ES2234628T3 - Diaminotiazoles y su uso para inhibir proteina-quinasas. - Google Patents

Diaminotiazoles y su uso para inhibir proteina-quinasas.

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ES2234628T3 ES00942660T ES00942660T ES2234628T3 ES 2234628 T3 ES2234628 T3 ES 2234628T3 ES 00942660 T ES00942660 T ES 00942660T ES 00942660 T ES00942660 T ES 00942660T ES 2234628 T3 ES2234628 T3 ES 2234628T3
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Suzanne Pritchett Benedict
Allen J. Borchardt
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Anna Maria Tempczyk-Russell
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Dilip Bhumralkar
Zhengwei Peng
Yi Michelle Yang
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Abstract

Un compuesto de la fórmula I: **(Fórmula)** en la cual: R1 es alquilo C1-C12, cicloalquilo C3-C12, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos, o un grupo de la fórmula R6-CO o R6-CS en las cuales R6 es alquilo C1-C12, cicloalquilo C3-C12, heterocicloalquilo, alquenilo C2-C12, arilo, heteroarilo, alcoxilo C1-C12 sin substituir o substituidos, o N-R7R8, en donde R7 y R8 son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C1-C12, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos; R2 es hidroxilo, halo, ciano, o nitro, o alquilo C1-C12, alquenilo C2-C12, cicloalquilo C3-C12, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos, o un grupo de la fórmula (A) **(Fórmula)** en donde Ra es hidrógeno, alquilo C1-C12, cicloalquilo C3-C12, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos; o un grupo de la fórmula (B) **(Fórmula)** en donde Ra es hidrógeno, alquilo C1-C12, cicloalquilo C3-C12, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos; o un grupo de la fórmula (C) **(Fórmula)** en donde Rb y Rc son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C1-C12, cicloalquilo C3-C12, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos.

Description

Diaminotiazoles y su uso para inhibir proteína-quinasas.
Campo de la invención
Esta invención se refiere a compuestos de diaminotiazol que modulan y/o inhiben la actividad de ciertas quinasas de proteína, y a composiciones farmacéuticas que contienen tales compuestos. La invención se refiere también a tales compuestos y a composiciones para uso terapéutico o profiláctico, y/o a métodos para el tratamiento de cáncer así como también otros estados morbosos asociados con angiogénesis y/o proliferación celular no deseadas, mediante la administración de cantidades efectivas de tales compuestos.
Fundamentos de la invención
Las quinasas de proteína son una familia de enzimas que catalizan la fosforilación del grupo hidroxilo de residuos de tirosina, serina, o treonina específicos en proteínas. Típicamente, tal fosforilación perturba considerablemente la función de la proteína, y de este modo las quinasas de proteína son claves en la regulación de una amplia variedad de procesos celulares, incluyendo metabolismo, proliferación celular, diferenciación celular y supervivencia celular. De las muchas funciones celulares diferentes en las cuales se sabe que ha de requerirse la actividad de la quinasas de proteína, algunos procesos representan objetivos atractivos para la intervención terapéutica para ciertos estados morbosos. Dos ejemplos son angiogénesis y control del ciclo celular, en los cuales las quinasas de proteína juegan un rol de pivote; estos procesos son esenciales para el crecimiento de tumores sólidos así como también para otras enfermedades.
La angiogénesis es el mecanismo por el cual se forman nuevos capilares a partir de vasos existentes. Cuando es requerido, el sistema vascular tiene el potencial para generar redes de capilares nuevas a fin de mantener el funcionamiento apropiado de tejidos y órganos. En el adulto, sin embargo, la angiogénesis está bastante restringida, tendiendo lugar solamente en el proceso de curación de heridas y neovascularización del endometrio durante la menstruación. Veáse Merenmies y otro(s), Cell Growth & Differentiation, 8, 3-10, (1997). Por otra parte, la angiogénesis no deseada es una característica distintiva de diversas enfermedades, tales como retinopatías, soriasis, artritis reumatoide, degeneración macular relacionada con la edad (AMD), y cáncer (tumores sólidos). Folkman, Nature Med., 1, 27-31, (1995). Se ha mostrado que las quinasas de proteína que están involucradas en el proceso angiogénico incluye tres miembros de la familia de quinasa de tirosina de receptor de factor de crecimiento: VEGF-R2 (receptor de factor de crecimiento endotelial vascular 2), también conocido como KDR (receptor de dominio de inserto de quinasa) y como FLK-1; FGF-R (receptor de factor de crecimiento de fibroblasto); y TEK (también conocido como Tie-2).
El VEGF-R2, que se expresa solamente en células endoteliales, liga al potente factor de crecimiento angiogénico VEGF y media la transducción de señal subsecuente a través de la activación de su actividad de quinasa intracelular. De este modo, es de esperar que la inhibición directa de la actividad de quinasa de VEGHF-R2 dará como resultado la reducción de la angiogénesis aún en presencia de VEGF exógeno (véase Strawn y otro(s), Cancer Research, 56, 3540-3545, (1996)), como se ha demostrado con mutantes de VEGF-R2 que no pueden mediar la transducción de señal. Millauer y otro(s), Cancer Research, 56, 1615-1620 (1996). Además, el VEGF-R2 no parece tener ninguna función en el adulto, más allá de aquélla de mediar la actividad angiogénica de VEGF. Por lo tanto, sería de esperar que un inhibidor selectivo de la actividad de quinasa de VEGF-R2 exhibiría escasa toxicidad.
De manera similar, el FGF-R liga los factores de crecimiento angiogénico aFGF y bFGF y media la transducción de señal angiogénica subsecuente. Recientemente, se ha sugerido que los factores de crecimiento tales como bFGF pueden desempeñar un papel crítico en la inducción de angiogénesis en tumores sólidos que han alcanzado un cierto tamaño. Yoshiji y otro(s), Cancer Research, 57, 3924-3928, (1997). A diferencia delVEGF-R2, sin embargo, el FGF-R es expresado en un número de diferentes tipos de células en todo el cuerpo y pueden o no pueden desempeñar roles importantes en otros procesos fisiológicos normales en el adulto. No obstante, se ha informado que la administración sistémica de un inhibidor de molécula pequeña de la actividad de quinasa de FGF-R bloquea la angiogénesis inducida por bFGF en ratones sin toxicidad aparente. Mohammadi y otro(s), EMBO Journal, 17, 5896-5904,
(1998).
Se ha demostrado que el TEK (también conocido como Tie-2) es otro receptor de quinasa de tirosina expresado solamente en células endoteliales que desempeña un rol en la angiogénesis. La unión del factor angiopoyetina-1 da como resultad una autofosforilación del dominio de quinasa del TEK y origina un proceso de transducción de señal que parece mediar la interacción de células endoteliales con células de soporte peri-endoteliales, facilitando de tal modo la maduración de vasos sanguíneos recientemente formados. El factor angiopoyetina-2, por otra parte, parece que antagoniza la acción de la angiopoyetina-1 en el TEK e interrumpe la angiogénesis. Maisonpierre y otro(s), Science, 277, 55-60 (1997).
Como un resultado de los desarrollos anteriormente descriptos, se ha propuesto el tratamiento de la angiogénesis por el uso de compuestos que inhiben la actividad de quinasa de VEGF-R2, FGF-R, y/o TEK. Por ejemplo, la publicación internacional WIPO Nº WO 97/34876 da a conocer ciertos derivados de quinolina que son inhibidores de VEGF-R2, que pueden utilizarse para el tratamiento de estados morbosos asociados con angiogénesis anormal y/o permeabilidad vascular incrementada tales como cáncer, diabetes, soriasis, artritis reumatoide, sarcoma de Kaposi, hemangioma, nefropatías aguda y crónica, ateroma, restinosis arterial, enfermedades autoinmunes, inflamación aguda y enfermedades oculares con proliferación vascular en la retina.
Además de su rol en la angiogénesis, las quinasas de proteína desempeñan también un papel crucial en el control del ciclo celular. La proliferación celular descontrolada es la insignia del cáncer. La proliferación celular en repuesta a diversos estímulos se manifiesta por medio de una desregulación del ciclo de división celular, el proceso mediante el cual las células se dividen y multiplican. Las células tumorales poseen típicamente daños en los genes que regulan directa o indirectamente el desarrollo de todo el ciclo de división celular.
Las quinasas dependientes de ciclina (CDKs) son quinasas de proteína de serina-treonina que desempeñan roles críticos en la regulación de las transiciones entre diferentes fases del ciclo celular. Véase, por ejemplo, los artículo compilados en Science, 274, 1643-1677 (1996). Los complejos de CDK se forman a través de la asociación de una subunidad de ciclina reguladora (por ejemplo, ciclina A, B1, B2, D1, D2, D3, y E) y una subunidad de quinasa catalítica (por ejemplo, cdc2 (CDK1), CDK2, CDK4, CDK5, y CDK6). Como el nombre implica, las CDKs exhiben una dependencia absoluta de la subunidad de ciclina a fin de fosforilar los substratos que constituyen sus objetivos, y diferentes pares de quinasa/ciclina funcionan para regular el progreso a través de fases específicas del ciclo
celular.
Es la CDK4 complejada a la ciclina D que juega un papel crítico en la iniciación del ciclo de división celular partiendo de un estadio de latencia o reposo a uno en el cual las células se ven comprometidas en la división celular. Este desarrollo está sometido a una variedad de mecanismos de regulación, tanto negativos como positivos. Las aberraciones en este sistema de control, particularmente aquéllas que afectan la función de CDK4, han sido implicadas en el avance de las células a un estado de muy alta proliferación característico de malignidades, particularmente melanomas de familia, carcinomas esofágicos, y cánceres pancreáticos. Véase, por ejemplo, Kamb, Trends in Genetics, 11, 136-140 (1995), Kamb y otro(s), Science, 264, 436-440 (1994).
El uso de compuestos como agentes terapéuticos anti-propiferativos que inhiben las CDKs es el tema de diversas publicaciones de patente. Por ejemplo, la patente US Nº 5,621,082 concedida a Xiong y otro(s) da a conocer ácido nucleico que codifica un inhibidor de CDK6, y la publicación de patente europea Nº 0 666 270 A2 describe péptidos y miméticos de péptido que actúan como inhibidores de CDK1 y CDK2. La publicación internacional WIPO Nº WO 97/16447 da a conocer ciertos análogos de cromonas que son inhibidores de quinasas dependientes de ciclina, en particular complejos de CDK/ciclina tales como CDK4/ciclina D1, que pueden ser utilizados para la inhibición de proliferación excesiva o anormal, y por lo tanto para el tratamiento de cáncer. La publicación internacional WIPO Nº WO 99/21845 describe derivados de 4-aminotiazol que son útiles como inhibidores de CDK.
Existe una necesidad aún, sin embargo, de compuesto de molécula pequeña que puedan ser fácilmente sintetizados y que sean efectivos en la inhibición de una o más CDKs o complejos de CDK/ciclina. Debido a que la CDK4 puede servir como un activador general de la división celular en la mayoría de las células, y que complejos de CDK4 y ciclinas del tipo D gobiernan la fase temprana G_{1} del ciclo celular, existe una necesidad de inhibidores efectivos de CDK4, y complejos de ciclinas del tipo D de la misma, para el tratamiento de uno o más tipos de tumores. También, los roles de pivote de las quinasas de ciclina E/CDK2 y ciclina B/CDK1 en la fase G_{1}/S y transiciones G_{2}/M, respectivamente, ofrecen blancos adicionales para intervención terapéutica al suprimir el progreso del ciclo celular desregulado en el cáncer.
Otra quinasa de proteína, CHK1, desempeña un rol importante como un punto de control en la progresión del ciclo celular. Los puntos de control son sistemas de control que coordinan el desarrollo del ciclo celular influenciando la formación, activación e inactivación subsecuente de las quinasas dependientes de ciclina. Los puntos de control evitan el progreso del ciclo celular en momentos inapropiados, mantienen el equilibrio metabólico de las células mientras la célula está en reposo, y en algunos casos pueden inducir apoptosis (muerte programada de la célula) cuando no se han satisfecho los requerimientos de los puntos de control. Véase, por ejemplo, O'Connor, Cancer Surveys, 29, 151-182 (1997); Nurse, Cell, 91, 865.867 (1997); Hartwell y otro(s), Science, 266, 1821-1828 (1994); Hartwell y otro(s), Science, 246, 629-634 (1989).
Una serie de puntos de control monitorea la integridad del genoma y, tras detectar daño en ADN, estos "puntos de control de daño en ADN" bloquean el avance del ciclo celular en las fases G_{1}y G_{2}, y retardan el mismo a través de la fase S. O'Connor, Cancer Surveys, 29, 151-182 (1997); Hartwell y otro(s), Science, 266, 1821-1828 (1994). Esta acción permite que el proceso de reparación de ADN complete su misión antes de que tenga lugar la replicación del genoma y la separación subsecuente de este material genético en una nueva célula hija. Es importante destacar que el gen más comúnmente mutado en el cáncer humano, el gen supresor de tumor p53, produce una proteína de punto de control de daño de ADN que bloquea el progreso del ciclo celular en la fase G_{1} y/o induce apoptosis (muerte celular programada) a continuación del daño de ADN. Hartwell y otro(s), Science, 266, 1821-1828 (1994). Se ha demostrado también que el supresor de tumor p53 refuerza la acción del punto de control de daño de ADN en la fase G_{2} del ciclo celular. Véase, por ejemplo, Buntz y otro(s), Science, 282, 1497-1501 (1998); Winters y otro(s), Oncogene, 17, 673-684 (1998); Thompson, Oncogene, 15, 3025-3035 (1997).
Dada la naturaleza de pivote del camino de supresor de tumor p53 en el cáncer humano, se han buscado activamente intervenciones terapéuticas que exploten vulnera-bilidades en el cáncer con deficiencias de p53. Una vulnerabilidad emergente radica en la operación del punto de control de G_{2} en células cancerosas con deficiencias de p53. Las células cancerosas, debido a que las mismas carecen de punto de control de G_{1}, son particularmente vulnerables a la abolición de la última barrera que queda que las protege de los efectos letales para el cáncer de los agentes que dañan el ADN: el punto de control de G_{2}. El punto de control de G_{2} es regulado por un sistema de control que ha sido conservado desde las levaduras hasta los humanos. Es importante es este sistema conservado una quinasa, CHK1, que transduce señales desde el complejo de detección de daño en ADN para inhibir la activación de la quinasa de ciclina B/Cdc2, que promueve la entrada mitótica. Véase, por ejemplo, Peng y otro(s), Science, 277, 1501-1505 (1997); Sanchez y otro(s), Science, 277, 1497-1501 (1997). Se ha demostrado que la inactivación de CHK1 abroga la detención de G_{2} inducida por el daño de ADN infligido tanto por agentes anticancerosos como por daño en el ADN exógeno, así como también origina una aniquilación preferencial de la células con deficiencias de punto de control resultantes. Véase, por ejemplo, Nurse, Cell, 91, 865-867 (1997); Weinert, Science, 277, 1450-1451, (1997); Walworth y otro(s), Nature, 363, 368-371 (1993); y Al-Khodairy y otro(s), Molec. Biol. Cell, 5, 147-160 (1994).
La manipulación selectiva del control del punto de control en células cancerosas podría proporcionar amplia utilización en los regímenes quimioterapéuticos y radioterapéuticos y pueden además, ofrecer una marca distintiva de la "inestabilidad genómica" del cáncer humano para ser explotada como una base selectiva para la destrucción de células cancerosas. Una variedad de factores colocan a la CHK1 como un blanco clave en el control de punto de control de daño de ADN. La dilucidación de inhibidores de esta y otras quinasas relacionadas funcionalmente tales como Cds1/CHK2, una quinasa que se ha descubierto recientemente que coopera con la CHK1 en la regulación del avance de la fase S (véase Zeng y otro(s), Nature, 395, 507-510 (1998); Matsuoka, Science, 282, 1893-1897, (1998)) podría proporcionar entidades terapéuticas nuevas para el tratamiento del cáncer.
La unión del receptor de integrina a ECM inicia señales intracelulares mediadas por FAK (quinasa de adhesión focal) que están implicadas en la motilidad celular, proliferación celular, y supervivencia. En los cánceres humanos, la sobreexpresión de FAK está involucrada en la tumorigénesis y el potencial metastático a través de su rol en los caminos de señalización mediados por integrina.
Las quinasas de tirosina pueden ser del tipo de receptor (que tienen dominios extracelulares, de transmembrana e intracelulares) o del tipo de no receptor (que son íntegramente intracelulares).
Se cree que al menos una de las quinasas de tirosina de proteína de no receptor, es decir, LCK, media la transducción en células T de una señal de la interacción de una proteína de superficie celular (Cd4) con un anticuerpo anti-Cd4 reticulado. Una discusión más detallada de quinasas de tirosina de no receptor es proporcionada en Bolen, Oncogene, 8, 2025-2031 (1993).
Además de las quinasas de proteínas identificadas anteriormente, se han considerado muchas otras quinasas de proteínas para que sean objetivos terapéuticos, y numerosas publicaciones dan a conocer inhibidores de la actividad de quinasa, como se reseña seguidamente: MacMahon y otro(s), Oncologist, 5, 3-10 (2000); Holash y otro(s), Oncogene, 18, 5356-62 (1999); Thomas y otro(s), J. Biol. Chem., 274, 36684-92 (1999); Cohen, Curr. Op. Chem. Biol., 3, 459-65 (1999); Klohs y otro(s), Curr. Op. Chem. Biol., 10, 544-49 (1999); MacMahon y otro(s), Current Opinion in Drug Discovery & Development, 1, 131-146 (1998); Strawn y otro(s), Exp. Opin. Invest. Drugs, 7, 553-573 (1998). La publicación internacional WIPO WO 00/18761 da a conocer ciertas 3-cianoquinolinas como inhibidores de quinasa de proteína. Como es comprendido por aquéllos con conocimientos en la especialidad, es deseable que los inhibidores de quinasa posean tanto elevada afinidad por la quinasa que es su objetivo como también alta selectividad respecto de otras quinasas de proteína.
Síntesis de la invención
La presente invención se refiere a compuestos que están comprendidos dentro de la fórmula I siguiente que modulan y/o inhiben la actividad de quinasas de proteína, así como también a sales farmacéuticamente aceptables de los mismos (a dichos compuestos y sales se hará alusión colectivamente como "agentes"). La invención se refiere también a composiciones farmacéuticas que contienen tales agentes y a su uso terapéutico en el tratamiento de enfermedades mediadas por la actividad de quinasa, tales como cáncer, así como también otros estados morbosos asociados con angiogénesis y/o proliferación celular no deseadas, tales como retinopatía diabética, glaucoma neovascular, artritis reumatoide y soriasis. Además, la invención se refiere a métodos de modulación y/o inhibición de actividad de quinasa asociada con VEGF-R, FGF-R, complejos de CDK, TEK, CHK1, LCK y FAK.
En un aspecto general, la invención se refiere a inhibidores de quinasa de proteína de la fórmula I:
1
en la cual:
R^{1} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos, o un grupo de la fórmula R^{6}-CO o R^{6}-CS en las cuales R^{6} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, alquenilo C_{2}-C_{12}, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12} sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos;
R^{2} es hidroxilo, halo, ciano, o nitro, o alquilo C_{1}-C_{12}, alquenilo C_{2}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos, o
un grupo de la fórmula (A)
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en donde R_{a} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo; o
un grupo de la fórmula (B)
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3 
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en donde R_{a} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo; o
un grupo de la fórmula (C)
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4 
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en donde R_{b} y R_{c} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo;
o un grupo de la fórmula (D)
5
en donde R_{d} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, hidroxilo, alcoxilo C_{1}-C_{12}, amino, alquilamino, dialquilamino, o acilamino, y R_{e} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, amino, alquilamino o dialquilamino;
o un grupo de la fórmula (E)
6
en donde R_{f} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo;
o un grupo de la fórmula (F)
7
en donde R_{g} y R_{h} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo; o
un grupo de la fórmula (G)
8
en donde R_{i} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo; o un grupo de la fórmula (A), de la fórmula (B), de la fórmula (C), de la fórmula (H), o de la fórmula (I) como se definen en la presente; o
un grupo de la fórmula (H)
9
en donde R_{j} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, hidroxilo, alcoxilo C_{1}-C_{12}, amino, o un grupo de la fórmula (A), de la fórmula (B), de la fórmula (C), o de la fórmula (D) como se definen en la presente, y R_{k} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, o un grupo de la fórmula (A), de la fórmula (B), de la fórmula (C), de la fórmula (D), de la fórmula (E), o de la fórmula (F) como se definen en la presente; o
un grupo de la fórmula (I)
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en donde R_{l} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, o un grupo de la fórmula (C) como se define en la presente;
o R^{2} es un cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, o arilo sin substituir o substituidos que están fusionados con Q:
X es C o N; y
Q es un radical divalente que tiene 2 ó 3 átomos anulares (en el anillo formado por Q conjuntamente con X, C* y N* en la fórmula I) cada uno seleccionado independientemente de C, N, O, S, C-R^{5}y N-R^{5}, en donde R^{5} es alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12}, hidroxilo, halo, ciano, o amino, que conjuntamente con C* y N* (en la fórmula I) forman un anillo aromático o no aromático de cinco o seis miembros.
La invención se refiere también a sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos de la fórmula I.
En una realización general preferida, la invención se refiere a compuestos que tienen la fórmula II:
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en la cual
R^{1} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos, o un grupo de la fórmula R^{6}-CO o R^{6}-CS en las cuales R^{6} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, alquenilo C_{2}-C_{12}, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12} sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos;
R^{2} es como se ha definido anteriormente;
X es C o N; e
Y y Z son cada uno independientemente C, N, S, O, C-R^{5} o N-R^{5} en donde R^{5} es como se ha definido anteriormente;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Se describen también métodos convenientes para la fabricación de los compuestos de la fórmula II.
De modo más preferido, la invención se refiere a compuestos de la fórmula II en la cual: R^{1} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos, o R^{6}-CO o R^{6}-CS en las cuales R^{6} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, alquenilo C_{2}-C_{12}, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12} sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos; R^{2} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos; X es Y son cada uno independientemente C o N, y Z es S u O. En otra realización preferida de los compuestos de la fórmula II, R^{1} y R^{2} son cada uno independientemente arilo substituido, X es C, Y es C o N, y Z es S u O. De modo más preferido, R^{1} es un alquilo C_{1}-C_{12} sin substituir o substituido, R^{2} es un arilo substituido, X es C, Y es C o N, y Z es S u O.
En otra realización general preferida, la invención se refiere a compuestos de la fórmula III:
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en la cual:
R^{1} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos, o R^{6}-CO o R^{6}-CS en las cuales R^{6} es alquilo C_{1}-C_{12}, alquenilo C_{2}-C_{12}, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12} sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo;
R^{3} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12}, ariloxilo sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo;
R^{4} es hidrógeno, hidroxilo, alquilo C_{1}-C_{8}, halo, alcoxilo C_{1}-C_{8}, amino, nitro, o trifluormetilo; e
Y y Z son cada uno independientemente C, N, S, O, C-R^{5} o N-R^{5} en donde R^{5} es alquilo C_{1}-C_{12} o arilo sin substituir o substituidos;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
Especialmente preferidos son compuestos de la fórmula IV:
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en la cual:
R^{1} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos, o R^{6}-CO en la cual R^{6} es un alquilo C_{1}-C_{12}, alquenilo C_{2}-C_{12}, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo;
R^{3} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12}, ariloxilo sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo;
R^{4} se selecciona independientemente de hidrógeno, hidroxilo, alquilo C_{1}-C_{8}, halo, alcoxilo C_{1}-C_{8}, amino, nitro, y trifluormetilo;
Y es C o N; y
Z es S u O;
y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
De modo más preferido, la invención se refiere a compuestos de la fórmula IV, en la cual:
R^{1} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos, o R^{6}-CO en la cual R^{6} es N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo; R^{3} es alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, heteroarilo, o alcoxilo C_{1}-C_{12}, sin substituir o substituidos; R^{4(a)} y R^{4(b)} son independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{8}, o halo; Y es C o N; y Z es S u O. Aún más preferidos son compuestos de la fórmula IV, en la cual: R^{1} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos, o R^{6}-CO en la cual R^{6} es N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo; R^{3} es arilo, heteroarilo, o alcoxilo C_{1}-C_{12} sin substituir o substituidos; R^{4(a)} es cloro, flúor, o metilo; R^{4(b)} es flúor; Y es N; y Z es O.
La invención también se refiere al uso de un compuesto de la fórmula I o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para la fabricación de un medicamento para modular y/o inhibir la actividad de quinasa de VEGF-R, FGF-R, TEK, un complejo de CDK, CHK1, TEK, LCK, y/o FAK.
Se proporcionan también compuestos de la presente invención que tienen actividad de quinasa selectiva - es decir, que poseen actividad significativa contra una quinasa específica, poseyendo a la vez poca o mínima actividad contra una quinasa diferente. En una realización preferida de la invención, los compuestos de la presente invención son aquéllos de la fórmula I que poseen potencia substancialmente mayor contra la quinasa de tirosina de receptor de VEGF que contra la quinasa de tirosina de receptor de FGF-R1. La invención también ser refiere a medicamentos para modular la actividad de quinasa de tirosina de receptor de VEGF sin modular significativamente la quinasa de tirosina de receptor de FGF.
La invención también se refiere a composiciones farmacéuticas cada una de las cuales comprende: una cantidad efectiva de un agente seleccionado de compuestos de la fórmula I y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos; y un portador o vehículo farmacéuticamente aceptable para tal agente. La invención proporciona además medicamentos para el tratamiento del cáncer así como también de otros estados morbosos asociados con angiogénesis y/o propliferación celular no deseadas, para la administración de cantidades efectivas de tales agentes a un paciente en necesidad de tal tratamiento.
Descripción detallada de la invención y realizaciones preferidas
Los compuestos de la invención de la fórmula I, II, III y IV son útiles para la mediación de la actividad de quinasas de proteína. Más en particular, los compuestos son útiles como agentes antiangiogénicos y como agentes para la modulación y/o inhibición de la actividad de quinasas de proteína, proporcionado de tal modo tratamientos para cáncer u otras enfermedades asociadas con proliferación celular mediada por quinasas de proteína.
El término "alquilo" tal como se lo emplea aquí se refiere a grupos de cadena recta y ramificada que tienen de uno a doce átomos de carbono. Grupos alquilo que sirven como ejemplo incluyen metilo (Me), etilo, n-propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, ter-butilo (t-Bu), pentilo, isopentilo, ter-pentilo, hexilo, isohexilo, y similares. El término "alquilo inferior" designa un alquilo que tiene de 1 a 8 átomos de carbono (un alquilo C_{1-8}). Alquilos substituidos adecuados incluyen fluormetilo, difluormetilo, trifluormetilo, 2-fluor-etilo, 3-fluorpropilo, hidroximetilo, 2-hidroxietilo, 3-hidroxipropilo, y similares.
El término "alquenilo" se refiere a grupos alquenilo de cadena recta y ramificada que tienen de dos a doce átomos de carbono. Grupos alquenilo ilustrativos incluyen prop-2-enilo, but-2-enilo, but-3-enilo, 2-metilprop-2-enilo, hex-2-enilo, y similares.
El término "cicloalquilo" se refiere a carbociclos parcialmente saturados o no saturados que tienen de tres a doce átomos de carbono. incluyendo estructuras de cicloalquilo bicíclicas y tricíclicas. Cicloalquilos adecuados incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo, y similares.
Con "heteocicloalquilo" se quiere significar un radical monocíclico parcialmente saturado o no saturado que contiene átomos de carbono, preferentemente 4 ó 5 átomos de carbono anulares, y al menos un heteroátomo seleccionado de nitrógeno, oxígeno y azufre.
Los términos "arilo" (Ar) y "heteroarilo" se refieren a estructuras anulares monocíclicas y policíclicas no saturadas o aromáticas, haciendo referencia con "arilo" a aquéllas que son carbocíclicas y con "heteroarilo" a aquéllas que son heterocíclicas. Ejemplos de estructuras anulares aromáticas incluyen fenilo, naftilo, 1,2,3,4-tetrahidronaftilo, furilo, tienilo, pirrolilo, piridilo, piridinilo, pirazolilo, imidazolilo, pirazinilo, piridazinilo, 1,2,3-tri-azinilo, 1,2,4-oxadiazolilo, 1,3,4-oxadiazolilo, 1-H-tetrazol-5-ilo, indolilo, quinolinilo, benzofuranilo, benzotiofenilo (tianaftenilo), y similares. Tales porciones puede estar opcionalmente substituidas con uno o más substituyentes adecuados, por ejemplo, un substituyente seleccionado de un halógeno (F, Cl, Br o I); alquilo inferior; OH; NO_{2}; CN; CO_{2}H; O-alquilo inferior; arilo; aril-alquilo inferior; CO_{2}CH_{3}; CO_{2}NH_{2}; OCO_{2}CONH_{2}; NH_{2}; SO_{2}NH_{2}; OCHF_{2}; CF_{3}; OCF_{3}; y similares. Tales porciones pueden también estar opcionalmente substituidas con una estructura anular condensada o de puente, por ejemplo, OCH_{2}-O.
Con el término "alcoxilo" se quiere significar el radical -O-alquilo. Ejemplos ilustrativos incluyen metoxilo, etoxilo, propoxilo y similares. El término "alcoxilo inferior" designa un alcoxilo que tiene de 1 a 8 átomos de carbono.
El término "ariloxilo" representa -O-arilo, en donde arilo es como se ha definido anteriormente.
El término "halógeno" representa cloro, flúor, bromo o yodo. El término "halo" representa cloro, flúor, bromo o yodo.
En general, las diversas porciones o grupos funcionales para variables en las fórmulas pueden estar opcionalmente substituidos con uno o más substituyentes adecuados. Subsituyentes que sirven como ejemplo incluyen un halógeno (cloro, flúor, bromo o yodo), alquilo inferior, -OH, -NO_{2}, -CN, -CO_{2}H, -O-alquilo inferior, -arilo, -aril-alquilo inferior, -CO_{2}CH_{3}, -CO_{2}NH_{2}, -OCO_{2}CONH_{2}, -NH_{2}, -SO_{2}NH_{2}, haloalquilo (por ejemplo, -CF_{3}, -CH_{2}CF_{3}), -O-haloalquilo (por ejemplo, -OCF_{3}; -OCHF_{2}), y similares.
Los términos "comprender" o "incluir" se emplean en sentido abierto, no limitativo.
Los compuestos de la invención están contenidos por la fórmula I. Si bien en la fórmula I está representado un doble enlace entre C* y N*, el experto entenderá que cuando Q conjuntamente con C* y N* forman un anillo aromático de cinco o seis miembros, la presencia del doble enlace no tiene lugar necesariamente entre C* y N*, ya que existen otras formas canónicas del anillo aromático. Se sobreentiende por consiguiente que se pretende que las formas canónicas posibles del anillo aromático formado por Q conjuntamente con C* y N* sean cubiertas por la fórmula I. Los compuestos de la invención son preferentemente aquéllos de la fórmula II, de modo más preferido aquéllos de la fórmula III, y de modo aún más preferido aquéllos de la fórmula IV.
Algunos de los compuestos de la invención pueden existir como estereoisómeros solos (es decir, esencialmente libres de otros estereoisómeros), racematos, y/o mezclas de enantiómeros y/o diasterómeros. Se pretende que todos dichos estereoisómeros solos, racematos, y mezclas los mismos estén comprendidos dentro de los alcances de la presente invención. Preferentemente, los compuestos de la invención que son ópticamente activos son usados en la forma ópticamente pura.
Según es entendido generalmente por aquéllos con conocimientos en la especialidad, un compuesto ópticamente puro que tiene un centro quiral (es decir, un átomo de carbono asimétrico) es uno que consiste esencialmente en dos enantiómeros posibles (es decir, enantioméricamente puro), y un compuesto ópticamente puro que tiene más de un centro quiral es uno que es tanto diasteroméricamente puro como enantioméricamente puro. Preferentemente, los compuestos de la presente invención se utilizan en una forma que es ópticamente pura en al menos 90%, es decir, una forma que contiene al menos 90% de un solo isómero (80% de exceso enantiomérico ("e.e.") o exceso diasteromérico ("d.e.")), de modo más preferido al menos 95% (90% de e.e. o d.e.), de modo aún más preferido al menos 97,5% (95% de e.e. o d.e.) y del modo más preferido al menos 99% (98% de e.e. o d.e.).
Adicionalmente, con las fórmulas se pretende cubrir formas tanto solvatadas como sin solvatar de las estructuras identificadas. Por ejemplo, la fórmula I incluye compuestos de la estructura indicada tanto en las formas hidratada como no hidratada. Otros ejemplos de solvatos incluyen las estructuras en combinación con isopropanol, etanol, metanol, DMSO, acetato de etilo, ácido acético, o etanolamina.
Además de los compuestos de la fórmula I, II, III y IV, tales compuestos pueden encontrarse en la forma de sus prodrogas farmacéuticamente aceptables, de metabolitos farmacéuticamente activos, y de sales farmacéuticamente aceptables.
Una "prodroga farmacéuticamente aceptable" es un compuesto que puede ser convertido bajo condiciones fisiológicas o mediante solvólisis en el compuesto especificado o en una sal farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto.
Con un "metabolito farmacéuticamente activo" se quiere significar un producto farmacológicamente activo producido por el metabolismo en el cuerpo de un compuesto especificado o sal del mismo. Los metabolistos de un compuesto pueden ser identificados utilizando técnicas de rutina conocidas en la especialidad y sus actividades determinadas usando pruebas tales como aquéllas descriptas en la presente.
Con una "sal farmacéuticamente aceptable" se quiere significar una sal que retiene la efectividad biológica de los ácidos y bases libres del compuesto especificado y que no es indeseable biológicamente o por algún otro motivo. Un compuesto de la invención puede poseer un grupo suficientemente ácido, un grupo suficientemente básico, o ambos grupos funcionales, y puede reaccionar en consecuencia con cualquiera de una variedad de bases inorgánicas u orgánicas, y de ácidos inorgánicos u orgánicos, para formar una sal farmacéuticamente aceptable. Sales farmacéuticamente aceptables que se pueden tomar como ejemplo incluyen aquellas sales preparadas mediante reacción de los compuestos de la presente invención con un ácido mineral u orgánico o una base inorgánica, tales como sales que incluyen sulfatos, pirosulfatos, bisulfatos, sulfitos, bisulfitos, fosfatos, fosfatos monoácidos, fosfatos diácidos, metafosfatos, pirofosfatos, cloruros, bromuros, yoduros, acetatos, propionatos, decanoatos, caprilatos, acrilatos, formiatos, isobutiratos, caproatos, heptanoatos, propiolatos, oxalatos, malonatos, succinatos, suberatos, sebacatos, fumaratos, maleatos, butin-1,4-dioatos, hexin-1,6-dioatos, benzoatos, clorobenzoatos, metilbenzoatos, dinitrobenzoatos, hidroxibenzoatos, metoxibenzoatos, ftalatos, sulfonatos, xilenosulfonatos, fenilacetatos, fenilpropionatos, fenilbutiratos, citratos, lactatos, \gamma-hidroxibutiratos, glicolatos, tartratos, metanosulfonatos, propanosulfonatos, naftalen-1-sulfonatos, naftalen-2-sulfonatos, y mandelatos.
Si el compuesto de acuerdo con la invención es una base, la sal farmacéutica-mente aceptable deseada puede ser preparada mediante cualquier método adecuado disponible en la especialidad, por ejemplo, tratamiento de la base libre con un ácido inorgánico, tal como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico y similares, o con un ácido orgánico, tal como ácido acético, ácido maleico, ácido succínico, ácido mandélico, ácido fumárico, ácido malónico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido glicólico, ácido salicílico, un ácido piranosidílico, tal como ácido glucurónico o ácido galacturónico, un ácido alfa-hidroxílico, tal como ácido cítrico o ácido tartárico, un aminoácido, tal como ácido aspártico o ácido glutámico, un ácido aromático, tal como ácido benzoico o ácido cinámico, un ácido sulfónico, tal como ácido p-toluenosulfónico o ácido etanosulfónico, o similares.
