ES2937960T3

ES2937960T3 - Proceso de extracción de lípidos

Info

Publication number: ES2937960T3
Application number: ES16709814T
Authority: ES
Inventors: Asgeir Saebo; Finn Myhren; Nils Hoem
Original assignee: Aker Biomarine Antarctic AS
Current assignee: Aker Biomarine Antarctic AS
Priority date: 2015-02-11
Filing date: 2016-02-10
Publication date: 2023-04-03
Anticipated expiration: 2036-02-10
Also published as: KR20170118125A; AU2019200757A1; PL3256003T3; EP3256003B1; US20160228461A1; EP3256003A1; US10456412B2; AU2016217559A1; WO2016128830A1; PT3256003T

Abstract

La presente invención proporciona procesos mejorados para extraer y preparar lípidos de fuentes biológicas para uso en productos farmacéuticos, nutracéuticos y alimentos funcionales. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Proceso de extracción de lípidos

CAMPO DE LA INVENCIÓN

[0001] La presente invención proporciona procesos mejorados para extraer y preparar lípidos de fuentes biológicas para su uso en productos farmacéuticos, nutracéuticos y alimentos funcionales, así como las composiciones resultantes de los mismos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

[0002] El documento WO 2014/013335 A2 se refiere al aceite de krill y, en particular, al aceite de krill con niveles elevados de ácidos grasos omega-3 y niveles reducidos de ácidos grasos saturados.

[0003] El documento US 2014/370115 A1 se refiere a procesos para extraer y preparar lípidos de fuentes biológicas para su uso en productos farmacéuticos, nutracéuticos y alimentos funcionales.

[0004] El documento WO 2012/139588 A2 se refiere a procesos para el aislamiento de un fosfolípido y para producir una fracción enriquecida en ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga (PUFA) a partir de un aceite de pescado.

[0005] El documento CN 102746941 B se refiere a un método para el enriquecimiento de fosfatidilinositoles de krill.

[0006] El documento JP 2909508 B2 se refiere a un método para obtener fosfolípidos de alta pureza fraccionando un lípido total extraído con etanol de krill fresco deshidratado mediante el método de liofilización al vacío en dos ingredientes específicos utilizando una cromatografía en columna de absorción y aislando además estos ingredientes utilizando un colector de fracciones.

[0007] El aceite de krill es uno de los productos nutracéuticos de más rápido crecimiento. El aceite de krill se puede extraer de cualquier especie de krill, pero generalmente se extrae del krill antártico Euphausia superba. El aceite de krill proporciona una fuente biodisponible de ácidos grasos omega-3, como el ácido eicosapentaenoico (EPA) y el ácido docosahexaenoico (DHA), así como el antioxidante astaxantina. El aceite de krill generalmente se caracteriza por contener cantidades sustanciales de fosfolípidos y triglicéridos.

[0008] El documento WO2008/117062 describe la extracción de aceite de krill a partir de harina de krill utilizando disolventes polares y procesos de extracción como la extracción con fluido supercrítico. Un problema con el aceite de krill extraído de la harina de krill es que el aceite generalmente tiene una alta viscosidad que dificulta la formulación en formas de administración preferidas, como cápsulas de gel. La causa de la alta viscosidad no se ha descrito previamente.

[0009] Los documentos WO2009/027692 y WO2010/097701 describen procesos para preparar un coagulado de proteína y lípido de krill y la extracción de un aceite del coagulado. Los aceites resultantes pueden tener una baja viscosidad. Sin embargo, el coágulo puede ser difícil de almacenar y transportar debido a su alto contenido de humedad.

[0010] Se ha realizado poco trabajo para descubrir procesos para extraer aceite de krill de baja viscosidad de la harina de krill más fácilmente disponible. Por tanto, lo que se necesita en la técnica son procesos para extraer un aceite de krill de baja viscosidad a partir de harina de krill y los aceites de krill de baja viscosidad resultantes de esos procesos.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

[0011] La presente invención proporciona procesos mejorados para extraer y preparar lípidos de fuentes biológicas para su uso en productos farmacéuticos, nutracéuticos y alimentos funcionales. En particular, la presente invención proporciona un proceso de alta eficiencia para extraer lípidos de una biomasa marina, que comprende:

mezclar dicha biomasa marina con un solvente prótico que tiene una concentración de 90 % a 97 % a una temperatura de aproximadamente 5°C a aproximadamente 65°C para producir una solución lipídica cruda; desalar dicha solución lipídica cruda;

fraccionar dicha solución lipídica cruda desalada ajustando el contenido de materia seca de dicha solución lipídica cruda de aproximadamente 10 % a 40 %, donde la concentración de dicho solvente prótico durante dicha etapa de fraccionamiento es de aproximadamente 65 % a aproximadamente 98 %, y manteniendo dicho solución a alrededor de 0°C a alrededor de 20°C de modo que los fosfolípidos en dicha solución se repartan en una fase ligera y los lípidos neutros en dicha solución se repartan en una fase pesada; y

separar dichas fases pesada y ligera.

[0012] En algunas formas de realización, el proceso de alta eficiencia para extraer lípidos de una biomasa marina comprende: mezclar la biomasa marina con un solvente prótico que tiene una concentración de 90 % a 97 % a una temperatura de aproximadamente 35 °C a aproximadamente 45 °C para producir una solución lipídica bruta, como se define en las reivindicaciones. En algunas formas de realización, el solvente prótico tiene una concentración de 95 % a 97 %. En algunas formas de realización, el disolvente prótico se selecciona del grupo que consta de etanol y metanol. En algunas formas de realización, la temperatura es de aproximadamente 35 °C a aproximadamente 45 °C. En algunas formas de realización, el pH del disolvente prótico es de aproximadamente 6,8 a 7,5. En algunas formas de realización, la biomasa marina y el disolvente prótico se mezclan en una proporción de aproximadamente 1:1 a 10:1 disolvente prótico:biomasa marina. En algunas formas de realización, la biomasa marina es una biomasa de krill. En algunas formas de realización, la biomasa de krill se selecciona del grupo que consiste en harina de krill, coágulos de krill y krill fresco congelado. En algunas formas de realización, la harina de krill se selecciona del grupo que consiste en harinas de krill cocidas y harinas de krill hidrolizadas. En algunas formas de realización, la harina de krill tiene un contenido de humedad de aproximadamente 5 % a 8 % y es de aproximadamente 12 % a 32 % p/p de lípidos. En algunas formas de realización, se extrae aproximadamente del 70 al 90 % p/p del total de lípidos disponibles en la biomasa. En algunas formas de realización, la solución lipídica bruta tiene un contenido de materia seca de aproximadamente 4 % a 9 % p/p. En algunas formas de realización, la materia seca de la solución de lípidos crudos se caracteriza por comprender de aproximadamente 30 % a aproximadamente 50 % p/p de fosfolípidos (fosfolípidos en masa como porcentaje del contenido de materia seca de la solución). En algunas formas de realización, la solución lipídica bruta tiene una conductividad superior a aproximadamente 50 pS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en etanol al 95 %.

[0013] Los métodos comprenden el paso de desalar la solución lipídica cruda para proporcionar una solución lipídica cruda desalada. En algunas formas de realización, la desalinización se realiza mediante un proceso seleccionado del grupo que consiste en cromatografía de adsorción de la solución lipídica bruta, filtración por membrana y lavado de los lípidos brutos con un disolvente acuoso. La solución lipídica cruda desalada comprende fosfolípidos y lípidos neutros, y el proceso comprende el paso de fraccionamiento de la solución lipídica cruda desalada ajustando el contenido de materia seca de la solución lipídica cruda de aproximadamente 10 % a 40 % y manteniendo la solución a aproximadamente 0°C. °C a aproximadamente 20 °C para que los fosfolípidos en la solución se dividan en una fase ligera y los lípidos neutros en la solución se dividan en una fase pesada. Los métodos comprenden separar las fases pesada y ligera. En algunas formas de realización, las fases pesada y ligera se separan por centrifugación. En algunas formas de realización, el paso de centrifugado usa una criocentrífuga. La concentración del disolvente prótico durante la etapa de fraccionamiento es de aproximadamente 65 % a aproximadamente 98 % p/p. En algunas formas de realización, la concentración del disolvente prótico durante el paso de fraccionamiento es de aproximadamente el 92 % a aproximadamente el 98 % p/p. En algunas formas de realización, la concentración del disolvente prótico durante el paso de fraccionamiento es de aproximadamente el 80 % a aproximadamente el 90 % p/p.

[0014] En algunas formas de realización, los métodos comprenden además el paso de eliminar el solvente de la fase ligera para proporcionar una composición concentrada de fosfolípidos que comprende de aproximadamente 50 % a aproximadamente 85 % p/p de fosfolípidos y donde la composición tiene uno o más de los siguientes propiedades: un contenido de triglicéridos de aproximadamente 5 % a 35 % p/p; un contenido de ácidos grasos libres de aproximadamente 4 % p/p a aproximadamente 11 % p/p, un contenido de lisofosfolípido de aproximadamente 0,8 % p/p a aproximadamente 7.0 % p/p, un contenido de sal inorgánica de menos de aproximadamente 0,2 % p/p; un contenido de nitrógeno de menos de aproximadamente 2 mg N/100 g, un contenido de cobre de menos de aproximadamente 2 ppm; un contenido de arsénico de menos de aproximadamente 3 ppm; un contenido de éster etílico de menos de aproximadamente 1 % p/p; una conductividad de menos de aproximadamente 20 pS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en 95 % de etanol; una viscosidad de aproximadamente 500 a 1800 mPas a 35°C; y un contenido de éster de astaxantina de menos de aproximadamente 100 ppm.

[0015] En algunas formas de realización, los métodos comprenden además el paso de eliminar el disolvente de la fase pesada para proporcionar una composición lipídica neutra concentrada que comprende de aproximadamente 80 % a aproximadamente 95 % p/p de lípidos neutros y donde la composición tiene uno o más de las siguientes propiedades: un contenido de fosfolípidos de aproximadamente 4 % a 15 % p/p; un contenido de ácidos grasos libres de aproximadamente 1 % p/p a aproximadamente 8 % p/p, un contenido de lisofosfolípidos de aproximadamente 0,1 % p/p a aproximadamente 2.0 % p/p, un contenido de sal inorgánica de menos de aproximadamente 0,2 % p/p; un contenido de nitrógeno de menos de aproximadamente 2 mg N/100 g, un contenido de cobre de menos de aproximadamente 2 ppm; un contenido de arsénico de menos de aproximadamente 3 ppm; un contenido de éster etílico de menos de aproximadamente 0,5 % p/p; una conductividad de menos de aproximadamente 20 pS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en 95 % de etanol; una viscosidad de menos de aproximadamente 400 mPas a 25°C; y un contenido de éster de astaxantina superior a aproximadamente 300 ppm. En algunas formas de realización, la composición lipídica neutra concentrada comprende de aproximadamente 300 a 1200 ppm de ésteres de astaxantina.

[0016] Los métodos de la presente invención comprenden el paso de dividir los lípidos en una solución lipídica que comprende fosfolípidos y lípidos neutros que comprende: formar una solución lipídica de los fosfolípidos y lípidos neutros en un disolvente prótico, donde la solución tiene un contenido de materia seca de aproximadamente 10 % a 40 %; en donde la concentración de dicho solvente prótico durante dicho paso de fraccionamiento es de aproximadamente 65 % a aproximadamente 98 %, y manteniendo la solución a aproximadamente 0 °C a aproximadamente 20 °C para que los fosfolípidos en la solución se dividan en una fase ligera y los lípidos neutros en la solución se reparte en una fase pesada; y separando las fases pesada y ligera. En algunas formas de realización, el solvente prótico se selecciona del grupo que consiste en etanol y metanol. En algunas formas de realización, la concentración del disolvente prótico es de aproximadamente el 92 % a aproximadamente el 98 % p/p. En algunas formas de realización, la concentración del disolvente prótico es de aproximadamente el 80 % a aproximadamente el 90 % p/p. En algunas formas de realización, las fases pesada y ligera se separan por centrifugación. En algunas formas de realización, el paso de centrifugado usa una criocentrífuga.

[0017] En algunas formas de realización, los métodos comprenden además el paso de eliminar el disolvente prótico de la fase ligera para proporcionar una composición concentrada de fosfolípidos que comprende de aproximadamente 50 % a aproximadamente 85 % p/p de fosfolípidos y en donde la composición tiene uno o más de las siguientes propiedades: un contenido de triglicéridos de aproximadamente 5 % a 35 % p/p; un contenido de ácidos grasos libres de aproximadamente 4 % p/p a aproximadamente 11 % p/p, un contenido de lisofosfolípido de aproximadamente 0,8 % p/p a aproximadamente 7.0 % p/p, un contenido de sal inorgánica de menos de aproximadamente 0,2 % p/p; un contenido de nitrógeno de menos de 2 mg N/100 g, un contenido de cobre de menos de 2 ppm, un contenido de arsénico de menos de 3 ppm; un contenido de éster etílico de menos de aproximadamente 1 % p/p; una conductividad de menos de aproximadamente 20 gS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en 95 % de etanol; una viscosidad de aproximadamente 500 a 1800 mPas a 35°C; y un contenido de éster de astaxantina de menos de aproximadamente 100 ppm.

