JPS62190094A - ３”，６’−ジヒドロキシ−ｍｌ−２３６ｂ誘導体及びその製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は式 を有するカルボン酸、その薬理上許容しうる塩、そのエ
ステルまたはその閉環ラクトン体からなる３／／、６／
−ジヒドロキシ−んｆＬ−２３６Ｂ誘導体およびその製
法に関する。

従来、前記一般式（Ｉ）において、３“位のヒドロキシ
基が水素原子で置換されたＭＬ−２３６Ｂ誘導体は例え
ば特開昭５７−２２４０号、同５７−５０８９４号、同
５７−６７５７’！号、同５７−１５５９９５号、同５
Ｂ　−１０５７２号、同５Ｂ　−８９１９１号等に記載
されており、また、６′位の水酸基がメチル基で置換さ
れたλＩＢ−５３０Ｂ誘導体は米国特許第４３７６８６
３号に記載されており、いずれもコレステロール合成阻
害作用を示すことが知られている。

不発明者らは、前記一般式（Ｉ）を有するカルボン酸、
その薬理上許容しうる塩、そのエステルまたはその閉環
ラクトン体がいずれもコレステロール合成阻害作用を示
すことを児出し、本発明を完成した。

本発明の前記一般式（Ｉ）を有する化合物の薬理上許容
しうる塩としては例えば金属塩、アミノ酸塩またはアミ
ン塩である。金属塩としては例えばナトリウム、カリウ
ムなどのアルカリ金属塩、カルシウム、マグネシウムな
どのアルカリ土類金属塩、およびアルミニウム塩、鉄塩
、亜鉛塩、銅塩、ニッケル塩およびコバルト塩などがあ
げられるが、この中、アルカリ金属塩、アルカリ土類金
属塩およびアルミニウム塩が好適であり、さらにナトリ
ウム塩、カリウム塩、カルシウム塩およびアルミニウム
塩が最も好適である。アミノ酸塩としては例えばアルギ
ニン、リジン、ヒスチジン、α、γ−ジアミノ酪酸、オ
ルニチンなどの塩基性アミノ故が好適である。

アミン塩としては例えばｔ−オクチルアミン、ジベンジ
ルアミン、ジシクロヘキシルアミン、モルホリン、Ｄ−
フェニルグリシンアルキルエステル、Ｄ−グルコサミン
などが好適である。

前記一般式（Ｉ）を有する化合物のエステルとしては、
例えばメチル、エチル、プロピル、イソプロピル、ブチ
ル、インブチル、ペンチルなどのアルキルエステルをあ
げることができる。

好適にはメチルである。

前記一般式（Ｉ）を有する化合物の閉環ラクトン体とは
、式（Ｉ）が次の閉環構造式で示される化合物をいう。

本発明によって得られる前記一般式ＣＩ）を有するカル
ボン酸、その薬理上許容しうる塩、そのエステルまたは
その閉環ラクトン体としては、例えば以下に記載する化
合物をあげることができる。

１）　　３”、　　６’−ジヒドロキシ−λＩＬ　−２
３３Ｂカルボン酸 ２）　　３”、　　６’−ジヒドロキシ−ＭＬ−２３６
Ｂカルボン酸ナトリウム塩 ３）　　３″、　　６’−ジヒドロキシ−ＭＬ、２３６
Ｂカルボン酸カリウム塩 ４）　　３ｔｚ　　ｅ／−ジヒドロキシ−ＭＬ　−２３
６１３カルボン酸カルシウム塩 ５）　　３”、　　６’−ジヒドロキシ−λ（Ｉ、−２
３６Ｂカルボン酸アルミニウム塩 ６）　　３”、　　６’−ジヒドロキシ−八（Ｌ−２３
６Ｂカルボン酸アルギニン塩 ７）３“、６′−ジヒドロキシ−ＭＬ　−２３６Ｂカル
ボン酸リジン塩 ８）　　３”、　　Ｅｉ’−ジヒドロキシ−ＭＬ　−２
３６１３カルボンなｔｔ−オクチルアミン塩 ９）　　３”、　　６’−ジヒドロキシ−へＩＬ−２３
６１３カルボン酸Ｄ−フェニルグリシンエチルエステル
１０）　　３”、・６′−ジヒドロキシ−ΔＩＬ−２３
６Ｂカルボン酸メチルエステル １１）　　３”、　　６’−ジヒドロキシ−ＭＬ−２３
６Ｂラクトン体 本発明の前記一般式（Ｉ）においては、置換分の配置に
より種々の幾何異性体が存在する。

