ES2882518T3

ES2882518T3 - Composición que comprende proteasa, amilasa y lipasa

Info

Publication number: ES2882518T3
Application number: ES18160053T
Authority: ES
Inventors: Joan M Fallon; Matthew Heil; James J Fallon
Original assignee: Galenagen LLC
Current assignee: Galenagen LLC
Priority date: 2009-01-06
Filing date: 2010-01-06
Publication date: 2021-12-02
Anticipated expiration: 2030-01-06
Also published as: AU2010203709A1; CN102300989A; US20110280853A1; HK1225961A1; EP3351264A1; IL213528A; AU2010203709B2; AU2014213477A1; US20150246105A1; JP5684725B2; US20200323965A1; ES2578618T3; WO2010080830A1; NZ593831A; HK1162586A1; BRPI1007378A2; EP3064217A1; GB201111565D0; JP2017057205A; CA2747611A1

Abstract

Uso no terapéutico de un desinfectante para erradicar, atenuar o reducir Staphylococcus aureus (S. aureus), donde el desinfectante es bacteriostático o bactericida para S. aureus, en donde el desinfectante comprende enzimas digestivas que comprenden una proteasa, una amilasa, y una lipasa, y en donde la proteasa total y la lipasa total en el desinfectante en unidades de la Farmacopea de los Estados Unidos (USP) están presentes en una relación de proteasa a lipasa de 1:1 a 20:1.

Description

DESCRIPCIÓN

Composición que comprende proteasa, amilasa y lipasa

Campo técnico

Esta divulgación se refiere a composiciones, que incluyen composiciones farmacéuticas tales como composiciones de antibióticos, y métodos de uso de las mismas para el tratamiento o la prevención de las infecciones por Staphyloccocus aureus (S. aureus, también referido como SA en la presente memoria) en seres humanos y otros animales. Esta descripción también se refiere a composiciones, tales como desinfectantes, higienizantes, antisépticos y detergentes, y métodos para usar los mismos, para erradicar o reducir la presencia de S. aureus sobre superficies, incluyendo las inanimadas/no vivas y superficies biológicas (por ejemplo, piel, heridas), y/o para atenuar la infectividad de S. aureus con el fin de prevenir y/o reducir la propagación de infecciones por S. aureus.

Antecedentes

Staphylococcus aureus, también referido simplemente como "staph", es una bacteria normalmente portada sobre la piel o en la nariz de personas sanas. Las bacterias staph son una de las causas más comunes de infecciones de la piel en los Estados Unidos. La mayor parte de estas infecciones de piel son poco graves (tales como espinillas y forúnculos) y pueden ser tratadas sin antibióticos. No obstante, la bacteria staph también puede causar infecciones graves, tales como infecciones de heridas quirúrgicas, infecciones del torrente sanguíneo, y neumonía.

Los estafilococos son bacterias esféricas Gram-positivas que aparecen en agrupaciones microscópicas que parecen uvas. En 1884, Rosenbach describió los dos tipos de colonias pigmentadas de estafilococos y propuso la nomenclatura apropiada: Staphylococcus aureus (de color amarillo) y Staphylococcus albus (de color blanco). La última especie se denomina actualmente Staphylococcus epidermidis. Los estafilococos son anaerobios facultativos que crecen por respiración aerobia o por fermentación que produce principalmente ácido láctico. Las bacterias son catalasa positivas y oxidasa negativas. S. aureus puede crecer a un intervalo de temperatura de 15 a 45 grados y a concentraciones de NaCl tan elevadas como 15 por ciento.

Algunas bacterias staph son resistentes a los antibióticos. Staphylococcus aureus Resistente a Meticilina (SARM) es un tipo de staph que es resistente a los antibióticos denominados beta-lactamas. Los antibióticos beta-lactámicos incluyen meticilina y otros antibióticos más comunes tales como oxacilina, penicilina y amoxicilina. La mayoría de las infecciones por SARM se producen entre pacientes en los hospitales u otros centros asistenciales (referidas como infecciones por SARM adquiridas en hospitales o SARM-AH); sin embargo, Staph y SARM también pueden causar enfermedades en personas fuera de los hospitales y las instalaciones de atención sanitaria. Las infecciones por SARM que son adquiridas por personas que no han sido recientemente hospitalizadas (en el plazo de un año) o no han tenido un procedimiento médico (tal como diálisis, cirugía, catéteres) se conocen como infecciones por SARM adquiridas en la comunidad (SARM-AC). Aproximadamente 75 por ciento de las infecciones SARM-AC se localizan en la piel y los tejidos blandos y normalmente pueden ser tratadas de manera eficaz. No obstante, las cepas SARM-AC presentan una mayor virulencia, se propagan más rápidamente y causan enfermedades más graves que las infecciones por SARM-Ah tradicionales, y pueden afectar a órganos vitales conduciendo a una infección generalizada (sepsis), síndrome de choque tóxico y neumonía.

No se sabe por qué algunas personas sanas desarrollan infecciones en la piel por SARM-AC que son tratables mientras otras infectadas por la misma cepa desarrollan infecciones graves, fatales. Los estudios han demostrado que las tasas de infección por SARM-AC están aumentando. En 1999, se informó de que cuatro niños en Minnesota y Dakota del Norte habían fallecido por infecciones fulminantes por SARM-AC. Un estudio sobre los niños del sur de Texas encontró que los casos de SARM-AC aumentaron 14 veces entre 1999 y 2001. Alrededor de 2007, SARM-AC fue la causa más frecuente de infecciones de la piel y los tejidos blandos observadas en los departamentos de urgencias de los Estados Unidos.

Las cepas de S. aureus de los hospitales son normalmente resistentes a una variedad de antibióticos diferentes. Unas pocas cepas son resistentes a todos los antibióticos clínicamente útiles excepto la vancomicina, y cada vez se informa más sobre cepas resistentes a la vancomicina (SARV). La resistencia a la metilicina es amplia (SARM) y la mayor parte de las cepas resistentes a meticilina también son resistentes a múltiples fármacos. Por añadidura, S. aureus muestra resistencia a antisépticos y desinfectantes, tales como compuestos de amonio cuaternario, lo que puede ayudar a su supervivencia en el entorno hospitalario.

En la actualidad muere más gente en los Estados Unidos por infección debida a SARM que por SIDA. SARM fue responsable de aproximadamente 94.000 infecciones que pusieron la vida en peligro y de 18.650 muertes en 2005, como informa CDC en la publicación del 17 de Oct. de 2007 de The Journal of the American Medical Association. La estimación nacional es más del doble de prevalencia de SARM invasivo referido cinco años antes. El mismo año, murieron aproximadamente 16.000 personas en los Estados Unidos por SIDA, de acuerdo con CDC.

Compendio

La presente invención está definida por las reivindicaciones. En el presente documento se proporciona el uso no terapéutico de un desinfectante para erradicar, atenuar o reducir Staphylococcus aureus (S. aureus), de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14.

También se describen en este documento las composiciones bactericidas y/o bacteriostáticas que comprenden una o más enzimas digestivas también para uso como o en desinfectantes, higienizantes, detergentes, y antisépticos, por ejemplo, en hospitales, residencias de ancianos, guarderías, centros de día, colegios, entornos laborales, servicios de alimentación, transporte público, y baños, para reducir, atenuar, y/o destruir el S. aureus presente en tales entornos. Las superficies tratadas con las composiciones descritas pueden ser grandes (por ejemplo, camillas de quirófano, puertas, cambiadores, sistemas de ventilación) o pequeñas (por ejemplo, dispositivos médicos, picaportes); objetos inanimados o no vivos (mesas) o tejidos vivos (manos, por ejemplo, detergentes para lavar las manos; heridas, por ejemplo, heridas quirúrgicas o heridas resultantes de accidentes/traumas). Las composiciones pueden ser útiles de ese modo para el tratamiento de superficies para reducir o erradicar S. aureus en ellos, o para atenuar o reducir la infectividad de S. aureus, y prevenir o reducir de ese modo la propagación de S. aureus.

La divulgación también presenta un método para higienizar o desinfectar una superficie para reducir la cantidad de S. aureus en la misma o para erradicar S. aureus de la misma, que comprende la aplicación a la superficie de una composición que comprende una o más enzimas digestivas. La superficie puede ser una superficie viva (por ejemplo, piel, herida) o una superficie inanimada o no viva (por ejemplo, dispositivos médicos, tales como escalpelo, cuchillo, tijeras, espátulas, expansores, clips, pinzas, espéculos, retractores, sutura, válvula, malla quirúrgica, cincel, taladro, nivel, escofina, sierra, férula, calibre, bridas, fórceps, garfios, lancetas, agujas, cánulas, curetas, depresores, dilatadores, elevadores, articuladores, extractores, sondas, grapas, catéteres, dispositivos intraluminales, tubos, cuencos, bandejas, esponjas, asas, cucharas, jeringas, marcapasos, tornillos, placas y alfileres).

También se describe en la presente descripción un método para reducir la cantidad de S. aureus presente sobre una región de la piel, tejido, o herida de un mamífero o ave que comprende la aplicación a la región de la piel, tejido, o herida de una composición que comprende una o más enzimas digestivas.

También se describe un desinfectante que comprende una o más enzimas digestivas, en el que el desinfectante tiene un coeficiente de fenol de> 1 a aproximadamente 20 para S. aureus o E. coli.

La divulgación también describe un antibiótico que comprende una o más enzimas digestivas, en donde el antibiótico es bactericida y/o bacteriostático para S. aureus.

De forma similar, también se describe un detergente que comprende una o más enzimas digestivas, en el que el detergente es bactericida y/o bacteriostático para S. aureus.

