FI111361B

FI111361B - Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 2-syano-3-hydroksienamidien valmistamiseksi

Info

Publication number: FI111361B
Application number: FI930048A
Authority: FI
Inventors: Rudolf Schleyerbach; Wilfried Schwab; Robert R Bartlett; Elizabeth Anne Kuo; David Paul Kay
Original assignee: Aventis Pharma Sa
Priority date: 1992-01-08
Filing date: 1993-01-07
Publication date: 2003-07-15
Also published as: AU3103593A; NO930036D0; ATE125252T1; US5308865A; CN1079216A; AU652088B2; NZ245631A; IL104225A; EP0551230B1; TW234116B; KR930016395A; HU9300022D0; CZ382692A3; NO179444C; FI930048A; JP3145824B2; DE69300261T2; HU215843B; NO179444B; GB9200275D0

Description

/ 111361

Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 2-syano-3-hydr-oksienamidien valmistamiseksi Tämä keksintö koskee menetelmää uusien 2-syano-3-5 hydroksienamidien valmistamiseksi. Yhdisteet ovat käyttökelpoisia lääkkeinä.

Keksinnön kohteena on menetelmä kaavan (I) mukaisten, terapeuttisesti käyttökelpoisten 2-syano-3-hydr-oksienamidien ja niiden emäsadditiosuolojen valmistamiseksi 10 I1 R cv 3

O OH

%y··· - [jossa

Ri merkitsee ryhmää, jolla on kaava 20 ^15 tai~(CH^ R13 R14 r13 Rl4 25 ; (joissa R13, Ri4 ja R15, jotka voivat olla samoja tai erilai sia, kukin merkitsevät vetyatomia tai alkyyliryhmää, joka sisältää 1-3 hiiliatomia ja n on 1, 2 tai 3); R2 merkitsee vetyatomia tai alkyyliryhmää, joka sisältää 30 1-3 hiiliatomia; R3, R4, Rs, Rö ja R7, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, kukin merkitsevät vetyatomia, halogeeniatomia, ryhmää NO2, syanoryhmää, lineaarista tai haarautunutta alkyyliryhmää, joka sisältää 1-6 hiiliatomia, ryhmää - (CH2)m-CF3, 35 -O- (CH2)m-CF3, -S- (CH2)m-CF3, joissa m on 0, 1, 2 tai 3; tri- fluorimetyylifenoksi- tai p-kloorifenoksiryhmää; tai R4 ja 111361 2

Rs yhdessä merkitsevät ryhmää -O-CH2-O-, ja R3, R6 j a R7 ovat edellä määriteltyjä].

On ymmärrettävä, että keksintö koskee kaikkia kaavan (I) mukaisten yhdisteiden tautomeerisia muotoja.

5 Termi "alkyyliryhmä, joka sisältää 1-3 hiiliato mia", kuten käytetty tässä, merkitsee metyyli-, etyyli-, propyyli- tai isopropyyliryhmää.

Termi "alkyyliryhmä, joka sisältää 1-6 hiiliatomia", kuten tässä käytetty, merkitsee esimerkiksi metyyli-, 10 etyyli-, propyyli- tai isopropyyliryhmää tai lineaarista tai haarautunutta butyyli-, pentyyli- tai heksyyliryhmää.

Termi " lineaarinen tai haarautunut alkyylikarbo-nyyliryhmä", kuten käytetty tässä, merkitsee esimerkiksi asetyyli-, etyylikarbonyyli-, propyylikarbonyyli-, butyy-15 likarbonyyli-, isobutyylikarbonyyli- tai isopentyylikar-bonyyliryhmää.

Termi "sykloalkyyliryhmä, joka sisältää 3-6 hiiliatomia", kuten tässä käytetty, merkitsee syklopropyyli-, syklobutyyli-, syklopentyyli- tai sykloheksyyliryhmää.

20 Termi "alkoksiryhmä, joka sisältää 1-6 hiiliato mia", kuten käytetty tässä, merkitsee esimerkiksi metoksi-, etoksi-, propoksi- tai isopropoksiryhmää tai lineaarista tai haarautunutta butoksi-, pentyylioksi- tai heksyyliok-siryhmää.

25 Termi "alkyylitioryhmä, joka sisältää 1-6 hii liatomia", kuten tässä käytetty, merkitsee esimerkiksi metyylitio-, etyylitio-, propyylitio- tai isopropyyli- tioryhmää tai lineaarista tai haarautunutta butyylitio-, pentyylitio- tai heksyylitioryhmää.

30 Termi "halogeeniatomi", kuten tässä käytetty, si sältää fluori-, kloori-, bromi- tai jodiatomin.

Emäsadditiosuolat voivat olla suoloja epäorgaanisten tai orgaanisten emästen kanssa, esimerkiksi suolat, jotka 3 111361 muodostuvat mineraaliemästen kanssa, kuten natrium-, kalium-, litium-, kalsium-, magnesium- ja ammoniumsuolat, tai suolat, jotka muodostuvat orgaanisten emästen kanssa, kuten metyyliamiini, propyyliamiini, trimetyyliamiini, 5 dietyyliamiini, trietyyliamiini, N,N-dimetyylietanoliamii-ni, tris(hydroksimetyyli)aminometaani, etanoliamiini, py-ridiini, pikoliini, disykloheksyyliamiini, morfoliini, bentsyyliamiini, prokaiini, lysiini tai arginiini, histi-diini ja N-metyyliglukamiini.

10 Edullisia yhdisteitä keksinnön mukaan ovat ne, joissa R3, FU, Rs, R6 ja R7, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, jokainen merkitsee vety-, fluori-, kloori-, bromi- tai jodiatomia, metyyli-, etyyli-, t-butyyli-, trifluorimetyyli-, trifluorimetoksi-, trifluorimetyylitio-, 15 syano-, nitro- tai p-kloorifenoksiryhmää; tai R4 ja R5 yhdessä merkitsevät ryhmää -O-CH2-O-, kun taas R3, Rö ja R7 ovat kuten edellä on määritelty; R2 merkitsee vetyatomia tai metyyliryhmää; ja Ri on kuten edellä on määritelty.

Erityisen edullisia yhdisteitä keksinnön mukaan ovat 20 ne, joissa Ri merkitsee ryhmää \===: ,^===== ...... , I tai 25 R2 merkitsee vetyatomia tai metyyliryhmää; ja R3, R4, Rs, Rö ja R7, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, jokainen merkitsee vety-, fluori-, kloori- tai bromiatomia, tai metyyli-, trifluorimetyyli-, trifluorimetoksi-, nitro- tai 30 syanoryhmää.

Erityisen edullisia yhdisteitä ovat: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-penta-2,4-dienamidi; 4 111361 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-heksa-2,5-dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-kloori-3-trifluorimetyylifenyyli) -penta-2,4-dienamidi; 5 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-trifluorimetoksifenyyli)-penta-2,4-dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-bromifenyyli)-penta-2,4-dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-hepta-2-10 eeni-6-ynamidi; 2-syano-3-hydroksi-N-(4-kloori-3-trifluorimetyylifenyyli)-heksa-2,5-dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-N-(3-metyyli-4-trifluorimetyylifenyyli)-hepta-2,6-dienamidi; 15 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-hepta-2,6-dienamidi; ja niiden emäsadditiosuolat.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet valmistetaan keksinnön mukaisesti patenttivaatimuksessa 1 kuvatulla 20 tavalla.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa esimerkiksi joko a) saattamalla yhdiste, jolla on kaava (II) R4 o (II) I J 1 30 *7 *2 ^ (jossa R2, R3, R4, Rs, R6 ja R7 ovat kuten on edellä määritelty) , reagoimaan natriumhydridin kanssa (missä sopivaa katalyytin läsnä ollessa) ja myöhemmin saattamalla tuote reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava (III) 35 5 111361

O

I (111)

Hal^X'R1 5 (jossa Hai merkitsee halogeeniatomia ja Rx on kuten edellä on määritelty); tai

b) saattamalla yhdiste, jolla on kaava (II) kuten on edellä määritelty, reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava 10 (IIIJ

0 I <ima)

Hal'/^R&

A

15 (jossa Hai merkitsee halogeeniatomia ja RÄ merkitsee ryhmää R3 kuten edellä on määritelty ja jossa on lisäksi suojaryh-mä), jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (IÄ) 20 R 4 R 5X\ 3

Y O OH

25 7 2 CN

(jossa RÄ, R2, R3, R4, R5, R6 ja R7 ovat kuten edellä on määritelty) ja myöhemmin lohkaisemalla suojaryhmä, jolloin 30 saadaan yhdiste, jolla on kaava (IA) jossa RÄ merkitsee ryhmää R3 kuten edellä on määritelty.

Yhdisteitä, joilla on kaava (I) kuten edellä on määritelty, joissa Rj^ merkitsee ryhmää 6 111361 {CH n /R15 tai —<CH^)n 5 /\ R13 14 joissa R13, R14 ja R15 ovat kuten edellä on määritelty ja n on 2 tai 3, voidaan lisäksi valmistaa saattamalla yhdiste, 10 jolla on kaava (V) -A*- 15 1 1 1 / (v) 6 ] o R7 R2 20 jossa R2 - R7 ovat kuten edellä on määritelty, reagoimaan yhdisteen kanssa, jolla on kaava (VI) tai (VI’) vastaavasti

25 /CH2)nA /“ /‘“’’n-H

x M x7

R13 K

(VI) (VI·) 30 jossa X merkitsee sopivaa poistuvaa ryhmää, edullisesti jodia, ja n, R13, r14 ja R15 ovat kuten edellä on määritelty, vahvan emäksen läsnä ollessa.

Missä tahansa edellä olevien menetelmien tapaukses-35 sa, jos halutaan näin saatu kaavan (I) mukainen yhdiste 7 111361 voidaan myöhemmin muuntaa sen emäsadditiosuolaksi tavanomaisilla menetelmillä.

Reaktio kaavan (II) mukaisen yhdisteen ja natrium-hydridin välillä suoritetaan edullisesti vedettömän or-5 gaanisen liuottimen, kuten tetrahydrofuraanin läsnä ollessa, ja kun sopivaa, sellaisen katalyytin läsnä ollessa, joka pystyy liuottamaan natriumhydridin, kuten esimerkiksi imidatsoli.

