ES2950988T3

ES2950988T3 - Procesos de extracción de lípidos

Info

Publication number: ES2950988T3
Application number: ES14792582T
Authority: ES
Inventors: Nils Hoem; Asgeir Saebo
Original assignee: Aker Biomarine Antarctic AS
Current assignee: Aker Biomarine Antarctic AS
Priority date: 2013-06-14
Filing date: 2014-06-13
Publication date: 2023-10-17
Anticipated expiration: 2034-06-13
Also published as: AU2016201168A1; EP3008156A2; US11578289B2; AU2016201168B2; US10704011B2; WO2014207571A3; EP3008156C0; AU2014203179B2; US20200148972A1; EP3008156B1; US20140370115A1; WO2014207571A2; CN105579565A; AU2014203179A1; AU2014203179C1; PL3008156T3

Abstract

La presente invención proporciona procesos mejorados para extraer y preparar lípidos de fuentes biológicas para su uso en productos farmacéuticos, nutracéuticos y alimentos funcionales. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Procesos de extracción de lípidos

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención proporciona procesos mejorados para extraer y preparar lípidos de fuentes biológicas para uso en productos farmacéuticos, nutracéuticos y alimentos funcionales.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

El documento WO 01/78385 se refiere a un proceso para la producción de materiales ricos en lípidos polares y preferiblemente fosfolípidos.

El documento JP S6323819 se refiere a “Medicina para prevenir la adición de plaquetas - comprende extracto de disolvente orgánico de eufasia, como ingrediente activo”.

La evidencia acumulada indica que los ácidos grasos omega-3 de cadena larga que se encuentran en el pescado, el ácido docosahexaenoico (DHA) y el ácido eicosapentaenoico (EPA), disminuyen el riesgo de cardiopatía coronaria y cardiopatía isquémica. Grandes estudios epidemiológicos, como el Physicians' Health Study y el Nurses' Health Study, examinaron la dieta y otros factores del estilo de vida que influyen en los resultados de salud. El Physician's Health Study informó que el consumo de una o más partes de pescado por semana se asoció con un 52 % menos de riesgo de enfermedad cardíaca repentina en comparación con menos de una comida de pescado por semana. En otro estudio epidemiológico, el Nurses' Health Study in America, se encontró que el consumo de cinco o más partes de pescado por semana se asoció con un 45 % menos de muertes cardíacas en comparación con el consumo de una comida de pescado por mes. Se sabe que los ácidos grasos omega-3 de cadena larga son un factor dietético protector para las enfermedades cardiovasculares. Se ha demostrado que EPA y DHA reducen los niveles de triglicéridos y actúan como agentes antiarrítmicos. La American Heart Association (AHA) realizó revisiones exhaustivas de los datos sobre el consumo de pescado y aceite de pescado y las enfermedades cardiovasculares. El informe de la AHA recomienda que las personas con y sin enfermedad cardíaca y niveles elevados de triglicéridos en la sangre consuman pescado o tomen un suplemento de aceite de pescado. Un informe preparado en 2003 por The Third Task Force of European and Other Societies también recomienda el aceite de pescado como una terapia estándar para el manejo posterior al infarto de miocardio.

El nivel de triglicéridos en la sangre se asocia positivamente con un aumento de CHD, ya que los niveles de triglicéridos aumentan también el riesgo de CHD. Múltiples factores influyen en la elevación de los triglicéridos séricos a lo largo de la vida, siendo la dieta uno de los principales contribuyentes. Tanto el DHA como el EPA, que abundan en muchos productos del mar, parecen favorecer la salud cardiovascular y reducir los niveles de triglicéridos en la sangre. Se sabe que el aceite de pescado puede reducir los niveles de triglicéridos séricos entre un 20 y un 50 %, efectos similares a los observados con medicamentos como las estatinas, la niacina y los fibratos. La American Heart Association recomienda que las personas sin CHD documentada consuman dos partes de pescado (preferiblemente pescado graso) por semana. Los pacientes con CHD deben consumir 1 gramo de EPA y DHA por día, preferiblemente de pescado graso o en forma de suplemento (si están bajo el cuidado de un médico). Para aquellos pacientes que necesitan reducir los niveles de triglicéridos, la American Heart Association recomienda 2-4 gramos de EPA y d Ha por día en forma de suplemento bajo el cuidado de un médico. Una forma de prescripción de EPA y DHA, Lovaza (anteriormente conocido como Omacor), es una buena fuente de ácidos grasos omega-3 disponible para personas con altos niveles de triglicéridos en la sangre. Cada cápsula de 1 gramo de Lovaza contiene 465 mg de éster etílico de EPA, 375 mg de éster etílico de DHA, 80 mg de otros ácidos grasos omega-3, 30 mg de ácidos grasos omega-6 y 50 mg de antioxidantes. Se prescribe como complemento de la dieta para reducir los niveles muy altos de triglicéridos en pacientes adultos.

En la investigación médica, los ácidos grasos omega-3 están siendo investigados para determinar si pueden mejorar efectivamente una amplia gama de estados de enfermedad, entre ellos, enfermedades cardíacas, diabetes, inflamación, depresión, Alzheimer y trastorno por déficit de atención, lo que convierte a este grupo de nutrientes en un apasionante y muy activa área de investigación clínica. Asegurarse de que los ácidos grasos omega-3 sean parte de la dieta según lo recomendado por las pautas dietéticas es un buen punto de partida para lograr una mejor salud; por lo tanto, existe una gran oportunidad en el potencial para mejorar la condición humana con ácidos grasos omega-3.

La administración oral de composiciones de omega-3 a algunos sujetos da como resultado efectos secundarios no deseados, que incluyen eructos y reflujo. La disponibilidad biológica de algunas formas de omega-3 también puede ser limitada. En consecuencia, lo que se necesita en la técnica son formulaciones de omega-3 mejoradas.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

La presente invención proporciona un proceso mejorado de acuerdo con la reivindicación 1 para extraer y preparar lípidos polares a partir de un material animal marino para uso en productos farmacéuticos, nutracéuticos y alimentos funcionales.

En particular, la presente invención proporciona un proceso para extraer un extracto rico en lípidos polares a partir de un material animal marino que comprende: poner en contacto el material animal marino con un disolvente prótico concentrado en condiciones tales que los lípidos polares se extraen preferentemente para formar una suspensión que comprende una solución de lípidos polares y material de residuos biológicos; separar la solución de lípido polar del material de residuo biológico para proporcionar una solución de lípido polar separada; añadir una solución acuosa a la solución de lípidos polares para diluir el disolvente prótico de modo que la solución de lípidos polares se separe en una fase superior que comprende disolvente prótico diluido y una fase inferior rica en lípidos polares; y aislar la fase inferior rica en lípidos polares para proporcionar el extracto rico en lípidos polares. La adición de una solución acuosa a la solución de lípidos polares para diluir el disolvente prótico que la solución de lípidos polares separa en una fase superior que comprende disolvente prótico diluido y una fase inferior rica en lípidos polares comprende agregar la solución acuosa para diluir el concentración del disolvente prótico de aproximadamente 50 % a 70 % p/p cuando se combina con la humedad en la muestra biológica, preferiblemente de aproximadamente 55 % a 65 % p/p, y más preferiblemente de aproximadamente 58 % a 62 % p/p. En algunas formas de realización, la concentración del disolvente prótico se diluye hasta aproximadamente un 60 % p/p cuando se combina con la humedad de la muestra biológica. En algunas formas de realización, el contacto del material animal marino con un disolvente prótico concentrado en condiciones tales que se extraen preferentemente los lípidos polares comprende mezclar el material animal marino con un disolvente prótico concentrado a una temperatura de aproximadamente -10 °C a aproximadamente 50 °C de modo que la concentración de disolvente cuando se combina con la humedad en el material animal marino es de aproximadamente 70 % a aproximadamente 95 % p/p.

En algunas formas de realización, los procesos comprenden además lavar el extracto rico en lípidos polares con un disolvente prótico diluido en el que los lípidos polares son poco solubles para proporcionar una fase superior que comprende el disolvente prótico diluido y una fase inferior rica en lípidos polares y aislar la fase inferior para proporcionar un extracto rico en lípidos polares lavados. En algunas formas de realización, el lavado se repite de 2 a aproximadamente 5 veces. En algunas formas de realización, en las que el lavado del extracto rico en lípidos polares con un disolvente prótico diluido en condiciones tales que los fosfolípidos son poco solubles comprende además mezclar el extracto rico en lípidos polares con el disolvente prótico diluido en un extracto rico en lípidos polares a la relación de disolvente prótico diluido de aproximadamente 0,5:1 a 5:1, en la que el disolvente prótico diluido comprende una solución acuosa de aproximadamente 30 % a 70 % del disolvente prótico. En algunas formas de realización, el disolvente prótico se selecciona del grupo que consiste en n-butanol, n-propanol, isopropanol, etanol y metanol concentrados. En algunas formas de realización, el disolvente prótico es etanol.

En algunas formas de realización, el extracto rico en lípido polar lavado se caracteriza por comprender al menos un 50 % de fosfolípido p/p. En algunas formas de realización, el extracto rico en lípido polar lavado se caracteriza por comprender menos de aproximadamente el 3 % p/p de lisofosfolípidos. En algunas formas de realización, el extracto rico en lípido polar lavado se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 1 % p/p de lisofosfolípidos. En algunas formas de realización, el extracto rico en lípido polar lavado se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 0,5 % p/p de lisofosfolípidos. En algunas formas de realización, el extracto rico en lípido polar lavado se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 0,1 % de lisofosfolípidos. En algunas formas de realización, el extracto rico en lípido polar lavado se caracteriza por tener una conductividad de menos de 300 uS/cm medida en una solución saturada de etanol al 60 %. En algunas formas de realización, los procesos comprenden además la precipitación de fosfolípidos del extracto lavado rico en lípidos polares. En algunas formas de realización, los fosfolípidos que precipitan del extracto rico en lípidos polares lavado comprenden además mezclar el extracto rico en lípidos polares lavado con acetona fría en condiciones tales que los fosfolípidos precipitan para proporcionar un precipitado rico en lípidos polares.

En algunas formas de realización, los procesos comprenden además eliminar el disolvente residual del extracto rico en lípidos polares o el extracto rico en lípidos polares lavado mediante evaporación para proporcionar una composición rica en lípidos polares sólida. En algunas formas de realización, la composición rica en lípidos polares sólidos comprende al menos un 90 % de fosfolípidos p/p. En algunas formas de realización, la composición sólida rica en lípidos polares comprende menos de aproximadamente 3 % de lisofosfolípidos p/p. En algunas formas de realización, la composición rica en lípidos polares sólidos comprende menos de aproximadamente el 1 % de lisofosfolípidos p/p.

En algunas formas de realización, el proceso comprende además poner en contacto el material de residuo biológico con un disolvente prótico en condiciones tales que los lípidos neutros se extraen del material de residuo biológico para formar una suspensión que comprende una solución lipídica neutra y material de residuo biológico; separar la solución lipídica neutra del material residual biológico; y evaporar el disolvente prótico concentrado de la solución de lípidos neutros para proporcionar un extracto de lípidos neutros. En algunas formas de realización, las condiciones tales que los lípidos neutros se extraen del material de residuo biológico comprenden mezclar el material de residuo biológico con el disolvente prótico concentrado en una proporción de aproximadamente 2:1 a 8:1 a una temperatura de aproximadamente 15 °C a aproximadamente 40 °C.

En algunas formas de realización, los procesos comprenden además la combinación del extracto rico en lípidos polares lavado con el extracto de lípidos neutros para proporcionar una composición lipídica combinada. En algunas formas de realización, la composición de lípidos combinados se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 3 % de lisofosfolípidos. En algunas formas de realización, la composición de lípidos combinados se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 1 % de lisofosfolípidos. En algunas formas de realización, la composición de lípidos combinados se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 0,5 % de lisofosfolípidos. En algunas formas de realización, la composición lipídica combinada se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 0,1 % de lisofosfolípidos.

El material animal marino se selecciona del grupo que consiste en un material de algas, un material de animales marinos y un material vegetal. En algunas formas de realización, el material de animales marinos se selecciona de un material de pescado, un material de krill y un material de plancton marino. En algunas formas de realización, el material de krill se selecciona del grupo que consiste en krill fresco, krill congelado, harina de krill, pasta de krill húmeda, pasta de krill seca y aceite de krill.

En algunas formas de realización, el extracto rico en lípidos polares lavado, el precipitado rico en lípidos polares, la composición rica en lípidos polares sólida, el extracto de lípidos neutros o la composición lipídica combinada producida como se describe anteriormente se formulan en un vehículo de administración oral. En algunas formas de realización, el vehículo de administración oral se selecciona del grupo que consiste en una tableta, una cápsula y una cápsula de gel, una solución, una suspensión, una emulsión y una matriz masticable. En algunas formas de realización, el extracto rico en lípidos polares lavado, el precipitado rico en lípidos polares, la composición rica en lípidos polares sólida, el extracto de lípidos neutros o las composiciones lipídicas combinadas producidas como se describe anteriormente se formulan en una emulsión para administración parenteral o administración.

Los productos del proceso de la presente invención o composiciones de la presente invención pueden ser útiles para fabricar productos de caramelo de goma. Los productos de caramelo de goma pueden prepararse mediante el mezclado de un extracto rico en lípidos polares lavado, un precipitado rico en lípidos polares, una composición rica en lípidos polares sólidos o una composición lipídica mezclada producida como se describe en las reivindicaciones o una composición de fosfolípidos como se ha descrito en las reivindicaciones en una matriz de gel para proporcionar una mezcla de caramelos de goma y formar un caramelo de goma a partir de la mezcla de caramelos de goma.

