ES2381892T3

ES2381892T3 - Procedimiento para producir composiciones de rebaudiósido A purificado que utiliza la cristalización disolvente/antidisolvente

Info

Publication number: ES2381892T3
Application number: ES08724627T
Authority: ES
Inventors: John J. Hahn; Jeffrey C. Evans; Alan Stuart Myerson; Timothy Oolman; Troy Allen Rhonemus; Christopher A. Tyler; Kern M. Storo
Original assignee: Cargill Inc
Current assignee: Cargill Inc
Priority date: 2007-01-22
Filing date: 2008-01-18
Publication date: 2012-06-01
Anticipated expiration: 2028-01-18
Also published as: KR20090107550A; AR064976A1; KR101527237B1; BRPI0807794A2; MX2009007834A; MY148593A; US8937168B2; ATE547953T1; WO2008091547A2; AU2008209573B2; JP5307730B2; AR082527A2; UY30877A1; CL2008000172A1; CA2676220A1; CA2676220C; EP2124633B1; US20100099857A1; AU2008209573A1; EP2124633A2

Abstract

Procedimiento para purificar el rebaudiósido A a partir de una mezcla de glicósidos, comprendiendo el procedimiento las etapas que consisten en: (a) proporcionar una composición de partida de glicósido que comprende: rebaudiósido A; y uno o más de entre rebaudiósido B, rebaudiósido C, rebaudiósido D, rebaudiósido E, rebaudiósido F, esteviósido, y dulcósido; (b) formar una solución de glicósido disolviendo la composición de partida de glicósido en un disolvente que comprende: (i) una mezcla de un alcohol inferior y agua, o (ii) una mezcla de un ácido carboxílico inferior y agua; y (c) añadir un antidisolvente a la solución de glicósido de la etapa (b), en una cantidad que resulte efectiva para provocar que por lo menos una parte del rebaudiósido A cristalice a partir de la solución de glicósido en forma de una composición de rebaudiósido A purificado.

Description

Procedimiento para producir composiciones de rebaudiósido a purificado que utiliza la cristalización disolvente/antidisolvente.

Referencia cruzada a las solicitudes relacionadas

La presente solicitud reivindica los derechos de la solicitud de patente provisional de los EE.UU. con el número de serie 60/881.798, presentada el 22 de enero de 2007, titulada METHOD OF PRODUCING PURIFIED REBAUDIOSIDE A COMPOSITIONS USING SOLVENT/ANTISOL VENT CRYSTALLIZATION, y de la solicitud de patente provisional de EE.UU. con el número de serie 61/008.163, presentada el 19 de diciembre de 2007, titulada METHOD OF PRODUCING PURIFIED REBAUDIOISDE A COMPOSTIONS USING SOLVENT/ANTISOLVENT CRYSTALLIZATION.

Campo

La invención se refiere a la purificación del rebaudiósido A a partir de extractos en bruto de la planta Stevia rebaudiana utilizando la cristalización disolvente/antidisolvente, tal como se define en las reivindicaciones.

Antecedentes

La especie Stevia rebaudiana ("Stevia") ha sido objeto de considerables investigaciones y de esfuerzos de desarrollo dirigidos a la purificación de ciertos glicósidos edulcorantes naturales de Stevia que tienen potencial como edulcorantes no calóricos. Los glicósidos edulcorantes que pueden extraerse de Stevia incluyen los seis rebaudiósidos (es decir, rebaudiósidos A a F), estaviósidos (el glicósido predominante en los extractos de la Stevia de tipo salvaje), dulcósidos y esterebinas.

El rebaudiósido A presenta el sabor más dulce de los glicósidos de Stevia mostrando aproximadamente 250 a 450 veces el sabor dulce de la sacarosa. Se está de acuerdo generalmente en que de entre los glicósidos, el rebaudiósido A constituye el más deseable para utilizar en los edulcorantes no calóricos a causa de su favorable perfil de dulzor, aprobaciones reguladoras, aceptación de los clientes, y de su regusto amargo mínimo.

Se ha informado de varios procedimientos para la purificación del rebaudiósido A a partir de los extractos de Stevia que contienen rebaudiósido A en bruto.

La publicación japonesa nº 56121454 informa de un procedimiento para llevar a cabo la separación del esteviósido y del rebaudiósido A con gran pureza, obtenida mediante cristalización. En el procedimiento, una mezcla de esteviósido y rebaudiósido A se extrae de las hojas y del tallo de Stevia rebaudiana Bertoni mediante un proceso convencional. El extracto se disuelve en una solución acuosa de � 70% de etanol, y el rebaudi6sido A se cristaliza selectivamente a partir de la solución.

La patente japonesa 63173531 describe un procedimiento para extraer glicósidos azucarados de la planta Stevia rebaudiana. La primera etapa del procedimiento consiste en extraer una solución líquida de glicósidos azucarados de la planta Stevia rebaudiana. En segundo lugar, la solución líquida de los glucósidos azucarados se hace pasar a través de una resina porosa no polar, eluyéndose con un disolvente orgánico hidrosoluble, preferentemente metanol. En tercer lugar, la solución eluída se concentra y se seca para dar lugar a un material en polvo. Este procedimiento aísla una mezcla de glucósidos azucarados, pero no aísla un glicósido puro único azucarado tal como el rebaudiósido A.

La publicación de la solicitud de patente US nº 2006/0083838 (Jackson et al.), informa de un procedimiento para aislar y purificar el rebaudiósido A a partir de material de partida comercializado de Stevia rebaudiana. El procedimiento comprende: (1) un estadio de formulación EtOH para formular un disolvente seleccionado EtOH, (2) un primer estadio de reflujo utilizando el material de partida de Stevia y, opcionalmente, unos estadios adicionales de reflujo que utilizan el retentato aislado a partir de una mezcla sometida a reflujo o de una mezcla de lavado expuesta a agitación, (3) opcionalmente, uno o más estadios de lavado expuestos a agitación y (4), una purga etanólica y un estadio de sequedad. En las formas de realización que utilizan material de partida de Stevia de menor calidad, se añade típicamente un segundo estadio de reflujo antes del estadio de lavado sometido a agitación, para maximizar la pureza del producto final del rebaudiósido A. En el procedimiento del que se informa, el estadio EtOH de formulación, se lleva a cabo para formular un disolvente de reflujo deseado, para utilizarlo en la etapa o etapas de reflujo. Típicamente, el disolvente de reflujo es una mezcla de etanol y agua con aproximadamente 5% a 15% de volumen acuoso. El procedimiento incluye además una o más etapas de sometimiento a un reflujo energético intenso, que se llevan típicamente a cabo a una temperatura de aproximadamente 89°C a 90°C durante aproximadamente 1 hora. El procedimiento del que se informa da lugar a un 100% de rebaudi6sido A hidrosoluble.

