CN112920183A - 作为kras-g12c抑制剂的化合物及其应用 - Google Patents

作为kras-g12c抑制剂的化合物及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN112920183A
CN112920183A CN202011409952.0A CN202011409952A CN112920183A CN 112920183 A CN112920183 A CN 112920183A CN 202011409952 A CN202011409952 A CN 202011409952A CN 112920183 A CN112920183 A CN 112920183A
Authority
CN
China
Prior art keywords
alkyl
alkoxy
hydroxy
group
amino
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN202011409952.0A
Other languages
English (en)
Inventor
赵立文
郁壮壮
王亚洲
宋海涛
王海
张明
徐政
李雪
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Nanjing Sanhome Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Nanjing Sanhome Pharmaceutical Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Nanjing Sanhome Pharmaceutical Co Ltd filed Critical Nanjing Sanhome Pharmaceutical Co Ltd
Publication of CN112920183A publication Critical patent/CN112920183A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents

Abstract

本发明属于医药化学领域，涉及作为KRAS‑G12C抑制剂的化合物及其应用，具体地，本发明提供式(I)、(II)所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，它们的制备方法以及含有这些化合物的药物组合物和这些化合物或组合物用于治疗KRAS‑G12C突变介导的疾病的用途。

Description

作为KRAS-G12C抑制剂的化合物及其应用
技术领域
本发明属于医药化学领域，具体涉及作为KRAS-G12C抑制剂的化合物及其应用，具体地，本发明提供式(I)、(II)所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，它们的制备方法以及含有这些化合物的药物组合物和这些化合物或组合物用于治疗和/或预防KRAS-G12C表达相关疾病。
背景技术
RAS基因家族与人类肿瘤相关的基因有HRAS、KRAS、NRAS，HRAS位于人类11号染色体短臂上(11p15.1～p15.3)，KRAS位于12号染色体短臂上(12p1.1～pter)，HRAS位于1号染色体短臂上(1p22～p32)。RAS蛋白为膜结合型的GTP/GDP结合蛋白，相对分子质量为2.1万，定位于细胞膜内侧，它由188或189个氨基酸组成。
在RAS基因中，KRAS对人类癌症影响最大，编码一种小型GTPase膜结合蛋白。这种蛋白以两种不同的形式出现，非激活状态下的GDP结合形式以及激活状态下的GTP结合形式。正常情况下，KRAS和GTP结合，把GTP的最末一个磷酸基切掉，让它变成GDP，然后失活。但是当KRAS基因突变后，KRAS蛋白持续保持与GTP结合的活化状态，不再依赖上级信号的刺激，导致下游的信号通路异常活跃，从而促进细胞的生长与增殖。
KRAS突变在所有癌症中高达四分之一以上，而95％的KRAS突变主要发生在2号外显子的第12号密码子(>80％)和13号密码子上，常见的突变形式有KRAS-G12C突变(39％)，KRAS-G12V(18-21％)和KRAS-G12D(17-18％)。在RAS突变驱动的肺癌中，约44％为KRASG12C突变。
综上所述，KRAS G12C靶点与癌症的发生发展密切，有很大潜力可以成为肿瘤治疗领域新的治疗手段，因此，需要开发更有效、更安全、药代性质好的KRAS G12C抑制剂以满足临床需求。
发明内容
本发明提供通式(I)所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，
Figure BDA0002817648820000011
其中，
Cx选自环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，所述环烷基、杂环基、芳基、杂芳基任选被一个或多个R6取代，R6选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、烯基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、氰基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基和环烷基；
L不存在或为-NH-；
R1选自芳基和杂芳基，所述芳基和杂芳基任选被一个或多个R7取代，R7选自羟基、氨基、羧基、烷基、卤素、氰基、硝基、烯基、炔基、氰基烷基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、羧基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氧基酰基、单烷基氨基酰基、双烷基氨基酰基、双烷基氨基、环烷基；
R2选自氢、卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、烯基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基和环烷基；
R3选自氰基、卤素、羟基、羧基、氨基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基和烷基羰基；R4是与K-Ras、H-Ras或N-Ras突变体蛋白的第12位的半胱氨酸残基能够形成共价键的亲电部分；和
R5选自C6-10芳基、5-10元杂芳基、3-8元环烷基和3-8元杂环基烷基，其任选被一个或多个选自羧基、氰基、氨基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基和环烷基的基团取代。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(I)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中：
Cx选自C4-10环烷基、4-10元杂环基、C6-8芳基和5-8元杂芳基，所述C4-10环烷基、4-10元杂环基、C6-8芳基、5-8元杂芳基任选被一个或多个R6取代，R6选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C2-4烯基、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氰基C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氧基、单C1-4烷基氨基、C1-4烷基酰基氨基、C1-4烷基酰基、氨基酰基、C1-4烷基氨基酰基、双C1-4烷基氨基和C3-6环烷基的基团取代；
近一步优选地，Cx选自环丁基、环戊基、环己基、氮杂环丁烷基、四氢吡咯基、四氢吡啶基、哌嗪基、2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷基、2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷、2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷、二氮杂双环[2.2.2]辛烷、二氮杂双环[2.2.1]庚烷、二氮杂双环[3.2.1]辛烷、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、噻吩，所述环丁基、环戊基、环己基、氮杂环丁烷基、四氢吡咯基、四氢吡啶基、哌嗪基、2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷基、2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷、2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷、二氮杂双环[2.2.2]辛烷、二氮杂双环[2.2.1]庚烷、二氮杂双环[3.2.1]辛烷、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、噻吩任选被一个或多个R6取代，R6选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C2-4烯基、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氰基C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氧基、单C1-4烷基氨基、C1-4烷基酰基氨基、C1-4烷基酰基、氨基酰基、C1-4烷基氨基酰基、双C1-4烷基氨基和C3-6环烷基的基团取代。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(I)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中：
Figure BDA0002817648820000031
选自
Figure BDA0002817648820000032
Figure BDA0002817648820000033
n为0、1、2、3或4，R4、R6如通式(I)定义。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(I)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中R3选自氰基、卤素、羟基、羧基、氨基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷氧基、单C1-6烷基氨基、C1-6烷基酰基氨基、C1-6烷基酰基、氨基酰基、C1-6烷基氨基酰基和C1-6烷基羰基。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(I)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中：
R4选自
Figure BDA0002817648820000034
其中，R4a、R4b分别独立地选自氢、卤素、氰基、烷基、羧基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、单烷基氨基烷基、双烷基氨基烷基、杂环基烷基、杂环基、环烷基；
进一步优选地，R4选自
Figure BDA0002817648820000035
其中，R4a、R4b分别独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、氰基、C1-3烷基、羧基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基C1-3烷基、3-8杂环基C1-3烷基、3-8元杂环基、C3-8环烷基；
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(I)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中：
R1选自C6-10芳基、5-10元杂芳基，所述C6-10芳基、5-10元杂芳基任选被一个或多个R7取代，R7选自羟基、氨基、羧基、C1-3烷基、卤素、氰基、硝基、烯基、炔基、氰基C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、羧基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氧基酰基、单C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基、C3-6环烷基和氧代基团取代；
进一步优选地，R1选自苯基、吡啶基、嘧啶基、苯并咪唑、苯并吡唑、萘基，所述苯基、吡啶基、嘧啶基、苯并咪唑、苯并吡唑、萘基任选被一个或多个R7取代，R7选自羟基、氨基、羧基、C1-3烷基、卤素、氰基、硝基、C2-4烯基、C2-4炔基、氰基C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、羧基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氧基酰基、单C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基、C3-6环烷基和氧代基团取代。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(I)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中：
R2选自氢、卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C2-4烯基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基和C3-6环烷基的基团取代；
进一步优选地，R2选自氢、氟、氯、溴、碘、羟基、羧基、氰基、氨基、乙烯基、丙烯基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基和C3-6环烷基的基团取代。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(I)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中：
R3选自氰基、卤素、羟基、羧基、氨基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷氧基、单C1-6烷基氨基、C1-6烷基酰基氨基、C1-6烷基酰基、氨基酰基、C1-6烷基氨基酰基和C1-6烷基羰基；
进一步优选地，R3选自氰基、卤素、羟基、羧基、氨基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基和C1-3烷基羰基。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(I)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中：
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(I)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中：
R5选自C6-10芳基5-10元杂芳基、3-8元环烷基和3-8元杂环基烷基，其任选被一个或多个选自羧基、氰基、氨基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、烷氧基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷氧基、单C1-6烷基氨基、C1-6烷基酰基氨基、C1-6烷基酰基、氨基酰基、C1-6烷基氨基酰基、双C1-6烷基氨基和C3-6环烷基的基团取代；
进一步优选地，R5选自苯基、萘基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基和苯并咪唑、四氢吡咯基C1-3烷基，所述苯基、萘基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、苯并咪唑、四氢吡咯基C1-3烷基任选被一个或多个选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷氧基、单C1-6烷基氨基、C1-6烷基酰基氨基、C1-6烷基酰基、氨基酰基、C1-6烷基氨基酰基、双C1-6烷基氨基和C3-6环烷基的基团取代。
在一些具体的实施方案中，R5选自
Figure BDA0002817648820000041
在一些具体的实施方案中，本发明的通式(I)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，R1选自
Figure BDA0002817648820000051
Figure BDA0002817648820000052
在一些实施方案中，本发明提供通式(I)所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中通式(I)具有以下通式(Ia)的结构：
Figure BDA0002817648820000053
其中Rx、Ry各自独立地选自氢、羟基、氨基、羧基、烷基、卤素、氰基、硝基、烯基、炔基、氰基烷基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、羧基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氧基酰基、单烷基氨基酰基、双烷基氨基酰基、双烷基氨基、环烷基，m为0、1、2、3或4；和
Cx、L、R2、R3、R4如以上通式(I)中所定义。
在一些实施方案中，根据本发明的通式(Ia)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中Rx、Ry各自独立地选自氢、羟基、氨基、羧基、C1-6烷基、卤素、氰基、硝基、C2-6烯基、C2-6炔基、氰基C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羧基C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷氧基、单C1-6烷基氨基、C1-6烷基酰基氨基、C1-6烷基酰基、氨基酰基、C1-6烷基氧基酰基、单C1-6烷基氨基酰基、双C1-6烷基氨基酰基、双C1-6烷基氨基、C3-8环烷基，m为0、1、2、3或4。
在一些实施方案中，根据本发明的通式(Ia)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中
Figure BDA0002817648820000054
选自
Figure BDA0002817648820000055
Figure BDA0002817648820000056
R4选自
Figure BDA0002817648820000057
R4a、R4b分别独立地选自氢、卤素、氰基、烷基、羧基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、单C1-6烷基氨基C1-6烷基、双C1-6烷基氨基C1-6烷基、C3-8杂环基C1-6烷基、C3-8杂环基、C3-8环烷基；R6选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C2-4烯基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、氰基C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷氧基、单C1-6烷基氨基、C1-6烷基酰基氨基、C1-6烷基酰基、氨基酰基、C1-6烷基氨基酰基、双C1-6烷基氨基和C3-6环烷基，n为0、1、2、3或4。
在另一些实施方案中，根据本发明的通式(Ia)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中R2选自氢、卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C2-4烯基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷氧基、单C1-6烷基氨基、C1-6烷基酰基氨基、C1-6烷基酰基、氨基酰基、C1-6烷基氨基酰基、双C1-6烷基氨基和C3-8环烷基，和R3选自氰基、卤素、羟基、羧基、氨基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷氧基、单C1-6烷基氨基、C1-6烷基酰基氨基、C1-6烷基酰基、氨基酰基、C1-6烷基氨基酰基和C1-6烷基羰基。
第二方面，本发明提供通式(II)所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，
Figure BDA0002817648820000061
Cx选自环烷基、杂环基、芳基、杂芳基，所述环烷基、杂环基、芳基、杂芳基任选被一个或多个R6取代，R6选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、烯基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、氰基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基和环烷基；
L不存在或为-NH-；
R1选自芳基、杂芳基、环烷基和杂环基，其任选被一个或多个R7取代，R7选自羟基、氨基、羧基、烷基、卤素、氰基、硝基、烯基、炔基、氰基烷基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、羧基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氧基酰基、单烷基氨基酰基、双烷基氨基酰基、双烷基氨基、环烷基；
R2选自氢、卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、烯基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基和环烷基；
Z为N或C(R3)，其中R3选自氢、氰基、烷基、卤代烷基、烷基羰基，优选地，R3选自氢、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷基羰基，
R4是与K-Ras、H-Ras或N-Ras突变体蛋白的第12位的半胱氨酸残基能够形成共价键的亲电部分；
R9、R10各自独立选自氢、羧基、氰基、氨基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基、环烷基和氧代基团；或
R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成3-6元杂环基、C3-6元环烷基，所述的3-6元杂环基、C3-6元环烷基任选被一个或多个选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基取代；
R11、R12各自独立选自氢、羧基、氰基、氨基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基、环烷基和氧代基团；或
R11和R12与它们所连接的碳原子一起形成3-6元杂环基、C3-6元环烷基，所述的3-6元杂环基、C3-6元环烷基被一个或多个选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基取代。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中：
Cx选自C4-10环烷基、4-10元杂环基、C6-8芳基、5-8元杂芳基，所述C4-10环烷基、4-10元杂环基、C6-8芳基、5-8元杂芳基任选被一个或多个R6取代，R6选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C2-4烯基、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氰基C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氧基、单C1-4烷基氨基、C1-4烷基酰基氨基、C1-4烷基酰基、氨基酰基、C1-4烷基氨基酰基、双C1-4烷基氨基和C3-6环烷基的基团取代；
近一步优选地，Cx选自环丁基、环戊基、环己基、氮杂环丁烷基、四氢吡咯基、四氢吡啶基、哌嗪基、2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷基、2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷、2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷、二氮杂双环[2.2.2]辛烷、二氮杂双环[2.2.1]庚烷、二氮杂双环[3.2.1]辛烷、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、噻吩，所述环丁基、环戊基、环己基、氮杂环丁烷基、四氢吡咯基、四氢吡啶基、哌嗪基、2,6-二氮杂螺[3.3]庚烷基、2,6-二氮杂螺[3.4]辛烷、2,7-二氮杂螺[3.5]壬烷、二氮杂双环[2.2.2]辛烷、二氮杂双环[2.2.1]庚烷、二氮杂双环[3.2.1]辛烷、苯基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、噻吩任选被一个或多个R6取代，R6选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C2-4烯基、C1-4烷基、卤代C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氰基C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤代C1-4烷氧基、羟基C1-4烷氧基、单C1-4烷基氨基、C1-4烷基酰基氨基、C1-4烷基酰基、氨基酰基、C1-4烷基氨基酰基、双C1-4烷基氨基和C3-6环烷基的基团取代。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中：
Figure BDA0002817648820000071
选自
Figure BDA0002817648820000072
Figure BDA0002817648820000073
n为0、1、2、3或4，R4、R6如通式(I)定义。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中：
R4选自
Figure BDA0002817648820000081
其中，R4a、R4b分别独立地选自氢、卤素、氰基、烷基、羧基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、单烷基氨基烷基、双烷基氨基烷基、杂环基烷基、杂环基、环烷基；
进一步优选地，R4选自
Figure BDA0002817648820000082
其中，R4a、R4b分别独立地选自氢、氟、氯、溴、碘、氰基、C1-3烷基、羧基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、单C1-3烷基氨基C1-3烷基、双C1-3烷基氨基C1-3烷基、3-8杂环基C1-3烷基、3-8元杂环基、C3-8环烷基；
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中：
R1选自C6-10芳基、5-10元杂芳基、3-8元环烷基和3-8元杂环基，其任选被一个或多个R7取代，R7选自羟基、氨基、羧基、C1-3烷基、卤素、氰基、硝基、烯基、炔基、氰基C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、羧基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氧基酰基、单C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基、C3-6环烷基和氧代基团取代；
进一步优选地，R1选自苯基、吡啶基、嘧啶基、苯并咪唑、苯并吡唑、萘基，所述苯基、吡啶基、嘧啶基、苯并咪唑、苯并吡唑、萘基、环丁基、环戊基、环己基、氮杂环丁烷基、四氢吡咯基、四氢吡啶基、哌嗪基，其任选被一个或多个R7取代，R7选自羟基、氨基、羧基、C1-3烷基、卤素、氰基、硝基、C2-4烯基、C2-4炔基、氰基C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、羧基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氧基酰基、单C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基、C3-6环烷基和氧代基团取代。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中：
R2选自氢、卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C2-4烯基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基和C3-6环烷基的基团取代；
进一步优选地，R2选自氢、氟、氯、溴、碘、羟基、羧基、氰基、氨基、乙烯基、丙烯基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基和C3-6环烷基的基团取代。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中Z为N。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中Z为C(R3)，R3选自氢、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷基羰基。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中R9、R10、R11、R12各自独立选自氢、羧基、氰基、氨基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基、C3-6环烷基和氧代基团。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中：
R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成3-6元杂环基、C3-6元环烷基，所述的3-6元杂环基、C3-6元环烷基被一个或多个选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基取代。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中：
R11和R12与它们所连接的碳原子一起形成3-6元杂环基、C3-6元环烷基，所述的3-6元杂环基、C3-6元环烷基被一个或多个选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基取代。
在一些优选的实施方案中，本发明的化合物为通式(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药，其中：
R9、R10、各自独立选自氢、羧基、氰基、氨基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基、C3-6环烷基和氧代基团；或
R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成3-6元杂环基、C3-6元环烷基，所述的3-6元杂环基、C3-6元环烷基被一个或多个选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基取代；且R11、R12均为H。
本发明提供以下具体化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药：
Figure BDA0002817648820000101
Figure BDA0002817648820000111
另一方面，本发明提供本发明的通式化合物或其药学上可接受的盐、异构体、溶剂化物、结晶或前药的制备方法，包括：
Figure BDA0002817648820000112
1)式3化合物可以通过式1化合物和式2化合物反应制得，
2)式4化合物可以通过式3化合物在碱条件下反应制得，
3)式5化合物可以通过式3化合物在氨溶液条件下反应制得，
4)式6化合物可以通过式5化合物经脱水反应制得，
5)式8化合物可以通过式6化合物和式7化合物反应制得，
6)式10化合物可以通过式8化合物和式9化合物反应制得，
7)式11化合物可以通过式8化合物脱保护基反应制得，
8)式(Ic)化合物可以通过式11化合物酰化反应制得。
其中，R1、R2、R4、R5、Cx如式(I)所述的定义，X为卤素，化合物1、2、7、9为市售化合物或可采用本领域技术人员惯用的其它技术手段进行合成。
第三方面，本发明提供药物组合物，其包含本发明式(I)、(Ia)、(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药。
在一些实施方案中，本发明提供本发明式(I)、(Ia)、(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药及包含本发明的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药的药物组合物，所述化合物或药物组合物用于治疗KRAS G12C介导的疾病。
在一些实施方案中，本发明提供药物组合物，其包含本发明式(I)、(Ia)、(II)的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药和可药用载体。
可以将本发明的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶、电子等排体或前药与药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂混合制备成药物制剂，以适合于经口或胃肠外给药。给药方法包括，但不限于皮内、肌内、腹膜内、静脉内、皮下、鼻内和经口途径。所述制剂可以通过任何途径施用，例如通过输注或推注，通过经上皮或皮肤粘膜(例如口腔粘膜或直肠等)吸收的途径施用。给药可以是全身的或局部的。经口施用制剂的实例包括固体或液体剂型，具体而言，包括片剂、丸剂、粒剂、粉剂、胶囊剂、糖浆、乳剂、混悬剂等。所述制剂可通过本领域已知的方法制备，且包含药物制剂领域常规使用的载体、稀释剂或赋形剂。
第四方面，本发明提供本发明式(I)、(Ia)、(II)所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，或包含其的药物组合物用于治疗KRAS G12C介导的疾病的方法以及在制备治疗KRAS G12C介导的疾病的药物中的用途。
在一些优选的实施方案中，本发明提供本发明式(I)、(Ia)、(II)所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，或包含其的药物组合物用于治疗KRAS G12C介导的疾病的方法以及在制备治疗KRAS G12C介导的疾病的药物中的用途，其中所述的KRAS G12C介导的疾病包括但不限于：增殖性疾病、代谢疾病或血液疾病。在一些实施方案中，本发明所述的KRAS G12C介导的疾病为癌症。
在一些实施方案中，本发明所述的KRAS G12C介导的疾病包括但不限于乳腺癌、食道癌、膀胱癌、肺癌、造血系统癌、淋巴瘤、髓母细胞瘤、成神经管细胞瘤、直肠腺癌、结肠癌、胃癌、胰腺癌、肝癌、腺样囊性癌、前列腺癌、肺癌、头颈部鳞状细胞癌、脑癌、肝细胞癌、黑色素瘤、少突神经胶质瘤、胶质母细胞癌、睾丸癌、卵巢透明细胞癌、卵巢浆液性囊腺癌、甲状腺癌、多发性骨髓瘤、肾细胞癌、套细胞淋巴瘤、三阴性乳腺癌、非小细胞肺癌。
术语说明
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
本发明化合物中的“氢”、“碳”、“氧”包括其所有同位素。同位素应理解为包括具有相同原子数但具有不同质量数的那些原子。举例来说，氢的同位素包括氚和氘，碳的同位素包括13C和14C，氧的同位素包括16O和18O等。
本发明的“卤素”是指氟、氯、溴、碘。本发明的“卤代”是指被氟、氯、溴或碘取代。
本发明的“烷基”指直链或支链的饱和脂肪烃基团，优选含1至6个碳原子的直链或支链基团，进一步优选含有1至3个碳原子的直链或支链基团，非限制性实例包括甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、异丁基、叔丁基、仲丁基、正戊基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、正己基等。烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上。
本发明的“亚烷基”是指烷基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团，如亚甲基(-CH2-)，亚乙基(-CH2-CH2-)，亚丙基(-CH2-CH2-CH2-)等，在本文中，所述的“亚C1-10烷基”是指C1-10烷基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团，所述的“亚C1-6烷基”是指C1-6烷基从形式上去掉一个氢原子所剩下的基团。亚烷基可以是取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上。
本发明的“卤代烷基”是指至少被一个卤素取代的烷基。
本发明的“羟基烷基”是指至少被一个羟基取代的烷基。
本发明的“烷氧基”是指-O-烷基。烷氧基的非限制性实例包括：甲氧基、乙氧基、丙氧基、正丙氧基、异丙氧基、异丁氧基、仲丁氧基等。烷氧基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上。
本发明的“环烷基”是指环状的饱和烃基。合适的环烷基可以为取代或未取代的具有3-10个碳原子的单环、二环或三环饱和烃基，例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基。
本发明的“杂环基”是指具有环碳原子以及1至4个环杂原子(其中每个杂原子独立地选自氮、氧、硫、硼、磷以及硅)的3-至10-元非芳香族环系统的基团(本发明的“C3-10元杂环基”的含义和“3-10元杂环基”相同)。在包含一个或多个氮原子的杂环基基团中，连接点可以是碳或氮原子，只要化合价许可。杂环基基团或者可以是单环的(“单环的杂环基”)或者是融合的、桥联的或螺的环系统(例如二环系统(“二环的杂环基”))并且可以是饱和的或可以是部分不饱和的。杂环基二环的环系统可以在一个或两个环中包括一个或多个杂原子。“杂环基”也包括环系统，其中杂环，如以上定义的，是与一个或多个碳环基基团融合的(其中连接点在碳环基或在杂环上)，或环系统中的杂环，如以上定义的，是与一个或多个芳基或杂芳基融合的(其中连接点在杂环上)，并且在此类情况下，环成员的数目继续称作在杂环系统中的环成员的数目。除非另有规定，杂环基的每个实例是独立地任选取代地，即，未取代的(“未取代的杂环基”)或用一个或多个取代基取代的(“取代的杂环基”)。在某些实施例中，该杂环基基团是未取代的3-10元杂环基。在某些实施例中，该杂环基基团是取代的3-10元杂环基。融合至C6芳基环(在此也称为5,6-二环杂环)的示例性5-元杂环基基团包括但不限于，吲哚啉基、异吲哚啉基、二氢苯并呋喃基、二氢苯并噻吩基、苯并噁唑啉酮基等等。融合至芳基环的示例性6-元杂环基基团(在此也称为6,6-二环杂环)包括但不限于，四氢喹啉基、四氢异喹啉基等等。
本发明的“芳基”是指可以包含单环或稠合多环的芳香体系，优选包含单环或稠合双环的芳香体系，其含有6个至18个碳原子，优选含有约6至约12个碳原子。合适的芳基包括但不限于苯基、萘基、蒽基、四氢萘基、芴基、茚满基。芳基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上。
本发明的“杂芳基”是指至少有一个碳原子被杂原子替代的芳基，所述的杂原子为O、S、N。合适的杂芳基包括但不限于咪唑基、苯并咪唑基、咪唑并吡啶基、喹唑啉酮基、吡咯基、咪唑酮基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、异噁唑基、异噻唑基、噁二唑基、三唑基等。其中，本发明的“杂芳基”优选由5-18个原子构成(在本发明中简称为“5-18元杂芳基”或“C5-18元杂芳基”)，进一步优选由5-12个原子组成，且至少有一个原子为杂原子的杂芳基。合适的五元至十二元杂芳基包括但不限于嘧啶基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶并吡唑基、嘧啶并咪唑基等。杂芳基可以是任选取代的或未取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上。
本发明的“异构体”是具有相同分子式的但在性质上或在其原子的键序列上或在其原子的空间排列上不同的化合物。立体异构体是其原子在空间排列上不同的异构体。彼此不成镜像的立体异构体是非对映体并且互相是非重叠的镜像的立体异构体是对映体。当化合物具有不对称中心时，例如，它被键合到四个不同的基团，一对对映体是可能的。对映体以其不对称中心的绝对构型为特征并且通过Cahn和Prelog的R-和S-测序规则，或通过分子旋转偏振光的平面的方法被描述并指定作为右旋的或左旋的(即分别作为(+)或(-)-异构体)。手性化合物可以作为单一的对映体或其混合物存在。包含对映体的相等比例的混合物称作“外消旋混合物”。
本发明的“药学上可接受的盐”是指本发明化合物的盐，这类盐用于哺乳动物体内时具有安全性和有效性，且具有应有的生物活性。
本发明的“溶剂化物”在常规意义上是指溶质(如活性化合物、活性化合物的盐)和溶剂(如水)组合形成的复合物。溶剂是指本领域的技术人员所知的或容易确定的溶剂。如果是水，则溶剂化物通常被称作水合物，例如半水合物、一水合物、二水合物、三水合物或其替代量等。
具有化学式(I)的化合物的体内作用可以部分地由在给予具有化学式(I)的化合物之后在人体或动物体内形成的一种或多种代谢物来发挥。如上所述，具有化学式(I)的化合物的体内作用也可以经由前体化合物(“前药”)代谢来发挥。本发明的“前药”是指在生物体中的生理条件下，由于与酶、胃酸等反应而转化成式(I)的化合物的化合物，即通过酶的氧化、还原、水解等转化成式(I)的化合物的化合物和/或通过胃酸等的水解反应等转化成式(I)的化合物的化合物等。具有羧基的具有化学式I的化合物的适合的药学上可接受的前药为例如其体内可裂解的酯。包含羧基的具有化学式I的化合物的体内可裂解的酯为例如在人体或动物体内裂解以产生母体酸的药学上可接受的酯。对于羧基的适合的药学上可接受的酯包括烷基酯，如甲基酯、乙基酯和叔丁基酯、烷氧基甲基酯如甲氧基甲基酯；链烷酰氧基甲基酯，如新戊酰氧基酯；3-酞基酯；环烷基羰氧基烷基酯，如环戊基羰氧基甲基酯和1-环己基羰氧基乙基酯；2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯基(dioxolenyl)甲基酯，如5-甲基-2-氧代-1,3-二氧杂环戊烯-4-基甲基酯；以及烷氧基羰氧基烷基酯，如甲氧基羰氧基甲基酯和1-甲氧基羰氧基乙基酯。具有羧基的具有化学式I的化合物的适合的药学上可接受的前药为例如体内可裂解的酰胺，诸如N-烷基酰胺和N,N-二烷基酰胺，如N-甲基酰胺、N-乙基酰胺、N-丙基酰胺、N,N-二甲基酰胺、N-乙基-N-甲基酰胺或N,N-二乙基酰胺。
本发明生物电子等排体(或简称“电子等排体”)是用于定义其中一个或多个原子(或原子团)已被具有与它们所置换的那些原子具有相似空间和/或电子特征的置换原子(或原子团)所取代的药物类似物的本领域中一般公认的术语。
本发明的“结晶”是指其内部结构是在三维上规律地重复构成原子(或其集团)而形成的固体，有别于不具有这种规律的内部结构的无定形固体。
本发明的“药物组合物”是指包含任何一种本文所述的化合物，包括对应的异构体、前药、溶剂化物、药学上可接受的盐或其化学的保护形式，和一种或多种药学上可接受载体的混合物。药用组合物的目的是促进化合物对生物体的给药。所述组合物通常用于制备治疗和/或预防由一种或多种激酶介导的疾病的药物。
本发明的“药学上可接受的载体”是指对有机体不引起明显刺激性和不干扰所给予化合物的生物活性和性质的载体，包含所有的溶剂、稀释剂或其它赋形剂、分散剂、表面活性剂等渗剂、增稠剂或乳化剂、防腐剂、固体粘合剂、润滑剂等。除非任何常规载体介质与本发明化合物不相容。可以作为药学上可接受的载体的一些实例包括，但不限于糖类，如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉，如玉米淀粉和马铃薯淀粉；纤维素及其衍生物，如羧甲基纤维素钠、以及纤维素和乙酸纤维素；麦芽、明胶等。
本发明的“赋形剂”指加入到药用组合物中以进一步促进给予化合物的惰性物质。赋形剂可以包括碳酸钙、磷酸钙、多种糖类和多种类型的淀粉、纤维素衍生物、明胶、植物油、聚乙二醇。
具体实施方法
下面结合实施例对本发明作进一步详细阐述，但本发明不限于这些实施例。以下实施例中使用的材料如无特殊说明均为商购获得。
中间体1 3-氯2-氟-6-羟基苯硼酸
Figure BDA0002817648820000151
步骤1：3-氯2-氟-6-甲氧基苯硼酸的制备
Figure BDA0002817648820000152
称取1-氯-2-氟-4-甲氧基苯(5g，31.25mmol)置于250mL三颈瓶中，加入无水四氢呋喃(20mL)，氮气保护，冷却至-78℃。缓慢滴加正丁基锂(32mL，78mmol)，30min滴完，-78℃下继续反应30min。缓慢滴加硼酸三甲酯(7mL，63mmol)，滴完后继续反应30min。升温至室温，搅拌10min后加入盐酸(10mL，1N)搅拌30min。反应体系中加入水20mL，乙酸乙酯萃取，无水硫酸钠干燥，浓酸，得到无色油状物5g，直接用于下一步反应。ESI-MS m/z:205.1[M+H]+。
步骤2：3-氯2-氟-6-羟基苯硼酸的制备
Figure BDA0002817648820000161
3-氯2-氟-6-甲氧基苯硼酸(5g，24mmol)溶于20mL二氯甲烷中，室温下缓慢加入三溴化硼(12.5g，50mmol)，室温下搅拌2小时。室温下缓慢加入甲醇50mL，减压浓缩，残留物中加入水100mL，乙酸乙酯(30×3mL)萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，浓缩，得无色透明油状物5g，直接用于下一步反应。ESI-MS m/z:191.1[M+H]+。
中间体2 3-三氟甲基-2-氟-6-羟基苯硼酸
Figure BDA0002817648820000162
以1-三氟甲基-2-氟-4-甲氧基苯为原料，参考中间体1合成方法，制备得3-三氟甲基-2-氟-6-羟基苯硼酸。ESI-MS m/z:225.1[M+H]+。
中间体3 3,6-二氟-2-羟基苯硼酸
Figure BDA0002817648820000163
以1,4-二氟-2-甲氧基苯为原料，参考中间体1合成方法，制备得3,6-二氟-2-羟基苯硼酸。ESI-MS m/z:175.1[M+H]+。
中间体4(5-氯-6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)硼酸
Figure BDA0002817648820000164
步骤1：3-溴-4-氯-5-氟-2-甲基苯胺的制备
Figure BDA0002817648820000165
3-溴-5-氟-2-甲基苯胺(1.0g,4.91mmol)溶于异丙醇(80mL)中，加入N-氯代丁二酰亚胺(0.77g,5.77mmol)，于80℃下回流搅拌4h。MS检测确认反应完全，旋干反应液制砂，硅胶柱纯化得产物0.736g(产率63％)。ESI-MS m/z 237.9[M+H]+。
步骤2：4-溴-5-氯-6-氟-1H-吲唑的制备
Figure BDA0002817648820000166
将3-溴-4-氯-5-氟-2-甲基苯胺(0.74g,3.09mmol)溶于冰醋酸(10mL)，加入亚硝酸钠(0.27g,3.87mmol)，室温搅拌过夜。反应结束后，旋干制砂，硅胶柱纯化得橙红色产物0.44g(产率58％)。ESI-MS m/z 248.9[M+H]+。
步骤3：4-溴-5-氯-6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑的制备
Figure BDA0002817648820000171
加入4-溴-5-氯-6-氟-1H-吲唑(0.4g,1.60mmol)，3,4-二氢-2H-吡喃(0.22mL,2.40mmol)和对甲苯磺酸吡啶盐(0.05g,0.19mmol)，氩气保护，加入无水乙腈(15mL)，30℃搅拌反应6h。TLC检测未反应完全，补加3,4-二氢-2H-吡喃(0.22mL,2.40mmol)和对甲苯磺酸吡啶盐(0.067g,0.27mmol)，反应过夜。将反应液旋干过柱，得产物0.4g(产率75％)。
步骤4：(5-氯-6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)硼酸的制备
Figure BDA0002817648820000172
两颈瓶中加入4-溴-5-氯-6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑(0.4g,1.20mmol)，联硼酸频那醇酯(0.71g,2.79mmol)，1,1'-双二苯基膦二茂铁二氯化钯(0.11g,0.14mmol)和乙酸钾(0.58g,5.91mmol)，氩气保护，加入无水1，4-二氧六环(20mL)，80℃过夜反应。反应完毕后，加入乙酸乙酯稀释，抽滤，滤液加入饱和氯化钠溶液，用乙酸乙酯提取三次。合并有机相，饱和氯化钠溶液洗涤两次，经无水硫酸钠干燥，过滤旋干，粗品直接用于下一步反应。ESI-MS m/z 299.1[M+H]+。
实施例1 4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-羰基-1,2–二氢-1,8-萘啶-3腈
Figure BDA0002817648820000173
步骤1：4-甲基-3-硝基-2-异丙烯基吡啶的制备
Figure BDA0002817648820000181
4-甲基-3-硝基-2-氯吡啶(97.8g，566.9mmol)、异丙烯基硼酸频那醇酯(100g，595.2mmol)、双三苯基膦二氯化钯(7.9g，11mmol)、碳酸铯(368g，1135mmol)、乙二醇二甲醚(1L)和水(300mL)置于2L单颈瓶中，氮气保护，100℃搅拌过夜。混合物冷却至室温，减压浓缩除去有机溶剂，乙酸乙酯(500×3mL)萃取，有机层经无水硫酸钠干燥，浓酸，硅胶柱层析，得到棕色油状物95g，收率：94％。ESI-MS m/z:179.1[M+H]+。
步骤2：2-异丙基-4-甲基吡啶-3-胺的制备
Figure BDA0002817648820000182
室温下，4-甲基-3-硝基-2-异丙烯基吡啶(95g，530mmol)溶于500mL甲醇中，加入氢氧化钯/碳(5g)，通入氢气，室温搅拌4小时。过滤，甲醇(20×3mL)洗涤，滤液浓缩得到淡黄色油状物90g，收率：100％。ESI-MS m/z:151.2[M+H]+。
步骤3：2-(2,6-二氯-5-氟烟酰基)-3-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)胺基)-3羰基丙酸乙酯的制备
Figure BDA0002817648820000183
1000mL单颈瓶中加入2-异丙基-4-甲基吡啶-3-胺(15g，100mmol)和1,2-二氯乙烷(300mL)，室温下缓慢加入三光气(10g，34mmol)和二异丙基乙胺(32.25g，250mmol)，室温搅拌30min。向上述反应中加入3-(2,6-二氯-5-氟吡啶-3-基)-3-羰基丙酸乙酯(22.4g，80mmol)和二异丙基乙胺(12.9g，100mmol)，室温搅拌过夜。TLC显示反应完全。加水1000mL，二氯甲烷(500×3mL)萃取，有机相经浓缩，硅胶柱层析，得棕色油状物25g，收率：54.8％。ESI-MS m/z 456.1[M+H]+。
步骤4：7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-3-羧酸乙酯的制备
Figure BDA0002817648820000184
500mL单颈瓶中加入2-(2,6-二氯-5-氟烟酰基)-3-((2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)胺基)-3羰基丙酸乙酯(25g，54mmol)和200mL无水四氢呋喃，冰水浴，缓慢加入双(三甲基硅烷基)氨基钾(1M，120mL)。加毕，室温搅拌3小时，TLC显示反应完全。加入饱和氯化铵水溶溶500mL，乙酸乙酯(500×3mL)萃取，有机相经浓缩，硅胶柱层析，得棕色油状物18g，收率：78.2％。ESI-MS m/z 420.0[M+H]+。
步骤5：7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-3-羧酸酰胺的制备
Figure BDA0002817648820000191
500mL封管中加入7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-3-羧酸乙酯(15g，35.7mmol)和氨甲醇溶液(7M，400mL)，80℃继续搅拌48小时。LC-MS显示反应完全。减压浓缩，经硅胶柱层析纯化，得棕色油状物14g，收率：100％。ESI-MS m/z 391.1[M+H]+。步骤6：4，7-二氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-3-腈的制备
Figure BDA0002817648820000192
500mL单颈瓶中加入7-氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2,4-二氧代-1,2,3,4-四氢-1,8-萘啶-3-羧酸酰胺(14g，35.7mmol)、三氯氧膦(50mL)和N,N-二异丙基乙胺(50mL)，80℃继续搅拌5小时。LC-MS显示反应完全。减压浓缩，加入冰淬灭，用饱和碳酸氢钠水溶液调节PH至中性，乙酸乙酯萃取，经硅胶柱层析)纯化，得黄色固体物5g，收率：35.7％。ESI-MS m/z 391.1[M+H]+。
步骤7：(S)-4-(7-氯-3-腈基-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0002817648820000193
100mL单颈瓶中加入4，7-二氯-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-3-腈(5g，12.7mmol)、(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(3g，15mmol)、乙腈(50mL)和N,N-二异丙基乙胺(1.9g，15mmol)，室温继续搅拌1小时。LC-MS显示反应完全。减压浓缩，加水100mL，乙酸乙酯萃取，经硅胶柱层析纯化，得黄色固体物5g，收率：70％。ESI-MS m/z 555.2[M+H]+。
步骤8：(S)-4-(3-腈基-6-氟-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0002817648820000194
100mL单颈瓶中加入(S)-4-(7-氯-3-腈基-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(200mg，0.36mmol)、2-氟-6-羟基苯硼酸(80mg，0.5mmol)、碳酸钠(106mg，1mmol)、四三苯基膦钯(11.5mg，0.01mmol)、二氧六环(30mL)和水(5mL)，90℃继续搅拌1小时。LC-MS显示反应完全。减压浓缩，加水100mL，乙酸乙酯萃取，经硅胶柱层析纯化，得黄色固体物150mg，收率：66％。ESI-MSm/z 631.2[M+H]+。
步骤9：(S)-4-(3-腈基-6-氟-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-4-基)-3-甲基哌嗪的制备
Figure BDA0002817648820000201
100mL单颈瓶中加入((S)-4-(3-腈基-6-氟-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.23mmol)和二氯甲烷(20mL)，室温下加入三氟醋酸(1mL)，室温搅拌过夜。LC-MS显示反应完全。减压浓缩，饱和碳酸氢钠调PH至碱性，乙酸乙酯萃取，浓缩，得黄色固体物100mg，收率：82％。ESI-MS m/z 531.2[M+H]+。
步骤10：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-3-腈的制备
Figure BDA0002817648820000202
100mL单颈瓶中加入(S)-4-(3-腈基-6-氟-7-(2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-4-基)-3-甲基哌嗪(100mg，0.18mmol)、二异丙基乙胺(26mg，0.2mmol)和二氯甲烷(20mL)，0℃下加入丙烯酰氯(14mg，0.18mmol)，0℃搅拌10min。LC-MS显示反应完全。减压浓缩，制备HPLC纯化，得黄色固体物20mg，收率：20％。ESI-MS m/z 585.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.31(s,1H),8.43(s,1H),8.29(s,1H),7.66-7.54(m,1H),7.38–7.15(m,2H),7.02-6.88(m,1H),6.74–6.56(m,1H),6.25-6.15(m,1H),5.77(d,J＝9.7Hz,1H),4.76–3.44(m,8H),1.98-1.79(m,3H),1.24(s,3H),1.10-0.99(m,6H)。
实施例2 4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(3-氯-2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-3-腈
Figure BDA0002817648820000203
制备方法同实施例1的制备方法，不同的是将2-氟-6-羟基苯硼酸替换为3-氯-2-氟-6-羟基苯硼酸，制得标题化合物。ESI-MS m/z 619.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.32(s,2H),7.42-7.39(m,1H),7.23–7.00(m,2H),6.85(d,J＝8.5Hz,1H),6.24(d,J＝11.4Hz,1H),5.78(d,J＝10.6Hz,1H),4.43-3.46(m,8H),1.85-1.73(m,3H),1.19(s,3H),1.02–0.98(m,3H),0.76-0.70(m,3H)。
实施例3 4-(4-丙烯酰基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(3-氯-2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-3-腈
Figure BDA0002817648820000211
制备方法同实施例1的制备方法，不同的是将(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯替换为哌嗪-1-甲酸叔丁酯，将2-氟-6-羟基苯硼酸替换为3-氯2-氟-6-羟基苯硼酸，制得标题化合物。ESI-MS m/z 605.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.50(s,1H),8.43(d,J＝4.7Hz,1H),8.32(d,J＝9.3Hz,1H),7.45-7.43(m,1H),7.22(d,J＝4.6Hz,1H),6.92(dd,J＝16.6,10.5Hz,1H),6.76(d,J＝8.9Hz,1H),6.21(d,J＝16.7Hz,1H),5.77(d,J＝10.3Hz,1H),3.95–3.77(m,9H),1.90(s,3H),1.07(d,J＝6.5Hz,3H),0.91(d,J＝6.5Hz,3H).手性柱分离(ChiralPak IG,250×30mm I.D.,10μm,40％EtOH/CO2,80mL/min,100bar)，按照洗脱先后顺序分别得到两个异构体3-1和3-2。
实施例3-1ESI-MS m/z 605.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.57(s,1H),8.43(d,J＝4.6Hz,1H),8.32(d,J＝9.3Hz,1H),7.45-7.43(m,1H),7.23(d,J＝4.5Hz,1H),6.92(dd,J＝16.6,10.6Hz,1H),6.76(d,J＝9.0Hz,1H),6.20(d,J＝16.6Hz,1H),5.77(d,J＝10.1Hz,1H),3.99–3.73(m,9H),1.89(s,3H),1.07(d,J＝6.6Hz,3H),0.91(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例3-2ESI-MS m/z 605.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.56(s,1H),8.43(d,J＝4.7Hz,1H),8.33(d,J＝9.2Hz,1H),7.45-7.43(m,1H),7.23(d,J＝4.6Hz,1H),6.92(dd,J＝16.6,10.5Hz,1H),6.77(d,J＝9.0Hz,1H),6.20(d,J＝16.6Hz,1H),5.77(d,J＝10.5Hz,1H),3.98–3.73(m,9H),1.89(s,3H),1.09-1.05(m,3H),0.91(d,J＝6.5Hz,3H).
实施例4 4-(4-丙烯酰基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(3-三氟甲基-2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-3-腈
Figure BDA0002817648820000212
制备方法同实施例3的制备方法，不同的是将原料3-氯-2-氟-6-羟基苯硼酸替换为3-三氟甲基-2-氟-6-羟基苯硼酸，制得标题化合物。ESI-MS m/z:639.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.43(d,J＝4.3Hz,1H),8.33(d,J＝9.2Hz,1H),7.64-7.57(m,2H),7.21(d,J＝4.0Hz,1H),6.95-6.88(m,1H),6.79(d,J＝8.3Hz,1H),6.20(d,J＝16.6Hz,1H),5.77(d,J＝10.6Hz,1H),3.97–3.75(m,9H),1.89(s,3H),1.06(d,J＝6.3Hz,3H),0.91(d,J＝6.2Hz,3H)。
实施例5 4-(4-丙烯酰基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2，3-二氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-3-腈
Figure BDA0002817648820000221
制备方法同实施例3的制备方法，不同的是将原料3-氯2-氟-6-羟基苯硼酸替换为2，3-二氟-6-羟基苯硼酸，制得标题化合物。ESI-MS m/z:589.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.79(s,1H),8.59(d,J＝4.4Hz,1H),7.94(d,J＝9.6Hz,1H),7.14(d,J＝4.5Hz,1H),7.12–7.04(m,1H),6.62–6.52(m,2H),6.35(d,J＝16.7Hz,1H),5.78(d,J＝10.4Hz,1H),4.04–3.72(m,9H),1.95(s,3H),1.14(d,J＝6.4Hz,3H),0.96(d,J＝6.5Hz,3H)。
实施例6 4-(4-丙烯酰基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(2，3-二氟-6-胺基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-3-腈
Figure BDA0002817648820000222
制备方法同实施例5的制备方法，不同的是将原料2，3-二氟-6-羟基苯硼酸替换为2，3-二氟-6-胺基苯硼酸，制得标题化合物。ESI-MS m/z:588.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.49(d,J＝4.6Hz,1H),8.36(d,J＝9.6Hz,1H),7.63-7.57(m,1H),7.26(d,J＝4.6Hz,1H),6.92(dd,J＝16.7,10.4Hz,1H),6.46-6.43(m,1H),6.21(d,J＝16.6Hz,1H),5.77(d,J＝10.1Hz,1H),3.96–3.80(m,9H),1.93(s,3H),1.06(d,J＝6.6Hz,3H),0.92(d,J＝6.4Hz,3H).
实施例7 N-(1-(3-腈基-7-(2，3-二氟-6-羟基苯基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-4-基)杂氮环丁烷-3-基)丙烯酰胺
Figure BDA0002817648820000223
制备方法同实施例5的制备方法，不同的是将原料哌嗪-1-羧酸叔丁酯替换为氮杂环丁烷-3-基氨基甲酸叔丁酯，制得标题化合物。ESI-MS m/z:575.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.20(s,1H),8.94(d,J＝6.0Hz,1H),8.41(d,J＝4.6Hz,1H),8.33(d,J＝9.7Hz,1H),7.35-7.29(m,1H),7.20(d,J＝4.7Hz,1H),6.68(d,J＝8.0Hz,1H),6.25–6.18(m,1H),5.70(d,J＝9.8Hz,1H),5.24(s,2H),4.86(s,2H),4.69(s,1H),4.09(d,J＝4.9Hz,1H),1.88(s,3H),1.07(d,J＝6.6Hz,3H),0.90(d,J＝6.5Hz,3H)。
实施例8 4-(4-丙烯酰基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(3，6-二氟-2-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-3-腈
Figure BDA0002817648820000231
制备方法同实施例5的制备方法，不同的是将原料2，3-二氟-6-羟基苯硼酸替换为3，6-二氟-2-羟基苯硼酸，制得标题化合物。ESI-MS m/z:589.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.43(d,J＝4.7Hz,1H),8.29(d,J＝9.1Hz,1H),7.22-7.21(m,2H),6.95-6.88(m,1H),6.60(br s,1H),6.20(d,J＝16.4Hz,1H),5.77(d,J＝10.8Hz,1H),3.91–3.81(m,9H),1.89(s,3H),1.07(d,J＝6.5Hz,3H),0.90(d,J＝6.4Hz,3H)。
实施例9 4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(3-氯-2-氟-6-胺基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-3-腈
Figure BDA0002817648820000232
制备方法同实施例2的制备方法，不同的是将3-氯-2-氟-6-羟基苯硼酸替换为3-氯-2-氟-6-胺基苯硼酸，制得标题化合物。ESI-MS m/z 618.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.47(d,J＝4.5Hz,1H),8.33(d,J＝8.5Hz,1H),7.28-7.23(m,2H),6.50(d,J＝8.9Hz,1H),6.22-6.17(dd,J＝17.2,10.0Hz,1H),6.07(d,J＝17.2Hz,1H),5.59(d,J＝10.0Hz,1H),5.49(br s,2H),4.68–3.40(m,8H),2.01(s 3H),1.15–0.74(m,9H).
实施例10 4-(4-丙烯酰哌嗪-1-基)-7-(5-氯-6-氟-1H-吲唑-4-基)-6-氟-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2-二氢-1,8-萘啶-3-腈
Figure BDA0002817648820000241
制备方法同实施例5的制备方法，不同的是将原料2，3-二氟-6-羟基苯硼酸替换为(5-氯-6-氟-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑-4-基)硼酸，制得标题化合物。ESI-MS m/z:629.3[M+H]+。1H NMR(400MHz,CDCl3)δ8.45(s,1H),8.02(d,J＝8.6Hz,1H),7.37(d,J＝8.3Hz,2H),7.08(s,1H),6.65(dd,J＝16.9,10.6Hz,1H),6.42(d,J＝16.6Hz,1H),5.85(d,J＝10.6Hz,1H),5.35(s,1H),4.76(s,1H),4.18–3.76(m,6H),2.61(s,1H),2.03(d,J＝7.3Hz,3H),1.68(s,3H),1.49(d,J＝6.0Hz,3H).
实施例11 4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(3，5-二氯-2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-3-腈
Figure BDA0002817648820000242
步骤1：(S)-4-(3-腈基-6-氟-7-(3,5-二氯-2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0002817648820000243
100mL单颈瓶中加入(S)-4-(3-腈基-6-氟-7-(3-氯-2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-4-基)-3-甲基哌嗪(200mg，0.30mmol)、N-氯代丁二酰亚胺(70mg，0.5mmol和乙腈(15mL)，回流继续搅拌1小时。LC-MS显示反应完全。减压浓缩，加水100mL，乙酸乙酯萃取，经硅胶柱层析纯化，得黄色固体物150mg，收率：66％。ESI-MS m/z 699.2[M+H]+。
步骤2：(S)-4-(3-腈基-6-氟-7-(3,5-二氯-2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-4-基)-3-甲基哌嗪的制备
Figure BDA0002817648820000244
100mL单颈瓶中加入(S)-4-(3-腈基-6-氟-7-(3,5-二氯-2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-4-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(150mg，0.23mmol)和二氯甲烷(20mL)，室温下加入三氟醋酸(1mL)，室温搅拌过夜。LC-MS显示反应完全。减压浓缩，饱和碳酸氢钠调PH至碱性，乙酸乙酯萃取，浓缩，得黄色固体物100mg，收率：82％。ESI-MS m/z 599.2[M+H]+。
步骤3：4-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-6-氟-7-(3,5-二氯-2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-3-腈的制备
Figure BDA0002817648820000251
100mL单颈瓶中加入(S)-4-(3-腈基-6-氟-7-(3,5-二氯-2-氟-6-羟基苯基)-1-(2-异丙基-4-甲基吡啶-3-基)-2-氧代-1,2–二氢-1,8-萘啶-4-基)-3-甲基哌嗪(100mg，0.18mmol)、二异丙基乙胺(26mg，0.2mmol)和二氯甲烷(20mL)，0℃下加入丙烯酰氯(14mg，0.18mmol)，0℃搅拌10min。LC-MS显示反应完全。减压浓缩，制备HPLC纯化，得黄色固体物20mg，收率：20％。ESI-MS m/z 653.2[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.53(s,1H),8.66–8.29(m,1H),7.83(d,J＝7.4Hz,1H),7.43–7.14(m,1H),7.05–6.77(m,1H),6.25-6.21(m,1H),5.77(d,J＝10.2Hz,1H),4.57–4.16(m,3H),4.11–3.89(m,3H),3.76–3.40(m,2H),1.99(s,3H),1.31–0.73(m,9H)。
实施例12(3S,10R)-7-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-9-氯-3-甲基-10-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-腈
Figure BDA0002817648820000252
步骤1：(S)-(1-(2,6-二溴苯氧基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0002817648820000253
0℃下，将2,6-二溴苯酚(25g,100mmol)与N-叔丁氧羰基-L-丙氨醇(17.5g,100mmol)加入到无水四氢呋喃(100mL)中，搅拌均匀，再加入三苯基膦(39.0g,150mmol)，氮气保护，再缓慢加入偶氮二甲酸二异丙酯(3g,150mmol)，加毕，将反应液移至室温，反应完全后，抽滤，滤液浓缩，硅胶柱层析(PE/EA＝50:1)，得16.5g浅黄色油状物。ESI-MS m/z:408.1[M+H]+。
步骤2：(S)-1-(2,6-二溴苯氧基)丙-2-胺的制备
Figure BDA0002817648820000261
将(S)-(1-(2,6-二溴苯氧基)丙烷-2-基)氨基甲酸叔丁酯(16g,40mmol)加入到二氯甲烷(120mL)中，搅拌溶解，再加入三氟乙酸(7.5mL)，室温搅拌，反应完全后，加入饱和碳酸氢钠溶液调pH至中性，乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，得14g油状物，ESI-MS m/z:308.1[M+H]+。
步骤3：(S)-8-溴-3-甲基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪的制备
Figure BDA0002817648820000262
将(S)-1-(2,6-二溴苯氧基)丙-2-胺(14g,45mmol)，醋酸钯(510mg,2.3mmol)，4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(1.8g,3.2mmol)，叔丁醇钠(8.7g,91.2mmol)加入到反应瓶中，用氮气置换三次后，加入甲苯，100℃反应完全后，加水，乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，硅胶柱层析(PE/EA＝20:1)得10g白色固体，ESI-MS m/z:228.3[M+H]+
步骤4：(S)-8-溴-7-氯-3-甲基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪的制备
Figure BDA0002817648820000263
将(S)-8-溴-3-甲基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪(18g,79.3mmol)加入到N,N-二甲基甲酰胺(50mL)中，搅拌溶解，再加入N-氯代丁二酰亚胺(7.2g,53mmol)，室温搅拌，反应完全后，加水，乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，硅胶柱层析得8.0g黄色固体，ESI-MS m/z:262.0[M+H]+.
步骤5：(S)-10-溴-9-氯-7-羟基-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁唑啉[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸乙酯的制备
Figure BDA0002817648820000264
将(S)-8-溴-7-氯-3-甲基-3,4-二氢-2H-苯并[b][1,4]噁嗪(6g,26.3mmol)，三羧酸三乙酯(18.3g,78.0mmol)加入到反应瓶中，升温至250℃，反应完全后，加水，乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，硅胶柱层析得4.2g白色固体，ESI-MS m/z:402.1[M+H]+。
步骤6：(S)-10-溴-9-氯-7-羟基-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酰胺的制备
Figure BDA0002817648820000265
将(S)-10-溴-9-氯-7-羟基-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁唑啉[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酸乙酯(4.2g,10.5mmol)加入到氨甲醇(50mL)中，封管反应，升温至100℃，反应完全后，浓缩反应液，得4.0g固体，所得固体直接投入下一步反应，ESI-MS m/z:373.0[M+H]+。
步骤7：(S)-7,10-二溴-9-氯-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-腈的制备
Figure BDA0002817648820000271
将(S)-10-溴-9-氯-7-羟基-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-甲酰胺(4.0g,10.7mmol)加入到氯苯(50mL)中，搅拌溶解，再加入三溴氧磷(6.1g,21.4mmol)，反应液冷却至0℃，再缓慢滴加N,N-二异丙基乙胺(2.8g,21.4mmol)，滴加完毕后，反应液升温至100℃，反应完全后，加水，乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，硅胶柱层析得3.0g固体，ESI-MS m/z:417.1[M+H]+。
步骤8：(S)-4-((S)-10-溴-9-氯-6-腈基-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁唑啉叔丁酯[2,3,4-ij]喹啉-7-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0002817648820000272
将(S)-7,10-二溴-9-氯-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-腈(3.0g,7.2mmol)加入到二甲基亚砜(40mL)中，搅拌溶解，加入(S)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.0g,0.5mmol)、三乙胺(1.5g,1.5mmol)，搅拌均匀，升温至50℃，反应完全后，加水，乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，硅胶柱层析得1.1g黄色固体，ESI-MS m/z:537.3[M+H]+。
步骤9：(3S)-4-((3S,10R)-9-氯-6-腈基-3-甲基-10-(5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑叔丁基)-4-基)-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯的制备
Figure BDA0002817648820000273
将(S)-4-((S)-10-溴-9-氯-6-腈基-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁唑啉叔丁酯[2,3,4-ij]喹啉-7-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg,0.6mmol)，5-甲基-1-氧代-2-呋喃基)-4-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼-吡啶-2-基)-1H-吲唑(0.5g,1.6mmol)，四三苯基膦钯(31mg,0.03mmol)和磷酸钾(343mg,1.62mol)加入到反应瓶中，用氮气置换三次后，加入二氧六环(10mL)，升至90℃，反应完全后，加水，乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，硅胶柱层析得(3S)-4-((3S,10R)-9-氯-6-氰基-3-甲基-10-(5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑叔丁基)-4-基)-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯100mg和(3S)-4-((3S,10S)-9-氯-6-氰基-3-甲基-10-(5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑叔丁基)-4-基)-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯100mg，极性由小到大。ESI-MS m/z:673.3[M+H]+。
步骤10：(3S,10R)-7-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-9-氯-3-甲基-10-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-腈的制备
Figure BDA0002817648820000281
将(S)-4-((3S,10R)-9-氯-6-腈基-3-甲基-10-(5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑叔丁基)-4-基)-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯(200mg,0.3mmol)加入到二氯甲烷(10mL)中，再加入三氟乙酸(1mL)室温搅拌反应，TLC监测反应完全后，向反应液中滴加饱和碳酸氢钠水溶液，调pH至中性，用乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，得110mg固体，将此固体加入到无水二氯甲烷(10mL)中，搅拌溶解，加入三乙胺(300mg,3mmol)，反应液冷却至-30℃，分批加入丙烯酰氯(40.3mg,0.5mmol)，实时监控反应，TLC监测反应完全后，浓缩反应液，高效液相制备色谱仪分离制备得20mg黄色粉末。ESI-MS m/z:543.1[M+H]+；1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.08(s,1H),7.74(s,1H),7.52(s,1H),7.33(d,J＝8.4Hz,1H),6.91(s,1H),6.23(s,1H),5.76(d,J＝9.4Hz,1H),4.90(s,1H),4.51–3.35(m,9H),2.16(s,3H),1.46–0.96(m,3H),0.01(s,3H).
实施例13(3S,10S)-7-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-9-氯-3-甲基-10-(5-甲基-1H-吲唑-4-基)-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-腈
Figure BDA0002817648820000282
按照实施例12方法，以异构体(S)-4-((3S，10S)-9-氯-6-腈基-3-甲基-10-(5-甲基-1-(四氢-2H-吡喃-2-基)-1H-吲唑叔丁基)-4-基)-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-基)-3-甲基哌啶-1-羧酸叔丁酯为原料，得到标题化合物。ESI-MS m/z:543.1[M+H]+.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ13.11(s,1H),7.76(s,1H),7.55(s,1H),7.35(s,1H),6.90(s,1H),6.20(s,1H),5.77(s,1H),4.90(s,1H),4.51–3.31(m,9H),2.11(s,3H),1.17(s,3H),0.18(s,3H)。
实施例14(3S，10S)-7-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-9-氯-10-(2-氟-6-羟基苯基)-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-腈
Figure BDA0002817648820000283
步骤1：(S)-4-((3S，10S)-9-氯-6-腈基-10-(2-氟-6-(甲氧基甲氧基)苯基)-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢叔丁酯-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯的制备
Figure BDA0002817648820000291
将(S)-4-((S)-10-溴-9-氯-6-氰基-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁唑啉叔丁酯[2,3,4-ij]喹啉-7-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg,0.6mmol)，2-氟-6-甲氧基甲氧基苯硼酸(2.16g,12mmol)，四三苯基膦钯(60mg,0.06mmol)，碳酸钾(1.1g,6mmol)加入到反应瓶中，用氮气置换三次后，加入二氧六环(10mL)搅拌溶解，升至95℃，反应完全后，加水，乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，硅胶柱层析得(S)-4-((3S，10S)-9-氯-6-氰基-10-(2-氟-6-(甲氧基甲氧基)苯基)-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢叔丁酯-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯100mg和(S)-4-((3S，10R)-9-氯-6-腈基-10-(2-氟-6-(甲氧基甲氧基)苯基)-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢叔丁酯-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯100mg，保留时间由小到大。ESI-MS m/z:613.3[M+H]+。
步骤2：(3S，10S)-7-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-9-氯-10-(2-氟-6-羟基苯基)-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-腈的制备
Figure BDA0002817648820000292
将(S)-4-((3S，10S)-9-氯-6-腈基-10-(2-氟-6-(甲氧基甲氧基)苯基)-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢叔丁酯-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(350mg,0.5mmol)加入到二氯甲烷(10mL)中，再加入三氟乙酸(1mL)室温搅拌反应，TLC监测反应完全后，向反应液中滴加饱和碳酸氢钠水溶液，调pH至中性，用乙酸乙酯萃取，有机层用无水硫酸钠干燥，抽滤，滤液浓缩，得185mg固体，将此固体溶于无水二氯甲烷(10mL)中，再加入三乙胺(500mg,5mmol)，反应液冷却至-30℃，分批加入丙烯酰氯(36mg,0.4mmol)，实时监控反应，TLC监测反应完全后，浓缩反应液，高效液相制备色谱仪分离制备得标题化合物，20mg黄色粉末。ESI-MS m/z:523.1[M+H]+。1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.08(s,1H),7.80(s,1H),7.31-7.26(m,1H),6.90-6.79(m,2H),6.20(d,J＝15.5Hz,1H),5.76(d,J＝10.6Hz,1H),4.88(d,J＝5.8Hz,1H),4.38(d,J＝11.3Hz,1H),4.03(d,J＝10.8Hz,2H),3.85-3.51(m,6H),1.25(d,J＝6.2Hz,3H),1.12(d,J＝5.7Hz,3H).
实施例15(3S，10R)-7-((S)-4-丙烯酰基-2-甲基哌嗪-1-基)-9-氯-10-(2-氟-6-羟基苯基)-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-6-腈
Figure BDA0002817648820000301
按照实施例14方法，以异构体(S)-4-((3S，10R)-9-氯-6-腈基-10-(2-氟-6-(甲氧基甲氧基)苯基)-3-甲基-5-氧代-2,3-二氢叔丁酯-5H-[1,4]噁嗪并[2,3,4-ij]喹啉-7-基)-3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯为原料，得到标题化合物。ESI-MS m/z:523.1[M+H]+。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.10(s,1H),7.69(s,1H),7.31-7.25(m,1H),6.90-6.79(m,2H),6.20(d,J＝15.8Hz,1H),5.76(d,J＝10.4Hz,1H),4.88(d,J＝5.8Hz,1H),4.38(d,J＝11.2Hz,1H),4.01(d,J＝11.4Hz,2H),3.89-3.39(m,6H),1.25(d,J＝6.2Hz,3H),1.12(d,J＝5.7Hz,3H)。
按照本发明实施例1或实施例12的合成方法，利用不同市售原料合成实施例16-31的化合物，这些化合物的表征参数如表1所示：
表1
Figure BDA0002817648820000302
Figure BDA0002817648820000311
Figure BDA0002817648820000321
比较例1
Figure BDA0002817648820000322
参照专利申请WO2018/217651中关于实施例41-1描述的方法制备以上式A的比较例1的化合物，并通过氢谱和质谱鉴定。使用以下实验例1和实施例2的方法平行测定比较例1的化合物对人非小细胞肺癌细胞NCI-H358增殖的抑制及药代动力学，体外细胞IC50值与本发明化合物的活性相当，不过体内半衰期(T1/2)和生物利用度(F)等明显弱于本发明的化合物。
实验例1细胞增殖抑制实验
1.实验材料
化合物：以上实施例制备的本发明的化合物用DMSO配制成20mM。所测化合物浓度依次4倍稀释为10μM、2.5μM、0.625μM、0.156μM、0.039μM、0.010μM、0.002μM、6.103×10-4μM。
细胞株：人非小细胞肺癌细胞NCI-H358(KRAS-G12C突变)和A549(非KRAS-G12C突变)细胞购于美国典型培养物保藏中心(ATCC)。
试剂盒：CCK-8增殖抑制检测试剂盒，购自于中国江苏凯基生物技术股份有限公司。
仪器：CKX41倒置显微镜，购自于日本Olympus公司；多功能读板机，购自于美国Molecular Devices公司。
2.实验方法
2.1细胞培养：
细胞复苏：从液氮罐中取出的细胞冻存管置37℃水浴锅中，轻轻摇动使其尽快解冻。解冻后取出冻存管，用酒精棉球消毒后旋开盖子，吸出细胞液注入离心管，并加入1mL完全培养基，混匀后置于离心机中，1000rpm，离心5min。之后弃上清液，加入完全培养基反复吹打至细胞完全吹散、重悬。以适宜浓度接种于培养皿中。置37℃，5％CO2、95％潮湿空气的CO2培养箱中培养。
细胞传代：当上述复苏细胞生长至约80-90％时，吸弃原有培养液，加入1mL胰蛋白酶消化液，消化1-2min，镜下观察细胞伪足回缩变圆但细胞还未成片脱落，此时加入1mL完全培养基终止消化，轻轻吹打并收集细胞悬液，1000rpm，离心5min。去除上清，用完全培养基重悬细胞，按所需密度接种于培养皿中，置于37℃、5％CO2、95％潮湿空气的CO2培养箱中培养，每2天更换一次培养液。
2.2实验步骤：
化合物对NCI-H358细胞增殖抑制：NCI-H358细胞传代后用新鲜培养基(1640培养基+10％FBS+1％青链霉素+1mM丙酮酸钠)重悬，细胞计数之后按照2X104个细胞/mL的密度接种到96孔细胞培养板中，每孔加入100μL(即为2000个细胞/孔)。24h后，在原有旧培养基(100μL)基础上，加入100μL含不同浓度(2×)药物的新鲜培养基。化合物终浓度分别为10μM、2.5μM、0.625μM、0.156μM、0.039μM、0.010μM、0.002μM、6.103×10-4μM，每个浓度组设置复孔。继续放入培养箱培养120h后吸弃孔内培养基，尽量吸干，加入100μL已加入CCK-8的培养基(CCK-8:培养基＝1:10)。继续放入培养箱培养一定时间后，将96孔板从培养箱中取出，置于室温中平衡5分钟，置于多功能读板机中，检测450nm处的吸光度(OD值)，并计算细胞增殖抑制率。计算公式为Inhibition(％)＝100–[(OD实验孔-OD空白孔)/(OD溶剂对照孔-OD空白孔)]X100，根据不同药物浓度及其所对应的抑制率，使用GraghPad 5.0软件进行IC50曲线绘制，分析数据，得出最终IC50值，部分化合物的IC50结果见表2；
表2
Figure BDA0002817648820000341
化合物对A549细胞增殖抑制：A549细胞传代后用新鲜培养基(1640培养基+10％FBS+1％青链霉素)重悬，细胞计数之后按照1x104个细胞/mL的密度接种到96孔细胞培养板中，每孔加入100μL(即为1000个细胞/孔)。24h后，在原有旧培养基(100μL)基础上，加入100μL含不同浓度(2×)药物的新鲜培养基。化合物终浓度分别为10μM、2.5μM、0.625μM、0.156μM、0.039μM、0.010μM、0.002μM、6.103×10-4μM，每个浓度组设置两个复孔。同时，该实验中设置紫杉醇对照组，紫杉醇的终浓度分别为100nM、33.33nM、11.11nM、3.70nM、1.23nM、0.41nM、0.14nM、0.045nM，每个浓度组设置两个复孔。继续放入培养箱培养120h后吸弃孔内培养基，尽量吸干，加入100μL已加入CCK-8的培养基(CCK-8:培养基＝1:10)。继续放入培养箱培养一定时间后，将96孔板从培养箱中取出，置于室温中平衡5分钟，置于多功能读板机中，检测450nm处的吸光度(OD值)，并计算细胞增殖抑制率。计算公式为Inhibition(％)＝100–[(OD实验孔-OD空白孔)/(OD溶剂对照孔-OD空白孔)]X100，根据不同药物浓度及其所对应的抑制率，使用GraghPad 5.0软件进行IC50曲线绘制，分析数据，得出最终IC50值。本发明的化合物对非KRAS-G12C突变的肺癌细胞A549的IC50值均大于10μM，具有非常高的选择性。
从以上实验结果可以看出，本发明化合物对KRAS-G12C突变的癌细胞表现出显著的抑制活性，靶点特异性好。
实验例2药代动力学评价
1.实验材料
化合物：以上实施例制备的本发明的化合物及参照化合物(比较例1的化合物)。口服药物配方为40％PEG，60％pH3.0柠檬酸盐缓冲液，配制成0.5mg/mL，透明溶液；静脉药物配方为8％PEG，12％pH3.0柠檬酸盐缓冲液，80％生理盐水，配置成0.1mg/mL，透明溶液。
动物：雄性BALB/c小鼠，SPF级，购自上海西普尔-必凯实验动物有限公司；18-20g。实验前给予2～3天适应期。
仪器：美国AB公司API4500型三重四级杆液质联用仪，配有电喷雾离子源(ESI)，LC-30AD双泵；SIL-30AC自动进样器；CTO-30AC柱温箱；DGU-20A3R脱气机；AnalystQSA01.01色谱工作站；Milli-Q超纯水器(Millipore Inc)；QilinbeierVortex-5振荡器；HITACHICF16RⅩⅡ台式高速冷冻离心机。
2.实验方法
(1)取小鼠3只，灌胃(IG)给予本发明实施例的化合物以及参照化合物10mg/kg；静脉(IV)给予本发明实施例的化合物以及参照化合物1mg/kg；
(2)静注和口服给药后于5min、15min、30min、1h、2h、6h、10h、24h自眼眶静脉丛采血，置于肝素化EP管(0.6ML)中，8000rpm/min离心5min后取上层血浆，-20℃冻存，LC-MS/MS分析；(3)根据上述步骤所得的血药浓度数据绘制血药浓度-时间曲线图，采用WinNonlin软件求算药代动力学参数。受试化合物的药代动力学参数见表3。
表3
Figure BDA0002817648820000351
实验结果表明，本发明的化合物具有优异的半衰期(T1/2)和生物利用度(F)，口服吸收暴露量好。
尽管以上已经对本发明作了详细描述，但是本领域技术人员理解，在不偏离本发明的精神和范围的前提下可以对本发明进行各种修改和改变。本发明的权利范围并不限于上文所作的详细描述，而应归属于权利要求书。

Claims (11)

1.一种通式(I)所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药
Figure FDA0002817648810000011
其中，
Cx选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，所述环烷基、杂环基、芳基、杂芳基任选被一个或多个R6取代，R6选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、烯基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、氰基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基和环烷基；
L不存在或为-NH-；
R1选自芳基和杂芳基，所述芳基和杂芳基任选被一个或多个R7取代，R7选自羟基、氨基、羧基、烷基、卤素、氰基、硝基、烯基、炔基、氰基烷基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、羧基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氧基酰基、单烷基氨基酰基、双烷基氨基酰基、双烷基氨基、环烷基；
R2选自氢、卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、烯基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基和环烷基；
R3选自氰基、卤素、羟基、羧基、氨基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基和烷基羰基；
R4是与K-Ras、H-Ras或N-Ras突变体蛋白的第12位的半胱氨酸残基能够形成共价键的亲电部分；和
R5选自C6-10芳基、5-10元杂芳基、3-8元环烷基和3-8元杂环基烷基，其任选被一个或多个选自羧基、氰基、氨基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基和环烷基的基团取代。
2.根据权利要求1所述的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中
Figure FDA0002817648810000012
选自
Figure FDA0002817648810000013
Figure FDA0002817648810000014
R4选自
Figure FDA0002817648810000015
R4a、R4b分别独立地选自氢、卤素、氰基、烷基、羧基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、单烷基氨基烷基、双烷基氨基烷基、杂环基烷基、杂环基、环烷基；R6选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C2-4烯基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氰基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基和C3-6环烷基，n选自0、1、2、3和4。
3.根据权利要求1或2所述的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中R1选自C6-10芳基、5-10元杂芳基，所述C6-10芳基、5-10元杂芳基任选被一个或多个R7取代，R7选自羟基、氨基、羧基、C1-3烷基、卤素、氰基、硝基、烯基、炔基、氰基C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、羧基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氧基酰基、单C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基、C3-6环烷基和氧代基团取代；和
R2选自氢、氟、氯、溴、碘、羟基、羧基、氰基、氨基、乙烯基、丙烯基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基和C3-6环烷基。
4.根据权利要求1-3之任一项所述的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中R5选自苯基、萘基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、苯并咪唑、四氢吡咯基C1-3烷基，所述苯基、萘基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、苯并咪唑、四氢吡咯基C1-3烷基任选被一个或多个选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、羟基C1-6烷基、C1-6烷氧基、卤代C1-6烷氧基、羟基C1-6烷氧基、单C1-6烷基氨基、C1-6烷基酰基氨基、C1-6烷基酰基、氨基酰基、C1-6烷基氨基酰基、双C1-6烷基氨基和C3-6环烷基的基团取代。
5.一种通式(II)所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，
Figure FDA0002817648810000021
其中，
Cx选自环烷基、杂环基、芳基和杂芳基，所述环烷基、杂环基、芳基和杂芳基任选被一个或多个R6取代，R6选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、烯基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、氰基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基和环烷基；
L不存在或为-NH-；
R1选自芳基、杂芳基、环烷基和杂环基，其任选被一个或多个R7取代，R7选自羟基、氨基、羧基、烷基、卤素、氰基、硝基、烯基、炔基、氰基烷基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、羧基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氧基酰基、单烷基氨基酰基、双烷基氨基酰基、双烷基氨基、环烷基；
R2选自氢、卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、烯基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基和环烷基；
Z为N或C(R3)，其中R3选自氢、氰基、C1-6烷基、卤代C1-6烷基、C1-6烷基羰基，
R4是与K-Ras、H-Ras或N-Ras突变体蛋白的第12位的半胱氨酸残基能够形成共价键的亲电部分；
R9、R10各自独立选自氢、羧基、氰基、氨基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基和环烷基、氧代基团；或
R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成3-6元杂环基、C3-6元环烷基，所述的3-6元杂环基、C3-6元环烷基任选被一个或多个选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基和氧代基团取代；和
R11、R12各自独立选自氢、羧基、氰基、氨基、烷基、卤代烷基、羟基烷基、烷氧基、卤代烷氧基、羟基烷氧基、单烷基氨基、烷基酰基氨基、烷基酰基、氨基酰基、烷基氨基酰基、双烷基氨基和环烷基、氧代基团；或
R11和R12与它们所连接的碳原子一起形成3-6元杂环基、C3-6元环烷基，所述的3-6元杂环基、C3-6元环烷基任选被一个或多个选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基和和氧代基团取代。
6.根据权利要求5所述的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中
Figure FDA0002817648810000031
选自
Figure FDA0002817648810000032
Figure FDA0002817648810000033
R4选自
Figure FDA0002817648810000034
R4a、R4b分别独立地选自氢、卤素、氰基、烷基、羧基、卤代烷基、羟基烷基、氨基烷基、单烷基氨基烷基、双烷基氨基烷基、杂环基烷基、杂环基、环烷基；R6选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C2-4烯基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氰基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基和C3-6环烷基，n为0、1、2、3或4。
7.根据权利要求6所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中R1选自C6-10芳基、5-10元杂芳基、3-8元环烷基和3-8元杂环基，其任选被一个或多个R7取代，R7选自羟基、氨基、羧基、C1-3烷基、卤素、氰基、硝基、烯基、炔基、氰基C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、氨基C1-3烷基、羧基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氧基酰基、单C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基、C3-6环烷基和氧代基团取代；和
R2选自氢、氟、氯、溴、碘、羟基、羧基、氰基、氨基、乙烯基、丙烯基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基和C3-6环烷基。
8.根据权利要求5所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中R9、R10各自独立选自氢、羧基、氰基、氨基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基、双C1-3烷基氨基、C3-6环烷基和氧代基团；或
R9和R10与它们所连接的碳原子一起形成3-6元杂环基、C3-6元环烷基，所述的3-6元杂环基、C3-6元环烷基任选被一个或多个选自卤素、羟基、羧基、氰基、氨基、C1-3烷基、卤代C1-3烷基、羟基C1-3烷基、C1-3烷氧基、卤代C1-3烷氧基、羟基C1-3烷氧基、单C1-3烷基氨基、C1-3烷基酰基氨基、C1-3烷基酰基、氨基酰基、C1-3烷基氨基酰基和氧代基团取代；且R11、R12均为H。
9.根据权利要求1或5所示的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药，其中所述化合物为选自以下的化合物：
Figure FDA0002817648810000041
Figure FDA0002817648810000051
Figure FDA0002817648810000061
10.一种药物组合物，其包含权利要求1至9之任一项所述的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药和可药用载体。
11.权利要求1-9之任一项所述的化合物或其异构体、药学上可接受的盐、溶剂化物、结晶或前药或权利要求10所述的药物组合物在制备用于治疗和/或预防KRAS-G12C突变相关的疾病的药物中的应用。
CN202011409952.0A 2019-12-06 2020-12-04 作为kras-g12c抑制剂的化合物及其应用 Pending CN112920183A (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201911244836 2019-12-06
CN2019112448365 2019-12-06

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112920183A true CN112920183A (zh) 2021-06-08

Family

ID=76162657

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202011409952.0A Pending CN112920183A (zh) 2019-12-06 2020-12-04 作为kras-g12c抑制剂的化合物及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN112920183A (zh)

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113286794A (zh) * 2019-11-04 2021-08-20 北京加科思新药研发有限公司 Kras突变蛋白抑制剂
WO2021249563A1 (zh) * 2020-06-12 2021-12-16 苏州泽璟生物制药股份有限公司 芳基或杂芳基并吡啶酮或嘧啶酮类衍生物及其制备方法和应用
WO2022135591A1 (zh) * 2020-12-25 2022-06-30 苏州泽璟生物制药股份有限公司 芳基或杂芳基并吡啶酮或嘧啶酮类衍生物及其制备方法和应用
WO2022235870A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors for the treatment of cancer
WO2022235864A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2022266167A1 (en) * 2021-06-16 2022-12-22 Erasca, Inc. Amide and urea-containing tricyclic kras inhibitors
WO2022265974A1 (en) * 2021-06-16 2022-12-22 Erasca, Inc. Aminoheterocycle-substituted tricyclic kras inhibitors
WO2022266069A1 (en) * 2021-06-16 2022-12-22 Erasca, Inc. Tricyclic kras g12d inhibitors
WO2023008462A1 (ja) 2021-07-27 2023-02-02 東レ株式会社 癌の治療及び／又は予防のための医薬品
WO2024081674A1 (en) 2022-10-11 2024-04-18 Aadi Bioscience, Inc. Combination therapies for the treatment of cancer

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112552294A (zh) * 2019-09-10 2021-03-26 上海翰森生物医药科技有限公司 含哌嗪杂环类衍生物抑制剂、其制备方法和应用
WO2022133345A1 (en) * 2020-12-18 2022-06-23 Erasca, Inc. Tricyclic pyridones and pyrimidones
CN116615428A (zh) * 2020-09-23 2023-08-18 医睿世康药业研发公司 三环吡啶酮和嘧啶酮

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN112552294A (zh) * 2019-09-10 2021-03-26 上海翰森生物医药科技有限公司 含哌嗪杂环类衍生物抑制剂、其制备方法和应用
CN116615428A (zh) * 2020-09-23 2023-08-18 医睿世康药业研发公司 三环吡啶酮和嘧啶酮
WO2022133345A1 (en) * 2020-12-18 2022-06-23 Erasca, Inc. Tricyclic pyridones and pyrimidones

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
CHENG-YI WANGA ET AL.: ""CIP2A mediates erlotinib-induced apoptosis in non-small cell lungcancer cells without EGFR mutation"", 《LUNG CANCER》, vol. 85, pages 152 - 160 *

Cited By (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN113286794A (zh) * 2019-11-04 2021-08-20 北京加科思新药研发有限公司 Kras突变蛋白抑制剂
CN113286794B (zh) * 2019-11-04 2024-03-12 北京加科思新药研发有限公司 Kras突变蛋白抑制剂
WO2021249563A1 (zh) * 2020-06-12 2021-12-16 苏州泽璟生物制药股份有限公司 芳基或杂芳基并吡啶酮或嘧啶酮类衍生物及其制备方法和应用
WO2022135591A1 (zh) * 2020-12-25 2022-06-30 苏州泽璟生物制药股份有限公司 芳基或杂芳基并吡啶酮或嘧啶酮类衍生物及其制备方法和应用
WO2022235870A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors for the treatment of cancer
WO2022235864A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2022266167A1 (en) * 2021-06-16 2022-12-22 Erasca, Inc. Amide and urea-containing tricyclic kras inhibitors
WO2022265974A1 (en) * 2021-06-16 2022-12-22 Erasca, Inc. Aminoheterocycle-substituted tricyclic kras inhibitors
WO2022266069A1 (en) * 2021-06-16 2022-12-22 Erasca, Inc. Tricyclic kras g12d inhibitors
WO2023008462A1 (ja) 2021-07-27 2023-02-02 東レ株式会社 癌の治療及び／又は予防のための医薬品
WO2024081674A1 (en) 2022-10-11 2024-04-18 Aadi Bioscience, Inc. Combination therapies for the treatment of cancer

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112920183A (zh) 作为kras-g12c抑制剂的化合物及其应用
CN113999226B (zh) 作为kras抑制剂的杂环化合物的制备及其应用方法
CN113563323B (zh) 一类苯并噻唑基联芳基类化合物、制备方法和用途
KR102585860B1 (ko) Ｒｈｏ-관련 단백질 키나아제 억제제, 이를 포함하는 약학 조성물, 및 이의 제조 방법 및 용도
CN113544128A (zh) Kras-g12c抑制剂
EP3917927A1 (en) Immunomodulators, compositions and methods thereof
JP7025556B2 (ja) Ｐｒｃ２阻害剤
EP4269405A1 (en) Preparation and application method of heterocyclic compound as kras inhibitor
EP2809652B1 (en) Isoquinoline and naphthyridine derivatives
CN114423751B (zh) 用作选择性aurora a抑制剂的新型杂环化合物
CN114437035A (zh) 一种抑制并降解irak4的化合物及其药物组合物和药学上的应用
CN113387962A (zh) 吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮衍生物、其药物组合物及应用
CN114656482A (zh) 作为egfr抑制剂的大环杂环类化合物及其应用
CN112047937A (zh) 四氢吡啶并[3,4-d]嘧啶-2(1H)-酮类化合物，其制法与医药上的用途
EP2785715A1 (en) Substituted pyridine derivatives as fabi inhibitors
CN116249683A (zh) 氘甲基取代吡嗪并吡嗪并喹啉酮类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CN103249733A (zh) 用于治疗或预防轻度认知障碍的稠合的三唑
CN115594666A (zh) 一种磷酸酶降解剂的合成和应用
WO2022037630A1 (zh) 四环类衍生物、其制备方法及其医药上的用途
AU2019383103A1 (en) Aromatic ring-linked dioxane-quinazoline or -quinoline compounds, compositions and use thereof
CN108570038B (zh) 二氢喹喔啉类溴结构域识别蛋白抑制剂及制备方法和用途
CN112513041B (zh) 三环化合物
CN117447449A (zh) Parp1抑制剂及其应用
CN112939966B (zh) 嘧啶衍生物、其制备及应用
CN111440177B (zh) 一种取代吡唑并[1,5-a]嘧啶类化合物及其制备方法和应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination