ES2281007T3

ES2281007T3 - Derivados de quinazolina.

Info

Publication number: ES2281007T3
Application number: ES04768652T
Authority: ES
Inventors: Robert Hugh Bradbury; Laurent Francois Andre Hennequin; Bernard Christophe Barlaam
Original assignee: AstraZeneca AB
Current assignee: AstraZeneca AB
Priority date: 2003-09-19
Filing date: 2004-09-15
Publication date: 2007-09-16
Anticipated expiration: 2024-09-15
Also published as: HK1091486A1; DE602004004811T2; WO2005028470A1; CN1882570A; EP1670782A1; DE602004004811D1; EP1670782B1; ATE353888T1; CN1882570B; JP2007505878A; US20070037837A1

Abstract

Un derivado de quinazolina de la **Fórmula**, en la que n es 0, 1, 2 ó 3, cada R5 se selecciona independientemente de halógeno, ciano, nitro, hidroxi, amino, carboxi, sulfamoilo, trifluorometilo, alquilo (C1-6), alquenilo (C2-8), alquinilo (C2-8), alcoxi (C1-6), alquenil(C2-6)oxi, alquinil(C2-6)oxi, alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)-sulfonilo, alquil(C1-6)amino, di-[alquil(C1-6)]amino, alcoxi(C1-6)carbonilo, N-alquil(C1-6)sulfamoilo, y N, N-di-[alquil(C1-6)]-sulfamoilo, C(O)NR6R7 en el que R6 y R7 se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo (C1-6) opcionalmente sustituido, cicloalquilo (C3-8) opcionalmente sustituido o arilo opcionalmente sustituido, o R6 y R7, junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico opcionalmente sustituido que puede contener heteroátomos adicionales; X1 es un enlace directo o O; R1 se selecciona de hidrógeno y alquilo (C1-6), en el que el grupo alquilo (C1-6) está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados de hidroxi y halógeno, y/o un sustituyente seleccionado de amino, nitro, carboxi, ciano, halógeno, alcoxi (C1-6), hidroxi-alcoxi(C1-6), alquenilo (C2-8), alquinilo (C2-8), alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)-sulfonilo, alquil(C1-6)amino, di-[alquil(C1-6)]amino, carbamoilo, N-alquil(C1-6)carbamoilo, N, N-di-[alquil(C1-6)]carbamoilo, alcanoilo (C2-6), alcanoil(C2-6)-oxi, alcanoil(C2-6)amino, N-alquil(C1-6)-alcanoil(C2-6)-amino, alcoxi(C1-6)carbonilo, sulfamoilo, N-alquil(C1-6)-sulfamoilo, N, N-di-[alquil(C1-6)]-sulfamoilo, alcano (C1-6)-sulfonilamino y N-alquil(C1-6)-alcano (C1-6)sulfonilamino; R2 es alquilo (C1-6), alquenilo (C2-6) o alquinilo (C2-6), cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido con fluoro, alcoxi (C1-6), alquil (C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)-sulfonilo, o un grupo de la subfórmula (i).

Description

Derivados de quinazolina.

La invención se refiere a ciertos derivados de quinazolina nuevos, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, que poseen actividad antitumoral y, en consecuencia, son útiles en métodos de tratamiento del cuerpo humano o animal. La invención también se refiere a procedimientos para la fabricación de dichos derivados de quinazolina, a composiciones farmacéuticas que los contienen, y a su uso en métodos terapéuticos, por ejemplo en la fabricación de medicamentos para uso en la prevención o tratamiento de la enfermedad de tumores sólidos en un animal de sangre caliente, tal como el hombre.

Muchos de los actuales regímenes de tratamiento para enfermedades que resultan de la regulación anormal de la proliferación celular, tales como psoriasis y cáncer, utilizan compuestos que inhiben la síntesis de ADN y la proliferación celular. Hasta la fecha, los compuestos usados en tales tratamientos son generalmente tóxicos para las células; sin embargo, sus efectos potenciados, sobre células que se dividen rápidamente, tales como células tumorales, pueden ser beneficiosos. Actualmente se están desarrollando enfoques alternativos a estos agentes antitumorales citotóxicos, por ejemplo inhibidores selectivos de las rutas de señalización celular. Estos tipos de inhibidores probablemente tengan el potencial para presentar una mejor selectividad de acción contra células tumorales, y es probable que reduzcan la probabilidad de los efectos secundarios indeseados que posee la terapia.

Las células eucariotas responden continuamente a muchas señales extracelulares diversas que permiten la comunicación entre las células en un organismo. Estas señales regulan una amplia variedad de respuestas físicas en la célula, incluyendo la proliferación, diferenciación, apoptosis y movilidad. Las señales extracelulares toman la forma de una variedad diversa de factores solubles, incluyendo factores de crecimiento así como factores paracrinos y endocrinos. Mediante la unión a receptores transmembránicos específicos, estos ligandos integran la señal extracelular a las rutas de señalización intracelular, transduciendo por lo tanto la señal a través de la membrana plasmática, y permitiendo que la célula individual responda a sus señales extracelulares. Muchos de estos procesos de transducción de señales utilizan el proceso reversible de la fosforilación de proteínas que están implicadas en la promoción de estas diversas respuestas celulares. El estado de la fosforilación de proteínas dianas está regulado por quinasas y fosfatasas específicas que son responsables de la regulación de alrededor de un tercio de todas las proteínas codificadas por el genoma de mamíferos. Puesto que la fosforilación es un mecanismo regulador tan importante en el proceso de transducción de señales, por lo tanto no es sorprendente que las aberraciones en estas rutas intracelulares den como resultado un crecimiento y diferenciación celular anormal, y promuevan así la transformación celular (revisado en Cohen et al, Curr Opin Chem Biol, 1999, 3, 459-465).

Se ha demostrado ampliamente que un número de estas tirosina quinasas mutan a formas constitutivamente activas, y/o, cuando se sobreexpresan, dan como resultado la transformación de una variedad de células humanas. Estas formas mutadas y sobreexpresadas de la quinasa están presentes en una gran proporción de tumores humanos (repasado en Kolibaba et al, Biochimica et Biophysica Acta, 1997, 133, F217-F248). Puesto que las tirosina quinasas desempeñan papeles fundamentales en la proliferación y diferenciación de una variedad de tejidos, se ha centrado mucha atención en estas enzimas en el desarrollo de nuevas terapias contra el cáncer. Esta familia de enzimas se divide en dos grupos - tirosina quinasas receptoras y no receptoras, por ejemplo receptores de EGF y la familia de SRC, respectivamente. A partir de los resultados de un gran número de estudios, incluyendo el Proyecto de Genoma Humano, se han identificado en el genoma humano alrededor de 90 tirosina quinasas, de las cuales 58 son del tipo receptoras y 32 son del tipo no receptoras. Éstas se pueden dividir en compartimientos en 20 subfamilias de tirosina quinasas receptoras y 10 subfamilias de tirosina quinasas no receptoras (Robinson et al, Oncogene, 2000, 19, 5548-5557).

Las tirosina quinasas receptoras son de particular importancia en la transmisión de señales mitógenas que inician la replicación celular. Estas grandes glicoproteínas, que se extienden a través de la membrana plasmática de la célula, poseen un dominio de unión extracelular para sus ligandos específicos (tales como el Factor de Crecimiento Epidérmico (EGF) para el Receptor de EGF). La unión del ligando da como resultado la activación de la actividad enzimática de la quinasa del receptor, que está codificada por la porción intracelular del receptor. Esta actividad fosforila aminoácidos de tirosina claves en proteínas diana, dando como resultado la transducción de señales proliferativas a través de la membrana plasmática de la célula.

Se sabe que la familia de erbB de tirosina quinasas receptoras, que incluye EGFR, erbB2, erbB3 y erbB4, están implicadas frecuentemente en la conducción de la proliferación y supervivencia de células tumorales (repasado en Olayioye et al., EMBO J., 2000, 19, 3159). Un mecanismo en el que esto se puede lograr es mediante la sobreexpresión del receptor al nivel de la proteína, generalmente como resultado de la amplificación génica. Esto se ha observado en muchos cánceres humanos habituales (repasado en Klapper et al., Adv. Cancer Res., 2000, 77, 25), tales como cáncer de mama (Sainsbury et al., Brit. J. Cancer, 1988, 58, 458; Guerin et al., Oncogene Res., 1988, 3, 21; Slamon et al., Science, 1989, 244, 707; Klijn et al., Breast Cancer Res. Treat., 1994, 29, 73 y repasado en Salomon et al., Crit. Rev. Oncol. Hematol., 1995, 19, 183), cánceres de pulmón no microcíticos (NSCLC) incluyendo adenocarcinomas (Cerny et al., Brit. J. Cancer, 1986, 54, 265; Reubi et al., Int. J. Cancer, 1990, 45, 269; Rusch et al., Cancer Research, 1993, 53, 2379; Brabender et al., Clin. Cancer Res., 2001, 7, 1850), así como otros cánceres del pulmón (Hendler et al., Cancer Cells, 1989, 7, 347; Ohsaki et al., Oncol. Rep., 2000, 7, 603), cáncer de vejiga (Neal et al., Lancet, 1985, 366; Chow et al., Clin. Cancer Res., 2001, 7, 1957, Zhau et al., Mol Carcinog., 3, 254), cáncer esofágico (Mukaida et al., Cancer, 1991, 68, 142), cáncer gastrointestinal tal como cáncer de colon, rectal o de estómago (Bolen et al., Oncogene Res., 1987, 1, 149; Kapitanovic et al., Gastroenterology, 2000, 112, 1103; Ross et al., Cancer Invest., 2001, 19, 554), cáncer de la próstata (Visakorpi et al., Histochem. J., 1992, 24, 481; Kumar et al., 2000, 32, 73; Scher et al., J. Natl. Cancer Inst., 2000, 92, 1866), leucemia (Konaka et al., Cell, 1984, 37, 1035, Martin-Subero et al., Cancer Genet Cytogenet., 2001, 127, 174), ovárico (Hellstrom et al., Cancer Res., 2001, 61, 2420), de cabeza y de cuello (Shiga et al., Head Neck, 2000, 22, 599) o cáncer pancreático (Ovotny et al., Neoplasma, 2001, 48, 188). Puesto que más tejidos de tumores humanos se ensayan para la expresión de la familia de erbB de tirosina quinasas receptoras, es de esperar que su prevalencia e importancia tan extendidas se potenciarán adicionalmente en el
futuro.

Como consecuencia de la mala regulación de uno o más de estos receptores, se cree ampliamente que muchos tumores se hacen clínicamente más agresivos y así se correlacionan con un peor pronóstico para el paciente (Brabender et al., Clin. Cancer Res., 2001, 7, 1850; Ross et al., Cancer Investigation, 2001, 19, 554, Yu et al., Bioessays, 2000, 22.7, 673). Además de estos hallazgos clínicos, una abundancia de información preclínica sugiere que la familia de erbB de tirosina quinasas receptoras está implicada en la transformación celular. Esto incluye las observaciones de que muchas estirpes celulares tumorales sobreexpresan uno o más de los receptores de erbB, y de que EGFR o erbB2, cuando se transfectan en células no tumorales, tienen la capacidad para transformar estas células. Este potencial tumorígeno se ha verificado adicionalmente puesto que los ratones transgénicos que sobreexpresan erbB2 desarrollan espontáneamente tumores en la glándula mamaria. Además de esto, un número de estudios preclínicos ha demostrado que se pueden inducir efectos antiproliferativos eliminando una o más actividades de erbB mediante inhibidores de pequeñas moléculas, anticuerpos negativos o inhibidores dominantes (repasado en Mendelsohn et al., Oncogene, 2000, 19, 6550). De este modo, se ha reconocido que los inhibidores de estas tirosina quinasas receptoras serían valiosos como un inhibidor selectivo de la proliferación de células cancerígenas de mamíferos (Yaish et al., Science, 1988, 242, 933, Kolibaba et al, Biochimica et Biophysica Acta, 1997, 133, F217-F248; Al-Obeidi et al., 2000, Oncogene, 19, 5690-5701; Mendelsohn et al, 2000, Oncogene, 19, 6550-6565). Además de estos datos preclínicos, los hallazgos usando anticuerpos inhibidores contra EGFR y erbB2 (c-225 y trastuzumab respectivamente) han demostrado ser beneficiosos, en el hospital, para el tratamiento de tumores sólidos seleccionados (repasado en Mendelsohn et al., 2000, Oncogene, 19, 6550-6565).

La amplificación y/o actividad de miembros de tirosina quinasas receptoras de tipo erbB se han detectado y se han amplificado así para desempeñar un papel en un número de trastornos proliferativos no tumorales, tales como psoriasis (Ben-Bassat, Curr. Pharm. Des., 2000, 6, 933; Elder et al., Science, 1989, 243, 811), hiperplasia prostática benigna (BPH) (Kumar et al., Int. Urol. Nephrol., 2000, 32, 73), aterosclerosis y restenosis (Bokemeyer et al., Kidney Int., 2000, 58, 549). Por lo tanto, es de esperar que los inhibidores de tirosina quinasas receptoras de tipo erbB serán útiles en el tratamiento de estos y de otros trastornos no tumorales de proliferación celular excesiva.

La Solicitud de Patente Europea EP 566.226 describe ciertas 4-anilinoquinazolinas que son inhibidores de tirosina quinasas receptoras.

Las Solicitudes de Patentes Internacionales WO 96/33977, WO 96/33978, WO 96/33979, WO 96/33980, WO 96/33981, WO 97/30034 y WO 97/38994 describen que ciertos derivados de quinazolina, que tienen un sustituyente anilino en la posición 4, y un sustituyente en la posición 6 y/ó 7, poseen actividad inhibidora de tirosina quinasas receptoras.

La Solicitud de Patente Europea EP 837.063 describe derivados de 4-aminoquinazolina sustituidos con arilo, que tienen un resto que contiene un grupo arilo o heteroarilo en la posición 6 ó 7 en el anillo de quinazolina. Se afirma que los compuestos son útiles para tratar trastornos hiperproliferativos.

Las Solicitudes de Patentes Internacionales WO 97/30035 y WO 98/13354 describen que ciertas 4-anilinoquinazolinas sustituidas en la posición 7 son inhibidores de tirosina quinasas del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular.

El documento WO 00/55141 describe compuestos de 4-anilinoquinazolina 6,7-sustituidos, caracterizado porque los sustituyentes en la posición 6 y/ó 7 tienen un resto enlazado mediante éster (RO-CO).

El documento WO 00/56720 describe compuestos de 6,7-dialcoxi-4-anilinoquinazolina para el tratamiento de cáncer o reacciones alérgicas.

El documento WO 02/41882 describe compuestos de 4-anilinoquinazolina sustituidos en la posición 6 y/ó 7 con un grupo pirrolidinil-alcoxi o piperidinil-alcoxi sustituido.

El documento WO 03/082290 describe ciertos compuestos de 4-anilinoquinazolina 6,7-sustituidos que poseen actividad inhibidora de tirosina quinasas receptoras. Un ejemplo específico de tal compuesto es 6-{[1-(N-metilcarbamoil-metil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-4-fluoroanilino)-7-metoxi-quinazolina.

Ninguno de la técnica anterior describe compuestos de 4-(2,3-dihalogenoanilino)quinazolina o 4-(2,3,4-trihalogenoanilino)quinazolina.

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La Solicitud de Patente Internacional nº PCT/GB03/01306, describe que ciertos derivados de 4-(2,3-dihalogenoanilino)-quinazolina poseen actividad antitumoral potente, y en particular son selectivos frente a EGFR. Un ejemplo específico de tal compuesto es 6-(1-acetilpiperidin-4-iloxi)-4-(3-cloro-2-fluoro-anilino)-7-metoxiquinazolina.

Sorprendentemente se ha encontrado, sin embargo, que la modificación de una cadena lateral y, opcionalmente, la adición de un sustituyente adicional al grupo anilina, produce un grupo selecto de compuestos con actividad potenciada, por cuanto los compuestos tienen un buen efecto inhibidor de quinasa de erbB2 además de un efecto inhibidor de EGF, haciéndolos de particular aplicación clínica en el tratamiento de tumores en los que están implicadas estas quinasas.

Sin desear sugerir que los compuestos descritos en la presente invención poseen actividad farmacológica sólo en virtud de un efecto sobre un único proceso biológico, se cree que los compuestos proporcionan un efecto antitumoral mediante la inhibición de dos de la familia de erbB de tirosina quinasas receptoras que están implicadas en las etapas de transducción de señales que conducen a la proliferación de células tumorales. En particular, se cree que los compuestos de la presente invención proporcionan un efecto antitumoral mediante la inhibición de tirosina quinasas receptoras de EGFR y/o erbB2.

