CN102746941B

CN102746941B - 一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法

Info

Publication number: CN102746941B
Application number: CN201210249120.6A
Authority: CN
Inventors: 刘代成; 马夫翠
Original assignee: Shandong Normal University
Current assignee: Shandong Normal University
Priority date: 2012-07-18
Filing date: 2012-07-18
Publication date: 2014-01-15
Anticipated expiration: 2032-07-18
Also published as: CN102746941A

Abstract

本发明公开了一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法，步骤如下：（1）取1公斤冰冻的南极磷虾，加入到1～1.3升的体积分数为90～100%的乙醇液中，自然条件下搅拌提取4～6次，每次1～3h，提取液过滤合并，得滤液；（2）将上述得到的滤液于60～65°C和-0.07～-0.09MPa条件下浓缩至滤液体积的8～10%，得浓缩提取液；（3）向上述得到的浓缩提取液中加入等体积的正己烷，混匀，静止分层后，取透明微红的最下层液；（4）将上述得到的最下层液于50～55°C和-0.07～-0.09MPa条件下蒸发除去正己烷，得油状液，即为富集了磷脂酰肌醇的产品，该产品中含磷脂2.70～2.76%，其中PI占磷脂的50.5～51.92%，可以在此基础上对磷脂酰肌醇进行进一步的再提取、分离、纯化等。

Description

一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法

技术领域

本发明涉及一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法。

背景技术

南极磷虾是一种生活在南冰洋的南极洲水域的磷虾，以群集方式生活，有时密度高达1万-3万只/M³，它们可能是地球上最成功的动物物种，据统计大约有5-50亿吨（因统计方法不一样有较大差异）。

目前南极磷虾渔业每年约10万吨，其中80%由日本捕获，由于南大洋以磷虾为主食物的须鲸也被歼捕殆尽。有关科学家曾根据旺盛时期鲸类对磷虾类的摄食量估计大约每年有1.5亿吨由于鲸类资源的衰退而剩余的磷虾可供捕获。世界上每年的全部的渔业产量为0.99亿吨，这标志着南极磷虾有较大的可利用空间。我国正在试探捕南极磷虾以完善南极磷虾的捕捞和相关海上技术。南极磷虾的大量捕捞标志着深加工技术的开始。在日本南极磷虾大多作为料理，而在其他国家则主要作为渔业的饲料和鱼的饵料。南极磷虾高附加值的研究是其深加工的研究核心。

南极磷虾含有较为丰富的油脂，含有不饱和脂肪酸、虾青素和磷脂。磷脂酰肌醇（phosphatidylinositol；PI）是细胞信号的通路成分，称为第三信使，信号通路的研究是当前生命科学研究的热点，也是生物制剂争相开发利用的重大课题。已知的信使如第一信使脂类激素和含氮激素，第二信使cAMP等均或为药物，或为保健成分。第三信使PI在人体、细胞代谢中起着极为重要的生理生化作用。是细胞快速应答和缓慢应答的启点、交叉点、关键点。PI就像通信网络中控制着信息传递方向的接线员，控制着人体生理生化、细胞生与死的进展方向。

PI的应用开发备受世界各国关注，2001年美国开发出了世界上第一个以PI作为中间体的抗艾滋病药物（US 6316424.B）。科学家在PI的肌醇环上接上磺酰基基团（-SO₃），当这种药物插入细胞膜后，暴露在膜外带有1-几个磺酰基团的肌醇环有极强的杀病菌、病毒作用，就像细胞全身穿上了盔甲。PI有望成为抗其他病毒药物的中间体。在流感病毒、SARS、霍乱等菌毒肆虐世界的今天，PI的应用具有极其广阔的前景。日本等国把PI也用于化妆品，作为药物脂质体和日常保健品的原料、食品和药物的乳化剂（JP 05097873 A₂）海产品的保鲜剂；PI还是心、肝、肾等人体重要器官移植前保存液的主要成分，有抗细胞凋亡（WO 99/47101），也有很好的免疫效果（WO 03/013513 A1）。另外实验证明PI有抗动脉粥样硬化的作用，有利尿和治疗便秘的作用等。

PI因sn-1和sn-2位所联接的脂肪酸不一而分子结构和分子量有很大差异。不同动物体PI分子群中各种PI分子种类及其比例有很大差异，即PI是一个分子群。不同的动物体中磷脂中的卵磷脂（PC）、脑磷脂（PE）、PI和磷脂酸，磷酯酰丝氨酸（PS）等比例也有很大差异。南极磷虾中虾油（磷脂是油的伴随物）的磷脂中PC占80%以上，而PS、PE、PA以及溶血性磷脂的总含量低于20%，而PI量很少，因此制备南极磷虾中的PI，最重要的第一步是PI的富集，然后才能在此基础上进一步再提取，分离，纯化。至今，人们还尚未对南极磷虾中的PI进行过研究报道。

发明内容

针对上述现有技术，本发明提供了一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法，为南极磷虾中磷脂酰肌醇的深入研究奠定了基础。

本发明是通过以下技术方案实现的：

一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法，步骤如下：

（1）取1公斤冰冻的南极磷虾，加入到1～1.3升的体积分数为90～100%的乙醇液中，自然条件下搅拌提取4～6次，每次1～3h，提取液过滤合并，得滤液；

（2）将上述得到的滤液于60～65°C和-0.07～-0.09MPa条件下浓缩至滤液体积的8～10%，得浓缩提取液；

（3）向上述得到的浓缩提取液中加入等体积的正己烷，混匀，静止分层后，取透明微红的最下层液；

（4）将上述得到的最下层液于50～55°C和-0.07～-0.09MPa条件下蒸发除去正己烷，得油状液，即为富集了磷脂酰肌醇的产品，该产品中含磷脂2.70～2.76%（质量分数），其中PI占磷脂的50.5～51.92%（质量分数）。

