CA2892497A1 - Procede d'elimination de biofilms pour le nettoyage d'instruments medicaux, en particulier pour lutter contre les maladies nosocomiales - Google Patents
Procede d'elimination de biofilms pour le nettoyage d'instruments medicaux, en particulier pour lutter contre les maladies nosocomiales Download PDFInfo
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Abstract
Procédé d'élimination de biofilms pour le nettoyage d'instruments médicaux, en particulier pour lutter contre les maladies nosocomiales, comprenant une étape de traitement de surface pendant une période de temps prédéterminée avec une composition comprenant au moins un composant détergent et au moins un composant enzymatique et une étape de rinçage et/ou de séchage de ladite surface.
Description
Procédé d'élimination de biofilms pour le nettoyage d'instruments médicaux, en particulier pour lutter contre les maladies nosocomiales La présente invention se rapporte à un procédé d'élimination de biofilms pour le nettoyage d'instruments médicaux, en particulier pour lutter contre les maladies nosoconniales.
Un biofilm est une pellicule visqueuse qui se développe sur toutes les surfaces, suite à l'adhésion de microorganismes sur ces surfaces et à la sécrétion par ceux-ci de polymères qui les recouvrent et facilitent leur adhésion. Les biofilms constituent ainsi une couche de protection autour des microorganismes et représentent une source récurrente de contamination du milieu environnant qui pose des problèmes majeurs en termes de santé, par exemple dans les milieux hospitaliers.
Les biofilms se retrouvent dans de nombreux environnements, par exemple dans les circuits d'eau, les tours de refroidissement, sur tout matériel immergé (coque bateau, ...) mais aussi sur les dents (plaque) ou dans les intestins et tout particulièrement sur les instruments médicaux utilisés en milieu hospitalier.
L'accumulation des polymères sécrétés par les bactéries (protéines et polysaccharides principalement) crée une matrice qui protège ces microorganismes des agressions extérieures et qui présente une très forte résistance aux procédures de nettoyage et de désinfection conventionnels. Les microorganismes s'y développent et contaminent le milieu environnant. Les biofilms constituent dès lors une source de contamination critique car ils sont présents partout, représentant ainsi un haut risque de contamination puisqu'ils sont très difficiles à éliminer.
On observe malheureusement que cette matrice est très résistante et peut constituer une barrière protégeant les bactéries des agents qui agiraient contre les microorganismes. Les traitements classiques à base de soude et/ou comportant différents biocides
Un biofilm est une pellicule visqueuse qui se développe sur toutes les surfaces, suite à l'adhésion de microorganismes sur ces surfaces et à la sécrétion par ceux-ci de polymères qui les recouvrent et facilitent leur adhésion. Les biofilms constituent ainsi une couche de protection autour des microorganismes et représentent une source récurrente de contamination du milieu environnant qui pose des problèmes majeurs en termes de santé, par exemple dans les milieux hospitaliers.
Les biofilms se retrouvent dans de nombreux environnements, par exemple dans les circuits d'eau, les tours de refroidissement, sur tout matériel immergé (coque bateau, ...) mais aussi sur les dents (plaque) ou dans les intestins et tout particulièrement sur les instruments médicaux utilisés en milieu hospitalier.
L'accumulation des polymères sécrétés par les bactéries (protéines et polysaccharides principalement) crée une matrice qui protège ces microorganismes des agressions extérieures et qui présente une très forte résistance aux procédures de nettoyage et de désinfection conventionnels. Les microorganismes s'y développent et contaminent le milieu environnant. Les biofilms constituent dès lors une source de contamination critique car ils sont présents partout, représentant ainsi un haut risque de contamination puisqu'ils sont très difficiles à éliminer.
On observe malheureusement que cette matrice est très résistante et peut constituer une barrière protégeant les bactéries des agents qui agiraient contre les microorganismes. Les traitements classiques à base de soude et/ou comportant différents biocides
2 n'agissent pas de manière suffisamment efficace car ils ne pénètrent pas le biofilm dans toute son épaisseur ou sont inhibés par certaines molécules composant cette matrice. Le traitement n'est alors que =
partiellement efficace sur la surface supérieure du biofilm.
Or, de nos jours, l'hygiène est devenue une problématique de première importance dans l'industrie alimentaire. En effet, les problèmes de contamination sont en augmentation alors que les moyens de désinfections utilisés sont de plus en plus puissants. Par ailleurs, cette problématique doit être adressée par une approche globale, notamment en ce qui concerne le phénomène de résistance.
On connait du document W02012/048757 une composition et un procédé d'élimination des biofilms pour le nettoyage des sols et des surfaces dans les industries agro-alimentaires. Plus particulièrement, la composition divulguée dans ce document est destinée aux traitements et aux nettoyages d'installations dans le domaine de l'industrie alimentaire où des bactéries propres à ce secteur d'activité sécrètent des biofilms protecteurs responsables d'une source récurrente de contamination des aliments et/ou des installations des industries agro-alimentaires.
Une problématique similaire est observée en milieu hospitalier où se développent de nombreux microorganismes responsables de la formation de biofilms qui sont détectés en de nombreux endroits, tant au niveau des patients (prothèses, plaies, système respiratoire, ...) qu'au niveau de l'environnement (salle d'opération, matériel chirurgical, équipements de maintenance de ce matériel, endoscopes, sondes urinaires, cathéters, équipement médical, appareil de dialyse ou de ventilation assistée des patients, ...) et des surfaces (sols, murs, chambres, lits, matelas, ...).
Dans le domaine de l'industrie alimentaire mais de façon encore plus conséquente en milieu hospitalier, la problématique de la présence de biofilms est double. Premièrement, ceux-ci représentent
partiellement efficace sur la surface supérieure du biofilm.
Or, de nos jours, l'hygiène est devenue une problématique de première importance dans l'industrie alimentaire. En effet, les problèmes de contamination sont en augmentation alors que les moyens de désinfections utilisés sont de plus en plus puissants. Par ailleurs, cette problématique doit être adressée par une approche globale, notamment en ce qui concerne le phénomène de résistance.
On connait du document W02012/048757 une composition et un procédé d'élimination des biofilms pour le nettoyage des sols et des surfaces dans les industries agro-alimentaires. Plus particulièrement, la composition divulguée dans ce document est destinée aux traitements et aux nettoyages d'installations dans le domaine de l'industrie alimentaire où des bactéries propres à ce secteur d'activité sécrètent des biofilms protecteurs responsables d'une source récurrente de contamination des aliments et/ou des installations des industries agro-alimentaires.
Une problématique similaire est observée en milieu hospitalier où se développent de nombreux microorganismes responsables de la formation de biofilms qui sont détectés en de nombreux endroits, tant au niveau des patients (prothèses, plaies, système respiratoire, ...) qu'au niveau de l'environnement (salle d'opération, matériel chirurgical, équipements de maintenance de ce matériel, endoscopes, sondes urinaires, cathéters, équipement médical, appareil de dialyse ou de ventilation assistée des patients, ...) et des surfaces (sols, murs, chambres, lits, matelas, ...).
Dans le domaine de l'industrie alimentaire mais de façon encore plus conséquente en milieu hospitalier, la problématique de la présence de biofilms est double. Premièrement, ceux-ci représentent
3 une source de contamination permanente et très difficile à éliminer par des moyens conventionnels, même les plus agressifs. En effet, les désinfectants classiques sont inefficaces car ils ne parviennent pas à
atteindre les microorganismes qui sont protégés par le biofilm. Leur élimination incomplète entraîne et accélère des transferts de contamination de patients à patients dès lors qu'ils sont pratiquement invisibles. Pourtant, à la suite de chocs ou de frottements, des pellicules de biofilms peuvent se détacher et libérer des bactéries qui y étaient logées. En effet, ces bactéries cachées sont par exemple libérées suite à
un choc ou à un frottement d'un outil chirurgical sur un chariot ou suite au frottement d'un lit contre une porte, ce qui permet un libre transfert des bactéries à un patient souvent en condition fragile. Cette problématique est une des causes des maladies nosoconniales problématiques. Dans le cas d'outil comme des râpes orthopédiques, cette problématique est encore plus criante dès lors que l'utilisation conventionnelle de l'outil provoque l'abrasion et le détachement de pellicules de biofilms. Par conséquent, les bactéries sont libérées directement dans le corps humain qui représente un incubateur vivant parfait pour leur prolifération. Ces microorganismes emprisonnés dans les biofilms, grâce à la résistance et à la protection que leur apporte le biofilm, représentent donc un risque très élevé de contamination des = patients suivants.
Deuxièmement, un biofilm est mixte. C'est-à-dire que, développé par certaines souches, un biofilm peut abriter d'autres '1 25 souches, qui vivent et se développent alors en colonies. Ces colonies favorisent la communication entre bactéries et, entre autre, l'échange de gènes. La propagation des gènes de résistance portés par certaines bactéries est ainsi facilitée au sein des biofilms qui sont alors encore plus difficiles à éliminer. A ce sujet, les hôpitaux constituent un environnement particulièrement propice à ces échanges de gènes puisque de nombreuses bactéries y cohabitent, par exemple dans les chambres,
atteindre les microorganismes qui sont protégés par le biofilm. Leur élimination incomplète entraîne et accélère des transferts de contamination de patients à patients dès lors qu'ils sont pratiquement invisibles. Pourtant, à la suite de chocs ou de frottements, des pellicules de biofilms peuvent se détacher et libérer des bactéries qui y étaient logées. En effet, ces bactéries cachées sont par exemple libérées suite à
un choc ou à un frottement d'un outil chirurgical sur un chariot ou suite au frottement d'un lit contre une porte, ce qui permet un libre transfert des bactéries à un patient souvent en condition fragile. Cette problématique est une des causes des maladies nosoconniales problématiques. Dans le cas d'outil comme des râpes orthopédiques, cette problématique est encore plus criante dès lors que l'utilisation conventionnelle de l'outil provoque l'abrasion et le détachement de pellicules de biofilms. Par conséquent, les bactéries sont libérées directement dans le corps humain qui représente un incubateur vivant parfait pour leur prolifération. Ces microorganismes emprisonnés dans les biofilms, grâce à la résistance et à la protection que leur apporte le biofilm, représentent donc un risque très élevé de contamination des = patients suivants.
Deuxièmement, un biofilm est mixte. C'est-à-dire que, développé par certaines souches, un biofilm peut abriter d'autres '1 25 souches, qui vivent et se développent alors en colonies. Ces colonies favorisent la communication entre bactéries et, entre autre, l'échange de gènes. La propagation des gènes de résistance portés par certaines bactéries est ainsi facilitée au sein des biofilms qui sont alors encore plus difficiles à éliminer. A ce sujet, les hôpitaux constituent un environnement particulièrement propice à ces échanges de gènes puisque de nombreuses bactéries y cohabitent, par exemple dans les chambres,
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dans les salles d'opérations mais aussi sur les instruments médicaux (râpes orthopédiques, alésoirs, canules, endoscopes, ...). Dans les biofilms, le problème est encore accentué car ces souches ne sont même pas atteintes par les désinfectants, protégées par le matrice du biofilm.
C'est pourquoi, de par la source de contamination persistante qu'ils représentent et de par leur présence répandue, il est estimé que les biofilms sont responsables de 65% des maladies nosocomiales (maladies contractées dans un établissement de santé).
Leur impact sur cette problématique très critique en milieu hospitalier est donc élevé, en parallèle avec leur participation au développement de phénomènes de résistance.
Malheureusement, les techniques de nettoyage et de désinfection classiques appliquées actuellement en milieu hospitalier montrent certaines limites quant à l'élimination des biofilms pour lutter contre les maladies nosocomiales. Ceci est principalement lié à leur inaptitude à attaquer la matrice de polymères qui protège les microorganismes. En effet, les détergents classiques ne permettent pas de décoller cette matrice et les oxydants puissants ne la dissolvent que partiellement. Les désinfectants et/ou biocides utilisés à posteriori sont dès lors inefficaces car ils ne peuvent pas atteindre les microorganismes. De plus il a été démontré que les bactéries sécrètent des substances qui ont un impact sur l'efficacité des biocides, ce qui limite d'autant plus l'action de ces derniers.
Actuellement, il est donc particulièrement difficile d'éliminer les biofilms pourtant en grande partie responsable des maladies nosocomiales en milieu hospitalier. Il existe donc un réel besoin de mettre au point une composition et un procédé d'élimination des biofilms de surfaces telles que par exemple celles des instruments médicaux, particulièrement pour lutter contre les maladies nosocomiales puisque les techniques de nettoyage actuelles ne sont pas suffisamment = CA 02892497 2015-05-22 efficaces.
L'invention a pour but de pallier ces inconvénients en procurant un procédé tel qu'indiqué au début, caractérisé en ce qu'il = comprend une étape de traitement de surface pendant une période de
dans les salles d'opérations mais aussi sur les instruments médicaux (râpes orthopédiques, alésoirs, canules, endoscopes, ...). Dans les biofilms, le problème est encore accentué car ces souches ne sont même pas atteintes par les désinfectants, protégées par le matrice du biofilm.
C'est pourquoi, de par la source de contamination persistante qu'ils représentent et de par leur présence répandue, il est estimé que les biofilms sont responsables de 65% des maladies nosocomiales (maladies contractées dans un établissement de santé).
Leur impact sur cette problématique très critique en milieu hospitalier est donc élevé, en parallèle avec leur participation au développement de phénomènes de résistance.
Malheureusement, les techniques de nettoyage et de désinfection classiques appliquées actuellement en milieu hospitalier montrent certaines limites quant à l'élimination des biofilms pour lutter contre les maladies nosocomiales. Ceci est principalement lié à leur inaptitude à attaquer la matrice de polymères qui protège les microorganismes. En effet, les détergents classiques ne permettent pas de décoller cette matrice et les oxydants puissants ne la dissolvent que partiellement. Les désinfectants et/ou biocides utilisés à posteriori sont dès lors inefficaces car ils ne peuvent pas atteindre les microorganismes. De plus il a été démontré que les bactéries sécrètent des substances qui ont un impact sur l'efficacité des biocides, ce qui limite d'autant plus l'action de ces derniers.
Actuellement, il est donc particulièrement difficile d'éliminer les biofilms pourtant en grande partie responsable des maladies nosocomiales en milieu hospitalier. Il existe donc un réel besoin de mettre au point une composition et un procédé d'élimination des biofilms de surfaces telles que par exemple celles des instruments médicaux, particulièrement pour lutter contre les maladies nosocomiales puisque les techniques de nettoyage actuelles ne sont pas suffisamment = CA 02892497 2015-05-22 efficaces.
L'invention a pour but de pallier ces inconvénients en procurant un procédé tel qu'indiqué au début, caractérisé en ce qu'il = comprend une étape de traitement de surface pendant une période de
5 temps prédéterminée avec une composition comprenant au moins un =
composant détergent et au moins un composant enzymatique et une étape de rinçage et/ou de séchage de ladite surface.