La patente US nº 5.962.678 (Payzant et al.), informa de un procedimiento para extraer glicósidos azucarados seleccionados a partir de la planta Stevia rebaudiana. En el procedimiento del que se informa, los glicósidos azucarados se extraen de la planta Stevia y se procesan para obtener componentes individuales en un procedimiento multietapa. En primer lugar, la planta Stevia es tratada para extraer una solución líquida acuosa que contiene una mezcla de glicósidos azucarados. Utilizando diversas resinas de intercambio iónico, los glicósidos impuros no azucarados se separan de los glicósidos azucarados mezclados, que se secan. Estos glicósidos azucarados mezclados secos, que contienen todavía impurezas, se disuelven entonces en un disolvente orgánicohidrosoluble tal como metanol anhidro, para formar una solución. Ésta se somete a reflujo y se enfría para precipitar un primer componente glicósido azucarado. Este primer componente glicósido azucarado, que es típicamente esteviósido, puede recuperarse mediante filtración y puede purificarse posteriormente mediante el procedimiento que se describe para el segundo componente.

El filtrado de la cristalización del primer glicósido azucarado precipitado puede tratarse posteriormente para obtener un segundo componente glicósido azucarado concentrando el filtrado mediante calentamiento. Después de enfriar la solución, puede recuperarse un segundo componente glicósido azucarado que precipita. Este segundo componente glicósido azucarado es típicamente el rebaudiósido A. Puede purificarse a continuación disolviéndolo en un disolvente orgánico hidrosoluble tal como metanol, que puede contener opcionalmente una pequeña cantidad de agua. La solución se calienta, se somete a reflujo, y finalmente se enfría para precipitar el segundo componente glicósido azucarado con una gran pureza. El precipitado puede recuperarse mediante filtración. Este procedimiento de purificación puede repetirse hasta que se obtiene un sólido final cristalizado de pureza deseada. El procedimiento informa de niveles de pureza del 90% o superiores, o del 95%, o superiores del Rebaudi6sido A.

La patente US nº 4.361.697 (Dobberstein et al.) informa de un procedimiento para recuperar glicósidos diterpénicos de la planta Stevia rebaudiana. El procedimiento incluye las etapas de extracción secuencial del material vegetal, con un primer disolvente de polaridad intermedia para extraer sustancias vegetales que tiendan a interferir en una separación cromatográfica de los glicósidos, y entonces con un segundo disolvente de alta polaridad para extraer glicósidos, y separando cromatográficamente los glicósidos extraídos introduciéndolos en una columna de cromatografía líquida que posee un equipo de una fase estacionaria orgánica que contiene oxígeno unida mediante un átomo de silicio a un soporte inorgánico. Los glicósidos se eluyen con un disolvente de polaridad que es superior a la del primer disolvente, pero inferior a la del segundo disolvente.

La patente US nº 4.892.938 (Giovanetto) informa de un procedimiento para recuperar esteviósidos a partir del material vegetal seco de Stevia rebaudiana Bertoni mediante la extracción y purificación. Se obtuvo un extracto mediante tratamiento en agua a una temperatura desde la temperatura ambiente a aproximadamente 65°C con agitación y subsiguientemente filtración y centrifugación. Este extracto se trató con hidróxido cálcico, obteniéndose entonces un precipitado mediante filtración o centrifugación. Este precipitado se trató con una resina de intercambio iónico fuertemente ácida y a continuación con una resina de intercambio iónico débilmente básica, filtrándose y secándose.

La patente US nº 4.082.858 (DuBois) informa de un procedimiento para la recuperación del rebaudiósido A a partir de las hojas de los vegetales Stevia rebaudiana . La purificación final se obtiene mediante cromatografía líquida, seguida a continuación por una extracción inicial con agua y alcanol, que presente de 1 a 3 compuestos de carbono, preferentemente metanol. También se da a conocer que el agua puede utilizarse como el disolvente inicial, siendo su disolvente preferido en esta etapa un aloalcano líquido con 1 a 4 átomos de carbono. El segundo disolvente preferido es un alcanol con 1 a 3 átomos de carbono, mientras el tercer disolvente preferido es un alcanol de entre 1 a 4 átomos de carbono y opcionalmente, cantidades menores de agua.

La solicitud de patente US nº 2006/0134292 (Abelyan et al.), informa de un procedimiento para recuperar glicósidos azucarados del material vegetal de Stevia rebaudiana. Las hojas en polvo y secas, son tratadas con agua en presencia de una pectinasa, celulasa y amilasa alfa. Se informa de que la utilización de dichas enzimas aumenta considerablemente la tasa de extracción y facilita las próximas etapas de purificación. El extracto resultante se purifica utilizando el tratamiento con hidróxido cálcico y ultrafiltración. El permeado se hace pasar a través de la columna envuelta con bentonita y concentrada hasta el estado de jarabe bajo vacío. El tratamiento con etanol permite la separación del rebaudiósido A prácticamente puro obtenido de la mezcla. El rebaudiósido A con alta pureza, se obtiene después de lavar los cristales con 88-95% de etanol.

La patente US nº 5.972.120 (Kutowy et al.) informa de un procedimiento para la extracción de compuestos azucarados de Stevia rebaudiana Bertoni, mediante extracción en columna, seguido por la purificación mediante filtración. La extracción se realiza a temperaturas en el intervalo de 0°C a 25°C. Preferentemente, se utiliza una etapa pretratamiento de microfiltración para clarificar el extracto. La purificación se lleva a cabo mediante ultrafiltración, seguido por nanofiltración. Las condiciones de filtración se controlan para optimizar la recuperación de los compuestos azucarados.

Otras técnicas incluyen aquellas de las que se informa en las publicaciones japonesas nº 56121454; nº 56121455; nº 52062300 y nº 56121453, asignadas a la compañía Ajinomoto Inc, y en la publicación china nº 1243835 que se asigna a la Hailin Stevia Rebaudium Sugar.

El documento WO03/033097 A da a conocer la utilización de un dispositivo rotor-estator en línea, de alta intensidad para producir finas partículas mediante precipitación y cristalización antidisolvente, reactiva, de salado o de enfriamiento rápido.

Se desea la mejoría en las técnicas y procedimientos disponibles para la purificación del rebaudiósido A de Stevia rebaudiana ("Stevia"). En particular, es deseable un procedimiento que pueda llevarse a cabo a temperatura ambiente sin necesidad de etapas de calentamiento o enfriamiento, o de la formación de un reflujo intenso de energía.

Sumario

La invención proporciona unos procedimientos para purificar el rebaudiósido A a partir de una mezcla que comprende glicósidos de la planta Stevia rebaudiana ("Stevia"). Los procedimientos de la invención son útiles para preparar composiciones muy puras de rebaudiósido A a partir de composiciones de partida de Stevia en bruto, que muestran típicamente un contenido considerablemente más bajo en la concentración de rebaudiósido A. Las composiciones muy puras de rebaudiósido A son útiles como edulcorantes no calóricos en composiciones comestibles o masticables tales como alimentos, bebidas, medicamentos, golosinas, chicles y similares.

Ventajosamente, en algunas formas de realización, el procedimiento de la invención puede llevarse enteramente a cabo a temperatura ambiente o próxima a ésta, sin necesidad de la formación de un reflujo energético intenso, y/o de etapas de calentamiento o enfriamiento. Además el procedimiento de la invención no requiere separaciones cromatográficas para proporcionar composiciones de gran pureza del rebaudiósido A. Sin embargo, en algunas formas de realización de la invención, el procedimiento puede incluir: (i) calentamiento, (ii) enfriamiento, y (iii) separación cromatográfica en columna, para purificar la composición del rebaudiósido A para obtener un nivel deseado de pureza.

