ES2638144T3

ES2638144T3 - Bencilpirazoles sustituidos

Info

Publication number: ES2638144T3
Application number: ES12808361.5T
Authority: ES
Inventors: Marion Hitchcock; Anne Mengel; Anja Richter; Hans Briem; Knut Eis; Vera PÜTTER; Gerhard Siemeister; Stefan Prechtl; Amaury Ernesto FERNÁNDEZ-MONTALVÁN; Christian Stegmann; Simon Holton; Mark Jean Gnoth; Cornelia PREUSSE
Original assignee: Bayer Pharma AG; Bayer Intellectual Property GmbH
Current assignee: Bayer Pharma AG; Bayer Intellectual Property GmbH
Priority date: 2011-12-21
Filing date: 2012-12-17
Publication date: 2017-10-18
Anticipated expiration: 2032-12-17
Also published as: CA2859779A1; JP6141866B2; EP2794596B1; US9643953B2; CN104125957A; WO2013092512A1; CN104125957B; JP2015506336A; EP2794596A1; HK1203196A1; US20140315934A1; UY34550A

Abstract

Un compuesto de fórmula (I)**Fórmula** en la que R1/R2 son independientemente entre sí hidrógeno, halógeno o fenil-S-, R3 es independientemente entre sí hidrógeno, 1-6C-alcoxi, halógeno, 2-6Calquenilo, 3-6C-cicloalquilo, 1-6C-haloalcoxi o C(O)OH, n es 1-3, R4 es (a) hidrógeno, (b) hidroxi, (c) 1-6C-alcoxi opcionalmente sustituido con (c1) 1-2 OH (c2) NR9R10, (c3) 1-4C-alquil-S-, (c4) 1-4C-alquil-S(O)-, (c5) 1-4C-alquil-S(O)2-, (c6) -S(O)2NR9R10, (d)**Fórmula** en la que el * es el punto de unión, (e)**Fórmula** en la que el * es el punto de unión (f) ciano, (g) 1-4C-alquil-S(O)2-, R5 es (a) hidrógeno, (b) 2-6C-hidroxialquilo, (c)**Fórmula** en la que el * es el punto de unión, (d) -C(O)-(1-6C-alquilo), (e) -C(O)-(1-6C-alquilen)-O-(1-6C-alquilo), (f) -C(O)-(1-6C-alquilen)-O-(1-6C-alquilen)-O-(1-6C-alquilo), R6 es hidrógeno, halógeno, ciano, C(O)NR11R12, C(O)OR13 o C(O)NHOH, R7 es hidrógeno, 1-6C-alquilo, 2-6C-alquenilo, 1-6C-alcoxi, 3-6C-cicloalquilo, o NR9R10, R8 es hidrógeno o 1-6C-alquilo, m es 1-4, R9, R10 son independientemente entre sí hidrógeno o 1-6C-alquilo, R11, R12 son independientemente entre sí hidrógeno, 1-6C-alquilo, 2-6C-hidroxialquilo o (1-4C-alquil)-SO2-(1-4Calquilo), R13 es hidrógeno o 1-4C-alquilo, o un N-óxido, una sal, un tautómero o un estereoisómero de dicho compuesto, o una sal de dicho N-óxido, tautómero o estereoisómero.

Description

imagen1

imagen2

imagen3

imagen4

imagen5

R3 es independientemente en cada caso hidrógeno, 1-4C-alcoxi, halógeno, 2-4C-alquenilo, 3-6C-cicloalquilo, 14C-haloalcoxi o C(O)OH,

n es 1 -3,

R4 es

5 (a) hidrógeno,

(b): hidroxi,

(c): 1-4C-alcoxi opcionalmente sustituido con

(c1) 1-2 OH, (c2) NR9R10,

10 (c3) 1-4C-alquil-S-, (c4) 1-4C-alquil-S(O)-, (c5) 1-4C-alquil-S(O)2-, (c6) -S(O)2NR9R10,

(d)

en el que el * es el punto de fijación,

(e)

imagen6

en el que el * es el punto de fijación,

20: (f) ciano,

(g) 1-4C-alquil-S(O)2-,

R5: es

(a) hidrógeno,

(b) 2-4C-hidroxialquilo,

25: (c)

imagen7

imagen8

en el que el * es el punto de fijación,

(d) -C(O)-(1-4C-alquilo),

(e) -C(O)-(1-4C-alquilen)-O-(1-4C-alquilo), 30 (f) -C(O)-(1-4C-alquilen)-O-(1-4C-alquilen)-O-(1-4C-alquilo),

R6 es hidrógeno, halógeno, ciano, C(O)NR11 R12, C(O)OR13 o C(O)NHOH, R7 es hidrógeno, 1-4C-alquilo, 2-4C-alquenilo, 1-4C-alcoxi, 3-4C-cicloalquilo, o NR9R10, R8 es hidrógeno o 1-4C-alquilo, m es 1-4,

35 R9, R10 son independientemente entre sí hidrógeno o 1-4C-alquilo, R11, R12 son independientemente entre sí hidrógeno, 1-4C-alquilo, 2-4C-hidroxialquilo o (1-4C-alquil)-SO2-(1-4Calquilo),

R13

es hidrógeno o 1-4C-alquilo,

o un N-óxido, una sal, un tautómero o un estereoisómero de dicho compuesto, o una sal de dicho N-óxido, 40 tautómero o estereoisómero.

Un aspecto adicional de la invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que

7 5

10

15

20

25

30

35

40

R1/R2 son independientemente entre sí hidrógeno, halógeno, R3 es independientemente entre sí hidrógeno, 1-4C-alcoxi, halógeno, 2-4Calquenilo, 3-6C-cicloalquilo, haloalcoxi n 1 -3, R4 es

(a) hidrógeno; (b) hidroxi; (c) 1-4C-alcoxi (opcionalmente sustituido con (c1) 1-2 OH,

(c2) NR9R10, (d)

imagen9

en el que el * es el punto de fijación, R5 es (a) hidrógeno, (b) 2-4C-hidroxialquilo, (c)

imagen10

en el que el * es el punto de fijación,

(d): -C(O)-(1-4C-alquilo)

(e): -C(O)-(1-4C-alquilen)-O-(1-4C-alquilo)

(f): -C(O)-(1-4C-alquilen)-O-(1-4C-alquilen)-O-(1-4C-alquilo)

R6 es hidrógeno, halógeno, ciano, C(O)NR11R12, R7 es hidrógeno, 1-4C-alquilo, 2-4C-alquenilo, 1-4C-alcoxi, 3-6C-cicloalquilo, NR9R10, R8 es hidrógeno, 1-4C-alquilo, m es 1-4 R9, R10 son independientemente entre sí hidrógeno, 1-4C-alquilo, R11, R12 son independientemente entre sí hidrógeno, 1-4C-alquilo,

o un N-óxido, una sal, un tautómero o un estereoisómero de dicho compuesto, o una sal de dicho N-óxido, tautómero o estereoisómero.

Un aspecto adicional de la invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R1/R2 son independientemente entre sí hidrógeno, halógeno R3 es independientemente hidrógeno, 1-4C-alcoxi, n 1 -3, R4 es (b) hidroxi; (c) 1-4C-alcoxi opcionalmente sustituido con (c1) 1-2 OH, (c2) NR9R10, (d)

imagen11

en el que el * es el punto de fijación, R5 es hidrógeno, R6 es hidrógeno, ciano, C(O)NR11R12, R7 es 2-4C-alquenilo, 1-4C-alcoxi, 3-6C-cicloalquilo, NR9R10, R8 es hidrógeno, 1-4C-alquilo, m es 1-4 R9, R10 son independientemente entre sí hidrógeno, 1-4C-alquilo, R11, R12 son hidrógeno,

Otro aspecto de la invención se refiere a compuestos de fórmula (I) en la que R1/R2 son independientemente entre sí hidrógeno, halógeno, R3 es independientemente hidrógeno, 1-4C-alcoxi, n es 1,

8

imagen12

imagen13

R11, R12 son independientemente entre sí hidrógeno, 1-6C-alquilo, 2-6C-hidroxialquilo o 2-(metilsulfonil)etilo,

R13

es hidrógeno o 1-4C-alquilo,

5 En aún otro aspecto de la invención se refiere a compuestos de fórmula (I), en la que

R1/R2 son independientemente entre sí hidrógeno, halógeno o fenil-S-, R3 es independientemente en cada caso hidrógeno, 1-6C-alcoxi, halógeno, 2-6Calquenilo, 3-6C-cicloalquilo, 16C-haloalcoxi o C(O)OH, n es 1 -3, 10 R4 es (a) hidrógeno,

(c) 1-6C-alcoxi opcionalmente sustituido con

(c1) 1-2 OH, (c2) NR9R10, c3) 1-4C-alquil-S-,

15 (c4) 1-4C-alquil-S(O)-, (c5) 1-4C-alquil-S(O)2-, (c6) S(O)2NR9R10,

(d)

imagen14

en el que el * es el punto de fijación, 20 (e)

imagen15

en el que el * es el punto de fijación, R5 es

(a): hidrógeno,

(b): 2-6C-hidroxialquilo

(c)

imagen10

en el que el * es el punto de fijación,

(d) -C(O)-(1-6C-alquilo),

30: (e) -C(O)-(1-6C-alquilen)-O-(1-6C-alquilo),

(f) -C(O)-(1-6C-alquilen)-O-(1-6C-alquilen)-O-(1-6C-alquilo),

R6 R7: es hidrógeno, halógeno, ciano, C(O)NR11 R12, C(O)OR13 o C(O)NHOH, es hidrógeno, 1-6C-alquilo, 2-6C-alquenilo, 1-6C-alcoxi, 3-6C-cicloalquilo, o NR9R10, R8 es hidrógeno o 1

6C-alquilo,

35: m es 1-4,

R9, R10: son independientemente entre sí hidrógeno o 1-6C-alquilo,

R13

es hidrógeno o 1-4C-alquilo,

En un aspecto adicional de la invención se refiere a compuestos de fórmula (I), en la que

11

imagen16

imagen17

imagen18

imagen19

imagen20

imagen21

imagen22

Otro aspecto de la invención son compuestos de fórmula (I), en los que

R1, R2 es flúor. Otro aspecto de la invención son compuestos de fórmula (I), en los que R1, R2 es -S-fenilo.

