FI58714C - Foerfarande foer framstaellning av en lipolyserat triglyceridfett innehaollande smak foerbaettrande naeringskomponent - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av en lipolyserat triglyceridfett innehaollande smak foerbaettrande naeringskomponent Download PDFInfo
- Publication number
- FI58714C FI58714C FI751051A FI751051A FI58714C FI 58714 C FI58714 C FI 58714C FI 751051 A FI751051 A FI 751051A FI 751051 A FI751051 A FI 751051A FI 58714 C FI58714 C FI 58714C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- enzyme
- cheese
- milk
- fat
- lipolytic enzyme
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
- A23C19/06—Treating cheese curd after whey separation; Products obtained thereby
- A23C19/063—Addition of, or treatment with, enzymes or cell-free extracts of microorganisms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C15/00—Butter; Butter preparations; Making thereof
- A23C15/12—Butter preparations
- A23C15/14—Butter powder; Butter oil, i.e. melted butter, e.g. ghee ; Anhydrous butter
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C19/00—Cheese; Cheese preparations; Making thereof
- A23C19/02—Making cheese curd
- A23C19/032—Making cheese curd characterised by the use of specific microorganisms, or enzymes of microbial origin
- A23C19/0328—Enzymes other than milk clotting enzymes, e.g. lipase, beta-galactosidase
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
- A23C9/1203—Addition of, or treatment with, enzymes or microorganisms other than lactobacteriaceae
- A23C9/1216—Other enzymes
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L27/00—Spices; Flavouring agents or condiments; Artificial sweetening agents; Table salts; Dietetic salt substitutes; Preparation or treatment thereof
- A23L27/20—Synthetic spices, flavouring agents or condiments
- A23L27/24—Synthetic spices, flavouring agents or condiments prepared by fermentation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/14—Hydrolases (3)
- C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
- C12N9/18—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
- C12N9/20—Triglyceride splitting, e.g. by means of lipase
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
- Y10S435/8215—Microorganisms
- Y10S435/911—Microorganisms using fungi
- Y10S435/931—Mucor
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Seasonings (AREA)
- Dairy Products (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Confectionery (AREA)
- Edible Oils And Fats (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Fats And Perfumes (AREA)
Description
£72=^1 f , KUULUTUSJULKAISU 507-14 year· i»j (”)utlaggningsskrift 30 ' c(45) Patentti myönnetty 10 04 1031 Patent aoddelat (51) K».ik?/int.ci. A 23 L 1/23, a 23 c 19/00, C 12 N 9/20 SUOM I — FI N LAN D (21) P*t«nttlh»k«mui —Pi**nttn*öknlnx T51051 (22) H«k*ml*pilvi — Aniölcnlngtdig 08.0U.75 (23) AlkupUvt—GIMgh«ttd»g 08.0U.75 (41) Tullut julkitulot — Bllvlt offuntllg 09.10.75
Patentti, ja rekisteri hallitut NlhtMtolpwou j. kuuLjulkteun pvm.-
Patent- och reglsterstyrelsen Antektn utiagd och utUtkrifMn pubikertd 31.12.80
(32)(33)(31) WHy «“olkuui —Buglrd (vlorltet O8.OU.7U
USA(US) U58737 (71) GB Fermentation Industries, Inc., Rt. 52N, Kingstree, South Carolina, USA(US) (72) Louis I. Feldman, Morton Grove, Illinois, J. Gordon Dooley, Glenview, Illinois, USA(US) (7U) Oy Kolster Ab (5U) Menetelmä lipolysoidun triglyseridirasvaa sisältävän makua parantavan ruoka-ainekomponentin valmistamiseksi - Förfarande för framställning av en lipolyserat triglyceridfett innehällande smak förbättrande närings-komponent
Keksinnön kohteena on menetelmä lipolysoidun triglyseridirasvaa sisältävän makua parantavan ruoka-ainekomponentin valmistamiseksi, ja erityisesti sen kohteena on parannetun lipolysoidun rasvan tuottaminen Mucor miehei-lajista saatavalla entsyymivalmisteella.
Entsymaattisesti aikaansaadut maut ovat tavallisia monissa elintarvikkeissa, varsinkin niissä, jotka on valmistettu käymistä käyttäen. Esimerkiksi valmistettaessa elintarviketuotteita, kuten leipomotuotteita, kahvikerman korvikkeita, maitosuklaata, margariinia ja niiden kaltaisia, on toivottavaa saada maidon tai voin kaltainen maku lopulliseen tuotteeseen. Tietyissä juustolajeissa ja juusto-tuotteissa, varsinkin ns. pehmeissä juustoissa ja väkevissä juustoissa, kuten italialais-tyyppisissä muunnelmissa, erilaiset makuvivahdukset riippuvat juuston valmistuksessa käytetyistä erilaisista entsyymijärjestelmistä.
Rasvaa sisältävissä ruoka-aineissa pääasiallinen entsyymitoiminta on iipo-lyysi eli entsyymien katalysoima hydrolyyttinen triglyseridien pilkkominen.
Vaikka muutakin entsymaattista maun kehittymistä voi tapahtua samanaikaisesti lipolyysin yhteydessä, käsittelee tämä keksintö pääasiallisesti viimeksimainittua tyyppiä.
2 58714
Itsestään tapahtuva tai ei-säädettävä rasvojen hajoaminen on rasittanut elintarviketeollisuutta monia vuosia, koska tällöin voi olla seurauksena ei-toivot-tuja nakuja tai karkeata härskiyttä. Viime vuosina on kuitenkin säädettävän lipo-lyysin kehittämisestä ollut seurauksena monia parannettuja elintarviketuotteita. Niinpä meijeriteollisuudessa on yleisenä käytäntönä käsitellä maitorasvoja rasvaa hajoittavilla entsyymeillä haluttujen makujen aikaansaamiseksi. Rasvaa hajoittava entsyymi vaikuttaa triglyserideihin niin, että syntyy vapaita rasvahappoja, jotka vuorostaan voidaan edelleen muuttaa muiksi yhdisteiksi, kuten ketoneiksi joissakin tapauksissa. Syntyneiden rasvahappojen määrä ja laji riippuvat elintarviketuotteessa olevan rasvan määrästä ja laadusta, rasvaa hajoittavan entsyymituotteen määrästä ja tyypistä sekä käsittelyajasta ja -lämpötilasta rasvaa hajoittavalla entsyymillä. Lisätaustaa tavanomaisesta säädettävästä lipolyysistä löytyy julkaisusta J. Amer. Oil Chem. Soc. k9, 559-62 ( 19T"1) * ja- sen sisältämistä viitteistä.