También se describe una composición de fosfolípidos tal como se define en las reivindicaciones en una matriz de gel sólido.

En algunas formas de realización, la presente invención proporciona procesos tal como se definen en las reivindicaciones para extraer una composición lipídica de un material animal marino que comprende: poner en contacto el material animal marino con un disolvente prótico concentrado en condiciones tales que los lípidos polares se extraen preferentemente para formar una suspensión que comprende una solución lipídica polar y un residuo biológico; separar la solución de lípidos polares del material residual biológico; añadir la solución acuosa a la solución de lípidos polares para diluir el disolvente prótico para que la solución de lípidos polares se separe en una fase superior que comprende el disolvente prótico diluido y una fase de abajo rica en lípidos polares inferior, comprendiendo la adición de la solución acuosa para diluir la concentración de dicho disolvente prótico a 50 % a 70 % p/p cuando se combina con la humedad en dicho material animal marino; aislar la fase de abajo rica en lípidos polares al evaporar el disolvente prótico de la solución de lípidos polares para proporcionar un extracto de lípidos polares que comprende fosfolípidos; lavar el extracto de lípido polar con un disolvente prótico diluido en condiciones tales que los fosfolípidos sean poco solubles; evaporar el segundo disolvente prótico para proporcionar un extracto de fosfolípido lavado. En algunas formas de realización, poner en contacto el material biológico con un disolvente prótico concentrado en condiciones tales que los lípidos polares se extraen preferentemente comprende mezclar el material biológico con un disolvente prótico concentrado a una temperatura de aproximadamente -10 °C a aproximadamente 50 °C de manera que la concentración de disolvente cuando combinado con la humedad en el material biológico es de aproximadamente 70 % p/p a aproximadamente 95 % p/p. En algunas formas de realización, el lavado del extracto de lípido polar con un segundo disolvente prótico en condiciones tales que los fosfolípidos son poco solubles comprende mezclar el extracto de lípido polar con el disolvente prótico diluido en una proporción de extracto de lípido polar a disolvente prótico diluido de aproximadamente 0,5:1 a 5:1, en donde el disolvente prótico diluido comprende una solución acuosa de aproximadamente 30 % p/p a 70 % p/p del disolvente prótico.

En algunas formas de realización, el disolvente prótico concentrado se selecciona del grupo que consiste en nbutanol, n-propanol, isopropanol, etanol y metanol concentrados. En algunas formas de realización, el disolvente prótico diluido se selecciona del grupo que consiste en n-butanol, n-propanol, isopropanol, etanol y metanol diluidos. En algunas formas de realización, el disolvente prótico concentrado es etanol concentrado. En algunas formas de realización, el disolvente prótico diluido es etanol diluido.

En algunas formas de realización, el extracto de fosfolípido lavado se caracteriza por comprender al menos 50 %, 60 %, 70 %, 80 % o 90 % de fosfolípido (es decir, peso de fosfolípidos/peso total del extracto de fosfolípido lavado). En algunas formas de realización, el extracto de fosfolípido lavado se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 3 % de lisofosfolípidos (es decir, peso de lisofosfolípidos/peso total del extracto de fosfolípidos lavado). En algunas formas de realización, el extracto de fosfolípido lavado se caracteriza por comprender menos de aproximadamente el 1 % de lisofosfolípidos. En algunas formas de realización, el extracto de fosfolípido lavado se caracteriza por comprender menos de aproximadamente un 0,5 % de lisofosfolípidos. En algunas formas de realización, el extracto de fosfolípido lavado se caracteriza por comprender menos de aproximadamente un 0,1 % de lisofosfolípidos. En algunas formas de realización, el extracto de fosfolípido lavado se caracteriza por tener una conductividad inferior a 300 uS/cm medida en una solución saturada de etanol al 60 %.

En algunas formas de realización, los procesos comprenden además poner en contacto el material de residuo biológico con un disolvente prótico concentrado en condiciones tales que los lípidos neutros se extraen del material de residuo biológico para formar una suspensión que comprende una solución lipídica neutra y material de residuo biológico; separar la solución lipídica neutra del material residual biológico; y evaporar el disolvente prótico concentrado de la solución de lípidos neutros para proporcionar un extracto de lípidos neutros. En algunas formas de realización, las condiciones tales que los lípidos neutros se extraen del material de residuo biológico comprenden mezclar el material de residuo biológico con el disolvente prótico concentrado en una proporción de aproximadamente 2:1 a 8:1 a una temperatura de aproximadamente 15 °C a aproximadamente 40 °C. En algunas formas de realización, los procesos comprenden además la combinación del extracto de fosfolípidos lavado con el extracto de lípidos neutros para proporcionar una composición lipídica combinada.

En algunas formas de realización, la composición de lípidos combinados se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 3 % de lisofosfolípidos (es decir, peso de lisofosfolípidos/peso total de extracto de fosfolípidos lavado). En algunas formas de realización, la composición de lípidos combinados se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 1 % de lisofosfolípidos. En algunas formas de realización, la composición lipídica combinada se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 0,5 % de lisofosfolípidos. En algunas formas de realización, la composición lipídica combinada se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 0,1 % de lisofosfolípidos. En algunas formas de realización, el extracto de fosfolípido lavado se caracteriza por tener una conductividad inferior a 300 uS/cm medida en una solución saturada de etanol al 60 %.

En algunas formas de realización, el proceso comprende además el paso de lavar los fosfolípidos con acetona fría para recuperar una fracción de fosfolípidos concentrada adicional. En algunas formas de realización, la fracción concentrada de fosfolípidos es al menos 80 %, 85 %, 90 % o 95 % de fosfolípidos p/p (es decir, peso de fosfolípidos/peso total del concentrado fracción de fosfolípidos).

En algunas formas de realización, el material biológico se selecciona del grupo que consiste en un material de algas, un material de animales marinos y un material vegetal. En algunas formas de realización, el material de animales marinos se selecciona de un material de pescado, un material de krill y un material de plancton marino. En algunas formas de realización, el material de krill se selecciona del grupo que consiste en krill fresco, krill congelado, harina de krill, pasta de krill húmeda, pasta de krill seca y aceite de krill.

En algunas formas de realización, el extracto de fosfolípidos lavado, el extracto de lípidos neutros o la composición lipídica combinada se formulan en un vehículo de administración oral. En algunas formas de realización, el vehículo de administración oral se selecciona del grupo que consiste en una tableta, una cápsula y una cápsula de gel, una solución, una suspensión, una emulsión y una matriz masticable. En algunas formas de realización, el extracto de fosfolípidos lavado, el extracto de lípidos neutros o la composición lipídica combinada se formulan en una emulsión para administración o entrega parenteral.

En algunas formas de realización, la presente invención proporciona una composición de fosfolípidos que comprende una mezcla de compuestos de fosfolípidos que tienen la siguiente estructura:

donde R1 y R2 se seleccionan del grupo que consiste en un resto de ácido graso y -H y R3 es H o se seleccionan de un resto de colina, etanolamina, inositol y serina, la mezcla de compuestos de fosfolípidos que comprenden más del 85 % o 90 % de restos de colina (es decir, % mol >, moles de restos de colina/moles totales de compuestos de fosfolípidos) en la posición R3 y más del 30 % p/p de restos de ácidos grasos omega-3 (es decir, peso de fracciones de ácidos grasos omega-3/peso total de compuestos de fosfolípidos), en donde más del 90 % p/p de las fracciones de ácidos grasos omega-3 (es decir, peso de fracciones de ácidos grasos omega-3/peso total de restos de ácido graso) están en la posición R2, caracterizándose además la composición por comprender menos de aproximadamente 3 % p/p, preferiblemente menos de 1 % p/p de lisofosfolípidos (es decir, peso de lisofosfolípidos/peso total de la composición de fosfolípidos). En algunas formas de realización, las composiciones tienen una conductividad de menos de aproximadamente 300 uS/cm medida en una solución saturada de etanol al 60 %. En algunas formas de realización, los restos de ácidos grasos omega-3 se seleccionan del grupo que consiste en ácido eicosapentaenoico, ácido docosahexaenoico y combinaciones de los mismos. En algunas formas de realización, la composición comprende al menos 50 %, 60 %, 70 %, 75 %, 80 %, 90 % o 95 % peso/peso (es decir, peso de compuestos de fosfolípidos/peso total de la composición de fosfolípidos) de los compuestos de fosfolípidos. En algunas formas de realización, los restos omega-3 en la mezcla de compuestos de fosfolípidos son ácido eicosapentaenoico y ácido docosahexaenoico y en donde el ácido eicosapentaenoico y el ácido docosahexaenoico están presentes en una proporción de ácido eicosapentaenoico:ácido docosahexaenoico de aproximadamente 1:1 a aproximadamente 3:1. En algunas formas de realización, la composición comprende además al menos 5 % p/p y hasta aproximadamente 10 %, 20 %, 30 %, 40 % o 50 % p/p de ésteres etílicos (es decir, peso de ésteres etílicos/peso total de la composición) que comprenden restos de ácidos grasos omega-3. En algunas formas de realización, la composición comprende al menos 10 % p/p y hasta aproximadamente 20 %, 30 %, 40 % o 50 % p/p de compuestos de glicérido (es decir, peso de compuestos de glicérido/peso total de la composición) que comprende las fracciones de ácidos grasos omega-3. En algunas formas de realización, la composición comprende astaxantina. En algunas formas de realización, la composición comprende al menos un segundo antioxidante. En algunas formas de realización, la composición se deriva parcial o totalmente del krill.

En algunas formas de realización, la composición se proporciona en una formulación seleccionada del grupo que consiste en una cápsula, una tableta, un líquido, un polvo, una emulsión, un suplemento dietético, un suplemento nutricional, una bebida y un alimento funcional.

En algunas formas de realización, las composiciones se usan para administración oral o administración intravenosa a un sujeto para reducir los triglicéridos séricos, reducir el colesterol sérico, reducir la formación de placa, reducir la agregación plaquetaria, tratar la aterosclerosis, mejorar la salud cardiovascular, reducir la inflamación, reducir la cardiopatía coronaria, tratar la depresión, tratar la enfermedad de Alzheimer, tratar el trastorno por déficit de atención y tratar el síndrome metabólico. En algunas formas de realización, la composición se administra en una dosis diaria de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 3 gramos. En algunas formas de realización, la composición se administra a un sujeto seleccionado del grupo que consiste en humanos, primates no humanos, animales domésticos criados o de granja y animales de compañía.

La presente invención es útil para fabricar productos de caramelo de goma. Los productos de caramelo de goma pueden prepararse mediante el mezclado de un extracto rico en lípidos polares lavado, un precipitado rico en lípidos polares, una composición rica en lípidos polares sólidos o una composición lipídica mezclada producida como se describe en las reivindicaciones o una composición de fosfolípidos como se ha descrito en las reivindicaciones en una matriz de gel para proporcionar una mezcla de caramelos de goma y formar un caramelo de goma a partir de la mezcla de caramelos de goma.

También se describe una composición de fosfolípidos tal como se define anteriormente en una matriz de gel sólido.

DEFINICIONES

Como se usa en este documento, "fosfolípido" se refiere a un compuesto orgánico que tiene la siguiente estructura general:

donde R1 es un resto de ácido graso o -H, R2 es un resto de ácido graso o -H, y R3 es un -H o un resto de grupo de cabeza de fosfolípido tal como fracción de colina (HOCH₂CH₂N+(CH₃)₃OH‘), etanolamina (HOCH²CH²NH²), fracción de serina o fracción de inositol tal como ciclohexano poliol inositol, o derivados del mismo. Preferiblemente, R1 y R2 no pueden ser simultáneamente -H. Cuando R3 es un -H, el compuesto es un diacilglicerofosfato, mientras que cuando R3 es un compuesto que contiene nitrógeno, el compuesto es un fosfátido tal como lecitina, cefalina, fosfatidilserina o plasmalógeno.

Como se usa aquí, el término "ácido graso poliinsaturado de cadena larga" se refiere a un ácido graso que tiene 20 o más carbonos y que está insaturado en dos o más enlaces.

Como se usa aquí, el término ácido graso omega-3 se refiere a ácidos grasos poliinsaturados que tienen el doble enlace final en la cadena hidrocarbonada entre el tercer y cuarto átomo de carbono desde el extremo metilo de la molécula. Los ejemplos no limitantes de ácidos grasos omega-3 incluyen ácido 5,8,11,14,17-eicosapentaenoico (EPA), ácido 4,7,10,13,16,19-docosahexanoico (DHA) y ácido 7,10,13,16,19-docosapentanoico (DPA).

Como se usa en este documento, el término "resto" cuando se usa en referencia a un ácido graso se refiere a la parte del ácido graso unida a otra molécula a través de un enlace, como un enlace éster o éter, p. ej., a una molécula de glicérido o fosfoglicérido. El "resto" de ácido graso se refiere así a la cadena alifática de un ácido graso o al grupo acilo graso de un ácido graso. En las estructuras de fosfolípidos definidas en el presente documento, cuando el resto de ácido graso es un acilo graso, la cadena alifática del acilo graso se une a través de un enlace éster y cuando el resto de ácido graso es una cadena alifática de un ácido graso, la cadena alifática se une a través de un enlace éter. Cuando se menciona un ácido graso particular en relación con un fosfolípido de la invención (p. ej., EPA o DHA), debe tomarse como referencia al grupo acilo graso relevante o a su cadena alifática.