Avantageusement, suivant l'invention, ledit composant détergent comprend un agent mouillant et un agent dispersant.
De préférence, suivant l'invention, ledit composant détergent comprend en outre un agent séquestrant.
Préférentiellement, suivant l'invention, ledit au moins un = composant enzymatique contient par exemple au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase.
Avantageusement, selon la présente invention, ledit agent mouillant et ledit agent dispersant forment un prémix et sont donc mélangés ensemble.
Dans le cadre de la présente invention, il a été montré qu'un tel traitement avec une telle composition selon l'invention permet aux = 20 enzymes (protéases, laccases, polysaccharidases) de dégrader efficacement et de manière polyvalente les polymères organiques de différentes natures constituant la matrice des biofilms formés par une multitude de microorganismes différents responsables directement ou indirectement des maladies nosocomiales. Sous l'action des enzymes et = 25 conjointement à l'action du composant détergent, la matrice du biofilm est fragilisée et gonflée, ce qui permet de l'éliminer de la surface traitée. Par ailleurs, de façon surprenante, il a également été montré que le procédé
selon l'invention n'est pas spécifique à un microorganisme particulier et donc à un type de biofilm particulier mais qu'il est adapté à de nombreuses =
30 souches bactériennes, les enzymes agissant sur les polymères des matrices des biofilms formés par n'importe quel microorganisme, L'action
composant détergent et au moins un composant enzymatique et une étape de rinçage et/ou de séchage de ladite surface.
Avantageusement, suivant l'invention, ledit composant détergent comprend un agent mouillant et un agent dispersant.
De préférence, suivant l'invention, ledit composant détergent comprend en outre un agent séquestrant.
Préférentiellement, suivant l'invention, ledit au moins un = composant enzymatique contient par exemple au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase.
Avantageusement, selon la présente invention, ledit agent mouillant et ledit agent dispersant forment un prémix et sont donc mélangés ensemble.
Dans le cadre de la présente invention, il a été montré qu'un tel traitement avec une telle composition selon l'invention permet aux = 20 enzymes (protéases, laccases, polysaccharidases) de dégrader efficacement et de manière polyvalente les polymères organiques de différentes natures constituant la matrice des biofilms formés par une multitude de microorganismes différents responsables directement ou indirectement des maladies nosocomiales. Sous l'action des enzymes et = 25 conjointement à l'action du composant détergent, la matrice du biofilm est fragilisée et gonflée, ce qui permet de l'éliminer de la surface traitée. Par ailleurs, de façon surprenante, il a également été montré que le procédé
selon l'invention n'est pas spécifique à un microorganisme particulier et donc à un type de biofilm particulier mais qu'il est adapté à de nombreuses =
30 souches bactériennes, les enzymes agissant sur les polymères des matrices des biofilms formés par n'importe quel microorganisme, L'action
6 détergente de la composition selon l'invention permet en outre d'assurer l'efficacité de la composition suivant l'invention. A cette fin, il est prévu suivant l'invention une base détergente qui soit compatible et qui puisse agir de manière synergique avec l'activité enzymatique du composant enzymatique. En outre, suivant l'invention, il est prévu une base détergente qui permette d'améliorer significativement la rapidité et l'efficacité de l'élimination du biofilm. C'est pour ces raisons que la présente invention associe un agent mouillant et un agent dispersant et éventuellement un agent séquestrant. Les actions conjointes de ces agents du composant détergent de la composition selon l'invention permet d'éliminer la partie superficielle du biofilm, de mouiller et de gonfler les structures organiques du biofilm favorisant donc de cette façon l'accessibilité du composant enzymatique qui fragilise et dégrade à son tour la matrice du biofilm.
De façon tout aussi inattendue, il a été déterminé, dans le cadre de la présente invention, qu'un tel traitement agit efficacement sur les microorganismes responsables des maladies nosocomiales et spécifiquement retrouvés en milieu hospitalier. Contre toute attente, il a été montré que le traitement suivant l'invention permet d'obtenir des résultats nettement et significativement supérieurs en termes = d'élimination des biofilms par rapport aux techniques de traitement actuellement appliquées en milieu hospitalier.
De préférence, selon le procédé suivant l'invention, ladite étape de traitement de surface pour lutter contre les maladies nosocomiales comprend une étape d'élimination des biofilms permettant de réaliser un abattement des microorganismes responsables des maladies nosocomiales. En effet, selon la présente invention, il est considéré qu'une réduction (ou abattement) logarithmique d'au moins 1 Log des microorganismes protégés par les biofilms est significative pour permettre de lutter contre les maladies nosocomiales, ce qui correspond à un pourcentage de réduction d'au moins 90% des microorganismes
De façon tout aussi inattendue, il a été déterminé, dans le cadre de la présente invention, qu'un tel traitement agit efficacement sur les microorganismes responsables des maladies nosocomiales et spécifiquement retrouvés en milieu hospitalier. Contre toute attente, il a été montré que le traitement suivant l'invention permet d'obtenir des résultats nettement et significativement supérieurs en termes = d'élimination des biofilms par rapport aux techniques de traitement actuellement appliquées en milieu hospitalier.
De préférence, selon le procédé suivant l'invention, ladite étape de traitement de surface pour lutter contre les maladies nosocomiales comprend une étape d'élimination des biofilms permettant de réaliser un abattement des microorganismes responsables des maladies nosocomiales. En effet, selon la présente invention, il est considéré qu'une réduction (ou abattement) logarithmique d'au moins 1 Log des microorganismes protégés par les biofilms est significative pour permettre de lutter contre les maladies nosocomiales, ce qui correspond à un pourcentage de réduction d'au moins 90% des microorganismes
7 protégés par les biofilms.
Cette réduction logarithmique est calculée en convertissant la charge microbienne en log 10, en soustrayant le résultat de l'échantillon test de l'échantillon témoin (contrôle), c'est-à-dire en soustrayant la charge microbienne présente dans un environnement donné (par exemple à la surface d'un outil médical ou à la surface d'un sol) avant une étape de traitement de surface suivant l'invention de la charge microbienne présente dans le même environnement suite à une = étape de traitement de surface suivant l'invention.
Il est bien entendu que toute autre technique bien connue de l'homme de métier et permettant de déterminer les quantités de microorganismes donnant lieu à la formation de biofilms avant et après traitement d'une surface peut également être utilisée dans le cadre de la présente invention.
De préférence, selon le procédé suivant l'invention, ladite étape de traitement de surface est réalisée par trempage pendant une période de temps prédéterminée comprise entre 20 minutes et 24 heures dans une solution de trempage comprenant ladite composition et une phase aqueuse de dilution préalablement formée. Un traitement par trempage est particulièrement indiqué pour nettoyer des surfaces ou des outils médicaux (râpes orthopédiques, alésoirs, canules, endoscopes...) dès lors que ces surfaces ou ces outils peuvent être plongés dans un conteneur (cuve, bassin, ...) rempli avec ladite solution de trempage. Par exemple, les outils médicaux peuvent séjourner plus ou moins longtemps, par exemple quelques minutes, quelques heures ou quelques jours dans la solution de trempage sans entraver la mise en uvre d'autres interventions médicales. Dans le cas des endoscopes, ladite solution de trempage peut être injectée dans les tuyaux des endoscopes pour en assurer le nettoyage.
Avantageusement, selon l'invention, ladite étape de traitement de surface par trempage est associée à une étape d'abrasion
Cette réduction logarithmique est calculée en convertissant la charge microbienne en log 10, en soustrayant le résultat de l'échantillon test de l'échantillon témoin (contrôle), c'est-à-dire en soustrayant la charge microbienne présente dans un environnement donné (par exemple à la surface d'un outil médical ou à la surface d'un sol) avant une étape de traitement de surface suivant l'invention de la charge microbienne présente dans le même environnement suite à une = étape de traitement de surface suivant l'invention.
Il est bien entendu que toute autre technique bien connue de l'homme de métier et permettant de déterminer les quantités de microorganismes donnant lieu à la formation de biofilms avant et après traitement d'une surface peut également être utilisée dans le cadre de la présente invention.
De préférence, selon le procédé suivant l'invention, ladite étape de traitement de surface est réalisée par trempage pendant une période de temps prédéterminée comprise entre 20 minutes et 24 heures dans une solution de trempage comprenant ladite composition et une phase aqueuse de dilution préalablement formée. Un traitement par trempage est particulièrement indiqué pour nettoyer des surfaces ou des outils médicaux (râpes orthopédiques, alésoirs, canules, endoscopes...) dès lors que ces surfaces ou ces outils peuvent être plongés dans un conteneur (cuve, bassin, ...) rempli avec ladite solution de trempage. Par exemple, les outils médicaux peuvent séjourner plus ou moins longtemps, par exemple quelques minutes, quelques heures ou quelques jours dans la solution de trempage sans entraver la mise en uvre d'autres interventions médicales. Dans le cas des endoscopes, ladite solution de trempage peut être injectée dans les tuyaux des endoscopes pour en assurer le nettoyage.
Avantageusement, selon l'invention, ladite étape de traitement de surface par trempage est associée à une étape d'abrasion
8 mécanique de ladite surface avec ladite solution de trempage, par exemple par brossage mécanisé ou manuel ou par traitement aux ultrasons. Une étape d'abrasion mécanique additionnelle permet à la solution de trempage comprenant ladite composition en phase aqueuse d'agir sur les différentes couches des biofilms mais aussi de participer mécaniquement à la déstructuration de la matrice polymère et ainsi ôter des pellicules de la surface des biofilms pour que les enzymes et les autres composants de ladite composition atteignent encore mieux les différentes couches des biofilms, ce qui assure un traitement optimal des surfaces afin d'éliminer efficacement les biofilms.
De préférence, selon le procédé suivant l'invention, le pH
de ladite solution de trempage est ajusté à une valeur de pH comprise entre 7 et 8.
De préférence, selon l'invention> le procédé comprend en outre une étape supplémentaire ultérieure de traitement de ladite surface à l'aide d'un biocide. Un traitement biocide désinfectant additionnel> suite à l'action de la solution enzymatique lors de l'étape de traitement de surface par trempage, permet d'assurer la destruction des bactéries rendues libres en fin de traitement de ladite surface.
Eventuellement, cette étape de traitement à l'aide d'un agent biocide peut être suivie par une étape de stérilisation, par exemple par un passage à l'autoclave.
D'autres formes de réalisation du procédé suivant l'invention sont indiquées dans les revendications annexées.
La présente invention porte également sur une nouvelle utilisation d'une composition comprenant au moins un composant détergent et au moins un composant enzymatique, pour lutter contre les maladies nosocomiales par élimination de biofilms. Une élimination des biofilms par trempage dans la composition diluée permet de lutter efficacement contre les maladies nosocomiales puisque les composants enzymatiques de la solution aqueuse de trempage permettent de
De préférence, selon le procédé suivant l'invention, le pH
de ladite solution de trempage est ajusté à une valeur de pH comprise entre 7 et 8.
De préférence, selon l'invention> le procédé comprend en outre une étape supplémentaire ultérieure de traitement de ladite surface à l'aide d'un biocide. Un traitement biocide désinfectant additionnel> suite à l'action de la solution enzymatique lors de l'étape de traitement de surface par trempage, permet d'assurer la destruction des bactéries rendues libres en fin de traitement de ladite surface.
Eventuellement, cette étape de traitement à l'aide d'un agent biocide peut être suivie par une étape de stérilisation, par exemple par un passage à l'autoclave.
D'autres formes de réalisation du procédé suivant l'invention sont indiquées dans les revendications annexées.
La présente invention porte également sur une nouvelle utilisation d'une composition comprenant au moins un composant détergent et au moins un composant enzymatique, pour lutter contre les maladies nosocomiales par élimination de biofilms. Une élimination des biofilms par trempage dans la composition diluée permet de lutter efficacement contre les maladies nosocomiales puisque les composants enzymatiques de la solution aqueuse de trempage permettent de
9 déstructurer et d'éliminer les biofilms des surfaces traitées de telle sorte que les biofilrns, en grande partie responsables des maladies nosocomiales, sont éliminés. Cette action des enzymes est favorisée par le fait qu'elle a lieu en synergie avec l'action du composant détergent de la composition selon l'invention, lequel permet d'éliminer la partie superficielle du biofilm, de mouiller et de gonfler les structures organiques du biofilm et de favoriser ainsi l'accessibilité du composant enzymatique qui fragilise et dégrade à son tour la matrice du biofilm.
De préférence, selon l'invention, ledit composant détergent de la composition utilisée comprend un agent mouillant et un agent dispersant.
Avantageusement, selon l'invention, ledit composant détergent de la composition utilisée comprend en outre un agent séquestrant.
De préférence, selon l'invention, ledit composant enzymatique de la composition utilisée contient par exemple au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase.
Plus particulièrement, la présente invention porte sur une utilisation d'une composition comprenant au moins un composant détergent comprenant un agent mouillant et un agent dispersant et éventuellement un agent séquestrant, et au moins un composant enzymatique contenant au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase, pour l'élimination de sources de contamination comprenant Staphylococcus aureus et/ou Escherichia coui et/ou Pseudonrionas aeruginosa. Ces bactéries se développent particulièrement bien en milieu hospitalier et sont responsables de nombreuses infections. A titre d'exemple, le staphylocoque doré, retrouvé
chez 15 à 30% des individus sains, est très résistant et se transmet dès lors très rapidement d'un patient à l'autre non seulement par transmission directe via le personnel soignant mais aussi par transmission indirecte via des objets (outils médicaux, ...) et même la poussière. Avec les bacilles, Staphylococcus aureus est considéré comme étant la principale bactérie responsable des infections hospitalières et il convient donc de contrôler sa dissémination responsable, en grande partie, des maladies nosoconniales entrainant la mort du patient.
=
L'invention porte aussi sur une utilisation d'une composition comprenant au moins un composant détergent et au moins un composant enzymatique, pour le traitement de surfaces, d'outils médicaux ou de sols afin de lutter contre les maladies nosocomiales par trempage.
De préférence, ledit composant détergent de ladite
De préférence, selon l'invention, ledit composant détergent de la composition utilisée comprend un agent mouillant et un agent dispersant.
Avantageusement, selon l'invention, ledit composant détergent de la composition utilisée comprend en outre un agent séquestrant.
De préférence, selon l'invention, ledit composant enzymatique de la composition utilisée contient par exemple au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase.
Plus particulièrement, la présente invention porte sur une utilisation d'une composition comprenant au moins un composant détergent comprenant un agent mouillant et un agent dispersant et éventuellement un agent séquestrant, et au moins un composant enzymatique contenant au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase, pour l'élimination de sources de contamination comprenant Staphylococcus aureus et/ou Escherichia coui et/ou Pseudonrionas aeruginosa. Ces bactéries se développent particulièrement bien en milieu hospitalier et sont responsables de nombreuses infections. A titre d'exemple, le staphylocoque doré, retrouvé
chez 15 à 30% des individus sains, est très résistant et se transmet dès lors très rapidement d'un patient à l'autre non seulement par transmission directe via le personnel soignant mais aussi par transmission indirecte via des objets (outils médicaux, ...) et même la poussière. Avec les bacilles, Staphylococcus aureus est considéré comme étant la principale bactérie responsable des infections hospitalières et il convient donc de contrôler sa dissémination responsable, en grande partie, des maladies nosoconniales entrainant la mort du patient.