[0018] En algunas formas de realización, los métodos comprenden además el paso de eliminar el disolvente de la fase pesada para proporcionar una composición lipídica neutra concentrada que comprende de aproximadamente 80 % a aproximadamente 95 % p/p de lípidos neutros y donde la composición tiene uno o más de las siguientes propiedades: un contenido de fosfolípidos de aproximadamente 4 % a 15 % p/p; un contenido de ácidos grasos libres de aproximadamente 1 % p/p a aproximadamente 8 % p/p, un contenido de lisofosfolípidos de aproximadamente 0,1 % p/p a aproximadamente 2.0 % p/p, un contenido de sal inorgánica de menos de aproximadamente 0,2 % p/p; un contenido de nitrógeno de menos de 2 mg N/100 g, un contenido de cobre de menos de 2 ppm, un contenido de arsénico de menos de 3 ppm; un contenido de éster etílico de menos de aproximadamente 0,5 % p/p; una conductividad de menos de unos 20 gS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en 95 % de etanol; una viscosidad de menos de aproximadamente 400 mPas a 25°C; y un contenido de éster de astaxantina superior a aproximadamente 300 ppm. En algunas formas de realización, la composición lipídica neutra concentrada comprende de aproximadamente 300 a 1200 ppm de ésteres de astaxantina. En algunas formas de realización, los lípidos son lípidos de krill. En algunas formas de realización, la solución de lípidos que comprende fosfolípidos y lípidos neutros es una solución de lípidos de krill desalado.

[0019] En algunas formas de realización, la presente invención proporciona procesos de alta eficiencia para extraer lípidos de una biomasa marina que comprenden: mezclar la biomasa marina con un solvente prótico que tiene una concentración de 90 % a 97 % a una temperatura de aproximadamente 35° C a aproximadamente 45°C para producir una solución lipídica cruda; desalar la solución lipídica bruta; fraccionar la solución lipídica cruda desalada ajustando el contenido de materia seca de la solución lipídica cruda de aproximadamente 10 % a 40 % y manteniendo la solución a aproximadamente 0°C a aproximadamente 20°C para que los fosfolípidos en la solución se dividan en una fase ligera y los lípidos neutros de la solución se reparten en una fase pesada; y separar las fases pesada y ligera. En algunas formas de realización, el solvente prótico se selecciona del grupo que consiste en etanol y metanol. Durante el paso de fraccionamiento, el disolvente prótico tiene una concentración de aproximadamente 65 % a aproximadamente 98 % p/p. En algunas formas de realización, la concentración del disolvente prótico es de aproximadamente el 92 % a aproximadamente el 98 % p/p. En algunas formas de realización, la concentración del disolvente prótico es de aproximadamente el 80 % a aproximadamente el 90 % p/p. En algunas formas de realización, las fases pesada y ligera se separan por centrifugación. En algunas formas de realización, el paso de centrifugado usa una criocentrífuga.

[0020] En algunas formas de realización, los métodos comprenden además el paso de eliminar el disolvente prótico de la fase ligera para proporcionar una composición concentrada de fosfolípidos que comprende de aproximadamente 50 % a aproximadamente 85 % p/p de fosfolípidos y en donde la composición tiene uno o más de las siguientes propiedades: un contenido de triglicéridos de aproximadamente 5 % a 35 % p/p; un contenido de ácidos grasos libres de aproximadamente 4 % p/p a aproximadamente 11 % p/p, un contenido de lisofosfolípido de aproximadamente 0,8 % p/p a aproximadamente 7.0 % p/p, un contenido de sal inorgánica de menos de aproximadamente 0,2 % p/p; un contenido de nitrógeno de menos de aproximadamente 1 mg N/100 g, un contenido de cobre de menos de aproximadamente 2 ppm, un contenido de arsénico de menos de aproximadamente 3 ppm; un contenido de éster etílico de menos de aproximadamente 1 % p/p; una conductividad de menos de aproximadamente 20 gS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en 95 % de etanol; una viscosidad de aproximadamente 500 a 1800 mPas a 35°C; y un contenido de éster de astaxantina de menos de aproximadamente 100 ppm.

[0021] En algunas formas de realización, los métodos comprenden además el paso de eliminar el solvente de la fase pesada para proporcionar una composición lipídica neutra concentrada que comprende de aproximadamente 80 % a aproximadamente 95 % p/p de lípidos neutros y donde la composición tiene uno o más de las siguientes propiedades: un contenido de fosfolípidos de aproximadamente 4 % a 15 % p/p; un contenido de ácidos grasos libres de aproximadamente 1 % p/p a aproximadamente 8 % p/p, un contenido de lisofosfolípidos de aproximadamente 0,1 % p/p a aproximadamente 2.0 % p/p, un contenido de sal inorgánica de menos de aproximadamente 0,2 % p/p; un contenido de nitrógeno de menos de 2 mg N/100 g, un contenido de cobre de menos de 2 ppm, un contenido de arsénico de menos de 3 ppm; un contenido de éster etílico de menos de aproximadamente 0,5 % p/p; una conductividad de menos de aproximadamente 20 gS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en 95 % de etanol; una viscosidad de menos de aproximadamente 400 mPas a 25°C; y un contenido de éster de astaxantina superior a aproximadamente 300 ppm. En algunas formas de realización, la composición lipídica neutra concentrada comprende de aproximadamente 300 a 1200 ppm de ésteres de astaxantina. En algunas formas de realización, los lípidos son lípidos de krill. En algunas formas de realización, la solución de lípidos que comprende fosfolípidos y lípidos neutros es una solución de lípidos de krill desalado.

[0022] En algunas formas de realización, la biomasa marina es una biomasa de krill. En algunas formas de realización, la biomasa de krill se selecciona del grupo que consiste en harina de krill, coágulos de krill y krill fresco congelado. En algunas formas de realización, la harina de krill se selecciona del grupo que consiste en harinas de krill cocidas y harinas de krill hidrolizadas. En algunas formas de realización, la harina de krill cocida tiene un contenido de humedad de aproximadamente 5 % a 8 % y es de aproximadamente 12 % a 24 % p/p de lípidos.

[0023] La presente invención proporciona además una composición lipídica preparada mediante los métodos descritos anteriormente. La presente invención proporciona además un vehículo de administración oral que comprende las composiciones lipídicas. En algunas formas de realización, el vehículo de administración oral es una cápsula de gelatina blanda. La presente invención proporciona además un suplemento nutricional, un suplemento dietético, un alimento médico o un alimento funcional que comprende las composiciones lipídicas.

DEFINICIONES

[0024] Como se usa en este documento, "fosfolípido" se refiere a un compuesto orgánico que tiene dos restos de ácido graso unidos en las posiciones sn-1 y sn-2 de glicerol, y contiene un grupo de cabeza unido por un residuo de fosfato en el sn- 3 posición de la glicerina. Los restos de grupo de cabeza ejemplares incluyen colina, etanolamina, serina e inositol. Los fosfolípidos incluyen fosfatidilcolina, fosfatidilserina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilinositol y ácido fosfatídico. El resto de ácido graso es la parte de la molécula de ácido graso que se une en la posición sn-1 o sn-2, por ejemplo mediante un enlace éster o éter. Cuando el resto de ácido graso es un acilo graso, la cadena alifática del acilo graso se une mediante un enlace éster y cuando el resto de ácido graso es una cadena alifática de un ácido graso, la cadena alifática se une mediante un enlace éter. Cuando se menciona un ácido graso particular en relación con un fosfolípido de la invención (p. ej., EPA o DHA), debe tomarse como referencia al grupo acilo graso relevante o a su cadena alifática.

[0025] Como se usa en el presente documento, el término "fosfolípido de éter" se refiere a un fosfolípido en el que el resto de ácido graso en una de las posiciones sn-1 o sn-2 es una cadena alifática de un ácido graso unida mediante un enlace éter. Los fosfolípidos de éter incluyen, por ejemplo, alquilacilfosfatidil-5 6 5 colina, alquilacilfosfatidiletanolamina y alquilacilfosfatidilserina.

[0026] Como se usa en el presente documento, el término "ácido graso poliinsaturado de cadena larga" se refiere a un ácido graso que tiene 20 o más carbonos y que está insaturado en dos o más enlaces.

[0027] Como se usa aquí, el término ácido graso omega-3 se refiere a ácidos grasos poliinsaturados que tienen el doble enlace final en la cadena hidrocarbonada entre el tercer y cuarto átomo de carbono desde el extremo metilo de la molécula. Los ejemplos no limitantes de ácidos grasos omega-3 incluyen ácido 5,8,11,14,17-eicosapentaenoico (EPA), ácido 4,7,10,13,16,19-docosahexaenoico (DHA) y ácido 7,10,13,16,19-docosapentaenoico (DPA).

[0028] Como se usa en el presente documento, el término "vehículo fisiológicamente aceptable" se refiere a cualquier vehículo o excipiente comúnmente usado con productos farmacéuticos oleosos. Dichos vehículos o excipientes incluyen, pero no se limitan a, aceites, almidón, sacarosa y lactosa.

[0029] Como se usa en el presente documento, el término "vehículo de administración oral" se refiere a cualquier medio para administrar un producto farmacéutico por vía oral, incluidos, entre otros, cápsulas, píldoras, tabletas y jarabes.

[0030] Como se usa en el presente documento, el término "producto alimenticio" se refiere a cualquier alimento o pienso adecuado para el consumo de humanos, animales no rumiantes o animales rumiantes. El "producto alimenticio" puede ser un alimento preparado y envasado (p. ej., mayonesa, aderezo para ensaladas, pan o queso) o un alimento para animales (p. ej., alimento para animales extruido y granulado o alimento mixto grueso). "Producto alimenticio preparado" significa cualquier alimento preenvasado aprobado para el consumo humano.

[0031] Como se usa en este documento, el término "producto alimenticio" se refiere a cualquier sustancia apta para el consumo humano o animal.

[0032] Como se usa en este documento, el término "alimento funcional" se refiere a un producto alimenticio al que se ha añadido un suplemento biológicamente activo.

[0033] Tal como se usa en el presente documento, el término "alimento infantil" se refiere a un producto alimenticio formulado para un lactante tal como una fórmula.

[0034] Como se usa en el presente documento, el término "alimento para ancianos" se refiere a un producto alimenticio formulado para personas de edad avanzada.

[0035] Como se usa en este documento, el término "alimento para el embarazo" se refiere a un producto alimenticio formulado para mujeres embarazadas.

[0036] Como se usa en este documento, el término "suplemento nutricional" se refiere a un producto alimenticio formulado como un suplemento dietético o nutricional para usarse como parte de una dieta.

[0037] Como se usa aquí, el término p/p (peso/peso), a menos que se especifique lo contrario, se refiere a la cantidad de una sustancia dada en una composición en peso y se expresa como un porcentaje del peso total de la composición. Por ejemplo, una composición que comprende 50 % p/p de fosfolípidos significa que la masa de los fosfolípidos es el 50 % de la masa total de la composición (es decir, 50 gramos de fosfolípidos en 100 gramos de la composición, como un aceite). Cuando la concentración de solvente se designa a lo largo de la especificación, la concentración se refiere al porcentaje en peso de solvente en la solución de solvente designada. Como ejemplo no limitante, el 96 % de etanol comprende el 96 % de etanol y el 4 % de agua. Como otro ejemplo no limitativo, cuando la especificación describe una solución lipídica que comprende 20 % p/p de materia seca y que el solvente es 95 % de etanol, esto significa que 100 g de la solución comprende un total de 20 gramos de materia seca y 80 g de etanol al 95 %.

[0038] Como se usa en este documento, el término "harina de krill" se refiere a polvo seco preparado a partir de krill y que tiene un contenido de humedad de aproximadamente 3 % a aproximadamente 15 %.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

[0039] La presente invención proporciona procesos mejorados como se define en las reivindicaciones para extraer y preparar lípidos de fuentes biológicas para su uso en nutracéuticos, productos farmacéuticos y alimentos funcionales, así como las composiciones resultantes de los mismos. En formas de realización particularmente preferidas, la fuente biológica es krill, por ejemplo, Euphausia superba o Euphausia pacifica.

[0040] Uno de los principales problemas con el aceite de krill existente es que el aceite es viscoso y difícil de llenar en los vehículos de administración preferidos tales como cápsulas de gel. Otros problemas actualmente asociados con la producción de aceite de krill incluyen productos con pureza, olor y sabor comprometidos, procesos con bajo rendimiento de masa de la materia prima y productos con un contenido de astaxantina y fosfolípidos inferior al deseable. Los presentes inventores han encontrado inesperadamente que las impurezas en el aceite de krill producidas por procesos de extracción comerciales, más que el contenido de fosfolípidos, son las responsables de los problemas asociados con la viscosidad. En particular, la eliminación de los componentes insolubles en hexano, como la sal de roca, del aceite de krill da como resultado un aceite de krill con una viscosidad reducida, propiedades de manejo mejoradas, mejor estabilidad y propiedades organolépticas mejoradas.

[0041] Un problema relacionado es que los procesos actuales para extraer lípidos del krill a menudo son ineficaces. Para evitar la extracción de contaminantes que afectan la calidad del aceite de krill, a menudo se sacrifica la eficiencia de la extracción de lípidos. Por lo tanto, para extraer un aceite de krill de alta calidad, los procesos actuales utilizan técnicas de extracción suaves que dejan una cantidad sustancial de lípidos en el material de krill inicial.

