FI70925B - Foerfarande foer framstaellning av 3-hydroxy-ml-236b-derivater - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av 3-hydroxy-ml-236b-derivater Download PDFInfo
- Publication number
- FI70925B FI70925B FI823978A FI823978A FI70925B FI 70925 B FI70925 B FI 70925B FI 823978 A FI823978 A FI 823978A FI 823978 A FI823978 A FI 823978A FI 70925 B FI70925 B FI 70925B
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- nocardia
- ferm
- compound
- brown
- microorganism
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 34
- 150000001732 carboxylic acid derivatives Chemical class 0.000 claims description 33
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 31
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 30
- 241000187654 Nocardia Species 0.000 claims description 23
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 23
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 claims description 23
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 claims description 18
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 13
- 230000033444 hydroxylation Effects 0.000 claims description 10
- 238000005805 hydroxylation reaction Methods 0.000 claims description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 claims description 9
- 238000005755 formation reaction Methods 0.000 claims description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 6
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 6
- 238000007273 lactonization reaction Methods 0.000 claims description 3
- 230000032050 esterification Effects 0.000 claims description 2
- 238000005886 esterification reaction Methods 0.000 claims description 2
- 230000001651 autotrophic effect Effects 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims 1
- 239000000376 reactant Substances 0.000 claims 1
- 235000002639 sodium chloride Nutrition 0.000 description 36
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 29
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 28
- AJLFOPYRIVGYMJ-INTXDZFKSA-N mevastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=CCC[C@@H]([C@H]12)OC(=O)[C@@H](C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 AJLFOPYRIVGYMJ-INTXDZFKSA-N 0.000 description 28
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 22
- -1 ML-236B carboxylic acid Chemical class 0.000 description 19
- 150000007942 carboxylates Chemical class 0.000 description 18
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 17
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 16
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 14
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 13
- 241000204087 Pseudonocardia autotrophica Species 0.000 description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 13
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 12
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 12
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 11
- 239000000047 product Substances 0.000 description 11
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 11
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 11
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 10
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 10
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 241000894007 species Species 0.000 description 9
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 8
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 8
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 8
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 7
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 7
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 7
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 7
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 7
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 7
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 6
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 6
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 5
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 5
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 5
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 5
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 5
- 150000001735 carboxylic acids Chemical class 0.000 description 5
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 5
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 5
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 5
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 5
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 5
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 4
- 208000019585 progressive encephalomyelitis with rigidity and myoclonus Diseases 0.000 description 4
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 4
- CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N tetramethylsilane Chemical compound C[Si](C)(C)C CZDYPVPMEAXLPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 3
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001278587 Nocardia coeliaca Species 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 3
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 3
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 3
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 3
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 3
- 125000005907 alkyl ester group Chemical group 0.000 description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 3
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 3
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 3
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 3
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 3
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 3
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000010409 thin film Substances 0.000 description 3
- 230000001131 transforming effect Effects 0.000 description 3
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N Diazomethane Chemical compound C=[N+]=[N-] YXHKONLOYHBTNS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 2
- PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N Nickel Chemical compound [Ni] PXHVJJICTQNCMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000187678 Nocardia asteroides Species 0.000 description 2
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 2
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L Sodium Sulfate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S([O-])(=O)=O PMZURENOXWZQFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 2
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 2
- WTEOIRVLGSZEPR-UHFFFAOYSA-N boron trifluoride Chemical compound FB(F)F WTEOIRVLGSZEPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 2
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 2
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 238000006884 silylation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NRKYWOKHZRQRJR-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-trifluoroacetamide Chemical compound NC(=O)C(F)(F)F NRKYWOKHZRQRJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QIJIUJYANDSEKG-UHFFFAOYSA-N 2,4,4-trimethylpentan-2-amine Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)N QIJIUJYANDSEKG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 3-[(1r)-1-[(2r,6s)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]ethyl]-n-[6-methyl-3-(1h-pyrazol-4-yl)imidazo[1,2-a]pyrazin-8-yl]-1,2-thiazol-5-amine Chemical compound N1([C@H](C)C2=NSC(NC=3C4=NC=C(N4C=C(C)N=3)C3=CNN=C3)=C2)C[C@H](C)O[C@H](C)C1 QBWKPGNFQQJGFY-QLFBSQMISA-N 0.000 description 1
- 102100029077 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase Human genes 0.000 description 1
- 101710158485 3-hydroxy-3-methylglutaryl-coenzyme A reductase Proteins 0.000 description 1
- KTFUTPSBLYIILV-UHFFFAOYSA-N 6,6-dichlorohexan-1-amine Chemical compound NCCCCCC(Cl)Cl KTFUTPSBLYIILV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000775660 Anarhichas lupus Type-3 ice-structuring protein 1.5 Proteins 0.000 description 1
- 101000775628 Anarhichas lupus Type-3 ice-structuring protein 1.9 Proteins 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 229910015900 BF3 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004215 Carbon black (E152) Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241001450911 Circinella Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235555 Cunninghamella Species 0.000 description 1
- 101710128746 Cytochrome b6-f complex iron-sulfur subunit 1 Proteins 0.000 description 1
- 101710128742 Cytochrome b6-f complex iron-sulfur subunit 2 Proteins 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 1
- ZGUNAGUHMKGQNY-SSDOTTSWSA-N D-alpha-phenylglycine Chemical compound OC(=O)[C@H](N)C1=CC=CC=C1 ZGUNAGUHMKGQNY-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 1
- 244000000626 Daucus carota Species 0.000 description 1
- 235000002767 Daucus carota Nutrition 0.000 description 1
- BWLUMTFWVZZZND-UHFFFAOYSA-N Dibenzylamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNCC1=CC=CC=C1 BWLUMTFWVZZZND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- KIWBPDUYBMNFTB-UHFFFAOYSA-N Ethyl hydrogen sulfate Chemical compound CCOS(O)(=O)=O KIWBPDUYBMNFTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 241001450909 Gongronella Species 0.000 description 1
- SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N Hexa-Ac-myo-Inositol Natural products CC(=O)OC1C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C(OC(C)=O)C1OC(C)=O SQUHHTBVTRBESD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010020649 Hyperkeratosis Diseases 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000002841 Lewis acid Substances 0.000 description 1
- 241000235575 Mortierella Species 0.000 description 1
- 241000235395 Mucor Species 0.000 description 1
- VCUFZILGIRCDQQ-KRWDZBQOSA-N N-[[(5S)-2-oxo-3-(2-oxo-3H-1,3-benzoxazol-6-yl)-1,3-oxazolidin-5-yl]methyl]-2-[[3-(trifluoromethoxy)phenyl]methylamino]pyrimidine-5-carboxamide Chemical compound O=C1O[C@H](CN1C1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1)CNC(=O)C=1C=NC(=NC=1)NCC1=CC(=CC=C1)OC(F)(F)F VCUFZILGIRCDQQ-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- 206010067482 No adverse event Diseases 0.000 description 1
- 241001503673 Nocardia farcinica Species 0.000 description 1
- 101000643905 Nostoc sp. (strain PCC 7120 / SAG 25.82 / UTEX 2576) Cytochrome b6-f complex iron-sulfur subunit 3 Proteins 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000235400 Phycomyces Species 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000775697 Pseudopleuronectes americanus Ice-structuring protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000775692 Pseudopleuronectes americanus Ice-structuring protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 241000222644 Pycnoporus <fungus> Species 0.000 description 1
- 241000235527 Rhizopus Species 0.000 description 1
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 1
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 1
- UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M Sodium bicarbonate-14C Chemical compound [Na+].O[14C]([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-DEQYMQKBSA-M 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- 241000736854 Syncephalastrum Species 0.000 description 1
- 241000533793 Tipuana tipu Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 244000098338 Triticum aestivum Species 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000307264 Zygorhynchus Species 0.000 description 1
- 239000003377 acid catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N aldehydo-L-rhamnose Chemical compound C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N 0.000 description 1
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical group 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000005215 alkyl ethers Chemical class 0.000 description 1
- 150000001350 alkyl halides Chemical class 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N aluminium oxide Inorganic materials [O-2].[O-2].[O-2].[Al+3].[Al+3] PNEYBMLMFCGWSK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N ammonium sulfate Chemical compound N.N.OS(O)(=O)=O BFNBIHQBYMNNAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052921 ammonium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011130 ammonium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N beta-D-glucosamine Chemical compound N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-QZABAPFNSA-N 0.000 description 1
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 230000025938 carbohydrate utilization Effects 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010941 cobalt Substances 0.000 description 1
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical compound [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000012230 colorless oil Substances 0.000 description 1
- 229940125846 compound 25 Drugs 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 description 1
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000010696 ester oil Substances 0.000 description 1
- ZYBWTEQKHIADDQ-UHFFFAOYSA-N ethanol;methanol Chemical compound OC.CCO ZYBWTEQKHIADDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000001495 ethyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 201000005577 familial hyperlipidemia Diseases 0.000 description 1
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000855 fungicidal effect Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 1
- 229930195733 hydrocarbon Natural products 0.000 description 1
- 150000002430 hydrocarbons Chemical class 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M hydroxide Chemical compound [OH-] XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000000640 hydroxylating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 229960000367 inositol Drugs 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 125000000959 isobutyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])* 0.000 description 1
- 125000001449 isopropyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 150000007517 lewis acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000002934 lysing effect Effects 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000004702 methyl esters Chemical class 0.000 description 1
- UIUXUFNYAYAMOE-UHFFFAOYSA-N methylsilane Chemical compound [SiH3]C UIUXUFNYAYAMOE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 229910052759 nickel Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- 125000001436 propyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000000527 sonication Methods 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 125000000026 trimethylsilyl group Chemical group [H]C([H])([H])[Si]([*])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/40—Preparation of oxygen-containing organic compounds containing a carboxyl group including Peroxycarboxylic acids
- C12P7/42—Hydroxy-carboxylic acids
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
- C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
- C12P7/62—Carboxylic acid esters
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/365—Nocardia
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/822—Microorganisms using bacteria or actinomycetales
- Y10S435/872—Nocardia
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Pyrane Compounds (AREA)
Description
70925 1 Menetelmä 3-hydroksi-ML-236B-johdannaisten M-4 ja M-4' valmistamiseksi Förfarande för framställning av 3-hydroxy-ML-236B-clerivaten M-4 och M-4' 5 Tämä keksintö käsittää menetelmän kaavan (I) mukaisen lääkeaineena käyttökelpoisen yhdisteen: 10
^ ...OH
hooc^ y‘
HCX J
H O £··% 15 '0 ΗΪ O) CH3fA|A>^3 HO^ 20 (missä 'VvAA.0H edustaa ryhmää "Ji**0H tai >M»iuoh), sen farmaseuttisesti hyväksyttävien suolojen ja esterien sekä vastaavien suljetun renkaan omaavlen laktonlen valmistamiseksi, saattamalla yhdiste 25 ML-236B, joka on kaavan II mukainen
..-OH
HOOCT ^-* 30 · 0%/
νϊ T-H
9 H I on 35 2 70925 1 (ML-236B)-karbokeyylihappo tai sen suola, kosketukseen hydroksylointient-syymin kanssa.
ML-236B, joka voi esiintyä happomuodossa ("ML-236B-karboksyylihappo") 5 tai laktonimuodossa ("ML-236B-laktoni"), on kuvattu GB patenttijulkaisussa 1.453.425, Ja, laktonimuodossaan, sillä on kaava:
10 O^J
-rVS
A A. /ch3
15 flT
Myöhemmin GB patenttijulkaisussa 1.555.831 on kuvattu erilaisia 20 ML-236B:n suoloja ja estereitä. ML-236B:n ja sen suolojen ja estereiden havaittiin Inhiboivan kolesterolin biosynteesiä kilpailemalla 3-hydroksi- 3-metyyliglutaryylikoentsyymi-A:n reduktaasin kanssa, mikä on reaktio-nopeutta määräävä entsyymi kolesterolin biosynteesissä; näiden yhdisteiden havaittiin siten osoittavan erittäin merkittävää kykyä alentaa seeru-25 min kolesterolitasoa.