=
L'invention porte aussi sur une utilisation d'une composition comprenant au moins un composant détergent et au moins un composant enzymatique, pour le traitement de surfaces, d'outils médicaux ou de sols afin de lutter contre les maladies nosocomiales par trempage.
De préférence, ledit composant détergent de ladite
10 composition utilisée comprend un agent mouillant et un agent dispersant.
Avantageusement, ledit composant détergent de ladite composition utilisée comprenant en outre un agent séquestrant.
Préférentiellement, ledit composant enzymatique de ladite composition utilisée contient par exemple au moins une protéase, au 15 moins une laccase et au moins une polysaccharidase.
D'autres formes de réalisation d'utilisation d'une composition par trempage suivant l'invention sont indiquées dans les revendications annexées.
= Le composant détergent comprenant un agent mouillant et 20 un agent dispersant et éventuellement un agent séquestrant agit tout d'abord en éliminant une partie superficielle du biofilm et en mouillant et/ou en gonflant les structures organiques du biofilm.
Le composant détergent favorise donc l'accessibilité du composant enzymatique en déstructurant la matrice du biofilm. Le 25 composant enzymatique agit ensuite en synergie avec le composant détergent et fragilise et dégrade à son tour la matrice du biofilm. Cette action combinée des trois types d'enzyme et du composant détergent, parfaitement compatible avec une action correcte des enzymes, favorise l'accessibilité à la composition des couches plus profondes et permet un 30 détachement rapide et optimal de tout type de biofilm tout en préservant le substrat. Une telle composition suivant l'invention réduit en outre
Avantageusement, ledit composant détergent de ladite composition utilisée comprenant en outre un agent séquestrant.
Préférentiellement, ledit composant enzymatique de ladite composition utilisée contient par exemple au moins une protéase, au 15 moins une laccase et au moins une polysaccharidase.
D'autres formes de réalisation d'utilisation d'une composition par trempage suivant l'invention sont indiquées dans les revendications annexées.
= Le composant détergent comprenant un agent mouillant et 20 un agent dispersant et éventuellement un agent séquestrant agit tout d'abord en éliminant une partie superficielle du biofilm et en mouillant et/ou en gonflant les structures organiques du biofilm.
Le composant détergent favorise donc l'accessibilité du composant enzymatique en déstructurant la matrice du biofilm. Le 25 composant enzymatique agit ensuite en synergie avec le composant détergent et fragilise et dégrade à son tour la matrice du biofilm. Cette action combinée des trois types d'enzyme et du composant détergent, parfaitement compatible avec une action correcte des enzymes, favorise l'accessibilité à la composition des couches plus profondes et permet un 30 détachement rapide et optimal de tout type de biofilm tout en préservant le substrat. Une telle composition suivant l'invention réduit en outre
11 l'apport de composés extérieurs dans les installations lors de l'étape de nettoyage et simplifie donc les procédures de validation des étapes de nettoyage. Ainsi, le composant détergent permet aux enzymes d'agir rapidement sur l'ensemble des structures des biofilms, ce qui, en milieu hospitalier où les outils, les chambres et les salles d'opération doivent pouvoir être réutilisées très rapidement suite à une intervention, représente un avantage certain.
L'agent dispersant du composant détergent permet d'améliorer la séparation des particules d'une suspension afin de prévenir l'agglutination, l'agrégation et/ou la décantation. Ledit agent dispersant peut être un polymère soluble ou partiellement soluble dans l'eau tel que par exemple le polyéthylène glycol, les dérivés de la cellulose ou un polymère comprenant au moins un motif acide acrylique ou ester acrylique. Préférentiellement, l'agent dispersant est un polymère comprenant au moins un motif acide acrylique ou ester acrylique de formule générale ¨(CH2-CH-COOR)- dans lequel R représente un groupe hydrogène, alkyle ou alkyle substitué, aryle ou aryle substitué. En particulier l'agent dispersant est un polymère ayant un poids moléculaire moyen Mw compris approximativement entre 500 et 10000.
Plus préférentiellement, l'agent dispersant est un polymère de l'acide acrylique. En particulier, l'agent dispersant peut être un hompolynière de l'acide acrylique ayant un poids moléculaire moyen compris approximativement entre 2000 et 6000.
Dans une variante avantageuse selon l'invention, le composant détergent comprend une proportion l'agent dispersant comprise entre 1 et 10% en poids par rapport au poids total du composant détergent.
Plus particulièrement, selon la présente invention, ledit agent dispersant dudit composant détergent est l'alkylglucoside en C6.
La présence d'un agent dispersant dans la composition suivant l'invention pour éliminer les biofilms et lutter contre les maladies
L'agent dispersant du composant détergent permet d'améliorer la séparation des particules d'une suspension afin de prévenir l'agglutination, l'agrégation et/ou la décantation. Ledit agent dispersant peut être un polymère soluble ou partiellement soluble dans l'eau tel que par exemple le polyéthylène glycol, les dérivés de la cellulose ou un polymère comprenant au moins un motif acide acrylique ou ester acrylique. Préférentiellement, l'agent dispersant est un polymère comprenant au moins un motif acide acrylique ou ester acrylique de formule générale ¨(CH2-CH-COOR)- dans lequel R représente un groupe hydrogène, alkyle ou alkyle substitué, aryle ou aryle substitué. En particulier l'agent dispersant est un polymère ayant un poids moléculaire moyen Mw compris approximativement entre 500 et 10000.
Plus préférentiellement, l'agent dispersant est un polymère de l'acide acrylique. En particulier, l'agent dispersant peut être un hompolynière de l'acide acrylique ayant un poids moléculaire moyen compris approximativement entre 2000 et 6000.
Dans une variante avantageuse selon l'invention, le composant détergent comprend une proportion l'agent dispersant comprise entre 1 et 10% en poids par rapport au poids total du composant détergent.
Plus particulièrement, selon la présente invention, ledit agent dispersant dudit composant détergent est l'alkylglucoside en C6.
La présence d'un agent dispersant dans la composition suivant l'invention pour éliminer les biofilms et lutter contre les maladies
12 nosocomiales permet d'éviter toute agrégation de particules bactériennes lors du nettoyage de surfaces, ce qui assure une élimination optimale des particules de biofilms détachées d'un support sous l'action des enzymes. En effet, plutôt que de s'agréger, ces particules restent 5 séparées dans une suspension, ne se redéposent pas et ne ré-adhèrent pas sur le support nettoyé.
L'agent mouillant du composant détergent est une substance chimique amphiphile, ou une composition comprenant ladite substance chimique amphiphile, qui modifie la tension superficielle entre 10 deux surfaces. L'agent mouillant a pour avantage de favoriser l'étalement d'un liquide sur un solide mais aussi d'accentuer le contact entre deux surfaces. Plus particulièrement, l'agent mouillant favorise un contact entre le composant détergent et une surface et, par conséquent, entre =
les enzymes et leur substrat. Or, en milieu hospitalier, les surfaces à
15 traiter sont souvent en inox ou en un matériau sur lequel l'application d'un liquide donne lieu à la formation de gouttelettes. Cette caractéristique des surfaces à traiter rend difficile une application homogène d'une composition sous forme liquide pour lutter contre la présence de biofilms. C'est pourquoi, l'agent mouillant est un constituant 20 particulièrement avantageux de ladite composition selon l'invention puisqu'il permet, même sur des surfaces de type inox, un étalement homogène de la composition et ainsi sa répartition parfaite sur les surfaces à décontaminer, par exemple sur les outils chirugicaux et les sols.
25 L'agent mouillant peut être anionique, cationique, non-ionique ou zwitterionique. Préférentiellement, l'agent mouillant peut être un mouillant anionique ou non-ionique, c'est-à-dire que la partie hydrophile est chargée négativement ou ne comporte aucune charge nette, ou peut être une composition comprenant un mouillant anionique.
30 Plus particulièrement, l'agent mouillant peut être un ester de saccharose ou une composition comprenant un alkyle sulfate de sodium et un alcool.
= WO 2014/079938
L'agent mouillant du composant détergent est une substance chimique amphiphile, ou une composition comprenant ladite substance chimique amphiphile, qui modifie la tension superficielle entre 10 deux surfaces. L'agent mouillant a pour avantage de favoriser l'étalement d'un liquide sur un solide mais aussi d'accentuer le contact entre deux surfaces. Plus particulièrement, l'agent mouillant favorise un contact entre le composant détergent et une surface et, par conséquent, entre =
les enzymes et leur substrat. Or, en milieu hospitalier, les surfaces à
15 traiter sont souvent en inox ou en un matériau sur lequel l'application d'un liquide donne lieu à la formation de gouttelettes. Cette caractéristique des surfaces à traiter rend difficile une application homogène d'une composition sous forme liquide pour lutter contre la présence de biofilms. C'est pourquoi, l'agent mouillant est un constituant 20 particulièrement avantageux de ladite composition selon l'invention puisqu'il permet, même sur des surfaces de type inox, un étalement homogène de la composition et ainsi sa répartition parfaite sur les surfaces à décontaminer, par exemple sur les outils chirugicaux et les sols.
25 L'agent mouillant peut être anionique, cationique, non-ionique ou zwitterionique. Préférentiellement, l'agent mouillant peut être un mouillant anionique ou non-ionique, c'est-à-dire que la partie hydrophile est chargée négativement ou ne comporte aucune charge nette, ou peut être une composition comprenant un mouillant anionique.
30 Plus particulièrement, l'agent mouillant peut être un ester de saccharose ou une composition comprenant un alkyle sulfate de sodium et un alcool.
= WO 2014/079938
13 Avantageusement, et de préférence, dans le composant détergent selon l'invention, ledit agent mouillant est non moussant à
chaud et est de préférence choisi dans le groupe des sulfates d'alkyle sodique en C6 à C10, des sulfates d'alcool éthérés en C6 à Cio et des 5 sulfonates d'alkylearyles en C6 à C10.
Plus particulièrement, selon la présente invention, ledit agent mouillant dudit composant détergent est le 2-éthylhexanol éthoxylé.
Le fait que l'agent mouillant soit non moussant à chaud 10 permet une utilisation de la composition suivant l'invention pour le traitement d'outils médicaux présentant des tuyaux, comme par exemple les endoscopes. En effet, l'agent mouillant étant non moussant, ceci permet d'éviter la formation de mousse, sans altérer, bien au contraire, les performances tensioactives et/ou émulsionnantes de la composition 15 selon l'invention. Il est bien entendu que l'apport d'une solution détergente efficace sans génération de mousse limite les étapes de rinçage, ce qui est particulièrement souhaitable, surtout pour les outils médicaux présentant des tuyaux qui peuvent ainsi être réutilisés rapidement pour une nouvelle intervention.
20 Dans une forme de réalisation selon l'invention, le composant détergent comprend une proportion d'agent mouillant comprise entre 1 et 15% en poids par rapport au poids total du composant détergent.
L'agent séquestrant est une substance chimique ayant la 25 capacité
à former des complexes avec des ions minéraux qu'il fixe sous une forme empêchant leur précipitation par les réactions habituelles. A
=, titre d'exemple, l'agent séquestrant peut être l'acide éthylène-diamine-tétraacétique, le giucono-delta-lactone, le gluconate de sodium, le gluconate de potassium, le gluconate de calcium, l'acide citrique, l'acide phosphorique, l'acide tartrique, l'acétate de sodium, le sorbitol, un composé comportant un atome de phosphore. Préférentiellement, l'agent
chaud et est de préférence choisi dans le groupe des sulfates d'alkyle sodique en C6 à C10, des sulfates d'alcool éthérés en C6 à Cio et des 5 sulfonates d'alkylearyles en C6 à C10.
Plus particulièrement, selon la présente invention, ledit agent mouillant dudit composant détergent est le 2-éthylhexanol éthoxylé.
Le fait que l'agent mouillant soit non moussant à chaud 10 permet une utilisation de la composition suivant l'invention pour le traitement d'outils médicaux présentant des tuyaux, comme par exemple les endoscopes. En effet, l'agent mouillant étant non moussant, ceci permet d'éviter la formation de mousse, sans altérer, bien au contraire, les performances tensioactives et/ou émulsionnantes de la composition 15 selon l'invention. Il est bien entendu que l'apport d'une solution détergente efficace sans génération de mousse limite les étapes de rinçage, ce qui est particulièrement souhaitable, surtout pour les outils médicaux présentant des tuyaux qui peuvent ainsi être réutilisés rapidement pour une nouvelle intervention.
20 Dans une forme de réalisation selon l'invention, le composant détergent comprend une proportion d'agent mouillant comprise entre 1 et 15% en poids par rapport au poids total du composant détergent.
L'agent séquestrant est une substance chimique ayant la 25 capacité
à former des complexes avec des ions minéraux qu'il fixe sous une forme empêchant leur précipitation par les réactions habituelles. A
=, titre d'exemple, l'agent séquestrant peut être l'acide éthylène-diamine-tétraacétique, le giucono-delta-lactone, le gluconate de sodium, le gluconate de potassium, le gluconate de calcium, l'acide citrique, l'acide phosphorique, l'acide tartrique, l'acétate de sodium, le sorbitol, un composé comportant un atome de phosphore. Préférentiellement, l'agent
14 séquestrant peut être un oxyde de phosphore tel qu'un phosphonate, un phosphinate ou un phosphate ou leur mélange, ou un sel de celui-ci, une amine ou un oxyde d'amine portant au moins, dans sa structure, un groupement fonctionnel phosphine, oxyde de phosphine, phophinite, phosphonite, phosphite, phosphonate, phosphinate ou phosphate, seul ou en combinaison, ou un sel de ceux-ci.
Avantageusement, l'agent séquestrant est une substance chimique compatible avec les substances utilisables dans les hôpitaux, par exemple, l'agent séquestrant est préférentiellement un agent non toxique pour la santé humaine.
Plus préférentiellement, l'agent séquestrant peut être un phosphonate ou un sel de celui-ci, une amine ou un oxyde d'amine comportant au moins, dans sa structure, un groupement fonctionnel phosphine, oxyde de phosphine, phosphinite, phosphonite, phosphite, phosphonate, phosphinate ou phosphate, seul ou en combinaison, ou un sel de ceux-ci. A titre d'exemple non limitatif, le phosphonate peut être de formule générale Ri(R20)(R30)P=0 dans lequel R1, R2 et R3 représentent indépendamment un groupe hydrogène, alkyle, alkyle substitué, alkyle-amino substitué ou non, aminoalkyl substitué ou non, aryle ou aryle substitué. A titre d'exemple non limitatif, l'amine ou l'oxyde d'amine peuvent comporter un, deux ou trois substituant(s) de formule générale CR4R5VV dans laquelle R4 et R5 représentent indépendamment l'un de l'autre un groupe hydrogène, alkyle, alkyle substitué, alkyle-amino substitué ou non, aminoalkyl substitué ou non, aryle ou aryle substitué, et W représente un groupe phosphonate, phosphinate ou phosphate.
