EA032384B1 - Антибактериальные композиции, имеющие широкий спектр активности - Google Patents

Антибактериальные композиции, имеющие широкий спектр активности Download PDF

Info

Publication number
EA032384B1
EA032384B1 EA201791219A EA201791219A EA032384B1 EA 032384 B1 EA032384 B1 EA 032384B1 EA 201791219 A EA201791219 A EA 201791219A EA 201791219 A EA201791219 A EA 201791219A EA 032384 B1 EA032384 B1 EA 032384B1
Authority
EA
Eurasian Patent Office
Prior art keywords
compound
mmol
alkyl
mixture
synthesis
Prior art date
Application number
EA201791219A
Other languages
English (en)
Other versions
EA201791219A1 (ru
Inventor
Розелла Омбрато
Барбара Гарофало
Джорджина Мангано
Алессандра Капеццоне Де Йоаннон
Гайя Корсо
Клаудия Каварискиа
Гвидо Фурлотти
Томмазо Иакоанджели
Original Assignee
Ацьенде Кимике Рьюните Анджелини Франческо А.К.Р.А.Ф. С.П.А.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ацьенде Кимике Рьюните Анджелини Франческо А.К.Р.А.Ф. С.П.А. filed Critical Ацьенде Кимике Рьюните Анджелини Франческо А.К.Р.А.Ф. С.П.А.
Publication of EA201791219A1 publication Critical patent/EA201791219A1/ru
Publication of EA032384B1 publication Critical patent/EA032384B1/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D241/00—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings
    • C07D241/02—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D241/04—Heterocyclic compounds containing 1,4-diazine or hydrogenated 1,4-diazine rings not condensed with other rings having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/453—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with oxygen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/498—Pyrazines or piperazines ortho- and peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinoxaline, phenazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4985—Pyrazines or piperazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/92—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with a hetero atom directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/94—Oxygen atom, e.g. piperidine N-oxide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D211/00—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings
    • C07D211/92—Heterocyclic compounds containing hydrogenated pyridine rings, not condensed with other rings with a hetero atom directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D211/96—Sulfur atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C07D491/052—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being six-membered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D497/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D497/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having oxygen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D497/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Other In-Based Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Abstract

Изобретение относится к новым антибактериальным соединениям формулы (I), фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения, а также к применению указанных соединений в качестве противомикробных лекарственных средств