El procedimiento de la invención comprende las etapas que consisten en:

(a) proporcionar una composición de partida de glicósidos, que incluye

rebaudiósido A, y

uno o más de entre rebaudiósido B, rebaudiósido C, rebaudiósido D, rebaudiósido E, rebaudiósido F, esteviósido y dulcósido;

(b): formar una solución de glicósido disolviendo la composición de partida de Stevia en un disolvente, que comprende: (i) una mezcla de un alcohol inferior (por ejemplo, un alcohol C1-C3) y agua, o (ii) una mezcla de un ácido carboxílico inferior (por ejemplo ácido acético) y agua; y

(c): añadiendo un antidisolvente a la solución de glicósido de la etapa (b) en una cantidad que sea efectiva para provocar que por lo menos una parte del rebaudiósido A cristalice a partir de la solución de glicósido en forma de una composición de rebaudiósido A purificado que posea un nivel de pureza más alto que la composición de partida de glicósidos.

En muchas formas de realización, la composición de partida de glicósido incluye aproximadamente 40% en peso o superior de rebaudiósido A. Por ejemplo, la composición de partida de glicósido puede comprender entre aproximadamente 40% y aproximadamente 80% en peso de rebaudiósido A o de aproximadamente 40% y aproximadamente 60% en peso del rebaudi6sido A.

La composición de partida de glicósidos se disuelve en una composición disolvente que incluye (i), una mezcla de un alcohol inferior (por ejemplo, un alcohol C1 a C3) y agua; (ii) o una mezcla de un ácido carboxílico inferior (por ejemplo, ácido acético) y agua; para formar una composición glicósida. Los ejemplos de alcoholes útiles inferiores incluyen metanol, etanol y propanol (n-propanol e i-propanol). En muchas formas de realización, la composición disolvente comprende una mezcla de alcohol inferior y agua, en la que la parte de alcohol inferior comprende aproximadamente 30% a aproximadamente 70% en peso de la composici6n del disolvente, comprendiendo la parte acuosa aproximadamente 30% y aproximadamente 70% en peso de la composici6n disolvente. En una forma de realización ejemplificativa, la composición del disolvente comprende aproximadamente 50% en peso de etanol y 50% del agua en peso. Una composici6n disolvente de un acido carboxilico inferior (por ejemplo, ácido acético) y agua, puede también utilizarse. Cuando se utiliza como un disolvente, el ácido carboxílico inferior está presente típicamente en una cantidad comprendida entre aproximadamente 30% y aproximadamente 90% en peso, y el agua está típicamente presente en una cantidad comprendida entre aproximadamente 10% en peso y aproximadamente 70% en peso. Mas tipicamente, el acido carboxílico inferior se encuentra en una cantidad comprendida entre aproximadamente 50% en peso y aproximadamente 90% en peso, estando el agua presente en una cantidad comprendida entre aproximadamente 10% en peso y aproximadamente 50% en peso.

Aunque cualquier cantidad inferior al límite de solubilidad puede utilizarse, la composición de partida de glicósidos se disuelve típicamente en la composición disolvente, para proporcionar una solución de glicósido que incluye aproximadamente 15 a aproximadamente 50% en peso, de la composición de partida glicósida, y aproximadamente 50% a aproximadamente 85% en peso de la composici6n disolvente. Por ejemplo, una solución de glicósido ejemplificativa comprende aproximadamente 30% en peso de la composición de partida de glicósido disuelta y aproximadamente 70% en peso de la composici6n disolvente, donde aproximadamente 50% de la composici6n disolvente es etanol, y aproximadamente 50% en peso de la composici6n disolvente es agua.

Después de disolver la composición de partida de los glicósidos en la composición disolvente se añade una cantidad efectiva del antidisolvente a la solución de glicósido, para iniciar la cristalización del rebaudiósido A. Las funciones del antidisolvente para cambiar la solubilidad de equilibrio del rebaudiósido A en la solución resultante son tales que la concentración de rebaudiósido A está sobresaturada (es decir, es superior al límite de su solubilidad). A causa de que el rebaudiósido A es superior a su límite de solubilidad de equilibrio, el rebaudiósido A cristaliza a partir de la composición disolvente en forma de cristales de rebaudiósido A purificado.

Cuando una mezcla de un alcohol inferior (por ejemplo, un alcohol C1-C3) y agua se utiliza como el disolvente, el antidisolvente comprende típicamente un alcohol inferior, tal como un alcohol C1-C3. Los ejemplos representativos incluyen metanol, etanol, propanol (ejemplo, n-propanol e i-propanol), acetona y acetato de etilo. El antidisolvente puede ser el mismo alcohol C1-C3 utilizado en el disolvente, o puede ser un alcohol C1-C3 distinto. Por ejemplo el disolvente puede incluir etanol y agua, y el antidisolvente puede comprender metanol. Cuando un ácido carboxílico inferior y el agua se utilizan como disolvente, los antidisolventes útiles incluyen metanol, etanol, propanol (por ejemplo, n-propanol e i-propanol), acetona y acetato de etilo).

Respecto a la masa de la composición del disolvente, la masa del antidisolvente está comprendida entre aproximadamente 0,5:1 y aproximadamente 9:1, más típicamente de entre aproximadamente 2:1 y aproximadamente 3:1.

El antidisolvente puede añadirse en una adición única (es decir, una adición única del volumen total del antidisolvente), o puede añadirse en adiciones distintas, proporcionando cada una, una fracción de la cantidad total requerida del antidisolvente. Una velocidad más lenta de adición, o múltiples adiciones pequeñas del antidisolvente, pueden proporcionar una pureza más alta de la composición del rebaudiósido A que si el antidisolvente se añadiera en una adición única.

Después de la adición del antidisolvente, la composición resultante se agitó típicamente a aproximadamente la temperatura ambiente, para permitir que ocurriera la cristalización del rebaudiósido A. Opcionalmente, la solución puede sembrarse añadiendo cristales para siembra que incluyen rebaudiósido A muy puro. Típicamente, una cristalización tiene lugar en las 24 horas después de la adición del antidisolvente. Como regla general, el tiempo para cristalización disminuye cuando la pureza de la composición de partida del rebaudiósido A, aumenta. Por ejemplo, si la composición de partida es relativamente pura, (por ejemplo, 80% Reb. A) en el rebaudi6sido A, la cristalización puede durar menos de 1 hora. En muchas formas de realización, la cristalización dura entre 1 y 4 horas.

Después de la cristalización, el rebaudiósido A purificado puede recuperarse utilizando técnicas conocidas tales como la filtración o la centrifugación. Después de la recuperación, los cristales de rebaudiósido A purificados pueden purificarse posteriormente lavando con un alcohol inferior, por ejemplo, metanol o etanol.