L'agent séquestrant peut être sous la forme d'un sel de sodium, calcium, lithium, magnésium ou potassium ; préférentiellement, l'agent séquestrant peut être sous la forme d'un sel de sodium, calcium ou potassium.
De préférence, l'agent séquestrant est un agent qui peut être utilisé sans danger lors d'interventions médicales, c'est-à-dire que l'agent séquestrant ne présente aucun danger pour la santé, seul ou en association avec d'autres composants utilisés en milieu hospitalier.
Plus particulièrement, suivant l'invention, ledit agent séquestrant dudit composant détergent est un sel de potassium à base 5 d'acide phosphonique modifié (N-oxyde ATMP).
Dans une forme de réalisation avantageuse selon l'invention, ledit au moins un composant détergent comprend une proportion d'agent séquestrant comprise entre 1 et 10% en poids par rapport au poids total du composant détergent, ce qui représente un 10 optimum entre efficacité, stabilité et coût.
De préférence, ledit au moins un composant enzymatique comprend une proportion de protéase(s) comprise entre 10 et 50%, une = proportion de laccase(s) comprise entre 5 et 35% et une proportion de polysaccharidase(s) comprise entre 5 et 20% en poids par rapport au
Avantageusement, l'agent séquestrant est une substance chimique compatible avec les substances utilisables dans les hôpitaux, par exemple, l'agent séquestrant est préférentiellement un agent non toxique pour la santé humaine.
Plus préférentiellement, l'agent séquestrant peut être un phosphonate ou un sel de celui-ci, une amine ou un oxyde d'amine comportant au moins, dans sa structure, un groupement fonctionnel phosphine, oxyde de phosphine, phosphinite, phosphonite, phosphite, phosphonate, phosphinate ou phosphate, seul ou en combinaison, ou un sel de ceux-ci. A titre d'exemple non limitatif, le phosphonate peut être de formule générale Ri(R20)(R30)P=0 dans lequel R1, R2 et R3 représentent indépendamment un groupe hydrogène, alkyle, alkyle substitué, alkyle-amino substitué ou non, aminoalkyl substitué ou non, aryle ou aryle substitué. A titre d'exemple non limitatif, l'amine ou l'oxyde d'amine peuvent comporter un, deux ou trois substituant(s) de formule générale CR4R5VV dans laquelle R4 et R5 représentent indépendamment l'un de l'autre un groupe hydrogène, alkyle, alkyle substitué, alkyle-amino substitué ou non, aminoalkyl substitué ou non, aryle ou aryle substitué, et W représente un groupe phosphonate, phosphinate ou phosphate.
L'agent séquestrant peut être sous la forme d'un sel de sodium, calcium, lithium, magnésium ou potassium ; préférentiellement, l'agent séquestrant peut être sous la forme d'un sel de sodium, calcium ou potassium.
De préférence, l'agent séquestrant est un agent qui peut être utilisé sans danger lors d'interventions médicales, c'est-à-dire que l'agent séquestrant ne présente aucun danger pour la santé, seul ou en association avec d'autres composants utilisés en milieu hospitalier.
Plus particulièrement, suivant l'invention, ledit agent séquestrant dudit composant détergent est un sel de potassium à base 5 d'acide phosphonique modifié (N-oxyde ATMP).
Dans une forme de réalisation avantageuse selon l'invention, ledit au moins un composant détergent comprend une proportion d'agent séquestrant comprise entre 1 et 10% en poids par rapport au poids total du composant détergent, ce qui représente un 10 optimum entre efficacité, stabilité et coût.
De préférence, ledit au moins un composant enzymatique comprend une proportion de protéase(s) comprise entre 10 et 50%, une = proportion de laccase(s) comprise entre 5 et 35% et une proportion de polysaccharidase(s) comprise entre 5 et 20% en poids par rapport au
15 poids total du composant enzymatique, les 100% du composant enzymatique étant éventuellement atteints à l'aide d'un excipient ou solvant conventionnel, par exemple un alcool.
Le composant enzymatique selon l'invention présente l'avantage d'être polyvalent, c'est-à-dire qu'il peut agir simultanément sur 20 diverses souches bactériennes, ce qui est particulièrement avantageux en milieu hospitalier où de nombreuses souches bactériennes différentes se développent simultanément.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, le composant enzymatique peut contenir entre 1 et 10 protéases, 25 préférentiellement entre 1 et 5 protéases, plus préférentiellement il peut contenir 2, 3, 4 ou 5 protéases.
Des exemples non limitatifs d'enzymes protéases appartenant à la classe EC 3.4 et susceptibles d'être utilisées dans l'invention sont les amino-peptidases (EC 3.4.11), les dipeptidases (EC
30 3.4.13), les dipeptidyl-peptidases et tripeptidyl-peptidases (EC
3.4.14), les peptidyl-dipeptidases (EC 3.4.15), les sérine carboxypeptidases (EC
Le composant enzymatique selon l'invention présente l'avantage d'être polyvalent, c'est-à-dire qu'il peut agir simultanément sur 20 diverses souches bactériennes, ce qui est particulièrement avantageux en milieu hospitalier où de nombreuses souches bactériennes différentes se développent simultanément.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, le composant enzymatique peut contenir entre 1 et 10 protéases, 25 préférentiellement entre 1 et 5 protéases, plus préférentiellement il peut contenir 2, 3, 4 ou 5 protéases.
Des exemples non limitatifs d'enzymes protéases appartenant à la classe EC 3.4 et susceptibles d'être utilisées dans l'invention sont les amino-peptidases (EC 3.4.11), les dipeptidases (EC
30 3.4.13), les dipeptidyl-peptidases et tripeptidyl-peptidases (EC
3.4.14), les peptidyl-dipeptidases (EC 3.4.15), les sérine carboxypeptidases (EC
16 3.4.16), les métallo carboxypeptidases (EC 3.4.17), les cystéine carboxypeptidases (EC 3.4.18), les oméga peptidases (EC 3.4.19), les sérine endopeptidases (EC 3.4.21), les cystéine endopeptidases (EC
3.4.22), les aspartique endopeptidases (EC 3.4.23), les métallo endopeptidases (EC 3.4.24), les thréonine endopeptidases ((EC 3.4.25), et les endopeptidases appartenant à la classe EC 3.4.99.
Préférentiellement, les protéases appartiennent à la classe EC 3.4.21. Les protéases sont disponibles commercialement et sous différentes formes incluant les poudres, les granulés, les suspensions, les solutions liquides.
=
Les laccases utilisées dans l'invention appartiennent à la classe EC 1.10.3.2. Les laccases sont des enzymes contenant du cuivre et ont pour fonction d'oxyder un substrat en présence d'oxygène. Plus spécifiquement, les laccases sont des oxydoréductases qui fonctionnent avec l'oxygène moléculaire comme accepteur d'électrons.
La au moins une polysaccharidase utilisée dans l'invention est une enzyme ayant pour fonction de briser des liaisons au sein des = polysaccharides. Préférentiellement, la au moins une polysaccharidase peut être une alpha-amylase, cellulase, hemi-cellulase, glucosidase, beta-glucanase ou pectinase.
Plus préférentiellement, la au moins une polysaccharidase peut être une alpha-amylase appartenant à la classe EC 3.2.1.1, ayant pour fonction de briser des liens (1-4)-alpha-glycosidiques dans des polysaccharides contenant trois unités ou plus alpha-(1-4)-D-glucose.
Préférentiellement, le composant enzymatique peut = comprendre une proportion de laccase(s) approximativement de 30%, une proportion de protéase(s) approximativement de 30%, une proportion d'alpha-amylase(s) approximativement de 10% en poids par rapport au poids total du composant enzymatique, les 100% du composant enzymatique étant éventuellement atteints à l'aide d'un = excipient ou solvant conventionnel.
3.4.22), les aspartique endopeptidases (EC 3.4.23), les métallo endopeptidases (EC 3.4.24), les thréonine endopeptidases ((EC 3.4.25), et les endopeptidases appartenant à la classe EC 3.4.99.
Préférentiellement, les protéases appartiennent à la classe EC 3.4.21. Les protéases sont disponibles commercialement et sous différentes formes incluant les poudres, les granulés, les suspensions, les solutions liquides.
=
Les laccases utilisées dans l'invention appartiennent à la classe EC 1.10.3.2. Les laccases sont des enzymes contenant du cuivre et ont pour fonction d'oxyder un substrat en présence d'oxygène. Plus spécifiquement, les laccases sont des oxydoréductases qui fonctionnent avec l'oxygène moléculaire comme accepteur d'électrons.
La au moins une polysaccharidase utilisée dans l'invention est une enzyme ayant pour fonction de briser des liaisons au sein des = polysaccharides. Préférentiellement, la au moins une polysaccharidase peut être une alpha-amylase, cellulase, hemi-cellulase, glucosidase, beta-glucanase ou pectinase.
Plus préférentiellement, la au moins une polysaccharidase peut être une alpha-amylase appartenant à la classe EC 3.2.1.1, ayant pour fonction de briser des liens (1-4)-alpha-glycosidiques dans des polysaccharides contenant trois unités ou plus alpha-(1-4)-D-glucose.
Préférentiellement, le composant enzymatique peut = comprendre une proportion de laccase(s) approximativement de 30%, une proportion de protéase(s) approximativement de 30%, une proportion d'alpha-amylase(s) approximativement de 10% en poids par rapport au poids total du composant enzymatique, les 100% du composant enzymatique étant éventuellement atteints à l'aide d'un = excipient ou solvant conventionnel.
17 Selon un autre mode de réalisation préféré, si le composant enzymatique comprend 2 protéases, la proportion de laccase(s) peut être approximativement de 30%, la proportion totale de protéases approximativement de 30%, la proportion d'alpha-amylase(s) approximativement de 10% en poids par rapport au poids total du composant enzymatique, les 100% du composant enzymatique étant éventuellement atteints à l'aide d'un excipient ou solvant conventionnel.
Par exemple, le rapport entre chaque protéase peut être compris entre 1:2 et 2:1, préférentiellement le rapport entre chaque protéase peut être de 1:1. Les enzymes présentes dans le composant enzymatique ont une action complémentaire sur le biofilm. Par exemple, la laccase présente une grande efficacité sur les souillures non attaquées par l'alpha-amylase ou les protéases. Comme mentionné plus haut, le composant enzymatique, de par la présence simultanée d'au moins trois types de d'enzymes, est polyvalent et peut agir en même temps sur divers types de biofilms produits par diverses souches bactériennes, ce qui est essentiel en milieu hospitalier.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, le composant enzymatique peut être une solution ou sous forme solide.
Préférentiellement, le composant enzymatique est une solution dont le pH peut être compris approximativement entre 8 et 10.
Préférentiellement, te composant enzymatique est une solution aqueuse dont le pH peut être compris approximativement entre 8,5 et 9,5; plus préférentiellement le pH peut être approximativement de 9,0, et ceci pour préserver au maximum l'intégrité des enzymes.
Alternativement, le composant enzymatique peut être sous forme solide tel que par exemple sous forme d'un lyophilisat, de poudres, de granulés ou sous tout autre forme permettant la solubilisation dudit composant dans un solvant, puis il sera ultérieurement dissous dans ledit solvant. Le solvant peut être de l'eau ou une solution aqueuse, acide, basique, alcoolique, tamponnée ou neutre. Le composant enzymatique
Par exemple, le rapport entre chaque protéase peut être compris entre 1:2 et 2:1, préférentiellement le rapport entre chaque protéase peut être de 1:1. Les enzymes présentes dans le composant enzymatique ont une action complémentaire sur le biofilm. Par exemple, la laccase présente une grande efficacité sur les souillures non attaquées par l'alpha-amylase ou les protéases. Comme mentionné plus haut, le composant enzymatique, de par la présence simultanée d'au moins trois types de d'enzymes, est polyvalent et peut agir en même temps sur divers types de biofilms produits par diverses souches bactériennes, ce qui est essentiel en milieu hospitalier.
Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, le composant enzymatique peut être une solution ou sous forme solide.
Préférentiellement, le composant enzymatique est une solution dont le pH peut être compris approximativement entre 8 et 10.
Préférentiellement, te composant enzymatique est une solution aqueuse dont le pH peut être compris approximativement entre 8,5 et 9,5; plus préférentiellement le pH peut être approximativement de 9,0, et ceci pour préserver au maximum l'intégrité des enzymes.
Alternativement, le composant enzymatique peut être sous forme solide tel que par exemple sous forme d'un lyophilisat, de poudres, de granulés ou sous tout autre forme permettant la solubilisation dudit composant dans un solvant, puis il sera ultérieurement dissous dans ledit solvant. Le solvant peut être de l'eau ou une solution aqueuse, acide, basique, alcoolique, tamponnée ou neutre. Le composant enzymatique
18 solubilisé pourra alors dans ce cas être ultérieurement dilué dans une solution aqueuse contenant éventuellement un ou plusieurs composés tels que par exemple des détergents pour former la solution de nettoyage.
5 Comme pour le composant enzymatique, le composant détergent peut être sous forme solide à dissoudre dans un solvant et/ou dans une phase aqueuse ou sous forme liquide.
Lorsqu'il est sous forme solide, il peut soit être mis directement en solution dans la solution formée par le composant enzymatique éventuellement déjà dilué dans la phase aqueuse, soit être mis en solution dans un solvant, préalablement à sa dilution dans la solution formée par le composant enzymatique et la phase aqueuse, ou dans la phase aqueuse directement, avant la dilution du composant enzymatique.
15 Lorsque le composant détergent est sous forme liquide, les 100% du composant détergent sont éventuellement atteints généralement à l'aide d'eau et, préalablement à l'application sur le biofilm, il sera dilué dans une phase aqueuse, contenant éventuellement déjà le composant enzymatique.
Eventuellement, selon le procédé de la présente invention, le pH de ladite solution est ajusté à une valeur de pH comprise entre 6,5 et 7,5, plus particulièrement autour de 7.
Alternativement, ladite composition peut être sous forme solide puis être dissoute avant utilisation dans un solvant afin d'obtenir, lorsqu'elle sera diluée dans une phase aqueuse avant application sur un biofilm, une solution dont le pH est compris approximativement entre 7 et 8. Dans une variante avantageuse selon l'invention, la composition est = une solution prévue pour, lorsqu'elle est diluée dans une phase aqueuse avant application sur le biofilm, former une solution présentant un pH
30 compris approximativement entre 6,5 et 7,5, plus particulièrement d'environ 7. De cette façon, le pH de la solution de la composition est
5 Comme pour le composant enzymatique, le composant détergent peut être sous forme solide à dissoudre dans un solvant et/ou dans une phase aqueuse ou sous forme liquide.
