ES2966517T3 - Estimuladores de sGC - Google Patents

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ES2966517T3 ES21214096T ES21214096T ES2966517T3 ES 2966517 T3 ES2966517 T3 ES 2966517T3 ES 21214096 T ES21214096 T ES 21214096T ES 21214096 T ES21214096 T ES 21214096T ES 2966517 T3 ES2966517 T3 ES 2966517T3
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Takashi Nakai
Joel Moore
Nicholas Robert Perl
Rajesh R Iyengar
Ara Mermerian
G-Yoon Jamie Im
Thomas Wai-Ho Lee
Colleen Hudson
Glen Robert Rennie
James Jia
Paul Allen Renhowe
Timothy Claude Barden
Xiang Y Yu
James Edward Sheppeck
Karthik Iyer
Joon Jung
George Todd Milne
Kimberly Kafadar Long
Mark G Currie
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Cyclerion Therapeutics Inc
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Abstract

Se describen compuestos de Fórmulas I' y I, que son útiles como estimuladores de sGC, particularmente estimuladores dependientes de hemo independientes de NO. Estos compuestos también son útiles para tratar, prevenir o gestionar diversos trastornos que se describen en el presente documento. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Estimuladores de sGC
Campo de la invención
La presente descripción se refiere a estimuladores del guanilato ciclasa soluble (sGC), formulaciones farmacéuticas que los comprenden y sus usos, solos o en combinación con uno o más agentes adicionales, para tratar y/o prevenir diversas enfermedades, en donde puede ser deseable un aumento en la concentración de óxido nítrico (NO) o un aumento en la concentración de Monofosfato de guanosina (cGMP) cíclico.
Antecedentes de la invención
El guanilato ciclasa soluble (sGC) es el receptor principal para el óxido nítrico (NO)in vivo.El sGC se puede activar tanto mediante mecanismos dependientes de NO como mediante mecanismos independientes de NO. En respuesta a esta activación, el sGC convierte la GTP en el GMP cíclico mensajero secundario (cGMP). El nivel aumentado de cGMP, a su vez, modula la actividad de los efectores corriente abajo, incluidas quinasas de proteínas, fosfodiesterasas (PDE) y canales iónicos.
En el cuerpo, el NO es sintetizado a partir de arginina y oxígeno por diversas enzimas de óxido nítrico sintasa (NOS) y por una reducción secuencial de nitrato inorgánico. Se han identificado tres isoformas distintas de NOS: NOS inducibles (iNOS o NOSII) en las células de macrófagos activados; NOS neuronales constitutivas (nNOS o NOSI) involucradas en la neurotransmisión y la potenciación a largo plazo; y NOS endotelial constitutiva (eNOS o NOSIII) que regula la relajación del músculo liso y la presión arterial.
Las pruebas experimentales y clínicas indican que la biodisponibilidad y/o la capacidad de respuesta reducida a NO endógenamente producida contribuye al desarrollo de la enfermedad cardiovascular, endotelial, renal y hepática, así como a la disfunción eréctil y otros trastornos sexuales (por ejemplo, trastorno sexual femenino o atrofia vaginal). Particularmente, la ruta de señalización de NO está alterada en las enfermedades cardiovasculares, incluidas, por ejemplo, la hipertensión sistémica y pulmonar, la insuficiencia cardíaca, la angina, el ictus, trombosis y otras enfermedades tromboembólicas, enfermedades arteriales periféricas, fibrosis del hígado, pulmón o riñón y aterosclerosis.
Los estimuladores de sGC también son útiles en el tratamiento de trastornos relacionados con los lípidos tales como, por ejemplo, dislipidemia, hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia, sitoesterolemia, enfermedad del hígado graso y hepatitis.
La hipertensión pulmonar (PH) es una enfermedad caracterizada por una elevación sostenida de la presión arterial en la vasculatura pulmonar (arteria pulmonar, vena pulmonar y capilares pulmonares), que resulta en hipertrofia cardíaca derecha, dando lugar en última instancia a insuficiencia cardíaca derecha y a la muerte. En la PH, la bioactividad de NO y otros vasodilatadores tales como prostaciclina está reducida, mientras que la producción de vasoconstrictores endógenos tales como endotalina está aumentada, lo que resulta en vasoconstricción pulmonar excesiva. Los estimuladores de sGC se han usado para tratar la PH debido a que promueven la relajación del músculo liso, lo que se traduce en vasodilatación.
El tratamiento con estimuladores de sGC independientes de NO también ha favorecido la relajación del músculo liso en el cuerpo cavernoso de conejos sanos, ratas y humanos, ocasionando erección del pene, indicando que los estimuladores de sGC son útiles para tratar la disfunción eréctil.
Los estimuladores de sGC hemo-dependientes, independientes de NO, tales como los descritos en la presente descripción, tienen varias características importantes de diferenciación, que incluyen dependencia crucial de la presencia del resto hemo protésico reducido para su actividad, fuerte activación de enzima sinérgica cuando se combina con NO y estimulación de la síntesis de cGMP mediante estimulación directa de sGC, independiente de NO. El compuesto de bencilindazol YC-1 fue el primer estimulador sGC en identificarse. Desde entonces, se han desarrollado estimuladores de sGC adicionales de potencia y especificidad mejorada para sGC. Se ha comprobado que estos compuestos producen efectos antiagregantes, antiproliferativos y vasodilatadores.
Dado que los compuestos que estimulan el sGC de manera independiente de NO ofrecen ventajas considerables frente a otras terapias alternativas actuales, existe la necesidad de desarrollar estimuladores novedosos de sGC. Son potencialmente útiles en la prevención, manejo y tratamiento de trastornos tales como la hipertensión pulmonar, la hipertensión arterial, la insuficiencia cardíaca, la aterosclerosis, la inflamación, la trombosis, la fibrosis y la insuficiencia renal, la cirrosis del hígado, la fibrosis pulmonar, la disfunción eréctil, el trastorno de deseo sexual hipoactivo femenino y la atrofia vaginal y otros trastornos cardiovasculares; también son potencialmente útiles para la prevención, el manejo y el tratamiento de los trastornos relacionados con los lípidos.
El documento WO 2013/101830 divulga pirazoles sustituidos que son útiles como estimuladores de sGC. El documento WO 2012/003405 divulga compuestos que son útiles como estimuladores de sGC.
Sumario de la invención
La presente invención está dirigida a compuestos representados por las siguientes fórmulas o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos:,
La invención está dirigida, además, a una composición farmacéutica que comprende los compuestos, sales farmacéuticamente aceptable de los mismos, y uno o más excipientes.
La invención también proporciona los compuestos, o sales farmacéuticamente aceptable de los mismos, para usar en el tratamiento de una enfermedad, afección o trastorno de salud seleccionado de:
(1) trastornos/afecciones periféricas, pulmonares, hepáticas, del riñón, cardíacas o cerebrovasculares/endoteliales o enfermedades relacionadas de cualquier otra manera con la circulación seleccionadas de:
• trastornos relacionados con la alta presión arterial y flujo sanguíneo coronario reducido; una mayor presión arterial coronaria aguda y crónica; hipertensión arterial; trastorno vascular debido a complicaciones cardíacas y renales, enfermedad cardíaca, ictus, isquemia cerebral o insuficiencia renal; hipertensión resistente; hipertensión diabética; insuficiencia cardíaca congestiva; disfunción diastólica o sistólica; insuficiencia coronaria; arritmias; reducción de precarga ventricular; hipertrofia cardíaca; síndrome de insuficiencia cardíaca/cardiorrenal; hipertensión portal; disfunción o lesión endotelial;
• trastornos e isquemias tromboembólicos; infarto de miocardio; ictus; ataques isquémicos transitorios (TIA); tromboanginitis obstructiva; angina de pecho estable o inestable; espasmos coronarios; angina variante; angina de Prinzmetal; restenosis resultante de terapias de trombolisis; trastornos trombogénicos;
• enfermedad de Alzheimer; enfermedad de Parkinson; demencia; deterioro cognitivo vascular; vasoespasmos cerebrales; traumatismo craneoencefálico;
• enfermedad arterial periférica; enfermedad arterial periférica oclusiva; vasculopatía periférica; hipertonias; síndrome o fenómeno de Raynaud; isquemia crítica de un miembro; vasculitis; embolismo periférico; claudicación intermitente; crisis vasoclusivas; distrofia muscular de Duchenne; distrofia muscular de Becker; anormalidades de la microcirculación; problemas de exudación o permeabilidad vascular;
• choque; septicemia; choque cardiogénico; control de la activación leucocitaria; inhibición o modulación de la agregación plaquetaria;
• condiciones pulmonares/respiratorias; hipertensión pulmonar; hipertensión arterial pulmonary remodelación vascular pulmonar asociada; trombosis localizada e hipertrofia cardíaca derecha; hipertonía pulmonar; hipertensión pulmonar primaria; hipertensión pulmonar secundaria; hipertensión pulmonar familiar; hipertensión pulmonar esporádica, hipertensión pulmonar precapilar; hipertensión pulmonar idiopática; arteriopatía pulmonar trombótica; arteriopatía pulmonar plexogénica; fibrosis quística; broncoconstricción o broncoconstricción pulmonar; síndrome de dificultad respiratoria aguda; fibrosis pulmonar; trasplante de pulmón;
• hipertensión pulmonar asociada a o relacionada con la disfunción ventricular izquierda, hipoxemia, hipertensiones de los grupos I, II, III, IV y V de la OMS, enfermedad de la válvula mitral, pericarditis constrictiva, estenosis aórtica, cardiomiopatía, fibrosis mediastínica, fibrosis pulmonar, drenaje venoso pulmonar anómalo, enfermedad pulmonar venoclusiva, vasculitis pulmonar, enfermedad del colágeno vascular, cardiopatías congénitas, hipertensión venosa pulmonar, enfermedad pulmonar intersticial, trastorno respiratorio del sueño, apnea del sueño, trastornos de hipoventilación alveolar, exposición crónica a altitud elevada, enfermedad pulmonar en neonatos, displasia alveolar capilar, enfermedad de células falciformes; trastornos de la coagulación; tromboembolismo crónico, embolismo pulmonar debido a tumor, parásitos o material extraño, enfermedad del tejido conectivo, lupus, esquistosomiasis, sarcoidosis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, asma, enfisema, bronquitis crónica, hemangiomatosis capilar pulmonar; histiocitosis X, linfangiomatosis y vasos pulmonares comprimidos debidos a adenopatía, tumor o mediastinitis fibrosante;
• enfermedades o condiciones arteroscleróticas; aterosclerosis; aterosclerosis asociada con lesión endotelial, adhesión y agregación plaquetaria y de monocitos, proliferación y migración de músculo liso; restenosis; restenosis desarrollada después de terapias de trombolisis, angioplastias transluminales percutáneas (ATP), angioplastias coronarias transluminales percutáneas (PTCA) y baypás; inflamación;
• enfermedad cardiovascular asociada con el síndrome metabólico, obesidad, dislipidemia, diabetes, alta presión arterial; trastornos relacionados con los lípidos, tales como la dislipidemia, la hipercolesterolemia, la hipertrigliceridemia, la sitosterolemia, la enfermedad del hígado graso, y la hepatitis; preeclampsia; avance de la enfermedad renal poliquística; acumulación subcutánea de grasa;
• cirrosis hepática; cirrosis hepática asociada con la enfermedad crónica del hígado; fibrosis hepática, activación de células estelares hepáticas, colágeno fibroso hepático; acumulación de colágeno total; enfermedad del hígado de origen necroinflamatorio y/o de origen inmunológico;
• trastornos del sistema urogenital; fibrosis renal; insuficiencia renal resultante de enfermedades o insuficiencia renal crónica; insuficiencia renal debido a la acumulación/deposición y lesión de tejido, esclerosis progresiva y glomerulonefritis; hipertrofia prostática;
• esclerosis sistémica;
• fibrosis intersticial cardíaca; remodelación cardíaca y fibrosis; hipertrofia cardíaca;
(2) daño por isquemia o reperfusión; isquemia/reperfusión asociada con transplante de órganos, trasplante de pulmón, trasplante pulmonar o transplante cardíaco; conservación de los sustituyentes de la sangre en pacientes con trauma;
(3) un trastorno sexual, ginecológico y urológico seleccionado de disfunción eréctil; impotencia; eyaculación precoz; disfunción sexual femenina; disfunción del deseo sexual femenino; trastorno del deseo sexual hipoactivo; atrofia vaginal; dispaneuria; vaginitis atrófica; hiperplasia prostática benigna (BPH) o hipertrofia o ampliación prostática benigna; obstrucción de la salida de la vejiga; síndrome de vejiga dolorosa (BPS); cistitis intersticial (IC); síndrome de vejiga hiperactiva, vejiga neurogénica e incontinencia; nefropatía diabética;
(4) enfermedades o trastornos oculares seleccionados de glaucoma, retinopatía, retinopatía diabética, blefaritis, síndrome del ojo seco, síndrome de Sjogren;
(5) enfermedades o trastornos de audición seleccionados del deterioro de la audición; pérdida parcial o pérdida total de audición; sordera parcial o total; acúfenos; pérdida de audición inducida por ruido;
(6) trastornos o afecciones tópicas o de la piel seleccionados de fibrosis dérmica, esclerodermia, fibrosis de la piel;
(7) curación de heridas; cicatrización de heridas en diabéticos; mejora de la perfusión microvascular; mejora de la perfusión microvascular después de una lesión, para contrarrestar la respuesta inflamatoria en el cuidado perioperativo; fisuras anales; úlceras diabéticas; y
(8) otras enfermedades o afecciones seleccionadas de metástasis de cáncer; osteoporosis, gastroparesis; dispepsia funcional; complicaciones diabéticas; enfermedades asociadas con la disfunción endotelial; y trastornos neurológicos asociados con la disminución de la producción de óxido nítrico.
Descripción detallada de la invención
A continuación se hará referencia en detalle a determinadas realizaciones de la invención, ejemplos de las cuales se ilustran en las estructuras y fórmulas adjuntas. Si bien la invención se describirá junto con las realizaciones enumeradas, se entenderá que estas no pretenden limitar la invención a esas realizaciones. Más bien, la invención pretende cubrir todas las alternativas, modificaciones y equivalentes que puedan incluirse dentro del alcance de la presente invención tal como se define en las realizaciones. La presente invención no se limita a los métodos y materiales descritos en el presente documento, sino que incluye cualquier método y material similar o equivalente a los descritos en el presente documento que podría usarse en la práctica de la presente invención. En el caso de que una o más de las referencias de la literatura, patentes o materiales similares difieran de o contradigan esta solicitud, incluidos, aunque no de forma limitativa, términos definidos, uso de términos, técnicas descritas o lo similar, prevalecerá lo indicado en esta solicitud.
Definiciones y terminología general
Para los fines de esta descripción, los elementos químicos se identifican según la tabla periódica de los elementos, la versión CAS y el Handbook of Chemistry and Physics, 75a ed. 1994. De forma adicional, se describen principios generales de química orgánica en “ Organic Chemistry” , Thomas Sorrell, University Science Books, Sausalito: 1999, y “ March's Advanced Organic Chemistry” , 5a ed., Smith, M. B. y March, J., eds. John Wiley & Sons, Nueva York: 2001.
Como se usa en la presente descripción, la expresión “ hasta” , se refiere a cero o cualquier número entero igual o inferior al número que sigue a la expresión. Por ejemplo, “ hasta 3” significa uno cualquiera de 0, 1, 2, o 3. Como se describe en la presente descripción, un intervalo numérico especificado de átomos incluye cualquier número entero dentro del intervalo. Por ejemplo, un grupo que tiene de 1 a 4 átomos podría tener 1, 2, 3 o 4 átomos. Cuando una variable cualquiera aparece más de una vez en cualquier posición, su definición en cada caso es independiente de los demás casos.
La selección de sustituyentes y combinaciones previstos por esta descripción son solamente los que dan lugar a la formación de compuestos estables o químicamente viables. Estas elecciones y combinaciones resultarán evidentes para el experto en la técnica y se pueden determinar sin experimentación excesiva. Como se usa en la presente descripción, el término “ estable” se refiere a compuestos que no se alteran sustancialmente cuando se someten a condiciones que permiten su producción, detección y, en algunas realizaciones, su recuperación, purificación, y uso para uno o más de los propósitos descritos en la presente descripción. En algunas realizaciones, un compuesto estable es uno que no se altera sustancialmente cuando se mantiene a una temperatura de 25 °C o menos, en ausencia de humedad u otras condiciones químicamente reactivas, durante al menos una semana. Un compuesto químicamente viable es un compuesto que puede ser preparado por una persona experta en la técnica basado en las descripciones aquí ofrecidas complementadas, si es necesario, con el conocimiento relevante de la técnica.
Un compuesto, tal como los compuestos de las reivindicaciones 1 y 2, puede estar presente en su forma libre (por ejemplo, una forma amorfa, o una forma cristalina o un polimorfo). Bajo determinadas condiciones, los compuestos también pueden formar coformas. Como se usa en la presente descripción, el término coforma es sinónimo del término forma cristalina de componentes múltiples. Cuando uno de los componentes en la coforma ha transferido claramente un protón al otro componente, la coforma resultante se denomina “ sal” . La formación de una sal viene determinada por lo grande que es la diferencia en el pKas entre los elementos que forman la mezcla. Para los fines de esta descripción, los compuestos incluyen sales farmacéuticamente aceptables, aunque el término “ sales farmacéuticamente aceptables” no se haga constar explícitamente.
A menos que solo uno de los isómeros se dibuje o se nombre específicamente, las estructuras representadas en la presente descripción también incluyen todas las formas estereoisoméricas (por ejemplo, las formas enantioméricas, diastereoméricas, atropoisoméricas e isoméricas cis-trans) de la estructura; por ejemplo, las configuracionesRy S para cada centro asimétrico, las configuracionesRaySapara cada eje asimétrico, las configuraciones de doble enlace
(Z)y(E)y los isómeros conformacionalescisytrans.Por lo tanto, los isómeros estereoquímicos simples, así como racematos, y mezclas de enantiómeros, diastereómeros e isómeroscis-trans(enlace doble o conformacional) de los presentes compuestos se encuentran dentro del alcance de la presente descripción. Salvo que se indique lo contrario, todas las formas tautoméricas de los compuestos de la presente descripción están también dentro del alcance de la invención. Como ejemplo, un sustituyente dibujado como se indica a continuación:
en donde R puede ser hidrógeno, incluiría ambos compuestos mostrados a continuación:
La presente descripción también abarca compuestos marcados isotópicamente que son idénticos a los mencionados en la presente descripción, salvo por que uno o más átomos son remplazados por un átomo que tiene una masa atómica o un número de masa diferente a la masa atómica o número de masa habitualmente encontrado en la naturaleza. Todos los isótopos de cualquier átomo o elemento en particular como se especifica se contemplan dentro del alcance de los compuestos de la invención y sus usos. Isótopos ilustrativos que se pueden incoporar en los compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, azufre, flúor, cloro, y yodo, tales como 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 13N, 15N, 15O, 17O, 18O, 32P, 33P, 35S, 18F, Determinados compuestos marcados isotópicamente de la presente invención (por ejemplo, los marcados con 3H y
14C) son útiles en los ensayos de distribución de compuestos y/o tejidos de sustrato. Los isótopos tritiados (es decir,
3H) y de carbono-14 (es decir, 14C) son útiles por su fácil preparación y detectabilidad. Además, la sustitución con isótopos más pesados como el deuterio (es decir, 2H) puede ofrecer determinadas ventajas terapéuticas debidas a una mayor estabilidad metabólica (por ejemplo, mayor vida media in vivo o menores requisitos de dosificación) y, por lo tanto, pueden preferirse en algunas circunstancias. Los isótopos emisores de positrones, tales como 15O, 13N, 11C,
y<18>F son útiles para estudios de tomografía por emisión de positrones (PET) para examinar la ocupación de receptores de sustrato. Los compuestos marcados isotópicamente de la presente invención pueden prepararse, generalmente, mediante los siguientes procedimientos análogos a los descritos en los esquemas y/o en los ejemplos incluidos más adelante, sustituyendo un reactivo marcado isotópicamente por un reactivo no marcado isotópicamente.
Como se usa en la presente descripción, el término “ alifático” o “ grupo alifático” significa una cadena hidrocarbonada de cadena lineal (es decir, no ramificada) o ramificada, sustituida o no sustituida que está completamente saturada o que contiene una o más unidades de insaturación. Salvo que se indique lo contrario, los grupos alifáticos contienen 1 20 átomos de carbono alifático. En algunas realizaciones, los grupos alifáticos contienen de 1 a 10 átomos de carbono alifáticos. En otras realizaciones, los grupos alifáticos contienen de 1 a 8 átomos de carbono alifáticos. En otras realizaciones, los grupos alifáticos contienen de 1 a 6 átomos de carbono alifáticos. En otras realizaciones, los grupos alifáticos contienen 1-4 átomos de carbono alifáticos y, en otras realizaciones, los grupos alifáticos contienen 1-3 átomos de carbono alifáticos. Los grupos alifáticos adecuados incluyen, pero no se limitan a, grupos alquilo, alquenilo o alquinilo lineales o ramificados, sustituidos o no sustituidos. Los ejemplos específicos de grupos alifáticos incluyen, pero no se limitan a: metilo, etilo, propilo, butilo, isopropilo, isobutilo, vinilo, sec-butilo, ferf-butilo, butenilo, propargilo, acetileno y similares. Para una total claridad, el término “ cadena alifática” se puede utilizar de manera intertambiable con el término “ alifático” o “ grupo alifático” .
Como se usa en la presente descripción, el término “ alquilo” se refiere a un radical hidrocarbonado monovalente de cadena lineal o ramificada saturada. Salvo que se indique lo contrario, un grupo alquilo contiene 1-20 átomos de carbono (por ejemplo, 1-20 átomos de carbono, 1-10 átomos de carbono, 1-8 átomos de carbono, 1-6 átomos de carbono, 1-4 átomos de carbono o 1-3 átomos de carbono). Los ejemplos de grupos alquilo incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, s-butilo, t-butilo, pentilo, hexilo, heptilo, octilo y similares.
El término “ alquenilo” se refiere a un radical hidrocarbonado monovalente de cadena lineal o ramificada con al menos un sitio de insaturación, es decir, un enlace doble carbono-carbono sp<2>, en donde el radical alquenilo incluye radicales que tienen orientaciones “ cis” y “trans” o, alternativamente, orientaciones “ E” y “ Z” . Salvo que se indique lo contrario, un grupo alquenilo contiene 2-20 átomos de carbono (por ejemplo, 2-20 átomos de carbono, 2-10 átomos de carbono, 2-8 átomos de carbono, 2-6 átomos de carbono, 2-4 átomos de carbono o 2-3 átomos de carbono). Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, vinilo, alilo y similares.
El término “ alquinilo” se refiere a un radical hidrocarbonado monovalente lineal o ramificado con al menos un sitio de insaturación, es decir, un triple enlace-carbono carbono sp. Salvo que se indique lo contrario, un grupo alquinilo contiene 2-20 átomos de carbono (por ejemplo, 2-20 átomos de carbono, 2-10 átomos de carbono, 2-8 átomos de carbono, 2-6 átomos de carbono, 2-4 átomos de carbono o 2-3 átomos de carbono). Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a, etinilo, propinilo y similares.
El término “ carbocíclico” se refiere a un sistema anular formado solo por átomos de carbono e hidrógeno. Salvo que se indique lo contrario, a lo largo de esta descripción, carbociclo se utiliza como sinónimo de “ carbociclo no aromático” o “ cicloalifático” . En algunos casos, el término se puede utilizar en la expresión “ carbociclo aromático” y en este caso se refiere a un “ grupo arilo” , según se define a continuación.
El término “ cicloalifático” (o “ carbociclo no aromático” , “ carbociclilo no aromático” , “ carbocíclico no aromático” ) se refiere a un hidrocarburo cíclico que está completamente saturado o que contiene una o más unidades de insaturación pero que no es aromático, y que tiene un único punto de unión al resto de la molécula. Salvo que se indique lo contrario, un grupo cicloalifático puede ser monocíclico, bicíclico, tricíclico, fusionado, espiro o con puente. En una realización, el término “ cicloalifático” se refiere a un hidrocarburo C<3>-C<12>monocíclico o un hidrocarburo C<7>-C<12>bicíclico. En algunas realizaciones, cualquier anillo individual en un sistema anular bicíclico o tricíclico tiene 3-7 miembros. Los grupos cicloalifáticos adecuados incluyen, pero no se limitan a, cicloalquilo, cicloalquenilo y cicloalquinilo. Los ejemplos de grupos alifáticos incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclopentenilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, cicloheptilo, cicloheptenilo, norbornilo, ciclooctilo, ciclononilo, ciclodecilo, cicloundecilo, ciclododecilo y similares.
El término “ cicloalifático” también incluye sistemas anulares policíclicos en los que el anillo carbocíclico no aromático puede estar “ fusionado” a uno o más anillos carbocíclicos o heterocíclicos aromáticos o no aromáticos o combinaciones de los mismos, siempre y cuando el radical o punto de unión esté en el anillo carbocíclico no aromático.
Como se usa en la presente descripción, “ cicloalquilo” se refiere a un sistema anular en el cual está completamente saturado y que tiene un único punto de unión al resto de la molécula. Salvo que se indique lo contrario, un grupo cicloalquilo puede ser monocíclico, bicíclico, tricíclico, fusionado, espiro o con puente. En una realización, el término “ cicloalquilo” se refiere a un hidrocarburo saturado C<3>-C<12>monocíclico o un hidrocarburo saturado C<7>-C<12>bicíclico. En algunas realizaciones, cualquier anillo individual en un sistema anular bicíclico o tricíclico tiene 3-7 miembros. Los grupos cicloalquilo adecuados incluyen, pero no se limitan a, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, cicloheptenilo, norbornilo, ciclooctilo, ciclononilo, ciclodecilo, cicloundecilo, ciclododecilo y similares.
Como se usa en la presente descripción, “ heterociclo” (o “ heterociclo” o “ heterocíclico” ) se refiere a un sistema anular en el cual uno o más miembros de anillo son un heteroátomo independientemente seleccionado, que está completamente saturado o que contiene una o más unidades de insaturación, pero que no es aromático, y que tiene un único punto de unión al resto de la molécula. Salvo que se indique lo contrario, a lo largo de esta descripción, heterociclo se usa como sinónimo de “ heterociclo no aromático” . En algunos casos, el término se puede utilizar en la expresión “ heterociclo aromático” y en este caso se refiere a un “ grupo heteroarilo” , según se define a continuación. El término heterociclo también incluye sistemas anulares heterocíclicos fusionados, en espiro o con puente. Salvo que se indique lo contrario, un heterociclo puede ser monocíclico, bicíclico o tricíclico. En algunas realizaciones, el heterociclo tiene 3-18 miembros de anillo en los que uno o más miembros de anillo es un heteroátomo seleccionado independientemente de oxígeno, azufre o nitrógeno, y cada anillo del sistema contiene de 3 a 7 miembros de anillo. En otras realizaciones, un heterociclo puede ser un monociclo que tiene de 3-7 miembros de anillo (2-6 átomos de carbono y 1-4 heteroátomos) o un biciclo que tiene 7-10 miembros de anillo (4-9 átomos de carbono y 1-6 heteroátomos). Los ejemplos de sistemas de anillos heterocíclicos bicíclicos incluyen, pero no se limitan a: adamantanilo, 2-oxa-biciclo[2.2.2]octilo, 1-aza-biciclo[2.2.2]octilo.
Como se usa en la presente descripción, el término “ heterociclo” también incluye sistemas anulares policíclicos, en donde el anillo heterocíclico está fusionado con uno o más anillos carbocíclicos o heterocíclicos aromáticos o no aromáticos, o con combinaciones de estos, siempre y cuando el radical o punto de unión esté en el anillo heterocíclico.
Ejemplos de anillos heterocíclicos incluyen, aunque no de forma limitativa, los siguientes monociclos: 2-tetrahidrofuranilo, 3-tetrahidrofuranilo, 2-tetrahidrotiofenilo, 3-tetrahidrotiofenilo, 2-morfolino, 3-morfolino, 4-morfolino, 2-tiomorfolino, 3-tiomorfolino, 4-tiomorfolino, 1 -pirrolidinilo, 2-pirrolidinilo, 3-pirrolidinilo, 1 -tetrahidropiperazinilo, 2-tetrahidropiperazinilo, 3-tetrahidropiperazinilo, 1 -piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo, 1 -pirazolinilo, 3-pirazolinilo, 4-pirazolinilo, 5-pirazolinilo, 1 -piperidinilo, 2-piperidinilo, 3-piperidinilo, 4-piperidinilo, 2-tiazolidinilo, 3-tiazolidinilo, 4-tiazolidinilo, 1 -imidazolidinilo, 2-imidazolidinilo, 4-imidazolidinilo, 5-imidazolidinilo; y los siguientes biciclos: 3-1H-benzimidazol-2-ona, 3-(1-alquil)-benzimidazol-2-ona, indolinilo, tetrahidroquinolinilo, tetrahidroisoquinolinilo, benzotiolano, benzoditiano, y 1,3-dihidro-imidazol-2-ona.
Como se usa en la presente descripción, el término “ arilo” (como en “ anillo arilo” o “ grupo arilo” ), usado solo o como parte de un resto más grande, como en “ aralquilo” , “ aralcoxi” , “ ariloxialquilo” , se refiere a un sistema anular carbocíclico en donde al menos un anillo en el sistema es aromático y tiene un único punto de unión con el resto de la molécula. Salvo que se indique lo contrario, un grupo arilo puede ser monocíclico, bicíclico o tricíclico y contener 6-18 miembros de anillo. El término también incluye sistemas de anillos policíclicos, donde el anillo arilo está fusionado con uno o más anillos carbocíclicos o heterocíclicos aromáticos o no aromáticos, o con combinaciones de los mismos, siempre que el radical o punto de unión esté en el anillo de arilo. Los ejemplos de anillos arilo incluyen, pero no se limitan a, fenilo, naftilo, indanilo, indenilo, tetralin, fluorenilo, y antracenilo.
El término “ aralquilo” se refiere a un radical que tiene un anillo de arilo sustituido con un grupo alquileno, en donde el extremo abierto del grupo alquileno permite que el radical aralquilo se enlace a otra parte del compuesto. El grupo alquileno es un grupo hidrocarbonado bivalente, de cadena lineal o ramificada y saturado. Como se usa en la presente descripción, el término “ aralquilo C<7-12>” significa un radical aralquilo en donde el número total de átomos de carbono en el anillo arilo y el grupo alquileno combinado es de 7 a 12. Los ejemplos de “ aralquilo” incluyen, pero no se limitan a, un anillo de fenilo sustituido por un grupo alquileno C<1-6>, por ejemplo, bencilo y feniletilo, y un grupo naftilo sustituido por un grupo alquileno C<1-2>.
El término “ heteroarilo” (o “ heteroaromático” o “ grupo heteroarilo” o “ heterociclo aromático” ) usado solo o como parte de un resto más grande, como en “ heteroaralquilo” o “ heteroarilalcoxi” se refiere a un sistema de anillos en donde al menos un anillo en el sistema es aromático y contiene uno o más heteroátomos, en donde cada anillo en el sistema contiene de 3 a 7 miembros del anillo y que tiene un único punto de unión al resto de la molécula. Salvo que se indique lo contrario, un sistema anular heteroarilo puede ser monocíclico, bicíclico o tricíclico y tener un total de cinco a catorce miembros de anillo. En una realización todos los anillos en un sistema de heteroarilo son aromáticos. También se incluyen en esta definición los radicales heteroarilo donde el anillo heteroarilo se fusiona con uno o más anillos carbocíclicos o heterocíclicos aromáticos o no aromáticos, o combinaciones de los mismos, siempre que el radical o punto de unión esté en el anillo heteroarilo. Como se usa en la presente descripción, el sistema heteroaromático bicíclico 6, 5, por ejemplo, es un anillo heteroaromático de seis miembros fusionado a un segundo anillo de cinco miembros, en donde el radical o punto de unión está en el anillo de seis miembros.
Los anillos heteroarilo incluyen, pero no se limitan a, los siguientes monociclos: 2-furanilo, 3-furanilo, N-imidazolilo, 2-imidazolilo, 4-imidazolilo, 5-imidazolilo, 3-isoxazolilo, 4-isoxazolilo, 5-isoxazolilo, 2-oxazolilo, 4-oxazolilo, 5-oxazolilo, N-pirrolilo, 2-pirrolilo, 3-pirrolilo, 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 2-pirimidinilo, 4-pirimidinilo, 5-pirimidinilo, piridazinilo (por ejemplo, 3-piridazinilo), 2-tiazolilo, 4-tiazolilo, 5-tiazolilo, tetrazolilo (por ejemplo, 5-tetrazolilo), triazolilo (por ejemplo, 2-triazolilo y 5-triazolilo), 2-tienilo, 3-tienilo, pirazolilo (por ejemplo, 2-pirazolilo), isotiazolilo, 1,2,3-oxadiazolilo, 1,2,5-oxadiazolilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,3-tiadiazolilo, 1,3,4-tiadiazolilo, 1,2,5-tiadiazolilo, pirazinilo, 1,3,5-triazinilo, y los siguientes biciclos: benzimidazolilo, benzofurilo, benzotiofenilo, benzopirazinilo, benzopiranonilo, indolilo (por ejemplo, 2-indolilo), purinilo, quinolinilo (por ejemplo, 2-quinolinilo, 3-quinolinilo, 4-quinolinil) e isoquinolinilo (por ejemplo, 1-isoquinolinilo, 3-isoquinolinilo o 4-isoquinolinilo).
Como se usa en la presente descripción, “ ciclo” (o “ cíclico” , o “ resto cíclico” ) abarca sistemas de anillo monocíclicos, bicíclicos y tricíclicos incluyendo cicloalifáticos, heterocíclicos, de arilo o heteroarilo, cada uno de los cuales se ha definido anteriormente.
Los sistemas de anillo bicíclicos “ fusionados” comprenden dos anillos que comparten dos átomos de anillo adyacentes.
Los sistemas de anillo bicíclicos “ con puente” comprenden dos anillos que comparten tres o cuatro átomos de anillo adyacentes. Como se usa en la presente descripción, el término “ puente” se refiere a un átomo o una cadena de átomos que conectan dos partes diferentes de una molécula. Los dos átomos que están conectados a través del puente (usualmente, pero no siempre, dos átomos de carbono tertiarios) se denominan “ cabezas de puente” . Además del puente, las dos cabezas de puente están conectadas por al menos dos átomos o cadenas de átomos individuales. Los ejemplos de sistemas de anillos bicíclicos de puente incluyen, aunque no de forma limitativa, adamantanilo, norbornanilo, biciclo[3.2.1]octilo, biciclo[2.2.2]nonilo, biciclo[3.3.1]nonilo, biciclo[3.2.3]nonilo, 2-oxa-biciclo[2.2.2]octilo, 1-aza-biciclo[2.2.2]octilo, 3-aza-biciclo[3.2.1]octilo, y 2,6-dioxa-triciclo[3.3.1.03,7]nonilo. Los sistemas de anillo bicíclicos de “ espiro” comparten solo un átomo de anillo (usualmente un átomo de carbono cuaternario) entre los dos anillos.
El término “ átomo de anillo” se refiere a un átomo tal como C, N, O o S que forma parte del anillo de un anillo aromático, un anillo cicloalifático, un anillo heterocíclico o un anillo heteroarilo. Un “ átomo de anillo sustituible” es un carbono del anillo o átomo de nitrógeno unido al menos aun átomo de hidrógeno. El hidrógeno se puede remplazar opcionalmente con un grupo sustituyente adecuado. Por tanto, el término “ átomo de anillo sustituible” no incluye nitrógeno del anillo o átomos de carbono que están compartidos cuando dos anillos están fusionados. Además, “ átomo de anillo sustituible” no incluye átomos de carbono o átomos de nitrógeno cuando la estructura describe que ya están unidos a uno o más radicales distintos del hidrógeno y no hay hidrógenos disponibles para la sustitución.
Heteroátomo” se refiere a uno o más de oxígeno, azufre, nitrógeno, fósforo, o silicio, incluida cualquier forma oxidada de nitrógeno, azufre, fósforo, o silicio, la forma cuaternizada de cualquier nitrógeno básico, o un nitrógeno sustituible de un anillo heterocíclico o de heteroarilo, por ejemplo N (como en 3,4-dihidro-2H-pirrolilo), NH (como en pirrolidinilo) o NR+ (como en pirrolidinilo N-sustituido).
Se pueden tomar conjuntamente dos casos independientes de una variable con el(los) átomo(s) al cual o a los cuales se une cada variable para formar un anillo heterocíclico, de arilo o heteroarilo cicloalifático de 5-8 miembros o un anillo cicloalifático de 3-8 miembros. Anillos ilustrativos que se forman cuando se toman conjuntamente dos elementos independientes de un sustituyente con el(los) átomo(s) al cual se une cada variable incluyen, pero no se limitan a, los siguientes: a) dos elementos independientes de un sustituyente que se unen al mismo átomo y se toman conjuntamente con ese átomo para formar un anillo, donde ambos elementos del sustituyente se toman conjuntamente con el átomo al que están unidos para formar un anillo heterociclilo, heteroarilo, cicloalifático o arilo, en donde el grupo se une al resto de la molécula por un único punto de unión; y b) dos elementos independientes de un sustituyente que se unen a átomos diferentes y se toman conjuntamente con ambos átomos para formar un anillo heterociclilo, heteroarilo, cicloalifático o arilo, en donde el anillo que se forma tiene dos puntos de unión con el resto de la molécula. Por ejemplo, cuando un grupo fenilo está sustituido con dos elementos de -ORo en la fórmula D1:
estos dos elementos de -ORo se toman junto con los átomos de carbono al cual están unidos para formar un anillo que contiene oxígeno de 6 miembros fusionado como en la fórmula 2:
Se apreciará que pueden formarse diversos anillos distintos cuando dos elementos independientes de un sustituyente se toman conjuntamente con el(los) átomo(s) al cual se une cada sustituyente y que los ejemplos detallados anteriormente no deben considerarse limitantes.
Una cadena alquílica o alifática puede estar opcionalmente interrumpida con otro átomo o grupo. Esto significa que una unidad de metileno de la cadena alquílica o alifática puede ser sustituida opcionalmente con dicho otro átomo o grupo. Salvo que se indique lo contrario, los remplazos opcionales forman un compuesto químicamente estable. Las interrupciones opcionales pueden producirse tanto dentro de la cadena como en el extremo de la cadena; es decir, en el punto de unión o uniones al resto de la molécula y/o en el extremo terminal. Además, dos remplazos opcionales pueden ser adyacentes entre sí dentro de una cadena siempre que se obtenga un compuesto químicamente estable.
Salvo que se indique lo contrario, si el remplazo o interrupción se produce en un extremo terminal de la cadena, el átomo de remplazo está unido a un átomo de H en el extremo terminal. Por ejemplo, si -CH<2>CH<2>CH<3>estuviera opcionalmente interrumpido con -O-, el compuesto resultante podría ser-OCH<2>CH<3>, -CH<2>OCH<3>o -CH<2>CH<2>OH. Como otro ejemplo, si el grupo de enlace divalente -CH<2>CH<2>CH<2>estuviera opcionalmente interrumpido con -O-, el compuesto resultante podría ser -OCH<2>CH<2>-, -CH<2>OCH<2>- o -CH<2>CH<2>O-. Los remplazos opcionales también pueden remplazar totalmente todos los átomos de carbono en una cadena. Por ejemplo, un C<3>alifático podría estar completamente remplazado por -N(R')-, -C(O)- y -N(R')- para formar -N(R')C(O)N(R')- (una urea).
En general, el término “vecinal” se refiere a la colocación de sustituyentes en un grupo que incluye dos o más átomos de carbono, en donde los sustituyentes están unidos a átomos de carbono adyacentes.
En general, el término “ geminal” se refiere a la colocación de sustituyentes en un grupo que incluye dos o más átomos de carbono, en donde los sustituyentes están unidos al mismo átomo de carbono.
Los términos “terminalmente” e “ internamente” se refieren a la ubicación de un grupo dentro de un sustituyente hidrocarbilo. Un grupo es terminal cuando el grupo está presente en el extremo del sustituyente que no está unido adicionalmente al resto de la estructura química. Carboxialquilo, es decir, R<X>O(O)C-alquilo es un ejemplo de un grupo carboxilo usado terminalmente. Un grupo es interno cuando el grupo está presente en el centro de un sustituyente al final del sustituyente unido al resto de la estructura química. Alquilcarboxilo (por ejemplo, alquil-C(O)O- o alquil-O(CO)-) y alquilcarboxiarilo (por ejemplo, alquil-C(O)O-arilo o alquil-O(CO)-arilo-) son ejemplos de grupos carboxilo utilizados internamente.
Como se describe en la presente descripción, un enlace trazado de un sustituyente al centro de un anillo dentro de un sistema de anillos múltiples (como se muestra más adelante), representa la sustitución del sustituyente en cualquier posición sustituible en cualquiera de los anillos dentro del sistema de anillos múltiples. Por ejemplo, la fórmula D3 representa una sustitución posible en cualquiera de las posiciones que se muestran en la fórmula D4:
Esto también se aplica a sistemas anulares múltiples fusionados a sistemas de anillos opcionales (que estarían representados por líneas punteadas). Por ejemplo, en la fórmula D5, X es un sustituyente opcional tanto para un anillo A como para un anillo B.
Si, sin embargo, dos anillos en un sistema de anillos múltiples tienen cada uno diferentes sustituyentes trazados desde el centro de cada anillo, entonces, salvo que se indique lo contrario, cada sustituyente solo representa sustitución en el anillo al que está unido. Por ejemplo, en la fórmula D6, Y es un sustituyente opcional para el anillo A solamente, y X es un sustituyente opcional para el anillo B solamente.
Como se usa en la presente descripción, los términos “ alcoxi” y “ alquiltio” se refieren a un grupo alquilo, como se ha definido anteriormente, unido a la molécula, o a otra cadena o anillo, a través de un átomo de oxígeno (“ alcoxi” es decir, -O-alquilo) o de azufre (“ alquiltio” , es decir, -S-alquilo).
Los términos de Cn-m “ alcoxialquilo” , Cn-m “ alcoxialquenilo” , Cn-m “ alcoxialifático” , y Cn-m “ alcoxialcoxi” significan alquilo, alquenilo, alifático o alcoxi, según sea el caso, sustituido con uno o más grupos alcoxi, en donde el número total combinado de carbonos de los grupos alquilo y alcoxi, alquenilo y alcoxi, grupos alifáticos y grupos alcoxi o alcoxi y grupos alcoxi, combinados, según sea el caso, está entre los valores de n y m. Por ejemplo, un alcoxialquilo C<4-6>tiene un total de 4-6 carbonos dividido entre la parte alquilo y alcoxi; p. ej. -puede ser -CH<2>OCH<2>CH<2>CH<3>, -CH<2>CH<2>OCH<2>CH<3>o -CH<2>CH<2>CH<2>OCH<3>.
Cuando los restos descritos en el párrafo anterior están opcionalmente sustituidos, pueden estar sustituidos en una o en ambas de las partes a cada lado del oxígeno o azufre. Por ejemplo, un alcoxialquilo C<4>opcionalmente sustituido podría ser, por ejemplo, -CH<2>CH<2>OCH<2>(Me)CH<3>o -CH<2>(OH)O CH<2>CH<2>CH<3>; un alcoxialquenilo C<5>podría ser, por ejemplo, -CH=CHO CH<2>CH<2>CH<3>o -CH=CHCH<2>OCH<2>CH<3>.
Los términos ariloxi, ariltio, benciloxi o benciltio, se refieren a un grupo arilo o bencilo unido a la molécula, o a otra cadena o anillo, a través de un átomo de oxígeno (“ ariloxi” , benciloxi, por ejemplo, -O-Ph, -OCH<2>Ph) o azufre (“ ariltio” , por ejemplo, -S-Ph, -S-CH<2>Ph). Además, los términos “ ariloxialquilo” , “ benciloxialquilo” , “ ariloxialquenilo” y “ ariloxialifático” significan alquilo, alquenilo o alifático, según sea el caso, sustituidos con uno o más grupos ariloxi o benciloxi, según sea el caso. En este caso, el número de átomos para cada arilo, ariloxi, alquilo, alquenilo o alifático se indicará por separado. Por lo tanto, un ariloxi(C<1-4>alquilo) de 5-6 miembros es un anillo arilo de 5-6 miembros, unido mediante un átomo de oxígeno a una cadena C<1-4>alquílica que, a su vez, está unida al resto de la molécula mediante el carbono terminal de la cadena alquílica C<1-4>.
Como se usa en la presente descripción, los términos “ halógeno” o “ halo” significan F, Cl, Br o I.
Los términos “ haloalquilo” , “ haloalquenilo” , “ haloalifático” y “ haloalcoxi” significan alquilo, alquenilo, alifático o alcoxi, según sea el caso, sustituidos con uno o más átomos de halógeno. Por ejemplo, un haloalquilo C<1-3>podría ser -CFHCH<2>CHF<2>y un haloalcoxi C<1-2>podría ser -OC(Br)HCHF<2>. Este término incluye grupos alquilo perfluorados, tales como -C F<3>y -CF<2>CF<3>.
Como se usa en la presente descripción, el término “ ciano” se refiere a -CN o -CeN.
Los términos “ cianoalquilo” , “ cianoalquenilo” , “ cianoalifático” , y “ cianoalcoxi” significan alquilo, alquenilo, alifático o alcoxi, según sea el caso, sustituidos con uno o más grupos ciano. Por ejemplo, un cianoalquilo C<1-3>podría ser -C(CN)<2>CH<2>CH<3>y un cianoalquenilo C<1-2>podría ser =CHC(CN)H<2>.
Como se usa en la presente descripción, un grupo “ amino” se refiere a -NH<2>.
Los términos “ aminoalquilo” , “ aminoalquenilo” , “ aminoalifático” y “ aminoalcoxi” significan alquilo, alquenilo, alifático o alcoxi, según sea el caso, sustituido con uno o más grupos amino. Por ejemplo un aminoalquilo C<1-3>podría ser -CH(NH<2>)CH<2>CH<2>NH<2>y un aminoalcoxi C<1-2>podría ser -OCH<2>CH<2>NH<2>.
El término “ hidroxilo” o “ hidroxi” se refiere a -OH.
Los términos “ hidroxialquilo” , “ hidroxialquenilo” , “ hidroxialifático” e “ hidroxialcoxi” significan alquilo, alquenilo, alifático o alcoxi, según sea el caso, sustituido con uno o más grupos -OH. Por ejemplo, un hidroxialquilo C<1-3>podría ser -CH<2>(CH<2>OH)CH<3>y un hidroxialcoxi C<4>podría ser-OCH<2>C(CH<3>)(OH)CH<3>.
Como se usa en la presente descripción, un “ carbonilo” , usado solo o en conexión con otro grupo se refiere a -C(O) -o -C(O)H. Por ejemplo, como se usa en la presente descripción, un “ alcoxicarbonilo” se refiere a un grupo tal como -C(O)O(alquilo).
Como se usa en la presente descripción, un “ oxo” se refiere a =O, en donde el oxo está usualmente, pero no siempre, unido a un átomo de carbono (por ejemplo, también puede estar unido a un átomo de azufre). Una cadena alifática puede estar opcionalmente interrumpida por un grupo carbonilo o puede estar opcionalmente sustituida por un grupo oxo, y ambas expresiones se refieren a lo mismo: por ejemplo, -CH<2>-C(O)-CH<3>.
Como se usa en la presente descripción en el contexto de la química de las resinas (por ejemplo, utilizando resinas sólidas o resinas solubles o perlas), el término “ grupo de enlace” se refiere a un resto químico bifuncional que une un compuesto a un soporte sólido o soporte soluble.
Como se usa en la presente descripción, en todas las demás situaciones, un “ grupo de enlace” , se refiere a un grupo divalente en el que las dos valencias libres están en átomos diferentes (por ejemplo, carbono o heteroátomo) o están en el mismo átomo pero pueden estar sustituidas por dos sustituyentes diferentes. Por ejemplo, un grupo metileno puede ser un grupo de enlace alquilo C<1>(-CH<2>-) que puede estar sustituido por dos grupos diferentes, uno para cada una de las valencias libres (por ejemplo, como en Ph-CH<2>-Ph, en donde el metileno actúa como un grupo de enlace entre dos anillos fenilo). El etileno puede ser un grupo de enlace alquilo C<2>(-CH<2>CH<2>-) en donde las dos valencias libres están en diferentes átomos. El grupo amida, por ejemplo, puede actuar como grupo de enlace cuando se coloca en una posición interna de una cadena (por ejemplo, -CONH-). Un grupo de enlace puede ser el resultado de interrumpir una cadena alifática por determinados grupos funcionales o de remplazar las unidades metileno en dicha cadena por dichos grupos funcionales. P. ej., un grupo de enlace puede ser una cadena alifática C<1-6>en la que hasta dos unidades de metileno están sustituidas por -C(O)- o -N H - (como en -C H<2>-NH-CH<2>-C(O)-CH<2>- o - CH<2>-NH-C(O)-CH<2>-). Una forma alternativa de definir el mismo grupo -CH<2>-NH-CH<2>-C(O)-CH<2>- y - CH<2>-NH-C(O)-CH<2>- es una cadena alquílica C3 opcionalmente interrumpida por hasta dos restos -C(O) - o -N H -. Los grupos cíclicos también pueden formar grupos de enlace: por ejemplo, un 1 ,6-ciclohexanodiilo puede ser un grupo de enlace entre dos grupos R, como en
Un grupo de enlace puede estar de forma adicional sustituido en cualquier parte o posición.
También son posibles grupos divalentes del tipo R-CH= o R2C=, en donde las dos valencias libres están en el mismo átomo y están unidas al mismo sustituyente. En este caso, se denominarán por sus nombres aceptados por la IUPAC.<Por ejemplo, un alquilideno (tal como, por ejemplo, un metilideno (=CH2) o un etilideno>(=C<h CH3)) no estaría>comprendido por la definición de un grupo de enlace en esta descripción.
Como se usa en la presente descripción, el término “ grupo protector” se refiere a un agente usado para bloquear temporalmente uno o más sitios reactivos deseados en un compuesto multifuncional. En determinadas realizaciones, un grupo protector tiene una o más, o preferiblemente todas, de las siguientes características: a) reacciona, selectivamente, con un buen rendimiento dando lugar a un sustrato protegido que es estable a las reacciones que se producen en uno o más de los otros sitios reactivos; y b) es selectivamente extraíble con un buen rendimiento mediante reactivos que no atacan el grupo funcional regenerado. Los grupos protectores ilustrativos se detallan en Greene, T. W. y col., “ Protective Groups in Organic Synthesis” , tertera edición, John Wiley & Sons, New York: 1999. Como se usa en la presente descripción, el término “ grupo protector de nitrógeno” se refiere a un agente utilizado para bloquear temporalmente uno o más sitios reactivos deseados de nitrógeno en un compuesto multifuncional. Los grupos protectores de nitrógeno preferidos también poseen las características ilustradas anteriormente, y determinados grupos protectores de nitrógeno ilustrativos se detallan en el capítulo 7 en Greene, T. W., Wuts, P. G, “ Protective Groups in Organic Synthesis” , tertera edición, John Wiley & Sons, Nueva York: 1999.
Como se usa en la presente descripción, el término “ resto desplazable” o “ grupo saliente” se refiere a un grupo que está asociado con un grupo alifático o aromático, como se usa en la presente descripción, y puede ser desplazado por un ataque nucleofílico por parte de un nucleófilo.
Como se usa en la presente descripción, “ agente de acoplamiento de amida” o “ reactivo de acoplamiento de amida” significa un compuesto que reacciona con el resto hidroxilo de un resto carboxilo, haciéndolo de esta manera susceptible a un ataque nucleofílico. Los agentes acopladores de amida ilustrativos incluyen DIC (diisopropilcarbodiimida), EDCI (1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida), DCC (diciclohexilcarbodiimida), BOP (benzotriazol-1-iloxi-tris(dimetilamino)-fosfonio hexafluorofosfato), pyBOP ((benzotriazol-1-iloxi)tripirrolidinofosfonio hexafluorofosfato), etc.
Los compuestos de la invención se definen en la presente descripción por sus estructuras químicas y/o nombres químicos. Cuando un compuesto se designa tanto por una estructura química como por un nombre químico, y la estructura química y nombre químico están en conflicto, la estructura química resulta determinante en cuanto a la identidad del compuesto.
Realizaciones del compuesto
La invención se refiere a un compuesto representado por las siguientes fórmulas, o sales farmacéuticamente aceptables de este:
Las Tablas 1A, Tabla 1B, Tabla 1C y Tabla 1D enumeran los compuestos reivindicados de la invención (compuestos 1-405 y 1-530), y también divulgan los compuestos I-1 a I-404, I-406 a 1-529, y 1-531 a I-634, que no están reivindicados.
Tabla 1A
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�� Tabla 1B
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Tabla 1C
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Métodos de preparación de los compuestos
El compuesto de la presente invención puede prepararse según los esquemas y ejemplos representados y descritos a continuación. Salvo que se indique lo contrario, los materiales de partida y los diferentes productos intermedios se pueden obtener a partir de fuentes comerciales, preparar a partir de compuestos comerciales o preparar utilizando métodos sintéticos bien conocidos. Se describe, pero no se reivindica, un proceso para preparar los compuestos como se divulga en el presente documento.
Los procedimientos sintéticos generales para el compuesto de esta invención se describen a continuación. Los esquemas sintéticos se presentan como ejemplos y no limitan el alcance de la invención de ninguna manera.
Procedimiento general A
Formación de enolato de diona:A una solución de cetona A en THF enfriada a -78 °C, se añadió LiHMDS (por ejemplo, 0,9 equiv, 1,0 M en tolueno) gota a gota mediante una jeringa. La reacción se dejó calentar hasta 0 °C, después se cargó con oxalato de dietilo (1,2 equiv). En aquel momento, la reacción se templó a temperatura ambiente y se agitó a esta temperatura hasta que se consideró completa (por ejemplo, utilizando análisis por TLC o LC/MS). Una vez completada la reacción (el tiempo de reacción era normalmente de 45 minutos), se utilizó el producto enolato B de diona “ tal cual” en la etapa 2, es decir, la etapa de ciclización, sin más purificación.
Etapa 2:
Formación de pirazol:Se diluyó el enolato B de diona con etanol y se cargó consecutivamente con HCl (por ejemplo, 3 equiv., solución 1,25 M en etanol) e hidrato de arilhidrazina (por ejemplo, 1,15 equiv). La mezcla de reacción se calentó a 70 °C y se agitó a esta temperatura hasta que la ciclización se consideró completa (por ejemplo, mediante análisis por LC/Ms , de forma típica 30 minutos). Una vez completa, la mezcla de reacción se trató cuidadosamente con bicarbonato de sodio sólido (por ejemplo, 4 equiv.) y se diluyó con diclorometano y agua. Las capas se separaron y la capa acuosa se diluyó adicionalmente con agua antes de la extracción con diclorometano (3 veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y se concentraron al vacío. El pirazol C resultante se purificó a continuación mediante cromatografía de SiO2 utilizando un gradiente adecuado de EtOAc en hexanos.
Etapa 3:
Formación de amidina:A una suspensión de NH4Cl (por ejemplo, 5 equiv.) en tolueno enfriada a 0 °C se añadió AlMe3 (por ejemplo, 5 equiv., solución de 2,0 M en tolueno) gota a gota con una jeringa. La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó a esta temperatura hasta que no se observó más burbujeo. Se añadió pirazol C en 1 parte a la mezcla de reacción, se calentó a 110 °C, y se agitó a esta temperatura hasta que se consideró completa (por ejemplo, utilizando análisis por TLC o LC/MS). Una vez completa, la reacción se enfrió, se trató con exceso de metanol y se agitó vigorosamente durante 1 hora a temperatura ambiente. La suspensión espesa se filtró, y la torta sólida resultante se lavó con metanol. El filtrado se concentró al vacío y los sólidos resultantes se resuspendieron en una mezcla de disolvente de acetato de etilo:alcohol isopropílico = 5:1. La reacción se trató adicionalmente con solución de carbonato de sodio saturado y se agitó durante 10 minutos antes de separar las capas. La capa acuosa se extrajo con la mezcla de disolvente de acetato de etilo:alcohol isopropílico = 5:1 (3 veces), y los materiales orgánicos combinados se lavaron con salmuera. Las sustancias orgánicas se secaron adicionalmente sobre MgSO4, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La amidina D resultante se usó tal cual en etapas posteriores sin purificación adicional.
Etapa 4:
Formación de pirimidona:La amidina D se suspendió en etanol y se agitó vigorosamente a 23 °C para favorecer la solvatación completa. La reacción se trató adicionalmente con 3-etoxi-2-fluoro-3-oxoprop-1-en-1-olato de sodio (por ejemplo, 3 equiv.), y el matraz se equipó con un condensador de reflujo. La reacción se colocó en un baño de aceite calentado previamente mantenido a 90 °C y se agitó hasta que se observó el consumo total de material de partida mediante LC/MS (los tiempos de reacción fueron de forma típica de 1 h). El contenido se enfrió a 23 °C, y la mezcla de reacción se acidificó con HCl (por ejemplo, 3 equiv., 1,25 ml de solución en EtOH). La mezcla se agitó durante 30 minutos y la mayor parte del disolvente se retiró al vacío. El contenido se resuspendió en éter y agua (mezcla 1:1), y la suspensión resultante se agitó durante 20 min. La suspensión se filtró al vacío, y la torta sólida se aclaró con agua y éter adicionales y se secó al vacío alto durante la noche. La pirimidona E resultante se usó tal cual en etapas posteriores sin purificación adicional.
Procedimiento general B
Una solución de nucleófilo de tipo amino (3 equiv.), trietilamina (10 equiv.), y producto intermedio 1 (1 equiv.) se agitó en dioxano y agua (relación 2:1) a 90 °C hasta que se observó por LC/MS el consumo completo de material de partida. La solución se diluyó con ácido clorhídrico 1N acuoso y diclorometano. Las capas se separaron a continuación y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación produjo el producto deseado.
Procedimiento general C
Una mezcla de producto intermedio 2 (este producto intermedio se describe en la solicitud de patente publicada previamente WO2012/3405 A1; 1 equivalente) y ácido carboxílico (1,1 equivalente) en W,W-dimetilformamida se trató con trietilamina (4 equivalentes) seguido de una solución de acetato de etilo a 50 % en acetato de etilo de anhídrido propilfosfónico (T3P, 1,4 equivalentes). La reacción se calentó hasta 80 °C durante 24 h, después de lo cual la reacción se diluyó con agua y solución de ácido clorhídrico 1N. El contenido se extrajo con diclorometano y a continuación acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. La purificación produjo el producto deseado.
Sales farmacéuticamente aceptables de la invención.
Una sal farmacéuticamente aceptable puede incluir la inclusión de otra molécula, tal como un ion acetato, un ion succinato u otro contraión. El contraión puede ser cualquier resto orgánico o inorgánico que estabilice la carga en el compuesto precursor. Además, una sal farmacéuticamente aceptable puede tener más de un átomo de carga en su estructura. Los casos en los que átomos con cargas múltiples forman parte de la sal farmacéuticamente aceptable pueden tener múltiples contraiones. Por consiguiente, una sal farmacéuticamente aceptable puede tener uno o más átomos cargados y/o uno o más contraiones.
Las sales farmacéuticamente aceptables del compuesto reivindicado incluyen las derivadas de los compuestos con ácidos inorgánicos, ácidos orgánicos o bases. En algunas realizaciones, las sales pueden prepararse in situ durante el aislamiento y purificación final de los compuestos. En otras realizaciones, las sales pueden prepararse a partir de la forma libre del compuesto en una etapa de síntesis aparte.
“ Sales farmacéuticamente aceptables” adecuadas se refiere a sales preparadas a partir de bases no tóxicas farmacéuticamente aceptables que incluyen bases inorgánicas y bases orgánicas. Las sales derivadas de bases inorgánicas incluyen las de aluminio, amonio, calcio, cobre, tipo férrico, ferroso, litio, magnesio, sales mangánicas, manganoso, potasio, sodio, zinc y similares. Las realizaciones particulares incluyen sales de amonio, calcio, magnesio, potasio y sodio. Las sales derivadas de bases orgánicas no tóxicas farmacéuticamente aceptables incluyen sales de aminas primarias, secundarias y tertiarias, aminas sustituidas que incluyen aminas sustituidas de origen natural, aminas cíclicas y resinas de intertambio iónico básicas, tales como arginina, betaína, cafeína, colina, N, N.sup.1-dibenciletilendiamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etilmorfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, resinas de poliamina, procaína, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina tripropilamina, trometamina y similares.
Las sales pueden prepararse a partir de ácidos no tóxicos farmacéuticamente aceptables, incluidos ácidos inorgánicos y orgánicos. Dichos ácidos incluyen ácidos acético, bencenosulfónico, benzoico, camforsulfónico, cítrico, etanosulfónico, fumárico, glucónico, glutámico, bromhídrico, clorhídrico, isetiónico, láctico, maleico, málico, mandélico, metanosulfónico, múcico, nítrico, pamoico, pantoténico, fosfórico, succínico, sulfúrico, tartárico, p-toluenosulfónico y similares. Las realizaciones particulares incluyen los ácidos cítrico, bromhídrico, clorhídrico, maleico, fosfórico, fulfúrico y tartárico. Otras sales ilustrativas incluyen, pero no se limitan, sales sulfato, citrato, acetato, oxalato, clorhídrico, bromhídrico, yoduro, nitrato, bisulfato, fosfato, fosfato ácido, isonicotinato, lactato, salicilato, citrato ácido, tartrato, oleato, tanato, pantotenato, bitartrato, ascorbato, succinato, maleato, gentisinato, fumarato, gluconato, glucuronato, sacarato, formiato, benzoato, glutamato, metanosulfonato, etanosulfonato, bencenosulfonato, p-toluensulfonato, y pamoato (es decir, 1,1'-metilen-bis-(2-hidroxi-3-naftoato)).
La preparación de las sales farmacéuticamente aceptables descritas anteriormente y otras sales farmacéuticamente aceptables típicas se describe con mayor detalle en Berg y col., “ Pharmaceutical Salts,” J. Pharm. Sci., 1977:66:1-19.
Además de los compuestos descritos en la presente descripción, sus sales farmacéuticamente aceptables también pueden emplearse en composiciones para tratar o prevenir los trastornos identificados en la presente descripción.
Composiciones farmacéuticas y métodos de administración.
Los co m p u e s to s de sc rito s en la p re sen te d e scrip c ión y sa les fa rm a cé u tica m e n te a ce p ta b le s de es to s pueden fo rm u la rs e com o co m p o s ic io n e s o “ fo rm u la c io n e s ” fa rm acé u tica s .
Una formulación típica se prepara mezclando un compuesto, o una sal farmacéuticamente aceptable de este, y un vehículo, diluyente o excipiente. Los vehículos, diluyentes y excipientes adecuados son bien conocido por los expertos en la técnica e incluyen materiales tales como carbohidratos, ceras, polímeros solubles y/o hinchables en agua, materiales hidrófilos o hidrófobos, gelatina, aceites, disolventes, agua, y similares. El vehículo, diluyente o excipiente utilizado en cada caso dependerá del medio y el fin para el que se esté formulado un compuesto. Los disolventes se seleccionan generalmente en función de los disolventes reconocidos por los expertos en la técnica como seguros (GRAS) generalmente considerados como seguros para ser administrados a un mamífero. En general, los disolventes seguros son disolventes acuosos no tóxicos, tales como agua y otros disolventes no tóxicos que son solubles o miscibles en agua. Los disolventes acuosos adecuados incluyen agua, etanol, propilenglicol, polietilenglicoles (por ejemplo, PEG400, PEG300), etc. y mezclas de estos. Las formulaciones pueden también incluir otros tipos de excipientes tales como uno o más tampones, agentes estabilizantes, antiadherents, tensioactivos, agentes humectantes, agentes lubricantes, emulsionantes, aglutinantes, agentes de suspensión, disgregantes, cargas, sorbentes, recubrimientos (por ejemplo, entéricos o de liberación lenta) conservantes, antioxidantes, agentes opacificantes, agentes deslizantes, coadyuvantes del proceso, colorantes, edulcorantes, agentes de perfume, agentes aromatizantes y otros aditivos conocidos por proporcionar una presentación elegante del fármaco o facilitar la fabricación del producto farmacéutico (es decir, fármaco).
Las formulaciones se pueden preparar utilizando procedimientos convencionales de disolución y mezclado. Por ejemplo, la sustancia farmacológica a granel (es decir, un compuesto de las reivindicaciones 1 y 2, sales farmacéuticamente aceptables del mismo, o una forma estabilizada de los compuestos, tal como un complejo con un derivado de ciclodextrina u otro agente complejante conocido) se disuelve en un disolvente adecuado en presencia de uno o más de los excipientes descritos anteriormente. Un compuesto que tiene el grado deseado de pureza se mezcla, opcionalmente, con diluyentes, vehículos, excipientes o estabilizantes farmacéuticamente aceptables, en la forma de una formulación liofilizada, polvo molido o una solución acuosa. La formulación se puede realizar mezclando a temperatura ambiente al pH adecuado y al grado deseado de pureza, con vehículos fisiológicamente aceptables. El pH de la formulación depende principalmente del uso y de la concentración particulares del compuesto, pero puede variar de aproximadamente 3 a aproximadamente 8. Cuando el agente descrito en la presente descripción es una dispersión amorfa sólida formada por un proceso de disolvente, los aditivos se pueden añadir directamente a la solución de secado por pulverización cuando se forma la mezcla, tal como cuando el aditivo se disuelve o suspende en la solución como una suspensión que luego se puede secar por pulverización. Alternativamente, los aditivos se pueden añadir después del proceso de secado por pulverización para ayudar en la formación del producto final formulado.
Los compuestos de las reivindicaciones 1 y 2 son típicamente formulados en formas de dosificación farmacéutica para proporcionar una dosificación fácilmente controlable del fármaco y para permitir el cumplimiento del paciente con el régimen prescrito. Las formulaciones farmacéuticas de los compuestos de las reivindicaciones 1 y 2, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, pueden prepararse para diversas rutas y tipos de administración. Pueden existir diversas formas de dosificación para el mismo compuesto, ya que diferentes condiciones médicas pueden justificar diferentes vías de administración.
La cantidad de ingrediente activo que puede combinarse con el material de vehículo proporcionando una sola forma de dosificación variará en función del individuo tratado y del modo concreto de administración. Por ejemplo, una formulación de liberación temporizada prevista para la administración oral a humanos puede contener aproximadamente de 1 a 1.000 mg de material activo combinado con una cantidad apropiada y adecuada de material de vehículo que puede variar de aproximadamente 5 a aproximadamente 95 % de las composiciones totales (peso: peso). La composición farmacéutica puede prepararse para proporcionar cantidades fácilmente cuantificables para su administración. Por ejemplo, una solución acuosa prevista para infusión intravenosa puede contener de aproximadamente 3 a 500 |jg del ingrediente activo por mililitro de solución para que se produzca la infusión de un volumen adecuado a una velocidad de aproximadamente 30 ml/h. Por norma general, la cantidad inicial farmacéuticamente eficaz del inhibidor administrado estará en el intervalo de aproximadamente 0,01-100 mg/kg por dosis, a saber, de aproximadamente 0,1 a 20 mg/kg de peso corporal del paciente por día, siendo el rango inicial típico de compuesto usado de 0,3 a 15 mg/kg/día.
Como se usa en la presente descripción, el término “ cantidad terapéuticamente eficaz” significa la cantidad de compuesto farmacéutico o agente farmacéutico que provoca la respuesta biológica o medicinal en un tejido, sistema, animal o humano estudiado por un investigador, veterinario, doctor en medicina u otro profesional clínico. La cantidad terapéuticamente o farmacéuticamente eficaz del compuesto que debe ser administrado estará regida por dichas consideraciones, y es la cantidad mínima necesaria para mejorar, curar o tratar la enfermedad o trastorno o uno o más de sus síntomas.
Las composiciones farmacéuticas se formularán, dosificarán y administrarán de similar manera, es decir, cantidades, concentraciones, programaciones, curso, vehículos y vía de administración, conformes con una buena práctica médica. Los factores que se consideran en este contexto incluyen el trastorno en concreto a tratar, el mamífero en concreto que se trata, la condición clínica del paciente individual, la causa del trastorno, el sitio de administración del agente, el método de administración, el programa de administración y otros factores conocidos por los profesionales médicos, tales como la edad, el peso y la respuesta del paciente individual.
El término “ cantidad profilácticamente eficaz” se refiere a una cantidad eficaz para prevenir o reducir sustancialmente las posibilidades de adquirir una enfermedad o trastorno o para reducir la gravedad de la enfermedad o trastorno antes de adquirirlo o reducir la gravedad de uno o más de sus síntomas antes de que se desarrollen los síntomas. Aproximadamente, las medidas profilácticas se dividen entre la profilaxisprimaria(para evitar el desarrollo de una enfermedad) y profilaxissecundaria(cuando la enfermedad ya se ha desarrollado y se protege al paciente contra el empeoramiento de este proceso).
Los diluyentes, vehículos, excipientes y estabilizantes aceptables son aquellos que no son tóxicos para los receptores en las dosificaciones y concentraciones empleadas, e incluyen tampones tales como fosfato, citrato y otros ácidos orgánicos; antioxidantes, incluidos ácido ascórbico y metionina; conservantes (tales como cloruro de octadecildimetilbencilamonio; cloruro de hexametonio; cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio; fenol, alcohol butílico o bencílico; alquilparabenos tales como metil o propilparabeno; catecol; resorcina; ciclohexanol; 3-pentanol; y m-cresol); proteínas, tales como albúmina sérica, gelatina o inmunoglobulinas; polímeros hidrófilos tales como polivinilpirrolidona; aminoácidos tales como glicina, glutamina, asparagina, histidina, arginina o lisina; monosacáridos, disacáridos y otros carbohidratos, incluidos glucosa, manosa o dextrinas; agentes quelantes como EDTA; azúcares tales como sacarosa, manitol, tretrosa o sorbitol; contraiones formadores de sales tales como sodio; complejos metálicos (por ejemplo, complejos de proteína de Zn); y/o tensioactivos no iónicos, tales como TWEEN™, PLURONICS™ o polietilenglicol (PEG). Los ingredientes farmacéuticos activos también se pueden atrapar en las microcápsulas preparadas, por ejemplo, mediante técnicas de formación de coacervados o mediante polimerización interfacial, por ejemplo, microcápsulas de hidroximetilcelulosa o gelatina y microcápsulas de poli-(metilmetacrilato), respectivamente; en sistemas de suministro de fármacos coloidales (por ejemplo, liposomas, microesferas de albúmina, microemulsiones, nanopartículas y nanocápsulas) o en macroemulsiones. Dichas técnicas se describen en la publicación de Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21a edición, University of the Sciences in Philadelphia, Eds., 2005 (de aquí en adelante “ Remington” ).
Los “ sistemas de suministro de fármacos controlados” suministran el fármaco al cuerpo de una manera precisamente controlada y adaptada al fármaco y a las condiciones tratadas. El objetivo principal es lograr una concentración terapéutica del fármaco en el sitio de acción durante el tiempo que se desee. El término “ liberación controlada” a menudo se utiliza para hacer referencia a diversos métodos que modifican la liberación del fármaco desde una forma de dosificación. Este término incluye preparaciones etiquetadas como de “ liberación prolongada” , “ liberación retardada” , “ liberación modificada” o “ liberación sostenida” . En general, se puede proporcionar una liberación controlada de los agentes descritos en la presente descripción mediante el uso de una amplia variedad de vehículos poliméricos y sistemas de liberación controlada que incluyen matrices erosionables y no erosionables, dispositivos de control osmótico, diversos dispositivos de depósito, recubrimientos entéricos y dispositivos de control de partículas múltiples.
“ Las preparaciones de liberación sostenida” son las aplicaciones más comunes de liberación controlada. Los ejemplos adecuados de preparaciones de liberación sostenida incluyen matrices semipermeables de polímeros hidrófobos sólidos que contienen el compuesto, cuyas matrices están en forma de artículos con forma, por ejemplo, películas o microcápsulas. Los ejemplos de matrices de liberación sostenida incluyen poliésteres, hidrogeles (por ejemplo, poli(2-hidroxietil-metacrilato) o poli(alcohol vinílico)), polilactidas (US-3.773.9l9), copolímeros de ácido L-glutámico y acetato de etilenvinilo no degradable, copolímeros de ácido láctico-ácido glicólico degradables, y ácido poli-D-(-)-3-hidroxibutírico.
También se pueden preparar “ preparaciones de liberación inmediata” . El objetivo de estas formulaciones es hacer llegar el fármaco al torrente sanguíneo y al sitio de acción lo más rápidamente posible. Por ejemplo, para una disolución rápida, la mayoría de los comprimidos están diseñados para experimentar una disgregación rápida en gránulos y su posterior desagregación en partículas finas. Esto proporciona una superficie específica mayor expuesta al medio de disolución, dando lugar a una mayor velocidad de disolución.
Los agentes descritos en la presente descripción pueden incorporarse en un dispositivo de liberación controlada de matriz polimérica erosionable o no erosionable. Por matriz erosionable, se entiende erosionable por el agua o hinchable por el agua o soluble en agua en el sentido de ser erosionable o hinchable o soluble en agua pura o de requerir la presencia de un ácido o base para ionizar la matriz polimérica lo suficiente para ocasionar la erosión o disolución. Cuando entra en contacto con el ambiente acuoso de uso, la matriz polimérica erosionable embebe agua y forma un gel o matriz hinchada acuosa que atrapa el agente descrito en la presente descripción. La matriz hinchada acuosa gradualmente se erosiona, hincha, desintegra o disuelve en el ambiente de uso, controlando de este modo la liberación de un compuesto descrito en la presente descripción al medio ambiente de uso. Un ingrediente de esta matriz hinchada en agua es el polímero hinchable, erosionable, o soluble en agua, que puede describirse, generalmente, como un osmopolímero, hidrogel o polímero hinchable en agua. Dichos polímeros pueden ser lineales, ramificados o reticulados. Los polímeros pueden ser homopolímeros o copolímeros. En determinadas realizaciones, pueden ser polímeros sintéticos derivados de monómeros de vinilo, acrilato, metacrilato, uretano, éster y óxido. En otras realizaciones, pueden ser derivados de polímeros naturales tales como polisacáridos (por ejemplo, quitina, quitosana, dextrano y pululano; goma agar, goma arábiga, goma karaya, goma de algarrobo, goma tragacanto, carragenanos, goma ghatti, goma guar, goma xantano y escleroglucano), almidones (por ejemplo, dextrina y maltodextrina), coloides hidrófilos (por ejemplo, pectina), fosfátidos (por ejemplo, lecitina), alginatos (alginato de amonio, alginato de sodio, potasio o calcio, alginato de propilenglicol), gelatina, colágeno y materiales celulósicos. Los materiales celulósicos son polímeros de celulosa que han sido modificados mediante la reacción de al menos una parte de los grupos hidroxilo en las unidades repetitivas de sacárido con un compuesto para formar un sustituyente enlazado con éster o enlazado con éter. Por ejemplo, el material celulósico etil celulosa tiene un sustituyente etilo enlazado con éter unido a la unidad repetitiva de sacárido, mientras que el material celulósico acetato de celulosa tiene un sustituyente acetato enlazado con éster. En determinadas realizaciones, los materiales celulósicos para la matriz erosionable comprenden materiales celulósicos solubles en agua y erosionables en acuosa que pueden incluir, por ejemplo, etilcelulosa (CMC), metiletilcelulosa (MEC), carboximetilcelulosa (CMC), CMEC, hidroxietilcelulosa (HEC), hidroxipropilcelulosa (HPC), acetato de celulosa (CA), propionato de celulosa (CP), butirato de celulosa (CB), acetato butirato de celulosa (CAB), CAP, CAT, hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC), HP<m>C<p>, HPMCAS, acetato trimetilato de hidroxipropilmetilcelulosa (HPMCAT), y etilhidroxietilcelulosa (EHEC). En determinadas realizaciones, los materiales celulósicos comprenden diversos grados de viscosidad baja (PM inferior o igual a 50.000 daltons, por ejemplo, la serie Dow Methocel™, E5, E15LV, E50LV y K100LY) y de alta viscosidad (PM superior a 50.000 daltons, por ejemplo, E4MCR, E10MCR, K4M, K15M y K100M y la serie Methocel™ K) HPm C. Otros tipos comercializados de HPm C incluyen la serie Shin Etsu Metolose 90SH.
Otros materiales útiles como material de matriz erosionable incluyen, pero no se limitan a, pululano, polivinilpirrolidona, alcohol polivinílico, acetato de polivinilo, ésteres de ácido graso de glicerol, poliacrilamida, ácido poliacrílico, copolímeros de ácido etacrílico o ácido metacrílico (EUDRAGIT®, Rohm America, Inc., Piscataway, New Jersey) y otros derivados de ácido acrílico tales como homopolímeros y copolímeros de butilmetacrilato, metilmetacrilato, etilmetacrilato, etilacrilato, (2-dimetilaminoetil)metacrilato y cloruro de (trimetilaminoetil)metacrilato.
Alternativamente, los agentes de la presente invención pueden administrarse o incorporarse en un dispositivo de matriz no erosionable. En estos dispositivos, un agente descrito en la presente descripción se distribuye en una matriz inerte. El agente se libera por difusión a través de la matriz inerte. Los ejemplos de materiales adecuados para la matriz inerte incluyen plásticos insolubles (por ejemplo, copolímeros de metilacrilato-metilmetacrilato, cloruro de polivinilo, polietileno), polímeros hidrófilos (por ejemplo, etilcelulosa, acetato de celulosa, polivinilpirrolidona reticulada (también conocida como crospovidona)), y compuestos grasos (por ejemplo, cera de carnauba, cera microcristalina y triglicéridos). Dichos dispositivos se describen adicionalmente en la publicación de Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20a edición (2000).
Como se ha indicado anteriormente, los agentes descritos en la presente descripción también pueden incorporarse en un dispositivo de control osmótico. Dichos dispositivos incluyen, generalmente, un núcleo que contiene uno o más agentes como se describe en la presente descripción y un recubrimiento permeable al agua, no soluble y no erosionable que rodea el núcleo que controla el flujo de agua al interior del núcleo frente a un ambiente acuoso de uso para causar la liberación del fármaco por extrusión de algunos o todos los núcleos al entorno de uso. En determinadas realizaciones, el recubrimiento es polimérico, permeable al agua y tiene al menos una abertura de suministro. El núcleo del dispositivo osmótico opcionalmente incluye un agente osmótico que actúa embebiendo agua del entorno circundante a través de dicha membrana semipermeable. El agente osmótico contenido en el núcleo de este dispositivo puede ser un polímero hidrófilo hinchable en agua o puede ser un osmógeno, también conocido como un agente osmoprotector. La presión se genera dentro del dispositivo, lo que fuerza la salida del agente o agentes fuera del dispositivo a través de un orificio (de un tamaño diseñado para minimizar la difusión de soluto mientras se evita la acumulación de una cabeza de presión hidrostática). Ejemplos no limitativos de dispositivos de control osmótico se describen en la solicitud de patente de Estados Unidos de número de serie 09/495.061.
La cantidad de polímeros hidrofílicos hinchables en agua presentes en el núcleo puede variar de aproximadamente 5 a aproximadamente 80 % en peso (incluyendo, por ejemplo, de 10 a 50 % en peso). Los ejemplos no limitativos de materiales de núcleo incluyen vinilo hidrófilo y polímeros acrílicos, polisacáridos tales como alginato de calcio, óxido de polietileno (PEO), polietilenglicol (PEG), polipropilenglicol (PPG), poli (metacrilato de 2-hidroxietilo), poli(ácido acrílico), poli(ácido metacrílico), polivinilpirrolidona (PVP) y PVP reticulada, poli(alcohol vinílico) (PVA), copolímeros de PVA/PVP y copolímeros de PVA/PVP con monómeross hidrófobos tales como metacrilato de metilo, acetato de vinilo, y similares, poliuretanos hidrófilos que contienen grandes bloques de PEO, croscarmelosa de sodio, carragenano, hidroxietilcelulosa (HEC), hidroxipropilcelulosa (HPC), hidroxipropilmetilcelulosa (HPMC), carboximetil celulosa (CMC) y carboxietilcelulosa (CEC), alginato de sodio, policarbófilo, gelatina, goma xantano y glicolato de almidón sodio. Otros materiales incluyen hidrogeles que comprenden redes interpenetrantes de polímeros que pueden formarse por adición o por polimerización por condensación, cuyos componentes pueden comprender monómeros hidrófilos e hidrófobos tales como los que se acaban de mencionar. Los polímeros hidrófilos hinchables en agua incluyen, pero no se limitan a, PEO, PEG, PVP, croscarmelosa sódica, HPMC, glicolato de almidón sodio, ácido poliacrílico y versiones reticuladas o mezclas de estos.
El núcleo también puede incluir un osmógeno (o agente osmótico). La cantidad de agente osmótico presente en el núcleo puede variar de aproximadamente 2 a aproximadamente 70 % en peso (incluyendo, por ejemplo, de 10 a 50 % en peso). Las clases típicas de osmógenos adecuados son ácidos orgánicos solubles en agua, sales y azúcares que son capaces de embeber agua proporcionando de este modo un gradiente de presión osmótica a través de la barrera del recubrimiento circundante. Los osmógenos típicos útiles incluyen, pero no se limitan a, sulfato de magnesio, cloruro de magnesio, cloruro de calcio, cloruro de sodio, cloruro de litio, sulfato de potasio, carbonato de sodio, sulfito de sodio, sulfato de litio, cloruro de potasio, sulfato de sodio, manitol, xilitol, urea, sorbitol, inositol, rafinosa, sacarosa, glucosa, fructosa, lactosa, ácido cítrico, ácido succínico, ácido tartárico, y mezclas de estos. En determinadas rea liza c io nes , el o sm ó g e n o es g lucosa , lactosa, saca rosa , m an ito l, x ilito l, c lo ru ro de sod io , inc lu ida s c o m b in a c io n e s de estos.
La velocidad de suministro de fármacos se controla mediante factores tales como la permeabilidad y el espesor del recubrimiento, la presión osmótica de la capa que contiene fármaco, el grado de hidrofilicidad de la capa de hidrogel y la superficie específica del dispositivo. Los expertos en la técnica apreciarán que aumentando el espesor del recubrimiento se reducirá la velocidad de liberación, mientras que cualquiera de los siguientes incrementará la velocidad de liberación: aumentar la permeabilidad del recubrimiento; aumentar la hidrofilicidad de la capa de hidrogel; aumentar la presión osmótica de la capa que contiene fármaco; o aumentar la superficie específica del dispositivo.
En determinadas realizaciones, es deseable el arrastre de las partículas de agentes descritos en la presente descripción en el fluido de extrusión durante el funcionamiento de dicho dispositivo osmótico. Para que las partículas sean adecuadamente arrastradas, la forma del fármaco agente se dispersa en el fluido antes de que las partículas se sedimenten en el núcleo del comprimido. Un medio para lograr esto es añadir un desintegrante que sirve para desintegrar el núcleo comprimido en sus componentes en forma de partículas. Ejemplos no limitativos de disgregantes estándar incluyen materiales tales como glicolato de almidón sodio (por ejemplo, Explotab™ CLV), celulosa microcristalina (por ejemplo, Avicel™), celulosa microcristalina silicificada (por ejemplo, ProSoIv™) y croscarmelosa sódica (por ejemplo, Ac-Di-Sol™), y otros disgregantes conocidos por el experto en la técnica. Dependiendo de la formulación concreta, algunos desintegrantes dan mejores resultados que otros. Varios desintegrantes tienden a formar geles a medida que se hinchan con agua, impidiendo por lo tanto el suministro de fármacos desde el dispositivo. Los desintegrantes no hinchables, no gelificantes proporcionan una dispersión más rápida de las partículas de fármaco dentro del núcleo a medida que el agua entra en el núcleo. En algunas realizaciones, los desintegrantes no gelificantes, no hinchables son resinas, por ejemplo, resinas de intertambio iónico. En una realización, la resina es Amberlite™ IRP 88 (comercializada por Rohm and Haas, Philadelphia, PA). Cuando se utiliza, el disgregante se encuentra presente en cantidades que oscilan de aproximadamente 1-25 % del agente del núcleo.
Otro ejemplo de un dispositivo osmótico es una cápsula osmótica. La envolvente de la cápsula o parte de la envolvente de la cápsula puede ser semipermeable. La cápsula puede llenarse con un polvo o líquido que consiste en un agente descrito en la presente descripción, excipientes que embeben agua para proporcionar un potencial osmótico y/o un polímero hinchable en agua u, opcionalmente, excipientes solubilizantes. El núcleo de cápsula también puede estar hecho de modo que tenga un agente de bicapa o multicapa análogo a las geometrías de bicapa, tricapa o concéntricas arriba descritas.
Otra clase de dispositivos osmóticos útiles en esta invención comprende comprimidos hinchables recubiertos, por ejemplo, como se describe en el documento EP378404. Los comprimidos hinchables recubiertos comprenden un núcleo de comprimido que comprende un agente descrito en la presente descripción y un material de hinchamiento, preferiblemente un polímero hidrófilo, recubierto con una membrana que contiene agujeros o poros a través de los cuales, en el entorno de uso acuoso, el polímero hidrófilo puede extrudir y extraer el agente. Alternativamente, la membrana puede contener porosígenos solubles en agua poliméricos o de bajo peso molecular. Los porosígenos se disuelven en el entorno de uso acuoso, proporcionando poros a través de los cuales se pueden extrudir el polímero hidrófilo y el agente. Los ejemplos de porosígenos son polímeros solubles en agua, tales como HPMC, PEG y compuestos de bajo peso molecular, tales como glicerol, sacarosa, glucosa y cloruro de sodio. Además, los poros pueden formarse en el recubrimiento mediante perforación de agujeros en el recubrimiento con láser u otros medios mecánicos. En esta clase de dispositivos osmóticos, el material de membrana puede comprender cualquier polímero filmógeno, incluidos polímeros que son permeables o impermeables al agua, siempre que la membrana depositada en el núcleo del comprimido sea porosa o contenga porosígenos solubles en agua o posea un agujero macroscópico para el ingreso de agua y la liberación del fármaco. Las realizaciones de esta clase de dispositivos de liberación sostenida también puede ser multicapa, como se describe, por ejemplo, en el documento EP378404.
Cuando un agente descrito en la presente descripción es un líquido o aceite, tal como una formulación de vehículo de lípidos, por ejemplo, como se describe en el documento WO05/011634, el dispositivo de liberación controlada de tipo osmótico puede comprender una cápsula de gel blando o gelatina blanda formada con una pared de material compuesto y que comprende la formulación líquida, donde la pared comprende una capa barrera formada sobre la superficie externa de la cápsula, una capa expandible formada sobre la capa barrera y una capa semipermeable formada sobre la capa expandible. Una abertura de suministro conecta la formulación líquida con el entorno de uso acuoso. Dichos dispositivos se describen, por ejemplo, en los documentos US6419952, US6342249, US5324280, US4672850, US4627850, US4203440 y US3995631.
Como se ha indicado anteriormente, los agentes descritos en la presente descripción pueden proporcionarse como materiales en forma de micropartículas, generalmente en un rango de tamaños de aproximadamente 10 pm a aproximadamente 2 mm (incluidos, por ejemplo, de aproximadamente 100 pm a 1 mm de diámetro). Dichos materiales en forma de micropartículas pueden envasarse, por ejemplo, en una cápsula, tal como una cápsula de gelatina o una cápsula formada a partir de un polímero soluble acuoso, tal como HPMCAS, HPMC o almidón; dosificarse como una suspensión o dispersión heterogénea sólido-líquido en un líquido; o pueden formarse a modo de comprimido, comprimido alargado o píldora por compresión u otros procesos conocidos en la técnica. Dichos materiales en forma de micropartículas se pueden obtener mediante cualquier proceso conocido, tal como procesos de granulación húmeda y seca, extrusión/esferonización, compactación con rodillo, solidificación por fusión o núcleos de simiente de re cu b rim ie n to po r pu lve rizac ión . P o r e jem p lo , en los p ro ceso s de g ra n u la c ió n hú m eda y seca, el a g en te de sc rito en la p re se n te de sc rip c ión y los e xc ip ie n te s op c io n a le s pueden g ra n u la rse para fo rm a r m a te ria le s m u ltip a rticu la d o s del ta m a ñ o deseado .
Los agentes pueden incorporarse en microemulsiones que, generalmente, son dispersiones isotópicamente transparentes y termodinámicamente estables de dos líquidos inmiscibles, tales como aceite y agua, estabilizadas por una película de interfase de moléculas tensioactivas (Enciclopedia of Pharmaceutical Technology, Nueva York: Marcel Dekker, 1992, volumen 9). Para la preparación de microemulsiones, se necesitan tensioactivo (emulsionante), tensioactivo auxiliar (emulsionante auxiliar), una fase oleosa y una fase acuosa. Los tensioactivos adecuados incluyen cualquier tensioactivo útil en la preparación de emulsiones, por ejemplo, emulsionantes que se usan, típicamente, en la preparación de cremas. El tensioactivo auxiliar (o “ emulsionante auxiliar” ) se selecciona, generalmente, del grupo de derivados de poliglicerol, derivados de glicerol y alcoholes grasos. Las combinaciones de emulsionante/emulsionante auxiliar preferidas se seleccionan generalmente aunque no necesariamente del grupo que consiste en: monoestearato de glicerilo y estearato de polioxietileno; polietilenglicol y palmitoestearato de etilenglicol; y triglicéridos caprílico y cáprico y macrogoglicéridos de oleílo. La fase acuosa no solo incluye agua sino también, de forma típica, tampones, glucosa, propilenglicol, polietilenglicoles, preferiblemente polietilenglicoles de bajo peso molecular (por ejemplo, PEG 300 y PEG 400), y/o glicerol, y similares, mientras que la fase oleosa generalmente comprenderá, por ejemplo, ésteres de ácido graso, aceites vegetales modificados, aceites de silicona, mezclas de monoglicéridos, diglicéridos y triglicéridos, monoésteres y diésteres de PEG (por ejemplo, oleoil macrogol glicéridos), etc.
Los compuestos descritos en la presente descripción se pueden incorporar a formulaciones de nanopartículas, nanoesferas y nanocápsulas farmacéuticamente aceptables (Delie and Blanco-Prieto, 2005, Molecule 10:65-80). Las nanocápsulas pueden generalmente atrapar compuestos de manera estable y reproducible. Para evitar los efectos secundarios debido a la sobrecarga polimérica intracelular, las partículas ultrafinas (con tamaños de alrededor de 0,1 |jm) se pueden diseñar usando polímeros capaces de degradarse in vivo (por ejemplo, nanopartículas de polialquilcianoacrilato biodegradables). Dichas partículas se describen en la técnica anterior.
Los dispositivos implantables recubiertos con un compuesto de esta invención son otra realización de la presente invención. Los compuestos también se pueden recubrir sobre dispositivos médicos implantables, tales como glóbulos o perlas, o formularse conjuntamente con un polímero u otra molécula, para proporcionar un “ depósito de fármaco” , permitiendo por lo tanto que el fármaco se libere durante un período de tiempo más largo que la administración de una solución acuosa del fármaco. Los recubrimientos adecuados y la preparación general de dispositivos implantables recubiertos se describen en las patentes US-6.099.562; US-5.886.026; y US-5.304.121. Los recubrimientos son, típicamente, materiales poliméricos biocompatibles tales como un polímero de hidrogel, polimetildisiloxano, policaprolactona, polietilenglicol, ácido poliláctico, acetato de etilenvinilo y mezclas de estos. Opcionalmente, los recubrimientos pueden estar además recubiertos por un recubrimiento superior adecuado de fluorosilicona, polisacáridos, polietilenglicol, fosfolípidos o combinaciones de estos para transmitir características de liberación controlada en la composición.
Las formulaciones incluyen las adecuadas para las rutas de administración detalladas en la presente descripción. Las formulaciones pueden presentarse convenientemente en forma farmacéutica unitaria y pueden prepararse por cualquiera de los métodos bien conocidos en la técnica de farmacia. Las técnicas y formulaciones generalmente se encuentran en el Remington. Dichos métodos incluyen la etapa de poner en asociación el ingrediente activo con el vehículo que constituye uno o más ingredientes auxiliares. En general, las formulaciones se preparan poniendo en asociación de manera uniforme e íntima el ingrediente activo con vehículos líquidos o vehículos sólidos finamente divididos, o ambos y, a continuación, si es necesario, dar forma al producto.
Los términos “ administrar” , “ administrando” o “ administración” en referencia a un compuesto, composición o formulación de la invención significa introducir el compuesto en el sistema del animal que necesite tratamiento. Cuando un compuesto de la invención se proporciona en combinación con uno o más agentes activos adicionales, se entiende que “ administración” y sus variantes incluyen la introducción simultánea y/o secuencial del compuesto y los otros agentes activos.
Las composiciones aquí descritas en la presente descripción pueden ser administradas sistémicamente o localmente, por ejemplo,: oralmente (por ejemplo, mediante cápsulas, polvos, soluciones, suspensiones, comprimidos, comprimidos sublinguales y similares), por inhalación (por ejemplo, con un aerosol, gas, inhalador, nebulizador o similares), a la oreja (por ejemplo, usando gotas para los oídos), tópicamente (por ejemplo, utilizando cremas, geles, linimentos, lociones, ungüentos, pastas, parches transdérmicos, etc.), oftálmicamente (por ejemplo, con colirios, geles oftálmicos, ungüentos oftálmicos), rectalmente (por ejemplo, usando enemas o supositorios), nasalmente, bucalmente, vaginalmente (por ejemplo, utilizando duchas vaginales, dispositivos intrauterinos, supositorios vaginales, anillos vaginales o comprimidos, etc.), a través de un depósito implantado o similares, o por vía parenteral dependiendo de la gravedad y tipo de la enfermedad a tratar. Como se usa en la presente descripción, el término “ parenteral” incluye, pero no se limita a, técnicas de infusión o inyección subcutánea, intravenosa, intramuscular, intraarticular, intrasinovial, intrasternal, intratratecal, intrahepática, intralesional e intracraneal. Preferiblemente, las composiciones se administran por vía oral, intraperitoneal o intravenosa.
Las composiciones farmacéuticas descritas en la presente descripción pueden administrarse por vía oral en cualquier forma de dosificación por vía oral aceptable incluyendo, pero sin limitarse a, cápsulas, comprimidos, suspensiones o soluciones acuosas. Las formas de dosificación líquidas para la administración oral incluyen, pero no se limitan a, emulsiones, microemulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires farmacéuticamente aceptables. Además de los compuestos activos, las formas de dosificación líquidas pueden contener diluyentes inertes habitualmente utilizados en la técnica tales como, por ejemplo, agua u otros disolventes, agentes solubilizantes y emulsionantes tales como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1,3-butilenglicol, dimetilformamida, aceites (en particular, los aceites de algodón, cacahuete, maíz, germen, oliva, ricino, y sésamo), glicerol, alcohol tetrahidrofurfurílico, polietilenglicoles y ésteres de ácido graso de sorbitán, y mezclas de estos. Además de los diluyentes inertes, las composiciones orales también pueden incluir adyuvantes, tales como agentes humectantes, agentes emulsionantes y de suspensión, edulcorantes, saborizantes y perfumantes.
Las formas de dosificación sólidas para la administración oral incluyen cápsulas, comprimidos, píldoras, polvos y gránulos. En dichas formas de dosificación sólidas, el compuesto activo se mezcla con al menos un excipiente o vehículo farmacéuticamente aceptable e inerte, tal como citrato de sodio o fosfato de dicalcio y/o a) cargas o extensores tales como almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol, y ácido silícico, b) aglutinantes tales como, por ejemplo, carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarosa y acacia, c) humectantes tales como glicerol, d) agentes disgregantes tales como agar-agar, carbonato de calcio, almidón de patata o tapioca, ácido algínico, determinados silicatos, y carbonato de sodio, e) agentes retardantes de solución tales como parafina, f) aceleradores de absorción tales como compuestos de amonio cuaternario, g) agentes humectantes tales como, por ejemplo, alcohol cetílico y monoestearato de glicerol, h) absorbentes tales como caolín y arcilla tipo bentonita, e i) lubricantes como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, polietilenglicoles sólidos, laurilsulfato de sodio, y mezclas de los mismos. Los comprimidos pueden ser no recubiertos o ser recubiertos mediante técnicas conocidas, incluidas microencapsulación para enmascarar un sabor desagradable o retrasar la desintegración y adsorción en el tracto gastrointestinal y de este modo proporcionar una acción sostenida durante un período más largo. Por ejemplo, puede emplearse un material de tiempo de retardo, tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo, solo o con una cera. Puede utilizarse un material enmascarante del sabor soluble en agua, tal como hidroxipropilmetilcelulosa o hidroxipropilcelulosa.
Las formulaciones de un compuesto que son adecuadas para la administración oral pueden prepararse como unidades discretas tales como comprimidos, píldoras, pastillas para chupar, pastillas para la garganta, suspensiones acuosas u oleosas, polvos o gránulos dispersables, emulsiones, cápsulas duras o blandas, p. ej. cápsulas de gelatina, jarabes o elixires. Las formulaciones de un compuesto previsto para uso oral se pueden preparar según cualquier método conocido en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas.
Los comprimidos (pastillas comprimidas) pueden prepararse comprimiendo en una máquina adecuada el ingrediente activo en una forma de flujo libre tal como un polvo o gránulos, opcionalmente mezclados con un aglutinante, lubricante, diluyente inerte, conservante, agente tensioactivo o agente dispersante. Los comprimidos moldeados pueden elaborarse mediante moldeo en una máquina adecuada de una mezcla del ingrediente activo en polvo humedecido con un diluyente líquido inerte.
Las formulaciones para uso oral también pueden presentarse como cápsulas de gelatina en dura donde el ingrediente activo se mezcla con un diluyente sólido inerte, por ejemplo, carbonato de calcio, fosfato de calcio o caolín, o como cápsulas de gelatina blanda en donde el ingrediente activo se mezcla con un vehículo soluble en agua tal como polietilenglicol o un medio de aceite, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina líquida o aceite de oliva.
Los compuestos activos también pueden estar en forma microencapsulada con uno o más excipientes, como se ha mencionado anteriormente.
Cuando se requieren suspensiones acuosas para uso oral, el ingrediente activo se combina con agentes emulsionantes y de suspensión. Si se desea, pueden añadirse determinados agentes edulcorantes y/o saborizantes. Los jarabes y elixires se pueden formular con agentes edulcorantes, por ejemplo glicerol, propilenglicol, sorbitol o sacarosa. Dichas formulaciones pueden contener, además, un demulcente, un conservante, agentes saborizantes y colorantes y antioxidante.
Las formas estériles inyectables de las composiciones descritas en la presente descripción (por ejemplo, para la administración parenteral) pueden ser una suspensión acuosa u oleaginosa. Estas suspensiones se pueden formular según técnicas conocidas en la técnica utilizando agentes dispersantes o humectantes adecuados y agentes de suspensión. La preparación inyectable estéril puede ser también una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente parenteralmente aceptable no tóxico, por ejemplo, como una solución en 1,3-butanodiol. Entre los vehículos y disolventes aceptables que pueden emplearse se halla el agua, la solución de Ringer y la solución de cloruro de sodio isotónica. Además, los aceites fijos y estériles se emplean convencionalmente como disolvente o medio de suspensión. Para este fin, se puede emplear cualquier aceite fijo suave, incluidos monoglicéridos o diglicéridos sintéticos. Los ácidos grasos, tales como el ácido oleico y sus derivados de glicérido son útiles en la preparación de sustancias inyectables, lo mismo que los aceites naturales farmacéuticamente aceptables, tales como el aceite de oliva o el aceite de ricino, especialmente en sus versiones polioxietiladas. Estas soluciones o suspensiones de aceite también pueden contener un diluyente o dispersante de alcohol de cadena larga, tal como carboximetilcelulosa o agentes dispersantes similares que se usan comúnmente en la formulación de formas de dosificación farmacéuticamente aceptables incluidas emulsiones y suspensiones. Otros tensioactivos comúnmente usados, tales como Tweens, Spans y otros agentes emulsionantes o potenciadores de la biodisponibilidad que se usan comúnmente en la fabricación de formas de dosificación sólidas, líquidas u otras formas de dosificación farmacéuticamente aceptables, pueden usarse también para los propósitos de las formulaciones inyectables.
Las suspensiones oleosas pueden formularse suspendiendo un compuesto en un aceite vegetal, por ejemplo, el aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco o en aceite mineral tal como parafina líquida. Las suspensiones oleosas pueden contener un agente espesante, por ejemplo cera de abejas, parafina dura o alcohol cetílico. Se pueden añadir agentes edulcorantes, tales como los descritos anteriormente, y agentes saborizantes para proporcionar una preparación oral agradable al paladar. Estas composiciones pueden conservarse mediante la adición de un antioxidante, tal como hidroxianisol butilado o alfa-tocoferol.
Las suspensiones acuosas de un compuesto contienen los materiales activos en una mezcla con excipientes adecuados para la fabricación de suspensiones acuosas. Dichos excipientes incluyen un agente de suspensión, tal como carboximetilcelulosa de sodio, croscarmelosa, povidona, metilcelulosa, hidroxipropilmetilceluosa, alginato de sodio, polivinilpirrolidona, goma tragacanto y goma de acacia, y agentes dispersantes o humectantes tales como un fosfátido natural (por ejemplo, lecitina), un producto de condensación de un óxido de alquileno con un ácido graso (por ejemplo, estearato de polioxietileno), un producto de condensación de óxido de etileno con un alcohol alifático de cadena larga (por ejemplo, heptadecaetilenoxicetanol), un producto de condensación de óxido de etileno con un éster parcial derivado de un ácido graso y un anhídrido hexitol (por ejemplo, monooleato de sorbitán polioxietilenado). La suspensión acuosa también puede contener uno o más conservantes tales como p-hidroxibenzoato de etilo o n-propilo, uno o más agentes colorantes, uno o más agentes saborizantes y uno o más agentes edulcorantes, tales como sacarosa o sacarina.
Las formulaciones inyectables se pueden esterilizar, por ejemplo, mediante filtración a través de un filtro de retención bacteriano, o mediante la incorporación de agentes esterilizantes en forma de composiciones sólidas estériles que pueden disolverse o dispersarse en agua estéril u otro medio inyectable acuoso antes del uso.
Con el fin de prolongar el efecto de un compuesto descrito en la presente descripción, frecuentemente es deseable ralentizar la absorción del compuesto de la inyección subcutánea o intramuscular. Esto puede lograrse mediante el uso de una suspensión líquida de material cristalino o amorfo con poca solubilidad en agua. La velocidad de absorción del compuesto depende, entonces, de su velocidad de disolución que, a su vez, puede depender del tamaño de cristal y la forma cristalina. Alternativamente, la absorción retardada de una forma de compuesto administrado por vía parenteral se logra disolviendo o suspendiendo el compuesto en un vehículo de aceite. Las formas de acción prolongada inyectables se elaboran mediante la formación de matrices microencapsuladas del compuesto en polímeros biodegradables, tales como poliláctido-poliglicólido. Dependiendo de la relación del compuesto al polímero y de la naturaleza del polímero específico empleado, se puede controlar la velocidad de liberación del compuesto. Los ejemplos de otros polímeros biodegradables incluyen poli(ortoésteres) y poli(anhídridos). Las formulaciones inyectables de acción prolongada se preparan también atrapando el compuesto en liposomas o microemulsiones que son compatibles con los tejidos corporales.
Las soluciones o microemulsiones inyectables se pueden introducir en el torrente sanguíneo de un paciente mediante inyección de bolo local. Alternativamente, puede ser ventajoso administrar la solución o microemulsión de tal manera que se mantenga una concentración de circulación constante del compuesto en cuestión. Para mantener esa concentración constante, puede utilizarse un dispositivo de suministro intravenoso continuo. Un ejemplo de este dispositivo es la bomba intravenosa Deltec CADD-PLUS™ modelo 5400.
Las composiciones para la administración rectal o vaginal son preferiblemente supositorios que pueden prepararse mezclando los compuestos descritos en la presente descripción con excipientes o vehículos no irritantes adecuados tales como manteca de cacao, cera de abejas, polietilenglicol o una cera para supositorios que son sólidos a temperatura ambiente pero líquidos a temperatura corporal y, por lo tanto, se funden en el recto o en la cavidad vaginal y liberan el compuesto activo. Otras formulaciones adecuadas para la administración vaginal pueden presentarse como pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o pulverizaciones.
Las composiciones farmacéuticas descritas en la presente descripción también pueden administrarse tópicamente, especialmente cuando el objetivo de tratamiento incluye áreas u órganos fácilmente accesibles mediante aplicación tópica, incluidas enfermedades del ojo, la oreja, la piel o el tracto intestinal inferior. Las formulaciones tópicas adecuadas se preparan fácilmente para cada una de estas áreas u órganos.
Las formas de dosificación para la administración tópica o trasdérmica de un compuesto descrito en la presente descripción incluyen ungüentos, pastas, cremas, lociones, geles, polvos, soluciones, pulverizaciones, inhalantes o parches. El componente activo se mezcla en condiciones estériles con un vehículo farmacéuticamente aceptable y los conservantes o tampones que puedan ser necesarios. También se contempla dentro del alcance de la invención una formulación oftálmica, gotas para los oídos y gotas oculares. De forma adicional, la presente invención contempla el uso de parches trasdérmicos, que tienen la ventaja añadida de proporcionar un suministro controlado de un compuesto al cuerpo. Estas formas de dosificación pueden prepararse disolviendo o dispensando el compuesto en el medio adecuado. Los potenciadores de la absorción también pueden utilizarse para aumentar el flujo del compuesto a lo largo de la piel. La velocidad se puede controlar proporcionando una membrana de control de la velocidad o dispersando el compuesto en una matriz o gel polimérico. La aplicación tópica para el tracto intestinal bajo puede realizarse en una formulación de supositorio rectal (ver más arriba) o en una formulación de enema adecuada. También pueden utilizarse parches trasdérmicos en forma tópica.
Para aplicaciones tópicas, las composiciones farmacéuticas pueden formularse en un ungüento adecuado que contiene el componente activo suspendido o disuelto en uno o más vehículos. Los vehículos para la administración tópica de los compuestos de esta invención incluyen, pero no se limitan a, aceite mineral, vaselina líquida, vaselina blanca, propilenglicol, polioxietileno, compuesto de polioxipropileno, cera emulsionante y agua. Alternativamente, las composiciones farmacéuticas pueden formularse en una loción o crema adecuada que contiene los componentes activos suspendidos o disueltos en uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables. Los vehículos adecuados incluyen, pero no se limitan a, aceite mineral, monoestearato de sorbitán, polisorbato 60, cera de cetil ésteres, alcohol cetearílico, 2-octildodecanol, alcohol bencílico y agua.
Para uso oftálmico, las composiciones farmacéuticas pueden formularse como suspensiones micronizadas en solución salina estéril a pH ajustado e isotónica, o, preferiblemente, como soluciones en solución salina estéril a pH ajustado e isotónica, ya sea con o sin un conservante, tal como cloruro de bencilalconio. Alternativamente, para usos oftálmicos, las composiciones farmacéuticas pueden formularse en un ungüento tal como vaselina. Para el tratamiento del ojo o de otros tejidos externos, por ejemplo, la boca y la piel, las formulaciones pueden aplicarse como una ungüento o crema tópica que contiene el ingrediente o ingredientes activos en una cantidad de, por ejemplo, 0,075 a 20 % p/p. Cuando se formula en un ungüento, los ingredientes activos se pueden emplear con una base de ungüento basada en aceite, parafínica o miscible en agua.
Alternativamente, los ingredientes activos pueden formularse en una crema con un aceite en una base de crema aceite/agua. Si se desea, la fase acuosa de la base de crema puede incluir un alcohol polihídrico, es decir, un alcohol que tiene dos o más grupos hidroxilo, tales como propilenglicol, butano 1,3-diol, manitol, sorbitol, glicerol y polietilenglicol (incluido PEG 400) y mezclas de estos. Las formulaciones tópicas pueden incluir, de forma deseable, un compuesto que mejora la absorción o penetración del ingrediente activo a través de la piel u otras áreas afectadas. Ejemplos de dichos potenciadores de la penetración dérmica incluyen dimetilsulfóxido y análogos relacionados.
La fase oleosa de las emulsiones preparadas usando un compuesto puede estar constituida por ingredientes conocidos de una manera conocida. Si bien la fase puede comprender simplemente un emulsionante (también conocido como emulsionante), preferiblemente comprende una mezcla de al menos un emulsionante con una grasa o un aceite o con una grasa y un aceite. Puede incluirse un emulsionante hidrófilo junto con un emulsionante lipófilo que actúa como estabilizante. En algunas realizaciones, el emulsionante incluye tanto un aceite como una grasa. Juntos, el(los) emulsionante(s) con o sin estabilizante(s) constituyen la denominada cera emulsionante y la cera junto con el aceite y la grasa constituyen el denominado ungüento emulsionante que forma la fase oleosa dispersa de las formulaciones de crema. Emulsionantes y estabilizantes de emulsión adecuados para usar en la formulación de un compuesto incluyen Tween™-60, Span™-80, alcohol cetoestearílico, alcohol bencílico, alcohol miristílico, monoestearato de glicerilo y laurilsulfato de sodio.
