ES2444128T3

ES2444128T3 - Nueva SAL-554

Info

Publication number: ES2444128T3
Application number: ES09746098.4T
Authority: ES
Inventors: Kay Alison Boardman; Susan Elizabeth Hard; Andrew Hornby Dobson; Brian Whitlock
Original assignee: AstraZeneca AB
Current assignee: AstraZeneca AB
Priority date: 2008-05-13
Filing date: 2009-05-11
Publication date: 2014-02-24
Anticipated expiration: 2029-05-11
Also published as: UY31820A; EA019183B1; TWI443095B; ECSP10010610A; WO2009138781A1; HK1152867A1; US8404839B2; EP2303276A1; BRPI0912170A2; MY183041A; AU2009247782C1; TW201008923A; NI201000197A; AR071714A1; CA2723989A1; CR11791A; ZA201008283B; IL209199A0; HN2010002408A; KR20110014192A

Abstract

Difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina.

Description

Nueva SAL-554

La presente invenci6n se relaciona con una sal de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(Nmetilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina en lo adelante "Compuesto (I)", mas particularmente con la sal de

5 difumarato del Compuesto (I). Se espera que la sal sea util para el tratamiento o la profilaxis de las afecciones mediadas solo o en parte por la senalizaci6n del receptor erbB, particularmente las enfermedades proliferativas como el cancer. La invenci6n tambien se relaciona con una composici6n farmaceutica que comprende la sal y con el uso de la misma en la fabricaci6n de un medicamento para su uso en el tratamiento o la profilaxis del cancer, como el cancer de mama.

10 Los receptores de las tirosina quinasas de la familia de erbB, que incluyen EGFR, erbB2, erbB3 y erbB4, estan frecuentemente involucrados en la conducci6n de la proliferaci6n y supervivencia de las celulas tumorales y como tal la familia de erbB de los receptores esta implicada en un numero de canceres del epitelio (revisado en Olayioye y otros, EMBO J., 2000, 19, 3159), incluyendo por ejemplo el cancer de mama (Sainsbury y otros, Brit. J. Cancer, 1988, 58, 458; Guerin y otros, Oncogene Res., 1988, 3, 21; Slamon y otros, Science, 1989, 244, 707; Klijn y otros, Brest Cancer Res.

15 Treat., 1994, 29, 73 y revisado en Salomon y otros, Crit. Rev. Oncol. Hematol., 1995, 19, 183), canceres de pulm6n de celulas no pequenas (NSCLC) incluyendo adenocarcinomas (Cerny y otros, Brit. J. Cancer, 1986, 54, 265; Reubi y otros, Int. J. Cancer, 1990, 45, 269; Rusch y otros, Cancer Research, 1993, 53, 2379; Brabender y otros, Clin. Cancer Res., 2001, 7, 1850) asi como otros canceres del pulm6n (Hendler y otros, Cancer Cells, 1989, 7, 347; Ohsaki y otros, Oncol. Rep., 2000, 7, 603), cancer de vejiga (Neal y otros, Lancet, 1985, 366; Chow y otros, Clin. Cancer Res., 2001, 7,

20 1957, Zhau y otros, Mol Carcinog., 3, 254), cancer esofagico (Mukaida y otros, Cancer, 1991, 68, 142), cancer gastrointestinal tal como cancer de colon, rectal o de est6mago (Bolen y otros, Oncogene Res., 1987, 1, 149; Kapitanovic y otros, Gastroenterology, 2000, 112, 1103; Ross y otros, Cancer Invest., 2001, 19, 554), cancer de pr6stata (Visakorpi y otros, Histochem. J., 1992, 24, 481; Kumar y otros, 2000, 32, 73; Scher y otros, J. Natl. Cancer Inst., 2000, 92, 1866), leucemia (Konaka y otros, Cell, 1984, 37, 1035, Martin-Subero y otros, Cancer Genet Cytogenet., 2001, 127,

25 174), cancer de ovario (Hellstrom y otros, Cancer Res., 2001, 61, 2420), cabeza y cuello (Shiga y otros, Head Neck, 2000, 22, 599) o pancreatico (Ovotny y otros, Neoplasma, 2001, 48, 188).

En correspondencia ha sido reconocido que un inhibidor de las tirosina quinasas del receptor erbB seria de valor como un inhibidor selectivo del crecimiento de algunos carcinomas. Un numero de inhibidores de la tirosina quinasa de erbB han demostrado beneficio clinico y un numero de inhibidores de la tirosina quinasa del erbB han sido aprobados para su

30 uso en el tratamiento del cancer. Por ejemplo, los inhibidores de la tirosina quinasa del EGFR gefitinib y erlotinib para el tratamiento del cancer de pulm6n de celulas no pequenas avanzado y lapatinib, el cual tiene actividad inhibidora de la tirosina quinasa del erbB2, para su uso en cancer de mama metastasico. Muchos otros inhibidores de la tirosina quinasa del EGFR y erbB2 estan actualmente en desarrollo.

El compuesto (I) es divulgado en la Publicaci6n de la Solicitud Internacional de Patente numero 35 WO2005/028469 como Ejemplo 1 aqui y es de la estructura:

O

Compuesto (I)

El Compuesto (I) es un inhibidor de la tirosina quinasa del receptor erbB, en particular el Compuesto (I) es un potente inhibidor de las tirosina quinasas del receptor EGFR y erbB2.

40 Existe un grupo creciente de evidencia clinica y preclinica que sugiere que, ademas de la senalizaci6n a traves de los homodimeros EGFR y erbB2, la senalizaci6n celular mediada por los heterodimeros EGFR, erbB2 y erbB3 puede ser una via de senalizaci6n oncogenica importante (Sergina y otros, Naturaleza, 2007, 445, 437; Ritter y otros, Clin Cancer Res. 2007, 13, 4909; Johnston y otros, JCO, 2008, 26, 1066). Ya que el erbB3 no tiene una actividad tirosina quinasa intrinseca, la activaci6n del receptor erbB3 es alcanzada solamente a traves de la formaci6n de complejos del receptor

45 heterodimerico con otros receptores activos de la quinasa incluyendo particularmente el EGFR y erbB2. Los heterodimeros EGFR y erbB2 formados con el erbB3 se piensa que conduzcan al crecimiento del tumor en los tumores donde estos receptores son expresados.

Hemos encontrado en los experimentos preclinicos que el Compuesto (I) tambien inhibe la senalizaci6n mediada por erbB3 a traves de la inhibici6n de la fosforilaci6n de erbB3 a continuaci6n de la heterodimerizaci6n de EGFR/erbB3 y/o erbB2/erbB3 estimulada por el ligando. En correspondencia, el Compuesto (I) exhibe un unico efecto inhibidor de la tirosina quinasa del erbB comparado con otros inhibidores de la tirosina quinasa del erbB tal como gefitinib o erlotinib que actuan principalmente como inhibidores de la tirosina quinasa del EGFR. Se han llevado a cabo estudios preclinicos que sugieren que el Compuesto (I) exhibe efectos antitumorales mejorados en comparaci6n con los inhibidores de la tirosina quinasa del EGFR tales como gefitinib y erlotinib. Sin desear estar atados por una teoria, se piensa que las propiedades mejoradas pueden resultar de la inhibici6n de la senalizaci6n mediada por erbB3 por el Compuesto (I).

La WO2005/028469 indica que los compuestos divulgados aqui pueden ser preparados en forma de una sal farmaceuticamente aceptable, por ejemplo, una sal de adici6n acida de un compuesto de la F6rmula I, con un acido inorganico u organico como acido clorhidrico, bromhidrico, sulfurico, trifluoroacetico, citrico o maleico. En WO2005/028469 no hay ninguna sugerencia de una sal con acido fumarico. El Compuesto (I) es divulgado en el Ejemplo 1 de WO2005/028469 y es aislado como la base libre. No se divulga en WO2005/028469 ninguna sal especifica del Compuesto (I).

Hemos encontrado que el Compuesto (I) es cristalino con algun caracter amorfo como es mostrado en la XRPD de la Figura 1. La calorimetria diferencial de barrido (Figura 2A) en el Compuesto (I) muestra una amplia endoterma con un inicio de 76.2°C, la cual se deba probablemente a la perdida de solvente, mas probablemente agua, seguido por una endoterma de fusi6n con un inicio de 126.2°C. El analisis termogravimetrico en el Compuesto (I) (Figura 2B) muestra una perdida de peso de 1.2% entre 25°C y 95°C.

La Sorci6n Dinamica de Vapor (Figura 3) muestra la humedad absorbida de aproximadamente 1.9% p/p a 80% humedad relativa, en correspondencia el Compuesto (I) es moderadamente higrosc6pico.

Hemos encontrado que el Compuesto (I) tiene una tasa de disoluci6n intrinseca relativamente baja, particularmente a pH por debajo de 6.0 y tiene una a alta permeabilidad celular. La baja solubilidad y alta permeabilidad sugieren una clasificaci6n BCS de Clase II para el Compuesto (I). Por lo tanto, las caracteristicas de disoluci6n del compuesto pueden ser criticas en el control de la absorci6n del farmaco y variabilidad entre los pacientes, especialmente a dosis mas altas. Estos descubrimientos junto con el hecho de que el Compuesto (I) es parcialmente amorfo y es higrosc6pico ha resultado en la necesidad de encontrar formas alternativas del Compuesto (I) con propiedades mejoradas.

Hemos descubierto sorprendentemente que la sal de difumarato del Compuesto (I) tiene propiedades favorables en comparaci6n con el Compuesto (I). El difumarato del Compuesto (I) tiene un perfil de disoluci6n favorable, alta solubilidad acuosa y una buena tasa de disoluci6n intrinseca. Ademas, el difumarato del Compuesto (I) exhibe propiedades favorables en estado s6lido, por ejemplo alta cristalinidad, baja higroscopicidad y/o propiedades termicas favorables, tal como un alto punto de fusi6n. De acuerdo con un primer aspecto de la presente invenci6n se proporciona difumarato del Compuesto (I).

Adecuadamente el difumarato del Compuesto (I) es cristalino. Por lo tanto de acuerdo con un aspecto adicional de la presente invenci6n se proporciona el difumarato del Compuesto (I) cristalino.

El difumarato del Compuesto (I) puede existir en formas solvatadas asi como no solvatadas tal como, por ejemplo, formas hidratadas. Sera entendido que la invenci6n abarca todas esas formas solvatadas y no solvatadas del difumarato del Compuesto (I).

Hemos encontrado que una forma cristalina particular del difumarato del Compuesto (I), en lo adelante "Forma A" esta caracterizada porque proporciona un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo sustancialmente como es mostrado en la Figura 4. Los picos mas prominentes de la Forma A son mostrados en la Tabla 1.

Tabla 1

Los picos más prominentes de la Difracción de rayos X en

polvo para la Forma A

Ángulo 2-Theta° (29): Conteo de intensidad Ángulo 2-Theta° (29) Conteo de intensidad

6.3: W 24.0 VS

7.1: S 24.7 S

8.7: S 25.5 S

10.2: M 26.1 M

10.6: M 26.4 VS

11.9: S 27.4 S

Los picos más prominentes de la Difracción de rayos X en

polvo para la Forma A

12.4: S 28.2 M

12.6: M 29.5 S

13.0: S 29.9 S

13.4: M 30.8 M

14.1: S 31.5 M

14.4: M 31.8 M

14.9: S 32.2 M

15.4: M 32.7 M

16.3: M 33.0 M

16.9: M 33.5 M

17.3: M 34.0 M

18.8: S 34.7 M

19.2: M 35.1 M

20.3: VS 35.5 M

20.5: VS 35.8 M

21.2: S 36.6 M

21.5: S 37.3 M

21.9: VS 38.3 M

22.7: M 39.2 M

23.0: S 39.7 M

23.5: S

En la Tabla 1 las siguientes abreviaturas son usadas: VS = muy fuerte; S = fuerte; M = medio yW=debil.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona la Forma A, donde dicha Forma A tiene un patr6n 5 de difracci6n de rayos X en polvo con al menos un pico especifico a alrededor de 2-theta = 26.4o.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona la Forma A, donde dicho Agente de la Forma A tiene un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo con al menos un pico especifico a alrededor de 2-theta = 26.4o, 14.9o

o 7.1o.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona la Forma A, donde dicha Forma A tiene un patr6n 10 de difracci6n derayos Xen polvo conpicosespecificosa alrededor de 2-theta = 26.4o, 14.9o y7.1o.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona la Forma A, donde dicha Forma A tiene un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo con al menos un pico especifico a alrededor de 2-theta = 26.4o, 24.0o, 14.9o, 12.4o o

7.1o.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona la Forma A, donde dicha Forma A tiene un patr6n 15 de difracci6n de rayos X en polvo con picos especificos a alrededor de 2-theta =26.4o, 24.0o, 14.9o, 12.4o y 7.1o.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona la Forma A, donde dicha Forma A tiene un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo con al menos un pico especifico a alrededor de 2-theta = 26.4o, 24.0 o, 23.0o, 21.2 o,

17.3o, 15.4o, 14.9o, 13.0o, 12.4o o 7.1o.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona la Forma A, donde dicha Forma A tiene un patr6n 20 de difracci6n de rayos X en polvo con picos especificos a alrededor de 2-theta = 26.4o, 24.0o, 23.0o, 21.2o, 17.3o, 15.4 o, 14.9o, 13.0o, 12.4o y 7.1o.

De acuerdo con otro aspecto de la invenci6n se proporciona la Forma A, donde dicha Forma A tiene un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo sustancialmente igual que el patr6n de difracci6n de rayos X en polvo mostrado en la Figura 4.

De manera adecuada la Forma A esta sustancialmente libre de otras formas de difumarato del Compuesto (I). Por ejemplo, al menos 80% del difumarato del Compuesto (I) esta en forma de la Forma A, particularmente al menos 90%, mas particularmente, al menos 95% y aun mas particularmente al menos 99% del difumarato del Compuesto (I) esta en forma de la Forma A. En una realizaci6n particular al menos 98% del difumarato del Compuesto (I) esta en forma de la Forma A. La referencia aqui a, por ejemplo, 80% del difumarato del Compuesto (I) que esta en forma de la Forma A, se refiere al % por peso del difumarato del Compuesto (I).

El Termograma DSC para la Forma A es mostrado en la Figura 5 aqui a continuaci6n. La Forma A, muestra una endoterma de fusi6n pronunciada con una temperatura de inicio de alrededor de 210.4oC, como se determin6 por el analisis de calorimetria diferencial de barrido (DSC) usando un aparato Mettler DSC820e como se describi6 en los Ejemplos. En correspondencia la Forma A tiene un punto de fusi6n de alrededor de 210oC.

Hemos encontrado que el difumarato del Compuesto (I) puede existir en otras formas cristalinas, por ejemplo las Formas B a Q descritas en los Ejemplos aqui. De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona difumarato del Compuesto (I) cristalino seleccionado de cualquiera de las Forma B a la Forma Q descritas aqui. De manera adecuada cada una de las formas del difumarato del Compuesto (I) cristalino descrito esta sustancialmente libre de otras formas del difumarato del Compuesto (I). Por ejemplo, al menos 80% del difumarato del Compuesto (I) esta en la forma deseada, particularmente al menos 90%, mas particularmente, al menos 95% y aun mas particularmente al menos 99% del difumarato del Compuesto (I) esta en la forma cristalina deseada del difumarato .

Las formas cristalinas del difumarato del Compuesto (I) descritas aqui son cristalinas. De manera adecuada el grado de cristalinidad como se determin6 por el dato de difracci6n de rayos X en polvo es por ejemplo mayor que alrededor de 60%, tal como mayor que alrededor de 80%, particularmente mayor que alrededor de 90% y mas particularmente mayor que alrededor de 95%. En realizaciones de la invenci6n, el grado de cristalinidad como se determin6 por el dato de difracci6n de rayos X en polvo es mayor que alrededor de 98%, donde el % de cristalinidad se refiere al % por peso de la masa de la muestra total que es cristalina.

En los parrafos precedentes que definen los picos de la difracci6n de rayos X en polvo para las formas cristalinas del Compuesto (I), el termino "a alrededor de" es usado en la expresi6n ".a alrededor de 2-theta =." para indicar que la posici6n precisa de los picos (es decir, los valores del angulo 2-theta citados) no deben ser construidos como valores absolutos porque, como sera apreciado por aquellos versados en el arte, la posici6n precisa de los picos puede variar ligeramente entre un aparato de medici6n y otro, de una muestra a otra, o como resultado de ligeras variaciones en las condiciones de medici6n utilizadas. Tambien se declar6 en los parrafos precedentes que la Forma A del difumarato del Compuesto (I) proporciona patrones de difracci6n de rayos X en polvo 'sustancialmente' iguales que los patrones de difracci6n de rayos X en polvo mostrados en la Figura 4, y tiene sustancialmente los picos mas prominentes (valores del angulo 2-theta) mostrados en la Tabla 1. Sera entendido que el uso del termino 'sustancialmente' en este contexto es tambien pretendido para indicar que los valores del angulo 2-theta de los patrones de difracci6n de rayos X en polvo pueden variar ligeramente de un aparato a otro, de una muestra a otra, o como resultado de ligeras variaciones en las condiciones de medici6n utilizadas, de manera que las posiciones de los picos mostradas en las Figuras o citadas en las Tablas otra vez no son construidas como valores absolutos.

En este sentido, es conocido en el arte que un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo puede ser obtenido el cual tiene uno o mas errores de medici6n dependiendo de las condiciones de medici6n (tal como equipo o maquina usada). En particular, es generalmente conocido que las intensidades en un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo pueden fluctuar dependiendo de las condiciones de medici6n y preparaci6n de la muestra. Por ejemplo, las personas versadas en el arte de la difracci6n de rayos X en polvo se percataran que la intensidad relativa de los picos puede ser afectada por, por ejemplo, granos de tamano por encima de 30 micrones y relaciones de aspecto no unitarios, que pueden afectar el analisis de las muestras. Las personas versadas se percataran tambien que la posici6n de las reflexiones puede ser afectada por la altura precisa a la cual se situa la muestra en el difract6metro y la calibraci6n cero del difract6metro. La planidad superficial de la muestra tambien puede tener un pequeno efecto. De ahi que una persona versada en el arte apreciara que el dato del patr6n de difracci6n presentado aqui no es construido como absoluto (para mas informaci6n vease Jenkins, R & Snyder, R.L. 'Introduction to X-Ray powder Diffractometry' John Wiley & Sons, 1996). Por lo tanto, sera entendido que las formas cristalinas del difumarato del Compuesto (I) descritas aqui no estan limitadas a los cristales que proporcionan patrones de difracci6n de rayos X en polvo identicos al patr6n de difracci6n de rayos X en polvo mostrado en la Figura 4, y cualquier cristal que proporcione patrones de difracci6n de rayos X en polvo sustancialmente iguales a aquellos mostrados en la Figura 4 caen dentro del alcance de la presente invenci6n. Una persona versada en el arte de la difracci6n de rayos X en polvo es capaz de juzgar la identidad sustancial de los patrones de difracci6n de rayos X en polvo.

Generalmente, un error de medici6n de un angulo de difracci6n en un difractograma de rayos X en polvo es de alrededor de 2-theta = 0.5° o menos, y tal grado de error de medici6n debe ser tomado en cuenta cuando se consideran los patrones de difracci6n de rayos X en polvo en las Figuras 1 y 4, y cuando se interpretan las posiciones de los picos referidas en el texto anterior y en la Tabla 1.

El punto de fusi6n y los datos DSC descritos aqui fueron determinados usando un aparato Mettler DSC820e, el uso del cual es descrito con mas detalles aqui a continuaci6n. Una persona versada en el arte apreciara que ligeras variaciones en el punto de fusi6n medido por DSC pueden ocurrir como resultado de variaciones en la pureza de la muestra, la

preparaci6n de la muestra y las condiciones de medici6n (por ejemplo, tasa de calentamiento). Sera apreciado que lecturas alternativas del punto de fusi6n pueden ser dadas por otros tipos de equipos o usando condiciones diferentes de aquellas descritas aqui a continuaci6n. De ahi que el punto de fusi6n y las Figuras de la endoterma citadas aqui no son tomados como valores absolutos y tales errores de medici6n son tomados en cuenta cuando se interpretan los datos de DSC. Tipicamente, el punto de fusi6n puede variar en ± 0.5oC o menos.