Lorsqu'il est sous forme solide, il peut soit être mis directement en solution dans la solution formée par le composant enzymatique éventuellement déjà dilué dans la phase aqueuse, soit être mis en solution dans un solvant, préalablement à sa dilution dans la solution formée par le composant enzymatique et la phase aqueuse, ou dans la phase aqueuse directement, avant la dilution du composant enzymatique.
15 Lorsque le composant détergent est sous forme liquide, les 100% du composant détergent sont éventuellement atteints généralement à l'aide d'eau et, préalablement à l'application sur le biofilm, il sera dilué dans une phase aqueuse, contenant éventuellement déjà le composant enzymatique.
Eventuellement, selon le procédé de la présente invention, le pH de ladite solution est ajusté à une valeur de pH comprise entre 6,5 et 7,5, plus particulièrement autour de 7.
Alternativement, ladite composition peut être sous forme solide puis être dissoute avant utilisation dans un solvant afin d'obtenir, lorsqu'elle sera diluée dans une phase aqueuse avant application sur un biofilm, une solution dont le pH est compris approximativement entre 7 et 8. Dans une variante avantageuse selon l'invention, la composition est = une solution prévue pour, lorsqu'elle est diluée dans une phase aqueuse avant application sur le biofilm, former une solution présentant un pH
30 compris approximativement entre 6,5 et 7,5, plus particulièrement d'environ 7. De cette façon, le pH de la solution de la composition est
19 particulièrement approprié à l'action du composant enzymatique, en = particulier de la laccase.
Alternativement, ladite composition peut être sous forme solide puis être dissoute avant utilisation dans un solvant afin d'obtenir 5 une solution qui sera ensuite diluée dans une phase aqueuse pour obtenir une solution de nettoyage dont le pH est compris approximativement entre 6,5 et 7,5, de préférence d'environ 7.
Selon le procédé de la présente invention, l'entièreté de la matrice des biofilms est éliminée, le traitement de surface selon l'invention ne laissant subsister que des bactéries nues , c'est-à-dire des bactéries dépourvues de toute protection et qui peuvent ainsi être facilement éliminées en totalité lors d'une utilisation ultérieure d'un biocide, comme expliqué ci-après après rinçage de la composition.
Comme mentionné plus haut, la composition suivant l'invention comprend un composant détergent qui favorise l'action des enzymes en leur permettant d'atteindre rapidement les couches inférieures des biofilms et pas uniquement leur couche supérieure. Les enzymes peuvent donc agir très rapidement sur l'ensemble de la structure des biofilms et ainsi mettre toutes les bactéries à nu non seulement à la surface des biofilms mais aussi au niveau des couches inférieures qui les constituent.
Les figures la à lf illustrent les colorations obtenues (les zones entourées sont des zones présentant une coloration bleue) lors de l'utilisation d'un kit de détection de la présence de biofilm pour évaluer l'efficacité des techniques de nettoyage sur des râpes à pores étroits après pré-nettoyage (la), après nettoyage dans une solution d'Aniosyme (lb) et après nettoyage dans une solution de trempage suivant l'invention (1c) mais aussi pour des râpes à pores larges après pré-nettoyage (1d), après nettoyage dans une solution d'Aniosyme (le) 30 et après nettoyage dans une solution de trempage suivant l'invention (1f).
Les figures 2a à 2f illustrent les colorations obtenues (les zones entourées sont des zones présentant une coloration bleue) lors de =.
l'utilisation d'un kit de détection selon le brevet EP 2537601 de la présence de biofilm pour évaluer l'efficacité des techniques de nettoyage 5 sur des râpes après pré-nettoyage (2a), après nettoyage dans une solution de trempage suivant l'invention (2b), après nettoyage dans une solution de trempage suivant l'invention et brossage (2c), après nettoyage dans une solution d'Aniosyme0 (2d), après nettoyage dans une solution d'Aniosyme0 et brossage (2e) et après nettoyage dans une 10 solution d'Aniosymee et brossage puis nettoyage dans une solution de trempage suivant l'invention et brossage (2f).
Exemples Exemple 1 - Nettoyage d'instruments médicaux par trempage dans une 15 solution de trempage suivant l'invention ¨ analyses ATP-métriques Des essais ont été réalisés afin de déterminer si le procédé
suivant l'invention permet d'éliminer efficacement les biofilms présents sur des instruments médicaux par trempage dans une solution aqueuse de trempage suivant l'invention.
Alternativement, ladite composition peut être sous forme solide puis être dissoute avant utilisation dans un solvant afin d'obtenir 5 une solution qui sera ensuite diluée dans une phase aqueuse pour obtenir une solution de nettoyage dont le pH est compris approximativement entre 6,5 et 7,5, de préférence d'environ 7.
Selon le procédé de la présente invention, l'entièreté de la matrice des biofilms est éliminée, le traitement de surface selon l'invention ne laissant subsister que des bactéries nues , c'est-à-dire des bactéries dépourvues de toute protection et qui peuvent ainsi être facilement éliminées en totalité lors d'une utilisation ultérieure d'un biocide, comme expliqué ci-après après rinçage de la composition.
Comme mentionné plus haut, la composition suivant l'invention comprend un composant détergent qui favorise l'action des enzymes en leur permettant d'atteindre rapidement les couches inférieures des biofilms et pas uniquement leur couche supérieure. Les enzymes peuvent donc agir très rapidement sur l'ensemble de la structure des biofilms et ainsi mettre toutes les bactéries à nu non seulement à la surface des biofilms mais aussi au niveau des couches inférieures qui les constituent.
Les figures la à lf illustrent les colorations obtenues (les zones entourées sont des zones présentant une coloration bleue) lors de l'utilisation d'un kit de détection de la présence de biofilm pour évaluer l'efficacité des techniques de nettoyage sur des râpes à pores étroits après pré-nettoyage (la), après nettoyage dans une solution d'Aniosyme (lb) et après nettoyage dans une solution de trempage suivant l'invention (1c) mais aussi pour des râpes à pores larges après pré-nettoyage (1d), après nettoyage dans une solution d'Aniosyme (le) 30 et après nettoyage dans une solution de trempage suivant l'invention (1f).
Les figures 2a à 2f illustrent les colorations obtenues (les zones entourées sont des zones présentant une coloration bleue) lors de =.
l'utilisation d'un kit de détection selon le brevet EP 2537601 de la présence de biofilm pour évaluer l'efficacité des techniques de nettoyage 5 sur des râpes après pré-nettoyage (2a), après nettoyage dans une solution de trempage suivant l'invention (2b), après nettoyage dans une solution de trempage suivant l'invention et brossage (2c), après nettoyage dans une solution d'Aniosyme0 (2d), après nettoyage dans une solution d'Aniosyme0 et brossage (2e) et après nettoyage dans une 10 solution d'Aniosymee et brossage puis nettoyage dans une solution de trempage suivant l'invention et brossage (2f).
Exemples Exemple 1 - Nettoyage d'instruments médicaux par trempage dans une 15 solution de trempage suivant l'invention ¨ analyses ATP-métriques Des essais ont été réalisés afin de déterminer si le procédé
suivant l'invention permet d'éliminer efficacement les biofilms présents sur des instruments médicaux par trempage dans une solution aqueuse de trempage suivant l'invention.
20 Cette solution aqueuse de trempage a été préparée par dilution d'un premier produit comprenant un composant détergent comprenant un agent séquestrant, un agent mouillant et un agent dispersant et d'un deuxième produit comprenant un composant enzymatique comprenant au moins une protéase, au moins une laccase et 25 au moins une polysaccharidase, dans de l'eau de distribution à 45 C de telle sorte que la solution aqueuse de trempage comprend une concentration de 0,25% (v/v) dudit premier produit et une concentration de 0,1% (v/v) dudit deuxième produit.
Préalablement au trempage des instruments dans la solution 30 de trempage, ces derniers ont été lavés au laveur-désinfecteur de telle
Préalablement au trempage des instruments dans la solution 30 de trempage, ces derniers ont été lavés au laveur-désinfecteur de telle
21 sorte à être prêts à l'emploi selon les procédures et les normes d'application dans les hôpitaux.
Des analyses ATP-métriques, afin de mesurer la présence d'Adénosine TriPhosphate, ont été effectuées pour déterminer :
- la quantité de molécules d'ATP sur la surface des instruments médicaux avant nettoyage avec la solution aqueuse de trempage =
suivant l'invention, - la quantité de molécules d'ATP dans la solution aqueuse de trempage directement suite à l'immersion des instruments médicaux (c'est-à-dire avant le nettoyage par trempage à
proprement parlé) dans la solution aqueuse de trempage, et - la quantité de molécules d'ATP dans la solution aqueuse de trempage après 30 minutes de trempage des instruments médicaux dans la solution aqueuse de trempage.
La quantité de molécules d'ATP à la surface des instruments médicaux a été déterminée par écouvillonnage de la surface des instruments avant d'appliquer le protocole d'analyse de la méthode ATP
Testing proposée par 3M-rm (3M Clean-Trace). Cette technique d'analyse permet de mesurer une quantité de lumière produite (URL) qui est directement proportionnelle à la quantité d'énergie biologique présente dans la solution analysée, c'est-à-dire à la quantité (concentration) de microorganismes dans la solution analysée. La mesure de la quantité de lumière émise permet donc de mettre en évidence et de quantifier la présence de molécules d'ATP et donc de déterminer la quantité
= 25 (concentration) de microorganismes dans la solution analysée (puisque l'ATP est une molécule essentielle à la vie microbienne). Par conséquent, cette technique d'analyse permet de déterminer dans quelle mesure la solution aqueuse de trempage suivant l'invention permet d'éliminer les biofilms pour permettre un accès aux microorganismes dont la quantité est mesurée par ATP-métrie.
=
Des analyses ATP-métriques, afin de mesurer la présence d'Adénosine TriPhosphate, ont été effectuées pour déterminer :
- la quantité de molécules d'ATP sur la surface des instruments médicaux avant nettoyage avec la solution aqueuse de trempage =
suivant l'invention, - la quantité de molécules d'ATP dans la solution aqueuse de trempage directement suite à l'immersion des instruments médicaux (c'est-à-dire avant le nettoyage par trempage à
proprement parlé) dans la solution aqueuse de trempage, et - la quantité de molécules d'ATP dans la solution aqueuse de trempage après 30 minutes de trempage des instruments médicaux dans la solution aqueuse de trempage.
La quantité de molécules d'ATP à la surface des instruments médicaux a été déterminée par écouvillonnage de la surface des instruments avant d'appliquer le protocole d'analyse de la méthode ATP
Testing proposée par 3M-rm (3M Clean-Trace). Cette technique d'analyse permet de mesurer une quantité de lumière produite (URL) qui est directement proportionnelle à la quantité d'énergie biologique présente dans la solution analysée, c'est-à-dire à la quantité (concentration) de microorganismes dans la solution analysée. La mesure de la quantité de lumière émise permet donc de mettre en évidence et de quantifier la présence de molécules d'ATP et donc de déterminer la quantité
= 25 (concentration) de microorganismes dans la solution analysée (puisque l'ATP est une molécule essentielle à la vie microbienne). Par conséquent, cette technique d'analyse permet de déterminer dans quelle mesure la solution aqueuse de trempage suivant l'invention permet d'éliminer les biofilms pour permettre un accès aux microorganismes dont la quantité est mesurée par ATP-métrie.
=
22 Les résultats obtenus ont été interprétés sur base du tableau 1 suivant et sont présentés au tableau 2.
Tableau 1 Quantité de Interprétation lumière produite (URL) <500 URL Pas d'action requise : peu de bactéries >500 URL et Action à entreprendre si zone à haut risque :
<999 URL bactéries présentes >1000 URL Action à entreprendre : nombreuses bactéries présentes Tableau 2 ATP en ATP en solution dans solution dans la solution ATP sur la la solution aqueuse de surface avant aqueuse de trempage nettoyage trempage après (URL) suite à
nettoyage par l'immersion trempage (URL) (URL) Canule d'aspiration pour non mesuré non mesuré
coelioscopie Alésoir 1576 14 Râpe orthopédique pour non mesuré non mesuré
hanches Râpe orthopédique pour non mesuré non mesuré
hanches : le pertuis Canule de colonne non mesuré non mesuré
non mesuré
Tableau 1 Quantité de Interprétation lumière produite (URL) <500 URL Pas d'action requise : peu de bactéries >500 URL et Action à entreprendre si zone à haut risque :
<999 URL bactéries présentes >1000 URL Action à entreprendre : nombreuses bactéries présentes Tableau 2 ATP en ATP en solution dans solution dans la solution ATP sur la la solution aqueuse de surface avant aqueuse de trempage nettoyage trempage après (URL) suite à
nettoyage par l'immersion trempage (URL) (URL) Canule d'aspiration pour non mesuré non mesuré
coelioscopie Alésoir 1576 14 Râpe orthopédique pour non mesuré non mesuré
hanches Râpe orthopédique pour non mesuré non mesuré
hanches : le pertuis Canule de colonne non mesuré non mesuré
non mesuré
23 Canule ORL non mesuré non mesuré non mesuré
Les analyses ATP-métriques ont permis de déterminer une quantité importante de biofilms (molécules d'ATP) pour l'alésoir avant nettoyage par trempage (1576 URL) tandis que de faibles niveaux d'encrassement (contamination par la présence de biofilms) ont été
relevés pour les autres instruments médicaux qui n'ont par conséquent pas fait l'objet d'un nettoyage par trempage dans la solution aqueuse de trempage suivant l'invention. Les résultats obtenus avec l'alésoir permettent de constater que le niveau d'ATP mesuré directement après l'immersion de l'alésoir dans la solution de trempage est très faible (14 URL) mais que ce niveau augmente de façon significative après 30 minutes de trempage dans la solution de trempage. Ceci indique clairement qu'un trempage dans la solution de trempage suivant l'invention permet de décrocher les biofilms de la surface des instruments médicaux, en l'occurrence de l'alésoir dans le cas présent, ce qui permet d'accéder aux microorganismes.
Exemple 2 - Essais comparatifs de nettoyage d'instruments médicaux par trempage dans une solution de trempage suivant l'invention et par autoclavage ¨ analyses par utilisation d'un kit de détection Des essais comparatifs ont été réalisés pour comparer, en terme d'élimination de biofilms, un nettoyage réalisé par trempage durant minutes dans une solution aqueuse de trempage suivant l'invention (telle que décrite à l'exemple 1) à un nettoyage réalisé par autoclavage à
25 134 C durant 90 minutes (technique actuellement d'application en milieu hospitalier).
Préalablement à ces deux types de nettoyage, les instruments médicaux ont d'abord été pré-nettoyés dans un nettoyeur-désinfecteur de telle sorte à être prêts à l'emploi selon les procédures et 30 les normes d'application dans les hôpitaux.