Description

Изобретение относится к новым антибактериальным соединениям формулы (I), фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения, а также к применению указанных соединений в качестве противомикробных лекарственных средств
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к новым антибактериальным соединениям, фармацевтическим композициям, содержащим эти соединения, а также их применению в качестве антимикробных средств.
Предпосылки изобретения
ДНК топоизомеразы являются ферментами, принимающими участие в модификации суперспирализации ДНК при репликации или транскрипции. Эти ферменты связываются с одноцепочечной или двухцепочечной ДНК и расщепляют фосфатный скелет ДНК таким образом, что нить ДНК распутывается или раскручивается. В конце процесса репликации или транскрипции ферменты самостоятельно осуществляют обратное сшивание скелета ДНК.
ДНК топоизомеразы относят к типу I, если они расщепляют одну нить двойной спирали ДНК, и к типу II, если они расщепляют обе нити двойной спирали ДНК.
Бактериальные топоизомеразы II типа включают ДНК-гиразу и топоизомеразу IV (Τοροΐν), которые являются гетеротетрамерными ферментами, одновременно присутствующими почти во всех прокариотических клетках. Оба этих фермента необходимы для репликации ДНК и, следовательно, для роста и деления бактериальной клетки.
Бактериальные топоизомеразы II типа являются хорошо зарекомендовавшими себя антибактериальными мишенями, в частности, для соединений, относящихся к классу фторхинолонов.
Фторхинолоны представляют собой антибактериальные препараты широкого спектра действия, которые играют важную роль в лечении бактериальных инфекций, в частности внутрибольничных инфекций и инфекций, для которых предполагается устойчивость к другим классам антибактериальных препаратов. Фторхинолоны действуют путем ингибирования ДНК-гиразы в грамотрицательных бактериях и топоизомеразы IV в грамположительных бактериях.
Тем не менее, в последнее время возникла устойчивость к фторхинолонам из-за мутаций, которые изменили либо активные сайты мишеней лекарственных препаратов, т. е. ДНК-гиразы и топоизомеразы IV, либо накопление препаратов. Кроме того, устойчивость к хинолонам может быть опосредована плазмидами, которые продуцируют белок фпг, защищающий мишени хинолонов от ингибирования (Ο.Ά. 1асоЬу, СГО, 2005:41, 8ирр1.2, 8Ό120-8126).
Согласно определению Всемирной Организации Здравоохранения устойчивость к антимикробным препаратам (АМК.) представляет собой устойчивость микроорганизма к антимикробному препарату, к которому он был восприимчив изначально. Устойчивые бактерии способны противостоять действию антибиотиков и антибактериальных препаратов, в результате чего стандартные способы лечения становятся неэффективными и инфекционные агенты выживают, что повышает риск распространения инфекции на окружающих людей.
В работе Μίΐΐοη-Бгу М.1. с! а1. (Вюогд. МеД. Сйет. Бс11.. 23, 2010, 2955-2961) разработаны новые производные хинолонов в качестве ингибиторов бактериальной ДНК-гиразы и топоизомеразы IV. Принимая во внимание важность постепенных мутаций мишеней в клинической истории устойчивости к фторхинолонам, авторы высказали четкое мнение, что решающее значение имеет обеспечение ингибирования ТороШ наряду с ингибированием ДНК-гиразы. По мнению авторов такая активность против двух мишеней должна замедлить скорость развития устойчивости в клинической практике, поскольку микроорганизм, в котором ингибирование ДНК-гиразы не происходит вследствие мутации, мог бы попрежнему являться чувствительным к уничтожению за счет ингибирования ТороШ.
8иг1уе1 1.Р. е! а1. (1. МеД. Сйет. 2013, 56, 7396-7415) сообщили о разработке новых двойных ингибиторов бактериальной ДНК-гиразы и ТороШ, включающих тетрагидропирановое ядро, и продемонстрировали, что двойное ингибирование ДНК-гиразы и ТороШ требуется для минимизации скорости развития устойчивости.
Заявка АО 2006/105289 относится к гетероциклическим соединениям, более конкретно, производным пиразола, которые были протестированы на ингибирование как ДНК-гиразы, так и топоизомеразы IV.
В заявках АО 02/072572, АО 2006/021448, АО 2008/139288, АО 2010/081874, АО 2010/084152, АО 2013/068948 и АО 2013/080156 раскрыты гетероциклические соединения, обладающие антимикробной активностью.
В заявках АО 96/10568 и АО 2012/003418 раскрыты гетероциклические соединения, обладающие другими видами терапевтической активности.
Сущность изобретения
Заявители приняли во внимание наличие значительной и постоянной потребности в антибактериальных препаратах, которые преодолевают проблему устойчивости бактерий.
Заявители столкнулись с задачей разработки новых антибактериальных соединений, которые позволяют преодолеть проблему устойчивости к антибактериальным препаратам.
Более конкретно, заявители поставили перед собой проблему разработки новых антибактериальных соединений, способных одновременно ингибировать бактериальные топоизомеразы II типа, т.е. ДНКгиразу и топоизомеразу IV.
Кроме того, заявители решали проблему разработки новых антибактериальных соединений, имею
- 1 032384 щих широкий спектр активности, т.е. применимых против грамположительных и/или грамотрицательных бактерий.
Таким образом, в первом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединению формулы (I)
где фрагменты θ1 и θ2, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой СН или Ν, при условии, что по крайней мере один из фрагментов θ1 и θ2 представляет собой Ν;
К1 означает атом водорода, атом галогена, ОН, (С1-3)алкил, (С1-3)алкокси, (С1-3)алкил-ОН, -СООК' или ΑΟΝΚ'Κ, где К' и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил;
Ь1 означает σ-связь, -О- или -ΝΗ-;
Υ представляет собой этиленильную, н-пропиленильную, н-бутиленильную, изобутиленильную, втор-бутиленильную, трет-бутиленильную, н-пентиленильную, изопентиленильную, вторпентиленильную, трет-пентиленильную, нео-пентиленильную, з-пентиленильную, н-гексиленильную, изогексиленильную группу, -NΗ-(С1-6)алкиленильную группу или (С4-5)циклоалкиленильную группу, где указанные группы необязательно замещены гидроксигруппой или аминогруппой или формамидогруппой (-ΝΗ-СНО);
Ь2 означает σ-связь, -ΝΗ- или -ЫН-(С1-6)алкиленил;
А представляет собой конденсированную бициклическую группу, имеющую одну из приведенных ниже формул (II) и (III)
где θ3 представляет собой Ν или С(К'), где К' означает Н или (С1-3) алкил;
θ4, θ5 и θ6, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой СН, СТ, С-СN или Ν;
К2 означает атом водорода, атом галогена, гидрокси, циано, (С1-3)алкил, (С1-3)алкокси, СТ3, ОСТ3 или -ΝΚ'Κ, где К' и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил; и
К3 означает атом водорода, атом галогена, гидрокси, циано, (С1-3)алкил, (С1-3)алкокси, трифторметил или -Ык'К, где К' и К представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил;
и
В представляет собой конденсированную бициклическую группу, имеющую одну из приведенных ниже формул (IV), (V) и (VI), или конденсированную трициклическую группу, имеющую приведенную ниже формулу (VII)
где
Р1 означает Ν или СК', где К' представляет собой Н, СN или СТ3;
Р2 означает О, 8, 8О2 или С(К')(К), где заместители К' и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил;
заместители К4 и К5 совместно образуют 3-7-членный ароматический или алифатический цикл, необязательно включающий как минимум один гетероатом, выбранный из Ν, О и 8;
η означает 0 или 1; и
К6 представляет собой атом водорода, атом галогена, СТ3, гидрокси или -Ык'К, где К' и К, иден
- 2 032384 тичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1_3)алкил;
а также аддитивным солям указанного соединения формулы (I) с фармацевтически приемлемыми органическими или неорганическими кислотами или основаниями, его энантиомерам, Ν-оксидам и четвертичным аммониевым солям.
Во втором варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей как минимум одно соединение формулы (I).
В третьем варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) для применения в медицине.
В четвертом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) для применения в лечении бактериальных инфекций.
В пятом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения бактериальной инфекции, включающему введение пациенту, которому это необходимо, соединения формулы (I).
Согласно предпочтительному аспекту настоящего изобретения С3 означает Ν, С (Н) или С(СН3).
Предпочтительно К3 представляет собой атом водорода, атом галогена, циано, (С1-3)алкил или -ΝΚ’Κ, где К’ и К представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил.
Более предпочтительно К3 представляет собой атом водорода, Б, С1, циано, СН3, ΝΗ2 или ^СН3)2.
Преимущественно Ь1 представляет собой σ-связь или -ΝΗ-.
Предпочтительно К1 представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора, ОН, (С1-3)алкилОН, -СООК’ или -СО^К’)(К), где К’ и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил.
Более предпочтительно К1 представляет собой Н, атом фтора, ОН, -СН2ОН, -СООС2Н5 или -ί'ΌΝΙ 12.
Предпочтительно К2 представляет собой атом водорода, атом галогена, гидрокси, циано, (С1-3)алкил, (С1-3)алкокси, ОСБ3 или NК’К, где К’ и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил.
Более предпочтительно К2 представляет собой атом водорода, атом галогена, , циано, (С1-3)алкил, (С1-3)алкокси или NК’К, где К’ и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил.
Предпочтительно Υ представляет собой этиленильную, н-пропиленильную, н-бутиленильную, изобутиленильную, втор-бутиленильную, трет-бутиленильную группу, ^Н-(С1-4) алкиленильную группу или (С4-5)циклоалкиленильную группу, где указанная группа необязательно замещена одной гидроксигруппой или аминогруппой.
Предпочтительно Р2 означает О, Б, БО2 или СН2.
Предпочтительно К4 и К5 совместно образуют 5- или 6-членный ароматический или алифатический цикл, необязательно включающий как минимум один гетероатом, выбранный из Ν, О и Б.
Более предпочтительно К и К5 совместно образуют 5-членный цикл, включающий как минимум один гетероатом, выбранный из Ν, О или Б, и необязательно замещенный кетогруппой.
Более предпочтительно К и К5 совместно образуют 6-членный цикл, выбранный из бензола или пиридина.
Согласно предпочтительному аспекту настоящего изобретения А является конденсированной бициклической системой, имеющей одну из приведенных ниже формул
где К’ представляет собой Н или (С1-3)алкил, К2 и К3 соответствуют данным выше определениям.
Согласно предпочтительному аспекту настоящего изобретения В представляет собой конденсированную бициклическую или трициклическую группу, имеющую одну из следующих структурных формул:
- 3 032384
где К6 соответствует данным выше определениям.
В настоящем описании и в следующей за ним формуле изобретения термин (С1-6)алкил означает линейную или разветвленную алкильную цепь, включающую от 1 до 6 атомов углерода, как, например, метил, этил, пропил, изопропил, н-бутил, изобутил, втор-бутил, трет-бутил, пентил, изопентил, вторпентил, трет-пентил, неопентил, 3-пентил, гексил, изогексил.
В настоящем описании и в следующей за ним формуле изобретения термин (С1-3)алкил означает линейную или разветвленную алкильную цепь, включающую от 1 до 3 атомов углерода, как, например, метил, этил, пропил, изопропил.
В настоящем описании и в следующей за ним формуле изобретения термин (С1-6)алкиленил означает двухвалентную линейную или разветвленную алкильную цепь, включающую от 1 до 6 атомов углерода, как, например, метиленил (-СН2-), этиленил (-СН2СН2-), пропиленил (-СН2СН2СН2-) или бутиленил (-СН2СН2СН2СН2-).
В настоящем описании и в следующей за ним формуле изобретения термин (С4-5)циклоалкиленил означает двухвалентную циклоалкильную группу, включающую 4 или 5 атомов углерода, такую как циклобутиленил и циклопентиленил.
Некоторые соединения по настоящему изобретению могут существовать в различных таутомерных формах, и изобретение включает все такие таутомерные формы этих соединений, если не указано иное.
Если не указано иное, имеется в виду, что структуры, изображенные в тексте заявки, включают также все стереохимические формы приведенной структуры, т.е. К- и 8-конфигурации для каждого асимметрического центра. Так, например, индивидуальные стереохимические изомеры, а также энантиомерные и диастереомерные смеси соединений по настоящему изобретению входят в объем изобретения. Таким образом, настоящее изобретение охватывает каждый из диастереомеров или энантиомеров, практически свободный от других изомеров (на >90% и предпочтительно >95% в мольном выражении свободный от других стереоизомеров), а также смесь таких изомеров.
- 4 032384
Отдельные оптические изомеры можно получать разделением рацемических смесей стандартными способами, например путем получения диастереомерных солей в результате обработки смеси оптически активной кислотой или основанием. Примерами подходящих кислот являются винная, диацетилвинная, дибензоилвинная, дитолуоилвинная и камфорсульфоновая кислоты, затем разделением смеси диастереомеров путем кристаллизации с последующим выделением оптически активных оснований из их солей. Другие способы разделения оптических изомеров включают применение хиральной хроматографической колонки, оптимально подобранной для максимального разделения энантиомеров. Еще один способ включает синтез ковалентных диастереомеров взаимодействием соединений по настоящему изобретению с оптически чистой кислотой в активированной форме или оптически чистым изоцианатом. Синтезированные диастереомеры можно разделить стандартными путями, такими как хроматография, перегонка, кристаллизация или сублимация, с последующим гидролизом, позволяющим высвободить энантиомерно чистое соединение.
Оптически активные соединения по настоящему изобретению можно получать с использованием оптически активных исходных соединений. Эти изомеры могут иметь форму свободной кислоты, свободного основания, сложного эфира или соли.
Соединения по настоящему изобретению могут существовать в формах, включающих радиоактивную метку, т.е. указанные соединения могут содержать один или несколько атомов, имеющих атомную массу или массовое число, отличающееся от атомной массы или массового числа, наиболее распространенного в природе. Радиоактивные изотопы водорода, углерода, фосфора, фтора и хлора включают 3Н, 14 32 35 18 36
С, Р, 8, Е и С1 соответственно. Соединения по настоящему изобретению, которые содержат указанные радиоактивные изотопы и/или другие радиоактивные изотопы других атомов, также входят в объем настоящего изобретения. Соединения, меченные тритием, т.е. 3Н, и углеродом-14, т.е. 14С, являются особенно предпочтительными благодаря легкости их получения и детектирования.
Соединения по настоящему изобретению, меченные радиоизотопами, как правило, можно получать способами, хорошо известными специалистам в данной области техники. Подобные меченые соединения с успехом можно получать, реализуя методики, раскрытые в настоящей заявке, за исключением применения легко доступных меченых реагентов вместо обычных аналогов.
Во втором варианте осуществления настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей по крайней мере одно соединение формулы (I), описанное выше, его соль с фармацевтически приемлемой органической или неорганической кислотой или основанием или его энантиомер, его Ν-оксид или его четвертичную аммониевую соль, а также как минимум один фармацевтически приемлемый эксципиент.
Предпочтительно фармацевтическую композицию по настоящему изобретению получают в подходящих дозированных формах.
Примерами подходящих дозированных форм являются таблетки, капсулы, таблетки с покрытиями, гранулы, растворы и сиропы для перорального введения; растворы, помада и мази для местного нанесения; пластыри с лекарственными средствами для трансдермального введения; суппозитории для ректального введения и стерильные растворы для инъекций. Другими подходящими дозированными формами являются формы с продолжительным высвобождением и формы на основе липосом для перорального, инъекционного или трансдермального введения. Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут также вводиться в форме назального аэрозоля или ингаляции или доставляться путем имплантации (например, хирургически), например, с имплантируемым или вживляемым устройством, таким как стент.
Другими подходящими дозированными формами являются формы с продолжительным высвобождением и формы на основе липосом для перорального, инъекционного или трансдермального введения.
Дозированные формы фармацевтической композиции по настоящему изобретению можно получать с применением способов, которые хорошо известны специалисту в области фармацевтической химии, и эти способы включают смешивание, гранулирование, прессование, растворение, стерилизацию и т.п.
Как правило, количество соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой четвертичной аммониевой соли, Ν-оксида и соли в фармацевтической композиции по настоящему изобретению должно находиться в пределах от 0,01 до 1500 мг, предпочтительно от 0,1 до 500 мг и более предпочтительно от 1 до 200 мг.
Как правило, количество соединения формулы (I) в фармацевтической композиции по настоящему изобретению должно быть таким, которое способно обеспечить количество вводимого действующего вещества от 0,001 до 20 мг/кг/день.
Предпочтительно это количество составляет от 0,01 до 7,5 мг/кг/день, более предпочтительно от 0,1 до 5 мг/кг/день и наиболее предпочтительно от 0,5 до 2,5 мг/кг/день.
Как способен понять специалист в данной области, могут потребоваться более низкие или более высокие дозировки по сравнению с указанными выше. Конкретные дозировки и схемы введения для любого конкретного пациента будут зависеть от ряда факторов, в т.ч. активности конкретного применяемого соединения, возраста, массы тела, общего состояния здоровья, пола, рациона питания, времени введения, скорости выведения, комбинации лекарственных средств, тяжести и характера развития заболева
- 5 032384 ния, а также предрасположенности пациента к заболеванию и мнения лечащего врача.
Фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно вводить перорально, парентерально, ингаляционным распылением, местно, ректально, назально, буккально, вагинально или с помощью имплантированного резервуара. Термин парентеральный в тексте настоящей заявки включает введение подкожной, внутрикожной, внутривенной, внутримышечной, внутрисуставной, интрасиновиальной, интрастернальной, интратекальной, внутриочаговой и внутричерепной инъекцией или инфузией.
Как указано выше, в зависимости от природы заместителей, соединение формулы (I) может образовывать аддитивные соли с фармацевтически приемлемыми органическими или неорганическими кислотами или основаниями.
Типовыми примерами подходящих физиологически приемлемых неорганических кислот являются хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, фосфорная кислота и азотная кислота.
Типовыми примерами подходящих физиологически приемлемых органических кислот являются уксусная кислота, аскорбиновая кислота, бензойная кислота, лимонная кислота, фумаровая кислота, молочная кислота, малеиновая кислота, метансульфоновая кислота, щавелевая кислота, паратолуолсульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, янтарная кислота, дубильная кислота и винная кислота.
Типовыми примерами подходящих физиологически приемлемых неорганических оснований являются гидроксиды, карбонаты и гидрокарбонаты аммония, кальция, магния, натрия и калия, например гидроксид аммония, гидроксид кальция, карбонат магния, гидрокарбонат натрия и гидрокарбонат калия.
Типовыми примерами подходящих физиологически приемлемых органических оснований являются аргинин, бетаин, кофеин, холин, Ν,Ν-дибензилэтилендиамин, диэтиламин, 2-диэтиламиноэтанол, 2диметиламиноэтанол, этаноламин, этилендиамин, Ν-этилморфолин, Ν-этилпиперидин, Ν-метилглюкамин, глюкамин, глюкозамин, гистидин, №(2-гидроксиэтил)пиперидин, №(2-гидроксиэтил)пирролидин, изопропиламин, лизин, метилглюкамин, морфолин, пиперазин, пиперидин, теобромин, триэтиламин, триметиламин, трипропиламин и трометамин.
Как указано выше, фармацевтическая композиция по настоящему изобретению включает соединение по настоящему изобретению наряду с фармацевтически приемлемым эксципиентом, который согласно настоящему изобретению включает все без исключения растворители, разбавители или другие носители, диспергирующие или суспендирующие средства, поверхностно-активные агенты, изотонические агенты, загустители или эмульгирующие агенты, консерванты, твердые связующие компоненты, смазывающие вещества и т.п., которые подходят для получения конкретной желаемой дозированной формы.
Некоторые примеры веществ, которые могут служить фармацевтически приемлемыми эксципиентами, включают, не ограничиваясь перечисленными, сахара, такие как лактоза, глюкоза и сахароза; крахмалы, такие как кукурузный крахмал и картофельный крахмал; целлюлозу и ее производные, такие как натрий карбоксиметил целлюлоза, этилцеллюлоза и ацетат целлюлозы; порошкообразный трагакант; солод; желатин; тальк; такие эксципиенты, как масло какао и воски для суппозиториев; масла, такие как арахисовое масло, масло хлопчатника; сафлоровое масло; кунжутное масло; оливковое масло; кукурузное масло и соевое масло; гликоли, такие как пропиленгликоль; сложные эфиры, такие как этилолеат и этиллаурат; агар; буферные агенты, такие как гидроксид магния и гидроксид алюминия; альгиновая кислота; апирогенная вода; изотонический солевой раствор; раствор Рингера; этиловый спирт и фосфатные буферные растворы, другие нетоксичные совместимые смазывающие компоненты, такие как лаурилсульфат натрия и стеарат магния, красящие агенты, агенты, способствующие высвобождению, покрывающие агенты, подсластители, вкусоароматические и ароматические агенты, консерванты и антиоксиданты.
Термины фармацевтически приемлемый и физиологически приемлемый служат для определения, без каких-либо конкретных ограничений, любого материала, подходящего для получения фармацевтической композиции, предназначенной для введения живому существу.
В третьем варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) для применения в медицине.
В четвертом варианте осуществления настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) для применения в лечении бактериальных инфекций.
В пятом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения бактериальной инфекции, включающему введение пациенту, которому это необходимо, соединения формулы (I).
Предпочтительно указанная бактериальная инфекция является инфекцией кожи, инфекцией слизистой оболочки, гинекологической инфекцией, инфекцией дыхательных путей (ЯП), инфекцией ЦНС, желудочно-кишечной инфекцией, инфекцией костной ткани, сердечно-сосудистой инфекцией, инфекцией, передающейся половым путем, или инфекцией мочевыводящих путей.
Более конкретно, указанная бактериальная инфекция представляет собой обострение хронического бронхита (АСЕВ), острое воспаление среднего уха, острый синусит, инфекцию, вызванную бактериями, устойчивыми к лекарственным препаратам, сепсис вследствие осложнений катетеризации, шанкроид,
- 6 032384 хламидию, внебольничную пневмонию (САР), осложненную инфекцию кожи и подкожной клетчатки, неосложненную инфекцию кожи и подкожной клетчатки, эндокардит, фебрильную нейтропению, гонококковый цервицит, гонококковый уретрит, внутрибольничную пневмонию (НАР), остеомиелит, сепсис, сифилис, пневмонию, спровоцированную искусственной вентиляцией легких, внутрибрюшные инфекции, гонорею, менингит, столбняк или туберкулез.
Еще предпочтительнее указанная бактериальная инфекция может представлять собой инфекцию, вызванную Нейсойас1ег ру1оп или Сй1атуД1а рпеитоша, связанную с атеросклерозом или сердечнососудистым заболеванием; инфекцию крови и тканей, в т.ч. эндокардит и остеомиелит, вызванную З.аигеик, 8.йаето1уйсик, Е. Гаесайк, Е. £аестт, Е. Дигапк, включая штаммы, устойчивые к известным антибактериальным средствам, таким как, но не ограничиваясь указанными, бета-лактамы, ванкомицин, аминогликозиды, хинолоны, хлорамфеникол, тетрациклины и макролиды; бронхит; сепсис вследствие осложнений катетеризации; шанкроид; хламидию; внебольничную пневмонию; диссеминированное заболевание микобактериального комплекса (МАС), вызванное инфекцией МусоЬас1епит аушт или МусоЬас1егшт ш1гасе11и1аге; эндокардит; фебрильную нейтропению; газовую гангрену, связанную с инфекцией С1ок1пДшт регГтдепк или видов рода Вас1егсиДек; инфекционный гастроэнтерит; гломерулонефрит, связанный с инфекцией 81гер1ососснк руодепек, стрептококков групп С и 6, СогупеЬас1епит Д|рй1йепае или АсйпойасШик йаето1уйсит; гонококковый цервицит; гонококковый уретрит; гинекологические инфекции; внутрибольничную пневмонию (НАР); инфекции, вызванные бактериями, устойчивыми к лекарственным препаратам; инфекции, вызванные МусоЬас1егшш ШЬегси1ок1к, М.1ергае, М.рага1иЬегси1ок1к, М.капкакй или М.сйе1опе1; инфекции, связанные с кишечными простейшими видами рода СгурЮкропДшт; болезнь Лайма, связанная с инфекцией Воггейа ЬигдДогГеп; конъюнктивит, кератит и дакриоцистит, связанные с инфекцией Сй1атуД1а (тасйотайк, №1ккепа допоггйоеае, З.аигеик, З.рпеитошае, З.руодепек, Н.т)1иеп/ае или видов рода Й-Щепа; мастоидит, связанный с инфекцией, вызванной 81гер1ососснк рпеитошае, Наеторййик щ)1иеп/ае, Могахе11а са1аггНаНк, 81арйу1ососсик аигеик, Ешегососсик Гаесайк, Е.Гаестт, Е.саккейПауик, 8.ер1Дегт1Д1к, 8.йаето1уйсик или видов рода Рер1ок1гер1ососсик; одонтогенные инфекции, связанные с МпДапк к!гер1ососс1; остеомиелит; воспаление среднего уха; непрекращающийся кашель, связанный с инфекцией ВогДе1е11а рейикак; фарингит; послеродовую лихорадку, связанную с инфекцией 81арйу1ососсик аигеик, коагулаза-отрицательных стафилококков 81гер1ососсик руодепек, 81гер(ососсик ада1асйае, стрептококков групп С-Е (стрептококки, образующие небольшие колонии), зеленящих стрептококков Согупейас1епит ттийкатцт, видов рода С1окйтДшт или ВаПопейа йепкеа1е; инфекции дыхательных путей, связанные с Мусор1акта рпеитошае, Ьедюпейа рпеиторИйа, 81герЮсоссик рпеитошае, Наеторййик т)1иепхае или Сй1атуД1а рпеитошае; ревматический полиартрит; сепсис; заболевания, передающиеся половым путем, связанные с инфекциями, вызванными Сй1атуД|а йасйотайк, Наеторййик Дцсгеу1, Тгеропета раШДцт, Игеар1акта игеа1уйсит или №1кепа допоггйоеае; синусит; сифилис; системные лихорадочные синдромы, связанные с инфекцией, вызванной Воггейа геспггепйк; тонзиллит; заболевания, вызванные токсинами, связанными с инфекциями З.апгепк (пищевое отравление и синдром токсического шока) или стрептококков групп А, В и С; язвы, связанные с инфекцией НейсоЬас(ег ру1оп; неосложненные острые инфекции мочевыводящих путей, связанные с 8(арйу1ососспк аигеик коагулаза-отрицательными видами стафилококков или видами рода Еп(егососсик; неосложненные инфекции и абсцессы кожи и мягких тканей; уретрит и цервицит; инфекции мочевыводящих путей; инфекции центральной нервной системы; инфекции, связанные с применением различных устройств, вызванные стафилококками; скелетно-мышечные инфекции, вызванные стафилококками; Е.Сой, продуцирующие шига-токсин; Наеторййик тПпепхае (инвазивное заболевание); болезнь легионеров; пситтакоз/орнитоз, вызванный Сй1атуД|а ркй1асц сальмонеллез, вызванный видами рода ка1топе11а; шигеллез, вызванный видами рода кЫдейа; синдром токсического шока, вызванный стрептококками; синдром токсического шока, вызванный стафилококками; и брюшной тиф, вызванный 8а1топе11а 1урйг
Бактериальная инфекция может представлять собой инфекцию, вызванную возбудителями видов рода Асте1оЬас1ег, видов рода Вас1его1Дек, видов рода Вцгкйо1Депа, видов рода Сатру1оЬас1ег, видов рода Сй1атуД1а, видов рода Сй1атуДорй11а, видов рода С1ок1пДшт, видов рода Еп1егоЬас1ег, видов рода Еп(егососсик, видов рода ЕксйепсЫа, видов рода 6агДпеге11а, видов рода Наеторййик, видов рода НейсоЬас1ег, видов рода К1еЬк1е11а, видов рода Ьедюпе11а, видов рода Могахе11а, видов рода Могдапе11а, видов рода Мусор1акта, видов рода НеЕкепа, видов рода Рер1ок1гер1ососсик, видов рода Рго1еик, видов рода РкеиДотопак, видов рода 8а1топе11а, видов рода Зеггайа, видов рода 81арйу1ососсик, видов рода 81гер(ососсик, видов рода 31епо1горйотопак, видов рода игеар1акта, аэробными микроорганизмами, облигатными анаэробами, факультативными анаэробами, грамположительными бактериями, грамотрицательными бактериями, грамвариабельными бактериями и атипичными патогенами дыхательных путей.
Более конкретно, бактериальная инфекция может представлять собой инфекцию, вызванную Асте1ойас1ег Ьаитапп, Асте1ойас1ег йаето1уйсик, Лсй1е1ойас1ег _)цпй, Асй1е1ойас1ег ]ойпкопп, Асй1е1ойас1ег [^оГП, Вас1егсйДек Ыушк, Вас1егсйДек ГгадШк, Вигкйо1Депа серата, Сатру1ойас1ег ]е.)иш, Сй1атуД1а рпеитошае, Сй1атуД|а цгеа1уДсик, СййатуДорййа рпеитошае, С1ок1пДтт ДгГйсйе, Еп1егойас1ег аегодепек, Еп1егойас1ег с1оасае, Еп(егососсик Гаесайк, Еп(егососсик £аесшт, Ексйепсййа сой, 6агДпеге11а уадтайк, Наеторййик рагашПиеп/ае, Наеторййик 1пДиеп/ае, Нейсойас1ег ру1оп, К1еЬк1е11а рпеитошае, Ьедюпейа
- 7 032384 рпеиторййа, устойчивыми к метициллину 81арйу1ососсиз аигеиз, чувствительными к метициллину 81арйу1ососсиз аигеиз, Могахе11а са1аггйайз, Могдапе11а тогдапп, Мусор1азта рпеитошае, Ые1ззепа допоггйоеае, устойчивыми к пенициллину 81гер!ососсиз рпеишошае, чувствительными к пенициллину 81гер!ососсиз рпеишошае, Рер!оз1гер1:ососсиз тадпиз, Рер!оз1гер1ососсиз тюгоз, Рер!оз1гер1ососсиз апаегоЬшз, Рер!оз1гер1ососсиз азассйаго1уйсиз, Рер!оз1гер1ососсиз ргеуоШ, Рер!оз1гер1ососсиз {ейаШиз, Рер!оз!гер!ососсиз уадшаНз, Рго!еиз т1гаЬШз, Рзеиботопаз аегидшоза, устойчивыми к хинолонам 81арйу1ососсиз аигеиз, устойчивыми к хинолонам 81арйу1ососсиз ерШегш1з, 8а1шопе11а 1урЫ, 8а1шопе11а рага!урЫ, 8а1шопе11а еп1епйб1з, 8а1шопе11а {урЫшигшш, Зеггайа тагсезсепз, 81арйу1ососсиз аигеиз, 81арйу1ососсиз ерШегш1з, 81арйу1ососсиз заргорйуйсиз, 81гер!ососсиз ада1асйае, 81гер!ососсиз рпеитошае, 81гер!ососсиз руодепез, 81епо1горйотопаз таЙорйШа, Игеар1азта игеа1уйсит, устойчивыми к ванкомицину Еп!егососсиз Гаесшт, устойчивыми к ванкомицину Еп!егососсиз Гаесайз, устойчивыми к ванкомицину 81арйу1ососсиз аигеиз и устойчивыми к ванкомицину 81арйу1ососсиз ер1бегт1з.
Примеры соединений по настоящему изобретению приведены в следующей табл. 1:
Таблица 1
- 8 032384
- 9 032384
Описанные выше соединения можно получать, как показано ниже в синтетических примерах.
У специалиста в данной области имеется хорошо разработанная литература по синтезу гетероциклических соединений и другим химическим превращениям, методикам выделения и очистки, которой можно руководствоваться наряду с информацией, содержащейся в приведенных ниже примерах, при
- 12 032384 разработке стратегий синтеза, выборе защитных групп и других материалов и методик, пригодных для синтеза, выделения и характеризации соединений по настоящему изобретению, включая соединения, содержащие различные возможные фрагменты для А, Ь1, В, Ь2, Υ, Ь3 и С.
Для получения соединений по настоящему изобретению можно использовать различные синтетические подходы, включая те подходы, которые схематически изображены ниже. Специалист в данной области поймет, что в этих способах синтеза могут применяться защитные группы. Защитные группы представляют собой фрагменты, которые применяются для временного блокирования химической реакции по потенциально реакционноспособному фрагменту (например, амино, гидрокси, тиолу, альдегиду и т.д.), с тем, чтобы реакцию можно было селективно проводить по другому фрагменту мультифункционального соединения. В предпочтительных вариантах осуществления защитная группа вступает в селективное взаимодействие с хорошим выходом, позволяя получить защищенный субстрат, который подходит для запланированной реакции; защитные группы должны допускать селективное удаление с хорошим выходом с помощью легко доступных предпочтительно нетоксичных реагентов, которые не склонны к ненужным реакциям по другим имеющимся функциональным группам; предпочтительно защитная группа образует легко выделяемое производное (более предпочтительно без образования новых центров пространственной изомерии); и защитная группа предпочтительно имеет минимум дополнительной функциональности, чтобы избежать осложнений от других реакционноспособных фрагментов. В технике известен широкий спектр защитных групп, а также стратегий, реагентов и условий для введения и удаления этих групп.
Кроме того, можно выбрать реагенты, обогащенные желаемым изотопом, например тритием вместо водорода, для получения соединений по настоящему изобретению, содержащих такой изотоп (изотопы). Соединения, содержащие тритий вместо водорода в одном или нескольких положениях или содержащие различные изотопы С, Ν, Р и О, охвачены настоящим изобретением и их можно применять, например, для исследования метаболизма и/или распределения соединений в тканях, или для изменения скорости или пути метаболизма, или других аспектов действия соединений в биологических системах.
Соединения по настоящему изобретению можно синтезировать с использованием описанных ниже способов в сочетании со способами синтеза, известными в синтетической органической химии, или вариантов указанных способов, которые способен предложить специалист в данной области техники. Предпочтительные способы включают, не ограничиваясь этим, способы, которые описаны ниже. Реакции проводят в растворителе, подходящем для применяемых реагентов и материалов, а также для осуществляемого превращения. Специалист в области органического синтеза поймет, что присутствующие в молекуле функциональные группы должны соответствовать предполагаемым превращениям. В некоторых случаях может потребоваться принятие определенных решений, чтобы модифицировать порядок стадий синтеза или выбрать конкретную схему синтеза для получения желательного соединения по настоящему изобретению.
Соединения по настоящему изобретению могут быть получены, как показано на приведенных ниже схемах синтеза, с применением стандартных методик, известных специалисту в данной области техники.
Примеры
Перечень сокращений, использованных при описании путей синтеза
Вос: Трет-бутил карбамат
сНех: Циклогексан
СУ: Объем колонки
ϋΒυ: 1,5-диазабицикло[5.4.0]ундец-5-ен
ϋΟΜ: Дихлорметан
ИРЕА: Ν,Ν-диизопропилэтиламин
ΏΜΕ: 1,2-диметоксиэтан
ΏΜΕ (ДМФА) : Ν,Ν-диметилформамид
ЕЕ2О: Диэтиловый эфир
ЕДОАс: Этилацетат
М3 (МС) : Масс-спектроскопия
ТЕА: Триэтиламин
ТЕА: Трифторуксусная кислота
ТНЕ (ТГФ): Тетрагидрофуран
Ρά/С: Палладий на активированном угле
РсЦОН)2/С: Гидроксид палладия на активированном угле
г.р.(кт): Комнатная температура
ирье Сверхэффективная жидкостная хроматография
Получение соединений 27, 29 и 40.
Соединения 27, 29 и 40 получали, как описано ниже по тексту, придерживаясь схемы синтеза А
- 13 032384
Стадия 1.
4-Гидроксикумарин А0 (1 г) растворяли в ИСМ (30 мл), содержащем триэтиламин (1,72 мл), и по каплям при -10°С добавляли трифторметансульфоновый ангидрид (1,25 мл) в ИСМ, после чего раствор оставляли перемешиваться при -10°С в течение 2 ч. Полученный красновато-коричневый раствор, нагретый до комнатной температуры, разбавляли смесью циклогексан/диэтиловый эфир 1/1 и фильтровали через слой силикагеля, используя смесь циклогексан/диэтиловый эфир 1/1. Растворитель удаляли в вакууме, получая 2-оксо-2Н-хромен-4-илтрифтрометансульфонат, т.е. интермедиат А1 (1,76 г, выход=97%). ЖХ-МС (М-Н+): 295,0.
Стадия 2.
Раствор триэтиламина (1 мл) в ацетонитриле (2 мл) по каплям при перемешивании добавляли к раствору интермедиата А1 (1,76 г) и 1-Вос-4-аминопиперидина (1,2 г) в сухом ацетонитриле (20 мл). По окончании добавления раствор нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ИСМ и промывали насыщенным раствором ЫаНСО3 и водой. Затем органическую фазу отделяли, высушивали над сульфатом натрия и упаривали в вакууме. Неочищенный продукт очищали растиранием с метанолом, получая трет-бутил 4-[(2оксо-2Н-хромен-4-ил)амино]пиперидин-1-карбоксилат, т.е. интермедиат А2 (1,51 г, выход=73%). ЖХМС (М-Н+): 345,2.
Стадия 3.
Интермедиат А2 (1 г) растворяли в ИСМ (10 мл), по каплям при 0°С добавляли ΤΡΆ (3 мл) и оставляли раствор перемешиваться в течение 2 ч. Затем раствор концентрировали в вакууме, промывали толуолом и диэтиловым эфиром, получая трифторацетат 4-(пиперидин-4-иламино)-2Н-хромен-2-она, т.е. интермедиат А3 (1,2 г, выход количественный). ЖХ-МС (М-Н+): 245,1.
Стадия 4.
Интермедиат А3 (50 мг) и карбонат калия (38,7 мг) смешивали в ДМФА (2 мл). Затем при комнатной температуре добавляли 3-бромпроп-1-ин (20,8 мг), и реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение ночи. Суспензию фильтровали, и фильтрат концентрировали. Остаток очищали на 81-колонке, элюируя градиентом от ЕЮАс до ЕЮАс/ментанол 8:2 и получая 4-{[1-(проп-2-ин-1-ил)пиперидин-4ил]амино}-2Н-хромен-2-он, т.е. интермедиат А4 (25,6 мг, выход=76%). ЖХ-МС (М-Н+): 283,1.
Стадия 5.
Интермедиат А4 (50 мг, 1 экв.), желаемое галогензамещенное гетероароматическое соединение ВНа1 (1,1 экв.), представленное в приведенной ниже таблице, и йодид меди (Си1, 3,42 мг, 0,1 экв.) растворяли в ДМФА (1 мл). Добавляли И1РЕА (0,125 мл, 4 экв.). Смесь дегазировали, попеременно вакуумируя и заполняя азотом, затем добавляли дихлорид бис-(трифенилфосфин) палладия(11) (12,6 мг, 0,1 экв.), и смесь нагревали при 60°С. Через 3 ч, когда реакция завершалась, добавляли воду, и экстрагировали смесь этилацетатом. Органическую фазу промывали насыщенным раствором соли, высушивали над Ыа28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая неочищенный продукт. После очистки на 81-колонке при элюировании градиентом от ЕЮАс до ЕЮАс/ментанол 8:2 получали соответствующий желаемый интермедиат А5, описанный в приведенной ниже таблице________________
Соединение Νο В-На1 Интермедиат А5 ЖХ-МС
27 Ν==\ 4-({1-[3-(1,3бензоксазол— 4 —ил) проп2-ин-1-ил]пиперидин-4ил}амино)-2Н-хромен-2он ЖХ-МС (М-Н+) : 400,1
29 4-({1-[3-(изохинолин-1- ил)проп-2-ин-1- ил]пиперидин-4- ил}амино)-2Н-хромен-2- он ЖХ-МС (М-Н+) : 410,3
40 мн/ А 7- ( 3-{4-[ (2-ОКСО-2Нхромен-4- ил)амино]пиперидин-1ил}проп-1-ин-1-ил)-1,3дигидро-2Н-индол-2-он ЖХ-МС (М-Н+) : 414,1
- 14 032384
Стадия 6.
Каждый из показанных выше интермедиатов А5 (0,09 ммоль, 1 экв.) помещали в ЕЮАс (5 мл). К каждому раствору добавляли Ρά/С 10% (0,05 экв.), и смесь перемешивали в атмосфере водорода (3,5 атм) при комнатной температуре. Через 3 ч добавляли ЭСМ, затем смеси фильтровали и концентрировали в вакууме, получая неочищенные продукты, которые очищали на 81-колонке, элюируя градиентом ЭСМЭСМ/метанол 8:2 и получая соответствующие соединения А6, описанные в приведенной ниже таблице
Соединение Νο А6 наименование ЮГРАС ЖХ-МС
27 4-({1-[3- (1,3- бензоксазол-4- ил)пропил]пиперидин-4ил}амино)-2Н-хромен-2-он ЖХ-МС (М-Н+) : 404,2
29 4- ( {1- [ 3- (изохинолин- 1-ил)пропил]пиперидин-4ил}амино)-2Н-хромен-2-он ЖХ-МС (М-Н+) : 414,1
40 7- ( 3-{4-[ (2-ОКСО-2Н- хромен-4-ил)амино]пиперидин1-ил]пропил)-1,3-дигидро-2Ниндол-2-он ЖХ-МС (М-Н+) : 418,1
Соединение 29 растворяли в ЭСМ. По каплям при 0°С добавляли 1М НС1 в диэтиловом эфире, и раствор оставляли перемешиваться в течение 2 ч. Затем каждый раствор концентрировали в вакууме, получая после растирания в диэтиловом эфире итоговое соединение в виде гидрохлорида.
Соединение Νο Аб наименование ЮГРАС ЖХ-МС
29 гидрохлорид 4-({1— [3- (изохинолин-1- ил)пропил]пиперидин-4ил}амино)-2Н-хромен-2-она ЖХ-МС (М-Н+) : 414,1
Соединение 29: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 10,62 (уш. с, 1Н), 8,62 (уш. с, 1Н), 8,55 (д, 1=6,3 Гц, 1Н), 8,21 (д, 1=8,5 Гц, 3Н), 8,09 (уш. с, 1Н), 7,95 (уш. с, 1Н), 7,64-7,56 (м, 1Н), 7,49 (уш. с, 1Н), 7,35-7,26 (м, 2Н), 5,36 (с, 1Н), 3,82 (уш. с, 2Н), 3,75-3,41 (м, 4Н), 3,26 (уш. с, 2Н), 3,12 (уш. с, 2Н), 2,40-2,25 (м, 2Н), 2,20-1,94 (м, 4Н).
Соединение 40: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 10,67 (уш. с, 1Н), 7,59-7,51 (м, 2Н), 7,35 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,30 (т, 1=7,5 Гц, 1Н), 7,10 (д, 1=7,0 Гц, 1Н), 7,05-7,00 (м, 1Н), 6,96 (т, 1=7,3 Гц, 1Н), 5,47-5,32 (м, 2Н), 3,63-3,52 (м, 3Н), 3,07 (д, 1=11,0 Гц, 2Н), 2,64 (т, 1=5,9 Гц, 2Н), 2,35 (т, 1=5,9 Гц, 2Н), 2,31-2,13 (м, 4Н), 2,06-1,93 (м, 2Н), 1,87 (тд, 1=6,1, 12,1 Гц, 2Н).
Получение соединения 46.
Соединение 46 получали, как описано ниже по тексту, следуя схеме синтеза В
Стадия 1 а.
2-Хлоризохинолон В0а (3 г) растворяли в СΗ3СN (150 мл) с пиперазином (23,7 г) и карбонатом калия (3,8 г), и раствор нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 48 ч. Раствор концентрировали, разбавляли ЭСМ и промывали насыщенным раствором №НСО3 и насыщенным раствором соли. Затем органическую фазу отделяли, высушивали сульфатом натрия и упаривали в вакууме, получая
1-(пиперазин-1-ил)изохинолин, т.е. интермедиат В1а (3,9 г, выход=94%). ЖХ-МС (М-Н+): 214,1.
Стадия 1Ь
ЫНВос
ВОЬ В1Ь
К раствору 3-(Вос-амино)-1-пропанола формулы В0Ь (3,9 мл) в ЭСМ (140 мл) добавляли перйодинан Десса-Мартина (12,4 г), и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Затем смесь разбавляли диэтиловым эфиром, промывали 1М водным раствором \а282О3 и насыщенным раствором ΝαΙ 1СО3. Затем органическую фазу отделяли, высушивали сульфатом натрия и упаривали в вакууме, получая трет-бутил (3-оксопропил)карбамат, т.е. интермедиат В1Ь (3,9 г, выход количественный). ЖХ-МС (м-Н+): 174,0.
- 15 032384
Стадия 2.
Интермедиат В1а (4 г) растворяли в ЭСМ (75 мл), и при комнатной температуре последовательно добавляли интермедиат В1Ь (4,9 г) и пять капель уксусной кислоты. Через 10 мин дополнительно добавляли триацетоксиборгидрид натрия (6 г), и раствор оставляли перемешиваться в течение ночи. Раствор разбавляли ЭСМ и промывали 1М раствором гидроксида натрия, высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали в вакууме. Неочищенный продукт очищали во-первых на 81-колонке, элюируя этилацетатом, и затем на другой 81-колонке, элюируя смесью ЭСМ/этилацетат/МеОН 7/2,5/0,5 и получая трет-бутил-{3-[4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропил}карбамат, т.е. интермедиат В2 (3,5 г, выход=50%). ЖХ-МС (М-Н+)=371,2.
Стадия 3.