[0042] La presente invención aborda estos problemas utilizando primero un proceso de alta eficiencia o alto rendimiento para la extracción de la composición de lípidos de krill en bruto a partir de un material de partida de krill, como la harina de krill. En algunas formas de realización, la extracción de alto rendimiento extrae de aproximadamente el 70 al 90 % p/p del total de lípidos disponibles en la biomasa de krill en comparación con un rendimiento de aproximadamente el 66 % observado en métodos de extracción anteriores que utilizan solventes próticos. A continuación, la composición de lípidos de krill crudo se desaliniza para proporcionar una composición de lípidos de krill desalinizada que contiene de aproximadamente 30 % a 50 % p/p de fosfolípidos. Las composiciones de lípidos de krill desalado son útiles como suplementos nutricionales, suplementos dietéticos y en alimentos funcionales. Las composiciones de lípidos de krill desalinizados también sirven como un excelente material para la producción de concentrados de fosfolípidos de krill y concentrados de lípidos neutros que contienen altos niveles de astaxantina. Como se describe a continuación, la presente invención proporciona además procesos para el fraccionamiento y separación de krill concentrados de fosfolípidos y concentrados de lípidos neutros de krill por fraccionamiento controlado de las composiciones de lípidos de krill desalado con un alcohol seguido de criocentrifugación. El resultado final son composiciones concentradas de fosfolípidos de krill de alta calidad que comprenden desde aproximadamente un 50 % hasta aproximadamente un 85 % de fosfolípidos p/py composiciones concentradas de lípidos neutros de krill con altos niveles de astaxantina. La astaxantina se puede purificar más a partir de las composiciones de concentrado de lípidos neutros de krill. Las composiciones de concentrado de lípidos neutros de krill de astaxantina purificada se pueden mezclar con las composiciones de concentrado de fosfolípidos de krill para proporcionar composiciones de lípidos de krill con la cantidad deseada de fosfolípidos y astaxantina.

[0043] La combinación de estos pasos del proceso proporciona una plataforma eficiente y flexible para la producción de productos de alta calidad a partir de un material de partida de krill. Los productos de alta calidad generalmente se caracterizan por tener una baja viscosidad, poco o ningún olor, sabor mejorado, estabilidad mejorada, bajo contenido de lisofosfolípidos y bajos niveles de materiales no deseados o contaminantes como solventes, cobre y otros prooxidantes metálicos, arsénico total (incluyendo arsénico orgánico e inorgánico), óxido de trimetilamina y ésteres etílicos.

[0044] El resto de la descripción se subdivide como sigue: 1) Materiales de partida; 2) Extracción con solvente de la harina de krill; 3) Desalación; 4) concentración de lípidos; 5) Formulación de composiciones de fosfolípidos de krill; y 6) Usos de las composiciones de fosfolípidos de krill.

1. Materiales de partida

[0045] La presente invención no se limita al uso de ningún material de partida biológico marino en particular. Preferiblemente, el material de partida biológico puede ser o ser producido a partir de una biomasa de algas, biomasa vegetal o biomasa de animales marinos. En formas de realización preferidas, se utilizan biomasas de animales marinos como material de partida. Las biomasas de animales marinos adecuadas incluyen, pero no se limitan a, krill, cangrejos, Calanus, plancton, huevos, cangrejos de río, camarones, peces, especialmente arenques, moluscos (incluidos cefalópodos tales como calamares), plantas y algas. El material de partida biológico puede ser fresco o congelado, o puede ser un material producido a partir de una biomasa de algas, plantas o animales marinos, como harina, polvo, hidrolizado o coagulado (pasta). La pasta puede ser una pasta húmeda o una pasta seca. En algunas formas de realización preferidas, el material de partida biológico es un material de krill, por ejemplo, harina de krill, hidrolizado de krill, coagulado de krill o krill fresco o congelado. Se puede utilizar cualquier especie de krill. En formas de realización preferidas, el krill es Euphausia superba o Euphausia pacifica.

[0046] En algunas formas de realización particularmente preferidas, el material de partida biológico es una harina de krill. La harina de krill se puede preparar preferiblemente mediante cualquier proceso estándar de harina marina. En general, la harina de krill se produce cocinando krill recién capturado a baja temperatura (aproximadamente 80-85°C) y secándolo para reducir el contenido de humedad a aproximadamente 5 a 8 % y luego moliéndolo. En formas de realización en las que el producto está destinado al consumo humano, es preferible envasar y almacenar la harina bajo nitrógeno sin la adición de antioxidantes.

[0047] En consecuencia, los procesos de la presente invención se pueden usar con una amplia variedad de materiales de partida. El resto de la discusión de los procesos generalmente se refiere al uso de harina de krill como material de partida. Sin embargo, se entenderá que cualquiera de los materiales de partida considerados en este documento puede sustituir a la harina de krill en los procesos descritos.

2. Extracción con solvente de la harina de krill

[0048] En el primer paso del proceso de extracción, la harina de krill se mezcla con un solvente adecuado para extraer los lípidos de la harina, como se define en las reivindicaciones. En contraste con los métodos de la técnica anterior, la presente invención utiliza condiciones que preferiblemente extraen la cantidad máxima de lípidos de la harina de krill a costa de una mayor cantidad de contaminantes en el extracto de solvente inicial. Como se define en las reivindicaciones, el solvente es un solvente prótico, por ejemplo, un solvente prótico orgánico, sin embargo, se describen aquí otros solventes conocidos para su uso en la extracción de lípidos de calidad alimentaria, tales como acetona, hexano, etc. Los disolventes próticos orgánicos adecuados incluyen, entre otros, n-butanol, n-propanol, isopropanol, nitrometano, etanol y metanol. En formas de realización particularmente preferidas, el disolvente prótico es etanol.

[0049] La concentración del solvente prótico usado en el paso inicial de extracción con solvente es de 90 % a 97 %, o preferiblemente de aproximadamente 95 % a 97 %, y lo más preferiblemente es de aproximadamente 96 % (p. ej., 96 % de etanol o metanol).

[0050] En algunas formas de realización, el disolvente prótico se mezcla con el material de partida biológico en una proporción de disolvente prótico: material de partida biológico de aproximadamente 1:1 a 10:1, preferiblemente de aproximadamente 3:1 a 6:1, más preferiblemente de aproximadamente 4:1 a 5:1, y lo más preferiblemente alrededor de 4,4:1.

[0051] El material de partida biológico se extrae con disolvente prótico a una temperatura de aproximadamente 5 °C a 65 °C, preferiblemente de aproximadamente 20 °C a aproximadamente 60 °C, más preferiblemente de aproximadamente 30 °C a 50 °C. y lo más preferiblemente a aproximadamente 40°C. En algunas formas de realización, el tiempo de extracción (es decir, la cantidad de tiempo que el material de partida biológico está en contacto con el disolvente) es de aproximadamente 10 minutos a aproximadamente 2 horas, preferiblemente de aproximadamente 15 minutos a 60 minutos, más preferiblemente de aproximadamente 20 minutos. a alrededor de 45 minutos, y lo más preferiblemente alrededor de 30 minutos.

[0052] Después de la etapa de extracción, una solución de lípidos de krill crudo que contiene los lípidos solubles de la harina de krill se separa de la mezcla de solvente/harina de krill, por ejemplo, por decantación y/o filtración. El material insoluble, que comprende proteínas y otros materiales útiles, se seca luego para recuperar el etanol. El producto de harina rico en proteínas restante se puede usar posteriormente en productos alimenticios, suplementos de proteínas, alimentos para animales y similares. En algunas formas de realización, la solución decantada que contiene lípidos solubles tiene un contenido de materia seca de aproximadamente 4 % a 9 % p/p, preferiblemente de aproximadamente 5,5 % a 7,5 % p/p, y más preferiblemente de aproximadamente 6 % a 7 % p/p, donde p/p se refiere al peso de materia seca como porcentaje del peso total de la solución. En formas de realización preferidas, la materia seca consiste esencialmente en lípidos de krill crudos, y preferiblemente tiene un contenido de lípidos superior al 90 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o 99 % p/p, donde p/p se refiere a el peso de lípidos un porcentaje del peso total de materia seca.

[0053] La composición de los lípidos de krill crudos se puede caracterizar preferiblemente como sigue. En algunas formas de realización, los lípidos de krill crudos comprenden preferiblemente de aproximadamente 30 % p/p a 50 % p/p de fosfolípidos, más preferiblemente de aproximadamente 35 % p/p a aproximadamente 45 % p/p de fosfolípidos, y lo más preferiblemente aproximadamente 40 % p/p de fosfolípidos, donde p/p se refiere al peso de los fosfolípidos como porcentaje del peso total de lípidos de krill crudo. En algunas formas de realización, los lípidos de krill crudos comprenden preferiblemente de aproximadamente 26 % p/p a 46 % p/p de triglicéridos, más preferiblemente de aproximadamente 31 % p/p a aproximadamente 41 % p/p de triglicéridos, y más preferiblemente aproximadamente 36 % p/p. /p de triglicéridos, donde p/p se refiere al peso de los triglicéridos como porcentaje del peso total de lípidos de krill crudo. En algunas formas de realización, los lípidos de krill crudos comprenden preferiblemente de aproximadamente 1 % p/p a 7 % p/p de diglicéridos, más preferiblemente de aproximadamente 1,5 % p/p a aproximadamente 4,5 % p/p de diglicéridos, y lo más preferiblemente aproximadamente 3 % p/p de diglicéridos, en donde p/p se refiere al peso de los diglicéridos como porcentaje del peso total de lípidos de krill crudo. En algunas formas de realización, los lípidos de krill crudos comprenden preferiblemente de aproximadamente 2 % p/p a 12 % p/p de ácidos grasos libres, más preferiblemente de aproximadamente 4,5 % p/p a aproximadamente 9,5 % p/p de ácidos grasos libres, y lo más preferiblemente aproximadamente 7 % p/p de ácidos grasos libres, donde p/p se refiere al peso de los ácidos grasos libres como porcentaje del peso total de lípidos de krill crudo. En algunas formas de realización, los lípidos de krill crudos comprenden preferiblemente de aproximadamente 1 % p/p a 7 % p/p de colesterol, más preferiblemente de aproximadamente 1,5 % p/p a aproximadamente 4,5 % p/p de colesterol, y más preferiblemente aproximadamente 3 % p/p de colesterol, donde p/p se refiere al peso del colesterol como un porcentaje del peso total de lípidos de krill crudo. En algunas formas de realización, los lípidos de krill crudos comprenden preferiblemente de aproximadamente 0,1 % p/p a 2 % p/p de ésteres de colesterol, más preferiblemente de aproximadamente 0,2 % p/p a aproximadamente 1,0 % p/p de ésteres de colesterol, y más preferiblemente aproximadamente 0,5 % p/p de ésteres de colesterol, donde p/p se refiere al peso de los ésteres de colesterol como porcentaje del peso total de lípidos de krill crudo. En algunas formas de realización, los lípidos de krill crudos comprenden preferiblemente de aproximadamente 0,5 % p/p a 5 % p/p de sales inorgánicas, más preferiblemente de aproximadamente 0,8 % p/p a aproximadamente 3,2 % p/p de sales inorgánicas, y más preferiblemente aproximadamente 1,2 % a 2,8 % p/p de sales inorgánicas, donde p/p se refiere al peso de las sales inorgánicas como porcentaje del peso total de lípidos de krill crudo. En algunas formas de realización, los lípidos de krill crudos comprenden preferiblemente de aproximadamente 0,5 % p/p a 5 % p/p de aminas terciarias (p. ej., óxido de trimetilamina (TMAO) y otras aminas terciarias), más preferiblemente de aproximadamente 0,8 % p/p a aproximadamente 3,2 % p/p de aminas terciarias, y lo más preferiblemente alrededor de 1,2 % a 2,8 % p/p de aminas terciarias, donde p/p se refiere al peso de las aminas terciarias como porcentaje del peso total de lípidos de krill crudo. En algunas formas de realización, las aminas terciarias son TMAO.

3. Desalinización

[0054] Como se define en las reivindicaciones, la solución de lípidos de krill crudo se desaliniza para eliminar materiales insolubles en hexano tales como sales inorgánicas insolubles (p. ej., NaCl con cantidades pequeñas o trazas de KCl y/o AlCh) así como compuestos como el óxido de trimetilamina y metales como el cobre y el arsénico.

[0055] En algunas formas de realización, la solución de lípidos de krill crudos se desaliniza evaporando el solvente de la solución de lípidos de krill crudos para proporcionar una composición de lípidos de krill crudos y luego sometiendo la composición de lípidos de krill crudos a lavados repetidos con un solvente acuoso. Los disolventes acuosos adecuados incluyen, pero no se limitan a, etanol mezclado con agua o agua desionizada de modo que la concentración de etanol sea del 40 % al 70 %, preferiblemente del 50 % al 60 %. En estas formas de realización, la composición lipídica de krill cruda se mezcla con el solvente, la fase lipídica se recupera y la fase acuosa se decanta. El paso de lavado se puede repetir según sea necesario, por ejemplo, 1, 2, 3, 4, 5 o más veces. La proporción de disolvente acuoso:composición de lípidos de krill crudo es preferiblemente de aproximadamente 1:1 a 1:5 para cada paso de lavado, más preferiblemente de aproximadamente 1:1 a 2,5:1 y lo más preferiblemente de aproximadamente 1:1,7.