Como se usa en el presente documento, el término "vehículo fisiológicamente aceptable" se refiere a cualquier vehículo o excipiente comúnmente usado con productos farmacéuticos oleosos. Dichos vehículos o excipientes incluyen, pero no se limitan a aceites, almidón, sacarosa y lactosa.

Como se usa en el presente documento, el término "vehículo de administración oral" se refiere a cualquier medio para administrar un producto farmacéutico por vía oral, incluidos, entre otros, cápsulas, píldoras, tabletas y jarabes.

Como se usa en el presente documento, el término "producto alimenticio" se refiere a cualquier alimento o pienso adecuado para el consumo de seres humanos, animales no rumiantes o animales rumiantes. El "producto alimenticio" puede ser un alimento preparado y envasado (p. ej., mayonesa, aderezo para ensaladas, pan o queso) o un alimento para animales (p. ej., alimento para animales extruido y granulado o alimento mixto grueso). "Producto alimenticio preparado" significa cualquier alimento preenvasado aprobado para el consumo humano.

Como se usa en este documento, el término "producto alimenticio" se refiere a cualquier sustancia apta para el consumo humano o animal.

Como se usa en el presente documento, el término "alimento funcional" se refiere a un producto alimenticio al que se ha añadido un suplemento biológicamente activo.

Como se usa en el presente documento, el término "alimento infantil" se refiere a un producto alimenticio formulado para un lactante tal como una fórmula.

Como se usa en el presente documento, el término "alimento para ancianos" se refiere a un producto alimenticio formulado para personas de edad avanzada.

Como se usa en este documento, el término "alimento para el embarazo" se refiere a un producto alimenticio formulado para mujeres embarazadas.

Como se usa aquí, el término "suplemento nutricional" se refiere a un producto alimenticio formulado como un suplemento dietético o nutricional para ser usado como parte de una dieta.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

En algunas formas de realización preferidas, la presente invención proporciona procesos de extracción de múltiples etapas diseñados para proporcionar extractos de lípidos neutros y polares a partir de un material biológico de partida. En algunas formas de realización, los extractos de lípidos neutros y polares separados se combinan posteriormente para proporcionar una composición lipídica con un contenido deseado de lípidos neutros y polares.

En algunas formas de realización de la invención, los lípidos se extraen en un solo paso con una concentración específica del disolvente prótico, ajustada al contenido de agua del material biológico. La relación entre los lípidos polares y los lípidos neutros se puede equilibrar u optimizar mediante la polaridad del disolvente. La proporción de lípidos polares se puede mejorar aún más mediante un procedimiento de lavado posterior con un disolvente prótico como se describe a continuación. Después de la extracción de un paso y los 3-5 pasos de lavado subsiguientes, el extracto rico en lípidos polares normalmente contendrá alrededor de 55-60 % p/p de fosfolípidos (es decir, peso de fosfolípidos/peso total del extracto de fosfolípidos lavado) cuando se elabora a partir de un material animal marino en el que los fosfolípidos constituyen aproximadamente el 40 % p/p de los lípidos (es decir, peso de fosfolípidos/peso total de la materia prima). En otras formas de realización, un material de partida biológico se pone en contacto con un disolvente prótico más fuerte para obtener un extracto de lípido altamente enriquecido en fosfolípidos.

En formas de realización preferidas, las extracciones se realizan en condiciones tales que los lípidos polares se extraen en una fase líquida (es decir, una solución de lípidos polares) y los lípidos neutros preferentemente permanecen asociados con el material biológico. Los solventes próticos incluyen cualquier disolvente que tenga un átomo de hidrógeno unido a un oxígeno (como en un grupo hidroxilo) o nitrógeno (como en un grupo amina). En términos generales, cualquier disolvente que contenga H+ lábil se denomina disolvente prótico. Las moléculas de tales solventes donan fácilmente protones (H+) a los reactivos. En formas de realización preferidas, el disolvente prótico es un disolvente prótico orgánico. Los disolventes próticos orgánicos adecuados incluyen, entre otros, n-butanol, n-propanol, isopropanol, nitrometano, etanol y metanol. En formas de realización particularmente preferidas, el disolvente prótico es etanol. En formas de realización preferidas, el material de partida biológico se extrae con disolvente prótico a una temperatura de aproximadamente -10 °C a aproximadamente 50 °C, preferiblemente de aproximadamente 10 °C a 30 °C. En formas de realización preferidas, la concentración del disolvente prótico es al menos del 90 %, 95 % o 98 % p/p de disolvente prótico (es decir, peso de disolvente prótico/peso total de la solución de disolvente diluida) o es aproximadamente 100 % pura. En algunas formas de realización, el disolvente prótico se usa en una proporción con respecto al material de partida biológico de aproximadamente 1:1 a 10:1, preferiblemente de aproximadamente 3:1 a 7:1 y más preferiblemente de aproximadamente 5:1. En algunas formas de realización preferidas, el prótico se añade disolvente de manera que la concentración de disolvente prótico cuando se combina con la humedad en dicho material biológico es de aproximadamente el 70 % a aproximadamente el 95 %. Este paso produce una solución de lípidos polares que está enriquecida con lípidos polares, especialmente fosfolípidos, y un residuo biológico que contiene lípidos neutros. La solución de lípidos polares y el residuo biológico se separan preferentemente, p. ej., mediante centrifugación o filtrado u otros métodos adecuados.

En algunas formas de realización, se agrega una solución acuosa a la solución de lípidos polares para diluir el disolvente prótico. En formas de realización preferidas, la dilución del disolvente prótico da como resultado la separación de la solución en una fase superior que comprende disolvente prótico diluido y una fase inferior rica en lípidos polares. En algunas formas de realización, la concentración del disolvente prótico se diluye hasta aproximadamente el 50 % > al 70 % > p/p (es decir, el peso del disolvente prótico/peso total de la solución de disolvente diluida), y preferiblemente hasta aproximadamente el 60 % > p/p. En algunas formas de realización, la fase inferior rica en lípidos polares se aísla para proporcionar un extracto rico en lípidos polares. El extracto rico en lípidos polares se puede lavar posteriormente o se pueden eliminar el disolvente residual y la humedad, p. ej., por evaporación.

En algunas formas de realización, el extracto rico en lípidos polares se lava con una solución de disolvente prótico, que preferiblemente comprende el mismo disolvente prótico utilizado para el paso de extracción inicial. El disolvente prótico se usa preferentemente a una concentración en la que los lípidos polares, especialmente los fosfolípidos, son poco solubles. En formas de realización preferidas, la(s) etapa(s) de lavado proporciona(n) una fase superior que comprende la solución de disolvente prótico y una fase inferior rica en lípidos polares que, cuando se aísla, proporciona un extracto rico en lípidos polares. En cada paso de lavado, el extracto rico en lípidos polares aislado del paso anterior se vuelve a mezclar con solución de disolvente prótico fresco y el extracto rico en lípidos polares se vuelve a aislar preferiblemente. En formas de realización preferidas, la solución de disolvente prótico utilizada en la etapa de lavado comprende de alrededor de 30 % a alrededor de 70 % p/p de disolvente prótico (es decir, peso de disolvente prótico/peso total de solución diluida de disolvente), preferiblemente de alrededor de 40 % al 60 % p/p de disolvente prótico, siendo el resto de la solución agua u otro diluyente adecuado para el disolvente prótico. En formas de realización preferidas, el paso de lavado utiliza una proporción de extracto de lípido polar a disolvente prótico diluido de aproximadamente 0,5: 1 a 5: 1. El paso de lavado puede repetirse varias veces, p. ej., al menos 2 veces, 3 veces, cuatro veces, cinco veces o hasta aproximadamente 10 veces y se repite preferiblemente de aproximadamente 2 a 5 veces. El proceso de lavado da como resultado un extracto lavado rico en lípidos polares.

En algunas formas de realización, se proporcionan concentrados de fosfolípidos incluso más purificados. Estos concentrados se pueden obtener sometiendo los extractos ricos en lípidos polares descritos en esta invención a precipitación como se conoce en la técnica. En algunas formas de realización, la etapa de precipitación se realiza con acetona pura a una temperatura de aproximadamente -20 °C a aproximadamente 20 °C, y más preferiblemente a una temperatura de aproximadamente 4 °C para proporcionar un precipitado rico en lípidos polares. En algunas formas de realización, el paso de precipitación se repite, p. ej., de 2 a 5 veces, y preferiblemente unas 3 veces, para proporcionar un precipitado polar rico en lípidos. Mediante esta tecnología, se puede eliminar prácticamente toda la fracción de los lípidos neutros restantes. En otras formas de realización, los fosfolípidos se pueden concentrar mediante cromatografía, p. ej., cromatografía sobre gel de sílice.

En algunas formas de realización, el disolvente residual y la humedad se eliminan preferiblemente del extracto rico en lípidos polares lavado o de los precipitados ricos en lípidos polares mediante evaporación a presión reducida para proporcionar una composición rica en lípidos polares sólida.

En algunas formas de realización, el extracto rico en lípido polar lavado se caracteriza preferiblemente por comprender al menos 50 %, 60 %, 70 %> o 75 % de fosfolípido p/p (es decir, peso de fosfolípidos/peso total del extracto lavado rico en lípidos polares). En algunas formas de realización, los extractos ricos en lípidos polares lavados comprenden de aproximadamente 30 % a 99 % p/p, 40 % a 60 % p/p o 50 % a 70 % p/p de fosfolípidos. En algunas formas de realización, el extracto rico en lípidos polares lavado se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 3 %, 2 %, 1 %, 0,5 % o 0,1 % p/p de lisofosfolípidos (es decir, peso de lisofosfolípidos/peso total del extracto rico en lípidos polares lavado). En algunas formas de realización, el extracto rico en lípido polar lavado se caracteriza por tener una conductividad de menos de 500 uS/cm, preferiblemente menos de 300 uS/cm, y lo más preferiblemente menos de 200 uS/cm (medida en una solución saturada de etanol al 60 %).

En algunas formas de realización, el precipitado polar rico en lípidos se caracteriza preferiblemente por comprender al menos 75 %, 80 %, 85 % u 80 % de fosfolípido p/p (es decir, peso de fosfolípidos/peso total del precipitado rico en lípidos polares). En algunas formas de realización, el extracto rico en lípidos polares lavado se caracteriza por comprender menos de aproximadamente 3 %, 2 %, 1 %, 0,5 % o 0,1 % p/p de lisofosfolípidos (es decir, peso de lisofosfolípidos/peso total de precipitado rico en lípidos polares).

Las composiciones de aceite de krill ricas en lípidos polares obtenidas del proceso se distinguen del aceite de krill natural. Si bien el contenido de lisofosfolípidos es preferiblemente bajo y la presente invención proporciona mejoras en el contenido de lisofosfolípidos en comparación con los aceites de krill disponibles, las composiciones en algunas formas de realización comprenden un límite inferior de lisofosfolípidos superior al 0,01 %, 0,05 %>, 0,1 % o 0,2 % p/p de fosfolípidos (es decir, peso de lisofosfolípidos/peso total de precipitado polar rico en lípidos). Con respecto al contenido de lisofosfolípidos, generalmente predominan los 2-lisofosfolípidos. El ácido graso libre indica que la presencia de ácidos grasos C-14, C-16 y C-18 y no EPA y DHA como se esperaría después de la hidrólisis en la posición SN-2. Se contempla que la vía de degradación sea la hidrólisis en la posición SN-1 seguida de la transesterificación in vitro que da como resultado 2-lisofosfolípidos. Las composiciones de aceite de krill ricas en lípidos polares obtenidas de los procesos de la presente invención también se oxidan hasta cierto punto, como lo demuestra la presencia de bajos niveles de fosfolípidos polimerizados que no se encuentran en la naturaleza, así como ciertos aldehídos.

Las composiciones de aceite de krill ricas en lípidos polares obtenidas a partir de los procesos de la presente invención también muestran un contenido alterado de astaxantina. La astaxantina se degrada como resultado de la oxidación y el calentamiento y, durante el procesamiento, la proporción de diésteres de astaxantina a monoésteres cambia debido a los lavados con solventes apróticos. La forma diéster predomina in vivo en el krill. Al medir la relación entre la absorción a 487 nm y 390 nm, se puede determinar el grado de este cambio en el contenido de astaxantina. En algunas formas de realización, la proporción de monéster de astaxantina:diéster de astaxantina es superior a aproximadamente 2:1, 3:1, 4:1, 5:1 o 10:1. En otras formas de realización, el rango de proporciones de monéster de astaxantina:diéster de astaxantina es preferiblemente de aproximadamente 2:1 a 100:1, 3:1 a 50:1, 4:1 a 20:1, 5:1 a 20:1 o 10:1 a 50:1. En algunas formas de realización, las composiciones polares ricas en lípidos comprenden menos de aproximadamente 50, 40, 30, 20, 10 o 5 mg/kg (ppm) de diésteres de astaxantina. El uso de solventes apróticos en los procesos de extracción y lavado descritos aquí también puede conducir a la producción de ésteres de ácidos grasos tales como ésteres etílicos de ácidos grasos, que no se encuentran in vivo en el krill. Es una ventaja de los procesos descritos en el presente documento que estos ésteres de ácidos grasos generalmente se eliminan a un nivel muy bajo mediante las etapas de lavado. En consecuencia, en algunas formas de realización, las composiciones de la presente invención comprenden menos de aproximadamente 1,0 %, 0,5 %. 0,1 %, 0,05 % o 0,01 % p/p de ésteres de ácidos grasos, preferentemente ésteres etílicos (es decir, peso de ésteres etílicos u otros/peso total de la composición rica en lípidos polares). En algunas formas de realización, las composiciones tienen un límite inferior de una cantidad traza de ésteres de ácidos grasos (preferiblemente ésteres etílicos) y en algunas formas de realización, comprenden más de aproximadamente 0,001 % o 0,005 % de ésteres de ácidos grasos tales como ésteres etílicos de ácidos grasos.