Reaktio kaavan (II) mukaisen yhdisteen ja natriumit) hydridin reaktiotuotteen ja yhdisteen, jolla on kaava (III) tai (IIIA), välillä suoritetaan edullisesti vedettömän orgaanisen liuottimen, kuten tetrahydrofuraanin, läsnä ollessa, alhaisessa lämpötilassa. Joissakin tapauksissa optimilämpötila on 0 °C:n alueella; muissa optimi-15 lämpötila on välillä -80 - -50 °C.

Esimerkkinä kaavan (III) mukaisesta yhdisteestä voidaan mainita propynoyylifluoridi; tämä voidaan valmistaa, esimerkiksi propiolihapon reaktiolla bentsoyyli-fluoridin kanssa, ja tislata se myöhempääm reaktioseok-20 seen.

Siellä missä ryhmä RA merkitsee ryhmää Rx, jossa on lisäksi suojaryhmä, tämä suojaryhmä voi olla, esimerkiksi aryyliseleeni- tai fenyyliseleeniryhmä. Tällaisen suoja-ryhmän suojauksen poisto voidaan toteuttaa, esimerkiksi 25 hapetuksella käyttäen esimerkiksi peroksidia, kuten vetyperoksidia, joko liuottimen poissa ollessa tai orgaanisten liuottimien seoksen läsnä ollessa, kuten esimerkiksi me-tanoli/dikloorimetaanin.

Reaktio kaavan (V) mukaisen yhdisteen ja kaavan 30 (VI) tai (VI') mukaisen yhdisteen välillä suoritetaan edu llisesti vedettömässä orgaanisessa liuottimessa, kuten tetrahydrofuraanissa, alhaisessa lämpötilassa. Edullinen esimerkki vahvasta emäksestä on butyylilitium.

Kaavan (I) mukaiset yhdisteet ovat luonteeltaan 35 happamia. Kaavan (I) mukaisten yhdisteiden emäsaddi- 8 111361 tiosuoloja voidaan edullisesti valmistaa saattamalla epäorgaaninen tai orgaaninen emäs reagoimaan kaavan (I) mukaisen yhdisteen kanssa, suunnilleen stoikiometrisissä osuuksissa. Suolat voidaan valmistaa ilman vastaavan hap-5 paman yhdisteen välituotteen eristämistä.

Kaavan (II) mukaisia yhdisteitä voidaan valmistaa EP-hakemuksessa nro 91402890.7, jätetty 29.10.1991, kuvatun menetelmän mukaan. Kuten on osoitettu tässä EP-hakemuksessa, näitä yhdisteitä voidaan valmistaa saattamalla 10 tuote, jolla on kaava (IV), reagoimaan R 3 T av) 15 XX ^

r ^ N

6 I i R7 R2 (jossa R2, R3, R4, R5, R6 ja R7 ovat kuten edellä on määri-20 telty) menetelmässä, joka on samanlainen kuin on kuvattu julkaisussa A. Nohara, T. Ishiguro et ai., J. Med. Chem.

(1985) 28 (5), 559 - 566, seuraavan kaavion mukaan: 25 2 ^^v^jo^ijhcoch 2cn R-- | | --► R-- |

O C

30

Kaavan (IV) mukaiset yhdisteet, joita käytetään edellä olevassa menetelmässä, ovat yleensä tunnettuja tuotteita tai ne voidaan valmistaa diatsotaatiolla, diat-soniumsuolan reaktiolla sopivan kupari- tai alkalimetal-35 lisuolan kanssa (esim. CuCl, KI, NaCN), sitten vastaavien 9 111361 nitroaniliinien pelkistys sinänsä tunnettujen menetelmien mukaan. Käytettyjä nitroaniliineja voidaan valmistaa kuten on osoitettu, esimerkiksi julkaisussa TP. Sura et ai. Synthetic Communications (1988) 18 (16 - 17) 2161 - 5.

5 Tiettyjä kaavan (IV) mukaisia aniliineja voidaan valmistaa patentissa EP-A-206951 kuvattujen menetelmien mukaan tai vastaavien nitrobentseenien pelkistyksellä, joista jotkin ovat tunnettuja.

Kaavan (V) mukaiset yhdisteet, joita käytetään ede-10 llä olevassa menetelmässä, ovat yleisesti tunnettuja tuotteita tai niitä voidaan valmistaa samanlaisen menetelmän mukaan kuin on kuvattu patenttihakemuksessa WO.91/17748.

Kaavan (I) mukaisilla yhdisteillä on erittäin mielenkiintoisia farmakologisia ominaisuuksia. Erityinen huo-15 mio on niiden merkittävä tulehduksen vastainen aktiivisuus. Ne inhiboivat sekä tulehduksen vastetta, joka aiheutuu ärsyttävistä aineista, ja viivyttynyttä yliherkkyysreaktiota, estämällä immuunisolujen aktivointia spesifisellä antigeenillä.

20 Näitä ominaisuuksia kuvataan lisää kokeellisessa osassa.

Kaavan (I) mukaisia yhdisteitä ja emäsadditiosuoloja käytetään siten lääkkeinä.

Edullisesti lääkkeinä käytettyjä ovat keksinnön 25 mukaiset yhdisteet, joissa R3, R4, Rs, Rö ja R7, jotka voi-vat olla samoja tai erilaisia, jokainen merkitsee vety-, fluori-, kloori-, bromi- tai jodiatomia, metyyli-, etyyli-, t-butyyli-, trifluorimetyyli-, trifluorimetoksi-, trifluo-rimetyylitio-, syano-, nitro- tai p-kloorifenoksiryhmää; 30 tai R4 ja R5 yhdessä merkitsevät ryhmää -O-CH2-O-, kun taas 10 111361 R3, Rö ja R7 ovat kuten edellä on määritelty; R2 merkitsee vetyatomia tai metyyliryhmää; ja Ri on kuten edellä on määritelty.

Erityisen edullisia yhdisteitä keksinnön mukaan 5 käytettäväksi lääkkeinä ovat ne, joissa Ri merkitsee ryhmää \= ^ e 10 R2 merkitsee vetyatomia tai metyyliryhmää; ja R3, R4, Rs, R6 ja R7, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, jokainen merkitsee vety-, fluori-, kloori- tai bromiatomia, metyyli-, trifluorimetyyli-, trifluorimetoksi-, nitro- tai 15 syanoryhmää.

Erityisen edullisia käytettäväksi lääkkeinä ovat seuraavat yhdisteet: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli~N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-penta-2,4-dienamidi; 20 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-heksa-2,5-dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-kloori-3-trifluorimetyy-lifenyyli)-penta-2,4-dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N~(4-trifluorimetoksifenyyli)-25 penta-2,4-dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-bromifenyyli)-penta-2,4-dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-hepta-2-eeni-6-ynamidi; 30 2-syano-3-hydroksi-N-(4-kloori-3-trifluorimetyylifenyyli)-heksa-2,5-dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-N-(3-metyyli-4-trifluorimetyylifenyyli)-hepta-2,6-dienamidi; 11 111361 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-hepta-2,6-dienamidi; ja niiden emäsadditiosuolat.

Näitä lääkkeitä käytetään, esimerkiksi nivelreuman, 5 immuuni- tai ei-immuunialkuperää olevien kroonisten tulehdussairauksien (esim. graft-versus-host-sairaus, kudoksen siirron reaktiot, uveiitti) ja syövän hoidossa.

Tavallinen annos vaihtelee riippuen käytetystä yhdisteestä, hoidettavasta potilaasta ja kyseessä olevasta 10 sairaudesta ja se voi olla, esimerkiksi 0, 1 - 200 mg vuorokaudessa oraalisella reitillä.

Yhdisteet (I) ovat käyttökelpoisia farmaseuttisissa koostumuksissa, jotka käsittävät aktiivisena ainesosana vähintään yhden yhdisteen, jolla on kaava (I) kuten edellä 15 on määritelty, tai sen farmakologisesti hyväksyttävän emä-sadditiosuolan yhdessä yhden tai useamman farmakologisesti hyväksyttävän laimentimen, kantajan ja/tai täyteaineen kanssa.

Käytettäväksi lääkkeinä yhdisteet, joilla on kaava 20 (I), ja niiden emäsadditiosuolat voidaan sisällyttää far maseuttisiin koostumuksiin, jotka on tarkoitettu oraalista, rektaalista tai parenteraalista reittiä varten.

Nämä farmaseuttiset koostumukset voivat olla, esimerkiksi kiinteitä tai nestemäisiä, ja ne voivat olla ta-25 vanomaisesti ihmisen lääkkeissä käytetyissä muodoissa kuten: paljaina tai päällystettyinä tabletteina, kapseleina (sisältäen gelatiinikapselit) , rakeina, peräpuikkoina, liuoksina esim. injektiota varten; ne voidaan valmistaa tavanomaisten menetelmien mukaan. Aktiivinen ainesosa(t) 30 voidaan sisällyttää tavallisesti käytettyjen täyteaineiden kanssa farmaseuttisissa koostumuksissa, kuten talkki, ara-bikumi, laktoosi, tärkkelys, magnesiumstearaatti, kaakaovoi, vesipitoiset tai ei-vesipitoiset vehikkelit, eläin-tai kasvisalkuperää olevat rasva-aineosat, parafiinijoh- 12 111361 dannaiset, glykolit, erilaiset kostutus-, dispergointi- tai emulgointiaineet ja säilöntäaineet.

Keksinnön lisänäkökohdan mukaan tarjotaan nivelreuman, immuuni- tai ei-immuunialkuperää olevien kroonisten 5 tulehdussairauksien ja syövän hoitomenetelmä ihmis- ja eläinkohteessa, joka menetelmä käsittää antamisen kohteelle vaikuttavan määrän yhdistettä, jolla on kaava (I) kuten on määritelty edellä, tai sen farmakologisesti hyväksyttävää emäsadditiosuolaa.

10 Yhdisteet, joilla on kaava (II) R4 V R (II) ryY* o 1, l2 du 20 jossa R.2 on kuten edellä on määritelty; yksi ryhmistä R3, R4, R5, Re tai R7 merkitsee sykloalkyyliryhmää, joka sisältää 3-6 hiiliatomia tai ryhmää, jolla on kaava R 9\ J' e 25 \-(

Rl° R11 R12 30 kuten edellä on määritelty, jäljelle jäävät ryhmät ovat kuten on määritelty edellä; ovat uusia teollisuustuotteita, erityisesti käyttökelpoisia kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistuksen välituotteina.