Un aspecto adicional de la invención son compuestos de fórmula (I), en los que

R3 es hidrógeno, 1-4C-alcoxi, halógeno, 1-4C-alquilo, 2-4C-alquenilo o 3-6Ccicloalquilo.

Aún otro aspecto de la invención son compuestos de fórmula (I), en la que

R3 es hidrogeno o 1-4C-alcoxi.

Aún otro aspecto de la invención son compuestos de formula (I), en la que

R3 es -C(O)OH.

Otro aspecto de la invención son compuestos de fórmula (I), en la que

R3 es halógeno, 1-4C-alquilo, 2-4C-alquenilo o 3-6C-cicloalquilo.

Un aspecto adicional de la invención son compuestos de fórmula (I), en la que

R3 está en la posición orto o bien en la posición meta en relación con R1 o R2.

Otro aspecto de la invención son compuestos de fórmula (I), en la que

R3 está en la posición orto en relación con R1 o R2. Otro aspecto de la invención son compuestos de fórmula (I), en la que R3 está en la posición para en relación con el punto de fijación del anillo fenilo con el grupo metileno bencíclico.

Un aspecto adicional de la invención son compuestos de fórmula (I), en la que

R1, R2 es flúor y R3 es 1-4C-alcoxi.

Todavía otro aspecto adicional de la invención son compuestos de fórmula (I), en la que

n es 1.

Un aspecto adicional de la invención son compuestos de fórmula (I), en la que

n es 3.

Un aspecto adicional de la invención son compuestos de fórmula (I), en la que

m es 1. Aún otro aspecto de la invención son compuestos de fórmula (I), en la que R4 es hidroxi, 1-4Calcoxi (que está opcionalmente sustituido con hidroxi o NR9R10), -S-(1-4C-alquilo), -S(O)-(l-4Calquilo), -SO2-(1-4C-alquilo) o

imagen23

en el que el * es el punto de fijación. Un aspecto adicional de la invención son compuestos de fórmula (I), en la que R4 es -S-(1-4C-alquilo), -S(O)-(1-4C-alquilo), -SO2-(1-4C-alquilo). Aún otro aspecto de la invención son compuestos de fórmula (I), en la que

R4 es hidroxi, 1-4C alcoxi (que está opcionalmente sustituido con hidroxi o NR9R10, o

imagen24

en el que el * es el punto de fijación. Otro aspecto de la invención son compuestos de fórmula (I), en la que

19

imagen25

imagen26

imagen27

imagen28

imagen29

imagen30

imagen31

imagen32

imagen33

imagen34

imagen35

imagen36

imagen37

imagen38

imagen39

imagen40

imagen41

imagen42

imagen43

imagen44

imagen45

imagen46

imagen47

imagen48

imagen49

imagen50

imagen51

imagen52

imagen53

imagen54

imagen55

imagen56

imagen57

según se divulga en los ejemplos específicos.

El término "de acuerdo con" dentro de la sección experimental se utiliza en el sentido de que el procedimiento en cuestión se utilizará en "forma análoga a".

Bencilpirazoles sustituidos PARTE EXPERIMENTAL

En la siguiente tabla se indican las abreviaturas usadas en este párrafo y la sección de ejemplos de intermedios y de ejemplos, siempre que no estén explicadas en el cuerpo del texto.

Abreviatura: Significado

ac.: acuoso

alloc: aliloxicarbonilo

boc: terc-butoxicarbonilo

a: amplio

IC: ionización química

d: doblete

dd: doblete de dobletes

DAD: detector por matriz de diodos

DCM: diclorometano

DMF: N,N-dimetilformamida

EtOAc: acetato de etilo

Eq: equivalente

ESI: ionización por electropulverización (ES)

HATU: hexafluorofosfato de 2-(7-aza-1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (N.º CAS 14889310-1)

HPLC: cromatografía líquida de alta presión

CL-EM: Cromatografía líquida -espectrometría de masa

m: multiplete

EM: espectrometría de masas

n-BuLi: n-butillitio

RMN: espectroscopía de resonancia magnética nuclear: los desplazamientos químicos (δ) se expresan en ppm. Los desplazamientos químicos se corrigieron estableciendo la señal de DMSO en 2,50 ppm a menos que se defina de otra manera.

PoraPakTM;: una columna de HPLC disponible de Waters

q: cuarteto

t.a. o ta: temperatura ambiente

TR: tiempo de retención (medido con HPLC o UPLC) en minutos

s: singlete

SM: Material de partida

t: triplete

THF: tetrahidrofurano

UPLC: cromatografía líquida de ultra presión

Otras abreviaturas tienen los significados conocidos per se por el especialista. Los diversos aspectos de la invención 10 que se describen en esta solicitud se ilustran con los siguientes ejemplos que no pretenden limitar la invención en modo alguno.

Descripciones experimentales específicas

Las formas de los picos de NMR en las siguientes descripciones experimentales específicas se indican tal como aparecen en los espectros, no habiéndose considerado los posibles efectos de orden superior. Las reacciones que 15 emplean irradiación con microondas se pueden conducir con un horno de microondas Biotage Initator®, opcionalmente equipado con una unidad robótica. Los tiempos de reacción informados que emplean calentamiento con microondas deben interpretarse como tiempos de reacción fijos después de alcanzar la temperatura de reacción indicada. Puede ser necesario purificar los compuestos y los intermedios que se producen de acuerdo con los procedimientos de la invención. La purificación de los compuestos orgánicos ha de ser conocida para los expertos 20 en la materia, y puede haber diversas maneras para purificar un mismo compuesto. En algunos casos, puede no ser necesaria una purificación. En algunos casos, los compuestos pueden purificarse por cristalización. En algunos casos, las impurezas pueden separarse utilizando un disolvente apropiado. En algunos casos, los compuestos pueden purificarse por cromatografía, particularmente cromatografía en columna instantánea, usando, por ejemplo, cartuchos de gel de sílice preenvasado, por ejemplo, de Separtis, tales como el gel de sílice Isolute® Ultrarrápida o

53 5

10

15

20

25

30

el gel de sílice Isolute® Ultrarrápida NH2, en combinación con un autopurificador Isolera® (Biotage), y eluyentes tales como gradientes de hexano/acetato de etilo o DCM/metanol. En algunos casos, los compuestos pueden purificarse por HPLC preparativa utilizando por ejemplo, un autopurificador Aguas equipado con un detector por conjunto de diodos y/o espectrómetro de masa de ionización por electroatomización en línea, en combinación con una columna de fase reversa preparada apropiada y eluyentes como por ejemplo, gradientes de agua y acetonitrilo que pueden contener aditivos como por ejemplo, ácido trifluoroacético, ácido fórmico o amoníaco acuoso. En algunos casos, los procedimientos de purificación que se describieron previamente pueden proporcionar aquellos compuestos de la presente invención que poseen una funcionalidad suficientemente básica o ácida en la forma de una sal, tal como, en el caso de un compuesto de la presente invención que sea suficientemente básico, por ejemplo una sal trifluoroacetato o formiato o, en el caso de un compuesto de la presente invención que sea suficientemente ácido, por ejemplo una sal de amonio. Una sal de este tipo se puede transformar en la forma de su base libre o de su ácido libre, respectivamente, utilizando diversos procedimientos conocidos por el especialista en el arte o pueden usarse como sales en los posteriores ensayos biológicos. Se podrá comprender que la forma específica (por ejemplo, la sal, la base libre, etc.) de un compuesto de la presente invención aislado como se describe en el presente documento no es necesariamente la única forma en la cual se puede emplear dicho compuesto en un ensayo biológico con el fin de cuantificar la actividad biológica específica.

El porcentaje de los rendimientos informado en los siguientes ejemplos se basan en el componente de partida que se usó a la cantidad molar más baja. Los líquidos y las soluciones sensibles al aire y a la humedad fueron transferidos mediante una jeringa o cánula y se introdujeron en los recipientes de reacción a través de diafragmas de goma. Se usaron reactivos y disolventes de grado comercial, sin purificaciones adicionales. El término "se concentró bajo vacío" se refiere al uso de un evaporador rotatorio Buchi a una presión mínima de aproximadamente 15 mm de Hg. Todas las temperaturas se informan sin corregir en grados Celsius (ºC).

Con el fin de comprender mejor esta invención, se ofrecen los siguientes ejemplos. Estos ejemplos solamente sirven fines ilustrativos y no deben considerarse como limitativos del alcance de la invención en modo alguno. Todas las publicaciones mencionadas se incorporan por completo en el presente documento a modo de referencia.

