ES2230371T3

ES2230371T3 - Procedimiento para producir antagonista de lhrh.

Info

Publication number: ES2230371T3
Application number: ES01978273T
Authority: ES
Inventors: Michael Damm; Waldemar Salonek; Jurgen Engel; Horst Bauer; Gabriele Stach
Original assignee: Zentaris AG
Current assignee: Aeterna Zentaris GmbH
Priority date: 2000-08-17
Filing date: 2001-08-09
Publication date: 2005-05-01
Anticipated expiration: 2021-08-09
Also published as: SI1309607T1; UA74005C2; DK1309607T3; CA2355573A1; CN1187369C; ZA200300777B; BR0113296A; EP1309607A2; WO2002014347A2; DE50104316D1; HUP0300738A3; CZ2003688A3; NZ524023A; AR030371A1; ATE280779T1; CN1447817A; PL359495A1; PL204496B1; AU1043902A; PT1309607E

Abstract

Procedimiento para la preparación de una formulación farmacéutica destinada a la aplicación por vía parenteral a animales mamíferos, caracterizado porque se hace reaccionar una sal por adición de ácido, fácilmente soluble, de un agente antagonista de LHRH peptídico de carácter básico, en presencia de un apropiado agente diluyente, con un intercambiador de iones en lecho mixto o con una mezcla de un intercambiador de iones de carácter ácido y de un intercambiador de iones de carácter básico, mediando formación del péptido de carácter básico libre, a continuación se separa el intercambiador de iones, y luego el péptido de carácter básico libre se hace reaccionar con un ácido inorgánico u orgánico mediando formación de la deseada sal por adición de ácido del péptido difícilmente soluble, luego se añaden apropiadas sustancias farmacéuticas coadyuvantes, de vehículo y de estructura, y a continuación se elimina el agente diluyente.

Description

Procedimiento para producir antagonistas de LHRH.

Es objeto del presente invento un procedimiento para la preparación de una formulación farmacéutica destinada a la aplicación por vía parenteral en el caso de animales mamíferos, caracterizado porque una sal por adición de ácido de un agente antagonista de LHRH peptídico de carácter básico (sal de péptido inicial) (1) se hace reaccionar en presencia de un agente diluyente apropiado con un intercambiador de iones en lecho mixto o con una mezcla de un intercambiador de iones de carácter ácido y de un intercambiador de iones de carácter básico, mediando formación del péptido de carácter básico libre, a continuación se separa el intercambiador de iones, y luego el péptido de carácter básico libre se hace reaccionar con un ácido inorgánico u orgánico mediando formación de la deseada sal por adición de ácido del péptido (sal de péptido final) (2), luego se añaden apropiadas sustancias farmacéuticas coadyuvantes, de vehículo y/o de estructura y a continuación se elimina el agente diluyente.

En el documento de solicitud de patente internacional Nº WO 95/15767 se describe la preparación de un péptido difícilmente soluble por reacción de una solución acuosa de una sal de ácido con una solución en ácido acético del péptido de carácter básico, mediando precipitación de la sal por adición de ácido del péptido, difícilmente soluble. Por ejemplo, se describe la preparación del agente antagonista de LHRH cetrorelix embonato.

La expresión "agente antagonista de LHRH peptídico de carácter básico" significa en este contexto antide, A-75998, ganirelix, antagonista de NalGlu, cetrorelix, teverelix (Antarelix ®) así como los agentes antagonistas de acuerdo con los siguientes compuestos: a saber los compuestos conocidos a partir del documento de solicitud de patente US 5.942.493 de la fórmula general (I)

1

en la que n significa el número 3 ó 4, R^{1} significa un grupo alquilo, un grupo alquiloxi, un grupo arilo, un grupo heteroarilo, un grupo aralquilo, un grupo heteroaralquilo, un grupo aralquiloxi o un grupo heteroaralquiloxi, en cada caso sin sustituir o sustituido, R^{2} y R^{3} independientemente uno de otro, significan en cada caso un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo, un grupo aralquilo o un grupo heteroaralquilo, en cada caso sin sustituir o sustituido, pudiendo la sustitución constar a su vez de un grupo arilo o de un grupo heteroarilo, o -NR^{2}R^{3} significa un grupo de aminoácido, así como R^{4} representa un grupo con la fórmula (II)

