ES2227639T3 - Sintesis de analogos de pth y ptrp. - Google Patents
Sintesis de analogos de pth y ptrp.Info
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Abstract
SE DESCRIBE UN PROCEDIMIENTO DE CONDENSACION DE FRAGMENTOS PARA LA SINTESIS DE ANALOGOS DE LA HORMONA PARATIROIDEA (PTH) Y DE PEPTIDO RELACIONADO CON LA HORMONA PARATIROIDEA (PTHRP), EN EL CUAL LOS RESTOS AMINOACIDOS (22 HELICE ANFIPATICA SINTETICA.
Description
Síntesis de análogos de PTH y PTrP.
Esta invención se refiere un método para la
síntesis de ciertos nuevos análogos de la hormona paratiroidea y del
péptido relacionado con la hormona paratiroidea útiles para el
tratamiento de la osteoporosis.
La osteoporosis es la forma más común de
enfermedad metabólica ósea, y puede considerarse la etapa
sintomática, de fractura, de la pérdida ósea (osteopenia). Aunque la
osteoporosis puede producirse de forma secundaria a diversas
enfermedades subyacentes, el 90% de todos los casos parecen ser
idiopáticos. Las mujeres postmenopáusicas presentan un riesgo
particular de osteoporosis idiopática (osteoporosis postmenopáusica
o de tipo I). Otro grupo de elevado riesgo para la osteoporosis
idiopática son los ancianos de ambos sexos (osteoporosis senil o de
tipo II). La osteoporosis se ha relacionado también con el uso de
corticosteroides, con la inmovilización o el reposo prolongado en
cama, alcoholismo, diabetes, quimioterapia gonadotóxica,
hiperprolactinemia, anorexia nerviosa, amenorrea primaria y
secundaria, y ovariectomía.
En las diversas formas de la osteoporosis se
producen frecuentemente fracturas óseas, que son el resultado de la
pérdida ósea que ha alcanzado el punto de fractura mecánica. La
osteoporosis postmenopáusica se caracteriza por fracturas de la
muñeca y de la columna, mientras que las fracturas del cuello
femoral parecen ser la característica dominante de la osteoporosis
senil.
El mecanismo mediante el cual se pierde hueso en
los pacientes osteoporóticos se cree que implica un desequilibrio en
el proceso mediante el cual el esqueleto se renueva a si mismo. Este
proceso ha sido denominado remodelación ósea. Tiene lugar en una
serie de bolsas de actividad discretas. Estas bolsas aparecen
espontáneamente dentro de la matriz ósea sobre una superficie ósea
dada como un sitio de resorción ósea. Los osteoclastos (células de
disolución o resorción de hueso) son responsables de la resorción de
una porción de hueso, generalmente de una dimensión constante. Este
proceso de resorción se sigue de la aparición de osteoblastos
(células de formación de hueso) que seguidamente rellenan con nuevo
hueso la cavidad dejada por los osteoclastos.
En un sujeto adulto sano, la velocidad a la cual
los osteoclastos y los osteoblastos se forman es tal que la
formación de hueso está en equilibrio con la resorción de hueso. Sin
embargo, en los osteoporóticos, se produce un desequilibrio en el
proceso de remodelación ósea, lo que tiene como resultado una
pérdida de hueso a una velocidad superior a la de formación de
hueso. Aunque este desequilibrio se produce hasta cierto punto en la
mayoría de individuos a medida que envejecen, es mucho más grave y
se produce a una edad menor en mujeres osteoporóticas
postmenopáusicas o tras la ovariectomía.
Adachi y col., en Seminars in Arthritis and
Rheumatism, 22:6, 375-84 (Junio 1993), informan
que a pesar de los datos contradictorios en relación con la
patofisiología de la osteoporosis inducida por corticosteroides, se
está de acuerdo en general en que se produce un descenso relativo en
la formación de hueso y un aumento relativo en la resorción de
hueso. La pérdida de hueso, con la osteonecrosis y fracturas
resultantes, es una consecuencia frecuente de la terapia con
corticosteroides. Existen evidencias de que se produce pérdida ósea
rápidamente dentro de los 6 a 12 primeros meses de terapia con
corticosteroides. Parece haber asimismo una estrecha relación entre
la velocidad de pérdida ósea y la dosis de corticosteroides. Los
hombres son igualmente susceptibles a los efectos de los
corticosteroides. La incidencia estimada de fracturas y de
osteonecrosis se encuentra en el intervalo del 30 al
50%.
50%.
Se han producido numerosos intentos de tratar la
osteoporosis con el objetivo de o bien ralentizar aún más la pérdida
ósea o, lo cual sería más deseable, producir una ganancia neta en
masa ósea. Ciertos fármacos, como estrógenos y los bifosfonatos,
parecen ralentizar más la pérdida ósea en los osteoporóticos. Los
fármacos que ralentizan la pérdida ósea, debido a la duración
diferente de la resorción y formación de hueso, parecen incrementar
la masa ósea (del orden del 3 a 7%). Sin embargo, este aparente
aumento está limitado en el tiempo, no es progresivo, y se debe a
una reducción del "espacio de remodelación". Adicionalmente,
debido al estrecho acoplamiento entre resorción y formación, los
tratamientos que impiden la resorción ósea también perjudican en
último término a la formación de
hueso.
hueso.
Se ha sugerido que el tratamiento con hormona
paratiroidea (PTH) produciría tanto un recambio de hueso aumentado
como un balance de calcio positivo. Sin embargo, los ensayos
clínicos humanos han demostrado que cualquier aumento en el hueso
trabecular viene contrarrestado por un descenso en el hueso
cortical, de modo que no se produce un aumento neto en hueso
total.
Hefti y col., en Clinical Science 62,
389-396 (1982), han informado que dosis diarias
subcutáneas de o bien bPTH (1-84) o hPTH
(1-34) aumentaban el calcio total corporal y el peso
en ceniza de huesos individuales de ratas hembra adultas tanto
normales como osteoporóticas.
Liu y col., en J. Bone Miner. Res. 6, 10,
1071-1080 (1991), han observado que la ovariectomía
de ratas hembra adultas inducía una pérdida del 47% en el porcentaje
de hueso trabecular en la metáfisis tibial proximal, acompañada de
un aumento significativo en el número de osteoblastos y de
osteoclastos trabeculares. Inyecciones subcutáneas diarias de hPTH
(1-34) revertían completamente la pérdida de hueso
trabecular y resultaban en cantidades de hueso trabecular que
superaban la de controles operados no tratados. El número de
osteoblastos aumentaba y el número de osteoclastos disminuía.
Hock y col., en J. Bone Min. Res. 7, 1,
65-71 (1992), han informado que inyecciones
subcutáneas diarias de hPTH (1-34) a ratas macho
adultas sanas durante 12 días aumentaban el calcio y el peso seco de
hueso cortical y trabecular. La masa ósea total, el volumen del
hueso trabecular, el número y grosor de las trabéculas y las
superficies osteoblásticas estaban aumentados.
Las hormonas paratiroideas de mamíferos, por
ejemplo humana (hPTH), bovina (bPTH), y porcina (pPTH), son cadenas
polipeptídicas únicas de 84 residuos aminoacídicos, con pesos
moleculares de aproximadamente 9500. La actividad biológica está
asociada con la porción N-terminal, constituyendo
los residuos (1-34) el mínimo aparentemente
requerido.
El segmento N-terminal de la PTH
humana difiere del segmento N-terminal de las
hormonas bovina y porcina en únicamente tres y dos residuos
aminoacídicos, respectivamente:
hPTH
(1-34):
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu
Gly Lys}
\sac{His Leu Asn Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu
Arg Lys}
\sac{Lys Leu Gln Asp Val His Asn Phe}
\;(SEQ ID NO:1);
\vskip1.000000\baselineskip
bPTH
(1-34):
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Met His Asn Leu
Gly Lys}
\sac{His Leu Ser Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu
Arg Lys}
\sac{Lys Leu Gln Asp Val His Asn Phe}
\;(SEQ ID NO:2);
\vskip1.000000\baselineskip
pPTH
(1-34):
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu
Gly Lys}
\sac{His Leu Ser Ser Leu Glu Arg Val Glu Trp Leu
Arg Lys}
\sac{Lys Leu Gln Asp Val His Asn Phe}
\;(SEQ ID NO:3);
\vskip1.000000\baselineskip
La principal función de la PTH es producir los
cambios adaptativos que sirven para mantener una concentración
constante de Ca^{2+} en el medio extracelular. La PTH actúa sobre
los riñones para aumentar la reabsorción tubular de Ca^{2+} de la
orina, así como para estimular la conversión de calcifediol en
calcitriol, el cual es responsable de la absorción de Ca^{2+} de
los intestinos. Un efecto fundamental es promover la movilización de
Ca^{2+} del hueso. La PTH actúa sobre el hueso para aumentar la
resorción de Ca^{2+} y fosfato. La PTH estimula la velocidad de
resorción ósea por los osteoclastos, aumenta la velocidad de
diferenciación de las células mesenquimales a osteoclastos, y
prolonga la vida media de este último tipo de células. Con la acción
prolongada de la PTH, el número de osteoblastos formadores de
células también aumenta; de este modo, la velocidad de recambio óseo
y de remodelación está aumentada. Sin embargo, los osteoblastos
individuales parecen ser menos activos de lo normal.
Rosenblatt, y col., en las Patentes
Estadounidenses números 4.423.037, 4.968.669 y 5.001.223, han
descubierto antagonistas de la PTH obtenidos mediante deleción de
los aminoácidos N-terminales (1-6) y
mediante el reemplazamiento selectivo de Phe^{7}, Met^{8,18}, y
Gly^{12}. Tyr^{34}-NH_{2} aumenta de forma
destacable la actividad y estabilidad de estos compuestos.
El péptido relacionado con la hormona
paratiroidea (PTHrp), una proteína de 140+ aminoácidos, y sus
fragmentos, reproducen las principales acciones biológicas de la
PTH. El PTHrp es elaborado por diversos tumores humanos y de
animales, así como por otros tejidos, y puede jugar un papel
importante en la hipercalcemia de la malignidad. La secuencia de
hPTHrp (1-34) es la siguiente:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu
His His}
\sac{Leu Ile Ala Glu Ile His Thr Ala}
\;(SEQ ID NO:4).
\vskip1.000000\baselineskip
La homología de secuencia entre hPTH y hPTHrp
está limitada sobre todo a los 13 residuos
N-terminales, 8 de los cuales son idénticos;
únicamente 1 de los 10 aminoácidos en la región de unión a receptor
(25-34) de la hPTH está conservado en la hPTHrp. La
similitud conformacional puede ser la razón subyacente de la
actividad común. Cohen y col., en J. Biol. Chem., 266, 3,
1997-2004 (1991) han sugerido que la mayoría de la
secuencia de PTH (1-34) y de PTHrp
(1-34), en particular las regiones
(5-18) y (21-34), asume una
configuración en hélice \alpha, haciendo notar al mismo tiempo que
existen algunas dudas sobre si esta configuración prevalece en el
extremo carboxilo terminal en condiciones fisiológicas. Tal
estructura secundaria podría ser importante para la interacción con
lípidos, interacción con el receptor, y/o estabilización
estructural.
Se han descubierto análogos de la PTH y del PTHrp
con propiedades terapéuticas mejoradas en relación con la
restauración de la masa ósea en sujetos mamíferos, incluyendo
aquellos afectados por osteoporosis, en las Publicaciones de
Solicitud de Patente Internacional números WO 94/01460.