また、不斉炭素原子′の存在により種々の光学異性体も
存在する。前記一般式（Ｉ）におい℃は、これらの異性
体およびこれらの異性体の混合物がすべて単一の式で示
されている。従って、本発明においては、前記一般式（
１）を套するカルボン酸、七〇薬理上許容しうる塩、そ
のエステルまたはその閉環ラクトン体には、これらの異
性体のみならず、これらの異性体の混合物をも全て含む
ものである。

本発明の目的化合物は、コレステロールの合成を阻害す
ることにより血中の脂質を低下させる作用をＷし、例え
ば高脂血症治僚剤、動脈硬化予防薬として医薬に使用す
ることができる。

これらの化合物は経口的または非経口的に例えはカプセ
ル剤、錠剤、注射剤等の形で投与することができる。投
与量は年令、症状、体１等によって異なるが、通常は成
人に対し１日約０．２〜２００　ｓｔｙを３〜４回に分
けて投与される。

しかし必要に応じてそれ以上の量を住戸することもでき
る。

本発明の原料物質である例えばＭＬ−２３６Ｂ　　ラク
トン体およびＭＬ−２３６Ｂカルボン酸は前述の如く既
知物質であり、青カビの一穆ベニシリウム・チトリヌム
の代Ｈａ物より分離、精製される。

その化学構造式は次式 および で示される通りであり、実験動物から分離した酵素系や
培養細胞系においてコレステロールの生合成をその律速
酵素の３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル・コエン
ザイムＡ　ＩＪダクターゼと競合することにより阻害し
、動物の個体レベルにおいても強力な血清コレステロー
ルの低下作用を示すことが知られている（Ｉ！＃開昭５
Ｏ−ｔｓｓｓｓｏ　号、ジャーナル・オプ・アンチビオ
ティクス２ｇ巻１３４６〜１３４８頁１９７６年）。

本発明の目的化合物は式 を有するカルボン酸、その薬理上許容しうる塩、そのエ
ステルまたはその閉環ラクトン体からなるＭＬ−２３８
Ｂ誘導体を、　ノカルディア属またはストレプトミセス
属に属する微生物を用いて水酸化して３／／、６／−ジ
ヒドロキシ−八ＩＬ　−２３６Ｂ誘導体に変換せしめ、
次いで得られた変換反応物を含む系より３“、６′−ジ
ヒドａキシ−ＡＩＬ　−２ｓｓＢＢｍ体を採取すること
によって得られる。

このようにして得られた誘導体は所望により更に加水分
解反応、塩形成反応、エステル化反応またはラクトン化
反応に付して変換することができる。

前記原料化合物を前記一般式（１）を有するカルボン酸
、七〇薬理上許容しうる塩、そのエステルまたはその閉
環ラクトン体に変換せしめ得る微生物としてはノカルデ
ィア属またはストレプトミセス属があげられる。

これらに属する微生物の中、特に ノカルディア・エスピー　（Ｎｏｃａｒｄｉａ　ｓｐ、
　）ＳハＩ＜　６２７３１　（微工研薗寄第６１８１号
）ノカルディア・エスピー　（Ｎｏｃａｒｄｉａ　Ｓｐ
、　）８ＡＮＫ　ＥＩ２８８１　（微工研菌寄第６１８
２号）ノカルディア・エスピー　（Ｎｏｃａｒｄｉａ　
ｓｐ、　）ＳＡＮＫ　６２９８１　（微工研菌寄第６１
８３号）が好適である。

これらの菌株の中、ノカルディア・エスピーＳＡＮＫ　
６２７８１　、同ＳＡＮＫ　６２Ｂ８１　＃よび同８Ａ
ＮＫ６２９１Ｈの菌学的性状は、既に特開昭５８−８９
１９１号に記載されている。