35 13 111361

Erityisen edullisia ovat seuraavat kaavan (II) mukaiset yhdisteet: [4-(4'-kloorifenoksi)fenyyli]-syanoasetanilidi; ja [4—(4*— trifluorimetyylifenoksi)fenyyli]-syanoasetanilidi.

5 Kaavan (II) mukainen välituote, 4-trifluorimetok- sisyanoasetanilidi, on myös uusi.

Keksintöä kuvataan lisää seuraavilla ei-rajoitta-villa esimerkeillä.

Esimerkki 1: 10 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N- (4-trifluorimetyyli- fenyyli)-penta-2,4-dienamidi

Yhdiste valmistettiin sopivista lähtöaineista samanlaisella menetelmällä kuin kuvataan esimerkissä 8 alempana (menetelmä F).

15 Esimerkki 2: 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-penta-2,4-dienamidi (menetelmä C)

Osa 1 4'-trifluorimetyylisyanoasetanilidia (7,0 g, 0,0307 20 moolia) kuivassa tetrahydrofuraanissa (200 ml) sekoitettiin käyttäen typpeä imidatsolin (0,02 g, katalyytti) ja natriumhydridin 80 %:isen öljydispersion (2,3 g, 0,077 moolia) lisäyksen aikana ja suspensiota sekoitettiin 2 tuntia huoneenlämpötilassa. Seos jäähdytettiin -78 °C:seen 25 ja käsiteltiin tipoittain 3-(fenyyliseleeni)propionyyli- kloridilla (9,11 g, 0,037 moolia), joka oli valmistettu kuten on kuvattu julkaisussa J. Med. Chem. (1988) 31, 1190 - 6. Seosta sekoitettiin 90 minuuttia -78 °C:ssa, kaadettiin laimeaan kloorivetyhappo/jäähän ja suodatet-30 tiin. Talteen otettu kiinteä aine liuotettiin dikloorime- taaniin, pestiin vedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja liuotin poistettiin käyttäen alipainetta. Trituroinnis-ta dietyylieetterillä saatiin 2-syano-3-hydroksi-5-fenyy- 14 111361 liseleeni-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-penta-2,4-dienami-dia värittöminä kiteinä (13,40 g, 99 %) .

Osa 2 2-syano-3-hydroksi-5-fenyyliseleeni-N-(4-trifluori-5 metyylifenyyli)-penta-2,4-dienamidia (8,0 g, 0,018 moolia) dikloorimetaanissa (200 ml) jäähdytettiin 0 °C:seen ja käsiteltiin 30 %:isella vetyperoksidilla (4,0 ml) ja seosta sekoitettiin voimakkaasti 30 minuuttia, jolloin saatiin väritön välituote seleenioksidin suspensio. Seos laimen-10 nettiin metanolilla (40 ml) ja dikloorimetaanilla (200 ml), sekoitettiin huoneenlämpötilassa 1 tunti ja vietiin silikageelipylvään läpi. Eluentti väkevöitiin käyttäen alipainetta ja laimennettiin dietyylieetterillä. Otettiin talteen värittömiä kiteitä otsikon yhdistettä (2,8 g, 15 54 %) .

Esimerkki 3: 2 - syano - 3 -hydr oksi- 4 -me tyy 1 i-N- (4 -bromi-3 -metyylifenyyli) -penta-2,4-dienamidi (menetelmä A) 4'-bromi-3'-metyylisyanoasetanilidin (6,3 g, 0,025 20 moolia) liuosta kuivassa tetrahydrofuraanissa (200 ml) sekoitettiin käyttäen typpeä imidatsolin (0,02 g, katalyyttinen) ja natriumhydridin 80 %:isen öljydispersion (1,85 g, 0,0625 moolia) lisäyksen aikana. Suspensiota sekoitettiin huoneenlämpötilassa 1 tunti, sitten jäähdytet-25 tiin -78 °C:seen. Metakryloyylikloridia (2,95 ml, 0,03 moolia), juuri tislattu fenotiatsiinista, lisättiin ti-poittain ja seos lämmitettiin -20 °C:seen 90 minuutin aikana. Seos kaadettiin laimeaan kloorivetyhappo/jäähän, ja suodatettiin. Talteen otettu kiinteä aine liuotettiin di-30 kloorimetaaniin, pestiin vedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja haihdutettiin käyttäen alipainetta, jolloin saatiin otsikon yhdistettä värittöminä kiteinä (8,0 g, 99,7 %) .

15 111361

Esimerkki 4 : 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)- penta-2,4-dienamidi (menetelmä E) 4'-trifluorimetyylisyanoasetanilidia (5,0 g, 0,22 5 moolia) kuivassa tetrahydrofuraanissa (150 ml) sekoitettiin huoneenlämpötilassa käyttäen typpeä ja käsiteltiin natriumhydridin 80 %:isella öljydispersiolla (2,0 g, 0,066 moolia). Suspensiota sekoitettiin 1 tunti huoneenlämpötilassa, sitten jäähdytettiin -70 °C:seen. Kolvi varustettiin 10 asetoni / kuiva jää -jäähdyttimellä ja sitä käytettiin keräyspullona tislauslaitteelle, johon oli viety pro-piolihappoa (3,01 ml, 0,05 moolia) ja bentsoyylifluoridia (15 g, 0,12 moolia), kuten on kuvattu julkaisussa J.A.C.S. (1974) 96(18), 5855 - 9. Tislauskolvia kuumennettiin öljy- 15 hauteessa 150 °C:ssa ja vapautunut propynoyylifluoridi vietiin ilmajäähdyttimen kautta suoraan kylmään karbanionin liuokseen. Seosta sekoitettiin -70 °C:ssa 1 tunti, sitten vaimennettiin kaatamalla se laimean kloorivetyhappo/jään seokseen. Seosta uutettiin etyyliasetaatilla, uutteet 20 kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja liuotin poistettiin käyttäen alipainetta. Trituroinnista dietyylieetterillä saatiin otsikon yhdisteen värittömiä kiteitä. Kantaliuoksen kromatografia silikageelillä eluoiden dikloorimetaanilla eristi loput tuotteesta (2,49 g, 40 %).

25 Esimerkki 5: (E) -2-syano-3-hydroksi-N- (4-trifluorimetyylifenyy li) -heksa-2,4-dienamidi (menetelmä B) 4'-trifluorimetyylisyanoasetanilidia (6,0 g, 0,026 moolia) kuivassa tetrahydrofuraanissa (200 ml) sekoitet-30 tiin käyttäen typpeä imidatsolin (0,02 g, katalyyttinen) ja natriumhydridin 80 %:isen öljydispersion (1,95 g, 0,065 moolia) lisäyksen aikana. Suspensiota sekoitettiin 2 tuntia huoneenlämpötilassa, sitten jäähdytettiin -78 °C:seen ennen juuri tislatun krotonyylikloridin (3,06 ml, 0,031 35 moolia) tipoittaista lisäämistä. Seosta sekoitettiin 16 111361 -78 °C:ssa 2 tuntia, kaadettiin laimean kloorivetyhap-po/jään seokseen ja suodatettiin. Talteen otettu kiinteä aine liuotettiin dikloorimetaaniin, pestiin vedellä, kuivattiin magnesiumsulfaatilla ja liuotin poistettiin käyt-5 täen alipainetta, jolloin saatiin otsikon yhdisteen värittömiä kiteitä (7,65 g, 99 %) .

Esimerkki 6: 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-heksa-2,5-dienamidi (menetelmä D) 10 4'-trifluorimetyylisyanoasetanilidia (6,0 g, 0,026 moolia) kuivassa tetrahydrofuraanissa (200 ml) sekoitettiin käyttäen typpeä huoneenlämpötilassa ja käsiteltiin natriumhydridin 80 %:isella öljydispersiolla (1,95 g, 0,065 moolia). Seosta sekoitettiin vielä 30 minuuttia huo-15 neenlämpötilassa ja jäähdytettiin -50 °C:seen ennen 3-bu-tenoyylikloridin (3,3 g, 0,033 moolia), valmistettu kuten on kuvattu julkaisussa J. Chem. Soc. (1948), 661, tipoit- taista lisäämistä. Seosta sekoitettiin -50 °C:ssa 2 tuntia, sitten kaadettiin laimeaan kloorivetyhappo/jäähän ja 20 suodatettiin. Talteen otettu kiinteä aine kromatografoitiin silikageelillä eluoiden dikloorimetaanilla, jolloin saatiin otsikon yhdistettä värittöminä kiteinä (2,4 g, 31 %). 3 g lähtöainetta saatiin talteen.

Esimerkki 7: 25 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N~ (4-trifluorimetyyli fenyyli)-pen ta-2, 4-dienamidi

30 Esimerkki 8: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-trifluorimetoksi-fenyyli)-penta-2,4-dienamidi (menetelmä F) 4-trifluorimetoksisyanoasetanilidin liuosta (0,5 g, 2,05 mmol) kuivassa THFrssa (22 ml) sekoitettiin käyttäen 35 typpeä huoneenlämpötilassa sillä aikaa kun katalyyttinen 17 111361 määrä imidatsolia ja natriumhydridin 80 %:ista öljydisper-siota (0,15 g, 5,12 mmol) lisättiin. 10 minuutin jälkeen liuos jäähdytettiin -78 °C:seen ja metakryloyylikloridia (0,24 ml, 2,46 mmol), juuri tislattu fenolitiatsiinista, 5 lisättiin pian. 30 minuutin jälkeen reaktio oli täydellinen. Jääetikkahappoa (0,3 ml) lisättiin ja seosta sekoitettiin vielä 30 minuuttia. Seos kaadettiin laimeaan kloo-rivetyhappoon 0 °C:ssa ja saostunut tuote suodatettiin pois, pestiin vedellä (3x5 ml) ja eetterillä (5 ml), ja 10 kuivattiin, jolloin saatiin 575 mg, (90 %) otsikon yhdistettä.

Esimerkki 9: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-[4-(4’-kloorifenoksi) fenyyli]-penta-2,4-dienamidi 15 Yhdiste valmistettiin sopivista lähtöaineista sa manlaisella menetelmällä kuin kuvataan esimerkissä 8 edellä (menetelmä F) paitsi, ettei imidatsolikatalyyttiä käytetty. Esimerkki 10: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-bromifenyyli)- 2 0 penta-2,4-dienamidi

Yhdiste valmistettiin sopivista lähtöaineista sa manlaisella menetelmällä kuin kuvataan esimerkissä 8 edellä (menetelmä F).