本发明的从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法，在低温下进行，能够保证南极磷虾中的磷脂、DHA、EPA、虾红素、动物类黄酮素、不饱和脂肪酸、维生素A、维生素E和微量元素等成分不受到破坏，且富集过程中的上层溶液可以回收再利用，提取后的南极磷虾可以再用于生产其它产品。经本发明的方法得到的产品，磷脂酰肌醇的富集效率高，产品中含磷脂2.70～2.76%，其中磷脂酰肌醇占磷脂的50.5～51.92%，可以在此基础上对磷脂酰肌醇进行进一步的再提取、分离、纯化等。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。

实施例1

称冰冻的南极磷虾500g（含水80%，虾干物质占20%，下同），加入95%乙醇600mL，在室温下搅拌3h，倒出上清液并过滤。沉淀再反复提取4次，共提取5次，提取液过滤合并得滤液；将滤液在60℃，-0.07MPa条件下蒸发浓缩至合并滤液体积的10%，得到浓缩提取液；向浓缩提取液中加入同体积的正己烷，摇匀静置分层，取透明微红色的最下层液，在52°C，-0.08MPa条件下蒸发除去正己烷，得13g油状液。该液体中磷脂含量为2.72%，其中PI占磷脂的51.92%。

实施例2

称冰冻的南极磷虾500g，加入90%乙醇550mL。在室温下搅拌提取3h，倒出上清液并过滤。沉淀再重复提取3次，共提取4次，提取液过滤合并得滤液；将滤液在65°C，-0.09MPa条件下浓缩至合并滤液体积的8%，得到浓缩提取液；向浓缩液中加入同体积的正己烷，摇匀静置分层，取透明微红的最下层液，在55°C，-0.09MPa条件下蒸除溶剂，得11g油状液。该液体中磷脂含量为2.70%，其中PI占磷脂的50.5%。

实施例3

称冰冻的南极磷虾500g，加入无水乙醇650mL，在室温下搅拌提取1h，倒出上清液并过滤。沉淀再重复提取5次，共提取6次。提取液过滤合并得滤液；将滤液在60°C，-0.08MPa条件下浓缩至合并滤液体积的10%，得到浓缩提取液；向浓缩液中加入同体积的正己烷，摇匀静置分层，取透明微红的最下层液，在50°C，-0.07MPa下蒸除溶剂，得12g油状液。该液体中磷脂含量为2.76%，其中PI占磷脂的51.7%。

实施例4

称冰冻的南极磷虾500g，加入95%乙醇500mL，在室温条件下搅拌提取2h，倒出上清液并过滤。沉淀再重复提取4次，共提取5次，提取液过滤合并得滤液；将滤液在65°C，-0.09MPa条件下浓缩至合并滤液体积的9%，得到浓缩提取液；向该浓缩液中加入同体积的正己烷，摇匀静置分层，取透明微红的最下层液，在50°C，-0.09MPa条件下蒸发溶剂，得12g油状液，该液体中磷脂含量为2.74%，其中PI占磷脂的51.9%。

Claims

1.一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法，步骤如下：称冰冻的南极磷虾500g，加入95%乙醇600mL，在室温下搅拌3h，倒出上清液并过滤；沉淀再反复提取4次，共提取5次，提取液过滤合并得滤液；将滤液在60℃，-0.07MPa条件下蒸发浓缩至合并滤液体积的10%，得到浓缩提取液；向浓缩提取液中加入同体积的正己烷，摇匀静置分层，取透明微红色的最下层液，在52℃，-0.08MPa条件下蒸发除去正己烷，得含有磷脂酰肌醇的油状液。

2.一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法，步骤如下：称冰冻的南极磷虾500g，加入90%乙醇550mL；在室温下搅拌提取3h，倒出上清液并过滤；沉淀再重复提取3次，共提取4次，提取液过滤合并得滤液；将滤液在65℃，-0.09MPa条件下浓缩至合并滤液体积的8%，得到浓缩提取液；向浓缩液中加入同体积的正己烷，摇匀静置分层，取透明微红的最下层液，在55℃，-0.09MPa条件下蒸除溶剂，得含有磷脂酰肌醇的油状液。

3.一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法，步骤如下：称冰冻的南极磷虾500g，加入无水乙醇650mL，在室温下搅拌提取1h，倒出上清液并过滤；沉淀再重复提取5次，共提取6次；提取液过滤合并得滤液；将滤液在60℃，-0.08MPa条件下浓缩至合并滤液体积的10%，得到浓缩提取液；向浓缩液中加入同体积的正己烷，摇匀静置分层，取透明微红的最下层液，在50℃，-0.07MPa下蒸除溶剂，得含有磷脂酰肌醇的油状液。

4.一种从南极磷虾中富集磷脂酰肌醇的方法，步骤如下：称冰冻的南极磷虾500g，加入95%乙醇500mL，在室温条件下搅拌提取2h，倒出上清液并过滤；沉淀再重复提取4次，共提取5次，提取液过滤合并得滤液；将滤液在65℃，-0.09MPa条件下浓缩至合并滤液体积的9%，得到浓缩提取液；向该浓缩液中加入同体积的正己烷，摇匀静置分层，取透明微红的最下层液，在50℃，-0.09MPa条件下蒸发溶剂，得含有磷脂酰肌醇的油状液。