Tunnetaan joukko erilaisia rasvaa hajoittavia entsyymejä, esimerkiksi hai-malipaasi, ennen mahalaukkua erittyvä esteraasi, maitolipaasi ja sienilipaasi. Erityisesti sienilipaaseja saadaan esimerkiksi Aspergillus-suvusta, kuten on esitetty U.S. patentissa 2 180 090, Rhizopus-suvusta, kuten on kuvattu U.S. patentissa 3 2β2 863, ja Mucor-suvusta, kuten nähdään U.S. patentista 3 6l6 233. Näiden sienilipaasien vaikutus härskiyden kehittymiseen rasvoissa Aspergillus-suvun suhteen on esitetty julkaisussa J. Gen. Appi. Microbiol. 10, 13-22 (1961); Rhizopus-suvun suhteen on kuvattu julkaisussa Agr. Biol. Chem. 33, 729-38 (1969); ja Mucor-suvun suhteen esitetty julkaisussa Appi. Microbiol. 16, 617-19 (1968) ja 17, 606-10 (1969). Tyypillisiä tähän asti käytettyjä kaupallisesti saatavia esteraaseja ja lipaaseja ovat ennen mahalaukkua erittyvät esteraasit, kuten ne, joita saadaan Dairyland Food Laboratory1stä kauppanimillä "Italase" ja "Capalase"; haimalipaasit, joita tuottaa Fermco Laboratories kauppanimellä "Fermlipase PL"; ja sienilipaasi, jota tuottaa Rohm and Haas kauppanimellä "Lipase B".
Eläimistä lipolyyttisia entsyymejä on hyvin niukasti saatavissa, kun taas mikro-organismien avulla lipolyyttisia entsyymi-järjestelmiä saadaan paremmin sekä lisäksi todennäköisesti tasaisempilaatuista tuotetta säädetyn käymisen ansiosta. Kaikki rasvaa hajoittavat entsyymit eivät kuitenkaan tuota haluttua maus-tamisjärjestelmää.
Nyt on keksitty, että laadultaan erinomainen, entsymaattisesti tuotettu triglyseridirasva-maustamisjärjestelmä voidaan saada mikro-organismista Mucor miehei. Tällöin triglyseridirasvaa sisältävä ruoka-ainekomponentti saatetaan kosketukseen rasvaa hajottavan entsyymijärjestelmän kanssa riittävässä määrässä lipolyysin aikaansaamiseksi entsyymijärjestelmän esteraasiaktiivisuuden ja lipaa-siaktiivisuuden suhteen ollessa suurempi kuin yksi, jolloin entsyymijärjestelmä 3 58714 muodostetaan fermentoimalla Mucor miehei-lajia viljelyväliaineessa ja erottamalla se viljelytuotteesta olennaisesti ilman Mucor miehein juoksutinentsyymiaktiivi-suutta.
EsteraasiaktiiviSuus (EA) tarkoittaa entsyymin vaikutusta vesiliuokoisiin rasvoihin, nimittäin rasvoihin, joiden hiiliketjujen pituudet ovat väliltä n. k - 10. Sitä vastoin lipaasiaktiivisuus (LA) tarkoittaa entsyymin vaikutusta veteen liukenemattomiin rasvoihin, nimittäin rasvoihin, joiden hiiliketjujen pituudet ovat n. 12 tai enemmän, erityisesti 12-22.
Tämän keksinnön mukaisesti on odottamatta havaittu, että lipolyyttisellä entsyymijärjestelmällä, joka on aikaansaatu tietyillä Mucor-suvun lajeilla ja erityisesti Mucor miehei-lajilla, päinvastoin kuin muilla sienillä, kuten Aspergillus- ja Rhizopus-suvuilla, on se haluttu ominaisuus, että niiden esteraa-si-aktiivisuus on suurempi kuin lipaasi-äktiivisuus, samalla tavalla kuin kaupallisesti käytettävissä ennen mahalaukkua erittyvissä esteraaseissa, jotka on saatu vasikasta, vohlasta ja karitsasta. Toisin sanoen sen EA/LA-suhde on suurempi kuin 1. Vertailun vuoksi mainittakoon, että Aspergillus- ja Rhizopus-suvuilla tuotettujen lipolyyttisten järjestelmien EA/LA-suhteiden on havaittu olevan pienempiä kuin 1, ja ne ovat niin muodoin sopimattomia tämän keksinnön tarkoituksiin. Edullisesti EA/LA-suhde on suurempi kuin 2 ja suhteet väliltä n. 2 - 10 ovat erinomaisen sopivia keksinnön mukaisesti.
Esteraasiaktiivisuus mitataan edullisesti trihutyriinitestillä, kun taas lipaasiaktiivisuus mitataan edullisesti oliiviöljysuhstraattitestillä. Nämä testit voidaan suorittaa seuraavasti.
Esterääsi-menetelmä Tätä menetelmää käytetään määritettäessä esteraasia, joka hydrolysoi tributyriinin. Esteraasia inkuboidaan tributyriiniliuoksessa pH 6:ssa ja 37°C:ssa. Reaktioseokseen 10 minuutin aikana vapautunut happo titrataan pH 8,7:ään.
Tulokset kuvastavat käytännöllisesti katsoen suoraa riippuvuussuhdetta reaktionopeuden ja entsyymiväkevyyden välillä suositellulla alueella.
Liuokset 1. Substraattiliuos 13 g arabikumia U.S.P. lisätään 11^ ml:aan 0,05M natriumasetaattiliuosta (6,8 g NaCgH^O^.3H20 1 litraan), sitten lisätään n. 50 mg tymolia ja sekoitetaan 25 minuuttia reagenssien liuottamiseksi. Lisätään 22,7 g tributyriiniä (75 mmoolia) puskuroituun kumiliuokseen ja emulgoidaan Waring-sekoittimella 5 minuuttia. Emulsio säädetään pH-arvoon 6,0 0,5N Na0H:lla. Alkalia tarvitaan vähemmän kuin 1 ml. Liuosta voidaan käyttää ainakin 3 päivää, kun sitä säilytetään jääkaapissa. Ravistetaan hyvin ennen jokaista käyttöä ja säädetään pH uudelleen 6,0:aan, jos on tarpeen.
* 5871 4
Entsyymin "sokeaa koetta" varten (ks. "Vertailut" seuraavassa) käytetään liuosta, jossa on 13 g arabikumia 11I+ ml:ssa 0,05M natriumasetaattia. Kumi-asetaat-tiliuoksen pH asetetaan arvoon 6,0, mikä vaatii 3 - ^ ml 0,1 N NaOH.
2. 0,02N NaOH.
3. Asetaattipuskuri, pH 5>9 - 6,2, 0,05M.
6,8 g natriumasetaatti. Trihydraattia liuotetaan n, 500 ml:aan vettä, lisätään 1,0 ml 1N HC1 ja liuos laimennetaan 1 litraksi tislatulla vedellä.
1. Entsyymiliuoksia.
Valmistetaan kaikki liuokset ja sarja laimennuksia asetaattipuskurin (n:o 3, edellä). Vaadittavat väkevyydet on annettu otsikon "Alue" alla seuraavassa.