En algunas formas de realización, las composiciones ricas en lípidos polares se caracterizan preferiblemente por comprender al menos 70 %, 80 %, 85 %, 90 % o 95 % de fosfolípido p/p (es decir, peso de fosfolípidos/peso total de la composición sólida rica en lípidos polares). En algunas formas de realización, las composiciones ricas en lípidos polares sólidos se caracterizan por comprender menos de aproximadamente 3 %, 2 %, 1 %, 0,5 % o 0,1 % p/p de lisofosfolípidos (es decir, peso de lisofosfolípidos/peso total de composición rica en lípidos polares sólidos).

En algunas formas de realización, los extractos ricos en lípidos polares lavados, los precipitados ricos en lípidos polares y las composiciones ricas en lípidos polares sólidos se caracterizan además por comprender una mezcla de compuestos de fosfolípidos que tienen la siguiente estructura:

donde R1 y R2 se seleccionan del grupo que consiste en un resto de ácido graso y -H y R3 es H o se seleccionan de un resto de colina, etanolamina, inositol o serina, comprendiendo la mezcla de compuestos fosfolípidos más de aproximadamente 85 % o 90 % > fracciones de colina (es decir, % en moles>, moles de fracciones de colina/moles totales de compuestos de fosfolípidos) en la posición R3 y más del 30 % p/p de fracciones de ácidos grasos omega-3 (es decir, peso de fracciones de ácidos grasos omega-3 /peso de compuestos de fosfolípidos), donde más del 90 % p/p de los restos de ácidos grasos omega-3 (es decir, peso de restos de ácidos grasos omega-3/peso total de restos de ácidos grasos) están en la posición R2. En algunas formas de realización, las composiciones se caracterizan por comprender menos de aproximadamente 3 %, 2 %, 1 %, 0,5 % o 0,1 % p/p de lisofosfolípidos (es decir, peso de lisofosfolípidos/peso total de la composición rica en lípidos polares sólidos) y por tener una conductividad de menos de aproximadamente 300 pS/cm medida en una solución saturada de etanol al 60 %.

En algunas formas de realización, los restos de ácidos grasos omega-3 se seleccionan preferiblemente del grupo que consiste en ácido eicosapentaenoico, ácido docosahexaenoico y combinaciones de los mismos. En algunas formas de realización, el resto de ácido graso omega-3 se selecciona del grupo que consiste en ácido eicosatrienoico (ETE; 20:3 (n-3); ácido all-cis-11,14,17-eicosatrienoico); ácido eicosatetraenoico (ETA; 20:4 (n-3); ácido all-cis-8,11,14,17-eicosatetraenoico); ácido eicosapentaenoico (EPA; 20:5 (n-3); ácido all-cis-5, 8,11,14, 17-eicosapentaenoico); ácido heneicosapentaenoico (HP A; 21:5 (n-3); ácido all-cis-6,9,12,15,18-heneicosapentaenoico); ácido docosapentaenoico (DPA; 22:5 (n-3); ácido all-cis-7,10,13,16,19-docosapentaenoico; ácido docosahexaenoico (DHA; 22:6 (n-3); ácido all-cis-4,7,10,13,16,19-docosahexaenoico); ácido tetracosapentaenoico (24:5 (n-3); ácido all-cis-9,12,15,18,21-tetracosapentaenoico; y ácido tetracosahexaenoico (24:6 (n-3) ácido all-cis-6,9,12,15,18,21-tetracosahexaenoico). El resto de ácido graso se une a través de un enlace de éter o un enlace de éter de vinilo (para proporcionar un fosfolípido de éter, un lípido de alquilacilfosfolípido o un lípido de alquenilacilfosfolípido).

En algunas formas de realización, los extractos ricos en lípidos polares lavados comprenden al menos el 50 % p/p, el 60 % p/p, el 75 % p/p o el 90 % p/p de los compuestos de fosfolípidos, o desde aproximadamente el 30 % p/p al 99 %, del 40 % al 60 % o del 50 % al 70 % de los compuestos de fosfolípidos (es decir, peso de compuestos de fosfolípidos/peso total de la composición de fosfolípidos). En algunas formas de realización, los precipitados ricos en lípidos polares comprenden al menos el 75 % p/p, el 80 % p/p, el 85 % p/p o el 90 % p/p de los compuestos de fosfolípidos, o desde aproximadamente el 60 % al 99 % p/p, 70 % a 95 %, o 80 % a 95 % de los compuestos de fosfolípidos (es decir, peso de compuestos de fosfolípidos/peso total de precipitado polar rico en lípidos). En algunas formas de realización, las composiciones ricas en lípidos polares sólidos comprenden al menos 80 % p/p, 85 % p/p, 90 % o 95 % p/p de los compuestos de fosfolípidos, o de aproximadamente 60 % a 99 %, 80 % a 99 %, o 85 % a 99 % de los compuestos de fosfolípidos (es decir, peso de compuestos de fosfolípidos/peso total de la composición rica en lípidos polares sólidos).

En algunas formas de realización, los restos omega-3 en dicha mezcla de mezcla de compuestos de fosfolípidos son ácido eicosapentaenoico y dicho ácido docosahexaenoico y en donde dicho ácido eicosapentaenoico y dicho ácido docosahexaenoico están presentes en una proporción de ácido eicosapentaenoico:ácido docosahexaenoico de aproximadamente 1:1 a aproximadamente 3:1. En algunas formas de realización, la composición se deriva parcial o totalmente del krill.

El contenido de ácidos grasos de los extractos, precipitados y composiciones es de aproximadamente 1 % a aproximadamente 99 % de restos de ácidos grasos omega-3 en peso/peso (p/p; calculado como el peso de ácidos grasos omega-3). fracciones de ácidos grasos en la fracción de fosfolípidos dividida por el peso total de ácidos grasos en la fracción de fosfolípidos) o en base a la relación molar (moles de fracciones de ácidos grasos omega-3 en la composición expresados como porcentaje de los moles de ácidos grasos totales), 10 % a 40 % de fracciones de ácidos grasos omega-3 p/p o proporción molar, 20 % a 40 % de fracciones de ácidos grasos omega-3 p/p o proporción molar, 20 % a 50 % de fracciones de ácidos grasos omega-3 p/p o proporción molar, 40 % a 60 % fracciones de ácidos grasos omega-3 p/p o proporción molar, 40 % a 99 % fracciones de ácidos grasos omega-3 p/p o proporción molar, 60 % a 99 % fracciones de ácidos grasos omega-3 p/ w o relación molar, o 80 % a 99 % de ácido graso omega-3 p/w o relación molar. El % p/p puede determinarse preferiblemente mediante un método analítico seleccionado del grupo que consiste en cromatografía de gases (GC), cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), espectrometría de masas GC (GC-MS), resonancia magnética nuclear (RMN) u otros métodos adecuados como se conoce en la técnica. En algunas formas de realización preferidas, los restos de ácidos grasos omega-3 se seleccionan preferiblemente de DHA, EPA y combinaciones de los mismos. En algunas formas de realización, más del 90 % p/p de las fracciones de ácidos grasos omega-3, preferentemente más del 95 % p/p de las fracciones de ácidos grasos omega-3, y lo más preferentemente más de aproximadamente el 98 % p/p de los restos de ácidos grasos omega-3 se distribuyen en la posición R2. En algunas formas de realización preferidas, los restos de ácidos grasos omega-3 son más del 50 %>, 60 %>, 70 %>, 80 %>, 90 %> o 95 % p/p de EPA y/o DHA (es decir, peso de EPA y/o DHA peso total de fracciones de ácidos grasos omega-3). En algunas formas de realización, la proporción de EPA a DPA es de aproximadamente 10:1 a 1:10, 3:1 a 1:3, 5:1 a 1:1, 3:1 a 1:1, 2:1 a 1:1, 1:1 a 1:3, o 1:1 a 1:5 en base molar. En algunas formas de realización, los extractos y las composiciones comprenden más del 40 %, 50 %, 60 %, 70 %, 80 %, 90 % o 95 % de compuestos de fosfolípidos p/p (es decir, peso de compuestos de fosfolípidos/peso total de la composición de fosfolípidos).

En algunas formas de realización, el residuo biológico del paso de extracción inicial se extrae para proporcionar un extracto lipídico neutro. Este paso de extracción usa preferiblemente un disolvente prótico, más preferiblemente el mismo disolvente prótico usado en el paso de extracción inicial. En formas de realización preferidas, el residuo biológico se extrae con disolvente prótico a una temperatura de aproximadamente 15 °C a aproximadamente 40 °C, preferiblemente de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 30 °C. En formas de realización preferidas, la concentración del disolvente prótico es al menos del 90 %, 95 % o 98 % peso/peso de disolvente prótico (es decir, volumen de disolvente prótico/volumen total de disolvente diluido) o es aproximadamente 100 % puro. En algunas formas de realización, el disolvente prótico se usa en una proporción con respecto al material de partida biológico de aproximadamente 1:1 a 10:1, preferiblemente de aproximadamente 3:1 a 7:1 y más preferiblemente de aproximadamente 5:1. Este paso produce un extracto de lípido neutro. que está enriquecido en lípidos neutros y sustancias lipófilas como la astaxantina y la vitamina E, si están presentes en el material de partida biológico.

En algunas formas de realización, el extracto de lípido neutro preferiblemente comprende una mezcla de triacilgliceroles, diacilgliceroles y ácidos grasos libres. En un concentrado de fosfolípidos que comprende alrededor del 60 % en peso de fosfolípidos (es decir, peso de fosfolípidos/peso total del concentrado), la fase neutra comprende preferentemente alrededor del 70-80 % de triacilgliceroles p/p (es decir, peso de triacilgliceroles/peso total de concentrado), aproximadamente 10-15 % de ácidos grasos libres p/p (es decir, peso de ácidos grasos libres/peso total de concentrado), aproximadamente 2-5 %> diacilgliceroles p/p (es decir, peso de diacilgliceroles/peso total de concentrado) y aproximadamente 1-2 % p/p de constituyentes minoritarios (es decir, peso de constituyentes minoritarios/peso total de concentrado) tales como colesterol y astaxantina. En un concentrado de fosfolípidos que comprende por encima de un 80-90 % p/p de fosfolípidos (es decir, peso de fosfolípidos/peso total de concentrado) obtenidos de la extracción de un coágulo de krill, la fase neutra comprende preferiblemente aproximadamente 70-80 % p/p de diacilgliceroles (es decir, peso de diacilgliceroles/peso total de concentrado), aproximadamente 10-25 % p/p de triacilgliceroles (es decir, peso de triacilgliceroles/peso total de concentrado) y aproximadamente 3-6 % p/p de ácidos grasos libres (es decir, peso de ácidos grasos libres/peso total de concentrado).

Los extractos ricos en lípidos polares lavados, los precipitados ricos en lípidos polares, las composiciones ricas en lípidos polares sólidos y los extractos de lípidos neutros se pueden usar tal cual o combinados para proporcionar una composición lipídica combinada con un contenido neutro y de lípido polar deseado. En formas de realización preferidas, la composición lipídica combinada tiene un contenido definido de fosfolípidos y triglicéridos. En algunas formas de realización preferidas, las composiciones de lípidos combinados tienen un contenido de fosfolípidos de aproximadamente 30 % a 60 % p/p, 35 % a 50 % p/p o 36 % a 44 % p/p (es decir, peso de fosfolípidos/peso total de la composición de lípidos combinados), y un contenido de triglicéridos de aproximadamente 40 % a 70 % p/p, 50 % a 65 % p/p o 56 % a 64 % p/p (es decir, peso total de triglicéridos/peso total de la composición lipídica mezclada). En algunas formas de realización, las composiciones de lípidos combinados comprenden astaxantina, preferiblemente astaxantina natural proporcionada a partir del extracto de lípidos neutros. En algunas formas de realización, las composiciones lipídicas proporcionan al menos un segundo antioxidante como la vitamina E. En algunas formas de realización, la composición lipídica puede complementarse con un derivado de ácido graso omega-3 adicional, como ésteres etílicos de EPA o DHA, preferiblemente EPA y/o o concentrados de éster etílico de DHA, o triglicéridos o diglicéridos que comprenden residuos de EPA y DHA. En estas formas de realización, los derivados de ácidos grasos omega-3 adicionales se agregan para proporcionar un contenido deseado de ácidos grasos omega-3 en la composición lipídica.

Se utilizan biomasas de animales marinos como material de partida. Las biomasas de animales marinos adecuadas incluyen, pero no se limitan a krill, cangrejos, Calanus, plancton, huevos, cangrejos de río, camarones, peces, especialmente arenques y algas marinas. El material de partida biológico puede ser fresco o congelado, o puede ser un material producido a partir de una biomasa de algas, plantas o animales marinos, como harina, polvo, hidrolizado o coagulado (pasta). La pasta puede ser una pasta húmeda o una pasta seca. En algunas formas de realización preferidas, el material de partida biológico es un material de krill, p. ej., un coágulo de krill, harina de krill, hidrolizado de krill o krill fresco o congelado. Se puede utilizar cualquier especie de krill. En formas de realización preferidas, el krill es Euphausia superba o Euphausia pacifica.