Интермедиат В2 (3,5 г) растворяли в ЭСМ (25 мл), по каплям при 0°С добавляли ТРЛ, и раствор оставляли перемешиваться в течение 2 ч. Раствор концентрировали в вакууме, промывали толуолом и диэтиловым эфиром, получая 3-[4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропан-1-амин, т.е. интермедиат В3 в виде соли с ТРА (6,35 г, выход=93%). ЖХ-МС (М-Н+)=271,2.
Стадия 4.
Интермедиат В3 в виде соли с ТРА (1,3 г) растворяли в ЭСМ (12 мл) и ТЕА (1 мл), последовательно при кт добавляли одну каплю уксусной кислоты и [1,3]оксатиоло[5,4-с]пиридин-6-карбальдегид (150 мг), полученный, как описано в РгерагаЧоп о£ парЫкупСте СепуаЧуез аз ап!1Ьас1епа1 адеп!з; МШег, ^1Шаш Непгу; Коизе, Меадап В.; 8ее£еМ, Магк АпСгеи·, РСТ Ιπΐ. Арр1., 2006014580, 09 РеЬ 2006. Через 10 мин добавляли триацетоксиборгидрид натрия (382 мг), и раствор оставляли перемешиваться в течение ночи. Раствор разбавляли ОСМ и промывали насыщенным раствором соли, высушивали сульфатом натрия, фильтровали и упаривали в вакууме. Неочищенный продукт очищали во-первых на 81-колонке (ΝΗ), элюируя градиентом этилацетат-этилацетат/МеОН 9:1, затем на 81-колонке, элюируя градиентом ОСМОСМ/МеОН 7:3 и получая желаемое соединение 46, т.е. 3-[4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]-№ ([1,3]оксатиоло-[5,4-с]пиридин-6-илметил)пропан-1-амин (290 мг, выход=28%).
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06): δ 8,15 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,10 (д, 1=8,5 Гц, 1Н), 8,03 (с, 1Н), 7,75 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,61 (ддд, 1=1,3, 7,0, 8,1 Гц, 1Н), 7,51 (ддд, 1=1,3, 7,0, 8,3 Гц, 1Н), 7,24 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,22 (с, 1Н), 5,74 (с, 2Н), 5,31 (с, 1Н), 3,83 (с, 2Н), 3,55-3,38 (м, 4Н), 2,82-2,68 (м, 6Н), 2,56 (т, 1=7,3 Гц, 2Н), 1,81 (квинтет, 1=7,1 Гц, 2Н).
Получение соединений 44, 51, 52, 56, 62, 66, 67, 69, 72, 73, 79, 80, 86, 88, 91, 95, 98, 108 и 124.
Соединения 44, 51, 52, 56, 62, 66, 67, 69, 72, 73, 79, 80, 86, 88, 91, 95, 98, 108 и 124 получали, как описано ниже по тексту, следуя схеме синтеза С
Способ синтеза, применявшийся для получения соединения 51.
Стадия 1.
Смесь 1,7-дихлоризохинолина С0 (350 мг), К2СО3 (390 мг) и трет-бутил пиперазин-1-карбоксилата (700 мг) помещали в колбу и проводили три цикла вакуумирование/заполнение Ν2. Добавляли ДМСО (10 мл), нагревали суспензию до 120°С и перемешивали в течение 5,5 ч. Затем реакционной смеси давали остыть, разбавляли водой и экстрагировали Е1ОАс. Органическую фазу отделяли и промывали насыщенным раствором соли, высушивали над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении, получая неочищенный продукт в виде коричневого масла. Его очищали с применением 50 г 81-картриджа 8NАР, элюируя смесью сНех/ЕЮАс (10/0, 2СУ - от 10/0 до 7/3, 8СУ - 7/3, 2СУ) и получая трет-бутил 4(7-хлоризохинолин-1-ил)пиперазин-1-карбоксилат, т.е. интермедиат С1 (выход=73%), в виде бесцветной клейкой смолы. ЖХ-МС (М-Н+)=348,3.
Стадия 2.
ТРА (1 мл) добавляли к раствору интермедиата С1 (480 мг) в дихлорметане (3 мл) при комнатной температуре, и перемешивали полученную смесь в течение 60 мин. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении. Остаток дважды растворяли в дихлорметане (10 мл) и упаривали при пониженном давлении, затем остаток растворяли в МеОН (4 мл) и помещали на предварительно подготовленный
- 16 032384 картридж 8СХ (5 г). 8СХ элюировали МеОН и затем 2М раствором аммиака в метаноле. Основные фракции упаривали при пониженном давлении, получая 330 мг 7-хлор-1-(пиперазин-1-ил)изохинолина, т.е. интермедиата С2, в виде густого бесцветного масла (выход количественный). ЖХ-МС (М-Н+)=248,2.
Стадия 3.
Смесь интермедиата С2 (325 мг), трет-бутил №(3-бромпропил)карбамата (297 мг), йодида калия (109 мг) и карбоната калия (362 мг) в ДМФА (4 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь распределяли между ЕЮАс (50 мл) и наполовину разбавленным насыщенным раствором соли (50 мл). Органическую фазу отделяли, затем промывали наполовину разбавленным насыщенным раствором соли (50 мл) и насыщенным раствором соли (50 мл), высушивали над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Остаток подвергали хроматографической очистке на силикагеле (8ΝΑΡ 25), элюируя градиентом 50-100% смеси А в циклогексане, где смесь А представляла собой смесь ЕЮАс/МеОН (97:3), получая 465 мг трет-бутил №{3-[4-(7-хлоризохинолин-1-ил)пиперазин-
1- ил] пропил} карбамата, т.е. интермедиата С3 (выход=92%) в виде бесцветной клейкой смолы. ЖХ-МС (М-Н+)=405,4.
Стадия 4.
ТЕА (2 мл) добавляли к раствору интермедиата С3 (462 мг) в дихлорметане (6 мл) при комнатной температуре, и полученную смесь перемешивали в течение 60 мин. Летучие вещества выпаривали при пониженном давлении. Остаток дважды растворяли в дихлорметане (10 мл) и упаривали при пониженном давлении, после чего остаток растворяли в МеОН (4 мл) и помещали на предварительно подготовленный картридж 8СХ (5 г). 8СХ элюировали МеОН и затем 2М раствором аммиака в метаноле. Основные фракции упаривали при пониженном давлении, получая 336 мг 3-[4-(7-хлоризохинолин-1ил)пиперазин-1-ил]пропан-1-амина, т.е. интермедиата С4 (выход=96%), в виде желтой смолы. ЖХ-МС (М-Н+)=305,3.
Стадия 5.
Раствор трифторметансульфонового ангидрида (2,5 мл) в дихлорметане (10 мл) по каплям при перемешивании и при -10°С добавляли к раствору 4-гидрокси-2Н-хромен-2-она, т.е. интермедиата С5 (2,00 г), и триэтиламина (3,44 мл) в дихлорметане (60 мл). Реакционную смесь перемешивали при -10°С в течение 2 ч, затем давали нагреться до 0°С и разбавляли смесью циклогексан/диэтиловый эфир (3:1, 100 мл). Смесь фильтровали через слой силикагеля, промывая дополнительными порциями смеси циклогексан/диэтиловый эфир (3:1). Промывочную жидкость, содержавшую желаемый продукт, упаривали при пониженном давлении, получая 3,80 г 2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметилсульфоната, т.е. интермедиата С6 (выход=97%) в виде коричневого твердого вещества. ЖХ-МС (М-Н+)=295,1.
Стадия 6.
Раствор интермедиата С4 (114 мг), триэтиламина (70 мкл) и интермедиата С6 (100 мг) в ацетонитриле (4 мл) нагревали до 70°С в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток распределяли между дихлорметаном (15 мл) и смесью насыщенный раствор соли/бикарбонат натрия (1:1, 15 мл). Смесь фильтровали через гидрофобную фритту (разделитель фаз), промывая дихлорметаном (10 мл). Органическую фазу упаривали при пониженном давлении, и остаток хроматографировали на силикагеле (2χ8ΝΑΡ 10 последовательно), элюируя 10-100% градиентом А в циклогексане, где А означает смесь МеОН/ЕЮАс (20:80), получая 63 мг 4-({3-[4-(7-хлоризохинолин-1ил)пиперазин-1-ил]пропил}амино)-2Н-хромен-2-она (соединение 51) в виде белой пены.
4-({3-[4-(7-Хлоризохинолин-1 -ил)пиперазин-1-ил]пропил } амино)-2Н-хромен-2-он (соединение 51) (60 мг) растворяли в дихлорметане (3 мл) и обрабатывали 1М раствором НС1 в диэтиловом эфире (0,35 мл), вызывая образование осадка. Полученную смесь упаривали при пониженном давлении, и остаток растирали с диэтиловым эфиром. Твердый остаток высушивали, получая 69 мг не совсем белого твердого вещества гидрохлорида 4-({3-[4-(7-хлоризохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропил}амино)-2Н-хромен-
2- она (выход=35%). ЖХ-МС (М-Н+)=449,3.
Соединения 44, 52, 56, 66, 67, 72, 88, 91, 95, 98 и 108 получали аналогичными способами, заменяя 1,7-дихлоризохинолин (С0) на стадии 1 следующими соединениями соответственно
Соедин ение Интермедиат СО ЖХ-МС итогового соединения
44 1-хлоризохинолин ЖХ-МС (М-Н+) =415,2
52 7-циано-1-хлоризохинолин ЖХ-МС (М-Н+) =440,3
56 3-метил-1-хлоризохинолин ЖХ-МС (М-Н+) =429,4
66 1,3-дихлоризохинолин ЖХ-МС (М-Н+) =449,3
67 7-фтор-1-хлоризохинолин ЖХ-МС (М-Н+) =433,3
72 7-метил-1-хлоризохинолин ЖХ-МС (М-Н+) =429,4
73 З-метокси-1-хлоризохинолин ЖХ-МС (М-Н+) =445,4
88 7-метокси-1-хлоризохинолин ЖХ-МС (М-Н+) =445,4
91 3-фтор-1-хлоризохинолин ЖХ-МС (М-Н+) =433,3
95 3-циано-1-хлоризохинолин ЖХ-МС (М-Н+) =440,3
98 7-диметиламино-1- хлоризохинолин ЖХ-МС (М-Н+) =458,4
108 8-метил-1-хлоризохинолин ЖХ-МС(М-Н+) =429,4
- 17 032384
Соединение 44: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Д6): δ 11,07 (уш. с, 1Н), 8,19 (д, 1=8,5 Гц, 1Н), 8,15 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 8.08 (д, 1=6,0 Гц, 1Н), 8,00 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 7,95 (т, 1=5,5 Гц, 1Н), 7,85 (т, 1=7,5 Гц, 1Н),
7.73- 7,67 (м, 1Н), 7,63-7,58 (м, 1Н), 7,57 (д, 1=6,0 Гц, 1Н), 7,39-7,28 (м, 2Н), 5,27 (с, 1Н), 4,23 (уш. с, 2Н), 4,00 (д, 1=13,3 Гц, 2Н), 3,65 (д, 1=10,5 Гц, 4Н), 3,50-3,34 (м, 4Н), 3,30 (тд, 1=4,8, 9,4 Гц, 2Н), 2,14 (квинтет, 1=7,3 Гц, 2Н).
Соединение 51: !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Щ): δ 10,72 (уш. с, 1Н), 8,18 (д, 1=5,5 Гц, 1Н), 8,15-8,09 (м, 2Н), 8,01 (д, 1=8,8 Гц, 1Н), 7,89 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 7,79 (дд, 1=1,9, 8,7 Гц, 1Н), 7,63-7,57 (м, 1Н), 7,55 (д, 1=5,5 Гц, 1Н), 7,38-7,28 (м, 2Н), 5,78 (уш. с, 1Н), 5,27 (с, 1Н), 3,90-3,75 (м, 2Н), 3,62 (д, 1=10,0 Гц, 2Н), 3,53-3,34 (м, 6Н), 3,33-3,22 (м, 2Н), 2,14 (квинтет, 1=7,0 Гц, 2Н).
Соединение 52: !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Щ): δ 10,73 (уш. с, 1Н), 8,65 (с, 1Н), 8,30 (д, 1=5,8 Гц, 1Н),
8.16- 8,07 (м, 2Н), 8.03 (дд, 1=1,5, 8,5 Гц, 1Н), 7,89 (т, 1=5,1 Гц, 1Н), 7,69-7,52 (м, 2Н), 7,41-7,25 (м, 2Н), 5,28 (с, 1Н), 4,75 (уш. с, 1Н), 3,89 (д, 1=11,5 Гц, 2Н), 3,62 (д, 1=9,3 Гц, 2Н), 3,55-3,36 (м, 6Н), 3,35-3,17 (м, 2Н), 2,14 (квинтет, 1=7,0 Гц, 2Н).
Соединение 56: !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Д6): δ 10.06 (уш. с, 2Н), 8,08 (д, 1=8,3 Гц, 2Н), 7,83 (д, 1=7,8 Гц, 2Н), 7,70 (т, 1=7,2 Гц, 1Н), 7,66-7,60 (м, 1Н), 7,59-7,50 (м, 1Н), 7,41-7,27 (м, 3Н), 5,31 (с, 1Н), 3,88 (д, 1=11,0 Гц, 2Н), 3,75-3,17 (м, 13Н), 2,21-2,02 (м, 2Н).
Соединение 72: 'Н ЯМР (400 МГц, ДМС’О-ώ,): δ (хлороформ-ά) 8,14 (д, 1=5,5 Гц, 1Н), 7,93 (уш. с, 2Н), 7,84 (с, 1Н), 7,71 (д, 1=8,5 Гц, 1Н), 7,55-7,44 (м, 2Н), 7,34-7,28 (м, 3Н), 5,25 (с, 1Н), 3,70 (уш. с, 4Н), 3,49 (уш. с, 2Н), 3,04 (уш. с, 4Н), 2,92 (уш. с, 2Н), 2,59-2,49 (м, 3Н), 2,18-2,04 (м, 2Н).
Соединение 73: !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Щ): δ 11,07 (уш. с, 1Н), 8,17 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,97 (уш. с, 2Н), 7,76 (д, 1=6,8 Гц, 1Н), 7,59 (уш. с, 2Н), 7,32 (уш. с, 3Н), 6,77 (уш. с, 1Н), 5,26 (уш. с, 1Н), 3,90 (уш. с, 6Н), 3,70-3,05 (м, 10Н), 2,15 (уш. с, 2Н).
Соединение 88: Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-Д6): δ 11,07 (уш. с, 1Н), 8,16 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 8,00 (д, 1=6,0 Гц, 1Н), 7,97-7,89 (м, 2Н), 7,65-7,56 (м, 1Н), 7,56-7,45 (м, 2Н), 7,40-7,27 (м, 3Н), 5,27 (с, 1Н), 4,64 (уш. с, 1Н), 4,03-3,84 (м, 5Н), 3,73-3,52 (м, 4Н), 3,50-3,35 (м, 4Н), 3,30 (уш. с, 2Н), 2,16 (квинтет, 1=7,2 Гц, 2Н).
Соединение 91: Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-Щ): δ 10,52 (уш. с, 1Н), 8,14-8,07 (м, 2Н), 7,93 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 7,86 (т, 1=5,5 Гц, 1Н), 7,74 (т, 1=7,5 Гц, 1Н), 7,64-7,58 (м, 1Н), 7,58-7,52 (м, 1Н), 7,40-7,28 (м, 2Н),
7,15 (с, 1Н), 5,28 (с, 1Н), 3,96 (д, 1=13,3 Гц, 2Н), 3,68 (уш. с, 1Н), 3,63 (д, 1=11,5 Гц, 2Н), 3,52-3,24 (м, 8Н),
2.17- 2,04 (м, 2Н).
Соединение 95: !Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-сГ): δ 10,57 (уш. с, 1Н), 8,24 (с, 1Н), 8,21 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 8,09 (дд, 1=8,0, 13,1 Гц, 2Н), 7,94-7,88 (м, 1Н), 7,88-7,80 (м, 2Н), 7,65-7,57 (м, 1Н), 7,38-7,28 (м, 2Н), 5,28 (с, 1Н), 3,98 (д, 1=13,3 Гц, 2Н), 3,63 (д, 1=11,0 Гц, 2Н), 3,55-3,45 (м, 2Н), 3,44-3,24 (м, 6Н), 2,12 (квинтет, 1=7,1 Гц, 2Н).
Соединение 98: Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-Д6): δ 11,12 (уш. с, 1Н), 8,14 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,93 (д, 1=8,5 Гц, 2Н), 7,78 (д, 1=6,3 Гц, 1Н), 7,68-7,49 (м, 3Н), 7,38-7,27 (м, 2Н), 6,96 (уш. с, 1Н), 5,28 (с, 1Н), 4,693,86 (м, 6Н), 3,69 (д, 1=12,3 Гц, 2Н), 3,52-3,35 (м, 4Н), 3,30 (уш. с, 2Н), 3,11 (с, 6Н), 2,23-2,08 (м, 2Н).
Соединение 108: Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-сГ): δ ррт 1,90-2,27 (м, 2Н), 2,92 (с, 3Н), 3,06-4,06 (м, 12Н), 5,27 (с, 1Н), 7,18-8,01 (м, 8Н), 8,03-8,19 (м, 2Н), 10,59 (уш. с, 1Н).
Соединение 62 получали по той же методике, что и соединение 44, но применяя трет-бутил N-(3бромэтил)карбамат вместо трет-бутил №(3-бромпропил)карбамата на стадии 3. ЖХ-МС (М-Н+)=401,3.
Соединение 62: Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-Д6): δ 11,28 (уш. с, 1Н), 8,23 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 8,19 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 8,11 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,04 (т, 1=5,3 Гц, 1Н), 7,99 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,83 (т, 1=7,4 Гц, 1Н),
7.73- 7,66 (м, 1Н), 7,65-7,58 (м, 1Н), 7,56 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,39-7,28 (м, 2Н), 5,39 (с, 1Н), 4,86 (уш. с, 1Н), 3,99 (д, 1=11,8 Гц, 2Н), 3,87-3,73 (м, 4Н), 3,64 (т, 1=11,4 Гц, 2Н), 3,51 (уш. с, 4Н).
Соединение 69 получали по той же методике, что и соединение 44, но применяя 1Н-инден-1,3(2Н)дион вместо 2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфоната на стадии 6. ЖХ-МС (М-Н+)=399,3.
Соединение 69: Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-Д6): δ 8,40 (т, 1=5,3 Гц, 1Н), 8,10 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,08 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 7,87 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,70 (т, 1=7,3 Гц, 1Н), 7,63-7,55 (м, 2Н), 7,43-7,33 (м, 3Н), 7,28-7,23 (м, 1Н), 4,84 (с, 1Н), 3,39 (кв, 1=6,5 Гц, 2Н), 3,36-3,25 (м, 6Н), 2,67 (уш. с, 4Н), 1,87 (квинтет, 1=6,5 Гц, 2Н)
Соединение 79 получали по той же методике, что и соединение 44, но применяя 2-оксо-6-хлор-2Нхромен-4-ил трифторметансульфонат вместо 2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфоната на стадии 6. ЖХ-МС (М-Н+)=449,3.
Соединение 79: Ί1 ЯМР (400 МГц, ДМСО-Д6): δ 10,86 (уш. с, 1Н), 8,28 (д, 1=1,8 Гц, 1Н), 8,17 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 8,11 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,97 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,95-7,88 (м, 1=5,0, 5,0 Гц, 1Н), 7,81 (т, 1=7,4 Гц, 1Н), 7,73-7,60 (м, 2Н), 7,54 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,37 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 5,32 (с, 1Н), 4,31 (уш. с, 1Н), 3,94 (д, 1=13,3 Гц, 2Н), 3,75-3,50 (м, 4Н), 3,48-3,12 (м, 6Н), 2,25-2,03 (м, 2Н).
Соединение 80 получали по той же методике, что и соединение 44, но применяя 2-оксо-6-фтор-2Нхромен-4-ил трифторметансульфонат вместо 2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфоната на стадии 6. ЖХ-МС (М-Н+)=433,3.
Соединение 80: Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-сГ): δ 11,07 (уш. с, 1Н), 8,18 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 8,14-8,05
- 18 032384 (м, 2Н), 7,99 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 7,92 (т, 1=5,3 Гц, 1Н), 7,83 (т, 1=7,4 Гц, 1Н), 7,74-7,65 (м, 1Н), 7,55 (д, 1=6,0 Гц, 1Н), 7,49 (дт, 1=2,8, 8,5 Гц, 1Н), 7,43-7,32 (м, 1Н), 5,31 (с, 1Н), 4,72 (уш. с, 1Н), 3,98 (д, 1=13,3 Гц, 2Н), 3,65 (д, 1=11,5 Гц, 4Н), 3,48-3,35 (м, 4Н), 3,30 (уш. с, 2Н), 2,24-2,06 (м, 2Н).
Соединение 86 получали по той же методике, что и соединение 44, но применяя 2-оксо-5,6,7,8тетрагидро-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфонат вместо 2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфоната на стадии 6. ЖХ-МС (М-Н+)=419,4.
Соединение 86: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ): δ 11,16 (уш. с, 1Н), 8,19 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 8,07 (д, 1=6,0 Гц, 1Н), 8,00 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,94-7,79 (м, 1Н), 7,77-7,66 (м, 1Н), 7,57 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 6,80 (уш. с, 1Н), 4,92 (с, 1Н), 4,01 (д, 1=13,3 Гц, 1Н), 4,06 (уш. с, 3Н), 3,68 (д, 1=10,0 Гц, 1Н), 3,62 (д, 1=12,0 Гц, 2Н), 3,39 (д, 1=10,0 Гц, 2Н), 3,30-3,12 (м, 4н), 2,42-2,32 (м, 2Н), 2,30-2,17 (м, 2Н), 2,03 (квинтет, 1=7,0 Гц, 2н), 1,78-1,53 (м, 4Н).
2-Оксо-6-хлор-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфонат, 2-оксо-6-фтор-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфонат и 2-оксо-5,6,7,8-тетрагидро-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфонат получали по методике стадии 5, используя 4-гидрокси-6-хлор-2Н-хромен-2-он, 4-гидрокси-6-фтор-2Н-хромен-2-он и 4гидрокси-5,6,7,8-тетрагидро-2Н-хромен-2-он соответственно.
Получение соединения 124.
К раствору 4-({3-[4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропил}амино)-2Н-хромен-2-она (соединения 44) (110 мг, 0,265 ммоль, 1 экв.) в ТГФ (5 мл) при 0°С добавляли СН31 (33 мкл, 0,53 ммоль, 2 экв.). Температура смеси самопроизвольно повышалась до кт, после чего реакционную смесь нагревали до 70° С в течение двух дней. Растворитель удаляли в вакууме, и неочищенный продукт очищали препаративной ВЭЖХ-МС, получая йодид 4-(изохинолин-1-ил)-1-метил-1-{3-[(2-оксо-2Н-хромен-4-ил)амино] пропил }пиперазиния (соединение 124) (52 мг, выход=32%). ЖХ-МС (М-Н+)=429,2.
1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-Й6+В2О): δ 8,20-8,09 (м, 2Н), 8,03 (дд, 1=1,3, 8,0 Гц, 1Н), 7,95 (д, 1=7,6 Гц, 1Н), 7,77 (дт, 1=1,0, 7,5 Гц, 1Н), 7,72-7,58 (м, 2Н), 7,52 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,41-7,30 (м, 2Н), 5,33 (с, 1Н), 3,87-3,58 (м, 10Н)), 3,42 (т, 1=6,6 Гц, 2Н), 3,22 (с, 3Н), 2,26-2,05 (м, 2Н).
Получение соединения 64.
Соединение 64 получали по методике получения соединения 44, заменяя 2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфонат на стадии 6 4-хлор-3,4-дигидро-2Н-1,3-бензоксазин-2-оном, т.е. интермедиатом Ό1, полученным, как описано ниже. ЖХ-МС (М-Н+)=416,3.
Методика синтеза соединения 64
ϋο οι
Пентахлорид фосфора (293 мг) при перемешивании и при комнатной температуре добавляли к смеси 4-гидрокси-1,3-бензоксазин-2-она, т.е. интермедиата Ό0 (100 мг), и оксихлорида фосфора (V) (0,335 мл). Реакционную смесь нагревали до 110°С и перемешивали 4 ч. Реакционную смесь охлаждали и упаривали при пониженном давлении. Затем остаток 3 раза растворяли в толуоле и концентрировали при пониженном давлении для удаления избытка РОС13. Неочищенный продукт хроматографировали на картридже с силикагелем, элюируя ЕЮАс и получая 108 мг 4-хлор-3,4-дигидро-2Н-1,3-бензоксазин-2-она, т.е. интермедиата Ό1 (выход=99%).
Соединение 64: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Х: δ 0,62 (уш. с, 1Н), 9,49 (уш. с, 1Н), 8,24 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 8,17 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 8,11 (д, 1=6,0 Гц, 1Н), 7,97 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,81 (т, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,77-7,71 (м, 1Н), 7,71-7,64 (м, 1Н), 7,54 (д, 1=6,0 Гц, 1Н), 7,37 (т, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,32 (д, 1=8,5 Гц, 1Н), 4,11 (уш. с, 1Н), 3,95 (д, 1=11,8 Гц, 2Н), 3,66 (кв, 1=6,1 Гц, 4Н), 3,56 (уш. с, 2Н), 3,41 (уш. с, 2Н), 3,31 (уш. с, 2Н), 2,16 (квинтет, 1=7,4 Гц, 2Н).
Получение соединений 61, 63, 65, 66, 67, 72, 88 и 100.
Соединения 61, 63, 65, 66, 67, 72, 88 и 100 получали как описано ниже по тексту, следуя схеме синтеза Е
- 19 032384
Способ синтеза соединения 61.
Стадия 1.
трет-бутил-4-[3-(1,3-диоксоизоиндол-2-ил)пропил]пиперазин-1-карбоксилат, т.е. интермедиат Е0 (1,9 г) растворяли в метиламине (33%-ный раствор в абсолютном этаноле, 20 мл) и нагревали до 40°С в течение 4 ч. Растворитель выпаривали, и остаток растворяли в диэтиловом эфире и фильтровали. Фильтрат упаривали, получая трет-бутил 4-(3-аминопропил)пиперазин-1-карбоксилат, т.е. интермедиат Е1, в виде бесцветного масла (1,1 г, выход=89%). ЖХ-МС (М-Н+)=244,3.
Стадия 2.
Раствор интермедиата Е1 (1,1 г), триэтиламина (0,674 мл) и 2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфоната (1,2 г), полученного, как описано на стадии 5 способа получения соединения 51, в ацетонитриле (20 мл) нагревали до 70°С в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток распределяли между дихлорметаном и смесью насыщенный раствор соли/бикарбонат натрия (1:1). Смесь фильтровали через гидрофобную фритту (разделитель фаз), промывая дихлорметаном. Органическую фазу упаривали при пониженном давлении, и остаток хроматографировали на силикагеле (ЗЫАР50), элюируя градиентом ЕЮЛс в циклогексане и получая 700 мг трет-бутил 4{3-[(2-оксо-2Н-хромен-4-ил)амино] пропил }пиперазин-1-карбоксилата, т.е. интермедиата Е2 (700 мг, выход=44%). ЖХ-МС (М-Н+)=388,3.
Стадия 3.
ТРЛ (2 мл) добавляли к раствору интермедиата Е2 (700 мг) в дихлорметане (6 мл) при комнатной температуре, и полученную смесь перемешивали в течение 20 мин. Остаток упаривали при пониженном давлении, растворяли в МеОН и помещали на предварительно подготовленный картридж ЗСХ. Картридж ЗСХ элюировали МеОН и затем 2М раствором аммиака в метаноле. Основные фракции упаривали при пониженном давлении, получая 4-{[3-(пиперазин-1-ил) пропил] амино }хромен-2Н-он, т.е. интермедиат Е3 (456 мг) (выход=88%). ЖХ-МС (М-Н+)=288,3.
Стадия 4.
Смесь интермедиата Е3 (40 мг), 8-хлор-1,7-нафтиридина (19 мг) и карбоната калия (23 мг) в ДМСО (1 мл) перемешивали в течение ночи при 110°С. Смесь разбавляли ЕЮЛс. Органическую фазу промывали раствором бикарбоната натрия, водой и насыщенным раствором соли. Органическую фазу высушивали над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на силикагеле (ЗЫАР 10), элюируя градиентом 0-100% А в ЕЮАс, где А представляет собой смесь МеОН/ЕЮАс (10:90) и получая 20 мг желаемого продукта, т.е. 4-({3-[4-(1,7-нафтиридин-8-ил)пиперазин-1ил] пропил }амино)-2Н-хромен-2-она (соединение 61). ЖХ-МС (М-Н+)=416,3.
4-({3-[4-(1,7-нафтиридин-8-ил)пиперазин-1-ил]пропил}амино)-2Н-хромен-2-он растворяли в дихлорметане (1,5 мл) и обрабатывали 1М раствором НС1 в диэтиловом эфире (0,12 мл), вызывая образование осадка. Полученную смесь упаривали при пониженном давлении, и остаток растирали с диэтиловым эфиром. Твердый остаток высушивали, получая 14,8 мг гидрохлорида 4-({3-[4-(1,7-нафтиридин-8ил)пиперазин-1-ил] пропил }амино)-2Н-хромен-2-она в виде твердого вещества желтого цвета. ЖХ-МС (М-Н+)=416,3.
Соединение 61: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-^) δ 10,56 (уш. с, 1Н), 8,91 (дд, Д=1,8, 4,3 Гц, 1Н), 8,35 (дд, 1=1,8, 8,3 Гц, 1Н), 8,15-8,04 (м, 2Н), 7,85 (т, 1=5,4 Гц, 1Н), 7,76 (дд, 1=4,0, 8,3 Гц, 1Н), 7,64-7,55 (м, 1Н), 7,43-7,25 (м, 3Н), 5,26 (с, 1Н), 5,04 (д, 1=14,1 Гц, 2Н), 3,71-3,48 (м, 6Н), 3,46-3,35 (м, 2Н), 3,34-3,16 (м, 4Н), 2,11 (квинтет, 1=7,2 Гц, 2Н).
Соединения 63, 65, 66, 67, 72, 88 и 100 получали аналогичным путем, заменяя 8-хлор-1,7нафтиридин на стадии 4 следующими соединениями соответственно:___________
Соед мнение Соединение, использованное в качестве замены ЖХ-МС
63 4-хлор-2Н-хромен-2-он ЖХ-МС (М- Н+) =432,4
65 5-хлор-1,6-нафтиридин ЖХ-МС (М- Н+) =416, 3
66 1,3-дихлоризохинолин ЖХ-МС (М- Н+) =449,3
67 7-фтор-1-хлоризохинолин ЖХ-МС (М- Н+) =433,3
72 7-метил-1-хлоризохинолин ЖХ-МС (М- Н+) =429,4
88 7-метокси-1-хлоризохинолин ЖХ-МС (М- Н+) =445,4
100 1-хлор-7-фторизохинолин-2-ий-2- олат ЖХ-МС (М- Н+) =449,3
Соединение 63: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 10,74 (уш. с, 1Н), 8,10 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,91-7,82 (м, 1Н), 7,73 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 7,61 (кв, 1=7,7 Гц, 2Н), 7,40 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,38-7,28 (м, 3Н), 5,87 (с, 1Н), 5,27 (с, 1Н), 3,78 (д, 1=9,0 Гц, 2Н), 3,59 (уш. с, 7Н), 3,45-3,22 (м, 8Н), 2,18-2,04 (м, 2Н).
Соединение 65: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 10,10 (уш. с, 1Н), 9,06 (дд, Д=1,6, 4,1 Гц, 1Н), 8,54
- 20 032384 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 8,35 (д, 1=6,0 Гц, 1Н), 8,07 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,81 (т, 1=5,5 Гц, 1Н), 7,68-7,57 (м, 2Н), 7,53 (д, 1=6,0 Гц, 1Н), 7,40-7,28 (м, 2Н), 5,28 (с, 1Н), 3,92 (д, 1=11,5 Гц, 2Н), 3,63 (д, 1=10,0 Гц, 2Н), 3,37-3,18 (м, 8Н), 2,18-2,01 (м, 2Н).
Соединение 66: Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 9,99 (уш. с, 1Н), 8,11 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 8,05 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 7,91 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,85-7,72 (м, 2Н), 7,69-7,56 (м, 3Н), 7,41-7,28 (м, 2Н), 5,29 (с, 1Н), 3,96 (д, 1=9,3 Гц, 2Н), 3,64 (д, 1=6,5 Гц, 2Н), 3,48-3,34 (м, 8Н), 2,16-2,01 (м, 2Н).
Соединение 67: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-66): δ 10,27 (уш. с, 1Н), 8,16 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,11-8,03 (м, 2Н), 7,88-7,80 (м, 2Н), 7,70 (дт, 1=2,5, 8,8 Гц, 1Н), 7,64-7,58 (м, 1Н), 7,56 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,39-7,26 (м, 2Н), 5,29 (с, 1Н), 3,81 (д, 1=12,0 Гц, 2Н), 3,68-3,58 (м, 2Н), 3,57-3,22 (м, 9Н), 2,12 (квинтет, 1=7,6 Гц, 2Н).
Соединение 72: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ (хлороформ-б) 8,14 (д, 1=5,5 Гц, 1Н), 7,93 (уш. с, 2Н), 7,84 (с, 1Н), 7,71 (д, 1=8,5 Гц, 1Н), 7,55-7,44 (м, 2Н), 7,34-7,28 (м, 3Н), 5,25 (с, 1Н), 3,70 (уш. с, 4Н), 3,49 (уш. с, 2Н), 3,04 (уш. с, 4Н), 2,92 (уш. с, 2Н), 2,59-2,49 (м, 3Н), 2,18-2,04 (м, 2Н).
Соединение 88: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 11,07 (уш. с, 1Н), 8,16 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 8,00 (д, 1=6, 0 Гц, 1Н), 7,97-7,89 (м, 2Н), 7,65-7,56 (м, 1Н), 7,56-7,45 (м, 2Н), 7,40-7,27 (м, 3Н), 5,27 (с, 1Н), 4,64 (уш. с, 1Н), 4,03-3,84 (м, 5Н), 3,73-3,52 (м, 4Н), 3,50-3,35 (м, 4Н), 3,30 (уш. с, 2Н), 2,16 (квинтет, 1=7,2 Гц, 2Н).
Соединение 100: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСОА): δ 9,97 (уш. с, 1Н), 8,12 (д, 1=7,3 Гц, 2Н), 8,07 (дд, 1=5,6, 8,9 Гц, 1Н), 8,00-7,81 (м, 3Н), 7,65-7,52 (м, 2Н), 7,39-7,29 (м, 2Н), 5,28 (с, 1Н), 4,31-3,71 (м, 3Н), 3,57 (д, 1=11,3 Гц, 2Н), 3,52-3,35 (м, 4н), 3,34-3,24 (м, 2Н), 3,13 (уш. с, 2н), 2,12 (квинтет, 1=7,3 Гц, 2Н).
Синтез 1-хлор-7-фторизохинолин-2-ий-2-олата, т.е. интермедиата Х0, использованного при синтезе соединения 100, описан ниже
3-Хлорпероксибензойную кислоту (0,10 г) добавляли к раствору 1-хлор-7-фторизохинолина Х0 (50 мг) в сухом дихлорметане (1,5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 дней. Затем смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 1М водным раствором №О11 (2х) и насыщенным раствором соли. Органическую фазу высушивали над №:БО.|, фильтровали и концентрировали в вакууме, получая неочищенный 1-хлор-7-фторизохинолин-2-ий-2-олат в виде белого твердого вещества (0,049 г, выход=80%). Полученный продукт использовали без дополнительной очистки. ЖХ-МС (М-Н+)=198,0.
Получение соединений 54, 55, 77, 78 и 99.
Соединения 54, 55, 77, 78 и 99 получали, как описано ниже по тексту, следуя схеме синтеза Б
Методика синтеза соединений 54 и 55.
Стадия 1.
Триацетоксиборгидрид натрия (597 мг) при перемешивании и при комнатной температуре добавляли к раствору 1-(пиперазин-1-ил)изохинолина, т.е. интермедиата Б0 (200 мл), полученного, как описано для стадии 1 методики получения соединения 46, и трет-бутил №(3-оксоциклобутил)карбамата (174 мг) в дихлорметане (5 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь разбавляли дихлорметаном (15 мл) и гасили водой (20 мл). Смесь фильтровали через гидрофобную фритту (разделитель фаз), и органическую фазу промывали смесью насыщенного раствора соли и раствора бикарбоната натрия (1:1, 20 мл), после чего вновь фильтровали через гидрофобную фритту (разделитель фаз). Органическую фазу упаривали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на силикагеле ^ΝΑΡ 25), элюируя градиентом А в циклогексане, где А представляла собой смесь МеОН/ЕЮАс (3:97), получая 84 мг цис-трет-бутил{3-[4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-1ил]циклобутил}карбамата в виде желтой смолы (выход=23%) и 175 мг транс-трет-бутил{3-[4(изохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]циклобутил}карбамата (интермедиат Б1) в виде белой пены (выход=49%), для обоих изомеров ЖХ-МС (М-Н+)=383,3.
Следующие стадии проводили с использованием транс-изомера интермедиата Б1 с целью получения соединения 55. Те же самые стадии можно повторить с использованием цис-изомера соединения Б1 для получения соединения 54.
- 21 032384
Стадия 2.
ТТА (1 мл) добавляли к раствору транс-изомера интермедиата Т1 (175 мг) в дихлорметане (3 мл) при комнатной температуре, и полученную смесь перемешивали в течение 60 мин. Летучие вещества выпаривали при пониженном давлении. Остаток дважды растворяли в дихлорметане (5 мл) и упаривали при пониженном давлении. Затем остаток растворяли в МеОН (2 мл) и помещали на предварительно подготовленный картридж 8СХ (1 г). Картридж 8СХ элюировали МеОН и затем 2М раствором аммиака в метаноле. Основные фракции упаривали при пониженном давлении, получая 127 мг транс-3-[4(изохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]циклобутанамина, т.е. интермедиата Т2 в виде бесцветного клейкого масла (выход=98%). ЖХ-МС (М-Н+)=283,2.
Стадия 3.
Раствор транс-изомера интермедиата Т2 (120 мг), триэтиламина (81 мкл) и 2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфоната (114 мг), полученного, как описано для стадии 5 методики получения соединения 51, в ацетонитриле (4 мл) нагревали до 70°С в течение 1 ч. Реакционную смесь охлаждали и фильтровали, промывая твердое вещество ацетонитрилом (2x1 мл). Затем твердое вещество очищали хроматографией на силикагеле (последовательно 2Χ8ΝΑΡ 10), элюируя градиентом 1-10% МеОН в дихлорметане и получая 148 мг транс-4-({3-[4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]циклобутил}амино)-2Н-хромен-2-она (соединение 55) в виде белой пены (выход=79%). ЖХ-МС (М-Н+)=427,4.
Транс-4-({3-[4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]циклобутил}амино)-2Н-хромен-2-он растворяли в дихлорметане (5 мл) и минимальном количестве МеОН и обрабатывали 1 М раствором НС1 в диэтиловом эфире (0,87 мл), что вызывало образование осадка. Полученную смесь упаривали при пониженном давлении, и остаток растирали с диэтиловым эфиром. Полученное твердое вещество высушивали, получая 152 мг гидрохлорида транс-4-({3-[4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-1 -ил]циклобутил}амино)-2Н-хромен-2она в виде белого твердого вещества (выход=79%). ЖХ-МС (М-Н+)=427,4.
Соединение 55.
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-б6): δ мд 2,55-2,69 (м, 2Н), 2,89-3,05 (м, 2Н), 3,19-3,37 (м, 2Н), 3,58-3,79 (м, 4Н), 3,94-4,10 (м, 3 Н), 4,31 (уш. с, 1Н), 4,98 (с, 1Н), 7,30-7,39 (м, 2Н), 7,55-7,65 (м, 2Н), 7,72 (т, 1=7,58 Гц, 1Н), 7,82-7,89 (м, 1Н), 7,94 (уш. с, 1Н), 8,01 (д, 1=7,60 Гц, 1Н), 8,06-8,13 (м, 1Н), 8,17-8,27 (м, 2Н), 11,84 (уш. с, 1Н). Соединение 54 ЖХ-МС (М-Н+)=427,4.
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-06): δ мд 2,60-2,70 (м, 2Н), 2,83-2,94 (м, 2Н), 3,27-3,38 (м, 2Н), 3,56 (д, 1=11,74 Гц, 2Н), 3,60-3,75 (м, 3Н), 3,86-3,96 (м, 1Н), 4,04 (д, 1=12,23 Гц, 2Н), 5,10 (с, 1Н), 7,30-7,38 (м, 2Н), 7,55-7,64 (м, 2Н), 7,72 (т, 1=7,58 Гц, 1Н), 7,86 (т, 1=7,34 Гц, 1Н), 7,97-8,04 (м, 2Н), 8,08 (д, 1=6,36 Гц, 1Н), 8,17-8,27 (м, 2Н), 11,85 (уш. с, 1Н).
Соединение 99 получали по аналогичной методике, заменяя 1-(пиперазин-1-ил)изохинолин на стадии 1 7-фтор-1-(пиперазин-1-ил)изохинолином (выход=50%). ЖХ-МС (М-Н+)=401,3.
Соединение 99: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-ф>): δ 10,82 (уш. с, 1Н), 9,37 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,29 (д, 1=7,0 Гц, 1Н), 8,18 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,08 (дд, 1=5,8, 9,0 Гц, 1Н), 7,87 (дд, 1=2,5, 10,3 Гц, 1Н), 7,79-7,68 (м, 2Н), 7,58 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,39 (т, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,33 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 4,96 (уш. с, 1Н), 4,78 (уш. с, 1Н), 4,01 (д, 1=7,3 Гц, 1Н), 3,86 (д, 1=12,3 Гц, 2Н), 3,65 (д, 1=10,8 Гц, 2Н), 3,47-3,17 (м, 4Н), 3,02-2,81 (м, 2Н),
2,74-2,57 (м, 2Н).
Получение соединений 77 и 78.
Соединения 77 и 78 получали по методике, аналогичной методике получения соединений 55 и 54, но на стадии 1 использовали трет-бутил ^^-оксоциклопентил^арбамат, имеющий приведенную ниже формулу (й), вместо трет-бутил ^(оксоциклобутил^арбамата. Оба соединения имели ЖХ-МС (МН+)=441,4.
Соединение 77: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06): δ 11,51 (уш. с, 1Н), 8,43 (д, 1=7,3 Гц, 1Н), 8,20 (д, 1=8,5 Гц, 1Н), 8,12 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,99 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 7,83 (т, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,75-7,66 (м, 2Н), 7,657,51 (м, 2Н), 7,37-7,26 (м, 2Н), 5,25 (с, 1Н), 4,68 (уш. с, 1Н), 4,17-4,05 (м, 1Н), 3,97 (д, 1=11,5 Гц, 2Н), 3,813,65 (м, 3Н), 3,65-3,51 (м, 2н), 3,50-3,35 (м, 2Н), 2,72-2,60 (м, 1Н), 2,27-2,08 (м, 3Н), 2,06-1,91 (м, 2Н).
Соединение 78: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06): δ 11,27 (уш. с, 1Н), 8,19 (т, 1=7,8 Гц, 2Н), 8,11 (д, 1=6, 0 Гц, 1Н), 7,98 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,82 (т, 1=7,5 Гц, 1Н), 7,73-7,65 (м, 1Н), 7,64-7,58 (м, 1Н), 7,55 (д, 1=6, 0 Гц, 1Н), 7,47 (д, 1=6,3 Гц, 1Н), 7,39-7,25 (м, 2Н), 5,24 (с, 1Н), 4,84 (уш. с, 1Н), 4,25-4,13 (м, 1Н), 4,01-3,92 (м, 2Н), 3,91-3,81 (м, 1Н), 3,74-3,64 (м, 2Н), 3,58 (т, 1=12,5 Гц, 2Н), 3,49-3,32 (м, 2Н), 2,48-2,40 (м, 1Н), 2,37-2,14 (м, 3Н), 2,08-1,95 (м, 1Н), 1,94-1,81 (м, 1Н).
трет-бутил ^^-оксоциклопентил^арбамат формулы (й) получали следующим способом:
Стадия 1а.
но
ЫНВОС Стадия 1а
ИНВос (’) (ϋ)
Перйодинан Десса-Мартина (2,53 г) порциями при 0°С добавляли к раствору трет-бутил(3гидроксициклопентил)карбамата (1 г) формулы (1) в дихлорметане (2 6 мл). По окончании добавления реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при 0°С, после чего давали нагреться до комнатной
- 22 032384 температуры и перемешивали в течение 18 ч. Реакционную смесь гасили смесью 50/50 насыщенного водного раствора бикарбоната натрия и насыщенного водного раствора тиосульфата натрия. Водный слой 3 раза экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли, высушивали над сульфатом магния и концентрировали в вакууме. Остаток очищали на силикагеле колоночной флэш-хроматографией, элюируя градиентом сНех-сНех/этилацетат 1:1, и получая 980 мг интермедиата формулы (ΐΐ), т.е. трет-бутил(3-оксоциклопентил)карбамата (выход=99%). ЖХМС (М-Н+)=200,1.
Получение соединений 59, 93, 94, 102, 103, 104, 106.
Соединения 59, 93, 94, 102, 103, 104, 106 получали, как описано ниже, следуя схеме синтеза О
Методика синтеза, использованная для получения соединения 59.
Стадия 1.
Смесь 1-(пиперазин-1-ил) изохинолина, т.е. интермедиата О0 (150 мг), полученного, как описано для стадии 1 методики получения соединения 61, и 2-(оксиран-2-илметил)-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-1,3диона (136 мг) в СЧ ЬСА (3 мл) нагревали до 60°С при встряхивании в течение двух дней. Реакционную смесь упаривали при пониженном давлении, и остаток хроматографировали на силикагеле (8ΝΛΡ 25), элюируя градиентом 50-100% ЕЮАс в циклогексане, получая 203 мг 2-{2-гидрокси-3-[4-(изохинолин-1ил)пиперазин-1-ил]пропил}-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-1,3-диона, т.е. интермедиата О1, в виде белой клейкой пены (выход=73%). ЖХ-МС (М-Н+)=417,3.
Стадия 2.
Интермедиат О1 (202 мг) растворяли в растворе метиламина в этаноле (5 мл, 33%-ный раствор в ЕЮН) и нагревали до 50°С в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток растирали со смесью диэтиловый эфир/ЕЮАс (1:1, ~10 мл). Смесь фильтровали, промывая твердый остаток небольшим количеством той же смеси растворителей. Остаток помещали на картридж 8СХ (1 г) и элюировали МеОН и затем 2М раствором ΝΠ3 в МеОН. Основные фракции собирали, получая 125 мг 1-амино-3-[4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропан-2-ола, т.е. интермедиата О2, в виде бесцветной клейкой смолы (выход=90%). ЖХ-МС (М-Н+)=287,2.
Стадия 3.
Раствор интермедиата О2 (123 мг), триэтиламина (82 мкл) и 2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфоната (115 мг), полученного, как описано для стадии 1 методики получения соединения 27, в ацетонитриле (4 мл) нагревали до 60°С в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток распределяли между дихлорметаном (20 мл) и смесью насыщенный раствор соли/бикарбонат натрия (1:1, 20 мл). Смесь фильтровали через гидрофобную фритту (разделитель фаз), промывая дихлорметаном (10 мл). Органическую фазу упаривали при пониженном давлении, и остаток хроматографировали на силикагеле (8ΝΛΡ 25), элюируя градиентом 1-10% МеОН в дихлорметане и получая 113 мг рацемической смеси желаемого продукта, т.е. 4-({2-гидрокси-3-[4-(изохинолин-1ил)пиперазин-1-ил] пропил }амино)-2Н-хромен-2-она (соединения 59) в виде бесцветной пены. ЖХ-МС (М-Н+)=431,3.
Соединение 59 растворяли в дихлорметане (3 мл) и минимальном количестве МеОН и обрабатывали 1М раствором НС1 в диэтиловом эфире (0,66 мл), вызывая образование осадка.
Образовавшуюся смесь упаривали при пониженном давлении, и остаток растирали с диэтиловым эфиром. Твердое вещество высушивали, получая 117 мг гидрохлорида 4-({2-гидрокси-3-[4-(изохинолин1-ил)пиперазин-1-ил]пропил}амино)-2Н-хромен-2-она в виде не совсем белого твердого вещества (выход=60%). ЖХ-МС (М-Н+)=431,3.
Соединение 59: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО^): δ 10,23 (уш. с, 1Н), 8,28-8,04 (м, 3Н), 8,03-7,75 (м, 3Н), 7,74-7,45 (м, 3Н), 7,40-7,26 (м, 2Н), 6,06 (уш. с, 1Н), 5,36 (с, 1Н), 4,76 (уш. с, 1Н), 4,39 (уш. с, 1Н), 3,95 (уш. с, 2Н), 3,82-3,42 (м, 7Н), 3,40-3,17 (м, 3Н).
Соединения 93 и 94, т.е. К- и 8-стереоизомеры соединения 59, разделяли с использованием хиральной препаративной ВЭЖХ-МС. Оба изомера имели ЖХ-МС (М-Н+)=431,3.
Соединение 93: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ): δ 9,89 (уш. с, 1Н), 8,18-8,06 (м, 3Н), 7,94 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,85 (т, 1=5,9 Гц, 1Н), 7,76 (т, 1=7,8 Гц, 1Н), 7,69-7,57 (м, 2Н), 7,49 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,40-7,29 (м, 2Н), 6,01 (уш. с, 1Н), 5,38 (с, 1Н), 4,33 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 4,19-3,77 (м, 4Н), 3,70 (уш. с, 1Н), 3,61 (д, 1=10,3 Гц,
- 23 032384
1Н), 3,54-3,31 (м, 6Н), 3,30-3,19 (м, 1Н).
Соединение 94: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-С6): δ 9,89 (уш. с, 1Н), 8,19-8,06 (м, 3Н), 7,94 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 7,85 (т, 1=6,0 Гц, 1Н), 7,76 (т, 1=7,4 Гц, 1Н), 7,68-7,58 (м, 2Н), 7,49 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,39-7,29 (м, 2Н), 6,01 (уш. с, 1Н), 5,38 (с, 1Н), 4,43-4,24 (м, 1Н), 3,96-3,81 (м, 2Н), 3,64 (уш. с, 3Н), 3,52-3,16 (м, 8Н).
Соединения 102 и 103 получали по аналогичной методике, заменяя 1-(пиперазин-1-ил)изохинолин на стадии 1 7-фтор-1-(пиперазин-1-ил)изохинолином. Оба соединения имели ЖХ-МС (М-Н+)=449,1.
Соединение 102: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Щ): δ 10,23 (уш. с, 1Н), 8,19 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 8,14 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,07 (дд, 1=5,8, 9,0 Гц, 1Н), 7,94 (т, 1=5,5 Гц, 1Н), 7,85 (дд, 1=2,3, 10,3 Гц, 1Н), 7,72 (дт, 1=2,5, 8,8 Гц, 1Н), 7,65-7,52 (м, 2Н), 7,40-7,26 (м, 2Н), 5,36 (с, 1Н), 4,65-3,17 (м, 15Н).
Соединение 103: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-С6): δ 10,17 (уш. с, 1Н), 8,18 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 8,15 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,07 (дд, 1=5,6, 8,9 Гц, 1Н), 7,92 (т, 1=5,7 Гц, 1Н), 7,84 (д, 1=10,3 Гц, 1Н), 7,71 (дт, 1=2,3, 8,8 Гц, 1Н), 7,64-7,59 (м, 1Н), 7,56 (д, 1=6,0 Гц, 1Н), 7,39-7,30 (м, 2Н), 5,37 (с, 1Н), 4,51-3,93 (м, 3 Н), 3,82 (т, 1=13,0 Гц, 2Н), 3,71 (д, 1=10,8 Гц, 1Н), 3,61 (д, 1=10,8 Гц, 1Н), 3,55-3,19 (м, 8Н).
Соединения 104 и 106 получали по методике, аналогичной методике получения соединений 103 и 102, заменяя 2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфонат на стадии 3 4-хлор-3,4-дигидро-2Н-1,3бензоксазин-2-оном, полученным, как описано в методике получения соединения 64. Оба соединения имеют ЖХ-МС (М-Н+)=450,3.
Соединение 104: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-С6): δ 10,05 (уш. с, 1Н), 9,41 (уш. с, 1Н), 8,27 (уш. с, 1Н),
8,15 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,05 (дд, 1=5,6, 8,7 Гц, 1Н), 7,82 (д, 1=10,3 Гц, 1Н), 7,78-7,64 (м, 2Н), 7,55 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,43-7,25 (м, 2Н), 4,51-4,31 (м, 1Н), 4,07-3,31 (м, 13Н), 3,29-3,17 (м, 1Н).
Соединение 106: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО^): δ 9,94 (уш. с, 1Н), 9,38 (т, 1=5,4 Гц, 1Н), 8,25 (д, 1=7,8 Гц, 1Н), 8,15 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,06 (дд, 1=5,6, 8,9 Гц, 1Н), 7,82 (дд, 1=2,1, 10,2 Гц, 1Н), 7,77-7,72 (м, 1Н), 7,69 (дт, 1=2,8, 8,8 Гц, 1Н), 7,55 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,37 (т, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,33 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 4,454,35 (м, 1=7,0 Гц, 1Н), 3,87-3,67 (м, 5Н), 3,66-3,57 (м, 3Н), 3,55-3,31 (м, 5Н), 3,24 (т, 1=11,4 Гц, 1Н).
Получение соединения 90.
Соединение 90 получали, как описано ниже по тексту, следуя схеме синтеза I
Стадия 1.
1-Хлоризохинолин, т.е. интермедиат 10 (905 мг), растворяли в СΗ3СN (72 мл). Добавляли карбонат калия (796 мг) и затем дигидрохлорид метилового эфира пиперазин-2-карбоновой кислоты (1,8 г). Смесь перемешивали при 100°С в течение 7 дней. Добавляли ЭСМ, и промывали смесь водой. Органическую фазу отделяли, высушивали и упаривали в вакууме. Неочищенный продукт очищали на 81-колонке, элюируя градиентом сНех/этилацетат 3:7 этилацетат/МеОН 9:1 и получая 570 мг метил 4-(изохинолин-1ил)пиперазин-2-карбоксилата, т.е. интермедиата II (выход=38%). ЖХ-МС (М-Н+)=272,2.
Стадия 2.
Смесь интермедиата II (570 мг), трет-бутил ^(3-бромпропил)карбамата (475 мг), йодида калия (174 мг) и карбоната калия (579 мг) в ДМФА (20 мл) перемешивали при 60°С в течение ночи.