Es un objeto de la presente invención el
proporcionar un método mejorado para la síntesis de un polipéptido
sintético análogo a la hormona paratiroidea (PTH) o al péptido
relacionado con la hormona paratiroidea (PTHrp), o una sal del
mismo, en el cual los residuos aminoacídicos (22-31)
forman una hélice \alpha anfipática, seleccionándose dichos
residuos (22-31) de las SEQ ID NOS: 85, 86, 26, 27,
28, 29 y 30, comprendiendo este método: a) la síntesis independiente
de fragmentos peptídicos precursores del polipéptido, mediante
técnicas en solución o en fase sólida, b) la condensación de dichos
fragmentos unos con otros para formar el producto polipeptídico
deseado, y c) la eliminación de los grupos protectores de
aminoácidos, en donde este método comprende: a) la síntesis
independiente de fragmentos peptídicos precursores del polipéptido
en soportes de resina, b) la escisión de los fragmentos del
polipéptido de sus soportes de resina respectivos, c) la
condensación secuencial de dichos fragmentos para formar el producto
polipeptídico deseado, y d) la eliminación de los grupos protectores
de aminoácidos, en donde todos excepto el fragmento
C-terminal del polipéptido, c) dichos fragmentos se
condensan secuencialmente con el fragmento
C-terminal unido a la resina para formar el producto
polipeptídico deseado, d) se eliminan los grupos protectores de
aminoácidos y el producto polipeptídico se escinde del soporte de
resina, en donde el producto polipeptídico se prepara a partir de
tres fragmentos peptídicos precursores, N-terminal,
medio y C-terminal, en los que el fragmento
N-terminal posee una Gly en su extremo
C-terminal, el fragmento peptídico medio posee una
Leu en su extremo C-terminal, y el fragmento
C-terminal posee una Leu en su extremo
N-terminal. En un aspecto alternativo, el fragmento
peptídico medio posee un Glu C-terminal y el
fragmento C-terminal posee una Leu
N-terminal.
N-terminal.
Adicionalmente, es un objeto de la presente
invención el proporcionar un proceso para la preparación de una
composición farmacéutica caracterizada en que se emplea un proceso
como el descrito anteriormente para la preparación de un análogo de
PTH o de PTHrp, y el análogo de PTH o de PTHrp obtenido se mezcla
con uno o más aditivos farmacéuticamente aceptables, siendo
específico este proceso para la preparación de una composición
farmacéutica para el tratamiento de la osteoporosis, en especial
para la curación de las fracturas.
Las abreviaturas de una letra y de tres letras
para las bases nucleotídicas y para los aminoácidos comunes son las
recomendadas en Pure Appl. Chem., 31, 639-645
(1972) y 40, 277-290 (1974), y por la Comisión de
Nomenclatura Bioquímica IUPAC-IUB, y cumplen con 37
CFR \NAK 1.822 (55 FR 18245, 1 de Mayo, 1990). Las abreviaturas de
una y de tres letras son las siguientes:
\newpage
Aminoácido | Símbolo de tres letras | Símbolo de una letra |
Alanina | Ala | A |
Arginina | Arg | R |
Asparagina | Asn | N |
Ácido aspártico | Asp | D |
Asn + Asp | Asx | B |
Cisteína | Cys | C |
Glutamina | Gln | Q |
Ácido glutámico | Glu | E |
Gln + Glu | Glx | Z |
Glicina | Gly | G |
Histidina | His | H |
Isoleucina | Ile | I |
Leucina | Leu | L |
Lisina | Lys | K |
Metionina | Met | M |
Fenilalanina | Phe | F |
Prolina | Pro | P |
Serina | Ser | S |
Treonina | Thr | T |
Triptófano | Trp | W |
Tirosina | Tyr | Y |
Valina | Val | V |
Otros aminoácidos | Xaa | X |
Estas abreviaturas representan
L-aminoácidos, a menos que se indique lo contrario
mediante la indicación D- ó D, L-. Ciertos aminoácidos, tanto
naturales como no naturales, son aquirales, por ejemplo glicina.
Todas las secuencias peptídicas se representan con el aminoácido
N-terminal a la izquierda y el aminoácido
C-terminal a la derecha.
Otras abreviaturas para otros aminoácidos y
compuestos utilizados aquí son:
hSer | homoserina |
hSerlac | homoserina lactona |
Nle | norleucina |
"Análogo truncado fisiológicamente activo de
PTH o de PTHrp" se refiere a un polipéptido que posee la
secuencia que comprende menos del complemento completo de
aminoácidos que se encuentra en PTH o en PTHrp y que, no obstante,
produce una respuesta fisiológica similar. El PTH o PTHrp truncado
no es necesario que sea completamente homólogo con el PTH o PTHrp
para producir una respuesta fisiológica similar. PTH
(1-34) y PTHrp (1-34) son
representantes preferidos, pero no exclusivos, de este grupo.
"Hélice \alpha anfipática" se refiere a la
estructura secundaria exhibida por ciertos polipéptidos en los que
los aminoácidos asumen una configuración en hélice \alpha que
presenta una cara no polar opuesta a una cara polar, orientadas
ambas a lo largo del eje longitudinal de la hélice. La posibilidad
de una estructura en hélice \alpha en el polipéptido de interés
puede ser explorada hasta cierto punto mediante la construcción de
una "rueda de Schiffer-Edmundson" (M. Schiffer
y A. B. Edmundson, Biophys. J., 7, 121 (1967)), del paso de
rosca adecuado, y comprobando la segregación de los residuos
hidrofílicos y lipofílicos en las caras opuestas del cilindro que
circunscribe la hélice. Alternativamente, las evidencias empíricas,
tales como los datos de dicroísmo circular o de difracción por rayos
X, pueden estar disponibles, e indicar la presencia de una región
con hélice \alpha en un polipéptido dado. Una hélice \alpha
ideal posee 3,6 residuos aminoácidos por vuelta, con cadenas
laterales adyacentes separadas por 100º de arco. Eisenberg y col.,
en Nature 299, 371-374 (1982) y Proc. Nat.
Acad. Sci. USA, 81, 140-144 (1984) han combinado
una escala de hidrofobicidad con la rueda en hélice para cuantificar
el concepto de hélices anfipáticas. El momento hidrofóbico medio se
define como la suma vectorial de las hidrofobicidades de los
aminoácidos componentes que constituyen la hélice. Las siguientes
hidrofobicidades para los aminoácidos son las descritas por
Eisenberg (1984) como la escala "consenso":
Ile 0,73; Phe 0,61; Val 0,54; Leu
0,53; Trp 0,37; Met 0,26; Ala 0,25; Gly 0,16; Cys 0,04; Tyr 0,02;
Pro -0,07; Thr -0,18; Ser -0,26; His -0,40; Glu -0,62; Asn -0,64;
Gln -0,69; Asp -0,72; Lys -1,10; Arg
-1,76.
El momento hidrofóbico, \mu_{H}, para una
hélice \alpha ideal que posee 3,6 residuos por vuelta (o un arco
de 100º
(= 360º/3,6) entre cadenas laterales), puede ser calculado a partir de:
(= 360º/3,6) entre cadenas laterales), puede ser calculado a partir de:
\mu_{H} =
[(\Sigma H_{N}sin\partial (N-1))^{2} + (\Sigma
H_{N}cos\partial(N-1))^{2}]
_,
donde H_{N} es el valor de
hidrofobicidad del aminoácido enésimo (Nº), y las sumas se toman
sobre los N aminoácidos de la secuencia con periodicidad \partial
= 100º. El momento hidrofóbico puede expresarse como el momento
hidrofóbico medio por residuo dividiendo \mu_{H} por N para
obtener <\mu_{H}>. Un valor de <\mu_{H}> a 100º
\pm 20º de aproximadamente 0,20 o superior sugiere la formación de
una hélice anfipática. Los valores de <\mu_{H}> a 100º
para hPTHrp (22-31) y hPTH (22-31)
son de 0,19 y 0,37,
respectivamente.
Cornett y col., en J. Mol. Biol., 195,
659-685 (1987) han extendido todavía más el estudio
de las hélices \alpha anfipáticas introduciendo el "índice de
anfipaticidad" como un predictor de la anfipaticidad. Estos
autores han concluido que aproximadamente la mitad de todas las
hélices \alpha conocidas son anfipáticas, y que la frecuencia
dominante es 97,5º en lugar de 100º, con el número de residuos por
vuelta más cercano a 3,7 que a 3,6. Mientras que tales refinamientos
son interesantes desde el punto de vista científico, la aproximación
básica de Eisenberg y col. es suficiente para clasificar una
secuencia dada como anfipática, en particular cuando se pretende
diseñar una secuencia de aminoácidos ab initio para que forme
una hélice \alpha.
Una secuencia aminoacídica formadora de hélice
\alpha anfipática de substitución puede carecer de homología con
la secuencia de un segmento dado de un polipéptido natural, pero
puede presentar una estructura secundaria similar, es decir, una
hélice \alpha que posee caras polares y no polares opuestas, en el
ambiente fisiológico. El reemplazamiento de la secuencia de
aminoácidos natural con una secuencia alternativa puede afectar de
forma beneficiosa la actividad fisiológica, la estabilidad u otras
propiedades del polipéptido parental alterado. Una guía para el
diseño y selección de estas secuencias la proporcionan J.L.
Krstenansky y col., FEBS Letters, 242, 2,
409-413 (1989), y J.P. Segrest y col., Proteins:
Structure, Function and Genetics, 8, 103-117
(1990), entre otros.
Un método conveniente para determinar si una
secuencia es suficientemente anfipática para ser una secuencia de
esta invención es calcular el momento hidrofóbico medio, como se
define anteriormente. Si el momento medio pico por residuo a 100º
\pm 20º supera aproximadamente 0,20, entonces la secuencia formará
una hélice anfipática y es una secuencia de esta invención.
Por ejemplo, el momento hidrofóbico medio por
residuo a 100º para (SEQ ID NO: 26), Xaa = Glu, se calcula como
sigue:
\mu_{H} = [(0,81)^{2} +
(-4,43)^{2}] _ = 4,50
<\mu_{H}> = 4,50/10 = 0,45
Para esta secuencia, el momento hidrofóbico pico
aparece a 92º y tiene un valor de 0,48.
En un aspecto, esta invención proporciona
procedimientos para la síntesis de PTH, PTHrp, y los análogos
fisiológicamente activos de PTH y PTHrp, o sales de los mismos, en
los que los residuos aminoácidos (22-31) forman una
hélice \alpha anfipática, seleccionándose la secuencia de dichos
residuos (22-31) de:
Xaa^{1} Xaa^{2} Leu Xaa^{4} Xaa^{5} Leu
Xaa^{7} Xaa^{8} Xaa^{9} Xaa^{10} donde
Xaa^{1} y Xaa^{4} son independientemente Glu,
Glu(OCH_{3}), His o Phe;
Xaa^{2} es Leu o Phe;
Xaa^{5} es Lys o His;
Xaa^{7} y Xaa^{10} son independientemente Leu
o Ile;
Xaa^{8} es Ala, Arg, o Glu; y
Xaa^{9} es Lys o Glu (SEQ ID NO: 85);
preferentemente Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa
Lys Leu
donde Xaa es Glu o Arg (SEQ ID NO: 26);
Xaa^{1} Xaa^{2} Leu Xaa^{4} Arg Leu Leu
Xaa^{8} Arg Leu donde
Xaa^{1} y Xaa^{4} son independientemente Glu,
Glu(OCH_{3}), His o Phe;
Xaa^{2} es Leu o Phe;
Xaa^{8} es Glu o Lys (SEQ ID NO: 86);
preferentemente Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa
Arg Leu
donde
Xaa es Glu o Lys (SEQ ID NO: 27);
Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala Leu (SEQ ID
NO: 28);
Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu (SEQ ID
NO: 29);
Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys Leu (SEQ ID
NO: 30).