Condiciones de CL-EM analíticas

Los datos de CL-EM indicados en las siguientes descripciones experimentales específicas se refieren (a menos que se indique lo contrario) a las siguientes condiciones:

Sistema:: Waters Acquity UPCL-EM: Inyector de disolvente binario, inyector/organizador de muestras, controlador de columna, PDA, ELSD, SQD 3001 o ZQ4000

Sistema:: Waters Acquity UPCL-EM: Inyector de disolvente binario, inyector/organizador de muestras, controlador de columna, PDA, ELSD,

Columna:: Acquity UPLC BEH C18 1,7 50x2,1 mm

Disolvente:: A1 = agua + 0,1 % de ácido fórmico A2 = agua + 0,2 % de amoníaco

B1 = acetonitrilo

Gradiente:: 0-1,6 min, 1-99 % de B; 1,6-2,0 min, 99 % de B

Caudal:: 0,8 ml/min

Temperatura: 60 ºC

Inyección:: 2,0 µl

Detección:: DAD, intervalo de barrido 210-400 nm -> Tabla Picos

ELSD

Procedimientos:: MS ESI+, ESI-Interruptor -> son posibles diversos intervalos de barrido Procedimiento 1: Masa_100_1000 Procedimiento 2: Masa_160_1000 Procedimiento 3: Masa_160_2000 Procedimiento 4: Masa_160_1000_InformeBásico

Procedimiento 5: NH3_Masa_100_1000 Procedimiento 6: NH3_Masa_160_1000

Condiciones de HPLC preparativa

La "purificación por HPLC preparativa" en las posteriores descripciones experimentales específicas se refiere a las siguientes condiciones (a menos que se indique lo contrario):

54

imagen58

imagen59

1-1-2: 1-(2-fluorobencil)-5-hidroxi-4metil-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1,22 (t, 3H), 2,02 (s, 3H), 4,17 (q, 2H), 5, 18 (s, 2H), 6,97 (d, 1H), 7,09 -7,22 (m, 2H), 7,30 (d, 1H), 10,73 (s, 1H).

1-1-3: 1-(2-fluorobencil)-5-hidroxi1H-pirazol-3-carboxilato de etilo RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1, 21 (t, 3H), 4,17 (q, 2H), 5,17 (s, 2H), 5,78 (s, 1H), 7,01 (d, 1H), 7,10 -7,23 (m, 2H), 7,27 -7,36 (m, 1H), 11,41 -12,01(s. a., 1H).

1-1-4: 1-bencil-5-hidroxi-1H-pirazol3-carboxilato de etilo RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1, 21 (t, 3H), 4,17 (q, 2H), 5,12 (s, 2H), 5,78 (s, 1H), 7, 10 -7, 17 (m, 2H), 7, 20 7,34 (m, 3H), 11,56 (s, 1H).

1-1-5: 5-hidroxi-1-(4-metoxi-benciI 1H-pirazol-3-carboxilato de etilo RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1,21 (t, 3H), 3,68 s 3H 4,17 2H 5,03 (s, 2H), 5,75 (s, 1H), 6,85 (d, 2H), 7,11 (d, 2H), 11,32 -11,62 (s. a, 1H).

1-1-6: 1-bencil-5-hidroxi-4-metil-1Hpirazol-3-carboxilato de etilo RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1,26 (t, 3H), 2,05 (s, 3H), 4,21 (q, 2H), 5,16 (s, 2H), 7,16 (d, 2H), 7,22 -7,39 (m, 3H), 10,56 -10,82 (s. a, 1H).

57

(continuación)

1-1-7: 1-bencil-5-etoxi-4-metil-1Hpirazol-3-carboxilato de etilo RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1,22 (dt, 6H), 2,09 (s, 3H), 4, 00 (q, 2H), 4,20 (q, 2H), 5,19 (s, 2H), 7,10 -7,16 (m, 2H), 7,21 -7,35 (m, 3H).

1-1-8: 1-(2,6-diclorobencil)-5hidroxi-4-metil-1H-pirazol-3carboxilato de etilo RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 1,18 (t, 3H), 2,00 (s, 3H), 4, 13 (q, 2H), 5,29 (s, 2H), 7,33 -7,41 (m, 1H), 7,44 7,51 (m, 2H), 10,61 -10,82 (s. a, 1H).

1-1-9: 5-etoxi-1-(2-fluoro-bencil)-1Hpirazol-3-carboxilato de etilo CL-EM: tiempo de retención: 1,24 min MS ES+: 293,0 [M+H]+ Procedimiento B

1-1-10 SM = 1-26-1: 4-etil-1-(2-fluorobencil)-5hidroxi-1H-pirazol-3carboxilato de etilo RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1,04 (t, 3H), 1,06 (t, 3H), 2,56 (q, 2H), 4,21 (q, 2H), 5,22 (s, 2H), 7,00 (td, 1H), 7,14 -7,23(m, 2H), 7,34 (m, 1H).

Intermedio 1-2-1

Preparación de 1-(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-5-metoxi-4-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo

58

imagen60

Se disolvieron 3,95 g de 1-(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-5-hidroxi-4-metil-lH-pirazol-3-carboxilato de etilo 1-1-1 (11,6

mmol, 1,0 eq.) en 50 ml de acetona. Se añadieron 1,45 ml de yodometano (23,2 mmol, 2,0 eq.) y 5,788 (41,8 mmol,

3,6 eq.) de carbonato de potasio y se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. Se añadieron 1,45 ml de

5 yodometano (23,2 mmol, 2,0 eq.) y la mezcla se agitó durante otras 24 horas a temperatura ambiente. La

suspensión se retiró por filtración a través de arena marina y el material filtrado se concentró al vacío. El residuo se

extrajo con DCM y agua. La capa acuosa se extrajo dos veces con DCM. Las capas orgánicas combinadas se

secaron sobre sulfato de sodio y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía ultrarrápida

para dar 2,29 g (6,46 mmol, 55,7 %) del compuesto deseado analíticamente puro. RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ 10 [ppm]= 1,21 (t, 3H), 1,27 (t, 3H), 2,08 (s, 3H), 3,83 (s, 3H), 4,01 (q, 2H), 4,17 (q, 2H), 5,11 (s, 2H), 6,68 -6,75 (m,

2H).

Los siguientes intermedios se prepararon de acuerdo con el mismo procedimiento:

1-2-2: 1-(2,6-diclorobencil)-5metoxi-4-metil-1Hpirazol-3-carboxilato de etilo RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1,20 (t, 3 H), 2,10 (s, 3H), 3,86 (s, 3 H), 4,16 (q, 2H), 5,37 (s, 2 H), 7,4 0 (dd, 1H), 7,48 -7,51(m, 2H).

1-2-3: 4-etil-1-(2-fluorobencil)-5metoxi-1H-pirazol-3carboxilato de etilo →

Intermedio 1-3-1

15 Preparación de clorhidrato de 1-(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-5-metoxi-4-metil-1H-pirazol-3-carboximidamida 1:1

59

imagen61

Se suspendieron 1,73 g de cloruro de amonio en 37 ml de tolueno seco bajo una atmósfera de nitrógeno y se enfrió a 0 ºC de temperatura de baño. Se añadieron 16,2 ml de solución de trimetilaluminio en heptano 2M (32,3 mmol, 5,0 eq.) por goteo. La mezcla se agitó a temperatura ambiente hasta no producirse más gas. Se disolvieron 2,29 g de 15 (4-etoxi-2,6-difluorobencil)-5-metoxi-4-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo 1-2-1 (6,46 mmol, 1,0 eq.) en 13 ml de tolueno seco y se añadió por goteo a la mezcla de reacción y se agitó durante 24 horas a 80 ºC de temperatura de baño. La mezcla se enfrió con un baño de hielo a 0 ºC de temperatura de baño, se añadieron 35,6 ml de metanol y se agitó durante una hora a temperatura ambiente. La suspensión resultante se retiró por filtración y se lavó con metanol. El material filtrado se concentró al vacío y el residuo se agitó con DCM/ metanol 9:1. La suspensión se

10 retiró por filtración. La almohadilla de filtrado se lavó dos veces con DCM/ metanol 9:1. El material filtrado se concentró al vacío y luego se extrajo con DCM y solución acuosa saturada de carbonato ácido de sodio, se secó sobre un filtro de silicona y se concentró al vacío para dar 1,95 g (5,42 mmol, 84 %) del compuesto deseado analíticamente puro. RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1,27 (t, 3H), 2,06 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 4,02 (q, 2H), 5,16 (s, 2H), 6,69 -6,75

15 (m, 2H), 8,79 -9,05 (m, 4H).

Los siguientes intermedios se prepararon de acuerdo con el mismo procedimiento:

1-3-2: clorhidrato de 1-bencil5-ciclopropil-1H-pirazol3-carboximidamida 1:1 RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,45 -0,60(m, 2H), 0,88 -0,98 (m, 2H), 1,87 -1,98 (m, 1H), 5,53 (s, 2H), 6, 84 (s, 1H), 7, 04 -7, 44 (m, 5H), 8,98(s. a., 2H), 9,17 (s. a., 1H).

1-3-3: clorhidrato de 5ciclopropil-1-(4metoxibencil)-1Hpirazol-3carboximidamida 1:1 RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,48 -0,57(m, 2H), 0,91 -0,98 (m,2H), 1,88 -1,97 (m, 1H),3,67 -3,72 (m, 3H), 5,43 (s,2H), 6,77 (s, 1H),6,88 (d,2H), 7,16 (d, 2H), 8, 78 -8, 96 (m, 2H), 9,07 -9,17(m, 1H).

60

(continuación)

1-3-4: 5-ciclopropil-1-(2,6diclorobencil)-4-metil1H-pirazol-3carboximidamida RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,68 -0,76(m, 2H), 1,02 -1,11 (m,2H), 1,84 (m, 1H), 2,12 (s,3H), 5,61 (s, 2H), 7,37 -7,44 (m, 1H), 7,47 -7,53(m, 2H), 8,65 (s. a., 1H), 8,93 (s. a., 2H).

1-3-5: 5-ciclopropil-1-(2fluorobencil)-4-metil1H-pirazol-3carboximidamida RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,53 -0,62(m, 2H), 0,92 -1,01 (m, 2H), 1,59 (m, 1H), 2,12 (s, 3H), 5,51 (s, 2H), 7, 02 -7, 41 (m, 4H), 8, 90 (d, 3H).