Реакционную смесь распределяли между ЕЮАс и наполовину разбавленным насыщенным раствором соли. Органическую фазу отделяли, промывали наполовину разбавленным насыщенным раствором соли и насыщенным раствором соли, высушивали над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на силикагеле (8NАР 50), элюируя градиентом 30-100% ЕЮАс в циклогексане и получая 470 мг метил 1-{3-[(трет-бутоксикарбонил)амино]пропил}-4-(изохинолин-1ил)пиперазин-2-карбоксилата, т.е. интермедиата П (выход=52%). ЖХ-МС (М-Н+)=429,4.
Стадия 3.
Интермедиат Е (200 мг) растворяли в ТГФ (2 мл), смесь охлаждали до 0°С и по каплям в атмосфере Ν2 добавляли 2М раствор боргидрида лития в ТГФ (0,259 мл). Смесь перемешивали при комнатной тем
- 24 032384 пературе в течение 7 ч, охлаждали до 0°С и гасили водой. Добавляли этилацетат, и органическую фазу промывали насыщенным раствором соли. Растворитель упаривали в вакууме, получая неочищенный продукт, который очищали на 81-колонке (ΝΉ), элюируя градиентом циклогексан-этилацетат и получая 102 мг трет-бутил К-{3-[2-(гидроксиметил)-4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропил} карбамата, т.е. интермедиата 13 (выход=54%). ЖХ-МС (М-Н+)=401,4.
Стадия 4.
Интермедиат 13 (100 мг) растворяли в ИСМ (5 мл), охлаждали до 0°С и по каплям добавляли ТЕА (1 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме, и неочищенный продукт очищали на 8СХ колонке, получая 70 мг 1-(3-аминопропил)-4-(изохинолин-1ил)пиперазин-2-карбоксамида, т.е. интермедиат 14 (выход=93%). ЖХ-МС (М-Н+)=301,3.
Стадия 5.
Раствор интермедиата 14 (70 мг), триэтиламина (0,726 мл) и 2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфоната (62 мг) в ацетонитриле (2 мл) нагревали до 70°С в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью 81-колонки (КН), элюируя градиентом циклогексан-этилацетат и получая 40 мг желаемого продукта, а именно 4-({3-[2-(гидроксиметил)-4(изохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропил}амино)-2Н-хромен-2-она (соединение 90). ЖХ-МС (МН+)=445,4.
Продукт растворяли в ИСМ, охлаждали до 0°С и добавляли 1М раствор НС1 в Е12О (3 экв.). Через 30 мин раствор упаривали в вакууме и растирали с Е12О, получая 28 мг гидрохлорида 4-({3-[2(гидроксиметил)-4-(изохинолин-1 -ил)пиперазин-1 -ил]пропил} амино)-2Н-хромен-2-она. ЖХ-МС (МН+)=445,4.
Соединение 90: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-^) δ 9,92 (уш. с, 1Н), 8,21-8,04 (м, 3Н), 7,95 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 7,87 (т, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,77 (т, 1=7,5 Гц, 1Н), 7,69-7,57 (м, 2Н), 7,51 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,37-7,27 (м, 2Н), 5,30 (с, 1Н), 4,12 (уш. с, 2Н), 3,98-3,83 (м, 3Н), 3,77 (д, 1=12,3 Гц, 1Н), 3,67 (уш. с, 1Н), 3,56 (уш. с, 3Н), 3,49-3,36 (м, 4Н), 3,31 (уш. с, 1Н), 2,22-2,00 (м, 2Н).
Получение соединения 105.
Соединение 105 получали, как описано ниже по тексту, следуя схеме синтеза Е
Стадия 1.
3-Хлорпероксибензойную кислоту (26 мг) при 0°С добавляли к раствору 4-({3-[4-(7фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил] пропил }амино)хромен-2-она Е0 (соединение 67) (60 мг) в сухом дихлорметане (3 мл). Смесь перемешивали при 0°С. Затем смесь разбавляли дихлорметаном и промывали 1М водным раствором КаОН (2х) и насыщенным раствором соли. Органическую фазу высушивали над Ка28О4, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток (59 мг) очищали флэш-хроматографией (картридж Бю1аде КР-811 10 г 8ΝΑΡ, элюент А: дихлорметан, элюент В: дихлорметан/МеОН 80/20, градиент А/В от 90/10 до 0/100 в 15θν, затем 5θν при 0/100, объем фракции 9 мл), получая 0,054 г желаемого продукта 4-({3- [4-(7-фторизохинолин-1-ил)-1 -оксидопиперазин-1-ил]пропил } амино)-2Н-хромен-2она (соединение 105). ЖХ-МС (м-Н+)=449,3.
Это соединение (29,5 мг) растворяли в дихлорметане и при комнатной температуре добавляли 1М раствор НС1 в диэтиловом эфире (0,14 мл, 2 экв). Полученную смесь концентрировали в атмосфере азота, и остаток растирали с диэтиловым эфиром (2х), получая гидрохлорид 4-({3-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)1-оксидопиперазин-1-ил]пропил}амино)-2Н-хромен-2-она в виде твердого вещества желтого цвета (0,028 г, выход=52%). ЖХ-МС (М-Н+)=449,3.
Соединение 105: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-^): δ 12,44 (уш. с, 1Н), 8,17 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,12 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 8,08 (дд, 1=5,8, 9,0 Гц, 1Н), 7,87 (д, 1=7,8 Гц, 2Н), 7,71 (дт, 1=2,5, 8,8 Гц, 1Н), 7,64-7,54 (м, 2Н), 7,39-7,27 (м, 2Н), 5,30 (с, 1Н), 4,18-3,73 (м, 8Н), 3,68-3,55 (м, 2Н), 3,45 (кв, 1=6,4 Гц, 2Н), 2,26 (квинтет, 1=7,0 Гц, 2Н).
Получение соединения 109.
Соединение 109 получали, как описано ниже по тексту, следуя схеме синтеза М
- 25 032384
МО М1 М2
Стадия 4
О
Стадия 1.
Колбу, в которой находились 1-хлоризохинолин, интермедиат М0 (2,2 г) и пинаколовый эфир ΝВос-1,2,3,6-тетрагидропиридин-4-бороновой кислоты (4 г), заполняли азотом. Добавляли ΌΜΕ (80 мл) и ЕЮН (24 мл), получая раствор. Добавляли раствор одноосновного фосфата калия (1,2 г) и трехосновного фосфата калия (1,9 мг) в воде (40 мл). Из смеси удаляли кислород путем нескольких циклов вакуумирование/заполнение Ν2, после чего добавляли ΡάΟ12(άΒρί) (548 мг). Затем полученную реакционную смесь перемешивали при 60°С в течение ночи. Реакционную смесь частично упаривали при пониженном давлении, удаляя летучие компоненты, после чего остаток распределяли между наполовину разбавленным насыщенным раствором бикарбоната натрия и ЕЮАс. Водную фазу дополнительно экстрагировали ЕЮАс. Объединенные органические фазы промывали насыщенным раствором соли, высушивали над №28О4 и упаривали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на силикагеле (8ΝΆΡ 100), элюируя градиентом 20-80% ЕЮЛс в циклогексане и получая 2,8 г трет-бутил 4-(изохинолин-1-ил)-3,6дигидро-2Н-пиридин-1-карбоксилата, т.е. интермедиата Μ1 (выход=67%). ЖХ-МС (М-Н+)=311,5.
Стадия 2.
К раствору интермедиата Μ1 (2,8 г) в ЕЮН (90 мл) при кт добавляли формиат аммония (3,9 г) и Р0(ОН)2/С (644 мг). Смесь нагревали до 80°С и оставляли перемешиваться при этой температуре в течение 1 ч, затем охлаждали до кт и фильтровали через слой целита, промывая ЕЮН. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на силикагеле (8ΝΆΡ 100), элюируя градиентом 10-80% ЕЮЛс в циклогексане и получая 1,66 г трет-бутил 4-(изохинолин-1-ил)пиперидин-1карбоксилата, т.е. интермедиата М2 (выход=59%). ЖХ-МС (М-Н+)=313,3.
Стадия 3.
К раствору интермедиата М2 (658 мг) в дихлорметане (6 мл) при комнатной температуре добавляли ТРЛ (2 мл), и полученную смесь перемешивали в течение 20 мин. Остаток упаривали при пониженном давлении, растворяли в метаноле и помещали на предварительно подготовленный картридж 8СХ. Картридж 8СХ элюировали МеОН и затем 2М раствором аммиака в метаноле. Основные фракции упаривали при пониженном давлении, получая 1-(пиперидин-4-ил)изохинолин, т.е. интермедиат Μ3 (447 мг, выход количественный). ЖХ-МС (М-Н+)=213,2.
Стадия 4.
Смесь интермедиата Μ3 (447 мг), трет-бутил №(3-бромпропил)карбамата (476 мг), йодида калия (174 мг) и карбоната калия (580 мг) в ДМФА (10 мл) перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Реакционную смесь распределяли между ЕЮЛс и наполовину разбавленным насыщенным раствором соли. Органическую фазу отделяли, затем промывали наполовину разбавленным насыщенным раствором соли и насыщенным раствором соли, высушивали над сульфатом натрия и упаривали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на силикагеле (8ΝΆΡ 25), элюируя градиентом 30100% А в ЕЮЛс, где А представляет собой смесь ΜеОН/ЕЮΑс (20:80), и получая 665 мг трет-бутил {3[4-(изохинолин-1-ил)пиперидин-1-ил]пропил}карбамата, т.е. интермедиата М4 (выход=85%). ЖХ-МС (М-Н+)=370,4.
Стадия 5.
Интермедиат М4 (665 мг) растворяли в ^СΜ (100 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли ТРА (18 мл), и реакционную смесь перемешивали при кт в течение ночи. Раствор концентрировали в вакууме, и остаток помещали на 5 г картридж 8СХ и элюировали МеОН/Ν^ 1М в МеОН. Фракции в МеОН повторно помещали на 5 г картридж 8СХ и элюировали ΜеОН/NН3 1Μ в МеОН. Фракции в ΝΙ13 объединяли, получая 3-[4-(изохинолин-1-ил)пиперидин-1-ил]пропан-1-амин, т.е. интермедиат М5 (410 мг), в виде светло-желтого масла (выход=85%). ЖХ-МС (М-Н+)=270,4.
Стадия 6.
Раствор интермедиата М5 (167 мг), ТЕА (130 мкл) и 4-хлор-2Н-хромен-2-она (100 мг) в ^^Ν (5 мл) перемешивали при кт в течение 2 ч. Раствор нагревали до 40°С, перемешивали в течение 1,5 ч, затем охлаждали до кт и перемешивали в течение ночи. На следующий день раствор нагревали до 60°С и перемешивали в течение 2 ч, после чего затем реакцию прекращали. Реакционный раствор концентрировали,
- 26 032384 и остаток растворяли в ЕЮАс, промывали КаНСО3 и насыщенным раствором соли, высушивали над Ка28О4 и концентрировали, получая неочищенный продукт (237 мг) в виде желтой пены. Этот неочищенный продукт очищали с использованием 25 г 81 картриджа, элюируя смесью ИСМ/МеОН (от 10/0 до 9/1) и получая желаемый продукт, а именно 4-({3-[4-(изохинолин-1-ил)пиперидин-1-ил]пропил}амино)2Н-хромен-2-он (соединение 109) в количестве 110 мг в виде белой пены. ЖХ-МС (М-Н+)=414,4.
мг соединения 109 растворяли в ИСМ, охлаждали до 0°С и затем добавляли 1М НС1 в Е12О (0,6 ммоль, 600 мкл). Через 15 мин раствор упаривали в атмосфере Ν2 и растирали с Е12О, получая гидрохлорид 4-({3-[4-(изохинолин-1-ил)пиперидин-1-ил]пропил}амино)-2Н-хромен-2-она в виде светло-желтого твердого вещества (123 мг, выход=44%). ЖХ-МС (М-Н+)=414,4.
1Н ЯМР (500 МГц, хлороформ-й): δ мд 1,65 (уш. с, 2Н), 1,92-2,15 (м, 4 Н), 2,31 (уш. с, 2Н), 2,45 (д, 1=12,23 Гц, 2Н), 2,76 (уш. с, 2Н), 3,27-3,50 (м, 4 Н), 3,62-3,78 (м, 1Н), 5,22 (с, 1Н), 7,32 (д, 1=8,80 Гц, 1Н), 7,46-7,56 (м, 2Н), 7,59 (д, 1=5,38 Гц, 1Н), 7,63 (т, 1=8,30 Гц, 1Н), 7,70 (т, 1=7,34 Гц, 1Н), 7,88 (д, 1=7,83 Гц, 1Н), 7,91-8,01 (м, 1Н), 8,22 (д, 1=7,83 Гц, 2Н), 8,54-8,72 (м, 2Н).
Получение соединений 125, 126 и 127.
Соединения 125, 126 и 127 получали, как описано ниже по тексту, следуя схеме синтеза N
Методика синтеза соединения 125.
Стадия 1.
Пирролидин (22 мл) добавляли к раствору тетрагидро-4Н-пиран-4-она, т.е. интермедиата N0 (10 г) в толуоле (120 мл). Смесь нагревали до кипения с обратным холодильником и насадкой Дина-Старка (температура бани 120-130°С). Через 1 ч 30 мин реакция завершалась, и наблюдалось образование стехиометрического количества воды. Затем смесь концентрировали в вакууме, получая интермедиат N1, т.е. 1(3,6-дигидро-2Н-пиран-4-ил)пирролидин, (17,5 г) в виде коричневого масла. Полученный продукт использовали для дальнейшего синтеза без дополнительной очистки.
Стадия 2.
К раствору интермедиата N1 (9,16 г) в 1,4-диоксане (60 мл) при 0°С добавляли уксусный ангидрид (12,4 мл), и полученную смесь оставляли перемешиваться при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи. Добавляли воду (15 мл), полученную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 1 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и концентрировали в вакууме. Добавляли воду (60 мл), и водную фазу дважды экстрагировали ЕЮАс (60 мл). Объединенные органические экстракты промывали 5% мас./мас. водным раствором НС1 (60 мл), высушивали над №28О4 и концентрировали в вакууме, получая 7,6 г неочищенного продукта. Этот неочищенный продукт очищали флэшхроматографией (картридж Бю!а§е КР-811 340 г 8NАΡ, градиент циклогексан/этилацетат от 90/10 до 20/80 в объеме 10СУ, объем фракции 100 мл), получая 2-ацетилоксан-4-он, т.е. интермедиат N2 в виде бесцветного масла (1,34 г, выход=16%). ЖХ-МС (М-Н+)=143,0.
Стадия 3.
Интермедиат N2 (1,34 г) в ТГФ (47 мл) охлаждали до -78°С и по каплям добавляли Е1НМИ8 (28,2 мл). После перемешивания в течение 1 ч при той же температуре добавляли диметилкарбонат. Полученной смеси давали медленно нагреться до -10°С и перемешивали при этой температуре. Через 5 ч реакционную смесь гасили при 0°С 1М водным раствором НС1 до рН 6. Добавляли этилацетат, и отделяли органическую фазу. Водную фазу повторно экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали концентрированным раствором соли, высушивали над №28О4, фильтровали и упаривали в вакууме, получая 1,7 г неочищенного метил 3-оксо-3-(4-оксотетрагидро-2Н-пиран-3-ил)пропаноата, т.е. интермедиата N3, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС (М-Н+)=183,1.
- 27 032384
Стадия 4.
Интермедиат N3 (1,7 г) растворяли в толуоле. Добавляли ΌΒϋ (1,4 мл), и смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и гасили 1М водным раствором НС1. Добавляли этилацетат, и отделяли органическую фазу. Водную фазу еще раз экстрагировали этилацетатом. Объединенные органические фазы промывали насыщенным раствором соли, высушивали над Να28Ο4, фильтровали и упаривали в вакууме, получая 1,2 г неочищенного вещества.
Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией (картридж Вю1а§е ΚΡ-811 50 г 8ΝΑΡ, элюент А: дихлорметан, элюент В: дихлорметан/МеОН 9/1, градиент А/В от 70/30 до 0/100 в 10СУ, объем фракции 9 мл), получая 4-гидрокси-2,5,7,8-тетрагидропирано[3,2-с]пиран-2-он, т.е. интермедиат Ν4, в виде желтой пены (553 мг, выход=35%). ЖХ-МС (М-Н+)=169,0.
Стадия 5.
Раствор трифторметансульфонового ангидрида (0,664 мл) в дихлорметане (5 мл) по каплям при перемешивании и при -10°С добавляли к раствору интермедиата Ν4 (553 мг) и триэтиламина (0,915 мл) в дихлорметане (10 мл). Реакционную смесь перемешивали при -10°С в течение 1 ч, затем давали нагреться до 0°С и разбавляли смесью циклогексан/диэтиловый эфир (3:1, 60 мл). Смесь фильтровали через слой силикагеля, промывая дополнительной порцией смеси циклогексан/диэтиловый эфир (3:1). Растворители, содержащие желаемый продукт, упаривали при пониженном давлении, получая 425 мг трифторметансульфоната 2-оксо-2,5,7,8-тетрагидропирано[3,2-с]пиран-4-ила, т.е. интермедиата Ν5 в виде желтого масла (выход=43%). ЖХ-МС (М-Н+)=301,1.
Стадия 6.
Раствор 3-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропан-1-амина (интермедиата С4 в методике синтеза соединения 67) (164 мг), триэтиламина (0,145 мл) и интермедиата Ν5 (150 мг) в ацетонитриле (4 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли ИСМ, и органическую фазу промывали насыщенным раствором соли. Растворитель удаляли в вакууме, получая 130 мг неочищенного продукта. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали на 81колонке, элюируя градиентом этилацетат-этилацетат/метанол 8:2 и затем градиентом ИСМИСМ/метанол 9:1, получая 58 мг желаемого продукта, а именно 4-({3-[4-(7-фторизохинолин-1ил)пиперазин-1-ил]пропил}амино)-7,8-дигидро-2Н,5Н-пирано[4,3-Ь]пиран-2-она (соединение 125) (выход=25%). ЖХ-МС (М-Н+)=439,3.
Соединение 125: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ): δ 10,07 (уш. с, 1Н), 8,17 (д, 1=5,5 Гц, 1Н), 8,06 (дд, 1=5,8, 9,0 Гц, 1Н), 7,84 (дд, 1=2,4, 10,4 Гц, 1Н), 7,70 (дт, 1=2,5, 8,8 Гц, 1Н), 7,56 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 6,75 (т, 1=5,4 Гц, 1Н), 4,99 (с, 1Н), 4,35 (с, 2Н), 3,91-3,75 (м, 5Н), 3,46-3,28 (м, 5Н), 3,27-3,14 (м, 5Н), 2,07-1,92 (м, 2Н).
Полученный продукт растворяли в ИСМ, охлаждали до 0°С и добавляли 2н. раствор НС1 в диэтиловом эфире (3 экв.). Через 10 мин растворитель выпаривали в вакууме, и твердый остаток растирали с диэтиловым эфиром, получая 20 мг гидрохлорида 4-({3-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1ил]пропил}амино)-7,8-дигидро-2Н,5Н-пирано[4,3-Ь]пиран-2-она (выход=7,5%). ЖХ-МС (М-Н+)=439,3.
Соединения 126 и 127 получали по аналогичной методике, заменяя тетрагидро-4Н-пиран-4-он (Ν0) на стадии 1 следующими соединениями соответственно:
Соединение Интермедиат ΝΟ ЖХ-МС
126 Тетрагидро-4Нтиопиран-4-он ЖХ-МС (М-Н+) =455,3
127 Тетрагидро-4Н- тиопиран-4-он 1,1-диоксид ЖХ-МС (М-Н+) =487,3
Соединение 126: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-бб): δ 10,30 (уш. с, 1Н), 8,16 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,07 (дд, 1=5,9, 9,2 Гц, 1Н), 7,90-7,78 (м, 1Н), 7,71 (т, 1=8,8 Гц, 1Н), 7,56 (д, 1=5,5 Гц, 1Н), 6,97-6,84 (м, 1Н), 5,00 (с, 1Н), 3,93 (уш. с, 1Н), 3,81 (д, 1=10,0 Гц, 2Н), 3,68-3,52 (м, 2Н), 3,48-3,31 (м, 6Н), 3,26 (д, 1=6,0 Гц, 4Н), 2,85 (т, 1=5,5 Гц, 2Н), 2,74-2,61 (м, 2Н), 2,12-1,90 (м, 2Н).
Соединение 127: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-άβ): δ 10,49 (уш. с, 1Н), 8,16 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,07 (дд, 4=5,6, 8,9 Гц, 1Н), 7,85 (дд, 4=2,1, 10,2 Гц, 1Н), 7,71 (дт, 4=2,5, 8,8 Гц, 1Н), 7,57 (д, 4=5,8 Гц, 1Н), 6,92 (т, 4=5,4 Гц, 1Н), 5,06 (с, 1Н), 4,16 (уш. с, 1Н), 4,07 (с, 2Н), 3,82 (д, 4=9,3 Гц, 2Н), 3,60 (д, 4=5,8 Гц, 2Н), 3,51 (т, 4=6,4 Гц, 2Н), 3,46-3,32 (м, 4Н), 3,24 (кв, 4=6,4 Гц, 4Н), 3,02 (т, 4=6,1 Гц, 2Н), 2,02 (квинтет, 4=7,0 Гц, 2Н).
Получение соединения 131.
Соединение 131 получали, как описано ниже по тексту, следуя схеме синтеза О
- 28 032384
Стадия 1.
Смесь 1,4-диокса-8-азаспиро[4.5]декана, т.е. интермедиата Оа (723 мг), 7-фтор-1-йодизохинолина, т.е. интермедиата ОЪ (1,15 г), и карбоната калия (872 мг) в ДМСО (13 мл) перемешивали в течение ночи при 110°С. Смесь разбавляли Е1ОАс. Органическую фазу промывали раствором бикарбоната натрия и насыщенным раствором соли. Органическую фазу высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении, получая 1,3 г 1-(1,4-диокса-8-азаспиро[4,5]дец-8-ил)-7фторизохинолина, т.е. интермедиата О1, в виде желтого масла (выход=92%). ЖХ-МС (М-Н+)=289,1.
Стадия 2.
К раствору 1-(1,4-диокса-8-азаспиро[4,5]дец-8-ил)-7-фторизохинолина, т.е. интермедиата О1 (1,1 г), в ТГФ (3 мл) при кт добавляли 2н НС1 (5 мл) и оставляли перемешиваться в течение ночи. Затем полученный красный раствор нагревали до 60°С в течение 8 ч и выдерживали в течение ночи при кт. Реакционную смесь подщелачивали 10%-ным раствором №О11 и экстрагировали Е1ОАс. Органическую фазу промывали насыщенным раствором соли, высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на силикагеле, элюируя градиентом СНС13СНС13/Ме0Н (99:1), получая 1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-он, т.е. интермедиат О2 (выход=78%). ЖХ-МС (М-Н+)=245,1.
Стадия 3.
трет-бутил {2-[(6-фтор-2-оксо-2Н-хромен-4-ил)амино]этил}карбамат, т.е. интермедиат О3, получали, как описано для стадии 6 методики получения соединения 51, используя трет-бутил (2аминоэтил)карбамат и 6-фтор-2-оксо-2Н-хромен-4-ила трифторметилсульфонат в качестве исходных реагентов (выход=50%). ЖХ-МС (М-Н+)=323,1.
Стадия 4.
4-[(2-Аминоэтил)амино]-6-фтор-2Н-хромен-2-он, т.е. интермедиат О4 получали, как описано для стадии 4 методики получения соединения 51, используя в качестве реагента трет-бутил {2-[(6-фтор-2оксо-2Н-хромен-4-ил)амино]этил}карбамат (выход=90%). ЖХ-МС (М-Н+)=223,1.
Стадия 5.
К суспензии 4-[(2-аминоэтил)амино]-6-фтор-2Н-хромен-2-она, т.е. интермедиата О4 (300 мг), в СНС13 (35 мл) при кт добавляли раствор 1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-она, т.е. интермедиата О2 (213 мг), в СНС13 (15 мл). К смеси добавляли две капли уксусной кислоты и через 10 мин триацетоксиборгидрид натрия (210 мг). Полученную смесь оставляли перемешиваться на два дня при кт. Суспензию разбавляли ГСМ и промывали раствором бикарбоната натрия. Фазы разделяли, и органическую фазу промывали насыщенным раствором соли, высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и упаривали при пониженном давлении. Остаток хроматографировали на силикагеле, элюируя градиентом СНС13СНС13/МеОН (9:1) и получая 6-фтор-4-[(2-{[1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4ил]амино}этил)амино]-2Н-хромен-2-он (соединение 131) (35 мг, выход=10%). ЖХ-МС (М-Н+)=451,19.
1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-б6): δ 8,09 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,04-7,94 (м, 2Н), 7,70-7,54 (м, 3Н), 7,48 (ддд, 1=3,0, 8,0, 9,0 Гц, 1Н), 7,41 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,37 (дд, 1=4,9, 9,1 Гц, 1Н), 5,27 (с, 1Н), 3,66 (тд, 1=3,0, 13,1 Гц, 2Н), 3,42-3,22 (м, 2Н), 3,03-2,83 (м, 4 Н), 2,79-2,66 (м, 1Н), 2,00 (дд, 1=2,4, 12,6 Гц, 2Н), 1,59 (дкв, 1=3,4, 11,3 Гц, 2Н).
Получение соединения 134.
Соединение 134 получали, как описано ниже по тексту, следуя схеме синтеза Р
- 29 032384
Стадия 1.
4-Метил-2Н-хромен-2-он, т.е. интермедиат Р0 (300 мг), растворяли в сухом ТГФ (4 мл) в атмосфере Ν2 и охлаждали до -30°С. По каплям добавляли 1М раствор бис-(триметилсилил)амида лития (1,87 мл), и перемешивали полученный красный раствор 30 мин при -30°С. Температуру понижали до -78°С, и по каплям добавляли хлорпропионилхлорид (0,35 мл). Температуре давали повысится до комнатной. Через 2 ч реакционную смесь распределяли между ЕЮАс и Ν^Ο, и органическую фазу упаривали в вакууме. Остаток растирали в смеси пептан/Е12О, получая 4-(4-хлор-2-оксобутил)-2Н-хромен-2-он, т.е. интермедиат Р1 (200 мг), который использовали в следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 2.
4-(4-Хлор-2-оксобутил)-2Н-хромен-2-он, т.е. интермедиат Р1 (200 мг), и 7-фтор-1-(пиперазин-1ил)изохинолин, т.е. интермедиат Ра (184 мг), растворяли в сухом СΗзСN (10 мл). Добавляли К2СО3 (330 мг), и перемешивали смесь при 45°С в течение 1 ч. После охлаждения неорганические соли отделяли фильтрованием, и фильтрат упаривали в вакууме. Неочищенный продукт подвергали первичной очистке флэш-хроматографией (элюент сНех:ЕЮАс:МеОН=6:3:1), получая 4-{4-[4-(7-фторизохинолин-1ил)пиперазин-1-ил]-2-оксобутил}-2Н-хромен-2-он, т.е интермедиат Р2 (135 мг) в виде бледно-желтого порошка. ЖХ-МС (м-Н+)=446,4.
Стадия 3.
К раствору 4-{4-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]-2-оксобутил}-2Н-хромен-2-она, т.е интермедиата Р2 (50 мг), в МеОН (4 мл) добавляли №В114 (9 мг), и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение ночи. Летучие вещества выпаривали в вакууме, и неочищенный продукт очищали хроматографией на обращенной фазе на колонке С-18, используя в качестве элюента смесь 1ЬО/МеСХ+1% НСООН. Получали 4-{4-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]-2-гидроксибутил}2Н-хромен-2-он (соединение 134) (26 мг, выход=37%) в виде формиата. ЖХ-МС (М-Н+)=448,4.
ХН-ЯМР (500 МГц, ДМСО-С6): δ мд 1,67-1,81 (м, 2Н), 2,53-2,58 (м, 1Н), 2,59-2,82 (м, 6 Н), 3,09 (дд, 1=13,45, 3,18 Гц, 1Н), 3,30 (уш. с, 4 Н), 3,85-4,03 (м, 1Н), 6,38 (с, 1Н), 7,34-7,43 (м, 2Н), 7,45 (д, 1=5,87 Гц, 1Н), 7,59-7,67 (м, 2Н), 7,68-7,73 (м, 1Н), 7,95 (д, 1=7,83 Гц, 1Н), 8,01 (дд, 1=8,80, 5,87 Гц, 1Н), 8,12 (д, 1=5,38 Гц, 1Н), 8,15 (с, 1Н).
Получение соединения 143.
Соединение 143 получали как описано ниже по тексту, следуя схеме синтеза О
Стадия 1.
К суспензии 4-амино-3-нитро-2Н-хромен-2-она, т.е. интермедиата О0 (100 мг), в изопропиловом спирте (6 мл) добавляли порошок цинка (1,2 г) и 3М водный раствор НС1 (6,4 мл). Смесь перемешивали 4 0 мин при кт и затем выливали в насыщенный водный раствор Ш2СО3. Продукт дважды экстрагировали Е12О, высушивали над безводным №28О4, фильтровали и упаривали, получая 55 мг чистого 3,4-диамино2Н-хромен-2-она, т.е. интермедиата Р1, который использовали на дальнейших стадиях без дополнительной очистки. ЖХ-МС (М-Н+)=177,1.
Стадия 2.
7-Фтор-1-(пиперазин-1-ил)изохинолин, т.е. интермедиат Оа (400 мг), растворяли в сухом МеОН (20 мл), добавляли Ν,Ν-диизопропилэтиламин (0,82 мл) и затем метилакрилат (0,356 мл). Смесь перемешивали при 60-70°С в течение 1 ч. Растворители выпаривали при пониженном давлении, и продукт выделяли колоночной хроматографией (градиент 20-80% этилацетата в циклогексане), получая метил 3-[4-(7фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропаноат, т.е. интермедиат 02 (410 мг, выход=75%). ЖХ-МС (МН+)=318,3.
- 30 032384
Стадия 3.
Получали раствор метил 3-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропаноата, т.е. интермедиата 02 (300 мг), в смеси ТГФ/вода (1:1) и добавляли ЫОН (68 мг). Смесь перемешивали при кт в течение 2 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, полученный остаток очищали с помощью картриджа 8СХ (элюируя желаемый продукт 3 раствором ТЕА в МеОН) и получая 3-[4-(7фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил] пропановую кислоту, т.е. интермедиат 03, в виде соли с триэтиламином (330 мг, выход=65%). ЖХ-МС (М-Н+)=304,2.
Стадия 4.
3,4-Диамино-2Н-хромен-2-он, т.е. интермедиат 01 (50 мг), и 3-[4-(7-фторизохинолин-1ил)пиперазин-1-ил] пропановую кислоту, т.е. интермедиат 03, в форме соли с триэтиламином (50 мг) суспендировали в полифосфорной кислоте (1,5 мл), и смесь нагревали до 140°С в течение 4 ч. Реакционную смесь выливали в насыщенный водный раствор Ха2СО3, и дважды экстрагировали продукт ЕЮАс. Органическую фазу очищали флэш-хроматографией, используя смесь сНех/ЕЮАс/МеОН (6:3:1) в качестве элюента. 30 мг выделенного соединения растворяли в ИСМ (1 мл) и обрабатывали избытком 1М НС1 в Е12О (1 мл). Полученную мутную смесь концентрировали и высушивали в печи (50°С) в течение 1 ч, получая 2-{2-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]этил}хромено[3,4-б]имидазол-4(1Н)он (соединение 143) в виде гидрохлорида. ЖХ-МС (М-Н+)=444,4.
Ή ЯМР (500 МГц, метанол-04): δ мд 3,63 (т, 1=6, 85 Гц, 2Н), 3,92 (уш. с, 4Н), 3,93-3,98 (м, 2Н), 4,20 (уш. с, 4Н), 7,45 (т, 1=7,34 Гц, 1Н), 7,50 (д, 1=7,83 Гц, 1Н), 7,56-7,63 (м, 1Н), 7,82 (д, 1=6,36 Гц, 1Н), 7,897,95 (м, 1Н), 7,97-8,03 (м, 2Н), 8,08 (д, 1=9,29 Гц, 1Н), 8,23 (дд, 1=9,29, 5,38 Гц, 1Н).
Получение соединения 144.
Соединение 144 получали, как описано ниже по тексту.
Стадия 1. Синтез трет-бутил 4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-карбоксилата
Е
Карбонат калия (2,9 г, 21 ммоль) при перемешивании и при комнатной температуре добавляли к раствору 1-хлор-7-фторизохинолина (2,6 г, 14 ммоль) и трет-бутил пиперазин-1-карбоксилата (5,2 г, 28 ммоль) в ДМСО (20 мл). Полученную смесь нагревали до 120°С в течение ночи. Исследование с помощью ИРЬС показало, что реакция завершилась. Затем смеси давали остыть до комнатной температуры и распределяли ее между ЕЮАс (300 мл) и водой (300 мл). Органическую фазу отделяли, промывали 1М раствором лимонной кислоты (100 мл) и насыщенным раствором соли (70 мл) и высушивали над сульфатом натрия. Растворители выпаривали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали флэшхроматографией на силикагеле (8ИАР 100, используя градиент Су-Су/этилацетат 8:2) и получали третбутил 4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-карбоксилат (4,3 г, 13 ммоль, выход 93%). ЖХ-МС (МН+)=332,3.
Стадия 2. Синтез 7-фтор-1-(пиперазин-1-ил)изохинолина н
Е
ТРА [_
ЦСМ
ТГА (10 мл) добавляли к раствору трет-бутил 4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-карбоксилата (4,3 г, 13 ммоль) в дихлорметане (30 мл), и полученную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Исследование с помощью ИРЬС показало, что реакция завершилась. Летучие компоненты выпаривали при пониженном давлении, остаток дважды растворяли в дихлорметане (20 мл) и упаривали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в МеОН и помещали в предварительно подготовленный картридж 8СХ (50 г). Картридж 8СХ элюировали МеОН и затем 2М раствором аммиака в метаноле. Наконец, основную фракцию упаривали при пониженном давлении, получая 3,1 г (выход количественный) 7-фтор-1-(пиперазин-1-ил)изохинолина в виде желтой клейкой смолы. ЖХ-МС (М-Н+)=232,2.
- 31 032384
4-Метил-2Н-1-бензопиран-2-он (200 мг, 1,25 ммоль) растворяли в сухом ТГФ (4 мл) в атмосфере Ν2 и охлаждали до -30°С, по каплям добавляли Ь1НМВ8 (1М раствор в ТГФ, 1,25 мл, 1,25 ммоль), и образовавшийся красный раствор перемешивали 30 мин при -30°С. Затем температуру понижали до -78°С, и по каплям добавляли хлорпропионилхлорид (0,24 мл, 2,5 ммоль). Реакционной смеси давали нагреться до комнатной температуры, затем распределяли между ЕЮАс и раствором ИНдСЕ Органическую фазу упаривали в вакууме, и оставшийся неочищенный продукт обрабатывали смесью пентан/Е12О, получая 270 мг (1,1 ммоль, выход 88%) 4-(4-хлор-2-оксобутил)-2Н-1-бензопиран-2-она. ЖХ-МС (М-Н+)=251,2.
Стадия 4. Синтез 4-{4-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]-2-оксобутил}-2Н-1-бензопиран2-она
4-(4-Хлор-2-оксобутил)-2Н-1-бензопиран-2-он (270 мг, 1,1 ммоль) и 7-фтор-1-(пиперазин-1ил) изохинолин (244 мг, 1,1 ммоль) растворяли в сухом МеС\ (10 мл). Добавляли К2СО3 (434 мг, 2,4 ммоль), и смесь перемешивали при 45°С в течение 1 ч. После охлаждения неорганические соли отделяли фильтрованием, и фильтрат упаривали в вакууме. Полученный продукт очищали флэш-хроматографией (Су:ЕЮАс:МеОН 6:3:1), выделяя 188 мг (0,42 ммоль, выход 38%) 4-{4-[4-(7-фторизохинолин-1ил)пиперазин-1-ил]-2-оксобутил}-2Н-1-бензопиран-2-она в виде бледно-желтого порошка. ЖХ-МС (МН+)=446,4.
Стадия 5. Синтез 4-{4-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]-2-гидроксибутил}-2Н-1бензопиран-2-она (соединение 144)
4-{4-[4-(7-Фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]-2-оксобутил}-2Н-1-бензопиран-2-он (80 мг, 0,18 ммоль) растворяли в сухом ТГФ (0,5 мл). Добавляли 2М Ν13 в МеОН (0,9 мл, 1,8 ммоль) и затем Τΐ(ΐРгО)4 (212 мкл, 0,72 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 50°С в закрытом сосуде в течение 3 ч и затем оставляли остывать до комнатной температуры на ночь. Летучие вещества выпаривали в вакууме, остаток растворяли в ТГФ/МеОН и охлаждали на ледяной бане. Быстро добавляли ШВ114 (127 мг). Через 10 мин реакционную смесь гасили 3 НС1 в диоксане до рН 4, растворитель выпаривали в вакууме, и неочищенный продукт очищали ВЭЖХ в основной среде, получая 25 мг (выход=31%) 4-{4-[4-(7фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1 -ил]-2-гидроксибутил}-2Н-1-бензопиран-2-она. ЖХ-МС (М-Н+)=447, 2.
*Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-4,.): δ мд 1,67-1,88 (м, 2Н) 2,50 (дт, 1=3,70, 1,79 Гц, 7Н) 3,09-3,95 (м, 6Н) 6,44 (с, 1Н) 7,35-7,44 (м, 2Н) 7,46 (д, 1=5,77 Гц, 1Н) 7,61-7,76 (м, 3Н) 7,97-8,04 (м, 2Н) 8,13 (д, 1=5,77 Гц, 1Н).
Получение соединения 145.
Соединение 145 получали, как описано ниже по тексту.
Стадия 1. Синтез трет-бутил [1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-ил]карбамата
Р
Интермедиат трет-бутил[1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-ил]карбамат получали по методике, описанной для синтеза трет-бутил 4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-карбоксилата (см. соединение 144), используя трет-бутил пиперидин-4-илкарбамат. Выход=71%. ЖХ-МС (М-Н+)=346,5.
Стадия 2. Синтез 1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-амина
- 32 032384
Интермедиат 1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-амин получали по методике, описанной для синтеза 7-фтор-1-(пиперазин-1-ил)изохинолина (см. соединение 144), используя трет-бутил [1-(7фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-ил] карбамат (выход количественный). ЖХ-МС (М-Н+)=246,3.
Стадия 3. Синтез этил 4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбоксилата
4-Хлор-3-формилкумарин (0,5 г, 2,4 ммоль) и гидрохлорид этилглицината (353 мг, 2,5 ммоль) суспендировали в абсолютном этаноле. Смесь охлаждали до 0°С и затем добавляли ТЕА (1,1 мл, 7,2 ммоль). Смесь перемешивали 2 ч при 0°С и затем нагревали до 80°С в течение 12 ч. Полученную смесь помещали на картридж С-18 и элюировали Н2О/ΜеСN (+0,1% НСООН) от 100/0 до 0/100, выделяя 400 мг этил 4оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбоксилата (400 мг, 1,5 ммоль, выход 64%). ЖХ-МС (М-Н+)=258,2.
Стадия 4. Синтез 2-(гидроксиметил)[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-4(1Н)-она
Этил 4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбоксилат (170 мг, 0,66 ммоль) растворяли в сухом ТГФ (6 мл). По каплям при 0°С добавляли ЫА1Н4 в ТГФ (1,33 мл, 1,33 ммоль). Раствор перемешивали 4 ч при 0°С, затем гасили добавлением №28О4-10Н2О. Неорганические соли отделяли фильтрованием, и растворители выпаривали. Неочищенный остаток очищали флэш-хроматографией (Су:Е1ОАс:МеОН 6:3:1), получая 2-(гидроксиметил)[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-4(1Н)-он (80 мг, 0,37 ммоль, выход 56%). ЖХ-МС (М-Н+)=216,2.
Стадия 5. Синтез 4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбальдегида
2-(Гидроксиметил)[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-4(1Н)-он (80 мг, 0,37 ммоль) суспендировали в сухом ^СΜ (15 мл) и обрабатывали перйодинаном Десса-Мартина (100 мг, 0,44 ммоль). Реакционную смесь перемешивали 45 мин при комнатной температуре после чего суспензию распределяли между ^СΜ и смесью насыщенный водный раствор №НСО3/10% №282О3 1:1. Органическую фазу высушивали над №28О4, фильтровали и упаривали, получая 40 мг (0,19 ммоль, выход=51%) 4-оксо-1,4дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбальдегида, который использовали в следующей стадии без какой-либо очистки. ЖХ-МС (М-Н+)=214,2.
Стадия 6. Синтез 2-({[1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-ил]амино}метил)[1]бензопирано[4,3Ь]пиррол-4(1Н)-она (формиата, соединение 145)
К суспензии 4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбальдегида (40 мг, 0,19 ммоль) в сухом ΜеСN (40 мл) добавляли 1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-амин (60 мг, 0,24 ммоль) и затем 3 капли уксусной кислоты. Полученную мутную смесь перемешивали 1 ч при комнатной температуре,
- 33 032384 затем одной порцией добавляли КаВН(ОАс)3 (100 мг, 047 ммоль). Гетерогенную смесь перемешивали в течение ночи, после чего летучие вещества выпаривали в вакууме. Остаток помещали на колонку С-18 с обращенной фазой и элюировали Н2О/МеОН+1% НСООН (от 95/5 до 70/30), получая 32 мг (0,066 ммоль, выход 34%) 2-({[1 -(7-фторизохинолин-1 -ил)пиперидин-4-ил] амино } метил)[ 1] бензопирано [4,3 -Ь] пиррол4(1Н)-она в виде формиата. ЖХ-МС (М-Н+)=443,4.
1Н ЯМР (500 МГц, метанол-04): δ мд 1,99 (квд, 1=12,06, 3,42 Гц, 2Н), 2,31 (д, 1=10,76 Гц, 2Н), 3,06 (т, 1=12,23 Гц, 2Н), 3,31-3,35 (м, 2Н), 3,84 (д, 1=13,21 Гц, 2Н), 4,37 (с, 2Н), 6,93 (с, 1Н), 7,37-7,46 (м, 3Н), 7,48-7,58 (м, 2Н), 7,76 (дд, 1=10,03, 2,20 Гц, 1Н), 7,91-7,99 (м, 2Н), 8,07 (д, 1=5,87 Гц, 1Н).
Получение соединения 146.
Соединение 146 получали, как описано ниже по тексту.
Стадия 1. Синтез 3,4-диамино-2Н-1-бензопиран-2-она
4-Амино-3-нитро-2Н-1-бензопиран-2-он (500 мг, 2,4 ммоль) суспендировали в ΙΡΑ (30 мл). Добавляли порошок цинка (6 г, 92 ммоль) и затем 3 раствор НС1 (32 мл, 96 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 мин и затем выливали в насыщенный раствор Ка2СО3. Продукт дважды экстрагировали Е12О, органические фазы высушивали над Ка28О4, фильтровали и концентрировали досуха, получая 330 мг 3,4-диамино-2Н-1-бензопиран-2-она (330 мг, выход 78%), который использовали без дополнительной очистки. ЖХ-МС (М-Н+)=177,2.
Стадия 2. Синтез 2-(хлорметил)[1]бензопирано[3,4-б]имидазол-4(1Н)-она
К суспензии 3,4-диамино-2Н-1-бензопиран-2-она (120 мг, 0,68 ммоль) в полифосфорной кислоте (2,5 мл) добавляли хлоруксусную кислоту (96 мг, 1 ммоль). Суспензию нагревали до 140°С в течение 45 мин, после чего охлаждали, и полученную смесь распределяли между Н2О и Е12О. Органическую фазу высушивали над Ка28О4, фильтровали и концентрировали, получая 90 мг (0,38 ммоль, выход 56%) 2(хлорметил)[1]бензопирано[3,4-б]имидазол-4(1Н)-она. ЖХ-МС (М-Н+)=235,1.
Стадия 3. Синтез 2-({[1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-ил]амино}метил)[1]бензопирано[4,3б]имидазол-4(1Н)-она (соединение 146)
1-(7-Фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-амин (370 мг, 1,5 ммоль, см. соединение 145) растворяли в сухом ДМФА (2 мл) и охлаждали на ледяной бане. Порциями добавляли твердый 2(хлорметил)[1]бензопирано[3,4-б]имидазол-4(1Н)-он (90 мг, 0,38 ммоль), и перемешивали смесь в течение 10 мин. Неочищенную реакционную смесь помещали непосредственно на колонку С-18 для хроматографии на обращенной фазе и элюировали Н2О/МеСК+1% НСООН (от 100/0 до 85/15), выделяя 38 мг (0,09 ммоль, выход 23%) 2-({[1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-ил] амино} метил )[1]бензопирано[4,3-б]имидазол-4(1Н)-она. ЖХ-МС (М-Н+)=444,4.
1Н ЯМР (500 МГц, метанол-44): δ мд 1,84-1,97 (м, 2Н), 2,25 (д, 1=11,74 Гц, 2Н), 3,03 (т, 1=11,74 Гц, 2Н), 3,11-3,21 (м, 1Н), 3,80 (д, 1=12,72 Гц, 2Н), 4,34 (с, 2Н), 7,40 (д, 1=5,87 Гц, 1Н), 7,43 (т, 1=7,58 Гц, 1Н), 7,48 (д, 1=7,83 Гц, 1Н), 7,50-7,60 (м, 2Н), 7,75 (дд, 1=10,03, 2,20 Гц, 1Н), 7,92 (дд, 1=9,05, 5,62 Гц, 1Н), 8,03 (дд, 1=7,83, 1,47 Гц, 1Н), 8,05 (д, 1=5,87 Гц, 1Н), 8,24-8,29 (м, 1Н).
Получение соединения 147.
Соединение 147 получали, как описано ниже по тексту.
Стадия 1. Синтез 2-(3-бромпропил)[1]бензопирано[3,4-б]имидазол-4(1Н)-она
- 34 032384
Интермедиат 2-(3-бромпропил)[1]бензопирано[3,4-й]имидазол-4(1Н)-он получали по методике, описанной для синтеза 2-(хлорметил)[1]бензопирано[3,4-й]имидазол-4(1Н)-она (см. соединение 146), используя 4-бромбутановую кислоту. ЖХ-МС (М-Н+)=307,1.
Стадия 2. Синтез 2-{3-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропил}[1]бензопирано[3,4й]имидазол-4(1Н)-она (формиата, соединение 147)
К суспензии 2-(3-бромпропил)[1]бензопирано[3,4-й]имидазол-4(1Н)-она (160 мг, 0,7 ммоль) в сухом ДМФА (2 мл) порциями добавляли твердый 7-фтор-1-(пиперазин-1-ил)изохинолин (70 мг, 0,30 ммоль, см. соединение 144). Смесь перемешивали в течение 2 ч, затем добавляли 1М НС1 (8 мл). Водную фазу дважды промывали ИСМ, затем помещали на колонку С-18 и осуществляли хроматографию на обращенной фазе, элюируя Н2О/МеСЫ+1% НСООН (от 100/0 до 75/25), получая 39 мг (0,09 ммоль, выход 3 0%) 2- {3 -[4-(7-фторизохинолин-1 -ил)пиперазин-1 -ил] пропил }[1] бензопирано [3,4-ά] имидазол-4( 1 Н)-она в виде формиата. ЖХ-МС (М-Н+)=458,4.
1Н ЯМР (500 МГц, метанол-04) δ мд 2,29 (квинтет, 1=7,09 Гц, 2Н), 3,02-3,17 (м, 4 Н), 3,28 (с, 4 Н), 3,61 (уш. с, 4 Н), 7,36-7,50 (м, 3Н), 7,51-7,62 (м, 2Н), 7,79 (дд, 1=9,78, 2,45 Гц, 1Н), 7,88-8,01 (м, 2Н), 8,11 (д, 1=5,38 Гц, 1Н).
Получение соединения 148.
Соединение 148 получали, как описано ниже по тексту.
Стадия 1. Синтез трет-бутил 4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-карбоксилата
ЛЛВОС- пиперазин ί-ВиОК, Рс1(ОАс)2
ΒΙΝΑΡ толуол , 85 °С
Раствор 1-хлор-7-фторизохинолина (0,5 г, 2,76 ммоль) и Ν-Вос-пиперазина (1,54 г, 8,3 ммоль) в толуоле дегазировали в течение 10 мин. Затем при комнатной температуре добавляли трет-бутоксид калия (626 мг, 5,6 ммоль), БГЫАР (174 мг, 0,28 ммоль) и ацетат палладия (61 мг, 0,28 ммоль). Смесь перемешивали при 85°С в течение 4ч, следя за ходом реакции с помощью ЖХМС. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЕЮАс, промывали водой и насыщенным раствором соли и высушивали над сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (60-120 меш) (0-20% этилацетат в гексане), получая трет-бутил 4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-карбоксилат (310 мг, 34%) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета. ЖХ-МС т/ζ 331,2 (М+1).
1Н ЯМР (ДМСО άβ) : δ мд 1,44 (с, 9Н), 3,21-3,24 (м, 4Н), 3,60 (м, 4Н), 7,48-7,49 (м, 1Н), 7,64-7,69 (м, 1Н), 7,75-7,78 (м, 1Н), 7,97-8,04 (м, 1Н), 8,13-8,14 (м, 1Н).
Стадия 2. Синтез 7-фтор-1-(пиперазин-1-ил)изохинолина трифторацетата
К раствору трет-бутил 4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-карбоксилата (300 мг, 0,9 ммоль) в
- 35 032384
ЭСМ (5 мл) медленно при комнатной температуре добавляли ТЕА (5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч, затем концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток (коричневую жидкость) использовали без дополнительной обработки в следующей стадии (310 мг, количественный выход). ЖХ-МС т/ζ 231,2 (М+1).
'И ЯМР (ДМСО б6): δ мд 3,38 (м, 4Н), 3,46-3,47 (м, 4Н), 7,52 (д, 1=5,7 Гц, 1Н), 7,67-7,72 (м, 1Н), 7,83 (д, 1=9,9 Гц, 1Н), 8,03-8,07 (м, 1Н), 8,15 (д, 1=5,7 Гц, 1Н), 8,83 (уш. с, 1Н).
Стадия 3. Синтез 1-хлор-3-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропан-2-ола
Е
ТЕА Н
Раствор трифторацетата 7-фтор-1-(пиперазин-1-ил) изохинолина (200 мг, 0,87 ммоль), Э1РЕА (398 мг, 43 ммоль) и эпихлоргидрина (398 мг, 4,8 ммоль) в этаноле (5 мл) перемешивали в течение 5 ч при комнатной температуре. За ходом реакции следили с помощью ЖХМС. После окончания реакции смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растворяли в ЕЮАс (50 мл) и промывали водой и насыщенным раствором соли. Органический слой высушивали и концентрировали, получая 1-хлор-3-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропан-2-ол (220 мг, 79%) в виде клейкой жидкости, которую использовали в следующей стадии без дальнейшей очистки. ЖХ-МС т/ζ 324,2 (М+1).
Стадия 4. Синтез 1-азидо-3-(4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил)пропан-2-ола
К раствору 1-хлор-3-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил] пропан-2-ола (210 мг, 0,65 ммоль) в ДМФА (4 мл) добавляли азид натрия (65 мг, 1 ммоль). Суспензию перемешивали при 85°С в течение 5 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и распределяли между водой и ЕЮАс. Органический слой высушивали над сульфатом натрия и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали колоночной хроматографией на силикагеле (60-120 меш, 0-10% МеОН в ЭСМ), получая 1-азидо-3-(4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил)пропан-2-ол (160 мг, 74%) в виде смолы бледно-желтого цвета. ЖХ-МС т/ζ 331,2 (М+1).
ΊI ЯМР (ДМСО ά6): δ мд 2,49-2,52 (м, 2Н), 2,50-2,71 (м, 4Н), 2,86-2,87 (м, 2Н), 3,19-3,20 (м, 4Н), 3,88-3,89 (м, 1Н), 5,14 (уш. с, 1Н), 7,44 (д, 1=7,7 Гц, 1Н), 7,61-7,70 (м, 2Н), 7,98-8,03 (м, 1Н), 8,11 (д, 1=7,6 Гц, 1Н).
Стадия 5. Синтез 1-амино-3-(4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил)пропан-2-ола
К раствору 1-азидо-3-(4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил)пропан-2-ола (160 мг) в этаноле (5 мл) добавляли 10% Рй/С (10 мг). Смесь перемешивали в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение 3 ч. По окончании реакции смесь фильтровали через слой целита, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая 1-амино-3 -(4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1 -ил)пропан-2-ол (125 мг, 85%) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета. ЖХ-МС т/ζ 305,2 (М+1).
’Н ЯМР (СЭС13): δ мд 2,27-2,28 (м, 2Н), 2,45-2,57 (м, 2Н), 2,70-2,91 (м, 4Н), 3,40 (м, 4Н), 3,81 (м, 1Н), 7,25-7,45 (м, 2Н), 7,56-8,12 (м, 2Н), 8,42-8,44 (м, 1Н).
Стадия 6. Синтез метил 5-фтор-2-гидроксибензоата
- 36 032384