2

en la que p significa un número entero de 1 a 4, R^{5} significa hidrógeno o un grupo alquilo y R^{6} significa un grupo arilo o un grupo heteroarilo, sin sustituir o sustituido, o R^{4} representa un anillo de la fórmula general (III)

3

en la que q significa el número 1 ó 2, R^{7} significa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo, R^{8} significa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo y X significa un átomo de oxígeno o de azufre, pudiendo los radicales aromáticos o heteroaromáticos presentarse en forma parcial o totalmente hidrogenada, así como pudiendo los átomos de carbono quirales estar configurados como R ó S, y sus sales con ácidos farmacéuticamente aceptables.

Un compuesto de la fórmula general V

\hskip1cm

Ac-D-Nal(2)^{1}-D-(pCl)Phe^{2}-D-Pal(3)^{3}-Ser^{4}-Tyr^{5}-D-Xxx^{6}-Leu^{7}-Arg^{8}-Pro^{9}-D-Ala^{10}-NH_{2}

\hskip1.5cm

(V)

en la que D-Xxx representa un grupo de aminoácido de la fórmula general (VI)

(VI)---HN---

\delm{C}{\delm{\para}{\delm{(CH _{2} ) _{n} }{\delm{\para}{\delm{NH}{\delm{\para}{CO---R ^{4} }}}}}}

H---CO---O---

en la que n representa el número 3 ó 4, R^{4} representa un grupo con la fórmula (II)

2

en la que p significa un número entero de 1 a 4, R^{5} significa hidrógeno o un grupo alquilo y R^{6} significa un grupo arilo o un grupo heteroarilo, sin sustituir o sustituido,

o R^{4} representa un anillo de la fórmula general (III)

4

en la que q significa el número 1 ó 2, R^{7} significa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo, R^{8} significa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo y X significa un átomo de oxígeno o de azufre, y sus sales con ácidos farmacéuticamente aceptables, y los compuestos divulgados en la solicitud de patente alemana DE 19911771 de la siguiente fórmula general (I)

\hskip2.8cm

A-Xxx^{1}-Xxx^{2}-Xxx^{3}-Xxx^{4}-Xxx^{5}-Xxx^{6}-Xxx^{7}-Xxx^{8}-Xxx^{9}-Xxx^{10}-NH_{2}

\hskip2.5cm

(I)

en la que

A representa un grupo acetilo o 3-(4-fluorofenil)-propionilo,

Xxx^{1} representa D-Nal(1) o D-Nal(2),

Xxx^{2}-Xxx^{3} representa D-Cpa-D-Pal(3) o un enlace simple,

Xxx^{4} representa Ser,

Xxx^{5} representa N-Me-Tyr,

Xxx^{6} representa D-Cit, D-Hci o un grupo de D-aminoácido de la fórmula general (II)

5

en la que n significa el número 3 ó 4, representando R^{1} un grupo con la fórmula general III,

\hskip6cm

-(CH_{2})_{p}-CO-NR^{2}R^{3}

\hskip6cm

(III)

en la que p significa un número entero de 1 a 4, R^{2} significa hidrógeno o un grupo alquilo y R^{3} significa un grupo arilo o un grupo heteroarilo, sin sustituir o sustituido, o R^{1} representa un grupo 3-amino-1,2,4-triazol-5-carbonilo o R^{1} representa un anillo de la fórmula general (IV)

6

en la que q representa el número 1 ó 2, R^{4} significa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo, R^{5} significa un átomo de hidrógeno o un grupo alquilo y X significa un átomo de oxígeno o de azufre,

Xxx^{7} significa Leu o Nle,

Xxx^{8} significa Arg o Lys(iPr),

Xxx^{9} significa Pro y

Xxx^{10} significa Ala o Sar,

y sus sales con ácidos farmacéuticamente aceptables.