1-3-6: clorhidrato de 5ciclopropil-1-(4-etoxi2,6-difluorobencil)-4metil-1H-pirazol-3carboximidamid a 1:1 RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,60 -0,72(m, 2H), 1,00 -1,08 (m,2H), 1,28 (t, 3H), 1,68 (m, 1H), 2,08 -2,12 (s, 3H),4,02 (q,2H), 5,39 (s, 2H),6,68 -6,76 (m, 2H), 8,40 -9, 15 (m, 3H).

1-3-7: 1-bencil-5-etenil-1Hpirazol-3carboximidamida RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 5,30 -5,36(m, 1H), 5,43 (s, 2H), 5,67 -5,79 (m, 1H), 6,74 (dd + s.a., 4H), 6, 98 (s, 1H), 7,09(d, 2H), 7,18 -7,36 (m, 3H).

1-3-9: 5-etoxi-1-(2- CL-EM:

fluorobencil)-1H-pirazol: tiempo de retención: 0,76 min

3-carboximidamida: EM ES+: 262,3 [M+H]+ Procedimiento B

61 (continuación)

1-3-10: 1-(2,6-dicloro-bencil)-5metoxi-4-metil-1Hpirazol-3carboximidamida RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 2,08 (s, 3H), 3,87 (s, 3H), 5,42 (s, 2H), 7,37 -7,43 (m, 1H), 7,46 -7,56 (m, 2H), 8,68 -9,05(m, 3H).

1-3-11: clorhidrato de5ciclopropil-1-(4metoxibencil)-4-metil1H-pirazol-3carboximidamida 1:1 RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,55 -0-59(m, 2H), 0, 95 -0, 99 (m,2H), 1,48 -1,58 (m, 1H),2,11 (s, 3H), 3,69 (s, 3H),5,36 (s, 2H), 6,83 -6,90 (m,2H), 7,16 (d, 2H), 8,61 -9,12 (m, 3H).

1-3-12: clorhidrato de 5ciclopropil-1-(4ciclopropil2,6_difluorobencil)-4metil-1H-pirazol-3carboximidamida 1:1 CL-EM: tiempo de retención: 1,01 min MS ES+: 331,2 [M+H]+

1-3-13: clorhidrato de 5(dimetilamino)-1-(4etoxi-2,6-difluorobencil)-4-metil-1Hpirazol-3-carboximidamida 1:1 RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1,27 (t, 3H), 2,12 (s, 3H), 2,71 (s, 6H), 4,00 (q, 2H), 5,19 (s, 2H), 6,63 -6,77 (m, 2H), 7,22 -7,70 (m, 1H), 8,50 -9,40(m, 3H).

1-3-14: 4-etil-1-(2-fluorobencil)5-metoxi-1H-pirazol-3carboximidamida

62

imagen62

imagen63

Se suspendieron 1,95 g de clorhidrato de 1-(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-5-metoxi-4-metil-1H-pirazol-3carboximidamida 1:1 1-3-1 (5,42 mmol, 1,0 eq) en 19,7 ml de 3-metil-1 butanol seco. Se añadieron 0,3 ml de piperidina (3,0 mmol, 0,56 eq) y 3,09 g de 3,3-bis(dimetilamino)-2-metoxipropanonitrilo 1-4-1 (18,0 mmol, 3,30 eq)

5 bajo una atmósfera de nitrógeno y se agitó durante 2 4 horas a 100 ºC de temperatura de baño. La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía ultrarrápida para dar 619 mg (1,13 mmol, 21 %) del compuesto deseado analíticamente puro. RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1,27 (t, 3H), 2,15 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,83 (s, 3H), 4,01 (q, 2H), 5,05 (s, 2H), 6,62 -6,74 (m, 4H), 7,81 (s, 1H).

10 Los siguientes intermedios se prepararon de acuerdo con el mismo procedimiento usando amidinas y el Intermedio 1-4-1:

1-5-2: imagen64 2-[5-ciclo-propil-1-(4etoxi-2,6-difluorobencil)-4-metil-1Hpirazol-3-il]-5metoxipirimidin-4amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,63 -0,68(m, 2H), 0,92 -1,07 (m,2H), 1,27 (t, 3H), 1,55 -1,73 (m, 1H), 2,18 ( s, 3H), 3, 78 (s, 3H), 4,01 (q, 2H), 5, 2 8 ( s, 2H), 6,54 -6,74 (m,4H), 7,80 (s, 1H).

1-5-3: 2-(1-bencil-5ciclopropil-1H-pirazol3-il)-5-metoxipirimidin4-amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,50 -0,62(m, 2H), 0,81 -0,93 (m,2H), 1,82 (s, 1H), 3,79 (s,3H), 5,39 (s, 2H), 6,31 (s, 1H), 6,66 (s. a., 2H), 7,14(d, 2H), 7,19 -7,38 (m, 3H), 7,77 (s, 1H).

64 (continuación)

1-5-4: 2-(1-bencil-5-etenil-1Hpirazol-3-il)-5metoxipirimidin-4amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 3,81 (s, 3H), 5,22 -5,35 (m, 1H), 5,43 (s, 2H), 5,78 (dd, 1H), 6,61 -6,86 (m, 3H), 6,97 (s, 1H), 7,0 5 -7,15 (m, 2H), 7,18 -7,35 (m, 3H), 7,81 (s, 1H).

1-5-5: 2-[1-(2-fluoro-bencil)-5metoxi-1H-pirazol-3-il]5-metoxipirimidin-4amina RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 3,80 (s, 3H), 3,88 (s, 3H), 5,15 (s, 2H), 6,13 (s, 1H), 6, 56 -6, 77 (s, 2H), 7,03 (d, 1H), 7,09 -7,22 (m, 2H), 7,30 (s, 1H), 7,7 9 (s, 1H).

1-5-6: 2-[5-ciclopropil-1-(2,6diclorobencil)-4-metil1H-pirazol-3-il]-5metoxipirimidin-4amina RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,67 -0,74 (m, 2H), 0,97 -1,04 (m,2H), 1,78 (m, 1H), 2,19 (s,3H), 3,76 (s, 3H), 5,52 (s,2H), 6,50 -6,65 (s. a, 2 H),7,35 -7,41 (m, 1H), 7,47 -7,51 (m, 2H), 7,78 (s, 1H).

1-5-7: imagen65 2[5-ciclopropil-1-(2fluorobencil)-4-metil1H-pirazol-3-il]-5-en-4amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,56 (m, 2 H),0,89 (m, 2H), 1,46 -1,62(m, 1H), 2,24 (s, 3H), 3,79(s, 3H), 5,41 (s, 2H), 6,52 -6,73 (s, 2H), 6,85 (t, 1H), 7,11 (t, 1H), 7,15 -7,23 (m,1H), 7,25 -7,34 (m, 1H),7,83 (s, 1H).

65 (continuación)

1-5-8: 2-[5-(dimetil-amino)-1(2-fluorobencil)-1Hpirazol-3-il]-5metoxiamina CL-EM: tiempo de retención: 0,81 min MS ES+: 343,0 [M+H]+ Procedimiento B

1-5-9: 2-[5-etoxi-1-(2fluorobencil)-1Hpirazol-3-il]-5metoxipirimidin-4amina RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1,28 (t, 3H), 3,79 (s, 3H), 4,14 (q, 2H),5,14 (s, 2H), 6,10 (s, 1H),6,57 (s. a, 1H), 6,99 7,09 (m, 1H), 7,09 -7,22 (m,3H), 7,27 -7,38 (m, 1H),7,78 (s, 1H).

1-5-10: propil-1-(4metoxibencil) -1Hpirazol-3-il]-5-metoxipirimidin-4-amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,44 -0,62(m, 2H), 0,83 -0-90 (m,2H), 1,74 -1,90 (m, 1H),3,68 (s, 3H), 3,79 (s, 3 H),5,31 (s, 2H), 6,28 (s, 1H), 6, 54 -6, 74 (m, 2H), 6,86 (d,2H), 7,11 (d, 2H), 7,77 (s,1H).

1-5-11: 2-[1-(2,6diclorobencil)-5metoxi-4-metil-1Hpirazol-3-il]-5metoxipirimidin-4amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 2,25 (s, 3 H),3,94 (s, 3H), 3,96 (s, 3H),5,38 (s, 2H), 7,35 -7, 44 (m, 1H), 7,52 (d, 2H),8,03 -8,11 (m, 2H), 8,19 (s, 1H),8,26 8, 34 (m, 2H), 9,22 (s,1H).

66 (continuación)

1-5-12: 2-[5-ciclopropil-1-(4metoxibencil)-4-metil1H-pirazol-3-il]-5metoxipirim idin-4amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,53 -0,58(m, 2H), 0, 86 -0,93 (m,2H),1, 39 -1, 56 (m, 1H),2,22 (s, 3 H), 3,68 (s, 3 H),3,79 (s, 3H), 5,27 (s, 2H),6,63 (s. a, 2H), 6,80 -6,91(m, 2H), 7,03 -7,08 (m,2H), 7,83 (s, 1H).

1-5-13: 2-[5-ciclo-propil-1-(4ciclo-propil-2,6difluorobencil)-4-metil1H-pirazol-3-il]-5metoxipirimidin-4amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]=0,68 (dd, 4H),0,86 -1,05 (m, 4H),1, 571, 67 (m, 1H), 1, 88 -1,98 (m, 1H), 2,18 (s, 3H), 3,77(s, 3H), 5,31 (s, 2H), 6,61 (s. a., 2H), 6,81 (d, 2H),7,80 (s, 1H).