К раствору 5-фторсалициловой кислоты (25 г, 160 ммоль) в МеОН (250 мл) при 0°С и перемешивании медленно добавляли концентрированную серную кислоту (20 мл). Полученную реакционную смесь нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 4 8 ч, затем концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток подщелачивали до рН 8,0 насыщенным раствором ЫаНСО3. Затем смесь нейтрализовали 1,5н. раствором НС1 и экстрагировали Е!ОАс. Органический слой высушивали над безводным Ыа28О4 и концентрировали, получая метил 5-фтор-2-гидроксибензоат в виде светлокоричневой жидкости (22,8 г, 83%). ГХМС (Способ регистрации данных НР-1М8.М) 170,1 (М).
Л ЯМР (400 МГц, ДМСО-ДД: δ мд 10,29 (с, 1Н), 7,51-7,49 (м, 1Н), 7,42-7,41 (м, 1Н), 57,03-7,01 (м, 1Н), 3,89 (с, 3Н).
Стадия 7. Синтез 5-фтор-2-гидроксибензамида
Смесь метил 5-фтор-2-гидроксибензоата (22 г, 129 ммоль) и раствора аммиака в метаноле (250 мл) нагревали до 50°С в автоклаве в течение 10 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, полученный остаток подвергали совместной отгонке с толуолом и высушивали, получая 5фтор-2-гидроксибензамид в виде твердого вещества коричневого цвета (18,5 г, 92%). ЖХ-МС т/ζ 154,0 (М-Н).
*Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Д6): δ мд 12,74 (с, 1Н), 8,40 (с, 1Н), 8,03 (с, 1Н), 7,73-7,71 (м, 1Н), 7,317,29 (м, 1Н), 6,91-6,90 (м, 1Н).
Стадия 8. Синтез 6-фтор-2Н-1,3-бензоксазин-2,4(3Н)-диона
К раствору 5-фтор-2-гидроксибензамида (8,0 г, 51,6 ммоль) в сухом ТГФ (80 мл) при 0°С и перемешивании добавляли 1,1'-карбонилдиимидазол (10,9 г, 67,09 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 14 ч и затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток обрабатывали метанолом и промывали диэтиловым эфиром. Полученное твердое вещество белого цвета высушивали и использовали в следующей стадии без дополнительной очистки (5,1 г, 55%, твердое белое в-во). ЖХ-МС т/ζ 180,0 (М-Н).
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Д6): δ мд 12,19 (с, 1Н), 7,68-7,67 (м, 2Н), 7,50-7,48 (м, 1Н).
Стадия 9. Синтез 4-хлор-6-фтор-2Н-1,3-бензоксазин-2-она
К раствору 6-фтор-2Н-1,3-бензоксазин-2,4(3Н)-диона (0,5 г, 2,76 ммоль) в сухом 1,2-дихлорэтане (2,5 мл) при 0°С добавляли пентахлорид фосфора (0,69 г, 3,31 ммоль). Полученную смесь кипятили с обратным холодильником в течение 6 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. К полученному остатку добавляли ВСМ (15 мл), промывали водой (2 мл) и высушивали над безводным На28О4. Растворитель выпаривали при пониженном давлении, получая 4-хлор-6-фтор-2Н-1,3-бензоксазин-2-он в виде не совсем белого твердого вещества (0,46 г, 84%).
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Д6): δ мд 7,69-7,67 (м, 2Н), 7,50-7,49 (м, 1Н).
Стадия 10. Синтез 6-фтор-4-({3-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]-2-гидроксипропил}амино)-2Н-1,3-бензоксазин-2-она (соединение 148)
К суспензии 4-хлор-6-фтор-2Н-1,3-бензоксазин-2-она (235 мг, 1,2 ммоль) в ацетонитриле (5 мл) при 0°С добавляли В^ЕА (402 мг, 3,1 ммоль) и 1-амино-3-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1ил]пропан-2-ола (120 мг, 0,39 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 ч, после чего образовавшееся твердое вещество отделяли фильтрованием, промывали водой и высушивали. Неочищенный продукт очищали колоночной хроматографией на силикагеле, элюируя 0-20% МеОН в ВСМ и получая 6-фтор-4-({3-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]-2-гидроксипропил}амино)-2Н
- 37 032384
1,3-бензоксазин-2-он (90 мг, 74%) в виде не совсем белого твердого вещества. ЖХ-МС т/ζ: 468,2 (М+1).
’Н ЯМР (ДМСО ά6): δ мд 2,48-2,49 (м, 2Н), 2,71 (м, 2Н), 2,76 (м, 2Н), 3,26 (м, 4Н), 3,40-3,43 (м, 1Н), 3,70-3,75 (м, 1Н), 4,07 (д, 1=5,9 Гц, 1Н), 5,00 (д, 1=4,5 Гц, 1Н) 7,35-7,39 (м, 1Н), 7,43 (д, 1=5,6 Гц, 1Н), 7,59-7,70 (м, 3Н), 7,98 (дд, 1=8,6, 5,6 Гц, 1Н), 8,09-8,12 (м, 2Н), 9,11-9,14 (м, 1Н).
Получение соединения 149.
Соединение 149 получали, как описано ниже по тексту.
Стадия 1. Синтез 2-(цианометил)-5-фторбензонитрила
ДМСО , 95 °с
К раствору ΝαΠ (2,58 г, 60% в минеральном масле, 64,74 ммоль) в ДМСО (30 мл) медленно при перемешивании и при 0°С добавляли этилцианоацетат (7,3 г, 64,7 ммоль) и перемешивали при той же температуре в течение 20 мин. Добавляли 2,5-дифторбензонитрил (3 г, 21,5 ммоль) в ДМСО (10 мл). Смесь нагревали до 95°С в течение ночи, затем добавляли воду (20 мл), и нагревали раствор до 120°С в течение 12 ч. За завершением реакции следили с помощью ЖХ-МС. К реакционной смеси при 0°С добавляли 0,1 н. НС1 (30 мл), после перемешивания в течение 10 мин твердое вещество отделяли фильтрованием, промывали водой и петролейным эфиром. Полученный продукт очищали флэш-хроматографией (24% ЕЮАс в петролейном эфире), получая указанное в заглавии соединение (1,8 г, 53,0%) в виде не совсем белого твердого вещества. ЖХ-МС т/ζ: 159,2 (М-1).
’Н ЯМР (ДМСО ά6): δ мд 4,2 (с, 2Н), 7,64-7,73 (м, 2Н), 7,96 (дд, 1=8,5, 2,5 Гц, 1Н).
Стадия 2. Синтез 1-бром-7-фторизохинолин-3-амина
ΟΝ
НВг
АсОН р
1=
К раствору НВг в АсОН (14 мл, 33%) медленно при перемешивании и при 0°С добавляли 2(цианометил)-5-фторбензонитрил (1,4 г, 87,5 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем разбавляли водой (15 мл) и подщелачивали насыщенным раствором №:СО3. Раствор экстрагировали ЕЮАс, органический слой промывали насыщенным раствором соли и высушивали над сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, получая 1-бром-7-фторизохинолин3-амин в виде твердого вещества желтого цвета (1,5 г, 75%). ЖХ-МС т/ζ: 241,0 (М+1).
’Н ЯМР (ДМСО ά6): δ мд 6,30 (с, 2Н), 6,70 (с, 1Н), 7,48-7,54 (м, 2Н), 7,70 (дд, 1=9,1, 5,5 Гц, 1Н). Стадия 3. Синтез 1-бром-3,7-дифторизохинолина
НЕ ΝαΝΟ:
Руг
Е
К раствору 1-бром-7-фторизохинолин-3-амина (0,5 г, 20,7 ммоль) в пиридине (2 мл) медленно при 0°С и перемешивании добавляли НЕ-пиридин (2 мл) и затем нитрит натрия (0,171 г, 24 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре, затем медленно выливали в насыщенный раствор карбоната натрия, доводя рН до 8, и экстрагировали ЕЮАс. Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли и высушивали над сульфатом натрия. Растворитель удаляли при пониженном давлении, и полученный остаток очищали флэш-хроматографией (25% ЕЮАс в петролейном эфире), получая 1-бром-3,7-дифторизохинолин в виде твердого вещества желтого цвета (0,250 г, 50%). ЖХ-МС т/ζ: 244,0 (М+1).
’Н ЯМР (ДМСО Щ): δ мд 7,83 (с, 1Н), 7,86-7,94 (м, 2Н), 7,20 (дд, 1=9,1, 5,5 Гц, 1Н).
Стадия 4. Синтез трет-бутил 4-(3,7-дифторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-карбоксилата
Е
Л'-В ОС- пиперазин
ХапГйРйоз, Рс1(с1Ьа)2 р
Е
С82СО3 диоксан,80°С
Раствор 1-бром-3,7-дифторизохинолина (400 мг, 1,6 ммоль) и Ν-Вос-пиперазина (610 мг, 3,2 ммоль) в диоксане (10 мл) дегазировали в течение 10 мин. Затем при комнатной температуре добавляли С§2СО3 (1,04 г, 3,2 ммоль), ΧαπΐΕΡΕοδ (138 мг, 0,24 ммоль) и Ρά(άΙχι): (61 мг, 0,28 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение ночи, затем фильтровали через слой целита и промывали ЭСМ. Объединенные органические слои концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали колоночной хроматографией (25-20% этилацетат в гексане) на силикагеле (60-120 меш), получая трет-бутил 4-(3,7-дифторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-карбоксилат (200 мг, 35%) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета. Е8-МС т/ζ: 294,2 (-1Ви+1).
- 38 032384 1Н ЯМР (ДМСО б): δ мд 1,43 (с, 9Н), 2,27-2,49 (м, 4Н), 3,58-3,59 (м, 4Н), 7,41 (с, 1Н), 7,65-7,77 (м, 2Н), 7,97-8,02 (м, 1Н).
Стадия 5. Синтез 3,7-дифтор-1-(пиперазин-1-ил)изохинолина гидрохлорида
К раствору трет-бутил 4-(3,7-дифторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-карбоксилата (280 мг, 0,8 ммоль) в диоксане (1 мл) медленно при 0°С добавляли диоксан-НС1 (5 мл, 4,5М). После перемешивания в течение 2 ч при 0°С реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и полученную густую жидкость коричневого цвета (160 мг) использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЕБ-МС т/ζ: 250,2 (М+1).
’Н ЯМР (ДМСО б6): δ мд 3,32-3,38 (м, 4Н), 3,53-3,54 (м, 4Н), 7,24 (с, 1Н), 7,69-7,73 (м, 1Н), 7,86 (дд, 1=10,4, 2,6 Гц, 1Н), 8,03 (дд, 1=8,8, 5,6 Гц, 1Н), 9,09 (уш.с, 1Н).
Стадия 6. Синтез 1-хлор-3-[4-(3,7-дифторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропан-2-ола
Указанный в заглавии интермедиат получали по методике, описанной для синтеза 1-хлор-3-[4-(7фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропан-2-ола (см. соединение 148), используя 3,7-дифтор-1(пиперазин-1-ил)изохинолина гидрохлорид (выход 99%). ЕБ-МС т/ζ: 342,2 (М+1).
’Н ЯМР (ДМСО б6): δ мд 2,68-2,71 (м, 2Н), 2,80-2,83 (м, 2Н), 2,97-3,10 (м, 2Н), 3,55-3,77 (м, 6Н), 4,07-4,09 (м, 1Н), 6,82 (с, 1Н), 7,40 (тд, 1=8,4, 2,1 Гц, 1Н), 7,63 (дд, 1=9,7, 2,1 Гц, 1Н), 7,60-7,72 (м, 1Н).
Стадия 7. Синтез 1-азидо-3-[4-(3,7-дифторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропан-2-ола
Указанный в заглавии интермедиат получали по методике, описанной для 1-азидо-3-(4-(7фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил)пропан-2-ола (см. соединение 148), используя 1-хлор-3-[4-(3,7дифторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропан-2-ол (выход 89%). ЕБ-МС т/ζ: 349,2 (М+1).
’Н ЯМР (ДМСО б6): δ мд 2,64-2,69 (м, 2Н), 2,68-2,73 (м, 4Н), 3,22-3,25 (м, 2Н), 3,31-3,36 (м, 4Н), 3,82-3,89 (м, 1Н), 5,10 (д, 1=4,9 Гц, 1Н), 7,10 (с, 1Н), 7,65-7,90 (м, 1Н), 7,96-8,00 (м, 1Н).
Стадия 8. Синтез 1-амино-3-[4-(3,7-дифторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропан-2-ола
Указанный в заглавии интермедиат получали по методике, описанной для 1-амино-3-(4-(7фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил)пропан-2-ола (см. соединение 148), используя 1-азидо-3-[4-(3,7дифторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропан-2-ол (выход 99%). ЕБ-МС т/ζ: 323,2 (М+1).
’Н ЯМР (ДМСО б6): δ мд 1,90 (уш. с, 2Н), 2,33-2,48 (м, 4Н), 2,51-2,68 (м, 4Н), 3,17-3,33 (м, 4Н), 3,603,62 (м, 1Н), 4,50 (с, 1Н), 7,10 (с, 1Н), 7,66-7,70 (м, 2Н), 7,98 (дд, 1=8,8, 6,6 Гц, 1Н).
Стадия 9. Синтез 4-({3-[4-(3,7-дифторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]-2-гидроксипропил}амино)6-фтор-2Н-1,3-бензоксазин-2-она (соединение 149)
- 39 032384
Указанное в заглавии соединение получали по методике, описанной для соединения 148, используя 1-амино-3-[4-(3,7-дифторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропан-2-ол (выход 23%). 1+-Μί т/ζ: 486,2 (М+1).
1Н ЯМР (ДМСО Й6): δ мд 2,69-2,75 (м, 4Н), 2,71 (м, 2Н), 3,32-3,36 (м, 4Н), 3,71-3,72 (м, 1Н), 4,06 (с, 1Н), 4,01 (с, 1Н), 7,09 (с, 1Н) 7,38 (с, 1Н), 7,62-7,70 (м, 2Н), 7,97 (с, 1Н), 8,10 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 9,13 (с, 1Н).
Получение соединения 150.
Соединение 150 получали, как описано ниже по тексту.
Стадия 1. Синтез №Вос-2-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]этанамина
Указанное в заглавии соединение получали по методике, описанной для синтеза интермедиата С3 (соединение 51), используя 7-фтор-1-(пиперазин-1-ил)изохинолин и трет-бутил-(2-бромэтил)карбамат (выход 82%). ЖХ-МС (М-Н+)=375,2.
Стадия 2. Синтез трифторацетата 2-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]этан-1-амина
Указанный в заглавии интермедиат получали по методике, описанной для синтеза 7-фтор-1(пиперазин-1-ил)изохинолина (см. соединение 144), используя №Вос-2-[4-(7-фторизохинолин-1ил)пиперазин-1-ил]этанамин (выход 91%). ЖХ-МС (М-Н+)=275,2.
Стадия 3. Синтез №[(3,4-дигидро-2Н-пирано[2,3-с]пиридин-6ил) метил]-2-[4-(7-фторизохинолин-1ил)пиперазин-1-ил]этан-1-амина (соединение 150)
К раствору 3,4-дигидро-2Н-пирано[2,3-с]пиридин-6-карбальдегида (полученного, как описано в АО 2012012391, 218 мг, 1,33 ммоль) и 1)1 ΡΓΛ (0,25 мл) в ^СΜ (3 мл) добавляли трифторацетат 2-[4-(7фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]этан-1-амина (1,6 г, 5,8 ммоль) в ^СΜ (5 мл) и 2 капли АсОН. После перемешивания в течение 10 мин добавляли №ВН(ОАс)3 (446 мг, 2 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч, после чего добавляли ^СΜ (35 мл) и насыщенный раствор ΝαΙ 1СО3 (25 мл). Органическую фазу отделяли, промывали насыщенным раствором №С1, высушивали над №2^О4 и концентрировали. Остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель,
- 40 032384
ЭСМ/МеОН 9/1), получая №[(3,4-дигидро-2Н-пирано[2,3-с]пиридин-6-ил)метил]-2-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]этан-1-амин (139 мг, 0,33 ммоль, выход 25%). ЖХ-МС (М-Н+)=422,2.
1Н ЯМР (300 МГц, хлороформ-С): δ 8,13 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,09 (с, 1Н), 7,76 (дд, 1=5,6, 9,0 Гц, 1Н), 7,69 (дд, 1=2,6, 10,2 Гц, 1Н), 7,39 (дт, 1=2,6, 8,6 Гц, 1Н), 7,24 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,01 (с, 1Н), 4,21 (т, 1=5,1 Гц, 2Н), 3,87 (с, 2Н), 3,40 (т, 1=4,9 Гц, 4 Н), 2,84 (т, 1=6,2 Гц, 2Н), 2,80-2,64 (м, 8 Н), 2,55 (уш. с, 1Н), 2,081,95 (м, 2Н).
Получение соединения 152.
Соединение 152 получали, как описано ниже по тексту.
Стадия 1. Синтез [1]бензопирано[3,4-С]имидазол-4(1Н)-она
Интермедиат [1]бензопирано[3,4-С]имидазол-4(1Н)-он получали по методике, описанной для синтеза 2-(хлорметил)[1]бензопирано[3,4-С]имидазол-4(1Н)-она (см. соединение 146), используя муравьиную кислоту. Выход=67%. ЖХ-МС (М-Н+)=187,1.
Стадия 2. Синтез 1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-С]имидазол-4(1Н)-она
ιιν'^ν 8ЕМ-С1 ШТ 8ΕΜ^νΖ%ν
/=\ /=О ДМФА , 0°С
Раствор [1]бензопирано[3,4-С]имидазол-4(1Н)-она (274 мг, 1,5 ммоль) в сухом ДМФА (10 мл) охлаждали до 0°С. Добавляли №11 (60% дисперсия в минеральном масле, 117 мг, 2,9 ммоль), и смесь перемешивали 15 мин при 0°С. Добавляли 8ЕМ-С1 (294 мг, 1,8 ммоль), и смесь перемешивали еще 2 ч. Анализ иРЬС показал, что реакция завершилась, поэтому при 0°С добавляли воду и затем этилацетат. Органическую фазу отделяли и промывали насыщенным раствором соли, высушивали над №28О4 и упаривали в вакууме. Неочищенный продукт очищали на 81-колонке, элюируя градиентом Су-Су/этилацетат 1:1, получая 265 мг 1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-С]имидазол-4(1Н)-она в виде смеси региоизомеров. ЖХ-МС (М-Н+)=317,3.
Стадия 3. Синтез 2-бром-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-С]имидазол4(1Н)-она
1-{[2-(Триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-С]имидазол-4(1Н)-он (150 мг, 0,47 ммоль) растворяли в ЭСМ. Добавляли Ν-бромсукцинимид (88 мг, 0,5 ммоль) и катализатор АШ^ и смесь перемешивали при 45°С в течение 4 ч. Анализ ИРЬС показал, что реакция завершилась, поэтому добавляли воду, и органическую фазу отделяли и упаривали в вакууме. Остаток очищали на 81-колонке, элюируя градиентом Су-Су/этилацетат 85:15 и получая 104 мг (выход=56%) 2-бром-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-С]имидазол-4(1Н)-она в виде смеси региоизомеров. ЖХ-МС (МН+)=396,2.
Стадия 4. Синтез 2-(1-этоксиэтенил)-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4С]имидазол-4(1 Н)-она
2-Бром-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-С]имидазол-4(1Н)-он (104 мг, 0,26 ммоль) растворяли в диоксане (2 мл), добавляли трибутил(1-этоксивинил)олово (140 мг, 0,39 ммоль), и продували смесь Ν2 в течение 20 мин. Добавляли тетракис(трифенилфосфин)палладий (0) (30 мг, 0,026 ммоль), и смесь перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 6 ч, после чего охлаждали до 0°С, разбавляли водой и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу промывали водным раствором КР, высушивали над №28О4 и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очи
- 41 032384 щали на ИН^-колонке, элюируя градиентом Су-Су/этилацетат 8:2 и получая 100 мг (0,25 ммоль) 2-(1этоксиэтенил)- 1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил }[1]бензопирано[3,4-б]имидазол-4(1 Н)-она, который использовали на следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС (М-Н+)=387,4.
Стадия 5. Синтез 2-(бромацетил)-1-{[2-(триметилсилил )этокси] метил }[1] бензопирано [3,4б]имидазол-4( 1 Н)-она
Раствор 2-( 1 -этоксиэтенил)-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил }[1]бензопирано[3,4-б]имидазол4(1Н)-она (100 мг, 0,25 ммоль) в смеси ТГФ/вода (10 мл) охлаждали до 0°С. Добавляли Νбромсукцинимид (76 мг, 0,43 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Анализ ИРЬС показал, что реакция завершилась. Добавляли ЭСМ и затем воду. Органическую фазу отделяли, высушивали над №:8О.| и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали на 81колонке, элюируя градиентом Су-Су/этилацетат 9:1 и получая 70 мг (0,16 ммоль, выход 64%) 2(бромацетил)-1-{ [2-(триметилсилил)этокси]метил }[1] бензопирано [3,4-ά] имидазол-4(1 Н)-она, который использовали без какой-либо дополнительной очистки и характеризации.
Стадия 6. Синтез 2-{[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]ацетил}-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-б]имидазол-4(1Н)-она
2-(Бромацетил)-1-{ [2-(триметилсилил)этокси] метил }[1] бензопирано[3,4-б]имидазол-4(1 Н)-он (70 мг, 0,16 ммоль), 7-фтор-1-(пиперазин-1-ил)изохинолин (37 мг, 0,16 ммоль, см. соединение 144) и карбонат калия (33 мг, 0,24 ммоль) растворяли в МеСК Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, затем добавляли этилацетат и после этого воду. Органическую фазу отделяли, высушивали над \а28Ο4 и концентрировали в вакууме. Полученный неочищенный продукт очищали на 81колонке, элюируя градиентом Су-Су/этилацетат 1:1 и получая 61 мг (0,1 ммоль, выход 65%) 2-{[4-(7фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1 -ил] ацетил }-1-{[2-(триметилсилил)этокси] метил }[1] бензопирано [3,4б]имидазол-4(1Н)-она. ЖХ-МС (М-Н+)=588,4.
Стадия 7. Синтез 2-{2-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]-1-гидроксиэтил}-1-{[2(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-б]имидазол-4(1Н)-она
Раствор 2-{[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил] ацетил }-1-{[2-(триметилсилил )этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-б]имидазол-4(1Н)-она (61 мг, 0,1 ммоль) в смеси метанол/ЭСМ 10:1 охлаждали до 0°С, после чего добавляли №311.1 (19 мг, 0,5 ммоль). Смесь перемешивали в течение 30 мин при 0°С, затем выпаривали растворитель в вакууме, добавляли этилацетат, органическую фазу промывали водой, высушивали над №28О4 и концентрировали в вакууме, получая 51 мг (0,086 ммоль, выход 86%) 2-{2-[4(7-фторизохинолин-1 -ил)пиперазин-1 -ил]-1-гидроксиэтил }-1-{ [2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-б]имидазол-4(1Н)-она, который использовали в следующей стадии без дополнительной
- 42 032384 очистки. ЖХ-МС (М-Н+)=590,4.
Стадия 8. Синтез гидрохлорида 2-{2-[4-(7-фторизохинолин-1-ил]пиперазин-1-ил}-1гидроксиэтил[1]бензопирано[3,4-б]имидазол-4(1Н)-она (соединение 152)
2-{2-[4-(7-Фторизохинолин-1 -ил)пиперазин-1-ил]-1 -гидроксиэтил }-1-{ [2-(триметилсилил)этокси]метил}-1Н,4Н-хромено[3,4-б]имидазол-4(1Н)-он (51 мг, 0,086 ммоль) растворяли в этаноле (8 мл), добавляли 1М НС1 в этаноле (10 мл, 10 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. После удаления растворителя в вакууме полученный остаток очищали хроматографией на обращенной фазе С-18, элюируя градиентом вода/ацетонитрил 95:5 - ацетонитрил 100% и получая 60 мг продукта. Соединение растворяли в ИСМ, и раствор охлаждали до 0°С. Добавляли 1М раствор НС1 в диэтиловом эфире (5 мл), смесь концентрировали в вакууме, и полученное твердое вещество обрабатывали диэтиловым эфиром, получая 30 мг гидрохлорида 2-{2-[4-(7-фторизохинолин-1-ил]пиперазин-1-ил}-1гидроксиэтил[1]бензопирано[3,4-б]имидазол-4(1Н)-она. ЖХ-МС (М-Н+)=460,4.
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-б6): δ мд 3,42-3,90 (м, 8Н), 5,51 (дд, 1=10,03, 2,69 Гц, 1Н), 6,95 (д, 1=8,80 Гц, 1Н), 7,37-7,48 (м, 1Н), 7,50-7,54 (м, 1Н), 7,55-7,62 (м, 2Н), 7,73 (тд, 6=8,68, 2,69 Гц, 1Н), 7,87 (дд, 6=10,03, 2,20 Гц, 1Н), 8,08 (дд, 6=9,05, 5,62 Гц, 1Н), 8,14-8,28 (м, 2Н), 10,55 (уш. с, 1Н).
Получение соединения 153.
Соединение 153 получали, как описано ниже по тексту.
Стадия 1. Синтез 4-хлор-3-(трифторацетил)-2Н-1-бензопиран-2-она
Реакцию проводили в пробирке для работы под давлением. К суспензии 4-гидроксикумарина (2,5 г, 15,4 ммоль) в сухом 1,4-диоксане добавляли 2,56 г сухого пиридина (2,6 мл, 32, 4 ммоль). Когда смесь становилась полностью гомогенной, добавляли триметилсилилхлорид (2 г, 18,5 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч при комнатной температуре. Затем добавляли трифторуксусный ангидрид (2,8 мл, 20 ммоль), и смесь перемешивали в течение 2 ч при 90°С. К охлажденной реакционной массе добавляли оксихлорид фосфора (1,4 мл, 15,4 ммоль), и смесь перемешивали при 60°С в течение 2 ч, после чего разбавляли ледяной водой и экстрагировали ИСМ (3x50 мл). Объединенные органические слои высушивали над сульфатом натрия и концентрировали, получая 4-хлор-3-(трифторацетил)-2Н-1бензопиран-2-он (3,1 г, выход 73%). Соединение использовали без дальнейшей очистки и характериза ции.
Стадия 2. Синтез этил 4-оксо-3-(трифторметил)-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2карбоксилата
Указанный в заглавии интермедиат получали по методике, описанной для синтеза этил 4-оксо-1,4дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбоксилата (см. соединение 145), используя 4-хлор-3(трифторацетил)-2Н-1-бензопиран-2-он (выход=74%). ЖХ-МС (М-Н+)=326,1.
Стадии 3 -4. Синтез 4-оксо-3 -(трифторметил)-1,4-дигидро [1 ] бензопирано [4,3 -Ь] пиррол-2карбальдегида
Указанный в заглавии интермедиат получали по методике, описанной для синтеза 4-оксо-1,4
- 43 032384 дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбальдегида (см. соединение 145), используя этил 4-оксо-3(трифторметил)-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбоксилат (выход двух стадий=35%), и полученное соединение использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС (МН+)=282,1.
Стадия 5. Синтез 2-({[1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-ил]амино}метил)-3-(трифторметил)[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-4(1Н)-она (формиата, соединение 153)
Соединение 153 получали по методике, описанной для синтеза соединения 145, используя 4-оксо-3(трифторметил)-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбальдегид (выход=8%). ЖХ-МС (МН+)=511,3.
’Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-Й6): δ мд 1,60-1,73 (м, 2Н), 1,98-2,08 (м, 2Н), 2,69-2,80 (м, 1Н), 2,93 (т, 1=11,60 Гц, 2Н), 3,67 (д, 1=11,60 Гц, 2Н), 4,06 (с, 2Н), 7,38-7,44 (м, 2Н), 7,44-7,48 (м, 1Н), 7,49-7,56 (м, 1Н), 7,60-7,69 (м, 2Н), 7,99 (дд, 1=8,80, 5,87 Гц, 1 Н), 8,09 (д, 1=5,87 Гц, 1Н), 8,17 (с, 1Н), 8,22 (дд, 1=7,83, 0,98 Гц, 1Н).
Получение соединения 155
Соединение 155, т.е. 6-фтор-4-[(3-{4-[3-фтор-7-(трифторметокси)изохинолин-1-ил]пиперазин-1ил}-2-гидроксипропил)амино]-2Н-1,3-бензоксазин-2-он, получали по методике, описанной для синтеза соединения 149, исходя из 2-фтор-5-трифторметоксибензонитрила. ЖХ-МС т/ζ: 552,2 (М+1).
1Н ЯМР (400 МГц, С^С1з+МеОИ-ά4): δ мд 2,48-2,54 (м, 1Н), 2,62-2,65 (м, 1Н), 2,74-2,75 (м, 2Н), 2,87-2,89 (м, 2Н), 3,33 (с, 1Н), 3,45-3,55 (м, 4Н), 3,88 (дд, 1=14,0, 3,6 Гц, 1Н), 4,05-4,06 (м, 1Н), 6,78 (с, 1Н) 7,23-7,27 (м, 2Н), 7,34 (дд, 1=8,8, 2,3 Гц, 1Н), 7,43 (д, 1=8,8 Гц, 1Н), 7,61 (дд, 1=8,4, 2,4 Гц, 1Н), 7,23 (д, 1=8,8 Гц, 1Н), 7,78 (с, 1Н).
Получение соединения 156 р
о
Соединение 156, т.е. 6-фтор-4-((2-гидрокси-3-(4-(пиридо[3,4-Ь]пиразин-5-ил)пиперазин-1ил)пропил)амино)-2Н-бензо[е][1,3]оксазин-2-он, получали по методике, описанной для синтеза соединения 149, используя 5-хлорпиридо[3,4-Ь]пиразин, полученный, как описано для соединения 196. ЖХ-МС т/ζ: 4 52,2 (М+1).
’Н ЯМР (ДМСО-Й6): δ мд 2,49-2,50 (м, 4Н), 3,31-3,34 (м, 3Н), 3,37-3,75 (м, 1Н), 3,98-3,99 (м, 4Н), 4,08-4,09 (м, 1Н), 5,00 (д, 1=4,4 Гц, 1Н) 7,23 (д, 1=5,6 Гц, 1Н), 7,38 (дд, 1=8,8, 4,6 Гц, 1Н), 7,60-7,64 (м, 1Н), 8,10 (д, 1=8,4 Гц, 1Н), 8,25 (д, 1=5,6 Гц, 1Н), 8,84 (с, 1Н), 8,99 (с, 1Н), 9,13-9,14 (м, 1Н).
Получение соединений 158 и 159.
Соединение 158 получали, как описано ниже по тексту.
Стадия 1. Синтез 2-{1-азидо-2-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]этил}-1-{[2-(триметилсилил)этокси] метил }[1] бензопирано [3,4-й] имидазол-4(1 Н)-она
- 44 032384
2-{2-[4-(7-Фторизохинолин-1 -ил)пиперазин-1-ил]-1 -гидроксиэтил }-1-{ [2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-д]имидазол-4(1Н)он (279 мг, 0,47 ммоль, см. соединение 152) растворяли в сухом ЭСМ (30 мл), добавляли ТЕА (98 мкл, 0,7 ммоль), и охлаждали смесь до 0°С. Добавляли МзС1 (40 мкл, 0,52 ммоль), и смесь перемешивали 1 ч при 0°С. Затем добавляли азид натрия (244 мг, 3,8 ммоль) и МеСЫ (16 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем разбавляли ЭСМ. Органическую фазу промывали водой и концентрировали в вакууме. Неочищенный продукт очищали на 81-колонке (от 100% Су до Су/этилацетат 6:4), получая 134 мг (0,22 ммоль, выход 4 6%) 2-{1азидо-2-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]этил}-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-д]имидазол-4(1Н)-она. ЖХ-МС (М-Н+)=615,3.
Стадия 2. Синтез 2-{1-амино-2-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]этил}-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-д]имидазол-4(1Н)-она
К раствору 2-{1 -азидо-2-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1 -ил]этил}-1-{ [2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-д]имидазол-4(1Н)-она (134 мг, 0,22 ммоль) в смеси ТГФ/Н2О 3:1 (44 мл) добавляли трифенилфосфин (69 мг, 0,26 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи, затем добавляли ЭСМ и после этого воду. Органическую фазу отделяли и упаривали в вакууме. Неочищенный остаток очищали на 81-колонке (ЭСМ/метанол 98:2), получая 124 мг (0,21 ммоль, выход 96%) 2- {1 -амино-2-[4-(7-фторизохинолин-1 -ил)пиперазин-1 -ил]этил}-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-д]имидазол-4(1Н)-она. ЖХ-МС (М-Н+)=589,5.
Стадия 3. Синтез гидрохлорида 2-{1-амино-2-[4-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]этил}[1]бензопирано[3,4-д]имидазол-4(1Н)-она (соединение 158) и гидрохлорида Ы-{2-[4-(7-фторизохинолин-1ил)пиперазин-1 -ил] -1 -(4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[3,4-ά] имидазол-2-ил)этил } формамида (соединение 159)
2-{1 - Амино-2-[4-(7-фторизохинолин-1 -ил)пиперазин-1 -ил]этил }-1-{[2-(триметилсилил)этокси]метил}[1]бензопирано[3,4-д]имидазол-4(1Н)-он (124 мг, 0,21 ммоль) растворяли в 4М растворе НС1 в диоксане (10 мл). Добавляли воду (1 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляли в вакууме, и полученный твердый остаток очищали хроматографией на обращенной фазе с использованием колонки С-18, элюируя смесью (вода+0,1% муравьиная кислота/метанол+0,1% муравьиная кислота). Выделяли два продукта 2-{1-амино-2-[4-(7-фторизохинолин-1ил)пиперазин-1-ил]этил}[1]бензопирано[3,4-д]имидазол-4(1Н)-он (соединение 158) и соответствующий
- 45 032384
Н-{2-[4-(7-фторизохинолин-1 -ил)пиперазин-1-ил]-1 -(4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[3,4-Д]имидазол2-ил)этил} формамид (соединение 159).
Соединение 158: продукт растворяли в ЭСМ и добавляли 1М раствор НС1 в диэтиловом эфире, получая 39 мг указанного в заглавии соединения в виде гидрохлорида. ЖХ-МС (М-Н+)=459,3.
1Н ЯМР (500 МГц, метанол-Д4): δ мд 2,87-2,98 (м, 2Н), 3,04-3,12 (м, 2Н), 3,20 (д, 1=6,85 Гц, 2Н), 3,83-4,03 (м, 4 Н), 4,88-4,99 (м, 1Н), 7,46 (т, 1=7,60 Гц, 1Н), 7,51 (д, 1=7,60 Гц, 1Н), 7,58-7,63 (м, 1Н), 7,66 (д, 1=6, 85 Гц, 1Н), 7,80 (д, 1=6,85 Гц, 1Н), 7,88 (тд, 1=8,80, 2,00 Гц, 1Н), 7,99 (дд, 1=9,78, 1,96 Гц, 1Н), 8,05 (д, 1=7,60 Гц, 1Н), 8,16 (дд, 1=8,80, 5,38 Гц, 1Н).
Соединение 159: продукт растворяли в ЭСМ и добавляли 1М раствор НС1 в диэтиловом эфире, получая 3,3 мг указанного в заглавии соединения в виде гидрохлорида. ЖХ-МС (М-Н+)=487,3.
1Н ЯМР (500 МГц, метанол-Д4): δ мд 3,70-4,01 (м, 9 Н), 4,14 (дд, 1=13,30, 6,02 Гц, 1Н), 5,98 (т, 1=6,90 Гц, 1Н), 7,45 (т, 1=7,53 Гц, 1Н), 7,49-7,54 (м, 1Н), 7,57-7,63 (м, 1Н), 7,66 (д, 1=6,27 Гц, 1Н), 7,74 (тд, 1=8,66, 2,30 Гц, 1Н), 7,95 (дд, 1=9,79, 2,26 Гц, 1Н), 8,01-8,15 (м, 3Н), 8,38 (с, 1Н).
Получение соединения 162.
Соединение 162 получали, как описано ниже по тексту.
Стадия 1. Синтез 2-хлор-5-фторникотинамида
К раствору 2-хлор-5-фтор никотиновой кислоты (5,0 г, 28,5 ммоль) в ТГФ (50 мл) при 0°С добавляли 1,1'-карбонил диимидазол (5,38 г, 39 ммоль). Смесь кипятили с обратным холодильником 3 ч, затем охлаждали до 0°С и добавляли ТГФ* аммиак (60 мл). После перемешивания в течение 12 ч при комнатной температуре реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и полученный продукт очищали флэш-хроматографией (5% МеОН в ЭСМ), получая 2-хлор-5-фторникотинамид (4,4 г, 88%) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХ-МС т/ζ: 175,2 (М+1).
1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6): δ мд 7,87 (уш. с, 1Н), 8,00 (д, 1=8,0 Гц, 1Н), 8,10 (уш. с, 1Н), 8,53 (д, 1=2,9 Гц, 1Н).
Стадия 2. Синтез 5-фтор-2-метилникотинамида
Раствор 2-хлор-5-фторникотинамида (4,2 г, 24,00 ммоль) в ДМФА (42 мл) продували аргоном в течение 15 мин. Добавляли тетраметилолово (8,58 г, 48 ммоль) и дихлорид бис-(трифенилфосфин)палладия (II) (0,84 г, 1,2 ммоль), и полученную смесь перемешивали при 90°С в течение 6 ч и затем фильтровали через слой целита. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали флэш-хроматографией (5% МеОН в ОСМ), получая 5-фтор-2-метилникотинамид (2,15 г, 58%) в виде бледно-коричневого твердого вещества. ЖХ-МС т/ζ: 155,2 (М+1).
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-Д6): δ мд 2,53 (с, 3Н), 7,71-7,68 (м, 2Н), 7,98 (с, 1Н), 8,49 (д, 1=2,9 Гц, 1Н).
Стадия 3. Синтез 3-фтор-1,6-нафтиридин-5(6Н)-она
Смесь 5-фтор-2-метилникотинамида (1,6 г, 10 ммоль) с безводными ДМФА/ОМА (3,2 мл) нагревали при 55 °С в течение 3 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и к полученному остатку добавляли безводный ДМФА (10 мл). Затем при 0°С добавляли НаН (60% в минеральном масле, 620 мг, 15,5 ммоль), и смесь нагревали при 85°С в течение 3 ч, охлаждали, разбавляли водой и нейтрализовали конц. НС1. Реакционную массу концентрировали при пониженном давлении, и полученный остаток очищали флэш-хроматографией (5% МеОН-ЫН3 в ОСМ), получая 3-фтор-1,6-нафтиридин5(6Н)-он в виде не совсем белого твердого вещества (150 мг, 9%). ЖХ-МС т/ζ: 165,2 (М+1).
1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-Д6): δ мд 6,66 (д, 1=7,5 Гц, 1Н), 7,46-7,40 (м, 1Н), 8,27-8,21 (м, 1Н), 8,96 (д, 1=3 Гц, 1Н), 11,7 (уш.с, 1Н).
Стадия 4. Синтез 5-хлор-3-фтор-1,6-нафтиридина
Смесь 3-фтор-1,6-нафтиридин-5(6Н)-она (150 мг, 0,9 ммоль) и оксихлорида фосфора (3,48 г, 23 ммоль) нагревали до 100°С в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении, удаляя избыток РОС13. Полученный остаток растворяли в ЕЮАс и промывали насыщенным раствором НаНСО3 и водой. Органический слой высушивали над
- 46 032384 сульфатом натрия и концентрировали, получая 5-хлор-3-фтор-1,6-нафтиридин (152 мг, 91,5%) в виде бледно-коричневого твердого вещества. Полученный продукт непосредственно использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС т/ζ: 183,2 (М+1).
Стадия 5. Синтез 6-фтор-4-({3-[4-(3-фтор-1,6-нафтиридин-5-ил)пиперазин-1-ил]-2-гидроксипропил}амино)-2Н-1,3-бензоксазин-2-она (соединение 162) о
Указанное в заглавии соединение получали по методике, описанной для синтеза соединения 149, используя 5-хлор-3-фтор-1,6-нафтиридин. ЖХ-МС т/ζ: 469,2 (М+1).
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-46): δ мд 2,78-2,58 (м, 6Н), 3,44-3,34 (м, 5Н), 3,73-3,71 (м, 1Н), 4,08-4,06 (м, 1Н), 5,04-5,02 (м, 1Н), 7,41-7,37 (м, 1Н), 7,49 (д, 1=5,6 Гц, 1Н), 7,65-7,61 (м, 1Н), 8,18-8,11 (м, 2Н), 8,31 (д, 1=8 Гц, 1Н), 9,17-9,10 (м, 2Н).
Получение соединения 163
Соединение 163, т.е. 6-фтор-4-[(2-гидрокси-3-{4-[3-(трифторметил)-1,6-нафтиридин-5-ил]пиперазин-1-ил}пропил)амино]-2Н-1,3-бензоксазин-2-он, получали по методике, описанной для синтеза соединения 162, исходя из 2-хлор-5-(трифторметил)пиридин-3-карбоновой кислоты. ЖХ-МС т/ζ: 519,2 (М+1).
1Н ЯМР (ДМСО-06): δ мд 2,26-2,18 (м, 4Н), 3,62-3,72 (м, 8Н), 4,24 (уш. с, 1Н), 7,18-7,21 (м, 1Н),
7,21-7,34 (м, 2Н), 7,51 (д, 1=6,0 Гц, 1Н), 7,74-7,75 (м, 1Н), 8,35 (д, 1=6,0 Гц, 1Н), 8,52 (с, 1Н), 9,09 (с, 1Н).
Получение соединения 166.
Соединение 166 получали, как описано ниже по тексту.
Стадия 1. Синтез трет-бутил 4-[3-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-2-ил)-2-гидроксипропил]пиперазин-1-карбоксилата
Вос
Смесь Ν-Вос-пиперазина (15 г, 81 ммоль) и К-2,3-эпоксипропил)фталимида (16,4 г, 81 ммоль) в ацетонитриле (100 мл) нагревали до 70°С в течение 6 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали в вакууме, и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, СНС13/МеОН 9/1), получая 20,4 г твердого вещества коричневого цвета (52 ммоль, выход=64%). ЖХ-МС (М-Н+)=390,1.
Стадия 2. Синтез трет-бутил 4-(3-амино-2-гидроксипропил)пиперазин-1-карбоксилата
ВОС
Раствор трет-бутил 4-[3-(1,3-диоксо-1,3-дигидро-2Н-изоиндол-2-ил)-2-гидроксипропил]пиперазин-
1-карбоксилата (20,4 г, 52 ммоль) и 30%-ный раствор метиламина в ЕЮН (215 мл) нагревали при 50°С в плотно закрытой пробирке в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали в вакууме и очищали флэш-хроматографией (силикагель, СНС13/МеОН 9/1), получая трет-бутил 4-(3-амино-2-гидроксипропил)пиперазин-1-карбоксилат (6,2 г, 24 ммоль, выход=46%). ЖХ-МС (М-Н+)=260,1.
Стадия 3. Синтез 6-фтор-2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфоната он (СР38О2)2О
ТЕА
Раствор 6-фтор-4-гидрокси-2Н-хромен-2-она (10 г, 55,5 ммоль) и ТЕА (15,5 мл, 111 ммоль) в ЭСМ (150 мл) охлаждали до -10°С. По каплям добавляли трифторметансульфоновый ангидрид (10,3 мл, 61,1
- 47 032384 ммоль) в БСМ (10 мл). Смесь перемешивали при -10°С в течение 2 ч и при комнатной температуре в течение ночи. Смесь разбавляли смесью гексан/диэтиловый эфир 1/1, твердые вещества отделяли фильтрованием через слой оксида кремния и концентрировали, получая твердое вещество (11,2 г, 35 ммоль, выход=63%), которое использовали без какой-либо дополнительной очистки. ГХ-МС=312,0.
Стадия 4. Синтез трет-бутил 4-{3-[(7-фтор-2-оксо-2Н-1-бензопиран-4-ил)амино]-2-гидроксипропил} пиперазин-1-карбоксилата
К раствору 6-фтор-2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфоната (7,5 г, 23,9 ммоль) и третбутил 4-(3-амино-2-гидроксипропил)пиперазин-1-карбоксилата (6,2 г, 23,9 ммоль) в сухом ацетонитриле (50 мл) по каплям при перемешивании добавляли раствор триэтиламина (4 мл, 2 8,7 ммоль) в ацетонитриле (20 мл). По окончании добавления раствор нагревали до кипения с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли БСМ и промывали насыщенным раствором ЖНСО3 и водой. Затем органическую фазу отделяли, высушивали над сульфатом натрия и упаривали в вакууме. Неочищенный продукт очищали флэш-хроматографией (силикагель, от 100% СНС13 до СНС13/МеОН 85/15) и получали трет-бутил 4-{3-[(7-фтор-2-оксо-2Н-1-бензопиран-4ил)амино]-2-гидроксипропил}пиперазин-1-карбоксилат (4,2 г, 10 ммоль, выход=42%). ЖХ-МС (М-Н+): 422,2.
Стадия 5. Синтез гидрохлорида 7-фтор-4-{[2-гидрокси-3-(пиперазин-1-ил)пропил] амино }-2Н-1бензопиран-2-она
трет-бутил 4-{3-[(7-фтор-2-оксо-2Н-1-бензопиран-4-ил)амино]-2-гидроксипропил}пиперазин-1карбоксилат (4 г, 9,5 ммоль) растворяли в МеОН (30 мл), добавляли 1,25М раствор НС1 в МеОН (4,5 мл), и смесь кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. После охлаждения белое твердое вещество отделяли фильтрованием и высушивали, получая гидрохлорид 7-фтор-4-{[2-гидрокси-3-(пиперазин-1ил)пропил]амино}-2Н-1-бензопиран-2-она (3,4 г, выход количественный), который вводили в следующую стадию без дополнительной очистки. ЖХ-МС (М-Н+): 322,2.
Стадия 6. Синтез 6-фтор-4-({2-гидрокси-3-[4-(1,6-нафтиридин-5-ил)пиперазин-1-ил]пропил}амино)-2Н-1-бензопиран-2-она (соединение 166)
К раствору гидрохлорида 7-фтор-4-{[2-гидрокси-3-(пиперазин-1-ил) пропил] амино }-2Н-1бензопиран-2-она (261 мг, 0,73 ммоль) и ТЕА (0,2 мл, 1,46 ммоль) в ДМФА (3 мл) добавляли 5-хлор-1,6нафтиридин (80 мг, 0,49 ммоль). Смесь перемешивали при 100°С в течение 18 ч, после чего охлаждали, разбавляли водой и экстрагировали Е1ОАс. Органический слой высушивали над сульфатом натрия, концентрировали в вакууме, и полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, СНС13/МеОН 95/5), получая 95 мг (0,21 ммоль, выход=29%) указанного в заглавии соединения. ЖХ-МС (М-Н+): 450,2.
’Н ЯМР (300 МГц, хлороформ-б): δ 9,01 (дд, .1=1,2, 4,3 Гц, 1Н), 8,42-8,33 (м, 2Н), 7,53 (д, 1=5,9 Гц,
- 48 032384
1Н), 7,45 (дд, 1=4,3, 8,4 Гц, 1Н), 7,36-7,19 (м, 4 Н), 5,78 (т, 1=4,3 Гц, 1Н), 5,36 (с, 1Н), 4,26-4,10 (м, 1Н), 3,50 (с, 6 Н), 3,28-3,15 (м, 1Н), 3,05-2,93 (м, 2Н), 2,81-2,70 (м, 2Н), 2,62 (д, 1=6,8 Гц, 2Н).
Получение соединения 171.
Соединение 171 получали, как описано ниже по тексту заявки.
Стадия 1. Синтез дигидрохлорида 3-метоксипиперидин-4-амина
НС1 з
диоксан
Вос н
Раствор трет-бутил 4-амино-3-метоксипиперидин-1-карбоксилата (900 мг, 3,9 ммоль) в 1,4-диоксане (10 мл) охлаждали до 0-5°С. Добавляли 4М НС1 в диоксане (9 мл). После перемешивания в течение 2 ч при комнатной температуре реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток растирали с петролейным эфиром (3x25 мл), фильтровали и высушивали при пониженном давлении, получая дигидрохлорид 3-метоксипиперидин-4-амина (700 мг неочищенного вещества) в виде не совсем белого твердого вещества. ЖХ-МС (ЕЬ8Н) т/ζ: 131,2 (М+Н).
Стадия 2. Синтез 1-(7-фторизохинолин-1-ил)-3-метоксипиперидин-4-амина
ОСН3
К раствору дигидрохлорида 3-метоксипиперидин-4-амина (700 мг, 3,4 ммоль) в 1-бутаноле (3 мл) при перемешивании добавляли О^ЕА (1,07 г, 8,28 ммоль). После перемешивания в течение 15 мин при комнатной температуре добавляли 1-хлор-7-фторизохинолин (300 мг, 1,6 ммоль). Смесь перемешивали при 100°С в течение 48 ч, затем охлаждали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавляли водой (25 мл) и экстрагировали ЕЮАс (3x50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (20 мл), высушивали над сульфатом натрия и упаривали в вакууме. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, 8-10% МеОН в ^СΜ), получая 1-(7фторизохинолин-1-ил)-3-метоксипиперидин-4-амин (150 мг, 32,9%) в виде бледно-желтого твердого вещества. ЖХ-МС т/ζ: 276,1 (М+Н).
Стадия 3. Синтез 2-({[1-(7-фторизохинолин-1-ил)-3-метоксипиперидин-4-ил] амино} метил)-
Указанное в заглавии соединение получали по методике, описанной для синтеза соединения 145, используя 1-(7-фторизохинолин-1-ил)-3-метоксипиперидин-4-амин. Очистка флэш-хроматографией (силикагель, 5% МеОН в ^СΜ) с последующим хиральным 8ГС разделением позволила получить 2-({[1-(7фторизохинолин-1-ил)-3-метоксипиперидин-4-ил]амино}метил)[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-4(1 Н)-он (неустановленный стереоизомер, выход=11%). ЖХ-МС (М-Н+)=473,2.
1Н ЯМР (ДМСО 06): δ мд 12,60 (уш.с, 1Н), 8,08 (д, 1=5,6 Гц, 2Н), 8,07-7,97 (м, 1Н), 7,77-7,74 (м, 1Н), 7,66-7,62 (м, 1Н), 7,45-7,34 (м, 4Н), 6,58 (с, 1Н), 3,92-3,91 (м, 2Н), 3,72-3,63 (м, 3Н), 3,33-3,29 (м, 3Н), 3,11-3,08 (м, 2Н), 2,93-2,91 (м, 1Н), 1,91-1,83 (м, 2Н).
Получение соединения 172
Соединение 172 получали по методике, описанной для синтеза соединения 171, используя третбутил 4-амино-3-фторпиперидин-1-карбоксилат. Очистка флэш-хроматографией (силикагель, 5% МеОН
- 49 032384 в ЭСМ) с последующим хиральным 8ЕС разделением позволила получить 2-({[3-фтор-1-(7фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-ил] амино} метил)[ 1] бензопирано [4,3 -Ь] пиррол-4(1 Н)-он (неустановленный стереоизомер, выход=7%). ЖХ-МС т/ζ: 461,2 (М+1).
’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО )-4,,): δ мд 12,56 (уш.с, 1Н), 8,11-8,08 (м, 2Н), 8,02-7,98 (м, 1Н), 7,75 (д, 1=10,4 Гц, 1Н), 7,67-7,62 (м, 1Н), 7,46-7,34 (м, 4Н), 6,60 (с, 1Н), 5,07-4,95 (м, 1Н), 3,99-3,93 (м, 3Н), 3,743,71 (м, 1Н), 3,22-2,99 (м, 1Н), 2,97-2,78 (м, 2Н), 1,98-1,97 (м, 2Н).
Получение соединения 177
2-({[1 -(7-Фторизохинолин-1 -ил)-3-метилпиперидин-4-ил] амино} метил)[1] бензопирано [4,3 -Ь] пиррол-4(1Н)-он получали по методике, описанной для синтеза соединения 171, используя трет-бутил 4амино-3-метилпиперидин-1-карбоксилат. Очистка флэш-хроматографией (силикагель, 0-6% МеОН в ЭСМ) с последующим хиральным 8ЕС разделением позволила получить указанное в заглавии соединение (неустановленный стереоизомер, выход=7%). ЖХ-МС т/ζ: 457,2 (М+Н).
’Н ЯМР (ДМСО ά6): δ мд 12,55 (уш.с, 1Н), 8,09-8,06 (м, 2Н), 8,01-7,97 (м, 1Н), 7,67-7,62 (м, 2Н), 7,45-7,35 (м, 4Н), 6,59 (с, 1Н), 4,01-3,98 (м, 1Н), 3,90-3,86 (м, 1Н), 3,72-3,69 (м, 1Н), 3,62-3,59 (м, 1Н), 2,89 (т, 1=12 Гц, 1Н), 2,68-2,60 (м, 1Н), 2,33-2,15 (м, 2Н), 1,86-1,80 (м, 1Н), 1,65-1,60 (м, 1Н), 1, 01 (д, 1=6,8 Гц, 3Н).
Получение соединения 184.
Соединение 184 получали, как описано ниже по тексту заявки.
Стадия 1. Синтез этил-4-амино-1-бензилпиперидин-3-карбоксилата
Указанное в заглавии соединение в виде рацемической смеси син/анти получали по методике, описанной для интермедиата трет-бутил 4-амино-3-(бензилокси)пиперидин-1-карбоксилат (смотрите соединение 186), используя этил 1-бензил-4-оксопиперидин-3-карбоксилат (выход=65%). ЖХ-МС т/ζ: 263,2 (М+Н).
Стадия 2. Синтез этил 1-бензил-4-[(трет-бутоксикарбонил)амино]пиперидин-3-карбоксилата
К холодному (0-5°С) раствору этил-4-амино-1-бензилпиперидин-3-карбоксилата (6 г, 22,87 ммоль) в ЭСМ (20 мл) медленно добавляли ТЕА (9,5 мл, 68,61 ммоль) и Вос ангидрид (5,98 г, 27,4 ммоль). После перемешивания в течение 4 ч при комнатной температуре смесь разбавляли водой (25 мл) и экстрагировали ЭСМ (3x30 мл). Объединенные органические слои промывали водой (25 мл) и насыщенным раствором соли (25 мл), высушивали над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме. Полученный остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, 30-35% ЕЮАс в петролейном эфире), получая указанное в заглавии соединение в виде рацемической смеси син/антиизомеров (1,4 г). ЖХ-МС т/ζ: 363,2 (М+Н).
’Н ЯМР (400 МГц, СЭСЬ): δ мд 7,31-7,28 (м, 5Н), 5,32 (уш.с, 1Н), 4,17-4,12 (м, 3Н), 3,90-3,80 (м, 1Н), 3,60-3,31 (м, 2Н), 3,15-3,08 (м, 1Н), 2,79-2,76 (м, 1Н), 2,24-2,20 (м, 3Н), 2,09-2,06 (м, 1Н), 1,61-1,59 (м, 1Н), 1,45 (с, 9Н), 1,22-1,18 (м, 2Н).
