ES2203224T3

ES2203224T3 - Composicion oral para inhibir la halitosis.

Info

Publication number: ES2203224T3
Application number: ES99961498T
Authority: ES
Inventors: Gunnar Rolla
Original assignee: Orix AS
Current assignee: Orix AS
Priority date: 1999-03-01
Filing date: 1999-11-16
Publication date: 2004-04-01
Anticipated expiration: 2019-11-16
Also published as: US6344184B1; DE69909135D1; CA2358707C; EP1156777A1; NO990975A; AR022751A1; JP2002538093A; CA2358707A1; AU764634B2; ATE243494T1; BR9917282A; AU1805900A; WO2000051559A1; EP1156777B1; DK1156777T3; NO307168B1; NO990975D0; DE69909135T2; JP4299972B2

Abstract

Composición oral para inhibir el mal olor bucal, que contiene un agente antibacteriano y un compuesto de cinc, en la forma de un colutorio que contiene 0, 01-0, 025% p/v de un agente antibacteriano seleccionado entre bis- guanidas y compuestos de amonio cuaternario, y 0, 1-0, 3% p/v de acetato de cinc,

Description

Composición oral para inhibir la halitosis.

La presente invención se refiere a una composición oral que es eficaz contra la halitosis (mal olor bucal, foetor ex ore). Dicha composición es eficaz al eliminar o reducir la producción de composiciones sulfuradas volátiles (VSCs) en la cavidad bucal. Está bien establecido que en la mayoría de los casos de halitosis, ésta se origina desde la cavidad bucal y no desde el estómago como frecuentemente cree el público.

Las bacterias situadas en las criptas del fondo de la lengua y en bolsas periodontales producen VSCs, principalmente sulfuro de hidrógeno (HS) y metilmercaptano (MM). Las bacterias producen estos compuestos mediante metabolismo proteolítico, anaerobio y tienen un olor extremadamente desagradable incluso en concentraciones muy pequeñas. Los VSCs son capaces de penetrar en el epitelio y poseen potencial patógeno, dañando células de los tejidos circundantes afectando también a su metabolismo. Se ha sugerido que Los VSCs producidos por bacterias en las bolsas periodontales pueden ser un factor importante en el desarrollo de la enfermedad periodontal. El MM parece tener un potencial patógeno mayor que el HS y posee también un olor más desagradable.

El sustrato más importante para la producción de HS en la cavidad bucal parece ser la cisteína. El HS se forma inmediatamente al enjuagarse la boca con una solución acuosa de este aminoácido (véase el ejemplo 2). La metionina es el sustrato principal para la formación de MM aun cuando este compuesto no se forma en la cavidad bucal tan rápidamente como el sulfuro de hidrógeno.

Es sabido que los iones cinc reducen la producción de VSC en la cavidad bucal. El mecanismo implicado lleva consigo, presumiblemente, la reacción entre el cinc y el azufre con lo que se forman sulfuros no volátiles y por tanto se inhibe la transformación de sustancias que contienen azufre en VSCs. El cinc posee, además, una cierta actividad antibacteriana y se sabe que este ion metálico es capaz de inhibir la formación de placa y reducir la formación de ácido en la placa dental. Las sales de cinc usadas habitualmente para tal fin son el cloruro, el sulfato y el citrato. No obstante, las soluciones acuosas de las dos primeras sales poseen un pH bajo y no son, por tanto, necesariamente adecuadas para uso oral mientras que las soluciones de citrato de cinc contienen complejos de cinc y citrato y muy pocos iones cinc libres.

El problema de la obtención de cinc en una forma adecuada es el objeto de la patente de EE.UU. No. 4.289.753 y de la solicitud de patente del Reino Unido No. 2.052.978. En la primera el compuesto de cinc empleado es un citrato de amonio o un citrato de metal alcalino. También se ha establecido en esta patente que este compuesto de cinc puede ser usado en combinación con agentes antibacterianos tales como el cloruro de cetilpiridinio.

La solicitud de patente del Reino Unido anteriormente citada, describe una composición oral en la que el pH de una solución que contiene cinc se ajusta a 4,5 u 8 por medio de glicocola. El cinc se encuentra presente generalmente como cloruro de cinc.