En otro aspecto, esta invención proporciona
procesos para la síntesis de PTH, PTHrp, y los análogos
fisiológicamente activos de PTH y PTHrp, o sales de los mismos, de
fórmula:
Xaa^{1} Xaa^{2} Xaa^{3}Xaa^{4} Xaa^{5}
Xaa^{6} Xaa^{7} Leu His Asp Xaa^{11} Gly Xaa^{13} Ser Ile
Gln Asp Leu Xaa^{19} Xaa^{20} Xaa^{21}
Xaa^{22-31} Xaa^{32} Xaa^{33} Xaa^{34}
Xaa^{35} Xaa^{36} Xaa^{37} Xaa^{38} Term, donde:
Xaa^{1} está ausente o es Ala;
Xaa^{2} está ausente o es Val;
Xaa^{3} está ausente o es Ser;
Xaa^{4} está ausente o es Glu o
Glu(OCH_{3});
Xaa^{5} está ausente o es His o Ala;
Xaa^{6} está ausente o es Gln;
Xaa^{7} está ausente o es Leu;
Xaa^{11} es Lys, Arg, o Leu;
Xaa^{13} es Lys, Arg, Tyr, Cys, Leu,
Cys(CH_{2}CONH-(CH_{2})_{2}NH(biotinil)),
Lys(7-dimetilamino-2-oxo-2H-1-benxopiran-4-acetil),
o Lys(dihidrocinnamoil);
Xaa^{20} es Arg o Leu;
Xaa^{19} y Xaa^{21} son independientemente
Lys, Ala o Arg;
Xaa^{22-31} se selecciona de
(SEQ ID NOS: 26, 27, 28, 29 o 30);
Xaa^{32} es His, Pro o Lys;
Xaa^{33} está ausente o es Pro, Thr, Glu o
Ala;
Xaa^{34} está ausente o es Pro, Arg, Met, Ala,
hSer, hSer lactona, Tyr o Leu;
Xaa^{35} está ausente o es Pro, Glu, Ser, Ala o
Gly;
Xaa^{36} está ausente o es Ala, Arg o Ile;
Xaa^{37} está ausente o es Arg, Trp, o
3-(2-naftil)-L-alanina;
Xaa^{38} está ausente o es Ala o hSer o
Xaa^{38-42} es Thr Arg Ser Ala Trp;
y Term es OR o NR_{2} donde cada R es
independientemente H,
(C_{1}-C_{4})alquilo o
fenil(C_{1}-C_{4})alquilo; y las
sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
En todavía otro aspecto, esta invención incluye
procesos para la síntesis de análogos polipeptídicos del homólogo
truncado fisiológicamente activo hPTHrp (1-34), como
se muestra en la Fórmula (I):
Ala Val Ser Glu Xaa^{5} Gln Leu Leu His Asp
Xaa^{11} Gly Xaa^{13} Ser Ile Gln Asp Leu Xaa^{19} Arg
Xaa^{21} Xaa^{22-31} Xaa^{32} Xaa^{33}
Xaa^{34} Term, donde:
Xaa^{5} es His o Ala;
Xaa^{11} y Xaa^{13} son independientemente
Lys, Arg o Leu;
Xaa^{19} y Xaa^{21} son independientemente
Ala o Arg;
Xaa^{22-31} se selecciona
de:
Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys Leu donde
Xaa es Glu o Arg (SEQ ID NO: 26);
Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg Leu donde
Xaa es Glu o Lys (SEQ ID NO: 27);
Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala Leu (SEQ ID
NO: 28);
Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser Leu (SEQ ID
NO: 29);
Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys Leu (SEQ ID
NO: 30);
Xaa^{32} es His o Lys;
Xaa^{33} es Thr, Glu o Ala;
Xaa^{34} es Ala, hSer, Tyr o Leu;
y Term es Gly Arg Arg, lactona, OH o NR_{2},
donde cada R es H o (C_{1}-C_{4}) alquilo; y sus
sales farmacéuticamente aceptables. (Fórmula I)
Un aspecto más específico de la invención incluye
la síntesis de aquellos polipéptidos de Fórmula (I) en los que
Xaa^{22-31} es (SEQ ID NO: 26), para los cuales
<\mu_{H}> a 100º es mayor de 0,45. Un aspecto todavía más
específico de la invención incluye aquellos polipéptidos de Fórmula
(I) en los que Xaa^{22-31} es (SEQ ID NO: 26);
Xaa^{11} y Xaa^{13} son ambos Lys; y Xaa^{19} y Xaa^{21} son
ambos Arg. Los polipéptidos representativos que pueden ser
preparados mediante los procedimientos descubiertos aquí incluyen,
pero no están limitados a:
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Arg
Lys Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 5);
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu
Lys Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 6);
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu
Lys Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 7);
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu
Lys Leu His Thr hSer NH2 (SEQ ID NO: 8);
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu
Lys Leu His Thr hSerlac (SEQ ID NO: 9);
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu
Lys Leu His Thr Ala Gly Arg Arg OH (SEQ ID NO: 10); y
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu
Lys Leu Lys Glu Leu NH_{2} (SEQ ID NO: 11).
Otro aspecto de esta invención incluye la
síntesis de aquellos polipéptidos de Fórmula (I) en los que
Xaa^{22-31} es (SEQ ID NO: 26); Xaa^{11} y
Xaa^{13} son ambos Lys; y uno de Xaa^{19} y Xaa^{21} es Arg y
el otro es Ala. Polipéptidos representativos de este subgénero que
pueden ser preparados mediante los procedimientos descubiertos aquí
incluyen, pero no están limitados a:
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Ala Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu
Lys Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 12) y
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Ala Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu
Lys Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 13).
En otro aspecto esta invención incluye la
síntesis de aquellos polipéptidos de Fórmula (I) en los que
Xaa^{22-31} es (SEQ ID NO: 26); uno de Xaa^{11}
y Xaa^{13} es Leu y el otro es Lys; y Xaa^{19} y Xaa^{21} son
ambos Arg. Polipéptidos representativos de este subgénero que pueden
ser preparados mediante los procesos de esta invención incluyen,
pero no están limitados a:
Ala Val Ser Glu Ala Gln Leu Leu His Asp Leu Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu
Lys Leu His Ala Leu OH (SEQ ID NO: 14).
En otro aspecto esta invención incluye la
síntesis de aquellos polipéptidos de Fórmula (I) en los que
Xaa^{22-31} es (SEQ ID NO: 27), para los que
<\mu_{H}> a 100º es superior a 0,50. Un aspecto adicional
de esta invención incluye la síntesis de aquellos polipéptidos de
Fórmula (I) en los que Xaa^{22-31} es (SEQ ID NO:
27); Xaa^{11} y Xaa^{13} son ambos Lys o ambos Arg; y Xaa^{19}
y Xaa^{21} son ambos Arg. Polipéptidos representativos de este
subgénero que pueden ser preparados mediante los procesos de esta
invención incluyen, pero no están limitados a:
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu
Arg Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 15);
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly
Arg Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu
Arg Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 16);
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg Gly
Arg Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Lys
Arg Leu His Thr Ala OH (SEQ ID NO: 17);
En otro aspecto esta invención incluye la
síntesis de polipéptidos de Fórmula (I) en los que
Xaa^{22-31} es (SEQ ID NO: 28),
para los que <\mu_{H}> a 100º es aproximadamente 0,25.
Polipéptidos representativos de este subgénero que pueden ser
preparados mediante los procesos de esta invención incluyen, pero no
están limitados a:
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu
Ala Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 20).
En otro aspecto esta invención incluye la
síntesis de polipéptidos de Fórmula (I) en los que
Xaa^{22-31} es (SEQ ID NO: 29),
para los que <\mu_{H}> a 100º es aproximadamente 0,28.
Polipéptidos representativos de este subgénero que pueden ser
preparados mediante los procesos de esta invención incluyen, pero no
están limitados a:
\newpage
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser
Ser Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 21).
En otro aspecto esta invención incluye la
síntesis de polipéptidos de Fórmula (I) en los que
Xaa^{22-31} es (SEQ ID NO: 30),
para los que <\mu_{H}> a 100º es aproximadamente 0,29.
Polipéptidos representativos de este subgénero que pueden ser
preparados mediante los procesos de esta invención incluyen, pero no
están limitados a:
Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly
Lys Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu
Lys Leu His Thr Ala NH_{2} (SEQ ID NO: 22).
Todavía otro aspecto de esta invención incluye la
síntesis de análogos polipeptídicos de los homólogos
fisiológicamente activos de bPTH (1-34), como se
muestra en la fórmula (II):
Xaa^{1} Val Ser Glu Ile Gln Xaa^{7} Xaa^{8}
His Asn Leu Gly Lys His Leu Xaa^{16} Ser Xaa^{18} Xaa^{19} Arg
Xaa^{21} Xaa^{22-31} His Asn Xaa^{34} Term,
donde:
Xaa^{1} es Ser o Ala;
Xaa^{7} es Leu o Phe;
Xaa^{8} es Met o Nle;
Xaa^{16} es Asn o Ser;
Xaa^{18} es Leu, Met o Nle;
Xaa^{19} es Glu o Arg;
Xaa^{21} es Val o Arg;
Xaa^{22-31} se selecciona de
(SEQ ID NO: 26, 27, 28, 29 y 30);
Xaa^{34} es Phe o Tyr;
Term es OH o NR_{2}, donde cada R es H o
(C_{1}-C_{4})alquilo; y las sales
farmacéuticamente aceptables de los mismos.
Polipéptidos representativos que pueden ser
sintetizados mediante los procesos de esta invención incluyen, pero
no están limitados a:
Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Nle His Asn Leu Gly
Lys His Leu Ser Ser Nle Glu Arg Val Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu
Lys Leu His Asn Tyr NH_{2} (SEQ ID NO: 23) y
Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Nle His Asn Leu Gly
Lys His Leu Ser Ser Nle Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu
Lys Leu His Asn Tyr NH_{2} (SEQ ID NO: 24).
En todavía otro aspecto de esta invención, se
proporcionan procesos para la síntesis de análogos de PTH y de PTHrp
de menos de 34 aminoácidos. Estos compuestos tienen como fórmula
general:
Ala Val Ser Glu Xaa^{5} Gln Leu Leu His Asp
Xaa^{11} Gly Xaa^{13} Ser Ile Gln Asp Leu Xaa^{19} Arg
Xaa^{21} Xaa^{22-31} Xaa^{32} Xaa^{33}
Xaa^{34} Term.
Polipéptidos representativos que pueden ser
preparados mediante los procesos de esta invención incluyen, pero no
están limitados a:
Compuesto 41:
\,AVSEHQLLHD
\,KGKSIQDLRR
\,RELLEKLLEK
\,LHP-NH_{2}
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Pro NH_{2}}
\;(SEQ ID NO:55).
Compuesto 42:
\,AVSEHQLLHD
\,KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
\,LP-NH_{2}
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu Pro NH_{2}}
\;(SEQ ID NO:55).
El artesano experimentado apreciará que pueden
sintetizarse numerosas permutaciones de los análogos polipeptídicos
que poseerán los atributos deseables de los descritos aquí, siempre
que una secuencia aminoacídica que posea un momento hidrofóbico
medio por residuo a 100º \pm 20º mayor de aproximadamente 0,20
esté insertada en las posiciones (22-31).
Los fragmentos polipeptídicos de la presente
invención pueden ser sintetizados mediante métodos tales como los
descritos por G. Barany, R.B. Merrifield en The Peptides, E.
Gross y J. Meienhofer eds., Academic Press, New York (1979), vol. 2,
págs. 1-284; J.M. Stewart y J.D. Young, Solid
Phase Peptide Synthesis, 2ª ed., Pierce Chemical Co., Rockford,
Illinois (1984) y J. Meienhofer, Hormonal Proteins and
Peptides, vol. 2, Academic Press, New York (1973) para la
síntesis en fase sólida, y E. Schroder y K. Lubke, The
Peptides, vol. 1, Academic Press, New York (1965) para la
síntesis en solución. En general, estos métodos implican la adición
secuencial de aminoácidos protegidos a una cadena peptídica en
crecimiento. Normalmente, o bien el grupo carboxilo o el grupo amino
del primer aminoácido y cualquier grupo reactivo de la cadena
lateral están protegidos. Este aminoácido protegido o bien se une a
un soporte inerte sólido o bien se utiliza en solución, y el
siguiente aminoácido en la secuencia, también protegido de forma
adecuada, se añade en condiciones adecuadas para la formación del
enlace amida. Una vez todos los aminoácidos deseados se han unido en
la secuencia adecuada, se eliminan los grupos de protección y
cualquier soporte sólido para rendir el polipéptido sin purificar.
El polipéptido se desala y se purifica, preferentemente mediante
cromatografía, para rendir el producto final.
En la puesta en práctica de esta invención, los
fragmentos peptídicos precursores pueden ser preparados bien por
técnicas en solución o en fase sólida, o mediante una combinación de
las mismas. Por ejemplo, algunos de los fragmentos pueden ser
preparados en solución, y seguidamente pueden condensarse con un
fragmento C-terminal unido a una resina, o bien los
fragmentos pueden prepararse por separado mediante un método en fase
sólida, escindirse de la resina y condensarse en solución, o bien
puede emplearse un protocolo mixto de síntesis en solución y en fase
sólida.
Un método preferido para la preparación de los
análogos de PTH y PTHrp de esta invención, que posean menos de
aproximadamente cuarenta aminoácidos, implica la síntesis peptídica
por condensación de fragmentos en fase sólida. En este método, el
producto último resulta de la condensación de varios fragmentos
peptídicos precursores. Dependiendo de la preferencia del trabajador
experimentado, puede emplearse cualquier combinación de fragmentos.