Las composiciones farmacéuticas pueden administrarse, además, mediante aerosol nasal o por inhalación. Dichas composiciones se preparan según técnicas bien conocidas en la técnica de formulación farmacéutica y pueden prepararse como soluciones en solución salina, utilizando alcohol bencílico u otros conservantes adecuados, promotores de la absorción para mejorar la biodisponibilidad, fluorocarbonos y/u otros agentes solubilizantes o dispersantes convencionales. Las formulaciones adecuadas para la administración intrapulmonar o nasal tienen un tamaño de partículas, por ejemplo, en el intervalo de 0,1 a 500 micrómetros (incluidas partículas en un intervalo entre 0,1 y 500 micrómetros en incrementos de 0,5, 1, 30, 35 micrómetros, etc.) que se administran por inhalación rápida a través del conducto nasal o mediante inhalación a través de la boca para alcanzar los sacos alveolares.
La composición (o formulación) farmacéutica para usar se puede envasar en una variedad de formas dependiendo del método utilizado para administrar el fármaco. Generalmente, un artículo para distribución incluye un recipiente que tiene depositado en el mismo la formulación farmacéutica en una forma adecuada. Los recipientes adecuados son bien conocidos por los expertos en la técnica e incluyen materiales tales como botellas (plástico y vidrio), bolsitas, ampollas, bolsas de plástico, cilindros de metal y similares. El recipiente también puede incluir un ensamblaje antimanipulación para evitar un acceso indiscreto al contenido del envase. Además, el recipiente tiene depositado sobre el mismo una etiqueta que describe el contenido del recipiente. La etiqueta también puede incluir advertencias adecuadas.
Las formulaciones pueden envasarse en recipientes de dosis unitarias o de múltiples dosis, por ejemplo, ampollas y viales sellados, y pueden almacenarse en una condición deshidratada por congelación (liofilizada), requiriendo solamente la adición del vehículo líquido estéril, por ejemplo agua, para una inyección inmediatamente antes del uso. Las soluciones y suspensiones de inyección extemporánea se preparan a partir de polvos, gránulos y pastillas estériles del tipo descrito anteriormente. Son formulaciones farmacéuticas unitarias preferidas las que contienen una dosis diaria o unidad inferior a la dosis diaria, como se ha citado anteriormente en la presente descripción, o una fracción adecuada de las mismas, del ingrediente activo.
En otro aspecto, un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable de este puede formularse en una composición veterinaria que comprende un vehículo veterinario. Los vehículos veterinarios son materiales útiles para el fin de la administración de la composición y pueden ser materiales sólidos, líquidos o gaseosos que de otro modo son inertes y son compatibles con el ingrediente activo. Estas composiciones veterinarias pueden administrarse por vía parenteral, oral o por cualquier otra ruta deseada.
Métodos terapéuticos
La invención también se refiere a los compuestos de las reivindicaciones 1 y 2 para usar en el tratamiento de determinados trastornos, únicamente o en combinación, o sus sales farmacéuticamente aceptables o composiciones farmacéuticas que las comprenden.
La presente descripción se refiere a estimuladores del guanilato ciclasa soluble (sGC), formulaciones farmacéuticas de estos y su uso, solos o en combinación con uno o más agentes adicionales, para tratar y/o prevenir diversas enfermedades, en donde puede ser deseable un aumento en la concentración de NO o un aumento en la concentración de cGMP. Las enfermedades que se pueden tratar incluyen, pero no se limitan a, hipertensión pulmonar, hipertensión arterial, insuficiencia cardíaca, aterosclerosis, inflamación, trombosis, fibrosis e insuficiencia renal, cirrosis del hígado, disfunción eréctil, trastornos del sexo femenino, trastornos relacionados con la diabetes, trastornos oculares y otros trastornos cardiovasculares relacionados.
La concentración aumentada de cGMP produce vasodilatación, inhibición de la agregación de plaquetas y adhesión, efectos antihipertensivos, efectos antiremodelación, efectos antiapoptóticos, efectos antiinflamatorios y efectos de transmisión de señales neuronales. Por lo tanto, se pueden usar estimuladores de sGC para tratar y/o prevenir un rango de enfermedades y trastornos, incluidos, pero no de forma limitativa, trastornos o afecciones periféricos, pulmonares, hepáticos, del hígado, cardíacos o cerebrovasculares/endoteliales, un trastorno o afección urogenitalginecológico o sexual, una enfermedad tromboembólica, una enfermedad isquémica, un trastorno fibrótico, una trastorno tópico o dérmico, un trastorno pulmonar o respiratorio, un trastorno renal o hepático, un trastorno metabólico, aterosclerosis, o un trastorno relacionado con un lípido.
Los compuestos aquí descritos son estimuladores de sGC que pueden ser útiles en la prevención y/o tratamiento de enfermedades y trastornos que se caracterizan por tener una biodisponibilidad de y/o sensibilidad a NO indeseablemente reducida(s), tales como las que se asocian con las condiciones de estrés oxidativo o esfuerzo nitrosativo.
A lo largo de esta descripción, los términos “ hipertensión” , “ hipertensión arterial” , o “ alta presión arterial (HBP)” se utilizan de forma intertambiable y se refieren a una condición crónica extremadamente común y altamente prevenible en la que la presión sanguínea (presión arterial - BP) en las arterias es superior a la normal. Si no se controla adecuadamente, supone un factor de riesgo significativo para varias afecciones cardiovasculares y renales graves. La hipertensión puede ser una enfermedad primaria, llamada “ hipertensión esencial” o “ hipertensión idiopática” , o puede estar causada por otras enfermedades, en cuyo caso se clasifica de “ hipertensión secundaria” . La hipertensión esencial representa 90-95 % de todos los casos.
Como se usa en la presente descripción, el término “ hipertensión resistente” se refiere a hipertensión que permanece por encima de la presión arterial objetivo (usualmente menos de 140/90 mmHg, aunque se recomienda un objetivo más bajo, inferior a 130/80 mmHg, para pacientes con diabetes comórbida o enfermedad del riñón), a pesar del uso simultáneo detresagentes antihipertensivos que pertenecen a diferentes clases de fármacos antihipertensivos. Además, se considera que las personas que requieren cuatro o más fármacos para controlar su presión arterial tienen una hipertensión resistente. La hipertensión es una condición extremadamente común que presenta comorbicidad con la diabetes, afectando al ~20-60 % de los pacientes con diabetes, dependiendo de la obesidad, etnia y edad. Este tipo de hipertensión se denomina en la presente descripción “ hipertensión diabética” . En la diabetes de tipo 2, la hipertensión suele estar presente como parte del síndrome metabólico de resistencia a la insulina, incluidas también la obesidad central y la dislipidemia. En la diabetes de tipo 1, la hipertensión puede indicar el inicio de la nefropatía diabética.
“ Hipertensión pulmonar (PH), ccomo se usa en la presente descripción, es una enfermedad caracterizada por elevaciones sostenidas de la presión arterial en la vasculatura pulmonar (arteria pulmonar, vena pulmonar y capilares pulmonares), que resulta en hipertrofia cardíaca derecha, dando lugar en última instancia a insuficiencia cardíaca derecha y a la muerte. Los síntomas comunes de la PH incluyen dificultad para respirar, mareos y desmayos, que se ven exacerbados por el esfuerzo. Sin tratamiento, la expectativa de vida media después del diagnóstico es de 2,8 años. La PH existe en muchas formas diferentes, que se clasifican según su etiología. Las categorías incluyen hipertensión arterial pulmonar (PAH), PH con enfermedad cardíaca izquierda, PH asociada con enfermedades pulmonares y/o hipoxemia, PH debida a enfermedad trombótica y/o embólica crónica y PH diversa. La PAH es rara en la población general, pero la prevalencia aumenta en asociación con determinadas condiciones comunes tales como infección por VIH, esclerodermia y enfermedad de células falciformes. Otras formas de PH son generalmente más comunes que la PAH y, por ejemplo, la asociación de PH con enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) es de particular interés. El tratamiento actual de la hipertensión pulmonar depende de la etapa y del mecanismo de la enfermedad.
Como se usa en la presente descripción, la “ insuficiencia cardíaca” es un trastorno progresivo de la remodelación miocárdica ventricular izquierda (LV) que culmina en un síndrome clínico complejo en el cual la función cardíaca afectada y la congestión circulatoria son las características que la definen y da lugar a un suministro insuficiente de sangre y nutrientes a los tejidos corporales. La condición se produce cuando el corazón está dañado o trabaja con exceso y no puede bombear toda la sangre que vuelve a él procedente de su circulación sistémica. A medida que se bombea menos sangre, la sangre que retorna al corazón se va acumulando y el fluido se acumula en otras partes del cuerpo. La insuficiencia cardíaca también afecta a la capacidad de los riñones para disponer de sodio y agua, complicando adicionalmente la retención de fluidos. La insuficiencia cardíaca se caracteriza por la disfunción autonómica, la activación neurohormonal y la sobreproducción de citoquinas, que contribuyen a una insuficiencia circulatoria progresiva. Los síntomas de la insuficiencia cardíaca incluyen: dispnea (dificultades para respirar) cuando se hace ejercicio y despertar nocturno debido a la aparición repentina de dificultades para respirar, siendo ambos indicativos de edema pulmonar; fatiga o debilidad general, edema de los pies, tobillos y piernas, aumento de peso rápido, tos crónica, incluida tos con producción de moco o sangre. Dependiendo de su presentación clínica, la insuficiencia cardíaca se clasifica como insuficiencia cardíacade novo,transitoria o crónica. La insuficiencia cardíaca aguda, es decir, el inicio rápido o gradual de los síntomas que requieren una terapia urgente, puede desarrollarse de novo o como resultado de la descompensación de la insuficiencia cardíaca. La diabetes es una comorbilidad común en pacientes con insuficiencia cardíaca y se asocia con un peor pronóstico así como la posibilidad de que la eficacia de los tratamientos se vea afectada. Otras comorbilidades importantes incluyen la hipertensión sistémica, la obstrucción crónica del flujo de aire, la apnea del sueño, la disfunción cognitiva, la anemia, enfermedad crónica del riñón y artritis crónica. La insuficiencia cardíaca izquierda crónica a menudo está asociada con el desarrollo de hipertensión pulmonar. La frecuencia de determinadas comorbilidades varía en función del sexo: entre las mujeres, la hipertensión y la enfermedad tiroidea son más comunes, mientras que los hombres padecen más comúnmente de enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), enfermedad vascular periférica, enfermedad de la arteria coronaria e insuficiencia renal. La depresión es una comorbilidad frecuente de la insuficiencia cardíaca y las dos condiciones pueden, a menudo, complicarse entre sí. La caquexia está reconocida desde hace mucho tiempo como una complicación grave y frecuente de la insuficiencia cardíaca que afecta hasta el 15 % de todos los pacientes con insuficiencia cardíaca y que está asociada con un mal pronóstico. La caquexia cardíaca se define como la pérdida involuntaria, no edematosa de al menos 6 % de peso corporal durante un período de seis meses.
El término “ apnea del sueño” se refiere al más común de los trastornos respiratorios de alteración del sueño. Es una condición caracterizada por que se producen reducciones intermitentes, cíclicas o interrupciones totales del flujo de aire, lo que puede o no implicar obstrucción de las vías respiratorias superiores. Existen tres tipos de apnea del sueño: apnea del sueño obstructiva, la forma más común, apnea del sueño central y apnea del sueño mixta.
La “Apnea central del sueño -(ACS)” , está causada por una alteración de la señal normal del cerebro para respirar, en lugar de un bloqueo físico de las vías respiratorias. La falta de esfuerzo respiratorio da lugar a un aumento de dióxido de carbono de la sangre, lo que puede despertar al paciente. La ACS es rara en la población general, pero es una manifestación relativamente común en pacientes con insuficiencia cardíaca sistólica.
Como se usa en la presente descripción, el término “ síndrome metabólico” , “ síndrome de resistencia a la insulina” o “ síndrome X” se refiere a un grupo o agrupación de condiciones metabólicas (obesidad abdominal, nivel de glucosa en ayunas elevado, y (presión arterial elevada (HBP]), que se producen con más frecuencia de forma conjunta que aislada y que favorecen de forma conjunta el desarrollo de la diabetes de tipo 2 y de la enfermedad cardiovascular. El síndrome metabólico se caracteriza por un perfil lipídico específico de triglicéridos aumentados, niveles reducidos de lipoproteínas de alta densidad-colesterol (HDL-colesterol) y, en algunos casos, niveles moderadamente altos de lipoproteínas de baja densidad-colesterol (LDL-colesterol), así como la progresión acelerada de la “ enfermedad aterosclerótica” debido a la presión de los factores de riesgo componentes. Existen varios tipos de dislipidemias: la “ hipercolesterolemia” se refiere a niveles elevados de colesterol. La hipercolesterolemia familiar es una forma específica de hipercolesterolemia debido a un defecto en el cromosoma 19 (19p13,1-13,3). La “ hipergliceridemia” se refiere a niveles elevados de glicéridos (por ejemplo, la “ hipertrigliceridemia” implica niveles elevados de triglicéridos). La “ hiperlipoproteinemia” se refiere a niveles elevados de lipoproteínas (normalmente LDL, salvo que se indique lo contrario).
Como se usa en la presente descripción, el término “ enfermedad vascular periférica (PVD)” , también denominado comúnmente “ enfermedad arterial periférica (PAD)” o “ enfermedad oclusiva arterial periférica (PAOD)” se refiere a la obstrucción de las arterias grandes quenoforman parte de la vasculatura coronaria, arco aórtico o cerebral. La PVD puede deberse a aterosclerosis, procesos inflamatorios que dan lugar a estenosis, una embolismo o formación de trombos. Produce “ isquemia (falta de suministro de sangre)” aguda o crónica. A menudo, PVD es un término utilizado para referirse a obstrucciones ateroscleróticas presentes en la extremidad inferior. La PVD también incluye un subconjunto de enfermedades clasificadas como enfermedades microvasculares que se deben al estrechamiento episódico de las arterias (por ejemplo, “ fenómeno de Raynaud” ), o ensanchamiento de estas (eritromelalgia), es decir, espasmos vasculares.
El término “trombosis” se refiere a la formación de un coágulo de sangre (“trombo” ) dentro de un vaso sanguíneo, obstruyendo el flujo de sangre a través del sistema circulatorio. Cuando un vaso sanguíneo está lesionado, el cuerpo utiliza plaquetas (trombocitos) y fibrina para formar un coágulo de sangre para evitar la pérdida de sangre. Alternativamente, aun cuando un vaso sanguíneo no esté lesionado, pueden formarse coágulos de sangre en el cuerpo si se presentan las condiciones adecuadas. Si la coagulación es demasiado pronunciada y el coágulo se libera, el coágulo que se desplaza se conoce entonces como “ émbolo” . El término “tromboembolismo” se refiere a la combinación de trombosis y su complicación principal, el “ embolismo” . Cuando un trombo ocupa más del 75 % de la superficie específica del lumen de una arteria, el flujo de sangre al tejido suministrado se reduce lo suficiente como para causar síntomas debido al reducido contenido de oxígeno (hipoxia) y a la acumulación de productos metabólicos como el ácido láctico (“ gota” ). Una obstrucción de más del 90 % puede dar lugar a anoxia, la falta total de oxígeno y al “ infarto” , un modo de muerte celular.
Un “ embolismo” (en plural, embolismos) es el caso en que un émbolo (una masa intravascular separada capaz de obstruir los lechos capilares arteriales en un sitio lejos de su origen) queda alojado en un vaso capilar estrecho de un lecho arterial, lo que causa una obstrucción (oclusión vascular) en una parte distante del cuerpo. Esto no debe confundirse con un trombo que ocasiona una obstrucción en el sitio de origen.
Un “ ictus” o accidente cerebrvascular accidente (ACV), es la pérdida rápida de la función o funciones del cerebro debido a la alteración en el suministro de sangre al cerebro. Esto puede deberse a una “ isquemia” (falta de flujo sanguíneo) causada por la obstrucción (trombosis, embolia arterial), o una hemorragia (escape de sangre). Como resultado, el área afectada del cerebro no puede funcionar, lo que podría resultar en una incapacidad para mover una o más extremidades en un lado del cuerpo, incapacidad para hablar o para entender el habla, o incapacidad para ver un lado del campo visual. Los factores de riesgo del ictus incluyen la edad, la hipertensión, un ictus o accidente isquémico transitorio (TIA) previo, diabetes, colesterol alto, fumar cigarrillos y fibrilación atrial. La alta presión arterial es el factor de riesgo modificable más importante del ictus. Un “ ictus isquémico” es ocasionalmente tratado en un hospital con trombolisis (también conocida como “ rompedora de trombos” ), y algunos ictus hemorrágicos se benefician de la neurocirugía. La prevención de las recaídas puede implicar la administración de fármacos antiagregantes, tales como aspirina y dipiridamol, control y reducción de la hipertensión y el uso de estatinas. Los pacientes seleccionados pueden beneficiarse de la endarterectomía de carótida y el uso de anticoagulantes.
“ La isquemia” es una restricción en el suministro de sangre a los tejidos, provocando una insuficiencia de oxígeno y glucosa necesaria para el metabolismo celular (para mantener el tejido vivo). La isquemia por lo general es causada por problemas con los vasos sanguíneos, con el daño resultante o la disfunción del tejido. También significa anemia local en una parte dada del cuerpo que a veces es debida a congestión (tal como vasoconstricción, trombosis o embolismo).
Según el manual de diagnóstico y estadísticas de la asociación psiquiátrica americana de trastornos mentales, cuarta edición (DSM-IV), el término “ disfunción sexual” abarca una serie de condiciones “ caracterizadas por alteraciones en el deseo sexual y en los cambios psicofisiológicos asociados con el ciclo de respuesta sexual” ; si bien los problemas de este tipo son comunes, se considera que la disfunción sexual existe solamente cuando los problemas causan incomodidad al paciente. La disfunción sexual puede ser de origen físico o psicológico. Puede existir como una condición primaria, generalmente de tipo hormonal, aunque con máxima frecuencia es secundaria a otras condiciones médicas o a la terapia farmacológica para dichas condiciones. Todos los tipos de disfunción sexual se pueden clasificar, además, como de larga duración, adquiridos, situacionales o generalizados (o combinaciones de estos).
La DSM-IV-TR especifica cinco categorías principales de “ disfunción sexual femenina” : trastornos del deseo/interés sexual; “trastornos de deseo sexual (incluidos genitales, subjetivos y combinados)” ; trastornos orgásmicos; dispareunia y vaginismo; y trastorno de deseo sexual persistente.
“ El trastorno de deseo sexual hipoactivo femenino (TDSH)” se define como una incapacidad persistente o recurrente para alcanzar o mantener los niveles suficientes de excitación sexual, lo que causa sufrimiento a la persona. El término “ TDSH” abarca tanto la falta de sentimientos subjetivos de excitación (es decir, trastorno de deseo sexual subjetivo) como la falta de respuestas somáticas tales como lubricación y dilatación (es decir, trastorno de deseo sexual genital/sexual). El TDSH puede ser de origen estrictamente psicológico, aunque generalmente es causado o complicado por factores médicos o fisiológicos. El hipoestrogenismo es el estado fisiológico más común asociado con el TDSH, lo que conduce a la atrofia urogenital y una disminución de la lubricación vaginal.
Como se usa en la presente descripción, la “ disfunción eréctil (DE)” es una disfunción sexual masculina, la cual se caracteriza por la incapacidad para desarrollar o mantener una erección del pene durante el acto sexual. Una erección del pene es el efecto hidráulico de la entrada de sangre y su retención en los cuerpos esponjosos dentro del pene. El proceso se inicia frecuentemente como resultado de la excitación sexual, cuando se transmiten señales desde el cerebro a los nervios en el pene. La disfunción eréctil se indica cuando una erección es difícil de producir. Las causas principales más importantes son la enfermedad cardiovascular y la diabetes, problemas neurológicos (por ejemplo, trauma de cirugía de prostatectomía), insuficiencia hormonal (hipogonadismo) y efectos adversos de fármacos.
Como se usa en la presente descripción, el término “ broncoconstricción” se utiliza para definir la constricción de las vías respiratorias en los pulmones debido a la tensión del músculo liso circundante, con la consiguiente tos, respiración con dificultad y falta de aliento. La condición tiene un número de causas, siendo la más común el asma. Los ejercicios y las alergias pueden desencadenar los síntomas en un individuo de cualquier otra manera asintomático. Otras condiciones tales como la enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC) también pueden presentarse con broncoconstricción.
Las enfermedades específicas de trastornos que se pueden tratar y/o prevenir administrando un estimulador de sGC de la invención incluyen, aunque no de forma limitativa: hipertensión (por ejemplo, hipertensión diabética, hipertensión arterial, hipertensión pulmonar, hipertensión resistente, enfermedad arterial periférica, etc.), insuficiencia cardíaca (por ejemplo, disfunción diastólica ventricular izquierda (LVDD) y disfunción sistólica ventricular izquierda (LVSD), apnea del sueño asociada con insuficiencia cardíaca), enfermedad esclerótica (por ejemplo, aterosclerosis), trastornos tromboembólicos (por ejemplo, hipertensión pulmonar tromboembólica crónica, trombosis, ictus, embolismo, embolismo pulmonar), enfermedad de Alzheimer, enfermedades renales (por ejemplo, fibrosis renal, enfermedad renal isquémica, fallo renal, insuficiencia renal, enfermedad renal crónica), enfermedad hepática (por ejemplo, fibrosis hepática o cirrosis), enfermedad respiratoria (por ejemplo, fibrosis pulmonar, asma, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, enfermedad pulmonar intersticial), trastornos sexuales (por ejemplo, disfunción eréctil, disfunción sexual masculina o femenina, atrofia vaginal), anemia de células falciformes, enfermedades neuroinflamatorias o trastornos y enfermedades asociadas (por ejemplo, trastornos relacionados con los lípidos).
Otro aspecto de la invención es los compuestos de las reivindicaciones 1 y 2, así como sales farmacéuticamente aceptables del mismo, para usar en el tratamiento de enfermedades, afección y trastorno de la salud seleccionado de:
(1) trastornos/afecciones periféricas, pulmonares, hepáticas, renales, cardíacas o cerebrovasculares/endoteliales relacionadas de cualquier otra manera con la circulación:
• trastornos relacionados con alta presión arterial y flujo sanguíneo coronario reducido, tales como presión arterial coronaria elevada aguda y crónica, hipertensión arterial y trastorno vascular debido a complicaciones del corazón y del riñón (por ejemplo, enfermedad cardíaca, ictus, isquemia cerebral, fallo renal); hipertensión resistente, hipertensión diabética, insuficiencia cardíaca congestiva; disfunción diastólica o sistólica; insuficiencia coronaria; arritmias; reducción de precarga ventricular; hipertrofia cardíaca; síndrome de insuficiencia cardíaca/cardiorrenal; hipertensión portal; disfunción o lesión endotelial;
• y trastornos tromboembólicos e isquemias tales como infarto de miocardio, ictus, ataques isquémicos transitorios (TIA); tromboanginitis obstructiva; angina de pecho estable o inestable; espasmos coronarios, angina variante, angina de Prinzmetal; prevención de restenosis después de terapias de trombolisis; trastornos trombogénicos;
• enfermedad de Alzheimer; enfermedad de Parkinson; demencia; deterioro cognitivo vascular; vasoespasmos cerebrales; traumatismo craneoencefálico;
• enfermedad arterial periférica, enfermedad arterial oclusiva periférica; vasculopatía periférica; hipertonía; síndrome o fenómeno de Raynaud, isquemia crítica de extremidades, vasculitis; embolismo periférico; claudicación intermitente; crisis vasoclusivas; distrofias musculares de Duchenne y Becker; anormalidades de la microcirculación; control de escapes o permeabilidad vascular;
• choque; septicemia; choque cardiogénico; control de la activación leucocitaria; inhibición o modulación de la agregación plaquetaria;
• afecciones pulmonares/respiratorias, tales como hipertensión pulmonar, hipertensión arterial pulmonar y remodelación vascular pulmonar asociada (por ejemplo, trombosis localizada e hipertrofia cardíaca derecha); hipertonía pulmonar; hipertensión pulmonar primaria, hipertensión pulmonar secundaria, hipertensión pulmonar familiar, hipertensión pulmonar esporádica, hipertensión pulmonar precapilar, hipertensión pulmonar idiopática, arteriopatía pulmonar trombótica, arteriopatía pulmonar plexogénica; fibrosis quística; broncoconstricción o broncoconstricción pulmonar; síndrome de dificultad respiratoria aguda; fibrosis pulmonar, trasplante de pulmón;
• hipertensión pulmonar asociada a o relacionada con: disfunción ventricular izquierda, hipoxemia, hipertensiones de los grupos I, II, III, IV y V de la OMS, enfermedad de la válvula mitral, pericarditis constrictiva, estenosis aórtica, cardiomiopatía, fibrosis mediastínica, fibrosis pulmonar, drenaje venoso pulmonar anómalo, enfermedad pulmonar venooclusiva, vasculitis pulmonar, enfermedad del colágeno vascular, cardiopatías congénitas, hipertensión venosa pulmonar, enfermedad pulmonar intersticial, trastorno respiratorio del sueño, apnea del sueño, trastornos de hipoventilación alveolar, exposición crónica a altitud elevada, enfermedad pulmonar en neonatos, displasia alveolar capilar, anemia de células falciformes, otros trastornos de coagulación, tromboembolismo crónico, embolismo pulmonar (debido a tumor, parásitos o material extraño), enfermedad del tejido conjuntivo, lupus, esquistosomiasis, sarcoiditis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, asma, enfisema, bronquitis crónica, hemangiomatosis capilar pulmonar; histiocitosis X, linfangiomatosis y vasos pulmonares comprimidos (debido, por ejemplo, a adenopatía, tumor o mediastinitis fibrosante);
• enfermedades o condiciones arteroscleróticas, tales como aterosclerosis (por ejemplo, asociada con lesión endotelial, adhesión y agregación plaquetaria y de monocitos, proliferación y migración de músculo liso); restenosis (por ejemplo, desarrollada después de terapias de trombolisis, angioplastias transluminales percutáneas (ATP), angioplastias coronarias transluminales percutáneas (ACTP) y baipás); inflamación;
• enfermedad cardiovascular asociada con el síndrome metabólico (por ejemplo, obesidad, dislipidemia, diabetes, alta presión arterial); trastornos relacionados con los lípidos, tales como la dislipidemia, la hipercolesterolemia, la hipertrigliceridemia, la sitosterolemia, la enfermedad del hígado graso, y la hepatitis; preeclamsia; avance de la enfermedad renal poliquística; grasa subcutánea; obesidad;
• cirrosis del hígado, asociada con enfermedad hepática crónica, fibrosis hepática, activación de células estelares hepáticas, acumulación de colágeno fibroso hepático y de colágeno total; enfermedad del hígado de origen necroinflamatorio y/o de origen inmunológico; trastornos del sistema andurogenital, tales como fibrosis renal y fallo renal que se deben a enfermedades o insuficiencia renal crónica (por ejemplo, debido a la acumulación/deposición y lesión tisular, esclerosis progresiva, glomerulonefritis); hipertrofia prostática esclerosis sistémica; fibrosis intersticial cardíaca; remodelación cardíaca y fibrosis; hipertrofia cardíaca;
(2) daño por isquemia o reperfusión; isquemia/reperfusión asociada con transplante de órganos, trasplante de pulmón, trasplante pulmonar, transplante cardíaco; conservación de los sustituyentes de la sangre en pacientes con trauma;
(3) trastornos sexuales, ginecológicos y urológicos: disfunción eréctil; impotencia; eyaculación precoz; disfunción sexual femenina (por ejemplo, disfunción del deseo sexual femenino, trastorno del deseo sexual hipoactivo), atrofia vaginal, dispaneuria, vaginitis atrófica; hiperplasia prostática benigna (BPH) o hipertrofia o ampliación prostática benigna, obstrucción de la salida de la vejiga; síndrome de vejiga dolorosa (BPS), cistitis intersticial (IC), síndrome de vejiga hiperactiva, e incontinencia neurogénica de la vejiga;nefropatía diabética;
(4) enfermedades o trastornos oculares: glaucoma, retinopatía, retinopatía diabética, blefaritis, síndrome del ojo seco, síndrome de Sjogren;
(5) enfermedades o trastornos de audición: deficiencia de audición, pérdida parcial o total de audición; sordera parcial o total; acúfenos; pérdida de audición inducida por ruido;
(6) trastornos o afecciones tópicas o de la piel: fibrosis dérmica, esclerodermia, fibrosis de la piel;
(7) curación de heridas: por ejemplo, en diabéticos; mejora de la perfusión microvascular (por ejemplo, después de una lesión, para contrarrestar la respuesta inflamatoria en el cuidado perioperativo), fisuras anales, úlceras diabéticas; y
(8) otras enfermedades o afecciones: metástasis de cáncer, osteoporosis, gastroparesis; dispepsia funcional; complicaciones diabéticas, enfermedades asociadas con la disfunción endotelial y los trastornos neurológicos asociados con una producción disminuida de óxido nítrico.
En otras realizaciones de la invención, los compuestos de las reivindicaciones 1 y 2 así como sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, son para usar en la prevención y/o tratamiento de los siguientes tipos de enfermedades, afecciones y trastornos que pueden mejorarse con estimulación de sGC:
hipertensión, hipertensión resistente, hipertensión diabética, hipertensión pulmonar (PH), hipertensión arterial pulmonar, PH asociada con EPOC, obstrucción crónica del flujo de aire, asma o fibrosis pulmonar, trombosis, embolismo, trastornos tromboembólicos, enfermedad de Alzheimer, aterosclerosis, hipertrofia cardíaca derecha, insuficiencia cardíaca, disfunción diastólica, disfunción sistólica, apnea del sueño asociada con insuficiencia cardíaca, cirrosis hepática, fibrosis renal, insuficiencia renal debida a enfermedades o insuficiencia renal, trastorno metabólico, dislipidemia, hipercolesterolemia, hipertrigliceridemia, sitosterolemia, enfermedad del hígado graso, hepatitis, disfunción eréctil, disfunción sexual femenina, disfunción del deseo sexual femenino y atrofia vaginal.
En otras realizaciones la enfermedad, afección o trastorno de salud se selecciona de un trastorno o afección periférica, pulmonar, hepática, del riñón, cardíaca o cerebrovascular/endotelial, o una enfermedad relacionada de cualquier otra manera con la circulación seleccionada de: presión arterial coronaria elevada aguda y crónica, hipertensión arterial y alteración vascular debida a complicaciones del corazón y del riñón, enfermedad cardíaca, ictus, isquemia cerebral, insuficiencia renal; hipertensión resistente, hipertensión diabética, insuficiencia cardíaca congestiva; disfunción diastólica o sistólica; insuficiencia coronaria; arritmias; reducción de precarga ventricular; hipertrofia cardíaca; síndrome de insuficiencia cardíaca/cardiorrenal; hipertensión portal; disfunción o lesión endotelial; infarto de miocardio; ictus o ataques isquémicos transitorios (TIA); tromboanginitis obstructiva; angina de pecho estable o inestable; espasmos coronarios, angina variante, angina de Prinzmetal; restenosis debidas a terapias de trombolisis y trastornos trombogénicos.
En otras realizaciones, la enfermedad, afección o trastorno de la salud se selecciona de un trastorno o afección vascular/endotelial periférica o una enfermedad relacionada de cualquier otra manera con la circulación seleccionada de: enfermedad arterial periférica, enfermedad arterial oclusiva periférica; vasculopatía periférica; hipertonias; síndrome o fenómeno de Raynaud; isquemia crítica de un miembro; vasculitis; embolismo periférico; claudicación intermitente; crisis vasoclusivas; distrofias musculares de Duchenne y Becker; anormalidades de la microcirculación; y problemas de escape o permeabilidad vascular.
En otras realizaciones, la enfermedad, afección o trastorno de la salud es un trastorno o afección pulmonar o una enfermedad relacionada de cualquier otra manera con la circulación seleccionada de: hipertensión pulmonar; hipertensión arterial pulmonar y remodelación vascular pulmonar asociada; trombosis localizada; hipertrofia cardíaca derecha; hipertonía pulmonar; hipertensión pulmonar primaria, hipertensión pulmonar secundaria, hipertensión pulmonar familiar, hipertensión pulmonar esporádica, hipertensión pulmonar precapilar, hipertensión pulmonar idiopática, arteriopatía pulmonar trombótica, arteriopatía pulmonar plexogénica; fibrosis quística; broncoconstricción o broncoconstricción pulmonar; síndrome de dificultad respiratoria aguda; fibrosis pulmonar y trasplante de pulmón. En algunas de estas realizaciones, la hipertensión pulmonar es hipertensión pulmonar asociada a o relacionada con la disfunción ventricular izquierda, hipoxemia, hipertensiones de los grupos I, II, III, IV y V de la OMS, enfermedad de la válvula mitral, pericarditis constrictiva, estenosis aórtica, cardiomiopatía, fibrosis mediastínica, fibrosis pulmonar, drenaje venoso pulmonar anómalo, enfermedad pulmonar venooclusiva, vasculitis pulmonar, enfermedad del colágeno vascular, cardiopatías congénitas, hipertensión venosa pulmonar, enfermedad pulmonar intersticial, trastorno respiratorio del sueño, apnea del sueño, trastornos de hipoventilación alveolar, exposición crónica a altitud elevada, enfermedad pulmonar en neonatos, displasia alveolar capilar, anemia de células falciformes, trastornos de la coagulación, tromboembolismo crónico; embolismo pulmonar, debido a tumores, parásitos o material extraño; enfermedad del tejido conectivo, lupus, esquistosomiasis, sarcoidosis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, asma, enfisema, bronquitis crónica y hemangiomatosis capilar pulmonar; histiocitosis X; linfangiomatosis y vasos pulmonares comprimidos debidos a adenopatía, tumor o mediastinitis fibrosante.
En otras realizaciones, la afección o trastorno de la salud es un trastorno o afección vascular o endotelial o una enfermedad relacionada de cualquier otra manera con la circulación seleccionada de: enfermedades arteroscleróticas; aterosclerosis, aterosclerosis asociada con lesión endotelial, aterosclerosis asociada con la adhesión y agregación plaquetaria y de monocitos, aterosclerosis asociada con la proliferación y migración de músculo liso; restenosis, restenosis desarrollada después de terapias de trombolisis; restenosis desarrollada después de angioplastias transluminales percutáneas; restensosis desarrollada después de angioplastías coronarias transluminales percutáneas y baipás; inflamación; enfermedad cardiovascular asociada con el síndrome metabólico, obesidad, dislipidemia, diabetes o alta presión arterial; trastornos relacionados con los lípidos, dislipidemia, la hipercolesterolemia, la hipertrigliceridemia, la sitosterolemia, la enfermedad del hígado graso, y la hepatitis; preeclamsia; avance de la enfermedad renal poliquística; y grasa subcutánea.
En otras realizaciones, la enfermedad, condición o trastorno de la salud es seleccionado de cirrosis hepática, cirrosis hepática asociada con enfermedad hepática crónica, fibrosis hepática, activación de células estelares hepáticas, acumulación de colágeno fibroso hepático y total; enfermedad del hígado de origen necroinflamatorio o de origen inmunológico.
En otras realizaciones, la enfermedad, condición o afección de la salud es un trastorno del sistema urogenital seleccionado de fibrosis renal; insuficiencia renal resultante de enfermedades o insuficiencia renal crónica; insuficiencia renal debido a la acumulación o deposición y lesión de tejido, esclerosis progresiva o glomerulonefritis; e hipertrofia prostática.
En realizaciones adicionales, la enfermedad, condición o afección de la salud es esclerosis sistémica.
En otras realizaciones, la enfermedad, condición o afección de la salud es un trastorno cardíaco seleccionado de fibrosis intersticial cardíaca; remodelación y fibrosis cardíaca e hipertrofia cardíaca.
En otras realizaciones, la enfermedad, condición o afección de la salud es un trastorno o afección del SNC seleccionada de la enfermedad de Alzheimer; enfermedad de Parkinson; demencia; deterioro cognitivo vascular; vasoespasmos cerebrales; y traumatismo craneoencefálico.
En otras realizaciones, la enfermedad, condición o afección de la salud se selecciona de daño por isquemia o reperfusión; isquemia/reperfusión asociada con transplante de órganos, trasplante de pulmón, trasplante pulmonar o transplante cardíaco; conservación de los sustituyentes de la sangre en pacientes con trauma.
En realizaciones adicionales, la enfermedad, afección o trastorno de la salud es un trastorno o afección de carácter sexual, ginecológico o urológico seleccionado de disfunción eréctil; impotencia; eyaculación precoz; disfunción sexual femenina; disfunción del deseo sexual femenino; trastorno del deseo sexual hipoactivo; atrofia vaginal, dispaneuria, vaginitis atrófica; hiperplasia prostática benigna (BPH) o hipertrofia o ampliación prostática benigna; obstrucción de la salida de la vejiga; síndrome de vejiga dolorosa (BPS); cistitis intersticial (IC); síndrome de vejiga hiperactiva, vejiga neurogénica e incontinencia; nefropatía diabética.
En otras realizaciones, la enfermedad, condición o afección de la salud se selecciona de atrofia vaginal, dispaneuria y vaginitis atrófica.
En otras realizaciones, la enfermedad, condición o afección de la salud se selecciona de hiperplasia prostética benigna (BPH) o hipertrofia o ampliación prostática benigna; obstrucción de la salida de la vejiga; síndrome de vejiga dolorosa (BPS); cistitis intersticial (IC); síndrome de vejiga hiperactiva, vejiga neurogénica e incontinencia.
En realizaciones adicionales, la enfermedad, afección o trastorno de la salud es una afección de carácter sexual, seleccionada de disfunción eréctil; impotencia; eyaculación precoz; disfunción sexual femenina; disfunción del deseo sexual femenino y trastorno del deseo sexual hipoactivo.
En realizaciones adicionales, la enfermedad o trastorno es una nefropatía diabética.
En realizaciones adicionales, la enfermedad, afección o trastorno de la salud consiste en distrofias musculares de Duchenne y Becker.
En otras realizaciones, la enfermedad es una enfermedad o trastorno ocular seleccionado de glaucoma, retinopatía, retinopatía diabética, blefaritis, síndrome de ojo seco y síndrome de Sjogren.
En realizaciones adicionales, la enfermedad es una enfermedad del oído o un trastorno seleccionado de audición disminuida, pérdida parcial o pérdida total de audición; sordera parcial o total; acúfenos; y pérdida de audición inducida por ruido.
En realizaciones adicionales, la enfermedad es un trastorno o condición tópica o de la piel seleccionada de fibrosis dérmica, esclerodermia y fibrosis de la piel.
En otras realizaciones, el tratamiento implica la curación de heridas; cicatrización de heridas en diabéticos; mejora de la perfusión microvascular; mejora de resultados de perfusión microvascular después de una lesión; tratamiento de fisuras anales; y tratamiento de úlceras diabéticas.
En otras realizaciones, la enfermedad o afección se selecciona de metástasis de cáncer; osteoporosis; gastroparesia; dispepsia funcional; complicaciones diabéticas; enfermedades asociadas con la disfunción endotelial y los trastornos neurológicos asociados con una producción disminuida de óxido nítrico.
En otra realización, los compuestos de la invención se pueden suministrar en la forma de dispositivos implantados, tales como stents. Un stent es un “ tubo” de malla insertado en un paso/conducto natural del cuerpo para prevenir o contrarrestar una constricción del flujo localizado inducida por una enfermedad. El término también puede referirse a un tubo utilizado para mantener temporalmente dicho conducto natural abierto para permitir el acceso para la cirugía.
Un stent de elución de fármaco (DES) es un stent periférico o coronario (una estructura base) colocada en arterias periféricas o coronarias enfermas y estrechadas, que libera lentamente un fármaco para bloquear la proliferación celular, usualmente la proliferación de células del músculo liso. Esto evita la fibrosis que, junto con los coágulos (trombo), podría bloquear sino la arteria que lleva el stent, un proceso denominado restenosis. El stent es colocado usualmente dentro de la arteria periférica o coronaria por un intervencionista de cardiología o intervencionista de radiología durante un procedimiento de angioplastia. Los fármacos usados comúnmente en los DES con el fin de bloquear la proliferación celular incluyen análogos de paclitaxel o de rapamicina
En algunas realizaciones de la invención, los compuestos de las reivindicaciones 1 y 2 puede ser suministrados mediante un stent de elución de fármacos recubierto con dichos compuestos. Un stent de elución de fármacos recubierto con los compuestos de las reivindicaciones 1 y 2 puede ser útil para prevenir la restenosis y la trombosis de stent durante intervenciones coronarias percutáneas. Un stent de elución de fármacos recubierto con los compuestos de las reivindicaciones 1 y 2, puede ser capaz de prevenir la proliferación de células lisas así como facilitar la revascularización y la regeneración del tejido endotelial de la arteria en la que se inserta el stent.
Una alternativa a la intervención coronaria percutánea para el tratamiento de angina intratable debida a enfermedad oclusiva de la arteria coronaria es el procedimiento denominado Injerto de derivación de la arteria coronaria (CABG). El CABG proporciona solo la paliación de un proceso continuo que se complica adicionalmente debido al desarrollo rápido de la aterosclerosis de injerto. El injerto de la vena safena es el conducto más comúnmente utilizado en cirugía de CABG. El éxito clínico a largo plazo del CABG venoso se ve obstaculizado por tres razones principales: aterosclerosis de injerto acelerada, endotalización incompleta y trombosis.
En algunas realizaciones, se pueden usar los compuestos de las reivindicaciones 1 y 2 para la prevención de un fallo de injerto safenoso durante el CABG. El compuesto puede ayudar en el proceso de endotelización y ayudar a prevenir la trombosis. En esta indicación, los compuestos de las reivindicaciones 1 y 2 se suministran de forma local en forma de gel.
Los términos, “ enfermedad” , “trastorno” y “ afección” se pueden utilizar indistintamente aquí en referencia a una afección médica o patológica mediada por sGC, cGMP y/o NO.
Como se usa en la presente descripción, los términos “ individuo” y “ paciente” se usan de forma intertambiable. Los términos “ individuo” y “ paciente” se refieren a un animal (por ejemplo, un pájaro tal como un pollo, codorniz o pavo, o un mamífero), específicamente un “ mamífero” , incluido un no primate (por ejemplo, una vaca, cerdo, caballo, oveja, conejo, cobaya, rata, gato, perro, y ratón) y un primate (por ejemplo, un mono, chimpancé y un humano) y, más específicamente, un humano. En algunas realizaciones, el individuo es un animal no humano, tal como un animal de granja (por ejemplo, un caballo, vaca, cerdo u oveja) o una mascota (por ejemplo, un perro, gato, cobaya o conejo). En algunas realizaciones, el sujeto es un ser humano.
Como se usa en la presente descripción, el término “ muestra biológica” se refiere a una muestrain vitrooex vivo,e incluye, sin limitación, cultivos celulares o extractos de los mismos; material extraído mediante biopsia obtenido de un mamífero o de extractos de este; sangre, saliva, orina, heces, semen, lágrimas, fluido linfático, fluido ocular, humor vítreo, u otros fluidos corporales o extractos de estos.
“ Tratar” , “tratando” o “tratamiento” con respecto a un trastorno o enfermedad se refiere al alivio o anulación de la causa y/o los efectos del trastorno o la enfermedad. Como se usa en la presente descripción, los términos “ tratar” , “ tratamiento” y “ tratando” se refieren a la reducción o mejora del avance, gravedad y/o duración de una afección mediada por sGC, cGMP y/o NO, o la mejora de uno o más síntomas (preferiblemente, uno o más síntomas discernibles) de dicha afección (es decir, “ controlar” sin “ curar” la afección), como resultado de la administración de una o más terapias (por ejemplo, uno o más agentes terapéuticos, tales como un compuesto o composición de la invención). En realizaciones específicas, los términos “tratar” ; “tratamiento” y “ tratando” se refieren a la mejora de al menos un parámetro físico medible de una afección mediada por sGC, cGMP y/o NO. En otras realizaciones, los términos “tratar” , “ tratamiento” y “tratando” se refieren a la inhibición del avance de una afección mediada por sGC, cGMP y/o NO, ya sea físicamente mediante, por ejemplo, la estabilización de un síntoma discernible o fisiológicamente mediante, por ejemplo, la estabilización de un parámetro físico, o ambos.
Como se usa en la presente descripción, el término “ evitar” se refiere a administrar un fármaco de forma previa para evitar o prevenir que aparezcan uno o más síntomas de una enfermedad o trastorno. El experto en la técnica médica entiende que el término “ prevenir” no es un término absoluto. En la industria médica se entiende que se refiere a la administración profiláctica de un fármaco para reducir sustancialmente la probabilidad o la gravedad de una afección o un síntoma de la afección y este es el sentido previsto en esta descripción. En The Physician's Desk Reference, un texto estándar en el campo, se utiliza el término “ prevenir” cientos de veces. Como se usa en la presente descripción, los términos “ prevenir” , “ previniendo” y “ prevención” con respecto a un trastorno o enfermedad, se refieren a evitar la causa, efectos, síntomas o avance de una enfermedad o trastorno antes de que la propia enfermedad o trastorno se manifiesten por completo.
Los compuestos y las composiciones farmacéuticas descritas en la presente descripción pueden usarse solos o en terapia de combinación para el tratamiento o prevención de una enfermedad o trastorno mediado, regulada o influenciado por sGC, cgMp y/o NO.
Los compuestos y composiciones descritas en la presente descripción también son útiles para el tratamiento veterinario de animales de compañía, animales exóticos y animales de granja, incluidos, sin limitación, perros, gatos, ratones, ratas, hámsters, gerbilinos, cobayas, conejos, caballos, cerdos y ganado vacuno.
Terapias de combinación
Los compuestos y las composiciones farmacéuticas que se describen en la presente descripción pueden usarse en terapias de combinación con uno o más agentes terapéuticos adicionales. Para el tratamiento de combinación con más de un agente activo, donde los agentes activos están en formulaciones de dosificación separadas, los agentes activos pueden administrarse por separado o conjuntamente. Además, la administración de un elemento puede tener lugar antes de, al mismo tiempo que o después de la administración del otro agente.
Cuando se administra junto con otros agentes, por ejemplo, cuando se administra junto con otro fármaco contra el dolor, una “ cantidad eficaz” del segundo agente dependerá del tipo de fármaco utilizado. Las dosis adecuadas son conocidas para los agentes aprobados y pueden ser ajustadas por el experto en la materia, según la afección del individuo, el tipo de afección o afecciones que se trate(n) y la cantidad de un compuesto descrito en la presente descripción que se esté utilizando. En los casos en los que no se indica expresamente ninguna cantidad, debe asumirse una cantidad eficaz. Por ejemplo, los compuestos descritos en la presente descripción pueden administrarse a un individuo con un rango de dosificación de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 10.000 mg/kg de peso corporal/día, de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 5.000 mg/kg de peso corporal/día, de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 3.000 mg/kg de peso corporal/día, de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 1.000 mg/kg de peso corporal/día, de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 500 mg/kg de peso corporal/día, de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 300 mg/kg de peso corporal/día, de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 100 mg/kg de peso corporal/día.
Cuando se emplea “terapia de combinación” , se puede lograr una cantidad eficaz utilizando una primera cantidad de un compuesto de las reivindicaciones 1 y 2 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y una segunda cantidad de un agente terapéutico adicional adecuado.
En una realización de esta invención, un compuesto de las reivindicaciones 1 y 2 y el agente terapéutico adicional se administran cada uno en una cantidad eficaz (es decir, cada uno en una cantidad que sería terapéuticamente eficaz si se administrara sola). En otra realización, un compuesto de las reivindicaciones 1 y 2 y el agente terapéutico adicional se administran cada uno en una cantidad que no proporciona por sí sola un efecto terapéutico (una dosis subterapéutica). En otra realización, un compuesto de las reivindicaciones 1 y 2 puede administrarse en una cantidad eficaz, mientras que el agente terapéutico adicional se administra en una dosis subterapéutica. En otra realización, un compuesto de las reivindicaciones 1 y 2 se puede administrar en una dosis subterapéutica, mientras que el agente terapéutico adicional, por ejemplo, un agente terapéutico para el cáncer adecuado se administra en una cantidad eficaz.
Como se usa en la presente descripción, los términos “ en combinación” o “ administración conjunta” se pueden utilizar indistintamente en referencia al uso de más de una terapia (por ejemplo, uno o más agentes profilácticos y/o terapéuticos). El uso de los términos no limita el orden en el cual se administran las terapias (por ejemplo, agentes profilácticos y/o terapéuticos) a un individuo.
La administración conjunta abarca la administración de las cantidades primera y segunda de los compuestos de una manera prácticamente simultánea, tal como en una única composición farmacéutica, por ejemplo, una cápsula o comprimido que tiene una relación fija de cantidades primera y segunda, o en múltiples cápsulas o comprimidos aparte para cada una. Además, dicha administración conjunta también abarca el uso de cada compuesto de manera secuencial en cualquier orden. Cuando la administración conjunta implica la administración aparte de la primera cantidad de un compuesto de las reivindicaciones 1 y 2 y una segunda cantidad de un agente terapéutico adicional, los compuestos se administran lo suficientemente próximos en el tiempo para obtener el efecto terapéutico deseado. Por ejemplo, el período de tiempo entre cada administración que puede tener como resultado el efecto terapéutico deseado puede variar de minutos a horas y puede determinarse teniendo en cuenta las propiedades de cada compuesto, tales como potencia, solubilidad, biodisponibilidad, semivida en plasma y perfil cinético. Por ejemplo, un compuesto de las reivindicaciones 1 y 2 y el segundo agente terapéutico pueden administrarse en cualquier orden en un intervalo de aproximadamente 24 horas entre sí, en un intervalo de aproximadamente 16 horas entre sí, un intervalo de aproximadamente 8 horas entre sí, un intervalo de aproximadamente 4 horas entre sí, un intervalo de aproximadamente 1 hora entre sí o en un intervalo de aproximadamente 30 minutos entre sí.
Más específicamente, una primera terapia (por ejemplo, un agente profiláctico o terapéutico tal como un compuesto descrito en la presente descripción) se puede administrar antes de (por ejemplo, 5 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 45 minutos, 1 hora, 2 horas, 4 horas, 6 horas, 12 horas, 24 horas, 48 horas, 72 horas, 96 horas, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas, 5 semanas, 6 semanas, 8 semanas, o 12 semanas antes), simultáneamente con, o después de (por ejemplo, 5 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 45 minutos, 1 hora, 2 horas, 4 horas, 6 horas, 12 horas, 24 horas, 48 horas, 72 horas, 96 horas, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas, 5 semanas, 6 semanas, 8 semanas, o 12 semanas después) la administración de una segunda terapia (por ejemplo, un agente profiláctico o terapéutico tal como un agente contra el cáncer) a un individuo.
Los ejemplos de otros agentes terapéuticos que pueden combinarse con un compuesto de esta descripción, ya sea administrados por separado o en la misma composición farmacéutica incluyen, pero no se limitan a:
(1) Factor de liberación derivado de endotelio (EDRF);
(2) donantes de NO tales como un nitrosotiol, un nitrito, una sidnoniimina, un NONOato, una N-nitrosamina, una N-hidroxilnitrosamina, una nitrosamina, nitrotirosina, un dióxido de diazetina, una oxatriazol 5-amina, una oxima, una hidroxilamina, una N-hidroxiguanidina, una hidroxiurea o un furoxano. Algunos ejemplos de estos tipos de compuestos incluyen: trinitrato de glicerilo (también conocido como GTN, nitrato de glicerilo y trinitrogilcerina), el éster nitrato de glicerol; nitroprusiato de sodio (SNP), en donde una molécula de óxido nítrico se coordina con metal hierro formando un complejo bipiramidal cuadrado; 3-morfolinosidnonimina (SIN-1), un compuesto de ion híbrido formado por la combinación de una morfolina y una sidnonimina; S-nitroso-N-acetilpenicilamina (SNAP), un derivado de aminoácido N-acetilado con un grupo funcional nitrosotiol; dietilentriamina/NO (DETA/NO), un compuesto de óxido nítrico unido covalentemente a dietilentriamina; y NCX 4016, un éster m-nitroximetil fenílico de ácido acetilsalicílico. Los ejemplos más específicos de algunas de estas clases de donantes de NO incluyen: los nitrovasodilatadores clásicos, tales como nitrato orgánico y ésteres de nitrito, que incluyen nitroglicerina, nitrito de amilo, dinitrato de isosorbide, 5-mononitrato de isosorbide y nicorandilo; Isosorbide (Dilatrate®-SR, Imdur®, Ismo®, Isordil®, Isordil®, Titradose®, Monoket®), FK 409 (NOR-3); FR 144420 (NOR-4); 3-morfolinosidnonimina; clorhidrato de linsidomina (“ SIN-1” ); S-nitroso-N-acetilpenicilamina (“ SNAP” ); AZD3582 (CINOD compuesto líder), NCX 4016, NCX 701, NCX 1022, HCT 1026, NCX 1015, NCX 950, NCX 1000, NCX 1020, AZD 4717, NCX 1510/NCX 1512, NCX 2216, y NCX 4040 (todos comercializados por NicOx S.A.), S-nitrosoglutationa (GSNO), nitroprusiato de sodio, mono-etil-éster de S-nitrosoglutationa (GSNO-éster),6-(2-hidroxi-1-metil-nitrosohidracino)-W-metil-1-hexanamina (NOC-9) o NONOato de dietilamina. También se describen donantes de óxido nítrico en las patentes US-5.155.137, US-5.366.997, US-5.405.919, US-5.650.442, US-5.700.830, US-5.632.981, US-6.290.981, US-5.691.423, US-5.721.365, US-5.714.511, US-6.511.911 y US-5.814.666, Chrysselis y col. (2002) J Med Chem. 45:5406-9 (tales como los donantes de NO 14 y 17), y Nitric Oxide Donors for Pharmaceutical and Biological Research, eds: Peng George Wang, Tingwei Bill Cai, Naoyuki Taniguchi, Wiley, 2005;
(3) Otras sustancias que mejoran las concentraciones de cGMP, tales como la protoporfirina IX, el ácido araquidónico y derivados de fenilhidrazina;
(4) sustratos de óxido nítrico sintasa: por ejemplo, análogos basados en n-hidroxiguanidina, tales como N[G]-hidroxi-L-arginina (NOHA), 1-(3, 4-dimetoxi-2-dorobencilidenamino)-3-hidroxiguanidina y PR5 (1-(3,4-dimetoxi-2-dorobencilidenamino)-3-hidroxiguanidina); derivados de L-arginina (tales como homo-Arg, homo-NOHA,N-tert-butiloxi- y N-(3-metil-2-butenil)oxi-L-arginina, canavanina, ácido epsilon guanidin-carpoico, agmatina, hidroxil-agmatina y L-tirosil-L-arginina)); N-alquil-N'-hidroxiguanidinas (tales como N-ciclopropil-N'-hidroxiguanidina y N-butil-N'-hidroxiguanidina), N-aril-N'-hidroxiguanidinas (tales como N-fenil-N'-hidroxiguanidina y sus derivados para-sustituidos que llevan los sustituyentes -F, -Cl, -metilo, -OH, respectivamente); derivados de guanidina, tales como 3-(trifluormetil)propilguanidina; y otros indicados por Cali y col. (2005, Current Topics in Medicinal Chemistry 5:721-736) y descritos en las referencias allí citadas;
(5) Compuestos que mejoran la transcripción eNOS: por ejemplo, los descritos en WO 02/064146, WO 02/064545, WO 02/064546 y WO 02/064565 y documentos de patente correspondientes, tales como US2003/0008915, US2003/0022935, US2003/0022939 y US2003/0055093. Otros potenciadores transcripcionales de eNOS, incluidos los descritos en US20050101599 (por ejemplo, ácido 2,2-difluorobenzo[1,3]dioxol-5-carboxílico indan-2-ilamida, y 4-fluoro-N-(indan-2-il)-benzamida), y los compuestos de Sanofi-Aventis AVE3085 y AVE9488 (CA Registry NO. 916514 70-0; Schafer y col., Journal of Thrombosis and Homeostasis 2005; volumen 3, suplemento 1: número abstracto P1487);
(6) activadores de sGC independientes de hemo independientes de NO incluidos, aunque no de forma limitativa: BAY 58-2667 (ver publicación de patente DE19943635)
HMR-1766 (ataciguat sodio, ver publicación de patente WO2000002851)
S 3448 (2-(4-cloro-fenilsulfonilamino)-4,5-dimetoxi-N-(4-(tiomorfolin-4-sulfonil)-fenil)-benzamida (ver las publicaciones de patente DE19830430 y WO2000002851)
y HMR-1069 (Sanofi-Aventis).
(7) Estimuladores de CGs dependientes de hemo incluidos, aunque no de forma limitativa:
YC-1 (ver publicaciones de patente EP667345 y DE19744026)
Riociguat (BAY 63-2521, Adempas, producto comercial, descrito en DE19834044)
Neliciguat (BAY 60-4552, descrito en WO 2003095451)
Vericiguat (BAY 1021189, alternativa clínica a Riociguat),
BAY 41-2272 (descrito en DE19834047 y DE19942809)
BAY 41-8543 (descrito en DE19834044)
Etriciguat (descrito en WO 2003086407)
CFM-1571 (ver publicación de patente WO2000027394)
A 344905, su análogo de acrilamida A-350619 y el análogo de aminopirimidina A-778935.
A-344905;
A-778935;
Compuestos descritos en una de las publicaciones: US20090209556, US8455638, US20110118282 (WO2009032249), US20100292192, US20110201621, US7947664, US8053455 (WO2009094242), US20100216764, US8507512, (WO2010099054) US20110218202 (WO2010065275), US20130012511 (WO2011119518), US20130072492 (WO2011149921), US20130210798 (WO2012058132) y otros compuestos descritos en Tetrahedron Letters (2003), 44(48): 8661-8663.
(8) Compuestos que inhiben la degradación de cGMP, tales como:
Inhibidores de PDE5, tales como, por ejemplo, Sildenafilo (Viagra®) y otros agentes relacionados, tales como Avanafilo, Lodenafilo, Mirodenafilo, citrato de sildenafilo (Revatio®), Tadalafilo (Cialis® o Adcirca®), Vardenafilo (Levitra®) y Udenafilo; Alprostadil; y Dipiridamol;
(9) Bloqueadores del canal de calcio, tales como:
Bloqueadores del canal de calcio de dihidropiridina: Amlodipino (Norvasc), Aranidipino (Sapresta), Azelnidipino (Calblock), Barnidipino (HypoCa), Benidipino (Coniel), Cilnidipino (Atelec, Cinalong, Siscard), Clevidipino (Cleviprex), Diltiazem, Efonidipino (Landel), Felodipino (Plendil), Lacidipino (Motens, Lacipil), Lercanidipino (Zanidip), Manidipino (Calslot, Madipine), Nicardipino (Cardene, Carden SR), Nifedipino (Procardia, Adalat), Nilvadipino (Nivadil), Nimodipino (Nimotop), Nisoldipino (Baymycard, Sular, Syscor), Nitrendipino (Cardif, Nitrepin, Bailotensin), Pranidipino (Acalas), Isradipino (Lomir);
Bloqueadores del canal de calcio de fenilalquilamina: Verapamilo (Calan, Isoptina)
Galopamilo (Procorum, D600);
Benzotiazepinas: Diltiazem (Cardizem);
Inhibidores del canal de calcio no selectivos tales como: mibefradilo, bepridilo y fluspirileno, fendilina;
(10) Antagonistas del receptor de endotelina (ERA): por ejemplo, el antagonista del receptor de la endotelina dual (ET<a>y ET<b>) Bosentan (comercializado como Tracleer®); Sitexentán, comercializado con el nombre Thelin®; El ambrisentán es comercializado como Letairis® en los EE. UU.; antagonista endotelino dual/no selectivo Actelion-1, que entró en fase de ensayos clínicos en 2008;
(11) Derivados o análogos de prostaciclina: por ejemplo, prostaciclina (prostaglandina I2), Epoprostenol (prostaciclina sintética, comercializado como Flolan®); Treprostinilo (Remodulin®), Iloprost (Ilomedin®), Iloprost (comercializado como Ventavis®); las formas orales e inhaladas de Remodulin® que están en fase de desarrollo; Beraprost, un prostanoide oral disponible en Japón y Corea del Sur;
(12) Antihiperlipidémicos, tales como: secuestrantes de ácido biliar (por ejemplo, Colestiramina, Colestipol, Colestilano y Colesevelam); estatinas, tales como Atorvastatina, Simvastatina, Lovastatina, Fluvastatina, Pitavastatina, Rosuvastatina y Pravastatina; inhibidores de absorción de colesterol tales como Ezetimiba; otros agentes reductores de lípidos, tales como éster etílico de Icosapent, ésteres etílicos de ácido graso omega-3, Reducol; derivados de ácido fíbrico tales como Clofibrato, Bezafibrato, Clinofibrato, Gemfibrozilo, Ronifibrato, Binifibrato, Fenofirate, Ciprofibrato, fenofibrato de Colina; derivados del ácido nicotínico tales como Acipimox y Niacina; también combinaciones de estatinas, niacina, suplementos de inhibición de la absorción del colesterol intestinal (ezetimib y otros) y fibratos; terapias antiplaquetarias, tales como el bisulfato de clopidogrel;
(13) Anticoagulantes, tales como los siguientes tipos:
• Cumarinas (antagonistas de Vitamina K): Warfarin® (Coumadina) utilizada principalmente en los Estados Unidos y en Reino Unido; Acenocoumarol® y Phenprocoumon®, utilizados principalmente en otros países Fenindiona®; • Heparina y sustancias derivadas, tales como: Heparina; heparina de bajo peso molecular, Fondaparinux e Idraparinux;
• inhibidores directos de la trombina tales como: Argatrobán, Lepirudina, Bivalirudina y Dabigatrán; Ximelogatrán (Exanta®) no aprobado en los Estados Unidos;
• Activadores del plasminógeno tisular, usados para disolver coágulos y desbloquear arterias, tales como alteplasa; (14) Fármacos antiplaquetarios: por ejemplo, tienopiridinas, tales como Lopidogrel y Ticlopidina; Dipiridamol; Aspirina; (15) inhibidores de ACE, por ejemplo, los siguientes tipos:
• Agentes que contienen sulfhidrilo, tales como Captoprilo (nombre comercial Capoten®), el primer inhibidor de ACE y Zofenprilo;
• Agentes que contienen dicarboxilato, tales como Enalaprilo (Vasotec/Renitec®); Ramiprilo (Altace/Tritace/Ramace/Ramiwin®); Quinaprilo (Accupril®), Perindoprilo (Coversil/Aceon®); Lisinoprilo (Lisodur/Lopril/Novatec/Prinivil/Zestril®) y Benazeprilo (Lotensin®);
• Agentes que contienen fosfonato tales como: Fosinoprilo;
• Inhibidores de ACE de origen natural, tales como: Casokininas y lactokininas, que son productos de descomposición de caseína y suero que se producen naturalmente después de la ingestión de productos lácteos, especialmente leche cultivada; Los lactotripéptidos Val-Pro-Pro y Ile-Pro-Pro producidos por el probióticoLactobacillus helveticuso derivados de caseína también tienen funciones inhibitorias de ACE y funciones antihipertensivas;
• Otros inhibidores de ACE, tales como Alaceprilo, Delaprilo, Cilazaprilo, Imidaprilo, Trandolaprilo, Temocaprilo, Moexiprilo, Espiraprilo,
(16) Terapia de suplemento de oxígeno;
(17) Bloquadores Beta, tales como los siguientes tipos:
• Agentes no selectivos: Alprenolol®, Bucindolol®, Carteolol®, Carvedilol® (tiene actividad bloqueadora a adicional), Labetalol® (tiene actividad bloqueadora a adicional), Nadolol®, Penbutolol® (tiene actividad simpatomimética intrínseca), Pindolol® (tiene actividad simpatomimética intrínseca), Oxprenonol, Acebutolol, Sotalol, Mepindolol, Celiprolol, Arotinolol, Tertatolol, Amosulalol, Nipradilol, Propranolol® y Timolol®;
• p-i-Agentes selectivos: Acebutolol® (tiene actividad simpatomimética intrínseca), Atenolol®, Betaxolol®, Bisoprolol®, Celiprolol®, hidrocloruro de dobutamina, maleato de irsogladina, Carvedilol, Talinolol, Esmolol®, Metoprolol® y Nebivolol®;
• p2-Agentes selectivos: Butaxamina® (ligera actividad agonista a-adrenérgica);
(18) Agentes antiarrítmicos tales como los siguientes tipos:
• Tipo I (bloqueadores del canal de sodio): Quinidina, Lidocaína, Fenitoína, Propafenona
• Tipo III (bloqueadores del canal de potasio): Amiodarona, Dofetilida, Sotalol
• Tipo V: Adenosina, Digoxina
(19) Diuréticos tales como: Diuréticos de tiazida, por ejemplo, Clorotiazida, Clotalidona e Hidroclorotiazida, Bendroflumetiazida, Ciclopentiazida, Meticlotiazida, Politiazida, Quinetaazona, Xipamida, Metolazona, Indapamida, Cicletanina; Diuréticos del asa, tales como Furosemida y Toresamida; diuréticos ahorradores de potasio, tales como Amilorida, Espironolactona, Canrenoato potasio, Eplerenona y Triamtereno; combinaciones de estos agentes; otros diuréticos tales como Acetazolamida y Carperitida
(20a) Vasodilatadores de acción directa, tales como el clorhidrato de hidralazina, diazóxido, nitroprusiato de sodio, cadralazina; otros vasodilatadores tales como isosorbide y 5-mononitrato de isosorbide;
(20b) Vasodilatadores exógenos, tales como
• Adenocard®, un agonista de adenosina, principalmente utilizado como antiarrítmico;
• Bloqueadores alfa (que bloquean el efecto vasoconstrictor de la adrenalina):
Antagonistas del adrenoreceptor Alfa-1 tales como Prazosina, Indoramin, Urapidilo, Bunazosina, Terazosina, Doxazosina
• Péptido natriurético atrial (ANP);
• Etanol;
• Los inductores de histamina, que complementan las proteínas C3a, C4a y C5a actúan activando la liberación de histamina de los mastocitos y los granulocitos basófilos;
• El tetrahidrocanabinol (THC), sustancia química activa principal de la marihuana que tiene efectos ligeramente vasodilatadores;
• La papaverina, un alcaloide encontrado en papaver somniferum, la amapola del opio;b
(21) Broncodilatadores: existen dos tipos principales de broncodilatadores, agonistas p2 y anticolinérgicos, ilustrados a continuación:
• Agonistas p2: El Salbutamol® o albuterol (nombre comercial común: Ventolin) y el Terbutaline® son agonistas p2 de acción rápida para un alivio rápido de los síntomas de la EPOC. Agonistas p2 de acción prolongada (LABA) tales como Salmeterol® y Formoterol®;
• anticolinérgicos: El Ipratropio® es el fármaco anticolinérgico de acción rápida más ampliamente prescrito. El Tiotropio® es el fármaco anticolinérgico de acción prolongada más ampliamente prescrito para la EPOC;
• La Teofilina®, un broncodilatador e inhibidor de fosfodiesterasa;
(22) Corticosteroides: tales como beclometasona, metilprednisolona, betametasona, prednisona, prednisolona, triamcinolona, fexametasona, fluticasona, flunisolida e hidrocortisona, y análogos de corticosteroide tales como budesonida
(23) Suplementos dietéticos tales como, por ejemplo: aceites omega-3; ácido fólico, niacina, zinc, cobre, ginseng rojo coreano, ginkgo, corteza de pino,Tribulus terrestris,arginina,Avena sativa, Epimedium,raíz de maca, muira puama,Serenoa repens,y polen de flor sueca; vitamina C, vitamina E, vitamina K2; Suplementos de testosterona, parche transdérmico de testosterona; Zoraxel, Naltrexone, Bremelanotide (antiguamente PT-141), Melanotan II, hMaxi-K; Prelox: una mezcla/combinación de propriedad protegida de ingredientes naturales, aspartato de L-arginina y picnogenol;
(24) antagonistas de receptores PGD2 incluidos, aunque no de forma limitativa, los compuestos de actividad antagonista de PGD2 descritos en las solicitudes de patente de Estados Unidos US20020022218, US20010051624, y US20030055077, solicitudes publicadas PCT W09700853, W09825919, WO03066046, WO03066047, WO03101961, WO03101981, WO04007451, WO0178697, WO04032848, WO03097042, WO03097598, WO03022814, WO03022813, y WO04058164, solicitudes de patente europea EP945450 y EP944614, y las indicadas en: Torisuycol. 2004Bioorg Med Chem Lett14:4557, Torisuy col. 2004BioorgMed Chem Lett200414:4891, yTorisu y col. 2004Bioorg & Med Chem2004 12:4685;
(25) Inmunosupresores tales como ciclosporina (ciclosporina A, Sandimmune® nebucal®), tacrolimus (FK-506, Prograf®), rapamicina (sirolimus, Rapamune®) y otros inmunosupresores de tipo FK-506 y micofenolato, por ejemplo, mofetilo de micofenolato (CellCept®);
(26) Antiasmáticos no esteroideos asmáticos tales como agonistas p2 (por ejemplo, terbutalina, metaproterenol, fenoterol, isoetarina, albuterol, salmeterol, bitolterol y pirbuterol) y combinaciones de agonista p2-corticosteroide (por ejemplo, salmeterol-fluticasona (Advair®), formoterol-budesónida (Symbicort®)), teofilina, cromolina, cromolina sodio, nedocromilo, atropina, ipratropio, bromuro de ipratropio, inhibidores de la biosíntesis de leucotrienos (zileutón, BAY1005);
(27) Agentes antiinflamatorios no esteroideos (AINE), tales como derivados de ácido propiónico (por ejemplo, alminoprofeno, benoxaprofeno, ácido buclóxico, carprofeno, fenbufeno, fenoprofeno, fluprofeno, flurbiprofeno, ibuprofeno, indoprofeno, ketoprofeno, miroprofeno, naproxeno, oxaprozina, pirprofeno, pranoprofeno, suprofeno, ácido tiaprofénico y tioxaprofeno), derivados de ácido acético (por ejemplo, indometacina, acematacina, alclofenaco, clidanaco, diclofenaco, fenclofenaco, ácido fenclózico, fentiazaco, furofenaco, ibufenaco, isoxepaco, oxpinac, sulindaco, tiopinaco, tolmetina, zidometacina y zomepiraco), derivados de ácido fenámico (por ejemplo, ácido flufenámico, ácido meclofenámico, ácido mefenámico, ácido niflúmico y ácido tolfenámico), derivados de ácido bifenilcarboxílico (por ejemplo, diflunisal y flufenisal), oxicamos (por ejemplo, isoxicam, piroxicam, sudoxicam y tenoxicam), salicilatos (por ejemplo, ácido acetilsalicílico y sulfasalazina) y pirazolonas (por ejemplo, apazona, bezpiperilona, feprazona, mofebutazona, oxifenbutazona y fenilbutazona);
(28) Inhibidores de ciclooxigenasa-2 (COX-2), tales como celecoxib®(Celebrex), rofecoxib®(Vioxx), valdecoxib, etoricoxib, parecoxib y lumiracoxib;
(analgésicos opioides tales como codeína, fentanilo, hidromorfona, levorfanol, meperidina, metadona, morfina, oxicodona, oximorfona, propoxifeno, buprenorfina, butorfanol, dezocina, nalbufina y pentazocina; y
(29) Agentes antidiabéticos tales como insulina y miméticos de insulina, sulfonilureas (por ejemplo, Gliburida, Glibenclamida, Glipizida, Gliclazida, Gliquidona, Glimepirida, Meglinatide, Tolbutamida, Clorpropamida, Acetohexamida, Tolazamida), biguanidas, por ejemplo, metformina (Glucophage®), inhibidores de a-glucosidasa (tales como Acarbosa, Epalrestat, Voglibosa, Miglitol), compuestos de tiazolidinona, por ejemplo, rosiglitazona (Arandia®), troglitazona (Rezulin®), ciglitazona, pioglitazona (Actos®) y englitazona; sensibilizantes de insulina tales como Pioglitazona y Rosiglitazona; secretagogos de insulina tales como Repaglinida, Nateglinida y Mitilinida; miméticos de incretina tales como Exanatida y Liraglutida; análogos de amilina tales como Pramlintida; agentes para reducir la glucosa tales como picolinato de cromo (opcionalmente combinado con biotina); inhibidores de dipeptidil peptidasa IV tales como sitagliptina, vildagliptina, saxagliptina, alogliptina y linagliptina; vacunas actualmente en desarrollo para el tratamiento de la diabetes; AVE-0277, Alum-GAD, Bh T-3021, IBC-VS01; terapias dirigidas a citoquinas en desarrollo para el tratamiento de la diabetes tales como Anakinra, Canakinumab, Diacerein, Gevokizumab, LY-2189102, MABP-1, GIT-027; fármacos en desarrollo para el tratamiento de la diabetes:
(30) Agentes de aumento del colesterol HDL, tales como Anacetrapib, MK-524, CER-001, DRL-17822, Dalcetrapib, JTT-302, RVX-000222, TA-8995;
(31) Fármacos contra la obesidad como el clorhidrato de metanfetamina, hidrocloruro de anfepramona (Tenuate®), Fentermina (Ionamin®), hidrocloruro de benzfetamina (Didrex®), tartrato de fendimetrazina (Bontril®, Prelu-2®, Plegine®), Mazindol (Sanorex®), Orlistat (Xenical®), clorhidrato de Sibutramina monohidratado (Meridia®, Reductil®), Rimonabant (Acomplia®), Amfepramona, picolinato de cromo, RM-493, TZP-301; combinación tal como fentermina/topiramato, bupropión/naltrexona, sibutramina/metformina, bupropión SR/zonisamida SR, salmeterol, xinafoato/propionato de fluticasona; clorhidrato de lorcaserina clorhidrato, fentermina/topiramato, bupropión/naltrexona, cetilistat, exenatida, KI-0803, liraglutida, clorhidrato de metformina, sibutramina/metformina, 876167, ALS-L-1023, bupropión SR/zonisamida SR, CORT-108297, canagliflozina, picolinato de cromo, GSK-1521498, LY-377604, metreleptina, obinepitida, P-57AS3, PSN-821, xinafoato de salmeterol/propionato de fluticasona, tungstato de sodio, somatropina (recombinante), TM-30339, TTP-435, tesamorelina, tesofensina, velneperita, zonisamida, BMS-830216, ALB-127158, AP-1030, ATHX-105, AZD-2820, AZD-8329, hemioxalato de beloranib, CP-404, HPP-404, ISIS-FGFR4Rx, insulinotropina, KD-3010PF, 05212389, PP-1420, PSN-842, Peptide YY3-36, Resveratrol, S-234462; S-234462, sobetiroma, TM-38837, tetrahidrocannabivarina, ZYO-1, beta-lapachona;
(32) bloqueadores de receptores de angiotensina tales como losartán, valsartán, candesartán cilexetilo, eprosartán, irbesartán, telmisartán, olmesartán medoxomil, azilsartán medoxomil;
(33) Inhibidores de renina tales como hemifumarato de Aliskiren;
(34) Agonistas del alfa-2-adrenoceptor de acción central, tales como metildopa, clonidina, guanfacina;
(35) Bloqueadores neuronales adrenérgicos, tales como guanetidina, guanadrel;
(36) Agonistas del receptor Imidazolina I-1, tales como hidrógenofosfato de rimenidina y clorhidrato de moxonidina hidratado;
(37) Antagonistas de aldosterona tales como espironolactona y eplerenona
(38) Activadores del canal de potasio tales como pinacidilo
(39) Agonistas de dopamina D1, tales como mesilato de fenoldopam; Otros agonistas de dopamina, tales como ibopamina, dopexamina y docarpamina;
(40) Antagonistas de 5-HT2, tales como katanserina;
(41) Los fármacos actualmente en desarrollo para el tratamiento de la hipertensión arterial:
(42) Antagonistas de vasopresina tales como Tolvaptan;
(43) Sensibilizantes del canal de calcio tales como Levosimendán o activadores tales como Nicorandil;
(44) Inhibidores de PDE-3 tales como Amrinona, Milrinona, Enoximona, Vesnarinona, Pimobendán, Olprinona; (45) Activadores de adenilatociclasa, tales como clorhidrato de Colforsin dapropato;
(46) Agentes inotrópicos positivos tales como Digoxina y Metildigoxina; agentes metabólicos cardiotónicos, tales como Ubidecarenona; péptidos natriuréticos del cerebro, tales como Nesiritida;
(47) Fármacos actualmente en desarrollo para el tratamiento de la insuficiencia cardíaca:
(48) Fármacos actualmente en desarrollo para el tratamiento de la hipertensión pulmonar:
(49) Fármacos actualmente en desarrollo para el tratamiento de la disfunción sexual femenina:
(50) Fármacos utilizados para el tratamiento de la disfunción eréctil, tal como Alprostadil, Aviptadil, mesilato de fenilamina, Weige, Alprostadil;
(51) Fármacos actualmente en el desarrollo para el tratamiento de la disfunción sexual masculina:
(51) Fármacos en desarrollo para el tratamiento de la apnea del sueño:
(52) Fármacos actualmente en desarrollo para el tratamiento del síndrome metabólico:
(53) Fármacos contra la obesidad:
(54) Medicamentos usados para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer: por ejemplo, inhibidores de la colinesterasa prescritos para la enfermedad de Alzheimer leve a moderada, incluidos Razadyne® (galantamina), Exelon® (rivastigmina) y Aricept® (donepezil), Cognex® (tacrina); Namenda® (memantina), un antagonista de D-aspartato de N-metilo (NMDA) y Aricept®, prescrito para tratar la enfermedad de Alzheimer de moderada a grave; vitamina E (un antioxidante).
(55) Antidepresivos: antidepresivos tricíclicos tales como amitriptilina (Elavil®), desipramina (Norpramin®), imipramina (Tofranil®), amoxapina (Asendin®), nortriptilina; inhibidores selectivos de la recaptación de serotonina (SSRI) tales como paroxetina (Paxil®), fluoxetina (Prozac®), sertralina (Zoloft®), y citralopram (celexa®); y otros tales como doxepina (sinecuan®) y trazodona (desarrel®); SNRI (por ejemplo, venlafaxina y reboxetina); antidepresivos dopaminérgicos (por ejemplo, bupropiona y amineptina).
(56) Agentes neuroprotectores: por ejemplo, memantina, L-dopa, bromocriptina, pergolida, talipexol, pramipexol, cabergolina, agentes neuroprotectores actualmente en investigación, incluidos fármacos antiapoptóticos (CEP 1347 y CTCT346), lazaroides, agentes bioenergéticos, antiglutamatérgicos y receptores de dopamina. Otros agentes neuroprotectores clínicamente evaluados son, por ejemplo, los inhibidores de monoamina oxidasa B selegilina y rasagilina, agonistas de dopamina, y la coenzima Q10 reforzadora mitocondrial de complejo I.
(57) Medicamentos antipsicóticos: por ejemplo, ziprasidona (Geodon™), risperidona (Risperdal™) y olanzapina (Zyprexa™).
Kits
Los compuestos y las formulaciones farmacéuticas que se describen en la presente descripción pueden estar contenidos en un kit. El kit puede incluir dosis únicas o múltiples de dos o más agentes, cada uno de ellos envasado o formulado individualmente, o dosis únicas o múltiples de dos o más agentes envasados o formulados en combinación. Por tanto, uno o más agentes pueden estar presentes en el primer recipiente, y el kit puede incluir opcionalmente uno o más agentes en un segundo recipiente. El recipiente o recipientes se colocan dentro de un envase, y el envase puede incluir opcionalmente instrucciones de administración o dosificación. Un kit puede incluir componentes adicionales, tales como jeringas u otros medios para administrar los agentes, así como diluyentes u otros medios para la formulación. Por lo tanto, los kits pueden comprender: a) una composición farmacéutica que comprende un compuesto descrito en la presente descripción y un portador, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable; y b) un recipiente o envase. Los kits pueden comprender, opcionalmente, instrucciones que describen un método para usar las composiciones farmacéuticas en uno o más de los métodos descritos en la presente descripción (por ejemplo, prevenir o tratar una o más de las enfermedades y trastornos descritos en la presente descripción). El kit puede comprender, opcionalmente, una segunda composición farmacéutica que comprende uno o más agentes adicionales descritos en la presente descripción para el uso en terapia auxiliar, un portador, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable. La composición farmacéutica que comprende el compuesto descrito en la presente descripción y la segunda composición farmacéutica contenida en el kit puede combinarse, opcionalmente, en la misma composición farmacéutica.
Un kit incluye un recipiente o envase para contener las composiciones farmacéuticas y puede incluir también recipientes divididos como una botella dividida o un paquete de lámina dividida. El recipiente puede ser, por ejemplo, una caja de papel o cartón, una botella o vial de vidrio o plástico, una bolsa resellable (por ejemplo, para contener un “ repuesto” de comprimidos para colocarlos en un recipiente diferente), o un envase de burbuja o blíster con dosis individuales para presionar fuera del paquete según un programa terapéutico. Es factible que se puedan utilizar más de un recipiente juntos en un solo envase para comercializar una sola forma de dosificación. Por ejemplo, los comprimidos pueden estar contenidos en una botella que a su vez está contenida dentro de una caja.
Un ejemplo de un kit es el denominado envase de burbuja o blíster. Los envases de burbuja o blíster son muy conocidos en la industria del envasado y se usan ampliamente para el envasado de formas farmacéuticas unitarias (comprimidos, cápsulas, y similares). Los envases de burbuja o blíster consisten, generalmente, en una hoja de material relativamente rígido cubierto con una lámina de un material plástico preferiblemente transparente. Durante el proceso de envasado, se forman cavidades en la lámina de plástico. Las cavidades tienen el tamaño y la forma de pastillas o cápsulas individuales para envasar o pueden tener un tamaño y forma para acomodar múltiples comprimidos y/o cápsulas para envasar. A continuación, las pastillas o cápsulas se colocan en las cavidades correspondientes y la hoja de material relativamente rígido se sella contra la lámina de plástico en la cara de la lámina opuesta a la dirección en la que se formaron las cavidades. En consecuencia, las comprimidos o cápsulas se sellan individualmente o de forma conjunta, según se desee, en las cavidades entre la lámina de plástico y la hoja. Preferiblemente la resistencia de la lámina es tal que los comprimidos o cápsulas pueden ser retirados del envase de burbuja o blíster aplicando manualmente presión sobre las cavidades de modo que se forma una abertura en la lámina en el lugar de la cavidad. A continuación, el comprimido o cápsula se puede(n) retirar a través de la abertura.
Puede ser deseable proporcionar un medio escrito para evitar olvidos que contenga información y/o instrucciones para el médico, farmacéutico o individuo acerca de cuándo tomar la medicación. Una “ dosis diaria” puede ser un solo comprimido o cápsula o varios comprimidos o cápsulas para tomar un día determinado. Cuando el kit contiene composiciones aparte, una dosis diaria de una o más composiciones del kit puede consistir en un comprimido o cápsula, mientras que una dosis diaria de otra o más composiciones del kit puede consistir en varios comprimidos o cápsulas. Un kit puede adoptar la forma de un dispensador diseñado para dispensar las dosis diarias a la vez en su orden de uso previsto. El dispensador puede equiparse con un medio para evitar olvidos para facilitar adicionalmente el cumplimiento del régimen. Un ejemplo de dicho medio para evitar olvidos es un contador mecánico que indica el número de dosis diarias que han sido dispensadas. Otro ejemplo de dicho medio para evitar olvidos es una memoria de microchip alimentada por batería acoplada con una lectura de cristal líquido o señal recordatoria audible que, por ejemplo, lee la fecha en que se ha tomado la última dosis diaria y/o recuerda cuándo se debe tomar la siguiente dosis.
Ejemplos
Como se usa en la presente descripción, todas las abreviaturas, símbolos y convenciones son conforme a las usadas en la literatura científica contemporánea. Véase, por ejemplo, Janet S. Dodd, ed., The ACS Stile Guide: A Manual for Authors and Editors, 2a ed., Washington, D.C.: American Chemical Society, 1997.
Ejemplo 1: Síntesis de los compuestos de la Tabla 1A, Tabla 1B, Tabla 1C y Tabla 1D.
Procedimiento general A
Formación de enolato de diona:A una solución de cetona A en THF enfriada a -78 °C, se añadió LiHMDS (por ejemplo, 0,9 equiv, 1,0 M en tolueno) gota a gota mediante una jeringa. La reacción se dejó calentar hasta 0 °C, después se cargó con oxalato de dietilo (1,2 equiv). En aquel momento, la reacción se templó a temperatura ambiente y se agitó a esta temperatura hasta que se consideró completa (por ejemplo, utilizando análisis por TLC o LC/MS). Una vez completada la reacción (el tiempo de reacción era normalmente de 45 minutos), se utilizó el producto enolato B de diona “tal cual” en la etapa 2 , es decir, la etapa de ciclización, sin más purificación.
Etapa 2:
Formación de pirazol:Se diluyó el enolato B de diona con etanol y se cargó consecutivamente con HCl (por ejemplo, 3 equiv., solución 1,25 M en etanol) e hidrato de arilhidrazina (por ejemplo, 1,15 equiv). La mezcla de reacción se calentó a 70 °C y se agitó a esta temperatura hasta que la ciclización se consideró completa (por ejemplo, mediante análisis por LC/Ms , de forma típica 30 minutos). Una vez completa, la mezcla de reacción se trató cuidadosamente con bicarbonato de sodio sólido (por ejemplo, 4 equiv.) y se diluyó con diclorometano y agua. Las capas se separaron y la capa acuosa se diluyó adicionalmente con agua antes de la extracción con diclorometano (3 veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y se concentraron al vacío. El pirazol C resultante se purificó a continuación mediante cromatografía de SiO2 utilizando un gradiente adecuado de EtOAc en hexanos.
Etapa 3:
Formación de amidina:A una suspensión de NH4Cl (por ejemplo, 5 equiv.) en tolueno enfriada a 0 °C se añadió AlMe3 (por ejemplo, 5 equiv., solución de 2,0 M en tolueno) gota a gota con una jeringa. La reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se agitó a esta temperatura hasta que no se observó más burbujeo. Se añadió pirazol C en 1 parte a la mezcla de reacción, se calentó a 110 °C, y se agitó a esta temperatura hasta que se consideró completa (por ejemplo, utilizando análisis por TLC o LC/MS). Una vez completa, la reacción se enfrió, se trató con exceso de metanol y se agitó vigorosamente durante 1 hora a temperatura ambiente. La suspensión espesa se filtró, y la torta sólida resultante se lavó con metanol. El filtrado se concentró al vacío y los sólidos resultantes se resuspendieron en una mezcla de disolvente de acetato de etilo:alcohol isopropílico = 5:1. La reacción se trató adicionalmente con solución de carbonato de sodio saturado y se agitó durante 10 minutos antes de separar las capas. La capa acuosa se extrajo con la mezcla de disolvente de acetato de etilo:alcohol isopropílico = 5:1 (3 veces), y los materiales orgánicos combinados se lavaron con salmuera. Las sustancias orgánicas se secaron adicionalmente sobre MgSO4, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La amidina D resultante se usó tal cual en etapas posteriores sin purificación adicional.
Etapa 4:
Formación de pirimidona:La amidina D se suspendió en etanol y se agitó vigorosamente a 23 °C para favorecer la solvatación completa. La reacción se trató adicionalmente con 3-etoxi-2-fluoro-3-oxoprop-1-en-1-olato de sodio (por ejemplo, 3 equiv.), y el matraz se equipó con un condensador de reflujo. La reacción se colocó en un baño de aceite calentado previamente mantenido a 90 °C y se agitó hasta que se observó el consumo total de material de partida mediante LC/MS (los tiempos de reacción fueron de forma típica de 1 h). El contenido se enfrió a 23 °C, y la mezcla de reacción se acidificó con HCl (por ejemplo, 3 equiv., 1,25 ml de solución en EtOH). La mezcla se agitó durante 30 minutos y la mayor parte del disolvente se retiró al vacío. El contenido se resuspendió en éter y agua (mezcla 1:1), y la suspensión resultante se agitó durante 20 min. La suspensión se filtró al vacío, y la torta sólida se aclaró con agua y éter adicionales y se secó al vacío alto durante la noche. La pirimidona E resultante se usó tal cual en etapas posteriores sin purificación adicional.
Procedimiento general B
Una solución de nucleófilo de tipo amino (3 equiv.), trietilamina (10 equiv.), y producto intermedio 1 (1 equiv.) se agitó en dioxano y agua (relación 2:1) a 90 °C hasta que se observó por LC/MS el consumo completo de material de partida. La solución se diluyó con ácido clorhídrico 1N acuoso y diclorometano. Las capas se separaron a continuación y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación produjo el producto deseado.
Procedimiento general C
Una mezcla de producto intermedio 2 (este producto intermedio se describe en la solicitud de patente publicada previamente WO2012/3405 A1; 1 equivalente) y ácido carboxílico (1,1 equivalente) en W,W-dimetilformamida se trató con trietilamina (4 equivalentes) seguido de una solución de acetato de etilo a 50 % en acetato de etilo de anhídrido propilfosfónico (T3P, 1,4 equivalentes). La reacción se calentó hasta 80 °C durante 24 h, después de lo cual la reacción se diluyó con agua y solución de ácido clorhídrico 1N. El contenido se extrajo con diclorometano y a continuación acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. La purificación produjo el producto deseado.
Síntesis del producto intermedio 1
Una suspensión de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-
-pirimidin-4-ol (generado mediante el procedimiento general A, utilizando 1-(isoxazol-3-il)etanona en la etapa 1 y 2-fluorobenzilhidrazina en la etapa 2, 11,5 g, 32,4 mmol, 1 equiv.) en tricloruro de fosforilo (60,3 ml, 647 mmol, 20 equiv.) a 60 °C durante 3 h. La solución se enfrió a 23 °C, y se vertió poco a poco en el transcurso de 15 min a agua con baño de hielo (800 ml) con agitación. Después de completar la adición, el contenido se agitó durante 15 min más y se diluyó con diclorometano (500 ml). Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 x 200 ml). Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío obteniéndose el producto intermedio 1 (12,5 g, 103 % rendimiento) como un sólido de color tostado.
1H RMN (500 MHz, DMSO-cfe) 89,11 (d, 1 H), 9,04 (s, 1 H), 7,71-7,68 (m, 1 H), 7,37-7,30 (m, 2 H), 7,25-7,20 (m, 1 H), 7,12 (t, 1 H), 6,92 (td, 1 H), 5,95 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-248
Se calentó una mezcla del producto intermedio 1 (48 mg, 1 equiv.), ácido (R)-3-metil-2-((metilamino)metil)butanoico, (99 mg, sal TFA, 3 equiv.), y trietilamina (0,177 ml, 10 equiv.) a 100 °C como una solución en dioxano/agua (2:1) durante 20 h, siguiendo el procedimiento general B. El contenido se trató con HCl 3N, y se repartió entre una mezcla 1:1 de diclorometano y agua. Las capas se separaron y la capa acuosa se trató con una pequeña cantidad de cloruro de sodio. La capa acuosa se extrajo a continuación con diclorometano (3 veces), y las partes orgánicas se combinaron y lavaron con salmuera. La mezcla se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-248 (20 mg, 93 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, MeOD) 88,74 (d, 1 H), 8,09 (d, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,29-7,23 (m, 1 H), 7,10-7,05 (m, 1 H), 7,02 (td, 1 H), 6,87-6,83 (m, 1 H), 6,83 (d, 1 H), 5,98-5,89 (m, 2 H), 4,15 (dd, 1 H), 3,81 (dd, 1 H), 3,33 (d, 3 H), 2,72-2,65 (m, 1 H), 1,94 (dq, 1 H), 1,09 (d, 3 H), 1,01 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-250
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 1-((metilamino)metil)ciclopropanocarboxílico (como la sal de TFA) fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-250 (40 mg, 54 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, MeOD) 88,74 (d, 1 H), 8,07 (d, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,29-7,23 (m, 1 H), 7,11-7,05 (m, 1 H), 7,03 (td, 1 H), 6,88 (d, 1 H), 6,85 (td, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4,14 (s, 2 H), 3,35 (d, 3 H), 1,30-1,25 (m, 2 H), 1,07-1,03 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-252
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-etil-2-((metilamino)metil)butanoico (como la sal de TFA) fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-252 (33 mg, 39 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,80 (d, 1 H), 8,25 (d, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,32-7,26 (m, 1 H), 7,12-7,06 (m, 1 H), 7,04 (t, 1 H), 6,94 (t, 1 H), 6,91 (d, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 4,20 (s, 2 H), 3,46 (d, 3 H), 1,86-1,77 (m, 2 H), 1,68 (dq, 2 H), 0,91 (t, 6 H).
Compuesto de referencia I-253
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-3-metil-2-((metilamino)metil)butanoico (como la sal de TFA) fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-253 (26 mg, 64 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,74 (d, 1 H), 8,08 (d, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,28-7,22 (m, 1 H), 7,10-7,05 (m, 1 H), 7,02 (t, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 6,82 (d, 1 H), 5,97-5,88 (m, 2 H), 4,15 (dd, 1 H), 3,79 (dd, 1 H), 3,32 (d, 3 H), 2,70-2,64 (m, 1 H), 1,93 (dq, 1 H), 1,08 (d, 3 H), 1,01 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-260
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-bencilpiperidin-4-carboxílico fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto de referencia I-260 deseado (26 mg, 64 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,74 (d, 1 H), 8,11 (d, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 7,29-7,22 (m, 3 H), 7,22-7,15 (m, 3 H), 7,11 7,06 (m, 1 H), 7,05-7,00 (m, 1 H), 6,91 (d, 1 H), 6,84-6,79 (m, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,57 (d, 2 H), 3,29-3,23 (m, 2 H), 2,90 (s, 2 H), 2,19 (d, 2 H), 1,68 - 1,61 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-262
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2-metilpiperidin-2-carboxilato de etilo fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 19 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-75 % acetonitrilo/agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-262 (1,1 mg, 8 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,82 (d, 1 H), 8,33 (d, 1 H), 7,47 (s, 1 H), 7,32-7,26 (m, 1 H), 7,12-7,07 (m, 1 H), 7,05 (t, 1 H), 6,92 (t, 1 H), 6,88 (d, 1 H), 6,03-5,95 (m, 2 H), 4,32-4,24 (m, 1 H), 3,63 (dt, 1 H), 2,14 (ddd, 1 H), 2,01-1,79 (m, 5 H), 1,76 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-265
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-fenilpirrolidin-3-carboxílico fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 24 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-265 (29 mg, 45 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,74 (d, 1 H), 8,11 (d, 1 H), 7,51-7,44 (m, 3 H), 7,40-7,36 (m, 2 H), 7,32-7,23 (m, 2 H), 7,12-7,06 (m, 1 H), 7,03 (t, 1 H), 6,92 (s, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,03-3,96 (m, 1 H), 3,91 (d, 1 H), 3,87 (br. s., 1 H), 3,07-3,00 (m, 1 H), 2,41-2,32 (m, 1 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-267
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3,3-dimetilpiperidin-2-carboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 18 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-267 (15 mg, 17 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,81 (d, 1 H), 8,35 (d, 1 H), 7,57 (s, 1 H), 7,32-7,26 (m, 1 H), 7,12-7,07 (m, 1 H), 7,04 (t, 1 H), 6,94-6,90 (m, 2 H), 5,99 (s, 2 H), 4,99 (s, 1 H), 4,62 (d, 1 H), 3,86 (td, 1 H), 2,07-1,96 (m, 1 H), 1,95-1,87 (m, 1 H), 1,81-1,75 (m, 1 H), 1,50 (d, 1 H), 1,22 (s, 3 H), 1,17 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-269
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-aminobiciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico (como la sal de TFA) fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 18 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio.
El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-269 (11 mg, 16 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD 88,76 (d, 1 H), 8,08 (d, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,30-7,23 (m, 1 H), 7,12-7,06 (m, 1 H), 7,04 (t, 1 H), 6,96 (d, 1 H), 6,91 (t, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 2,53 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-80
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la L-fenilalanina fue el reactivo de amina y el contenido se calentó hasta 90 °C durante 48 h como una solución en THF/agua (2:1). El contenido se concentró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-75 % acetonitrilo/agua proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-80 (1,3 mg, 4 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3ODMeOD) 88,81 (s, 1 H), 8,20 (d, 1 H), 7,51-7,48 (m, 1 H), 7,34- 7,26 (m, 3 H), 7,22 (t, 2 H), 7,17-7,03 (m, 3 H), 6,96 (s, 1 H), 6,90 (t, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 5,36-5,29 (m, 1 H), 3,48 (d, 1 H), 3,24-3,18 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-81
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el L-triptófano fue el reactivo de amina y el contenido se calentó hasta 90 °C durante 48 h como una solución en THF/agua (2:1). El contenido se concentró al vacío y después se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-75 % acetonitrilo/agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-81 (7,3 mg, 18 %) como un sólido marrón.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,86-8,83 (m, 1 H), 8,16 (d, 1 H), 7,69 (d, 1 H), 7,33-7,27 (m, 1 H), 7,16 (d, 1 H), 7,13 7,04 (m, 4 H), 7,01-6,96 (m, 1 H), 6,95-6,88 (m, 3 H), 5,96 (s, 2 H), 5,51 (dd, 1 H), 3,74-3,67 (m, 1 H), 3,30-3,25 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-85
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 1-aminociclopropanocarboxílico fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 90 °C durante 48 h como una solución en THF/agua (2:1). El contenido se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-95 % acetonitrilo/agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-85 (7,3 mg, 18 %) como un aceite transparente.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,83 (d, 1 H), 8,38 (d, 1 H), 7,47 (s, 1 H), 7,34-7,28 (m, 1 H), 7,13-7,04 (m, 2 H), 6,99 6,95 (m, 2 H), 6,02 (s, 2 H), 1,84-1,79 (m, 2 H), 1,43-1,38 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-93
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el (3-aminooxetan-3-il)metanol fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 170 °C durante 15 min en el microondas como una solución en THF/agua (2:1). El contenido se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-75 % acetonitrilo/agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-93 (0,6 mg, 4 %) como un aceite transparente.
<1>H -R M N (500 M H z, C D<3>O D ) 8 8 ,85 (d, 1 H), 8 ,55 (s, 1 H), 7 ,69 (s, 1 H), 7 ,32 - 7 ,37 (m, 1 H), 7 ,09 - 7 ,17 (m, 3 H), 6 ,97 (d, 1 H), 6,01 (s, 2 H), 5 ,00 (s, 2 H), 3 ,76 (q, 4 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-102
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2-amino-2-(oxetan-3-il) acetato de metilo fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 100 °C durante 42 h como una solución en THF/agua (2:1). El contenido se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-75 % acetonitrilo/agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-102 (0,6 mg, 2 %) como un aceite transparente.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,80 (d, 1 H), 8,30 (d, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,32-7,27 (m, 1 H), 7,12-7,03 (m, 2 H), 6,92 (t, 1 H), 6,89 (d, 1 H), 5,99 (s, 2 H), 5,23 (d, 1 H), 4,65 (t, 1 H), 4,31 (t, 1 H), 3,83-3,74 (m, 2 H), 3,02 (dtd, 1 H).
Compuesto de referencia I-109
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que no se usó reactivo de amina, se usó DBU en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (2:1). El contenido se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-75 % acetonitrilo/agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-109 (7 mg, 35 %) como un aceite transparente.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,84 (d, 1 H), 8,26 (d, 1 H), 7,67 (s, 1 H), 7,25-7,28 (m, 1 H), 7,14-7,05 (m, 2 H), 7,02 (d, 1 H), 7,01- 6,97 (m, 1 H), 6,03 (s, 2 H), 3,79 (t, 2 H), 3,56-3,47 (m, 4 H), 2,56-2,50 (m, 2 H), 1,99 (quintuplete, 2 H), 1,80-1,73 (m, 2 H), 1,72 -1,61 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-108
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el D-triptófano fue el reactivo de amina y el contenido se calentó hasta 100 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (2:1). El contenido se trató con solución de HCl 3N, el disolvente se retiró al vacío y el sólido resultante se lavó con H2O, a continuación se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-75 % acetonitrilo/agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-108 (3,5 mg, 16 %) como un aceite transparente.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,85 (d, 1 H), 8,16 (d, 1 H), 7,69 (d, 1 H), 7,33-7,27 (m, 1 H), 7,17 (d, 1 H), 7,13-7,05 (m, 4 H), 7,01-6,96 (m, 1 H), 6,95-6,89 (m, 3 H), 5,97 (s, 2 H), 5,50 (dd, 1 H), 3,70 (dd, 1 H), 3,28 (d, 1 H).
Compuesto de referencia I-116
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la D-fenilalanina fue el reactivo de amina y el contenido se calentó hasta 100 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (2:1). El contenido se trató con solución de HCl 3N, el disolvente se retiró al vacío y el residuo resultante se purificó mediante HPCL de fase inversa con un gradiente de 5-75 % acetonitrilo/agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-116 (25 mg, 61 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD, MeOD) 88,77 (s, 1 H), 8,13 (d, 1 H), 7,43 (s, 1 H), 7,31 (d, 2 H), 7,28-7,18 (m, 3 H), 7,16 7,11 (m, 1 H), 7,09-7,03 (m, 1 H), 7,01 (t, 1 H), 6,91 (s, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 5,26 (dd, 1 H), 3,45 (dd, 1 H), 3,19 (dd, 1 H).
Compuesto de referencia I-117
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la L-fenilglicina fue el reactivo de amina y el contenido se calentó hasta 100 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (2:1). El contenido se trató con solución de HCl 3N, el disolvente se retiró al vacío y el sólido resultante se purificó mediante HPCL de fase inversa con un gradiente de 5-75 % acetonitrilo/agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-117 (26 mg, 63 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,81 (s, 1 H), 8,29 (d, 1 H), 7,61 (d, 2 H), 7,52 (s, 1 H), 7,46-7,36 (m, 3 H), 7,27 (q, 1 H), 7,10-7,05 (m, 1 H), 7,03 (t, 1 H), 6,95-6,90 (m, 2 H), 6,02 (s, 1 H), 5,97 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-118
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la D-fenilglicina fue el reactivo de amina y el contenido se calentó hasta 100 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (2:1). El contenido se trató con solución de HCl 3N, el disolvente se retiró al vacío y el sólido resultante se purificó mediante HPCL de fase inversa con un gradiente de 5-75 % acetonitrilo/agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-118 (22 mg, 53 %) como un sólido.
<1>H -R M N (500 M Hz, C D<3>O D ) 8 8,81 (s, 1 H), 8 ,30 (d, 1 H), 7 ,60 (d, 2 H), 7 ,53 (s, 1 H), 7 ,46 -7 ,37 (m, 3 H), 7 ,28 (q, 1 H), 7 ,11 -7 ,06 (m, 1 H), 7 ,04 (t, 1 H), 6 ,96-6 ,91 (m, 2 H), 6 ,02 (s, 1 H), 5 ,99 (s, 2 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-142
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la N-metil-fenilglicina fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 100 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (2:1). El contenido se trató con solución de HCl 3N, el disolvente se retiró al vacío y el sólido resultante se purificó mediante HPCL de fase inversa con un gradiente de 5-75 % acetonitrilo/agua proporcionando el compuesto deseado (15 mg, 52 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, MeOD) 88,80 (d, 1 H), 8,45-8,39 (m, 1 H), 7,58-7,55 (m, 1 H), 7,50-7,44 (m, 5 H), 7,34-7,27 (m,
1 H), 7,14-7,04 (m, 2 H), 7,00-6,94 (m, 1 H), 6,90 (d, 1 H), 6,61-6,55 (m, 1 H), 6,02 (s, 2 H), 3,25-3,20 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-120
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 1-(aminometil)ciclopropanocarboxílico fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 22 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-120 (20 mg, 42 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,75 (d, 1 H), 8,05 (d, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,30-7,24 (m, 1 H), 7,12-7,06 (m, 1 H), 7,03
(t, 1 H), 6,89 (d, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 3,88 (s, 2 H), 1,25-1,20 (m, 2 H), 1,15-1,10 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-207
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la N-metil-L-alanina fue el reactivo de amina, el contenido se calentó hasta 100 °C durante 22 h, y la capa acuosa durante la preparación se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-207 (20 mg, 57 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,74 (d, 1 H), 8,16 (d, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 7,29-7,23 (m, 1 H), 7,11-7,05 (m, 1 H), 7,02
(t, 1 H), 6,87 (d, 1 H), 6,82 (t, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 5,10 (q, 1 H), 3,33 (d, 3 H), 1,59 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-217
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-(aminometil)-2-etilbutanoico fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 22 h, y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-217 (20 mg, 50 %) como un sólido transparente.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,76-8,72 (m, 1 H), 8,07-8,03 (m, 1 H), 7,42-7,39 (m, 1 H), 7,29-7,22 (m, 1 H), 7,11
7,04 (m, 1 H), 7,02 (t, 1 H), 6,89-6,81 (m, 2 H), 5,94 (s, 2 H), 3,91 (s, 2 H), 1,68 (q, 4 H), 0,98-0,90 (t, 6 H).
Compuesto de referencia I-224 y compuesto I-225
Los compuestos del título se prepararon siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-amino-5,5,5-trifluoro-4-metilpentanoico fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 18 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-75 % acetonitrilo/agua proporcionando los diastereómeros deseados, el compuesto I-224
(3,3 mg, 7 %, eluyente primero en la LCMS) como un sólido blanco y el compuesto de referencia I-225 (2 mg, 5 %, eluyente segundo en la LCMS) como un sólido blanco.
1H-RMN para el Compuesto de referencia I-224 (500 MHz, CD3OD) 8 8,75 (d, 1 H), 8,15 (d, 1 H), 7,38 7,24 (m, 1 H), 7,11-7,06 (m, 1 H), 7,03 (t, 1 H), 6,86 (d, 1 H), 6,83 (t, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 4,94 (t, 1 H), 2,60 (dd, 1 H),
2,45-2,38 (m, 1 H), 1,96-1,89 (m, 1 H), 1,25 (d, 3 H).
1H-RMN para el Compuesto de referencia I-225 (500 MHz, CD3OD) 8 8,81 (d, 1 H), 8,34 (d, 1 H), 7,58 7,27 (m, 1 H), 7,13-7,08 (m, 1 H), 7,06 (t, 1 H), 6,99-6,92 (m, 2 H), 6,01 (s, 2 H), 5,26 (dd, 1 H), 2,53-2,42 (m, 2,42-2,33 (m, 1 H), 2,13 (ddd, 1 H), 1,24 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-226
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-amino-3-fluoro-3-metilbutanoico fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-226 (11 mg, 42 %) como un sólido blanco.
<1>H -R M N (500 M Hz, C D<3>O D ) 8 8 ,75 (d, 1 H), 8 ,16 (d, 1 H), 7 ,44 (s, 1 H), 7 ,30 -7 ,22 (m, 1 H), 7 ,11 -7 ,06 (m, 1 H), 7 ,02
(t, 1 H), 6 ,90 (d, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5 ,95 (s, 2 H), 5 ,13 (d, 1 H), 1 ,65 -1 ,58 (m, 3 H), 1 ,58 -1 ,51 (m , 3 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-227
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-2-amino-2-cidopropilacético fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-227 (21 mg, 86 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, MeOD) 88,74 (d, 1 H), 8,10 (d, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,28-7,22 (m, 1 H), 7,11-7,05 (m, 1 H), 7,02 (t, 1 H), 6,85 (d, 1 H), 6,82 (t, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 3,96 (d, 1 H), 1,38-1,28 (m, 1 H), 0,75-0,64 (m, 3 H), 0,53-0,47 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-239
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-N-metil--2-amino-2-ciclopropilacético fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-239 (4 mg, 20 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,75 (d, 1 H), 8,16 (d, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,26 (ddd, 1 H), 7,08 (ddd, 1 H), 7,04-7,00 (m, 1 H), 6,86 (d, 1 H), 6,82 (td, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 4,19 (d, 1 H), 3,48 (d, 3 H), 1,53-1,44 (m, 1 H), 0,91-0,83 (m, 1 H), 0,76-0,64 (m, 2 H), 0,44 (dq, 1 H).
Compuesto de referencia I-240
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (R)-2-amino-2-ciclopropilacético fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 2 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-240 (46 mg, 93 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,74 (d, 1 H), 8,10 (d, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,28-7,22 (m, 1 H), 7,07 (ddd, 1 H), 7,01 (td, 1 H), 6,84 (d, 1 H), 6,81 (td, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 3,96 (d, 1 H), 1,38-1,30 (m, 1 H), 0,74-0,65 (m, 3 H), 0,52-0,47 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-241
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (R)-N-metil-2-amino-2-ciclopropilacético (como sal de TFA) fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-241 (20 mg, 93 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,74 (d, 1 H), 8,15 (d, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,28-7,22 (m, 1 H), 7,10-7,04 (m, 1 H), 7,04 6,99 (m, 1 H), 6,85 (d, 1 H), 6,82 (t, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4,18 (d, 1 H), 3,48 (d, 3 H), 1,53-1,44 (m, 1 H), 0,91-0,82 (m, 1 H), 0,76-0,64 (m, 2 H), 0,48-0,41 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-90
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-indolin-2-carboxílico fue el reactivo de amina (1 equiv.), y el contenido se calentó a 90 °C durante 12 h como una solución en THF/agua (1:1), seguido de calentamiento a 125 °C durante 15 min en el microondas. El contenido se extrajo con acetato de etilo durante el procesamiento. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando de 5 a 95 % de acetonitrilo en agua con adición de ácido trifluoacético a 0,1 % proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-90 (3,9 mg, 15 % rendimiento) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-de) 8 (ppm): 9,10 - 9,21 (d, 1 H), 8,61 - 8,75 (m, 1 H), 8,47 - 8,57 (d, 1 H), 7,49 - 7,58 (s, 1 H), 7,33 - 7,41 (m, 1 H), 7,22 - 7,33 (m, 4 H), 7,10 - 7,20 (m, 2 H), 6,98 - 7,10 (m, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 5,39 - 5,53 (m, 1 H), 3,64 - 3,74 (dd, 1 H), 3,20 - 3,32 (dd, 2 H).