Esimerkki 11: 25 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N- [4- (4' -trifluori- metyylifenoksi) fenyyli]-penta-2,4-dienamidi

30 Esimerkki 12: 2-syano-3-hydroksi-N- (4-trifluorimetyylifenyyli) -hepta-2,6-dienamidi (menetelmä 6) 6,75 g (0,025 mol) 5-metyyli-4-(N-(4-trifluorime-tyyli)fenyyli)karbamoyyli-isoksatsolia liuotetaan 500 ml 18 111361 absoluuttista tetrahydrofuraania käyttäen argon-ilmakehää.

32 ml 2,5 N butyylilitiumin liuosta (0,08 mol) heksaanissa lisätään hitaasti -78 °C:ssa. 1,5 tunnin jälkeen, 10,8 ml (0,1 mol) allyyliodidiä lisätään tipoittain samassa lämpö-5 tilassa. 2 lisätunnin jälkeen lisätään 20 ml vettä ja kuiva jäähaude poistetaan. Kun seos on lämmitetty lähelle 0 °C, noin 500 ml etyyliasetaattia ja 200 ml 1 N HCl:a lisätään ja faasin erotuksen jälkeen orgaaninen kerros pestään vedellä, kuivataan ja väkevöidään. Tuote uudel- 10 leenkiteytetään asetoni/vedestä käyttäen pientä määrää 1 N HCl:a. Saanto: 6,35 g, sulamispiste: 145 °C.

Esimerkki 13: 2-syano-3-hydroksi-N-(4-kloori-3-metyylifenyyli)-hepta-2,6-dienamidi 15 Yhdistettä valmistettiin lähtien 5-metyyli-4-(N-(4- kloori-3-metyyli)fenyyli)karbamoyyli-isoksatsolista käyttäen menetelmää, joka kuvataan esimerkille 12 (menetelmä G). Saanto: 7,5 g, sulamispiste: 134 °C.

Esimerkki 14: 20 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)- hepta-2-eeni-6-ynamidi

Yhdiste valmistettiin lähtien 5-metyyli-4-(N-(4-trifluorimetyyli)fenyyli)karbamoyyli-isoksatsolista käyttäen menetelmää, joka kuvataan esimerkille 12 (menetel- 25 mä G), ja propargyliodidia alkylointiaineena.

Saanto: 4,0 g, sulamispiste: 172 °C.

Esimerkki 15: 2-syano-3-hydroksi-N-(4-kloori-3-metyylifenyyli)-hepta-2-eeni-6-ynamidi 30 Yhdiste valmistettiin lähtien 5-metyyli-4-(N-(4- kloori-3-metyyli)fenyyli)karbamoyyli-isoksatsolista käyttäen menetelmää, joka kuvataan esimerkille 12 (menetelmä G), ja propargyliodidia alkylointiaineena.

Saanto: 3,2 g, sulamispiste: 147 °C.

35 19 111361

Seuraavat esimerkit 16 - 31 valmistettiin sopivista lähtöaineista joko menetelmällä A tai D, jotka kuvataan edellä.

Esimerkki 16: 5 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-kloorifenyyli)- penta-2,4-dienamidi (menetelmä A)

Esimerkki 17: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N- (4-jodifenyyli) -pen-ta-2,4-dienamidi (menetelmä A) 10 Esimerkki 18: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-fluorifenyyli)-penta-2,4-dienamidi (menetelmä A)

Esimerkki 19: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N- (3-metyyli-4-tri£-15 luorimetyylifenyyli)-penta-2,4-dienamidi (menetel mä A)

Esimerkki 20: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-syanofenyyli)-penta-2,4-dienamidi (menetelmä A) 20 Esimerkki 21: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N- (4-nitrofenyyli) -pen-ta-2,4-dienamidi (menetelmä A)

Esimerkki 22: 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetoksifenyyli)-25 heksa-2,5-dienamidi (menetelmä D)

Esimerkki 23: 2-syano-3-hydroksi-N- (4-trifluorimetyylitiofenyyli) -heksa-2,5-dienamidi (menetelmä D)

Esimerkki 24: 30 2-syano-3-hydroksi-N- (4-kloori-3-trifluorimetyyli- f enyyli) -heksa-2,5-dienamidi (menetelmä D)

Esimerkki 25: 2-syano-3-hydroksi-N- (4-fluorifenyyli) -heksa-2,5-dienamidi (menetelmä D) 35 20 111361

Esimerkki 26: 2-syano-3-hydroksi-N-(3,4-difluorifenyyli)-heksa- 2.5- dienamidi (menetelmä D)

Esimerkki 27: 5 2-syano-3-hydroksi-N-(2,4-difluorifenyyli)-heksa- 2.5- dienamidi (menetelmä D)

Esimerkki 28: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(3-trifluorimetyy-lifenyyli)-penta-2,4-dienamidi (menetelmä A) 10 Esimerkki 29: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(3,4-difluorifenyyli) -penta-2,4-dienamidi (menetelmä A)

Esimerkki 30: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(3-kloori-4-fluori-15 fenyyli)-penta-2,4-dienamidi (menetelmä A)

Esimerkki 31: 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(3,4-difluorifenyy-li)-penta-2,4-dienamidi (menetelmä A)

Esimerkki 32: 20 2-syano-3-hydroksi-N-(4-kloorifenyyli)-hepta-2,6- dienamidi

Yhdiste valmistettiin lähtien 5-metyyli-4-(N-(4-kloorifenyyli)karbamoyyli-isoksatsolista käyttäen menetelmää, joka kuvataan esimerkille 12 (menetelmä G).

25 Saanto: 4,3 g, sulamispiste: 138 °C.

Esimerkki 33: 2-syano-3-hydroksi-N-(3-metyyli-4-trifluorimetyyli-fenyyli)-hepta-2,6-dienamidi

Yhdiste valmistettiin lähtien 5-metyyli-4-(N-(4-30 trifluorimetyyli-3-metyyli)fenyyli)karbamoyyli-isoksatsolista käyttäen menetelmää, joka kuvataan esimerkille 12 (menetelmä G). Saanto: 4,29 g, sulamispiste: 133 °C.

Spektritiedot, saannot, sulamispisteet ja analyyttiset tiedot esimerkeille annetaan taulukossa I.

21 111361 5 n r-r-o cNcno<a· £> I ^ , ^ ,η σι r~ «{ ionoMj^ in m o O oj^'icoi °'° T3 m h in cm >h in cm - EH---

*H

10 lOtt^lOO ΓΟΉΟη^Ι· 10 00 <0 CM CO

>i n-r'CM^oo γην in aui mocor-o ** h M m fl^ ) A ^ Η ϋ icmcncno innooin cm "0· 'O· co on nj m in ·η ·η inoirH m on Ö « u (< l·! UShSO OKU.ZO U I m 2 o

1 I

2 I 2

n in rr in H CO

(μ CM (T) CM 0Q ή Ή [μ - m —

frt rH VD ON CM ^ rH

S X ON X CD X CM

nj rr cm cm n cm cm ifN n . id 5 .γΌ ήΟ ho w MgOrM U CM U cm pJ____ ΙΪ / ·* ’*» ·»» · · ·»» » ·«, ··. ts tk. · »K. ·K «K. »K IK IK *

'w. 10 W Ό Ό W ε ε ε (Π Ό Ό Ό Ό OIMOOOIOÖIMCO

\\ >2» ,. , k “ -Ό Ό Ό ' - ' i*d ·. - » *» ^_Π g ϊιιιιιι te π: - - ν sssK .ma / MJ g H IN (N Π H (M IN iDrH ΙΝΪΙΙ ΗΗΗΗΪΗΗΠΠ f rocr» i r- w w> r>o w

O 1 Λ 33 HOMHMTHOin O HHtO o οι H O» Γ1ΙΝ OHO if H H CO

\ 1-1 U »<t ΙΝΠ H INO l/) *k CO CO CM VO O vhlOr)CNOr)rfO

\ ΩΓ' IKIKIKI-K.·. XtN K 1 »· K QIO KIi^kKkms

' _^ UHMHONHH Q ·Η f» ID ID U) UHMHhlMOUlININ

/ —~tt:--—--—-

H CO O CM 10INH I CM O' CO

rtj *7 incncMio - «»o n m h r- ». - rj· in cm • ''Ήοηο -ίμο m n h n «λοηνο

E >H SSHrlri KZHHHHCO IZHHH

u CO Z U Z U Z Ό M ' ' »I K K “Γ k I K K K »KK» K*» μ w μ *5 mOOHio O UHN O IN hoi O O CO Ή O · m r» cm nif o in o h nm h (n ιο o in o <o h in n CN CNN) in H n O CN N) UI M· in o Γ) CN ΙΟ M Γ) Π

INCNHrlHIO ININrlHrlriH IN CN H H H OI

Q---- 3 O m CO rt X) o eri O rt

l_q CL Ή CM rH

5 W ' ' '

Pjj rH I-C 10 n

Eh oi en o

jT rH CM rH

— / 1 I I

υ \ H H rH

\ _ o d) Φ <u \ 2; +> 0) ί M-1 o·^ ) U C rfp lO ^(k in Jiu O JJ < / iti 0Hid <U SCO απιΰ Q---/ ω__s_g__a e__ss_ / “ y$ y y$ * £ 0 ^

CiH D- CQ

g ω ^ M ^ . w 22 111361 R ,-ι m ro cn o to m n h w r-ο σ> h n 'ΤΊίπαι vt co m vt t- r- o ro σ, ·~ι ro

Jr *.“··»»! - - ~ -1 — - -1 - - t ι -1 „ ,¾ ιηΜΟΦ «π co m ro ro σι σ> o n co N! tfl IN 1/1 rrt UI rrt 1/1 - &---- -rt 01 (Ν (Μ >ί O IN <Ω vt vf Ώ Ο ΙΩ vt Vf \D Ο ro ro CN ΓΟ Γ- C0 >, r- ro η ο <}· r- t- μ «3· ro r- r- ru ο· ro raor-N'tio η ,¾ ro m o o ri ro ro cn cn ο ro ro tn cn o o n o h ω m

tlj W ΙΠ CN H H L/1 rrt rrt 1/1 rrt rrt 1/1 H H

C n)