Si el compuesto de la invención es un ácido, la sal farmacéuticamente aceptable deseada puede ser preparada mediante cualquier método adecuado, por ejemplo, tratamiento del ácido libre con una base inorgánica u orgánica, tal como una amina (primaria, secundaria o terciaria), un hidróxido de metal alcalino o hidróxido de metal alcalinotérreo, o similares. Ejemplos ilustrativos de sales adecuadas incluyen sales orgánicas derivadas de aminoácidos, tales como glicina o arginina, amoníaco, aminas primarias, secundarias y terciarias, y aminas cíclicas, tales como piperidina, morfolina y piperazina, y sales inorgánicas derivadas de sodio, calcio, potasio, magnesio, manganeso, hierro, cobre, zinc, aluminio y litio.
En el caso de agentes que son sólidos, aquéllos con experiencia en la especialidad entenderán que los compuestos y sales de acuerdo con la invención pueden existir en diferentes formas cristalinas o polimórficas, y se pretende que todas ellas se encuentren comprendidas dentro de los alcances de la presente invención y las fórmulas especificadas.
Pueden ser empleadas cantidades terapéuticamente efectivas de los agentes de la invención para tratar enfermedades mediadas por modulación o regulación de quinasas de proteína. Se pretende que una "cantidad efectiva" signifique aquella cantidad de un agente que, cuando es administrada a un mamífero en necesidad de tal tratamiento, sea suficiente para efectuar tratamiento para una enfermedad mediada por la actividad de una o más quinasas de proteína, tal como quinasas de tirosina. De este modo, una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto de la fórmula I, sal, metabolito activo o prodroga del mismo, es una cantidad suficiente para modular, regular, o inhibir la actividad de una o más quinasas de proteína de modo tal que se reduzca o alivie un cuadro morboso que es mediado por dicha actividad. La cantidad de un agente dado que corresponderá a dicha cantidad variará en función de factores tales como el compuesto en particular, el cuadro morboso y su severidad, la identidad (por ejemplo, peso) del mamífero en necesidad de tal tratamiento, pero puede ser no obstante determinado rutinariamente por alguien con pericia en la especialidad. Se pretende que "tratar" signifique al menos mitigar un cuadro morboso en un mamífero, tal como un ser humano, que es afectado, al menos en parte, por la actividad de una o más quinasas de proteína, tal como quinasas de tirosina, e incluye: evitar que el cuadro morboso tenga lugar en un mamífero, particularmente cuando se encuentra que un mamífero está predispuesto a tener el cuadro morboso, pero aún no se ha efectuado el diagnóstico de que lo padezca; modular y/o inhibir el cuadro morboso; y/o aliviar el cuadro morboso.
Los agentes de la invención pueden ser preparados utilizando las rutas de reacción y esquemas de síntesis como se describe más adelante, empleando las técnicas disponibles en la especialidad utilizando materiales de partida que son de fácil acceso.
En un proceso de síntesis general, se preparan los compuestos de la fórmula I de acuerdo con el siguiente esquema de reacción:
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Una solución de un isotiocianato, por ejemplo, R^{1}-N=C=S y cianamida se hace reaccionar con de 1,1 a 1,5 equivalentes molares de 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno ("DBU") en un solvente adecuado, tal como acetonitrilo, a una temperatura apropiada (preferentemente a temperatura ambiente) durante aproximadamente 40-80 minutos, generando al intermediario V. Sin aislamiento, el intermediario V se hace reaccionar a su vez con un compuesto de la fórmula VI, en la cual LG es un grupo lábil adecuado tal como cloro, bromo, o mesiloxilo, bajo las mismas condiciones durante de 0,5 a 24 horas (h) adicionales para dar un compuesto de la fórmula VII.
En algunos casos, el compuesto de la fórmula VII no es aislado, sino es directamente convertido en el compuesto de la fórmula I continuando la reacción a una temperatura entre temperatura ambiente y 80ºC, preferentemente 50ºC, durante de 1 a 24 h. El procesado y purificación convencionales permite la obtención del compuesto final I. Alternativamente, un compuesto de la fórmula VII es aislado y purificado, y luego es convertido en un compuesto de la fórmula I mediante tratamiento con una base adecuada, tal como t-butóxido de potasio, hexametildisililazida de litio, o diisopropilamida de litio, en un solvente apropiado, tal como THF, durante de 0,5 a 24 h a una temperatura entre -78ºC y temperatura ambiente. Varios compuestos de la fórmula VI se encuentran disponibles en el comercio o son conocidos, por ejemplo, 2-(clorometil)bencimidazol, 2-(clorometil)-quinolina, cloruro de 2-picolilo, 2-acetamido-4-(clorometil)tiazol, 6-(clorometil)-2-isopropil-pirimidin-4-ol, 4-clorometil-2-(4-clorofenil)tiazol, 3-(clorometil)-1,2,4-oxadiazol, 3-(clorometil)-5-(3,5-dimetilisoxazol-4-il)-1,2,4-oxadiazol, 3-(bromometil)-6,7-dimetoxi-1-metil-2(1h)-quino-xalinona, 2-clorometil-5-metoxibencimidazol, 5-(ter-butil)-3-(clorometil)-1,2,4-oxadiazol, 5-cloro-3-(clorometil)-1,2,4-tiadiazol, 3-(clorometil)-5-(3-tienil)-1,2,4-oxadiazol, 5-[4-(cloro-metil)-1,3-tiazol-2-il]isoxazol, 5-(clorometil)-3-[3,5-di(trifluormetil)estiril]-1,2,4-oxadiazol, 5-cloro-4-(clorometil)-1,2,3-tiadiazol, 5-(clorometil)-3-(4-clorofenil)-1,2,4-oxadiazol, 3-cloro-2-(clorometil)-5-(trifluormetil)piridina, 5-(clorometil)-3-[(2-piridilsulfonil)metil]-1,2,4-oxadiazol, 3-(clorometil)-5-metilisoxazol, 2-clorometil-4,6-dimetoxipirimidina, 3-(clorometil)-5-(4-cloro-fenil)-4H-1,2,4-triazol, 2-(clorometil)-5-(4-clorofenil)-1,3,4-oxadiazol, 4-clorometil-5-metil-2-fenil-oxazol, 3-(clorometil)-1-(3,5-diclorofenil)-5-metil-1h-pirazol, y 3-(clorometil)-5-(1,2,3-tiadiazol-4-il)-1,2,4-oxadiazol. Los compuestos de la fórmula VI pueden ser preparados también mediante métodos conocidos por aquéllos con pericia en la especialidad. Véase, por ejemplo, Mylari y otro(s), J. Med. Chem., 35, 457-465, (1992); Baiocchi y otro(s), Heterocyclic Chem., 16, 1469-1474, (1979).
Un compuesto de la fórmula VIII puede ser preparado mediante acilación convencional de 3-aminobenzonitrilo, seguida de calentamiento a 60-100ºC con hidroxilamina en una solvente adecuado, tal como etanol o isopropanol, durante de 1 a 24 horas. Un compuesto de la fórmula VI(a) puede ser preparado mediante tratamiento de un compuesto de la fórmula VIII con cloruro de cloroacetilo y una base adecuada, tal como diisopropiletilamina ("DIEA"), en un solvente apropiado, tal como diclorometano. El procesado acuoso convencional proporciona un intermediario en bruto, que es posteriormente calentado a 100ºC en un solvente adecuado, tal como dioxano, durante de 0,5 a 4 horas, para dar, después de aislamiento y purificación convencional, un compuesto de la fórmula VI(a).
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Los compuestos de la fórmula II en la cual X es C e Y y Z son independientemente C, N, u O, pueden ser también preparados mediante el procedimiento general descripto anteriormente. A una solución de R^{1}-isotiocianato en acetonitrilo se le agrega cianamida, a lo que le sigue la adición de DBU, mientras se mantiene la temperatura interna de la reacción a aproximadamente 15-30ºC. Después de agitar durante 1-2 horas, se agrega un reactivo adecuado que lleve a cabo la ciclación y la formación como se describió anteriormente de un compuesto de la fórmula II en presencia de una cantidad catalítica de yoduro de tetrabutilamonio. Por ejemplo, la reacción de 3-clorometil-5-R^{2}-[1,2,4]oxadiazol (VI(a)) con el compuesto VII durante aproximadamente dos horas a aproximadamente 50ºC proporciona después de purificación el compuesto ciclado II(a).
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Los compuestos de la invención de las fórmulas II, III y IV pueden también ser preparados mediante otros procesos, incluyendo el procedimiento general mostrado en el siguiente esquema de reacción.
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Un compuesto de la fórmula II, en la cual X e Y son C y Z es S, puede ser preparado por adición de DBU a una solución de R^{1}-isotiocianato y cianamida en un solvente adecuado a una temperatura apropiada, preferentemente acetonitrilo a temperatura ambiente durante aproximadamente 40-80 minutos. A esta mezcla de reacción se le agrega bromo-acetonitrilo y más DBU, para dar, después de procesamiento y purificación convencional, un 2-R^{1}-amino-4-amino-tiazol-5-carbonitrilo intermedio, intermediario IX. La reacción del intermediario IX con sulfuro de dihidrógeno en trietilamina/piridina a aproximadamente 0ºC proporciona el intermediario X. El intermediario X es convertido en un compuesto II(b) mediante agitación de una solución de compuesto X y 2-bromo-1-R^{2}-etanona en metanol durante toda la noche a temperatura ambiente. Después de la eliminación del metanol, el compuesto en bruto II(b) es procesado utilizando técnicas de aislamiento convencionales y purificado empleando cromatografía de columna con sílice.
Los compuestos de la fórmula II(c) pueden también ser preparados directamente a partir del compuesto X haciéndolo reaccionar con éster de ácido \alpha-bromo-acético o una \alpha-bromolactona bajo las mismas condiciones que las descriptas en la preparación de compuestos II(b).
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Mediante el tratamiento del compuesto IX con un 2-amino-alcohol adecuado y una cantidad catalítica de ZnCl_{2}, se produce un compuesto de la fórmula II(d) después de procesamiento ácido standard y purificación mediante cromatografía con sílice. Los compuestos de la fórmula II(e) pueden ser también preparados a partir de compuestos IX sometiendo a reflujo una solución de IX, TMSN_{2}, y una cantidad catalítica de Bu_{2}SnO en un solvente aprótico adecuado, tal como tolueno. Después de someter a reflujo, el solvente es eliminado y el residuo es redisuelto en acetato de etilo, lavado con una solución ácida acuosa apropiada, y secado sobre un agente secante adecuado. Después de la eliminación del solvente, el residuo es triturado en éter etílico y el compuesto II(e) recogido por filtración.
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Los compuestos de la fórmula III pueden ser también preparados directamente a partir del compuesto II(b) en donde R^{2} es 3-nitrofenilo reduciendo el grupo nitro con un agente reductor adecuado para formar el fenilo amino substituido (II(f)). Preferentemente, se disuelve una solución de compuesto II(b) en el cual R^{2} es 3-nitrofenilo y cloruro estannoso en dimetilformida ("DMF") bajo condiciones de atmósfera inerte y se agita a entre 40 y 60ºC hasta que se forme
II(f).
El intermediario II(f) puede hacerse reaccionar con un agente acilante adecuado bajo condiciones de acilación corrientes para formar un compuesto de la fórmula III(a). Un procedimiento de acilación preferido implica disolver el compuesto II(f) en DMF y tetrahidrofurano ("THF") y adicionar piridina y un cloruro de ácido o cloroformiato de acilo adecuados a entre -30 y 0ºC. La reacción es apagada con una fuente de protones (por ejemplo, metanol) y purificada mediante HPLC de fase inversa de C-18 preparativa para proporcionar el compuesto III(a).
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Otros compuestos de la fórmula I pueden ser preparados de manera análoga a los procedimientos generales descriptos anteriormente o a procedimientos detallados descriptos en los ejemplos de la presente. La afinidad de los compuestos de la invención respecto de un receptor puede ser intensificada proporcionando copias múltiples del ligando en proximidad inmediata, utilizando preferentemente un andamiaje proporcionado por una porción portante. Se ha demostrado que dicha provisión de tales compuestos de valencia múltiple con espaciado óptimo entre las porciones mejora significativamente la unión a un receptor. Véase, por ejemplo, Lee y otro(s), Biochem., 23, 4255 (1984). La multivalencia y el espaciado pueden ser controlados por medio de una selección de unidades de porción portante o linker adecuadas. Tales porciones incluyen soportes moleculares que contienen una multiplicidad de grupos funcionales que pueden hacerse reaccionar con grupos asociados con los compuestos de la invención. Por supuesto, pueden emplearse una variedad de portadores, incluyendo proteínas tales como BSA o HAS, una multiplicidad de péptidos incluyendo, por ejemplo, pentapéptidos, decapéptidos, pentadecapéptidos, y similares. Los péptidos o proteínas pueden contener el número deseado de residuos de aminoácidos que tengan grupos amino libres en sus cadenas laterales; sin embargo, otros grupos funcionales, tales como grupos sulfhidrilo o grupos hidroxilo, pueden ser también utilizados para obtener enlaces estables.
Son deseables compuestos que regulen, modulen, o inhiban potentemente la actividad de quinasa de proteína asociada con receptores, FGF, complejos de CDK, TEK, CHK1, LCK, y FAK, entre otros, y que inhiban la angiogénesis y/o proliferación celular y constituyen una realización preferida de la presente invención. La presente invención se refiere además a métodos para la modulación o inhibición de la actividad de quinasa de proteína, por ejemplo, en tejido de mamífero, mediante la administración de un agente de la invención. La actividad de los compuestos de la invención como moduladores de la actividad de quinasa de proteína, tal como la actividad de quinasas, puede ser medida por medio de cualquiera de los métodos a los que tienen acceso aquéllos con conocimientos en la especialidad, incluyendo ensayos in vivo e in vitro. Ejemplos de ensayos adecuados para mediciones de actividad incluyen aquéllos descriptos en Parast C. y otro(s), BioChemistry, 37, 16788-16801 (1998), Jeffrey y otro(s), Nature, 376, 313-320 (27 de julio de 1995); publicación internacional WIPO Nº WO 97/34876; y publicación internacional WIPO Nº WO 96/14843. Estas propiedades pueden ser evaluadas, por ejemplo, utilizando uno o más de los procedimientos de ensayo biológicos expuestos en los ejemplos que siguen.
Los agentes activos de la invención pueden ser formulados dando origen a composiciones farmacéuticas como se describe más adelante. Las composiciones farmacéuticas de esta invención comprenden una cantidad efectiva para la modulación, regulación, o inhibición de un compuesto de la fórmula I, II, III o IV y un vehículo o diluyente inerte, farmacéuticamente aceptable. En una realización de las composiciones farmacéuticas, se suministran niveles eficaces de los agentes de la invención de modo de proporcionar beneficios terapéuticos que involucran la modulación de quinasas de proteína. Por "niveles eficaces" se entienden niveles en los cuales los efectos de las quinasas de proteína son, cuando menos, regulados. Estas composiciones son preparadas en forma de unidad de dosificación apropiada para el modo de administración, por ejemplo, administración parenteral u oral.
Un agente de la invención es administrado en forma de dosificación convencional preparada combinando una cantidad terapéuticamente efectiva de un agente (es decir, un compuesto de la fórmula I) como un ingrediente activo con vehículos o diluyentes farmacéuticos apropiados de acuerdo con procedimientos convencionales. Estos procedimientos pueden implicar mezclado, granulado y comprimido o disolución de los ingredientes según sea apropiado para la preparación deseada.
El vehículo farmacéutico empleado puede ser tanto sólido como líquido. Vehículos sólidos que pueden citarse a título de ejemplo son lactosa, sacarosa, talco, gelatina, agar, pectina, goma arábiga, estearato de magnesio, ácido esteárico y similares. Vehículos líquidos que pueden citarse a título de ejemplo son jarabe, aceite de maní, aceite de oliva, agua y similares. De un modo similar, el vehículo o diluyente puede incluir material de retardo de tiempo o de liberación en el tiempo conocido en la especialidad, tal como monoestearato o diestearato de glicerilo solos o con una cera, etilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, metacrilato de metilo y similares.
Pueden ser empleadas una variedad de formas farmacéuticas. De este modo, si se emplea un vehículo sólido, la preparación puede ser transformada en tabletas, colocada en una cápsula de gelatina dura en polvo o en forma de pellet o llevada a la forma de un trocisco o pastilla. La cantidad de vehículo sólido puede variar, pero generalmente será de desde aproximadamente 25 mg a aproximadamente 1 g. Si se utiliza un vehículo líquido, la preparación tendrá la forma de jarabe, emulsión, cápsula de gelatina blanda, solución o suspensión inyectable estériles en una ampolla o frasco o suspensión líquida no acuosa.
Para obtener una forma de dosificación soluble en agua, se disuelve una sal farmacéuticamente aceptable de un agente de la invención en una solución acuosa de un ácido orgánico o inorgánico, tal como una solución 0,3 M de ácido succínico o ácido cítrico. Si no se dispone de una forma de sal soluble, el agente puede ser disuelto en un cosolvente adecuado o combinación de cosolventes. Ejemplos de cosolventes adecuados incluyen, pero sin limitarse a, alcohol, propilén glicol, polietilén glicol 300, polisorbato 80, glicerina y similares en concentraciones en el orden de desde 0-60% del volumen total. En una realización a título de ejemplo, un compuesto de la fórmula I es disuelto en DMSO y diluido con agua. La composición puede encontrarse también en la forma de una solución de una forma de sal del ingrediente activo en un vehículo acuoso apropiado tal como agua o solución de cloruro de sodio o solución de dextrosa isotónicas.
Se apreciará que las dosis reales de los agentes utilizadas en las composiciones de esta invención variarán de acuerdo con el complejo particular que se esté utilizando, la composición particular formulada, el modo de administración y el sitio, huésped y enfermedad particulares que se estén tratando. Dosis óptimas para una serie dada de condiciones pueden ser determinadas por aquéllos con experiencia en la especialidad empleando ensayos de determinación de dosis convencionales en vista de la información experimental para un agente. Para la administración oral, una dosis diaria que se puede tomar como ejemplo va de desde aproximadamente 0,001 a aproximadamente 1000 mg/kg de peso corporal, con cursos de tratamiento repetidos a intervalos apropiados. La administración de prodrogas está dosificada típicamente a niveles de peso que son químicamente equivalentes a los niveles de peso de la forma completamente activa.
Las composiciones de la invención pueden ser fabricadas de modos generalmente conocidos para la preparación de composiciones farmacéuticas, por ejemplo, utilizando técnicas convencionales tales como mezclado, disolución, granulación, elaboración de grageas, levigación, emulsificación, encapsulado, inserción o liofilización. Las composiciones farmacéuticas pueden ser formuladas de una manera convencional utilizando uno o más vehículos fisiológicamente aceptables, que pueden ser seleccionados de excipientes y auxiliares que facilitan el procesamiento de los compuestos activos para la obtención de preparaciones que pueden ser empleadas farmacéuticamente.
La formulación apropiada depende de la ruta de administración escogida. Para inyección, los agentes de la invención pueden ser formulados en soluciones acuosas, preferentemente en tampones fisiológicamente compatibles tales como solución de Hank, solución de Ringer, o tampón de cloruro de sodio fisiológico. Para administración transmucosal, se usan en la formulación los penetrantes apropiados para la barrera que se desea permear. Tales penetrantes son generalmente conocidos en la especialidad.
Para administración oral, los compuestos pueden ser formulados fácilmente combinando los compuestos activos con vehículos farmacéuticamente aceptables conocidos en la especialidad. Tales vehículos hacen posible que los compuestos de la invención sean formulados como tabletas, píldoras, grageas, cápsulas, líquidos, geles, jarabes, lechadas, suspensiones y similares, para que sean ingeridos por un paciente a ser tratado. Las preparaciones farmacéuticas para uso oral pueden ser obtenidas utilizando un excipiente sólido en mezcla con el ingrediente activo (agente), moliendo opcionalmente la mezcla resultante, y procesando la mezcla de gránulos después de la adición de adyuvantes adecuados, si se desea, para la obtención de tabletas o núcleos de grageas. Excipientes adecuados incluyen: rellenos tales como azúcares, incluyendo lactosa, sacarosa, manitol, o sorbitol; y preparaciones de celulosa, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz, almidón de papa, gelatina, goma, metil celulosa, hidroxipropilmetil-celulosa, carboximetilcelulosa sódica, o polivinilpirrolidona (PVP). Si se desea, se pueden adicionar agentes desintegrantes, tales como polivinil pirrolidona reticulada, agar, o ácido algínico o una sal del mismo tal como alginato de
sodio.
Los núcleos de gragea son provistos de recubrimientos adecuados. Para este propósito, se pueden emplear soluciones de azúcar concentradas, que pueden contener opcionalmente goma arábiga, polivinil pirrolidona, gel de Carbopol, polietilén glicol, y/o dióxido de titanio, soluciones de laca, y solventes orgánicos o mezclas de solventes apropiados. Pueden ser adicionados materiales colorantes o pigmentos a las tabletas o recubrimientos de gragea para identificación o para caracterizar diferentes combinaciones de agentes activos.
Las preparaciones farmacéuticas que se pueden utilizar por vía oral incluyen cápsulas enchufables confeccionadas con gelatina, así como también cápsulas blandas selladas confeccionadas con gelatina y un plastificante, tal como glicerina o sorbitol. Las cápsulas enchufables pueden contener los ingredientes activos en mezcla con rellenos tales como lactosa, aglutinantes tales como almidones, y/o lubricantes tales como talco o estearato de magnesio, y, opcionalmente, estabilizadores. En las cápsulas blandas, los agentes activos pueden estar disueltos o suspendidos en líquidos adecuados, tales como aceites grasos, parafina líquida, o polietilén glicoles líquidos. Además, pueden ser agregados estabilizadores. Todas las formulaciones para administración oral deberán encontrarse en dosificaciones adecuadas para tal administración. Para administración bucal, las composiciones pueden adoptar la forma de tabletas o pastillas formuladas de una manera convencional.
Para la administración intranasal o mediante inhalación, los compuestos para uso de acuerdo con la presente invención pueden ser administrados convenientemente en la forma de una presentación de spray en aerosol a partir de envases presurizados o un nebulizador, con el uso de un propulsor adecuado, por ejemplo, diclorodifluormetano, tri-clorofluormetano, diclorotetrafluoretano, dióxido de carbono u otro gas adecuado. En el caso de un aerosol presurizado la unidad de dosificación puede estar determinada por la provisión de una válvula para suministrar una cantidad medida. Las cápsulas y cartuchos de gelatina para uso en un inhalador o insuflador y similares pueden estar formuladas mediante la inclusión de una mezcla de polvo del compuesto y una base de polvo adecuada tal como lactosa o
almidón.
Los compuestos pueden ser formulados para administración parenteral por inyección, por ejemplo, mediante inyección de bolo o infusión continua. Las formulaciones para inyección pueden estar presentadas en forma de dosificación única, por ejemplo, en ampollas o en recipientes multi-dosis, con el agregado de un preservante. Las composiciones pueden adoptar formas tales como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos aceitosos o acuosos, y pueden contener agentes de formulación tales como agentes de suspensión, estabilizadores y/o dispersantes.
Las formulaciones farmacéuticas para administración parenteral incluyen soluciones acuosas de los compuestos activos en forma soluble en agua. Adicionalmente, las suspensiones de los agentes activos pueden ser preparados como suspensiones de inyección oleosas apropiadas. Solventes o vehículos lipófilos adecuados incluyen aceites grasos tales como aceite de sésamo, o ésteres de ácidos grasos sintéticos, tales como oleato de etilo o triglicéridos, o liposomas. Las suspensiones de inyección acuosas pueden contener substancias que incrementan la viscosidad de la suspensión, tales como carboximetil celulosa sódica, sorbitol o dextrano. Opcionalmente, la suspensión puede también contener estabilizadores adecuados o agentes que incrementen la solubilidad de los compuestos para permitir la preparación de soluciones altamente concentradas.
Para la administración al ojo, un compuesto de la fórmula I, II, III o IV es suministrado en un vehículo oftálmico farmacéuticamente aceptable de modo tal que el compuesto se mantenga en contacto con la superficie ocular durante un período de tiempo suficiente como para permitir que penetre en las regiones de la córnea e internas del ojo, incluyendo, por ejemplo, la cámara anterior, la cámara posterior, el cuerpo vítreo, el humor acuoso, el humor vítreo, la córnea, el iris/pestañas, lentes, coroide/retina y selera. El vehículo oftálmico farmacéuticamente aceptable puede ser un ungüento, aceite vegetal, o un material de encapsulamiento. Un compuesto de la invención puede también ser inyectado directamente dentro del humor vítreo y acuoso.
Alternativamente, el ingrediente activo puede estar en la forma de polvo para la incorporación a un vehículo adecuado, por ejemplo, agua estéril libre de pirógeno, antes del uso. Los compuestos pueden ser también formulados en composiciones rectales tales como supositorios o enemas de retención, por ejemplo, que contienen bases para supositorios convencionales tales como manteca de cacao u otros glicéridos.
Además de la formulaciones descriptas anteriormente, los compuestos pueden también ser formulados como una preparación de depósito. Tales formulaciones de acción duradera pueden ser administradas por implantación (por ejemplo, subcutánea, intramuscular, o intraocularmente). Así, por ejemplo, los compuestos pueden ser formulados con materiales poliméricos o hidrófobos adecuados (por ejemplo, como una emulsión en un aceite aceptable) o resinas de intercambio iónico, o como derivados escasamente solubles, por ejemplo, como una sal escasamente soluble.
Un vehículo farmacéutico para compuestos hidrófobos es un sistema de cosolventes que comprende alcohol bencílico, un agente tensioactivo no polar, un polímero orgánico miscible en agua, y una fase acuosa. El sistema de cosolventes puede ser un sistema de cosolventes VDP. EL VPD es una solución de 38% p/v de alcohol bencílico, 8% p/v de agente tensioactivo no polar polisorbato 80, y 65% p/v de polietilén glicol 300, llevado a volumen en etanol absoluto. El sistema de cosolventes VPD (VPD.5W) contiene VPD en dilución 1 : 1 con un 5% de dextrosa en solución acuosa. Este sistema de cosolventes disuelve bien compuestos hidrófobos, y produce el mismo una baja toxicidad luego de administración sistémica. Naturalmente, las proporciones de un sistema de cosolventes pueden variar considerablemente sin afectar su solubilidad y características de toxicidad. Además, la identidad de los componentes del cosolvente puede variarse: por ejemplo, se pueden emplear otros agentes tensioactivos no polares de baja toxicidad en lugar de polisorbato 80, puede variarse el tamaño de la fracción de polietilén glicol; otros polímeros biocompatibles pueden reemplazar al polietilén glicol, por ejemplo, polivinil pirrolidona; y la dextrosa puede ser substituida por otros azúcares o polisacáridos.
Alternativamente, pueden emplearse otros sistemas de transferencia para compuestos farmacéuticos hidrófobos. Ejemplos conocidos de vehículos o portadores para drogas hidrófobas son liposomas y emulsiones. Pueden emplearse también ciertos solventesa orgánicos tales como dimetilsulfóxido, si bien usualmente al precio de mayor toxicidad. Adicionalmente, los compuestos pueden ser transferidos utilizando un sistema de liberación sostenida, tales como matrices semipermeables de polímeros hidrófobos sólidos que contienen el agente terapéutico. Se han establecido varios materiales de liberación sostenida y son conocidos por aquéllos con experiencia en la especialidad. Las cápsulas de liberación sostenida pueden liberar, dependiendo de su naturaleza química, los compuestos en el lapso de desde unas pocas semanas a más de 100 días. Dependiendo de la naturaleza química y de la estabilidad biológica del reactivo terapéutico, pueden emplearse otras estrategias para la estabilización de proteínas.
Las composiciones farmacéuticas pueden también comprender vehículos o excipientes de fase sólida o de gel adecuados. Ejemplos de tales vehículos o excipientes incluyen carbonato de calcio, fosfato de calcio, azúcares, almidones, derivados de celulosa, gelatina, y polímeros tales como polietilén glicoles.
Algunos de los compuestos de la invención pueden ser suministrados como sales con contraiones farmacéuticamente compatibles. Las sales farmacéuticamente compatibles pueden formarse con muchos ácidos, incluyendo ácidos clorhídrico, sulfúrico, acético, láctico, tartárico, málico, succínico, etc. Las sales tienden a ser más estables en agua u otros solventes protónicos que las formas de base libre correspondientes.
La preparación de compuestos preferidos de la presente invención es descripta en detalle en los siguientes ejemplos, pero el experto reconocerá que las reacciones químicas descriptas pueden ser fácilmente adaptadas para preparar una variedad de otros inhibidores de quinasa de proteína de la invención. Por ejemplo, la síntesis de compuestos no ejemplificados de acuerdo con la invención puede ser llevada a cabo exitosamente mediante modificaciones obvias para aquéllos con conocimientos en la especialidad, por ejemplo, protegiendo adecuadamente grupos que interfieren, realizando cambios por otros reactivos adecuados conocidos en la especialidad, o realizando modificaciones de rutina de las condiciones de reacción. Alternativamente, se reconocerá que otras reacciones dadas a conocer en la presente o conocidas en la especialidad tienen aplicabilidad para la preparación de otros compuestos de la invención.
Ejemplos
En los ejemplos descriptos seguidamente, a menos que se indique lo contrario, todas las temperaturas están expresadas en grados Celsius y todas las partes y porcentajes son en peso. Los reactivos se adquirieron a proveedores comerciales tales como Aldrich Chemical Company o Lancaster Synthesis Ltd., y se utilizan sin más purificación a menos que se especifique lo contrario. El tetrahidrofurano (THF) y la N,N-dimetilformamida (DMF) se adquirieron a Aldrich en botellas de cierre Sure y se utilizaron tal como se recibieron. Todos los solventes se purificaron utilizando métodos standard bien conocidos por aquéllos con cocimientos en la técnica, a menos que se especifique de otro modo.
Las reacciones expuestas seguidamente se llevaron a cabo generalmente bajo una presión positiva de nitrógeno o con un tubo de secado, a temperatura ambiente (a menos que se indique lo contrario), en solventes anhidros, y los matraces de reacción estaban equipados con septos de goma para la introducción de substratos y reactivos por medio de jeringas. El material de vidrio se secó en estufa y/o al calor. Se llevó a cabo la cromatografía de capa fina (TLC) analítica en placas Analtech (0,25 mm) 60 F 254 de gel de sílice con respaldo de vidrio y se eluyó con las proporciones de solvente apropiadas (v/v), y está indicado cuando corresponde. Las reacciones se chequearon mediante TLC y se dieron por terminadas según se juzgó por el agotamiento del material de partida.
La visualización de las placas de punta se realizó con un reactivo de spray de p-anisaldehido o reactivo de ácido fosfomolíbdico (Aldrich Chemical 20% en peso en etanol) y activado con calor. Los procesamientos se realizaron típicamente duplicando el volumen de reacción con el solvente de reacción o solvente de extracción y lavando luego con las soluciones acuosas indicadas empleando 25% en volumen del volumen de extracción a menos que se indique lo contrario. Las soluciones de producto se secaron sobre Na_{2}SO_{4} anhidro antes de la filtración y evaporación del solvente a presión reducida en una evaporador rotativo y se consigna como solventes eliminados al vacío. La cromatografía de columna flash (Still y otro(s), J. Org. Chem., 43, 2923, (1978)) se realizó utilizando gel de sílice para flash grado Baker (47-61 \mum) y una relación de gel de sílice: material en bruto de aproximadamente desde 20:1 a 50:1 a menos que se indique lo contrario.
La hidrogenólisis se llevó a cabo a la presión indicada en los ejemplos o a presión atmosférica.
Los espectros de RMN de ^{1}H se registraron en un instrumento Bruker que operaba a 300 MHz y los espectros de RMN de ^{13}C se registraron operando a 75 MHz. Los espectros de RMN se obtuvieron como soluciones de CDCl_{3} (informadas en ppm), utilizando cloroformo como el patrón de referencia (7,25 ppm y 77,00 ppm) o CD_{3}OD (3,4 y 4,8 ppm y 49,3 ppm), o internamente tetrametilsilano (0,00 ppm) cuando se lo consideró apropiado. Otros solventes de RMN se utilizaron cuando se juzgó necesario. Cuando se informan multiplicidades de pico, se utilizan las siguientes abreviaturas: s (singlete), d (doblete), t (triplete), m (multiplete), br (ensanchado), dd (doblete de dobletes), dt (doblete de tripletes). Las constantes de acoplamiento, cuando se indican, se expresan en Hertz (Hz).
Los espectros infrarrojos (IR) se registraron en un espectrómetro Perkin-Elmer FT-IR como aceites netos, como pellets de KBr, o como soluciones de CDCl_{3}, y cuando se indican se expresan en números de onda (cm^{-1}). Los espectros de masa se obtuvieron utilizando LSIMS o electronebulización. Todos los puntos de fusión (p. de f.) están sin corregir.
Ejemplo A(1) 4-(4'-amino-4-fenil-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-bencenosulfonamida
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El material de partida se preparó utilizando las Etapas (i) y (ii) descriptas seguidamente.
Etapa (i)
A una solución de isotiocianato de 4-(aminosulfonil)fenilo (1,12 g; 5,0 mmoles) y cianamida (0,23 g; 5,5 mmoles) en acetonitrilo (50 ml) se le agregó DBU (0,83 g; 5,5 mmoles), y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 60 minutos. A la mezcla de reacción se le agregó bromo-acetonitrilo (0,66 g; 5,5 mmoles) seguido de DBU (0,83 g; 5,5 mmoles) 30 minutos después. La mezcla de reacción se agitó durante toda la noche a temperatura ambiente, el solvente se eliminó a presión reducida y el residuo se disolvió en EtOAc (200 mL). La solución de EtOAc se lavó con HCl 0,1 N (150 mL x 3) y salmuera y se secó con MgSO_{4} y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía de gel de sílice (EtOAc) para proporcionar 0,73 mg (48%) de 2-(4-aminosulfonilfenil)amino-4-amino-tiazol-5-carbonitrilo.
Etapa (ii)
A una solución de 2-(4-aminosulfonilfenil)amino-4-amino-tiazol-5-carbo-nitrilo (0,59 g; 2 mmoles) en 20% de trietilamina/piridina (50 mL) se le hizo burbujear H_{2}S gaseoso a temperatura de agua helada durante 30 minutos. Luego la solución de reacción se cerró herméticamente y se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. Se hizo burbujear argón a través de la solución de reacción durante 60 minutos para reemplazar al H_{2}S, y luego se eliminaron los solventes a presión reducida. El residuo se disolvió en EtOAc, y la solución de EtOAc se lavó entonces con ácido cítrico al 5% (50 mL x 3) seguido de salmuera. El solvente se eliminó al vacío y el residuo se trituró en Et_{2}O. El producto 2-(4-aminosulfonilfenil)amino-4-amino-tiazol-5-carbotioamida se recogió por filtración (0,56 g; 95%).
Para preparar el compuesto del título, se agitó una solución de 2-(4-aminosulfonil-fenil)amino-4-amino-tiazol-5-carbotioamida (164 mg; 0,5 mmol) y \alpha-bromoacetofenona (110 mg; 0,55 mmol) en MeOH (20 mL) a temperatura ambiente durante toda la noche. El solvente se eliminó al vacío y el residuo se disolvió en EtOAc (50 mL). La solución de EtOAc se lavó con NaHCO_{3} saturado (10 mL), seguido de salmuera. La purificación del residuo mediante cromatografía en gel de sílice proporcionó 4-(4'-amino-4-fenil-[2,5']bi-tiazolil-2'-ilamino)-bencenosulfonamida. P. de f. 233-235ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,96 (s, 1 H); 7,82 (s, 4 H); 7,44-7,25 (m, 4 H). ESIMS (MH^{+}): 430; (M-H^{-}): 428.