Compuesto de referencia I-91
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (R)-indolin-2-carboxílico fue el reactivo de amina (1 equiv.), y el contenido se calentó a 90 °C durante 12 h como una solución en THF/Agua (1:1), seguido de calentamiento a 125 °C durante 15 min en el microondas. El contenido se extrajo con acetato de etilo durante el trabajo. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-95 % acetonitrilo en agua (en TFA a 0,1 %) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-91 obtenido siguiendo el procedimiento habitual (1,9 mg, 7 %).
1H RMN (500 MHz, CD3CN) 5 (ppm): 8,68 - 8,75 (d, 1 H), 8,35 - 8,49 (m, 2 H), 7,42 -7,49 (m, 1 H), 7,27 - 7,41 (m, 3 H), 7,05 - 7,24 (m, 4 H), 6,91 - 6,96 (m, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 5,38 - 5,48 (m, 1 H), 3,65 - 3,79 (dd, 1 H), 3,31 - 3,44 (dd, 1 H).
Compuesto de referencia I-114
La purificación se logró mediante HPLC de fase inversa utilizando acetonitrilo en agua a 5-75 % durante 30 minutos (con adición de ácido trifluoacético a 0,1 %) proporcionando el compuesto deseado (1,6 mg, 4 % rendimiento) como un aceite transparente. Solamente se purificó el último diastereómero (compuesto de referencia I-114) a partir de esta mezcla de reacción.
1H RMN (500 MHz, 500 MHz, CD3CN) 5 (ppm): 8,85 (s, 1 H), 8,33 (d, 1 H), 7,40 - 7,48 (m, 1 H), 7,28 - 7,38 (m, 1 H), 7,04 - 7,19 (m, 2 H), 6,90 - 7,00 (m, 2 H), 6,03 (s, 2 H), 3,13 - 3,17 (m, 1 H), 2,47 - 2,59 (m, 1 H), 2,36 - 2,42 (m, 1 H), 2,03-2,17 (m, 1 H), 1,77- 1,85 (m, 1 H), 1,65 - 1,74 (m, 2 H), 1,49 - 1,60 (m, 2 H), 1,38- 1,47 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-107
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (1S,2S,5R)-3-azabiciclo[3.1.0]hexano-2-carboxílico fue el reactivo de amina (1 equiv.), se usaron 3 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 70 °C durante 14 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se extrajo con acetato de etilo durante el procesamiento, se secó, filtró y concentró obteniéndose el compuesto deseado. Se obtuvo el compuesto de referencia I-107 (38,3 mg, 100 % rendimiento) como un sólido de color tostado. No se necesitó purificación para este compuesto.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 5 ppm: 8,79 (s, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 7,36-7,46 (br. s, 1 H), 7,25-7,31 (m, 1 H), 7 ,06 -7 ,12 (m, 1 H), 7,01 - 7,06 (m, 1 H), 6,83 - 6,90 (m, 2 H, 2 desplazamientos solapados), 5,96 (s, 2 H), 4,18 (dd, 1 H), 4,02 -4,08 (m, 1 H), 1,93 - 2,02 (m, 1 H), 0,83 - 0,93 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-129
La purificación se logró mediante cromatografía en gel de sílice utilizando metanol de 1 a 10 % en diclorometano durante 30 minutos proporcionándose el compuesto I-129 (21,7 mg, 57 % rendimiento) como un sólido blanco.
1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 (ppm): 8,45 - 8,57 (m, 2 H, 2 desplazamientos isocronos) 7,40 - 7,48 (m, 3 H), 7,24 -7,40 (m, 1 H), 6,93 -7,09 (m, 2 H), 6,58-6,68 (m, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 3,74- 3,90 (m, 2 H), 1,99 -2,20 (m, 2 H),1,70-1,89 (m, 4 H), 1,55- 1,69 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-124
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-metilpiperidin-4-carboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina (1,1 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 80 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se extrajo con acetato de etilo durante el trabajo. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1 10 % metanol/diclorometano durante 30 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-124 como un sólido blanquecino (36,1 mg, 95 % rendimiento).
1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 (ppm): 8,49 (s, 1 H), 8,16 - 8,28 (d, 1 H), 7,35 -7,44 (m, 1 H), 7,17 - 7,26 (m, 1 H), 6,95 -7,10 (m, 2 H), 6,87 (m, 1 H), 6,62 (s, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,34 - 4,48 (m, 1 H), 3,36 - 3,48 (m, 1 H), 2,36 - 2,41 (m, 1 H), 1,58 - 1,68 (m, 1 H), 1,34 (s, 3 H), 0,71 -0,81 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-143
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-metilpirrolidin-3-carboxílico fue el reactivo de amina (1,05 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 80 °C durante 4 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se extrajo con acetato de etilo durante el trabajo. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 1-10 % metanol/diclorometano durante 30 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-143 como un sólido blanco (18,9 mg, 48 % rendimiento).
1H RMN (500 MHz, CDCh) 5 ppm: 8,45 (s, 1 H), 8,12 - 8,19 (d, 1 H), 7,30 (s, 1 H), 7,27 (s, 1 H), 7,14 - 7,22 (m, 1 H), 6,98 - 7,05 (m, 1 H), 6,93 - 6,98 (m, 1 H), 6,80 - 6,87 (m, 1 H), 6,57 (d, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,24 - 4,36 (m, 1 H), 3,84 -4,00 (m, 2 H), 3,59 - 3,70 (m, 1 H), 2,45 - 2,58 (m, 1 H), 1,84 - 2,00 (m, 1 H), 1,47 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-152
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4,4-dimetil-pirrolidin-3-carboxílico fue el reactivo de amina (1,05 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 90 °C durante 14 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se extrajo con acetato de etilo durante el trabajo. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1-7 % metanol/diclorometano durante 30 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-152 como un sólido blanquecino (14,3 mg, 37 % rendimiento).
1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 (ppm): 8,45 (s, 1 H), 8,05 - 8,20 (d, 1 H), 7,29 -7,34 (m, 1 H), 7,14 - 7,25 (m, 1 H), 6,91 -7,08 (m, 2 H), 6,79 - 6,87 (m, 1 H), 6,56 - 6,63 (m, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,01 - 4,23 (m, 2 H), 3,71 - 3,87 (dd, 1 H), 3,53 -3,65 (dd, 1 H), 2 ,85-2,97 (m, 1 H), 1,34 (s, 3 H), 1,15 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-186
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-fenilpiperidin-4-carboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina (1,05 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 70 °C durante 24 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se extrajo con acetato de etilo durante el trabajo. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 4-7 % metanol/diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-186 como un sólido blanco (22,3 mg, 51 % rendimiento).
1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 (ppm): 8,46 (s, 1 H), 8,19 (d, 1 H), 7,44 -7,49 (m, 2 H, 2 desplazamientos solapados), 7,36 - 7,41 (m, 2 H), 7,29 - 7,34 (m, 2 H), 7,16 - 7,22 (m, 2 H), 6,99 - 7,05 (m, 1 H), 6,93 - 6,98 (m, 1 H), 6,81 - 6,86 (m, 1 H), 6,59(m, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 4,50 - 4,58 (m, 2 H), 3,42 - 3,50 (m, 2 H), 2,69 - 2,75 (m, 2 H), 2,07-2,14 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-194
Este compuesto se preparó siguiendo el procedimiento general B descrito anteriormente, salvo que el ácido 4-(aminometil)tetrahidro-2 H-pirano-carboxílico fue el reactivo de amina (1,05 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 70 °C durante 6 h como una solución en THF/agua (10:1), seguido de calentamiento a 90 °C durante 12 h. El contenido se extrajo con acetato de etilo durante la preparación y la purificación se logró por cromatografía en gel de sílice utilizando metanol de 4 a 7 % en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-194 ((26,8 mg, rendimiento 66 %) como un sólido blanco
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 (ppm): 8,46 (s, 1 H), 8,10 (d, 1 H), 7,28 (s, 1 H), 7,18 - 7,24 (m, 1 H), 6,94 - 7,07 (m, 3 H), 6,58(d, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 5,50 - 5,57 (m, 1 H), 3,86 - 3,94 (m, 2 H), 3,79 - 3,85 (m, 2 H), 3,51 - 3,60 (m, 2 H), 2,12 -2,20 (m, 2 H), 1,53- 1,62 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-228
El compuesto del título se preparó en 4 etapas:
Etapa 1: ácido 1-((4-metilfenilsulfonamido)metil)ciclopentanocarboxílico
Una suspensión de ácido 1-(aminometil)ciclopentanocarboxílico (316 mg, 1,0 equiv.), cloruro de p-toluenosulfonilo (505 mg, 1,2 equiv) y solución acuosa de hidróxido de sodio 1 M (6,62 ml, 3,0 equiv.) en agua (10 ml) se calentó a 90 °C durante 1 h, después de lo cual la mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se acidificó mediante la adición de una solución acuosa de ácido clorhídrico al 3M. El precipitado blanco resultante se filtró, a continuación se lavó sucesivamente con agua y etanol proporcionando ácido 1-((4 metilfenilsulfonamido)metil)ciclopentanocarboxílico (383 mg, rendimiento 58 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-de) 8 (ppm): 12,14 - 12,38 (s, 1H), 7,64 - 7,75 (d, 2H), 7,47 - 7,56 (t, 1H), 7,33 - 7,45 (d, 2H), 2,79-2,90 (d, 2H), 2,38 (s, 3H), 1,81 -1,95 (m, 2H), 1,47 -1,65 (m, 6H).
Etapa 2: Ácido 1-((N,4-dimetilfenilsulfonamido)metil)ciclopentanocarboxílico
Una solución de ácido 1-((4-metilfenilsulfonamido)metil)ciclopentanocarboxílico (383 mg, 1,0 equiv.), yodometano (0,254 ml, 3,15 equiv.) y solución acuosa de hidróxido de sodio 1 M (5,15 ml, 4,0 equiv.) en agua (5 ml) se calentó a 75 °C durante 1,5 horas, tras lo cual un análisis mediante LC/MS indicó que se había completado la reacción. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se lavó con diclorometano (3 x 30 ml), se acidificó mediante la adición de solución de ácido clorhídrico acuoso 3 M, se extrajo con dietil éter (3 x 30 ml), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró proporcionando ácido 1-((N,4-dimetilfenilsulfonamido)metil)cidopentanocarboxílico (343 mg, rendimiento 86 %) como un sólido amarillo-dorado. No fue necesario purificar.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 (ppm): 7,59 - 7,73 (d, 2H), 7,30 - 7,41 (d, 2H), 3,24 -3,39 (s, 2H), 2,71 (s, 3H), 2,45 (s, 3H), 2,06 - 2,22 (m, 2H), 1,69 - 1,88 (m, 6H).
Etapa 3: bromhidrato de ácido 1-((metilamino)metil)ciclopentanocarboxílico
Se calentó una solución de ácido 1-((N,4-dimetilfenilsulfonamido)metil)ciclopentanocarboxílico (343 mg, 1,0 equiv.) en una solución de ácido acético glacial a 33 % de bromuro de hidrógeno (6,0 ml, 30 equiv.) durante 2 horas 75 °C. A continuación, la reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó en agua (10 ml) y se lavó con dietil éter (3 x 40 ml). La capa acuosa se concentró a sequedad y el sólido resultante se recristalizó en acetona proporcionando bromhidrato de ácido 1-((metilamino)metil)ciclopentanocarboxílico (127 mg, rendimiento 48 %) como un sólido blanco cristalino.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-de) 8 (ppm): 12,76-13,15 (s, 1 H), 8,12-8,39 (m, 2 H), 2,98-3,11 (m, 2 H), 2,55 (s, 3 H), 1,86-2,01 (m, 2 H), 1,62 (m, 6 H).
Etapa 4: compuesto de referencia I-228
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 1-((metilamino)metil)ciclopentanocarboxílico (como la sal de HBr) fue el reactivo de amina (1,3 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 6 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se extrajo con acetato de etilo durante el procesamiento. La purificación se logró mediante cromatografía en gel de sílice utilizando mentol de 2 a 5 % en diclorometano durante 40 minutos. Se obtuvo el compuesto deseado como un sólido blanco (13,4 mg, rendimiento 45 %).
1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 (ppm): 8,44 (s, 1 H), 8,08 (d, 1 H), 7,29 (s, 1 H), 7,15 - 7,25 (m, 1 H), 6,95 - 7,08 (m, 3 H), 6,55-6,58 (m, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 4,02 (s, 2 H), 3,35 (d, 3 H), 2 ,18-2,29 (m, 2 H), 1,57- 1,79 (m, 6 H).
Compuesto de referencia I-238
El compuesto del título se preparó en 4 etapas:
Etapa 1: ácido 4-((4-metilfenilsulfonamido)metil)tetrahidro-2H-pirano-4 carboxílico
Se calentó una suspensión de ácido 4-(aminometil)tetrahidro-2H-pirano-4-carboxílico (500 mg, 1,0 equiv.), cloruro de p-toluenosulfonilo (719 mg, 1,2 equiv.) y solución acuosa de hidróxido de sodio acuoso 1 M (9,4 ml, 3,0 equiv.) a 90 °C durante 1 hora, después de lo cual la mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se acidificó mediante la adición de una solución acuosa de ácido clorhídrico 3 M. El precipitado blanco resultante se filtró, a continuación se lavó sucesivamente con agua y etanol proporcionando ácido 4-((4 metilfenilsulfonamido)metil)tetrahidro-2H-pirano-4-carboxílico (840 mg, rendimiento 85 %) como un sólido blanco. No fue necesario purificar.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) 8 (ppm): 12,6 (br. s, 1 H), 7,68 (d, 2 H), 7,66 (t, 1 H), 7,39 (d, 2 H), 3,63 - 3,72 (m, 2 H), 3,27 - 3,32 (m, 2 H), 2,81 (d, 2 H), 2,38 (s, 3 H), 1,76 - 1,85 (m, 2 H), 1,33 - 1,46 (m, 2 H).
Etapa 2: Ácido 4-((N,4-dimetilfenilsulfonamido)metil)tetrahidro-2H-pirano-4-carboxílico
Una suspensión de ácido 4-((4-metilfenilsulfonamido)metil)tetrahidro-2H-pirano-4-carboxílico (840 mg, 1,0 equiv.) en una solución acuosa de hidróxido de sodio 1 M (10,7 ml, 4,0 equiv.) y yodometano (0,528 ml, 3,15 equiv.) se calentó a 100 °C durante dos horas, después de lo cual la mezcla de reacción se diluyó en solución acuosa de ácido clorhídrico 3 M, se extrajo con diclorometano (3 x 30 ml), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró proporcionando ácido 4-((N,4-dimetilfenilsulfonamido)metil)tetrahidro-2H-pirano-4 carboxílico (197 mg, rendimiento 22 %) como un sólido de color crema. No fue necesario purificar.
1H RMN (500 MHz, CDCI3) 8 (ppm): 7,63 - 7,72 (d, 2 H), 7,31 - 7,39 (d, 2 H), 3,87 -3,97 (m, 2 H), 3,50 - 3,61 (m, 2 H), 3,25 (s, 2 H), 2,76 (s, 3 H), 2,45 (s, 3 H), 2,13-2,23 (m, 2 H), 1,62 - 1,74 (m, 2 H).
Etapa 3: bromhidrato de ácido 4-((metilamino)metil)tetrahidro-2H-pirano-4-carboxílico
Una solución de ácido 4-((N,4-dimetilfenilsulfonamido)metil)tetrahidro-2H-pirano-4-carboxílico (197 mg, 1,0 equiv.) se calentó en una solución de ácido acético glacial a 33 % (1 ml, 31 equiv.) a 85 °C durante 3 horas, después de lo cual un análisis mediante LCMS indicó que el material de partida se había consumido. Después de enfriar la mezcla de reacción a temperatura ambiente, se añadió agua, y la mezcla de reacción se lavó con dietil éter (3 x 30 ml). La capa acuosa se concentró a sequedad, y el sólido resultante se recristalizó desde acetona obteniéndose bromhidrato de ácido 4-((metilamino)metil)tetrahidro-2H-pirano-4-carboxílico (54,8 mg, rendimiento 36 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, D2O) 8 (ppm): 3,71 - 3,89 (m, 2 H), 3,50-3,64 (m, 2 H), 3,17 (s, 2 H), 2,66 (s, 3 H), 1,96-2,09 (m, 2 H), 1,48- 1,66 (m, 2 H).
Etapa 4: Compuesto de referencia I-238
Este compuesto se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-((metilamino)metil)tetrahidro-2 H-pirano-4-carboxílico (como la sal de HBr) fue el reactivo de amina (1,05 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y la reacción se recogió en cabo en dioxano/agua (3:1) a 90 °C durante 18 horas. El contenido se extrajo con acetato de etilo durante el procesamiento y la purificación se logró mediante cromatografía en gel de sílice utilizando metanol de 2 a 7 % en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-238, como un sólido blanco (31,0 mg, rendimiento 43 %) siguiendo el procedimiento descrito anteriormente.
1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 (ppm): 8,47 (s, 1 H), 8,06 (d, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 7,23 - 7,27 (m, 1 H), 7,22 (br. s, 1 H), 7,00 - 7,09 (m, 3 H), 6,59 (d, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 3,83 - 3,95 (m, 4 H), 3,47 - 3,56 (m, 2 H), 3,40 (d, 3 H), 2,20 - 2,26 (m, 2 H), 1,51 -1,64 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-244
El compuesto del título se preparó en 4 etapas:
Etapa 1: ácido 4,4,4-trifluoro-2-(4-metilfenilsulfonamido)butanoico
Se formó una suspensión de ácido 2-amino-4,4,4-trifluorobutanoico (300 mg, 1,0 equiv.), cloruro de p-toluenosulfonilo (437 mg, 1,2 equiv.) y solución acuosa de hidróxido de sodio 1 M (5,73 ml, 3,0 equiv.) en agua (4 ml) a 90 °C durante 1 hora, después de enfriar la mezcla de reacción a 0 °C y de acidificarla mediante la adición de solución acuosa de ácido clorhídrico 3 M, se extrajo con diclorometano (3 x 40 ml), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró proporcionando ácido 4,4,4-trifluoro-2-(4-metilfenilsulfonamido)butanoico (175 mg, 29 % rendimiento) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 (ppm): 7,71 - 7,80 (d, 2 H), 7,28 (d, 2 H, isocrono con cloroformo), 5,72 - 5,91 (br. s, 1 H), 4,16 - 4,29 (m, 1 H), 2,64 - 2,76 (m, 1 H), 2,52 - 2,63 (m, 1 H), 2,43 (s, 3 H).
Etapa 2: ácido 2 -(N,4-dimetilfenilsulfonilamido)-4,4,4-trifluorobutanoico
Una mezcla de ácido 4,4,4-trifluoro-2-(4-metilfenilsulfonilamido)butanoico (175 mg, 1,0 equiv.) y yodometano (146 pl, 3,15 equiv.) en solución acuosa de hidróxido de sodio 1 M (2,81 ml, 4,0 equiv.) se calentó a 85 °C durante 2,5 horas, después de lo cual el análisis de LC/MS indicó la presencia del producto deseado y el éster metílico del producto deseado. La mezcla de reacción se acidificó con una solución de ácido clorhídrico 3 M, se extrajo con diclorometano (3 x 30 ml), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró hasta obtener un residuo. Este residuo se reconstituyó en tetrahidrofurano (2 ml) y a continuación se trató con una solución acuosa de hidróxido de sodio 1 M (0,5 ml). Al cabo de 30 minutos de agitación a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se acidificó con una solución de ácido clorhídrico 3 M, se extrajo con diclorometano (3 x 30 ml), se secó (sulfato de sodio) y se concentró produciendo ácido 2-(N,4-dimetilfenilsulfonilamido)-4,4,4-trifluorobutanoico (66 mg, rendimiento 36 %) como una goma con aproximadamente 90 % de pureza según 1H RMN. Se usó como tal en la siguiente etapa sin purificación adicional. 1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 (ppm): 7,60 - 7,70 (d, 2 H), 7,19 (d, 2 H), 4,90 - 4,99 (m, 1 H), 2,75 - 2,89 (m, 1 H), 2,66 -2,72 (s, 3 H), 2,30 - 2,44 (m, 1 H), 2,29 (s, 3 H).
Etapa 3: bromhidrato de ácido 4,4,4-trifluoro-2-(metilamino)butanoico
Se calentó una solución de ácido 2-(N,4-dimetilfenilsulfonilamido)-4,4,4-trifluorobutanoico (66 mg, 1,0 equiv.) en una solución de ácido acético glacial a 33 % de bromuro de hidrógeno (1,0 ml, 91 equiv.) a 85 °C durante 2 horas. Todavía quedaba material de partida. Se dejó agitar a 60 °C durante 72 horas, tras lo cual la desprotección casi se había completado. La mezcla de reacción se diluyó en agua, se lavó con dietil éter (3 x 30 ml), y la capa acuosa se concentró a sequedad. Este material bruto se usó tal cual en la siguiente etapa sin purificación.
Etapa 4: Compuesto de referencia I-244
Este compuesto se preparó siguiendo el procedimiento B descrito anteriormente, salvo que se usó ácido 4,4,4-trifluoro-2-(metilamino)butanoico (como la sal de HBr) fue el reactivo de amina (1,2 equiv.), 4 equivalentes de trietilamina y la reacción se recogió en cabo en dioxano/agua (3:1) a 90 °C durante 5 días. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 2-10 % metanol/diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-244 (24,7 mg, rendimiento 32 %) como un sólido de color tostado.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 (ppm): 8,77 (s, 1 H), 8,21 (d, 1 H), 7,41 (m, 1 H), 7,24 - 7,33 (m, 1 H), 6,07 - 7,13 (m, 1 H), 7,02 - 7,07 (m, 1 H), 6,90 (d, 1 H), 6,82-6,88 (m, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 3,38 - 3,46 (m, 2 H), 3,33 - 3,36 (m, 1 H), 3,03 - 3,19 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-94
El compuesto se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que se usó 1-aminociclobutanocarboxilato de metilo como reactivo de amina, se usaron 5 equivalentes de trietilamina, la reacción se calentó a 90 °C como solución en THF/agua (10:1) durante 14 h, seguido de calentamiento a 170 °C durante 10 minutos en el microondas. Después, el contenido se trató con agua y HCl 1N sólido y se secó al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa preparativa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-94 (0,30 MG, rendimiento 1,5 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 8 (ppm): 8,81 (d, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 7,25 - 7,31 (m, 1 H), 7,01 - 7,13 (m, 2 H), 6 ,86-6,94 (m, 2 H), 5,97 (s, 2 H), 2,89 (ddd, 2 H), 2,45-2,54(m, 2 H), 2 ,07-2,14 (m, 1 H), 1,95-2,03 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-138
Este compuesto fue preparado del modo anterior con la excepción de que el 1-aminociclopentanocarboxilato de metilo (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, la mezcla se calentó durante 5 horas a 140 °C en DMA (volumen: 142 |jl) proporcionando el éster. A continuación, la reacción se agita a temperatura ambiente (23 °C) durante 16 horas. Se añadió hidróxido de sodio (14,2 mg) y se hizo reaccionar y se calentó a 40 °C durante 1 h, a continuación se enfrió, se añadió agua, se neutralizó con HCl 1N y se extrajo con acetato de etilo (3 veces). Las sustancias orgánicas se combinaron y secaron, se purificaron mediante HPLC preparativa de fase inversa obteniéndose el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-138 (0,5 mg, rendimiento 1,5 %).1
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 8 (ppm): 8,84 (s, 1 H), 8,29 (d, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 7,28 - 7,35 (m, 1 H), 7,04 - 7,16 (m, 2 H), 6,91 -7,00 (m, 2 H), 6,01 (s, 2 H), 2,50-2,62 (m, 3 H), 2,17-2,26 (m, 2 H), 1,90 (br. s., 3 H).
Compuesto de referencia I-156
Una mezcla de producto intermedio 1 (30,8 mg), ácido (1S,2R)-2 aminociclopentanocarboxílico (31,9 mg, 3 equiv.) y trietilamina (115 jl, 10 equiv.) a 80 °C durante 16 horas en una mezcla de THF/agua 10: 1. El contenido se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa obteniéndose el compuesto deseado, el compuesto I-156, como un sólido blanco (6,2 mg, rendimiento 16 %).
1H RMN (500 MHz, CDCI3) 5 ppm: 8,52 (s, 1 H), 8,46 (br. s., 1 H), 7,44 (br. s., 2 H), 7,22 - 7,27 (m, 1 H), 7,15 (t, 1 H), 7,00 - 7,09 (m, 2 H), 6,66 (s, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 4,88 (br. s., 1 H), 3,13 - 3,21 (m, 1 H), 2,23 (d,1 H), 2,15 (br. s., 2 H), 1,85-2,03 (m, 2 H), 1,76 (d, 1 H).
Compuesto de referencia I-154
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácidocis-2-aminociclohexanocarboxílico fue el el reactivo de amina y la mezcla se calentó a 80 °C durante 24 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC de fase inversa obteniéndose el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-154 (8,5 mg, rendimiento 26 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 5 ppm: 8,62 (d, 1 H), 8,53 (d,1 H), 7,79 (br. s., 1 H), 7,45 (s, 1 H), 7,19 - 7,27 (m, 2 H), 7,00 - 7,10 (m, 2 H), 6,67 (s, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 4,58 (br. s.,1 H), 2,94 (d, 1 H), 2,33 (d, 1 H), 1,87 (br. s., 2 H), 1,81 (d, 1 H), 1,61 -1,74 (m, 2 H), 1,36 - 1,57 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-159
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-(4-hidroxifenil)-L-alanina fue el reactivo de amina y la mezcla se calentó a 80 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-159 como un aceite marrón.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 5 ppm: 8,82 (d, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,25 - 7,33 (m, 1 H), 7,02 - 7,15 (m, 4 H), 6,97 (d, 1 H), 6,92 (t, 1 H), 6,64 (d, 2 H), 6,00 (s, 2 H), 5,29 (dd, 1 H), 3,40 (dd, 1 H), 3,09 (dd, 1 H).
Compuesto de referencia I-165
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-(4-hidroxifenil)-D-alanina fue el reactivo de amina y la mezcla se calentó a 80 °C durante 90 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-165 (4,7 mg, rendimiento 13 %) como un aceite marrón.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 5 ppm: 8,82 (d, 1 H), 8,24 (d, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,26 - 7,38 (m, 1 H), 7,13 (d, 2 H), 7,04 - 7,11 (m, 2 H), 6,98 (d, 1 H), 6,93 (t, 1 H), 6,64 (d, 2 H), 6,01 (s, 2 H), 5,30 (dd, 1 H), 3,41 (dd, 1 H), 3,09 (dd, 1 H). Compuesto de referencia I-179
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido(1S,3R)-3-aminociclohexanocarboxílico fue el el reactivo de amina y la mezcla se calentó a 80 °C durante 48 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-179 (1,7 mg, 5 % rendimiento).
1H RMN (400 MHz, CD3OD) 5 ppm: 8,83 (d, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 7,67 (s, 1 H), 7,26 - 7,35 (m, 1 H), 7,12 (d, 1 H), 7,05 - 7,10 (m, 1 H), 7,01 (d, 1 H),) 6,94 - 7,00 (m, 1 H), 6,03 (s, 2 H), 2,96 - 3,06 (m, 1 H), 2,42 - 2,54 (m, 1 H), 2,21 (td,1 H), 1,97 - 2,15 (m, 4 H), 1,80- 1,96 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-188
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-fluoro-piperidincarboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina y la mezcla se calentó a 80 °C durante 8 h como una solución en THF/agua (10:1) seguido de agitación a 23 °C durante 8 h más. El contenido se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-188 (7 mg, rendimiento 18 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 5 ppm: 8,81 (d, 1 H), 8,32 (d, 1 H), 7,63 (s, 1 H), 7,26 - 7,33 (m, 1 H), 7,03 - 7,14 (m, 2 H), 6,91 - 6,98 (m, 2 H), 6,01 (s, 2 H), 4,82 (br. s., 1 H), 3,59-3,73 (m, 2 H), 2,26-2,41 (m, 2 H), 2,16-2,23 (m, 2 H), 0,10 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-199
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-2-amino-4-(metilmercapto)butírico fue el reactivo de amina y la mezcla se calentó a 80 °C durante 16 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC de fase inversa obteniéndose el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-199 (4 mg, rendimiento 9 %) como un sólido blanco.1
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 5 ppm: 8,82 (d, 1 H), 8,34 (d, 1 H), 7,58 (s, 1 H), 7,27 - 7,34 (m, 1 H), 7,04 -7,14 (m, 2 H), 6,93 - 7,00 (m, 2 H), 6,02 (s, 2 H), 5,24 (dd, 1 H), 2,59 - 2,79 (m, 2 H), 2,36 - 2,46 (m, 1 H), 2,22 - 2,31 (m, 1 H), 2,12 (s, 3 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-192
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-(metanosulfonil)pirrolidina fue
el reactivo de amina y la mezcla se calentó a 80 °C durante 48 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido
se acidificó con ácido clorhídrico 1N, se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando
el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-192 (6,3 mg, rendimiento 18 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 6 ppm: 8,81 (d, 1 H), 8,30 (d, 1 H), 7,61 (s, 1 H), 7,30 (ddd,1 H), 7,03 - 7,14 (m, 2 H - 6,98 (m, 2 H), 6,01 (s, 2 H), 4,41 - 4,54 (m, 1 H), 4,27 - 4,38 (m, 1 H), 4,06 - 4,27 (m, 3 H), 3,11 (s, 3 H), 2,52 - 2,68 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-220
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la p-ciano-L-alanina fue el reactivo
de amina y la mezcla se calentó a 80 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se concentró
al vacío y se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-220 (2,5 mg, rendimiento 8 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 6 ppm: 8,79 (d, 1 H), 8,30 (d, 1 H), 7,52 (s, 7,25 - 7,31 (m, 1 H), 7,02 - 7,13 (m, 2 H), 6,86 - 6,95 (m, 2 H), 5,99 (s, 2 H), 5,34 (dd, 1 H), 3,15 - 3,25 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-198
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácidotrans-2-aminociclohexanocarboxílico fue el el reactivo de amina y la mezcla se calentó a 80 °C durante 16 h como una solución
en THF/agua (10:1). El contenido se acidificó con una solución de ácido clorhídrico 1 N, y los sólidos se filtraron, se resuspendieron en diclorometano, y se filtraron para suministrar el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-198 (14,5 mg, rendimiento 31 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 6 ppm: 8,75 (d, 1 H), 8,00 (d, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,23 - 7,29 (m, 1 H), 7,05 - 7,11
(m, 1 H), 7,02 (t, 1 H), 6,89 - 6,92 (m, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 4,58 (td, 1 H), 2,56 (td, 1 H), 1,98 - 2,14 (m, 2
H), 1,78 - 1,90 (m, 2 H), 1,67 (qd, 1 H), 1,48 - 1,61 (m, 1 H), 1,28 - 1,47 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-208
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido octahidrociclopenta[c]pirrol-3a-carboxílico (4 equiv.) fue el reactivo de amina y la mezcla se calentó a 80 °C durante 5 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se secó mediante soplado con nitrógeno, y la mezcla bruta se resuspendió en metanol y se filtró proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-208 (37 mg, rendimiento 93 %).
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 6 ppm: 8,74 (d, 1 H), 8,06 - 8,13 (m, 1 H), 7,39 - 7,45 (m, 1 H), 7,26 (m, 1 H), 7,09
(m, 1 H), 7,02 (d, 1 H), 6,91 (d, 1 H), 6,82 (m, 1 H), 5,96 (s., 2 H), 4,40 (d, 1 H), 4,06 (m, 1 H), 3,79 (d, 2 H), 3,06 (br.
s., 1 H), 2,31 (m, 1 H), 2,11 (m, 1 H), 1,90 (m, 2 H), 1,64 (m, 1 H),1,30 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-233
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el éster metílico de L-ciclohexilglicina (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó hasta 90 °C como solución en THF/agua (10:1) durante 16 h. El contenido se enfrió, se trató con hidróxido de sodio sólido y se agitó a 23 °C durante
2 h. El disolvente orgánico se retiró de la mezcla de reacción, a su término, y el precipitado se filtró proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-233 como un sólido blanco (26,0 mg, 0,047 mmol, rendimiento 70,7
%).
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 6 ppm: 9,08 (d,1 H), 8,12 (d, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,29-7,35 (m, 1 H), 7,25 (d, 1 H),
7,18-7,24 (m, 1 H), 7,09 (t, 1 H), 6,93 (t, 1 H), 6,77 (d, 1 H), 5,82-5,92 (dd, 2 H), 4,17 (br. s., 1 H), 3,30 (s., 1 H), 1,79 -1,91 (m, 2 H), 1,50 - 1,69 (m, 3 H), 0,89 - 1,24 (m, 5 H).
Compuesto de referencia I-243
Una mezcla del producto intermedio 1 (25 mg, clorhidrato de (S)-metil-2-amino-2-ciclohexilacetato (41,7 mg, 3 equiv.) y trietilamina (93 pl, 10 equiv), se calentó a 90 °C durante 16 ciclos en una mezcla de THF/agua. La mezcla de reacción
se enfrió, se añadió NaOH (5,35 mg, 2 equiv), y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. Se retiró el disolvente orgánico y el precipitado resultante se filtró proporcionando ácido (R)-2-ciclohexil-2-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1 H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)acético como un sólido blanco (26,0 mg, 0,047 mmol, rendimiento 70,7 %).12
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 6 ppm: 8,75 (d, 1 H), 8,11 (d, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 7,23 - 7,29 (m, 1 H), 7,00 - 7,11
(m, 1 H), 7,02 (t, 1 H), 6,88 (d, 1 H), 6,83 (t, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 4,73 (d,1 H), 1,97-2,04 (m, 1 H), 1,88 (t, 2 H), 1,80 (d,
2 H), 1,70 (d, 1 H), 1,17 -1,39 (m, 5 H). El compuesto del título se preparó también siguiendo el procedimiento general
B, salvo que el éster metílico de metil D-cicIohexilglicina (como la sal de HCl) fue el reactivo amina (1 equiv.), y el contenido se calentó a 90 °C durante 16 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se enfrió, se trató con hidróxido de sodio sólido y se agitó a 23 °C durante 18 h. El contenido se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-243 (1 mg, rendimiento 3 %) como un sólido blanco.
Compuesto de referencia I-242
El compuesto del título se preparó en 4 etapas:
Etapa 1: Ácido trans-2-(4-metilfenilsulfonamido)ciclohexanocarboxílico
Se calentó una suspensión de ácido trans-2-aminociclohexanocarboxílico (318 mg, 1,0 equiv.), cloruro de ptoluenosulfonilo (508 mg, 1,2 equiv.) y solución acuosa de hidróxido de sodio 1 M (6,7 ml, 3,0 equiv) en agua (5 ml) a 90 °C durante 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C, y se acidificó mediante la adición de una solución acuosa de ácido clorhídrico 3 M. El precipitado blanco resultante se filtró y se lavó sucesivamente con agua y a continuación etanol proporcionando ácido trans-2-(4-metilfenilsulfonamido)ciclohexanocarboxílico racémico como un sólido blanco (179,6 mg, rendimiento 27 %).
1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 (ppm): 7,73 (d, 2 H), 7,27 (d, 2 H), 4,98 - 5,16 (m, 1 H), 3,24 - 3,46 (br. s, 1 H), 2,39 (s, 3 H), 2,23 - 2,34 (m, 1 H), 1,87 - 2,03 (m, 2 H), 1,58 - 1,78 (m, 2 H), 1,42 - 1,58 (m, 1 H), 1,08 - 1,35 (m, 3 H).
Etapa 2: Síntesis de ácido frans-2-(N,4-dimetilfenilsulfonamido)ciclohexanocarboxílico
Una solución de ácido trans-2-(4-metilfenilsulfonamido)ciclohexanocarboxílico (187 mg, 0,629 mmol), yodometano (0,124 ml, 3,0 equiv) y solución acuosa de hidróxido de sodio 1 M (2,52 ml, 4,0 equiv) en agua (5 ml) se calentó a 75 °C durante 1,5 horas, tras lo cual la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente, se lavó con diclorometano (2 x 30 ml), se acidificó mediante la adición de solución acuosa de ácido clorhídrico 3 M, se extrajo con diclorometano (3 x 30 ml), se secó (sulfato de sodio), se filtró, y se concentró proporcionando el producto bruto de ácido N-metilaminoácido. La purificación se logró usando cromatografía en gel de sílice con metanol de 2 a 5 % en diclorometano como eluyente en el transcurso de 40 minutos. Esto proporcionó ácido trans-2-(A/,4-dimetilfenilsulfonamido)ciclohexanocarboxílico como una espuma blanca (130 mg, rendimiento 66 %).
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm: 7,69 - 7,76 (d, 2 H), 7,28 (d, 2 H), 4,03 - 4,16 (m, 1 H), 2,78 (s, 3 H), 2,49 - 2,61 (m, 1 H), 2,43 (s, 3 H), 2,02-2,13 (m, 1 H), 1,73- 1,84 (m, 2 H), 1,63- 1,73 (m, 1 H), 1,55- 1,63 (m, 1 H), 1,35- 1,45 (m, 2 H), 1,10-1,22 (m, 1 H).
Etapa 3: bromhidrato de ácido trans-2-(metilamino)ciclohexanocarboxílico
A un vial que contenía ácido trans-2-(N,4-dimetilfenilsulfonilamido)ciclohexanocarboxílico (130 mg, 1,0 equiv) se añadió una solución de ácido acético glacial a 33 % (1,2 ml, 53 equiv). La suspensión se calentó a 85 °C durante 2,5 horas, tras lo cual se diluyó en agua y se lavó con dietil éter (2 x 30 ml) y, a continuación, se concentró hasta obtener un residuo espumoso dorado. La recristalización de este material a partir de acetona proporcionó bromhidrato de ácido trans-2-(metilamino)cidohexanocarboxílico como un sólido de color crema (54,4 mg, rendimiento 55 %).
1H RMN (500 MHz, D2O) 8 (ppm): 3,24 - 3,37 (m, 1 H), 2,65 (s, 3 H), 2,47 - 2,60 (m, 1 H), 2,06 - 2,20 (m, 2 H), 1,76 -1,84 (m, 1 H), 1,15-1,51 (m, 5 H).
Etapa 4: Compuesto de referencia I-242
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácidotrans-2-(metilamino)ciclohexanocarboxílico (como la sal de HBr) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 85 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se enfrió, se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-242 (1 mg, rendimiento 3 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, M ETAN O L^) 8 ppm: 8,75 (d, 1 H), 8,09 (d, 1 H), 7,38 (o, 1 H), 7,23 - 7,30 (m, 1 H), 7,06 - 7,11
(m, 1 H), 7,00 - 7,05 (m, 1 H), 6,89 (d, 1 H), 6,83 (t, 1 H), 5,94 (o, 2 H), 3,16 - 3,24 (m, 3 H), 2,79 (br. s., 1 H), 2,08 (d,
1 H), 1,86 - 1,97 (m, 2 H), 1,81 (d, 2 H), 1,45 - 1,70 (m, 2 H), 1,34 (dt, 1 H)
Compuesto de referencia I-31
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2-amino-1-morfolinoetanona (5 equiv.) fue el reactivo de amina, y se usaron 3 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 80 °C durante 1 h como una solución en THF. El disolvente se retiró al vacío y el contenido se recogió en acetato de etilo.
La capa orgánica se lavó con solución de ácido clorhídrico 1 N, agua y salmuera, se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de
0 a 100 % acetato de etilo/hexano proporcionando el compuesto deseado, compuesto de referencia I-31 (4,7 mg, rendimiento 23 %).
1H RMN (500 MHz, CDCh) 88,44-8,52 (m, 1 H), 8,14-8,25 (m, 1 H), 7,19-7,27 (m, 1 H), 6,97-7,12 (m, 2 H), 6,83-6,91
(m, 1 H), 6,61-6,66 (m, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,39-4,47 (m, 2 H), 3,71-3,82 (m, 7 H), 3,56-3,63 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-33
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-metilmorfolina fue el reactivo de amina, se usaron 5 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 60 °C durante 18 h como una solución en THF, y a continuación a 80 °C durante 18 h. El disolvente se retiró al vacío y el contenido se recogió en acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con ácido clorhídrico 1 N, agua y salmuera, se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-5 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto de referencia I-33 (8 mg, rendimiento 41 %).
1H RMN (500 MHz, CDCla) 88,48 (m, 1 H), 8,22 (m, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 7,1822 (m, 1 H), 6,99 (s, 2 H), 6,87 (m, 1 H 6,61 (d, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,69 (m, H), 4,37 (m, 1 H), 4,05 (m, 1 H), 3,83 (m, 2 H), 3,69 (m, 1 H), 3,4752 (m, 1 H), 1,45 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-34
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el pirrolidin-2-carboxilato de metilo fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 60 °C durante 18 h como una solución en THF. El disolvente se retiró al vacío y el contenido se recogió en acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución de ácido clorhídrico 1 N, agua y salmuera, se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-5 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-34 (10,6 mg, rendimiento
57 %).
1H RMN (500 MHz, CDCh) 88,47 (m, 1 H), 8,20 (m, 1 H), 8,17,29 (s, 1 H), 7,21 (m, 1 H), 7,04 (m, 1 H), 6,98 (m, 1 H),
6,87 (m, 1 H), 6,59 (dm, 1 H), 5,98 (m, 2 H), 4,76 (m, 1 H), 4,05 (m, 1 H), 3,94 (m, 1 H), 3,73 (s, 3 H), 2,35 (m, 1 H),
2,17 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-35
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el terf-butilpirrolidin-3-ilcarbamato fue el reactivo de amina (5 equiv.), se usaron 3 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 80 °C durante
1 h como una solución en<t>H<f>. El disolvente se retiró al vacío y el contenido se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-35 (30 mg, rendimiento 68 %).
1H RMN (500 MHz, CDCh) 88,44-8,48 (m, 1 H), 8,14-8,19 (m, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,17-7,24 (m, 1 H), 6,95-7,08 (m, 2
H), 6,82-6,89 (m, 1 H), 6,57-6,63 (m, 1 H), 5,99 (s, 2 H), 4,72-4,79 (m, 1 H), 4,32-4,43 (m, 1 H), 4,00-4,07 (m, 1 H),
3,86-3,95 (m, 2 H), 3,68-3,75 (m, 1 H), 2,23-2,33 (m, 1 H), 1,96-2,05 (m, 1 H), 1,48 (s, 9 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-41
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el pirrolidin-2-carboxilato de metilo fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 60 °C durante 18 h como una solución en THF. El disolvente se retiró al vacío y el contenido se recogió en acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución de ácido clorhídrico 1 N, agua y salmuera, se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-5 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto de referencia I-41 (4 mg, rendimiento 22 %).
1H RMN (500 MHz, CDCh) 88,44-8,49 (m, 1 H), 8,19-8,26 (m, 1 H), 7,34-7,39 (m, 1 H), 7,18-7,25 (m, 1 H), 6,92-7,10
(m, 3 H), 6,74-6,80 (m, 1 H), 5,95-6,00 (m, 2 H), 4,45-4,51 (m, 2 H), 2,42-2,51 (m, 3 H), 2,16-2,23 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-46
El compuesto del título se preparó tratando una solución del compuesto de referencia I-35 en diclorometano con un volumen igual de ácido trifluroacético. Después de agitar a 23 °C durante 1 h, el disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno, y el contenido se secó al vacío durante 18 h proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-46 (29 mg) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 88,83-8,87 (m, 1 H), 8,37-8,42 (m, 1 H), 7,59-7,63 (m, 1 H), 7,29-7,37 (m, 1 H), 7,05-7,16
(m, 2 H), 6,94-7,02 (m, 2 H), 6,04 (s, 2 H), 4,13-4,33 (m, 5 H), 2,53-2,64 (m, 1 H), 2,27-2,39 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-48
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el piperidin-2-carboxilato de metilo fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 60 °C durante 18 h como una solución en THF. El disolvente se retiró al vacío y el contenido se recogió en acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución de ácido clorhídrico 1 N, agua y salmuera, se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-48 (3,7 mg, rendimiento 18 %).
1H RMN (400 MHz, CDCla) 88,46-8,50 (m, 1 H), 8,37-8,44 (m, 1 H), 7,32-7,37 (m, 1 H), 7,17-7,23 (m, 1 H), 6,97-7,09
(m, 3 H), 6,59-6,62 (m, 1 H), 5,91 (s, 2 H), 5,46-5,57 (m, 1 H), 4,54-4,67 (m, 1 H), 3,75 (s, 3 H), 3,38-3,47 (m, 1 H), 2,34-2,45 (m, 1 H), 1,78-1,89 (m, 3 H), 1,61-1,72 (m, 1 H), 1,45-1,55 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-53
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido acetidin-3-carboxílico fue el reactivo de amina (5 equiv.), se usaron 3 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 75 °C durante 18 h como una solución en THF. El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno. El producto se aisló mediante
HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-53 (15,4 mg, rendimiento
88 %).
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,81-8,85 (m, 1 H), 8,22-8,27 (m, 1 H), 7,55-7,59 (m, 1 H), 7,29-7,36 (m, 1 H), 7,05-7,16 (m, 2 H), 6,93-6,99 (m, 2 H), 5,99-6,05 (m, 2 H), 4,65-4,84 (m, 4 H), 3,75-3,84 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-54
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-metilpiperazin-2-ona fue el reactivo de amina (5 equiv.), se usaron 3 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 75 °C durante 18 h como solución en THF. El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno. El producto se aisló mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-54 (1,4 mg, rendimiento 8 %).
1H RMN (500 MHz, CDCh) 88,53-8,55 (m, 1 H), 8,49-8,53 (m, 1 H), 7,43-7,48 (m, 1 H), 7,31-7,37 (m, 1 H), 7,24-7,28
(m, 1 H), 7,09-7,14 (m, 1 H), 7,02-7,08 (m, 2 H), 6,67-6,70 (m, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 5,34-5,47 (m, 1 H), 4,89-4,95 (m, 1
H), 3,62-3,78 (m, 2 H), 3,50-3,60 (m, 1 H), 1,70 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-55
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido acetidin-2-carboxílico (5 equiv.) fue el reactivo de amina, y se usaron 5 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 75 °C durante 18 h como una solución en THF. El disolvente se retiró al vacío y el contenido se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-55 (1,3 mg, rendimiento 2 %).
<1>H R M N (500 M Hz, C D<3>O D ) 8 8 ,82 (s, 1 H), 8 ,23 -8 ,29 (m, 1 H), 7 ,40 -7 ,52 (m, 1 H), 7 ,28 -7 ,35 (m, 1 H), 7 ,04 -7 ,16 (m,
2 H), 6 ,93 (br. s., 2 H), 5 ,98 -6 ,03 (m , 2 H), 5 ,23 -5 ,36 (m, 1 H), 4 ,42 -4 ,67 (m, 2 H), 2 ,92 -3 ,07 (m, 1 H), 2 ,50 -2 ,62 (m, 1
H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-56
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-fluoropiperidina (5 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 5 equivalentes detrietilamina, y el contenido se calentó hasta 75 °C durante 18 h como una solución en THF. El disolvente se retiró al vacío y el contenido se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-56 (1,3 mg, rendimiento 2 %).
1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 88,52-8,56 (m, 1 H), 8,45-8,50 (m, 1 H), 7,49-7,54 (m, 1 H), 7,24-7,28 (m, 1
H), 7,13-7,20 (m, 1 H), 7,01-7,11 (m, 2 H), 6,68 (s, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 4,85-5,03 (m, 1 H), 4,56-4,81 (m, 2 H), 3,71-3,89
(m, 1 H), 3,47-3,60 (m, 1 H), 1,75-2,26 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-57
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3,3-difluoropiperidina (5 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 5 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 75 °C durante 18 h como una solución en THF. El disolvente se retiró al vacío y el contenido se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-57 (4,5 mg, rendimiento 5 %).
1H RMN (500 MHz, CDCh) 88,52-8,55 (m, 1 H), 8,47-8,52 (m, 1 H), 7,40-7,45 (m, 1 H), 7,24-7,28 (m, 1 H), 7,11-7,17
(m, 1 H), 7,02-7,10 (m, 2 H), 6,65-6,68 (m, 1 H), 5,93-5,98 (m, 2 H), 4,20-4,30 (m, 2 H), 4,00-4,08 (m, 2 H), 2,16-2,27
(m, 2 H), 1,96-2,05 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-58
Se disolvió una solución del compuesto de referencia I-48 en THF, y se añadió una solución acuosa de hidróxido de litio (3 equiv.). La solución se agitó a 25 °C durante 18 h. El contenido se concentró y la capa acuosa restante se acidificó con una solución de ácido clorhídrico 1 N dando lugar a un precipitado blanco. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera. El contenido se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-58 (29 mg, rendimiento 100 %).
1H RMN (400 MHz, CD3OD) 88,75 (m, 1 H), 8,20 (m, 1 H), 7,42 (m, 1 H), 7,26 (m, 1 H), 6,98-7,11 (m, 2 H), 6,84 (m,
2 H), 5,95 (s, 2 H), 5,47 (m, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 3,44 (m, 1 H), 2,31-2,40 (m, 1 H), 1,93 (m, 1 H), 1,81 (m, 2 H), 1,68
(m, 1 H), 1,54 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-59
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la piperazin-2-ona fue el reactivo de amina (5 equiv.), se usaron 5 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 75 °C durante 18 h como solución en THF. El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno y el contenido se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-59 (1,6 mg, rendimiento 2 %).
1H RMN (500 MHz, CDCla ) 88,51-8,54 (m, 1 H), 8,45-8,49 (m, 1 H), 7,69-7,73 (m, 1 H), 7,23-7,27 (m, 1 H), 7,03-7,09
(m, 3 H), 6,69-6,73 (m, 2 H), 6,00-6,03 (m, 2 H), 4,70-4,73 (m, 2 H), 4,26-4,32 (m, 2 H), 3,64-3,69 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-60
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la trietilamina fue el reactivo de amina y el contenido se calentó hasta 60 °C durante 18 h como una solución en THF. El disolvente se retiró al vacío y el contenido se recogió en acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución de ácido clorhídrico 1 N, agua y salmuera, se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC
de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-60 (1,9 mg, rendimiento 11 %).
1H RMN (400 MHz, CD3OD) 88,77-8,81 (m, 1 H), 8,17-8,22 (m, 1 H), 7,48-7,52 (m, 1 H), 7,23-7,32 (m, 1 H), 7,01-7,13
(m, 2 H), 6,89-6,98 (m, 2 H), 5,96-6,01 (m, 2 H), 3,81-3,90 (m, 4 H), 1,34 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-66
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la piperidin-3-carboxamida fue el reactivo de amina (5 equiv.), se usaron 8 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 75 °C durante 18 h como solución en THF. El disolvente se retiró y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-66 (7 mg, rendimiento 36 %).
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 8,51-8,55 (m, 1 H), 8,25-8,31 (m, 1 H), 7,47-7,52 (m, 1 H), 7,22-7,27 (m, 1 H), 7,09-7,16
(m, 1 H), 7,00-7,09 (m, 2 H), 6,83-6,90 (m, 1 H), 6,67-6,72 (m, 1 H), 6,17-6,22 (m, 1 H), 5,90-5,95 (m, 2 H), 4, (m, 1 H), 4,30-4,43 (m, 1 H), 3,81-3,90 (m, 1 H), 3,60-3,69 (m, 1 H), 2,69-2,81 (m, 1 H), 2,05-2,13 (m, 2 H), 1,92-2,00
(m, 1 H), 1,69-1,81 (m, 1 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-75
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el acepan-2-carboxilato de metilo fue el reactivo de amina (1,5 equiv.), se usó carbonato de potasio (4 equiv.) en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó a 150 °C durante 10 min en el microondas como una solución en NMP. La mezcla resultante se filtró para retirar el carbonato de potasio sólido y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 20-70 % acetonitrilo/agua (con TFA a 0,1 %) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-75 (1 mg, rendimiento 3 %).
1H RMN (500 MHz, CDCla) 88,83 (m, 1 H), 8,33 (m, 1 H), 7,48 (m, 1 H), 7,31 (m, 1 H), 7,10 (m, 2 H), 6,91 (m, 2 H), 6,01 (s, 2 H), 5,04 (m, 1 H), 4,18 (m, 1 H), 3,73 (m, 1 H), 2,58 (m, 1 H), 2,04 (m, 3 H), 1,92 (m, 1 H), 1,79 (m, 1 H), 1,53 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-82
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el (1R,3S,5S)-8-azabiciclo[3.2.1]octan-3-il-metanol (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina (3,5 equiv.), se usaron 5 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 120 °C durante 30 min en el microondas como solución en NMP. La mezcla resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-82 (10,8 mg, rendimiento 42 %).
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,82-8,86 (m, 1 H), 8,25-8,29 (m, 1 H), 7,62-7,66 (m, 1 H), 7,30-7,36 (m, 1 H), 7,05-7,15 (m, 2 H), 6,92-7,02 (m, 2 H), 6,00-6,06 (m, 2 H), 3,66-3,72 (m, 2 H), 2,10-2,40 (m, 4 H), 1,78-2,07 (m, 5 H).
Compuesto de referencia I-83
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido morfolin-2 carboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina (2 equiv.), se usó base de Hunig (3 equiv.) en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 120 °C durante 30 min en el microondas como una solución en NMP. La mezcla resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 0-95 % acetonitrilo/agua (con TFA a 0,1 %) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-83 (10,8 mg, rendimiento 42 %) como un cristal transparente.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,81-8,85 (m, 1 H), 8,35-8,44 (m, 1 H), 7,64 (s, 1 H), 7,26-7,35 (m, 1 H), 7,04 7,14 (m, 2 H), 6,97 (d, 2 H), 6,02 (s, 2 H), 4,73 (m, 1 H), 4,46 (m, 2 H), 4,14-4,20 (m, 1 H), 3,97 (m, 1 H), 3,89 (d, 2 H).
Compuesto de referencia I-87
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (R)-piperidin-2-carboxílico (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 5 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 90 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (9:1). El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 20-51 % de acetonitrilo/agua (en 0,1 % TFA) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-87 (12 mg, rendimiento 48 %).
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,79-8,83 (m, 1 H), 8,34-8,39 (m, 1 H), 7,60 (s, 1 H), 7,27-7,35 (m, 1 H), 7,03 7,15 (m, 2 H), 6,90-6,98 (m, 2 H), 6,02 (s, 2 H), 4,61-4,83 (m, 1 H), 3,43-3,58 (m, 1 H), 2,43-2,51 (m, 1 H), 1,69-2,02 (m, 5 H), 1,55-1,69 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-84
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-piperidin-2-carboxílico (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 5 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 90 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (9:1). El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 20-51 % acetonitrilo/agua (en 0,1 % TFA) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-84 (9,6 mg, rendimiento 39 %).
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,79-8,83 (m, 1 H), 8,31-8,36 (m, 1 H), 7,54-7,58 (m, 1 H), 7,27-7,34 (m, 1 H), 7,04-7,15 (m, 2 H), 6,89-6,97 (m, 2 H), 6,01 (s, 2 H), 5,65 (br. s., 1 H), 4,58-4,80 (m, 1 H), 3,42-3,57 (m, 1 H), 2,41 2,50 (m, 1 H), 1,67-2,02 (m, 4 H), 1,55-1,66 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-95
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (R)-morfolin-3-carboxílico (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usó base de Hunig (5 equiv.) en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 90 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (9:1). El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 20-51 % acetonitrilo/agua (en 0,1 % TFA) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-95 (19 mg, rendimiento 76 %).
<1>H R M N (500 M Hz, C D<3>O D ) 8 8,81 (d, 1 H), 8 ,39 (d, 1 H), 7 ,57 (s, 1 H), 7 ,26 - 7 ,34 (m, 1 H), 7 ,02 - 7 ,16 (m, 2 H), 6 ,93 (d, 2 H), 6 ,00 (s, 2 H), 5 ,26 - 5 ,59 (m, 1 H), 4 ,55 (d, 2 H), 4 ,04 (s, 1 H), 3 ,93 (dd, 1 H), 3 ,62 - 3 ,80 (m, 2 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-96
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-morfolin-3-carboxílico (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usó base de Hunig (5 equiv.) en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 90 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (9:1). El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 20-51 % acetonitrilo/agua (en 0,1 % TFA) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-96 (8 mg, rendimiento 31 %).
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,81 (s, 1 H), 8,34-8,42 (m, 1 H), 7,51-7,59 (m, 1 H), 7,27-7,35 (m, 1 H), 7,02 7,15 (m, 2 H), 6,94 (s, 2 H), 6,01 (s, 2 H), 5,37-5,54 (m, 1 H), 4,56 (d, 2 H), 4,01-4,09 (m, 1 H), 3,89-3,96 (m, 1 H), 3,61-3,81 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-97
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-1-carboxílico (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usó base de Hunig (5 equiv.) en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 90 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (9:1). El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno, y el contenido se recogió en acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución de ácido clorhídrico 1 N, agua y salmuera, se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-97 (3,4 mg, rendimiento 12 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4)88,84-8,89 (m, 1 H), 8,42-8,49 (m, 1 H), 7,62-7,69 (m, 2 H), 7,30-7,40 (m, 4 H), 7,06-7,16 (m, 2 H), 6,97(m, 2 H), 6,12-6,18 (m, 1 H), 6,05 (s, 2 H), 4,48-4,58 (m, 1 H), 4,14-4,23 (m, 2H), 3,05-3,15 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-98
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, excepto que el 3-metil-5-(piperidin-2 il)-1,2,4-oxadiazol (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usó base de Hunig (5 equiv.) en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 90 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (9:1). El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno, y el contenido se recogió en acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución de ácido clorhídrico 1 N, agua y salmuera, se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto I-98 (5,3 mg, rendimiento 20 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,77-8,83 (m, 1 H), 8,37-8,45 (m, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,26-7,36 (m, 1 H), 7,03 7,17 (m, 2 H), 6,93 (s, 2 H), 6,48-6,55 (m, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,60-4,75 (m, 1 H), 3,45-3,55 (m, 1 H), 2,49-2,58 (m, 1 H), 2,38 (s, 3 H), 2,15-2,27 (m, 1 H), 1,74-1,94 (m, 3 H), 1,59-1,73 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-99
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, excepto que el morfolin-3-carboxilato de metilo (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usó base de Hunig (3 equiv.) en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 120 °C durante 2 h como una solución en NMP. El disolvente se retiró y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-99 (7 mg, 25 % rendimiento) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, CD3OD) 88,71-8,75 (m, 1 H), 8,21-8,26 (m, 1 H), 7,39-7,43 (m, 1 H), 7,19-7,29 (m, 1 H), 6,97-7,12 (m, 2 H), 6,85-6,88 (m, 1 H), 6,75-6,82 (m, 1 H), 5,90-5,95 (m, 2 H), 5,20-5,31 (m, 1 H), 4,45 (s, 1 H), 3,93-4,01 (m, 1 H), 3,82-3,93 (m, 2 H), 3,66-3,75 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-105
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la piperidin-2-carboxamida (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 6 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 60 °C durante 48 h como una solución en THF/agua (9:1). El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 20-51 % acetonitrilo/agua (en 0,1 % TFA) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-105 (12 mg, 48 % rendimiento) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,80-8,87 (m, 1 H), 8,35-8,41 (m, 1 H), 7,58-7,65 (m, 1 H), 7,28-7,36 (m, 1 H), 7,05-7,16 (m, 2 H), 6,91-7,02 (m, 2 H), 6,03 (s, 2 H), 5,53-5,61 (m, 1 H), 4,65-4,77 (m, 1 H), 3,56-3,69 (m, 1 H), 2,37 2,46 (m, 1 H), 1,62-2,07 (m, 6 H).
Compuesto de referencia I-106
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-aminotetrahidro-2 H-pirano-4-carboxílico (3,5 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 5 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 200 °C durante 10 min en el microondas como una solución en NMP. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se filtró. El filtrado se alcalinizó a pH 10 con una solución de hidróxido de sodio 3N y se extrajo con diclorometano. A continuación, el filtrado se acidificó a pH 1 con una solución de ácido clorhídrico 1N y se extrajo con diclorometano. La capa orgánica se concentró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-106 (2,3 mg, rendimiento 9 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,81-8,87 (m, 1 H), 8,31-8,35 (m, 1 H), 7,38-7,41 (m, 1 H), 7,25-7,34 (m, 1 H), 7,04-7,15 (m, 2 H), 6,89-6,98 (m, 2 H), 6,01 (s, 2 H), 3,87-3,96 (m, 2 H), 3,76-3,87 (m, 2 H), 2,36-2,45 (m, 2 H), 2,23 2,33 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-110
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-amino-1-(tertbutoxicarbonil)piperidin-4-carboxílico (3 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 5 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 120 °C durante 18 h como una solución en DMSO. Sin procesamiento, el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia 1-110(8,2 mg, rendimiento 26 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,83 (s, 1 H), 8,31-8,36 (m, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,26-7,36 (m, 1 H), 7,02-7,14 (m, 2 H), 6,91 (s, 2 H), 6,00 (s, 2 H), 3,75-3,88 (m, 2 H), 3,36-3,49 (m, 2 H), 2,29 (br. s., 4 H), 1,50 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-111
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina (2,5 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 120 °C durante 18 h como una solución en THF. El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 20-51 % acetonitrilo/agua (en 0,1 % TFA) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-111 (13,9 mg, 55 % rendimiento) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,82-8,86 (m, 1 H), 8,28-8,34 (m, 1 H), 7,68-7,73 (m, 1 H), 7,24-7,35 (m, 6 H), 6,93-7,15 (m, 5 H), 6,00-6,06 (m, 2 H), 5,24 (s, 2 H), 4,27-4,33 (m, 2 H), 3,10-3,16 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-122
En un matraz de 25 ml se disolvió el compuesto de referencia I-110 (0,056 g, 0,096 mmol) en DCM (volumen: 2 ml), y TFA (2 ml, 26,0 mmol). Después de agitar durante 3 horas a temperatura ambiente, la reacción se completó. El disolvente se retiró al vacío dando un producto puro, el compuesto de referencia I-122 (13,9 mg, rendimiento 55 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,78-8,86 (m, 1 H), 8,30-8,38 (m, 1 H), 7,26-7,38 (m, 2 H), 7,01-7,15 (m, 2 H), 6,84-6,96 (m, 2 H), 5,97 (s, 2 H), 3,36-3,51 (m, 4 H), 2,50-2,67 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-126
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 6-metoxi-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-1-carboxílico (3 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 120 °C durante 18 h como una solución en DMSO. La mezcla de reacción se filtró y se purificó directamente mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-126 (11 mg, rendimiento 38 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,82-8,85 (m, 1 H), 8,33-8,37 (m, 1 H), 7,53-7,59 (m, 2 H), 7,27-7,34 (m, 1 H), 7,10 (m, 2 H), 6,86-6,97 (m, 4 H), 5,01 (s, 2 H), 5,96 (m, 1 H), 4,35-4,45 (m, 1 H), 4,04-4,15 (m, 1 H), 3,84 (s, 3 H), 3,04 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-127
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 6-hidroxi-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolina-1-carboxílico (3 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 120 °C durante 18 h como una solución en DMSO. La mezcla de reacción se filtró y se purificó directamente mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-127 (5,2 mg, rendimiento 18 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,83-8,87 (m, 1 H), 8,37-8,42 (m, 1 H), 7,57-7,63 (m, 1 H), 7,42-7,48 (m, 1 H), 7,28-7,36 (m, 1 H), 7,05-7,16 (m, 2 H), 6,90-7,00 (m, 2 H), 6,71-6,80 (m, 2 H), 6,02 (s, 2 H), 5,94-5,99 (m, 1 H), 4,42 4,51 (m, 1 H), 3,99-4,13 (m, 1 H), 3,16-3,27 (m, 2 H), 2,94-3,02 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-128
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 5-fluoro-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-1-carboxílico (3 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 60 °C durante 18 h como una solución en DMSO, seguido de calentamiento a 120 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se filtró y se purificó directamente mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-128 (5,7 mg, rendimiento 20 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 88,83 (m, 1 H), 8,31 (m, 1 H), 7,68 (m, 1 H), 7,28 (m, 2 H), 7,03 (m, 6 H), 6,02 (s, 2 H), 5,21 (s, 2 H), 4,27 (m, 2 H), 3,08 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-130
Una solución del compuesto de referencia I-122 (como la sal de TFA) en diclorometano se trató con trietilamina (2 equiv.) y cloruro de propionilo (1,1 equiv.) a 25 °C. La reacción se agitó a 25 °C durante 18 h. Quedó una suspensión, así como un contenido tratado con 5 gotas de NMP (el contenido se vuelve transparente), y 1 equivalente adicional tanto de cloruro de propionilo como de trietilamina. A continuación, el contenido se agitó a 25 °C durante 18 h. El disolvente se retiró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-130 (5,5 mg, 47 % rendimiento) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,82-8,86 (m, 1 H), 8,33-8,38 (m, 1 H), 7,38-7,42 (m, 1 H), 7,28-7,36 (m, 1 H), 7.05- 7,15 (m, 2 H), 6,89-6,99 (m, 2 H), 6,00 (s, 2 H), 4,04-4,13 (m, 1 H), 3,82-3,92 (m, 1 H), 3,55-3,64 (m, 1 H), 3,44 3,52 (m, 1 H), 2,21-2,52 (m, 7 H), 1,16 (t, 3 H).
Compuesto de referencia I-131
Una solución del compuesto de referencia I-122 (como la sal de TFA) en diclorometano se trató con trietilamina (2 equiv.) y carbonoclorohidrato de metilo (1,1 equiv.) a 25 °C. La reacción se agitó a 25 °C durante 18 h. Quedó una suspensión, así como un contenido tratado con 5 gotas de NMP (el contenido se vuelve transparente), y 1 equivalente adicional tanto de carbonoclorohidrato de metilo como de trietilamina. A continuación, el contenido se agitó a 25 °C durante 18 h. El disolvente se retiró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-131 (3,8 mg, 32 % rendimiento) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,81-8,86 (m, 1 H), 8,30-8,37 (m, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,26-7,34 (m, 1 H), 7,04 7,15 (m, 2 H), 6,93 (m, 2 H), 6,00 (s, 2 H), 3,88 (m, 2 H), 3,73 (s, 3 H), 3,42-3,52 (m, 2 H), 2,28-2,34 (br.s., 4 H).
Compuesto de referencia I-132
Una solución del compuesto de referencia I-122 (como la sal de TFA) en diclorometano se trató con trietilamina (2 equiv.) e isocianato de etilo (1,1 equiv.) a 25 °C. La reacción se agitó a 25 °C durante 18 h. Quedó una suspensión, así como un contenido tratado con 5 gotas de NMP (el contenido se vuelve transparente), y 1 equivalente adicional tanto de isocianato de etilo como de trietilamina. A continuación, el contenido se agitó a 25 °C durante 18 h. El disolvente se retiró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-132 (5,9 mg, 49 % rendimiento) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,83-8,86 (m, 1 H), 8,32-8,37 (m, 1 H), 7,38-7,41 (m, 1 H), 7,28-7,34 (m, 1 H), 7.05- 7,15 (m, 2 H), 6,89-6,99 (m, 2 H), 6,00 (s, 2 H), 3,74-3,83 (m, 2 H), 3,37-3,45 (m, 2 H), 3,19-3,26 (m, 2 H), 2,30 (s, 4 H), 1,14 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-153
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-(metilamino)benzoico fue el reactivo de amina, se usaron 5 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 120 °C durante 12 h como una solución en THF. El disolvente se retiró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-153 (5,5 mg, 40 % rendimiento) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 88,80-8,85 (m, 1 H), 8,12-8,21 (m, 2 H), 7,71-7,78 (m, 1 H), 7,53-7,64 (m, 3 H), 7,28-7,36 (m, 1 H), 7,06-7,17 (m, 2 H), 6,91-7,02 (m, 2 H), 6,04 (s, 2 H), 3,72 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-161 y compuesto de referencia I-162
Los compuestos del título se prepararon siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-metilpiperidin-2-carboxílico fue el reactivo de amina, se usó base de Hunig (5 equiv.) en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 120 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (5:1). El disolvente se retiró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando los compuestos deseados, el compuesto de referencia I-161 (cis, racémico, 5,1 mg, 20 % rendimiento) como un sólido y el compuesto de referencia I-162 (trans, racémico, 1,3 mg, 5 %) como un sólido.1*3
1H RMN (400 MHz, CD3OD) Compuesto de referencia I-161 88,77-8,80 (m, 1 H), 8,30-8,34 (m, 1 H), 7,52-7,56 (m, 1 H), 7,23-7,32 (m, 1 H), 6,99-7,12 (m, 2 H), 6,87-6,94 (m, 2 H), 5,98 (s, 2 H), 5,24-5,30 (m, 1 H), 4,50-4,61 (m, 1 H), 3,72-3,83 (m, 1 H), 2,09-2,21 (m, 1 H), 1,91-2,00 (m, 1 H), 1,72-1,81 (m, 2 H), 1,48-1,62 (m, 1 H), 1,22 (d, J=7,43 Hz, 3 H).
1H RMN (400 MHz, CD3OD) Compuesto de referencia I-16258,78-8,80(m, 1 H), 8,31-8,35 (m, 1 H), 7,55-7,58 (m, 1 H), 7,24-7,32 (m, 1 H), 7,01-7,12 (m, 2 H), 6,87-6,96 (m, 2 H), 5,99 (s, 2 H), 5,29-5,39 (m, 1 H), 3,44-3,57 (m, 1 H), 2,67-2,75 (m, 1 H), 1,78-2,03 (m, 3 H), 1,54-1,72 (m, 2 H), 1,19 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-197
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que se usó ácido 2-(piperidin-4 iloxi)acético como reactivo de amina, base de Hunig (5 equiv.) en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). El disolvente se retiró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-197 (3 mg, 11 % rendimiento) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 58,80-8,84 (m, 1 H), 8,24-8,30 (m, 1 H), 7,57-7,64 (m, 1 H), 7,29-7,35 (m, 1 H), 7,05-7,16 (m, 2 H), 6,92-7,01 (m, 2 H), 6,00-6,05 (m, 2 H), 4,28-4,36 (m, 2 H), 4,23 (s, 2 H), 3,97-4,05 (m, 2 H), 3,82 3,89 (m, 1 H), 2,05-2,16 (m, 2 H), 1,87-1,95 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-214
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-aminobutanoico fue el reactivo de amina, y el contenido se agitó durante 14 h. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de metanol/diclorometano a 0-10 % proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-214 (20 mg, 57 % rendimiento) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 12,09 (bs, 1 H), 9,08 (d, 1 H), 8,21 (d, 1 H), 8,19 (bs, 1 H), 7,55 (s, 1 H), 7,33-7,27 (m, 1 H), 7,21-7,18 (m, 2 H), 7,08 (ddd, 1 H), 6,82 (t, 1 H), 5,88 (s, 2 H), 3,50 (dd, 2 H), 2,30 (dd, 2 H), 1,86-1,79 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-215
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-(metilamino)butanoico fue el reactivo de amina. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-215 (31 mg, 81 % rendimiento) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 59,10 (d, 1 H), 8,35 (d, 1 H), 7,67 (s, 1 H), 7,33-7,28 (m, 1 H), 7,22-7,18 (m, 2 H), 7,08 (t, 1 H), 6,86 (t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 1,88 (t, 2 H), 3,30 (d, 3 H), 2,30 (t, 2 H), 1,90-1,82 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-219
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, excepto que la N-metil-D-valina fue el reactivo de amina. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-219 (17 mg, 43 % rendimiento) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,74 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 7,27-7,22 (m, 1 H), 7,09-6,98 (m, 2 H), 6,87 (d, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4,71 (d, 1 H), 3,31 (s, 3 H), 2,51-2,43 (m, 1 H), 1,14 (d, 3 H), 0,96 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-221
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la N-metil-D-leucina fue el reactivo de amina. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-221 (31 mg, 76 % rendimiento) como un sólido.1
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 12,86 (bs, 1 H), 9,07 (d, 1 H), 8,29 (d, 1 H), 7,44 (s, 1 H), 7,32-7,27 (m, 1 H), 7,20 7,15 (m, 1 H), 7,16 (d, 1 H), 7,08-7,05 (m, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 5,83 (dd, 2 H), 3,12 (d, 3 H), 3,05-3,00 (m, 1 H), 1,91 1,82 (m, 1 H), 1,76-1,68 (m, 1 H), 1,51-1,47 (m, 1 H), 0,89 (d, 3 H), 0,85 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-185
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-(trifluorometil)pirrolidin-3-carboxílico fue el reactivo de amina. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-185 (51 mg, 87 % rendimiento) como un sólido.
<1>H -R M N (400 M H z, D M S O -d<6>) 5 9 ,05 (d, 1 H), 8 ,29 (d, 1 H), 7 ,53 (s, 1 H), 7 ,29 (q, 1 H), 7 ,24 (d, 1 H), 7 ,21 -7 ,16 (m, 1 H), 7 ,07 (t, 1 H), 6 ,78 (t, 1 H), 5 ,88 (s, 2 H), 4 ,29 (d, 1 H), 3 ,98 (d, 1 H), 3 ,95 -3 ,75 (m, 2 H), 2 ,64 -2 ,37 (m, 2 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-180
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-amino-4,4,4-trifluorobutanoico fue el reactivo de amina. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-180 (24 mg, 58 % rendimiento) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 813,29 (bs, 1 H), 9,07 (d, 1 H), 8,26 (d, 1 H), 8,15-8,12 (m, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,28 (q, 1 H), 7,18 (t, 1 H), 7,15 (s, 1 H), 7,07 (t, 1 H), 6,83 (t, 1 H), 5,84 (s, 2 H), 4,95-4,92 (m, 1 H), 3,03-2,94 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-178
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, excepto que el ácido 2-amino-4-(metilsulfonil)butanoico fue el reactivo de amina. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-178 (6 mg, 14 % rendimiento) como un sólido.
H1 RMN (400 MHz, CD3OD) 88,78 (d, 1 H), 8,29 (d, 1 H), 7,57 (s, 1 H), 7,29-7,23 (m, 1 H), 7,10-7,04 (m, 1 H), 7,03 (t, 1 H), 6,91 (d, 1 H), 6,89 (t, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 5,24 (dd, 1 H), 3,38-3,25 (m, 1 H), 3,22-3,16 (m, 1 H), 2,29 (s, 3 H), 2,67 2,58 (m, 1 H), 2,47-2,38 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I -72
Este compuesto se preparó siguiendo el procedimiento descrito anteriormente para el compuesto de referencia I-71, salvo que el disolvente de reacción fue el THF y la preparación se llevó a cabo con DCM y salmuera (22 mg, 31 %).
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 89,06 (d, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 7,33-7,27 (m, 1 H), 7,23-7,17 (m, 2 H), 7,08 7,03 (m, 1 H), 6,77-6,73 (m, 1 H), 5,86 (s, 2 H), 4,33-4,24 (m, 2 H), 4,11-4,03 (m, 2 H), 3,60-3,55 (m, 1 H), 3,14-3,07 (m, 2 H), 2,85-2,78 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-103
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la D-leucina fue el reactivo de amina. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-103 (18 mg, 46 % rendimiento) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 812,67 (bs, 1 H), 9,07 (d, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 8,04 (d, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,28 (dd, 1 H), 7,20-7,14 (m, 1 H), 7,14 (d, 1 H), 7,07 (t, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 5,89-5,80 (m, 2 H), 4,74-4,64 (m, 1 H), 1,86-1,79 (m, 1 H), 1,70-1,58 (m, 2 H), 0,90 (d, 3 H), 0,67 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-148
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (R)-2-amino-3,3-dimetilbutanoico fue el reactivo de amina. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-148 (33 mg, 83 % rendimiento) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 812,84 (br, s, 1 H), 9,09 (d, 1 H), 8,27 (d, 1 H), 7,43-7,27 (m, 2 H), 7,33-7,27 (m, 1 H), 7.18 (t, 1 H), 7,15 (d, 1 H), 7,08 (t, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 5,85 (s, 2 H), 4,58 (d, 1 H), 0,96 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-151
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-2-amino-3,3-dimetilbutanoico fue el reactivo de amina. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-151 (22 mg, 59 % rendimiento) como un sólido.1
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 812,84 (br, s, 1 H), 9,09 (d, 1 H), 8,27 (d, 1 H), 7,43-7,27 (m, 2 H), 7,33-7,27 (m, 1 H), 7.18 (t, 1 H), 7,15 (d, 1 H), 7,08 (t, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 5,85 (s, 2 H), 4,58 (d, 1 H), 0,96 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-137
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, excepto que la N-metil-L-leucina fue el reactivo de amina. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0 10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-137 (14 mg, 36 % rendimiento) como un sólido.
<1>H -R M N (400 M H z, C D<3>O D ) 8 8 ,79 (d, 1 H), 8 ,34 (d, 1 H), 7 ,52 (s, 1 H), 7 ,27 (dd, 1 H), 7 ,10-7 ,01 (m, 2 H), 6 ,95 -6 ,90 (m, 2 H), 5 ,98 (s, 2 H), 5 ,57 -5 ,47 (m, 1 H), 3 ,44 (d, 3 H), 2 ,03 -1 ,98 (m, 2 H), 1 ,74-1,51 (m, 1 H), 1 ,00 (d, 3 H), 0 ,98 (d, 3 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-115
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 5,6,7,8-tetrahidro-[1.2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-3-carboxilato de etilo (4 equiv.) fue el reactivo de amina, y la reacción se realizó en THF. La reacción se recogió en cabo en diclorometano y salmuera. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-115 (42 mg, 37 % rendimiento) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, CDCl3) 88,47 (d, 1 H), 8,35 (d, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 7,21-7,16 (m, 1 H), 7,01 (t, 1 H), 6,95 (t, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 6,65 (d, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 5,35 (s, 2 H), 4,59 (t, 2 H), 4,48 (q, 2 H), 4,30 (t, 2 H), 1,44 (t, 3 H).
Compuesto de referencia I-16
Se diluyó el producto intermedio 1 (0,030 g, 0,080 mmol) con THF (2,0 ml) y a continuación se cargó con 3-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidro[1.2,4]triazolo[4,3 a]pirazina (0,031 g, 0,161 mmol). La reacción se calentó a 50 °C y se agitó durante 1 hora. En aquel momento, la LC/<m>S no mostró formación de productos; por lo tanto, en este momento se añadió TEA (0,056 ml, 0,401 mmol) y la mezcla de reacción resultante se calentó a 80 °C durante la noche. Por la mañana, se detectó reacción limpia mediante LC/MS. La reacción bruta se concentró y se purificó usando cromatografía de SiO2 utilizando un gradiente de 0-50 % (7:1 ACN/MeOH) en DCM proporcionando el material deseado como un sólido blanco (32 mg, 72 %).
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 89,08 (d, 1 H), 8,43 (d, 1 H), 7,62 (s, 1 H), 7,30 (dd, 1 H), 7,23 (d, 1 H), 7,19 (t, 1 H), 7,07 (t, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 5,24 (s, 2 H), 4,33-4,25 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-112
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la D-serina fue el reactivo de amina, y la reacción se recogió en cabo en THF/agua. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-112 (4 mg, rendimiento 15 %) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,78 (d, 1 H), 8,27 (dd, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,29-7,23 (m, 1 H), 7,07 (t, 1 H), 7,02 (t, 1 H), 6,92-6,91 (m, 1 H), 6,88 (t, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 5,13 (t, 1 H), 4,09 (d, 2 H).
Compuesto de referencia I-86
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la D-valina fue el reactivo de amina, y la reacción se recogió en cabo en THF/agua. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-86 (2 mg, rendimiento 7 %) como un sólido. 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,80 (d, 1 H), 8,32 (d, 1 H), 7,57 (s, 1 H), 7,31-7,25 (m, 1 H), 7,10-7,02 (m, 2 H), 6,95 (s, 1 H), 6,95-6,91 (m, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,85 (d, 1 H), 2,45-2,36 (m, 1 H), 1,11 (d, 3 H), 1,10 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-88
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la L-leucina fue el reactivo de amina, y la reacción se recogió en cabo en THF/agua. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-88 (3 mg, rendimiento 10 %) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 812,67 (bs, 1 H), 9,07 (d, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 8,04 (d, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,28 (dd, 1 H), 7,20-7,14 (m, 1 H), 7,14 (d, 1 H), 7,07 (t, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 5,89-5,80 (m, 2 H), 4,74-4,64 (m, 1 H), 1,86-1,79 (m, 1 H), 1,70-1,58 (m, 2 H), 0,90 (d, 3 H), 0,67 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-67
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la glicina fue el reactivo de amina, y la reacción se recogió en cabo en THF/agua. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-67 (8 mg, rendimiento 33 %) como un sólido.1 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 812,72 (bs, 1 H), 9,07 (d, 1 H), 8,25 (d, 1 H), 8,14 (bs, 1 H), 7,45 (s, 1 H), 7,32-7,27 (m, 1 H), 7,21-7,16 (m, 1 H), 7,16 (d, 1 H), 7,07 (t, 1 H), 6,80 (t, 1 H), 5,86 (s, 2 H), 4,15 (d, 2 H).
Compuesto de referencia I-69
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la L-valina fue el reactivo de amina, y la reacción se recogió en cabo en THF/agua. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-69 (24 mg, rendimiento 66 %) como un sólido.
<1>H -R M N (400 M H z, C D<3>O D ) 8 8 ,80 (d, 1 H), 8 ,32 (d, 1 H), 7 ,57 (s, 1 H), 7 ,31 -7 ,25 (m, 1 H), 7 ,10 -7 ,02 (m, 2 H), 6 ,95 (s, 1 H), 6 ,95-6 ,91 (m, 1 H), 6 ,00 (s, 2 H), 4 ,85 (d, 1 H), 2 ,45 -2 ,36 (m, 1 H), 1,11 (d, 3 H), 1,10 (d, 3 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-89
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la N-metil-L-valina fue el reactivo de amina, y la reacción se recogió en cabo en THF/agua. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-89 (22 mg, rendimiento 76 %) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 68,74 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 7,27-7,22 (m, 1 H), 7,09-6,98 (m, 2 H), 6,87
(d, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4,71 (d, 1 H), 3,31 (s, 3 H), 2,51-2,43 (m, 1 H), 1,14 (d, 3 H), 0,96 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-79
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 1,1 -dióxido de tiomorfolina fue el reactivo de amina, y la reacción se recogió en cabo en THF/agua. La reacción se recogió en cabo en diclorometano y salmuera. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa para obtener el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-79 (4 mg, rendimiento 16 %).
1H-RMN (400 MHz, CDCl3) 68,47-8,45 (m, 1 H), 8,33 (d, 1 H), 7,24 (s, 1 H), 7,19 (dd, 1 H), 7,02 (t, 1 H), 6,96 (t, 1 H),
6,84 (t, 1 H), 6,57 (d, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 4,36 (dd, 2 H), 3,19 (dd, 2 H).
Compuesto de referencia I-68
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la L-serina fue el reactivo de amina, y la reacción se recogió en cabo en THF/agua. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-68 (12 mg, rendimiento 48 %) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 68,78 (d, 1 H), 8,27 (dd, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,29-7,23 (m, 1 H), 7,07 (t, 1 H), 7,02 (t, 1 H),
6,92-6,91 (m, 1 H), 6,88 (t, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 5,13 (t, 1 H), 4,09 (d, 2 H).
Compuesto de referencia I-65
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la ferf-butilamina (50 equiv.) fue el reactivo de amina y la reacción se calentó a 60 °C durante 48 h como una solución en THF. La reacción se concentró al vacío y el material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-30 % (7:1 acetonitrilo/metanol) en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-65 (19 mg, rendimiento 96 %) como un sólido 1H-RMN (400 MHz, CDCl3) 68,45 (d, 1 H), 8,14 (d, 1 H), 7,40 (bs, 1 H), 7,21
7,16 (m, 1 H), 7,03-6,91 (m, 3 H), 6,61 (d, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 1,58 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-113
Este compuesto se preparó tratando el compuesto de referencia I-115 con LO H H 2O en una mezcla de disolvente
2:1:1 de THF:MeOH:agua. Una vez completada la descarboxilación, la reacción se acidificó con HCl 1N y, a continuación, se extrajo (3 veces) con diclorometano. Las partes orgánicas se combinaron, se secaron (Na2SO4), se filtraron, y después se concentraron. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % MeOH en diclorometano de proporcionando el compuesto del título, el compuesto de referencia
I-113, como un sólido blanco (5 mg, 5 %).
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 69,07 (d, 1 H), 8,50 (s, 1 H), 8,41 (d, 1 H), 7,61 (s, 1 H), 7,32-7,28 (m, 1 H), 7,24 (d, 1
H), 7,19 (t, 1 H), 7,07 (t, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 5,14 (s, 2 H), 4,28-4,16 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-174
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-aminopropanoico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 14 h como una solución en THF/agua (10:1). El material bruto se purificó mediante HPLC preparativa de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-174 (17 mg, 56 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 6 ppm 8,80 (br. s., 1 H), 8,17 (br. s., 1 H), 7,55 (s, 1 H), 7,29 (d, 1 H), 7,01 - 7,15 (m, 2 H), 6,95 (br. s., 1 H), 6,91 (d, 1 H), 6,00 (br. s., 2 H), 3,96 (t, 2 H), 2,77 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-169
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-(metilamino)propanoico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 4 h como una solución en THF/agua (10:1). La reacción se concentró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-169 (14 mg, 56 % rendimiento) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 6 ppm 8,71 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 7,19 (d, 1 H), 6,89 - 7,05 (m, 2 H), 6,84 (d, 2 H), 5,90 (s, 2 H), 4,05 (t, 2 H), 3,42 (d, 3 H), 2,71 (t, 2 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-170
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-metil-3-(metilamino)propanoico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). La reacción se concentró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-170 (13 mg, 51 % rendimiento) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,68 (d, 1 H), 8,09 (d, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,14 - 7,21 (m, 1 H), 6,90 - 7,02 (m, 2 H), 6,76-6,83 (m, 2 H), 5,87 (s, 2 H), 4,01 (dd, 1 H), 3,77 (dd, 1 H), 3,34 (d, 3 H), 2,92 (m, 1 H), 1,14 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-171
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (R)-2-(aminometil)-3-metilbutanoico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). La reacción se concentró al vacío, se añadió metanol, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-171 (15 mg, rendimiento 57 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, M ETAN O L^) 8 ppm 8,86 (d, 1 H), 8,29 (d, 1 H), 7,60 (s, 1 H), 7,33 (d, 1 H), 7,06 - 7,17 (m, 2 H), 6,99 - 7,05 (m, 1 H), 6,95 (d, 1 H), 6,04 (s, 2 H), 3,93 - 4,08 (m, 2 H), 2,71 (ddd, 1 H), 2,10 (dq, 1 H), 1,07 - 1,20 (m, 6 H).
Compuesto de referencia I-173
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-2-(aminometil)-3-metilbutanoico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). La reacción se concentró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-173 (18 mg, 68 % rendimiento) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,84 (d, 1 H), 8,25 (d, 1 H), 7,56 (s, 1 H), 7,31 (d, 1 H), 7,04 - 7,15 (m, 2 H), 6,96 -7,01 (m, 1 H), 6,93 (d, 1 H), 6,01 (s, 2 H), 3,91 -4,04 (m, 2 H), 2,71 (dt, 1 H), 2 ,04-2,14 (m, 1 H), 1,14 (d, 3 H), 1,10 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-181
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (R)-3-amino-4-metilpentanoico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). La reacción se concentró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-181 (7 mg, rendimiento 21 %).
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,85 (d, 1 H), 8,29 (d, 1 H), 7,65 (s, 1 H), 7,30 - 7,37 (m, 1 H), 7,07 - 7,16 (m, 2 H), 6,98-7,03 (m, 2 H), 6,05 (s, 2 H), 4,91 -4 ,96 (m , 1 H), 2,71 -2,86(m , 2 H), 2 ,05-2,13 (m, 1 H), 1,08 (dd, 6 H). Compuesto de referencia I-182
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-3-amino-4-metilpentanoico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). La reacción se concentró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-182 (7 mg, rendimiento 24 %).
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,79 - 8,85 (m, 1 H), 8,23 - 8,28 (m, 1 H), 7,63 (d, 1 H), 7,30 (br. s., 1 H), 7,03 -7,15 (m, 2 H), 6,94-7,02 (m, 2 H), 6,03 (br. s., 2 H), 2 ,66-2,85 (m, 2 H), 2,01 -2,13 (m, 2 H), 1,00-1,10 (m, 6 H). Compuesto de referencia I-195 y compuesto de referencia I-196
Los compuestos del título se prepararon siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-metil-3-(metilamino)pentanoico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). La reacción se concentró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando dos compuestos, el compuesto de referencia I-195 (5 mg, rendimiento 16 %), y el compuesto de referencia I-196 (12 mg, rendimiento 41 %).
1H RMN para el Compuesto de referencia I-195 (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,82 (d, 1 H), 8,28 (d, 1 H), 7,57 (s, 1 H), 7.29 - 7,34 (m, 1 H), 7,05 - 7,15 (m, 2 H), 6,93 - 6,98 (m, 2 H), 6,02 (s, 2 H), 2,92 (m, 2 H), 2,75 - 2,82 (m, 3 H), 2,10 -2,19 (m, 2 H), 1,13 (d, 3 H) 1,00 (d, 3 H).
1H RMN para el Compuesto de referencia I-196 (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,83 (d, 1 H), 8,21 (d, 1 H), 7,64 (s, 1 H), 7.29 - 7,35 (m, 1 H), 7,05 -7,14 (m, 2 H), 6,95 - 7,01 (m, 2 H), 6,03 (s, 2 H), 3,27 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-202
El co m p u e s to de l títu lo se p repa ró en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 3-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1 H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4-metolpentanoato de (R)-metilo
A una solución agitada del compuesto de referencia I-181 en éter/metanol (3:1) se añadió TMS-diazometano (2 equiv.) lentamente a 23 °C. La mezcla se agitó durante 30 min y el disolvente se retiró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice proporcionando el producto intermedio deseado, 3-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1 H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il) amino)-4-metilpentanoato de (R)-metilo (58 mg, rendimiento 56 %). Etapa 2: Síntesis de 3-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1 H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)(metil)amino)-4-metilpentanoato de (R)-metilo
A una solución a 0 °C de 3-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1 H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)-4-metilpentanoato de (R)-metilo en DMF se añadió hidruro de sodio (1,2 equiv.) seguido de yodometano (1,1 equiv.). La mezcla se agitó y se calentó hasta 23 °C. La reacción se desactivó con agua y se separaron las capas. La capa acuosa se extrajo con diclorometano, y la capa orgánica se secó, se filtró y se concentró. El residuo se recogió en la siguiente etapa sin purificación adicional.
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-202
A una solución agitada de 3-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1 H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)(metil)amino)-4-metilpentanoato de (R)-metilo en THF/agua/metanol (3:1:1) se añadió hidróxido de sodio (3 equiv.). El contenido se agitó a 23 °C durante 18 h. El disolvente se retiró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto de referencia I-202 (0,5 mg, rendimiento 12 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,83 (d, 1 H), 8,29 (d, 1 H), 7,58 (s, 1 H), 7,32 (dd, 2 H), 7,06 - 7,15 (m, 1 H), 6,93 -6,99 (m, 2 H), 6,02 (s, 2 H), 2,90 (dd, 2 H), 2 ,75-2,82 (m, 3 H), 2,14 (m, 2 H), 1,13 (d, 3 H), 1,00 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-206
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-amino-2,2-difluoropentanoico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 18 h como una solución en dioxano/agua (10:1). La reacción se concentró al vacío, se añadió metanol, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-206 (20 mg, rendimiento 22 %).
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,78 (d, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 7,61 (s, 1 H), 7,25 - 7,31(m, 1 H), 7,07 - 7,12 (m, 1 H), 7,05 (t, 1 H), 6,96 (d, 1 H), 6,89 (t, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,35 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-251
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-3-amino-4,4-dimetilpentanoico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). La reacción se concentró al vacío, se añadió metanol, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-251 (15 mg, rendimiento 44 %).1 1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,83 (d, 1 H), 8,26 (d, 1 H), 7,63 (s, 1 H), 7,29 - 7,35 (m, 1 H), 7,06 - 7,16 (m, 2 H), 7,02 (d, 1 H), 6,95 - 7,00 (m, 1 H), 6,04 (s, 2 H), 2,82 - 2,88 (m, 1 H), 2,72 (dd, 2 H), 1,08 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-266
Una solución de ácido 5,5-difluoropiperidin-2-carboxílico (2,5-3,0 equivalentes), trietilamina (8,0-10 equivalentes) y producto intermedio 1 se agitó en dioxano/agua (relación 2:1) a 100 °C hasta el consumo completo del material de partida según LC/MS, siguiendo el procedimiento general B. La solución se vertió sobre HCl 1N y se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación por cromatografía en gel de sílice (gradiente de 3-8 % metanol/diclorometano) produjo el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-266, (29 mg, rendimiento combinado de 2 experimentos) como un sólido blanquecino.
1H -R M N (400 M H z, C D C h ) 8 8 ,46 (d, 1 H), 8 ,25 (d, 1 H), 7 ,36 (s, 1 H), 7 ,20 (ap. q, 1 H), 7 ,03 (ap. t, 1 H), 6 ,96 (ap. t, 1 H), 6 ,69 (ap. t, 1 H), 6 ,58 (d, 1 H), 6 ,22 (d, 1 H), 6 ,08 (d, 1 H), 5 ,95 (m, 1 H), 4 ,59 (m, 1 H), 3 ,53 (dd, 1 H), 2 ,37 (br. d, 1 H), 2 ,08 (m, 2 H), 1.57 (m, 1 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-263
El co m p u e s to de l títu lo se p repa ró en 4 etapas:
Etapa 1: Síntesis 4, 4-difluoropiperidin-1-carboxilato de ferf-butilo
Se añadió una suspensión de clorhidrato de 4,4-difluorpiperidina y trietilamina (2,2 equivalentes) en diclorometano a una solución de dicarbonato de di-ferf-butilo (1,1 equivalentes) en diclorometano lentamente mediante una pipeta (nota: se observó liberación de gas). La reacción se agitó a temperatura ambiente hasta el consumo completo del material de partida según lo indicado mediante RMN. La mezcla de reacción se diluyó con diclorometano y se lavó con solución de cloruro de amonio medio saturada. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación por cromatografía en gel de sílice (acetato de etilo/hexano a 2 %) produjo 4,4-difluoropiperidin-1-carboxilato de ferf-butilo (73 %).
Etapa 2: Síntesis de ácido 1-(ferf-butoxicarbonil)-4,4-difluorpiperidin-2-carboxílico
Una solución 0,5 M de 4,4-difluoropiperidin-1-carboxilato de ferf-butilo, tetrametiletilendiamina (TMEDA, 1,0 equivalente) en éter anhidro a -78 °C se trató gota a gota con sec-butillitio (1,2 equivalentes) y se agitó durante 2 horas. A continuación, se introdujo gas dióxido de carbono mediante burbujeo durante 2 min. La reacción se agitó a -78 °C durante 10 min, se calentó hasta la temperatura ambiente y se agitó durante una hora más. A continuación, la mezcla resultante se desactivó con agua, se acidificó a pH 2 con HCl 1N y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación por cromatografía en gel de sílice (gradiente de 20-50 % acetato de etilo/hexano) proporcionó ácido 1-( ferfbutoxicarbonil)-4,4-difluoropiperidin-2-carboxílico (87 %).
Etapa 3: Síntesis de trifluoroacetato de 2-carboxi-4,4-difluoropiperidinio
Una solución de ácido trifluoroacético (20 equivalentes) y ácido 1-(ferf-butoxicarbonil)-4,4-difluoropiperidin-2-carboxílico se agitó en diclorometano a temperatura ambiente hasta el consumo completo de material de partida determinado mediante LC/MS. La mezcla de reacción se concentró al vacío proporcionando trifluoroacetato de 2-carboxi-4,4-difluoropiperidinio (producto intermedio WW) como un sólido naranja pálido pegajoso (99 %) que se usó sin manipulación adicional.
Etapa 4: Síntesis del compuesto de referencia I-263
Se preparó el compuesto del título siguiendo el procedimiento general B, salvo que el trifluoroacetato de 2-carboxi-4,4-difluoropiperidinio (2,4 equiv.) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 2-7 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto de referencia I-263 deseado (26 mg, rendimiento 56 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (400 MHz, acetona-da) 88,88 (s, 1 H), 8,30 (d, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,31 (ap. q, 1 H), 7,14 (ap. t, 1 H), 7,08 (ap. t, 1 H), 7,01 (s, 1 H), 6,90 (ap. t, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 5,70 (br. d, 1 H), 4.69 (br. d, 1 H), 3,68 (ap. t, 1 H), 2,84 (m, 1 H), 2,52 (m, 1 H), 2,23 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-247
Una mezcla del producto intermedio 1 (26,0 mg,), ácido (2S)-3-metil-2-(metilamino)pentanoico (0,030 g, 3 equiv y trietilamina (0,096 ml, 10 equiv) en una mezcla 10:1 de THF/agua se calentó a 85 °C durante 16 h, siguiendo el procedimiento B. La reacción se enfrió, se retiró el disolvente, y el producto bruto resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa preparativa proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-247 como un sólido (2,4 mg, rendimiento 7,2 %).
d 1H RMN (500 MHz, CD3OD) 88,80 (d, 1 H), 8,32 (d, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,26 - 7,32 (m, 1 H), 7,02 - 7,13 (m, 2 H), 6,92 - 6,95 (m, 1 H), 6,91 (d, 1 H), 5,99 (s, 2 H), 5,49 (s, 1 H), 3,44 (d, 3 H), 2,03 (s, 1 H), 1,03 (t, 3 H), 0,98 (dd, 2 H), 0 ,85-0,92 (m, 3 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-255
Una mezcla del producto intermedio-i (36,0 mg), ácido 4-isopropilpiperidin-4-carboxílico (3equiv.), y TEA (10 equiv.), en una mezcla 10:1 de THF/agua se calentó a 90 °C durante 3 horas, siguiendo el procedimiento general B. La reacción
se enfrió, el disolvente se retiró, y el producto bruto resultante proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-255, como un sólido blanco (22 mg, 49 % rendimiento)
1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm 8,49 (d, 1 H), 8,35 (d, 1 H), 7,64 (s, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 7,20 - 7,25 (m,
1 H), 7,05 (s, 1 H), 7,01- 7,05 (m, 3 H), 6,67 (d, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,80 (d, 2 H), 3,72 - 3,79 (m, 1 H), 3,23 (t, 2 H), 2,35
(d, 3 H), 1,80 - 1,92 (m, 2 H), 1,62 (td, 2 H), 1,41 (t, 1 H), 0,97 (d, 6 H)
Compuesto de referencia I-254
Una mezcla del producto intermedio-1 (35,0 mg), ácido 42-(piperidin-4-il)benzoico (3 equiv.), y TEA (10 equiv.), en una mezcla 10:1 de THF/agua se calentó a 90 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió, el disolvente se retiró, y la mezcla se trató con HCl 1N y el producto bruto resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa preparativa proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-254, como un sólido blanco (1 mg, rendimiento 2 %).
1H RMN (500 MHz, CDCh) 6 ppm 8,45 (d, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 7,99 (dd, 1 H), 7,51 - 7,56 (m, 1 H), 7,39 - 7,44(m, 2 H),
7,32 (t, 1 H), 7,17 - 7,24 (m, 1 H), 6,95 - 7,09 (m, 2 H), 6,86 - 6,93 (m, 1 H), 6,61 (s, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,90 (br. s. H), 3,94 (br. s., 1 H), 3,21 (t, 2 H), 2,03 - 2,09 (m, 2 H), 1,80 - 1,90 (m, 2 H)
Compuesto de referencia I-256
Una mezcla del producto intermedio 1 (20,0 mg), ácido 4-(tert-pentil)piperidin-4-carboxílico (3 equiv, como la sal de
TFA), y TEA (10 equiv.), en una mezcla de 10:1 de THF/agua se calentó a 90 °C durante 2 horas. La reacción se enfrió, se retiró el disolvente orgánico, se añadió HCl 1N y el precipitado resultante se filtró proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-256, como un sólido blanco (13,4 mg, rendimiento 47 %).
1H RMN (500 MHz, CDCla) 6 ppm: 8,45 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,29 (s, 1 H), 7,15 - 7,22 (m, 1 H), 6,99 - 7,07 (m, 1 H),
6,96 (t, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 6,58 (d, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 4,69 (d, 2 H), 3,04 (t, 2 H), 2,25 (d, 2 H), 1,71 (td, 2 H), 1,35
1,45 (m, 2 H), 0,90 - 0,95 (m, 6 H), 0,87 (t, 3 H)
Compuesto de referencia I-258
A una solución de ácido (S)-2-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1 H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)-3-metilbutanoico (compuesto de referencia I-69, 0,040 g, 0,088 mmol) en DCM (1,8 ml) se añadió CDI (0,043 g, 0,264 mmol). La reacción se calentó a 45 °C durante 60 minutos. Tras ello, se añadieron DBU (0,013 ml, 0,088 mmol) y ciclopropanosulfonamida (0,053 g, 0,440 mmol). Se continuó la reacción durante 40 minutos más a la misma temperatura, hasta que se consideró completa. En aquel momento, la reacción se desactivó con HCl 1N. Las capas se separaron y la parte acuosa se extrajo dos veces con DCM. Las partes orgánicas se combinaron, se secaron (Na2SO4), se filtraron, y se concentraron. El material bruto se purificó mediante cromatografía de sílice con un gradiente
de 0-10 % MeOH/DCM proporcionando el compuesto deseado, el compuesto I-258, como un sólido blanco (10,8 mg, rendimiento 80 %).
1H RMN (500 MHz, CLOROFORMO-d) 6 ppm: 9,93 (br. s., 1 H), 8,46 (d, 1 H), 8,21 (d,1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,21 - 7,25
(m, 1 H), 6,99 - 7,09 (m, 2 H), 6,91 - 6,97 (m, 1 H), 6,61 (d, 1 H), 6,03 - 6,08 (m, 1 H), 5,93 - 5,99 (m, 1 H), 5,45 (d, 1
H), 4,35 (t, 1 H), 2,77 - 2,88 (m, 1 H), 2,52 - 2,62 (m, 1 H), 1,12-1,15 (m, 6 H), 1,05 - 1,07 (m, 2 H), 0,88 - 0,90 (m, 2
H).
Compuesto de referencia I-259
A una solución del compuesto de referencia I-88 en diclorometano se añadió CDI (3 equiv.). La reacción se calentó a
45 °C durante 30 min, tras lo cual se añadieron DBU (1 equiv.) y metanosulfonamida (5 equiv.). La reacción se calentó durante 40 min más hasta que se completó la reacción. En aquel momento, la reacción se desactivó con solución de ácido clorhídrico 1N. Las capas se separaron y la parte acuosa se extrajo con diclorometano (2 veces). Las partes orgánicas se combinaron, se secaron (Na2SO4), se filtraron, y se concentraron. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-259 (15,8 mg, rendimiento 44 %) como un sólido blanco.1
1H RMN (500 MHz, CDCta) 6 ppm 10,14 (br. s., 1 H), 8,47 (d, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 7,33 (s, 1 H), 7,21 - 7,26 (m, 1 H),
6,99 - 7,08 (m, 2 H), 6,91 - 6,96 (m, 1 H), 6,63 (d, 1 H), 5,96- 6,09 (m, 2 H), 5,3 (br. s., 1 H) 4,51 - 4,60 (m, 1 H), 3,06
- 3,11 (m, 3 H), 1,90-2,00 (m, 1 H), 1,71 - 1,87 (m, 2 H), 1,05 (d, 3 H), 0,96-0,99 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-261
A una solución del compuesto de referencia I-103 en diclorometano se añadió CDI (3 equiv.). La reacción se calentó
a 45 °C durante 1,5 h, tras de lo cual se añadieron DBU (1 equiv.) y ciclopropanosulfonamida (5 equiv.). La reacción
se calentó durante 40 minutos más, hasta que se completó la reacción. La reacción se desactivó con solución de ácido clorhídrico 1N, las capas se separaron, y la parte acuosa se extrajo con diclorometano (2 veces). Las partes orgánicas se combinaron, se secaron (Na2SO4), se filtraron, y se concentraron. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-261 (40 mg, rendimiento 80 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm: 10,20 (br. s., 1 H), 8,47 (s, 1 H), 8,22 (br. s., 1 H), 7,35 (s, 1 H), 7,17 - 7,26 (m, 1
H), 6,91 - 7,09 (m, 3 H), 6,64 (s, 1 H), 5,92 - 6,09 (m, 2 H), 5,39 (br. s., 1 H), 4,59 - 4,70 (m, 1 H), 2,76 - 2,89 (m, 1 H),
2,50 - 2,65 (m, 1 H), 1,95 (dt, 1 H), 1,69 - 1,86 (m, 2 H), 1,04 (d, 2 H), 0,98 (d, 3 H), 0,85 - 0,95 (m, 3 H), 0,74 - 0,83 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-264
Una mezcla de producto intermedio 1 (38,8 mg), 1,1-dióxido de 2,2-dimetiltiomorfolina, (3 equiv.), y TEA (10 equiv.), en una mezcla 10:1 de THF/agua se calentó a 90 °C durante 3 h, siguiendo el procedimiento general B. La reacción se desactivó, se vertió a una mezcla 1:1 de HCl 1N y DCM, se combinaron los materiales orgánicos extraídos (tres veces), se secaron, se purificaron mediante cromatografía de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-264 (40 mg, rendimiento
77 %) en forma de sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 8,48 (d, 8,31 (d, 1 H), 7,26 (s, 1 H), 7,22 (q, 1 H), 7,02 - 7,07 (m, 1 H), 6,99 (t,1 H), 6,86 - 6,91 (m, 1 H), 6,59 (d,1 H), 5,97 (s, 2 H), 4,41 (br.s., 2 H), 4,09 (br.s., 2 H), 3,26 (t, 2 H), 1,43 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-270
Una mezcla del producto intermedio-1 (313 mg), ácido (S)-4-metil-3-(metilamino)pentanoico (3 equiv.), y TEA (10 equiv.), en una mezcla 10:1 de THF/agua se calentó a 85 °C durante 3 horas, siguiendo el procedimiento B. La reacción se enfrió, se vertió a una mezcla 1:1 de HCl 1N y DCM, se combinaron las sustancias orgánicas extraídas (tres veces), se secaron, se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-270 (56 mg, rendimiento
14 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,48 - 8,53 (m, 1 H), 8,31 (br. s., 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,20 - 7,26 (m, 1 H), 7,13 (t, 1
H), 6,99-7,05 (m, 2 H), 6,66 (br. s., 1 H), 5,86-5,94 (m, 2 H), 3,19 (d, 3 H), 2,85 (dd, 1 H), 2,60-2,73 (m, 1 H), 1,93
- 2,05 (m, 1 H), 1,26 (s, 1 H), 0,93 (d, 3 H), 1,08 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-271
Una mezcla del producto intermedio-1 (313 mg), ácido (1R,5S,6R)-3-azabiciclo[3.1.0]hexano-6-carboxílico (3 equiv.).
y TEA (10 equiv.), en una mezcla 10:1 de THF/agua se calentó a 85 °C durante 3 h, siguiendo el procedimiento general
B. La reacción se enfrió, se vertió a una mezcla 1:1 de HCl 1N y DCM, las sustancias orgánicas extraídas (tes veces), se combinaron, se secaron, se purificaron mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-271 (22 mg, rendimiento
33 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCta) 8 ppm: 8,49 (d, 1 H), 8,35 (d, 1 H), 7,45 (br. s., 1 H), 7,23 (td, 1 H), 7,05 (d, 1 H), 7,01 (d, 2
H), 6,63 (d, 1 H), 5,97(s, 2 H), 4,32 (d, 2 H), 3,95 (d, 2 H), 2,40 (br. s., 2 H, 1,65 (t, 1 H), 0,97 (d, 1 H).
Compuesto de referencia I-268
El compuesto del título se preparó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de trifluoroacetato de 2-carboxi-5,5-dimetilpiperidinio
Se preparó trifluoroacetato de 2-carboxi-5,5-dimetil-piperidinio como un sólido blanco siguiendo el procedimiento para la síntesis de trifluoroacetato de 2-carboxi-4,4-difluoropiperidinio, como se describe en la preparación del compuesto de referencia I-263, salvo por el uso de clorhidrato de 3,3-dimetilpiperidina en la etapa 1.