En muchas formas de realización, el procedimiento de la invención produce composiciones de rebaudiósido A purificado que comprenden aproximadamente 90% en peso o rebaudi6sido A en mas cantidad, aproximadamente 96% o superior, aproximadamente 97% o superior, o aproximadamente 98,5% en peso o superior. En muchas formas de realización, el procedimiento de la invención produce composiciones del rebaudiósido A purificado que incluyen aproximadamente 2,5% en peso o menos del rebaudi6sido B, por ejemplo, de aproximadamente 2% en peso o menos del rebaudiósido B, o de aproximadamente 1% en peso o menos del rebaudi6sido B. En muchas formas de realización, el procedimiento de la invención produce composiciones de rebaudiósido A purificado que comprenden aproximadamente 1% en peso o menos del rebaudi6sido D, por ejemplo, aproximadamente 0,5% o menos del rebaudiósido D. Los niveles finales de rebaudiósido A, B y D dependerán típicamente de la cantidad de estos materiales que se encuentren en el material de alimentación inicial.

También se proporciona un procedimiento para lavar un sólido que incluya rebaudiósido A y rebaudiósido D, con el fin de eliminar por lo menos una parte del rebaudiósido D de la composición sólida. El procedimiento comprende las etapas que consisten en: (a) proporcionar un sólido que incluye rebaudiósido A y rebaudiósido D; y (b), lavado del sólido con un alcohol C1-C3 para eliminar por lo menos una parte del rebaudiósido D de la composición sólida. Ejemplos de disolventes incluyen alcoholes C1-C3 tales como metanol, etanol y propanol. En muchas formas de realización, resulta preferido el metanol para la reducción del rebaudiósido D.

Breve descripción de las figuras

La figura 1 es un patrón de difracción de rayos X para los cristales de rebaudiósido A producidos por cristalización a partir de un disolvente de etanol/agua utilizando metanol como el antidisolvente.

La figura 2 es una imagen del microscopio óptico de los cristales de rebaudiósido A producidos mediante cristalización a partir de un disolvente de etanol/agua utilizando metanol como antidisolvente.

Descripción detallada

La invención proporciona un procedimiento para purificar composiciones que incluyen rebaudiósido A. Los procedimientos de la invención pueden utilizarse para preparar composiciones de rebaudiósido A muy puro que sean apropiadas como edulcorantes de bajas calorías en composiciones comestibles o de tipo chicle tales como alimentos, bebidas, medicamentos, golosinas, chicles y similares.

La invención proporciona un procedimiento para purificar el rebaudiósido A a partir de una mezcla de glicósidos. El procedimiento comprende las etapas que consiste en:

(a) proporcionar una composición de partida de glicósidos, que incluye

-: rebaudiósido A, y

-: uno o más rebaudiósido B, rebaudiósido C, rebaudiósido D, rebaudiósido E, rebaudiósido F, esteviósido y dulcósido;

(c): añadiendo un antidisolvente a la solución de glicósido de la etapa (b) en una cantidad que sea efectiva para provocar que al menos una parte del rebaudiósido A cristalice a partir de la solución de glicósido en forma de una composición purificada de rebaudiósido A.

Etapa (a):

Los procedimientos de la invención son útiles para purificar composiciones de partida que comprenden rebaudiósido A, para formar composiciones de rebaudiósido A muy puras. Típicamente, las composiciones de partida se obtienen de las plantas de Stevia rebaudiana utilizando técnicas conocidas, tales como la extracción de glicósidos diterpénicos a partir de las hojas de Stevia utilizando soluciones acuosas o disolventes acuosos, precedidos opcionalmente con un pretratamiento, tal como la extracción de grasas y/o de otros compuestos. Las operaciones de tratamiento pueden incluir etapas de clarificación y decoloración (por ejemplo, utilizando coagulantes, adsorbentes y/o la extracción de disolventes), y pueden incluir opcionalmente la remoción de escoria mediante intercambio iónico. Después de esto, puede llevarse a cabo una purificación posterior mediante adsorción selectiva, tratamiento con disolventes, o una combinación. Finalmente, el material de partida puede purificarse mediante cristalización y secado, utilizando composiciones de partida que comprenden rebaudiósido A y que también comprenden uno u otros glicósidos tales como rebaudiósido B, rebaudiósido C, rebaudiósido D, rebaudiósido E, rebaudiósido F, esteviósido y dulcósido.

En muchas formas de realización, las composiciones de partida comprenden aproximadamente 40% en peso o superior de rebaudi6sido A, por ejemplo, aproximadamente 40% a aproximadamente 95% en peso de rebaudi6sido

A. El esteviósido también se encuentra típicamente en la composición de partida. En algunas formas de realización, el esteviósido se encuentra con hasta aproximadamente 40% en peso de la composición de partida. Otros glicósidos que podrían encontrarse en la composición de partida incluyen, por ejemplo rebaudiósido B, rebaudiósido C, rebaudiósido D y rebaudiósido F. Las composiciones de partida típicas comprenden, por ejemplo un peso del rebaudiósido B de hasta aproximadamente 8%, de un peso del rebaudi6sido C de hasta aproximadamente 10%, de un peso del rebaudiósido F de hasta aproximadamente 2%, y de un peso de dulc6sido de aproximadamente 1%, y de un peso de rebaudi6sido D de hasta el 4% aproximadamente. El rebaudi6sido E puede tambien encontrarse en la composición de partida.

Ventajosamente, el procedimiento de la invención puede utilizarse para purificar el rebaudiósido A de las composiciones de partida que muestran un nivel bajo de pureza de dicho rebaudiósido. Por ejemplo, el procedimiento de la invención puede utilizarse para producir rebaudiósido A purificado a partir de las composiciones de partida que presenten menos del aproximadamente 60% del rebaudi6sido A en peso, por ejemplo, de entre aproximadamente 40% y aproximadamente 60% del rebaudi6sido A en peso.

Etapa (b)

En el procedimiento de la invención, la composición de partida se disuelve en una composición disolvente para formar una solución. Típicamente la composición de partida se añade a la composición disolvente y ésta se agita para provocar que la composición de partida se disuelva en la composición disolvente. La composición de partida puede añadirse a la composición disolvente a una velocidad relativamente constante en el tiempo, o puede añadirse en una o más adiciones individuales. Típicamente, la composición de partida se disuelve en la composición disolvente a aproximadamente la temperatura ambiente, por ejemplo, entre aproximadamente 20°C y aproximadamente 25°C. Está asimismo comprendido en el alcance de la invención calentar ligeramente la composición disolvente de forma que se colabore para disolver la composición de partida. Por ejemplo, la composición disolvente puede calentarse a una temperatura comprendida entre 20°C y aproximadamente 70°C, más típicamente entre aproximadamente 60°C y aproximadamente 70°C.