D O X tn Z O O X tn Z O UlhZO U X U tn Z O

M CN I

MO o z

Om cn n

M v-i z ro z ro tn O

ZM CO M CO M rrt Γ- ΓΟ — tu*v |r< —* O — tn o rrt ® rrt VO o o r~ oo rrt Cn rrt U> rrt ro

kZM ZM ZM ZM

rt M rf -a· vt es

rt ^ rrt rrt rrt r-lO

Sg U O O UM

10 inTJTJtn ui ~ ~ x tj 33 nn d E EU wgHwwra . - - - - ». tn u U muu ------ £ xxxx z...... xxxxxx xxxxxx

Φ Ori MNH vOrl XXXXXX rrt rrt r* rrt [N rO VDrl rt OI rt H (O

z 13----- U -rt M M rt rl n ------— Ό —————— I ® I — — — — — — mm I m ® O (μ·μ n OMiniMMOdi rt i m io mo o o ro m o ro ro •o oi -r- ro oi w r-rH ro r- en m m u -en io oi n n en -cn Μίηοι g r-| -·-*»·- Z '—* -----.- Q 1/1 — — — — — SM — r. r_ — D H h M DrtOlP-MDlOrt O rrt r- O- ITI ® ro Q rrt CO Γ- t/1 1/1 rrt "73 - - - - - - - - ------ -ro rt (N P· rl τ/ rl ro O 00 · CO rrt ro <-rt OOOMOOOm R V - - m m rt ® - -m ro ro r-ι cn - - ro ro ro r- - -(ohidhidooico · rpj — 'ΊΟ P1 rt o —r-U3 OI 1*1 rt 3· — -KIOHO — — ini/ll lOMHO -o

Jr rt P S Z rt H rl rl ZZrrtrrtrrtrrtOO ZZrrtrrtrrtrrt I Z rt rt rt rt rl rl rt N M

J* 0 ra zo ζυ zu ζυ roro

Jj ^ —— - - - - —— ----- — — - - - - — — ------ -oi O in on oi O inoiOOinOM o ro ui M M O · orooorooorto - - H tn -rt o o ro o rHrrti/irrtinrof- o h cn ro m m ro rooMror-rooMfooro M M M rl VO OI rl ro IN ro ID ro rrt o 13 Π VO 1/1 Π H <i NMroiniinnNrtint- Q rO(N(Nrrtrrtrrt CO CN r-l r-l rrt rrt rrt Γ0 M rl r-l rrt rrt CO /OiNrrtrrtrrtrrtrrtrrtrrtOiro do o ro D o m ro D 0, M · rrt

rtl 01 · I rrt I

Eh O -n o Λ ro en r- iti rrt rj ro ro rrt z! (N 01 rrt rrt ---!--|--1--1--- rrt rrt rrt rrt o ω ω d> Φ

-P /-,+3 mP .P P

TL O /1) UI m rrt /1, Mr, g» oi? n ro ϊ a io Su, $ <11 nti dl nti 0) nti 0) nti ®ae se se se

1 j f) H

1 0 0 0 o o u X) rt r> r> *-1 r>

Cl. Cj_ Cl, (J Cl, ^-------- - - ...... . ....... ----------- 1 - ^ un \o r·' w . ω . ----- - If..-.-.»..-,— *— ·ι ...... '1............... -........ I I I ................. ,1 23 111361 Γ"· CN V0 Η Π CO O CO O Γ' σ» O f·» C> 'ί Π 0> CU Π rg \o r* 2***l^l »>»»"· ^ k M | ^ | 4_j «3* m co σ\ r** ro h co co +j m M) »h m <«> <1) ____ Ό ' ~ -- 'd fl in in in m» iNnmon ^ homm X/ ~ oo m (n σι ro ro cm σν σι in ro ro o >-< *r ►. ^ r· »· #* s i. K «» n «« m «k «k r> h XV lv ro n co co in ) ί en r' n o ro vo en o

M « H H VO rH in CM rH

^ ^ OEfezo υχυζο uxmzo

I I I

Z 2 z ^ ro m 5 O f; m

g fcl ΡΊ O ® 03 rH

S rH ~ VO ~ »-H

Ή N H 't rH r> « x h X m X o > t? n ro o\n ^ ro cm ro 5 rnO l-iO t-io O CM O N u n

10 »O Ή ΌΌ tn tn tn + + + ... b w"eouT

^ X ·. W ^ w L L ·Τ) Hl) mj) f. L L L L

5 xxxxx xxx »n «σι XXXX

g VDt-H CM CM CM rH rOrMrHXNXNXXX»». vOrH VT (N Π z TJ'-'—''-'—'—' —— 1— ηίηχηΟΗΐη·' .q _ „ t ro m — cm -—o — —h in i ro k o ro o vo in r- rH en co "?} in · τη »vd ovin » o o <f n to “v m »-f* ro m ov uomoffitMoovvt r~ ·« x w *. in ro en •g r-l « <« «> ·- Q ·· < ·> >-11 »I »Il «λΗ Jg rH »» » Ϊ.

Or-tr-t^inrH utNinrororjr-rot—rofrtn—' QriMnn o o o o « kfOiNvifOfflovroffl oinoointMin» , HHOHO l > rtooifiMUMMOO · cviroinr-oor-voin « · ,__ 1 n vo in vf vd o in (NtninviroNMrion cMro^mrMrHOtocnt''

3 BM NrlHrlOlHO [NHHHHHHHHN N H H i-l H H H OV O VO

|3uCQ OVOO CO OTP* Λί lVl *l ^ L. *L L. ««««««·««.. L.L.hL.L.h^h.

4J 5 0 0 0 0 0 --.. ONOvrOvDI^OOvai - OIDOOOOM/I »» rd M ovntninHinino p^o^roiHr-rrocviroro oroiOHvroooo

•ro CvIVDinvtrHrOfOffl N'OinO’vfmi'K'IO'J rOCOvfvfrONHOHtO

— (NHHHHOVCOP OHrlHrtHrlHrtO) fOHHHHrlHHOvr H ---

S o° S

w 0/ V

g . ω VO in 00 Ö in rM %

g r-ι ^ rH

EM-------- I, I l

H rH rH

o <u <d m •M o -μ ro -μ in jj C # Φ ® 61 in ΦΒ VDCDtu <ti C fi £ (Ö φ :¾ dl i(Ö Q) :(0 -« _S_g__^_g__g_g_ * ,)-¾ ^-¾ ,)-¾

' K ' E κ K

* P § £ u. / en —t υ _ ___

00 CO O

. H __ M_ 24 111361 f. n tn σ» O n fl r- en rH M> in •V *·» 4. ·* ·*, Y» j. ,¾ h n h oj

* ·ΰ VO rH rH

- f-t ——----- rl tn νοα'Ήΐοοο r» cm en .h r- r- o m ·η σ\ in o en to en >! to to in n ό o cm o m m ousidoh nioonif *#**%* ^, ·***·>». N ·»*.·***<*

H Ä HnhM'i 00 (Τ' O CO H l/Ί C> H CN CO n CT» O CO

HjWVOrHrH LO rH rH Φ H H ID H H

d ftf rH

<? »j uizoim υ rc z o u* υ s: z o o o x z o &*

I tn I I

O co O co I tn O to

CM- CM CM CM P* CM CM

Z CO Z -* 2 - 2 * tn co no too »neo

_< r-H m rH rH rH O' r-* O

Pk sen ffirHCM X n ä on n n tno in n IS CMtn rHfx» rH CM Hb*

MS Urn U CM UO U CM

’ ΙΛ

• ' S

(» X IX CM I ' lO - in li ή in cm Ό *» m in h, ».χ · ·» ·» ' ·» rj —m CM ·'— X C rH CM ·- ·» · r» -Γ»Ηί· — pj -— -— '—' -—‘ ^ w G0 Oi * > -— ·—l (0 iH s λ -— *» - D — (0 X tn tn tn ΕΌ ·~ό p. - n gin- - cm E m E in tn cM'j**«. -

g v . . **n* x »ri to in I ·» - rH »in - ® X — oo ·- X

XXX x x x x r» rH o mx «. co m »r —- · mx » ·» x ·. .. χ mv; ^ n n r~ — rn M Π H H M· (N O (N ·« ·ι I Orj-tn » rw- ΌΜΠ r.H t] « O i -r S" en— ----1 — — co — — —. in i — i in f" m tn t — I E *" l E w l Ή'Γ_Ι in r» en in HOiooinnHH >cn mx i O ra co ta - o in »m t- »r- o tn·» m rn uomoorHinrotnxzx tn r~ cr> ·» ·» r» - x t/jr-cnxcocMX - tn in χ ω cm - ·-

O ·» ·» ·»·*·»·» Il ·Ό » rH X ·. ..r» r-. ΓΗ X ·. »CM » -»CO o X »CM ».Il „ Ä H

UcNinmnnnOhU) tn— qcn·» E EMt- o n m· — in e- —h qcm—ιμ»-ο_^<·-η W te. W te fc· S h ^ ^ k h 2 t-i ^rcMf^tonvovocMCM o tn tn o o o · o o ·» o in o o rf i Hin^HtnounoH *. -ONHHcnnMn w - m »h o *. · ·► kO'Htol· jj ts . (NinnncMHHHO ^^ιπμπηηομ ^^innuuno in ^ho

πί Π ^ fMHHHHHHHH X2HHHHHHCO E 2 H H (JUO H DC Z H rH rH rH

,5L υ ra z u zu ω co z u ^ M ' »· te te te. te te te. W W ^ Y k “ te-* te te te te 5 (Ν’ίΗποηοιπΟ * oootnommr-o oinooin ·* ·. © o o o in o * i_* H r^oonmnr^nvo^r ocNnincnvovOHH ohouö^oo n cm n tn cm cm o 1-1 (NvoinncMrMHHon nMOinncsHHO n cm n ^ o cm cm n cm vo tn n n ^

Q nHHHHHHHHCO Π (N H H H H H H H Π (M H H H ^ CO n CM H H H H CO

B υ i » j?! tn

En in in cm tn ^ n r-

«H fH rH «-H

. j j j t—l r—I i—f r—|

O (1) 0) CD CU

ii σι·^ in CM 10-1-1 CM +3 g# m2 a Jo m 2 o m 2 u

iti G C , G G

(rt Q) :(Ö d) scö 0) «Ö CD ICO

tn a e__a_e__- a e___s_s_ ‘h ^ Ί ^ \

......... K .....— -------- ----------------- — ............ ............. M—-. -I

* S 0 *0 0 *J m i—I r> / Du o Du υ U« f-i CM n ^

rH f-t H rH

. *^-1 I ------- - - * I - ------ - I .....-......... ........