También se describe un antiséptico que comprende una o más enzimas digestivas, en donde el antiséptico es bactericida y/o bacteriostático para S. aureus.

También se describe un desinfectante que comprende una o más enzimas digestivas, en donde el desinfectante es bactericida y/o bacteriostático para S. aureus

Los detalles de una o más realizaciones de la invención se muestran en los dibujos adjuntos y en la siguiente descripción. Otras características, objetos y ventajas de la invención serán evidentes a partir de la descripción y los dibujos, y de las reivindicaciones.

Descripción detallada

El término "administración" o "administrar" hace referencia a un método para proporcionar una dosificación de una composición o composición farmacéutica a un vertebrado o invertebrado, incluyendo un mamífero, un ave, un pez, o un anfibio, en el que el método es por cualquier vía, por ejemplo, intrarrespiratoria, nasal, tópica, oral, intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, transmucosal, bucal, rectal, vaginal, o sublingual. El método de administración preferido puede variar dependiendo de diversos factores, por ejemplo, los componentes de la composición farmacéutica, el sitio de la enfermedad, la enfermedad implicada, y la gravedad de la enfermedad.

El término "mamífero" se utiliza en su sentido biológico habitual. De este modo, incluye específicamente seres humanos, ganado vacuno, caballos, perros, y gatos, pero también incluye muchas otras especies.

El término "portador farmacéuticamente aceptable" o "excipiente farmacéuticamente aceptable" incluye todos y cada uno de los disolventes, medios de dispersión, recubrimientos, agentes para conferir isotonicidad y para retrasar la absorción y similares. El uso de tales medios y agentes para sustancias farmacéuticamente activas es bien conocido en la técnica. Salvo en la medida en donde cualquier medio o agente convencional es incompatible con los ingredientes activos, se contempla su uso en las composiciones terapéuticas. También se pueden incorporar a las composiciones ingredientes activos complementarios, tales como antibióticos, antifúngicos, antimicrobianos. Además, se pueden incluir coadyuvantes diversos tales como los comúnmente utilizados en la técnica. Estos y otros de tales compuestos se describen en la bibliografía, por ejemplo, en el Merck Index, Merck & Company, Rahway, NJ. Las consideraciones para la inclusión de diversos componentes en las composiciones farmacéuticas son descritas, por ejemplo, por Gilman et al. (Eds.) (2006); Goodman y Gilman's: The Pharmacological Basis of Therapeutics, 11a Ed., The McGraw-Hill Companies.

"Sujeto" o "paciente" o "individuo" de acuerdo con se utiliza en la presente memoria, representa un mamífero humano o no humano, por ejemplo, un perro, un gato, un ratón, una rata, una vaca, una oveja, un cerdo, una cabra, un primate no humano o un ave, por ejemplo, un pollo, así como cualquier otro vertebrado o invertebrado.

"Cantidad terapéuticamente eficaz" o "cantidad farmacéuticamente eficaz" es típicamente aquella que es suficiente para lograr el efecto deseado y puede variar de acuerdo con la naturaleza y la gravedad del estado de enfermedad, la naturaleza del sujeto, y la potencia de la composición. Se apreciará que se pueden emplear diferentes concentraciones para la profilaxis que para el tratamiento de una enfermedad activa. Esta cantidad puede depender adicionalmente de la altura, el peso, el sexo, la edad y el historial médico del paciente.

Un efecto terapéutico alivia, hasta cierto punto, uno o más de los síntomas de la enfermedad, e incluye la curación de una enfermedad. "Curar" significa que los síntomas de la enfermedad activa se eliminan. Sin embargo, ciertos efectos a largo plazo o permanentes de la enfermedad pueden existir incluso después de lograrse la curación (tal como una lesión tisular).

En el presente documento se describen composiciones que comprenden una o más enzimas digestivas y métodos de uso de las mismas como antisépticos, detergentes, desinfectantes, e higienizantes, por ejemplo, como composiciones bactericidas y/o bacteriostáticas, para erradicar o atenuar S. aureus y/o reducir su infectividad.

Composiciones

Una composición para su uso como se describe en la presente memoria puede incluir una o más enzimas digestivas. Si bien no se desea estar limitado por la teoría, se cree que la o las enzimas digestivas de la composición pueden degradar la pared celular, la membrana, y/o las estructuras proteicas de S. aureus, conduciendo a la actividad bacteriostática y/o bactericida. Las composiciones demuestran una actividad bactericida/bacteriostática específica de la especie contra S. aureus y E. coli, pero no contra S. entérica, demostrando posiblemente que la vulnerabilidad de los dos organismos deriva de la degradación proteolítica de una secuencia de proteínas similar presente en los dos organismos.

Una enzima digestiva como se describe en la presente memoria es una enzima que puede descomponer uno o más componentes de los alimentos (por ejemplo, proteínas, grasas, carbohidratos). Las enzimas digestivas pueden ser enzimas derivadas de animales (por ejemplo, enzimas pancreáticas u otras enzimas del tracto digestivo), o derivadas de plantas, hongos, o microorganismos, o se pueden preparar sintéticamente. Muchas enzimas digestivas se encuentran disponibles en el mercado o se pueden aislar y purificar a partir de otras fuentes mediante métodos bien conocidos por los expertos normales en la técnica. La actividad enzimática de las enzimas también se puede evaluar utilizando análisis convencionales.

Las enzimas digestivas se pueden usar en cualquier combinación de tipo de enzima y cualquier combinación de fuentes enzimáticas. En algunos casos, las una o más enzimas digestivas comprenden una o más enzimas seleccionadas del grupo que consiste en proteasas, amilasas, celulasas, sacarasas, maltasas, papaína (por ejemplo, de papaya), bromelaína (por ejemplo, de piña), hidrolasas, y lipasas. En algunas realizaciones, las una o más enzimas digestivas comprenden una o más enzimas pancreáticas. En algunas realizaciones, la composición comprende una o más proteasas, una o más lipasas, y una o más amilasas. En algunas realizaciones, las una o más proteasas comprenden quimotripsina y tripsina. En algunos casos, una composición como la descrita en la presente memoria consiste esencialmente en, o consiste en, las una o más enzimas digestivas.

En ciertos casos, la composición puede comprender al menos una amilasa, al menos dos proteasas, y al menos una lipasa. En ciertos casos, la composición puede incluir adicionalmente una o más hidrolasas, papaína, bromelaína, papaya, celulasas, pancreatina, sacarasas, y maltasas.

Como se indica, las una o más enzimas digestivas pueden derivar de una fuente animal. En algunas realizaciones, la fuente animal es un cerdo, por ejemplo, un páncreas de cerdo. Los extractos y formulaciones de enzima pancreática de cerdo son conocidos por los expertos normales en la técnica y se encuentran disponibles en el mercado o se pueden preparar utilizando métodos conocidos. Por ejemplo, se puede adquirir una composición de enzima pancreática de cerdo de Scientific Protein Laboratories (denominada PEC). Una composición de enzima pancreática, o cualquier composición de la presente memoria, se puede ajustar para modificar la cantidad de una o más enzimas digestivas contenidas en la misma, por ejemplo, el contenido de lipasa, amilasa, o proteasa, por ejemplo mediante métodos de producción y/o procesamiento o mediante la adición selectiva de enzimas exógenas, activadores, o inhibidores a la composición.

En ciertas circunstancias, puede ser deseable tener una actividad relativamente mayor de proteasas que de lipasas. De este modo, en algunas realizaciones, una composición comprende al menos una proteasa y al menos una lipasa, en donde la razón de proteasas totales con respecto a lipasas totales (en unidades USP) oscila de aproximadamente 1:1 a aproximadamente 20:1 incluyendo 1:1,2:1, 3;1,4:1, 5;1, 6:1, 7:1,8:1, 9:1, 10:1, 11;1, 12;1, 13;1, 14:1, 15:1, 16;1, 17:1, 18:1, 19:1 y 20:1, junto con todos los valores intermedios. En algunas realizaciones, la razón de proteasas con respecto a lipasas oscila de aproximadamente 4:1 a aproximadamente 10:1 incluyendo 4:1, 5:1, 6:1, 7:1, 8:1, 9:1, y 10:1, junto con todos los valores intermedios.

En ciertas circunstancias puede resultar útil modificar la cantidad de actividad de una enzima concreta en una composición dada. La actividad de las una o más enzimas digestivas se puede ajustar de diferentes maneras conocidas por el experto en la técnica, por ejemplo, aumentando la cantidad de la enzima concreta, o ajustando los componentes de la composición, por ejemplo, a través del uso de estabilizadores, inhibidores, y activadores. En algunas realizaciones, una composición descrita en la presente memoria incluye una o más proteasas que tienen una actividad de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 400 Unidades USP por mg de la composición, o cualquier valor intermedio (por ejemplo, 0.1; 0,2; 0,25; 0,5; 1,2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 75, 100, 150, 200, 250, 300, 350 Unidades USP por mg). En algunas realizaciones, una composición descrita en la presente memoria incluye una o más lipasas que tienen una actividad de aproximadamente 0,005 a aproximadamente 50 Unidades por mg de la composición, o cualquier valor intermedio (por ejemplo, 0,01, 0,02, 0,025, 0,03, 0,04, 0,05, 0,06, 0,08, 0,1, 0,2, 0,5, 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 18, 20, 22, 25, 28, 30, 35, 38, 40, 45 Unidades USP por mg). En algunas realizaciones, una composición descrita en la presente memoria incluye una o más amilasas que tienen una actividad de aproximadamente 0,05 a aproximadamente 400 Unidades USP por mg de la composición, o cualquier valor intermedio (por ejemplo, 0,1; 0,2; 0,25; 0,5; 1, 2, 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 75, 100, 150, 200, 250, 300, 350 Unidades USP por mg). En algunas realizaciones, una composición descrita en la presente memoria incluye una o más proteasas en el intervalo de actividad anterior, una o más lipasas en el intervalo de actividad anterior, y una o más amilasas en el intervalo de actividad anterior. Una realización ilustrativa incluye una o más proteasas que tienen una actividad en el intervalo de aproximadamente 150-250 unidades USP/mg; una o más lipasas que tienen una actividad en el intervalo de aproximadamente 20-40 unidades USP/mg; y una o más amilasas que tienen una actividad en el intervalo de aproximadamente 200-300 unidades USP/mg.