Стадия 3. Синтез этил 4-[(трет-бутоксикарбонил)амино]пиперидин-3-карбоксилата
- 50 032384
К раствору этил 1-бензил-4-[(трет-бутоксикарбонил)амино]пиперидин-3-карбоксилата (1,4 г, 3,86 ммоль) в АсОН (30 мл) при комнатной температуре в атмосфере азота и при перемешивании добавляли 10% Рй/С (140 мг, влажность 50%). Реакционную смесь гидрировали при 50°С в течение 24 ч, затем фильтровали через слой целита, и фильтрат концентрировали при пониженном давлении, получая этил 4[(трет-бутоксикарбонил)амино]пиперидин-3-карбоксилат (900 мг, выход 85%) в виде рацемической смеси син/антиизомеров. ЖХ-МС (ЕЬ8О) т/ζ: 273,2 (М+Н).
’и ЯМР (400 МГц, СБС13): δ мд 5,56-5,45 (м, 1Н), 4,33-4,12 (м, 2Н), 3,90-3,78 (м, 1Н), 3,45-3,33 (м, 1Н), 3,15-3,01 (м, 1Н), 2,86-2,68 (м, 3Н), 1,88-1,76 (м, 3Н), 1,45 (с, 9Н), 1,32-1,23 (м, 3Н).
Стадия 4. Синтез этил 4-[(трет-бутоксикарбонил)амино]-1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-3карбоксилата
Указанное в заглавии соединение получали в виде рацемической смеси син/антиизомеров по методике, описанной для интермедиата 1-(7-фторизохинолин-1-ил)-3-метоксипиперидин-4-амин (см. соединение 171), используя этил 4-[(трет-бутоксикарбонил)амино]пиперидин-3-карбоксилат (выход=24%). ЖХ-МС т/ζ: 418,2 (М+Н).
’Н ЯМР (СЭС13): δ мд 8,18-8,16 (м, 1Н), 7,91-7,88 (м, 1Н), 7,87-7,85 (м, 1Н), 7,52-7,44 (м, 1Н), 7,357,30 (м, 1Н), 5,67 (уш.с, 1Н), 4,29-4,01 (м, 4Н), 3,35-3,33 (м, 1Н), 3,20-3,18 (м, 1Н), 2,45-2,42 (м, 2Н), 2,081,98 (м, 2Н), 1,45 (с, 9Н), 1,25-1,17 (м, 3Н).
Стадия 5. Синтез гидрохлорида этил 4-амино-1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-3-карбоксилата
Е
Указанное в заглавии соединение в виде рацемической смеси син/антиизомеров получали по методике, описанной для интермедиата гидрохлорид 3-метоксипиперидин-4-амина (см. соединение 171), используя этил 4- [(трет-бутоксикарбонил)амино]-1 -(7-фторизохинолин-1 -ил)пиперидин-3 -карбоксилат (выход=88%). ЖХ-МС т/ζ: 318,1 (М+Н).
Стадия 6. Синтез этил 1-(7-фторизохинолин-1-ил)-4-{[(4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3Ь]пиррол-2-ил)метил]амино}пиперидин-3-карбоксилата (соединение 184)
Указанное в заглавии соединение в виде рацемической смеси син/антиизомеров получали по методике, описанной для синтеза соединения 145, используя гидрохлорид этил 4-амино-1-(7фторизохинолин-1-ил)пиперидин-3-карбоксилата (выход=9%). ЖХ-МС т/ζ: 515,2 (М+Н).
’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-йб): δ мд 12,48 (уш.с, 1Н), 8,12 (д, 1=5,6 Гц, 1Н), 8,06 (д, 1=7,6 Гц, 1Н), 8,03-7,98 (м, 1Н), 7,71-7,63 (м, 2Н), 7,46-7,24 (м, 4Н), 6,59 (с, 1Н), 4,07-3,84 (м, 5Н), 3,59-3,11 (м, 5Н), 2,08-1,92 (м, 2Н), 1,04-1,03 (м, 3Н).
Получение соединения 186.
Соединение 186 получали, как описано ниже по тексту заявки.
Стадия 1. Синтез трет-бутил 4-амино-3-(бензилокси)пиперидин-1-карбоксилата
(ΊΙ,ί.ΌΟΝΙβ №ΒΗ3ΟΝ
МеОН
Раствор трет-бутил 3-(бензилокси)-4-оксопиперидин-1-карбоксилата (1,9 г, 6,2 ммоль) и ацетата
- 51 032384 аммония (3,35 г, 43,5 ммоль) в метаноле (100 мл) перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре и затем охлаждали до 10°С. Добавляли цианоборгидрид натрия (580 мл, 9,3 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь концентрировали в вакууме, разбавляли водой (20 мл) и экстрагировали ЕЮАс (3x50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным раствором соли (40 мл), высушивали над сульфатом натрия и концентрировали в вакууме, получая неочищенный трет-бутил 4-амино-3-(бензилокси)пиперидин-1-карбоксилат (1,6 г) в виде бледно-зеленой смолы. Полученный продукт непосредственно использовали в следующей стадии без дополнительной очистки. ЖХ-МС т/ζ: 307,1 (М+Н).
Стадия 2. Синтез дигидрохлорида 3-(бензилокси)пиперидин-4-амина
Раствор трет-бутил 4-амино-3-(бензилокси)пиперидин-1-карбоксилата (1,6 г, 5,2 ммоль) в 1,4диоксане (5 мл) при перемешивании охлаждали до 0-5°С. Добавляли НС1 (4М раствор в 1,4-диоксане, 16 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении, полученный остаток растирали с петролейным эфиром (3x25 мл) и фильтровали. Не совсем белый твердый остаток высушивали при пониженном давлении, получая дигидрохлорид 3(бензилокси)пиперидин-4-амина (1,5 г неочищенного вещества), который непосредственно вводили в следующую стадию без дополнительной очистки. ЖХ-МС т/ζ: 207,1 (М+Н-2НС1).
Стадия 3. Синтез 3-(бензилокси)-1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-амина
Указанное в заглавии соединение получали по методике, описанной для интермедиата 1-(7фторизохинолин-1-ил)-3-метоксипиперидин-4-амина (см. соединение 171), используя дигидрохлорид 3(бензилокси)пиперидин-4-амина (выход=35%). ЖХ-МС т/ζ: 352,1 (М+Н).
Стадия 4. Синтез 2-({[3-(бензилокси)-1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-ил]амино}метил)[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-4(1Н)-она
Указанное в заглавии соединение в виде смеси стереоизомеров получали по методике, описанной для синтеза соединения 145, используя 3-(бензилокси)-1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-амин (выход=45%). ЖХ-МС т/ζ: 549,1 (М+Н).
Стадия 5. Синтез 2-({[1-(7-фторизохинолин-1-ил)-3-гидроксипиперидин-4-ил]амино}метил)[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-4(1Н)-он (соединение 186)
К раствору 2-({ [3-(бензилокси)-1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-ил]амино}метил)[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-4(1Н)-она (смесь стереоизомеров, 200 мг, 0,36 ммоль) в хлороформе (20 мл) медленно при перемешивании при 0-5°С в защищенной от света пробирке добавляли триметилсилилйодид (0,729 г, 3,6 ммоль). Смесь перемешивали в течение 4 ч при 70°С, затем разбавляли раствором тиосуль
- 52 032384 фата натрия (30 мл) и фильтровали. Остаток промывали хлороформом (3x15 мл) и петролейным эфиром (2x20 мл). Очистка флэш-хроматографией (силикагель, 8-10% МеОН в ЭСМ) и последующее разделение препаративной ВЭЖХ позволяло получить 2-({[1-(7-фторизохинолин-1-ил)-3-гидроксипиперидин-4ил]амино}метил)[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-4(1Н)-он (неустановленный стереоизомер, 18 мг, выход 11%) в виде не совсем белого твердого вещества. ЖХ-МС т/ζ: 459,2 (М+Н).
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО ά): δ мд 12,35 (уш.с, 1Н), 8,09-7,95 (м, 4Н), 7,65-7,60 (м, 1Н), 7,44-7,35 (м, 4Н), 6,57 (с, 1Н), 5,03-5,02 (м, 1Н), 3,99-3,93 (м, 1Н), 3,91-3,72 (м, 2Н), 3,69-3,33 (м, 2Н), 3,05-3,01 (м,
2Н), 2,76-2,67 (м, 1Н), 1,89-1,77 (м, 2Н).
Получение соединения 187.
Соединение 187 получали, как описано ниже по тексту заявки.
Стадия 1. Синтез трет-бутил [1-(1,6-нафтиридин-5-ил)пиперидин-4-ил]карбамата
Интермедиат трет-бутил [1-(1,6-нафтиридин-5-ил)пиперидин-4-ил]карбамат получали по методике, описанной для синтеза трет-бутил [1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-ил] карбамата (см. соединение 145), используя 5-хлор-1,6-нафтиридин. Выход=82%. ЖХ-МС (М-Н+)=329,3.
Стадия 2. Синтез 1-(1,6-нафтиридин-5-ил)пиперидин-4-амина
Интермедиат 1-(1,6-нафтиридин-5-ил)пиперидин-4-амин получали по методике, описанной для синтеза 1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-амина (см. соединение 145), используя трет-бутил [1(1,6-нафтиридин-5-ил)пиперидин-4-ил]карбамат.
Выход=98%. Соединение использовали без какой-либо характеризации.
Стадия 3. Синтез 4-хлор-6-фтор-2-оксо-2Н-1-бензопиран-3-карбальдегида
К ДМФА (25 мл) при перемешивании и 0°С одной порцией добавляли РОС13 (25 мл). Полученный раствор нагревали при 50°С в течение 0,5 ч, после чего добавляли раствор 6-фтор-4-гидроксикумарина (5 г, 27,7 ммоль) в ДМФА (50 мл). Смесь перемешивали при 60°С в течение 3 ч и затем выливали в лед. После перемешивания в течение 20 мин добавляли ЭСМ (50 мл), и органическую фазу отделяли, высушивали над Ыа28О4 и концентрировали в вакууме, получая 6,2 г 4-хлор-6-фтор-2-оксо-2Н-1-бензопиран-
3-карбальдегида, который использовали в следующей стадии без дополнительной очистки.
Стадия 4. Синтез этил 8-фтор-4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбоксилата
описанной для синтеза 4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3Данный интермедиат, карбоксилат, получали по методике,
Ь]пиррол-2-карбоксилата (см. соединение 145), используя 4-хлор-6-фтор-2-оксо-2Н-1-бензопиран-3карбальдегид, (выход=50%). ЖХ-МС (М-Н+)=276,1.
Стадия 5. Синтез 8-фтор-2-(гидроксиметил)[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-4(1Н)-она
Данный интермедиат, т.е. 8-фтор-2-(гидроксиметил)[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-4(1Н)-он, получали по методике, описанной для синтеза 2-(гидроксиметил)[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-4(1Н)-она (см. соединение 145), используя 8-фтор-4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбоксилат. По
- 53 032384 лученное соединение использовали в следующей стадии без дополнительной характеризации. ЖХ-МС (М-Н+)=234,2.
Стадия 6. Синтез 8-фтор-4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбальдегида
Данный интермедиат, т.е. 8-фтор-4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбальдегид, получали по методике, описанной для синтеза 4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2карбальдегида (см. соединение 145), используя 8-фтор-2-(гидроксиметил)[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол4(1Н)-он. Соединение использовали в следующей стадии без дополнительной характеризации. ЖХ-МС (М-Н+)=232,2.
Стадия 7. Синтез 8-фтор-2-({[1-(1,6-нафтиридин-5-ил)пиперидин-4-ил]амино}метил)[1]бензопирано[3,4-Ь]пиррол-4(3Н)-она (соединение 187)
Указанное в заглавии соединение получали по методике, описанной для синтеза соединения 145, используя 8-фтор-4-оксо-1,4-дигидро[1]бензопирано[4,3-Ь]пиррол-2-карбальдегид и 1-(1,6-нафтиридин5-ил)пиперидин-4-амин (выход=41%). ЖХ-МС (М-Н+)=444,3.
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-а6): δ мд 1,55-1,69 (м, 2Н), 2,03 (д, 1=10,15 Гц, 2Н), 2,67-2,76 (м, 1Н), 3,01 (т, 1=11,12 Гц, 2Н), 3,77 (д, 1=12,90 Гц, 2Н), 3,91 (с, 2Н), 6,59 (с, 1Н), 7,29 (тд, 1=8,65, 3,02 Гц, 1Н), 7,37 (д, 1=6, 04 Гц, 1Н), 7,47 (дд, 1=9,06, 4,67 Гц, 1Н), 7,57 (дд, 1=8,37, 4,25 Гц, 1Н), 7,95 (дд, 1=9,06, 3,02 Гц, 1Н), 8,26 (д, 1=5,76 Гц, 1Н), 8,39 (д, 1=7,96 Гц, 1Н), 8,99 (дд, 1=4,39, 1,65 Гц, 1Н), 11,96-13,07 (м, 1Н).
Получение соединения 188.
Соединение 188 получали, как описано ниже по тексту заявки.
Стадии 1-2. Синтез 1-(6-метокси-1,5-нафтиридин-4-ил)пиперидин-4-амина
Смесь 8-бром-2-метокси-1,5-нафтиридина (250 мг, 1 ммоль), 4-(К-Вос-амино) пиперидина (600 мг, 3 ммоль) и Э1РЕА (44 мкл, 0,25 ммоль) в КМР (4 мл) перемешивали при 90°С в течение ночи. Добавляли ЭСМ (20 мл), и смесь промывали насыщенным раствором КаНСО3. Растворитель удаляли в вакууме, и неочищенный продукт очищали на 81-колонке, элюируя градиентом Су-этилацетат 100%. Продукт растворяли в ЭСМ (20 мл), добавляли ТЕА (4 мл), и смесь перемешивали при 40°С в течение 1 ч. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток очищали на 8СХ колонке, получая 265 мг 1-(6-метокси-1,5нафтиридин-4-ил)пиперидин-4-амина. ЖХ-МС (М-Н+)=259,2.
Стадия 3. Синтез 8-фтор-2-({[1-(6-метокси-1,5-нафтиридин-4-ил)пиперидин-4-ил] амино }метил)[1]бензопирано[3,4-Ь]пиррол-4(3Н)-она (соединение 188)
- 54 032384
Указанное в заглавии соединение получали по методике, описанной для синтеза соединение 187, используя 1-(6-метокси-1,5-нафтиридин-4-ил)пиперидин-4-амин (выход=23%). ЖХ-МС (М-Н+)=474,3.
1Н ЯМР (500 МГц, ДМСО-Д6): δ мд 1,48-1,65 (м, 2Н), 2,04 (д, 1=10,15 Гц, 2Н), 2,66-2,79 (м, 1Н), 3,00 (т, 1=10,84 Гц, 2Н), 3,91 (с, 2Н), 3,97 (с, 3Н), 4,26 (д, 1=12,35 Гц, 2Н), 6,59 (с, 1Н), 6,93 (д, 1=5,49 Гц, 1Н),
7,16 (д, 1=9,06 Гц, 1Н), 7,29 (тд, 1=8,65, 3,02 Гц, 1Н), 7,47 (дд, 1=9,06, 4,67 Гц, 1Н), 7,95 (дд, 1=9,06, 3,02 Гц, 1Н), 8,13 (д, 1=8,78 Гц, 1Н), 8,43 (д, 1=5,21 Гц, 1Н), 11,53-13,13 (м, 1Н).
Получение соединения 192.
Соединение 192 получали, как описано ниже по тексту заявки.
Стадии 1-2. Синтез 1-(3-фтор-6-метокси-1,5-нафтиридин-4-ил)пиперидин-4-амина
В сосуде смешивали 8-бром-7-фтор-2-метокси-1,5-нафтиридин (250 мг, 0,97 ммоль), трет-бутил Ν(пиперидин-4-ил)карбамат (194 мг, 0,97 ммоль), трис-(дибензилиденацетон) дипалладий (0) (53 мг, 0,06 ммоль), рац-ВШАР (37 мг, 0,06 ммоль), Ск2СО3 (664 мг, 2,04 ммоль) и 18-краун-6 (26 мг, 0,097 ммоль) в диоксане (10 мл) и продували Ν2. Сосуд нагревали до 100°С при быстром перемешивании. Через 12 ч раствор фильтровали, концентрировали, и остаток очищали флэш-хроматографией (силикагель, 1% МеОН в ОСМ), получая трет-бутил [1-(3-фтор-6-метокси-1,5-нафтиридин-4-ил)пиперидин-4-ил]карбамат (309 мг, 0,82 ммоль, выход 82%) в виде твердого вещества оранжевого цвета, которое использовали без дополнительной характеризации. Соединение растворяли в ОСМ (20 мл) и охлаждали до 0°С. Добавляли ТЕА (3 мл), и смесь перемешивали в течение 1 ч. Удаляли растворитель, остаток растворяли в смеси дихлорметан/МеОН и помещали на картридж 8СХ, который элюировали МеОН и затем 2М раствором аммиака в МеОН. Основные фракции упаривали, получая 1-(3-фтор-6-метокси-1,5-нафтиридин-4ил)пиперидин-4-амин (180 мг, 0,66 ммоль, выход 80%). ЖХ-МС (М-Н+)=277,3
Стадия 3. Синтез 8-фтор-2-({[1-(3-фтор-6-метокси-1,5-нафтиридин-4-ил)пиперидин-4-ил]амино}метил)[1]бензопирано[3,4-Ь]пиррол-4(3Н)-она (соединение 192)
Указанное в заглавии соединение получали по методике, описанной для синтеза соединения 187, используя 1-(3-фтор-6-метокси-1,5-нафтиридин-4-ил)пиперидин-4-амин (выход=16%). ЖХ-МС (М- 55 032384
Н+)=492,1.
1Н ЯМР (400 МГц, метанол-Сд): δ мд 1,68-1,82 (м, 2Н), 2,12 (д, 1=9,29 Гц, 2Н), 2,81-2,92 (м, 1Н), 3,37 (т, 1=12,42 Гц, 2Н), 4,02 (с, 2Н), 4,04-4,08 (м, 3Н), 4,15 (д, 1=11,80 Гц, 2Н), 6,73 (с, 1Н), 7,10 (д, 1=9,03 Гц, 1Н), 7,22 (тд, 1=8,72, 2,89 Гц, 1Н), 7,44 (дд, 1=8,70, 4,52 Гц, 1Н), 7,65 (дд, 1=8,70, 2,90 Гц, 1Н), 8,08 (д, 1=9,04 Гц, 1Н), 8,42 (д, 1=4,77 Гц, 1Н).
Получение соединения 195.
Соединение 195 получали, как описано ниже по тексту заявки.
Стадия 1. Синтез диэтил {[(6-метоксипиридин-3-ил)амино]метилиден}пропандиоата
Раствор 6-метоксипипридин-3-амина (5 г, 40,3 ммоль) и триэтил этен-1,1,2-трикарбоксилата (8,13 мл, 40,3 ммоль) в ЕЮН (50 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 3 ч. После охлаждения смесь концентрировали в вакууме, получая диэтил {[(6-метоксипиридин-3-ил)амино]метилиден}пропандиоат в виде темно-красного масла (12 г, выход количественный), который использовали без дальнейшей очистки. ЖХ-МС (М-Н+)=295,3.
Стадия 2. Синтез этил 6-метокси-4-оксо-1,4-дигидро-1,5-нафтиридин-3-карбоксилата н
ОоМЬегш А
Н3
1)о\\111егт® А (10 мл) доводили до кипения (250°С) в 50-мл 3-горлой колбе, снабженной дефлегматором и обратным холодильником. Порциями добавляли диэтил {[(6-метоксипиридин-3ил)амино]метилиден}пропандиоат (2,1 г, 7,2 ммоль). Смесь кипятили в течение 15 мин, затем охлаждали до комнатной температуры, разбавляли Су (15 мл) и охлаждали до -20°С в течение ночи. Коричневый осадок отделяли фильтрованием и промывали Су, получая коричневое твердое вещество, которое растирали с ЕЮАс. Суспензию фильтровали, получая этил 6-метокси-4-оксо-1,4-дигидро-1,5-нафтиридин-3карбоксилат в виде твердого вещества серого цвета (1,04 г, 4,2 ммоль, выход 58%). ЖХ-МС (МН+)=249,2.
Стадия 3. Синтез этил 4-бром-6-метокси-1,5-нафтиридин-3-карбоксилата
Н3
Суспензию этил 6-метокси-4-оксо-1,4-дигидро-1,5-нафтиридин-3-карбоксилата (6,3 г, 25,4 ммоль) в ДМФА (20 мл) перемешивали в атмосфере Ν2 при комнатной температуре. По каплям добавляли трибромид фосфора (2,5 мл, 26,7 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение еще 30 мин. Смесь помещали в баню со льдом, добавляли воду (120 мл) и затем насыщенный раствор №2СО3 до рН7. Твердое вещество отделяли вакуумным фильтрованием, промывали водой и высушивали в вакууме. Неочищенный продукт очищали с помощью КН-картриджа (элюент от Су 100% до Су/ЕЮАс 95/5%), получая этил 4-бром-6-метокси-1,5-нафтиридин-3-карбоксилат (6,6 г, 21 ммоль, выход 83%). ЖХ-МС (МН+)=311,1.
Стадия 4. Синтез 4-бром-6-метокси-1,5-нафтиридин-3-карбоновой кислоты ион
ТГФ /Н2О
Н3
Раствор этил 4-бром-6-метокси-1,5-нафтиридин-3-карбоксилата (500 мг, 1,6 ммоль) в ТГФ (4,5 мл) и воде (1,5 мл) обрабатывали ЫОН-Н2О (201 мг, 4,8 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч и затем концентрировали. Остаток растворяли в воде (5 мл) и доводили рН до 4 добавлением 1н. НС1, получая осадок, который отделяли фильтрованием и промывали холодной водой, получая 4-бром-6-метокси-1,5-нафтиридин-3-карбоновую кислоту (409 мг, 1,45 ммоль, выход 90%) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХ-МС (М-Н+)=283,1.
Стадия 5. Синтез 4-хлор-6-метокси-1,5-нафтиридин-3-карбоксамида
1.8ОС12, ΙΧΜ
2. ΝΗ3/ диоксан >
Н3
К раствору 4-бром-6-метокси-1,5-нафтиридин-3-карбоновой кислоты (350 мг, 1,24 ммоль) в сухом ЭСМ (5 мл) добавляли 8ОС12 (136 мкл, 1,86 ммоль), и реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Смесь концентрировали, и остаток растворяли в 0,5М растворе аммиака в
- 56 032384 диоксане (7,4 мл, 3,7 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, затем концентрировали и неочищенный 4-хлор-6-метокси-1,5-нафтиридин-3-карбоксамид (0,6 г) вводили в следующую стадию без дополнительной очистки. ЖХ-МС (М-Н+)=238,2.
Стадия 6. Синтез 4-хлор-6-метокси-1,5-нафтиридин-3-карбонитрила
Н3
К суспензии 4-хлор-6-метокси-1,5-нафтиридин-3-карбоксамида (неочищенный продукт 0,6 г, 2,5 ммоль) в ТГФ (15 мл) добавляли реагент Берджесса (1,2 г, 5,0 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток очищали с помощью хроматографической колонки 8\ΑΡ-25, элюируя ЭСМ и получая 190 мг (0,87 ммоль, выход 35%) 4-хлор-6метокси-1,5-нафтиридин-3-карбонитрила. ЖХ-МС (М-Н+)=220,2.
[1-(3-циано-6-метокси-1,5-нафтиридин-4-ил)пиперидин-4Стадия 7. Синтез трет-бутил ил] карбамата
Указанный в заглавии интермедиат получали по методике, описанной для синтеза трет-бутил [1-(7фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-ил]карбамата (см. соединение 145), используя 4-хлор-6-метокси-1,5нафтиридин-3-карбонитрил. Выход=92%. ЖХ-МС (М-Н+)=384,4.
Стадия 8. Синтез 4-(4-аминопиперидин-1-ил)-6-метокси-1,5-нафтиридин-3-карбонитрила
Указанное в заглавии соединение получали по методике, описанной для синтеза 1-(7фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-амина (см. соединение 145), используя трет-бутил [1-(3-циано-6метокси-1,5-нафтиридин-4-ил)пиперидин-4-ил]карбамат. Выход=88%. ЖХ-МС (М-Н+)=284,3.
Стадия 9. Синтез 4-(4-{[(8-фтор-4-оксо-3,4-дигидро[1]бензопирано[3,4-Ь]пиррол-2-ил)метил]амино}пиперидин-1-ил)-6-метокси-1,5-нафтиридин-3-карбонитрила (соединение 195)
Указанное в заглавии соединение получали по методике, описанной для синтеза соединения 187, используя 4-(4-аминопиперидин-1-ил)-6-метокси-1,5-нафтиридин-3-карбонитрил (выход=35%). ЖХ-МС (М-Н+)=499,4.
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ мд 1,54-1,72 (м, 2Н), 2,02-2,14 (м, 2Н), 2,63 (уш. с, 1Н), 2,75-2,87 (м, 1Н), 3,52 (т, 1=11,07 Гц, 2Н), 3,92 (с, 2Н), 3,96 (с, 3Н), 4,32 (д, 1=11,10 Гц, 2Н), 6,60 (с, 1Н), 7,22-7,35 (м, 2Н), 7,47 (дд, 1=9,15, 4,66 Гц, 1Н), 7,95 (дд, 1=9,10, 2,96 Гц, 1Н), 8,17 (д, 1=8,99 Гц, 1Н), 8,57 (с, 1Н), 12,50 (уш. с, 1Н).
Получение соединения 196.
Соединение 196 получали, как описано ниже по тексту заявки.
Стадия 1. Синтез 5-хлорпиридо[3,4-Ь] пиразина
Смесь 2-хлорпиридин-3,4-диамина (1 г, 6,96 ммоль) и раствора этандиаля (40 мас.% в виде, 3,2 мл,
- 57 032384
27,84 ммоль) в этаноле (20 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч и затем охлаждали до комнатной температуры. Осадок выделяли фильтрованием, промывали ЕЮН и высушивали в вакууме, получая 5-хлорпиридо[3,4-Ь] пиразин (0,3 г, 1,8 ммоль, выход 26%), который вводили в следующую стадию без дополнительной очистки. ЖХ-МС (М-Н+)=166,1.
Стадия 2. Синтез трет-бутил [1-(пиридо[3,4-Ь]пиразин-5ил)пиперидин-4-ил]карбамата
^ΝΗ Вос
Указанное в заглавии соединение получали согласно методике, описанной для синтеза трет-бутил [1-(7-фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-ил]карбамата (см. соединение 145), используя 5хлорпиридо[3,4-Ь]пиразин. Выход=69%. ЖХ-МС (М-Н+)=330,4.
Стадия 3. Синтез 1-(пиридо[3,4-Ь]пиразин-5-ил)пиперидин-4-амина
Указанное в заглавии соединение получали по методике, описанной для синтеза 1-(7фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-амина (см. соединение 145), используя трет-бутил[1-(пиридо[3,4Ь]пиразин-5-ил)пиперидин-4-ил]карбамат. Выход=98%. ЖХ-МС (М-Н+)=230,3.
Стадия 4. Синтез 8-фтор-2-({[1-(пиридо[3,4-Ь]пиразин-3ил)пиперидин-4-ил]амино}метил)[1]бензо-
Указанное в заглавии соединение получали по методике, описанной для синтеза соединения 187, используя 1-(пиридо[3,4-Ь]пиразин-5-ил)пиперидин-4-амин (выход=37%). ЖХ-МС (М-Н+)=445,4. 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-46): δ мд 1,42-1,61 (м, 2Н), 2,02 (д, 1=10,30 Гц, 2Н), 2,76-2,91 (м, 1Н), 3,22 (т, 1=11,46 Гц, 2Н), 3,96 (с, 2Н), 4,80 (д, 1=11,50 Гц, 2Н), 6,62 (с, 1Н), 7,20 (д, 1=5,70 Гц, 1Н), 7,29 (тд, 1=8,74, 3,01 Гц, 1Н), 7,47 (дд, 1=9,10, 4,60 Гц, 1Н), 7,95 (дд, 1=9,10, 2,96 Гц, 1Н), 8,24 (д, 1=5,70 Гц, 1Н), 8,83 (д, 1=1,75 Гц, 1Н), 8,98 (д, 1=1,75 Гц, 1Н).
Получение соединения 199.
Соединение 199 получали, как описано ниже по тексту заявки.
Стадия 1. Синтез 5-хлорпиридо[3,4-Ь]пиразин-3(4Н)-она
Смесь 2-хлорпиридин-3,4-диамина (1 г, 6,96 ммоль) и раствора глиоксиловой кислоты (50 мас.% в Н2О, 0,92 мл, 8,35 ммоль) в МеОН (20 мл) нагревали в сосуде до 50°С в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры, и удаляли растворитель в вакууме. Остаток растирали с Е12О, и суспензию фильтровали. Неочищенный продукт очищали С-18 хроматографией (от 100% воды+0,1% муравьиной кислоты до 80/20 вода+0,1% муравьиная кислота/ΜеСN+0,1% муравьиная кислота), получая 5хлорпиридо[3,4-Ь]пиразин-3(4Н)-он (255 мг, 1,4 ммоль, выход 20%). ЖХ-МС (М-Н+)=182,1.
Стадия 2. Синтез 3,5-дихлорпиридо[3,4-Ь]пиразина
- 58 032384
Смесь 5-хлорпиридо[3,4-Ъ]пиразин-3(4Н)-она (200 мг, 1,1 ммоль) и оксихлорида фосфора (6 мл) кипятили с обратным холодильником в течение 2 ч. После охлаждения растворитель отгоняли в вакууме. Реакционную смесь осторожно выливали на лед и нейтрализовали насыщенным раствором №:СО3. Добавляли ЭСМ, органическую фазу промывали насыщенным раствором соли, высушивали над сульфатом натрия и концентрировали. Неочищенный продукт очищали ИН-хроматографией (от 100% ЭСМ до 80/20 ЭСМ/Е1ОАс), получая 3,5-дихлорпиридо[3,4-Ъ]пиразин (200 мг, 1 ммоль, выход 91%). ЖХ-МС (МН+)=200,1.
Стадия 3. Синтез 5-хлор-3-метоксипиридо[3,4-Ъ] пиразина
А
N ^С1
С1
№ОМе
МеОН/ ДМФА
Ν<Αοχ0Η3
С1
К раствору 3,5-дихлорпиридо[3,4-Ъ]пиразина (200 мг, 1 ммоль) в ДМФА (3 мл) добавляли метоксид натрия (0,5М раствор в МеОН, 2,2 мл, 1,1 ммоль), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Раствор разбавляли водой и экстрагировали Е1ОАс. Органический слой высушивали над сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали, получая 5-хлор-3метоксипиридо[3,4-Ъ] пиразин (150 мг, 0,77 ммоль, выход 77%). ЖХ-МС (М-Н+)=196,1.
Стадия 4. Синтез трет-бутил [1-(3-метоксипиридо[3,4-Ъ]пиразин-5-ил)пиперидин-4-ил] карбамата
Вос
5-Хлор-3-метоксипиридо[3,4-Ъ] пиразин (100 мг, 0,55 ммоль) и 4-(№Бос-амино)пиперидин (332 мг, 1,66 ммоль) суспендировали в изопропаноле (5 мл) и перемешивали при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционный раствор концентрировали и очищали КН-хроматографией (от 100% ЭСМ до 95/5 ЭСМ/МеОН), получая трет-бутил [1-(3-метоксипиридо[3,4-Ъ]пиразин-5ил)пиперидин-4-ил] карбамат (170 мг, 0,47 ммоль, выход 85%). ЖХ-МС (М-Н+)=360,4.
Стадия 5. Синтез 1-(3-метоксипиридо[3,4-Ъ]пиразин-5-ил)пиперидин-4-амина
получали (см. соединение 145), по методике, описанной для синтеза 1-(7используя трет-бутил [1-(3Указанное в заглавии соединение фторизохинолин-1-ил)пиперидин-4-амина метоксипиридо[3,4-Ъ]пиразин-5-ил)пиперидин-4-ил]карбамат. Выход=91%. ЖХ-МС (М-Н+)=260,3.
Стадия 6. Синтез 8-фтор-2-({[1-(3-метоксипиридо[3,4-Ъ]пиразин-5-ил)пиперидин-4-ил]амино}метил)[1]бензопирано[3,4-Ъ]пиррол-4(3Н)-она (формиата, соединение 199)
Указанное в заглавии соединение получали по методике, описанной для синтеза соединения 187, используя 1-(3-метоксипиридо[3,4-Ъ]пиразин-5-ил)пиперидин-4-амин (выход=44%). ЖХ-МС (МН+)=475,2.
’Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ мд 1,35-1,53 (м, 2Н), 1,89-2,02 (м, 2Н), 2,69-2,84 (м, 1Н), 3,11 (т, 1=11,35 Гц, 2Н), 3.90 (с, 2Н), 3,99 (с, 3Н), 4,60-4,71 (м, 2Н), 6,57 (с, 1Н), 6,98 (д, 1=5,67 Гц, 1Н), 7,26 (тд, 1=8,75, 3,03 Гц, 1Н), 7,44 (дд, 1=9,10, 4,60 Гц, 1Н), 7,92 (дд, 1=9,10, 3,03 Гц, 1Н), 8,13 (д, 1=5,48 Гц, 1Н), 8,15 (с, 1Н), 8,42 (с, 1Н), 12,68 (уш. с, 1Н).
Получение соединения 203.
Соединение 203 получали, как описано ниже по тексту заявки.
Стадия 1. Синтез 1-бром-7-метоксиизохинолин-3-амина
- 59 032384
Вг
Указанный в заглавии интермедиат получали по методике, описанной для синтеза 2-(цианометил-5фторбензонитрила (см. соединение 149), используя 2-(цианометил)-5-метоксибензонитрил (выход=17%). ЖХ-МС т/ζ: 2 53,0 (М+1).
1Н ЯМР (300 МГц, ДМСО-дб): δ мд 7,55 (д, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,22 (дд, 1=9,0, 2,5 Гц, 1Н), 7,14 (д, 1=2,5 Гц, 1Н), 6,64 (с, 1Н), 6,05 (с, 2Н), 3,85 (с, 3Н).
Стадия 2. Синтез 1-бром-3-фтор-7-метоксиизохинолина
Вг Вг
Указанный в заглавии интермедиат получали по методике, описанной для синтеза 1-бром-3,7дифторизохинолина (см. соединение 149), используя 1-бром-7-метоксиизохинолин-3-амин (выход=66%). ЖХ-МС т/ζ: 256,0 (М+1).
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06): δ мд 8,01 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 7,71 (с, 1Н), 7,58 (дд, 1=9,3, 2,2 Гц, 1Н), 7,43 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 3,96 (с, 3Н).
Стадия 3. Синтез 6-фтор-4-({3-[4-(3-фтор-7-метоксиизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]-2гидроксипропил}амино)-2Н-1-бензопиран-2-она (соединение 203)
Ν,Ν-диизопропилэтиламин (1,7 мл, 9,57 ммоль) при перемешивании добавляли к суспензии 1-бром3-фтор-7-метоксиизохинолина (490 мг, 1,91 ммоль) и гидрохлорида 6-фтор-4-{[2-гидрокси-3-(пиперазин1-ил)пропил] амино }-2Н-1-бензопиран-2-она (полученного, как описано в синтезе соединения 166, 754 мг, 1,91 ммоль) в ДМСО (15 мл). Полученную смесь перемешивали при 100°С в течение 18 ч, затем охлаждали, выливали в воду (25 мл) и экстрагировали диэтиловым эфиром (3х25 мл) и БСМ (20 мл). Объединенные органические слои высушивали над сульфатом магния, фильтровали и концентрировали. Неочищенный продукт адсорбировали на силикагель и очищали флэш-хроматографией (БСМ/МеОН/КН3), получая 6-фтор-4-({3-[4-(3-фтор-7-метоксиизохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]-2-гидроксипропил}амино)2Н-1-бензопиран-2-он (375 мг, выход 39%) в виде бежевого твердого вещества. ЖХ-МС т/ζ: 497,1 (М+1).
1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-06)^ мд 8,02 (дд, 1=10,0, 2,9 Гц, 1Н), 7,82 (д, 1=9,0 Гц, 1Н), 7,71 (т, 1=5,5 Гц, 1Н), 7,52-7,43 (м, 1Н), 7,42-7,33 (м, 2Н), 7,28 (д, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,01 (с, 1Н), 5,34 (с, 1Н), 4,99 (д, 1=4,8 Гц, 1Н), 4,03-3,92 (м, 1Н), 3,89 (с, 3Н), 3,48-3,35 (м, 5Н), 3,29-3,18 (м, 1Н), 2,83-2,68 (м, 4Н).
- 60 032384
Стадия 1.
Смесь карбоната калия (634 мг, 4,6 ммоль, 1,5 экв. ), 1-хлоризохинолина (500 мг, 3,1 ммоль, 1 экв.) и метилпиперазин-2-карбоксилата (880 мг, 6,1 ммоль, 2 экв.) в ДМСО (4 мл) нагревали микроволновым излучением до 120°С в течение 5 ч. Реакционной смеси давали остыть до комнатной температуры. Твердое вещество отделяли фильтрованием, промывали водой и затем высушивали при пониженном давлении, получая метил 4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-2-карбоксилат, т.е. интермедиат Р1 (выход=81%).
Стадия 2.
КаН (60%-ная дисперсия в минеральном масле, 81 мг, 2 ммоль, 1,1 экв.) и трет-бутил Ν-(3бромпропил)карбамат (330 мг, 1,4 ммоль, 0,75 экв.) при перемешивании добавляли к раствору интермедиата Р1 (488 мг, 1,8 ммоль, 1 экв.) в безводном ДМФА (6 мл). Смесь перемешивали в течение 4 ч, затем гасили водой и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу высушивали над сульфатом натрия и хроматографировали на оксиде кремния, элюируя градиентом 50-100% ЕЮАс в петролейном эфире и получая метил 1 -{ 3 -[(трет-бутоксикарбонил)амино]пропил}-4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-2карбоксилат, т.е. интермедиат Р2 (выход=51%).
Стадия 3.
К раствору интермедиата Р2 (130 мг, 0,3 ммоль, 1 экв.) в смеси ТГФ/вода 9:1 (10 мл) добавляли ΕίОН (13 мг, 0,33 ммоль, 1,1 экв). Смесь перемешивали при 60°С в течение 5 ч, затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный продукт растворяли в ДМФА (2 мл), добавляли ТЕА (62 мкл, 0,45ммоль, 1,5 экв.) и затем гексаметилдисилазан (72,4 мг, 0,45 ммоль, 1,5 экв.). Смесь охлаждали до 0°С и добавляли НАТи (137 мг, 0,36 ммоль, 1,2 экв.). После перемешивания в течение 3 ч при кт растворитель выпаривали в вакууме, остаток растворяли в этилацетате и промывали насыщенным раствором соли. Органическую фазу отделяли, высушивали и упаривали в вакууме. Полученный продукт очищали на 81-колонке, элюируя градиентом этилацетат-этилацетат/МеОН 95:5 и получая 90 мг трет-бутил {3-[2карбамоил-4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-1-ил]пропил}карбамат, т.е. интермедиат К3 (выход=58%). ЖХ-МС (М-Н+)=414,4.
Стадия 4.
ТЕА (1 мл) добавляли к раствору интермедиата К4 (78 мг, 0,2 ммоль, 1 экв.) в дихлорметане (3 мл) при комнатной температуре, и полученную смесь перемешивали в течение 60 мин. Летучие компоненты выпаривали при пониженном давлении, после чего остаток растворяли в МеОН (2 мл) и помещали на предварительно подготовленный картридж 8СХ (1 г). 8СХ элюировали МеОН и затем 2М раствором аммиака в метаноле. Основные фракции упаривали при пониженном давлении, получая 56 мг 1-(3аминопропил)-4-(изохинолин-1-ил)пиперазин-2-карбоксамида, т.е. интермедиата К4 (выход=количественный). ЖХ-МС (М-Н+)=314,2.
Стадия 5.
Раствор интермедиата К4 (56 мг, 0,2 ммоль, 1,1 экв.), триэтиламина (37 мкл, 0,27 ммоль, 1,5 экв.) и 2-оксо-2Н-хромен-4-ил трифторметансульфоната, т.е. интермедиата А1 (53 мг, 0,18 ммоль, 1 экв.) в ацетонитриле (2 мл) нагревали до 70°С в течение 1 ч. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток распределяли между дихлорметаном (10 мл) и смесью насыщенный раствор соли/бикарбонат натрия (1:1, 10 мл). Смесь фильтровали через гидрофобную фритту (разделитель фаз), промывая дихлорметаном (10 мл). Органическую фазу упаривали при пониженном давлении, и остаток хроматографировали на ΝΉ-модифицированном силикагеле (2x8NΑΡ 11 последовательно), элюируя градиентом 20-100% ЕЮАс в циклогексане, получая 79 мг бесцветной клейкой смолы. Продукт растворяли в дихлорметане (3 мл) и обрабатывали 1М раствором НС1 в диэтиловом эфире (0,46 мл), вызывая образование осадка. Полученную смесь упаривали при пониженном давлении, и остаток растирали с диэтиловым эфиром. Твердое вещество высушивали, получая гидрохлорид 4-(изохинолин-1-ил)-1-{3-[(2-оксо2Н-хромен-4-ил)амино]пропил}пиперазин-2-карбоксамида (соединение 89) (выход=25%). ЖХ-МС (МН+)=458,4.
Соединение 89: 1Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-46): δ 10,23 (уш. с, 1Н), 8,38 (уш. с, 1Н), 8,19 (д, 1=8,5 Гц, 1Н), 8,15 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 8,05 (д, 1=7,3 Гц, 1Н), 7,99 (уш. с, 1Н), 7,96 (д, 1=8,3 Гц, 1Н), 7,83 (т, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,78 (т, 1=7,4 Гц, 1Н), 7,70-7,64 (м, 1Н), 7,64-7,58 (м, 1Н), 7,54 (д, 1=5,8 Гц, 1Н), 7,39-7,29 (м, 2Н), 5,29 (с, 1Н), 4,49-3,82 (м, 4Н), 3,75-3,53 (м, 2Н), 3,48-3,19 (м, 6Н), 2,24-1,93 (м, 2Н).
Биологические исследования.
Пример 1. Ингибирование ДНК-гиразы и Торо IV у Е.СоБ и 8.аигеик.
Описанные выше соединения тестировали в отношении ингибирования фермента ДНК-гиразы в анализе суперспирализации и в отношении ингибирования фермента топоизомеразы IV в анализе декатенации как для грамположительных, так и для грамотрицательных бактерий согласно описанной ниже методике.
Оба анализа выполняли согласно модифицированной типовой методике, приведенной в статье В1апсНе Е., е! а1. ”01ГГегеп11а1 ВеНагюгк оГ 81арНу1ососсик аигеик αηά ЕксНепсЫа со11 Туре II ΩΝΛ Торо1котегакек, АпИт1сгоЬ. Адеп!к СНетоШег.. 1996, уо1. 40, № 12, р. 2714-2720.
Соединения подвергали скринингу в одной концентрации (200, 100 или 50 мкм) в двух параллель
- 61 032384 ных экспериментах.
Ципрофлоксацин и новобиоцин использовались в качестве эталонных соединений в одной концентрации, равной 200 и 50 мкм соответственно.
Анализ суперспирализации под действием ДНК-гиразы.
Использовались реагенты из наборов для исследования суперспирализации под действием гираз 8.Ацгеик и Е.Со11 Сугаке 8ирегсоШпд Аккау к11ь ЦпкрпаНк, иК). Готовили мастер-микс (исходную смесь) в общем объеме, достаточном для проведения необходимого количества реакций, содержащий следующие реагенты: 5х аналитический буфер, релаксированный субстрат рВК322 (0,5 мкг/реакцию), воду, свободную от РНКазы-ДНКазы. Аликвоты этой смеси помещали в каждую пробирку, затем в каждую реакционную пробирку добавляли 10х концентрированные растворы соединений или носитель (ДМСО) для контрольных опытов.
Реакции начинали добавлением фермента гиразы Е.СоН (2 и/реакцию) или 8.Ацгеик (1 и/реакцию).
В качестве отрицательного контроля использовали образцы, в которые добавляли аналогичные объемы буфера для разбавления (без ферментов).
Содержимое реакционных пробирок осторожно перемешивали на вортексе и инкубировали в течение 30 мин при 37°С. Каждую реакцию останавливали добавлением 30 мкл останавливающего буфера и 30 мкл смеси хлороформ/изоамиловый спирт (24/1), подвергали кратковременному перемешиванию в течение 5-10 с и центрифугировали при 20000хд в течение 2 мин. Образцы помещали в 1%-ный агарозный гель и подвергали электрофорезу в течение 1 ч при постоянном напряжении 80В в ТАЕ (40 мМ трисацетат, 2 мМ ЕЭТА).
Регистрация и анализ данных.
Обработка релаксированных молекул рВК322 ДНК-гиразой превращала релаксированные топологические изомеры (ДНК с различным числом зацеплений) в суперспиральную форму плазмиды, которая быстрее перемещается по агарозному гелю. Кроме того, может наблюдаться верхняя полоса, которая состоит из ДНК с открытым циклом (имеющих разрыв), которые присутствуют в релаксированном субстрате, но мигрируют совместно с некоторыми из релаксированных топоизомеров.
Полосы визуализировали окрашиванием бромистым этидием (разбавление 1:20000) в течение 30 мин и затем обесцвечивали в дистиллированной воде в течение 10 мин.
Для оценки активности соединений в отношении ферментов полосы суперспирализованных ДНК в геле фотографировали с помощью цифровой системы получения изображений ИпадеОиаШ ЬА8 4000 (СЕ Неаййсаге), согласно инструкциям производителя.
Интенсивность флуоресценции каждой полосы определяли с помощью программы 1тадеОиап1 ТЬ и выражали в виде объема (объема некалиброванного количества материала в элементе изображения после вычитания интенсивности фона с использованием метода катящегося шара).
Интенсивность каждой полосы сравнивали в процентном выражении с интенсивностью полосы для носителя на том же самом геле, причем полоса носителя служила положительным контролем.
Ингибирующую активность выражали в процентах ингибирования относительно положительного контроля.
Результаты суммированы в приведенной ниже табл. 2.
Анализ декатенации под действием топоизомеразы IV.
Использовали наборы для определения декатенации под действием топоизомераз IV 8.Ацгеик и Е.СоН Торокотегаке IV беса!епа1юп кНк (1пкр1га1к, ИК). Готовили мастер-микс (исходную смесь) в общем объеме, достаточном для проведения необходимого количества реакций, содержащий следующие реагенты: 5х аналитический буфер (50 мМ НЕРЕ8-КОН (рН 7,6), 100 мМ глутамат калия, 10 мМ ацетат магния, 10 мМ ОТТ, 1 мМ АТР, 50 мкг/мл альбумин), субстрат кДНК (200 нг/реакцию), воду, свободную от РНКазы-ДНКазы. Аликвоты этой смеси помещали в каждую пробирку, затем в каждую реакционную пробирку добавляли 10х концентрированные растворы соединений или носитель (ДМСО) для контрольных опытов.
Реакции начинали добавлением фермента топоизомераза IV (0,5 и/реакцию).
Образцы, в которые добавляли аналогичный объем буфера для разбавления, использовали в качестве отрицательного контроля (без фермента).
Содержимое реакционных пробирок осторожно перемешивали на вортексе и инкубировали в течение 30 мин при 37°С. Каждую реакцию останавливали добавлением 30 мкл останавливающего буфера и 30 мкл смеси хлороформ/изоамиловый спирт (24/1), подвергали кратковременному перемешиванию в течение 5-10 с и центрифугировали при 20000хд в течение 2 мин. Образцы, отобранные из верхней фазы, помещали в 1%-ный агарозный гель и подвергали электрофорезу в течение 1 ч при постоянном напряжении 80В в ТАЕ (40 мМ трис-ацетат, 2 мМ ЕЭТА).
Регистрация и анализ данных.
Вследствие высокой молекулярной массы кДНК не способна проходить через агарозный гель в нормальных условиях электрофореза и остается в лунках. В присутствии топоизомеразы Торо IV в результате декатенации из кДНК высвобождались мини-циклические (2,5 КЬ) структуры, которые очень
- 62 032384 быстро и легко разделялись в геле при относительно высоком напряжении.
Полосы визуализировали окрашиванием бромистым этидием (разбавление 1:20000) в течение 30 мин и затем обесцвечивали в дистиллированной воде в течение 10 мин.
Для скрининга соединений в одной концентрации с целью оценки активности соединений в отношении ферментов полосы декатенированных ДНК в геле фотографировали с помощью цифровой системы получения изображений НтадеРиап! ЬА8 4000 (СЕ Неа1!йсаге) согласно инструкциям производителя.
Интенсивность флуоресценции каждой полосы определяли с помощью программы [тадеОиап! ТЕ и выражали в виде объема (объема некалиброванного количества материала в элементе изображения после вычитания интенсивности фона с использованием метода катящегося шара).
Интенсивность каждой полосы сравнивали в процентном выражении с интенсивностью полосы для носителя на том же самом геле, причем полоса носителя служила положительным контролем.
Ингибирующую активность выражали в процентах ингибирования относительно положительного контроля.
Результаты суммированы в приведенной ниже табл. 2.
Таблица 2
- 63 032384
90 50 93
91 50 99
93 50 100
94 50 100
95 50 92
98 50 93
99 50 98
100 50 95
102 50 100
103 50 98
104 50 100
105 50 91
106 50 100
108 50 100
109 50 100
124 50 79
125 50 86
126 50 96
127 50 89
131 50 100
134 50 87
143 50 96
144 50 72
145 50 99
146 50 91
147 50 84
148 50 96
149 50 90
150 50 50
152 50 88
153 50 72
155 50 60
156 50 78
158 50 95
159 50 94
162 50 95
163 50 80
166 50 80
171 50 93
172 50 94
177 50 77
184 50 68
186 50 70
187 50 79
188 50 100
192 50 70
195 50 99
196 50 85
199 50 90
203 50 100
н/а - не активно.
81 89 н/а
95 95 67
100 95 63
91 100 88
53 81 н/а
90 90 н/а
100 94 92
76 91 н/а
100 100 100
100 100 100
100 100 100
66 100 н/а
100 100 68
76 100 н/а
72 100 н/а
62 75 н/а
68 89 н/а
100 95 86
70 76 н/а
100 81 78
78 71 н/а
91 89 н/а
85 65 н/а
100 97 н/а
100 93 н/а
74 85 н/а
100 100 100
90 100 100
50 100 50
100 100 88
50 100 61
0 50 50
91 89 86
97 100 100
98 100 100
100 100 100
90 30 100
90 70 97
97 100 72
89 64 39
74 98 14
58 83 69
54 100 87
82 95 95
92 97 98
37 88 76
100 100 100
100 83 89
100 92 100
100 100 100
Приведенные выше результаты демонстрируют, что типовые соединения по настоящему изобретению эффективно ингибируют как ДНК-гиразу так и Торо IV Е.СоБ, которая является грамположительной бактерией, и/или 8.аигеи§, которая является грамотрицательной бактерий.
Пример 2. Определение 1С50.
Соединения, которые в приведенном выше примере 1 продемонстрировали ингибирующую активность, превышающую выбранный порог (т.е. как минимум 50%-ное ингибирование в одной из концентраций), подвергались дополнительному исследованию с построением кривой концентрация-реакция (восемь полулогарифмических концентраций в диапазоне от 0,1 до 300 мкМ) для определения 1С50.
Полосы суперспирализованных или декатенированных ДНК, полученные, как описано в примере 1, анализировали следующим образом.
Полосы анализировали с помощью оборудования для документирования гелей (8упдепе, СатЬпйде, иК), и количественные показатели определяли с использованием программы 8упдепе Оепе Тоок. Исходные данные о гелях (объемы флуоресцентных полос), полученные из данных 8упдепе, программа для анализа гелей Оепе Тоок пересчитывала в процентные доли от 100%-ного результата (полосы полностью суперспирализованных или декатенированных ДНК). Эти данные анализировали с использованием про- 64 032384 граммы 81дтаР1о! версии 12.3 (2013). Данные по 1С50 вычисляли с помощью инструмента д1оЬа1 сигуе ίιΐ поп-йпеаг гедгеззюп (подбор кривой по всей области нелинейная регрессия), выбирая функцию подбора 81пд1е, 2 Рагате!ег из категории Ехропепйа1 Эесау ециайоп (Уравнение экспоненциального спада).
Результаты приведены в помещенной ниже табл. 3.
Таблица 3
Соединение Νο Е. соИ 3 . аигеиз
1С5о днк- гиразы 1С50 Торо IV 1С5о ДНК- гиразы 1С50 Торо IV
29 6 10 20
44 0,5 10 14 90
51 0,9 2,4 4,5
52 2,3 1,7 6, 8
55 2,1 2,6 5,6
56 4,8 13,1 33,1
59 1,2 16, 1 4,4 18,5
61 3,3 20,2 8,7
62 22,3 6,7 6, 9
64 20,4 16,5 5,2
65 40,6 29,3 26, 8
66 2,3 3,2 12,1
67 0,8 1,7 2,8 11,8
69 12 51 300
72 2,6 3,8 9,6 52
73 66 43,3 136, 9
77 6, 8 3,8 13,9
78 19,5 6, 8 6, 3
79 0,6 1,2 5,2 5,5
80 1,2 1,3 3,9 3,1
86 7,6 7,8 3,7 52,8
88 3,2 0,9 1,1 6, 7
89 28 54 33
90 8,3 15,5 9,3
91 0,9 1,9 2,6 7,1
93 2,2 3,8 5,2 6, 9
94 4,8 3,0 4,2 13,8
95 5,6 3,9
98 5,6 8,8 4,6
99 2,1 1,5 0,4 3,5
100 4,5 10,2 4,7
102 1,8 1,1 1,5 1,7
103 1,1 1,3 1,6 3,0
104 1,5 0,4 0,6 0,3
105 11,4 5,6 6, 6
106 2,7 2,2 1 0,6
108 1,0 1,8 4,8
109 5,1 5,6 20,7
124 7,0 6, 0 9,0
125 6, 3 59 19
126 1,3 8,0 1,3 15
127 2,9 52,5
134 2,8 2,5 0,81 1,72
148 0,42 0,12 0,024 0,05
149 0,1 0,14 0,018 0,04
150 17,1 4,24 1,02 5,89
152 0,66 0,85 0,31 0,53
153 1,42 1,34 0,49 2,3
155 6, 31 8,74 7,21
156 2,74 0,64 1,76 1,25
158 1,86 0,92 0,86 2,13
159 1,65 1,04 0,51 1,09
162 4,85 0,95 0,88 0,31
163 4,4 9,89 82,7 1,22
166 0,15 0,2 1,13 0,3
187 0,19 1,57 0,16 1,37
188 0,09 0,3 0,015 0,2
192 0,08 0,13 0,017 0,1
195 0,14 0,3 0,1 0,1
196 0,79 2,54 0,16 0,39
- 65 032384