Menettelytapa
Substraattiliuosta ravistellaan ja pipetoidaan 50,0 ml 125 ml:n Erlenmeyer-pulloon. Lisätään 10,0 ml entsyymiliuosta, sekoitetaan nopeasti ja liuoksesta otetaan 10,0 ml:n näyte, joka lisätään kO ml:aan vettä ja titrataan välittömästi 0,02N Na0H:lla pH 8,7:ään. Välittömästi 10,0 ml:n erän poistamisen jälkeen loput seoksesta pannaan 37°:lle hauteelle (mikä katsotaan ajan 0-pisteeksi), jolla sitä pidetään bo minuuttia jatkuvasti sekoittaen (upotettu magneettisekoitin). Tasan i+0 minuutin kuluttua 0-aikapisteestä otetaan toinen 10,0 ml:n näyte, joka lisätään ^0 ml:aan vettä ja titrataan pH 8,7:ään. Näiden kahden titrauksen välinen erotus ilmaisee asteen, johon tributyriini on hydrolysoitunut entsyymin vaikutuksesta.
Vertailut
Substraatin sokeaa koetta ei tarvita, mutta raakaentsyymi-valmisteet voivat vaatia entsyymin sokean kokeen. Menetellään kuten edellä kuvattiin, mutta käytetään säädettyä arabikumiliuosta ilman tributyriiniä tavallisen substraatti-liuoksen asemesta. Varsinainen tulos korjataan vähentämällä titrauslisäys, joka saadaan sokeassa kokeessa.
Yksiköt
Yksi yksikkö esteraasia tuottaa testiolosuhteissa yhden mikroekvivalentin happoa minuutissa.
Esteraasi-aktiivisuus (EA) on yksiköiden lukumäärä grammaa kohti valmistetta.
Laskeminen EA = ml NaOH x N NaOH x 1000 x ml taa inkuboitua seosta (1) minuuttia x g valmistetta inkuboidussa seoksessa x ml:aa näytettä jossa ml NaOH on titrauslisäys 10 ml:n näytteelle ja N NaOH on titraukseen käytetyn NaOH:in normaalisuus.
5871 4 5
Niinpä: EA = ml :aa NaOH x 0,02 x 1000 x 60 (2 ) UO x g:aa valmistetta x 10 EA = ml:aa NaOH x 3 (1) grammaa valmistetta inkuboidussa seoksessa
Alue Näytteen laimennuksen tulisi olla sellainen, että saadaan titrauslisäyksiä väliltä 0,5 - 1,5 ml. Uusintatestejä tulisi tehdä, jos on tarpeen, tulosten saamiseksi tältä alueelta.
Tributyriinihydrolyysin edistyminen on suoraan verrannollinen aikaan ja on mahdollista suorittaa määritys käyttämällä lyhyempiä kuin 1*0 minuutin inkubointi-jaksoja. Luonnollisesti yhtälö (3) on sitten korjattava oikealla aikakertoimella. Lipaasi-menetelmä Tätä menetelmää käytetään määritettäessä lipaasia, joka hydrolysoi oliiviöljyn. Lipaasia inkuboidaan oliiviöljyemulsiossa pH 6,5:ssä ja 30°C:ssa. Reaktio-seoksessa 5 minuutin aikana vapautunut happo titrataan pH 8,0:aan. Tulokset kuvastavat käytännöllisesti katsoen suoraa riippuvuussuhdetta reaktionopeuden ja entsyymi väkevyyden välillä suositellulla alueella.
Kemikaalit: 1. Oliiviöljy, U.S.P.
2. "Amerchol L-101" (lanoliinista johdettuja vapaita steroleja), American Cholestrol Products, Edison, New Jersey 3. Natriumbarbitaali, N.F.
1*. Arabikumi, U.S.P.
5. Natriumasetaatti .3Hg0, C.P.
6. Natriumkloridi, C.P.
7. 0,5N NaOH
8. 0,02N NaOH
9. 0,1N HC1 10. Etyylialkoholi (denaturoitu n:o 23A on sopiva).
Laitteisto 1. Waring-sekoitin 2. Kaksi magneettisekoitinta, joista toinen on sopiva upotettavaksi vesi-hauteeseen (model MS-7, Tri-R Instruments, Jamaica, New York).
3. pH-mittari titrausta varten, varustettu pienellä yhdistelmäelektrodil-la (kuten n:o I+858—L15 , A.H. Thomas) 1*. Mikrobyretti, 10 ml 0,02 ml:n jaoituksella (Kimble ψψ 17107F, jossa on Luer-tyyppinen käsiruiskuneula 20G 1-1/2").
6 58714
Liuokset 1. Substraattiemulsio 30 g arabikumia ja 270 ml tislattua vettä sekoitetaan magneettisesti 30 minuuttia huoneen lämpötilassa. Kaikki muodostuneet kasautumat hajoitetaan lasisauval-la. Jäähdytetään 5°C:seen. Punnitaan 6 g Amerchol'ia 1*00 ml:n laboratoriotasi in, lisätään 72 g oliiviöljyä ja 222 g jäähdytettyä arabikumi-liuosta. Sekoitetaan lasisauvalla ja kaadetaan Waring-sekoittimeen. Sekoitetaan 5 minuuttia. Säädetään pH 6,3:een Q,5N NaOHrlla, jäähdytetään 5°C:seen ja sekoitetaan vielä 7 minuuttia. Lämpötila on voinut nousta enintään l*7°C:seen ja pH 6,5:een. Ellei, säädetään pH 6,5:een. Emulsio on pysyvä ainakin 8 päivän ajan jääkaapissa säilytettynä. Lämpötila ei saisi pudota alle 1°C:een.
2. Puskuri a. Varastoliuos. Liuotetaan 9»7 g natriumasetaattitrihydraattia ja lt,7 g natriumbarbitaalia tislattuun veteen 500 mlrksi. Tämä liuos on 0,1^-normaalinen barbitaalin suhteen ja 0,ll+-normaalinen asetaatin suhteen, pH 9*9. Säilytetään j ääkaapissa.
b. Käyttöliuos. Laimennetaan Uo ml varastoliuosta, 16 ml 8,5-# NaCl-liuosta ja 53 ml 0,111 HC1 tislatulla vedellä 200 ml:ksi, pH 6,5· Hienosäätöä varten käytetään 0,111 HC1 tai 0,1N NaOH. Varastoidaan jääkaapissa. Liuos heitetään pois, jos kiteitä ilmestyy varastoinnin aikana.
3. Entsyymiliuokset
Kiinteiden valmisteiden analysoimiseksi valmistetaan ensin varastoliuos sekoittamalla näytettä magneettisesti sopivassa määrässä vettä n. 30 minuuttia ennen lopullisen laimennuksen valmistamista laimentamalla edelleen vedellä. Varastoliuos on pysyvä useita tunteja 5°C:ssa, mutta erittäin laimea lopullinen käyttöliuos tulisi käyttää 5 minuutissa. Tuntemattomien näytteiden analysoimiseksi on tarpeen etsiä sopiva laimennus kokeilemalla. Valmisteet, joiden aktiivisuus likimain tunnetaan, tulisi laimentaa pitoisuuteen 1 - 3,6 lipaasi-yksikköä/ml.
Käsite "lipaasi-yksikkö" määritellään seuraavassa.