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-268
Se preparó el compuesto del título siguiendo el procedimiento general B, salvo que el trifluoroacetato de 2-carboxi-5,5-dimetilpiperidinio fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C. La solución resultante se vertió en agua y se acidificó a pH 3 con una solución acuosa de ácido clorhídrico 1N. El precipitado resultante se recogió mediante filtración al vacío, se lavó con solución de HCl (pH 3) y éter proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-268 (38 mg, rendimiento 62 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) 813,0 (br. s, 1 H), 9,10 (d, 1 H), 8,33 (d, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,33 (ap. q, 1 H), 7,22 (m, 2 H), 7,10 (ap. t, 1 H), 6,85 (ap. t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 5,38 (m, 1 H), 3,99 (m, 1 H), 3,03 (m, 1 H), 2,11 (m, 1 H), 2,01 (m, 1 H), 1,44 (br. d, 1 H), 1,32 (td, 1 H), 0,97 (s, 3 H), 0,95 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-245
Una solución de clorhidrato de 2-(4-aminotetrahidro-2H-piran-4 -il)acetato de metilo (3,0 equivalentes), trietilamina (10 equivalentes) y el producto intermedio 1 se agitó en dioxano/agua (relación 2:1) a 100 °C hasta el consumo completo del material de partida mediante LC/MS, siguiendo el procedimiento general B. La solución se vertió en agua y se acidificó a pH 3 con HCl 1N y se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 20-65 % acetonitrilo en agua con ácido trifluoacético a 0,1 %, 20 minutos) proporcionó el compuesto de referencia I-245 (8,8 mg, 13 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,82 (d, 1 H), 8,31 (d, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,30 (ap. q, 1 H), 7,09 (m, 1 H), 7,05 (ap. t, 1 H), 7,01 (d, 1 H), 6,97 (ap. t, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 3,82 (dt, 2 H), 3,74 (td, 2 H), 3,20 (s, 2 H), 2,65 (br. d, 2 H), 2,06 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-155
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el (R)-pirrolidin-2-ilmetanol fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 40 °C durante 18 min como una solución en THF. La reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera. La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 20-60 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-155 (11 mg, 44 % rendimiento) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 88,43 (d, 1 H), 8,14 (d, 1 H), 7,27 (s, 1 H), 7,19 (m, 1 H), 7,01 (ap. t, 1 H), 6,97 (ap. t, 1 H), 6,89 (ap. t, 1 H), 6,57 (d, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 5,29 (br. s, 1 H), 4,52 (m, 1 H), 3,88 (m, 2 H), 3,78 (m, 2 H), 2,13 (m, 1 H), 2,07-1,92 (m, 2 H), 1,79 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-160
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el piperidin-2-ilmetanol fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 55 °C durante 4 h como una solución en THF/DMSO (2:1). La reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera. La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 30-60 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-160 (9,6 mg, rendimiento 70 %) como un aceite transparente.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 88,44 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,26 (s, 1 H), 7,19 (m, 1 H), 7,02 (ap. t, 1 H), 6,97 (ap. t, 1 H), 6,86 (ap. t, 1 H), 6,58 (d, 1 H), 5,97 (d, 1 H), 5,93 (d, 1 H), 4,81 (m, 1 H), 4,25 (m, 1 H), 4,14 (m, 1 H), 3,83 (br. s, 1 H), 3,79 (m, 1 H), 3,28 (m, 1 H), 1,85-1,65 (m, 6 H).
Compuesto de referencia I-183
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el pirazolin-1-carboxilato detert-butilo (1,1 equiv.) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó hasta 70 °C durante 5 d como una solución en THF/DMSO (4:1). La reacción se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 20 % acetato de etilo/hexano proporcionando el compuesto deseado, compuesto de referencia I-183 (53 mg, rendimiento 75 %).1
1H-RMN (400 MHz, CDCls) 88,44 (d, 1 H), 8,26 (d, 1 H), 7,30 (s, 1 H), 7,18 (m, 1 H), 7,01 (ap. t, 1 H), 6,95 (ap. t, 1 H), 6,84 (ap. t, 1 H), 6,56 (d, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,40-3,60 (br. m, 4 H), 2,13 (ap. quintuplete, 2 H), 1,45 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-193
Una solución de ácido trifluoroacético (20 equivalentes) y compuesto de referencia I-183 se agitó en diclorometano a temperatura ambiente hasta el consumo completo del material de partida según lo determinado mediante LC/MS. La solución se vertió cuidadosamente en bicarbonato de sodio saturado y diclorometano. Las capas se separaron y la capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y el disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto de referencia I-193 (35 mg, 85 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCI3) 58,43 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 7,18 (m, 1 H), 7,01 (ap. t, 1 H), 6,95 (ap. t, 1 H), 6,82 (ap. t, 1 H), 6,57 (d, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,58 (br. s, 1 H), 3,87 (m, 2 H), 3,19 (ap. t, 2 H), 2,19 (ap. quintuplete, 2 H).
Compuesto de referencia I-213
Una solución de bromoacetato de etilo (1,0 equivalente), W,W-diisopropiletilamina (1,5 equivalentes) y el compuesto de referencia I-193 se agitó en dimetilformamida a temperatura ambiente hasta el consumo completo de material de partida según lo determinado mediante LC/MS. La solución se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación por cromatografía en gel de sílice (50 % acetato de etilo/hexanos) dio el compuesto de referencia I-213 (20 mg, 59 %) como un aceite transparente.
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 58,44 (d, 1 H), 8,21 (d, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,17 (m, 1 H), 7,01 (ap. t, 1 H), 6,95 (ap. t, 1 H), 6.83 (ap. t, 1 H), 6,57 (d, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,22 (q, 2 H), 3,98 (ap. t, 2 H), 3,70 (s, 2 H), 3,28 (ap. t, 2 H), 2,25 (ap. quintuplete, 2 H), 1,28 (t, 3 H).
Compuesto de referencia I-216
Una solución de hidróxido de sodio (3,0 N en agua, 8,0 equivalentes) y el compuesto de referencia I-213 se agitó en metanol a temperatura ambiente hasta el consumo completo del material de partida según lo determinado mediante LC/MS. La mezcla de reacción se concentró, se diluyó con agua y se neutralizó a pH 6-7 mediante la adición de HCl 1N. El producto bruto se recogió mediante filtración al vacío y purificación mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-95 % acetonitrilo en agua con ácido trifluoacético a 0,1 %, 20 minutos) proporcionó el compuesto de referencia I-216 (13 mg, 72 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 59,09 (d, 1 H), 8,29 (d, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,33 (m, 1 H), 7,22 (m, 2 H), 7,10 (ap. t, 1 H), 6.84 (ap. t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 3,84 (m, 2 H), 3,57 (s, 2 H), 3,12 (m, 2 H), 2,17 (ap. quintuplete, 2 H).
Compuesto de referencia I-222
Una solución de clorhidrato de ácido 2-(pirrolidin-2-il)acético (2,3 equivalentes), trietilamina (10 equivalentes) y el producto intermedio 1 se agitó en dioxano/agua (relación 2:1) a 100 °C hasta el consumo completo del material de partida según lo determinado mediante LC/MS siguiendo el procedimiento B. La solución se diluyó con agua y se neutralizó a pH 3 mediante la adición de HCl 1N. El sólido resultante se recogió mediante filtración y se secó al vacío proporcionando el compuesto de referencia I-222 (63 mg, 94 %).
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) 512,3 (s, 1 H), 9,11 (d, 1 H), 8,24 (d, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 7,33 (m, 1 H), 7,21 (m, 1 H), 7,11 (m, 2 H), 6,90 (m, 1 H), 5,87 (s, 2 H), 4,62 (m, 1 H), 3,80 (m, 1 H), 3,65 (m, 1 H), 2,82 (m, 1 H), 2,39 (m, 1 H), 2,12-1,90 (m, 3 H), 1,84 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-184
El compuesto se obtuvo mediante el procedimiento general B, partiendo de producto intermedio 1. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 20-50 % acetato de etilo/hexanos) produjo el compuesto de referencia I-184 (62 mg, 81 %) como un aceite transparente.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 58,45 (d, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 7,27 (s, 1 H), 7,19 (m, 1 H), 7,02 (ap. t, 1 H), 6,97 (ap. t, 1 H), 6,87 (ap. t, 1 H), 6,59 (d, 1 H), 5,97 (d, 1 H), 5,93 (d, 1 H), 4,76 (br. m, 1 H), 4,34-3,96 (br. m, 3 H), 3,96-3,74 (br. m, 2 H), 3,50-3,10 (br. m, 4 H), 1,49 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-211 y compuesto de referencia I-212
Una solución de ácido trifluoroacético (20 equivalentes) y compuesto de referencia I-184 se agitó en diclorometano a temperatura ambiente hasta el consumo completo del material de partida según lo determinado mediante LC/MS. La solución se vertió cuidadosamente en bicarbonato de sodio saturado y se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con ácido trifluoacético 0,1 %, 20 minutos) produjo dos productos: El compuesto de referencia I-211 (17 mg, 28 % como sal de TFA) como un aceite transparente.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,79 (m, 1 H), 8,35 (m, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,28 (m, 1 H), 7,10 (m, 1 H), 7,04 (m, 1 H), 6,90 (m, 1 H), 6,85 (m, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 5,08 (m, 1 H), 4,91 (m, 1 H), 4,09 (m, 1 H), 4,01 (m, 1 H), 3,85 (ap. t, 1 H), 3,71 (ap. d, 1 H), 3,52 (ap. d, 1 H), 3,45 (m, 1 H), 3,40 (m, 1 H).
El compuesto de referencia I-212 (19 mg, 32 %) como un aceite transparente. 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,80 (s, 1 H), 8,34 (d, 1 H), 7,61 (d, 1 H), 7,29 (m, 1 H), 7,10 (ap. t, 1 H), 7,05 (ap. t, 1 H), 6,94 (m, 1 H), 6,91 (ap. t, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 5,12-4,98 (m, 1 H*), 4,82 (m, 1 H), 4,59-4,32 (m, 1 H*), 4,17 (m, 1 H*), 3,93-3,58 (m, 4 H*), 3,65-3,33 (m, 1 H*). Series de picos rotámeros (~0,5 H cada uno) vistos para los protones seleccionados marcados con *.
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-150
El compuesto del título se preparó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-6-hidroxipirimidin-4(3H)-ona (la preparación de este compuesto se describe en una solicitud de patente, WO2013/101830).
Una mezcla de 1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-carboximidamida, 2-fluoromalonato de dietilo (1 equiv.) y DBU (1 equiv.) en etanol se calentó a 70 °C durante 24 h. La mezcla se concentró al vacío proporcionando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en columna (0 a 20 % diclorometano en metanol) para dar 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-6-hidroxipirimidin-4(3H)-ona (145 mg, rendimiento 100 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,81 (d, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,26 - 7,36 (m, 1 H) 7,05 - 7,18 (m, 2 H), 6,97 (t, 1 H), 6,92 (d, 1 H), 5,97 (s, 2 H).
Etapa 2: Síntesis de 3-(3-(4,6-dicloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol
Una mezcla de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-6-hidroxipirimidin-4(3H)-ona (1 equiv.) y POCl3 (40 equiv.) se calentó a 70 °C durante 24 h. La mezcla se concentró al vacío dando un sólido blanco. Se diluyó en acetato de etilo y se lavó con agua. La capa orgánica se secó, se filtró y evaporó dando 3-(3-(4,6-dicloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (61 mg, rendimiento 38 %) como un sólido blanco. 1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,40 (s, 1 H) 7,37 (s, 1 H) 7,10 - 7,18 (m, 1 H) 6,88 - 7,00 (m, 2 H) 6,76 (t, 1 H) 6,53 (d, 1 H) 5,96 (s, 2 H).
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-150
Una mezcla de 3-(3-(4,6-dicloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (1 equiv.), morfolina [1 M en THF] (1 equiv.) y base de Hunig (1 equiv.) en THF se agitó a 23 °C durante 24 horas. La mezcla se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó proporcionando un sólido blanco. El sólido se purificó por cromatografía en columna (acetato de etilo 0-100 % en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-150 (32 mg, rendimiento 47 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 8,47 (d, 1 H), 7,31 - 7,34 (m, 1 H), 7,19 - 7,26 (m, 1 H), 7,02 - 7,09 (m, 1 H), 6,99 (t, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 6,59 (d, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 3,89 - 3,96 (m, 4 H), 3,81 - 3,89 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-172
Este compuesto se preparó en dos etapas.
Etapa 1: Síntesis de 3-(3-(4-cloro-5-fluoro-6-metoxipirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol.
A una suspensión de 3-(3-(4,6-dicloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (1 equiv.) en metanol se añadió metóxido de sodio [0,5 M en metanol] (1 equiv.). La mezcla se agitó a 23 °C durante 4 h. La mezcla se trató con HCl (4,0 M en dioxano, 1 equiv.). La mezcla se concentró al vacío. El sólido resultante se disolvió en acetato de etilo y se lavó con salmuera. La capa orgánica se secó, se filtró y evaporó dando 3-(3-(4-cloro-5-fluoro-6-metoxipirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (42 mg, rendimiento 85 %) como un sólido blanco.1 1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,67 (d, 1 H), 7,45 (s, 1 H), 7,16 - 7,21 (m, 1 H), 6,97 - 7,04 (m, 1 H), 6,94 (t, 1 H), 6,83 (d, 1 H), 6,74 (t, 1 H), 5,88 (s, 2 H), 4,12 (s, 3 H).
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-172
Una mezcla de 3-(3-(4-cloro-5-fluoro-6-metoxipirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (1 equiv.), trietilamina (2 equiv.) y morfolina (2 equiv.) en THF se agitó a 100 °C durante 24 h. La mezcla se diluyó en acetato de etilo y se lavó con agua. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en columna (acetato de etilo a 0-100 % en hexanos) dando un sólido marrón claro. El sólido se aclaró con metanol proporcionando el compuesto deseado,
Compuesto de referencia I-172 (19 mg, rendimiento 41 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 9,08 (d, 1 H), 7,56 (s, 1 H), 7,29 - 7,36 (m, 1 H), 7,18 - 7,26 (m, 2 H), 7,09 (t, 1 H), 6,72 (t, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 4,01 (s, 3 H), 3,72 (s, 8 H).
Compuesto de referencia I-23
Una suspensión de 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5-(trifluorometil)pirimidin-4(3H)-ona (este producto intermedio se describe en una solicitud de patente publicada, WO2012/3405 A1) en tricloruro de fosforilo (75 equiv.) se calentó a 70 °C durante 1 h. El tricloruro de fosforilo se retiró bajo una corriente de nitrógeno y el producto intermedio bruto resultante se disolvió en tetrahidrofurano. Se añadió morfolina (30 equiv.) y la solución se agitó a temperatura ambiente hasta que la reacción se completó según lo determinado mediante LC/MS. La solución se vertió en solución de cloruro de amonio acuosa saturada y diclorometano. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El residuo se suspendió en dietil éter y, a continuación, el sólido resultante se retiró filtrando proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-23 (6,5 mg, rendimiento 69 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,77 (m, 1 H), 8,66 (s, 1 H), 7,57 (s, 1 H), 7,31-7,26 (m, 1 H), 7,12-7,02 (m, 2 H), 6,94 (m, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 5,99 (s, 2 H), 3,85-3,81 (m, 8 H).
Compuesto de referencia I-24
El compuesto del título se sintetizó según el procedimiento descrito para el compuesto de referencia I-23, salvo por el uso de 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il) pirimidin-4-(3H)-ona (este producto intermedio se describió en la publicación de solicitud de patente anterior WO2012/3405 A1) como pirimidona de partida. El residuo final se suspendió en dietil éter y, a continuación, el sólido resultante se retiró filtrando proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-24 (42 mg, rendimiento cuantitativo) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,74 (m, 1H), 8,21 (d, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,27-7,22 (m, 1H), 7,10-6,99 (m, 2H), 6,89 (m, 1H), 6,79 (t, 1H), 6,70 (d, 1H), 5,95 (s, 2H), 3,77 (br s, 8H).
Compuesto de referencia I-28
El compuesto del título se sintetizó según el procedimiento descrito para el compuesto de referencia I-23, salvo por el uso de 5-cloro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4(3H)-ona (este producto intermedio se describe en la solicitud de patente publicada WO2012/3405 A1) como la pirimidona de partida. El residuo final se suspendió en dietil éter y a continuación el sólido resultante se filtró proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-28 (7,5 mg, rendimiento 32 %) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, CDCl3) 88,44 (m, 1H), 8,38 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,21-7,15 (m, 1H), 7,03-6,98 (s, 1H), 6,95 (t, 1H), 6,82 (t, 1H), 6,57 (m, 1H), 5,95 (s, 2H), 3,85-3,81 (m, 8H).
Compuesto de referencia I-29
El compuesto del título se sintetizó según el procedimiento descrito para el compuesto de referencia I-23, salvo por el uso de 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-5-carbonitrilo (este producto intermedio se describió en una publicación de solicitud de patente anterior, WO2012/3405 A1) como la pirimidona de partida. El residuo final se suspendió en dietil éter y a continuación el sólido resultante se retiró filtrando proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-29 (18 mg, rendimiento 84 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 89,11 (m, 1H), 8,78 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,36-7,31 (m, 1H), 7,27-7,20 (m, 2H), 7,11 (t, 1H), 6,83 (t, 1H), 5,93 (s, 2H), 4,02-4,00 (m, 4H), 3,76-3,74 (m, 4H).
Compuesto de referencia I-73
[0595] El compuesto del título se preparó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5-metoxipirimidin-4(3H)-ona
Una solución de 1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-carboximidamida (1 equiv.), 3-(dimetilamino)-2-metoxiacrilato de metilo (3,1 equiv.) y 1,8-diazabicicloundec-7-eno (2 equiv.) se agitó a 100 °C durante 6 h. La solución de reacción se diluyó con diclorometano y cloruro de amonio saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 veces). Las sustancias orgánicas se lavaron con cloruro de amonio saturado y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación del material bruto mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-5 % metanol en diclorometano) proporcionó 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5-metoxipirimidin-4-ol (49 mg, rendimiento 35 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,77 (d, 1 H), 7,58 (s, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,29-7,24 (m, 1 H), 7,10-7,02 (m, 2 H), 6,92 6,85 (m, 2 H), 5,96 (s, 2 H), 3,87 (s, 3 H).
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-73
El compuesto del título se sintetizó según el procedimiento descrito para el compuesto de referencia I-23, salvo por el uso de 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5-metoxipirimidin-4(3H)-ona como la pirimidona de partida. El residuo final se suspendió en dietil éter y a continuación el sólido resultante se retiró filtrando proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-73 (50 mg, rendimiento 86 %) como un sólido blanco.
<1>H -R M N (400 M Hz, D M S O -d a) 5 9 ,08 (m, 1 H), 8,11 (s, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7 ,35 -7 ,29 (m, 1 H), 7 ,24 -7 ,20 (m, 2 H), 7 ,10 (t, 1 H), 6 ,79 (t, 1 H), 5 ,89 (s, 2 H), 3 ,88 (s, 3 H), 3 ,75-3 ,71 (m, 8 H).
Compuesto de referencia I-77
Una solución de ácido piperidin-4-carboxílico (3 equivalentes), trietilamina (10 equivalentes), y el producto intermedio 1 se agitó en tetrahidrofurano y agua (relación 1:1) a 100 °C hasta el consumo completo del material de partida determinado según LC/MS, siguiendo el procedimiento general B. La misma solución se diluyó con ácido clorhídrico 1N concentrado y acetato de etilo. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y diclorometano/alcohol isopropílico 5:1. Las sustancias orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con ácido triefluoacético a 0,1 %, 20 minutos) produjo el compuesto de referencia I-77 (11 mg, rendimiento 44 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,79 (m, 1H), 8,23 (d, 1H), 7,57 (m, 1H), 7,31-7,26 (m, 1H), 7,12-7,03 (m, 2H), 6,96 (m, 1H), 6,90 (t, 1H), 5,99 (s, 2H), 4,70 (d, 2H), 3,51-3,45(m, 2H), 2,79-2,74(m, 1H), 2,15-2,11 (m, 2H), 1,90-1,80(m, 2H).
Compuesto de referencia I-78
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido piperidin-3-carboxílico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 1,5 h como una solución en THF/agua (1:1). La solución se diluyó con solución de ácido clorhídrico 1N y acetato de etilo. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y diclorometano/alcohol isopropílico 5:1. Las sustancias orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con ácido triefluoacético a 0,1 %, 20 minutos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-78 (7 mg, rendimiento 28 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,81 (m, 1H), 8,28 (d, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,33-7,27 (m, 1H), 7,13-7,04 (m, 2H), 6,97 6,92 (m, 2H), 6,01 (s, 2H), 4,52 (d, 1H), 4,31-4,26 (m, 1H), 4,00 (dd, 1H), 3,93-3,84 (m, 1H), 2,84-2,78 (m, 1H), 2,23 2,12 (m, 1H), 2,04-1,88 (m, 2H), 1,82-1,73 (m, 1H).
Compuesto de referencia I-76
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido pirrolidin-3-carboxílico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 60 °C durante 2,5 h como una solución en THF/agua (1:1). La solución se diluyó con solución de ácido clorhídrico 1N y acetato de etilo. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y diclorometano/alcohol isopropílico 5:1. Las sustancias orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con ácido triefluoacético a 0,1 %, 20 minutos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-76 (11 mg, rendimiento 45 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,83 (m, 1H), 8,29-8,27 (m, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,33-7,29 (m, 1H), 7,13-7,05 (m, 2H), 6,99-6,96 (m, 2H), 6,03 (s, 2H), 4,23-4,03 (m, 5H), 2,34 (br s, 2H).
Compuesto de referencia I-92
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-azabiciclo[2.2.1]heptano-3-carboxílico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 16 h como una solución en THF/agua (10:1). Una vez completada la reacción, se añadió solución de ácido clorhídrico 3N y el disolvente se retiró al vacío. El residuo bruto se captó en agua y el sólido se filtró y se aclaró con agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-92 (12 mg, rendimiento 47 %) como un sólido marrón.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD)existe como >3 diastereómeros5 8,80 (m, 1H), 8,25-8,16 (m, 1H), 7,32-7,28 (m, 2H), 7,12-7,03 (m, 2H), 6,97-6,83 (m, 2H), 6,00-5,96 (m, 2H), 4,51-4,36 (m, 1H), 2,99-2,90 (m, 1H), 2,25 (d, 1H), 1,94-1,57 (m, 6H).
Compuesto de referencia I-100
Se disolvió hidruro de sodio (1,0 equivalente) y 1H-pirrol-2-carboxilato de etilo (1 equivalente) en tetrahidrofurano. Después de agitar durante 15 minutos, se añadieron 0,5 equivalentes de anión de pirrolidina a una solución del producto intermedio 1 (1,0 equivalente) en tetrahidrofurano a temperatura ambiente. Al cabo de 5 minutos, se añadieron 0,5 equivalentes adicionales de anión. La solución se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos, 45 °C durante 2 horas y, a continuación, a 65 °C durante 15 horas. Se añadió 1 equivalente más de anión de pirrol, y al cabo de 1,5 horas a 65 °C la solución se diluyó con solución acuosa saturada de cloruro amónico y diclorometano. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (acetato de etilo 0-50 % en hexanos) proporcionó el compuesto de referencia I-100 (16 mg, rendimiento 42 %) como un sólido blanco.
<1>H -R M N (400 M Hz, C D C I3 ) 5 8,71 (m, 1H), 8 ,45 (m, 1H), 7 ,40 (s, 1H), 7 ,33 -7 ,32 (m, 1H), 7 ,22 -7 ,14 (m , 2H ), 7 ,04 -6 ,95 (m, 2H ), 6 ,84 (t, 1H), 6 ,57 (m, 1H), 6 ,43 -6 ,41 (m, 1H), 6 ,00 (s, 2H ), 4 ,23 (q, 2H ), 1 ,25 (t, 3H).
Compuesto de referencia I-104
Una solución del compuesto de referencia I-100 (1 equivalente) en tetrahidrofurano, metanol y agua (relación 3:1:1) se trató con hidróxido de litio hidratado (1,5 equivalente). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 45 minutos y a 45 °C durante 3 minutos. La solución se diluyó con acetato de etilo, hidróxido de sodio 1N acuoso, y agua. Las capas se separaron y la capa acuosa se acidificó con ácido clorhídrico 1N acuoso a pH ~ 1. La capa acuosa acidificada se extrajo con acetato de etilo, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con ácido trifluoacético a 0,1 %, 20 minutos) proporcionó el compuesto de referencia I-104 (1 mg, rendimiento 6 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,83 (m, 1H), 8,77 (m, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,47 (m, 1H), 7,31-7,25 (m, 1H), 7,16-7,03 (m, 3H), 6,94 (m, 1H), 6,87 (t, 1H), 6,48-6,46 (m, 1H), 6,00 (s, 2H).
Compuesto de referencia I-119
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-3-carboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, y la reacción se calentó como una solución en THF/agua (10:1) durante 16 h. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se captó en agua. El sólido se retiró filtrando y el filtrado se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con ácido trifluoacético 0,1 %, 20 minutos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-119 (20 mg, rendimiento 48 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,80 (m, 1H), 8,33 (d, 1H), 7,55 (br s, 1H), 7,30-7,27 (m, 5H), 7,12-7,03 (m, 2H), 6,93 (s, 1H), 6,89 (t, 1H), 5,99 (s, 2H), 5,58 (brs, 1H), 5,21 (d, 1H), 5,10 (d, 1H), 3,42-3,40 (m, 2H).
Compuesto de referencia I-140
Este se sintetizó según el procedimiento general B utilizando ácido 1,2,3,4-tetrahidroquinolin-2-carboxílico y una relación de 10:1 de tetrahidrofurano:agua como disolvente. Después del consumo de material de partida, el disolvente se retiró al vacío y el residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con TFA a 0,1 %, 20 minutos) proporcionando el compuesto de referencia I-140 (9 mg, rendimiento 22 %) como un sólido naranja.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,79 (m, 1H), 8,35 (d, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,30-7,19 (m, 3H), 7,16-7,02 (m, 4H), 6,90-6,85 (m, 2H), 5,97 (s, 2H), 5,04 (t, 1H), 2,85-2,81 (m, 1H), 2,75-2,69 (m, 2H), 1,88-1,80 (m, 1H).
Compuesto de referencia I-120
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-1-carboxílico fue el reactivo de amina, y la reacción se calentó a 80 °C durante 2 h como una solución en THF/agua (10:1). Después del consumo de material de partida, el disolvente se retiró al vacío y el residuo resultante se captó en metanol, los sólidos se retiraron filtrando, el filtrado se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con TFA a 0,1 %, 20 minutos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-120 (27 mg, rendimiento 65 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,80 (m, 1H), 8,34 (d, 1H), 7,67-7,64 (m, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,34-7,26 (m, 4H), 7,12-7,03 (m, 2H), 6,91 (t, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,02 (s, 1H), 5,98 (s, 2H), 4,45-3,37 (m, 1H), 4,13-4,04 (m, 1H), 3,26-3,20 (m, 1H), 3.05 (dt, 1H).
Compuesto de referencia I-121
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (R)-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-1-carboxílico fue el reactivo de amina, y la reacción se calentó a 80 °C durante 2 h como una solución en THF/agua (10:1). Después del consumo de material de partida, el disolvente se retiró al vacío y el residuo resultante se captó en metanol, los sólidos se retiraron filtrando, el filtrado se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con TFA a 0,1 %, 20 minutos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-121 (17 mg, rendimiento 62 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,80 (m, 1H), 8,34 (d, 1H), 7,67-7,64 (m, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,34-7,26 (m, 4H), 7,12-7,03 (m, 2H), 6,91 (t, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,02 (s, 1H), 5,98 (s, 2H), 4,45-3,37 (m, 1H), 4,13-4,04 (m, 1H), 3,26-3,20 (m, 1H), 3.05 (dt, 1H).
Compuesto de referencia I-123
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el piperidin-4-carbonitrilo fue el reactivo de amina, y la reacción se calentó a 80 °C durante 2 h como una solución en THF/agua (10:1). Después del consumo de material de partida, la solución de reacción se diluyó con diclorometano y el disolvente se secó con sulfato de magnesio. Después de filtrar y eliminar el disolvente al vacío, el material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (0-70 % de acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-123 (28 mg, rendimiento 94 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,75 (m, 1H), 8,16 (d, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,29-7,24 (m, 1H), 7,11-7,06 (m, 1H), 7,02 (t, 1H), 6,90 (m, 1H), 6,80 (t, 1H), 5,95 (s, 2H), 4,24-4,18 (m, 2H), 3,76-3,70 (m, 2H), 3,13 (tt, 1H), 2,08 (ddd, 2H), 1,96 1,87 (m, 2H).
Compuesto de referencia I-141
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2-aminoacetonitrilo (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, y la reacción se calentó a 90 °C como una solución en THF/agua (10:1). Después de agitar durante 15 h, se añadieron dos equivalentes adicionales de 2-aminoacetonitrilo (como la sal de HCl) y la solución se agitó durante 24 h más, momento en el cual la solución se diluyó con agua y acetato de etilo. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con agua. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. Se añadió metanol, y el producto sólido deseado resultante se separó por filtración. El filtrado de metanol contenía producto disuelto y se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua, ácido trifluoacético 0,1 %, 20 minutos) proporcionando producto adicional, que se combinó con los sólidos filtrados para suministrar el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-141 (11 mg, rendimiento 35 %) como un sólido de color tostado.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) 89,11 (m, 1H), 8,43 (t, 1H), 8,36 (d, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,36-7,30 (m, 1H), 7,25-7,20 (m, 2H), 7,11 (t, 1H), 6,86 (t, 1H), 5,90 (s, 2H), 4,55 (d, 2H).
Compuesto de referencia I-145
Una suspensión de azida sódica (1 equivalente), cloruro de amonio (1 equivalente), y el compuesto de referencia I-141 (1 equivalente) en W,A/-dimetilformamida se calentó hasta 80 °C durante 1 hora y a continuación a 110 °C durante 16 horas. Se añadió cloruro de amonio y azida de sodio adicional y al cabo de 20 horas la solución se diluyó con metanol y agua. La purificación mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con ácido trifluoacético a 0,1 %, 20 minutos) proporcionó el compuesto de referencia I-145 (6 mg, 43 %) como un sólido amarillo.
1H-RMN (400 MHz, DMSO- d6) 89,10 (m, 1H), 8,37 (d, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,35-7,30 (m, 1H), 7,25-7,20 (m, 2H), 7,10 (t, 1H), 6,81 (t, 1H), 5,90 (s, 2H), 3,93-3,91 (m, 4H), 3,28-3,26 (m, 4H), 2,91 (br s, 2H).
Compuesto de referencia I-139
A una solución a 0 °C de 2-metilpropan-2-ol (165 equivalentes) en diclorometano se añadió cloruro sulfuroisocianatídico (150 equivalentes). La solución se mantuvo a 0 °C durante 20 minutos y, a continuación, se añadieron 3 equivalentes del cloruro de sulfonilo resultante a una solución a temperatura ambiente del compuesto de referencia I-4 (1 equivalente) y trietilamina (3 equivalentes) en diclorometano. La solución se mantuvo a temperatura ambiente durante 30 minutos, momento en el cual la solución se diluyó con bicarbonato de sodio acuoso saturado y acetato de etilo. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las sustancias orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación por cromatografía en gel de sílice (hexanos en acetato de etilo) dio el compuesto de referencia I-139 (8 mg, rendimiento cuantitativo) como un sólido de color tostado.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,76 (m, 1H), 8,21 (d, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,29-7,24 (m, 1H), 7,12-7,07 (m, 1H), 7,02 (t, 1H), 6,91 (m, 1H), 6,80 (t, 1H), 5,96 (s, 2H), 4,02-3,99 (m, 4H), 3,49-3,47 (m, 2H), 1,46-1,43 (m, 9H).
Compuesto de referencia I-125
A una solución del compuesto de referencia I-4 (1 equivalente) en diclorometano se añadió trietilamina (2 equivalentes) seguido de cloruro de metanosulfonilo (1,5 equivalentes). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 15 minutos y, a continuación, se diluyó con agua y acetato de etilo. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con agua. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto de referencia I-125 (8,5 mg, rendimiento cuantitativo) como un sólido de color tostado.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 89,06 (m, 1H), 8,34 (d, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,32-7,27 (m, 1H), 7,22-7,17 (m, 2H), 7,07 (t, 1H), 6,78 (t, 1H), 5,87 (s, 2H), 3,90-3,88 (m, 4H), 3,25-3,22 (m, 4H), 2,88 (s, 3H).
Compuesto de referencia I-146
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, la (1H-tetrazol-5-il)metanamina (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, y la reacción se calentó a 90 °C durante 3 horas como una solución en dioxano/agua (3:1). Después del procesamiento, las sustancias orgánicas se lavaron con agua, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-146 (21 mg, rendimiento 60 %) como un sólido blanco.
<1>H -R M N (400 M Hz, C D 3O D ) 5 8,81 (m, 1H), 8 ,34 (d, 1H), 7 ,45 (s, 1H), 7 ,32 -7 ,26 (m, 1H), 7 ,12 -7 ,03 (m, 2H ), 6 ,94 -6 ,90 (m, 2H ), 6 ,00 (s, 2H ), 5 ,23 (s, 2H).
Compuesto de referencia I-147
Una solución del compuesto de referencia I-139 (1 equiv.) en diclorometano y ácido trifluoroacético (200 equiv.) se agitó a 23 °C durante 2 h, momento en el cual el disolvente se retiró al vacío y el residuo se captó en metanol. El producto sólido se retiró mediante filtración. La purificación del filtrado mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con ácido trifluoacético a 0,1 %, 20 minutos) y la combinación con el producto previamente filtrado proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-147 (2,4 mg, rendimiento 41 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) 59,10 (m, 1H), 8,37 (d, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,36-7,30 (m, 1H), 7,24-7,20 (m, 2H), 7,10 (t, 1H), 6,88 (s, 2H), 6,81 (t, 1H), 5,90 (s, 2H), 3,91-3,89 (m, 4H), 3,11-3,09 (m, 4H).
Compuesto de referencia I-149
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, el ácido isoindolin-1-carboxílico fue el reactivo de amina, y la reacción se calentó a 80 °C durante 1,5 h como una solución en THF/agua (10:1). Al completarse, según lo determinado mediante LC/MS, el disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno y el sólido resultante se captó en metanol y agua (5:1). Los sólidos resultantes se retiraron filtrando y el filtrado se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con ácido trifluoacético 0,1 %, 20 minutos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-149 (14,5 mg, rendimiento 54 %) como un sólido de colortostado.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) 59,13 (br s, 1H), 8,39 (br s, 1H), 7,51 (brs, 2H), 7,45-7,39 (m, 2H), 7,36-7,31 (m, 1H), 7,27-7,21 (m, 1H), 7,14-7,05 (m, 2H), 6,96-6,75 (m, 2H), 6,03-5,82 (m, 3H), 5,23-5,07 (m, 2H).
Compuesto de referencia I-158
A una solución del compuesto de referencia I-139 (1 equiv) en metanol se añadió (diazometil)trimetilsilano (~15 equiv) hasta que persistió el color amarillo. El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno proporcionando un producto intermedio que no se aisló. Se añadió diclorometano y ácido trifluoacético (200 equivalentes), y después de agitar a temperatura ambiente durante 2 horas, el disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno. La purificación por cromatografía en gel de sílice (0-5 % metanol en diclorometano) proporcionó el compuesto de referencia I-158 (2,1 mg, rendimiento 31 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,74 (m, 1H), 8,19 (d, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,28-7,22 (m, 1H), 7,10-7,05 (m, 1H), 7,01 (t, 1H), 6,90 (m, 1H), 6,78 (t, 1H), 5,94 (s, 2H), 4,01-3,98 (m, 4H), 2,66 (s, 3H).
Compuesto de referencia I-177
A una solución a 0 °C del compuesto de referencia I-147 (1 equivalente) y piridina (100 equivalentes) en diclorometano se añadió cloruro de acetilo (5 equivalentes). Al cabo de cinco minutos, la solución se calentó a temperatura ambiente y se mantuvo a esa temperatura durante 1 hora. Se añadió cloruro de acetilo (5 equiv) adicional y se agitó a temperatura ambiente durante 2,5 horas. A continuación, la solución se vertió a cloruro de amonio acuoso saturado y diclorometano. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró alvacío.La purificación por HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con ácido trifluoacético a 0,1 %, 20 minutos) proporcionó el compuesto de referencia I-177 (7,9 mg, rendimiento 29 %) como un sólido amarillo.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,83 (m, 1H), 8,36 (d, 1H), 7,67 (s, 1H), 7,33-7,28 (m, 1H), 7,13-7,04 (m, 2H), 6,97-6,92 (m, 2H), 6,02 (s, 2H), 4,22-4,20 (m, 4H), 3,60-3,58 (m, 4H), 2,03 (s, 3H).
Compuesto de referencia I-175
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, la 4-(metilsulfonil)piperidina fue el reactivo de amina, y la reacción se calentó a 80 °C durante 1,5 h como una solución en THF. Una vez finalizada la reacción, según lo determinado mediante LC/MS, la solución se diluyó con acetato de etilo y cloruro de amonio acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con solución de cloruro de amonio adicional, se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y el disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-175 (25 mg, rendimiento 93 %) como un sólido amarillo.
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 58,44 (m, 1H), 8,21 (d, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,20-7,15 (m, 1H), 7,03-6,96 (m, 1H), 6,95 (t, 1H), 6,82 (t, 1H), 6,57 (m, 1H), 5,95 (s, 2H), 4,83 (d, 2H), 3,18-3,05 (m, 3H), 3,07 (s, 3H), 2,26 (d, 2H), 1,93 (qd, 2H).
Compuesto de referencia I-192
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, la W-metil-1-(1H-tetrazol-5-il)metanamina (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, y la reacción se calentó a 90 °C durante 1,5 horas como una solución en dioxano/agua (3:1). Después de completar la reacción, según lo determinado mediante LC/MS, la disolución se diluyó con ácido clorhídrico 1 N en solución y acetato de etilo. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se lavaron con agua, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-192 (30 mg, 83 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) 89,11 (m, 1H), 8,34 (d, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,35-7,30 (m, 1H), 7,23-7,17 (m, 2H), 7,10 (t, 1H), 6,84 (t, 1H), 5,88 (s, 2H), 5,21 (s, 2H), 3,35 (m, 3H).
Compuesto de referencia I-201
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, el 2-((ciclopropilmetil)amino)acetato de etilo fue el reactivo de amina, y la reacción se calentó a 90 °C durante 16 h como una solución en dioxano. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (0-70 % de acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-201 (32 mg, rendimiento 81 %) como un aceite transparente.
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 88,43 (m, 1H), 8,17 (d, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,19-7,13 (m, 1H), 7,01-6,92 (m, 2H), 6,81 (t, 1H), 6,54 (m, 1H), 5,92 (s, 2H), 4,37 (s, 2H), 4,17 (q, 2H), 3,63 (d, 2H), 1,21 (t, 3H), 1,15-1,09 (m, 1H), 0,59-0,54 (m, 2H), 0,31-0,26 (m, 2H).
Compuesto de referencia I-203
Una solución del compuesto de referencia I-201 (1 equivalente) en tetrahidrofurano, etanol y agua (relación 3:1:1) se trató con hidróxido de litio monohidratado (1,5 equivalentes) y se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas, momento en el cual la solución se diluyó con agua y diclorometano. Las capas se separaron y la capa acuosa se acidificó a pH ~1. La capa acuosa acidificada se extrajo con diclorometano, se secó con sulfato de magnesio, se filtró, y el disolvente se retiró al vacío dando el compuesto de referencia I-203 (18,5 mg, rendimiento 65 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,76 (d, 1H), 8,15 (d, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,29-7,24 (m, 1H), 7,10-7,01 (m, 2H), 6,86-6,82 (m, 2H), 5,94 (s, 2H), 4,47 (s, 2H), 3,96 (d, 2H), 1,22-1,15 (m, 1H), 0,59-0,55 (m, 2H), 0,38-0,34 (m, 2H).
Compuesto de referencia I-204
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, el ácido 2-(isopropilamino)acético fue el reactivo de amina, y la reacción se calentó a 100 °C durante 16 h como una solución en dioxano/agua (3:1). El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (0-10 % metanol en diclorometano) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-204 (8 mg, rendimiento 33 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 88,40 (br s, 1H), 8,11 (br s, 1H), 7,22 (s, 1H), 7,20-7,15 (m, 1H), 7,20-6,92 (m, 2H), 6,83 (brs, 1H), 6,60 (brs, 1H), 5,91 (brs, 2H), 4,75 (brs, 1H), 4,14 (brs, 2H), 1,29 (d, 6H).
Compuesto de referencia I-205
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, el 2-(isobutilamino)acetato de etilo fue el reactivo de amina, y la reacción se calentó a 90 °C durante 44 h como una solución en dioxano. Después de completar la reacción, según lo determinado mediante LC/MS, la disolución se diluyó con agua y diclorometano. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (0-50 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-205 (19 mg, rendimiento 57 %) como un sólido amarillo.
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 88,43 (m, 1H), 8,16 (d, 1H), 7,20-7,14 (m, 2H), 7,02-6,98 (m, 1H), 6,94 (t, 1H), 6,81 (t, 1H), 6,54 (m, 1H), 6,54 (m, 1H), 5,93 (s, 2H), 4,26 (s, 2H), 4,16 (q, 2H), 3,54 (d, 2H), 2,09-2,03 (m, 1H), 1,19 (t, 3H), 0,97 (d, 6H).
Compuesto de referencia I-209
Una solución del compuesto de referencia I-205 (1 equivalente) en tetrahidrofurano, etanol y agua (relación 3:1:1) se trató con hidróxido de litio monohidratado (2 equivalentes) y se agitó a temperatura ambiente hasta el consumo completo de material de partida, según lo determinado mediante LC/MS. La solución se diluyó con agua y dietil éter. Las capas se separaron y la capa acuosa se acidificó a pH ~1. La capa acuosa acidificada se extrajo con diclorometano, se secó con acetato de etilo, se filtró, y el disolvente se retiró al vacío dando el compuesto de referencia I-209 (13 mg, rendimiento 86 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,76 (m, 1H), 8,15 (d, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,29-7,24 (m, 1H), 7,10-7,01 (m, 2H), 6,86-6,82 (m, 2H), 5,92 (s, 2H), 4,38 (s, 2H), 3,61 (d, 2H), 2,15-2,08 (m, 1H), 1,00 (d, 6H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-257
El compuesto del título se preparó en 4 etapas:
Etapa 1: Síntesis de ácido (S)-2-(4-metilfenilsulfonamido)-3-(piridin-2-il)propanoico
Una suspensión de ácido (S)-2-amino-3-(piridin-2-il)propanoico, cloruro p-toluenesulfónico (1,2 equiv.) en agua se trató con hidróxido de sodio (solución 1 N, 3 equiv.). La reacción se agitó a 90 °C durante 18 h. La mezcla resultante se enfrió a temperatura ambiente, se neutralizó a pH 6 con solución de HCl 1 N. Se añadió cloruro de sodio para saturar la solución que se extrajo a continuación con diclorometano//so-propanol (4:1 v/v). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío proporcionando (S)-2-(4-metilfenilsulfonamido)-3-(piridin-2-il)propanoico, un sólido blanquecino (rendimiento 35 %).
Etapa 2: Síntesis de ácido (S)-2-(N,4-dimetilfenilsulfonamido)-3-(piridin-2-il)propanoico
Una suspensión de ácido (S)-2-(4-metilfenilsulfonamido)-3-(piridin-2-il)propanoico y yoduro de metilo (3,2 equiv.) en solución acuosa de hidróxido de sodio 1 N (4,0 equiv.) se calentó a 100 °C durante 6 h. La mezcla resultante se enfrió a temperatura ambiente, se neutralizó a pH 6 con solución de HCl 1 N y se extrajo con diclorometano//so-propanol (4:1 v/v). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación por cromatografía en gel de sílice (gradiente 20-50 % acetonitrilo/metanol (7:1) en diclorometano) proporcionó ácido (S)-2-(A/,4-d¡met¡lfen¡lsulfonam¡do)-3-(pir¡d¡n-2-¡l) propanoico como un sólido de espuma amarillo (rendimiento 39 %).
Etapa 3: Síntesis de ácido (S)-2-(metilamino)-3-(piridin-2-il)propanoico (como sal de HBr)
A ácido (S)-2-(A/,4-dimetilfenilsulfonamido)-3-(piridin-2-il)propanoico se añadió HBr (33 % en peso en ácido acético glacial, 25 equiv.). La reacción se agitó a 85 °C durante 6 h y a continuación a 60 °C durante 3 d. Se añadió una cantidad adicional de solución de HBr (3,3 equiv.) y la mezcla resultante se agitó a 85 °C durante 6 h. La reacción se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua y se lavó con éter. La fase acuosa se concentró al vacío proporcionando dihidrobromuro de ácido (S)-2-(metilamino)-3-(piridin-2-il)propanoico como un aceite rojo espeso (rendimiento >99 %) que se usó en la siguiente etapa sin manipulación adicional.
Etapa 4: Síntesis del compuesto de referencia I-257
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-2-(metilamino)-3-(piridin-2-il)propanoico (como la sal de HBr) fue el reactivo de amina, se usaron 1,1 equivalentes del producto intermedio 1, y el contenido se calentó a 100 °C. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 20-75 % acetonitrilo en agua con ácido trifluoacético a 0,1 %, 20 minutos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-257 (123 mg, rendimiento 73 %) como un sólido de color tostado.
1H-RMN (400 MHz,CDaOD) d 8,81 (d, 1H), 8,49 (d, 1H), 8,24 (d, 1H), 8,13 (ap. t, 1H), 7,88 (d, 1H), 7,58 (ap. t, 1H), 7.42 (s, 1H), 7,29 (ap. q, 1H), 7,11 (m, 1H), 7,06 (ap. t, 1H), 6,90 (d, 1H), 6,89 (m, 1H), 6,01 (d, 1H), 5,97 (d, 1H), 5,65 (br. m, 1H), 3,88 (dd, 1H), 3,67 (dd, 1H), 3,35 (d, 3H).
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,81 (d, 1H), 8,49 (d, 1H), 8,24 (d, 1H), 8,13 (ap. t, 1H), 7,88 (d, 1H), 7,58 (ap. t, 1H), 7.42 (s, 1H), 7,29 (ap. q, 1H), 7,11 (m, 1H), 7,06 (ap. t, 1H), 6,90 (d, 1H), 6,89 (m, 1H), 6,01 (d, 1H), 5,97 (d, 1H), 5,65 (br. m, 1H), 3,88 (dd, 1H), 3,67 (dd, 1H), 3,35 (d, 3H).
Compuesto de referencia I-200
El co m p u e s to de l títu lo se s in te tizó en 8 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 3-(¡soxazol-3-il)-1H-1,2,4-triazol-5-carbox¡lato de etilo
Una suspensión de isoxazol-3-carbohidrazida (1 equiv.), 2-amino-2-tioxoacetato de etilo (1 equiv.) y cloruro de amonio (10 equiv.) en etanol absoluto en un vial sellado se calentó a 110 °C durante 7 d. La mezcla bruta se concentró al vacío. Se añadió agua y la fase acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 10-20 % acetonitrilo/metanol (7:1) en diclorometano) produjo 3-(isoxazol-3-il)-1H-1,2,4-tnazol-5-carboxilato de etilo como un sólido naranja (rendimiento 24 %).
Etapa 2: Síntesis de 1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-t^azol-3-carbox¡lato de etilo y 1-(2-fluorobencil)-3-(¡soxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-t^azol-5-carbox¡lato de etilo
A 3-(¡soxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-t^azol-5-carbox¡lato de etilo en DMF se añadió hidruro de sodio (60 % en peso en aceite mineral, 1,2 equiv.). Después de 10 min, se añadió bromuro de 2-fluorobencilo (1,2 equiv.) y la reacción se agitó durante 2 h. Se añadió agua y la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 10-40 % acetato de etilo/hexanos) produjo 1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-t^azol-3-carbox¡lato de etilo y 1-(2-fluorobencil)-3-(isoxazol-3-il)-1H-1,2,4-triazol-5-carboxilato de etilo (rendimiento 63 %, relación 42:58).
Etapa 3: Síntesis de ácido 1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-t^azol-3-carboxíl¡co y ácido 1-(2-fluorobencil)-3-(isoxazol-3-il)-1 H-1,2,4-triazol-5-carboxílico
A una solución de 1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-t^azol-3-carbox¡lato de etilo y 1-(2-fluorobencil)-3-(¡soxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-tr¡azol-5-carbox¡lato de etilo en tetrahidrofurano/metanol/agua (relación 3:1:1) se añadió hidróxido de litio hidratado (1,5 equivalentes). Al cabo de 1 h, se añadió agua y solución de HCl 1 N (relación 50:8) y la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo. Nota: El producto no era completamente soluble y se recogió por filtración al vacío. La capa acuosa se extrajo con diclorometano//so-propanol (4:1 v/v). Las fases orgánicas combinadas se concentraron al vacío y se trituraron con éter proporcionando producto adicional. Los sólidos combinados (88 %, mezcla de regioisómeros) se usaron en la siguiente etapa sin manipulación adicional.
Etapa 4: Síntesis de 1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-tr¡azol-3-carbonitr¡lo
A una suspensión de ácido 1-(2-fluorobenc¡l)-5-(isoxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-tr¡azol-3-carboxíl¡co y ácido 1-(2-fluorobencil)-3-(¡soxazol-3-il)-1H-1,2,4-tr¡azol-5-carboxíl¡co, 2-metilpropan-2-amina (2 equiv.), y trietilamina (2 equiv.) en acetato de etilo se añadió anhídrido n-propilfosfónico (T3P, solución a 50 % en acetato de etilo, 3 equiv.). La solución amarilla resultante se calentó a 65 °C durante 2,5 h. El disolvente se retiró al vacío. Se añadió tricloruro de fosforilo (18 equiv.) y las mezclas resultantes se agitaron a 70 °C durante 50 min. La reacción se desactivó vertiéndola cuidadosamente a una mezcla de agua y hielo, se neutralizó a pH 7 mediante la adición de solución de bicarbonato de sodio saturada y se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 10-60 % acetato de etilo/hexanos) produjo 1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-tr¡azol-3- carbonitrilo (rendimiento 39 %). Nota: Uno de los regioisómeros se decarboxiló formando 3-(1-(2-fluorobencil)-1H-1,2,4-triazol-3-¡l)¡soxazol. La asignación estructural es coherente con los nOe observados. Esta reacción secundaria pudo haberse producido durante la etapa de saponificación (etapa 3).
Etapa 5: Síntesis de 1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-triazol-3-carbox¡m¡dam¡da
Una solución de 1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-tr¡azol-3-carbonitr¡lo en metanol se trató con metóxido de sodio (solución a 25 % en peso en metanol, 5 equiv.) y se agitó durante 1 h. Se añadió cloruro de amonio (10 equiv.). Al cabo de 18 h, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se dividió entre solución semisaturada de bicarbonato de sodio/hidróxido de sodio 1 N (relación 10:1) y acetato de etilo. Las fases orgánicas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío proporcionando 1-(2-fluorobencil)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-triazol-3-carboximidamida (rendimiento >99 %) que se usó sin purificación adicional.
Etapa 6: Síntesis de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-tr¡azol-3-¡l) pirim¡d¡n-4(3H)-ona
Una suspensión de 1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-triazol-3-carbox¡m¡dam¡da se trató con (Z)-3-etox¡-2-fluoro-3-oxoprop-1-en-1-olato (3,0 equiv.) y se calentó a 90 °C durante 1 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se neutralizó mediante la adición de HCl (solución 1,25 M en etanol). La suspensión de color amarillo pálido resultante se agitó durante 5 min y, a continuación se concentró al vacío. El residuo se repartió entre diclorometano y agua y la capa acuosa se extrajo nuevamente con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación por cromatografía en gel de sílice (gradiente de 5-20 % acetonitrilo/metanol (7:1) en diclorometano) proporcionó 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-1,2,4-tr¡azol-3-¡l)-p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (61 mg, rendimiento 74 %) como un sólido amarillo pálido.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 58,95 (d, 1H), 8,09 (d, 1H), 7,35 (ap. q, 1H), 7,23 (ap. t, 1H), 7,17 (d, 1H), 7,15 (m, 2H), 6,07 (s, 2H).
Etapa 7: Síntesis de 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-1,2,4-triazol-5-il)isoxazol
Una suspensión de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-1,2,4-triazol-3-il) pirimidin-4(3H)-ona en tricloruro de fosforilo (77 equiv.) se calentó a 65 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se vertió cuidadosamente en hielo y se agitó durante 20 min. La mezcla resultante se alcalinizó a pH 8 mediante la adición de bicarbonato de sodio saturado y se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío proporcionando 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-1,2,4-triazol-5-il)isoxazol como un sólido blanquecino (rendimiento >99 %).
Etapa 8: Síntesis del compuesto de referencia I-200
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-3-metil-2-(metilamino)butanoico fue el reactivo de amina, se usó 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-1,2,4-triazol-5-il)isoxazol en lugar del producto intermedio 1, y el contenido se calentó a 100 °C. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 20-50 % (acetonitrilo/metanol=7:1) en diclorometano) obteniéndose un producto impuro. La muestra se purificó de nuevo mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5 95 % acetonitrilo en agua con ácido trifluoacético a 0,1 %, 20 minutos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-200 (23 mg, 66 % en dos etapas) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 58,56 (d, 1 H), 8,34 (d, 1 H), 7,27 (ap. q, 1 H), 7,21 (ap. t, 1 H), 7,15 (d, 1 H), 7,06 (m, 2 H), 6,09 (d, 1 H), 6,02 (d, 1 H), 4,27 (d, 1 H), 3,07 (d, 3 H), 2,55 (m, 1 H), 1,10 (d, 3 H), 0,95 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-249
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-metilpiperidin-4-carboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, se usó 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-1,2,4-triazol-5-il)isoxazol (cuya síntesis se describe en el procedimiento descrito para el compuesto de referencia I-200) en lugar del producto intermedio 1 y el contenido se calentó a 100 °C durante 19 h. La reacción se enfrió y se diluyó con agua, y se neutralizó con HCl 1N acuoso. Los sólidos resultantes se recogieron mediante filtración al vacío, se lavaron con agua, y se secaron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-249 (29 mg, rendimiento 85 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (400 MHz, CDCl3) 58,54 (d, 1H), 8,22 (d, 1H), 7,24 (m, 1H), 7,17 (d, 1H), 7,07-7,00 (m, 3H), 6,08 (s, 2H), 4,41 (br. d, 2H), 3,38 (ap. t, 2H), 2,28 (br. d, 2H), 1,59 (m, 2H), 1,31 (s, 3H).
Compuesto de referencia I-1
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la pirrolidina (7 equiv.) fue el reactivo de amina, no se utilizó trietilamina, y el contenido se calentó a 40 °C durante 10 min como una solución en THF, a continuación a 23 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-1 (23 mg, rendimiento 76 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,08 (d, 1 H), 8,20 (d, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,30 - 7,40 (m, 1 H), 7,18 - 7,28 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,82 (t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 3,65 - 3,70 (m, 4 H), 1,92 (d, 4 H).
Compuesto de referencia I-2
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la piperidina (7 equiv.) fue el reactivo de amina, no se utilizó trietilamina, y el contenido se calentó a 40 °C durante 10 min como una solución en THF, a continuación a 23 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-2 (25 mg, rendimiento 80 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 9,09 (s, 1 H), 8,26 (d, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,32 (s, 2 H), 7,20 - 7,27 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 3,74 - 3,80 (m, 4 H), 1,58 - 1,62 (m, 6 H).
Compuesto de referencia I-3
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la morfolina (7 equiv.) fue el reactivo de amina, no se utilizó trietilamina, y el contenido se calentó a 40 °C durante 10 min como una solución en THF, a continuación a 23 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-3 (24 mg, rendimiento 76 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,08 (s, 1 H), 8,33 (d, 1 H), 7,57 (s, 1 H), 7,32 (d, 2 H), 7,20 - 7,27 (m, 2 H), 7,10 (t, 2 H), 6,81 (t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 3,79 (d, 4 H), 3,74 (d, 4 H).
Compuesto de referencia I-4
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la piperacina (7 equiv.) fue el reactivo de amina, no se utilizó trietilamina, y el contenido se calentó a 40 °C durante 10 min como una solución en THF, a continuación a 23 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-4 (20 mg, rendimiento 64 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,09 (s, 1 H), 8,33 (d, 1 H), 7,56 (s, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,20 - 7,28 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 3,78 - 3,84 (m, 4 H), 2,90 - 3,00 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-5
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la N-metilpiperazina (7 equiv.) fue el reactivo de amina, no se utilizó trietilamina, y el contenido se calentó a 40 °C durante 10 min como una solución en THF, a continuación a 23 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-5 (23 mg, rendimiento 71 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,09 (s, 1 H), 8,31 (d, 1 H), 7,56 (s, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,18 - 7,27 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,80 (s, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 3,74 - 3,81 (m, 4 H), 3,25 - 3,35 (s, 3 H), 2,20 - 2,30 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-6
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2-morfolinoetanamina (7 equiv.) fue el reactivo de amina, no se utilizó trietilamina, y el contenido se calentó a 40 °C durante 10 min como una solución en THF, a continuación a 23 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-6 (25 mg, rendimiento 72 %) como una goma.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,09 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,59 (s, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 7,28 - 7,38 (m, 1 H), 7,17 - 7,26 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,86 (t, 1 H), 5,88 (s, 2 H), 3,56 - 3,62 (m, 4 H), 3,48 (t, 4 H), 2,44(m, 2 H), 2,29 - 2,40 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-7
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la W,A/-dimetiletano-1,2 diamina (7 equiv.) fue el reactivo de amina, no se utilizó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 10 min como una solución en THF, después a 23 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-7 (24 mg, rendimiento 76 %) como una goma.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,09 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 7,29 - 7,38 (m, 1 H), 7,18 - 7,27 (m, 2 H), 7,11 (t, 1 H), 6,88 (t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 3,57 (q, 2 H), 2,43-2,49 (m, 2 H), 2,19 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-9
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la ciclohexilamina (7 equiv.) fue el reactivo de amina, no se utilizó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 10 min como una solución en THF, después a 23 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-9 (20 mg, rendimiento 62 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 9,09 (d, 1 H), 8,14 (d, 1 H), 7,51 (d, 1 H), 7,45 (s, 1 H), 7,33 (d, 1 H), 7,18 - 7,28
(m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 5,88 (s, 2 H), 4,03-4,08 (m, 1 H), 1,89-1,92 (m, 2 H), 1,72-1,76 (m, 2 H), 1,63 (d, 2
H), 1,32- 1,43 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-8
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la dimetilamina (7 equiv.) fue el reactivo de amina, no se utilizó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 10 min como una solución en THF, después a 23 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-8 (19 mg, rendimiento 67 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,09 (s, 1 H), 8,18 (d, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,39 - 7,45 (m, 1 H), 7,18 - 7,27 (m, 2
H), 7,10 (t, 1 H), 6,82 - 6,88 (m, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 3,24 (d, 6 H).
Compuesto de referencia I-11
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2-metilpirrolidina fue el reactivo de amina, no se utilizó trietilamina, y el contenido se calentó a 40 °C durante 10 min como una solución en THF, a continuación a 23 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera.
El disolvente se retiró al vacío, y el material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-11
(16 mg, rendimiento 51 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,09 (d, 1 H), 8,21 (d, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,29 - 7,38 (m, 1 H), 7,17 - 7,27 (m, 2
H), 7,10 (t, 1 H), 6,84 (t 1 H), 5,92 (s, 2 H), 4,40-4,48 (m, 1 H), 3,75 - 3,90 (m, 1 H), 3,56 - 3,69 (m, 1 H), 2,00 - 2,07
(m, 2 H), 1,93 (d, 1 H), 1,65-1,73 (m, 1 H), 1,23 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-10
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el piperidin-4-ol fue el reactivo de amina, no se utilizó trietilamina, y el contenido se calentó a 40 °C durante 10 min como una solución en THF, a continuación a 23 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera.
El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-10 (19 mg, rendimiento 58 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,08 (d, 1 H), 8,27 (d, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,21 - 7,39 (m, 3 H), 7,10 (t, 1 H), 6,81
(t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,78-4,84 (m, 1 H), 4,18 (d, 2 H), 3,74-3,79 (m, 1 H), 3,37 - 3,47 (m, 2 H), 1,81-8,89 (m, 2 H),
1,40 - 1,54 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-12
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 4-aminopiperidin-1-carboxilato de fed-butilo (1,5 equiv.) fue el reactivo de amina, no se utilizó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 10 min como una solución en THF, después a 23 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío, y el material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-12 (36 mg, rendimiento 90 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,04 - 9,15 (m, 1 H), 8,18 (d, 1 H), 7,53 - 7,65 (m, 1 H), 7,47 (s, 1 H), 7,30 - 7,39
(m, 1 H), 7,19 - 7,27 (m, 2 H), 7,07 - 7,16 (m, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 5,83 - 5,91 (m, 2 H), 4,25 (d, 1 H), 3,96 (d, 2 H), 2,87 - 2,91 (m, 2 H), 1,87 (d, 2 H), 1,44 -1,51 (m, 2 H),1,41 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-13
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el (S)-pirrolidin-2-ilmetanol fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 10 min como una solución en
THF, después a 23 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío, y el material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-13 (18 mg, rendimiento 55 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,09 (d, 1 H), 8,21 (d, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,28 - 7,37 (m, 1 H), 7,18 - 7,26 (m, 2
H), 7,10 (t, 1 H), 6,83 (t, 1 H), 5,85 - 5,93 (m, 2 H), 4,86 (t, 1 H), 4,32 - 4,39 (m, 1 H), 3,74 - 3,79 (m, 1 H), 3, (m, 1 H), 3,52 - 3,59 (m, 1 H), 3,44 - 3,50 (m, 1 H), 1,98 - 2,04 (m, 2 H), 1,91 (d, 2 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-17
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-metoxipirrolidina (4 equiv.) fue el reactivo de amina, y se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 1 h como una solución en THF. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-17 (12 mg, rendimiento 61 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 9,09 (d, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,29 - 7,40 (m, 1 H), 7,18 - 7,28 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,82 (t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,03 - 4,12 (m, 1 H), 3,70 - 3,87 (m, 3 H), 3,66 (d, 1 H), 3,28 (s, 3 H), 1,96 - 2,15 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-18
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el piperidin-3-ol (4 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 1 h como una solución en THF. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-18 (14 mg, rendimiento 72 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,09 (d, 1 H), 8,25 (d, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,28 - 7,39 (m, 1 H), 7,17 - 7,27 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,97 (d, 1 H), 4,18 (d, 1 H), 3,56 - 3,68 (m, 1 H), 3,37 - 3,48 (m, 2 H), 3,21 (dd, 1 H), 1,73 - 1,96 (m, 2 H), 1,43-1,58 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-25
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el piperidin-3-ilcarbamato detert-butilo (4 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 1 h como una solución en THF. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío, y el material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0 10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-25 (25 mg, rendimiento 66 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,75 (d, 1 H), 8,16 (d, 1 H), 7,58 (s, 1 H), 7,23 - 7,38 (m, 1 H), 7,08 - 7,17 (m, 1 H), 7.05 (t, 1 H), 6,95 (s, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 6,78 (d, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,40 (d, 1 H), 4,13 - 4,24 (m, 1 H), 3,69 (br. s., 1 H), 3,56 (d, 1 H), 3,35 - 3,42 (m, 1 H), 2,00 - 2,09 (m, 1 H), 1,91 (dd, 1 H), 1,59 - 1,72 (m, 2 H), 1,45 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-26
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 3-aminoazetidin-1-carboxilato de tert-butilo (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 40 °C durante 1 hora como una solución en THF, seguido de calentamiento a 75 °C hasta que se observó el consumo completo de material de partida mediante LC/MS. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío, y el material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-26 (24 mg, rendimiento 67 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,10 (d, 1 H), 8,31 (d, 1 H), 8,25 (d, 1 H), 7,48 - 7,57 (m, 1 H), 7,29 - 7,38 (m, 1 H), 7 ,15-7,28 (m, 2 H), 7,11 (t, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 4,76-4,93 (m, 1 H), 4,15-4,25 (m, 2 H), 3,91 (dd, 2 H), 1,39 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-27
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 3-aminopiperidina-1-carboxilato de tert-butilo (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 40 °C durante 1 hora como una solución en THF, seguido de calentamiento a 75 °C hasta que se observó el consumo completo de material de partida mediante LC/MS. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío, y el material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-27 (24 mg, rendimiento 57 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,78 (d, 1 H), 8,15 (d, 1 H), 7,58 (s, 1 H), 7,25 - 7,33 (m, 1 H), 7,08 - 7,17 (m, 1 H), 7.05 (t, 1 H), 6,95 (s, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 6,78 (d, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,40 (d, 1 H), 4,18 (d, 1 H), 3,69 (m, 1 H), 3,56 (d, 1 H), 3,39 (d, 1 H), 1,99-2,08 (m, 1H), 1,91 (dd, 1 H), 1,57- 1,76 (m, 2 H), 1,45 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-19
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-metoxipiperidina (4 equiv.) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 1 h como una solución en THF, seguido de calentamiento a 75 °C hasta que se observó el consumo completo de material de partida en LC/MS. La reacción se enfrió y se filtró, y los sólidos se lavaron con acetato de etilo. El filtrado se recogió y lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-19 (15 mg, rendimiento 74 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-da) 8 ppm 9,06 (d, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,25 - 7,35 (m, 1 H), 7,13 - 7,24 (m, 2 H), 7,07 (t, 1 H), 6,78 - 6,87 (m, 1 H), 5,86 (s, 2 H), 3,91 (d, 1 H), 3,62 - 3,81 (m, 3 H), 3,34 (dd, 1 H), 3,23 (s, 3 H), 1,83 - 1,94 (m, 1 H), 1,72 - 1,81 (m, 1 H), 1,56 - 1,65 (m, 1 H), 1,44 - 1,54 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-20
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el pirrolidin-3-ol (4 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 1 h como una solución en THF. La reacción se enfrió y se filtró, y los sólidos se lavaron con acetato de etilo. El filtrado se recogió y lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-20 (10 mg, rendimiento 53 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,08 (d, 1 H), 8,21 (d, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,29 - 7,37 (m, 1 H), 7,18 - 7,28 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,82 (t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 5,04 (d, 1 H), 4,32-4,39 (m, 1 H), 3,81 (d, 1 H), 3,69-3,77 (m, 1 H), 3,60 -3,68 (m, 1 H), 1,96-2,05 (m, 1 H), 1,88 - 1,95 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-21
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el acetidin-3-ilcarbamato detert-butilo (4 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 1 h como una solución en THF. La reacción se enfrió y se filtró, y los sólidos se recogieron y secaron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-21 (30 mg, rendimiento 79 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,08 (s, 1 H), 8,25 (m, 1 H), 7,62 - 7,66 (m, 2 H), 7,51 (s, 1 H), 7,29 - 7,34 (m, 1 H), 7,15 - 7,27 (m, 2 H), 7,07 - 7,14 (m, 1 H), 6,79 - 6,84 (m, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,35 - 4,44 (m, 2 H), 4,01 - 4,12 (m, 2 H), 3,84-3,90 (m, 1 H), 1,39 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-22
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 4-metoxipiperidina (4 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 1 h como una solución en THF. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-22 (15 mg, rendimiento 74 %) como un sólido.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,05 (d, 1 H), 8,25 (d, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,26 - 7,31 (m, 1 H), 7,14 - 7,25 (m, 2 H), 7,07 (t, 1 H), 6,74 - 6,82 (m, 1 H), 5,87 (s, 2 H), 4,06 - 4,11 (m, 2 H), 3,42 - 3,50 (m, 2 H), 3,25 (s, 3 H), 1,89-1,95 (m, 2 H), 1,46-1,51 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-64
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 4-metiltetrahidro-2H-piran-4-amina (como la sal de HCl) (5 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 10 equivalentes de base de Hunig en lugar de trietilamina y el contenido se calentó a 175 °C durante 1 h en el microondas como una solución en THF/DMF (1:1). La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío, y el material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 5-90 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-64 (4 mg, rendimiento 20 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,74 (s, 1 H), 8,05 (d, 1 H), 7,19 - 7,33 (m, 2 H), 6,97 - 7,12 (m, 2 H), 6,79 - 6,93 (m, 2 H), 5,92 (s, 2 H), 3,67 - 3,81 (m, 4 H), 2,49 (d, 2 H), 1,77 -1,91 (m, 2 H), 1,63 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-101
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-(tertbutoxicarbonil)piperazin-2-carboxílico (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 5 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 5 h como una solución en THF/agua (9:1). La reacción se recogió en cabo con acetato de etilo en lugar de diclorometano. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-101 (12 mg, rendimiento 26 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,10 (d, 1 H), 8,39 (d, 1 H), 7,54 (s, 1H), 7,28 - 7,39 (m, 1 H), 7,15 - 7,25 (m, 2 H), 7,11 (t, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 5,85- 5,97 (m, 2 H), 5,17 (br. s., 1 H), 4,45 (d, 1 H), 4,33 (br. s., 1 H), 3,91 -4,02 (m, 1 H), 3,33 - 3,39 (m, 2 H), 3,05 - 3,17 (m, 1 H), 1,41 (s, 9 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-163
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4,5,6,7-tetrahidro-3H-imidazo[4,5-c]piridin-4-carboxílico (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 3 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 175 °C durante 10 min como una solución en NMP. El contenido se diluyó con dietil éter, y el precipitado resultante se filtró y se recogió. El material bruto se purificó adicionalmente mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-163 (5 mg, rendimiento 15 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, metanol-d^ 8 ppm 9,03 (d, 1 H), 8,82 - 8,89 (m, 1 H), 8,58 (s, 1 H), 7,58 (s, 1 H), 7,28 - 7,37 (m, 1
H), 7,11 -7,18 (m, 1 H), 7 ,02-7,10 (m, 1 H), 6,94 (s, 1 H), 6,83-6,92 (m, 1 H), 6,01 (s, 2 H), 5,12 (d, 1 H), 5,00 (d, 1
H), 4,55 - 4,64 (m, 1 H), 3,43 (dd, 1 H), 3,20 (d, 1 H).
Compuesto de referencia I-189
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-etilpiperidin-4-carboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 40
°C durante 18 h como una solución en THF. La reacción estaba incompleta, por lo que se introdujo reactivo de amina adicional (3 equiv.), trietilamina (4 equiv.) y DMF (volumen equivalente en THF) en el recipiente, y la mezcla resultante se calentó a 85 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera.
El disolvente se retiró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-189 como un sólido.
1H RMN (500 MHz, metanol-d^ 8 ppm 8,79 (d, 1 H), 8,20 (d, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,21 - 7,35 (m, 1 H), 7,07 - 7,13 (m, 1
H), 7,05 (t, 1 H), 6,95 (d, 1 H), 6,89 (t, 1 H), 5,99 (s, 2 H), 4,65 (d, 2 H), 3,33 - 3,43 (m, 2 H), 2,32 (d, 2 H), 1,63 - 1,68 (m, 2 H), 1,55 - 1,63 (m, 2 H), 0,91 (t, 3 H).
Compuesto de referencia I-190
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-metilpiperidin-4-carboxílico fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 40 °C durante
18 h como una solución en THF. La reacción estaba incompleta, por lo que se introdujo reactivo de amina adicional (3 equiv.), trietilamina (4 equiv.) y DMF (volumen equivalente en THF) en el recipiente, y la mezcla resultante se calentó a 85 °C durante 18 h. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo, y se lavó con agua y salmuera. El disolvente se retiró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-190 como un sólido.
1H RMN (500 MHz, m etano l^) 8 ppm 8,79 (d, 1 H), 8,22 - 8,29 (m, 1 H), 7,59 (s, 1 H), 7,24 -7,34 (m, 1 H), 7,02 -7,15 (m, 2 H), 6,96 - 7,00 (m, 1 H), 6,93 (t, 1 H), 6,01 (m, 2 H), 4,76 (d, 1 H), 4,58 (d, 1 H), 3,70 (dd, 1 H), 3,52 - 3,58 (m, 1
H), 2,87-2,94 (m, 1 H), 2,45-2,54 (m, 1 H), 2,00-2,11 (m, 1 H), 1,90- 1,99 (m, 1 H), 1,02 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-235
El compuesto del título se preparó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 2-(1-(2,3-difluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5-fluoropirimidin-4(3H)-ona
El compuesto anterior se preparó siguiendo el procedimiento general A, usando 1-(isoxazol-3-il)etanona en la etapa 1 y 2,3-difluorobencilhidrazina en la etapa 2.
Etapa 2: Preparación de 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2,3-difluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol
Una suspensión de 2-(1-(2,3-difluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5-fluoropirimidin-4(3H)-ona en tricloruro de fosforilo (47 equiv) se calentó a 65 °C durante 2 horas. La mezcla de reacción se vertió cuidadosamente en hielo y se agitó durante 20 min. La mezcla resultante se alcalinizó a pH 8 mediante la adición de bicarbonato de sodio saturado y se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío proporcionando 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2,3-difluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol como un sólido amarillo claro que se usó en la siguiente etapa sin manipulación adicional.
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-235
Una solución de ácido (S)-3-metil-2-(metilamino)butanoico (3,0 equivalentes), trietilamina (10 equivalentes) y 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2,3-difluorobencil) 1H-pirazol-5-il)isoxazol se agitó en dioxano/agua (relación 2:1) a 100
°C durante 23 h, siguiendo el procedimiento general B. La solución se diluyó con agua, se neutralizó a pH 3 mediante la adición de HCl 1N y se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación por cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0
10 % acetonitrilo/metanol (7:1) en diclorometano) produjo el compuesto de referencia I-235 (38 mg, 61 % durante 2 etapas) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 88,46 (d, 1H), 8,22 (d, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,04 (dd, 1H), 6,92 (dd 1H), 6,77 (ap. t, 1H), 6,58
(d, 1H), 5,99 (d, 1H), 5,94 (d, 1H), 4,27 (d, 1H), 3,24 (d, 3H), 2,52 (m, 1H), 1,11 (d, 3H), 0,94 (d, 3H).
Compuesto de referencia I-236
El compuesto del título se preparó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(oxazol-2-N)-1H-pirazol-3-N) pirimidin-4(3H)-ona
El compuesto anterior se preparó siguiendo el procedimiento general A, utilizando 1-(oxazol-2-il)etanona en la etapa 1 y 2-fluorobenzilhidrazina en la etapa 2.
Etapa 2: Síntesis de 2-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)oxazol
El compuesto anterior se preparó siguiendo un proceso análogo a la etapa 2 de la síntesis del compuesto de referencia I-235, utilizando 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(oxazol-2-il)-1H-pirazol-3-il)-pirimidin-4(3H)-ona como la pirimidona de partida.
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-236
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-3-metil-2-(metilamino)butanoico fue el reactivo de amina, se usó 2-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)oxazol en lugar del producto intermedio 1, y el contenido se calentó a 100 °C durante 41 h. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-20 % (acetonitrilo/metanol=7:1) en diclorometano) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-236 (8,9 mg, 49 % durante dos etapas) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 88,25 (d, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,24 (s, 1H), 7,21 (m 1H), 7,07-6,95 (m, 3H), 6,11 (d, 1H), 6,04 (d, 1H), 4,27 (d, 1H), 3,23 (d, 3H), 2,52 (m, 1H), 1,11 (d, 3H), 0,94 (d, 3H).
Compuesto de referencia I-36
En una solución agitada del compuesto de referencia I-12 disuelto en diclorometano se añadió un volumen equivalente de ácido trifluoacético a 23 °C. El contenido se agitó hasta que se observó todo el consumo de material de partida mediante LC/MS. La reacción se diluyó con diclorometano y se desactivó con solución de bicarbonato de sodio saturado. Las capas se separaron, y la capa orgánica se lavó con solución saturada de bicarbonato de sodio, agua y salmuera. La capa orgánica se secó adicionalmente sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-36 (19,5 mg, rendimiento 75 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 88,46 (s, 1 H), 8,15 (d, 1 H), 7,27 - 7,30 (m, 1 H), 7,13 - 7,23 (m, 1 H), 7,00 - 7,09 (m, 1 H), 6,91 -7,00 (m, 1 H), 6,81 -6,90(m , 1 H), 6,54-6,62 (m, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 5,19 (d, 1 H), 4,26 - 4,40 (m, 1 H), 3,23 - 3,35 (m, 2 H), 3,03 (br. s, 1H), 2,92 (td, 2 H), 2,10-2,20 (m, 2 H), 1,59 - 1,77 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-37
En una solución agitada del compuesto de referencia I-25 disuelto en diclorometano se añadió un volumen equivalente de ácido trifluoacético a 23 °C. El contenido se agitó hasta que se observó todo el consumo de material de partida mediante LC/MS. La reacción se diluyó con diclorometano y se desactivó con solución de bicarbonato de sodio saturado. Las capas se separaron, y la capa orgánica se lavó con solución saturada de bicarbonato de sodio, agua y salmuera. La capa orgánica se secó adicionalmente sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-37 (14 mg, rendimiento 79 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CDCta) 88,45 (d, 1 H), 8,16 (d, 1 H), 7,30 (s, 1 H), 7,14 - 7,23 (m, 1 H), 7,00 - 7,07 (m, 1 H), 6,96 (td, 1 H), 6,78 - 6,89 (m, 1 H), 6,60 (d, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,39 - 4,51 (m, 1 H), 4,22 - 4,36 (m, 1 H), 3,25 (ddd, 1 H), 2,93-3,08 (m, 2H), 1,99-2,11 (m, 1 H), 1,83- 1,92 (m, 1 H), 1,59- 1,72 (m, 1 H), 1,37- 1,50 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-38
En una solución agitada del compuesto de referencia I-26 disuelto en diclorometano se añadió un volumen equivalente de ácido trifluoacético a 23 °C. El contenido se agitó hasta que se observó todo el consumo de material de partida mediante LC/MS. La reacción se diluyó con diclorometano y se desactivó con solución de bicarbonato de sodio saturado. Las capas se separaron, y la capa orgánica se lavó con solución saturada de bicarbonato de sodio, agua y salmuera. La capa orgánica se secó adicionalmente sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-38 (11 mg, rendimiento 55 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CDCta) 88,46 (d, 1 H), 8,16 - 8,22 (m, 1 H), 7,30 (m, 1 H), 7,17 - 7,25 (m, 2 H), 7,00 - 7,09 (m, 1 H), 6,91 - 6,98 (m, 1 H), 6,85 (d, 1 H), 6,56 - 6,68 (m, 1 H), 5,96 - 6,03 (m, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 4,94 - 5,01 (m, 1 H), 4,39 (t, 2 H), 3,99 (dd, 2 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-39
En una solución agitada del compuesto de referencia I-27 disuelto en diclorometano se añadió un volumen equivalente de ácido trifluoacético a 23 °C. El contenido se agitó hasta que se observó todo el consumo de material de partida mediante LC/MS. La reacción se diluyó con diclorometano y se desactivó con solución de bicarbonato de sodio saturado. Las capas se separaron, y la capa orgánica se lavó con solución saturada de bicarbonato de sodio, agua y salmuera. La capa orgánica se secó adicionalmente sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-39 (12,2 mg, rendimiento 69 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 88,45 (d, 1H), 8,13 (d, 1 H), 7,35 (s, 1 H), 7 ,14-7,24 (m, 1 H), 6 ,99-7,08 (m, 1 H), 6,92 6,99 (m, 1 H), 6,79 - 6,89 (m, 1 H), 6,64 (d, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 5,55 (br. s., 1 H), 4,34 - 4,49 (m, 1 H), 3,29 (dd, 1 H), 2,88-3,01 (m, 1 H), 2,79-2,87 (m, 1 H), 2,75(dd, 1 H), 1,90-2,02 (m, 1 H), 1,77- 1,88 (m, 1 H), 1,58 - 1,76 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-40
En una solución agitada del compuesto de referencia I-21 disuelto en diclorometano se añadió un volumen equivalente de ácido trifluoacético a 23 °C. El contenido se agitó hasta que se observó todo el consumo de material de partida mediante LC/MS. La reacción se diluyó con diclorometano y se desactivó con solución de bicarbonato de sodio saturado. Las capas se separaron, y la capa orgánica se lavó con solución saturada de bicarbonato de sodio, agua y salmuera. La capa orgánica se secó adicionalmente sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-40 (22 mg, rendimiento 90 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, metanol-d4) 88,73 (d, 1 H), 8,06 (d, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,19-7,30 (m, 1 H), 7,04-7,11 (m, 1 H), 7,00 (t, 1 H), 6,86 (d, 1 H), 6,77 (t, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4,58 (t, 2 H), 4,13 (dd, 2 H), 3,98 - 4,09 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-133
En una solución agitada del compuesto de referencia I-101 disuelto en diclorometano se añadió un volumen equivalente de ácido trifluoacético a 23 °C. El contenido se agitó hasta que se observó todo el consumo de material de partida mediante LC/MS. La mezcla se concentró al vacío y la goma resultante se trituró con dietil éter, se filtró, y los sólidos se lavaron con dietil éter. Los sólidos se recogieron y secaron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-133 (como la sal de TFA, 100 mg, rendimiento 83 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-de) 89,11 (s, 1 H), 8,87 (s, 1 H), 8,47 (d, 1 H), 7,58 (s, 1 H), 7,29 - 7,40 (m, 1 H), 7,17 -7,27 (m, 2 H), 7,11 (t, 1 H), 6,83 (t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 5,44-5,49 (m, 1 H), 4,59 - 4,64 (m, 1 H), 3,79 (d, 1 H), 3,41 -3,46 (m, 1 H), 3,11-3,18 (m, 1 H), 3,01 -3,12(m , 1 H).
Compuesto de referencia I-30
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2,8-diazaspiro[4.5]decan-3-ona (2 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 2 d como una solución en THF. La reacción se enfrió, el disolvente se retiró al vacío y el sólido resultante se aclaró con solución de HCl 1N proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-30 (57,8 mg, rendimiento 83 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,86 (s, 1 H) 8,36 (d, 1 H) 7,71 (s, 1 H) 7,31 - 7,37 (m, 1 H) 7,13 (dd, 2 H) 6,99 - 7,04 (m, 2 H) 6,06 (s, 2 H) 4,32 (br. s., 2 H) 4,13 (br. s., 2 H) 3,37 (br. s., 2 H) 2,42 (s, 2 H) 1,95 (t, 4 H).
Compuesto de referencia I-42
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el oxalato de 2-oxa-7-azaspiro[3.5]nonano (2 equiv.) fue el reactivo de amina, y se usaron 8 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 24 h como una solución en NMP. La reacción se enfrió, se diluyó con acetato de etilo, y la mezcla se aclaró con agua. El contenido se secó, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-80 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-42 (42 mg, rendimiento 52 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,75 (s, 1 H) 8,13 (d, 1 H) 7,41 (s, 1 H) 7,20 - 7,32 (m, 1 H) 6,97 - 7,14 (m, 2 H) 6,90 (s, 1 H) 6,81 (t, 1 H) 5,95 (s, 2 H) 4,52 (s, 4 H) 3,80 - 3,88 (m, 4 H) 1,90 - 2,05 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-43
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 8-oxa-2-azaspiro[4.5]decano (2 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 24 h como una solución en THF. La reacción se enfrió y se concentró proporcionando un sólido, el cual se disolvió en acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución acuosa de HCl 1N, se secó, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-42 (6,4 mg, rendimiento 17 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,77 (s, 1 H) 8,09 (d, 1 H) 7,44 (s, 1 H) 7,25 - 7,33 (m, 1 H) 7,11 (t, 1 H) 7,05 (s, 1 H) 6,93 (s, 1 H) 6,82 (s, 1 H) 5,98 (s, 2 H) 3,92 (br. s., 2 H) 3,71 - 3,84 (m, 6 H) 2,00 (t, 2 H) 1,64 - 1,75 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-32
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el oxalato de 2-oxa-6-azaspiro[3.3]heptano (2 equiv.) fue el reactivo de amina, y se usaron 6 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 2 h como una solución en<t>H<f>. La reacción se enfrió y se concentró proporcionando un sólido, el cual se disolvió en acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución de HCl 1N, se secó, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-32 (19 mg, rendimiento 33 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,83 (s, 1 H) 8,24 (br. s, 1 H) 7,57 (br. s., 1 H) 7,29 - 7,33 (m, 1 H) 7,03 -7,16 (m, 2 H) 6,91 - 7,01 (m, 2 H) 5,99 - 6,05 (m, 2 H) 4,28 - 4,61 (m, 4 H) 3,99 (s, 2 H) 3,88 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-47
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el oxalato de 2-oxa-6-azaspiro[3.5]nonano (2 equiv.) fue el reactivo de amina, y se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 2 h como una solución en NMP. La reacción se enfrió y se concentró proporcionando un sólido, el cual se disolvió en acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, se secó, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-47 (42,3 mg, rendimiento 66 %) como un sólido blanco.
1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,67 - 8,76 (m, 1 H) 8,12 (d, 1 H) 7,40 (s, 1 H) 7,19 - 7,28 (m, 1 H) 7,02 -7,10 (m, 1 H) 6,99 (t, 1 H) 6,88 (d, 1 H) 6,79 (t, 1 H) 5,89 - 5,95 (m, 2 H) 4,38 - 4,49 (m, 4 H) 4,05 - 4,10 (m, 2 H) 3,71 - 3,79 (m, 2 H) 1,92 - 1,98 (m, 2 H) 1,58 - 1,68 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-44
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2,8-diazaspiro[4.5]decano-2-carboxilato de fed-butilo (2 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 2 d como una solución en THF. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, se secó, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-44 (51,6 mg, rendimiento 67 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,77 (s, 1 H)8,15(d, 1 H) 7,43 (s, 1 H) 7,23 - 7,33 (m, 1 H) 7,11 (t, 1 H) 7,05 (t, 1 H) 6,92 (s, 1 H) 6,83 (t, 1 H) 5,97 (s, 2 H) 3,79 - 4,09 (m, 4 H) 3,43 - 3,52 (m, 2 H) 3,30 (s, 2 H) 1,89 (t, 2 H) 1,72 (br. s., 4 H) 1,49 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-45
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2,7-diazaspiro[4.4]nonano-2-carboxilato de fed-butilo (2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usó 1 equivalente de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 40 °C durante 2 d como una solución en THF. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, se secó, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-45 (48,3 mg, rendimiento 64 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8,75 (s, 1 H) 8,04 - 8,13 (m, 1 H) 7,40 (s, 1 H) 7,24 - 7,32 (m, 1 H) 7,10 (t, 1 H) 7,03 (t, 1 H) 6,89 (s, 1 H) 6,82 (t, 1 H) 5,96 (s, 2 H) 3,85 - 3,98 (m, 2 H) 3,69 - 3,82 (m, 2 H) 3,49 (br. s., 2 H) 3,30 -3,43 (m, 4 H) 1,48 (d, 9 H).
Compuesto de referencia I-61
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3,3-difluoroazetidina (como la sal de HCl, 1 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de base de Hunig en lugar de trietilamina y el contenido se calentó a 40 °C durante 3 h como una solución en NMP. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, se secó, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-30 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-61 (37 mg, rendimiento 71 %) como un sólido blanco.1
1H RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm 8,44 (d, 1 H) 8,22 (d, 1 H) 7,30 (s, 1 H) 7,14 - 7,21 (m, 1 H) 6,91 - 7,04 (m, 2 H) 6,81 (t, 1 H) 6,54 - 6,59 (m, 1 H) 5,95 (s, 2 H) 4,60 - 4,71 (m, 4 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-62
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 4,4-difluoropiperidina (como la sal de HCl, 1 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de base de Hunig en lugar de trietilamina y el contenido se calentó a 40 °C durante 3 h como una solución en NMP. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, se secó, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-30 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-62 (40,4 mg, rendimiento 71 %) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,43 (d, 1 H) 8,22 (d, 1 H) 7,24 - 7,25 (m, 1 H) 7,12 - 7,21 (m, 1 H) 6,91 - 7,04 (m, 2 H) 6,82 (t, 1 H) 6,56 (d, 1 H) 5,94 (s, 2 H) 3,94 - 4,02 (m, 4 H) 2,04 - 2,17 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-63
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3,3-difluoro-pirrolidina (como sal de HCl, 1 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de base de Hunig en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó a 40 °C durante 3 h como una solución en NMP. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua, se secó, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-30 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-63 (41,5 mg, rendimiento 71 %) como un sólido blanco.
1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,43 (d, 1 H) 8,19 (d, 1 H) 7,29 (s, 1 H) 7,11 - 7,22 (m, 1 H) 6,90 - 7,04 (m, 2 H) 6,78 - 6,87 (m, 1 H) 6,56 (d, 1 H) 5,94 (s, 2 H) 3,98 - 4,18 (m, 4 H) 2,40 - 2,54 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-166
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el éster etílico de A/-bencilglicina (1 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 80 °C durante 24 h como una solución en THF/agua (10:1). La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución de cloruro de amonio saturada, se secó, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-166 (33 mg, 47 %) como un sólido blanco.
1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,42 (d, 1 H) 8,23 (d, 1 H) 7,28 - 7,39 (m, 5 H) 7,23 (d, 1 H) 7,12 - 7,21 (m, 1 H) 6,91 - 7,05 (m, 2 H) 6,83 (t, 1 H) 6,53 (d, 1 H) 5,94 (s, 2 H) 5,00 (s, 2 H) 4,20 - 4,24 (m, 2 H) 4,14 - 4,20 (m, 2 H) 1,21 (t, 3 H).
Compuesto de referencia I-167
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el W-metilaminoacetato de etilo (como la sal de HCl, 1 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 24 h como una solución en THF. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo y agua. Las capas se separaron y la capa orgánica se secó, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-167 (77 mg, rendimiento 79 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,46 (d, 1 H) 8,22 (d, 1 H) 7,28 (d, 1 H) 7,15 - 7,25 (m, 1 H) 6,95 - 7,06 (m, 2 H) 6,81 - 6,89 (m, 1 H) 6,58 (d, 1 H) 5,95 - 6,00 (m, 2 H) 4,35 (s, 2 H) 4,23 (q, 2 H) 3,43 (d, 3 H) 1,25 (t, 3 H).
Compuesto de referencia I-176
Una mezcla del compuesto de referencia I-167 (70 mg, 1 equiv.) e hidróxido de sodio [solución acuosa 1,0 N] (770 pl, 5 equiv.) en THF (385 pl) y MeOH (385 pl) se agitó a ta durante 24 h. La mezcla se desactivó con HCl 1N (5 equiv.). El precipitado blanco formado se recogió por filtración, se aclaró con una cantidad mínima de éter y se secó dando el compuesto de referencia I-176 (52 mg, rendimiento 79 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,11 (d, 1 H) 8,34 (d, 1 H) 7,54 (s, 1 H) 7,30-7,37 (m, 1 H) 7,19-7,25 (m, 2 H) 7,11 (t, 1 H) 6,86 (t, 1 H) 5,90 (s, 2 H) 4,41 -4,45 (m, 2 H) 3,32 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-168
Una mezcla del compuesto de referencia I-167 (30 mg, 1 equiv.) e hidróxido de sodio [solución acuosa 1,0 N] (57 pl, 1 equiv) en THF (141 pl) y MeOH (141 pl) se agitó a ta durante 24 h. La mezcla se trató con HCl 1N (5 equiv.). La mezcla se diluyó en diclorometano (100 ml) y se lavó con agua (50 ml). La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó por cromatografía en columna (0 a 10 % metanol en diclorometano) dando el compuesto de referencia I-168 (10 mg, rendimiento 36 %) como un sólido blanco.1
1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,74 (d, 1 H) 8,20 (d, 1 H) 7,33 - 7,43 (m, 5 H) 7,22 - 7,32 (m, 3 H) 6,99 -7,13 (m, 3 H) 6,84 (d, 2 H) 5,95 (s, 2 H) 5,05 (s, 2 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-218
Una mezcla del compuesto de referencia I-176 (48 mg, 1 equiv.), clorhidrato de O-metilhidroxilamina (14 mg, 1,5 equiv), EDC (32 mg, 1,5 equiv.) y DMAP (21 mg, 1,5 equiv) en DMF (563 j l) se agitó a ta durante 2 h. La mezcla se diluyó en acetato de etilo (100 ml) y se lavó con agua (50 ml x 3). La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en columna dando el compuesto de referencia I-218 (26 mg, rendimiento 51 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,63 - 8,68 (m, 1 H) 8,08 (d, 1 H) 7,30 (s, 1 H) 7,13 - 7,20 (m, 1 H) 6,96 -7,02 (m, 1 H) 6,92 (t, 1 H) 6,77 (s, 1 H) 6,71 (t, 1 H) 5,85 (s, 2 H) 4,17 (s, 2 H) 3,55 (s, 3 H) 3,30 - 3,34 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-223
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la W-metil-1-(3-metil-1,2,4-oxadiazol-5-il)metanamina (como sal de HCl, 1 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 85 °C durante 24 h como una solución en dioxano. La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución de HCl 1N, se secó, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-223 (16,3 mg, rendimiento 21 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,46 (d, 1 H) 8,25 (d, 1 H) 7,15 - 7,22 (m, 2 H) 6,96 (t, 1 H) 6,84 (t, 1 H) 6,61 (d, 1 H) 5,95 (s, 2 H) 5,03 (s, 2 H) 3,52 (d, 3 H) 2,38 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-14
2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5-nitropirimidin-4-ol (1 equiv.) (este producto intermedio se encontraba en una patente anterior: WO2012/3405 A1) (25 mg, 1 equiv.) se trató con POCh (457 jl, 75 equiv.) y se agitó a reflujo durante 1,5 h. El contenido se concentró al vacío y el residuo se azeotropizó con tolueno (2 veces). El residuo se disolvió nuevamente en THF (0,7 ml) y se trató con morfolina (171 jl, 30 equiv.). El contenido se calentó a 40 °C, y se agitó la reacción durante 1,5 h. El residuo se transfirió a una mezcla 1:1 de acetato de etilo y agua. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 veces). Las partes orgánicas se combinaron y lavaron con salmuera. La mezcla se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el compuesto de referencia I-14 deseado (30 mg, 97 %) como un sólido amarillo pálido.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 88,47 (d, 1 H), 8,36 (d, 1 H), 8,09 - 8,16 (m, 1 H), 7,69 (dd, 1 H), 7,41 (d, 1 H), 7,20 (t, 1 H), 6,66 - 6,70 (m, 1 H), 6,45 (d, 1 H), 6,06 (s, 2 H), 3,79 - 3,86 (m, 4 H), 3,74 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-15
Una solución del compuesto de referencia I-14 (30 mg, 1 equiv.) en metanol se trató con paladio sobre carbono (7 mg, 10 % en peso de paladio, 0,1 equiv) y se colocó bajo una atmósfera de hidrógeno. El contenido se agitó durante 2 h a 23 °C. El contenido se filtró sobre celita y se eluyó con metanol. El contenido se concentró al vacío y el material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-70 % (acetonitrilo:metanol=7:1)/diclorometano proporcionando el compuesto de referencia I-15 deseado (11,5 mg, 39 %) como un sólido blanco. 1H-RMN (400 MHz, CDCh) 88,43 (d, 1 H), 8,36 (d, 1 H), 7,35 (d, 1 H), 6,80 (t, 1 H), 6,59-6,53 (m, 1 H), 6,49-6,40 (m, 2 H), 6,11 (dd, 1 H), 5,93-5,82 (m, 2 H), 3,87-3,76 (m, 4 H), 3,72 (d, 4 H).
Compuesto de referencia I-70
Una solución del compuesto de referencia I-37 en tolueno se trató con isocianato de etilo (3 equiv.) y se calentó a 90 °C durante 20 min. Los precipitados resultantes se filtraron y se aclararon con tolueno. Los sólidos se recogieron y secaron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-70 (7 mg, rendimiento 36 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, DMSO-de) 89,09 (d, 1 H), 8,27 (d, 1 H), 7,77 (s, 1 H), 7,30 - 7,36 (m, 1 H), 7,14 - 7,27 (m, 2 H), 7,07 - 7,12 (m, 1 H), 6,83 (t, 1 H), 5,94 (d, 1 H), 5,91 (s, 2 H), 5,76 (t, 1 H), 4,17 (d, 1 H), 3,94 (d, 1 H), 3,69 (dt, 1 H), 3,52 (t, 1 H), 3,22 (dd, 1 H), 3,02 (quin, 2 H), 1,85 (d, 1 H), 1,71 -1,81 (m, 1 H), 1,43 - 1,62 (m, 2 H), 0,97 (t, 3 H).
Compuesto de referencia I-71
Una solución del compuesto de referencia I-40 en tolueno se trató con isocianato de etilo (3 equiv.) y se calentó a 90 °C durante 20 min. Los precipitados resultantes se filtraron y se aclararon con tolueno. Los sólidos se recogieron y secaron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-71 (3 mg, rendimiento 16 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, DMSO-de) 89,10 (d, 1 de H), 8,25 (d, 1 H), 7,49 - 7,55 (m, 1 h) 7,29 - 7,37 (m, 1 H), 7,19 - 7,27 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 6,52 - 6,61 (m, 1 H), 6,02 (t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,51 - 4,59 (m, 1 H), 4,47 (m, 2 H), 4,06 (d, 2 H), 2,94 - 3,07 (m, 2 H), 0,99 (t, 3 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-136
Se trató una solución del compuesto de referencia I-133 en diclorometano con isocianato de etilo (1,1 equiv.) y trietilamina (2 equiv.), y se agitó a 23 °C durante 1 h. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se resuspendió en dietil éter. Los precipitados resultantes se filtraron y se aclararon con dietil éter. Los sólidos se recogieron y secaron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-136 (2,9 mg, rendimiento 28 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, DMSO-de) 8 9,09 (s, 1 H), 8,26 - 8,39 (m, 1 H), 7,52 (s, 1 H) 7,32 (m, 1 H), 7,17 - 7,27 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,78-6,88 (m, 1 H), 6,63 (br.s., 1 H), 5,90 (m, 2 H), 4,90 - 5,19 (m, 1 H) 4,43 (d, 1 H), 4,30 (br.s., 1 H), 3,91 (d, 1 H), 3,48 (d, 1 H), 3,22 (d, 1 H), 2,99 - 3,05 (m, 3 H), 1,01 (t, 3 H).
Compuesto de referencia I-134
Se trató una solución del compuesto de referencia I-133 en diclorometano con cloruro de propionilo (1,1 equiv.) y trietilamina (2 equiv.), y se agitó a 23 °C durante 1 h. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se resuspendió en dietil éter. Los precipitados resultantes se filtraron y se aclararon con dietil éter. Los sólidos se recogieron y secaron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-134 (3,5 mg, rendimiento 35 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, DMSO-de) 8 9,10 (s, 1 H 8,40 (d, 1 H), 7,49 - 7,64 (m, 1 H), 7,28 - 7,39 (m, 1 H), 7,15 - 7,26 (m, 2 H), 7,11 (t, 1 H), 6,84 (br. s., 1 H), 5,89 (s, 2 H), 4,79 (d, 1 H), 4,24 - 4,45 (m, 2 H), 3,91 (d, 1 H), 3,67 (br. s., 1 H), 3,58 (d, 1 H), 2 ,87-3,00 (m, 1 H), 2,31 -2,40 (m, 2 H), 0,93- 1,04 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-135
Se trató una solución del compuesto de referencia I-133 en diclorometano con cloroformiato de metilo (1,1 equiv.) y trietilamina (2 equiv.), y se agitó a 23 °C durante 1 h. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se resuspendió en dietil éter. Los precipitados resultantes se filtraron y se aclararon con dietil éter. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-135 (3,5 mg, rendimiento
37 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 88,82 (s, 1 H), 8,41 (d, 1 H), 7,58 (s, 1 H), 7,26 - 7,35 (m, 1 H), 7,12 (t, 1 H), 7,07 (t, 1 H), 6,88 - 6,97 (m, 2 H), 6,01 (s, 2 H), 5,51 (br. s., 1 H), 4,68 (d, 1 H), 4,58 (br. s., 1 H), 4,09 (d, 1 H), 3,79 - 3,95 (m, 1 H), 3,76 (s, 3 H), 3,52 - 3,62 (m, 1 H), 3,35 - 3,45 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-49 y compuesto de referencia I-50
Una solución de ácido 1-metilciclopropanocarboxílico (141 mg, 10 equiv.) en diclorometano (1 ml) se trató con cloruro de oxalilo (0,11 ml, 9 equiv.), y el contenido se agitó hasta que no se observó más burbujeo. La solución resultante se añadió a continuación poco a poco durante 5 minutos a una solución enfriada (0 °C) de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-pirimidin-4-amina (1 equiv, 50 mg) este producto intermedio se describe en una publicación de solicitud de patente anterior, WO2012/3405 A1) en diclorometano (0,35 ml) y piridina (0,35 ml). La mezcla se calentó a 60 °C y se agitó durante 24 h. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y se lavó con solución de cloruro de amonio acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (3 veces) y diclorometano (1 vez). Las partes orgánicas se combinaron y lavaron con salmuera. La mezcla se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-60 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto de referencia I-49 deseado (18,5 mg, 30 %) como un sólido blanco, junto con I-50 (16,2 mg, 22 %) como un aceite transparente.
Compuesto de referencia I-49 H1 RMN (400 MHz, CDCh) 88,57 (d, 1 H), 8,43 (d, 1 H), 8,01 (s, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,22-7,13 (m, 1 H), 7,00 (t, 1 H), 6,98-6,90 (m, 1 H), 6,78 (t, 1 H), 6,57 (d, 1 H), 5,99 (s, 2 H), 1,48 (s, 3 H), 1,38-1,32
(m, 2 H), 0,79-0,73 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-50 H1 RMN (400 MHz, CDCla) 88,64 (d, 1 H), 8,47-8,44 (m, 1 H), 7,28 (s, 1 H), 7,22-7,15
(m, 1 H), 7,02 (d, 1 H), 6,97 (t, 1 H), 6,93-6,87 (m, 1 H), 6,55-6,53 (m, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 1,53-1,48 (m, 4 H), 1,22 (s, 6 H), 0,85-0,79 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-51 y compuesto de referencia I-52
Una solución de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-pirimidin-4-amina (1 equiv, este producto intermedio en una publicación de solicitud de patente anterior; WO2012/3405 A1) (ver más arriba) (50 mg, 1 equiv.) en THF (0,7 ml) se enfrió a 0 °C y se trató con LiHMDS (0,16 ml, 1,1 equiv., solución 1 M) y se agitó durante 20 minutos. Después, la reacción se trató a continuación con cloroformiato de metilo (44 pL, 4 equiv.). La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 20 minutos, a continuación se calentó a 23 °C, durante 1 hora. La reacción se diluyó con acetato de etilo y se desactivó con solución de cloruro amónico acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (dos veces) y diclorometano (tres veces). Las partes orgánicas se combinaron y lavaron con salmuera. La mezcla se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto de referencia I-51 deseado (5,3 mg, 9 %) como un sólido blanquecino, junto con el compuesto de referencia I-52 (13,1 mg, 20 %) como un sólido blanco.
Compuesto de referencia I-51 1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,56 (s, 1 H), 8,45 (s, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,19 (m, 1 H), 7,02 (t, 1 H), 6,95 (m, 1 H), 6,81 (m, 1 H), 6,61 (s, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 3,87 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-521H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,77 (s., 1 H), 8,47 (s, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 7,21 (m, 1 H), 7,07-6,93 (m, 2 H), 6,84 (m, 1 H), 6,59 (s, 1 H), 6,02 (s, 2 H), 3,83 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-144
En un vial pequeño, el compuesto de referencia I-58 (0,022 g, 0,047 mmol) se diluyó con DCM (volumen: 2,0 ml) a continuación se introdujo con CDI (28 mg, 0,173 mmol). La mezcla de reacción se calentó a continuación a 45 °C hasta que se comprobó el consumo completo del ácido de partida mediante LC/MS. En aquel momento, se añadieron ciclopropanosulfonamida (22,86 mg, 0,189 mmol) y DBU (7,11 pl, 0,047 mmol) y la reacción se calentó durante 30 minutos adicionales. En aquel momento, la reacción se desactivó con HCl 1N, a continuación se diluyó con DCM. Las capas se separaron y la parte acuosa se extrajo dos veces más con DCM. Las partes orgánicas se combinaron, se secaron (Na2SO4), se filtraron, y se concentraron. El material bruto se purificó utilizando cromatografía de SiO2 con un gradiente de 0-10 % MeOH/DCM proporcionando la sulfonamida deseada, el compuesto de referencia I-144 (16 mg, rendimiento 54 %).
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 810,62 (bs, 1H), 8,43 (d, 1H), 8,23 (d, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,19 (dd, 1H), 7,03-6,95 (m, 2H), 6,85 (t, 1H), 6,69 (s, 1H), 5,96 (dd, 2H), 4,20-4,12 (m, 1H), 2,87-2,79 (m, 1H), 2,30-2,24 (m, 1H), 2,02-1,92 (m, 1H), 1,86-1,70 (m, 4H), 1,30-0,86 (m, 6H).
Compuesto de referencia I-157
El compuesto del título se preparó usando el procedimiento descrito para el compuesto de referencia I-144, salvo por el uso del compuesto de referencia I-88 como el ácido carboxílico de partida. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-157 (10 mg, rendimiento 55 %) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,76 (d, 1H), 8,18 (d, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,25 (dd, 1H), 7,07 (t, 1H), 7,00 (t, 1H), 6,92 (d, 1H), 6,81 (t, 1H), 5,96 (dd, 2H), 4,66-4,62 (m, 1H), 2,88-2,83 (m, 1H), 1,93-1,83 (m, 2H), 1,31-1,27 (m, 2H), 1,16-1,10 (m, 1H), 1,04 (d, 3H), 0,97 (d, 3H), 0,92-0,78 (m, 2H).
Compuesto de referencia I-187
El compuesto del título se preparó usando el procedimiento descrito para el compuesto de referencia I-144, salvo por el uso del compuesto de referencia I-89 como el ácido carboxílico de partida. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-187 (33 mg, rendimiento 80 %) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) 811,92 (s, 1H), 9,09 (d, 1H), 8,33 (d, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,29 (dd, 1H), 7,18 (t, 1H), 7,12 (d, 1H), 7,07 (t, 1H), 6,84 (t, 1H), 5,87 (s, 2H), 4,50 (d, 1H), 3,19 (d, 3H), 2,95-2,87 (m, 1H), 2,42-2,35 (m, 1H), 1,05 (d, 3H), 1,02-0,94 (m, 2H), 0,89 (d, 3H), 0,87-0,83 (m, 2H).
Compuesto de referencia I-272
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-3-metil-2-(metilamino)butanoico fue el reactivo de amina, se usó 3-(3-(4-cloropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (síntesis descrita en el procedimiento para el compuesto de referencia I-24) en lugar del producto intermedio I y el contenido se calentó a 110 °C durante 72 h. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-272 (4 mg, rendimiento 8 %) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) 812,98 (bs, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,24 (bs, 2H), 7,48 (bs, 1H), 7,30 (dd, 1H), 7,19 (t, 1H), 7,07 (t, 1H), 6,84 (bs, 1H), 6,60 (bs, 1H), 5,86 (s, 2H), 5,24 (bs, 1H), 2,94 (bs, 3H), 2,30 (bs, 1H), 1,02 (d, 3H), 0,77 (d, 3H).
Compuesto de referencia I-74
El producto intermedio 1 se disolvió en THF y se enfrió a 0 °C. En un vial aparte, se diluyó 1H-pirazol (1 equiv.) con THF, a continuación se introdujo hidruro de sodio (60 % en aceite de dispersión, 1 equiv.) para generar la sal sódica. El contenido se dejó agitar durante 15 min. En aquel momento, la sal sódica se añadió por partes a la solución del producto intermedio 1. Una vez consumido el material de partida según lo observado mediante LC/MS, la reacción se desactivó con HCl 1N y la mezcla se extrajo con diclorometano (tres veces). Las porciones orgánicas se combinaron, se filtraron y se concentraron. A continuación, el material bruto se purificó usando un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-74 (41 mg, rendimiento 72 %).
1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 89,10 (t, 1H), 9,03 (dd, 1H), 8,80-8,79 (m, 1H), 8,02-8,00 (m, 1H), 7,81 (d, 1H), 7,34 7,28 (m, 1H), 7,24 (t, 1H), 7,23-7,18 (m, 1H), 7,09 (t, 1H), 6,88 (t, 1H), 6,72-6,70 (m, 1H), 5,93 (s, 2H).
Compuesto de referencia I-273
Este compuesto se sintetizó según el procedimiento general B usando clorhidrato de ácido 2-((2,2,2-trifluoroetil)amino)acético. Después de completar el consumo de material de partida, la solución se diluyó con hidróxido de sodio 1N acuoso hasta pH ~ 10. Se añadió dietil éter y las capas se separaron. La capa acuosa se acidificó con ácido clorhídrico acuoso hasta pH ~ 2. Se añadió acetato de etilo, y las capas se separaron otra vez. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y los materiales orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación por cromatografía en gel de sílice (0-15 % metanol en diclorometano) proporcionó el compuesto de referencia I-273 (6 mg, 23 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,73 (m, 1H), 8,27 (d, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,27-7,22 (m, 1H), 7,09-6,99 (m, 2H), 6,87-6,86 (m, 1H), 6,80 (t, 1H), 5,94 (s, 2H), 4,61-4,55 (m, 2H), 4,45 (s, 2H).
Compuesto de referencia I-274
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-((metilamino)metil)benzoico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 2 h como una solución en dioxano. El acetato de etilo se usó como el disolvente de extracción durante el procesamiento. El compuesto bruto del compuesto de referencia I-274 (20 mg, rendimiento 68 %) se aisló como un sólido blanco para el que no se necesitó purificación adicional.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,76 (m, 1H), 8,29 (d, 1H), 8,08 (s, 1H), 7,97 (d, 1H), 7,65-7,63 (m, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,48 (t, 1H), 7,30-7,24 (m, 1H), 7,10-7,01 (m, 2H), 6,94-6,88 (m, 2H), 5,99 (s, 2H), 5,16 (s, 2H), 3,48 (d, 3H).