Por ejemplo, puede prepararse un producto de 34 aminoácidos a partir
de dos fragmentos peptídicos precursores de 17 aminoácidos, tres
fragmentos peptídicos precursores, de longitudes variables, cuatro
fragmentos precursores, etc. Véase P. Lloyd-Williams
y col., "Convergent Solid Phase Peptide Synthesis", en
Tetrahedron, 49, 11065-11133, (1993) para una
discusión ilustrativa.
En general, las funciones
\alpha-amino (N^{\alpha}) y cualquier cadena
lateral reactiva están protegidas mediante grupos sensibles a ácidos
o a bases. El grupo protector debe ser estable en las condiciones de
formación del enlace peptídico, siendo al mismo tiempo fácilmente
removible sin afectar a la cadena polipeptídica naciente. Los grupos
protectores en \alpha-amino adecuados incluyen,
pero no están limitados a: t-butoxicarbonilo (Boc),
benciloxicarbonilo (Cbz),
o-clorobenciloxicarbonilo,
bifenilisopropiloxicarbonilo, t-amiloxicarbonilo
(Amoc), isoborniloxicarbonilo,
\alpha,\alpha-dimetil-3,5-dimetoxibenciloxicarbonilo,
o-nitrofenilsulfenilo,
2-ciano-t-butoxicarbonilo,
preferentemente 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc).
Los grupos protectores de las cadenas laterales incluyen, pero no
están limitados a: acetilo, bencilo (Bzl), benciloximetilo (Bom),
t-butilo, ciclohexilo,
o-bromobenciloxicarbonilo,
t-butildimetilsililo,
2-clorobencilo (Cl-z),
2,6-diclorobencilo,
2,4-dinitrofenilo, ciclopentilo, isopropilo,
pivalilo, tetrahidropiran-2-ilo,
tosilo (Tos), trimetilsililo, metiltritilo, mesitileno sulfonilo
(Mts),
4-metoxi-2,3,6-trimetilbencenosulfonilo
(Mtr),
2,2,4,6,7-pentametildihidrobenzofuran-5-sulfonilo
(Pbf),
2,2,5,7,8-pentametilcroman-6-sulfonilo
(Pmc), y tritilo (Trt).
En la síntesis en fase sólida, el aminoácido
C-terminal se une en primer lugar a un soporte de
resina adecuado. Los soportes de resina adecuados son aquellos
materiales que son inertes a los reactivos y a las condiciones de
reacción de las reacciones de condensación y desprotección
secuenciales, y que son al mismo tiempo insolubles en el medio
utilizado. Los ejemplos de resinas disponibles comercialmente
incluyen resinas de estireno/divinilbenceno modificadas con un grupo
reactivo, por ejemplo resinas de
co-poli(estiren-divinilbenceno)clorometilado,
co-poli(estiren-divinilbenceno)hidroximetilado,
y resinas de fenilacetamidometil (PAM) benciladas e
hidroximetiladas. Para preparar péptidos con ácido terminal, pueden
utilizarse las resinas de Wang. Una resina preferida es resina de
p-metilbenzhidrilamino-co-poli(estireno-divinilbenceno)
(MBHA).
En el aspecto preferido, todos los fragmentos
excepto el fragmento C-terminal se preparan en una
resina sensible a ácido, tal como Sasrin
(2-metoxi-4-alcoxibencilalcohol)
o ácido
4-hidroximetil-3-metoxifenoxibutírico
4-metilbenzhidrilamina (HMPB-MBHA).
Las resinas HMPA-MBHA, HMPB-BHA y
HMPA-BHA son también adecuadas para los péptidos
con terminación carboxilo. El fragmento C-terminal
se prepara empleando una resina Knorr
espaciador-MBHA. Las resinas Sieber amida, las
resinas Rink engarce-MBHA o BHA, y las resinas
Ramage engarce-MBHA o BHA son todas adecuadas para
los péptidos terminados en amida. Estas resinas están disponibles
comercialmente con el primer aminoácido ya unido, o bien el primer
aminoácido puede unirse al engarce. Las resinas
HMPB-MBHA y Knorr con espaciador pueden prepararse
como se describe en los Ejemplos 1, 2, y 3 a continuación para la
resina MBHA. El acoplamiento sucesivo del resto de aminoácidos
protegidos puede llevarse a cabo mediante métodos bien conocidos en
el campo. Cada aminoácido protegido se introduce preferentemente en
un exceso molar de aproximadamente 1,5 a 2,5 veces, y el
acoplamiento se realiza en un solvente polar no acuoso inerte, como
por ejemplo N-metil pirrolidinona (NMP),
diclorometano, dimetilformamida (DMF), dimetil sulfóxido (DMSO), o
mezclas de los mismos, preferentemente a temperatura ambiente.
Agentes acoplantes representativos son
N,N'-diciclohexilcarbodiimida (DCC),
N,N'-diisopropilcarbodiimida (DIC), u otras
carbodiimidas, bien sea solas o en presencia de
1-hidroxibenzotriazol (HOBt), O-acil
ureas,
benzotriazol-1-il-oxitris(pirrolidino)fosfonio
hexafluorofosfato (PyBop), N-hidroxisuccinimida,
otras N-hidroxiimidas, u oximas. Alternativamente,
pueden emplearse ésteres activos de aminoácidos protegidos (por
ejemplo, p-nitrofenilo, pentafluorofenilo y
similares) o bien pueden utilizarse anhídridos simétricos.
El acoplamiento sucesivo de aminoácidos
protegidos con Fmoc se lleva a cabo empleando una solución de una
amina secundaria, tal como piridina, para eliminar el grupo Fmoc. La
resina peptidica puede ser controlada para un acoplamiento completo
mediante el ensayo de Kaiser tras cada etapa de acoplamiento.
Al final de la síntesis de fase sólida, el
péptido completamente protegido se separa de la resina empleando
condiciones que no inducen una desprotección prematura de los grupos
protectores de las cadenas laterales. Los péptidos pueden ser
escindidos mediante saponificación o transesterificación o mediante
un tratamiento de desprotección acídico suave, empleando por ejemplo
ácido trifluoroacético (TFA) al 1%. El péptido protegido puede
purificarse mediante cromatografía en gel de sílice.
La solución puede desalarse (por ejemplo con
resina de intercambio aniónico BioRad AG-3®) y el
péptido puede purificarse con una secuencia de etapas
cromatográficas empleando cualquiera, o todos, de los siguientes
tipos: cromatografía de adsorción hidrofóbica en
co-poli(estiren-divinilbenceno)
no derivatizado, por ejemplo Amberlite® XAD; cromatografía de
adsorción en gel de sílice; cromatografía de intercambio catiónico
en carboximetilcelulosa; cromatografía de partición, por ejemplo en
Sephadex® G-25; distribución a contracorriente; o
cromatografía líquida de alta resolución en fase reversa (HPLC),
especialmente HPLC de intercambio catiónico y HPLC de fase reversa
en rellenos de columna con fase unida de octil- u
octadecilsililsílice (ODS).
En un aspecto de la síntesis en
multi-fragmento, los fragmentos medio y
N-terminal se aíslan y se condensan sucesivamente
con el fragmento C-terminal. El producto
polipeptídico se desprotege y se escinde de la resina, purificándose
seguidamente. La secuencia de purificación es en general una serie
completa de separaciones cromatográficas. El análisis por HPLC
determina la secuencia y la elección de la purificación. Una
secuencia típica implica el intercambio catiónico, el HPLC de fase
reversa, y una columna de concentración en fase reversa. La solución
final se somete a liofilización y el fármaco producto se conserva
en botellas ámbar. Los aminoácidos protegidos se obtuvieron de
Genzyme (Cambridge, MA, EE.UU.), Propeptide (Princeton, NJ, EE.UU.)
o Synthetec (Albany, OR, EE.UU.).
El polipéptido de SEQ ID NO: 7, un péptido de 34
aminoácidos, AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKL
HTA-NH_{2}, se preparó empleando un procedimiento de condensación de tres fragmentos. El fragmento N-terminal consistía en los aminoácidos 1 a 12, el fragmento medio consistía en los aminoácidos 13 a 23, y el fragmento C-terminal consistía en los aminoácidos 24 a 34. Se preparó cada fragmento mediante el método en fase sólida en un sintetizador automático de péptidos Vega 296 Automated Peptide Synthesizer. Se empleó el modo automático para la escisión de los grupos protectores en N^{\alpha} y para los lavados tras el acoplamiento. Los reactivos y solventes de acoplamiento se añadieron manualmente al recipiente de reacción en la etapa de acoplamiento. Se purificaron los fragmentos medio y N-terminal por HPLC y se condensaron sucesivamente con el fragmento C-terminal. Se desprotegió el polipéptido final, se escindió de la resina y se purificó.
HTA-NH_{2}, se preparó empleando un procedimiento de condensación de tres fragmentos. El fragmento N-terminal consistía en los aminoácidos 1 a 12, el fragmento medio consistía en los aminoácidos 13 a 23, y el fragmento C-terminal consistía en los aminoácidos 24 a 34. Se preparó cada fragmento mediante el método en fase sólida en un sintetizador automático de péptidos Vega 296 Automated Peptide Synthesizer. Se empleó el modo automático para la escisión de los grupos protectores en N^{\alpha} y para los lavados tras el acoplamiento. Los reactivos y solventes de acoplamiento se añadieron manualmente al recipiente de reacción en la etapa de acoplamiento. Se purificaron los fragmentos medio y N-terminal por HPLC y se condensaron sucesivamente con el fragmento C-terminal. Se desprotegió el polipéptido final, se escindió de la resina y se purificó.
El fragmento N-terminal,
consistente en los aminoácidos 1 a 12, AVSEHQLLHDKG, se preparó a
una escala de 250 mmoles en la resina ácido sensible ácido
4-hidroximetil-3-metoxifenoxi-butírico
4-metilbenzhidrilamina (HMPB-MBHA).
Esta resina se preparó a partir de una resina MBHA (Novabiochem) del
modo siguiente:
\newpage
Etapa | Paso | Tiempo (mins) | Repeticiones |
1. | lavado CH_{2}Cl_{2}/DMF (1/1) | 60 | 1 |
2. | Et_{3}N 10% en CH_{2}Cl_{2} | 5 | 2 |
3. | CH_{2}Cl_{2}/DMF (1/1) | 5 | 3 |
4. | engarce HMPB (1,15 eqs.)/ 300 @ 40ºC | 1 | |
PyBOP/DIPEA en CH_{2}Cl_{2}/DMF 500 @ TA | |||
(1/1) | |||
5. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 2 |
6. | lavado DMF | 1,5 | 2 |
7. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 1 |
8. | lavado i-PrOH | 1,5 | 2 |
9. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 3 |
Después de al menos un lavado con
DMF/CH_{2}Cl_{2}, se realizó el acoplamiento del primer
aminoácido (^{12}Gly) empleando Fmoc-GlyOH
(1,5-2,2 eqs.), DIC (1,5-2,2 eqs.)