ストレプトミセスーエスヒ−ＳＡＮＫ　６２５８５　株
の菌学的性状は次の通りである。

１、　形態学的特徴 形態はＩ８Ｐ　Ｃインターナショナル・ストレプトマイ
七ス・プロジェクト（ｘｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌｓｔ
ｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｐｒｏｊｅｃｔ　）　）規定の
培地上、２Ｂ’ｃ、１４日間培養後、顕微鏡下で観察し
た。５ａＮＫ６２５８５株の基生菌糸は分枝して良く伸
長し、気菌糸は単純分枝である。

ＳＡＮＫ　６２５８５株の胞子鎖の形態は通常直状〜曲
状であるが螺旋状を示す場合もある。胞子鎖の表面構造
は≠学≠平滑（ｓｍｏｏｔｈ　）を示す。また気菌糸の
車軸分枝、曹桜、基生薗糸の断裂、胞子のうなどの特殊
器官は観察されなかった。

２、　各種培養基上の諸性質 各種培養基上で２８℃、１４日間培養後の性状は第１表
に示す通りである。色−の表示は日本色彩研究新版、′
標準色票”のカラーチップ・ナンバーを表わす。

第　　１　　表 ３、生理学的性質 １９ＡＮＫ　６２５８５株の生理学的性質は諮２表に示
第　　２　　表 ＳＡＮＫ　６２５８５株の性状 澱粉の水解　　　　　　　　　　陽　注ゼラチンの液化
　　　　　　　陰　註 硝戯塩の還元　　　　　　　　陽　注 ミルクの凝固　　　　　　　　　陽　注ミルクのペプト
ン化　　　　　陽性 生育温度範囲（培地１）＊　　　４〜４５℃生育適正温
度（培地１）　　　１５〜３３℃メラニン様色素生産地
（培地２）　　　　　　陰　　注（培地３）　　　　　
疑＠ａ” ＊：培地１；イーストエキス：麦芽エキス寒天（ＩＳＰ
　２　） ２；トリプトン　イーストエキス・ブ ロス（ＩＳＰＩ） ３１ペプトン・イーストエキス・鉄寒 天（ＩＳＰ　６　） ４；チロシン寒天（ＩＳＰ’　？　） ＊＊：　　培養後期にメラニン汁色素が生産される場合
もある。

また、プリドハム・ゴトリープ寒天培地７Ｊ：使−用し
て、１４日間培養後の炭素源、即ちＤ−グルーｔ−ｘ、
Ｌ−７ラヒノース、Ｄ−キシロース、イノシトール、Ｄ
−マンニトール％　Ｄ−フルクトース、Ｌ−ラムノース
、シュクロース、ラフィノース、セロビオース、トレハ
ロース添加培地を調べた。ＳＡＮＫ　６２５８５床は炭
素源無添加の対照培地でも良好に生育がみられるため、
正確な資化性を記述することは困難である。しがしな２
＞Ｅ　ＩＥ）　、　Ｄ−クルコース、Ｄ−キシロース、
イノシトール、ラフィノース、セロビオース、トレハロ
ース添加培地では無添加対照培地に比べ著しく良好な生
育がみられた。

４、　菌体取分について ＳＡＮＫ　６２５８５株の細胞壁はビー　ベラカーらの
方法（Ｂ　Ｂｅｃｋｅｒ　ｅｔ　ａｌ、、　　アフ′ラ
イド・マイクロバイオロジー（Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｍｉｃ
ｒｏｂｉｏｌｏｇｙ）。

１２巻、４２１〜ｊｊｊ頁、１９６，１年〕に従い検討
した結果、Ｌ、Ｌ−ジアミノピメリン酸およびグリシン
が検出されたことから、細胞壁タイプＩであることが確
認された。また、ＳＡＮＫ　６２５８５株の全＃ａ胞中
の糖成分をエム・ピー・レシェバリエの方法［：　Ｍ、
　Ｐ、　Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅ７、ジャーナルーオブ・
ラボラトリイ・アンド・クリニカル・メデイシン（Ｊｏ
ｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ　ａｎｄ　Ｏ
ｌｉｎｉｃａｌＭｅｄｉｃｉｎｅ　）ｔ　７１巻、９３
４頁、　　１９６８年〕に従い検討した結果、特徴的な
パターンは認められなかった。