Otros péptidos son abarelix, azaline B, detirelix, ramorelix (Stoeckemann y Sandow, J. Cancer Res. Clin. Oncol. 1993, 119, 457) y RS-68439. Las estructuras de los mencionados péptidos se encuentran en: Behre y colaboradores, GnRH antagonists: an overview [Agentes antagonistas de GnRH], Proceedings of the 2^{nd} Conference on Ovulation Induction, The Parthenon Publishing Group Ltd.; Kutscher y colaboradores, Angew. Chem. 1997, 109, 2.240.

En el caso de las sales por adición de ácidos de los péptidos conformes al invento, que se emplean como eductos (productos de partida), se trata preferiblemente de sales fácilmente solubles, tales como los acetatos, hidrocloruros o sulfatos.

De acuerdo con el procedimiento conforme al invento, la sal de péptido inicial se disuelve total o parcialmente en un agente diluyente o se suspende en éste. A continuación, se añade un agente diluyente. Los agentes disolventes y diluyentes pueden ser iguales o diferentes. Como agentes disolventes o bien diluyentes entran en cuestión por ejemplo: agua, etanol, metanol, propanol, isopropanol, butanol, acetona, dimetilcetona, metiletilcetona, dimetilacetamida, dimetilformamida, N-metil-pirrolidona, acetonitrilo, pentano, hexano, heptano y sus mezclas. Se prefieren etanol, isopropanol o acetona. Ha de preferirse asimismo un contenido de agua de 1 a 60%, preferentemente de 5 a 50%.

A la solución o suspensión de la sal de péptido inicial se le añade el intercambiador de iones en lecho mixto, es decir una mezcla de un intercambiador de iones de carácter ácido y de un intercambiador de iones de carácter básico. Para los intercambiadores de iones entra en cuestión por ejemplo Amberlite®.

La cantidad de intercambiadores de iones se ajusta al número de los grupos de carácter básico por péptido. La cantidad se determina mediante adición hasta que se obtenga un valor constante del pH. Por ejemplo, para 1 g de cetrorelix se necesitan 10 g de Amberlite MB-3.

Los valores del pH de las soluciones de bases, al realizar la preparación de las bases, se ajustan a 7,5 hasta 13 según cuál sea la sal de sustancia activa que se emplee, en particular en el caso de sales de péptidos con aminoácidos que reaccionan de modo básico, pero más en particular en el caso de sales de agentes antagonistas de LHRH (por ejemplo cetrorelix, D-63153, abarelix, ganirelix, ramorelix, que se pueden presentar por ejemplo en forma de acetato), dependiendo de la sustancia activa utilizada.

La temperatura no debería sobrepasar los 25-30ºC, con el fin de evitar una descomposición del péptido. El período de tiempo de reacción para la preparación de la base libre se efectúa usualmente en el transcurso de unos pocos minutos, por ejemplo 20 min, partiendo del acetato de cetrorelix. También puede ser más largo, por ejemplo de aproximadamente 1 h, partiendo del cetrorelix embonato. Después de haberse alcanzado un valor constante del pH, la reacción debería ser interrumpida, puesto que pueden formarse por ejemplo productos de descomposición a causa de la basicidad de las soluciones.

A continuación, el intercambiador de iones se elimina desde la mezcla de reacción. La eliminación puede efectuarse mediante separación por tamizado, separación por filtración, separación por centrifugación o filtración en columna.

La solución desde transparente hasta turbia de la base de péptido libre, que es inestable, debería hacerse reaccionar con la mayor rapidez posible con el ácido, mediando formación de la deseada sal por adición de ácido. La adición del ácido puede efectuarse como sustancia sólida o en solución, o bien en forma de suspensión. Exactamente igual, puede efectuarse la disolución de la base de péptido libre en el ácido.

Los períodos de tiempo de reacción están situados en el intervalo de desde algunos minutos hasta algunas horas. Por ejemplo, para la formación de cetrorelix embonato, el período de tiempo de reacción es de 1,5 h.