Compuesto de referencia I-275
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-((metilamino)metil)benzoico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina. El acetato de etilo se usó como el disolvente de extracción durante el procesamiento. El compuesto bruto del compuesto de referencia I-275 (17 mg, rendimiento 63 %) se aisló como un sólido blanco para el que no se necesitó purificación adicional.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) 8 12,88 (br s, 1H), 9,05 (m, 1H), 8,25 (d, 1H), 7,87 (d, 2H), 7,48 (s, 1H), 7,44 (d, 2H), 7,32-7,27 (m, 1H), 7,21-7,19 (m, 2H), 7,07 (t, 1H), 6,83 (t, 1H), 5,86 (s, 2H), 4,95 (s, 2H), 3,24 (d, 3H).
Compuesto de referencia I-276
Este compuesto se sintetizó según el procedimiento general B usando 1 H-tetrazol-5-amina y dioxano como disolvente. El residuo bruto se suspendió en diclorometano y se filtró. El filtrado se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (0-10 % metanol en diclorometano) proporcionando el compuesto de referencia I-276 (0,4 mg, rendimiento 2 %) como una película blanca.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,75 (m, 1H), 8,42 (d, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,29-7,24 (m, 1H), 7,11-7,06 (m, 1H), 7,05-7,01 (m, 1H), 6,89-6,83 (m, 2H), 5,97 (s, 2H).
Compuesto de referencia I-277
Este compuesto se sintetizó según el procedimiento general B utilizando ácido 3-amino-3-metilbutanoico y el contenido se calentó a 80 °C durante 68 h. La purificación por cromatografía en gel de sílice (0-10 % metanol en diclorometano) proporcionó el compuesto de referencia I-277 (1,3 mg, rendimiento 5 %) como una película blanca.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,74 (m, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,34 (d, 1H), 7,27-7,22 (m, 1H), 7,09-7,00 (m, 2H), 6,89-6,83 (m, 2H), 5,93 (s, 2H), 3,03 (s, 2H), 1,66 (s, 6H).
Compuesto de referencia I-278
Este compuesto se sintetizó según el procedimiento general B utilizando 5-(aminometil)piridin-2(1 H)-ona y el contenido se agitó a 90 °C durante 40 h. La mezcla de reacción bruta se diluyó con ácido clorhídrico acuoso 1N y acetato de etilo. Las capas se separaron y la capa acuosa se concentró al vacío. La purificación por HPLC de fase inversa (gradiente de 20-50 % acetonitrilo en agua con TFA a 0,1 %, 20 min) proporcionó el compuesto de referencia I-278 (13 mg, rendimiento 35 %) como un sólido de color tostado.1
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,82 (s, 1H), 8,28 (d, 1H), 7,73-7,64 (m, 3H), 7,32-7,26 (m, 1H), 7,11-7,03 (m, 2H), 6,99 6,95 (m, 2H), 6,54 (d, 1H), 6,01 (s, 2H), 4,73 (s, 2H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-279
Este compuesto se sintetizó según el procedimiento general B utilizando la sal del ácido trifluoroacético de ácido 2-((metilamino)metil)benzoico con dioxano como disolvente y el contenido se calentó a 90 °C durante 2 días. La purificación de la mezcla de reacción bruta mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con TFA a 0,1 %, 20 min) proporcionó el compuesto de referencia I-279 (15 mg, rendimiento 37 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) 813,17 (br s, 1H), 9,10 (m, 1H), 8,25 (d, 1H), 7,94 (d, 1H), 7,56-7,52 (m, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,41-7,29 (m, 3H), 7,24-7,19 (m, 2H), 7,12-7,08 (m, 1H), 6,85-6,81 (m, 1H), 5,89 (s, 2H), 5,24 (s, 2H), 3,30 (s, 3H).
Compuesto de referencia I-280
Este compuesto se sintetizó según el procedimiento general B utilizando ácido 4-(aminometil)benzoico con acetato de etilo como disolvente de extracción. La purificación de la mezcla de reacción bruta mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con TFA a 0,1 %, 20 min) proporcionó el compuesto de referencia I-280 (3,4 mg, rendimiento 9 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,81 (s, 1H), 8,26 (d, 1H), 8,02 (d, 2H), 7,58 (d, 2H), 7,53 (s, 1H), 7,33-7,27 (m, 1H), 7,13-7,04 (m, 2H), 6,95-6,91 (m, 2H), 6,01 (s, 2H), 5,01 (s, 2H).
Compuesto de referencia I-281
Este compuesto se sintetizó según el procedimiento general B utilizando ácido 6-metilpiperidin-2-carboxílico. La purificación de la mezcla de reacción bruta mediante cromatografía en gel de sílice (metanol en diclorometano a 0-10 %) proporcionó el compuesto de referencia I-281 (3,4 mg, rendimiento 9 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,75 (d, 1H), 8,15 (d, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,29-7,23 (m, 1H), 7,11-7,06 (m, 1H), 7,02 (td, 1H), 6,88 (d, 1H), 6,82-6,78 (m, 1H), 5,95 (s, 2H), 5,46 (br s, 1H), 2,46-2,43 (m, 1H), 1,91-1,72 (m, 4H), 1,63-1,60 (m, 2H), 1,35 (d, 3H).
Compuestos de referencia I-282 y I-283
Estos se sintetizaron según el procedimiento general B utilizando una mezcla de ácido (1R,4S)-4-metilpiperidin-2-carboxílico y ácido (1S,4S)-4-metilpiperidin-2-carboxílico. La purificación de la mezcla de reacción bruta mediante cromatografía en gel de sílice (metanol en diclorometano a 0-10 %) proporcionó el compuesto de referencia I-282 (15 mg, rendimiento 39 %) como un sólido blanco. La repurificación de las fracciones mezcladas mediante HPLC de fase inversa (acetonitrilo en agua a 5-75 % con TFA 0,1 %) proporcionó el compuesto de referencia I-283 (4 mg, rendimiento 10 %).
Compuesto de referencia I-282 1H-RMN (400 MHz,CD3OD) 88,74 (m, 1H), 8,22 (d, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,26-7,21 (m, 1H), 7,08-7,04 (m, 1H), 7,01-6,98 (m, 1H), 6,84 (m, 1H), 6,81-6,78 (m, 1H), 5,93 (s, 2H), 4,44 (dd, 1H), 4,04-3,98 (m, 1H), 3,65-3,60 (m, 1H), 2,19 (dt, 1H), 1,93-1,70 (m, 3H), 1,46-1,38 (m, 1H), 1,04 (d, 3H).
Compuesto de referencia I-283 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,77 (d, 1H), 8,28 (d, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,29-7,23 (m, 1H), 7,10-7,00 (m, 2H), 6,92 (d, 1H), 6,88-6,85 (m, 1H), 5,97 (s, 2H), 5,68 (br s, 1H), 4,74 (br s, 1H), 3,41 (br s, 1H), 2,44-2,39 (m, 1H), 1,87-1,82 (m, 1H), 1,74-1,65 (m, 1H), 1,58-1,50 (m, 1H), 1,38-1,28 (dq, 1H), 1,00 (d, 3H).
Compuesto de referencia I-237
Este compuesto se sintetizó según el procedimiento general B utilizando (R)-W,2-dimetil-1-(1H-tetrazol-5-il)propan-1-amina (2 equivalentes). La purificación de la mezcla de reacción bruta mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con TFA a 0,1 %) proporcionó el compuesto de referencia I-237 (4 mg, rendimiento 23 %) como un aceite transparente.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,80 (m, 1H), 8,31 (d, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,28-7,25 (m, 1H), 7,09-7,01 (m, 3H), 6,96 (m, 1H), 6,05 (d, 1H), 5,98 (d, 1H), 5,76 (br s, 1H), 3,35 (d, 3H), 2,86-2,80 (m, 1H), 1,07 (d, 3H), 0,90 (d, 3H).
Compuesto de referencia I-284
Este compuesto se sintetizó según el procedimiento general B utilizando (R)-2-metil-1-(1H-tetrazol-5-il)propan-1-amina. La purificación de la mezcla de reacción bruta mediante cromatografía en gel de sílice (metanol en diclorometano a 0-10 %) proporcionó el compuesto de referencia I-284 (16 mg, rendimiento 37 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,75 (m, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,27-7,21 (m, 2H), 7,06-7,03 (m, 1H), 7,01-6,98 (m, 1H), 6,88 (d, 1H), 6,82-6,78 (m, 1H), 5,96 (d, 1H), 5,91 (d, 1H), 5,50 (d, 1H), 2,61-2,52 (m, 1H), 1,14 (d, 3H), 0,93 (d, 3H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-285
A una solución del compuesto de referencia I-147 (anteriormente descrito, 1 equivalente) y piridina (50 equivalentes) en diclorometano a 0 °C se añadió cloruro de ciclopropanocarbonilo (1,2 equivalentes) durante 30 segundos. La solución se calentó inmediatamente a temperatura ambiente y se agitó durante 2,5 horas más. Después de diluir con cloruro de amonio acuoso saturado y diclorometano, las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación por cromatografía en gel de sílice (0-5 % metanol en diclorometano) proporcionó el compuesto de referencia I-285 (11 mg, rendimiento 34 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,73 (m, 1H), 8,18 (d, 1H), 7,43 (s, 1H), 7,27-7,22 (m, 1H), 7,09-7,04 (m, 1H), 7,00 (t, 1H), 6,90 (m, 1H), 6,77 (t, 1H), 5,95 (s, 2H), 3,98-3,95 (m, 4H), 3,46-3,44 (m, 4H), 1,65-1,59 (m, 1H), 0,92-0,84 (m, 4H).
Compuesto de referencia I-229
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-(piperidin-3-il)acético fue el reactivo de amina, se usaron 6 equivalentes de base de Hunig en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 120 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno. y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-229 (8,1 mg, rendimiento 32 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,84 (m, 1 H), 8,28 (m, 1 H), 7,73 (m, 1 H), 7,32 (m, 1 H), 7,12 (m, 2 H), 6,98 (m, 2 H), 6,04 (s, 2 H), 4,96 (m, 1 H), 4,67 (m, 1 H), 3,54 (m, 1 H), 3,27 (m, 1 H), 2,42 (m, 2 H), 2,25 (m, 1 H), 2,00 (m, 2 H), 1,79 (m, 1 H), 1,54 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-230 y compuesto de referencia I-231
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que una mezcla de ácido 2-(piperidin-4-il)acético y 2-(piperidin-4-il)acetato de metilo fue el reactivo de amina, se usaron 6 equivalentes de base de Hunig en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 120 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno, y el material bruto resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando los compuestos deseados, el compuesto de referencia I-230 (6,5 mg, rendimiento 25 %) como un sólido, y el compuesto de referencia I-231 (16,2 mg, rendimiento 61 %) como un sólido.
1H RMN para el Compuesto de referencia I-230 (500 MHz, M ETAN O L^) 8 ppm 8,83 (m, 1 H), 8,26 (m, 1 H), 7,63 (m, 1 H), 7,30 (m, 1 H), 7,10 (m, 2 H), 6,97 (m, 2 H), 6,03 (s, 2 H), 4,98 (m, 2 H), 3,40 (m, 1 H), 2,35 (m, 2 H), 2,25 (m, 1 H), 2,04 (m, 2 H), 1,50 (m, 2 H).
1H RMN para el Compuesto de referencia I-231 (500 MHz, M ETAN O L^) 8 ppm 8,84 (m, 1 H), 8,30 (m, 1 H), 7,66 (m, 1 H), 7,28-7,37 (m, 1 H), 7,05-7,17 (m, 2 H), 7,00 (d, 2 H), 6,04 (s, 2 H), 4,93-5,02 (m, 2 H), 3,70 (s, 3 H), 3,35-3,45 (m, 2H), 2,358 (d, 2 H), 2,22-2,34 (m, 1 H), 1,99-2,08 (m, 2 H), 1,50 (br.s., 2 H).
Compuesto de referencia I-232
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-amino-4-metoxibutanoico fue el reactivo de amina, se usaron 6 equivalentes de base de Hunig en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó a 120 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-232 (10 mg, rendimiento 40 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 (ppm) 8,80 (m, 1 H), 8,32 (m, 1 H), 7,55 (s, 1 H), 7,29 (m, 1 H), 7,08 (m, 2 H), 6,96 (m, 2 H), 6,01 (s, 2 H), 5,11 (m, 1 H), 3,61 (m, 2 H), 3,35 (s, 3 H), 2,43 (m, 1 H), 2,21 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-234
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-(piperidin-4-il)propanoico fue el reactivo de amina. El disolvente se retiró bajo una corriente de nitrógeno y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-234 (13 mg, rendimiento 49 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 (ppm) 8,81 - 8,86 (m, 1 H), 8,25 - 8,31 (m, 1 H), 7,61 - 7,67 (m, 1 H), 7,29 - 7,36 (m, 1 H), 7,05-7,16 (m, 2 H), 6 ,95-7,02 (m, 2 H), 6,04 (s, 2 H), 4,93 - 5,02 (m, 2 H), 3,37 (s, 2 H), 2,36-2,45 (m, 2 H), 1,96 - 2,06 (m, 2 H), 1,76 - 1,88 (m, 1 H), 1,61 - 1,70 (m, 2 H), 1,35 - 1,48 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-286
El c o m p u e s to de l títu lo se p repa ró s ig u ie n d o el p ro ce d im ie n to g e n e ra l B, sa lvo que el 4 -(a m in o m e til) fe n o l fue el reac tivo de am ina (1,1 equ iv .), se usa ron 4 e q u iva le n te s de tr ie tila m in a , y el co n te n id o se ca len tó a 90 °C d u ra n te 12 h com o una solución en dioxano/agua (10:1). El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1-5 % metanol/diclorometano durante 40 min proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-286 (17,7 mg, 48 % rendimiento) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 (ppm): 8,45 (d, 1H), 8,16 (d, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,16- 7,24 (m, 3H), 6,99 - 7,04 (m, 1H), 6.94 - 6,99 (m, 1H), 6,85 - 6,90 (m, 1H), 6,79 - 6,83 (m, 2H), 6,58 (d, 1H), 5,97 (s, 2H), 5,67 (br. s, 1H), 5,28 - 5,30 (m, 1H), 4,72 (d, 2H).
Compuesto de referencia I-287
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la (4-(metilsulfonil)fenil)metanamina fue el reactivo de amina (1 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 12 h como solución en dioxano/agua (10:1). El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1-5 % metanol/diclorometano durante 40 min proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-287 (23,3 mg, 56 % rendimiento) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 (ppm): 8,47 (d, 1H), 8,22 (m, 1H), 7,90 - 7,96 (m, 2H), 7,64 - 7,68 (m, 2H), 7,20 - 7,25 (m, 2H), 6,98 - 7,08 (m, 2H), 6,88 - 6,93 (m, 1H), 6,57 (d, 1H), 5,98 (s, 2H), 5,52 - 5,63 (br. d, 1H), 4,93 - 4,97 (m, 2H), 3,06 (s, 3H).
Compuesto de referencia I-288
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2-(aminometil)fenol fue el reactivo de amina (1,1 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 12 h como solución en dioxano/agua (10:1). El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1-5 % metanol/diclorometano durante 40 min proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-288 (4,5 mg, 12 % rendimiento) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 (ppm): 9,52 (s, 1H), 8,49 (d, 1H), 8,15 (d, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,21 - 7,27 (m, 3H), 7,02 -7,11 (m, 3H), 6,89 - 6,95 (m, 2H), 6,64 (d, 1H), 6,03 (s, 2H), 5 ,80 -5 ,85 (m, 1H), 4,75 (d, 2H).
Compuesto de referencia I-289
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-(4-metilpiperidin-4-il)acético fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 12 h como una solución en dioxano/agua (3:1). Se usó una mezcla de diclorometano/isopropanol (5:1) como disolvente de extracción. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1-5 % metanol/diclorometano durante 40 min proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-289 (37,4 mg, 70 % rendimiento) como un sólido blanco espumoso.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 (ppm): 8,45 (s, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,30 (s, 1H), 7,16 - 7,22 (m, 1H), 7,00 - 7,06 (m, 1H), 6.94 - 6,98 (m, 1H), 6,82 - 6,88 (m, 1H), 6,59 (d, 1H), 5,97 (s, 2H), 3,83 - 3,96 (m, 2H), 3,59 (s, 2H), 2,42 - 2,49 (m, 2H), 1,76- 1,86 (m, 4H), 1,15 (s, 3H).
Compuesto de referencia I-290
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-ciclohexilpiperidin-4-carboxílico (como la sal de TFA, 1,2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 12 h como una solución en dioxano/agua (3:1). Se usó una mezcla de diclorometano/isopropanol (5:1) como disolvente de extracción. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1-5 de metanol/diclorometano durante 40 min proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-290 (44,6 mg, 76 % rendimiento) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 (ppm): 8,47 (s, 1H), 8,17 (d, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,16 - 7,24 (m, 1H), 7,01 - 7,08 (m, 1H), 6.95 - 7,00 (m, 1H), 6,83 - 6,88 (m, 1H), 6,60 (d, 1H), 5,99 (s, 2H), 4,58 - 4,65 (m, 2H), 3,07 - 3,18 (m, 2H), 2,24 -2,32 (m, 2H), 1,77- 1,86 (m, 4H), 1 ,45 - 1,70 (m, 3H), 1 ,13 -1 ,26 (m, 3H), 1 ,03 -1 ,13 (m, 3H).
Compuesto de referencia I-291
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2-fenilpiperidin-2-carboxilato de metilo fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de bicarbonato de sodio en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 48 h. El acetato de etilo se usó como el disolvente de extracción. La primera purificación de pasada se logró mediante cromatografía en gel de sílice utilizando gradiente de 1-5 % metanol en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el producto con una pureza del 80 %. La purificación adicional se logró utilizando HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-95 % acetonitrilo en agua durante 30 minutos proporcionando el compuesto deseado analíticamente puro, compuesto de referencia I-291 (2 mg, rendimiento 3 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCI3) 5 (ppm): 8,41 (s, 1H), 8,35 (br. s, 1H), 7,24-7,27 (m, 2H), 7 ,09 -7 ,18 (m, 3H), 7 ,02 -7 ,09 (m, 1H), 6,90 - 7,00 (m, 2H), 6,79 - 6,87 (m, 1H), 6,67 - 6,74 (m, 1H), 6,44 - 6,51 (m, 1H), 5,86 (d, 1H), 5,74 (d, 1H), 3,72 - 3,85 (m, 1H), 3,36 - 3,51 (m, 1H), 2,47 - 2,56 (m, 1H), 1,70 - 1,99 (m, 5H).
Compuesto de referencia I-292
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-amino-2-fenilbutanoico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 95 °C durante 12 h. El acetato de etilo se usó como el disolvente de extracción. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1-5 % metanol en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-292 (37,9 mg, rendimiento 50 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 5 (ppm): 8,47 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,29 - 7,36 (m, 6H), 7,15 - 7,23 (m, 1H), 6,99 - 7,04 (m, 1H), 6 ,92-6,97 (m, 1H), 6 ,86 -6 ,91 (m, 1H), 6,60 (d, 1H), 6,01 (d, 1H), 5,94 (d, 1H), 5,21 -5 ,28 (m, 1H), 3 ,85 3,94 (m, 1H), 3,62 - 3,80 (m, 2H), 2,51 -2 ,61 (m, 1H), 2,11 -2 ,19 (m , 1H).
Compuesto de referencia I-293
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-metoxipiperidin-4-carboxílico (como la sal de TFA) fue el reactivo de amina (2 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 105 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 12 h. El acetato de etilo se usó como el disolvente de extracción. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 1 a 5 % metanol en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-293 (52,7 mg, rendimiento 56 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 5 (ppm): 8,47 (s, 1H), 8,22 (d, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,16 - 7,25 (m, 1H), 7,01 - 7,09 (m, 1H), 6,95 - 7,01 (m, 1H), 6,84 - 6,89 (m, 1H), 6,60 (d, 1H), 5,98 (s, 2H), 4,33 - 4,41 (m, 2H), 3,53 - 3,62 (m, 2H), 3,41 (s, 3H), 2,05-2,20 (m, 4H).
Compuesto de referencia I-294
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-(piperidin-4-il)propanoico fue el reactivo de amina (2 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 12 h como una solución en dioxano/agua (3:1). Se usó una mezcla de diclorometano/isopropanol (5:1) como disolvente de extracción. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1a 5 % metanol en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-294 (42,8 mg, rendimiento 68 %) como un sólido blanquecino.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 5 (ppm): 8,47 (s, 1H), 8,20 (d, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,17 - 7,23 (m, 1H), 7,00 - 7,07 (m, 1H), 6,94 - 7,02 (m, 1H), 6,81 - 6,89 (m, 1H), 6,60 (d, 1H), 5,98 (s, 2H), 4,70 - 4,84 (m, 2H), 3,01 - 3,06 (t, 2H), 2,39 - 2,44 (m, 1H), 1,93 - 2,01 (m, 1H), 1,82 - 1,93 (m, 2H), 1,37 - 1,54 (m, 2H), 1,24 (d, 3H).
Compuesto de referencia I-295
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 4-fenilpiperidin-2-carboxílico (como la sal de TFA) fue el reactivo de amina (2 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 64 h. El acetato de etilo se usó como el disolvente de extracción. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1 a 5 % metanol en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-295 (12,0 mg, rendimiento 18 %) como una mezcla racémica con configuración cis (como un sólido blanquecino).
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 5 (ppm): 8,76 (s, 1H), 8,21 (d, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,25 - 7,36 (m, 5H), 7 ,19 -7 ,25 (m, 1H), 7,08 - 7,14 (m, 1H), 7,02 - 7,07 (m, 1H), 6,91 (d, 1H), 6,80 - 6,86 (m, 1H), 5,97 (s, 2H), 5,62 - 5,77 (m, 1H), 2,77 -2,89 (m, 1H), 2 ,55 -2 ,62 (m, 1H), 2 ,03 -2 ,12 (m, 1H), 1 ,96 -2 ,02 (m, 1H), 1 ,83 - 1,96 (m, 1H), 1 ,25 - 1,35 (m, 1H), 0,84-0,98 (m, 1H).
Compuesto de referencia I-296
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-(4-metoxifenil)piperidin-4-carboxílico (como la sal de TFA) fue el reactivo de amina (2 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 17 h como una solución en dioxano/agua (3:1). El acetato de etilo se usó como el disolvente de extracción. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 1 a 5 % metanol en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-296 (41,1 mg, rendimiento 66 %) como un sólido blanco.
1H RMN (400 MHz, CDCh) 5 (ppm): 8,43 (s, 1H), 8,12 (d, 1H), 7,34 (d, 2H), 7,28 (s, 1H), 7,12 - 7,16 (m, 1H), 6,94 -7,02 (m, 1H), 6,88 - 6,93 (m, 1H), 6,86 (d, 2H), 6,75- 6,80 (m, 1H), 6,56 (d, 1H), 5,94 (s, 2H), 4,44 - 4,52 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,36 - 3,41 (m, 2H), 2,63 - 2,72 (m, 2H), 1,96 - 2,08 (m, 2H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-298
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-aminopiperidin-4-carboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 18 h como una solución en THF/DMF/trietilamina (1:1:1). Tras el consumo completo del material de partida, la reacción se enfrió a 0° y se añadió un exceso de solución 2 M de trimetilsilildiazometano y se agitó a 23 °C durante 3 d hasta completar la conversión al éster de amina. El contenido se diluyó con solución de NaOH 1N y se extrajo con diclorometano. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 20 a 100 % acetato de etilo en hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-298 (22 mg, rendimiento 63 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 9,08 (d, 1 H), 8,28 (d, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,29 - 7,39 (m, 1 H), 7,18 - 7,27 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,83 (t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,02 - 4,09 (m, 2 H), 3,66 - 3,74 (m, 2 H), 3,63 - 3,65 (m, 3 H), 1,99 - 2,04 (m, 2 H), 1,91 -1,98 (m2 H), 1,62 (d, 2 H).
Compuesto de referencia I-299
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-aminopiperidin-4-carboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina (5 equiv.), se usaron 8 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (5:1). Tras el consumo completo del material de partida, la reacción se enfrió y se filtró. El material bruto resultante se recogió y purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-299 (2 mg, rendimiento 7 %) como un resultante sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,80 (d, 1 H), 8,31 (d, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,23 - 7,35 (m, 1 H), 7,08 - 7,15 (m, 1 H), 7,05 (t, 1 H), 6,92 (d, 1 H), 6,81 - 6,90 (m, 1 H), 5,99 (s, 2 H), 4,45 (dt, 2 H), 3,96 - 4,13 (m, 2 H), 2,44 (dt, 2 H), 2,02 (ddd, 2 H).
Compuesto de referencia I-300
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-hidroxipiperidin-4-carboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina (5 equiv.), se usaron 8 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 90 °C como una solución en THF/agua (5:1) durante 18 h. Tras el consumo completo del material de partida, la reacción se enfrió y se filtró. El filtrado se recogió y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-300 (22 mg, rendimiento 81 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, METANOL-d4) 8 ppm 8,83 (d, 1 H), 8,22 - 8,35 (m, 1 H), 7,58 - 7,70 (m, 1 H), 7,25 - 7,37 (m, 1 H), 7,04-7,18 (m, 2 H), 6,90-7,02 (m, 2 H), 6,03 (s, 2 H), 4,76 (d, 2 H), 3,69-3,82 (m, 2 H), 2 ,16-2,33 (m, 2 H), 1,94 (d, 2 H).
Compuesto de referencia I-301
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-4,4-difluoropirrolidin-2-carboxílico fue el reactivo de amina (5 equiv.), se usaron 8 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (5:1). Tras el consumo completo del material de partida, la reacción se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-301 (20 mg, rendimiento 67 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,80 (d, 1 H), 8,34 (d, 1 H), 7,35 - 7,42 (m, 1 H), 7,24 - 7,34 (m, 1 H), 7,10 (dd, 1 H), 7,01 - 7,07 (m, 1 H), 6,91 (td, 2 H), 5,98 (s, 2 H), 5,44 - 5,69 (m, 2 H) 4,76 - 4,87 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-302
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-2-amino-3-etoxipropanoico fue el reactivo de amina (4 equiv.), se usaron 6 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 18 h como una solución en dioxano/agua (3:1). Después de la neutralización, el material bruto se suspendió en acetato de etilo y se diluyó con hexanos hasta que se produjo la precipitación. El precipitado se filtró y se recogió proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-302 (9 mg, rendimiento 24 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,08 (s, 1 H), 8,20 (d, 1 H), 7,47 (s, 1 H), 7,27 - 7,40 (m, 2 H), 7,17 - 7,26 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 5,81 - 5,98 (m, 2 H), 4,59 (br. s., 1 H), 3,83 - 3,90 (m, 1 H), 3,75 - 3,83 (m, 1 H), 3,45 -3,54 (m, 1 H), 3,37 - 3,44 (m, 1 H), 0,92 - 1,08 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-303
El c o m p u e s to de l títu lo se p repa ró s ig u ie n d o el p ro ce d im ie n to g e ne ra l B, sa lvo que el ác ido 2 -a m in o -3 -m e to x ip ro p a n o ico fue el rea c tivo de am ina (4 equ iv .), se usa ron 6 e q u iva le n te s de tr ie tila m in a , y el co n te n id o se ca len tó a 100 °C durante 18 h como una solución en dioxano/agua (3:1). Después de la neutralización, el material bruto se suspendió en acetato de etilo y se diluyó con hexanos hasta que se produjo la precipitación. El precipitado se filtró y se recogió proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-303 (8 mg, rendimiento 22 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 9,09 (d, 1 H) 8,22 (d, 1 H), 7,47 (s, 1 H), 7,28 - 7,39 (m, 1 H), 7,17 - 7,27 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 6,63 (br. s., 1 H), 5,81 - 5,94 (m, 2 H), 4,54 - 4,88 (m, 1 H), 3,72 - 3,87 (m, 2 H), 3,57 (s, 2 H), 3,25 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-304
El compuesto del título se preparó siguiendo la etapa 3 del procedimiento descrito para el compuesto de referencia I-235, salvo que el ácido 1-((metilamino)metil)ciclopropanocarboxílico (como la sal de TFA) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 6 h. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 1-4 % metanol en diclorometano) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-304 (67 mg, rendimiento 72 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 88,77 (d, 1H), 8,10 (d, 1H), 7,39 (s, 1H), 7,16 (ap. q, 1H), 7,03 (ap. q, 1H), 6,92 (d, 1H), 6,68 (ap. t, 1H), 5,98 (s, 2H), 4,15 (s, 2H), 3,37 (d, 3H), 1,28 (m, 2H), 1,07 (m, 2H).
Compuesto de referencia I-305
El compuesto del título se preparó siguiendo la etapa 3 del procedimiento descrito para el compuesto de referencia I-235, salvo que el ácido (2R,3S)-3-metilpiperidin-2-carboxílico (como la sal de ácido acético) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 21 h. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 2-4 % metanol en diclorometano) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-305 (24 mg, rendimiento 46 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 88,77 (d, 1H), 8,21 (d, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,15 (ap. q, 1H), 7,02 (ap. q, 1H), 6,89 (d, 1H), 6,66 (ap. t, 1H), 5,98 (s, 2H), 5,04 (d, 1H), 4,37 (br. d, 1H), 3,70 (ap. t, 1H), 2,10 (m, 1H), 1,90 (br. d, 1H), 1,80-1,69 (m, 2H), 1,52 (ap. q, 1H), 1,21 (d, 3H).
Compuesto de referencia I-306
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-isopropilpiperidin-4-carboxílico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 3 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se enfrió a 23 °C, y los disolventes orgánicos se eliminaron al vacío. Los sólidos se trataron con solución de HCl 1 N y el precipitado resultante se filtró y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-306 (42 mg, rendimiento 86 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,49 (d, 1 H), 8,35 (d, 1H), 7,64 (s, 1 H), 7,25-7,20 (m, 1 H), 7,05-7,01 (m, 3 H), 6,67 (d, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,80 (d, 2 H), 3,79-3,72 (m, 1 H), 3,23 (t, 1 H), 2,35 (d, 2 H), 1,92-1,80 (m, 1 H), 1,62 (td, 1 H), 1,41 (t, 1 H), 0,97 (d, 6 H).
Compuesto de referencia I-307
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-(metilamino)biciclo[1.1.1]pentano-1-carboxílico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10 :1 ). El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-307 (74 mg, rendimiento 53 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,53 (d, 1 H), 8,45 (d, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,26-7,21 (m, 2 H), 7,09-7,01 (m, 2 H), 6,67 (d, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 3,36 (d, 3 H), 2,68 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-308
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-azabiciclo[4.1.0]heptano-1-carboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 3 h como una solución en THF/agua (10:1). El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-308 (32 mg, rendimiento 17 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,46 (d, 1 H), 8,21 (d, 1 H), 7,27 (s, 1 H), 7,23-7,18 (m, 1 H), 7,04 (t, 1 H), 6,98 (t, 1 H), 6,87 (t, 1 H), 6,59 (d, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,62 (br. s., 1 H), 3,01 (br. s., 1 H), 2,20-2,11 (m, 1 H), 2,08-1,98 (m, 2 H), 1,83-1,72 (m, 2 H), 1,57-1,49 (m, 1 H), 1,04 (br. s., 1 H).
Compuesto de referencia I-309
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (1R,3S)-3-(Bocamino)ciclopentano-1-carboxílico (como la sal de TFA) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 3 h como una solución en THF/agua (10:1). El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando un producto intermedio. Este producto intermedio se disolvió inmediatamente en THF, y se enfrió a 0 °C. El contenido se trató con hidruro de sodio (60 % en aceite mineral, 2 equiv.) seguido de yoduro de metilo (10 equiv.). La reacción se dejó calentar a 23 °C durante 3 días. Se vertió el contenido sobre agua y se extrajo con acetato de etilo (3 veces). Las partes orgánicas se combinaron y lavaron con salmuera. La mezcla se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-15 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-309 (0,9 mg, rendimiento 1 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,45 (s, 1 H), 8,13 (d, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,23-7,15 (m, 1 H), 7,03 (t, 1H), 6,97 (t, 1 H), 6,86 (t, 1 H), 6,60 (s, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 4,75 (d, 1 H), 3,74 (s, 3 H), 3,08-2,94 (m, 1 H), 2,42-2,30 (m, 1 H), 2,17-1,84 (m, 5 H).
Compuesto de referencia I-310
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (2S, 3S)-2-metil-piperidin-3-carboxílico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 90 °C como una solución en THF/agua (10:1) durante 3 d. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-50 % (acetonitrilo:metanol = 9:1 con TFA a 0,1 %)/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-310 (4,9 mg, rendimiento 2 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCla) 88,46 (d, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 7,24-7,18 (m, 1 H), 7,13-7,01 (m, 1 H), 6,98 (t, 1 H), 6,87 (t, 1 H), 6,59 (d, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 5,38 (br. s., 1 H), 4,42 (d, 1 H), 3,22 (t, 1 H), 2,99-2,87 (m, 1 H), 2,05 1,96 (m, 2 H), 1,93-1,84 (m, 2 H), 1,32 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-311
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido(2R,3R)-2-metilpiperidin-3-carboxílico fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (10:1). El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-311 (17,2 mg, rendimiento 12 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-de) 812,51 (br. s., 1 H), 9,09 (d, 1 H), 8,31 (d, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,36-7,29 (m, 1 H), 7,25 7,18 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 5,09 (br. s., 1 H), 4,37 (br. s., 1 H), 3,10 (t, 1 H), 2,74 (br. s., 1 H), 1,84-1,72 (m, 3 H), 1,50 (br. s., 1 H), 1,19 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-312
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-azabiciclo[3.1.0]hexano-1-carboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 18 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-312 (44 mg, rendimiento 70 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-de) 812,65 (br. s., 1 H), 9,08 (d, 1 H), 8,26 (d, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,35-7,30 (m, 1 H), 7,26 (d, 1 H), 7,25-7,20 (m, 1 H), 7,10 (td, 1 H), 6,83-6,79 (m, 1 H), 5,91 (s, 2 H), 4,09-3,98 (m, 3 H), 3,81 (br. s., 1 H), 2,22-2,17 (m, 1 H), 1,51 (dd, 1 H), 0,97 (t, 1 H).
Compuesto de referencia I-313
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (S)-3-aminopropano-1,2-diol fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, compuesto de referencia I-313 (39 mg, rendimiento 85 %) como un sólido blanquecino.1
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,74 (d, 1 H), 8,07 (d, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,29-7,22 (m, 1 H), 7,11-7,05 (m, 1 H), 7,02 (td, 1 H), 6,88 (d, 1 H), 6,81 (td, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 3,88 (quin, 1 H), 3,81-3,74 (m, 1 H), 3,69-3,62 (m, 1 H), 3,59 (s, 1 H), 3,58 (s, 1 H).
Compuesto de referencia I-314
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido c/s-4-metilpirrolidina-3-carboxílico fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10%metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-314 (50 mg, rendimiento 72 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 68,74 (d, 1 H), 8,09 (d, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 7,29-7,23 (m, 1 H), 7,11-7,06 (m, 1 H), 7,02 (t, 1 H), 6,91 (d, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 4,22-4,13 (m, 2 H), 3,98-3,92 (m, 1 H), 3,41 (t, 1 H), 2,84-2,77 (m, 1 H), 2,58 (d, 1 H), 1,24 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-315
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el serinol fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-315 (49 mg, rendimiento 84 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 68,75 (t, 1 H), 8,08 (dd, 1 H), 7,46 (d, 1 H), 7,30-7,23 (m, 1 H), 7,09 (dd, 1 H), 7,03 (t, 1 H), 6,91-6,88 (m, 1 H), 6,80 (t, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,54 (quin, 1 H), 3,75-3,82 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-316
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (R)-3-aminopropano-1,2-diol (2 equiv.) fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante el procesamiento se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-316 (36 mg, rendimiento 78 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 68,73 (d, 1 H), 8,06 (d, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 7,27-7,22 (m, 1 H), 7,10-7,04 (m, 1 H), 7,01 (t, 1 H), 6,86 (d, 1 H), 6,83-6,78 (m, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 3,88 (quin, 1 H), 3,80-3,74 (m, 1 H), 3,68-3,62 (m, 1 H), 3,58 (d, 2 H).
Compuesto de referencia I-317
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 4-(aminometil)-2,6-difluorofenol fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante la preparación se trató con cloruro de sodio. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0 30 % (acetonitrilo:metanol=7:1)/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-317 (38 mg, rendimiento 30 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 68,77-8,74 (m, 1 H), 8,08 (d, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,26 (dd, 1 H), 7,11-7,06 (m, 1 H), 7,06 7,01 (m, 3 H), 6,88 (d, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,69 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-318
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el c/s-piperidin-2,4-diildimetanol fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h. La reacción se vertió en una mezcla 1:1 de diclorometano y agua para el procesamiento, y la capa acuosa se trató con cloruro de sodio antes de la extracción con diclorometano. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-70 % (acetonitrilo:metanol=7:1)/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-318 (39 mg, rendimiento 25 %) como un sólido blanquecino. 1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 68,75 (d, 1 H), 8,12 (d, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 7,29-7,23 (m, 1 H), 7,11-7,05 (m, 1 H), 7,04-6,99 (m, 1 H), 6,90 (d, 1 H), 6,82 (td, 1 H), 5,99-5,91 (m, 2 H), 4,52-4,45 (m, 1 H), 4,35-4,26 (m, 1 H), 3,86-3,76 (m, 2 H), 3,58-3,42 (m, 3 H), 2,09-1,99 (m, 2 H), 1,85-1,75 (m, 1 H), 1,65-1,55 (m, 1 H), 1,45-1,36 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-319
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-fenilpiperidin-2-carboxílico (como la sal de AcOH) fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa durante la preparación se trató con cloruro de sodio. Una parte del material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-75 % acetonitrilo/agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-319 (30 mg, rendimiento 9 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 68,37 (d, 1 H), 8,27 (d, 1 H), 7,34-7,28 (m, 4 H), 7,26-7,22 (m, 1 H), 7,20 (s, 1 H), 7,15 (ddd, 1 H), 6,99-6,88 (m, 3 H), 6,45 (d, 1 H), 5,91-5,82 (m, 2 H), 5,18 (d, 1 H), 4,31 (d, 1 H), 3,59 (td, 1 H), 3,26-3,17 (m, 1 H), 2,49 (qd, 1 H), 2,06-1,99 (m, 1 H), 1,98-1,81 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-320
El co m p u e s to de l títu lo se p re pa ró s ig u ie n d o el p ro ced im ie n to ge ne ra l B, sa lvo que el (S )-3 -(m e tila m in o )p ro p a n o -1 ,2 -d io l fu e el rea c tivo de am ina y el co n te n id o se ca len tó a 100 °C d u ra n te 20 h. La reacc ión se ve rtió en una m ezc la 1:1 de diclorometano y agua para el procesamiento, y la capa acuosa se trató con cloruro de sodio antes de la extracción con diclorometano. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-320 (81 mg, rendimiento 84 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,75 (d, 1 H), 8,10 (d, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,29-7,23 (m, 1 H), 7,11-7,06 (m, 1 H), 7,02 (t, 1 H), 6,88 (d, 1 H), 6,85-6,80 (m, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 4,03-3,94 (m, 2 H), 3,73-3,66 (m, 1 H), 3,58 (d, 2 H), 3,42 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-321
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el (R)-3-(metilamino)propano-1,2-diol fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 100 °C durante 2 d. La reacción se vertió en una mezcla 1:1 de diclorometano y agua para el procesamiento, y la capa acuosa se trató con cloruro de sodio antes de la extracción con diclorometano. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-321 (88 mg, rendimiento 77 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,74 (d, 1 H), 8,09 (d, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 7,28-7,22 (m, 1 H), 7,10-7,05 (m, 1 H), 7,04 6,99 (m, 1 H), 6,87 (d, 1 H), 6,82 (td, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 4,02-3,93 (m, 2 H), 3,72-3,66 (m, 1 H), 3,58 (d, 2 H), 3,41 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-322
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el (S)-3-((ciclopropilmetil)amino)propano-1,2-diol fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h. La reacción se vertió en una mezcla 1:1 de diclorometano y agua para el procesamiento, y la capa acuosa se trató con cloruro de sodio antes de la extracción con diclorometano. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-322 (39 mg, 62 % rendimiento) como una espuma blanca.
1H-RMN (500 MHz, CDCla) 88,45 (d, 1 H), 8,12 (d, 1 H), 7,29 (s, 1 H), 7,24-7,19 (m, 1 H), 7,05-6,97 (m, 3 H), 6,57 (d, 1 H), 5,99-5,94 (m, 1 H), 5,91-5,86 (m, 1 H), 4,14 (dd, 1 H), 4,02 (br. s., 1 H), 3,93 (br. s., 1 H), 3,86 (br. s., 1 H), 3,68-3,57 (m, 4 H), 3,43 (ddd, 1 H), 1,15-1,06 (m, 1 H), 0,65-0,53 (m, 2 H), 0,38-0,32 (m, 1 H), 0,32-0,26 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-323
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el (S)-3-(isopropilamino)propano-1,2-diol fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h. La reacción se vertió en una mezcla 1:1 de diclorometano y agua para el procesamiento, y la capa acuosa se trató con cloruro de sodio antes de la extracción con diclorometano. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-50 % (acetonitrilo:metanol=7:1)/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-323 (12 mg, rendimiento 20 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,45 (d, 1 H), 8,13 (d, 1 H), 7,30 (s, 1 H), 7,25-7,19 (m, 1 H), 7,06-6,98 (m, 3 H), 6,58 (d, 1 H), 6,00-5,94 (d, 1 H), 5,91-5,85 (d, 1 H), 4,95 (br. s., 1 H), 4,67-4,58 (m, 1 H), 3,82-3,74 (m, 2 H), 3,70-3,60 (m, 2 H), 3,59-3,49 (m, 2 H), 1,32 (d, 3 H), 1,29 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-324
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2-(aminometil)-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol fue el reactivo de amina, el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h y la capa acuosa se trató con cloruro de sodio antes de la extracción con diclorometano durante el procesamiento. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % acetato de etilo/hexano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-324 (5 mg, rendimiento 9 %) como un sólido blanco.12
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,48 (d, 1 H), 8,36 (s, 1 H), 8,26 (d, 1 H), 7,25-7,20 (m, 2 H), 7,14 (t, 1 H), 7,05-6,99 (m, 2 H), 6,59 (d, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 5,59 (br. s., 1 H), 4,12 (d, 2 H).
Compuesto de referencia I-325
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 1-amino-2-metilpropan-2-ol fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 100 °C durante 20 h. La reacción se vertió en una mezcla 1:1 de diclorometano y agua para el procesamiento, y la capa acuosa se trató con cloruro de sodio antes de la extracción con diclorometano. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-325 (43 mg, rendimiento 93 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCI3) 58,43 (d, 1 H), 8,14 (d, 1 H), 7,27 (s, 1 H), 7,21-7,15 (m, 1 H), 7,04-6,98 (m, 1 H), 6,95 (t, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 6,59 (d, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 5,62 (br. s., 1 H), 3,70 (s, 1 H), 3,63 (d, 2 H), 1,31 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-326
Una mezcla de ácido (S)-trifluoroláctico (1,5 equiv.) y 1,1'-carbodiimidazol (1,5 equiv.) en THF se calentó a 70 °C durante 2 h. 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-pirimidin-4 amina (producto intermedio descrito en WO2012/3405 A1) (1 equiv.) se añadió a la mezcla de reacción, y el contenido se agitó a 70 °C durante 3 d. El contenido se enfrió a 23 °C, se diluyó con acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-326 (3 mg, rendimiento 4 %) como un sólido blanco. 1H-RMN (500 MHz, CDCh) 5 9,61 (br. s., 1 H), 8,76 (d, 1 H), 8,49 (d, 1 H), 8,16 (d, 1 H), 7,47 (s, 1 H), 7,25-7,21 (m, 1 H), 7,11-7,03 (m, 1 H), 7,00 (t, 1 H), 6,83 (t, 1 H), 6,63 (d, 1 H), 6,36 (br. s., 1 H), 6,06-5,95 (m, 2 H), 4,69 (d, 1 H).
Compuesto de referencia I-329 y compuesto de referencia I-330
El compuesto de referencia I-161 se disolvió mediante separación quiral con columna semipreparativa chiralcel-ODH 20 mm x 250 mm usando un gradiente de 10-90 % isopropanol/hexanos. La recolección del pico que eluyó primero y la concentración al vacío produjo el compuesto de referencia I-329 como un sólido blanco. La recolección del pico que eluyó en segundo lugar y la concentración al vacío produjo el compuesto 330 como un sólido blanco.
1H-RMN para el Compuesto de referencia I-329 (500 MHz, CDCh) 58,38 (d, 1 H), 8,16 (d, 1 H), 7,21 (s, 1 H), 7,20 7,15 (m, 1 H), 7,04-6,99 (m, 1 H), 6,97-6,93 (m, 1 H), 6,89-6,84 (m, 1 H), 6,48 (d, 1 H), 6,06-6,00 (m, 1 H), 5,93-5,88 (m, 1 H), 4,76 (d, 1 H), 4,15 (d, 1 H), 3,54-3,43 (m, 1 H), 2,09-1,98 (m, 1 H), 1,91-1,82 (m, 1 H), 1,81-1,64 (m, 3 H), 1,17 (d, 3 H).
1H-RMN para el Compuesto de referencia I-330 (500 MHz, CD3OD) 58,78-8,74 (d, 1 H), 8,21 (d, 1 H), 7,45 (s, 1 H), 7,30-7,23 (m, 1 H), 7,11-7,06 (m, 1 H), 7,03 (t, 1 H), 6,86 (d, 1 H), 6,83 (t, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 5,04 (d, 1 H), 4,37 (d, 1 H), 3,69 (td, 1 H), 2,16-2,07 (m, 1 H), 1,93-1,86 (m, 1 H), 1,82-1,70 (m, 2 H), 1,52 (qd, 1 H), 1,21 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-331 y compuesto de referencia I-332
Una mezcla del compuesto de referencia I-329 y 1,1-carbodiimidazol (1 equiv.) en DCM se calentó a 45 °C hasta que todo el material de partida se consumió según lo observado mediante LC/MS. Se añadió ciclopropanosulfonamida (4 equiv.) y DBU (2 equiv.) a la mezcla de reacción, y el contenido se agitó a 45 °C durante 30 min adicionales. El contenido se enfrió a 23 °C, se desactivó con solución de HCl 1N y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 veces) y las partes orgánicas se combinaron y lavaron con salmuera. La mezcla se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-20 % (acetonitrilo:metanol=7:1)/diclorometano proporcionando el compuesto de referencia I-331 (40 mg, rendimiento 13 %) como un sólido blanco, y el compuesto de referencia I-332 (3 mg, rendimiento 1 %) como un sólido blanco.
1H-RMN para el Compuesto de referencia I-331 (400 MHz, DMSO-d6) 5 12,09 (s, 1 H), 9,14 (d, 1 H), 8,38 (d, 1 H), 7,25-7,18 (m, 1 H), 7,37-7,29 (m, 1 H), 7,55 (s, 1 H), 7,12-7,06 (m, 2 H), 6,87-6,80 (m, 1 H), 5,94-5,84 (m, 2 H), 4,73 (d, 1 H), 4,23 (br. s., 1 H), 3,66-3,54 (m, 1 H), 2,94-2,85 (m, 1 H), 2,38 (d, 1 H), 1,89-1,81 (m, 1 H), 1,68-1,51 (m, 3 H), 1,15 (d, 3 H), 0,97-0,92 (m, 2 H), 0,89-0,84 (m, 2 H).
1H RMN para el compuesto de referencia I-332 (400 MHz, DMSO-d6) 511,97 (s, 1 H), 9,14 (d, 1 H), 8,41 (d, 1 H), 7,65 (s, 1 H), 7,37-7,28 (m, 1 H), 7,26-7,17 (m, 1 H), 7,14-7,05 (m, 2 H), 6,88-6,79 (m, 1 H), 5,97-5,86 (m, 2 H), 4,70 (d, 1 H), 4,13 (d, 1 H), 3,83-3,72 (m, 1 H), 2,97-2,87 (m, 1 H), 2,10 (d, 1 H), 1,85 (d, 1 H), 1,74-1,60 (m, 2 H), 1,53-1,39 (m, 1 H), 1,16 (d, 3 H), 1,05-0,93 (m, 3 H), 0,87-0,78 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-333
Una mezcla de 3-(3-(4-cloropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (cuya síntesis se describe en el procedimiento para el compuesto de referencia I-24) (1 equiv.), ácido (2R,3S)-3-metilpiperidin-2-carboxílico (como la sal del ácido (1S)-(+)-canforsulfónico, 1 equiv.), y trietilamina (1 equiv.) se calentó a 110 °C durante 48 h como una solución en dioxano/agua (2:1). El contenido se enfrió a 23 °C, y se dividió entre una mezcla 1:1 de diclorometano y solución de HCl 1N. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 veces), y las partes orgánicas se combinaron y lavaron con salmuera. La mezcla se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-20 % (acetonitrilo:metanol=7:1)/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-333 (10 mg, rendimiento 4 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 512,64 (br. s., 1 H), 9,10 (d, 1 H), 8,30 (d, 1 H), 7,55 (br. s., 1 H), 7,38-7,29 (m, 1 H), 7,27-7,16 (m, 2 H), 7,15-7,06 (m, 1 H), 6,83 (d, 2 H), 5,90 (s, 2 H), 3,21 (s, 1 H), 1,94 (br. s., 1 H), 1,89-1,80 (m, 1 H), 1,69-1,35 (m, 5 H), 1,13 (d, 3 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-334
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2-amino-2-(hidroximetil)propano-1,3-diol fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 110 °C durante 20 h. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-20 % (acetonitrilo:metanol=7:1)/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-334 deseado (185 mg, rendimiento 72 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 89,10 (d, 1 H), 8,24 (d, 1 H), 7,46 (s, 1 H), 7,36-7,29 (m, 1 H), 7,25-7,18 (m, 2 H), 7,10 (td, 1 H), 6,91-6,84 (m, 1 H), 6,36 (s, 1 H), 5,86 (s, 2 H), 4,95 (br. s., 3 H), 3,76-3,72 (m, 6 H).
Compuesto de referencia I-335
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la (S)-2-amino-3-hidroxipropanamida fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 110 °C durante 20 h. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-20 % (acetonitrilo:metanol=7:1)/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-335 (170 mg, rendimiento 37 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 89,14 (d, 1 H), 8,56 (br. s., 1 H), 8,41 (d, 1 H), 7,70 (s, 2 H), 7,37-7,31 (m, 1 H), 7,29 7,19 (m, 3 H), 7,14-7,08 (m, 1 H), 6,86 (t, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 4,87-4,80 (m, 1 H), 3,89-3,78 (m, 2 H), 3,06 (qd, 1 H).
Compuesto de referencia I-336
Una solución del compuesto de referencia I-112 (1 equiv.) en DMF se trató sucesivamente con base de Hunig (3 equiv.) y HATU (1 equiv.). Después de agitar durante 5 minutos, se añadió serinol (1,5 equiv.), y la reacción se agitó a 23 °C durante 20 h. La mezcla se repartió entre una mezcla 1:1 de diclorometano y una solución de HCl 1N. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 veces). Las porciones orgánicas combinadas se lavaron con salmuera. La mezcla se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-20 % (acetonitrilo:metanol=7:1)/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-336 (22 mg, rendimiento 26 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 89,14 (d, 1 H), 8,96 (br. s., 1 H), 8,45 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,85 (s, 1 H), 7,38-7,29 (m, 1 H), 7,28-7,18 (m, 2 H), 7,14-7,07 (m, 1 H), 6,86 (t, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,94-4,86 (m, 1 H), 3,86-3,78 (m, 2 H), 3,74-3,65 (m, 1 H), 3,64-3,53 (m, 1 H), 3,53-3,46 (m, 1 H), 3,45-3,40 (m, 2 H), 3,40-3,34 (m, 2 H), 3,16-3,04 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-337
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 3-amino-1,1,1-trifluoropropan-2-ol (5 equiv.) fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 110 °C durante 20 h. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-20 % (acetonitrilo: metanol=7:1)/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-337 (70 mg, rendimiento 53 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 88,76 (d, 1 H), 8,10 (d, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,30-7,23 (m, 1 H), 7,08 (dd, 1 H), 7,05-7,00 (m, 1 H), 6,88-6,82 (m, 2 H), 5,95 (s, 2 H), 4,40-4,30 (m, 1 H), 3,99 (dd, 1 H), 3,70 (dd, 1 H).
Compuesto de referencia I-339
El compuesto del título se preparó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 2-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-carboxilato de metilo
Este producto intermedio se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-carboxilato de metilo (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina. La preparación proporcionó el éster metílico deseado, 2-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-carboxilato de metilo (compuesto de referencia I-338, 55 mg, rendimiento 97 %) como un aceite naranja, y se recogió en cabo sin purificación adicional.
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-339
Una solución de 2-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-8-carboxilato de metilo e hidróxido de litio hidratado (1,5 equiv.) en tetrahidrofurano, agua y metanol (relación 3:1:1) se agitó a 23 °C durante 21 h. Se añadió más base (1,5 equiv.), y la solución se agitó durante 24 h. La solución se vertió en agua, hidróxido de sodio 1 N y diclorometano (relación 10:1:10). Las capas se separaron y la capa acuosa se acidificó a pH 1. La capa acuosa se extrajo con diclorometano, se secó con sulfato de magnesio, se filtró, y el disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-339 (9 mg, rendimiento 17 % en 2 etapas) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-de) 813,14 (s, 1 H), 9,12 (d, 1 H), 8,32 (d, 1 H), 7,79-7,77 (m, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 7,43-7,41 (d, 1 H), 7,34-7,30 (m, 2 H), 7,24-7,20 (m, 2 H), 7,11 (dt, 1 H), 6,85 (dt, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 5,34 (d, 2 H), 4,07 (t, 2 H), 3,04 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-341
El compuesto del título se preparó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de c/s-1-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4il)-3 metilpiperidin-2-carboxamida
(Compuesto de referencia I-340)
A una solución del compuesto de referencia I-161 y trietilamina (1 equiv.) a 0 °C en tetrahidrofurano se añadió cloroformiato de etilo (1,05 equiv.) gota a gota durante 5 minutos. La mezcla de reacción se mantuvo a 0 °C durante 45 min y, a continuación, se añadió hidróxido de amonio (7 equiv.). La solución se calentó inmediatamente a 23 °C y se agitó durante 15 horas adicionales. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y cloruro de amonio acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 20-100 % hexanos en acetato de etilo) proporcionó c/s-1-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)-3-metilpiperidin-2-carboxamida (compuesto de referencia I-340, 270 mg, rendimiento 54 %) como una espuma amarilla.
1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,46 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,23 (s, 1 H), 7,22-7,17 (m, 1 H), 7,12-6,91 (m, 3 H), 6,59 (d, 1 H), 6,06-5,76 (m, 2 H), 5,34 (br. s., 1 H), 4,76 (d, 1 H), 4,18 (d, 1 H), 3,32 (ddd, 1 H), 2,64-2,50 (m, 1 H), 2,08-1,79 (m, 2 H), 1,65-1,50 (m, 1 H), 1,49-1,37 (m, 1 H), 1,15 (d, 1 H), 1,05 (d, 3 H).
Etapa 2: Síntesis de c/s-1-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)-3-metilpiperidin-2-carbonitrilo
A una solución a 0 °C de c/s-1 -(5-fluoro-2-(1 -(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)-3-metilpiperidin-2-carboxamida en piridina se añadió anhídrido trifluoroacético (2 equiv.) gota a gota durante 5 minutos.
Después de agitar durante 45 minutos a 0 °C, la solución se calentó hasta temperatura ambiente y a continuación se vertió inmediatamente en diclorometano y cloruro de amonio acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 10-75 % hexanos en acetato de etilo) proporcionó c/s-1 -(5-fluoro-2-(1 -(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)-3-metilpiperidin-2-carbonitrilo (215 mg, rendimiento 83 %) como una espuma blanca.
1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,44 (d, 1 H), 8,31 (d, 1 H), 7,30 (s, 1 H), 7,22-7,11 (m, 1 H), 7,06-6,91 (m, 2 H), 6,82 (t, 1 H), 6,59 (d, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 5,40 (s, 1 H), 4,35 (d, 1 H), 3,32 (td, 1 H), 2,48-2,35 (m, 1 H), 2,20-1,84 (m, 2 H), 1,61-1,76 (m, 2 H), 1,17 (d, 3 H).
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-341
Una suspensión de c/s-1-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)-3-metilpiperidin-2-carbonitrilo, hidrocloruro de amonio (5 equiv.), y azida de sodio (5 equiv.) en W,A/-dimetilformamida se calentó a 90 °C durante 60 horas. La solución se diluyó con acetato de etilo y solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las sustancias orgánicas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El sólido bruto se suspendió en diclorometano y se filtró para dar el producto contaminado con producto secundario. El filtrado se concentró al vacío y el sólido resultante se suspendió en dietil éter y se filtró proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-341 (135 mg, rendimiento 57 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 88,51 (d, 1 H), 8,15 (d, 1 H), 7,29 (s, 1 H), 7,25-7,20 (m, 2 H), 7,04-6,99 (m, 2 H), 6,63 (d, 1 H), 6,09 (d, 1 H), 6,00 (d, 1 H), 5,18 (d, 1 H), 3,98 (dd, 1 H), 3,31 (dt, 1 H), 2,81-2,75 (m, 1 H), 2,54-2,46 (m, 1 H), 2,13-2,02 (m, 1 H), 1,80-1,75 (m, 1 H), 1,60-1,51 (m, 1 H), 1,11 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-342
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 1-((metilamino)metil)ciclobutanocarboxílico (como la sal de TFA) fue el reactivo de amina. La preparación proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-342 (64 mg, rendimiento cuantitativo) como un sólido amarillo.
1 H - R M N ( 400 M H z , C D 3O D ) 8 8 , 81 ( d , 1 H ) , 8 , 29 ( d , 1 H ) , 7 , 56 ( m , 1 H ) , 7 , 32 - 7 , 26 ( m , 1 H ) , 7 , 11 - 7 , 0 2 ( m , 2 H ) , 6 , 96 6 , 92 ( m , 2 H ) , 5 , 98 ( s , 2 H ) , 4 , 37 ( s , 2 H ) , 3 , 48 ( d , 3 H ) , 2 , 51 - 2 , 44 ( m , 2 H ) , 2 , 25 - 2 , 16 ( m , 2 H ) , 2 , 09 - 1 , 93 ( m , 2 H ) .
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-343
Una suspensión de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(tiazol-2- il)-1H-pirazol-3-ilo)pirimidin-4-ol (producto intermedio previamente descrito en WO2013/101830 A1) en cloruro de fosforilo (20 equiv.) se calentó a 60 °C durante 2 h. El cloruro de fosforilo se retiró bajo una corriente de nitrógeno y el residuo resultante se disolvió en dioxano y agua (relación 2:1). Después de la adición de clorhidrato de ácido 1-((metilamino)metil)ciclopropanocarboxílico (3 equiv.) y trietilamina (10 equiv.), la solución se calentó a 90 °C durante 4 h. La solución se diluyó con diclorometano y solución de ácido clorhídrico 1 N. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-5 % metanol en diclorometano) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-343 (17 mg, rendimiento 52 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-da) 812,34 (s, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 7,98 (d, 1 H), 7,92 (d, 1 H), 7,35 (s, 1 H), 7,34-7,29 (m, 1 H), 7,23-7,18 (m, 1 H), 7,10 (dt, 1 H), 6,93 (dt, 1 H), 6,02 (s, 2 H), 4,00 (s, 2 H), 3,24 (d, 3 H), 1,15-1,12 (m, 2 H), 1,03-1,01 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-344
A una solución del compuesto de referencia I-248 en diclorometano se añadió carbonildiimidazol (1,2 equiv.). La mezcla resultante se agitó a 40 °C durante 45 min. La solución se enfrió a 23 °C y se añadió 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (2 equiv.), seguido de ciclopropanosulfonamida (3 equiv.). Después de agitar durante 16 h, la solución se vertió en diclorometano y solución de ácido clorhídrico 1 N. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación inicial mediante cromatografía en gel de sílice (metanol en diclorometano) dio el producto impuro. El residuo impuro se captó en dietil éter, y se añadieron hexanos hasta que la solución se volvió turbia. Después de agitar durante 20 minutos, el sólido se filtró proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-344 (29 mg, rendimiento 48 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 88,44 (d, 1 H), 8,09 (d, 1 H), 7,23-7,17 (m, 2 H), 7,03-6,97 (m, 3 H), 6,51 (d, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 3,96 (dd, 1 H), 3,69-3,63 (m, 1 H), 3,32 (d, 3 H), 2,90-2,81 (m, 2 H), 2,03-1,96 (m, 1 H), 1,18-1,14 (m, 2 H), 1,03 (dd, 6 H), 0,92-0,90 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-345
Una suspensión de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(tiazol-4-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-ol (producto intermedio previamente descrito en WO2013/101830 A1) en cloruro de fosforilo (50 equiv.) se calentó a 60 °C durante 2 h. El cloruro de fosforilo se retiró bajo una corriente de nitrógeno, y el residuo resultante se disolvió en dioxano y agua (2:1) y se trató con clorhidrato de ácido 1-((metilamino)metil)ciclopropanocarboxílico (3 equiv.), seguido de trietilamina (10 equiv.). La solución resultante se calentó a 90 °C durante 7,5 días. La mezcla de reacción se vertió en diclorometano y solución de ácido clorhídrico 1 N. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación por cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-10 % metanol en diclorometano) proporcionó el compuesto de referencia I-345 (2,8 mg, rendimiento 11 %) como una película blanca.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 89,03 (d, 1 H), 8,07 (d, 1 H), 7,89 (d, 1 H), 7,24-7,19 (m, 2 H), 7,04-6,96 (m, 2 H), 6,81 (t, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 4,13 (s, 2 H), 3,34 (d, 3 H), 1,28-1,25 (m, 2 H), 1,08-1,05 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-346
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-(trifluorometil)-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridina (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina. Después de la preparación, el sólido bruto se suspendió en dietil éter y se filtró proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-346 (57 mg, rendimiento 84 %) como un sólido de color tostado.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,84 (d, 1 H), 8,41 (d, 1 H), 7,63 (s, 1 H), 7,33-7,28 (m, 1 H), 7,13-7,04 (m, 2 H), 6,98 6,95 (m, 2 H), 6,03 (s, 2 H), 5,19 (s, 2 H), 4,42 (t, 2 H), 3,09 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-347
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el sin-piperidin-3,4,5-triol fue el reactivo de amina. Al completarse la reacción, según lo determinado mediante LC/MS, el disolvente se retiró al vacío. Se añadió metanol y la suspensión resultante se filtró proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-347 (20 mg, rendimiento 11 %) como un sólido.
1 H -R M N (400 M H z, D M S O -d 6) 8 9 ,09 (d, 1 H), 8 ,28 (d, 1 H), 7 ,52 (s, 1 H), 7 ,35 -7 ,29 (m, 1 H), 7 ,24-7 ,21 (m, 2 H), 7 ,09 (t, 1 H), 6 ,80 (t, 1 H), 5 ,90 (s, 2 H), 4 ,92 (d, 2 H), 4 ,80 (d, 1 H), 4 ,15-4 ,11 (m, 2 H), 3 ,83 -3 ,80 (m, 1 H), 3 ,58 -3 ,53 (m, 2 H), 3 ,27-3 ,21 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-348
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 1,3-diaminopropan-2-ol fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 40 °C durante 45 min. Una vez completada la reacción, según lo determinado mediante LC/MS, se retiró el dioxano en vacío y se añadió suficiente metanol para solubilizar la mezcla bruta. La purificación mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con ácido trifluoacético a 0,1 %, 20 min) proporcionó el compuesto deseado, compuesto de referencia I-348 (58 mg, rendimiento 80 %) como una espuma rosa.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,82 (d, 1 H), 8,27 (d, 1 H), 7,62 (s, 1 H), 7,32-7,27 (m, 1 H), 7,12-7,03 (m, 2 H), 6,95 6,91 (m, 2 H), 6,02 (d, 1 H), 5,97 (d, 1 H), 4,21-4,15 (m, 1 H), 3,85-3,77 (m, 2 H), 3,22-3,18 (dd, 1 H), 2,96 (dd, 1 H).
Compuesto de referencia I-349
A una solución del compuesto de referencia I-340 y trietilamina (5 equiv.) en diclorometano a 0 °C se añadió cloruro de metanosulfonilo (1 equiv.) gota a gota. Después de agitar durante 45 minutos, se añadió una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y la mezcla de reacción se calentó a 23 °C. Se añadió diclorometano y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con diclorometano y las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-50 % acetonitrilo en agua con TFA a 0,1 %) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-349 (6 mg, rendimiento 25 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,78 (d, 1 H), 8,24 (d, 1 H), 7,70 (s, 1 H), 7,31-7,25 (m, 1 H), 7,11-7,02 (m, 3 H), 6,92 6,88 (m, 1 H), 6,04 (s, 2 H), 4,10-4,01 (m, 2 H), 3,61-3,56 (m, 1 H), 3,18-3,17 (m, 2 H), 2,95 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-350
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, excepto el cis-piperidin-3,4-diol racémico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 5-50 % acetonitrilo en agua con TFA a 0,1 %, 20 min) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-350 (1,7 mg, rendimiento 3 %) como una película transparente.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,81 (m, 1 H), 8,28 (d, 1 H), 7,64 (s, 1 H), 7,32-7,26 (m, 1 H), 7,12-7,03 (m, 2 H), 6,97 6,93 (m, 2 H), 6,01 (s, 2 H), 4,52 (br s, 2 H), 4,38 (dd, 1 H), 3,97-3,90 (m, 2 H), 3,77-3,72 (m, 1 H), 2,02-1,97 (m, 1 H), 1,90-1,86 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-351
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 3-(aminometil)-3-hidroxiazetidin-1 -carboxilato de ferf-butilo fue el reactivo de amina, y la reacción se recogió en cabo como una solución en dioxano. Se usó acetato de etilo como disolvente durante la preparación. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-5 % metanol en diclorometano) para suministrar el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-351 (144 mg, rendimiento cuantitativo) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,76 (d, 1 H), 8,11 (d, 1 H), 7,44 (s, 1 H), 7,30-7,25 (m, 1 H), 7,12-7,01 (m, 2 H), 6,92 (d, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 4,09 (d, 2 H), 3,93 (br s, 2 H), 3,78 (d, 2 H), 1,40 (s, 9 H).
Compuesto de referencia I-352
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 3-(aminometil)oxetan-3-ol era el reactivo de amina, y la reacción se recogió en cabo como una solución en dioxano. Después de agitar durante 1,5 horas a 90 °C, se añadieron 2 equivalentes más de oxetano y la mezcla de reacción se agitó a 90 °C durante 3 h. A continuación, la solución de reacción se vertió en acetato de etilo y solución acuosa de ácido clorhídrico 1 N. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con 5:1 diclorometano/alcohol isopropílico. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación por HPLC de fase inversa (gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua con TFA a 0,1 %, 15 min) proporcionó el compuesto de referencia I-352 (25 mg, rendimiento 53 %) como un sólido blanco.1
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,83 (d, 1 H), 8,29 (d, 1 H), 7,65 (s, 1 H), 7,32-7,28 (m, 1 H), 7,13-7,05 (m, 2 H), 6,99 6,94 (m, 2 H), 6,02 (s, 2 H), 4,05 (d, 1 H), 3,98 (d, 1 H), 3,78-3,63 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-353
A una solución del compuesto de referencia I-351 a 23 °C en diclorometano se añadió ácido trifluoacético (30 equiv.) en una sola parte. Después de agitar durante 30 minutos, la solución se concentró al vacío y el residuo resultante se captó en dietil éter. El sólido se filtró proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-353 (160 mg, rendimiento cuantitativo) como un sólido de color tostado.
1 H -R M N (400 M Hz, C D 3O D ) 8 8 ,83 (m, 1 H), 8 ,29 -8 ,25 (m, 1 H), 7 ,60 -7 ,57 (m, 1 H), 7 ,33 -7 ,28 (m , 1 H), 7 ,14 -7 ,04 (m, 2 H), 6 ,93 -6 ,89 (m , 2 H), 6 ,00 (s, 2 H), 4,31 (d, 2 H), 4 ,05 (m, 2 H), 3 ,97 (d, 2 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-354
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la N-(1-(aminometil)ciclopropil)-1,1,1-trifluorometanosulfonamida (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-50 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-354 (15 mg, rendimiento 25 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,75 (d, 1 H), 8,08 (d, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,28-7,24 (m, 1 H), 7,10-7,07 (m, 1 H), 7,04 7,01 (m, 1 H), 6,83-6,80 (m, 2 H), 5,96 (s, 2 H), 3,85 (s, 2 H), 1,06-1,04 (m, 2 H), 0,99-0,96 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-355
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2-(aminometil)-3,3,3-trifluoropropano-1,2-diol fue el reactivo de amina, y la reacción se realizó como una solución en dioxano. Después de la preparación con acetato de etilo y solución de ácido clorhídrico 1N, la purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-10 % metanol en diclorometano) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-355 (17 mg, rendimiento 36 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,75 (d, 1 H), 8,15 (d, 1 H), 7,39 (s, 1 H), 7,28-7,23 (m, 1 H), 7,09-7,01 (m, 2 H), 6,88 6,85 (m, 2 H), 5,96 (d, 1 H), 5,93 (d, 1 H), 4,02 (d, 1 H), 3,90 (d, 1 H), 3,75 (d, 1 H), 3,62 (d, 1 H).
Compuesto de referencia I-356
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la (S)-3-aminopirrolidin-2-ona (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina. El residuo bruto se suspendió en 3:1 de dietil éter y diclorometano. El sólido resultante se filtró proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-356 (10 mg, rendimiento 22 %) como un sólido de color tostado.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,83 (s, 1 H), 8,34 (m, 1 H), 7,63-7,62 (m, 1 H), 7,33-7,29 (m, 1 H), 7,13-7,05 (m, 2 H), 6,98-6,96 (m, 2 H), 6,03 (s, 2 H), 5,36-5,32 (m, 1 H), 3,56-3,49 (m, 2 H), 2,66-2,61 (m, 1 H), 2,38-2,30 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-357
El compuesto del título se preparó en 5 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 3-(2,22-trifluoro-1 -hidroxietil)acetidin-1 -carboxilato de ferf-butilo
A una solución a 0 °C de 3-formilazetidin-1-carboxilato de ferf-butilo (1 equiv.) y trimetil(trifluorometil)silano (1,4 equiv.) en tetrahidrofurano se añadió fluoruro detetrabutilamonio (solución 1 M en tetrahidrofurano, 1,1 equiv.) en el transcurso de 10 min. La solución se calentó inmediatamente a 23 °C y se agitó durante 19 h. La mezcla de reacción se vertió en solución de ácido clorhídrico 1 N y dietil éter. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con dietil éter. Las sustancias orgánicas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío dando 3-(2,2,2-trifluoro-1-hidroxietil)azetidina-1-carboxilato de ferf-butilo (558 mg, rendimiento 79 %) como un sólido amarillo pálido.
Etapa 2: Síntesis de 3-(2,2, 2 trifluoroacetil)azetidina-1-carboxilato de fbutilo
A 3-(2,2,2-trifluoro-1-hidroxietil)azetidina-1-carboxilato de ferf-butilo (1 equiv.) en diclorometano a 0 °C se añadió periodinano de Dess-Martin (2 equiv.) en una sola parte. Después de 5 minutos a 0 °C, la solución se calentó a 23 °C. Después de dos horas, el análisis mediante LC/MS mostró una conversión completa. La mezcla de reacción se vertió en una solución acuosa saturada de ditionito de sodio y bicarbonato de sodio acuoso saturado 5:1 (75 ml). Después de agitar durante 10 minutos, se añadió diclorometano y las capas se separaron. La capa acuosa se extrajo con diclorometano, las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío proporcionando 3-(2,2,2-trifluoroacetil)azetidin-1-carboxilato de ferf-butilo (263 mg, rendimiento 92 %) como un sólido grasiento blanco que era una mezcla de cetona e hidrato conforme a 1H-RMN.
Etapa 3: Síntesis de 3-(1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-hidroxipropan-2-il)azetidin-1 carboxilato de ferf-butilo
A una solución a 0 °C de 3-(2,2,2-trifluoroacetil)azetidin-1-carboxilato de ferf-butilo (1 equiv.) y trimetil(trifluorometil)silano (1,4 equiv.) en tetrahidrofurano se añadió fluoruro de tetrabutilamonio (1,1 equiv.) como una solución en tetrahidrofurano 1 M gota a gota durante 5 min. La solución se calentó inmediatamente a 23 °C y se agitó durante 2,5 d. A continuación, la solución se vertió a acetato de etilo y solución acuosa de ácido clorhídrico 1N. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 veces). Las sustancias orgánicas se lavaron con cloruro de sodio acuoso saturado, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-60 % acetato de etilo en hexanos) proporcionó 3-(1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-hidroxipropan-il)azetidin-1-carboxilato de ferf-butilo (24 mg, rendimiento 7 %) como un sólido oleoso.
Etapa 4: Síntesis de 2-(acetidin-3-il)-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol
Se agitó 3-(1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-hidroxipropan-2-il)azetidin-1-carboxilato de ferf-butilo en ácido trifluoroacético y diclorometano (relación 1:2) durante 1,5 h. Después, la solución se concentró al vacío proporcionando 2-(acetidin-3-il)-1,1,1,3,3,3,3-hexafluoropropan-2 ol como sal de TFA.
Etapa 5: Síntesis del compuesto de referencia I-357
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2-(acetidin-3-il)-1,1,1,3,3,3,3-hexafluoropropan-2 ol (como la sal de TFA, 1,5 equiv.) fue el reactivo de amina. El residuo bruto se captó en diclorometano y dietil éter 1:1 y el sólido se filtró y se lavó con dietil éter adicional proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-357 (17 mg, rendimiento 64 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 88,83 (d, 1 H), 8,27 (d, 1 H), 7,62 (s, 1 H), 7,35-7,30 (m, 1 H), 7,15-7,07 (m, 2 H), 7,00 6,96 (m, 2 H), 6,05 (s, 2 H), 4,82-4,70 (m, 4 H), 3,79 (quint, 1 H).
Compuesto de referencia I-359
Este compuesto se preparó en dos etapas
Etapa 1: Síntesis de éster I-358
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 1-aminometilciclopropanol (2 equiv.) fue el reactivo de amina, no se utilizó trietilamina, y el contenido se calentó hasta 100 °C durante 96 h como una solución en dioxano/agua (3:1). El acetato de etilo fue el disolvente usado para el procesamiento. El material bruto se purificó primero mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos, a continuación mediante HPLC de fase inversa (agua/acetonitrilo con ácido trifluoacético 0,1 %). Las fracciones de agua/acetonitrilo que contenían producto se trataron con NaHCO3 a 10 % (aq), se concentraron a 5 ml, después se extrajeron con acetato de etilo para recuperar el material neutro proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-358 (32 mg, rendimiento 28 %) como un sólido blanco.1
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 88,42 (d, 1 H), 8,11 (m, 1 H), 7,24 (s, 1 H), 7,15 (m, 1 H), 6,99 (m, 1 H), 6,94 (m, 1 H), 6,85 (m, 1 H), 6,56 (d, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 5,63 (m, 1 H), 4,77 (m, 1 H), 3,74 (d, 2 H), 0,86 (m, 2 H), 0,65 (m, 2 H).
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-359
El compuesto de referencia I-358 se disolvió en tetrahidrofurano a temperatura ambiente y se añadieron trietilamina (3 equiv.) y cloroformiato de etilo (2 equiv.) en sucesión. El contenido se dejó agitar durante 1 hora a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua (3 veces), a continuación se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El residuo resultante se disolvió nuevamente en tetrahidrofurano, se trató con borohidruro de sodio (6 equiv.), y se agitó durante 1 h. Esta mezcla se diluyó con acetato de etilo, se lavó con agua (3 veces), después se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 10-80 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-359 (11 mg, rendimiento 76 %) como un sólido blanco.
Compuesto de referencia I-360
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 1-(4-aminofenil)cidopropanocarboxílico (1 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 20 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 100 °C durante 18 h como una solución en dioxano/agua (3:1). El acetato de etilo fue el disolvente usado para el procesamiento. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 5-95 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-360 (11 mg, rendimiento 9 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, ace tona^) 58,89 (d, 1 H), 8,81 (br d, 1 H), 8,30 (d, 1 H), 8,03 (d, 2 H), 7,48 (s, 1 H), 7,39 (d, 2 H), 7,30 (m, 1 H), 7,15 (m, 1 H), 7,10 (m, 1 H), 7,07 (d, 1 H), 7,05 (m, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 1,53 (m, 2 H), 1,18 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-361
El compuesto del título se sintetizó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de metil-(2-oxo-2-(fenilsulfonamido)etil)carbamato de ferf-butilo
A una solución de 1,1-carbonildiimidazol (1,2 equiv.) en diclorometano se añadió ácido2-((ferf-butoxicarbonil)(metil)amino)acético (1 equiv.). La mezcla se agitó a 23 °C hasta que cesó la liberación de gas. A esta mezcla se añadió bencenosulfonamida (3 equiv.) y DBU (1 equiv.). La mezcla se agitó a 23 °C durante 1 h. La mezcla se diluyó con diclorometano y se lavó con agua. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó proporcionando un sólido blanco. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 80 % acetato de etilo en hexanos) proporcionó metil(2-oxo-2-(fenilsulfonamido)etil)carbamato de ferf-butilo (1,3 g) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 5 ppm 7,91 - 7,95 (m, 2 H), 7,59 - 7,65 (m, 3 H), 3,86 (s, 2 H), 2,82 - 2,88 (m, 3 H), 1,20 (s, 9 H).
Etapa 2: Síntesis de clorhidrato de 2-(met¡lamino)-A/-(fen¡lsulfon¡l)acetam¡da
Una mezcla de metil-(2-oxo-2-(fenilsulfonamido)etil)carbamato de ferf-butilo (1 equiv.) y HCl [4,0 M en 1,4-dioxano] se agitó a 23 °C durante 24 h. La mezcla se concentró proporcionando clorhidrato de 2-(metilamino)-A/-(fenilsulfonil)acetamida (3,2 g) como un sólido de color crema. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) 5 ppm 8,04 - 8,07 (m, 2 H), 7,57 - 7,64 (m, 3 H), 3,88 (s, 2 H), 2,67 (s, 3 H).
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-31
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el clorhidrato de 2-(metilamino)-N-(fenilsulfonil)acetamida fue el reactivo de amina, se usaron 6 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 85 °C como una solución en dioxano/agua (4:1) durante 24 h. La mezcla se enfrió a 23 °C y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución saturada de cloruro de amonio, se secó, se filtró y se evaporó dando un sólido. El sólido se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 100 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-361 (6,5 mg, rendimiento 14 % para la etapa 3) como un sólido amarillo claro.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 5 ppm 8,79 (d, 1 H), 8,12 (d, 1 H), 7,91 - 7,96 (m, 2 H), 7,43 - 7,49 (m, 1 H), 7,25 - 7,37 (m, 4 H), 7,03 - 7,14 (m, 2 H), 6,95 (d, 1 H), 6,85 - 6,91 (m, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 4,30 (s, 2 H), 3,39 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-363
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido piperidin-4-sulfónico (2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 70 °C como una solución en dioxano/agua (1:1) durante 2 h. El acetato de etilo se usó como el disolvente de extracción durante la preparación. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-363 (102 mg, rendimiento 69 %) como un sólido blanco.
1 H R M N ( 500 M H z , D M S O - d a ) 5 p p m 9 , 12 ( d , 1 H ) , 8 , 41 ( d , 1 H ) , 7 , 72 ( s , 1 H ) , 7 , 28 - 7 , 39 ( m , 2 H ) , 7 , 18 - 7 , 27 ( m , 1 H ) , 7 , 11 (t, 1 H ) , 6 , 85 (t, 1 H ) , 5 , 95 ( s , 2 H ) , 4 , 65 ( d , 2 H ) , 3 , 21 (t, 2 H ) , 2 , 61 - 2 , 7 2 ( m , 1 H ) , 2 , 0 2 - 2 , 12 ( m , 2 H ) , 1 , 52 - 1 , 70 ( m , 2 H ) .
Compuesto de referencia I-364
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 4,5,6,7-tetrahidroisoxazolo[5,4-c]piridin-3-ol (como la sal de HCl, 2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 70 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 2 h. El acetato de etilo se usó como el disolvente de extracción durante la preparación. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró al vacío proporcionando un sólido, el cual se aclaró adicionalmente con dietil éter y diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-364 (46 mg, rendimiento 72 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 11,47 (s, 1 H), 9,10 (d, 1 H), 8,40 (d, 1 H), 7,62 (s, 1 H), 7,30 - 7,37 (m, 1 H), 7,27 (d, 1 H), 7,20 - 7,25 (m, 1 H), 7,11 (t, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 5,91 (s, 2 H), 4,90 (s, 2 H), 3,98 (t, 2 H), 2,51 - 2,55 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-365
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (1R,3S,4S)-2-azabiciclo[2.2.1]heptano-3-carboxílico (como sal de HCl, 2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2,5 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 60 °C durante 24 h, y a continuación a 80 °C durante 3 h. Se usó acetato de etilo como disolvente de extracción durante el procesamiento. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando un sólido, que se aclaró adicionalmente con dietil éter y diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-365 (21 mg, rendimiento 16 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 5 ppm 8,78 (d, 1 H), 8,07 - 8,20 (m, 1 H), 7,23 - 7,35 (m, 2 H), 7,08 - 7,15 (m, 1 H), 7,04 (t, 1 H), 6,94 (br. s., 1 H), 6,79 - 6,87 (m, 1 H), 5,92 - 6,01 (m, 2 H), 4,28 - 4,38 (m, 1 H), 2,85 - 2,97 (m, 1 H), 2,23 (d, 1 H), 1,72 - 1,98 (m, 4 H), 1,48 - 1,71 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-366
El compuesto del título se preparó mediante el procedimiento general B, salvo que la piperidina-4-sulfonamida (2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 75 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 2 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. Los sólidos insolubles se recogieron mediante filtración y se secaron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-366 (64 mg, rendimiento 48 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,10 (d, 1 H), 8,35 (d, 1 H), 7,60 (s, 1 H), 7,31 - 7,37 (m, 1 H), 7,21 - 7,28 (m, 2 H), 7,11 (t, 1 H), 6,79-6,85 (m, 3 H), 5,91 (s, 2 H), 4,66 (d, 2 H), 3,24 (ddt, 1 H), 3,16 (t, 2 H), 2,13 (d, 2 H), 1,67 (qd, 2 H).
Compuesto de referencia I-367
El compuesto del título se sintetizó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)-A/-metiletanosulfonamida.
A una solución de cloruro de 2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)-etanosulfonilo (1 equiv.) en THF se añadió metilamina (solución 2,0 M en THF] (2 equiv.). La mezcla se agitó a 23 °C durante 1 h. La mezcla se concentró proporcionando 2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il J-N-metiletilanesulfonamida (0,98 g) como un sólido blanco. 1H RMN (500 M<h z>, CD3OD) 5 ppm 7,79 - 7,92 (m, 4 H), 4,06 - 4,13 (m, 2 H), 3,42 (t, 2 H), 2,74 (s, 3 H).
E t a p a 2 : S í n t e s i s d e 2 - a m i n o - W - m e t i l e t i l e n o s u l f o n a m i d a .
A una suspensión de 2-(1,3-d¡oxo¡so¡ndol¡n-2-¡l)-A/-met¡letilanesulfonam¡da (1 equiv.) en etanol se añadió monohidrato de hidrazina (1,5 equiv.). La mezcla se calentó a 75 °C durante 2 h. El precipitado blanco formado se retiró por filtración. El filtrado se concentró al vacío proporcionando 2-amino-W-metiletanosulfonamida como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 3,20 - 3,24 (m, 2 H), 3,08 - 3,14 (m, 2 H), 2,71 (s, 3 H).
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-367
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2-amino-A/-metiletanosulfonamida (2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 65 °C durante 2 d. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con solución saturada de bicarbonato de sodio. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un sólido. El sólido se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 100 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-367 (8,6 mg, rendimiento 14 %) como un sólido de color crema. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,76 (d, 1 H), 8,10 (d, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,24 - 7,30 (m, 1 H), 7,07 - 7,13 (m, 1 H), 7,03 (t, 1 H), 6,87 - 6,90 (m, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,01 (t, 2 H), 3,42 (t, 2 H), 2,68 - 2,70 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-368
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la W-metiltaurina (como sal sódica, 2 equiv.) fue el reactivo amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina y el contenido se calentó a 65 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 horas. El acetato de etilo se usó como disolvente para la preparación. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un sólido. El sólido se recogió por filtración y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-368 (31 mg, rendimiento 33 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,13 (d, 1 H), 8,40 (d, 1 H), 7,93 (br. s., 1 H), 7,31 - 7,38 (m, 1 H), 7,21 - 7,27 (m, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 7,12 (t, 1 H), 6,88 (t, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 3,94 - 4,02 (m, 2 H), 3,38 (d, 3 H), 2,84 - 2,92 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-369
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido c/s-1-amino-1,2,3,4-tetrahidronafthlen-2-carboxílico (2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 65 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 h. El acetato de etilo se usó como disolvente para la preparación. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-50 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-369 (7,0 mg, rendimiento 10 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,07 - 9,10 (m, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 7,70 (d, 1 H), 7,57 (s, 1 H), 7,30 - 7,41 (m, 2 H), 7,08 - 7,24 (m, 6 H), 6,89 (t, 1 H), 5,91 (s, 2 H), 2,99 (dt, 1 H), 2,74 - 2,91 (m, 2 H), 2,28 - 2,37 (m, 1 H), 1,94 - 2,01 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-370
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[3,4-c]p¡r¡d¡n-3(2H)-ona (como la sal de HCl, 3,2 equiv.) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó hasta 65 °C como una solución en dioxano/agua (1:1) durante 24 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se extrajo con solución de HCl 1N. La capa acuosa se alcalinizó con solución de bicarbonato de sodio saturada y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron, se filtraron y se evaporaron proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-370 (83 mg, rendimiento 65 %) como un sólido marrón claro.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,38 (d, 1 H), 8,08 - 8,21 (m, 1 H), 7,22 (s, 1 H), 7,07 - 7,13 (m, 1 H), 6,91 (t, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 6,73 - 6,78 (m, 1 H), 6,52 (d, 1 H), 5,85 (s, 2 H), 4,69 (s, 2 H), 3,83 - 3,91 (m, 2 H), 2,52 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-371
El compuesto del título se preparó mediante el procedimiento general B, salvo que el ácido c/s-1-amino-2,3-dih¡dro-1H-inden-2-carboxílico (2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 80 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró al vacío. El sólido resultante se aclaró con cantidades mínimas de metanol proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-371 (11 mg, rendimiento 16 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,10 (d, 1 H) 8,25 (d, 1 H) 7,63 (s, 1 H) 7,29 - 7,39 (m, 3 H) 7,20 - 7,28 (m, 3 H) 7,09 - 7,19 (m, 2 H) 6,88 (t, 1 H) 6,22 - 6,29 (m, 1 H) 5,87 - 5,97 (m, 2 H) 3,67 (q, 1 H) 3,52 (dd, 1 H) 3,06 (dd, 1 H).
Compuesto de referencia I-372
El co m p u e s to de l títu lo se s in te tizó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de metil(2-oxo 2-(fenilsulfonamido)etil)carbamato de ferf-butilo.
A una suspensión de ácido 2-(((ferf-butoxicarbonil)amino)metil)tiazol-4-carboxílico (1 equiv.) y yoduro de metilo (10 equiv.) en THF a 0 °C s e añadió hidruro de sodio [dispersión a 60 % en peso en aceite mineral] (10 equiv.). La mezcla se agitó a 23 °C durante 24 h. La mezcla se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución de Hcl 1N. La capa orgánica se secó, se filtró y evaporó dando un aceite, que se purificó adicionalmente mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-50 % acetato de etilo/hexanos) proporcionando ácido 2-(((ferfbutoxicarbonil)(metil)amino)metil)tiazol-4-carboxílico (217 mg, rendimiento 82 %) como un sólido rojo.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 8,26-8,34 (m, 1 H), 4,76 (d, 2 H), 3,00 (d, 3 H), 1,51 (br. s, 9 H).
Etapa 2: Síntesis de clorhidrato de 2-((metilamino)metil)tiazol-4-carboxilato de etilo.
Una mezcla de ácido 2-(((ferf-butoxicarbonil)(metil)amino)metil)tiazol-4-carboxílico (1 equiv.) y una solución de HCl [1,3 M en etanol] (10 equiv.) se agitó a 23 °C durante 24 h. La mezcla se concentró proporcionando 2-((metilamino)metil)tiazol-4-carboxilato de etilo (como sal de HCl, 222 mg) como un sólido amarillo.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,46 (s, 1 H), 4,63 (s, 2 H), 4,27-4,37 (m, 2 H), 2,80 (s, 3 H), 1,28- 1,35 (m, 3 H). Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-372
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2-((metilamino)metil)tiazol-4-carboxilato de etilo (como la sal de HCl, 2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 6 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 80 °C como una solución en dioxano/agua (4:1) durante 24 h. La mezcla se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución saturada de bicarbonato de sodio. La capa orgánica se secó, se filtró y evaporó dando un sólido, el cual se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 100 % acetato de etilo en hexanos) para suministrar el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-372 (78 mg, rendimiento 77 %) como una goma de color amarillo claro.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 8,45 (d, 1 H), 8,26 (d, 1 H), 8,12 (s, 1 H), 7,28 (s, 1 H), 7,17 - 7,23 (m, 1 H), 6,94 -7,06 (m, 2 H), 6,86 - 6,92 (m, 1 H), 6,58 (d, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 5,22 (s, 2 H), 4,44 (q, 2 H), 3,42 (d, 3 H), 1,42 (t, 3 H). Compuesto de referencia I-373
Una mezcla del compuesto de referencia I-372 (1 equiv.) e hidróxido de litio (10 equiv.) en una mezcla THF/agua/metanol (1:1:1) se agitó a 23 °C durante 24 h. La mezcla se concentró al vacío. La solución resultante se acidificó a pH 1. El precipitado formado se recogió por filtración y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-373 (38 mg, rendimiento 67 %) como un sólido blanco.1
1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 13,05 (s, 1 H), 9,09 (d, 1 H), 8,36 (t, 2 H), 7,57 (s, 1 H), 7,30 - 7,37 (m, 1 H), 7,18 - 7,26 (m, 2 H), 7,11 (t, 1 H), 6,89 (t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 5,17 (s, 2 H), 3 ,32-3,39 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-374
Una suspensión del compuesto de referencia I-368 (1 equiv.) en cloruro de tionilo (50 equiv.) se calentó a reflujo durante 24 h. La mezcla se enfrió y se concentró al vacío proporcionando el producto intermedio de cloruro de sulfonilo cloruro de 2-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)(metil)amino)-etanosulfonilo (169 mg) como un sólido amarillo. A continuación, este material se trató con amoniaco [solución 0,05 M en 1,4-dioxano] (5 equiv.) y la mezcla se dejó agitar a 23 °C durante 24 h. La reacción se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución saturada de bicarbonato de sodio. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 30 % metanol en diclorometano) y se recristalizó a partir de una mezcla de metanol:diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-374 (13 mg, rendimiento 8 %) como un sólido amarillo claro.
1 H R M N (400 M H z, D M S O -d 6) 8 ppm 9 ,10 (d, 1 H) 8 ,28 (d, 1 H) 7 ,58 (s, 1 H) 7 ,33 (d, 1 H) 7 ,19 - 7 ,25 (m, 1 H) 7 ,14 (d, 1 H) 7 ,08 - 7 ,13 (m , 2 H) 5 ,89 (s, 2 H) 4 ,00 - 4 ,06 (m, 2 H) 3 ,36 - 3,41 (m, 2 H) 3 ,28 (d, 3 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-375
El co m p u e s to de l títu lo se p repa ró en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de ácido 2-(((terf-butox¡carbon¡l)(met¡l)am¡no)met¡l)oxazol-4-carboxíl¡co
A una suspens¡ón fría de ác¡do 2-(((terf-butox¡carbon¡l)am¡no)met¡l)oxazol-4-carboxíl¡co (1 equ¡v.) y yodometano (10 equ¡v.) en THF a 0 °C s e añad¡ó h¡druro de sod¡o [d¡spers¡ón a 60 % en peso en ace¡te m¡neral] (10 equ¡v.). La mezcla se dejó calentar a 23 °C y se ag¡tó durante 24 h. La mezcla se d¡luyó en acetato de et¡lo y se lavó con soluc¡ón de HCl 1N. La capa orgán¡ca se secó, se f¡ltró y se evaporó dando un ace¡te. El ace¡te se pur¡f¡có por cromatografía en columna (grad¡ente de 0 a 100 % acetato de et¡lo en hexanos) proporc¡onando ác¡do2-(((tert-butox¡carbon¡l)(met¡l)am¡no)met¡l)oxazol-4-carboxíl¡co (215 mg, rend¡m¡ento 81 %) como un ace¡te amar¡llo.
1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,27 (s, 1 H), 4 ,52-4,69 (m, 2 H), 2,93 (d, 3 H), 1,37- 1,53 (m, 9 H).
Etapa 2: Síntes¡s de ác¡do 2-((met¡lam¡no)met¡l)oxazol-4-carboxíl¡co, sal de TFA.
Una mezcla de ác¡do 2-(((terf-butox¡carbon¡l)(met¡l)am¡no)met¡l)oxazol-4-carboxíl¡co (1 equ¡v) y TFA (10 equ¡v.) en DCM se ag¡tó a 23 °C durante 1 h. La mezcla se concentró proporc¡onando ác¡do 2-((met¡lam¡no)met¡l)oxazol-4-carboxíl¡co, sal de TFA (237 mg) como un ace¡te transparente. 1H R<m>N (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,62 - 8,64 (m, 1 H), 4,49 (s, 2 H), 2,86 (s, 3 H).
Etapa 3: Síntes¡s del compuesto de referenc¡a I-375
El compuesto del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento general B, salvo que el ác¡do 2-((met¡lam¡no)met¡l)oxazol-4-carboxíl¡co (como sal de TFA, 4 equ¡v.) fue el react¡vo de am¡na, se usaron 8 equ¡valentes de tr¡et¡lam¡na y el conten¡do se calentó a 80 °C como una soluc¡ón en d¡oxano/agua (4:1) durante 24 horas. El acetato de et¡lo se usó como d¡solvente durante la preparac¡ón. El ace¡te bruto obten¡do después de la preparac¡ón se trató con d¡et¡l éter y el sól¡do prec¡p¡tado resultante se recog¡ó por f¡ltrac¡ón y se secó al vacío proporc¡onando el compuesto deseado, el compuesto de referenc¡a I-375 (rend¡m¡ento 68 %) como un sól¡do blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,10 (d, 1 H), 8,73 (s, 1 H), 8,36 (d, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,28 - 7,36 (m, 1 H), 7,16 - 7,26 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 5,88 (s, 2 H), 5,07 (s, 2 H), 3,35 - 3,40 (m, 3 H).
Compuesto de referenc¡a I-376
El compuesto del título se s¡ntet¡zó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntes¡s de clorh¡drato de ác¡do 1-met¡l-2-((met¡lam¡no)met¡l)-1H-¡m¡dazol-4-carboxíl¡co.
A una suspens¡ón de ác¡do 2-(((tert-butox¡carbon¡l)am¡no)met¡l)-1H-¡m¡dazol-4-carboxíl¡co (1 equ¡v.) y yoduro de met¡lo (10 equ¡v.) en THF a 0 °C se añad¡ó h¡druro de sod¡o [d¡spers¡ón a 60 % en peso en ace¡te m¡neral] (10 equ¡v.). La mezcla se ag¡tó a 23 °C durante 24 h. La mezcla se trató con una soluc¡ón de HCl [soluc¡ón 4,0 M en 1,4-d¡oxano]. La mezcla se concentró al vacío y el sól¡do resultante se suspend¡ó en d¡et¡l éter. El prec¡p¡tado se recog¡ó por f¡ltrac¡ón y se secó al vacío dando ác¡do 1-met¡l-2-((met¡lam¡no)met¡l)-1H-¡m¡dazol-4-carboxíl¡co (80 mg, rend¡m¡ento 38 %) como un sól¡do amar¡llo.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,34 (br. s., 2 H), 7,91 (s, 1 H), 4,29 (t, 2 H), 3,71 (s, 3 H), 2,64 (t, 3 H).
E tap a 2: S ín tes¡s de l c o m p u e s to de re fe renc¡a I-376
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 1-metil-2-((metilamino)metil)-1H-imidazol-4-carboxílico (como la sal de HCl, 3 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 80 °C como una solución en dioxano/agua (4:1) durante 24 h. La mezcla se enfrió a 23 °C, se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. El precipitado formado se recogió por filtración y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-376 (26 mg, rendimiento 37 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 9,10 (d, 1 H), 8,39 (d, 1 H), 8,11 (br. s., 1 H), 7,56 (s, 1 H), 7,28 - 7,39 (m, 1 H), 7,18 - 7,26 (m, 2 H), 7,07 - 7,14 (m, 1 H), 6,82 (t, 1 H), 5,91 (s, 2 H), 5,08 (s, 2 H), 3,85 (s, 3 H), 3,41 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-377
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-(2-aminoetil)benzoico fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 90 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 h. Se usó acetato de etilo como disolvente durante la preparación. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-80 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-377 (25 mg, rendimiento 31 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,44 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 8,04 (s, 1 H), 7,98 (d, 1 H), 7,50 (d, 1 H), 7,40 - 7,45 (m, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,14 - 7,21 (m, 1 H), 7,00 (t, 1 H), 6,92 - 6,97 (m, 1 H), 6,85 - 6,92 (m, 1 H), 6,64 (d, 1 H), 5,99 (s, 2 H), 5,24 - 5,31 (m, 1 H), 3,90 - 3,97 (m, 2 H), 3,08 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-378
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 5-hidroxi-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-carboxilato (como sal de TFA, 1 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 3 equivalentes de trietilamina y el contenido se calentó a 70 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 h. El acetato de etilo se usó como disolvente durante la preparación. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-30 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-378 (68 mg, rendimiento 15 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 12,17 (s, 1 H), 8,46 (d, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 7,16 - 7,22 (m, 1 H), 7,02 (t, 1 H), 6,96 (t, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 6,62 (d, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,47 - 4,50 (m, 2 H), 4,26 (q, 2 H), 3,94 (t, 2 H), 2,51 (t, 2 H), 1,33 (t, 3 H).
Compuesto de referencia I-379
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (1SR,2SR,3RS,4RS)-3-aminobiciclo[2.2.1]heptano-2-carboxílico (como la sal HCl, racémico, 3 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 6 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 70 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 h. La mezcla de reacción se enfrió, se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-80 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-379 (47 mg, rendimiento 36 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,76 - 8,79 (m, 1 H), 8,07 (d, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,25 - 7,32 (m, 1 H), 7,11 (ddd, 1 H), 7,05 (td, 1 H), 6,92 (d, 1 H), 6,83 (td, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 4,58-4,66 (m, 1 H), 3,13 (ddd, 1 H), 2,83 (br. s., 1 H), 2,67 (br. s., 1 H), 1,74 (d, 1 H), 1,65 - 1,71 (m, 1 H), 1,58 - 1,64 (m, 1 H), 1,49 - 1,57 (m, 2 H), 1,41 - 1,49 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-380
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (1S,3R)-3-aminociclohexanocarboxílico fue el reactivo de amina (98 % ee, 4 equiv.), se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 80 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 h. Se usó acetato de etilo como disolvente durante la preparación. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-380 (70 mg, rendimiento 55 %) como un sólido amarillo.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,81 (d, 1 H), 8,18 (d, 1 H), 7,59 (s, 1 H), 7,29 (q, 1 H), 7,07 - 7,14 (m, 1 H), 7,05 (t, 1 H), 6,98 (d, 1 H), 6,92 (t, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,46 (t, 1 H), 2,59 (t, 1 H), 2,31 (d, 1 H), 2,04 (d, 2 H), 1,95 (d, 1 H), 1,51 -1,65 (m, 2 H), 1,35-1,51 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-381
El co m p u e s to de l títu lo se s in te tizó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 2-(1,3 dioxoisoindolin-2-il )-N-(2,2,2-trifluoroetil) etanosulfonamida
Una mezcla de 2-[2-(clorosulfonil)etil]benzo[c]azolin-1,3-diona (1 equiv.), clorhidrato de 2,2,2-trifluoroetilamina (3 equiv.) y trietilamina (6 equiv.) en diclorometano se agitó a 23 °C durante 24 h. La mezcla se diluyó en diclorometano y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó, se filtró y evaporó dando un sólido blanco. El sólido se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (acetato de etilo en hexanos de 0 a 100 %) dando 2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)-N-(2,2,2-trifluoroetil)etanosulfonamida (370 mg, rendimiento 30 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 7,84 - 7,92 (m, 4 H), 4,05 - 4,09 (m, 2 H), 3,97 - 4,01 (m, 2 H), 3,32 (s, 2 H).
Etapa 2: Síntesis de 2-amino-N-(2,2,2-trifluoroetil)etanosulfonamida
Una mezcla de 2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)-N-(2,2,2-trifluoroetil)etanosulfonamida (1 equiv.) y monohidrato de hidrazina (1 equiv.) en etanol se agitó a 80 °C durante 24 h. La mezcla se enfrió a 23 °C y se concentró al vacío. El residuo resultante se trató con una cantidad mínima de metanol. El precipitado se recogió por filtración y se secó al vacío proporcionando un sólido blanco que contenía 2-amino-N-(2,2,2-trifluoroetil)etanosulfonamida (136 mg). El material se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional.
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-381
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2-amino-N-(2,2,2-trifluoroetil)etanosulfonamida (1 equiv.) fue el reactivo de amina, y los contenidos se calentaron hasta 80 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 h. La mezcla se enfrió, se diluyó en acetato de etilo y se lavó con agua. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 70 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-361 (28 mg, rendimiento 14 % para la etapa 2 y 3) como un sólido blanco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 9,10 (d, 1 H), 8,25 (d, 2 H), 7,55 (s, 1 H), 7,30 - 7,37 (m, 1 H), 7,19 - 7,26 (m, 1 H), 7,15 (d, 1 H), 7,10 (t, 1 H), 6,82 (t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 3,87 - 3,82 (m, 4 H), 3,45 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-382
El compuesto del título se sintetizó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 2-hidroxi-N-2-dimetil-3-(metilamino)propanamida
En un vial sellado, una mezcla de 2-metilglicidato de metilo (1 equiv.) y metilamina [33 % en peso en THF] (10 equiv.) se calentó a 80 °C durante 24 h. La mezcla se concentró al vacío dando 2-hidroxi-N-2-dimetil-3-(metilamino)propanamida (1,7 g, rendimiento 100 %) como un aceite transparente. 1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 3,67 - 3,76 (m, 1 H), 3,22 - 3,29 (m, 1 H), 2,79 - 2,82 (m, 3 H), 2,40 - 2,43 (m, 3 H), 1,31 -1,33 (m, 3 H).
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-382
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2-hidroxi-N-2-dimetil-3-(metilamino)propanamida (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina y el contenido se calentó hasta 80 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 4 h. El acetato de etilo se usó como disolvente durante la preparación. El sólido resultante se trató con una cantidad mínima de metanol y dietil éter, se recogió por filtración y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-382 (67 mg, rendimiento 52 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 5 ppm 9,09 - 9,12 (m, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 7,87 (q, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,30 - 7,37 (m, 1 H), 7,18-7,26 (m, 1 H), 7,11 (td, 1 H), 6,88 (t, 1 H), 5,86-5,92 (m, 2 H), 4,12 (d, 1 H), 3,68 (d, 1 H), 3,22 (s, 3 H), 2,55 (d, 3 H), 1,27 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-383
El compuesto del título se sintetizó en 5 etapas:
Etapa 1: Síntesis de (3-hidroxi-2,2-dimetilpropil)carbamato de bencilo
A una mezcla fría de 3-amino-2,2-dimetil-1-propanol (1 equiv.) y trietilamina (1 equiv.) en diclorometano se añadió cloroformiato de bencilo (1 equiv.). La mezcla se agitó a 23 °C durante 30 min, a continuación se diluyó en diclorometano y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando (3-hidroxi-2,2-dimetilpropil)carbamato de bencilo (1,9 g, rendimiento 86 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 5 ppm 7,34 - 7,45 (m, 5 H), 5,14 (s, 2 H), 3,25 (d, 2 H), 3,08 (d, 2 H), 0,89 (s, 6 H).
Etapa 2: Síntesis de ácido 3-(((benciloxi)carbonil)amino)-2,2-dimetilpropanoico
A una suspensión de (3-hidroxi-2,2-dimetilpropil)carbamato de bencilo (1 equiv.) en CCl4, agua y acetonitrilo (mezcla 1:1:1) se añadió peryodato de sodio (3 equiv.) y cloruro de rutenio (III) (0,05 equiv.). La mezcla se agitó a 23 °C durante 24 h. A esta mezcla se añadieron cantidades adicionales de peryodato de sodio (3 equiv.) y cloruro de rutenio (III) (0,05 equiv.), y el contenido se agitó a 23 °C durante 3 días. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se extrajo con solución saturada de carbonato de sodio, después la capa acuosa se acidificó a pH 1 y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 100 % acetato de etilo en hexanos) dando ácido 3-(((benciloxi)carbonil)amino)-2,2-dimetilpropanoico (943 mg, rendimiento 45 %) como un aceite de color rojo.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 5 ppm 7,35- 7,42 (m, 5 H), 5,12 (s, 2 H), 3,35 (d, 2 H), 1,23- 1,28 (m, 6 H).
Etapa 3: Síntesis de ácido 3-(((benciloxi)carbonil)(metil)amino)-2,2 dimetilpropanoico
A una solución fría de ácido 3-(((benciloxi)carbonil)amino)-2,2-dimetilpropanoico (1 equiv.) en THF se añadió hidruro de sodio [dispersión a 60 % en peso en aceite mineral] (10 equiv.). La mezcla se agitó a 0 °C durante 30 min. A esta mezcla se añadió yoduro de metilo (10 equiv.). La mezcla se dejó calentar hasta 23 °C y se agitó durante 24 h. La mezcla se vertió sobre hielo y se acidificó a pH 1. La mezcla se extrajo con dietil éter, y la capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó para dar un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 80 % acetato de etilo en hexanos) dando ácido 3-(((benciloxi)carbonil)(methyl)amino)-2,2-dimetilpropanoico (686 mg, rendimiento 69 %) como un aceite transparente.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 5 ppm 7,36 - 7,39 (m, 4 H), 7,32 - 7,35 (m, 1 H), 5,13 (s, 2 H), 3,53 - 3,60 (m, 2 H), 2,96 (br. s., 3 H), 1,18-1,26 (m, 6 H).
Etapa 4: Síntesis de clorhidrato de ácido 2,2-dimetil-3-(metilamino)propanoico
Una solución que contenía ácido 3-(((benciloxi)carbonil)(methyl)amino)amino)-2,2-dimetilpropanoico (1 equiv.) en metanol se hidrogenó utilizando el H-cube (0,7 ml/min, catalizador: 10 % Pd/C, 70 °C). La mezcla resultante se trató con una solución de HCl [1,25 M en etanol] y se concentró al vacío dando clorhidrato de ácido 2,2-dimetil-3-(metilamino)propanoico (569 mg, rendimiento 100 %) como un aceite transparente.1
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 5 ppm 3,09 (s, 2 H), 2,69 - 2,74 (m, 3 H), 1,25 -1,31 (m, 6 H).
E tap a 5: S ín tes is de l c o m p u e s to de re fe re nc ia I-383
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2,2-dimetil-3-(metilamino)propanoico (como sal de HCl, 4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 8 equivalentes de trietilamina y el contenido se calentó a 80 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 horas. El acetato de etilo se usó como disolvente durante la preparación. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 60 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-383 (38 mg, rendimiento 30 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 12,51 (br. s., 1 H), 9,10 (d, 1 H), 8,25 (d, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,30 - 7,37 (m, 1 H), 7 ,18-7,25 (m, 2 H), 7,11 (td, 1 H), 6,92 (t, 1 H), 5,88 (s, 2 H), 3,96 (s, 2 H), 3,33 (s, 3 H), 1,13 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-384
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido (1RS,2SR,3RS,4SR)-3-amino-7-oxabiciclo[2.2.1]heptano-2-carboxílico (es decir, racémico, 4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 80 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 h. Se usó acetato de etilo como disolvente durante la preparación. El sólido resultante se aclaró con metanol y dietil éter, se recogió por filtración y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-384 (43 mg, rendimiento 33 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,40 (br. s., 1 H), 9,10 (d, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,30 - 7,36 (m, 1 H), 7,20 - 7,25 (m, 2 H), 7,09 - 7,13 (m, 1 H), 6,94 (d, 1 H), 6,83 - 6,87 (m, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 4,86 (t, 1 H), 4,72 (d, 1 H), 4,47 (d, 1 H), 3,10 (d, 1 H), 1,53 - 1,68 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-436
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2-aminoetanosulfonamida fue el reactivo de amina, se usaron 3 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 65 °C durante 24 h como una solución en dioxano. La mezcla se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución de cloruro de amonio saturado. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un sólido. El sólido se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-100 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-436 (26 mg, rendimiento 42 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,77 (d, 1 H), 8,12 (d, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,25 - 7,32 (m, 1 H), 7,03 - 7,14 (m, 2 H), 6,90 (d, 1 H), 6,82 - 6,88 (m, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,07 - 4,15 (m, 5 H), 3,47 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-385
A una solución de ácido acético (10 equiv.) en DMF se añadió CDI (10 equiv.). La mezcla se agitó a 45 °C durante 30 min. A esta mezcla se añadió el compuesto de referencia I-436 y DBU (10 equiv.). La mezcla se agitó a 23 °C durante 3 d. La mezcla se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 10 % metanol en diclorometano) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-385 (8,2 mg, rendimiento 25 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,10 (d, 1 H), 8,24 (d, 1 H), 7,55 (s, 1 H), 7,30 - 7,37 (m, 1 H), 7,17 - 7,26 (m, 2 H), 7,11 (t, 1 H), 6,86 (t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 3,75-3,87 (m, 4 H), 1,99 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-387
El compuesto del título se sintetizó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de (1-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)acetidin-3-il)carbamato de tert-butilo (Compuesto de referencia I-21)
El compuesto intermedio del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la3-(tert-butoxicarbonilamino)acetidina fue el reactivo de amina, se usaron 3 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 80 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 h. Se usó acetato de etilo como disolvente durante la preparación. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el producto intermedio deseado, 1-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)azetidin-3-il)carbamato de ferf-butilo (480 mg, rendimiento 100 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,09 (d, 1 H), 8,28 (d, 1 H), 7,65 (d, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,29 - 7,35 (m, 1 H), 7,20 - 7,25 (m, 2 H), 7,08 - 7,12 (m, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,91 (s, 2 H), 4,49 (br. s., 3 H), 4,12 (br. s., 2 H), 1,40 (s, 9 H).