以上のことから、本菌株は放線菌の中でもストレプトミ
セス属に属することが判明したので、命名された。

な才６．ＳＡＮＫ　６２５８５株の同定はＩＳＰ　［ニ
ジ・　インターナショナル−ストレプトマイ七ス・ブロ
ジエク、　ト（Ｔｈｅ　Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　
Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｐｒｏｊｅｃｔ　）　］基準
；バーシーズ・マニュアル（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎ
ｕａｌ　ｏｆ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａｃｔ
ｅｒｉｏｌｏｇｙ　）ＩＥ８版；ニス・エイ・ワラフス
マｙ（ｓ、Ａ。

Ｗａｋｓｍａｎ　）著ジ・アクチノミセイテス（Ｔｈｅ
Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ　）第２巻および放線菌に
関する最近の文献によって行った。

以上、ＳＡＮＫ　６２７８１．ＳＡＮＫ　６２８８１．
ＳＡＮＫ６２９８１および１９ＡＮＫ　６２５Ｂ５株に
ついて説明したが、放線菌の諸性質は一定したものでな
く、自然的、人工的に容易に変化することは周知のとお
りであり、本発明で使用しうる菌株はノカルディア属ま
たはストレプトミセス属に属し、ＭＬ−２３６Ｂ誘導体
を３“、６′−ジヒドロキシ−ＭＬ−２３６Ｂ誘導体に
変換し得る菌株すべてを包含するものである。

本発明の方法を実施するに際して、酵素的に水酸化する
方法としては、変換菌をその生育に適した培養条件下で
培養し、■原料化合物を培地中に添加すして接触させる
方法　■変換菌を培養・集菌し、得られた変換菌菌体を
原料化合物と接触させる方法、ゴロよび　■変換菌菌体
から調製した無細胞抽出液を原料化合物と接触させる方
法などが採用される。

変換菌の培養方法としては、通常微生物が利用しうる栄
養物を含有する培地で培養することができる。栄養源と
しては一般微生物培養に利用される公知のものが使用で
きる。例えば炭素源トしてグルコース、シュークロース
、澱粉、グリセリン、水飴、糖蜜、大豆油等を使用しう
る。また窒素源としては大豆粉、小麦胚芽、肉エキス、
ペプトン、コーンスチープリカー、乾燥酵母、硫酸アン
モニウム等を使用しうる。その他必要に応じて食塩、塩
化カリ、炭酸カルシウム、講酸塩等の無機塩のほか、菌
の発育を助け、前記水酸化能を有する酵素の生産促′進
に必要な添加物を適宜組合せ使用することができる。

培養方法としては微生物一般に用いられる培養法例えば
液体培養法が可能であり、工業的には深部培養法が適し
ている。

培養、は好気的条件で行なわれ、培養温度は２０〜３７
℃、好適には２６〜３５℃である。

■法は、原料化合物を添加し培養することによって行な
われる。添加時期は、使用する変換菌の至適培養条件、
特に培養装置、培地組成、培養温度等により異なるが、
変換菌の水酸化能が高まりはじめる時期がよく、通常は
変換菌の培養開始後１〜３日経過した時点が好ましい。

原料化金物の添加量は培地に対し０．０１〜５．０％の
範囲から選ばれるが、０．０５〜２．０％の範囲が好適
である。原料化合物添加後の培養は好気的条件で上記培
養温度で行なわれる。培養期間は原料化合物の添加後３
〜５日である。

■法は、上記の方法により変換菌を少量の基質の存在下
で培養し、変換菌の水酸化能が最大となるまで培養する
。即ち、水酸化能は培地の種類、温度等によって異なる
が、通常は培養開始後４〜５日で最大となるので、この
時点で培養を終了する。集菌は培養物を゛遠心分離、濾
過等の方法に付すことによって行なわれる。集菌された
変換菌菌体は通常生理食塩水、緩衝液等で洗浄して使用
するのが好ましい。

このようにして得られた変換菌菌体を原料化金物と接触
させるには、通常は水性媒体中、例えばｐＨ５〜９の燐
酸塩緩衝液中で行なわれる。

反応温度は２０〜４５℃、好適には２５〜３５１：であ
る。原料化合物の濃度は通常ｏ、０１〜Ｓ、Ｏ９６の範
囲から選ばれる。反応時間は原料化合物の濃度、反応温
度等によるが、通常１〜５日位である。