Análisis calculado para C_{18}H_{15}N_{5}O_{2}S_{3}: C: 50,33; H: 3,52; N: 16,30; S: 22,39. Encontrado: C: 50,62; H: 3,54; N: 16,03; S: 22,12. De una manera similar a aquélla utilizada para la preparación del Ejemplo A(1), se prepararon los siguientes Ejemplos A(2) hasta A(71).
Ejemplo A(2) 4-[4'-amino-4-(4-metoxi-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
22
P. de f. 195-198ºC. RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,78 (d, J = 8,80 Hz, 2 H); 7,75 (s, 4 H); 7,13 (s, 1 H); 6,88 (d, J = 8,86 Hz, 2 H); 3,75 (s, 3 H). FABMS (MH^{+}): 460.
Análisis calculado para C_{18}H_{15}N_{5}O_{2}S_{3}: C: 50,33; H: 3,52; N: 16,30; S: 22,39. Encontrado: C: 50,62; H: 3,54; N: 16,03; S: 22,12.
Ejemplo A(3) 4-[4'-amino-4-(2-metoxi-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
23
P. de f. 231-235ºC (se descompone). R_{f} (75% de EtOAc/Hex) = 0,56. RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,10 (dd, J = 7,79; 1,73 Hz, 1 H); 7,79-7,70 (m, 4 H); 7,57 (s, 1 H); 7,25-7,19 (m, 1 H); 7,03-6,93 (m, 2 H); 3,84 (s, 3 H). FABMS (MH^{+}): 460.
Ejemplo A(4) 4-[4'-amino-4-(2,4-difluor-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
24
P. de f. 233-238ºC. RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,26-8,21 (m, 1 H); 7,88 (s, 4 H); 7,47 (s, 1 H); 7,14-7,07 (m, 2 H). ESIMS (MH^{+}): 466; [M-H^{-}]: 464.
Análisis calculado para C_{18}H_{13}F_{2}N_{5}O_{2}S_{3} \cdot 0,4 H_{2}O: C: 45,73; H: 2,94; N: 14,82; S: 20,35. Encontrado: C: 45,82; H: 2,78; N: 14,77; S: 20,38.
Ejemplo A(5) 4-[4'-amino-4-(4-fluor-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
25
P. de f. 254-257ºC. RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,01-7,91 (m, 2 H); 7,88-7,76 (m, 4 H); 7,35 (s, 1 H); 7,20-7,09 (m, 2 H).
Análisis calculado para C_{18}H_{14}FN_{5}O_{2}S_{3}: C: 48,31; H: 3,15; N: 15,65; S: 21,49. Encontrado: C: 48,40; H: 3,26; N: 15,44; S: 21,68.
Ejemplo A(6) 4-[4'-amino-4-(2,4-dicloro-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
26
P. de f. 173-175ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,97-7,93 (m, 1 H); 7,87-7,81 (m, 4 H); 7,67-7,59 (m, 1 H); 7,57 (s, 1 H); 7,49-7,39 (m, 1 H). FABMS (MH^{+}): 498.
Análisis calculado para C_{18}H_{13}Cl_{2}N_{5}O_{2}S_{3}: C: 43,38; H: 2,63; N: 14,05; S: 19,30. Encontrado: C: 43,32; H: 2,78; N: 13,84; S: 19,06%.
Ejemplo A(7) 4-[4'-amino-4-(3-cloro-5-fluor-4-metil-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
27
P. de f. 208-212ºC. RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 10,63 (s, NH); 7,95 (t, J = 8,42 Hz, 1 H); 7,73 (q, J = 9,00 Hz, 4 H); 7,55 (d, J = 2,32 Hz, 1 H); 7,35 (d, J = 8,55 Hz, 1 H); 7,17 (s, NH_{2}); 6,96 (s, NH_{2}); 2,28 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 496.
Análisis calculado para C_{19}H_{15}ClFN_{5}O_{2}S_{3}: C: 46,01; H: 3,05; N: 14,12; S: 19,12. Encontrado: C: 45,93; H: 3,23; N: 13,86; S: 19,47.
Ejemplo A(8) 4-[4'-amino-4-(4-hidroxi-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
28
P. de f. 168-170ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,83 (s, 4 H); 7,97-7,76 (d, J = 8,59 Hz, 2 H); 7,16 (s, 1 H); 6,85-6,82 (d, J = 8,46 Hz, 2 H). FABMS (MH^{+}): 446.
Análisis calculado para C_{18}H_{15}N_{5}O_{3}S_{3} \cdot 0,5 H_{2}O: C: 47,56; H: 3,55; N: 15,41; S: 21,16. Encontrado: C: 47,87; H: 3,59; N: 15,09; S: 21,11.
Ejemplo A(9) 4-(2,4-difluor-fenil)-N^{2'}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-[2,5']bitiazolil-2',4'-diamina
29
P. de f. 180-183ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,26-8,23 (m, 1 H); 7,41 (d, J = 2,2 Hz, 1 H); 7,13-7,05 (m, 2 H); 7,02 (s, 2 H); 3,90 (s, 6 H); 3,78 (s, 3 H). FABMS (MH^{+}): 476.
Análisis calculado para C_{21}H_{18}F_{2}N_{4}O_{3}S_{3}: C: 52,93; H: 3,81; N: 11,76; S: 13,46. Encontrado: C: 52,81; H: 3,72; N: 11,58; S: 13,45.
Ejemplo A(10) 4-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenol
30
P. de f. 129-133ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,80 (d, J = 8,09 Hz, 2 H); 7,16 (s, 1 H); 7,02 (s, 2 H); 6,86 (d, J = 8,09 Hz, 2 H); 3,90 (s, 6 H); 3,78 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 457; (M-H^{-}). 455.
Análisis calculado para C_{21}H_{20}N_{4}O_{4}S_{3} \cdot 1,0 Et_{2}O. C: 56,58; H: 5,70; N: 10,56; S: 12,08. Encontrado: C: 56,27; H: 5,48; N: 10,69; S: 12,00.
Ejemplo A(11) Éster etílico del ácido 4-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-benzoico
31
P. de f. 240-245ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,18-8,16 (d, J = 8,46 Hz, 2 H); 8,09-8,06 (d, J = 8,09 Hz, 2 H); 7,06 (s, 1 H); 4,38 (q, J = 7,35 Hz, 2 H); 3,85 (s, 6 H); 3,68 (s, 3 H); 1,41-1,37 (t, J = 6,99 Hz, 3 H). FABMS (MH^{+}): 513.
Análisis calculado para C_{22}H_{20}N_{4}O_{5}S_{3} \cdot 0,3 Et_{2}O. C: 56,59; H: 5,09; N: 10,48; S: 11,99. Encontrado: C: 56,24; H: 4,83; N: 10,26; S: 11,86.
Ejemplo A(12) 4-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-benceno-1,2-diol
32
P. de f. 132-137ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,42-7,41 (d, J = 2,20 Hz, 1 H); 7,32-7,28 (dd, J = 7,65; 1,84 Hz, 1 H); 7,11 (s, 1 H); 7,07 (s, 2 H); 6,85-6,82 (d, J = 8,45 Hz, 1 H); 3,90 (s, 6 H); 3,78 (s, 3 H). FABMS (MH^{+}): 473.
Ejemplo A(13) 4-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-2-metoxi-fenol
33
P. de f. 202-203ºC. RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,42 (s, 1 H); 7,39 (d, J = 2,11 Hz, 1 H); 7,15 (s, 1 H); 6,99 (s, 2 H); 6,97 (d, J = 2,10 Hz, 1 H); 3,91 (s, 3 H); 3,88 (s, 6 H); 3,76 (s, 3 H). FABMS (MH^{+}): 487.
Análisis calculado para C_{22}H_{22}N_{4}O_{5}S_{3}. C: 54,31; H: 4,56; N: 11,51; S: 13,18. Encontrado: C: 54,52; H: 4,70; N: 11,26; S: 13,32.
Ejemplo A(14) 4-[4'-amino-4-(4-fluor-fenil)-5-metil-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
34
P. de f. 145-148ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,90-7,82 (m, 4 H); 7,76-7,70 (m, 2 H); 7,22-7,17 (m, 2 H); 2,56 (s, 3 H). HRFABMS: calculado para C_{19}H_{16}FN_{3}O_{2}S_{3}. (MH^{+}): 461,0450; encontrado: 461,0466.
Ejemplo A(15) 4-[4'-amino-5-(4-fluor-bencil)-4-metil-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
35
P. de f. 130-135ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,76-7,68 (m, 4 H); 7,17-7,12 (m, 2 H); 6,97-6,90 (m, 2 H); 3,97 (s, 2 H); 2,23 (s, 3 H).
Análisis calculado para C_{20}H_{18}FN_{5}O_{2}S_{3}. C: 50,51; H: 3,81; N: 14,73; S: 20,23. Encontrado: C: 50,40; H: 3,73; N: 14,64; S: 20,37.
Ejemplo A(16) 4-[4'-amino-5-(3-hidroxi-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
36
P. de f. 205-209ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,94-7,81 (m, 4 H); 7,43-7,39 (m, 2 H); 7,33 (s, 1 H); 7,24 (t, J = 8,17 Hz, 1 H); 6,80-6,75 (m, 1 H). FABMS (MH^{+}): 445.
Análisis calculado para C_{18}H_{15}N_{5}O_{3}S_{3}. C: 48,53; H: 3,39; N: 15,72; S: 21,59. Encontrado: C: 48,74; H: 3,47; N: 15,44; S: 21,31.
Ejemplo A(17) 3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenol
37
P. de f. 226-230ºC. RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,43-7,41 (m, 2 H); 7,31 (s, 1 H); 7,28-7,23 (m, 1 H); 7,02 (s, 2 H); 6,80-6,77 (m, 1 H); 3,90 (s, 6 H); 3,78 (s, 3 H). FABMS (MH^{+}): 456.
Análisis calculado para C_{21}H_{20}N_{4}O_{4}S_{2}. C: 55,25; H: 4,42; N: 12,27; S: 14,05. Encontrado: C: 55,39; H: 4,56; N: 12,07; S: 14,05.
Ejemplo A(18) 5-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-benceno-1,3-diol
38
P. de f. 198-202ºC. RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,21 (s, 1 H); 6,99 (s, 2 H); 6,91 (d, J = 2,06 Hz, 2 H); 6,27 (t, J = 2,03 Hz, 1 H); 3,88 (s, 6 H); 3,77 (s, 3 H). FABMS (MH^{+}): 473.
Análisis calculado para C_{21}H_{20}N_{4}O_{4}S_{2} \cdot 0,5 H_{2}O: C: 52,38; H: 4,40; N: 11,63; S: 13,32. Encontrado: C: 52,53; H: 4,44; N: 11,83; S: 13,47.
Ejemplo A(19) 3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-5-metoxi-fenol
39
P. de f. 208-210ºC. RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,14 (s, 1 H); 6,89-6,86 (m, 2 H); 6,85 (s, 2 H); 6,23 (t, J = 2,06 Hz, 1 H); 3,75 (s, 6 H); 3,69 (s, 3 H); 3,63 (s, 3 H). FABMS (MH^{+}): 486.
Análisis calculado para C_{22}H_{22}N_{4}O_{5}S_{2} \cdot 0,5 H_{2}O: C: 54,20; H: 4,57; N: 11,49; S: 13,16. Encontrado: C: 54,02; H: 4,71; N: 11,09; S: 13,56.
Ejemplo A(20) 4-[4'-amino-4-(4-hidroxi-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
40
P. de f. 200-203ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,30 (s, 1 H); 6,98 (s, 2 H); 6,83 (d, J = 2,93 Hz, 1 H); 6,56 (d, J = 2,93 Hz, 1 H); 3,88 (s, 6 H); 3,81 (s, 3 H); 3,76 (s, 3 H). FABMS (MH^{+}): 565/567.
Análisis calculado para C_{22}H_{21}BrN_{4}O_{5}S_{2} \cdot 0,5 H_{2}O C: 46,00; H: 3,86; N: 9,77; S: 11,16. Encontrado: C: 46,26; H: 3,69; N: 9,55; S: 11,09.
Ejemplo A(21) Ácido 3-[4'-amino-2'-(4-sulfamoil-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-benzoico
41 
\vskip1.000000\baselineskip
RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 10,94 (s, OH); 8,46 (s, 1 H); 8,18 (d, J = 7,80 Hz, 1 H); 7,92 (d, J = 7,80 Hz, 1 H); 7,78 (m, 4 H); 7,56 (t, J = 7,80 Hz, 1 H); 7,22 (brd, NH_{2}); 7,04 (brd, NH_{2}).
Análisis calculado para C_{19}H_{15}N_{5}O_{4}S_{3} \cdot 0,3 EtOAc C: 48,52; H: 3,51; N: 14,01; S: 19,24. Encontrado: C: 48,37; H: 3,67; N: 13,97; S: 19,24.
Ejemplo A(22) 5-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-2-cloro-fenol
42
P. de f. 235-238ºC. RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,61 (d, J = 1,92 Hz, 1 H); 7,47-7,39 (m, 2 H); 7,37 (s, 1 H); 7,05 (s, 2 H); 3,94 (s, 6 H); 3,82 (s, 3 H). FABMS (MH^{+}): 490.
Análisis calculado para C_{21}H_{19}ClN_{4}O_{4}S_{2}: C: 51,37; H: 3,90; N: 11,41; S: 13,06. Encontrado: C: 51,38; H: 3,95; N: 11,32; S: 12,72.
Ejemplo A(23) 2-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenol
43
P. de f. 186-190ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,88 (dd, J = 7,99; 1,61 Hz, 1 H); 7,62 (s, 1 H); 7,27-7,20 (m, 1 H); 7,04 (s, 2 H); 6,98-6,91 (m, 2 H); 3,92 (s, 6 H); 3,80 (s, 3 H). FABMS (MH^{+}): 457.
Análisis calculado para C_{21}H_{20}N_{4}O_{4}S_{2}: C: 55,25; H: 4,42; N: 12,27; S: 14,05. Encontrado: C: 55,28; H: 4,62; N: 11,96; S: 13,72.
Ejemplo A(24) 4-(4'-amino-4-p-tolil-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-bencenosulfonamida
44
RMN de ^{1}H (DMSO): \delta 7,92-7,84 (m, 4 H); 7,32 (m, 3 H); 7,11 (s, 2 H); 2,39 (s, 3 H). FABMS (M^{+}): 443; (MNa^{+}): 466.
Ejemplo A(25) 2-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-benceno-1,4-diol
45
P. de f. 208-212ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,56 (s, 1 H); 7,31 (d, J = 2,80 Hz, 1 H); 7,00 (s, 2 H); 6,77 (d, J = 8,69 Hz, 1 H); 6,68 (dd, J = 8,72; 2,87 Hz, 1 H); 3,89 (s, 6 H); 3,77 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 473.
Análisis calculado para C_{21}H_{20}N_{4}O_{5}S_{2} \cdot 0,45 H_{2}O: C: 52,47; H: 4,38; N: 11,66; S: 13,34. Encontrado: C: 52,77; H: 4,48; N: 11,23; S: 12,98.
Ejemplo A(26) 3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-4-bromo-fenol
46
P. de f. 214-216ºC. RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,47 (d, J = 8,67 Hz, 1 H); 7,38 (s, 1 H); 7,26 (d, J = 3,02 Hz, 1 H); 7,07 (s, 2 H); 6,72 (dd, J = 8,69; 3,07 Hz, 1 H); 3,89 (s, 6 H); 3,76 (s, 3 H). FABMS (MH^{+}): 535/537.
Análisis calculado para C_{21}H_{19}BrN_{4}O_{4}S_{2}: C: 47,11; H: 3,58; N: 10,46; S: 11,85. Encontrado: C: 47,31; H: 3,65; N: 10,26; S: 11,85.
Ejemplo A(27) 2-(4'-amino-4-benzo[b]tiofen-3-il-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-bencenosulfonamida
47
P. de f. 155-160ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,39 (d, J = 7,94 Hz, 1 H); 8,01 (s, 1 H); 7,96 (d, J = 7,72 Hz, 1 H); 7,86 (s, 4 H); 7,50-7,39 (m, 3 H). FABMS (MH^{+}): 485.
Ejemplo A(28) 4-{4'-amino-[4-(2,4-dicloro-fenil)-furan-2-il]-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino}-bencenosulfonamida
48
P. de f. 225-230ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,00 (d, J = 8,62 Hz, 1 H); 7,86 (s, 4 H); 7,58 (d, J = 2,10 Hz, 1 H); 7,45 (dd, J = 8,60; 2,12 Hz, 1 H); 7,40 (s, 1 H); 7,29 (d, J = 3,61 Hz, 1 H); 6,97 (d, J = 3,59 Hz, 1 H). FABMS (MH^{+}): 564/566.
Ejemplo A(29) 3-(4'-amino-2'-propilamino-[2,5']bitiazolil-4-il)-fenol
49
RMN de ^{1}H (CD_{3}COCD_{3}): \delta 8,43 (s, 1 H); 7,50 (d, 1 H); 7,43 (d, 1 H); 7,30-7,20 (m, 3 H); 6,55 (s, 2 H); 3,40 (t, 2 H); 1,69 (sexteto, 2 H); 0,97 (t, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 333; (MNa^{+}): 355; (MH^{-}): 331.
Ejemplo A(30) 3-(4'-amino-2'-metilamino-[2,5']bitiazolil-4-il)-fenol
50
RMN de ^{1}H (CD_{3}COCD_{3}): \delta 8,40 (s, 1 H); 7,50 (d, 1 H); 7,43 (d, 1 H); 7,31-7,15 (m, 3 H); 6,63 (s, 2 H); 3,00 (d, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 305; (M-H^{-}): 303.
Ejemplo A(31) 3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-N-fenetil-benzamida
51
ESMS (MH^{+}): 588.
Análisis calculado para C_{30}H_{29}N_{5}O_{4}S_{2}: C: 61,31; H: 4,97; N: 11,92; S: 10,91. Encontrado: C: 61,02; H: 4,86; N: 11,72; S: 10,83.
Ejemplo A(32) 3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-N-bencil-benzamida
52
ESMS (MH^{+}): 574.
Ejemplo A(33) 3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-N-fenil-benzamida
53
ESMS (MH^{+}): 560.
Análisis calculado para C_{28}H_{25}N_{5}O_{4}S_{2} \cdot 0,8 H_{2}O C: 58,58; H: 4,67; N: 12,20; S: 11,17. Encontrado: C: 58,68; H: 4,49; N: 12,23; S: 11,33.
Ejemplo A(34) 3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-N-(4-isopropil-3-metil-fenil)-benzamida
54
ESMS (MH^{+}): 616.
Análisis calculado para C_{32}H_{33}N_{5}O_{4}S_{2} \cdot 0,4 H_{2}O C: 61,69; H: 5,47; N: 11,24; S: 10,29. Encontrado: C: 61,76; H: 5,26; N: 11,08; S: 10,18.
Ejemplo A(35) 3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-N-(2-metil-quinolin-6-il)-benzamida
55
ESIMS (MH^{+}): 625.
Análisis calculado para C_{32}H_{28}N_{6}O_{4}S_{2} \cdot 0,2 H_{2}O C: 58,41; H: 4,36; N: 12,65; S: 9,66. Encontrado: C: 58,40; H: 4,31; N: 12,28; S: 9,54.
Ejemplo A(36) Éster bencílico del ácido [3-(4'-amino-2'-p-tolilamino-[2,5']bitiazolil-4-il)-fenil]-carbámico
56
RMN de ^{1}H (CD_{3}COCD_{3}): \delta 8,85 (s, 1 H); 8,21 (s, 1 H); 7,70-7,25 (m, 14 H); 6,52 (s, 2 H); 5,30 (s, 2 H); 2,41 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 514; (MH^{-}): 512.
Ejemplo A(37) N-{3-[4'-amino-2'-(3-dietilaminopropilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-benzamida
57
RMN de ^{1}H (DMSO-D_{6}): \delta 10,39 (s, 1 H); 9,12 (s, 1 H); 8,35 (s, 2 H); 7,96 (m, 3 H); 7,79 (m, 1 H); 7,69-7,39 (m, 6 H); 3,36 (m, 2 H); 3,12 (m, 6 H); 2,93 (m, 2 H); 1,20 (m, 6 H). ESIMS (MH^{+}): 507.
Ejemplo A(38) N-[3-(4'-amino-2'-fenetilamino-[2,5']bitiazolil-4-il)-fenil]-benzamida
58
RMN de ^{1}H (DMSO-D_{6}): \delta 10,39 (s, 1 H); 8,42-7,15 (m, 16 H); 6,85 (s, 1 H); 5,20 (s ancho, 2 H); 2,90 (m, 2 H); 3,50 (m, 2 H). ESIMS (MH^{+}): 498.
Ejemplo A(39) Éster metílico del ácido 3-[4'-amino-4-(3-benzoilaminofenil)-[2,5']bitiazolil-2'-il-amino]-benzoico
59
RMN de ^{1}H (DMSO-D_{6}): \delta 10,39 (s, 1 H); 10,38 (s, 1 H); 8,37 (s, 1 H); 8,16 (s, 1 H); 8,18 (d, 1 H); 7,98 (d, 2 H); 7,84 (d, 1 H); 7,70 (d, 1 H); 7,65-7,39 (m, 8 H); 7,10 (s ancho, 2 H); 3,89 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 528; (MNa^{+}): 550; (MH^{-}): 526.
Ejemplo A(40) Éster etílico del ácido 3-[4'-amino-4-(3-benzoilaminofenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-benzoico
60
RMN de ^{1}H (DMSO-D_{6}): \delta 10,80 (s, 1 H); 10,38 (s, 1 H); 8,37 (s, 1 H); 8,16 (s, 1 H); 8,15 (d, 2 H); 8,00 (d, 2 H); 7,88 (d, 1 H); 7,75-7,40 (m, 8 H); 7,10 (s ancho, 1 H); 4,38 (cuarteto, 2 H); 1,39 (t, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 542; (MNa^{+}): 564.
Ejemplo A(41) N-{3-[4'-amino-2'-(benzo[1,3]dioxol-5-ilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-benzamida
61
RMN de ^{1}H (DMSO-D_{6}): \delta 10,41 (m, 2 H); 8,35 (s, 1 H); 8,00-6,88 (m, 14 H); 6,10 (s, 2 H). ESIMS (MH^{+}): 514; (MH^{-}): 512.
Ejemplo A(42) N-{3-[4'-amino-2'-(3,5-dimetilfenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-benzamida
62
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,36-6,79 (m, 16 H); 6,68 (s, 1 H); 2,28 (s, 6 H). ESIMS (MH^{+}): 993; (MNa^{+}): 1015.
Ejemplo A(43) N-{3-[4'-amino-2'-(indan-5-ilamino)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-fenil}-benzamida
63
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,50-7,15 (m, 17 H); 2,95 (m, 4 H); 2,15 (m, 2 H). ESIMS (MH^{+}): 510; (MNa^{+}): 532; (MH^{-}): 508.
Ejemplo A(44) [3-(4'-amino-2'-m-tolilamino-[2,5']bitiazolil-4-il)-fenil]-benzamida
64
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,25-6,81 (m, 18 H); 2,29 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 484; (MNa^{+}): 506.
Ejemplo A(45) N-{3-[4'-amino-2'-(2,3-dihidro-benzo[1,4]dioxin-6-ilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-benzamida
65
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,42-6,83 (m, 17 H); 4,29 (m, 4 H). ESIMS (MH^{+}): 528; (MNa^{+}): 550.
Ejemplo A(46) N-{3-[4'-amino-2'-(3-metilsulfanil-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-benzamida
66
RMN de ^{1}H (DMSO-D_{6}): \delta 10,39 (s, 1 H); 8,89 (d, 2 H); 8,51-6,91 (m, 18 H). ESIMS (MH^{+})*: 1029.
Ejemplo A(47) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4-dimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-benzamida
67
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,32 (s, 1 H); 7,98 (d, 2 H); 7,78-6,91 (m, 14 H); 3,88 (s, 3 H); 3,81 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 530; (MNa^{+}): 552.
Ejemplo A(48) N-{3-[2'-(3-acetilamino-4-metil-fenilamino)-4'amino-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-benzamida
68
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,32 (s, 1 H); 7,98 (d, 2 H); 7,72-7,15 (m, 15 H); 2,22 (s, 3 H); 1,98 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 541; (MNa^{+}): 563; (MK^{+}): 579; (MH^{-}): 539.
Ejemplo A(49) N-{3-[4'-amino-2'-(1,4-dioxo-1,2,3,4-tet4rahidro-ftalazin-6-ilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-benzamida
69
RMN de ^{1}H (DMSO-D_{6}): \delta 11,11 (s, 1 H); 10,39 (s, 1 H); 8,35-7,10 (m, 17 H). ESIMS (MNa^{+}): 576; (MH^{-}): 552.
Ejemplo A(50) Ácido 3-[4'-amino-4-(3-benzoilamino-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-benzoico
70
RMN de ^{1}H (DMSO-D_{6}): \delta 10,79 (s, 1 H); 10,39 (s, 1 H); 8,35 (s, 1 H); 8,18-7,34 (m, 16 H). ESIMS (MH^{+}): 514; (MNa^{+}): 536; (MH^{-}): 512.
Ejemplo A(51) 4-[4'-amino-4-(3-benzamido-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-benzoato de etilo 
\vskip1.000000\baselineskip
71
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 1,2 (t, 3 H); 4,3 (q, 2 H); 7,4 (t, 1 H); 7,5-8,0 (m, 14 H); 8,35 (s br, 1 H); 10,4 (s, 1 H); 10,95 (s, 1 H). ESIMS (MH^{+}): 542; (M-H^{-}): 540.
Ejemplo A(52) 4-[4'-amino-4-(3-benzamido-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-metoxifenilo
72
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 2,6 (s, 3 H); 7,2-7,8 (m, 11 H); 8,35 (s br, 1 H); 7,9 (d, 2 H); 8,2 (s br, 1 H). ESIMS (MH^{+}): 500; (M+Na^{+}): 522; (M+K^{+}): 538.
Ejemplo A(53) 3-(4'-amino-4-(3-benzamidofenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-piridina
73
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 7,1 (s br, 1 H); 7,4 (t, 1 H); 7,5-7,7 (m, 7 H); 7,85 (m, 1 H); 8,0 (m, 2 H); 8,25-8,4 (m, 3 H); 9,0 (d, 1 H); 10,4 (s, 1 H); 10,95 (s, 1 H). ESIMS (M+Na^{+}): 493; (M-H^{-}): 469.
Ejemplo A(54) Éster metílico del ácido 2-(4'-amino-4-(3-benzamidofenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-tiofen-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
74
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 3,8 (s, 3 H); 7,0 (s br, 2 H); 7,4 (t, 1 H); 7,5-7,7 (m, 6 H); 7,85 (m, 1 H); 8,0 (m, 3 H); 8,15 (d, 1 H); 8,35 (m, 1 H); 10,4 (m, 1 H). ESIMS (MH^{+}): 534; (M+Na^{+}): 556; (M-H^{-}): 532.
Ejemplo A(55) 4-(4'-amino-4-(3-benzamidofenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-fenilsulfonilpiperidina
75
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 1,2-1,6 (m, 6 H); 3,1 (m, 4 H); 7,3-8,5 (m, 14 H); 8,9 (d, 1 H);10,4 (s, 1 H); 10,5 (s, 1 H); 11,2 (s, 1 H). ESIMS (MH^{+}): 617; (M-H^{-}): 615.
Ejemplo A(56) 4-(4'-amino-4-(3-benzamidofenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-nitrofenilo
76
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 7,2-7,9 (m, 13 H); 8,2 (d, 2 H); 8,3 (s, 1 H); 10,3 (s, 1 H); 11,2 (s, 1 H). ESIMS (MH^{+}): 515; (M-H^{-}): 513.
Ejemplo A(57) Lactona de 4-(4'-amino-4-(3-benzamidofenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-trans-benzoil-DL-homo-serina
77
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 2,5 (m, 1 H); 2,7 (m, 1 H); 4,35 (m, 1 H); 4,5 (m, 1 H); 4,8 (m, 1 H); 7,2 (m, 1 H); 7,45 (m, 3 H); 7,55 (m, 4 H); 7,75 (m, 5 H); 7,85 (m, 3 H); 8,0 (m, 3 H); 8,35 (m, 1 H). ESIMS (MH^{+}): 597; (M+Na^{+}): 619.
Ejemplo A(58) 4-(4'-amino-4-(3-benzamidofenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-acetofenona
78
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 2,5 (s, 3 H); 7,1 (s br, 1 H); 7,42 (t, 1 H); 7,5-7,7 (m, 6 H); 7,8 (m, 4 H); 8,0 (m, 5 H); 8,35 (t br, 1 H). ESIMS (MH^{+}): 512; (M+Na^{+}): 534; (M-H^{-}): 510.
Ejemplo A(59) (4'-amino-4-(3-benzamidofenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-ciclohexano
79
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 1,0-2,0 (m, 10 H); 3,2 (m br, 1 H); 5,2 (s, 2 H); 7,0 (d, 1 H); 7,4-8,0 (m, 11 H). ESIMS (MH^{+}): 506; (M-H^{-}): 504.
Ejemplo A(60) 3-(4'-amino-4-(3-benzamidofenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-metoxipropano
80
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 1,5 (m, 1 H); 1,8 (m, 1 H); 2,0 (m, 2 H); 3,1 (s, 3 H); 3,3 (m, 2 H); 5,0 (s, 2 H); 7,2-7,4 (m, 12 H). ESIMS (MH^{+}): 496; (M-H)^{-}: 494.
Ejemplo A(61) 4-[4'-amino-4-(3-benciloxi-5-hidroxi-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
81
P. de f. 185-187ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,88 (s, 4 H); 7,56-7,32 (m, 6 H); 7,10-7,03 (m, 2 H); 6,45 (t, J = 2,23 Hz, 1 H); 5,13 (s, 2 H). ESIMS (MH^{+}): 552; (M-H^{-}): 550.
Análisis calculado para C_{25}H_{21}N_{5}O_{4}S_{3} \cdot 0,3 EtOAc: C: 54,43; H: 4,08; N: 12,12; S: 16,64. Encontrado: C: 54,54; H: 4,00; N: 12,06; S: 16,59.
Ejemplo A(62) 4-[4-(3-aliloxi-5-hidroxi-fenil)-4'-amino-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
82
P. de f. 200-202ºC. RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 11,12 (s, NH); 9,81 (s, NH_{2}); 8,07-8,00 (m, 4 H); 7,86 (s, NH_{2}); 7,48 (s, 1 H); 7,30-7,23 (m, 2 H); 6,57 (s, 1 H); 6,34-6,23 (m, 1 H); 5,68-5,52 (m, 2 H); 5,32-5,28 (m, 2 H). ESIMS (MH^{+}): 502; (M-H^{-}): 501.
Análisis calculado para C_{21}H_{19}N_{5}O_{4}S_{3}: C: 50,29; H: 3,82; N: 13,96; S: 19,18. Encontrado: C: 50,31; H: 3,93; N: 13,74; S: 19,05.
Ejemplo A(63) 4-(4'-amino-4-estiril-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-bencenosulfonamida
83
P. de f. 140-143ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,80-7,72 (m, 4 H); 7,50-7,46 (m, 1 H); 7,38-7,06 (m, 6 H); 6,95 (s, 1 H). FABMS calculado para C_{20}H_{17}N_{5}O_{4}S_{3}: 455,0544. Encontrado: 455,0529.
Ejemplo A(64) 4-{4'-amino-4-[2-(4-hidroxi-fenil)-vinil]-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino}-bencenosulfonamida
84
P. de f. 138-140ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 10,90 (2, MH); 7,73 (q, J = 15,32 Hz, 4 H); 7,36 (d, J = 8,75 Hz, 2 H); 7,22 (d, J = 15,80 Hz, 1 H); 7,18 (s, NH_{2}); 7,06 (s, 1 H); 6,90 (d, J = 16,1 Hz, 1 H); 6,84 (s, NH_{2}); 6,70 (d, J = 8,62 Hz, 2 H). FABMS calculado para C_{20}H_{17}N_{5}O_{3}S_{3}: 471,0494. Encontrado: 471,0502.
Ejemplo A(65) 4-{4'-amino-4-[2-(3-hidroxi-4-metoxi-fenil)-etenil]-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino}-bencenosulfonamida
85
P. de f. 190-193ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 10,71 (s, NH_{2}); 9,83 (s, NH_{2}); 7,63 (q, J = 15,40 Hz, 4 H); 7,10-7,03 (m, 2 H); 6,98 (s, 1 H); 6,86 (s, NH_{2}); 6,83-6,72 (m, 3 H, NH_{2}); 3,60 (s, 3 H). ESIMS (MNa^{+}): 524.
Análisis calculado para C_{21}H_{19}N_{5}O_{4}S_{3} \cdot 0,4 EtOAc: C: 50,56; H: 4,17; N: 13,05; S: 17,92. Encontrado: C: 50,50; H: 4,35; N: 12,75; S: 17,88.
Ejemplo A(66) 4-[4'-amino-4-(4-fenil-buta-1,3-dienil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
86
P. de f. 193-195ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 10,92 (s, NH); 7,82 (q, J = 15,92 Hz, 4 H); 7,53 (q, J = 7,42 Hz, 2 H); 7,36 (t, J = 7,41 Hz, 2 H); 7,28-7,06 (m, 2 H, 2 NH_{2}); 6,77 (m, 2 H). ESIMS (MH^{+}): 482.
Ejemplo A(67) 4-(4'-amino-4-benzoil-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-bencenosulfonamida
87
P. de f. 255-260ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 10,99 (s, 1 H); 8,12 (s, 1 H); 8,04-8,02 (m, 2 H); 7,78 (q, J = 12,1 Hz, 4 H); 7,72-7,66 (m, 2 H); 7,60-7,55 (m, 2 H); 7,26 (s, NH_{2}); 7,05 (br, NH_{2}). ESIMS (MNa^{+}): 480; (M-H^{-}): 456.
Ejemplo A(68) 4'-amino-2'-(4-sulfamoil-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-carboxilato de etilo
88
RMN de ^{1}H (DMSO-D_{6}): \delta 11,0 (s, NH); 8,12 (s, H); 7,80 (m, 4 H); 7,32 (s, NH_{2}); 7,08 (m, br, NH_{2}); 4,35 (q, J = 8,7 Hz, 2 H); 1,30 (t, J = 8,7 Hz, 3 H). FABMS calculado para C_{15}H_{16}N_{5}O_{4}S_{3}, (MH^{+}): 426,0364. Encontrado: 426,0356.
Ejemplo A(69) 4-[4'-amino-4-(4-cloro-3-hidroxi-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
89
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,97 (s, 4 H); 7,63 (s, 1 H); 7,58-7,46 (m, 3 H). FABMS (MH^{+}): 480.
Ejemplo A(70) 4-(4'-amino-4-bifenil-4-il]-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino}-bencenosulfonamida
90
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,09-8,00 (m, 1 H); 7,88 (s, 4 H); 7,72-7,63 (m, 3 H); 7,51-7,40 (m, 3 H); 7,38-7,29 (m, 1 H). ESIMS (M-H^{-}): 504.
Análisis calculado para C_{24}H_{19}N_{5}O_{2}S_{3}: C: 57,01; H: 3,79; N: 13,85; S: 19,02. Encontrado: C: 56,87; H: 3,81; N: 13,57; S: 19,16.
Ejemplo A(71) 4-(4'-amino-4-benzoil-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-N-(2-dimetilamino-etil)-bencenosulfonamida
91
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,88 (s, 1 H); 7,84-7,78 (m, 2 H); 7,69-7,47 (m, 5 H); 7,40-7,34 (m, 2 H); 2,63 (t, J = 6,70 Hz, 2 H); 2,06 (t, J = 6,60 Hz, 2 H); 1,84 (s, 6 H). FABMS calculado para C_{23}H_{24}N_{6}O_{3}S_{3}: 529,1150. Encontrado: 529,1158.