A continuación, la solución de reacción, que usualmente es transparente, se filtra en condiciones estériles. A continuación, se puede eliminar el disolvente mediando obtención de la sal de péptido pura. Alternativamente, antes de la eliminación del disolvente, se pueden añadir a la solución sustancias coadyuvantes, aditivas o de soporte. La adición de las sustancias coadyuvantes puede efectuarse en forma de un material sólido antes de la filtración en condiciones estériles, o en forma de una solución filtrada estéril después de la filtración en condiciones estériles.

Apropiadas sustancias coadyuvantes son ejemplo manitol, sorbitol, xilita o un almidón soluble.

Conforme al invento, las siguientes sales se pueden preparar mediante adición del ácido correspondiente: acetato, adipato, ascorbato, alginato, benzoato, bencenosulfonato, bromuro, carbonato, citrato, cloruro, dibutil-fosfato, dihidrógeno-citrato, dioctil-fosfato, dihexadecil-fosfato, fumarato, gluconato, glucuronato, glutamato, hidrógeno-carbonato, hidrógeno-tartrato, hidrocloruro, hidrógeno-citrato, yoduro, lactato, alfa-ácido lipónico, malato, maleato, malonato, pamoato (embonato), palmitato, fosfato, salicilato, estearato, succinato, sulfato, tartrato, tanatos, oleato u octil-
fosfato.

Ejemplo

46,47 g de D-20761 se añadieron en porciones a 1.193 g de agua y se disolvieron mediando agitación (= solución 1). A continuación, la solución 1 se diluyó mediando agitación con 3.261 g de etanol al 96% (= solución 2). La solución 2, después de la dilución, se filtró a través de un filtro preliminar de fibras de vidrio, y el material filtrado se mezcló mediando agitación con 390 g de Amberlite MB3 (intercambiador de iones de lecho mixto a base de intercambiadores de cationes y de aniones fuertemente ácidos).(= mezcla 1).

316,8 g de manita se disolvieron mediando agitación en 1.267 g de agua (= solución 3).

Después de haber agitado durante 15 min, se midió el valor del pH de la solución sobrante de la mezcla 1, y después de haber seguido agitando todavía durante otros 5 minutos, se midió de nuevo el valor del pH. La solución, después de haberse alcanzado el valor del pH de 12,5, se separó a continuación, a través de un tamiz de malla fina, del Amberlite MB3. (= solución 4).

4.162 g de la solución 4 se mezclaron mediando agitación con 5,34 g de ácido embónico. Esta mezcla se agitó enérgicamente durante otras 1,5 h y la solución algo turbia se filtró a continuación a través de un filtro preliminar de fibras de vidrio. En el caso de esta solución se midió un valor del pH de 8,4 (= solución 5). Los valores medidos del pH se midieron con un electrodo pulimentado con un líquido electrolítico viscoso. Los valores del pH habían de ser considerados solamente como valores relativos, puesto que las soluciones o suspensiones medidas contenían etanol y por consiguiente indicaban un valor aparentemente más alto.

3.333 g de la solución 5 se filtraron en condiciones estériles en el equipo de reacción atemperado a la temperatura ambiente (TA) y se añadieron 528 g de la solución 3, filtrados en condiciones estériles, mediando agitación a la solución 5 atemperada a la TA (= solución 6).

La solución 6 se calentó a 40ºC y a continuación la mezcla de etanol y agua se separó por destilación hasta dejar <= 1.931 g en vacío (= suspensión 1). La suspensión 1 de cetrorelix embonato se enfrió a TA y se diluyó mediando agitación con agua filtrada en condiciones estériles para finalidades de inyección hasta 3.000 g (= suspensión 2). La suspensión 2 acabada, atemperada a la TA, se envasó a continuación en porciones cada una de 3,0 g en frascos para inyección con una capacidad de 10 ml, éstos se proveyeron de tapones para liofilización y se transfirieron a una instalación de liofilización.