Agentes antibacterianos tales como bis-biguanidas catiónicas y compuestos de amonio cuaternario, han sido empleados ampliamente en odontología preventiva como inhibidores de la formación de placa dental y del desarrollo de gingivitis. La bis-biguanida clorhexidina se usa frecuentemente para este fin, habitualmente en forma de una solución acuosa al 0,2% de su sal gluconato y se aplica como un colutorio dos veces al día. Tales concentración y frecuencia son necesarias para obtener una inhibición clínica de la placa dental que sea consistente. Sin embargo, la clorhexidina en estas concentraciones posee un sabor amargo y ocasiona mancha dental. La clorhexidina forma sales de solubilidad baja con el cloruro, sulfato y citrato y, por tanto, no es compatible con cinc que contenga estos aniones.

Los otros agentes antibacterianos catiónicos que inhiben la formación de placa, por ejemplo el cloruro de cetilpiridinio o el cloruro de benzalconio, poseen menos efecto clínico y ponen de manifiesto una tendencia menos pronunciada a causar mancha dental. Los agentes antibacterianos catiónicos citados son capaces de inhibir la formación de VSC en la cavidad bucal, pero se necesitan concentraciones relativamente altas (véase el Ejemplo 1).

Se ha descubierto ahora, inesperadamente, que el efecto anti-VSC de los iones cinc está dirigido principalmente contra la producción de sulfuro de hidrógeno y en una extensión mucho menor contra la producción de metil- mercaptano (véase el Ejemplo 1, Fig. 2). La especie de VSC con el máximo potencial patógeno y el mayor olor desagradable, es decir, el MM, es, por tanto, eliminado incompletamente por los iones cinc.

El efecto selectivo sobre el HS por el cinc puede ser explicado, presumiblemente, por el hecho de que la cisteína (que es el sustrato principal para la formación de HS) posee un grupo -SH expuesto, que reacciona fácilmente con los iones cinc, mientras que la metionina (que es un sustrato para la formación de MM) no posee tal grupo. Cuando el sulfuro de hidrógeno se disuelve en agua (o en la saliva) se forman HS- y S^{=} (junto con dos protones) y ambos de estos intermedios que contienen azufre reaccionan rápidamente con los iones cinc formando sulfuros insolubles.

Se descubrió inesperadamente, además, que cuando se usaron una combinación de iones cinc y muy bajas concentraciones de ciertos agentes antibacterianos catiónicos, las combinaciones inhibían la formación tanto de HS como de MM: El efecto de las combinaciones es sinérgico (Ejemplo 1, tabla 1). Las combinaciones de cinc y concentraciones bajas de agente antibacteriano causaban una inhibición de VSCs mucho mayor que cualquiera de los agentes individuales aislados. La concentración de un agente antibacteriano usado de este modo contra el mal olor bucal fue marcadamente inferior que las concentraciones necesarias para obtener la inhibición de la placa dental o la formación reducida de ácido en la placa (1/10 ó menos)

La importancia de la invención reside en el hecho de que permite el uso de muy bajas concentraciones de agentes antibacterianos, es decir, concentraciones en las que se evitan efectos secundarios indeseados. La contribución del agente antibacteriano es probablemente, principalmente, inhibir la formación de MM, pero también se observó un efecto sinérgico con el cinc contra el HS, aun cuando no en el mismo grado que contra el MM. La concentración de cinc puede, también, mantenerse más baja que cuando el cinc se usa solo, por la misma razón El cinc tiene un sabor metálico que depende de la concentración.

El empleo de combinaciones de acetato de cinc y clorhexidina está descrito en el documento DE 30001575 A1. Sin embargo la finalidad es evitar la decoloración de los dientes por la clorhexidina. En la patente de EE.UU. No. 4.522.806 se cita un efecto anti-placa de la combinación de clorhexidina y acetato de cinc (página 5, primer párrafo). Se encontró que la combinación era numéricamente mejor que la clorhexidina sola, pero la diferencia no era estadísticamente importante.

En la patente de EE.UU. 5.906.811 se menciona una combinación de acetato de cinc y cloruro de benzalconio como ingrediente de pastas de dientes. El fin principal es evitar daño procedente de las especies de radicales libres sobre la cavidad orofaríngea de los fumadores de tabaco, incluyendo a los fumadores secundarios.

La presente invención proporciona una composición oral para inhibir el mal olor bucal, que comprende un agente antibacteriano y un compuesto de cinc. La composición tiene la forma de un colutorio que contiene 0,01-0,025%(p/v) de un agente antibacteriano seleccionado entre bis-biguanidas y compuestos de amonio cuaternario, y 0,1-0,3% (p/v) de acetato de cinc.