Ejemplo A(72) 4-[4-amino-4-(3-amino-benzoil-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
92
RMN de ^{1}H (DMSO): \delta 10,91 (s, 1 H); 7,99 (s, 1 H); 7,86-7,84 (m, 4 H); 7,27 (s, 2 H); 7,23-7,06 (m, 5 H); 6,81-6,90 (m, 1 H); 5,38 (s, 2 H). HRFABMS (MNa^{+}): calculado: 495,0344. Encontrado: 495,0330.
Ejemplo A(73) Éster etílico del ácido 4'-amino-5-bencil-2'-(4-sulfamoil-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-carboxílico
93
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,76 (s, 4 H); 7,18 (m, 5 H); 4,40 (s, 2 H); 4,30 (d, J = 7,8 Hz, 2 H); 1,26 (t, J = 7,8 Hz, 3 H).
Ejemplo B(1) Éster ter-butílico del ácido (3-{5-[4-amino-2-(tritilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-fenil)-carbámico
94
El material de partida para uso en la preparación del compuesto del título se preparó de acuerdo con las siguientes Etapas (i) y (ii).
Etapa (i)
A una solución de 3,15 g (26,7 mmoles; 1,0 equivalente) de 3-amino-benzonitrilo en 10 mL de CH_{2}Cl_{2} se le añadió una solución de 6,4 g (29,4 mmoles; 1,1 equivalentes) de dicarbonato de di-ter-butilo en 10 mL de CH_{2}Cl_{2}, seguido de 320 mg (2,7 mmoles; 0,1 equivalente) de DMAP y 8 mL (80,1 mmoles; 3,0 equivalentes) de piridina. Se produjo desprendimiento de CO_{2} y la reacción se siguió por TLC hasta que se completó. El solvente se separó por bombeo, el residuo se recogió en EtOAc, y se lavó con HCl 1 N y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se eliminó el solvente. El producto en bruto se purificó sobre SiO_{2} (2% de Et_{2}O - CH_{2}Cl_{2} como eluyente) para producir 5,4 g de 3-(t-butoxicarbamoil)benzonitrilo (rendimiento 93%). R_{f} = 0,9 (10% de Et_{2}O - CH_{2}Cl_{2}). RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 1,5 (s, 9 H); 6,6 (s br, 1 H); 7,35 (m, 2 H); 7,55 (m, 1 H); 7,82 (m, 1 H).
Etapa (ii)
A una solución de 2 g (9,17 mmoles, 1,0 equivalente) de 3-(t-butoxi-carbamoil)benzonitrilo en 25 mL de EtOH se le adicionó 0,84 mL (13,76 mmoles, 1,5 equivalentes) de una solución acuosa al 50% de NH_{2}OH. La reacción se colocó en un baño de aceite a 80ºC y se calentó a 85ºC durante 4 horas. El solvente se eliminó al vacío, y el agua residual se eliminó destilando azeotrópicamente el residuo con THF-tolueno. Sin purificación, la hidroxiamidina en bruto (R_{f} = 0,1 en 10% de Et_{2}O -CH_{2}Cl_{2}) se disolvió en 45 mL de DMF y se adicionaron 2,1 mL (12 mmoles; 1,3 equivalentes) de diisopropiletilamina y 110 mg (0,92 mmol; 0,1 equivalente) de DMAP. La mezcla se enfrió a -50ºC, y se agregó gota a gota, bajo argón, una solución de 0,88 mL (11 mmoles; 1,2 equivalentes) de cloruro de cloroacetilo en 15 mL de CH_{2}Cl_{2} (o DMF). La reacción se agitó a -50ºC durante 1 hora, y luego se vertió en EtOAc y se lavó con HCl 1 N y salmuera. La capa orgánica se secó sobre Na_{2}SO_{4} y se eliminó el solvente. El residuo se recogió en 50 mL de dioxano y se colocó en un baño de aceite a 110ºC durante aproximadamente 1 hora. El solvente se eliminó y el residuo se purificó sobre SiO_{2} (Et_{2}O - hexano como eluyente) para producir 2 g de 5-clorometil-3-(3-t-butoxi-carbamoil)fenil)-[1,2,4]-oxadiazol como un sólido blanco (70% de rendimiento total para las tres etapas). R_{f} = 0,9 (10% de Et_{2}O - CH_{2}Cl_{2}). RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 1,5 (s, 9 H); 4,75 (s, 2 H); 6,62 (s br, 1 H); 7,45 (dd, 1 H); 7,62 (d br, 1 H); 7,75 (m, 1 H); 8,05 (m, 1 H).
El compuesto del título se preparó de la siguiente manera: A una solución de isotiocianato de tritilo (5,0 mmoles) y cianamida (5,5 mmoles) disueltos en THF anhidro (10 mL) se le agregó 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno (5,5 mmoles). Después de agitar durante 2 horas, la reacción se diluyó con acetonitrilo (15 mL) y luego se trató con 5-clorometil-3-(3-t-butoxi-carbamoil)fenil)-[1,2,4]-oxadiazol (2,5 mmoles) y 1,8-diazabiciclo [5.4.0]undec-7-eno (2,75 mmoles). El producto se aisló después de 1 hora mediante concentración de la reacción en bruto al vacío, y cromatografía del aceite resultante (elución con gradiente, 20% de EtOAc - hexano a 40% de EtOAc - hexano), proporcionando 1,30 g de producto (84% de rendimiento). RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,79 (1 H, s); 7,60 (2 H, m); 7,24 (16 H, m); 6.91 (1 H, s); 6,48 (1 H, s); 5,77 (2 H, s); 1,52 (3 H, s); 1,46 (6 H, s). ESIMS (MH^{+}): 617
Los siguientes Ejemplos B(2) a B(36) se prepararon de una manera similar a la del Ejemplo B(1).
Ejemplo B(2) 3-(3-ter-butiloxicarboxi-aminofenil)-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
95
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 1,5 (s, 9 H); 3,7 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 7,0 (s br, 2 H); 7,05 (s, 2 H); 7,4 (t, 1 H); 7,75 (d, 2 H); 8,53 (s, 1 H); 8,6 (s br; 1 H); 9,7 (s br, 1 H). ESIMS (MH^{+}): 541; (M-H^{-}): 539.
Análisis calculado para C_{25}H_{28}N_{6}O_{6}S: C: 55,54; H: 5,22; N: 15,55; S: 5,93. Encontrado: C: 56,45; H: 5,67; N: 14,88; S: 5,58.
Ejemplo B(3) 5-[3-(4-ter-butil-fenil)-[1,2,4]oxadiazol-5-il]-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
96
MS (FAB) [m+]/z calculado: 481; encontrado 481.
Análisis calculado: C: 59,86; H: 5,65; N: 14,54; S: 6,66. Encontrado: C: 58,36; H: 5,53; N: 13,95; S: 6,36.
Ejemplo B(4) 5-[3-(3-metoximetoxi-fenil)-[1,2,4]oxadiazol-5-il]-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-di-amina
97
RMN de ^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta 3,41 (s, 3 H); 3,64 (s, 3 H); 3,81 (s, 6 H); 5,29 (s, 2 H); 7,01 (s, 2 H); 7,22 (m, 1 H); 7,34 (br s, 2 H); 7,47 (m, 1 H); 7,70 (m, 2 H); 10,76 (s; 1 H).
Análisis calculado para C_{22}H_{23}N_{5}O_{6}S \cdot H_{2}O: C: 52,48; H: 5,00; N: 13,91. Encontrado: C: 52,47; H: 4,98; N: 13,75.
Ejemplo B(5) 3-(3-(ter-butiloxicarboxiamino)-6-fluor-fenil-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
98
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 1,5 (s, 9 H); 3,7 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 6,6 (s br, 2 H); 6,7 (s br, 1 H); 7,05 (t, 1 H); 7,55 (m br, 1 H); 7,85 (m, 1 H). ESIMS [MH]+: 559.
Ejemplo B(6) 3-(2-metil-5-(ter-butiloxicarboxiamino)-fenil)-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
99
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 1,5 (s, 9 H); 2,55 (s, 3 H); 3,85 (s, 3 H); 3,87 (s, 6 H); 6,65 (s br, 2 H); 7,22 (d br, 1 H); 7,28 (s, 1 H); 7,55 (d br, 1 H); 7,85 (m br, 1 H). ESIMS [MH]^{+}: 555.
Ejemplo B(7) 3-[3-[(3-metoxibenzoil)amino]-6-metil-fenil]-5-[2-[4-(N,N-dimetilaminofenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
100
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 2,55 (s, 3 H); 2,9 (s, 6 H); 3,85 (s, 3 H); 6,75 (m, 2 H); 7,18 (m, 3 H); 7,35-7,6 (m, 6 H); 7,95 (dd, 1 H); 8,35 (d, 1 H); 10,3 (s br; 1 H); 10,4 (s br; 1 H). ESIMS [MH]^{+}: 542; [M+Na]^{+}: 564.
Análisis calculado para C_{28}H_{27}N_{7}O_{3}S: C: 58,22; H: 5,41; N: 16,97; S: 5,55. Encontrado: C: 58,01; H: 5,54; N: 16,13; S: 5,22.
Ejemplo B(8) 3-[3-[(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-carboxi)amino]-6-metil-fenil]-5-[2-(3-hidroximetilfenil)-amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
101
RMN de ^{1}H (MeOD): \delta 1,4 (t, 3 H); 2,3 (s, 3 H); 2,6 (s, 3 H); 4,5 (q, 2 H); 4,65 (s, 2 H); 6,75 (s, 1 H); 7,1 (d br, 1 H); 7,35 (m, 2 H); 7,55 (m, 1 H); 7,65 (m br, 1 H); 7,8 (dd, 1 H); 8,25 (d, 1 H). ESIMS [MH]^{+}: 531.
Ejemplo B(9) 3-[3-[(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-carboxi)amino]-6-metil-fenil]-5-[2-(3-metilpirrolidinofenil)-amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
102
RMN de ^{1}H (MeOD): \delta 1,4 (t, 3 H); 1,8 (m br; 4 H); 2,3 (s, 3 H); 2,6 (s br, 7 H); 3,7 (s, 2 H); 4,5 (q, 2 H); 6,75 (s, 1 H); 7,18 (m, 3 H); 7,35 (m, 2 H); 7,55 (m br, 1 H); 7,65 (s br, 1 H); 7,8 (dd, 1 H); 8,28 (d, 1 H). ESIMS [MH]^{+}: 584.
Ejemplo B(10) 3-[3-[(1-etil-3-metil-1H-pirazol-5-carboxi)amino]-6-metil-fenil]-5-[2-(4-metilpirrolidinofenil)-amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
103
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 1,32 (t, 3 H); 1,7 (m br; 4 H); 2,2 (s, 3 H); 2,6 (s, 3 H); 3,3 (m, 4 H); 3,6 (s, 2 H); 4,45 (q, 2 H); 6,85 (s, 1 H); 7,3 (m, 5 H); 7,6 (d, 2 H); 7,92 (dd, 1 H); 8,28 (d, 1 H); 10,25 (s, 1 H); 10,8 (s br; 1 H). ESIMS [MH]^{+}: 584.
Análisis calculado para C_{30}H_{33}N_{9}O_{2}S: C: 61,73; H: 5,70; N: 21,60; S: 5,49. Encontrado: C: 61,52; H: 5,61; N: 21,52; S: 5,46.
Ejemplo B(11) (R,S)-3-[3-[(2-hidroxi-4-metil-pentanoil)amino]-6-metil-fenil]-5-[2-(3-metilpirrolidinofenil)-amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
104
RMN de ^{1}H (MeOD): \delta 1,0 (dd, 6 H); 1,65 (m, 3 H); 1,9 (m; 4 H); 2,6 (s, 3H); 2,8 (m br, 4 H); 3,85 (s, 2 H); 4,2 (dd, 1 H); 7,13 (d br, 1 H); 7,35 (m, 3 H); 7,56 (m br, 1 H); 7,72 (m br, 2 H); 8,28 (d, 1 H).
Ejemplo B(12) Éster ter-butílico del ácido (3-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4] oxadiazolil}-4-cloro-fenil)-carbámico
105
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,71 (s, 1 H); 8,71 (s, 1 H); 8,20 (m, 1 H); 7,78 (m, 1 H); 7,52 (m, 1 H); 7,06 (s, 2 H); 6,95 (s, 2 H); 3,85 (s, 6 H); 3,72 (s, 3 H); 1,50 (s; 9 H). ESIMS [MH]^{+}: 575 (100%); 577 (30%).
Ejemplo B(13) Éster ter-butílico del ácido (5-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4] oxadiazol-3-il}-2,4-difluor-fenil)-carbámico
106
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,71 (s, 1 H); 8,68 (m, 1 H); 8,24 (m, 1 H); 7,28 (m, 1 H); 7,04 (s, 2 H); 6,99 (s, 2 H); 3,85 (s, 6 H); 3,72 (s, 3 H); 1,51 (s; 9 H). ESIMS [MH]^{+}: 577.
Ejemplo B(14) Éster ter-butílico del ácido (5-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4] oxadiazol-3-il}-4-cloro-2-fluor-fenil)-carbámico
107
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,72 (s, 1 H); 8,68 (m, 1 H); 7,49 (m, 1 H); 7,07 (s, 2 H); 6,97 (s, 2 H); 3,85 (s, 6 H); 3,72 (s, 3 H); 1,51 (s; 9 H). ESIMS [MH]^{+}: 593 (100%); 595 (30%).
Ejemplo B(15) Éster ter-butílico del ácido (5-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4] oxadiazol-3-il}-2,4-dicloro-fenil)-carbámico
108
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,73 (s, 1 H); 8,71 (s, 1 H); 7,96 (s, 1 H); 7,72 (s, 1 H); 7,07 (s, 2 H); 6,98 (s, 2 H); 3,85 (s, 6 H); 3,72 (s, 3 H); 1,52 (s; 9 H). ESIMS [MH]^{+}: 609 (100%); 611 (60%).
Ejemplo B(16) Éster ter-butílico del ácido N-(3-{5-[4-amino-2-(3,4,5-metilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-4-metil-fenil)-carbámico 
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109
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 8,48 (s, 1 H); 8,20 (m, 1 H); 7,69 (m, 1 H); 7,55 (m, 1 H); 7,28 (m, 1 H); 6,77 (s, 2 H); 3,02 (d, 3 H); 2,55 (s, 3 H); 1,55 (s; 9 H). ESIMS [MH]^{+}: 403; (MNa)^{+}:425.
Ejemplo B(17) N-(3-{5-[4-amino-2-(3,4,5-metilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-4-metil-fenil)-3-metoxi-benzamida
110
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 10,33 (s, 1 H); 8,59 (m, 1 H); 8,35 (m, 1 H); 7,95 (m, 1 H); 7,55 (m, 2 H); 7,45 (m, 2 H); 7,36 (m, 1 H); 7,19 (m, 2 H); 3,88 (s, 3 H); 2,91 (m, 3 H); 2,50 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 437; (MNa)^{+}:459.
Ejemplo B(18) N-(5-{5-[4-amino-2-(6-morfolin-4-il-piridin-3-ilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida
111
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 10,62 (s, 1 H); 10,27 (s, 1 H); 8,39 (m, 1 H); 8,33 (m, 1 H); 7,85 (m, 1 H); 7,63 (m, 3 H); 7,48 (m, 1 H); 7,30 (s, 2 H); 7,20 (m, 1 H); 6,88 (m, 1 H); 3,85 (s, 3 H); 3,70 (m, 4 H); 3,42 (m, 4 H). ESIMS [MH]^{+}: 607.
Ejemplo B(19) N-{5-[5-(4-amino-2-isopropilamino-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-2,4-difluor-fenil}-3-metoxi-benzamida 
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112 
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RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,37 (s, 1 H); 8,70 (m, 1 H); 7,65-7,60 (m, 3 H); 7,45 (m, 1 H); 7,34 (m, 1 H); 7,18 (m, 1 H); 6,78 (s, 2 H); 3,96 (m, 1 H); 3,90 (s, 3 H); 1,30 (d, 6 H). ESIMS [MH]^{+}: 487.
Ejemplo B(20) Sal de TFA de N-(5-{5-[4-amino-2-(piridin-3-ilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida 
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113 
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RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona y d_{6}-DMSO): \delta 11,07 (s, 1 H); 9,94 (s, 1 H); 8,98 (m, 1 H); 8,54 (m, 1 H); 8,30 (m, 2H); 7,64 (m, 3 H); 7,48-7,36 (m, 4 H); 7,18 (m, 2 H); 3,89 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 522.
Ejemplo B(21) Éster ter-butílico del ácido {5-[5-(4-amino-2-isopropilamino-tiazol-5-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-2,4-difluor-fenil}-carbámico 
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114 
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RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 8,42 (s, 1 H); 8,18 (m, 1 H); 7,70 (m, 1 H); 7,67 (m, 1 H); 7,26 (m, 1 H); 6,73 (s, 2 H); 3,97 (m, 1 H); 2,54 (s, 3 H); 1,50 (s; 9 H); 1,29 (d, 6 H). ESIMS [MH]^{+}: 431.
Ejemplo B(22) N-{3-[5-(4-amino-2-isopropilamino-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-4-metil-fenil}-3-metoxi-benzamida 
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115 
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RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,59 (s, 1 H); 8,42 (m, 1 H); 8,03 (m, 1 H); 7,57 (m, 2 H); 7,43-7,37 (m, 3 H); 7,14 (m, 1 H); 6,73 (s, 2 H); 3,97 (m, 1 H); 3,88 (s, 3 H); 2,60 (s, 3 H); 1,29 (d, 6 H). ESIMS [MH]^{+}: 465.
Ejemplo B(23) Éster ter-butílico del ácido {3-[5-(4-amino-2-fenil-tiazol-5-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-4-metil-fenil}-carbámico 
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116 
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RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,78 (s, 1 H); 8,44 (s, 1 H); 7,72 (m, 3 H); 7,42 (m, 2 H); 7,39 (m, 1 H); 7,11 (m, 1 H); 6,91 (s, 2 H); 2,57 (s, 3 H); 1,51 (s; 9 H). ESIMS [MH]^{+}: 465.
Ejemplo B(24) Éster ter-butílico del ácido (3-{5-[4-amino-2-(1H-benzoimidazol-5-il)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxa-diazol-3-il}-4-metil-fenil)-carbámico 
\newpage
Ejemplo B(25) Éster ter-butílico del ácido (3-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxa-diazol-3-il}-4-metil-fenil)-carbámico 
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117 
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RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,62 (s, 1 H); 8,23 (m, 1 H); 8,09 (m, 1 H); 7,15-7,05 (m, 2 H); 7,39 (m, 3 H); 6,82 (s, 2 H); 6,91 (s, 2 H); 4,07-3,85 (s, 9 H); 3,76 (s, 3 H); 1,49 (s; 9 H). ESIMS [MH]^{+}: 571.
Ejemplo B(26) {3-[5-(4-amino-2-fenil-tiazol-5-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-4-metil-fenil}-amida del ácido 2-etil-5-metil-2H-pirazol-3-carboxílico 
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118 
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RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 10,75 (s, 1 H); 9,42 (m, 1 H); 8,38 (m, 1 H); 7,99 (m, 1 H); 7,20 (m, 2 H); 7,45-7,35 (m, 3 H); 7,12 (m, 1 H); 6,90 (s, 2 H); 6,74 (s, 1 H); 4,55 (cuarteto, 2 H); 2,62 (s, 3 H); 2,21 (s, 3 H); 1,39 (t, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 500; [MNa]^{+}: 523.
Ejemplo B(27) [3-(5-{4-amino-2-[6-(4-metil-piperazin-1-il)-piridin-3-il]-tiazol-5-il}-[1,2,4]oxadiazol-3-il)-4-metil-fenil]-amida del ácido 2-etil-5-metil-2H-pirazol-3-carboxílico 
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RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,37 (m, 1 H); 8,25 (m, 1 H); 7,89 (m, 1 H); 7,77 (m, 1 H); 7,34 (m, 1 H); 6,87 (m, 1 H); 6,73 (m, 1 H); 4,51 (cuarteto, 2 H); 3,58 (m, 4 H); 2,72 (m, 4 H); 2,58 (s, 3 H); 2,46 (s, 3 H); 2,28 (s, 3 H); 1,42 (t, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 600.
Ejemplo B(28) N-[5-(5-{4-amino-2-[6-(4-metil-piperazin-1-il)-piridin-3-il]-tiazol-5-il}-[1,2,4]oxadiazol-3-il)-2-cloro-4-metil-fenil]-3-metoxibenzamida
120
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona y d_{6}-DMSO): \delta 10,51 (s, 1 H); 9,89 (s, 1 H); 8,47 (m, 2 H); 7,91 (m, 1 H); 7,70-7,51 (m, 3 H); 7,45 (m, 1 H); 7,20-7,14 (m, 3 H); 6,89 (m, 1 H); 3,91 (s, 3 H); 3,58 (m, 4 H); 2,67 (s, 3 H); 2,58 (m, 4 H); 2,36 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 632.
Ejemplo B(29) [3-(5-{4-amino-2-[6-(4-metil-piperazin-1-il)-piridin-3-il]-tiazol-5-il}-[1,2,4]oxadiazol-3-il)-4-metil-fenil]-amida del ácido 2-hidroxi-4-metil-pentanoico
121
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,47 (m, 1 H); 8,28 (m, 1 H); 8,01 (m, 1 H); 7,68 (m, 1 H); 7,32 (m, 1 H); 7,00 (m, 1 H); 4,20 (m, 1 H); 3,41-3,31 (m, 7 H); 2,99 (m, 4 H); 2,59 (s, 3 H); 1,93 (m, 1 H); 1,65 (m, 2 H); 1,10 (d, 6 H). ESIMS [MH]^{+}: 578.
Ejemplo B(30) (3-{5-[4-amino-2-(4-hidroxi-fenil)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-4-metil-fenil)-amida del ácido 2-etil-5-metil-2H-pirazol-3-carboxílico
122
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,77 (s, 1 H); 9,43 (s, 1 H); 8,36 (m, 1 H); 7,98 (m, 1 H); 7,66 (m, 2 H); 7,41-7,36 (m, 3 H); 6,90 (s, 2 H); 6,75 (s, 1 H); 4,64 (m, 2 H); 4,54 (cuarteto, 2 H); 4,14 (m, 1 H); 2,61 (s, 3 H); 2,20 (s, 3 H); 1,39 (t, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 531.
Ejemplo B(31) [3-(5-{4-amino-2-[4-(4-metil-piperazin-1-il)-fenil]-tiazol-5-il}-[1,2,4]oxadiazol-3-il)-4-metil-fenil]-amida del ácido (Z)-2-metil-but-2-enoico
123
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 10,55 (s, 1 H); 9,92 (s, 1 H); 8,60 (m, 1 H); 8,24 (m, 1 H); 7,81 (m, 2 H); 7,31 (m, 1 H); 7,22 (s, 2 H); 6,87 (m, 1 H); 5,61 (m, 1 H); 3,45 (m, 4 H); 2,50 (s, 3 H); 2,40 (m, 4 H); 2,22 (s, 3 H); 1,92 (s, 3 H); 1,72 (d, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 546.
Ejemplo B(32) (3-{5-[4-amino-2-(3-pirrolidin-1-ilmetil-fenil)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-4-metil-fenil)-amida del ácido (Z)-2-metil-but-2-enoico
124
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,31 (m, 1 H); 7,80 (m, 2 H); 7,68 (m, 1 H); 7,50 (m, 2 H); 7,32 (m, 1 H); 5,70 (m, 1 H); 4,33 (s, 2 H); 2,59 (s, 3 H); 2,16 (s, 3 H); 2,10 (m, 4 H); 1,99 (m, 4 H); 1,80 (m, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 530.
Ejemplo B(33) Éster ter-butílico del ácido (3-{5-[4-amino-2-(3-pirrolidin-1-ilmetil-fenil)-tiazol-5-il]-[1,2,4] oxadiazol-3-il}-4-metil-fenil)-carbámico
125
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 10,48 (s, 1 H); 8,61 (m, 1 H); 8,47 (m, 1 H); 8,23 (m, 1 H); 7,74 (m, 1 H); 7,63 (m, 1 H); 7,38-7,28 (m, 5 H); 4,33 (s, 2 H); 3,47 (m, 4 H); 2,80 (m, 4 H); 2,58 (s, 3 H); 1,51 (s, 9 H). ESIMS [MH]^{+}: 548.
Ejemplo B(34) Éster iso-butílico del ácido (3-{5-[4-amino-2-(3-pirrolidin-1-ilmetil-fenil)-tiazol-5-il]-[1,2,4] oxadiazol-3-il}-4-metil-fenil)-carbámico
126
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 10,46 (s, 1 H); 8,75 (m, 1 H); 8,52 (m, 1 H); 8,26 (m, 1 H); 7,74 (m, 1 H); 7,63 (m, 1 H); 7,36-7,27 (m, 3 H); 7,22 (s, 2 H); 4,29 (s, 2 H); 3,92 (d, 2 H); 3,22 (m, 4 H); 3,09 (m, 4 H); 2,57 (s, 3 H); 1,98 (m, 1 H); 0,97 (d, 6 H). ESIMS [MH]^{+}: 548.
127
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,79 (s, 1 H); 8,45 (s, 1 H); 8,11-8,15 (m, 2 H); 7,71 (m, 1 H); 7,64 (m, 1 H); 7,39 (m, 1 H); 7,29 (m, 1 H); 6,79 (s, 2 H); 2,57 (s, 3 H); 1,51 (s, 9 H). ESIMS [MH]^{+}: 505.
Ejemplo B(35) 3-[3-[(3-metoxibenzoil)amino]-6-metil-fenil]-5-(2-fenilamino)-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxa-diazol
128
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 2,55 (s, 3 H); 3,85 (s, 3 H); 7,1 (m, 1 H); 7,18 (m, 1 H); 7,2 (s br, 2 H); 7,4 (m, 2 H); 7,45 (m, 2 H); 7,55 (m, 2 H); 7,7 (dd, 2 H); 7,95 (dd, 1 H); 8,35 (d, 1 H); 10,35 (s br; 1 H); 10,85 (s br; 1 H). ESIMS [MH]^{+}: 499.
Análisis calculado para C_{26}H_{22}N_{6}O_{3}S: C: 62,64; H: 4,45; N: 16,86; S: 6,43. Encontrado: C: 62,41; H: 4,54; N: 16,72; S: 6,30.
Ejemplo B(36) 3-[3-[(3-metoxibenzoil)amino]-6-metil-fenil]-5-[2-[3-amino-6-(4-morfolinil)-piridinil]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxa-diazol
129
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 2,55 (s, 3 H); 3,4 (m, 4 H); 3,7 (m, 4 H); 3,85 (s, 3 H); 6,9 (d, 1 H); 7,15 (m, 1 H); 7,22 (s br, 1 H); 7,35 (d, 1 H); 7,45 (m, 1 H); 7,55 (m, 2 H); 7,85 (dd, 1 H); 7,95 (dd, 1 H); 8,4 (dd, 2 H); 9,75 (s br, 1 H); 10,35 (s br; 1 H); 10,7 (s br; 1 H). ESIMS [MH]^{+}: 585.
Ejemplo B(37) 5-{3-[3-(5-metil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-fenil-[1,2,4]-oxadiazol-5-il}-N2-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
130
(A) a 1 (6,0 g; 37,5 mmoles) en 120 mL de EtOH se le agregó gota a gota hidrazina (6,24 mL; 200 mmoles, 5,3 equivalentes). La solución resultante se colocó en un baño de aceite a 90ºC. La reacción se dejó bajo agitación hasta que no se detectó más 1 por medio de TLC (\sim 2 h). La reacción se dejó enfriar, el solvente se redujo a \sim 50 mL mediante evaporación rotativa, y 2 precipitó como un sólido blanco. El sólido se recogió por filtración. El volumen del filtrado se redujo nuevamente a \sim 20 mL y se diluyó con éter (10 mL) permitiendo que se recuperara una segunda tanda de 2. Las dos tandas se combinaron después de que la RMN de ^{1}H mostrara que las dos tenían la misma pureza (rendimiento: 5,07 g; 83%). R_{f} de 1 = 0,8 (25% de CH_{2}Cl_{2} - EtOAc); R_{f} de 2 = 0,2 (25% de CH_{2}Cl_{2} - EtOAc)
RMN de ^{1}H de 2 (d_{6}-DMSO): \delta 9,98 (s, 1 H); 8,21 (m, 1 H); 8,14 (m, 1 H); 8,00 (m, 1 H); 7,71 (m, 1 H); 4,60 (s, 2 H).
131
(B) A una solución de acetamidina \cdot HCl (2,3 g; 24,6 mmoles; 1 equivalente) en 20 mL de etanol anhidro se le agregó NaOEt (24,6 mL; 1 M en EtOH, 1 equivalente) bajo argón. Después de 30 minutos la solución turbia se filtró a través de un embudo fritado rellenado con celite. A la solución transparente resultante se le agregó 2. Tras la adición de 2 la reacción se volvió amarilla y turbia. La solución se aclara después de \sim 5 minutos de agitación y luego se forma un precipitado pesado. La reacción se deja bajo agitación hasta que no se detecta más 2 por medio de TLC (3 h). R_{f} de 2 = 0,75 (30% de EtOH : 30% de CHCl_{3} : 40% de EtOAc); R_{f} del intermediario sin ciclar = 0,2 (30% de EtOH : 30% de CHCl_{3} : 40% de EtOAc). La reacción se agitó en hielo durante 30 minutos, y luego se filtró para dar un sólido blanco (2,125 g; 85%). 2,07 g de este intermediario se disolvieron en 10 mL de xilenos y 0,52 mL de 1-octanol y se colocaron en un baño de aceite a 150ºC. Después de \sim 15 horas se observó mediante TLC conversión completa en 3 y habían precipitado cristales blancos. La reacción se colocó en un baño de hielo - MeOH por 15 minutos y luego se filtró. Los cristales se lavaron con xilenos fríos y entonces se secaron para proporcionar 1,636 g de 3 (80%). R_{f} de 3 = 0,6 (30% de EtOH : 30% de CHCl_{3} : 40% de EtOAc).
RMN de ^{1}H de 3 (d_{6}-DMSO): \delta 13,89 (s, 1 H); 8,27 (m, 2 H); 7,86 (m, 1 H); 7,67 (m, 1 H); 2,43 (s, 3 H).
132
El compuesto 3 se hizo reaccionar posteriormente de una manera similar al procedimiento B(1) para formar el Ejemplo B(37).
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 8,85 (m, 1 H); 8,26 (m, 1 H); 8,15 (m, 1 H); 7,63 (m, 1 H); 7,09 (s, 2 H); 3,86 (s, 6 H); 3,72 (s, 3 H); 2,49 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 507.
Los Ejemplos (B(38) y B(39) se formaron utilizando un procedimiento similar al descripto en B(37).
Ejemplo B(38) 5-{3-[3-(5-isopropil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-fenil-[1,2,4]-oxadiazol-5-il}-N2-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
133
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 13,79 (s, 1 H); 10,78 (s, 1 H); 8,63 (m, 1 H); 8,15 (m, 2 H); 7,63 (m, 1 H); 7,36 (s, 2 H); 7,02 (s, 2 H); 3,81 (s, 6 H); 3,72 (s, 3 H); 3,13 (septeto, 1 H); 1,33 (d, 6 H). ESIMS [MH]^{+}: 535.
Ejemplo B(39) 5-(3-{5-[5-isobutil-2H-[1,2,4]triazol-3-il)-fenil-[1,2,4]-oxadiazol-5-il)-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
134
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 12,75 (s, 1 H); 9,68 (s, 1 H); 8,81 (m, 1 H); 8,23 (m, 1 H); 8,11 (m, 1 H); 7,58 (m, 1 H); 7,02 (s, 2 H); 6,93 (s, 2 H); 3,77 (s, 6 H); 3,67 (s, 3 H); 2,51 (d, 2 H); 2,01 (m, 1 H); 0,98 (d, 6 H). ESIMS [MH]^{+}: 549.
Ejemplo B(40)
135
Ejemplo B(41)
136
Ejemplo B(42)
137
Ejemplo B(43)
138
Ejemplo C(1) 4-(3-aminofenil)-N^{2'}-(3,4,5-trimetoxifenil)-[2,5']bitiazolil-2',4'-diamina
139
Una solución de (3-nitrofenil)-N^{2'}-trimetoxifenil)-[2,5']bitiazolil-2',4'-diamina (1 mmol), preparada según el Ejemplo A(1), y cloruro estannoso (3 mmoles) en DMF (3 mL), bajo una atmósfera de argón, se agitó a 50ºC (temperatura interna) durante 2,5 horas. La solución marrón oscuro resultante se diluyó con acetato de etilo (10 mL) y NaHCO_{3} (10 mL), causando la formación de un precipitado, que se eliminó por medio de filtración y se enjuagó con 50% de DMF/acetato de etilo (20 mL) hasta que el filtrado era casi incoloro. El filtrado se lavó entonces con NaHCO_{3}(30 mL), salmuera (30 mL), se secó sobre MgSO_{4}, se filtró, se eliminó el solvente, y se purificó mediante cromatografía flash (elusión de gradiente, 10% de acetona/CH_{2}Cl_{2} a 40% de acetona/CH_{2}Cl_{2} ) para dar 4-(3-aminofenil)-N^{2'}-(3,4,5-trimetoxifenil)-[2,5']bitiazolil-2',4'-diamina.
P. de f. 205-210ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 10,35 (br d, NH_{2}); 7,41 (s, 1 H); 7,18 (s, 1 H); 7,07 (d, J = 4,82 Hz, 1 H); 7,00 (s, 2 H); 6,95 (s, 1 H); 6,57-6,52 (m, 1 H); 5,13 (br d, NH_{2}); 3,80 (s, 6 H); 3,65 (s, 3 H). FABMS (MH^{+}): 456.
Análisis calculado para C_{21}H_{21}N_{5}O_{3}S_{2}: C: 55,37; H: 4,65; N: 15,37; S: 14,08. Encontrado: C: 55,59; H: 4,72; N: 15,11; S: 13,92.
Ejemplo C(2) 3-[3-aminofenil)-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol 
\vskip1.000000\baselineskip
140 
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución de 267 mg (0,49 mmol) de 3-(3-t-butiloxicarboxi-aminofenil)-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol (preparado de acuerdo con el Ejemplo B(2)) en 3 mL de ácido trifluoracético al 50% en diclorometano se agitó durante 60 minutos a temperatura ambiente y luego se volcó sobre hielo. Se agregó gota a gota NaOH 3 N hasta que la solución se hizo alcalina, y la mezcla se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se lavó con NaHCO_{3} y salmuera, y se secó sobre Na_{2}SO_{4}. El solvente se eliminó para dar 204 mg (95% de rendimiento) del compuesto del título como un sólido amarillo claro.
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 3,6 (s, 3 H); 3,75 (s, 6 H); 4,8 (s br, 2 H); 6,75 (m, 1 H); 6,85 (s br, 2 H); 6,95 (s, 2 H); 7,1 (t, 1 H); 7,25 (m, 1 H); 7,35 (m, 1 H); 9,6 (s br, 1 H). ESIMS (MH^{+}): 441; (M-H^{-}): 439.
Análisis calculado para C_{20}H_{20}N_{6}O_{4}S: C: 54,53; H: 4,58; N: 19,08; S: 7,28. Encontrado: C: 54,79; H: 4,59; N: 18,81; S: 7,09.
Ejemplo C(3) 4-[4'-amino-4-(3-aminofenil)]-[bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida 
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141 
\vskip1.000000\baselineskip
De una manera similar a la descripta anteriormente para los Ejemplos C(1) y C(2), se preparó el compuesto del título.
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,88 (s, 4 H); 7,42 (s, 1 H); 7,40-7,29 (m, 2 H); 7,25-7,18 (m, 1 H); 6,80-6,72 (m, 1 H). FABMS (MH^{+}): 445.
Ejemplo C(4) 3-(3-amino-6-fluorfenil)-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
142
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}-MeOD 10 : 1): \delta 3,85 (s, 3 H); 3,95 (s, 6 H); 6,75 (m, 2 H); 7,1 (m, 2 H); 7,7 (s br, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 459.