Las formas cristalinas del difumarato del Compuesto (I), tal como la Forma A de acuerdo con la invenci6n tambien pueden ser caracterizadas y/o distinguidas de otras formas fisicas usando otras tecnicas analiticas adecuadas, por ejemplo Espectroscopia NIR o espectroscopia de resonancia magnetica nuclear en estado s6lido.

La estructura quimica del difumarato del Compuesto (I) de la presente invenci6n puede ser confirmada por metodos de rutina por ejemplo analisis de resonancia magnetica nuclear de protones (NMR).

Sintesis del Compuesto (I)

El Compuesto (I) puede ser sintetizado usando los metodos descritos en WO2005/028469 o como es ilustrado en los Ejemplos aqui.

La WO2005/028469 divulga como Ejemplo 1 la preparaci6n del Compuesto (I)

como sigue:

2-Cloro-N-metilacetamida (32 mg, 0.3 mmol) fue anadida a una mezcla de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6[(piperidin-4-il)oxi]quinazolina (120 mg, 0.3 mmol), yoduro de potasio (16 mg, 0.1 mmol), y carbonato de potasio (50 mg, 0.36 mmol) en acetonitrilo (5 ml). La mezcla fue calentada a reflujo durante una hora. Despues de la evaporaci6n de los solventes bajo vacio, el residuo fue tomado en diclorometano. La soluci6n organica fue lavada con agua y salmuera, secada sobre sulfato de magnesio. Despues de la evaporaci6n de los solventes bajo vacio, el residuo fue purificado por cromatografia sobre gel de silice (eluente: 1% a 2% amoniaco metab6lico 7N en diclorometano) para dar el Compuesto (I).

Hemos encontrado que la reacci6n de 2-cloro-N-metilacetamida directamente con 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7metoxi-6-[(piperidin-4-il)oxi]quinazolina evita el uso de yoduro de potasio. Ademas, la cristalizaci6n del Compuesto (I) a partir de ciertos solventes proporciona el Compuesto (I) con alta pureza. Por lo tanto el nuevo proceso se espera que sea adecuado para la fabricaci6n a gran escala del Compuesto (I).

En correspondencia como un aspecto adicional de la presente invenci6n se proporciona un metodo para preparar el Compuesto (I) que comprende:

(i): reaccionar 2-cloro-N-metilacetamida con 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4-il)oxi]quinazolina dihidrocloruro en presencia de una base adecuada;

(ii): anadir un solvente seleccionado de etanol, agua y metanol, o una mezcla de los mismos a la mezcla de reacci6n del Paso (i) para efectuar la cristalizaci6n del Compuesto (I); y

(iii) aislar el Compuesto (I).

La reacci6n en el Paso (i) es convenientemente llevada a cabo en un solvente inerte adecuado tal como aquellos descritos en el Proceso (c) en la pagina 30 de la WO2005/028469. Por ejemplo, la reacci6n puede ser llevada a cabo usando acetonitrilo como el solvente. La reacci6n es llevada a cabo en presencia de una base adecuada, por ejemplo una de las bases descrita en el Proceso (c) en la pagina 30 de la WO2005/028469, tal como trietilamina. De manera adecuada la reacci6n es llevada a cabo a una elevada temperatura, por ejemplo a alrededor de 75oC.

En una realizaci6n en el Paso (ii) del proceso el solvente es agua. De manera adecuada en esta realizaci6n cuando el Paso (i) es llevado a cabo en acetonitrilo la relaci6n en volumen de agua:acetonitrilo es aproximadamente 1:3.

En otra realizaci6n de la invenci6n en el Paso (ii) del proceso el solvente es etanol. De manera adecuada en esta realizaci6n cuando el Paso (i) es llevado a cabo en acetonitrilo la relaci6n en volumen de etanol:acetonitrilo es aproximadamente 3.5:7.

En una realizaci6n adicional de la invenci6n en el Paso (ii) del proceso el solvente es una mezcla de etanol y agua. De manera adecuada en esta realizaci6n la relaci6n en volumen de etanol a agua es de alrededor de 20:1 a alrededor de 30:1, por ejemplo de alrededor de 21.9:1 a 25:1. Cuando el Paso (i) es llevado a cabo en acetonitrilo de manera adecuada aproximadamente 3.5 volumenes de etanol y 0.15 volumenes de agua son anadidos a 7 volumenes de acetonitrilo para efectuar la cristalizaci6n.

Como sera entendido la referencia a una relaci6n de volumen de por ejemplo agua:acetonitrilo siendo 1:3 significa que 1 volumen de agua es anadido a 3 volumenes del acetonitrilo presente en el recipiente de reacci6n despues del completamiento del Paso (i) del proceso.

En una realizaci6n, en el Paso (ii) del proceso la mezcla de reacci6n del Paso (i) es enfriada a alrededor de 70oC y etanol es anadido. La mezcla de reacci6n es entonces enfriada a alrededor de 45oC y el agua es anadida para efectuar la cristalizaci6n del Compuesto (I). Si se requiere, la mezcla de reacci6n puede ser sembrada con el Compuesto (I) para ayudar a iniciar la cristalizaci6n. La mezcla de reacci6n es entonces enfriada a alrededor de 20oC para completar la cristalizaci6n.

El aislamiento del Compuesto (I) en el Paso (iii) puede ser llevado a cabo usando metodos convencionales, por ejemplo filtraci6n y secado del Compuesto (I).

4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4-il)oxi]quinazolina dihidrocloruro usado como el material de partida puede ser preparado como se describi6 en los Ejemplos aqui. Por ejemplo, anadiendo acido clorhidrico a 6-{[(1tert-butoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina. Convenientemente la reacci6n es llevada a cabo en un solvente adecuado, por ejemplo etanol, acetonitrilo, tetrahidrofurano, 2-metiltetrahidrofurano, n-propanol, metanol, 1-butanol, acetato de etilo, tert-butil acetato, isopropanol o alcohol metilado industrial. Un solvente particular es etanol o mas particularmente alcohol metilado industrial.

6-{[(1-tert-butoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina puede ser preparada usando el metodo descrito en el Ejemplo 1 de la WO2005/028469 reaccionando 4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-6-hidroxi-7metoxiquinazolina con tert-Butil (4-metanosulfoniloxi)piperidina-1-carboxilato, donde la reacci6n es llevada a cabo en presencia de fluoruro de cesio usando DMA como un solvente y a una temperatura de 85oC.

Esta reacci6n tambien puede ser llevada a cabo en presencia de N-metilpirrolidona (NMP) en presencia de una base adecuada tal como carbonato de potasio. Esta reacci6n es de manera adecuada realizada a una elevada temperatura como se describi6 en los Ejemplos aqui.

Sin embargo, hemos encontrado que conduciendo la reacci6n en presencia de ciertos solventes proporciona el producto en buena forma. Ademas algunos de estos solventes se espera que sean adecuados para la fabricaci6n a gran escala del producto.

En correspondencia, como un aspecto adicional de la presente invenci6n se proporciona un proceso para la preparaci6n de 6-{[(1-tert-butoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina que comprende:

(i): reaccionar 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-6-hidroxi-7-metoxiquinazolina con tert-butil (4-metanosulfoniloxi)piperidina1-carboxilato en presencia de una base adecuada, donde la reacci6n es llevada a cabo en un solvente seleccionado de N-metilpirrolidona o un alcohol seleccionado de metanol, etanol, alcohol isopropilico, n-propanol y alcohol metilado industrial; y

(ii): cristalizar la 6-{[(1-tert-butoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina.

El Paso (i) de este proceso es llevado a cabo en presencia de una base adecuada, por ejemplo aquellas descritas en WO2005/028469, tal como carbonato de potasio. La reacci6n es de manera adecuada llevada a cabo a elevada temperatura convenientemente a la temperatura de reflujo.

Si se requiere, puede ser anadida agua a los solventes usados en el Paso (i) para ayudar al proceso, por ejemplo para aumentar la movilidad de la mezcla de reacci6n. En una realizaci6n el Paso (i) de la reacci6n es llevado a cabo en un alcohol seleccionado de metanol, etanol, alcohol isopropilico, n-propanol y alcohol metilado industrial, opcionalmente en presencia de agua. En una realizaci6n adicional la reacci6n Paso (i) es llevada a cabo en una mezcla de etanol y agua. Cuando una mezcla de etanol y agua es usada, la relaci6n en volumen de etanol a agua en el Paso (i) no es critica, por ejemplo una relaci6n de volumen de etanol a agua puede ser hasta alrededor de 10:2 es adecuada, tal como alrededor de 10:1.

La cristalizaci6n en el Paso (ii) del proceso es convenientemente llevada a cabo enfriando la mezcla de reacci6n del Paso (i) (por ejemplo enfriando a alrededor de 70oC) y anadiendo agua a la mezcla para efectuar la cristalizaci6n. El producto puede ser entonces aislado por metodos convencionales tal como aquellos descritos en los Ejemplos.

El Compuesto (I) tambien puede ser preparado de acuerdo con los procesos ilustrados en el Esquema de Reacci6n 1:

Pg1

H

NN

(ii) N (i) N

H+

NHO OO

Pg1

O O

O 1

N

3 O

(iii)

Lg1

N

H Lg2O OO N

N

NH H HN

N N

(vi)

(v)

Nitraci6n Reducci6n

N N

NO

O O O NH2

O NO2 O 64

(vi) DMF-DMA OO

N

N HH N

N H2N

Cl

F HN

N FOO N

(vii) ONO NN

Compuesto I

Esquema de Reacci6n 1

Notas en el Esquema de Reacci6n 1:

Paso (i): Lg1 es un grupo de salida adecuado, por ejemplo, un hal6geno, grupo alcanosulfoniloxi o arilsulfoniloxi, por

5 ejemplo un grupo cloro, bromo, metanosulfoniloxi, 4-nitrobencenosulfoniloxi o tolueno-4-sulfoniloxi (de manera adecuada un grupo metanosulfoniloxi, 4-nitrobencenosulfoniloxi o tolueno-4-sulfoniloxi, por ejemplo Lg1 es metanosulfoniloxi).

Pg1 es un grupo de protecci6n amina adecuado. Tales grupos son bien conocidos, por ejemplo como es descrito en cualquiera de los muchos textos generales sobre el tema, tal como, 'Protective Groups in Organic Synthesis' de

10 Theodora Green (publicado por: John Wiley & Sons). Ejemplos de grupos de protecci6n amino incluyen un grupo acil, por ejemplo un grupo alcanoil tal como acetil, un grupo alcoxicarbonil, por ejemplo un metoxicarbonil, etoxicarbonil o grupo tert -butoxicarbonil, un grupo arilmetoxicarbonil, por ejemplo benciloxicarbonil, o un grupo aroil, por ejemplo benzoil. Un ejemplo particular de Pg1 es tert-butoxicarbonil.

La reacci6n es de manera adecuada llevada a cabo en presencia de una base, por ejemplo un carbonato tal como

15 carbonato de potasio. La reacci6n es convenientemente llevada a cabo en presencia de un solvente inerte adecuado, por ejemplo un alcohol tal como isopropanol. La reacci6n es de manera adecuada llevada a cabo a elevada temperatura, convenientemente a la temperatura de reflujo del solvente.

Paso (ii): El grupo de protecci6n Pg1 es eliminado usando metodos convencionales. Por ejemplo cuando Pg1 es tertbutoxicarbonil este puede ser eliminado por tratamiento con un acido adecuado como acido clorhidrico, sulfurico o

20 fosf6rico o acido trifluoroacetico.

Paso (iii): Lg2 es un grupo de salida adecuado, por ejemplo, un hal6geno, tal como cloro. La reacci6n es de manera adecuada llevada a cabo en presencia de una base adecuada tal como un carbonato, una amina organica o un alc6xido. Las bases adecuadas incluyen carbonato de potasio o trietanolamina. La reacci6n es convenientemente llevada a cabo en presencia de un solvente inerte tal como acetonitrilo o un alcohol tal como etanol. La reacci6n es de manera adecuada realizada a una elevada temperatura, convenientemente la temperatura de reflujo del solvente.

Paso (iv): La nitraci6n puede ser efectuada usando metodos bien conocidos para la nitraci6n de anillos aromaticos, por ejemplo tratando la 2-[4-(5-Ciano-2-metoxifenoxi)piperidin-1-il]-N-metilacetamida (4) con acido nitrico en presencia de acido sulfurico usando condiciones bien conocidas para tales reacciones y como se ilustra en los Ejemplos.

Paso (v): Las reacciones de reducci6n adecuadas para reducir los grupos nitro a aminas son bien conocidos, por ejemplo por reducci6n en presencia de un agente reductor adecuado tal como ditionita de sodio. Esta reacci6n es de manera adecuada llevada a cabo en presencia de un solvente acuoso, por ejemplo metanol acuoso. La reacci6n es convenientemente realizada a elevada temperatura por ejemplo de 40 a 60oC. Como alternativa, la reducci6n puede ser efectuada por hidrogenaci6n, por ejemplo por hidrogenaci6n catalitica usando un catalizador adecuado tal como un catalizador de paladio sobre carbono, por ejemplo un catalizador 10% paladio sobre carbono. La hidrogenaci6n es convenientemente llevada a cabo en un solvente adecuado tal como metanol.

Paso (vi): 2-[4-(4-Amino-5-ciano-2-metoxifenoxi)piperidin-1-il]-N-metilacetamida (6) es reaccionada con N,Ndimetilformamida dimetil acetal. La reacci6n es convenientemente llevada a cabo en presencia de un solvente adecuado tal como un eter, por ejemplo, 2-metiltetrahidrofurano o un hidrocarburo aromatico tal como tolueno. La reacci6n es de manera adecuada realizada a una elevada temperatura, por ejemplo a alrededor de 70 a 105oC, de manera adecuada alrededor de 76oC.

Paso (vii)

La reacci6n es de manera adecuada llevada a cabo en presencia de un acido adecuado, tal como uno o mas acidos seleccionados de acido acetico, propanoico, succinico, fumarico y citrico. En un ejemplo el acido es acido acetico. La reacci6n es de manera adecuada llevada a cabo en presencia de un solvente inerte, por ejemplo un solvente de hidrocarburo aromatico tal como metoxibenceno. La reacci6n es de manera adecuada llevada a cabo a elevada temperatura, por ejemplo desde alrededor de 90 a alrededor de 120oC, de manera adecuada a alrededor de 90oC.

El proceso descrito en el Esquema de Reacci6n 1 forma un aspecto adicional de la presente invenci6n. En correspondencia, se proporciona un metodo para preparar el Compuesto (I) que comprende reaccionar 2-[4-(5-ciano4-{[(dimetilamino)metileno]amino}-2-metoxifenoxi)piperidin-1-il]-N-metilacetamida (7) con 3-cloro-2-fluoroanilina en presencia de un acido adecuado.

Las condiciones de reacci6n adecuadas son como las aqui anteriormente descritas en relaci6n con el Paso (vii) del Esquema de Reacci6n 1.

Algunos productos intermedios mostrados en el Esquema de Reacci6n 1 son nuevos y forman un aspecto adicional de la presente invenci6n. En correspondencia otro aspecto de la invenci6n proporciona un compuesto seleccionado de cualquiera de los compuestos 2, 3, 4, 5, 6 y 7 en el Esquema de Reacci6n 1, o una sal de los mismos; donde Pg1 es como se defini6 aqui anteriormente (por ejemplo tert-butoxicarbonil). Algunos de los productos intermedios tal como el compuesto (7) en el Esquema de Reacci6n 1 pueden tener centros isomericos geometricos (is6meros E y Z). Sera entendido que la presente invenci6n abarca todos esos is6meros geometricos y mezclas de los mismos.

Sintesis de la Forma A del difumarato del Compuesto (I)

De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invenci6n se proporciona un proceso para la preparaci6n del difumarato del Compuesto (I) (Forma A) que comprende:

(i): reaccionar el Compuesto (I) con una cantidad suficiente de acido fumarico para formar la sal de difumarato;

(ii): cristalizar la Forma A; y

(iii) aislar la Forma A.

Notas en el Paso (i)

Convenientemente la reacci6n con el acido fumarico es llevada a cabo en un solvente adecuado, por ejemplo, seleccionado de metanol, etanol, 1-butanol, 2-butanol y alcohol diacet6nico. La reacci6n tambien puede ser llevada a cabo en una mezcla de solventes adecuados, por ejemplo una mezcla seleccionada de metil etil cetona y dimetilformamida; metil etil cetona y tetrahidrofurano; metil etil cetona y metanol; metil etil cetona e isopropanol; etanol y dimetil sulf6xido; etanol y tetrahidrofurano; etanol e isopropanol; 1-butanol y dimetilformamida; 1-butanol y dimetil sulf6xido; 1-butanol y tetrahidrofurano; 1-butanol y metanol; 1-butanol e isopropanol; etilacetato y dimetilformamida; acetato de etilo y metanol; acetato de etilo e isopropanol; y metanol e isopropanol.

En una realizaci6n la reacci6n en el Paso (i) es llevada a cabo en agua.

En una realizaci6n la reacci6n en el Paso (i) es llevada a cabo en una mezcla de solventes que comprende metil etil cetona y un solvente seleccionado de dimetilformamida, tetrahidrofurano, metanol e isopropanol.

En otra realizaci6n la reacci6n en el Paso (i) es llevada a cabo en una mezcla de solventes que comprende etanol y un solvente seleccionado de dimetil sulf6xido, tetrahidrofurano e isopropanol.

En otra realizaci6n la reacci6n en el Paso (i) es llevada a cabo en una mezcla de solventes que comprende 1-butanol y un solvente seleccionado de dimetilformamida, dimetil sulf6xido, tetrahidrofurano, metanol e isopropanol.

En otra realizaci6n la reacci6n en el Paso (i) es llevada a cabo en una mezcla de solventes que comprende acetato de etilo y un solvente seleccionado de dimetil formamida, metanol e isopropanol.

En otra realizaci6n la reacci6n en el Paso (i) es llevada a cabo en una mezcla de solventes que comprende acetato de etilo e isopropanol.

En otra realizaci6n la reacci6n en el Paso (i) es llevada a cabo en una mezcla de solventes que comprende metanol e isopropanol.

En aquellas realizaciones donde el Paso (i) de la reacci6n es llevado a cabo en una mezcla de solventes que comprende metanol e isopropanol, la relaci6n en volumen de isopropanol a metanol esta de manera adecuada en el rango de alrededor de 3.4:1 a alrededor de 1.0:1, por ejemplo de alrededor de 1.5:1 a alrededor de 1.0:1. Esta reacci6n es de manera adecuada llevada a cabo a una elevada temperatura, por ejemplo a una temperatura por encima de 60oC, de manera adecuada desde 65oC a la temperatura de reflujo del solvente. Convenientemente el Compuesto (I) es disuelto o dispersado en el isopropanol y esta mezcla es reaccionada con una soluci6n o dispersi6n del acido fumarico en el metanol.

En aquellas realizaciones donde el Paso (i) de la reacci6n es llevado a cabo en una mezcla de solventes que comprende acetato de etilo e isopropanol, la relaci6n en volumen de acetato de etilo a isopropanol esta de manera adecuada en el rango de alrededor de 5.1:1 a 1.9:1, por ejemplo de alrededor de 3.9:1 a 1.9:1 tal como alrededor de

2.1:1. Esta reacci6n es de manera adecuada llevada a cabo a una temperatura de alrededor de 20 a alrededor de 73oC, por ejemplo a alrededor de 40oC. Convenientemente el Compuesto (I) es disuelto o dispersado en el acetato de etilo y esta mezcla es reaccionada con una soluci6n o dispersi6n de acido fumarico en el isopropanol. Como alternativa, el Compuesto (I) puede ser disuelto previamente en una mezcla de acetato de etilo e isopropanol. Si se requiere, el isopropanol puede ser eliminado despues de la disoluci6n del Compuesto (I) usando metodos convencionales tal como la destilaci6n.

Cuando se prepara la soluci6n o dispersi6n de acido fumarico en un alcohol tal como metanol o alcohol isopropilico, puede ser necesario calentar la mezcla para efectuar la disoluci6n del acido fumarico. Sin embargo, un calentamiento excesivo y/o mantener la mezcla a elevada temperatura durante periodos de tiempo prolongados debe ser evitado para minimizar la formaci6n del ester.