Myöhemmin tiettyjä 3-hydroksi-ML-236B:n johdannaisia eristettiin ML-236B-laktouin eläinten aineenvaihdunnan tuotteina, ja samanlaisia johdannaisia havaittiin tuotettavan ML-236B-laktonln ja -karboksyylihapon tai niiden 30 suolojen tai estereiden entsymaattlsella hydroksylolnnilla, mikä oli saatu aikaan suvun Absldia, Cunninghamella, Syncephalastrum, Streptomyces, Mucor, Rhizopus, Zygorhynchus, Circinella, Actlnomucor, Gongronella, Phycomyces, Mortierella, Pycnoporus ja Rhizoctonla mikro-organismeilla. A. Terahara ja M. Tanaka julkaisivat nämä menetelmät US-patentlssa 4.346.227, jota 35 vastaava patenttihakemus jätettiin 5. heinäkuuta 1981, ja siten tuotettuja yhdisteitä kuvataan tuossa patenttihakemuksessa M-4:ksi, M-4':ksi, TsoM-4:-ksi ja IsoM-4':ksi. Näillä yhdisteillä havaittiin olevan kykyä inhiboida 3 70925 1 kolesterolin biosynteesiä» mikä on vähintään verrannollinen itse ML-236B:n inhibointikyvyn kanssa ja mikä joissakin tapauksissa olennaisesti ylittää sen.
5 ML-236B:llä ja sen johdannaisilla käsittäen M-4- ja M-41-yhdisteet on siten terapeuttista merkitystä veren hyperlipemian hoitamisessa ja val-timonkovetustaudin ennaltaehkäisyssä.
Tekniikan tasona mainitaan myös FI-patenttien 66.427 ja 67.231 sekä FI-10 hakemuksen 802357 esittämät läheistä rakennetta olevat yhdisteet.
Me olemme nyt keksineet, että M-4:ä ja M-4':ä voidaan myös valmistaa ML-236B:stä ja sen erilaisista johdannaisista käsittelemällä suvun Nocardia mikro-organismilla tai sen soluttomalla, entsyymiä sisältävällä 15 uutteella. Suvun Nocardia mikro-organismien käytöllä on se etu verrattuna US-patentissa 4.346.227 esitettyihin mikro-organismeihin nähden, että substraattina käytettävää ML-236B-yhdistettä voi olla reaktioliuok-sessa paljon suurempana konsentraatloua kuin jos käytetään aiemman kaltaisia mikro-organismeja. Tämä on kalkkein hännnästyttävlntä, sillä 20 ML-236B-yhdisteiden on havaittu omaavan fungisidisia ja antibioottisia ominaisuuksia.
Näin ollen tämä keksintö on tunnettu siltä, että hydroksylointientsyyml on valmistettu suvun Nocardia mikro-organismilla; jos on tarpeellista, 25 altistamalla saatu tuote yhteen tai useampaan reaktioon, joka on hydro-lyysi, suolan muodostus, esterölnti tai laktonlsointl; ja eristämällä tuote reaktioseoksesta.
Kaavan (I) yhdistettä, jossa SΙΛ/ΙΑ. OH on OH, kutsutaan 30 (M-4)-karboksyylihapoksi, ja vastaavat suolat ja esterit tunnetaan (M-4)-karboksylaatteina. Kaavan (I) yhdiste, missä SVWL OH on OH, lyhennetään (M-41)-karboksyylihapoksi, ja vastaavat suolat ja esterit lyhennetään (M-4')-karbokeylaareiksi.
35 4 70925 1 Suljetun renkaan omaavla laktoneja, jotka vastaavat kaavan (I) yhdisteitä, voidaan kuvata kaavalla (Ia): h3C'^y o h> (Ta> 10 »Tipu
H CT
15 missä /VW> OH edustaa ryhmää -*·βθΗ tai ja ne tunnetaan vastaavasti (M-A)-laktonlna ja (M-VJ-laktonlna.
Suljetun renkaan omaavaa laktonla, joka vastaa kaavan (TI) ML-236B-20 karboksyyllhappoa, voidaan kuvata kaavalla (Ila):
.....OH
25 y' H O [x. dia)
hSH
ja se tunnetaan ML-236B-laktonina.
35 5 70925 1 Suvun Nocardia parempina pidettyjä lajeja käytettäväksi tämän keksinnön menetelmässä ovat Nocardia autotrophica, Nocardia asteroldes, Nocardia farclnica ja Nocardia coeliaca, erityisesti Nocardia autotrophica. Näistä lajeista seuraavia kantoja pidetään parempina: 5
Nocardia autotrophica FERM P-6181 (SANK 62781);
Nocardia autotrophica subsp. canberrica nov. PERM P-6182 (SANK 62881); Nocardia autotrophica subsp. amethystine nov. FERM P-6183 (SANK 62981); 10 Nocardia autotrophica IFO 12743 (SANK 91279);
Nocardia asteroides IFO 3424 (SANK 62065);
Nocardia farcinica ATCC 3318 (SANK 64265) ja Nocardia coeliaca ATCC 17040 (SANK 63665).
15 Yllä mainituista suvuista Nocardia autotrophica IFO 12743, Nocardia asteroides IFO 3424, Nocardia farclnica ATCC 3318 ja Nocardia coeliaca ATCC 17040 tunnetaan kaikki lajeina, joita on vapaasti ja yleisesti saatavissa vastaavalta vi.ljelmäkokoelmalta, so. the Institute for Fermentation, Osaka, Japani (IFO) tai the American Type 20 Culture Collection, USA (ATCC), annetuilla talletusnumerollia.
Nocardia autotrophica kannat, joita merkitään talletusnumerollla FERM P-6181, FERM P-6182 ja FERM P-6183, ovat kaikki tämän mikro-organismin uusia kantoja, jotka on hiljakkoin eristetty maa-aineksesta ja jotka on 25 16. lokakuuta 1981 liitetty kokoelmaan Fermentation Research
Institute:ssa, Ibaraki-Ken, Japani (FERM).
Vastikään eristettyjen mikro-organismien morfologiset ja fysiologiset ominaisuudet määritettiin käyttäen tavanomaista väliainetta ja 30 Shirlingin ja Gottliebin kuvaamia menetelmiä International Journal of Systematic Bacteriology 16, 313-340 (1966) yhdessä useiden lisä-testien kanssa. Havaintoja viljelmästä tehtiin inkuboinnin jälkeen 28°C:8sa 2 viikkoa. Käytetyt värien nimet merkittiin "Guide to Colour Standard"-käsikirjan mukaan (Nippon Shikisai Kenkyushorn, Tokio, 35 Japani, julkaisema käsikirja). Viljelmien omineisuuksia verrattiin ak-tlnomysetaalien erilaisten tunnettujen Actinomycetes lajien ominaisuuksiin, joita Wakeman kuvaa teoksessa "The Actinomycetes, Voi. 2", Shir- 6 70925 1 ling ja Gottlieb julkaisussa "The ISP Report" ja joita kuvataan "Bergey's Manual of Determinative Bacteriology", 8. painoksessa ja muussa viimeaikaisessa kirjallisuudessa, joka käsittelee suvun Nocar-dlaceae taksonomiaa. Uusia mikro-organismeja merkitään niiden FERM-5 talletusnumeroilla.
Taulukossa 1 on esitetty edellä mainittujen uusien mikro-organismien morfologisia ominaisuuksia.
10 TAULUKKO 1
FERM FERM FF.RM
P-6181 P-6182 P-6183 15_____________
Itiöketjun morfologia RF RF RF
Haaroittuminen vaatimaton vaatimaton vaatimaton
Fragmentoltuminen kyllä kyllä kyllä
Segmentoituneiden rihmojen 20 (hyphae) pintarakenne (itiöt) sileä, sileä, sileä, kiiltävä kiiltävä kiiltävä
Muut elimet solmukoh- solmu- ei tla, pesä- kohtia kemäistä 25 kasvustoa (tangles) ----- — - - ------- * - ' . j—....
RF - Rectus Flexlbills 30
Kalkki uudet kannat osoittivat hyvää kasvua vaihteleviesa väliaineissa.
Kannalla FERM P-6181 oli valkoisia plntarihmastoja (aerial mycelia) väriltään kellanharmaasta vaalean kellanoransslln kasvuston päällä. Tle-35 tylssä liuoksissa havaittiin vaalea, kellanruskea, liukoinen pigmentti, mutta vain vähäisessä määrin.
7 70925 1 Kannalla FERM P-6182 oli ruskean valkoisesta vaalean kellanoransslln värisiä pintarlhmaetoja harmahtavan kellanruskean kasvuston päällä. Mitään liukoista pigmenttiä el havaittu.
5 Kannalla FERM P-6183 oli väriltään ruskean valkoisesta vaalean kellanoransslln värinen kasvusto, ja violetlnruskeita täpliä havaittiin, kun viljely edistyi. Rusehtavan harmaita pintarilimastoja oli mukana kalkkien väliaineiden päällä paitsi hiiva-mallas-väliaineella.
10 Viljelmien ominaisuudet 14. viljelypäivänä 28°C:ssa eri väliaineissa on esitetty taulukossa 2. Taulukossa käytetyt lyhenteet ovat seuraa-vat: G * kasvusto; 15 AM pintarihmasto; R « kääntöpuoli; SP - liukoinen pigmentti.