[0056] En algunas formas de realización, la solución lipídica bruta se desaliniza mediante cromatografía. Los medios cromatográficos adecuados incluyen medios de gel de sílice, que incluyen, entre otros, geles de sílice esféricos y geles de sílice derivatizados como C8 (sílice con funcionalidad octilo) y C18 (sílice con funcionalidad octadecil) y resinas de intercambio iónico como las resinas Dowex™. En formas de realización en las que se utiliza la cromatografía, los lípidos de krill crudos se aplican preferentemente al medio cromatográfico en un disolvente prótico, preferentemente el mismo disolvente utilizado en la extracción inicial (p. ej., etanol). Se pueden utilizar métodos de cromatografía en columna estándar, sin embargo, se pueden utilizar preferentemente aparatos de cromatografía de lecho móvil o cromatografía de lecho móvil simulado.

[0057] La composición de los lípidos de krill desalinizados en base a la materia seca se puede caracterizar preferentemente como sigue. En algunas formas de realización, los lípidos de krill desalinizados comprenden preferiblemente de aproximadamente 30 % p/p a 50 % p/p de fosfolípidos, más preferiblemente de aproximadamente 35 % p/p a aproximadamente 45 % p/p de fosfolípidos, y más preferiblemente aproximadamente 40 % p/p de fosfolípidos, donde p/p se refiere al peso de los fosfolípidos como porcentaje del peso total de lípidos muertos desalinizados. En algunas formas de realización, los lípidos de krill desalinizados comprenden preferiblemente de aproximadamente 32 % p/p a 52 % p/p de triglicéridos, más preferiblemente de aproximadamente 36 % p/p a aproximadamente 48 % p/p de triglicéridos, y más preferiblemente aproximadamente 42 % p/p de triglicéridos, en donde p/p se refiere al peso de los triglicéridos como porcentaje del peso total de lípidos de krill desalado. En algunas formas de realización, los lípidos de krill desalinizados comprenden preferiblemente de aproximadamente 3 % p/p a 13 % p/p de ácidos grasos libres, más preferiblemente de aproximadamente 5 % p/p a aproximadamente 11 % p/p de ácidos grasos libres, y la mayoría preferiblemente alrededor del 8 % p/p de ácidos grasos libres, donde p/p se refiere al peso de los ácidos grasos libres como porcentaje del peso total de lípidos de krill desalado. En algunas formas de realización, los lípidos de krill desalinizados comprenden preferiblemente de aproximadamente 0,5 % p/p a 5 % p/p de lisofosfolípidos, más preferiblemente de aproximadamente 0,8 % p/p a aproximadamente 3,2 % p/p de lisofosfolípidos, y lo más preferiblemente de aproximadamente 1,2 % a 2,8 % p/p de lisofosfolípidos, donde p/p se refiere al peso de los lisofosfolípidos como un porcentaje del peso total de lípidos de krill desalado. En algunas formas de realización, los lípidos de krill desalinizados comprenden preferiblemente menos del 1 % p/p de sales inorgánicas, más preferiblemente menos del 0,5 % p/p de sales inorgánicas, incluso más preferiblemente menos del 0,2 % p/p/p de sales inorgánicas, y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 0,1 % p/p de sales inorgánicas, donde p/p se refiere al peso de las sales inorgánicas como porcentaje del peso total de lípidos de krill desalado. En algunas formas de realización, los lípidos de krill desalinizados comprenden preferiblemente menos de aproximadamente 5 mg N/100 g, más preferiblemente menos de aproximadamente 3 mg N/100 g, incluso más preferiblemente menos de aproximadamente 2 mg N/100 g, y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 1 mg N/100g, donde el contenido de N sirve como un indicador conveniente del contenido de óxido de trimetilamina (TMAO). En algunas formas de realización, los lípidos de krill desalinizados comprenden menos de aproximadamente 10 ppm de cobre (Cu++), más preferiblemente menos de aproximadamente 5 ppm de Cu++, incluso más preferiblemente menos de aproximadamente 2 ppm de Cu++, y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 1 ppm Cu++. En algunas formas de realización, los lípidos de krill desalinizados comprenden menos de aproximadamente 10 ppm de arsénico total (As3+, orgánico e inorgánico), más preferiblemente menos de aproximadamente 5 ppm de arsénico total, incluso más preferiblemente menos de aproximadamente 3 ppm de arsénico total, y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 1 ppm de arsénico total. En algunas formas de realización, los lípidos de krill desalinizados comprenden preferiblemente de aproximadamente 0,01 % a 2 % p/p de ésteres etílicos, más preferiblemente de aproximadamente 0,01 % a aproximadamente 1,5 % p/p de ésteres etílicos, y más preferiblemente de aproximadamente 0,01 % a aproximadamente 1 % p/p ésteres etílicos, donde p/p se refiere al peso de los ésteres etílicos como porcentaje del peso total de lípidos de krill desalado. En algunas formas de realización, el concentrado de fosfolípidos de krill comprende preferiblemente menos de aproximadamente 5 %, 4 %, 3 % o 2 % p/p de ésteres etílicos hasta un límite inferior de 0,01 % de ésteres etílicos (es decir, entre 5 % y 0,01 % p/p). w ésteres etílicos, entre 4 % y 0,01 % p/p de ésteres etílicos, entre 3 % y 0,01 % p/p de ésteres etílicos, o entre 2 % y 0,01 % p/p de ésteres etílicos), más preferiblemente menos de aproximadamente 1,5 % p /p de ésteres etílicos, y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 1 % p/p de ésteres etílicos, donde p/p se refiere al peso de los ésteres etílicos como porcentaje del peso total de lípidos de krill desalado. En algunas formas de realización, los lípidos de krill desalinizados tienen una conductividad de menos de aproximadamente 50 pS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en 95 % de etanol, más preferiblemente una conductividad de menos de aproximadamente 30 pS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca. materia seca en etanol al 95 %, y lo más preferiblemente una conductividad de menos de aproximadamente 20 pS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en etanol al 95 %. En algunas formas de realización, los lípidos de krill desalinizados tienen una viscosidad de aproximadamente 50 a 800 mPas a 25°C, más preferiblemente de aproximadamente 100 a 400 mPas a 25°C, y lo más preferiblemente de 180 a 340 mPas a 25°C. En algunas formas de realización, las composiciones de lípidos de krill desalado tienen un pH de aproximadamente 6,7 a 8,3 cuando se mide en etanol al 95 %.

4. Concentración de lípidos

[0058] La presente invención proporciona métodos para concentrar lípidos (por ejemplo, lípidos neutros o lípidos polares tales como fosfolípidos) en una solución. Si bien los métodos se describen en referencia a los lípidos de krill desalinizados descritos anteriormente, como se define en las reivindicaciones, los métodos son generalmente aplicables a cualquier fracción lipídica que contenga fosfolípidos.

[0059] En consecuencia, el contenido de materia seca de una composición lipídica que contiene fosfolípidos se ajusta a un nivel predeterminado (desde aproximadamente el 10 % hasta aproximadamente el 40 %) agregando o eliminando el solvente y se permite que el resultante se fraccione para que los fosfolípidos se repartan predominantemente en una fase y los lípidos neutros se repartieron en una fase diferente. Una composición de lípidos que contiene fosfolípidos como los lípidos de krill desalinizados se mezcla con un disolvente prótico adecuado, preferiblemente etanol, de modo que el contenido de materia seca (es decir, lípidos) de la solución resultante sea de aproximadamente 10 % a 40 % p/p, preferiblemente aproximadamente del 15 % al 35 % p/p, más preferiblemente aproximadamente del 18 % al 30 % p/p, y lo más preferiblemente aproximadamente del 20 % al 25 % p/p. En las formas de realización en las que el paso de desalinización ya proporciona los lípidos en una solución de alcohol prótico adecuada, como es el caso en el que se utiliza etanol como disolvente para la cromatografía, la solución de lípidos de krill desalado se puede evaporar preferiblemente para proporcionar el contenido deseado de materia seca de aproximadamente del 10 % al 40 % p/p, preferentemente del 15 % al 35 % p/p, más preferentemente del 18 % al 28 % p/p, y lo más preferentemente del 20 % al 22 % p/p. Los métodos adecuados para la evaporación incluyen, pero no se limitan a, evaporación a presión reducida (p. ej., destilación al vacío), evaporación de película descendente y eliminación de disolventes a través de una membrana.

[0060] Después del ajuste del contenido de materia seca al nivel deseado de aproximadamente 10 % a 40 % agregando o eliminando el solvente, la solución se deja fraccionar en una solución de fase ligera superior con un contenido mejorado de fosfolípidos y una solución de fase pesada inferior que contiene predominantemente lípidos neutros y un alto nivel de astaxantina. Se controla la temperatura de la solución durante el paso de fraccionamiento. La temperatura para el paso de fraccionamiento es de alrededor de 0°C a alrededor de 20°C, preferiblemente de alrededor de 5°C a alrededor de 15°C, más preferiblemente de alrededor de 8°C a alrededor de 12°C, y lo más preferiblemente alrededor de 10°C.

[0061] La concentración del disolvente prótico se puede variar para controlar la concentración de fosfolípidos en la composición lipídica de la fase superior. El disolvente prótico tiene una concentración de aproximadamente 65 % a 98 %, más preferiblemente de aproximadamente 92 % a 98 % y lo más preferiblemente de aproximadamente 95 %. En estas formas de realización, el contenido de fosfolípidos sobre una base de materia seca de los lípidos en la fase superior después del fraccionamiento es de aproximadamente 50 % a 70 % p/p, preferiblemente aproximadamente de 55 % a 65 % p/py lo más preferiblemente de aproximadamente 60 % p/p. En aún otras formas de realización preferidas, el disolvente prótico tiene una concentración de aproximadamente 80 % a 90 % p/p, más preferiblemente de aproximadamente 82 % a 88 % p/p, y lo más preferiblemente de aproximadamente 85 % p/p. En estas formas de realización, el contenido de fosfolípidos en materia seca de los lípidos en la fase superior después del fraccionamiento es de aproximadamente 70 % a 90 % p/p, preferiblemente de aproximadamente 75 % a 85 % p/p y más preferiblemente de aproximadamente 80 % p/p.

[0062] En algunas formas de realización, las fases superior e inferior se separan mediante centrifugación, preferiblemente criocentrifugación con un separador de dos o tres fases. En algunas formas de realización, la centrifugación se lleva a cabo entre alrededor de 0 °C y alrededor de 30 °C, más preferiblemente entre alrededor de 0 °C y alrededor de 10 °C y lo más preferiblemente entre alrededor de 3 °C y alrededor de 7 °C. En general, la fuerza gravitacional utilizada dependerá del delta T entre las fases. Las temperaturas más bajas proporcionan un mayor delta T. En algunas formas de realización preferidas, la fuerza G empleada en la separación es de aproximadamente 8000 X G a aproximadamente 15000 X G.

[0063] En algunas formas de realización, los pasos del proceso para ajustar el contenido de materia seca como se describe anteriormente a través de los pasos de centrifugación se repiten una o más veces.

[0064] En algunas formas de realización, la fase de luz superior se recoge y se procesa adicionalmente. El disolvente se elimina preferiblemente de la fase superior mediante una o más etapas de evaporación para producir un concentrado de fosfolípidos de krill. Los concentrados de fosfolípidos de krill comprenden preferiblemente de aproximadamente 50 % a 85 % p/p de fosfolípidos, y más preferiblemente de aproximadamente 55 % a 80 % p/p de fosfolípidos, donde p/p se refiere al peso de fosfolípidos como porcentaje del peso total del concentrado.

[0065] En algunas formas de realización, la fase pesada inferior se recoge y se procesa más. En algunas formas de realización, el disolvente se elimina de la fase inferior para proporcionar un concentrado de lípidos neutros de krill. En algunas formas de realización, la fase inferior puede fraccionarse con disolvente prótico y someterse a un segundo paso de centrifugación para recuperar fosfolípidos adicionales no recuperados en el primer paso de fraccionamiento. Nuevamente, el solvente se elimina de la fase inferior resultante para proporcionar un concentrado de lípidos neutros de krill. El concentrado de lípidos neutros de krill en ambas instancias se caracteriza por contener altos niveles de astaxantina. En algunas formas de realización, el concentrado de lípidos neutros de krill puede combinarse o mezclarse con el concentrado de fosfolípidos de krill para proporcionar una composición lipídica con los niveles deseados de fosfolípidos, lípidos neutros y astaxantina. En algunas formas de realización, el concentrado de lípidos neutros de krill puede procesarse adicionalmente (p. ej., mediante cromatografía) para proporcionar un concentrado de astaxantina. El concentrado de astaxantina puede entonces combinarse o mezclarse con el concentrado de fosfolípidos de krill para proporcionar una composición lipídica con los niveles deseados de fosfolípidos y astaxantina.