y DMAP (0,05 eq.) durante aproximadamente 15 horas a temperatura
ambiente en DMF / CH_{2}Cl_{2} (1/1), empleando el siguiente
protocolo:
Etapa | Paso | Tiempo (mins) | Repeticiones |
1. | CH_{2}Cl_{2}/DMF (1/1) | 60 | 1 |
2. | Fmoc-X-OH (2 eq.) / DIC-DMAP (0,05 eq.) | 900 | 1 |
en CH_{2}Cl_{2}/DMF (1/1) | |||
3. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 2 |
4. | lavado DMF | 1,5 | 2 |
5. | lavado i-PrOH | 1,5 | 2 |
6. | DMF/CH_{2}Cl_{2} (1/1) | 1,5 | 2 |
7. | i-PrOH | 1,5 | 2 |
8. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 3 |
La resina se lavó seguidamente repitiendo las
etapas 3 a 8, y se encapuchó siguiendo el siguiente protocolo:
Etapa | Paso | Tiempo (mins) | Repeticiones |
9. | DMF | 15 | 1 |
10. | PhCOCl (0,18 M) / piridina (0,36 M) en | 30-180 | 1 |
DMF / CH_{2}Cl_{2} | |||
11. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 2 |
12. | lavado DMF | 1,5 | 2 |
13. | lavado i-PrOH | 1,5 | 2 |
14. | lavado DMF/CH_{2}Cl_{2} (1/1) | 1,5 | 1 |
15. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 3 |
Los restantes aminoácidos se unieron a la resina
en ciclos de acoplamiento sucesivos en secuencia reversa empleando
los siguientes aminoácidos protegidos:
aa11
\;N^{\alpha}-Fmoc-N^{\varepsilon}-t-butiloxicarbonil-L-lisina
aa10
\;ácido N^{\alpha}-Fmoc-L-aspártico \beta-t-butil-éster
aa9
\;N^{\alpha}-Fmoc-N^{im}-tritil-L-histidina
aa8
\;N^{\alpha}-Fmoc-L-leucina
aa7
\;N^{\alpha}-Fmoc-L-leucina
aa6
\;N^{\alpha}-Fmoc-N^{g}-tritil-L-glutamina
aa5
\;N^{\alpha}-Fmoc-N^{im}-tritil-L-histidina
aa4
\;ácido N^{\alpha}-Fmoc-L-glutámico \gamma-t-butil-éster
aa3
\;N^{\alpha}-Fmoc-O-t-butil-L-serina
aa2
\;N^{\alpha}-Fmoc-L-valina
aa1
\;N^{\alpha}-t-butiloxicarbonil-L-alanina
Los acoplamientos se realizaron a temperatura
ambiente en NMP empleando de 1,5 a 2,2 equivalentes de aminoácido
(0,1 - 0,25 M), HOBt, y DIC. Tras 1,5-3 horas, se
añadió DMSO y el acoplamiento continuó durante 1,5-3
horas. Cada acoplamiento implicó las siguientes etapas:
Etapa | Paso | Tiempo (mins) | Repeticiones |
1. | lavado DMF | 2,5-30 | 1 |
2. | piperidina 20% en NMP | 3 | 1 |
3. | piperidina 20% en NMP | 14 | 1 |
4. | lavado DMF | 1,5 | 2 |
5. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 2 |
6. | lavado i-PrOH | 1,5-2,5 | 2-5 |
7. | lavado DMF/CH_{2}Cl_{2} (1/1) | 1,5 | 2-3 |
8. | acoplamiento | 240 | 1 |
9. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 2 |
10. | lavado DMF | 1,5 | 2 |
11. | lavado i-PrOH | 1,5 | 2 |
12. | lavado DMF/CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 2 |
13. | i-PrOH | 1,5 | 1 |
14. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 3 |
Se confirmó la finalización del acoplamiento
mediante el ensayo de Kaiser; si el ensayo era positivo, se repetían
las etapas 8 a 14, empleando opcionalmente PyBOP como agente
acoplante.
Para escindir el péptido protegido de la resina,
se agitó una suspensión de la resina en TFA 1% en CH_{2}Cl_{2}
(4 ml/g resina) a 0ºC o temperatura ambiente durante hasta 15
minutos. La solución se filtró y se extrajo con NaHCO_{3}. El
tratamiento de la resina se repitió tres veces. Las fases orgánicas
se reunieron y se lavaron con agua, NaHSO_{4} 5%, y agua de nuevo.
La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico y se evaporó. El
residuo se purificó por HPLC como sigue:
Columna: Zorbax Pro-10/150 C8,
6'' x 40 cm
Temperatura de columna: ambiente
Flujo: 2,2-3,0
ml/min.cm^{2}
Longitud de onda del detector: 250 nm
Fase móvil: HOAc 0,1%, pH 6-6,2
con trietilamina, CH_{3}CN
El péptido protegido se cargó en la columna en
65-70% CH_{3}CN. Se aplicó un gradiente aumentando
la proporción de CH_{3}CN hasta el 85%. Se reunieron las
fracciones, se concentraron y el producto se aisló por extracción en
CH_{2}Cl_{2}. La fase orgánica se lavó con una solución diluida
de bicarbonato sódico o agua, se secó sobre sulfato magnésico y se
evaporó.
El fragmento medio, consistente en los
aminoácidos 13 a 23, KSIQDLRRREL, se preparó a una escala de 230
mmoles en una resina sensible a ácido, ácido
4-hidroximetil-3-metoxifenoxibutírico
4-metilbenzhidrilamina (HMPB-MBHA).
Esta resina se preparó a partir de resina MBHA como se ha descrito
anteriormente en el Ejemplo 1. El primer aminoácido (aa24) se
incorporó como se ha mostrado empleando
Fmoc-L-leucina. Los restantes
aminoácidos se unieron a la resina en ciclos de acoplamiento
sucesivos empleando el procedimiento del Ejemplo 1:
aa23
\;ácido N^{\alpha}-Fmoc-L-glutámico \gamma-t-butil-éster
aa22
\;N^{\alpha}-Fmoc-N^{g}-4-metoxi-2,3,6-trimetilbencilsulfonil-L-arginina
aa21
\;N^{\alpha}-Fmoc-N^{g}-4-metoxi-2,3,6-trimetilbencilsulfonil-L-arginina
aa20
\;N^{\alpha}-Fmoc-N^{g}-4-metoxi-2,3,6-trimetilbencilsulfonil-L-arginina
aa19
\;N^{\alpha}-Fmoc-L-leucina
aa18
\;ácido N^{\alpha}-Fmoc-L-aspártico \beta-t-butil-éster
aa17
\;N^{\alpha}-Fmoc-N^{g}-tritil-L-glutamina
aa16
\;N^{\alpha}-Fmoc-L-isoleucina
aa15
\;N^{\alpha}-Fmoc-O-t-butil-L-serina
aa14
\;N^{\alpha}-Fmoc-N^{\varepsilon}-t-butiloxicarbonil-L-lisina
El péptido se escindió de la resina en forma de
ácido libre, se extrajeron los disolventes orgánicos, se secaron y
se evaporaron como se ha mostrado para el Ejemplo 1. El residuo
puede precipitarse disolviéndolo en diclorometano y añadiendo
t-butil-metil-éter
(t-BuOMe). Tras la filtración, el lavado con
t-BuOMe y el secado al vacío, el producto se
purificó isocráticamente con CH_{3}CN 75% por HPLC en una columna
Zorbax, descrita anteriormente; la longitud de onda del detector fue
de 267 nm.
El fragmento C-terminal, que
consiste en los aminoácidos 24-34, LEKLLEKLHTA, se
preparó en una resina MBHA a una escala de 130 mmoles, empleando un
engarce
Fmoc-2,4-dimetoxi-4'-(carboximetiloxi)-benzhidrilamina
del modo siguiente:
Etapa | Paso | Tiempo (mins) | Repeticiones |
1. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 60 | 1 |
2. | DIPEA 10% en CH_{2}Cl_{2} | 5 | 2 |
3. | CH_{2}Cl_{2} | 5 | 3 |
4. | DMF | 5 | 3 |
5. | engarce/HOBt/DIC (1,5 eq.) en CH_{2}Cl_{2}/DMF (1/1) | 300-420 | 1 |
6. | CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 2 |
7. | DMF | 1,5 | 2 |
8. | iPrOH | 2,5 | 2 |
9. | CH_{2}Cl_{2}/DMF | 1,5 | 2 |
10. | iPrOH | 2,5 | 2 |
11. | CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 3 |
12. | DMF en DMF/CH_{2}Cl_{2} | 10 | 1 |
13. | Ac_{2}O, DIPEA en DMF/CH_{2}Cl_{2} | 30-35 | 1 |
14. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 2 |
15. | lavado DMF | 1,5 | 2 |
16. | lavado i-PrOH | 1,5 | 2 |
17. | lavado DMF/CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 1 |
18. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 3 |
Los restantes aminoácidos se unieron a la resina
en ciclos de acoplamiento sucesivos en secuencia reversa empleando
los siguientes aminoácidos protegidos:
aa34
\;N^{\alpha}-Fmoc-L-alanina
aa33
\;N^{\alpha}-Fmoc-O-t-butil-L-treonina
aa32
\;N^{\alpha}-Fmoc-N^{im}-tritil-L-histidina
aa31
\;N^{\alpha}-Fmoc-L-leucina
aa30
\;N^{\alpha}-Fmoc-N^{\varepsilon}-t-butiloxicarbonil-L-lisina
aa29
\;ácido N^{\alpha}-Fmoc-L-glutámico \gamma-t-butil-éster
aa28
\;N^{\alpha}-Fmoc-L-leucina
aa27
\;N^{\alpha}-Fmoc-L-leucina
aa26
\;N^{\alpha}-Fmoc-N^{\varepsilon}-t-butiloxicarbonil-L-lisina
aa25
\;ácido N^{\alpha}-Fmoc-L-glutámico \gamma-t-butil-éster
aa24
\;N^{\alpha}-Fmoc-L-leucina
Los acoplamientos se llevaron a cabo durante de
1,5 a 3 horas a temperatura ambiente en NMP empleando de 1,5 a 2,2
equivalentes de aminoácido, HOBt y DIC para los aminoácidos 34 a 26.
Se emplearon tres equivalentes de aminoácido, HOBt y DIC para los
aminoácidos 24 y 25. Tras de 1,5 a 3 horas, se añadió DMSO 20% y el
acoplamiento continuó durante de 1,5 a 3 horas. Cada acoplamiento
implicó las siguientes etapas, incluyendo la escisión de Fmoc y los
lavados tras el acoplamiento:
Etapa | Paso | Tiempo (mins) | Repeticiones |
1. | lavado DMF | 2,5-30 | 1 |
2. | piperidina 20% en NMP | 3 | 1 |
3. | piperidina 20% en NMP | 14 | 1 |
4. | lavado DMF | 1,5 | 3 |
5. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 2 |
6. | lavado i-PrOH | 1,5-2,5 | 2-6 |
7. | lavado DMF/CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 3 |
8. | acoplamiento | 240 | 1 |
9. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 2 |
10. | lavado DMF | 1,5 | 2 |
11. | lavado i-PrOH | 1,5-2,5 | 2 |
12. | lavado DMF/CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 2 |
13. | lavado i-PrOH | 2,5 | 2 |
14. | lavado CH_{2}Cl_{2} ensayo Kaiser | 1,5 | 3 |
15. | DMF | 2,5-15 | 1 |
16. | Ac_{2}O/DIPEA/CH_{2}Cl_{2}/DMF | 30-35 | 1 |
17. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 2 |
18. | lavado DMF | 1,5 | 2 |
19. | lavado i-PrOH | 1,5 | 2 |
20. | lavado DMF/CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 1 |
21. | lavado CH_{2}Cl_{2} | 1,5 | 3 |
Se confirmó el acoplamiento completo mediante el
ensayo de Kaiser tras cada etapa de acoplamiento. Si el ensayo era
positivo (\geq 1,5% no acoplado), se repetían las etapas de 8 a
14; si el ensayo era negativo, se acetilaba la resina.
Los tres fragmentos se prepararon como se ha
descrito anteriormente en los Ejemplos 1, 2 y 3. El grupo
N^{\alpha}-Fmoc restante del fragmento
C-terminal se eliminó empleando las etapas 1 a 7 del
último protocolo descrito para el Ejemplo 3.
El fragmento medio B (172 g, 61,8 mmoles), HOBt
(59,2 mmoles), HOAt (3,7 mmoles) y DIC (61,9 mmoles) se añadieron a
la resina del fragmento C-terminal (190 g, 41
mmoles) en NMP (900 ml) y CH_{2}Cl_{2}. La mezcla se agitó a
temperatura ambiente durante 22 horas. Se añadió DIPEA (7 ml) y la
agitación continuó durante un día más. La resina se lavó como se ha
descrito en el Ejemplo 1 (etapas 9 a 13). Un ensayo de Kaiser mostró
menos de un 2% remanente de material no acoplado. La resina se
acetiló (Ejemplo 3, etapas 14 a 20) y los grupos Fmoc se eliminaron
(Ejemplo 3, etapas 1 a 7).
El fragmento N-terminal A, en
forma de la sal sódica (153 g, 62,4 mmoles), HOBt (59,2 mmoles),
HOAt (3,7 mmoles), PyBOP (62,5 mmoles) y DIPEA (125,15 mmoles) se
añadieron a la resina en NMP (900 ml) y CH_{2}Cl_{2}. La mezcla
se agitó a temperatura ambiente durante 24 horas, se filtró y se
lavó (Ejemplo 3, etapas 9 a 13). El ensayo de Kaiser mostró menos de
un 1% remanente de material no acoplado. La resina se acetiló
(Ejemplo 3, etapas 14 a 20), se retiró del reactor y se secó al
vacío.