25 111361 VO Φ Ο Π o "ί H h ΟΟΦ O γμ in m (Tv *-i oo \o m co c* P > 1» *· *· K. Λ ^ K N r 4J' (juron nnM/i rivo 4- ΙΛ d pH vn »Ori

dt> OJ

-o------ M £ o ro oo vtNtncn iiinHn how nL v w f» o in v in co v ohimo v in m <2 # *· #- ** «s. ·% «fr *» A» ·» ^ ^ H ·« ^ fs

HV ΟΙ<ί^Η(Ν O» <fr O r> Tf CO Γ- tf) Γ0 rH

Hj Kj Φ H H ΙΛ H H ^ Π ID H

^ ^ U ffi 2 O U OXZU UXZM UffiZ

i—I d ο υ m &.

(N IN [N IN _ 0 θ'*1 o 1/1 o'*

IN IN® (N rl IN M

>£S S*· k "· zK

g % O ™ d ^ Ti® d d ® (H m H ^

rt) EC K® K <N

> tn n n n

(1 H H d H

g υ _ υ υ υ --c-g---- . ----- «o w^aj4j ~ wggOw w ό ό ό to to g g τ* to fr cm C »fr in m <. κ ^ ν s ·.*.*** « h w w % g χ fr XÄXXX xxxxx xxxxx S voro . [ö H N ^ »fr x VDrH CM CM CM Π \Or-t ΓΜ CM CM Π VDrH CM CM CM m Ä 'ζΙ Sv* fy Λ *Mt JJJ JS <<»» H ^ «»I» fr* fr* fr* fr»·* fr-* S«* «V* Sm* Sm* *Q fr-* Sm» Sm* Sm* «m** 1 ήΟ m l E — | o l ID Iin 55 O o N->m · oo ^ co o o o m v co o v d v co v oohOOin d WNtnMfflNNK - ι/l -.IMMOOl WslOVVO (O «ID HIO dl S » *»ΓΝ »· Il “Π O SH o . » k 22 r~l — — ·» S ci — k

a IN IN —IN rt —cl QHhMOH QHhMnH OH^MnH

V ( ( *. * W * S V «k. * * * * * % * % S % S * *N omin O o O m o O oomomö Ο o o O O m m I - - o m d - - m vd oo σι oo o « ><on «o w to h «. »oumoMMnH · T E u ---m tn m -'«(o^noidH —.—.m in v n in ci »mmvnricioo S U m ϊ ZHHH ΪΖΗΗΗΗΗΗ XZHrtrtrtrtrt XZrtrtrtrtrtrtrtn 3 S z o z υ ζυ ζυ «o +J m ooooo · ο o o in in in o o m ooooooooo οοοοιηιηοοο -

.2, d CN d 01 C7> 10 OHOlCTirilNincNOl O n N 10 (0 0Ή Γ) m HHONOHINNOO

ZJ m in <n m v in mtNcovvroiNHO ocNiomvmmiNo mtNeoiomvmcNHV

Π IN H H f—I CO ΠΝΗΗΗΗΗΗΗ ΙΟΙΊΗΗΗΗΗΗΗ ΙΟΪΝΗΗΗΗΗΗΗΟΙ H '----

O P Ή t" (N

M m m ci

p4 01 H H rH

B tn i i i o f- m v ci b V v m d rfj d d d d ti ______ 0 ω β> ... o © .

§ * v g o ro g « S g < ° g < # ai__§1__|_1_J__U_ k* ( \—v y~u V-υ

\ ' X ' X / X

' *0 0 0 0 υ υ h (>i τί~ m co r^- co $ rt rt d d 26 111361

O* O O ^ H

O' (N (N CO VD O' CN

E m M ^ w ·% «.

+- sorrin n ro CO CO

,1..¾ ^ -υ----

•H O

» t< f'MPIHI' 0000..0 rf \D CO in UI f~ in >ι οοιοπη m· en m to non oo in in rs p( ·*>·»- k* ·* ** *» »« Si ·\ rt *k ^ *k rt k.

H Λ! oo ^ m o co φ τί u> cm t'^rin en en co co

It) 1/1 UI H H VD H H in "H in r-t

ä (O

rt rH O K 2 O b* 0X20 0X2 UXZh

I (M τί I

Or- O to O Ti O in <m <m en o) en cm in n) a 2 2 2 2 v.

§ o o ή m ή m *-h is)

rH rH rH m •Hr' rH ,-H

nj 2 m 2 cm 2 CN Ken s in π ti· ro *t ro (rt rHfc* rH rH rHtl* g un · υ υ o o ·«· *S ·· »K · ·% ·*» »V · *% *V *V % ♦ »% ·% «H *W *W t

to tn tn ό tn tn tn tn Ό tn ιητ)Ό·σιη m to Et) E ED

, , , , V W V ^ , V Ik « W k , rt m rt rt *t* rt Hr* *r* Hr* *r* *r* *t* *t* rt *** *T* Hr* Hr* Hr* *r* Hr* rt K rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* rt* X id*h tn cm n m ιχνπ Ti cm n vo*—i cm cm im o *h *h cm cm *-c cm cm I o i en ia eno K O tn im co in r~ o cm in in cm o ^ no r· im r-tiococMTicncMr· m to »-to »n n· σ. w cMno. tn *.cm oo m m o -hio m cm m en en S H H r» rt *» 5) N *· H ·* X CM ******** QIO **r*-HH*.

Qrttr»incMrtt d h hin h o h to Mn h UrHC't^t-'intnen H O O O O O O tn O O O O O O OOinO» 00 in o I * »o .f in in -i o. O * * nuo in to h m h *. *hoocoo · - -mji σι O Eli ^^10 <f tn nh on «rtio m *i n en n h ^**ιο m en h tuo — — ιπτή

3 0 m XSHHrHHrtrtJl Ι2ΗΗΗΗΗΗΗ 22*“trHrHrHCnin 2 2 rH r-H rH

H Ö2U 2 U 20 0020 pj ·»—* ·» ·«. W ·. W K W W S»» k. K ·> % % *—* w ^ ^ k · tJ m oomoooooo οοιηοοιηοοοιΛ oomoomtn*. o m ^ m o o (ησιηησΌΠΗπ ouMHomHncotnH oionio^^oo co co en co m

t"> (NHioinnnMHO cNfNicnvotnrfncNtHO nMicmniNH^ nnmi/iNH

fOCNHHHHHHH Γ0ΜΗΗΗΗΗΗΗΗ Γ0(ΝΗΗΗΗΗ(Τ» Π Oi H H H H

H---- Q ¥ σ* r- o o £4 ·ςτ r> rH m

n DL| H H 04 H

b m i i i i b o- in co co b *· o o

rH rH 04 rH

H______

11 II

O *~H rH Γ—l Γ—|

ij (D Q) 0) (D

e# cf -P t^4J in -P O -P

B co <U e r-airt ooDrt r- 0) o (Tl O* 0* C* C*

m 0) >10 <D »0 0) >(Ö 0):iD

—— a s__s_e__g_g___ * y~% y~$ y~$ > * & £ i5 ti* x 2 O* e •H σ» O rH o»

to .-H oi OI OI

. w I_I_1_1_ 111361 27

ιο r*· m id en γη co r^r-^rcN

tj*covdvd r* o *3· r*» cn m m co P * ** ** ^ «« a^; +j h n co c^ Orncoor^ n tj· h r*

+J ^ ID H H VD iH

dp ω Π3 --- rf £ fN co n u) in in r- cn *<r h o co n >_ (Nninr* coo^r^(N m m

►-. f r· r· M *\ W Η Μ k X ·· M k V

r_j v> h n co ^ oncoor- η -<3· h r· (¾ (/) ^ tn H H lD f~i rtj ,H O X Z (/) Ο X Z U (¾ UIZh I in tu CN fN} ΓΜ O £J O O O ^

& CN *** CM f" c\j CN

S ^ ω*' Zo o~ *H vo- nj i-I M -in —I ** > X ro X n X <n id h? n «as-1 ro

id «-(In —iU —I

W, O W U n U

— .....- II II - II - ·» II ·- - II — — ·-. .. n ... II

«> ----- - η η — η — — n-->-} _. „_to »»EEfl-tj - ω - ωε - ε ε - w ω ε ε ε ό n - Κ ------Ό·'Ό » τ) --Ό - ·. Ό »ν^»»·οχ·π X ΧΧΧΧΧΝ-— Χ--ΧΧ-.-ΧΧ-. χχχχχ-Λ-· Ζ HHtJHHSINI- ΗΧ— —I—(X— —ΙΟίΧ— γ-|ι-Ι(ΝΟΙ>-ΙΚΗΪ — —'C0—ΙΧΙΝ N -Η Ν — — —I Ν — — ΓΜ Ν — —' —· —- — *ΓΊΝ X η<Ν ·.— —X nc-i —χ ^-χ —- χ no) —to —-χ —I —lin^O^-tflDOOICO —I tr O CM O' rH O' .H 00 —ll-il/iooirI ».O- U -r- φ m n h n vn ro U scnrororomvoconnro U to^rionuiciKi

Ql/) *- -* *- — Il * O — — Q 1/1 - t.-i-K-i.t-.v Q LD Τ' *> —I »s.