[0066] En algunas formas de realización, los procesos comprenden además el paso de añadir un aceite de triglicéridos, tal como un aceite de triglicéridos de cadena media o un aceite de triglicéridos de cadena larga, en cualquier etapa durante el proceso. Por ejemplo, el aceite de triglicéridos se puede añadir a la fase ligera, la fase pesada, el concentrado de fosfolípidos o el concentrado de lípidos neutro recogidos. En algunas formas de realización, los pasos del proceso de ajuste del contenido de materia seca como se describe anteriormente a través de los pasos de centrifugación y/o los pasos de evaporación se repiten una o más veces.

[0067] En algunas formas de realización, los concentrados de fosfolípidos de krill en base a materia seca comprenden preferiblemente de aproximadamente 5 % p/p a 35 % p/p de triglicéridos, más preferiblemente de aproximadamente 10 % p/p a aproximadamente 30 % p/p de triglicéridos, y lo más preferiblemente alrededor del 15 % al 25 % p/p de triglicéridos, donde p/p se refiere al peso de los triglicéridos como porcentaje del peso total del concentrado de fosfolípidos de krill. En algunas formas de realización, los concentrados de fosfolípidos de krill comprenden preferiblemente de aproximadamente 2 % p/p a 13 % p/p de ácidos grasos libres, más preferiblemente de aproximadamente 4 % p/p a aproximadamente 11 % p/p de ácidos grasos libres, y lo más preferiblemente aproximadamente del 4 % al 10 % p/p de ácidos grasos libres, donde p/p se refiere al peso de los ácidos grasos libres como porcentaje del peso total del concentrado de fosfolípidos de krill. En algunas formas de realización, los concentrados de fosfolípidos de krill comprenden preferiblemente de aproximadamente 0,5 % p/p a 10 % p/p de lisofosfolípidos, más preferiblemente de aproximadamente 0,8 % p/p a aproximadamente 7,0 % p/p de lisofosfolípidos, y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 5,0 % p/po 3,0 % p/p de lisofosfolípidos, donde p/p se refiere al peso de los lisofosfolípidos como porcentaje del peso total del concentrado de fosfolípidos de krill. En algunas formas de realización, los concentrados de fosfolípidos de krill comprenden preferiblemente menos del 1 % p/p de sales inorgánicas, más preferiblemente menos del 0,5 % p/p de sales inorgánicas, incluso más preferiblemente menos del 0,2 % p/p de sales inorgánicas, y la mayoría preferiblemente menos de aproximadamente 0,1 % o 0,05 % p/p de sales inorgánicas, donde p/p se refiere al peso de las sales inorgánicas como porcentaje del peso total del concentrado de fosfolípidos de krill. En algunas formas de realización, el concentrado de fosfolípidos de krill comprende preferiblemente menos de aproximadamente 5 mg N/100 g, más preferiblemente menos de aproximadamente 3 mg N/100 g, incluso más preferiblemente menos de aproximadamente 2 mg N/100 g, y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 1 mg N/100 g de TMAO, donde el contenido de N sirve como un indicador conveniente del contenido de óxido de trimetilamina (TMAO). En algunas formas de realización, los concentrados de fosfolípidos de krill comprenden menos de aproximadamente 10 ppm de cobre (Cu++), más preferiblemente menos de aproximadamente 5 ppm de Cu++, incluso más preferiblemente menos de aproximadamente 2 ppm de Cu++, y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 1 ppm Cu++. En algunas formas de realización, los concentrados de fosfolípidos de krill comprenden menos de aproximadamente 10 ppm de arsénico total (As3+ ), más preferiblemente menos de aproximadamente 5 ppm de arsénico total, incluso más preferiblemente menos de aproximadamente 3 ppm de arsénico total y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 1 ppm de arsénico total. En algunas formas de realización, el concentrado de fosfolípidos de krill comprende preferiblemente de aproximadamente 0,01 % a 2 % p/p de ésteres etílicos, más preferiblemente de aproximadamente 0,01 % a aproximadamente 1,5 % p/p de ésteres etílicos, y más preferiblemente de aproximadamente 0,01 % a aproximadamente 1 % p/p ésteres etílicos, donde p/p se refiere al peso de los ésteres etílicos como porcentaje del peso total del concentrado de fosfolípidos de krill. En algunas formas de realización, el concentrado de fosfolípidos de krill comprende preferiblemente menos de aproximadamente 5 %, 4 %, 3 % o 2 % p/p de ésteres etílicos hasta un límite inferior de 0,01 % de ésteres etílicos (es decir, entre 5 % y 0,01 % p/p de ésteres etílicos, entre el 4 % y el 0,01 % p/p de ésteres etílicos, entre el 3 % y el 0,01 % p/p de ésteres etílicos, o entre el 2 % y el 0,01 % p/p de ésteres etílicos), más preferentemente menos de aproximadamente el 1,5 % p/p de ésteres etílicos ésteres de etilo, y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 1 % p/p de ésteres de etilo, donde p/p se refiere al peso de los ésteres de etilo como un porcentaje del peso total del concentrado de fosfolípidos de krill. En algunas formas de realización, el concentrado de fosfolípidos de krill tiene una conductividad de menos de aproximadamente 50 pS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en 95 % de etanol, más preferiblemente una conductividad de menos de aproximadamente 30 pS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca. materia seca en etanol al 95 %, y lo más preferiblemente una conductividad de menos de aproximadamente 20 pS/cm, 10 pS/cm, 5 pS/cm o 1 pS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en etanol al 95 %. En algunas formas de realización, el concentrado de fosfolípidos de krill tiene una viscosidad de alrededor de 400 a 2000 mPas a 35 °C, más preferiblemente de alrededor de 500 a 1800 mPas a 35 °C, y lo más preferiblemente de alrededor de 600 a 1600 mPas a 35 °C. En algunas formas de realización, el concentrado de fosfolípidos de krill tiene un pH de aproximadamente 6,7 a 8,3 cuando se mide en etanol al 95 %.

[0068] En algunas formas de realización, los concentrados de lípidos neutros de krill comprenden preferiblemente, sobre una base de materia seca, de aproximadamente 70 % p/p a 95 % p/p de triglicéridos, más preferiblemente de aproximadamente 75 % p/p a aproximadamente 95 % p/p. triglicéridos, y lo más preferiblemente alrededor del 88 % al 92 % p/p de triglicéridos, donde p/p se refiere al peso de los triglicéridos como un porcentaje del peso total del concentrado de lípidos neutros de krill. En algunas formas de realización, los concentrados de lípidos neutros de krill comprenden preferiblemente de aproximadamente 2 % p/p a 20 % p/p de fosfolípidos, más preferiblemente de aproximadamente 4 % p/p a aproximadamente 15 % p/p de fosfolípidos, y más preferiblemente aproximadamente 5 % a 10 % p/p de fosfolípidos, donde p/p se refiere al peso de los fosfolípidos como porcentaje del peso total del concentrado de lípidos neutros de krill.

[0069] En algunas formas de realización, los concentrados de lípidos neutros de krill comprenden preferiblemente de aproximadamente 0,5 % p/p a 10 % p/p de ácidos grasos libres, más preferiblemente de aproximadamente 1 % p/p a aproximadamente 8 % p/p de ácidos grasos libres, y lo más preferiblemente de aproximadamente 1 % a 5 % p/p de ácidos grasos libres, donde p/p se refiere al peso de los ácidos grasos libres como un porcentaje del peso total del concentrado de lípidos neutros de krill. En algunas formas de realización, los concentrados de lípidos neutros de krill comprenden preferiblemente de aproximadamente 0,1 % p/p a 2 % p/p de lisofosfolípidos, más preferiblemente de aproximadamente 0,2 % p/p a aproximadamente 1,0 % p/p de lisofosfolípidos, y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 0,5 % p/p o 0,2 % p/p de lisofosfolípidos, donde p/p se refiere al peso de los lisofosfolípidos como porcentaje del peso total del concentrado de lípidos neutros de krill. En algunas formas de realización, los concentrados de lípidos neutros de krill comprenden preferiblemente menos de aproximadamente 1 % p/p de sales inorgánicas, más preferiblemente menos de aproximadamente 0,5 % p/p de sales inorgánicas, incluso más preferiblemente menos de aproximadamente 0,2 % p/p de sales inorgánicas, y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 0,1 % o 0,05 % p/p de sales inorgánicas, donde p/p se refiere al peso de las sales inorgánicas como porcentaje del peso total del concentrado de lípidos neutros de krill. En algunas formas de realización, el concentrado de lípidos neutros de krill comprende preferiblemente menos de aproximadamente 5 mg N/100 g, más preferiblemente menos de aproximadamente 3 mg N/100 g, incluso más preferiblemente menos de aproximadamente 2 mg N/100 g, y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 1 mg N/100g, donde el contenido de N sirve como un indicador conveniente del contenido de óxido de trimetilamina (TMAO). En algunas formas de realización, los concentrados de lípidos neutros de krill comprenden menos de aproximadamente 10 ppm de cobre (Cu++), más preferiblemente menos de aproximadamente 5 ppm de Cu++, incluso más preferiblemente menos de aproximadamente 2 ppm de Cu++, y lo más preferiblemente menos de aproximadamente alrededor de 1 ppm de Cu++. En algunas formas de realización, los concentrados de lípidos neutros de krill comprenden menos de aproximadamente 10 ppm de arsénico total (As3+), más preferiblemente menos de aproximadamente 5 ppm de arsénico total, incluso más preferiblemente menos de aproximadamente 3 ppm de arsénico total y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 1 ppm total de arsénico. En algunas formas de realización, el concentrado de lípidos neutros de krill comprende preferiblemente de aproximadamente 0,01 % a 2 % p/p de ésteres etílicos, más preferiblemente de aproximadamente 0,01 % a aproximadamente 1,5 % p/p de ésteres etílicos, y lo más preferiblemente de aproximadamente 0,01 % a aproximadamente 1 % p/p de ésteres etílicos, donde p/p se refiere al peso de los ésteres etílicos como porcentaje del peso total del concentrado de lípidos neutros de krill. En algunas formas de realización, el concentrado de lípidos neutros de krill comprende preferiblemente menos de aproximadamente 2 % p/p de ésteres etílicos, más preferiblemente menos de aproximadamente 1,5 % p/p de ésteres etílicos y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 1 % p/p de ésteres etílicos, en donde p/p se refiere al peso de los ésteres etílicos como porcentaje del peso total del concentrado de lípidos neutros de krill. En algunas formas de realización, el concentrado de lípidos neutros de krill tiene una conductividad de menos de aproximadamente 50 pS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en 95 % de etanol, más preferiblemente una conductividad de menos de aproximadamente 30 pS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en etanol al 95 %, y lo más preferiblemente una conductividad de menos de aproximadamente 20 pS/cm, 10 pS/cm, 5 pS/cm o 1 pS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en 95 % etanol. En algunas formas de realización, el concentrado de lípidos neutros de krill tiene una viscosidad de menos de aproximadamente 400 mPas a 25 °C, más preferiblemente menos de aproximadamente 300 mPas a 25 °C y lo más preferiblemente menos de aproximadamente 200 mPas a 25 °C. En algunas formas de realización, el concentrado de lípidos neutros de krill tiene un pH de aproximadamente 7,0 a 9,0 cuando se mide en etanol al 95 %.

5. Formulación de composiciones de fosfolípidos de krill

[0070] Las composiciones de fosfolípidos de krill de la presente invención se administran preferiblemente por vía oral. En consecuencia, en algunas formas de realización, las composiciones de esta invención (como las descritas en las secciones anteriores) están contenidas en excipientes y/o vehículos aceptables para consumo oral. La forma real del vehículo y, por lo tanto, la composición en sí misma, no es crítica. El vehículo puede ser un líquido, gel, gelcap, cápsula, polvo, tableta sólida (recubierta o no recubierta), té o similar. La composición está preferiblemente en forma de tableta o cápsula y lo más preferiblemente en forma de cápsula de gelatina blanda. Excipientes y/o vehículos adecuados incluyen aceite vegetal, aceite de pescado, aceite de krill, maltodextrina, carbonato de calcio, fosfato dicálcico, fosfato tricálcico, celulosa microcristalina, dextrosa, harina de arroz, estearato de magnesio, ácido esteárico, croscarmelosa sódica, glicolato de almidón sódico, crospovidona, sacarosa, gomas vegetales, lactosa, metilcelulosa, povidona, carboximetilcelulosa, almidón de maíz y similares (incluidas sus mezclas). Los vehículos preferidos incluyen carbonato de calcio, estearato de magnesio, maltodextrina y mezclas de los mismos. Los diversos ingredientes y el excipiente y/o vehículo se mezclan y se les da la forma deseada usando técnicas convencionales. La tableta o cápsula de la presente invención se puede recubrir con un recubrimiento entérico que se disuelve a un pH de aproximadamente 6,0 a 7,0. Un recubrimiento entérico adecuado que se disuelve en el intestino delgado pero no en el estómago es el ftalato de acetato de celulosa. Se pueden encontrar más detalles sobre las técnicas de formulación y administración en la última edición de Remington's Pharmaceutical Sciences (Maack Publishing Co., Easton, PA). Para la administración intravenosa u oral, los compuestos omega-3 y las composiciones de la presente invención se pueden proporcionar preferiblemente como emulsiones.

[0071] En algunas formas de realización, las composiciones de fosfolípidos de krill se formulan para administración oral con agentes aromatizantes o edulcorantes. Los ejemplos de aromatizantes útiles incluyen, entre otros, extracto de anís puro, extracto de plátano de imitación, extracto de cereza de imitación, extracto de chocolate, extracto de limón puro, extracto de naranja puro, extracto de menta pura, extracto de piña de imitación, extracto de ron de imitación, extracto de fresa de imitación., o extracto puro de vainilla; o aceites volátiles, tales como aceite de bálsamo, aceite de laurel, aceite de bergamota, aceite de cedro, aceite de nuez, aceite de cereza, aceite de canela, aceite de clavo o aceite de menta; mantequilla de maní, saborizante de chocolate, miga de galleta de vainilla, caramelo o caramelo. En una forma de realización, el suplemento dietético contiene cacao o chocolate. Se pueden agregar emulsionantes para la estabilidad del producto final. Los ejemplos de emulsionantes adecuados incluyen, entre otros, lecitina (p. ej., de huevo o soja) y/o monoglicéridos y diglicéridos. Otros emulsionantes son fácilmente evidentes para el experto en la materia y la selección del (de los) emulsionante(s) adecuado(s) dependerá, en parte, de la formulación y el producto final. Además de los carbohidratos descritos anteriormente, el suplemento nutricional puede contener edulcorantes naturales o artificiales (preferiblemente bajos en calorías), por ejemplo, sacáridos, ciclamatos, aspartamina, aspartamo, acesulfamo K y/o sorbitol.

[0072] Las composiciones de fosfolípidos de krill de la presente invención también pueden administrarse como suplementos dietéticos, suplementos nutricionales o alimentos funcionales.

[0073] El suplemento dietético puede comprender uno o más ingredientes inertes, especialmente si es deseable limitar el número de calorías añadidas a la dieta por el suplemento dietético. Por ejemplo, el suplemento dietético de la presente invención también puede contener ingredientes opcionales que incluyen, por ejemplo, hierbas, vitaminas, minerales, potenciadores, colorantes, edulcorantes, saborizantes, ingredientes inertes y similares. Por ejemplo, el suplemento dietético de la presente invención puede contener uno o más de los siguientes: asorbatos (ácido ascórbico, sales minerales de ascorbato, escaramujo, acerola y similares), dehidroepiandosterona (DHEA), té verde (polifenoles), inositol, algas marinas, dulse, bioflavonoides, maltodextrina, ortigas, niacina, niacinamida, romero, selenio, sílice (dióxido de silicio, gel de sílice, cola de caballo, hierba de afeitar y similares), espirulina, zinc y similares. Dichos ingredientes opcionales pueden ser formas naturales o concentradas.

[0074] En algunas formas de realización, los suplementos dietéticos comprenden además vitaminas y minerales que incluyen, entre otros, fosfato o acetato de calcio, tribásicos; fosfato de potasio, dibásico; sulfato u óxido de magnesio; sal (cloruro de sodio); cloruro o acetato de potasio; ácido ascórbico; ortofosfato férrico; niacinamida; sulfato u óxido de zinc; pantotenato de calcio; gluconato de cobre; riboflavina; betacaroteno; clorhidrato de piridoxina; mononitrato de tiamina; ácido fólico; biotina; cloruro de cromo o picolonato; yoduro de potasio; selenato de sodio; molibdato de sodio; filoquinona; vitamina D3; cianocobalamina; selenito de sodio; sulfato de cobre; vitamina A; vitamina C; inositol; yoduro de potasio. Se pueden obtener dosis adecuadas de vitaminas y minerales, por ejemplo, consultando las directrices de la RDA de EE. UU.

[0075] En otras formas de realización, la presente invención proporciona complementos nutricionales (p. ej., barritas energéticas o barritas sustitutas de comidas o bebidas) que comprenden las composiciones de fosfolípidos de krill de la presente invención. En formas de realización preferidas, los complementos nutricionales comprenden una cantidad eficaz de los componentes descritos anteriormente. El suplemento nutricional puede servir como sustituto de una comida o un refrigerio y, en general, proporciona calorías de nutrientes. Preferentemente, los suplementos nutricionales aportan carbohidratos, proteínas y grasas en cantidades equilibradas. El complemento nutricional puede comprender además hidratos de carbono, polisacáridos simples, de cadena media o polisacáridos, o una combinación de los mismos. Se puede elegir un azúcar simple por sus propiedades organolépticas deseables. La maicena cruda es un ejemplo de carbohidrato complejo. Si se desea que mantenga su estructura de alto peso molecular, debe incluirse solo en formulaciones de alimentos o porciones de los mismos que no se cocinen ni se procesen con calor, ya que el calor descompondrá el carbohidrato complejo en carbohidratos simples, en los que los carbohidratos simples son mono- o disacáridos. El suplemento nutricional contiene, en una forma de realización, combinaciones de fuentes de carbohidratos de tres niveles de longitud de cadena (simple, medio y complejo; por ejemplo, sacarosa, maltodextrinas y almidón de maíz crudo).

[0076] En aún otras formas de realización, la presente invención proporciona productos alimenticios, productos alimenticios preparados o alimentos (es decir, alimentos funcionales) que comprenden las composiciones de fosfolípidos de krill de la presente invención. En formas de realización preferidas, los alimentos comprenden una cantidad eficaz de los componentes descritos anteriormente. Por ejemplo, en algunas formas de realización, bebidas y alimentos sólidos o semisólidos que comprenden los ácidos grasos o derivados se proporcionan. Estas formas pueden incluir, entre otras, bebidas (p. ej., refrescos, leche y otras bebidas lácteas y bebidas dietéticas), productos horneados, pudines, productos lácteos, dulces, refrigerios o dulces congelados o novedades (p. ej., helados, batidos de leche), comidas congeladas preparadas, dulces, bocadillos (p. ej., papas fritas), sopas, pastas para untar, salsas, aderezos para ensaladas, productos cárnicos preparados, queso, yogur y cualquier otro alimento que contenga grasa o aceite e ingredientes alimentarios ( ej., harina de trigo).

[0077] En algunas formas de realización preferidas, las composiciones de fosfolípidos de krill se incorporan en matrices masticables. Matrices masticables preferidas son caramelos de gelatina y caramelos de goma a base de gelatina. Caramelos de goma a modo de ejemplo incluyen ositos de goma, gusanos de goma, ranas de goma, hamburguesas de goma, cerezas de goma, botellas de refresco de goma, tiburones de goma, soldados de goma, hipopótamos de goma, langostas de goma, sandías de goma, pulpos de goma, manzanas de goma, duraznos de goma y naranjas Los términos "gummi" y "gomoso" se usan indistintamente en este documento.

[0078] En algunas formas de realización particularmente preferidas, el material de matriz masticable es un material edulcorado comúnmente denominado caramelo gomoso o material de gelatina. Los dulces gomosos o dulces de gelatina son un tipo general amplio de dulces masticables a base de gelatina. Los ositos de goma son los caramelos de goma más populares y conocidos. También se proporcionan otras formas y los dulces gomosos a veces se combinan con otras formas de dulces, como malvaviscos y chocolates, y también se hacen amargos.

[0079] En formas de realización preferidas, el material de matriz masticable comprende un agente gelificante, que puede ser cualquier agente gelificante fisiológicamente tolerable (preferiblemente un sacárido (p. ej., un oligosacárido o polisacárido), una proteína o una glicoproteína) o una combinación capaz de formar un gel blando, Gel masticable autoportante masticable. Muchos de estos materiales se conocen de la industria alimentaria y farmacéutica y se analizan, por ejemplo, en Handbook of hydrocolloids, G O Phillips y P A Williams (Eds.), Woodhead Publishing, Cambridge, Reino Unido, 2000. Los agentes gelificantes son preferentemente materiales capaces de experimentar una transformación solgel, por ejemplo, bajo la influencia de un cambio en parámetros fisicoquímicos tales como temperatura, pH, presencia de iones metálicos (por ejemplo, iones metálicos del grupo 1 o 2), etc. Los agentes gelificantes preferidos incluyen gelatinas, alginatos y carragenanos. Sin embargo, se prefiere especialmente el uso de gelatinas ya que se asegura la ruptura en la garganta de los fragmentos atrapados y como núcleos que tienen las propiedades deseadas se pueden producir fácilmente usando gelatinas.

[0080] Las gelatinas utilizadas como gelificantes en la matriz masticable de la invención pueden ser producidas a partir del colágeno de cualquier mamífero o del colágeno de cualquier especie acuática, sin embargo, el uso de gelatina de peces de agua salada y en particular de agua fría y caliente Se prefieren los pescados. Gelatinas que tienen un contenido de aminoácidos de 5 a 25 % en peso se prefieren, más especialmente aquellos que tienen un contenido de aminoácidos de 10 a 25 % en peso. Las gelatinas tendrán típicamente un peso molecular promedio en peso en el rango de 10 a 250 kDa, preferiblemente de 75 a 220 kDa, especialmente de 80 a 200 kDa. Se prefieren las gelatinas que no tienen valor Bloom o valores Bloom bajos de 60-300, 150-300 y especialmente 90-200. Cuando se utiliza una gelatina sin valor Bloom, por ejemplo, una gelatina de pescado de agua fría, normalmente se utilizará junto con otra gelatina u otro agente gelificante. Se prefiere especialmente la combinación de gelatinas de pescado de agua fría y de agua caliente. La gelatina estará típicamente presente en la fase acuosa a una concentración de 1 a 50 % en peso, preferiblemente de 2 a 35 % en peso, particularmente de 5 a 25 % en peso. En el caso de mezclas de gelatina y polisacáridos, la proporción en peso de gelatina a polisacárido en la fase acuosa será típicamente de 50:1 a 5:1, preferiblemente de 40:1 a 9:1, especialmente de 20:1 a 10:1.

[0081] Cuando se usan polisacáridos, o mezclas de polisacáridos y gelatina como agente gelificante, se prefiere usar polisacáridos naturales, polisacáridos sintéticos o polisacáridos semisintéticos, por ejemplo, polisacáridos de plantas, peces, mamíferos terrestres, algas, bacterias y derivados y fragmentación productos de los mismos. Los polisacáridos marinos típicos incluyen carragenanos, alginatos, agares y quitosanos.

[0082] Los polisacáridos vegetales típicos incluyen pectinas. Los polisacáridos de microorganismos típicos incluyen gelanos y escleroglucanos. Se prefiere el uso de polisacáridos cargados, por ejemplo, cargados electrostáticamente y/o sulfatados, así como el uso de polisacáridos marinos, en particular carragenanos, y alginatos, especialmente carragenanos. La familia de los carragenanos, que incluye los carragenanos iota y kappa, es una familia de polisacáridos sulfatados lineales producidos a partir de algas rojas. La unidad de disacárido que se repite en la kappa-carragenina es P-D-galactosa-4-sulfato y 3,6-anhidro-a-D-galactosa, mientras que en la iota-carragenina es p-D-galactosa-4-sulfato y 3,6-anhidro-a-D-galactosa. 6-anhidro-a-D-galactosa-2-sulfato. Tanto los carragenanos kappa como los iota se utilizan en preparaciones alimenticias. Los carragenanos se utilizan como estabilizadores, emulsionantes, gelificantes y sustitutos de grasas.

[0083] Los carragenanos tanto iota como kappa forman geles reversibles de fraguado en frío o en sal en un entorno acuoso. La transición bobina-hélice y la agregación de hélices forman la red de gel. La carragenina kappa tiene sitios de unión para cationes monovalentes específicos, lo que da como resultado la formación de gel con módulos elásticos y de cizallamiento decrecientes en el orden Cs+>K+>>Na+>Li+. Como regla general, una concentración creciente de sal mejora el módulo elástico y las temperaturas de fraguado y fusión de un gel de kappa-carragenano. Se prefiere el uso de compuestos de potasio, rubidio o cesio solubles en agua, en particular compuestos de potasio y, en particular, compuestos de origen natural (por ejemplo, sales) cuando se usa kappa-carragenina de acuerdo con la invención, por ejemplo, en concentraciones de hasta 100 mM, más especialmente hasta 50 mM. También se encuentra una transición conformacional dependiente de la sal para la iota-carragenina. También se sabe que las moléculas experimentan una transición espiralhélice con una fuerte estabilización de hélice en presencia de cationes multivalentes, como Ca2+. El uso de compuestos solubles en agua de calcio, estroncio, bario, hierro o aluminio, especialmente calcio, y particularmente compuestos de origen natural (p. ej. sales) se prefiere cuando se usa iota-carragenano de acuerdo con la invención, por ejemplo, en concentraciones de hasta 100 mM.

[0084] Los agentes gelificantes de polisacáridos usados de acuerdo con la invención tendrán típicamente pesos moleculares promedio de 5 kDa a 2 MDa, preferiblemente de 10 kDa a 1 MDa, lo más preferiblemente de 100 kDa a 900 kDa, particularmente de 200 a 800 kDa. Se utilizarán típicamente en concentraciones de 0,01 a 5 % en peso, preferiblemente de 0,1 a 1,5 % en peso, particularmente de 0,2 a 1 % en peso en la fase acuosa. Cuando se incluyen en la fase acuosa cationes monovalentes o multivalentes, típicamente iones metálicos del grupo 1 o del grupo 2, esto será típicamente en concentraciones en el rango de 2,5 a 100 mM, particularmente de 5 a 50 mM.