Ejemplo C(5) 3-(2-fluor-4-metoxi-5-aminofenil)-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
143
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 3,6 (s, 3 H); 3,8 (s, 6 H); 4,0 (s, 3 H); 6,95 (s br, 2 H); 7,2 (m, 3 H); 8,65 (d, 1 H); 9,05 (s br, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 489.
Ejemplo C(6) 3-(3-amino-6-metil-fenil)-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
144
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 2,05 (s, 3 H); 3,8 (s, 9 H); 6,2 (s br, 2 H); 6,6 (s br, 2 H); 6,8 (m br, 1 H); 7,05 (m br, 1 H); 7,45 (s br, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 455.
Ejemplo C(7) 5-[3-(5-amino-2-cloro-fenil)-[1,2,4]-oxadiazol-5-il]-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
145
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,58 (s, 1 H); 7,13 (m, 2 H); 6,92 (s, 2 H); 6,78 (s, 2 H); 6,70 (m, 1 H); 4,91 (s, 2 H); 3,78 (s, 6 H); 3,58 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 475 (100%); 477 (30%).
Ejemplo C(8) 5-[3-(5-amino-2,4-difluor-fenil)-[1,2,4]-oxadiazol-5-il]-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
146
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,72 (s, 1 H); 7,63 (m, 1 H); 7,09 (m, 1 H); 7,05 (s, 2 H); 6,94 (s, 2 H); 4,83 (s, 2 H); 3,85 (s, 6 H); 3,72 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 477.
Ejemplo C(9) 5-[3-(5-amino-2-cloro-4-fluor-fenil)-[1,2,4]-oxadiazol-5-il]-N-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
147
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 10,76 (s, 1 H); 7,36 (m, 2 H); 7,18 (s, 2 H); 6,93 (s, 2 H); 5,60 (s, 2 H); 3,86 (s, 6 H); 3,73 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 493 (100%); 495 (30%).
Ejemplo D(1) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-acetamida
148
Se agregó anhídrido acético (21,3 \muL; 02250 mmol) a una solución de 4-(3-amino-fenil)-N^{2'}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-[2,5']bitiazolil-4-il-2',4'-diamina (50,0 mg; 0,1125 mmol), preparado como se describió en el Ejemplo C(1), disuelto en piridina (28,5 \muL; 0,352 mmol), DMF (70 \muL), y THF (700 \muL) a -15ºC (temperatura de baño). Después de 30 minutos, la reacción se apagó con MeOH (0,5 mL), se concentró, y se purificó mediante HPLC de fase inversa de C-18 preparativa (elución de gradiente, 95% de H_{2}O/0,1% de TFA/CH_{3}CN a 5% de H_{2}O/0,1% de TFA/CH_{3}CN), proporcionando 46 mg (82% de rendimiento) de N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-acetamida.
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,97 (s, 1 H); 7,56 (d, J = 7,7 Hz, 1 H); 7,44 (d, J = 7,8 Hz, 1 H); 7,30 (t, J = 7,6 Hz, 1 H); 7,27 (s, 1 H); 7,19 (s, 1 H); 6,55 (s, 2 H); 5,90-6,10 (bs, 1 H); 3,82 (s, 6 H); 3,78 (s, 3 H); 2,14 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 498.
Análisis calculado para C_{23}H_{23}N_{5}O_{4}S_{2} \cdot (0,5 H_{2}O; 0,5 acetona): C: 54,93; H: 5,08; N: 13,08; S: 11,97. Encontrado: C: 54,73; H: 4,80; N: 13,21; S: 11,98.
De una manera análoga a aquélla descripta para el Ejemplo D(1), se prepararon los siguientes Ejemplos D(2) hasta D(57).
Ejemplo D(2) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-C-fenil-metano-sulfonamida
149
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,61 (s, 1 H); 7,55 (d, J = 7,9 Hz, 1 H); 7,32 (d, J = 7,9 Hz, 1 H); 7,26-7,16 (m, 5 H); 7,03 (s, 1 H); 7,00 (s, 2 H); 6,51 (s, 2 H); 6,42 (s, 1 H); 5,90-6,00 (bs, 2 H); 4,26 (s, 2 H); 3,78 (s, 6 H); 3,74 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 610.
Análisis calculado para C_{28}H_{27}N_{5}O_{5}S_{3} \cdot 0,3 H_{2}O: C: 54,67; H: 4,52; N: 11,39. Encontrado: C: 54,70; H: 4,52; N: 11,04.
Ejemplo D(3) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-metanosulfonamida
150
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,81 (s, 1 H); 7,69 (d, J = 7,8 Hz, 1 H); 7,45 (d, J = 7,9 Hz, 1 H); 7,26 (s, 1 H); 7,24 (s, 1 H); 6,73 (bs, 1 H); 6,70 (s, 2 H); 3,92 (s, 6 H); 3,89 (s, 3 H); 3,12 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 534.
Análisis calculado para C_{22}H_{23}N_{5}O_{5}S_{3} \cdot 0,9 TFA: C: 44,92; H: 3,79; N: 11,01; S: 15,12. Encontrado: C: 44,94; H: 3,87; N: 11,12.
Ejemplo D(4) Éster fenílico del ácido {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-carbámico
151
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 8,04 (s, 1 H); 7,64 (t, J = 7,2 Hz, 1 H); 7,46-7,38 (m, 5 H); 7,28-7,18 (m, 4 H); 7,14 (s, 1 H); 7,05 (s, 1 H); 6,64 (s, 2 H); 6,09 (bs, 1 H); 3,91 (s, 6 H); 3,87 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 576.
Análisis calculado para C_{28}H_{25}N_{5}O_{5}S_{2} \cdot 0,3 DMF: C: 58,08; H: 4,57; N: 12,42; S: 10,73. Encontrado: C: 58,33; H: 4,39; N: 11,53; S: 10,68.
Ejemplo D(5) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-2-fenil-acetamida
152
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,89 (s, 1 H); 7,64 (d, J = 7,4 Hz, 1 H); 7,47-7,32 (m, 7 H); 7,14 (s, 1 H); 7,10 (s, 1 H); 6,64 (s, 2 H); 6,06 (bs, 2 H); 3,91 (s, 6 H); 3,87 (s, 3 H); 3,79 (s, 2 H). ESIMS (MH^{+}): 574.
Análisis calculado para C_{29}H_{27}N_{5}O_{4}S_{2}: C: 60,71; H: 4,74; N: 12,21; S: 1,18. Encontrado: C: 60,88; H: 4,78; N: 12,00; S: 11,14.
Ejemplo D(6) Éster metílico del ácido {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-carbámico 
\vskip1.000000\baselineskip
153
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 8,14 (s, 1 H); 7,82 (d, J = 6,9 Hz, 1 H); 7,59 (m, 3 H); 7,34 (s, 1 H); 6,90 (s, 1 H); 6,85 (s, 2 H); 6,40-6,20 (bs, 1 H); 4,12 (s, 6 H); 3,78 (s, 3 H); 2,14 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 514.
Análisis calculado para C_{23}H_{23}N_{5}O_{5}S_{2} \cdot 0,35 H_{2}O: C: 53,13; H: 4,60; N: 13,47; S: 12,34. Encontrado: C: 53,10; H: 4,58; N: 13,34; S: 12,11.
Ejemplo D(7) 1-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-3-metil-urea
154
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 8,63 (bs, 1 H); 7,90 (s, 1 H); 7,61 (s, 1 H); 7,49 (d, J = 8,0 Hz, 1 H); 7,39 (d, J = 8,2 Hz, 1 H); 7,31 (s, 1 H); 7,07 (s, 1 H); 6,75 (s, 2 H); 6,00-6,10 (bs, 1 H); 5,35 (bs, 1 H); 3,87 (s, 6 H); 3,81 (s, 3 H); 2,80 (d, J = 4,3 Hz, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 513.
Análisis calculado para C_{23}H_{24}N_{6}O_{4}S_{2} \cdot 0,4 H_{2}O: C: 53,14; H: 4,81; N: 16,17; S: 12,84. Encontrado: C: 53,15; H: 4,75; N: 16,12; S: 12,46.
Ejemplo D(8) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-propionamida
155
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 8,27 (s, 1 H); 7,85 (d, J = 7,5 Hz, 1 H); 7,74 (d, J = 8,0 Hz, 1 H); 7,59 (t, J = 7,9 Hz, 1 H); 7,41 (s, 1 H); 7,33 (s, 1 H); 6,84 (s, 2 H); 6,20-6,35 (bs, 1 H); 4,11 (s, 6 H); 4,07 (s, 3 H); 2,64 (q, J = 7,6 Hz, 2 H); 1,50 (t, J = 7,5 Hz, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 512.
Análisis calculado para C_{24}H_{25}N_{5}O_{4}S_{2}: C: 56,34; H: 4,93; N: 13,69; S: 12,54. Encontrado: C: 56,22; H: 5,01; N: 13,48; S: 12,73.
Ejemplo D(9) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-isobutiramida
156
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 9,16 (s, 1 H); 8,54 (s, 1 H); 8,06 (s, 1 H); 7,57 (d, J = 8,1 Hz, 1 H); 7,53 (d, J = 7,8 Hz, 1 H); 7,27 (t, J = 8,0 Hz, 1 H); 7,03 (s, 1 H); 6,77 (s, 2 H); 6,00-6,20 (bs, 1 H); 3,81 (s, 6 H); 3,75 (s, 3 H); 2,18 (m, 3 H); 0,95 (d, J = 6,3 Hz, 6 H). ESIMS (MH^{+}): 540.
Análisis calculado para C_{26}H_{29}N_{5}O_{4}S_{2}\cdot 0,5 H_{2}O: C: 56,91; H: 5,51; N: 12,76; S: 11,69. Encontrado: C: 57,33; H: 5,57; N: 12,28; S: 11,64.
Ejemplo D(10) Éster isopropílico del ácido {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-carbámico
157
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,93 (s, 1 H); 7,60 (d, J = 6,9 Hz, 1 H); 7,40 (m, 3 H); 7,13 (s, 1 H); 6,65 (s, 2 H); 6,62 (s, 1 H); 6,08 (bs, 2 H); 5,06 (m, J = 6,4 Hz, 1 H); 3,92 (s, 6 H); 3,87 (s, 3 H); 1,33 (d, J = 6,4 Hz, 6 H). ESIMS (MH^{+}): 542.
Análisis calculado para C_{25}H_{27}N_{5}O_{5}S_{2}: C: 55,44; H: 5,02; N: 12,93; S: 11,84. Encontrado: C: 55,15; H: 5,14; N: 12,46; S: 11,75.
Ejemplo D(11) {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-amida del ácido 4-cloro-piridin-2-carboxílico
158
HRFABMS: calculado para C_{27}H_{23}ClN_{6}O_{4}S_{2} (MH^{+}): 594,0911. Encontrado: 594,0927.
Análisis calculado para C_{27}H_{23}ClN_{6}O_{4}S_{2}: C: 54,94; H: 3,90; N: 14,12; S: 10,78. Encontrado: C: 54,43; H: 3,87; N: 14,01; S: 10,92.
Ejemplo D(12) Éster bencílico del ácido {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-carbámico
159
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,93 (s, 1 H); 7,61 (d, J = 7,0 Hz, 1 H); 7,40 (m, 7 H); 7,12 (s, 1 H); 6,76 (s, 1 H); 6,64 (s, 2 H); 6,07 (bs, 2 H); 5,25 (s, 2 H); 3,91 (s, 6 H); 3,87 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 590.
Análisis calculado para C_{29}H_{27}N_{5}O_{5}S_{2}: C: 59,07; H: 4,62; N: 11,88; S: 10,88. Encontrado: C: 58,84; H: 4,64; N: 11,71; S: 11,07.
Ejemplo D(13) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-2,2,2-trifluor-acetamida
160
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 8,14 (s, 1 H); 7,96 (bs, 1 H); 7,79 (d, J = 6,4 Hz, 1 H); 7,48 (d, J = 8,0 Hz, 1 H); 7,17 (s, 1 H); 6,65 (s, 2 H); 6,05 (bs, 2 H); 3,92 (s, 6 H); 3,87 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 552.
HRMS (FAB), m/z calculado para C_{23}H_{20}F_{3}N_{5}O_{4}S_{2} (MH^{+}): 552,0987. Encontrado: 552,0981
Ejemplo D(14) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-2,2-difluor-acetamida
161
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 8,15 (s, 1 H); 7,98 (bs, 1 H); 7,75 (d, J = 7,5 Hz, 1 H); 7,61 (d, J = 8,1 Hz, 1 H); 7,46 (t, J = 8,0 Hz, 1 H); 7,17 (s, 1 H); 6,66 (s, 2 H); 6,08 (bs, 2 H); 3,93 (s, 6 H); 3,89 (s, 3 H); 3,52 (s, 1 H). ESIMS (MH^{+}): 534.
HRMS (FAB), m/z calculado para C_{23}H_{21}F_{2}N_{5}O_{4}S_{2} (M+Cs^{+}): 666,0057. Encontrado: 666,0032
Ejemplo D(15) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-2-fenoxi-acetamida
162
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 8,27 (s, 1 H); 8,06 (s, 1 H); 7,63 (d, J = 7,8 Hz, 1 H); 7,51 (d, J = 8,0 Hz, 1 H); 7,32 (m, 4 H); 7,07 (s, 1 H); 6,56 (s, 2 H); 6,01 (bs, 2 H); 4,58 (s, 2 H); 3,82 (s, 6 H); 3,78 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 590.
Análisis calculado para C_{29}H_{27}N_{5}O_{5}S_{2}\cdot (0,7 H_{2}O; 0,2 EtOAc): C: 57,73; H: 4,88; N: 11,30; S: 15,74. Encontrado: C: 57,97; H: 4,59; N: 11,08; S: 10,33.
Ejemplo D(16) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-3-fenil-propionamida
163
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,97 (s, 1 H); 7,63 (d, J = 8,0 Hz, 1 H); 7,46 (d, J = 7,9 Hz, 1 H); 7,40 (m, 3 H); 7,12 (s, 1 H); 7,06 (s, 1 H); 6,64 (s, 2 H); 6,07 (bs, 1 H); 3,91 (s, 6 H); 3,87 (s, 3 H); 3,11 (t, J = 7,5 Hz, 2 H); 2,72 (t, J = 7,5 Hz, 2 H). ESIMS (MH^{+}): 588.
Análisis calculado para C_{30}H_{29}N_{5}O_{5}S_{2}: C: 61,31; H: 4,97; N: 11,92; S: 10,91. Encontrado: C: 60,67; H: 5,09; N: 11,77; S: 10,69.
Ejemplo D(17) Éster bencílico del ácido {3-[4'-amino-2'-(2,4-dimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-carbámico
164
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,65 (s, 1 H); 7,48 (d, J = 9,4 Hz, 1 H); 7,37 (d, J = 7,3 Hz, 1 H); 7,16 (m, 7 H); 6,85 (s, 1 H); 6,54 (s, 1 H); 6,31 (m, 3 H); 6,00-5,70 (bs, 2 H); 5,00 (s, 2 H); 3,65 (s, 3 H); 3,60 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 560.
Análisis calculado para C_{28}H_{25}N_{5}O_{4}S_{2}\cdot 0,7 H_{2}O: C: 59,14; H: 4,61; N: 12,32; S: 11,28. Encontrado: C: 59,51; H: 4,41; N: 11,82; S: 10,90.
Ejemplo D(18) Éster bencílico del ácido {3-[4'-amino-2'-(2,5-dimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-carbámico
165
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,91 (s, 1 H); 7,65 (d, J = 9,4 Hz, 1 H); 7,37 (d, J = 7,3 Hz, 1 H); 7,16 (m, 7 H); 6,85 (s, 1 H); 6,54 (s, 1 H); 6,31 (m, 3 H); 6,00-5,70 (bs, 2 H); 5,00 (s, 2 H); 3,65 (s, 3 H); 3,60 (s, 3 H). ESIMS (MH^{+}): 560.
Análisis calculado para C_{28}H_{25}N_{5}O_{4}S_{2}: C: 60,09; H: 4,50; N: 12,51; S: 11,46. Encontrado: C: 60,52; H: 4,64; N: 12,00; S: 10,96.
Ejemplo D(19) Éster bencílico del ácido {3-[4'-amino-2'-(4-fenoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-carbámico
166
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,90 (s, 1 H); 7,61 (d, J = 7,4 Hz, 1 H); 7,46 (m, 10 H); 7,116 (m, 8 H); 6,81 (s, 1 H); 6,08 (bs, 2 H); 5,25 (s, 2 H). ESIMS (MH^{+}): 592.
Análisis calculado para C_{32}H_{25}N_{5}O_{3}S_{2}: C: 64,96; H: 4,26; N: 11,84; S: 10,84. Encontrado: C: 64,68; H: 4,36; N: 11,58; S: 10,65.
Ejemplo D(20) Éster bencílico del ácido [3-(4'-amino-2'-fenilamino-[2,5']bitiazolil-4-il)-fenil]-carbámico
167
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,81 (s, 1 H); 7,55 (d, J = 7,3 Hz, 1 H); 7,30 (m, 12 H); 7,10 (m, 1 H); 7,02 (s, 1 H); 6,68 (s, 1 H); 6,10-5,90 (bs, 2 H); 5,15 (s, 2 H). ESIMS (MH^{+}): 500.
HRMS (FAB), m/z calculado para C_{26}H_{21}N_{5}O_{2}S_{2} (MH^{+}): 500,1215. Encontrado: 500,1232
Ejemplo D(21) {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-amida del ácido benzo-furano-2-carboxílico
168
ESMS (MH^{+}): 600.
Análisis calculado para C_{30}H_{25}N_{5}O_{5}S_{2}\cdot 0,75 H_{2}O: C: 58,76; H: 4,36; N: 11,42; S: 10,46. Encontrado: C: 58,74; H: 4,08; N: 11,46; S: 10,41.
Ejemplo D(22) Éster naftalen-1-ílico del ácido {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-carbámico
169
ESMS (MH^{+}): 626.
Análisis calculado para C_{32}H_{27}N_{5}O_{5}S_{2}\cdot 0,7 H_{2}O: C: 60,21; H: 4,48; N: 10,97; S: 10,05. Encontrado: C: 60,24; H: 4,31; N: 10,72; S: 10,03.
Ejemplo D(23) Éster 1-R-fenil-etílico del ácido {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-carbámico
170
ESMS (MH^{+}): 604.
Análisis calculado para C_{30}H_{29}N_{5}O_{5}S_{2}\cdot 0,4 H_{2}O: C: 58,98; H: 4,92; N: 11,46; S: 10,50. Encontrado: C: 58,93; H: 4,90; N: 11,41; S: 10,27.
Ejemplo D(24) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-benzamida
171
ESMS (MH^{+}): 560.
Análisis calculado para C_{28}H_{25}N_{5}O_{4}S_{2}: C: 60,09; H: 4,50; N: 12,51; S: 11,46. Encontrado: C: 60,07; H: 4,54; N: 12,45; S: 11,42.
Ejemplo D(25) Éster bencílico del ácido {3-[4'-amino-2'-(4-sulfamoil-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-carbámico
172
ESMS (MH^{+}): 579.
Ejemplo D(26) Éster metílico del ácido 4-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenilcarbamoiloximetil}-benzoico
173
ESMS (MH^{+}): 648.
Análisis calculado para C_{31}H_{29}N_{5}O_{7}S_{2}: C: 57,48; H: 4,51; N: 10,81; S: 9,90. Encontrado: C: 57,66; H: 4,52; N: 10,64; S: 10,08.
Ejemplo D(27) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-3-isopropil-benzamida
174
ESMS (MH^{+}): 602.
Análisis calculado para C_{31}H_{31}N_{5}O_{4}S_{2}: C: 61,88; H: 5,19; N: 11,64; S: 10,66. Encontrado: C: 61,45; H: 5,38; N: 11,30; S: 10,38.
Ejemplo D(28) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-4-fluor-benzamida
175
ESMS (MH^{+}): 578.
Análisis calculado para C_{28}H_{24}FN_{5}O_{4}S_{2}\cdot 0,3 H_{2}O: C: 57,68; H: 4,25; N: 12,01; S: 11,00. Encontrado: C: 57,64; H: 4,32; N: 11,79; S: 10,97.
Ejemplo D(29) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-3-bromo-benzamida
176
ESMS (MH^{+}): 638/640.
Análisis calculado para C_{28}H_{24}BrN_{5}O_{4}S_{2}: C: 52,67; H: 3,79; N: 10,97; S: 10,04. Encontrado: C: 52,49; H: 3,99; N: 10,36; S: 9,71.
Ejemplo D(30) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-4-cloro-3-metil-benzamida
177
ESMS (MH^{+}): 608/610.
Análisis calculado para C_{29}H_{26}ClN_{5}O_{4}S_{2}\cdot 0,6 H_{2}O: C: 56,27; H: 4,43; N: 11,32; S: 10,36. Encontrado: C: 56,36; H: 4,38; N: 11,14; S: 10,14.
Ejemplo D(31) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-3,4-dimetil-benzamida
178
ESMS (MH^{+}): 588.
Ejemplo D(32) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-3-metoxi-4-metil-benzamida
179
ESMS (MH^{+}): 604.
Análisis calculado para C_{30}H_{29}N_{5}O_{5}S_{2}\cdot 0,6 H_{2}O: C: 58,52; H: 5,07; N: 11,08; S: 10,14. Encontrado: C: 58,48; H: 5,03; N: 10,75; S: 9,95.
Ejemplo D(33) {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-amida del ácido 2,4-di-metil-tiazol-5-carboxílico
180
ESMS (MH^{+}): 595.
Análisis calculado para C_{27}H_{26}N_{6}O_{4}S_{3}\cdot 0,25 H_{2}O: C: 54,22; H: 4,77; N: 13,08; S: 14,97. Encontrado: C: 54,59; H: 4,89; N: 12,61; S: 14,73.
Ejemplo D(34) {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-amida del ácido 5-metil-tiofen-2-carboxílico
181
ESMS (MH^{+}): 580.
Análisis calculado para C_{27}H_{25}N_{5}O_{4}S_{3}: C: 55,94; H: 4,35; N: 12,08; S: 16,59. Encontrado: C: 55,78; H: 4,26; N: 11,80; S: 16,58.
Ejemplo D(35) {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-amida del ácido 5-cloro-tiofen-2-carboxílico
182
ESMS (MH^{+}): 600/602.
Análisis calculado para C_{26}H_{22}ClN_{5}O_{4}S_{3}: C: 52,03; H: 3,69; N: 11,67; S: 16,03. Encontrado: C: 51,61; H: 3,82; N: 11,46; S: 16,01.
Ejemplo D(36) {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-amida del ácido 5-bromo-tiofeno-2-carboxílico
183
ESMS (MH^{+}): 644/646.
Análisis calculado para C_{26}H_{22}BrN_{5}O_{4}S_{3}\cdot 0,8 H_{2}O: C: 47,39; H: 3,61; N: 10,63; S: 14,60. Encontrado: C: 47,31; H: 3,51; N: 10,57; S: 14,70.
Ejemplo D(37) {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-amida del ácido 5-bromo-furano-2-carboxílico
184
ESMS (MH^{+}): 628/630.
Análisis calculado para C_{26}H_{22}BrN_{5}O_{5}S_{2}\cdot 0,5 H_{2}O: C: 48,98; H: 3,64; N: 10,99; S: 10,06. Encontrado: C: 48,98; H: 3,43; N: 10,79; S: 9,80.
Ejemplo D(38) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-3-metil-benzamida
185
ESMS (MH^{+}): 574.
Análisis calculado para C_{29}H_{27}N_{5}O_{4}S_{2}\cdot 0,5 H_{2}O \cdot 0,5 CH_{2}Cl_{2}: C: 56,67; H: 4,68; N: 11,20; S: 10,26. Encontrado: C: 56,76; H: 4,39; N: 11,04; S: 10,12.
Ejemplo D(39) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-3-etil-benzamida
186
ESMS (MH^{+}): 588.
Análisis calculado para C_{30}H_{29}N_{5}O_{4}S_{2}\cdot 0,4 H_{2}O: C: 60,56; H: 5,05; N: 11,77; S: 10,78. Encontrado: C: 60,63; H: 4,87; N: 11,57; S: 10,65.
Ejemplo D(40) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-3-cloro-benzamida
187
ESMS (MH^{+}): 594/596.
Análisis calculado para C_{28}H_{24}ClN_{5}O_{4}S_{2} \cdot 0,5 H_{2}O\cdot 0,3 CH_{2}Cl_{2}: C: 54,07; H: 4,11; N: 11,14; S: 10,20. Encontrado: C: 54,16; H: 3,88; N: 10,95; S: 10,10.
Ejemplo D(41) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-3-metoxi-benzamida
188
ESMS (MH^{+}): 590.
Análisis calculado para C_{29}H_{27}N_{5}O_{5}S_{2} \cdot 0,85 H_{2}O: C: 57,57; H: 4,78; N: 11,58; S: 10,60. Encontrado: C: 57,62; H: 4,58; N: 11,40; S: 10,53.
Ejemplo D(42) {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-amida del ácido 5-metil-tiazol-2-carboxílico
189
ESMS (MH^{+}): 581.
Análisis calculado para C_{26}H_{24}N_{6}O_{4}S_{3}: C: 53,78; H: 4,17; N: 14,47; S: 16,57. Encontrado: C: 53,57; H: 4,24; N: 14,23; S: 16,47.
Ejemplo D(43) Éster ter-butílico del ácido {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-carbámico
190
ESMS (MH^{+}): 556.
Análisis calculado para C_{26}H_{29}N_{5}O_{3}S_{2}\cdot 0,4 H_{2}O: C: 55,48; H: 35,34; N: 12,44; S: 11,39. Encontrado: C: 55,33; H: 5,28; N: 12,55; S: 11,12.
Ejemplo D(44) 3-[3-benciloxicarboxi-aminofenil]-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
191
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 3,7 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 5,2 (s, 2 H); 6,95 (s br, 2 H); 7,05 (s, 2 H); 7,4 (m, 6 H); 7,8 (d, 2 H); 8,35 (s, 1 H); 8,95 (s br, 1 H); 9,7 (s br, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 575; [M-H^{-}]: 573.
Ejemplo D(45) 3-[3-acetamidofenil]-5-[2-[(3,4,5-trimetoxi-fenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
192
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 2,0 (s, 3 H); 3,6 (s, 3 H); 3,75 (s, 6 H); 6,95 (s, 2 H); 7,25 (s br, 2 H); 7,4 (t, 1 H); 7,75 (m, 2 H); 8,2 (s, 1 H); 10,1 (s br, 1 H); 10,7 (s br, 1 H). ESIMS [M+Na^{+}]: 505; [M-H^{-}]: 481.
Ejemplo D(46) 3-[3-benzamidofenil]-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
193
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 3,7 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 7,0 (s br, 2 H); 7,05 (s, 2 H); 7,6 (m, 4 H); 7,9 (m, 1 H); 8,05 (m, 2 H); 8,1 (m, 1 H); 8,6 (m br, 1 H); 9,75 (s br, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 545; [M+Na^{+}]: 567; [M-H^{-}]: 543.
Ejemplo D(47) 3-[3-(3-metilbenzamido)fenil]-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
194
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 2,2 (s, 3 H); 3,5 (s, 3 H); 3,65 (s, 6 H); 6,75 (s br, 2 H); 6,85 (s, 2 H); 7,2 (d, 2 H); 7,3 (t, 1 H); 7,65 (m, 3 H); 7,95 (d, 1 H); 8,35 (s br, 1 H); 9,5 (s br, 2 H). ESIMS [MH^{+}]: 559; [M+Na^{+}]: 581; [M-H^{-}]: 557.
Análisis calculado para C_{28}H_{26}N_{6}O_{5}S: C: 60,20; H: 4,69; N: 15,04; S: 5,74. Encontrado: C: 60,34; H: 4,82; N: 14,39; S: 5,50.
Ejemplo D(48) 3-[3-(3-metoxibenzamido)fenil]-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
195
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 3,7 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 3,9 (s, 3 H); 7,0 (s br, 2 H); 7,1 (s, 2 H); 7,15 (m, 1 H); 7,45 (t, 1 H); 7,55 (t, 1 H); 7,65 (m, 2 H); 7,9 (m, 1 H); 8,15 (m, 1 H); 8,6 (m, 1 H); 9,7 (d br, 2 H). ESIMS [MH^{+}]: 575; [M+Na^{+}]: 597; [M-H^{-}]: 573.
Análisis calculado para C_{28}H_{26}N_{6}O_{6}S: C: 58,53; H: 4,56; N: 14,63; S: 5,58. Encontrado: C: 58,89; H: 4,78; N: 13,88; S: 5,35.
Ejemplo D(49) 3-[3-(3-trifluormetilbenzamido)fenil]-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
196
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 3,65 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 7,0 (s, 2 H); 7,25 (s br, 2 H); 7,55 (t, 1 H); 7,8 (m, 2 H); 8,0 (d, 1 H); 8,1 (d, 1 H); 8,32 (d, 1 H); 8,35 (d, 1 H); 8,45 (s br, 1 H); 10,7 (s, 1 H); 10,8 (s, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 613; [M+Na^{+}]: 635; [M-H^{-}]: 611.
Análisis calculado para C_{28}H_{23}F_{3}N_{6}O_{5}S: C: 54,90; H: 3,78; F: 9,30; N: 13,72; S: 5,23. Encontrado: C: 53,55; H: 3,95; N: 12,24; S: 4,67.
Ejemplo D(50) 3-[3-(3-clorobenzamido)fenil]-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
197
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 3,6 (s, 3 H); 3,75 (s, 6 H); 6,85 (s br, 2 H); 6,95 (s, 2 H); 7,45 (m, 3 H); 7,75 (d, 1 H); 7,9 (d, 1 H); 8,0 (m, 2 H); 8,45 (s, 1 H); 9,6 (s br, 1 H); 9,7 (s br, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 597/581; [M-H^{-}]: 577/579.
Análisis calculado para C_{27}H_{23}ClN_{6}O_{5}S: C: 56,01; H: 4,00; Cl: 6,12; N: 14,51; S: 5,54. Encontrado: C: 55,53; H: 4,23; Cl: 6,31; N: 14,00; S: 5,33.
Ejemplo D(51) 3-[3-(2-carboxi-5-metiltiazolil)-aminofenil]-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
198
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 2,6 (s, 3 H); 3,65 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 7,0 (s, 2 H); 7,38 (s br, 2 H); 7,55 (t, 1 H); 7,85 (m, 2 H); 8,05 (m, 1 H); 8,65 (m, 1 H); 10,75 (s, 1 H); 10,95 (s, 1 H). ESIMS [M+Na^{+}]: 588; [M-H^{-}]: 564.
Análisis calculado para C_{25}H_{23}N_{7}O_{3}S_{2}: C: 53,09; H: 4,10; N: 17,33; S: 11,34. Encontrado: C: 50,46; H: 4,39; N: 16,10; S: 10,47.
Ejemplo D(52) 3-[3-(3-clorobenzamido)fenil]-5-[2-(3-aminopiridil)-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
199
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 7,42 (m, 3 H); 7,57 (m, 2 H); 7,7 (m, 1 H); 7,85 (m, 1 H); 7,98 (m, 1 H); 8,07 (m, 2 H); 8,2 (m, 1 H); 8,3 (m, 1 H); 8,48 (m, 1 H); 8,88 (d br, 1 H); 10,6 (s br, 1 H); 11,1 (s br, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 490/492; [M-H^{-}]: 577/579.
Análisis calculado para C_{23}H_{16}ClN_{7}O_{2}S: C: 56,38; H: 3,29; N: 20,01; S: 6,54. Encontrado: C: 53,07; H: 3,41; N: 18,01; S: 5,90.
Ejemplo D(53) {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-amida del ácido 2-metil-tiazol-5-carboxílico 
\vskip1.000000\baselineskip
200
ESMS (MH^{+}): 581.
Análisis calculado para C_{26}H_{24}N_{6}O_{4}S_{3} \cdot 0,5 H_{2}O: C: 52,95; H: 4,27; N: 14,25; S: 16,31. Encontrado: C: 52,99; H: 4,27; N: 14,21; S: 16,39.
Ejemplo D(54) {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-amida del ácido 6-cloro-piridino-2-carboxílico
201
ESMS (MH^{+}): 595/597.
Análisis calculado para C_{27}H_{23}ClN_{6}O_{4}S_{2} \cdot (0,5 H_{2}O; 0,5 CH_{2}Cl_{2}): C: 51,08; H: 3,90; N: 13,00; S: 9,92. Encontrado: C: 51,04; H: 3,65; N: 12,54; S: 9,63.
Ejemplo D(55) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-2-cloro-isonicotinamida
202
HRFAB MS: calculado para C_{27}H_{23}ClN_{6}O_{4}S_{2} (MNa^{+}): 617,0808. Encontrado: 617,0832
Análisis calculado para C_{27}H_{23}ClN_{6}O_{4}S_{2} \cdot 0,6 H_{2}O: C: 53,52; H: 4,03; N: 13,87; S: 10,58. Encontrado: C: 53,53; H: 3,85; N: 13,39; S: 10,42.
Ejemplo D(56) Sal de trifluoracetato de N-(3-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4] oxadiazol-3-il}-fenil)-3,5-dimetil-benzamida
203
RMN de ^{1}H (CD_{3}COCD_{3}): \delta 9,65 (s, 1 H); 8,56 (s, 1 H); 8,13 (d, 1 H); 7,88 (d, 1 H); 7,67 (s, 2 H); 7,53 (m, 1 H); 7,24 (s, 1 H); 7,07 (s, 3 H); 3,86 (s, 6 H); 3,75 (s, 3 H); 2,39 (s, 6 H). ESIMS [MH]^{+}: 573; [MNa^{+}]: 595; [MH^{-}]: 571.
Ejemplo D(57) Sal de trifluoracetato de N-(3-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4] oxadiazol-3-il}-fenil)-2-metil-benzamida
204
RMN de ^{1}H (CD_{3}COCD_{3}): \delta 9,58 (s, 1 H); 8,60 (s, 1 H); 8,08 (d, 1 H); 7,89 (d, 1 H); 7,67 (s, 2 H); 7,56 (m, 2 H); 7,36 (m, 3 H); 7,07 (s, 3 H); 3,86 (s, 6 H); 3,73 (s, 3 H); 2,49 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 559; [MNa^{+}]: 581; [MH^{-}]: 557.
Ejemplo D(58) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-4-hidroxi-3,5-dimetil-benzamida
205
Una solución de 4-(3-aminofenil)-N^{2'}-(3,4,5-trimetoxifenil)-[2,5']bitiazolil-2',4'-diamina (100 mg; 0,2195 mmol) del Ejemplo C(1), ácido 4-hidroxi-3,5-dimetilbenzoico (38,3 mg; 0,2305 mmol), trietilamina (64 \muL, 0,4609 mmol), y DMF (1,0 mL) se trató con HATU (hexa-fluorfosfato de (O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio)) (87,6 mg; 0,2305 mmol), y se agitó durante 30 minutos a temperatura ambiente. El producto en bruto se purificó mediante HPLC de fase inversa de C-18 preparativa (elución de gradiente, 95% de H_{2}O/0,1% de TFA/CH_{3}CN a 5% de H_{2}O/0,1% de TFA/CH_{3}CN), proporcionando 33 mg (25% de rendimiento) del compuesto del título como un polvo amarillo.
Análisis calculado para C_{30}H_{29}N_{5}O_{5}S_{2} \cdot 0,5 H_{2}O: C: 58,81; H: 4,94; N: 11,43; S: 14,36.
Encontrado: C: 58,81; H: 4,87; N: 11,50; S: 10,50. ESIMS [M+Na^{+}]: 626.
Los siguientes Ejemplos D(59) a D(61) se prepararon de una manera análoga al D(58).
Ejemplo D(59) N-{3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-2-biciclo[2.2.1]hept-2-il-acetamida
206
Análisis calculado para C_{30}H_{33}N_{5}O_{4}S_{2} \cdot 0,8 H_{2}O: C: 59,44; H: 5,75; N: 11,55; S: 10,58. Encontrado: C: 59,43; H: 5,55; N: 11,40; S: 10,54. ESIMS [MH^{+}]: 592.