Según un primer aspecto de la invención, se proporciona un derivado de quinazolina de la Fórmula I:

1

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en la que n es 0, 1, 2 ó 3,

cada R^{5} se selecciona independientemente de halógeno, ciano, nitro, hidroxi, amino, carboxi, sulfamoilo, trifluorometilo, alquilo (C1-6), alquenilo (C2-8), alquinilo (C2-8), alcoxi (C1-6), alquenil(C2-6)oxi, alquinil(C2-6)oxi, alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)-sulfonilo, alquil(C1-6)amino, di-[alquil(C1-6)]amino, alcoxi(C1-6)carbonilo, N-alquil(C1-6)sulfamoilo, y N,N-di-[alquil(C1-6)]-sulfamoilo, C(O)NR^{6}R^{7} en el que R^{6} y R^{7} se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo (C1-6) opcionalmente sustituido, cicloalquilo (C3-8) opcionalmente sustituido o arilo opcionalmente sustituido, o R^{6} y R^{7}, junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico opcionalmente sustituido que puede contener heteroátomos adicionales;

X^{1} es un enlace directo o O;

R^{1} se selecciona de hidrógeno y alquilo (C1-6), en el que el grupo alquilo (C1-6) está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados de hidroxi y halógeno, y/o un sustituyente seleccionado de amino, nitro, carboxi, ciano, halógeno, alcoxi (C1-6), hidroxi-alcoxi(C1-6), alquenilo (C2-8), alquinilo (C2-8), alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)-sulfonilo, alquil(C1-6)amino, di-[alquil(C1-6)]amino, carbamoilo, N-alquil(C1-6)carbamoilo, N,N-di-[alquil(C1-6)]carbamoilo, alcanoilo (C2-6), alcanoil(C2-6)-oxi, alcanoil(C2-6)amino, N-alquil(C1-6)-alcanoil(C2-6)-amino, alcoxi(C1-6)carbonilo, sulfamoilo, N-alquil(C1-6)-sulfamoilo, N,N-di-[alquil(C1-6)]-sulfamoilo, alcano (C1-6)-sulfonilamino y N-alquil(C1-6)-alcano (C1-6)sulfonilamino;

R^{2} es alquilo (C1-6), alquenilo (C2-6) o alquinilo (C2-6), cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido con fluoro, alcoxi (C1-6), alquil (C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)-sulfonilo, o un grupo de la subfórmula (i)

2

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en la que m es 0, 1, 2 ó 3;

R^{3} y R^{4} se seleccionan independientemente de hidrógeno o alquilo (C1-6),

o R^{3} y R^{4}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros saturado que contiene opcionalmente heteroátomos adicionales seleccionados de oxígeno, S, SO, SO_{2} o NR^{8}, en el que R^{8} es hidrógeno, alquilo (C1-6), alquenilo (C2-6), alquinilo (C2-6), alquil(C1-6)sulfonilo o alquil (C1-6)carbonilo;

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con la condición de que el derivado de quinazolina no sea:

4-[(3-cloro-4-fluorofenil)amino]-6-[1-(terc-butiloxicarbonil)-piperidin-4-il-oxi]-7-metoxi-quinazolina;

4-[(3-cloro-4-fluorofenil)amino]-6-[1-(isopropiloxicarbonil)-piperidin-4-il-oxi]-7-metoxi-quinazolina;

4-[(3-etinil-fenil)amino]-6-[1-(terc-butiloxicarbonil)-piperidin-4-il-oxi]-7-metoxiquinazolina; o

6-{[(1-terc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Según otro aspecto de la invención, se proporciona un derivado de quinazolina de la Fórmula I:

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3

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en la que n es 0, 1, 2 ó 3,

cada R^{5} se selecciona de halógeno, ciano, nitro, hidroxi, amino, carboxi, sulfamoilo, trifluorometilo, alquilo (C1-6), alquenilo (C2-8), alquinilo (C2-8), alcoxi (C1-6), alquenil(C2-6)oxi, alquinil(C2-6)oxi, alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)sulfonilo, alquil(C1-6)amino, di-[alquil(C1-6)]amino, alcoxi(C1-6)carbonilo, N-alquil(C1-6)sulfamoilo, y N,N-di-[alquil(C1-6)]sulfamoilo, C(O)NR^{6}R^{7}, en el que R^{6} y R^{7} se seleccionan independientemente de hidrógeno, alquilo (C1-6) opcionalmente sustituido, cicloalquilo (C3-8) opcionalmente sustituido o arilo opcionalmente sustituido, o R^{6} y R^{7}, junto con el nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico que puede contener heteroátomos adicionales;

X^{1} es un enlace directo o O;

R^{2} es alquilo (C1-6), alquenilo (C2-6) o alquinilo (C2-6), cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido con fluoro, alcoxi (C1-6), alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)-sulfonilo, o un grupo de la subfórmula (i)

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4

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en la que m es 1, 2 ó 3;

R^{3} y R^{4} se seleccionan independientemente de hidrógeno o alquilo (C1-6),

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con la condición de que el derivado de quinazolina no sea:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

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En esta memoria descriptiva, el término genérico "alquilo" incluye tanto grupos alquilo de cadena lineal como de cadena ramificada, tales como propilo, isopropilo y terc-butilo y también grupos cicloalquilo (C3-7) tales como ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo y cicloheptilo. Sin embargo, las referencias a grupos alquilo individuales, tales como "propilo", son específicas para la versión de cadena lineal solamente; las referencias a grupos alquilo individuales de cadena ramificada, tales como "isopropilo", son específicas para la versión de cadena ramificada solamente; y las referencias a grupos cicloalquilo individuales, tales como "ciclopentilo", son específicas para ese anillo de 5 miembros solamente. Lo mismo se aplica a otros términos genéricos, por ejemplo alcoxi (C1-6) incluye metoxi, etoxi, ciclopropiloxi y ciclopentiloxi, alquilamino (C1-6) incluye metilamino, etilamino, ciclobutilamino y ciclohexilamino, y di-[alquil(C1-6)]amino incluye dimetilamino, dietilamino, N-ciclobutil-N-metilamino y N-ciclohexil-
N-etilamino.

El término "arilo" se refiere a anillos de hidrocarburos aromáticos, tales como fenilo o naftilo. Los términos "heterocíclico" o "heterociclilo" incluyen estructuras anulares que pueden ser mono- o bicíclicas, y contienen de 3 a 15 átomos, al menos uno de los cuales, y adecuadamente 1 a 4 de los cuales, es un heteroátomo tal como oxígeno, azufre o nitrógeno. Los anillos pueden ser aromáticos, no aromáticos o parcialmente aromáticos, en el sentido de que un anillo de un sistema anular condensado puede ser aromático y el otro no aromático. Los ejemplos particulares de tales sistemas anulares incluyen furilo, benzofuranilo, tetrahidrofurilo, cromanilo, tienilo, benzotienilo, piridilo, piperidinilo, quinolilo, 1,2,3,4-tetrahidroquinolinilo, isoquinolilo, 1,2,3,4-tetrahidroisoquinolinilo, pirazinilo, piperazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo, pirrolilo, pirrolidinilo, indolilo, indolinilo, imidazolilo, bencimidazolilo, pirazolilo, indazolilo, oxazolilo, benzoxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, benzotiazolilo, isotiazolilo, morfolinilo, 4H-1,4-benzoxazinilo, 4H-1,4-benzotiazinilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, oxadiazolilo, furazanilo, tiadiazolilo, tetrazolilo, dibenzofuranilo, dibenzotienilo, oxiranilo, oxetanilo, azetidinilo, tetrahidropiranilo, oxepanilo, oxazepanilo, tetrahidro-1,4-tiazinilo, 1,1-dioxotetrahidro-1,4-tiazinilo, homopiperidinilo, homopiperazinilo, dihidropiridinilo, tetrahidropiridinilo, dihidropirimidinilo, tetrahidropirimidinilo, tetrahidrotienilo, tetrahidrotiopiranilo o tiomorfolinilo.

Los ejemplos particulares de grupos heterocíclicos incluyen tetrahidropiranilo, tetrahidrofuranilo o N-alquil(C1-6)-pirrolidina o N-alquil(C1-6)-piperidina.

Cuando los anillos incluyen átomos de nitrógeno, estos pueden tener un átomo de hidrógeno o un grupo sustituyente, tal como un grupo alquilo (C1-6), si es necesario, para satisfacer los requisitos del enlace del nitrógeno, o pueden estar enlazados al resto de la estructura por medio del átomo de nitrógeno. Un átomo de nitrógeno dentro de un grupo heterociclilo puede estar oxidado para dar el N-óxido correspondiente.

Generalmente, los compuestos muestran propiedades físicas favorables, tales como una elevada solubilidad, a la vez que retienen una elevada actividad antiproliferativa. Además, muchos de los compuestos según la presente invención son inactivos o sólo débilmente activos en un ensayo de hERG.

Se entenderá que ciertos compuestos de la Fórmula I definida anteriormente pueden existir en formas ópticamente activas o racémicas en virtud de uno o más átomos de carbono y/o azufre asimétricamente sustituidos, y en consecuencia pueden existir y se pueden aislar como enantioméricamente puros, como una mezcla de diastereoisómeros, o como un racemato. La presente invención incluye en su definición cualquiera de tal forma racémica, ópticamente activa, enantioméricamente pura, mezcla de diastereoisómeros, forma esteroisomérica del compuesto de Fórmula (I), o sus mezclas, que posean la actividad anteriormente mencionada. La síntesis de formas ópticamente activas se puede llevar a cabo mediante técnicas estándares de química orgánica bien conocidas en la técnica, por ejemplo mediante síntesis a partir de materiales de partida ópticamente activos, o mediante resolución de una forma racémica. De forma similar, la actividad anteriormente mencionada se puede evaluar usando las técnicas de laboratorio estándares citadas en lo sucesivo.

La invención se refiere a todas las formas tautómeras de los compuestos de la Fórmula I que posean actividad antiproliferativa.

También se entenderá que ciertos compuestos de la Fórmula I pueden existir en formas solvatadas así como no solvatadas, tales como, por ejemplo, formas hidratadas. Se entenderá que la invención engloba todas las citadas formas solvatadas que posean actividad antiproliferativa.

También se entenderá que ciertos compuestos de la Fórmula I pueden mostrar polimorfismo, y que la invención engloba tales formas que posean actividad antiproliferativa.

Los valores adecuados para los radicales genéricos citados anteriormente incluyen aquellos expuestos más
abajo.

Los valores adecuados para cualquiera de los grupos R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4} o R^{5} según se definen aquí anteriormente, o en lo sucesivo, en esta memoria descriptiva, incluyen:

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100

101

102

Se entiende que cuando R^{1} es un grupo alquilo (C1-6) sustituido con, por ejemplo, amino, para dar, por ejemplo, un grupo 2-aminoetilo, es el grupo alquilo (C1-6) el que está unido al grupo X^{1} (o al anillo de quinazolina cuando X^{1} es un enlace directo).

Cuando en esta memoria descriptiva se haga referencia a un grupo alquilo (C1-4), se entenderá que tales grupos se refieren a grupos alquilo que contienen hasta 4 átomos de carbono. La persona experta sabrá que los ejemplos representativos de tales grupos son los enumerados anteriormente bajo alquilo (C1-6) que contiene hasta 4 átomos de carbono, tales como metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo y terc-butilo. De forma similar, la referencia a un grupo alquilo (C1-3) se refiere a grupos alquilo que contienen hasta 3 átomos de carbono, tales como metilo, etilo, propilo e isopropilo. Se adopta una convención similar para los otros grupos enumerados anteriormente, tales como alcoxi (C1-4), alquenilo (C2-4), alquinilo (C2-4) y alcanoilo (C2-4).

En el compuesto de la Fórmula I, los átomos de hidrógeno están presentes en las posiciones 2, 5 y 8 en el anillo de quinazolina.

Una sal farmacéuticamente aceptable adecuada de un compuesto de la Fórmula I es, por ejemplo, una sal de adición de ácidos de un compuesto de la Fórmula I, por ejemplo una sal de adición de ácidos con un ácido inorgánico u orgánico, tal como ácido clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, trifluoroacético, cítrico o maleico; o, por ejemplo, una sal de un compuesto de la Fórmula I que sea suficientemente ácida, por ejemplo una sal de metal alcalino o alcalino-térreo, tal como una sal de calcio o de magnesio, o una sal de amonio, o una sal con una base orgánica tal como metilamina, dimetilamina, trimetilamina, piperidina, morfolina o tris(2-hidroxietil)amina.

Los ejemplos particulares de n son 1, 2 ó 3, de forma adecuada 2 ó 3.

De forma adecuada, cada R^{5} se selecciona independientemente de halógeno, trifluorometilo, alquilo (C1-6), alquenilo (C2-8), alquinilo (C2-8) o un grupo C(O)NR^{6}R^{7}, en el que R^{6} y R^{7} son como se definen anteriormente.

En particular, cada grupo R^{5} se selecciona independientemente de halógeno, tal como cloro o fluoro.

Los sustituyentes particulares para grupos R^{6} y R^{7}, cuando estos son distintos de hidrógeno, incluyen halógeno, nitro, ciano, hidroxi, amino, carboxi, carbamoilo, sulfamoilo, trifluorometilo, alquenilo (C2-8), alquinilo (C2-8), alcoxi (C1-6), alquenil(C2-6)oxi, alquinil(C2-6)oxi, alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)-sulfonilo, alquil(C1-6)amino, di-[alquil(C1-6)]amino, alcoxi(C1-6)carbonilo, N-alquil(C1-6)carbamoilo, N,N-di-[alquil(C1-6)]carbamoilo, N-alquil(C1-6)sulfamoilo, N,N-di-[alquil(C1-6)]sulfamoilo, cicloalquilo (C3-8), arilo o grupos heterocíclicos.

Los ejemplos particulares de sustituyentes arilo para R^{6} o R^{7} incluyen fenilo o naftilo, particularmente fenilo.

Los ejemplos particulares de sustituyentes heterocíclicos para R^{6} o R^{7} incluyen anillos heterocíclicos de 5 ó 6 miembros, tal como furilo, tetrahidrofurilo, tienilo, piridilo, piperidinilo, pirazinilo, piperazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, pirrolilo, pirrolidinilo, imidazolilo, pirazolilo, oxazolilo, isoxazolilo, tiazolilo, isotiazolilo, morfolinilo, 1,2,3-triazolilo, 1,2,4-triazolilo, oxadiazolilo, furazanilo, tiadiazolilo o tetrazolilo.

Cuando R^{6} y R^{7} junto con el nitrógeno al que están unidos forman un anillo heterocíclico opcionalmente sustituido, este es, por ejemplo, un anillo de 5 ó 6 miembros, que está saturado o insaturado. Los ejemplos particulares incluyen piperidinilo, pirrolidinilo, morfolinilo o tiomorfolino. Alternativamente, R^{6} y R^{7} forman juntos un grupo alquenilo (C3-6).

Los anillos heterocíclicos formados por R^{6} y R^{7} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos pueden estar sustituidos con cualquiera de los grupos mencionados anteriormente con relación a R^{6} y R^{7}. Adicionalmente, estos anillos pueden estar sustituidos con uno o más grupos alquilo (C1-6), los cuales pueden estar a su vez opcionalmente sustituidos con uno o más grupos seleccionados de halógeno, nitro, ciano, hidroxi, amino, carboxi, carbamoilo, sulfamoilo, trifluorometilo, alquenilo (C2-8), alquinilo (C2-8), alcoxi (C1-6), alquenil(C2-6)oxi, alquinil(C2-6)-oxi, alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)-sulfonilo, alquil(C1-6)amino, di-[alquil(C1-6)]-amino, alcoxi (C1-6)carbonilo, N-alquil(C1-6)carbamoilo, N,N-di-[alquil(C1-6)]carbamoilo, N-alquil(C1-6)-sulfamoilo, o N,N-di-[alquil(C1-6)]sulfamoilo.

Un grupo ejemplar de sustituyentes para R^{6} o R^{7}, cuando estos son distintos de hidrógeno, son ciano, hidroxi, alquenilo (C2-8), alquinilo (C2-8), alcoxi (C1-6), alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)amino, arilo tal como fenilo, o grupos heterocíclicos tal como furilo, y adicionalmente, cuando R^{6} y R^{7} junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos forman un anillo, grupos alquilo (C1-6) tal como metilo.

Cuando n es 1, 2 ó 3, un grupo R^{5} está adecuadamente en una posición orto en el anillo bencénico.

Cuando n es 1, 2 ó 3, un grupo R^{5} está adecuadamente en una posición meta en el anillo bencénico.

De este modo, cuando n es 1, el grupo R^{5} está adecuadamente en una posición orto o meta en el anillo bencénico.

En un aspecto de la invención, cuando n es 2, el primer grupo R^{5} está adecuadamente en una posición meta, y el segundo grupo R^{5} está adecuadamente en una posición orto o para en el anillo bencénico, y de este modo el anillo tiene los sustituyentes en las posiciones 2 y 3 ó 3 y 4 en el anillo bencénico.

En otro aspecto de la invención, cuando n es 2 ó 3, el primer grupo R^{5} está adecuadamente en una posición orto, el segundo grupo R^{5} está adecuadamente en una posición meta y, opcionalmente (cuando n es 3), el tercer grupo R^{5} está adecuadamente en una posición para en el anillo bencénico. De este modo, cuando n es 2, el anillo tiene adecuadamente los sustituyentes en las posiciones 2 y 3 en el anillo bencénico, y, cuando n es 3, el anillo tiene adecuadamente los sustituyentes en las posiciones 2, 3 y 4 en el anillo bencénico.

Se ha encontrado sorprendentemente que los derivados de quinazolina que tienen sustituyentes (por ejemplo, sustituyentes halógeno) en las posiciones 2 y 3, o en las posiciones 2, 3 y 4, en el anillo bencénico, en comparación con los derivados de quinazolina que tienen los sustituyentes en las posiciones 3 y 4 en el anillo bencénico, producen compuestos con una actividad potenciada, por cuanto los compuestos tienen una potencia aumentada contra tirosina quinasas receptoras de erbB2 y/o EGFR (particularmente erbB2), en ensayos celulares. Se cree que los derivados de quinazolina que tienen sustituyentes (por ejemplo, sustituyentes halógeno) en las posiciones 2 y 3, o en las posiciones 2, 3 y 4 en el anillo bencénico, también tendrán una potencia aumentada contra tirosina quinasas receptoras de erbB2 y/o EGFR (particularmente erbB2) in vivo.

De forma adecuada, cuando n es 2 ó 3, cada grupo R^{5} es el mismo átomo de halógeno, o diferente, tal como cloro o fluoro. De forma adecuada, al menos un grupo R^{5} es fluoro, dicho al menos un fluoro está preferiblemente situado en una posición orto (2-) en el anillo bencénico.

De forma adecuada, cuando n es 2, cada grupo R^{5} es el mismo átomo de halógeno, o diferente. En particular, un grupo R^{5} es cloro, y éste está preferiblemente en una posición meta (3-) en el anillo bencénico al que se une, y el otro grupo R^{5} es fluoro, que está preferiblemente en una posición orto (2-) o para (4-) (preferiblemente en una posición orto (2-)) en el anillo bencénico.

De forma adecuada, cuando n es 3, cada grupo R^{5} es el mismo átomo de halógeno, o diferente. En particular, un grupo R^{5} es cloro, y éste está preferiblemente en una posición meta (3-) en el anillo bencénico al que está unido, y los otros dos grupos R^{5} son cada uno fluoro, los cuales están preferiblemente en una posición orto (2-) y para (4-), respectivamente, en el anillo bencénico.

De este modo, ejemplos particulares del grupo de subfórmula (ii):

5

en la Fórmula I, son los grupos de subfórmula (iii):

6

en la que (a) uno de R^{10} o R^{12} es hidrógeno, y el otro es halógeno, tal como cloro o fluoro, y particularmente fluoro, y R^{11} es halógeno tal como cloro o fluoro, y particularmente cloro, o (b) R^{10} es halógeno, tal como cloro o fluoro, y particularmente fluoro, R^{11} es halógeno, tal como cloro o fluoro, y particularmente cloro, y R^{12} es hidrógeno o halógeno, tal como cloro o fluoro, y particularmente fluoro, o (c) R^{10} es fluoro, R^{11} es cloro, y R^{12} es hidrógeno o fluoro. En particular, R^{10}, R^{11} y R^{12} son como se definen en (b) y/o (c).

En una realización, cuando n es 2, cada grupo R^{5} es el mismo átomo de halógeno, o diferente (tal como fluoro y/o cloro), y el primer grupo R^{5} está en una posición orto, y el segundo grupo R^{5} está en una posición meta en el anillo bencénico, y entonces R^{2} no es alquilo (C1-6) (opcionalmente sustituido). En particular, R^{2} no es alquilo (C1-6) opcionalmente sustituido con fluoro, alcoxi (C1-6) o un grupo de la subfórmula (i)

7

en la que m es 0, y R^{3} y R^{4} se seleccionan independientemente de hidrógeno o alquilo (C1-4).

De forma adecuada, X^{1} es oxígeno.

En particular, R^{1} se selecciona de hidrógeno, alquilo (C1-6) y alcoxi (C1-6)-alquilo (C1-6), en el que cualquier grupo alquilo (C1-6) en R^{1} tiene opcionalmente uno o más (adecuadamente 1 ó 2) sustituyentes hidroxi o halógeno. Más particularmente, R^{1} se selecciona de alquilo (C1-6), preferiblemente de alquilo (C1-4), e incluso más preferiblemente de alquilo (C1-2). Por ejemplo, R^{1} puede ser metilo.

Por ejemplo, R^{1}-X^{1}- se selecciona de metoxi, etoxi, isopropiloxi, ciclopropilmetoxi, 2-hidroxietoxi, 2-fluoroetoxi, 2-metoxietoxi, 2,2-difluoroetoxi, 2,2,2-trifluoroetoxi o 3-hidroxi-3-metilbutoxi.