Generalmente en el Paso (i) del proceso el Compuesto (I) es reaccionado con al menos 2 equivalentes molares de acido fumarico, por ejemplo desde alrededor de 2 a alrededor de 3, particularmente alrededor de 2 a alrededor de 2.7 equivalentes molares de acido fumarico. Sin embargo, cantidades inferiores de acido fumarico pueden ser usadas en ciertos sistemas solventes. Por ejemplo, cuando la reacci6n es llevada a cabo en una mezcla de acetato de etilo e isopropanol hemos encontrado que el difumarato del Compuesto (I) puede ser preparado cuando la relaci6n molar de acido fumarico al Compuesto (I) es mayor que o igual a 1.725.

Notas en el Paso (ii)

La cristalizaci6n de la Forma A puede ser efectuada usando metodos conocidos para la cristalizaci6n de un compuesto de la soluci6n. Por ejemplo provocando la supersaturaci6n de la soluci6n que contiene la sal. La supersaturaci6n puede ser alcanzada, por ejemplo, enfriando la soluci6n, evaporando el solvente de la soluci6n o anadiendo un antisolvente adecuado a la soluci6n.

En una realizaci6n, la cristalizaci6n es efectuada enfriando la soluci6n. Por ejemplo, cuando el Paso (i) de la reacci6n es llevado a cabo en una mezcla de metanol e alcohol isopropilico, la mezcla de reacci6n es enfriada a alrededor de 30oC durante un periodo de alrededor de 90 minutos y es mantenida a 30oC durante alrededor de 30 minutos. La mezcla de reacci6n puede entonces ser enfriada adicionalmente durante un periodo de alrededor de 2 horas a una temperatura de alrededor de 0oC y es mantenida a la temperatura durante un tiempo suficiente para permitir el completamiento de la cristalizaci6n, por ejemplo alrededor de 1 hora.

Como alternativa, cuando el Paso (i) de la reacci6n es llevado a cabo en una mezcla de acetato de etilo e alcohol isopropilico, la mezcla de reacci6n es enfriada a alrededor de 20oC (por ejemplo desde alrededor de 40oC a alrededor de 20oC durante un periodo de alrededor de 1 hora). La mezcla de reacci6n es entonces mantenida a 20oC durante un tiempo suficiente para efectuar la cristalizaci6n. De manera adecuada, la mezcla de reacci6n es mantenida a alrededor de 20oC durante al menos 10 horas, por ejemplo durante alrededor de 13.5 horas.

En otra realizaci6n cuando el Paso(i) de la reacci6n es llevado a cabo en una mezcla de metanol e alcohol isopropilico, la cristalizaci6n puede ser efectuada eliminando una proporci6n del solvente para provocar la supersaturaci6n de la mezcla de reacci6n restante. El solvente puede ser eliminado por evaporaci6n o destilaci6n. De manera adecuada alrededor de 55 a 65% por peso del solvente es eliminado, por ejemplo alrededor de 62%. Si se requiere isopropanol adicional puede ser anadido a la mezcla despues de la destilaci6n de aproximadamente el mismo peso del solvente. Por ejemplo aproximadamente 50 a 60% de isopropanol adicional puede ser anadido a la mezcla, donde el % es el % por peso del solvente restante en el recipiente de reacci6n despues de la primera destilaci6n. Despues de la adici6n del isopropanol un peso similar de solvente es eliminado por destilaci6n. La cristalizaci6n puede ser completada anadiendo mas isopropanol y enfriando la mezcla a alrededor de 0oC durante un periodo de alrededor de 8 horas.

Generalmente la Forma A se auto cristalizara en el Paso (ii) del proceso, pero como sera apreciado por una persona versada en el arte, la siembra con la Forma A puede ser usada para promover la cristalizaci6n. Si se requiere, cristales semilla pudieran ser preparados usando el metodo descrito anteriormente e ilustrado en los Ejemplos para la preparaci6n de la Forma A del difumarato del Compuesto (I).

Notas en el Paso (iii)

Cualquier metodo adecuado conocido en el arte para aislar materiales cristalinos a partir de una soluci6n puede ser usado en el Paso (iii) del proceso. De manera adecuada, la Forma A es recogida por filtraci6n. Despues del aislamiento de la Forma A, la sal puede ser lavada con un solvente adecuado, por ejemplo isopropanol frio. Despues del aislamiento la Forma A puede ser secada usando metodos convencionales, por ejemplo secado al vacio.

En correspondencia en una realizaci6n de la invenci6n se proporciona un proceso para la preparaci6n del difumarato del Compuesto (I) (Forma A) que comprende:

(i) reaccionar una soluci6n o suspensi6n del Compuesto (I) en isopropanol con al menos 2 equivalentes molares de acido fumarico en metanol,

donde la relaci6n en volumen de isopropanol a metanol es desde 3.4:1 a alrededor de 1.0:1, por ejemplo de alrededor de 1.5:1 a alrededor de 1.0:1,

y donde la reacci6n es llevada a cabo a una temperatura de al menos 60oC;

(ii) cristalizar la Forma A; y

(iii) aislar la Forma A.

Condiciones adecuadas para la cristalizaci6n y aislamiento de la Forma A son como se defini6 aqui anteriormente.

En correspondencia en otra realizaci6n de la invenci6n se proporciona un proceso para la preparaci6n del difumarato del Compuesto (I) (Forma A) que comprende:

(i): reaccionar una soluci6n o suspensi6n del Compuesto (I) en acetato de etilo con al menos 1.725 equivalentes molares de acido fumarico en isopropanol (de manera adecuada al menos 2 equivalentes molares de acido fumarico),

donde la relaci6n en volumen de acetato de etilo a isopropanol es de manera adecuada desde alrededor de 5:1 a 1:1, por ejemplo de alrededor de 5.1:1 a 1.9:1 tal como alrededor de 2.1:1 y donde la reacci6n es llevada a cabo a una temperatura de alrededor de 20 a alrededor de 73oC (por ejemplo alrededor de 40oC);

(ii): enfriar la mezcla de reacci6n del Paso (i) a alrededor de 20oC y mantener la mezcla a esta temperatura para efectuar la cristalizaci6n de la Forma A; y

(iii) aislar la Forma A del difumarato del Compuesto (I).

Las condiciones adecuadas para el aislamiento de la Forma A son como se defini6 aqui anteriormente.

En otra realizaci6n de la invenci6n se proporciona un proceso para la preparaci6n del difumarato del Compuesto (I) (Forma A) que comprende:

(i): reaccionar el Compuesto (I) en agua con al menos 2 equivalentes molares de acido fumarico (por ejemplo al menos 2.05, tal como alrededor de 2.1 equivalentes molares de acido fumarico), y donde la reacci6n es llevada a cabo a alrededor de 85oC;

(ii): enfriar la mezcla de reacci6n del Paso (i) a alrededor de 60oC; y

(iii) aislar la Forma A del difumarato del Compuesto (I).

De manera adecuada en el Paso (ii) la mezcla de reacci6n es enfriada lentamente a alrededor de 60oC, por ejemplo a una tasa de enfriamiento de alrededor de 1oC/minuto. Si se requiere, la cristalizaci6n de la Forma A puede ser inducida anadiendo cristales semilla de la Forma A durante el enfriamiento de la mezcla. De manera adecuada los cristales

semilla de la Forma A son anadidos cuando la mezcla de reacci6n ha ido enfriada a alrededor de 77oC. Las condiciones adecuadas para el aislamiento de la Forma A en el Paso (iii) son como las descritas aqui anteriormente.

Las Formas B a P del difumarato cristalino del Compuesto (I) pueden ser preparadas, por ejemplo, mediante los metodos descritos aqui en los Ejemplos.

Composiciones Farmacéuticas

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona una composici6n farmaceutica que comprende difumarato del Compuesto (I) en asociaci6n con un diluente o portador farmaceuticamente aceptable. El difumarato del Compuesto (I) puede ser usado en la composici6n en cualquiera de las formas descritas aqui, por ejemplo la Forma A.

Las composiciones de la invenci6n pueden estar en una forma adecuada para uso oral (por ejemplo como tabletas, pildoras, capsulas duras o blandas, suspensiones acuosas o aceitosas, emulsiones, polvos o granulos dispersables, siropes o elixires), para uso t6pico (por ejemplo como cremas, unguentos, geles, o soluciones o suspensiones acuosas

o aceitosas), para administraci6n por inhalaci6n (por ejemplo como un polvo finamente dividido o un aerosol liquido), para administraci6n por insuflaci6n (por ejemplo como un polvo finamente dividido) o para administraci6n parenteral (por ejemplo como una soluci6n esteril acuosa o aceitosa para dosificaci6n intravenosa, subcutanea o intramuscular o como un supositorio para dosificaci6n rectal).

Las composiciones de la invenci6n pueden ser obtenidas por procedimientos convencionales usando excipientes farmaceuticos convencionales, bien conocidos en el arte. Asi, las composiciones pretendidas para uso oral pueden contener, por ejemplo, uno o mas agentes colorantes, edulcorantes, saborizantes y/o preservantes.

Por ejemplo el difumarato del Compuesto (I) es de manera adecuada formulado como una tableta usando los siguientes excipientes:

Núcleo de la Tableta:

difumarato del Compuesto (I) (por ejemplo Forma A);

lactosa;

celulosa microcristalina;

crospovidona;

polividona (PVP); y

estearato de magnesio

El nucleo de la tableta puede ser recubierto con un recubrimiento de pelicula, tal como un recubrimiento de pelicula basado en HPMC, dicho recubrimiento opcionalmente contiene uno o mas agentes colorantes y/o protectores de la luz.

Las tabletas pueden ser preparadas usando metodos convencionales y como se ilustra en los Ejemplos. Si se requiere, el difumarato del Compuesto (I) se puede moler antes de ser formulado como la tableta para proporcionar una distribuci6n uniforme de tamanos de particula del difumarato del Compuesto (I) en la tableta. Por ejemplo, el difumarato del Compuesto (I) se puede moler para proporcionar un tamano de particula medio de aproximadamente 5 !m. Los metodos de molienda adecuados son bien conocidos.

La cantidad de ingrediente activo que es combinado con uno o mas excipientes para producir una forma de dosificaci6n unica necesariamente variara dependiendo del hospedero tratado y la ruta de administraci6n particular. Por ejemplo, una formulaci6n pretendida para administraci6n oral a humanos generalmente contendra, por ejemplo, de 0.5 mg a 0.5 g de agente activo (de manera mas adecuada de 0.5 a 200 mg, por ejemplo de 1 a 30 mg) compuesto con una cantidad apropiada y conveniente de excipientes que puede variar desde alrededor de 5 a alrededor de 98 por ciento por peso de la composici6n total.

El tamano de la dosis para prop6sitos terapeuticos o profilacticos del difumarato del Compuesto (I) naturalmente variara de acuerdo con la naturaleza y gravedad de las afecciones, la edad y sexo del animal o paciente y la ruta de administraci6n, de acuerdo con principios bien conocidos de medicina.

Al usar el difumarato del Compuesto (I) para prop6sitos terapeuticos o profilacticos este generalmente sera administrado de manera que una dosis diaria en el rango, por ejemplo, de 0.1 mg/kg a 75 mg/kg peso corporal sea recibida, administrandolo si se requiere, en dosis divididas. En general dosis inferiores seran administradas cuando se emplee una ruta parenteral. Asi, por ejemplo, para administraci6n intravenosa, una dosis en el rango, por ejemplo, de 0.1 mg/kg a 30 mg/kg peso corporal sera generalmente usada. De manera similar, para la administraci6n por inhalaci6n, una dosis en el rango, por ejemplo, de 0.05 mg/kg a 25 mg/kg peso corporal sera usada. La administraci6n oral es sin embargo preferida, particularmente en forma de tableta. Por ejemplo, el difumarato del Compuesto (I) puede ser administrado a un animal de sangre caliente oralmente, a una dosis unitaria menor que 1g diariamente pero mayor que

1mg. Particularmente el difumarato del Compuesto (I) puede ser administrado a un animal de sangre caliente, a una dosis unitaria menor que 250 mg por dia. En otro aspecto de la invenci6n, el difumarato del Compuesto (I) puede ser administrado a un animal de sangre caliente, a una dosis unitaria menor que 160 mg por dia. En un aspecto adicional de la invenci6n, el difumarato del Compuesto (I) puede ser administrado a un animal de sangre caliente, a una dosis unitaria menor que 50 mg por dia. La dosis de difumarato del Compuesto (I) puede ser administrada como una dosis unica diaria o como multiples fracciones de la dosis total diaria. Por ejemplo, la dosis total diaria de difumarato del Compuesto (I) puede ser administrada como dos dosis, que pueden ser iguales o diferentes. De manera adecuada sin embargo, cada fracci6n de la dosis total diaria seria aproximadamente igual. A modo de ejemplo el difumarato del Compuesto (I) puede ser administrado como una o mas formas de dosificaci6n orales tales como una tableta o capsula conteniendo 1.5, 3.7, 14.9, 59.6 6 149 mg de difumarato del Compuesto (I) (equivalente a 1, 2.5, 10, 40 o 100 mg de la forma libre del Compuesto (I)). En una realizaci6n adicional, se administra dos veces al dia una dosis de difumarato del Compuesto (I) equivalente a 40, 80, 100, 160, 200 6 240 mg de Compuesto (I). En una realizaci6n particular, se administra dos veces al dia una dosis de difumarato del Compuesto (I) equivalente a 160 mg de Compuesto (I). En una realizaci6n particular, se administra dos veces al dia una dosis de difumarato del Compuesto (I) equivalente a 200 mg de Compuesto (I). En otra realizaci6n particular, se administra dos veces al dia una dosis de difumarato del Compuesto

(I) equivalente a 240 mg de Compuesto (I).

Ensayos Biológicos

Las actividades inhibidoras del Compuesto (I) y del difumarato del Compuesto (I) pueden ser medidas en los ensayos descritos en laWO2005/028469 o como se describi6 en los Ejemplos aqui.

Los compuestos de la presente invenci6n poseen propiedades antiproliferativas tal como propiedades anticancerosas que se cree que surgen de su actividad inhibidora de la tirosina quinasa del receptor de la familia de erbB, y particularmente un perfil erbB2/ EGF y/o erbB3/EGF mezclado.

En correspondencia, los compuestos de la presente invenci6n se espera que sean utiles en el tratamiento de enfermedades o afecciones medicas mediadas solo o en parte por el receptor erbB de las tirosina quinasas, es decir, los compuestos pueden ser usados para producir un efecto inhibidor de la tirosina quinasa del receptor erbB en un animal de sangre caliente en necesidad de tal tratamiento. Asi los compuestos de la presente invenci6n proporcionan un metodo para el tratamiento de celulas malignas caracterizado por la inhibici6n de uno o mas del receptor de las tirosina quinasas de la familia de erbB. Particularmente los compuestos de la invenci6n pueden ser usados para producir un efecto antiproliferativo y/o proapopt6tico y/o antiinvasivo mediado solo o en parte por la inhibici6n del receptor erbB de las tirosina quinasas. Particularmente, los compuestos de la presente invenci6n se espera que sean utiles en la prevenci6n o tratamiento de aquellos tumores que son sensibles a la inhibici6n de uno o mas receptores erbB de las tirosina quinasas, que estan involucrados en los Pasos de transducci6n de la senal que conduce a la proliferaci6n y supervivencia de estas celulas tumorales. En correspondencia los compuestos de la presente invenci6n se espera que sean utiles en el tratamiento de la soriasis, hiperplasia prostatica benigna (BPH), aterosclerosis y restenosis y/o cancer proporcionando un efecto antiproliferativo, particularmente en el tratamiento de los canceres sensibles al receptor erbB de la tirosina quinasa. Tales tumores benignos o malignos pueden afectar cualquier tejido e incluyen los tumores no s6lidos tales como leucemia, mieloma multiple o linfoma, y tambien tumores s6lidos, por ejemplo canceres del conducto biliar, hueso, vejiga, cerebro/CNS, mama, colorrectal, endometrial, gastrico, de cabeza y cuello, hepatico, de pulm6n, neuronal, esofagico, de ovario, pancreatico, de pr6stata, renal, piel, testicular, de tiroides, uterino y vulval.

Cuando se habla del cancer, particularmente se refiere al cancer esofagico, mieloma, hepatocelular, pancreatico, cancer cervical, tumor de Ewing, neuroblastoma, sarcoma de Kaposi, cancer de ovario, cancer de mama, cancer colorrectal, cancer de pr6stata, cancer de vejiga, melanoma, cancer de pulm6n - cancer de pulm6n de celulas no pequenas (NSCLC), y cancer de pulm6n de celulas pequenas (SCLC), cancer gastrico, cancer de cabeza y cuello, cancer de cerebro, cancer renal, linfoma y leucemia. En una realizaci6n se refiere al cancer de mama, por ejemplo cancer de mama positivo al receptor hormonal. En otra realizaci6n el cancer se refiere a SCLC, NSCLC, cancer colorrectal, cancer de ovario y/o cancer de mama. En otra realizaci6n el cancer se refiere a SCLC. En otra realizaci6n el cancer se refiere a cancer gastrico. Ademas, se refiere a NSCLC. Ademas, se refiere al cancer colorrectal. Ademas, se refiere al cancer de ovario. Ademas, mas particularmente se refiere al cancer de mama. Ademas, mas particularmente se refiere al cancer de mama positivo al receptor hormonal, especialmente al cancer de mama positivo al receptor hormonal en mujeres postmenopausicas. En una realizaci6n se refiere al cancer de mama positivo al receptor hormonal no metastasico en estadio temprano, por ejemplo cancer de mama positivo al receptor hormonal no metastasico en estadio temprano en mujeres postmenopausicas. Aun ademas se refiere al cancer de mama positivo al receptor de estr6geno y/o progesterona no metastasico en estadio temprano, especialmente al cancer de mama positivo al receptor de estr6geno y/o progesterona no metastasico en estadio temprano en mujeres postmenopausicas. Ademas, mas particularmente se refiere al cancer de mama positivo al receptor hormonal metastasico, especialmente a cancer de mama positivo al receptor hormonal metastasico en mujeres postmenopausicas. Aun ademas se refiere al cancer de mama positivo al receptor de estr6geno y/o progesterona metastasico, especialmente al cancer de mama positivo al receptor de estr6geno y/o progesterona metastasico en mujeres postmenopausicas. Ademas, se refiere al cancer de vejiga, cancer esofagico, cancer gastrico, melanoma, cancer cervical y/o cancer renal. Ademas se refiere al cancer endometrial, higado, est6mago, de tiroides, rectal y/o de cerebro. En otra realizaci6n de la invenci6n, particularmente el cancer esta en un estado no mestastasico. En otra realizaci6n de la invenci6n, particularmente el cancer esta en un estado mestastasico. En una realizaci6n adicional de la invenci6n, particularmente el cancer esta en un estado mestastasico, y

mas particularmente el cancer produce metastasis en la piel. En una realizaci6n adicional de la invenci6n, particularmente el cancer esta en un estado mestastasico, y mas particularmente el cancer produce mestastasis linfatica. En una realizaci6n adicional de la invenci6n, particularmente el cancer esta en un estado mestastasico, y mas particularmente el cancer produce mestastasis cerebral.

Cuando se habla de tratamiento del cancer se refiere particularmente este es el tratamiento de tumores cancerosos que expresan uno o mas receptores de la familia de erbB, por ejemplo los receptores EFGR, erbB2 y/o erbB3. El efecto anticanceroso del difumarato del Compuesto (I) de acuerdo con la invenci6n puede ser medido en terminos de uno o mas de efecto antitumoral, la extensi6n de la respuesta (por ejemplo volumen del tumor reducido o peso del tumor reducido), la velocidad de respuesta, la tasa de beneficio clinico (la suma de la respuesta completa, respuesta parcial y enfermedad estable) el tiempo de progreso de la enfermedad, supervivencia sin progreso y la tasa de supervivencia total. Tales puntos finales del ensayo clinico son bien conocidos y son descritos en por ejemplo la publicaci6n de FDA "Guidance for Industry Clinic Trial Endpoints for the Approval of Cancer Drugs and Biologics" Mayo 2007 (www.fda.gov/CbER/gdlns/clintrialend.htm). Los efectos antitumorales del difumarato del Compuesto (I) de acuerdo con la invenci6n pueden ser por ejemplo, uno o mas de inhibici6n del crecimiento del tumor, retraso en el crecimiento del tumor, regresi6n del tumor, contracci6n del tumor, aumento de tiempo para el recrecimiento del tumor cuando cesa el tratamiento o ralentizaci6n del progreso de la enfermedad.

El uso del difumarato del Compuesto (I) tambien puede tener un efecto benefico en la prevenci6n del inicio del cancer en animales de sangre caliente, tal como el hombre.