En algunas formas de realización particularmente preferidas, el material de partida biológico es una pasta o coágulo de krill y puede estar húmedo o seco. Las pastas de krill adecuadas se describen, p. ej., en el documento WO 09/027692. En algunas formas de realización, la biomasa (preferiblemente krill, recién cosechada o congelada) se calienta a una temperatura en el rango de 25 a 80°C, preferiblemente de 40 a 75°C, y más preferiblemente de 60 a 75°C para disolver/dispersar los lípidos y las proteínas del krill a la fase acuosa. En algunas formas de realización, las proteínas y los fosfolípidos se precipitan de la fase acuosa calentando el agua (después de retirar el krill) a una temperatura superior a aproximadamente 80 °C, preferiblemente de 80 a 120 °C, más preferiblemente de 95 a 100 °C. La fase de agua se puede calentar a presión atmosférica, o la fase de agua se puede calentar en un sistema cerrado a una presión elevada para que la temperatura se pueda aumentar por encima de 100 °C. El precipitado formado (en lo sucesivo denominado coágulo) se puede aislar y caracterizar. En otras formas de realización, la fase acuosa se microfiltra. La fase sólida producida por microfiltración (llamada retenido) es similar a la del coágulo. Los datos divulgados muestran que gran parte de los fosfolípidos del krill se transfieren del krill al coágulo o retenido.

Las composiciones de pasta de krill se caracterizan por ser una mezcla de proteínas y lípidos. En formas de realización preferidas, las composiciones comprenden de alrededor del 10 % a alrededor del 30 %> de fosfolípidos en base seca p/p, y alrededor del 20 %> al 50 %> de proteína en base seca p/p, donde los fosfolípidos comprenden residuos de ácidos grasos omega-3. En algunas formas de realización, las composiciones comprenden una fracción lipídica que tiene un contenido de ácidos grasos omega-3 de aproximadamente el 10 % a aproximadamente el 25 % en peso seco p/p. En algunas formas de realización, los fosfolípidos comprenden más de aproximadamente el 90 % de fosfatidilcolina sobre una base seca p/p. En algunas formas de realización, los fosfolípidos comprenden menos de aproximadamente el 10 % de etanolamina sobre una base seca p/p. En algunas formas de realización, las composiciones de pasta comprenden de aproximadamente 20 % a aproximadamente 45 % de triacilglicerol sobre una base seca p/p. En algunas formas de realización, las composiciones comprenden menos de aproximadamente 1 % p/p de colesterol (es decir, peso de colesterol/peso total de pasta de krill). En algunas formas de realización, las composiciones comprenden de aproximadamente 0,01 a aproximadamente 200 mg/kg de astaxantina natural. Se reconocerá que el contenido de astaxantina de la composición se puede aumentar añadiendo astaxantina de otras fuentes (exógenas), tanto naturales como no naturales. Asimismo, las composiciones pueden complementarse con triglicéridos, fosfolípidos y ácidos grasos exógenos tales como ácidos grasos omega-3 durante el procesamiento. En algunas formas de realización preferidas, la pasta de krill es una pasta de krill húmeda, que comprende agua en una concentración de aproximadamente 50 %> a 80 %>, 60 %> a 70 %> o aproximadamente 65 %> p/p (es decir, peso de agua /peso total o pasta de krill).

En algunas formas de realización, los compuestos o composiciones descritos anteriormente se administran a un sujeto que los necesita para tratar una enfermedad o afección asociada con los glóbulos rojos y las membranas celulares y, en particular, una enfermedad o afección asociada con una anomalía en los glóbulos rojos o las membranas celulares. membranas En algunas formas de realización, la condición o enfermedad es enfermedad de células falciformes, anemia de células falciformes o rasgo de células falciformes. En algunas formas de realización, la afección o enfermedad es talasemia (alfa, beta o delta), talasemia en combinación con una hemoglobinopatía (hemoglobina E, hemoglobina S o hemoglobina C), esplenomegalia o anomalías de la membrana tales como acantocitos o espolones/ células de espiga, codocitos (células diana), equinocitos (células de rebaba), eliptocitos y ovalocitos, esferocitos, estomatocitos (células de la boca) y degmocitos ("células de mordida").

En algunas formas de realización, se administra una cantidad efectiva de los compuestos o composiciones descritos anteriormente a un sujeto que los necesita para tratar o prevenir un trastorno cardiovascular o síndrome metabólico. En algunas formas de realización, el trastorno cardiovascular se selecciona de aterosclerosis, arteriosclerosis, enfermedad del corazón coronario (arteria carótida) (CHD o CAD), síndrome coronario agudo (o SCA), enfermedad cardíaca valvular, trastornos de las válvulas aórtica y mitral, arritmia/fibrilación auricular, cardiomiopatía e insuficiencia cardíaca, angina de pecho, infarto agudo de miocardio (o IAM), hipertensión, hipotensión ortostática, shock, embolia (pulmonar y venosa), endocarditis, enfermedades de las arterias, la aorta y sus ramas, trastornos del sistema vascular periférico (periférico enfermedad arterial o EAP), enfermedad de Kawasaki, cardiopatía congénita (defectos cardiovasculares) y accidente cerebrovascular (enfermedad cerebrovascular), dislipidemia, hipertrigliceridemia, hipertensión, insuficiencia cardíaca, arritmias cardíacas, niveles bajos de HDL, niveles altos de LDL, angina estable, enfermedad coronaria, infarto agudo de miocardio, prevención secundaria de infarto de miocardio, miocardiopatía, endocarditis, diabetes tipo 2, resistencia a la insulina, alteración de la tolerancia a la glucosa, hipercolesterolemia, accidente cerebrovascular, hiperlipidemia, hiperlipoproteinemia, enfermedad renal crónica, claudicación intermitente, hiperfosfatemia, deficiencia de omega-3, deficiencia de fosfolípidos, aterosclerosis carotídea, enfermedad arterial periférica, nefropatía diabética, hipercolesterolemia en la infección por VIH, síndrome coronario agudo (SCA), enfermedad del hígado graso no alcohólico/esteatohepatitis no alcohólica (NAFLD/NASH), enfermedades arteriales oclusivas, aterosclerosis cerebral, arteriosclerosis, trastornos cerebrovasculares, isquemia miocárdica, coagulopatías que conducen a la formación de trombos en un vaso y neuropatía autonómica diabética.

En algunas formas de realización, se administra una cantidad eficaz de los compuestos o composiciones descritos anteriormente a un sujeto que los necesita para tratar, prevenir o mejorar la cognición y/o una enfermedad, trastorno o deterioro cognitivo (memoria, concentración, aprendizaje (déficit)), o para tratar o prevenir trastornos neurodegenerativos. En algunas formas de realización, la enfermedad, trastorno o deterioro cognitivo se selecciona de Trastorno por Déficit de Atención (ADD), Trastorno por Déficit de Atención con Hiperactividad (TDAH), autismo/trastorno del espectro autista (TEA), (dislexia, deterioro de la memoria asociado con la edad y trastornos del aprendizaje, amnesia, deterioro cognitivo leve, deterioro cognitivo no demente, pre-enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Alzheimer, epilepsia, enfermedad de Pick, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Lou Gehrig, síndrome de predemencia, demencia con cuerpos de Lewy, demencia, atrofia dentatorrubropalidoluisiana, ataxia de Freidreich, atrofia multisistémica, tipos 1, 2, 3, 6, 7 ataxia espinocerebelosa, esclerosis lateral amiotrófica, paraparesia espástica familiar, atrofia muscular espinal, atrofia muscular espinal y bulbar, deterioro cognitivo relacionado con la edad, deterioro cognitivo, deterioro mental moderado, deterioro mental como resultado del envejecimiento, condiciones que influyen en la intensidad de las ondas cerebrales y/o la utilización de glucosa cerebral, estrés, ansiedad, deterioro de la concentración y la atención, deterioro del estado de ánimo, bienestar mental y cognitivo general, neurodesarrollo, trastornos neurodegenerativos, trastornos hormonales, desequilibrio neurológico o cualquier combinación de los mismos. En una forma de realización específica, el trastorno cognitivo es un deterioro de la memoria.

En algunas formas de realización, se administra una cantidad eficaz de los compuestos o composiciones descritos anteriormente a un sujeto que los necesita para inhibir, prevenir o tratar la inflamación o una enfermedad inflamatoria. En algunas formas de realización, la inflamación o enfermedad inflamatoria se selecciona del rechazo del trasplante de órganos; lesión por reoxigenación resultante del trasplante de órganos (véase Grupp et al., J. Mol. Cell. Cardiol. 31: 297-303 (1999)) que incluye, entre otros, el trasplante de los siguientes órganos: corazón, pulmón, hígado y riñón; enfermedades inflamatorias crónicas de las articulaciones, incluyendo artritis, artritis reumatoide, osteoartritis y enfermedades óseas asociadas con una mayor reabsorción ósea; enfermedades inflamatorias del intestino (EII) tales como ileítis, colitis ulcerosa (CU), síndrome de Barrett y enfermedad de Crohn (EC); enfermedades pulmonares inflamatorias tales como asma, síndrome de dificultad respiratoria aguda (SDRA) y enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC); enfermedades inflamatorias del ojo que incluyen distrofia corneal, tracoma, oncocercosis, uveítis, oftalmitis simpática y endoftalmitis; enfermedades inflamatorias crónicas de las encías, incluyendo gingivitis y periodontitis; enfermedades inflamatorias del riñón que incluyen complicaciones urémicas, glomerulonefritis y nefrosis; enfermedades inflamatorias de la piel que incluyen esclerodermatitis, psoriasis y eczema; enfermedades inflamatorias del sistema nervioso central, incluyendo enfermedades desmielinizantes crónicas del sistema nervioso, esclerosis múltiple, neurodegeneración relacionada con el SIDA y enfermedad de Alzheimer, meningitis infecciosa, encefalomielitis, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, epilepsia, esclerosis lateral amiotrófica y encefalitis viral o autoinmune, preeclampsia; insuficiencia hepática crónica, trauma cerebral y de la médula espinal y cáncer. La enfermedad inflamatoria también puede ser inflamación sistémica del cuerpo, ejemplificada por shock grampositivo o gramnegativo, choque hemorrágico o anafiláctico, o choque inducido por quimioterapia contra el cáncer en respuesta a citoquinas proinflamatorias, p. ej., choque asociado con citoquinas proinflamatorias. Tal choque puede ser inducido, p. ej., por un agente quimioterapéutico que se administra como tratamiento para el cáncer. Otros trastornos incluyen depresión, obesidad, enfermedades alérgicas, eventos cardiovasculares agudos, enfermedades de desgaste muscular y caquexia por cáncer. También la inflamación que resulta de la cirugía y el trauma se puede tratar con las composiciones de fosfolípidos terapéuticos concentrados.

En algunas formas de realización, la cantidad efectiva comprende de alrededor de 0,1 a alrededor de 5 gramos de la composición de fosfolípidos lavados o composición de lípidos combinados, preferiblemente de alrededor de 0,2 a alrededor de 3 gramos de la composición de fosfolípidos lavados o composición de lípidos combinados, y lo más preferiblemente de alrededor de 0,5 a alrededor de 1,5 gramos de la composición de fosfolípidos lavados o de la composición de lípidos combinados.

Las composiciones de extracto de fosfolípidos lavados o las composiciones de lípidos combinados (es decir, las composiciones de lípidos) de la presente invención pueden usarse para tratar una variedad de sujetos. Los sujetos adecuados incluyen seres humanos, así como animales domésticos, primates no humanos y animales de compañía tales como perros, gatos y pájaros.

Las composiciones lipídicas de la presente invención se administran preferentemente por vía intravenosa u oral. Por consiguiente, en algunas formas de realización, las composiciones de esta invención (como las descritas en las secciones anteriores) están contenidas en excipientes y/o vehículos aceptables para consumo oral o para administración intravenosa. La forma real del vehículo y, por lo tanto, la composición en sí misma, no es crítica. El vehículo puede ser un líquido, gel, gelcap, cápsula, polvo, tableta sólida (recubierta o no recubierta), té o similar. La composición está preferiblemente en forma de tableta o cápsula y lo más preferiblemente en forma de cápsula de gelatina blanda. Los excipientes y/o vehículos adecuados incluyen aceite vegetal, aceite de pescado, aceite de krill, maltodextrina, carbonato de calcio, fosfato dicálcico, fosfato tricálcico, celulosa microcristalina, dextrosa, harina de arroz, estearato de magnesio, ácido esteárico, croscarmelosa sódica, glicolato de almidón sódico, crospovidona, sacarosa, gomas vegetales, lactosa, metilcelulosa, povidona, carboximetilcelulosa, almidón de maíz y similares (incluidas sus mezclas). Los vehículos preferidos incluyen carbonato de calcio, estearato de magnesio, maltodextrina y mezclas de los mismos. Los diversos ingredientes y el excipiente y/o vehículo se mezclan y se les da la forma deseada usando técnicas convencionales. La tableta o cápsula de la presente invención se puede recubrir con un recubrimiento entérico que se disuelve a un pH de aproximadamente 6,0 a 7,0. Un recubrimiento entérico adecuado que se disuelve en el intestino delgado pero no en el estómago es el ftalato de acetato de celulosa. Se pueden encontrar más detalles sobre las técnicas de formulación y administración en la última edición de Remington's Pharmaceutical Sciences (Maack Publishing Co., Easton, PA). Para la administración intravenosa u oral, los compuestos omega-3 y las composiciones de la presente invención se pueden proporcionar preferiblemente como emulsiones.