En algunas realizaciones, se puede formular una composición con el fin de estabilizar las una o más enzimas digestivas, por ejemplo, para conservar la actividad enzimática de las enzimas. Las técnicas de estabilización pueden limitar o prevenir la auto-degradación de las una o más enzimas en una composición y ayudar a mantener la actividad enzimática, aumentar la vida útil, y ayudar a la tolerancia de la actividad de las composiciones a los cambios de temperatura, humedad, y condiciones de almacenamiento. Por ejemplo, en algunas realizaciones, las una o más enzimas de la composición están encapsuladas, por ejemplo, encapsuladas en lípidos. En otras aplicaciones, se pueden emplear variaciones en los excipientes, el pH, los inhibidores de enzimas, etc. para ayudar a estabilizar las enzimas. Las técnicas de estabilización apropiadas dependerán de la aplicación pretendida para la composición (por ejemplo, antibiótico vs. detergente), de la vía de administración, la forma de la composición, el sitio de suministro/actividad pretendido, y otros factores, y pueden ser determinadas por los expertos normales en la técnica.

Ciertos estabilizadores de actividad enzimática útiles incluyen compuestos que proporcionan una fuente de calcio libre en una solución tal como por ejemplo sales de calcio; alquilalcoholes o ramificados tales como por ejemplo etanol y alcohol isopropílico; alcanolamidas tales como por ejemplo trietanolamina; ácidos tales como ácidos orgánicos; y mezclas de productos destilados del petróleo.

En ciertas realizaciones, el estabilizador de la actividad enzimática puede ser una composición seleccionada entre (1) composiciones que se sabe que son eficaces en la estabilización de enzimas en soluciones acuosas líquidas, incluyendo compuestos y sistemas que estabilizan enzimas, (2) "inhibidores de micelas" seleccionados, y mezclas de (1) y (2). En algunas realizaciones, la actividad estabilizadora es una concentración adecuada de aniones de boro. En algunos casos, el estabilizador de la actividad está solvatado en un poliol y se puede combinar con sinergistas o coadyuvantes estabilizadores de enzimas que forman un sistema de estabilización de enzimas. Los "inhibidores de micelas" preferidos incluyen especies que se sabe que modifican y también que inhiben la formación de micelas y se pueden seleccionar entre disolventes miscibles con agua tales como alcanoles C1-C6, dioles C1-C6, éteres de alquilen(C2-C24)glicol éteres, alquilenglicol alquiléteres, y mezclas de los mismos. Un inhibidor de micelas altamente preferido es el metiléter de di-(propilenglicol) ("DPM") y los análogos del mismo que modifican la formación de micelas.

Un ejemplo de un "sistema de estabilización de enzima" es un compuesto de boro (por ejemplo ácido bórico) que en el pasado se utilizaba solo o con otros coadyuvantes o sinergistas seleccionados (por ejemplo compuestos amino polifuncionales, antioxidantes, etc.) para proteger las enzimas proteolíticas y otras enzimas en el almacenamiento y en diversos productos.

Se puede seleccionar un estabilizador de la actividad para minimizar sustancialmente la Concentración Inhibidora Mínima ("CIM") de la enzima digestiva en la formulación. La CIM es una medida de la concentración mínima del biocida que permite la prevención del crecimiento bacteriano en un cultivo durante un período de tiempo especificado, por ejemplo 24 hrs. Los detalles del ensayo de CIM se muestran en "Bailey & Scott 'Diagnostic Microbiology', 8a edición, 1990 en la página 177.

En algunas realizaciones, una composición descrita en la presente memoria se puede recubrir con una variedad de recubrimientos naturales o sintéticos, por ejemplo, para proporcionar una liberación programada de las enzimas, para proporcionar un enmascaramiento del sabor u olor, o para estabilizar las enzimas. Las preparaciones de enzimas recubiertas, incluyendo las composiciones de enzimas recubiertas con lípidos o encapsuladas con lípidos, que comprenden una o más enzimas digestivas útiles para los métodos y composiciones descritas en la presente memoria se describen en el documento U.S. Núm. de Serie 12/386,051, presentado el 13 de abril de 2009. Tales preparaciones recubiertas pueden proporcionar las características deseadas, incluyendo un aumento de la estabilidad de almacenamiento, una reducción de la aerosolización de las formulaciones en polvo o sólidas, un enmascaramiento del olor y el sabor, una estabilización de las enzimas, y una liberación retardada o programada de las enzimas.

Otros aditivos para su inclusión en las composiciones descritas en la presente memoria pueden ser determinados por los expertos normales en la técnica, y se basarán en numerosos rasgos, incluyendo la aplicación pretendida, por ejemplo, aplicaciones en seres humanos vs. veterinarias; el perfil de liberación deseado; la farmacocinética deseada; la seguridad; la estabilidad; y las características físicas (olor, color, sabor, vertibilidad, aerosolización). Los ingredientes, excipientes, aglutinantes, agentes voluminizantes, aromatizantes, colorantes, etc. de formulación adecuados se pueden determinar y evaluar mediante métodos conocidos por los expertos normales en la técnica.

Desinfectantes e higienizantes

Las composiciones que comprenden una o más enzimas digestivas como las descritas en la presente memoria también se pueden utilizar como desinfectantes e higienizantes, por ejemplo, para desinfectar objetos inanimados y superficies, sin limitación, en entornos hospitalarios, domésticos, y comunitarios erradicando, atenuando o reduciendo S. aureus en tales localizaciones. Los desinfectantes son agentes antimicrobianos que se aplican a objetos no vivos para destruir microorganismos. Los desinfectantes se deben distinguir generalmente de los antibióticos que destruyen los microorganismos dentro del organismo, y de los antisépticos, que destruyen los microorganismos en los tejidos vivos. Los higienizantes son desinfectantes que reducen el número de microorganismos a un nivel seguro. Una definición de un higienizante establece que un higienizante debe ser capaz de destruir 99,999%, conocido como una reducción log de 5, de una población de ensayo bacteriana específica, y de hacerlo en 30 segundos. La principal diferencia entre un higienizante y un desinfectante es que a una dilución de uso especificada, el desinfectante debe tener mayor capacidad de destrucción para las bacterias patógenas en comparación con la de un higienizante.

Un desinfectante o un higienizante como se describen en la presente memoria pueden incluir una o más enzimas digestivas, en diversas realizaciones como se ha descrito anteriormente, y opcionalmente pueden incluir otros ingredientes activos e inactivos, incluyendo estabilizadores (por ejemplo, estabilizadores de enzimas), otros desinfectantes conocidos por los expertos normales en la técnica, excipientes de formulación, colorantes, perfumes, etc. Un experto normal en la técnica puede seleccionar los ingredientes activos o inactivos adicionales para incluirlos en un desinfectante. Los ejemplos de los desinfectantes adicionales incluyen: fuentes de cloro activo (es decir, hipocloritos, cloraminas, dicloroisocianurato y tricloroisocianurato, cloro húmedo, dióxido de cloro etc.); fuentes de oxígeno activo (peróxidos, tales como ácido peracético, persulfato de potasio, perborato sódico, percarbonato de sodio y perhidrato de urea); soluciones de yodo y yodóforo (povidona yodada (povidona-yodo, Betadine), solución de Lugol, tintura de yodo, tensioactivos no iónicos yodados); alcoholes concentrados (principalmente etanol, 1-propanol, también denominado n-propanol y 2-propanol, denominado isopropanol y mezclas de los mismos; adicionalmente, 2-fenoxietanol y 1-y 2-fenoxipropanoles); sustancias fenólicas (tales como fenol (también denominado "ácido carbólico"), cresoles (denominados "Lysol" combinados con jabones de potasio líquido), fenoles halogenados (clorados, bromados), tales como hexaclorofeno, triclosan, triclorofenol, tribromofenol, pentaclorofenol, Dibromol y sales de los mismos); tensioactivos catiónicos, tales como algunos cationes de amonio cuaternario (tales como cloruro de benzalconio, bromuro o cloruro de cetil trimetilamonio, cloruro de didecildimetilamonio, cloruro de cetilpiridinio, cloruro de benzetonio) y otros; compuestos no cuaternarios, tales como clorhexidina, glucoprotamina, dihidrocloruro de octenidina; oxidantes fuertes, tales como ozono y soluciones de permanganato; metales pesados y sus sales, tales como plata coloidal, nitrato de plata, cloruro de mercurio, sales de fenilmercurio, sulfato de cobre, y cloruro de óxido de hierro; ácidos fuertes concentrados (ácidos fosfórico, nítrico, sulfúrico, amidosulfúrico, toluenesulfónico) y álcalis (hidróxidos de sodio, potasio, calcio), tales como los de pH < 1 o > 13, concretamente a una temperatura elevada (por encima de 60°C). En algunos casos, un desinfectante como los descritos en la presente memoria consistirá esencialmente en las una o más enzimas digestivas. En algunos casos, el desinfectante consistirá esencialmente en las una o más enzimas digestivas, y no incluirá otros agentes desinfectantes.