Ejemplo D(60) {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-amida del ácido quinolin-3-carboxílico
207
Análisis calculado para C_{31}H_{26}N_{6}O_{4}S_{2} \cdot 0,3 H_{2}O: C: 60,43; H: 4,35; N: 13,64; S: 10,41. Encontrado: C: 60,49; H: 4,36; N: 13,77; S: 10,40. ESIMS (MH^{+}): 611.
Ejemplo D(61) {3-[4'-amino-2'-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-amida del ácido 5-fenil-oxazol-4-carboxílico
208
ESIMS (MH^{+}): 627.
De una manera análoga a aquélla descripta para el Ejemplo D(1), se prepararon los siguientes Ejemplos D(62) a D(77).
Ejemplo D(62) (3-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-fenil)-amida del ácido hex-5-enoico
209
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,72 (s, 1 H); 9,35 (s, 1 H); 8,39 (m, 1 H); 7,92 (d, 1 H); 7,82 (m, 2 H); 7,46 (m, 1 H); 7,06 (s, 2 H); 6,98 (s, 2 H); 3,85 (s, 6 H); 3,72 (s, 3 H); 2,57 (s, 2 H); 2,33 (t, 2 H); 1,93 (m, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 535; [MH]^{-}: 533.
Ejemplo D(63) N-[3-(5-{4-amino-2-[3-(2H-tetrazol-5-il)-fenilamino]-tiazol-5-il}-[1,2,4]oxadiazol-3-il)-fenil]-3-cloro-benzamida
210
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 11,04 (s, 1 H); 10,59 (s, 1 H); 8,46 (s, 1 H); 8,17 (m, 1 H); 8,11 (m, 2 H); 7,98 (m, 1 H); 7,83 (m, 2 H); 7,69 (m, 2 H); 7,56 (m, 3 H); 7,42 (m, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 557 (100%); 559 (30%).
Ejemplo D(64) N-(3-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-4-cloro-fenil)-3-cloro-benzamida
211
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 10,79 (s, 1 H); 10,66 (s, 1 H); 8,39 (m, 1 H); 8,06 (m, 3 H); 7,68 (m, 1 H); 7,65 (m, 2 H); 7,33 (s, 2 H); 7,02 (s, 2 H); 3,81 (s, 6 H); 3,65 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 613 (100%); 615 (60%).
Ejemplo D(65) N-(3-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazolil}-4-cloro-fenil)-3-metoxi-benzamida
212
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 10,79 (s, 1 H); 10,53 (s, 1 H); 8,40 (m, 1 H); 8,07 (m, 1 H); 7,66 (m, 1 H); 7,55 (m, 3 H); 7,33 (s, 2 H); 7,19 (m, 1 H); 6,96 (s, 2 H); 3,85 (s, 3 H); 3,81 (s, 6 H); 3,65 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 609 (100%); 611 (30%).
Ejemplo D(66) N-(5-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-2,4-difluor-fenil)-3-cloro-benzamida
213
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,73 (s, 1 H); 9,58 (s, 1 H); 8,73 (m, 1 H); 8,07 (m, 1 H); 8,02 (m, 1 H); 7,65 (m, 2 H); 7,42 (m, 1 H); 7,06 (s, 2 H); 6,98 (s, 2 H); 3,85 (s, 6 H); 3,72 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 615 (100%); 617 (30%).
Ejemplo D(67) N-(5-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenil-1-amino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida
214
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,71 (s, 1 H); 9,41 (s, 1 H); 8,73 (m, 1 H); 7,61 (m, 2 H); 7,47 (m, 1 H); 7,37 (m, 1 H); 7,21 (m, 1 H); 7,06 (s, 2 H); 6,98 (s, 2 H); 3,90 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 3,72 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 611.
Ejemplo D(68) N-(3-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-fenil)-3-ciano-benzamida
215
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,91 (s, 1 H); 9,73 (s, 1 H); 8,55 (m, 1 H); 8,45 (m, 1 H); 8,38 (m, 1 H); 8,13 (m, 1 H); 8,03 (m, 1 H); 7,92 (m, 1 H); 7,80 (m, 1 H); 7,56 (m, 1 H); 7,07 (s, 2 H); 7,00 (s, 2 H); 3,86 (s, 6 H); 3,73 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 570.
Ejemplo D(69) N-(5-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-4-cloro-2-fluor-fenil)-3-cloro-benzamida
216
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,73 (s, 1 H); 9,63 (s, 1 H); 8,74 (m, 1 H); 8,07 (m, 1 H); 8,03 (m, 1 H); 7,68 (m, 2 H); 7,63 (m, 1 H); 7,07 (s, 2 H); 6,98 (s, 2 H); 3,86 (s, 6 H); 3,73 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 631 (100%); 633 (60%); 635 (10%).
Ejemplo D(70) Sal de trifluoracetato de N-(5-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4] oxadiazol-3-il}-4-cloro-2-fluor-fenil)-3-metoxi-benzamida
217
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,74 (s, 1 H); 9,45 (s, 1 H); 8,74 (m, 1 H); 7,61 (m, 2 H); 7,46 (m, 1 H); 7,19 (m, 1 H); 7,06 (s, 3 H); 6,97 (s, 2 H); 3,89 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 3,72 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 627 (100%); 629 (30%)
Ejemplo D(71) N-(3-{5-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-fenil)-3-carboxiimido-benzamida
218
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 9,91 (s, 1 H); 9,73 (s, 1 H); 8,58 (m, 2 H); 8,21 (m, 1 H); 8,15 (m, 2 H); 7,85 (m, 1 H); 7,66 (m, 2 H); 7,57 (m, 1 H); 7,06 (s, 2 H); 7,00 (s, 2 H); 3,85 (s, 6 H); 3,72 (s, 3 H). ESIMS [MH]^{+}: 588.
Ejemplo D(72) 3-[2-fluor-5-[(3-metoxibenzoil)-amino]-fenil]-5-[2-(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
219
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 3,7 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 3,9 (s, 3 H); 7,05 (s, 2 H); 7,25 (m, 1 H); 7,6 (m, 6 H); 8,15 (m, 1 H); 8,55 (m, 1 H); 10,5 (s, 1 H); 10,85 (s, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 593.
Análisis calculado C: 56,75; H: 4,25; F: 3,21; N: 14,18; S: 5,41. Encontrado: C: 56,55; H: 4,48; N: 13,20; S: 5,39.
Ejemplo D(73) 3-[3-(3-clorobenzoil)-amino]-6-fluor-fenil]-5-[2-(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
220
RMN de ^{1}H (d_{6}-DMSO): \delta 3,7 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 6,95 (s, 2 H); 7,05 (s, 2 H); 7,35 (t, 1 H); 7,6 (m, 2 H); 8,0 (m, 2 H); 8,15 (m, 1 H); 8,55 (m, 1 H); 9,7 (s br, 1 H); 9,85 (s br, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 597; 599.
Ejemplo D(74) 3-[3-[(3-metoxibenzoil)-amino]-6-metil-fenil]-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
221
RMN de ^{1}H (MeOD): \delta 2,6 (s, 3 H); 3,75 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 3,9 (s, 3 H); 7,0 (s, 2 H); 7,15 (m, 1 H); 7,35 (d, 1 H); 7,45 (t, 1 H); 7,55 (m, 2 H); 7,8 (m, 1 H); 8,35 (d, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 589.
Análisis calculado para C_{29}H_{28}N_{6}O_{6}S: C: 59,17; H: 4,79; N: 14,28; S: 5,45. Encontrado: C: 60,07; H: 5,30; N: 13,69; S: 5,07.
Ejemplo D(75) 3-[3-[(3-clorobenzoil)-amino]-6-metil-fenil]-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
222
RMN de ^{1}H (MeOD): \delta 2,6 (s, 3 H); 3,75 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 7,0 (s, 2 H); 7,35 (m, 1 H); 7,57 (m, 2 H); 7,8 (m, 1 H); 7,9 (m, 1 H); 8,0 (m, 1 H); 8,35 (d, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 593; 595.
Análisis calculado para C_{28}H_{25}ClN_{6}O_{5}S: C: 56,71; H: 4,25; N: 14,17; S: 5,41. Encontrado: C: 56,66; H: 4,38; N: 13,54; S: 4,89.
Ejemplo D(76) 3-[3-[(4-morfolinilmetil)benzoil]amino]fenil]-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
223
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 2,6 (m, 4 H); 3,7 (s, 2 H); 3,8 (m, 4 H); 3,9 (s, 3 H); 4,0 (s, 6 H); 7,1 (s, 2 H); 7,2 (s, 2 H); 7,65 (m, 3 H); 8,0 (d br, 1 H); 8,15 (d, 2 H); 8,3 (d br, 1 H); 9,8 (s br, 1 H); 10,05 (s br, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 644.
Ejemplo D(77) 3-[3-[4-[(4-metil-1-piperazinil)metil]-benzoil]amino]fenil]-5-[2-[(3,4,5-trimetoxifenil)amino]-4-amino-5-tiazolil]-1,2,4-oxadiazol
224
RMN de ^{1}H (d_{6}-acetona): \delta 2,6 (m br, 8 H); 3,5 (s br, 2 H); 3,6 (s, 3 H); 3,7 (s, 6 H); 6,8 (s, 2 H); 6,9 (s, 2 H); 7,4 (m, 3 H); 7,75 (m, 1 H); 7,9 (d, 2 H); 8,0 (m, 1 H); 8,4 (m, 1 H); 9,55 (s br, 1 H); 9,65 (s br, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 657.
Ejemplo D(78)
225
Ejemplo E(1)
[No forma parte de la invención]
Éster ter-butílico del ácido {3-[5-(2,4-diaminotiazol-5-il)-[1,2,4]oxadiazol-3-il]-fenil}-carbámico 
\vskip1.000000\baselineskip
226 
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución de 1,3 mmoles de éster ter-butílico del ácido (3-{5-[4-amino-2-(tritil-amino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-fenil)-carbámico, preparado como se describió en el Ejemplo B(1), disuelto en 8 mL de ácido fórmico/éter dietílico 1 : 1 se agitó a temperatura ambiente hasta que el material de partida había sido consumido según se verificó por medio de TLC (típicamente 5 horas). Se extrajo de la solución de color amarillo claro resultante todo el solvente al vacío, se calentó suavemente bajo alto vacío para eliminar el ácido fórmico residual, y luego se recristalizó a partir de cloruro de metileno, proporcionando 255 mg del compuesto del título (53% de rendimiento) como un polvo de color amarillo claro.
RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 9,54 (s, 1 H); 8,177 (s, 1 H); 8,07 (s, 2 H); 7,65-7,59 (m, 3 H); 7,39 (t, 1 H); 7,12 (bs, 2 H); 1,49 (s, 9 H). ESMS [MH]^{+}: 375.
Análisis calculado para C_{19}H_{15}ClN_{6}O_{2}S_{3}: C: 46,48; H: 3,08; N: 17,12; S: 19,59. Encontrado: C: 46,47; H: 3,21; N: 17,10; S: 19,43.
Ejemplo E(2)
[No forma parte de la invención]
N-[3-(2',4'-diamino-[2,5']bitiazolil-5-il)-[1,2,4]-fenil]-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
227 
\vskip1.000000\baselineskip
Una solución de amida del ácido 4.amino-2-(tritil-amino)-tiazol-5-carbotioico (304 mg; 0,73 mmol) y N-(3-bromoacetil-fenil)-benzamida (300 mg; 0,94 mmol) en MeOH (30 mL) se agitó a temperatura ambiente durante toda la noche. El solvente se eliminó al vacío y el residuo se disolvió en EtOAc (100 mL). La solución de EtOAc se lavó con solución acuosa saturada de NaHCO_{3} (3 x 25 mL). La capa orgánica se separó, se secó sobre MgSO_{4}, y se concentró. La purificación del residuo se logró por medio de cromatografía en gel de sílice (75% de EtOAc/DCM) proporcionando N-[3-(2',4'-diamino-[2,5']bi-tiazolil-5-il)-[1,2,4]-fenil]-benzamida (110 mg; 39% de rendimiento).
P. de f.: 159-163ºC (se descompone). RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,33 (s, 1 H); 8,00-7,97 (m, 2 H); 7,75-7,71 (m, 2 H); 7,64-7,52 (m, 3 H); 7,43 (t, J = 7,74 Hz, 1 H); 7,33 (s, 1 H). FABMS calculado para C_{19}H_{15}N_{5}OS_{2}: 394,0796. Encontrado: 394,0802.
\newpage
Ejemplo E(3)
[No forma parte de la invención]
N-[3-(2',4'-diamino-[2,5']bitiazolil-4-il)-fenil]-5-cloro-tiofeno-2-carboxamida
228
El material de partida se preparó siguiendo las Etapas (i) y (ii) que se describen a continuación.
Etapa (i)
Se agregó cloruro de oxalilo (4,9 mL; 56,00 mmoles) a una solución de ácido 5-cloro-tiofeno-2-carboxílico (4,78 g; 29,40 mmoles), DMF (0,25 mL), y CH_{2}Cl_{2} (50 mL) a temperatura ambiente. Después de agitar durante toda la noche, se extrajo el solvente de la reacción y el cloruro de oxalilo sin reaccionar al vacío, lo que dio un aceite incoloro. El aceite se disolvió en CH_{2}Cl_{2} (50 mL), y se trató con 3-aminoacetofenona (3,78 g; 28,00 mmoles) y trietilamina (4,68 mL; 33,60 mmoles). Después de agitar durante 1 hora, la mezcla se diluyó con 800 mL de acetato de etilo, se extrajo con HCl 1 N, NaHCO_{3} 1 N, salmuera, y se secó sobre MgSO_{4}. La solución resultante se concentró al vacío hasta un volumen de 100 mL, proporcionando (3-acetil.fenil)-amida del ácido 5-cloro-tiofeno-2-carboxílico como un polvo blanco, que se recogió por filtración y se secó bajo alto vacío (8,12 g; 81% de rendimiento).
Etapa (ii)
Una solución de (3-acetil-fenil)-amida del ácido 5-cloro-tiofeno-2-carbo-xílico (2,0 g; 7,17 mmoles) y CuBr_{2} (3,19 g; 14,34 mmoles) en EtOAc (100 mL) se calentó en reflujo. El progreso de la reacción se monitoreó cada 30 minutos mediante TLC. Después de 2,5 horas, el material de partida aún se encontraba presente, de modo que se agregó más CuBr_{2} (0,75g). Después de 1,5 horas adicionales, la TLC indicaba que todo el material de partida se había consumido. La reacción se redujo en volumen en un 50% al vacío, se diluyó con CH_{2}Cl_{2} (50 mL), se filtró a través de un tapón de sílice, que se eluyó con 40% de acetato de etilo/CH_{2}Cl_{2} (300 mL). La solución resultante se concentró al vacío, proporcionando un aceite incoloro, que se recogió en CH_{2}Cl_{2} (2mL) y se precipitó con éter dietílico (10 mL), dando (3-bromoacetil-fenil)-amida del ácido 5-cloro-tiofeno-2-carboxílico (2,06, 80% de rendimiento) como un polvo blanco
El compuesto del título se preparó del siguiente modo: A una solución de 1,07 g (3,0 mmoles) de amida del ácido 4-amino-2-(tritil-amino)-tiazol-5-carbotioico (preparada de manera análoga al material de partida descripto en la Etapa (ii) del Ejemplo A(1)) disuelta en DMF (12 mL), se le adicionó (3-bromoacetil-fenil)-amida del ácido 5-cloro-tiofeno-2-carboxílico. Después de 15 minutos, la reacción se diluyó con MeOH (12 mL), se trató con TFA (4 mL), y se agitó durante toda la noche. La solución resultante se concentró al vacío, se diluyó con acetato de etilo, se extrajo con NaHCO_{3} 1 M, se extrajo con salmuera, se seco sobre MgSO_{4}, se concentró y se purificó mediante cromatografía flash (elusión de gradiente: 5% de CH_{3}CN/CH_{2}Cl_{2} a 30% de CH_{3}CN/CH_{2}Cl_{2}), proporcionando 0,47 g (36% de rendimiento) de N-[3-(2',4'-diamino-[2,5']bitiazolil-4-il)-fenil]-5-cloro-tiofeno-2-carboxamida.
RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 10,41 (s, 1 H); 8,23 (s, 1 H); 7,95 (d, J = 4,1 Hz, 2 H); 7,73-7,65 (m, 4 H); 7,48 (s, 1 H); 7,41 (t, J = 8,1 Hz, 1 H); 7,92 (d, J = 4,1 Hz, 1 H); 6,90 (s, 1 H).
Ejemplo E(4)
[No forma parte de la invención]
(2',4'-diamino-[2,5']bitiazolil-4-il)-fenil]-metanona
229
El compuesto del título se preparó de una manera similar a la del Ejemplo E(3)
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,02-7,99 (m, 2 H); 7,94 (s, 1 H); 7,76 (s, NH_{2}); 7,70-7,64 (m, 1 H); 7,57-7,52 (m, 2 H); 6,85 (bs, NH_{2}). FABMS (MH^{+}): 303. FABMS calculado para C_{13}H_{10}N_{4}OS_{2}(MNa^{+}): 325,0194, encontrado: 325,0182.
Ejemplo F(1) {3-[4'-amino-2'-(3-metil-ureido)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-amida del ácido 5-cloro-tiofeno-2-carboxílico
230
Una solución de N-[3-(2',4!60!-diamino-[2,5']bitiazolil-4-il)fenil]-5-cloro-tiofeno-2-carboxamida (0,2397 mmol) (preparada según el Ejemplo E(3)), disuelta en THF anhidro (5,0 mL) y N-metilpirrolidinona anhidra (1,0 mL) a
-78ºC, se trató con fenillitio (0,2307 mmol), seguido de isocianato de metilo (0,3461 mmol). Después de 5 minutos se agregó lentamente una segunda porción de fenillitio (0,2307 mmol). Tras agitar durante 15 minutos más, la reacción se apagó con ácido acético (0,6921 mmol), y metanol (0,5 mL), se concentró, y se purificó mediante HPLC de fase inversa. Se recogió el componente principal, se disolvió en acetato de etilo, se extrajo con NaHCO_{3}, salmuera, se secó sobre MgSO_{4}, se concentró hasta que se formó un precipitado y se filtró. La masa del polvo amarillo claro resultante era de 46 mg (41% de rendimiento) después de secado a alto vacío.
ESIMS [MH^{+}]: 491; 493.
Análisis calculado para C_{19}H_{15}ClN_{6}O_{2}S_{3}: C: 46,48; H: 3,08; N: 17,12; S: 19,59. Encontrado: C: 46,47; H: 3,21; N: 17,10; S: 19,43.
De una manera análoga a aquélla descripta en el Ejemplo F(1), se prepararon los siguientes Ejemplos F(2) a F(15).
Ejemplo F(2) N-{3-[2'-acetilamino-4'-amino-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-5-cloro-tiofeno-2-carboxamida
231
ESIMS [MH^{+}]: 476/478.
Análisis calculado para C_{19}H_{14}N_{5}O_{2}S_{3}: C: 47,94; H: 2,96; N: 14,17; S: 19,46. Encontrado: C: 47,66; H: 3,39; N: 13,87; S: 19,21.
Ejemplo F(3) Éster metílico del ácido (4'-amino-4-{3-[(5-cloro-tiofeno-2-carbonil)-amino]-fenil-[2,5']bi-tiazolil-2'-il]-carbámico
232
ESIMS [MH^{+}]: 492/494.
Ejemplo F(4) N-{3-[5-(2-acetilamino-4-amino-tiazol-5-il)-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil}-3-cloro-benzamida
233
RMN de ^{1}H (CD_{3}COCD_{3}/DMSO-d_{6}): \delta 10,55 (s, 1 H); 8,60 (m, 1 H); 8,20 (m, 2 H); 8,15 (m, 1 H); 8,19 (m, 1 H); 7,66-7,50 (m, 4 H); 7,12 (s, 2 H); 2,22 (s, 3 H). ESIMS [MNa]^{+}: 477; [MH]^{-}: 453.
Ejemplo F(5) (4-amino-5-{3-[3-(3-cloro-benzoilamino)-fenil]-[1,2,4]oxadiazol-5-il}-tiazol-2-il)-amida del ácido tiofeno-2-carboxílico
234
RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 13,19 (s, 1 H); 10,60 (s, 1 H); 8,52 (s, 1 H); 8,32 (m, 1 H); 8,09-7,88 (m, 5 H); 7,72-7,56 (m, 3 H); 7,29 (m, 1 H); 7,22 (s, 2 H). ESIMS [MH]^{+}: 523; [MNa]^{+}: 545; [MH]^{-}: 521.
Ejemplo F(6) N-{3-[5-(4-amino-2-propionilamino-tiazol-5-il)-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil}-3-cloro-benzamida
235
RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 12,41 (s, 1 H); 10,57 (s, 1 H); 8,48 (s, 1 H); 8,06 (m, 2 H); 7,96 (m, 1 H); 7,85 (m, 1 H); 7,70 (m, 1 H); 7,67-7,55 (m, 2 H); 7,15 (s, 2 H); 2,46 (q, 2 H); 1,09 (t, 3 H). ESIMS [MNa]^{+}: 491; [MH]^{-}: 467.
Ejemplo F(7) N-{3-[5-(4-amino-2-benzoilamino-tiazol-5-il)-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil}-3-cloro-benzamida
236
RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 13,08 (s, 1 H); 10,57 (s, 1 H); 8,50 (s, 1 H); 8,43-8,10 (m, 4 H); 8,07 (m, 1 H); 7,97 (m, 1 H); 7,86 (m, 1 H); 7,71-7,52 (m, 6 H); 7,14 (s, 2 H). ESIMS [MH^{+}]: 517; [MNa^{+}]: 539; [MH^{-}]: 515.
Ejemplo F(8) N-(3-{5-[4-amino-2-(3-metil-ureido)-tiazol-5-il)-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil}-3-metil-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
237 
\vskip1.000000\baselineskip
ESMS [MH^{+}]: 450.
Análisis calculado para C_{21}H_{19}N_{7}O_{3}S: C: 56,11; H: 4,26; N: 21,81; S: 7,13. Encontrado: C: 55,97; H: 4,39; N: 21,54; S: 6,89.
Ejemplo F(9) N-[3-(2'-acetilamino-4'-amino-[2,5']bitiazolil-4-il)-fenil]-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
238 
\vskip1.000000\baselineskip
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 8,27-8,24 (m, 1 H); 7,89-7,85 (m, 2 H); 7,67-7,61 (m, 2 H); 7,51-7,31 (m, 5 H); 2,14 (s, 3 H). ESIMS [MH^{+}]: 436; [M-H^{-}]: 434.
Ejemplo F(10) N-{3-[4'-amino-2'-(3-metil-ureido)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-3-cloro-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
239 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{21}H_{17}ClN_{6}O_{2}S_{2} \cdot 1,0 H_{2}O: C: 50,14; H: 3,81; N: 16,71; S: 12,75. Encontrado: C: 51,12; H: 3,64; N: 16,96; S: 12,87. ESIMS [MH^{+}]: 485/487.
Ejemplo F(11) N-{3-[4'-amino-2'-(3-metil-ureido)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-3-metoxi-benzamida
240
Análisis calculado para C_{22}H_{20}N_{6}O_{3}S_{2}\cdot 0,7 H_{2}O: C: 53,58; H: 4,37; N: 17,04; S: 13,00. Encontrado: C: 53,60; H: 4,34; N: 17,04; S: 12,93. ESIMS [M-H^{-}]: 479.
Ejemplo F(12) N-(3-{5-[4-amino-2-(3-fenil-ureido)-tiazol-5-il]-[1,2,4]-oxadiazol-3-il}-fenil)-3-metil-benzamida
241
Análisis calculado para C_{26}H_{21}N_{7}O_{3}S: C: 61,04; H: 4,14; N: 19,17; S: 6,27. Encontrado: C: 60,78; H: 4,18; N: 19,05; S: 6,08. ESIMS [MH^{+}]: 512.
Ejemplo F(13) N-(3-{5-[4-amino-2-(3-isopropil-ureido)-tiazol-5-il]-[1,2,4]-oxadiazol-3-il}-fenil)-3-metil-benzamida
242
Análisis calculado para C_{23}H_{23}N_{7}O_{3}S: C: 57,85; H: 4,85; N: 20,53; S: 6,71. Encontrado: C: 57,65; H: 4,97; N: 20,47; S: 6,64. ESIMS [MH^{+}]: 478.
Ejemplo F(14) N-(3-{5-[4-amino-2-(3-bencil-ureido)-tiazol-5-il]-[1,2,4]-oxadiazol-3-il}-fenil)-3-metil-benzamida
243
Análisis calculado para C_{27}H_{23}N_{7}O_{3}S \cdot 0,9 H_{2}O: C: 59,85; H: 4,61; N: 18,10; S: 5,92. Encontrado: C: 59,86; H: 4,55; N: 17,86; S: 5,78. ESIMS [MH^{+}]: 526.
Ejemplo F(15) N-{3-[5-(4-amino-2-metanosulfonilamino-tiazol-5-il)-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-fenil}-3-metil-benzamida
244
ESIMS [MNa^{+}]: 493.
Ejemplo F(16) N-[4'-amino-4-benzoil-[2,5']bitiazolil-2'-il]-acetamida
245
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 6,81-6,69 (m, 2 H); 6,41-6,18 (m, 3 H); 6,07-5,91 (m, 1 H); 0,93 (s, 3 H). FABMS: calculado para C_{15}H_{12}N_{4}O_{2}S_{2}Na: 367,0299; encontrado: 367,0991.
Ejemplo G(1) 5-piridin-2-il-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
246
Se mezclaron isotiocianato de 3,4,5-trimetoxifenilo (250 mg; 1,11 mmoles, 1 equivalente) y cianamida (56 mg; 1,33 mmoles; 1,2 equivalentes) con acetonitrilo/ter-butanol (1 : 1; 10 mL) a 23ºC. A esta mezcla se le agregaron KO-t-Bu (286 mg; 2,55 mmoles; 2,3 equivalentes) e hidrocloruro de 2-clorometilpiridina (182 mg; 1,11 mmoles; 1,00 equivalente). La mezcla de reacción se dejó bajo agitación durante 1,5 horas a 23ºC. La mezcla se diluyó con agua (20 mL) y se filtraron los sólidos blancos, se lavaron con éter y se secaron (257 mg). El residuo seco (60 mg; 0,167 mmol; 1 equivalente) se disolvió en THF (3 mL), se enfrió a -78ºC y se trató con n-butillitio (0,261 mL; 1,6 M; 2,5 equivalentes). Se dejó que la mezcla se calentara a 23ºC, se apagó con bicarbonato de sodio saturado, y se extrajeron los materiales orgánicos en acetato de etilo. El residuo concentrado se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (acetato de etilo/hexano; 1 : 1; 48,3 mg; 80%).
MS (FAB) [m+]/z calculado: 359; encontrado: 359. MS (FAB) [m-]/z calculado: 357; encontrado: 357.
Análisis calculado: C: 56,97; H: 5,06; N: 15,63; S: 8,95. Encontrado: C: 56,18; H: 5,10; N: 15,31; S: 8,68.
Los siguientes Ejemplos G(2) a G(9) se prepararon de una manera similar al Ejemplo G(1).
Ejemplo G(2) N^{2}-fenil-5-piridin-2-il-tiazol-2,4-diamina
247
MS (FAB) [m+]/z calculado: 269; encontrado: 269.
Análisis calculado: C: 62,66; H: 4,51; N: 20,88; S: 11,95. Encontrado: C: 62,71; H: 4,46; N: 20,76; S: 11,91.
Ejemplo G(3) N^{2}-(2,3-dihidro-benzo[1,4]dioxin-6-il)-5-piridin-2-il-tiazol-2,4-diamina
248
MS (FAB) [m+]/z calculado: 327; encontrado: 327.
Análisis calculado: C: 58,88; H: 4,32; N: 17,17; S: 9,82. Encontrado: C: 59,00; H: 4,29; N: 16,92; S: 9,58.
Ejemplo G(4) N^{2}-(3,4-dimetoxi-fenil)-5-piridin-2-il-tiazol-2,4-diamina
249
MS (FAB) [m+]/z calculado: 329; encontrado: 329.
Análisis calculado: C: 58,52; H: 4,91; N: 17,06; S: 9,76. Encontrado: C: 58,43; H: 4,89; N: 17,03; S: 9,67.
Ejemplo G(5) 5-quinolin-2-il-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
250
MS (FAB) [m+]/z calculado: 408; encontrado: 408.
Análisis calculado: C: 61,75; H: 4,94; N: 13,72; S: 7,85. Encontrado: C: 61,96; H: 4,80; N: 13,05; S: 7,54.
Ejemplo G(6) 5-(6-bromo-piridin-2-il)-2-N-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
251
RMN de ^{1}H (300 MHz; CDCl_{3}): \delta 7,35 (t, 1 H); 6,98 (d, 1 H); 6,76 (d, 1 H); 6,62 (s, 2 H); 3,85 (s, 6 H); 3,82 (s, 3 H).
MS (FAB) [m+]/z calculado: 437; encontrado: 438.
Análisis calculado: C: 46,69; H: 3,92; N: 12,81; S: 7,33. Encontrado: C: 46,66; H: 3,84; N: 12,68; S: 7,25.
Ejemplo G(7) 5-(5-tiofen-3-il)-[1,2,4]-oxadiazol-3-il}-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
252
MS (FAB) [m+]/z calculado: 431; encontrado: 431.
Análisis calculado: C: 50,10; H: 3,97; N: 16,23; S: 14,86. Encontrado: C: 50,45; H: 3,96; N: 15,31; S: 14,46.
Ejemplo G(8) 4-{4-amino-5-[1-(4-cloro-bencil)-1H-imidazol-2-il]-tiazol-2-ilamino}-bencenosulfonamida
253
Ejemplo G(9) 4-[4-amino-5-(5-nitro-benzotiazol-2-il]-tiazol-2-ilamino)-bencenosulfonamida
254
RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 8,35 (s, 1 H); 8,02 (d, J = 6,5 Hz, 1 H); 7,90 (d, J = 6,5 Hz, 1 H); 7,72 (m, 4 H); 7,64 (br, NH_{2}); 7,22 (br, NH_{2}).
Ejemplo H(1) 4-[4'-amino-4-hidroxi-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-bencenosulfonamida
255
El compuesto del título de este Ejemplo y de los Ejemplos H(2) a H(6) se prepararon de una manera similar a aquélla descripta en el Ejemplo A(1) y siguientes a partir de 2-arilamino-4-nitro-tiazol-5-carbotioamidas y \alpha-bromoésteres, \alpha-bromolactonas, o \alpha-bromo-nitrilos, según resultara conveniente.
RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 7,88 (s, 4 H); 7,39 (s, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 370; [M-H^{-}]: 368.
Ejemplo H(2) 4-[4'-amino-4-hidroxi-5-(4-hidroxi-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-bencenosulfonamida
256
RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 9,52 (s, 1 H); 7,83 (m, 4 H); 7,32 (s, 2 H); 7,06 (d, J = 8,0 Hz, 2 H); 7,42 (d, J = 8,0 Hz, 2 H); 5,38 (s, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 462.
Análisis calculado para C_{18}H_{15}N_{5}O_{4}S_{3}\cdot 0,2 Et_{2}O: C: 47,04; H: 3,65; N: 14,59; S: 20,04. Encontrado: C: 46,78; H: 3,59; N: 14,36; S: 20,73.
Ejemplo H(3) 4'-amino-2'-(4-dimetilamino-fenilamino)-5-(2-hidroxi-fenil)-[2,5']bitiazolil-4-ol
257
RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 7,30 (m, 2 H); 7,04 (m, 2 H); 6,68 (m, 4 H); 2,88 (s, 6 H). ESIMS [MH^{+}]: 426; [M-H^{-}]: 424.
Ejemplo H(4) 4-[4'-amino-4-hidroxi-5-(2-hidroxi-fenil)-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
258
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,82 (m, 4 H); 7,02 (m, 2 H); 6,62 (m, 2 H). ESIMS [MH^{+}]: 462; [M-H^{-}]: 460.
Ejemplo H(5) 4-[4'-amino-4-hidroxi-5-(2-hidroxi-etil)-3'-H-1'-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino]-bencenosulfonamida
259
RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 7,83 (s, 4 H); 4,72 (m, 1 H); 4,26 (m, 1 H); 3,52 (m, 2 H); 2,30 (m, 1 H); 1,78 (m, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 414; [M-H]^{-}: 412.
Análisis calculado para C_{14}H_{15}N_{5}O_{4}S_{3}: C: 40,67; H: 3,66; N: 16,94; S: 23,26. Encontrado: C: 40,81; H: 3,76; N: 16,76; S: 23,02.
Ejemplo H(6) 4-(4,4'-diamino-[2,5']bitiazolil-2'-ilamino)-bencenosulfonamida
260
RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 11,0 (s, NH); 8,12 (s, H); 7,80 (m, 4 H); 7,32 (s, NH_{2}); 7,08 (br s, NH_{2}); 7,02 (s, NH_{2}). ESIMS [MH^{+}]: 369; [M-H^{-}]: 367.
Ejemplo I(1) S-5-(4-bencil-4,5-dihidro-oxazol-2-il)-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
261
Una mezcla de 4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-5-carbonitrilo (153 mg; 0,5 mmol), 2(S)-amino-3-fenil-propan-1-ol (84 mg; 0,55 mmol), y una cantidad catalítica de ZnCl_{2} seco en clorobenceno (15 mL) se sometió a reflujo durante 4 horas. El solvente se eliminó a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con HCl 0,1 N, salmuera y se secó con MgSO_{4}. El producto (53 mg) se obtuvo después de purificación con cromatografía en sílice (hexanos/acetato de etilo = 1/1).
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,33-7,22 (m, 5 H); 6,58 (s, 2 H); 4,50 (m, 1 H); 4,24 (t, J = 9,0 Hz, 1 H); 4,01 (t, J = 9,0 Hz, 1 H); 3,86 (s, 6 H); 3,82 (s, 3 H); 3,11 (m, 1 H); 2,70 (m, 1 H). ESIMS [MH^{+}]: 441; [M-H^{-}]: 439.
Los siguientes Ejemplos I(2) a I(19) se prepararon de una manera similar:
Ejemplo I(2) R-5-(4-bencil-4,5-dihidro-oxazol-2-il)-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
262
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,33-7,22 (m, 5 H); 6,58 (s, 2 H); 4,50 (m, 1 H); 4,24 (t, J = 9,0 Hz, 1 H); 4,01 (t, J = 9,0 Hz, 1 H); 3,86 (s, 6 H); 3,82 (s, 3 H); 3,11 (m, 1 H); 2,70 (m, 1 H). Análisis calculado para C_{22}H_{24}N_{4}O_{4}S: C: 59,98; H: 5,49; N: 12,72; S: 7,28. Encontrado: C: 59,88; H: 5,54; N: 12,67; S: 7,21.
Ejemplo I(3) S-5-(4-isobutil-4,5-dihidro-oxazol-2-il)-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
263
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 6,57 (s, 2 H); 5,71 (brd, NH_{2}); 4,36 (m, 1 H); 4,26 (m, 1 H); 3,85-3,80 (m, 10 H); 1,80 (m, 1 H); 1,62 (m, 1 H); 1,35 (m, 1 H); 0,95 (m, 6 H). ESIMS [MH^{+}]: 407.
Ejemplo I(4) 5-{(4R)-[(1R)-(benciloxi-etil]-4,5-dihidro-oxazol-2-il}-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
264
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,35-7,25 (m, 5 H); 6,58 (s, 2 H); 5,70 (brd, NH_{2}); 4,70-4,59 (m, 2 H); 4,48 (m, 1 H); 4,25 (m, 2 H); 3,86 (s, 6 H); 3,83 (s, 3 H); 3,77 (m, 1 H); 1,14 (m, 3 H). ESIMS [MH^{+}]: 485.