Etapa 2: Síntesis de 1-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)azetidin-3-amine (Compuesto de referencia I-40)
U na m ezc la de (1 -(5 -flu o ro -2 -(1 -(2 -flu o ro b e n c il)-5 -( is o x a z o l-3 -il) -1 H -p ira z o l-3 - il)p ir im id in -4 - il)a z e tid in -3 - il)c a rb a m a to de te rt-bu tilo (1 eq u iv .) y T F A (10 eq u iv .) en d ic lo ro m e ta n o se ag itó a 23 °C du ran te 24 h. La m ezc la se co n ce n tró al vacío. El aceite resultante se trató con solución saturada de bicarbonato de sodio y se extrajo con acetato de etilo. El precipitado formado se recogió y se secó al vacío. La capa orgánica también se secó, se filtró y se evaporó dando 1-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)azetidin-3-amina (116 mg (combinada), rendimiento 36 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,81 - 8,83 (m, 1 H) 8,32 (d, 1 H) 7,52 - 7,55 (m, 1 H) 7,27 - 7,34 (m, 1 H) 7,02 -7,14 (m, 2 H) 6,89 - 6,95 (m, 2 H) 6,00 (s, 2 H) 4,84 - 4,88 (m, 2 H) 4,55 (d, 2 H) 4,35 - 4,42 (m, 1 H).
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-387
A una suspensión blanca que contenía 1-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)azetidin-3-amina (1 equiv.) y piridina (10 equiv.) en THF se añadió anhídrido trifluorometanosulfónico (2 equiv.). La mezcla se agitó a 23 °C durante 30 min. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1 N. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 80 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-387 (61 mg, rendimiento 48 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 10,10 (d, 1 H), 9,08 (d, 1 H), 8,30 (d, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,30 - 7,36 (m, 1 H), 7,16 - 7,27 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,71 - 4,83 (m, 1 H), 4,52 - 4,63 (m, 2 H), 4,27 (dd, 2 H).
Compuesto de referencia I-388
A una suspensión fría de 1-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)azetidin-3-amina (generada en la etapa 2 del procedimiento para el compuesto de referencia I-387 1 equiv.) y piridina (4 equiv.) en diclorometano a -78 °C se añadió anhídrido trifluorometanosulfónico (2 equiv.). La mezcla se agitó a -78 °C durante 2 h. A continuación, se retiró del baño de acetona en hielo seco y se calentó a 23 °C. Se continuó la agitación a 23 °C durante 1 h. La mezcla se desactivó con metanol, y se concentró al vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 100 % acetato de etilo en hexanos) y el material aislado se recristalizó a partir de una mezcla de dietil éter y metanol proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-388 (90 mg, rendimiento 19 %) como un sólido amarillo claro.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,10 (d, 1 H), 8,35 (br. s., 1 H), 7,57 (br. s., 1 H), 7,31 - 7,37 (m, 1 H), 7,19 - 7,28 (m, 2 H), 7,11 (t, 1 H), 6,82 (t, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 4,67 (br. s., 2 H), 4,61 (br. s., 1 H), 4,22 (br. s., 2 H).
Compuesto de referencia I-389
El compuesto del título se sintetizó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 3-amino-2-hidroxi-2-metilpropanamida
Una mezcla de amoníaco [7 M en metanol] (20 equiv.) y 2-metilglicidato de metilo (1 equiv.) se agitó en un vial sellado a 80 °C durante 24 h. La mezcla se concentró al vacío dando 3-amino-2-hidroxi-2-metilpropanamida (731 mg, rendimiento 100 %) como un aceite transparente que se transformó en un sólido blanco cuando se dejó a 23 °C.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 2,90 - 2,96 (m, 1 H) 2,60-2,66 (m, 1 H) 1,32- 1,35 (m, 3 H).
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-389
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-amino-2-hidroxi-2-metilpropanamida (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina y el contenido se calentó hasta 80 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 h. La mezcla se diluyó en acetato de etilo y se lavó con agua. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un sólido. El sólido se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 5 % metanol en diclorometano) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-389 (78 mg, rendimiento 25 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 8,23 (d, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,30 - 7,35 (m, 2 H), 7,27 (t, 1 H), 7,25 - 7,29 (m, 1 H), 7,20 - 7,24 (m, 3 H), 7,10 (td, 1 H), 6,86 (t, 1 H), 5,94 (s, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 3,75 (dd, 1 H), 3,59 (dd, 1 H), 1,28 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-390
El co m p u e s to de l títu lo se p re pa ró s ig u ie n d o el p ro ce d im ie n to g e ne ra l B, sa lvo que el W -(2 -am inoe til)ca rb am a to de fe d -b u tilo (4 eq u iv .) fu e el rea c tivo de am ina , se usa ron 4 e q u iva le n te s de tr ie tila m in a , y el co n te n id o se c a le n tó hasta 85 °C com o una so luc ió n en d io xa n o /a g u a (3 :1 ) d u ran te 3 h. S e usó a ce ta to de e tilo com o d iso lve n te d u ran te la pre pa rac ió n . Las ca p a s o rg á n ica s se seca ron , se filtra ro n y se co n ce n tra ro n al v a c ío p ro p o rc io n a n d o el co m p u e s to deseado , el c o m p u e s to de re fe re nc ia I-390 (200 mg, re n d im ie n to 75 % ) com o un só lido b lanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 9,13 (s, 1 H), 8,30 (d, 1 H), 7,71 (s, 1 H), 7,31 - 7,37 (m, 1 H), 7,19 - 7,26 (m, 2 H), 7,11 (t, 1 H), 6,98 (t, 1 H), 6,86 (t, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 3,50-3,59 (m, 3 H), 3,25 (q, 2 H), 1,31 -1,37 (m, 9 H). Compuesto de referencia I-391
Una mezcla del compuesto de referencia I-390 (1 equiv.) y HCl [4,0 M en 1,4-dioxano] (50 equiv.) se agitó a 23 °C durante 24 h. La mezcla se concentró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-391 (como la sal de HCl, 157 mg, rendimiento 100 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,11 (s, 1 H), 8,31 (br. s., 1 H), 7,73 (br. s., 1 H), 7,26 - 7,38 (m, 2 H), 7,21 - 7,26 (m, 1 H), 7,11 (t, 1 H), 6,83 (t, 1 H), 5,91 (s, 2 H), 3,74 (br. s., 2 H), 3,07-3,15 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-392 Una mezcla que contenía el compuesto de referencia I-391 (1 equiv.), DBU (2,0 equiv.), trietilamina (2 equiv.) y N-fenil-bis(trifluorometanosulfonimida) (1,2 equiv.) en acetonitrilo se agitó a 23 °C durante 24 h. La mezcla se concentró al vacío. El residuo resultante se diluyó en acetato de etilo y se lavó con agua. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 100 % acetato de etilo en hexanos). La recristalización del material purificado proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-392 (123 mg, rendimiento 19 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,56 (s, 1 H), 9,11 (d, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 7,87 (t, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,30 - 7,35 (m, 1 H), 7,20 - 7,24 (m, 1 H), 7,08 - 7,13 (m, 2 H), 6,83 - 6,87 (m, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 3,60 (q, 2 H), 3,46 (d, 2 H). Compuesto de referencia I-393
El compuesto del título se sintetizó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 2-hidroxi-2-metil-3-(metilamino)propanoato de metilo
Se calentó una mezcla de metanamina [2,0 M en THF] (1,3 equiv) y 2-metilglicidato de metilo (1 equiv.) en etanol hasta 80 °C durante 24 h. La mezcla se concentró dando 2-hidroxi-2-metil-3-(metilamino)propanoato de metilo (2,26 g) como un aceite transparente. La mezcla se recogió en la siguiente etapa sin purificación adicional.
Etapa 2: Síntesis de 2-hidroxi-2-metil-3-(metilamino)propanamida
Una mezcla de 2-hidroxi-2-metil-3-(metilamino)propanoato de metilo (1 equiv.) y amoníaco [7,0 M en metanol] (5 equiv.) se calentó a 85 °C en un vial sellado durante 24 h. La mezcla se concentró dando 2-hidroxi-2-metil-3-(metilamino)propanamida como un aceite espeso. El material se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional. Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-393
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2-hidroxi-2-metil-3-(metilamino)propanamida (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina y el contenido se calentó hasta 85 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 h. La mezcla se enfrió hasta 23 °C y el precipitado blanco formado se recogió por filtración, se aclaró con dietil éter y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-393 (45 mg, rendimiento 11 % durante la etapa 3) como un sólido blanco. 1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,09 (d, 1 H), 8,21 (d, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,27 - 7,36 (m, 2 H), 7,19 - 7,26 (m, 1 H), 7,10 (t, 1 H), 6,88 (t, 1 H), 5,88 (s, 2 H), 4,11 (d, 1 H), 3,72 (d, 1 H), 3,26 (d, 3 H), 1,25 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-394
El compuesto del título se sintetizó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 3-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)azetidin-1-carboxilato de fed-butilo
El p ro du c to in te rm ed io se p re pa ró s ig u ie n d o el p ro ce d im ie n to g e n e ra l B, sa lvo que el 3 -a m in o a ze tid in -1 -ca rb o x ila to de fe d -b u tilo (4 eq u iv .) fu e el rea c tivo de am ina , se usa ron 4 e q u iva le n te s de tr ie tila m in a , y el co n te n id o se c a le n tó hasta 80 °C com o una so luc ió n en d io xa n o /a g u a (3 :1 ) d u ran te 24 h. El a ce ta to de e tilo se usó com o d iso lve n te du ran te la preparación. La capa orgánica se secó, se filtró y evaporó dando 3-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)azetidin-1-carboxilato de fed-butilo (505 mg, rendimiento 100 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 9,10 (d, 1 H), 8,45 (br. s., 1 H), 8,36 (d, 1 H), 8,27 (d, 1 H), 7,53 - 7,57 (m, 1 H), 7,30-7,37 (m, 1 H), 7,19-7,28 (m, 1 H), 7,11 (t, 1 H), 6,83-6,91 (m, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,81 -4,90(m , 1 H), 4,21 (br. s., 2 H), 3,92 (dd, 2 H), 1,36 -1,41 (m, 9 H).
Etapa 2: Síntesis de clorhidrato de A/-(azet¡d¡n-3-¡l)-5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-p¡razol-3-il)pirimidin-4-amina
Una mezcla de 3-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)azetidin-1-carboxilato de fed-butilo (1 equiv.) y cloruro de hidrógeno [4,0 M en 1,4-dioxano] (10 equiv.) se agitó a 23 °C durante 4 h. La mezcla se concentró al vacío proporcionando A/-(azetidin-3-il)-5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-amina (como sal de HCl, 450 mg, rendimiento 100 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 9,13 - 9,16 (m, 1 H), 8,40 - 8,49 (m, 1 H), 7,62 - 7,70 (m, 1 H), 7,32 - 7,39 (m, 1 H), 7,28 (dd, 1 H), 7,21 - 7,25 (m, 1 H), 7,12 (td, 1 H), 6,89 (t, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4,95 - 5,02 (m, 1 H), 4,26 - 4,35 (m, 3 H), 4 ,17-4,25 (m, 2 H).
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-394
A una mezcla fría de clorhidrato de A/-(azetidin-3-il)-5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-amina (1 equiv.), trietilamina (3 equiv.) y piridina (245 pl, 3 equiv.) en diclorometano a -78 °C se añadió anhídrido trifluorometanosulfónico (4 equiv.). La mezcla se agitó a -78 °C durante 2 h antes de calentar hasta 23 °C. A continuación, la mezcla se trató con solución de HCl 1N y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 30 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-394 (90 mg, rendimiento 16 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,83 (d, 1 H), 8,32 (d, 1 H), 7,62 (s, 1 H), 7,29 - 7,34 (m, 1 H), 7,05 - 7,13 (m, 2 H), 6,96 - 7,00 (m, 2 H), 6,03 (s, 2 H), 4,98 (br. s., 2 H), 4,74 - 4,83 (m, 1 H), 4,53 (br. s., 2 H).
Compuesto de referencia I-395
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el (1R,2S)-(+)-c/'s-1-amino-2-indanol (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 80 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 3 h. Se usó acetato de etilo como disolvente durante la preparación. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-50 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-395 (4 mg, rendimiento 27 %) como un sólido de color crema.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,07 (d, 1 H), 8,28 (d, 1 H), 7,55 (s, 1 H), 7,30 - 7,37 (m, 2 H), 7,26 - 7,29 (m, 1 H), 7,13 - 7,25 (m, 5 H), 7,10 (td, 1 H), 6,80 - 6,87 (m, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 5,75 (dd, 1 H), 5,27 (d, 1 H), 4,60 (d, 1 H), 3,15 (dd, 1 H), 2,93 (dd, 1 H).
Compuesto de referencia I-396
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 3-(trifluorometil)azetidin-3-ol (3 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 3 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 80 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 3 h. Se usó acetato de etilo como disolvente durante la preparación. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró al vacío proporcionando un sólido, que se aclaró con cantidades mínimas de metanol y dietil éter y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-396 (57 mg, rendimiento 45 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,09 (d, 1 H), 8,37 (d, 1 H), 7,57 (s, 2 H), 7,30 - 7,36 (m, 1 H), 7,19 - 7,26 (m, 2 H), 7,10 (td, 1 H), 6,82 (t, 1 H), 5,91 (s, 2 H), 4,52 (d, 2 H), 4,30 (d, 2 H).
Compuesto de referencia I-397
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 4-(aminometil)tetrahidro-2H-piran-4-ol (3 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 3 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 80 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 h. Se usó acetato de etilo como disolvente durante la preparación. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-397 (30 mg, rendimiento 24 %) como un sólido blanco.1
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,80 (d, 1 H), 8,20 (d, 1 H), 7,57 (s, 1 H), 7,24 - 7,32 (m, 1 H), 7,02 - 7,13 (m, 2 H), 6,87 - 6,97 (m, 2 H), 5,99 (s, 2 H), 3,74 - 3,80 (m, 6 H), 1,76 - 1,85 (m, 2 H), 1,59 (d, 2 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-398
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-amino-4,4-difluorobutanoico (3 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 3 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 80 °C como una solución en dioxano/agua (4:1) durante 24 h. El acetato de etilo se usó como disolvente durante el trabajo. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró al vacío proporcionando un sólido, que se aclaró con cantidades mínimas de metanol y dietil éter y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-398 (123 mg, rendimiento 52 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 9,10 (d, 1 H), 8,29 (d, 1 H), 8,12 (d, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,32 (d, 1 H), 7,18 - 7,24 (m, 1 H), 7,16 (d, 1 H), 7,10 (t, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 6,09 - 6,37 (m, 2 H), 5,87 (s, 2 H), 4,85 (d, 1 H), 4,04 (s, 1 H).
Compuesto de referencia I-399
A una suspensión del compuesto de referencia I-398 (1 equiv.) en THF se añadió hidruro de litio y aluminio [solución 1,0 M en THF] (3 equiv.). La mezcla se agitó a 23 °C durante 24 h más. La mezcla se desactivó con agua, a continuación una solución de NaOH a 15 % y a continuación agua. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 100 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-399 (23 mg, rendimiento 12 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,75 (d, 1 H), 8,08 (d, 1 H), 7,43 (s, 1 H), 7,23 - 7,30 (m, 1 H), 7,06 - 7,12 (m, 1 H), 7,03 (t, 1 H), 6,87 - 6,89 (m, 1 H), 6,81 (t, 1 H), 6,05 - 6,21 (m, 1 H), 5,93 - 5,98 (m, 2 H), 4,71 (dq, 1 H), 3,63 - 3,75 (m, 2 H), 2 ,18-2,35 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-400
Una mezcla de ácido 2,2 bis-(trifluorometil)-2-hidroxiacético (1,5 equiv.) y CDI (1,5 equiv.) en THF se calentó a reflujo durante 2 h. A esta mezcla se añadió 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-amina (producto intermedio anterior descrito en la publicación de la solicitud de patente WO2012/3405 A1) (1 equiv.) en una parte. La mezcla se calentó a reflujo durante 3 h. A continuación, se enfrió a 23 °C, se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 80 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-400 (111 mg, rendimiento 35 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,79 - 8,82 (m, 1 H), 8,75 - 8,77 (m, 1 H), 8,07 - 8,10 (m, 1 H), 7,54 - 7,56 (m, 1 H), 7,22 - 7,31 (m, 1 H), 6,99 - 7,12 (m, 2 H), 6,86 - 6,93 (m, 2 H), 5,95 - 6,00 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-401
El compuesto del título se sintetizó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de ácido (S)-4-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)-5-metoxi-5-oxopentanoico
El producto intermedio se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el éster metílico de L-glutamato (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 80 °C como una solución en dioxano/agua (3:1) durante 24 h. La mezcla se concentró al vacío. El sólido resultante se aclaró con dietil éter y agua, y se recogió por filtración y se secó al vacío proporcionando ácido-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il) pirimidin-4-il)amino)-5-metoxi-5-oxopentanoico (274 mg, rendimiento 69 %) como un sólido amarillo.12
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,76 - 8,78 (m, 1 H) 8,15 (d, 1 H) 7,37 (s, 1 H) 7,23 - 7,31 (m, 2 H) 6,99 - 7,13 (m, 2 H) 6,84 (t, 1 H) 5,94 - 5,99 (m, 2 H) 3,73 (s, 1 H) 3,34 (s, 3 H) 2,29 - 2,43 (m, 2 H) 2,12 - 2,24 (m, 2 H).
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-401
A una solución de ácido (S)-4-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)-5-metoxi-5-oxopentanoico (1 equiv.) en THF se añadieron cloruro de oxalilo (1,5 equiv.) y una gota de DMF. La mezcla se agitó a 23 °C durante 30 min. A continuación, se calentó a reflujo durante 30 min. La mezcla se enfrió a 23 °C, se diluyó con acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 50 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-401 (81 mg, rendimiento 33 %) como un sólido amarillo claro.
1<H R M N (500 M H z, C D 3O D ) 8 ppm 8 ,76 - 8 ,78 (m, 1 H), 8,71 - 8 ,74 (m, 1 H), 7 ,32 - 7 ,35 (m, 1 H), 7 ,23 - 7 ,30 (m, 1 H),>7 ,06 - 7 ,12 (m, 1 H), 7 ,00 - 7 ,05 (m, 1 H), 6,81 - 6 ,90 (m, 2 H), 5 ,94 (s, 2 H), 5 ,10 (dd, 1 H), 3 ,75 (s, 3 H), 2 ,59 - 2 ,80 (m, 3 H), 2 ,23 - 2 ,33 (m , 1 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-403
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que se el ácido 2-amino-3,3,3-trifluoropropanoico (3 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 3 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 70 °C durante 24 h como una solución en dioxano/agua (3:1). Se usó acetato de etilo como disolvente durante la preparación. La capa orgánica se secó, se filtró y se concentró al vacío proporcionando un sólido, que se aclaró con cantidades mínimas de metanol y dietil éter y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-403 (71 mg, rendimiento 17 %) como un sólido amarillo.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,76 (d, 1 H), 8,27 (d, 1 H), 7,48 - 7,51 (m, 1 H), 7,24 - 7,31 (m, 1 H), 7,07 - 7,13 (m, 1 H), 7,00 - 7,06 (m, 1 H), 6,92 (d, 1 H), 6,80 (t, 1 H), 6,10 - 6,16 (m, 1 H), 5,98 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-404
A una suspensión del compuesto de referencia I-403 (1 equiv.) en THF se añadió hidruro de litio y aluminio [solución 1,0 M en THF] (2 equiv.). La mezcla se agitó a 23 °C durante 1 h. La mezcla se desactivó con agua, a continuación una solución de NaOH a 15 % y a continuación agua. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un sólido. El sólido se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 50 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-404 (19 mg, rendimiento 12 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,75 - 8,77 (m, 1 H), 8,21 (d, 1 H), 7,46 - 7,48 (m, 1 H), 7,24 - 7,31 (m, 1 H), 7,06 -7,14 (m, 1 H), 7,03 (t, 1 H), 6,89 - 6,94 (m, 1 H), 6,79 (t, 1 H), 5,97 (d, 2 H), 5,47 - 5,54 (m, 1 H), 3,87 - 4,01 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-405
El compuesto del título se sintetizó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 2-(trifluorometil)oxirano-2-carboxamida
A una solución de 2-(bromometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropanamida (1 equiv.) en acetona se añadió carbonato de potasio (2 equiv.). La mezcla se calentó a reflujo durante 2 h. La mezcla se concentró al vacío. El residuo resultante se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó, se filtró y evaporó dando 2 (trifluorometil)oxirano-2-carboxamida (1,44 g, rendimiento 76 %) como una goma amarilla.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 3,17 (dd, 2 H).
Etapa 2: Síntesis de 2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropanamida
Una mezcla de amoníaco [7 M en metanol] (10 equiv.) y 2-(trifluorometil)oxirano-2-carboxamida (1 equiv.) se agitó en un vial sellado a 80 °C durante 24 h. La mezcla se concentró al vacío proporcionando 2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropanamida (1,3 g, rendimiento 84 %) como una goma marrón.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 83,01 - 3,11 (m, 1 H), 2,84 (d, 1 H).
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-405
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropanamida (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina y el contenido se calentó a 90 °C durante 24 h como una solución en dioxano/agua (3:1). La mezcla se diluyó en acetato de etilo y se lavó con agua. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un sólido. El sólido se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0 a 80 % acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-405 (262 mg, rendimiento 40 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 9,08 - 9,13 (m, 1 H), 8,33 (d, 1 H), 7,49 - 7,55 (m, 1 H), 7,28 - 7,37 (m, 1 H), 7,17 - 7,25 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,98 (t, 1 H), 5,86 - 5,92 (m, 2 H), 3,92 - 4,04 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-406
El co m p u e s to del títu lo se p repa ró s ig u ie nd o el p ro ce d im ie n to ge ne ra l B, sa lvo que el ác ido 3 -m e tilp ip e rid in -3 -c a rb o x ílico (co m o la sa l de HCl, 1,7 eq u iv .) fue el reac tivo de am ina , y el co n te n id o se ca len tó a 100 °C d u ran te 19 h.
La m ezc la de reacc ión se a c id ificó a pH 3 con una so luc ió n de HC l 1N y los só lido s re su lta n te s se reco g ie ron por f iltra c ió n al v a c ío p ro p o rc io n a n d o el co m p u e s to deseado , el co m p u e s to de re fe re nc ia I-406 (95 mg, re n d im ie n to 94 % ) co m o un só lido b lanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,75 (d, 1 H), 8,10 (d, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 7,26 (ap. q, 1 H), 7,09 (dd, 1 H), 7,03 (ap. t, 1 H), 6,91 (d, 1 H), 6,81 (ap. t, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 4,58 (d, 1 H), 4,39 (br d, 1 H), 3,43 (m, 1 H), 3,41 (d, 1 H), 2,24 (m, 1 H), 1,77 (m, 2 H), 1,61 (m, 1 H), 1,23 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-407
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2-aminoetanol (10 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina y el contenido se calentó a 100 °C durante 40 min. La mezcla de reacción se acidificó a pH 3 con solución de HCl 1N y los sólidos resultantes se recogieron por filtración al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-407 (57 mg, rendimiento 58 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 89,08 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,61 (ap. t, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,33 (ap. q, 1 1 H), 7,22 (ap. t, 1 H), 7,10 (ap. t, 1 H), 6,82 (ap. t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 4,78 (t, 1 H), 3,58 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-408
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 3-aminopropan-1-ol (10 equiv.) fue el reactivo de amina, no se usó trietilamina y el contenido se calentó a 100 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se acidificó a pH 3 con solución de HCl 1N y los sólidos resultantes se recogieron por filtración al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-408 (26 mg, rendimiento 37 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 89,08 (d, 1 H), 8,16 (d, 1 H), 7,66 (ap. t, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,32 (ap. q, 1 1 H), 7,21 (m, 1 H), 7,10 (ap. t, 1 H), 6,83 (ap. t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 4,54 (t, 1 H), 3,51 (m, 4 H), 1,75 (ap. quintuplete, 2 H).
Compuesto de referencia I-409
El compuesto del título se sintetizó en 2 etapas:
Etapa 1. Síntesis de ácido 1-(((terf-butoxicarbonil)(etil)amino)metil)ciclopropanocarboxílico
Una solución de ácido 1-(((tert-butoxicarbonil)amino)metil)ciclopropanocarboxílico en THF a 0 °C se trató con yodoetano (10 equiv.) seguido de hidruro de sodio (aceite mineral 60 % p/p, 10 equivalentes, añadido en 6 partes).
Después de 2 días, la mezcla de reacción se desactivó cuidadosamente con agua y se lavó con acetato de etilo. La capa acuosa se acidificó a pH 3 con HCl 3N y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y el disolvente se retiró al vacío proporcionando ácido1-(((tert-butoxicarbonil)(etil)amino)metil)ciclopropanocarboxílico (rendimiento 92 %) como un aceite amarillo pálido que se usó sin purificación adicional.
Etapa 2. Síntesis de trifluoroacetato de A/-((1-carboxiciclopropil)metil)etanaminio
Una solución de ácido 1-(((tert-butoxicarbonil)(etil)amino)metil)ciclopropanocarboxílico en diclorometano se trató con ácido trifluoacético (30 equiv.). Al cabo de 2 h, la mezcla de reacción se concentró al vacío proporcionando trifluoroacetato de W-((1-carboxiciclopropil)metil)etanaminio (rendimiento >99 %) como un aceite amarillo oscuro que se usó sin manipulación adicional.
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-409
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el trifluoroacetato de N-((1-carboxiciclopropil)metil)etanaminio (1,5 equiv.) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 3 días. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 20-70 % acetonitrilo/agua con TFA a 0,1 %) proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-409 (86 mg, rendimiento 51 %) como un sólido blanco. 1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,82 (d, 1 H), 8,28 (d, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,30 (ap. q, 1 H), 7,10 (m, 1 H), 7,06 (ap. t, 1 H), 6,97 (d, 1 H), 6,96 (m, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,30 (s, 2 H), 4,00 (q, 2 H), 1,41 (q, 2 H), 1,37 (t, 3 H), 1,16 (q, 2 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-410
El compuesto del título se sintetizó en 5 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 1-(2-fluorobencil)-5-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo
A 3-metil-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo en DMF se añadió hidruro de sodio (60 % en peso en aceite mineral, 1,2 equiv.). Al cabo de 10 min, se añadió bromuro de 2-fluorobencilo (1,2 equiv.) y la reacción se agitó durante 20 h. Se añadió agua y la mezcla resultante se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 10-40 % acetato de etilo/hexanos) produjo 1-(2-fluorobencil)-5-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo (rendimiento 79 %) y 1-(2-fluorobencil)-3-metil-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo (rendimiento 9 %).
Etapa 2: Síntesis de ácido 1-(2-fluorobencil)-5-metil-1H-pirazol-3-carboxílico
A una solución de 1-(2-fluorobencil)-5-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo en THF/MeOH/agua (relación 3:1:1) se añadió hidróxido de litio hidratado (1,5 equiv.). Al cabo de 23 h, los materiales orgánicos volátiles se eliminaron al vacío y la mezcla resultante se acidificó a pH 3 con HCl 1N. Se recogió ácido 1-(2-fluorobencil)-5-metil-1H-pirazol-3-carboxílico por filtración al vacío (rendimiento 92 %).
Etapa 3: Síntesis de 1-(2-fluorobencil)-5-metil-1H-pirazol-3-carbonitrilo
A una suspensión de ácido 1-(2-fluorobencil)-5-metil-1H-pirazol-3-carboxílico, 2-metilpropan-2-amina (3 equiv.), y trietilamina (2 equiv.) en acetato de etilo se añadió anhídrido W-propilfosfónico (T3P, solución a 50 % en acetato de etilo, 3 equiv.). La solución amarilla resultante se calentó a 65 °C durante 2,5 h. El disolvente se retiró al vacío. Se añadió tricloruro de fosforilo (12 equiv.) y la mezcla resultante se agitó a 70 °C durante 1 h 40 min. La reacción se desactivó vertiéndola cuidadosamente a una mezcla de agua y hielo, se neutralizó a pH 7 mediante la adición de solución de bicarbonato de sodio saturada y se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación por cromatografía en gel de sílice (gradiente de 10 % acetato de etilo/hexanos) produjo 1-(2-fluorobencil)-5-metil-1H-pirazol-3-carbonitrilo (rendimiento 49 %).
Etapa 4: Síntesis de 1-(2-fluorobenc¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-3-carbox¡m¡dam¡da
Una soluc¡ón de 1-(2-fluorobenc¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-3-carbon¡tr¡lo en metanol se trató con metóx¡do de sod¡o (soluc¡ón a 25 % en peso en MeOH, 5 equ¡v.) y se ag¡tó durante 24 h. Se añad¡ó cloruro de amon¡o (10 equ¡v.). Al cabo de 26 h, la mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío y se repart¡ó entre b¡carbonato de sod¡o sem¡saturado y acetato de et¡lo. Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre sulfato de sod¡o, se f¡ltraron, y el d¡solvente se ret¡ró al vacío. El producto bruto quedó contam¡nado con mater¡al de part¡da deb¡do a la reacc¡ón ¡ncompleta. Este mater¡al se somet¡ó a cond¡c¡ones s¡m¡lares proporc¡onando 1-(2-fluorobenc¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-3-carbox¡m¡dam¡da (rend¡m¡ento 92 %). Etapa 5: Síntes¡s del compuesto de referenc¡a I-410
Una suspens¡ón de 1-(2-fluorobenc¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-3-carbox¡m¡dam¡da se trató con (Z)-3-etox¡-2-fluoro-3-oxoprop-1-en-1-olato de sod¡o (ver tamb¡én el proced¡m¡ento general A, etapa 4, 3,0 equ¡v.) y se calentó a 90 °C durante 1 hora. Después de enfr¡ar a temperatura amb¡ente, la mezcla de reacc¡ón se neutral¡zó med¡ante la ad¡c¡ón de HCl (soluc¡ón 1,25 M en EtOH). La suspens¡ón de color tostado resultante se concentró al vacío. El res¡duo se repart¡ó entre d¡clorometano y agua y la capa acuosa se extrajo nuevamente con d¡clorometano. Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre sulfato de sod¡o, se f¡ltraron, y el d¡solvente se ret¡ró al vacío. La tr¡turac¡ón con d¡clorometano produjo el compuesto del título (206 mg, rend¡m¡ento 62 %) como un sól¡do blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-da) 812,9 (brs, 1 H), 8,07 (brs, 1 H), 7,38 (ap. q, 1 H), 7,25 (m, 1 H), 7,18 (ap. t, 1 H), 7,11 (m, 1 H), 6,72 (s, 1 H), 5,44 (s, 2 H), 2,30 (s, 3 H).
Compuesto de referenc¡a I-411
El compuesto del título se s¡ntet¡zó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntes¡s de 4-cloro-5-fluoro-2-(1-(2-fluorobenc¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-3-¡l) p¡r¡m¡d¡na
El producto ¡ntermed¡o se generó usando el proced¡m¡ento descr¡to para la síntes¡s del producto ¡ntermed¡o 1, salvo por el uso del compuesto de referenc¡a I-410 como la p¡r¡m¡dona de part¡da. Se obtuvo un sól¡do blanquec¡no (210 mg, rend¡m¡ento 96 %), y el conten¡do se usó s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.
Etapa 2: Síntes¡s del compuesto de referenc¡a I-411
El compuesto del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento general B, salvo que el ác¡do 1-((met¡lam¡no)met¡l)c¡clopropanocarboxíl¡co (como la sal de HCl) fue el react¡vo de am¡na. La mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có a pH 3 y el prec¡p¡tado resultante se recog¡ó por f¡ltrac¡ón al vacío proporc¡onando el compuesto deseado, el compuesto de referenc¡a I-411 (48 mg, rend¡m¡ento 93 %) como un sól¡do blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 812,3 (s, 1 H), 8,16 (d, 1 H), 7,36 (ap. q, 1 H), 7,25 (m, 1 H), 7,17 (ap. t, 1 H), 6,99 (ap. t, 1 H), 6,61 (s, 1 H), 5,38 (s, 2 H), 3,97 (s, 2 H), 3,22 (d, 3 H), 2,29 (s, 3 H), 1,13 (m, 2 H), 1,01 (m, 2 H).
Compuesto de referenc¡a I-412
El compuesto del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento general B, salvo que el ác¡do (2R,3S)-3-met¡lp¡per¡d¡n-2-carboxíl¡co fue el react¡vo de am¡na, y el conten¡do se calentó a 100 °C durante 20 h. El mater¡al bruto se pur¡f¡có med¡ante HPLC de fase ¡nversa (grad¡ente de 25-80 % aceton¡tr¡lo/agua con TFA 0,1 %) proporc¡onando el compuesto deseado, el compuesto de referenc¡a I-412 (12 mg, rend¡m¡ento 23 %) como un sól¡do blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,33 (d, 1 H), 7,36 (ap. q, 1 H), 7,15 (m, 2 H), 7,06 (ap. t, 1 H), 6,89 (s, 1 H), 5,52 (s, 2 H), 5,36 (d, 1 H), 4,58 (br s, 1 H), 3,83 (ap. t, 1 H), 2,36 (s, 3 H), 1,99 (m, 1 H), 1,96 (m, 1 H), 1,79 (m, 2 H), 1,58 (m, 1 H), 1,24 (d, 3 H).
Compuesto de referenc¡a I-413
El compuesto del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento general B, salvo que el ser¡nol (10 equ¡v.) fue el react¡vo de am¡na, y no se usó tr¡et¡lam¡na, y el conten¡do se calentó a 90 °C durante 40 m¡n y a cont¡nuac¡ón a 100 °C durante 20 m¡n. La mezcla de reacc¡ón se ac¡d¡f¡có a pH 3 y el prec¡p¡tado resultante se recog¡ó por f¡ltrac¡ón al vacío proporc¡onando el compuesto deseado, el compuesto de referenc¡a I-413 (46 mg, rend¡m¡ento 88 %) como un sól¡do blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 88,11 (d, 1 H), 7,35 (ap. q, 1 H), 7,24 (m, 1 H), 7,16 (ap. t, 1 H), 7,03 (d, 1 H), 6,92 (ap. t, 1 H), 6,64 (s, 1 H), 5,40 (s, 2 H), 4,71 (t, 2 H), 4,24 (m, 1 H), 3,56 (m, 4 H), 3,12 (s, 3 H).
Compuesto de referenc¡a I-414
El c o m p u e s to de l títu lo se p repa ró s¡gu¡endo el proced¡m ¡en to g e ne ra l B, sa lvo que el 2 -(a m ¡nom e t¡l)-1 ,1 ,1 ,3 ,3 ,3 -h e xa flu o ro p ro p a n -2 -o l (2 ,2 equ¡v.) fue el react¡vo de am ¡na, se usa ron 5 eq u¡va len te s de tr¡et¡lam ¡na y el con ten ¡do se c a le n tó a 90 °C d u ra n te 18 h y a con t¡nuac¡ón a 100 °C d u ran te 4 d. El m ater¡a l b ru to se pur¡f¡có m ed¡an te H P LC de fase inversa (gradiente de 35-80%acetonitrilo/agua con TFA 0,1 %) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-414 (35 mg, rendimiento 58 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, MeOH-d4) 88,29 (d, 1 H), 7,35 (ap. q, 1 H), 7,13 (m, 3 H), 6,79 (s, 1 H), 5,50 (s, 2 H), 4,29 (s, 2 H), 2,36 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-416
El compuesto del título se sintetizó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 3-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-1,2,4-triazin-5(4H)-ona.
Una solución de clorhidrato de 1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-carboximidamida en etanol absoluto se trató con hidrato de hidrazina (1,5 equiv.) a temperatura ambiente. Al cabo de 45 min, se añadió 2-oxoacetato de etilo (solución a 50 % en peso en tolueno, 3,0 equiv.) y la solución resultante se calentó a 50-60 °C durante 65 h. La mezcla de reacción se concentró a continuación al vacío, se recogió en diclorometano, se filtró y se concentró al vacío proporcionando un aceite de color naranja. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (10-20 % acetonitrilo-metanol (7:1) en diclorometano) proporcionó el compuesto deseado 3-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-1,2,4-triazin-5(4H)-ona (320 mg, rendimiento 73 %) como un sólido de color tostado claro.
1H-RMN (500 MHz, CDCla) 88,54 (d, 1 H), 7,84 (br s, 1 H), 7,44 (s, 1 H), 7,31 (m, 1 H), 7,12-7,04 (m, 3 H), 6,63 (d, 1 H), 5,95 (s, 2 H).
Etapa 2: Síntesis de 3-(3-(5-cloro-1,2,4-triazin-3-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol
Se trató 3-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-1,2,4-triazin-5(4H)-ona con tricloruro de fosforilo (42 equivalentes, exceso). La mezcla resultante se calentó a 65 °C durante 4 h. La suspensión de color tostado resultante se secó por soplado en una corriente de nitrógeno y se secó azeotrópicamente con tolueno. La cloro-triazina se utilizó en la siguiente etapa sin manipulación adicional.
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-416
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el serinol (10 equiv.) fue el reactivo de amina, se usó 3-(3-(5-cloro-1,2,4-triazin-3-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol en lugar del producto intermedio 1, no se usó trietilamina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 24 h como una solución en dioxano/DMSO (7.5:1). La mezcla de reacción se diluyó con agua, se neutralizó a pH 4 con solución de HCl 1N y se extrajo con diclorometano/isopropanol (4:1). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente 10 70 % acetonitrilo/agua con TFA a 0,1 %) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-416 (5,2 mg, rendimiento 9,8 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,84 (d, 1 H), 8,35 (s, 1 H), 7,74 (s, 1 H), 7,32 (ap. q, 1 H), 7,11 (m, 1 H), 7,08 (ap. t, 1 H), 6,99 (ap. t, 1 H), 6,96 (d, 1 H), 6,06 (s, 2 H), 4,62 (ap. quintuplete, 1 H), 3,84 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-417
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la glicinamida (como la sal de HCl, 3,0 equiv.) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C durante22h. La mezcla de reacción se acidificó a pH 4 con una solución de HCl 1N y los sólidos resultantes se recogieron por filtración al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-417 (110 mg, rendimiento 94 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 89,09 (d, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 7,83 (ap. t, 1 H), 7,51 (br s, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 7,31 (ap. q, 1 H), 7,21 (m, 1 H), 7,18 (d, 1 H), 7,12-7,08 (m, 2 H), 6,81 (ap. t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 4,01 (d, 2 H).
Compuesto de referencia I-418
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-amino-4,4,4-trifluorobutanoico (3 equiv.) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 3,5 horas, a continuación a 120 °C durante 18 h como una solución en dioxano/DMSO (2:1). Se añadieron 2 equivalentes adicionales del producto intermedio 1 a la reacción, y el contenido se agitó a 120 °C durante 4 d más. Se usó una mezcla de diclorometano:isopropanol (4:1) como disolvente durante la preparación. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (5 % metanol/diclorometano isocrático) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-418 (38 mg, rendimiento 10 %) como un sólido blanquecino.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,65 (br. s., 1 H), 9,09 (d, 1 H), 8,35 (d, 1 H), 8,29 (d, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,32 (q, 1 H), 7,26 (d, 1 H), 7,24-7,19 (m, 1 H), 7,10 (t, 1 H), 6,83 (t, 1 H), 5,91 (s, 2 H), 5,53 (br. s., 1 H), 2,96-2,85 (m, 2 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-419
Una solución del compuesto de referencia I-418 en diclorometano se trató con W,W-diisopropiletilamina (2,0 equiv.) seguido de hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1-il)-W,W,W',W'-tetrametiluronio (HAT<u>, 1,2 equiv.). Al cabo de 15 min, se añadió amoniaco (solución 0,5 N en dioxano, 2,0 equiv.) y la suspensión marrón claro resultante se agitó durante 1,5 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se extrajo con diclorometano/2-propanol (4:1). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-3 % metanol en diclorometano) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-419 (20 mg, rendimiento 57 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-da) 89,10 (d, 1 H), 8,34 (d, 1 H), 8,24 (d, 1 H), 7,51 (m, 2 H), 7,32 (ap. q, 1 H), 7,25 (d, 1 H), 7,22 (ap. t, 1 H), 7,10 (ap. t, 1 H), 7,06 (br s, 1 H), 6,82 (ap. t, 1 H), 5,91 (s, 2 H), 5,55 (br s, 1 H), 2,77 (dd, 1 H), 2,67 (dd, 1 H).
Compuesto de referencia I-420
El compuesto del título se preparó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 2-(dicianometil)-2-metilmalonato de dietilo.
Una mezcla de 2-bromo-2-metilmalonato de dietilo (1 equiv.), malononitrilo (1 equiv.) y t-butóxido de potasio (1 equiv.) en THF se calentó a reflujo durante 15 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro de amonio y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró dando un aceite. El aceite se purificó por cromatografía en gel de sílice (gradiente de 10-15 % acetato de etilo en hexano) dando 2-(dicianometil)-2-metilmalonato (5,76 g, rendimiento 32 %) como un aceite incoloro.
1H RMN (500 MHz, CDCfe) 8 ppm4,53(s, 1 H), 4 ,27-4,39 (m, 4 H), 1,81 (s, 3 H), 1,33 (t, 6 H).
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-420
Una mezcla de clorhidrato de 1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-carboximidamida (generado en la etapa 3 del procedimiento general A, usando 1-(isoxazol-3-il)etanona en la etapa 1 y 2-fluorobenzilhidrazina en la etapa 2) (1 equiv.), 2-(dicianometil)-2-metilmalonato de dietilo (1,15 equiv.) y bicarbonato de potasio (2 equiv.) en t-BuOH se calentó a reflujo durante 5 h. Después de enfriar, se añadió agua a la mezcla de reacción y se agitó durante 30 min. El precipitado se filtró, se lavó con una cantidad mínima de agua y dietil éter y se secó toda la noche bajo alto vacío dando el compuesto de referencia I-420 (385 mg, rendimiento 52 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,30 (s, 1 H), 9,10 (d, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,29 - 7,36 (m, 1 H), 7,18-7,26 (m, 2 H), 7,08-7,14 (m, 1 H), 6,81 -6,90 (m, 1 H), 6,65 (br. s., 2 H), 5,88 (s, 2 H), 4 ,04-4,16 (m, 2 H), 1,59 (s, 3 H), 1,11 (t, 3 H).
Compuesto de referencia I-421
Se añadió amoniaco (7,0 M en MeOH) (200 equiv.) al compuesto de referencia I-420 (1 equiv.). La mezcla de reacción se calentó a 50 °C durante 16 h. La solución resultante se concentró a continuación al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (5-60 % acetonitrilo en agua con TFA a 1 %) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-421 (24 mg, rendimiento 63 %) como un sólido blanco.
1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 11,35 (br. s., 1 H), 9,08 - 9,13 (m, 1 H), 7,47 (s, 1 H), 7,43 (s, 1 H), 7,28 - 7,38 (m, 1 H), 7,23 - 7,27 (m, 1 H), 7,17 - 7,23 (m, 2 H), 7,06 - 7,14 (m, 1 H), 6,77 - 7,00 (m, 3 H), 5,91 (s, 2 H), 1,56 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-422
Se añadió ciclopropil amina (150 equiv.) al compuesto de referencia I-420 (1 equiv.) y la mezcla de reacción se calentó a 50 °C durante 30 h. La solución resultante se concentró a continuación al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (25-50 % acetonitrilo en agua con TFA a 1 %) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-422 (29 mg, rendimiento 57 %) como un sólido blanco.
1H R M N (400 M Hz, DMSO-cfe) 8 ppm 11 ,29 (br. s., 1 H), 9,11 (d, 1 H), 7 ,59 - 7 ,66 (m, 1 H), 7 ,42 (s, 1 H), 7 ,29 - 7 ,37 (m, 1 H), 7 ,16 - 7 ,28 (m , 2 H), 7 ,06 - 7 ,15 (m, 1 H), 6 ,65 - 6 ,89 (m, 3 H), 5 ,90 (s, 2 H), 2 ,59 - 2 ,69 (m, 1 H), 1 ,54 (s, 3 H), 0 ,53 - 0 ,65 (m, 2 H), 0 ,39 - 0 ,52 (m , 2 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-423
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 4-(piperidin-4-ilsulfonil)morfolina (como la sal de TFA, 1,7 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 105 °C durante 12 h. El acetato de etilo fue el disolvente usado para la preparación. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 1 a 5 % metanol en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-423 (32,7 mg, rendimiento 35 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm: 8,48 (d, 1 H), 8,25 (d, 1 H), 7,30 (s, 1 H), 7,20 - 7,25 (m, 1 H), 7,03 - 7,08 (m, 1 H), 6.96 - 7,01 (m, 1 H), 6,83-6,88 (m, 1 H), 6,60 (d, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,83 (d, 2 H), 3,76 (m, 4 H), 3,41 (m, 4 H), 3,23 -3,29 (m, 1 H), 3 ,06-3 ,11 (m, 2 H), 2 ,20-2,26 (m, 2 H), 1 ,91-2 ,03 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-424
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido trans-4-(trifluorometil)pirrolidina-3-carboxílico (como la sal de TFA, 1,5 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 105 °C durante 3 h. Se usó una mezcla de diclorometano:isopropanol (5:1) como disolvente para la preparación. La concentración de la capa orgánica seca y filtrada al vacío proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-424 (108,3 mg, rendimiento 89 %) como un sólido blanquecino.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm: 8,50 (d, 1 H), 8,18 (d, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 7 ,19 -7 ,25 (m, 1 H), 6 ,98 -7 ,07 (m, 3 H), 6,65 (d, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 4,26 (m, 1 H), 4,11 -4 ,18 (m, 2 H), 4 ,03 -4 ,09 (m, 1 H), 3 ,48 -3 ,55 (m, 1 H), 3 ,39 -3 ,54 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-425
A una suspensión del compuesto de referencia I-366 (1 equiv.) en diclorometano se añadió cloruro de ácido ciclopropanocarboxílico (1,08 equiv.) y trietilamina (1,1 equiv.). Después de agitar a temperatura ambiente durante 24 horas, la reacción siguió siendo heterogénea e incompleta según análisis mediante LC/MS. Se añadieron 4 equivalentes adicionales de cloruro ácido y 1,8-diazabicicloundec-7-eno, y la reacción se calentó después a 60 °C durante 1 h, tras lo cual la reacción era de color tostado y completamente homogénea. La reacción se diluyó en agua, se acidificó mediante la adición de una solución de ácido clorhídrico 1N, se extrajo con diclorometano (3 veces), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró proporcionando un sólido blanco. La purificación se logró mediante gel de sílice utilizando metanol a 1 a 8 % en diclorometano durante 38 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-425 (40,4 mg, rendimiento 71 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm: 8,47 (d, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 7,82 (br. s, 1 H), 7,29 (s, 1 H), 7 ,17 -7 ,23 (m, 1 H), 7,01 - 7,06 (m, 1 H), 6,95 - 6,99 (m, 1 H), 6,81 - 6,87 (m, 1 H), 6,60 (d, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,79 - 4,84 (m, 2 H), 3,83 -3.94 (m, 1 H), 3 ,08 -3 ,15 (m, 2 H), 2 ,23 -2 ,29 (m, 2 H), 2,01 -2 ,06 (m, 1 H), 1,27 (m, 2 H), 1,19 (m, 2 H), 0 ,99-1 ,04 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-426
A una suspensión del compuesto de referencia I-366 (1 equiv.) en diclorometano se añadió anhídrido acético (1,25 equiv.) y 1,8-diazabicicloundec-7-eno (1,25 equiv.). Después de agitar a temperatura ambiente durante 24 horas, la reacción siguió siendo heterogénea e incompleta según lo determinado mediante LC/MS. Se añadieron 4 equivalentes adicionales de anhídrido acético y 1,8-diazabicicloundec-7-eno, y la reacción se calentó después a 60 °C durante 1 h, tras lo cual la reacción era de color tostado y completamente homogénea. La reacción se diluyó en agua, se acidificó mediante la adición de una solución de ácido clorhídrico 1N, se extrajo con diclorometano (3 veces), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró proporcionando un sólido blanco. La purificación se logró mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 1 a 8 % metanol en diclorometano durante 38 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-426 (24,7 mg, rendimiento 44 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm: 8,47 (d, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 7,85 (br. s, 1 H), 7,29 (s, 1 H), 7 ,18 -7 ,25 (m, 1 H), 7,02 - 7,08 (m, 1 H), 6,96 - 7,02 (m, 1 H), 6,84 - 6,89 (m, 1 H), 6,61 (d, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,80 - 4,90 (m, 2 H), 3,85 -3.95 (m, 1 H), 3 ,08 -3 ,17 (m, 2 H), 2 ,23-2 ,31 (m, 2 H), 2,17 (s, 3 H), 1 ,97 -2 ,08 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-427
El compuesto del título se preparó mediante el procedimiento general B, salvo que la pirrolidin-3-sulfonamida (1,35 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 105 °C durante 2 h. Después del enfriamiento, la reacción se vertió a una mezcla 1:1 de agua y acetato de etilo, y el precipitado resultante se filtró y se secó al vacío suministrado el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-427 (46,7 mg, rendimiento 39 %) como un sólido blanquecino.
1H RMN (500 MHz, DMSO-de) 8 (ppm): 9,05 - 9,13 (m, 1 H), 8,24 - 8,31 (m, 1 H), 7,51 - 7,57 (m, 1 H), 7,28 - 7,37 (m, 1 H), 7,18 - 7,27 (m, 2 H), 7,06 - 7,17 (m, 3 H), 6,76 - 6,87 (m, 1 H), 5,87 - 5,93 (m, 2 H), 4,00 - 4,09 (m, 2 H), 3,84 -3.97 (m, 2 H), 3,75 - 3,84 (m, 1 H), 2,29 - 2,42 (m, 2 H).
C o m p u e s to de re fe re nc ia I-428
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la dietanolamida (1,3 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 12 h. Se usó una mezcla de diclorometano:isopropanol (5:1) como disolvente para la preparación. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 1 a 8 % metanol en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-428 (24,7 mg, rendimiento 26 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 (ppm): 8,48 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,24 (s, 1 H), 7,18 - 7,23 (m, 1 H), 7,01 - 7,06 (m, 1 H), 6,96 - 7,01 (m, 1 H), 6,87-6,92 (m, 1 H), 6,58 (d, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 3,99 (m, 4 H), 3,89 (m, 4 H), 3,30 (br. s, 2 H). Compuesto de referencia I-429
A una solución del compuesto de referencia I-427 (1 equiv.), en diclorometano se añadió cloruro de ácido ciclopropanocarboxílico (6 equiv.) seguido de 1,8-diazabicicloundec-7-eno (8 equiv.). La reacción se calentó durante 1 h a 100 °C, después de lo cual se enfrió, se diluyó en agua y solución de ácido clorhídrico 1 M, se extrajo con diclorometano (2 veces), se concentró y se purificó directamente mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1 a 8 % metanol en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-429 (26,5 mg, rendimiento 70 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm: 8,47 (d, 1 H), 8,18 (d, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 7 ,18 -7 ,23 (m, 1 H), 7 ,01 -7 ,06 (m, 1 H), 6,96 - 7,01 (m, 1 H), 6,83 - 6,88 (m, 1 H), 6,60 (d, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 4,40 - 4,47 (m, 2 H), 4,04 - 4,15 (m, 2 H), 3,90 -3 ,97 (m, 1 H), 2 ,65 -2 ,73 (m, 1 H), 2 ,45 -2 ,53 (m, 1 H), 1,30 (m, 1 H), 1,17 (m, 2 H), 0,99 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-430
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el (2R,3R)-2-(hidroximetil)pirrolidin-3-ol (como la sal de TFA, 1,7 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 2 h. Tras el enfriamiento, la reacción se diluyó con agua y metanol, y el precipitado resultante se filtró, se lavó con agua, y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-430 (79,3 mg, rendimiento 64 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 (ppm): 9,09 (d, 1 H), 8,24 (d, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,30 - 7,36 (m, 1 H), 7,19 - 7,25 (m, 2 H), 7 ,08 -7 ,13 (m, 1 H), 6 ,82 -6 ,87 (m, 1 H), 5,90 (d, 1 H), 5,85 (d, 1 H), 5,23 (d, 1 H), 4,71 (br. s, 1 H), 4 ,35 -4 ,42 (m, 1 H), 4 ,15 -4 ,20 (m, 1 H), 3 ,77 -3 ,87 (m, 2 H), 3 ,64 -3 ,74 (m, 2 H), 2 ,04 -2 ,09 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-431
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la diisopropanolamina (1 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 24 h. Se usó acetato de etilo como disolvente para la preparación. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 1 a 8 % metanol en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-431 (47,1 mg, rendimiento 42 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 (ppm): 8,72 (d, 1 H), 8,11 (d, 1 H), 7,35 (s, 1 H), 7,23 - 7,28 (m, 1 H), 7,05 - 7,11 (m, 1 H), 7,01 - 7,05 (m, 1 H), 6,83 - 6,88 (m, 2 H, 2 desplazamientos isocronos), 5,96 (d, 1 H), 5,92 (d, 1 H), 4,10 - 4,21 (m, 2 H), 3,90 - 3,97 (m, 2 H), 3,61 - 3,67 (m, 2 H), 1,21 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-432
El compuesto del título se preparó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de ácido 2-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)etanosulfónico
El producto intermedio se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la taurina (1,3 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 2 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 8 h. Después del enfriamiento, la reacción se diluyó con solución de HCl 1N, se filtró, se lavó con agua, y se secó al vacío proporcionando el producto intermedio deseado, ácido 2-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)etanosulfónico (60,2 mg, rendimiento 64 %) como un sólido blanco. El producto intermedio se usó sin purificación adicional.
Etapa 2: Síntesis de cloruro de 2-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)etanosulfonilo
Una suspensión de ácido 2-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)etanosulfónico (1 equiv.) y cloruro de tionilo (5 equiv.) en diclorometano se agitó a temperatura ambiente, después de lo cual se añadieron 2 gotas de DMF. Se calentó la suspensión a 60 °C durante 12 horas, después de lo c u a l e l a n á l i s i s d e L C / M S in d ic ó q u e s e h a b í a f o r m a d o e l c l o r u r o d e s u l f o n i lo . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c o n c e n t r ó a s e q u e d a d p r o p o r c io n a n d o 90 m g d e u n s ó l id o b l a n q u e c in o .
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-432
A una suspensión del cloruro de 2-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)etanosulfonilo bruto en tetrahidrofurano se añadió una solución acuosa a 50 % de hidroxilamina (10 equiv.). La reacción se volvió homogénea instantáneamente, y el análisis mediante LC/MS demostró que se había completado. La reacción se concentró hasta un tertio de su volumen y se purificó directamente en gel de sílice usando de 3 a 10 % de metanol en diclorometano durante 45 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-432 (8,2 mg, rendimiento 25 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 (ppm): 8,76 (d, 1 H), 8,13 (d, 1 H), 7,60 (s, 1 H), 7,25 - 7,31 (m, 1 H), 7,07 - 7,13 (m, 1 H), 7,03 - 7,07 (m, 1 H), 6,89 (d, 1 H), 6,83 - 6,88 (m, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,07 (t, 2 H), 3,62 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-433
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la piperidin-3,5-diona (como la sal de TFA, 1,4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 1 h. Se usó acetato de etilo como disolvente para la preparación. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 3 a 20 % metanol en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-433 (45,6 mg, rendimiento 44 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 (ppm): 8,77 (s, 1 H), 8,30 (d, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,26 - 7,32 (m, 1 H), 7,07 - 7,13 (m, 1 H), 7,03 - 7,07 (m, 1 H), 6,94 (d, 1 H), 6,83 - 6,88 (m, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,58 (s, 4 H).
Compuesto de referencia I-434
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 4-(hidroximetil)piperidin-4-ol (como la sal de TFA, 1,4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 1 h. Tras el enfriamiento, la reacción se diluyó con agua y solución de HCl 1N, y el precipitado resultante se filtró, se lavó con agua, y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-434 (88,5 mg, rendimiento 82 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 (ppm): 8,77 (d, 1 H), 8,15 (d, 1 H), 7,43 (s, 1 H), 7,23 - 7,30 (m, 1 H), 7,06 - 7,12 (m, 1 H), 7,00 - 7,05 (m, 1 H), 6,91 (d, 1 H), 6,79 - 6,84 (m, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 4,49 - 4,57 (m, 2 H), 3,49 - 3,57 (m, 2 H), 3,40 (s, 2 H), 1,65 - 1,71 (m, 2 H), 1,77 - 1,84 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-435
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el (3R,5S)-5-(hidroximetil)pirrolidin-3-ol (2,7 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 30 min. Tras el enfriamiento, la reacción se diluyó con agua y metanol, y el precipitado resultante se filtró, se lavó con agua, y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-435 (77,3 mg, rendimiento 87 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 (ppm): 8,75 (d, 1 H), 8,12 (d, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 7,24 - 7,28 (m, 1 H), 7,06 - 7,10 (m, 1 H), 7,01 - 7,05 (m, 1 H), 6,90 (d, 1 H), 6,80 - 6,85 (m, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 4,63 - 4,68 (m, 1 H), 4,53 - 4,57 (m, 1 H), 3,81 - 3,94 (m, 3 H), 3 ,73 -3 ,80 (m, 1 H), 2,10 - 2,25 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-437
Este compuesto se preparó en dos etapas
Etapa 1: producto intermedio cetal
A una suspensión del cloruro de 2-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)etanosulfonilo bruto (síntesis descrita en la etapa 2 del procedimiento para preparar el compuesto de referencia I-432 (1 equiv.) en dioxano se añadió (S)-(2,2-dimetil-1,3-dioxolan-4-il)metanamina (2 equiv.). La reacción se agitó durante 24 h, después de lo cual la mezcla de reacción se diluyó en diclorometano/isopropanol 5:1 y se acidificó mediante la adición de ácido clorhídrico 1 M, se extrajo con diclorometano/isopropanol 5:1 (3 x 30 ml), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró proporcionando un residuo. La purificación se logró por cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 7 a 12 % metanol en diclorometano durante 45 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-43 (31,0 mg, rendimiento 42 %) como un sólido blanco.
1 H R M N ( 500 M H z , C D 3 O D ) 8 ( p p m ) : 8 , 78 (d , 1 H ) , 8 , 13 (d , 1 H ) , 7 , 52 ( s , 1 H ) , 7 , 26 - 7 , 32 ( m , 1 H ) , 7 , 10 - 7 , 15 ( m , 1 H ) , 7 , 04 - 7 , 08 ( m , 1 H ) , 6 , 91 (d , 1 H ) , 6 , 80 - 6 , 85 ( m , 1 H ) , 6 , 00 ( s , 2 H ) , 4 , 16 - 4 , 20 ( m , 1 H ) , 4 , 03 - 4 , 12 ( m , 2 H ) , 3 , 98 - 4 , 02 ( m , 1 H ) , 3 , 70 - 3 , 74 ( m , 1 H ) , 3 , 45 - 3 , 52 ( m , 2 H ) , 3 , 22 ( d , 2 H ) , 1 , 34 ( s , 3 H ) , 1 , 27 ( s , 3 H ) .
E t a p a 2 : C o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 437
A una solución del producto intermedio preparado en la etapa 1 (1 equiv.) en diclorometano se añadió una solución 4 M en dioxano de cloruro de hidrógeno (20 equiv.). Al cabo de 1 h, la reacción se concentró a sequedad, se diluyó en agua, se extrajo con diclorometano/isopropanol 5:1 (3 veces), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró proporcionando un residuo. La purificación se logró mediante cromatografía en gel de sílice proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-437 (10,3 mg, rendimiento 38,2 %) como un sólido blanquecino.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 (ppm): 8,77 (d, 1 H), 8,12 (d, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,26 - 7,32 (m, 1 H), 7,08 - 7,13 (m, 1 H), 7,03 - 7,08 (m, 1 H), 6,93 (d, 1 H), 6,81 - 6,86 (m, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,03 - 4,13 (m, 2 H), 3,70 - 3,75 (m, 1 H), 3,47 - 3,54 (m, 3 H), 3,24 - 3,29 (m, 2 H), 3,08 - 3,13 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-438
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 4-hidroxipiperidin-4-carboxamida (1,4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 30 min. El acetato de etilo se usó como disolvente para la preparación, y la purificación se logró por precipitación del producto por trituración de una solución de acetonitrilo del producto bruto con agua. El precipitado resultante se filtró y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-438 (26,3 mg, rendimiento 26 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-de) 8 (ppm): 9,08 (d, 1 H), 8,29 (d, 1 H), 7,55 (s, 1 H), 7 ,30-7 ,35 (m, 2H, 2 desplazamientos isocronos), 7,26 (d, 2 H), 7,19 - 7,25 (m, 1 H), 7,16 (br. s, 1 H), 7,08 - 7,13 (m, 1 H), 6,79 - 6,84 (m, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,39 (m, 2 H), 3 ,34 -3 ,39 (m, 2 H), 1,95-2,01 (m, 2 H), 1,58 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-439
A una suspensión del cloruro de 2-((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)etanosulfonilo (síntesis descrita en la etapa 2 del procedimiento para el compuesto de referencia I-432, 1 equiv.) en dioxano se añadió etanolamina (2,2 equiv.). La reacción se agitó durante 24 h a temperatura ambiente, después de lo cual la mezcla de reacción se diluyó en diclorometano/isopropanol 5:1 y se acidificó mediante la adición de ácido clorhídrico 1 M, se extrajo con diclorometano/isopropanol 5:1 (3 veces), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró proporcionando un residuo. La purificación se logró mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 3 a 8 % metanol en diclorometano durante 45 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-439 (31,3 mg, rendimiento 65 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-de) 8 (ppm): 9,09 (d, 1 H), 8,24 (d, 1 H), 7,78 - 7,83 (m, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,30 - 7,35 (m, 1 H), 7,21 -7 ,25 (m, 2 H), 7,17 (d, 1 H), 7 ,08 -7 ,13 (m, 1 H), 6,81 -6 ,86 (m, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,80 (t, 1 H), 3,84 (q, 2 H), 3,44 (q, 2 H), 3,39 (t, 2 H), 3,03 (q, 2 H).
Compuesto de referencia I-440
El compuesto del título se sintetizó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 1-(benziloxi)-N-(1-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-
-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)azetidin-3-il)ciclopropanocarboxamida
El producto intermedio se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la N-(acetidin-3-il)-1-(benciloxi)ciclopropanocarboxamida (como la sal de TFA, 1,2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 2 h. Después de enfriar, la mezcla de reacción se diluyó con agua, y el precipitado resultante se filtró, se lavó con agua, y se secó al vacío proporcionando el producto intermedio deseado, 1-(benziloxi)-N-(1-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)azetidin-3-il)ciclopropanocarboxamida (104,3 mg, rendimiento 86 %) como un sólido blanco.
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-440
A una suspensión de 1-(benziloxi)-N-(1-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)azetidin-3-il)ciclopropanocarboxamida en etanol se añadió paladio a 10 % sobre carbono (0,1 equiv). La mezcla de reacción se evacuó hasta sequedad y se aplicó un balón de hidrógeno. A efectos de solubilidad, también se añadió acetato de etilo. Al cabo de 24 h, se observó una mezcla de material de partida, producto y otros subproductos. La mezcla de reacción se filtró a través de celita, a continuación se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 1 a 8 % diclorometano en metanol durante 60 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-440 (3,8 mg, rendimiento 5 %). Varias fracciones posteriores que contenían el producto deseado quedaron contaminadas con un subproducto de salida próxima y se desecharon.12
1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 (ppm): 8,44 (d, 1 H), 8,09 (d, 1 H), 7,92 (br. s, 1 H), 7,20 - 7,25 (m, 1 H), 6,93 - 7,03 (m, 2 H, 2 transiciones isócronas), 6,83 - 6,88 (m, 2 H), 6,56 (d, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 4,81 - 4,91 (m, 1 H), 4,55 - 4,63 (m, 1 H), 4 ,05 -4 ,12 (m, 2 H), 2,31 -2 ,36 (m , 1 H), 1 ,33 - 1,37 (m, 2 H), 1 ,04 - 1,09 (m, 2 H).
C o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 441
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-(aminometil)-1H-1,2,4-triazol-5(4H)-ona (1,3 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina y el contenido se calentó a 100 °C durante 12 h. Después de enfriar, la reacción se filtró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 3 a 10 % metanol en diclorometano durante 40 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-441 (12,9 mg, rendimiento 13 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 (ppm): 8,78 (d, 1 H), 8,17 (m, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,25 - 7,31 (m, 1 H), 7,07 - 7,12 (m, 1 H), 7,02 - 7,07 (m, 1 H), 6,88 - 6,93 (m, 2 H, 2 transiciones isocronas), 6,02 (s, 2 H), 4,61 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-442
A una suspensión de 1,2,4-triazolin-3-ona (0,5 equiv.), carbonato de potasio (1,5 equiv.), y yoduro de cobre (I) (0,05 equiv.) en W,A/-dimetilformamida se añadió el producto intermedio 1 (1 equiv.) seguido de trans-1,2-bis-(metilamino)ciclohexano (0,1 equiv.). La reacción se calentó a 100 °C durante 24 h, después de lo cual la reacción se diluyó en agua, se extrajo con acetato de etilo, se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró. Se realizaron dos intentos de purificación mediante cromatografía en gel de sílice (metanol a 5-7 % en diclorometano), dando lugar a un pico correspondiente tres compuestos. La purificación adicional mediante HPLC de fase inversa (5 a 75 % acetonitrilo en agua con adición de ácido trifluoacético a 0,1 % durante 20 minutos) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-442 (0,9 mg, rendimiento 0,8 %) como un sólido blanco. 1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 (ppm): 8,96 (s, 1 H), 8,81 (d, 1 H), 8,12 (s, 1 H), 7,66 (s, 1 H), 7,25 - 7,31 (m, 1 H), 7,09 - 7,15 (m, 1 H), 7,02 - 7,07 (m, 1 H), 6,89 - 6,94 (m, 1 H), 5,98 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-443
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-amino-2-hidroxipropanamida (2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 4 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 6 h. Se usó una mezcla de diclorometano:isopropanol (5:1) como disolvente para la preparación. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 3 a 10 % metanol en diclorometano durante 45 minutos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-443 (17,3 mg, rendimiento 14 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 (ppm): 8,78 (d, 1 H), 8,11 (d, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7 ,27-7 ,31 (m, 1 H), 7 ,09 -7 ,13 (m, 1 H), 7,03 - 7,08 (m, 1 H), 6,95 (d, 1 H), 6,83 - 6,88 (m, 1 H), 5,99 (s, 2 H), 4,37 (dd, 1 H), 4,05 (dd, 1 H), 3,81 (dd, 1 H).
Compuesto de referencia I-444
A una solución de producto intermedio 2 (producto intermedio descrito en la publicación de solicitud de patente WO2012/3405 A1) (1 equiv.) en diclorometano se añadió cloruro de 2,2,2-trifluoroetanosulfonilo (1,08 equiv.) seguido de 1,8-diazabicicloundec-7-eno (1,2 equiv.). La reacción se agitó 16 h a 23 °C, tras lo cual la mezcla de reacción se diluyó en agua y solución de ácido clorhídrico 1N, se extrajo con acetato de etilo (3 veces), se lavó con una solución de ácido clorhídrico 1N (2 veces), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró al vacío. La purificación del material bruto mediante cromatografía en gel de sílice usando gradiente isocrático de 5 % metanol en diclorometano proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-444 (28,9 mg, rendimiento 27 %) como un sólido blanquecino.12
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 (ppm): 8,82 (d, 1 H), 8,24 (br. s, 1 H), 7,57 (s, 1 H), 7,26 - 7,32 (m, 1 H), 7,08 - 7,13 (m, 1 H), 7,03 - 7,08 (m, 1 H), 6,93 - 6,99 (m, 2 H, 2 desplazamientos solapados), 6,79 - 6,85 (br. s, 1 H), 6,01 (s, 2 H), 4,49 - 4,58 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-445
A una suspensión de hidruro de sodio (1,2 equiv.) en tetrahidrofurano anhidro a 23 °C se añadió el producto intermedio-2 (1 equiv.). La reacción se dejó en agitación durante 30 min a 23 °C. Se añadió cloruro de 3,3,3-trifluoropropano-1-sulfonilo (1 equiv.) disuelto en tetrahidrofurano a la mezcla de reacción, la cual se agitó durante 18 h. La mezcla de reacción se diluyó en agua y la solución de ácido clorhídrico 1N, se extrajo con acetato de etilo (3 veces), se lavó con una solución de ácido clorhídrico 1N (2 veces), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró al vacío. La purificación del material bruto mediante HPLC de fase inversa proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-445 (17,1 mg, rendimiento 20 %) como un sólido blanquecino.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm: 8,51 (d, 1 H), 8,25 (br. s, 1 H), 7,20 -7,29 (m, 2 H), 6,98 - 7,08 (m, 3 H), 6,59 (d, 1 H), 5,80 - 5,99 (m, 2 H), 3,64 (br. s, 2 H), 2,69 - 2,88 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-446
A una suspensión de hidruro de sodio (1,2 equiv.) en tetrahidrofurano anhidro a 23 °C se añadió el producto intermedio-21 equiv.). La reacción se dejó en agitación durante 30 min a 23 °C. Se disolvió cloruro de 2-metoxietanosulfonilo (1 equiv.) disuelto en tetrahidrofurano a la mezcla de reacción, la cual se agitó durante 18 h. La mezcla de reacción se diluyó en agua y solución de ácido clorhídrico 1N, se extrajo con acetato de etilo (3 veces), se lavó con una solución de ácido clorhídrico 1N (2 veces), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró. La purificación del material bruto mediante HPLC de fase inversa proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-446 (9,1 mg, rendimiento 13,5 %) como un sólido blanquecino.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm: 8,50 (d, 1 H), 8,37 (br. s, 1 H), 7,19-7,27 (m, 2 H), 6,92 - 7,07 (m, 3 H), 6,61 (d, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 3,85 - 3,92 (m, 2 H), 3,78 (br. s, 2 H), 3,28 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-447
Se añadió cloruro de oxalilo (4 equiv.) a una solución de trietilamina (4 equiv.) y el compuesto de referencia I-214 (1 equiv.) en DCM se mantuvo a 0 °C. La reacción se calentó y se agitó a temperatura ambiente durante 2 h. La reacción se desactivó a continuación mediante la adición de agua, se extrajo con diclorometano, y los extractos orgánicos se concentraron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-447 (3,7 mg, rendimiento 69 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,11 (d, 1 H), 8,90 (d, 1 H), 7,65 (s, 1 H), 7,30-7,37 (m, 1 H), 7,27 (d, 1 H), 7,19 - 7,26 (m, 1 H), 7,11 (t, 1 H), 6,87 (t, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4 ,00-4,07 (m, 2 H), 2,57 (t, 2 H), 2,13-2,21 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-448
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 5-(aminometil)tiofen-2-carboxílico (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 9 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 110 °C como una solución en dioxano/agua (4.5:1) durante 2 d. El contenido se diluyó con acetato de etilo y solución de HCl 1N, y el precipitado resultante se filtró. Los sólidos se recogieron y secaron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-448 (12 mg, rendimiento 27 %) como un sólido. 1H R<m>N (500 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 12,9 (br. s., 1 H), 9,11 (d, 1 H), 8,92 - 9,08 (m, 1 H), 8,35 (t, 1 H), 7,61 - 7,67 (m, 1 H), 7,56 (d, 1 H), 7,30 - 7,38 (m, 1 H), 7,19 - 7,26 (m, 3 H), 7,12 (t, 1 H), 6,92 (t, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 4,88 - 4,97 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-449
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 5-aminopentanoico (4 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 9 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 110 °C como una solución en dioxano/agua (4.5:1) durante 2 d. El contenido se diluyó con acetato de etilo y solución de HCl 1N, y el precipitado resultante se filtró. Los sólidos se recogieron y secaron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-449 (34 mg, rendimiento 84 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 12,01 (s, 1 H), 9,12 (s, 1 H), 8,32 - 8,62 (m, 1 H), 8,27 (br. s., 1 H), 7,61 (br. s., 1 H), 7,29 - 7,40 (m, 1 H), 7,18 - 7,27 (m, 2 H), 7,11 (t, 1 H), 6,88 (t, 1 H), 5,93 (br. s., 2 H), 2,29 (t, 3 H), 1,49 - 1,72 (m, 5 H).
Compuesto de referencia I-450
Una suspensión de 5-fluoro-2-(1 -(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)—pirimidin-4-ol (generado mediante el procedimiento general A, utilizando 1-(isoxazol-3-il)etanona en la etapa 1 y 2-fluorobenzilhidrazina en la etapa 2) (1 equiv.) y metóxido de sodio en metanol (solución 0,5 M, 4 equiv.) se calentó en un recipiente de microondas a 130 °C durante 4 h. La reacción se desactivó con solución de HCl 1N a pH 2, y el residuo resultante se filtró. Los sólidos se lavaron con metanol y se secaron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-450 (1,45 g, 68 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,04 (d, 1 H), 7,71 (s, 1 H), 7,23 - 7,36 (m, 1 H), 7,00 - 7,18 (m, 2 H), 6,90 (t, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 2,56 (s, 3 H)
Compuesto de referencia I-451
E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo s e p r e p a r ó e n 2 e t a p a s :
Etapa 1: Síntesis de 1-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)etanona
El compuesto de referencia I-450 se cargó con tricloruro de fosforilo (60 equiv.) y la mezcla resultante se agitó a 45 °C hasta que la reacción se consideró completa según lo determinado mediante L<c>/MS. A continuación, la reacción se vertió cuidadosamente sobre hielo, se extrajo con 4:1 diclorometano/isopropanol y las capas se separaron. Las partes orgánicas se combinaron, se secaron con sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material se transfirió a la siguiente etapa sin purificación adicional.
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-451
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 1-((metilamino)metil)ciclopropanocarboxílico fue el reactivo de amina, se usó 1-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)etanona en lugar del producto intermedio 1, y el contenido se calentó a 100 °C durante 36 h como una solución en dioxano. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-451 (50 mg, rendimiento 69 %) como un sólido de color tostado.
1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 12,53 (br. s, 1 H), 8,19 (d, 1 H), 7,65 (s, 1 H), 7,33 (d, 1 H), 7,17 - 7,26 (m, 1 H), 7,11 (t, 1 H), 6,86 (t, 1 H), 5,81 (s, 2 H), 4,00 (s, 2 H), 3,24 (d, 3 H), 2,57 (s, 3 H), 1,03 (d, 2 H), 0,74-0,91 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-452 y compuesto de referencia I-453
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 4-(trifluorometil)piperidin-2-carboxílico fue el reactivo de amina, se usó base de Hunig (8 equiv.) en lugar de trietilamina, y el contenido se calentó a 120 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (1:1). El disolvente se retiró al vacío y el residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa, a continuación con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando los compuestos deseados, el compuesto de referencia I-452 (14 mg, rendimiento 15 %) como un sólido y el compuesto de referencia I-453 (18,4 mg, rendimiento 21 %) como un sólido. La asignación de trans frente a cis se realizó de manera arbitraria en el momento de la síntesis; cada diastereómero es una mezcla de racematos.
1H RMN del Compuesto de referencia I-452 (500 MHz, CD3OD) 88,72 - 8,79 (m, 1 H), 8,20 - 8,25 (m, 1 H), 7,41 - 7,47 (m, 1 H), 7,22 - 7,32 (m, 1 H), 6,99 - 7,14 (m, 2 H), 6,87 - 6,92 (m, 1 H), 6,76 - 6,84 (m, 1 H), 5,93 - 5,99 (m, 2 H), 5,59 - 5,76 (m, 1 H), 4,64 - 4,80 (m, 1 H), 3,38 - 3,46 (m, 1 H), 2,55 - 2,63 (m, 1 H), 2,40 - 2,54 (m, 1 H), 2,00 - 2,08 (m, 1 H), 1,84 - 1,96 (m, 1 H), 1,64 - 1,75 (m, 1 H).
1H RMN del Compuesto de referencia I-453 (500 MHz, CD3OD) 88,73 - 8,79 (m, 1 H), 8,23 - 8,33 (m, 1 H), 7,43 (s, 1 H), 7,24 - 7,31 (m, 1 H), 7,07 - 7,13 (m, 1 H), 7,00 - 7,06 (m, 1 H), 6,82 - 6,88 (m, 2 H), 5,96 (s, 2 H), 4,52 - 4,60 (m, 1 H), 4 ,05-4,14 (m, 1 H), 3,75-3,85 (m, 1 H), 2 ,64-2,78 (m, 1 H), 2,41 -2,49 (m, 1 H), 2,12 (dd, 2 H), 1,77- 1,87 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-454
El compuesto del título se preparó por medio del procedimiento general B, salvo que el ácido 3-(trifluorometil)piperidin-2-carboxílico (5 equiv.) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (3:1). El disolvente se retiró al vacío y el residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa, a continuación con un gradiente de 0-15 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-454 (1,6 mg, rendimiento 4 %) como un sólido. 1H<r>M<n>(500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,76 - 8,80 (m, 1 H), 8,28 - 8,33 (m, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,25 - 7,32 (m, 1 H), 7,02 - 7,13 (m, 2 H), 6,84 - 6,90 (m, 2 H), 5,94 - 6,00 (m, 2 H), 5,37 - 5,41 (m, 1 H), 4,35 - 4,43 (m, 1 H), 3,80 - 3,89 (m, 1 H), 2,89 - 3,00 (m, 1 H), 1,93 - 2,08 (m, 3 H), 1,77 - 1,90 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-455
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 3-etilpiperidin-2-carboxílico (1 equiv.) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 18 h como una solución en THF/agua (5:1). El disolvente se retiró al vacío y el residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-455 (5 mg, rendimiento 15 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,81 - 8,86 (m, 1 H), 8,33 - 8,40 (m, 1 H), 7,53 - 7,59 (m, 1 H), 7,27 - 7,35 (m, 1 H), 7,03 - 7,16 (m, 2H), 6,91 - 7,00 (m, 2 H), 5,99 - 6,05 (m, 2 H), 5,39 - 5,47 (m, 1 H), 4,55 - 4,68 (m, 1 H), 3,78 - 3,89 (m, 1 H), 1,75-2,06 (m, 5 H), 1,46- 1,60 (m, 2H), 1,07-1,13 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-362
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que se usó la 1-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)etanona (descrita en la etapa 1 para la síntesis del compuesto de referencia I-451 en lugar del producto intermedio 1, el 2-(aminometil)-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 100 °C durante 36 h como una solución en dioxano. El material bruto resultante se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano seguido de
1H-RMN (500 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 8,54 (s, 1 H), 8,36 (d, 1 H), 8,07 (br. s., 1 H), 7,58 - 7,69 (m, 1 H), 7,33 (q, 1 H), 7,16 - 7,26 (m, 1 H), 7,10 (t, 1 H), 6,92 - 7,02 (m, 1 H), 5,81 (s, 2 H), 4,12 (d, 2 H), 2,56 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-462
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que se usó la 1-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)etanona (descrita en la etapa 1 para la síntesis del compuesto de referencia I-451 en lugar del producto intermedio 1, el 2-aminopropano-1,3-diol fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 100 °C durante 36 h como una solución en dioxano. El material bruto resultante se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano seguido de purificación adicional mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-462 (10 mg, rendimiento 26 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,18 (d, 1 H), 7,65 (d, 1 H), 7,33 (q, 1 H), 7,21 (dd, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,79 (t, 1 H), 5,82 (s, 2 H), 4,72 (t, 2 H), 4,33 (d, 1 H), 3,52 - 3,64 (m, 4 H), 2,57 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-463
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que se usó la 1-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)etanona (descrita en la etapa 1 para la síntesis del compuesto de referencia I-451 en lugar del producto intermedio 1, el ácido (2R,3S)-3-metilpiperidin-2-carboxílico fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 100 °C durante 36 h como una solución en dioxano. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano seguido de purificación adicional mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-463 (6,5 mg, rendimiento 15 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,38 (d, 1 H), 7,69 (s, 1 H), 7,33 (q, 1 H), 7,17-7,27 (m, 1 H), 7,11 (t, 1 H), 6,77 - 6,89 (m, 1 H), 5,82 (s, 2 H), 4,85 (d, 1 H), 4,26 - 4,28 (m, 1 H), 3,48 - 3,57 (m, 1 H), 2,56 (s, 3 H), 1,98 - 2,12 (m, 1 H), 1,83 (d, 1 H), 1,58-1,71 (m, 2 H), 1,34- 1,47 (m, 1 H), 1,11 (d, 3 H), COOH protones intertambiados.
Compuesto de referencia I-519
Se agitó ácido 2-((ted-butoxicarbonil)amino)acético (1 equiv.), HATU (1,1 equiv.), y base de Hunig (1,3 equiv.) como una solución en DMF a 23 °C durante 2 h. A continuación, se añadió el producto intermedio 2 (1 equiv.) en una sola parte y el contenido se calentó en el microondas a 100 °C durante 30 min. La reacción se desactivó mediante la adición de agua, se extrajo con acetato de etilo, y los extractos orgánicos se lavaron con agua y salmuera. La mezcla se secó, se filtró, se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-519 (60 mg, rendimiento 53 %) como un sólido amarillo.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,03 - 11,19 (m, 1 H), 9,11 (d, 1 H), 8,73 (d, 1 H), 7 ,93-8,04 (m, 1 H), 7,65 (s, 1 H), 7,33 (q, 1 H), 7,20 - 7,29 (m, 2 H), 7,06 - 7,16 (m, 2 H), 6,89 (t, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 3,83 (d, 2 H), 1,36 - 1,42 (m, 9 H).
Compuesto de referencia I-520
A una solución del compuesto de referencia I-519 en diclorometano a 0 °C se añadió ácido trifluoacético de igual volumen y el contenido se dejó calentar hasta 23 °C durante un periodo de 12 h. El contenido se secó al vacío y el residuo resultante se recogió en una solución de NaHCO3 saturado y se extrajo con una mezcla de isopropanol/diclorometano. El contenido se secó, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-520 (37 mg, rendimiento 79 %) como un sólido marrón.
1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,10 (d, 1 H), 8,74 (d, 1 H), 8,04 (d, 1 H), 7,68 (s, 1 H), 7,34 (q, 1 H), 7,29 (d, 1 H), 7 ,18-7,26 (m, 1 H), 7,11 (t, 1 H), 6,88 (t, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 3,36 (s, 2 H), se intertambiaron protones de NH.
Compuesto de referencia I-535
A una solución del compuesto de referencia I-520 (1 equiv.) y trietilamina (2 equiv.) en diclorometano mantenida a 0 °C se añadió cloruro de acetilo (1,2 equiv.), y la mezcla resultante se dejó calentar hasta 23 °C durante un periodo de 18 h. Los disolventes se retiraron al vacío y el residuo resultante se trituró con una mezcla de acetato de etilo/hexanos. El contenido se filtro, y el sólido resultante se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-535 (6 mg, rendimiento 53 %) como un sólido blanco.1
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,18 (s, 1 H), 9,11 (d, 1 H), 8,73 (d, 1 H), 8,22 (t, 1 H), 7,98 (d, 1 H), 7,66 (s, 1 H), 7,30-7,39 (m, 1 H), 7,27 (d, 1 H), 7,20 - 7,26 (m, 1 H), 7,12 (td, 1 H), 6,89 (t, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 3,97 (d, 2 H), 1,83 - 1,93 (m, 3 H).
C o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 543
A una solución del compuesto de referencia I-520 (1 equiv.) y trietilamina (6 equiv.) en diclorometano mantenida a 0 °C se añadió cloruro de metanosulfonilo (3,3 equiv.), y la mezcla resultante se dejó calentar a 23 °C durante un periodo de 3 h. La reacción se desactivó mediante adición de agua, y la mezcla se extrajo con diclorometano. El contenido se secó, se concentró al vacío y se purificó por cromatografía en gel de sílice proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-543 (6,2 mg, rendimiento 47 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 11,17 (s, 1 H), 9,11 (d, 1 H), 8,76 (d, 1 H), 8,00 (d, 1 H), 7,66 (s, 1 H), 7,54 (t, 1 H), 7,30 - 7,39 (m, 1 H), 7,27 (d, 1 H), 7,21 - 7,26 (m, 1 H), 7,12 (t, 1 H), 6,89 (t, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 3,99 (d, 2 H), 2,98 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-584
A una solución del compuesto de referencia I-520 (1 equiv.) en diclorometano se añadió isocianatotrimetilsilano (1,1 equiv.), y la suspensión resultante se calentó a 40 °C durante 18 h. Después de completar la reacción, el disolvente se retiró al vacío y el residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I 584 (16 mg, rendimiento 55 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,02 (s, 1 H), 9,10 (d, 1 H), 8,73 (d, 1 H), 7,99 (d, 1 H), 7,59 - 7,68 (m, 1 H), 7,30 - 7,37 (m, 1 H), 7,19 - 7,27 (m, 2 H), 7,12 (t, 1 H), 6,89 (t, 1 H), 6,25 (t, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 5,72 (s, 2 H), 3,90 (d, 2 H).
Compuesto de referencia I-585
A una solución del compuesto de referencia I-520 (1 equiv.) en diclorometano se añadió isocianato de isopropilo (1,1 equiv.), y la mezcla resultante se calentó a 40 °C durante 18 h. Después de completar la reacción, el disolvente se retiró al vacío y el residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I 585 (19 mg, rendimiento 59 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,04 (s, 1 H), 9,10 (d, 1 H), 8,72 (d, 1 H), 7,98 (d, 1 H), 7,64 (s, 1 H), 7,30-7,38 (m, 1 H), 7,19 - 7,28 (m, 2 H), 7,12 (td, 1 H), 6,85 - 6,95 (m, 1 H), 6,09 (d, 1 H), 6,01 (t, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 3,92 (d, 2 H), 3,58-3,71 (m, 1 H), 1,03 (d, 6 H).
Compuesto de referencia I-586
A una solución del compuesto de referencia I-520 (1 equiv.) ytrietilamina (2 equiv.) en diclorometano se añadió cloruro de dimetilsulfamoilo (1,5 equiv.), y la mezcla se calentó a 40 °C durante 18 h. Después de completar la reacción, los disolventes se eliminaron al vacío y el residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-586 (9 mg, rendimiento 28 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,12 (s, 1 H), 9,10 (d, 1 H), 8,75 (d, 1 H), 8,00 (d, 1 H), 7,64 (s, 1 H), 7,58 (t, 1 H), 7,30 - 7,38 (m, 1 H), 7,19 - 7,27 (m, 2 H), 7,12 (td, 1 H), 6,90 (t, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 3,92 (d, 2 H), 2,67 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-633
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el (3-(trifluorometil)-5,6,7,8-tetrahidro-[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-6-il)metanol fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 48 h como una solución en THF/dioxano/agua (1:10:1). El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano seguido de HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-633 (6 mg, rendimiento 36 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,11 (d, 1 H), 8,46 (d, 1 H), 7,67 (s, 1 H), 7,30-7,38 (m, 1 H), 7,28 (d, 1 H), 7,19 - 7,25 (m, 1 H), 7,11 (t, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 5,88- 5,98 (m, 2 H), 5,61 (d, 1 H), 5,20 (t, 1 H), 5,13 (br. s., 1 H), 4,82 (d, 1 H), 4,38 - 4,51 (m, 2 H), 3,64 (dt, 1 H), 3,50 - 3,59 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-466
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2,2,2-trifluoroetanamina (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 90-100 °C durante 42 h. El material bruto se purificó mediante HPLC preparativa utilizando un gradiente de 25-80 % acetonitrilo/agua (con TFA 0,1 %) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-466 (35 mg, rendimiento 60 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,76 (d, 1 H), 8,20 (d, 1 H), 7,46 (s, 1 H), 7,28 (ap. q, 1 H), 7,10 (m, 1 H), 7,03 (ap. t, 1 H), 6,92 (d, 1 H), 6,80 (ap. t, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 4,44 (q, 2 H).
C o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 487
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2-(metilsulfonil)etanamina (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 17 h. El contenido se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua y se acidificó hasta un pH de 3 con una solución de HCl 1N. El precipitado resultante se filtró y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-487 (56 mg, rendimiento 91 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 9,10 (d, 1 H), 8,24 (d, 1 H), 7,93 (br. t, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,33 (ap. q, 1 H), 7,22 (m, 1 H), 7,18 (d, 1 H), 7,11 (ap. t, 1 H), 6,88 (ap. t, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 3,87 (dt, 2 H), 3,46 (t, 2 H), 3,06 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-502
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el (1-aminociclopropil)metanol (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 100 °C durante 6,5 h. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 15 % acetonitrilo:metanol (7:1) en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-502 (54 mg, rendimiento 90 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 89,10 (d, 1 H), 8,18 (d, 1 H), 8,00 (s, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 7,33 (ap. q, 1 H), 7,24-7,20 (m, 1 H), 7,22 (d, 1 H), 7,11 (ap. t, 1 H), 6,89 (ap. t, 1 H), 5,86 (s, 2 H), 4,89 (t, 1 H), 3,63 (d, 2 H), 0,85 (m, 2 H), 0,77 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-581
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-aminopropanamida (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 100 °C durante 21 h. El contenido se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua y se acidificó hasta un pH de 4 con una solución de HCl 1N. El precipitado resultante se filtró y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-581 (66 mg, rendimiento 89 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,08 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,65 (t, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,34 (br. s, 1 H), 7,32 (ap. q, 1 H), 7,24-7,18 (m, 1 H), 7,21 (d, 1 H), 7,10 (ap. t, 1 H), 6,86 (br. s, 1 H), 6,84 (m, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 3,67 (dt, 2 H), 2,45 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-515
Una solución del compuesto de referencia I-358 en diclorometano se trató con N,N-diisopropiletilamina (2 equiv.) seguido de hexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1-il)- -N,N,N',N'-tetrametiluronio (HATU, 1,5 equiv.). Al cabo de 1 h, se añadió amoniaco (solución 0,5N en dioxano, 3 equiv.) y la solución de color naranja parduzco claro se agitó durante 21 h. La suspensión color tostado claro resultante se diluyó con agua y se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 10-15 % acetonitrilo:metanol (7:1) en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-515 (36 mg, rendimiento 73 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,76 (s, 1 H), 8,10 (d, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,28 (ap. q, 1 H), 7,10 (m, 1 H), 7,05 (ap. t, 1 H), 6,90 (s, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 3,88 (s, 2 H), 1,20 (m, 2 H), 1,02 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-536
Se trató una solución del compuesto de referencia I-86 en diclorometano con N,N-diisopropiletilamina (2 equiv.) seguido de HATU (1,5 equiv.). Al cabo de 1 h, se añadió amoniaco (solución 0,5 N en dioxano, 3 equiv.) y la reacción se agitó durante 24 h. La mezcla resultante se diluyó con agua y se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 10-25 % acetonitrilo-metanol (7:1) en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto I-536 (33 mg, rendimiento 81 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 8,47 (d, 1 H), 8,15 (d, 1 H), 7,28 (s, 1 H), 7,22 (ap. q, 1 H), 7,03 (ap. t, 1 H), 6,99 (ap. t, 1 H), 6,94 (ap. t, 1 H), 6,61 (d, 1 H), 6,56 (br. s, 1 H), 5,99 (d, 1 H), 5,89 (d, 1 H), 5,60 (d, 1 H), 5,50 (br. s, 1 H), 4,57 (ap. t, 1H), 2,32 (m, 1 H), 1,09 (d, 3 H), 1,07 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-537
Se trató una solución del compuesto de referencia I-69 en diclorometano con N,N-diisopropiletilamina (2 equiv.) seguido de HATU (1,5 equiv.). Al cabo de 1 h, se añadió amoniaco (solución 0,5 N en dioxano, 3 equiv.) y la reacción se agitó durante 24 h. La mezcla resultante se diluyó con agua y se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 10-25 % acetonitrilo:metanol (7:1) en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-537 (27 mg, rendimiento 65 %) como un sólido blanco.
1 H - R M N ( 500 M H z , D M S O - d a ) 5 p p m 9 , 11 (d , 1 H ) , 8 , 23 (d , 1 H ) , 7 , 57 ( b r . s , 1 H ) , 7 , 53 ( s , 1 H ) , 7 , 38 - 7 , 30 ( m , 2 H ) , 7 , 24 - 7 , 16 ( m , 2 H ) , 7 , 16 (d , 1 H ) , 7 , 10 ( a p . t, 1 H ) , 6 , 85 ( a p . t, 1 H ) , 5 , 87 ( s , 2 H ) , 4 , 42 ( a p . t, 1 H ) , 2 , 20 ( m , 1 H ) , 0 , 97 ( a p . t, 6 H ) .
Compuesto de referencia I-538
Se trató una solución del compuesto de referencia I-85 en diclorometano con W,W-diisopropiletilamina (2 equiv.) seguido de HATU (1,5 equiv.). Al cabo de 1 h, se añadió amoniaco (solución 0,5 N en dioxano, 3 equiv.) y la reacción se agitó durante 24 h. La mezcla resultante se diluyó con agua y se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 10-25 % acetonitrilo:metanol (7:1) en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-538 (36 mg, rendimiento 86 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,10 (d, 1 H), 8,22 (m, 2 H), 7,40 (br. s, 1 H), 7,36-7,28 (m, 2 H), 7,23 (m, 1 H), 7,15 (s, 1 H), 7,11 (ap. t, 1 H), 6,98 (br. s, 1 H), 6,86 (ap. t, 1 H), 5,86 (s, 2 H), 1,42 (m, 2 H), 1,02 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-546
Una suspensión del compuesto de referencia I-67 en diclorometano se trató con di(1H-imidazol-1-il)metanona (CDI, 3 equiv.) y la mezcla resultante se calentó a 45 °C durante 1 h 40 min. Después de enfriar a temperatura ambiente, se añadieron metanosulfonamida (5 equiv.) y 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU, 1 equiv.) y la reacción se calentó a 45 °C durante 1 h. La mezcla resultante se enfrió a temperatura ambiente, se desactivó con solución de HCl 1N y se extrajo con diclorometano/isopropanol (4:1). El sólido bruto se disolvió en agua con la ayuda de una solución de NaOH 1N y se acidificó hasta un pH de 3-4 agregando gota a gota HCl 1N. El precipitado resultante se filtró y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-546 (39 mg, rendimiento 80 %) como un sólido de color tostado.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 12,1 (s, 1 H), 9,11 (d, 1 H), 8,27 (d, 1 H), 8,17 (br. s, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,32 (ap. q, 1 H), 7,22 (m, 1 H), 7,12 (d, 1 H), 7,10 (m, 1 H), 6,79 (ap. t, 1 H), 5,88 (s, 2 H), 4,12 (d, 2 H), 3,17 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-566
El compuesto del título se sintetizó en 4 etapas:
Etapa 1: Síntesis de ácido 2-((4-metoxibencil)oxi)acético
A una solución de (4-metoxifenil)metanol (1 equiv.) y ácido 2-bromoacético (1,2 equiv.) en THF anhidro a 0 °C se añadió hidruro de sodio (60 % p/p en aceite mineral, 3 equiv.) en 3 partes. La mezcla se agitó a 70 °C durante 4 h. Después de enfriar a temperatura ambiente se añadió agua y la mezcla resultante se lavó con hexanos. La fase acuosa se acidificó a pH 2 con HCl 1N y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó, se filtró y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice con acetato de etilo a 50 % en hexanos proporcionó ácido 2-((4-metoxibenzil)oxi)acético (0,51 g, rendimiento 71 %) como un sólido transparente.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 5 ppm 7,29 (m, 2 H), 6,90 (m, 2 H), 4,59 (s, 2 H), 4,10 (s, 2 H), 3,81 (s, 3 H).
Etapa 2: Síntesis de 2-((4-metoxibencil)oxi)-W -(2,2,2-trifluoroetil)acetamida
Una solución de ácido 2-((4-metoxibencil)oxi)acético (1 equiv.) en diclorometano se trató con W,A/-diisopropiletilamina (1,5 equiv.) seguido de HATU (1,2 equiv.). Al cabo de 30 min, se añadieron W,W-diisopropiletilamina (2 equiv.) y clorhidrato de 2,2,2-trifluoroetanamina (2 equiv.) y la reacción se agitó durante 17 h. La mezcla resultante se diluyó con agua y se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 10-20 % acetato de etilo/hexanos proporcionando 2-((4-metoxibencil)oxi)-A/-(2,2,2-trifluoroetil)acetamida (0,28 g, rendimiento 78 %) como un sólido blanco.
1 H R M N ( 500 M H z , C D C l a ) 5 p p m 7 , 26 (d , 2 H ) , 6 , 91 ( d , 2 H ) , 6 , 89 (b r . s , 1 H ) , 4 , 52 ( s , 2 H ) , 4 , 02 ( s , 2 H ) , 3 , 93 ( d q , 2 H ) , 3 , 82 ( s , 3 H ) .
Etapa 3: Síntesis de W-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-p¡razol-3-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)-2-((4-metox¡benz¡l)ox¡)-A/-(2,2,2-tr¡fluoroet¡l)acetam¡da
Una suspens¡ón de 3-(3-(4-cloro-5-fluorop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-1-(2-fluorobenc¡l)-1H-p¡razol-5-¡l)¡soxazol (1 equ¡v.), 2-((4-metox¡benz¡l)ox¡)—W-(2,2,2-tr¡fluoroet¡l)acetam¡da (1 equ¡v.) y carbonato de ces¡o (0,8 equ¡v.) en d¡oxano anh¡dro se calentó a 100 °C durante 4 d. La mezcla resultante se vert¡ó en soluc¡ón de b¡carbonato de sod¡o med¡o saturada y se extrajo con acetato de et¡lo. La fase orgán¡ca se secó sobre sulfato de sod¡o, se f¡ltró y el d¡solvente se ret¡ró al vacío. El mater¡al bruto se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en gel de síl¡ce con un grad¡ente de 10-20 % acetato de et¡lo/hexanos proporc¡onando A/-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-p¡razol-3-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)-2-((4-metox¡benz¡l)ox¡)-A/-(2,2,2-tr¡fluoroet¡l)acetam¡da (16 mg, rend¡m¡ento 12 %) como un ace¡te transparente.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 8,65 (d, 1 H), 8,49 (d, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,22 (ap. q, 1 H), 7,07-6,96 (m, 4 H), 6,89 (ap. t, 1 H), 6,73 (d, 2 H), 6,60 (d, 1 H), 6,01 (s, 2 H), 4,68 (q, 2 H), 4,33 (s, 2 H), 4,31 (s, 2 H), 3,71 (s, 3 H).
Etapa 4: Síntes¡s del compuesto de referenc¡a I-566
Una soluc¡ón b¡fás¡ca de W-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-p¡razol-3-¡l)- -p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)-2-((4-metox¡benz¡l)ox¡)-A/-(2,2,2-tr¡fluoroet¡l)acetam¡da (1 equ¡v.) en d¡clorometano/agua (10:1) se trató con 2,3-d¡cloro-5,6-d¡c¡ano-p-benzoqu¡nona (DDQ, 1,2 equ¡v.) y se ag¡tó durante 20 h. Se añad¡eron cant¡dades ad¡c¡onales de DDQ (2,4 equ¡v.) y la reacc¡ón se ag¡tó durante 5 d. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con d¡clorometano y se f¡ltró. La soluc¡ón bruta se secó sobre sulfato de sod¡o, se f¡ltró, y el d¡solvente se ret¡ró al vacío. El mater¡al bruto se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en gel de síl¡ce con un grad¡ente de 15-50 % acetato de et¡lo/hexanos proporc¡onando el compuesto deseado, el compuesto de referenc¡a I-566 (2,6 mg, rend¡m¡ento 45 %) como un sól¡do blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,78 (d, 1 H), 8,55 (d, 1 H), 7,44 (s, 1 H), 7,26 (ap. q, 1 H), 7,09 (m, 1 H), 7,03 (ap. t, 1 H), 6,87 (d, 1 H), 6,80 (ap. t, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 5,16 (s, 2 H), 3,94 (q, 2 H).
Compuesto de referenc¡a I-457
El compuesto del título se s¡ntet¡zó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntes¡s de 3-(4-cloro-5-fluorop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-1-(2-fluorobenc¡l)-1H-p¡razol-5-carbon¡tr¡lo
Una suspens¡ón de 3-(5-fluoro-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)- -1-(2-fluorobenc¡l)-1H-p¡razol-5-carbon¡tr¡lo (este compuesto se descr¡b¡ó en la publ¡cac¡ón de sol¡c¡tud de patente anter¡or WO2013/101830) en tr¡cloruro de fosfor¡lo (50 equ¡v.) como d¡solvente se calentó a 65 °C durante 2 h 15 m¡n. La mezcla de reacc¡ón se secó por soplado bajo una comente de n¡trógeno y a cont¡nuac¡ón se concentró dos veces desde tolueno. El ace¡te/sól¡do marrón roj¡zo resultante se secó al vacío y se usó en la s¡gu¡ente etapa s¡n man¡pulac¡ón ad¡c¡onal.
Etapa 2: Síntes¡s del compuesto de referenc¡a I-457
El compuesto del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento general B, salvo que el 3-(4-cloro-5-fluorop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-1- (2-fluorobenc¡l)-1H-p¡razol-5-carbon¡tr¡lo fue el react¡vo de clorop¡r¡m¡d¡na y el ác¡do (2R,3S)-3-met¡lp¡per¡d¡n-2-carboxíl¡co fue el react¡vo de am¡na, y el conten¡do se calentó a 100 °C durante 18 h. El conten¡do se enfr¡ó a temperatura amb¡ente, se d¡luyó con agua, se ac¡d¡f¡có a pH 3 con soluc¡ón de HCl 1N y se extrajo con d¡clorometano. Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre sulfato de sod¡o, se f¡ltraron, y el d¡solvente se ret¡ró al vacío. El mater¡al bruto se pur¡f¡có med¡ante HPLC de fase ¡nversa ut¡l¡zando un grad¡ente de 25-80 % aceton¡tr¡lo/agua (con TFA a 0,1 %) proporc¡onando el compuesto deseado, el compuesto de referenc¡a I-457 (18 mg, rend¡m¡ento 38 % durante 2 etapas) como un sól¡do blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,32 (d, 1 H), 7,65 (s, 1 H), 7,41 (ap. q, 1 H), 7,36 (ap. t, 1 H), 7,23-7,13 (m, 2 H), 5,71 (s, 2 H), 5,17 (d, 1 H), 4,48 (br. d, 1 H), 3,78 (ap. t, 1 H), 2,13 (m, 1 H), 1,94 (m, 1 H), 1,78 (m, 2 H), 1,54 (m, 1 H), 1,22 (d, 3 H).
Compuesto de referenc¡a I-474
El compuesto del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento general B, salvo que se usó 3-(4-cloro-5-fluorop¡r¡m¡d¡n-2- ¡l)-1-(2-fluorobenc¡l)-1H-p¡razol-5-carbon¡tr¡lo (generado en la etapa 1 para la síntes¡s del compuesto de referenc¡a I-457 en lugar del producto ¡ntermed¡o 1, el 2-(am¡nomet¡l)-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol fue el react¡vo de am¡na y el conten¡do se calentó a 100 °C durante 16 h. El conten¡do se enfr¡ó a temperatura amb¡ente, se d¡luyó con agua, se ac¡d¡f¡có hasta pH 3 con soluc¡ón de HCl 1N y se extrajo con d¡clorometano. Las fases orgán¡cas se secaron sobre sulfato de sod¡o, se f¡ltraron, y el d¡solvente se ret¡ró al vacío. El mater¡al bruto se pur¡f¡có med¡ante HPLC de fase ¡nversa ut¡l¡zando un grad¡ente de 25-80 % aceton¡tr¡lo/agua (con TFA a 0,1 %) proporc¡onando el compuesto deseado, el compuesto de referenc¡a I-474 (31 mg, rend¡m¡ento 49 % durante 2 etapas a part¡r de 3-(5-fluoro-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-1-
- ( 2 - f l u o r o b e n c ¡ l ) - 1 H - p ¡ r a z o l - 5 - c a r b o n ¡ t r ¡ l o ) c o m o u n s ó l ¡ d o b l a n c o .
Compuesto de referencia I-480
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que se usó 3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-carbonitrilo (generado en la etapa 1 para la síntesis del compuesto de referencia I-457 en lugar del producto intermedio 1, y la 1-(1-carboxiciclopropil)-A/-metilmetanamina (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 100 °C durante 17 h. El contenido se enfrió a temperatura ambiente, se diluyó con agua, se acidificó hasta pH 3 con solución de HCl 1N y se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC preparativa utilizando un gradiente de 15-70 % acetonitrilo/agua (con TFA a 0,1 %) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-480 (90 mg, rendimiento 66 % durante 2 etapas a partir de 3-(5-fluoro-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-carbonitrilo) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 12,3 (br. s, 1 H), 8,24 (d, 1 H), 7,66 (s, 1 H), 7,44 (ap. q, 1 H), 7,36 (ap. t, 1 H), 7,30-7,22 (m, 2 H), 5,65 (s, 2 H), 3,99 (s, 2 H), 3,24 (d, 3 H), 1,13 (m, 2 H), 1,01 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-476
Se calentó una solución del compuesto de referencia I-474 en solución de NaOH 1 N (exceso) a 65 °C durante 70 min. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se acidificó hasta un pH de 3 con una solución de HCl 1N. El precipitado resultante se filtró y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-476 (13 mg, rendimiento 77 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8,50 (s, 1 H), 8,34 (d, 1 H), 8,03 (br. t, 1 H), 7,35 (ap. q, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,22 (m, 1 H), 7,13 (ap. t, 1 H), 7,02 (ap. t, 1 H), 5,87 (s, 2 H), 4,13 (d, 2 H). No se observó el protón de ácido carboxílico intertambiable.
Compuesto de referencia I-481
Se trató una suspensión del compuesto de referencia I-480 en agua con solución de NaOH 1 N (2 equiv.) y se agitó a temperatura ambiente durante 18 h. La mezcla de reacción se acidificó a pH 3 con una solución de HCl 1N. El precipitado resultante se filtró y se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-481 (7,4 mg, rendimiento 64 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 12,3 (br. s, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 8,14 (br. s, 1 H), 7,60 (br. s, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,33 (ap. q, 1 H), 7,21 (m, 1 H), 7,12 (ap. t, 1 H), 6,90 (ap. t, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 3,99 (s, 2 H), 3,24 (d, 3 H), 1,14 (m, 2 H), 1,02 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-327
A una mezcla que contenía 1,2-dietoxiciclobutenodiona (1,3 equiv.) e hidruro de sodio [dispersión a 60 % en aceite mineral] (1 equiv.) en THF se añadió el producto intermedio 2 (1 equiv.). La mezcla se agitó a 0 °C durante 1 h y a continuación se retiró del baño de hielo y se dejó agitar a 23 °C durante 24 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y evaporó dando un sólido. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-327 (90 mg, rendimiento 43 %) como un sólido amarillo claro.
1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,12 (d, 1 H), 8,69 (d, 1 H), 7,67 (s, 1 H), 7,30 - 7,38 (m, 1 H), 7,29 (d, 1 H), 7,24 (d, 1 H), 7,20 (d, 1 H), 7,09-7,15 (m, 1 H), 6 ,86-6,92 (m, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 4,81 (q, 2 H), 1,36 (t, 3 H).