20 25 30 35 1 TAULUKKO 2 8 70925 Väliaine FERM P-6181 FERM P-6182 FFIRM P-6183 5 ________________________________________________________
Hiiva- G Erittäin hyvä, Erittäin hyvä, Erittäin hyvä, mallas- vaalean kellan- ruskea (6-4-1) ruskean valkeasta agari ruskea (6-7-9) (2-9-8) harmah- (ISP 2) tavan punarus- 10 keaan (4-3-5) AM Runsas, Runsas, Jälkiä, valkoinen rusehtavan valkoinen valkoinen (2-9-7) 15 R Kiilloton, Ruskea (4-4-7) Ruskean valkeasta kellanoranssi (2-9-8) harmahta- (8-8-8) van punaruskeaan (4-3-5) SP Kellanruskea Ei lainkaan Ei lainkaan 20 (8-7-9)
Kaura- G Hyvä, vaalean Erittäin hyvä, Erittäin hyvä, jauho- ruskea (2-8-9) vaalean kellan- tumman punaruskea agari oranssi (2-9-9) (4-3-4) 25 (ISP 3) AM Kohtalainen, Runsas, vaalean Kohtalainen, hiu- valkea kellanruskea kan vaalean pu- (2-9-9) nainen (2-8-4) R Kellertävän Vaalean kellan- Ruskean violetti 30 ruskea (4-7-9) ruskea (4-8-9) (3-3-2) SP Vaalean kellan- Ei lainkaan F.i lainkaan ruskea (4-8-9) 35 1 TAULUKKO 2 (jatkuu) 9 70925 - - - ------- ------------ — i Väliaine FERM P-6181 FERM P-6182 PERM P-6183 5 _________________________________________________________________ Tärkkelys/ Γ. Hyvä, keller- Niukka, ke Her- Erittäin hyvä, epäorg. tävän harmaa tavan harmaa ruskean violetti suola (2-9-10) (1-9-10) (3-3-2) - agari AM Kohtalainen, Runsas, vaalean Hyvä, kiiltävän 10 (ISP 4) valkoinen kellanoranssi ruskean harmaa (2-9-9) (2-8-2) R Vaalean keltai- Vaalean kellan- Tumman punaruskea nen (3-9-10) oranssi (2-9-9) (4-3-4) SP Ei lainkaan Ei lainkaan Ei lainkaan 15 __________________________________________________________________________ . Glyseriini/ G Hyvä, vaalean Hyvä, harmahta- Erittäin hyvä, asparagiini ruskea (2-8-9) van kellan- vaalean ruskeasta -agari ruskea (4-5-7) (2-9-9) ruskean (ISP 5) violettiin (3-3-2) 20 AM Runsas, Runsas, ruskean Runsas, valkoinen valkoinen valkoinen (1-8-6) R Vaalean kellan- Ruskea (4-4-6) Vaalean kellanruskea (6-8-9) oranssista (2-9-9) 25 harmahtavan puna ruskeaan (4-3-6) SP Vaalean kellan- Ei lainkaan Ei lainkaan ruskea (6-9-11) 30 Ty rosiini- G Erittäin hyvä, Erittäin hyvä, Hyvä harmahtavan agari vaalean keltai- harmahtavan ruskea (4-6-6) (ISP 7) sen oranssi kellanruskea (3-8-8) (4-5-7) AM Runsas Runsas, ruskean Jälkiä, 35 valkoinen valkoinen valkoinen (2-9-7) _____________ 10 1 TAULUKKO^ (jatkuu) 70925 Väliaine FERM P-6181 FERM P-6182 FFRM P-6183 5 ________________________________________________________________ R Kellertävän Kirkkaan Vaalean kellan- harmaa (1-9-10) ruskea (6-5-7) oranssista (2-9-9) ruskeanviolettiin i (3-3-2) | 10 SP J Vaalean kellan- Ki lainkaan F.i lainkaan j I ruskea (6-7-9) |
j ‘ I
Sakkaroosi- G | Hyvä, vaalean Heikko, Heikko, nitraatti- j kellanruskea vaalean kellan- vaalean kellan- 15 agari I (2-9-9) ruskea (2-9-9) oranssi (2-9-9) i i AM j Kohtalainen, Runsas, Kohtalainen, ! valkoinen ruskean valkoi- valkoinen - nen (2-9-7) R Kellertävän Ruskean valkoi- Vaalean kellan- 20 I I harmaa (1-9-10) nen (1-9-6) oranssi (2-9-9) j SP 1 Fi lainkaan Ki lainkaan Ei lainkaan |
Glukoosi/ G Erittäin hyvä, Hyvä, harmahta- Erittäin hyvä, asparagiini 'vaalean kellan-jvan kellan- vaalean kellan- 25 -agari 'oranssi (2-9-9)!ruskea (4-5-7) oranssista (2-9-9) I ruskean violettiin ! (3-3-2) AM Kohtalainen, Runsas, kiiltä- Kohtalainen, ! valkoinen vän ruskean valkoinen _ i 30 | valkoinen ; (1-7-6) R , Vaalean kellan- Harmahtavan Vaalean kellan- ruskea (4-8-9) punaruskea oranssista (2-9-9) (4-3-6) harmahtavan puna- 35 ruskeaan (4-3-6) SP Vaalean kellan- Ei lainkaan Ei lainkaan ruskea (4-8-9) 1 TAULUKKO 2 (jatkuu) π 70925 Väliaine FFRM P-6181 FF.RM P-6182 FF.RM P-6183
Ravinto- G Hyvä, keller- Erittäin hyvä, Hyvä vaalean kel- agari tävän harmaa vaaleau kellan- lanoranssi (2-9-9) (2-9-10) ruskea (6-8-9) AM Kohtalainen, Vaalean kellan- Jälkiä, valkoinen Ί0 valkoinen oranssi (2-9-9) R Kellertävän Vaalean kellan- Vaalean kellan- harraaa (4-9-10) ruskea (6-8-9) oranssi (2-9-9) SP Ei lainkaan F.i lainkaan Ei lainkaan 15 Vesi- G Heikko, keller- Heikko, Heikko, vaalean agari tävän harmaa väritön ke 1lanoranssi (1-9-10) (2-9-9) AM Kohtalainen, Runsas, Kohtalainen, valkoinen valkoinen valkoinen 20 R Kellertävän Vaalean kellan- Vaalean kellan- harmaa (1-9-10) oranssi (2-9-9) oranssi (2-9-9) SP Ei lainkaan Ei lainkaan Ei lainkaan
Peruna/ G Heikko, keller- Heikko, Heikko, vaalean 25 porkkana- tävän harmaa väritön kellanoranssi 1 uute (1-9-10) (2-9-9) -agari AM Kohtalainen Kohtalainen, Kohtalainen, valkoinen valkoinen valkoinen 30 R Kellertävän Vaalean kellan- Vaalean kellan- harmaa (1-9-10) oranssi (2-9-9) oranssi (2-9-9) SP Ei lainkaan Ei lainkaan Ei lainkaan 35 12 70925 1 Uusien kantojen fysiologiset ominaisuudet on esitetty taulukossa 3. Tumman pigmentin muodostuinlskoe tehtiin seuraavlssa kolmessa väliaineessa: 5 Väliaine 1: Tryptoni-hlivauute-lihaliemi (ISP 1); Väliaine 2: Peptoni-hilvauute-rauta-agari (ISP 6); Väliaine 3: Tyrosiinlagarl (ISP 7).
TAULUKKO 3 10
FERM FERM FERM
P-6181 P-6182 P-6183 15 Nitraatin pelkistys - - Tärkkelyksen hydrolyysl - -
Urean hajoaminen + +
Lysoteyymien kestävyys +
Tumman pigmentin muodostus 20 Väliaine 1 - - Väliaine 2 - - Väliaine 3 -
Happojen tuottaminen arablnoosista + - + 25 ksyloosista + +
raffinoosista + NG
- - negatiivinen; 30 + = positiivinen; NG « el kasvustoa.
Hiilihydraattien hyväksikäyttö uusilla kannoilla on esitetty taulukossa 4. Käytetty väliaine oli Pridham-Cottlieb-agaria (ISP 9), ja 35 määritys tehtiin viljelyn jälkeen 28°C:ssa 14 päivän ajan.
70925 1 TAULUKKO 4
FERM PERM FF.RM
5 P-6181 P-6182 P-6183 D-glukoosi + + + D-arablnooei +-+ D-ksyloosl +-+ 10 D-fruktoosi +++ L-ramnoosi +-+
Inositoli +++
Sakkaroosi + --
Raffinoosi +-- 15 D-mannitoli +++
Vertailu --- + = hyödynnetty; 20 + => hiukan hyödynnetty; - e ei hyödynnetty.
Paperikromatografia-analyyseja tehtiin kunkin kolmen, uuden suvun hap-pohydrolyysituotteelle B. Beckerin et ai. {^Applied Microbiology, 13, 25 236 (1965)J ja M.P. LeChevalier'n et ai. [[H. Prauset, "The Actino- mycetales", 311 (1970)J menetelmän mukaan. Meso-2,6-diaminopimeeli-happoa löydettiin soluseinlstä, ja arabinoosia ja galaktoosia löydettiin koko solun sakkarilnln aineosina, mikä siten varmistaa sen, että kullakin suvulla olivat solun osat tyyppiä TV-A.
30 Näiden taksonomisten tutkimusten tulokset osoittavat, että kaikki kannat kuuluvat sukuun Nocardla. Nocardlan tunnetuista lajeista uusien kantojen ominaisuudet ovat lähimpänä Nocardla autotrophican ominaisuuksia International Journal of Systematic Bacteriology, 30, 337 (1980) 35 paitsi ainoastaan niiden erojen kohdalla, jotka on esitetty taulukossa 5. Taulukossa merkit ja lyhenteet ovat samoja kuin vastaavissa taulukoissa 1-4 annetut.
14 70925 1 TAULUKKO 5 FERM FERM FERM Nocardia 5 Koe P-6181 P-6182 P-6183 autotrophica___
Kasvuston AM valkoinen valkoisesta valkoi- valkoisesta värit vaalean koisesta vaalean kellan- rusehta- keltaiseen 10 oranssiin van har maaseen C kellertävän harmahtavan ruskean vaalean kel- barmaasta kellan- violetti täisestä vaalean kel- ruskea kellertävän 15 lan oranssiin harmaaseen
Urean hajoaminen + - + +
Kestävyys 20 lyeotsyymille - + - -
Happojen tuotto: arablnooslsta + - + + ksyloosista + - + + 25 raffinoosista + - NG -
Hyväksikäyttö: arabinoosl + - + + ksyloosi + _ + + 30 ramnoosl + - + + sakkaroosi + - - + raffinoosi + + 35 Kanta FERM P-6181 ja Nocardla autotrophica muistuttivat toisiaan morfo logisilta, kasvuetollisiltä ja fysiologisilta ominaisuuksiltaan, ja siten pääteltiin, että tämä kanta kuului lajiin Nocardia autotrophica.
15 70925 1 Kanta FERM P-6182 poikkesi Nocardla autotrophlcasta urean hajottamisessa, kestävyydessä lysotsyymeille, happojen tuottamisessa hiilihydraateista ja hiilihydraattien hyväksikäytössä. Kuitenkaan nämä erot eivät ole riittäviä, jotta kanta FERM P-6182 tulisi käsittää uudeksi lajiksi; 5 sen tähden sitä pidetään Nocardla autotrophican uutena alalajina. Vastaavasti tämä kanta nimettiin Nocardla autotrophica subsp. canberrica subsp. nov.:kel.
Subsp. FERM P-6183 poikkesi Nocardla autotrophlcasta kasvustonsa värissä 10 ja ramnoosln, sakkaroosin ja raffinoosln hyväksikäytössä. Samoin nämä erot eivät olleet riittäviä, jotta tämä kanta tulisi käsittää uudeksi lajiksi, ja siksi sitä pidetään Nocardla autotrophican alalajina. Se on nimetty Nocardla autotrophica subsp. amethystlna subsp. nov.:ksl.
15 Suvun Nocardla erilaisista mikro-organismeista, joita voidaan käyttää keksinnön menetelmässä, me erityisesti pidämme parempana käyttää näitä kolmea uutta kantaa, toisin sanoen Nocardla autotrophica FERM P-6181, Nocardla autotrophica subsp. canberrica FERM P-6182 tai Nocardla autotrophica subsp. amethystlna FERM P-6183.
20 Tämän keksinnön entsymaattinen hydroksylolntiprosessi voidaan suorittaa saattamalla ML-236B-yhdlste kosketukseen sukuun Nocardla kuuluvan mikro-organismin kanssa tai sen soluttaman, entsyymiä sisältävän uutteen kanssa.
25 Tämän keksinnön prosessi suoritetaan mieluummin jollakin kolmesta tavasta: (a) lisäämällä lähtöyhdlstettä ML-236B viljelmän väliaineeseen muunta- 30 van mikro-organismin viljelyn aikana, ja sitten jatkamalla viljelyä; (b) kokoamalla muuntavan mikro-organismin viljelmää, ja saattamalla kerätyt solut kosketukseen lähtöyhdlsteen ML-236B kanssa; tai 35 (c) valmistamalle solutonta, entsyymiä sisältävää uutetta muuntavan mikro-organismin soluista, ja yhdistämällä tämä uute lähtöyhdis-teen ML-236B kanssa.
i6 70925 1 Suvun Nocardia muuntavan mikro-organismin viljely voi tapahtua tavanomaisella tavalla tavanomaisessa vlljelmMn väliaineessa, joka sisältää ravintoaineita, jotka sellaisten mikro-organismien kanssa käytettäväksi hyvin tunnetaan. Siten, niinkuin hyvin tiedetään, sellainen 5 viljelmän väliaine sisältää assimiloituvan hiilen ja assimiloituvan typen lähteen ja usein epäorgaanisia suoloja. Esimerkit assimiloituvan hiilen lähteistä käsittävät glukoosin, sakkaroosin, tärkkelyksen, glyseriinin, hirssigelatiinin, melassit ja soijapapu öljyn. Esimerkit assimiloituvan typen lähteistä käsittävät soijapavun kuiva-aineen 10 (mikä käsittää karkeat ja hienot soijapapujauhot) , vehnänalkion, liha-uutteet, peptonin, maissiniiotusveden, kuivatun hiivan ja ammonium-suolat, kuten ammoniumsulfaatin. Jos on tarpeen, voidaan myös epäorgaanisia suoloja, kuten natriumkloridia, kaliumkloridia, kalsiutnkarbo-naattia tai fosfaatteja, sisällyttää mukaan.
15
Myös, jos halutaan, voidaan käyttää muita lisäaineita, jotka kykenevät edistämään hydroksylointientsyymin tuotantoa, sopivina kombinaatioina. Erityinen viljelytekniikka ei ole kriittinen keksinnön menetelmälle, ja mitä tahansa tavanomaisesti mikro-organismien viljelyyn käytettyä 20 tekniikkaa voidaan käyttää yhtäläisesti tämän keksinnön kanssa. Yleensä tietenkin käytettävä tekniikka valitaan ottamalla huomioon teollinen tehokkuus. Siten liuosviljelyä pidetään parempana, ja syväviljely-menetelmä on mukavin teolliselta näkökannalta.
25 Viljely suoritetaan tavallisesti aerobisissa olosuhteissa ja alueella 20-37°C olevassa lämpötilassa, vielä mieluummin 26-28°C:ssa.