[0085] Además del agente gelificante y el agua y cualquier iniciador de gelificación requerido, otros materiales fisiológicamente tolerables pueden estar presentes en la matriz masticable, por ejemplo, emulsionantes, estabilizadores de emulsión, modificadores de pH, modificadores de viscosidad, edulcorantes, rellenos, vitaminas (por ejemplo, vitamina C, tiamina, riboflavina, niacina, vitamina B6, vitamina B12, folacina, ácido pantoténico), minerales, aromas, sabores, agentes de preparación, colorantes, agentes fisiológicamente activos, etc., como se describe anteriormente en detalle en relación con los materiales de adición que se pueden incluir en la composición de ácidos grasos oxidables.

[0086] La matriz masticable tiene preferiblemente una temperatura de gelificación en el rango de 10 a 30 °C, más preferiblemente de 15 a 28 °C, y una temperatura de fusión en el rango de 20 a 80 °C, más preferiblemente de 24 a 60 °C, especialmente de 28 a 50 °C.

[0087] Cuando se incluye un edulcorante en la matriz masticable, normalmente se seleccionará entre edulcorantes naturales como sacarosa, fructosa, glucosa, glucosa reducida, maltosa, xilitol, maltitol, sorbitol, manitol, lactitol, isomalta, eritritol, poliglicitol, poliglucitol, glicerol, stevia, néctar de agave, jarabe de inverti y edulcorantes artificiales como aspartamo, acesulfamo-K, neotamo, sacarina, sucralosa. Se prefiere el uso de edulcorantes no cariogénicos y se prefiere especialmente el uso de xilitol. Los aromatizantes preferidos incluyen naranja, frambuesa, cereza, limón, naranja sanguina, pomelo, fresa, arándano, mora y combinaciones de los mismos, especialmente naranja y frambuesa.

[0088] La producción en masa de dulces de goma (por ejemplo, ositos de goma) incluye mezclar los ingredientes del dulce de goma y verter la mezcla resultante en muchas bandejas/moldes revestidos con almidón (por ejemplo, revestidos con almidón de maíz). El almidón de maíz evita que los ositos de goma se peguen al molde y permite que se desprendan fácilmente una vez que estén listos. Primero, se crean los moldes de personajes deseados y, si es necesario, se duplican con una máquina. Opcionalmente, se aplica polvo de almidón a los moldes de caracteres. Los ingredientes de la confitería de gummi, como el azúcar, el jarabe de glucosa, la gelatina y el agua, se mezclan y calientan. En un aspecto, los ingredientes se mezclan con colores y sabores que dan a los ositos su aspecto y sabor característicos. La mezcla de gelatina fundida se vierte en los moldes y se deja enfriar y fraguar antes del envasado o consumo. Preferiblemente, el dulce de goma se calienta posteriormente y se coloca en un tambor giratorio grande para aplicar una composición de Bacillus coagulans aislado y un edulcorante (por ejemplo, un azúcar).

[0089] En algunas formas de realización preferidas, la producción de dulces de goma incluye lo siguiente. Se forman un lote de coloides y un lote de puré y se combinan con jarabe de maíz y azúcar para formar una suspensión base. El lote de coloide comprende una solución del agente gelificante en agua a un nivel de 5 a 15 % en peso del agente gelificante, más preferiblemente de 7 a 12 % del agente gelificante basado en el peso total del lote de coloide. El lote de coloides se mantiene a una temperatura de 77 a 88°C (170 a 190 F). El lote de puré comprende preferiblemente agua, puré de frutas y/o jarabe de maíz con alto contenido de fructosa u otros edulcorantes, almidón de ebullición diluido y citrato de sodio. Se mantiene a una temperatura de 18 a 24°C (65 a 75F). Preferiblemente, el puré de fruta tiene un % en peso de sacarosa (Brix) de 10 a 45, más preferiblemente de 25 a 40. Opcionalmente, el lote de puré incluye una pluralidad de purés de fruta. El puré de frutas comprende un puré de frutas típico, un zumo de frutas o un polvo de frutas. El lote de puré comprende de 30 a 40 % en peso de agua, de 0 a 40 % en peso de puré de frutas, de 0 a 40 % en peso de jarabe de maíz rico en fructosa, de 25 a 35 % en peso de almidón de ebullición diluido y de 0,0 a Citrato de sodio al 2,0 % en peso. En un recipiente de mezcla se combina de 25 a 40 % en peso de jarabe de maíz adicional con de 15 a 40 % en peso de azúcar granulada fina, de 10 a 15 % en peso de la carga coloidal y de 20 a 30 % en peso del lote de puré para formar la suspensión base. Preferiblemente, el jarabe de maíz es aproximadamente 42 DE jarabe de maíz, sin embargo, como comprenderá un experto en la materia, podrían usarse otros jarabes de maíz DE. Los componentes de la lechada base se mezclan completamente y se mantienen a una temperatura de 54 a 66 °C (130 a 150 °F) en un tanque de retención.

[0090] La suspensión base luego se cuece para llevar el % en peso de sacarosa (Brix) de 70 a 85, más preferiblemente a un % en peso de sacarosa (Brix) de 75 a 80. En una forma de realización, la suspensión base se pasa a través de una estufa de bobina y se calienta a una temperatura de 121 a 163°C (250 a 325F) para cocinarlo. Se podrían usar otros métodos de cocción como comprenderá un experto en la materia. La suspensión de base cocida se somete preferiblemente a vacío para aumentar aún más el % en peso de sacarosa (Brix) al rango deseado. La suspensión base cocida se mantiene a aproximadamente 93 °C (200 °F) hasta que se use. Preferiblemente, se añade una solución acidulante junto con color y sabor a la suspensión base cocida justo antes de la deposición en los moldes de almidón. En un aspecto, la solución acidulante comprende ácido ascórbico presente en una cantidad de 15 a 20 % en peso, ácido cítrico presente en una cantidad de 10 a 20 % en peso y ácido málico presente en una cantidad de 5 a 10 % en peso. % en peso comprendiendo el resto agua. Como comprenderá un experto en la materia, podrían usarse otros ácidos comestibles en lugar de o además de los enumerados. En un aspecto, del 95 al 97 % en peso de la suspensión base cocida se combina con del 2 al 3 % en peso de la solución acidulante y el resto comprende sabores y colores. Opcionalmente, se utiliza una solución acidulante para llevar el pH de la suspensión base de 2,6 a 3,2. Un experto normal en la técnica no tendría dificultad para seleccionar colores y sabores adecuados. A continuación, la mezcla combinada se deposita en moldes de almidón, por ejemplo, utilizando una máquina de moldeo de almidón Mogul. Tales máquinas de moldeo de almidón son bien conocidas por los expertos en la materia. En un aspecto, se depositan de 0,3 a 3 gramos de la suspensión base en cada cavidad del molde. En algunas formas de realización preferidas, la máquina de moldeo de almidón ("Mogul") utilizada para formar los ositos de goma comprende dos boquillas para cada molde y un dispositivo para la entrega de pequeñas cápsulas de gelatina blanda. La primera boquilla proporciona aproximadamente el 40 % del volumen del molde antes de colocar una cápsula en el molde. Finalmente, la segunda boquilla llena el molde. A continuación, el osito de goma que contiene la cápsula se enfría rápidamente. Las bandejas de almidón con la suspensión base depositada se transfieren a una sala de secado donde se mantienen de 12 a 48 horas. Opcionalmente, las bandejas se mantienen primero a una temperatura de 54 a 66°C (130 a 150F) durante 10 a 15 horas, y luego se enfrían a 21 a 27°C (70 a 80F) y se mantienen a esa temperatura durante 6 a 12 horas. A continuación, los trozos de comida moldeados con almidón gelificado se retiran de las bandejas y el almidón se recicla.

[0091] En algunas formas de realización de la invención, se contempla que el aceite dentro de la cápsula esté protegido de la hidrólisis por el agua presente en el producto. Los caramelos de goma y otros dulces de gelatina contienen cantidades bastante altas de agua y, además, la acidez es baja para contrarrestar el crecimiento de bacterias.

[0092] En algunas formas de realización, la presente invención proporciona composiciones que comprenden las composiciones de fosfolípidos de krill descritas anteriormente y uno o más derivados de ácidos grasos omega-3 adicionales o ácidos grasos libres. Los derivados de ácidos grasos omega-3 o ácidos grasos libres pueden derivarse del extracto de lípidos neutros o de una fuente adicional, como aceite de pescado o concentrado de éster omega-3. En algunas formas de realización, uno o más derivados de ácidos grasos omega-3 adicionales se seleccionan de ésteres omega-3 y glicéridos. Por ejemplo, en algunas formas de realización, la composición puede comprender de aproximadamente 1 % a aproximadamente 60 % p/p de la composición de aceite de krill (es decir, peso de compuestos de fosfolípidos/peso total de la composición), con el 99 % a 40 % p/p restante de la composición siendo glicéridos, ésteres o ácidos grasos libres omega-3 o una combinación de los mismos (es decir, peso de glicéridos, ésteres o ácidos grasos libres omega-3 o una combinación de los mismos/peso total de la composición). En algunas formas de realización, la composición puede comprender de aproximadamente 5 % a aproximadamente 60 % p/p de fosfolípidos, siendo el restante 95 % a 40 % p/p de la composición glicéridos omega-3, ásteres o ácidos grasos libres o una combinación del mismo. En algunas formas de realización, la composición puede comprender de aproximadamente 20 % a aproximadamente 60 % p/p de fosfolípidos, siendo el restante 80 % a 40 % p/p de la composición glicéridos omega-3, ásteres o ácidos grasos libres o una combinación del mismo. En algunas formas de realización, la composición puede comprender de aproximadamente 30 % a aproximadamente 60 % p/p de fosfolípidos, siendo el restante 70 % a 40 % p/p de la composición glicéridos omega-3, ásteres o ácidos grasos libres o una combinación del mismo. En algunas formas de realización, la composición puede comprender de aproximadamente 40 % a aproximadamente 60 % p/p de fosfolípidos, siendo el restante 60 % a 40 % p/p de la composición glicéridos omega-3, ásteres o ácidos grasos libres o una combinación del mismo. En algunas formas de realización, la composición puede comprender de aproximadamente 50 % a aproximadamente 60 % p/p de fosfolípidos, siendo el restante 50 % a 40 % p/p de la composición glicéridos omega-3, ésteres o ácidos grasos libres o una combinación del mismo.

• Usos de las composiciones de fosfolípidos de krill

[0093] Las composiciones descritas anteriormente se pueden administrar a un sujeto que las necesite para tratar una enfermedad o afección asociada con los glóbulos rojos y las membranas celulares y, en particular, una enfermedad o afección asociada con una anomalía en los glóbulos rojos. células de las membranas celulares. La afección o enfermedad puede ser anemia de células falciformes, anemia de células falciformes o rasgo de células falciformes. Alternativamente, la afección o enfermedad puede ser talasemia (alfa, beta o delta), talasemia en combinación con una hemoglobinopatía (hemoglobina E, hemoglobina S o hemoglobina C), esplenomegalia o anomalías de la membrana como acantocitos o espuela/espiga. células, codocitos (células diana), equinocitos (células de rebaba), eliptocitos y ovalocitos, esferocitos, estomatocitos (células de la boca) y degmocitos ("células de mordida").

[0094] Se puede administrar una cantidad eficaz de las composiciones descritas anteriormente a un sujeto que lo necesite para tratar o prevenir un trastorno cardiovascular o síndrome metabólico. El trastorno cardiovascular puede seleccionarse de aterosclerosis, arteriosclerosis, enfermedad coronaria (arteria carótida) (CHD o CAD), síndrome coronario agudo (o SCA), enfermedad cardíaca valvular, trastornos de las válvulas aórtica y mitral, arritmia/fibrilación auricular, cardiomiopatía y enfermedad cardíaca. insuficiencia cardíaca, angina de pecho, infarto agudo de miocardio (o IAM), hipertensión, hipotensión ortostática, shock, embolia (pulmonar y venosa), endocarditis, enfermedades de las arterias, la aorta y sus ramas, trastornos del sistema vascular periférico (enfermedad arterial periférica o PAD), enfermedad de Kawasaki, cardiopatía congénita (defectos cardiovasculares) y accidente cerebrovascular (enfermedad cerebrovascular), dislipidemia, hipertrigliceridemia, hipertensión, insuficiencia cardíaca, arritmias cardíacas, niveles bajos de HDL, niveles altos de LDL, angina estable, enfermedad coronaria, infarto agudo de miocardio, prevención secundaria de infarto de miocardio, miocardiopatía, endocarditis, diabetes tipo 2, resistencia a la insulina, glucosa alterada tolerancia, hipercolesterolemia, accidente cerebrovascular, hiperlipidemia, hiperlipoproteinemia, enfermedad renal crónica, claudicación intermitente, hiperfosfatemia, deficiencia de omega-3, deficiencia de fosfolípidos, aterosclerosis carotídea, enfermedad arterial periférica, nefropatía diabética, hipercolesterolemia en infección por VIH, síndrome coronario agudo (SCA), enfermedad del hígado graso no alcohólico/esteatohepatitis no alcohólica (NAFLD/NASH), enfermedades arteriales oclusivas, aterosclerosis cerebral, arteriosclerosis, trastornos cerebrovasculares, isquemia miocárdica, coagulopatías que conducen a la formación de trombos en un vaso y neuropatía autonómica diabética.