Claims (16)

  1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
    1. Соединение формулы (I) где
    С1 и СЕ, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой СН или Ν при условии, что по крайней мере один из С1 и СЕ представляет собой Ν;
    К1 означает атом водорода, атом галогена, ОН, (С1-3)алкил, (С1-3)алкокси, (С1-3)алкил-ОН, -СООК' или -СΟ\Κ'Κ, где К' и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил;
    Е1 означает σ-связь, -О- или -Ν^;
    Υ представляет собой этиленильную, н-пропиленильную, н-бутиленильную, изобутиленильную, втор-бутиленильную, трет-бутиленильную, н-пентиленильную, изопентиленильную, вторпентиленильную, трет-пентиленильную, нео-пентиленильную, 3-пентиленильную, н-гексиленильную, изогексиленильную группу, -\Η-(С1-6)алкиленильную группу или (С4-5)циклоалкиленильную группу, где указанные группы необязательно замещены гидроксигруппой, или аминогруппой, или формамидогруппой (-ЯН-СНО);
    Е2 означает σ-связь, -Ν! или -Ν 1-(СУ6)ал1<илелнил;
    А представляет собой конденсированную бициклическую группу, имеющую одну из приведенных ниже формул (II) и (III) где
    С3 представляет собой Ν или С(К'), где К' означает Н или (С1-3)алкил;
    С4, СЕ и С6, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой СН, СЕ, С-ΟΝ или Ν;
    К2 означает атом водорода, атом галогена, гидрокси, циано, (С1-3)алкил, (С1-3)алкокси, СЕ3, ОСЕ3 или -ΝΕ'Ε, где К' и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил; и
    К3 означает атом водорода, атом галогена, гидрокси, циано, (С1-3)алкил, (С1-3)алкокси, трифторметил или -^'К, где К' и К представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил; и
    В представляет собой конденсированную бициклическую группу, имеющую одну из приведенных ниже формул (IV), (V) и (VI), или конденсированную трициклическую группу, имеющую приведенную ниже формулу (VII) где
    Р1 означает Ν или СК', где К' представляет собой Н, ΟΝ или СЕ3;
    Р2 означает О, 8, 8О2 или С(К')(К), где заместители К' и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил;
    заместители К4 и К5 совместно образуют 3-7-членный ароматический или алифатический цикл, необязательно включающий как минимум один гетероатом, выбранный из Ν, О и 8;
    η означает 0 или 1; и
    Кб представляет собой атом водорода, атом галогена, СЕ3, гидрокси или -^'К, где К' и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил;
    а также аддитивная соль указанного соединения формулы (I) с фармацевтически приемлемыми ор
    - 66 032384 ганическими или неорганическими кислотами или основаниями, его энантиомер, Ν-оксид и четвертичная аммониевая соль.
  2. 2. Соединение по п.1, где А представляет собой конденсированную бициклическую систему, имеющую одну из приведенных ниже формул:
    где
    К' представляет собой Н или (С1_3)алкил;
    К2 означает атом водорода, атом галогена, гидрокси, циано, (С1-3)алкил, (С1-3)алкокси, ОСЕ3 или -ΝΚ'Κ, где К' и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1_3)алкил; и
    К3 означает атом водорода, атом галогена, гидрокси, циано, (С1_3)алкил, (С1_3)алкокси, трифторметил или -ΝΚ'Κ, где К' и К представляют собой атом водорода или (С]_3)алкил.
  3. 3. Соединение по п.1, где В означает конденсированную бициклическую или трициклическую группу, имеющую одну из следующих формул:
    - 67 032384 где Кб представляет собой атом водорода, атом галогена, СР3, гидрокси или -ΝΚ'Κ, где К' и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил.
  4. 4. Соединение по п.1, где О3 означает Ν, СН или С(СН3).
  5. 5. Соединение по любому из пп.1-4, где К3 представляет собой атом водорода, атом галогена, циано, (С1-3)алкил или -ΝΕΈ, где К' и К представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил.
  6. 6. Соединение по любому из пп.1-4, где К3 представляет собой атом водорода, Р, С1, циано, СН3, NΗ2 или Ν(^)2.
  7. 7. Соединение по любому из пп.1-4, где К1 представляет собой атом водорода, атом фтора, атом хлора, ОН, (С1-3)алкил-ОН, -СООК' или -СОN(К')(К), где К' и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил.
  8. 8. Соединение по любому из пп.1-4, где К2 представляет собой атом водорода, атом галогена, циано, (С1-3)алкил, (С1-3)алкокси или NК'К, где К' и К, идентичные или отличающиеся друг от друга, представляют собой атом водорода или (С1-3)алкил.
  9. 9. Соединение по любому из пп.1-4, где Υ представляет собой этиленильную, н-пропиленильную, н-бутиленильную, изобутиленильную, втор-бутиленильную, трет-бутиленильную группу, -№Н-(С14)алкиленильную группу или (С4-5)циклоалкиленильную группу, где указанная группа необязательно замещена одной гидроксигруппой или аминогруппой.
  10. 10. Соединение по любому из пп.1-4, где Р2 означает О, 8, 8О2 или СН2.
  11. 11. Соединение по любому из пп.1-4, где Кд и К5 совместно образуют 5- или 6-членный ароматический или алифатический цикл, необязательно включающий как минимум один гетероатом, выбранный из Ν, О и 8.
  12. 12. Соединение по п.11, где Кд и К5 совместно образуют 6-членный цикл, выбранный из бензола или пиридина.
  13. 13. Фармацевтическая композиция для лечения бактериальных инфекций, включающая по меньшей мере одно соединение формулы (I) по любому из пп.1-12, его аддитивную соль с фармацевтически приемлемой органической или неорганической кислотой или основанием, или его энантиомер, или его четвертичную аммониевую соль, или его Ν-оксид, а также по меньшей мере один инертный фармацевтически приемлемый эксципиент.
  14. 14. Применение соединения формулы (I) по любому из пп.1-12 для получения лекарственного средства для лечения бактериальных инфекций.
  15. 15. Применение согласно п.14, где указанные бактериальные инфекции выбраны из группы, состоящей из кожных инфекций, инфекций слизистых оболочек, гинекологических инфекций, инфекций дыхательных путей (КТ), инфекций центральной нервной системы, желудочно-кишечных инфекций, инфекций костной ткани, сердечно-сосудистых инфекций, инфекций, передающихся половым путем, или инфекций мочевыводящих путей.
  16. 16. Способ лечения бактериальных инфекций, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, соединения формулы (I) по любому из пп.1-12.
EA201791219A 2014-12-17 2015-12-14 Антибактериальные композиции, имеющие широкий спектр активности EA032384B1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP14198414 2014-12-17
PCT/EP2015/079528 WO2016096686A1 (en) 2014-12-17 2015-12-14 Antibacterial compounds having broad spectrum of activity