= WO 2014/079938
Les analyses ATP-métriques ont permis de déterminer une quantité importante de biofilms (molécules d'ATP) pour l'alésoir avant nettoyage par trempage (1576 URL) tandis que de faibles niveaux d'encrassement (contamination par la présence de biofilms) ont été
relevés pour les autres instruments médicaux qui n'ont par conséquent pas fait l'objet d'un nettoyage par trempage dans la solution aqueuse de trempage suivant l'invention. Les résultats obtenus avec l'alésoir permettent de constater que le niveau d'ATP mesuré directement après l'immersion de l'alésoir dans la solution de trempage est très faible (14 URL) mais que ce niveau augmente de façon significative après 30 minutes de trempage dans la solution de trempage. Ceci indique clairement qu'un trempage dans la solution de trempage suivant l'invention permet de décrocher les biofilms de la surface des instruments médicaux, en l'occurrence de l'alésoir dans le cas présent, ce qui permet d'accéder aux microorganismes.
Exemple 2 - Essais comparatifs de nettoyage d'instruments médicaux par trempage dans une solution de trempage suivant l'invention et par autoclavage ¨ analyses par utilisation d'un kit de détection Des essais comparatifs ont été réalisés pour comparer, en terme d'élimination de biofilms, un nettoyage réalisé par trempage durant minutes dans une solution aqueuse de trempage suivant l'invention (telle que décrite à l'exemple 1) à un nettoyage réalisé par autoclavage à
25 134 C durant 90 minutes (technique actuellement d'application en milieu hospitalier).
Préalablement à ces deux types de nettoyage, les instruments médicaux ont d'abord été pré-nettoyés dans un nettoyeur-désinfecteur de telle sorte à être prêts à l'emploi selon les procédures et 30 les normes d'application dans les hôpitaux.
= WO 2014/079938
24 Pour mesurer l'efficacité de chacun de ces nettoyages, un kit de détection a été utilisé sur les surfaces des instruments médicaux pour mettre en évidence la présence ou l'absence de biofilnns :
- avant nettoyage, 5 - après nettoyage par trempage dans une solution aqueuse de trempage suivant l'invention, et - après nettoyage par passage à l'autoclave.
Le kit de détection est composé de deux produits, un réactif de coloration et un réactif de nettoyage. Le colorant bleu présent dans le réactif de coloration adhère spécifiquement aux EPS (Ddracellular Polymeric Substances) formant la matrice protective du biofilm. La surface à analyser est aspergée avec la solution de coloration. Après 5 minutes d'action sur la surface, l'excédent de la solution est absorbé. Ensuite la surface est rincée à l'aide de fa solution nettoyante qui requiert un temps 15 de pose de cinq minutes. La surface est enfin rincée à l'eau et est analysée. La présence ou l'absence de biofilm est démontrée par une couleur bleue plus ou moins foncée selon la quantité de biofilm existant sur la surface. Une coloration bleu intense indique une présence importante de biofilm.
20 Les résultats obtenus, en terme de coloration à la surface des instruments analysés, sont présentés au tableau 3 ci-dessous pour les instruments médicaux testés.
Tableau 3 Après trempage Après pré-, dans la solution nettoyage au Après de trempage nettoyeur-autoclavage suivant désinfecteur l'invention Alésoir coloration bleue absence de coloration bleue intense coloration bleue moyenne Canule coloration bleue absence de d'aspiration pour non mesuré
intense coloration bleue coelioscopie Râpe coloration bleue absence de coloration bleue orthopédique intense coloration bleue moyenne Canule ORL coloration bleue faible coloration non mesuré
intense bleue Il ressort de ces essais que les instruments pré-nettoyés par passage dans un nettoyeur-désinfecteur comportent tous des biofilms (coloration bleue intense) et donc que cette technique actuelle de 5 nettoyage d'application dans les hôpitaux laisse subsister des biofilms sur les instruments médicaux. Par contre, ces résultats indiquent clairement qu'un trempage dans une solution aqueuse de trempage suivant l'invention permet d'éliminer très significativement les biofilms à la surface des instruments médicaux, ce qu'un autoclavage ne permet pas 10 puisqu'une coloration bleue est toujours relevée suite à ce type de nettoyage.
Exemple 3 - Essais comparatifs de nettoyage d'instruments médicaux par trempage dans une solution de trempage suivant l'invention, par trempage 15 dans une solution aqueuse d'Aniosyme0 et par autoclavage ¨ analyses ATP-métriques Des essais comparatifs ont été réalisés pour comparer, en terme d'élimination de biofilms, un nettoyage réalisé par trempage durant minutes dans une solution aqueuse suivant l'invention (telle que décrite 20 et préparée à l'exemple 1), à un nettoyage réalisé par trempage durant minutes dans une solution aqueuse d'Aniosyme0 (solution prétendant éliminer les biofilms) à 0,5% préparée selon les prescriptions du fabricant et à un nettoyage réalisé par autoclavage à 134 C durant 90 minutes.
Préalablement à ces trois types de nettoyage, les instruments médicaux ont d'abord été pré-nettoyés dans un nettoyeur-. désinfecteur de telle sorte à être prêts à l'emploi selon les procédures et les normes d'application dans les hôpitaux.
Suite aux trempages soit dans une solution aqueuse suivant l'invention, soit dans une solution aqueuse d'Aniosyme suivant les prescriptions du fabricant, les instruments médicaux ont été rincés à l'eau claire mais également autoclavés.
Des analyses ATP-métriques, selon le protocole d'analyse de la méthode ATP Testing proposée par 3M-rm (3M
Clean-Trace), ont été effectuées pour mesurer :
- la quantité de molécules d'ATP à la surface des instruments médicaux avant nettoyage, - la quantité de molécules d'ATP à la surface des instruments médicaux après 30 minutes de trempage dans la solution de trempage suivant L'invention et après autoclavage, - la quantité de molécules d'ATP à la surface des instruments médicaux après 15 minutes de trempage dans la solution aqueuse d'Aniosyme et après autoclavage, et - la quantité de molécules d'ATP à la surface des instruments médicaux après autoclavage à 134 C durant 90 minutes.
= Les résultats obtenus ont été interprétés selon les critères mentionnés au tableau 1 et sont présentés au tableau 4 ci-dessous.
Tableau 4 ATP après ATP après ATP après pré- trempage trempage ATP après nettoyage dans la dans une autoclavage au solution de solution (URL) nettoyeur- trempage d'Aniosyme désinfecteur suivant et (URL) l'invention et autoclavage autoclavage (URL) (URL) Alésoir 14 non mesuré non mesuré non mesuré
Canule 1 418,5 non mesuré 15 non mesuré
Canule 2 476,5 non mesuré non mesuré non mesuré
Canule 3 non mesuré non mesuré
Râpe 14 non mesuré non mesuré non mesuré
Pince à dents large non mesuré non mesuré non mesuré
droite Pince à dente non mesuré non mesuré non mesuré
penchée Canule 2 (extérieur) 522 non mesuré non mesuré non mesuré
Canule ORL large 569,5 " 12 non mesuré non mesuré
Canule ORL fine 400 non mesuré 32 non mesuré
Canule d'aspiration 2487,5 9 non mesuré non mesuré
pour coelioscopie Une valeur ATP très élevée (2487,5 URL) est observée pour la canule d'aspiration pour coelioscopie avant les nettoyages. Ceci indique =
une grande quantité de biofilms résiduels après un pré-nettoyage dans un nettoyeur-désinfecteur et donc que les instruments censés être prêts à
l'emploi comportent malgré tout encore des biofilms protégeant des microorganismes potentiellement responsables des maladies nosocomiales.
Par contre, après le trempage dans la solution de trempage suivant l'invention, le niveau ATP (ou quantité de molécules d'ATP) descend à un niveau très bas (9 URL), indiquant un niveau de propreté
élevé, correspondant à une réduction logarithmique de 1,6 Log des microorganismes protégés par les biofilms et responsables des maladies =
nosocomiales, c'est-à-dire à un pourcentage de réduction supérieur à 90%
des microorganismes protégés par les biofilms. Des résultats similaires =
sont obtenus pour la canule ORL large pour laquelle une réduction logarithmique de 2,44 Log est notée, ce qui correspond à un pourcentage 5 de réduction supérieur à 90% des microorganismes protégés par les ==
biofilms. Les autres instruments analysés présentent des valeurs ATP
faible à moyenne avant les nettoyages et n'ont donc pas été soumis à un nettoyage avec la solution de trempage suivant l'invention.
10 Exemple 4-Essais comparatifs de nettoyage d'instruments médicaux par trempage dans une solution de trempage suivant l'invention et par trempage dans une solution aqueuse d'Aniosvme0 ¨ analyses par utilisation d'un kit de détection Des essais comparatifs ont été réalisés pour comparer, en 15 terme d'élimination de biofilms, un nettoyage réalisé par trempage durant 30 minutes dans une solution aqueuse suivant l'invention (telle que décrite et préparée à l'exemple 1), à un nettoyage réalisé par trempage durant 15 minutes dans une solution aqueuse d'Aniosymee (solution prétendant éliminer les biofilms) à 0,5% préparée selon les prescriptions du fabricant.
Préalablement à ces deux types de nettoyage, les instruments médicaux ont d'abord été pré-nettoyés dans un nettoyeur-désinfecteur de telle sorte à être prêts à l'emploi selon les procédures et les normes d'application dans les hôpitaux.
- avant nettoyage, 5 - après nettoyage par trempage dans une solution aqueuse de trempage suivant l'invention, et - après nettoyage par passage à l'autoclave.
Le kit de détection est composé de deux produits, un réactif de coloration et un réactif de nettoyage. Le colorant bleu présent dans le réactif de coloration adhère spécifiquement aux EPS (Ddracellular Polymeric Substances) formant la matrice protective du biofilm. La surface à analyser est aspergée avec la solution de coloration. Après 5 minutes d'action sur la surface, l'excédent de la solution est absorbé. Ensuite la surface est rincée à l'aide de fa solution nettoyante qui requiert un temps 15 de pose de cinq minutes. La surface est enfin rincée à l'eau et est analysée. La présence ou l'absence de biofilm est démontrée par une couleur bleue plus ou moins foncée selon la quantité de biofilm existant sur la surface. Une coloration bleu intense indique une présence importante de biofilm.
20 Les résultats obtenus, en terme de coloration à la surface des instruments analysés, sont présentés au tableau 3 ci-dessous pour les instruments médicaux testés.
Tableau 3 Après trempage Après pré-, dans la solution nettoyage au Après de trempage nettoyeur-autoclavage suivant désinfecteur l'invention Alésoir coloration bleue absence de coloration bleue intense coloration bleue moyenne Canule coloration bleue absence de d'aspiration pour non mesuré
intense coloration bleue coelioscopie Râpe coloration bleue absence de coloration bleue orthopédique intense coloration bleue moyenne Canule ORL coloration bleue faible coloration non mesuré
intense bleue Il ressort de ces essais que les instruments pré-nettoyés par passage dans un nettoyeur-désinfecteur comportent tous des biofilms (coloration bleue intense) et donc que cette technique actuelle de 5 nettoyage d'application dans les hôpitaux laisse subsister des biofilms sur les instruments médicaux. Par contre, ces résultats indiquent clairement qu'un trempage dans une solution aqueuse de trempage suivant l'invention permet d'éliminer très significativement les biofilms à la surface des instruments médicaux, ce qu'un autoclavage ne permet pas 10 puisqu'une coloration bleue est toujours relevée suite à ce type de nettoyage.
Exemple 3 - Essais comparatifs de nettoyage d'instruments médicaux par trempage dans une solution de trempage suivant l'invention, par trempage 15 dans une solution aqueuse d'Aniosyme0 et par autoclavage ¨ analyses ATP-métriques Des essais comparatifs ont été réalisés pour comparer, en terme d'élimination de biofilms, un nettoyage réalisé par trempage durant minutes dans une solution aqueuse suivant l'invention (telle que décrite 20 et préparée à l'exemple 1), à un nettoyage réalisé par trempage durant minutes dans une solution aqueuse d'Aniosyme0 (solution prétendant éliminer les biofilms) à 0,5% préparée selon les prescriptions du fabricant et à un nettoyage réalisé par autoclavage à 134 C durant 90 minutes.
Préalablement à ces trois types de nettoyage, les instruments médicaux ont d'abord été pré-nettoyés dans un nettoyeur-. désinfecteur de telle sorte à être prêts à l'emploi selon les procédures et les normes d'application dans les hôpitaux.
Suite aux trempages soit dans une solution aqueuse suivant l'invention, soit dans une solution aqueuse d'Aniosyme suivant les prescriptions du fabricant, les instruments médicaux ont été rincés à l'eau claire mais également autoclavés.
Des analyses ATP-métriques, selon le protocole d'analyse de la méthode ATP Testing proposée par 3M-rm (3M
Clean-Trace), ont été effectuées pour mesurer :
- la quantité de molécules d'ATP à la surface des instruments médicaux avant nettoyage, - la quantité de molécules d'ATP à la surface des instruments médicaux après 30 minutes de trempage dans la solution de trempage suivant L'invention et après autoclavage, - la quantité de molécules d'ATP à la surface des instruments médicaux après 15 minutes de trempage dans la solution aqueuse d'Aniosyme et après autoclavage, et - la quantité de molécules d'ATP à la surface des instruments médicaux après autoclavage à 134 C durant 90 minutes.
= Les résultats obtenus ont été interprétés selon les critères mentionnés au tableau 1 et sont présentés au tableau 4 ci-dessous.
Tableau 4 ATP après ATP après ATP après pré- trempage trempage ATP après nettoyage dans la dans une autoclavage au solution de solution (URL) nettoyeur- trempage d'Aniosyme désinfecteur suivant et (URL) l'invention et autoclavage autoclavage (URL) (URL) Alésoir 14 non mesuré non mesuré non mesuré
Canule 1 418,5 non mesuré 15 non mesuré
Canule 2 476,5 non mesuré non mesuré non mesuré
Canule 3 non mesuré non mesuré
Râpe 14 non mesuré non mesuré non mesuré
Pince à dents large non mesuré non mesuré non mesuré
droite Pince à dente non mesuré non mesuré non mesuré
penchée Canule 2 (extérieur) 522 non mesuré non mesuré non mesuré
Canule ORL large 569,5 " 12 non mesuré non mesuré
Canule ORL fine 400 non mesuré 32 non mesuré
Canule d'aspiration 2487,5 9 non mesuré non mesuré
pour coelioscopie Une valeur ATP très élevée (2487,5 URL) est observée pour la canule d'aspiration pour coelioscopie avant les nettoyages. Ceci indique =
une grande quantité de biofilms résiduels après un pré-nettoyage dans un nettoyeur-désinfecteur et donc que les instruments censés être prêts à
l'emploi comportent malgré tout encore des biofilms protégeant des microorganismes potentiellement responsables des maladies nosocomiales.