Menettelytapa
Emulsiota ja puskuria sekoitetaan painosuhteessa 3:1 substraatin valmistamiseksi. 8,0 ml:an annoksia substraattia pannaan 100 ml:n laboratoriolaseihin, jotka sisältävät magneettisen sekoitussauvan. Substraattiliuosta sekoitetaan magneettisesti. Jokainen koe suoritetaan kahdesti (sokea koe ja näyte), sisältäen substraattia seuraavasti:
Hokea koe 1. Lisätään HO ml etyylialkoholia.
2. Lisätään 2,0 ml entsyymiliuoksen näytettä.
7 5871 4 Näyte 1. Tasapainoitetaan substraatti 30°C:ssa vesihauteessa.
2. Lisätään 2,0 ml:n näyte entsyymiliuosta.
3. Inkuboidaan 30°C:ssa 5,0 minuuttia.
U. Lisätään U0 ml etyylialkoholia.
Titrataan sekä sokea koe että näyte 0,02N NaOH:lla pH 8,Oraan.
Laskelmat 1 Lipaasi-yksikkö (LU) = lipaasimäärä, joka tarvitaan antamaan 1 mikromooli H+/minuutti
Lipaasi-aktiivisuus (LA) = LU:n lukumäärä/g valmistetta.
3 ~3 LA = mlraa NaOH x N NaOH x 10 /mg lisättyä entsyymi-valmistetta x 10 x minuuttia. Kun käytetään 0,02 N NaOHrta ja 5 minuutin reaktioaikaa on LA = mlraa NaOH x k000/mg entsyymiä.
U.S.P. = United States Pharmacopoeia N.F. = National Formulary (kansallinen kaavakokoelma) C.P. = kemiallisesti puhdas Tämä keksintö ei rajoitu edellä esitettyihin menetelmiin esteraasiaktiivi-suuden ja lipaasiaktiivisuuden mittaamiseksi, muut menetelmät ja muunnelmat esitetyistä menetelmistä ovat alaan perehtyneelle selviä tämän selostuksen perusteella.
Halutun lipolyyttisen entsyymimaustamisjärjestelmän tuottaminen voidaan suorittaa tavanomaisin käymisprosessein, minkä jälkeen tuote otetaan talteen sopivalla menetelmällä. Niinpä ravintovällainetta, joka sisältää assimiloituvaa hiiltä, typpeä ja pieniä määriä mineraaleja, inkuboidaan jonkun Mucor-lajin viljelmän, erityisesti Mucor mieheirn viljelmän kanssa pinnanalaisena viljelmänä aerobisissa olosuhteissa pHrssa väliltä n. 3 - 8 ja lämpötilassa väliltä n. 20 - 50°C n. 2 - 1 ii päivää. Esimerkkejä valikoiduista Mucor miehei-kannoista, jotka voidaan täten käyttää antamaan haluttu entsyymi-maustamisjärjestelmä, on rajoituksitta yleisesti saatavissa koodinimillä NRRLA 13 131 ja A 13 0^2 laboratorioista "Northern Regional Research Laboratories, Peoria, Illinois, Muut sopivat Mucor miehei-kan-nat selviävät alaan perehtyneelle tästä selostuksesta.
Aikaisemman käytännön mukaisesti esteraasit ja lipaasit on joko poistettu tai inaktivoitu halutun juoksutintuotteen talteenoton yhteydessä, kuten on esitetty U.S. patenteissa 3 6l6 233 ja 3 763 011, saksalaisessa hakemusjulkaisussa 2 232 996 sekä brittiläisessä patentissa 1 207 892.
Tämän keksinnön mukaisesti haluttu entsyymimaustamisjärjestelmä otetaan talteen erottamalla käymismäskistä, niin että saadaan sopiva EA/LA-suhde, kuten edellä määriteltiin. Tämä voidaan suorittaa suodattamalla maski alhaisessa 8 58714 pH:ssa n. h - 5,uuttamalla suodatuskakku korkeassa pH:ssa n. 10 - 1?, lisäämällä uutteeseen happoa, kunnes pH on n. 7 ja ottamalla sitten suodattamalla talteen tai väkevöimällä uute johon happoa on lisätty, haihduttamalla tai ultrasuodatlamalla ja kuivaamalla sitten väkevöity uute esimerkiksi suihkukuivaarnalla tms.
On selvää, että tiettyjä käyttötarkoituksia varten on toivottavaa käyttää lipolyyttistä entsyymijärjestelmää, joka ei sisällä käytännöllisesti katsoen lainkaan aktiivista juoksutusentsyymiä. Tähän päästään käyttämällä edellä esitettyä talteenottomenettelyä tai muuta puhdistusmenetelmää, joka on alaan perehtyneen hyvin tuntema.
Talteenotettu lipolyyttinen entsyymimaustamisjärjestelmä voidaan lisätä maitoon, maitorasvaan, voiöljyyn, juustoon, maitosuklaaseen margariiniöljyyn, kahvikerman korvikkeisiin, ja muihin triglyseridirasvaa sisältäviin ruoka-aineisiin ja näiden raaka-aineisiin sekä inkuboida lämpötiloissa väliltä n. 10 - 50°C n. kahdesta tunnista 20 päivään halutun maidon tai voin kaltaisen maun saamiseksi. Sitä voidaan käyttää kiihdyttämään tai voimistamaan luonnollisesti kehittyviä makuja näissä ruoka-aineissa ja näiden raaka-aineissa ja sitä voidaan sekoittaa tunnettujen makua kehittävien aineiden kanssa antamaan erilaisia makusävyjä.
Sitä voidaan esimerkiksi sekoittaa U.S. patentin 2 531 329 mukaisten ennen mahalaukkua erittyvien esteraasientsyymiyhdistelmien kanssa (tuottaa Dairyland Food Laboratory nimellä Italase), tai sitä voidaan käyttää yhdessä U.S. patentin 3 100 153 mukaisten PeniciIlium roquefortimaustamisyhdistelmien kanssa. Yleensä talteenotettua rasvaa hajoittavaa entsyymiä lisätään määrissä väliltä n. 0,001 -0,1 paino-$, triglyseridirasvaa sisältävän substraatin painosta laskettuna, ja maidon ollessa kysymyksessä edullisesti määrissä väliltä n. 8 - 125 g/1000 kg maitoa.
Esimerkkejä triglyseridirasvoista, joita voidaan käsitellä tämän keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetulla lipolyyttisellä entsyymimaustamisjärjestelmällä haluttujen makujen kehittämiseksi, ovat eläinrasvat, kuten maitorasva, sianihra ja tali, sekä kasvirasvat, kuten puuviliasiemenöljy, soijaöljy, maissi-öljy, maapähkinäöljy, safloriöljy, palmuöljy, kookosöljy sekä margariiniöljy ja leivontarasva seokset.
Esimerkkejä juustoista, joissa esillä olevaa lipolyyttistä entsyymimaustamis j ärjestelmää voidaan käyttää haluttujen makujen kehittämiseksi, ovat Pro olone, Romano, Feta, Pizza, Mozzarella, Cheddar, Swiss, Blue, Parmesan, Colby, Couda ja
Edam.
Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä lähemmin, 9 58714
Esimerkki 1
Mucor miehei, NRRL 13,0^2, siirretään agarvinopintaviljelmästä aseptisissa olosuhteissa i litran Erlenmeyer-pulloon, joka sisältää 2tf) ml seuraavaa väJ lainetta : soijajauhoa ("Nutrisoy 300 C") 1,5 % kuivattua heraa 3,0 entsymaattisesti hajoitettua maissitärkkelystä 12,0 vettä 83,5
Yhteensä 100,0 %
Pulloa inkuboidaan pyörivässä ravistimessa 3T°C:ssa 1lh tuntia lähtien alku-pH-arvosta n. 6. Haluttu lipolyyttinen entsyymijärjestelmä otetaan talteen seuraavasti: käymisliemi säädetään pH 5:een ja suodatetaan sitten. Suodos uutetaan laimealla NaOH-liuoksella pH 10 - 11:ssa ja uutteeseen lisätään happoa kunnes pH on 7· Sen jälkeen uute suodatetaan ja haihdutetaan väkevöidyksi tuotteeksi, jonka EA-arvo on 25,8 ja EA/LA-suhde 2,6 yhdessä talteenottovaiheessa (A); ja suodatetaan, haihdutetaan ja suihkukuivataan kiintoaineeksi, jonka EA/LA-suhde on 3,5 toisessa talteenottovaiheessa (B).
Mucor miehei'stä kehitettyä lipolyyttistä entsyymiä, joka on valmistettu kuten edellä esitettiin talteenottovaiheessa A ja jolla on todettu EA/LA-suhde 2,6, käytetään kehittämään haluttu juuston maku seuraavasti: k^0 g:n näytteitä "Current A Cheddar"-juustoa (2 - h viikon vanhaa juustoa, jolla on mieto maku) jauhetaan Sunbeam-mallisella pöytäsähköjauhimel.la, ja rasvoja hajoittava entsyymi sekoitetaan sen kanssa jatkaen sekoittamista, kunnes se on tasaisesti jakautunut suhteessa mg/ä50 g juustoa. Sekoitetut entsyymi-juustoyhdistelmät pannaan sitten steriileihin muovisiin petrimaljoihin. Maljat sijoitetaan anaerobiseen säiliöön homeen kasvun estämiseksi, ja osaa näytteistä inkuboidaan 1 päivää 20°C:ssa ja loppuosaa 11 päivää 20°C:ssa. Näiden inkuboimis-jaksojen jälkeen juuston organoeptisiä ominaisuuksia tutkittiin maistamalla juustoa ja sillä havaittiin olevan puhdas makusävy, samanlainen, jollaine.n saadaan kaupallisesti saatavalla ennen mahalaukkua erittyvällä Esterase C:llä (Dairdland Foods Laboratory) testattuna samalla tavalla. Kumpikin juusto kehitti halutun härskin maun miedosta keskinkertaiseen. Vertailemalla havaittiin, että esterausi-valmisteella, joka oli saatu Aspergillus Flavus-lajista, EA/LA-suhde oli 0,08 ja se antoi edellisessä testissä ei-toivotun karkean butyyli-kapronikapriini.-tyyppisen sävyn ja lievän metallisen jälkimaun.
Esimerkki 2
Mucor miehei’tä, NRRL 13,0h2, käytettiin lipolyyttisen entsyymijärjestelmän valmistamiseen, kuten esimerkissä 1, paitsi että käyminen suoritettiin tuotan- ,0 5871 4 tosäiliössä, jossa oli vesipitoinen ravintoväliaine, joka sisälsi 16 % maissitärk-kelystä, joka oli liuotettu bakteriaalisella (X~amylaasilla, i* % Kaysoy-soijapapu-jauhoa, josta rasva oli poistettu, ja 2 % suihkukuivattua makeata heraa. Talteenoton jälkeen 77 tunnin käymisen jälkeen mäskistä määritettiin EA- ja LA-arvot seuraavasti: EA = 2k,9 LA = 2,8 EA/LA = 8,9
Lipolyyttinen entsyymituote otetaan talteen ja käytetään kehittämään haluttu juuston maku, kuten esimerkissä 1 käytännöllisesti katsoen yhtä hyvin tuloksin.
Seuraavissa esimerkeissä Mucor miehei-lipolyyttinen entsyymi on entsyymijärjestelmä, joka valmistettiin kimmankin esimerkin 1 ja 2 menetelmän mukaisesti ja jonka EA-arvot ovat väliltä 10 - 100.
Esimerkki 3
Mucor miehei-lipolyyttistä entsyymiä lisätään juustomaitoon ennen alkuun-panevan viljelmän lisäystä 8-125 g/1000 kg maitoa säädettävän lipolyysin kehittämiseksi antamaan makuja, jotka vaihtelevat hienosta ja voin kaltaisesta pippurisen ja terävän "pikanttiin" valmistettaessa erilaisia italialaistyyppisiä juustoja, nimittäin laatuja Asiago-Mozzarella, Provolone ja Romano vastaavasti juusto-maidon kanssa Romanoa ja muita terävästi maustettuja muunnelmia varten, joita on käsitelty pitemmälle lipolyyttisellä entsyymillä.
Esimerkki b
Mucor miehei-lipolyyttistä entsyymiä lisätään juustomaitoon ennen alkuun-panevan viljelmän lisäystä 8-125 g/1000 kg maitoa säädettävän lipolyysin kehittämiseksi antamaan suurempia määriä lyhytketjuisia rasvahappoja suhteessa pitkä-ketjuisiin rasvahappoihin, jolloin lyhytketjuiset rasvahapot muutetaan aineenvaih-dunnallisesti Penicillium rocueforti-itiöiden lopputuotteilla antamaan haluttu maku ja haluttu metyyliketonien sekä C02:n määrä Blue Cheese-juustoon ja Blue Cheese-maku.
Esimerkki 5
Mucor miehei-lipolyyttistä entsyymiä lisätään juustolaatujen Cheddar, Colby, Romano, Swiss, Mozzarella, Blue, Gouda, Edam, Provolone ja Parmesan maseroituun muotoon 0,01 - 0,1 %, laskettuna jauhetun juuston painosta tai kiinteästä juustosta, sekä ilman muita entsyymejä että niiden kanssa antamaan entsyymillä modifioituja erittäin hyvänmakuisia juustoja käytettäviksi korvaamaan kiinteä juusto valmistettaessa pastöroitua sulatejuustoa, juustoruokia, juustolevitettä, juusto-jauhoa, juustovälipaloja, juustokastikkeita, kastojuustoja ja salaattikastikkeita.
Π 58714
Pysyvän maun saavuttamiseksi entsyymillä modifioidun juuston lipolyyttinen entsyymi inaktivoidaan käsittelemällä tuotetta 70°C;ssa 15 minuuttia pH 5,0:ssa.