Una solución de fenol (60,3 g) en tioanisol
(152,6 ml) y TFA (1 l) se añadió al péptido-resina
(64 g) bajo atmósfera de N_{2}. La mezcla se enfrió a -10ºC y se
añadió lentamente TMSBr. La mezcla se agitó durante 0,5 horas a
-10ºC en un sistema cerrado y durante 1-2 horas a
temperatura ambiente. La mezcla se concentró hasta la mitad del
volumen bajo vacío a 50ºC y la resina se filtró y se lavó dos veces
con TFA (250 ml) y ácido acético glacial (250 ml). Los filtrados se
precipitaron por adición de una mezcla 3:1 de
t-butil-metil-éter:hexano (6,5 l).
El péptido crudo se filtró, se lavó con
t-butil-metil-éter, tolueno y
t-butil-metil-éter (2x250 ml de cada
uno) y se volvió a precipitar disolviéndolo en metanol (500 ml) y
añadiéndolo a t-butil-metil-éter (7
l). El producto sin refinar se filtró, se lavó con
t-butil-metil-éter y se secó bajo
vacío para rendir 33 g del péptido.
De forma similar, pueden prepararse los
siguientes análogos de PTHrp, substituyendo los péptidos terminados
en ácido por una resina adecuada:
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTA-OH
\;(SEQ ID NO: 6)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLERLLERLHTA-OH
\;(SEQ ID NO: 15)
AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLERLHTA-OH
\;(SEQ ID NO: 16)
AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLKRLHTA-OH
\;(SEQ ID NO: 17)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLRKLHTA-OH
\;(SEQ ID NO: 5)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTAGRR-OH
\;(SEQ ID NO: 10)
AVSEAQLLHDLGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHAL-OH
\;(SEQ ID NO: 14)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLELLKEL-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 11)
AVSEIQFXHNLGKHLSSXERVELLEKLLEKLHNY-NH_{2}
\;(X=Nle, SEQ ID NO:23)
AVSEIQFXHNLGKHLSSXRRRELLEKLLEKLHNY-NH_{2}
\;(X=Nle, SEQ ID NO:24)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRALAEALAEALHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 20)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLARRELLEKLLEKLHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 12)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRAELLEKLLEKLHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 13)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRSLLSSLLSSLHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 21)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRAFYDKVAEKLHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 22)
AVSEIQFLHN LGKHLSSLRR RELLEKLLEK
LHNY-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 35)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLKL KELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 38)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 39)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER
LHTAP-OH
\;(SEQ ID NO: 40)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER
LHTAGRR-OH
\;(SEQ ID NO: 41)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTY-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 43)
AVSEHQLLHD KGYSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 44)
AVSEHQLLHD KGCSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 45)
AVSEHQLLHD KGXSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 46)
(X=Cys(CH_{2}CONH(CH_{2})_{2}NH(biotinil)))
AVSEHQLLHD KGXSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 47)
(X=Lys(7-dimetilamino-2-oxo-2H-1-benxopiran-4-acetil))
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAG-OH
\;(SEQ ID NO: 48)
AVSX_{1}HQLLHX_{2} KGKSIQX_{2}LRR
RX_{1}LLX_{1}KLLX_{1}K LHA-OH
\;(SEQ ID NO: 49)
(X_{1}=Glu(OCH_{3});
X_{2}=Asp(OCH_{3}))
AVSX_{1}HQLLHX_{2} KGKSIQX_{2}LRR
RX_{1}LLX_{1}KLLX_{1}K LHA-OCH_{3}
\;(SEQ ID NO:50)
(X_{1}=Glu(OCH_{3});
X_{2}=Asp(OCH_{3}))
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAP-OH
\;(SEQ ID NO: 52)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTP-OH
\;(SEQ ID NO: 53)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAP-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 54)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHP-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 55)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LP-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 56)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTRSAW-OH
\;(SEQ ID NO: 57)
AVSEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER
LHTAGRRTRSAW-OH
\;(SEQ ID NO: 58)
AVSEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER
LHTAGRRTRSAW-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 59)
AVSEHQLLHD RGXSIQDLRR RELLERLLER
LHTAGRRTRSAW-OH
\;(SEQ ID NO: 60)
(X=Lys(dihidrocinamoil)
AVSEIQFXHN LGKHLSSXTR SAWLRKKLQD
VHNY-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 61)
(X=norleucina)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTMA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 62)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RFFLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 64)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLHKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 65)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEHLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 66)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLIAK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 67)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEE
IHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 68)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTRSAW-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 72)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTRSAX-OH
\;(SEQ ID NO: 73)
(X=Nal(2)=3-(2-naftil)-L-alanina)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTASAW-OH
\;(SEQ ID NO: 74)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAEIRA-OH
\;(SEQ ID NO: 75)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAEIR-OH
\;(SEQ ID NO: 76)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAEI-OH
\;(SEQ ID NO: 77)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAE-OH
\;(SEQ ID NO: 78)
SEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 80)
LLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 81)
LHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 82)
SEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER
LHAGRRTRSAW-OH
\;(SEQ ID NO:83)
LLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER
LHAGRRTRSAW-OH
\;(SEQ ID NO:84)
Pueden preparase y purificarse [Met^{34},
Ala^{35}] (SEQ ID NO: 25), AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKL
HTMA-NH_{2}, (SEQ ID NO: 25), mediante los procedimientos descritos anteriormente. Este polipéptido puede convertirse en la homoserina lactona del modo siguiente. El péptido purificado se disuelve en ácido fórmico 44%. Esta solución se combina con una solución premezclada de bromuro de cianógeno (700 mg) y fenol (1,6 mg) en ácido fórmico 44% a 0ºC. La solución se agita a 0ºC durante 2 horas y a temperatura ambiente durante 2 horas. La formación del producto puede controlarse mediante HPLC (Vydac^{r} C-18, 300Aº, 4,6 x 250 mm, flujo de 1,2 ml/min, gradiente de acetonitrilo 25-45% en TFA 0,1% durante 10 min). La muestra se concentra y se purifica mediante HPLC-RP preparativo (Vydac^{r} C-18, gradiente de acetonitrilo 25-45% en TFA 0,1%) para rendir (SEQ ID NO: 9).
HTMA-NH_{2}, (SEQ ID NO: 25), mediante los procedimientos descritos anteriormente. Este polipéptido puede convertirse en la homoserina lactona del modo siguiente. El péptido purificado se disuelve en ácido fórmico 44%. Esta solución se combina con una solución premezclada de bromuro de cianógeno (700 mg) y fenol (1,6 mg) en ácido fórmico 44% a 0ºC. La solución se agita a 0ºC durante 2 horas y a temperatura ambiente durante 2 horas. La formación del producto puede controlarse mediante HPLC (Vydac^{r} C-18, 300Aº, 4,6 x 250 mm, flujo de 1,2 ml/min, gradiente de acetonitrilo 25-45% en TFA 0,1% durante 10 min). La muestra se concentra y se purifica mediante HPLC-RP preparativo (Vydac^{r} C-18, gradiente de acetonitrilo 25-45% en TFA 0,1%) para rendir (SEQ ID NO: 9).
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTX
\;(X=hSerlac, SEQ ID NO: 9)
De forma similar, puede prepararse (SEQ ID NO:
79) de conformidad con este procedimiento.
AVSEIQFX_{1}HN KGKHLSSX_{1}ER VEWLRKKLQD
VHNX_{2}
\;(SEQ ID NO: 79)
(X_{1}=L-norleucina;
X_{2}=homoserina lactona)
Para preparar la amida de homoserina, el análogo
crudo de hSerlactona, Compuesto 4, se concentra y se trata con 25 ml
de NH_{3} saturado en metanol. La solución se agita a 0ºC durante
2 horas y a temperatura ambiente durante 16 horas. La reacción puede
controlarse por HPLC (Vydac^{r} C-18, 300Aº, 4,6 x
250 mm, flujo de 1,2 ml/min, gradiente de acetonitrilo
20-45% en TFA 0,1%). La solución se concentra y se
purifica por HPLC-RP preparativo (Vydac^{r}
C-18, gradiente de acetonitrilo
25-45% en TFA 0,1%). Las fracciones de péptido de
amida de homoserina se reúnen y se liofilizan para obtener (SEQ ID
NO: 8).
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTX-NH_{2}
\;(X=hSer, SEQ ID NO:8)
De forma similar, los Compuestos 22, 23 y 28
pueden prepararse siguiendo este procedimiento, empleando metionina
como C-terminal.
AVSEIQFLHN LGKHLSSLRR RELLEKLLEK
LHNX-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 36)
(X=homoserina)
AVSEIQFLHN KGKHLSSLRR RELLEKLLEK
LHNX-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 37)
(X=homoserina)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER
LHTAGRRX-NH_{2}
\;(SEQ ID NO:42)
(X=homoserina)
Las alquilamidas de homoserina se preparan de
forma similar a partir de la homoserina lactona disolviéndola en DMF
conteniendo un exceso de la correspondiente alquilamina. Tras agitar
a temperatura ambiente durante varios días (la reacción puede
controlarse por HPLC analítico) la mezcla se evapora a sequedad y el
péptido se purifica por HPLC preparativo. Alquilamidas de homoserina
representativas son los Compuestos 55 y 56.
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTX-NHCH_{2}CH_{3}
(SEQ ID NO: 69) (X=homoserina)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTX-NHCH_{2}CH_{2}C_{6}H_{5}
(SEQ ID NO: 70) (X=homoserina)
Puede tratarse una solución acuosa del análogo de
lactona de homoserina anterior con esterasa de hígado porcina (Sigma
Chemical Company, St. Louis, MO). La hidrólisis de la lactona a la
homoserina C-terminal puede ser monitorizada por
HPLC analítico. Cuando se juzga que la hidrólisis es completa, el
material puede purificarse por HPLC preparativo como
anteriormente.
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTX-OH
(SEQ ID NO: 51) (X=homoserina)
Si bien esta invención se ha ejemplificado
mediante el descubrimiento de la síntesis de un polipéptido de 34
aminoácidos a partir de tres fragmentos, es igualmente aplicable a
la síntesis de otros análogos de PTH y de PTHrp de diferentes
longitudes a partir de diferentes fragmentos. En general, son
extremos C-terminales deseables de los fragmentos
ácido glutámico, glicina, leucina y prolina. En los Ejemplos
anteriores, el acoplamiento leucina-leucina entre
los fragmentos 2 y 3 produjo rendimientos inesperadamente altos. De
forma similar, puede explotarse el acoplamiento
leucina-leucina mediante la preparación del
polipéptido de SEQ ID NO: 7 a partir de los fragmentos
1-7, 8-23, 24-27 y
28-34. En otro aspecto, cuando los aminoácidos
24-27 (LEKL) son los mismos que los aminoácidos
28-31, puede prepararse el fragmento de cuatro
aminoácidos mediante técnicas bien en solución o en fase sólida, y
puede condensarse consigo mismo para proporcionar el fragmento
24-31. Alternativamente, el fragmento de cuatro
aminoácidos 23-26 (LLEK) puede prepararse y
condensarse consigo mismo para proporcionar el fragmento
23-30. La facilidad de purificación viene aumentada
por el uso de fragmentos de menor tamaño, los cuales cristalizan
fácilmente. Sin embargo, un aumento en el número de fragmentos
requiere más etapas de condensación de fragmentos.
(1) INFORMACIÓN GENERAL:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- SOLICITANTE: F. HOFFMANN-LA ROCHE A.G.
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TÍTULO DE LA INVENCIÓN: MÉTODO PARA LA SÍNTESIS DE ANÁLOGOS DE LA HORMONA PARATIROIDEA Y DEL PÉPTIDO RELACIONADO CON LA HORMONA PARATIROIDEA
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- NÚMERO DE SECUENCIAS: 86
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- DIRECCIÓN PARA CORRESPONDENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- DESTINATARIO: F. HOFFMANN-LA ROCHE A.G.