■方法での無細胞抽出液は、上記の方法で得られた変換
菌菌体に物理的または化学的手段を適用し、例えば磨砕
、超音波処理等によって菌体破壊物として、または界面
活性剤、酵素処理等によって菌体溶解液として得られる
。

このようにして得られた無細胞抽出液を原料化金物と接
触させる方法は、上記の変換菌菌体を原料化合物と接触
させる方法と同様に行なわれる。

変換反応終了後、目的化合物は生成物から既知の方法で
直接採取、分離、精製することができる。例えば生成物
を濾過し、得られたｆ液を酢酸エチルのような水と混和
しにくい有機溶媒で抽出し、抽出液から溶媒を留去させ
たのち、得られた粗目的化合物をシリカゲル、アルミナ
等を用いたカラムクロマトグラフに付し、適切な溶離剤
で溶出することによって分離、精製することができる。

さらに、得られた生成物は所望により、化学的常法に従
って加水分解反応、塩形成反応、エステル化反応または
ラクトン化反応に付すことによって目的化合物に変え１
．容易に採取することができる。

−これらの方法は（・ずれも常法であり、例えば次のよ
うな方法である。

式（Ｉ）を有するカルボン酸は、変換反応の生成物がカ
ルボン酸塩である場合、得られたｒ液をｐＨ４以下、好
ましくはｐＨ３〜４に調整することによって得られる。

使用される酸としては目的化合物に影響を与えるもので
なげれば有機酸または鉱酸等に限定はなく、例えばトリ
フルオロ酢酸、塩酸、硫酸などが好適に使用される。

このようにして得られたカルボン酸は、追出、洗浄、脱
水等の処理をした後、以下の反応に使用することができ
る。

式（Ｉ）を有するカルボン酸の金属塩は、該金属の水酸
化物、炭酸塩等を水性溶媒中で上記カルボン酸と接触さ
せることによって得られる。

使用される水性溶媒としては例えば水；メタノール、エ
タノールのようなアルコール類、アセトン、ｎ−ヘキサ
ン、酢酸エチルなどの有機溶媒と水との混合溶媒が好適
である。特に親水性有機溶媒と水との混合溶媒が好適で
ある。反応は通常室温付近で好適に行なわれるが、必要
に応じて加熱下で行ってもよい。

式（１）を有するカルボン酸のアミン塩は、アミンを水
性溶媒中で上記カルボン酸と接触させることによって得
られる。使用される水性溶媒としては例えば水；メタノ
ール、エタノールなどのアルコール類、テトラヒドロフ
ランなどのエーテル類、アセトニトリルなどのニトリル
類と水との混合溶媒等をあげることができるが、好まし
くは含水アセトンである。反応は通常ｐＨ７〜８．５で
室温以下、特に５〜１０℃で好適に行なわれる。反応は
瞬時に完了する。あるいは例えば上記で得られたカルボ
ン酸金属塩を水性溶媒に溶解し、次いで目的のアミンの
鉱酸塩（例えば塩酸塩など）を上記条件下で添加し、塩
交換反応により得ることもできる。

式（１）を有するカルボン酸のアミノ酸塩は、アミノ酸
を水性溶媒中で上記カルボン酸と接触させることによっ
て得られる。使用される水性溶媒としては例えば水；メ
タノール、エタノールなどのアルコール類、テトラヒド
ロフランなどのエーテル類と水との混合溶媒等をあげる
ことができる。反応は通常加熱下、好ましくは５０〜６
０℃付近で行なわれる。

式（Ｉ）を有するカルボン酸のアルキルエステルは、上
記で得られたカルボン酸をアルコールと接触させること
によって得られる。この際、触媒として塩酸、硫酸など
の鉱酸あるいはフッ化ホウ素、酸性イオン交換樹脂など
が用いられ、溶媒としては同一のアルコールまたはベン
ゼン、クロロホルム、エーテル等反応に関与しないもの
が使用される。あるいは、上記で得られたカルボン酸を
ジアゾアルカンと接触させることによって得られる。反
応は通常ジアゾアルカンのエーテル溶液と接触させるこ
とによって行なわれる。あるいは、上記で得られたカル
ボン酸の金属塩にハロゲン化アルキルを接触させるこ゛
とによって得られる。使用される溶媒としては例えばジ
メチルホルムアミ・ド、テトラヒドロフラン、ジメチル
スルホキシド、アセトンなどが好適である。