Se puede incorporar una composición desinfectante que comprende una o más enzimas digestivas como se describe en la presente memoria a otros ingredientes para formar una variedad de productos desinfectantes que incluyen, pero no se limitan a, limpiadores de manos, enjuagues bucales, batas quirúrgicas, colonias corporales, geles y espumas higienizantes para las manos, toallitas desinfectantes, y productos similares para el cuidado personal. Otros tipos de productos incluyen espumas desinfectantes, cremas, espumas y similares, y composiciones que contienen materiales de relleno orgánicos e inorgánicos, tales como emulsiones, lociones, cremas, pastas, y similares. Las composiciones también se pueden utilizar como limpiador antibacteriano para superficies duras, por ejemplo, lavabos y encimeras en hospitales, zonas donde se sirven alimentos, y plantas de procesamiento de carne. Las composiciones desinfectantes también se pueden utilizar como nieblas desinfectantes y vaporizaciones desinfectantes. Las presentes composiciones de enzimas digestivas se pueden elaborar en forma de composiciones diluidas listas para su uso, o en forma de productos concentrados que se diluyen antes de su uso. Los diversos productos en los que se utilizan los desinfectantes también pueden incluir fragancias, dependiendo de la naturaleza del producto. Por ejemplo, puede ser deseable una fragancia de pino o limón para su uso en toallitas de limpieza para la cocina debido a su asociación atractiva con la limpieza para muchos consumidores. Adicionalmente, también se pueden aromatizar geles o aerosoles por razones similares u otras razones.

En una realización, las composiciones desinfectantes se pueden utilizar para elaborar toallitas desinfectantes. Se puede utilizar una toallita desinfectante para limpiar una variedad de superficies duras y otras superficies, incluyendo, por ejemplo, manos y piel humanos, instrumental y dispositivos médicos, encimeras, suelos, paredes, y ventanas. Las toallitas pueden estar elaboradas de una variedad de géneros. Los géneros se definen para que incluyan telas y papeles, así como materiales tejidos y no tejidos. Los géneros tejidos y no tejidos se pueden elaborar a partir de materiales adecuados tales como rayón, nailon, o algodón, y combinaciones de los mismos. Los ejemplos de los géneros no tejidos se describen en las Patentes de los Estados Unidos Núms. 3.786.615; 4.395.454; y 4.199.322. Los géneros o papeles se pueden impregnar con la solución desinfectante mediante cualquier método conocido en la técnica. Las toallitas se pueden empaquetar de cualquier manera conocida en la técnica incluyendo blísters individuales o en paquetes de múltiples toallitas envueltas o apiladas.

En otra realización, la composición desinfectante se puede formular en una composición higienizante en gel o gelatinosa. Además de las composiciones desinfectantes, los higienizantes en gel pueden incluir un agente espesante o gelificante, en donde "agente espesante" y "agente gelificante" se utilizan indistintamente. De acuerdo con se utilizan en la presente memoria, los términos composiciones higienizantes en "gel" o "gelatinosas" hacen referencia a sustancias líquidas desinfectantes que pueden tener una viscosidad de aproximadamente 1 Pa.s a aproximadamente 100 Pa.s, o de 2 Pa.s a 50 Pa.s en otra realización, aunque no se pretende que estos intervalos sean limitantes. Por ejemplo, un gel de manos puede ser considerablemente menos viscoso que un gel utilizado para limpieza industrial o para fines desinfectantes. Los ejemplos de los agentes gelificantes o espesantes incluyen, pero no se limitan a, gomas naturales tales como guar y derivados de guar, un polímero sintético, una arcilla, un aceite, una cera, gel de aloe vera, un homopolímero de acrilato, un copolímero de acrilato, un carbómero, celulosa, un derivado de celulosa, algina, un derivado de algina, un alcohol C8-C20 insoluble en agua, carragenano, sílice ahumada, mezclas de los mismos, y similares. El agente gelificante puede estar presente en la composición higienizante gelatinosa en una cantidad de aproximadamente 0,1 % en peso a 50 % en peso de la composición gelatinosa. En otra realización, el agente gelificante está presente en una cantidad de 0,25 % en peso a 10 % en peso de la composición gelatinosa. La cantidad de agente gelificante puede depender de una variedad de factores incluyendo el tipo de agente gelificante y la viscosidad deseada del gel. Los higienizantes gelatinosos se pueden utilizar para una variedad de aplicaciones incluyendo la higienización de la piel humana por ejemplo, higienizante de manos en gel, y la higienización de superficies duras. En una realización concreta, la composición desinfectante se puede mezclar con gel de aloe vera natural para formar una formulación de aloe desinfectante. Semejante formulación sería útil para la aplicación a quemaduras, infecciones de la piel, y otras irritaciones. El aloe puede actuar como un agente espesante, o también puede incluir otro agente espesante o gelificante como se ha descrito anteriormente, dependiendo de la viscosidad deseada del gel desinfectante.

En otra realización, una composición desinfectante se puede formular en una espuma desinfectante o una composición espumante. Las espumas desinfectantes o composiciones espumantes incluyen la composición desinfectante y agentes espumantes. Se puede utilizar cualquier agente espumante conocido en la técnica dependiendo de la aplicación deseada y de las características de la espuma desinfectante resultante. Como con la composición desinfectante, las espumas desinfectantes de la presente invención se pueden utilizar tanto en aplicaciones humanas (por ejemplo lavado de manos) como industriales.

En otra realización, la composición desinfectante puede estar en forma de un aerosol o niebla desinfectante. La nebulización, también referida como nebulización térmica, es el procedimiento por medio del cual se aplican como aerosoles los desinfectantes. Las partículas en aerosol del desinfectante se suspenden en el aire durante un período de tiempo con el fin de desinfectar el propio aire y las superficies, incluyendo las partes inaccesibles de una estructura tales como las rendijas de ventilación. Las partículas en aerosol del desinfectante pueden tener un tamaño de partícula de aproximadamente 5 pm a aproximadamente 200 pm. En otra realización, la partícula en aerosol puede tener un tamaño de partícula de aproximadamente 20 pm a aproximadamente 150 pm.

Los métodos para la evaluación de la capacidad desinfectante de una composición concreta son conocidos por los expertos normales en la técnica. Típicamente, la eficacia relativa de un desinfectante se puede medir comparando lo bien que desinfecta en comparación de un desinfectante conocido. El fenol es un desinfectante conocido convencional, y el correspondiente sistema de clasificación se denomina "Coeficiente fenol". El desinfectante que se va a someter a ensayo se compara con el fenol sobre un microbio convencional, por ejemplo, E. coli o S. aureus. Los desinfectantes que son más eficaces que el fenol tienen un coeficiente > 1. Los que son menos eficaces tienen un coeficiente < 1. Para calcular el coeficiente del fenol, se divide la concentración del compuesto de ensayo a la cual el compuesto destruye el organismo de ensayo en 10 minutos, pero no en 5 minutos, por la concentración de fenol que destruye el organismo en las mismas condiciones. El coeficiente de fenol se puede determinar en presencia de una cantidad patrón de materia orgánica añadida o en ausencia de materia orgánica. Un análisis del coeficiente de fenol concreto utiliza el método de Rideal-Walker. El Departamento de Agricultura de los Estados Unidos también tiene un método que proporciona el coeficiente del Departamento de Agricultura de los Estados Unidos. Los expertos normales en la técnica conocen otros métodos.

Un desinfectante como se describe en la presente memoria puede tener un coeficiente de fenol para S. aureus que es > 1, por ejemplo, mayor de 1,05, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,75, 2, 2,25, 2,5, 2,75, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 18, o mayor. En algunos casos, el coeficiente de fenol está en el intervalo de aproximadamente 2 a aproximadamente 20, por ejemplo, de aproximadamente 4 a aproximadamente 10, de aproximadamente 2 a aproximadamente 6, de aproximadamente 6 a aproximadamente 12, o de aproximadamente 10 a aproximadamente 15.

Un desinfectante como se describe en la presente memoria puede tener un coeficiente de fenol para E. coli que es > 1, por ejemplo, mayor de 1,05, 1,1, 1,2, 1,3, 1,4, 1,5, 1,75, 2, 2,25, 2,5, 2,75, 3, 3,5, 4, 4,5, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 14, 16, 18. En algunos casos, el coeficiente de fenol está en el intervalo de aproximadamente 2 a aproximadamente 20, por ejemplo, de aproximadamente 4 a aproximadamente 10, de aproximadamente 2 a aproximadamente 6, de aproximadamente 6 a aproximadamente 12, o de aproximadamente 10 a aproximadamente 15.

Un desinfectante o un higienizante como los descritos en la presente memoria pueden ser bactericidas y/o bacteriostáticos para S. aureus. En algunas realizaciones, un desinfectante o un higienizante como se describen en la presente memoria pueden ser bactericidas y/o bacteriostáticos contra SARM o SARV, o ambos.

Detergentes

Una composición desinfectante que comprende una o más enzimas digestivas descritas en la presente memoria también se puede formular como detergente. Un detergente es un material destinado a ayudar a la limpieza. Un detergente puede contener una o más enzimas digestivas, como las descritas previamente, en una formulación adecuada para mantener su capacidad desinfectante, y puede contener ingredientes activos o inactivos opcionales, por ejemplo, estabilizadores de enzimas, desinfectantes adicionales, blanqueadores, jabones, tensioactivos, colorantes y perfumes, abrasivos, modificadores del pH, ácidos, álcalis, o compuestos cáusticos, descalcificadores, oxidantes, agentes de suspensión, suavizantes de ropa, agentes espumantes o agentes anti-espumantes, modificadores de la viscosidad, inhibidores de la corrosión, y blanqueadores ópticos. Un detergente como los descritos en la presente memoria puede ser bacteriostático y/o bactericida para S. aureus, y en algunas realizaciones puede ser bacteriostático y/o bactericida contra SARM o SARV, o ambos.