Las composiciones disolventes útiles comprenden: (i) una mezcla de un alcohol inferior (por ejemplo, un alcohol C1-C3) y agua, o (ii) una mezcla de un ácido carboxílico inferior y agua. Los ejemplos de alcoholes inferiores incluyen metanol, etanol y propanol (por ejemplo, n-propanol e i-propanol). Las mezclas de dos o más alcoholes y agua pueden utilizarse también. En muchas formas de realización, la composición disolvente incluye entre aproximadamente 20% y aproximadamente 80% en peso del alcohol inferior, y aproximadamente 20% y aproximadamente 80% en peso de agua, basándose en el peso total de la composición disolvente. Más típicamente, la composición disolvente comprende entre aproximadamente 30% y aproximadamente 70% en peso del alcohol inferior y entre aproximadamente 30% y aproximadamente 70%, de agua en peso. En las formas de realización ejemplificativas, la composición disolvente comprende entre aproximadamente 40% y aproximadamente 60% en peso del alcohol inferior, y entre aproximadamente 40% y aproximadamente 60% en peso del agua, o entre aproximadamente 45% y aproximadamente 55% del peso del alcohol inferior y de entre el 45% y aproximadamente 55% en peso de agua. En una forma de realización ejemplificativa, la composición de partida comprende aproximadamente 50% en peso de etanol y aproximadamente 50% de peso de agua.

Los ejemplos de ácidos carboxílicos inferiores incluyen ácido acético, ácido fórmico y ácido propiónico, aunque pueden utilizarse también otros ácidos carboxílicos inferiores. Cuando se utilizan como un disolvente, el ácido carboxílico inferior se encuentra típicamente en una cantidad comprendida entre aproximadamente 30% en peso a aproximadamente 90% en peso, estando presente el agua tipicamente en una cantidad que está comprendida entre aproximadamente 10% en peso a aproximadamente 70% en peso. Más típicamente, el ácido carboxílico inferior se encuentra presente en una cantidad comprendida entre aproximadamente 50% en peso y aproximadamente 90% en peso, y el agua se encuentra presente en una cantidad comprendida entre aproximadamente 10% en peso y aproximadamente 50% en peso. En una forma de realización ejemplificativa, la composición disolvente está constituida por el 50% en peso de acido acetico y el 50% en peso de agua.

La composición disolvente se prepara típicamente mezclando conjuntamente los componentes individuales, antes de añadir la composición de partida del rebaudiósido A. Sin embargo, también puede disolverse la composición de partida de rebaudiósido A en un componente de la composición disolvente y añadir entonces el segundo componente para maquillar la composición disolvente.

Al disolver la composición de partida en la composición disolvente, la solución de glicósido resultante comprende típicamente aproximadamente 15% a aproximadamente 50% del peso de los s6lidos disueltos de la composición de partida, y aproximadamente 50% a aproximadamente 85% del disolvente en peso. En algunas formas de realizaci6n, la solución de glicósido comprende entre aproximadamente 30% a aproximadamente 50% en peso de los s6lidos disueltos y entre aproximadamente 50% a aproximadamente 70% en peso del disolvente.

Etapa (c)

Después de formar la solución de glicósido, se añadió entonces una cantidad efectiva de un antidisolvente, para inducir la cristalización del rebaudiósido A. Después de la adición de una cantidad efectiva del antidisolvente, la solución de glicósido resultante (incluyendo el antidisolvente) excedió el límite de solubilidad del rebaudiósido, provocando, pues, que el rebaudiósido A cristalizara a partir de la solución de glicósido. Ya que otros glicósidos que pueden encontrarse en la solución de glicósido permanecen por debajo de su límite de solubilidad, el rebaudiósido A cristaliza preferentemente a partir de la solución.

Los antidisolventes útiles incluyen materiales que son efectivos para modificar el límite de solubilidad del rebaudiósido A en la solución de glicósido. Más particularmente, un antidisolvente efectivo es tanto miscible en la solución de glicósido como capaz de disminuir el poder de solvatación del agua, disminuyendo la constante dieléctrica de la solución. Típicamente, los antidisolventes son líquidos que son miscibles en agua y típicamente menos polares que el agua. Los ejemplos representativos de antidisolventes incluyen alcoholes inferiores (por ejemplo, alcoholes C1-C3), tales como metanol, etanol y propanol (n-propanol e i-propanol). También son útiles la acetona y el acetato de etilo. El antidisolvente puede ser el mismo alcohol inferior que está presente en la composición disolvente, o puede ser un alcohol inferior distinto.

En el procedimiento de la invención, el antidisolvente se añade a la solución de glicósido en una cantidad efectiva para inducir la cristalización de por lo menos una parte del rebaudiósido A que se encuentra en la composición glicósida. La cantidad de antidisolvente que es necesaria puede depender de diversos factores que incluyen, por ejemplo, la preparación de la composición disolvente, la composición del material de partida, la cantidad de rebaudiósido A que se encuentra en la composición, la cantidad de otras impurezas glicósidas en la solución, la temperatura de cristalización, y la temperatura de disolución. Típicamente, la masa del antidisolvente que se añade respecto a la masa del disolvente en la solución de glicósido está comprendida entre aproximadamente 0,5:1 a aproximadamente 9:1. Más típicamente, la masa del antidisolvente respecto a la masa de solución de los glicósidos está comprendida entre aproximadamente 2:1 y aproximadamente 3:1.

La cristalización del rebaudiósido A puede llevarse a cabo utilizando, bien un procedimiento de cristalización intermitente o un procedimiento de cristalización continuo. En el procedimiento intermitente, la composición de partida, el disolvente, y el antidisolvente, se añaden todos a un contenedor único donde tiene lugar la cristalización. Después de que los cristales se recojan, el procedimiento puede repetirse. En la cristalización continua, una mezcla de los glicósidos que se proporcionan se disuelve en una solución disolvente. La mezcla resultante se bombea continuamente a un recipiente de cristalización. Al mismo tiempo, el antidisolvente se bombea a un recipiente de cristalización en una cantidad que dará lugar a la concentración final deseada del antidisolvente, cuando se mezcle con la mezcla de soluto y disolvente. La cristalización tiene lugar en este recipiente, realizándose típicamente a una velocidad mayor que en un recipiente de intermitencia, debido a la presencia continua de los cristales de siembra. La lechada del producto se bombea continuamente fuera del recipiente a una velocidad que es igual a la suma de los flujos internos del antidisolvente y del disolvente, manteniendo de esta forma un volumen constante en el cristalizador. La lechada del producto se filtra o centrifuga, secándose entonces para proporcionar un producto final. Los disolventes utilizados en el procedimiento pueden recuperarse mediante destilación. El soluto disuelto al final de la cristalización, puede recuperarse o reciclarse para alimentación, o utilizarse separadamente.

El antidisolvente puede añadirse a la solución de glicósidos de una vez (es decir, añadir en una sola vez la cantidad total), o puede añadirse en varias veces. En algunas formas de realización, el antidisolvente se añade a la solución de glicósido a velocidad constante de adición a lo largo del tiempo. La velocidad de adición del antidisolvente a la solución de glicósido puede afectar a la pureza de los cristales de rebaudiósido A que se forman. Por ejemplo, añadiendo el antidisolvente de una sola vez puede provocar que el rebaudiósido A cristalice rápidamente a partir de la solución de glicósido, dando lugar a cristales de rebaudiósido A que presenten una pureza más baja que los que se hubieran formado si el antidisolvente se hubiera añadido a la solución de glicósido lentamente a lo largo del tiempo, o realizando múltiples pequeñas adiciones.