Esimerkki 6
Voita, joka on valmistettu kirnutusta kermasta ja pesty vedellä, muutetaan voiöljyksi lämmittämällä 39°C:seen ja linkoamalla jäännös voiheran erottamiseksi. Tätä yleistyyppistä voiöljyä käsitellään 0,005 - 0,5 %:lla. Mucor miehei-lipolyyt-tistä entsyymiä, laskettuna steriloidun voiöljyn voirasvan painosta. Lipolyytti-sellä entsyymillä käsiteltyä voiöljyä inkuboidaan 22 - 37°C:ssa 1 - 3 päivää sopivan maun kehittymistä varten ennen inaktivointia 70°C:ssa 15 minuutin ajan pH 5,0:ssa. Lipolyyttisellä entsyymillä käsiteltyä voiöljyä käytetään sekä pelkästään että muiden maustehappojen, nimittäin etikka- ja butyyrihapon kanssa, ja/tai muiden maustekemikaalien, varsinkin diasetyylin kanssa, maku- ja rakenneaineena voimausteessa, margariinissa, maitotuotteiden korvikkeissa, maitosuklaatyyppisissä makeisissa sekä voilevitteissä ja kastikkeissa.
Esimerkki 7
Mucor miehei-lipolyyttistä entsyymiä lisätään 200-kertaiseen painomäärään steriloitua kermaa, jonka voirasvapitoisuus on 35 %· Sen jälkeen kun kerman pH on säädetty happamaksi maitohapolla tai maitohappoviljelmällä, seosta sekoitetaan mekaanisesti 37°C:ssa U tuntia. Syntynyttä seosta käsitellään tavanomaisella menetelmällä voin valmistamiseksi, jolloin saadaan voita, jolla on erinomainen, parantunut maku.
Esimerkki 8
Mucor miehei-lipolyyttistä entsyymiä lisätään 0,001 - 0,01 % joko muun entsyymijärjestelmän kanssa tai ilman sitä lietteeseen, jossa on 9 ~ 1^ % täys-rasvaisen maidon kiintoainetta, ennen inkubointia 22 - 33°C:ssa h - 8 tunnin ajan. Säädettävä lipolyysi inaktivoidaan samalla tavalla kuin esimerkissä 6 kuvattiin. Tätä lipolyyttisellä entsyymillä modifioitua täysmaitojauhetta käytetään antamaan luontaisten maitotuotteiden kaltaista makua ruoka-ainetuotteille, kuten maitosuklaamakeiselle, kahvikerman korvikkeille, korvikejuustolle ja meijerielintarviketuotteille.
Esimerkki 9
Mucor miehei-lipolyyttisellä entsyymillä modifioitua kiinteätä juustoa, joka on valmistettu kuten esimerkissä 5, käytetään lemmikkieläinten ruokavalmisteissa, varsinkin koiran ruokavalmisteissa, 1,0 - 10,0 % valmisteen kiintoaineiden kokonaismäärästä, antamaan ravitseva, parantunut maku ruokavalmisteelle.
Esimerkki 10
Mucor miehei-lipolyyttistä entsyymiä käytetään levitejuuston käsittelemiseen esimerkissä 5 kuvatun menetelmän mukaisesti lämpökäsittelemällä juustoa 77°C:ssa 15 sekunnin ajan ei-toivotun homeen ja bakteerien hävittämiseksi ja 12 5 871 4 lipolyyttisen entsyymin tehokkaaksi inaktivoimiseksi. Lipolyyttisellä entsyymillä käsitelty levitejuusto on hyväksyttävää lemmikkieläinten ruokavalmisteisiin.
Esimerkki 11
Mucor miehei-lipolyyttisellä entsyymillä käsiteltyä (modifioitua) täysmai-tojauhetta, joka on valmistettu kuten esimerkissä 8, käytetään 5,0 - 15,0 % valmistettaessa parannettua, täyteläisemmin maustettua kahvikerman korviketta.
Esimerkki 12
Mucor miehei-lipolyyttisellä entsyymillä käsiteltyä (modifioitua) täysmaito-jauhetta, joka on valmistettu kuten esimerkissä 8, käytetään määrässä 2,0 - 10,0 % valmistettaessa parannettua, voimakkaammin ja täyteläisemmin maustettua happaman kerman korviketta.
Esimerkki 13
Bleu-juustoa tehdään raakamaidosta, homogenoidaan 32°C:ssa ja valkaistaan bentsoyyliperoksidilla. Maito kuumennetaan 30°C:seen ja ympätään 1 %:lla. Streptoccus lactis-käynnistinainetta. Lyhyen seisotusajan jälkeen maito ympätään mikrobisella juoksutusaineella, joka on saatu Mucor miehei-kannan NRRL A 13,1+02 viljelmästä, juoksutusainetta lisätään 188 g/1000 kg maitoa, ja 8 - 16 g:lla Mucor miehei-lipolyyttistä entsyymiä/1000 kg maitoa. Seosta sekoitetaan kunnes saadaan juusto-massa, joka on kiinteydeltään tyydyttävä. Juustomassa ympätään sitten Penicillium roqueforti-itiöillä, erotetaan herasta ja siirretään muotteihin. Muoteissa oleva juustomassa suolataan upottamalla suolaliuokseen 3 päiväksi ja pakataan tyhjiö-pakattuihin muovipusseihin ("Cryovac"). Pieniä reikiä pistellään kautta koko juuston ilman päästämiseksi ja homeen kasvun edistämiseksi. Juusto kypsennetään sitten sijoittamalla se kypsytystilaan 2 kuukaudeksi l8°C:seen ja 90 %:n kosteuteen antamaan laadultaan erinomaista Bleu-juustoa, jolla on parantunut maku verrattuna juustoon, joka saadaan lisäämättä lipolyyttistä entsyymiä.
Esimerkki 1U
Romano-tyyppinen juusto tehdään osittain kuoritusta maidosta, joka sisältää n. 2 % rasvaa. Maito lämmitetään 31~32°C:seen, ja lisätään 1 % Streptococcus thermophilus- ja Lactobacillus bulgaricus-viljelmiä suhteessa 1:1. Juoksutinta lisätään riittävä määrä maidon koaguloimiseksi 15 - 17 minuutissa (n. 190 g/ 1000 kg). Lisätään Mucor miehei-lipolyyttistä entsyymiä 62 125 g 1000 kg kohti maitoa. Syntynyt juusto leikataan 9 mm:n veitsillä. Leikkaamisen jälkeen juustoa keitetään 1+7-1+8°C: ssa 30 minuuttia ja erotetaan sitten herasta. Juusto pannaan nuotteihin, puristetaan, kuivataan hyllyillä 2-1+ päivää ja suolataan sitten b - 5 %‘n suolapitoisuuteen. Juusto kypsytetään sitten 10-l6°C:ssa ja 70 %:n suhteellisessa kosteudessa antamaan laadultaan erinomaista Romano-juustoa, jolla on parantunut maku verrattuna juustoon, joka on saatu lisäämättä lipolyyttistä entsyymiä.