En particular, R^{1}-X- se selecciona de hidrógeno, alcoxi (C1-4) y alcoxi (C1-4)-alcoxi (C1-4). Por ejemplo, R^{1}-X- se selecciona de hidrógeno, metoxi, etoxi y 2-metoxietoxi. Un ejemplo particular de un grupo R^{1}-X^{1}- es metoxi.

De forma adecuada, R^{2} es alquilo (C1-6) (particularmente alquilo (C1-3), más particularmente alquilo (C1-2)) opcionalmente sustituido con fluoro, alcoxi (C1-6), alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)-sulfonilo, o un grupo de la subfórmula (i) tal como se define anteriormente. Un ejemplo particular de un sustituyente para R^{2} es un grupo de la subfórmula (i) tal como se define anteriormente.

Particularmente, R^{2} es un grupo alquilo (C1-3) tal como metilo o etilo, que está opcionalmente sustituido con un grupo de la subfórmula (i) tal como se define anteriormente. Cuando R^{2} contiene un sustityuente de la subfórmula (i), m es, de forma adecuada, 0, 1 ó 2.

Cuando R^{2} contiene un sustituyente de la subfórmula (i), m es, de forma adecuada, 1 ó 2, y preferiblemente 2. En otro aspecto, m es particularmente 0 ó 1.

Cuando R^{3} y R^{4}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros saturado que contiene opcionalmente heteroátomos adicionales, éste contiene adecuadamente heteroátomos adicionales seleccionados de O y NR^{8}, en el que R^{8} es como se define en relación a la Fórmula I.

Cuando R^{3} y R^{4}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros saturado que contiene opcionalmente heteroátomos adicionales, éste comprende adecuadamente un anillo de pirrolidina, un anillo de morfolina, un anillo de piperidina, o un anillo de piperazina, que está opcionalmente sustituido en el átomo de nitrógeno disponible con un grupo R^{8} como se define anteriormente. Los ejemplos particulares de grupos R^{8} incluyen alquilo (C1-3) tal como metilo; alquil(C1-3)sulfonilo tal como metilsulfonilo; alquil(C1-3)carbonilo, tal como acetilo; alquenilo (C2-4) tal como alilo; o alquinilo (C2-4) tal como propargilo. En particular, R^{8} es un grupo alquilo (C1-3) tal como metilo.

Alternativamente, los grupos R^{3} y R^{4} se pueden seleccionar, de forma adecuada, independientemente de alquilo (C1-6), particularmente de alquilo (C1-3), tal como metilo o etilo. Por ejemplo, cada uno de los grupos R^{3} y R^{4} puede ser, de forma adecuada, alquilo (C1-3), tal como, en un aspecto, cada uno de los grupos R^{3} y R^{4} puede ser etilo.

Los ejemplos particulares de grupos R^{2} incluyen metilo, 2-(pirrolidin-1-il)etilo, 2-(dimetilamino)etilo, 2-(dietil-
amino)etilo, 2-(piperidinil)etilo, 2(morfolin-4-il)etilo o 2-(4-metilpiperazin-1-il)etilo. Más particularmente, los ejemplos de grupos R^{2} incluyen metilo, 2-(pirrolidin-1-il)etilo, 2-(dietilamino)etilo, 2-(piperidin-1-il)etilo, 2-(morfolin-4-il)etilo o 2-(4-metilpiperazin-1-il)etilo.

En una realización particular, R^{2} es metilo. En una realización alternativa, R^{2} se selecciona de 2-(piperidin-1-il)etilo, 2-(4-metilpiperazin-1-il)etilo y 2-(pirrolidin-1-il)etilo; particularmente, R^{2} es 2-(pirrolidin-1-il)etilo. En otra realización alternativa, R^{2} se selecciona de 2-(dimetilamino)etilo y 2-(dietilamino)etilo. En otra realización alternativa, R^{2} es 2-(morfolin-4-il)etilo.

Ejemplos particulares de los compuestos de Fórmula I son compuestos de Fórmula IA:

8

en la que R^{2} es como se definen anteriormente con relación a la Fórmula I, R^{10}, R^{11} y R^{12} son como se definen con relación a la subfórmula (iii) anterior, y R^{13} se selecciona de hidrógeno, metoxi, etoxi y 2-metoxietoxi, y especialmente metoxi.

Para evitar cualquier duda, cuando los compuestos de Fórmula I se definen como compuestos de Fórmula IA, el derivado de quinazolina no es:

4-[(3-cloro-4-fluorofenil)amino]-6-[1-(terc-butoxicarbonil)-piperidin-4-il-oxi]-7-metoxi-quinazolina;

4-[(3-cloro-4-fluorofenil)amino]-6-[1-(isopropiloxicarbonil)-piperidin-4-il-oxi]-7-metoxi-quinazolina; o

6-{[(1-terc-butoxicarbonil)piperidin-4-il]-oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina;

o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

Otros ejemplos particulares de los compuestos de Fórmula I son compuestos de las Fórmulas IB y/o IC:

9

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10

en las que R^{2} es como se define anteriormente con relación a la Fórmula I, y R^{13} se selecciona de hidrógeno, metoxi, etoxi y 2-metoxietoxi, y especialmente metoxi.

Para evitar cualquier duda, cuando los compuestos de Fórmula I se definen como compuestos de Fórmula IB, el derivado de quinazolina no es 6-{[(1-terc-butoxicarbonil)-piperidin-4-il]-oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-quinazolina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

Otros ejemplos particulares de los compuestos de Fórmula I son compuestos de la Fórmula ID:

11

en la que

R^{5a} y R^{5b} se seleccionan independientemente de halógeno (por ejemplo, fluoro y/o cloro);

X^{1} es un enlace directo o O;

R^{1} se selecciona de hidrógeno y alquilo (C1-6), en el que el grupo alquilo (C1-6) está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, que pueden ser iguales o diferentes, seleccionados de hidroxi y halógeno, y/o un sustituyente seleccionado de amino, nitro, carboxi, ciano, halógeno, alcoxi (C1-6), hidroxi-alcoxi (C1-6), alquenilo (C2-8), alquinilo (C2-8), alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)sulfonilo, alquil(C1-6)amino, di-[alquil(C1-6)]amino, carbamoilo, N-alquil(C1-6)carbamoilo, N,N-di-[alquil(C1-6)]-carbamoilo, alcanoilo (C2-6), alcanoil(C2-6)-oxi, alcanoil(C2-6)amino, N-alquil(C1-6)-alcanoil(C2-6)-amino, alcoxi(C1-6)carbonilo, sulfamoilo, N-alquil(C1-6)sulfamoilo, N,N-di-[alquil(C1-6)]sulfamoilo, alcano (C1-6)sulfonilamino y N-alquil(C1-6)-alcano(C1-6)-sulfonilamino;

R^{2} es alquilo (C1-6), en el que el grupo alquilo (C1-6) está opcionalmente sustituido con fluoro, alcoxi (C1-6), o un grupo de la subfórmula (iv)

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12

en la que R^{3} y R^{4} se seleccionan independientemente de hidrógeno o alquilo (C1-4),

o R^{3} y R^{4}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico saturado de 5 a 6 miembros, el cual puede opcionalmente contener heteroátomos adicionales seleccionados de oxígeno, S, SO, SO_{2} o NR^{8} en el que R^{8} es hidrógeno, alquilo (C1-4) o alquil(C1-4)-sulfonilo;

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Para evitar cualquier duda, cuando los compuestos de Fórmula I se definen como compuestos de Fórmula ID, el derivado de quinazolina no es 6-{[(1-terc-butoxicarbonil)-piperidin-4-il]-oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-quinazolina, o una sal farmacéuticamente aceptable de la misma.

En los compuestos de la Fórmula ID, el grupo R^{2} es adecuadamente alquilo (C1-6), particularmente alquilo (C1-6) no sustituido. Por ejemplo, el grupo R^{2} puede ser metilo o etilo, particularmente metilo.

En los compuestos de la Fórmula ID, X^{1} es adecuadamente oxígeno. R^{1} se selecciona adecuadamente de hidrógeno y alquilo (C1-6), en el que cualquier grupo alquilo (C1-6) en R^{1} tiene opcionalmente uno o más (adecuadamente 1 ó 2) sustituyentes hidroxi o halógeno. Más particularmente, R^{1} se selecciona de alquilo (C1-6), preferiblemente de alquilo (C1-4), e incluso más preferiblemente de alquilo (C1-2). Por ejemplo, R^{1} puede ser metilo. Un ejemplo particular de un grupo R^{1}-X^{1}, en los compuestos de Fórmula ID, es metoxi.

Será claro para una persona experta en la técnica que los nuevos compuestos particulares de la invención incluyen aquellos compuestos de la Fórmula I (incluyendo IA, IB, IC y ID) en los que, excepto que se establezca de otro modo, cada uno de R^{1}, R^{2}, R^{3}, R^{4}, R^{5}, X^{1}, m y n tienen cualquiera de los significados como se definen aquí anteriormente.

Los ejemplos de compuestos de la Fórmula I incluyen, por ejemplo, uno o más de:

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(metoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina;

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(pirrolidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazolina;

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-2-(N,N-dimetilamino)etoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina;

4-(3-Cloro-4-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(pirrolidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazolina;

4-(3-Cloroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(pirrolidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazolina;

4-(3-Cloro-2,4-difluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(metoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina;

4-(3-Cloro-2,4-difluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(pirrolidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazolina;

4-(3-Cloro-2,4-difluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(piperidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazolina;

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(piperidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazolina;

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-6-{[1-{2-(dietilamino)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}-7-metoxiquinazolina;

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(morfolin-4-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazolina; y

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(4-metilpiperidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazoli-
na;

o una sal farmacéuticamente acceptable de los mismos.

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Ejemplos preferidos de compuestos de la Fórmula I incluyen, por ejemplo, uno o más de:

o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

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Un grupo particular de ejemplos de derivados de quinazolina de la Fórmula IA incluyen uno o más de:

o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

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Un grupo particular de ejemplos de derivados de quinazolina de la Fórmula IB incluyen uno o más de:

o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

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Un grupo particular de ejemplos de derivados de quinazolina de la Fórmula IC incluyen uno o más de:

4-(3-Cloro-2,4-difluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(pirrolidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazolina; y

o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

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Un ejemplo particular de derivado de quinazolina de la Fórmula ID es:

o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

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Compuestos preferidos de la Fórmula I son, por ejemplo, uno o más de:

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(metoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina; y

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(pirrolidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazolina,

o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

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Síntesis de derivados de quinazolina de la Fórmula I

En un aspecto adicional, la presente invención proporciona un procedimiento para preparar un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo. Se apreciará que durante algunos de los siguientes procedimientos, ciertos sustituyentes pueden requerir protección para evitar su reacción indeseada. El químico experto sabrá cuándo se requiere tal protección, y cómo se colocarán tales grupos protectores, y se eliminarán después.

Para ejemplos de grupos protectores, véase uno de los muchos textos generales sobre la materia, por ejemplo, "Protective Groups in Organic Synthesis" de Theodora Green (editor: John Wiley & Sons). Los grupos protectores se pueden eliminar mediante cualquier método conveniente, como se describe en la bibliografía, o como es conocido por el químico experto como apropiado para la eliminación del grupo protector en cuestión, escogiéndose tales métodos para efectuar la eliminación del grupo protector con la mínima molestia de los grupos en cualquier parte en la molécula.

De este modo, si los agentes reaccionantes incluyen, por ejemplo, grupos tales como amino, carboxi o hidroxi, puede ser deseable proteger el grupo en algunas de las reacciones mencionadas aquí.

Un grupo protector adecuado para un grupo amino o alquilamino es, por ejemplo, un grupo acilo, por ejemplo un grupo alcanoilo tal como acetilo, un grupo alcoxicarbonilo, por ejemplo un grupo metoxicarbonilo, etoxicarbonilo o t-butoxicarbonilo, un grupo arilmetoxicarbonilo, por ejemplo benciloxicarbonilo, o un grupo aroilo, por ejemplo benzoilo. Las condiciones de desprotección para los grupos protectores anteriores variarán necesariamente con la elección del grupo protector. De este modo, por ejemplo, un grupo acilo, tal como un grupo alcanoilo o alcoxicarbonilo, o un grupo aroilo, se puede eliminar, por ejemplo, mediante hidrólisis con una base adecuada, tal como un hidróxido de metal alcalino, por ejemplo hidróxido de litio o de sodio. Como alternativa, un grupo acilo, tal como un grupo t-butoxicarbonilo, se puede eliminar, por ejemplo, mediante tratamiento con un ácido adecuado tal como ácido clorhídrico, sulfúrico o fosfórico, o ácido trifluoroacético, y un grupo arilmetoxicarbonilo, tal como un grupo benciloxicarbonilo, se puede eliminar, por ejemplo, por hidrogenación sobre un catalizador tal como paladio sobre carbón, o por tratamiento con un ácido de Lewis, por ejemplo tris(trifluoroacetato) de boro. Un grupo protector alternativo adecuado para un grupo primario es, por ejemplo, un grupo ftaloilo, que se puede eliminar por tratamiento con una alquilamina, por ejemplo dimetilaminopropilamina, o con hidrazina.

Un grupo protector adecuado para un grupo hidroxi es, por ejemplo, un grupo acilo, por ejemplo un grupo alcanoilo, tal como acetilo, un grupo aroilo, por ejemplo benzoilo, o un grupo arilmetilo, por ejemplo bencilo. Las condiciones de desprotección para los grupos protectores anteriores variarán necesariamente con la elección del grupo protector. De este modo, por ejemplo, un grupo acilo, tal como un alcanoilo, o un grupo aroilo, se puede eliminar, por ejemplo, mediante hidrólisis con una base adecuada, tal como un hidróxido de metal alcalino, por ejemplo hidróxido de litio, de sodio, o amoníaco. Como alternativa, un grupo arilmetilo, tal como un grupo bencilo, se puede eliminar, por ejemplo, por hidrogenación sobre un catalizador tal como paladio sobre carbón.

Un grupo protector adecuado para un grupo carboxi es, por ejemplo, un grupo esterificante, por ejemplo un grupo metilo o etilo, que se puede eliminar, por ejemplo, mediante hidrólisis con una base tal como hidróxido sódico, o, por ejemplo, un grupo t-butilo, que se puede eliminar, por ejemplo, mediante tratamiento con un ácido, por ejemplo un ácido orgánico tal como ácido trifluoroacético, o, por ejemplo, un grupo bencilo, que se puede eliminar, por ejemplo, mediante hidrogenación sobre un catalizador tal como paladio sobre carbón.

También se pueden usar, como grupo protector, las resinas.

Los grupos protectores se pueden eliminar en cualquier etapa conveniente en la síntesis, usando técnicas convencionales bien conocidas en la técnica química.

Un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se puede preparar mediante cualquier procedimiento conocido y que sea aplicable a la preparación de compuestos químicamente relacionados. Tales procedimientos, cuando se usan para preparar un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, se proporcionan como una característica adicional de la invención, y se ilustran mediante los siguientes ejemplos representativos. Los materiales de partida necesarios se pueden obtener mediante procedimientos estándares de química orgánica (véase, por ejemplo, Advanced Organic Chemistry (Wiley-Interscience), Jerry March). La preparación de tales materiales de partida se describe en los Ejemplos no limitantes que se acompañan. Como alternativa, los materiales de partida necesarios se pueden obtener mediante procedimientos análogos a los ilustrados que están dentro de la pericia normal de un químico orgánico. También se puede encontrar información sobre la preparación de materiales de partida necesarios, o de compuestos relacionados (que se pueden adaptar para formar los materiales de partida necesarios), en las siguientes Publicaciones de Patentes y Solicitudes, cuyos contenidos de las secciones de procedimiento pertinentes se incorporan aquí como referencia: WO 94/27965, WO 95/03283, WO 96/33977, WO 96/33978, WO 96/33979, WO 96/33980, WO 96/33981, WO 97/30034, WO 97/38994, WO 01/66099, US 5,252,586, EP 520722, EP 566226, EP 602851 y EP 635507.

La presente invención también proporciona que los derivados de quinazolina de la Fórmula I, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, se pueden preparar mediante un procedimiento (a) a (k) siguiente (en los que las variables son como se definen anteriormente, excepto que se establezca de otro modo):

Proceso (a)

Haciendo reaccionar un compuesto de la Fórmula II:

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13

en la que R^{1}, X^{1}, R^{5} y n tienen cualquiera de los significados definidos aquí anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario,

con un compuesto de la Fórmula III:

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14

en la que R^{2} tiene cualquiera de los significados definidos aquí anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario, y Lg es un grupo desplazable, en el que la reacción se lleva a cabo convenientemente en presencia de una base adecuada,

y después se elimina por medios convencionales cualquier grupo protector que esté presente.

Un grupo desplazable Lg conveniente es, por ejemplo, un grupo halógeno, alcanosulfoniloxi o arilsulfoniloxi, por ejemplo un grupo cloro, bromo, metanosulfoniloxi, 4-nitrobencenosulfoniloxi o tolueno-4-sulfoniloxi (adecuadamente, un grupo metanosulfoniloxi, 4-nitrobenceno-sulfoniloxi o tolueno-4-sulfoniloxi).

La reacción se lleva a cabo ventajosamente en presencia de una base. Una base adecuada es, por ejemplo, una base de amina orgánica, tal como, por ejemplo, diisopropiletilamina, piridina, 2,6-lutidina, colidina, 4-dimetilaminopiridina, trietilamina, N-metilmorfolina o diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno, o, por ejemplo, un carbonato o hidróxido de metal alcalino o alcalino-térreo, por ejemplo carbonato de sodio, carbonato de potasio, carbonato de cesio, carbonato de calcio, hidróxido de sodio o hidróxido de potasio. Como alternativa, tal base es, por ejemplo, un hidruro de metal alcalino, por ejemplo hidruro de sodio, un amiduro de metal alcalino o de metal alcalino-térreo, por ejemplo amiduro de sodio o bis(trimetilsilil)amiduro de sodio, o un haluro de metal alcalino suficientemente básico, por ejemplo fluoruro de cesio o yoduro de sodio. La reacción se efectúa adecuadamente en presencia de un disolvente o diluyente inerte, por ejemplo un alcanol o éster tal como metanol, etanol, 2-propanol o acetato de etilo, un disolvente halogenado tal como cloruro de metileno, triclorometano o tetracloruro de carbono, un éter tal como tetrahidrofurano o 1,4-dioxano, un disolvente de hidrocarburo aromático tal como tolueno, o (adecuadamente) un disolvente aprótico dipolar tal como N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida, N-metilpirrolidin-2-ona o dimetilsulfóxido. La reacción se efectúa convenientemente a una temperatura en el intervalo de, por ejemplo, 10 a 150ºC (o el punto de ebullición del disolvente), adecuadamente en el intervalo de 20 a 90ºC.

Una base particularmente adecuada es fluoruro de cesio. Esta reacción se lleva a cabo adecuadamente en un disolvente aprótico dipolar inerte, tal como N,N-dimetilacetamida o N,N-dimetilformamida. La reacción se lleva a cabo adecuadamente a una temperatura desde 25 hasta 85ºC.

Proceso (b)

Modificando un sustituyente en, o introduciendo un sustituyente en, otro derivado de quinazolina de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario, y con lo que después se elimina por medios convencionales cualquier grupo protector que esté presente.