Típicamente, el antidisolvente se añade a la solución de glicósido mientras ambos materiales se mantienen a aproximadamente la temperatura ambiente, por ejemplo de 20 ± 5°C. Después de la adición del antidisolvente, la solución de glicósido resultante se deja reposar con una agitación media a moderada, a aproximadamente la temperatura ambiente, de forma que el rebaudiósido A cristalice a partir de la solución de glicósido. Típicamente, el rebaudiósido A cristaliza en un intervalo de 24 horas después de la adición del antidisolvente. La velocidad de cristalización disminuye típicamente, cuando la pureza del material de partida del rebaudiósido A también disminuye.

En algunas formas de realización, el procedimiento de la invención incluye además la etapa de enfriamiento de la solución de glicósido para promover la cristalización del rebaudiósido A a partir de la solución de glicósido. La solución de glicósido puede enfriarse antes de añadir el antidisolvente, simultáneamente con la adición del antidisolvente, o después de la adición del antidisolvente. Las combinaciones anteriores pueden también llevarse a cabo. La solución de glicósido puede enfriarse a cualquier temperatura útil para promover la cristalización del rebaudiósido A. En algunas formas de realización, la solución de glicósido se enfría hasta una temperatura de aproximadamente 0°C a aproximadamente -10°C. La velocidad de enfriamiento puede ser cualquiera útil, pero está opcionalmente comprendida entre aproximadamente 1°C/minuto y aproximadamente 5°C/minuto.

En algunas formas de realización, la solución se siembra para promocionar la cristalización y potenciar la pureza del rebaudiósido A cristalizado. La siembra se lleva a cabo típicamente añadiendo una pequeña cantidad de rebaudiósido A muy puro (por ejemplo, aproximadamente 0,2% hasta aproximadamente 10% de la carga del peso de la siembra basada en la masa total) con respecto a la solución.

Después de la cristalización, el rebaudiósido A purificado puede eliminarse mediante filtración utilizando técnicas y materiales bien conocidos. En algunas formas de realización, los cristales de rebaudiósido A purificado se lavan utilizando un alcohol inferior (por ejemplo, un alcohol C1-C3) tal como metanol, etanol o propanol (n-propanol o i-propanol), o su mezcla. Lavar con un alcohol inferior puede ser efectivo para eliminar un disolvente residual junto con cualesquiera glicósidos que estén disueltos en el disolvente. Típicamente, los glicósidos que se encuentran en la parte líquida del producto filtrado húmedo son inferiores en la composición del rebaudiósido A que los que se encuentran en la parte sólida del producto filtrado húmedo. El lavado empuja hacia afuera los glicósidos, aumentando por lo tanto la concentración total del rebaudiósido A, una vez el producto filtrado se ha secado. Además, el lavado puede eliminar preferentemente los glicósidos indeseables (por ejemplo, la eliminación de Reb. B y Reb. D de los cristales Reb. A).

El procedimiento de la invención puede utilizarse para producir una composición del rebaudiósido A purificado. En algunas formas de realizaci6n, la composici6n del rebaudi6sido purificado A comprende rebaudi6sido A de 90% en peso o superior. En otras formas de realización, la composición del rebaudiósido A purificado comprende rebaudi6sido A de 95% en peso o superior. En todavía otras formas de realización, la composición del rebaudiósido A purificado comprende aproximadamente 97% o superior en peso de rebaudiósido A. En otras formas de realización, todavía, la composición del rebaudiósido A purificado comprende aproximadamente 98% en peso o superior del rebaudiósido A, o aproximadamente 99% en peso o superior del rebaudi6sido A, aproximadamente. En muchas formas de realización, la composición del rebaudiósido A purificado comprende aproximadamente 2,5% en peso, o menor, del rebaudiósido B, o aproximadamente 2% en peso o inferior, del rebaudiósido B. En muchas formas de realización, la composición del rebaudiósido A purificado comprende aproximadamente 1% en peso o inferior del rebaudiósido D, o aproximadamente 0,5% en peso o menos del rebaudi6sido D. En muchas formas de realización, la composición del rebaudiósido A purificado comprende aproximadamente 0,1% en peso o menor, del esteviósido.

Las composiciones del rebaudiósido A purificado de la invención pueden utilizarse como edulcorantes únicos de alimentos, bebidas, medicamentos, tabaco, productos farmacéuticos y productos de cuidado personal, o mezcladas con otros edulcorantes en dichos productos (es decir, como un "coedulcorante".) Más de un edulcorante se utiliza típicamente para obtener perfiles de sabor específico y/o propiedades físicas. Dichos edulcorantes incluyen edulcorantes convencionales (azúcar de caña, azúcar de abejas, miel, jarabes y otros edulcorantes "naturales" y edulcorantes de alta intensidad (ciclamatos, sacarina, sucralosa, aspartamo, Stevia y otros edulcorantes producidos químicamente y/o naturales de alta intensidad).

5 Está asimismo previsto un procedimiento para cristalizar esteviósido utilizando la cristalización antidisolvente/disolvente. La cristalización del esteviósido a partir de una composición glicósida que comprende rebaudiósido A y esteviósido, puede ser útil para formar una composición de esteviósido purificado, y también para proporcionar una composición glicósida disuelta que está enriquecida en rebaudiósido A respecto a la composición de partida. Una vez enriquecida en rebaudiósido A (por ejemplo, aproximadamente 20% en peso a

10 aproximadamente 50% en peso de rebaudiósido A), la composición enriquecida del rebaudiósido A puede utilizarse como un material de partida en el procedimiento anteriormente descrito para formar las composiciones de rebaudiósido A purificado.

En muchas formas de realización, el procedimiento para precipitar el esteviósido mediante cristalización antidisolvente/disolvente, comprende las etapas que consisten en:

15 (a) proporcionar una composición glicósida que comprende rebaudiósido A y esteviósido (también se encuentran típicamente presentes otros glicósidos).

(b): formar una solución de glicósido disolviendo la composición glicósida en un disolvente que comprende un alcohol inferior (por ejemplo, un alcohol C1 a C3 y agua); y

(c): añadir un antidisolvente a la solución de glicósido de la etapa (b) en una cantidad que es efectiva para provocar

20 que, por lo menos una parte del esteviósido cristalice a partir de la solución de glicósido, formando de esta forma una composición glicósida que está enriquecida en rebaudiósido A con respecto a la solución de glicósido de la etapa (b).

En algunas formas de realización, el procedimiento comprende además las etapas que consisten en:

(d) filtrar el esteviósido cristalizado y recuperar una composición enriquecida en rebaudiósido A a partir de la 25 solución de glicósido de la etapa (c);

(e): formar una segunda solución de glicósido disolviendo la composición glicósida enriquecida de la etapa (d) en un disolvente que comprende un alcohol inferior (por ejemplo, un alcohol C1 a C3 y agua; y

(f): añadir un antidisolvente a la solución de glicósido azucarada de la etapa (e), en una cantidad que es efectiva

para cristalizar, por lo menos, una parte del rebaudiósido A a partir de la solución de glicósido azucarada, en 30 forma de una composición de rebaudiósido A purificado.