反応はいずれも室温付近で好適に行なわれるが、反応系
の種類によっては必要に応じて加熱下で行なってもよい
。

式ＣＩ）を有するカルボン酸のラクトン体は、上記で得
られたカルボン酸を触媒量の酸と接触させることによっ
て得られる。使用される酸としては、例えはトリフルオ
ロ酢酸、塩酸、硫酸などの有機酸または鉱酸が好適であ
る。反応は通常室温付近で好適に行なわれる。

さらに、このようにして得られた目的化合物を原料とし
て、上記の化学的常法に従って、他の目的化合物に変え
ることもできる。

このようにして得られた目的化合物は種々の方法を適宜
組合わせることによって採取、分離、精製することがで
きる。例えば活性炭、シリカゲル等の各種担体を用いる
吸着またはイオン交換クロマト、あるいはセファデック
スカラムによるゲル濾過、エーテル、酢酸エチル、クロ
ロホルムなどの有機溶媒を用いての抽出などにより行な
われる。

特に異性体の分離は、変換反応終了後、または所望工程
の終了後の適切な時期に上記の分離精製手段によ・り行
うことができる。

次に実施例を示すが、本゛発明はこれらに限定実於例１
゜ ヒドロキシ−八ＩＬ　−２３８Ｂカルボン酸ナトリウム
塩（Ａ物’Ｅ） 下記組成の培地１００ｓ＋ｌを含有する５００ｍ１容三
角フラスコ２０本にノカルディア・エスピー５ＡＮＩＣ
６２９８１菌株を植菌し、３０”Ｃ１２２Ｏ７、ｐ、ｍ
で振盪培養し、２日後、λＩＬ−２３６Ｂ　　カルボン
酸ナトリウム塩を最終濃度でＯ，ＯＳ％になるように添
加して、更に５日間２６　”Ｃ，２２０７、ｐ、ｍで培
養した。

培地組成 グルコース　　　　　　１．０％ ペプトン　　　　　　　０．２ 肉エキス　　　　　　　０．１％ 酵母エキス　　　　　　０・ト コーンスチーブリカー　　　　　０．３水道水　　　　
　　　　残 （ｐＨ未修正） 培養終了後、変換反応液をｒ過し、ｒ液を苛性ソーダで
ｐＨ８，５に調整した。次いで、Ｆ液をハイポーラスポ
リマーＨＰ−２０の６００ｍ１を充填したカラムに付し
、水３６００ｇ１で洗ったのち、２０＊ｖ／ｖメタノー
ル１．２００ヨｌで溶出を行なった。

溶出液を減圧濃縮後、凍結乾燥し固型物６１０■が得ら
れた。こへで得られた固型物を分取用液体クロマトグラ
フィー（使用カラム；５ＳＯ−ＯＤｓ　−２９４２，φ
３０　ｆｌ　Ｘ　２５０朋）に付し、３０％ｖ／ｖメタ
ノールを展開溶媒としてくり返し溶出を行ない、最初に
溶出する人物質、次いで溶出するＢ物質が得られた。と
工で得られた２物質はそれぞれ減圧濃縮後、凍結乾燥し
てＡ物質５０η６６よびＢ物質５５１Ｉｇが得られた。

得られた人物質およびＢ物質のうち、いずれか一方は３
“位のヒドロキシ基がα配位であり、他方はβ配位であ
る。

以下、人物質およびＢ物質の物性値は次の通りである。

１）分子式＝０２３Ｈ５５０８Ｎａ ２）分子量：ＦＡＢ　　ｂｌｓ法による実測の結果、人
物質およびＢ物質のいずれも４６３　（Ｍ−１−Ｈ）＋
および４８５　（Ｍ＋Ｎａ）＋であった。