De acuerdo con este aspecto de la invenci6n se proporciona difumarato del Compuesto (I), para su uso como un medicamento.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona difumarato del Compuesto (I), para su uso en la producci6n de un efecto antiproliferativo en un animal de sangre caliente tal como el hombre.

Asi de acuerdo con este aspecto de la invenci6n se proporciona el uso de difumarato del Compuesto (I) en la fabricaci6n de un medicamento para su uso en la producci6n de un efecto antiproliferativo en un animal de sangre caliente tal como el hombre.

De acuerdo con una caracteristica adicional de este aspecto de la invenci6n se proporciona un metodo para producir un efecto antiproliferativo en un animal de sangre caliente, tal como el hombre, en necesidad de tal tratamiento que comprende administrar a dicho animal una cantidad efectiva del difumarato del Compuesto (I).

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona difumarato del Compuesto (I), para su uso en la prevenci6n o tratamiento de aquellos tumores que son sensibles a la inhibici6n del receptor erbB de las tirosina quinasas, tal como una combinaci6n de EGFR y erbB2 y/o EGFR y erbB3, que estan involucrados en la transducci6n de la senal que conducen a la proliferaci6n de celulas tumorales.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona el uso de difumarato del Compuesto (I) en la fabricaci6n de un medicamento para su uso en la prevenci6n o tratamiento de aquellos tumores que son sensibles a la inhibici6n del receptor erbB de las tirosina quinasas, tal como una combinaci6n de EGFR y erbB2 y/o EGFR y erbB3, que estan involucrados en los Pasos de transducci6n de la senal que conducen a la proliferaci6n de celulas tumorales.

De acuerdo con una caracteristica adicional de este aspecto de la invenci6n se proporciona un metodo para la prevenci6n o tratamiento de aquellos tumores que son sensibles a la inhibici6n de uno o mas de receptores de las tirosina quinasas de la familia de erbB, tal como una combinaci6n de EGFR y erbB2 y/o EGFR y erbB3, que estan involucrados en los Pasos de transducci6n de la senal que conducen a la proliferaci6n y/o supervivencia de las celulas tumorales que comprende administrar a dicho animal una cantidad efectiva del difumarato del Compuesto (I).

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona el uso del difumarato del Compuesto (I) en la fabricaci6n de un medicamento para su uso en proporcionar un efecto inhibidor de la tirosina quinasa de EGFR y erbB2 combinado.

De acuerdo con una caracteristica adicional de este aspecto de la invenci6n se proporciona un metodo para proporcionar un efecto inhibidor de la tirosina quinasa de EGFR y erbB2 combinado que comprende administrar a dicho animal una cantidad efectiva del difumarato del Compuesto (I).

De acuerdo con una caracteristica adicional de este aspecto de la invenci6n se proporciona difumarato del Compuesto (I), para su uso en proporcionar un efecto inhibidor de la tirosina quinasa de EGFR y erbB2 combinado.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona el uso del difumarato del Compuesto (I) en la fabricaci6n de un medicamento para su uso en proporcionar un efecto inhibidor de la tirosina quinasa en dos o mas receptores seleccionados de EGFR, erbB2 y erbB3.

De acuerdo con una caracteristica adicional de este aspecto de la invenci6n se proporciona un metodo para proporcionar un efecto inhibidor de la tirosina quinasa en dos o mas receptores seleccionados de EGFR, erbB2 y erbB3, que comprende administrar a dicho animal una cantidad efectiva del difumarato del Compuesto (I).

De acuerdo con una caracteristica adicional de este aspecto de la invenci6n se proporciona difumarato del Compuesto (I), para su uso en proporcionar un efecto inhibidor de la tirosina quinasa en dos o mas receptores seleccionados de EGFR, erbB2 y erbB3.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona el uso de difumarato del Compuesto (I) en la fabricaci6n de un medicamento para su uso en el tratamiento de una afecci6n (por ejemplo un tumor) mediada totalmente o en parte por la fosforilaci6n de un heterodimero de erbB2/erbB3.

De acuerdo con una caracteristica adicional de este aspecto de la invenci6n se proporciona el uso en un metodo para el tratamiento de una afecci6n (por ejemplo un tumor) mediada totalmente o en parte por la fosforilaci6n de un heterodimero de erbB2/erbB3, que comprende administrar a dicho animal una cantidad efectiva del difumarato del Compuesto (I).

De acuerdo con una caracteristica adicional de este aspecto de la invenci6n se proporciona difumarato del Compuesto (I), para su uso en el tratamiento de una afecci6n (por ejemplo un tumor) mediada totalmente o en parte por la fosforilaci6n de un heterodimero de erbB2/erbB3.

De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invenci6n se proporciona el uso de difumarato del Compuesto (I) en la fabricaci6n de un medicamento para su uso en el tratamiento de un cancer (por ejemplo un cancer seleccionado de leucemia, mieloma multiple, linfoma, cancer del conducto biliar, de hueso, de vejiga, de cerebro/CNS, de mama, colorrectal, endometrial, gastrico, de cabeza y cuello, hepatico, de pulm6n (particularmente cancer de pulm6n de celulas no pequenas), neuronal, esofagico, de ovario, pancreatico, de pr6stata, renal, de piel, testicular, de tiroides, uterino y vulval y particularmente un cancer seleccionado de cancer de mama, gastrico, colorrectal, de cabeza y cuello, de ovario y pulm6n, mas particularmente cancer de mama).

De acuerdo con una caracteristica adicional de este aspecto de la invenci6n se proporciona el uso en un metodo para tratar un cancer (por ejemplo un cancer seleccionado de leucemia, mieloma multiple, linfoma, cancer del conducto biliar, de hueso, de vejiga, cerebro/CNS, de mama, colorrectal, endometrial, gastrico, de cabeza y cuello, hepatico, de pulm6n (particularmente cancer de pulm6n de celulas no pequenas), neuronal, esofagico, de ovario, pancreatico, de pr6stata, renal, de piel, testicular, de tiroides, uterino y vulval y particularmente un cancer seleccionado de cancer de mama, gastrico, colorrectal, de cabeza y cuello, de ovario y de pulm6n, mas particularmente cancer de mama en un animal de sangre caliente, tal como el hombre, en necesidad de tal tratamiento, que comprende administrar a dicho animal una cantidad efectiva del difumarato del Compuesto (I).

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona difumarato del Compuesto (I), para su uso en el tratamiento de un cancer (por ejemplo seleccionado de leucemia, mieloma multiple, linfoma, cancer del conducto biliar, de hueso, de vejiga, de cerebro/CNS, de mama, colorrectal, endometrial, gastrico, de cabeza y cuello, hepatico, de pulm6n (particularmente cancer de pulm6n de celulas no pequenas), neuronal, esofagico, de ovario, pancreatico, de pr6stata, renal, de piel, testicular, de tiroides, uterino y vulval y particularmente un cancer seleccionado de cancer de mama, gastrico, colorrectal, de cabeza y cuello, de ovario y de pulm6n, mas particularmente cancer de mama).

Como se mencion6 anteriormente el tamano de la dosis requerida para el tratamiento terapeutico o profilactico de una enfermedad particular necesariamente sera variado dependiendo de, entre otras cosas, el hospedero tratado, la ruta de administraci6n y la gravedad de la enfermedad que esta siendo tratada.

De acuerdo con un aspecto adicional de la invenci6n se proporciona una composici6n farmaceutica que comprende el difumarato del Compuesto (I), en asociaci6n con un diluente o portador farmaceuticamente aceptable para su uso en el tratamiento de un cancer

Para evitar dudas, cuando el tratamiento del cancer es indicado, sera entendido que este tambien se refiere a la prevenci6n de la mestastasis y el tratamiento de la mestastasis, es decir, el cancer diseminado. Por lo tanto el Compuesto (I) y el difumarato del Compuesto (I) de la presente invenci6n pueden ser usados para tratar un paciente que no tiene mestastasis para detener que ocurra, o para alargar el periodo de tiempo antes que esto ocurra, y para un paciente que ya tiene mestastasis para tratar la mestastasis en si misma. Ademas el tratamiento del cancer tambien se refiere al tratamiento de un tumor primario o tumores establecidos y tumor primario o tumores en desarrollo. En un aspecto de la invenci6n el tratamiento del cancer se relaciona con la prevenci6n de la mestastasis. En otro aspecto de la invenci6n el tratamiento del cancer se relaciona con el tratamiento de la mestastasis. En otro aspecto de la invenci6n el tratamiento del cancer se relaciona con el tratamiento de un tumor primario o tumores establecidos o tumor primario o tumores en desarrollo. En una realizaci6n el tratamiento del cancer se relaciona con un tratamiento adyuvante. En otra realizaci6n el tratamiento del cancer se refiere al tratamiento neoadyuvante del cancer. En correspondencia en una realizaci6n de la invenci6n el difumarato del Compuesto (I) de acuerdo con la invenci6n es usado como un tratamiento adyuvante del cancer de mama sensible a las hormonas, particularmente como un tratamiento adyuvante del cancer de mama positivo al receptor de estr6geno en mujeres postmenopausicas. En otra realizaci6n de la invenci6n el difumarato del Compuesto (I) de acuerdo con la invenci6n es usado como un tratamiento neoadyuvante del cancer de mama

sensible a las hormonas, particularmente como un tratamiento neoadyuvante del cancer de mama sensible al receptor de estr6geno y/o progesterona en mujeres postmenopausicas. En otra realizaci6n el difumarato del Compuesto (I) es usado para tratar el cancer de mama sensible a las hormonas (positivo al receptor de estr6geno y/o progesterona), avanzado (metastasico) particularmente el cancer positivo al receptor de estr6geno avanzado en mujeres postmenopausicas.

En una realizaci6n adicional el difumarato del Compuesto (I) de acuerdo con la invenci6n puede ser usado como una terapia neoadyuvante en el tratamiento del cancer de mama sensible a las hormonas en pacientes. En otra realizaci6n el difumarato del Compuesto (I) de acuerdo con la invenci6n no es usado como un tratamiento neoadyuvante.

El termino "terapia adyuvante" se refiere a un tratamiento dado despues de la eliminaci6n del tumor primario. Cuando el cancer es cancer de mama, la eliminaci6n del tumor primario puede ser efectuada, por ejemplo, mediante cirugia (por ejemplo lumpectomia o mastectomia) y/o radioterapia.

El termino "terapia neoadyuvante" se refiere a un tratamiento dado antes de la eliminaci6n del tumor primario mediante cirugia o radioterapia.

Aqui, el tratamiento del cancer tambien se refiere a la prevenci6n del cancer per se.

En una realizaci6n de la invenci6n el difumarato del Compuesto (I) es usado en combinaci6n con un agente endocrino adecuado para su uso en el tratamiento del cancer de mama. Por ejemplo, una combinaci6n del difumarato del Compuesto (I) y un agente endocrino seleccionado de un inhibidor de aromatasa, un modulador del receptor de estr6geno selectivo, un agonista LHRH y regulador hacia abajo del receptor de estr6geno. Por ejemplo, una combinaci6n del difumarato del Compuesto (I) y un inhibidor de aromatasa. Por ejemplo una combinaci6n del difumarato del Compuesto (I) y tamoxifeno. Por ejemplo una combinaci6n del difumarato del Compuesto (I) y anastrozol. Por ejemplo una combinaci6n del difumarato del Compuesto (I) y letrozol. Por ejemplo una combinaci6n del difumarato del Compuesto (I) y exemestano. La combinaci6n del difumarato del Compuesto (I) y una terapia endocrina puede ser particularmente adecuada para su uso en el tratamiento del cancer de mama como es descrito aqui. Por ejemplo, la combinaci6n puede ser util en el tratamiento de cancer de mama positivo al estr6geno y/o progesterona metastasico. Como alternativa la combinaci6n puede ser util como un tratamiento adyuvante del cancer de mama, particularmente como un tratamiento adyuvante del cancer de mama positivo al estr6geno y/o progesterona. La combinaci6n tambien puede ser util en el tratamiento del cancer de mama positivo al estr6geno y/o progesterona en pacientes que no han recibido terapia endocrina previa (por ejemplo un modulador del receptor de estr6geno selectivo tal como tamoxifeno, un inhibidor de aromatasa tal como anastrozol o regulador hacia abajo del receptor de estr6geno).

En correspondencia, en una realizaci6n de la invenci6n se proporciona un metodo para el tratamiento de cancer de mama positivo al estr6geno y/o progesterona avanzado (metastasico) en un animal de sangre caliente, tal como el hombre, en necesidad de tal tratamiento, que comprende administrar a dicho animal una cantidad efectiva del difumarato del Compuesto (I) en combinaci6n con una cantidad efectiva de un inhibidor de aromatasa tal como anastrozol,

donde dicho animal no ha sido previamente tratado con una terapia endocrina tal como por ejemplo, a modulador del receptor de estr6geno selectivo tal como tamoxifeno, un inhibidor de aromatasa tal como anastrozol o regulador hacia abajo del receptor de estr6geno.

En otra realizaci6n de la invenci6n se proporciona el uso en un metodo para el tratamiento de cancer de mama positivo al estr6geno y/o progesterona no metastasico en un animal de sangre caliente, tal como el hombre, en necesidad de tal tratamiento, que comprende administrar a dicho animal una cantidad efectiva del difumarato del Compuesto (I) en combinaci6n con una cantidad efectiva de un inhibidor de aromatasa tal como anastrozol,

donde dicho animal no ha sido previamente tratado con una terapia endocrina tal como por ejemplo, un modulador del receptor de estr6geno selectivo tal como tamoxifeno, un inhibidor de aromatasa tal como anastrozol o regulador hacia abajo del receptor de estr6geno. En esta realizaci6n la combinaci6n es de manera adecuada administrada como un tratamiento adyuvante.

En las dos realizaciones anteriores para el tratamiento del cancer de mama, el animal de sangre caliente es de manera adecuada una mujer post-menopausica. El termino "post-menopausia" incluye a las mujeres que son postmenopausicas de manera natural y las mujeres donde la menopausia ha sido inducida, por ejemplo, mediante tratamiento con un agonista LHRH tal como goserelina. Sera entendido que donde se declare aqui que un paciente "no ha sido previamente tratado con una terapia endocrina", se pretende que el tratamiento de un paciente con un agonista LHRH para inducir la menopausia temprana en el paciente no sea considerado como "previamente tratado con una terapia endocrina". En correspondencia, los pacientes que han sido tratados con un agonista LHRH para inducir la menopausia temprana no estan excluidos de aquellas realizaciones que son descritas aqui como no siendo "tratado con una terapia endocrina".

En otra realizaci6n el difumarato del Compuesto (I) es usado en combinaci6n con un taxano tal como paclitaxel o docetaxel. Esta combinaci6n puede ser util en el tratamiento del cancer de mama. Por ejemplo, en el tratamiento de un cancer de mama (de un cancer de mama especialmente avanzado o metastasico) que tiene una baja sobreexpresi6n de

erbB2. El termino "baja sobreexpresi6n de erbB2" se refiere a tumores que son negativos a la hibridaci6n in-situ fluorescente (FISH) con Her2. Los tumores particulares que son de "baja sobreexpresi6n de erbB2" son aquellos que:

(i): Her2 + por inmunohistoquimica (IHC); y/o

(ii): Her2 ++ por IHC y negativo a la hibridaci6n in-situ fluorescente (FISH) con Her2.

En correspondencia en una realizaci6n particular de la invenci6n el difumarato del Compuesto (I) es usado en combinaci6n con un taxano tal como paclitaxel o docetaxel en el tratamiento de un cancer con baja sobreexpresi6n de erbB2 seleccionado de uno o mas de:

(a): un cancer de mama que es Her2 FISH negativo;

(b): un cancer de mama que es Her2+ por IHC; y

(c): un cancer de mama que es Her2++por IHC y Her2 FISH negativo.

De acuerdo con un aspecto adicional de la presente invenci6n se proporciona un metodo para el tratamiento del cancer de mama con baja sobreexpresi6n de erbB2 en un animal de sangre caliente, tal como el hombre, en necesidad de tal tratamiento, que comprende administrar a dicho animal una cantidad efectiva del difumarato del Compuesto (I) en combinaci6n con una cantidad efectiva de un taxano tal como paclitaxel o docetaxel.

Aqui, cuando el termino "combinaci6n" es usado sera entendido que este se refiere a la administraci6n simultanea, separada o secuencial. En un aspecto de la invenci6n "combinaci6n" se refiere a la administraci6n simultanea. En otro aspecto de la invenci6n "combinaci6n" se refiere a administraci6n separada. En un aspecto adicional de la invenci6n "combinaci6n" se refiere a administraci6n secuencial. Cuando la administraci6n es secuencial o separada, el plazo para administrar el segundo componente no debe ser tal que se pierda el efecto benefico de la combinaci6n.

Como sera entendido las referencias al uso del difumarato del Compuesto (I) descrito en los metodos, usos y composiciones farmaceuticas descritas aqui, se refieren a cualquiera de los difumaratos descritos aqui, por ejemplo la Forma A.

Leyenda de las Figuras

La Figura 1 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo (XRPD) para la forma libre del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 2A muestra una traza de la calorimetria diferencial de barrido en la forma libre del Compuesto (I). El eje x muestra la temperatura y el tiempo, el eje y muestra la potencia en mW. El texto de la Figura muestra la temperatura de inicio de las endoterma y la integral (mJ) de las curvas.

La Figura 2B es una traza termogravimetrica para la forma libre del Compuesto (I). El eje x muestra temperatura y tiempo, el eje y muestra el peso en mg. El texto en este grafico muestra las perdidas de peso en % y las perdidas de peso absolutas de la muestra para el evento entre alrededor de 30 y 80oC.

La Figura 3 muestra un trazo de la isoterma de la Sorci6n Dinamica de Vapor para la forma libre del Compuesto (I). El eje x muestra el % humedad relativa, el eje y muestra el % cambio en masa de la muestra. "sorp" se refiere a un ciclo de adsorci6n y "desorp" a un ciclo de desorci6n.

La Figura 4 muestra un Patr6n de difracci6n de rayos X en polvo (XRPD) para la Forma A del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 5 muestra una traza de la calorimetria diferencial de barrido en la Forma A del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra la temperatura y tiempo, el eje y muestra la potencia en mW. El texto en la Figura muestra la temperatura de inicio de la endoterma de fusi6n y la integral (mJ) de la curva.

La Figura 6 muestra una traza termogravimetrica para la Forma A del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra la temperatura y tiempo, el eje y muestra el peso en mg. El texto en este grafico muestra las perdidas de peso en % y perdidas de peso absolutas de la muestra entre alrededor de 30 y 80oC.

La Figura 7 muestra un trazo de la isoterma de la Sorci6n Dinamica de Vapor para Forma A del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el % humedad relativa, el eje y muestra el % cambio en masa de la muestra. "sorc" se refiere a un ciclo de sorci6n y "desorc" a un ciclo de desorci6n.

La Figura 8 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma B del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 9 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma C del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 10 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma D del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 11 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma E del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 12 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma F del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 13 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma G del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 14 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma H del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 15 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma I del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 16 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma J del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 17 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma K del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 18 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma L del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 19 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma M del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 20 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma N del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 21 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma O del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 22 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma P del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

La Figura 23 muestra un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo para la Forma Q del difumarato del Compuesto (I). El eje x muestra el valor 2-theta y el eje y los conteos.

Ejemplos

La invenci6n es ilustrada adicionalmente por medio de los siguientes ejemplos, los cuales estan destinados a elaborar varias realizaciones de la invenci6n. Estos ejemplos no se pretende que, ni son construidos para, limitar el alcance de la invenci6n. Resultara claro que la invenci6n puede ser practicada de otra manera de la particularmente descrita aqui. Numerosas modificaciones y variaciones de la presente invenci6n son posibles en vistas de las ensenanzas de aqui y, por lo tanto, estan dentro del alcance de la invenci6n.