La invención se describe a continuación haciendo referencia a los ejemplos siguientes no limitativos.

Ejemplos

Materiales de partida

La Tabla 1 presenta diversas composiciones de material de partida que se utilizaron en los Ejemplos.

35 Tabla 1

Material: Dulc. (%) Stev. (%) Reb. A (%) Reb. B (%) Reb. C (%) Reb. F (%) Reb.D (%)

59 RA40: 0,6 39,1 44,4 1,0 10,0 1,8 3,1

58 RA60: 0,6 29,7 56,6 1,5 7,6 1,5 2,5

Tabla 1 (continuación)

26 RA80: 0,2 9,3 79,2 3,6 3,4 1,0 3,2

70 RA80: 0,1 2,6 86,5 8,1 1,2 1,2 0,4

RA 20: 1,6 74,1 16,0 0,0 7,0 0,7 0,6

Ejemplo 1

En primer lugar, la composición de partida 70 RA80 (vease Tabla 1), se disolvi6 en un peso del 30% en una composici6n disolvente que comprende un 50% del peso de etanol y un 50% del peso de agua. La soluci6n resultante se dejó equilibrar durante la noche a temperatura ambiente. Después de alcanzar el equilibrio, se añadió 5 el metanol antidisolvente a la composición glicósida azucarada en una cantidad que se muestra en la Tabla 2, para provocar la cristalización. Después de añadir el antidisolvente, se dejó que la cristalización progresara por la noche a temperatura ambiente. Después de la cristalización, las soluciones se filtraron, y el producto filtrado resultante, se lavó con 2 pesos de etanol. Los productos del filtro y las muestras del sobrenadante se secaron entonces, analizándose mediante HPLC los productos filtrados secos para determinar la composición glicósida. Los resultados 10 son proporcionados en la Tabla 2.

Tabla 2

Mat.: Antidisolvente Lavado Rendimiento de la masa (%) Rendimiento Reb. A (%) Dulc. (%) Stev. (%) Reb. A (%) Reb. B (%) Reb. C (%) Reb. F (%) Otros* (%)

70 RA80: 0,25 pesos MeOH 2 pesos EtOH 0,0 0,0 -- -- -- -- -- -- --

0,0
0,0: -- -- -- -- -- -- --

0,0
0,0: -- -- -- -- -- -- --

70 RA80: 0,50 pesos MeOH 2 pesos EtOH 38,1 42,0 0,0 0,2 95,5 3,9 0,1 0,2 0,2

0,0
0,0: -- 0,2 -- -- -- -- --

0,0
0,0: -- 0,2 -- -- -- -- --

70 RA80: 1 pesos MeOH 2 pesos EtOH 57,7 62,7 0,0 0,0 94,1 5,1 0,0 0,3 0,1

57,5: 63,2 0,0 0,0 95,0 4,3 0,0 0,3 0,1

58,9: 64,0 0,0 0,1 94,1 5,0 0,0 0,3 0,3

70 A80: 2 pesos MeOH 2 pesos EtOH 62,0 70,2 0,0 0,2 98,0 1,5 0,0 0,2 0,4

62,1: 70,4 0,0 0,1 98,1 1,4 0,0 0,1 0,4

62,2: 70,6 0,0 0,0 98,3 1,1 0,0 0,2 0,3

70 RA80: 3 pesos MeOH 2 pesos EtOH 65,6 73,5 0,0 0,0 96,9 2,3 0,0 0,2 0,4

64,1: 72,2 0,0 0,0 97,4 1,9 0,0 0,2 0,4

64,7: 73,2 0,0 0,0 97,9 1,6 0,0 0,2 0,4

70 RA80: 4 pesos MeOH 2 pesos EtOH 64,2 72,2 0,0 0,0 97,3 2,1 0,0 0,2 0,4

64,5: 72,7 0,0 0,0 97,5 1,9 0,0 0,2 0,4

60,8: 68,4 0,0 0,0 97,4 2,0 0,0 0,2 0,4

* Otros = suma de picos entre Reb. A y Reb. B que se cree que incluye Reb. D y esteviolbiósido.

Ejemplo 2

15 En primer lugar, los materiales de partida identificados en la Tabla 3, se disolvieron al 30% en peso en una composici6n disolvente que comprendia 50% en peso de etanol y 50% en peso de agua. Se dejó que las soluciones resultantes se equilibraran durante la noche a temperatura ambiente. Después de alcanzado el equilibrio, se añadieron 2 volúmenes de antidisolvente a la composición glicósida azucarada para provocar la cristalización. Después de la adición del antidisolvente, se dejó que la cristalización progresara durante la noche a temperatura 20 ambiente. Se observ6 que la adici6n de 2 volumenes de antidisolvente provocaba cristalizaci6n en el 80% Reb. Sin embargo, los materiales de partida no dieron lugar a la cristalización en las composiciones glicósidas preparadas a

partir de las composiciones de partida Reb. A del 60% o 40%. Se anadi6 un volumen adicional de antidisolvente a las composiciones glicósidas preparadas a partir de las composiciones de partida Reb. A del 60% y 40%. El volumen adicional del antidisolvente etanol provocó cristalización en dos de las tres muestras preparadas con Reb. A del 60%. El volumen adicional del antidisolvente etanol no caus6 cristalizaci6n en ninguna de las muestras preparadas

5 con Reb. A del 40%. El volumen adicional de antidisolvente metanol provocó cristalización en las tres muestras preparadas con Reb. A del 40% y en las tres muestras preparadas con Reb. A del 60%. Despues de la cristalizaci6n las soluciones se filtraron y el producto filtrado resultante se lavó con 2 volúmenes de etanol. Los productos filtrados se secaron entonces y los productos filtrados sanos se analizaron mediante HPLC para determinar la composición glicósida. Los resultados son proporcionados en la Tabla 3.

10 Tabla 3

Mat.: Antidisolvente Lavado Rendimiento de la masa Rendimiento Reb. A Dulc. Stev. Reb. A Reb. B Reb. C Reb. F Otros*

70 RA80: 2 pesos EtOH 2 pesos EtOH 50,1 55,8 0,1 0,0 98,3 1,4 0,0 0,2 0,0

46,0: 51,3 0,1 0,0 98,4 1,4 0,0 0,1 0,0

46,9: 52,6 0,1 0,0 98,9 1,0 0,0 0,1 0,0

70 RA80: 2 pesos MeOH 2 pesos EtOH 38,1 42,0 0,1 0,0 97,6 1,8 0,0 0,2 0,3

--
--: 0,1 0,0 97,7 1,8 0,1 0,2 0,1

--
--: 0,3 0,0 97,6 1,8 0,1 0,2 0,0

70 RA60: 3 pesos EtOH 2 pesos EtOH 57,7 62,7 0,4 0,0 95,5 2,9 0,1 0,2 0,8

57,5: 63,2 0,3 0,0 96,1 2,6 0,1 0,3 0,6

58,9: 64,0 -- -- -- -- -- -- --

70 RA60: 3 pesos MeOH 2 pesos EtOH 62,0 70,2 0,2 0,0 97,5 1,4 0,1 0,3 0,4

62,1: 70,4 0,3 0,0 97,8 1,1 0,2 0,3 0,3

62,2: 70,6 0,4 0,0 97,8 0,9 0,2 0,3 0,3

70 RA40: 3 pesos EtOH 65,6 64,1 73,5 72,2 ---- ---- ---- ---- ---- ---- ----

64,7: 73,2 -- -- -- -- -- -- --

70 RA40: 3 pesos MeOH 2 vol. EtOH 64,2 72,2 0,3 0,0 98,1 0,6 0,2 0,4 0,4

64,5: 72,7 0,2 0,0 98,2 0,6 0,2 0,5 0,3

60,8: 68,4 0,6 0,0 97,6 0,6 0,3 0,4 0,4

* Otros = (suma de picos entre Reb. A y Reb. B que se cree que incluye Reb. D y esteviolbiósido).