13 5 87 1 4
Esimerkki 15
Nestemäistä lyhennysainetta, jollaista on kuvattu U.S. patentissa 2 H1',· Ά',(> ja plastista lyhennysainetta, joka on kuvattu U.S. patentissa. 2 132 333, i riku toi -daan kumpaakin 1 - 15 paino-#:n kanssa Mucor miehei-lipolyyttistä entsyymiä 32°C:ssa 2 tuntia haluttujen makujen kehittämiseksi, mitä seuraa entsyymin inaktivointi 21°C:ssa 15 minuutin ajan pH 5,0:ssa.
Claims (3)
1. Menetelmä lipolysoidun triglyseridirasvaa sisältävän makua parantavan ruoka-ainekomponentin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että triglyseridirasvaa sisältävä ruoka-ainekomponentti saatetaan kosketukseen rasvaa hajottavan entsyymijärjestelmän kanssa riittävässä määrässä lipolyysin aikaansaamiseksi, entsyymijärjestelmän esteraasiaktiivisuuden ja lipaasiaktiivisuuden suhteen ollessa suurempi kuin yksi, jolloin entsyymijärjestelmä muodostetaan fermentoimal-la Mucor miehei-lajia viljelyväliaineessa ja erottamalla se viljelytuotteesta olennaisesti ilman Mucor miehein juoksutinentsyymiaktiivisuutta.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lipolyyttinen entsyymijärjestelmä saatetaan kosketukseen maitorasvaväliaineen kanssa.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lipolyyttinen entsyymijärjestelmä saatetaan kosketukseen maidon kanssa ja että lipolyyttistä entsyymiä lisätään 8-125 g 1000 kiloa kohti maitoa. k, Patenttivaatimusten 1-3 mukaisessa menetelmässä käytettävä entsymaatti-r.er. makuaine, tunnettu siitä, että se sisältää lipolyyttisen entsyymi-ihakuainejärjestelmän, jossa esteraasiaktiivisuuden ja lipaasiaktiivisuuden suhde on suurempi kuin yksi ja joka on erotettu Mucor miehein fermentoidusta viljely-tuotteesta, ja joka on olennaisesti vapaa Mucor miehein juoksutinentsyymiaktiivisuudesta.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US45873774A | 1974-04-08 | 1974-04-08 | |
| US45873774 | 1974-04-08 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI751051A FI751051A (fi) | 1975-10-09 |
| FI58714B FI58714B (fi) | 1980-12-31 |
| FI58714C true FI58714C (fi) | 1981-04-10 |
Family
ID=23821891
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI751051A FI58714C (fi) | 1974-04-08 | 1975-04-08 | Foerfarande foer framstaellning av en lipolyserat triglyceridfett innehaollande smak foerbaettrande naeringskomponent |
Country Status (29)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4065580A (fi) |
| JP (1) | JPS5738226B2 (fi) |
| AR (1) | AR218602A1 (fi) |
| AT (1) | AT353082B (fi) |
| AU (1) | AU499232B2 (fi) |
| BE (1) | BE827695A (fi) |
| CA (1) | CA1050909A (fi) |
| CH (1) | CH628216A5 (fi) |
| CS (1) | CS188224B2 (fi) |
| DD (1) | DD117591A5 (fi) |
| DE (1) | DE2515021C2 (fi) |
| DK (1) | DK150275A (fi) |
| ES (1) | ES436419A1 (fi) |
| FI (1) | FI58714C (fi) |
| FR (1) | FR2266464B1 (fi) |
| GB (1) | GB1486069A (fi) |
| HU (1) | HU173421B (fi) |
| IE (1) | IE40888B1 (fi) |
| IL (1) | IL46862A (fi) |
| IT (1) | IT1054613B (fi) |
| MX (1) | MX2953E (fi) |
| NL (1) | NL181549C (fi) |
| NO (1) | NO140524C (fi) |
| PL (1) | PL94989B1 (fi) |
| RO (1) | RO72845A (fi) |
| SE (4) | SE409405B (fi) |
| SU (1) | SU576010A3 (fi) |
| YU (2) | YU89275A (fi) |
| ZA (1) | ZA751708B (fi) |
Families Citing this family (30)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4206631A (en) * | 1978-06-02 | 1980-06-10 | Batavian Rubber Company Limited | Inflatable product testing |
| US4244983A (en) * | 1979-02-06 | 1981-01-13 | The Pro-Mark Companies | Preparation of low fat imitation cream cheese |
| US4379175A (en) * | 1979-02-06 | 1983-04-05 | The Pro-Mark Companies | Preparation of low fat imitation cream cheese |
| DE3106250C2 (de) * | 1981-02-20 | 1983-10-13 | Dr. Otto Suwelack Nachf. GmbH & Co, 4425 Billerbeck | Verfahren zur Herstellung von aromahaltigen Lebensmittelprodukten und deren Verwendung |
| DK402583D0 (da) * | 1983-09-05 | 1983-09-05 | Novo Industri As | Fremgangsmade til fremstilling af et immobiliseret lipasepraeparat og anvendelse deraf |
| US4636468A (en) * | 1984-06-25 | 1987-01-13 | Genencor, Inc. | Lipolytic enzyme derived from a aspergillus microorganism having an accelerating effect on cheese flavor development |
| JPS62127548A (ja) * | 1985-11-28 | 1987-06-09 | Hino Motors Ltd | トランスミツシヨンの変速操作機構 |
| US5674745A (en) * | 1989-08-31 | 1997-10-07 | Bush Boake Allen Limited | Biotransformation of fatty substrates |
| GB8919671D0 (en) * | 1989-08-31 | 1989-10-11 | Bush Boake Allen Ltd | Biotransformation of fatty substrates |
| US5320959A (en) * | 1990-08-15 | 1994-06-14 | Rhone-Poulenc Inc. | Liquid lipase from animal origin and method of preparation |
| US5271949A (en) * | 1991-09-18 | 1993-12-21 | Van Den Bergh Foods Company, Division Of Conopco, Inc. | Process for preparing a flavor concentrate |
| JPH0824534B2 (ja) * | 1992-03-02 | 1996-03-13 | カンバーランド・パツキング・コーポレーシヨン | 天然バターの風味をもつマーガリン等のスプレッドの製造方法 |
| ATE149290T1 (de) * | 1992-04-25 | 1997-03-15 | Nestle Sa | Verfahren zur aromatisierung von milchschokolade |
| EP0567661A1 (fr) * | 1992-04-25 | 1993-11-03 | Societe Des Produits Nestle S.A. | Lipase modifiée, procédé de modification et utilisations |
| US5429829A (en) * | 1993-05-17 | 1995-07-04 | Ernster, Sr.; John H. | Cheese manufacturing method |
| US6936289B2 (en) | 1995-06-07 | 2005-08-30 | Danisco A/S | Method of improving the properties of a flour dough, a flour dough improving composition and improved food products |
| ATE217900T1 (de) * | 1995-06-08 | 2002-06-15 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Aromastoff |
| EP0973399B1 (en) | 1997-04-09 | 2002-07-17 | Danisco A/S | Improved method for preparing flour doughs and products made from such doughs using glycerol oxidase |
| ES2188190T5 (es) | 1998-07-21 | 2007-11-16 | Danisco A/S | Producto alimentario. |