Menetelmä (a) toteutetaan lisäämällä lähtöyhdistettä ML-236B viljelyvä-llalneeseen viljelyn kuluessa. Viljelyn aikana täsmällinen kohta, jol-30 loin lähtöyhdisteita lisätään, vaihtelee riippuen viljelyvälineestä, vällaineseoksesta, viljelyväliaineen lämpötilasta ja muista tekijöistä, mutta se on mieluummin sinä aikana, jolloin mikro-organismin hyd-rokeylointikapasiteetti alkaa lisääntyä, ja tämä on tavallisesti 2 tai 3 päivää mikro-organismin viljelyn aloittamisen jälkeen. Lisättävän 35 ML-236B-yhdisteen määrä on mieluummin 0,01-5,0 paino-% väliaineesta, vielä mieluummin 0,05-0,5, esim. 0,05-0,1, paino-Z. ML-236B-yhdisteen lisäämisen jälkeen viljelyä jatketaan aerobisesti tavallisesti lämpö- i7 70925 1 tilassa, joka on yllä esitettyjen rajojen sisällä. Viljelyä jatketaan tavallisesti 3-5 päivän ajan ML-236B-yhdlsteen lisäämisen jälkeen.
Menetelmässä (b) mikro-organismin viljely tapahtuu ensin olosuhteissa, 5 joissa saavutetaan maksimi hydrokaylointikapasiteetissa; tämä kapasiteetti saavuttaa tavallisesti maksimin 4-5 päivän välillä viljelyn aloittamisen jälkeen, vaikka tämä ajanjakso on vaihteleva riippuen väliaineen luonteesta ja lämpötilasta, mikro-orpanistnin lajista ja muista tekijöistä. Viljelmän hydroksylointikapasiteettia voidaan tark-10 käillä ottamalla näytteitä viljelmästä sopivin väliajoin, määrittämällä näytteiden hydroksylolntlkapasiteetti saattamalla ne kosketukseen ML-236B-yhdisteen kanssa vakio-olosuhteissa ja määrittämällä saatujen yhdisteiden M-4 ja M-4' määrä sekä merkitsemällä tämä kapasiteetti ajan suhteen kaaviona. Kun hydroksylolntlkapasiteetti on saavuttanut maksi-15 mipisteensä, viljely lopetetaan, ja mikrobisolut kerätään. Tämä voi tapahtua sentrlfugolmalla, suodattamalla tai samankaltaisilla erottelu-menetelmillä. Siten kerätyt viljeltävän mikro-organismin kokonaiset solut mieluummin pestään sitten sopivalla pesuliuoksella, kuten fysiologisella suolaliuoksella tai sopivalla puskuriliuoksella.
20
Suvun Nocardia mikro-organismin kerättyjen solujen saattaminen yhteen yhdisteen KL-236B kanssa suoritetaan yleensä vesiliuoksessa, esimerkiksi fosfaattlpuskurllluoksessa pH-arvossa 5-9. Reaktiolämpötila on mieluummin rajojen 20-45°C sisällä, vielä mieluummin 25-3U°C. ML-236R-25 yhdisteen konsentraatio reaktiolluoksessa on mieluummin alueen 0,01- 5,0 paino-% sisällä. Aika, joka sallitaan reaktiolle, on mieluummin 1-5 päivää, vaikka tämä voi vaihdella riippuen ML-23f>B-yhdisteen kon-sentraatiosta reaktloseoksessa, reaktlolämpötilasta, mikro-organismin hydroksylointikapasiteetiata (mikä voi tietenkin vaihdella lajista 30 lajiin ja mikä myös, kuten yllä kerrottiin, riippuu viljelyajasta) ja muista tekijöistä.
Soluton, entsyymiä sisältävä uute, jota käytetään menetelmässä (c), voidaan saada hajoittamalla koko mikro-organismin solut, jotka on saa-35 tu niin kuin kuvattiin menetelmän (b) yhteydessä, fysikaalisin tai kemiallisin keinoin, esimerkiksi jauhamalla tai ultraäänikäsittelyllä hajoitetun solumassan aikaansaamiseksi tai käsittelemällä pinta-aktiivi- ie 70925 1 eella aineella tai entsyymillä soluliuokeen tuottamiseksi. Lopullinen soluton uute yhdistetään sitten lähtöyhdisteen ML-236B kanssa samoissa olosuhteissa, kuten kuvattiin yllä menetelmän (b) yhteydessä.
5 Muuntoreaktion loppuunsaattamisen jälkeen millä tahansa yllä mainitulla menetelmällä voidaan haluttu yhdiste suoraan eristää, erottaa tai puhdistaa tavanomaisin keinoin. Esimerkiksi erottaminen ja puhdistaminen voidaan suorittaa suodattamalla reaktloseos, uuttamalla saatu suodos veteen liukenemattomalla orgaanisella liuottImellä (kuten etyy-10 lisulfaatilla), tislaamalla liuotin uutteesta, viemällä saatu raaka-tuote kromatografiapylvääseen (esimerkiksi silikageeli tai aluminium-oksidi) ja eluolmalla pylvästä sopivalla elucntilla.
Milloin mikro-organismilla muunnettu yhdiste M-4 tai M-4' ei ole tuon 15 yhdisteen haluttu muoto, voidaan konversloreaktlon tuote sitten saattaa yhteen tai useampaan jatkoreaktioon, kuten hydrolyysiin, suolan muodostamisreaktioon, esteröintiin tai laktonlsointlin, tavanomaisilla menetelmillä, kuten tässä jäljempänä kuvataan. Sellaiset llsäreak-tiot voidaan sovittaa yllä kuvattujen erottelu- ja puhdistusvaibeita 20 ennen, niiden jälkeen tai niiden aikana, mieluummin näiden vaiheiden aikana.
Keksinnön menetelmässä aktiivisella hydroksylointientsyymillä ei ole itsessään vaikutusta ML-236B-yhdisteen karboksyyliryhmään, ja siten, 25 kun muut tekijät ovat samat, ML-236B-laktoni antaisi (M-4)- ja/tai (M-4’)-laktonia, ML-236B-karboksyylihappo antaisi (M-4)- ja/tai (M—4*) — karboksyylihappoa ja ML-236B-karboksyylihapon suola tai esteri antaisi (M-4)- ja/tai (M-4')-karboksyylihapon samaa suolaa tai esteriä. Kuitenkin tähän voidaan vaikuttaa muilla tekijöillä, erityisesti reaktio-30 seoksen pH-arvolla, tavalla, mikä on ennustettavissa tavallisilla kemian laeilla. Lähtöyhdiste ML-236B voi olla kaavan (TI) vapaa ML-236B-karboksyylihappo, sen vastaava kaavan (ITa) laktoni tai suola (esim. metalli-, aminohappo- tai amiinin suola) tai sen esteri (erityisesti alkyylieeteri).
Parempina pidettyjä metalllsuoloja ovat suolat alkallmetallien kanssa, kuten natrium tel kalium, suolat maa-a.1 kallmetal 1 ien kanssa, kuten 35 i9 70925 1 kalsium, tai suolat muiden metallien kanssa, kuten magnesium, alumiini, rauta, sinkki, kupari, nikkeli tai koboltti, joista alkalimetalli-, maa-alkalimetalli-, magnesium- ja alumlniumsuoloja pidetään parempina, ja natrium-, kalsium- ja alumlniumsuoloja pidetään parhaimpina.
5
Parempina pidettyjä aminohappoja aminohapon suolojen muodostamiseksi ovat emäksiset aminohapot, kuten arglnllni, lysllnl, hlstldilnl, •<,y$-diaminobutyyrihappo tai ornltllnl.
10 Parempina pidetyt amiinit amlinlsuolojen muodostamiseksi käsittävät t-oktyyliamilnln, dibentsyyllamllnln, dikloorlheksyyllamllnln, morfo-lilnln, D-fenyyliglysilnin alkyyHesterit ja D-glukoosiamlinin.
ML-236B-esterit ovat mieluummin alkyyllestereitä, kuten metyyli-, 15 etyyli-, propyyll-, lsopropyyli-, butyyli-, isobutyyli- tai pentyyli-estereltä, joista metyyliesterlä pidetään parempana. Kuitenkin voidaan käyttää multa estereitä, jos halutaan.
ML-236B:n lähtömateriaaleista pidetään erityisesti parempana alkall-20 metalllsuoloja, esim. natrium- tai kallumsuoloja, natrlumsuolaa pidettäessä parhaimpana, sillä me olemme havainneet, että se antaa yhdisteen ML-236B parhaan muuntumisen toivotuksi M-4- tai M-4'-yhdisteeksi.
Milloin tämän keksinnön entsymaattlsella hydroksylointlmenetelmällä 25 saatu tuote on kaavan (I) karboksyyllhapon suola, voidaan itse vapaa karbokeyylihappo saada säätämällä suodoksen pH arvoon 4 tai alemmas, mieluummin arvoon 3-4. Mitä tahansa orgaanista happoa tai mineraali-happoa voidaan käyttää ottamalla huomioon, ettei sillä ole mitään haittavaikutuksia haluttuun yhdisteeseen. Esimerkit monista hapoista, 30 jotka ovat sopivia, käsittävät trifluorietikkahapon, etlkkahapon, kloorlvetyhapon ja rikkihapon. Tämä karbokeyylihappo voi itse olla haluttu tuote, tai se voidaan saattaa, ja mieluummin saatetaan, jatko-reaktlolhln, kuten jäljempänä kuvataan, valinnan mukaan sellaisten käsittelyjen jälkeen kuin uuttaminen, pesu ja dehydraatio.
Kaavan (I) karboksyyllhappojen metalllsuoloja voidaan saada saattamalla valitun metallin hydroksidia, karbonaattia tai samankaltaista reaktli- 35 20 70 9 2 5 1 vista yhdistettä vesiliuoksessa kosketukseen kaavan (I) karboksyyliha-pon kanssa. Käytettävä vesiliuos on mieluummin vettä tai se voi olla veden ja orgaanisen liuottimen seos, mieluummin alkoholin (kuten meta-noli tai etanoli), ketonln (kuten asetoni), allfaattisen hiilivedyn 5 (kuten heksaani) tai esterin (kuten etyyliasetaatti). Erityisesti me pidämme parempana käyttää hydrofUlisen orgaanisen liuottimen ja veden seosta. Sellaisten reaktioiden annetaan tapahtua tavallisesti ympäristön lämpötilassa, mutta ne voivat tapahtua, jos halutaan, kuumentamalla.
10 Kaavan (I) karboksyyllhappojen amiinisuoloja voidaan saada saattamalla kosketukseen amiini vesiliuoksessa kaavan (I) karboksyylihapon kanssa. Sopivat vesiliuokset käsittävät veden ja veden seokset alkoholien (kuten metanoli tai etanoli), eettereiden (kuten tetrahydrofuraani), nitrii-lien (kuten asetonltrllll) tai ketonien (kuten asetoni) kanssa; me eri-15 tyisesti pidämme parempana käyttää vesipitoista asetonia liuottimena tätä reaktiota varten. Reaktio suoritetaan mieluummin pH:ssa 7-8,5 ja mieluummin ympäristön lämpötilassa tai sen alapuolella, vielä mieluummin lämpötilassa 5-10°C. Reaktio menee heti loppuun. Vaihtoehtoisesti kaavan (I) karboksyylihapon metallisuola (joka on voitu saada niin kuin 20 yllä kuvattiin) voidaan liuottaa vesiliuokseen, minkä jälkeen lisätään halutun amiinin mlneraalihapon suolaa (esimerkiksi kloorivetyhapon suolaa) käyttäen samoja reaktio-olosuhteita kuin jos amiini itse reagoisi kaavan (1) karboksyylihapon kanssa, ja haluttu tuote saadaan sitten suolanvalhtoreaktiolla.
25
Kaavan (1) karboksyyllhappojen aminohapon suoloja voidaan saada saattamalla vesiliuoksessa oleva aminohappo kosketukseen kaavan (1) karboksyylihapon kanssa. Sopivat vesipitoiset liuottimet käsittävät veden ja veden seokset alkoholien (kuten metanoli tai etanoli) tai eetterien 30 (kuten tetrahydrofuraani) kanssa. Reaktio suoritetaan mieluummin kuumentamalla, esimerkiksi lämpötilassa 50-60°C.
Kaavan (I) karboksyyllhappojen eetereltä, mieluummin alkyylestereltä, voidaan saada saattamalla kaavan (I) karboksyylihappo kosketukseen sopi-35 van alkoholin kanssa. Me pidämme parempana suorittaa tämä reaktio hap-pokatalyytin kanssa, esimerkiksi mlneraalihapon (kuten suolahappo tai 2i 70925 1 rikkihappo), Lewis'n hapon (esimerkiksi boriumtrifluoridi) tai ionin-vaihtohartein kanssa.