Los métodos para convertir sustituyentes en otros sustituyentes son conocidos en la técnica. Por ejemplo, un grupo alquiltio se puede oxidar a un grupo alquilsulfinilo o alquilsulfonilo, un grupo ciano se puede reducir a un grupo amino, un grupo nitro se puede reducir a un grupo amino, un grupo hidroxi se puede alquilar a un grupo metoxi, un grupo bromo se puede convertir en un grupo alquiltio, un grupo amino se puede acilar para dar un grupo alcanoilamino (por ejemplo, mediante reacción con un cloruro de ácido o anhídrido de ácido adecuado), o un grupo alcanoiloxi se puede hidrolizar a un grupo hidroxi (por ejemplo, un grupo acetiloxiacetilo se puede convertir en un grupo hidroxiacetilo). De forma conveniente, un grupo R^{1} se puede convertir en otro grupo R^{1} como una etapa final en la preparación de un compuesto de la Fórmula I.

Proceso (c)

Haciendo reaccionar un compuesto de Fórmula IV:

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en la que R^{1}, X^{1}, R^{5} y n son como se definen en relación a la Fórmula I, con un compuesto de Fórmula V:

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en la que R^{2} es como se define anteriormente, y Lg es un grupo desplazable (por ejemplo, halógeno tal como cloro o bromo, o 1-imidazolilo). Las reacciones descritas anteriormente se llevan a cabo convenientemente en presencia de una base adecuada (tal como las descritas anteriormente en el proceso (a), por ejemplo carbonato de potasio, o diisopropiletilamina), y convenientemente en presencia de un disolvente o diluyente inerte (por ejemplo, los disolventes y diluyentes inertes descritos en el proceso (a), tales como acetonitrilo, N,N-dimetilacetamida, metanol, etanol o cloruro de metileno).

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Proceso (d)

Eliminando un grupo protector de un derivado de quinazolina de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los métodos adecuados para la eliminación de grupos protectores son bien conocidos y se explican aquí. Por ejemplo, para la producción de aquellos compuestos de la Fórmula I en la que R^{1} contiene un grupo amino primario o secundario, la escisión del compuesto correspondiente de Fórmula I en la que R^{1} contiene un grupo amino primario o secundario protegido.

Los grupos protectores adecuados para un grupo amino son, por ejemplo, cualquiera de los grupos protectores descritos aquí anteriormente para un grupo amino. Los métodos adecuados para la ruptura de tales grupos protectores de amino también se describen aquí anteriormente. En particular, un grupo protector adecuado es un grupo alcoxicarbonilo inferior, tal como un grupo terc-butoxicarbonilo, que se puede escindir en condiciones de reacción convencionales, tales como en hidrólisis catalizada por ácidos, por ejemplo en presencia de ácido trifluoroacético.

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Proceso (e)

Haciendo reaccionar un compuesto de la Fórmula II, como se define aquí anteriormente, con un compuesto de la Fórmula III, como se define aquí anteriormente, excepto que Lg es OH, en condiciones de Mitsunobu, y en el que después se elimina por medios convencionales cualquier grupo protector que esté presente.

Las condiciones de Mitsunobu adecuadas incluyen, por ejemplo, la reacción en presencia de una fosfina terciaria adecuada y un azodicarboxilato de dialquilo en un disolvente orgánico tal como THF, o adecuadamente diclorometano, y en el intervalo de temperatura de 0ºC hasta 60ºC, pero de forma adecuada a la temperatura ambiente. Una fosfina terciaria adecuada incluye, por ejemplo, tri-n-butilfosfina, o de forma adecuada trifenilfosfina. Un azodicarboxilato de dialquilo adecuado incluye, por ejemplo, azodicarboxilato de dietilo (DEAD), o de forma adecuada azodicarboxilato de di-terc-butilo. Los detalles de las reacciones de Mitsunobu están contenidos en Tet. Letts., 31, 699 (1990); The Mitsunobu Reaction, D.L. Hughes, Organic Reactions, 1992, Vol. 42, 335-656 y Progress in the Mitsunobu Reaction, D.L. Hughes, Organic Preparations and Procedures International, 1996, Vol. 28, 127-164.

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Proceso (f)

Para la preparación de aquellos compuestos de la Fórmula I en la que R^{1}-X^{1} es un grupo hidroxi, escindiendo un derivado de quinazolina de la Fórmula I, en la que R^{1}-X^{1} es un grupo alcoxi (C1-6).

La reacción de escisión se puede llevar a cabo convenientemente por cualquiera de los muchos procedimientos conocidos para tal transformación. La reacción de escisión de un compuesto de la Fórmula I, en la que R^{1} es un grupo alcoxi (C1-6), se puede llevar a cabo, por ejemplo, mediante tratamiento del derivado de quinazolina con un alquil (C1-6)sulfuro de metal alcalino, tal como etanotiolato de sodio, o, por ejemplo, mediante tratamiento con un diarilfosfuro de metal alcalino, tal como difenilfosfuro de litio. Como alternativa, la reacción de escisión se puede llevar a cabo convenientemente, por ejemplo, mediante tratamiento del derivado de quinazolina con un trihaluro de boro o de aluminio, tal como tribromuro de boro, o mediante reacción con un ácido orgánico o inorgánico, por ejemplo ácido trifluoroacético. Tales reacciones se llevan a cabo de forma adecuada en presencia de un disolvente o diluyente inerte adecuado, como se define aquí anteriormente. Una reacción de escisión preferida es el tratamiento de un derivado de quinazolina de la Fórmula I con hidrocloruro de piridina. Las reacciones de escisión se llevan a cabo de forma adecuada a una temperatura en el intervalo de, por ejemplo, 10 a 200ºC. En algunos casos, esto se puede lograr a temperaturas, por ejemplo, desde 25 hasta 80ºC, pero en otros casos, por ejemplo usando una desprotección con hidrocloruro de piridina, es adecuado fundir típicamente a 160-200ºC.

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Proceso (g)

Para la preparación de aquellos compuestos de la Fórmula I en la que X^{1} es O, haciendo reaccionar un compuesto de la Fórmula VI:

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en la que R^{2}, R^{5}, y n tienen cualquiera de los significados definidos aquí anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario, con un compuesto de la fórmula R^{1}-Lg, en la que R^{1} tiene cualquiera de los significados definidos aquí anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario, y Lg es un grupo desplazable, en el que la reacción se realiza convenientemente en presencia de una base adecuada;

y en el que después se elimina por medios convencionales cualquier grupo protector que esté presente.

Los grupos desplazables adecuados, Lg, son como se definen aquí anteriormente para el proceso (a), por ejemplo cloro o bromo. La reacción se realiza adecuadamente en presencia de una base adecuada. Los disolventes, diluyentes y bases adecuados incluyen, por ejemplo, los descritos aquí anteriormente en relación con el proceso (a). Como alternativa, Lg puede ser OH, con lo que la reacción se puede efectuar en condiciones de Mitsunobu, como se describe anteriormente en relación con el proceso (e).

Proceso (h)

Para la preparación de aquellos compuestos de la Fórmula I en la que R^{1} contiene un grupo alcoxi (C1-6) o un grupo alcoxi (C1-6) sustituido, o un grupo alquilamino (C1-6) o un grupo alquilamino (C1-6) sustituido, alquilar, convenientemente en presencia de una base adecuada como se define aquí anteriormente para el proceso (a), un derivado de quinazolina de la Fórmula I en la que R^{1} contiene un grupo hidroxi o un grupo amino primario o secundario, según sea apropiado.

Un agente alquilante adecuado es, por ejemplo, cualquier agente conocido en la técnica para la alquilación de hidroxi a alcoxi o a alcoxi sustituido, o para la alquilación de amino a alquilamino o a alquilamino sustituido, por ejemplo un haluro de alquilo o haluro de alquilo sustituido, por ejemplo un cloruro, bromuro o yoduro de alquilo (C1-6), o un cloruro, bromuro o yoduro de alquilo (C1-6) sustituido, convenientemente en presencia de una base adecuada como se define aquí anteriormente, en un disolvente o diluyente inerte adecuado como se define aquí anteriormente, y a una temperatura en el intervalo de, por ejemplo, 10 hasta 140ºC, convenientemente a la temperatura ambiente o próximo a ella. Se puede usar un procedimiento análogo para introducir grupos alcanoil (C2-6)oxi, alcanoil (C2-6)amino y alcano (C1-6)sulfonilamino, opcionalmente sustituidos, en R^{1}.

Convenientemente, para la producción de aquellos compuestos de la Fórmula I en la que R^{1} contiene un grupo alquil (C1-6)amino o un grupo alquil (C1-6)amino sustituido, se puede emplear una reacción de aminación reductora, usando formaldehído o un alcanol (C2-6)aldehído (por ejemplo acetaldehído o propionaldehído). Por ejemplo, para la producción de aquellos compuestos de la Fórmula I en la que R^{1} contiene un grupo N-metilo, se puede hacer reaccionar el compuesto correspondiente que contiene un grupo N-H con formaldehído en presencia de un agente reductor adecuado. Un agente reductor adecuado es, por ejemplo, un agente reductor de tipo hidruro, por ejemplo ácido fórmico, un hidruro de metal alcalino y aluminio, tal como hidruro de litio y aluminio, o, de forma adecuada un borohidruro de metal alcalino, tal como borohidruro de sodio, cianoborohidruro de sodio, trietilborohidruro de sodio, trimetoxiborohidruro de sodio y triacetoxiborohidruro de sodio. La reacción se lleva a cabo convenientemente en un disolvente o diluyente inerte adecuado, por ejemplo tetrahidrofurano y éter dietílico para los agentes reductores más poderosos tales como hidruro de litio y aluminio, y, por ejemplo, cloruro de metileno o un disolvente prótico, tal como metanol y etanol, para los agentes reductores menos potentes, tales como triacetoxiborohidruro de sodio y cianoborohidruro de sodio. Cuando el agente reductor es ácido fórmico, la reacción se lleva a cabo convenientemente usando una disolución acuosa del ácido fórmico. La reacción se realizó a una temperatura en el intervalo de, por ejemplo, 10 hasta 100ºC, tal como 70 hasta 90ºC, o, convenientemente, a la temperatura ambiente o próximo a ella. De forma conveniente, cuando el agente reductor es ácido fórmico, los grupos protectores tales como terc-butoxicarbonilo, en el grupo NH a alquilar (por ejemplo, presente a partir de la síntesis del material de partida), se pueden eliminar in situ durante la reacción.

Proceso (i)

Para la preparación de aquellos compuestos de la Fórmula I en la que R^{1} está sustituido con un grupo T, en el que T se selecciona de alquil (C1-6)amino, di-[alquil (C1-6)]amino, alcanoil (C2-6)amino, alquil (C1-6)tio, alquil (C1-6)sulfinilo y alquil (C1-6)sulfonilo, hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula VII:

18

en la que R^{2}, R^{5}, X^{1}, n y m tienen cualquiera de los significados definidos aquí anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario, R^{1'} es un grupo R^{1} como se define aquí, excepto que cualquiera de los grupos T se sustituye por Lg, y Lg es un grupo desplazable (por ejemplo, cloro o bromo, o aril/alquil (C1-6) sulfonatos tal como mesilato), con un compuesto de la fórmula TH, en la que T es como se define anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario; y en el que después se elimina por medios convencionales cualquier grupo protector que esté presente.

La reacción se lleva a cabo convenientemente en presencia de una base adecuada. La reacción se puede realizar convenientemente en un disolvente o diluyente inerte adecuado. Las bases, disolventes y diluyentes adecuados son, por ejemplo, los descritos en el proceso (a). La reacción se realiza adecuadamente a una temperatura de, por ejemplo, 10 hasta 150ºC, por ejemplo 30 hasta 60ºC.

Se apreciará que algunos de los diversos sustituyentes del anillo en los compuestos de la presente invención se pueden introducir mediante reacciones estándares de sustitución aromática, o se pueden generar mediante modificaciones convencionales de grupos funcionales, bien antes o inmediatamente después de los procesos mencionados anteriormente, y como tales se incluyen en el aspecto de procedimiento de la invención. Tales reacciones y modificaciones incluyen, por ejemplo, la introducción de un sustituyente por medio de una reacción de sustitución aromática, la reducción de sustituyentes, la alquilación de sustituyentes y la oxidación de sustituyentes. Los reactivos y las condiciones de reacción para tales procedimientos son bien conocidos en la técnica química. Los ejemplos particulares de reacciones de sustitución aromática incluyen la introducción de un grupo nitro usando ácido nítrico concentrado, la introducción de un grupo acilo usando, por ejemplo, un haluro de acilo y un ácido de Lewis (tal como tricloruro de aluminio) en condiciones de Friedel Crafts, la introducción de un grupo alquilo usando un haluro de alquilo y ácido de Lewis (tal como tricloruro de aluminio) en condiciones de Friedel Crafts, y la introducción de un grupo halógeno.

Proceso (j)

Haciendo reaccionar un compuesto de la Fórmula VIII:

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en la que R^{1}, R^{2}, X^{1} y m tienen cualquiera de los significados definidos aquí anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario, y Lg es un grupo desplazable como se define aquí anteriormente, con una anilina de la Fórmula IX:

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en la que R^{5} y n tienen cualquiera de los significados definidos aquí anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario, y en el que la reacción se realiza convenientemente en presencia de un ácido adecuado,

Los grupos desplazables adecuados, representados por Lg, son como se definen aquí anteriormente, en particular halógeno, tal como cloro.

La reacción se lleva a cabo convenientemente en presencia de un disolvente o diluyente inerte adecuado, por ejemplo un alcohol o éster tal como metanol, etanol, isopropanol o acetato de etilo, un disolvente halogenado tal como cloruro de metileno, cloroformo o tetracloruro de carbono, un éter tal como tetrahidrofurano o 1,4-dioxano, un disolvente aromático tal como tolueno, o un disolvente aprótico dipolar tal como N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida, N-metilpirrolidin-2-ona, acetonitrilo o dimetilsulfóxido. La reacción se lleva a cabo convenientemente a una temperatura en el intervalo de, por ejemplo, 10 hasta 250ºC, convenientemente en el intervalo de 40 hasta 120ºC, o, cuando se use un disolvente o diluyente, a la temperatura de reflujo. De forma conveniente, el compuesto de Fórmula VIII se hace reaccionar con un compuesto de la Fórmula IX en presencia de un disolvente prótico tal como isopropanol, convenientemente en presencia de un ácido, por ejemplo una cantidad catalítica de un ácido, en las condiciones descritas anteriormente. Los ácidos adecuados incluyen cloruro de hidrógeno gaseoso en éter dietílico o en dioxano, y ácido clorhídrico, por ejemplo una disolución 4 M de cloruro de hidrógeno en dioxano. Como alternativa, esta reacción se puede llevar a cabo convenientemente en un disolvente aprótico, tal como dioxano, o en un disolvente aprótico dipolar, tal como N,N-dimetilacetamida o acetonitrilo, en presencia de un ácido, por ejemplo cloruro de hidrógeno gaseoso en éter dietílico o dioxano, o ácido clorhídrico.

El compuesto de la Fórmula VIII, en la que Lg es halógeno, se puede hacer reaccionar con un compuesto de la Fórmula IX en ausencia de un ácido. En esta reacción, el desplazamiento del grupo saliente Lg de tipo halógeno da como resultado la formación del ácido HLg in situ, y la autocatálisis de la reacción. De forma conveniente, la reacción se lleva a cabo en un disolvente orgánico inerte adecuado, por ejemplo isopropanol, dioxano o N,N-dimetilacetamida. Las condiciones adecuadas para esta reacción son como se describen anteriormente.

Como alternativa, el compuesto de Fórmula VIII se puede hacer reaccionar con un compuesto de la Fórmula IX, en presencia de una base adecuada. Las bases adecuadas para esta reacción son como se definen aquí anteriormente para el proceso (a). Por ejemplo, bases adecuadas son amidas de metales alcalino-térreos, tal como bis(trimetilsilil)-amiduro de sodio. Esta reacción se realiza convenientemente en un disolvente o diluyente inerte, por ejemplo los mencionados en relación con este proceso (j).

Proceso (k)

Haciendo reaccionar un compuesto de Fórmula X:

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en la que R^{5}, X^{1}, R^{1} y n son como se definen anteriormente, y en la que Lg es un grupo saliente, tal como halógeno, especialmente cloro, o 1-imidazolilo, con un alcohol de fórmula R^{2}-OH, en la que R^{2} es como se define anteriormente. La reacción se efectúa adecuadamente en disolvente aprótico, tal como DCM, en presencia de una base, tal como amina terciaria/piridina. Las temperaturas adecuadas serán manifiestas para un químico experto.

Proceso (l)

Para compuestos en los que R^{2} incluye un grupo de la subfórmula (i), hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula XI:

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en la que R^{1}, X^{1}, R^{5} y n son como se definen anteriormente, R^{15} es un grupo alquileno (C1-6), y Lg es un grupo saliente, con un compuesto de fórmula R^{3}R^{4}NH, en la que R^{3} y R^{4} son como se definen en relación con la subfórmula (i) anterior. Los grupos salientes Lg adecuados en este caso incluyen halógeno, tal como cloro, o aril/alquilsulfonato tal como mesilato). La reacción se efectúa adecuadamente en presencia de un fuente de yoduro, tal como yoduro de potasio o yoduro de tetrabutilamonio, en un disolvente orgánico tal como dimetilacetamida, N-metilpirrolidona o dimetilformamida. De forma adecuada, se usa un exceso de la amina R^{3}R^{4}NH. Esto puede ser útil, por ejemplo, cuando Lg es cloro, para paralizar el cloruro de hidrógeno que se forma durante el transcurso de la reacción. De forma adecuada, se emplean temperaturas elevadas, por ejemplo de 50-120ºC, por ejemplo a alrededor de 80ºC.

Las personas expertas en la técnica apreciarán que, a fin de obtener compuestos de la invención en una manera alternativa, y en algunas ocasiones más conveniente, las etapas del procedimiento individuales, mencionadas aquí anteriormente, se pueden realizar en diferente orden, y/o las reacciones individuales se pueden realizar en una etapa diferente en la ruta global (es decir, las transformaciones químicas se pueden realizar sobre diferentes intermedios a los asociados aquí anteriormente con una reacción particular).

Cuando se requiera una sal farmacéuticamente aceptable de un derivado de quinazolina de la Fórmula I, por ejemplo una sal de adición de ácidos, se puede obtener, por ejemplo, haciendo reaccionar dicho derivado de quinazolina con un ácido adecuado, usando un procedimiento convencional. Para facilitar el aislamiento del compuesto durante la preparación, el compuesto se puede preparar en forma de una sal que no es una sal farmacéuticamente aceptable. La sal resultante se puede modificar entonces mediante técnicas convencionales para dar una sal farmacéuticamente aceptable del compuesto. Tales técnicas incluyen, por ejemplo, técnicas de intercambio iónico, o reprecipitación del compuesto en presencia de un contraión farmacéuticamente aceptable. Por ejemplo, la reprecipitación en presencia de un ácido adecuado, tal como HCl para dar una sal de adición de ácidos de hidrocloruro.

En la sección anterior, la expresión "disolvente inerte" se refiere a un disolvente que no reacciona con los materiales de partida, reactivos, intermedios o productos, de manera que afecte adversamente al rendimiento del producto deseado.