Ejemplo I(5) S-4-[4-amino-5-(4-fenil-4,5-dihidro-oxazol-2-il)-tiazol-2-ilamino]-bencenosulfonamida
265
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,82 (m, 4 H); 7,34 (m, 5 H); 5,26 (t, J = 8 Hz, 1 H); 4,72 (t, J = 7,80 Hz, 1 H); 4,16 (t, J = 7,80 Hz, 1 H).
Análisis calculado para C_{18}H_{17}N_{3}O_{3}S_{2}\cdot 0,5 Et_{2}O: C: 53,08; H: 4,90; N: 15,48; S: 14,17. Encontrado: C: 53,36; H: 4,79; N: 15,66; S: 14,33.
Ejemplo I(6) S-5-(4-fenil-4,5-dihidro-oxazol-2-il)-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
266
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,37-7,26 (m, 5 H); 6,59 (s, 2 H); 5,80 (brd, NH_{2}); 5,32 (t, J = 7,80 Hz, 1 H); 4,65 (t, J = 7,80 Hz, 1 H); 4,09 (t, J = 7,80 Hz, 1 H). FABMS [MH^{+}]: 427.
Ejemplo I(7) R-5-(4-fenil-4,5-dihidro-oxazol-2-il)-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
267
RMN de ^{1}H (CDCl_{3}): \delta 7,37-7,26 (m, 5 H); 6,59 (s, 2 H); 5,80 (brd, NH_{2}); 5,32 (t, J = 7,80 Hz, 1 H); 4,65 (t, J = 7,80 Hz, 1 H); 4,09 (t, J = 7,80 Hz, 1 H). FABMS [MH^{+}]: 427.
Ejemplo I(8) S-5-[4-(3-benciloxi-fenil)-4,5-dihidro-oxazol-2-il]-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
268
RMN de ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 3,83 (s, 3 H); 3,87 (s, 6 H); 4,08 (dd, J = 8; 8 Hz, 1 H); 4,62 (dd, J = 8; 10 Hz, 1 H); 5,05 (s, 2 H); 5,30 (dd, J = 8; 8 Hz, 1 H); 5,80 (s, 2 H); 6,59 (s, 2 H); 6,90 (m, 3 H); 7,33 (m, 6 H). HRMS (FAB) [MH^{+}] calculado: 533,1859; encontrado: 533,18477.
Ejemplo I(9) S-3-{2-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-4,5-dihidro-oxazol-4-il}-fenol
269
A una solución de S-5-[4-(3-benciloxi-fenil)-4,5-dihidro-oxazol-2-il]-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina (preparado según se describió en el Ejemplo I(8)) (20 mg; 0,038 mmol) en DMF (0,5 mL) se le agregaron negro de Pd (10 mg) y formiato de amonio (10 mg; 0,14 mmol). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 42 horas. La mezcla de reacción se diluyó con CH_{2}Cl_{2} ( 5 mL) y se filtró a través de Celite. El producto (4 mg) se obtuvo después de la eliminación del solvente.
RMN de ^{1}H (300 MHz, CD_{3}OD): \delta 3,74 (s, 3 H); 3,85 (s, 6 H); 4,28 (dd, J = 8; 8 Hz, 1 H); 4,84 (m, 1 H); 5,20 (dd, J = 8; 9 Hz, 1 H); 6,74 (m, 3 H); 6,93 (s, 2 H); 7,18 (dd, J = 8; 8 Hz, 1 H). HRMS (FAB) [MH^{+}] calculado: 443,1389; encontrado: 443,1377.
Ejemplo I(10) S-5-[4-(4-benciloxi-fenil)-4,5-dihidro-oxazol-2-il]-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina 
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270 
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RMN de ^{1}H (300 MHz, CDCl_{3}): \delta 3,82 (br s, 9 H); 4,06 (dd, J = 8; 8 Hz, 1 H); 4,60 (dd, J = 9; 9 Hz, 1 H); 5,05 (s, 2 H); 5,26 (dd, J = 9; 9 Hz, 1 H); 5,89 (br s, 2 H); 6,58 (s, 2 H); 6,94 (d, J = 9 Hz, 1 H); 7,20 (J = 9 Hz, 2 H); 7,39 (m, 5 H). HRMS (FAB) [MH^{+}] calculado: 533,1859; encontrado: 533,1876.
Ejemplo I(11) S-4-{2-[4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-4,5-dihidro-oxazol-4-il]-fenol 
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271 
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El compuesto del título se preparó a partir del compuesto del Ejemplo I(10) de una manera similar a aquélla descripta para el Ejemplo I(9).
RMN de ^{1}H (300 MHz, CD_{3}OD): \delta 3,73 (s, 3 H); 3,80 (2, 6 H); 4,12 (dd, J = 8; 8 Hz, 1 H); 4,70 (dd, J = 9; 9 Hz, 1 H); 5,16 (dd, J = 8; 8 Hz, 1 H); 6,70 (d, J = 8 Hz, 2 H); 6,92 (s, 2 H); 7,12 (d, J = 8 Hz, 2 H). HRMS (FAB) [MH^{+}] calculado: 443,1389; encontrado: 443,1377.
Ejemplo I(12) (R/S)-5-[4-(4-bromo-fenil)-4,5-dihidro-oxazol-2-il]-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina 
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272 
\vskip1.000000\baselineskip
MS (FAB) [M+H]/z calculado: 505; encontrado: 505.
Análisis calculado: C: 49,91; H: 4,19; N: 11,09; S: 6,34. Encontrado: C: 49,32; H: 4,02; N: 10,59; S: 6,05.
Ejemplo I(13) (R/S)-5-[4-(2-bromo-fenil)-4,5-dihidro-oxazol-2-il]-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
273
MS (FAB) [M+H]/z calculado: 505; encontrado: 505.
Análisis calculado: C: 49,91; H: 4,19; N: 11,09; S: 6,34. Encontrado: C: 49,32; H: 4,02; N: 10,59; S: 6,05.
Ejemplo I(14) (R/S)-5-[4-(3-bromo-fenil)-4,5-dihidro-oxazol-2-il]-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
274
MS (FAB) [M+H]/z calculado: 505; encontrado: 505.
Análisis calculado: C: 49,91; H: 4,19; N: 11,09; S: 6,34. Encontrado: C: 50,16; H: 4,41; N: 9,64; S: 5,4.
Ejemplo I(15) (R/S)-5-(4-metil-4,5-dihidro-oxazol-2-il)-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
275
MS (FAB) [M+H]/z calculado: 364; encontrado: 364.
Análisis calculado: C: 52,73; H: 5,53; N: 15,37; S: 8,8. Encontrado: C: 50,58; H: 5,36; N: 13,92; S: 7,84.
Ejemplo I(16) 5-(4-metil-5-fenil-4,5-dihidro-oxazol-2-il)-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
276
MS (FAB) [M+H]/z calculado: 441; encontrado: 441.
Análisis calculado: C: 59,98; H: 5,49; N: 12,72; S: 7,28. Encontrado: C: 59,38; H: 5,49; N: 12,50; S: 7,16.
Ejemplo I(17) (R/S)-5-(4-isopropil-4,5-dihidro-oxazol-2-il)-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
277
MS (FAB) [M+H]/z calculado: 393; encontrado: 393.
Análisis calculado: C: 55,08; H: 6,16; N: 14,28; S: 8,17. Encontrado: C: 55,62; H: 6,33; N: 13,07; S: 7,73.
Ejemplo I(18) 5-(4(R)-metil-5(S)-fenil-4,5-dihidro-oxazol-2-il)-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
278
MS (FAB) [M+H]/z calculado: 441; encontrado: 441.
Análisis calculado: C: 59,98; H: 5,49; N: 12,72; S: 7,28. Encontrado: C: 59,38; H: 5,49; N: 12,50; S: 7,16.
Ejemplo I(19) (R/S)-5-(5-metil-4,5-dihidro-oxazol-2-il)-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina
279
MS (FAB) [M+H]/z calculado: 365; encontrado: 365.
Análisis calculado: C: 52,73; H: 5,53; N: 15,37; S: 8,8. Encontrado: C: 50,91; H: 5,27; N: 14,03; S: 8,09.
Ejemplo I(20)
280
Ejemplo J(1) 5-(2H-tetrazol-5-il)-N-(3,4,5-trimetoxi)-tiazol-2,4-diamina
281
Una solución de 4-amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-carbonitrilo (110 mg; 0,35 mmol), TMSN_{3} (115 mg; 1,0 mmol) y una cantidad catalítica de Bu_{2}SnO en tolueno se sometió a reflujo durante cuatro días (se agregaron durante la reacción cantidades adicionales de TMSN_{3} y Bu_{2}SnO). El solvente se eliminó a presión reducida. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con HCl 0,1 N, salmuera y se secó con MgSO_{4}. El solvente se eliminó y el residuo se trituró en éter etílico. El producto final (30 mg) se recogió por filtración.
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 6,99 (s, 2 H); 3,89 (s, 6 H); 3,77 (s, 3 H). ESIMS [MH^{+}]: 350; [M-H]^{-}:348.
El siguiente Ejemplo se preparó de una manera similar:
Ejemplo J(2) N-(4-dimetilamino-fenil)-5-(2H-tetrazol-5-il)-tiazol-2,4-diamina
282
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,38 (d, J = 5,40 Hz, 2 H); 6,85 (d, J = 5,40 Hz, 2 H); 2,95 (s, 6 H). ESIMS [MH^{+}]: 302; [M-H]^{-}:301.
Ejemplo K(1) 3-{5-[4amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-fenol
283
A una solución de 200 mg (0,412 mmol) de 5-[3-(3-metoximetoxi-fenil)-[1,2,4]oxa-diazol-5-il]-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina (preparada en el Ejemplo B(4)) en 8 mL de dioxano acuoso al 50% se le agregó ácido trifluoracético (8 mL) con refrigeración por medio de baño de agua a 15ºC. Después de dos horas a temperatura ambiente, se agregó tolueno, y la solución se concentró al vacío con el baño de agua a 22ºC. Cuando quedaban cinco mililitros de solvente, la solución se volcó sobre bicarbonato de sodio acuoso frío. Esta solución se extrajo con dos porciones de diclorometano, que se lavó acto seguido con salmuera y se secó sobre sulfato de sodio. La cromatografía de sílice radial eluyendo con 5-10% de metanol/diclorometano proporcionaron 3-{5-[4amino-2-(3,4,5-trimetoxi-fenilamino)-tiazol-5-il]-[1,2,4]oxadiazol-3-il}-fenol (60 mg) como un sólido amarillo pálido.
RMN de ^{1}H (300 MHz, DMSO-d_{6}): \delta 3,64 (s, 3 H); 3,81 (s, 6 H); 6,95 (m, 3 H); 7,34 (m, 2 H); 7,49 (m, 2 H); 9,76 (s, 1 H); 10,76 (s; 1 H).
Análisis calculado para C_{20}H_{19}N_{5}O_{5}S: C: 54,41; H: 4,34; N: 15,86. Encontrado: C: 54,40; H: 4,40; N: 15,86.
Ejemplo L(1) 5-{6-(furan-2-il)-piridin-2-il}-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina 
\vskip1.000000\baselineskip
284 
\vskip1.000000\baselineskip
A una solución de 5-(6-bromo-piridin-2-il)-2-N-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-di-amina (preparada según se indicó en el Ejemplo G(6)) (60 mg; 0,137 mmol; 1,0 equivalente) en DMF (0,7 mL) se le agregó 2-furantributilestaño (130 \muL; 0,411 mmol; 3,0 equivalentes), trietilamina (95 \muL; 0,685 mmol; 5,0 equivalentes) y diclorobis(trifenilfosfina) paladio (19 mg; 0,027 mmol; 0,2 equivalente). La mezcla de reacción se calentó a 85ºC durante 18 horas, se enfrió y se distribuyó entre acetato de etilo y bicarbonato de sodio. La capa orgánica se secó sobre sulfato de sodio, se decantó y se concentró. El material se purificó mediante cromatografía de gel de sílice (acetato de etilo/hexano, 1 : 1) para dar 5-{6-(furan-2-il)-piridin-2-il}-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina (30,5 mg; 53% de rendimiento).
MS (FAB) [m+]/z calculado: 424; encontrado: 424.
Análisis calculado: C: 59,42; H: 4,75; N: 13,20; S: 7,55. Encontrado: C: 59,56; H: 4,71; N: 13,10; S: 7,44.
Los siguientes Ejemplos L(2) y L(3) se prepararon de una manera similar a la del Ejemplo L(1).
Ejemplo L(2) 5-(6-tiofen-2-il-piridin-2-il)-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina 
\vskip1.000000\baselineskip
285 
\vskip1.000000\baselineskip
MS (FAB) [m+]/z calculado: 441; encontrado: 441.
Análisis calculado: C: 57,25; H: 4,58; N: 12,72; S: 14,56. Encontrado: C: 56,57; H: 4,60; N: 12,47; S: 14,33.
Ejemplo L(3) 5-(6-(tiofen-3-il-piridin-2-il)-N^{2}-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-tiazol-2,4-diamina 
\vskip1.000000\baselineskip
286 
\vskip1.000000\baselineskip
MS (FAB) [m+]/z calculado: 440; encontrado: 440.
Análisis calculado: C: 57,25; H: 4,58; N: 12,72; S: 14,56. Encontrado: C: 56,57; H: 4,60; N: 12,47; S: 14,33.
Ejemplo M(1) 4-bencilsulfanilmetil-N-(4-isopropil-fenil)-[2,5']-bitiazolil-2',4'-diamina
287
A una solución de 204 mg (0,7 mmol) de 4-amino-2-(4-isopropil-fenilamino)-tiazol-5-carbotioamida (preparada según lo descripto en el Ejemplo A (1), Etapa (ii)) y 1,3-di-bromoacetona (154 mg; 0,72 mmol) se agitó en MeOH (10 mL) a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción resultante se diluyó luego con éter etílico (150 mL). Se separó por filtración un sólido amarillo amarronado, se enjuagó con éter etílico, y se secó al vacío para dar un intermediario en bruto como un sólido marrón (298 mg; 91% de rendimiento). Sin otra purificación, el intermediario anterior (50 mg; 0,12 mmol) se disolvió en DMF (10 mL) con DIEA (17 mg; 0,14 mmol). Se agregó entonces bencil mercapteno (17 mg; 0,14 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. El solvente se eliminó a presión reducida y el residuo se redisolvió en acetato de etilo (100 mL). La solución orgánica se extrajo con NaHCO_{3} saturado (3 x 20 mL) seguido de salmuera. La solución orgánica se secó sobre sulfato de magnesio y se concentró para suministrar un sólido marrón. El producto final se purificó seguidamente mediante HPLC preparativa para proporcionar 4-bencilsulfanilmetil-N-(4-isorpopil-fenil)-[2,5']-bitiazolil-2',4'-diamina (9 mg; 18% de rendimiento).
RMN de ^{1}H (DMSO-d_{6}): \delta 7,91 (s, 1 H); 7,20-7,38 (m, 9 H); 6,65 (s, 1 H); 5,98 (s, 2 H); 3,73 (s, 1 H); 3,63 (s, 2 H); 2,9 (hepteto, J = 6,9 Hz, 1 H). 1,22-1,24 (d, J = 6,9 Hz, 6 H). FABMS [M^{+}]: 452; FABMS [MNa^{+}]: 475.
Ejemplo N(1) Sal del ácido trifluoracético del ácido 4'-amino-2'-(4-metanosulfonil-fenilamino)-[2,5']-bitiazolil-4-carboxílico
288
El compuesto del título se preparó de la siguiente manera: a una solución de amida del ácido 4-amino-2-(4-sulfamoil-fenilamino)-tiazol-5-carbotioico (164 mg; 0,5 mmol) en DMF, se agregó ácido bromopirúvico (125 mg; 0,75 mmol), y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Después de la remoción del solvente, el residuo se disolvió con acetato de etilo y se lavó con agua y salmuera, luego se secó con MgSO_{4}. La purificación del residuo mediante HPLC preparativa proporcionó el compuesto del título como un polvo amarillo con un rendimiento del 34%.
RMN de ^{1}H (DMSO): \delta\delta 10,08 (s, 1 H); 8,04 (s, 1 H); 7,88-7,78 (m, 4 H); 7,31 (s, 4 H). HRFABMS [M^{+}]: calculado: 398,0051; encontrado: 398,0059.
Ejemplo N(2) (2-dimetilamino-etil)-amida del ácido 4-amino-2'-(4-sulfamoil-fenilamino)-[2,5']-bitiazolil-4-carboxílico
289
El compuesto del título se preparó de la siguiente manera: una mezcla de ácido 4'-amino-2'-(4-metanosulfonil-fenilamino)-[2,5']-bitiazolil-4-carboxílico (64 mg; 0,13 mmol), PyBop (81 mg; 0,16 mmol), N,N-dimetiletilendiamina (28 \muL; 0,25 mmol) y DIEA (65 \muL; 0,38 mmol) en DMF se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. El solvente se eliminó a presión reducida y el residuo se disolvió en acetato de etilo. La solución de acetato de etilo se extrajo con solución saturada de NaHCO_{3} seguida de salmuera, y se secó con MgSO_{4}. La purificación del residuo mediante HPLC preparativa proporcionó el compuesto del título como un polvo amarillo con el 17% de rendimiento.
RMN de ^{1}H (DMSO): \delta\delta 10,91 (s, 1 H); 8,72 (t, J = 12,3 Hz, 1 H); 7,80 (dd, J = 27,1 Hz, 4 H); 7,73 (s, 1 H); 7,28 (s, 1 H); 7,20 (s, 2 H); 2,61-2,51 (m, 4 H); 2,25 (s, 6 H).
HRFABMS [M^{+}]: calculado: 468,0946; encontrado: 468,0955.
De una manera similar a aquélla empleada para preparar el Ejemplo N(2), se prepararon los siguientes Ejemplos N(3) y N(4).
Ejemplo N(3) Metoxi-metil-amida del ácido 4'-amino-2'-(4-sulfamoil-fenilamino)-[2,5']-bitiazolil-4-carboxílico
290
P. de f.: 195-198ºC. RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 9,80 (s, NH); 7,80-7,65 (m, 4 H); 7,54 (s, 1 H); 6,60 (s, NH_{2}); 6,32 (s, NH_{2}); 3,61 (s, 3 H); 3,22 (s, 3 H).
FABMS [MH^{+}]: 441.
Ejemplo N(4) Fenil-amida del ácido 4'-amino-2'-(4-sulfamoil-fenilamino)-[2,5']-bitiazolil-4-carboxílico
291
RMN de ^{1}H (CD_{3}OD): \delta 7,91 (s, 1 H); 7,88-7,71 (m, 4 H); 7,40-7,22 (m, 4 H); 7,17-7,09 (m, 1 H).
FABMS calculado para C_{19}H_{16}N_{6}O_{3}S_{3}: 473,0524; encontrado: 473,0540.
Ejemplo O(1) N-[5-(5-{4-amino-2-[3-(2-morfolin-4-il-etil)-ureido]-tiazol-5-il}-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-2,4-difluor-fenil}-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
292 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa (i)
Una solución de carbamato activado (preparado en la etapa (ii)), amina, y DMF (0,60 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución resultante se concentró al vacío, luego se purificó mediante cromatografía radial "Chromatatron" (10% de metanol/cloruro de metileno), proporcionando 35 mg (72% de rendimiento) del compuesto del título como un sólido blanco.
Análisis calculado para C_{26}H_{26}F_{2}N_{8}O_{5}S \cdot 1,2 H_{2}O: C: 50,19; H: 4,60; N: 18,01; S: 5,15. Encontrado: C: 50,16; H: 4,35; N: 17,95; S: 5,22. ESIMS [MH^{+}]: 601.
\vskip1.000000\baselineskip
293 
\vskip1.000000\baselineskip
Etapa (ii)
Preparación del carbamato activado (éster metílico del ácido 4-{4-amino-5-[3-(2,4-difluor-5-{[1-(3-metoxi-fenil)-metanoil]-amino}-fenil)-[1,2,4]oxadiazol-5-il]-tiazol-2-ilcarbamoiloxi}-benzoico). Una solución de N-{5-[5-(2,4-diamino-tiazol-5-il)-[1,2,4] oxadiazol-3-il]-2,4-difluor-fenil}-3-metoxi-benzamida (533 mg; 1,20 mmoles) preparada de manera análoga al Ejemplo E(1), disuelta en THF anhidro (20,0 mL) y N-metilpirrolidinona anhidra (1,0 mL) a -78ºC, se trató con fenillitio (0,660 mL; 1,20 mmoles), al que le siguió cloroformiato de p-carboximetilo (772 mg; 3,60 mmoles) disuelto en THF anhidro (5,0 mL), en una porción (la temperatura interna se elevó a -55ºC). Después de 5 minutos se agregó lentamente una segunda porción de fenillitio (0,660 mL; 1,20 mmoles). Después de agitar durante otros 15 minutos la reacción se apagó con ácido acético (0,30 mL), se calentó a temperatura ambiente, se diluyó con acetato de etilo, se extrajo con una mezcla 1 : 1 de salmuera y solución de bicarbonato de sodio, se secó sobre sulfato de magnesio, y se filtró. La solución resultante se concentró al vacío hasta que quedaron solamente \sim 50 mL de solvente, y se había formado un precipitado blanco. El sólido blanco se recogió por filtración, dando 446 mg (60% de rendimiento) del carbamato activado. ESIMS [MNa^{+}]: 645.
Los siguientes Ejemplos O(2) a O(32) se prepararon de una manera análoga a O(1).
Ejemplo O(2) N-{5-[5-(4-amino-2-{3-[3-(2-oxo-pirrolidin-1-il)-propil]-ureido}-tiazol-5-il)-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-2,4-difluor-fenil}-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
294 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{27}H_{26}F_{2}N_{8}O_{5}S \cdot 1,5 H_{2}O: C: 50,07; H: 4,57; N: 17,52; S: 5,01. Encontrado: C: 50,60; H: 4,58; N: 17,42; S: 5,17. ESIMS [MH^{+}]: 613.
Ejemplo O(3) N-(5-{5-[4-amino-2-(3-carbamoilmetil-ureido)-tiazol-5-il]-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
295 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{22}H_{18}F_{2}N_{8}O_{5}S \cdot 0,6 H_{2}O: C: 47,86; H: 4,05; N: 20,09; S: 5,11. Encontrado: C: 47,92; H: 3,95; N: 20,01; S: 5,44. ESIMS [MNa^{+}]: 567.
Ejemplo O(4) N-(5-{5-[4-amino-2-(3-metil-ureido)-tiazol-5-il]-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
296 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{21}H_{17}F_{2}N_{7}O_{4}S \cdot (0,9 DMF; 0,5 H_{2}O): C: 49,47; H: 4,10; N: 19,23; S: 5,57. Encontrado: C: 49,58; H: 4,24; N: 19,33; S: 5,63. ESIMS [M-H^{-}]: 500.
Ejemplo O(5) N-[5-(5-{4-amino-2-[3-(tetrahidro-furan-2-ilmetil)-ureido]-tiazol-5-il]-[1,2,4]-oxadiazol-3-il}-2,4-difluor-fenil]-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
297 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{25}H_{23}F_{2}N_{7}O_{5}S \cdot 0,5 H_{2}O: C: 51,72; H: 4,17; N: 16,89; S: 5,52. Encontrado: C: 51,61; H: 4,09; N: 16,87; S: 5,57. ESIMS [MNa^{+}]: 594.
Ejemplo O(6) N-{5-[5-(4-amino-2-{3-[2-(2-hidroxi-etoxi)-etil]-ureido}-tiazol-5-il)-[1,2,4]-oxadiazol-3-il]-2,4-difluor-fenil}-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
298 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{24}H_{23}F_{2}N_{7}O_{6}S \cdot 1,0 H_{2}O: C: 48,56; H: 4,25; N: 16,52; S: 5,40. Encontrado: C: 48,67; H: 4,04; N: 16,63; S: 5,50. ESIMS [M-H^{-}]: 574.
Ejemplo O(7) N-(5-{5-[4-amino-2-(3-isobutil-ureido)-tiazol-5-il]-[1,2,4]-oxadiazol-3-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
299 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{24}H_{23}F_{2}N_{7}O_{4}S \cdot 0,6 H_{2}O: C: 52,00; H: 4,40; N: 17,69; S: 5,78. Encontrado: C: 52,02; H: 4,29; N: 17,87; S: 5,85. ESIMS [MH^{+}]: 544.
Ejemplo O(8) N-(5-{5-[4-amino-2-(3-piridin-2-ilmetil-ureido)-tiazol-5-il]-[1,2,4]-oxadiazol-3-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
300 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{26}H_{20}F_{2}N_{8}O_{4}S \cdot 1,0 H_{2}O: C: 52,34; H: 3,72; N: 18,78; S: 5,37. Encontrado: C: 52,24; H: 3,75; N: 18,74; S: 5,32. ESIMS [MH^{+}]: 579.
Ejemplo O(9) N-(5-{5-[4-amino-2-(3-piridin-3-ilmetil-ureido)-tiazol-5-il]-[1,2,4]-oxadiazol-3-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
301 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{26}H_{20}F_{2}N_{8}O_{4}S \cdot 0,8 H_{2}O: C: 52,66; H: 3,67; N: 18,90; S: 5,41. Encontrado: C: 52,57; H: 3,99; N: 18,92; S: 5,16. ESIMS [MH^{+}]: 579.
Ejemplo O(10) N-[5-(5-{4-amino-2-[3-(2-hidroxi-etil)-ureido]-tiazol-5-il}-[1,2,4]-oxadiazol-3-il)-2,4-difluor-fenil]-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
302 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{22}H_{19}F_{2}N_{7}O_{5}S: C: 49,72; H: 3,6; N: 18,45; S: 6,03. Encontrado: C: 49,45; H: 3,80; N: 18,30; S: 5,97. ESIMS [M-H^{-}]: 530.
Ejemplo O(11) N-[5-(5-{4-amino-2-[3-(trans-4-hidroxi-ciclohexil)-ureido]-tiazol-5-il}-[1,2,4]-oxadiazol-3-il)-2,4-difluor-fenil]-3-metoxi-benzamida
303 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{26}H_{25}F_{2}N_{7}O_{5}S \cdot 2,8 H_{2}O: C: 49,10; H: 4,85; N: 15,42; S: 5,04. Encontrado: C: 49,06; H: 4,71; N: 15,39; S: 4,79. ESIMS [M-H^{-}]: 584.
Ejemplo O(12) N-[3-(5-{4-amino-2-[3-(3-morfolin-4-il-propil)-ureido]-tiazol-5-il}-[1,2,4]-oxadiazol-3-il)-fenil]-3-metil-benzamida
304
Análisis calculado para C_{27}H_{30}N_{8}O_{4}S \cdot 1,5 H_{2}O: C: 54,99; H: 5,64; N: 19,00; S: 5,44. Encontrado: C: 54,83; H: 5,49; N: 18,50; S: 5,30. ESIMS [MH^{+}]: 563.
Ejemplo O(13) N-{5-[4'-amino-2'-(3-bencil-ureido]-[2,5']bitiazolil-4-il]-2,4-difluor-fenil}-3-metoxi-benzamida
305
Análisis calculado para C_{28}H_{22}F_{2}N_{6}O_{3}S_{2}: C: 56,75; H: 3,74; N: 14,18; S: 10,82. Encontrado: C: 56,70; H: 3,85; N: 14,09; S: 10,70. ESIMS [MH^{+}]: 593.
Ejemplo O(14) N-(5-{4'-amino-2'-[3-(2-metoxi-1-metil-etil)-ureido]-[2,5']bitiazolil-4-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida
306
Análisis calculado para C_{25}H_{24}F_{2}N_{6}O_{4}S_{2}: C: 52,25; H: 4,21; N: 14,63; S: 11,16. Encontrado: C: 52,06; H: 4,21; N: 14,55; S: 11,09. MALDI FTMS [MH^{+}]: 575,1341; encontrado: 575,1342.
Ejemplo O(15) N-[5-(4'-amino-2'-{3-[3-(2-oxo-pirrolidin-1-il)-ureido}-[2,5']bitiazolil-4-il)-2,4-difluor-fenil]-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
307 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{28}H_{27}F_{2}N_{7}O_{4}S_{2}\cdot 1,1 H_{2}O: C: 51,94; H: 4,55; N: 15,14; S: 9,90. Encontrado: C: 52,38; H: 4,79; N: 14,64; S: 9,48. MALDI FTMS [MNa^{+}]: 650,1426; encontrado: 6505,1394.
Ejemplo O(16) N-{5-[4'-amino-2'-(3-piridin-2-ilmetil-ureido)-[2,5']bitiazolil-4-il]-2,4-difluor-fenil}-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
308 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{27}H_{21}F_{2}N_{7}O_{3}S_{2}: C: 54,63; H: 3,57; N: 16,52; S: 10,80. Encontrado: C: 54,44; H: 3,68; N: 16,33; S: 10,60. MALDI FTMS [MH^{+}]: 594,1188; encontrado: 594,1191.
Ejemplo O(17) N-{5-[4'-amino-2'-(3-piridin-3-ilmetil-ureido)-[2,5']bitiazolil-4-il]-2,4-difluor-fenil}-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
309 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{27}H_{21}F_{2}N_{7}O_{3}S_{2}\cdot 0,5 H_{2}O: C: 53,81; H: 3,68; N: 16,27; S: 10,64. Encontrado: C: 53,95; H: 3,78; N: 16,21; S: 10,68. MALDI FTMS [MH^{+}]: 594,1188; encontrado: 594,1185.
Ejemplo O(18) N-{5-[4'-amino-2'-(3-piridin-4-ilmetil-ureido)-[2,5']bitiazolil-4-il]-2,4-difluor-fenil}-3-metoxi-benzamida
310
Análisis calculado para C_{27}H_{21}F_{2}N_{7}O_{3}S_{2}\cdot 0,5 H_{2}O: C: 53,81; H: 3,68; N: 16,27; S: 10,64. Encontrado: C: 53,83; H: 3,60; N: 16,33; S: 10,80. MALDI FTMS [MH^{+}]: 594,1188; encontrado: 594,1198.
Ejemplo O(19) N-(5-{4'-amino-2'-[3-((R)-2-hidroxi-propil)-ureido]-[2,5']bitiazolil-4-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida
311
Análisis calculado para C_{24}H_{22}F_{2}N_{6}O_{4}S_{2}: C: 51,42; H: 3,96; N: 14,99; S: 11,44. Encontrado: C: 50,95; H: 4,12; N: 14,97; S: 11,22. MALDI FTMS [MH^{+}]: 561,1185; encontrado: 561,1212.
Ejemplo O(20) N-(5-{4'-amino-2'-[3-((S)-2-hidroxi-propil)-ureido]-[2,5']bitiazolil-4-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida
312
Análisis calculado para C_{24}H_{22}F_{2}N_{6}O_{4}S_{2}\cdot 1,0 H_{2}O: C: 49,82; H: 4,18; N: 14,53; S: 11,08. Encontrado: C: 49,77; H: 3,92; N: 14,74; S: 10,96. ESIMS [MNa^{+}]: 583.
Ejemplo O(21) N-(5-{4'-amino-2'-[3-((R)-1-hidroximetil-propil)-ureido]-[2,5']bitiazolil-4-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida
313
Análisis calculado para C_{25}H_{24}F_{2}N_{6}O_{4}S_{2}\cdot 0,5 H_{2}O: C: 51,45; H: 4,32; N: 14,40; S: 10,99. Encontrado: C: 51,32; H: 4,30; N: 14,53; S: 11,06. ESIMS [MNa^{+}]: 597.
Ejemplo O(22) N-(5-{4'-amino-2'-[3-((S)-1-hidroximetil-propil)-ureido]-[2,5']bitiazolil-4-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida
314
Análisis calculado para C_{25}H_{24}F_{2}N_{6}O_{4}S_{2}\cdot 0,5 H_{2}O: C: 51,45; H: 4,32; N: 14,40; S: 10,99. Encontrado: C: 51,49; H: 4,26; N: 14,66; S: 11,16. ESIMS [MNa^{+}]: 597.
Ejemplo O(23) N-[5-(4'-amino-2'-{3-[(S)-1-(tetrahidrofuran-2-il)metil]-ureido}-[2,5']bitiazolil-4-il)-2,4-difluor-fenil]-3-metoxi-benzamida
315
Análisis calculado para C_{26}H_{24}F_{2}N_{6}O_{4}S_{2}\cdot 0,5 H_{2}O: C: 52,43; H: 4,23; N: 14,11; S: 10,77. Encontrado: C: 52,55; H: 4,29; N: 14,44; S: 10,53. ESIMS [M-H^{-}]: 585.
Ejemplo O(24) N-[5-(4'-amino-2'-{3-[(R)-1-(tetrahidro-furan-2-il)-metil]-ureido}-[2,5']bitiazolil-4-il)-2,4-difluor-fenil]-3-metoxi-benzamida
316
Análisis calculado para C_{26}H_{24}F_{2}N_{6}O_{4}S_{2}\cdot 0,6 H_{2}O: C: 52,27; H: 4,25; N: 14,07; S: 10,73. Encontrado: C: 52,29; H: 4,33; N: 14,33; S: 10,55. ESIMS [M-H^{-}]: 585.
Ejemplo O(25) N-{5-[4'-amino-2'-(3-ciclohexilmetil-ureido)-[2,5']bitiazolil-4-il]-2,4-difluor-fenil}-3-metoxi-benzamida
317
Análisis calculado para C_{28}H_{28}F_{2}N_{6}O_{3}S_{2}\cdot 0,5 H_{2}O: C: 55,34; H: 4,81; N: 13,83; S: 10,55. Encontrado: C: 55,26; H: 4,78; N: 14,00; S: 10,56. MALDI FTMS [MH^{+}]: 599,1705; encontrado: 621,1525.
Ejemplo O(26) N-(5-{4'-amino-2'-[3-(2-morfolin-4-il-etil)-ureido]-[2,5']bitiazolil-4-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida 
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318 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{27}H_{27}F_{2}N_{7}O_{4}S_{2}\cdot 1,0 H_{2}O: C: 51,17; H: 4,61; N: 15,47; S: 10,12. Encontrado: C: 51,00; H: 4,39; N: 15,12; S: 9,75. MALDI FTMS [MH^{+}]: 616,1607; encontrado: 616,1597.
Ejemplo O(27) N-(5-{4'-amino-2'-[3-(2-pirrolidin-1-il-etil)-ureido]-[2,5']bitiazolil-4-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida 
\vskip1.000000\baselineskip
319 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{27}H_{27}F_{2}N_{7}O_{3}S_{2}: C: 54,08; H: 4,54; N: 16,35; S: 10,69. Encontrado: C: 53,93; H: 4,66; N: 16,11; S: 10,51. MALDI FTMS [MH^{+}]: 600,1658; encontrado: 600,1640.
Ejemplo O(28) N-[5-(4'-amino-2'-{3-[2-(2-hidroxi-etoxi)-etil]-ureido}-[2,5']bitiazolil-4-il)-2,4-difluor-fenil]-3-metoxi-benzamida 
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320 
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Análisis calculado para C_{25}H_{24}F_{2}N_{6}O_{5}S_{2}\cdot 1,0 H_{2}O: C: 49,33; H: 4,31; N: 13,81; S: 10,54. Encontrado: C: 49,47; H: 4,08; N: 13,87; S: 10,49. MALDI FTMS [MH^{+}]: 591,1290; encontrado: 591,1276.
Ejemplo O(29) N-(5-{4'-amino-2'-[3-(2-piridin-2-il-etil)-ureido]-[2,5']bitiazolil-4-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida 
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321 
\vskip1.000000\baselineskip
Análisis calculado para C_{28}H_{23}F_{2}N_{7}O_{3}S_{2}\cdot 1,8 H_{2}O: C: 52,54; H: 4,19; N: 15,32; S: 10,02. Encontrado: C: 52,56; H: 4,07; N: 15,54; S: 10,03. MALDI FTMS [MH^{+}]: 608,1345; encontrado: 608,1346.