En algunas formas de realización, las composiciones lipídicas se formulan para administración oral con agentes saborizantes o edulcorantes. Los ejemplos de aromatizantes útiles incluyen, entre otros, extracto de anís puro, extracto de plátano de imitación, extracto de cereza de imitación, extracto de chocolate, extracto de limón puro, extracto de naranja puro, extracto de menta pura, extracto de piña de imitación, extracto de ron de imitación, extracto de fresa de imitación., o extracto puro de vainilla; o aceites volátiles, tales como aceite de bálsamo, aceite de laurel, aceite de bergamota, aceite de cedro, aceite de nuez, aceite de cereza, aceite de canela, aceite de clavo o aceite de menta; mantequilla de maní, saborizante de chocolate, miga de galleta de vainilla, caramelo o caramelo. En una forma de realización, el suplemento dietético contiene cacao o chocolate. Se pueden agregar emulsionantes para la estabilidad del producto final. Los ejemplos de emulsionantes adecuados incluyen, entre otros, lecitina (p. ej., de huevo o soja) y/o monoglicéridos y diglicéridos. Otros emulsionantes son fácilmente evidentes para el experto en la materia y la selección del (de los) emulsionante(s) adecuado(s) dependerá, en parte, de la formulación y el producto final. Además de los carbohidratos descritos anteriormente, el suplemento nutricional puede contener edulcorantes naturales o artificiales (preferiblemente bajos en calorías), p. ej., sacáridos, ciclamatos, aspartamina, aspartamo, acesulfamo K y/o sorbitol.

Las composiciones de lípidos de la presente invención también pueden administrarse como suplementos dietéticos, suplementos nutricionales o alimentos funcionales.

El suplemento dietético puede comprender uno o más ingredientes inertes, especialmente si se desea limitar el número de calorías añadidas a la dieta por el suplemento dietético. p. ej., el suplemento dietético de la presente invención también puede contener ingredientes opcionales que incluyen, p. ej., hierbas, vitaminas, minerales, potenciadores, colorantes, edulcorantes, saborizantes, ingredientes inertes y similares. p. ej., el suplemento dietético de la presente invención puede contener uno o más de los siguientes: asorbatos (ácido ascórbico, sales minerales de ascorbato, escaramujo, acerola y similares), dehidroepiandosterona (DHEA), té verde (polifenoles), inositol, algas marinas, dulse, bioflavonoides, maltodextrina, ortigas, niacina, niacinamida, romero, selenio, sílice (dióxido de silicio, gel de sílice, cola de caballo, hierba de afeitar y similares), espirulina, zinc y similares. Dichos ingredientes opcionales pueden ser formas naturales o concentradas.

En algunas formas de realización, los suplementos dietéticos comprenden además vitaminas y minerales que incluyen, entre otros, fosfato o acetato de calcio, tribásicos; fosfato de potasio, dibásico; sulfato u óxido de magnesio; sal (cloruro de sodio); cloruro o acetato de potasio; ácido ascórbico; ortofosfato férrico; niacinamida; sulfato u óxido de zinc; pantotenato de calcio; gluconato de cobre; riboflavina; betacaroteno; clorhidrato de piridoxina; mononitrato de tiamina; ácido fólico; biotina; cloruro de cromo o picolonato; yoduro de potasio; selenato de sodio; molibdato de sodio; filoquinona; vitamina D³; cianocobalamina; selenito de sodio; sulfato de cobre; vitamina A; vitamina C; inositol; yoduro de potasio. Se pueden obtener dosis adecuadas de vitaminas y minerales, p. ej., consultando las directrices de la RDA de e E. UU.

En otras formas de realización, la presente invención proporciona complementos nutricionales (p. ej., barritas energéticas o barritas sustitutivas de comidas o bebidas) que comprenden las composiciones lipídicas de la presente invención. En formas de realización preferidas, los complementos nutricionales comprenden una cantidad eficaz de los componentes descritos anteriormente. El suplemento nutricional puede servir como sustituto de una comida o un refrigerio y, en general, proporciona calorías de nutrientes. Preferentemente, los suplementos nutricionales aportan carbohidratos, proteínas y grasas en cantidades equilibradas. El complemento nutricional puede comprender además hidratos de carbono, polisacáridos simples, de cadena media o polisacáridos, o una combinación de los mismos. Se puede elegir un azúcar simple por sus propiedades organolépticas deseables. La maicena cruda es un ejemplo de carbohidrato complejo. Si se desea que mantenga su estructura de alto peso molecular, debe incluirse solo en formulaciones de alimentos o partes de los mismos que no se cocinen ni se procesen con calor, ya que el calor descompondrá el carbohidrato complejo en carbohidratos simples, en los que los carbohidratos simples son mono- o disacáridos. El suplemento nutricional contiene, en una forma de realización, combinaciones de fuentes de carbohidratos de tres niveles de longitud de cadena (simple, medio y complejo; p. ej., sacarosa, maltodextrinas y almidón de maíz crudo).

En aún otras formas de realización, la presente invención proporciona productos alimenticios, productos alimenticios preparados o productos alimenticios (es decir, alimentos funcionales) que comprenden las composiciones lipídicas de la presente invención. En formas de realización preferidas, los alimentos comprenden una cantidad eficaz de los componentes descritos anteriormente. p. ej., en algunas formas de realización, se proporcionan bebidas y alimentos sólidos o semisólidos que comprenden los ácidos grasos o derivados de los mismos. Estas formas pueden incluir, entre otras, bebidas (p. ej., refrescos, leche y otras bebidas lácteas y bebidas dietéticas), productos horneados, pudines, productos lácteos, dulces, refrigerios o dulces congelados o novedades (p. ej., helados, batidos de leche), comidas congeladas preparadas, dulces, bocadillos (p. ej., papas fritas), sopas, pastas para untar, salsas, aderezos para ensaladas, productos cárnicos preparados, queso, yogur y cualquier otro alimento que contenga grasa o aceite e ingredientes alimentarios (ej., harina de trigo).

Las composiciones lipídicas se incorporan en matrices masticables. Matrices masticables incluyen caramelos de gelatina y caramelos de goma a base de gelatina. Caramelos de goma a modo de ejemplo incluyen ositos de goma, gusanos de goma, ranas de goma, hamburguesas de goma, cerezas de goma, botellas de refresco de goma, tiburones de goma, soldados de goma, hipopótamos de goma, langostas de goma, sandías de goma, pulpos de goma, manzanas de goma, melocotones y naranjas de goma. Los términos "gummi" y "gomoso" se usan indistintamente en este documento.

En algunas formas de realización particularmente preferidas, el material de la matriz masticable es un material edulcorado comúnmente denominado caramelo gomoso o material de gelatina. Los dulces gomosos o dulces de gelatina son un tipo general amplio de dulces masticables a base de gelatina. Los ositos de goma son los caramelos de goma más populares y conocidos. También se proporcionan otras formas y los dulces gomosos a veces se combinan con otras formas de dulces, como malvaviscos y chocolates, y también se hacen amargos.

En formas de realización preferidas, el material de matriz masticable comprende un agente gelificante, que puede ser cualquier agente gelificante fisiológicamente tolerable (preferiblemente un sacárido (p. ej., un oligosacárido o polisacárido), una proteína o una glicoproteína) o una combinación capaz de formar un gel suave, masticable y autosuficiente. Muchos de estos materiales se conocen de la industria alimentaria y farmacéutica y se analizan, p. ej., en Handbook of hydrocolloids, G O Phillips y P A Williams (Eds.), Woodhead Publishing, Cambridge, Reino Unido, 2000. Los agentes gelificantes son preferiblemente materiales capaces de experimentar una transformación sol-gel, p. ej., bajo la influencia de un cambio en parámetros fisicoquímicos tales como temperatura, pH, presencia de iones metálicos (p. ej., iones metálicos del grupo 1 o 2), etc. Los agentes gelificantes preferidos incluyen gelatinas, alginatos y carragenanos. Sin embargo, se prefiere especialmente el uso de gelatinas ya que se asegura la ruptura en la garganta de los fragmentos atrapados y como núcleos que tienen las propiedades deseadas se pueden producir fácilmente usando gelatinas.

Las gelatinas utilizadas como gelificantes en la matriz masticable de la invención pueden ser producidas a partir del colágeno de cualquier mamífero o del colágeno de cualquier especie acuática, sin embargo, se prefiere el uso de gelatina de peces de agua salada y en particular de peces de agua fría y caliente. Se prefieren gelatinas que tienen un contenido de aminoácidos de 5 a 25 % en peso, más especialmente aquellos que tienen un contenido de aminoácidos de 10 a 25 % en peso. Las gelatinas tendrán típicamente un peso molecular promedio en peso en el rango de 10 a 250 kDa, preferiblemente de 75 a 220 kDa, especialmente de 80 a 200 kDa. Se prefieren las gelatinas que no tienen valor Bloom o valores Bloom bajos de 60-300, 150-300 y especialmente 90-200. Cuando se utiliza una gelatina sin valor Bloom, p. ej., una gelatina de pescado de agua fría, normalmente se utilizará junto con otra gelatina u otro agente gelificante. Se prefiere especialmente la combinación de gelatinas de pescado de agua fría y de agua caliente. La gelatina estará típicamente presente en la fase acuosa a una concentración de 1 a 50 % en peso, preferiblemente de 2 a 35 % en peso, particularmente de 5 a 25 % en peso. En el caso de mezclas de gelatina y polisacáridos, la relación en peso de gelatina a polisacárido en la fase acuosa será típicamente de 50:1 a 5:1, preferiblemente de 40:1 a 9:1, especialmente de 20:1 a 10:1.

Cuando se usan polisacáridos o mezclas de polisacáridos y gelatina como agente gelificante, se prefiere usar polisacáridos naturales, polisacáridos sintéticos o polisacáridos semisintéticos, p. ej., polisacáridos de plantas, peces, mamíferos terrestres, algas, bacterias y derivados y productos de fragmentación de los mismos. Los polisacáridos marinos típicos incluyen carragenanos, alginatos, agares y quitosanos.

Los polisacáridos vegetales típicos incluyen pectinas. Los polisacáridos de microorganismo típico incluyen gelanos y escleroglucanos. Se prefiere el uso de polisacáridos cargados, p. ej., cargados electrostáticamente y/o sulfatados, al igual que el uso de polisacáridos, en particular carragenanos y alginatos, en particular carragenanos. La familia de los carragenanos, que incluye los carragenanos iota y kappa, es una familia de polisacáridos sulfatados lineales producidos a partir de algas rojas. La unidad de disacárido que se repite en la kappa-carragenina es p-D-galactosa-4-sulfato y 3,6-anhidro-a-D-galactosa, mientras que en la iota-carragenina es p-D-galactosa-4-sulfato y 3,6-anhidro-a-D-galactosa-2-sulfato. Tanto los carragenanos kappa como los iota se utilizan en preparaciones alimenticias. Los carragenanos se utilizan como estabilizadores, emulsionantes, gelificantes y sustitutos de grasas.

Tanto los carragenanos iota como los kappa forman geles reversibles de fraguado en frío o en sal en un ambiente acuoso. La transición bobina-hélice y la agregación de hélices forman la red de gel. La kappa-carragenina tiene sitios de unión para cationes monovalentes específicos, lo que da como resultado la formación de gel con módulos elásticos y de cizallamiento decrecientes en el orden Cs+>K+>>Na+>Li+. Como regla general, una concentración creciente de sal mejora el módulo elástico y las temperaturas de fraguado y fusión de un gel de kappa-carragenano. Se prefiere el uso de compuestos de potasio, rubidio o cesio solubles en agua, en particular compuestos de potasio y, en particular, compuestos de origen natural (p. ej., sales) cuando se usa kappa-carragenina de acuerdo con la invención, p. ej., en concentraciones de hasta 100 μM, más especialmente hasta 50 mM. También se encuentra una transición conformacional dependiente de la sal para la iota-carragenina. También se sabe que las moléculas experimentan una transición espiral-hélice con una fuerte estabilización de hélice en presencia de cationes multivalentes, como Ca2+. Se prefiere el uso de compuestos de calcio, estroncio, bario, hierro o aluminio solubles en agua, especialmente compuestos de calcio y, en particular, compuestos de origen natural (p. ej., sales) cuando se usa iota-carragenina de acuerdo con la invención, p. ej., en concentraciones de hasta 100 mM.

Los agentes gelificantes de polisacáridos usados según la invención tendrán típicamente pesos moleculares promedio de 5 kDa a 2 MDa, preferiblemente de 10 kDa a 1 MDa, lo más preferiblemente de 100 kDa a 900 kDa, particularmente de 200 a 800 kDa. Se utilizarán típicamente en concentraciones de 0,01 a 5 % en peso, preferiblemente de 0,1 a 1,5 % en peso, particularmente de 0,2 a 1 % en peso en la fase acuosa. Cuando se incluyen en la fase acuosa cationes monovalentes o multivalentes, típicamente iones metálicos del grupo 1 o del grupo 2, esto será típicamente en concentraciones en el rango de 2,5 a 100 mM, particularmente de 5 a 50 mM.

Además del agente gelificante y el agua y cualquier iniciador de gelificación requerido, la matriz masticable puede contener otros materiales fisiológicamente tolerables, p. ej., emulsionantes, estabilizadores de emulsión, modificadores de pH, modificadores de viscosidad, edulcorantes, rellenos, vitaminas (p. ej., vitamina C, tiamina, riboflavina, niacina, vitamina B6, vitamina B12, folacina, ácido pantoténico), minerales, aromas, sabores, agentes de preparación, colorantes, agentes fisiológicamente activos, etc., como se describió anteriormente en detalle en relación con los materiales de adición que se pueden incluir en los ácidos grasos oxidables. composición ácida.