Cuando se emplea acetato de cinc junto con un agente antibacteriano seleccionado entre las bis-biguanidas o compuestos de amonio cuaternario, aparece que el efecto es sinérgico, como se ha citado anteriormente. Esto significa que usando una combinación tal, la cantidad de ambos (es decir, acetato de cinc y agente antibacteriano) puede mantenerse muy baja. Empleando tales cantidades bajas pueden evitarse el amargor del sabor y la tendencia a causar mancha dental.

Un beneficio principal de esta invención es que permite el uso de concentraciones mucho menores de agentes antibacterianos en composiciones destinadas especialmente a inhibir el mal olor bucal, que en los productos ordinarios destinados a fines anti-placa y anti-gingivitis.

Las bajas concentraciones del agente antibacteriano son favorables tanto desde el punto de vista económico como desde el punto de vista toxicológico. La presencia de cinc por sí misma reduce la tendencia a causar mancha dental, debido a que el sulfuro de cinc es blanco o gris, mientras que los otros sulfuros metálicos que se forman sobre los dientes son negros, pardos o amarillos.

Como se ha citado antes, es una gran ventaja el que las concentraciones de los dos ingredientes, en particular la concentración del agente antibacteriano, pueda mantenerse muy baja. Es particularmente fácil ejercer control sobre un colutorio en el que las concentraciones de dichos ingredientes activos pueden ajustarse fácilmente al valor deseado. La composición oral de la invención está en la forma de un colutorio que contiene desde 0,01% a 0,025% (p/v) de los agentes antibacterianos y 0,1% a 0,3% (p/v) de acetato de cinc.

Como se ha citado antes, el agente antibacteriano preferido es la clorhexidina o una de sus sales, en particular las sales acetato o gluconato. Los compuestos de amonio cuaternario preferidos son el cloruro de cetilpiridinio o el cloruro de benzalconio.

Según otra realización de la invención, se usa una composición que comprende un agente antibacteriano seleccionado entre las bis-biguanidas y los compuestos de amonio cuaternario, y el acetato de cinc, para la preparación de una composición oral, en particular un colutorio, para inhibir el mal olor bucal.

En otra realización de la invención se usa una composición que contiene un agente antibacteriano seleccionado entre las bis-biguanidas, un compuesto de amonio cuaternario y acetato de cinc, para el tratamiento del mal olor bucal. En el uso indicado, las cantidades de los componentes deben ser como las anteriormente descritas en relación con la composición oral.

Ejemplo 1

Se llevaron a cabo experimentos in vitro para ensayar el potencial de inhibición de VSC de diferentes combinaciones de acetato de cinc y agentes antibacterianos catiónicos.

A una muestra de 1 ml de saliva humana recién recogida, en un tubo de ensayo, se añadieron 10 microlitros de las soluciones (colutorios) que se describen más adelante. Los tubos de ensayo se cerraron con un tapón y se incubaron durante la noche a 37ºC. Un tubo que contenía solamente saliva sirvió como testigo. Es bien sabido que se forman grandes cantidades de VSCs en un tubo de ensayo durante las últimas condiciones, destruyendo las bacterias las proteínas de la saliva y formando VSCs a partir de la cisteína y la metionina. Los VSCs existentes en la fase gaseosa por encima de la saliva incubada, fueron medidos mediante cromatografía de gases en un instrumento Shimadzu 14B empleándose como patrones sulfuro de hidrógeno, metilmercaptano y dl-sulfuro de metilo.

Las soluciones a ser ensayadas fueron : acetato de cinc al 0,3%, clorhexidina al 0,025%, cloruro de cetilpiridinio al 0,025% y cloruro de benzalconio al 0,025%. Seguidamente el acetato de cinc se combinó con cada uno de los agentes antibacterianos individuales. Todos los experimentos descritos en este párrafo fueron llevados a cabo el mismo día en condiciones idénticas. Las concentraciones elegidas estaban basadas en la experiencia procedente de experimentos piloto con concentraciones diferentes del cinc y los agentes antibacterianos. Los resultados pueden apreciarse de los cromatogramas que aparecen en las figuras 1-8, y desde la tabla 1 que sigue.

Los experimentos mostraron que el testigo contenía cantidades muy altas tanto de sulfuro de hidrógeno (HS) como de metilmercaptano (MM), mientras que las muestras que contenían cinc tenían cantidades bajas tanto de HS como de MM. Se encontró, no obstante, que el acetato de cinc reducía la cantidad de HS mucho más que la cantidad de MM. Este efecto se observó en muchos experimentos con saliva procedente de diferentes sujetos.