Compuesto de referencia I-402
Una mezcla del compuesto de referencia I-327 (1 equiv.) y HCl [solución acuosa 1,0 M] (1 equiv.) en MeOH se calentó a 65 °C durante 2 h. Al enfriar la mezcla a 23 °C se formó un precipitado amarillo que se recogió por filtración y se aclaró con una cantidad mínima de metanol. El precipitado recogido se secó al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-402 (50 mg, rendimiento 76 %) como un sólido amarillo.1
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,08 - 9,17 (m, 1 H), 8,64 (d, 1 H), 7,73 (s, 1 H), 7,30 - 7,42 (m, 1 H), 7,28 (s, 1 H), 7,17 - 7,26 (m, 2 H), 7,12 (t, 1 H), 6,90 - 7,04 (m, 1 H), 5,85 - 6,03 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-456
A una solución fría de trietilamina (1,5 equiv.) en diclorometano a 0 °C se añadió isocianato de clorosulfonilo (1,5 equiv.). La mezcla se agitó a 0 °C durante 30 min. A esta mezcla se añadió el producto intermedio 2 (1 equiv.) ytert-butanol (1,5 equiv.), y el contenido se agitó a 23 °C durante 24 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua. El precipitado se retiró por filtración. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío proporcionando un aceite bruto, que se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100%acetato de etilo/hexanos proporcionando N-(2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)sulfamoilcarbamato de fed-butilo, el producto intermedio de sulfamida protegida con Boc deseado. Este producto intermedio se disolvió en metanol y se trató con HCl [una solución a 4,0 M en 1,4-dioxano] (5 equiv.) y se agitó a 23 °C durante 24 h. La mezcla se concentró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-456 (26 mg, rendimiento 6 %, sal de HCl) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,85 (d, 1 H), 8,54 (d, 1 H), 7,88 (s, 1 H), 7,26 - 7,34 (m, 2 H), 7,00 - 7,14 (m, 4 H), 6,05-6,08 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-467
El compuesto del título se sintetizó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de ácido 2-(bromometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropanoico.
Una mezcla de 2-(bromometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropanonitrilo (1 equiv.), agua (1 equiv.) y ácido sulfúrico concentrado (4 equiv.) se calentó a 110 °C en un vial sellado durante 1 h. La mezcla se vertió sobre hielo y se extrajo con dietil éter. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío proporcionando ácido 2-(bromometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropanoico (1,3 g, rendimiento 33 %) como un aceite transparente. 1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 3,89 (d, 1 H), 3,63 - 3,69 (m, 1 H).
Etapa 2: Síntesis de ácido 2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropanoico.
Una mezcla de hidróxido de amonio [solución a 28 % en agua] (10 equiv.) y ácido 2-(bromometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropanoico (1 equiv.) se agitó a 23 °C durante 24 h. La mezcla se concentró al vacío. El sólido resultante se trató con una cantidad mínima de etanol. El precipitado se recogió por filtración y se secó al vacío proporcionando ácido 2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropanoico (412 mg, rendimiento 43 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 2,86 - 3,27 (m, 2 H).
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-467
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropanoico (4 equiv,) fue el reactivo de amina, se usaron 6 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 85 °C como una solución en 1,4- dioxano/agua (4:1) durante 24 h. La mezcla se enfrió a 23 °C y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con solución saturada de cloruro de amonio, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío proporcionando un sólido bruto. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-467 (50 mg, rendimiento 7 % para la etapa 3) como un sólido blanco.1
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,28 (d, 1 H), 7,59 (t, 1 H), 7,46 (s, 1 H), 7,30 - 7,36 (m, 1 H), 7,16 - 7,24 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,91 (t, 1 H), 5,88 (s, 2 H), 4,24 (dd, 1 H), 3,84 (dd, 1 H).
Compuesto de referencia I-468
Una mezcla de CDI (6 equiv.) y ácido 3,3,3-trifluoro-2-hidroxi-2-(trifluorometil)propanoico (6 equiv.) en THF se calentó a 90 °C durante 1 hora. A esta mezcla, se añadió 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5-morfolinopirimidin-4-amina (este producto intermedio se describió en la solicitud de patente publicada anteriormente WO2012/3405A1; 1 equiv.). La mezcla se agitó a 90 °C durante 24 h. La mezcla se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y evaporó dando un aceite bruto. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-468 (18 mg, rendimiento 62 %) como un sólido amarillo claro.
1 H R M N ( 500 M H z , C D 3O D ) 8 p p m 8 , 76 ( d , 1 H ) , 8 , 64 ( s , 1 H ) , 7 , 60 - 7 , 63 ( m , 1 H ) , 7 , 20 - 7 , 26 ( m , 1 H ) , 7 , 00 - 7 , 06 ( m , 1 H ) , 6 , 98 (t, 1 H ) , 6 , 92 (d , 1 H ) , 6 , 74 - 6 , 83 ( m , 1 H ) , 5 , 93 ( s , 2 H ) , 3 , 88 - 3 , 92 ( m , 4 H ) , 3 , 04 - 3 , 09 ( m , 4 H ) .
C o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 473
A una mezcla de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)- -pirimidin-4-amina (este producto intermedio se ha descrito previamente en la solicitud de patente publicada WO2012/3405A1, 1 equiv.) y cloruro de 3,3,3-trifluoro-2-(trifluorometil)-2- -((trimetilsilil)oxi)propanoilo (3 equiv.) [preparado según el procedimiento descrito en Aicher, T.D.y col. J. Med. Chem.2000,43,245, Método J.] en THF a 23 °C, se añadió, muy lentamente, LiHMDS (2,0 M en THF, 3 equiv.). La reacción exotérmica se tornó marrón oscuro inmediatamente. La mezcla se agitó a 23 °C durante 1 h, después se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. El precipitado se retiró por filtración. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró, y se concentró al vacío proporcionando un aceite bruto. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-30 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-473 (11 mg, rendimiento 3 %) como un sólido amarillo.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,83 (d, 1 H), 8,80 (s, 1 H), 7,60 (s, 1 H), 7,27 - 7,33 (m, 1 H), 7,09 - 7,15 (m, 1 H), 7.06 (t, 1 H), 6,94 (d, 1 H), 6,90 (t, 1 H), 6,00 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-477
A una mezcla de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)- -pirimidin-4-amina (descrito en WO2012/3405 A1, 1 equiv.) y cloruro de morfolin-4-carbonilo (1,2 equiv.) en THF a 23 °C, se añadió, muy lentamente, LiHMDS (2,0 M en THF, 1,2 equiv.). La mezcla se agitó a 23 °C durante 24 h. La mezcla se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y evaporó dando un aceite bruto. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-5 % metanol/DCM proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-477 (24 mg, rendimiento 18 %) como un sólido amarillo claro.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,49 - 8,54 (m, 1 H), 7,47 (s, 1 H), 7,33 - 7,42 (m, 1 H), 7,23 - 7,30 (m, 1 H), 7,12 -7,22 (m, 1 H), 6,99 - 7,11 (m, 2 H), 6,87 (d, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 3,72 (q, 4 H), 3,56 - 3,62 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-482
A una mezcla fría de trifosgeno (0,75 equiv.) y 3-bromo-1,1,1-trifluoro-propan-2-ol (1,5 equiv.) en diclorometano se añadió piridina (1,5 equiv.). La mezcla se agitó a 0 °C durante 30 min. En un matraz separado, se enfrió una suspensión del producto intermedio 2 (1 equiv.) en piridina a 0 °C. Esta suspensión se transfirió a la mezcla de trifosgeno y bromopropanol mediante una jeringa. La mezcla resultante se calentó a 60 °C durante 24 h. El contenido se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y evaporó dando un aceite bruto. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-482 (46 mg, rendimiento 9 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,79 (d, 1 H), 8,50 (d, 1 H), 8,11 -8,14(m , 1 H), 7,43 (s, 1 H), 7 ,19-7,27 (m, 1 H), 6,96 - 7,10 (m, 2 H), 6,87 - 6,93 (m, 1 H), 6,62 (d, 1 H), 5,99 - 6,03 (m, 2 H), 4,99 - 5,07 (m, 1 H), 4,57 - 4,65 (m, 1 H), 4,49-4,56 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-492
Una solución de ácido 2,2-bis(trifluorometil)-2-hidroxiacético (3 equiv.) en THF se calentó a 80 °C durante 1 h. A esta mezcla se añadió una solución de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-amina (producto intermedio descrito en el documento WO2012/3405 A1 anterior; 1 equiv.) en NMP. La mezcla resultante se calentó en un microondas a 200 °C durante 1 h. El contenido se diluyó en acetato de etilo y se lavó con agua. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se secó al vacío proporcionando un aceite bruto. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-492 (25 mg, rendimiento 8 %) como un sólido amarillo.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,48 (d, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,18 - 7,25 (m, 2 H), 7,00 - 7,06 (m, 1 H), 6,98 (t, 1 H), 6,85 (t, 1 H), 6,59 (d, 1 H), 5,99 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-493
Una mezcla del compuesto de referencia I-403 (1 equiv.), HOBT (3 equiv.), trietilamina (3 equiv.), HATU (3 equiv.) y ciclopropilamina (3 equiv.) en DMF se agitó a 23 °C durante 24 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó en secuencia con solución de HCl 1N, solución saturada de bicarbonato de sodio y salmuera. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío proporcionando un aceite bruto. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-493 (20,4 mg, rendimiento 27 %) como un sólido blanco.1
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,76 - 8,80 (m, 1 H), 8,25 - 8,29 (m, 1 H), 7,47 - 7,49 (m, 1 H), 7,24 - 7,31 (m, 1 H), 7.07 - 7,14 (m, 1 H), 7,03 (t, 1 H), 6,87 - 6,90 (m, 1 H), 6,77 (t, 1 H), 5,95 - 5,99 (m, 2 H), 5,87 - 5,94 (m, 1 H), 2,70 -2,77 (m, 1 H), 0,70 - 0,78 (m, 2 H), 0,47 - 0,54 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-504
El compuesto del título se sintetizó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 2-bromo-3,3,3-trifluoropropilo (2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)carbamato.
A una mezcla fría de trifosgeno (0,9 equiv.) y 2-bromo-3,3,3-trifluoropropan-1-ol (2 equiv.) en THF se añadió piridina (2 equiv.). La mezcla se agitó a 0 °C durante 30 min. En un matraz separado, se enfrió una suspensión del producto intermedio 2 (1 equiv.) en piridina (2 equiv.) a 0 °C. A esta suspensión se añadió la mezcla de trifosgeno y bromopropanol a través de una jeringa, y la mezcla resultante se calentó hasta 60 °C durante 24 h. El contenido se concentró al vacío y el residuo se diluyó con acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró al vacío proporcionando un aceite bruto. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el producto intermedio de carbamato deseado, 2-bromo-3,3,3-trifluoropropilo (2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)carbamato (77 mg, rendimiento 4 %) como un aceite marrón claro.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,46 - 8,48 (m, 1 H), 8,07 (br. s., 1 H), 7,86 (d, 1 H), 7,44 - 7,47 (m, 1 H), 7,17 - 7,24 (m, 1 H), 7,00 - 7,07 (m, 1 H), 6,93 - 7,00 (m, 1 H), 6,78 - 6,85 (m, 1 H), 6,57 - 6,62 (m, 1 H), 6,02 (s, 2 H), 4,28 (quint, 1 H), 3,93-4,15 (m, 2 H).
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-504
A una solución de 2-bromo-3,3,3-trifluoropropilo (2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)carbamato en THF se añadió LiHMDS (2,0 M en THF, 1 equiv.). La mezcla se selló y se calentó a 60 °C durante 2 días. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se evaporó dando un aceite bruto. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos y se recristalizó de una mezcla de éter dietílico hexanos proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-504 (7 mg, rendimiento 11 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,13 (s, 1 H), 8,84 (s, 1 H), 7,99 (d, 1 H), 7,70 (s, 1 H), 7,31 - 7,38 (m, 1 H), 7,19 - 7,26 (m, 2 H), 7,12 (t, 1 H), 6,91 (t, 1 H), 6,03 - 6,09 (m, 1 H), 5,86 - 5,98 (m, 2 H), 4,73 - 4,80 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-544
Una mezcla del compuesto de referencia I-419 (1 equiv.) e hidruro de litio y aluminio (2 equiv.) en THF se calentó a 60 °C durante 24 h. La mezcla se enfrió a 23 °C, a continuación se trató de forma secuencial con agua (x ml/x g de hidruro de litio y aluminio), NaOH 15 % (aq) (x ml/x g de hidruro de litio y aluminio) y agua (3x ml/x g de hidruro de litio y aluminio). El precipitado se retiró por filtración y el filtrado se concentró al vacío proporcionando la amina intermedia como un sólido amarillo. El producto intermedio se suspendió en THF, y se añadió una solución de cloruro de metanosulfonilo (1 M en THF, 2 equiv.) y piridina (3 equiv.) en THF a la suspensión gota a gota mediante una jeringa. La mezcla se agitó a 23 °C durante 3 h, después se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó proporcionando un aceite bruto. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-544 (4 mg, rendimiento 19 %) como un sólido amarillo.
1H RMN (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,71 - 8,78 (m, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,22 - 7,32 (m, 1 H), 6,97 - 7,15 (m, 2 H), 6,89 - 6,96 (m, 1 H), 6,69 - 6,83 (m, 1 H), 5,99 - 6,05 (m, 2 H), 5,56 (s, 1 H), 3,03 - 3,23 (m, 2 H), 2,68 - 2,83 (s, 3 H), 1,95-2,08 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-575
El compuesto del título se sintetizó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de (R)-1-((tert-butildimetilsilil)oxi)-3-((5-fluoro-2-
-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)propan-2-ol.
Una mezcla del compuesto de referencia I-316 (1 equiv.), imidazol (2 equiv.) y TBDMS-Cl (1 equiv.) en DMF se agitó a ta durante 24 h. La mezcla se diluyó en acetato de etilo y se lavó con solución de HCl 1N. La capa orgánica se secó, se filtró y se evaporó dando un aceite bruto. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el producto intermedio deseado, (R)-1-((tertbutildimetilsilil)oxi)-3- -((5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)propan-2-ol (258 mg, rendimiento 63 %).
1 H R M N ( 500 M H z , C D C l a ) 8 p p m 8 , 34 (d , 1 H ) , 8 , 04 - 8 , 07 ( m , 1 H ) , 7 , 23 (b r . s . , 1 H ) , 7 , 06 - 7 , 13 ( m , 1 H ) , 6 , 82 - 6 , 97 ( m , 3 H ) , 6 , 76 (t, 1 H ) , 5 , 84 - 5 , 90 ( m , 2 H ) , 3 , 80 - 3 , 89 ( m , 1 H ) , 3 , 47 - 3 , 66 ( m , 4 H ) , 0 , 79 - 0 , 84 ( m , 9 H ) , 0 , 03 ( m , 6 H ) .
Etapa 2: Síntesis de (R)-5-(((tert-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)-3-(5-fluoro- -2-(1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)oxazolidin-2-ona.
Una mezcla de (R)-1-((tert-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-3-((5-fluoro- -2-(1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-p¡razol-3-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)am¡no)propan-2-ol (1 equ¡v.), 2,6-d¡met¡lp¡r¡d¡na (2 equ¡v.) y tr¡fosgeno (0,7 equ¡v.) en THF se ag¡tó a 23 °C durante 30 m¡n. A cont¡nuac¡ón, la mezcla se calentó a 60 °C durante 24 h. El conten¡do se d¡luyó en acetato de et¡lo y se lavó con agua. La capa orgán¡ca se secó, se f¡ltró y se evaporó dando un ace¡te bruto. El ace¡te se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en gel de síl¡ce con un grad¡ente de 0-100 % acetato de et¡lo/hexanos proporc¡onando el producto ¡ntermed¡o de carbamato proteg¡do con TBS deseado, la (R)-5-(((tert-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)-3-(5-fluoro-2-(1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-p¡razol-3-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)oxazol¡d¡n-2-ona (221 mg, rend¡m¡ento 82 %).
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 8,54 (d, 1 H), 8,36 (d, 1 H), 7,24 (s, 1 H), 7,05 - 7,13 (m, 1 H), 6,84 - 6,97 (m, 2 H), 6,72 - 6,81 (m, 1 H), 6,47 (d, 1 H), 5,87 (s, 2 H), 4,65 - 4,74 (m, 1 H), 4,24 - 4,32 (m, 1 H), 4,16 (dd, 1 H), 3,83 (m, 2H), 0 ,74-0,82 (m, 9 H), 0,00 (d, 6 H).
Etapa 3: Síntes¡s del compuesto de referenc¡a I-575
A una soluc¡ón fría de (R)-5-(((tert-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)met¡l)-3-(5-fluoro-2--(1-(2-fluorobenc¡l)-5-(¡soxazol-3-¡l)-1H-p¡razol-3-¡l)p¡r¡m¡d¡n-4-¡l)oxazol¡d¡n-2-ona (1 equ¡v.) en THF a 25 °C se añad¡ó una soluc¡ón de TBAF (1 M en THF, 1 equ¡v.). Después de ag¡tar la mezcla a 23 °C durante 30 m¡n, la mezcla se desact¡vó con agua y se d¡luyó con acetato de et¡lo. La capa orgán¡ca se secó, se f¡ltró y se evaporó dando un ace¡te bruto. El ace¡te se pur¡f¡có por cromatografía en gel de síl¡ce ut¡l¡zando un grad¡ente de 0-100 % acetato de et¡lo/hexanos. La pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal por recr¡stal¡zac¡ón a part¡r de una mezcla de d¡clorometano-d¡et¡l éter d¡o el compuesto deseado, el compuesto de referenc¡a I-575 (10 mg, rend¡m¡ento 4 % durante 3 etapas) como un sól¡do blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,25 (d, 1 H), 8,02 (t, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,30 - 7,39 (m, 1 H), 7,17 - 7,25 (m, 2 H), 7,11 (td, 1 H), 6,85 - 6,91 (m, 1 H), 5,88 (s, 2 H), 5,06 (dq, 1 H), 4,61 (t, 1 H), 4,45 (dd, 1 H), 3,83 (m, 2 H).
Compuesto de referenc¡a I-490
Una mezcla de ác¡do 4,4,4-tr¡fluoro-3-h¡drox¡-3-(tr¡fluoromet¡l)butano¡co (1,5 equ¡v.) y CDI (1,5 equ¡v.) en THF se calentó a reflujo durante 2 h. A esta mezcla se añad¡ó el producto ¡ntermed¡o 2 (1 equ¡v.) en una parte. La mezcla se d¡luyó en acetato de et¡lo y se lavó con soluc¡ón de HCl 1N. La capa orgán¡ca se secó, se f¡ltró y se evaporó dando un ace¡te. El ace¡te se pur¡f¡có med¡ante cromatografía en gel de síl¡ce ut¡l¡zando un grad¡ente ¡socrát¡co de 80 % de acetato de et¡lo en hexanos proporc¡onando el producto deseado, el compuesto de referenc¡a I-490 (2 mg, rend¡m¡ento 1,2 %) como un sól¡do blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 8,80 (d, 1 H), 8,51 (s, 1 H), 8,05 (d, 1 H), 7,44 -7,50 (m, 1 H), 7,19 - 7,32 (m, 2 H), 6,95 - 7,08 (m, 2 H), 6,87 (d, 1 H), 6,58 - 6,65 (m, 1 H), 5,97 (s, 2H), 2,93 - 2,99 (m, 2 H).
Compuesto de referenc¡a I-496
El compuesto del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento general B, salvo que la (5-met¡l-1,3,4-oxad¡azol-2-¡l)metanam¡na (como la sal de HCl) fue el react¡vo de am¡na, y el conten¡do se calentó a 110 °C durante 24 h como una soluc¡ón en THF/agua (10:1). El conten¡do se enfr¡ó a 23 °C, y los d¡solventes orgán¡cos se el¡m¡naron al vacío. El res¡duo resultante se pur¡f¡có med¡ante HPLC de fase ¡nversa proporc¡onando el producto deseado, el compuesto de referenc¡a I-496 (81 mg, rend¡m¡ento 64 %) como un sól¡do blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,09 - 9,12 (m, 1 H), 8,57 (br. s., 1 H), 8,32 (d, 1 H), 7,48 (s, 1 H), 7,30 - 7,36 (m, 1 H), 7,19-7,25 (m, 1 H), 7,16 (d, 1 H), 7,11 (t, 1 H), 6,84 (t, 1 H), 5,88 (s, 2 H), 4,92 (d, 2 H), 2,45 (s, 3 H).
Compuesto de referenc¡a I-508
El compuesto del título se preparó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntes¡s de fed-but¡lo (1-(c¡cloprop¡lam¡no)-3-met¡l-1-oxobutan-2-¡l)carbamato
A una soluc¡ón de ác¡do 2-((ted-butox¡carbon¡l)am¡no)-3- met¡lbutano¡co (1 eq) y c¡clopropanoam¡na (1 Eq) en THF (10 ml) se añad¡ó PyAOP (1,0 eq) segu¡do de DIPEA (3 eq). La mezcla de reacc¡ón se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante 4 horas. Con la convers¡ón completa de mater¡al de part¡da en el producto deseado, el d¡solvente se ret¡ró al vacío y se pur¡f¡có con eluyente de cromatografía “ flash” con acetato de et¡lo/hexano 1:1. Las fracc¡ones que contenían el producto deseado se recog¡eron y concentraron proporc¡onando el producto ¡ntermed¡o de am¡da como un ace¡te.
Etapa 2: Síntesis de 2-amino-N-cidopropil-3-metilbutanamida
El producto intermedio de amida (1-(cidopropilamino)-3-metil-1--oxobutan-2-il)carbamato de terf-butilo (1 equiv.) se disolvió en diclorometano y TFA (relación 3:1) y se agitó durante 4 h a 23 °C. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el producto intermedio de amina libre 2-amino-N-ciclopropil-3-metilbutanamida (0,25 g, rendimiento 42 %) como un semisólido.
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-508
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2-amino-N-ciclopropil-3-metilbutanamida fue el reactivo de amina y el contenido se calentó a 110 °C durante 24 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se enfrió a 23 °C, y los disolventes orgánicos se eliminaron al vacío. El residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-508 (15 mg, rendimiento 22 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,51 - 8,55 (m, 1 H), 8,15 (d, 1 H), 7,40 - 7,45 (m, 1H), 7,23 - 7,28 (m, 1 H), 6,99 -7,12 (m, 2 H), 6 ,70-6,75 (m, 1 H), 6,62-6,69 (m, 1 H), 6,65 (br. s., 1H), 5,93- 5,98 (m, 2 H), 4,58 (t, 1 H), 2,75 (tq, 1 H), 2,31 (dq, 1 H), 0,99 - 1,08 (m, 6 H), 0,67 - 0,79 (m, 2 H), 0,44 - 0,55 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-509
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2-((trifluorometil)tio)etanamina fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 24 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se enfrió a 23 °C, y los disolventes orgánicos se eliminaron al vacío. El residuo resultante se purificó utilizando un gradiente de 5-50 % acetato de etilo en hexano proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-509 (81 mg, rendimiento 60 %) como un sólido blanquecino.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 8,45 - 8,48 (m, 1 H), 8,20 (d, 1 H), 7,30 (s, 2 H), 7,16 - 7,23 (m, 1 H), 7,00 - 7,06 (m, 1 H), 6,97 (t, 1 H), 6,86 (t, 1 H), 6,57 - 6,60 (m, 1 H), 5,95 - 6,01 (m, 2 H), 3,96 (q, 2 H), 3,27 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-514
A una solución agitada del compuesto de referencia I-509 (1 equiv.) en diclorometano se añadió mCPBA (2 equiv.), y la mezcla se agitó durante 12 h. El disolvente se retiró al vacío y el residuo resultante se purificó mediante HpLC de fase inversa proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-514 (5 mg, rendimiento 6 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,41 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,28-7,32 (m, 1 H), 7,10-7,17 (m, 1 H), 6,89-6,99 (m, 2 H), 6,80 - 6,86 (m, 1 H), 6,53 (d, 1 H), 5,99 (d, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,20 (q, 2 H), 3,70 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-529
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-((metilamino)metil)propan-2-ol fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 24 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se enfrió a 23 °C, y los disolventes orgánicos se eliminaron al vacío. El residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-529 (2,5 mg, rendimiento 2 %) como un sólido blanquecino.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,53 (d, 1 H), 8,36 (d, 1 H), 7,42 (br. s., 1 H), 7,23 -7,28 (m, 2 H), 7,03 - 7,25 (m. 2 H), 6,64 (s, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 4,22 (br. s., 1 H), 3,49 - 3,53 (m, 3 H), 3,02 - 3,08 br. 2 H).
Compuesto de referencia I-545
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la (1-(metilsulfonil)ciclopropil)metanamina (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 24 h como una solución en dioxano/agua (10:1). El contenido se enfrió a 23 °C, y los disolventes orgánicos se eliminaron al vacío. El residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-545 (81 mg, rendimiento 59 %) como un sólido blanco.
1 H R M N ( 500 M H z , D M S O - d 6) 8 p p m 9 , 12 (d , 1 H ) , 8 , 30 ( d , 1 H ) , 8 , 19 ( b r . s . , 1 H ) , 7 , 55 - 7 , 61 ( m , 1 H ) , 7 , 31 - 7 , 38 (m , 1 H ) , 7 , 19 - 7 , 26 ( m , 2 H ) , 7 , 13 (t, 1 H ) , 6 , 96 (t, 1 H ) , 5 , 89 ( s , 2 H ) , 4 , 04 (d , 2 H ) , 3 , 09 ( s , 3 H ) , 1 , 22 ( s , 4 H ) .
C o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 567
El compuesto del título se preparó en 5 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 1-(((ferf-butox¡carbon¡l)am¡no)met¡l)ciclopropanocarbox¡lato de metilo
A una solución agitada de ácido 1-(((ferf-butox¡carbon¡l)am¡no)met¡l)c¡clopropanocarboxíl¡co (1 equiv.) en dietil éter y metanol (relación 5:1) se añadió lentamente (diazometil)tr¡met¡ls¡lano (1 equiv.) a 25 °C. La mezcla se agitó durante la noche, y los disolventes se eliminaron al vacío proporcionando el producto intermedio de éster metílico deseado, el 1-(((ferf-butox¡carbon¡l)am¡no)met¡l)c¡clopropanocarbox¡lato de metilo (0,400 g, rendimiento 75 %).
Etapa 2: Síntesis de ((1-(hidrox¡met¡l)c¡cloprop¡l)met¡l)carbamato de ferf-butilo
Se disolvió 1-(((ferf-butox¡carbon¡l)am¡no)met¡l)ciclopropanocarbox¡lato de metilo (1 equiv.) en THF y se enfrió a 0 °C. Se añadió hidruro de litio y aluminio (3 equiv.) lentamente al recipiente, y el contenido se agitó mientras se dejó calentar a 23 °C durante un periodo de 4 h. La solución de reacción se enfrió después a 0 °C y, a continuación, se añadió agua (x ml de agua / x g de L¡AlH4 usado), solución de hidróxido de sodio 15 % (x ml de agua/x g de L¡AlH4 usado) y agua (3 x ml de agua/x g de L¡AlH4 usado) a la reacción de manera secuencial. La reacción se filtró a través de celita y el filtrado se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice proporcionando el producto intermedio de alcohol deseado, el ((1-(h¡drox¡metil)c¡cloprop¡l)met¡l)carbamato de ferf-butilo (0,41 g, rendimiento 88 %).
Etapa 3: Síntesis de ((1-formilc¡cloprop¡l)met¡l)carbamato de ferf-butilo
A una solución de ((1-(h¡drox¡metil)c¡cloprop¡l)met¡l)carbamato de ferf-butilo (1 equiv.) en diclorometano a 25 °C se añadió PCC (1,15 equiv.) en una sola parte. La reacción se agitó durante 2 h. Se añadió dietil éter al recipiente, y la mezcla heterogénea se filtró a través del gel de sílice proporcionando el producto intermedio de aldehído deseado, el cual se usó sin purificación adicional.
Etapa 4: Síntesis de (1-(1H-¡m¡dazol-2-il)c¡cloprop¡l)metanam¡na
Una solución agitada de ((1-formilc¡cloprop¡l)met¡l)carbamato de ferf-butilo (1 equiv.) en metanol se trató con hidróxido de amonio (10 equiv.) seguido de oxalaldehído (1,1 equiv.). El contenido se dejó agitar a 23 °C durante 3 horas antes de eliminar el metanol al vacío. A continuación, el residuo se trató con TFA en diclorometano (relación 1:1) y se agitó a 23 °C durante 5 h. La mezcla se diluyó con salmuera y se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de sodio y se concentraron al vacío proporcionando el producto intermedio de imidazol deseado, (1-(1H-¡m¡dazol-2-il)c¡cloprop¡l)metanam¡na (0,124 g, rendimiento 100 %), que se recogió en la siguiente reacción sin purificación adicional.
Etapa 4: Síntesis del compuesto de referencia I-567
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la (1-(1H-imidazol-2-¡l)cicloprop¡l)metanam¡na fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 110 °C durante 24 h como una solución en THF/agua (10:1). El contenido se enfrió a 23 °C, y los disolventes orgánicos se eliminaron al vacío. El residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-567 (36 mg, rendimiento 27 %) como un sólido blanco.
1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 9,16 (br. s., 1 H), 8,53 (d, 1 H), 7,98 - 8,05 (m, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,22 - 7,31 (m, 2 H), 6,97 - 7,09 (m, 2 H), 6,90 (s, 2 H), 6,81 (d, 2 H), 5,92 (s, 2 H), 4,05 (d, 2 H), 1,40 - 1,47 (m, 2 H), 1,32 - 1,39 (m, 2 H).
C o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 589
Una solución de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H--pirazol-3-il)pirimidin-4-amina (producto intermedio descrito en la patente anterior: WO2012/3405 A1) (1 equiv.), ácido 2-(metilsulfonil)propanoico (3 equiv.), trietilamina (10 equiv.), y 2,4,6-trióxido de 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioxatrifosfinana (4 equiv.) en DMF se calentó a 90 °C durante 4 h. La reacción se enfrió a 23 °C, después se vertió en una mezcla 1:1 de acetato de etilo y agua. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (2 veces). Las sustancias orgánicas se lavaron con agua (3 veces), se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-589 (10 mg, rendimiento 28 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 11,49 (s, 1 H), 9,11 (d, 1 H), 8,92 (d, 1 H), 7,61 (s, 1 H), 7,31 - 7,37 (m, 1 H), 7,27 (d, 1 H), 7,19 - 7,25 (m, 1 H), 7,12 (td, 1 H), 6,92 - 6,97 (m, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 4,40 (d, 1 H), 3,07 (s, 3 H), 1,58 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-608
El compuesto del título se preparó en 4 etapas:
Etapa 1: Síntesis de (2-hidrazinil-2-oxoetil)carbamato de ferf-butilo.
A una solución de 2-((ferf-butoxicarbonil)amino)acetato de metilo (1 equiv.) en etanol se añadió hidrato de hidrazina (15 equiv.), y la reacción se dejó agitar durante la noche. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se trituró con hexano, se filtró y se secó en alto vacío proporcionando el producto intermedio de acilhidrazina deseado (2-hidrazinil-2-oxoetil)carbamato de ferf-butilo, el producto intermedio B (0,89 g, rendimiento 92 %) como un sólido blanco.
Etapa 2: Síntesis de (2-oxo-2-(2-(2,2,2-trifluoroacetil)hidrazinil)etil)carbamato de ferf-butilo
A una solución de (2-hidrazinil-2-oxoetil)carbamato de ferf-butilo (1 equiv.) en acetonitrilo se añadió DIEA(1,1 equiv.). El contenido se enfrió a -45 °C, y se añadió anhídrido 2,2,2-trifluoroacético (1,1 equiv.) a la reacción. La mezcla resultante se agitó mientras se calentaba lentamente a 23 °C. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se repartió entre agua y acetato de etilo. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron con Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice, utilizando un gradiente de 5-45 % acetato de etilo en hexanos proporcionando el producto intermedio deseado, el (2-oxo-2-(2-(2,2,2-trifluoroacetil)hidrazinil)etil)carbamato de ferf-butilo (0,73 g, rendimiento 54 %).
Etapa 3: Síntesis de (5-(trifluorometil)-1,3,4-oxadiazol-2-il)metanamina
A una suspensión de (2-oxo-2-(2-(2,2,2-trifluoroacetil)hidrazinil)etil)carbamato de ferf-butilo (1 equiv.) en acetonitrilo se añadió DIEA (5,8 equiv.) y trifenilfosfina (4,1 equiv.), que se agitó durante 5 min. A continuación, se añadió percloroetano (2,3 equiv.) a la reacción, y la mezcla se agitó durante 20 h a 23 °C. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se repartió entre agua y acetato de etilo. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron con Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice, utilizando un gradiente de 5-45 % acetato de etilo en hexanos proporcionando el producto intermedio de oxadiazol protegido con N-Boc, el ((5-(trifluorometil)--1,3,4-oxadiazol-2-il)metil)carbamato de ferf-butilo (0,24 g, rendimiento 35 %). A una solución agitada de este producto intermedio de oxadiazol protegido con N-Boc (1 equiv.) en diclorometano se añadió TFA (8 equiv.), y la mezcla se agitó a 23 °C durante 4 h. El disolvente se retiró al vacío proporcionando el producto intermedio de amina libre deseado, la (5-(trifluorometil)-1,3,4-oxadiazol-2-il)metanamina (como sal de HCl, 0,15 g, rendimiento 100 %), que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
E t a p a 4 : S í n t e s i s d e l c o m p u e s t o d e r e f e r e n c ia I - 608
A una solución agitada de (5-(trifluorometil)-1,3,4-oxadiazol-2-il)metanamina (como la sal de HCl, 2 equiv.) en dioxano enfriado a 0 °C se añadió carbonato de cesio (3 equiv.), y la mezcla se agitó durante 1 h. El producto intermedio 1 (1 equiv.) se añadió a la reacción, y la mezcla resultante se agitó a 90 °C durante 24 h. La reacción se enfrió a 23 °C y se diluyó con acetato de etilo. Las sustancias orgánicas se lavaron con agua y salmuera, se concentraron al vacío, y el residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-608 (2,5 mg, rendimiento 5 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,67 (d, 1 H), 8,15 (d, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 7,17 (ddd, 1H), 6,96-7,01 (m, 1 H), 6,90 - 6,95 (m, 1 H), 6,76 (d, 1 H), 6,70 - 6,74 (m, 1 H), 5,85 (s, 2 H), 5,09 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-622
El compuesto del título se preparó en 4 etapas:
Etapa 1: Síntesis de (R)-tert-butilo (1-hidrazinil-1-oxopropan-2-il)carbamato
El compuesto del título se preparó según el procedimiento descrito en la etapa 1 para la síntesis del compuesto de referencia I-608, salvo por el uso de 2-((tert-butoxicarbonil)amino)propanoato de (R)-metilo como material de partida (rendimiento 97 %).
Etapa 2: Síntesis de (1-oxo-1-(2-(2,2,2-trifluoroacetil)hidrazinil)propan-2-il)carbamato de (R)-tert-butilo. Se preparó según el procedimiento descrito en la etapa 2 para la síntesis del compuesto de referencia I-608, salvo por el uso de (1-hidrazinil-1-oxopropan-2-il)carbamato de (R)-tert-butilo como material de partida (rendimiento 82 %).
Etapa 3: Síntesis de (R)-1-(5-(trifluorometil)-1,3,4-oxadiazol-2-il)etanamina
Se preparó según el procedimiento descrito en la etapa 3 para la síntesis del compuesto de referencia I-608, salvo por el uso de (1-oxo-1-(2-(2,2,2-trifluoroacetil)hidrazinil)propan-2-il)
-carbamato de (R)-tert-butilo como material de partida (rendimiento 37 %).
Etapa 4: Síntesis del compuesto de referencia I-622
A una solución agitada de (R)-1-(5-(trifluorometil)-1,3,4-oxadiazol-2-il)etanamina, (R)-1-(5-(trifluorometil)-1,3,4-oxadiazol-2-il)etanamina (2 equiv.) y producto intermedio 1 (1 equiv.) en DMF se añadió carbonato de cesio (3 equiv.). La mezcla se calentó a 90 °C y se agitó durante 24 h. El contenido se enfrió a 23 °C y se diluyó con acetato de etilo. La mezcla se lavó con agua y salmuera, se concentró al vacío, y el residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-622 (5 mg, rendimiento 9 %) como un sólido blanco.1
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,66 - 8,69 (m, 1 H), 8,14 (d, 1 H), 7,27 (s, 1 H), 7,15-7,21 (m, 1 H), 6,99 (dd, 1 H), 6,93 (t, 1 H), 6,76 (d, 1 H), 6,72 (t, 1 H), 5,87 - 5,91 (m, 1 H), 5,85 (s, 2 H), 1,74 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-616
A una solución agitada de 2-(metilsulfonil)acetamida (1 equiv.) en DMF se añadió carbonato de cesio (3 equiv.) a 0 °C, y la mezcla se agitó durante 1 h. El producto intermedio 1 (1 equiv.) se añadió al recipiente, y la reacción se calentó a 90 °C y se agitó durante 24 h. El contenido se enfrió a 23 °C y se diluyó con acetato de etilo. La mezcla se lavó con agua y salmuera, se concentró al vacío, y el residuo resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el producto deseado, el compuesto de referencia I-616 (11 mg, rendimiento 22 %) como un sólido blanco.
1 H R M N ( 500 M H z , C D 3O D ) 5 p p m 8 , 67 (d , 1 H ) , 8 , 59 (d , 1 H ) , 7 , 45 ( s , 1 H ) , 7 , 17 ( d d d , 1 H ) , 6 , 91 - 7 , 02 ( m , 2 H ) , 6 , 77 - 6 , 82 ( m , 2 H ) , 5 , 87 ( s , 2 H ) , 4 , 58 (b r . s . , 2 H ) , 3 , 11 ( s , 3 H ) .
Compuesto de referencia I-386
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que el ácido 1H-pirazol-3-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 3-8 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-386 (20,2 mg, rendimiento 40 %) como un sólido de color tostado claro. 1H-RMN (500 MHz, CDCh) 5 ppm 9,93 (s, 1 H), 8,77 (d, 1 H), 8,50 (s, 1 H), 8,33 (d, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,44 (d, 1 H), 7,19-7,25 (m, 1 H), 7,02-7,08 (m, 1 H), 6,96-7,02 (m, 1 H), 6,94 (d, 1H), 6,83-6,87 (m, 1 H), 6,65 (s, 1 H), 6,02 (s, 2 H); no se observó 1 protón N-H.
Compuesto de referencia I-164
A una solución del producto intermedio 2 (1 equiv.) en diclorometano se añadió anhídrido trifluoroacético (3 equiv.) seguido de trietilamina (3 equiv.). La reacción se calentó a 60 °C durante 20 min, tras lo cual la reacción se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1-3 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-635 (16,4 mg, 32 % rendimiento) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 58,95 (br. s, 1 H), 8,86 (d, 1 H), 8,49 (d, 1 H), 8,10 (d, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,20-7,26 (m, 1 H), 7,03-7,07 (m, 1 H), 6,98-7,02 (m, 1 H), 6,82-6,87 (m, 1H), 6,62 (d, 1 H), 6,04 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-458
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que se usó ácido 3-hidroxi-5-oxociclohex-3-encarboxílico (1,3 equiv.) como reactivo ácido y 2,5 equivalentes de T3P. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de3-10 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-458 (26,4 mg, 30 % rendimiento) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 58,79 (m, 1 H), 8,68 (d, 1 H), 8,13 (d, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,24-7,33 (m, 1 H), 7,08-7,13 (m, 1 H), 7,01-7,08 (m, 1 H), 6,86-6,92 (m, 2 H, 2 desplazamientos isocronos), 5,97 (s, 2 H), 2,66-2,75 (m, 2 H), 2,56 2,64 (m, 2 H); no se observó 1 protón C-H (isocrono con el pico de disolvente).
Compuesto de referencia I-459
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que se usó ácido 5-oxociclohex-2-carboxílico (1,2 equiv.) como reactivo ácido y 2,5 equivalentes de T3P. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 3-10 % metanol en diclorometano, seguido de una segunda purificación mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 7-12 % (7:1 metanol/acetonitrilo) en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-459 (12,6 mg, rendimiento 15 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 58,79 (s, 1 H), 8,70 (d, 1 H), 8,13 (d, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,26-7,32 (m, 1 H), 7,08-7,13 (m, 1 H), 7,02-7,08 (m, 1 H), 6,87-6,93 (m, 2 H, 2 desplazamientos isocronos), 5,95 (s, 2H), 4,41-4,49 (m, 1 H), 2,52 2,60 (m, 1 H), 2,40-2,50 (m, 1 H), 2,32-2,40 (m, 1 H), 2,20-2,30 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-464
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que se usó ácido 5-oxipirrolidin-3-carboxílico (1,2 equiv.) como reactivo ácido y 2,5 equivalentes de T3P. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 3-10 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-464 (31,3 mg, 31 % rendimiento) como un sólido blanco.1
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 58,79 (s, 1 H), 8,69 (d, 1 H), 8,13 (d, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,26-7,31 (m, 1 H), 7,07-7,13 (m, 1 H), 7,02-7,07 (m, 1 H), 6,86-6,93 (m, 2 H, 2 desplazamientos isocronos), 5,97 (s, 2 H), 3,67-3,76 (m, 1 H), 3,57 3,65 (m, 2 H), 2,60-2,72 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-461
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que el ácido 1-(benziloxi)ciclopropanocarboxílico (1 equiv.) fue el reactivo ácido y se usaron 2,5 equivalentes de T3P. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 30-50 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-461 (14,2 mg, rendimiento 19 %) como un sólido de color tostado.
1 H - R M N ( 500 M H z , C D C l a ) 5 9 , 33 ( s , 1 H ) , 8 , 73 (d , 1 H ) , 8 , 48 (d , 1 H ) , 8 , 08 (d , 1 H ) , 7 , 42 ( s , 1 H ) , 7 , 34 - 7 , 4 1 ( m , 4 H ) , 7 , 29 - 7 , 3 2 ( m , 1 H ) , 7 , 18 - 7 , 2 3 ( m , 1 H ) , 7 , 0 2 - 7 , 06 ( m , 1 H ) , 6 , 9 7 - 7 , 0 1 ( m , 1 H ) , 6 , 84 - 6 , 88 ( m , 1 H ) , 6 , 61 (d , 1 H ) , 6 , 03 ( s , 2 H ) , 4 , 68 ( s , 2 H ) , 1 , 4 5 - 1 , 5 1 ( m , 2 H ) , 1 , 3 2 - 1 , 3 7 ( m , 2 H ) .
Compuesto de referencia I-469
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que el ácido 2-(tiazol-2-il)acético fue el reactivo ácido. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 3-8 % metanol en diclorometano, seguido de una segunda purificación mediante HPLC de fase inversa con un gradiente de 10-95 % acetonitrilo en agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-469 (4,3 mg, rendimiento 6 %) como un sólido de color tostado.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,81 (s, 1 H), 8,69 (d, 1 H), 8,20 (d, 1 H), 7,81 (d, 1 H), 7,61 (d, 1 H), 7,57 (s, 1 H), 7,25 7,33 (m, 1 H), 7,08-7,13 (m, 1 H), 7,02-7,07 (m, 1 H), 6,87-6,96 (m, 2 H, 2 desplazamientos isocronos), 5,99 (s, 2 H), 3,30 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-465
A una solución de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)--pirimidin-4-amina (producto intermedio descrito en WO2012/3405 A1; 1 equiv.) en diclorometano se añadió anhídrido trifluoroacético (3 equiv.) seguido de trietilamina (3 equiv.). La reacción se calentó a 60 °C durante 20 min, tras lo cual la reacción se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1-3 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-465 (26,8 mg, 28 % rendimiento) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,77 (s, 1 H), 8,56 (br. s, 1 H), 8,40 (s, 1 H), 7,44 (s, 1 H), 7,19-7,25 (m, 1 H), 7,02-7,08 (m, 1 H), 6,96-7,02 (m, 1 H), 6,81-6,88 (m, 1 H), 6,62 (d, 1 H), 6,02 (s, 2H).
Compuesto de referencia I-470
A una mezcla del compuesto de referencia I-38 (1 equiv.), ácido 1-hidroxiciclopropanocarboxílico (1,1 equiv.) y 4-dimetilaminopiridina (0,1 equiv.) en diclorometano se añadió trietilamina (3 equiv.) seguido de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (1,1 equiv.). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12 h, tras lo cual la reacción se diluyó con agua y solución de ácido clorhídrico 1N y se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 10-95 % acetonitrilo en agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-470 (1,3 mg, rendimiento 4 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCla) 88,50 (d, 1 H), 8,26 (s, 1 H), 7,33 (s, 1 H), 7,19-7,26 (m, 1 H), 6,97-7,07 (m, 3 H), 6,67 (m, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 5,31 (m, 1 H), 4,91-5,04 (m, 2 H), 4,42-4,75 (m, 2 H), 4,16-4,32 (m, 1 H), 1,28-1,43 (m, 2H), 0,79-0,92 (m, 2 H); no se observó 1 protón intertambiable.
Compuesto de referencia I-471
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que el ácido 3,3,3-trifluoropropanoico fue el reactivo ácido, se usaron 2,5 equivalentes de T3P y la reacción se agitó a 23 °C durante 24 h. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 3-10 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-471 (79,3 mg, rendimiento 85 %) como un sólido de color tostado.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,78 (d, 1 H), 8,48 (d, 1 H), 8,47 (br. s, 1 H), 8,09 (d, 1 H), 8,03 (s, 1 H), 7,47 (s, 1 H), 7,19-7,24 (m, 1 H), 7,02-7,09 (m, 1 H), 6,96-7,01 (m, 1 H), 6,81-6,86 (m, 1 H), 6,61 (d, 1 H), 6,03 (s, 1 H), 3,29 (q, 2 H).
Compuesto de referencia I-472
A una solución del producto intermedio 2 (1 equiv.) en diclorometano se añadió cloruro de metilsulfonilmetilsulfonilo (1,08 equiv.) seguido de 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (1 equiv.). La reacción se calentó a 60 °C durante 1 h, tras lo cual la reacción se diluyó con agua y solución de ácido clorhídrico 1 N y se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 3-8 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-472 (39,6 mg, 37 % rendimiento) como un sólido blanco.1
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,55 (d, 1 H), 8,26 (br. s, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,26-7,30 (m, 1 H), 7,07-7,16 (m, 3 H), 6,84-6,91 (m, 1 H), 6,62-6,67 (m, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 4,60 (s, 2 H), 3,17 (s, 3 H); no se observó 1 protón N-H.
Compuesto de referencia I-486
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que el ácido 4-sulfamoilbutanoico fue el reactivo ácido, y se usaron 2,5 equivalentes de T3P. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 3-10 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-486 (14,7 mg, rendimiento 15 %) como un sólido blanco.
1 H - R M N ( 500 M H z , C D 3O D ) 58 ,78 (s, 1H ) , 8 , 66 (d , 1 H ) , 8 , 12 (d , 1 H ) , 7 , 52 ( s , 1 H ) , 7 , 25 - 7 , 3 2 ( m , 1 H ) , 7 , 0 7 - 7 , 13 ( m , 1 H ) , 7 , 0 2 - 7 , 0 7 ( m , 1 H ) , 6 , 86 - 6 , 91 ( m , 2 H , 2 d e s p l a z a m i e n t o s is o c r o n o s ) , 5 , 97 ( s , 2 H ) , 3 , 19 (t, 2 H ) , 2 , 71 (t, 2 H ) , 2 , 21 ( m , 2 H ) .
Compuesto de referencia I-496
A suspensión a 0 °C del producto intermedio 2 (1 equiv.) en diclorometano se añadió trimetilaluminio (solución 2 M en tolueno, 0,45 equiv.). La reacción se calentó a 23 °C tras lo cual se añadió a,a-dimetil-Y-butirolactona (1,1 equiv.). La reacción se calentó a 80 °C durante 16 h, se enfrió hasta 23 °C, a continuación se diluyó con solución de cloruro de amonio saturado, se extrajo con acetato de etilo y se lavó con solución de ácido clorhídrico 1N. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-75 % de un acetonitrilo en agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-496 (7,7 mg, rendimiento 25 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 58,71 (d, 1 H), 8,47 (d, 1 H), 8,34 (d, 1 H), 7,41 (s, 1 H), 7,17-7,24 (m, 1 H), 7,01-7,07 (m, 1 H), 6,95-6,99 (m, 1 H), 6,85-6,90 (m, 1 H), 6,60 (d, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,15 (t, 2 H), 2,04 (t, 2 H), 1,29 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-501
A una mezcla del producto intermedio 1 (1 equiv.) y 5-(trifluorometil)pirrolidin-2-ona (1,2 equiv.) en 1,4-dioxano se añadió carbonato de cesio (1,5 equiv.). La reacción se calentó a 100 °C durante 16 h, tras lo cual la reacción se diluyó con agua, se extrajo con diclorometano, y se lavó con solución saturada de bicarbonato de sodio. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 10-95 % acetonitrilo en agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-501 (13,4 mg, rendimiento 13 %) como un sólido blanquecino. 1H-RMN (500 MHz, CDCla) 58,76 (d, 1 H), 8,49 (d, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,21-7,26 (m, 1 H), 7,03-7,07 (m, 1 H), 6,98-7,02 (m, 1 H), 6,86-6,92 (m, 1 H), 6,61 (d, 1 H), 6,01 (s, 2 H), 5,34-5,39 (m, 1 H), 2,88-2,99 (m, 1 H), 2,58-2,70 (m, 2 H), 2,40-2,46 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-503
A una mezcla del producto intermedio 1 (1 equiv.) y 1,1 -dióxido de isotiazolidina (1,2 equiv.) en 1,4-dioxano se añadió carbonato de cesio (1,5 equiv.). La reacción se calentó a 100 °C durante 16 h, tras lo cual la reacción se diluyó con agua, y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 3-10 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-503 (71,3 mg, rendimiento 73 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 58,57 (d, 1 H), 8,47 (d, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,20-7,25 (m, 1 H), 7,03-7,07 (m, 1 H), 6,96 7,01 (m, 1 H), 6,84-6,88 (m, 1 H), 6,61 (m, 1 H), 5,99 (s, 2 H), 4,27 (t, 2 H), 3,44 (t, 2 H), 2,66 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-506
A una mezcla del producto intermedio 1 (1 equiv.) y piperidin-2-ona (1,2 equiv.) en 1,4-dioxano se añadió carbonato de cesio (1,5 equiv.). La reacción se calentó a 100 °C durante 16 h, tras lo cual la reacción se diluyó con agua, se extrajo con diclorometano, y se lavó con solución de hidróxido de sodio 1N. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron alvacío.El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-95 % de un acetonitrilo en agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-506 (4,9 mg, rendimiento 5 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 58,64 (d, 1 H), 8,48 (d, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,19-7,23 (m, 1 H), 7,03-7,07 (m, 1 H), 6,97 7,01 (m, 1 H), 6,85-6,88 (m, 1 H), 6,60 (d, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,00 (t, 2 H), 2,65 (t, 2 H), 1,98-2,07 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-512
A una mezcla del producto intermedio 1 (1 equiv.) y 5,5- dimetilpirrolidin-2-ona (1,2 equiv.) en 1,4-dioxano se añadió carbonato de cesio (1,5 equiv.). La reacción se calentó a 100 °C durante 16 h, tras lo cual la reacción se diluyó con agua, se extrajo con diclorometano, y se lavó con solución saturada de bicarbonato de sodio. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 10-95 % acetonitrilo en agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-512 (0,6 mg, rendimiento 1 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 58,69 (d, 1 H), 8,49 (d, 1 H), 7,28 (s, 1 H), 7,20-7,25 (m, 1 H), 7,01-7,06 (m, 1 H), 6,98 7,01 (m, 1 H), 6,89-6,95 (m, 1 H), 6,60 (d, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 2,67 (t, 2 H), 2,14 (t, 2 H), 1,63 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-526 y compuesto de referencia I-527
A u n a m e z c l a d e l p r o d u c t o in t e r m e d io 1 ( 1 e q u iv . ) y u n a m e z c l a i n s e p a r a b l e d e 3 - m e t i l - 3 - ( m e t i l s u l f o n i l ) p i r r o l i d i n - 2 - o n a y 4 - h i d r o x i - 2 - m e t i l - 2 - ( m e t i l s u l f o n i l ) - - b u t a n a m i d a ( c o m b in a d a , 1 e q u iv . ) e n 1 , 4 - d i o x a n o s e a ñ a d i ó c a r b o n a t o d e c e s i o (1,5 equiv.). La reacción se calentó a 100 °C durante 16 h, tras lo cual la reacción se diluyó con agua, y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-95 % acetonitrilo en agua proporcionando los compuestos deseados, el compuesto de referencia I-526 (0,5 mg, rendimiento 2 %) y el compuesto de referencia I-527 (1,3 mg, rendimiento 5 %) como un sólido blanco.
1H-RMN para el Compuesto de referencia I-526 (500 MHz, CDCh) 88,73 (d, 1 H), 8,49 (d, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,20 7,25 (m, 1 H), 7,02-7,06 (m, 1 H), 6,96-7,01 (m, 1 H), 6,84-6,89 (m, 1 H), 6,61 (d, 1 H), 6,01 (s, 2 H), 4,28-4,33 (m, 1 H), 4,18-4,23 (m, 1 H), 3,20-3,25 (m, 1 H), 3,12 (s, 3 H), 2,29-2,35 (m, 1 H), 2,87 (s, 3 H).
1H-RMN para el Compuesto de referencia I-527 (500 MHz, CDCla) 88,50 (d, 1 H), 8,44 (d, 1 H), 7,38 (s, 1 H), 7,20 7,26 (m, 1 H), 7,06-7,11 (m, 1 H), 7,02-7,06 (m, 1 H), 6,95-7,03 (m, 1 H), 6,65 (d, 1 H), 6,00 (d, 1 H), 5,98 (d, 1 H), 5,91 (br. s, 1 H), 4,82-4,86 (m, 1 H), 4,74-4,78 (m, 1 H), 3,03 (s, 3 H), 2,86-2,90 (m, 1 H), 2,48-2,52 (m, 1 H), 1,76 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-533
A una mezcla del producto intermedio 1 (1 equiv.) y pirrolidin-2,5-ona (1,3 equiv.) en 1,4-dioxano se añadió carbonato de cesio (1,5 equiv.). La reacción se calentó a 100 °C durante 16 h, tras lo cual la reacción se diluyó con agua, se extrajo con acetato de etilo, y se lavó con solución de hidróxido de sodio 1N. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-95 % acetonitrilo en agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-533 (3,8 mg, rendimiento 5 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,86 (d, 1 H), 8,47 (d, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,20-7,24 (m, 1 H), 7,01-7,06 (m, 1 H), 6,96 7,00 (m, 1 H), 6,81-6,85 (m, 1 H), 6,59 (d, 1 H), 6,02 (s, 2 H), 3,02 (s, 4 H).
Compuesto de referencia I-534
A una mezcla del producto intermedio 1 (1 equiv.) y 5- oxipirrolidin-2-carboxamida (1,2 equiv.) en 1,4-dioxano se añadió carbonato de cesio (1,5 equiv.). La reacción se calentó a 100 °C durante 24 h, tras lo cual la reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5 75 % acetonitrilo en agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-534 (0,6 mg, rendimiento 1 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,62 (d, 1 H), 8,50 (d, 1 H), 7,31 (s, 1 H), 6,99-7,07 (m, 3 H), 6,61 (d, 1 H), 6,01 (d, 1 H), 5,85 (d, 2 H), 5,29 (s, 2 H), 4,92-4,96 (m, 1 H), 2,87-2,93 (m, 1 H), 2,58-2,63 (m, 1 H), 2,43-2,55 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-590
A una mezcla del producto intermedio 1 (1 equiv.) y 5- oxipirrolidin-3-carboxamida (1,3 equiv.) en 1,4-dioxano se añadió carbonato de cesio (1,5 equiv.). La reacción se calentó a 100 °C durante 16 h, después de lo cual la reacción se diluyó con agua, se extrajo con acetato de etilo y se lavó con una solución de ácido clorhídrico 1N. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 5-12 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-590 (3,2 mg, rendimiento 3 %) como un sólido de color tostado.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,76 (d, 1 H), 8,74 (d, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,25-7,29 (m, 1 H), 7,07-7,11 (m, 1 H), 7,02 7,07 (m, 1 H), 6,91 (d, 1 H), 6,83-6,87 (m, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 4,26-4,37 (m, 2 H), 3,45-3,49 (m, 1 H), 2,84-2,94 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-691
A una mezcla del producto intermedio 1 (1 equiv.) y 3-metil-2-oxopirrolidin-3-carboxilato de etilo (1,2 equiv.) en 1,4-dioxano se añadió carbonato de cesio (1,5 equiv.). La reacción se calentó a 75 °C durante 16 h, tras lo cual la reacción se diluyó con solución de cloruro de amonio saturado y se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 3-7 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-691 (377 mg, 92 % rendimiento) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,68 (d, 1 H), 8,48 (d, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,19-7,25 (m, 1 H), 7,01-7,06 (m, 1 H), 6,96 7,01 (m, 1 H), 6,86-6,90 (m, 1 H), 6,60 (d, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,26 (q, 2 H), 4,15-4,21 (m, 2 H), 2,75-2,80 (m, 1 H), 2,17-2,23 (m, 1 H), 1,59 (s, 3 H), 1,30 (t, 3H).
Compuesto de referencia I-604
A u n a s u s p e n s i ó n d e l c o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 591 ( 1 e q u iv . ) e n t e t r a h id r o f u r a n o / a g u a s e a ñ a d i ó u n a s o l u c i ó n a c u o s a 1 M d e h id r ó x id o d e s o d io ( 2 e q u iv . ) . L a r e a c c i ó n s e a g it ó a t e m p e r a t u r a a m b ie n t e d u r a n t e 2 h , t r a s lo c u a l la r e a c c i ó n se concentró a ~50%de su volumen, se acidificó mediante la adición de una solución acuosa de ácido clorhídrico 1 M y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-604 (154,6 mg, rendimiento 95 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,77-8,80 (m, 2 H, 2 desplazamientos solapados), 7,57 (s, 1 H), 7,28-7,32 (m, 1 H), 7,09-7,13 (m, 1 H), 7,04-7,09 (m, 1 H), 6,94 (d, 1 H), 6,86-6,90 (m, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,26-4,31 (m, 1 H), 4,16-4,20 (m, 1 H), 2,75-2,79 (m, 1 H), 2,27-2,31 (m, 1 H), 1,54 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-605
A una solución de -78 °C del compuesto de referencia I-604 (1 equiv.) en diclorometano se añadió cloruro de oxalilo (solución 2 M en diclorometano, 2,5 equiv.). La reacción se agitó a -78 °C durante 30 min, después se calentó a 0 °C y se agitó a esa temperatura durante 1 h. La reacción se concentró a continuación al vacío, se reconstituyó en diclorometano y se enfrió a -78 °C. A esta solución se añadió ciclopropilamina (5 equiv.), tras lo cual la reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Al cabo de 20 min, la reacción se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 1-8 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-604 (14,5 mg, 23 % rendimiento) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCla) 88,70 (d, 1 H), 8,49 (d, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,20-7,25 (m, 1 H), 7,01-7,08 (m, 1 H), 6,97 7,01 (m, 1 H), 6,86-6,90 (m, 1 H), 6,60 (d, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,06-4,09 (m, 2 H), 3,00-3,06 (m, 1 H), 2,75-2,80 (m, 1 H), 2,14-2,29 (m, 1 H), 1,58 (s, 3 H), 0,78-0,82 (m, 2 H), 0,51-0,54 (m, 2 H); no se observó 1 protón N-H.
Compuesto de referencia I-606
A una solución de -78 °C del compuesto de referencia I-604 (1 equiv.) en diclorometano se añadió una solución 2 M en diclorometano de cloruro de oxalilo (2,5 equiv.). La reacción se agitó a -78 °C durante 30 minutos, a continuación, se calentó hasta 0 °C, y se agitó a esa temperatura durante 1 h. La reacción se concentró a continuación al vacío, se reconstituyó en diclorometano, y se enfrió a -78 °C. A esta solución se añadió solución de hidróxido de amonio (50 equiv.), tras lo cual la reacción se dejó calentar a temperatura ambiente. Al cabo de 20 minutos, la reacción se diluyó en agua y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-619 (43,3 mg, rendimiento 75 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,71 (d, 1 H), 8,49 (d, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,20-7,25 (m, 1 H), 7,03-7,07 (m, 1 H), 6,97 7,01 (m, 1 H), 6,86-6,91 (m, 1 H), 6,60 (d, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,07-4,13 (m, 2 H), 2,97-3,03 (m, 1 H), 2,17-2,22 (m, 1 H), 1,65 (s, 3 H); no se observaron 2 protones N-H.
Compuesto de referencia I-612
Una suspensión del producto intermedio 1 (1 equiv) y ((2-carboxilatoetil)sulfonil)amida de potasio (1,15 equiv.) en DMSO se agitó a temperatura ambiente durante 72 h. La reacción se diluyó en agua, se lavó con diclorometano, se acidificó mediante la adición de una solución de ácido clorhídrico 1 M y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío proporcionando el producto intermedio ácido. A una suspensión de este producto intermedio ácido en diclorometano se añadió trietilamina (3 equiv.), seguido de cloruro de oxalilo (solución 2 M en diclorometano, 2 equiv). Al cabo de 15 min, la reacción se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa utilizando un gradiente de 5-75 % acetonitrilo en agua proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-612 (5,8 mg, rendimiento 12 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,86 (d, 1 H), 8,47 (d, 1 H), 7,43 (s, 1 H), 7,19-7,24 (m, 1 H), 7,01-7,06 (m, 1 H), 6,96 7,01 (m, 1 H), 6,83-6,88 (m, 1 H), 6,63 (d, 1 H), 6,02 (s, 2 H), 3,89 (t, 2 H), 3,35 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-615
A una mezcla del producto intermedio 1 (1 equiv.) y 3- dimetilpirrolidin-2-ona (1,2 equiv.) en 1,4-dioxano se añadió carbonato de cesio (1,5 equiv.). La reacción se calentó a 70 °C durante 12 h, tras lo cual la reacción se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-615 (59,7 mg, rendimiento 48 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 88,48 (d, 1 H), 8,46 (d, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,19-7,24 (m, 1 H), 7,02-7,07 (m, 1 H), 6,98 7,02 (m, 1 H), 6,89-6,94 (m, 1 H), 6,60 (d, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 5,92-5,96 (m, 1 H), 3,60-3,65 (m, 1 H), 3,47-3,52 (m, 1 H), 2,82-2,86 (m, 1 H), 2,33-2,41 (m, 1 H); no se observó 1 protón O-H.
Compuesto de referencia I-628
U n a s o l u c i ó n d e c l o r h id r a t o d e 1 - ( 2 - f l u o r o b e n c i l ) - 5 - ( i s o x a z o l - 3 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 3 - c a r b o x i m i d a m i d a ( g e n e r a d o e n la e t a p a 3 d e l p r o c e d im i e n t o g e n e r a l A , u s a n d o 1 - ( i s o x a z o l - 3 - i l ) e t a n o n a e n la e t a p a 1 y 2 - f l u o r o b e n z i l h i d r a z i n a e n la e t a p a 2 , 1 equiv.), 4-oxotetrahidrotiofen-3-carboxilato de metilo (3 equiv.), y 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (1 equiv.) en piridina se calentó a 80 °C durante 12 h. La reacción se concentró al vacío, se suspendió en metanol, se concentró al vacío y se volvió a suspender en metanol. El precipitado se filtró y se secó proporcionando el producto intermedio de sulfuro cíclico deseado (190 mg, rendimiento 45 %) como un sólido de color tostado claro. A una solución de este producto intermedio de sulfuro (1 equiv.) en diclorometano se añadió ácido peracético (2,3 equiv.). Al cabo de 30 min, la reacción se concentró al vacío, se suspendió en agua y se filtró proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-628 (148,8 mg, rendimiento 73 %) como un sólido blanquecino.
1H-RMN (500 MHz, CDCla) 810,2 (br. s, 1 H), 8,56 (s, 1 H), 7,31-7,34 (m, 1 H), 7,30 (s, 1 H), 7,07-7,12 (m, 3 H), 6,64 (m, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4,36 (s, 2 H), 4,35 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-632
Una suspensión del compuesto de referencia I-628 (1 equiv.) en oxicloruro de fósforo (62 equiv.) se calentó a 90 °C durante 2 h, tras lo cual la mezcla de reacción se concentró al vacío proporcionando el producto intermedio de cloropirimidina deseado (155 mg, rendimiento 100 %) como un sólido de color tostado. A una suspensión de este producto intermedio (1 equiv.) en dioxano se añadió una solución de hidróxido de amonio (440 equiv.). La reacción se agitó a 23 °C durante 15 h, a continuación se calentó a 60 °C durante 1 h, tras lo cual la mezcla se diluyó en agua y se extrajo con acetato de etilo. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-632 (44,5 mg, rendimiento 60 %) como un sólido de color tostado. 1H-RMN (500 MHz, DMSO-de) 89,09 (d, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,31-7,35 (m, 1 H), 7,27 (d, 1 H), 7,21-7,24 (m, 1 H), 7,09-7,13 (m, 1 H), 6,83-6,87 (m, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,49 (s, 2 H), 4,31 (s, 2 H).
Compuestos de referencia I-497 y I-524
Una solución del producto intermedio 2 (1 equiv.), trietilamina (3,5 equiv.), DMAP (0,1 equiv.), y 2-cloro-2-oxetilacetato (2,2 equiv.) en diclorometano se calentó a 60 °C durante 26 h. El disolvente se retiró al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-497 (30 mg, rendimiento 23 %) como un sólido blanco, y un producto secundario, el compuesto de referencia I-524 (4,5 mg, rendimiento 4 %) como un sólido blanco.
1H-RMN para el Compuesto de referencia I-497 (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,37 (m, 1 H), 9,11 (d, 1 H), 8,75 (d, 1 H), 7,94 (m, 1 H), 7,66 (s, 1 H), 7,35 (m, 1 H), 7,27 (d, 2 H), 7,11 (m, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4,77 (s, 2 H), 2,12 (s, 3 H).
1H-RMN para el Compuesto de referencia I-524 (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,13 (m, 1 H), 9,09 (m, 1 H), 8,72 (m, 1 H), 8,00 (m, 1 H), 7,65 (s, 1 H), 7,35 (m, 1 H), 7,26 (s, 2 H), 7,12 (m, 1 H), 6,88 (m, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 2,15 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-499
A una suspensión del compuesto de referencia I-497 (1 equiv.) en metanol se añadió una solución de carbonato de potasio (0,5 equiv.) en agua. Después de agitar durante 1 h a 23 °C, se añadieron 0,5 equivalentes adicionales de carbonato de potasio en agua al recipiente, junto con THF (volumen igual al volumen de partida de metanol). La reacción se dejó en agitación durante 1 h más a 23 °C. El disolvente se retiró al vacío y el material bruto resultante se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-5 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-499 (10,5 mg, rendimiento 17 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,43 (m, 1 H), 9,11 (m, 1 H), 8,75 (m, 1 H), 8,01 (m, 1 H), 7,68 (s, 1 H), 7,34 (m, 1 H), 7,24 (m, 2 H), 7,12 (m, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 5,61 (m, 1 H), 4,11 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-525
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido 4-(benziloxi)tetrahidro-2H-piran-4-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-525 (9 mg, rendimiento 27 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,39 (m, 1 H), 8,91 (m, 1 H), 8,56 (s, 1 H), 8,36 (m, 1 H), 7,53 (m, 1 H), 7,38 (m, 5 H), 7,26 (m, 1H), 7,07 (s, 3 H), 6,65 (s, 1 H), 6,02 (s, 2 H), 4,51 (s, 2 H), 3,96 (m, 2 H), 3,87 (m, 2 H), 2,28 (m, 2 H), 1,99 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-528
E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo s e p r e p a r ó s i g u i e n d o e l p r o c e d im i e n t o g e n e r a l C e n e l f o r m a t o d e b ib l io t e c a , s a l v o q u e e l á c id o 2 - m e t o x i a c é t i c o f u e e l r e a c t iv o á c id o , y e l m a t e r ia l b r u t o s e p u r i f ic ó m e d ia n t e H P L C d e f a s e in v e r s a p r o p o r c io n a n d o e l c o m p u e s t o d e s e a d o , e l c o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 528 ( 7 m g , r e n d im ie n t o 58 % ) c o m o u n s ó l id o b la n c o .
1 H - R M N ( 500 M H z , D M S O - d a ) 5 p p m 9 , 18 ( m , 1 H ) , 8 , 75 ( m , 1 H ) , 8 , 47 ( m , 1 H ) , 8 , 18 ( m , 1 H ) , 7 , 50 ( m , 1 H ) , 7 , 21 ( m ,
1 H ) , 7 , 05 ( m , 1 H ) , 6 , 97 ( m , 1 H ) , 6 , 83 ( m , 1 H ) , 6 , 61 ( m , 1 H ) , 6 , 05 ( m , 2 H ) , 4 , 08 ( m , 2 H ) , 3 , 52 ( s , 3 H ) .
Compuesto de referencia I-532
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido oxazol-4-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-532 (3,8 mg, rendimiento 15 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 10,39 (m, 1 H), 9,09 (m, 2 H), 8,82 (m, 1 H), 8,65 (m, 1 H), 8,11 (m, 1 H), 7,73
(m, 1 H), 7,29 (m, 3 H), 7,13 (m, 1 H), 6,88 (m, 1 H), 5,94 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-547
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido
3-metoxipropanoico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-547 (4,9 mg, rendimiento 20 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 11,09 (m, 1 H), 9,09 (m, 1 H), 8,72 (m, 1 H), 8,02 (m, 1 H), 7,64 (s, 1 H), 7,34 (m, 1 H), 7,23 (m, 2 H), 7,12 (m, 6,89 (m, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 3,61 (t, 2 H), 3,23 (s, 3 H), 2,70 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-548
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que la tosilalanina fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-548 (3,1 mg, rendimiento 9 %) como un sólido blanco.
Compuesto de referencia I-549
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido tiazol-4-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-549 (3,7 mg, rendimiento 14 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 10,20 (m, 1 H), 9,31 (m, 1 H), 9,09 (m, 1 H), 8,84 (m, 1 H), 8,72 (m, 1 H), 8,14 (m, 1 H), 7,73 (m, 1 H), 7,29 (m, 3 H), 7,13 (m, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 5,94 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-550
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido
1H-pirrol-2-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-550 (3,4 mg, rendimiento 13 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 11,84 (m, 1 H), 10,84 (m, 1 H), 9,09 (m, 1 H), 8,73 (m, 1 H), 8,16 (m, 1 H), 7,68
(s, 1 H), 7,36 (m, 2 H), 7,24 (m, 2 H), 7,13 (m, 1 H), 7,06 (m, 1 H), 6,88 (m, 1 H), 6,19 (m, 1 H), 5,94 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-551
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido
1-cianociclopropano-1-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-551 (3,3 mg, rendimiento 13 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 11,02 (m, 1 H), 9,09 (m, 1 H), 8,74 (m, 1 H), 7,88 (m, 1 H), 7,67 (s, 1 H), 7,33
(m, 1 H), 7,27 (m, 1 H), 7,23 (m, 1 H), 7,12 (m, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 1,74 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-552
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido tiazol-5-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-552 (2,3 mg, rendimiento 9 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 11,71 (m, 1 H), 9,35 (m, 1 H), 9,12 (m, 1 H), 8,96 (m, 1 H), 8,79 (m, 1 H), 8,08
(m, 1 H), 7,70 (m, 1 H), 7,34 (m, 1 H), 7,24 (m, 2 H), 7,12 (m, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 5,95 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-553
E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo s e p r e p a r ó s i g u i e n d o e l p r o c e d im i e n t o g e n e r a l C e n e l f o r m a t o d e b ib l io t e c a , s a l v o q u e e l á c id o
6 - o x o - 1 ,6 - d i h i d r o p i r i d i n - 2 - c a r b o x í l i c o f u e e l r e a c t iv o á c id o , y e l m a t e r ia l b r u t o s e p u r i f ic ó m e d ia n t e H P L<c>d e f a s e inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-553 (1,9 mg, rendimiento 7 %) como un sólido blanco.
Compuesto de referencia I-554
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido 3-metoxiisoxazol-1-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-554 (4,6 mg, rendimiento 17 %) como un sólido blanco.
Compuesto de referencia I-555
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido pirimidin-4-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-555 (1,6 mg, rendimiento 6 %) como un sólido blanco.
Compuesto de referencia I-556
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido oxazol-5-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-556 (4,4 mg, rendimiento 17 %) como un sólido blanco.
Compuesto de referencia I-557
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido oxazol-4-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-557 (4,4 mg, rendimiento 17 %) como un sólido blanco.
Compuesto de referencia I-558
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido ciclopropanocarboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-558 (5,1 mg, rendimiento 21 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 11,42 (m, 1 H), 9,11 (m, 1 H), 8,69 (m, 1 H), 8,01 (m, 1 H), 7,66 (m, 1 H), 7,34 (m, 1 H), 7,24 (m, 2 H), 7,12 (m, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 5,93 (m, 2 H), 2,12 (m, 1 H), 0,87 (d, 4 H).
Compuesto de referencia I-559
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido (S)-2-metoxi-2-fenilacético fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-559 (6,8 mg, rendimiento 24 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 811,03 (m, 1 H), 9,09 (m, 1 H), 8,72 (m, 1 H), 7,96 (m, 1 H), 7,67 (m, 1 H), 7,51 (m, 2 H), 7,36 (m, 4 H), 7,23 (m, 2 H), 7,12 (m, 1 H), 6,87 (m, 1 H), 5,93 (m, 2 H), 5,12 (m, 1 H), 3,34 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-560
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido furano-2-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-560 (5,2 mg, rendimiento 20 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,10 (m, 1 H), 9,09 (m, 1 H), 8,75 (m, 1 H), 8,10 (m, 1 H), 8,00 (m, 1 H), 7,78 (m, 1 H), 7,69 (m, 1 H), 7,34 (m, 1 H), 7,24 (m, 2 H), 7,12 (m, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 6,73 (m, 1 H), 5,94 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-561
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido tiofen-2-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-561 (3,9 mg, rendimiento 15 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,39 (m, 1 H), 9,10 (m, 1 H), 8,78 (m, 1 H), 8,36 (m, 1 H), 8,10 (m, 1 H), 7,95 (m, 1 H), 7,70 (s, 1 H), 7,34 (m, 1 H), 7,25 (m, 3 H), 7,12 (m, 1 H), 6,88 (m, 1 H), 5,95 (m, 2 H).
C o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 562
E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo s e p r e p a r ó s i g u i e n d o e l p r o c e d im i e n t o g e n e r a l C e n e l f o r m a t o d e b ib l io t e c a , s a l v o q u e e l á c id o
2 - e t o x i a c é t i c o f u e e l r e a c t iv o á c id o , y e l m a t e r ia l b r u t o s e p u r i f ic ó m e d ia n t e H P L C d e f a s e i n v e r s a p r o p o r c io n a n d o e l c o m p u e s t o d e s e a d o , e l c o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 562 ( 5 , 7 m g , r e n d im ie n t o 23 % ) c o m o u n s ó l id o b la n c o .
1H-RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 10,70 (m, 1 H), 9,10 (m, 1 H), 8,73 (m, 1 H), 8,00 (m, 1 H), 7,66 (m, 1 H), 7, (m, 1 H), 7,23 (m, 2 H), 7,11 (m, 6,89 (m, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4,17 (s, 2 H), 3,55 (m, 2 H), 1,17 (m, 3 H).
Compuesto de referencia I-563
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido
2- (metilsulfonil)acético fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-563 (3 mg, rendimiento 11 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 11,53 (m, 1 H), 9,08 (m, 1 H), 8,78 (m, 1 H), 7,99 (m, 1 H), 7,66 (m, 1 H), 7, (m, 1 H), 7,23 (m, 2 H), 7,12 (m, 6,91 (m, 1 H), 5,93 (m, 2 H), 4,46 (m, 2 H), 3,17 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-564
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido
3- ciclopropil-1H-pirazol-5-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLc de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-564 (1,2 mg, rendimiento 4 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,84 (br s, 1 H), 9,10 (m, 1 H), 8,77 (m, 1 H), 8,07 (m, 1 H), 7,72 (m, 1 H), 7,34
(m, 1 H), 7,28 (m, 1 H), 7,23 (m, 1 H), 7,12 (m, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 6,61 (m, 1 H), 5,95 (m, 2 H), 1,96 (m, 1 H), 0,98 (m,
2 H), 0,76 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-565
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido
2-acetoxi-2-fenilacético fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-565 (4,1 mg, rendimiento 14 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,60 (m, 1 H), 9,08 (m, 1 H), 8,72 (m, 1 H), 7,92 (m, 1 H), 7,65 (m, 1 H), 7,59
(m, 2 H), 7,41 (m, 3 H), 7,33 (m, 1 H), 7,23 (m, 2 H), 7,11 (m, 1 H), 6,88 (m, 1 H), 6,17 (s, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 2,15 (s,
3 H).
Compuesto de referencia I-569
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido
1- metilciclopropano-1-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-569 como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,81 (m, 1 H), 8,69 (m, 1 H), 8,18 (m, 1 H), 7,59 (m, 1 H), 7,31 (m, 1 H), 7,10 (m,
2 H), 6,93 (m, 2 H), 6,01 (m, 2 H), 1,52 (s, 3 H), 1,32 (m, 2 H), 0,84 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-570
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido tetrahidrofurano-2-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-570 como un sólido blanco.12
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,79 (m, 1 H), 8,72 (m, 1 H), 8,17 (m, 1 H), 7,55 (m, 1 H), 7,29 (m, 1 H), 7,09 (m, 2 H), 6,92 (m, 2 H), 5,99 (m, 2 H), 4,53 (m, 1 H), 4,13 (m, 1 H), 3,98 (m, 1 H), 2,39 (m, 1 H), 2,14 (m, 1 H), 2,01 (m, 2
H).
Compuesto de referencia I-571
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido
2- (5-metil-2,4-dioxo-3,4-dihidropirimidin-1(2H)-il)acético fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-571 como un sólido blanco.
1 H - R M N ( 500 M H z , C D 3 O D ) 8 p p m 8 , 79 (d , 1 H ) , 8 , 69 (d , 1 H ) , 8 , 09 (d , 1 H ) , 7 , 54 ( s , 1 H ) , 7 , 43 ( d , 1 H ) , 7 , 3 2 - 7 , 25 ( m ,
1 H ) , 7 , 14 - 7 , 0 1 ( m , 2 H ) , 6 , 96 - 6 , 89 ( m , 1 H ) , 6 , 88 ( d , 1 H ) , 5 , 98 ( s , 2 H ) , 4 , 70 ( s , 2 H ) , 1 , 91 (d , 3 H ) .
C o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 572
E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo s e p r e p a r ó s i g u i e n d o e l p r o c e d im i e n t o g e n e r a l C e n e l f o r m a t o d e b ib l io t e c a , s a l v o q u e e l á c id o 3 , 3 , 3 - t r i f l u o r o - 2 - m e t o x i - 2 - f e n i l p r o p a n o i c o f u e e l r e a c t iv o á c id o , y e l m a t e r ia l b r u t o s e p u r i f ic ó m e d ia n t e H P L C d e f a s e i n v e r s a p r o p o r c io n a n d o e l c o m p u e s t o d e s e a d o , e l c o m p u e s t o d e r e f e r e n c ia I - 572 c o m o u n s ó l id o b la n c o .
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,79 (m, 2 H), 8,19 (m, 1 H), 7,64 (m, 2 H), 7,57 (m, 1 H), 7,48 (m, 3 H), 7,30 (m, 1 H), 7,08 (m, 2 H), 6,92 (m, 2 H), 5,99 (m, 2 H), 3,63 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-574
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido tetrahidro-2H-pirano-4-carboxílico fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-574 como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,81 (d, 1 H), 8,66 (s, 1 H), 8,20 (d, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,30 (m, 1 H), 7,09 (m, 2 H), 6,93 (m, 1 H), 6,88 (d, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,02 (m, 2 H), 3,52 (m, 2 H), 2,80 (m, 1 H), 1,85 (d, 4 H).
Compuesto de referencia I-577
El producto intermedio protegido con acetilo se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido 2-acetoxibenzoico era el reactivo ácido. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el producto intermedio deseado. A continuación, el producto intermedio se disolvió en una mezcla de metanol:agua (8:1) y se trató con hidróxido de litio (4,5 equiv.) y una pequeña cantidad de THF (300 |jl). Tras completar la reacción, las sustancias volátiles se retiraron al vacío y el residuo se trató con solución de HCl 1N hasta alcanzar un pH ~4. La mezcla se extrajo con acetato de etilo y las capas orgánicas se lavaron con agua y salmuera. El contenido se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-577 (10 mg, rendimiento 33 %, 2 etapas) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,81 (m, 1 H), 11,12 (m, 1 H), 9,10 (d, 1 H), 8,79 (m, 1 H), 8,20 (m, 1 H), 8,00 (m, 1 H), 7,66 (s, 1 H), 7,51 (m, 1 H), 7,34 (m, 1 H), 7,28 (d, 1 H), 7,23 (m, 1 H), 7,08 (m, 3 H), 6,90 (m, 1 H), 5,96 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-579
Una solución de ácido 2-cianoacético (4 equiv.) en DMF se enfrió a 0 °C, y se trató con cloruro de oxalilo (4,1 equiv.) como una solución en DMF. Se observó liberación de gas y el contenido se agitó a 0 °C durante 30 min. Se añadió el producto intermedio 2 (1 equiv.) a la reacción, y el contenido se agitó durante 18 h, mientras se dejaba calentar hasta 23 °C. Los disolventes se retiraron al vacío y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-579 (2,3 mg, rendimiento 10 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,47 (m, 1 H), 9,10 (d, 1 H), 8,78 (m, 1 H), 7,94 (m, 1 H), 7,65 (s, 1 H), 7,34 (d, 1 H), 7,24 (m, 2 H), 7,12 (m, 1 H), 6,91 (t, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 4,05 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-594
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el 1,1-dióxido de ácido 2-metil-2,3-dihidrobenzo[b]tiofen-2-carboxílico fue el reactivo ácido y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-594 (7,4 mg, rendimiento 23 %) como un sólido amarillo.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 10,96 (m, 1 H), 9,09 (m, 1 H), 8,77 (m, 1 H), 7,93 (m, 1 H), 7,79 (m, 1 H), 7,68 (s, 2 H), 7,57 (m, 2 H), 7,34 (m, 1 H), 7,24 (m, 2 H), 7,12 (m, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 4,11 (m, 1 H), 3,30 (m, 1 H), 1,89 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-596
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido 2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)acético fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-596 (17,4 mg, rendimiento 56 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,60 (m, 1 H), 9,09 (m, 1 H), 8,74 (m, 1 H), 7,91 (m, 5 H), 7,65 (m, 1 H), 7,35 (m, 1 H), 7,24 (m, 2 H), 7,12 (m, 1 H), 6,92 (m, 1 H), 5,93 (m, 2 H), 4,58 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-597
E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo s e p r e p a r ó s i g u i e n d o e l p r o c e d im i e n t o g e n e r a l C e n e l f o r m a t o d e b ib l io t e c a , s a l v o q u e la ( 2 -f e n i l a c e t i l ) g l i c i n a f u e e l r e a c t iv o á c id o , y e l m a t e r ia l b r u t o s e p u r i f ic ó m e d ia n t e H P L C d e f a s e in v e r s a p r o p o r c io n a n d o e l c o m p u e s t o d e s e a d o , e l c o m p u e s t o d e r e f e r e n c ia I - 597 ( 4 , 4 m g , r e n d im ie n t o 15 % ) c o m o u n s ó l id o b l a n c o .
1 H - R M N ( 500 M H z , C D 3O D ) 5 p p m 8 , 83 ( m , 1 H ) , 8 , 68 ( m , 1 H ) , 8 , 24 ( m , 1 H ) , 7 , 58 ( s , 1 H ) , 7 , 34 ( m , 5 H ) , 7 , 26 ( m , 1 H ) , 7 , 10 ( m , 2 H ) , 6 , 97 ( m , 1 H ) , 6 , 90 ( m , 1 H ) , 6 , 01 ( s , 2 H ) , 4 , 17 ( s , 2 H ) , 3 , 66 ( s , 2 H ) .
Compuesto de referencia I-598
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que la (benciloxi)carbonil)glicina fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-598 (4 mg, rendimiento 13 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 11,15 (m, 1 H), 9,10 (d, 1 H), 8,73 (m, 1 H), 7,98 (m, 1 H), 7,65 (s, 1 H), 7,57 (m, 1 H), 7,37 (m, 6 H), 7,23 (m, 2 H), 7,12 (m, 1 H), 6,90 (m, 1 H), 5,92 (m, 2 H), 5,05 (s, 2 H), 3,93 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-599
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido 2-(1-dioxoisoindolin-2-il)acético fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-599 (11,7 mg, rendimiento 39 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 11,42 (m, 1 H), 9,10 (m, 1 H), 8,74 (m, 1 H), 7,95 (m, 1 H), 7,72 (m, 1 H), 7,66 (m, 1 H), 7,63 (m, 2 H), 7,52 (m, 1 H), 7,34 (m, 1 H), 7,24 (m, 2 H), 7,13 (m, 1 H), 6,92 (m, 1 H), 5,93 (m, 2 H), 4,55 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-610
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido 2-(2-oxooxazolidin-3-il)acético fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-610 (11,4 mg, rendimiento 42 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 11,33 (m, 1 H), 9,10 (m, 1 H), 8,75 (m, 1 H), 7,96 (m, 1 H), 7,64 (m, 1 H), 7,35 (m, 1 H), 7,24 (m, 2 H), 7,12 (m, 1 H), 6,91 (m, 1 H), 5,93 (m, 2 H), 4,33 (m, 2 H), 4,15 (s, 2 H), 3,64 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-601
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el ácido 2-(4-oxoquinazolin-3(4H)-il)acético fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-601 (3,3 mg, rendimiento 11 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 11,69 (m, 1 H), 9,10 (m, 1 H), 8,75 (m, 1 H), 8,37 (s, 1 H), 8,15 (m, 1 H), 7,90 (m, 2 H), 7,73 (m, 1 H), 7,67 (s, 1 H), 7,56 (m, 1 H), 7,34 (m, 1 H), 7,24 (m, 2 H), 7,13 (m, 1 H), 6,93 (m, 1 H), 5,94 (s, 2 H), 4,99 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-602
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que el (2-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)acetil)glicina fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-602 (1,2 mg, rendimiento 4 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 11,20 (m, 1 H), 9,09 (m, 1 H), 8,74 (m, 1 H), 8,62 (m, 1 H), 7,98 (m, 1 H), 7,91 (s, 2 H), 7,88 (s, 2 H), 7,64 (s, 1 H), 7,33 (m, 1 H), 7,24 (d, 1 H), 7,20 (m, 1 H), 7,11 (m, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 5,92 (m, 2 H), 4,29 (s, 2 H), 4,05 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-603
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C en el formato de biblioteca, salvo que la (metoxicarbonil)glicina fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-603 (2,2 mg, rendimiento 8 %) como un sólido blanco.
H ) , 7 , 42
C o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 592
1H-RMN (500 MHz, DMSO-da) 8 ppm 11,44 (m, 1 H), 9,10 (m, 1 H), 8,75 (m, 1 H), 7,92 (m, 1 H), 7,91 (m, 1 H), 7,89 (m, 1 H), 7,88 (m, 1 H), 7,76 (m, 1 H), 7,65 (m, 2 H), 7,34 (m, 1 H), 7,26 (m, 1 H), 7,22 (m, 1 H), 7,12 (m, 1 H), 6,91 (m, 1 H), 5,92 (m, 2 H), 4,67 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-594
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C salvo que el ácido 2-((4-clorofenil)sulfonil)acético fue el reactivo ácido, y el material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-594 (5,8 mg, rendimiento 15 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,48 (s, 1 H), 9,10 (d, 1 H), 8,76 (d, 1 H), 7,92 (m, 2 H), 7,87 (m, 1 H), 7,76 (m, 2 H), 7,65 (s, 1 H), 7,34 (m, 1 H), 7,24 (m, 2 H), 7,12 (m, 1 H), 6,91 (m, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4,73 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-498
A una mezcla de 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)--pirimidin-4-amina (producto intermedio descrito en WO2012/3405 A1; 1 equiv.), trietilamina (6 equiv.), y N,N-dimetilpiridin-4-amina (0,01 equiv.) en diclorometano se añadió acetato de 2-cloro-2-oxoetilo (3 equiv.) a 23 °C. El contenido se calentó a 60 °C y se agitó durante 18 h. El disolvente se retiró al vacío y la purificación del material bruto mediante HPLC de fase inversa proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I 498 (1,0 mg, rendimiento 2 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,21 (m, 1 H), 9,09 (m, 1 H), 8,84 (m, 1 H), 7,61 (m, 1 H), 7,34 (m, 1 H), 7,27 (m, 1 H), 7,22 (m, 1 H), 7,12 (m, 1 H), 6,94 (m, 1 H), 5,92 (m, 2 H), 4,91 (s, 2 H), 2,13 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-578
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la tetrahidrofuran-3-amina fue el reactivo de amina, se usaron 6 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó hasta 100 °C como una solución en dioxano/agua (4:1) durante 24 h. La mezcla se enfrió a 23 °C y el disolvente se retiró al vacío. El sólido se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-578 (12 mg, rendimiento 53 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,11 (m, 1 H), 8,58 (m, 1 H), 8,31 (m, 1 H), 7,61 (m, 1 H), 7,34 (m, 1 H), 7,24 (m, 2 H), 7,11 (m, 1 H), 6,89 (m, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4,76 (m, 1 H), 4,04 (m, 1 H), 3,89 (m, 1 H), 3,77 (m, 1 H), 3,64 (m, 1 H), 2,27 (m, 1 H), 2,04 (s, 1 H).
Compuesto de referencia I-613
Se trató una solución del producto intermedio 1 (1 equiv.) en DMSO con bencenosulfonamida de potasio (2 equiv.).
La mezcla de reacción resultante se agitó a 100 °C durante 8 h. El contenido se filtró, y el filtrado se purificó directamente mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-613 (7 mg, rendimiento 26 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,82 (m, 1 H), 8,37 (m, 1 H), 8,26 (m, 2 H), 7,58 (m, 1 H), 7,47 (m, 2 H), 7,31 (m, 2 H), 7,11 (m, 2H), 6,94 (m, 2 H), 5,98 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-614
Una solución del producto intermedio 1 (1 equiv.) en DMSO se trató con 3,4-dimetoxibenzenosulfonamida de potasio (2 equiv.). La mezcla de reacción resultante se agitó a 100 °C durante 8 h. El contenido se filtró, y el filtrado se purificó directamente mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-614 (1,3 mg, rendimiento 5 %) como un sólido.12
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,12 (m, 1 H), 8,56 (m, 1 H), 7,90 (m, 1 H), 7,60 (m, 1 H), 7,38 (m, 2 H), 7,27 (d, 2 H), 7,12 (m, 1 H), 6,92 (m, 2 H), 5,94 (s, 2 H), 3,71 (d, 6 H).
Compuesto de referencia I-607
Se trató una solución del producto intermedio 1 (1 equiv.) en DMSO con (4-fluorofenil)metanosulfonamida de potasio (2 equiv.). La mezcla de reacción resultante se agitó a 60 °C durante 0,5 h, tras lo cual la reacción se diluyó con agua y solución de ácido clorhídrico 1N y se extrajo con diclorometano. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-5 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-607 (2,8 mg, rendimiento 6 %) como un sólido.
1 H - R M N ( 500 M H z , C D 3 O D ) 5 p p m 8 , 79 ( m , 1 H ) , 8 , 45 ( m , 1 H ) , 7 , 52 ( m , 1 H ) , 7 , 40 ( m , 2 H ) , 7 , 26 ( m , 1 H ) , 6 , 94 ( d , 6 H ) , 5 , 98 ( s , 2 H ) , 5 , 04 ( m , 2 H ) .
Compuesto de referencia I-624
A una solución de 4-fluorobencenosulfonamida (4 equiv.) en DMF se añadió bis(trimetilsilil)amida de potasio (4 equiv.) a 23 °C. Tras 15 minutos de agitación, se añadió el producto intermedio 1 (1 equiv.) y la reacción se agitó durante 3 días a 75 °C. Sin procesar, el producto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-624 (1,9 mg, rendimiento 7 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-da) 5 ppm 9,13 (m, 1 H), 8,51 (m, 1 H), 8,30 (m, 2 H), 7,40 (m, 2 H), 7,27 (m, 2 H), 7,15 (m, 3 H), 6,95 (m, 1 H), 5,99 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-625
Se trató una solución del producto intermedio 1 (1 equiv.) en DMSO con piridin-3-sulfonamida de potasio (1 equiv.) y carbonato de potasio (0,5 equiv.). La mezcla de reacción resultante se calentó a 150 °C durante 10 min. en un microondas. El contenido se filtró, y el filtrado se purificó directamente mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-625 (4,4 mg, rendimiento 33 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,24 (m, 1 H), 9,14 (m, 1 H), 8,69 (m, 1 H), 8,59 (m, 1 H), 8,40 (m, 1 H), 7,42 (m, 1 H), 7,34 (m, 2 H), 7,24 (m, 2 H), 7,13 (m, 1 H), 6,96 (m, 1 H), 5,95 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-583
Una solución del producto intermedio 2 (1 equiv.) en DMF se trató con isocianatobenceno (2 equiv.) y trietilamina (2 equiv.). La mezcla de reacción resultante se calentó a 100 °C durante 18 h. El contenido se filtró, y el filtrado se purificó directamente mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-583 (1,0 mg, rendimiento 4 %) como un sólido. 1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 10,20 (m, 1 H), 9,10 (m, 1 H), 8,62 (m, 1 H), 7,71 (m, 1 H), 7,63 (m, 2 H), 7,27 (m, 7 H), 7,09 (m, 1 H), 7,01 (m, 1 H), 6,88 (m, 1 H), 5,99 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-491
A una solución del producto intermedio 2 (1 equiv.) en diclorometano se añadió cloruro de (4-fluorofenil)metanosulfonilo (1 equiv.), seguido de DBU (1 equiv.). La reacción se agitó a 90 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua, se extrajo con diclorometano (3 veces), se lavó con una solución de ácido clorhídrico 1N (2 veces), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró al vacío. La purificación del material bruto mediante HPLC de fase inversa proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-491 (17,8 mg, rendimiento 17 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 5 ppm 8,52 (d, 1 H), 8,28 (br. s., 1 H), 7,38 (br. s., 1 H), 7,30 (dd, 2 H), 7,25 (br. s., 1 H), 7,14-6,97 (m, 4 H), 6,92-6,73 (m, 3 H), 6,63 (d, 1 H), 5,91 (s, 2 H), 4,54 (br. s., 2 H).
Compuesto de referencia I-495
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la etanol-1,1,2,2-d4-amina fue el reactivo de amina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 20 h. El contenido se enfrió a 23 °C, y se repartió entre una mezcla 1:1 de diclorometano y solución de HCl 1N. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 veces), y las partes orgánicas se combinaron y lavaron con salmuera. La mezcla se secó con sulfato de magnesio, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-495 (120 mg, rendimiento 74 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 9,09 (d, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,61 (s, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,33 (d, 1 H), 7,14 - 7,28 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 6,82 (s, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,74 (br. s., 1 H).
Compuesto de referencia I-505
Se añadió 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-amina (producto intermedio descrito en WO2012/3405 A1; 1 equiv.) a una suspensión de NaH (1,2 equiv.) en THF anhidro a 23 °C. Después de agitar durante 30 minutos a 23 °C, se añadió una solución de cloruro de propano-2-sulfonilo (1 equiv.) en THF a la mezcla de reacción. El contenido se calentó a 70 °C y se agitó durante 18 h adicionales. La mezcla de reacción se diluyó con agua, se extrajo con diclorometano (3 veces), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró al vacío. La purificación del material bruto mediante HPLC de fase inversa proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-505 (2,9 mg, rendimiento 6 %) como un sólido.
1 H R M N ( 500 M H z , C D C l a ) 5 p p m 11 , 59 (b r . s . , 1 H ) , 9 , 13 ( d , 1 H ) , 8 , 66 ( b r . s . , 1 H ) , 7 , 45 ( s , 1 H ) , 7 , 3 8 - 7 , 3 1 ( m , 1 H ) , 7 , 26 (d , 1 H ) , 7 , 24 - 7 , 17 ( m , 1 H ) , 7 , 13 (t, 1 H ) , 7 , 0 8 - 7 , 0 2 ( m , 1 H ) , 5 , 89 ( s , 2 H ) , 4 , 24 (b r . s . , 1 H ) , 1 , 35 ( d , 6 H ) .
C o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 510
A una solución del producto intermedio 2 (1 equiv.) en diclorometano se añadió DBU (1 equiv.) seguido de 2-(clorosulfonil)acetato de metilo (1 equiv.). La reacción se agitó a 90 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua, se extrajo con diclorometano (3 veces), se lavó con una solución de ácido clorhídrico 1N (2 veces), se secó (sulfato de sodio), se filtró y se concentró al vacío. La purificación del material bruto mediante HPLC de fase inversa proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-510 (8,3 mg, rendimiento 12 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,52 (d, 1 H), 8,37 (d, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 7,26-7,22 (m, 1 H), 7,08-6,99 (m, 4 H), 6,63 (d, 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4,31 (s, 2 H), 3,71 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-521
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3-amino-2,2-difluoropropan-1-ol (1,5 equiv., como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, se usó 1 equivalente de trietilamina, y el contenido se calentó a 60 °C durante 20 h. El contenido se enfrió a 23 °C, y se repartió entre una mezcla 1:1 de diclorometano y solución de HCl 1N. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano (2 veces), y las partes orgánicas se combinaron y lavaron con salmuera. La mezcla se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de 0-10 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-521 (36 mg, rendimiento 60 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 8,48 (d, 1 H), 8,32 (d, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,24-7,19 (m, 1 H), 7,04-6,97 (m, 3 H), 6,60 (d, 1 H), 6,05 (br. s., 1 H), 5,93 (s, 2 H), 4,12 (td, 2 H), 3,74 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-539
A una solución del compuesto de referencia I-510 (1 equiv.) en THF se añadió borohidruro de sodio (3 equiv.) a 23 °C. La mezcla de reacción se calentó a 75 °C, se añadió metanol (4 equiv.) gota a gota con una jeringa, y el contenido se agitó durante 1 h. Después de enfriar a 23 °C, la reacción se concentró al vacío y el material bruto resultante se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-539 (1,5 mg, rendimiento 27 %) como un sólido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,69 (d, 1 H), 8,35 (d, 1 H), 7,47 (s, 1 H), 7,19 (d, 1 H), 6,96 (s, 3 H), 6,89 (d, 1 H), 6,84-6,82 (m, 1 H), 5,89 (s, 2 H), 3,92 (t, 2 H), 3,66 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-610
Una solución del producto intermedio 1 (1 equiv.) en DMSO se trató con (ciclopropilsulfonil)amida de potasio (2 equiv.). La mezcla de reacción resultante se agitó a 23 °C durante 16 h. El contenido se filtró, y el filtrado se purificó directamente mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-610 (34 mg, rendimiento 55 %) como un sólido. 1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,66 (d, 1 H), 8,35 (d, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,23-7,11 (m, 1 H), 7,02-6,89 (m, 2 H), 6,86-6,74 (m, 2 H), 5,91-5,77 (m, 2 H), 3,36-3,26 (m, 1 H), 1,35 1,17 (m, 2 H), 1,08-0,89 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-611
Una solución del producto intermedio 1 (1 equiv.) en DMSO se trató con (propilsulfonil)amida de potasio (2 equiv.). La mezcla de reacción resultante se agitó a 23 °C durante 16 h. El contenido se filtró, y el filtrado se purificó directamente mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-611 (50 mg, rendimiento 81 %) como un sólido. 1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,67 (d, 1 H), 8,36 (d, 1 H), 7,33 (s, 1 H), 7,23 7,13 (m, 1 H), 7,03-6,89 (m, 2 H), 6,87-6,81 (m, 1 H), 6,79 (d, 1 H), 5,91-5,68 (m, 2 H), 3,63 (t, 2 H), 1,93-1,74 (m, 2 H), 0,97 (t, 3 H).
Compuesto de referencia I-629
Una solución del producto intermedio 1 (1 equiv.) en DMSO se trató con metil(metilsulfonil)amida de potasio (1 equiv.). La mezcla de reacción resultante se agitó a 23 °C durante 16 h. El contenido se filtró, y el filtrado se purificó directamente mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-629 (8 mg, rendimiento 33 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,11 (d, 1 H), 8,93 (d, 1 H), 7,62 (s, 1 H), 7,34 (d, 1 H), 7,28 (d, 1 H), 7,24-7,19 (m, 1 H), 7,12 (td, 1 H), 6,94 (td, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 3,49 (s, 3 H), 3,37 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-475
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que el ácido (S)-2-acetoxi-3,3,3-trifluoropropanoico fue el reactivo ácido (3 equiv.), se usaron 7 equivalentes de trietilamina, y se usaron 4 equivalentes de T3P. La solución se calentó a 50 °C durante 10 minutos, momento en el cual la solución se diluyó con acetato de etilo y agua. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La p u r i f ic a c ió n m e d ia n t e c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e ( g r a d ie n t e d e 0 - 5%m e t a n o l e n d ic l o r o m e t a n o ) p r o p o r c io n ó e l c o m p u e s t o d e s e a d o , e l c o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 475 ( 98 m g , r e n d im ie n t o c u a n t i t a t iv o ) c o m o u n s ó l id o b la n c o .
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 8 ppm 8,81 (d, 1 H), 8,78 (s, 1 H), 8,50 (d, 1 H), 8,15 (d, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,25-7,22 (m, 1 H), 7,09-7,05 (m, 1 H), 7,00 (t, 1 H), 6,85-6,82 (m, 1 H), 6,63 (d, 1 H), 6,06 (s, 2 H), 5,77 (q, 1 H), 2,39 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-485
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 4-aminopirrolidin-2-ona fue el reactivo de amina. Después de agitar a 90 °C durante 16 h, se añadió agua adicional para solubilizar los reactivos. Al cabo de 5 h, la mezcla de reacción se repartió entre diclorometano y bicarbonato de sodio acuoso saturado. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-15 % metanol en diclorometano) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-485 (11 mg, rendimiento 19 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,76 (s, 1 H), 8,11 (d, 1 H), 7,46 (s, 1 H), 7,27 (q, 1 H), 7,11-7,07 (m, 1 H), 7,03 (t, 1 H), 6,93 (s, 1 H), 6,83-6,80 (m, 1 H), 5,96 (s, 2 H), 5,11-5,06 (m, 1 H), 3,90 (dd, 1 H), 3,40 (dd, 1 H), 2,84 (dd, 1 H), 2,51 (dd, 1 H).
Compuesto de referencia I-500
Una solución de 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-ol (producto intermedio descrito en WO2012/003405 A1; 1 equiv.) y tricloruro de fosforilo (20 equiv.) se calentó a 60 °C durante 1 h, tras lo cual el tricloruro de fosforilo se retiró al vacío. El residuo resultante se disolvió en dioxano y agua (relación 2:1). Se añadieron 2-(aminometil)-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (3 equiv.) y trietilamina (10 equiv.) y la solución resultante se calentó a 110 °C durante 7 d. La solución se repartió entre ácido clorhídrico 1 N acuoso y diclorometano. La capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-100 % (7:1 = acetonitrilo:metanol) en diclorometano) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-500 (16 mg, rendimiento 21 %) como un sólido amarillo.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,77 (s, 1 H), 8,20 (d, 1 H), 7,37 (s, 1 H), 7,29-7,24 (m, 1 H), 7,09-7,00 (m, 3 H), 6,85 (s, 1 H), 6,61 (d, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 4,08 (s, 2 H).
Compuesto de referencia I-518
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 3,3,3-trifluoropropano-1,2-diamina (9 equiv.) fue el reactivo de amina, y se usaron 30 equivalentes de trietilamina. Después de agitar durante 16 h, la mezcla de reacción bruta se repartió entre agua y acetato de etilo. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-5 % metanol en diclorometano) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-518 (10 mg, rendimiento 21 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,39 (d, 1 H), 8,11 (d, 1 H), 7,19 (s, 1 H), 7,14-7,10 (m, 1 H), 6,97-6,93 (m, 1 H), 6,89 (t, 1 H), 6,81-6,78 (m, 1 H), 6,52 (d, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 5,57 (br s, 1 H), 4,17 (ddd, 1 H), 3,51-3,44 (m, 1 H), 3,34 (ddd, 1 H).
Compuesto de referencia I-540
Una solución del compuesto de referencia I-403 (1 equiv.) en diclorometano se trató con diisopropiletilamina (2 equiv.), seguido de HATU (1,5 equiv.). Después de agitar durante 20 minutos, se añadió amoniaco (3 equiv., solución 0,5 M en dioxano). Al cabo de 22 h, se añadió amoniaco adicional (3 equiv.). Al cabo de 4 horas, la solución se diluyó con solución de ácido clorhídrico 1N acuoso y diclorometano. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-15 % metanol en diclorometano) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-540 (3 mg, rendimiento 13 %) como una película amarilla.1
1H-RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 8,47 (d, 1 H), 8,27 (d, 1 H), 7,30 (s, 1 H), 7,24-7,20 (m, 1 H), 7,07-6,98 (m, 2 H), 6,91 (m, 1 H), 6,80 (br s, 1 H), 6,59 (d, 1 H), 6,10 (d, 1 H), 5,97 (d, 1 H), 5,92 (d, 1 H), 5,84 (quint, 1 H), 5,74 (br s, 1 H).
Compuesto de referencia I-568
Una solución del compuesto de referencia I-418 (1 equiv.), fosforazidato de difenilo (1,5 equiv.) y trietilamina (1,5 equiv.) en tolueno se calentó a 50 °C durante 15 h. La solución se enfrió a 23 °C y se trató con metanolato de sodio (3 equiv., solución 0,5 N en metanol). Después de agitar a 23 °C durante 1 h, se añadió solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y la solución resultante se agitó durante 1 h más. La reacción se diluyó con agua y diclorometano, y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío proporcionando el producto bruto. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-15 % (7:1 = acetonitrilo:metanol) en diclorometano) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-568 (11 mg, rendimiento 52 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,76 (d, 1 H), 8,21 (d, 1 H), 7,49 (s, 1 H), 7,29-7,24 (m, 1 H), 7,12-7,06 (m, 1 H), 7,03 (t, 1 H), 6,94 (d, 1 H), 6,80 (t, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 5,67-5,58 (m, 1 H), 3,73 (dd, 1 H), 3,51 (s, 3 H), 3,42 (dd, 1 H).
Compuesto de referencia I-576
El compuesto del título se sintetizó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de acetato de (S)-1-((2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)amino)-1-oxopropan-2-ilo
El producto intermedio se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que el ácido (S)-2-acetoxipropanoico fue el reactivo ácido (3 equiv.), se usaron 10 equivalentes de trietilamina, y 4 equivalentes de T3P. La solución se calentó a 50 °C durante 16 h, momento en el cual la solución se diluyó con acetato de etilo y agua. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-5 % metanol en diclorometano) proporcionó el producto intermedio impuro, que se tomó en la siguiente etapa sin manipulación adicional.
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-576
A una solución de acetato de (S)-1-((2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)—pirimidin-4-il)amino)-1 -oxopropan-2-ilo (1 equiv.) en 4:1=metanol:agua se añadió carbonato de potasio (0,5 equiv.) en una sola parte. Después de agitar durante 10 minutos, la solución de reacción se acidificó con una solución de ácido clorhídrico 3N y se diluyó con agua y diclorometano. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (0-5 % metanol en diclorometano) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-576 (4,5 mg, rendimiento 29 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,77 (m, 1 H), 8,71 (d, 1 H), 8,14 (d, 1 H), 7,54 (s, 1 H), 7,30-7,26 (m, 1 H), 7,11 7,03 (m, 2 H), 6,91-6,88 (m, 2 H), 5,98 (s, 2 H), 4,32 (q, 1 H), 1,45 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-580
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que el ácido 2-metil-2-(metilsulfonil)propanoico fue el reactivo ácido (3 equiv.), se usaron 10 equivalentes de trietilamina, y se usaron 4 equivalentes de la T3P. La solución se calentó a 70 °C durante 3 h, momento en el cual la solución se diluyó con acetato de etilo y agua. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con agua y cloruro de sodio acuoso saturado. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-100 % acetato de etilo en hexanos) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-580 (30 mg, rendimiento 42 %) como espuma amarilla.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 89,13 (br s, 1 H), 8,78 (d, 1 H), 8,48 (d, 1 H), 8,06 (d, 1 H), 7,46 (s, 1 H), 7,24-7,19 (m, 1 H), 7,06-7,02 (m, 1 H), 7,00-6,97 (m, 1 H), 6,89-6,86 (m, 1 H), 6,63 (d, 1 H), 6,03 (s, 2 H), 3,00 (s, 3 H), 1,81 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-582
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que se usó 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-amina (producto intermedio descrito en una patente anterior: WO2012/003405 A1; 1 equiv.) en lugar del producto intermedio 2, el ácido 2-metil-2-(metilsulfonil)propanoico intermedio fue el reactivo ácido (3 equiv.), se usaron 10 equivalentes de trietilamina, y se usaron 4 equivalentes de anhídrido propilfosfónico (T3P, 50 % en peso en acetato de etilo). Después de calentar la mezcla a 90 °C durante 4 horas, la solución se diluyó con acetato de etilo y agua. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las sustancias orgánicas se lavaron con agua, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente (7:1 acetonitrilo:metanol) en diclorometano) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-582 (29 mg, rendimiento 41 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 89,10 (br s, 1 H), 8,67 (d, 1 H), 8,48 (d, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,23-7,19 (m, 1 H), 7,06-7,02 (m, 1 H), 7,10-6,97 (t, 1 H), 6,86 (t, 1 H), 6,63 (d, 1 H), 6,02 (s, 2 H), 3,02 (s, 3 H), 1,82 (s, 6 H).