Tähän reaktioon käytettävä liuotin ei ole kriittinen, kun otetaan huo-5 mioon, ettei se vaikuta reaktiota haittaavasti; sopivat liuottimet käsittävät bentseenln, kloroformin ja eetterit. Vaihtoehtoisesti voidaan haluttu tuote saada saattamalla kaavan (I) karboksyylihappo kosketukseen diatsoalkaanln kanssa, missä alkaaniosa voi olla substituoltu tai subs-tituoimaton. Tämä reaktio toteutetaan tavallisesti saattamalla koske-10 tukseen happo diatsoalkaanln eetterlpitolsen liuoksen kanssa. Seuraavana vaihtoehtona voidaan esteriä saada liittämällä kaavan (1) karboksyyli-hapon metallisuola halogenidin, mieluummin alkyyllhalogenidin, kanssa sopivassa lluottimessa; parempina pidetyt liuottimet käsittävät dimetyy-liformamidin, tetrahydrofuraanin, dlmetyylisulfoksldln ja asetonin.
15 Kaikki reaktiot esterien tuottamiseksi suoritetaan mieluummin lähes ympäristön lämpötilassa, vaikka jos reaktlomenetelmän luonne vaatii, voidaan reaktiot suorittaa kuumentamalla.
Kaavan (I) karboksyyllhappojen laktoneja voidaan saada saattamalla 20 kaavan (1) karboksyylihappo kosketukseen katalyyttisen määrän kanssa happoa, joka voi olla orgaaninen tai epäorgaaninen. Me pidämme parempana käyttää sellaisia orgaanisia ja mineraallhappoja kuin trifluorietikka-happo, suolahappo ja rikkihappo. Tämä reaktio suoritetaan mieluummin suunnilleen ympäristön lämpötilassa.
25
Esimerkit yhdisteiden M-A ja M-A' suoloista ja estereistä, jotka on valmistettu keksinnön menetelmällä, sisältävät yllä annetut ML-236B:n suolat ja esterit käytettäväksi lähtöaineena.
30 Siten saadut johdannaiset M-A ja M-A' voidaan eristää, erotella tai puhdistaa tavanomaisilla keinoilla, esimerkiksi adsorptiolla kantaja-aineelle (kuten aktiivihiili tai slllkageell) tai ioninvaihtokromato-grafialla tai geelisuodatuksella Sephadex-pylväällä (tavaramerkki) tai uuttamalla orgaanisella liuottimelle, kuten eetterillä, etyyllasetaa-35 tiliä tai kloroformilla; jos halutaan, ja sitä tavallisesti pidetään parempana, voidaan käyttää näiden tekniikkojen yhdistelmää.
22 70925 1 Isomeerit M-4 ja M-4' voidaan erotella toisistaan joko konversioreak-tion loppuunsaattamisen jälkeen tai missä tahansa sopivassa kohdassa reaktioiden aikana tai yllä kuvattujen erottelu- tai puhdistusprosessien aikana.
5
Keksintöä kuvataan edelleen seuraavilla esimerkeillä.
Esimerkki 1 10 Nocardia autotrophica subsp. amethystina FERM P-6183:n soluja ympättiin vinopintaviljelmältä platinasilmukan avulla jokaiseen kahteenkymmeneen 500 ml:n Erlenmeyer-pulloon, joista jokainen sisälsi 100 ml viljelyliuosta, jolla oli seuraava kokoonpano (prosentit ovat paino/ tilavuus): 15
Glukoosi 1,0%
Peptoni 0,2%
Lihauute 0,1%
Hiivauute 0,1% 20 Maissinliotusvesi 0,3%
Vesijohtovesi loput (pH:ta ei säädetty)
Viljelmää ravisteltiin 26°C:esa ja 220 r.p.rarssä kahden päivän ajan, 25 missä ajassa lisättiin natrium-(ML-236B)-karboksylaattia loppukonsen-traatioon 0,05% (paino/tilavuus) asti. Inkubointia jatkettiin 26°C:ssa ja 220 r.p.m:ssä seuraavat 5 päivää.
Viljelyn loppuun saattamisen jälkeen reaktioseos suodatettiin, ja suo-30 doksen pH säädettiin arvoon 3 lisäämällä trifluorietikkahappoa. Happamaksi tehty suodos uutettiin sitten kolme kertaa kullakin kerralla 1 litran kanssa etyyliasetaattia, mikä antoi uutteet, jotka sisälsivät (M-4)- ja (M-4')-karboksyylihapon seosta. Otettiin näytteitä näistä uutteista, ja niihin käytettiin ohutkerroskromatograflaa silika-35 geelilevyllä Art 5715 (valmistanut Merck / Co. Tnc.), kehitettiin 50:50:3-tllavuussuhteessa bentseenin, asetonin ja etikkahapon seosta. (M-4)-karboksyylihapon Rf-arvo oli 0,45, ja (M-4')-karboksyylihapon 23 70925 1 Rf-arvo oli 0,46.
Koko loppu-uute pestiin kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella, minkä jälkeen lisättiin ekvivalentti moolimäärä diatsometaanin eetteripitois-5 ta liuosta huoneenlämpötilassa. Seoksen annettiin seistä 30 minuuttia, minkä jälkeen se haihdutettiin kuivaksi alipaineessa. Jäännös laitettiin Lobarin kolonniin (Si 60, valmistanut Merck / Co. Inc., koko A), mitä sitten eluoltiin 1:1 tilavuussuhteise]la seoksella bentseeniä ja etyyliasetaattia. Saatiin erotellut fraktiot, jotka sisälsivät metyyii-10 (M-4)-karboksylaattia ja metyyli-(M-4')-karboksylaattia. Nämä fraktiot konsentroitiin haihduttamalla alipaineessa, mikä antoi 320 g metyyli-(M-4)-karboksylaattia ja 11 mg metyyli-(M-4’)-karboksylaattia, molemmat värittömien Öljyjen muodossa.
15 Korvaamalla diatsometaani yllä kuvatussa menettelyssä muilla sopivilla diatsoalkaaneilla voidaan saada muita (M-4)-karboksyylihapon ja (M-4')-karboksyylihapcn estereitä.
Metyyli-(M-4)-karboksylaatln fysikaalisia ominaisuuksia 20 kuvataan seuraavaksi.
Ydinmagneettinen resonanssispektri (deuteriumkloroformissa käyttäen tetrametyylisilaania sisäisenä standardina, 200 MHz:ssa), & ppm: 25 0,88 (3H, tripletti, J * 7,3 Hz); 0,89 (3H, dupletti, J - 6,5 Hz); 1,12 (3H, dupletti, J * 6,8 Hz); 1,1-1*7 (10H, multipletti); 30 2,34 (1H, sekstetti, J « 7 Hz); 2,3-2,5 (2H, multipletti); 2,49 (2H, dupletti, J * 6,4 Hz); 2,58 (1H, multipletti); 3,72 (3H, singletti); 35 3,78 (1H, multipletti); A,25 (1H, kvintetti, J - 7 Hz); 4,40 (1R, multipletti); 24 70925 1 5,42 (1H, multipletti); 5,56 (1H, multipletti); 5.90 (1H, dupletti dupletelsta, J ·= 9,8 ja 5,6 Hz); 5,99 (1H, dupletti, J = 9,8 Hz), 5
Massaspektri: Silyloinnin jälkeen N ,Q-bis(trimetyylisilyyli)t:rif lnori-asetamidilla tehtiin mittaus käyttäen D-300 -tyyppistä laitetta, Jonka on valmistanut Nihon Electronics Co.
10 M/e: 654 (M+), 552, 462, 372, 290, 272, 233, 231.
Ultraviolettiabsorptiospektri (etanoli) λ nm: max 230,1, 237,3, 246,4.
15 Infrapuna-absorptiospektri (ohut kalvo) ^max cm 3400, 2950, 1730.
Ohutkerroskromatografia: Silikageelilevyllä Art 5715, valmistanut Merck / Co. Inc., käyttäen 1:1 tilavuussuhteessa bentseenln ja aseto-20 nln seosta kehityslluoksena.
Rf-arvo: 0,88.
Seuraavaksi kuvataan mgtyyli-(M-4*)-karboksylaatin fysikaalisia ominaisuuksia.
25
Ydinmagneettinen resonansslspektri (deuteriumkloroformlssa käyttäen tetrametyylisilaanla sisäisenä standardina, 60 MHz:ssa) S ppm: 30 3,70 (3H, singletti); 5,50 (1H, leveä singletti); 5,75 (1H, leveä singletti); 5.90 (1H, kvartetti); 6,01 (1H, dupletti).
Ultraviolettiabsorptiospektri (metanoli) Λ nm: max 230, 238, 246.
35 25 70925 1 Infrapuna-absorptlospektri (ohut kalvo) ^max cm *: 3400, 1730.
Massaspektri: Silyloinnin jälkeen N,Q~hls(trimetyyllsllyyll)trifluorl-5 asetamldilla tehtiin mittaus käyttäen D-300-tyyppistä laitetta, jonka on valmistanut Nihon Electronic Co.
M/e: 654 (M+).
Alkuaineanalyysi: 10 Laskettu Co.Hoo0,:lie: C, 65,73%; H, 8,73%.
Zh jo / Löydetty: C, 65,55%; H 8,79%.
Esimerkki 2 15 Esimerkissä 1 kuvattu menettelytapa toistettiin, mikä antoi 1,9 litraa konversioreaktlon seosta. Tämän seoksen pH asetettiin sitten arvoon 3,0 lisäämällä trlfluorletikkahappoa, minkä jälkeen seosta uutettiin kolme kertaa, kullakin kerralla 1 litralla etyyliasetaattia, mikä antoi fraktion, joka sisälsi sekä (M-4)-karboksyylihappoa että (M-4')-20 karboksyylihappoa.
Tämä uute pestiin sitten kyllästetyllä natriumkloridiliuoksella, minkä jälkeen se kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla. Sitten lisättiin katalyyttinen määrä trifluorletikkahappoa laktonisoinnin alkaan-25 saamiseksi. Saatu seos pestiin sitten 5%:11a (paino/tilavuus) natrium-vetykarbonaatin vesiliuoksella, minkä jälkeen se kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla, ja sitten ee haihdutettiin kuivaksi, mikä antoi laktonifraktion.
30 Tämä laktonifraktlo laitettiin Lobarln kolonniin (Si 60, valmistanut
Merck / Co. Inc., koko A) Ja eluoitiln 7:3 tilavuuesuhtelsella bentsee-nin ja asetonin seoksella, mikä antoi erotetut fraktiot, jotka sisälsivät (M-4)-laktonia ja (M-4')-laktonia. Nämä fraktiot uudelleenkiteytet-tiin erikseen etyyliasetaatilla, mikä antoi 270 mg (M-4)-laktonia ja 35 8 mg (M-4')-laktonia.
Seuraavaksi esitetään (M-4)-laktonln fysikaalisia ominaisuuksia.
26 70925 1 Ydinmagneettinen resonanssispektri (deuteriumkloroformissa käyttäen tetrametyylisilaania sisäisenä standardina» 100 MHz:saa) 6 ppm: 5 4,38 (1H, multipletti); 4.41 (1H, multipletti); 4,62 (1H, multipletti); 5.41 (1H, multipletti); 5,58 (1H, multipletti); 10 5,90 (1H, kvartetti); 6,01 (1H, dupletti).
Ultraviolettiabsorptiospektri (metanoli) Tv nm: 230, 236,7, 244,6.
15
Infrapuna-absorptiospektri (ohut kalvo) U cm 3400, 2950, 1725.
Ohutkerroskromatografia: Silikageelilevyllä Art 5715, valmistanut 20 Merck / Co. Inc., käyttäen 50:50:3 tilavuussuhteessa bentseenin, asetonin ja etikkahapon seosta kehitysliuoksena.
Rf-arvo: 0,62.
Seuraavaksi kuvataan (M-4*)-laktonin fysikaalisia ominaisuuksia.
25
Ydinmagneettinen resonanssispektri (deuteriumklorofomissa käyttäen tetrametyylisilaania sisäisenä standardina, 100 MHz:ssa) S ppm: 30 4,25 (1H, multipletti); 4,60 (1H, multipletti); 5,50 (1H, multipletti); 5,75 (1H, multipletti); 5,90 (1H, kvartetti); 35 6,01 (1H, dupletti).