Ejemplo O(30) N-(5-{4'-amino-2'-[3-(2-piridin-4-il-etil)-ureido]-[2,5']bitiazolil-4-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida 
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322 
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Análisis calculado para C_{28}H_{23}F_{2}N_{7}O_{3}S_{2}\cdot 1,0 H_{2}O: C: 53,75; H: 4,03; N: 15,67; S: 10,25. Encontrado: C: 53,32; H: 4,01; N: 15,50; S: 9,90. MALDI FTMS [MH^{+}]: 608,1345; encontrado: 608,1327.
Ejemplo O(31) N-{3-[4'-amino-5-metil-2'-(3-metil-ureido)-[2,5']bitiazolil-4-il]-fenil}-3-metoxi-benzamida 
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323 
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El precursor (N-[3-(2',4'-diamino-5-metil-[2,5']bitiazolil-4-il)-fenil]-3-metoxi-benzamida) para el carbamato activado, a partir del cual este Ejemplo se preparó, se sintetizó de modo análogo al Ejemplo E(3), solo que partiendo de 3-aminopropiofenona en lugar de 3-amino-acetofenona.
Análisis calculado para C_{23}H_{22}N_{6}O_{3}S_{2}\cdot 0,6 H_{2}O: C: 54,66; H: 4,63; N: 16,63; S: 12,69. Encontrado: C: 54,50; H: 4,48; N: 16,77; S: 12,70. ESIMS [MH^{+}]: 495.
Ejemplo O(32) N-(5-{4'-amino-2'-[3-(2-piridin-3-il-etil)-ureido]-[2,5']bitiazolil-4-il}-2,4-difluor-fenil)-3-metoxi-benzamida
324
Análisis calculado para C_{28}H_{23}F_{2}N_{7}O_{3}S_{2}\cdot 0,5 H_{2}O: C: 54,53; H: 3,92; N: 15,90; S: 10,40. Encontrado: C: 54,35; H: 4,02; N: 16,05; S: 10,30. ESIMS [MH^{+}]: 608.
Los compuestos ilustrativos descriptos anteriormente pueden ser ensayados para determinar su actividad según se indica seguidamente:
Ensayos biológicos: Ensayos enzimáticos
La estimulación de la proliferación celular por medio de factores de crecimiento tales como VEGF, FGF, y otros, depende de su inducción de autofosforilación de cada una de sus quinasas de tirosina de receptor respectivas. Por lo tanto, la habilidad de un inhibidor de quinasa de proteína para bloquear la proliferación celular inducida por estos factores de crecimiento está correlacionada directamente con su habilidad para bloquear la autofosforilación de receptor. Para medir la actividad inhibitoria de quinasa de proteína de los compuestos, se diseñaron las siguientes construcciones.
Construcción de VEGF-R2 para ensayo: Esta construcción determina la habilidad de un compuesto de ensayo para inhibir la actividad de quinasa de tirosina. Una construcción (VEGF-R2\Delta50) del dominio citosólico del receptor de factor de crecimiento endotelilal vascular humano 2 (VEGF-R2) al que le faltan 50 residuos centrales de los 68 residuos del dominio de inserto de quinasa se expresó en un sistema celular de baculovirus/insecto. De los 1356 residuos del VEGF-R2 de longitud completa, el VEGF-R2\Delta50 contiene los residuos 806-939 y 990-1171, y también un punto de mutación (E990V) dentro del dominio de inserto de quinasa respecto al VEGF-R2 de tipo silvestre. La autofosforilación de la construcción purificada se llevó a cabo mediante incubación de la enzima a una concentración de 4 \muM en presencia de ATP 3 mM y MgCl_{2} 40 mM en Hepes 100 mM, pH 7,5, que contiene 5% de glicerina y DTT 5 mM, a 4ºC durante 2 horas. Después de la autofosforilación, esta construcción ha demostrado poseer actividad catalítica esencialmente equivalente a la construcción del dominio de quinasa autofosforilado silvestre. Véase Parast y otro(s), Biochemistry, 37, 16788-16801 (1998).
Construcción de FGF-R1 para ensayo: El dominio de quinasa intracelular de FGF-R1 humano se expresó utilizando el sistema de expresión de vector de baculovirus partiendo del residuo de metionina endógeno 456 a glutamato 766, de acuerdo con el sistema de numeración de residuos de Mohammadi y otro(s), Mol. Cell. Biol., 16, 977-989 (1996). Además, la construcción tenía también las 3 substituciones de aminoácidos siguientes: L457V, C488A, y C584S.
Construcción de LCKC para ensayo: La quinasa de tirosina LCK se expresó en células de insecto como una deleción N-terminal comenzando a partir del residuo de aminoácido 233 hasta el extremo de la proteína en el residuo 509, con las 2 substituciones de aminoácidos siguientes en el terminal de N: P233M, C224D.
Construcción de CHK-1 para ensayo: Se expresó CHK1 humana de longitud completa (FL-CHK1) marcado
("tagged") con His con terminaciones de C utilizando el sistema celular de baculovirus/insecto. Contiene 6 residuos de histidina (6 x "tag" de His) en el terminal de C de la CHK1 humana en el aminoácido 476. La proteína se purificó empleando técnicas de cromatografía convencionales.
Construcción de CDK2/ciclina A para ensayo: La CDK2 se purificó usando metodología publicada (Rosenblatt y otro(s), J. Mol. Biol.., 230, 1317-1319 (1993)) a partir de células de insectos infectadas con un vector de expresión de baculovirus. La ciclina A se purificó a partir de células de E. coli que expresaban ciclina A recombinante de longitud completa, y se generó una construcción truncada de ciclina A mediante proteolisis limitada y se purtificó según se describió previamente (Jeffrey y otro(s), Nature, 376, 313-320 (27 de julio de 1995)).
Construcción de CDK4/ciclina D para ensayo: Se purificó un complejo de CDK4 humana y ciclina D3, o un complejo de ciclina D1 y una proteína de fusión de CDK4 humana y glucotationa-S-transferasa (GST-CDK4) utilizando técnicas cromatográficas bioquímicas tradicionales a partir de células de insectos que habían sido co-infectadas con los vectores de expresión de baculovirus correspondientes.
Construcción de FAK para ensayo: El dominio catalítico de FAK humana (FAKcd409) se expresó empleando el sistema de expresión de vector de baculovirus. El dominio de 280 aminoácidos expresado comprende los residuos metionina 409 a glutamato 689. Existe una substitución de aminoácido (P410T) respecto al número de estimación de secuencia L13616 publicado por Whithey, G. S. y otro(s), DNA Cell Biol., 9, 823-830, 1993. La proteína se purificó empleando técnicas cromatográficas convencionales.
Ensayo de VEGF-R2 Ensayo espectrofotométrico acoplado (FLVK-P)
La producción de ADP a partir de ATP que acompaña la transferencia de fosforilo se acopló a la oxidación de NADH utilizando piruvato de fosfoenol (PEP) y un sistema que tenía quinasa de piruvato (PK) y deshidrogenasa láctica (LDH). La oxidación de NADH se monitoreó siguiendo la disminución de la absorbancia a 340 nm (e_{340} = 6,22 cm^{-1}mM^{-1}) empleando un espectrofotómetro Beckman DU 650. Las condiciones de ensayo para VEGF-R2\Delta50 fosforilado (indicadas como FLVK-P en las Tablas siguientes) eran las siguientes: PEP 1 mM; NADH 250 \muM; 50 unidades de LDH/mL; 20 unidades de PK/mL; DTT 5 mM; poli(E_{4}Y_{1}) 5,1 mM; ATP 1 mM; y MgCl_{2} 25 mM en Hepes 200 mM, pH 7,5. Las condiciones de ensayo para VEGF-R2\Delta50 sin fosforilar (indicadas como FLVK en las Tablas siguientes) eran las siguientes: PEP 1 mM; NADH 250 \muM; 50 unidades de LDH/mL; 20 unidades de PK/mL; DTT 5 mM; poli(E_{4}Y_{1}) 20 mM; ATP 3 mM; y MgCl_{2} 60 mM y MnCl_{2} 2 mM en Hepes 200 mM, pH 7,5. Los ensayos se iniciaron con de 5 a 40 nM de enzima. Los valores de K_{i} se determinaron por la medición de la actividad enzimática en presencia de concentraciones variables de compuestos de ensayo. Las informaciones se analizaron utilizando software Enzyme Kinetic y Kaleidapraph.
Ensayo ELISA
La formación de fosafogastrina se monitoreó utilizando péptido de gastrina biotinilado (1-17) como substrato. La fosfogastrina biotinilada se inmovilizó empleando placas de microtitulación de 96 receptáculos recubiertas con streptavidin, a lo que le siguió la detección utilizando anticuerpo de anti-fosfotirosina conjugado con peroxidasa de rábano picante. La actividad de peroxidasa de rábano picante se monitoreó empleando sal de diamonio de 2,2'-azino-di-[3-etilbenzatiazolin sulfonato (6)] (ABTS). Las soluciones de ensayo típicas contenían: péptido de gastrina biotinilado 2 \muM; DTT 5 mM; ATP 20 \muM; MgCl_{2} 26 mM; y MnCl_{2} 2 mM en Hepes 200 mM, pH 7,5. El ensayo se inició con 0,8 nM de VEGF-R2\Delta50 fosforilado. La actividad de peroxidasa de rábano picante se extinguió mediante la adición de ácido (H_{2}SO_{4}), seguida por la lectura de la absorbancia a 405 nm. Los valores de K_{i} se determinaron mediante la medición de la actividad enzimática en presencia de concentraciones variables de compuestos de ensayo. Las informaciones se analizaron utilizando software Enzyme Kinetic y Kaleidapraph.
Ensayo de FGF-R
El ensayo espectrofotométrico se llevó a cabo como se describió anteriormente para VEGF-R2, excepto por lo siguientes cambios en la concentración: FGF-R = 50 nM, ATP = 2 mM, y poli(E_{4}Y_{1}) = 20 mM.
Ensayo de LCK
El ensayo espectrofotométrico se llevó a cabo como se describió anteriormente para VEGF-R2, excepto por lo siguientes cambios en la concentración: LCK = 60 nM, MgCl_{2} = 0 mM, poli(E_{4}Y_{1}) = 20 mM.
Ensayo de CHK-1
La producción de ADP a partir de ATP que acompaña la transferencia de fosforilo al péptido de substrato sintético Sintido-2 (PLARTLSVAGLPGKK) se acopló a la oxidación de NADH utilizando piruvato de fosfoenol (PEP) a través de las acciones de quinasa de piruvato (PK) y deshidrogenasa láctica (LDH). La oxidación de NADH se monitoreó siguiendo la disminución de la absorbancia a 340 nm (e_{340} = 6,22 cm^{-1}mM^{-1}) empleando un espectrofotómetro HP8452. Las soluciones de reacción típicas contenían: PEP 4 mM; NADH 0,15 mM; 28 unidades de LDH/mL; 16 unidades de PK/mL; DTT 3 mM; sintido-2 0,125 mM; ATP 0,15 mM; MgCl_{2} 25 mM en TRIS 50 mM, pH 7,5; y NaCl 400 mM. Los ensayos se iniciaron con 10 nM de FL-CHK1. Los valores de K_{i} se determinaron por la medición de la actividad enzimática en presencia de concentraciones variables de compuestos de ensayo. Las informaciones se analizaron utilizando software Enzyme Kinetic y Kaleidapraph.
Ensayos de CDK-2/ciclina A y CDK4/ciclina D
La actividad de quinasa dependiente de ciclina se midió por la cuantificación de la incorporación dependiente del tiempo catalizada por enzima de fosfato radiactivo a partir de [^{32}P]ATP en un fragmento recombinante de la proteína de retinoblastoma. A menos que se especifique lo contrario, los ensayos se llevaron a cabo en placas de 96 receptáculos en un volumen total de 50 \muL en presencia de HEPES (ácido N-[2-hidroxietil]-piperazino-N'-[2-etanosulfónico]) 10 mM (pH 7,4); MgCl_{2} 10 mM; trifosfato de adenosina (ATP) 25 mM; 1 mg/mL de ovalbúmina; 5 \mug/mL de leupeptina; ditiotreitol 1 mM; \beta-glicerofosfato 10 mM; vanadato de sodio 0,1 mM; fluoruro de sodio 0,1 mM; ácido etilen glicol-bis(\beta-aminoetil éter)-N,N,N'N'-tetraacético (EGTA) 2,5 mM, 2% (v/v) de dimetilsulfóxido; y 0,03-0,2 \muCi de [^{32}P]ATP. El substrato (0,3-0,5 \mug) consitía en fragmento de proteína de retinoblastoma recombinante purificada (Rb) (residuos 386-928 de la proteína de retinoblastoma nativa; 62,3 Kda, que contenía la mayoría de los sitios de fosforilación encontrados en la proteína nativa de 106 Kda, así como también un "tag" de seis residuos de histidina, a fin de facilitar la purificación). Las reacciones se iniciaron con CDK2 (complejo de CDK-2/ciclina A 150 nM) o CDK4 (complejo de CDK4/ciclina D3 50 nM), se incubó a 30ºC y se terminaron después de 20 minutos mediante la adición de ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) a 250 mM. El substrato fosforilado se capturó entonces sobre una membrana de nitrocelulosa utilizando un múltiple de filtración de 96 receptáculos, y se eliminó la radioactividad no incorporada mediante lavado reiterado con ácido fosfórico al 0,85%. La radioactividad se cuantificó exponiendo las membranas de nitrocelulosa secas a un generador de imágenes de fósforo ["phosphorimager"]. Los valores de K_{i} aparentes se midieron ensayando la actividad enzimática en presencia de diferentes concentraciones de compuestos y restando la radioactividad de fondo medida en ausencia de enzima. Los parámetros cinéticos (kcat, Km para ATP) se midieron para cada enzima bajo las condiciones de ensayo usuales determinando la dependencia de los regímenes iniciales sobre la concentración de ATP. Las informaciones se adecuaron a una ecuación para inhibición competitiva utilizando Kaleidapraph (Synergy Software), o se adecuaron a una ecuación para inhibición de unión estrecha competitiva utilizando el software KineTic (BioKin Ltd). Los valor medidos de K_{i} para inhibidores conocidos respecto de CDK4 y CDK2 coincidieron con los valores de CI_{50} publicados. La actividad específica de CDK4 fue la misma, tanto si estaba complejado con la ciclina D3 de longitud completa como a la construcción de ciclina D3 truncada; ambos complejos también produjeron valores de K_{i} muy similares para inhibidores selectivos.
Ensayo de FAK
FAK HTS utilizó el ensayo de polarización de fluorescencia proporcionado por LJL Biosystems. La reacción de quinasa contenía: Hepes 100 mM pH 7,5; MgCl_{2} 10 mM; DTT 1 mM; ATP 1 mM; y mg/mL de poli Glu-Tyr (4 : 1). La reacción se inició con la adición de FAKcd409 5 nM. La reacción se terminó mediante la adición de EDTA seguida de la adición de peptido marcado con flúor y un anticuerpo anti-fosfotirosina, ambos suministrados por LJL Biosystems. Los resultados de inhibición se leen en un detector Analyst (LJL).
Ensayo de proliferación de HUVEC
Este ensayo determina la capacidad de un compuesto de ensayo para inhibir la proliferación estimulada por factor de crecimiento de las células endoteliales de vena umbilical humana ("HUVEC"). Las células de HUVEC (pasaje 3-4, Clonetics Corp.) se descongelaron en medio de cultivo EGM2 (Clonetics Corp.) en frascos T75. Se adicionó a los frascos 24 horas más tarde medio EGM2 fresco. Cuatro o cinco días después, las células se expusieron a otro medio de cultivo (medio F12K suplementado con 10% de suero fetal bovino (FBS)), 60 \mug/ml de suplemento de crecimiento celular endotelial (ECGS), y 0,1 mg/ml de heparina). Posteriormente se utilizaron en los experimentos células de HUVEC de crecimiento exponencial. De diez a doce mil células de HUVEC se plaquearon en platos de 96 receptáculos en 100 \muL de medio de cultivo rico (descripto anteriormente). Se dejó que las células se unieran durante 24 horas en este medio. El medio se retiró entonces por aspiración y se agregaron a cada receptáculo 105 \muL de medio de inanición (F12K + 1% de FBS). Después de 24 horas, se agregaron 15 \muL de agente de ensayo disuelto en DMSO al 1% en medio de inanición o este vehículo solo a cada receptáculo de tratamiento; la concentración final de DMSO fue de 0,1%. Una hora más tarde, se agregaron 30 \muL de VEGF (30 ng/mL) en medio de inanición a todos los receptáculos excepto aquéllos que contenían controles sin tratar; la concentración final de VEFG fue de 6 ng/mL. La proliferación celular se cuantificó 72 horas después mediante reducción de colorante MTT, momento en el cual las células se expusieron durante 4 horas a MTT (Promega Corp.). La reducción de colorante se detuvo por adición de una solución de paro (Promega Corp.) y se determinó la absorbancia a 595 \lambda sobre un lector de placa espectrofotométrico de 96 receptáculos.
Los valores de CI_{50} se calcularon mediante adaptación a curva de la respuesta de A^{595} a varias concentraciones del agente de ensayo, se emplearon siete concentraciones separadas por 0,5 log, con celdas por triplicado para cada concentración. Para el rastreo de placas de biblioteca de compuestos, se emplearon una o dos concentraciones (un receptáculo por concentración), y el% de inhibición se calculó por medio de la siguiente fórmula:
\text{% de inhibición = (control} - \text{ensayo) dividido por (control} - \text{inanición)}
en donde:
control = A^{595} en donde VEGF está presente sin agente de ensayo
ensayo = A^{595} en donde VEGF está presente con agente de ensayo
inanición = A^{595} en donde están ausentes tanto el VEGF como el agente de ensayo
Ensayo de proliferación de células cancerosas (MV522)
Para determinar si un inihibidor de quinasas de proteína podría tener utilidad terapéutica en el tratamiento del cáncer, es importante demostrar que la capacidad del inhibidor para bloquear la proliferación celular en respuesta a un factor de crecimiento que está involucrado en la mediación de un trastorno proliferativo. El protocolo para evaluar la proliferación celular en células cancerosas es similar a aquél utilizado para la evaluación en células de HUVEC. Dos mil células de cáncer pulmonar (linaje MV522, adquiridas de American Tissue Cultural Collection) se sembraron en medio de crecimiento (medio RPMI1640 suplementado con glutamina 2mM y 10% de FBS). Se dejó que las células se unieran durante 1 día antes de la adición de los agentes de ensayo y/o vehículos. Las células se trataron simultáneamente con los mismos agentes de ensayo empleados en el ensayo de HUVEC. La proliferación celular se cuantifica mediante ensayo de reducción de colorante MTT 72 horas después de exposición a los agentes de ensayo. La duración total del ensayo es de 4 días frente a los 5 días para células HUVEC debido a que las células MV522 no está expuestas a medio de inanición.
Ensayo in vivo de desarrollo del sistema vascular retinal en ratas neonatales
El desarrollo del sistema vascular retinal en ratas tiene lugar desde el día 1 postnatal hasta el día postnatal 14 (P1-P14). Este proceso es dependiente de la actividad de VEGF (J. Stone, y otro(s), J. Neurosci., 15, 4738 (1995)). El trabajo previo ha demostrado que el VEGF también actúa como un factor de supervivencia para los vasos de la retina durante el desarrollo vascular temprano (Alon, y otro(s), Nat. Med., 1, 1024 (1995)). Para evaluar la capacidad de compuestos específicos para inhibidir la actividad de VEGF in vivo, los compuestos se formularon en un vehículo apropiado, usualmente 50% de polietilén glicol, peso molecular promedio 400 daltons, y 50% de solución de sacarosa 300 mM en agua desionizada. Típicamente, se inyectaron dos microlitros (2 \muL) de la solución de droga dentro del vítreo medio del ojo de las crías de ratas en el día 8 ó 9 postnatal. Seis días después de la inyección intravitral, los animales fueron sacrificados y las retinas disecadas apartándolas del tejido ocular remanente. Las retinas aisladas se sometieron entonces a un protocolo de tinción histoquímica que tiñe específicamente las células endoteliales (Lutty y McLeoch, Arch. Ophthalmol., 110, 267 (1992)), poniendo de manifiesto la extensión de la vascularización dentro de la muestra de tejido. Las retinas individuales se montan entonces en forma aplanada sobre portaobjetos de vidrio y se examinan para determinar la extensión de la vascularización. Los compuestos efectivos inhiben el desarrollo ulterior de la vasculatura retinal e induce una regresión de casi todos los vasos mayores dentro de la retina. La cantidad de regresión vascular se emplea para evaluar la potencia relativa de los compuestos después de administración in vivo. La regresión vascular se clasifican en una escala subjetiva que va de uno a tres signos más, significando un signo más una regresión detectable que se estima es de aproximadamente 25% o menos, se considera que dos signos más equivalen a aproximadamente 25-75% de regresión y se le otorgan tres signos más a retinas con regresión casi total (aproximadamente 75% o mayor). En el modelo de desarrollo, el compuesto del Ejemplo B(30) es uno de los compuestos más efectivos ensayados hasta la fecha, obteniendo una calificación de dos signos màs (++) cuando se suministró una dosis de 2 \muL de 5 mg/mL de concentración de droga inicial.
Ensayo in vivo de desarrollo de sistema vascular retinal en modelo neonatal de rata de retinopatía de premadurez
Un segundo modelo de neovascularización retinal dependiente de VEGF se empleó para evaluar las actividades de esta serie de compuestos. En este modelo (Penn y otro(s), Invest. Ophthamol. Vis. Sci., 36, 2063, 1995)) se colocaron a crías de ratas (n = 16) con sus madres en un recinto controlado por computadora que regula la concentración de oxígeno. Los animales se expusieron durante 24 horas a una concentración de 50% de oxígeno a las que le siguieron 24 horas a una concentración de 10% de oxígeno. Este ciclo alternativo de hiperoxia seguida por hipoxia se repite 7 veces después de las cuales se sacan al aire ambiente (P14). Los compuestos son administrados por medio de inyección intravitral después de ser retirados los animales para exposición al aire ambiental, y éstos son sacrificados 6 días después (P20). Las retinas son entonces aisladas, teñidas, montadas y analizadas como se detalló anteriormente en el modelo de desarrollo. La efectividad se calificó también como se describió para el modelo de desarrollo. El Ejemplo D(74) es el compuesto más efectivo ensayado hasta la fecha en este modelo (++).
Los resultados de las pruebas de los compuestos utilizando varios ensayos se resumen en las Tablas que siguen, en donde una notación de "% @" indica el porcentaje de inhibición a la concentración especificada y "NI" indica que no existe inhibición.
TABLA 1
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327 
\hskip0.5cm
Nota: * = Determinado con ensayo ELISA en lugar de ensayo espectrofotométrico TABLA 2
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330
331 
\hskip0.5cm
Nota: * = Determinado con ensayo ELISA en lugar de ensayo espectrofotométrico 
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TABLA 3
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333
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Resultados de rastreo de alto rendimiento de CHK1 se muestran en la Tabla 4.
TABLA 4
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Resultados de rastreo de alto rendimiento de FAK se muestran en la Tabla 4.
TABLA 5
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362 
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Protocolos de síntesis para Ejemplos combinatorios en las Tablas A-D
Los cuatro bloques de formación de bibliotecas 2-(4-aminosulfonilfenil)amino,4-aminotiazol-5-carbotioamida, 2-(4-dimetilaminofenil)amino,4-aminotiazol-5-carbotioamida, 2-(3,4,5-trimetoxiaminosulfonilfenil)amino,4-aminotiazol-5-carbotioamida y 2-(4-isopropil-fenil)amino,4-aminotiazol-5-carbotioamida se sintetizaron de una manera similar a aquélla de las Etapas (i) y (ii) en el Ejemplo A anterior.
Todos los compuestos en las Tablas A-D se sintetizaron mediante una química similar a la utilizada para preparar el Ejemplo A(1) excepto: Se distribuyó una solución madre de las 4 carbotioamidas anteriores correspondientes en 10% de DMF/metanol en una placa de 96 receptáculos profundos cada uno de los cuales contenía 5 \mumoles de material. Luego, se adicionaron 5 \mumoles de 63-\alpha-haluro cetonas a los receptáculos indiciduañes de cada placa. Después se agitaron las placas de reacción a temperatura ambiente durante 16 horas, agregándose aproximadamente 10 mg de resina Merrifield y 10 mg de resina de N-(2-mercaptoetil)aminometil poliestireno a cada receptáculo. Las placas de reacción se agitaron por otras dos horas. La mezcla de reacción se filtró entonces y los filtrados de cada reacción se recogieron individualmente en una placa de recepción de 96 receptáculos. Los compuestos se obtuvieron después de la eliminación del solvente.
TABLA A 
\vskip1.000000\baselineskip
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TABLA B
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TABLA C 
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TABLA D 
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Procedimiento combinatorio para la síntesis de derivados de tiazol funcionalizados con urea e inhibición de proliferación de HUVEC
387
388
Se distribuyeron soluciones de 263 aminas (1,5 \mumoles), y Et_{2}N (0,1393 \muL; 1,0 \mumol), disueltos en DMF (15 \muL) en los receptáculos de una placa de 96 receptáculos. En los casos en los que la amina se utilizó como una sal de hidrocloruro, se agregó Et_{2}N adicional [0,4179 \muL; 3,0 \mumoles] para liberar la base libre. Cada uno de los receptáculos se trató con una solución de carbamato de p-carboxi-fenol (0,5395 mg; 1,0 \mumol) disuelto en DMF (30 mL), y luego se agitó durante 24 horas a temperatura ambiente. Las mezclas de reacción en bruto se concentraron utilizando un aparato Gene Vac®, y luego se diluyeron con DMSO hasta una concentración final de 10 mM, dando como resultado los Ejemplos mostrados en la Tabla E.
TABLA E
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\newpage
Inhibición de Proliferación de HUVEC
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Inhibición de Proliferación de HUVEC
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Procedimientos combinatorios para los Ejemplos en la Tabla I
Se prepararon separadamente soluciones 0,1 M del ácido, del patrón de amina, de hexafluorfosfato de o-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametil-uronio y trietilamina en DMF anhidra. A cada tubo en una disposición de 8 x 11 tubos de cultivo (10 x 75 mm) se agregaron 110 \muL (0,011 mmol) de un ácido diferente. A la misma se le añadieron 100 \muL (0,01 mmol) de la solución de amina, 110 \muL (0,011 mmol) de la solución de trietilamina seguida de 110 \muL (0,011 mmol) de la solución de hexafluorfosfato de o-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametil-uronio. Las reacciones se agitaron en un bloque de calentamiento a 60ºC durante 6 horas. Las mezclas de reacción se transfirieron a una placa de 96 receptáculos de 1 mL utilizando un manipulador de líquido. Los solventes se eliminaron utilizando el aparato SpeedVac®, y las mezclas de reacción en bruto se redisolvieron en DMSO para dar la concentración teórica final de 10 mM. Los resultados del rastreo se muestran en la Tabla I.
TABLA I
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Procedimientos combinatorios para los Ejemplos en la Tabla II
Se prepararon separadamente soluciones 0,1 M del ácido, del patrón de amina, de hexafluorfosfato de o-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametil-uronio y trietilamina en DMF anhidra. A cada tubo en una disposición de 8 x 11 tubos de cultivo (10 x 75 mm) se agregaron 105 \muL (0,0105 mmol) de un ácido diferente. A la misma se le añadieron 100 \muL (0,01 mmol) de la solución de amina, 105 \muL (0,0105 mmol) de la solución de trietilamina seguida de 105 \muL (0,0105 mmol) de la solución de hexafluorfosfato de o-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametil-uronio. Las reacciones se agitaron en un bloque de calentamiento a 50ºC durante 3 horas. Las mezclas de reacción se transfirieron a una placa de 96 receptáculos de 1 mL utilizando un manipulador de líquido. Los solventes se eliminaron utilizando el aparato SpeedVac®, y las mezclas de reacción en bruto se redisolvieron en DMSO para dar la concentración teórica final de 10 mM. Los resultados del rastreo se muestran en la Tabla II
TABLA II
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Los compuestos ilustrativos descriptos anteriormente pueden ser formulados en composiciones farmacéuticas de acuerdo con los siguientes ejemplos generales:
Ejemplo 1 Composición parenteral
Para preparar una composición farmacéutica parenteral adecuada para administración por inyección, se disuelven 100 mg de una sal soluble en agua de un compuesto de la fórmula I en DMSO y luego es mezclado con 10 mL de solución de cloruro de sodio estéril al 0,9%. La mezcla es incorporada en una forma de dosificación unitaria apropiada para administración por inyección.
Ejemplo 2 Composición oral
Para preparar una composición farmacéutica para administración oral, se mezclan 100 mg de un compuesto de la fórmula I con 750 mg de lactosa. La mezcla es incorporada en una forma unitaria de dosificación oral, tal como una cápsula de gelatina dura, que es apropiada para administración oral.
Ejemplo 3 Composición intraocular
Para preparar una composición farmacéutica de liberación sostenida para administración intraocular, se suspende un compuesto de la fórmula I en una solución neutra, isotónica de ácido hialurónico (contracción 1,5%) en tampón de fosfato (pH 7,4) para formar una suspensión al 1%.
Deberá entenderse que la descripción anterior es de naturaleza ilustrativa y explicativa, y está concebida para esclarecer la invención y sus realizaciones preferidas.

Claims (13)

1. Un compuesto de la fórmula I:
509
en la cual:
R^{1} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos, o un grupo de la fórmula R^{6}-CO o R^{6}-CS en las cuales R^{6} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, alquenilo C_{2}-C_{12}, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12} sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos;
R^{2} es hidroxilo, halo, ciano, o nitro, o alquilo C_{1}-C_{12}, alquenilo C_{2}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos, o
un grupo de la fórmula (A)
510
en donde R_{a} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos; o
un grupo de la fórmula (B)
511
en donde R_{a} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos; o
un grupo de la fórmula (C)
512
en donde R_{b} y R_{c} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos; o
un grupo de la fórmula (D)
513
en donde R_{d} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, hidroxilo, alcoxilo C_{1}-C_{12}, amino, alquilamino, dialquilamino, o acilamino sin substituir o substituidos, y R_{e} es hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, amino, alquilamino o dialquilamino sin substituir o substituidos; o
un grupo de la fórmula (E)
514
en donde R_{f} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos; o
un grupo de la fórmula (F)
515
en donde R_{g} y R_{h} son cada uno independientemente alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos; o
un grupo de la fórmula (G)
516
en donde R_{i} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos; o un grupo de la fórmula (A), de la fórmula (B), de la fórmula (C), de la fórmula (H), o de la fórmula (I); o
n grupo de la fórmula (H)
517
en donde R_{j} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, hidroxilo, alcoxilo C_{1}-C_{12}, o amino sin substituir o substituidos, o un grupo de la fórmula (A), de la fórmula (B), de la fórmula (C), o de la fórmula (D), y R_{k} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos, o un grupo de la fórmula (A), de la fórmula (B), de la fórmula (C), de la fórmula (D), de la fórmula (E), o de la fórmula (F); o
un grupo de la fórmula (I)
518
en donde R_{l} es hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos, o un grupo de la fórmula (C);
o R^{2} es un cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, o arilo sin substituir o substituidos que está fusionado con Q;
X es C o N; y
Q es un radical divalente que tiene 2 ó 3 átomos anulares cada uno seleccionado independientemente de C, N, O, S, C-R^{5}y N-R^{5}, en donde R^{5} es hidroxilo, halo, ciano, o amino, o alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12} sin substituir o substituidos, que conjuntamente con C* y N* forman un anillo aromático o no aromático de cinco o seis miembros;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula II:
519
en la cual
R^{1} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos, o un grupo de la fórmula R^{6}-CO o R^{6}-CS en las cuales R^{6} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C _{12}, heterocicloalquilo, alquenilo C_{2}-C_{12}, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12} sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos;
R^{2} es como se ha definido en la reivindicación 1;
X es C o N; e
Y y Z son cada uno independientemente C, N, S, O, C-R^{5} o N-R^{5} en donde R^{5} es como se ha definido en la reivindicación 1;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
3. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable de acuerdo con la reivindicación 2, en el cual:
R^{1} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos, o R^{6}-CO o R^{6}-CS en las cuales R^{6} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, alquenilo C_{2}-C_{12}, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12} sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno o alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo sin substituir o substituidos;
R^{2} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos;
X e Y son cada uno independientemente C o N; y
Z es S u O.
4. Un compuesto o sal farmacéuticamente aceptable de acuerdo con la reivindicación 3, en el cual:
R^{1} y R^{2} son cada uno independientemente un arilo substituido;
X es C;
Y es C o N; y
Z es S u O.
5. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula III:
520
en la cual:
R^{1} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos, o R^{6}-CO o R^{6}-CS en las cuales R^{6} es alquilo C_{1}-C_{12}, alquenilo C_{2}-C_{12}, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12} sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo;
R^{3} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12}, ariloxilo sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo;
R^{4} es hidrógeno, hidroxilo, alquilo C_{1}-C_{8}, halo, alcoxilo C_{1}-C_{8}, amino, nitro, o trifluormetilo; e
Y y Z son cada uno independientemente C, N, S, O, o C-R^{5} o N-R^{5} en donde R^{5} es alquilo C_{1}-C_{12} o arilo sin substituir o substituidos;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
6. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 de la fórmula IV:
521
en la cual:
R^{1} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos, o R^{6}-CO en la cual R^{6} es alquilo C_{1}-C_{12}, alquenilo C_{2}-C_{12}, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo;
R^{3} es alquilo C_{1}-C_{12}, cicloalquilo C_{3}-C_{12}, heterocicloalquilo, arilo, heteroarilo, alcoxilo C_{1}-C_{12}, ariloxilo sin substituir o substituidos, o N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo;
R^{4} se selecciona independientemente de hidrógeno, hidroxilo, alquilo C_{1}-C_{8}, halo, alcoxilo C_{1}-C_{8}, amino, nitro, o trifluormetilo; e
Y es C o N; y
Z es S u O;
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
7. Un compuesto o sal farmacéuticamente aceptable del mismo de acuerdo con la reivindicación 6, en el cual: R^{1} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos, o R^{6}-CO en la cual R^{6} es N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo; R^{3} es alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, heteroarilo, o alcoxilo C_{1}-C_{12}, sin substituir o substituidos; R^{4(a)} y R^{4(b)} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, o halo; Y es C o N; y Z es S u O.
8. Un compuesto o sal farmacéuticamente aceptable del mismo de acuerdo con la reivindicación 7, en el cual: R^{1} es arilo o heteroarilo sin substituir o substituidos, o R^{6}-CO en la cual R^{6} es N-R^{7}R^{8}, en donde R^{7} y R^{8} son cada uno independientemente hidrógeno, alquilo C_{1}-C_{12}, arilo, o heteroarilo; R^{3} es arilo, heteroarilo, o alcoxilo C_{1}-C_{12} sin substituir o substituidos; R^{4(a)} es flúor; R^{4(b)} es flúor; Y es N; y Z es O.
9. Una composición farmacéutica que comprende:
(a) una cantidad terapéuticamente efectiva de un compuesto, o sal farmacéuticamente aceptable de acuerdo con la reivindicación 1; y
(b) un portador, diluyente, vehículo o excipiente farmacéuticamente aceptable para el mismo.
10. El uso de un compuesto o sal farmacéuticamente aceptable según se ha definido en la reivindicación 1 para la preparación de un medicamento para el tratamiento de una enfermedad mediada por actividad de quinasa de proteína.
11. El uso de acuerdo con la reivindicación 10, en el cual la enfermedad está asociada con crecimiento de tumores, proliferación celular o angiogénesis.
12. El uso de acuerdo con la reivindicación 10 u 11, en el cual la actividad de un receptor de quinasa de proteína es modulada poniendo en contacto del receptor de quinasa con una cantidad efectiva del compuesto.
13. El uso de acuerdo con la reivindicación 12, en el cual el receptor de quinasa de proteína es un receptor de VEGF.
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