Los frascos para inyección se congelaron a una temperatura de la placa de -40ºC en una instalación de liofilización (GT). La desecación se efectuó mediante un programa de desecación a una temperatura de la placa subiendo desde -40ºC a 20ºC. La instalación de GT se cubrió con nitrógeno filtrado en condiciones estériles, los frascos para inyección se cerraron en la instalación y a continuación las caperuzas rebordeables se colocaron y rodaron.

Después de la liofilización, los frascos para inyección cerrados se esterilizaron por rayos gamma a 12 kGy (min) - 15 kGy. Esto último es opcional. 1 frasco para inyección para 140,0(7) mg contiene 34,07 mg de cetrorelix embonato, correspondientes a 30 mg de cetrorelix y 106 mg de manitol. Para la reconstitución, se utilizan 2 ml de agua para finalidades de inyección. La suspensión obtenida se puede administrar por vía i.m. (intramuscular) o s.c. (subcutánea).

Efecto biológico

El material liofilizado de cetrorelix embonato (2:1), obtenido de acuerdo con el Ejemplo 1 (30 mg) se vuelve a suspender en 2 ml de agua para finalidades de inyección, y luego se puede administrar por vía parenteral, preferiblemente por vía subcutánea (s.c.) o intramuscular (i.m.).

En el caso de una administración por vía s.c., se encuentra para el cetrorelix embonato (2:1) una biodisponibilidad de aproximadamente 30-50% (100% = acetato de cetrorelix administrado por vía intravenosa). Una ventaja especial del material liofilizado de cetrorelix embonato (2:1) es el pequeño o ningún efecto denominado de reventamiento en un paciente. La duración del efecto es dependiente de la dosis, y en el caso de una dosis de 30-150 mg está situada en 2-8 semanas o más tiempo. El material liofilizado de cetrorelix embonato (2:1) conforme al invento ya ha sido investigado en un ser humano en la fase clínica 1.

La Figura 1 muestra el transcurso de la concentración en plasma de cetrorelix en función del tiempo (en horas) comenzando a partir de la administración i.m. de 60 mg de material liofilizado de cetrorelix embonato (2:1) de acuerdo con el Ejemplo 1 en un ser humano. No se podía comprobar ningún efecto de reventamiento (aproximadamente 100 mg/ml). La duración del efecto era de más de 700 horas. A partir de 150 h después de la administración, había un nivel constante en plasma de aproximadamente 2 ng/ml. La biodisponibilidad estaba en aproximadamente 40%.

Los sectores de aplicaciones de las sales de péptidos conformes al invento son BPH (hiperplasia prostática benigna), mioma y endometriosis.

Claims

1. Procedimiento para la preparación de una formulación farmacéutica destinada a la aplicación por vía parenteral a animales mamíferos, caracterizado porque se hace reaccionar una sal por adición de ácido, fácilmente soluble, de un agente antagonista de LHRH peptídico de carácter básico, en presencia de un apropiado agente diluyente, con un intercambiador de iones en lecho mixto o con una mezcla de un intercambiador de iones de carácter ácido y de un intercambiador de iones de carácter básico, mediando formación del péptido de carácter básico libre, a continuación se separa el intercambiador de iones, y luego el péptido de carácter básico libre se hace reaccionar con un ácido inorgánico u orgánico mediando formación de la deseada sal por adición de ácido del péptido difícilmente soluble, luego se añaden apropiadas sustancias farmacéuticas coadyuvantes, de vehículo y de estructura, y a continuación se elimina el agente diluyente.

2. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque como sal de péptido inicial se emplea una sal de cetrorelix, teverelix, abarelix, ganirelix, azaline B, antide, A-75998, detirelix, ramorelix o RS-68439.

3. Procedimiento de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, caracterizado porque el ácido es ácido embónico, ácido esteárico o ácido salicílico.

4. Procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque la relación molar de cetrorelix a ácido embónico es de 2: 1.

5. Procedimiento de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque el agente diluyente se elimina mediante liofilización.