Una composición detergente que comprende una o más enzimas digestivas, especialmente aquellas elaboradas para su uso con agua, puede incluir componentes adicionales tales como tensioactivos para "cortar" (disolver) la grasa y para humedecer superficies, abrasivos para restregar, sustancias para modificar el pH o afectar al funcionamiento o la estabilidad, ácidos para descalcificar o cáusticos para romper compuestos orgánicos, descalcificadores para contrarrestar el efecto de los iones de "dureza", oxidantes (oxidantes) para blanquear, desinfectar, y romper compuestos orgánicos, materiales no tensioactivos que mantienen la suciedad en suspensión, enzimas para digerir proteínas, grasas, o carbohidratos en las manchas o para modificar el tacto del tejido, ingredientes que modifican las propiedades espumantes de los tensioactivos de limpieza, para estabilizar o contrarrestar la espuma, ingredientes para aumentar o disminuir la viscosidad de la solución, o para mantener otros ingredientes en solución, en un detergente suministrado como disolución en agua o gel, ingredientes que afectan a las propiedades estéticas del artículo que se va a limpiar, o del propio detergente antes o durante su utilización, tales como blanqueadores ópticos, suavizantes para ropa, colores, y perfumes, ingredientes tales como inhibidores de la corrosión para contrarrestar el daño al equipo con el que se utiliza el detergente, ingredientes para reducir el perjuicio o producir beneficios en la piel, cuando el detergente se utiliza con las manos descubiertas sobre objetos inanimados o se utiliza para limpiar la piel, y conservantes para evitar el deterioro de otros ingredientes.

La composición detergente puede estar en cualquier forma seca conveniente, por ejemplo, una barra, un comprimido, un polvo, un gránulo o una pasta. También puede ser un detergente líquido.

La enzima o las enzimas digestivas de la composición detergente de la invención se pueden estabilizar utilizando agentes estabilizadores convencionales, por ejemplo, un poliol tal como propilen glicol o glicerol, un azúcar o alcohol de azúcar, ácido láctico, ácido bórico, o un derivado de ácido bórico, por ejemplo, un éster de borato aromático, o un derivado de ácido fenilborónico tal como ácido 4-formilfenil borónico, y la composición se puede formular como se describe por ejemplo en los documentos WO 92/19709 y WO 92/19708.

Antisépticos

También se pueden utilizar diversos casos de composiciones que comprenden una o más enzimas digestivas como agentes antisépticos, por ejemplo, para reducir, erradicar, o atenuar S. aureus sobre la piel u otros tejidos vivos. Los antisépticos son sustancias antimicrobianas que se aplican a tejido vivo/piel para reducir la posibilidad de infección, sepsis, o putrefacción. Generalmente se deben distinguir de los antibióticos que destruyen las bacterias dentro del organismo, y de los desinfectantes, que destruyen los microorganismos encontrados en objetos no vivos. Algunos antisépticos son verdaderos germicidas, capaces de destruir microbios (bactericidas), mientras otros son bacteriostáticos y solamente previenen o inhiben su crecimiento.

Los antisépticos descritos en la actualidad pueden encontrar usos concretos en entornos hospitalarios o del cuidado de la salud, por ejemplo, en formulaciones para manos, faciales o de lavado corporal; como antisépticos para su uso antes y después del tratamiento quirúrgico; y como antisépticos para su uso en la limpieza y tratamiento de heridas, tales como heridas traumáticas o quirúrgicas. En el entorno comunitario, los antisépticos son útiles en cualquier entorno en el que las infecciones adquiridas por la comunidad sean una preocupación, por ejemplo, centros de día, grandes instituciones, colegios, etc. Los antisépticos también pueden ser útiles en el entorno doméstico en formulaciones para las manos, faciales o de lavado corporal, o para el tratamiento de heridas.

Un antiséptico puede incluir una o más enzimas digestivas, en diversos casos como se ha descrito previamente, y opcionalmente pueden incluir uno o más ingredientes activos o inactivos, tales como otros agentes antisépticos conocidos por los expertos normales en la técnica, estabilizadores (por ejemplo, estabilizadores de enzimas), colorantes, perfumes, y otros excipientes. Los ejemplos de los agentes antisépticos que se incluyen con las una o más enzimas digestivas incluyen alcoholes (por ejemplo, etanol, 1- y 2-propanol, o mezclas de los mismos), compuestos de amonio cuaternario (cloruro de benzalconio, bromuro de cetil trimetilamonio, cloruro de cetilpiridinio, y cloruro de bencetonio), ácido bórico, gluconato de clorhexidina, peróxidos (por ejemplo, peróxido de hidrógeno, peróxido de benzoílo); soluciones de yodo y yodóforo (por ejemplo, povidona-yodo), dicloruro de octenidina, compuestos Fenólicos (ácido carbólico) y derivados fenólicos, cloruro de sodio, hipoclorito sódico, e hipoclorito cálcico.

Un antiséptico descrito en la presente memoria puede ser bactericida y/o bacteriostático para S. aureus, y en algunos casos puede ser bactericida y/o bacteriostático para SARM o SARV, o ambos.

En un caso, una composición antiséptica comprende una o más enzimas digestivas y opcionalmente uno o más de un agente anti-inflamatorio, un analgésico, o un anestésico.

Un agente anti-inflamatorio puede incluir compuestos anti-inflamatorios esteroideos y no esteroideos. En un caso, la composición antiséptica incluye uno o más esteroides. En un caso, las composiciones antisépticas pueden comprender un agente anti-inflamatorio que es un fármaco anti-inflamatorio no esteroideo. Los ejemplos no limitantes de los fármacos anti-inflamatorios no esteroideos adecuados incluyen aspirina (Anacin, Ascriptin, Bayer, Bufferin, Ecotrin, Excedrin), colina y salicilatos de magnesio (CMT, Tricosal, Trilisate), salicilato de colina (Artliropan), celecoxib (Celebrex), diclofenaco potásico (Cataflam), diclofenaco sódico (Voltaren, Voltaren XR), diclofenaco sódico con misoprostol (Arthrotec), diflunisal (Dolobid), etodolac (Lodine, Lodine XL), fenoprofeno cálcico (Nalfon), flurbiprofeno (Ansaid), ibuprofeno (Advil, Motrin, Motrin IB, Nuprin), indometacina (Indocin, Indocin SR), ketoprofeno (Actron, Orudis, Orudis KT, Oruvail), salicilato de magnesio (Arthritab, Bayer Select, Doan's Pills, Magan, Mobidin, Mobogesic), meclofenamato sódico (Meclomen), ácido mefenámico (Ponstel), meloxicam (Mobic), nabumetona (Relafen), naproxeno (Naprosyn, Naprelan), naproxeno sódico (Aleve, Anaprox), oxaprozin (Daypro), piroxicam (Feldene), rofecoxib (Vioxx), salsalato (Amigesic, Anaflex 750, Disalcid, Marthritic, Mono-Gesic, Salflex, Salsitab), salicilato sódico, sulindac (Clinoril), tolmetin sódico (Tolectin), valdecoxib (Bextra), o una combinación de los mismos.

Los ejemplos no limitantes de los analgésicos incluyen ácido acetilsalicílico, codeína, ibuprofeno, acetaminofeno, o aceite del arbol del té. Los ejemplos no limitantes de los anestésicos incluyen xilocaína, prilocaína o benzocaína.

Los métodos ilustrativos para someter a ensayo las composiciones antisépticas candidatas se proporcionan más abajo. Un experto en la técnica comprenderá que se conocen en la técnica otros métodos de ensayo de las composiciones antisépticas y que también son adecuados para someter a ensayo composiciones antisépticas candidatas.

Los métodos in vitro de determinación de la capacidad de las composiciones antisépticas candidatas para destruir o inhibir el crecimiento de células microbianas tales como S. aureus son bien conocidos en la técnica. En general, estos métodos implican poner en contacto un cultivo de las células de interés con diversas concentraciones de las composiciones antisépticas candidatas y controlar el crecimiento del cultivo celular con respecto a un cultivo de control no tratado. También se puede incluir en tales ensayos un segundo cultivo de control que comprende células que se han puesto en contacto con un agente anti-microbiano conocido, si se desea.

Por ejemplo, la capacidad de una composición antiséptica candidata para inhibir el crecimiento de células microbianas se puede determinar fácilmente mediante medición de la concentración inhibidora mínima (CIM) para la composición antiséptica. La CIM se define como la concentración más baja que inhibe el crecimiento del organismo a un nivel predeterminado. Por ejemplo, un valor de CIM 100 se define como la concentración más baja que inhibe completamente el crecimiento del organismo, mientras un valor CIM 90 se define como la concentración más baja que inhibe el crecimiento en un 90% y un valor CIM 50 se define como la concentración más baja que inhibe el crecimiento en un 50%. Los valores de CIM se expresan a veces como intervalos, por ejemplo, la CIM 100 para una composición antiséptica se puede expresar como la concentración a la que no se observa crecimiento o como un intervalo entre la concentración a la cual no se observa crecimiento y la concentración de la dilución que sigue inmediatamente.

Las CIM antibacterianas para las composiciones antisépticas candidatas se pueden medir utilizando un análisis de macro-y micro-dilución de caldo (véase Amsterdam, D. (1996) "Susceptibility testing of antimicrobials in liquid media," págs. 52-111. En Loman, V., ed. Antibiotics in Laboratory Medicine, 4a ed. Williams y Wilkins, Baltimore, MD). Se proporciona un ensayo de susceptibilidad anti-bacteriana normalizado en el National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS) como NCc Ls , 2000; documento M7-A58.