27 709 2 5 1 Ultraviolettiabsorptiospektri (metanoli) Λ χ nm: 230, 237, 245.
Infrapuna-absorptiospektri (KBr) ^max cm 5 3500, 1720.
Massaspektrl: M/e 406 (M+), 304, 286.
Optinen kiertokyky: 10 = = p>66, metanoli).
Sulamispiste: 141-143°C.
Alkuaineanalyysi: 15 Laskettu c23H34°6:lle: C, 67,95%; H, 8,43%.
Löydetty: C, 68,05%; H, 8,37%.
Ohutkerroskromatografia: Silikageelilevyllä Art 5715, valmistanut Merck / Co. Inc., käyttäen 1:1 tilavuussuhteessa bentseenin ja aseto-20 nin seosta kehityslluoksena.
Rf-arvo: 0,64.
Esimerkki 3 25 Esimerkissä 1 kuvattu menettelytapa toistettiin uuttamiseen asti, ja tämä mukaan lukien, kolmella etyyliasetaattierällä, mikä antoi uutteen, joka sisälsi sekä (M-4)-karboksyylihappoa että (M-4')-karboksyylihappoa.
Tämä uute siirrettiin sitten välittömästi 5%reen (paino/tilavuus) nat-30 riumvetykarbonaatln vesiliuokseen, ja seoksen pH asetettiin arvoon 7,0 lisäämällä 2N kloorivetyhappoa. Seos adsorboitiin sitten Dlalon HP-20-kolonniin (valmistanut Mitsubishi Chemical Industries). Kolonnia pestiin vedellä ja sitten eluoitiin 50 tilavuus-Zrlla vesipitoisella asetonilla, mikä antoi fraktion, joka sisälsi natrium-(M-4)-karboksylaattia. Tämä 35 pakastekuivattiin, mikä antoi 200 mg natrium-(M-4)-karboksylaattia.
28 70925 1 Seuraavaksi on kuvattu natrlum-(M-4)-karboksylaatin fysikaalisia ominaisuuksia.
Ydinmagneettinen resonanssispektri (deuterlummetanoliesa kHyttöen tetru-5 metyylisilaania sisäisenä standardina, 200 MHz:ssa) & ppm: 0,91 (3H, tripletti, J = 7,5 Hz); 0,92 (3H, duplettl, J = 7 Hz); 10 1*12 (3H, dupletti, J - 7 Hz); 1.1- 1,8 (10H, multipletti); 2,25 (1H, dupletti dupleteista, J >* 15 / 7,6 Hz); 2,34 C1H, dupletti dupleteista, J ** 15 / 5,5 Hz); 2.2- 2,4 (3H, multipletti); 15 2,48 (1K, multipletti); 3,68 (1H, multipletti); 4,07 (1H, multipletti); 4,28 (1H, multipletti); 5,36 (1H, multipletti); 20 5,48 (1H, dupletti dupleteista, J *= 3 / 2 Hz); 5,88 (1H, dupletti dupleteista, J 9,6 /5,3 Hz); 5,98 (1H, dupletti, J - 9,8 Hz).
Ultraviolettiabsorptiospektri (metanoli) ^max nm: 25 230,0, 237,2, 245,0.
Infrapuna-absorptiospektri (KBr) u cm 3400, 2900, 1725, 1580.
30 Ohutkerroskromatografla: Silikageelllevyllä Art 5715, valmistanut
Merck / Co. Inc., käyttäen 50:50:3 tilavuussuhteessa bentseenin, asetonin ja etyyliasetaatin seosta kehityslluoksena.
Rf-arvo: 0,45.
35 il 70925 29 1 Esimerkki 4
Esimerkeissä 1-3 kuvatut menettelytavat toistettiin, mutta käyttäen kantaa Nocardia autotrophica FERM P-6181 kannan Nocardia autotrophlca 5 subsp. amethystine FERM P-6183 tilalla; saatiin: 150 mg metyyli-(M-4)-karboksylaattia; 37 mg metyyli-(M-4')-karboksylaattia; 140 mg (M-4)-laktonia; 30 mg (M-4')-laktonia; ja 110 mg natrium-(M-4)-karboksylaattia. Kussakin tapauksessa tuotteiden ominaisuudet olivat samat esimerkeissä 1-3 saatujen vastaavien yhdisteiden kanssa.
10
Esimerkki 5
Silmukal1 itien viljelmää Nocardia autotrophica subsp. canberrica FERM P-6182 ympättiin kuhunkin kahteenkymmeneen 500 ml:n Erlenmeyer-pulloon, 15 joista jokainen sisälsi 100 ml liuosta, jolla oli seuraava kokoonpano (prosentit ovat paino/tilavuus):
Glyseriiniä 0,5%
Sakkaroosia 2,0% 20 Soijapapujauhoja 1,0%
Puristettua hiivaa 1,0%
Maissinliotusvettä 0,5%
Kobolttikloridia 0,001%
Vesijohtovettä loput 25 (pH 7,0)
Viljelmän ravistelua jatkettiin 26°C:ssa ja 220 r.p.mtssä 2 päivää, missä ajassa lisättiin natrium-(ML-236B)-karboksylaattia lopulliseen konsentraatioon 0,05% (paino/tilavuus) asti. Viljelyä jatkettiin sit-30 ten 26°C:ssa ja 220 r.p.m:ssä seuraavat 5 päivää. Konversiorenktion seos suodatettiin sitten, ja suodoksen pH asetettiin arvoon 3,0 lisäämällä kloorivetyhappoa. Seos uutettiin sitten kolme kertaa, kullakin kerralla 1 litralla etyyliasetaattia, mikä antoi uutteen, joka sisälsi sekä (M-4)-karboksyylihappoa että (M-4’)-karboksyyllhappoa, joiden 35 osoitettiin ohutkerroskromatografiällä olevan identtisiä esimerkin 1 vastaavien tuotteiden kanssa.
30 70925 1 Tätä uutetta käsiteltiin sitten edelleen, kuten esimerkissä 1 kuvattiin, mikä antoi 180 mg metyyli-(M-4)-karboksylaattia ja 110 mg metyyli-(M-4')-karboksylaattia.
5 Esimerkki 6
Esimerkissä 5 kuvattu menettelytapa toistettiin (M-4)-karboksyylihap-poa ja (M-4')-karboksyylihappoa sisältävän uutteen valmistukseen asti, ja käsittäen myfis valmistuksen. Tätä uutetta käsiteltiin sitten niin 10 kuin esimerkissä 2 kuvattiin, mikä antoi 170 mg (M-4)-laktonia ja 90 mg (M-4')-laktonia.
Esimerkki 7 15 Silmuksilinen viljelmää Nocardia autotrophica subsp. amethystina PERM P-6183 ympättiin kymmeneen 500 ml:n Erlenmeyer-pulloon, joista jokainen sisälsi 100 ml liuosta, jolla oli seuraava kokoonpano (prosentit ovat paino/tilavuue): 20 Glukoosia 1,0%
Peptonla 0,2%
Lihauutetta 0,1%
Hiivauutetta 0,1%
Vesijohtovettä loput 25 (pH:ta ei säädetty).
Viljelmää ravisteltiin 26°C:ssa ja 220 r.p.m:ssä 5 päivän ajan, minkä jälkeen kaikki mikrobisolut kerättiin erottamalla sentrifuugil-la. Kerätyt solut pestiin 0,1 M fosfaattipuskuriiiuoksella (pH 7,0), 30 ja sitten ne jälleen kerättiin ja suspendoitlln 900 ml:aan 0,1 M fos-faattipuskuriliuosta. Tähän suspensioon lisättiin natrium-(ML-236B)-karboksylaattia konsentraatioksi 0,5 g/100 ml, ja sitten seosta in-kuboitiin 26°C:ssa ja 220 r.p.mtssä 5 päivää. Tämän ajan päätyttyä konversioseos suodatettiin, Ja sen pH asetettiin arvoon 3,0 lisäämäl-35 lä kloorivetyhappoa. Seos uutettiin sitten kolme kertaa, kullakin kerralla 1 litralla etyyliasetaattia, mikä antoi uutetta, joka sisälsi (M-4)-karboksyylihappoa ja (M-4')-karboksyylihappoa, jotka tunnistet- 3i 709 2 5 1 tiin ohutkerroskromatografisesti ja joiden osoitettiin olevan samoja kuin esimerkin 1 vastaavat tuotteet.
Esimerkki 8 5
Esimerkissä 2 kuvattu menettelytapa toistettiin, paitsi että käytettiin taulukossa 6 lueteltuja mikro-organismeja; saadun (M-4)-laktonin määrä on sellainen kuin taulukossa esitetään.
10 TAULUKKO 6
Mikro-organismi (M-4)-laktonin määrä (mg) 15 Nocardla farclnlca ATCC 3318 7
Nocardla coellaca ATCC 17040 5
Nocardla autotrophlca IFO 12743 10
Nocardla asteroldes IFO 3424 15 20
Esimerkki 9
Soluja Nocardla autotrophlca subsp. amethystine FERM P-6183 ympättiin vinopintavlljelmältä platlnasllmukalla jokaiseen kahteenkymmeneen 25 500 ml:n Erlenmeyer-pulloon, joista jokainen sisälsi 100 ml viljely- liuosta, jolla on esimerkissä 7 annettu kokoonpano. Viljelmää ravisteltiin sitten 26°C:88a ja 220 r.p.m:ssä 2 päivän ajan, missä ajassa lisättiin natrium-(ML-236B)-karboksylaattia loppukonsentraatioksi 0,4Z (paino/tilavuus). Inkubointia jatkettiin 26°C:ssa ja 220 r.p.m:ssä 30 seuraavat 5 päivää. Esimerkissä 2 kuvattu menettelytapa toistettiin sitten, mikä antoi 2,9 g (M-4)-laktonla.
35
Claims (8)
1. Menetelmä kaavan (I) mukaisen lääkeaineena käyttökelpoisen yhdisteen: 5 HOOC^ γ H O Πχ 1° I L π (I) η2ο^ί; 9 h I
15 Her (missä λπΑΛοη edustaa ryhmää *^·ββ OH tai f/f IM OH), sen farma-20 seuttisesti hyväksyttävien suolojen ja esterien sekä vastaavien suljetun renkaan omaavien laktonlen valmistamiseksi, saattamalla yhdiste ML-236B, joka on kaavan II mukainen 25 .OH hooca y • H <«>
30 H3C/T 9 h? I I f 1 JZHz 35 33 7 0 9 2 5 1 (ML-236B)-karboksyylihappo tai sen suola, kosketukseen hydrokeylointient-syymln kanssa, tunnettu silti, että hydroksylointlentsyyml on tuotettu suvun Nocardla mikro-organismi11a; jos on tarpeen, viemällä saatu tuote yhteen tai useampaan reaktioon, joka on suolan muodostus, 5 esteröinti tai laktonlsolntl; ja eristämällä tuote reaktloseokseeta.
1 Patenttivaatimukset
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siltä, että kyseinen ML-236B-yhdlste saatetaan kosketukseen hydroksylolntlentsyymln kanssa viljelemällä suvun Nocardla mlkro-organlsmla liuoksessa, joka 10 sisältää ML-236B-yhdlstettä.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että suvun Nocardla mlkro-organlsmln kokonaiset solut saatetaan kosketukseen ML-236B-yhdlsteen kanssa. 15
4. Patenttivaatimuksen 1,2 tai 3 mukainen menetelmä, tunnettu siltä, että mainittu mikro-organismi on Nocardla auto- trophica, Nocardla asteroldes, Nocardla farclnlca tai Nocardla coellaca. 20
5. Patenttivaatimuksen 1,2 tai 3 mukainen menetelmä, tunnettu siltä, että kyseinen mikro-organismi on: Nocardla autotrophlca FERM P-6181 25 Nocardla autotrophlca subsp. canberrlca FERM P-6182 Nocardla autotrophlca subsp. amethystine FERM P-6183 Nocardla autotrophlca IFO 12743 Nocardla asteroldes IFO 3424 Nocardla farclnlca ATCC 3318 ja 30 Nocardla coellaca ATCC 17040.