Preparación de Materiales de Partida

Los compuestos de Fórmula II están comercialmente disponibles o se pueden preparar usando técnicas convencionales o procedimientos análogos a los descritos en la técnica anterior. En particular, aquellas patentes y Solicitudes enumeradas aquí anteriormente, tales como los documentos WO 96/15118, WO 01/66099 y EP 566.226. Por ejemplo, los compuestos de Fórmula II se pueden preparar según el Esquema de Reacción 1:

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Esquema de Reacción 1

23

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en el que R^{1}, X^{1}, R^{5}, Lg y n son como se definen aquí anteriormente, y Pg es un grupo protector de hidroxi.

(i): Mediante reacción adecuadamente en un disolvente prótico inerte (tal como un alcanol, por ejemplo isopropanol), un disolvente aprótico (tal como dioxano) o un disolvente aprótico dipolar (tal como N,N-dimetilacetamida), en presencia de un ácido, por ejemplo cloruro de hidrógeno gaseoso en éter dietílico o dioxano, o ácido clorhídrico, en condiciones análogas a las descritas anteriormente en el proceso (i).

: Como alternativa, la reacción se puede llevar a cabo en uno de los disolventes inertes anteriores, convenientemente en presencia de una base, por ejemplo carbonato potásico. Las reacciones anteriores se llevan a cabo convenientemente a una temperatura en el intervalo de, por ejemplo, 0 hasta 150ºC, de forma adecuada a la temperatura de reflujo del disolvente de la reacción, o próximo a ella.

(ii): La escisión de Pg se puede realizar en condiciones estándares para tales reacciones. Por ejemplo, cuando Pg es un grupo alcanoilo tal como acetilo, se puede escindir mediante calentamiento en presencia de una disolución de amoníaco metanólico.

Los compuestos de Fórmula XII son conocidos o se pueden preparar usando procedimientos conocidos para la preparación de compuestos análogos. Si no están comercialmente disponibles, los compuestos de la Fórmula XII se pueden preparar mediante procedimientos que se seleccionan a partir de técnicas químicas estándares, técnicas que son análogas a la síntesis de compuestos conocidos, estructuralmente similares, o técnicas que son análogas a los procedimientos descritos en los Ejemplos. Por ejemplo, las técnicas químicas estándares se describen en Houben Weyl. A título de ejemplo, el compuesto de la Fórmula XII, en la que R^{1}-X^{1} es metoxi, Lg es cloro y Pg es acetilo, se puede preparar usando el proceso ilustrado en el Esquema de Reacción 2:

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Esquema de Reacción 2

24

El Esquema de Reacción 2 se puede generalizar por la persona experta para aplicarlo a compuestos dentro de la presente memoria descriptiva que no se ilustren específicamente (por ejemplo, para introducir un sustituyente distinto de metoxi en la posición 7 en el anillo de quinazolina).

Los compuestos de la Fórmula III están comercialmente disponibles o se pueden preparar usando técnicas estándares, por ejemplo como se ilustra en los documentos US 5.252.586 y WO 94/27965.

Los compuestos de la Fórmula IV se pueden preparar haciendo reaccionar un compuesto de la Fórmula II con un compuesto de XVa o XVb:

25

en las que Lg es un grupo desplazable como se define aquí anteriormente, y Pg es un grupo protector adecuado.

La reacción del compuesto de Fórmula II con el compuesto de Fórmula XVa se puede llevar a cabo usando condiciones análogas a las descritas en el proceso (a) anterior, seguido de la eliminación del grupo protector en condiciones estándares.

La reacción del compuesto de Fórmula II con el compuesto de Fórmula XVb se puede llevar a cabo en condiciones de Mitsunobu como se describe en el proceso (e) anterior, seguido de la eliminación del grupo protector en condiciones estándares.

Los compuestos de la Fórmula IV también se pueden preparar haciendo reaccionar un compuesto de la Fórmula IX con un compuesto de la Fórmula XVc:

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en la que Lg, X^{1} y R^{1} son como se definen aquí anteriormente, y Pg es un grupo protector adecuado.

La reacción del compuesto de Fórmula IX con el compuesto de Fórmula XVc se puede llevar a cabo usando condiciones análogas a las descritas en el proceso (j) anterior, seguido de la eliminación del grupo protector en condiciones estándares.

Los compuestos de la Fórmula V y IX están comercialmente disponibles o se pueden preparar usando técnicas convencionales.

Los compuestos de la Fórmula VI se pueden preparar usando el proceso (e) anterior, partiendo de un compuesto preparado, por ejemplo, usando el proceso (a).

Los compuestos de la Fórmula VII se pueden preparar usando, por ejemplo, el proceso (a) o el proceso (d) o el proceso (e), en el que el grupo representado por R^{1} está apropiadamente funcionalizado con un grupo desplazable Lg adecuado, tal como cloro o bromo.

Los compuestos de la Fórmula VIII se pueden preparar usando métodos convencionales bien conocidos en la técnica. Por ejemplo, el grupo protector de hidroxi, Pg, en un compuesto de la Fórmula XII como se describe aquí anteriormente, en el Esquema de Reacción 1, se elimina para dar el compuesto de la Fórmula XIV:

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El grupo protector Pg se puede eliminar del compuesto de Fórmula XII usando técnicas convencionales.

El compuesto de la Fórmula XIV se puede acoplar entonces con un compuesto de la Fórmula III como se define aquí anteriormente, usando condiciones análogas a las descritas en el proceso (a) o en el proceso (e).

Los compuestos de la Fórmula X se pueden preparar usando métodos convencionales bien conocidos en la técnica. Por ejemplo, haciendo reaccionar un compuesto de la Fórmula IV con un compuesto de la fórmula Lg-CO-Lg, en la que Lg es un grupo desplazable, tal como halógeno (por ejemplo, cloro o bromo) o imidazolilo. La reacción del compuesto de Fórmula IV con el compuesto de la fórmula Lg-CO-Lg se puede llevar a cabo usando condiciones similares a las descritas en el proceso (c) anterior, en presencia de una base débil, tal como piridina o lutidina, y en presencia de un disolvente inerte (por ejemplo acetonitrilo o cloruro de metileno). Los ejemplos de compuestos adecuados de la fórmula Lg-CO-Lg son fosgeno y 1,1'-carbonildiimidazol.

Ciertos intermedios nuevos utilizados en los procesos anteriores se proporcionan como una característica adicional de la presente invención, junto con el proceso para su preparación.

Según una característica adicional de la presente invención, se proporcionan los compuestos de las fórmulas VI, VII, X y XI o una sal de los mismos, (incluyendo sus sales farmacéuticamente aceptables), como se definen aquí anteriormente.

Ensayos Biológicos

Se evaluaron las actividades inhibidoras de los compuestos en ensayos de tirosina quinasas proteínicas no basadas en células, así como en ensayos de proliferación a base de células, antes de que su actividad in vivo se evaluase en estudios de xenoinjertos.

a) Ensayos de fosforilación de tirosina quinasas proteínicas

Este ensayo mide la capacidad de un compuesto de ensayo para inhibir la fosforilación de un sustrato polipeptídico que contiene tirosina mediante la enzima de tirosina quinasa de EGFR o ErbB2.

Los fragmentos intracelulares recombinantes de EGFR, erbB2 y erbB4 (números de acceso X00588, X03363 y L07868, respectivamente) se clonaron y se expresaron en el sistema de baculovirus/Sf21. Se prepararon lisados a partir de estas células mediante tratamiento con tampón de lisis enfriado en hielo (20 mM de ácido N-2-hidroxietilpiperazin-N'-2-etanosulfónico (HEPES) pH 7,5, 150 mM de NaCl, 10% de glicerina, 1% de Triton X-100, 1,5 mM de MgCl_{2}, 1 mM de ácido etilenglicol-bis(\beta-aminoetileter)-N',N',N',N'-tetraacético (EGTA), más inhibidores de proteasa, y después se aclararon mediante centrifugación.

La actividad de quinasa constitutiva de la proteína recombinante se determinó mediante su capacidad para fosforilar un péptido sintético (hecho de un copolímero al azar de ácido glutámico, alanina y tirosina, en la relación 6:3:1). Específicamente, se revistieron inmunoplacas de 96 pocillos Maxisorb^{TM} con péptido sintético (0,2 \mug de péptido en 100 \mul de disolución salina tamponada con fosfato (PBS), e incubado a 4ºC toda la noche). Las placas se lavaron en PBS-T (disolución salina tamponada con fosfato, con 0,5% de Tween 20), y después en 50 mM de HEPES pH 7,4 a temperatura ambiente, para eliminar cualquier exceso de péptido sintético no unido. La actividad de tirosina quinasa de EGFR, ErbB2 o ErbB4 se evaluó mediante incubación en placas revestidas con péptido, durante 20 minutos a 22ºC en 100 mM de HEPES pH 7,4, adenosintrifosfato (ATP) a concentración de Km para la enzima respectiva, 10 mM de MnCl_{2}, 0,1 mM de Na_{3}VO_{4}, 0,2 mM de DL-ditiotreitol (DTT), 0,1% de Triton X-100 con compuesto de ensayo en DMSO (concentración final de 2,5%). Las reacciones se terminaron mediante la eliminación de los componentes líquidos del ensayo, seguido del lavado de las placas con PBS-T.

El producto fosfo-peptídico inmovilizado de la reacción se detectó por métodos inmunológicos. En primer lugar, las placas se incubaron durante 90 minutos a temperatura ambiente con anticuerpo primarios anti-fosfotirosina, que se produjeron en el ratón (AG10 de Upstate Biotechnology). Tras el lavado intenso, las placas se trataron con anticuerpo secundario anti-ratón de oveja conjugado con peroxidasa de rábano picante (HRP) (NXA931 de Amersham), durante 60 minutos a temperatura ambiente. Tras un lavado posterior, la actividad de HRP en cada pocillo de la placa se midió colorimétricamente usando como sustrato cristales de la sal diamónica de 22'-azino-di-[sulfonato (6) de 3-etilbentiazolina] (ABTS^{TM} de Roche).

La cuantificación del revelado del color, y de este modo de la actividad enzimática, se logró midiendo la absorbancia a 405 nm en un lector de microplacas de Molecular Devices ThermoMax. La inhibición de quinasa para un compuesto dado se expresó como un valor de IC_{50}. Éste se determinó calculando la concentración de compuesto que se requirió para dar una inhibición del 50% de fosforilación en este ensayo. El intervalo de fosforilación se calculó a partir de los valores del control positivos (vehículo más ATP) y negativos (vehículo menos ATP).

b) Ensayo de proliferación celular de KB conducida por EGFR

Este ensayo mide la capacidad de un compuesto de ensayo para inhibir la proliferación de células KB (carcinoma nasofaríngeo humano, obtenido de la American Type Culture Collection (ATCC)).

Las células KB (carcinoma nasofaríngeo humano, obtenido de la ATCC) se cultivaron en medio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) que contiene 10% de suero fetal de ternera, 2 mM de glutamina y aminoácidos no esenciales, a 37ºC en una incubadora con 7,5% de CO_{2} y aire. Las células se cosecharon de los matraces madre usando tripsina/ácido etilendiaminotetraacético (EDTA). La densidad celular se midió usando un hemocitómetro, y la viabilidad se calculó usando una disolución de azul de tripano antes de sembrar a una densidad de 1,25 x 10^{3} células por pocillo de una placa de 96 pocillos en DMEM que contiene suero lavado con 2,5% de carbón, 1 mM de glutamina y aminoácidos no esenciales, a 37ºC en 7,5% de CO_{2}, y se dejó sedimentar durante 4 horas.

Tras la adhesión a la placa, las células se trataron con o sin EGF (concentración final de 1 ng/ml), y con o sin compuesto en un intervalo de concentraciones en dimetilsulfóxido (DMSO) (0,1% final), antes de la incubación durante 4 días. Tras el período de incubación, los números de células se determinaron añadiendo 50 \mul de bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio (MTT) (lote madre de 5 mg/ml), durante 2 horas. La disolución de MTT se eliminó entonces ladeándola, la placa se secó mediante golpes suaves, y las células se disolvieron con la adición de 100 \mul de DMSO.

La absorbancia de las células solubilizadas se leyó a 540 nm usando un lector de microplacas de Molecular Device ThermoMax. La inhibición de la proliferación se expresó como un valor de IC_{50}. Éste se determinó calculando la concentración del compuesto que se requirió para dar una inhibición de 50% de la proliferación. El intervalo de proliferación se calculó a partir de los valores de control positivos (vehículo más EGF) y negativo (vehículo menos EGF).

c) Ensayos de xenoinjerto in vivo (i) LOVO

Este ensayo mide la capacidad de un compuesto de ensayo para inhibir el crecimiento de un tumor LoVo (adenocarcinoma colorrectal, obtenido de la ATCC) en ratones atímicos Suizos hembra (Alderley Park, genotipo nu/nu).

Se criaron ratones atímicos (genotipo nu/nu) Suizos hembra, y se mantuvieron en Alderley Park en aisladores de presión negativa (PFI Systems Ltd.). Los ratones se alojaron en una instalación con barrera, con ciclos de 12 h de luz/oscuridad, y se les proporcionó comida esterilizada y agua a voluntad. Todos los procedimientos se realizaron en ratones de al menos 8 semanas. Se implantaron xenoinjertos de célula tumoral LoVo (adenocarcinoma colorrectal obtenido de la ATCC) en el flanco trasero de ratones donantes, mediante inyecciones subcutáneas de 1 x 10^{7} células recientemente cultivadas en 100 \mul de medio libre de suero, por animal. En el 5º día después del implante, los ratones se distribuyeron al azar en grupos de 7, antes del tratamiento con el compuesto o el control de vehículo, que se administró una vez al día a 0,1 ml/10 g de peso corporal. El volumen del tumor se evaluó dos veces al día mediante medición con un calibre Vernier bilateral, usando la fórmula (longitud x anchura) x \sqrt(longitud x anchura) x (\pi/6), en la que la longitud fue el diámetro más largo a través del tumor, y la anchura fue la perpendicular correspondiente. La inhibición del crecimiento desde el comienzo del estudio se calculó comparando los cambios medios en el volumen del tumor para los grupos del control y los tratados, y se evaluó la significancia estadística entre los dos grupos usando una prueba de la t de Student.

(ii) Ensayo de xenoinjerto de BT-474 in vivo

Este ensayo mide la capacidad de un compuesto de ensayo para inhibir el crecimiento de un xenoinjerto de célula tumoral BT-474 (carcinoma mamario humano obtenido de Dr. Baselga, Laboratorio Recerca Oncologica, Paseo Vall D'Hebron 119-129, Barcelona 08035, España) en ratones atímicos Suizos hembra (Alderley Park, genotipo nu/nu) (Baselga, J. et al. (1998) Cancer Research, 58, 2825-2831).

Se criaron ratones atímicos (genotipo nu/nu) Suizos hembra, y se mantuvieron en Alderley Park en aisladores de presión negativa (PFI Systems Ltd.). Los ratones se alojaron en una instalación con barrera, con ciclos de 12 h de luz/oscuridad, y se les proporcionó comida esterilizada y agua a voluntad. Todos los procedimientos se realizaron en ratones de al menos 8 semanas. Se implantaron xenoinjertos de células tumorales BT-474 en el flanco trasero de ratones donantes, mediante inyecciones subcutáneas de 1 x 10^{7} células recientemente cultivadas en 100 \mul de medio libre de suero, con 50% de Matrigel, por animal. En el día 14º tras el implante, los ratones se distribuyeron al azar en grupos de 10, antes de que se administrase el tratamiento con compuesto o con el control de vehículo, una vez al día a 0,1 ml/kg de peso corporal. El volumen del tumor se evaluó dos veces a la semana mediante medición con un calibre Vernier bilateral, usando la fórmula (longitud x anchura) x \sqrt(longitud x anchura) x (\pi/6), en la que la longitud fue el diámetro más largo a través del tumor, y la anchura fue la perpendicular correspondiente. La inhibición del crecimiento desde el comienzo del tratamiento se calculó comparando los cambios medios en el volumen del tumor para los grupos del control y los tratados, y se evaluó la significancia estadística entre los dos grupos usando la prueba de la t de Student.

d) Ensayo de inhibición del canal de potasio codificado por hERG

Este ensayo determina la capacidad de un compuesto de ensayo para inhibir la corriente de cola que fluye a través del canal de potasio codificado por el gen humano relacionado con el éter a-go-gó (hERG).

Se hicieron crecer células de riñón embriónico humano (HEK), que expresan el canal codificado por hERG, en Medio Esencial Mínimo de Eagle (EMEM; número de catálogo M2279 de Sigma-Aldrich), complementado con suero de ternero fetal al 10% (Labtech International; número de producto 4-101-500), suplemento libre de suero M1 al 10% (Egg Technologies; número de producto 70916) y 0,4 mg/ml de Geneticina G418 (número de catálogo G7034 de Sigma-Aldrich). Uno o dos días antes de cada experimento, las células se despegaron de los matraces del cultivo de tejido con Accutase (TCS Biologicals), usando métodos de cultivo de tejido estándares. Después se pusieron sobre cubreobjetos de vidrio que descansan en pocillos de una placa de 12 pocillos, y se cubieron con 2 ml del medio de crecimiento.

Para cada célula registrada, se colocó un cubreobjetos de vidrio, que contiene las células, en el fondo de una cámara Perspex que contiene una disolución de baño (véase más abajo) a temperatura ambiente (\sim 20ºC). Esta cámara se fijó a la altura de un microscopio de contraste de fase, invertido. Inmediatamente después de colocar el cubreobjetos en la cámara, se perfusionó la disolución del baño en la cámara, desde un depósito alimentado por gravedad, durante 2 minutos a una velocidad de \sim 2 ml/min. Después de este tiempo, se detuvo la perfusión.

Se rellenó una pipeta de pinzamiento zonal, hecha de tubo de vidrio de borosilicato (GC120F, Harvard Apparatus), que usa un retractor de micropipeta P-97 (Sutter Instrument Co.), con disolución para pipeta (véase más abajo). La pipeta se conectó a la etapa de cabeza del amplificador del pinzamiento zonal (patch clamp) (Axopatch 200B, Axon Instruments), vía un alambre de plata/cloruro de plata. La tierra de la etapa de toma de señal se conectó al electrodo de tierra. Éste consistió en un alambre de plata/cloruro de plata embebido en agar al 3% completado con cloruro sódico al 0,85%.

La célula se registró en la configuración de célula completa de la técnica de pinzamiento zonal. Tras la etapa de "adaptación", que se realizó a un potencial de mantenimiento de -80 mV (ajustado por el amplificador), y tras el ajuste apropiado de los controles de la resistencia en serie y de la capacitancia, se usó un programa de ordenador para electrofisiología (Clampex, Axon Instruments) para establecer un potencial de mantenimiento (-80 mV), y para suministrar un protocolo de voltaje. Este protocolo se aplicó cada 15 segundos, y consistió en una etapa de 1s hasta +40 mV, seguido de una etapa de 1s hasta -50 mV. La respuesta de la corriente a cada protocolo de voltaje impuesto se filtró a baja pasada por el amplificador a 1 kHz. La señal filtrada se adquirió entonces, en línea, digitalizando esta señal analógica desde el amplificador con un convertidor de analógica a digital. La señal digitalizada se capturó entonces en un ordenador que funciona con el programa Clampex (Axon Instruments). Durante el potencial de mantenimiento y la etapa hasta +40 mV, la corriente se muestreó a 1 kHz. La velocidad de toma de muestras se ajustó entonces a 5 kHz para el resto del protocolo del voltaje.