1-5-14: 2-[5-(dimetilamino)-1(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-4-metil-1Hpirazol-3-il]-5metoxipirimidin-4amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1,27 (t, 3H),2,21 (s, 3H), 2,71 (s, 6H),3,78 (s, 3H), 4,00 (q, 2H),5,1 0 (s, 2H), 6,49 -6, 63 ( m, 2H), 6, 6 2 -6,74 (m, 2H),7,80 (s, 1H).

1-5-15: 2-[4-etil-1-(2fluorobencil)-5-metoxi1H-pirazol-3-il]-5metoxipirimidin-4amina

67

imagen66

1-7-2: 5-ciclopropil-1-(4metoxibencil)-1Hpirazol-3-carboxilato de etilo RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,58 (m, 2H),0,79 -0,93 (m, 2H), 1,17 -1,30 (t, 3H), 1,85 (s, 1H),3,69 (s, 3H), 4, 10 -4, 26 (q, 2H), 5,37 (s, 2H), 6,35 (s, 1H), 6,82 -6,93(m, 2H),7,11 (d, 2H).

1-7-3: imagen67 5-ciclo-propil-1-(2fluorobencil)-4-metil-1Hpirazol-3-carboxilato de etilo RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,53 -0,60(m, 2H), 0,88 -0,94 (m,2H), 1,23 (t, 3H), 1,54 (m, 1H), 2,16 (s, 3H), 4,19 (q,2H), 5,47 (s, 2H), 6,86 -6,94 (m, 1H), 7,13 (td, 1H), 7, 17 -7,24 (m, 1H), 7,33 (d,1H).

1-7-4: imagen68 5-ciclo-propil-1-(2,6diclorobencil)-4-metil1H-pirazol-3-carboxilato de etilo RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,67 -0,75(m, 2H), 0,97 -1,05 (m,2H), 1,17 (t, 3H), 1,78 ( m, 1H), 2, 15 (s, 3H), 4,13 (q,2H), 5, 57 (s, 2H), 7,3 7 -7,43 (t, 1H), 7, 48 -7,53 (m,2H).

1-7-6: 1-bencil-5-etenil-1Hpirazol-3-carboxilato de metilo RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 3, 76 (s, 3H), 3,9 0 (s, 1H), 5,35 -5,41 (m, 1H), 5,49 (s, 2H), 5,84 -5,92 (m, 1H), 6, 75 -6,85(m, 1H), 7,07 -7,13 (m, 21-1), 7,29 (d, 31-1).

Intermedio 1-8-1

Preparación de 5-amino-1-(2-fluorobencil)-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo 69

imagen69

imagen70

imagen71

imagen72

imagen73

1-17-2: imagen74 5-ciclopropil-1-(4metoxibencil)-4-metil-1Hpirazol-3-carboxilato de etilo RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,53 -0,59(m, 2H), 0,86 -0,97 (m,2H), 1,23 (t, 3H), 1,39 -1,57 (m, 1H), 2,14 (s, 3H),3,68 (s, 3H), 4,20 (q, 2H),5,32 (s, 2H), 6,80 -6,91 (m,21-1 ), 7, 04 -7, 08 ( m, 211).

1-17-3: imagen75 1-(4-bromo-2,6-difluorobencil)-5-ciclopropil-4metil-1H-pirazol-3carboxilato de etilo RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,64 -0,68(m, 2H), 0,96 -1,01 (m, 2H), 1,20 (t, 3H), 1,56 -1,67 (m, 1H), 2,13 (s, 3H), 4,16 (q, 2H), 5,40 (s, 2H), 7,47 -7,54 (m, 2H).

Intermedio 1-19-1

Preparación de (2Z)-3-ciano-1-etoxi-1-oxobut-2-en-2-olato de potasio

imagen76

5 Se disolvieron 3,84 g de 2-metilpropan-2-olato de potasio (34,2 mmol, 1,0 eq.) y 723 mg 18-crown-6 (2,74 mmol, 0,08 eq.) en THF y se añadieron 5,00 g de oxalato de dietilo (34,2 mmol, 1,0 eq.) a lo largo de 5 minutos. La mezcla de reacción se calentó a 60 ºC y se añadieron 1,88 g de propiononitrilo (34,2 mmol, 1,0 eq.) a lo largo de 5 minutos. La reacción se agitó a 60 ºC durante 1 hora. El sólido se retiró por filtración, se secó al vacío a 50 ºC para dar 5,11 g (26,4 mmol, 77 %) del producto bruto el cual se usó sin purificación adicional.

10 RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1,14 (t, 3H), 3,51 (s, 3H), 3,97 (q, 2H).

Intermedio 1-20-1

Preparación de 5-amino-1-(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-4-metil-1H-pirazol-3-carboxilato de etilo

75

imagen77

imagen78

imagen79

Se diluyeron 146 mg de metanolato de sodio (2,70 mmol, 1,0 eq) en 20 ml de metanol a temperatura ambiente bajo una atmósfera de nitrógeno. Luego se añadió 1,0 g de clorhidrato de 5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-4metil-1H-pirazol-3-carboximidamida 1:1 1-3-6 (2,70 mmol, 1,0 eq) y 329 mg de (etoximetilen)malononitrilo (2,70

5 mmol, 1,0 eq) y la mezcla se agitó a 65C de temperatura de baño durante 18 horas. Después de enfriar a temperatura ambiente la mezcla de reacción se concentró al vacío y se purificó mediante HPLC (ACN/H2O/NH3 0,2 %) para dar 284 mg (0,65 mmol, 24 %) del compuesto deseado analíticamente puro. RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,64 -0,71 (m, 2H), 0,95 -1,04 (m, 2H), 1,27 (t, 3H), 1,63 (m, 1H), 2,25 (s, 3H), 4,01 (q, 2H), 5,34 (s, 2H), 6,72 (m, 2H), 7,76 (s.a., 2H), 8,56 (s, 1H).

10 Los siguientes intermedios se prepararon de acuerdo con el mismo procedimiento usando los materiales de partida que se han descrito:

1-24-2: 2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi2,6-difluorobencil)-4-metil1H-pirazol-3-il]-5(metilsulfonil)pirimidin-4amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,68 (m, 2H), 1,00 (m, 2H), 1,27 (t, 3H), 1, 63 (m, 1H), 2,27 (s, 3H), 3,20 (s, 3H), 4,01 (q, 2 H), 5,35 (s, 2H), 6,72 (m, 2H) ,6. 62 8.28 (m. a., 2H), 8,49 (s, 1H).

1-24-3: 2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi2,6-difluorobencil)-4-metil1H-pirazol-3-il]-5(isopropilsulfonil)pirimidin4-amina RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,68 (m, 2H),1,01 (m, 2H), 1,17 (d, 6H),1,27 (t, 3H), 1,64 (m, 1H),2,28 (s, 3H), 3,40 (m, 1H), 4,02 (q, 2H), 5,35 (s, 2H),6,72 (m, 2H), 6,91 (s a,1H), 8,08 (s a, 1H), 8,42 (s,1H),

Intermedio 1-25-1

Preparación de 2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-4-metil-1H-pirazol-3-il]pirimidin-4-amina

78

imagen80

imagen81

2-1-2: imagen82 2-[5-(dimetil-amino)-1(2-fluorobencil)-1Hpirazol-3-il]-5-metoxiN-(piridin-4-il)pirimidin4-amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 2,64 (s, 6H),3,95 (s, 3H), 5,29 (s, 2H),6,43 (s, 1H), 7,10 -7,25 (m,3H), 7,28 -7,39 (m, 1H), 8, 06 (d, 2H), 8,16 (s, 1H),8,33 (d, 2H), 9,26 -9,33 (m,1H).

2-1-3: 2-[1-(2-fluoro-bencil)-5- RMN 1H (500MHz, DMSO-d6): δ [ppm]=

metoxi-1H-pirazol-3-il]: 4,00 (d, 6H), 5,25 (s, 2H), 6,26 (s, 1H),

5-metoxi-N-(piridin-4: 7,15 -7,29 (m, 3H), 7,33 -7,42 (m, 1H),

il)pirimidin-4-amina: 8,08-8,15(m, 2H), 8,21 (s, 1H), 8,40(d, 2H), 9,33 (s, 1H).

2-1-4: imagen83 2-[5-etoxi-1-(2fluorobencil)-1Hpirazol-3-il]-5-metoxiN-(piridin-4-il)pirimidin 4-amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6):6 [ppm]= 1,32 (t, 3H),3,96 (s, 3H), 4,20 (d, 2H),5,20 (s, 2H), 6,19 (s, 1H),7,18 (s, 3H), 7,29 -7,39 (m, 1H), 8,08 (s, 2H), 8,16 (s,1H), 8,34 (s, 2H), 9,27 -9,32 (m, 1H).

2-1-5: 2(1-bencil-5ciclopropil-1H-pirazol-3-il)-5-metoxi-N(piridin-4-il)pirimidin-4amina RMN 1H (300MHz, DMSO-ds): b [ppm]= 0,54 -0,70(m, 2H), 0,82 0,98 (m,2H), 1,78 1,96 (m, 1H),3,96 (s, 3H), 5, 46 (s, 2H),6,41 (s, 1H), 7,17 -7,40 (m,4H), 8,03 8,09 (m, 2H),8,14 (d, 2H), 8,36 (d, 2H),9,28 (s, 1H).,

81 (continuación)

2-1-6: 2-(1-bencil-5-etenil-1Hpirazol-3-il)-5-metoxiN-(piridin-4-il)pirimidin4-amina RMN 1H (400MHz, DMSO-ds): δ [ppm]= 3,98 (s, 3H),5,36 (d, 1H), 5,49 (s, 2H),5,87 (d, 1H), 6,84 (dd, 1H),7,0 7 (s, 1H), 7,18 (d, 2H),7,22 -7,36 (m, 3H), 8,06 -8,12 (m, 2H), 8,20 (s, 1H),8,38 (d, 2H), 9,32 (s, 1H).