La adición de clorhexidina tenía un efecto claro sobre el HS y el MM del mismo orden de magnitud que el acetato de cinc. Los otros agentes antibacterianos eran eficaces, pero mucho menos que la clorhexidina o el cinc. Sin embargo, cuando se ensayaron combinaciones de acetato de cinc y los diferentes agentes antibacterianos, se observó una reducción clara, adicional, de los VSCs, tanto para el HS como para el MM. Puede apreciarse que la clorhexidina no era mejor que los otros agentes antibacterianos en estos experimentos.

Se llevó a cabo un examen para investigar si el efecto de la combinación de acetato de cinc y los agentes antibacterianos individuales representaba un efecto sinérgico. Este examen se llevó a cabo según el método de Behrenbaum (J. Inf. Dis. 137:122-130, 1978). Las concentraciones inhibitorias fraccionadas (el índice FIC) se calculó en base a las cantidades (AUC) de sulfuro de hidrógeno y metilmercaptano formadas en condiciones diferentes. Una AUC baja indica, por tanto, la presencia de un inhibidor potente. El índice FIC se calculó a partir de la fórmula siguiente:(A+B)/A + (A+B)/B, en la que A*B representa las combinaciones de cinc y agente antibacteriano mientras que A y B solas representan los agentes individuales.

Si el índice FIC está por debajo de 1 (<1) se establece un efecto sinérgico. Si el índice es igual a 1 (=1) se aprecia un efecto adicional entre A y B mientras que un índice por encima de 1 (>1) indica un efecto antagónico. El índice FIC de las diferentes combinaciones se aprecia en la Tabla 1. Todas las diferentes combinaciones tenían efecto sinérgico tanto contra el HS como el MM, pero el efecto era mucho más fuerte contra el MM, presumiblemente debido a que el acetato de cinc tenía un efecto más débil contra el MM (tabla 1).

(Tabla pasa a página siguiente)

TABLA 1

La tabla contiene los valores de AUC (cantidades de VSCs) de las fig- 1-8 y el índice FIC para
las combinaciones de cinc y los agentes antibacterianos individuales.
Fig.	Agentes ensayados	HS	Índice FIC	MM	Índice FIC
1	Testigo	>27 mill		>41 mill
2	Ac. cinc, 0,3%	150.000		4 mill
3	CHX, 0,025%	443.000		355.000
4	CPC, 0,025%	5,2 mill		6,89 mill
5	Benzalc, 0,025%	1,4 mill		1,7 mill
6	Ac. cinc, 0,3% + CHX, 0,025%	82.000	0,73	34.000	0,1
7	Ac. Cinc, 0,3% + Benzalc, 0,025%	47.000	0.33	13.000	0,01
8	Ac. cinc, 0,3% + CPC, 0,025%	37.000	0,24	1.000	0,00
AUC - Área bajo la curva
Ac. - Acetato
CHX - Acetato de clorhexidina
Benzalc. - Cloruro de benzalconio
CPC - Cloruro de cetilpiridinio
HS - Sulfuro de hidrógeno
MM – Metilmercaptano
* Un índice FIC por debajo de 1 (<1) indica un efecto sinérgico

Ejemplo 2

Se ha puesto de manifiesto que colutorios acuosos con cisteína 6 mM dan una elevación escarpada, inmediata, en la formación de VSC en la cavidad bucal. El efecto puede ser usado como un sistema de ensayo observando el efecto de un lavado de cisteína cuando se lleva a cabo un prelavado con un inhibidor de formación de VSC (por ejemplo con soluciones de cinc). Este sistema está descrito en la patente de EE.UU. No. 5.833.955 de Kleinberg et al. (1998). Mediante lavados de cisteína subsiguientes, cada hora después de, por ejemplo, una solución de cinc, puede ponerse de manifiesto en que medida es eficaz el inhibidor. En la exposición que sigue se puso de manifiesto que con 0,3% de acetato de cinc y 0,025% de cada uno de los agentes antibacterianos clorhexidina y cloruro de cetilpiridino, el inhibidor era eficaz durante más de 5 horas. El diseño experimental descrito es, presumiblemente, riguroso y parece probable que bajo condiciones "normales" en que no se introduce cisteína en la boca, sería de esperar que la duración del efecto permaneciera durante un tiempo considerablemente más largo de lo que indican los resultados presentes. Una limitación del modelo es que solamente se forma sulfuro de hidrógeno por los sujetos en ensayo por lavados con cisteína. Esto se pone de manifiesto claramente cuando se analiza el aire de la boca por cromatografía de gases, como en el presente estudio. Si el Halimeter, frecuentemente usado, se emplea para realizar las medidas, esta limitación no es evidente debido a que el Halimeter opera mediante sensores químicos que no pueden establecer diferencias entre el sulfuro de hidrógeno y el metilmercaptano. Los experimentos presentes muestran, por tanto, el efecto de inhibición de los inhibidores sobre el sulfuro de hidrógeno solamente. Sin embargo, en combinación con los experimentos del Ejemplo 1 (que examinaban también el efecto de las combinaciones sobre el etilmercaptano), se juzga que los experimentos presentes proporcionan datos válidos.