Compuesto de referencia I-587
E l c o m p u e s t o d e l t ít u lo s e p r e p a r ó s i g u i e n d o e l p r o c e d im i e n t o g e n e r a l C , s a l v o q u e e l á c i d o 2 - ( m e t i l s u l f o n i l ) p r o p a n o i c o f u e e l r e a c t iv o á c i d o ( 3 e q u iv . ) , s e u s a r o n 10 e q u i v a l e n t e s d e t r ie t i la m in a , y s e u s a r o n 4 e q u i v a l e n t e s d e T 3 P . D e s p u é s de agitar durante 1 hora a 70 °C, la mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo y agua. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las sustancias orgánicas se lavaron con agua, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-5 % metanol en diclorometano) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-587 (45 mg, rendimiento 64 %) como un sólido marrón.
1H-RMN (500 MHz, CDCh) 89,45 (br s, 1 H), 8,72 (d, 1 H), 8,48 (d, 1 H), 8,01 (d, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 7,21-7,16 (m, 1 H), 7,04-7,01 (m, 1 H), 6,92 (t, 1 H), 6,80-6,77 (m, 1 H), 6,65 (d, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,14 (q, 1 H), 3,02 (s, 3 H), 1,73 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-609
A una solución de ((2,2,2-trifluoroetil)sulfonil)amida de potasio (2 equiv.) en dimetilsulfóxido se añadió el producto intermedio 1 (1 equiv.). Después de agitar durante 62 h, la solución se diluyó con acetato de etilo y solución acuosa de ácido clorhídrico 1N. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con acetato de etilo. Las sustancias orgánicas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El residuo bruto se captó en metanol y el sólido resultante se filtró y se lavó con metanol adicional. El residuo se captó de nuevo en metanol y los sólidos resultantes se filtraron y se aclararon con metanol proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I 609 (24 mg, rendimiento 28 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 89,14 (d, 1 H), 8,44 (br s, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,37-7,31 (m, 1 H), 7,24-7,20 (m, 2 H), 7,12 (t, 1 H), 7,02-6,99 (m, 1 H), 5,92 (s, 2 H), 4,74 (br s, 2 H).
Compuesto de referencia I-627
Una suspensión de 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-ol (producto intermedio descrito en WO2012/003405 A1; 1 equiv.) en tricloruro de fosforilo (20 equiv.) se calentó a 60 °C durante 2 h. Después de evaporar a sequedad al vacío, el residuo resultante y 2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropanamida (3 equiv.) se disolvieron en una mezcla 2:1 de dioxano:agua y se trataron con trietilamina (10 equiv.). La solución se calentó a 110 °C durante 38 h. La solución se diluyó con diclorometano y ácido clorhídrico 1N, se separaron las capas y la capa acuosa se extrajo con diclorometano. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. La purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-65 % (7:1=acetonitrilo:metanol) en diclorometano) proporcionó el producto contaminado. El producto bruto se repartió entre agua y diclorometano. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio, se filtró, y el disolvente se retiró al vacío proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-627 (1 mg, rendimiento 1 %) como una película transparente.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 88,78 (s, 1 H), 8,17 (d, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,30-7,26 (m, 1 H), 7,11-7,04 (m, 2 H), 7,01 6,98 (m, 1 H), 6,89 (s, 1 H), 6,59 (d, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 4,10-4,02 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-634
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 3-amino-1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-ol (como sal de HCl, 2 equiv.) fue el reactivo de amina, y se usaron 4 equivalentes de trietilamina. Después de agitar a 90 °C durante 21 h, la preparación y la purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-70 % acetato de etilo en hexanos) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-634 (33 mg, rendimiento 48 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 8,48 (m, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 7,27 (s, 1 4-7,19 (m, 1 H), 7,05-6,95 (m, 3 H), 6,61 (m, 1 H), 6,04-5,93 (m, 3 H), 5,74 (br s, 1 H), 4,00 (dd, 1 H), 3,81 (dd 1 H), 1,44 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-631
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el diclorhidrato de 4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazolo[4,3-c]piridin-3(2H)-ona (2 equiv) fue el reactivo de amina, y se usaron 4 equivalentes de trietilamina. Después de agitar a 90 °C durante 1,5 horas, la preparación y purificación mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 0-15 % metanol en diclorometano) proporcionaron el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-631 (9 mg, rendimiento 14 %) como un sólido blanco.1
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,79 (d, 1 H), 8,22 (d, 1 H), 7,50 (s, 1 H), 7,31-7,27 (m, 1 H), 7,13-7,09 (m, 1 H), 7,05 (t, 1 H), 6,94 (m, 1 H), 6,85-6,82 (m, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,76 (s, 2 H), 4,17 (t, 2 H), 2,85 (t, 2 H).
Compuesto de referencia I-328
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que el ácido 1-(trifluorometil)ciclopropanocarboxílico (2 equiv.) fue el reactivo ácido, se usaron 3 equivalentes de trietilamina, y se usaron 3 equivalentes de T3P. La solución se agitó a 23 °C durante 18 h, momento en el cual la solución se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con agua (2 veces) y cloruro de sodio acuoso saturado. Las sustancias orgánicas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. La purificación del residuo mediante cromatografía en gel de sílice (acetato de etilo en hexanos) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-328 (2 mg, rendimiento 14 %).
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,73 (d, 1 H), 8,57 (br s, 1 H), 8,45 (d, 1 H), 8,02 (d, 1 H), 7,45 (s, 1 H), 7,19 (m, 1 H), 7,02 (m, 1 H), 6,96 (m, 1 H), 6,83 (m, 1 H), 6,60 (d, 1 H), 6,01 (s, 2 H), 1,40 (m, 4 H).
Compuesto de referencia I-415
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que se usó 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-amina (producto intermedio descrito en una patente anterior: WO2012/003405 A1; 1 equiv.) en lugar del producto intermedio 2, el ácido 1-(trifluorometil)ciclopropanocarboxílico (3 equiv.) fue el reactivo ácido, se usaron 7 equivalentes de trietilamina y 4 equivalentes de T3P. Tras calentar a 90 °C durante 2 d, el vial se enfrió a 23 °C y el contenido se diluyó con acetato de etilo. El contenido se lavó con agua (3 veces), salmuera, después se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró mediante evaporación rotatoria. La purificación del residuo mediante cromatografía en gel de sílice (acetato de etilo en hexanos) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-415 (42 mg, rendimiento 30 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,67 (s, 1 H), 8,49 (s, 1 H), 8,31 (br s, 1 H), 7,43 (s, 1 H), 7,23 (m, 1 H), 7,06 (m, 1 H), 6,99 (m, 1 H), 6,84 (m, 1 H), 6,63 (s, 1 H), 6,04 (s, 2 H), 1,64 (m, 2 H), 1,45 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-460
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que se usó 5-fluoro-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-amina (producto intermedio descrito en una patente anterior: WO2012/003405 A1; 1 equiv.) en lugar del producto intermedio 2, el ácido 1-cianociclopropanocarboxílico (3 equiv.) fue el reactivo ácido, se usaron 7 equivalentes de trietilamina y 4 equivalentes de T3P. Después de calentar a 50 °C durante 18 h, el vial se enfrió hasta 23 °C y el contenido se diluyó con acetato de etilo. El contenido se lavó con agua (3 veces), salmuera, después se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró mediante evaporación rotatoria. La purificación del residuo mediante cromatografía en gel de sílice (acetato de etilo en hexanos) proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-460 (29 mg, rendimiento 23 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,61 (s, 1 H), 8,50 (br s, 1 H), 8,41 (s, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 7,14 (m, 1 H), 6,97 (m, 1 H), 6,91 (m, 1 H), 6,77 (m, 1 H), 6,54 (s, 1 H), 5,95 (s, 2 H), 1,80 (m, 2 H), 1,67 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-483
El compuesto del título se sintetizó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 3-(3-(4-cloro-5-nitropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol
Se añadió 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5-nitropirimidin-4-ol (producto intermedio descrito en una patente previa: WO2012/003405 A1; 1 equiv.) a oxicloruro de fósforo (22 equiv.) y la mezcla se calentó durante 4 h a 90 °C. El contenido se concentró al vacío y el residuo se recogió en acetato de etilo y posteriormente se lavó con solución de bicarbonato de sodio a 10 % (2 veces), agua (2 veces) y salmuera. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el producto intermedio deseado, 3-(3-(4-cloro-5-nitropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-
-pirazol-5-il)isoxazol como un sólido de color tostado (1,86 g, rendimiento 96 %).
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 9,35 (s, 1 H), 8,53 (d, 1 H), 7,59 (s, 1 H), 7,25 (m, 1 H), 7,07 (m, 1 H), 7,02 (m, 1 H), 6,91 (m, 1 H), 6,65 (d, 1 H), 6,08 (s, 2 H).
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-483
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que se usó 3-(3-(4-cloro-5-nitropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol en lugar del producto intermedio 1, el 2-(aminometil)-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (1,5 equiv.) fue el reactivo de amina, se utilizaron 3 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 30 °C durante 1 h como una solución en dioxano:agua (3:1). La reacción se enfrió y se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua (2 veces) y salmuera, después se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-100 % acetato de etilo/hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-483 (77 mg, rendimiento73 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 9,36 (s, 1 H), 8,59 (m, 1 H), 8,55 (d, 1 H), 7,64 (br s, 1 H), 7,42 (s, 1 H), 7,28 (m, 1 H), 7,08 (m, 1 H), 7,06 (m, 1 H), 6,64 (d, 1 H), 5,98 (s, 2 H), 4,27, (d, 2 H).
C o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 484
Una solución del compuesto de referencia I-483 (1 equiv.) en metanol a 23 °C se trató con paladio a 10 % sobre carbono (0,2 equiv.), a continuación se colocó bajo una atmósfera de H2 suministrado mediante un balón lleno de hidrógeno unido a una aguja. La mezcla se agitó durante 1 h bajo una presión de H2 positiva y se filtró a través de celita. La torta de filtración se aclaró con metanol, y las sustancias lavadas se concentraron al vacío. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de acetato de etilo en hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-484 (53 mg, rendimiento 66 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 9,39 (s, 1H), 7,92 (br s, 1H), 7,19 (m, 1H), 7,13 (m, 2H), 7,98 (m, 1H), 6,92 (m, 2H),
6,52 (s, 1H), 5,85 (s, 2H), 4,01, (s, 2H).
Compuesto de referencia I-541
Una mezcla de 3-(3-(4-cloro-5-nitropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H--pirazol-5-il)isoxazol (como se describe en la etapa 1 de síntesis del compuesto de referencia I-483 (1 equiv.), carbamato de metilo (5 equiv.) y carbonato de cesio
(5 equiv.) se calentó a 90 °C durante 18 h. Después de enfriar a 23 °C, la mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua (3 veces) y salmuera. El contenido se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró al vacío. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de acetato de etilo en hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-541 (35 mg, rendimiento 19 %) como un sólido amarillo claro.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 10,09 (br s, 1 H), 9,51 (s, 1 H), 8,50 (d, 1 H), 7,60 (s, 1 H), 7,24 (m, 1 H), 7,06 (m, 1
H), 7,02 (m, 1 H), 6,87 (m, 1 H), 6,67 (d, 1 H), 6,07 (s, 2 H), 3,95 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-542
Una solución del compuesto de referencia I-541 (1 equiv.) en metanol a 23 °C se trató con paladio a 10 % sobre carbono (0,2 equiv.), a continuación se colocó bajo una atmósfera de H2 suministrado mediante un balón lleno de hidrógeno unido a una aguja. La mezcla se agitó durante 1 h bajo una presión de H2 positiva y se filtró a través de celita. La torta de filtración se aclaró con metanol, y las sustancias lavadas se concentraron al vacío. El residuo resultante se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de acetato de etilo en hexanos proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-542 (26 mg, rendimiento 87 %) como un sólido.
1H-RMN (400 MHz, CDCta) 8 ppm 8,43 (d, 1 H), 8,27 (s 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,32 (s, 1 H), 7,18 (m, 1 H), 7,02 (m, 1 H 6,99 (m, 1 H), 6,77 (m, 1 H), 6,57 (d, 1 H), 5,99 (s, 2 H), 4,61 (br s, 2 H), 3,81 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-488
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2-(aminometil)-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (2,3 equiv.) fue el reactivo de amina, se usó 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2,3-difluorobenzil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (descrito en la etapa 2 para la síntesis del compuesto de referencia I-235) en lugar del producto intermedio 1 y el contenido se calentó a 90 °C durante 3 días. El contenido se enfrió a 23 °C, y la mezcla se diluyó con acetato de etilo. La capa orgánica se lavó con agua (2 veces) y salmuera, después se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de acetato de etilo en hexanos) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-488
(62 mg, rendimiento 44 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCta) 8 ppm 8,52 (s, 1 H), 8,39 (s, 1 H), 8,29 (s, 1 H), 7,25 (s, 1 H), 7,09 (m, 1 H), 6,98 (m, 1 H 6,96 (m, 1 H), 6,64 (s, 1 H), 5,99 (s, 2 H), 5,58 (br s, 1 H), 4,14 (d, 2 H).
Compuesto de referencia I-489
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 2-(aminometil)-3,3,3-trifluoro-2-hidroxipropanoico (1,3 equiv.) fue el reactivo de amina, se usó 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(2,3-difluorobenzil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (descrito en la etapa 2 para la síntesis del compuesto de referencia I-235) en lugar del producto intermedio 1, y el contenido se calentó a 90 °C durante 3 días. El contenido se enfrió a 23 °C, y la mezcla se diluyó con agua, y el pH se ajustó a 5 con una solución de HCl 3N. La mezcla se filtró, y la torta de filtración se lavó con agua (2 veces) y se secó al vacío. Una parte del residuo se disolvió en diclorometano/metanol (4 ml, 1:1).
Tras la filtración quedaron 62 mg de material insoluble. La fracción soluble se sometió a cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de diclorometano/metanol proporcionando el compuesto de referencia I-489 como un sólido blanco (60 mg). El análisis del material insoluble que quedó tras la filtración también mostró ser el compuesto de referencia I-489 (total: 0,122 g, rendimiento 90 %). 1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,77 (d, 1 H), 8,16 (d, 1 H), 7,51
(s, 1 H), 7,15 (m, 1 H), 7,01 (m, 1 H), 6,94 (d, 1 H), 6,71 (m, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 4,43 (d, 1 H), 4,12 (d, 1 H).
Compuesto de referencia I-522
U n a s o l u c i ó n d e l c o m p u e s t o d e r e f e r e n c i a I - 489 ( 1 e q u iv . ) e n d ic l o r o m e t a n o s e t r a t ó c o n b a s e d e H u n i g ( 3 e q u iv . ) y
H A T U ( 1 , 5 e q u iv . ) . L a s o l u c i ó n r e s u lt a n t e s e a g it ó d u r a n t e 2 h , a c o n t in u a c ió n s e a ñ a d i ó a la r e a c c i ó n u n a s o l u c i ó n d e amoniaco (0,5 M en dioxano, 8 equiv.). El contenido se dejó agitar durante la noche a 23 °C. La mezcla se diluyó con diclorometano y se lavó con agua (3 veces) y salmuera. La solución se secó a continuación con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. La purificación del residuo bruto mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de diclorometano/metanol proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-522 (5 mg, rendimiento 8 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,45 (s, 1 H), 8,14 (s, 1 H), 7,98 (s, 1 H), 7,18 (s, 1 H), 7,13 (s, 1 H), 7,01 (m, 1 H), 6,90 (m, 2 H), 6,56 (s, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 5,65 (br s, 1 H), 5,53 (br s, 1 H), 4,12 (d, 2 H).
Compuesto de referencia I-507
El compuesto del título se sintetizó en 4 etapas:
Etapa 1: Síntesis de clorhidrato de (3,3,3-trifluoropropil)hidrazina
Se disolvieron 3-Bromo-1,1,1-trifluoropropano (1 equiv.) e hidrato de hidrazina (10 equiv.) en etanol absoluto y se calentaron a 80 °C durante 18 h. La solución se enfrió a 23 °C y se concentró al vacío a 15 °C. El aceite espeso se diluyó con agua y diclorometano, después se añadió carbonato de potasio sólido para saturar la capa acuosa. Las fases se mezclaron y se separaron, a continuación la fase acuosa se extrajo con diclorometano adicional (2 veces). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron al vacío proporcionando un aceite incoloro. Se eliminó una pequeña parte del producto de hidrazina neutro para su caracterización mediante RMN. El resto se recogió en dietil éter y se trató con ácido clorhídrico (solución 2,5 M en etanol), y la mezcla resultante se concentró al vacío proporcionando el producto intermedio deseado (3,3,3-trifluoropropil)hidrazina (2,02 g, rendimiento 43 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 3,18 (br s, 4 H), 3,02 (m, 2 H), 2,36 (m, 2 H).
Etapa 2: Síntesis de 3-(isoxazol-3-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)--1H-pirazol-5-carboxilato de etilo
Una solución de clorhidrato de (3,3,3-trifluoropropil)hidrazina (1 equiv.) en una mezcla de etanol y agua (9:1) a 23 °C se trató con carbonato de potasio (0,6 equiv.) seguido de 4-(isoxazol-3-il)-2-(metoxi(metil)amino)-4-oxobut-2-enoato de etilo (2 equiv.) generado en la etapa 1 del procedimiento general A, usando 1-(isoxazol-3-il)etanona en la etapa 1). La solución se agitó 2 d a 23 °C, a continuación se añadió a la reacción ácido clorhídrico 6N (1,5 equiv.) gota a gota. Los disolventes se eliminaron al vacío y el residuo se recogió en acetato de etilo. Las sustancias orgánicas se lavaron con agua (5 veces), salmuera, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El residuo bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando gradiente de acetato de etilo en diclorometano proporcionando el éster de pirazol deseado, el 3-(isoxazol-3-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo (1,34 g, rendimiento 36 %) como un sólido amarillo claro.1
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,55 (d, 1 H), 7,15 (s, 1 H), 6,63 (d, 1 H), 4,95 (m, 2 H), 4,46 (q, 2 H), 2,85 (m, 2 H), 1,44 (t, 3 H).
Etapa 3: Síntesis de 5-(isoxazol-3-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)-1H-pirazol-3-carboximidamida
El producto intermedio de amidina deseado se generó según el procedimiento descrito en la etapa 3 del procedimiento general A, salvo por el uso de 3-(isoxazol-3-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)-1H-pirazol-5-carboxilato de etilo como el éster de partida y la mezcla se calentó 4 h a 110 °C. La mezcla de reacción se enfrió en hielo, a continuación se añadieron metanol (14 equiv.) y ácido clorhídrico acuoso (17 equiv.) sucesivamente durante 5 min. Esta mezcla se calentó durante 30 min a 80 °C, después se enfrió en hielo y se filtró. La torta de filtración se lavó con tolueno (2 veces) y se secó al aire proporcionando la sal de clorhidrato de amidina bruta. Este material se agitó en carbonato de sodio acuoso saturado y se extrajo con acetato de etilo/alcohol isopropílico (mezcla 5:1). La fase orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío proporcionando la amidina neutra deseada, la 5-(isoxazol-3-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)-1H-pirazol-3-carboximidamida como un sólido amarillo claro.
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,45 (d, 1 H), 6,99 (s, 1 H), 6,55 (d, 1 H), 5,61 (br. s., 3 H), 4,83-4,74 (m, 2 H), 2,81 2,65 (m, 2 H).
Etapa 4: Síntesis del compuesto de referencia I-507
El producto del título se preparó siguiendo la etapa 4 del procedimiento general A, salvo que la 5-(isoxazol-3-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)-1H-pirazol-3-carboximidamida fue la amidina de partida, se usaron 2,5 equivalentes de (Z)-3-etoxi-2-fluoro-3-oxoprop-1-en-1-olato de sodio y la mezcla se calentó 2 h a 90 °C. La reacción se enfrió a 23 °C, y el disolvente se retiró al vacío. El residuo se disolvió nuevamente en diclorometano y se trató con ácido clorhídrico (2,5 M en etanol, 3 equiv.). Los sólidos resultantes se filtraron, se lavaron con diclorometano (2 veces) y se secaron al aire proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-507 (0,43 g, rendimiento 110 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,84 (d, 1 H), 8,03 (d, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 6,95 (d, 1 H), 4,96 (t, 2 H), 2,92 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-511
El compuesto del título se sintetizó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol
Una mezcla del compuesto de referencia I-507 (1 equiv.) en oxicloruro de fósforo (28 equiv.) se calentó durante 2 h a 90 °C. El disolvente se retiró al vacío y el residuo se aclaró con diclorometano (2 veces) proporcionando el producto intermedio deseado 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (0,28 g, rendimiento 69 %) como un sólido de color tostado.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,59 (s, 1 H), 8,47 (d, 1 H), 7,30 (s, 1 H), 6,60 (d, 1 H), 4,92 (t, 2 H), 2,81 (m, 2 H).
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-511
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 2-aminoacetamida (como sal de HCl, 2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usó 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (descrito anteriormente) en lugar del producto intermedio 1, se usaron 5 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 90 °C durante 2 h. La mezcla se enfrió a 23 °C, se diluyó con agua y el pH se recogió en ~5 con ácido clorhídrico 3N acuoso. El producto crudo se recogió por filtración, a continuación se purificó por cromatografía en gel de sílice con un gradiente de metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-511 (12 mg, rendimiento 45 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,81 (s, 1 H), 8,13 (d, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 6,93 (s, 1 H), 4,91 (m, 2 H), 4,21 (s, 2 H), 2,89 (m, 2 H).
El compuesto de referencia I-513
3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (descrito en la etapa 1 de síntesis del compuesto de referencia I-511 (1 equiv.) e hidróxido de amonio acuoso concentrado (2,8 equiv.) en dioxano se sellaron en un vial de tapón a rosca y se calentaron durante 2 h a 95 °C. La mezcla se enfrió a 23 °C, se diluyó con agua, a continuación se filtró. La torta de filtración se lavó con agua (2 veces) y se secó al aire proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-513 (0,14 g, rendimiento 76 %) como un polvo de color tostado claro.1*3
1H-RMN (400 MHz, CDCta) 8 ppm 8,51 (d, 1 H), 8,21 (d, 1 H), 7,26 (s, 1 H), 6,63 (d, 1 H), 5,26 (s, 2 H), 4,95 (m, 2 H), 2,85 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-516 y compuesto de referencia I-517
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el 2-(aminometil)-1,1,1,3,3,3-hexafluoropropan-2-ol (2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usó 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (descrito en la etapa 1 de la síntesis del compuesto de referencia I-511 (1 equiv.) en lugar del producto intermedio 1, se usaron 6 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó a 95 °C durante 3 d. La mezcla se enfrió a 23 °C, se diluyó con acetato de etilo, después se lavó con agua (2 veces) y salmuera. El contenido se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el producto bruto. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de hexano/acetato de etilo proporcionando dos productos, el compuesto de referencia I-516 (27 mg, rendimiento 37 %) como un sólido blanco, y el compuesto de referencia I-517 (9 mg, rendimiento 16 %) como un sólido blanco.
1H-RMN para el Compuesto de referencia I-517 (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 8,54 (s, 1 H), 8,15 (d, 1 H), 7,17 (s, 1 H), 6,68 (s, 1 H), 4,94 (m, 2 H), 3,69 (q, 4 H), 2,89 (m, 2 H), 1,31 (t, 6 H).
Compuesto de referencia I-523
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que el ácido 1-((metilamino)metil)ciclopropanocarboxílico (como la sal de HCl) fue el reactivo de amina, se usó 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (descrito en la etapa 1 de síntesis del compuesto de referencia I-511 (1 equiv.) en lugar del producto intermedio 1, se usaron 6,6 equivalentes de trietilamina y el contenido se calentó a 90 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua y se llevó cuidadosamente a pH 4 con una solución acuosa de ácido clorhídrico 3N. La mezcla se filtró, y la torta de filtración se lavó con agua (2 veces) y se secó al aire proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-523 (9 mg, rendimiento 60 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm 8,51 (d, 1 H), 8,16 (d, 1 H), 7,16 (s, 1 H), 6,64 (s, 1 H), 4,92 (m, 2 H), 4,10 (s, 2 H), 3,35 (d, 3 H), 2,87 (m, 2 H), 1,44 (m, 2 H), 1,13 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-573
El compuesto del título se sintetizó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de ácido 3-(metilsulfonil)propanoico
Se enfrió una solución de ácido 3-(metiltio)propanoico (1 equiv.) en ácido acético glacial en hielo como peróxido de hidrógeno acuoso (27 %, 6 equiv.) a una velocidad para mantener la temperatura interna <50 °C. El baño de enfriamiento se retiró y se continuó la agitación durante 18 h a 23 °C. Los disolventes se eliminaron al vacío proporcionando una pasta blanca. La pasta se mezcló en diclorometano y se filtró. La torta de filtración se lavó con diclorometano adicional (3 veces) y se secó al aire proporcionando el ácido carboxílico deseado, el ácido 3 (metilsulfonil)propanoico (3,0 g, rendimiento 47 %) como un sólido blanco. 1H-RMN (400 MHz, acetona-d6) 5 ppm 10,2 (br s, 1 H), 3,38 (t, 2 H), 3,00 (s, 3 H), 2,85 (t, 2 H).
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general C, salvo que el ácido 3-(metilsulfonil)propanoico (2 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 6 equivalentes de trietilamina y 3 equivalentes de anhídrido propilfosfónico (T3P, 50 % en peso en acetato de etilo), y la solución se calentó a 70 °C durante 18 h. El contenido se enfrió a 23 °C, se diluyó con acetato de etilo, después se lavó con agua (3 veces) y salmuera. El contenido se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró al vacío. La purificación del residuo mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de acetato de etilo en hexanos proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-573 (6 mg, rendimiento 8 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, ace tona^) 5 ppm 8,77 (d, 1 H), 8,58 (d, 1 H), 7,92 (d, 1 H), 7,40 (s, 1 H), 7,20 (m, 1 H), 7,03 (m, 1 H), 6,98 (m, 1 H), 6,94 (d, 1 H), 6,83 (m, 1 H), 5,88 (s, 2 H), 3,38 (t, 2 H), 3,07 (t, 2 H), 2,88 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-588
El compuesto del título se sintetizó en 6 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 3-((ferf-butoxicarbonil)amino)-4,4,4-trifluorobutanoato de etilo
Una solución de clorhidrato de 3-amino-4,4,4-trifluorobutanoato de etilo (1 equiv.) en THF se enfrió en hielo como trietilamina (2,2 equiv.) se añadió durante 5 min. Se añadió al recipiente dicarbonato de di-terf-butilo (2 equiv.) en THF y la mezcla se agitó durante 2 d a 23 °C. El disolvente se eliminó al vacío y el residuo se recogió en acetato de etilo, a continuación se lavó sucesivamente con agua, solución de bicarbonato de sodio acuoso a 10 %, agua (3 veces) y después salmuera. El contenido se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. La purificación del residuo mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de acetato de etilo en hexanos proporcionó la amina protegida por Boc deseada, el 3-((ferf-butoxicarbonil)amino)-4,4,4-trifluorobutanoato de etilo (1,9 g, rendimiento 74 %) como un sólido blanco.
Etapa 2: Síntesis de (1,1,1-trifluoro-4-hidroxibutan-2-il)carbamato de ferf-butilo
Una solución de 3-((ferf-butoxicarbonil)amino)-4,4,4-trifluorobutanoato de etilo (1 equiv.) en THF se enfrió en hielo como hidruro de litio y aluminio (2 M en THF, 2,5 equiv.) durante 5 min. La solución se agitó durante 3 h a 23 °C, a continuación se enfrió en hielo y se trató secuencialmente con agua, NaOH acuoso a 15 % y agua. La agitación continuó durante 15 min a 23 °C, a continuación la mezcla se filtró a través de celita y la torta de filtración se aclaró con acetato de etilo (4 veces). Los filtrados orgánicos combinados se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron al vacío proporcionando el producto intermedio de alcohol deseado, el (1,1,1 -trifluoro-4-hidroxibutan-2-il)carbamato de ferf-butilo (0,26 g, rendimiento 98 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm 4,79 (br d, 1 H), 4,44 (m, 1 H), 3,76 (m, 1 H), 3,68 (m, 1 H), 2,63 (br s, 1 H), 2,08 (m, 1 H), 1,55 (m, 1 H), 1,45 (s, 9 H).
Etapa 3: Síntesis de metanosulfonato de 3-((ferf-butoxicarbonil)amino)-4,4,4-trifluorobutilo
Una solución de (1,1,1-trifluoro-4-hidroxibutan-2-il)carbamato de ferf-butilo (1 equiv.) y trietilamina (2,5 equiv.) en diclorometano se agitó a 23 °C conforme se añadía cloruro de metansulfonilo (1,7 equiv.) al recipiente. La solución resultante se agitó durante 2 h a 23 °C, a continuación se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua (4 veces) y salmuera. El contenido se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío proporcionando el producto intermedio de alcohol protegido con mesilo deseado, el metanosulfonato de 3-((ferf-butoxicarbonil)amino)-4,4,4-trifluorobutilo (0,29 g, rendimiento 89 %) como un sólido incoloro.
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 5 ppm 4,67 (br d, 1 H), 4,45 (m, 1 H), 4,31 (m, 2 H), 3,05 (s, 3 H), 2,28 (m, 1 H), 1,84 (m, 1 H), 1,45 (s, 9 H).
Etapa 4: Síntesis de (1,1,1-trifluoro-4-(metilsulfonil)butan-2-il)carbamato de ferf-butilo
Una solución de metanosulfonato de 3-((ferf-butoxicarbonil)amino)-4,4,4-trifluorobutilo (1 equiv.) en THF a 23 °C se trató con metanotiolato de sodio (10 equiv.), y la solución resultante se calentó durante 6 h a 60 °C. A continuación, la mezcla de reacción se enfrió en hielo conforme se añadía ácido m-cloroperoxibenzoico (70 % peso/peso, 12,5 equiv.) en partes. Para confirmar la conversión completa en sulfona se analizó la reacción mediante LC/Ms . La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó sucesivamente con solución 7:1=10 % de bicarbonato acuoso/hidróxido de sodio acuoso 3N (2 veces), solución de bicarbonato de sodio acuoso a 10 % (2 veces), agua (4 veces) y a continuación salmuera. El contenido se secó sobre sulfato de sodio, se filtró, y se concentró al vacío proporcionando un residuo. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice, utilizando un gradiente de acetato de etilo en hexanos proporcionando el producto intermedio de sulfona deseado, el (1,1,1 -trifluoro-4-(metilsulfonil)butan-2-il)carbamato de ferf-butilo (0,18 g, rendimiento 72 %) como un sólido blanco.1
1H-RMN (400 MHz, CDCta) 5 ppm 4,75 (br d, 1 H), 4,36 (m, 1 H), 3,16 (m, 2 H), 2,99 (s, 3 H), 2,37 (m, 1 H), 2,07 (m, 1 H), 1,49 (s, 9 H).
Etapa 5: Síntesis de 1,1,1-trifluoro-4-(metilsulfonil)butan-2-amina
S e d is o l v ió ( 1 , 1 , 1 - t r i f l u o r o - 4 - ( m e t i l s u l f o n i l ) b u t a n - 2 - i l ) c a r b a m a t o d e f e r f - b u t i lo ( 1 e q u iv . ) e n d ic l o r o m e t a n o a 23 ° C , a c o n t i n u a c i ó n s e t r a t ó c o n á c i d o t r i f l u o a c é t ic o ( 25 e q u iv . ) y s e a g it ó d u r a n t e 3 h a 23 ° C . L a r e a c c i ó n s e d i l u y ó c o n d ic l o r o m e t a n o y s o l u c i ó n a c u o s a d e b ic a r b o n a t o d e s o d io a 10 % , y l a s f a s e s s e s e p a r a r o n y m e z c l a r o n b ie n . L a f a s e a c u o s a s e e x t r a jo c o n d ic l o r o m e t a n o ( 3 v e c e s ) , y l a s f a s e s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e s e c a r o n s o b r e s u lf a t o d e s o d io , s e f i lt r a r o n , y s e c o n c e n t r a r o n a l v a c í o p r o p o r c io n a n d o e l p r o d u c t o in t e r m e d io d e a m i n a d e s p r o t e g i d a d e s e a d o , la 1 , 1 , 1 - t r i f l u o r o - 4 - ( m e t i l s u l f o n i l ) b u t a n - 2 - a m i n a ( 18 m g , r e n d im ie n t o 54 % ) c o m o u n a c e i t e in c o lo r o .
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 3,25 (m, 2 H), 3,15 (m, 1 H), 2,89 (s, 3 H), 2,23 (m, 1 H), 1,80 (m, 1 H), 1,36 (br s, 2 H).
Etapa 6: Síntesis del compuesto de referencia I-588
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 1,1,1 -trifluoro-4-(metilsulfonil)butan-2-amina (6 equiv.) fue el reactivo de amina, se usaron 6 equivalentes de trietilamina, y el contenido se calentó mediante microondas a 215 °C durante 2 h como una solución en NMP. La purificación directa de la mezcla resultante mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de acetato de etilo en hexanos proporcionó producto impuro. La purificación adicional mediante HPLC de fase inversa proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-588 (17 mg, rendimiento 16 %).
1H-RMN (400 MHz, CDCla) 8 ppm 8,40 (d, 1 H), 8,23 (d, 1 H), 7,29 (s, 1 H), 7,13 (m, 1 H), 6,97 (m, 1 H), 6,91 (m, 1 H), 6,81 (m, 1 H), 6,56 (d, 1 H), 5,93 (d, 1 H), 5,88 (d, 1 H), 5,35(m, 1 H), 5,18, (br s, 1 H), 3,19 (m, 1 H), 3,11 (m, 1 H), 2,86 (s, 3 H), 2,53 (m, 1 H), 2,21 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-626
El compuesto del ejemplo se preparó siguiendo el procedimiento general B, salvo que la 1,1,1 -trifluoro-4-(metilsulfonil)butan-2-amina (1,3 equiv.) fue el reactivo de amina, se usó 3-(3-(4-cloro-5-fluoropirimidin-2-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)-1H-pirazol-5-il)isoxazol (descrito en la etapa 1 de síntesis del compuesto de referencia I-511 (1 equiv.) en lugar del producto intermedio 1, se usaron 1,3 equivalentes de trietilamina y el contenido se calentó mediante microondas a 215 °C durante 2,5 h como una solución en NMP. La purificación directa de la mezcla resultante mediante cromatografía en gel de sílice utilizando un gradiente de acetato de etilo en hexanos proporcionó producto impuro. La purificación adicional mediante HPLC de fase inversa proporcionó el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-626 (1 mg, rendimiento 1 %).
1H-RMN (400 MHz, CDCh) 8 ppm 8,53 (d, 1 H), 8,32 (d, 1 H), 7,30 (s, 1 H), 6,71 (d, 1 H), 5,44 (m, 1 H), 5,27 (br d, 1 H), 4,94 (m, 2 H), 3,21 (m, 2 H), 2,95 (s, 3 H), 2,87 (m, 2 H), 2,61 (m, 1 H), 2,28 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-617
El compuesto del título se preparó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 2-(2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5-nitropirimidin-4-il)-2-metilmalonato de dietilo.
Una mezcla de 3-(3-(4-cloro-5-nitropirimidin-2-il)-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-
- 5-il)isoxazol (descrito en la etapa 1 para la síntesis del compuesto de referencia I-483, 1,2 equiv.), 2-metilmalonato de etilo (1 equiv.) y f-butóxido de potasio (0,9 equiv.) en THF se agitó a temperatura ambiente durante 15 min. La solución se diluyó con solución de cloruro de amonio acuosa saturada y acetato de etilo. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (gradiente de 10-50 % acetato de etilo en hexano) proporcionando el producto intermedio deseado 2-(2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5--nitropirimidin-4-il)-2-metilmalonato de etilo (94,5 mg, rendimiento 40 %) como un sólido amarillo.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,56 (s, 1 H), 9,14 (d, 1 H), 7,69 (s, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,30 (d, 1 H), 7,19-7,25 (m, 1 H), 7,12 (t, 1 H), 6,97-7,03 (m, 1 H), 5,95-5,97 (m, 2 H), 4,12-4,19 (m, 4 H), 1,94 (s, 3 H), 1,11 (t, 6 H).
Etapa 2: Síntesis de 2-(5-amino-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-4-il)-2-metilmalonato de dietilo.
Una mezcla de 2-(2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)--5-nitropirimidin-4-il)-2-metilmalonato de dietilo (1 equiv.) y paladio a 20 % sobre carbono (0,5 equiv.) en etanol y acetato de etilo (1:1) se agitó en una atmósfera de hidrógeno a 23 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se filtró a continuación a través de celita y el residuo se lavó con acetato de etilo. El filtrado se concentró al vacío y el residuo se recogió en la siguiente etapa sin ninguna purificación o caracterización adicional.
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-617
U n a s o l u c i ó n d e 2 - ( 5 - a m i n o - 2 - ( 1 - ( 2 - f l u o r o b e n c i l ) - 5 - ( i s o x a z o l - 3 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 3 - i l ) - p i r i m i d i n - 4 - i l ) - 2 - m e t i l m a l o n a t o d e d ie t i lo e n e t a n o l y T H F ( 2 : 1 ) s e c a l e n t ó a 85 ° C d u r a n t e 16 h . L a s o l u c ió n r e s u lt a n t e s e c o n c e n t r ó a l v a c í o y e l r e s i d u o s e p u r i f ic ó m e d ia n t e H P L C d e f a s e i n v e r s a ( g r a d ie n t e d e 20 - 60 % a c e t o n it r i lo e n a g u a , c o n T F A d e 1 % )
Etapa 1: Síntesis de 2-(dicianometil)-2-metilmalonato de dietilo
Una mezcla de 2-bromo-2-metilmalonato de dietilo (1 equiv.), malononitrilo (1 equiv.) y f-butóxido de potasio (1 equiv.) en THF se calentó a reflujo durante 15 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y solución acuosa saturada de cloruro de amonio y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. La fase orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró al vacío dando un aceite. El aceite se purificó mediante cromatografía en gel de sílice, utilizando un gradiente de 10-15 % acetato de etilo en hexano proporcionando el producto intermedio deseado, el 2-(dicianometil)-2-metilmalonato de dietilo (5,76 g, rendimiento 32 %) como un aceite incoloro.
1H RMN (500 MHz, CDCla) 8 ppm 4,53 (s, 1 H), 4 ,27-4,39 (m, 4 H), 1,81 (s, 3 H), 1,33 (t, 6 H).
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-618
Una mezcla de 5-(isoxazol-3-il)-1-(3,3,3-trifluoropropil)-1H-pirazol-3-carboximidamida (generada en la etapa 3 para la síntesis del compuesto de referencia I-507 (1 equiv.), 2-(dicianometil)-2-metilmalonato de dietilo (1,15 equiv.) y bicarbonato de potasio (2 equiv.) en f-BuOH se calentó a reflujo durante 5 h. La solución resultante se concentró a continuación al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice utilizando gradiente de 0-5 % metanol en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-618 (88,5 mg, rendimiento 51 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,31 (s, 1 H), 9,14 (d, 1 H), 7,34 (s, 1 H), 7,24 (d, 1 H), 6,57 - 6,71 (m, 2 H), 4,85 (t, 2 H), 4,11 (t, 2 H), 2,85-2,98 (m, 2 H), 1,61 (s, 3 H), 1,12 (t, 3 H).
Compuesto de referencia I-619
Se añadió amoniaco (7,0 M en MeOH, 200 equiv.) al compuesto de referencia I-618 (1 equiv.). La mezcla de reacción se calentó a 50 °C durante 16 h. La solución resultante se concentró a continuación al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 20-40 % acetonitrilo en agua con TFA a 1 %) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-619 (4,7 mg, rendimiento 31 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 11,30 (s, 1 H), 9,14 (d, 1 H), 7,42 - 7,50 (m, 1 H), 7,36 (s, 1 H), 7,25 (d, 1 H), 7 ,17-7,22 (m, 1 H), 6 ,67-6,92 (m, 2 H), 4 ,83-4,89 (m, 2 H), 2 ,86-2,99 (m, 2 H), 1,56 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-620
El compuesto del título se preparó en 3 etapas:
Etapa 1: Síntesis de (E)-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5-(fenildiazenil)pirimidin-4,6-diamina.
Una mezcla de 1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-carboximidamida (generada en la etapa 3 para la síntesis del compuesto de referencia I-507 (1 equiv), (E)-2-(fenildiazenil)malononitrilo (1,2 equiv.) y bicarbonato de potasio (2 equiv.) en f-BuOH se calentó a reflujo durante 18 h. Tras el enfriamiento, la mezcla de reacción se concentró al vacío y se llevó hasta la siguiente etapa sin purificación adicional.
Etapa 2: Síntesis de 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)--pirimidin-4,5,6-triamina.
Una mezcla de (E)-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)--5-(fenildiazenil) pirimidin-4,6-diamina (1 equiv.) y paladio a 20 % sobre carbono (0,5 equiv.) en DMF se agitó bajo una atmósfera de hidrógeno a 23 °C durante 18 h. La mezcla de reacción se filtró después a través de celita y el residuo se lavó con DMF seguido de una pequeña parte de metanol. El filtrado se concentró al vacío y el residuo se suspendió en acetato de etilo y una gota de metanol y se agitó vigorosamente. El precipitado se filtró, se lavó con acetato de etilo y se secó al vacío proporcionando el producto intermedio triaminopirimidina deseado, la 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-pirimidin-4,5,6-triamina (278 mg, rendimiento 46%en 2 etapas) como un sólido amarillo oscuro.
Etapa 3: Síntesis del compuesto de referencia I-620
Una solución de 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il) pirimidin-4,5,6-triamina (1 equiv.) en piridina a 0 °C se trató con cloroformiato de metilo (1 equiv.). La mezcla de reacción se calentó lentamente hasta 23 °C y se agitó durante 18 h. Los compuestos volátiles se eliminaron al vacío y el residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con agua. El contenido se secó sobre sulfato de sodio anhidro, se filtró y se concentró para dar un sólido amarillo oscuro. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 20-40 % acetonitrilo/agua con TFA a 1 %) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-620 (15 mg, rendimiento 26 %) como un sólido amarillo pálido.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,82 (d, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,27 - 7,35 (m, 1 H), 7,04 - 7,15 (m, 2 H), 6,92 - 6,99 (m, 1 H), 6,89 (d, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 3,78 (br. s., 3 H), 3,34 - 3,35 (m, 1 H).
Compuesto de referencia I-621
Se formó una solución del compuesto de referencia I-620 (1 equiv.) y LiHMDS (1 M en tolueno, 6 equiv.) en THF a 0 °C y se agitó durante 20 min. Se añadió yodometano (12 equiv.) al recipiente de reacción, la mezcla se calentó hasta 23 °C y se agitó durante 1 h. La mezcla se diluyó con diclorometano y solución de cloruro de amonio acuoso saturada, y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo dos veces con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro, se filtraron, y se concentraron. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 20-40 % acetonitrilo/agua con TFA a 1 %) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-621 (1,6 mg, rendimiento 17 %) como un sólido amarillo.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,83 (d, 1 H), 7,53 (s, 1 H), 7,27 - 7,35 (m, 1 H), 7,05 - 7,15 (m, 2 H), 6,96 (t, 1 H), 6,90 (d, 1 H), 6,00 (s, 2 H), 3,66 - 3,86 (m, 3 H), 3,13 (d, 3 H).
Compuesto de referencia I-623
El compuesto del título se preparó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de 4-amino-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)--5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-carbohidrazida.
Una mezcla del compuesto de referencia I-420 (1 equiv.), hidrazina anhidra (325 equiv.), y agua (11,2 equiv.) en metanol se calentó a 50 °C durante 2 h. La solución resultante se concentró al vacío. El exceso de hidrazina se retiró azeotrópicamente mediante tratamiento con metanol y diclorometano proporcionando el producto intermedio de acilhidracina deseado, la 4-amino-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-carbohidrazida como un sólido amarillo. El material se usó tal cual en la siguiente etapa sin purificación adicional.
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-623
Una mezcla de 4-amino-2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)-5-metil-6-oxo-6,7-dihidro-5H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-carbohidrazida (1 equiv.) y A/-acetilimidazol (4 equiv.) en THF se agitó a 23 °C durante 16 h. La solución resultante se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante HPLC de fase inversa (gradiente de 20-80 % acetonitrilo en agua, con TFA 1 %) proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-623 (71 mg, rendimiento 46 %) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,80 (d, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,25 - 7,32 (m, 1 H), 7,06 - 7,14 (m, 1 H), 7,01 - 7,06 (m, 1 H), 6,87 - 6,92 (m, 2 H), 5,98 (s, 2 H), 2,66 (s, 1 H), 2,00 (s, 3 H), 1,82 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-478
A una solución agitada del compuesto de referencia I-461 (1 equiv.) en DMF y etanol (3:2) se añadió paladio a 10 % sobre carbono (10 equiv.), y el recipiente de reacción se colocó bajo una atmósfera de hidrógeno mediante un balón y aguja. El contenido se agitó durante 18 h a 23 °C, y la mezcla se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-461 (5 mg, rendimiento 19 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,69 (s, 1 H), 9,11 (d, 1 H), 8,78 (d, 1 H), 8,00 (d, 1 H), 7,72 (s, 1 H), 7,31 - 7,38 (m, 1 H), 7,29 (d, 1 H), 7,21 - 7,26 (m, 1 H), 7,12 (t, 1 H), 6,86-6,94 (m, 2 H), 5,95 (s, 2 H), 1,22- 1,28 (m, 2 H), 1,09 - 1,14 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-479
A u n a s o l u c i ó n a g i t a d a d e l p r o d u c t o in t e r m e d io 2 ( 1 e q u iv . ) y c l o r u r o d e 2 - m e t o x i e t a n o s u l f o n i l o ( 1 e q u iv . ) e n d ic l o r o m e t a n o s e a ñ a d i ó D B U ( 1 e q u iv . ) . L a r e a c c i ó n s e c a l e n t ó a 60 ° C d u r a n t e 24 h o r a s , a c o n t in u a c ió n s e e n f r ió a 23 °C. El contenido se diluyó en agua y se extrajo con diclorometano (3 veces). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con solución de HCl 1N, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y se concentraron al vacío. El material bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-479 (8 mg, rendimiento 6 %) como un sólido.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,82 (d, 1 H), 8,50 (d, 1 H), 7,60 (s, 1 H), 7,27 - 7,35(m, 1 H), 7,05 - 7,15 (m, 3 H), 6,94 - 6,98 (m, 2 H), 6,02 (s, 2 H), 3,86 (s, 4 H), 3,27 (s, 3 H).
Compuesto de referencia I-595
Una solución de 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-5-amina (este compuesto se describió en la solicitud de patente anterior WO2012003405 A1) en diclorometano/piridina (2:1) se trató con cloruro de 3,3,3 trifluoropropano-1-sulfonilo (1,8 equiv.). Al cabo de 3 h, se añadió solución de NaOH 1N y la reacción se agitó durante 1,5 h. A continuación, se añadió agua y la mezcla resultante se acidificó a pH 3 con una solución de HCl 1N y se extrajo con diclorometano. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 0-10 % metanol/diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-595 (6,8 mg, rendimiento 15 %) como un sólido blanco.
1H-RMN (500 MHz, CD3OD) 8 ppm 8,77 (d, 1 H), 8,74 (s, 2 H), 7,52 (s, 1 H), 7,27 (ap. q, 1 H), 7,09 (m, 1 H), 7,04 (ap. t, 1 H), 6,90 (d, 1 H), 6,87 (m, 1 H), 5,97 (s, 2 H), 3,49 (m, 2 H), 2,77 (m, 2 H).
Compuesto I-530 y compuesto de referencia I-531
El compuesto de referencia I-405 se disolvió mediante separación quiral de SRC con columna semipreparativa chiralcel AD-H 50 mm x 250 mm, utilizando 15:85 etanol+dietilamina 0,5 %:CO2. La recolección de los dos picos y la concentración al vacío produjo el compuesto de referencia I-530 (primer pico de elución mediante HPLC analítica, Chiralcel AD-H 4,6 mm x 250 mm, 15:85 etanol+dietilamina 0,5 %:hexano) como un sólido de color naranja claro. La recolección del pico que eluyó en segundo lugar y la concentración al vacío produjo el compuesto de referencia I-531 (primer pico de elución mediante HPLC analítica, Chiralcel AD-H 4,6 mm x 250 mm, 15:85 etanol+dietilamina 0,5 %:hexano) como un sólido de color naranja claro.
1H-RMN para el Compuesto I-530 (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,11 (d, 1 H), 8,32 (d, 1 H), 7,93 (t, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,78 (br s, 1 H), 7,69 (br s, 1 H), 7,51 (s, 1 H), 7,35-7,31 (m, 1 H), 7,22-7,19 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 7,00-6,97 (m, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,02-3,94 (m, 2 H).
1H-RMN para el Compuesto de referencia I-531 (500 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 9,11 (d, 1 H), 8,33 (d, 1 H), 7,93 (t, 1 H), 7,90 (s, 1 H), 7,78 (br s, 1 H), 7,69 (br s, 1 H), 7,52 (s, 1 H), 7,35-7,31 (m, 1 H), 7,22-7,19 (m, 2 H), 7,10 (t, 1 H), 7,00 6,97 (m, 1 H), 5,90 (s, 2 H), 4,02-3,94 (m, 2 H).
Compuesto de referencia I-630
El compuesto del título se sintetizó en 2 etapas:
Etapa 1: Síntesis de (2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-
pirazol-3-il)pirimidin-5-il)carbamato de metilo
A una solución de 2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-pirazol-3-il)pirimidin-5-amina (este compuesto se describió en la publicación de solicitud de patente WO2012003405 A1) (1 equiv.) en piridina anhidra a 0 °C se añadió cloroformiato de metilo (1,2 equiv.). Después de agitar durante 10 min, la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se monitorizó detenidamente mediante LC/MS. Se añadieron partes adicionales de cloroformiato de metilo (3,2 equiv.) a 0 °C. Después de agitar a temperatura ambiente durante 20 h, la mezcla bruta se diluyó con agua. Los sólidos de color tostado resultantes se recogieron por filtración y se usaron en la siguiente etapa sin purificación adicional.
Etapa 2: Síntesis del compuesto de referencia I-630
Una suspensión de (2-(1-(2-fluorobencil)-5-(isoxazol-3-il)-1H-
-pirazol-3-il)pirimidin-5-il)carbamato de metilo (1 equiv.) en DMF a 0 °C se trató con hidruro de sodio (60 % p/p en aceite mineral, 1,1 equiv.) y se calentó a temperatura ambiente. Al cabo de 30 min, la mezcla de reacción se enfrió a 0 °C y se añadió yodometano (1,1 equiv.). Al cabo de 25 min, la mezcla de reacción bruta se vertió en agua y se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron, y el disolvente se retiró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice con un gradiente de 20 % acetonitrilo:metanol (7:1) en diclorometano proporcionando el compuesto deseado, el compuesto de referencia I-630 (12 mg, rendimiento 21 % en dos etapas) como un sólido blanco.
1H RMN (500 MHz, CD3OD) 5 ppm 8,88 (s, 2 H), 8,77 (d, 1 H), 7,55 (s, 1 H), 7,28 (ap. q, 1 H), 7,09 (ap. t, 1 H), 7,04 (ap. t, 1 H), 6,91 (d, 1 H), 6,88 (ap. t, 1 H), 5,99 (s, 2 H), 3,79 (s, 3 H), 3,40 (s, 3 H).
Ejemplo de referencia 2A: Medición de la actividad biológica mediante ensayo de sGC-HEK-cGMP (ensayo con incubación de SNP)
Se usaron células de riñón embrionarias humanas (HEK293), de expresión endógena de guanilato ciclasa soluble (sGC) para evaluar la actividad de los compuestos de prueba. Los compuestos que estimulan el receptor de sGC deberían causar un aumento en la concentración intracelular de cGMP. Las células HEK 293 se sembraron en modificación de Dulbecco de medio de Eagle complementado con suero fetal bovino (10 % final) y L-glutamina (2 mm final) en un volumen de 200 pl a una densidad de 1x105 células/pocillo en una placa de fondo plano de 96 pocillos recubierta con poli-D-lisina y se cultivaron durante la noche a 37 °C. El medio se aspiró y las células se lavaron con (1 vez) solución salina tamponada de Hank (200 pl). A continuación, las células se incubaron durante 15 minutos a 37 °C con 200 pl de una solución de 3-isobutil-1-metilxantina (IBMX) 0,5 mM. A continuación se añadieron artículo de prueba y soluciones de nitroprusiato de sodio (concentración x pM para la solución del artículo de prueba y 10 pM de concentración para la solución de SNP; en donde x es una de las siguientes concentraciones: 30 pM, 10 pM, 3 pM, 1 pM, 0,3 pM, 0,1 pM, 0,03 pM, 0,01 pM, 0,003 pM, 0,001 pM, 0,0003 pM o 0,0001 pM) a la mezcla de ensayo (2 pl cada una) y la mezcla resultante se incubó a 37 °C durante 10 minutos. Después de la incubación de 10 minutos, la mezcla de ensayo se aspiró y se añadió HCl 0,1 M (200 pl) a las células. La placa se incubó a 4 °C durante 30 minutos en el HCl 0,1 M para detener la reacción y lisar las células. A continuación, las placas se centrifugaron a 1.200 g durante 5 minutos a temperatura ambiente. Los sobrenadantes se recogieron y transfirieron a una nueva placa de 96 pocillos de fondo plano para análisis mediante HPLC-MS. Se llevaron a cabo controles de vehículo con soluciones de DMSO (1 %). Se utilizó un estimulador de sGC conocido, BAY 41-2272, como control positivo. Las muestras se diluyeron con un volumen igual de acetato de amonio 1 M (pH 7) para neutralizar las muestras para una mejor cromatografía. Se preparó una solución estándar 2x cGMP en HCl 0,1 M y a continuación se diluyó con un volumen igual de acetato de amonio 1 M, con las siguientes concentraciones finales en nM: 1.024, 512, 256, 128, 64, 32, 16, 8, 4, 2, 1. Las concentraciones de cGMP en las placas de prueba se determinaron a partir de cada muestra usando las condiciones de LC/MS mostradas en la Tabla 2 siguiente y la curva estándar de cGMP calculada. Los valores EC50 se calcularon a partir de curvas de respuesta-concentración generadas con software GraphPad Prism. Los datos se normalizaron a un control alto mediante el uso de la siguiente ecuación: 100 * (Muestra - Control bajo)/(Control alto -Control bajo), donde el Control bajo es el promedio de 6 muestras tratadas con DMSO 1 %, y el control alto es el promedio de 8-12 muestras tratadas con 10uM BAY 41-2272. Los datos se ajustaron utilizando regresión no lineal, respuesta de dosis sigmoidal, 3 ajustes de parámetros. Las muestras se procesaron típicamente, en n=1, pero para las muestras que se procesaron con n=2 (o más) los resultados aquí proporcionados corresponden a la media aritmética de los diversos resultados obtenidos para cada compuesto determinado. Si una curva no llegó a estabilizarse en meseta, entonces se impuso la limitación de 100 %.
Los compuestos que no indujeron una respuesta mínima de 30 % se registraron como ND y no se determinaron los valores EC50. Las actividades biológicas de algunos de los compuestos de referencia determinadas con el ensayo de sGC-HEK con incubación de SNP se resumen en la Tabla 3.
Tabla 2 (condiciones experimentales de HPLC LC/MS)
Tabla 3. Actividad de células enteras en el ensayo HEK con detección de LC/MS.
Ejemplo 2B: Medición de la actividad biológica mediante el ensayo de sGCs-HEK-cGMP (utilizando detección de HTRF) (ensayo con incubación de SNP)
Se usaron células de riñón embrionarias humanas (HEK293), de expresión endógena de guanilato ciclasa soluble (sGC) para evaluar la actividad de los compuestos de prueba. Los compuestos que estimulan la enzima sGC deberían ocasionar un aumento en la concentración intracelular de cGMP. Las células HEK 293 se sembraron en modificación de Dulbecco de medio de Eagle complementado con suero fetal bovino (10 % final) y L-glutamina (2 mm final) en un volumen de 200 pl a una densidad de 1x105 células/pocillo en una placa de fondo plano de 96 pocillos recubierta con poli-D-lisina y se cultivaron durante la noche a 37 °C. El medio se aspiró y las células se lavaron con (1 vez) solución salina tamponada de Hank (200 pl). A continuación, las células se incubaron durante 15 minutos a 37 °C con 200 pl de una solución de 3-isobutil-1-metilxantina (IBMX) 0,5 mM. A continuación, se añadió el artículo de prueba y las soluciones de nitroprusiato de sodio a la mezcla de ensayo (2 pl cada una) y la mezcla resultante se incubó a 37 °C durante 10 minutos. Después de la incubación de 10 minutos, la mezcla de ensayo se aspiró y se añadió HCl 0,1 M (200 pl) a las células. La placa se incubó a 4 °C durante 30 minutos en el HCl 0,1 M para detener la reacción y lisar las células. A continuación, las placas se centrifugaron a 1.200 g durante 5 minutos a temperatura ambiente. Los niveles de GMP se determinaron usando un ensayo de cGMP HTRF (Cisbio Product n.° 62GM2PEC). Para cada muestra, se diluyeron 5ul de sobrenadante de ensayo HEK 1:5 en diluyente de ensayo de kit HTRF y se transfirió a un depósito de la placa de ensayo, y el ensayo HTR<f>se realizó según las instrucciones del fabricante del kit HTRF. Se realizaron cálculos de muestra utilizando controles altos y bajos, donde el control alto fue sobrenadante de un ensayo HEK realizado en presencia de Bay 41-2272 10 uM SNP 100 uM y el control bajo fue el sobrenadante del ensayo HEK realizado en presencia de vehículo. Se preparó una solución estándar cGMP en HCl 0,1 M y se diluyó para realizar una curva estándar cGMP usando el ensayo HTRF. Usando datos de relación media del ensayo HTRF, los datos de muestra se normalizaron según la ecuación: 100 * (Muestra - Control bajo)/(Control alto - Control bajo). Los datos se ajustan a 3 parámetros log de agonista-respuesta de dosis de agonista (Top (% EMax), inferior, log EC50) usando Graphpad (software Prism). Los datos en la Tabla 4 se obtuvieron utilizando este procedimiento de ensayo modificado. (concentración x pM para la solución del artículo de prueba y concentración 10 pM para la solución SNP; en donde x es una de las siguientes concentraciones : 30 pM, 10 pM, 3 pM, 1 pM, 0,3 pM, 0,1 pM, 0,03 pM, 0,01 pM, 0,003 pM, 0,001 pM, 0,0003 pM y 0,01 nM.
Tabla 4. Actividad de células enteras en el ensayo HEK con detección de HTRF.
El Compuesto I-405 y los Compuestos de Referencia I-306 a I-404 y I-406 a I-455 se analizaron en este ensayo y la mayoría de ellos mostraron valores EC50 inferiores a 5,0 pM, con valores Emax de al menos 80 %.
E j e m p l o 2 C : M e d ic i ó n d e la a c t iv id a d b io l ó g ic a m e d ia n t e e n s a y o d e s G C - H E K - c G M P , n u e v o p r o t o c o lo c o n d e t e c c ió n L C / M S
Se usaron células de riñón embrionarias humanas (HEK293), de expresión endógena de guanilato ciclasa soluble (sGC) para evaluar la actividad de los compuestos de prueba. Los compuestos que estimulan la enzima sGC deberían ocasionar un aumento en la concentración intracelular de cGMP. Se sembraron células HEK 293 en modificación de Dulbecco de medio de Eagle complementado con suero fetal bovino (10 % final) y penicilina (100 U/ml)/estreptomicina (100 p g/ml) en volumen de 50 pl a una densidad de 1,5x104 células/pocillo en una placa de fondo plano de 384 pocillos recubierta con poli-D-lisina. Las células se incubaron durante la noche a 37 °C en una cámara humidificada con CO2 a 5 %. El medio se aspiró y las células se lavaron con (1 vez) solución salina tamponada de Hank (50 pl). A continuación, las células se incubaron durante 15 minutos a 37 °C con 50 pl de una solución de 3-isobutil-1-metilxantina (IBMX) 0,5 mM. A continuación, se añadieron artículo de prueba y soluciones de dietilentriamina-NONOato (DETA-NONOato) (concentración x pM para la solución del artículo de prueba y concentración 10 pM para la solución de DETA-NONOato; en donde x es una de las siguientes concentraciones);
se añadieron a la mezcla de prueba y la mezcla resultante se incubó a 37 °C durante 20 minutos. Al cabo de 20 minutos de incubación, la mezcla de ensayo se aspiró y se añadió ácido acético 10 % que contenía 150 ng/ml 3 cGMP (patrón interno para LCMS) (50 pl) a las células. La placa se incubó a 4 °C durante 30 minutos en la solución de ácido acético para detener la reacción y lisar las células. Las placas se centrifugaron a continuación a 1.000 g durante 3 minutos 4 °C y el sobrenadante se transfirió a una placa de reacción limpia para análisis LCMS.
Las concentraciones de cGMP de cada muestra se determinaron usando las condiciones de LCMS mostradas a continuación (Tabla 5) y se calculó la curva estándar. La curva estándar se preparó en ácido acético 10 % con 150 ng/ml 3cGMP (cGMP marcado isotópicamente con un peso 3 unidades mayor que el tipo natural) con las siguientes concentraciones finales de cGMP en ng/ml: 1, 5, 10, 50, 100, 250, 500, 1000, 2000.
Tabla 5: condiciones de LC/MS, Ejemplo 2C
Los datos se normalizaron a un control alto mediante el uso de la siguiente ecuación: 100 * (Muestra - Control bajo)/(Control alto - Control bajo), donde el Control bajo es el promedio de 16 muestras tratadas con DMSO 1 %, y el control alto es el promedio de 16 muestras tratadas conp30 M de I-329. Los datos se ajustaron usando un ajuste de 4 parámetros (log (agonista) frente a respuesta - pendiente variable) con el software GraphPad Prism v. 5. n=2 para todos los compuestos. El valor EC50 absoluto se interpoló a partir del ajuste de la curva y se define como la concentración a la cual un compuesto dado provoca 50 % de la respuesta de control alta. Los compuestos que no producen una respuesta mínima de 50 % se indican > como 30 pM. Para los compuestos de ensayo por duplicado o n superior a 2, el resultado aquí indicado es la media geométrica de los diferentes resultados obtenidos. La Tabla 6 resume los resultados obtenidos para los compuestos de la invención (I-405 y I-530) y los compuestos de referencia seleccionados en este ensayo.
Tabla 6. Actividad de célula total en ensayo de HEK con detección LC/MS (condiciones de ensayo actualizadas,
Ejemplo 2C).
Ejemplo de referencia 3A: Medición de la actividad biológica mediante el ensayo de anillos aórticos torácicos
Se disectan los anillos aórticos torácicos de ratas Sprague-Dawley (isoflurano) macho anestesiadas que pesan 275 299 g. Los tejidos se transfieren inmediatamente a la solución Krebs-Henseleit muy fría, que se ha aireado con O2 a 95 % y CO2 a 5 % durante 30 minutos. Tras la retirada de tejido conjuntivo, se cortan secciones aórticas en 4 anillos (~2 mm cada una) y se suspenden en 2 ganchos en forma de L, con un gancho fijo en la parte inferior del baño de tejido (Schuler Organ Bath, Harvard Apparatus) y el otro conectado a un transductor de fuerza (transductor de fuerza F30, Harvard Apparatus). Los baños que contienen solución de Krebs Henseleit (10 ml) se calientan a 37 °C y se airean con O2 a 95 % y CO2 a 5 %. Los anillos se llevan a una tensión inicial de 0,3-0,5 g y se aumenta gradualmente a una tensión de reposo de 1,0 g durante 60 minutos. Los anillos se enjuagan con solución de Krebs Henseleit (calentada a 37 °C y se airean con O2 a 95 % y CO2 a 5 %) a intervalos de 15 minutos hasta obtener un valor de base estable. Se considera que los anillos son estables después de mantener una tensión de reposo de 1,0 g (durante aproximadamente 10 minutos) sin necesidad de ajuste. A continuación, los anillos se contraen con fenilefrina 100 ng/ml añadiendo 100 ul de una solución madre de fenilefrina de 10 pg/ml. Los tejidos que logran una contracción estable se tratan a continuación de modo acumulativo, dependiente de dosis, con compuestos de prueba preparados en dimetilsulfóxido (DMSO). En algunos casos, los tejidos se aclaran tres veces durante un período de 5 minutos con solución de Krebs-Heinseleit (calentada a 37 °C y aireada con O2 a 95 % y CO2 a 5 %), se dejan estabilizar al valor de base y después se utilizan para la caracterización de otros artículos de prueba o efectos de DMSO. Todos los datos se toman con el software HSE-ACAD proporcionado por Harvard Apparatus. Los efectos de relajación porcentual se calculan en Microsoft Excel utilizando el valor de tensión registrado de tratamiento de fenilefrina 100 ng/ml como 0 % de inhibición y tratamiento con 3-isobutil-1-metilxantina 100 pM como 100 % de inhibición. Los valores EC50 se calculan a partir de curvas de respuesta de concentración generadas con el software GraphPad Prism.
Ejemplo de referencia 3B: Medición de la actividad biológica mediante el ensayo de anillos aórticos torácicos, método alternativo
Como ensayo de anillos aórticos torácicos alternativo, se utiliza el procedimiento del Ejemplo de referencia 3, salvo que el porcentaje de efectos de relajación se calcula en Microsoft Excel utilizando el valor registrado de tensión de tratamiento de fenilefrina 100 ng/ml como 0 % de inhibición y, después de lavar el tejido con tampón, la tensión de reposo original del tejido se usa como inhibición de 100 %.
Ejemplo 4: Cambio de presión arterial en ratas Sprague-Dawley
S e a n e s t e s i a r o n r a t a s m a c h o ( 250 - 350 g d e p e s o c o r p o r a l , s u m i n i s t r a d a s p o r H a r l a n L a b o r a t o r i e s ) a n e s t e s i a d a s c o n k e t a m i n a / x i l a z i n a y u n c a t é t e r c a r g a d o d e f lu id o s a l i n o h e p a r i n i z a d o im p l a n t a d o e n la a r t e r ia f e m o r a l d e r e c h a . E l c a t é t e r s e e x t e r io r iz ó e n t r e la e s c á p u l a , s e t a p ó y s e d e jó q u e e l a n i m a l s e r e c u p e r a s e d u r a n t e a l m e n o s 7 d í a s d e s p u é s d e la c i r u g í a a n t e s d e r e a l i z a r n in g ú n e n s a y o d e c o m p u e s t o . A n t e s d e l e n s a y o lo s a n i m a l e s s e m a n t u v ie r o n c o n u n a d ie t a n o r m a l , c o n a c c e s o l ib r e a a g u a p o t a b le , e n u n c ic l o d e l u z - o s c u r i d a d d e 12 h o r a s .
El día de experimentación, bajo anestesia con isoflurano inhalado, el catéter se destapó y conectó a una cable (Instech Labs) y transductor de presión (Harvard Apparatus). Posteriormente se tomó su presión arterial y ritmo cardíaco y se analizaron con un sistema de captura de datos empleado para ello (PowerLab, ADInstruments). Las velocidades de muestreo de datos se establecieron a 1 ciclo por segundo. Una vez conectada, se permitió que cada rata se recuperase de la anestesia y los niveles de presión arterial y ritmo cardíaco de base se establecieron en estos animales conscientes y con libertad para moverse. Una vez establecido el valor de base se administró oralmente o bien vehículo (metilcelulosa 0,5 % o PEG400100 %) o artículo de prueba por vía oral (PO, 10 mg/kg) y se monitorizaron los efectos en la presión arterial y el ritmo cardíaco durante 24 horas.
Los datos se indican como promedios horarios y los cambios en la presión arterial se calculan restando los valores de base individuales cada hora.
Ejemplo de referencia 5: Descripciones modelos animales:
Modelo de cordero de hemodinámica utilizando estimulador de sGC inhalado
(“ Inhaled Agonists of Soluble Guanilate Cyclase Induce Selective Pulmonary Vasodilation” , Oleg V. y col., American J of Resp and Critical Care Medicine, vol. 176, 2007, p. 1138)
Es posible probar si la inhalación de formulaciones novedosas de micropartículas de polvo seco que contienen estimuladores de sGC producirían vasodilatación pulmonar selectiva en corderos con hipertensión pulmonar aguda siguiendo un procedimiento publicado. También es posible evaluar la administración combinada de las micropartículas de estimulador de sGC y óxido nítrico inhalado (iNO) en este sistema. Finalmente, es posible examinar si la inhalación d e m i c r o p a r t í c u l a s d e u n e s t i m u l a d o r s G C p r o d u c i r í a v a s o d i l a t a c i ó n p u l m o n a r c u a n d o s e v e a f e c t a d a la r e s p u e s t a a i N O ( ó x id o n ít r ic o s i n t a s a in d u c ib l e ) .
Protocolo: En corderos con respiración espontánea y despiertos que llevan implantados catéteres vasculares y un tubo de traqueotomía, se insufla por vía intravenosa U-46619 para aumentar la presión arterial pulmonar a 35 mm Hg. La inhalación de micropartículas compuestas de BAY 41-2272, BAY 41-8543, o Ba Y 58-2667 y excipientes (dipalmitoilfosfatidilcolina, albúmina, lactosa) produjo vasodilatación pulmonar dependiente de dosis y un aumento de la liberación de cGMP transpulmonar sin un efecto significativo en la presión arterial media. La inhalación de micropartículas que contenían BAY 41-8543 o BAY 58-2667 aumentó la oxigenación arterial sistémica. La magnitud y duración de la vasodilatación pulmonar inducida por iNO aumentaron después de la inhalación de micropartículas de BAY 41-8543. La administración intravenosa de 1H-[1,2,4]oxadiazolo[4,3-a]quinoxalin-1-ona (ODQ), que oxida el grupo hemo protésico de sGC, redujo notablemente el efecto vasodilatador pulmonar de iNO. En cambio, la vasodilatación pulmonar y la liberación de cGMP transpulmonar inducida por inhalación de micropartículas de BAY 58-2667 aumentaron en gran medida después del tratamiento con ODQ. Por lo tanto, la inhalación de micropartículas que contienen agonistas de sGC puede proporcionar un tratamiento novedoso eficaz para pacientes con hipertensión pulmonar, especialmente cuando la capacidad de respuesta a iNO se ve afectada por la oxidación de CGs. Nota: BAY 41-2272, Ba Y 41-8543 son estimuladores de sGC, mientras que BAY 58-2667 es un activador de sGC.
Modeloin vitro (ex vivo)de músculo liso traqueal de cobaya estimulado con un campo eléctrico para la evaluación de la broncodilatación.
Es posible evaluar los efectos broncodilatadores de estimuladores de sGC usando el sistema descrito a continuación. Este sistema nos permite determinar la potencia, la eficacia y la duración de acción de varios estimuladores de sGC, así como evaluar efectos adversos potenciales tales como cambios en la presión arterial, o el ritmo cardíaco.
Animales: Cobayas, Dunkin Hartley, macho, alimentación sin restricciones y certificados como libres de microorganismos específicos en el momento de la recepción de 525-609 g el día del experimento. Los cobayas Harlan UK Ltd. se alojan en un grupo de 4 en jaulas de fondo sólido con lecho Gold Flake en un ambiente controlado (flujo de aire, temperatura y humedad). El alimento (FD1, Special Diet Services) y el agua se proporcionan ad libitum.
Contracción del músculo liso traqueal de cobaya en respuesta a EFS. Evaluación de la potencia y eficacia del compuesto:
En cada día de experimentos, se mata un cobaya mediante exposición a una concentración creciente de CO2 y retirada de la tráquea. La tráquea quede limpia de tejido extraño y se abre cortándola longitudinalmente en una línea en frente del músculo, se abre y se corta en tiras de una anchura de 2-3 anillos de cartílago. Se une un bucle de algodón a un extremo de cada tira traqueal y una longitud de algodón al otro extremo. Las tiras traqueales se suspenden a continuación entre dos electrodos de platino, usando soportes de tejido, en un sistema Myobath (World Precision Instruments Stevenage, Reino Unido). El lazo está unido sobre el gancho en la parte inferior del soporte de tejido y el otro extremo se une al brazo de un transductor de fuerza FORT10 (World Precision Instruments Stevenage, Reino Unido) garantizando que el tejido queda colocado entre los dos electrodos de platino. A continuación, se hace descender toda la unidad a un baño de tejido de 10 ml que contiene tampón de Henseleit modificado por Kreb a 37 °C, con burbujeó de carbógeno. Se aplica una tensión de 1 g a cada pieza de tejido y el tejido se lava, seguido de un período de estabilización de 1 hora. Una vez que se ha dejado estabilizar los tejidos, el aparato para estimulación de campo eléctrico se configura para suministrar una estimulación de la frecuencia de 80 Hz de anchura de pulso de 0,1 ms, con un pulso uni-polar, conmutado, cada 2 minutos usando un simulador digital de 8 canales DS8000 (World Precision Instruments Stevenage, Reino Unido). Se lleva a cabo una curva de respuesta de tensión en cada tira a 2, 4, 6, 7, 8, 10, 12 V y a continuación se selecciona un voltaje submáximo para aplicarlo a cada tejido durante el resto del experimento. Se induce la contracción del músculo liso traqueal de cobaya (GPTSM) utilizando Estimulación de campo eléctrico (EFS) submáxima (también es posible inducir contracción usando una sustancia espasmógena, tal como metacolina o histamina como se describe en Coleman y col.*). Los compuestos se disuelven en DMSO 100 % a 3x10-2 M y se almacenan alícuotas a -200 °C. Se usa una alícuota aparte para cada experimento. Los tejidos se lavan con tampón de Krebs y se estimulan utilizando el voltaje submáximo determinado previamente durante 1 hora para establecer una contracción de base estable antes de la evaluación de la actividad del compuesto.
A continuación se realiza una curva de respuesta a la dosis (DRC) acumulativa para cada sustancia de ensayo y se miden los cambios en la contracción del músculo liso. El efecto de cada sustancia de prueba en cada experimento se expresa como porcentaje de inhibición de la contracción base, normalizado según los controles relevantes de vehículo. El experimento se realiza tres veces utilizando tejido de tres animales diferentes. Los datos de los tres experimentos se combinan, se representa la DRC y se determinan la potencia de la sustancia de prueba y la eficacia. La potencia del bromuro de ipratropio se evalúa junto a los compuestos de prueba y el valor IC50 determinado es de 0,86 nM (95 % Cl, 0,78-0,94), según los datos obtenidos previamente en el sistema.
“ Novel and Versatile Superfusion System. Its use in the Evaluation of Some Spasmogenic and Spasmolytic Agents Using Guinea pig isolated Tracheal Smooth Muscle.” , R. A. Coleman y col.., J. Pharmacol. Métodos, 21, 71-86, 1989.
Modelo de ratón para enfermedades en las que la función CFTR alterada está causalmente involucrada.
E s t a s e n f e r m e d a d e s c o m p r e n d e n f i b r o s i s q u í s t i c a , t r a s t o r n o s p a n c r e á t i c o s , t r a s t o r n o s g a s t r o i n t e s t i n a l e s , t r a s t o r n o s d e l h íg a d o , d i a b e t e s r e l a c i o n a d a c o n f i b r o s i s q u í s t i c a ( C F R O ) , o jo s e c o , b o c a s e c a y s í n d r o m e d e S j o e g r e n .
Utilizando ratones transgénicos que expresan o no expresan el canal F508CFTR delta es posible medir diferencias en diferencia potencial nasal y salivación en presencia de un estimulador de sGC de prueba usando el protocolo de la bibliografía descrito más adelante (ver WO2011095534).
Ensayo de secreción salival en ratones delta(.6.)50S-CFTR
15 homocigotos macho y hembra, heterocigotos 6.50S-CFTR (retrocruzados sobre el fondo genético FVB más de 12 generaciones, originalmente obtenidos de la Universidad Erasmo de Rotterdam; los utilizados en este ensayo tenían 10-14 semanas de edad y pesaban 1S-36 g, de ambos sexos. Se prepararon soluciones de Vardenafilo en concentraciones de 0,07, 0,14 y 0,42 mg/kg BW en solución salina estéril, mientras que el estimulador de sGC BAY 41-2272 se disolvió en 0,01, 0,03, 0,1 y 0,3 mg/kg BW en un disolvente que contenía ddH2O, PEG 400 40 % (polietilenglicol 400) y etanol 10 %. Las sustancias o los vehículos adecuados se administraron a ratones mediante inyección intraperitoneal (5 ml/kg de masa corporal) 60 min antes del ensayo de secreción salival. Al cabo de 60 min, los ratones se anestesiaron con una combinación de 25 ketamina y diazepam. La solución se preparó de modo que contuviera 1 ml de diazepam 5 mg/ml y 1 ml de ketamina 100 mg/ml en 8 ml de solución salina estéril. La anestesia se indujo por inyección intraperitoneal de la solución (10 ml/kg de masa corporal). Después de la anestesia, los ratones se pretrataron con una inyección subcutánea de 1 mM de atropina (50 1-11) en la mejilla izquierda para evitar una estimulación cruzada de receptores colinérgicos. Se colocaron tiras pequeñas de papel 5 de filtro Whatman 5 dentro de la mejilla previamente inyectada durante 4 min para absorber la saliva secretada después de la inyección de atropina. Esta primera pieza del papel de filtro se retiró y se remplazó con un segundo papel de filtro previamente pesado. Después de eso, 50 1-11 de una solución que contenía isoprenalina 100 I-IM y atropina 1 mM se inyectó en la mejilla izquierda en el mismo sitio para inducir la secreción salival por mecanismos adrenérgicos. El momento de la inyección de isoprenalina 10 se tomó como tiempo cero, y las tiras de papel de filtro se remplazaron cada 10 minutos durante un período de recogida total de 30 minutos. Cada pieza del papel de filtro se colocó inmediatamente y se selló en un vial pesado previamente. Después de recoger todas las muestras, se volvió a medir cada vial y se registraron los pesos de todas las muestras. La diferencia en el peso total del vial más el papel medido antes y después de recoger la saliva 15 se tomó como el peso neto de la saliva secretada durante el período de recolección. Las cantidades totales de secreción salival se calcularon como el peso de la saliva dividido por el número de minutos necesarios para cada recolección y normalizado a continuación conforme a la masa del ratón en gramos. Los resultados se expresan como el aumento medio en porcentaje de los ratones n en comparación con el tratamiento de placebo. El análisis estadístico se realizó mediante una prueba 20 ANOVA de una vía seguida de un análisis de Bonferroni post-hoc; *****//* significa estadísticamente significativo con valores p<0,05/<0,01/0,001 y n.s. significa no significativo.
Estos estudios en animales se llevaron a cabo con varios estimuladores de sGC, activadores de sGC e inhibidores de PDE5. Los resultados sugieren que los compuestos de la invención son útiles para el tratamiento de la fibrosis quística, trastornos pancreáticos, trastornos gastrointestinales, trastornos hepáticos, Diabetes relacionada con la fibrosis quística (CFRO), ojo seco, boca seca y síndrome de Sjoegren.
Trastornos neuromusculares
Se ha demostrado previamente que se observa la incorrecta localización de la Óxido nítrico sintasa (nNOS) de la membrana sarcolemal al sarcoplasma en una amplio rango de afecciones neurológicas no distróficas asociadas con el estado de motilidad deficiente y el estrés catabólico. Una herramienta para la evaluación de biopsias musculares de pacientes con diversas formas hereditarias y adquiridas de trastornos neuromusculares es la evaluación de la localización sarcolemal de nNOS. Se descubrió que el nivel de nNOS en el sarcolema se correlaciona con la movilidad y el estado funcional.
Se puede utilizar una evaluación análoga para determinar la localización de nNOS en modelos animales de miopatía no distrófica siguiendo los protocolos de la bibliografía descritos a continuación (“ Loss of sarcolemmal nNOS is common in acquired and inherited neuromuscular disorders” ; E.L. Finanger Heddericky col.,Neurology,2011, 76(11), 960-967).
Localización incorrecta de nNOS en modelos de ratón de atrofia muscular adquirida
Se han descrito dos modelos de ratón que demuestran la atrofia muscular sin comprometer la movilidad: la terapia con corticosteroides de dosis alta y no alimentados a corto plazo. Los ratones tratados con esteroides o no alimentados durante 48 horas mostraron disminuciones significativas en la masa corporal general y en la masa muscular del esqueleto en húmedo normalizada. El análisis morfométrico de los especímenes de músculo esquelético de ambos modelos mostró atrofia muscular, definida por una disminución significativa en el diámetro mínimo de fibra Feret en comparación con los controles de edad ajustada (n = 5 para cada grupo). Sin embargo, la tinción de inmunofluorescencia para la distrofina, el a-sarcoglicano y la a-1-sintrofina mostraron una localización de distrofina sugerente de complejo DGC intacto. Sin embargo, tanto los ratones tratados con esteroides como los no alimentados presentaron una tinción de nNOS sarcolemal nula o muy reducida. La PCR en tiempo real para las proteínas de la familia de NOS (nNOS, eNOS, iNOS) no reveló diferencias significativas en los niveles de expresión de ninguno de lo s 3 t r a n s c r i t o s e n lo s r a t o n e s t r a t a d o s c o n e s t e r o i d e s ( n = 8 p a r a c a d a g r u p o ) . A d e m á s , e l a n á l i s i s W e s t e r n b lo t p a r a n N O S , i N O S y e N O S n o m o s t r ó d i f e r e n c i a s e n lo s n i v e l e s d e p r o t e ín a .
Estos modelos animales murinos podrían usarse para evaluar los efectos de estimuladores de sGC (por ejemplo, un estimulador sGC de la invención) en los síntomas de atrofia muscular y estados de enfermedad relacionados.
Los ratones no alimentados mostraron una disminución del cien por cien de la expresión de transcripción de nNOS y de iNOS en comparación con ratones en estado natural (n = 9 para los controles, n = 7 para los no alimentados). Sin embargo, el nivel de proteínas de nNOS, iNOS y eNOS no reveló diferencias entre los ratones de control y no alimentados (n = 4 para cada grupo). Estos datos demuestran que la localización anormal de nNOS se produce en ratones con atrofia muscular grave incluso si se conserva la movilidad global, apoyando la noción de que, además de la movilidad disminuida, otros factores desencadenantes, tales como el estrés catabólico, pueden asociarse con la pérdida sarcolemal de nNOS.
La localización de nNOS de músculo esquelético se mantiene durante la hibernación (estudios con ardillas)
Se han usado especímenes de músculo esquelético de ardillas de tierra de trece franjas hibernantes para evaluar el efecto de la inmovilidad y el estrés catabólico en la localización de nNOS en el contexto de la homeostasis muscular mantenida y la integridad. Estos animales son mamíferos necesariamente hibernantes que están protegidos frente a la atrofia musculoesquelética durante la hibernación. A pesar de hibernar durante 5 meses con casi completa inmovilidad y sin ingesta calórica, la expresión sarcolemal de nNOS se mantiene. Estos datos junto con los datos de los pacientes y de los ratones indican que el control bioquímico de la localización de nNOS es complejo y, lo que es importante, la conservación de nNOS sarcolemal puede ser significativa en el mantenimiento de la homeostasis muscular.
Estos resultados también sugieren que puede resultar beneficioso abordar como objetivo la señalización de NO aberrante (por ejemplo, con estimuladores de sGC tales como los descritos aquí) para un amplio grupo de pacientes con trastornos neuromusculares.
Modelos de ratón de distrofia Muscular (BMD y DMD)
La Distrofia muscular de Becker (BMD), caracterizada por el desgaste progresivo del músculo esquelético, está causada por mutaciones de la distrofina de la proteína muscular. En un estudio humano, Martin y col. (ver “ Tadalafil Alleviates Muscle Ischemia in Patients with Becker Muscular Dystrophy” ; Elizabeth A. Martin y col.,Sci. Transí. Med.
4, 162ra155 (2012); “ Vascular-targetted therapies for Duchenne muscular dystrophy” ; Ennen y col.,Skeletal Muscle,2013, 3:9) evaluaron la atenuación inducida por ejercicio de la vasoconstricción simpática refleja en los músculos de 10 pacientes con BMD y controles de sexo masculino sanos de edad ajustada a 7 años. Este es un mecanismo protector que optimiza la perfusión del músculo esquelético para satisfacer las demandas metabólicas del ejercicio. La vasoconstricción fue inducida por estrés ortostático simulado y se midió cuando los músculos del antebrazo estaban en reposo o ligeramente ejercitados en forma de empuñadura rítmica. En primer lugar, los investigadores mostraron que la atenuación de la vasoconstricción refleja inducida por el ejercicio era deficiente en 9 de 10 pacientes con BMD en los que las mutaciones de distrofina comunes interrumpen la señalización de la NO sintasa neuronal (nNOS) al sarcolemma muscular. A continuación, en un ensayo de cruce controlado con placebo aleatorizado doble ciego, los autores mostraron que la regulación normal del flujo sanguíneo quedó restaurada en ocho de nueve pacientes con una única dosis oral de 20 mg de tadalafilo, un inhibidor de PDE5 específico.
Es posible evaluar los efectos de los fármacos que actúan en la ruta de NO utilizando un modelo de la enfermedad relacionada distrofia muscular de Duchenne (DMD) para ratónmdxcon deficiencia en distrofina. Este modelo también ha demostrado que los inhibidores de fosfodiesterasa 5 (PDE5) alivian algunas características del fenotipo distrófico, incluido el vasospasmo de los microvasos del músculo esquelético que puede dar lugar a lesión y fatiga muscular.
Con el ejercicio del músculo esquelético sano, el NO derivado de nNOS sarcolemal atenúa la vasoconstricción local a adrenérgica, optimizando de esta manera la perfusión para satisfacer las demandas metabólicas del músculoactivo. Este mecanismo protector (denominado simpatolisis funcional) se pierde en ratonesmdx(un modelo de BMD y DMD), ratones sin nNOS y chicos con DMD, causando isquemia muscular funcional. Los ataques repetidos de isquemia funcional podrían acelerar el daño dependiente del uso de las fibras musculares ya debilitadas por la deficiencia en distrofina.
En el ratónmdx,muchas características del fenotipo distrófico puede mejorarse mediante múltiples estrategias que impulsen la señalización de NO, incluida la expresión transgénica de minigenes de distrofina que restauran nNOS sarcolemal (y restauran de esta manera la simpatolisis funcional), administración del sustrato de NOS L-arginina (24, 25), el tratamiento sin fármacos donadores de NO, e inhibición de fosfodiesterasa 5A (PDE5A) con el fármaco tadalafilo o sildenafilo. Estos inhibidores de PDE5A, que prolongan la vida media del guanosin-3',5'-monofosfato (cGMP) — el objetivo aguas abajo de NO en el músculo liso vascular— mostraron aliviar en el ratónmdxla isquemia muscular, así como las lesiones y la fatiga después de una corta sesión de ejercicio. También, estos fármacos mostraron mejorar la dinámica cardíaca en ratonesmdxy rescate del músculo esquelético distrófico y prolongar la supervivencia en pez cebra con deficiencia de distrofina.
Estos resultados apoyan un papel esencial del nNOS sarcolemal en la modulación de la vasoconstricción simpática en los músculos esqueléticos humanos y sugiere que abordar como objetivo la ruta de NO aberrante (por ejemplo utilizando un estimulador de sGC de la invención) puede ser un enfoque terapéutico útil para tratar BMD y DMD en humanos.
Enfermedad de células falciformes
La enfermedad de células falciformes (SCD), o anemia de células falciformes (SCA) o drepanocitosis, es un trastorno sanguíneo hereditario, caracterizado por glóbulos rojos que adquieren forma de “ hoz” (falciformes), rígida y anómala. El trastorno drepanocítico disminuye la flexibilidad de las células y se traduce en el riesgo de diversas complicaciones. El trastorno drepanocítico se produce debido a una mutación en el gen de hemoglobina. Los individuos con una copia del gen silencioso muestran tanto hemoglobina normal como anormal. Este es un ejemplo de codominancia. En 1994, en los EE. UU., se estimó que la expectativa de vida media de las personas con esta condición era de 42 años en el caso de los hombres y 48 años en el de las mujeres, pero hoy en día, gracias a un mejor manejo de la enfermedad, los pacientes pueden vivir 70 años o más.
La anemia de células falciformes es una forma de enfermedad de células falciformes en la cual existe homocigosidad para la mutación que causa HbS. La anemia de células falciformes también se denomina “ HbSS” , “ enfermedad de SS” , “ hemoglobina S” o permutaciones de esos nombres. En las personas heterocigotas, es decir, las que tienen solamente un gen falciforme y un gen normal de hemoglobina en adultos, la condición se denomina “ HbAS” o “ rasgo drepanocítico” . Otras formas menos comunes de enfermedad de células falciformes son estados heterocigotos compuestos en los cuales la persona tiene solo una copia de la mutación que causa HbS y una copia de otro alelo de hemoglobina anormal. Incluyen enfermedad drepanocítica de hemoglobina C (HbSC), talasemia falciforme beta plus (HbS/p+) y talasemia falciforme beta cero (HBS/p°).
Aunque los glóbulos rojos (RBC) falciformes y las anormalidades reológicas son muy características de la patofisiología de la enfermedad de células falciformes, la disfunción vascular resultante de las interacciones complejas entre los glóbulos rojos falciformes (sRBC), las células endoteliales, plaquetas y leucocitos desempeñan un papel igualmente importante. En la enfermedad de células falciformes, la activación endotelial está asociada con eventos de hipoxiareperfusión mediados por células falciformes (ver, por ejemplo, “Advances in understanding of the pathogenesis of cerebrovascular vasculopathy in sicke cell anemia” , P. Connes y col.,Br. J. Haematol.2013, l6 l , 484-98). La deformación falciforme de los glóbulos rojos y la adhesión al endotelio inician la vasoclusión afectando al flujo sanguíneo. El aumento posterior de los mediadores inflamatorios y la activación endotelial desencadenan una cascada de eventos que producen daño vascular. Las respuestas patofisiológicas a la hipoxia-reperfusión intermitente procedente de estos eventos vasoclusivos se manifiestan por una mayor producción de citocinas, regulación de leucocitos y activación de las moléculas procoagulantes y de adhesión, con la inhibición simultánea de los mediadores citoprotectores.
La leucocitosis se correlaciona con casi todas las manifestaciones de la enfermedad de células falciformes, subrayando el importante papel de la inflamación en la patofisiología de la vasculopatía falciforme. Incluso a los valores de base, los pacientes con enfermedad de células falciformes presentan elevaciones en las citoquinas proinflamatorias, incluida proteína C-reactiva (CRP), factor de necrosis tumoral (TNF), interleucina-1 (IL-1) e interleucina-8 (IL-8). Los estudiosin vitrohan demostrado que los sRBC favorecen la regulación positiva endotelial de TNF-ay IL-1-p (8-1°). Los estudios de micromatriz de monocitos activados han demostrado una expresión diferencial de los genes involucrados en la inflamación, metabolismo del hemo, regulación del ciclo celular, respuestas antioxidantes y angiogénesis. Más recientemente, se ha demostrado que la expresión diferencial de factor nuclear potenciador de las cadenas ligeras kappa de las células B activadas (NFKB/p65), el factor de tipo Kruppel 2 (KLF2), y otros factores de transcripción regulan las rutas de inflamación en niños con enfermedad de células falciformes con riesgo aumentado de ictus.
En modelos de ratón transgénico (ver “ Novel Therapies Targetting the Endothelium in sickle cell disaease” , C.C Hoppe,Hemoglobin,35(5-6):530-546 (2011) y las referencias citadas en ella), se ha demostrado que el estrés oxidativo que produce deformación falciforme altera los mecanismos regulatorios microvasculares lo que conduce a activación endotelial y respuestas inflamatorias y proadhesivas exageradas. El estrés oxidativo se produce mediante la formación de especies reactivas de oxígeno (ROS). El agotamiento de NO se produce mediante eliminación mediada por hemoglobina (Hb), el consumo por ROS y el agotamiento del sustrato mediado por arginasa. En la enfermedad de células falciformes los sistemas eliminadores que normalmente retiran Hb que circula libremente están saturados. La Hb libre agota el NO, lo que conduce a la disfunción endotelial. Por consiguiente, el equilibrio normal de vasoconstricción y vasodilatación tiende hacia la vasoconstricción, activación endotelial, estrés oxidativo y vasculopatía proliferativa.
Las terapias dirigidas a restaurar la homeostasis de NO han demostrado ser prometedoras en estudios preliminares en pacientes con enfermedad de células falciformes. Los estudios previosin vitroy los estudios en otras poblaciones de pacientes mostraron una regulación negativa mediada por NO de la expresión de moléculas de adhesión endotelial. Después de estas observaciones, se estudió el uso de NO inhalado en niños con enfermedad de células falciformes que presentaban VOE y se hallaron tendencias asociadas a menores puntuaciones de dolor, menores requerimientos de analgésicos y una estancia hospitalaria más corta.
Estos descubrimientos se reprodujeron en un ensayo reciente controlado con placebo aleatorizado evaluando NO inhalado para el tratamiento de<v>O<e>agudo en pacientes adultos con enfermedad de células falciformes, mostrando que el NO inhalado redujo significativamente las puntuaciones de dolor y se asoció a una tendencia hacia la disminución del uso de morfina por vía parenteral en comparación con placebos. Los resultados de un ensayo de fase II completo de pacientes con enfermedad de células falciformes tratados con NO inhalado para VOE agudo no están disponibles aún (clinicaltrials. gov NCT00023296). Se espera que se complete otro ensayo de fase II de NO inhalado para el tratamiento de VOE en niños con enfermedad de células falciformes (clinicaltrials.gov NCT00094887). El posible papel terapéutico del NO inhalado para el ACS en la enfermedad de células falciformes está siendo evaluado actualmente tanto en niños como en adultos en dos ensayos de fase II/III franceses distintos en los que se compara el uso de NO inhalado con placebo o cuidado estándar en niños con ACS (clinicaltrials.gov NCT01089439 y NCT00748423).
La suplementación dietética del sustrato NO sintasa, L-arginina, ha sido estudiada extensamente en la enfermedad de células falciformes como un medio de aumento de la biodisponibilidad de NO. En ratones con enfermedad de células falciformes, la L-arginina a dosis elevadas ha demostrado disminuir la actividad del canal de Gardos, la hemólisis y formación de células densas, así como las mejoras funcionales en la reactividad vascular.
El sildenafilo, un agente dirigido a ampliar el efecto del NO endógeno inhibiendo PDE5, un mediador corriente abajo de NO se utiliza ampliamente en la población general para tratar la PHT primaria. En estudios preliminares en pacientes con enfermedad de células falciformes con PHT grave se describieron mejoras en PAP y capacidad de ejercicio después del tratamiento con sildenafilo. Un ensayo multicéntrico (Treatment of Pulmonary Hypertension and Sickle Cell Disease with Sildenafil Therapy, Walk-PHaSST) en el que se estudiaba la seguridad y eficacia del sildenafilo en pacientes con enfermedad de células falciformes con PHT definida mediante Doppler se terminó prematuramente debido a una mayor frecuencia de efectos secundarios graves, que incluyen mayores velocidades de VOE, dolor de cabeza y alteración visual en el grupo de tratamiento.
El nitrito y la niacina se han investigado también por sus propiedades como donantes de NO directos. En una prueba clínica de fase I/II, las infusiones de nitrito de sodio en pacientes con enfermedad de células falciformes mejoró el flujo sanguíneo del antebrazo, consistente con un mecanismo de acción de donante de NO. En un ensayo de mayor escala de fase I/II se está investigando si la administración de infusiones de nitrito como terapia adyuvante durante un VOE aguda mejorará el flujo sanguíneo y la oxigenación tisular (clinicaltrials.gov NCT01033227). También se está evaluando el efecto de la niacina en la vasodilatación dependiente del endotelio en un ensayo controlado aleatorizado de fase II (clinicaltrials.gov NCT 00508989).
Los resultados anteriores sugieren que abordar como objetivo la ruta de NO aberrante en la enfermedad de células falciformes (por ejemplo, utilizando un estimulador de sGC de la invención) puede ser una terapia útil para el tratamiento de la enfermedad. Los modelos murinos de anemia de células falciformes que podrían usarse para evaluar el efecto de estimuladores de sGC (por ejemplo, un estimulador de sGC de la invención) en este estado de enfermedad, se describen enBlood,2001, 98(5), 1577-84;J. Clin. Invest.2004, 114(8), 1136-45; yBr. J. Haematol.,2004, 124(3), 391-402.
Disfunción de la vejiga
Se ha demostrado que el activador BAY 60-2770 de sGC mejora el síndrome de vejiga hiperactiva en ratones obesos (ver “The Soluble Guanililo Cyclase Activator BAY 60-2770 ameliorates overactive bladder in obese mice” , Luiz O Leiria y col.,The Journal of Urology,2013, doi:10.1016/j.juro.2013.09.020.). El modelo animal descrito en esta publicación puede usarse de manera análoga para evaluar el efecto de un estimulador de sGC (por ejemplo, un estimulador de sGC de la invención) en el síndrome de vejiga hiperactiva.
El mismo grupo de investigadores ha descrito también un modelo de rata de disfunción de la vejiga (ratas con deficiencia en NO, F Z Monica y col.,Neurology and Urodynamics,30, 456-60, 2011) y han mostrado los efectos protectores de BAY-2272 (un activador de sGC) en este modelo. El modelo animal descrito en esta publicación puede usarse de manera análoga para evaluar el efecto de un estimulador de sGC (por ejemplo, un estimulador de sGC de la invención) en la disfunción de la vejiga relacionado con la hiperactividad del músculo liso detrusor.

Claims (14)

  1. REIVINDICACIONES 1. Un compuesto representado por la siguiente fórmula estructural:
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  2. 2. Un compuesto representado por la siguiente fórmula estructural:
    o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
  3. 3. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la reivindicación 1 o 2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y uno o más excipientes.
  4. 4. Un compuesto de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, o una composición farmacéutica de la reivindicación 3 para uso en el tratamiento de una enfermedad, afección de salud o trastorno seleccionado del grupo que consiste en: (1) trastornos/afecciones periféricas, pulmonares, hepáticas, del riñón, cardíacas o cerebrovasculares/endoteliales o enfermedades relacionadas de cualquier otra manera con la circulación seleccionadas de: • trastornos relacionados con la alta presión arterial y flujo sanguíneo coronario reducido; una mayor presión arterial coronaria aguda y crónica; hipertensión arterial; trastorno vascular debido a complicaciones cardíacas y renales, enfermedad cardíaca, ictus, isquemia cerebral o insuficiencia renal; hipertensión resistente; hipertensión diabética; insuficiencia cardíaca congestiva; disfunción diastólica o sistólica; insuficiencia coronaria; arritmias; reducción de precarga ventricular; hipertrofia cardíaca; síndrome de insuficiencia cardíaca/cardiorrenal; hipertensión portal; disfunción o lesión endotelial; • trastornos e isquemias tromboembólicos; infarto de miocardio; ictus; ataques isquémicos transitorios (TIA); tromboanginitis obstructiva; angina de pecho estable o inestable; espasmos coronarios; angina variante; angina de Prinzmetal; restenosis resultante de terapias de trombolisis; trastornos trombogénicos; • enfermedad de Alzheimer; enfermedad de Parkinson; demencia; deterioro cognitivo vascular; vasoespasmos cerebrales; traumatismo craneoencefálico; • enfermedad arterial periférica; enfermedad arterial periférica oclusiva; vasculopatía periférica; hipertonias; síndrome o fenómeno de Raynaud; isquemia crítica de un miembro; vasculitis; embolismo periférico; claudicación intermitente; crisis vasoclusivas; distrofia muscular de Duchenne; distrofia muscular de Becker; anormalidades de la microcirculación; problemas de exudación o permeabilidad vascular; • choque; septicemia; choque cardiogénico; control de la activación leucocitaria; inhibición o modulación de la agregación plaquetaria; • afecciones pulmonares/respiratorias; hipertensión pulmonar; hipertensión arterial pulmonar y remodelación vascular pulmonar asociada; trombosis localizada e hipertrofia cardíaca derecha; hipertonía pulmonar; hipertensión pulmonar primaria; hipertensión pulmonar secundaria; hipertensión pulmonar familiar; hipertensión pulmonar esporádica, hipertensión pulmonar precapilar; hipertensión pulmonar idiopática; arteriopatía pulmonar trombótica; arteriopatía pulmonar plexogénica; fibrosis quística; broncoconstricción o broncoconstricción pulmonar; síndrome de dificultad respiratoria aguda; fibrosis pulmonar; trasplante de pulmón; • hipertensión pulmonar asociada a o relacionada con la disfunción ventricular izquierda, hipoxemia, hipertensiones de los grupos I, II, III, IV y V de la OMS, enfermedad de la válvula mitral, pericarditis constrictiva, estenosis aórtica, cardiomiopatía, fibrosis mediastínica, fibrosis pulmonar, drenaje venoso pulmonar anómalo, enfermedad pulmonar venoclusiva, vasculitis pulmonar, enfermedad del colágeno vascular, cardiopatías congénitas, hipertensión venosa pulmonar, enfermedad pulmonar intersticial, trastorno respiratorio del sueño, apnea del sueño, trastornos de hipoventilación alveolar, exposición crónica a altitud elevada, enfermedad pulmonar en neonatos, displasia alveolar capilar, enfermedad de células falciformes; trastornos de la coagulación; tromboembolismo crónico, embolismo pulmonar debido a tumor, parásitos o material extraño, enfermedad del tejido conectivo, lupus, esquistosomiasis, sarcoidosis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica, asma, enfisema, bronquitis crónica, hemangiomatosis capilar pulmonar; histiocitosis X, linfangiomatosis y vasos pulmonares comprimidos debidos a adenopatía, tumor o mediastinitis fibrosante; • enfermedades o afecciones arteroscleróticas; aterosclerosis; aterosclerosis asociada con lesión endotelial, adhesión y agregación plaquetaria y de monocitos, proliferación y migración de músculo liso; restenosis; restenosis desarrollada después de terapias de trombolisis, angioplastias transluminales percutáneas (ATP), angioplastias coronarias transluminales percutáneas (PTCA) y baipás; inflamación; • enfermedad cardiovascular asociada con el síndrome metabólico, obesidad, dislipidemia, diabetes, alta presión arterial; trastornos relacionados con los lípidos, tales como la dislipidemia, la hipercolesterolemia, la hipertrigliceridemia, la sitosterolemia, la enfermedad del hígado graso, y la hepatitis; preeclampsia; avance de la enfermedad renal poliquística; acumulación subcutánea de grasa; • cirrosis hepática; cirrosis hepática asociada con la enfermedad crónica del hígado; fibrosis hepática, activación de células estelares hepáticas, colágeno fibroso hepático; acumulación de colágeno total; enfermedad del hígado de origen necroinflamatorio y/o de origen inmunológico; • trastornos del sistema urogenital; fibrosis renal; insuficiencia renal resultante de enfermedades o insuficiencia renal crónica; insuficiencia renal debido a la acumulación/deposición y lesión de tejido, esclerosis progresiva y glomerulonefritis; hipertrofia prostática; • esclerosis sistémica; • fibrosis intersticial cardíaca; remodelación cardíaca y fibrosis; hipertrofia cardíaca; (2) daño por isquemia o reperfusión; isquemia/reperfusión asociada con transplante de órganos, trasplante de pulmón, trasplante pulmonar o transplante cardíaco; conservación de los sustituyentes de la sangre en pacientes con trauma; (3) un trastorno sexual, ginecológico y urológico seleccionado de disfunción eréctil; impotencia; eyaculación precoz; disfunción sexual femenina; disfunción del deseo sexual femenino; trastorno del deseo sexual hipoactivo; atrofia vaginal; dispaneuria; vaginitis atrófica; hiperplasia prostática benigna (BPH) o hipertrofia o ampliación prostática benigna; obstrucción de la salida de la vejiga; síndrome de vejiga dolorosa (BPS); cistitis intersticial (IC); vejiga hiperactiva, vejiga neurogénica e incontinencia; nefropatía diabética; (4) enfermedades o trastornos oculares seleccionados de glaucoma, retinopatía, retinopatía diabética, blefaritis, síndrome del ojo seco, síndrome de Sjogren; (5) enfermedades o trastornos de audición seleccionados del deterioro de la audición; pérdida parcial o pérdida total de audición; sordera parcial o total; acúfenos; pérdida de audición inducida por ruido; (6) trastornos o afecciones tópicas o de la piel seleccionados de fibrosis dérmica, esclerodermia, fibrosis de la piel; (7) curación de heridas; cicatrización de heridas en diabéticos; mejora de la perfusión microvascular; mejora de la perfusión microvascular después de una lesión, para contrarrestar la respuesta inflamatoria en el cuidado perioperativo; fisuras anales; úlceras diabéticas; y (8) otras enfermedades o afecciones seleccionadas de metástasis de cáncer; osteoporosis, gastroparesis; dispepsia funcional; complicaciones diabéticas; enfermedades asociadas con la disfunción endotelial; y trastornos neurológicos asociados con la disminución de la producción de óxido nítrico.
  5. 5. El compuesto, sal farmacéuticamente aceptable o composición farmacéutica para uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que la enfermedad, afección o trastorno de salud es un trastorno o afección vascular/endotelial p e r if é r ic o , p u lm o n a r , h e p á t ic o , r e n a l , c a r d í a c o o c e r e b r a l , o u n a e n f e r m e d a d r e l a c i o n a d a d e o t r o m o d o c o n la c i r c u l a c i ó n .
  6. 6. El compuesto, sal farmacéuticamente aceptable composición farmacéutica para uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que la enfermedad, afección o trastorno de salud se selecciona de isquemia, daño por reperfusión, isquemia/reperfusión asociada con trasplante de órganos, trasplante de pulmón, trasplante pulmonar o trasplante cardíaco, y conservando sustituyentes sanguíneos en pacientes con trauma.
  7. 7. El compuesto, sal farmacéuticamente aceptable o composición farmacéutica para uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que la enfermedad, afección o trastorno de salud es un trastorno o afección sexual, ginecológica o urológica seleccionada de disfunción eréctil; impotencia; eyaculación precoz; disfunción sexual femenina; disfunción del deseo sexual femenino; trastorno de excitación sexual hipoactiva; atrofia vaginal, dispareunia, vaginitis atrófica; hiperplasia prostática benigna (HPB) o hipertrofia o ampliación; obstrucción de la salida de la vejiga; síndrome de vejiga dolorosa (BPS); cistitis intersticial (CI); vejiga hiperactiva, vejiga neurogénica e incontinencia; y nefropatía diabética.
  8. 8. El compuesto, sal farmacéuticamente aceptable o composición farmacéutica para uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que la enfermedad es una enfermedad o trastorno ocular seleccionado de glaucoma, retinopatía, retinopatía diabética, blefaritis, síndrome de ojo seco y síndrome de Sjogren.
  9. 9. El compuesto, sal farmacéuticamente aceptable o composición farmacéutica para uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que la enfermedad es una enfermedad o trastorno auditivo seleccionado de deficiencia auditiva, pérdida auditiva parcial o total; sordera parcial o total; tinnitus; y pérdida de audición inducida por ruido.
  10. 10. El compuesto, sal farmacéuticamente aceptable o composición farmacéutica para uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que la enfermedad es un trastorno o afección tópica o cutánea seleccionado de fibrosis dérmica, esclerodermia y fibrosis cutánea.
  11. 11. El compuesto, sal farmacéuticamente aceptable o composición farmacéutica para uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que el tratamiento implica la curación de heridas; cicatrización de heridas en diabéticos; mejora de la perfusión microvascular; mejora de los problemas de perfusión microvascular después de una lesión; tratamiento de fisuras anales; y tratamiento de úlceras diabéticas.
  12. 12. El compuesto, sal farmacéuticamente aceptable o composición farmacéutica para uso de acuerdo con la reivindicación 4, en el que la enfermedad, o afección se selecciona de metástasis de cáncer; osteoporosis; gastroparesia; dispepsia funcional; complicaciones diabéticas; enfermedades asociadas con disfunción endotelial; y trastornos neurológicos asociados con la disminución de la producción de óxido nítrico.
  13. 13. El compuesto, sal farmacéuticamente aceptable o composición farmacéutica para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 4-12, en el que el compuesto se usa en combinación con uno o más agentes terapéuticos adicionales.
  14. 14. El compuesto, sal farmacéuticamente aceptable o composición farmacéutica para uso de acuerdo con la reivindicación 13, en el que uno o más agentes terapéuticos adicionales se seleccionan de factor liberador derivado del endotelio, donantes de NO, sustancias que mejoran las concentraciones de cGMP, sustratos de óxido nítrico sintasa, compuestos que mejoran la transcripción de eNOS, activadores de sGC independientes del grupo hemo, estimuladores de sGC dependientes del grupo hemo, inhibidores de la degradación de cGMP, bloqueadores de los canales de calcio, antagonistas del receptor de endotelina, derivados de prostaciclina, antihiperlipidémicos, anticoagulantes, fármacos antiplaquetarios, inhibidores de la ACE, oxígeno suplementario, bloqueadores beta, agentes antiarrítmicos, diuréticos, vasodilatadores exógenos, broncodilatadores, corticosteroides, suplementos dietéticos, antagonistas del receptor PGD2, inmunosupresores, antiasmáticos no esteroides, agentes antiinflamatorios no esteroides, inhibidores de la ciclooxigenasa-2 y agentes antidiabéticos.
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