2-1-7: 4-({2-[1-(2fluorobencil)-5-metoxi1H-pirazol-3-il]-5metoxipirimidin-4il)amino)piridin-3carbonitrilo RMN 1H (300MHz,DMSO-d6):6 [ppm]=3,91 (s, 3H),3,99 (s, 3H), 5,19 (s, 2H),6,18 (s, 1 H), 7,05 -7,25 (m,3H),7,27 -7,38 (m, 1 H),8,23 -8,38 (m,2H), 8,58 -8,68 (m, 1H), 8,77 -8,88(m, 1H), 8,96 -9,06 (m,1H).

2-1-8: imagen84 2-[5-ciclopropil-1-(4metoxibencil)-1Hpirazol-3-il]-5-metoxiN-(piridin-4-il)pirimidin4-amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,62 (dd, 2H),0,91 (dd, 2H), 1,80 -1,96(m, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,95 (s, 3H), 5,37 (s, 2H), 6,38(s, 1H), 6,81 -6,94 (m, 2H),7,20 (d, 2H), 8,01 -8,10 (m, 2H), 8, 16 (s, 1H), 8,28 -8,42 (m, 3H), 9,27 (s, 1H).

2-1-9: 2-[5-ciclopropil-1-(2,6diclorobencil)-4-metil1H-pirazol-3-il]-5metoxi-N-(piridin-4il)pirimidin-4-amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,70 -0,83(m, 2H), 0,97 -1,11 (m,2H), 1,78 -1,92 (m, 1H),2,29 (s, 3H), 3,93 (s, 3H),5,58 (s, 2H), 7,33 -7,45 (m, 1H), 7,50 7,58 (m, 2H),8,02 (d, 2H), 8,18 (s, 1H), 8, 24 -8, 33 (m, 2H), 9,16 (s,1H).

82 (continuación)

2-1-10: imagen85 2-[5-ciclo-Propil-1-(2fluorobencil)-4-metil1H-pirazol-3-il]-5metoxi-N-(piridin-4il)pirimidin-4-amina RMN 1H (300MHz, DMSO-ds):6 [ppm]= 0,58-0,68 (m, 2H), 0,90 -1,02 (m,2H), 1,64 (s, 1H), 2,27 (s,3H), 3,96 (s, 3H), 5, 46 (s, 2H), 7,06 -7,40 (m, 4H),7,99 -8,09 (m, 2H), 8,21 (s, 1H), 8,27 -8,37 (m, 2H),9,23 (s, 1H).

2-1-11: 2-[1-(2,6-diclorobencil)5-metoxi-4-metil1Hpirazol-3-il]-5metoxi-N-(piridin-4il)pirimidin-4-amina RMN 1H (300MHz, DMSO-ds): b [ppm]= 2,25 (s, 3H), 3,94 (s, 3H), 3,96 (s, 3H), 5, 38 (s, 2H), 7,35 -7, 44 (m, 1H), 7, 52 (d, 2H), 8,03 -8,11 (m, 2H), 8,19 (s, 1H),8,26 8,34 (m, 2H), 9,22 (s,1H).

2-1-12: 2-[5-ciclopropil-1-(4etoxi-2,6difluorobencil)-4-metil1H-pirazol-3-il]-5metoxi-N-(piridin-4il)pirimidin-4-amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,69 -0,74 (m, 2H), 1,00 -1,07 (m,2H), 1,27 (t, 3H), 1,65 -1,78 (m, 1H), 2,26 (s, 3H),3,94 (s, 3H), 4,01 (q, 2H),5,33 (s, 2H), 6,71 -6,79 (m,2H), 8, 0 0 -8, 1 2 ( m, 2H),8,19 (s, 1H), 8, 25 -8, 38 ( m, 2H), 9,23 (s, 1H).

Ejemplo 2-2-1

Preparación de 2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-4-metil-1H-pirazol-3-il]-4-(piridin-4-ilamino)pirimidin-5-ol

imagen86

Se disolvieron 310 mg de 2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-4-metil-lH-pirazol-3-il]-5-metoxi-N-(piridin-4il)pirimidin-4-amina 2-1-12 (0,629 mmol, 1 eq.) en 27,2 ml de 1-metilpirrolidin-2-ona seca. Se añadieron 348 mg de

83

imagen87

5 HPLC dio 10 mg (0,02 mmol, 37 %) del compuesto deseado analíticamente puro. RMN 1H (400MHz, METANOL-d4): δ [ppm]= 0,73 -0,80 (m, 2H), 1,05 -1,13 (m, 2H), 1,35 (t, 3H), 1,66 -1,76 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 2,82 (s, 6H), 3,41 (t, 2H), 4, 0 1 (q, 2H), 4,47 (t, 2H), 5,47 (s, 2H), 6,54 -6,62 (m, 2H), 8,18 -8,26 (m, 3H), 8,38 (d, 2H).

Lo siguientes compuestos se prepararon de acuerdo con el mismo procedimiento que el descrito anteriormente 10 usando los materiales de partida adecuados para la estructura del producto final mostrado en la tabla a continuación:

ilamino)pirimidin-5-ol 2-2-1 (0,048 mmol, 1,0 eq) en 1,9 ml de DMF seco y se añadieron 33,5 mg de carbonato de potasio (0,24 mmol, 5,0 eq) y 10,5 mg de 2-cloro-N,N-dimetiletanamina (0,073 mmol, 1,5 eq). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 50 ºC. Luego se añadió butan-2-ona y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre sulfato de sodio y se concentró al vacío. La purificación del residuo mediante cromatografía ultrarrápida y

2-3-2: {3-[({2-[ 5-ciclopropil-1(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-4-metil-1Hpirazol-3-il]-4-(piridin-4il-amino)pirimidin-5il)oxi)-metil]oxetan-3il}metanol RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,67 -0,77(m, 2H), 0,94 -1,09 (m,2H), 1,27 (t, 3H), 1,64 -1,78 ( m, 1H), 2,26 (s, 3H),3,80 (s, 2H), 4,02 (q, 2H),4,35 (s, 2H), 4,41 (s, 4H),5,33 (s, 2H), 6,69 -6,82 (m,2H),7, 92 -7, 9 9 ( m, 2H),8,11 (s, 1H),8, 24 -8, 39 (m, 3H), 8, 72 (s, 1H).

2-3-3: imagen88 2-({2-[5-ciclopropil-1-(4etoxi-2,6-difluorobencil)4-metil-1H-pirazol-3-il]4-(piridin-4ilamino)pirimidin-5il)oxi)-etanol RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,65 -0,78(m, 2H), 0,97 -1,09 (m,2H), 1,27 (t, 3H), 1,65 -1,80 (m, 1H), 2,26 (s, 3H), 3, 70 -3,85 (m, 2H), 4,02 (q,2H),4, 08 -4, 2 1 ( m, 2H),5,06 (t, 1H),5, 33 (s, 2H), 6, 64 6,83 (m, 2H), 7,97 -7,99 (m, 2H), 8,19 (s, 1H),8,27 -8,40 (m, 2H), 8, 93 (s, 1H).

2-3-4: 2-[5-ciclopropil-1-(4etoxi-2,6-difluorobencil)4-metil-1H-pirazol-3-il]5-[2-(metilsulfanil)etoxi]N-(piridin-4-il)pirimidin-4amina RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,69 -0,80(m, 2H), 1,01 -1,12 (m,2H), 1,31 (t, 3H), 1,69 -1,84 (m, 1H), 2,16 (s, 3H),2,30 (s, 3H), 2,96 (t, 2H),4,06 (q, 2H), 4,36 (t, 2H),5,37 (s, 2H), 6,73 6,85 (m,2H), 8,00 -8,11 (m, 2H),8,28 (s, 1H), 8,31 -8,42 (m,2H), 8,98 (s, 1H).

85 (continuación)

2-3-5: 1-({2-[5-ciclopropil-1-( 4etoxi-2,6-difluorobencil)4-metil-1H-pirazol-3-il]4-(piridin-4-ilamino)pirimidin-5-il)oxi)metansulfonamida RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,67 -0,77(m, 2H),0, 99 -1, 07 (m,2H),1, 27 (t, 3H), 1, 65 -1,78 (m, 1H), 2,26 ( s, 3H),4,02 ( q, 2H), 5,22 (s, 2H),5,34 (s, 2H), 6,71 -6,79(m, 2H), 7,39 (s, 2H), 7,95 -8,04 (m, 2H), 8,31 -8,38(m, 2H), 8,41 (s, 1H), 9,00(s, 1H).

2-3-6: 5-[({2-[5-ciclopropil-1-(4- RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm] =

etoxi-2,6-difluorobencil): 0,68 -0,73(m, 2H), 0,96 -1,09 (m,2H), 1,27

4-metil-1H-pirazol-3-il]: (t, 3H), 1,63 -1,79 (m, 2H), 2,10 -2,29(m,

4-(piridin-4: 6H), 3,79 -3,91 (m,1H), 3,93 -4, 05 (m,

ilamino)pirimidin-5: 3H),4,20 -4,31 (m, 1H), 5,33 (s,2H), 6,72

il)oxi)-metil]-pirrolidin-2: 6,81 (m, 2H),7,91 -8,05 (m, 2H), 8,18 (s,

ona enantiómero 1: 1H), 8,29 (s, 1H), 8,33 -8,40 (m, 2H), 8,75 (s, 1H).α = -68,8 '(8,4 mg/m LDMSO)

2-3-7: 5-[({2-[5-ciclopropil-1- RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]=

(4-etoxi-2,6: 0,68 -0,73(m, 2H), 0,96 -1,09 (m,2H), 1,27

difluorobencil)-4-metil: (t, 3H), 1,63 -1,79 (m, 2H), 2,10 -2,29(m,

1H-pirazol-3-il]-4: 6H), 3,79 -3,91 (m,1H), 3,93 -4, 05 (m,

(piridin-4: 3H),4,20 -4,31 (m, 1H), 5,33 (s,2H), 6,72

ilamino)pirimidin-5: 6,81 (m, 2H),7,91 -8, 05 (m, 2H), 8, 18 (s,

il)oxi)-metil]-pirrolidin-2: 1H), 8,29 (s, 1H), 8,33 -8,40 ( m, 2H), 8, 75

ona enantiómero 2: (s, 1H).