La matriz masticable tiene preferiblemente una temperatura de gelificación en el rango de 10 a 30 °C, más preferiblemente de 15 a 28 °C, y una temperatura de fusión en el rango de 20 a 80 °C, más preferiblemente de 24 a 60 °C, especialmente de 28 a 50 °C.

Cuando se incluye un edulcorante en la matriz masticable, normalmente se seleccionará entre edulcorantes naturales como sacarosa, fructosa, glucosa, glucosa reducida, maltosa, xilitol, maltitol, sorbitol, manitol, lactitol, isomalta, eritritol, poliglicitol, poliglucitol, glicerol, stevia, néctar de agave, jarabe de invertí y edulcorantes artificiales como aspartamo, acesulfamo-K, neotamo, sacarina, sucralosa. Se prefiere el uso de edulcorantes no cariogénicos y se prefiere especialmente el uso de xilitol. Los aromatizantes preferidos incluyen naranja, frambuesa, cereza, limón, naranja sanguina, pomelo, fresa, arándano, mora y combinaciones de los mismos, especialmente naranja y frambuesa.

La producción en masa de dulces de goma (p. ej., ositos de goma) incluye mezclar los ingredientes del dulce de goma y verter la mezcla resultante en muchas bandejas/moldes revestidos con almidón (p. ej., revestidos con almidón de maíz). El almidón de maíz evita que los ositos de goma se peguen al molde y permite que se desprendan fácilmente una vez que estén listos. Primero, se crean los moldes de personajes deseados y, si es necesario, se duplican con una máquina. Opcionalmente, se aplica polvo de almidón a los moldes de caracteres. Los ingredientes de la confitería Gumml, como el azúcar, el jarabe de glucosa, la gelatina y el agua, se mezclan y calientan. En un aspecto, los ingredientes se mezclan con colores y sabores que dan a los ositos su aspecto y sabor característicos. La mezcla de gelatina fundida se vierte en los moldes y se deja enfriar y fraguar antes del envasado o consumo. Preferiblemente, el dulce de goma se calienta posteriormente y se coloca en un tambor giratorio grande para aplicar una composición de Bacillus coagulans aislado y un edulcorante (p. ej., un azúcar).

EJEMPLO 1

Este ejemplo describe la producción de coágulo (pasta) de krill.

Materiales y métodos

Materia prima. Aker Biomarine obtuvo krill congelado y se almacenaron 10 toneladas en Norway Pelagic, Bergen, y se recuperaron según fuera necesario. El krill se envasó en bolsas de plástico en cajas de cartón con 2x12,5 kg de krill. Las cajas tenían el sello FRAL y C05S o A06S. Las cajas con krill se colocaron en una sola capa en el suelo de la planta de procesamiento el día anterior al procesamiento. En el momento del procesamiento, el krill varió de 3 °C a -3 °C.

Procesamiento y equipo.

El calentamiento se realizó en calderas calentadas con vapor (200 l) o en intercambiadores de calor de superficie rascada (Contherm 6x4, Alfa Laval AB).

El krill y el líquido caliente (generalmente 95 ± 2 °C) se mezclaron en una bomba monobomba con alimentación de tornillo (PCM 4L IVA, PCM S.A., Vanves, Francia). La bomba se calibró con agua para el caudal total y cuando se añadió krill se redujo el caudal de agua.

La mezcla de krill y líquido caliente se mantuvo a la temperatura designada (70 ± 5 °C) mediante transporte a través de un tubo de acero inoxidable aislado (6 x 2 " tubos de 6 m y 5 x 180° codo de 0,3 m, longitud total 37,5 m) o mediante bomba peristáltica tipo Arquímedes (Matcon, Herslev, tubo 3" x 26 m).

El krill y el líquido primero se separaron en un tamiz de metal.

Para la mayoría de los experimentos, el krill y el coágulo se drenaron en un filtro de correa simple o doble (Sobye Miljofilter AS, Skogsvag, la abertura de aire del filtro de fibra sintética era de 0,8 mm). La filtración por membrana del líquido de cocción se realizó en una (membrana PI9-40 100 nm ZrO₂, planta Ceramic MF, Downstream Processing, Bergen) a 70 °C. Como prefiltro antes de la filtración por membrana, un tamiz rotofluido (Jesma vs 20/65, Hans Jessens Maskinbyggeri AS, Vejle), (apertura de aire 100 μm).

El coágulo drenado se deshidrató en una prensa de doble tornillo (P9, Stord Bartz, Bergen, relación de volumen 1:4,2).

El krill cocido se deshidrató en una prensa de doble tornillo (PI 3, Stord Bartz, Bergen, Relación de volumen 1:5).

El líquido de prensa se separó en un tricanter (Z23, Flottweg GmbH & Co., Vilsbiburg, Alemania) o en una combinación de un tamiz roto-fluido (Jesma vs 20/65, Hans Jessens Maskinbyggeri AS, Vejle), (abertura de aire 100 μm) y separador de aceite (SA-1, Westfalia Separator AG, Oelde, Alemania).

El agua de barra se concentró en un evaporador de película descendente de 4 etapas (Anhydro, Soborg, Dinamarca).

El secado se realizó en un secador de aire caliente con fluidización mecánica (FT200, Forberg, Larvik) o en un secador Rotadisc calentado por vapor (TST 0,3R, Stord Bartz, Bergen).

Métodos analíticos.

Proteína, método de Kjeldahl: El nitrógeno de la muestra se transforma en amonio por disolución en ácido sulfúrico concentrado con cobre como catalizador. El amoníaco se libera en una destilación básica y se determina por titulación (ISO 5983: 1997(E), Método A 01). Incertidumbre: 1 %.

Proteína, Combustión: Liberación de nitrógeno al quemar la muestra a alta temperatura en oxígeno puro. Detección por conductividad térmica. El porcentaje de proteína en la muestra se calcula multiplicando el porcentaje de nitrógeno analizado y un factor de proteína dado (AOAC Official Method 990.03, 16a ed. 1996, Method A 25).

Humedad: Determinación de la pérdida de masa por secado a 103 °C durante cuatro horas (ISO 6496 (1999). Method A 04). Incertidumbre: 4 %.

Ceniza: Combustión de materia orgánica a 550 °C. El residuo que queda después de la combustión se define como el contenido de cenizas de la muestra. (ISO 5984:2002. Method A 02). Incertidumbre: 3 %.

Extracción de grasa con acetato de etilo: Absorción de humedad en la muestra húmeda por sulfato de sodio, seguida de extracción de grasa por acetato de etilo (NS 9402, 1994 (cálculo modificado). Method A 29).

Grasa, Soxhlet: Extracción de grasa por éter de petróleo. Principalmente se determina el contenido de triglicéridos, (AOCS Official Method Ba 3-38 Reapproved 1993. Method A 03).

Grasa, Bligh y Dyer: Extracción de grasa por una mezcla de cloroformo, metanol y agua en la proporción 1:2:0,8 que forman un sistema monofásico. La adición de cloroformo y agua da una fase de cloroformo con los lípidos y una fase de agua/metanol. Los lípidos se determinan en una alícuota de la fase de cloroformo después de evaporar y pesar. La extracción incluye tanto triglicéridos como fosfolípidos. (E.G. Bligh & W.J. Dyer: A rapid method of total lipid extraction and purification. Can.J.Biochem.Physiol. Vol 37 (1959). Method A 56).

Astaxantina: Extracción con etanol y diclorometano. Los productos polares se eliminan mediante cromatografía en columna abierta sobre gel de sílice. Los isómeros se separan en HPLC de fase normal en columna Si 60 y detección a 470 nm. (Schierle J. & Hardi W. 1994. Determination of stabilized astaxanthin in Carophyll® Pink, premixes and fish feeds. Edition 3. Revised Supplement to: Hoffman P, Keller HE, Schierle J., Schuep W. Analytical methods for vitamins and carotenoids in feed. Basel: Department of Vitamin Research and Development, Roche. Method A 23).

Humedad en aceite: Determinación del contenido real de agua de grasas y aceites por titulación con reactivo de Karl Fischer, que reacciona cuantitativamente con agua (AOCS Official Method ^cA 2e-84. Reapproved 1993. Method A 13).

El krill y el agua precalentada se mezclaron en un cocedor y se llevaron a una temperatura de 70°C. A continuación, el krill calentado y el agua caliente se separaron por filtración para proporcionar una leche de krill. A continuación, la leche de krill se coaguló calentándola a 95 °C y se separó del líquido mediante un filtro Soby Miljo. A continuación, se prensó Coagulum en la prensa P-9. Las tablas 1 y 2 dan análisis de coágulo en base húmeda y base seca. La materia seca del coágulo estuvo entre 12,8 y 16,7 %. En base seca el contenido de grasa alrededor del 60 % y TMAO 340 mg N/100 g. La materia seca del coágulo aumentó a 34-38 % por prensado. El contenido de grasa también aumentó en base seca (Cuadro 3), pero el TMAO se redujo a 145 mg N/100 g. Después de lavar la torta prensada con 1 parte de agua por 1 parte de torta prensada de coágulo y luego prensar nuevamente, el TMAO se redujo a 45 mg N/100 g en base seca (Tabla 4).

Tabla 1 Análisis o coagulación en base húmeda (wb)

Tabla 2 Análisis o coagulación en base seca (db)

Tabla 3 Análisis o turto a partir de coagulación en base húmeda

Tabla 4 Análisis o turtó a partir de la coagulación en la base seca

EJEMPLO 2

Este ejemplo describe el procedimiento de lavado de un extracto de aceite obtenido a partir de harina seca de krill con extracción con etanol. Después de una primera eliminación de la mayor parte del etanol, el material comprendía un 60,5 % de materia seca y un 2,4 % de agua, además de etanol. A 94,5 kg de este material se le añadieron 24,8 kg de agua y 35,0 kg de etanol. La mezcla se agitó y se dejó separar en una capa inferior que comprendía la mayoría de los fosfolípidos, una capa rica en triacilglicerol en el medio y una capa superior que contenía menos del 3 % de lípidos, principalmente lisofosfolípidos. La conductividad de la capa inferior fue de 722 us/cm. Se retiraron las dos capas superiores que comprendían 81,7 kg y se añadieron 67 kg de etanol al 60 % en agua (p/p) a la capa inferior y se agitó vigorosamente durante aproximadamente 10 minutos. Después de la sedimentación de las fases, se eliminó una capa superior de 82,2 kg y se añadieron 76,0 kg de una solución de etanol al 60 % a la capa inferior (conductividad ahora 384 uS/cm) y se agitó vigorosamente durante aproximadamente 10 minutos. Después del asentamiento, se eliminó la fase superior que comprendía 82,0 kg. La conductividad de la fase inferior era ahora de 183 uS/cm. Después de la evaporación de etanol/agua de la fase inferior, 31,0 kg de un producto lipídico que contenía un 16,4 % de EPA y un 7,9 % de DHA (frente a un 12 % de EPA y un 6 %> de DHA) y un 55,21 % de fosfolípidos (superior a un 40 %>). El producto mejoró mucho más en olor y sabor.

La composición de la fracción lipídica polar fue la siguiente:

Ejemplo 3

Este ejemplo describe la extracción de aceite de un material húmedo. Se obtuvo un coágulo de krill que comprendía aproximadamente un 70 % de agua, un 15 % de lípidos y aproximadamente un 15 % de otra materia seca, principalmente proteínas, tal como se describe en el documento ^wO 2009/027692, incorporado en su totalidad como referencia en el presente documento. Este material se sometió a un procedimiento de extracción como sigue. Se añadieron 3500 gramos de etanol puro a 1004 gramos del coágulo y se agitó durante 45 minutos. A continuación, la mezcla se filtró a través de un papel de filtro aplicando vacío en el matraz receptor para obtener 3854 gramos de filtrado. Se sometieron a evaporación en rotavapor 1179 gramos del filtrado y la materia seca obtenida se lavó 4 veces con una solución de etanol al 60 % y finalmente se evaporó el disolvente en rotavapor. El aceite obtenido, 23,7 gramos, era sólido a temperatura ambiente y comprendía 76,8 % de fosfolípidos. El agua se elimina mediante liofilización.

El contenido de EPA fue de 200 mg/gramo y el contenido de DHA de 87 mg/gramo de aceite. La composición de la fracción de fosfolípidos fue la siguiente:

Ejemplo 4

Este ejemplo describe un método alternativo para la extracción de aceite del material húmedo de krill, a partir de una pasta congelada de krill, que se sometió a un procedimiento de extracción como se describe a continuación. A diferencia del ejemplo 3, todos los pasos se realizaron en atmósfera de nitrógeno.

La pasta comprende alrededor del 65 % de agua (evaluada a través de la materia seca), 17 % de lípidos (aproximadamente pesos iguales de fosfolípidos y lípidos neutros) y alrededor del 18 % de otra materia seca, principalmente proteínas. Dentro de los lípidos, las proporciones de ciertos ácidos grasos en peso fueron las siguientes: C16:0 alrededor de 15-17 %; C14:0 aproximadamente 6-10 %; C18:3 n-3 aproximadamente 1,4-3,1 %; y C18:4 n-3 aproximadamente 3,5-7 %.

