
SE436130B (sv) Sett att framstella 1-karba-2-penem-3-karboxylsyror
EP0001627A1 (en) 3-Substituted-6-(1&#39;hydroxethyl)-7-oxo-1-azabicyclo(3.2.0.)-hept-2-ene-2-carboxylic acid, its preparation and pharmaceutical compositions containing it
EP0037081A1 (en) Process for the preparation of 1-carbapenems and intermediates via trithioorthoacetates
EP0050334B1 (en) 2-carbamimidoyl-6-substituted-1-carbadethiapen-2-em-3-carboxylic acids, a process for preparing and an antibiotic composition comprising the same
SE460790B (sv) Nya karbapenemderivat samt foerfarande foer framstaellning daerav
EP0037082B1 (en) Process for the preparation of 1-carbapenems and intermediates via silyl-substituted dithioacetals
JPH06179674A (ja) カルバペネム、それを含有する抗生物質医薬組成物及びその製法及びその製造中間体
EP0160876A1 (en) 1-Hetero-6-/1-Hydroxyethyl/-2-SR8-1-carbadethiapen-2-EM-3-carboxylic acids
US4310538A (en) 3-Halo-1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-en-7-one-2-carboxylic acid
SE461734B (sv) Nya karbapenem-antibiotika samt foerfarande foer framstaellning daerav
IE840549L (en) Carbapenem process and intermediates
DK170341B1 (da) Penem-derivater, fremgangsmåde til fremstilling heraf og farmaceutiske og veterinære præparater indeholdende disse forbindelser
EP0030032B1 (en) 6-, 1- and 2-substituted-1-carbadethiapen-2-em-3-carboxylic acids, processes for preparing the same, pharmaceutical compositions containing the same, and intermediates
EP0235823B1 (en) Carbapenem antibiotics, a process for preparing them and pharmaceutical compositions containing them
US4347368A (en) 3-Substituted-6-substituted-7-oxo-1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-ene-2-carboxylic acid
US4880922A (en) Carbapenems with quaternized heterothioalkylthio substitution at position 2
US4640799A (en) Carbapenem antibiotics
KR100189667B1 (ko) 카바페넴 유도체
KR910006807B1 (ko) 카바펜엠 항생제의 제조방법
US4665170A (en) Carbapenem antibiotics
KR910009270B1 (ko) 카바펜엠 항생제의 제조방법
US4369187A (en) 3-Substituted-1-azabicyclo[3.2.0]hept-2-en-7-one-2-carboxylic acid

Legal Events

Date Code Title Description
NUG Patent has lapsed

Ref document number: 8301929-9

Effective date: 19941110

Format of ref document f/p: F