３）核磁気共鳴スペクトル：δ：　ｐｐｍ重水中、外部
基準にテトラメチルシランを使用して測定した核磁気共
鳴スペクトル（２７０λＩＨ２）は第１図（人物質）お
よび第２図（Ｂ物質）に示す通りである。

４）高速液体クロマトグラフィー： 以下の条件で人物質は４．８３３分、Ｂ物質は５．５分
の保持時間を有する。

カラム；内径約６朋、長さ約１０αのＦＩＲＯ−０ＤＳ
　−１２６２（エルマー光学（株）社製）杉動相；メタ
ノール：水：氷酢酸ニトリエチルアミン（５００：　５
００　：　ｉ　：　１　）カラム温度；４０℃ 流量；１．Ｏｓ＋ｌ／分 検出器：　ＵＶ２３８ｎｍ ５）ガスクロマトグラフィー： 以下の条件でＢ物質は２４．５６３分、人物質は２５．
４７５分の保持時間を有する。

カラム；内径約０２１１ｘ、長さ約２５ｍ、膜厚０．３
３μｍの化学結合型メチルシリコン（ヒユーレット・パ
ラカード社製、　　ＵＬＴＲＡ＃１　）カラム温度；約
２８０℃ 試料気化室及び検出器温度；約３００℃キャリアーガス
；ヘリウム　２．Ｏｍｔ１分検出器；水素炎イオン化検
出器 実施例２゜ ヒドロキシ−ＭＬ−２３６Ｂカルボン酸ナトリウム塩（
人物質） 下記組成の培地１００ｇ／を含有する５００；ｔｔ溶三
角フラスコ２０本にストレプトミセス・　エスピー　Ｓ
ＡＮＫ　６２５８５園株を植菌し、２７〜２８℃。

２２０　ｒｉｐ、ｍ、で振盪培養した。２日後、λＩＬ
−２３６Ｂカルボン酸ナトリウム塩を最終濃度で０．０
５％になるように添加して、更に５日間２７〜２８℃。

２２０　７、ｐ、ｍ、で培養した。

培地組成 グルコース　　　　　　　２．０％ ペプトン　　　　　　　　１．０ イーストエキス　　　　　０，１ 水道水　　　　　　　　　残　（ｐＨ＝７、ｏ　）培養
終了後、変換反応液をｒ過し、ｒ液を苛性ソーダでＩ）
Ｈ＝８．５に訓整した。次いで、　ｒ液をハイポーラス
ポリマーＨＰ−２０の６００−を充填したカラムに付し
、水３６００ｇ／で洗ったのち、２０％ｖ／ｖメタノー
ル１２００ｕｔで溶出を行なった。

溶出液を減圧濃縮後、凍結乾燥し、固形物７２０ｑが得
られた。この固形物を分取用液体クロマトグラフィー（
便用カラム８８０−ＯＤＳ−２９４２。

φ３０１２１　Ｘ　２５Ｑｆｌ　）に付し、３０％ｖ／
ｖメタノールす。

を展開溶媒としてくり返し溶出を行な−・、最初に溶出
する人物質、次いで溶出するＢ物質が得られた。こ〜で
得られた２物質はそれぞれ減圧濃縮後、凍結乾燥して純
粋の人物質−１５１１！９およびＢ物質３８■が得られ
た。人物質およびＢ物質の示す物性値は実施例１に記載
の通りであった。

試験例　コレステロール合成阻害作用 前記一般式（Ｉ）を有する力、ルボン酸、その薬理上許
容しうる塩、そのエステルまたはその閉環ラクトン体か
らなる？′；ど′ｌ−ジヒドロキシーλ（Ｌ−２３６Ｂ
誘導体はコレステロール合成経路上の律速酵素として知
られる３−ヒドロキシ−３−メチルグルタリル・コエン
ザイム人リダクターゼ（３−ｈｙｄｒｏｘｙ−３−ｍｅ
ｔｌｌｙｌ−ｇｌｕｔａｒｙｌ　−ｃ。