α = 81,9° (9,1 mg/ml DMSO)

86 (continuación)

2-3-8: imagen89 2-[5-ciclopropil-1-(4etoxi-2,6-difluorobencil)4-metil-1H-pirazol-3-il]5-[3-(metilsulfanil)propoxi]-N-(piridin-4-il)pirimidin-4-amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,65 -0,84(m, 2H), 0,99 -1,13 (m,2H), 1,31 (t, 3H), 1,65 -1,83 (m, 1H), 1, 98 -2,17(m, 5H), 2,29 (s, 3H), 2,73(t, 2H), 4,05 (q, 2H), 4,25 (t,2H), 5,36 (s, 2H), 6,71 -6,95 ( m, 2H), 7,99 -8,17(m, 2H), 8,23 (s, 1H), 8,29 8,41 ( m, 2H), 8, 9 6 (s, 1H).

2-3-9: [ 3-({[2-{5-ciclopropil-1- RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]=

[4-etoxi-2-fluoro-6: 0,0,65 -0,73(m, 2H), 0,93-1,05 (m,2H),

(fenilsulfanil)bencil]-4: 1,22 (t, 3H), 1,70 -1,86 (m, 1H), 2,23 (s,

metil-1H-pirazol-3-il)-4: 3H),3,81 (d, 2H), 3,93 (q, 2H),4,36 (s, 2H),

(piridin-4-il: 4,42 (s, 4H),5,05 (t, 1H), 5,48 (s, 2H),6,58

amino)pirimidin-5-il]oxi}: (d, 1H), 6,91 (dd, 1H),7,16 -7,32 (m, 5H),

metil)oxetan-3-il]metanol: 7, 88 -8, 03 (m, 2H), 8,22 -8,37(m, 3H), 8,73 (s, 1H).

2-3-10: 2-[5-ciclopropil-1-(4etoxi-2,6-difluorobencil)4-metil-1H-pirazol-3-il]5-[3-(metilsulfonil)propoxi]-N-(piridin-4-il)pirimidin-4-amina RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 0,69 -0,82(m, 2H), 1,00 -1,12 (m,2H), 1,31 (t, 3H), 1,65 -1,85 (m, 1H), 2,19 -2,28(m, 2H), 2,29 (s, 3H), 3,04(s, 3H), 3,45 (t, 2H), 4,05(q, 2H), 4,28 (t, 2H), 5,37 (s, 2H), 6,68 -6,93 (m, 2H),7,99 -8,13 (m, 2H), 8,22 (s, 1H), 8, 30 -8, 49 ( m, 2H),8,97 (s, 1H).

87

Ejemplo 2-4-1

Preparación de 4-({2-[1-(2-fluorobencil)-5-metoxi-1H-pirazol-3-il]-5-metoxi-pirimidin-4-il)amino)piridin-3-carboxamida

imagen90

A 126 mg de 4-({2-[1-(2-fluorobencil)-5-metoxi-1H-pirazol-3-il]-5-metoxi-pirimidin-4-il)amino)piridin-3-carbonitrilo 2-1-7

5 (0,294 mmol, 1,0 eq.) se añadieron 0,446 ml de ácido sulfúrico a temperatura ambiente con precaución. La mezcla se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. Luego la mezcla de reacción se goteó sobre agua helada y se ajustó con solución acuosa de hidróxido de sodio 2 M hasta pH alcalino. Esta fase acuosa se extrajo tres veces con DCM/ propan-2-ol 4:1. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentró al vacío. La cristalización desde metanol dio 37,0 mg (0,08 mmol, 28 %) del compuesto deseado analíticamente puro.

10 RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): d [ppm]= 3,95 (d, 6H), 5,22 (s, 2H), 6,26 (s, 1H), 7,10 -7,26 (m, 3H), 7,29 -7, 40 (m, 1H), 7, 73 -7, 86 (m, 1H), 8,22 (s, 1H), 8,34 -8, 43 (m, 1H), 8,46 -8,54 (m, 1H), 8,84 -8,91 (m, 1H), 9,08 -9,16 (m, 1H), 12,04 -12,16 (m, 1H).

El siguiente compuesto se preparó de acuerdo con el mismo procedimiento:

2-4-2: 4-({2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6- 1H-NMR(300MHz,DMSO

difluorobencil)-4-metil-1H-pirazol: d6):δ [ppm] = 0,67 -0,77 (m,

3-il]-5-metoxipirimidin-4: 2H),0,98 -1,10 (m,2H),1,27

il}amino)nicotinamida: (t,3H), 1,67 -1,79(m, 1H),

2,28 (s,3H), 3,94 (s, 3H), 4,

02 (q,2H), 5,34 (s, 2H), 6, 70

-6,85(m, 2H), 7,79 (s,1H),

8,24 (s,1H), 8,33 -8,45(m,

2H), 8,86 (s,1H), 9,05-9,18

(m, 1H), 12,06(s, 1H).

2-4-3: 4-({2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6- 1H-NMR(300MHz,DMSO

difluorobencil)-4-metil-1H-pirazol: d6):δ [ppm] =0,73 (m,2H),1,

3-il]pirimidin-4: 04 (m, 2H), 1,27 (t,3H), 1,73

il}amino)nicotinamida: (m, 1H), 2,30 (s,3H), 4,02

(q,2H), 5,36 (s,2H), 6, 76

(m,2H),6, 81 (d, 1H),7, 83 (s

a, 1H), 8,35 -8,41(m, 2H),

8,44 (d, 1H), 8,85 (s, 1H),

8,93 (d,1H), 11,71(s, 1H).

88

imagen91

El siguiente compuesto se preparó de acuerdo con el mismo procedimiento:

2-6-2: 2-[5-(dimetilamino)-1-(4-etoxi-2,6- 1H-NMR(600MHz,DMSO

difluorobencil)-4-metil-1H-pirazol: d6):δ [ppm] = 1,37 (t,3H),

3-il]-5-metoxi-N-(piridin-4: 2,40 (s,3H), 2,89 (s, 6H), 4,

il)pirimidin-4-amina: 04 (s,3H), 4,08 -4,13(m, 2H),

5,26 (s,2H), 6,79 -6,87(m,

2H), 8,19 (d,2H), 8,30 (s, 1H),

8,41 (d,2H), 9,36 (s. a.,1H).

2-6-3: imagen92 2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6difluorobencil)-4-metil-1H-pirazol3-il]-4-yridin-4-ilamino)pirimidin-5carbonitrilo ' H-NMR(300MHz,DMSOd6):δ [ppm] = 0,62 -0,77 (m, 2H),0,97 -1,11 (m,2H), 1,27 (t,3H), 1,63 -1,78(m, 1H), 2,25 (s,3H), 4,02 (q,2H), 5,38 (s,2H), 6,74 (d, 2H), 7, 81 7,96(m, 2H), 8,37 (d, 2H), 8,87 (s,1H), 9,96 (s. a.,1H).

2-6-4: 4-({2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6- 1H-NMR(300MHz,DMSO

difluorobencil)-4-metil-1H-pirazol: d6):δ [ppm] = 0,69 -0,76 (m, 2

3-il]-5-metoxipirimidin-4: H),1,01 -1,10 (m, 2 H), 1, 27

il}amino)nicotinonitrilo: -1,34(m, 3 H), 1,67 -1,76 (m,

1H),2,23 (s, 3 H)3,99 -4,09

(m,5 H), 5,35 (s, 2H), 6,73

6,81 (m, 2 H), 8,35(s, 1H)

8,50 (d,1H), 8,60 (s, 1H), 8,76

(s, 1H), 8,85 (s, 1H).

2-6-5: 4-({2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6difluorobencil)-4-metil-1H-pirazol3-il]-5-metoxipirimidin-4il}amino)nicotinato de etilo ' H-NMR(300MHz,DMSOd6):δ [ppm] = 0,67 -0,78 (m, 2H),0,98 -1,10 (m,2H), 1,27 (t, 3H), 1,34 (t,3H), 1,65 -1, 81(m, 1H), 2,29 (s,3H), 3,92 4,09(m, 5H), 4,38 (q,2H), 5,34 (s,2H), 6,70 -6,85(m, 2H), 8,32 (s, 1H), 8, 43 8,53(m, 1H), 9,02 (s,1H),9,17-9,28(m, 1H), 11, 17(s, 1H).

90 (continuación)

2-6-6: imagen93 4-({2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6difluorobencil)-4-metil-1H-pirazol3-il]pirimidin-4il}amino)nicotinonitrilo RMN 1H (300MHz,DMSOd6):δ [ppm] =0, 70 -0,78 (m, 2 H),1,01 -1,12 (m, 2 H), 1,31 (t, 3H), 11,68 -1, 70(s, 1H), 2,27 (s,3 H), 4, 05 (q, 2H), 5,38 (s, 2H), 6,78 (d, 2H), 7,11 (d, Hz,1H), 8,54 (d, 2H), 8,57 -8,62(m, 1H), 8,83(s, 1H), 9,99 (s, 1H).