En los Ejemplos a menos que se declare otra cosa:

(i) los rendimientos son dados para ilustraci6n solamente y no necesariamente son el maximo alcanzable;

(ii) los puntos de fusi6n fueron determinados por analisis DSC usando un aparato Mettler DSC820e; 1 -2mg muestras fueron cuidadosamente pesados y analizados en un cacerola de muestra con agujeros; el calentamiento fue llevado a cabo a 10°C/minuto desde 25°C a 325°C; a menos que se declare otra cosa los puntos de fusi6n aqui se refieren a la temperatura de inicio de la endoterma de fusi6n medida usando DSC;

(iii) los espectros de masa fueron corridos con una energia del electr6n de 70 voltios electrones en el modo de ionizaci6n quimica (CI) usando una sonda de exposici6n directa; donde sea indicado la ionizaci6n fue efectuada por impacto de electrones (EI), bombardeo rapido de atomos (FAB) o electrospray (ESP); los valores para m/z son dados; generalmente, solamente los iones que indican la masa principal son reportados; y a menos que se declare otra cosa, el i6n de masa citado es (MH)+ el cual se refiere al i6n de masa protonado; la referencia a M+ es para el i6n de masa generado por la perdida de un electr6n; y la referencia a M-H+ es para el i6n de masa generado por la perdida de un prot6n;

(iv) cuando son dados, los datos NMR estan en forma de valores delta para los protones de diagn6stico principales, dados en partes per mill6n (ppm) en relaci6n con el tetrametilsilano (TMS) como un estandar interno,

45 % Intensidad relativa*

25 - 100 10 - 25 3 - 10 1 - 3 determinado a 500 MHz usando perdeuterio dimetil sulf6xido (DMSO-d6) como solvente a menos que se indique otra cosa; las siguientes abreviaturas han sido usadas: s, singlete; d, doblete; t, triplete; q, cuartete; m, multiplete; br, amplio;

(v): los simbolos quimicos tienen su significado usual; las unidades SI y los simbolo son usados;

(vi): las relaciones de los solvente son dadas en terminos de volumen:volumen (v/v);

(vii) el analisis termogravimetrico fue llevado a cabo usando un equipo Mettler TG851 [1 -5mg muestras fueron cuidadosamente pesados y analizados en una cacerola abierta; el calentamiento fue llevado a cabo a 10°C/minuto desde 25°C a 325°C.

(viii) el analisis de difracci6n de rayos X en polvo fue llevado a cabo usando un difract6metro de rayos X en

polvo Siemens D5000 ajustado con un detector de centelleo; la fuente de rayos X fue Cu Kα, dando una longitud de onda de 1.54A; los datos fueron recogidos durante el rango 2-theta 2 -40°, en incrementos de 2-theta 0.02°, con 1 segundo por incremento y fue categorizado en las categorias identificadas en la Tabla 2 a continuaci6n:

Tabla 2

Definici6n

vs (muy fuerte) s (fuerte) m (medio) w (debil)

* Las intensidades relativas son derivadas de los difractogramas medidas con ranuras fijas

[Como se declar6 previamente, las personas versadas en el arte de la difracci6n de rayos X en polvo se percataran que la intensidad relativa de los picos puede ser afectada, por ejemplo, por los granos de tamano por encima de 30 micrones y relaciones de aspecto no unitarias, que pueden afectar el analisis de las muestras. Las personas versadas se percataran tambien que la posici6n de las reflexiones puede ser afectada por altura precisa a la cual se situa la muestra en el difract6metro y la calibraci6n cero del difract6metro. La planidad superficial de la muestra tambien puede tener un pequeno efecto. De ahi que los datos del patr6n de difracci6n presentados no son tomados como valores absolutos (vease Jenkins, R & Snyder, R.L. 'Introduction to X-Ray Powder Diffractometry' John Wiley & Sons, 1996, para mas informaci6n)];

(ix): La sorci6n dinamica de vapor fue medida usando un SMS DVS (Surface Measurement Systems Limited, UK). Las muestras fueron analizadas a 25°C usando un flujo de gas de 200 centimetros cubicos por minuto. La humedad relativa (HR) fue aumentada desde 0% HR en los Pasos de 10% HR a 80% HR con el Paso final de 95% HR. La muestra fue luego desorbida usando el mismo patr6n del Paso HR como la sorci6n; este procedimiento fue luego repetido en un segundo ciclo de sorci6n/desorci6n. El equilibrio en cada Paso de humedad es fijado de manera que la tasa de cambio de peso con el tiempo (minuto) fue 0.002%.

(x): tasa de disoluci6n intrinseca fue medida en un bano de disoluci6n acoplado a un detector uv de fibra 6ptica.

(xi): la solubilidad en agua fue medida usando HPLC UV.

(xii) en los ejemplos que se dan a continuaci6n, el numero de moles y el rendimiento mostrados se refieren a los materiales sin tratar y a reactivos del 100% p/p, por lo que, se tiene en cuenta la pureza de los materiales utilizados.

Ejemplo A

Preparación de 4–(3–Cloro–2–fluoroanilino)–7–metoxi–6–{[1–(N–metilcarbamoilmetil)piperidin–4– il]oxi}quinazolina (Compuesto (I))

2-Cloro-N-metilacetamida (3.720 kg, 34.60 mol) y 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4il)oxi]quinazolina dihidrocloruro (13.70 kg, 27.25 mol), se disolvieron en acetonitrilo (79.2 kg). A la suspensi6n agitada, a temperatura ambiente, fue anadida trietilamina (17.40 kg, 172.11 mol). La soluci6n clara resultante fue calentada a reflujo y mantenida durante 3 horas. La soluci6n fue enfriada a 20°C (el producto cristaliz6 a 50°C). Agua (54.2 kg) fue anadida al reactor y la suspensi6n fue agitada durante otras 2 horas a 20°C. El producto fue filtrado y lavado con agua (34 kg) seguido por acetonitrilo frio (0°C) (13.0 kg). El producto fue recristalizado a partir del acetonitrilo (94.6 kg), aislado por filtraci6n y lavado con acetonitrilo frio (0°C) (13.2 kg). Una recristalizaci6n posterior de este producto fue entonces llevada a cabo como anteriormente a partir del acetonitrilo (75.2 kg). El s6lido fue entonces secado bajo vacio para dar el producto del titulo como un s6lido blanco (6.50 kg, 50%); Espectro 1H NMR: (CDCl3) 1.98 (m, 2H), 2.08 (m, 2H), 2.46 (-m, 2H), 2.85 (m, 2H), 2.87 (d, 3H), 3.07 (s, 2H), 4.02 (s, 3H), 4.49 (m, 1H), 7.16 (m, 4H), 7.31 (m, 2H), 8.49 (m, 1H), 8.71 (s, 1H); Espectro de masa: MH+ 474.

La 4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4-il)oxi]quinazolina usada como el material de partida fue preparada como sigue:

Paso 1: 6–Acetoxi–4–(3–cloro–2–fluoroanilino)–7–metoxiquinazolina hidrocloruro

6-Acetoxi-7-metoxiquinazolin-4-ona (Solicitud Internacional de Patente WO 96/15118, Ejemplo 39 de esta; 21.4 kg, 89.3 mol) se suspendieron en tolueno (150 kg). A esto fue anadido N-etildiisopropilamina (13.3 kg, 103 mol). La suspensi6n marr6n fue calentada a 70°C y luego oxicloruro de f6sforo (36.0 kg, 228 mol) fue cargado. La mezcla de reacci6n fue agitada a 70°C durante 5 horas. Mas tolueno 84.0 kg) fue anadido seguido por 3-cloro-2-fluoroanilina (14.88 kg, 102 mol). La mezcla de reacci6n fue agitada a 70°C durante 2 horas durante ese tiempo un s6lido precipit6. La suspensi6n fue enfriada a 25°C y mantenida a esta temperatura durante 93 horas. La mezcla de reacci6n fue filtrada y la torta del filtro lavada con tolueno (2 x 55.5 kg). La torta fue lavada adicionalmente con una mezcla de etanol (24.5 kg) y agua

(32.0 kg) dos veces, y luego etanol (50.5 kg) dos veces y el s6lido entonces secado bajo vacio para dar el producto del titulo como un s6lido beige (33.4 kg, 78%); 1H NMR: 2.37 (s, 3H), 4.00 (s, 3H), 7.34 (ddd, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.52 (ddd, 1H), 7.61 (ddd, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.86 (s, 1H); Espectro de masa: 362.4, 364.4.

Paso 2: 4–(3–Cloro–2–fluoroanilino)–6–hidroxi–7–metoxiquinazolina

6-Acetoxi-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina hidrocloruro del Paso 1 (33.5 kg, 69.6 mol) fue suspendida en metanol (198 kg). A la suspensi6n agitada a 25°C fue anadido agua (86 kg) e hidr6xido de sodio (31.5 kg, 32%). La soluci6n resultante fue agitada a 60°C durante 4.5 horas y luego enfriada a 25°C. Acetico acido (aproximadamente 16.0 kg) fue anadido hasta que un pH de 5.5-6.0 fue alcanzado, punto en el cual el producto precipita de la soluci6n. Despues de la adici6n de mas metanol (5.5 kg) la suspensi6n fue agitada durante 90 minutos. El producto fue filtrado y luego lavado con 25% metanol acuoso (39.0 kg MeOH + 17.0 kg Agua) y luego metanol (55.5 kg). El s6lido crudo fue secado bajo vacio a 40°C. El s6lido crudo fue formado una pasta con agua (145 kg) y agitado durante 2 horas a 65°C. La pasta fue enfriada a 20°C y filtrada. La torta del filtro fue lavada con metanol (2 x 21.5 kg), y luego secada bajo vacio a 40°C para dar el producto del titulo como un s6lido marr6n claro (21.85 kg, 98%); 1H NMR: 3.95 (s, 3H), 7.19 (s, 1H),

7.23 (dd, 1H), 7.42 (dd, 1H), 7.50 (dd, 1H), 7.64 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 9.43 (s, 1H), 9.67 (br.s, 1H); Espectro de masa: 320.4, 322.4.

Paso 3: 6–{[(1–tert–Butoxicarbonil)piperidin–4–il]oxi}–4–(3–cloro–2–fluoroanilino)–7–metoxi quinazolina

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-6-hidroxi-7-metoxiquinazolina del Paso 2 (15.591 kg, 48.44 mol), tert-Butil (4metanosulfoniloxi)piperidina-1-carboxilato (preparado como en el Chemical & Pharmaceutical Bulletin 2001, 49(7), 822-829; 16.20 kg, 57.99 mol) y carbonato de potasio (7.978 kg, 57.73 mol) fueron disueltos en N-metilpirrolidinona

(114.2 kg), y la mezcla fue calentada a 100°C con agitaci6n. El calentamiento fue continuado a 100°C (95°C -105°C) durante 5 horas. La mezcla fue luego enfriada a 80°C y apagada por la adici6n de agua (216.6 kg).

El lote fue agitado a 80°C durante otros 60 minutos y luego enfriado a 20°C durante 2 horas, tiempo durante el cual el producto cristaliz6. El producto fue aislado por filtraci6n. El producto fue disuelto en metanol caliente (reflujo) (200 L). A esta mezcla fue anadida agua (20 L), lo que indujo la cristalizaci6n. La suspensi6n fue enfriada a 0°C y filtrada. El secado al vacio a 50°C produjo el producto del titulo, 18.80 kg (77%); 1H NMR: 1.40 (s, 9H), 1.60-1.65 (m, 2H), 1.95

2.00 (m, 2H), 3.20-3.25 (m, 2H), 3.65-3.70 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 4.68 (m, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.27 (dd, 1H), 7.47 (ddd, 1H), 7.51 (dd, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 9.53 (s, 1H); Espectro de masa: 503.5, 505.5.

Paso 4: 4–(3–cloro–2–fluoroanilino)–7–metoxi–6–[(piperidin–4–il)oxi]quinazolina dihidrocloruro

6-{[(1-tert-Butoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina del Paso 3 (18.80 kg,

37.38 mol) fue suspendida en isopropanol (139.8 kg), y calentada a 40°C con agitaci6n. Acido clorhidrico (15.40 kg, -156.3 mol) fue cargado en el recipiente durante 50 minutos, permitiendo que una exoterma de aproximadamente 9°C ocurra. Durante la carga del acido, la suspensi6n se disolvi6 para dar una soluci6n clara. La soluci6n fue calentada lentamente a reflujo durante aproximadamente 90 minutos, y luego mantenida a reflujo durante otras 3 horas. El producto cristaliz6 durante este periodo de reflujo. La suspensi6n espesa fue enfriada a 0°C y filtrada. La torta del filtro fue lavada dos veces con isopropanol frio (0°C) (2 x 20.6 kg). El producto fue secado bajo vacio a 50°C para dar el producto del titulo, 13.60 kg (73%); 1H NMR: 1.53-1.64 (m, 2H), 2.00-2.05 (m, 2H), 2.64-2.72 (m, 2H), 3.00-3.07 (m, 2H), 3.92 (s, 3H), 4.60 (m, 1H), 7.20 (s, 1H), 7.26 (ddd, 1H), 7.47 (dd, 1H), 7.50 (dd, 1H), 7.82 (s, 1H), 8.34 (s, 1H), 9.56 (s, 1H); Espectro de masa: 403.2, 405.2.

Ejemplo B Preparación de 4–(3–Cloro–2–fluoroanilino)–7–metoxi–6–{[1–(N–metilcarbamoilmetil)piperidin–4– il]oxi}quinazolina (Compuesto (I))

2-Cloro-N-metilacetamida (24.22 g, 223.1 mmol) y 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4il)oxi]quinazolina dihidrocloruro (86.00 g, 160.9 mmol), fueron formados una pasta en acetonitrilo (537 ml). A la suspensi6n agitada, a temperatura ambiente, fue anadida trietilamina (101 ml, 723.9 mmol). La reacci6n fue calentada a 75°C mantenida durante 5 horas. La soluci6n fue enfriada a 70°C y etanol (268 ml) anadido. La reacci6n fue enfriada a 45°C y agua (9.6 ml) anadida. El Compuesto (I) (0.42 g) fue anadido para establecer la cristalizaci6n y luego la pasta enfriada a 20°C durante 2 horas. Despues de la agitaci6n durante otras 12 horas el producto fue aislado por filtraci6n. La torta del filtro fue lavada dos veces con acetonitrilo (102 ml): etanol (51 ml): agua (1.8 ml) y luego con agua (153 ml). El producto fue secado al vacío a 60°C para dar el compuesto del titulo como un s6lido blanco (45.9g, 60%); 1H NMR

(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.76 -1.87 (m, 2 H) 2.01 -2.11 (m, 2 H) 2.35 -2.44 (m, 2 H) 2.64 (d, J=4.74 Hz, 3 H)

2.72 -2.80 (m, 2 H) 2.95 (s, 2 H) 3.95 (s, 3 H) 4.51 -4.63 (m, 1 H) 7.23 (s, 1 H) 7.29 (td, J=8.08, 1.29 Hz, 1 H) 7.46 7.58 (m, 2 H) 7.75 (q, J=4.60 Hz, 1 H) 7.83 (s, 1 H) 8.38 (s, 1 H) 9.59 (s, 1 H) Espectro de masa: MH+ 474.

4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4-il)oxi]quinazolina dihidrocloruro usado como el material de partida fue preparado como sigue:

Paso 1: 6-{[(1-tert-Butoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi quinazolina

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-6-hidroxi-7-metoxiquinazolina (preparado como es descrito en el Paso 2 de Ejemplo A;

60.00 g, 0.1828 mol), tert-Butil (4-metanosulfoniloxi)piperidina-1-carboxilato (88.04 g, 0.3107 mol) y carbonato de potasio (30.31 g, 0.2193 mol) fueron suspendidos en etanol (584 ml) y agua (58 ml), y la mezcla fue calentada a reflujo con agitaci6n. El calentamiento fue continuado a reflujo durante 16.5 horas. La mezcla fue luego enfriada a 70°C y agua (234 ml) fue anadida durante 60 minutos.

El lote fue agitado a 65°C durante otras 2 horas para establecer la cristalizaci6n. La pasta fue enfriada a 20°C durante 6 horas. El producto fue aislado por filtraci6n. La torta del filtro fue formada una pasta con etanol acuoso (etanol 117 ml, agua 58 ml) y luego del desplazamiento lavada con etanol acuoso (etanol 117 ml, agua 58 ml). La torta del filtro fue entonces formada una pasta con agua (175 ml) y luego del desplazamiento lavada con agua (175 ml). El producto fue

secado al vacío a 40°C para dar el compuesto del titulo (81.5 g, 84%); 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.42 (s, 9 H) 1.60 -1.70 (m, 2 H) 1.96 -2.04 (m, 2 H) 3.23 -3.30 (m, 2 H) 3.65 -3.75 (m, 2 H) 3.95 (s, 3 H) 4.68 -4.75 (m, 1 H)

7.24 (s, 1 H) 7.29 (t, J=8.06 Hz, 1 H) 7.49 (t, J=7.50 Hz, 1 H) 7.54 (t, J=7.19 Hz, 1 H) 7.88 (s, 1 H) 8.39 (s, 1 H) 9.57 (s, 1 H); Espectro de masa: 503.5, 505.5.

Paso 2: 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4-il)oxi]quinazolina dihidrocloruro

6-{[(1-tert-Butoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina (10.00 g, 0.1879 mol) fue suspendida en alcoholes metilados industriales (95 ml), y calentada a 35°C con agitaci6n. Acido clorhidrico (6.59 ml, aproximadamente 0.7891 mol) fue cargado en el recipiente permitiendo que una exoterma de aproximadamente 5.5°C ocurra. Durante la carga del acido, la suspensi6n disuelta para dar una soluci6n clara. La soluci6n fue calentada lentamente a 70°C durante aproximadamente 90 minutos, y luego mantenida a 70°C durante 1 hora mas. La reacci6n es entonces enfriada a 0°C durante 4 horas, tiempo durante el cual el producto cristaliza. El producto fue aislado por filtraci6n y luego la torta del filtro fue lavada dos veces con alcoholes metilados industriales (2 x 14 ml). El producto fue

secado al vacío a 50°C para dar el producto del titulo (9.04 g, 88%); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.91 -2.01 (m, 2 H) 2.27 -2.35 (m, 2 H) 3.15 -3.26 (m, 2 H) 3.26 -3.35 (m, 2 H) 4.02 (s, 3 H) 5.07 -5.15 (m, 1 H) 7.35 (td, J=8.08, 1.29 Hz, 1 H) 7.46 (s, 1 H) 7.52 (ddd, J=8.03, 5.23 Hz, 1 H) 7.63 (ddd, J=8.22, 6.76, 1.62 Hz, 1 H) 8.83 (s, 1 H)

8.91 (s, 1 H) 9.02 - 9.13 (m, 1 H) 9.20 -9.31 (m, 1 H) 12.51 (br. s., 1 H)); Espectro de masa: 403.2, 405.2.

Ejemplo C Preparación de 4–(3–Cloro–2–fluoroanilino)–7–metoxi–6–{[1–(N–metilcarbamoilmetil)piperidin–4– il]oxi}quinazolina (Compuesto (I))

El Compuesto (I) fue preparado de acuerdo con el esquema mostrado a continuaci6n:

2-[4-(5-ciano-4-{[(dimetilamino)metileno]amino}-2-metoxifenoxi)piperidin-1-il]-N-metilacetamida (7, 7.00g,

17.71mmoles), fue suspendida en metoxibenceno (35.8g). Acetico acido (16.6g) fue cargado y a la soluci6n resultante

5 fue anadida 3-cloro-2-fluoroanilina (2.71g, 18.07mmoles). La mezcla de reacci6n fue calentada a 90°C durante 20

horas y luego enfriada a 20°C. Agua (37.04g) fue cargado a la mezcla de reacci6n, y la capa organica desechada. A la

mezcla acuosa resultante fue cargado isopropanol (39.00g), seguido por amoniaco acuoso (20.79g, 25%). La mezcla de

reacci6n fue calentada a 30°C y sembrada con el Compuesto (I), que indujo la cristalizaci6n. La reacci6n fue luego

enfriada a 0°C y el producto aislado por filtraci6n. La torta del filtro fue lavada dos veces con una mezcla de agua 10 (7.28g) e isopropanol (4.68g), y luego secada para proporcionar el Compuesto (I) (5.65g, 55% rendimiento); 1H NMR

(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.79 (m, 2 H) 2.04 (m, 2 H) 2.38 (m, 2 H) 2.62 (d, J=4.5 Hz, 3 H) 2.74 (m, 2 H) 2.94 (s, 2 H)

3.93 (s, 3 H) 4.56 (tt, J=8.1, 3.8 Hz, 1 H) 7.21 (s, 1 H) 7.28 (m, 1 H) 7.50 (m, 2 H) 7.73 (q, J=4.5 Hz, 1 H) 7.81 (s, 1 H)

8.36 (s, 1 H) 9.56 (br.s, 1 H);Espectro de masa: m/z (M+ H)+ 474.2, 476.2.