En los presentes experimentos el sujeto en ensayo se enjuagó con 5 ml de una solución de cisteína 6 mM y el VSC de la boca fue examinado después de que la boca había sido mantenida cerrada durante 90 segundos. El sujeto se enjuagó luego con un inhibidor de VSC (es decir, combinaciones de acetato de cinc y los agentes antibacterianos respectivos). Al cabo de una hora el sujeto se enjuagó de nuevo con cisteína. Cualquier reducción en VSC (es decir, sulfuro de hidrógeno) desde los valores originales se supuso que era causado por el inhibidor. Los lavados con cisteína fueron llevados a cabo cada hora, durante 5 horas, para establecer la duración del efecto de inhibición. Los resultados de estos ensayos se muestran en los cromatogramas de las figuras 9 y 10. La Fig. 9 muestra la producción normal de sulfuro de hidrógeno por el sujeto en ensayo, por la mañana, después de un lavado con cisteína, que es AUC de 10 mill. Después de un lavado con la combinación de acetato de cinc de 0,3% y acetato de clorhexidina al 0,025% y otro lavado con cisteína una hora después, el valor HS fue solamente 32.000 (fig. 9a), después de otra hora fue 500.000 (fig. 9b), luego 270.000 (fig. 9c), 1,7 mill (fig. 9d) y 1,7 mill (fig. 9e). La combinación, por tanto, redujo la producción de sulfuro de hidrógeno en la boca por cisteína en más de 80% cinco horas después de un lavado único con la combinación anteriormente descrita.

En un experimento similar se ensayó la combinación de acetato de cinc al 0,3% y cloruro de cetilpiridinio al 0,025%. El valor normal después del lavado con cisteína fue AUC de 11 mill de sulfuro de hidrógeno (fig. 10). Después de un lavado con la combinación y un enjuagado con cisteína una hora más tarde, el valor de HS fue tan bajo como 22.000 (fig. 10 a). Al cabo de dos horas era 67.000 (fig. 10b), después de tres horas 315.000 (fig. 10c), cuatro horas 275.000 (fig. 10d) y cinco horas 47.000 (fig. 10e).

Puede llegarse a la conclusión de que las combinaciones de acetato de cinc y los dos agentes antibacterianos ensayados tenían un efecto muy potente y de larga duración, y de que la clorhexidina no era mejor que el cloruro de cetilpiridinio en combinación con cinc. Probablemente es seguro llegar a la conclusión de que un colutorio de este tipo podría inhibir el malo olor bucal durante ocho horas o más en condiciones normales.

Fue evidente, además, de experimentos adicionales con los agentes individuales en el siguiente modelo experimental, que el efecto anti-VSC de los agentes antibacterianos individuales era marcadamente inferior al efecto de las combinaciones. Efectos sinérgicos de combinaciones de acetato de cinc y los agentes antibacterianos fueron demostrados de este modo también en el modelo vivo, que incluyeron sulfuro de hidrógeno solamente (resultados no indicados).

Claims

1. Composición oral para inhibir el mal olor bucal, que contiene un agente antibacteriano y un compuesto de cinc, en la forma de un colutorio que contiene 0,01-0,025% p/v de un agente antibacteriano seleccionado entre bis-guanidas y compuestos de amonio cuaternario, y 0,1-0,3% p/v de acetato de cinc,

2. La composición oral según la reivindicación 1, en la que el agente antibacteriano es clorhexidina o una de sus sales.

3. La composición oral, según la reivindicación 1, en la que el agente antibacteriano es un compuesto de amonio cuaternario seleccionado entre cloruro de cetilpiridinio y cloruro de benzalconio.