2 -[ 5 -ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6: 1H-NMR(400MHz,DMSOd6):δ

difluorobencil)-4-metil-1H-pirazol: [ppm] = 0,73 (m,2 H), 1,05

3-il] -5-(metilsulfonil)-N-(piridin-4: (m,2H), 1,27 (t, 3H),1,72 (m,

il)pirimidin-4-amina: 1H),2,29 (s, 3H),3,41 (s, 3

H),4,02 (q, 2 H),5,40 (s, 2

H),6,76 (m, 2 H),7,85 (d, 2

H),8,41 (d, 2 H), 8,83 (s,

1H),9,15 (s, 1H).

2-6-7

2-6-9: imagen94 4-({2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6difluorobencil)-4-metil-lH-pirazol-3il]pirimidin-4-il}amino)nicotinato de etilo 'H-NMR(300MHz,DMSO-d6): δ [ppm] = 0,71 -0,81 (m, 2 H),1,02 -1,13 (m, 2 H), 1,26 1,39(m, 6 H), 1,81 -1,73 (m, 1H),2,32 (s, 3 H),4,05 (q, 2 H),4,37 (q, 2 H), 5,40 (s, 2 H), 6, 80 (d, 2 H), 6, 99 (d, 1H),8,51 (dd, 2 H),8,96 -9,03 (m, 2 H), 10, 64 (s, 1H).

2-[4-etil-1-(2-fluorobencil)-5

metoxi-1H-pirazol-3-il]-5-metoxi-N

(piridin-4-il)pirimidin-4-amina

2-6-10

91

imagen95

imagen96

imagen97

Ejemplo 2-11-1

Preparación de ácido 4-({2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-4-metil-1H-pirazol-3-il]-5-metoxipirimidin-4il)amino)nicotínico

imagen98

5 A una solución de 722 mg de 4-({2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-4-metil-1H-pirazol-3-il]-5metoxipirimidin-4-il)amino)-piridin-3-carboxilato de etilo 2-6-5 (1,28 mmol, 1,0 eq) en 13 ml de THF y 1,6 ml de metanol se añadieron 256 mg de hidróxido de sodio (6,39 mmol, 5,0 eq). La mezcla se agitó durante 45 minutos a temperatura ambiente. Usando ácido cítrico acuoso al 10 % el pH de la mezcla se ajustó a 3,5. La suspensión resultante se filtró. El precipitado se lavó con agua y etanol y luego se secó para dar 660 mg del producto deseado

10 (1,11 mmol, 87 %) como el compuesto deseado 90 % puro. RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0,76 (d, 2 H), 1,03 -1,14 (m, 2 H), 1,30 (t, 3 H), 1,69 -1, 84 (m, 1H), 2,32 (s, 3 H), 4,05 (q, 5 H), 5,38 (s, 2 H), 6,80 (d, 2 H), 8,34 (s, 1H), 8,45 (d, 1H), 9,00 (s, 1H), 9,27 (d, 1H), 12,59 (s. a., 1H).

El siguiente compuesto se preparó de acuerdo con el mismo procedimiento:

2-11-2: imagen99 ácido 4-({2-[5-ciclopropil-1-(4etoxi-2,6-difluorobencil)-4metil-1H-pirazol-3-il]pirimidin4-il}amino}nicotínico RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 0,77 (m, 2 H), 1,08 (m, 2H), 1,31 (t, 3 H), 1,72 -1,82 (m, 1H), 2,34 (s, 3 H), 4,06 (q, 2 H),5,40 (s, 2 H), 6,79 (d, 3 H), 8,31(d, 1H), 8, 45 (d, 1H), 8, 92 -9,00(m, 2 H), 12,76 (s. a, 1H).

2-11-3: imagen100 ácido 4-({2-[4-etil-1-(2fluorobencil)-5-metoxi-1Hpirazol-3-il]-5-metoxipirimidin4-il)amino)nicotínico

Ejemplo 2-12-1

Preparación de 4-({2-[5-ciclopropil-1-(4-etoxi-2,6-difluorobencil)-4-metil-lH-pirazol-3-il]-5-metoxipirimidin-4-il)amino)N-[2-(metilsulfonil)etil]nicotinamida

95

imagen101

imagen102

imagen103

imagen104

MaTu y HeLa-MaTu-ADR, que se obtuvieron de EPO-GmbH, Berlín) a una densidad de entre 1000 y 5000 células/pocillo, dependiendo del índice de crecimiento de la respectiva línea celular, en una placa para multititulación de 96 pocillos en 200 µl de su respectivo medio de crecimiento suplementado con suero fetal bovino 10 %. Después de 24 horas, se tiñeron las células de una placa (placa del punto cero) con violeta cristal (véase más adelante), en 5 tanto el medio de las otras placas era reemplazado por medio de cultivo fresco (200 µl), al cual se añadieron las sustancias de prueba a diversas concentraciones (0 µM, así como en el rango de 0,001-10 µM; la concentración final del disolvente dimetilsulfóxido era de 0,5 %). Las células se incubaron durante 4 días en presencia de las sustancias de prueba. La proliferación de las células se determinó por coloración de las células con violeta cristal: las células se fijaron por adición de 20 µl/punto de medición de una solución de aldehído glutárico 11 % durante 15 minutos a 10 temperatura ambiente. Después de tres ciclos de lavado con agua de las células fijadas, las placas se secaron a temperatura ambiente. Las células se tiñeron por adición de 100 µl/punto de medición de una solución de violeta cristal 0,1 % (pH 3,0). Después de tres ciclos de lavado con agua de las células teñidas, las placas se secaron a temperatura ambiente. El colorante se disolvió por adición de 100 µl/punto de medición de una solución de ácido acético 10 %. La absorción se determinó por fotometría a una longitud de onda de 595 nm. El cambio en la cantidad

15 de células, como un porcentaje, se calculó normalizando los valores medidos con respecto a los valores de absorción de la placa del punto cero (=0 %) y la extinción de las células no tratadas (0 µm) (= 100 %). Los valores de IC50 se determinaron por medio de un ajuste de 4 parámetros.

Tabla 1. Los compuestos fueron evaluados en las siguientes líneas celulares, que ejemplifican las sub-indicaciones enumeradas

Indicación de tumor: Línea celular

Cáncer cervical: HeLa HeLa-MaTu-ADR

Cáncer de pulmón de células no microcíticas (NSCLC): NCI-H460

Cáncer de próstata: DU 145

Cáncer de colon: Caco2

Melanoma: 1316F10

La siguiente tabla proporciona los datos para los ejemplos de la presente invención para los ensayos biológicos 1 y

2:

N.º de Ejemplo: Ensayo biológico 1: ensayo Bub1 quinasa mediana IC50[mol/I] Ensayo biológico 2: ensayo de proliferación (línea celular HeLa)mediana IC50 [mol/I]

2-1-1: 6,14E-9 7,38E-6

2-1-2: 1,15E-6 > 1,0E-5

2-1-3: 3,81 E-7 >1,0E-5

2-1-4: 6,38E-7 > 1,0E-5

2-1-5: 5,16E-7 > 1,0E-5

2-1-6: 5,17E-7 > 1,0E-5

2-1-7: 1,42E-6 > 1,0E-5

2-1-8: 7,38E-8 > 1,0E-5

2-1-9: 5,76E-9 > 1,0E-5

2-1-10: I 3,65E-8 3,49E-6

2-1-11: 7,86E-9 2,74E-6

2-1-12: 6,03E-9 4,38E-6

2-2-1: 6,20E-9 nd

2-2-2: 5,39E-8 4,97E-6

2-3-1: 7,45E-9 3,45E-6

2-3-2: 5,23E-9 6,00E-6

2-3-3: 7,86E-9 3,59E-6

2-3-4: 1,08E-8 5,57E-6

2-3-5: 5,55E-9 3,20E-6

2-3-6: 8,14E-9 2,97E-6

100 (continuación)

2-3-7: 1,21 E-8 2,89E-6

2-3-8: 1,37E-8 2,96E-6

2-3-9: 2,49E-7 6,46E-6

2-3-10: 9,49E-9 1,13E-6

2-4-1: 4,15E-8 > 1,0E-5

2-4-2: 1,05E-8 3,23E-6

2-4-3: 9,32E-9 4,46E-6

2-5-1: nd nd

2-6-1: 1,51 E-8 nd

2-6-2: 1,26E-8 nd

2-6-3: nd 9,35E-6

2-6-4: 4,86E-8 nd

2-6-5: 2,74 E-8 nd

2-6-6: 8,77E-9 > 1,00E-5

2-6-7: nd nd

2-6-8: nd nd

2-6-9: nd nd

2-6-10: nd nd

2-6-11: nd nd

2-7-1: 8,62E-9 nd

2-8-1: 4,19E-9 3,93E-6

2-8-2: 3,96E-9 nd

2-8-3: 6,17E-9 nd

2-8-4: 7,90E-9 4,31 E-6

2-9-1: 7,87E-9 5,17E-6

2-10-1: 6,79E-9 nd

2-10-2: 6,13E-8 5,28E-6

2-11-1: 2,68E-8 nd

2-11-2: nd nd

2-11-3: nd nd

2-12-1: nd nd

2-12-2: nd nd

2-12-3: nd nd

2-12-4: nd nd

2-12-5: nd nd

2-12-6: nd nd

2-12-7: nd nd

2-12-8: nd nd

Inhibición de proliferación de células HeLa-MaTu-ADR, MCF7, NCI-H460, DU145, Caco-2 y 1316F10 por compuestos de acuerdo con la presente invención, determinada como se describe bajo Ensayos biológicos 2.0. Todos los valores de IC50 (concentración inhibitoria a 50 % del efecto máximo) se indican en [mol/l].

101

imagen105

Claims

imagen1

imagen2

imagen3

imagen4

imagen5

imagen6