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- CALLE: Grenzacherstrasse 124
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- CIUDAD: Basilea
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- ESTADO: BS
\vskip0.500000\baselineskip
- (E)
- PAÍS: Suiza
\vskip0.500000\baselineskip
- (F)
- ZIP: CH-4070
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- FORMA LEGIBLE POR COMPUTADOR:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- TIPO DE SOPORTE: DISQUETE FLEXIBLE
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- COMPUTADOR: IBM PC compatible
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- SISTEMA OPERATIVO: PC-DOS/MS-DOS
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- SOFTWARE: PatentIn Release #1.0, Versión #1.25
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 1:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 1:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu
Gly Lys}
\sac{His Leu Asn Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu
Arg Lys}
\sac{Lys Leu Gln Asp Val His Asn Phe}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 2:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 2:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Met His Asn Leu
Gly Lys}
\sac{His Leu Ser Ser Met Glu Arg Val Glu Trp Leu
Arg Lys}
\sac{Lys Leu Gln Asp Val His Asn Phe}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 3:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 3:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Val Ser Glu Ile Gln Leu Met His Asn Leu
Gly Lys}
\sac{His Leu Ser Ser Leu Glu Arg Val Glu Trp Leu
Arg Lys}
\sac{Lys Leu Gln Asp Val His Asn Phe}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 4:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 4:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu
His His}
\sac{Leu Ile Ala Glu Ile His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 5:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 5:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Arg Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 6:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 6:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 7:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 7:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 8:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota="Xaa34=homoserina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 8:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Xaa}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 9:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa34=homoserina lactona"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 9:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Xaa}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 10:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 37 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 10:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala Gly Arg
Arg}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 11:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 11:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu Lys Glu Leu}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 12:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 12:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Ala Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 13:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 13:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Ala Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 14:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 14:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ala Gln Leu Leu His Asp Leu
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Ala Leu}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 15:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 15:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Arg}
\sac{Leu Leu Glu Arg Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 16:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 16:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg
Gly Arg}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Arg}
\sac{Leu Leu Glu Arg Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 17:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 17:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg
Gly Arg}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Arg}
\sac{Leu Leu Lys Arg Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 18:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 29
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa29 = lisina-(OCCH_{2}(OCH_{2}CH_{2})_{2}OCH_{3})"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 18:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg
Gly Arg}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Arg}
\sac{Leu Leu Xaa Arg Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 19:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 29
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa29 = lisina-(OCCH_{2}(OCH_{2}CH_{2})_{110}OCH_{3}"
\vskip0.800000\baselineskip
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 19:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Arg
Gly Arg}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Arg}
\sac{Leu Leu Xaa Arg Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 20:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 20:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ala Leu Ala
Glu Ala}
\sac{Leu Ala Glu Ala Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 21:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 21:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ser Leu Leu
Ser Ser}
\sac{Leu Leu Ser Ser Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 22:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 22:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Ala Phe Tyr
Asp Lys}
\sac{Val Ala Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 23:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa8 = norleucina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 18
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa18 = norleucina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 23:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Xaa His Asn Leu
Gly Lys}
\sac{His Leu Ser Ser Xaa Glu Arg Val Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Asn Tyr}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 24:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa8 = norleucina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 18
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa18 = norleucina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 24:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Xaa His Asn Leu
Gly Lys}
\sac{His Leu Ser Ser Xaa Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Asn Tyr}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 25:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 25:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Met Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 26:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa8 = ácido glutámico o arginina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Región
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1..10
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "la secuencia 26 está contenida en las posiciones 22 a 31 de las secuencias 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 y 14"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 26:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Xaa Lys
Leu}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 27:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa8 = ácido glutámico, lisina o lisina-(OCCH_{2}PEGX)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Región
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1..10
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "la secuencia 27 está contenida en las posiciones 22 a 31 de las secuencias 15, 16, 17, 18 Y 19."
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 27:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Xaa Arg
Leu}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 28:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Péptido
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1..10
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "la secuencia 28 está contenida en las posiciones 22 a 31 de la secuencia 20"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 28:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Leu Ala Glu Ala Leu Ala Glu Ala
Leu}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 29:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Péptido
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1..10
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "la secuencia 29 está contenida en las posiciones 22 a 31 de la secuencia 21"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 29:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Leu Leu Ser Ser Leu Leu Ser Ser
Leu}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 30:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Péptido
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1..10
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "la secuencia 30 está contenida en las posiciones 22 a 31 de la secuencia 22"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 30:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Phe Tyr Asp Lys Val Ala Glu Lys
Leu}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 31:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 88 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- HEBRA: sencilla
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: cDNA
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 31:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipCCTCTAGATC TCCGCGGCGC TAGCATGGCT GTTTCTGAAC ATCAGCTGCT
\hfill50
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipTCATGACAAA GGTAAATCGA TTCAAGATCT GAGACGTC
\hfill88
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 32:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 90 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- HEBRA: sencilla
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: cDNA
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: SI
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 32:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipCCTCGAAGCT TATGCATCAT TATCTAGACA TAGTATGCAG CTTTTCAAGC
\hfill50
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipAGTTTCTCCA GCAGCTCGCG ACGTCTCAGA TCTTGAATCG
\hfill90
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 33:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 23 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- HEBRA: sencilla
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: cDNA
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 33:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipCCTCTAGATC TCCGCGCGCT AGC
\hfill23
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 34:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 24 pares de bases
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: ácido nucleico
\vskip0.500000\baselineskip
- (C)
- HEBRA: sencilla
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: cDNA
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (iv)
- ANTISENTIDO: SI
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 34:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip0.400000\baselineskip
\hskip-.1em\dddseqskipCCTCGAAGCT TATGCATCAT TATC
\hfill24
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 35:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 35:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Leu
Gly Lys}
\sac{His Leu Ser Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Asn Tyr}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 36:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa es homoserina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 36:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Leu
Gly Lys}
\sac{His Leu Ser Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Asn Xaa}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 37:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa es homoserina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 37:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Lys
Gly Lys}
\sac{His Leu Ser Ser Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Asn Xaa}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 38:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 38:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Lys Leu Lys Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 39:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 39:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Arg}
\sac{Leu Leu Glu Arg Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 40:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 40:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Arg}
\sac{Leu Leu Glu Arg Leu His Thr Ala Pro}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 41:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 37 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 41:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Arg}
\sac{Leu Leu Glu Arg Leu His Thr Ala Gly Arg
Arg}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 42:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 38 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 38
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa es homoserina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 42:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Arg}
\sac{Leu Leu Glu Arg Leu His Thr Ala Gly Arg Arg
Xaa}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 43:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 43:
\newpage
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Tyr Tyr}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 44:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 44:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Tyr}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 45:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
(iii) HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 45:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Cys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 46:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 13
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa es Cys(CH-2CONH(CH-2)-2NH-(biotinil))"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 46:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Xaa}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 47:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa es Lys(7-dimetilamino-2-oxo-2H-1-benxopiran-4-acetil)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 47:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Xaa}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 48:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 48:
\newpage
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala Gly}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 49:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 33 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.800000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 4
\vskip0.800000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa4 es Glu(OCH-3)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 10
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa10 es Asp(OCH-3)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 17
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa17 es Asp(OCH-3)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 22
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa22 es Glu(OCH3)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 25
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa25 es Glu(OCH-3)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 29
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa29 es Glu(OCH-3)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 49:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Xaa His Gln Leu Leu His Xaa Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Xaa Leu Arg Arg Arg Xaa Leu Leu
Xaa Lys}
\sac{Leu Leu Xaa Lys Leu His Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 50:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 33 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 4
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa4 es Glu(OCH-3)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 10
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa10 es Asp(OCH-3)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 17
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa17 es Asp(OCH-3)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 22
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa22 es Glu(OCH3)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 25
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa25 es Glu(OCH-3)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 29
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa29 es Glu(OCH-3)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 50:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Xaa His Gln Leu Leu His Xaa Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Xaa Leu Arg Arg Arg Xaa Leu Leu
Xaa Lys}
\sac{Leu Leu Xaa Lys Leu His Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 51:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa es homoserina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 51:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Xaa}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 52:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 52:
\newpage
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala Pro}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 53:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 53:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Pro}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 54:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 54:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Pro}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 55:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 33 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 55:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Pro}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 56:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 32 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 56:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu Pro}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 57:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 37 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 57:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Arg Ser Ala
Trp}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 58:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE 42 SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 58:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 59:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 42 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 59:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 60:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 42 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 13
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa13 es Lys(dihidrocinamoil)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 60:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 61:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Leu8 es norleucina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 18
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Leu18 es norleucina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 61:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Leu
Gly Lys}
\sac{His Leu Ser Ser Leu Thr Arg Ser Ala Trp Leu
Arg Lys}
\sac{Lys Leu Gln Asp Val His Asn Tyr}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 62:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 62:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Met Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 63:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 33 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 33
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa es Thr-1,4-diaminobutiril lactama"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 63:
\newpage
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Xaa}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 64:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 64:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Phe Phe Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 65:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 65:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
His Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 66:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 66:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu His}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 67:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 67:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Ile Ala Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 68:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 68:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Glu Ile His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 69:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa es homoserina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 69:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Xaa}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 70:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa es homoserina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 70:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Xaa}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 71:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: ambas
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 71:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 72:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 37 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 72:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Arg Ser Ala
Trp}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 73:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 36 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 36
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa es Ala-3-(2-naftil)-L-alanina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 73:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Arg Ser
Xaa}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 74:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 37 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 74:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala Ser Ala
Trp}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 75:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 38 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 75:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala Glu Ile Arg
Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 76:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 37 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 76:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala Glu Ile
Arg}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 77:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 36 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 77:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala Glu
Ile}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 78:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 78:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys
Gly Lys}
\sac{Ser Ile Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu
Glu Lys}
\sac{Leu Leu Glu Lys Leu His Thr Ala Glu}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 79:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 34 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: N-terminal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Leu8 es norleucina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 18
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Leu18 es norleucina"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 34
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa es homoserina lactona"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 79:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ala Val Ser Glu Ile Gln Phe Leu His Asn Lys
Gly Lys}
\sac{His Leu Ser Ser Leu Glu Arg Val Glu Trp Leu
Arg Lys}
\sac{Lys Leu Gln Asp Val His Asn Xaa}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 80:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 32 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 80:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Ser Glu His Gln Leu Leu His Asp Lys Gly Lys
Ser Ile}
\sac{Gln Asp Leu Arg Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys
Leu Leu}
\sac{Glu Lys Leu His Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 81:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 28 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 81:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Leu Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp
Leu Arg}
\sac{Arg Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys
Leu His}
\sac{Thr Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 82:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 27 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 82:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Leu His Asp Lys Gly Lys Ser Ile Gln Asp Leu
Arg Arg}
\sac{Arg Glu Leu Leu Glu Lys Leu Leu Glu Lys Leu
His Thr}
\sac{Ala}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 83:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 41 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 83:
\vskip1.000000\baselineskip
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 84:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 35 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: lineal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: proteína
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 84:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Leu Leu His Asp Arg Gly Arg Ser Ile Gln Asp
Leu Arg}
\sac{Arg Arg Glu Leu Leu Glu Arg Leu Leu Glu Arg
Leu His}
\sac{Ala Gly Arg Arg Thr Arg Ser Ala Trp}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 85:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1 y 4
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa1 y Xaa4 = Glu, Glu(OCH3), His o Phe"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 2
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa2 = Leu o Phe"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 5
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa5 = Lys o His"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 7 y 10
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa7 y Xaa10 = Leu o Ile"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa8 = Ala, Arg, o Glu"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 9
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "xaa9 = Lys o Glu"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 85:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Leu Xaa Xaa Xaa
Xaa}
\vskip1.000000\baselineskip
(2) INFORMACIÓN PARA SEQ ID NO: 86:
\vskip0.800000\baselineskip
- (i)
- CARACTERÍSTICAS DE LA SECUENCIA:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- LONGITUD: 10 aminoácidos
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- TIPO: aminoácido
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- TOPOLOGÍA: helicoidal
\vskip0.800000\baselineskip
- (ii)
- TIPO DE MOLÉCULA: péptido
\vskip0.800000\baselineskip
- (iii)
- HIPOTÉTICA: NO
\vskip0.800000\baselineskip
- (v)
- TIPO DE FRAGMENTO: interno
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 1 y 4
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa1 y Xaa4 = Glu, Glu(OCH3), His o Phe"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 2
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa2 = Leu o Phe"
\vskip0.800000\baselineskip
- (ix)
- CARACTERÍSTICAS:
\vskip0.500000\baselineskip
- (A)
- NOMBRE/CLAVE: Sitio modificado
\vskip0.500000\baselineskip
- (B)
- LOCALIZACIÓN: 8
\vskip0.500000\baselineskip
- (D)
- OTRA INFORMACIÓN:
\vskip0.500000\baselineskip
- /nota= "Xaa8 = Glu, Lys o Lys(COCH2PEGX)"
\vskip0.800000\baselineskip
- (xi)
- DESCRIPCIÓN DE LA SECUENCIA: SEQ ID NO: 86:
\vskip1.000000\baselineskip
\sa{Xaa Xaa Leu Xaa Arg Leu Leu Xaa Arg
Leu}
Claims (11)
1. Un proceso para la síntesis de un polipéptido
sintético análogo a la hormona paratiroidea (PTH) o al péptido
relacionado con la hormona paratiroidea (PTHrP), o una sal del
mismo, en el que los residuos aminoácidos (22-31)
seleccionados de entre (SEQ ID NOS: 85, 86, 26, 27, 28, 29 y 30)
forman una hélice \alpha anfipática, e incluyendo dicho
proceso:
a) sintetizar de forma independiente tres
fragmentos peptídicos precursores: uno N-terminal,
uno medio y un fragmento C-terminal,
en donde el fragmento N-terminal
tiene una glicina C-terminal, el fragmento medio
tiene una leucina C-terminal y el fragmento
C-terminal tiene una leucina
N-terminal;
b) escindir todos los fragmentos peptídicos
precursores excepto el que va a ser finalmente el fragmento
peptídico precursor C-terminal del polipéptido
deseado de sus respectivos soportes de resina;
c) condensar secuencialmente dichos fragmentos
peptídicos precursores escindidos con el fragmento peptídico
C-terminal enlazado de resina para formar el
producto polipeptídico deseado;
d) eliminar los grupos protectores de cadena
lateral; y
e) escindir el producto polipeptídico del soporte
de resina.