6. Jonkin edellisistä patenttivaatimuksista 1-5 mukainen menetelmä, tunnettu siltä, että valmistetaan yhdiste M-4, missä edustaa ryhmää -^41 OH. 35 34 70925
7. Jonkin edellisistä patenttivaatimuksista 1-5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan yhdiste M-4', missä rWirvjpil, edustaa ryhmää HMUOH.
8. Jonkin edellisistä patenttivaatimuksista 1-7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että valmistetaan kaavan (I) mukaisen yhdisteen natriumsuola. 10 15 20 25 30 35 35 70925
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18664181 | 1981-11-20 | ||
| JP56186641A JPS5889191A (ja) | 1981-11-20 | 1981-11-20 | ３−ヒドロキシ−ｍｌ−２３６ｂ誘導体の製造法 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI823978A0 FI823978A0 (fi) | 1982-11-19 |
| FI823978L FI823978L (fi) | 1983-05-21 |
| FI70925B true FI70925B (fi) | 1986-07-18 |
| FI70925C FI70925C (fi) | 1986-10-27 |
Family
ID=16192138
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI823978A FI70925C (fi) | 1981-11-20 | 1982-11-19 | Foerfarande foer framstaellning av 3-hydroxy-ml-236b-derivaterm-4 och m4' |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4537859A (fi) |
| JP (1) | JPS5889191A (fi) |
| KR (1) | KR880002483B1 (fi) |
| AT (1) | AT387585B (fi) |
| AU (1) | AU551720B2 (fi) |
| BE (1) | BE895080A (fi) |
| CA (1) | CA1186647A (fi) |
| CH (1) | CH651065A5 (fi) |
| DE (1) | DE3242849A1 (fi) |
| DK (1) | DK159328C (fi) |
| ES (1) | ES517542A0 (fi) |
| FI (1) | FI70925C (fi) |
| FR (1) | FR2516935A1 (fi) |
| GB (1) | GB2111052B (fi) |
| IT (1) | IT1191235B (fi) |
| NL (1) | NL194373C (fi) |
| SE (1) | SE453996B (fi) |
| ZA (1) | ZA828535B (fi) |
Families Citing this family (95)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0215665B1 (en) * | 1985-09-13 | 1991-11-21 | Sankyo Company Limited | Hydroxy-ml-236b derivatives, their preparation and use |
| USRE36481E (en) * | 1986-06-23 | 2000-01-04 | Merck & Co., Inc. | HMG-CoA reductase inhibitors |
| US4940727A (en) * | 1986-06-23 | 1990-07-10 | Merck & Co., Inc. | Novel HMG-CoA reductase inhibitors |
| US5116870A (en) * | 1986-06-23 | 1992-05-26 | Merck & Co., Inc. | HMG-CoA reductase inhibitors |
| US4833258A (en) * | 1987-02-17 | 1989-05-23 | Merck & Co., Inc. | Intermediates useful in the preparation of HMG-COA reductase inhibitors |
| EP0306263B1 (en) * | 1987-09-02 | 1992-03-18 | Merck & Co. Inc. | Novel hmg-coa reductase inhibitors |
| US4997848A (en) | 1987-10-27 | 1991-03-05 | Sankyo Company, Limited | Octahydronaphthalene oxime derivatives for cholesterol synthesis inhibition |
| US4997755A (en) * | 1988-04-15 | 1991-03-05 | Merck & Co., Inc. | HMG-CoA reductase inhibitors produced by Nocardia sp. (MA 6455) |
| EP0337548A3 (en) * | 1988-04-15 | 1991-08-14 | Merck & Co. Inc. | HMG-COA reductase inhibitors produced by nocardia SP. (MA6455)(ATCC 53695) |
| US4963538A (en) * | 1988-06-29 | 1990-10-16 | Merck & Co., Inc. | 5-oxygenated HMG-CoA reductase inhibitors |
| US5041562A (en) * | 1989-06-09 | 1991-08-20 | Merck & Co., Inc. | 3-keto HMG-CoA reductase inhibitors |
| US5001241A (en) * | 1989-06-09 | 1991-03-19 | Merck & Co., Inc. | 3-KETO HMG-CoA reductase inhibitors |
| US4970231A (en) * | 1989-06-09 | 1990-11-13 | Merck & Co., Inc. | 4-substituted HMG-CoA reductase inhibitors |
| US4937259A (en) * | 1989-06-09 | 1990-06-26 | Merck & Co., Inc. | Antihypercholesterolemic compounds |
| US5010105A (en) * | 1989-06-09 | 1991-04-23 | Merck & Co., Inc. | Antihypercholesterolemic compounds |
| US4997849A (en) * | 1989-06-23 | 1991-03-05 | Merck & Co., Inc. | Microbial transformation of simvastatin |
| US4965200A (en) * | 1989-06-23 | 1990-10-23 | Merck & Co., Inc. | Process for the preparation of 3-keto, 5-hydroxy simvastatin analogs |
| US5112857A (en) * | 1990-09-04 | 1992-05-12 | Merck & Co., Inc. | Hmg-coa reductase inhibitor metabolites |
| NZ250609A (en) * | 1992-12-28 | 1995-07-26 | Sankyo Co | Hexahydronaphthalene esters and ring closed lactones; preparation and medicaments |
| IL108432A (en) * | 1993-01-29 | 1997-09-30 | Sankyo Co | DERIVATIVES OF 3, 5-DIHYDROXY-7- £1, 2, 6, 7, 8, 8a-HEXAHYDRO-2- METHYL-8- (SUBSTITUTED ALKANOYLOXY)-1-NAPHTHYL| HEPTANOIC ACID AND THEIR LACTONES, THEIR PREPARATION, AND PHARMACEUTICAL COMPOSITIONS CONTAINING THEM |
| US6043064A (en) * | 1993-10-22 | 2000-03-28 | Bristol-Myers Squibb Company | Enzymatic hydroxylation process for the preparation of HMG-CoA reductase inhibitors and intermediates thereof |
| US5942423A (en) * | 1995-06-07 | 1999-08-24 | Massachusetts Institute Of Technology | Conversion of compactin to pravastatin by actinomadura |
| SI9800144A (sl) | 1998-05-21 | 1999-12-31 | LEK, tovarna farmacevtskih in kemičnih izdelkov, d.d. | Nov biotehnološki postopek pridobivanja 3-hidroksi-ML-236B derivatov poznanih kot M-4 in M-4' |
| SI20305A (sl) * | 1999-08-06 | 2001-02-28 | LEK, tovarna farmacevtskih in kemi�nih izdelkov, d.d. | Kristali natrijeve soli pravastatina |
| AU3074300A (en) | 1999-01-20 | 2000-08-07 | Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. | Process for producing hmg-coa reductase inhibitors |
| HK1040530A1 (en) * | 1999-01-29 | 2002-06-14 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Process for producing hmg-coa reductase inhibitor |
| US6682913B1 (en) | 1999-02-03 | 2004-01-27 | Institute For Drug Research Ltd. | Microbial process for preparing pravastatin |
| HUP9902352A1 (hu) * | 1999-07-12 | 2000-09-28 | Gyógyszerkutató Intézet Kft. | Eljárás pravasztatin mikrobiológiai előállítására |
| HRP20030347A2 (en) * | 2000-10-05 | 2005-04-30 | Teva Gy�gyszergy�r R�szv�nyt�rsas�g | Pravastatin sodium substantially free of pravastatin lactone and epi-pravastatin, and compositions containing same |
| JP3236282B1 (ja) * | 2000-10-16 | 2001-12-10 | 三共株式会社 | プラバスタチンを精製する方法 |
| JP2003093045A (ja) * | 2001-09-26 | 2003-04-02 | Godo Shusei Co Ltd | 有用変換微生物 |
| AU2003226051A1 (en) * | 2002-04-16 | 2003-11-03 | Banyu Pharmaceutical Co., Ltd. | Solid forms of salts with tyrosine kinase activity |
| RU2217141C1 (ru) * | 2002-11-20 | 2003-11-27 | Балавадзе Михаил Элизбарович | Состав "витализин-1" для профилактики атеросклероза, сердечно-сосудистых заболеваний и поддерживающей терапии вирусных заболеваний |
| US20040198800A1 (en) * | 2002-12-19 | 2004-10-07 | Geoffrey Allan | Lipoxygenase inhibitors as hypolipidemic and anti-hypertensive agents |
| CA2508840A1 (en) | 2002-12-20 | 2004-07-08 | Pfizer Products Inc. | Dosage forms comprising a cetp inhibitor and an hmg-coa reductase inhibitor |
| US20040132771A1 (en) * | 2002-12-20 | 2004-07-08 | Pfizer Inc | Compositions of choleseteryl ester transfer protein inhibitors and HMG-CoA reductase inhibitors |
| KR100470078B1 (ko) * | 2003-06-12 | 2005-02-04 | 씨제이 주식회사 | 컴팩틴을 프라바스타틴으로 전환할 수 있는 스트렙토마이세스 종(Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｓｐ.)ＣＪＰＶ 975652 및 그를 이용한 프라바스타틴의 제조방법 |
| JP4553899B2 (ja) | 2003-08-21 | 2010-09-29 | メルク フロスト カナダ リミテツド | カテプシンシステインプロテアーゼ阻害剤 |
| US20050101927A1 (en) * | 2003-09-11 | 2005-05-12 | Kimberly-Clark Worldwide, Inc. | Absorbent products comprising a moisturizing and lubricating composition |
| JP2007512359A (ja) | 2003-11-19 | 2007-05-17 | メタバシス・セラピューティクス・インコーポレイテッド | 新規なリン含有甲状腺ホルモン様物質 |
| TWI252253B (en) * | 2004-01-09 | 2006-04-01 | Chinese Petroleum Corp | A novel Pseudonocardia sp RMRC PAH4 and a process for bioconverting compactin into pravastatin using the same |
| US20110217412A1 (en) * | 2004-07-30 | 2011-09-08 | Jinis Biopharmaceuticals Co. | Cholesterol lowering supplement and low cholesterol egg produced by using the same |
| KR100637762B1 (ko) * | 2004-07-30 | 2006-10-23 | 주식회사 지니스 | 저콜레스테롤 란을 생산하기 위한 가금류용 사료첨가제 및 이를 이용한 저콜레스테롤 란의 생산방법 |
| TWI307360B (en) | 2004-12-03 | 2009-03-11 | Teva Gyogyszergyar Zartkoruen Mukodo Reszvenytarsasag | Process for constructing strain having compactin hydroxylation ability |
| CA2590860C (en) | 2004-12-09 | 2011-05-03 | Merck & Co., Inc. | Estrogen receptor modulators |
| PT1855674E (pt) | 2005-03-02 | 2014-10-08 | Merck Canada Inc | Composição para a inibição de catepsina k |
| EP1888050B1 (en) | 2005-05-17 | 2012-03-21 | Merck Sharp & Dohme Ltd. | cis-4-[(4-chlorophenyl)sulfonyl]-4-(2,5-difluorophenyl)cyclohexanepropanoic acid for the treatment of cancer |
| TW200804345A (en) | 2005-08-30 | 2008-01-16 | Novartis Ag | Substituted benzimidazoles and methods of preparation |
| GB0603041D0 (en) | 2006-02-15 | 2006-03-29 | Angeletti P Ist Richerche Bio | Therapeutic compounds |
| RS56600B1 (sr) | 2006-04-19 | 2018-02-28 | Novartis Ag | 6-o-supstituisana jedinjenja benzoksazola i benzotiazola i postupci inhibicije csf-1r signalinga |
| EP2698157B1 (en) | 2006-09-22 | 2015-05-20 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Method of treatment using fatty acid synthesis inhibitors |
| US20110218176A1 (en) | 2006-11-01 | 2011-09-08 | Barbara Brooke Jennings-Spring | Compounds, methods, and treatments for abnormal signaling pathways for prenatal and postnatal development |
| RS51780B (sr) | 2007-01-10 | 2011-12-31 | Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti S.R.L. | Indazoli supstituisani amidom kao inhibitori poli(adp-riboza)polimeraze (parp) |
| CN101679266B (zh) | 2007-03-01 | 2015-05-06 | 诺华股份有限公司 | Pim激酶抑制剂及其应用方法 |
| AU2008254425A1 (en) | 2007-05-21 | 2008-11-27 | Novartis Ag | CSF-1R inhibitors, compositions, and methods of use |
| WO2009002495A1 (en) | 2007-06-27 | 2008-12-31 | Merck & Co., Inc. | 4-carboxybenzylamino derivatives as histone deacetylase inhibitors |
| EP2489656A1 (en) | 2007-12-21 | 2012-08-22 | Ligand Pharmaceuticals Inc. | Selective androgen receptor modulators (sarms) and uses thereof |