U—11- μλ in i) in rιπιο UHi-(Nr-i-t-coinini*uo uhi-i-i-uii/iiidu) v w K s s *· * ^ k k ^ % S W h H O O »H m O O CN h h ro COCD*-(r^

| - “CO Π σΌ h (M h Ί ^00 CO CN ^ ·* **· 10 »H CN

o Gu ~ Ätn innioHHO ^ ^ m *3* m »h m «9* ro cn

3 Um XZrtHH-trHHrt ΙΪΗΗΗΗ I2HHHH

3 «S . 5.«..... 5.0____ £J m Or^ococococncNO H<t o\HHhfM o co in n in r· · ΙΟΟΟΟνΟΓ^ΙϋΓ'^Η o M CN in CD Γ' n (N H (Τ' H CO 10 in (NHinin^mcNriH ro (N id m n h h ro m m in ro (N n

fOMHHHHHHH (O (N H H H H H (O CN H H H H CO

H--- g y S es,

fti -t tD rO

W (¾ Ή —I —I

n ro i 1 1 k) ro O σ'

P 'T to (M

Λ Ή —I i-i

Eh - F--1--1-

- H i-H

O ®( O) +i r) m -i "3 Ui -fc?

ro g Q

rd «J!g 0) *m O m) ro SS__s_6_ g g _s_j_Y2

•f A A

g ^ ro “01 CM rtl 28 111361 co cr cg f" Γ" co h n n h h ui o> h ocovo^y n eri ^ σι vdco^tcn cr> co ui P *» K >» *, te »« «·» (fc te ^ 1^· ** 4- oi ro o ^ σι π o n u) n ^ σ\ cono^r

^ U) H H U) H H U) H U) H H

*#> (U

Ό------ — " 1 —

•H O

to f-ι oi h o a) Τ' h o co vD^in^ σι h o o) ^ o co u) n o co <o ro r> f^- cn ocovom H X tr ro o en n o ^ cc ro (T ct en m o

(tJtQlDHH l/> «—I»—I ΙΠ H U) H H

UICZln U X Z k, U XZX O X Z

CN CN ro CN

tn (ti tn tn CN _ (N (N (N _ O ^ On O ^ O ^

> CN 01 CN01 CN01 CN N

rH VO ^ VO rH O' rH VO

ste^ x0* z ™ ajrN

S ro n % n

frt ^-· rH Ή rH

$ υ υ υ u .......- - - n - - - ·-· - n- ......... ... .» . .» ~ ... ... n e® E E E Ό n - metnEEOXO- cncncnEEtnEtn oi n E E n g .

K ^ w . X Ό . . . . . Ό i—i . —- .......k . ^ «4J

g X x x x x oo - · xxxxx »r-ιχΝ xxxxxxxx χ χ x χ x x * .

g HPI1NHM rH rH rH CN rH X ~ CN X rH HrIHMHHn ΗΗΗΝΗΗΪ-'

——· ·—' —'03 CN N —' — ’— — — OI CO “00 '— '— --- ^.wwwwwcn N

K fTCNj ' — x γτο — sco - roo neo —x ,-l rllfltflfKhOM' H^ffirOOI/llDn® HCOO\r-(MOinOO' rll"flOHIn(Mh

U «tft H 00 n H n 03 u .(Mfl Oi 03 Π H - o -σι ra ΐΜί O Ό O U stOIOHOIOOO

□ ΙΠ .. ». || ^ ^ Q m — Il η II Q ΙΠ ik. r» * « + ·- Q tn H i» ^ Il .. k ^ U h h Muin o n io D h r-mo in m o b Ui-nr-r-r-c-toincN uhm'MOuiinh I ijoior- cn in - h o in to hho "7? b n . .ιοπ oi h » - io co to . * in r- r- cn * »id v oi 2 U m — m n cn cn λλιο n ίο ·— —· m en cn i-h "-—in n cn

R »n X Z r-IrlH H X Z H t—1 03 X X tH rH rH rH X 2 rl H H

•MojJsu ζυ z υ ζυ +. μ '—' ’— ---- ' ’— -- - —— .-.- --- — -.- ό cnocTicoi-itN r~ to t- o cn · ch ot"f h o cn cn oo n n co cn en <η o. m cmn οι η ίο η οη<»οινγ- HH<f ηγ- w cNCNininncN in n m m n n ro cn to n m rH n eno in n

OCVHHHH ONHHHOl O) OI H H H H OOIrtHH

H

- - M Q, tD n to b w i i i i J in to co rH in O n n to n in

rtj rH rH rH rH

En _k____ il il

rH rH rH rH

O CD CD <D (D

e dc ® ω ®α> νο in-Jj! § * n g a '"S4 vog< id CD «0 CD nti (D nti CD «Ö b s e se se se · ........ 1 1..--.1. — I ..................... ......... ......... - K \ \ Vsi >~y

) ) / X x X

- rf 0- 4 Λ ^ to C- CO 03

tn CN CN CN CN

. M ,________ 29 111361

h n σ> O VOlfiiNCN

*3· vo en co r- ^ *3· en

J] »*»··»♦>► » «t H »S

|J in m en 04 uD cn ro en ro +Ji in i-t in oi

tfP (U

TJ ......

Ή o tn jn n en co n r- in m mo r- hj· cn vo -h vo vo -i r- r- ^ I min cmd h in n -v? oo t- t- n in oo cn Φ to o in ,-) i; in m oi nuo Nnom o oo h m en -t to en r- <lj tl) in rH UI CM ID r»HH ΙΛ i-l C Hi ^ rH Ή «J m υ x z u x υ x z υ . υ x z o o O X Z O fern en il υ fern CM (N (N ΓΜΟ o®o^ Or- On .> (N ^ n1-1 CM»· <N»>

Ssr-T z ~ Z CM Z-cr

Ob; OL" n vo intN

n ® Ή cm h n

g X w X ^ X X

£ nt* n γμ -i- vo

2 --vh n-H rH rH

^ O O U U O O

— - - -- ·- - ·- Il II

10 w E E w E w ro ui ^ - ό in e ie υ w ~ 2.

pe - -τι -0-0--- t~- g - - in in g n t X X X X XX xx -·**.·*.«. χ X r- -—i — x -- x vo rH ^ m s

g HMM H HH HHI^I^-IHHn lOv- v-»X «|<i — -H VO ·» — <v — X VO ·- X

--------- '— —- '— rH N rH M rH '—' —' '— Ό M ·— LO -— rH . r-,---r ' Ό (N —' LT) ·—- rH — .— rH

K nn nn — χ ~x — I l g l E — n ι l E l g -ί- E ~ m h hh o m tn oi h h m to -o* o n o oi Oin-in-vncococQvo o m -m >m i -n O -r~ n o vo o O —oo r-vt-fOriOMO i/iMXoiXtomm· *- mnxoiXOM5 ·*

Q in — ·* - Q in — ♦· ·- r ~ r ^ r . S „H}. > CM ·· » «ιίο X «.n ** (N ·«* «JM rH

U H H H VO tn (N UHn-HPIMOOMOinM Q(N—<J—inr-HltH Q CN — *3- —1/1 r- --Ή rH - - r w *. K·.-- w w a.

I nn r- en oo - oooo m in o > C β Li ---00 > Όπιοπ - «niin h h - -mono P R „ ----.(010 r-. — voinnin -«ininno —. in n n -vf

P Η X Z rH rH X 2 H H H dl XZrHrHrHrH S 2 H H H CO

M « K 2 υ z υ z υ ζυ n) n cm co r- co Novototno - o o o o o o · o o in o o in n en rH en h* vo o cm n vo r- rH en oiNOvotncno o in en h vo -j cm γη vo in m n m vo in -f n m mnvo inno n m n in -f h o

nCNrHrHrH m N H H H H OI nCNrHHHrHOO n M rl H rl H

H ______ s y o 5 w 7 7 t) co -h oo n <il 0> CO fO ro

f-* . H i—I H rH

_ 1 I I I

o H H rH rH

a) a> Φ a)

S * ro P ro -P p-jP ro P

5 oo o>a ® 5J x 0¾ o n ¾o *U £J £ £ cj <D *rö <D :fö Q) «tf φ !(Ö as__a s__a s__as_ te V-u \—u ( / / r> / r> \ \ / X / X \ \

- $ ä 0 A

o u υ u 2 *

~X

m O rH CN CO

y ro ro ro ro 30 111361

Esimerkki 34:

Valmistettiin tabletteja, jotka vastaavat seuraavaa kaavaa:

Esimerkin 1 yhdiste 20 mg 5 Täyteaine yhdelle tabletille enintään 150 mg (Täyteaineen yksityiskohta: laktoosi, tärkkelys, talkki, magnesiumstearaatti).

Esimerkki 35:

Valmistettiin tabletteja, jotka vastaavat seuraavaa 10 kaavaa:

Esimerkin 2 yhdiste 20 mg Täyteaine yhdelle tabletille enintään 150 mg (Täyteaineen yksityiskohta: laktoosi, tärkkelys, talkki, magnesiumstearaatti).

15 Farmakologinen aktiivisuus

Biokemialliset koemenetelmät

Koe 1: Carrageenan rotan tassujen turvotus (PO-R)

Yksi tunti koeyhdisteiden tai kontrollivehikkelin oraalisen antamisen rottaryhmille (n = 6 - 12, koiras 20 CFHB, painoalue 160 - 180 g) jälkeen 1 mg carrageenania, joka on liuotettu 0,2 ml:aan suolaliuosta, injektoitiin oikean takajalan tassuun. Vastapuoliset tassut saavat kon-trollisuolaliuosinjektioita. Tassuturvotusvasteet arvioidaan kolme tuntia myöhemmin.

25 Koe 2: Viivyttyneen tyyppinen yliherkkyys hiiren tassujen turvotus (DTH-M)

Ryhmä hiiriä (n = 8 - 10, koiras CD-I, painoalue 25 - 30 g) herkistetään ihonalaisella injektiolla, jonka muodosti 1 mg metyloitua naudan seerumialbumiinia (MBSA) 30 0,2 ml:n tilavuudessa suolaliuos/Freudin täydellinen adju- vantti (FCA) -emulsiota. Negatiiviset kontrolliryhmät saavat suolaliuos/FCA-emulsio injektioita. DTH tassuturvotusvasteet arvioidaan 24 tuntia oikean takajalan tassun ärsytyksen jälkeen 0,1 mg:11a MBSA:ta 0,5 ml:n suolaliuok-35 sen tilavuudessa seitsemäntenä päivänä herkistyksen jäi- 31 111361 keen. Vastapuoliset tassut saavat kontrollisuolaliuosin-jektioita. Koeyhdisteitä tai kontrollivehikkeleitä annetaan oraalisesti päivittäin päivinä neljä, viisi, kuusi ja kahdesti seitsemäntenä päivänä, yksi tunti ennen ja kuusi 5 tuntia MBSA-ärsytyksen jälkeen.