Par contre, après le trempage dans la solution de trempage suivant l'invention, le niveau ATP (ou quantité de molécules d'ATP) descend à un niveau très bas (9 URL), indiquant un niveau de propreté
élevé, correspondant à une réduction logarithmique de 1,6 Log des microorganismes protégés par les biofilms et responsables des maladies =
nosocomiales, c'est-à-dire à un pourcentage de réduction supérieur à 90%
des microorganismes protégés par les biofilms. Des résultats similaires =
sont obtenus pour la canule ORL large pour laquelle une réduction logarithmique de 2,44 Log est notée, ce qui correspond à un pourcentage 5 de réduction supérieur à 90% des microorganismes protégés par les ==
biofilms. Les autres instruments analysés présentent des valeurs ATP
faible à moyenne avant les nettoyages et n'ont donc pas été soumis à un nettoyage avec la solution de trempage suivant l'invention.
10 Exemple 4-Essais comparatifs de nettoyage d'instruments médicaux par trempage dans une solution de trempage suivant l'invention et par trempage dans une solution aqueuse d'Aniosvme0 ¨ analyses par utilisation d'un kit de détection Des essais comparatifs ont été réalisés pour comparer, en 15 terme d'élimination de biofilms, un nettoyage réalisé par trempage durant 30 minutes dans une solution aqueuse suivant l'invention (telle que décrite et préparée à l'exemple 1), à un nettoyage réalisé par trempage durant 15 minutes dans une solution aqueuse d'Aniosymee (solution prétendant éliminer les biofilms) à 0,5% préparée selon les prescriptions du fabricant.
Préalablement à ces deux types de nettoyage, les instruments médicaux ont d'abord été pré-nettoyés dans un nettoyeur-désinfecteur de telle sorte à être prêts à l'emploi selon les procédures et les normes d'application dans les hôpitaux.
25 Un rinçage à l'eau claire des instruments a été effectué suite aux nettoyages par trempage.
Pour mesurer l'efficacité de chacun de ces nettoyages, un kit de détection tel que décrit à l'exemple 2 a été utilisé sur les surfaces des instruments médicaux :
30 - avant nettoyage, -après nettoyage par trempage durant 30 minutes dans une solution de trempage suivant l'invention, et =
- après nettoyage par trempage durant 15 minutes dans une solution = de trempage d'Aniosyrne0 selon les prescriptions du fabricant.
5 La présence ou l'absence de biofilm est démontrée par une couleur bleue plus ou moins foncée selon la quantité de biofilm existant sur la surface. Une coloration bleu intense indique une présence importante de biofilm.
Les résultats obtenus sont présentés au tableau 5 ci-10 dessous pour les instruments médicaux testés.
Tableau 5 Après trempage Après trempage Après pré-= dans la solution dans une nettoyage au de trempage solution nettoyeur-suivant d'Aniosyme désinfecteur ['invention Râpe coloration bleue faible coloration coloration bleue orthopédique à intense bleue intense pores étroits (figure la) (figure 1c) (figure lb) Râpe coloration bleue faible coloration coloration bleue orthopédique à intense bleue intense pores larges (figure 1d) (figure lf) (figure le) Pince coloration bleue faible coloration coloration bleue d'orthodontie intense bleue intense Canule coloration bleue faible coloration coloration bleue = d'aspiration pour intense bleue intense coelioscopie Canule ORL coloration bleue faible coloration coloration bleue (embout large) intense bleue intense Il ressort de ces essais, et comme illustré aux figures la à 1f, que les instruments pré-nettoyés par passage dans un nettoyeur-désinfecteur comportent tous des biofilms (coloration bleue intense) et donc que cette technique actuelle de nettoyage d'application dans les 5 hôpitaux laisse subsister des biofilms sur les instruments médicaux. Par contre, ces résultats indiquent clairement qu'un trempage dans une solution aqueuse de trempage suivant l'invention permet d'éliminer très significativement les biofilms à la surface des instruments médicaux, ce qu'un trempage dans une solution aqueuse d'Aniosyrne ne permet qu'en 10 une moindre mesure.
Exemple 5: Essais comparatifs de nettoyage d'instruments médicaux (râpes) par trempage dans une solution de trempage suivant l'invention et par trempage dans une solution aqueuse d'Aniosyme associés à une 15 étape de brossage manuel ¨ analyses par utilisation d'un kit de détection Des essais comparatifs ont été réalisés pour comparer, en terme d'élimination de biofilms, un nettoyage réalisé par trempage durant 30 minutes dans une solution aqueuse de trempage suivant l'invention 20 (telle que décrite à l'exemple 1) et associé à une étape de brossage manuel à un nettoyage réalisé par trempage durant 15 minutes dans une solution aqueuse d'Aniosyme (solution prétendant éliminer les biofilms) à
0,5% préparée selon les prescriptions du fabricant et associé à une étape de brossage manuel.
25 Préalablement à ces deux types de nettoyage, les instruments médicaux (râpes) ont d'abord été pré-nettoyés dans un nettoyeur-désinfecteur de telle sorte à être prêts à l'emploi selon les procédures et les normes d'application dans les hôpitaux.
Pour mesurer l'efficacité de chacun de ces nettoyages, un kit 30 de détection tel que décrit à l'exemple 2 a été utilisé sur les surfaces des râpes :
- avant nettoyage, - après nettoyage par trempage durant 30 minutes dans une solution de trempage suivant l'invention, - après nettoyage par trempage durant 30 minutes dans une solution de trempage suivant l'invention et brossage manuel, - après nettoyage par trempage durant 15 minutes dans une solution de trempage d'Aniosyme selon les prescriptions du fabriquant, - après nettoyage par trempage durant 15 minutes dans une solution de trempage d'Aniosynne selon les prescriptions du fabriquant et brossage manuel, et - après un premier nettoyage par trempage durant 15 minutes dans une solution de trempage d'Aniosyme selon les prescriptions du fabriquant et brossage manuel suivi d'un deuxième nettoyage par trempage dans une solution de trempage suivant l'invention et brossage manuel.
Les résultats obtenus sont présentés au tableau 6 ci-dessous.
La présence ou l'absence de biofilm est démontrée par une couleur bleue plus ou moins foncée selon la quantité de biofilm existant sur la surface. Une coloration bleu intense indique une présence importante de biofilm.
Tableau 6 (a) (b) (c) (d) (e) (f) Après pré- Après (b) + Après (d) (c)+
(e) nettoyage trempage brossage trempage suivant dans une brossage l'invention solution d'Aniosyme =
Râpes coloration faible absence coloration coloration absence pores bleue coloration de bleue bleue de larges moyenne bleue coloration moyenne moyenne coloration Râpes coloration faible absence coloration coloration absence pores bleue coloration de bleue bleue de étroits intense bleue coloration intense moyenne coloration (figure 2a) (figure 2b) (figure 2c) (figure 2d) (figure (figure 2f) 2e) I
Ces résultats ainsi que les figures 2a à 2f montrent qu'un pré-nettoyage supposé fournir des râpes prêtes à l'emploi laisse subsister des biofilms (coloration moyenne à intense selon la taille des pores des râpes).
Par ailleurs, il ressort de ces essais qu'un nettoyage par trempage dans une solution aqueuse d'Aniosyme0 ne permet pas non plus d'éliminer tout le biofilm présent (coloration moyenne à intense) même lorsqu'un brossage manuel est effectué (coloration moyenne).
10 Par contre, un trempage dans une solution de trempage suivant l'invention permet d'éliminer significativement les biofilms puisqu'une faible coloration bleue est observée suite à ce nettoyage.
De plus, si le trempage dans une solution de trempage suivant l'invention est associé à une étape de brossage manuel, le 15 nettoyage selon l'invention permet d'éliminer totalement les biofilms de la surface des râpes. Le même constat peut être uniquement établi si un nettoyage avec une solution d'Aniosyme associé à un brossage manuel est suivi d'un nettoyage par trempage dans une solution suivant l'invention associé à un brossage manuel.
20 Le fait que, sans l'étape de brossage manuel, le trempage dans une solution de trempage suivant l'invention laisse subsister une faible coloration bleue s'explique par l'action de la solution de trempage qui déstructure le biofilm mais sans toutefois le décoller totalement des surfaces. C'est pourquoi une étape de brossage manuel est particulièrement indiquée.
Exemple 6: Nettoyage d'endoscopes avec une solution de trempage suivant l'invention Des endoscopes propres mais déclassés (non utilisés depuis plusieurs années) et non stérilisés ont été utilisés pour déterminer l'efficacité de la solution de trempage suivant l'invention pour le nettoyage des endoscopes.
= Une première étape a consisté à réaliser une mise à blanc des endoscopes dans un lave endoscope selon un protocole et une procédure connue avec les solutions commerciales Soluscope E (solution enzymatique) à 0,5% et Soluscope D (solution désinfectante à base de glutaraldéhyde) selon les prescriptions du fabricant.
Une deuxième étape a porté sur la mise à blanc du lave endoscope avec une solution suivant l'invention (telle que décrite à
l'exemple 1) en suivant le programme de lavage prévu à cet effet par le fabricant (cycle de 30 minutes : désinfection ¨ rinçage ¨ désinfection ¨
vidange ¨ rinçage ¨ séchage).
Une troisième étape a porté sur le nettoyage des endoscopes dans le lave endoscope avec une solution suivant l'invention (telle que décrite à l'exemple 1) et avec une solution désinfectante commerciale (Soluscope D) suite aux deux étapes précédentes. Ce nettoyage dans le lave endoscope consiste en un cycle de 35 minutes comprenant les étapes séquentielles suivantes : test d'étanchéité ¨ pré-nettoyage ¨ nettoyage ¨ rinçage ¨ désinfection ¨ rinçage ¨ séchage.
a) analyses de la présence de biofilm suite à la première éta_pe Suite à la mise à blanc des endoscopes par nettoyage standard dans un lave endoscope, les analyses suivantes ont été réalisées :
= 5 - analyse bactériologique de l'intérieur de la canule de biopsie de l'endoscope par écouvillonnage à l'aide d'une brosse à endoscope plongée ensuite dans de l'eau peptonée jusqu'à analyse au laboratoire par étalement sur milieu de culture non sélectif et par mesures Bart Test selon les recommandations du fabricant.
10 Ces analyses de l'endoscope mis à blanc ont permis de montrer que le nettoyage standard au lave endoscope ne donne pas lieu au développement de microorganismes sur les milieux de culture.
Cependant, les Bart Test ont réagi positivement, ce qui indique quand même la présence de microorganismes vivants et donc de 15 bactéries susceptibles de former des biofilms.
- analyse bactériologique du lave endoscope (grille d'évacuation, goulot d'évacuation, filtre) par écouvillonnage, les écouvillons obtenus étant conservés dans de l'eau peptonée jusqu'à analyse au laboratoire par étalement sur milieu de culture non sélectif, par 20 analyse ATP-métrique (comme décrite aux exemples précédents) =
et par mesures Bart Test.
Les comptages des bactéries se développant sur boites de pétri ont permis de mettre en évidence une forte présence de microorganismes au niveau du goulot d'évacuation du lave 25 endoscope (colonies de couleur rouge) ainsi qu'au niveau de la grille d'évacuation (colonie jaune-dorée) et du filtre (colonie rouge).
Les analyses ATP-métriques ont quant à elles révélés une faible présence de microorganismes sur ces mêmes zones du lave endoscope (valeurs URL inférieures à 500).
30 Un repiquage des colonies se développant sur le milieu de culture non sélectif sur des milieux spécifiques (Petrifilnri Staph Express = 35 3M) a permis de déterminer que ces colonies sont formées par Staphylococcus aureus.
Les mesures Bart Test ont réagi positivement pour les prélèvements effectués au niveau de la grille d'évacuation et du filtre du lave endoscope.
Il ressort donc de ces analyses que tant les endoscopes mis à
blanc que le lave endoscope utilisé pour réaliser cette mise à blanc selon les procédures actuelles comportent toujours des microorganismes susceptibles de former du biofilm et donc que ces procédures ne sont pas optimales.
b) analyses de la présence de biofilm suite à la deuxième étape Suite à la mise à blanc du lave endoscope avec une solution de trempage suivant l'invention, une analyse bactériologique de l'eau de rinçage du lave endoscope a été réalisée par étalement sur milieu de culture et par mesures Bart Test.
Des colonies bactériennes ont été dénombrées sur le milieu de culture non sélectif (28 CFU/150p1) puis repiquées sur un milieu sélectif pour la croissance des staphylocoques, ce qui a permis d'établir la présence de Staphylococcus aureus dans les eaux de rinçage du lave endoscope suite au nettoyage avec la solution de trempage suivant l'invention. Les mesures Bart Test ont confirmé cette présence de bactéries dans les eaux de rinçage du lave endoscope.
Ces essais permettent de conclure que la solution de trempage suivant l'invention assure le décrochage des bactéries dans le lave endoscope, ce qui permet d'assurer, par la suite, un meilleur nettoyage des endoscopes, le lave endoscope ne constituant plus une source de contamination.
c) analyses de la présence de biofilm suite à la troisième étape Suite au nettoyage avec la solution de trempage suivant l'invention, des endoscopes préalablement mis à blanc (selon !a première étape) dans un lave endoscope préalablement mis à blanc (selon la deuxième 5 étape) et à une désinfection (Soluscope D), des analyses bactériologiques de l'eau de rinçage du lave endoscope et des endoscopes ont été réalisées par étalement sur milieu de culture et par mesures Bart Test.
Des colonies bactériennes ont été dénombrées dans l'eau de rinçage 10 suite au nettoyage des endoscopes avec la solution selon l'invention (colonies rouges, 32 CFU/150p1). Les bactéries formant ces colonies ont été identifiées comme étant des Staphylococcus aureus. Les mesures Bart Test ont également indiqué la présence de bactéries dans l'eau de rinçage.
15 Ceci indique que la solution de trempage suivant l'invention permet de décrocher des bactéries encore présentes dans les endoscopes et/ou dans le lave endoscope même lorsqu'ils ont été préalablement mis à
blanc.
L'analyse des endoscopes, par écouvillonnage et étalement des écouvillons obtenus sur boites de pétri, n'a pas permis de mettre en évidence la présence de bactéries. Par contre, les mesures Bart Test :==
ont révélé la présence de bactéries au niveau des endoscopes même après lavage avec la solution de trempage suivant l'invention.
Il est bien entendu que la présente invention n'est en aucune 25 façon !imitée aux formes de réalisations décrites ci-dessus et que bien des modifications peuvent y être apportées sans sortir du cadre des revendications annexées.
Pour mesurer l'efficacité de chacun de ces nettoyages, un kit de détection tel que décrit à l'exemple 2 a été utilisé sur les surfaces des instruments médicaux :
30 - avant nettoyage, -après nettoyage par trempage durant 30 minutes dans une solution de trempage suivant l'invention, et =
- après nettoyage par trempage durant 15 minutes dans une solution = de trempage d'Aniosyrne0 selon les prescriptions du fabricant.
5 La présence ou l'absence de biofilm est démontrée par une couleur bleue plus ou moins foncée selon la quantité de biofilm existant sur la surface. Une coloration bleu intense indique une présence importante de biofilm.