[0095] Se puede administrar una cantidad eficaz de las composiciones descritas anteriormente a un sujeto que lo necesite para tratar, prevenir o mejorar la cognición y/o una enfermedad, trastorno o deterioro cognitivo (memoria, concentración, aprendizaje (déficit)), o para tratar o prevenir trastornos neurodegenerativos. La enfermedad, trastorno o deterioro cognitivo puede seleccionarse entre Trastorno por Déficit de Atención (ADD), Trastorno por Déficit de Atención con Hiperactividad (TDAH), autismo/trastorno del espectro autista (TEA), (dislexia, deterioro de la memoria asociado con la edad y trastornos del aprendizaje, amnesia, deterioro cognitivo, deterioro cognitivo sin demencia, enfermedad de pre-Alzheimer, enfermedad de Alzheimer, epilepsia, enfermedad de Pick, enfermedad de Huntington, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Lou Gehrig, síndrome de predemencia, demencia con cuerpos de Lewy, atrofia dentorrubropalidoluisiana, ataxia de Freidreich, atrofia de sistemas múltiples, ataxia espinocerebelosa de tipos 1,2, 3, 6, 7, esclerosis lateral amiotrófica, paraparesia espástica familiar, atrofia muscular espinal, atrofia muscular espinal y bulbar, deterioro cognitivo relacionado con la edad, deterioro cognitivo, deterioro mental moderado, deterioro mental como un resultado del envejecimiento, condiciones que influyen en la intensidad de las ondas cerebrales y/o la utilización de glucosa cerebral, estrés, ansiedad, estafa deterioro de la concentración y la atención, deterioro del estado de ánimo, bienestar general cognitivo y mental, neurodesarrollo, trastornos neurodegenerativos, trastornos hormonales, desequilibrio neurológico o cualquier combinación de los mismos. En una forma de realización específica, el trastorno cognitivo es un deterioro de la memoria.

[0096] Se puede administrar una cantidad eficaz de las composiciones descritas anteriormente a un sujeto que lo necesite para inhibir, prevenir o tratar la inflamación o una enfermedad inflamatoria. La inflamación o enfermedad inflamatoria puede seleccionarse del rechazo del trasplante de órganos; lesión por reoxigenación resultante del trasplante de órganos (ver Grupp et al., J. Mol. Cell. Cardiol. 31: 297-303 (1999)) que incluye, entre otros, el trasplante de los siguientes órganos: corazón, pulmón, hígado y riñón ; enfermedades inflamatorias crónicas de las articulaciones, incluyendo artritis, artritis reumatoide, osteoartritis y enfermedades óseas asociadas con una mayor reabsorción ósea; enfermedades inflamatorias del intestino (IBD) tales como ileítis, colitis ulcerosa (UC), síndrome de Barrett y enfermedad de Crohn (CD); enfermedades pulmonares inflamatorias tales como asma, síndrome de dificultad respiratoria aguda (SDRA) y enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC); enfermedades inflamatorias del ojo que incluyen distrofia corneal, tracoma, oncocercosis, uveítis, oftalmitis simpática y endoftalmitis; enfermedades inflamatorias crónicas de las encías, incluyendo gingivitis y periodontitis; enfermedades inflamatorias del riñón que incluyen complicaciones urémicas, glomerulonefritis y nefrosis; enfermedades inflamatorias de la piel que incluyen esclerodermatitis, psoriasis y eccema; enfermedades inflamatorias del sistema nervioso central, incluyendo enfermedades desmielinizantes crónicas del sistema nervioso, esclerosis múltiple, neurodegeneración relacionada con el SIDA y enfermedad de Alzheimer, meningitis infecciosa, encefalomielitis, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, epilepsia, esclerosis lateral amiotrófica y encefalitis viral o autoinmune, preeclampsia; insuficiencia hepática crónica, trauma cerebral y de la médula espinal y cáncer. La enfermedad inflamatoria también puede ser una inflamación sistémica del cuerpo, ejemplificada por shock grampositivo o gramnegativo, shock hemorrágico o anafiláctico, o shock inducido por quimioterapia contra el cáncer en respuesta a citoquinas proinflamatorias, por ejemplo, shock asociado con citoquinas proinflamatorias. Tal choque puede ser inducido, por ejemplo, por un agente quimioterapéutico que se administra como tratamiento para el cáncer. Otros trastornos incluyen depresión, obesidad, enfermedades alérgicas, eventos cardiovasculares agudos, enfermedades de desgaste muscular y caquexia por cáncer. También la inflamación que resulta de cirugía y trauma puede tratarse con las composiciones de fosfolípidos.

[0097] La cantidad eficaz puede comprender de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 5 gramos de la composición de fosfolípidos de krill, preferiblemente de aproximadamente 0,2 a aproximadamente 3 gramos de la composición de fosfolípidos de krill, y más preferiblemente de aproximadamente 0,5 a aproximadamente 1,5 gramos de la composición de fosfolípidos de krill.

[0098] Las composiciones de fosfolípidos de krill de la presente invención se pueden usar para tratar una variedad de sujetos. Los sujetos adecuados incluyen seres humanos, así como animales domésticos, primates no humanos y animales de compañía tales como perros, gatos y pájaros.

Ejemplos

Ejemplo 1

[0099] Se obtuvieron 10,5 gramos de un aceite de krill libre de sales que contenía aproximadamente un 58 % de lípidos neutros y un 40,5 % de fosfolípidos (medidos por P-NMR). Se colocaron 1,75 gramos de aceite de krill en cada uno de los seis tubos de centrífuga con 7,0 gramos de etanol al 95 % para proporcionar una solución lipídica con un 20 % de materia seca. Los tubos se agitaron vigorosamente a temperatura ambiente y luego se centrifugaron durante 4 minutos a 4000 RPM, lo que proporcionó 715 XG en la parte superior del tubo y 2000 XG en la parte inferior del tubo. A continuación, los tubos se dejaron durante dos noches a 10°C. La fase clara superior se eliminó y se evaporó hasta sequedad. La fase pesada del fondo también se eliminó y se evaporó a sequedad.

[0100] El volumen de la fase superior a 20 °C fue el 92,5 % de la solución inicial. El rendimiento de materia seca a 10°C fue de 6,27 gramos o 60 % de la materia seca inicial. Se midió que el contenido de fosfolípidos de la materia seca era 60,8 % por P-NMR. Aproximadamente el 90 % de los fosfolípidos presentes en el material de partida original se recuperó en la fase superior. Se midió que el contenido de éster de astaxantina de la fase superior era de aproximadamente 52 ppm.

[0101] El volumen de la fase inferior a 20°C fue 7,5 % de la solución inicial. El rendimiento de materia seca a 10°C fue de 4,23 gramos. El contenido de fosfolípidos de la materia seca fue calculado en 9,65 % por P-RMN, y la materia seca contenía aproximadamente 90 % de lípidos neutros. Se calculó que el contenido de éster de astaxantina de la fase inferior era de aproximadamente 419 ppm.

Ejemplo 2

[0102] El ejemplo describe un proceso para preparar un extracto de lípidos de krill crudo. Se añadieron 440 gramos de etanol al 96 % que contenía 10 gramos de HCl 1M a 100 gramos de harina en un reactor y se agitó durante 45 minutos a 40 °C. Luego se vació el contenido del rector a través de un filtro para retener la harina/partículas sólidas. El extracto filtrado se evaporó a 50°C al vacío y se obtuvieron 29,7 gramos de materia seca (29,7 % de rendimiento). La conductividad en el extracto se midió a 616 uS/cm. Este proceso produce un extracto de lípidos de krill crudo que posteriormente se puede desalar y concentrar como se describe en otra parte de este documento.

Ejemplo 3

[0103] Este ejemplo describe el uso de fraccionamiento de alcohol y centrifugación para preparar un concentrado de fosfolípidos de krill. Se mezclaron 10,23 gramos de aceite desalado con 35,60 % de PL con 41 gramos de etanol al 95 % y se agitó fuertemente. A continuación, la muestra se centrifugó a 6 °C y 4000 rpm durante 4 minutos. La fase superior se recogió y se evaporó para producir 6,16 gramos de aceite (61 % de rendimiento). El aceite contenía 54,94 % de PL.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un proceso de alta eficiencia para extraer lípidos de una biomasa marina que comprende:

mezclar dicha biomasa marina con un solvente prótico que tiene una concentración de 90 % a 97 % a una temperatura de aproximadamente 5°C a aproximadamente 65°C a producir una solución lipídica cruda; desalar dicha solución lipídica cruda;

fraccionando dicha solución lipídica cruda desalada ajustando el contenido de materia seca de dicha solución lipídica cruda de aproximadamente 10 % a 40 %, donde la concentración de dicho solvente prótico durante dicha etapa de fraccionamiento es de aproximadamente 65 % a aproximadamente 98 %, y manteniendo dicho solución a alrededor de 0°C a alrededor de 20°C de modo que los fosfolípidos en dicha solución se repartan en una fase ligera y los lípidos neutros en dicha solución se repartan en una fase pesada; y

separar dichas fases pesada y ligera.

2. El método de la reivindicación 1, en el que dicha biomasa marina es una biomasa de krill, preferiblemente en el que dicha biomasa de krill se selecciona del grupo que consiste en harina de krill, coágulos de krill y krill fresco congelado, preferiblemente en el que dicha harina de krill se selecciona del grupo que consiste en cocido harinas de krill y harinas de hidrolizado de krill, preferiblemente en las que dicha harina de krill cocida tiene un contenido de humedad de aproximadamente 5 % a 8 % y es de aproximadamente 12 % a 24 % p/p de lípidos.

3. El método de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, en el que dicho disolvente prótico se selecciona del grupo que consiste en etanol y metanol.

4. El método de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que dichas fases pesada y ligera se separan mediante centrifugación, opcionalmente en el que dicha etapa de centrifugación utiliza una criocentrífuga.

5. El método de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que la concentración de dicho disolvente prótico durante dicha etapa de fraccionamiento es de aproximadamente 92 % a aproximadamente 98 % o de aproximadamente 80 % a aproximadamente 90 % p/p.

6. El método de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, que comprende además el paso de eliminar dicho solvente de dicha fase ligera para proporcionar una composición concentrada de fosfolípidos que comprende de aproximadamente 50 % a aproximadamente 85 % p/p de fosfolípidos y donde la composición tiene uno o más de las siguientes propiedades:

un contenido de triglicéridos de aproximadamente 5 % a 35 % p/p;

un contenido de ácidos grasos libres de aproximadamente 4 % p/p a aproximadamente 11 % p/p;

un contenido de lisofosfolípido de aproximadamente 0,8 % p/p a aproximadamente 7,0 % p/p;

un contenido de sal inorgánica de menos de aproximadamente 0,2 % p/p;

un contenido de nitrógeno de menos de aproximadamente 2 mg N/100 g;

un contenido de cobre de menos de aproximadamente 2 ppm;

un contenido de arsénico de menos de aproximadamente 3 ppm;

un contenido de éster etílico de menos de aproximadamente 1 % p/p;

una conductividad de menos de aproximadamente 20 pS/cm cuando se mide con 5 % de materia seca en 95 % de etanol;

una viscosidad de aproximadamente 500 a 1800 mPas a 35°C; y

un contenido de éster de astaxantina de menos de aproximadamente 100 ppm.

7. El método de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, que comprende además el paso de eliminar dicho solvente de dicha fase pesada para proporcionar una composición lipídica neutra concentrada que comprende de aproximadamente 80 % a aproximadamente 95 % p/p de lípidos neutros y donde la composición tiene una o más de las siguientes propiedades:

un contenido de fosfolípidos de aproximadamente 4 % a 15 % p/p;

un contenido de ácidos grasos libres de aproximadamente 1 % p/p a aproximadamente 8 % p/p;

un contenido de lisofosfolípidos de aproximadamente 0,1 % p/p a aproximadamente 2,0 % p/p;

un contenido de sal inorgánica de menos de aproximadamente 0,2 % p/p;

un contenido de nitrógeno de menos de aproximadamente 2 mg N/100 g;

un contenido de cobre de menos de aproximadamente 2 ppm;

un contenido de arsénico de menos de aproximadamente 3 ppm;

un contenido de éster etílico de menos de aproximadamente 1 % p/p;

una viscosidad de menos de aproximadamente 400 mPas a 25°C; y

un contenido de éster de astaxantina superior a aproximadamente 300 ppm.

8. El método de la reivindicación 7, en el que dicha composición lipídica neutra concentrada comprende de aproximadamente 600 a 2000 ppm de ásteres de astaxantina.

9. Una composición lipídica preparada mediante el método de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8.

10. Un vehículo de administración oral que comprende la composición lipídica de la reivindicación 9, en el que opcionalmente dicho vehículo de administración oral es una cápsula de gelatina blanda.

11. Un suplemento nutricional, suplemento dietético, alimento medicinal o alimento funcional que comprende la composición lipídica de la reivindicación 9.