En el método de microdilución de caldo clásico, la composición antiséptica candidata se diluye en medio de cultivo un una placa de microtitulación de 96 pocillos recubierta, estéril. Se diluye un cultivo durante la noche de una sola colonia bacteriana en medio estéril de manera que, tras la inoculación, cada pocillo de la placa de microtitulación contiene un número apropiado de unidades formadoras de colonias (UFC)AnI (típicamente, aproximadamente 5 x 105 UFC/ml). También se incluye el medio de cultivo solo (que no contiene bacterias) como control negativo para cada placa y a menudo se incluyen antibióticos conocidos como controles positivos. La placa de microtitulación inoculada se incuba a continuación a una temperatura apropiada (por ejemplo, 35°C - 37°C durante 16-48 horas). La turbidez de cada pocilio se determina a continuación mediante inspección visual y/o midiendo la absorbancia, o la densidad óptica (DO), a 595 nm o 600 nm utilizando un lector de microplaca y se utiliza como una indicación del grado de crecimiento bacteriano.

Los efectos anti-microbianos también se pueden expresar como el porcentaje (%) de inhibición del crecimiento de un microorganismo dado a lo largo de un período de tiempo pre-determinado mediante tratamiento con una única concentración de una composición antiséptica candidata. Este método proporciona un método rápido de evaluación de la capacidad de una composición antiséptica para inhibir el crecimiento microbiano, por ejemplo, antes de llevar a cabo más ensayos en profundidad, tales como determinaciones de CIM o ensayos in vivo.

La capacidad de cualquiera de las presentes composiciones desinfectantes, detergentes, higienizantes, y antisépticas para destruir o inhibir el crecimiento de la bacteria S. aureus se puede someter a ensayo utilizando métodos bien conocidos en la técnica, incluyendo los diversos métodos descritos anteriormente. Los métodos y protocolos para someter a ensayo las composiciones contra bacterias específicas se pueden encontrar, por ejemplo, en Official Methods of Analysis of the A o AC, 15a Ed., Arlington Virginia 22201, USA (Association of Official Analytical Chemists (AOAC), Inc. 1990), Designación: E 1054-91 "Practices for Evaluation Inactivators of Antimicrobial Agents Used in Disinfectant, Sanitizer, Antiseptic, o Preserved Products" (American Society for Testing and Materials (ASTM), 1991). Como también es sabido en la técnica, se pueden realizar evaluaciones de Mortalidad-Tiempo in vitro utilizando una modificación de los métodos descritos en Draft European Standard, prEN 12054, "Chemical Disinfectants and Antiseptics - Products for Hygienic and Surgical Handrub and Handwash - Bactericidal Activity - Test Method and Requirements (1995)." Otros métodos adicionales que se pueden utilizar incluyen el ensayo de reducción log, los ensayos de proliferación, el método de dilución utilizado por la AOAC, o el ensayo de la zona de inhibición. Otros métodos se describen en los Ejemplos a continuación.

Kits

También se describen en la presente memoria kits. Típicamente, un kit incluye una o más composiciones como las descritas en la presente memoria. En ciertos casos, un kit puede incluir uno o más sistemas de suministro o administración, por ejemplo, para suministrar o administrar una composición como la proporcionada más arriba, y/o directrices para el uso del kit (por ejemplo, instrucciones para el tratamiento de un paciente; instrucciones para desinfectar una superficie). En otro caso, el kit puede incluir una composición como la descrita en la presente memoria y una etiqueta, por ejemplo, una etiqueta que indica que los contenidos se van a administrar a un paciente con una infección por S. aureus, o una etiqueta en cuanto a cómo utilizar la composición como desinfectante, higienizante, detergente, o antiséptico.

Las composiciones desinfectantes, higienizantes, y detergentes descritas en la presente memoria se pueden aplicar a superficies no vivas en las cantidades y de la manera apropiadas para reducir o erradicar S. aureus de tales superficies, y de ese modo pueden reducir o prevenir la transmisión y/o infectividad por S. aureus. Las concentraciones, la programación, y la frecuencia de tratamiento son parámetros que pueden ser determinados por un experto normal en la técnica.

Cualquier superficie puede ser desinfectada con las composiciones descritas, incluyendo una variedad de dispositivos médicos utilizados en el entorno hospitalario o del cuidado de la salud. De acuerdo con se utiliza en la presente memoria, "dispositivo médico" hace referencia a cualquier dispositivo para su uso en o sobre un paciente, tal como un implante o prótesis. Tales dispositivos incluyen, sin limitación, injertos vasculares sintéticos, dispositivos de control de la sangre, válvulas cardíacas artificiales, escalpelo, cuchillo, tijeras, espátulas, expansores, clips, pinzas, espéculos, retractores, sutura, malla quirúrgica, cincel, taladro, nivel, escofina, sierra, férula, calibre, bridas, fórceps, garfios, lancetas, agujas, cánulas, curetas, depresores, dilatadores, elevadores, articuladores, extractores, sondas, grapas, catéteres, dispositivos intraluminales, tubos, cuencos, bandejas, esponjas, asas, cucharas, jeringas, marcapasos, tornillos, placas, o alfileres.

Otras superficies comunitarias, hospitalarias o para el cuidado de la salud que se sospecha que albergan S. aureus pueden ser desinfectadas, incluyendo superficies grandes o pequeñas (suelos, mesas, cambiadores, camas, sistemas de ventilación, bañeras, picaportes, mostradores, superficies para servicio de alimentación, etc.). Las composiciones también pueden encontrar uso en lavados de manos o corporales, por ejemplo, en puntos de entrada a entornos comunitarios, habitaciones de hospitales, o cuartos de baño.

Las composiciones proporcionadas en la presente memoria se pueden utilizar como desinfectantes comunes o en cualquier situación en donde no sean deseables microorganismos. Por ejemplo, se pueden utilizar como desinfectantes de superficies, en recubrimientos para dispositivos médicos, en recubrimientos para indumentaria, tales como para inhibir el crecimiento de bacterias o repeler mosquitos, en filtros para la purificación de aire, tales como aeroplanos o en entornos comunitarios u hospitalarios, en sistemas de purificación de agua, como constituyentes de champús y jabones, como conservantes alimentarios, conservantes cosméticos, conservantes de medios, en herbicidas o insecticidas, como constituyentes de materiales de construcción, tales como selladores de silicona, y en el procesamiento de productos animales, tales como el curado de pieles de animales o en mataderos.

Para estos fines, típicamente las enzimas digestivas solas o junto con otros desinfectantes o detergentes se incluyen en las composiciones y se aplican con un aplicador apropiado. También se pueden incorporar o impregnar en el material durante la fabricación, tal como para un filtro de aire, o se aplican de otro modo al material u objeto.

Por ejemplo, en algunas realizaciones, una composición descrita en la presente memoria se puede mezclar con el material, por ejemplo durante la fabricación del material o en un momento posterior. Adicionalmente, se puede aplicar una composición a la superficie de un material, o bien durante la fabricación o bien en un momento posterior. De acuerdo con se utiliza en la presente memoria, el término "material adecuado" representa cualquier material sobre el cual, para el cual, o en el cual se pueden aplicar o incorporar las enzimas digestivas, incorporando de ese modo una actividad antimicrobiana en/sobre el material. Por ejemplo, se puede fabricar una gasa sobre un apósito con una composición que comprende una o más enzimas digestivas en o sobre la gasa, y/o se puede aplicar a la gasa una pomada que comprende una o más enzimas digestivas incorporando de ese modo actividad antimicrobiana a la gasa. Los ejemplos de los materiales adecuados en los cuales se pueden utilizar enzimas digestivas, incluyen, pero no se limitan a: alimentos, líquidos, un dispositivo médico (por ejemplo instrumental quirúrgico), una cuenta, una película, un monofilamento, un material no tejido, esponja, tela, tejido de punto, una fibra corta, un tubo, una fibra hueca, un órgano artificial, un catéter, una sutura, una membrana, un apósito, y gasa. Las enzimas digestivas se pueden aplicar o mezclar en otros numerosos tipos de materiales que son adecuados para su uso en actividades médicas, de la salud, de seguridad alimentaria, o de limpieza del medio ambiente.

Métodos para evaluar la actividad

Las composiciones descritas en esta descripción pueden evaluarse para una variedad de actividades mediante métodos conocidos por los expertos en la técnica. Por ejemplo, las actividades enzimáticas se pueden evaluar usando ensayos enzimáticos estándar. Las Concentraciones Inhibidoras Mínimas ("CIM") de las composiciones también se pueden evaluar mediante métodos conocidos por los expertos en la técnica, como se describió anteriormente. Otros ensayos, que incluyen el coeficiente de Fenol, también son bien conocidos por los expertos en la técnica. Ver también los ejemplos a continuación.

Ejemplos

Composiciones líquidas ilustrativas

Una composición de enzima pancreática seca que contiene aproximadamente 200 unidades USP/mg de proteasa, aproximadamente 40 unidades USP/mg de lipasa, y aproximadamente 250 unidades USP/mg de amilasa se puede diluir con diversos diluyentes (agua, solución salina, soluciones tamponadas de fosfato, soluciones de pH estabilizado) y opcionalmente con otros aditivos activos o inactivos (sistemas de estabilización de enzima, tampones, colorantes, higienizantes, detergentes, desinfectantes, antisépticos) para formar composiciones líquidas ilustrativas para los usos descritos en la presente memoria. En algunas realizaciones, la composición de enzima seca se puede diluir a una razón en mgs de la composición de enzima seca con respeto a mls del diluyente total en el intervalo de 1 mg de composición de enzima:1 ml de diluyente total a 1 mg de composición de enzima: 10.000 mls de diluyente total, o cualquier valor intermedio, por ejemplo, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1:7, 1:8, 1:9, 1:10, 1:20, 1:50, 1:100, 1:200, 1:500, 1:1000, 1:5000, o 1:10,000.