Las composiciones, pH y osmolaridad de la disolución del baño y de la pipeta se tabulan a continuación.

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La amplitud de la corriente de cola del canal de potasio codificado por hERG, tras la etapa desde +40 mV hasta -50 mV, se registró en línea mediante el programa de ordenador Clampex (Axon Instruments). Tras la estabilización de la amplitud de la corriente de cola, se aplicó a la célula la disolución del baño que contiene el vehículo para la sustancia de ensayo. Teniendo en cuenta que la aplicación del vehículo no tuvo ningún efecto significativo sobre la amplitud de la corriente de cola, se construyó entonces una curva de efecto frente a concentración acumulativa, para el compuesto del ensayo.

El efecto de cada concentración de compuesto de ensayo se cuantificó expresando la amplitud de la corriente de cola en presencia de una concentración dada de compuesto de ensayo como porcentaje de aquél en presencia de vehículo.

La potencia del compuesto de ensayo (IC_{50}) se determinó ajustando los valores del porcentaje de inhibición que conforman la curva de concentración y efecto a una ecuación de Hill de cuatro parámetros, usando un paquete de ajuste de datos estándar. Si el nivel de inhibición observado a la concentración de ensayo más elevada no superó el 50%, no se produjo un valor de potencia, y se dio un valor de porcentaje de inhibición a esa concentración.

e) Ensayo celular de fosfo-erbB2 de Clone 24

Este ensayo del punto final de la inmunofluorescencia mide la capacidad de un compuesto de ensayo para inhibir la fosforilación de erbB2 en una estirpe celular derivada de MCF7 (carcinoma de mama) que se generó transfectando células MCF7 con el gen de erbB2 de longitud completa usando métodos estándares para dar una estirpe celular que sobreexpresa la proteína de erbB2 de tipo natural de longitud completa (en lo sucesivo células "Clone 24").

Las células Clone 24 se cultivaron en medio de crecimiento (medio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) libre de rojo fenol, que contiene 10% de suero fetal bovino, 2 mM de glutamina y 1,2 mg/ml de G418) en una incubadora de 7,5% de CO_{2} y aire, a 37ºC. Las células se cosecharon de matraces de lote T75, lavando una vez en PBS (disolución salina tamponada con fosfato, pH 7,4, Gibco nº 10010-015), y se cosecharon usando 2 ml de disolución de tripsina (1,25 mg/ml)/ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) (0,8 mg/ml). Las células se resuspendieron en medio de crecimiento. La densidad celular se midió usando un hemocitómetro, y la viabilidad se calculó usando disolución de azul de tripano antes de diluir adicionalmente en medio de crecimiento, y se sembró a una densidad de 1 x 10^{4} células por pocillo (en 100 ul) en placas de 96 pocillos de fondo claro (Packard, nº 6005182).

3 días más tarde, se retiró el medio de crecimiento de los pocillos, y se sustituyó por 100 ul de medio de ensayo (DMEM libre de rojo fenol, 2 mM de glutamina, 1,2 mg/ml de G418), con o sin compuesto inhibidor de erbB. Las placas se devolvieron a la incubadora durante 4 h, y después se añadieron a cada pocillo 20 \mul de disolución de formaldehído al 20% en PBS, y la placa se dejó a temperatura ambiente durante 30 minutos. Esta disolución fijadora se eliminó con una pipeta de múltiples canales, se añadieron a cada pocillo 100 \mul de PBS, y se eliminaron entonces con una pipeta de múltiples canales, y después se añadieron a cada pocillo 50 \mul de PBS. Las placas se cerraron entonces herméticamente y se almacenaron hasta 2 semanas a 4ºC.

La inmunotinción se realizó a temperatura ambiente. Los pocillos se lavaron una vez con 200 \mul de PBS/Tween 20 (obtenido añadiendo 1 saquito de polvo seco de PBS/Tween (Sigma, nº P3563) a 1 l de H_{2}O doblemente destilada) usando un lavador de placas, después se añadieron 200 \mul de disolución bloqueante (leche desnatada seca Marvel al 5% (Nestle) en PBS/Tween 20), y se incubaron durante 10 minutos. La disolución de bloqueo se eliminó usando un lavador de placas, y se añadieron 200 \mul de 0,5% de Triton X-100/PBS para permeabilizar las células. Después de 10 minutos, la placa se lavó con 200 \mul de PBS/Tween 20, y se añadieron nuevamente 200 \mul de disolución bloqueante, y se incubó durante 15 minutos. Tras la eliminación de la disolución bloqueante con un lavador de placas, se añadieron a cada pocillo 30 \mul de anticuerpo anti-fosfo ErbB2 IgG policlonal de conejo (epítopo fosfo-Tyr 1248, SantaCruz, nº SC-12352-R), diluido 1:250 en disolución bloqueante, y se incubó durante 2 horas. Después, esta disolución de anticuerpo primario se eliminó de los pocillos usando un lavador de placas, seguido de dos lavados con 200 \mul de PBS/Tween 20 usando un lavador de placas. Seguidamente, se añadieron 30 \mul de anticuerpo secundario anti-IgG de conejo de cabra Alexa-Fluor 488 (Molecular Probes, nº A-11008), diluido 1:750 en disolución bloqueante, a cada pocillo. De aquí en adelante, siempre que sea posible, las placas se protegieron de la exposición a la luz, cerrando herméticamente en esta etapa con cinta de fondo negro. Las placas se incubaron durante 45 minutos, y después se eliminó la disolución de anticuerpo secundario de los pocillos, seguido de dos lavados con 200 ul de PBS/Tween 20 usando un lavador de placas. A continuación, se añadieron a cada placa 100 \mul de PBS, se incubó durante 10 minutos y después se eliminó usando un lavador de placas. Seguidamente, se añadieron a cada placa otros 100 \mul de PBS, y después, sin incubación prolongada, se eliminó usando un lavador de placas. A continuación, se añadieron 50 \mul de PBS a cada pocillo, y las placas se volvieron a cerrar herméticamente con una cinta de fondo negro, y se almacenaron hasta 2 días a 4ºC antes del análisis.

La señal de fluorescencia en cada pocillo se midió usando un instrumento Acumen Explorer (Acumen Bioscience Ltd.), un lector de placas que se puede usar para cuantificar rápidamente cifras de imágenes generadas mediante barrido por láser. El instrumento se ajustó para medir el número de objetos fluorescentes por encima de un valor umbral preestablecido, y esto proporcionó una medida del estado de fosforilación de la proteína erbB2. Los datos de respuesta frente a la dosis de fluorescencia, obtenidos con cada compuesto, se exportaron a un paquete de programa de ordenador adecuado (tal como Origin), para realizar el análisis de ajuste de curvas. La inhibición de la fosforilación de erbB2 se expresó como un valor de IC_{50}. Éste se determinó calculando la concentración de compuesto que se requirió para dar una inhibición de 50% de la señal de fosforilación de erbB2.

Aunque las propiedades farmacológicas de los compuestos de la Fórmula I varían con el cambio estructural como era de esperar, en general la actividad que poseen los compuestos de la Fórmula I se puede demostrar en las siguientes concentraciones o dosis en uno o más de los ensayos anteriores:

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A título de ejemplo, la Tabla A ilustra la actividad de compuestos representativos según la invención. La columna 2 de la Tabla A muestra datos de IC_{50} a partir del Ensayo (a) para la inhibición de la fosforilación de la proteína de tirosina quinasa de EGFR; la columna 3 muestra los datos de IC_{50} a partir del Ensayo (a) para la inhibición de la fosforilación de la proteína de tirosina quinasa de erbB2; la columna 4 muestra los datos de IC_{50} para la inhibición de la proliferación de células KB en el Ensayo (b) descrito anteriormente; y la columna 5 muestra los datos de IC_{50} para la inhibición de la fosforilación de erbB2 en una estirpe celular derivada de MCF7, en el Ensayo (e) descrito anteriormente:

TABLA A

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Según un aspecto adicional de la invención, se proporciona una composición farmacéutica que comprende un derivado quinazolínico de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí anteriormente, en asociación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

Las composiciones de la invención pueden estar en una forma adecuada para uso oral (por ejemplo como comprimidos, pastillas, cápsulas duras o blandas, suspensiones acuosas u oleosas, emulsiones, polvos dispersables o gránulos, jarabes o elixires), para uso tópico (por ejemplo como cremas, ungüentos, geles, o disoluciones o suspensiones acuosas u oleosas), para administración mediante inhalación (por ejemplo, como un polvo finamente dividido o un aerosol líquido), para la administración mediante insuflación (por ejemplo, como un polvo finamente dividido) o para administración parenteral (por ejemplo, como una disolución estéril acuosa u oleosa para dosificación intravenosa, subcutánea o intramuscular, o como un supositorio para dosificación rectal).

Las composiciones de la invención se pueden obtener mediante procedimientos convencionales usando excipientes farmacéuticos convencionales, bien conocidos en la técnica. De este modo, las composiciones destinadas a uso oral pueden contener, por ejemplo, uno o más agentes colorantes, edulcorantes, aromatizantes y/o conservantes.

La cantidad de ingrediente activo que se combina con uno o más excipientes para producir una forma de dosificación individual necesariamente variará dependiendo del hospedante tratado y de la vía particular de administración. Por ejemplo, una formulación destinada a la administración oral a seres humanos generalmente contendrá, por ejemplo, de 0,5 mg hasta 0,5 g de agente activo (más adecuadamente, de 0,5 hasta 100 mg, por ejemplo de 1 hasta 30 mg) en composición con una cantidad apropiada y conveniente de excipientes que puede variar desde alrededor de 5 hasta alrededor de 98 por ciento en peso de la composición total.

El tamaño de la dosis para fines terapéuticos o profilácticos de un compuesto de la Fórmula I variará naturalmente según la naturaleza y gravedad de las afecciones, según la edad y sexo del animal o paciente, y según la vía de administración, de acuerdo con principios bien conocidos de medicina.

Al usar un compuesto de la Fórmula I con fines terapéuticos o profilácticos generalmente se administrará de forma que se reciba una dosis diaria en el intervalo de, por ejemplo, 0,1 mg/kg hasta 75 mg/kg de peso corporal, dada, si se requiere, en dosis divididas. En general, cuando se emplee una vía parenteral, se administrarán dosis más bajas. De este modo, por ejemplo, para administración intravenosa, se usará generalmente una dosis en el intervalo de, por ejemplo, 0,1 mg/kg hasta 30 mg/kg de peso corporal. De forma similar, para la administración por inhalación, se usará una dosis en el intervalo de, por ejemplo, 0,05 mg/kg hasta 25 mg/kg de peso corporal. Sin embargo, se prefiere la administración oral, particularmente en forma de comprimido. Típicamente, las formas de dosificación unitaria contendrán alrededor de 0,5 mg hasta 0,5 g de un compuesto de esta invención.

Se ha encontrado que los compuestos de la presente invención poseen propiedades antiproliferativas , tales como propiedades contra el cáncer, que se cree que surgen de su actividad inhibidora de tirosina quinasas receptoras de la familia de erbB, y particularmente un perfil mixto de erbB2/EGF.

En consecuencia, es de esperar que los compuestos de la presente invención sean útiles en el tratamiento de enfermedades o patologías mediadas sólo o en parte por tirosina quinasas receptoras de erbB, es decir, los compuestos se pueden usar para producir un efecto inhibidor de tirosina quinasas receptoras de erbB en un animal de sangre caliente que necesite de tal tratamiento. De este modo, los compuestos de la presente invención proporcionan un método para el tratamiento de células cancerosas, caracterizado por la inhibición de una o más de la familia de erbB de tirosina quinasas receptoras. Particularmente, los compuestos de la invención se pueden usar para producir un efecto antiproliferativo y/o proapoptótico y/o antiinvasivo, mediado, sólo o en parte, por la inhibición de tirosina quinasas receptoras de erbB. Particularmente, es de esperar que los compuestos de la presente invención sean útiles en la prevención o tratamiento de aquellos tumores que sean sensibles a la inhibición de una o más de las tirosina quinasas receptoras de erbB, que están implicadas en las etapas de transducción de señales que accionan la proliferación y supervivencia de estas células tumorales. En consecuencia, es de esperar que los compuestos de la presente invención sean útiles en el tratamiento de psoriasis, hiperplasia prostática benigna (BPH), aterosclerosis y restenosis y/o cáncer, proporcionando un efecto antiproliferativo, particularmente en el tratamiento de cánceres sensibles a tirosina quinasas receptoras de erbB. Tales tumores benignos o malignos pueden afectar a cualquier tejido, e incluyen tumores no sólidos, tales como leucemia, mieloma múltiple o linfoma, y también tumores sólidos, por ejemplo, cánceres de conducto biliar, óseo, de la vejiga, del cerebro/SNC, de mama, colorrectal, endometrial, gástrico, de cabeza y cuello, hepático, de pulmón, neuronal, esofágico, ovárico, pancreático, de próstata, renal, de piel, testicular, de tiroide, uterino y de vulva.

Según este aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso como un medicamento.

Según un aspecto adicional de la invención, se proporciona un compuesto de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en la producción de un efecto antiproliferativo en un animal de sangre caliente, tal como el hombre.

De este modo, según este aspecto de la invención, se proporciona el uso de un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí anteriormente, en la fabricación de un medicamento para uso en la producción de un efecto antiproliferativo en un animal de sangre caliente, tal como el hombre.

Según una caracterísica adicional de este aspecto, se proporciona un método para producir un efecto antiproliferativo en un animal de sangre caliente, tal como el hombre, que necesite de tal tratamiento, que comprende administrar a dicho animal una cantidad eficaz de un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí anteriormente.

Según un aspecto adicional de la invención, se proporciona el uso de un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí anteriormente, en la fabricación de un medicamento para uso en la prevención o tratamiento de aquellos tumores que son sensibles a la inhibición de tirosina quinasas receptoras de erbB, tales como una combinación de EGFR y erbB2, que están implicadas en las etapas de transducción de señales que conducen a la proliferación de células tumorales.

Según una caracterísica adicional de este aspecto, se describe un método para la prevención o tratamiento de aquellos tumores que son sensibles a la inhibición de una o más de la familia de erbB de tirosina quinasas receptoras, tales como una combinación de EGFR y erbB2, que están implicadas en las etapas de transducción de señales que conducen a la proliferación y/o supervivencia de células tumorales, que comprende administrar a dicho animal una cantidad eficaz de un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí anteriormente.

Según una caracterísica adicional de este aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en la prevención o tratamiento de aquellos tumores que son sensibles a la inhibición de tirosina quinasas receptoras de erbB, tales como una combinación de EGFR y erbB2, que están implicadas en las etapas de transducción de señales que conducen a la proliferación de células tumorales.

Según un aspecto adicional de la invención, se proporciona el uso de un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí anteriormente, en la fabricación de un medicamento para uso en la provisión de un efecto inhibidor de tirosina quinasas de EGFR y erbB2 combinadas.

Según una caracterísica adicional de este aspecto, se describe un método para proporcionar un efecto inhibidor de tirosina quinasas de EGFR y erbB2 combinadas, que comprende administrar a dicho animal una cantidad eficaz de un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí anteriormente.

Según una caracterísica adicional de este aspecto de la invención, se proporciona un compuesto de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en la provisión de un efecto inhibidor de tirosina quinasas de EGFR y erbB2 combinadas.

Según un aspecto adicional de la presente invención, se proporciona el uso de un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí anteriormente, en la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de un cáncer (por ejemplo, un cáncer seleccionado de leucemia, mieloma múltiple, linfoma, del conducto biliar, óseo, de la vejiga, del cerebro/SNC, de mama, colorrectal, endometrial, gástrico, de cabeza y cuello, hepático, de pulmón, neuronal, esofágico, ovárico, pancreático, de próstata, renal, de piel, testicular, de tiroide, uterino y de vulva).

Según una caracterísica adicional de este aspecto, se describe un método para tratar un cáncer (por ejemplo, un cáncer seleccionado de leucemia, mieloma múltiple, linfoma, del conducto biliar, óseo, de la vejiga, del cerebro/SNC, de mama, colorrectal, endometrial, gástrico, de cabeza y cuello, hepático, de pulmón, neuronal, esofágico, ovárico, pancreático, de próstata, renal, de piel, testicular, de tiroide, uterino y de vulva), en un animal de sangre caliente, tal como el hombre, que necesite de tal tratamiento, que comprende administrar a dicho animal una cantidad eficaz de un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí anteriormente.

Según un aspecto adicional de la invención, se proporciona un compuesto de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso en el tratamiento de un cáncer (por ejemplo, un cáncer seleccionado de leucemia, mieloma múltiple, linfoma, del conducto biliar, óseo, de la vejiga, del cerebro/SNC, de mama, colorrectal, endometrial, gástrico, de cabeza y cuello, hepático, de pulmón, neuronal, esofágico, ovárico, pancreático, de próstata, renal, de piel, testicular, de tiroide, uterino y de vulva).

Como se ha mencionado anteriormente, el tamaño de la dosis requerida para el tratamiento terapéutico o profiláctico de una enfermedad particular variará necesariamente dependiendo, entre otros factores, del hospedante tratado, de la vía de administración y de la gravedad de la enfermedad que se está tratando.

El tratamiento antiproliferativo definido aquí anteriormente se puede aplicar como una terapia única, o puede implicar, además del derivado quinazolínico de la invención, cirugía convencional o radioterapia o quimioterapia. Tal quimioterapia puede incluir una o más de las siguientes categorías de agentes antitumorales:

(i): fármacos antiproliferativos/antineoplásicos, y combinaciones de los mismos, como se usan en oncología médica, tales como agentes alquilantes (por ejemplo cis-platino, carboplatino, ciclofosfamida, mostaza nitrogenada, melfalán, clorambucilo, busulfán y nitrosoureas); antimetabolitos (por ejemplo, antifolatos tales como fluoropirimidinas como 5-fluorouracilo y tegafur, raltitrexed, metotrexato, citosina arabinósido e hidroxiurea; antibióticos antitumorales (por ejemplo, antraciclinas como adriamicina, bleomicina, doxorrubicina, daunomicina, epirrubicina, idarrubicina, mitomicina-C, dactinomicina y mitramicina); agentes antimitóticos (por ejemplo, alcaloides de la vinca como vincristina, vinblastina, vindesina y vinorrelbina, y taxoides como taxol y taxotere); e inhibidores de topoisomerasa (por ejemplo, epipodofilotoxinas como etopósido y tenipósido, amsacrina, topotecán y camptotecina).