2. Un proceso de conformidad con la
reivindicación 1, en el que el producto polipeptídico final
comprende un análogo de PTH o de PTHrP de fórmula:
Xaa^{1} Xaa^{2} Xaa^{3}Xaa^{4} Xaa^{5}
Xaa^{6} Xaa^{7} Leu His Asp Xaa^{11} Gly Xaa^{13} Ser Ile
Gln Asp Leu Xaa^{19} Xaa^{20} Xaa^{21}
Xaa^{22-31} Xaa^{32} Xaa^{33} Xaa^{34}
Xaa^{35} Xaa^{36} Xaa^{37} Xaa^{38} Term, donde:
Xaa^{1} está ausente o es Ala;
Xaa^{2} está ausente o es Val;
Xaa^{3} está ausente o es Ser;
Xaa^{4} está ausente o es Glu o
Glu(OCH_{3});
Xaa^{5} está ausente o es His o Ala;
Xaa^{6} está ausente o es Gln;
Xaa^{7} está ausente o es Leu;
Xaa^{11} es Lys, Arg, o Leu;
Xaa^{13} es Lys, Arg, Tyr, Cys, Leu,
Cys(CH_{2}CONH-(CH_{2})_{2}NH(biotinil)),
Lys(7-dimetilamino-2-oxo-2H-1-benxopiran-4-acetil),
o Lys(dihidrocinamoil);
Xaa^{20} es Arg o Leu;
Xaa^{19} y Xaa^{21} son independientemente
Lys, Ala o Arg;
Xaa^{22-31} se selecciona de
(SEQ ID NOS: 85, 86, 26, 27, 28, 29 ó 30);
Xaa^{32} es His, Pro o Lys;
Xaa^{33} está ausente o es Pro, Thr, Glu o
Ala;
Xaa^{34} está ausente o es Pro, Arg, Met, Ala,
hSer, hSer lactona, Tyr o Leu;
Xaa^{35} está ausente o es Pro, Glu, Ser, Ala o
Gly;
Xaa^{36} está ausente o es Ala, Arg o Ile;
Xaa^{37} está ausente o es Arg, Trp, o
3-(2-naftil)-L-alanina;
Xaa^{38} está ausente o es Ala o hSer o
Xaa^{38-42} es Thr Arg Ser Ala Trp;
y Term es OR o NR_{2} donde cada R es
independientemente H,
(C_{1}-C_{4})alquilo o
fenil(C_{1}-C_{4})alquilo; y las
sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.
3. Un proceso de conformidad con la
reivindicación 1, en el que el análogo polipeptídico de PTH o a
PTHrP tiene la fórmula:
Xaa^{1} Val Ser Glu Ile Gln Xaa^{7} Xaa^{8}
His Asn Xaa^{11}Gly Lys His Leu Xaa^{16} Ser Xaa^{18}
Xaa^{19} Arg Xaa^{21} Xaa^{22-31} His Asn
Xaa^{34} Term, donde:
Xaa^{1} es Ser o Ala;
Xaa^{7} es Leu o Phe;
Xaa^{8} es Leu, Met o Nle;
Xaa^{11} es Leu o Lys;
Xaa^{16} es Asn o Ser;
Xaa^{18} es Leu, Met o Nle;
Xaa^{19} es Glu, Thr o Arg;
Xaa^{21} es Val, Ser o Arg;
Xaa^{22-31} se selecciona de
(SEQ ID NOS: 26, 27, 28, 29 ó 30);
Xaa^{34} es Phe, hSer o Tyr;
Term es OR o NR_{2}, donde R es H o un
(C_{1}-C_{4})alquilo; y las sales
farmacéuticamente aceptables de los mismos.
4. El proceso de conformidad con la
reivindicación 1, en el que el análogo de PTH o de PTHrP se
selecciona del grupo que consiste en:
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 7)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTA-OH
\;(SEQ ID NO: 6)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLERLLERLHTA-OH
\;(SEQ ID NO: 15)
AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLERLHTA-OH
\;(SEQ ID NO: 16)
AVSEHQLLHDRGRSIQDLRRRELLERLLKRLHTA-OH
\;(SEQ ID NO: 17)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLRKLHTA-OH
\;(SEQ ID NO: 5)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTAGRR-OH
\;(SEQ ID NO: 10)
AVSEAQLLHDLGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHAL-OH
\;(SEQ ID NO: 14)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLELLKEL-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 11)
AVSEIQFXHNLGKHLSSXERVELLEKLLEKLHNY-NH_{2}
\;(X=Nle, SEQ ID NO:23)
AVSEIQFXHNLGKHLSSXRRRELLEKLLEKLHNY-NH_{2}
\;(X=Nle, SEQ ID NO:24)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRALAEALAEALHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 20)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLARRELLEKLLEKLHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 12)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRAELLEKLLEKLHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 13)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRSLLSSLLSSLHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 21)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRAFYDKVAEKLHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 22)
AVSEIQFLHN LGKHLSSLRR RELLEKLLEK
LHNY-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 35)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLKL KELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 38)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 39)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER
LHTAP-OH
\;(SEQ ID NO: 40)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER
LHTAGRR-OH
\;(SEQ ID NO: 41)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTY-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 43)
AVSEHQLLHD KGYSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 44)
AVSEHQLLHD KGCSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 45)
AVSEHQLLHD KGXSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 46)
(X=Cys(CH_{2}CONH(CH_{2})_{2}NH(biotinil)))
AVSEHQLLHD KGXSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 47)
(X=Lys(7-dimetilamino-2-oxo-2H-1-benxopiran-4-acetil))
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAG-OH
\;(SEQ ID NO: 48)
AVSX_{1}HQLLHX_{2} KGKSIQX_{2}LRR
RX_{1}LLX_{1}KLLX_{1}K LHA-OH
\;(SEQ ID NO: 49)
(X_{1}=Glu(OCH_{3});
X_{2}=Asp(OCH_{3}))
AVSX_{1}HQLLHX_{2} KGKSIQX_{2}LRR
RX_{1}LLX_{1}KLLX_{1}K LHA-OCH_{3} (SEQ ID
NO:50)
(X_{1}=Glu(OCH_{3});
X_{2}=Asp(OCH_{3}))
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAP-OH
\;(SEQ ID NO: 52)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTP-OH
\;(SEQ ID NO: 53)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAP-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 54)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHP-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 55)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LP-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 56)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTRSAW-OH
\;(SEQ ID NO: 57)
AVSEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER
LHTAGRRTRSAW-OH
\;(SEQ ID NO: 58)
AVSEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER
LHTAGRRTRSAW-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 59)
AVSEHQLLHD RGXSIQDLRR RELLERLLER
LHTAGRRTRSAW-OH
\;(SEQ ID NO: 60)
(X=Lys(dihidrocinamoil)
AVSEIQFXHN LGKHLSSXTR SAWLRKKLQD
VHNY-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 61)
(X=norleucina)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTMA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 62)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RFFLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 64)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLHKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 65)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEHLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 66)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLIAK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 67)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEE
IHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 68)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTRSAW-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 72)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTRSAX-OH
\;(SEQ ID NO: 73)
(X=Nal(2)=3-(2-naftil)-L-alanina)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTASAW-OH
\;(SEQ ID NO: 74)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAEIRA-OH
\;(SEQ ID NO: 75)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAEIR-OH
\;(SEQ ID NO: 76)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAEI-OH
\;(SEQ ID NO: 77)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTAE-OH
\;(SEQ ID NO: 78)
SEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 80)
LLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 81)
LHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTA-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 82)
SEHQLLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER
LHAGRRTRSAW-OH
\;(SEQ ID NO:83)
LLHD RGRSIQDLRR RELLERLLER
LHAGRRTRSAW-OH
\;(SEQ ID NO:84)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTX
\;(X=hSerlac, SEQ ID NO: 9)
AVSEIQFX_{1}HN KGKHLSSX_{1}ER VEWLRKKLQD
VHNX_{2}
\;(SEQ ID NO: 79)
(X_{1}=L-norleucina;
X_{2}=homoserina lactona)
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTX-NH_{2}
\;(X=hSer, SEQ ID NO:8)
AVSEIQFLHN LGKHLSSLRR RELLEKLLEK
LHNX-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 36)
(X=homoserina)
AVSEIQFLHN KGKHLSSLRR RELLEKLLEK
LHNX-NH_{2}
\;(SEQ ID NO: 37)
(X=homoserina)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLERLLER
LHTAGRRX-NH_{2}
\;(SEQ ID NO:42)
(X=homoserina)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTX-NHCH_{2}CH_{3}
\;(SEQ ID NO: 69)
(X=homoserina)
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTX-NHCH_{2}CH_{2}C_{6}H_{5}
\;(SEQ ID NO: 70)
(X=homoserina), y
AVSEHQLLHD KGKSIQDLRR RELLEKLLEK
LHTX-OH
\;(SEQ ID NO: 51)
(X=homoserina).
5. El proceso de conformidad con la
reivindicación 1, en el que el análogo de PTH o de PTHrP es el
polipéptido de SEQ ID NO: 7,
AVSEHQLLHDKGKSIQDLRRRELLEKLLEKLHTA-NH_{2}.
6. El proceso de la reivindicación 5 en el que
dicho primer fragmento comprende AVSEHQLLHDKG, dicho segundo
fragmento comprende KSIQDLRRREL, y dicho tercer fragmento comprende
LEKLLEKLHTA.
7. El proceso de conformidad con la
reivindicación 6, en el que dicho tercer fragmento se forma por la
condensación de LEKL, LEKL y HTA.
8. Un proceso de de conformidad con la
reivindicación 7, en el que dicho primer fragmento comprende
AVSEHQLLHDKG, dicho segundo fragmento comprende KSIQDLRRRE y dicho tercer fragmento comprende
LLEKLLEKLHTA.
AVSEHQLLHDKG, dicho segundo fragmento comprende KSIQDLRRRE y dicho tercer fragmento comprende
LLEKLLEKLHTA.
9. Un proceso de conformidad con la
reivindicación 8 en el que dicho tercer fragmento está formado por
la condensación de LLEK, LLEK y LHTA.
10. Un polipéptido sintético de la secuencia
elegida entre
AVSEHQLLHDKG;
KSIQDLRRREL;
LEKLLEKLHTA;
KSIQDLRRRE y
LLEKLLEKLHTA.
11. Un proceso para la preparación de una
composición farmacéutica caracterizada en que se realiza un
proceso tal como se ha reivindicado en cualquiera de las
reivindicaciones de 1 a 9 para la preparación de un análogo de PTH o
PTHrP, y el análogo de PTHrP obtenido se mezcla con uno o más
aditivos farmacéuticamente aceptables.
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