2-[4-(5-ciano-4-{[(dimetilamino)metileno]amino}-2-metoxifenoxi)piperidin-1-il]-N-metilacetamida (7), usada como el 15 material de partida fue preparada como sigue:

Paso 1. Preparación de tert–butil 4–(5–ciano–2–metoxifenoxi)piperidina–1–carboxilato (2)

3-hidroxi-4-metoxibenzonitrilo (1, 6.00g, 39.62mmole), tert-butil (4-metanosulfoniloxi)piperidina-1-carboxilato (16.6g,

59.44mmoles) (Chemical & Pharmaceutical Bulletin 2001, 49(7), 822-829); y carbonato de potasio (6.71g,

47.55mmoles) fueron suspendidos en isopropanol (78.98g) y la mezcla fue calentada a reflujo con agitaci6n. tert-Butil 20 (4-metanosulfoniloxi)piperidina-1-carboxilato (2.08g, 7.43mmoles) adicional fue anadido para forzar la reacci6n al

completamiento. La mezcla fue entonces enfriada y apagada por la adici6n de agua (100.47g). La siembra con tert-butil

4-(5-ciano-2-metoxifenoxi)piperidina-1-carboxilato (2) seguido del enfriamiento a 0°C result6 en un producto

cristalino, que fue aislado por filtraci6n. La torta del filtro fue lavada con una mezcla de agua (8.86g) e isopropanol (6.97g), seguido por agua (23.64g) y luego secada para dar el compuesto del titulo (10.75g, 80% rendimiento); 1H NMR

(400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.39 (s, 9 H) 1.48 (m, 2 H) 1.88 (m, 2 H) 3.13 (m, 2 H) 3.67 (m, 2 H) 3.83 (s, 3 H) 4.56 (tt, J=8.1, 3.8 Hz, 1 H) 7.13 (d, J=8.4 Hz, 1 H) 7.42 (dd, J=8.4, 1.9 Hz, 1 H) 7.51 (d, J=1.9 Hz, 1 H); Espectro de masa: m/z (M + H)+ 333.1.

Paso 2. Preparación de 4–metoxi–3–(piperidin–4–iloxi)benzonitrilo (3)

Tert-butil 4-(5-ciano-2-metoxifenoxi)piperidina-1-carboxilato (2, 39.31g, 118.26mmoles) fue suspendido en etanol (155.53g) y calentado a 40°C. A esta pasta fue lentamente anadido HCl (46.61g, 573.04mmoles). La mezcla fue calentada a 60°C y mantenida durante 3 horas. La mezcla de reacci6n fue enfriada a 20°C y la semilla fue cargada iniciando la cristalizaci6n. El s6lido resultante fue aislado por filtraci6n a 0°C, lavado dos veces con etanol (62.21g) y luego secado para dar el compuesto del titulo como la sal de hidrocloruro (29.84g, 77% rendimiento); 1H NMR (400

MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.84 (m, 2 H) 2.09 (m, 2 H) 3.02 (ddd, J=12.7, 8.9, 3.4 Hz, 2 H) 3.20 (m, 2 H) 3.84 (s, 3 H) 4.63 (tt, J=7.7, 3.6 Hz, 1 H) 7.15 (d, J=8.5 Hz, 1 H) 7.45 (dd, J=8.5, 1.9 Hz, 1 H) 7.56 (d, J=1.9 Hz, 1 H) 9.16 (br. s, 2 H); Espectro de masa: m/z (M+ H)+ 233.2.

Paso 3. Preparación de 2–[4–(5–ciano–2–metoxifenoxi)piperidin–1–il]–N–metilacetamida (4)

La sal de 4-metoxi-3-(piperidin-4-iloxi)benzonitrilo hidrocloruro (3, 28.36g, 95.82mmoles), 2-cloro-N-metilacetamida (12.37g, 114.98mmoles) y carbonato de potasio (33.11g, 239.55mmoles) fueron suspendidos en acetonitrilo (161.36g). La mezcla de reacci6n fue calentada a reflujo durante 3 horas. La mezcla de reacci6n fue enfriada a 20°C y agua (386.26g) fue cargada. La reacci6n fue calentada a 75°C y el volumen reducido por destilaci6n. Con el enfriamiento ocurri6 la cristalizaci6n. El s6lido resultante fue aislado por filtraci6n, lavado dos veces con agua (77.25g y 128.75g) y

luego secado para dar el compuesto del titulo (27.95g, 94% rendimiento); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.68 (m, 2 H) 1.91 (m, 2 H) 2.29 (m, 2 H) 2.61 (d, J=4.7 Hz, 3 H) 2.67 (m, 2 H) 2.88 (s, 2 H) 3.83 (s, 3 H) 4.41 (tt, J=8.3, 4.0 Hz, 1 H) 7.11 (d, J=8.4 Hz, 1 H) 7.40 (dd, J=8.4, 1.9 Hz, 1 H) 7.47 (d, J=1.9 Hz, 1 H) 7.68 (q, J=4.7 Hz, 1 H); Espectro de masa: m/z (M+ H)+ 304.2.

Paso 4. Preparación de 2–[4–(5–ciano–2–metoxi–4–nitrofenoxi)piperidin–1–il]–N–metilacetamida (5)

2-[4-(5-Ciano-2-metoxifenoxi)piperidin-1-il]-N-metilacetamida (4, 8.78g, 26.11mmoles) fue suspendida en acetico acido (22.82g, 364.87mmoles) y la mezcla de reacci6n resultante enfriada a 5°C. A esto fue anadido acido sulfurico (23.64g, 234.95mmoles) manteniendo la temperatura de reacci6n por debajo de 30°C. A la soluci6n resultante fue anadido acido nitrico (2.40g, 26.63mmoles). La mezcla de reacci6n fue entonces calentada a 35°C y mantenida durante 3 horas. Acido nitrico adicional (117 mg, 1.31 mmoles) y acido sulfurico (1.31g 13.1 mmoles) fueron cargados y la mezcla de reacci6n fue calentada a 35°C durante 30 minutos. La soluci6n fue enfriada a 20°C y apagada con amoniaco acuoso (92.45g 1.36 moles), resultando en un aumento de la temperatura a 50°C. A la pasta resultante fue anadido, propionitrilo (61.58g 1.12 moles) y agua (19g). La mezcla de reacci6n fue calentada a 80°C resultando en una soluci6n clara, la cual despues de asentarse dio dos capas. La capa del fondo fue eliminada. La mezcla de reacci6n fue enfriada a 20°C resultando en una pasta espesa. El s6lido fue aislado por filtraci6n, lavado con propionitrilo (6.16g 112.0

mmoles) y secado para proporcionar el compuesto del titulo (7.44g, 82% rendimiento); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.72 (m, 2 H) 1.97 (m, 2 H) 2.35 (m, 2 H) 2.61 (d, J=4.7 Hz, 3 H) 2.66 (m, 2 H) 2.90 (s, 2 H) 3.96 (s, 3 H) 4.73 (tt, J=8.4, 4.0 Hz, 1 H) 7.71 (q, J=4.7 Hz, 1 H) 7.82 (s, 1 H) 7.86(s, 1 H). Espectrode masa: m/z (M+ H)+ 349.2

Paso 5. Preparación de 2–[4–(4–amino–5–ciano–2–metoxifenoxi)piperidin–1–il]–N–metilacetamida (6)

2-[4-(5-Ciano-2-metoxi-4-nitrofenoxi)piperidin-1-il]-N-metilacetamida (5, 7.42g, 19.38mmoles) fue suspendida en agua (44.52g) y metanol (5.35g). A esto fue anadido ditionita de sodio (11.91g, 58.15mmoles) y la mezcla de reacci6n resultante fue calentada a 60°C. A la mezcla de reacci6n fue anadido acido clorhidrico (46.98g, 463.89mmoles)), resultando en una soluci6n, la cual fue mantenida a 60°C durante 3 horas. La mezcla de reacci6n entonces se dej6 enfriar a 20°C. Hidr6xido de sodio acuoso (15.51g 182.2 mmoles) fue cargado seguido por 2-metiltetrahidrofurano (58.0g). La mezcla de reacci6n fue calentada a 60°C, la cual despues de asentarse dio dos capas y la capa acuosa inferior fue desechada. El volumen de la mezcla de reacci6n fue reducido por destilaci6n al vacio y metil tert-butil eter (18.54g) fue anadido para dar una pasta que fue enfriada a 10°C y luego el s6lido fue recogido por filtraci6n. El s6lido fue lavado con 2-metiltetrahidrofurano (5.8g) y secado para dar el compuesto del titulo (5.4g, 78% rendimiento); 1H

NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.62 (m, 2 H) 1.82 (m, 2 H) 2.20 (m, 2 H) 2.60 (d, J=4.7 Hz, 3 H) 2.65 (m, 2 H) 2.86 (s, 2 H) 3.72 (s, 3 H) 4.00 (tt, J=8.3, 4.0 Hz, 1 H) 5.66 (br. s, 2 H) 6.39 (s, 1 H) 6.94 (s, 1 H) 7.65 (q, J=4.7 Hz, 1 H)

Espectro de masa: m/z (M+ H)+ 319.2

Paso 6. Preparación de 2–[4–(5–ciano–4–{[(dimetilamino)metileno]amino}–2–metoxifenoxi)piperidin–1–il]–N– metilacetamida (7)

2-[4-(4-Amino-5-ciano-2-metoxifenoxi)piperidin-1-il]-N-metilacetamida (6, 18.21g, 52.05mmoles) fue suspendida en 2-metiltetrahidrofurano (99.62g). A esto fue anadido acetico acido (162.79mg), y N,N-dimetilformamida dimetil acetal

(DMF-DMA) (8.63g, 70.27mmoles) y la mezcla de reacci6n resultante fue calentada a 76°C durante 16 horas. N,Ndimetilformamida dimetil acetal adicional (639.41mg, 5.20mmoles) fue anadido a la mezcla de reacci6n para asegurar la reacci6n completada. La mezcla de reacci6n fue enfriada a 30°C tiempo durante el cual ocurri6 la cristalizaci6n. El s6lido resultante fue aislado por filtraci6n, lavado con 2-metiltetrahidrofurano (14.23g) y secado para proporcionar el

compuesto del titulo (19.53g, 97% rendimiento); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.65 (m, 2 H) 1.86 (m, 2 H) 2.24 (m, 2 H) 2.60 (d, J=4.7 Hz, 3 H) 2.66 (m, 2 H) 2.87 (s, 2 H) 2.95 (s, 3 H) 3.04 (s, 3 H) 3.81 (s, 3 H) 4.19 (tt, J=8.2, 3.8 Hz, 1 H) 6.72 (s, 1 H) 7.15 (s, 1 H) 7.67 (q, J=4.7 Hz, 1 H) 7.90 (s, 1 H); Espectrode masa: m/z (M+ H)+ 374.2.

Actividad Biológica

La actividad del Compuesto (I) fue evaluada para probar su capacidad para:

a) inhibir la activaci6n (fosforilaci6n) de EGFR, ErbB2 y ErbB3 en las celulas estimuladas por ligandos; y

b) inhibir la proliferaci6n basal y estimulada por ligandos de celulas MCF-7. a) Compuesto (I) en Ensayos Conducidos por Ligandos Métodos: Las celulas KB y celulas MCF–7 fueron obtenidas de la American Type Culture Collection (ATCC) y rutinariamente cultivadas en RPMI 1640 (libre de Fenol rojo) + 10% Suero Fetal de Ternero + 2mM L–Glutamina.

Tratamiento y Lisis de Celulas:

Las celulas KB fueron sembradas a 5000celulas/pocillos y las celulas MCF-7 a 4000celulas/pocillos en placas de 96 pocillos en medio RPMI 1640 conteniendo 10% FBS. Las celulas fueron incubadas durante 72 horas antes de reemplazar el medio con medio RPMI 1640 libre de suero durante 24 horas. Las celulas fueron luego tratadas con el

Compuesto (I) durante 90 minutos a concentraciones que oscilan de 0-10μM. Inmediatamente antes de la lisis celular, las celulas MCF-7 y KB fueron incubadas durante 5 minutos con el ligando (heregulina ("HRG") para las celulas MCF-7 y factor de crecimiento epidermico ("EGF") para las Celulas KB) a concentraciones requeridas para aumentar la fosforilaci6n del receptor a 90% de (ED90) max. para permitir la comparaci6n entre los ensayos.

Medici6n de p-EGFR, p-ErbB2 y p-ErbB3:

El estado p-EGFR de las celulas KB fue medido usando el kit ELISA Duoset fosfo-EGFR Humano (R&D systems, EGFR #DYC1854, pEGFR #DYC1095 total). Los contenidos de p-ErbB2 y p-ErbB3 de las celulas MCF-7 fueron medidos usando el Kit ELISA Duoset fosfo-EGFR Humano (R&D systems, DYC1768) y Kit ELISA Duoset fosfo-ErbB3 Humano (R&D systems, DYC1769) respectivamente. Los kits midieron la fosforilaci6n de la tirosina en la celula completa de EGFR, ErbB2 o ErbB3. Los ensayos fueron realizados de acuerdo con las instrucciones de los fabricantes, con 50μl lisado anadido por pocillo.

Resultados: Los resultados son resumidos en la Tabla 3

Tabla 3 Actividad del Compuesto (I) contra p–EGFR (en Células KB) y p–ErbB2 y p–ErbB3 (en células MCF–7)

Compuesto: p-EGFR Geo Medio IC50 (95% CIR*) p-ErbB2 Geo Medio IC50 (95% CIR) p-ErbB3 Geo Medio IC50 (95% CIR)

Compuesto (I): 0.004 (1.377) 0.003 (1.817) 0.004 (1.89)

* Relaci6n del Intervalo de Confidencia

La Tabla 3 muestra que el Compuesto (I) es un potente inhibidor de fosfo–EGFR, fosfo–ErbB2 y fosfo–ErbB3 en estas celulas.

b) Compuesto (I) en el ensayo de proliferación de células MCF-7 basal o estimulada por HRG Métodos:

Las celulas MCF-7 fueron cultivadas rutinariamente en DMEM (libre de Fenol rojo) + 10% Suero Fetal de Bovino + 2mM L-Glutamina.

Las celulas fueron sembradas a 4000 celulas por pocillo en placas de 96 pocillos en medio DMEM con 1% FBS tratado con carb6n vegetal/dextrano y 2mM glutamina y se dejaron reposar durante 4 horas antes del tratamiento con el

Compuesto (I) a concentraciones que oscilaban entre 0-3!M y 0-10!g/ml respectivamente. Dos horas despues del tratamiento, las celulas fueron incubadas con 10ng/ml HRG, una concentraci6n requerida para aumentar la proliferaci6n de las celulas MCF-7 hasta un 90% de (ED90) max. Los pocillos basales no fueron estimulados con ligando. Despues de la incubaci6n durante 4 dias, la viabilidad celular se evalu6 usando un ensayo 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3carboximetoxifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazolio (MTS).

Antes de la determinaci6n de IC50 de las celulas tratadas con el compuesto estimuladas con HRG, el crecimiento basal medio a 96 horas fue sustraido de cada una de las lecturas de manera que la proliferaci6n conducida a traves de la senalizaci6n-HRG fue evaluada. Los valores IC50 basales son expresados como GI50, es decir, el numero de celulas en la placa el dia 0 (lectura de linea base) fue sustraido de la lectura 96 horas mas tarde.

Resultados:

Los resultados son resumidos en las Tablas 4 y 5.

Tabla 4 Valor IC50 de la proliferación estimulada por HRG

Compuesto: Geo Medio IC50 95% CIR

Compuesto (I): 0.061μM 2.421

Tabla 5 Valores GI50 de la proliferación basal

Compuesto: Geo Medio GI50 95% CIR

Compuesto (I): 1.094μM 4.423

En las celulas KB, la estimulaci6n con EGF, el cual se une especificamente al EGFR, provoca la fosforilaci6n y, por lo tanto, la activaci6n de este receptor. De manera similar, en las celulas MCF-7, HRG, que se une especificamente a ErbB3, provoca que forme heterodimeros con ErbB2 y ambos receptores se fosforilan y activan. La Tabla 4 muestra que el Compuesto (I) es un potente inhibidor de la proliferaci6n de MCF-7 estimulada por HRG. Se cree que estos efectos sobre la proliferaci6n son debidos a las actividades de estos compuestos sobre los heterodimeros ErbB2/ErbB3, siendo el Compuesto (I) un inhibidor mucho mas potente de este heterodimero.

Los ensayos de MCF-7 basales representan una situaci6n donde no hay estimulaci6n o activaci6n aumentada de la heterodimerizaci6n de erbB2/erbB3. La Tabla 5 muestra que incluso en tales condiciones el Compuesto (I) inhibe MCF

7.

Ejemplo 1

Preparación de la Forma A del difumarato del Compuesto (I): 2–[4–({4–[(3–Cloro–2–fluorofenil)amino]–7– metoxiquinazolin–6–il}oxi)piperidin–1–il]–N–metilacetamida di–[(2E)–but–2–enedioato] Forma A

Una soluci6n de acido fumarico (2.7 g, 23.22mmol) en metanol (95 ml) fue anadida a una mezcla de 2-[4-({4-[(3Cloro-2-fluorofenil)amino]-7-metoxiquinazolin-6-il}oxi)piperidin-1-il]-N-metilacetamida (Compuesto (I)) (5.62g a 89% p/p, 10.55 mmol) en isopropanol (100 ml) manteniendo la temperatura >65°C. La mezcla fue calentada a reflujo durante una hora antes de la clarificaci6n. La mezcla de reacci6n fue enfriada a 30°C durante 90 minutos y mantenida durante 30 minutos para establecer la cristalizaci6n. La reacci6n fue enfriada a 0°C durante 2 horas y mantenida durante 1 hora antes del aislamiento por filtraci6n. La torta del filtro fue lavada dos veces con isopropanol frio(2 x 10 ml) y secada al vacío a 50°C para dar el compuesto del titulo como un s6lido blanco (5.84 g, 78%); Espectro1H NMR: (DMSO) 1.85 (m, 1H), 2.08 (m, 1H), 2.50 (m, 1H), 2.66 (d, 3H), 2.83 (m, 1H), 3.05 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 4.58 (m, 1H), 6.64 (s, 4H), 7.23 (s, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.46 (ddd, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.70 (amplio q, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.38 (s, 1H).

Ejemplo 2

Una soluci6n de acido fumarico (1.4 kg, 12.1mol) en metanol (26.6 kg) fue anadida a una mezcla de 2–[4–({4–[(3–cloro– 2–fluorofenil)amino]–7–metoxiquinazolin–6–il}oxi)piperidin–1–il]–N–metilacetamida (2.93 kg, 84.8% p/p, 5.24mol) en isopropanol (39 kg) manteniendo la temperatura >65°C. Un lavado en linea de metanol (3.6 kg) fue cargado. La mezcla fue calentada a reflujo durante una hora antes de la clarificaci6n, seguido por un lavado en linea de metanol (7 kg). La mezcla de reacci6n fue destilada a presi6n atmosferica para eliminar 47 kg de destilados. Isopropanol (15.8 kg) fue anadido y la mezcla de reacci6n destilada para eliminar 15.6 kg de destilados. La cristalizaci6n ocurri6 durante la destilaci6n. Isopropanol (21 kg) fue anadido y la reacci6n enfriada a 0°C durante 8 horas y mantenida durante 1 hora antes del aislamiento por filtraci6n. La torta del filtro fue lavada con 50:50 isopropanol frio:MeOH (4kg) seguido por isopropanol frio(4kg) y secada al vacío a 50°C para dar el compuesto del titulo como un s6lido blanco (3.64 kg, 98%); Espectro 1H NMR: (DMSO) 1.85 (m, 1H), 2.08 (m, 1H), 2.50 (m, 1H), 2.66 (d, 3H), 2.83 (m, 1H), 3.05 (s, 2H), 3.96 (s,

3H), 4.58 (m, 1H), 6.64 (s, 4H), 7.23 (s, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.46 (ddd, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.70 (amplio q, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.38 (s, 1H).