(ii): agentes citostáticos tales como antiestrógenos (por ejemplo tamoxifeno, toremifeno, raloxifeno, droloxifeno e yodoxifeno), reguladores a la baja del receptor de estrógenos (por ejemplo, fulvestrant), antiandrógenos (por ejemplo bicalutamida, flutamida, nilutamida y acetato de ciproterona), antagonistas de LHRH o agonistas de LHRH (por ejemplo goserelina, leuprorrelina y buserelina), progestágenos (por ejemplo acetato de megestrol), inhibidores de aromatasa (por ejemplo como anastrozol, letrazol, vorazol y exemestano) e inhibidores de 5\alpha-reductasa tales como finasterida;

(iii): agentes que inhiben la invasión de células cancerosas (por ejemplo, inhibidores de metaloproteinasas como marimastat, e inhibidores de la función del receptor del activador de plasminógeno uroquinasa);

(iv): inhibidores de la función del factor de crecimiento, por ejemplo tales inhibidores incluyen anticuerpos del factor de crecimiento, anticuerpos del receptor del factor de crecimiento (por ejemplo, el anticuerpo anti-erbB2 trastuzumab [Herceptin^{TM}] y el anticuerpo anti-erbB1 cetuximab [C225]), inhibidores de farnesil trasnferasas, inhibidores de tirosina quinasas e inhibidores de serina/treonina quinasas, por ejemplo otros inhibidores de la familia del factor de crecimiento epidérmico (por ejemplo, los inhibidores de tirosina quinasas de la familia de EGFR, tales como \underline{N}-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-metoxi-6-(3-morfolinopropoxi)quinazolin-4-amina (gefitinib, AZD1839), \underline{N}-(3-etinilfenil)-6,7-bis(2-metoxietoxi)-quinazolin-4-amina (erlotinib, OSI-774) y 6-acrilamido-\underline{N}-(3-cloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolinopropoxi)-quinazolin-4-amina (CI 1033)), por ejemplo inhibidores de la familia del factor del crecimiento derivado de plaquetas y, por ejemplo, inhibidores de la familia del factor de crecimiento de hepatocitos;

(v): agentes antiangiogénicos tales como aquellos que inhiben los efectos del factor de crecimiento endotelial vascular (por ejemplo, el anticuerpo del factor de crecimiento de células endoteliales antivascular bevacizumab [Avastin™], compuestos tales como los descritos en las Solicitudes de Patentes Internacionales WO 97/22596, WO 97/30035, WO 97/32856 y WO 98/13354) y compuestos que funcionan mediante otros mecanismos (por ejemplo linomida, inhibidores de la función \alpha\nu\beta3 de integrina y angiostatina);

(vi): agentes que dañan la vasculatura, tales como Combretastatina A4 y los compuestos descritos en las Solicitudes de Patentes Internacionales WO 99/02166, WO00/40529, WO 00/41669, WO01/92224, WO02/04434 y WO02/08213;

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(vii): terapias antisentido, por ejemplo las que van dirigidas contra las dianas enumeradas anteriormente, tales como ISIS 2503, un antisentido anti-ras;

(viii): enfoques de terapia génica, incluyendo, por ejemplo, enfoques para sustituir genes aberrantes, tales como p53 aberrante o BRCA1 or BRCA2 aberrante, enfoques de GDEPT (terapia de profármaco y enzima dirigida por genes), tales como aquellos que usan citosina desaminasa, timidina quinasa o una enzima de nitrorreductasa bacteriana, y enfoques para incrementar la tolerancia del paciente a la quimioterapia o radioterapia, tales como la terapia génica de resistencia a múltiples fármacos; y

(ix): enfoques inmunoterapéuticos, incluyendo, por ejemplo, enfoques ex vivo e in vivo para incrementar la inmunogenicidad de las células tumorales del paciente, tales como la transfección con citoquinas tales como interleuquina 2, interleuquina 4 o el factor estimulador de colonias de granulocitos-macrófagos, enfoques para disminuir la anergia de las células T, enfoques que usan células inmunitarias transfectadas, tales como células dendríticas transfectadas con citoquinas, enfoques que usan estirpes celulares tumorales transfectadas con citoquinas, y enfoques que usan anticuerpos anti-idiotípicos.

Tal tratamiento conjunto se puede lograr mediante la dosificación simultánea, secuencial o separada de los componentes individuales del tratamiento. Tales productos de combinación emplean los compuestos de esta invención dentro del intervalo de dosificación descrito aquí anteriormente y los otros agentes farmacéuticamente activos dentro de su intervalo de dosificación aceptado.

Según este aspecto de la invención, se proporciona un producto farmacéutico que comprende un derivado quinazolínico de la Fórmula I como se define aquí anteriormente, y un agente antitumoral adicional como se define aquí anteriormente, para el tratamiento conjunto del cáncer.

Aunque los compuestos de la Fórmula I son valiosos principalmente como agentes terapéuticos para uso en animales de sangre caliente (incluyendo el hombre), también son útiles siempre que se requiera la inhibición de los efectos de tirosina quinasas receptoras proteínicas de erbB. De este modo, son útiles como estándares farmacológicos para uso en el desarrollo de nuevos ensayos biológicos, y en la investigación de nuevos agentes farmacológicos.

La invención se ilustrará ahora mediante los siguientes ejemplos no limitantes, en los que, excepto que se establezca de otro modo:

(i): las temperaturas se dan en grados Celsius (ºC); las operaciones se llevaron a cabo a temperatura ambiente, esto es, a una temperatura en el intervalo de 18-25ºC;

(ii): las disoluciones orgánicas se secaron sobre sulfato de magnesio anhidro; la evaporación del disolvente se llevó a cabo usando un evaporador giratorio a presión reducida (600-4000 pascales; 4,5-30 mm Hg) con una temperatura del baño de hasta 60ºC;

(iii): cromatografía significa cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice; la cromatografía de capa fina (TLC) se llevó a cabo sobre placas de gel de sílice;

(iv): en general, el transcurso de las reacciones fue seguido por TLC y/o LCMS analítica, y los tiempos de reacción se dan sólo para ilustración;

(v): los productos finales tuvieron datos de espectros de resonancia magnética nuclear protónica (RMN) y/o de masas satisfactorios;

(vi): los rendimientos se dan sólo para ilustración y no son necesariamente los que se pueden obtener mediante un desarrollo diligente del procedimiento; las preparaciones se repitieron si se requirió más material;

(vii): cuando se dan, los datos de RMN están en forma de valores de delta para los protones de diagnóstico principales, dados en partes por millón (ppm) con relación a tetrametilsilano (TMS) como patrón interno, determinados a 400 MHz usando perdeuteriodimetilsulfóxido (DMSO-d_{6}) como disolvente, excepto que se indique de otro modo; se han usado las siguientes abreviaturas: s, singlete; d, doblete; t, triplete; q, cuartete; m , multiplete; b, ancho;

(viii): los símbolos químicos tienen sus significados habituales; se usan las unidades y símbolos de SI;

(ix): las relaciones de disolventes se dan en términos de volumen:volumen (v/v); y

(x): los espectros de masas (MS) se llevaron a cabo con una energía electrónica de 70 electrón-voltios en el modo de ionización química (CI), usando una sonda de exposición directa, y la ioniación se efectuó mediante electropulverización; se dan los valores para m/z; generalmente, sólo se dan los iones que indican la masa progenitora; y, excepto que se establezca de otro modo, el ion másico dado es (MH)^{+};

(xi): excepto que se establezca de otro modo, no se han resuelto los compuestos que contienen un átomo de carbono y/o de azufre asimétricamente sustituido;

(xii): cuando una síntesis se describe como análoga a aquella descrita en un ejemplo previo, las cantidades usadas son los relaciones equivalentes milimolares a las usadas en el ejemplo previo;

(xiii): se han usado las siguientes abreviaturas:

DCM: diclorometano;

DMF: N,N-dimetilformamida;

DMA: N,N-dimetilacetamida;

THF: tetrahidrofurano;

(xiv): cuando una síntesis se describe como aquella que conduce a una sal de adición de ácidos (por ejemplo, la sal de HCl), no se confirmó la estequiometría específica de la sal;

(xv): en los Ejemplos 1-2 y los ejemplos de referencia, excepto que se establezca de otro modo, todos los datos de RMN se dan con respecto al material de base libre, con las sales aisladas convertidas en la forma de base libre antes de la caracterización.

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Ejemplo 1 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(metoxicarbonilo)piperidin-4-il]oxi}quinazolina

Se añadió gota a gota cloroformiato de metilo (23 \mul, 0,3 mmoles) a una mezcla, enfriada en hielo, de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4-il)oxi]-quinazolina (120 mg, 0,3 mmoles), y diisopropiletilamina (63 \mul, 0,36 mmoles), en diclorometano (5 ml). La mezcla se agitó a 0ºC durante una hora. La disolución orgánica se lavó con agua y salmuera, y se secó sobre sulfato de magnesio. Tras la evaporación de los disolventes a vacío, el residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (eluyente: 2% de amoníaco metanólico 7 N en diclorometano), para dar el compuesto del título como un sólido blanco (80 mg, 58%).

Espectro de RMN ^{1}H: (CDCl_{3}) 1,90 (m, 2H), 2,00 (m, 2H), 3,44 (m, 2H), 3,72 (s, 3H), 3,84 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 4,64 (m, 1H), 7,17 (m, 3H), 7,30 (m, 2H), 8,48 (m, 1H), 8,71 (s, 1H); Espectro de masas: MH^{+} 461.

La 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4-il)oxi]quinazolina usada como material de partida se preparó según lo siguiente:

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Etapa 1

Hidrocloruro de 6-acetoxi-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina

Se suspendieron 6-acetoxi-4-cloro-7-metoxiquinazolina (preparada como se describe en el Ejemplo 25-5 del documento WO 01/66099, 6,00 g, 23,8 mmoles) y 3-cloro-2-fluoroanilina (3,46 g, 23,8 mmoles) en isopropanol (200 ml). La mezcla se calentó a 80ºC a reflujo durante 3 horas. El disolvente se evaporó. El residuo se cristalizó en acetonitrilo, dando el producto de hidrocloruro como un sólido cristalino rosa pálido (8,16 g, 92%). RMN ^{1}H: 2,37 (s, 3H), 4,00 (s, 3H), 7,34 (ddd, 1H), 7,48 (s, 1H), 7,52 (ddd, 1H), 7,61 (ddd, 1H), 8,62 (s, 1H), 8,86 (s, 1H); Espectro de masas: 362,4, 364,4.

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Etapa 2

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-6-hidroxi-7-metoxiquinazolina

El hidrocloruro de 6-acetoxi-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina de la Etapa 1 (8,72 g, 21,9 mmoles) se disolvió en metanol (200 ml). Se añadió amoníaco acuoso concentrado (15 ml), y la disolución se calentó hasta 50ºC con agitación durante 2 horas, provocando la precipitación de un sólido de color crema. El sólido se recogió por filtración, se lavó con éter dietílico (3 x 200 ml), y se secó a vacío a 60ºC sobre pentóxido de difósforo, dando el producto como un sólido blanquecino (5,40 g, 77%); RMN ^{1}H: 3,95 (s, 3H), 7,19 (s, 1H), 7,23 (dd, 1H), 7,42 (dd, 1H), 7,50 (dd, 1H), 7,64 (s, 1H), 8,32 (s, 1H), 9,43 (s, 1H), 9,67 (br, s, 1H); Espectro de masas: 320,4, 322,4.

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Etapa 3

6-{[(1-terc-Butoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina

Se disolvió 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-6-hidroxi-7-metoxiquinazolina de la Etapa 2 (1870 mg, 5,85 mmoles) en DMA (50 ml). Se añadieron (4-metanosulfoniloxi)piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (preparado como en Chemical & Pharmaceutical Bulletin 2001, 49(7), 822-829; 490 mg, 1,76 mmoles) y fluoruro de cesio (890 mg, 5,85 mmoles), y la mezcla se calentó hasta 85ºC con agitación. A intervalos de 2 horas, 4 horas y 6 horas, el (4-metanosulfoniloxi)-piperidin-1-carboxilato de terc-butilo y el fluoruro de cesio se añadieron en las cantidades anteriores, a la mezcla de reacción. El calentamiento se continuó a 85ºC durante otras 6 horas después de la adición final. El disolvente se evaporó, y el residuo se repartió entre DCM (150 ml) y H_{2}O (150 ml). La capa acuosa se extrajo con DCM (4 x 100 ml), y las extracciones se combinaron con la capa de DCM. Las fracciones de DCM combinadas se secaron sobre MgSO_{4}, y se evaporaron. El residuo se purificó mediante cromatografía, eluyendo con 0 hasta 2,5% (7:1 MeOH/NH_{4}OH acuoso concentrado) en DCM. Las fracciones apropiadas se combinaron y se evaporaron, dando el producto como una espuma marrón clara (2,40 g, 58%, dejando 2,3 equivalentes de DMA residual); RMN ^{1}H: 1,40 (s, 9H), 1,60-1,65 (m, 2H), 1,95-2,00 (m, 2H), 3,20-3,25 (m, 2H), 3,65-3,70 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 4,68 (m, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,27 (dd, 1H), 7,47 (ddd, 1H), 7,51 (dd, 1H), 7,85 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 9,53 (s, 1H); Espectro de masas: 503,5, 505,5.

Etapa 4

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4-il)oxi]quinazolina

Se disolvió 6-{[(1-terc-Butoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina de la etapa 3 (350 mg, 0,70 mmoles) en ácido trifluoroacético (5 ml), y la disolución se dejó reposar durante 2 horas. Se evaporó el exceso de ácido trifluoroacético, y el residuo se destiló azeotrópicamente dos veces con DCM. El residuo se purificó mediante cromatografía, eluyendo con 0 hasta 4% (7:1 de MeOH/NH_{4}OH acuoso concentrado) en DCM. La evaporación de las fracciones apropiadas dio el producto como un sólido blanquecino (270 mg, 96%); RMN ^{1}H: 1,53-1,64 (m, 2H), 2,00-2,05 (m, 2H), 2,64-2,72 (m, 2H), 3,00-3,07 (m, 2H), 3,92 (s, 3H), 4,60 (m, 1H), 7,20 (s, 1H), 7,26 (ddd, 1H), 7,47 (dd, 1H), 7,50 (dd, 1H), 7,82 (s, 1H), 8,34 (s, 1H), 9,56 (s, 1H); Espectro de masas: 403,2, 405,2.

Ejemplo 2 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(pirrolidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazolina

Una mezcla de 6-{[1-(2-cloroetoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina
(510 mg, 1 mmol), pirrolidina (0,33 ml, 4 mmoles) y yoduro de potasio (330 mg, 2 mmoles), en dimetilacetamida, se calentó a 80ºC durante 4 horas. Tras enfriar, los disolventes se evaporaron a alto vacío. El residuo se repartió entre agua y diclorometano, y se extrajo con diclorometano.

La capa orgánica se lavó con agua y salmuera, y se secó sobre sulfato de magnesio. Después de la evaporación de los disolventes, el residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (eluyente: 2% a 3% de amoníaco metanólico 7 N en diclorometano), y se purificó adicionalmente sobre una columna de HPLC (C18, 5 micrómetros, 100 mm de longitud) de un sistema de HPLC preparativa - MS, eluyendo con una mezcla de agua (que contiene 5% de metanol y 1% de ácido acético) y acetonitrilo (gradiente). Después de la evaporación de los disolventes, el residuo se disolvió en diclorometano y carbonato de potasio acuoso. La capa orgánica se secó sobre sulfato de magnesio. La evaporación de los disolventes y la trituración del residuo en pentano dieron el compuesto del título como un sólido blanco (230 mg, 42%). Espectro de RMN ^{1}H: (CDCl_{3}) 1,80 (m, 4H), 1,91 (m, 2H), 2,00 (m, 2H), 2,60 (m, 4H), 2,77 (t, 2H), 3,45 (m, 2H), 3,83 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 4,26 (t, 2H), 4,64 (m, 1H), 7,16 (m, 2H), 7,20 (s, 1H), 7,30 (m, 2H), 8,48 (m, 1H), 8,71 (s, 1H); Espectro de masas: MH^{+} 544.

La 6-{[1-(2-cloroetoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina usada como
material de partida se obtuvo según lo siguiente:

Se añadió gota a gota cloroformiato de 2-cloroetilo (0,52 ml, 5 mmoles) a una mezcla, enfriada en hielo, de 4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4-il)oxi]-quinazolina (2 g, 5 mmoles) y diisopropiletilamina (1,05 ml, 6 mmoles) en diclorometano (100 ml). La mezcla se agitó a 0ºC durante una hora. La disolución orgánica se lavó con agua y salmuera, y se secó sobre sulfato de magnesio. Después de la evaporación de los disolventes a vacío, el residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (eluyente: 2% de amoníaco metanólico 7 N en diclorometano), para dar el compuesto del título como un sólido blanco (1,6 g, 65%). Espectro de RMN ^{1}H: (CDCl_{3}) 1,90 (m, 2H), 2,00 (m, 2H), 3,47 (m, 2H), 3,71 (t, 2H), 3,83 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 4,36 (t, 2H), 4,65 (m, 1H), 7,15 (m, 2H), 7,21 (s, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,34 (s br, 1H), 8,46 (m, 1H), 8,71 (s, 1H); Espectro de masas: MH^{+} 509, 511.

Ejemplo 3 4-(3-Cloro-2,4-difluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(metoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}quinazolina

Se añadió gota a gota cloroformiato de metilo (40 \mul, 0,48 mmoles) a una mezcla, enfriada en hielo, de 4-(3-cloro-2,4-difluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4-il)-oxi]quinazolina (200 mg, 0,48 mmoles) y diisopropiletilamina (170 \mul, 0,95 mmoles) en diclorometano (2 ml). La mezcla se agitó a 0ºC durante 90 minutos. Después de la evaporación de los disolventes, el residuo se disolvió en DMSO, y se purificó en una columna de HPLC (C18, 5 micrómetros, 19 mm de diámetro, 100 mm de longitud) de un sistema de HPLC preparativa-MS, eluyendo con una mezcla de agua y acetonitrilo que contiene 2 g/l de formiato de amonio (gradiente). Después de la evaporación de los disolventes a vacío, el residuo se repurificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (eluyente: 0-3% de amoníaco metanólico 7 N en diclorometano). Después de la evaporación de los disolventes, el residuo se trituró en acetonitrilo para dar el compuesto del título como un sólido blanco (35 mg, 15%). Espectro de RMN ^{1}H: (DMSOd_{6}) 1,67 (m, 2H), 2,02 (m, 2H), 3,35 (m, 2H), 3,61 (s, 3H), 3,73 (m, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,72 (m, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,42 (m, 1H), 7,58 (m, 1H), 7,86 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 9,61 (s br, 1H); Espectro de masas: MH^{+} 479.

La 4-(3-cloro-2,4-difluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4-il)oxi]quinazolina usada como material de partida se obtuvo según lo siguiente:

Se añadieron 3-cloro-2,4-difluoroanilina (1,7 g, 10,1 mmoles) y cloruro de hidrógeno 5N en isopropanol (2 ml) a una suspensión de 4-[(4-cloro-7-metoxiquinazolin-6-il)oxi]piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (4 g, 10,1 mmoles, Sol. Intl. PCT WO2003082831, AstraZeneca) en isopropanol (50 ml). La mezcla se agitó a 80ºC durante 3 horas. Después de la evaporación de los disolventes, el residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (eluyente: 5-10% de amoníaco metanólico 7 N en diclorometano), para dar 4-(3-cloro-2,4-difluoroanilino)-7-metoxi-6-[(piperidin-4-il)oxi]quinazolina (3,63 g, 85%) como un sólido blanco. Espectro de RMN ^{1}H: (CDCl_{3} + CD_{3}CO_{2}D): 2,15 (m, 2H), 2,30 (m, 2H), 3,34 (m, 2H), 3,47 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 4,91 (m, 1H), 7,03 (m, 1H), 7,58 (m, 2H), 7,90 (s, 1H), 8,55 (s, 1H); Espectro de masas: MH^{+} 421.