Composiciones sólidas ilustrativas

Una composición de enzima pancreática seca que contiene aproximadamente 200 unidades USP/mg de proteasa, aproximadamente 40 unidades USP/mg de lipasa, y aproximadamente 250 unidades USP/mg de amilasa se puede mezclar con diversos ingredientes y aditivos activos o inactivos (por ejemplo, detergentes secos, desinfectantes, antisépticos, e higienizantes, tales como alquilsulfato etoxilado, SDS, lauriléter sulfato de sodio, dodecilbenzeno, 4-dodecilbencenesulfonato de sodio, sistemas de estabilización de enzima, excipientes, colorantes) para formar composiciones sólidas ilustrativas. En algunas realizaciones, la composición de enzima seca se puede mezclar con los mgs totales de los aditivos en el intervalo de 1 mg de composición de enzima: 1 mg de aditivos totales a 1 mg de composición de enzima: 10.000 mgs de aditivos totales, o cualquier valor intermedio, por ejemplo, 1:2, 1:3, 1:4, 1:5, 1:6, 1:7, 1:8, 1:9, 1:10, 1:20, 1:50, 1:100, 1:200, 1:500, 1:1000, 1:5000, o 1:10,000.

Formulaciones tópicas ilustrativas

Una composición de enzima pancreática seca que contiene aproximadamente 200 unidades USP/mg de proteasa, aproximadamente 40 unidades USP/mg de lipasa, y aproximadamente 250 unidades USP/mg de amilasa se puede mezclar con diversos portadores apropiados para formulaciones farmacéuticas tópicas a razones que oscilan de aproximadamente 1 mg de la composición de enzima con respecto a 1 mg del portador a aproximadamente 1 mg de la composición de enzima con respecto a aproximadamente 200 mg del portador, o cualquier razón intermedia (por ejemplo, 1:2, 1:4, 1:5, 1:10, 1:20, 1:30, 1:40, 1:50, 1:75, 1:100, 1:150). Por ejemplo, en una realización se emplea una razón de 1:25, y el portador es vaselina.

Ensayo de límite bacteriano - Evaluación de las propiedades bactericidas y bacteriostáticas

Los autores de la presente invención han descubierto sorprendentemente en el transcurso de la ejecución del ensayo de límite bacteriano sobre una composición de enzima pancreática de cerdo seca que comprende aproximadamente 200 unidades USP/mg de actividad proteasa, aproximadamente 40 unidades USP/mg de actividad lipasa, y 250 unidades USP/mg de actividad amilasa que la bacteria S. aureus no crece en presencia de diversas diluciones de este material. La recuperación de las UFC de S. aureus de los controles positivos "enriquecidos" con S. aureus era constantemente de baja a ausente. El ensayo de límite bacteriano de dilución de la composición seca en forma tanto no encapsulada como encapsulada en lípido (20% de aceite de soja en peso de la composición) demuestra una recuperación mínima o nula de la bacteria a partir de controles positivos a los que se había añadido un número conocido de UFC de S. aureus. La carencia de recuperación durante tales métodos de recuperación sugiere una naturaleza bacteriostática y/o bactericida de la composición.

Métodos y materiales

Materiales de muestra - Se elaboró producto Concentrado de Enzima Pancreática Porcina No Encapsulado (uPEC, por sus siglas en inglés) aislado de cerdo (Sus scrofa) por un proveedor comercial (Scientific Protein Labs) para que contuviera aproximadamente 200 U/mg de actividad proteasa, 40 U de actividad lipasa/mg, y 250 U de actividad amilasa/mg. Se obtuvo una versión encapsulada en lípido de este material (ePEC) utilizando un procedimiento de lecho fludificado y un aceite orgánico altamente purificado totalmente hidrogenado (aceite de soja totalmente hidrogenado) que se utilizó a continuación para recubrir las partículas de enzima a un porcentaje en peso de aproximadamente 20% de las partículas finales.

Métodos: Tanto ePEC como uPEC experimentaron un análisis microbiano convencional para la detección de microbios. Ninguna de las composiciones mostró una contaminación significativa utilizando el Ensayo de límites microbianos mediante los métodos USP. Adicionalmente, ambas muestras son negativas/10 g para especies de Salmonella y E. coli. En resumen, el procedimiento para el examen de las composiciones de ensayo para la idoneidad microbiológica (es decir, estimación del número total de microorganismos viable y libertad del organismo específico) se esboza en la USP, capítulo 61, "Microbial Limit Tests." La USP 61 esboza el ensayo preparatorio, durante el cual se determinan los parámetros de ensayo en donde la propia composición de ensayo ya no inhibe la multiplicación de los organismos viables. La USP 1227 ("Validation") también proporciona pautas para la validación de los métodos de recuperación. Los métodos para la evaluación del recuento microbiano aeróbico total, se llevaron a cabo en especies de E. coli, y Salmonella.

Recuento Microbiano Aeróbico Total; Preparación de diluciones de ensayo - Se prepararon diluciones masivas de ePEC y uPEC a 1:10, 1:50, 1:100 y 1:200 en Caldo de Soja con Tripsina añadida que contenía Polisorbato 20 al 4% y lecitina al 0,5%. La dilución de la muestra de ensayo masiva se dividió después en alícuotas separadas de 10 ml, en las que se inoculó a continuación un pequeño número de unidades formadoras de colonias (UFC <100/mL) de los microorganismos apropiados (S. aureus, P. aeruginosa, E. coli, S. enterica). Se cultivó en placa un mililitro de las alícuotas inoculadas por duplicado utilizando el medio sólido apropiado (agar). Se prepararon controles positivos, se inocularon, y se cultivaron en placa de una manera similar a las muestras de ensayo. Se prepararon controles negativos, se inocularon con reactivos estériles, y se cultivaron en placa de una manera similar a las muestras de ensayo. Las placas se incubaron de 30°C a 35°C durante dos días. Al final del período se calculó la recuperación. La recuperación de los organismos inoculados debe ser al menos 70% del control positivo con el fin de mostrar la no inhibición del crecimiento por la composición de ensayo. Se utilizó cloruro de trifeniltetrazolio para el recuento de las placas.

Ensayo para las especies de Salmonella - Las diluciones preparadas con caldo de Lactosa que contenía Polisorbato 20 al 4% y lecitina al 0,5% con <= 100 UFC de Salmonella enterica. Las diluciones inoculadas se incubaron de 30°C a 35°C durante 24 horas antes de transferir 1 ml a caldos de Selenita Cistina y Tetrahionato. Los caldos selectivos se inocularon durante 18 horas de 30°C a 35°C antes de ser aplicados en estrías en agares verde brillante, sulfito de bismuto y xilosa lisina desoxicolato. Las placas de agar selectivo se incubaron de 30°C a 35°C durante 24 horas. Las placas se observaron para determinar las colonias características de las especies de Salmonella. Cuando se observaron, se confirmó que una colonia representativa era de una especie de Salmonella utilizando un ensayo de identificación bioquímica API 20e.

Ensayo para E. coli - Las diluciones preparadas con caldo de Lactosa que contenía Polisorbato 20 al 4% y lecitina al 0,5% se inocularon con <= 100 UFC de E. coli. Las diluciones inoculadas se incubaron de 30°C a 35°C durante 24 horas antes de ser aplicadas en estrías sobre agar MacKonkey. Las placas se observaron para determinar las colonias características de E. coli. Cuando se observaron, se confirmó que una colonia representativa era E. coli utilizando un ensayo de identificación bioquímica API 20e.

Resultados

Recuento aeróbico total: Los resultados del ensayo utilizando PEC no recubierto (uPEC) se muestran en la Tabla 1, más abajo. Como se muestra, para las diluciones de 1:50, 1:100, y 1:200 el porcentaje de recuperación de S. aureus fue de 0%, demostrando la acción bactericida y/o bacteriostática de uPEC de S. aureus.

Tabla 1

El porcentaje de recuperación uPEC para E. coli también se proporciona en la Tabla 1. Para una dilución de 1:50 la recuperación fue de 0%, para una dilución de 1:100 la recuperación fue de 2%, y para una dilución de 1:200 la recuperación fue de 2%.

El porcentaje de recuperación uPEC para S. entérica también se proporciona en la Tabla 1. Para una dilución de 1:50 la recuperación fue de 73%, para una dilución de 1:100 la recuperación fue de 94%, y para una dilución de 1:200 la recuperación fue de 85%.

Los resultados del ensayo utilizando PEC encapsulado en lípido (ePEC) se proporcionan en la Tabla 2, más abajo. Como se muestra, para una dilución de 1:50 la recuperación de S. aureus fue de 29%, para una dilución de 1:100 la recuperación fue de 0%, y para 1:200 el porcentaje de recuperación de S. aureus también fue de 0%.

Tabla 2

El porcentaje de recuperación ePEC para E. coli también está en la Tabla 2. Para una dilución de 1:50 la recuperación fue de 32%, para una dilución de 1:100 la recuperación fue de 17%, y para una dilución de 1:200 la recuperación fue de 78%.

El porcentaje de recuperación ePEC para S. entérica también se da en la Tabla 2. Para una dilución de 1:50 la recuperación fue de 87%, para una dilución de 1:100 y 1:200 los ensayos no se llevaron a cabo.