Ejemplo 3

2-[4-({4-[(3-Cloro-2-fluorofenil)amino]-7-metoxiquinazolin-6-il}oxi)piperidin-1-il]-N-metilacetamida (Compuesto (I))

(60.19 g a 88% p/p, 111.8 mmol) fue disuelto en acetato de etilo (1550 ml). La soluci6n fue clarificada por filtraci6n y el filtro lavado con acetato de etilo (53 ml). La soluci6n fue enfriada a 40°C. Una soluci6n clarificada de acido fumarico

(26.60 g, 257.0mmol) en isopropanol (408 ml) fue entonces anadida durante 1 hora. El filtro usado para clarificar la soluci6n de acido fumarico fue entonces lavado con isopropanol (37 ml). Despues de mantenerla durante 1 hora a 40°C la reacci6n fue enfriada a 20°C durante 1 hora. La mezcla de reacci6n fue mantenida durante 13.5 horas antes de aislar el producto por filtraci6n. La torta del filtro fue lavada dos veces con acetato de etilo (82 ml) : isopropanol (24 ml) y luego secada al vacío a 40°C para dar el compuesto del titulo como un s6lido blanco (72.32 g, 90%); Espectro 1H NMR: (DMSO) 1.85 (m, 1H), 2.08 (m, 1H), 2.50 (m, 1H), 2.66 (d, 3H), 2.83 (m, 1H), 3.05 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 4.58 (m, 1H),

6.64 (s, 4H), 7.23 (s, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.46 (ddd, 1H), 7.55(m, 1H), 7.70 (amplio q, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.38 (s, 1H).

Ejemplo 4

(2.75 g a 100% p/p asumido, 5.80 mmol) fue disuelta en acetato de etilo (94 ml) e isopropanol (14 ml). La soluci6n fue destilada de manera que 25.2 ml de destilados fueron recogidos. La soluci6n fue enfriada a 40°C. Una soluci6n de acido fumarico clarificada (1.38 g, 11.90 mmol) en isopropanol (21 ml) fue entonces anadida durante 1 hora. La semilla de la Forma A del difumarato del Compuesto (I) fue anadida (3.7 mg, 5.3 Imol). El filtro usado para clarificar la soluci6n de acido fumarico fue entonces lavado con isopropanol (2 ml). Despues de mantenerla durante 1 hora a 40°C la reacci6n fue enfriada a 20°C durante 2 horas. La mezcla de reacci6n fue mantenida durante 15 horas antes de aislar el producto por filtraci6n. La torta del filtro fue lavada dos veces con acetato de etilo (4.3 ml): isopropanol (1.2 ml) y luego secada al vacío a 40°C para dar el compuesto del titulo como un s6lido blanco (72.32 g, 90%); Espectro 1H NMR: (DMSO) 1.85 (m, 1H), 2.08 (m, 1H), 2.50 (m, 1H), 2.66 (d, 3H), 2.83 (m, 1H), 3.05 (s, 2H), 3.96 (s, 3H), 4.58 (m, 1H), 6.64 (s, 4H), 7.23 (s, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.46 (ddd, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.70 (amplio q, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.38 (s, 1H).

Ejemplo 5

2-[4-({4-[(3-Cloro-2-fluorofenil)amino]-7-metoxiquinazolin-6-il}oxi)piperidin-1-il]-N-metilacetamida (Compuesto (I)) (1g, 1.86mmoles) y acido fumarico (0.44g, 3.81mmoles) fueron suspendidos en agua (4.4g) y calentados a 85°C. La mezcla de reacci6n fue enfriada a 60°C a 1°C/minuto y la semilla de la Forma A del Compuesto (I) fue anadida cuando la temperatura fue 77°C. El s6lido resultante fue aislado por filtraci6n, lavado dos veces con acetona (0.70g por lavado) y secado en un horno de vacio a 40°C para proporcionar el compuesto del titulo (0.89g, 68% rendimiento), 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d ppm 1.84 (m, 2 H) 2.08 (m, 2 H) 2.55 (m, 2 H) 2.63 (d, J=4.7 Hz, 3 H) 2.86 (m, 2 H) 3.12 (s, 2 H) 3.93 (s, 3 H) 4.59 (tt, J=7.8, 3.7 Hz, 1 H) 6.62 (s, 4 H) 7.21 (s, 1 H) 7.27 (td, J=8.1, 1.3 Hz, 1 H) 7.49 (m, 2 H) 7.86 (m, 2 H) 8.36 (s, 1 H) 9.63 (br. s., 1 H).

Propiedades de la Forma A del difumarato del Compuesto (I)

La Forma A del difumarato del Compuesto (I) es un polvo de flujo libre. La difracci6n de rayos X en polvo del difumarato del Compuesto (I) (Figura 4) indica que el material es cristalino. Los picos mas prominentes del patr6n de XRPD de la Forma A son descritos aqui anteriormente y enumerados en la Tabla 1. La calorimetria diferencial de barrido muestra una endoterma de fusi6n simple con un inicio a 210.4°C (Figura 5). Perdidas de peso no apreciables fueron observadas por analisis termogravimetrico (Figura 6). La Sorci6n Dinamica de Vapor demuestra que el compuesto no es higrosc6pico absorbiendo <0.5% humedad hasta 95% humedad relativa sin evidencia de histeresis (Figura 7).

Comparación de la solubilidad del Compuesto (I) acuoso y la Forma A del difumarato del Compuesto (I)

La solubilidad (48 horas, 25°C) del Compuesto (I) en un rango de buffer acuoso es detallada en la Tabla 4. El Compuesto (I) exhibe un pH dependiente de la solubilidad en buffer acuoso con alta solubilidad a bajo pH (27.2mg/ml, pH 2.7) y baja solubilidad a alto pH (1μg/ml, pH 7.9). Aumentos significativos en la solubilidad del Compuesto (I) ocurren a pH 6 y por debajo. Por lo tanto, a valores bajos de pH la tasa de disoluci6n del Compuesto (I) seria anticipado que es rapida mientras que a pH por encima de 6 la tasa de disoluci6n seria anticipado que es lenta.

La solubilidad (48 horas, 25°C) del Compuesto (I) en aguaes 1 μg/ml (pH 7.0). En comparaci6n, la solubilidad de la Forma A del difumarato del Compuesto (I) en agua (48 horas) es 22.5 mg/ml (pH 3.5). Las tasas de disoluci6n intrinsecas de la Forma A del difumarato del Compuesto (I) y el Compuesto (I) fueron tambien medidas en un rango de buffer acuoso. La Forma A del difumarato del Compuesto (I) tiene una tasa de disoluci6n intrinseca significativamente mayor en buffer de fosfato pH 6.5 como es mostrado en la Tabla 6.

Tabla 6

Tasa de disolución Intrínseca del Compuesto (I) y la Forma A del difumarato del Compuesto (I) en buffer acuoso a 37°C

2)1

Compuesto Tasa de disolución Intrínseca (mgmin–1cm–

pH 6.5 SGF

Compuesto (I) 0.01 19.2 difumarato del Compuesto (I) 2.51 15.9 Forma A

1Medido usando sonda de fibra 6ptica, λ =335nm, tamano del disco 4mm, temp 37°C

SGF = Fluido Gastrico Simulado

Estudios Farmacocinéticos en Perros para Comparar con el Compuesto (I) y la Forma A del difumarato del Compuesto (I)

Ambos compuestos fueron dosificados para perros como tabletas de compresi6n directa conteniendo 100 mg de la base libre del Compuesto (I), o el equivalente del mismo para las tabletas que contienen la sal de difumarato) con la siguiente composici6n:

25%p/p Compuesto (I) (o equivalente del mismo de la sal de difumarato);

10%p/p celulosa microcristalina (Avicel 102);

4%p/p croscarmelosa de sodio (AcDiSol);

1%p/p lauril sulfato de sodio;

Lactosa para 99%p/p

Estearato de magnesio para 100%p/p.

Por tableta esto equivale a:

151mg Compuesto (I);

60.4mg Avicel;

24.16mg AcDiSol;

6.04mg lauril sulfato de sodio;

356.36mg Lactosa; y

6.04mg Estearato de magnesio.

El peso total de la tableta fue 604mg.

La ejecuci6n de las formas de dosificaci6n s6lidas fue evaluada in vitro antes de comenzar el estudio con perros in-vivo.

La disoluci6n de las formas de dosificaci6n s6lidas en el medio pH 4.5 (pr6ximo a las condiciones de inmersi6n), a

100mg (equivalentes de base libre) carga del Compuesto (I), mostr6 >90% liberaci6n despues de 45minutos (Tabla 7)

indicando la conveniencia de estas formas de dosificaci6n para su uso en el estudio PK en perros.

Tabla 7 %Disolución del Compuesto (I) y la Forma A del difumarato del Compuesto (I) en buffer de citrato pH 4.5.

Compuesto %Disolución a 45minutos Compuesto (I) 93.6 Forma A del difumarato del Compuesto (I) 100.3

La ejecuci6n de las composiciones en tabletas administradas oralmente a los perros fue comparada con una inyecci6n intravenosa de una dosis del Compuesto (I) de 20mg que comprende 4mg.mL-1 disueltos y llevada al volumen con 25% p/v hidroxipropil-beta-ciclodextrina (HP-beta-CD) en agua para inyecci6n pH ajustado a 4 usando HCl 1M.

Los resultados del estudio con perros son mostrados en la Tabla 8.

Tabla 8 Resumen de los Parámetros Farmacocinéticos para el Compuesto (I) y la Forma A del difumarato del Compuesto (I) administrado oralmente y el Compuesto

(I) administrado intravenosamente en Perros Beagle Machos (n=4, media SE) Parámetro Estudio 0383KD – formulación Compuesto (I)/Ruta (Dosis)

1dosificado como tableta comprimida directa;

IV (20mg): Forma libre1 (100mg) Difumarato Forma A1 (equivalente a 100mg forma libre)

Cmax (μmol/L): 9.0 ± 1.1 14.0 ± 1.7 32.6 ± 3.6

Tmax (h): 0.2 ± 0.0 1.6 ± 0.8 1.1 ± 0.3

Vida media (h): 5.3 ± 0.2 8.2 ± 0.6 16.9 ± 4.0

AUC(0-48) (μmol.h/L): 33.4 ± 7.7 103.9 ± 25.3 190.3 ± 46.9

Cl (ml/min/kg): 1.9 ± 0.5 - -

Hbf (ml/min): 39 - -

Vss (L/kg): 0.6 ± 0.1 - -

Biodisponibilidad: (0 - 63.5 ± 7.0 112.5 ± 8.1

48h) (%)

Cmax = Concentraci6n pico en plasma

Tmax = tiempo para la maxima concentraci6n en plasma.

AUC = Area bajo la curva

Cl = Aclaramiento

Hbf = Flujo de sangre hepatica

Vss= Volumen de distribuci6n en estado de reposo

La Tabla 8 muestra que la biodisponibilidad y la concentraci6n pico en plasma (Cmax) de la Forma A del difumarato del Compuesto (I) son significativamente mejores que aquellas obtenidas para el Compuesto (I) (113 % comparado con 64 % biodisponibilidad) como se determin6 en una prueba t pareada (n=4) a un nivel de confidencia de 95 %.

Ejemplos 6 a 21 Formas B a Q del difumarato del Compuesto (I) cristalino

Analisis XRPD

Los patrones XRPD fueron recogidos usando un difract6metro Bruker D-8 Discover y Sistema Detector General de Bruker (GADDS, v. 4.1.20). Un micro-rayo incidente de radiaci6n Cu Ka fue producido usando un tubo de foco fino (40 kV, 40 mA), un espejo Gobel, y un colimador con agujero para pasador doble 0.5 mm. Antes del analisis, un estandar de silic6n (NIST SRM 640c) fue analizado para verificar la posici6n del pico Si 111. La muestra fue empacada entre peliculas delgadas de 3 Im para formar un especimen en forma de disco, portatil. El especimen preparado se carg6 en un soporte asegurado para una etapa de traslaci6n. Una camara de video y laser fueron usados para posicionar el area de interes para interceptar el rayo incidente en geometria de transmisi6n. El rayo incidente fue barrido y rastreado para optimizar las estadisticas de orientaci6n. Un pararrayos fue usado para minimizar la dispersi6n de aire del rayo incidente. Los patrones de difracci6n fueron recogidos usando un detector de area Hi-Star localizado a 15 cm de la muestra y procesado usando GADDS. La intensidad en la imagen GADDS del patr6n de difracci6n fue integrada usando un tamano de Paso de 0.04° 28. Los patrones integrados exhiben una intensidad de difracci6n como una funci6n de 28.

XRPD-temperatura variable

Los Patrones XRPD-temperatura variable (VT-XRPD) fueron recogidos usando un difract6metro de rayos X en polvo Shimadzu XRD-6000 equipado con una etapa de alta temperatura Anton Paar HTK 1200. Antes del analisis, un estandar de silic6n (NIST SRM 640c) fue analizado para verificar la posici6n del pico Si 111, y estandares de vainillina y sulfapiridina fueron analizados para verificar la temperatura de la etapa. La muestra fue empacada en un soporte de ceramica y analizada de 2.5 a 40° 28 a 3 °/minuto (0.4 seg/0.02° Paso).

XRPD – analisis microplaca

Los patrones XRPD fueron recogidos con un difract6metro Bruker D-8 Discover y Sistema de Detecci6n de la Difracci6n de Area General de Bruker (GADDS, v. 4.1.20). Un rayo incidente de radiaci6n Cu Ka fue producido usando un tubo de foco fino (40 kV, 40 mA), un espejo Gobel, y un colimador con agujero para pasador doble 0.5 mm. Las muestras fueron 5 posicionadas para analisis asegurando la placa de pocillos para una etapa de traslaci6n y moviendo cada muestra para interceptar el rayo incidente. Las muestras fueron analizadas usando una geometria de transmisi6n. El rayo incidente fue barrido y rastreado sobre la muestra durante el analisis para optimizar las estadisticas de orientaci6n. Un pararrayos fue usado para minimizar la dispersi6n de aire del rayo incidente a angulos bajos. Los patrones de difracci6n fueron recogidos usando un detector de area Hi-Star localizado a 15 cm de la muestra y procesado usando GADDS. La

10 intensidad en la imagen GADDS del patr6n de difracci6n fue integrada usando un tamano de Paso de 0.04° 28. Los patrones integrados exhiben una intensidad de difracci6n como una funci6n de 28. Antes del analisis un estandar de silic6n fue analizado para verificar la posici6n del pico Si 111.

Ejemplo 6 Preparación de la Forma B del difumarato del Compuesto (I)

Una pasta fue preparada anadiendo suficiente Forma A del difumarato del Compuesto (I) en agua de manera que un

15 exceso de s6lido estaba presente. La mezcla fue entonces agitada en un vial sellado a 4°C durante 7 dias. Los s6lidos fueron aislados por filtraci6n al vacio y analizados. El patr6n XRPD para la Forma B resultante es mostrado en la Figura

8. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma B son mostrados en la Tabla 9:

Tabla 9

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

4.7: 362 22.1 561

6.8: 984 22.8 531

7.4: 977 23.1 355

9.0: 457 23.6 459

10.3: 751 24.5 694

12.6: 1446 24.7 870

13.3: 473 25.2 388

13.6: 375 25.5 530

14.0: 656 25.9 497

14.3: 414 26.2 2683

14.6: 377 26.7 593

15.8: 579 27.0 2034

16.8: 963 27.4 697

17.3: 454 27.6 788

17.6: 352 27.8 374

17.9: 338 28.3 419

19.0: 519 28.6 792

20.1: 672 28.7 721

20.3: 1165 28.9 510

21.1: 388 29.4 538

22.0: 704 30.4 407

La Forma B se piensa que sea un hidrato, posiblemente un tetra o penta hidrato.

20 Ejemplo 7 Preparación de la Forma C del difumarato del Compuesto (I)

Una pasta fue preparada anadiendo suficiente Forma A del difumarato del Compuesto (I) a IPA/agua (90/10 v/v) de manera que un exceso de s6lido estaba presente. La mezcla fue entonces agitada en un vial sellado a 15 °C durante 6 dias. Los s6lidos fueron aislados por filtraci6n al vacio y analizados. El patr6n XRPD para la Forma C resultante es mostrado en la Figura 9. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma C son

25 mostrados en la Tabla 10: La Forma C se cree que es una forma hidrato/solvato mezclada.

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

3.5: 1014 19.5 3574

5.3: 1016 19.7 1957

6.9: 3144 20.2 1066

9.1: 1820 20.6 2120

10.1: 1648 21.0 2043

10.7: 919 21.9 1661

11.1: 917 22.6 1643

11.9: 1221 22.9 2277

12.6: 1733 23.3 1424

13.3: 1185 24.1 6452

14.0: 1316 24.5 1094

14.3: 1081 25.1 1701

15.0: 2958 25.6 1249

15.6: 1009 26.7 917

16.0: 1161 27.1 2265

17.3: 886 27.8 884

17.6: 897 28.0 874

18.1: 941 28.6 826

18.3: 871 29.5 2106

19.2: 1791 33.2 912

Ejemplo 8 Preparación de la Forma D del difumarato del Compuesto (I)

Una soluci6n de difumarato del Compuesto (I) fue preparada en acetonitrilo/agua 50/50 y una alicuota fue anadida a un pocillo de la microplaca. El solvente fue evaporado y 2-propanol/agua (90/10, v/v) fue anadido al pocillo. La placa fue sonicada y luego el solvente fue evaporado bajo vacio. El patr6n XRPD para la Forma D resultante es mostrado en la Figura 10. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma D son mostrados en la Tabla

11:

Tabla 11

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

3.3: 14.1 17.1 19.1

5.1: 39.1 19.0 21.4

6.9: 35 20.2 47.6

8.8: 14.9 21.6 39.2

10.2: 10.5 24.2 85.2

12.0: 13.6 25.8 61

14.0: 18.9 26.7 39.6

15.0: 22.5 28.1 30.3

16.2: 26.3 29.8 28.1

Ejemplo 9 Preparación de la Forma E del difumarato del Compuesto (I) Una soluci6n de difumarato del Compuesto (I) fue preparada en acetonitrilo/agua 50/50 y una alicuota fue anadida a un pocillo de la microplaca. El solvente fue evaporado y tetrahidrofurano fue anadido al pocillo. La placa fue sonicada y

luego el solvente fue evaporado bajo vacio. El patr6n XRPD para la Forma E resultante es mostrado en la Figura 11. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma E son mostrados en la Tabla 12:

Tabla 12

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

5: 1.12 20.5 61.5

6.7: 13.3 22.9 31.4

8.7: 26.7 23.8 39.8

10.4: 13.3 25.2 26

14.2: 28.7 26.1 57.5

17.0: 26.4 27.3 23.2

Ejemplo 10 Preparación de la Forma F del difumarato del Compuesto (I)

5 Una soluci6n saturada de difumarato del Compuesto (I) fue preparada en tetrahidrofurano a elevada temperatura y filtrada a traves de un filtro de nylon 0.2Im en viales previamente calentados mientras se calienta aun. Los viales fueron cubiertos y se dejaron enfriar lentamente a temperatura ambiente. La presencia o ausencia de s6lidos fue notada. Si no habia s6lidos presentes, o si la cantidad de s6lidos era considerada demasiado pequena para el Analisis XRPD, el vial fue colocado en un refrigerador. Nuevamente, la presencia o ausencia de s6lidos fue notada y si no habia ninguno, el

10 vial fue colocado en un congelador. Los s6lidos que se formaron fueron aislados por filtraci6n y se dejaron secar antes del analisis. El patr6n XRPD para la Forma F resultante es mostrado en la Figura 12.

Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma F son mostrados en la Tabla 13.

Tabla 13

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

6.3: 1491 20.1 1547

8.0: 1591 21.5 1327

13.5: 1764 22.8 2683

13.9: 1759 23.9 1397

15.0: 1349 24.8 1295

16.0: 1301 26.2 1276

19.1: 1743 27.4 970

Ejemplo 11 Preparación de la Forma G del difumarato del Compuesto (I)

15 Una soluci6n de difumarato del Compuesto (I) fue preparada en acetonitrilo/agua 50/50 y una alicuota fue anadida a un pocillo de la microplaca. El solvente fue evaporado y 2-propanol/agua 90/10, fue anadido al pocillo. La placa fue sonicada y luego el solvente fue evaporado bajo vacio. El patr6n XRPD para la Forma G resultante es mostrado en la Figura 13. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma G son mostrados en la Tabla

14.