Ejemplos 4 y 5

Una mezcla de 4-(3-cloro-2,4-difluoroanilino)-6-{[1-(2-cloroetoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-7-metoxi-quinazolina (350 mg, 0,66 mmoles), la amina apropiada (2,6 mmoles) y yoduro de potasio (220 mg, 1,33 mmoles) en dimetilacetamida (5 ml) se calentó a 95ºC durante 2 horas. Después de enfriar, los disolventes se evaporaron a alto vacío. El residuo se diluyó en diclorometano, y los sólidos se separaron por filtración. Después de la evaporación del filtrado, el residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (eluyente: 2% de amoníaco metanólico 7 N en diclorometano). La evaporación de los disolventes dio el compuesto del título.

La 4-(3-cloro-2,4-difluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-(2-cloroetoxicarbonil)piperidin-4-il)oxi]quinazolina usada como material de partida se obtuvo de cloroformiato de 2-cloroetilo y 4-(3-cloro-2,4-difluoroanilino)-7-metoxi-6-[(pipe-
ridin-4-il)oxi]quinazolina, usando el mismo procedimiento que el descrito en el Ejemplo 2. Rendimiento: 464 mg, 74%. Espectro de RMN ^{1}H: (DMSOd_{6}) 1,70 (m, 2H), 2,03 (m, 2H), 3,30 (m, 2H), 3,74 (m, 2H), 3,83 (t, 2H), 3,94 (s, 3H), 4,28 (t, 2H), 4,73 (m, 1H), 7,23 (s, 1H), 7,40 (m, 1H), 7,58 (m, 1H), 7,86 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 9,59 (s, 1H).

Ejemplo 4

4-(3-Cloro-2,4-difluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(pirrolidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}-quinazolina

La amina usada fue pirrolidina (0,22 ml, 2,6 mmoles).

Rendimiento: 190 mg, 51%. Espectro de RMN ^{1}H: (CDCl_{3}) 1,80 (m, 4H), 1,90 (m, 2H), 2,00 (m, 2H), 2,57 (m, 4H), 2,76 (t, 2H), 3,43 (m, 2H), 3,83 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 4,25 (t, 2H), 4,64 (m, 1H), 7,07 (m, 1H), 7,21 (s, 2H), 7,30 (s, 1H), 8,32 (m, 1H), 8,66 (s, 1H); Espectro de masas: MH^{+} 562.

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Ejemplo 5

4-(3-Cloro-2,4-difluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(piperidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}-quinazolina

La amina usada fue piperidina.

Rendimiento: 63 mg, 52%. Espectro de RMN: (CDCl_{3}) 1,45 (m, 2H), 1,60 (m, 4H), 1,90 (m, 2H), 2,00 (m, 2H), 2,46 (m, 4H), 2,63 (t, 2H), 3,43 (m, 2H), 3,83 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 4,24 (t, 2H), 4,64 (m, 1H), 7,07 (m, 1H), 7,18 (s br, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,30 (s, 1H), 8,33 (m, 1H), 8,67 (s, 1H); Espectro de masas: MH^{+} 574.

Ejemplos 6 a 9

Una mezcla de 6-{[1-(2-cloroetoxicarbonil)piperidin-4-il]oxi}-4-(3-cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxiquinazolina
(204 mg, 0,4 mmoles), yoduro de potasio (134 mg, 0,8 mmoles) y la amina apropiada (1,6 mmoles) en dimetilacetamida (4 ml) se calentó a 80ºC durante 4 horas. Después de enfriar, los disolventes se evaporaron a alto vacío. El residuo se repartió entre agua y diclorometano, y se extrajo con diclorometano. La capa orgánica se lavó con agua y salmuera, y se secó sobre sulfato de magnesio. Después de la evaporación de los disolventes, el residuo se purificó mediante cromatografía sobre gel de sílice (eluyente: 2% hasta 3% de amoníaco metanólico 7 N en diclorometano), y se trituró en pentano para dar el compuesto del título.

Ejemplo 6

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(piperidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazolina

La amina usada fue piperidina.

Rendimiento: 150 mg, 54% (reacción llevada a cabo a una escala de 0,5 mmoles). Espectro de RMN ^{1}H: (CDCl_{3}) 1,44 (m, 2H), 1,60 (m, 4H), 1,88 (m, 2H), 2,00 (m, 2H), 2,46 (m, 4H), 2,63 (t, 2H), 3,43 (m, 2H), 3,82 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 4,24 (t, 2H), 4,64 (m, 1H), 7,16 (m, 2H), 7,20 (s, 1H), 7,30 (m, 2H), 8,48 (m, 1H), 8,71 (s, 1H); Espectro de masas: MH^{+} 556.

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Ejemplo 7

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-6-{[1-{2-(dietilamino)-etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}-7-metoxiquinazolina

La amina usada fue dietilamina.

Rendimiento: 100 mg, 46% (la reacción se realiza en un tubo cerrado herméticamente con un gran exceso de dietilamina). Espectro de RMN ^{1}H: (CDCl_{3}) 1,04 (m, 6H), 1,90 (m, 2H), 1,99 (m, 2H), 2,59 (m, 4H), 2,73 (t, 2H), 3,72 (m, 2H), 3,82 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 4,18 (t, 2H), 4,64 (m, 1H), 7,16 (m, 2H), 7,20 (s, 1H), 7,31 (m, 2H), 8,48 (m, 1H), 8,71 (s, 1H); Espectro de masas: MH^{+} 546.

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Ejemplo 8

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(morfolin-4-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazolina

La amina usada fue morfolina.

Rendimiento: 140 mg, 62%. Espectro de RMN ^{1}H: (CDCl_{3}) 1,91 (m, 2H), 2,00 (m, 2H), 2,53 (m, 4H), 2,65 (t, 2H), 3,44 (m, 2H), 3,72 (m, 4H), 3,83 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 4,25 (t, 2H), 4,64 (m, 1H), 7,16 (m, 2H), 7,20 (s, 1H), 7,31 (m, 2H), 8,48 (m, 1H), 8,71 (s, 1H); Espectro de masas: MH^{+} 560.

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Ejemplo 9

4-(3-Cloro-2-fluoroanilino)-7-metoxi-6-{[1-{2-(4-metilpiperidin-1-il)etoxicarbonil}piperidin-4-il]oxi}quinazolina

La amina usada fue 4-metilpiperidina.

Rendimiento: 110 mg, 50%. Espectro de RMN ^{1}H: (CDCl_{3}) 1,89 (m, 2H), 2,00 (m, 2H), 2,28 (s, 3H), 2,6-2,3 (m, 8H), 2,68 (t, 2H), 3,44 (m, 2H), 3,82 (m, 2H), 4,01 (s, 3H), 4,25 (t, 2H), 4,64 (m, 1H), 7,16 (m, 2H), 7,20 (s, 1H), 7,31 (m, 2H), 8,48 (m, 1H), 8,71 (s, 1H); Espectro de masas: MH^{+} 573.

Ejemplo 10 Composiciones farmacéuticas

Lo siguiente ilustra formas de dosificación farmacéuticas representativas de la invención, como se definen aquí (denominándose el ingrediente activo "Compuesto X"), para uso terapéutico o profiláctico en seres humanos:

(a)	Comprimido I	mg/comprimido

	Compuesto X	100
	Lactosa Ph. Eur	182,75
	Croscarmelosa de sodio	12,0
	Pasta de almidón de maíz (pasta al 5% p/v)	2,25
	Estearato de magnesio	3,0

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(b)	Inyección I	(50 mg/ml)

	Compuesto X	5,0% p/v
	Disolución de hidróxido de sodio 1M	15,0% v/v
	Ácido clorhídrico 0,1M	(para ajustar el pH hasta 7,6)
	Polietilenglicol 400	4,5% p/v
	Agua para inyección	Hasta 100%

Las formulaciones anteriores se pueden obtener mediante procedimientos convencionales bien conocidos en la técnica farmacéutica. Por ejemplo, el comprimido se puede preparar mezclando juntos los componentes, y comprimiendo la mezcla en un comprimido.

Claims

1. Un derivado de quinazolina de la Fórmula I:

33

en la que n es 0, 1, 2 ó 3,

X^{1} es un enlace directo o O;

34

en la que m es 0, 1, 2 ó 3;

R^{3} y R^{4} se seleccionan independientemente de hidrógeno o alquilo (C1-6), o R^{3} y R^{4}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros saturado que contiene opcionalmente heteroátomos adicionales seleccionados de oxígeno, S, SO, SO_{2} o NR^{8}, en el que R^{8} es hidrógeno, alquilo (C1-6), alquenilo (C2-6), alquinilo (C2-6), alquil(C1-6)sulfonilo o alquil (C1-6)carbonilo;

con la condición de que el derivado de quinazolina no sea:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 1, en el que R^{2} es alquilo (C1-6), alquenilo (C2-6) o alquinilo (C2-6), cualquiera de los cuales puede estar opcionalmente sustituido con fluoro, alcoxi (C1-6), alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)-sulfonilo, o un grupo de la subfórmula (i)

35

en la que m es 1, 2 ó 3; y

R^{3} y R^{4} se seleccionan independientemente de hidrógeno o alquilo (C1-6),

o R^{3} y R^{4}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo heterocíclico de 5 ó 6 miembros saturado que contiene opcionalmente heteroátomos adicionales seleccionados de oxígeno, S, SO, SO_{2} o NR^{8}, en el que R^{8} es hidrógeno, alquilo (C1-6), alquenilo (C2-6), alquinilo (C2-6), alquil(C1-6)sulfonilo o alquil (C1-6)carbonilo.

3. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que n es 1, 2 ó 3.

4. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 3, en el que n es 2 ó 3.

5. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 4, en el que n es 2.

6. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 4, en el que n es 3.

7. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que cada grupo R^{5} es un grupo halógeno.

8. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que cada grupo R^{5} se selecciona de cloro o fluoro.

9. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que incluye un grupo R^{5} en una posición orto (2-) en el anillo bencénico al que está unido.

10. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 9, en el que el grupo R^{5} en una posición orto (2-) es fluoro.

11. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que, en la Fórmula I, el grupo de subfórmula (ii):

36

es un grupo de subfórmula (iii):

37

en la que (a) uno de R^{10} o R^{12} es hidrógeno, y el otro es halógeno, y R^{11} es halógeno, o (b) R^{10} es halógeno, R^{11} es halógeno, y R^{12} se selecciona de hidrógeno o halógeno, o (c) R^{10} es fluoro, R^{11} es cloro, y R^{12} se selecciona de hidrógeno o fluoro.

12. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 11, en el que uno de R^{10} o R^{12} es hidrógeno y el otro es fluoro, y R^{11} es cloro.

13. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 11, en el que R^{10} es fluoro, R^{11} es cloro y R^{12} es hidrógeno.

14. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 11, en el que R^{10} es fluoro, R^{11} es cloro y R^{12} es fluoro.

15. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que X^{1} es oxígeno.

16. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R^{1} se selecciona de hidrógeno, alquilo (C1-6) y alcoxi (C1-6)-alquilo (C1-6), en el que cualquier grupo alquilo (C1-6) en R^{1} tiene opcionalmente uno o más sustituyentes hidroxi o halógeno.

17. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 16, en el que R^{1} se selecciona de alquilo (C1-6), que tiene opcionalmente uno o más sustituyentes hidroxi o halógeno.

18. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R^{1}-X^{1}- se selecciona de hidrógeno, metoxi, etoxi y 2-metoxietoxi.

19. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 18, en el que R^{1}-X^{1}- es metoxi.

20. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 1, de fórmula IA:

38

en la que R^{2} es como se define en la reivindicación 1, R^{10}, R^{11} y R^{12} son como se definen en una cualquiera de las reivindicaciones 11 a 14, y R^{13} se selecciona de hidrógeno, metoxi, etoxi y 2-metoxietoxi.

21. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 1, de fórmula IB:

39

en la que R^{2} es como se define en la reivindicación 1, y R^{13} se selecciona de hidrógeno, metoxi, etoxi y 2-metoxietoxi.

\newpage

22. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 1, de fórmula IC:

40

23. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones 20 a 22, en el que R^{13} es metoxi.

24. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R^{2} es un grupo alquilo (C1-6), que está opcionalmente sustituido con fluoro, alcoxi (C1-6), alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)-sulfonilo, o un grupo de la subfórmula (i) como se define en la reivindicación 1 o la reivindicación 2.

25. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R^{2} es un grupo alquilo (C1-3), que está opcionalmente sustituido con fluoro, alcoxi (C1-6), alquil(C1-6)tio, alquil(C1-6)sulfinilo, alquil(C1-6)-sulfonilo, o un grupo de la subfórmula (i) como se define en la reivindicación 1 o la reivindicación 2.

26. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R^{2} es un grupo alquilo (C1-6), que está opcionalmente sustituido con un grupo de subfórmula (i) como se define en la reivindicación 1 o la reivindicación 2.

27. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R^{2} es un grupo alquilo (C1-3), que está opcionalmente sustituido con un grupo de subfórmula (i) como se define en la reivindicación 1 o la reivindicación 2.

28. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R^{2} es metilo.

29. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R^{2} contiene un sustituyente de la subfórmula (i) según la reivindicación 1 o la reivindicación 2.

30. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 29, en el que m es 1 ó 2.

31. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 30, en el que m es 2.

32. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 30, en el que m es 1.

33. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones 29 a 32, en el que R^{3} y R^{4}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo de pirrolidina, un anillo de morfolina, un anillo de piperidina, o un anillo de piperazina, que está opcionalmente sustituido en el átomo de nitrógeno disponible con alquilo (C1-3).

34. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 33, en el que R^{3} y R^{4}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un anillo de pirrolidina, un anillo de morfolina, un anillo de piperidina, o un anillo de piperazina, que está opcionalmente sustituido en el átomo de nitrógeno disponible con metilo.

35. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 33 o la reivindicación 34, en el que R^{3} y R^{4}, junto con el átomo de nitrógeno al que están unidos, forman un un anillo de pirrolidina.

36. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones 29 a 32, en el que R^{3} y R^{4} se seleccionan independientemente de alquilo (C1-3).

37. Un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que R^{2} se selecciona de metilo, 2-(pirrolidin-1-il)etilo, 2-(dimetil-amino)etilo, 2-(dietilamino)etilo, 2-(piperidinil)etilo, 2(morfolin-4-il)etilo y 2-(4-metilpiperazin-1-il)etilo.

38. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 37, en el que R^{2} es 2-(pirrolidin-1-il)etilo.

39. Un derivado de quinazolina según la reivindicación 1, que se selecciona de uno o más de los siguientes:

o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos.

40. Un procedimiento para la preparación de un derivado de quinazolina según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende:

Proceso (a)

Hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula II:

\vskip1.000000\baselineskip

41

en la que R^{1}, X^{1}, R^{5} y n tienen cualquiera de los significados definidos en la reivindicación 1, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario,

con un compuesto de la Fórmula III:

\vskip1.000000\baselineskip

42

en la que R^{2} tiene cualquiera de los significados definidos aquí anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario,

y LG es un grupo desplazable

Proceso (b)

Modificar un sustituyente en, o introducir un sustituyente en, otro derivado de quinazolina de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define aquí anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario,

Proceso (c)

Hacer reaccionar un compuesto de Fórmula IV:

43

44

en la que R^{2} es como se define anteriormente, y Lg es un grupo desplazable (por ejemplo halógeno tal como cloro o bromo);

Proceso (d)

Eliminar un grupo protector de un derivado de quinazolina de Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo;

Proceso (e)

Hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula II, como se define aquí anteriormente, con un compuesto de la Fórmula III, como se define aquí anteriormente, excepto que Lg es OH, en condiciones de Mitsunobu;

Proceso (f)

Para la preparación de aquellos compuestos de la Fórmula I en la que R^{1}-X^{1} es un grupo hidroxi, escindir un derivado de quinazolina de la Fórmula I, en la que R^{1}-X^{1} es un grupo alcoxi (C1-6);

\newpage

Proceso (g)

Para la preparación de aquellos compuestos de la Fórmula I en la que X^{1} es O, hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula VI:

45

en la que R^{2}, R^{5}, y n tienen cualquiera de los significados definidos en la reivindicación 1, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario, con un compuesto de la fórmula R^{1}-Lg, en la que R^{1} tiene cualquiera de los significados definidos en aquí anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario, y Lg es un grupo desplazable;

Proceso (h)

Para la preparación de aquellos compuestos de la Fórmula I en la que R^{1} contiene un grupo alcoxi (C1-6) o un grupo alcoxi (C1-6) sustituido, o un grupo alquilamino (C1-6) o un grupo alquilamino (C1-6) sustituido, alquilar un derivado de quinazolina de la Fórmula I en la que R^{1} contiene un grupo hidroxi o un grupo amino primario o secundario, según sea apropiado;

Proceso (i)

46

en la que R^{2}, R^{5}, X^{1}, n y m tienen cualquiera de los significados definidos en la reivindicación 1, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario, R^{1'} es un grupo R^{1} como se define aquí, excepto que cualquiera de los grupos T se sustituye por Lg, y Lg es un grupo desplazable (por ejemplo, cloro o bromo), con un compuesto de la fórmula TH, en la que T es como se define anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario;

\newpage

Proceso (j)

Hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula VIII:

47

en la que R^{1}, R^{2}, X^{1} y m tienen cualquiera de los significados definidos en la reivindicación 1, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario, y Lg es un grupo desplazable como se define aquí anteriormente, con una anilina de la Fórmula IX:

48

en la que R^{5} y n tienen cualquiera de los significados definidos aquí anteriormente, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario; los mencionados con relación a este proceso (j);

Proceso (k)

Hacer reaccionar un compuesto de Fórmula X:

49

en la que R^{5}, X^{1}, R^{1} y n son como se definen en la reivindicación 1, excepto que cualquier grupo funcional se protege si es necesario, y Lg es un grupo saliente, con un alcohol de fórmula R^{2}-OH, en la que R^{2} es como se define en la reivindicación 1; o

\newpage

Proceso (l)

Para compuestos den los que R^{2} incluye un grupo de la subfórmula (i), hacer reaccionar un compuesto de la Fórmula XI:

50

en la que R^{1}, X^{1}, R^{5} y n son como se definen anteriormente, R^{15} es un grupo alquileno (C1-6), y Lg es un grupo saliente, con un compuesto de fórmula R^{3}R^{4}NH, en la que R^{3} y R^{4} son como se definen en relación con la subfórmula (i) anterior;

y en el que después, en cualquiera de dichos procesos, se elimina cualquier grupo protector que esté presente.

41. Una composición farmacéutica que comprende un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente del mismo, según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 39, en asociación con un diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable.

42. Un derivado de quinazolina de la Fórmula I según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 39, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para uso como medicamento.

43. El uso de un derivado de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 39, en la fabricación de un medicamento para uso en la producción de un efecto antiproliferativo en un animal de sangre caliente.

44. Un compuesto de fórmula VI, VII, X o XI según la reivindicación 40, o una sal del mismo.

45. El uso de un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 39, en la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de cáncer.

46. El uso de un derivado de quinazolina de la Fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 39, en la fabricación de un medicamento para uso en el tratamiento de un tumor.