Les résultats obtenus sont présentés au tableau 5 ci-10 dessous pour les instruments médicaux testés.
Tableau 5 Après trempage Après trempage Après pré-= dans la solution dans une nettoyage au de trempage solution nettoyeur-suivant d'Aniosyme désinfecteur ['invention Râpe coloration bleue faible coloration coloration bleue orthopédique à intense bleue intense pores étroits (figure la) (figure 1c) (figure lb) Râpe coloration bleue faible coloration coloration bleue orthopédique à intense bleue intense pores larges (figure 1d) (figure lf) (figure le) Pince coloration bleue faible coloration coloration bleue d'orthodontie intense bleue intense Canule coloration bleue faible coloration coloration bleue = d'aspiration pour intense bleue intense coelioscopie Canule ORL coloration bleue faible coloration coloration bleue (embout large) intense bleue intense Il ressort de ces essais, et comme illustré aux figures la à 1f, que les instruments pré-nettoyés par passage dans un nettoyeur-désinfecteur comportent tous des biofilms (coloration bleue intense) et donc que cette technique actuelle de nettoyage d'application dans les 5 hôpitaux laisse subsister des biofilms sur les instruments médicaux. Par contre, ces résultats indiquent clairement qu'un trempage dans une solution aqueuse de trempage suivant l'invention permet d'éliminer très significativement les biofilms à la surface des instruments médicaux, ce qu'un trempage dans une solution aqueuse d'Aniosyrne ne permet qu'en 10 une moindre mesure.
Exemple 5: Essais comparatifs de nettoyage d'instruments médicaux (râpes) par trempage dans une solution de trempage suivant l'invention et par trempage dans une solution aqueuse d'Aniosyme associés à une 15 étape de brossage manuel ¨ analyses par utilisation d'un kit de détection Des essais comparatifs ont été réalisés pour comparer, en terme d'élimination de biofilms, un nettoyage réalisé par trempage durant 30 minutes dans une solution aqueuse de trempage suivant l'invention 20 (telle que décrite à l'exemple 1) et associé à une étape de brossage manuel à un nettoyage réalisé par trempage durant 15 minutes dans une solution aqueuse d'Aniosyme (solution prétendant éliminer les biofilms) à
0,5% préparée selon les prescriptions du fabricant et associé à une étape de brossage manuel.
25 Préalablement à ces deux types de nettoyage, les instruments médicaux (râpes) ont d'abord été pré-nettoyés dans un nettoyeur-désinfecteur de telle sorte à être prêts à l'emploi selon les procédures et les normes d'application dans les hôpitaux.
Pour mesurer l'efficacité de chacun de ces nettoyages, un kit 30 de détection tel que décrit à l'exemple 2 a été utilisé sur les surfaces des râpes :
- avant nettoyage, - après nettoyage par trempage durant 30 minutes dans une solution de trempage suivant l'invention, - après nettoyage par trempage durant 30 minutes dans une solution de trempage suivant l'invention et brossage manuel, - après nettoyage par trempage durant 15 minutes dans une solution de trempage d'Aniosyme selon les prescriptions du fabriquant, - après nettoyage par trempage durant 15 minutes dans une solution de trempage d'Aniosynne selon les prescriptions du fabriquant et brossage manuel, et - après un premier nettoyage par trempage durant 15 minutes dans une solution de trempage d'Aniosyme selon les prescriptions du fabriquant et brossage manuel suivi d'un deuxième nettoyage par trempage dans une solution de trempage suivant l'invention et brossage manuel.
Les résultats obtenus sont présentés au tableau 6 ci-dessous.
La présence ou l'absence de biofilm est démontrée par une couleur bleue plus ou moins foncée selon la quantité de biofilm existant sur la surface. Une coloration bleu intense indique une présence importante de biofilm.
Tableau 6 (a) (b) (c) (d) (e) (f) Après pré- Après (b) + Après (d) (c)+
(e) nettoyage trempage brossage trempage suivant dans une brossage l'invention solution d'Aniosyme =
Râpes coloration faible absence coloration coloration absence pores bleue coloration de bleue bleue de larges moyenne bleue coloration moyenne moyenne coloration Râpes coloration faible absence coloration coloration absence pores bleue coloration de bleue bleue de étroits intense bleue coloration intense moyenne coloration (figure 2a) (figure 2b) (figure 2c) (figure 2d) (figure (figure 2f) 2e) I
Ces résultats ainsi que les figures 2a à 2f montrent qu'un pré-nettoyage supposé fournir des râpes prêtes à l'emploi laisse subsister des biofilms (coloration moyenne à intense selon la taille des pores des râpes).
Par ailleurs, il ressort de ces essais qu'un nettoyage par trempage dans une solution aqueuse d'Aniosyme0 ne permet pas non plus d'éliminer tout le biofilm présent (coloration moyenne à intense) même lorsqu'un brossage manuel est effectué (coloration moyenne).
10 Par contre, un trempage dans une solution de trempage suivant l'invention permet d'éliminer significativement les biofilms puisqu'une faible coloration bleue est observée suite à ce nettoyage.
De plus, si le trempage dans une solution de trempage suivant l'invention est associé à une étape de brossage manuel, le 15 nettoyage selon l'invention permet d'éliminer totalement les biofilms de la surface des râpes. Le même constat peut être uniquement établi si un nettoyage avec une solution d'Aniosyme associé à un brossage manuel est suivi d'un nettoyage par trempage dans une solution suivant l'invention associé à un brossage manuel.
20 Le fait que, sans l'étape de brossage manuel, le trempage dans une solution de trempage suivant l'invention laisse subsister une faible coloration bleue s'explique par l'action de la solution de trempage qui déstructure le biofilm mais sans toutefois le décoller totalement des surfaces. C'est pourquoi une étape de brossage manuel est particulièrement indiquée.
Exemple 6: Nettoyage d'endoscopes avec une solution de trempage suivant l'invention Des endoscopes propres mais déclassés (non utilisés depuis plusieurs années) et non stérilisés ont été utilisés pour déterminer l'efficacité de la solution de trempage suivant l'invention pour le nettoyage des endoscopes.
= Une première étape a consisté à réaliser une mise à blanc des endoscopes dans un lave endoscope selon un protocole et une procédure connue avec les solutions commerciales Soluscope E (solution enzymatique) à 0,5% et Soluscope D (solution désinfectante à base de glutaraldéhyde) selon les prescriptions du fabricant.
Une deuxième étape a porté sur la mise à blanc du lave endoscope avec une solution suivant l'invention (telle que décrite à
l'exemple 1) en suivant le programme de lavage prévu à cet effet par le fabricant (cycle de 30 minutes : désinfection ¨ rinçage ¨ désinfection ¨
vidange ¨ rinçage ¨ séchage).
Une troisième étape a porté sur le nettoyage des endoscopes dans le lave endoscope avec une solution suivant l'invention (telle que décrite à l'exemple 1) et avec une solution désinfectante commerciale (Soluscope D) suite aux deux étapes précédentes. Ce nettoyage dans le lave endoscope consiste en un cycle de 35 minutes comprenant les étapes séquentielles suivantes : test d'étanchéité ¨ pré-nettoyage ¨ nettoyage ¨ rinçage ¨ désinfection ¨ rinçage ¨ séchage.
a) analyses de la présence de biofilm suite à la première éta_pe Suite à la mise à blanc des endoscopes par nettoyage standard dans un lave endoscope, les analyses suivantes ont été réalisées :
= 5 - analyse bactériologique de l'intérieur de la canule de biopsie de l'endoscope par écouvillonnage à l'aide d'une brosse à endoscope plongée ensuite dans de l'eau peptonée jusqu'à analyse au laboratoire par étalement sur milieu de culture non sélectif et par mesures Bart Test selon les recommandations du fabricant.
10 Ces analyses de l'endoscope mis à blanc ont permis de montrer que le nettoyage standard au lave endoscope ne donne pas lieu au développement de microorganismes sur les milieux de culture.
Cependant, les Bart Test ont réagi positivement, ce qui indique quand même la présence de microorganismes vivants et donc de 15 bactéries susceptibles de former des biofilms.
- analyse bactériologique du lave endoscope (grille d'évacuation, goulot d'évacuation, filtre) par écouvillonnage, les écouvillons obtenus étant conservés dans de l'eau peptonée jusqu'à analyse au laboratoire par étalement sur milieu de culture non sélectif, par 20 analyse ATP-métrique (comme décrite aux exemples précédents) =
et par mesures Bart Test.
Les comptages des bactéries se développant sur boites de pétri ont permis de mettre en évidence une forte présence de microorganismes au niveau du goulot d'évacuation du lave 25 endoscope (colonies de couleur rouge) ainsi qu'au niveau de la grille d'évacuation (colonie jaune-dorée) et du filtre (colonie rouge).
Les analyses ATP-métriques ont quant à elles révélés une faible présence de microorganismes sur ces mêmes zones du lave endoscope (valeurs URL inférieures à 500).
30 Un repiquage des colonies se développant sur le milieu de culture non sélectif sur des milieux spécifiques (Petrifilnri Staph Express = 35 3M) a permis de déterminer que ces colonies sont formées par Staphylococcus aureus.
Les mesures Bart Test ont réagi positivement pour les prélèvements effectués au niveau de la grille d'évacuation et du filtre du lave endoscope.
Il ressort donc de ces analyses que tant les endoscopes mis à
blanc que le lave endoscope utilisé pour réaliser cette mise à blanc selon les procédures actuelles comportent toujours des microorganismes susceptibles de former du biofilm et donc que ces procédures ne sont pas optimales.
b) analyses de la présence de biofilm suite à la deuxième étape Suite à la mise à blanc du lave endoscope avec une solution de trempage suivant l'invention, une analyse bactériologique de l'eau de rinçage du lave endoscope a été réalisée par étalement sur milieu de culture et par mesures Bart Test.
Des colonies bactériennes ont été dénombrées sur le milieu de culture non sélectif (28 CFU/150p1) puis repiquées sur un milieu sélectif pour la croissance des staphylocoques, ce qui a permis d'établir la présence de Staphylococcus aureus dans les eaux de rinçage du lave endoscope suite au nettoyage avec la solution de trempage suivant l'invention. Les mesures Bart Test ont confirmé cette présence de bactéries dans les eaux de rinçage du lave endoscope.
Ces essais permettent de conclure que la solution de trempage suivant l'invention assure le décrochage des bactéries dans le lave endoscope, ce qui permet d'assurer, par la suite, un meilleur nettoyage des endoscopes, le lave endoscope ne constituant plus une source de contamination.
c) analyses de la présence de biofilm suite à la troisième étape Suite au nettoyage avec la solution de trempage suivant l'invention, des endoscopes préalablement mis à blanc (selon !a première étape) dans un lave endoscope préalablement mis à blanc (selon la deuxième 5 étape) et à une désinfection (Soluscope D), des analyses bactériologiques de l'eau de rinçage du lave endoscope et des endoscopes ont été réalisées par étalement sur milieu de culture et par mesures Bart Test.
Des colonies bactériennes ont été dénombrées dans l'eau de rinçage 10 suite au nettoyage des endoscopes avec la solution selon l'invention (colonies rouges, 32 CFU/150p1). Les bactéries formant ces colonies ont été identifiées comme étant des Staphylococcus aureus. Les mesures Bart Test ont également indiqué la présence de bactéries dans l'eau de rinçage.
15 Ceci indique que la solution de trempage suivant l'invention permet de décrocher des bactéries encore présentes dans les endoscopes et/ou dans le lave endoscope même lorsqu'ils ont été préalablement mis à
blanc.
L'analyse des endoscopes, par écouvillonnage et étalement des écouvillons obtenus sur boites de pétri, n'a pas permis de mettre en évidence la présence de bactéries. Par contre, les mesures Bart Test :==
ont révélé la présence de bactéries au niveau des endoscopes même après lavage avec la solution de trempage suivant l'invention.
Il est bien entendu que la présente invention n'est en aucune 25 façon !imitée aux formes de réalisations décrites ci-dessus et que bien des modifications peuvent y être apportées sans sortir du cadre des revendications annexées.
Claims (17)
1. Procédé d'élimination de biofilms pour le nettoyage d'instruments médicaux, en particulier pour lutter contre les maladies nosocomiales, caractérisé en ce qu'il comprend une étape de traitement de surface pendant une période de temps prédéterminée avec une composition comprenant au moins un composant détergent et au moins un composant enzymatique et une étape de rinçage et/ou de séchage de ladite surface.
2. Procédé d'élimination selon la revendication 1, ledit composant détergent comprenant un agent mouillant et un agent dispersant.
3. Procédé d'élimination selon la revendication 1 ou 2, ledit composant détergent comprenant en outre un agent séquestrant.
4. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 3, ledit au moins un composant enzymatique contenant par exemple au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase.
5. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que ladite étape de traitement de surface pour lutter contre les maladies nosocomiales comprend une étape d'élimination des biofilms permettant de réaliser un abattement logarithmique d'au moins 1 Log des microorganismes responsables des maladies nosocomiales.
6. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que ladite étape de traitement de surface est réalisée par trempage pendant une période de temps prédéterminée comprise entre 20 minutes et 24 heures dans une solution de trempage comprenant ladite composition et une phase aqueuse de dilution préalablement formée.
7. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que ladite étape de traitement de surface par trempage est associée à une étape d'abrasion mécanique de ladite surface avec ladite solution de trempage, par exemple par brossage mécanisé ou manuel ou par traitement aux ultrasons.
8. Procédé selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisé en ce qu'il comprend en outre une étape supplémentaire de traitement de ladite surface à l'aide d'un biocide.
9. Utilisation d'une composition comprenant au moins un composant détergent et au moins un composant enzymatique, pour lutter contre les maladies nosocomiales par élimination de biofilms.
10. Utilisation d'une composition selon la revendication 9, ledit composant détergent comprenant un agent mouillant et un agent dispersant.
11. Utilisation d'une composition selon la revendication 9 ou 10, ledit composant détergent comprenant en outre un agent séquestrant.
12. Utilisation d'une composition selon l'une quelconque des revendications 9 à 11, ledit composant enzymatique contenant par exemple au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase.
13. Utilisation d'une composition selon l'une quelconque des revendications 9 à 12, pour l'élimination de sources de contamination comprenant Staphylococcus aureus et/ou Escherichia coli et/ou Pseudomonas aeruginosa.
14. Utilisation d'une composition comprenant au moins un composant détergent et au moins un composant enzymatique, pour le traitement de surfaces, d'outils médicaux ou de sols afin de lutter contre les maladies nosocomiales par trempage.
15. Utilisation d'une composition selon la revendication 14, ledit composant détergent comprenant un agent mouillant et un agent dispersant.
16. Utilisation d'une composition selon la revendication 14 ou 15, ledit composant détergent comprenant en outre un agent séquestrant.
17. Utilisation d'une composition selon l'une quelconque des revendications 14 à 16, ledit composant enzymatique contenant par exemple au moins une protéase, au moins une laccase et au moins une polysaccharidase.
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