Ａ　ｒｅｄｕｃｔａｓｅ　）を特異的に阻害することが
分った。

これら化合物のコレステロール合成阻害作用〔ジャーナ
ル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｊ、　Ｂｉ
ｏｌ、　Ｏｈｅｍ、　）　２３４巻　２３３５頁（１９
５９年）記載の方法で測定〕　を第３表に示ｇａ表　：
’レスチロール合成ヲ５０％阻害する濃度 μｆ／ｘｌ ”物質　　　０．００１８ Ｂ物質　　　Ｑ、０２４ ＭＬ−２３６Ｂラクトン体（対照）　　　０．０１０

【図面の簡単な説明】

第１図は人物質の核磁気共鳴スペクトルを示し、第２図
はＢ物質の核磁気共鳴スペクトルを示す、

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、式▲数式、化学式、表等があります▼ を有するカルボン酸、その薬理上許容しうる塩、そのエ
   ステルまたはその閉環ラクトン体からなる３″，６′−
   ジヒドロキシ−ＭＬ−２３６Ｂ誘導体。 ２、式▲数式、化学式、表等があります▼ を有するカルボン酸、その薬理上許容しうる塩、そのエ
   ステルまたはその閉環ラクトン体からなる３″，６′β
   −ジヒドロキシ−ＭＬ−２３６Ｂ誘導体である特許請求
   の範囲第１項記載の化合物。 ３、式▲数式、化学式、表等があります▼ を有するカルボン酸、その薬理上許容しうる塩、そのエ
   ステルまたはその閉環ラクトン体からなる３″α，６′
   β−ジヒドロキシ−ＭＬ−２３６Ｂ誘導体である特許請
   求の範囲第２項記載の化合物。 ４、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を有するカルボン酸、その薬理上許容しうる塩、そのエ
   ステルまたはその閉環ラクトン体からなる３″β，６′
   Ｂ−ジヒドロキシ−ＭＬ−２３６Ｂ誘導体である特許請
   求の範囲第２項記載の化合物。 ５、式▲数式、化学式、表等があります▼ を有するカルボン酸、その薬理上許容しうる塩、そのエ
   ステルまたはその閉環ラクトン体からなるＭＬ−２３６
   Ｂ誘導体を、ノカルデイア属またはストレプトミセス属
   に属する微生物を用いて水酸化して式 ▲数式、化学式、表等があります▼ を有するカルボン酸、その薬理上許容しうる塩、そのエ
   ステルまたはその閉環ラクトン体からなる３″，６′−
   ジヒドロキシ−ＭＬ−２３６Ｂ誘導体に変換せしめ、変
   換反応物を含む系より３″，６′−ジヒドロキシ−ＭＬ
   −２３６Ｂ誘導体を採取することを特徴とする３″，６
   ′−ジヒドロキシ−ＭＬ−２３６Ｂ誘導体の製法。 ６、３″，６′−ジヒドロキシ−ＭＬ−２３６Ｂ誘導体
   の製造において、変換菌を培養した培養液にＭＬ−２３
   ６Ｂ誘導体を添加して変換培養させることからなる特許
   請求の範囲第５項記載の製法。 ７、３″，６′−ジヒドロキシ−ＭＬ−２３６Ｂ誘導体
   の製造において、変換菌を培養・集菌し、得られた変換
   菌菌体をＭＬ−２３６Ｂ誘導体と接触させることからな
   る特許請求の範囲第５項記載の製法。 ８、３″，６′−ジヒドロキシ−ＭＬ−２３６Ｂ誘導体
   の製造において、変換菌菌体から調製した無細胞抽出液
   をＭＬ−２３６Ｂ誘導体と接触させ、酵素的に水酸化す
   ることからなる特許請求の範囲第５項記載の製法。 ９、ノカルデイア属に属する微生物がノカルデイア・エ
   スピーＳＡＮＫ６２７８１（微工研菌寄第６１８１号）
   、同ＳＡＮＫ６２８８１（微工研菌寄第６１８２号）ま
   たは同ＳＡＮＫ６２９８１（微工研菌寄第６１８３号）
   である特許請求の範囲第５項、第６項、第７項または第
   ８項記載の製法。 １０、ストレプトミセス属に属する微生物がストレプト
   ミセス・エスピーＳＡＮＫ６２５８５（微工研条寄第１
   １４５号）である特許請求の範囲第５項、第６項、第７
   項または第８項記載の製法。