Ejemplo 3

Se disolvió RA 20 (vease Tabla 1), en una soluci6n del 50% de etanol y del 50% de agua, para producir una soluci6n

15 que contenia 30% en peso del RA 20. La solución se diluyó con 3 pesos de metanol, se filtró y se lavó con dos pesos de metanol. Los cristales constituian el 56% en peso del material original, y se enriquecieron en estevi6sido. El filtrado constituía el balance del material, y se enriqueció en Reb. A. La pureza de los cristales resultantes y del filtrado es proporcionada en la Tabla 4.

Tabla 4

Dulc: Stev Reb. A Reb. B Reb. C Reb. F Otros*

Cristales: 0,0% 93,2% 3,9% 0,1% 0,5% 0,0% 2,2%

Filtrado: 0,0% 29,8% 40,8% 60,0% 21,9% 4,1% 2,8%

Ejemplo 4

5 Un material en bruto de glicósidos de esteviol que contenía aproximadamente 60% en peso del Reb. A, se disolvi6 en un disolvente que contenia 65% en peso de etanol y 35% en peso de agua, para producir una soluci6n que contenia 56% en peso de glic6sidos de esteviol. La soluci6n se calent6 a aproximadamente 70°C, en la cual todos los glic6sidos se disolvieron. Se anadi6 un 100% de etanol como un antidisolvente, de forma que la composición final del disolvente fue de 89,3% de etanol en peso. Simultaneamente a la adici6n de etanol, la soluci6n se enfri6

10 lentamente durante aproximadamente 2 horas, a temperatura ambiente. Los cristales resultantes se filtraron a partir de la soluci6n y se lavaron con 2 pesos de producto filtrado de etanol al 95%, secandose. El producto filtrado contenía 95-97% de Reb. A en peso en una base seca. Aproximadamente 75% del Rebaudi6sido A en la soluci6n, se recuperó en la cristalización.

Ejemplo 5

15 Un material en bruto de glicósidos de esteviol que contenía aproximadamente 80% en peso del Reb. A, se disolvi6 en un disolvente que contenia 85% en peso de etanol y 15% en peso de agua, para producir una soluci6n que contenia 15% en peso de glic6sidos de esteviol. La soluci6n se calent6 a aproximadamente 70°C, en la cual todos los glic6sidos se disolvieron. Se anadi6 un 100% de etanol como un antidisolvente, de forma que la composici6n final del disolvente fue de 89,3% de etanol en peso. Simultáneamente a la adición de etanol, la solución se enfrió

20 lentamente durante aproximadamente 2 horas, a la temperatura ambiente. Los cristales resultantes se filtraron a partir de la solución y se lavaron con 2 pesos de producto filtrado de etanol al 95%, secandose. El producto filtrado contenía 94-95% Reb. A en peso en una base seca. En la soluci6n se recuper6 en la cristalizaci6n mas del 95% de Rebaudiósido A.

Otras formas de realización de la presente invención resultarán evidentes para los expertos en la materia, a partir de

25 la presente descripción o a partir de la puesta en práctica de la invención que se da a conocer en la presente memoria. Las variaciones en las formas de realización que se describen en la presente invención resultarán evidentes para los expertos en la materia a partir de la presente descripción. Se espera que los expertos en la materia utilizarán dichas variaciones de forma apropiada y con la intención de que la invención sea puesta en práctica de forma distinta a la que se describe en la presente memoria. De acuerdo con esto, la invención incluye

30 todas las modificaciones equivalentes del objeto expuesto en las reivindicaciones, tal como se permite por la ley aplicable.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Procedimiento para purificar el rebaudiósido A a partir de una mezcla de glicósidos, comprendiendo el procedimiento las etapas que consisten en:

(a) proporcionar una composición de partida de glicósido que comprende:

rebaudiósido A; y

uno o más de entre rebaudiósido B, rebaudiósido C, rebaudiósido D, rebaudiósido E, rebaudiósido F, esteviósido, y dulcósido;

(b)

formar una solución de glicósido disolviendo la composición de partida de glicósido en un disolvente que comprende: (i) una mezcla de un alcohol inferior y agua, o (ii) una mezcla de un ácido carboxílico inferior y agua; y

(c)

añadir un antidisolvente a la solución de glicósido de la etapa (b), en una cantidad que resulte efectiva para provocar que por lo menos una parte del rebaudiósido A cristalice a partir de la solución de glicósido en forma de una composición de rebaudiósido A purificado.
2.

Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el procedimiento incluye además la etapa de siembra de la solución de glicósido de la etapa (c) añadiendo cristales que comprenden rebaudiósido A a la solución de glicósido.
3.

Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el procedimiento se lleva a cabo como un procedimiento de cristalización intermitente o como un procedimiento de cristalización continua.
4.

Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la composición de partida de glicósido comprende aproximadamente 40% en peso o mas de rebaudi6sido A, preferentemente aproximadamente 40% a aproximadamente 80% en peso de rebaudi6sido A.
5.

Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la composición de partida de glicósido comprende aproximadamente 60% en peso o menos de rebaudi6sido A, preferentemente aproximadamente 40% a 60% en peso de rebaudiósido A.
6.

Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el alcohol inferior comprende un alcohol C1 a C3, seleccionado preferentemente de entre metanol, etanol, n-propanol, i-propanol, o su mezcla.
7.

Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el disolvente comprende aproximadamente 30% a aproximadamente 70% en peso de alcohol C1 a C3, y aproximadamente 30% a aproximadamente 70% en peso de agua.
8.

Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el antidisolvente comprende un alcohol C1 a C3, o su mezcla.
9.

Procedimiento según la reivindicación 1, en el que el ácido carboxílico inferior comprende ácido acético, ácido fórmico, ácido propiónico o su mezcla.
10.

Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la masa de antidisolvente respecto a la de la solución de glicósido está comprendida entre aproximadamente 0,50:1 y aproximadamente 9:1, preferentemente aproximadamente 1:1 y aproximadamente 3:1.
11.

Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la solución de glicósido y el antidisolvente se encuentran a una temperatura comprendida entre aproximadamente 15°C y aproximadamente 25°C.
12.

Procedimiento según la reivindicación 1, en el que la etapa de formación de la solución de glicósido, incluye calentar el disolvente a una temperatura comprendida entre aproximadamente 60°C y aproximadamente 70°C.