| WO2009131264A1 (en) * | 2008-04-25 | 2009-10-29 | Amorepacific Corporation | Method for preparing ortho-dihydroxyisoflavones using a biotransformation system |
| WO2010093601A1 (en) | 2009-02-10 | 2010-08-19 | Metabasis Therapeutics, Inc. | Novel sulfonic acid-containing thyromimetics, and methods for their use |
| EP2413932A4 (en) | 2009-04-01 | 2012-09-19 | Merck Sharp & Dohme | HAMMER OF ACT ACTIVITY |
| UA109417C2 (uk) | 2009-10-14 | 2015-08-25 | Мерк Шарп Енд Доме Корп. | ЗАМІЩЕНІ ПІПЕРИДИНИ, ЯКІ ПІДВИЩУЮТЬ АКТИВНІСТЬ p53, І ЇХ ЗАСТОСУВАННЯ |
| US8999957B2 (en) | 2010-06-24 | 2015-04-07 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Heterocyclic compounds as ERK inhibitors |
| CN103068980B (zh) | 2010-08-02 | 2017-04-05 | 瑟纳治疗公司 | 使用短干扰核酸（siNA）的RNA干扰介导的联蛋白（钙粘蛋白关联蛋白质），β1（CTNNB1）基因表达的抑制 |
| LT2606134T (lt) | 2010-08-17 | 2019-07-25 | Sirna Therapeutics, Inc. | Hepatito b viruso (hbv) geno raiškos slopinimas, tarpininkaujant rnr interferencijai naudojant mažą interferuojančią nukleorūgštį (sina) |
| US8883801B2 (en) | 2010-08-23 | 2014-11-11 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Substituted pyrazolo[1,5-a]pyrimidines as mTOR inhibitors |
| US8946216B2 (en) | 2010-09-01 | 2015-02-03 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Indazole derivatives useful as ERK inhibitors |
| EP2615916B1 (en) | 2010-09-16 | 2017-01-04 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Fused pyrazole derivatives as novel erk inhibitors |
| EP2632472B1 (en) | 2010-10-29 | 2017-12-13 | Sirna Therapeutics, Inc. | Rna interference mediated inhibition of gene expression using short interfering nucleic acids (sina) |
| US9351965B2 (en) | 2010-12-21 | 2016-05-31 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Indazole derivatives useful as ERK inhibitors |
| EP2675440B1 (en) | 2011-02-14 | 2020-03-25 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Cathepsin cysteine protease inhibitors |
| WO2012143879A1 (en) | 2011-04-21 | 2012-10-26 | Piramal Healthcare Limited | A crystalline form of a salt of a morpholino sulfonyl indole derivative and a process for its preparation |
| US9023865B2 (en) | 2011-10-27 | 2015-05-05 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Compounds that are ERK inhibitors |
| EP3453762B1 (en) | 2012-05-02 | 2021-04-21 | Sirna Therapeutics, Inc. | Short interfering nucleic acid (sina) compositions |
| EP2900241B1 (en) | 2012-09-28 | 2018-08-08 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Novel compounds that are erk inhibitors |
| SI2925888T1 (en) | 2012-11-28 | 2018-02-28 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Compounds and methods for the treatment of cancer |
| TW201429969A (zh) | 2012-12-20 | 2014-08-01 | Merck Sharp & Dohme | 作爲ｈｄｍ２抑制劑之經取代咪唑吡啶 |
| EP2951180B1 (en) | 2013-01-30 | 2018-05-02 | Merck Sharp & Dohme Corp. | 2,6,7,8 substituted purines as hdm2 inhibitors |
| EP3041938A1 (en) | 2013-09-03 | 2016-07-13 | Moderna Therapeutics, Inc. | Circular polynucleotides |
| JP6454335B2 (ja) | 2013-10-08 | 2019-01-16 | メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーションＭｅｒｃｋ Ｓｈａｒｐ ＆ Ｄｏｈｍｅ Ｃｏｒｐ． | カテプシンシステインプロテアーゼ阻害剤 |
| WO2015051479A1 (en) | 2013-10-08 | 2015-04-16 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Cathepsin cysteine protease inhibitors |
| EP3094323A4 (en) | 2014-01-17 | 2017-10-11 | Ligand Pharmaceuticals Incorporated | Methods and compositions for modulating hormone levels |
| WO2015120580A1 (en) | 2014-02-11 | 2015-08-20 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Cathepsin cysteine protease inhibitors |
| JO3589B1 (ar) | 2014-08-06 | 2020-07-05 | Novartis Ag | مثبطات كيناز البروتين c وطرق استخداماتها |
| EP3525785B1 (en) | 2016-10-12 | 2025-08-27 | Merck Sharp & Dohme LLC | Kdm5 inhibitors |
| WO2019094312A1 (en) | 2017-11-08 | 2019-05-16 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Prmt5 inhibitors |
| EP3706742B1 (en) | 2017-11-08 | 2023-03-15 | Merck Sharp & Dohme LLC | Prmt5 inhibitors |
| WO2020033284A1 (en) | 2018-08-07 | 2020-02-13 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Prmt5 inhibitors |
| EP3833668B1 (en) | 2018-08-07 | 2025-03-19 | Merck Sharp & Dohme LLC | Prmt5 inhibitors |
| US12173026B2 (en) | 2018-08-07 | 2024-12-24 | Merck Sharp & Dohme Llc | PRMT5 inhibitors |
| CA3133929A1 (en) | 2019-04-19 | 2020-10-22 | Lin Zhi | Crystalline forms and methods of producing crystalline forms of a compound |
| WO2021126728A1 (en) | 2019-12-17 | 2021-06-24 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Prmt5 inhibitors |
| CA3160153A1 (en) | 2019-12-17 | 2021-06-24 | Michelle Machacek | Prmt5 inhibitors |
| EP4076460A4 (en) | 2019-12-17 | 2023-11-15 | Merck Sharp & Dohme LLC | PRMT5 INHIBITORS |
| CN120917311A (zh) | 2023-03-02 | 2025-11-07 | 卡西蒙生物技术有限责任公司 | 用于诊断癌症和/或急性炎性疾病的手段和方法 |
| WO2025147589A1 (en) | 2024-01-05 | 2025-07-10 | Osanni Bio, Inc. | Implants, compositions, and methods for treating retinal diseases and disorders |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3281330A (en) * | 1964-03-20 | 1966-10-25 | Upjohn Co | Microbiological process for the oxygenation of cycloalkanes |
| US3392171A (en) * | 1964-03-20 | 1968-07-09 | Upjohn Co | 4-morpholino-4'-hydroxy bicyclohexyls |
| MX7065E (es) * | 1980-06-06 | 1987-04-10 | Sankyo Co | Un procedimiento microbiologico para preparar derivados de ml-236b |
-
1981
- 1981-11-20 JP JP56186641A patent/JPS5889191A/ja active Granted
-
1982
- 1982-11-16 CA CA000415650A patent/CA1186647A/en not_active Expired
- 1982-11-16 AU AU90610/82A patent/AU551720B2/en not_active Expired
- 1982-11-18 US US06/442,840 patent/US4537859A/en not_active Expired - Lifetime
- 1982-11-18 SE SE8206580A patent/SE453996B/sv not_active IP Right Cessation
- 1982-11-19 DK DK516182A patent/DK159328C/da not_active IP Right Cessation
- 1982-11-19 FR FR8219433A patent/FR2516935A1/fr active Granted
- 1982-11-19 BE BE0/209527A patent/BE895080A/fr unknown
- 1982-11-19 ZA ZA828535A patent/ZA828535B/xx unknown
- 1982-11-19 ES ES517542A patent/ES517542A0/es active Granted
- 1982-11-19 CH CH6754/82A patent/CH651065A5/de not_active IP Right Cessation
- 1982-11-19 FI FI823978A patent/FI70925C/fi not_active IP Right Cessation
- 1982-11-19 NL NL8204505A patent/NL194373C/nl not_active IP Right Cessation
- 1982-11-19 DE DE19823242849 patent/DE3242849A1/de active Granted
- 1982-11-20 KR KR8205250A patent/KR880002483B1/ko not_active Expired
- 1982-11-22 AT AT0425182A patent/AT387585B/de not_active IP Right Cessation
- 1982-11-22 GB GB08233267A patent/GB2111052B/en not_active Expired
- 1982-11-22 IT IT68359/82A patent/IT1191235B/it active Protection Beyond IP Right Term
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA1186647A (en) | 1985-05-07 |
| US4537859A (en) | 1985-08-27 |
| IT1191235B (it) | 1988-02-24 |
| NL8204505A (nl) | 1983-06-16 |
| DK516182A (da) | 1983-05-21 |
| ES8402350A1 (es) | 1984-01-16 |
| KR840002451A (ko) | 1984-07-02 |
| IT8268359A0 (it) | 1982-11-22 |
| FR2516935B1 (fi) | 1985-02-08 |
| DE3242849A1 (de) | 1983-06-01 |
| JPH0371116B2 (fi) | 1991-11-12 |
| ZA828535B (en) | 1983-10-26 |
| DK159328C (da) | 1991-02-25 |
| FI70925C (fi) | 1986-10-27 |
| KR880002483B1 (ko) | 1988-11-19 |
| DK159328B (da) | 1990-10-01 |
| AT387585B (de) | 1989-02-10 |
| SE8206580L (sv) | 1983-05-21 |
| NL194373B (nl) | 2001-10-01 |
| CH651065A5 (de) | 1985-08-30 |
| FI823978A0 (fi) | 1982-11-19 |
| AU9061082A (en) | 1983-05-26 |
| AU551720B2 (en) | 1986-05-08 |
| JPS5889191A (ja) | 1983-05-27 |
| SE453996B (sv) | 1988-03-21 |
| ATA425182A (de) | 1988-07-15 |
| NL194373C (nl) | 2002-02-04 |
| GB2111052B (en) | 1985-05-09 |
| BE895080A (fr) | 1983-03-16 |
| SE8206580D0 (sv) | 1982-11-18 |
| FR2516935A1 (fr) | 1983-05-27 |
| ES517542A0 (es) | 1984-01-16 |
| GB2111052A (en) | 1983-06-29 |
| DE3242849C2 (fi) | 1989-01-05 |
| FI823978L (fi) | 1983-05-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI70925B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av 3-hydroxy-ml-236b-derivater | |
| Iwai et al. | Production of deoxyfrenolicin and a new antibiotic, frenolicin B by Streptomyces roseofulvus strain AM-3867 | |
| US5153124A (en) | Hydroxyl-ml-236b derivatives, their preparation and use | |
| CZ2002119A3 (cs) | Způsob hydroxylace kompaktinu na pravastatin za použití mikromonospor | |
| US4421687A (en) | Macbecin derivatives | |
| US4421688A (en) | Macbecin derivatives | |
| EP0404581A3 (en) | Process for the preparation of 3-keto, 5-hydroxy simvastatin analogs | |
| US4540517A (en) | Antibiotic TAN-420 | |
| US4199514A (en) | Compound, frenolicin B which is useful as an antibiotic | |
| GB2106111A (en) | Macbecin derivatives and their production | |
| US4351769A (en) | Antibiotic composition of matter | |
| US5719179A (en) | Compound GEX1 | |
| US4997755A (en) | HMG-CoA reductase inhibitors produced by Nocardia sp. (MA 6455) | |
| US5272174A (en) | Hydroxy-ML-236B derivatives, their preparation and use | |
| EP0381478A1 (en) | Process for the preparation of 6-alpha-hydroxymethyl lovastatin derivatives | |
| EP0337548A3 (en) | HMG-COA reductase inhibitors produced by nocardia SP. (MA6455)(ATCC 53695) | |
| US4247703A (en) | Microbiological modification of antibiotic A23187 esters | |
| US4287302A (en) | Microbiological modification of antibiotic A23187 esters | |
| JPH0538283A (ja) | 新規微生物 | |
| JPH0365347B2 (fi) | ||
| JPS62190094A (ja) | ３”，６’−ジヒドロキシ−ｍｌ−２３６ｂ誘導体及びその製法 | |
| JPH0827143A (ja) | Ｕｃｆ７６化合物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MA | Patent expired |
Owner name: SANKYO COMPANY LIMITED |