20 Tabla 14 Ejemplo 12 Preparación de la Forma H del difumarato del Compuesto (I)

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

6.9: 919 20.2 1461

8.7: 446 21.6 925

10.1: 259 23.2 848

12.0: 488 24.1 2532

12.8: 394 25.4 753

14.0: 223 26.7 579

14.9: 695 27.4 756

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

16.2: 244 29.7 749

19.0: 366

Una soluci6n de difumarato del Compuesto (I) fue preparada en acetona/agua (95/5, v/v), y sonicada entre adiciones de

5 alicuotas para ayudar a la disoluci6n. Una vez que la mezcla alcanz6 la disoluci6n completa, considerado por observaci6n visual, la soluci6n fue filtrada a traves de un filtro de nylon 0.2Im. La soluci6n filtrada se dej6 evaporar bajo condiciones ambientales en un vial sin tapa. Los s6lidos que se formaron fueron aislados y analizados. El patr6n XRPD para la Forma H resultante es mostrado en la Figura 14. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma H son mostrados en la Tabla 15:

10 Tabla 15

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

4. 8: 1837 16.9 1603

5.2: 2010 23.3 1786

6.8: 1639 25.2 2564

13.2: 1563 25.4 2231

13.8: 1603 26.1 1698

15.8: 1625 27.6 1864

16.5: 1658

Ejemplo 13 Preparación de la Forma I del difumarato del Compuesto (I)

Una soluci6n de difumarato del Compuesto (I) fue preparada en metanol a temperatura ambiente. La soluci6n fue entonces filtrada en tolueno a temperatura ambiente. El s6lido resultante fue aislado por filtraci6n y secado antes del analisis. El patr6n XRPD para la Forma I resultante es mostrado en la Figura 15. Los picos mas prominentes de la

15 difracci6n de rayos X en polvo para la Forma I son mostrados en la Tabla 16:

Tabla 16

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

10.7: 2170 17.4 1868

11.1: 1793 21.7 1947

14.3: 1728 22.1 2130

14.8: 2080 24.8 1688

16.0: 2165 26.8 1643

Ejemplo 14 Preparación de la Forma J del difumarato del Compuesto (I)

Una soluci6n de difumarato del Compuesto (I) fue preparada en metanol a temperatura ambiente. La soluci6n fue entonces filtrada en un exceso de heptano a temperatura ambiente. El s6lido resultante fue aislado por filtraci6n y 20 secado antes del analisis. El patr6n XRPD para la Forma J resultante es mostrado en la Figura 16. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma J son mostrados en la Tabla 17:

Tabla 17

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

7.0: 1804 19.1 2165

7.6: 2353 20.1 2723

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

8.7: 2306 21.6 3417

10.5: 2129 22.5 2094

11.9: 1719 23.8 3119

12.2: 1802 24.4 2048

12.9: 1696 25.4 2041

14.7: 2171 27.3 1978

16.1: 1728 29.5 1501

17.4: 2079

Ejemplo 15 Preparación de la Forma K del difumarato del Compuesto (I)

Una soluci6n de difumarato del Compuesto (I) fue preparada en acetonitrilo/agua (50/50 v/v) y una alicuota fue anadida a un pocillo de la microplaca. El solvente fue evaporado y fluorobenceno fue anadido al pocillo. La placa fue sonicada y luego el solvente fue evaporado bajo condiciones ambientales. El patr6n XRPD para la Forma K resultante es mostrado en la Figura 17. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma K son mostrados en la Tabla 18:

Tabla 18

Ángulo 2-Theta °: Conteo intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo intensidad

10.5: 32.3 23.0 76.3

11.8: 109 23.9 101

12.3: 96.7 24.6 198

13.0: 49.4 25.5 133

14.2: 11.8 27.4 191

16.1: 41 29.4 140

20.4: 137 31.8 39.3

21.4: 128 33.9 50.6

21.8: 112 34.8 69.6

10 Ejemplo 16 Preparación de la Forma L del difumarato del Compuesto (I)

Una soluci6n de difumarato del Compuesto (I) fue preparada en acetonitrilo/agua 50/50 (v/v) y una alicuota fue anadida a un pocillo de la microplaca. El solvente fue evaporado y 1,1,1,3,3,3 hexafluoro-2-propanol fue anadido al pocillo. La placa fue sonicada y luego el solvente fue evaporado bajo condiciones ambientales. El patr6n XRPD para la Forma L resultante es mostrado en la Figura 18. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma L

15 son mostrados en la Tabla 19:

Tabla 19

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

7.1: 13.7 22.9 55.4

9.7: 10.1 23.5 21.8

11.1: 17.9 26.0 34.7

14.7: 17 26.9 30.4

18.2: 20.4 27.7 24.1

18.7: 15.7 28.9 42.7

19.6: 14.8 29.5 19.8

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

21.2: 25.8 33.7 11.4

21.8: 21.1

Ejemplo 17 Preparación de difumarato del Compuesto (I) Forma M

Una soluci6n de difumarato del Compuesto (I) fue preparada en acetonitrilo/agua (50/50 v/v) y una alicuota fue anadida a un pocillo de la microplaca. El solvente fue evaporado y 2-propanol/agua (90/10 v/v), fue anadido al pocillo. La placa fue sonicada y luego el solvente fue evaporado bajo condiciones ambientales. El patr6n XRPD para la Forma M resultante es mostrado en la Figura 19. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma M son mostrados en la Tabla 20:

Tabla 20

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

5.3: 41.8 23.9 72.2

6.7: 18.6 25.4 54.8

16.1: 20 27.4 41.9

20.1: 125 29.5 25.8

21.5: 63.3 31.2 25.4

10 Ejemplo 18 Preparación de la Forma N del difumarato del Compuesto (I)

Una soluci6n de difumarato del Compuesto (I) fue preparada en acetonitrilo/agua (50/50 v/v) y una alicuota fue anadida a un pocillo de la microplaca. El solvente fue evaporado y acetona/agua (60/40 v/v), fue anadido al pocillo. La placa fue sonicada y luego el solvente fue evaporado a 4°C. El patr6n XRPD para la Forma N resultante es mostrado en la Figura

20. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma N son mostrados en la Tabla 21: 15 Tabla 21

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

5.3: 59.2 13.9 28.2

6.9: 36.2 23.5 51.1

9.2: 23.2 25.6 80.3

10.5: 8.5 26.4 60.5

12.2: 9.01 27.8 62.3

13.3: 25.1

Ejemplo 19 Preparación de la Forma O del difumarato del Compuesto (I)

Una soluci6n de difumarato del Compuesto (I) fue preparada en acetonitrilo/agua (50/50 v/v) y una alicuota fue anadida a un pocillo de la microplaca. El solvente fue evaporado y etanol/agua (30/70 v/v), fue anadido al pocillo. La placa fue sonicada y luego el solvente fue evaporado a 4°C. El patr6n XRPD para la Forma O resultante es mostrado en la Figura

20 21. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma O son mostrados en la Tabla 22:

Tabla 22

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

6.9: 28.5 24.0 223

8.7: 21.7 25.5 59.1

11.9: 27.6 26.4 56.2

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

14.9: 36.8 27.4 63.7

20.2: 87.4 29.5 58.4

21.8: 70.6

Ejemplo 20 Preparación de la Forma P del difumarato del Compuesto (I)

Una soluci6n de difumarato del Compuesto (I) fue preparada en acetonitrilo/agua (50/50 v/v) y una alicuota fue anadida a un pocillo de la microplaca. El solvente fue evaporado y 2-propanol/agua (90/10 v/v) fue anadido al pocillo. La placa fue sonicada y luego el solvente fue evaporado a 4°C. El patr6n XRPD para la Forma P resultante es mostrado en la Figura 22. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma P son mostrados en la Tabla

23:

Tabla 23

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

5.3: 9.97 26.5 23.2

7.2: 9.97 27.2 27.9

14.8: 15.8 27.9 20.3

24.1: 30.6 29.5 23.2

25.6: 29.3

10 Ejemplo 21 Preparación de la Forma Q del difumarato del Compuesto (I)

La Forma Q fue observada cuando la Forma B fue calentada a 150 °C durante el analisis XRPD a temperatura variable. El patr6n XRPD para la Forma Q es mostrado en la Figura 23. Los picos mas prominentes de la difracci6n de rayos X en polvo para la Forma Q son mostrados en la Tabla 24:

Tabla 24

Ángulo 2-Theta °: Conteo Intensidad Ángulo 2-Theta ° Conteo Intensidad

8.0: 92 24.9 290

12.5: 210 25.9 358

17.8: 130 26.3 280

18.9: 212 27.6 110

20.9: 318 35.4 552

22.7: 316 38.1 244

23.9: 272

15 Ejemplo 22 Formulación en tableta del difumarato del Compuesto (I)

Los ingredientes en polvo mostrados a continuaci6n fueron cargados en un mezclador y mezclados para producir una distribuci6n uniforme del difumarato del Compuesto (I). Una soluci6n aglutinante fue preparada y anadida a los polvos con mezclado adicional hasta que una masa humeda adecuada se form6. La masa humeda fue pasada a traves de un tamiz y los granulos resultantes secados a un contenido de humedad apropiado (por ejemplo menor que 2% por peso).

20 Los granulos secados fueron pasados a traves de un tamiz de tamano apropiado y mezclados con estearato de magnesio antes de ser comprimidos en nucleos de tabletas usando equipamientos convencionales para la formaci6n de tabletas. Los nucleos comprimidos fueron luego recubiertos con una suspensi6n acuosa de componentes de recubrimiento de pelicula usando un recubridor de tambor perforado convencional.

Las tabletas recubiertas con la pelicula conteniendo Forma A del difumarato del Compuesto (I) equivalente a 2.5, 10, 40 25 y 100 mg del compuesto (I) preparado como se describi6 anteriormente son ilustradas en la Tabla 25.

Tabla 25

Fortaleza de la Tableta1 Ingrediente: 2.5 mg g/lote 10 mg g/lote 40 mg g/lote 100mg g/lote

Núcleo de la Tableta

Forma A2 del difumarato del Compuesto (I) Lactosa (450 malla): 37.25 782.75 149.0 671.0 448.1 371.9 448.1 371.9

Celulosa microcristalina (PH101): 100.0 100.0 100.0 100.0

Crospovidona: 50.0 50.0 50.0 50.0

Polividona: 20.0 20.0 20.0 20.0

Estearato de magnesio: 10.0 10.0 10.0 10.0

Peso del nucleo de la tableta Recubrimiento de la tableta: 100 mg 100 mg 133 mg 333 mg

Opadry White (03B28460) Hipromelosa3 Di6xido de titanio3: 23.0 15.0 5.0 23.0 15.0 5.0 23.3 15.0 5.3 23.0 15.0 5.0

Macrogol 3003 Agua purificada4: 3.0 177.0 3.0 177.0 3.0 176.7 3.0 177.0

Peso de la tableta recubierta nominal: 102.1 mg 102.1 mg 136.1 mg 140.6 mg

1. Fortaleza de la tableta se refiere a la cantidad equivalente de la base libre del Compuesto (I) presente en la tableta.

2. El difumarato del Compuesto (I) se microniz6 antes de la formulaci6n para proporcionar un tamano de particula 5 medio menor de aproximadamente 5 !m.

3.: La hipromelosa, macrogol 300 y di6xido de titanio estan incluidos como Opadry White (03B28460), suministrado por Colorcon.

4.: Agua purificada es usada como el solvente/ fluido portador durante el recubrimiento de pelicula y es eliminado durante el proceso de recubrimiento.

10 Un proceso de fabricaci6n adecuado es esbozado a continuaci6n:

COMPONENTES PROCESO

-

ETAPA 1: MEZCLA EN SECO

ETAPA 2: MEZCLA EN HÚMEDO

ETAPA 3: GRANULACIÓN HÚMEDA

ETAPA 4: SECADO

ETAPA 5: GRANULACIÓN SECA

ETAPA 7: COMPRESIÓN

ETAPA 8: RECUBRIMIENTO

ETAPA 9: EMPAQUE EN BOTELLAS HDPE

Claims

REIVINDICACIONES

1.

Difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina.
2.

Difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina cristalino.
3.

Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4il]oxi}quinazolina, donde dicha Forma A tiene un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo, medido utilizando radiaci6n Cu K�, con al menos un pico especifico a alrededor de 2-theta = 26.4° � 0.5°.
4.

Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4il]oxi}quinazolina de acuerdo con la reivindicaci6n 3, donde dicha Forma A tiene un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo, medido utilizando radiaci6n Cu K�, con al menos un pico especifico a alrededor de 2-theta = 26.4° � 0.5°, 14.9 � 0.5° o 7.1° � 0.5°.
5.

Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4il]oxi}quinazolina de acuerdo con la reivindicaci6n 3, donde dicha Forma A tiene un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo, medido utilizando radiaci6n Cu K�, con al menos un pico especifico a alrededor de 2-theta = 26.4° � 0.5°, 24.0° � 0.5°, 14.9° � 0.5°, 12.4° � 0.5° o 7.1° � 0.5°.
6.

Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4il]oxi}quinazolina de acuerdo con la reivindicaci6n 3, donde dicha Forma A tiene un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo, medido utilizando radiaci6n Cu K�, con picos especificos a alrededor de 2-theta = 26.4° � 0.5°, 14.9° � 0.5° y 7.1° � 0.5°.
7.

Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4il]oxi}quinazolina de acuerdo con la reivindicaci6n 3, donde dicha Forma A tiene un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo, medido utilizando radiaci6n Cu K�, con picos especificos a alrededor de 2-theta = 26.4° � 0.5°, 24.0° � 0.5°, 14.9° � 0.5°, 12.4° � 0.5° y 7.1° � 0.5°.
8.

Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4il]oxi}quinazolina de acuerdo con la reivindicaci6n 3, donde dicha Forma A tiene un patr6n de difracci6n de rayos X en polvo, medido utilizando radiaci6n Cu K�, con picos especificos a alrededor de 2-theta = 26.4° � 0.5°, 24.0° � 0.5°, 23.0° � 0.5°, 21.2° � 0.5°, 17.3° � 0.5°, 15.4° � 0.5°, 14.9° � 0.5°, 13.0° � 0.5°, 12.4° � 0.5° y 7.1° � 0.5°.
9.

Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4il]oxi}quinazolina, medido utilizando radiaci6n Cu K�, de acuerdo con la reivindicaci6n 3, donde dicha Forma A tiene un punto de fusi6n de 210°C � 0.5°, como se determin6 por el analisis de calorimetria diferencial de barrido (DSC) usando un aparato Mettler DSC820e.
10.

Un proceso para la preparaci6n de la Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(Nmetilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolinatal como se define en la reivindicaci6n 3 que comprende:

(i)

reaccionar 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina con una cantidad suficiente de acido fumarico para formar la sal de difumarato;

(ii)

cristalizar el difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4il]oxi}quinazolina; y

(iii) aislar la Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(Nmetilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina.
11.

El proceso de acuerdo con la reivindicaci6n 10 donde el Paso (i) del proceso es llevado a cabo en una mezcla de solventes que comprende metanol e isopropanol.
12.

El proceso de acuerdo con la reivindicaci6n 11 donde la relaci6n en volumen de isopropanol a metanol es de alrededor de 3.4:1 a alrededor de 1.0:1.
13.

El proceso de acuerdo con la reivindicaci6n 10 donde el Paso (i) del proceso es llevado a cabo en una mezcla de solventes que comprende acetato de etilo e isopropanol.
14.

El proceso de acuerdo con la reivindicaci6n 13 donde la relaci6n en volumen de acetato de etilo a isopropanol es desde alrededor de 5.1:1 a alrededor de 1.9:1.
15.

El proceso de acuerdo con la reivindicaci6n 10 donde el Paso (i) del proceso es llevado a cabo en agua.
16.

El proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 10 a 15 donde la 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina es reaccionada con al menos 2 equivalentes molares de acido fumarico.
17.

Un proceso para la preparaci6n de la Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(Nmetilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina tal como se define en la reivindicaci6n 3 que comprende:

(i)

reaccionar una soluci6n o suspensi6n de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(Nmetilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina en acetato de etilo con al menos 1.725 equivalentes molares de acido fumarico en isopropanol,

donde la relaci6n en volumen de acetato de etilo a isopropanol es adecuada desde alrededor de 5:1 a 1:1, por ejemplo de alrededor de 5.1:1 a 1.9:1 y donde la reacci6n es llevada a cabo a una temperatura de alrededor de 20 a alrededor de 73oC;

(ii)

enfriar la mezcla de reacci6n del Paso (i) a alrededor de 20oC y mantener la mezcla a esta temperatura para efectuar la cristalizaci6n de la Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(Nmetilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina; y

(iii) aislar la Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(Nmetilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina.
18.

Un proceso de acuerdo con la reivindicaci6n 17 donde la 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(Nmetilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina es reaccionada con al menos 2 equivalentes molares de acido fumarico.
19.

Un proceso para la preparaci6n de la Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(Nmetilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina tal como se define en la reivindicaci6n 3 que comprende los Pasos:

(i)

reaccionar una soluci6n o suspensi6n de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(Nmetilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina en agua con al menos 2 equivalentes molares de acido fumarico, donde la reacci6n es llevada a cabo a alrededor de 85oC;

(ii)

enfriar la mezcla de reacci6n del Paso (i) a alrededor de 60oC; y

(iii) aislar la Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(Nmetilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina.
20.

El proceso de acuerdo con la reivindicaci6n 19 donde en el Paso (ii) la mezcla de reacci6n es enfriada a una tasa de alrededor de 1oC por minuto.
21.

Una composici6n farmaceutica que comprende difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(Nmetilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en asociaci6n con un diluente o portador farmaceuticamente aceptable.
22.

Una composici6n farmaceutica la cual es una tableta que comprende:

difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9; lactosa; celulosa microcristalina; crospovidona; polividona; y estearato de magnesio;

y donde la tableta esta opcionalmente recubierta con un recubrimiento, dicho recubrimiento contiene opcionalmente uno

o mas agentes colorantes y/o protectores de la luz.
23.

Una composici6n farmaceutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 21 a 22, donde el difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4-il ]oxi}quinazolina es la Forma A del difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina tal como se define en la reivindicaci6n 3.
24.

Difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, para su uso como un medicamento.
25.

El uso de difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4il]oxi}quinazolina de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 en la fabricaci6n de un medicamento para su uso en el tratamiento de un cancer.
26.

Difumarato de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(N-metilcarbamoilmetil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 para su uso en el tratamiento de un cancer.

2102030 40

Escala 2-Theta

Figura 1

Lab: TTL

Figura 2A

Figura 2B

Figura 3

2102030 4 Escala 2-Theta

Figura 4

Lab: TTL

Figura 5

Figura 6

Isoterma de sorción dinámica de vapor para la Forma A del difumarato del Compuesto (I)

Figura 7

5 10 20 30 Escala 2-Theta Figura 8

510 20 30 40 Escala 2-Theta

Figura 9

Patrón de difracción de rayos X en polvo para la Forma D del difumarato del Compuesto (I)

2 10 20 30 Escala 2-Theta

Figura 10

Patrón de difracción de rayos X en polvo para la Forma E del difumarato del Compuesto (I)

2 10 20 30 Escala 2-Theta

Figura 11

2 10 20 30 Escala 2-Theta

Figura 12

2 10 20 30 Escala 2-Theta Figura 13

Patrón de difracción de rayos X en polvo para la Forma H del difumarato del Compuesto (I)

3 10 20 30 Escala 2-Theta

Figura 14

3 10 20 30 Escala 2-Theta

Figura 15

Patrón de difracción de rayos X en polvo para la Forma J del difumarato del Compuesto (I)

3 10 20 30 Escala 2 -Theta

Figura 16

Patrón de difracción de rayos X en polvo para la Forma K del difumarato del Compuesto (I)

3 10 20 30 Escala 2-Theta

Figura 17

Patrón de difracción de rayos X en polvo para la Forma L del difumarato del Compuesto (I)

3 10 20 30 Escala 2-Theta

Figura 18

3 10 20 30 Escala 2-Theta

Figura 19

Patrón de difracción de rayos X en polvo para la Forma N del difumarato del Compuesto (I)

2 10 20 30 Escala 2-Theta

Figura 20

Patrón de difracción de rayos X en polvo para la Forma O del difumarato del Compuesto (I)

2 10 20 30 Escala 2-Theta

Figura 21

Patrón de difracción de rayos X en polvo para la Forma P del difumarato del Compuesto (I)

2 10 20 30 Escala 2-Theta

Figura 22

Patrón de difracción de rayos X en polvo para la Forma Q del difumarato del Compuesto (I)

510 20 30 40 Escala 2-Theta

Figura 23