Se añadieron 100 kg del coágulo congelado (-20°C) a un recipiente. Basándose en el contenido de agua del coágulo, se añadieron al recipiente 350 kg de etanol puro (99,8 % p/p, temperatura ambiente), lo que dio una concentración final de etanol en la fase líquida de alrededor del 84 % p/p (~350 kg de etanol en 415 kg de disolventes líquidos). Se añadió etanol para aproximarse a la concentración final deseada y luego se comprobó el contenido de agua mediante titulación de Karl Fischer y se añadió etanol extra para dar la cantidad final correcta.

La mezcla se agitó en el recipiente durante 45 minutos, con calentamiento suave si era necesario. Se estudiaron cuatro temperaturas finales en lotes separados, concretamente a) 2°C, b) 10°C, c) 15°C y d) 20°C. Una vez completada la agitación, se permitió que las mezclas sedimentaran y cada una incluía una fase líquida de color rojo y una suspensión húmeda que contenía fragmentos de conchas y otros materiales insolubles. Para eliminar la fase líquida de la suspensión, las mezclas se decantaron y el material líquido se pasó por un filtro grueso y luego se filtró en serie a través de un filtro de cartucho de 75 μm y 5 μm para obtener a) 345 kg, b) 366 kg, c) 372 kg o d) 374 kg de filtrado, quedando material residual en la torta de filtración. También se han utilizado filtros de cartucho más pequeños (p. ej., 1,2 μm).

A continuación, los filtrados se sometieron a una secuencia de lavados. En primer lugar, se añadió agua desionizada para obtener soluciones de etanol al ~60 % p/p (a: 137 kg de agua; b: 149 kg; c: 152 kg; d: 155 kg) y las mezclas se agitaron durante 10-15 minutos y se dejaron sedimentar durante 12-24 h a temperatura ambiente (15-20 °C) en recipientes con válvula en la base. La fase inferior se aisló drenando la fase inferior a través de la válvula, para dar entre 5,4 y 9,0 kg de una fracción rica en lípidos. La fracción rica en lípidos se volvió a lavar de 2 a 5 veces con etanol al 60 % p/p a temperatura ambiente para dar un material final que contenía aproximadamente un 80 % en peso de fosfolípidos y un 20 % de lípidos neutros. Incluso en el primer lavado, se eliminó el 85 % de TMAO, y los lavados posteriores dieron lugar a material con TMAO indetectable (menos de 1 mgN/100g, es decir, al menos 20 veces menor que lo informado en la Tabla X de WO2013/102792).

Este material rico en lípidos se trató al menos una vez mediante precipitación con acetona en frío. Se añadieron tres partes p/p de acetona y el material rico en lípidos se disolvió mediante calentamiento suave y agitación lenta. Se detuvo la agitación y se enfrió la mezcla a 4°C para precipitación. Cuando se completó la precipitación, se eliminó la fase superior de disolvente. Este procedimiento de precipitación en frío se realizó tres veces en total, después de volver a disolver primero en acetona fresca cada vez.

A continuación, el precipitado se sometió a evaporación y liofilización para eliminar la acetona y el agua residuales. El lote c (es decir, se extrajo a 15 °C, luego se lavó 3 veces con EtOH al 60 % antes de la precipitación con acetona fría) proporcionó 1,9 kg de material sólido (una cera naranja) que constaba de 98 % de fosfolípidos/1,7 % de lípidos neutros con un contenido de agua del 3 %. El contenido de EpA fue de 19,2 g/100 g y el contenido de DHA fue de 11,0 g/100 g de material sólido. La composición de la fracción de fosfolípidos medida por 31P RMN fue la siguiente:

Así, en base al peso total del material analizado por RMN, casi el 93 % del material final era fosfolípido. Después de compensar el agua residual (alrededor del 3 %), el disolvente orgánico residual y sales/minerales presentes después de la ignición, la pureza total fue del 98 %. Por lo tanto, este proceso proporciona fosfolípidos con mayor pureza que la observada en el Ejemplo 1.

Se realizó un análisis adicional de la composición de lípidos mediante HPLC, y los resultados se muestran a continuación (gramos por 100 g de aceite):

(1) Calculado con base en técnicas de Winther et al. (2011) Lipids

46:25-36; Homan R et al 1998 J

Chromatogr B Biomed Sci Appl 708:21-26; y Moreau et al 2006

Lipids 41:727-734.

(2) Calculado como ésteres metílicos de ácidos grasos, por AOCS

Ce lb-89.

En cuanto a los ácidos grasos específicos, las proporciones fueron las siguientes, medidas en varios lotes:

Los fosfolípidos incluían ácidos grasos enlazados a éter y enlazados a éster, pero 10 % o menos estaban enlazados con éter. La RMN mostró restos de ácidos grasos enlazados con éter en la posición snl pero no en sn2, y los ácidos grasos enlazados con éter estaban completamente saturados o eran monoinsaturados. Cuando un fosfolípido era una fosfatidilcolina, alrededor del 10 % de las moléculas incluían ácidos grasos unidos por éter; donde un fosfolípido era una fosfatidiletanolamina (con o sin N-acetilación), alrededor del 40 % de las moléculas incluían ácidos grasos unidos por éter. Los PUFA se observaron solo con enlaces éster. El 30-40 % en peso de los ácidos grasos en los fosfolípidos purificados eran omega-3 y estos se distribuyeron en las posiciones sn1 y sn2 (principalmente en sn2). La mayoría de los ácidos grasos omega-3 eran EPA y/o DHA, con aproximadamente 2 veces más EPA que DHA.

El contenido de fosfatidiletanolamina usando este proceso fue mayor que el observado cuando se usó el método del Ejemplo 1 (alrededor de 2 veces mayor).

El contenido de lisofosfatidilcolina (0,2-0,4 % mol) es muy bajo en los fosfolípidos purificados, en comparación tanto con la cantidad observada utilizando el método del Ejemplo 1 (alrededor del 1 %) como en el material húmedo de partida (alrededor del 1,2-1,4 % en moles). No se detectaron moléculas en las que se habían perdido cadenas de ácidos grasos en las posiciones sn1 y sn2. Tampoco se observaron lisofosfatidiletanolamina (con o sin N-acetilación) ni lisofosfatidilinositol.

Los niveles de astaxantinas fueron mucho más bajos en los fosfolípidos purificados en comparación con el material obtenido en el Ejemplo 3. Esta reducción fue incluso visible debido al color rojo más débil. Los aminoácidos, TMAO y homarine estaban todos por debajo del LOQ según los métodos analíticos estándar.

Por lo tanto, se pueden lograr fosfolípidos de krill muy puros mediante un proceso que usa extracción en etanol al 84 %, seguido de lavado en etanol al 60 % y luego múltiples pasos de precipitación con acetona fría.

Ejemplo 5

Este ejemplo describe un proceso para hacer caramelos de goma que contienen un extracto de aceite de krill, preferiblemente usando una composición de fosfolípidos de krill al 60 % p/p preparada a partir de un extracto rico en lípido polar lavado. La gelatina se disuelve en agua (1:2) y las proteínas se deforman en gel a 80-100 °C (la gelatina se funde a 68°C). Al mismo tiempo, en otro tambor, se mezclan el azúcar y los almíbares y se cuecen a 100-120 °C. La gelatina y los azúcares se mezclan en otro tambor cocinando y removiendo a aprox. Después de 2 horas, el producto final suele contener entre un 15 y un 17 % de agua. La mezcla de gelatina y azúcar se enfría automáticamente a 70-80°C fuera del tambor de vacío. Se añaden diferentes sabores (p. ej., una combinación de frambuesa y naranja) a la mezcla de gomitas. Acidificación o tratamiento alcalino en pi para la gelatina (gelatina de cerdo, 250 bloom tiene un pI en pH 3-4) en luego realizado. A continuación, se agrega el aceite de extracto de fosfolípidos de krill a la mezcla de gelatina y azúcar. Este proceso dura entre 5 y 10 minutos. El extracto de krill se diluye preferentemente con agua o jarabe de sorbitol antes de la adición (p. ej., el extracto es líquido en una proporción de 1:4 de agua o aceite). Una mezcla homogénea de material de goma se vierte en moldes. Los moldes pueden ser de calidad maíz o trigo y se reutilizan. Después de 1-3 días a temperatura ambiente, se forman los GB y se retiran de los moldes. Los caramelos de goma se transfieren a una cámara donde se rocían con cera y aceite. Es posible realizar un segundo recubrimiento con azúcar.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un proceso para extraer un extracto rico en lípidos polares de un material animal marino que comprende:

poner en contacto dicho material de animales marinos con un disolvente prótico concentrado en condiciones tales que los lípidos polares se extraigan preferentemente para formar una suspensión que comprende una solución de lípidos polares y material de residuo biológico;

separar dicha solución lipídica polar de dicho material de residuo biológico para proporcionar una solución lipídica polar separada;

añadir una solución acuosa a dicha solución de lípidos polares para diluir dicho disolvente prótico de modo que dicha solución de lípidos polares se separe en una fase superior que comprende disolvente prótico diluido y una fase inferior rica en lípidos polares inferiores, que comprende añadir dicha solución acuosa para diluir la concentración de dicho disolvente prótico de 50% a 70% p/p cuando se combina con la humedad en dicho material de animales marinos; y

aislar dicha fase inferior rica en lípidos polares para proporcionar dicho extracto rico en lípidos polares.

2. El proceso de la reivindicación 1, en el que la concentración de dicho disolvente prótico se diluye al 60% p/p cuando se combina con la humedad en dicho material de animales marinos.

3. El proceso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, en el que dicha puesta en contacto de dicho material biológico con un disolvente prótico concentrado en condiciones tales que los lípidos polares se extraen preferentemente comprende mezclar dicho material de animales marinos con un disolvente prótico concentrado a una temperatura de -10 °C a 50°C de modo que la concentración de disolvente cuando se combina con la humedad en dicho material animal marino es del 70% al 95% p/p.

4. El proceso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que comprende además lavar dicho extracto rico en lípidos polares con un disolvente prótico diluido en el que los lípidos polares son poco solubles para proporcionar una fase superior que comprende dicho disolvente prótico diluido y una fase inferior rica en lípidos polares y aislar dicha fase inferior para proporcionar un extracto rico en lípidos polares lavado (en el que opcionalmente el lavado se repite de 2 a 5 veces).

5. El proceso de la reivindicación 4, en el que dicho lavado de dicho extracto rico en lípidos polares con un disolvente prótico diluido en condiciones tales que los fosfolípidos son poco solubles comprende además mezclar dicho extracto rico en lípidos polares con dicho disolvente prótico diluido en un extracto rico en lípidos polares para la relación de disolvente prótico diluido de 0,5:1 a 5:1, en el que dicho disolvente prótico diluido comprende una solución acuosa de 30% a 70% de dicho disolvente prótico.

6. El proceso de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicho disolvente prótico se selecciona del grupo que consiste en n-butanol, n-propanol, isopropanol, etanol y metanol (preferiblemente etanol) concentrados.

7. El proceso de cualquiera de las reivindicaciones 4 a 6, en el que dicho extracto rico en lípidos polares lavado se caracteriza por:

- comprender al menos 50% de fosfolípido p/p;

- comprender menos del 3% de lisofosfolípidos;

- comprender menos del 1% de lisofosfolípidos;

- comprender menos del 0,5% de lisofosfolípidos;

- comprender menos del 0,1% de lisofosfolípidos;

- tener una conductividad inferior a 300 uS/cm medida en una solución saturada de etanol al 60 %.

8. El proceso de cualquiera de las reivindicaciones 4 a 7, que comprende además la precipitación de fosfolípidos de dicho extracto rico en lípidos polares lavado (por ejemplo, mezclando dicho extracto rico en lípidos polares lavado con acetona fría en condiciones tales que los fosfolípidos precipitan para proporcionar un precipitado rico en lípidos polares lavado).

9. El proceso de cualquier reivindicación anterior, en el que dicho material animal marino se selecciona de un material de pescado, un material de krill (como krill fresco, krill congelado, harina de krill, pasta de krill húmeda, pasta de krill seca o aceite de krill) y un material de plancton marino.

10. Una composición de fosfolípidos que comprende una mezcla de compuestos de fosfolípidos que tienen la siguiente estructura:

donde Ri y R²se seleccionan del grupo que consiste en un resto de ácido graso y -H y R³es H o un resto de colina, etanolamina, inositol o serina, comprendiendo dicha mezcla de compuestos fosfolípidos más del 85 % (% en moles) de restos de colina en posición R³y más del 30 % p/p de fracciones de ácidos grasos omega-3, donde más del 90 % p/p de dichas fracciones de ácidos grasos omega-3 están en la posición R², caracterizada dicha composición además por comprender menos del 3 % p/p lisofosfolípidos y con una conductividad inferior a 300 pS/cm medida en una solución saturada de etanol al 60%.

11. La composición de la reivindicación 10, en la que dicha composición comprende al menos el 50% p/p de dichos compuestos de fosfolípidos.

12. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 10 a 11, en la que dicha composición comprende astaxantina.

13. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 10 a 12, en la que dicha composición comprende menos del 1% p/p de lisofosfolípidos.

14. La composición de cualquiera de las reivindicaciones 10 a 13 para usar en un método para reducir los triglicéridos séricos, reducir el colesterol sérico, reducir la formación de placa, reducir la agregación plaquetaria, tratar la aterosclerosis, mejorar la salud cardiovascular, reducir la inflamación, reducir la enfermedad coronaria, tratar la depresión, tratar la enfermedad de Alzheimer, el tratamiento del trastorno por déficit de atención o el tratamiento del síndrome metabólico; comprendiendo el método la administración oral o intravenosa de la composición a un sujeto.