Koe 3: Viivyttyneen tyyppinen yliherkkyys rotan tassujen turvotus (DTH-R)

Ryhmä rottia (n = 8 - 12), koiras CFHB, painoalue 160 - 180 g) herkistetään ihonalaisella hännän aluksen 10 injektiolla, jonka muodostaa 0,1 ml:n tilavuus FCArta. Negatiiviset kontrolliryhmät saavat Freudin epätäydellisen adjuvantin injektioita. DTH-tassuturvotusvasteet arvioidaan 24 tuntia oikean takajalan tassun ärsytyksen jälkeen 0,1 mg:11a MBSA:ta 0,4 mg:ssa Mycobacterium tuberculosis 15 -uutteen antigeeniä 0,2 ml:n tilavuudessa suolaliuosta seitsemäntenä päivänä herkistyksen jälkeen. Vastapuoliset tassut saavat kontrollisuolaliuosinjektioita. Koeyhdis-teet annetaan oraalisesti kerran päivässä päivinä neljä, viisi, kuusi ja kahdesti seitsemäntenä päivänä, yksi tunti 20 ennen ja kuusi tuntia antigeenisen ärsytyksen jälkeen.

Tulokset näistä kokeista annetaan taulukossa II, jossa annetaan tulehduksen muodostumisen inhibitioprosent-tiosuus. Annokset annetaan yksiköissä mg/kg p.o.

32 111361

Taulukko II

Esim. Koe 1 Koe 2 Koe 3

Inhibitio Annos Inhibitio Annos Inhibitio Annos 5 1__31__(50)__54__(100)__78__(50) 2 __16__(50)__7__(100)__65__(50) 3 __30__(50)__36__(100)__20__(50) 4 __-24__(50)__45__(100)__4__(50) 5 __23__(50)__50__(100)__16__(50) 10 6__30__(50)__75__(30)__79__(50) 7 __43__(50)__62__(100)__65 (50) 8 __23__(50)__60__(100)__92__(50) 9 __12__(50)__44__(100)__64__(50) 10 __24__(50)__61__(100)__41 (50) 11 __24__(50)__26 (100)__33__(10) 12 __-3__(10)__43__(30)__43__(10) 13 __24__(50)__62__(100)__^__(50) 14 __14__(10)__66__(30J__28__(10) 15 __-__-__-__-__-__- 16 __8__(50)__17__(100)__62__(50) 20 17__-24__(50)__15__(100) 60/39 (50) 18 __15__(50)__19__(100)__9__(50) 19 __39__(50) 55/62 (100)__24__(50) 20 __7__(50)__47__(100)__26__(50) 21 __-5__(50)__16__(100)__30__(50) 25 22__11__(50)__16__(30)__78__(50) 23 __22__(50)__23__(30)__62__(50) 24 __-__64__(30)__78__(50) 25 __24 (50) toksinen__(100)__46__(50) 26 __39 (50) toksinen (100) 54 (50) 27 __14__(50)__6__(100)__7__(50) 30 28__39__(50)__20__(100)__13__(50) 29 __39__(50)__18__(100)__34__(50) 30 __-__-__52__(100)__37__(50) 31 __-__2__53__(100)__66__(50) 32 __-__-__=__3__2__1_ 35 33__-___“___-__“__I__I_

Claims

33 111361 Patenttivaat inmkset

1 M / ^

1. Menetelmä kaavan (I) mukaisten, terapeuttisesti käyttökelpoisten 2-syano-3-hydroksienamidien ja niiden 5 emäsadditiosuolojen valmistamiseksi 0 0H 10 111 (I) j r7 R2 cn 15 [jossa Rx merkitsee ryhmää, jolla on kaava Rl3 ^14 R13 R14 (joissa R13, R14 ja R15, jotka voivat olla samoja tai erilai-25 siä, kukin merkitsevät vetyatomia tai alkyyliryhmää, joka sisältää 1-3 hiiliatomia ja n on 1, 2 tai 3); R2 merkitsee vetyatomia tai alkyyliryhmää, joka sisältää 1-3 hiiliatomia; R3, R4, R5, R6 ja R7, jotka voivat olla samoja tai erilai-30 siä, kukin merkitsevät vetyatomia, halogeeniatomia, ryhmää N02/ syanoryhmää, lineaarista tai haarautunutta alkyyliryhmää, joka sisältää 1-6 hiiliatomia, ryhmää - (CH2) m-CF3, -O-(CH2)ra-CF3, -S- (CH2)m-CF3, joissa m on 0, 1, 2 tai 3; tri-fluorimetyylifenoksi- tai p-kloorifenoksiryhmää; tai R4 ja 34 111361 R5 yhdessä merkitsevät ryhmää -0-CH2-0-, ja R3, R6 ja R7 ovat edellä määriteltyjä]; tunnettu siitä, että a) yhdisteen, jolla on kaava (II)

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktio kaavan (II) mukaisen yhdisteen ja natriumhydridin reaktiotuotteen ja kaavan (III) tai (IIIA) mukaisen yhdisteen välillä suoritetaan vedettömän tetrahydrofuraanin läsnä ollessa, alhaisessa 15 lämpötilassa.

3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktio kaavan (II) mukaisen yhdisteen ja natriumhydridin välillä suoritetaan vedettömän tetrahydrofuraanin läsnä ollessa ja imidatsolin olles- 20 sa läsnä katalyyttinä.

4. Jonkin patenttivaatimuksista 1-3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että jos yhdisteessä, jolla on kaava (IIIA) , ryhmä RÄ merkitsee ryhmää Rlf jossa on lisäksi suojaryhmä, tämä suojaryhmä on aryyliseleeni- 25 tai fenyyliseleeniryhmä.

5. Patenttivaatimuksen 1, kohdan (c) mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että X merkitsee jodia.

5 R13 (VI) (VI') jossa X merkitsee sopivaa poistuvaa ryhmää, ja n, R13, R14 ja R15 ovat edellä määriteltyjä, vahvan emäksen läsnä ollessa .

5 R. v T X (ii> 10 li a ™ (jossa R2, R3, R4, R5/ R6 ja R7 ovat edellä määriteltyjä) , annetaan reagoida natriumhydridin kanssa (tarvittaessa so-15 pivan katalyytin läsnä ollessa) ja sen jälkeen tuotteen annetaan reagoida yhdisteen kanssa, jolla on kaava (III) 0 (III)

20 A Hal^ ^Ri (jossa Hai merkitsee halogeeniatomia ja R3 on edellä määritelty) ; tai 25 b) yhdisteen, jolla on edellä määritelty kaava (II), annetaan reagoida yhdisteen kanssa, jolla on kaava (IHa) O 30 (III»> A (jossa Hai merkitsee halogeeniatomia ja RÄ merkitsee edellä määriteltyä ryhmää Rlf jossa on lisäksi suojaryhmä), jol-35 loin saadaan yhdiste, jolla on kaava (IA) *4 35 111361 R 5\ ^ 3 ~ (1¾)

0 OH κ«'/η^Ν^γ^«Α R, R2 cn (jossa Ra, R2, R3/ R4, R5, Rs ja R, ovat edellä määriteltyjä) 10 ja sen jälkeen suojaryhmä lohkaistaan, jolloin saadaan yhdiste, jolla on kaava (IA) , jossa RÄ merkitsee edellä määriteltyä ryhmää R1; tai c) sellaisten kaavan (I) mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi, joissa Rx merkitsee ryhmää 15 tai —(CH^)n 20 jossa R13, R14 ja R15 ovat edellä määriteltyjä ja n on 2 tai 3, annetaan kaavan (V) mukaisen yhdisteen, *4 25 xxXc li °

30 R, jossa R2 - R7 ovat edellä määriteltyjä, reagoida kaavan (VI) tai (VI1) mukaisen yhdisteen kanssa, 35 36 111361 /CHj,n-\ /“ ycH 2) n -1,

6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktio yhdisteen, jolla on 30 kaava (V), ja yhdisteen, jolla on kaava (VI) tai (VI'), välillä suoritetaan vedettömässä tetrahydrofuraanissa, alhaisessa lämpötilassa, käyttäen butyylilitiumia vahvana emäksenä.

7. Jonkin patenttivaatimuksen 1-6 mukainen mene- 35 telmä, tunnettu siitä, että lähtöaineena käytetään 37 111361 yhdistettä, jolla on kaava (II) tai kaava (V) , joissa R3, FU, R5, Rö ja R7, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, kukin merkitsevät vety-, fluori-, kloori-, bromi- tai jo-diatomia, metyyli-, etyyli-, t-butyyli-, trifluorimetyy-5 li-, trifluorimetoksi-, trifluorimetyylitio-, syano-, nitro-, tai p-kloorifenoksiryhmää; tai R4 ja R5 yhdessä merkitsevät ryhmää -O-CH2-O-, R3, R6 ja R7 ovat edellä määriteltyjä; ja R2 merkitsee vetyatomia tai metyyli-ryhmää .

8. Jonkin patenttivaatimuksen 1-4 tai 7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineena käytetään yhdistettä, jolla on kaava (III) tai (IIIA) , jossa Ri merkitsee ryhmää ja lähtöaineena käytettävässä yhdisteessä, jolla on kaava 20 (II,) R2 merkitsee vetyatomia tai metyyliryhmää; ja R3, R4, Rs, Re ja R7, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, kukin merkitsevät vety-, fluori-, kloori- tai bromiatomia, tai metyyli-, trifluorimetyyli-, trifluorimetoksi-, nitro- tai syanoryhmää.

9. Jonkin patenttivaatimuksen 1-7 mukainen mene telmä, tunnettu siitä, että lähtöaineena käytetään yhdistettä, jolla on kaava (V) , jossa R2 merkitsee vety-atomia tai metyyliryhmää; ja R3, R4, R5, R6 ja R7, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, kukin merkitsevät vety-, 30 fluori-, kloori- tai bromiatomia, tai metyyli-, trifluo-rimetyyli-, trifluorimetoksi-, nitro- tai syanoryhmää.

10. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lähtöaineena käytettävät yhdisteet valitaan siten, että valmistetaan yhdiste, joka on 35 valittu seuraavista: 38 111361 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-trifluorimetyylifenyy-li)-penta-2,4-dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-heksa- 2.5- dienamidi; 5 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-kloori-3-trifluorimetyylifenyyli) -penta-2,4-dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-trifluorimetoksifenyy-li)-penta-2,4-dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-4-metyyli-N-(4-bromifenyyli)-penta-2,4-10 dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-hepta-2-eeni-6-ynamidi; 2-syano-3-hydroksi-N-(4-kloori-3-trifluorimetyylifenyyli)-heksa-2,5-dienamidi; 15 2-syano-3-hydroksi-N-(3-metyyli-4-trifluorimetyylifenyyli) -hepta-2,6-dienamidi; 2-syano-3-hydroksi-N-(4-trifluorimetyylifenyyli)-hepta- 2.6- dienamidi; ja niiden emäsadditiosuolat. 39 111361