| NZ528260A (en) | 2001-05-18 | 2005-09-30 | Danisco | Method of improving dough and bread quality with the addition of an enzyme that hydrolyses a glycolipid and a phospholipid and incapable of hydrolysing a triglyceride or monoglyceride |
| US7955814B2 (en) | 2003-01-17 | 2011-06-07 | Danisco A/S | Method |
| US20050196766A1 (en) | 2003-12-24 | 2005-09-08 | Soe Jorn B. | Proteins |
| MXPA05007653A (es) | 2003-01-17 | 2005-09-30 | Danisco | Metodo. |
| US7906307B2 (en) | 2003-12-24 | 2011-03-15 | Danisco A/S | Variant lipid acyltransferases and methods of making |
| GB0716126D0 (en) | 2007-08-17 | 2007-09-26 | Danisco | Process |
| US7718408B2 (en) | 2003-12-24 | 2010-05-18 | Danisco A/S | Method |
| GB0405637D0 (en) | 2004-03-12 | 2004-04-21 | Danisco | Protein |
| WO2006008508A1 (en) | 2004-07-16 | 2006-01-26 | Danisco A/S | Enzymatic oil-degumming method |
| BRPI0720801A2 (pt) | 2007-01-25 | 2014-09-16 | Dupont Nutrition Biosci Aps | Produção de um lipídio aciltranfersase a partir de células transformadas de bacillus licheniformis. |
| MX2010009464A (es) | 2008-02-29 | 2010-09-22 | Dsm Ip Assets Bv | Lipasas con alta especificidad hacia acidos grasos de cadena corta y usos de las mismas. |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR1556473A (fi) | 1967-04-18 | 1969-02-07 | ||
| US3549390A (en) * | 1968-09-09 | 1970-12-22 | Miles Lab | Milk-clotting enzyme product and process therefor |
| FR96349E (fr) | 1968-12-16 | 1972-06-16 | Baxter Laboratories Inc | Présure microbienne obtenue par culture de mucor miehei. |
| US3616233A (en) * | 1969-02-19 | 1971-10-26 | Baxter Laboratories Inc | Removing esterase from microbial rennin |
-
1975
- 1975-03-18 IL IL46862A patent/IL46862A/en unknown
- 1975-03-19 ZA ZA00751708A patent/ZA751708B/xx unknown
- 1975-03-24 AU AU79424/75A patent/AU499232B2/en not_active Expired
- 1975-03-26 IE IE674/75A patent/IE40888B1/xx unknown
- 1975-04-01 GB GB13319/75A patent/GB1486069A/en not_active Expired
- 1975-04-03 JP JP4075175A patent/JPS5738226B2/ja not_active Expired
- 1975-04-04 IT IT22010/75A patent/IT1054613B/it active
- 1975-04-04 NL NLAANVRAGE7504019,A patent/NL181549C/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-04-07 AR AR258268A patent/AR218602A1/es active
- 1975-04-07 SE SE7503960A patent/SE409405B/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-04-07 NO NO751175A patent/NO140524C/no unknown
- 1975-04-07 HU HU75BA3239A patent/HU173421B/hu not_active IP Right Cessation
- 1975-04-07 DD DD185270A patent/DD117591A5/xx unknown
- 1975-04-07 MX MX468675U patent/MX2953E/es unknown
- 1975-04-07 FR FR7510700A patent/FR2266464B1/fr not_active Expired
- 1975-04-07 DE DE2515021A patent/DE2515021C2/de not_active Expired
- 1975-04-07 CA CA223,907A patent/CA1050909A/en not_active Expired
- 1975-04-08 BE BE155199A patent/BE827695A/xx not_active IP Right Cessation
- 1975-04-08 YU YU00892/75A patent/YU89275A/xx unknown
- 1975-04-08 SU SU7502123718A patent/SU576010A3/ru active
- 1975-04-08 AT AT264875A patent/AT353082B/de active
- 1975-04-08 CH CH445175A patent/CH628216A5/de not_active IP Right Cessation
- 1975-04-08 DK DK150275A patent/DK150275A/da not_active IP Right Cessation
- 1975-04-08 FI FI751051A patent/FI58714C/fi not_active IP Right Cessation
- 1975-04-08 CS CS752410A patent/CS188224B2/cs unknown
- 1975-04-08 ES ES436419A patent/ES436419A1/es not_active Expired
- 1975-04-08 PL PL1975179434A patent/PL94989B1/pl unknown
- 1975-07-08 RO RO7581929A patent/RO72845A/ro unknown
- 1975-11-17 US US05/632,605 patent/US4065580A/en not_active Expired - Lifetime
-
1979
- 1979-03-15 SE SE7902357A patent/SE430561B/sv not_active IP Right Cessation
- 1979-03-15 SE SE7902358A patent/SE430560B/sv not_active IP Right Cessation
- 1979-03-15 SE SE7902356A patent/SE424598B/sv not_active IP Right Cessation
-
1981
- 1981-05-11 YU YU01195/81A patent/YU119581A/xx unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI58714C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av en lipolyserat triglyceridfett innehaollande smak foerbaettrande naeringskomponent | |
| Yilmaz et al. | The effect of microbial lipase on the lipolysis during the ripening of Tulum cheese | |
| CA2357120C (en) | Natural biogenerated cheese flavoring system | |
| EP0167309B1 (en) | A lipolytic enzyme derived from a aspergillus microorganism having an accelerating effect on cheese flavor development | |
| US4595594A (en) | Process for preparing intensified cheese flavor product | |
| US4675193A (en) | Cheese-flavored substance and method of producing same | |
| BUSTAMANTE et al. | Coagulating and lipolytic activities of artisanal lamb rennet pastes | |
| US4432997A (en) | Process for producing aroma-containing food products | |
| US6271013B1 (en) | Aspergillus niger aminopeptidase compositions for making bread doughs and cheese | |
| JP2009296972A (ja) | 酵素処理チーズ及びその製造方法 | |
| US3072488A (en) | Cheese flavoring process | |
| Revah et al. | Accelerated production of blue cheese flavors by fermentation on granular curds with lipase addition | |
| US6242015B1 (en) | Process for producing a fruity flavoring agent | |
| AU4479599A (en) | Highly flavored component for use in cheese manufacture and method for producing | |
| EP0284739B1 (en) | Flavouring composition | |
| EP0150743B1 (en) | Enzyme preparation for accelerating the aging process of cheese | |
| US3365303A (en) | Preparation of blue cheese by adding to the cheese milk a blue cheese mold and ripening the curd in a divided condition | |
| Liu et al. | Production of natural fruity flavour in dairy foods | |
| Peters et al. | The Influence of Mycotorula Lipolytiga Lipase upon the Ripening of Blue Cheese Made from Pasteurized Homogenized Milk | |
| AT363305B (de) | Verfahren zur herstellung eines verbesserten, lipolytischen enzymatischen geschmacksverbesserungssystems |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: GB FERMENTATION INDUSTRIES INC. |