Los controles positivos referidos en las Tablas 1 y 2 demuestran claramente que el medio de crecimiento para todos los cultivos microbiológicos estaba funcionando eficazmente. En la Tabla 1, se puede observar que la composición de uPEC era altamente eficaz tanto sobre S. aureus como sobre E. coli. Esto se fundamentó por el hecho de que la recuperación de los controles enriquecidos positivamente no lograron satisfacer el criterio USP de la recuperación positiva (al menos 70% de las UFC de la muestra enriquecida se recuperaron).

También es importante observar que la actividad bacteriostática/bactericida mostraba especificidad de especie. La muestra de S. enterica mostró una excelente recuperación utilizando PEC tanto recubierto como no recubierto. Debido a que las bacterias comparten paredes celulares y estructuras de membrana comunes tales como lípidos y peptidoglicanos, es posible que estos resultados apunten a la sensibilidad de más de un componente celular más específico de la especie tal como una proteína. Si la acción lipasa o amilasa sola fuera suficiente para inducir la muerte bacteriana o la supresión del crecimiento, en ese caso sería poco probable observar la recuperación de S. enterica a tales niveles robustos. Es posible que una o varias proteínas específicas de la especie en S. aureus y E. coli compartan secuencias peptídicas similares y la estructura terciaria local apropiada para permitir el ataque enzimático por una o varias de las proteasas presentes en PEC, conduciendo a la posterior destrucción de la bacteria. Estos resultados no excluyen sin embargo, un evento de múltiples fases en el que la acción por las lipasas y amilasas contra la pared celular y la membrana bacterianas se exponen primero a proteínas extracelulares o transmembrana que tienen la estructura primaria y terciaria apropiadas para facilitar su degradación enzimática por una o muchas de las proteasas PEC.

Estos resultados demuestran un claro efecto bacteriostático para PEC tanto recubierto por lípidos como no recubierto. Debido a que este experimento depende de una lectura del criterio de valoración final del crecimiento de las colonias bacterianas mientras la bacteria sujeto permanece en presencia de PEC, no es posible, basándose en estos resultados, excluir la posibilidad de un efecto meramente bacteriostático. De este modo, el fracaso en la recuperación de un número suficiente de unidades formadoras de colonias viables podría ser el resultado de la presencia supresora continua del material PEC, en oposición a la inducción de la muerte bacteriana. Por consiguiente, se llevaron a cabo ensayos experimentales adicionales con el fin de evaluar de manera más concluyente las capacidades bactericidas de PEC.

Materiales y métodos: La formulación de PEC no recubierta descrita más arriba se utilizó previamente para evaluar la actividad bactericida de las formulaciones.

Preparación de las diluciones de ensayo - Se prepararon diluciones masivas de uPEC a 1:100 y 1:200 en caldo se soja con tripsina añadida que contenía Polisorbato 20 al 4% y lecitina al 0,5%. La dilución masiva se dividió después en alícuotas de 10 ml separadas, que se inocularon a continuación con un pequeño número de unidades formadoras de colonias (UFC <100) de los microorganismos adecuados. Se cultivó en placa un mililitro de las alícuotas inoculadas por duplicado utilizando el medio sólido apropiado (agar). Los controles positivos se prepararon, se inocularon, y se cultivaron en placa de una manera similar a las muestras de ensayo. Se prepararon se prepararon, se inocularon con reactivo estéril, y se cultivaron en placa de una manera similar a las muestras de ensayo. Las placas se incubaron de 30°C a 35°C durante dos días. Después de esta incubación inicial, el material cultivado se recogió y se lavó en Solución salina tamponada con fosfato (PBS) y se filtró con el fin de eliminar PEC. El material se resuspendió en caldo de soja con tripsina añadida diluido de acuerdo con lo anterior y se volvió a cultivar en placa sobre medio sólido de nueva aportación (agar) y se incubó durante 2 días más. Al finalizar este período, las colonias se enumeraron y se calculó el porcentaje de recuperación. Al finalizar el período se calculó la recuperación. La recuperación de los organismos inoculados debe ser de al menos 70% con el fin de mostrar la no inhibición del crecimiento. Se utilizó cloruro de trifeniltetrazolio para el recuento de las placas.

Ensayos para E. coli - Las diluciones preparadas con caldo de Lactosa que contenía Polisorbato 20 al 4% y lecitina al 0,5% se inocularon con <= 100 UFC de E. coli. Las diluciones inoculadas se incubaron de 30°C a 35°C durante 24 horas antes de ser aplicadas en estrías al agar MacKonkey. Las placas se observaron para determinar las colonias características de E. coli. Cuando se observaron, se confirmó que una colonia representativa era E. coli utilizando un ensayo de identificación bioquímica API 20e.

Los ensayos también se repitieron tanto para S. aureus como para E. coli a Diluciones de 1:20, 1:40, y 1:80.

Resultados de ensayo

Los resultados de ensayo utilizando el uPEC no recubierto se proporciona en las Tablas 3 y 4, más abajo, demostrando la recuperación de la bacteria después de volver a cultivar en placa la bacteria sola, post-incubar con uPEC y lavar. Como se muestra en la Tabla 3, para las diluciones de 1:100, y 1:200, el porcentaje de recuperación de S. aureus fue de 13% y 48%, respectivamente, demostrando claramente la acción bactericida de uPEC sobre S. aureus. Como se muestra en la Tabla 4, el porcentaje de recuperación de S. aureus a una dilución de 1:20 es de 2%, para una dilución de 1:40 es de 4%, y para una dilución de 1:80 es de 23%.

Tabla 3

Tabla 4

La recuperación para E. coli también se proporciona en las Tablas 3 y 4. Como se muestra en la Tabla 3, para una dilución de 1:100 la recuperación fue de 2%, y para una dilución de 1:200 la recuperación fue de 28%. Como se muestra en la Tabla 4, el porcentaje de recuperación de E. coli a una dilución de 1:20 es de 0%, para una dilución de 1:40 es de 0%, y para una dilución de 1:80 es de 12%

Los controles positivos demuestran que los medios de crecimiento para todos los cultivos microbianos estaban funcionando eficazmente. Esto indica un efecto bactericida auténtico cuando los organismos seleccionados se exponen a PEC. Si la acción del PEC fuera meramente bacteriostática, la eliminación de PEC del cultivo simultáneo con las bacterias de ensayo daría como resultado una liberación de cualquier acción supresora por PEC con una recuperación del crecimiento activo. No obstante, la eliminación de PEC no da como resultado ninguna recuperación, ni siquiera cuando los cultivos se dejaron crecer a lo largo de un período de 24 horas completo. Esto apoya fuertemente la noción de que la razón de que los organismos seleccionados no logren mostrar la recuperación de las UFC tras la exposición a PEC se debe a la acción bactericida de PEC. Esta acción podría incluir mecanismos tales como el daño físico e irreversible a los lípidos de la superficie celular, las proteínas de la membrana o la cápsula bacteriana por la degradación enzimática, conduciendo a desequilibrios de electrolitos iónicos extracelulares e intercelulares, cambios de acidez, y daño del material genético.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Uso no terapéutico de un desinfectante para erradicar, atenuar o reducir Staphylococcus aureus (S. aureus), donde el desinfectante es bacteriostático o bactericida para S. aureus, en donde el desinfectante comprende enzimas digestivas que comprenden una proteasa, una amilasa, y una lipasa, y en donde la proteasa total y la lipasa total en el desinfectante en unidades de la Farmacopea de los Estados Unidos (USP) están presentes en una relación de proteasa a lipasa de 1:1 a 20:1.

2. El uso no terapéutico de un desinfectante de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el desinfectante comprende además una o más enzimas seleccionadas del grupo que consiste en una celulasa, una sacarasa, una maltasa y papaína.

3. El uso no terapéutico de un desinfectante de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde las enzimas digestivas son enzimas animales, enzimas microbianas, enzimas vegetales, enzimas fúngicas o se preparan sintéticamente.

4. El uso no terapéutico de un desinfectante de acuerdo con la reivindicación 3, en donde las enzimas digestivas son enzimas animales derivadas de un páncreas de cerdo.

5. El uso no terapéutico de un desinfectante de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en donde la proteasa total y la lipasa total en el desinfectante en unidades U.S.P. están presentes en una relación de proteasa a lipasa de 4:1.

6. El uso no terapéutico de un desinfectante de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la proteasa total y la lipasa total en el desinfectante en unidades U.S.P. están presentes en una relación de proteasa a lipasa de 5:1.

7. El uso no terapéutico de un desinfectante de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la proteasa total y la lipasa total en el desinfectante en unidades U.S.P. están presentes en una relación de proteasa a lipasa de 6:1.

8. El uso no terapéutico de un desinfectante de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la proteasa total y la lipasa total en el desinfectante en unidades U.S.P. están presentes en una relación de proteasa a lipasa de 7:1.

9. El uso no terapéutico de un desinfectante de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la proteasa total y la lipasa total en el desinfectante en unidades U.S.P. están presentes en una relación de proteasa a lipasa de 8:1.

10. El uso no terapéutico de un desinfectante de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la proteasa total y la lipasa total en el desinfectante en unidades U.S.P. están presentes en una relación de proteasa a lipasa de 9:1.

11. El uso no terapéutico de un desinfectante de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en donde la proteasa total y la lipasa total en el desinfectante en unidades U.S.P. están presentes en una relación de proteasa a lipasa de 10:1.

12. El uso no terapéutico de un desinfectante de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde S. aureus es un S. aureus resistente a meticilina o un S. aureus resistente a vancomicina.

13. El uso no terapéutico de un desinfectante de acuerdo con cualquier reivindicación anterior, en donde el desinfectante tiene un coeficiente de fenol de> 1 a 20 para Staphylococcus aureus (S. aureus).

14. El uso no terapéutico de un desinfectante de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el uso es para erradicar, atenuar o reducir Staphylococcus aureus (S. aureus) en una superficie muerta o inanimada.