Publications (2)

Publication Number Publication Date
EA201791219A1 EA201791219A1 (ru) 2018-01-31
EA032384B1 true EA032384B1 (ru) 2019-05-31

Family

ID=52338839

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
EA201791219A EA032384B1 (ru) 2014-12-17 2015-12-14 Антибактериальные композиции, имеющие широкий спектр активности

Country Status (28)

Country Link
US (1) US10221144B2 (ru)
EP (1) EP3233827B1 (ru)
JP (1) JP6723242B2 (ru)
KR (1) KR20170097069A (ru)
CN (1) CN107108569A (ru)
AR (1) AR102989A1 (ru)
AU (1) AU2015366469B2 (ru)
BR (1) BR112017011980A2 (ru)
CA (1) CA2968455A1 (ru)
CY (1) CY1123465T1 (ru)
DK (1) DK3233827T3 (ru)
EA (1) EA032384B1 (ru)
ES (1) ES2850248T3 (ru)
GE (1) GEP20196991B (ru)
HK (1) HK1245257A1 (ru)
HR (1) HRP20201379T1 (ru)
HU (1) HUE050749T2 (ru)
IL (1) IL252432B (ru)
MA (1) MA41169A (ru)
MD (1) MD3233827T2 (ru)
MX (1) MX2017007371A (ru)
PL (1) PL3233827T3 (ru)
PT (1) PT3233827T (ru)
RS (1) RS60866B1 (ru)
SG (1) SG11201704168QA (ru)
SI (1) SI3233827T1 (ru)
UA (1) UA121978C2 (ru)
WO (1) WO2016096686A1 (ru)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2748748C1 (ru) * 2020-06-25 2021-05-31 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Пермский государственный национальный исследовательский университет" (ПГНИУ) Противотуберкулёзное средство на основе (Z)-3-(3,3-Диметил-2-оксобутилиден)-3,4-дигидро-2H-1,4-бензоксазин-2-она и способ его синтеза

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MA41168A (fr) * 2014-12-17 2017-10-24 Acraf Nouveaux composés antibactériens
WO2017106607A1 (en) 2015-12-17 2017-06-22 Merck Patent Gmbh Polycyclic tlr7/8 antagonists and use thereof in the treatment of immune disorders
JP2019517545A (ja) 2016-06-08 2019-06-24 アジェンデ・キミケ・リウニテ・アンジェリニ・フランチェスコ・ア・チ・エレ・ア・エフェ・ソシエタ・ペル・アチオニＡｚｉｅｎｄｅ Ｃｈｉｍｉｃｈｅ Ｒｉｕｎｉｔｅ Ａｎｇｅｌｉｎｉ Ｆｒａｎｃｅｓｃｏ Ａ．Ｃ．Ｒ．Ａ．Ｆ．Ｓｏｃｉｅｔａ Ｐｅｒ Ａｚｉｏｎｉ 新しい抗菌性化合物
ES2944573T3 (es) 2016-08-08 2023-06-22 Merck Patent Gmbh Antagonistas de TLR7/8 y usos de los mismos
TWI673271B (zh) 2016-12-15 2019-10-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 製備btk抑制劑之方法
CN108689876B (zh) * 2018-06-28 2020-11-27 苏州东南药业股份有限公司 一种8-(2-羟基苯甲酰胺基)辛酸钠的制备方法
ES2952567T3 (es) * 2019-05-20 2023-11-02 Lonza Guangzhou Pharmaceutical Ltd Método para la preparación de Carsalam
CN114085194B (zh) * 2021-12-08 2023-07-18 青岛科技大学 一种2-(2-羟苯基)-4h-[1,3]-苯并噁嗪-4-酮制备方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010081874A1 (en) * 2009-01-15 2010-07-22 Glaxo Group Limited Naphthyridin-2 (1 h)-one compounds useful as antibacterials
WO2010084152A1 (en) * 2009-01-21 2010-07-29 Basilea Pharmaceutica Ag Novel bicyclic antibiotics
WO2013068948A1 (en) * 2011-11-08 2013-05-16 Actelion Pharmaceuticals Ltd 2-oxo-oxazolidin-3,5-diyl antibiotic derivatives

Family Cites Families (36)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2679481A (en) * 1952-02-07 1954-05-25 Socony Vacuum Oil Co Inc Antioxidants
GB1187680A (en) * 1967-11-15 1970-04-15 Science Union & Cie New Heterocyclic Substituted Piperazines
DE2037852C3 (de) * 1970-07-30 1980-06-26 Boehringer Sohn Ingelheim Neue Piperazinderivate und Verfahren zu ihrer Herstellung
US3859438A (en) * 1971-07-08 1975-01-07 Boehringer Sohn Ingelheim Pharmaceutical compositions containing an n-(1-bicyclic aryl-propyl-2)-n-bicyclic aryl-piperazine and method of use
DE2325633A1 (de) * 1973-05-21 1974-12-12 Boehringer Sohn Ingelheim Piperazinderivate
CA1041523A (en) * 1974-06-19 1978-10-31 Queen's University Preparation of 1-oxapenicillins and novel intermediates therefor
FI60041C (fi) * 1980-05-21 1981-11-10 Ahlstroem Oy Foerfarande foer tillverkning av alkalisk sulfitmassa
MX173362B (es) * 1987-03-02 1994-02-23 Pfizer Compuestos de piperazinil heterociclicos y procedimiento para su preparacion
US4883795A (en) * 1988-01-22 1989-11-28 Pfizer Inc. Piperazinyl-heterocyclic compounds
US4831031A (en) * 1988-01-22 1989-05-16 Pfizer Inc. Aryl piperazinyl-(C2 or C4) alkylene heterocyclic compounds having neuroleptic activity
FR2640266B2 (fr) * 1988-07-12 1992-07-10 Synthelabo Derives de (hydroxy-1 piperidinyl-2 alkyl) indolones-2, quinoleinones-2, benzo(b)azepinones-2 et benzimidazolones-2, leur preparation et leur application en therapeutique
WO1990006303A1 (en) * 1988-12-02 1990-06-14 Pfizer Inc. Arylpiperidine derivatives
US5618819A (en) * 1994-07-07 1997-04-08 Adir Et Compagnie 1,3-dihydro-2H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-one and oxazolo[4,5-b]pyridin-2-(3H)-one compounds
US5607936A (en) 1994-09-30 1997-03-04 Merck & Co., Inc. Substituted aryl piperazines as neurokinin antagonists
CN1169795C (zh) * 1996-10-01 2004-10-06 协和发酵工业株式会社 环胺取代的含氮杂环化合物及其组合物
US6008352A (en) * 1997-04-03 1999-12-28 Neurogen Corporation 1-(isoquinolin-1-yl)-4-(1-phenylmethyl) piperazines; dopamine receptor subtype specific ligands
IL125951A (en) * 1997-09-05 2003-09-17 Pfizer Prod Inc A pharmaceutical composition comprising a piperazinyl-heterocyclic compound for treating tourette's syndrome, obsessive compulsive disorder, chronic motor or vocal tic disorder in a mammal
IL127497A (en) * 1997-12-18 2002-07-25 Pfizer Prod Inc Medicinal products containing piperazinyl-heterocyclic compounds for the treatment of psychiatric disorders
FR2822154B1 (fr) 2001-03-13 2005-10-21 Aventis Pharma Sa Derives de la quinolyl propyl piperidine, leur preparation et les compositions qui les contiennent
US6921821B2 (en) * 2002-06-12 2005-07-26 Abbott Laboratories Antagonists of melanin concentrating hormone receptor
GB0227240D0 (en) * 2002-11-21 2002-12-31 Glaxo Group Ltd Compounds
TW200507841A (en) * 2003-03-27 2005-03-01 Glaxo Group Ltd Antibacterial agents
DE10316081A1 (de) * 2003-04-08 2004-10-21 Morphochem AG Aktiengesellschaft für kombinatorische Chemie Neue Verbindungen mit antibakterieller Aktivität
JP2007502856A (ja) * 2003-05-16 2007-02-15 ファイザー・プロダクツ・インク 精神病性障害および抑うつ性障害の治療
CN102786482A (zh) * 2003-11-21 2012-11-21 阿雷生物药品公司 Akt蛋白激酶抑制剂
JP2008505920A (ja) 2004-07-08 2008-02-28 グラクソ　グループ　リミテッド 抗菌剤
DE102004041163A1 (de) 2004-08-25 2006-03-02 Morphochem Aktiengesellschaft für kombinatorische Chemie Neue Verbindungen mit antibakterieller Aktivität
CA2603322C (en) 2005-03-31 2014-12-16 Janssen Pharmaceutica N.V. Bicyclic pyrazole compounds as antibacterial agents
KR20080064953A (ko) * 2005-10-13 2008-07-10 모르포켐 악티엥게셀샤프트 퓌르 콤비나토리셰 케미 항균 활성을 갖는 5-퀴놀린 유도체
WO2008020306A2 (en) * 2006-08-18 2008-02-21 Pfizer Products Inc. Isoindole derivatives
EP2481735A1 (en) 2007-05-09 2012-08-01 Pfizer Inc. Substituted heterocyclic derivatives and compositions and their pharmaceutical use as antibacterials
EP2300456A1 (en) * 2008-05-22 2011-03-30 Allergan, Inc. Bicyclic compounds having activity at the cxcr4 receptor
US9156822B2 (en) 2010-07-02 2015-10-13 The University Of North Carolina At Chapel Hill Functionally selective ligands of dopamine D2 receptors
ES2574179T3 (es) 2010-07-20 2016-06-15 Glaxo Group Limited Procedimiento para preparar derivados de pirano-[2,3-c]piridina
TW201326180A (zh) 2011-11-30 2013-07-01 Actelion Pharmaceuticals Ltd ３，７－二取代八氫－２Ｈ－吡啶并［４，３－ｅ］［１，３］□嗪－２－酮抗生素
MA41168A (fr) * 2014-12-17 2017-10-24 Acraf Nouveaux composés antibactériens

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010081874A1 (en) * 2009-01-15 2010-07-22 Glaxo Group Limited Naphthyridin-2 (1 h)-one compounds useful as antibacterials
WO2010084152A1 (en) * 2009-01-21 2010-07-29 Basilea Pharmaceutica Ag Novel bicyclic antibiotics
WO2013068948A1 (en) * 2011-11-08 2013-05-16 Actelion Pharmaceuticals Ltd 2-oxo-oxazolidin-3,5-diyl antibiotic derivatives

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2748748C1 (ru) * 2020-06-25 2021-05-31 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Пермский государственный национальный исследовательский университет" (ПГНИУ) Противотуберкулёзное средство на основе (Z)-3-(3,3-Диметил-2-оксобутилиден)-3,4-дигидро-2H-1,4-бензоксазин-2-она и способ его синтеза

Also Published As

Publication number Publication date
JP2017537933A (ja) 2017-12-21
AR102989A1 (es) 2017-04-05
HK1245257A1 (zh) 2018-08-24
WO2016096686A1 (en) 2016-06-23
HUE050749T2 (hu) 2021-01-28
US20170369450A1 (en) 2017-12-28
KR20170097069A (ko) 2017-08-25
DK3233827T3 (da) 2020-09-21
JP6723242B2 (ja) 2020-07-15
UA121978C2 (uk) 2020-08-25
AU2015366469B2 (en) 2019-06-27
MD3233827T2 (ro) 2020-11-30
HRP20201379T1 (hr) 2020-11-27
IL252432A0 (en) 2017-07-31
MA41169A (fr) 2017-10-24
IL252432B (en) 2020-06-30
RS60866B1 (sr) 2020-11-30
ES2850248T3 (es) 2021-08-26
AU2015366469A1 (en) 2017-06-15
GEP20196991B (en) 2019-07-10
PL3233827T3 (pl) 2020-11-30
MX2017007371A (es) 2018-04-24
CA2968455A1 (en) 2016-06-23
CN107108569A (zh) 2017-08-29
CY1123465T1 (el) 2022-03-24
BR112017011980A2 (pt) 2017-12-26
US10221144B2 (en) 2019-03-05
SG11201704168QA (en) 2017-07-28
PT3233827T (pt) 2020-09-28
EP3233827B1 (en) 2020-07-08
EP3233827A1 (en) 2017-10-25
SI3233827T1 (sl) 2020-11-30
EA201791219A1 (ru) 2018-01-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EA032384B1 (ru) Антибактериальные композиции, имеющие широкий спектр активности
KR102027602B1 (ko) 신규 화합물
EP3917927A1 (en) Immunomodulators, compositions and methods thereof
KR20220106765A (ko) 치환된 헤테로환형 융합된 환형 화합물, 이의 제조 방법 및 이의 약학적 용도
JP2009534444A (ja) 三環系窒素含有化合物とその抗菌剤としての使用
EP3468975B1 (en) New antibacterial compounds
JP2008528604A (ja) 抗菌剤
CN112920183A (zh) 作为kras-g12c抑制剂的化合物及其应用
KR20080016577A (ko) 항균 활성을 갖는 아미노피페리딘 퀴놀린 및 이들의아자이소스테릭 유사체
BRPI0617467A2 (pt) compostos e seus usos como antibacterianos
EP2041145A1 (en) Azatricyclic compounds and their use
WO2017093727A1 (en) Inhibitors of metallo-beta-lactamases
JP2010524887A (ja) 抗菌剤としての含窒素三環式複素環化合物
AU2016357433A1 (en) A solid state form of pladienolide pyridine compounds and methods of use
CN112771047A (zh) 作为RET激酶抑制剂的取代的咪唑[1,2-a]吡啶和[1,2,4]三唑[1,5-a]吡啶化合物
CA2919572A1 (en) Isoindoline or isoquinoline compounds, a process for their preparation and pharmaceutical compositions containing them
WO2016112088A1 (en) Aryloxyacetylindoles and analogs as antibiotic tolerance inhibitors
CN113527300B (zh) 布鲁顿酪氨酸蛋白激酶抑制剂
CN115397822B (zh) Cbp/ep300抑制剂及其用途
US10369130B2 (en) Antibacterial compounds
CN110407854B (zh) 新的四环化合物
RU2713932C1 (ru) Соединения фторхинолонового ряда на основе производных пиридоксина, обладающие антибактериальными свойствами
CN116568302A (zh) 杂环取代的稠合γ-咔啉类衍生物、其制备方法、中间体及应用
CA3168355A1 (en) Macrocyclic indole derivatives as inhibitors of mcl-1
WO1997031919A1 (fr) Derives d&#39;acide pyridonecarboxylique et leur intermediaires de synthese

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s)

Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU