ES2850248T3 - Compuestos antibacterianos que presentan un espectro de actividad amplio - Google Patents

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Barbara Garofalo
Giorgina Mangano
De Joannon Alessandra Capezzone
Gaia Corso
Claudia Cavarischia
Guido Furlotti
Tommaso Iacoangeli
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Abstract

Compuesto de fórmula (I): **(Ver fórmula)** en el que G1 y G2, idénticos o diferentes entre sí, son CH o N, con la condición de que por lo menos uno de G1 y G2 sea N; R1 es átomo de hidrógeno, átomo de halógeno, OH, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3), alquil (C1-3)-OH, -COOR' o -CONR'R", en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3); L1 es un enlace σ, -CH2-, -O- o -NH-; Y es grupo alquilenilo (C1-6), grupo -NH-alquilenilo (C1-6) o grupo cicloalquilenilo (C4-5), estando dicho grupo sustituido opcionalmente con un grupo hidroxi o un grupo amino o un grupo formamido-(NH-CHO); L2 es un enlace σ, -NH- o -NH-(alquilenilo C1-6)-; A es un grupo bicíclico fusionado que presenta la fórmula (III): **(Ver fórmula)** en el que G3 es N o C(R'), en el que R' es H o alquilo (C1-3); G4, G5 y G6, idénticos o diferentes entre sí, son CH, CF, C-CN o N, R2 es átomo de hidrógeno, átomo de halógeno, hidroxi, ciano, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3), CF3, OCF3 o NR'R", en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3); y R3 es átomo de hidrógeno, átomo de halógeno, hidroxi, ciano, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3), trifluorometilo o NR'R", en el que R' y R" son átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3); y B es un grupo bicíclico fusionado que presenta la fórmula (V) siguiente, o un grupo tricíclico fusionado que presenta la fórmula (VII) siguiente: **(Ver fórmula)** en el que P1 es N o CR', en el que R' es H, CN o CF3; n es 0 o 1; y R6 es átomo de hidrógeno, átomo de halógeno, CF3, hidroxi o NR'R", en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3); y sales de adición con ácidos o bases orgánicos/as o inorgánicos/as farmacéuticamente aceptables, enantiómeros, N-óxidos y sales de amonio cuaternario de dicho compuesto de fórmula (I).

Description

DESCRIPCIÓN
Compuestos antibacterianos que presentan un espectro de actividad amplio
Campo de la invención
La presente invención se refiere a nuevos compuestos antibacterianos, a composiciones farmacéuticas que los contienen y a su utilización como antimicrobianos.
Antecedentes de la invención
Las ADN topoisomerasas son enzimas que participan en la modificación del superenrollamiento del ADN durante la replicación o transcripción. Dichos enzimas se unen a ADN de cadena sencilla o de doble cadena y cortan el esqueleto de fosfato del ADN de manera que la cadena de ADN se desenreda o desenrolla. Al final de los procesos de replicación o transcripción, los enzimas mismos sellan nuevamente el esqueleto de ADN.
Las ADN topoisomerasas se clasifican como tipo I en el caso de que corten una cadena sencilla de una doble hélice de a Dn y como tipo II en el caso de que corten ambas cadenas de una doble hélice de ADN.
Las topoisomerasas de tipo II bacterianas comprenden ADN girasa y topoisomerasa IV (TopoIV), que son enzimas heterotetraméricos presentes concurrentemente en la práctica totalidad de las células procarióticas. Ambos enzimas resultan necesarios para la replicación del ADN y, por lo tanto, para el crecimiento y división celular bacteriano.
Las topoisomerasas de tipo II bacterianas son una diana antibacteriana probada, en particular de compuestos pertenecientes a la clase de la fluoroquinolona.
Las fluoroquinolonas son fármacos antibacterianos de amplio espectro que desempeñan un importante papel en el tratamiento de infecciones bacterianas, especialmente infecciones de adquisición hospitalaria e infecciones en las que se sospecha resistencia a otras clases de fármacos antibacterianos. Las fluoroquinolonas actúan mediante la inhibición de la ADN girasa en bacterias Gram-negativas y la topoisomerasa IV, en bacterias Gram-positivas. Sin embargo, la resistencia a las fluoroquinolonas ha emergido en los últimos años debido a mutaciones que alteran el sitio activo de las dianas del fármaco, la ADN girasa y la topoisomerasa IV, o la acumulación del fármaco. Además, la resistencia a las quinolonas puede estar mediada por plásmidos que producen la proteína Qnr, que protege las dianas de la quinolona frente a la inhibición (G.A. Jacoby, CID 41, supl. 2, SD120-S126, 2005).
Según la Organización Mundial de la Salud, la resistencia antimicrobiana (RAM) es la resistencia de un microorganismo a un fármaco antimicrobiano al que era originalmente sensible. Las bacterias resistentes son capaces de resistir el ataque por antibióticos y fármacos antibacterianos, de manera que los tratamientos convencionales resultan ineficaces y persisten las infecciones, incrementando el riesgo de extensión a otros. Mitton-Fry M.J. et al. (Bioorg. Med. Chem. Lett., 23, 2955-2961, 2010) han desarrollado nuevos derivados de quinolona como inhibidores de la ADN girasa y topoisomerasa IV bacterianas. Dada la importancia de la utilización escalonada como diana de las mutaciones en la historia clínica de la resistencia a las fluoroquinolonas, los autores estaban convencidos de que proporcionar inhibición de la TopoIV además de inhibición de la ADN girasa, resultaba críticamente importante. Según los autores, dicha actividad con doble diana debería retrasar la tasa de surgimiento de resistencias en la clínica, ya que los organismos que mutan la ADN girasa para evitar la inhibición todavía resultarían susceptibles a la eliminación mediante inhibición de TopoIV.
Surivet J.P. Et al. (J. Med. Chem. 56, 7396-7415, 2013) informan del diseño de nuevos inhibidores bacterianos duales de ADN girasa y TopoIV que comprenden un núcleo de tetrahidropirano y muestran que la inhibición dual de ADN girasa y TopoIV resulta necesaria para minimizar la tasa de desarrollo de resistencias.
El documento WO 2006/105289 se refiere a compuestos heterocíclicos, más particularmente compuestos pirazol, que han sido sometidos a ensayo para inhibición de tanto ADN girasa como topoisomerasa IV.
Los documentos WO 02/072572, WO 2006/021448, WO 2008/139288, WO 2010/081874, WO 2010/084152, WO 2013/068948 y WO 2013/080156 dan a conocer compuestos heterocíclicos dotados de actividad antimicrobiana. Los documentos WO 96/10568 y WO 2012/003418 dan a conocer compuestos heterocíclicos dotados de otra actividad terapéutica.
Sumario de la invención
El Solicitante ha reconocido que existe una fuerte necesidad continua de fármacos antibacterianos que superan el problema de las bacterias resistentes.
El Solicitante se ha enfrentado al problema de desarrollar nuevos compuestos antibacterianos que permiten superar el problema de la resistencia antibacteriana.
Más en particular, el Solicitante se ha enfrentado al problema de desarrollar nuevos compuestos antibacterianos capaces de inhibir concurrentemente las topoisomerasas de tipo II bacterianas, es decir, la ADN girasa y la topoisomerasa IV.
Además, el Solicitante se ha enfrentado al problema de desarrollar nuevos compuestos antibacterianos con un amplio espectro de actividad, es decir, útiles contra bacterias Gram-positivas y/o Gram-negativas.
De esta manera, en una primera forma de realización, la presente invención se refiere a un compuesto de fórmula (I):
Figure imgf000003_0001
en la que:
G1 y G2, idénticos o diferentes uno de otro, son CH o N, con la condición de que por lo menos uno de G1 y G2 sea N,
R1 es un átomo de hidrógeno, un átomo de halógeno, OH, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3), alquil (C1-3)-OH, -COOR' o -CONR'R", en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son un átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3), L1 es un enlace a, -CH2-, -O- o -NH-,
Y es un grupo alquilenilo (C1-6), un grupo -NH-alquilenilo (C1-6) o un grupo cicloalquilenilo (C4-5), sustituyendo opcionalmente dicho grupo con un grupo hidroxi o un grupo amino o un grupo formamido (-NH-CHO);
L2 es un enlace a, -NH- o -NH-alquilenilo (C1-6),
A es un grupo bicíclico fusionado con la fórmula (III) a continuación
Figure imgf000003_0002
en la que:
G3 es N o C(R'), en el que R' es H o alquilo (C1-3),
G4, G5 y G6, idénticos o diferentes entre sí, son CH, CF, C-CN o N,
R2 es un átomo de hidrógeno, un átomo de halógeno, hidroxi, ciano, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3), CF3, OCF3 o NR'R", en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomos de hidrógeno o alquilo (C1-3), y R3 es un átomo de hidrógeno, un átomo de halógeno, hidroxi, ciano, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3), trifluorometilo o NR'R", en el que R' y R" son átomos de hidrógeno o alquilos (C1-3),
y
B es un grupo bicíclico fusionado con la fórmula (V) a continuación o un grupo tricíclico fusionado con la fórmula (VII) a continuación:
Figure imgf000004_0001
en la que:
P1 es N o CR', en la que R' es H, CN o CF3,
n es 0 o 1, y
R6 es un átomo de hidrógeno, un átomo de halógeno, CF3, hidroxi o NR'R", en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomos de hidrógeno o alquilos (C1-3),
y sales de adición con ácidos o bases orgánicos o inorgánicos farmacéuticamente aceptables, enantiómeros, N-óxidos y sales de amonio cuaternario de dicho compuesto de fórmula (I).
En una segunda forma de realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende por lo menos un compuesto de fórmula (I).
En una tercera forma de realización, la presente invención se refiere a los compuestos de fórmula (I) para la utilización en medicina.
En una cuarta forma de realización, la presente invención se refiere a los compuestos de fórmula (I) para la utilización en el tratamiento de infecciones bacterianas.
Se da a conocer además un método de tratamiento de una infección bacteriana, que comprende la administración de un compuesto de fórmula (I) en un paciente que lo necesita.
Según un aspecto preferente de la presente invención, G3 es N, C(H) o C(CH3).
Preferentemente, R3 es un átomo de hidrógeno, un átomo de halógeno, ciano, alquilo (C1-3) o NR'R", en el que R' y R" son átomos de hidrógeno o alquilos (C1-3).
Más preferentemente, R3 es un átomo de hidrógeno, F, Cl, ciano, CH3, NH2 o N(CH3)2.
Ventajosamente, L1 es un enlace o o -NH-.
Preferentemente, R1 es un átomo de hidrógeno, un átomo de flúor, un átomo de cloro, OH, alquilo (C1-3)-OH, -COOR' o -CON(R')(R"), en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomos de hidrógeno o alquilos (C1-3).
Más preferentemente, R1 es H, un átomo de flúor, OH, -CH2OH, -COOC2H5 o -CONH2.
Preferentemente, R2 es un átomo de hidrógeno, un átomo de halógeno, hidroxi, ciano, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3), OCF3 o NR'R", en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomos de hidrógeno o alquilos (C1-3).
Más preferentemente, R2 es un átomo de hidrógeno, F, Cl, ciano, CH3, OCH3, NH2 o N(CH3)2.
Preferentemente, Y es un grupo alquilenilo (C1-4), un grupo -NH-alquilenilo (C1-4) o un grupo cicloalquilenilo (C4-5), estando dicho grupo sustituido opcionalmente con un grupo hdiroxi o un grupo amino.
Más preferentemente, Y es un grupo alquilenilo (C1-3), un grupo -NH-alquilenilo (C1-3) o un grupo cicloalquilenilo (C4-5), estando dicho grupo sustituido opcionalmente con un grupo hidroxi o un grupo amino.
Preferentemente, L2 es un enlace a, -NH- o -NH-alquilenilo (C1-3).
Más preferentemente, L2 es un enlace a, -NH- o -NH-CH2-.
Preferentemente, R6 es un átomo de hidrógeno o un átomo de halógeno.
Más preferentemente, R6 es un átomo de hidrógeno, F o Cl.
Según un aspecto preferente de la presente invención, A es un anillo bicíclico fusionado con las fórmulas siguientes:
Figure imgf000005_0001
en las que R' es H o alquilo (C1-3) y R2 y R3 presentan los significados explicados anteriormente.
Según un aspecto preferente de la presente invención, B es un grupo bicíclico o tricíclico fusionado con las fórmulas siguientes:
Figure imgf000006_0001
en las que R6 presenta el significado explicado anteriormente.
En la presente descripción y en las reivindicaciones siguientes, el término "alquilo (C1-6)" se refiere a una cadena de alquilo lineal o ramificada que comprende 1 a 6 átomos de carbono, tal como, por ejemplo, metilo, etilo, propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo, isopentilo, sec-pentilo, terc-pentilo, neopentilo, 3-pentilo, hexilo e isohexilo.
En la presente descripción y en las reivindicaciones siguientes, el término "alquilo (C1-3)" se refiere a una cadena alquilo lineal o ramificada que comprende 1 a 3 átomos de carbono, tal como, por ejemplo, metilo, etilo, propilo e isopropilo.
En la presente descripción y en las reivindicaciones siguientes, el término "alquilenilo (C1-6)" se refiere a una cadena alquilo lineal o ramificada divalente que comprende 1 a 6 átomos de carbono, tal como, por ejemplo, metilenilo (-CH2-), etilenilo (-CH2CH2-), propilenilo (-CH2CH2CH2-) o butilenilo (-CH2CH2CH2CH2-).
En la presente descripción y en las reivindicaciones siguientes, el término "cicloalquilenilo (C4-5)" se refiere a un grupo cicloalquilo divalente que comprende 4 o 5 átomos de carbono, tal como ciclobutilenilo y ciclopentilenilo.
Determinados compuestos de la presente invención pueden existir en formas tautoméricas, y la presente invención incluye la totalidad de dichas formas tautoméricas de dichos compuestos, a menos que se indique lo contrario.
A menos que se indique lo contrario, las estructuras ilustradas en la presente memoria también pretenden incluir todas las formas estereoquímicas de la estructura, es decir, las configuraciones R y S de cada centro asimétrico. De esta manera, los isómeros estereoquímicos individuales, así como las mezclas enantioméricas y diastereoméricas de los presentes compuestos se encuentran comprendidas dentro del alcance de la invención. De esta manera, la presente invención comprende cada diastereómero o enantiómero sustancialmente libre de otros isómeros (>90% y preferentemente >95% libre de otros estereoisómeros en moles), así como una mezcla de dichos isómeros.
Pueden obtenerse isómeros ópticos particulares mediante resolución de las mezclas racémicas según procedimientos convencionales, por ejemplo, mediante formación de sales diastereoisoméricas, mediante tratamiento con un ácido o base ópticamente activo. Son ejemplos de ácidos apropiados, los ácidos tartárico, diacetiltartárico, dibenzoiltartárico, ditoluoiltartárico y canforsulfónico, y la separación de la mezcla de diastereómeros mediante cristalización seguido de la liberación de las bases ópticamente activas a partir de dichas sales. Un procedimiento diferente para la separación de isómeros ópticos implica la utilización de una columna de cromatografía quiral seleccionada óptimamente para maximizar la separación de los enantiómeros. Todavía otro método implica la síntesis de diastereómeros covalentes mediante la reacción de compuestos de la invención con un ácido ópticamente puro en una forma activada o un isocianato ópticamente puro. Los diastereómeros sintetizados pueden separarse por medios convencionales, tales como cromatografía, destilación, cristalización o sublimación y después hidrolizarse para administrar el compuesto enantioméricamente puro.
Pueden obtenerse compuestos ópticamente activos de la invención mediante la utilización de materias primas activas. Dichos isómeros puede encontrarse en forma de un ácido libre, una base libre, un éster o una sal.
Los compuestos de la presente invención pueden existir en forma radiomarcada, es decir, dichos compuestos pueden contener uno o más átomos que contienen una masa atómica o un número másico diferente de la masa atómica o número másico observado ordinariamente en la naturaleza. Entre los radioisótopos de hidrógeno, carbono, fósforo, fluoro y cloro se incluyen 3H, 14C, 32P, 35S, 18F y 36Cl, respectivamente. Los compuestos de la presente invención que contienen dichos radioisótopos y/o otros radioisótopos de otros átomos se encuentran comprendidos dentro del alcance de la presente invención. Los radioisótopos tritiados, es decir, 3H, y carbono-14, es decir 14C, resultan particularmente preferentes por su facilidad de preparación y detectabilidad.
Los compuestos radiomarcados de la presente invención pueden prepararse generalmente mediante métodos bien conocidos por el experto en la materia. Convenientemente, dichos compuestos radiomarcados pueden prepararse llevando a cabo los procedimientos dados a conocer en la presente memoria excepto por la sustitución de un reactivo radiomarcado fácilmente disponible por un reactivo no radiomarcado.
En una segunda forma de realización, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende por lo menos un compuesto de fórmula (I) tal como se ha indicado anteriormente, una sal del mismo con un ácido o base orgánico o inorgánico farmacéuticamente aceptable, o un enantiómero del mismo, o un N-óxido del mismo, o una sal de amonio cuaternario del mismo, y por lo menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.
Preferentemente, la composición farmacéutica de la presente invención se prepara en formas de administración adecuadas.
Son ejemplos de formas de administración adecuadas, comprimidos, cápsulas, comprimidos recubiertos, gránulos, soluciones y jarabes para la administración oral; soluciones, pomada y ungüento para la administración tópica; parches medicamentosos para la administración transdérmica; supositorios para la administración rectal y soluciones estériles inyectables. Otras formas de administración adecuadas son aquellas de liberación sostenida y las basadas en liposomas para la administración oral, inyectable o transdérmica. Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden administrarse además mediante aerosol nasal o inhalación o administrarse mediante implantación (por ejemplo, quirúrgicamente), tal como con un dispositivo implantable o permanente, tal como un stent.
Otras formas de administración adecuadas son aquellas de liberación sostenida y las basadas en liposomas para la administración oral, inyectable o transdérmica.
Las formas de administración de la composición farmacéutica de la presente invención pueden prepararse mediante técnicas que resultan familiares para el químico farmacéutico, y comprenden la mezcla, granulación, compresión, disolución, esterilización y similares.
Típicamente, la cantidad de compuesto de fórmula (I) o de la sal de amonio cuaternario farmacéuticamente aceptable, N-óxido y sal del mismo en la composición farmacéutica de la presente invención se encontrará comprendida entre 0.01 mg y 1,500 mg, preferentemente entre 0.1 mg y 500 mg y más preferentemente entre 1 mg y 200 mg.
Típicamente, la cantidad de compuesto de fórmula (I) en la composición farmacéutica de la presente invención será suficiente para garantizar un nivel de administración de entre 0.001 y 20 mg/kg/día. Preferentemente, el nivel de administración es de 0.01 a 7.5 mg/kg/día, más preferentemente de 0.1 a 5 mg/kg/día, y todavía más preferentemente de 0.5 a 2.5 mg/kg/día.
Tal como apreciará el experto en la materia, pueden resultar necesarias dosis más bajas o altas que las indicadas anteriormente. Los regímenes de dosis y tratamiento específicos para cualquier paciente particular dependerán de una diversidad de factores, incluyendo la actividad del compuesto específico utilizado, la edad, el peso corporal, el estado general de salud, el sexo, la dieta, el momento de la administración, la tasa de excreción, la combinación de fármacos, la gravedad y el curso de la enfermedad, y la predisposición del paciente a la enfermedad y el criterio del médico responsable del tratamiento.
Las composiciones farmacéuticas de la presente invención pueden administrarse por vía oral, parenteral, mediante espray inhalable, por vía tópica, rectal, nasal, bucal, vaginal o mediante un reservorio implantado. El término parenteral tal como se utiliza en la presente memoria incluye técnicas de inyección o infusión subcutánea, intracutánea, intravenosa, intramuscular, intraarticular, intrasinovial, intraesternal, intratecal, intralesional e intracraneal.
Tal como se ha indicado anteriormente, dependiendo de la naturaleza de los sustituyentes, el compuesto de fórmula (I) puede formar sales de adición con un ácido o base orgánico o inorgánico farmacéuticamente aceptable.
Son ejemplos típicos de ácidos inorgánicos fisiológicamente aceptables adecuados, ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico y ácido nítrico.
Son ejemplos típicos de ácidos orgánicos fisiológicamente aceptables adecuados, ácido acético, ácido ascórbico, ácido benzoico, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido láctico, ácido maleico, ácido metanosulfónico, ácido oxálico, ácido para-toluenosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido succínico, ácido tánico y ácido tartárico.
Son ejemplos típicos de bases inorgánicas fisiológicamente aceptables adecuadas, hidróxidos, carbonatos e hidrogenocarbonatos de amonio, calcio, magnesio, sodio y potasio, por ejemplo hidróxido amónico, hidróxido de calcio, carbonato de magnesio, hidrogenocarbonato sódico e hidrogenocarbonato potásico.
Son ejemplos típicos de bases orgánicas fisiológicamente aceptables adecuadas: arginina, betaína, cafeína, colina, N,N-dibenciletilén-diamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilén-diamina, N-etilmorfolina, N-etilpiperidina, N-metilglucamina, glucamina, glucosamina, histidina, N-(2-hidroxietil)-piperidina, N-(2-hidroxietil)pirrolidina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina y trometamina.
Tal como se indica en la presente memoria, la composición farmacéutica de la presente invención comprende un compuesto de la invención junto con un excipiente farmacéuticamente aceptable, que, tal como se indica en la presente memoria, incluye todos y cada uno de los solventes, diluyentes u otros vehículos, adyuvantes de dispersión o suspensión, agentes activos en superficie, agentes isotónicos, agentes espesantes o emulsionantes, conservantes, ligantes sólidos, lubricantes y similares, resultan adecuada para la forma de dosis particular deseada.
Entre algunos ejemplos de materiales que pueden servir como excipiente farmacéuticamente aceptable se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, azúcares, tales como lactosa, glucosa y sacarosa; almidones, tales como almidón de maíz y almidón de patata; celulosa y sus derivados, tales como carboximetilcelulosa sódica, etilcelulosa y acetato de celulosa; tragacanto en polvo, malta, gelatina, talco, excipientes, tales como manteca de cacao y ceras supositorias; aceites, tales como aceite de cacahuete, aceite de semilla de algodón, aceite de cártamo, aceite de sésamo, aceite de oliva, aceite de maíz y aceite de soja; glicoles, tales como propilenglicol; ésteres, tales como oleato de etilo y laurato de etilo; agar; agentes tamponadores, tales como hidróxido de magnesio e hidróxido de aluminio; ácido algínico; agua libre de pirógenos; solución salina isotónica; solución de Ringer; alcohol etílico y soluciones tamponadoras de fosfato, otros lubricantes compatibles no tóxicos, tales como laurilsulfato sódico y estearato de magnesio, agentes colorantes, agentes desmoldantes, agentes de recubrimiento, agentes edulcorantes, saborizantes y perfumantes, conservantes y antioxidantes.
Las expresiones “farmacéuticamente aceptable” y “fisiológicamente aceptable” pretenden definir, sin ninguna limitación particular, cualquier material adecuado para preparar una composición farmacéutica para la administración en un ser vivo. En una tercera forma de realización, la presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) para la utilización en medicina.
En una cuarta forma de realización, la presente invención se refiere a los compuestos de fórmula (I) para la utilización en el tratamiento de infecciones bacterianas.
Se da a conocer además un método de tratamiento de una infección bacteriana, que comprende la administración de un compuesto de fórmula (I) en un paciente que lo necesita.
Preferentemente, dicha infección bacteriana es una infección de la piel, una infección mucosa, una infección ginecológica, una infección de tracto respiratorio (RTI), infecciones del SNC, una infección gastrointestinal, una infección ósea, una infección cardiovascular, una infección de transmisión sexual o una infección de las vías urinarias.
Más particularmente, dicha infección bacteriana es una exacerbación aguda de la bronquitis crónica (ACEB), otitis media aguda, sinusitis aguda, infección causada por bacterias resistentes a fármacos, sepsis relacionada con un catéter, chancroide, una Chlamydia, neumonía adquirida en la comunidad (CAP), infección complicada de la piel y la estructura de la piel, infección no complicada de la piel y la estructura de la piel, endocarditis, neutropenia febril, cervicitis gonocócica, uretritis gonocócica, neumonía intrahospitalaria (HAP), osteomielitis, sepsis, sífilis, neumonía asociada a ventilador, infección intraabdominal, una gonorroea, meningitis, tétano o tuberculosis.
Todavía adicionalmente, dicha infección bacteriana puede ser una ateroesclerosis, una enfermedad cardiovascular relacionada con la infección por Helicobacter pylori o Chlamydia pneumonia; infecciones sanguíneas y tisulares, incluyendo endocarditis y osteomielitis, causada por S. aureus, S. haemolyticus, E. faecalis, E. faecium, E. durans, incluyendo cepas resistentes a antibacterianos conocidos, tales como, aunque sin limitarse a ellos, beta-lactamos, vancomicina, aminoglucósidos, quinolonas, cloranfenicol, tetraciclinas y macrólidos; bronquitis; sepsis relacionada con catéter; chancroide; Chlamydia; neumonía adquirida en la comunidad; enfermedad diseminada por complejo de Mycobacterium avium (CMA) relacionada con la infección por Mycobacterium avium, o Mycobacterium intracellulare; endocarditis; neutropenia febril; gangrena gaseosa relacionada con la infección por Clostridium perfringens o Bacteroides spp; infección de gastroenteritis; glomerulonefritis relacionada con la infección por Streptococcus pyogenes, estreptococos de grupos C y G, Corynebacterium diphtheriae, o Actinobacillus haemolyticum; cervicitis gonocócica; uretritis gonocócica; infección ginecológica; neumonía intrahospitalaria (NIH); infección causada por bacterias resistentes a fármacos; infecciones causadas por Mycobacterium tuberculosis, M. leprae, M. paratuberculosis, M. kansasii, o M. chelonei; protozoos intestinales relacionados con la infección por Cryptosporidium spp; enfermedad de Lyme relacionada con la infección por Borrelia burgdorferi; conjuntivitis, queratitis y dacrocistitis relacionada con la infección por Chlamydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, S. aureus, S. pneumoniae, S. pyogenes, H. injluenzae, o Listeria spp.; mastoiditis relacionada con la infección por Streptococcus pneumoniae, Haemophilus injluenzae, Moraxella catarrhalis, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecalis, E. faecium, E. casseliflavus, S. epidermidis, S. haemolyticus, o Peptostreptococcus spp; infección odontogénica relacionada con la infección por estreptococos viridans; osteomielitis; otitis media; tos persistente relacionada con la infección por Bordetella pertussis; faringitis; fiebre puerperal relacionada con la infección por Staphylococcus aureus, estafilococos negativos por coagulada Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, grupos estreptocócicos C-F (estreptococos de colonia diminuta), estreptococos viridans Corynebacterium minutissimum, Clostridium spp., o Bartonella henselae; infecciones de las vías respiratorias relacionada con la infección por Mycoplasma pneumoniae, Legionella pneumophila, Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, o Chlamydia pneumoniae; fiebre reumática; sepsis; enfermedades de transmisión sexual relacionadas con la infección por Chlamydia trachomatis, Haemophilus ducreyi, Treponema pallidum, Ureaplasma urealyticum, o Neiseria gonorrhoeae; sinusitis,; sífilis; síndromes febriles sistémicos relacionados con la infección por Borrelia recurrentis; amigdalitis; enfermedades de toxinas relacionadas con la infección por S. aureus (envenenamiento alimentario y síndrome del choque tóxico), o estreptococos de los grupos A, B y C; úlceras relacionadas con la infección por Helicobacter pylori; infecciones agudas no complicadas de las vías urinarias relacionadas con la infección por especies estafilocócicas negativas para coagulasa Staphylococcus aureus, o Enterococcus spp; infecciones y abscesos no complicados de la piel y los tejidos blandos ; uretritis y cervicitis; infección de las vías urinarias; infecciones del sistema nervioso central; infecciones relacionadas con el dispositivo causadas por estafilococos; infección musculoesquelético causada por estafilococos; E. coli productora de toxina Shiga; Haemophilus influenzae (enfermedad invasiva); legionelosis; psitacosis/ornitosis Chlamydia psittaci; salmonelosis causada por Salmonella spp; shigelosis por Shigella spp; síndrome de choque tóxico estreptocócico; síndrome de choque tóxico estafilocócico; y fiebre tifoidea causada por Salmonella typhi.
La infección bacteriana puede ser una infección causada por Acinetobacter spp, Bacteroides spp, Burkholderia spp, Campylobacter spp, Chlamydia spp, Chlamydophila spp, Clostridium spp, Enterobacter spp, Enterococcus spp, Escherichia spp, Gardnerella spp, Haemophilus spp, Helicobacter spp, Klebsiella spp, Legionella spp, Moraxella spp, Morganella spp, Mycoplasma spp, Neisseria spp, Peptostreptococcus spp, Proteus spp, Pseudomonas spp, Salmonella spp, Serratia spp, Staphylococcus spp, Streptoccocus spp, Stenotrophomonas spp, Ureaplasma spp, aerobios, anaerobios obligados, anaerobios facultativos, bacterias Gram-positivas, bacterias Gram-negativas, bacterias Gram-variables y patógenos respiratorios atípicos.
Más en particular, la infección bacteriana puede ser una infección causada por Acinetobacter baumanii, Acinetobacter haemolyticus, Acinetobacter junii, Acinetobacter johnsonii, Acinetobacter Iwoffi, Bacteroides bivius, Bacteroides fragilis, Burkholderia cepacia, Campylobacter jejuni, Chlamydia pneumoniae, Chlamydia urealyticus, Chlamydophila pneumoniae, Clostridium difficile, Enterobacter aerogenes, Enterobacter cloacae, Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium, Escherichia coli, Gardnerella vaginalis, Haemophilus parainfluenzae, Haemophilus influenzae, Helicobacterpylori, Klebsiella pneumoniae, Legionella pneumophila, Staphylococcus aureus resistente a la meticilina, Staphylococcus aureus susceptible a la meticilina, Moraxella catarrhalis, Morganella morganii, Mycoplasma pneumoniae, Neisseria gonorrhoeae, Streptococcus pneumoniae resistente a la penicilina, Streptococcus pneumoniae susceptible a la penicilina, Peptostreptococcus magnus, Peptostreptococcus micros, Peptostreptococcus anaerobius, Peptostreptococcus asaccharolyticus, Peptostreptococcus prevotii, Peptostreptococcus tetradius, Peptostreptococcus vaginalis, Proteus mirabilis, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus resistente a la quinolona, Staphylococcus epidermis resistente a la quinolona, Salmonella typhi, Salmonella paratyphi, Salmonella enteritidis, Salmonella typhimurium, Serratia marcescens, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus saprophyticus, Streptococcus agalactiae, Streptococcus pneumoniae, Streptococcus pyogenes, Stenotrophomonas maltophilia, Ureaplasma urealyticum, Enterococcus faecium resistente a la vancomicina, Enterococcus faecalis resistente a vancomicina, Staphylococcus aureus resistente a la vancomicina y Staphylococcus epidermis resistente a la vancomicina.
Se proporcionan ejemplos de compuestos según la presente invención en la tabla 1 a continuación, en los que los compuestos marcados con un asterisco no forman parte de la invención.
Tabla 1
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Los compuestos anteriormente indicados pueden prepararse tal como se explica en los ejemplos sintéticos, a continuación.
El experto en la materia dispone de una literatura bien establecida de transformación químicas heterocíclicas y otras relevantes, tecnologías de recuperación y purificación a las que recurrir, en combinación con la información contenida en los ejemplos, posteriormente, para una guía sobre las estrategias sintéticas, grupos protectores y otros materiales y métodos útiles para la síntesis, recuperación y caracterización de los compuestos de la presente invención, incluyendo compuestos que contienen diversas opciones de A L1, B, L2, Y, L3 y C. Pueden utilizarse diversos enfoques sintéticos para producir los compuestos indicados en la presente memoria, incluyendo los enfoques ilustrados esquemáticamente después. El experto en la materia apreciará que pueden utilizarse grupos protectores en dichos enfoques. Los “grupos protectores” son fracciones que se utilizan para bloquear temporalmente una reacción química en un sitio potencialmente reactivo (por ejemplo, una amina, hidroxi, tiol, aldehído, etc.) de manera que puede llevarse a cabo una reacción selectivamente en otro sitio en un compuesto multifuncional. En formas de realización preferentes, un grupo protector reacciona selectivamente con un buen rendimiento, proporcionando un sustrato protegido que resulta adecuado para las reacciones planificadas; el grupo protector debe ser selectivamente eliminable con un buen rendimiento con reactivos fácilmente disponibles, preferentemente no tóxicos, que no ataquen indebidamente los demás grupos funcionales presentes; el grupo protector preferentemente forma un derivado fácilmente separable (más preferentemente sin la generación de nuevos centros estereogénicos) y el grupo protector preferentemente presenta un mínimo de funcionalidad adicional para evitar la complicación de sitios adicionales de reacción. Se conoce en la técnica una amplia diversidad de grupos protectores y estrategias, reactivos y condiciones para desplegarlos y eliminarlos.
Además, pueden seleccionarse reactivos enriquecidos para un isótopo deseado, por ejemplo, tritio en lugar de hidrógeno, para crear compuestos de la presente invención que contienen dicho isótopo o isótopos. Los compuestos que contienen tritio en lugar de hidrógeno en una o más localizaciones, o que contienen diversos isótopos de C, N, P y O, se encuentran comprendidos en la presente invención y pueden utilizarse, por ejemplo, para estudiar el metabolismo y/o distribución en los tejidos de los compuestos o para alterar la tasa o ruta del metabolismo u otros aspectos del funcionamiento biológico.
Los compuestos de la presente invención pueden sintetizarse utilizando los métodos indicados posteriormente, junto con métodos sintéticos conocidos en la técnica de la química orgánica sintética, o mediante una variación de la misma, tal como apreciará el experto en la materia. Entre los métodos preferentes se incluyen, aunque sin limitación, los indicados posteriormente. Las reacciones se llevan a cabo en un solvente apropiado a los reactivos y materiales utilizados y adecuadas para la transformación que se lleva a cabo. El experto en la materia de la síntesis orgánica entenderá que la funcionalidad presente en la molécula debería ser consistente con las transformaciones propuestas. Lo anterior en ocasiones requerirá cierto criterio para modificar el orden de las etapas sintéticas o para seleccionar un esquema de procedimiento particular respecto a otro a fin de obtener un compuesto deseado de la invención. Un compuesto de la presente invención podría prepararse tal como se indica de manera general en las rutas sintéticas indicadas posteriormente en la presente memoria y mediante métodos estándares conocidos por el experto en la materia.
Ejemplos
Listado de las abreviaturas utilizadas en las rutas sintéticas indicadas a continuación en la presente memoria:
Boc: carbamato de terc-butilo
cHex ciclohexano
VC: volumen de columna
DBU: 1,5-diazabiciclo[5.4.0]undec-5-eno
DCM: diclorometano
DIPEA W,W-diisopropiletilamina
DME: 1,2-dimetoxietano
DMF: W,W-dimetilformamida
Et2O: éter dietílico
EtOAc: acetato de etilo
EM: espectroscopía de masa
TEA: trietilamina
TFA: ácido trifluoroacético
THF: tetrahidrofurano
Pd/C: paladio sobre carbón activo
Pd(OH)2/C: hidróxido de paladio sobre carbón activo
t.a.: temperatura ambiente
UPLC: cromatografía líquida de rendimiento ultraelevado
Preparación de los compuestos 27, 29 y 40 (no forma parte de la invención)
Los compuestos 27, 29 y 40 se prepararon tal como se indica posteriormente en la presente memoria, siguiendo la ruta sintética A.
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Etapa 1
Se disolvió 4-hidroxicoumarina A0 (1 g) en DCM (30 ml) con trietilamina (1.72 ml) y se añadió gota a gota anhídrido trifluorometanosulfónico (1.25 ml) a -10°C en DCM y la solución se dejó bajo agitación a -10°C durante 2 horas. La solución rojiza-marrón resultante, se calentó hasta la temperatura ambiente, se diluyó con ciclohexano/éter dietílico 1/1 y se filtró a través de una almohadilla de gel de sílice utilizando ciclohexano/éter dietílico 1/1. Se eliminó el solvente al vacío para obtener el compuesto intermedio 2-oxo-2H-cromén-4-iltrifluorometanosulfonato A1 (1.76 g, Y=97%). CL-EM (M-H+): 295,0
Etapa 2
Se añadió gota a gota trietilamina (1 ml) en acetonitrilo (2 ml) a una solución bajo agitación del compuesto intermedio A1 (1.76 g) y 1-Boc-4-aminopiperidina (1.2 g) en acetonitrilo seco (20 ml). Una vez completada la adición, la solución se calentó bajo reflujo durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente, se diluyó con DCM y se lavó con NaHCO3 saturado y agua. A continuación, se separó la fase orgánica, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó al vacío. El material en bruto se purificó mediante trituración con metanol, obteniendo el compuesto intermedio 4-[(2-oxo-2H-cromén-4-il)amino]piperidín-1-carboxilato de terc-butilo A2 (1.51 g, Y=73%). CL-EM (M-H+): 345.2
Etapa 3
El compuesto intermedio A2 (1 g) se disolvió en DCM (10 ml); se añadió gota a gota TFA (3 ml) a 0°C y la solución se dejó bajo agitación durante 2 horas. A continuación, la solución se concentró al vacío, se lavó con tolueno y éter dietílico, obteniendo la sal de ácido trifluoroacético del compuesto intermedio 4-(piperidín-4-ilamino)-2H-cromén-2-ona A3 (1.2 g, Y=cuant.). CL-EM (M-H+): 245,1
Etapa 4
Se mezclaron el compuesto intermedio A3 (50 mg) y carbonato potásico (38.7 mg) en DMF (2 ml). Posteriormente se añadió 3-bromoprop-1-ino (20.8 mg) a temperatura ambiente y la reacción se dejó bajo agitación durante la noche. Se filtró la suspensión y se concentró el filtrado. El residuo se purificó mediante columna de Si, eluyendo con EtOAc a EtOAc/metanol 8:2, proporcionando el compuesto intermedio 4-{[1(prop-2-in-1-il)piperidín-4-il]amino}-2H-cromén-2-ona A4 (25.6 mg, Y=76%). CL-EM (M-H+): 283.1
Etapa 5
El compuesto intermedio A4 (50 mg, 1 eq.), el compuesto halógeno-heteroaromático deseado B-hal (1.1 eq.), representado en la tabla, posteriormente, y yoduro de cobre (Cul, 3.42 mg, 0.1 eq.) se disolvieron en DMF (1 ml). Se añadió DIPEA (0.125 ml, 4 eq.). La mezcla se desgasificó mediante aplicación alternativa de vacío y nitrógeno, después se añadió dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (12.6 mg, 0.1 eq.) y la mezcla se calentó a 60°C. Tras 3 horas, tras completarse la reacción, se añadió agua y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. La fase orgánica se lavó con solución hipersalina, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío, proporcionando el material en bruto. Tras la purificación mediante columna de Si, eluyendo con EtOAc a EtOAc/metanol 8:2, se obtuvieron los compuestos intermedios deseados A5 correspondientes, indicados en la tabla a continuación:
Figure imgf000021_0001
Etapa 6
Cada uno de los compuestos intermedios anteriormente indicados A5 (0.09 mmoles, 1 eq.) se introdujo en EtOAc (5 ml). Se añadió Pd/C al 10% (0.05 eq.) a cada solución y la mezcla se agitó bajo hidrógeno (3.5 atm.) a temperatura ambiente. Tras 3 horas, se añadió DCM, a continuación se filtró la mezcla y se concentró al vacío, proporcionando material en bruto, que se purificó mediante columna de Si, eluyendo con DCM a DCM/metanol 8:2, proporcionando el compuesto A6 correspondiente, indicado a continuación:
Figure imgf000022_0002
Se disolvió el compuesto 29 en DCM. Se añadió gota a gota HCl 1 M en éter dietílico a 0°C y las soluciones se dejaron bajo agitación durante 2 horas. A continuación, se concentró cada solución al vacío, obteniendo, tras la trituración a partir de éter dietílico, el compuesto final en forma de sal hidrocloruro:
Figure imgf000022_0003
Compuesto 29: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 510.62 (br. s., 1H), 8.62 (br. s., 1H), 8.55 (d, J=6.3 Hz, 1H), 8.21 (d, J=8.5 Hz, 3H), 8.09 (br. s., 1H), 7.95 (br. s., 1H), 7.64 - 7.56 (m, 1H), 7.49 (br. s., 1H), 7.35 - 7.26 (m, 2H), 5.36 (s, 1H), 3.82 (br. s., 2H), 3.75 - 3.41 (m, 4H), 3.26 (br. s., 2H), 3.12 (br. s., 2H), 2.40 - 2.25 (m, 2H), 2.20 - 1.94 (m, 4H).
Compuesto 40: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 510.67 (br. s., 1H), 7.59 - 7.51 (m, 2H), 7.35 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.30 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.10 (d, J=7.0 Hz, 1H), 7.05 - 7.00 (m, 1H), 6.96 (t, J=7.3 Hz, 1H), 5.47 - 5.32 (m, 2H), 3.63 - 3.52 (m, 3H), 3.07 (d, J=11.0 Hz, 2H), 2.64 (t, J=5.9 Hz, 2H), 2.35 (t, J=5.9 Hz, 2H), 2.31 - 2.13 (m, 4H), 2.06 - 1.93 (m, 2H), 1.87 (td, J=6.1, 12.1 Hz, 2H).
Preparación del compuesto 46 (no forma parte de la invención)
Se preparó el compuesto 46 tal como se indica posteriormente en la presente memoria, siguiendo la ruta sintética B.
Figure imgf000022_0001
Etapa 1a
Se disolvió 2-cloroisoquinolina B0a (3 g) en CH3CN (150 ml) con piperazina (23.7 g) y carbonato potásico (3.8 g) y la solución se calentó bajo reflujo durante 48 h. La solución se concentró, se diluyó con DCM y se lavó con NaHCO3 saturado y solución hipersalina. A continuación, se separó la fase orgánica, se secó con sulfato sódico y se evaporó al vacío, obteniendo el compuesto intermedio 1-(piperazín-1-il)isoquinolina B1a (3.9 g, Y=94%). CL-EM (M-H+): 214.1.
Etapa 1b
Figure imgf000023_0001
A una solución de 3-(Boc-amino)-1-propanol de fórmula B0b (3.9 ml) en DCM (140 ml) se le añadió peryodinano de Dess-Martin (12.4 g) y la mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. A continuación, la mezcla se diluyó con éter dietílico y se lavó con una solución acuosa 1 M de Na2S2O3 y sol. sat. de NaHCO3. A continuación, se separó la fase orgánica, se secó con sulfato sódico y se evaporó al vacío, proporcionando el comuesto intermedio (3-oxopropil)carbamato de terc-butilo B1b (3.9 g, Y=cuant.). CL-EM (M-H+): 174.0.
Etapa 2
Se disolvió el compuesto intermedio B1a (4 g) en DCM (75 ml) y posteriormente se añadió el compuesto intermedio B1b (4.9 g) y cinco gotas de ácido acético, a temperatura ambiente. Tras diez minutos, se añadió también triacetoxiborohidruro sódico (6 g) y la solución se dejó bajo agitación durante la noche. La solución se diluyó con DCM y se lavó con 1 M de hidróxido sódico, se secó con sulfato sódico, se filtró y se evaporó al vacío.
El material en bruto en primer lugar se purificó con una columna de Si, eluyendo con acetato de etilo y después otra columna de Si, eluyendo con DCM/acetato de etilo/MeOH 7/2.5/0.5, obteniendo el compuesto intermedio tercbutil-{3-[4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}carbamato B2 (3.5 g, Y=50%). CL-EM (M-H+)=371.2.
Etapa 3
El compuesto intermedio B2 (3.5 g) se disolvió en DCM (25 ml); se añadió gota a gota TFA (10 ml) a 0°C y la solución se dejó bajo agitación durante 2 horas. La solución se concentró al vacío, se lavó con tolueno y éter dietílico, obteniendo el compuesto intermedio 3-[4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propán-1-amina B3 como sal de TFA (6.35 g, Y=93%). CL-EM (M-H+)=271.2.
Etapa 4
El compuesto intermedio B3 en forma de sal de TFA (1.3 g) se disolvió en DCM (12 ml) y TEA (1 ml); posteriormente se añadió a t.a. una gota de ácido acético y [1,3]oxatiolo[5,4-c]piridín-6-carbaldehído (150 mg), preparado tal como se indica en Preparation of naphthyridine derivatives as antibacterial agents; Miller, William Henry; Rouse, Meagan B.; Seefeld, Mark Andrew, solicitud de patente internat. PCT n° 2006/014580, 09 de feb., 2006). Tras diez minutos, se añadió triacetoxiborohidruro sódico (382 mg) y la solución se dejó bajo agitación durante la noche. La solución se diluyó con DCM y se lavó con solución hipersalina, se secó con sulfato sódico, se filtró y se evaporó al vacío. El material en bruto en primer lugar se purificó mediante columna de Si (NH), eluyendo con acetato de etilo a acetato de etilo/MeOH 9:1, seguido de columna de Si, eluyendo con DCM a DCM/MeOH 7:3, obteniendo el compuesto deseado 46, 3-[4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]-N-([1,3]oxatiolo-[5,4-c]piridín-6-ilmetil)propán-1-amina (290 mg, Y=28%). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 8.15 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.10 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.75 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.61 (ddd, J=1.3, 7.0, 8.1 Hz, 1H), 7.51 (ddd, J=1.3, 7.0, 8.3 Hz, 1H), 7.24 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 5.74 (s, 2H), 5.31 (s, 1H), 3.83 (s, 2H), 3.55 - 3.38 (m, 4H), 2.82 - 2.68 (m, 6H), 2.56 (t, J=7.3 Hz, 2H), 1.81 (quin, J=7.1 Hz, 2H).
Preparación de los compuestos 44, 51, 52, 56, 62, 66, 67, 69, 72, 73, 79, 80, 88, 91, 95, 98, 108 y 124, y 86 (no forma parte de la invención).
Se prepararon los compuestos 44, 51, 52, 56, 62, 66, 67, 69, 72, 73, 79, 80, 86, 88, 91, 95, 98, 108 y 124 tal como se indica posteriormente en la presente memoria, siguiendo la ruta sintética C.
Figure imgf000024_0001
Método sintético utilizado para preparar compuesto 51
Etapa 1
Una mezcla de 1,7-dicloroisoquinolina C0 (350 mg), K2CO3 (390 mg) y piperazín-1-carboxilato de terc-butilo (700 mg) se introdujo en un matraz y se llevaron a cabo tres ciclos de vacío/N2. Se añadió DMSO (10 ml) y la suspensión se calentó a 120°C y se agitó durante 5.5 h. A continuación, la reacción se dejó enfriar, se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. Se separó la fase orgánica y se lavó con solución hipersalina, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó bajo presión reducida, obteniendo el material en bruto en forma de aceite marrón. Se purificó mediante cartucho de 50 g de Si SNAP, eluyendo la mezcla de cHex/EtOAc (10/0, 2 VC, de 10/0 a 7/3, 8 VC - 7/3, 2 VC), obteniendo una goma pegajosa incolora, compuesto intermedio 4-(7-cloroisoquinolín-1-il)piperazín-1-carboxilato de terc-butilo C1. (Y=73%). CL-EM (M-H+)=348.3.
Etapa 2
Se añadió TFA (1 ml) a una solución de compuesto intermedio C1 (480 mg) en diclorometano (3 ml) a temperatura ambiente y la mezcla resultante se agitó durante 60 minutos. La reacción se evaporó bajo presión reducida. El residuo se disolvió dos veces en diclorometano (10 ml) y se evaporó bajo presión reducida; después, el residuo se disolvió en MeOH (4 ml) y se cargó en un cartucho s Cx preacondicionado (5 g). Se eluyó el SCX con MEOH y después con una solución 2 M de amonio en metanol. Se evaporaron las fracciones básicas bajo presión reducida, proporcionando 330 mg de un aceite incoloro espeso, compuesto intermedio 7-cloro-1-(piperazín-1-il)isoquinolina C2. (Y=cuant.). CL-EM (M-H+)=248.2.
Etapa 3
Una mezcla de compuesto intermedio C2 (325 mg), N-(3-bromopropil)carbamato de terc-butilo (297 mg), yoduro potásico (109 mg) y carbonato potásico (362 mg) en DMF (4 ml) se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La reacción se repartió entre EtOAc (50 ml) y solución hipersalina semisaturada (50 ml). Se separó la fase orgánica; después, se lavó con solución hipersalina semisaturada (50 ml) y solución hipersalina (50 ml), se secó sobre sulfato sódico y se evaporó bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (SNAP 25), eluyendo con un gradiente de 50% a 100% de mezcla A en ciclohexano, en la que A es EtOAc/MeOH (97:3), proporcionando 465 mg de una goma pegajosa incolora, N-{3-[4-(7-cloroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}carbamato de tercbutilo, compuesto intermedio C3 (Y=92%). CL-EM (M-H+)=405.4.
Etapa 4
Se añadió TFA (2 ml) a una solución de compuesto intermedio C3 (462 mg) en diclorometano (6 ml) a temperatura ambiente y la mezcla resultante se agitó durante 60 minutos. Se evaporaron los volátiles bajo presión reducida. El residuo se disolvió dos veces en diclorometano (10 ml) y se evaporó bajo presión reducida; después, el residuo se disolvió en MeOH (4 ml) y se cargó en un cartucho de SCX preacondicionado (5 g). Se eluyó el SCX con MEOH y después con una solución 2 M de amonio en metanol. Se evaporaron las fracciones básicas bajo presión reducida, proporcionando 336 mg de una goma amarilla, compuesto intermedio 3-[4-(7-cloroisoquinolín-1-il)piperazm-1-il]propán-1-amina C4 (Y=96%). CL-EM (M-H+)=305.3.
Etapa 5
Una solución de anhídrido trifluorometanosulfónico (2.5 ml) en diclorometano (10 ml) se añadió gota a gota a una solución bajo agitación de compuesto intermedio 4-hidroxi-2H-cromén-2-ona C5 (2.00 g) y trietilamina (3.44 ml) en diclorometano (60 ml) a -10°C. La reacción se agitó a -10°C durante 2 horas, después se dejó que se calentase hasta 0°C y se diluyó con ciclohexano/éter dietílico (3:1, 100 ml). La mezcla se filtró por un tapón de gel de sílice, lavando con ciclohexano/éter dietílico adicional (3:1). Los lavados que contenían el producto deseado se evaporaron bajo presión reducida, proporcionando 3.80 g de un sólido marrón, compuesto intermedio trifluorometanosulfonato de 2-oxo-2H-cromén-4-ilo C6 (Y=97%). CL-EM (M-H+)=295.1.
Etapa 6
Una solución de compuesto intermedio C4 (114 mg), trietilamina (70 microl) y compuesto intermedio C6 (100 mg) en acetonitrilo (4 ml) se calentó a 70°C durante 1 hora. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo se repartió entre diclorometano (15 ml) y una mezcla de solución hipersalina/bicarbonato sódico (1:1, 15 ml). La mezcla se filtró a través de una frita hidrofóbica (separador de fases), lavando con diclorometano (10 ml). La fase orgánica se evaporó bajo presión reducida y el residuo se cromatografió en gel de sílice (2x SNAP 10 en serie), eluyendo con un gradiente 10% a 100% de A en ciclohexano, en el que A es MeOH/EtOAc (20:80), proporcionando 63 mg de 4-({3-[4-(7-cloroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona (compuesto 51) en forma de una espuma blanca.
Se disolvió 4-({3-[4-(7-cloroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona (compuesto 51) (60 mg) en diclorometano (3 ml) y se trató con solución 1 M de HCl en éter dietílico (0.35 ml), causando la precipitación. La mezcla resultante se evaporó bajo presión reducida y el residuo se trituró con éter dietílico. Los sólidos se secaron, proporcionando 69 mg de un sólido blanquecino, hidrocloruro de 4-({3-[4-(7-cloroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona (Y=35%). LC-MS (M-H+)=449.3.
Se prepararon los compuestos 44, 52, 56, 66, 67, 72, 88, 91, 95, 98 y 108 de una manera similar, sustituyendo la 1,7-dicloroisoquinolina (C0) de la etapa 1 con los compuestos siguientes, respectivamente.
Figure imgf000025_0001
Compuesto 44: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 11.07 (br. s., 1H), 8.19 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.15 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.08 (d, J=6.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.95 (t, J=5.5 Hz, 1H), 7.85 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.73 - 7.67 (m, 1H), 7.63 - 7.58 (m, 1H), 7.57 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.39 - 7.28 (m, 2H), 5.27 (s, 1H), 4.23 (br. s., 2H), 4.00 (d, J=13.3 Hz, 2H), 3.65 (d, J=10.5 Hz, 4H), 3.50 - 3.34 (m, 4H), 3.30 (td, J=4.8, 9.4 Hz, 2H), 2.14 (quin, J=7.3 Hz, 2H).
Compuesto 51: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 10.72 (br. s., 1H), 8.18 (d, J=5.5 Hz, 1H), 8.15 - 8.09 (m, 2H), 8.01 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.89 (t, J=5.9 Hz, 1H), 7.79 (dd, J=1.9, 8.7 Hz, 1H), 7.63 - 7.57 (m, 1H), 7.55 (d, J=5.5 Hz, 1H), 7.38 - 7.28 (m, 2H), 5.78 (br. s., 1H), 5.27 (s, 1H), 3.90 - 3.75 (m, 2H), 3.62 (d, J=10.0 Hz, 2H), 3.53 - 3.34 (m, 6H), 3.33 - 3.22 (m, 2H), 2.14 (quin, J=7.0 Hz, 2H).
Compuesto 52: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 510.73 (br. s., 1H), 8.65 (s, 1H), 8.30 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.16 - 8.07 (m, 2H), 8.03 (dd, J=1.5, 8.5 Hz, 1H), 7.89 (t, J=5.1 Hz, 1H), 7.69 - 7.52 (m, 2H), 7.41 - 7.25 (m, 2H), 5.28 (s, 1H), 4.75 (br. s., 1H), 3.89 (d, J=11.5 Hz, 2H), 3.62 (d, J=9.3 Hz, 2H), 3.55 - 3.36 (m, 6H), 3.35 - 3.17 (m, 2H), 2.14 (quin, J=7.0 Hz, 2H).
Compuesto 56: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 510.06 (br. s., 2H), 8.08 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.83 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.70 (t, J=7.2 Hz, 1H), 7.66 - 7.60 (m, 1H), 7.59 - 7.50 (m, 1H), 7.41 - 7.27 (m, 3H), 5.31 (s, 1H), 3.88 (d, J=11.0 Hz, 2H), 3.75 - 3.17 (m, 13H), 2.21 - 2.02 (m, 2H).
Compuesto 72: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 (CLOROFORMO-d) 8.14 (d, J=5.5 Hz, 1H), 7.93 (br. s., 2H), 7.84 (s, 1H), 7.71 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.55 - 7.44 (m, 2H), 7.34 - 7.28 (m, 3H), 5.25 (s, 1H), 3.70 (br. s., 4H), 3.49 (br. s., 2H), 3.04 (br. s., 4H), 2.92 (br. s., 2H), 2.59 - 2.49 (m, 3H), 2.18 - 2.04 (m, 2H)
Compuesto 73 : RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 11.07 (br. s., 1H), 8.17 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.97 (br. s., 2H), 7.76 (d, J=6.8 Hz, 1H), 7.59 (br. s., 2H), 7.32 (br. s., 3H), 6.77 (br. s., 1H), 5.26 (br. s., 1H), 3.90 (br. s., 6H), 3.70 - 3.05 (m, 10H), 2.15 (br. s., 2H).
Compuesto 88: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 511.07 (br. s., 1H), 8.16 (d, J=7.8 Hz, 1H), 8.00 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.97 - 7.89 (m, 2H), 7.65 - 7.56 (m, 1H), 7.56 - 7.45 (m, 2H), 7.40 - 7.27 (m, 3H), 5.27 (s, 1H), 4.64 (br. s., 1H), 4.03 - 3.84 (m, 5H), 3.73 - 3.52 (m, 4H), 3.50 - 3.35 (m, 4H), 3.30 (br. s., 2H), 2.16 (quin, J=7.2 Hz, 2H)
Compuesto 91 : RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 10.52 (br. s., 1H), 8.14 - 8.07 (m, 2H), 7.93 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.86 (t, J=5.5 Hz, 1H), 7.74 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.64 - 7.58 (m, 1H), 7.58 - 7.52 (m, 1H), 7.40 - 7.28 (m, 2H), 7.15 (s, 1H), 5.28 (s, 1H), 3.96 (d, J=13.3 Hz, 2H), 3.68 (br. s., 1H), 3.63 (d, J=11.5 Hz, 2H), 3.52 - 3.24 (m, 8H), 2.17 - 2.04 (m, 2H).
Compuesto 95: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 510.57 (br. s., 1H), 8.24 (s, 1H), 8.21 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.09 (dd, J=8.0, 13.1 Hz, 2H), 7.94 - 7.88 (m, 1H), 7.88 - 7.80 (m, 2H), 7.65 - 7.57 (m, 1H), 7.38 - 7.28 (m, 2H), 5.28 (s, 1H), 3.98 (d, J=13.3 Hz, 2H), 3.63 (d, J=11.0 Hz, 2H), 3.55 - 3.45 (m, 2H), 3.44 - 3.24 (m, 6H), 2.12 (quin, J=7.1 Hz, 2H)
Compuesto 98: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 511.12 (br. s., 1H), 8.14 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.93 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.78 (d, J=6.3 Hz, 1H), 7.68 - 7.49 (m, 3H), 7.38 - 7.27 (m, 2H), 6.96 (br. s., 1H), 5.28 (s, 1H), 4.69 - 3.86 (m, 6H), 3.69 (d, J=12.3 Hz, 2H), 3.52 - 3.35 (m, 4H), 3.30 (br. s., 2H), 3.11 (s, 6H), 2.23 - 2.08 (m, 2H).
Compuesto 108: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 1.90 - 2.27 (m, 2 H), 2.92 (s, 3 H), 3.06 - 4.06 (m, 12 H), 5.27 (s, 1 H), 7.18 - 8.01 (m, 8 H), 8.03 - 8.19 (m, 2 H), 10.59 (br. s., 1H).
Se preparó el compuesto 62 al igual que el compuesto 44, aunque utilizando N-(3-bromoetil)carbamato de tercbutilo en lugar de N-(3-bromopropil)carbamato de terc-butilo en la etapa 3. CL-EM (M-H+)=401.3.
Compuesto 62: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 511.28 (br. s., 1H), 8.23 (d, J=7.5 Hz, 1H), 8.19 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.11 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.04 (t, J=5.3 Hz, 1H), 7.99 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.83 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.73 - 7.66 (m, 1H), 7.65 - 7.58 (m, 1H), 7.56 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.39 - 7.28 (m, 2H), 5.39 (s, 1H), 4.86 (br. s., 1H), 3.99 (d, J=11.8 Hz, 2H), 3.87 - 3.73 (m, 4H), 3.64 (t, J=11.4 Hz, 2H), 3.51 (br. s., 4H).
Se preparó el compuesto 69 al igual que el compuesto 44, aunque utilizando 1H-indén-1,3(2H)-diona en lugar de trifluorometanosulfonato de 2-oxo-2H-cromén-4-ilo en la etapa 6. CL-EM (M-H+)=399.3
Compuesto 69: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 58.40 (t, J=5.3 Hz, 1H), 8.10 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.08 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.87 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.70 (t, J=7.3 Hz, 1H), 7.63 - 7.55 (m, 2H), 7.43 - 7.33 (m, 3H), 7.28 - 7.23 (m, 1H), 4.84 (s, 1H), 3.39 (q, J=6.5 Hz, 2H), 3.36 - 3.25 (m, 6H), 2.67 (br. s., 4H), 1.87 (quin, J=6.5 Hz, 2H).
Se preparó el compuesto 79 al igual que el compuesto 44, aunque utilizando trifluorometanosulfonato de 2-oxo-6-cloro-2H-cromén-4-ilo en lugar de trifluorometanosulfonato de 2-oxo-2H-cromén-4-ilo en la etapa 6. CL-EM (M-H+)=449.3. Compuesto 79: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 5 10.86 (br. s., 1H), 8.28 (d, J=1.8 Hz, 1H), 8.17 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.11 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.97 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.95 - 7.88 (m, J=5.0, 5.0 Hz, 1H), 7.81 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.73 - 7.60 (m, 2H), 7.54 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.37 (d, J=9.0 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.31 (br. s., 1H), 3.94 (d, J=13.3 Hz, 2H), 3.75 - 3.50 (m, 4H), 3.48 - 3.12 (m, 6H), 2.25 - 2.03 (m, 2H).
Se preparó el compuesto 80 al igual que el compuesto 44, aunque utilizando trifluorometanosulfonato de 2-oxo-6-fluoro-2H-cromén-4-ilo en lugar de trifluorometanosulfonato de 2-oxo-2H-cromén-4-ilo en la etapa 6. CL-EM (M-H+)=433.3. Compuesto 80 : RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 511.07 (br. s., 1H), 8.18 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.14 - 8.05 (m, 2H), 7.99 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.92 (t, J=5.3 Hz, 1H), 7.83 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.74 - 7.65 (m, 1H), 7.55 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.49 (dt, J=2.8, 8.5 Hz, 1H), 7.43 - 7.32 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.72 (br. s., 1H), 3.98 (d, J=13.3 Hz, 2H), 3.65 (d, J=11.5 Hz, 4H), 3.48 - 3.35 (m, 4H), 3.30 (br. s., 2H), 2.24 - 2.06 (m, 2H).
Se preparó el compuesto 86 al igual que el compuesto 44, aunque utilizando trifluorometanosulfonato de 2-oxo -5,6,7,8- tetrahidro-2H-cromén-4-ilo en lugar de trifluorometanosulfonato de 2-oxo-2H-cromén-4-ilo en la etapa 6. CL-EM (M-H+)=419.4 Compuesto 86 : RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 11.16 (br. s., 1H), 8.19 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.07 (d, J=6.0 Hz, 1H), 8.00 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.94 - 7.79 (m, 1H), 7.77 - 7.66 (m, 1H), 7.57 (d, J=5.8 Hz, 1H), 6.80 (br. s., 1H), 4.92 (s, 1H), 4.01 (d, J=13.3 Hz, 1H), 4.06 (br. s., 3H), 3.68 (d, J=10.0 Hz, 1H), 3.62 (d, J=12.0 Hz, 2H), 3.39 (d, J=10.0 Hz, 2H), 3.30 - 3.12 (m, 4H), 2.42 - 2.32 (m, 2H), 2.30 - 2.17 (m, 2H), 2.03 (quin, J=7.0 Hz, 2H), 1.78 - 1.53 (m, 4H) trifluorometanosulfonato de 2-oxo-6-cloro-2H-cromén-4-ilo, trifluorometanosulfonato de 2-oxo-6-fluoro-2H-cromén-4-ilo y 2-oxo-5,6,7,8-tetrahidro-2H-cromén-4-ilo trifluorometano se prepararon utilizando el procedimiento de la etapa 5, utilizando 4-hidroxi-6-cloro-2H-cromén-2-ona, 4-hidroxi-6-fluoro-2H-cromén-2-ona y 4-hidroxi-5,6,7,8-tetrahidro-2H-cromén-2-ona, respectivamente.
Preparación de compuesto 124
A una solución de 4-({3-[4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona (compuesto 44) (110 mg, 0.265 mmoles, 1 eq.) en THF (5 ml), a 0°C, se le añadió CH3I (33 pl, 0.53 mmoles, 2 eq.). La temperatura de la mezcla se elevó espontáneamente hasta la t.a. y después se calentó a 70°C durante dos días. Se eliminó el solvente al vacío y el material en bruto se purificó mediante HPLC-EM preparativa, obteniendo yoduro de 4-(isoquinolín-1-il)-1-metil-1-{3-[(2-oxo-2H-cromén-4-il)amino]propil}piperazín-1-io (compuesto 124) (52 mg, Y=32%). CL-EM (M-H+)=429.2.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-de + D2O) ó = 8.20 - 8.09 (m, 2 H), 8.03 (dd, J = 1.3, 8.0 Hz, 1 H), 7.95 (d, J = 7.6 Hz, 1 H), 7.77 (dt, J = 1.0, 7.5 Hz, 1 H), 7.72 - 7.58 (m, 2 H), 7.52 (d, J = 5.8 Hz, 1 H), 7.41 - 7.30 (m, 2 H), 5.33 (s, 1 H), 3.87 - 3.58 (m, 10 H), 3.42 (t, J = 6.6 Hz, 2 H), 3.22 (s, 3 H), 2.26 - 2.05 (m, 2 H).
Preparación de compuesto 64
Se preparó el compuesto 64 al igual que el compuesto 44, mediante la sustitución de 2-oxo-2H-cromén-4-iltrifluorometanosulfonato de la etapa 6 por el compuesto intermedio D1 4-cloro-3,4-dihidro-2H-1,3-benzoxazín-2-ona, tal como se indica posteriormente. CL-EM (M-H+)=416.3.
Método sintético utilizado para preparar compuesto 64
Figure imgf000027_0001
Se añadió pentacloruro de fósforo (293 mg) a una mezcla bajo agitación de compuesto intermedio 4-hidroxi-1,3-benzoxazín-2-ona D0 (100 mg) en oxicloruro de fósforo (V) (0.335 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se calentó a 110°C y se agitó durante 4 h. La mezcla de reacción se enfrió y se evaporó bajo presión reducida. A continuación, se disolvió el residuo tres veces en tolueno y se concentró bajo presión reducida, eliminando el exceso de POCb. El producto en bruto se cromatografió en un cartucho de gel de sílice, eluyendo con EtOAc, proporcionando 108 mg de compuesto intermedio 4-cloro-3,4-dihidro-2H-1,3-benzoxazín-2-ona D1 (Y=99%). Compuesto 64: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 10.62 (br. s., 1H), 9.49 (br. s., 1H), 8.24 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.17 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.11 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.97 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.81 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.77 - 7.71 (m, 1H), 7.71 - 7.64 (m, 1H), 7.54 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.37 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.32 (d, J=8.5 Hz, 1H), 4.11 (br. s., 1H), 3.95 (d, J= 11.8 Hz, 2H), 3.66 (q, J=6.1 Hz, 4H), 3.56 (br. s., 2H), 3.41 (br. s., 2H), 3.31 (br. s., 2H), 2.16 (quin, J=7.4 Hz, 2H).
Preparación de los compuestos 61,65, 66, 67, 72, 88 y 100, y 63 (no forma parte de la invención)
Se prepararon los compuestos 61, 63, 65, 66, 67, 72, 88 y 100 tal como se indica posteriormente en la presente memoria, siguiendo la ruta sintética E.
Figure imgf000028_0001
Método sintético utilizado para preparar el compuesto 61
Etapa 1
Se disolvió el compuesto intermedio terc-butil-4-[3-(1,3-dioxoisoindol-2-il)propil]piperazín-1-carboxilato E0 (1.9 g) en metilamina (al 33% en etanol absoluto, 20 ml) y se calentó a 40°C durante 4 h. Se evaporó el solvente y el residuo se disolvió en éter dietílico y se filtró. Se evaporó el filtrado, proporcionando el compuesto intermedio 4-(3-aminopropil)piperazín-1-carboxilato de terc-butilo E1 en forma de un aceite incoloro (1.1 g, Y=89%). CL-EM (M-H+)=244.3.
Etapa 2
Una solución de compuesto intermedio E1 (1.1 g), trietilamina (0.674 ml) y trifluorometanosulfonato de 2-oxo-2H-cromén-4-ilo (1.2 g), preparada tal como se indica en la etapa 5 de la preparación del compuesto 51, en acetonitrilo (20 ml) se calentó a 70°C durante 1 hora. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo se repartió entre diclorometano y una mezcla de solución hipersalina/bicarbonato sódico (1:1). La mezcla se filtró a través de una frita hidrofóbica (separador de fases), lavando con diclorometano. La fase orgánica se evaporó bajo presión reducida y el residuo se cromatografió en gel de sílice (SNAP50), eluyendo con un gradiente de EtOAc en ciclohexano, proporcionando 700 mg de compuesto intermedio 4-{3-[(2-oxo-2H-cromén-4-il)amino]propil}piperazín-1-carboxilato de terc-butilo E2 (700 mg, Y=44%). CL-EM (M-H+)=388.3.
Etapa 3
Se añadió TFA (2 ml) a una solución de compuesto intermedio E2 (700 mg) en diclorometano (6 ml) a temperatura ambiente y la mezcla resultante se agitó durante 20 minutos. Se evaporó el residuo bajo presión reducida, se disolvió en MeOH y se cargó en un cartucho de SCX preacondicionado. Se eluyó el SCX con MEOH y después con una solución 2 M de amonio en metanol. Se evaporaron las fracciones básicas bajo presión reducida, proporcionando el compuesto intermedio 4-{[3-(piperazín-1-il)propil]amino}cromén-2-ona E3 (456 mg) (Y=88%). CL-EM (M-H+)=288.3.
Etapa 4
Una mezcla de compuesto intermedio E3 (40 mg), 8-cloro-1,7-naftiridina (19 mg) y carbonato potásico (23 mg) en DMSO (1 ml) se agitó durante la noche a 110°C. La mezcla se diluyó con EtOAc. La fase orgánica se lavó con solución de bicarbonato de sodio, agua y solución hipersalina. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico y se evaporó bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (SNAP10), eluyendo con un gradiente de 0% a 100% de A en EtOAc, en el que A es MeOH/EtOAc (10:90), proporcionando 20 mg del producto deseado 4-({3-[4-(1,7-naftiridín-8-il)piperazín-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona (compuesto 61). CL-EM (M-H+)=416.3. Se disolvió 4-({3-[4-(1,7-naftiridín-8-il)piperazín-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona en diclorometano (1.5 ml) y se trató con solución 1 M de HCl en éter dietílico (0.12 ml), causando la precipitación. La mezcla resultante se evaporó bajo presión reducida y el residuo se trituró con éter dietílico. Los sólidos se secaron, proporcionando 14.8 mg de sal hidrocloruro de 4-({3-[4-(1,7-naftiridín-8-il)piperazín-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona en forma de un sólido amarillo. CL-EM (M-H+)=416.3.
Compuesto 61: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 610.56 (br. s., 1H), 8.91 (dd, J=1.8, 4.3 Hz, 1H), 8.35 (dd, J=1.8, 8.3 Hz, 1H), 8.15 - 8.04 (m, 2H), 7.85 (t, J=5.4 Hz, 1H), 7.76 (dd, J=4.0, 8.3 Hz, 1H), 7.64 - 7.55 (m, 1H), 7.43 -7.25 (m, 3H), 5.26 (s, 1H), 5.04 (d, J=14.1 Hz, 2H), 3.71 - 3.48 (m, 6H), 3.46 - 3.35 (m, 2H), 3.34 - 3.16 (m, 4H), 2.11 (quin, J=7.2 Hz, 2H).
También se prepararon los compuestos 63, 65, 66, 67, 72, 88 y 100 de una manera similar, mediante la sustitución de la 8-cloro-1,7-naftiridina de la etapa 4 con los compuestos siguientes, respectivamente.
Figure imgf000029_0001
Compuesto 63: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 610.74 (br. s., 1H), 8.10 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.91 - 7.82 (m, 1H), 7.73 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.61 (q, J=7.7 Hz, 2H), 7.40 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.38 - 7.28 (m, 3H), 5.87 (s, 1H), 5.27 (s, 1H), 3.78 (d, J=9.0 Hz, 2H), 3.59 (br. s., 7H), 3.45 - 3.22 (m, 8H), 2.18 - 2.04 (m, 2H).
Compuesto 65: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 610.10 (br. s., 1H), 9.06 (dd, J=1.6, 4.1 Hz, 1H), 8.54 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.35 (d, J=6.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.81 (t, J=5.5 Hz, 1H), 7.68 - 7.57 (m, 2H), 7.53 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.28 (m, 2H), 5.28 (s, 1H), 3.92 (d, J=11.5 Hz, 2H), 3.63 (d, J=10.0 Hz, 2H), 3.37 - 3.18 (m, 8H), 2.18 -2.01 (m, 2H).
Compuesto 66: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 69.99 (br. s., 1H), 8.11 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.05 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.91 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.85 - 7.72 (m, 2H), 7.69 - 7.56 (m, 3H), 7.41 - 7.28 (m, 2H), 5.29 (s, 1H), 3.96 (d, J=9.3 Hz, 2H), 3.64 (d, J=6.5 Hz, 2H), 3.48 - 3.34 (m, 8H), 2.16 - 2.01 (m, 2H).
Compuesto 67: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 610.27 (br. s., 1H), 8.16 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.11 - 8.03 (m, 2H), 7.88 - 7.80 (m, 2H), 7.70 (dt, J=2.5, 8.8 Hz, 1H), 7.64 - 7.58 (m, 1H), 7.56 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.39 - 7.26 (m, 2H), 5.29 (s, 1H), 3.81 (d, J=12.0 Hz, 2H), 3.68 - 3.58 (m, 2H), 3.57 - 3.22 (m, 9H), 2.12 (quin, J=7.6 Hz, 2H).
Compuesto 72: RMN (400 MHz, DMSO-d6) 6 (CLOROFORMO-d) 8.14 (d, J=5.5 Hz, 1H), 7.93 (br. s., 2H), 7.84 (s, 1H), 7.71 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.55 - 7.44 (m, 2H), 7.34 - 7.28 (m, 3H), 5.25 (s, 1H), 3.70 (br. s., 4H), 3.49 (br. s., 2H), 3.04 (br. s., 4H), 2.92 (br. s., 2H), 2.59 - 2.49 (m, 3H), 2.18 - 2.04 (m, 2H).
Compuesto 88: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 611.07 (br. s., 1H), 8.16 (d, J=7.8 Hz, 1H), 8.00 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.97 - 7.89 (m, 2H), 7.65 - 7.56 (m, 1H), 7.56 - 7.45 (m, 2H), 7.40 - 7.27 (m, 3H), 5.27 (s, 1H), 4.64 (br. s., 1H), 4.03 - 3.84 (m, 5H), 3.73 - 3.52 (m, 4H), 3.50 - 3.35 (m, 4H), 3.30 (br. s., 2H), 2.16 (quin, J=7.2 Hz, 2H).
Compuesto 100: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 69.97 (br. s., 1H), 8.12 (d, J=7.3 Hz, 2H), 8.07 (dd, J=5.6, 8.9 Hz, 1H), 8.00 - 7.81 (m, 3H), 7.65 - 7.52 (m, 2H), 7.39 - 7.29 (m, 2H), 5.28 (s, 1H), 4.31 - 3.71 (m, 3H), 3.57 (d, J=11.3 Hz, 2H), 3.52 - 3.35 (m, 4H), 3.34 - 3.24 (m, 2H), 3.13 (br. s., 2H), 2.12 (quin, J=7.3 Hz, 2H).
La síntesis de 1-cloro-7-fluoroisoquinolín-2-io-2-olato, el intermedio X0 utilizado en la preparación del compuesto 100, se indica posteriormente.
Figure imgf000030_0001
Se añadió ácido 3-cloroperoxibenzoico (0.10 g) a una solución de 1-cloro-7-fluoroisoquinolina X0 (50 mg) en diclorometano seco (1.5 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 días. A continuación, la mezcla se diluyó con diclorometano y se lavó con una solución acuosa 1 M de NaOH (2x) y solución hipersalina. La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío, proporcionando 1-cloro-7-fluoroisoquinolín-2-io-2-olate en bruto en forma de un sólido blanco (0.049 g, Y=80%). Dicho producto se utilizó sin purificación adicional. CL-EM (M-H+)=198.0.
Preparación de los compuestos 54, 55, 77, 78 y 99
Se prepararon los compuestos 54, 55, 77, 78 y 99 tal como se indica posteriormente en la presente memoria, siguiendo la ruta sintética F.
Figure imgf000030_0002
Método sintético utilizado para preparar los compuestos 54 y 55
Etapa 1
Se añadió triacetoxiborohidruro sódico (597 mg) a una solución bajo agitación del compuesto intermedio 1-(piperazín-1-il)isoquinolina F0 (200 mg), preparado tal como se ha indicado en la etapa 1 de la preparación del compuesto 46, y N-(3-oxociclobutil)carbamato de terc-butilo (174 mg) en diclorometano (5 ml) a temperatura ambiente. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La reacción se diluyó con diclorometano (15 ml) y se desactivó con agua (20 ml). La mezcla se filtró a través de una frita hidrófoba (separador de fases) y la fase orgánica se lavó con una mezcla de solución hipersalina y solución de bicarbonato sódico (1:1, 20 ml) y después se filtró a través de una frita hidrófoba (separador de fases). La fase orgánica se separó bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (SNAP 25), eluyendo con un gradiente de A en ciclohexano, en el que A es MeOH/EtOAc (3:97), proporcionando 84 mg de {3-[4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]ciclobutil}-carbamato de cis-terc-butilo en forma de una goma amarilla (Y=23%) y 175 mg de trans-terc-butil-{3-[4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]ciclobutil}-carbamato (compuesto intermedio F1) en forma de espuma blanca (Y=49%), ambos presentan CL-EM (M-H+)=383.3. Se llevaron a cabo las etapas siguientes utilizando el compuesto intermedio trans F1 a fin de obtener el compuesto 55. Las mismas etapas pueden repetirse utilizando el compuesto intermedio cis F1 a fin de obtener el compuesto 54.
Etapa 2
Se añadió TFA (1 ml) a una solución de compuesto intermedio trans F1 (175 mg) en diclorometano (3 ml) a temperatura ambiente y la mezcla resultante se agitó durante 60 minutos. Se evaporaron los volátiles bajo presión reducida. El residuo se disolvió dos veces en diclorometano (5 ml) y se evaporó bajo presión reducida. A continuación, se disolvió el residuo en MeOH (2 ml) y se cargó en un cartucho de SCX preacondicionado (1 g). Se eluyó el SCX con MeOH y después con una solución 2 M de amonio en metanol. Las fracciones básicas se evaporaron bajo presión reducida, proporcionando 127 mg del compuesto intermedio trans-3-[4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]ciclobutanamina F2 en forma de un aceite pegajoso incoloro (Y=98%). CL-EM (M-H+)=283.2.
Etapa 3
Una solución del compuesto intermedio trans F2 (120 mg), trietilamina (81 pl) y trifluorometanosulfonato de 2-oxo-2H-cromén-4-ilo (114 mg), preparada tal como se indica en la etapa 5 de la preparación del compuesto 51, en acetonitrilo (4 ml) se calentó a 70°C durante 1 hora. La mezcla de reacción se enfrió y se filtró, lavando el sólido con acetonitrilo (2x1 ml). El sólido se purificó adicionalmente mediante cromatografía en gel de sílice (2x SNAP 10 en serie), eluyendo con un gradiente de MeOH al 1-10% en diclorometano, proporcionando 148 mg de trans-4-({3-[4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]ciclobutil}amino)-2H-cromén-2-ona (compuesto 55) en forma de una espuma blanca (Y=79%). C l - E M (M-H+)=427.4. Trans-4-({3-[4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]ciclobutil}amino)-2H-cromén-2-ona se disolvió en diclorometano (5 ml) y una cantidad mínima de MeOH y se trató con solución 1 M de Hcl en éter dietílico (0,87 ml) causando la precipitación. La mezcla resultante se evaporó bajo presión reducida y el residuo se trituró con éter dietílico. El sólido se secó, proporcionando 152 mg de sal hidrocloruro de trans-4-({3-[4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]ciclobutil}amino)-2H-chro-men-2-ona en forma de un sólido blanco (Y=79%). c L - E M (M-H+)=427.4.
Compuesto 55
RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) ó ppm 2.55 - 2.69 (m, 2 H), 2.89 - 3.05 (m, 2 H), 3.19 - 3.37 (m, 2 H), 3.58 - 3.79 (m, 4 H), 3.94 - 4.10 (m, 3 H), 4.31 (br. s., 1 H), 4.98 (s, 1 H), 7.30 - 7.39 (m, 2 H), 7.55 - 7.65 (m, 2 H), 7.72 (t, J=7.58 Hz, 1 H), 7.82 - 7.89 (m, 1 H), 7.94 (br. s., 1 H), 8.01 (d, J=7.60 Hz, 1 H), 8.06 - 8.13 (m, 1 H), 8.17 - 8.27 (m, 2 H), 11.84 (br. s., 1 H).
Compuesto 54
CL-EM (M-H+)=427.4.
RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) ó ppm 2.60 - 2.70 (m, 2 H), 2.83 - 2.94 (m, 2 H), 3.27 - 3.38 (m, 2 H), 3.56 (d, J=11.74 Hz, 2 H), 3.60 - 3.75 (m, 3 H), 3.86 - 3.96 (m, 1 H), 4.04 (d, J=12.23 Hz, 2 H), 5.10 (s, 1 H), 7.30 - 7.38 (m, 2 H), 7.55 - 7.64 (m, 2 H), 7.72 (t, J=7.58 Hz, 1 H), 7.86 (t, J=7.34 Hz, 1 H), 7.97 - 8.04 (m, 2 H), 8.08 (d, J=6.36 Hz, 1 H), 8.17 - 8.27 (m, 2 H), 11.85 (br. s., 1 H).
Se preparó el compuesto 99 de una manera similar, mediante la sustitución de la 1-(piperazín-1-il)isoquinolina de la etapa 1 con 7-fluoro-1 -(piperazín-1 -il)isoquinolina (Y=50%) CL-EM (M-H+)=401.3.
Compuesto 99: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 10.82 (br. s., 1H), 9.37 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.29 (d, J=7.0 Hz, 1H), 8.18 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.08 (dd, J=5.8, 9.0 Hz, 1H), 7.87 (dd, J=2.5, 10.3 Hz, 1H), 7.79 - 7.68 (m, 2H), 7.58 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.39 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.33 (d, J=8.3 Hz, 1H), 4.96 (br. s., 1H), 4.78 (br. s., 1H), 4.01 (d, J=7.3 Hz, 1H), 3.86 (d, J=12.3 Hz, 2H), 3.65 (d, J=10.8 Hz, 2H), 3.47 - 3.17 (m, 4H), 3.02 - 2.81 (m, 2H), 2.74 - 2.57 (m, 2H).
Preparación de los compuestos 77 y 78
Se prepararon los compuestos 77 y 78 de una manera similar a los compuestos 54 y 55, aunque en la etapa 1, se utilizó N-(3-oxociclopentil)carbamato de terc-butilo con la fórmula (ii) siguiente en lugar de N-(3-oxociclobutil)carbamato de terc-butilo. Ambos compuesto presentan LC- EM (M-H+)=441.4.
Compuesto 77: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 11.51 (br. s., 1H), 8.43 (d, J=7.3 Hz, 1H), 8.20 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.12 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.99 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.83 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.75 - 7.66 (m, 2H), 7.65 - 7.51 (m, 2H), 7.37 - 7.26 (m, 2H), 5.25 (s, 1H), 4.68 (br. s., 1H), 4.17 - 4.05 (m, 1H), 3.97 (d, J=11.5 Hz, 2H), 3.81 - 3.65 (m, 3H), 3.65 - 3.51 (m, 2H), 3.50 - 3.35 (m, 2H), 2.72 - 2.60 (m, 1H), 2.27 - 2.08 (m, 3H), 2.06 - 1.91 (m, 2H).
Compuesto 78: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 11.27 (br. s., 1H), 8.19 (t, J=7.8 Hz, 2H), 8.11 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.98 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.82 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.73 - 7.65 (m, 1H), 7.64 - 7.58 (m, 1H), 7.55 (d, J=6.0 Hz, 1H), 7.47 (d, J=6.3 Hz, 1H), 7.39 - 7.25 (m, 2H), 5.24 (s, 1H), 4.84 (br. s., 1H), 4.25 - 4.13 (m, 1H), 4.01 - 3.92 (m, 2H), 3.91 - 3.81 (m, 1H), 3.74 - 3.64 (m, 2H), 3.58 (t, J=12.5 Hz, 2H), 3.49 - 3.32 (m, 2H), 2.48 - 2.40 (m, 1H), 2.37 - 2.14 (m, 3H), 2.08 - 1.95 (m, 1H), 1.94 - 1.81 (m, 1H).
Se preparó N-(3-oxociclopentil)carbamato de terc-butilo de fórmula (ii) de la manera siguiente.
Etapa 1a
Figure imgf000032_0001
Se añadió peryodinano de Dess-Martin (2.53 g) en partes a una solución de (3-hidroxiciclopentil)carbamato de terc-butilo (1 g) de fórmula (i) en diclorometano (26 ml) a 0°C. Tras completar la adición, la mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a 0°C y después se dejó que se calentase hasta la temperatura ambiente y se agitó durante 18 horas. La mezcla de reacción se desactivó con una solución acuosa saturada 50/50 de bicarbonato sódico y una solución acuosa saturada de tiosulfato sódico. La capa acuosa se extrajo 3 veces con diclorometano. Las capas orgánicas agrupadas se lavaron con solución hipersalina, se secaron sobre sulfato de magnesio y se concentraron al vacío. El residuo se purificó en gel de sílice mediante cromatografía flash de columna, eluyendo con cHex a cHex/acetato de etilo 1:1, proporcionando 980 mg del compuesto intermedio (3-oxociclopentil)carbamato de terc-butilo de fórmula (ii). (Y=99%). CL-EM (M-H+)=200.1.
Preparación de los compuestos 59, 93, 94, 102, 103, 104 y 106
Se prepararon los compuestos 59, 93, 94, 102, 103, 104 y 106 tal como se indica posteriormente en la presente memoria, siguiendo la ruta sintética G.
Figure imgf000032_0002
Método sintético utilizado para preparar compuesto 59
Etapa 1
Una mezcla de 1-(piperazín-1-il)isoquinolina, compuesto intermedio G0 (150 mg), preparada tal como se indica en la etapa 1 de la preparación del compuesto 61 y 2-(oxirán-2-ilmetil)-2,3-dihidro-1 H-isoindol-1,3-diona (136 mg) en CH3CN (3 ml) se calentó bajo agitación a 60°C durante dos días. La mezcla de reacción se evaporó bajo presión reducida y el residuo se cromatografió en gel de sílice (SNAP 25), eluyendo con un gradiente de 50%-100% de EtOAc en ciclohexano, proporcionando 203 mg del compuesto intermedio 2-{2-hidroxi-3-[4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}-2,3-dihidro-1 H-isoindol-1,3-diona, compuesto intermedio G1 en forma de una espuma pegajosa blanca (Y=73%). CL-EM (M-H+)=417.3.
Etapa 2
Se disolvió el compuesto intermedio G1 (202 mg) en solución de etanol-metilamina (5 ml, solución al 33% en EtOH) y se calentó a 50°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo se trituró con éter dietílico/EtOAc (1:1 - 10 ml). La mezcla se filtró, lavando el sólido con una pequeña cantidad de la misma mezcla de solvente. El residuo se cargó en un cartucho de SCX (1 g) y se eluyó con MeOH y después con una solución 2 M de NH3 en MeOH. Se recolectaron las fracciones básicas, proporcionando 125 mg de 1-amino-3-[4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propán-2-ol, compuesto intermedio G2 en forma de una goma pegajosa incolora (Y=90%). CL-EM (M-H+)=287.2.
Etapa 3
Una solución del compuesto intermedio G2 (123 mg), trietilamina (82 microl) y 2-oxo-2H-cromén-4-iltrifluorometano-sulfonate (115 mg), preparada tal como se indica en la etapa 1 de la preparación del compuesto 27, en acetonitrilo (4 ml) se calentó a 60°C durante 1 hora. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo se repartió entre diclorometano (20 ml) y una mezcla de solución hipersalina/bicarbonato sódico (1:1, 20 ml). La mezcla se filtró a través de una frita hidrófoba (separador de fases), lavando con diclorometano (10 ml). La fase orgánica se evaporó bajo presión reducida y el residuo se cromatografió en gel de sílice (SNAP 25), eluyendo con un gradiente de 1%-10% de MeOH en diclorometano, proporcionando 113 mg de la mezcla racémica del producto deseado 4-({2-hidroxi-3-[4-(iso-quinolin-1-il)piperazín-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona (compuesto 59) en forma de una espuma incolora. CL-EM (M-H+)=431.3. El compuesto 59 se disolvió en diclorometano (3 ml) y la cantidad mínima de MeOH y se trató con solución 1 M de HCl en éter dietílico (0.66 ml), causando la precipitación. La mezcla resultante se evaporó bajo presión reducida y el residuo se trituró con éter dietílico. Se secaron los sólidos, proporcionando 117 mg de la sal hidrocloruro de 4-({2-hidroxi-3-[4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona en forma de un sólido blanquecino (Y=60%). CL-Em (M-H+)=431.3.
Compuesto 59: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 10.23 (br. s., 1H), 8.28 - 8.04 (m, 3H), 8.03 - 7.75 (m, 3H), 7.74 -7.45 (m, 3H), 7.40 - 7.26 (m, 2H), 6.06 (br. s., 1H), 5.36 (s, 1H), 4.76 (br. s., 1H), 4.39 (br. s., 1H), 3.95 (br. s., 2H), 3.82 - 3.42 (m, 7H), 3.40 - 3.17 (m, 3H).
Los compuestos 93 y 94, es decir, los estereoisómeros R y S del compuesto 59 se resolvieron mediante la utilización de una Hp Lc -EM preparativa quiral. Ambos presentan LC- EM (M-H+)=431.3.
Compuesto 93: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 9.89 (br. s., 1H), 8.18 - 8.06 (m, 3H), 7.94 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.85 (t, J=5.9 Hz, 1H), 7.76 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.69 - 7.57 (m, 2H), 7.49 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.40 - 7.29 (m, 2H), 6.01 (br. s., 1H), 5.38 (s, 1H), 4.33 (d, J=7.8 Hz, 1H), 4.19 - 3.77 (m, 4H), 3.70 (br. s., 1H), 3.61 (d, J=10.3 Hz, 1H), 3.54 -3.31 (m, 6H), 3.30 - 3.19 (m, 1H) Compuesto 94 : RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 9.89 (br. s., 1H), 8.19 - 8.06 (m, 3H), 7.94 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.85 (t, J=6.0 Hz, 1H), 7.76 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.68 - 7.58 (m, 2H), 7.49 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.39 - 7.29 (m, 2H), 6.01 (br. s., 1H), 5.38 (s, 1H), 4.43 - 4.24 (m, 1H), 3.96 - 3.81 (m, 2H), 3.64 (br. s., 3H), 3.52 - 3.16 (m, 8H).
Se prepararon los compuestos 102 y 103 de una manera similar, mediante la sustitución de la 1-(piperazín-1-il)isoquinolina de la etapa 1 por la 7-fluoro-1 -(piperazín-1 -il)isoquinolina. Ambos presentan LC- EM (M-H+)=449.1.
Compuesto 102: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 10.23 (br. s., 1H), 8.19 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.14 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.07 (dd, J=5.8, 9.0 Hz, 1H), 7.94 (t, J=5.5 Hz, 1H), 7.85 (dd, J=2.3, 10.3 Hz, 1H), 7.72 (dt, J=2.5, 8.8 Hz, 1H), 7.65 - 7.52 (m, 2H), 7.40 - 7.26 (m, 2H), 5.36 (s, 1H), 4.65 - 3.17 (m, 15H) Compuesto 103 : RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) ó = 10.17 (br. s., 1 H), 8.18 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 8.15 (d, J = 5.8 Hz, 1 H), 8.07 (dd, J = 5.6, 8.9 Hz, 1 H), 7.92 (t, J = 5.7 Hz, 1 H), 7.84 (d, J = 10.3 Hz, 1 H), 7.71 (dt, J = 2.3, 8.8 Hz, 1 H), 7.64 - 7.59 (m, 1 H), 7.56 (d, J = 6.0 Hz, 1 H), 7.39 - 7.30 (m, 2 H), 5.37 (s, 1 H), 4.51 - 3.93 (m, 3 H), 3.82 (t, J = 13.0 Hz, 2 H), 3.71 (d, J = 10.8 Hz, 1 H), 3.61 (d, J = 10.8 Hz, 1 H), 3.55 - 3.19 (m, 8 H).
Se prepararon los compuestos 104 y 106 de una manera similar a los compuestos 103 y 102, mediante la sustitución del 2-oxo-2H-cromén-4-il-trifluorometano-sulfonato de la etapa 3 por 4-cloro-3,4-dihidro-2H-1,3-benzoxazín-2-ona, preparada tal como se ha indicado en la preparación del compuesto 64. Ambos presentan LC-EM (M-H+)=450.3.
Compuesto 104: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 10.05 (br. s., 1H), 9.41 (br. s., 1H), 8.27 (br. s., 1H), 8.15 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.05 (dd, J=5.6, 8.7 Hz, 1H), 7.82 (d, J=10.3 Hz, 1H), 7.78 - 7.64 (m, 2H), 7.55 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.43 - 7.25 (m, 2H), 4.51 - 4.31 (m, 1H), 4.07 - 3.31 (m, 13H), 3.29 - 3.17 (m, 1H).
Compuesto 106: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 9.94 (br. s., 1H), 9.38 (t, J=5.4 Hz, 1H), 8.25 (d, J=7.8 Hz, 1H), 8.15 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.06 (dd, J=5.6, 8.9 Hz, 1H), 7.82 (dd, J=2.1, 10.2 Hz, 1H), 7.77 - 7.72 (m, 1H), 7.69 (dt, J=2.8, 8.8 Hz, 1H), 7.55 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.37 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.33 (d, J=8.3 Hz, 1H), 4.45 - 4.35 (m, J=7.0 Hz, 1H), 3.87 - 3.67 (m, 5H), 3.66 - 3.57 (m, 3H), 3.55 - 3.31 (m, 5H), 3.24 (t, J=11.4 Hz, 1H).
Preparación de compuesto 90
Se preparó el compuesto 90 tal como se indica posteriormente en la presente memoria, siguiendo la ruta sintética I.
Figure imgf000034_0001
Etapa 1
Se disolvió 1-cloroisoquinolina, compuesto intermedio I0 (905 mg) en CH3CN (72 ml). Se añadió carbonato potásico (796 mg) seguido de dihidrocloruro de metil-éster de ácido piperazín-2-carboxílico (1.8 g). La mezcla se agitó a 100°C durante 7 días. Se añadió DCM y la mezcla se lavó con agua. Se separó la fase orgánica, se secó y se evaporó al vacío. El material en bruto se purificó mediante columna de Si, eluyendo con cHex/acetato de etilo 3:7 a acetato de etilo/MeOH 9:1, obteniendo 570 mg de 4-(isoquinolín-1-il)piperazín-2-carboxilato de metilo, compuesto intermedio I1 (Y=38%). CL-EM (M-H+)=272.2.
Etapa 2
Una mezcla de compuesto intermedio I1 (570 mg), N-(3-bromopropil)carbamato de terc-butilo (475 mg), yoduro potásico (174 mg) y carbonato potásico (579 mg) en DMF (20 ml) se agitó durante la noche a 60°C.
La reacción se repartió entre EtOAc y solución hipersalina semisaturada. Se separó la fase orgánica; después, se lavó con solución hipersalina semisaturada y solución hipersalina, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (SNAP 50), eluyendo con un gradiente de 30%-100% de EtOAc en ciclohexano, proporcionando 470 mg de 1-{3-[(terc-butoxicarbonil)amino]propil}-4-(isoquinolm-1-il)piperazín-2-carboxilato de metilo, compuesto intermedio I2 (Y=52%). CL-EM (M-H+)=429.4.
Etapa 3
El compuesto intermedio I2 (200 mg) se disolvió en THF (2 ml); la mezcla se enfrió a 0°C y se añadió gota a gota solución 2M de borohidruro de litio en ThF (0.259 ml) bajo una atmósfera de N2. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 7 horas, se enfrió a 0°C y se desactivó con agua. Se añadió acetato de etilo y la fase orgánica se lavó con solución hipersalina. El solvente se evaporó al vacío, obteniendo el material en bruto purificado mediante columna de Si (NH), eluyendo con ciclohexano a acetato de etilo, obteniendo 102 mg de N-{3-[2-(hidroximetil)-4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}carbamato de terc-butilo, compuesto intermedio I3 (Y=54%). CL-EM (M-H+)=401.4.
Etapa 4
El compuesto intermedio I3 (100 mg) se disolvió en DCM (5 ml), se enfrió a 0°C y se añadió gota a gota TFA (1 ml). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Se eliminó el solvente al vacío y el producto en bruto se purificó mediante columna de SCX, obteniendo 70 mg del compuesto intermedio 1-(3-aminopropil)-4-(isoquinolín-1-il)piperazín-2-carboxamida I4 (Y=93%). CL-EM (M-H+)=301.3.
Etapa 5
Una solución del compuesto intermedio I4 (70 mg), trietilamina (0.726 ml) y trifluorometanosulfonato de 2-oxo-2H-cromén-4-ilo (62 mg) en acetonitrilo (2 ml) se calentó a 70°C durante 1 hora. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante columna de Si (NH), eluyendo con ciclohexano a acetato de etilo, obteniendo 40 mg del producto deseado, 4-({3-[2-(hidroximetil)-4-(isoquinolín-1 -il)piperazín-1 -il]-propil}amino)-2H-cromén-2-ona (compuesto 90). CL-EM (M-H+)=445.4.
Dicho producto se disolvió en DCM, se enfrió a 0°C y se añadió HCl 1 M en Et2Ü (3 eq.). Tras 30 minutos, la solución se evaporó al vacío y se trituró con Et2Ü, obteniendo 28 mg de la sal hidrocloruro de 4-({3-[2-(hidroximetil)-4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona. CL-EM (M-H+)=445.4.
Compuesto 90: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 9.92 (br. s., 1H), 8.21 - 8.04 (m, 3H), 7.95 (d, J=8.0 Hz, 1H), 7.87 (t, J=5.8 Hz, 1H), 7.77 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.69 - 7.57 (m, 2H), 7.51 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.37 - 7.27 (m, 2H), 5.30 (s, 1H), 4.12 (br. s., 2H), 3.98 - 3.83 (m, 3H), 3.77 (d, J=12.3 Hz, 1H), 3.67 (br. s., 1H), 3.56 (br. s., 3H), 3.49 - 3.36 (m, 4H), 3.31 (br. s., 1H), 2.22 - 2.00 (m, 2H).
Preparación de compuesto 105
Se preparó el compuesto 105 tal como se indica posteriormente en la presente memoria, siguiendo la ruta sintética L.
Figure imgf000035_0001
Etapa 1
Se añadió ácido 3-cloroperoxibenzoico (26 mg) a 0°C a una solución de 4-({3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}amino)cromén-2-ona L0 (compuesto 67) (60 mg) en diclorometano seco (3 ml). La mezcla se agitó a 0°C. A continuación, la mezcla se diluyó con diclorometano y se lavó con una solución acuosa 1 M de NaOH (2x) y solución hipersalina. La fase orgánica se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El residuo (59 mg) se purificó mediante cromatografía flash (Biotage KP-Sil, cartucho SNAP de 10 g, eluyente A: diclorometano; eluyente B: diclorometano/MeOH 80/20, gradiente A/B de 90/10 a 0/100 en 15 VC, seguido de 5 VC a 0/100, tamaño de fracción: 9 ml), proporcionando (0.054 g) del producto deseado 4-({3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)-1-oxidopipera-zin-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona (compuesto 105). CL-EM (M-H+)=449.3.
Dicho compuesto (29.5 mg) se disolvió en diclorometano y se añadió una solución 1 M de HCl en éter dietílico (0.14 ml, 2 eq.) a temperatura ambiente. La mezcla obtenida de esta manera se concentró bajo nitrógeno y el residuo se trituró con éter dietílico (2x), proporcionando la sal hidrocloruro de 4-({3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)-1-oxidopiperazín-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona en forma de un sólido amarillo (0.028 g, Y=52%). CL-EM (M-H+)=449.3.
Compuesto 105 : RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 12.44 (br. s., 1H), 8.17 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.12 (d, J=7.5 Hz, 1H), 8.08 (dd, J=5.8, 9.0 Hz, 1H), 7.87 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.71 (dt, J=2.5, 8.8 Hz, 1H), 7.64 - 7.54 (m, 2H), 7.39 - 7.27 (m, 2H), 5.30 (s, 1H), 4.18 - 3.73 (m, 8H), 3.68 - 3.55 (m, 2H), 3.45 (q, J=6.4 Hz, 2H), 2.26 (quin, J=7.0 Hz, 2H).
Preparación de compuesto 109
Se preparó el compuesto 109 tal como se indica posteriormente en la presente memoria, siguiendo la ruta sintética M.
Figure imgf000036_0001
Etapa 1
Un matraz cargado con 1-cloroisoquinolina, compuesto intermedio M0 (2.2 g) y pinacol-éster de ácido N-Boc-1.2.3.6- tetrahidropiridín-4-borónico (4 g) se sometió a una atmósfera de nitrógeno. Se añadieron DME (80 ml) y EtOH (24 ml) para proporcionar una solución. Se añadió una solución de fosfato potásico monobásico (1.2 g) y fosfato potásico tribásico (1.9 mg) en agua (40 ml). La mezcla se desoxigenó mediante varios ciclos de vacío/N2 antes de la adición de PdCl2(dbpf) (548 mg). La mezcla de reacción resultante a continuación se agitó a 60°C durante la noche. La mezcla de reacción se evaporó parcialmente bajo presión reducida para eliminar los volátiles; después, el residuo se repartió entre solución semisaturada de bicarbonato sódico y EtOAc. La fase acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. Las fases orgánicas agrupadas se lavaron con solución hipersalina, se secaron sobre Na2SO4 y se evaporaron bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (SNAP 100), eluyendo con un gradiente de 20% a 80% de EtOAc en ciclohexano, proporcionando 2.8 g de 4-(isoquinolín-1 -il)-3.6- dihidro-2H-piridín-1-carboxilato de terc-butilo, compuesto intermedio M1 (Y=67%). CL-EM (M-H+)=311.5.
Etapa 2
A una solución del compuesto intermedio M1 (2.8 g) en EtOH (90 m), se le añadió a t.a. formato amónico (3.9 g) y Pd(OH)2/C (644 mg). La mezcla se calentó a 80°C y se dejó bajo agitación a dicha temperatura durante 1 hora; después, se enfrió hasta la t.a. y se filtró por una almohadilla de Celite, lavando con EtOH. El solvente se eliminó bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (SNAP 100), eluyendo con un gradiente de 10% a 80% de EtOAc en ciclohexano, proporcionando 1.66 g de 4-(isoquinolín-1 -il)piperidín-1 -carboxilato de terc-butilo, compuesto intermedio M2 (Y=59%). CL-EM (M-H+)=313.3.
Etapa 3
Se añadió TFA (2 ml) a una solución de compuesto intermedio M2 (658 mg) en diclorometano (6 ml) a temperatura ambiente y la mezcla resultante se agitó durante 20 minutos. El residuo se evaporó bajo presión reducida, se disolvió en MeOH y se cargó en un cartucho de SCX preacondicionado. Se eluyó el SCX con MeOH y después con una solución 2 M de amonio en metanol. Las fracciones básicas se evaporaron bajo presión reducida, proporcionando 1-(piperidín-4-il)isoquinolina, compuesto intermedio M3 (447 mg, Y=cuant.). CL-Em (M-H+)=213.2.
Etapa 4
Una mezcla de compuesto intermedio M3 (447 mg), N-(3-bromopropil)carbamato de terc-butilo (476 mg), yoduro potásico (174 mg) y carbonato potásico (580 mg) en DMF (10 ml) se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La reacción se repartió entre EtOAc y solución hipersalina semisaturada. Se separó la fase orgánica; después, se lavó con solución hipersalina semisaturada y solución hipersalina, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice (SNAP 25), eluyendo con un gradiente de 30%-100% de A en EtOAc, en el que A es MeOH/EtOAc (20:80), proporcionando 665 mg de {3-[4-(isoquinolín-1-il)piperidín-1-il]propil}carbamato de terc-butilo, compuesto intermedio M4 (Y=85%). CL-EM (M-H+)=370.4.
Etapa 5
El compuesto intermedio M4 (665 mg) se disolvió en DCM (100 ml) y se enfrió a 0°C. Se añadió TFA (18 ml) y la reacción se agitó a t.a. durante la noche. La solución se concentró al vacío y el residuo se cargó en 5 g de SCX y se eluyó con MeOH/NH31 M en MeOH. Las fracciones en MeOH se cargaron nuevamente en 5g de SCX y se eluyeron con MeOH/NH31 M en MeOH. Las fracciones en NH3 se agruparon, obteniendo el compuesto intermedio 3-[4-(isoquinolín-1-il)piperidín-1 -il]propán-1-amina M5 (410 mg), en forma de un aceite amarillo pálido (Y=85%). CL-EM (M-H+)=270.4.
Etapa 6
Una solución del compuesto intermedio M5 (167 mg), TEA (130 pl) y 4-cloro-2H-cromén-2-ona (100 mg) en CH3CN (5 ml) se agitó a t.a. durante 2 horas. La solución se calentó a 40°C, se agitó durante 1.5 horas, después se enfrió a t.a. y se agitó durante la noche. El día después, la solución se calentó a 60°C y se agitó durante 2 horas; después, se detuvo la reacción. Se concentró la solución de reacción y el residuo se disolvió en EtOAc, se lavó con NaHCO3 y solución hipersalina, se secó sobre Na2SO4 y se concentró, obteniendo un producto en bruto (237 mg) en forma de una espuma amarilla. Dicho producto en bruto se purificó mediante un cartucho de 25 g de Si, eluyendo con una mezcla de DCM/MeOH (de 10/0 a 9/1), obteniendo el producto deseado 4-({3-[4-(isoquinolín-1-il)piperidín-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona, 110 mg (compuesto 109), en forma de una espuma blanca. CL-EM (M-H+)=414.4
Se disolvieron 83 mg del compuesto 109 en DCM, se enfriaron a 0°C y después se añadió HCl 1 M en Et2O (0.6 mmoles, 600 pl). Tras 15 minutos, se evaporó la solución con N2 y se trituró con Et2O, obteniendo la sal hidrocloruro de 4-({3-[4-(isoquinolín-1-il)piperidín-1-il]propil}amino)-2H-cromén-2-ona, en forma de un sólido amarillo pálido (123 mg, Y=44%). CL-EM (M-H+)=414.4.
RMN 1H (500 MHz, CLOROFORMO-d) ó ppm 1.65 (br. s., 2 H), 1.92 - 2.15 (m, 4 H), 2.31 (br. s., 2 H), 2.45 (d, J=12.23 Hz, 2 H), 2.76 (br. s., 2 H), 3.27 - 3.50 (m, 4 H), 3.62 - 3.78 (m, 1 H), 5.22 (s, 1 H), 7.32 (d, J=8.80 Hz, 1 H), 7.46 - 7.56 (m, 2 H), 7.59 (d, J=5.38 Hz, 1 H), 7.63 (t, J=8.30 Hz, 1 H), 7.70 (t, J=7.34 Hz, 1 H), 7.88 (d, J=7.83 Hz, 1 H), 7.91 - 8.01 (m, 1 H), 8.22 (d, J=7.83 Hz, 2 H), 8.54 - 8.72 (m, 2 H).
Preparación de los compuestos 125, 126 y 127 (no forma parte de la invención)
Los compuestos 125, 126 y 127 se prepararon tal como se indica posteriormente en la presente memoria, siguiendo la ruta sintética N.
Método sintético utilizado para preparar compuesto 125
Etapa 1
Se añadió pirrolidina (22 ml) a una solución de tetrahidro-4H-pirán-4-ona, compuesto intermedio N0 (10 g) en tolueno (120 ml). La mezcla se calentó bajo reflujo con un aparato de Dean-StaRk (temperatura del baño: 120-130°C). Tras 1 hora y 30 minutos, se completó la reacción, ya que se observó la formación de una cantidad estequiométrica de agua. A continuación, se concentró la mezcla al vacío, proporcionando un aceite marrón 1-(3,6-dihidro-2H-pirán-4-il)pirrolidina, compuesto intermedio N1 (17.5 g). El compuesto se utilizó en la síntesis a continuación sin purificación adicional.
Etapa 2
A una solución del compuesto intermedio N1 (9.16 g) en 1,4-dioxano (60 ml) a 0°C, se le añadió anhídrido acético (12.4 ml) y la mezcla resultante se dejó bajo agitación a temperatura ambiente bajo nitrógeno durante la noche. Se añadió agua (15 ml), la mezcla resultante se sometió a reflujo durante 1 hora, después se enfrió hasta la temperatura ambiente y se concentró al vacío. Se añadió agua (60 ml) y la fase acuosa se extrajo dos veces con EtOAc (60 ml). Los extractos orgánicos agrupados se lavaron con una solución acuosa al 5% p/p de HCl (60 ml), se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron al vacío, proporcionando 7.6 g de material en bruto. Dicho material en bruto se purificó mediante cromatografía flash (cartucho NAP de 240 g Biotage KP-Sil, gradiente de ciclohexano/acetato de etilo de 90/10 a 20/80 en 10 VC, tamaño de fracción: 100 ml), proporcionando 2-acetiloxán-4-ona, compuesto intermedio N2 en forma de un aceite incoloro (1,34 g, Y=16%). Cl-e M (M-H+)=143.0.
Etapa 3
El compuesto intermedio N2 (1.34 g) en THF (47 ml) se enfrió a -78°C y se añadió gota a gota LiHMDS (28.2 ml). Tras agitar durante 1 hora a la misma temperatura, se añadió carbonato de dimetilo. La mezcla resultante se dejó bajo calentamiento lento hasta -10°C y se agitó a dicha temperatura. Tras 5 horas, la mezcla de reacción se desactivó a 0°C con HCl acuoso 1 M hasta pH 6. Se añadió acetato de etilo y se separó la fase orgánica. La fase acuosa se extrajo nuevamente con acetato de etilo. Las fases orgánicas mixtas se lavaron con solución hipersalina, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se evaporaron al vacío, obteniendo 1.7 g de 3-oxo-3-(4-oxotetrahidro-2H-pirán-3-il)propanoato de metilo en bruto, compuesto intermedio N3, que se utilizó para la etapa siguiente sin purificación adicional. CL-EM (M-H+)=183.1.
Etapa 4
El compuesto intermedio N3 (1.7 g) se disolvió en tolueno. Se añadió DBU (1.4 ml) y la mezcla se agitó bajo reflujo. La reacción se enfrió a 0°C y se desactivó con HCl acuoso 1 M. Se añadió acetato de etilo y se separó la fase orgánica. La fase acuosa se extrajo nuevamente con acetato de etilo. Las fases orgánicas mixtas se lavaron con solución hipersalina, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se evaporaron al vacío, obteniendo 1.2 g de material en bruto. El material en bruto se purificó mediante cromatografía flash (cartucho SNAP de 50 g Biotage KP-Sil, eluyente A: diclorometano, eluyente B: diclorometano/MeOH 9/1, gradiente A/B de 70/30 a 0/100 en 10 VC, tamaño de fracción: 9 ml), proporcionando 4-hidroxi-2,5,7,8-tetrahidropirano[3,2-c]pirán-2-ona, compuesto intermedio N4 en forma de una espuma amarilla (553 mg, Y=35%). CL-EM (M-H+)=169.0.
Etapa 5
Una solución de anhídrido trifluorometanosulfónico (0.664 ml) en diclorometano (5 ml) se añadió gota a gota a una solución bajo agitación del compuesto intermedio N4 (553 mg) y trietilamina (0.915 ml) en diclorometano (10 ml) a -10°C. La reacción se agitó a -10°C durante 1 hora, después se dejó que se calentase hasta 0°C y se diluyó con ciclohexano/éter dietílico (3:1,60 ml). La mezcla se filtró por un tapón de gel de sílice, lavando con ciclohexano/éter dietílico adicional (3:1). Los lavados que contenía el producto deseado se evaporaron bajo presión reducida, proporcionando 425 mg de trifluorometanosulfonato de 2-oxo-2,5,7,8-tetrahidropirano[3,2-c]pirán-4-ilo, compuesto intermedio N5 en forma de un aceite amarillo (Y=43%). CL-EM (M+H+)=301.1.
Etapa 6
Una solución de 3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propán-1-amina (compuesto intermedio C4 en la síntesis de compuesto 67) (164 mg), trietilamina (0.145 ml) y compuesto intermedio N5 (150 mg) en acetonitrilo (4 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Se añadió DCM y la fase orgánica se lavó con solución hipersalina. Se eliminó el solvente se eliminó al vacío, obteniendo 130 mg de material en bruto. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó mediante columna de Si, eluyendo con acetato de etilo a acetato de etilo/metanol 8:2, y después con DCM a DCM/metanol 9:1, obteniendo 58 mg del producto deseado 4-({3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}amino)-7,8-dihidro-2H,5H-pirano[4,3-b]pirán-2-ona (compuesto 125) (Y=25%). CL-EM (M-H+)=439.3. Compuesto 125: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 10.07 (br. s., 1H), 8.17 (d, J=5.5 Hz, 1H), 8.06 (dd, J=5.8, 9.0 Hz, 1H), 7.84 (dd, J=2.4, 10.4 Hz, 1H), 7.70 (dt, J=2.5, 8.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J=5.8 Hz, 1H), 6.75 (t, J=5.4 Hz, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.35 (s, 2H), 3.91 - 3.75 (m, 5H), 3.46 - 3.28 (m, 5H), 3.27 - 3.14 (m, 5H), 2.07 - 1.92 (m, 2H).
Dicho producto se disolvió en DCM a 0°C y se añadió HCl 2 N en éter dietílico (3 eq.). Tras 10 minutos, el solvente se evaporó al vacío y el sólido se trituró con éter dietílico, proporcionando 20 mg de sal hidrocloruro de 4-({3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}amino)-7,8-dihidro-2H,5H-pirano[4,3-b]pirán-2-ona (Y=7.5%). CL-EM (M-H+)=439.3.
Se prepararon los compuestos 126 y 127 de una manera similar, mediante sustitución de tetrahidro-4H-pirán-4-ona (N0) de la etapa 1 por los compuestos siguientes, respectivamente.
Figure imgf000039_0002
Compuesto 126: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 10.30 (br. s., 1H), 8.16 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.07 (dd, J=5.9, 9.2 Hz, 1H), 7.90 - 7.78 (m, 1H), 7.71 (t, J=8.8 Hz, 1H), 7.56 (d, J=5.5 Hz, 1H), 6.97 - 6.84 (m, 1H), 5.00 (s, 1H), 3.93 (br. s., 1H), 3.81 (d, J=10.0 Hz, 2H), 3.68 - 3.52 (m, 2H), 3.48 - 3.31 (m, 6H), 3.26 (d, J=6.0 Hz, 4H), 2.85 (t, J=5.5 Hz, 2H), 2.74 - 2.61 (m, 2H), 2.12 - 1.90 (m, 2H).
Compuesto 127: RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 10.49 (br. s., 1H), 8.16 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.07 (dd, J=5.6, 8.9 Hz, 1H), 7.85 (dd, J=2.1, 10.2 Hz, 1H), 7.71 (dt, J=2.5, 8.8 Hz, 1H), 7.57 (d, J=5.8 Hz, 1H), 6.92 t, J=5.4 Hz, 1H),
Figure imgf000039_0001
Hz, 2H), Etapa 1
Una mezcla de 1,4-dioxa-8-azaspiro[4.5]decano, compuesto intermedio Oa (723 mg), el compuesto intermedio 7-fluoro-1-yodoisoquinolina Ob (1.15 g) y carbonato potásico (872 mg) en DMSO (13 ml) se agitó durante la noche a 110°C. La mezcla se diluyó con EtOAc. La fase orgánica se lavó con solución de bicarbonato sódico y solución hipersalina. La fase orgánica se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se evaporó bajo presión reducida, proporcionando 1.3 g de 1-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4.5]dec-8-il)-7-fluorisoquinolina, compuesto intermedio O1, en forma de un aceite amarillo (Y=92%). CL-EM (M-H+)=289.1.
Etapa 2
A una solución de 1-(1,4-dioxa-8-azaspiro[4.5]dec-8-il)-7-fluoroisoquinolina compuesto intermedio O1 (1.1 g) en THF (3 ml), se le añadió HCl 2 N (5 ml) a t.a. y se dejó bajo agitación durante la noche. A continuación, la solución roja se calentó a 80°C durante 8 h y durante la noche a t.a. La mezcla de reacción se basificó con una solución de NaOH al 10% y se extrajo con EtOAc. La fase orgánica se lavó con solución hipersalina, se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se evaporó bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice, eluyendo CHCb a CHCl3 / MeOH (99:1), obteniendo 1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperidín-4-ona, compuesto intermedio 02 (Y=78%). CL-EM (M-H+)=245.1.
Etapa 3
Se preparó {2-[(6-fluoro-2-oxo-2H-cromén-4-il)amino]etil}carbamato de terc-butilo, compuesto intermedio 03, tal como se indica en la etapa 6 de preparación del compuesto 51, utilizando (2-aminoetil)carbamato de terc-butilo y trifluorometanosulfonato de 6-fluoro-2-oxo-2H-cromén-4-ilo como reactivos de partida (Y=50%). CL-EM (M-H+)=323.1.
Etapa 4
Se preparó 4-[(2-aminoetil)amino]-6-fluoro-2H-cromén-2-ona, compuesto intermedio 04, tal como se indica en la etapa 4 de preparación del compuesto 51, utilizando {2-[(6-fluoro-2-oxo-2H-cromén-4-il)amino]etil} carbamato de terc-butilo como reactivo (Y=90%). CL-EM (M-H+)=223.1.
Etapa 5
A una suspensión de 4-[(2-aminoetil)amino]-6-fluoro-2H-cromén-2-ona, compuesto intermedio 04 (300 mg) en CHCl3 (35 ml), se le añadió una solución de 1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperidín-4-ona 02 (213 mg) en CHCb (15 ml) a t.a... Se añadieron a la mezcla dos gotas de ácido acético y, tras diez minutos, triacetoxiborohidruro sódico (210 mg). Lo anterior se dejó bajo agitación durante dos días a t.a. La suspensión se diluyó con DCM y se lavó con solución de bicarbonato sódico. Se separaron las fases y la fase orgánica se lavó con solución hipersalina, se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se evaporó bajo presión reducida. El residuo se cromatografió en gel de sílice, eluyendo con CHCb a CHCb/MeOH (9:1), obteniendo 6-fluoro-4-[(2-{[1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperidín-4-il]amino}etil)amino]-2H-cromén-2-ona (compuesto 131) (35 mg, Y=10%). c L-e M (M-H+)=451.19.
RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) 6 = 8.09 (d, J = 5.8 Hz, 1 H), 8.04 - 7.94 (m, 2 H), 7.70 - 7.54 (m, 3 H), 7.48 (ddd, J = 3.0, 8.0, 9.0 Hz, 1 H), 7.41 (d, J = 5.8 Hz, 1 H), 7.37 (dd, J = 4.9, 9.1 Hz, 1 H), 5.27 (s, 1 H), 3.66 (td, J = 3.0, 13.1 Hz, 2 H), 3.42 - 3.22 (m, 2 H), 3.03 - 2.83 (m, 4 H), 2.79 - 2.66 (m, 1 H), 2.00 (dd, J = 2.4, 12.6 Hz, 2 H), 1.59 (dq, J = 3.4, 11.3 Hz, 2 H).
Preparación de compuesto 134
Se preparó el compuesto 134 tal como se indica posteriormente en la presente memoria, siguiendo la ruta sintética P.
Figure imgf000041_0001
Etapa 1
Se disolvió 4-metil-2H-cromén-2-ona, compuesto intermedio P0 (300 mg), en THF seco (4 ml) bajo N2 y se enfrió a -30°C. Se añadió gota a gota una solución 1 M de bis(trimetilsilil)amida de litio (1.87 ml) y la solución roja se agitó durante 30 min a -30°C. La temperatura se redujo a -78°C y se añadió gota a gota cloruro de cloropropionilo (0.35 ml). Se dejó que la temperatura alcanzase la t.a. Tras 2 h, la reacción se repartió entre EtOAc y NH4Cl y la fase orgánica se evaporó al vacío. El material en bruto residual se trituró en una mezcla de pentano/Et2O, obteniendo 4-(4-cloro-2-oxobutil)-2H-cromén-2-ona, compuesto intermedio P1 (200 mg) utilizado para la reacción posterior sin purificación adicional.
Etapa 2
Se disolvió 4-(4-cloro-2-oxobutil)-2H-cromén-2-ona, compuesto intermedio P1 (200 mg) y 7-fluoro-1-(piperazín-1-il)isoquinolina, compuesto intermedio Pa (184 mg), en CH3CN seco (10 ml). Se añadió K2CO3 (330 mg) y la mezcla se agitó a 45°C durante 1 h. Tras el enfriamiento, se separaron las sales inorgánicas mediante filtración y el filtrado se evaporó al vacío. El producto en bruto se purificó preliminarmente mediante cromatografía flash (eluyente cHex:EtOAc:MeOH=6:3:1), obteniendo 4-{4-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]-2-oxobutil}-2H-cromén-2-ona, compuesto intermedio P2 (135 mg) en forma de unos polvos amarillos pálidos. CL-EM (M-H+)=446.4.
Etapa 3
A una solución de 4-{4-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]-2-oxobutil}-2H-cromén-2-ona, compuesto intermedio P2 (50 mg) en MeOH (4 ml), se le añadió NaBH4 (9 mg) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante la noche. Los volátiles se evaporaron al vacío y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía de fase inversa C-18 utilizando la mezcla de H2O/MeCN HCOOH al 1% como eluyente. Se obtuvo 4-{4-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]-2-hidroxibutil}-2H-cromén-2-ona (compuesto 134) (26 mg, Y=37%) como sal formato. CL-EM (M-H+)=448.4.
RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) ó ppm 1.67 - 1.81 (m, 2 H), 2.53 - 2.58 (m, 1 H), 2.59 - 2.82 (m, 6 H), 3.09 (dd, J=13.45, 3.18 Hz, 1 H), 3.30 (br. s., 4 H), 3.85 - 4.03 (m, 1 H), 6.38 (s, 1 H), 7.34 - 7.43 (m, 2 H), 7.45 (d, J=5.87 Hz, 1 H), 7.59 - 7.67 (m, 2 H), 7.68 - 7.73 (m, 1 H), 7.95 (d, J=7.83 Hz, 1 H), 8.01 (dd, J=8.80, 5.87 Hz, 1 H), 8.12 (d, J=5.38 Hz, 1 H), 8.15 (s, 1 H).
Preparación de compuesto 143
Se preparó el compuesto 143 tal como se indica posteriormente en la presente memoria, siguiendo la ruta sintética Q.
Figure imgf000042_0001
Etapa 1
A una suspensión de 4-amino-3-nitro-2H-cromén-2-ona, compuesto intermedio Q0 (100 mg) en alcohol isopropílico (6 ml), se le añadieron polvos de cinc (1.2 g) y solución acuosa 3 M de HCl (6.4 ml). La mezcla se agitó durante 40 min a t.a. y después se vertió en solución acuosa saturada de Na2CO3. El producto se extrajo dos veces con Et2O, se secó sobre Na2SO4 seco, se filtró y se evaporó, recuperando 55 mg de 3,4-diamino-2H-cromén-2-ona puro, compuesto intermedio Q1, utilizando sin purificación adicional para la etapa siguiente. CL-EM (M-H+)=177.1.
Etapa 2
Se disolvió 7-fluoro-1-(piperazín-1 -il)isoquinolina compuesto intermedio Qa (400 mg) en MeOH seco (20 ml), se añadió N,N-diisopropiletilamina (0.82 ml) seguido de acrilato de metilo (0.356 ml). La mezcla se agitó a 60-70°C durante 1 h. Se evaporaron los solventes bajo presión reducida y el producto se aisló mediante cromatografía de columna (gradiente de 20% a 80% de acetato de etilo en ciclohexano), obteniendo 3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propanoato de metilo, compuesto intermedio Q2 (410 mg, Y=75%). CL-e M (M-H+)=318.3.
Etapa 3
Una solución de 3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propanoato de metilo, compuesto intermedio Q2 (300 mg) se disolvió en THF/agua (1:1) y se añadió LiOH (68 mg). La mezcla se sometió a agitación a t.a. durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida, el residuo obtenido se purificó mediante cartucho de SCX (eluyendo el producto deseado con solución 3 M de TEA en MeOH), obteniendo ácido 3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propanoico, compuesto intermedio Q3 en forma de sal trietilamina (330 mg, Y=65%). CL-EM (M-H+)=304.2.
Etapa 4
Se suspendió 3,4-diamino-2H-cromén-2-ona, compuesto intermedio Q1 (50 mg) y ácido 3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propanoico, compuesto intermedio Q3, en forma de sal trietilamina (50 mg) en ácido polifosfórico (1.5 ml) y la mezcla se calentó a 140°C durante 4 h. La mezcla de reacción se vertió en solución acuosa saturada de Na2CO3 y el producto se extrajo dos veces con EtOAc . La fase orgánica se purificó mediante cromatografía flash utilizando una mezcla de cHex/EtOAc/MeOH (6:3:1) como eluyente. Se disolvieron 30 mg de compuesto recuperado en DCM (1 ml) y se trataron con un exceso de HCl 1 M en EfeO (1 ml). La mezcla turbia se concentró y se secó en un horno (50°C) durante 1 h, obteniendo 2-{2-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]etil}chromeno[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (compuesto 143) en forma de sal hidrocloruro. CL-EM (M-H+)=444.4 RMN 1H (500 MHz, METANOL-d4) ó ppm 3.63 (t, J=6.85 Hz, 2 H), 3.92 (br. s., 4 H), 3.93 - 3.98 (m, 2 H), 4.20 (br. s., 4 H), 7.45 (t, J=7.34 Hz, 1 H), 7.50 (d, J=7.83 Hz, 1 H), 7.56 - 7.63 (m, 1 H), 7.82 (d, J=6.36 Hz, 1 H), 7.89 - 7.95 (m, 1 H), 7.97 - 8.03 (m, 2 H), 8.08 (d, J=9.29 Hz, 1 H), 8.23 (dd, J=9.29, 5.38 Hz, 1 H).
Preparación de compuesto 144
El compuesto 144 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapa 1. Síntesis de 4-(7-fluoro¡soquinolín-1-¡l)p¡perazín-1-carbox¡lato de terc-butilo:
Figure imgf000043_0001
Se añadió carbonato potásico (2.9 g, 21 mmoles) a una solución bajo agitación de 1-cloro-7-fluoroisoquinolina (2.6, 14 mmoles) y piperazín-1-carboxilato de terc-butilo (5.2 g, 28 mmoles) en DMSO (20 ml) a temperatura ambiente. La mezcla resultante se calentó a 120°C durante la noche. La comprobación mediante UPLC mostró que la reacción se había completado. A continuación, se dejó que la mezcla se enfriase hasta la temperatura ambiente y se repartió entre EtOAc (300 ml) y agua (300 ml). Se separó la fase orgánica, se lavó con solución 1 M de ácido cítrico (100 ml) y solución hipersalina (70 ml) y se secó sobre sulfato sódico. Se evaporaron los solventes bajo presión reducida y el residuo resultante se purificó mediante cromatografía flash en gel de sílice (SNAP 100, de Cy a Cy/acetato de etilo 8:2), obteniendo 4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-carboxilato de terc-butilo (4.3 g, 13 mmoles, rendimiento: 93%). CL-EM (M-H+)=332.3.
Etapa 2. Síntesis de 7-fluoro-1-(p¡perazín-1-¡l)¡soqu¡nol¡na:
Figure imgf000043_0002
Se añadió TFA (10 ml) a una solución de 4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-carboxilato de terc-butilo (4.3 g, 13 mmoles) en diclorometano (30 ml) y la mezcla resultante se sometió a agitación durante la noche a temperatura ambiente. La comprobación mediante UPLC mostró que la reacción se había completado. Se evaporaron los volátiles bajo presión reducida, el residuo se disolvió en diclorometano (20 ml) y se evaporó bajo presión reducida dos veces. El residuo resultante se disolvió en MeOH y se cargó en un cartucho de SCX preacondicionado (50 g). Se eluyó el SCX con MEOH y después con una solución 2 M de amonio en metanol. Finalmente, la fracción básica se evaporó bajo presión reducida, proporcionando 3.1 g (Y=cuant.) de 7-fluoro-1 -(piperazín-1 -il)isoquinolina en forma de una goma pegajosa amarilla. CL-EM (M-H+)=232.2
Etapa 3. Síntesis de 4-(4-cloro-2-oxobutil)-2H-1-benzopirán-2-ona:
Figure imgf000044_0001
Se disolvió 4-metil-2H-1-benzopirán-2-ona (200mg, 1.25 mmoles) en THF seco (4 ml) bajo N2 y se enfrió a -30°C. Se añadió gota a gota solución de LiHDMS (solución 1 M en THF, 1.25 ml, 1.25 mmoles) y la solución roja se sometió a agitación durante 30 min a -30°C. A continuación, se redujo la temperatura a -78°C y se añadió gota a gota cloruro de cloropropionilo (0.24 ml, 2.5 mmoles). Se dejó que la mezcla de reacción alcanzase la temperatura ambiente y después se repartió entre EtOAc y NH4CL Se evaporó al vacío la fase orgánica y el material residual en bruto se trató con una mezcla de pentano/Et2O, proporcionando 270 mg (1.1 mmoles, rendimiento: 88%) de 4-(4-cloro-2-oxobutil)-2H-1-benzopirán-2-ona. CL-EM (M-H+)=251.2.
Etapa 4. Síntesis de 4-f4-[4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l]-2-oxobut¡l}-2H-1-benzop¡rán-2-ona:
Figure imgf000044_0002
Se disolvió 4-(4-cloro-2-oxobutil)-2H-1-benzopirán-2-ona (270mg, 1.1 mmoles) y 7-fluoro-1-(piperazín-1-il^soquinolina (244 mg, 1.1 mmoles) en MeCN seco (10 ml). Se añadió K2CO3 (434 mg, 2.4 mmoles) y la mezcla se sometió a agitación a 45°C durante 1 h. Tras enfriar, las sales se separaron mediante filtración y el filtrado se evaporó al vacío. El producto en bruto se purificó mediante FC (Cy:EtOAc:MeOH 6:3:1), recuperando 188 mg (0.42 mmoles, rendimiento: 38%) de 4-{4-[4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l]-2-oxobut¡l}-2H-1-benzop¡rán-2-ona en forma de unos polvos amarillo pálido (Y=39%). CL-EM (M-H+)=446.4.
Etapa 5. Síntesis de 4-{4-[4-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1-2-h¡drox¡but¡l}-2H-1-benzop¡rán-2-ona (compuesto 144):
Figure imgf000045_0001
Se d¡solv¡ó 4-{4-[4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l]-2-oxobut¡l}-2H-1-benzop¡rán-2-ona (80mg, 0.18 mmoles) en THF seco (0.5 ml). Se añad¡ó NH32 M en MeOH (0.9 ml, 1.8 mmoles), segu¡do de T¡(/PrO)4 (212 pl, 0.72 mmoles). La mezcla de reacc¡ón se calentó a 50°C en un v¡al cerrado durante 3 horas y después se dejó que alcanzase la temperatura amb¡ente durante la noche. Se evaporaron los volátiles al vacío; el res¡duo se d¡solv¡ó en THF/MeOH y se enfr¡ó en un baño de hielo. Se añad¡ó ráp¡damente NaBH4 (127 mg). Tras 10 m¡nutos, la reacc¡ón se desact¡vó con Hcl 4 M en d¡oxano hasta alcanzar un pH de 4; se evaporó al vacío el solvente y el mater¡al en bruto se pur¡f¡có med¡ante HPLC preparat¡va bajo cond¡c¡ones bás¡cas, obten¡endo 25 mg (Y=31%) de 4-{4-[4-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l]-2-h¡drox¡but¡l}-2H-1-benzop¡rán-2-ona. CL-EM (M-H+)=447.2. RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 1.67 - 1.88 (m, 2 H) 2.50 (dt, J=3.70, 1.79 Hz, 7 H) 3.09 - 3.95 (m, 6 H) 6.44 (s, 1 H) 7.35 - 7.44 (m, 2 H) 7.46 (d, J=5.77 Hz, 1 H) 7.61 - 7.76 (m, 3 H) 7.97 - 8.04 (m, 2 H) 8.13 (d, J=5.77 Hz, 1 H).
Preparac¡ón de compuesto 145
El compuesto 145 se preparó tal como se ¡nd¡ca poster¡ormente en la presente memor¡a.
Etapa 1. Síntes¡s de [1-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-¡l1carbamato de terc-but¡lo:
Figure imgf000045_0002
Se preparó el ¡ntermed¡o [1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-¡l]carbamato de terc-but¡lo s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de 4-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-carbox¡lato de terc-but¡lo (ver el compuesto 144), ut¡l¡zando p¡per¡dín-4-¡lcarbamato de terc-but¡lo. Y=71%. CL-EM (M-H+)=346.5.
Etapa 2. Síntesis de 1-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-am¡na:
Figure imgf000046_0001
Se preparó el ¡ntermed¡o 1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-am¡na s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de 7-fluoro-1-(p¡perazín-1-¡l)¡soqu¡nol¡na (ver el compuesto 144), ut¡l¡zando [1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-¡l]carbamato de terc-but¡lo. Y=cuant. CL-EM (M-H+)=246.3.
Etapa 3. Síntes¡s de 4-oxo-1.4-d¡h¡dro[11benzop¡rano[4.3-b]p¡rrol-2-carbox¡lato de et¡lo:
Figure imgf000046_0002
Se suspend¡eron 4-cloro-3-form¡lcumar¡na (0.5 g. 2.4 mmoles) e h¡drocloruro de gl¡c¡nato de etilo (353 mg. 2.5 mmoles) en etanol absoluto. La mezcla se enfr¡ó a 0°C; después. se añad¡ó TEA (1.1 ml. 7.2 mmoles). La mezcla se somet¡ó a ag¡tac¡ón durante 2 h a 0°C y después se calentó a 80°C durante 12 h. La mezcla en bruto se cargó en un cartucho C-18 y se eluyó con H2Ü/MeCN (+ 0.1% HCOOH) de 100/0 a 0/100. recuperando 400 mg de 4-oxo-1.4-d¡h¡dro[1]benzop¡rano[4.3-b]p¡rrol-2-carbox¡lato de et¡lo (400 mg. 1.5 mmoles. rend¡m¡ento: 64%). CL-EM (M-H+)=258.2.
Etapa 4. Síntes¡s de 2-(h¡drox¡met¡l)[11benzop¡rano[4.3-b1p¡rrol-4(1H)-ona:
Figure imgf000046_0003
Se d¡solv¡ó 4-oxo-1.4-d¡h¡dro[1]benzop¡rano[4.3-b]p¡rrol-2-carbox¡lato de et¡lo (170 mg. 0.66 mmoles) en THF seco (6 ml). Se añad¡ó gota a gota L¡AlH41 M en THF (1.33 ml. 1.33 mmoles) a 0°C. La soluc¡ón se somet¡ó a ag¡tac¡ón durante 4 h a 0°C; después. se desact¡vó med¡ante la ad¡c¡ón de Na2SO4*10H2O. Se separaron las sales ¡norgán¡cas med¡ante f¡ltrac¡ón y se evaporaron los solventes. El res¡duo en bruto se pur¡f¡có med¡ante cromatografía flash (Cy:EtOAc:MeOH 6:3:1). obten¡endo 2-(h¡drox¡met¡l)[1]benzop¡rano[4.3-b]p¡rrol-4(1H)-ona (80 mg. 0.37 mmoles. rend¡m¡ento: 56%). CL-e M (M-H+)=216.2.
Etapa 5. Síntesis de 4-oxo-1.4-d¡h¡dro[1lbenzop¡rano[4.3-blp¡rrol-2-carbaldehído:
Figure imgf000047_0001
Se suspendió 2-(hidrox¡met¡l)[1]benzop¡rano[4,3-b]p¡rrol-4(1H)-ona (80 mg, 0.37 mmoles) en DCM seco (15 ml) y se trató con peryod¡nano de Dess-Mart¡n (100 mg. 0.44 mmoles). La mezcla de reacc¡ón se somet¡ó a ag¡tac¡ón durante 45 m¡n a temperatura amb¡ente; después. la suspens¡ón se repart¡ó entre DCM y una soluc¡ón acuosa sat. de NaHCÜ3/Na2S2O3 al 10% 1:1. La fase orgán¡ca se secó sobre Na2SÜ4. se f¡ltró y se evaporó. recuperando 40 mg (0.19 mmoles. Y=51%) de 4-oxo-1.4-d¡h¡dro[1]benzop¡rano[4.3-blp¡rrol-2-carbaldehído. que se trató ad¡c¡onalmente en la etapa s¡gu¡ente s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. CL-EM (M-H+)=214.2.
Etapa 6. Síntes¡s de 2-({[1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-¡llam¡no}met¡l)[1lbenzop¡rano[4.3-blp¡rrol-4(1H)-ona (sal formato. compuesto 145):
Figure imgf000047_0002
A una suspens¡ón de 4-oxo-1.4-d¡h¡dro[1lbenzop¡rano[4.3-blp¡rrol-2-carbaldehído (40 mg. 0.19 mmoles) en MeCN seco (40 ml). se le añad¡ó 1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-am¡na (60 mg. 0.24 mmoles) segu¡do de 3 gotas de ác¡do acét¡co. La mezcla turbia se somet¡ó a ag¡tac¡ón durante 1 h a temperatura amb¡ente; después. se añad¡ó NaBH(OAc)3 (100 mg. 0.47 mmoles) de una vez. La mezcla heterogénea se somet¡ó a ag¡tac¡ón durante la noche; después. se evaporaron los volátiles al vacío. El res¡duo se cargó en una columna de fase ¡nversa C-18 y se eluyó con H2O/MeOH HCOOH al 1% (de 95/5 a 70/30). proporc¡onando 32 mg (0.066 mmoles. rend¡m¡ento: 34%) de 2-({[1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-¡llam¡no}met¡l)[1lbenzop¡rano[4.3-blp¡rrol-4(1H)-ona en forma de sal formato. CL-EM (M-H+)=443.4.
RMN 1H (500 MHz, METANOL-d4) ó ppm 1.99 (qd, J=12.06, 3.42 Hz, 2 H), 2.31 (d, J=10.76 Hz, 2 H), 3.06 (t, J=12.23 Hz. 2 H). 3.31 - 3.35 (m. 2 H). 3.84 (d. J=13.21 Hz. 2 H). 4.37 (s. 2 H). 6.93 (s. 1 H). 7.37 - 7.46 (m. 3 H).
7.48 - 7.58 (m. 2 H). 7.76 (dd. J=10.03. 2.20 Hz. 1 H). 7.91 - 7.99 (m. 2 H). 8.07 (d. J=5.87 Hz. 1 H).
Preparación de compuesto 146
El compuesto 146 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapa 1. Síntesis de 3,4-d¡am¡no-2H-1-benzopirán-2-ona:
Figure imgf000048_0001
Se suspendió 4-amino-3-nitro-2H-1-benzopirán-2-ona (500 mg, 2.4 mmoles) en IPA (30 ml). Se añadieron polvos de cinc (6 g, 92 mmoles) seguido de solución 3 M de HCl (32 ml, 96 mmoles). La mezcla se sometió a agitación a temperatura ambiente durante 40 min; después, se vertió en solución sat. de Na2CÜ3. El producto se extrajo dos veces con Et2Ü; las fases orgánicas se secaron sobre Na2SÜ4, se filtraron y se concentraron a sequedad, proporcionando 330 mg de 3,4-diamino-2H-1-benzopirán-2-ona (330 mg, rendimiento: 78%), que se utilizó sin purificación adicional. CL-EM (M-H+)=177.2.
Etapa 2. Síntesis de 2-(cloromet¡l)[11benzop¡rano[3.4-d1¡m¡dazol-4(1H)-ona:
Figure imgf000048_0002
A una suspensión de 3,4-diamino-2H-1-benzopirán-2-ona (120 mg, 0.68 mmoles) en ácido polifosfórico (2.5 ml), se le añadió ácido cloroacético (96 mg, 1 mmol). La suspensión se calentó a 140°C durante 45 min; después, se enfrió y el producto en bruto se repartió entre H2O y Et2Ü. La fase orgánica se secó sobre Na2SÜ4, se filtró y se concentró, proporcionando 90 mg (0.38 mmoles, rendimiento: 56%) de 2-(clorometil)[1]benzopirano[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona. CL-EM (M-H+)=235.1.
Etapa 3. Síntesis de 2-({[1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperidín-4-il]amino}metil)[1]benzopirano[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (compuesto 146):
Figure imgf000048_0003
Se disolvió 1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperidín-4-amina (370 mg, 1.5 mmoles, ver el compuesto 145) en DMF seco (2 ml) y se enfrió en un baño de hielo. Se añadió en partes 2-(clorometil)[1]benzopirano[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona sólida (90 mg, 0.38 mmoles) y la mezcla se sometió a agitación durante 10 min. La reacción en bruto se cargó directamente en una cromatografía de fase inversa C-18 y se eluyó con H2O/MeCN HCOOH al 1% (de 100/0 a 85/15), recuperando 38 mg (0.09 mmoles, rendimiento: 23%) de 2-({[1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperidín-4-il]amino}metil)[1]benzopirano[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona. CL-EM (M-H+)=444.4.
RMN 1H (500 MHz, METANOL-d4) ó ppm 1.84 - 1.97 (m, 2 H), 2.25 (d, J=11.74 Hz, 2 H), 3.03 (t, J=11.74 Hz, 2 H), 3.11 - 3.21 (m, 1 H), 3.80 (d, J=12.72 Hz, 2 H), 4.34 (s, 2 H), 7.40 (d, J=5.87 Hz, 1 H), 7.43 (t, J=7.58 Hz, 1 H), 7.48 (d, J=7.83 Hz, 1 H), 7.50 - 7.60 (m, 2 H), 7.75 (dd, J=10.03, 2.20 Hz, 1 H), 7.92 (dd, J=9.05, 5.62 Hz, 1 H), 8.03 (dd, J=7.83, 1.47 Hz, 1 H), 8.05 (d, J=5.87 Hz, 1 H), 8.24 - 8.29 (m, 1 H).
Preparación de compuesto 147
El compuesto 147 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapa 2. Síntesis de 2-(3-bromoprop¡l)[11benzop¡rano[3,4-d1¡m¡dazol-4(1H)-ona:
Figure imgf000049_0001
Se preparó el intermedio 2-(3-bromopropil)[11benzopirano[3,4-d1imidazol-4(1H)-ona siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de 2-(clorometil)[11benzopirano[3,4-d1imidazol-4(1H)-ona (ver el compuesto 146) utilizando ácido 4-bromobutanoico. CL-EM (M-H+)=307.1.
Etapa 2. Síntesis de 2-{3-[4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1prop¡l}[11benzop¡rano[3.4-d1¡m¡dazol-4(1H)-ona (sal formato, compuesto 147):
Figure imgf000049_0002
A una suspensión de 2-(3-bromopropil)[1]benzopirano[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (160 mg, 0.7 mmoles) en DMF seco (2 ml), se le añadió en partes 7-fluoro-1-(piperazín-1-il)isoquinolina sólida (70 mg, 0.30 mmoles, ver el compuesto 144). La mezcla se sometió a agitación durante 2 h; después se añadió HCl 1 M (8 ml). La fase acuosa se lavó con DCM dos veces; después, se cargó en una columna de cromatografía de fase inversa C-18 y se eluyó con H2O/MeCN HCOOH al 1% (de 100/0 a 75/25), proporcionando 39 mg (0.09 mmoles, rendimiento: 30%) de 2-{3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}[1]benzopirano[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona en forma de sal formato CL-EM (M-H+)=458.4.
RMN 1H (500 MHz, METANOL-d4) ó ppm 2.29 (quin, J=7.09 Hz, 2 H), 3.02 - 3.17 (m, 4 H), 3.28 (s, 4 H), 3.61 (br. s., 4 H), 7.36 - 7.50 (m, 3 H), 7.51 - 7.62 (m, 2 H), 7.79 (dd, J=9.78, 2.45 Hz, 1 H), 7.88 - 8.01 (m, 2 H), 8.11 (d, J=5.38 Hz, 1 H).
Preparación de compuesto 148
El compuesto 148 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapa 1. Síntesis de 4-(7-fluoro¡soquinolín-1-¡l)p¡perazín-1-carbox¡lato de terc-butilo:
Figure imgf000050_0001
Una solución de 1-cloro-7-fluoroisoquinolina (0.5 g, 2.76 mmoles) y W-Boc-piperazina (1.54 g, 8.3 mmoles) en tolueno se desgasificó durante 10 min. A continuación, se añadió ferc-butóxido potásico (626 mg, 5.6 mmoles), BINAP (174 mg, 0.28 mmoles) y acetato de paladio (61 mg 0.28 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla se sometió a agitación a 85°C durante 4 h, monitorizando la reacción mediante CL-EM. La mezcla de reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente, se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y solución hipersalina, y se secó sobre sulfato sódico. El solvente se concentró bajo presión reducida y el producto en bruto resultante se purificó en columna de cromatografía de gel de sílice (malla de 60-120 mesh) (acetato de etilo al 0-20% en hexano), obteniendo 4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-carboxilato de terc-butilo (310 mg, 34%) en forma de un sólido color amarillo pálido. CL-EM m/z: 331,2 (M+1). RMN 1H (DMSO d6): ó ppm 1.44 (s, 9H), 3.21-3.24 (m, 4H), 3.60 (m, 4H), 7.48-7.49 (m, 1H), 7.64-7.69 (m, 1H), 7.75-7.78 (m, 1H), 7.97-8.04 (m, 1H), 8.13-8.14 (m, 1H).
Etapa 2. Síntesis de trifluoroacetato de 7-fluoro-1-(p¡perazín-1-¡l)¡soqu¡nol¡na:
Figure imgf000050_0002
A una solución de 4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-carboxilato de terc-butilo (300 mg, 0.9 mmoles) en DCM (5 ml), se le añadió lentamente TFA (5 ml) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se sometió a agitación durante 4 h; después se concentró bajo presión reducida y el producto en bruto resultante (líquido marrón) se utilizó sin modificación en la etapa siguiente (310 mg, cuant.). CL-EM m/z: 231,2 (M+1). RMN 1H (Dm SO d6): ó ppm 3.38 (m, 4H), 3.46-3.47 (m, 4H), 7.52 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 7.67-7.72 (m, 1H), 7.83 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 8.03-8.07 (m, 1H), 8.15 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 8.83 (br. s, 1H).
Etapa 3. Síntesis de 1-cloro-3-[4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1propán-2-ol:
Figure imgf000051_0001
Una soluc¡on de tr¡fluoroacetato de 7-fluoro-1-(p¡perazin-1-¡l)¡soqu¡nol¡na (200 mg, 0.87 mmoles), DIPEA (398 mg, 43 mmoles) y ep¡cloroh¡dr¡na (398 mg, 4.8 mmoles) en etanol (5 ml) se ag¡tó durante 5 h a temperatura amb¡ente. Se llevó a cabo un segu¡m¡ento de la reacc¡ón med¡ante LCMS. Tras completar la reacc¡ón, la mezcla se concentró bajo pres¡ón reduc¡da. El producto en bruto resultante se d¡solv¡ó en EtOAc (50 ml) y se lavó con agua y soluc¡ón h¡persal¡na. Se secó la capa orgán¡ca y se concentró, obten¡endo 1-cloro-3-[4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l]propán-2-ol (220 mg, 79%) en forma de un líqu¡do gomoso que se ut¡l¡zó en la etapa s¡gu¡ente s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. CL-EM m/z: 324.2 (M+1).
Etapa 4. Síntes¡s de 1-az¡da-3-(4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l) p¡perazín-1-¡l)propán-2-ol:
Figure imgf000051_0002
A una soluc¡ón de 1-cloro-3-(4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l)propán-2-ol (210 mg, 0.65 mmoles) en DMF (4 ml), se le añad¡ó az¡da sód¡ca (65 mg, 1 mmol). La suspens¡ón se agitó a 85°C durante 5 h; después, se enfr¡ó hasta la temperatura amb¡ente y se repart¡ó entre agua y EtOAc. La capa orgán¡ca se secó sobre sulfato sód¡co y se concentró bajo pres¡ón reduc¡da. El producto en bruto resultante se pur¡f¡có en columna de cromatografía de gel de síl¡ce (malla de 60-120, MeOH al 0-10% en DCM), obten¡endo 1-az¡da-3-(4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l)propán-2-ol (160 mg, 74%) en forma de una goma de color amar¡llo pálido. Cl-EM m/z: 331.2 (M+1). RMN 1H (DMSO d6): 6 ppm 2.49-2.52 (m, 2H), 2.50-2.71 (m, 4H), 2.86-2.87 (m, 2H), 3.19-3.20 (m, 4H), 3.88-3.89 (m, 1H), 5.14 (br. s, 1H), 7.44 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.61-7.70 (m, 2H), 7.98-8.03 (m, 1H), 8.11 (d, J =7.6 Hz, 1H).
Etapa 5. Síntesis de 1-am¡no-3-(4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l)propán-2-ol:
Figure imgf000052_0001
A una soluc¡ón de 1-az¡da-3-(4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l)propán-2-ol (160 mg) en etanol (5 ml), se le añad¡ó Pd/C al 10% (10 mg). La mezcla se somet¡ó a ag¡tac¡ón bajo una atmósfera de h¡drógeno a temperatura amb¡ente durante 3 h. Tras completar la reacc¡ón, la mezcla se f¡ltró a través de un lecho de Cel¡te y el f¡ltrado se concentró bajo pres¡ón reduc¡da, obten¡endo 1-am¡no-3-(4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l)propán-2-ol (125 mg, 85%) en forma de un sól¡do de color amar¡llo pálido. c L-EM m/z: 305,2 (M+1). RMN 1H (CüCl3): 6 ppm 2.27­ 2.28 (m, 2H), 2.45-2.57 (m, 2H), 2.70-2.91 (m, 4H), 3.40 (m, 4H), 3.81 (m, 1H), 7.25-7.45 (m, 2H), 7.56-8.12 (m, 2H), 8.42-8.44 (m, 1H).
Etapa 6. Síntes¡s de 5-fluoro-2-h¡drox¡benzoato de met¡lo:
Figure imgf000052_0002
A una soluc¡ón bajo ag¡tac¡ón de ác¡do 5-fluoro sal¡cil¡co (25 g, 160 mmoles) en MeOH (250 ml), se le añad¡ó lentamente ác¡do sulfúr¡co conc. (20 ml) a 0°C. La mezcla de reacc¡ón resultante se somet¡ó a reflujo durante 48 h; después, se concentró bajo pres¡ón reduc¡da y el producto en bruto resultante se bas¡f¡có a pH 8.0 con sol. sat. de NaHCO3. A cont¡nuac¡ón, se neutral¡zó con soluc¡ón de HCl 1.5 N y se extrajo con EtOAc. Se secó sobre Na2SO4 anh¡dro y se concentró, proporc¡onando 5-fluoro-2-h¡drox¡benzoato de met¡lo en forma de un líqu¡do marrón pál¡do (22.8 g, 83%). CG-EM: (AcqMethod HP-1MS.M) 170.1 (M). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 6 ppm 10.29 (s, 1H), 7.51-7.49 (m, 1H), 7.42-7.41 (m, 1H), 57.03-7.01 (m, 1H), 3.89 (s, 3H).
Etapa 7. Síntes¡s de 5-fluoro-2-h¡drox¡benzam¡da:
Figure imgf000052_0003
Una mezcla de 5-fluoro-2-h¡drox¡benzoato de met¡lo (22 g, 129 mmoles) y amon¡o metanól¡co (250 ml) se calentó a 50°C en un autoclave durante 10 h. La mezcla de reacc¡ón se concentró bajo pres¡ón reduc¡da, El producto en bruto resultante se codest¡ló con tolueno y se secó, proporc¡onando 5-fluoro-2-h¡drox¡benzam¡da en forma de un sólido marrón (18.5 g, 92%). CL-EM m/z: 154.0 (M-H). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 6 ppm 12.74 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.73-7.71 (m, 1H), 7.31-7.29 (m, 1H), 6.91-6.90 (m, 1H).
Etapa 8. Síntesis de 6-fluoro-2H-1.3-benzoxazín-2.4(3H)-diona:
Figure imgf000053_0001
A una solución bajo agitación of 5-fluoro-2-hidroxibenzamida (8.0 g. 51.6 mmoles) en THF seco (80 ml), se le añadió 1.1'-carbonildiimidazole (10.9 g. 67.09 mmoles) a 0°C. La mezcla se sometió a agitación a temperatura ambiente durante 14 h; después. se concentró bajo presión reducida. El producto en bruto resultante se trató con MeOH y se lavó con éter dietílico. El sólido blanco resultante se secó y se utilizó en la etapa siguiente sin purificación adicional (5.1 g. 55% sólido blanco). CL-EM m/z: 180.0 (M-H). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 12.19 (s. 1H). 7.68-7.67 (m. 2H). 7.50-7.48 (m. 1H).
Etapa 9. Síntesis de 4-cloro-6-fluoro-2H-1.3-benzoxazín-2-ona:
Figure imgf000053_0002
A una solución bajo agitación of 6-fluoro-2H-1.3-benzoxazín-2.4(3H)-diona (0.5 g. 2.76 mmoles) en 1.2-dicloroetano seco (2.5 ml). se le añadió pentacloruro de fósforo (0.69 g. 3.31 mmoles) a 0°C. La mezcla resultante se sometió a reflujo durante 6 h; después. se concentró bajo presión reducida. Se añadió DCM (15 ml) al producto en bruto resultante. se lavó con agua (2 ml) y se secó sobre Na2SO4 anhidro. El solvente se concentró bajo presión reducida. proporcionando 4-cloro-6-fluoro-2H-1.3-benzoxazín-2-ona en forma de un sólido blanquecino (0.46 g.
84%). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): 5 ppm 7.69-7.67 (m, 2H), 7.50-7.49 (m, 1H).
Etapa 10. Síntesis de 6-fluoro-4-({3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-ill-2-hidroxipropil}amino)-2H-1.3-benzoxazín-2-ona (compuesto 148):
Figure imgf000053_0003
A una suspensión de 4-cloro-6-fluoro-2H-1.3-benzoxazin-2-ona (235 mg. 1.2 mmoles) en aceton¡tr¡lo (5 ml). se le añadió DIPEA (402 mg. 3.1 mmoles) y 1-amino-3-[4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l]propán-2-ol (120 mg.
0.39 mmoles) a 0°C. La mezcla se sometió a agitación a temperatura ambiente durante 15 h; después. el sólido resultante se filtró. se lavó con agua y se secó. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna de gel de sílice. eluyendo con (MeOH al 0-20% en DCM). obteniendo 6-fluoro-4-({3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]-2-hidroxipropil}amino)-2H-1.3-benzoxazín-2-ona (90 mg. 74%) en forma de un sólido blanquecino. CL-EM m/z: 468.2 (M+1).
RMN 1H (DMSO d6): 5 ppm 2.48-2.49 (m, 2H), 2.71 (m, 2H), 2.76 (m, 2H), 3.26 (m, 4H), 3.40-3.43 (m, 1H), 3.70­ 3.75 (m. 1H). 4.07 (d. J = 5.9 Hz. 1H). 5.00 (d. J = 4.5 Hz. 1H) 7.35-7.39 (m. 1H). 7.43 (d. J = 5.6 Hz. 1H). 7.59­ 7.70 (m. 3H). 7.98 (dd. J = 8.6. 5.6 Hz. 1H). 8.09-8.12 (m. 2H). 9.11-9.14 (m. 1H).
Preparación de compuesto 149
El compuesto 149 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapa 1. Síntesis de 2-(c¡anometil)-5-fluorobenzon¡tr¡lo:
Figure imgf000054_0001
DMSO, 95°C
A una solución bajo agitación de NaH (2.58 g, al 60% en aceite mineral, 64.74 mmoles) en DMSO (30 ml), se le añadió lentamente cianoacetato de etilo (7.3 g, 64.7 mmoles) a 0°C y se sometió a agitación a la misma temperatura durante 20 min. A continuación, se añadió 2,5-difluoro benzonitrilo (3 g, 21.5 mmoles) en DMSO (10 ml). La mezcla se calentó a 95°C durante la noche; después, se añadió agua (20 ml) y la solución se calentó a 120°C durante 12 h. Se monitorizó la completitud de la reacción mediante CL-EM. Se añadió HCl 0.1 N (30 ml) a la mezcla de reacción a 0°C, tras agitar durante 10 min, se filtró el sólido y se lavó con agua y éter de petróleo. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía flash (EtOAc al 24% en éter de petróleo), proporcionando el compuesto del título (1.8 g, 53.0%) en forma de un sólido blanquecino. CL-EM m/z: 159,2 (M-1). RMN 1H (DMSO d6): 5 ppm 4.2 (s, 2H), 7.64-7.73 (m, 2H), 7.96 (dd, J = 8.5, 2.5 Hz, 1H).
Etapa 2. Síntesis de 1-bromo-7-fluoro¡soqu¡nolín-3-am¡na:
Figure imgf000054_0002
A una solución bajo agitación de HBr en AcOH (14 ml, 33%), se le añadió 2-(cianometil)-5-fluorobenzonitrilo (1.4 g, 87.5 mmoles) lentamente a 0°C. La mezcla se sometió a agitación a temperatura ambiente durante 1 h; después, se diluyó con agua (15 ml) y se basificó mediante la utilización de sol. sat. de Na2CO3. La solución se extrajo con EtOAc, la capa orgánica se lavó con solución hipersalina y se secó sobre sulfato sódico. Se eliminó el solvente bajo presión reducida, proporcionando 1-bromo-7-fluoroisoquinolín-3-amina en forma de sólido amarillo (1.5 g, 75%). CL-EM m/z: 241.0 (M+1). RMN 1H (DMSO d6): 5 ppm 6.30 (s, 2H), 6.70 (s, 1H), 7.48-7.54 (m, 2H), 7.70 (dd, J = 9.1, 5.5 Hz, 1H).
Etapa 3. Síntesis de 1-bromo-3.7-d¡fluoro¡soqu¡nol¡na:
Figure imgf000054_0003
A una solución bajo agitación of 1-bromo-7-fluoroisoquinolín-3-amina (0.5 g, 20.7 mmoles) en piridina (2 ml), se le añadió lentamente HFpiridina (2 ml) a 0°C, seguido de nitrito sódico (0.171 g, 24 mmoles). La mezcla de reacción se sometió a agitación durante 3 días a temperatura ambiente; después, se vertió lentamente en una solución saturada de carbonato sódico para ajustar el pH a 8 y se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas agrupadas se lavaron con solución hipersalina y se secaron sobre sulfato sódico. Se eliminó el solvente bajo presión reducida y el producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía flash (EtOAc al 25% en éter de petróleo), proporcionando 1-bromo-3,7-difluoroisoquinolina en forma de un sólido amarillo (0.250 g, 50%). CL-EM m/z: 244,0 (M+1). RMN 1H (DMSO d6): 5 ppm 7.83 (s, 1H), 7.86-7.94 (m, 2H), 7.20 (dd, J = 9.1, 5.5 Hz, 1H).
Etapa 4. Síntesis de 4-í3.7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-carboxilato de terc-butilo:
Figure imgf000055_0001
Una solución de 1-bromo-3,7-difluoro¡soqu¡nolina (400 mg, 1.6 mmoles) y N-Boc-piperazina (610 mg, 3.2 mmoles) en dioxano (10 ml) se desgasificó durante 10 min. A continuación. se añadió Cs2CO3 (1.04 g. 3.2 mmoles). XanthPhos (138 mg. 0.24 mmoles) y Pd(dba)2 (61 mg. 0.28 mmoles) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se sometió a agitación a 80°C durante la noche; después. se filtró por una almohadilla de Celite y se lavó con DCM. Las capas orgánicas agrupadas se concentraron bajo presión reducida y el producto en bruto resultante se purificó en columna de cromatografía de gel de sílice (malla de 60-120) (acetato de etilo al 25-20% en hexano). obteniendo 4-(3.7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-carbox¡lato de terc-butilo (200 mg. 35%) en forma de un sólido color amarillo pálido. CL-EM m/z: 294.2 (-tBu+1). RMN 1H (DMSO d6): ó ppm 1.43 (s, 9H), 2.27-2.49 (m, 4H), 3.58­ 3.59 (m. 4H). 7.41 (s. 1H). 7.65-7.77 (m. 2H). 7.97-8.02 (m. 1H).
Etapa 5. Síntesis de hidrocloruro de 3.7-d¡fluoro-1-(piperazín-1-¡l)¡soqu¡nol¡na:
Figure imgf000055_0002
A una solución de 4-(3.7-d¡fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-carbox¡lato de terc-butilo (280 mg. 0.8 mmoles) en dioxano (1 ml). se le añadió lentamente dioxanoHCl (5 ml. 4.5 M) a 0°C. Tras la agitación durante 2 h a 0°. la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el líquido espeso de color marrón (160 mg) se utilizó en la etapa siguiente sin purificación adicional. CL-EM m/z: 250.2 (M+1). RMN 1H (DMSO d6): ó ppm 3.32-3.38 (m, 4H). 3.53-3.54 (m. 4H). 7.24 (s. 1H). 7.69-7.73 (m. 1H). 7.86 (dd. J = 10.4. 2.6 Hz. 1H). 8.03 (dd. J = 8.8. 5.6 Hz.
1H). 9.09 (br.s. 1H).
Etapa 6. Síntesis de 1-cloro-3-[4-(3.7-d¡fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1propán-2-ol:
Figure imgf000055_0003
El intermedio del titulo se preparó siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de 1-cloro-3-[4-(7-fluoroisoquinolín-1 -il)piperazín-1 -¡l1propán-2-ol (ver el compuesto 148). utilizando hidrocloruro de 3.7-difluoro-1-(piperazín-1-¡l)¡soqu¡nol¡na (rendimiento: 99%). CL-EM m/z: 342.2 (M+1). RMN 1H (DMSO d6): ó ppm 2.68-2.71 (m. 2H). 2.80-2.83 (m. 2H). 2.97-3.10 (m. 2H). 3.55-3.77 (m. 6H). 4.07-4.09 (m. 1H). 6.82 (s. 1H). 7.40 (td. J = 8.4.
2.1 Hz. 1H). 7.63 (dd. J = 9.7. 2.1 Hz. 1H). 7.60-7.72 (m. 1H).
Etapa 7. 1-Az¡do-3-[4-(3.7-d¡fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1propán-2-ol:
Figure imgf000056_0001
El ¡ntermed¡o del titulo se preparo s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para 1-az¡da-3-(4-(7-fluoro¡soqu¡nolin-1-¡l)p¡perazín-1-¡l)propán-2-ol (ver el compuesto 148). ut¡l¡zando 1-cloro-3-[4-(3.7-d¡fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l]propán-2-ol (rend¡m¡ento: 89%). CL-EM m/z: 349.2 (M+1). RMN 1H (DMSO d6): 8 ppm 2.64-2.69 (m, 2H), 2.68­ 2.73 (m, 4H). 3.22-3.25 (m. 2H). 3.31-3.36 (m, 4H). 3.82-3.89 (m, 1H). 5.10 (d. J = 4.9 Hz. 1H). 7.10 (s. 1H). 7.65­ 7.90 (m. 1H). 7.96-8.00 (m. 1H).
Etapa 8. Síntes¡s de 1-am¡no-3-[4-(3.7-d¡fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1propán-2-ol:
Figure imgf000056_0002
El ¡ntermed¡o del título se preparo s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para 1-am¡no-3-(4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡ll)p¡perazín-1-¡l)propán-2-ol (ver el compuesto 148). ut¡l¡zando 1-az¡do-3-[4-(3.7-d¡fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l]propán-2-ol (rend¡m¡ento: 99%). CL-EM m/z: 323.2 (M+1). RMN 1H (DMSO d6): 8 ppm 1.90 (br. s, 2H), 2.33­ 2.48 (m. 4H). 2.51-2.68 (m. 4H). 3.17-3.33 (m. 4H). 3.60-3.62 (m. 1H). 4.50 (s. 1H). 7.10 (s. 1H). 7.66-7.70 (m. 2H).
7.98 (dd. J = 8.8. 6.6 Hz. 1H).
Etapa 9 - Síntesis de 4-((3-[4-(3.7-d¡fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1-2-h¡drox¡prop¡l}am¡no)-6-fluoro-2H-1.3-benzoxazín-2-ona (compuesto 149):
Figure imgf000057_0001
El compuesto del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para el compuesto 148. ut¡l¡zando 1-am¡no-3-[4-(3,7-d¡fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l]propán-2-ol (rend¡m¡ento: 23%). EM-IEP m/z: 486.2 (M+1).
RMN 1H (DMSO d6). ó ppm 2.69-2.75 (m, 4H), 2.71 (m, 2H), 3.32-3.36 (m, 4H), 3.71-3.72 (m, 1H), 4.06 (s, 1H), 4.01 (s. 1H). 7.09 (s. 1H) 7.38 (s. 1H). 7.62-7.70 (m. 2H). 7.97 (s. 1H). 8.10 (d. J = 8.4 Hz. 1H). 9.13 (s. 1H). Preparac¡ón del compuesto 150 (no forma parte de la ¡nvenc¡ón)
El compuesto 150 se preparó tal como se ¡nd¡ca poster¡ormente en la presente memor¡a.
Etapa 1 - Síntes¡s de N-boc-2-[4-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l]etanam¡na:
Figure imgf000057_0002
El compuesto del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de ¡ntermed¡o C3 (compuesto 51). med¡ante la ut¡l¡zac¡ón de 7-fluoro-1-(p¡perazín-1-¡l)¡soqu¡nol¡na y terc-but¡l-(2-bromoet¡l)carbamato (rend¡m¡ento: 82%). CL-EM (M-H+)=375.2
Etapa 2 - Síntesis de trifluoroacetato de 2-[4-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1etán-1-am¡na:
Figure imgf000058_0001
El ¡ntermed¡o del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de 7-fluoro-1-(p¡perazín-1-¡l)¡soau¡nol¡na (ver el compuesto 144), ut¡l¡zando W-boc-2-[4-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1etanam¡na (rend¡m¡ento: 91%). CL-EM (M-H+)=275.2.
Etapa 3 - Síntes¡s de M-[(3.4-d¡h¡dro-2H-p¡rano[2.3-c1p¡r¡dín-6-¡l)met¡l1-2-[4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1etán-1-am¡na (compuesto 150):
Figure imgf000058_0002
A una soluc¡ón de 3,4-d¡h¡dro-2H-p¡rano[2.3-c1p¡r¡dín-6-carbaldehído (preparada tal como se ¡nd¡ca en el documento n° WO2012012391, 218 mg. 1.33 mmoles) y DIPEA (0.25 ml) en DCM (3 ml). se le añad¡ó tr¡fluoroacetato de 2-[4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1etán-1-am¡na (1.6 g. 5.8 mmoles) en DCM (5 ml) y 2 gotas de AcOH. Tras ag¡tar durante 10 m¡n. se añad¡ó NaBH(OAc)3 (446 mg. 2 mmoles). La mezcla se somet¡ó a ag¡tac¡ón a temperatura amb¡ente durante 4 h; después. se añad¡ó DCM (35 ml) y sol. sat. de NaHCO3 (25 ml). Se separó la fase orgán¡ca. se lavó con sol. sat. de NaCl. se secó sobre Na2SO4 y se concentró. El res¡duo se pur¡f¡có med¡ante cromatografía flash (gel de síl¡ce. DCM/MeOH 9/1). proporc¡onando W-[(3.4-d¡h¡dro-2H-p¡rano[2.3-c1p¡r¡dín-6-¡l)met¡l1-2-[4-(7-fluoro ¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1etán-1-am¡na (139 mg. 0.33 mmoles. rend¡m¡ento: 25%). CL-EM (M-H+)=422.2.
RMN 1H (300MHz ,CLOROFORMO-d) ó = 8.13 (d, J = 5.8 Hz, 1 H), 8.09 (s, 1 H), 7.76 (dd, J = 5.6, 9.0 Hz, 1 H), 7.69 (dd. J = 2.6. 10.2 Hz. 1 H). 7.39 (dt. J = 2.6. 8.6 Hz. 1 H). 7.24 (d. J = 5.8 Hz. 1 H). 7.01 (s. 1 H). 4.21 (t. J = 5.1 Hz. 2 H). 3.87 (s. 2 H). 3.40 (t. J = 4.9 Hz. 4 H). 2.84 (t. J = 6.2 Hz. 2 H). 2.80 - 2.64 (m. 8 H). 2.55 (br. s.. 1 H).
2.08 - 1.95 (m. 2 H).
Preparación de compuesto 152
El compuesto 152 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapa 1 - Síntesis de [11benzopirano[3.4-d1imidazol-4(1H)-ona:
Figure imgf000059_0001
Se preparó el intermedio [11benzopirano[3.4-d1imidazol-4(1H)-ona siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de 2-(clorometil)[11benzopirano[3.4-d1imidazol-4(1H)-ona (ver el compuesto 146) utilizando ácido fórmico. Y=67%. CL-EM (M-H+)=187.1.
Etapa 2 - Síntesis de 1-{[2-(trimetilsilil)etoxi1metil}[11benzopirano[3.4-d1imidazol-4(1H)-ona:
Figure imgf000059_0002
Una solución de [11benzopirano[3.4-d1imidazol-4(1H)-ona (274 mg. 1.5 mmoles) en DMF seco (10 ml) se enfrió a 0°C. Se añadió NaH (dispersión al 60% en aceite mineral. 117 mg. 2.9 mmoles) y la mezcla se sometió a agitación durante 15 min a 0°C. Se añadió SEM-Cl (294 mg. 1.8 mmoles) y la mezcla se sometió a agitación durante 2 h adicionales. El análisis de UPLC mostró que la reacción se había completado. por lo que se añadió agua a 0°C seguido de acetato de etilo. Se separó la fase orgánica y se lavó con solución hipersalina. se secó sobre Na2SÜ4 y se evaporó al vacío. El material en bruto se purificó mediante columna de Si. eluyendo con Cy a Cy/acetato de etilo 1:1. obteniendo 265 mg de 1-{[2-(trimetilsilil)etoxi1metil}[11benzopirano[3.4-d1imidazol-4(1H)-ona en forma de mezcla de regioisómeros. CL-EM (M-H+)=317.3.
Etapa 3. Síntesis de 2-bromo-1-{[2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡1met¡l}[11 benzop¡rano[3.4-d1¡m¡dazol-4(1H)-ona:
Figure imgf000059_0003
Se disolvió 1-{[2-(trimetilsilil)etoxi1metil}[11benzopirano[3.4-d1imidazol-4(1H)-ona (150 mg. 0.47 mmoles) en DCM. Se añadió W-bromosuccinimida (88 mg. 0.5 mmoles) y cat. AIBN y la mezcla se sometió a agitación a 45°C durante 4 h. El análisis de UPLC mostró que la reacción se había completado. por lo que se añadió agua y se separó la fase orgánica y se evaporó al vacío. El material en bruto se purificó mediante columna de Si. eluyendo con Cy a Cy/acetato de etilo 1:1. obteniendo 104 mg (Y=56%) de 2-bromo-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi1metil}[11benzopirano[3.4-d1imidazol-4(1H)-ona en forma de mezcla de regioisómeros. CL-EM (M-H+)=396.2.
Etapa 4. Síntesis de 2-(1-etox¡eten¡l)-1-{[2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡1 met¡l}[11benzop¡rano[3.4-d1¡m¡dazol-4(1 H)-ona:
Figure imgf000060_0001
Se d¡solv¡ó 2-bromo-1-{[2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡]met¡l}[1]benzop¡rano[3,4-d]¡m¡dazol-4(1H)-ona (104 mg. 0.26 mmoles) en d¡oxano (2 ml); se añad¡ó tr¡but¡l(1-etox¡v¡n¡l)-estaño (140 mg. 0.39 mmoles) y la mezcla se purgó con N2 durante 20 m¡nutos. Se añad¡ó tetrak¡s(tr¡fen¡lfosf¡na)palad¡o (0) (30 mg. 0.026 mmoles) y la mezcla se somet¡ó a ag¡tac¡ón bajo reflujo durante 6 h; después. se enfr¡ó a 0°C. se diluyó con agua y se extrajo con acetato de et¡lo. La fase orgán¡ca se lavó con soluc¡ón acuosa de KF. se secó sobre Na2SÜ4 y se concentró al vacío. El mater¡al en bruto se pur¡f¡có med¡ante columna de NH2. eluyendo con Cy a Cy/acetato de et¡lo 8:2. obten¡endo 100 mg (0.25 mmoles) de 2-(1-etox¡eten¡l)-1-{[2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡1met¡l}[1]benzop¡rano[3.4-d1¡m¡dazol-4(1H)-ona. que se ut¡l¡zó en la etapa s¡gu¡ente s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. CL-EM (M-H+)=387.4.
Etapa 5. Síntes¡s de 2-(bromoacet¡l)-1-{[2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡1 met¡l}[11benzop¡rano[3.4-d1¡m¡dazol-4(1 H)-ona:
Figure imgf000060_0002
Una soluc¡ón de 2-(1-etox¡eten¡l)-1-{[2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡] met¡l}[1]benzop¡rano[3.4-d1¡m¡dazol-4(1H)-ona (100 mg.
0.25 mmoles) en THF/agua (10 ml) se enfr¡ó a 0°C. Se añad¡ó W-bromosucc¡n¡m¡da (76 mg. 0.43 mmoles) y la mezcla se somet¡ó a ag¡tac¡ón a temperatura amb¡ente durante 1 h. El anál¡s¡s de UPLC mostró que se había completado la reacc¡ón. Se añad¡ó DCM segu¡do de agua. Se separó la fase orgán¡ca. se secó sobre Na2SÜ4 y se concentró al vacío. El mater¡al en bruto se pur¡f¡có med¡ante columna de S¡. eluyendo con Cy a Cy/acetato de et¡lo 9:1. obten¡endo 70 mg (0.16 mmoles. rend¡m¡ento: 64%) de 2-(bromoacet¡l)-1-{[2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡] met¡l}[1]benzop¡rano[3.4-d1¡m¡dazol-4(1H)-ona. que se ut¡l¡zó s¡n pur¡f¡cac¡ón n¡ caracter¡zac¡ón ad¡c¡onal.
Etapa 6. Síntesis de 2-(r4-í7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1acet¡l}-1-(r2-ítr¡met¡ls¡l¡l) etox¡1metil}[11benzop¡rano [3.4-d1¡midazol-4(1 H)-ona:
Figure imgf000061_0001
Se disolvió 2-(bromoacet¡l)-1-{[2-(tr¡met¡ls¡lil)etox¡]met¡l}[1]benzop¡rano[3,4-d]¡m¡dazol-4(1H)-ona (70 mg. 0.16 mmoles). 7-fluoro-1-(p¡perazín-1-il)¡soqu¡nol¡na (37 mg. 0.16 mmoles. ver el compuesto 144) y carbonato potásico (33 mg. 0.24 mmoles) en MeCN. La mezcla se sometió a agitación a temperatura ambiente durante 30 min; después. se añadió acetato de etilo seguido de agua. Se separó la fase orgánica. se secó sobre Na2SÜ4 y se concentró al vacío. El producto en bruto resultante se purificó mediante columna de Si. eluyendo con Cy a Cy/acetato de etilo 1:1. obteniendo 61 mg (0.1 mmoles. rendimiento: 65%) de 2-{[4-(7-fluoroisoquinolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1acet¡l}-1-{[2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡1met¡l}[1]benzop¡rano[3.4-d1¡m¡dazol-4(1H)-ona. Cl-EM (M-H+)=588.4.
Etapa 7. Síntesis de 2-{2-[4-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1-1-h¡drox¡etil}-1-{[2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡1met¡l}[11 benzop¡rano[3.4-d1 imidazol-4( 1 H)-ona:
Figure imgf000061_0002
Una solución de 2-{[4-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1acet¡l}-1-{[2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡1met¡l}[1]benzop¡rano[3.4-d]imidazol-4(1H)-ona (61 mg. 0.1 mmoles) en metanol/DCM 10:1 (11 ml) se enfrió a 0°C; después. se añadió NaBH4 (19 mg. 0.5 mmoles). La mezcla se sometió a agitación durante 30 min a 0°C; después. el solvente se evaporó al vacío; se añadió acetato de etilo y la fase orgánica se lavó con agua. se secó sobre Na2SÜ4 y se concentró al vacío. obteniendo 51 mg (0.086 mmoles. rendimiento: 86%) de 2-{2-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1-1-h¡drox¡et¡l}-1-{[2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡1met¡l}[1]benzop¡rano[3.4-d1¡m¡dazol-4(1H)-ona. que se utilizó en la etapa siguiente sin purificación adicional. CL-EM (M-H+)=590.4
Etapa 2. Síntesis de hidrocloruro de 2-(2-r4-í7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1-1-hidrox¡et¡l}ri1benzop¡ranor3.4-d]¡midazol-4(1H)-ona (compuesto 152):
Figure imgf000062_0001
Se disolvió 2-{2-[4-(7-fluoroisoauinolín-1 -il)piperazín-1 -il]-1 -hidroxietil}-1 -{[2-(tr¡metilsil¡l)etoxi]metil}-1 H,4H-cromeno[3,4-d]imidazol-4-ona (51 mg. 0.086 mmol) en etanol (8 ml); se añadió Hcl 1 M en etanol (10 ml. 10 mmoles) y la mezcla se sometió a agitación a temperatura ambiente durante 4 h. Tras eliminar el solvente al vacío. el producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía inv. C18, eluyendo con agua/acetonitrilo 95:5 a acetonitrilo 100%, obteniendo 60 mg del producto. El compuesto se disolvió en DCM y la solución se enfrió a 0°C. Se añadió HCl 1 M en éter dietílico (5 ml); la mezcla se concentró al vacío y el sólido en bruto se trató con éter dietílico. obteniendo 30 mg fr 2-{2-[4-(7-fluoroisoquinolín-1 -il)piperazín-1 -il]-1 -hidroxietil}[1 ]benzopirano[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona en forma de sal hidrocloruro. CL-EM (M-H+)=460.4.
RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) ó ppm 3.42 - 3.90 (m, 8 H), 5.51 (dd, J=10.03, 2.69 Hz, 1 H), 6.95 (d, J=8.80 Hz, 1 H). 7.37 - 7.48 (m. 1 H). 7.50 - 7.54 (m. 1 H). 7.55 - 7.62 (m. 2 H). 7.73 (td. J=8.68. 2.69 Hz. 1 H). 7.87 (dd. J=10.03.
2.20 Hz. 1 H). 8.08 (dd. J=9.05. 5.62 Hz. 1 H). 8.14 - 8.28 (m. 2 H). 10.55 (br. s.. 1 H).
Preparación de compuesto 153
El compuesto 153 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapa 1. Síntesis de 4-cloro-3-(trifluoroacet¡l)-2H-1-benzop¡rán-2-ona:
Figure imgf000062_0002
La reacción se llevó a cabo en un tubo presurizado. A una suspensión de 4-hidroxicoumarina (2.5 g. 15.4 mmoles) en 1.4-dioxano seco. se le añadió piridina seca 2.56 g (2.6 ml. 32.4 mmoles). Tras tornarse la mezcla completamente homogénea. se añadió cloruro de trimetilsililo (2 g. 18.5 mmoles). La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. A continuación. se añadió anhídrido trifluoroacético (2.8 mL. 20 mmoles) y la mezcla se sometió a agitación durante 2 h a 90°C. A la masa de reacción fría se le añadió oxicloruro de fósforo (1.4 ml. 15.4 mmoles) y la mezcla se sometió a agitación a 60°C durante 2 h; después. se diluyó con agua helada y se extrajo con DCM (3x50 ml). Las capas orgánicas agrupadas se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron. proporcionando 4-cloro-3-(trifluoroacetil)-2H-1-benzopirán-2-ona (3.1 g. rendimiento: 73%). Se utilizó el compuesto sin purificación adicional ni caracterización.
Etapa 2. Síntesis de 4-oxo-3-(tr¡fluoromet¡l)-1.4-d¡h¡dro[1lbenzop¡rano[4.3-blp¡rrol-2-carbox¡lato de etilo:
Figure imgf000063_0001
El ¡ntermed¡o del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de 4-oxo-1,4-d¡h¡dro[1]benzop¡rano[4,3-b]p¡rrol-2-carbox¡lato de etilo (ver el compuesto 145). ut¡l¡zando 4-cloro-3-(tr¡fluoroacet¡l)-2H-1 -benzop¡rán-2-ona (Y=74%). CL-EM (M-H+)=326.1.
Etapa 3-4. Síntes¡s de 4-oxo-3-(tr¡fluoromet¡l)-1.4-d¡h¡dro[1lbenzop¡rano[4,3-blp¡rrol-2-carbaldehído:
Figure imgf000063_0002
El ¡ntermed¡o del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de 4-oxo-1,4-d¡h¡dro[1]benzop¡rano[4.3-blp¡rrol-2-carbaldehído (ver el compuesto 145), ut¡l¡zando 4-oxo-3-(tr¡fluoromet¡l)-1.4-d¡h¡dro[1]benzop¡rano[4.3-blp¡rrol-2-carbox¡lato de et¡lo (Y=35% en dos etapas). que se ut¡l¡zó en la etapa s¡gu¡ente s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. CL-EM (M-H+)=282.1.
Etapa 5. Síntes¡s de 2-({[1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-¡llam¡no}met¡l)-3-(tr¡fluoromet¡l)[1lbenzop¡rano[4.3-blp¡rrol-4(1H)-ona (sal formato. compuesto 153):
Figure imgf000063_0003
El compuesto 153 se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de compuesto 145. ut¡l¡zando 4-oxo-3-(tr¡fluoromet¡l)-1.4-d¡h¡dro[1]benzop¡rano[4.3-blp¡rrol-2-carbaldehído (Y=8%). CL-e M (M-H+)=511.3.
RMN 1H (500 MHz. DMSO-d6) 5 ppm 1.60 - 1.73 (m, 2 H), 1.98 - 2.08 (m, 2 H), 2.69 - 2.80 (m, 1 H), 2.93 (t, J=11.60 Hz. 2 H). 3.67 (d. J=11.60 Hz. 2 H). 4.06 (s. 2 H). 7.38 - 7.44 (m. 2 H). 7.44 - 7.48 (m. 1 H). 7.49 - 7.56 (m. 1 H).
7.60 - 7.69 (m. 2 H). 7.99 (dd. J=8.80. 5.87 Hz. 1 H). 8.09 (d. J=5.87 Hz. 1 H). 8.17 (s. 1 H). 8.22 (dd. J=7.83. 0.98 Hz. 1 H).
Preparación de compuesto 155
Figure imgf000064_0001
El compuesto 1556-fluoro-4-[(3-{4-[3-fluoro-7-(trifluorometoxi)isoquinolín-1-il]piperazín-1-il}-2-hidroxipropil)amino]-2H-1,3-benzoxazín-2-ona se preparó siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de Compuesto 149, partiendo de 2-fluoro-5-triflurometoxibenzonitrilo. CL-EM m/z: 552.2 (M+1).
RMN 1H (400 MHz, CDCla+MeOH-d4): ó ppm 2.48-2.54 (m, 1H), 2.62-2.65 (m, 1H), 2.74-2.75 (m, 2H), 2.87-2.89 (m, 2H), 3.33 (s, 1H), 3.45-3.55 (m, 4H), 3.88 (dd, J = 14.0, 3.6 Hz, 1H), 4.05-4.06 (m, 1H), 6.78 (s, 1H) 7.23-7.27 (m, 2H), 7.34 (dd, J = 8.8, 2.3 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 8.4, 2.4 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.78 (s, 1H).
Preparación de compuesto 156
Figure imgf000064_0002
El compuesto 156 6-fluoro-4-((2-hidroxi-3-(4-(pirido[3,4-b]pirazín-5-il)piperazín-1-il)propil)amino)-2H-benzo[e][1,3] oxazín-2-ona se preparó según la síntesis de compuesto 149, utilizando 5-cloropirido[3,4-b]pirazina, preparado tal como se indica para el compuesto 196. CL-EM m/z: 452.2 (M+1).
RMN 1H (DMSO-d6): ó ppm 2.49-2.50 (m, 4H), 3.31-3.34 (m, 3H), 3.37-3.75 (m, 1H), 3.98-3.99 (m, 4H), 4.08-4.09 (m, 1H), 5.00 (d, J = 4.4 Hz, 1H) 7.23 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 7.38 (dd, J = 8.8, 4.6 Hz, 1H), 7.60-7.64 (m, 1H), 8.10 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.25 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.84 (s, 1H), 8.99 (s, 1H), 9.13-9.14 (m, 1H).
Preparación de compuestos 158 y 159
El compuesto 158 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapa 1. Síntesis de 2-{1-az¡do-2-[4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1et¡l}-1-{[2-(tr¡met¡ls¡lil)etox¡1met¡l}[11 benzop¡rano[3.4-d1¡midazol-4( 1 H)-ona:
Se disolvió 2-{2-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]-1-hidroxietil}-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}[1]benzopirano [3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (279 mg, 0.47 mmoles, ver el compuesto 152) en DCM seco (30 ml), TEA (98 pl, 0.7 mmoles) y la mezcla se enfrió a 0°C. Se añadió MsCI (40 pl, 0.52 mmoles) y la mezcla se sometió a agitación durante 1 h a 0°C. A continuación, se añadió azida sódica (244 mg, 3.8 mmoles) y MeCN (16 ml). La mezcla se sometió a agitación a temperatura ambiente durante la noche; después, se diluyó con DCM. La fase orgánica se lavó con agua y se concentró al vacío. El material en bruto se purificó mediante columna de Si (de 100% Cy a cy/acetato de etilo 6:4), obteniendo 134 mg (0.22 mmoles, rendimiento: 46%) de 2-{1-azido-2-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]etil}-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}[1]benzopirano[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona. CL-EM (M-H+)=615.3.
Etapa 2. Síntesis de 2-{1-am¡no-2-[4-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l1et¡l}-1-{[2-(tr¡met¡ls¡lil)etox¡1met¡l}[11 benzop¡rano[3,4-d1¡m¡dazol-4( 1 H)-ona:
Figure imgf000065_0001
A una solución de 2-{1-azido-2-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]etil}-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}[1] benzopirano[3,4-d] imidazol-4(1H)-ona (134 mg, 0.22 mmoles) en THF/H2O 3:1 (44 ml), se le añadió trifenilfosfina (69 mg, 0.26 mmoles). La mezcla se sometió a agitación a temperatura ambiente durante la noche; después, se añadió DCM seguido de agua. Se separó la fase orgánica y se evaporó al vacío. El material en bruto se purificó mediante columna de Si (DCM/metanol 98:2), obteniendo 124 mg (0.21 mmoles, rendimiento: 96%) de 2-{1-amino-2-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]etil}-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}[1]benzo pirano[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona. CL-EM (M-H+)=589.5.
Etapa 3 - Síntesis de hidrocloruro de 2-{1-amino-2-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]etil}[1]benzopirano[3,4-d]¡midazol-4(1H)-ona (compuesto 158) e hidrocloruro de N-{2-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)p¡perazín-1-il]-1-(4-oxo-1.4-d¡h¡dro[11benzop¡rano[3.4-d1¡m¡dazol-2-¡l)et¡l}formam¡da (compuesto 159):
Figure imgf000065_0002
Se disolvió 2-{1-amino-2-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]etil}-1-{[2-(trimetilsilil)etoxi]metil}[1]benzopirano [3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (124 mg, 0.21 mmoles) en HCl 4 M en dioxano (10 ml). Se añadió agua (1 ml) y la mezcla se sometió a agitación a temperatura ambiente durante 2 h. Se eliminó el solvente al vacío; el sólido resultante se purificó mediante cromatografía inversa C-18, eluyendo con (agua ácido fórmico al 0.1% / metanol ácido fórmico al 0.1%). Se recuperó tanto 2-{1-amino-2-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]etil}[1]benzopirano[3,4-d]imidazol-4(1H)-ona (compuesto 158) como la correspondiente W-{2-[4-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperazín-1-il]-1-(4-oxo-1,4-dihidro[1]benzopirano[3,4-d]imidazol-2-il)etil}formamida (compuesto 159).
Compuesto 158: el producto se disolvió en DCM y se añadió HCl 1 M en éter dietílico, obteniendo 39 mg del compuesto del título en forma de sal hidrocloruro. CL-EM (M-H+)=459.3.
RMN 1H. (500 MHz, METANOL-d4) ó ppm 2.87 - 2.98 (m, 2 H), 3.04 - 3.12 (m, 2 H), 3.20 (d, J=6.85 Hz, 2 H), 3.83 - 4.03 (m, 4 H), 4.88 - 4.99 (m, 1 H), 7.46 (t, J=7.60 Hz, 1 H), 7.51 (d, J=7.60 Hz, 1 H), 7.58 - 7.63 (m, 1 H), 7.66 (d, J=6.85 Hz, 1 H), 7.80 (d, J=6.85 Hz, 1 H), 7.88 (td, J=8.80, 2.00 Hz, 1 H), 7.99 (dd, J=9.78, 1.96 Hz, 1 H), 8.05 (d, J=7.60 Hz, 1 H), 8.16 (dd, J=8.80, 5.38 Hz, 1 H).
Compuesto 159: el producto se disolvió en DCM y se añadió HCl 1 M en éter dietílico, obteniendo 3.3 mg del compuesto del título en forma de sal hidrocloruro. CL-EM (M-H+)=487.3.
RMN 1H (500 MHz, METANOL-d4) ó ppm 3.70 - 4.01 (m, 9 H), 4.14 (dd, J=13.30, 6.02 Hz, 1 H), 5.98 (t, J=6.90 Hz, 1 H), 7.45 (t, J=7.53 Hz, 1 H), 7.49 - 7.54 (m, 1 H), 7.57 - 7.63 (m, 1 H), 7.66 (d, J=6.27 Hz, 1 H), 7.74 (td, J=8.66, 2.30 Hz, 1 H), 7.95 (dd, J=9.79, 2.26 Hz, 1 H), 8.01 - 8.15 (m, 3 H), 8.38 (s, 1 H).
Preparación de compuesto 162
El compuesto 162 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapa 1. Síntesis de 2-cloro-5-fluoronicot¡nam¡da:
Figure imgf000066_0001
A una solución de ácido 2-cloro-5-fluoro nicotínico (5.0 g, 28.5 mmoles) en THF (50 ml), se le añadió 1,1 '-carbonil diimidazol (5.38 g, 39 mmoles) a 0°C. La mezcla se sometió a reflujo durante 3 h; después, se enfrió a 0°C y se añadió THF*amonio (60 ml). Tras agitar durante 12 h a temperatura ambiente la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía flash (MeOH al 5% en DCM), proporcionando 2-cloro-5-fluoronicotinamida (4.4 g, 88%) en forma de un sólido blanco. CL-EM m/z: 175,2 (M+1). RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): ó ppm 7.87 (br. s, 1H), 8.00 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.10 (br. s, 1H), 8.53 (d, J = 2.9 Hz, 1H).
Etapa 2. Síntesis de 5-fluoro-2-met¡ln¡cot¡nam¡da:
Figure imgf000066_0002
Una solución de 2-cloro-5-fluoronicotinamida (4.2 g, 24.0 mmoles) en DMF (42 ml) se purgó durante 15 min bajo argón. Se añadió tetrametil estaño (8.58 g, 48 mmoles) y dicloruro de bis(trifenilfosfina)paladio (II) (0.84 g, 1.2 mmoles) y la mezcla resultante se agitó a 90°C durante 6 h y después se filtró a través de un lecho de Celite. El filtrado se concentró bajo presión reducida y el producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía flash (MeOH al 5% en DCM), proporcionando 5-fluoro-2-metilnicotinamida (2.15 g, 58%) en forma de un sólido marrón pálido. CL-EM m/z: 155,2 (M+1). RMN 1H (400MHz, DMSO-d6): ó ppm 2.53 (s, 3H), 7.71-7.68 (m, 2H), 7.98 (s, 1H), 8.49 (d, J = 2.9 Hz, 1H).
Etapa 3. Síntesis de 3-fluoro-1.6-naftir¡dín-5í6H)-ona:
Figure imgf000067_0001
Una mezcla de 5-fluoro-2-metilnicot¡nam¡da (1.6 g. 10 mimóles) en DMF/DMA anhidro (3.2 ml) se calentó a 55°C durante 3 h. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y se añadió DMF anhidro (10 ml) al producto en bruto resultante. A continuación. se añadió NaH (al 60% en aceite mineral. 620 mg, 15.5 mmoles) a 0°C y la mezcla se calentó a 85°C durante 3 h. se enfrió. se diluyó con agua y se neutralizó mediante la utilización de HCl conc. La masa de reacción se concentró bajo presión reducida y el producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía flash (MeOH.NH3 al 5% en DCM). proporcionando 3-fluoro-1,6-naft¡r¡dín-5(6H)-ona en forma de un sólido blanquecino (150 mg. 9%). CL-EM m/z: 165.2 (M+1). RMN 1H (300MHz, DMSO-d6): ó ppm 6.66 (d. J = 7.5 Hz. 1H). 7.46-7.40 (m. 1H). 8.27-8.21 (m. 1H). 8.96 (d. J = 3 Hz. 1H). 11.7 (br.s. 1H).
Etapa 4. Síntesis de 5-cloro-3-fluoro-1.6-naft¡r¡d¡na:
Figure imgf000067_0002
Una mezcla de 3-fluoro-1,6-naft¡r¡dín-5(6H)-ona (150 mg. 0.9 mmoles) y oxicloruro de fósforo (3.48 g. 23 mmoles) se calentó a 100°C durante 3 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente y se concentró bajo presión reducida para eliminar el exceso de POCb. El producto en bruto resultante se disolvió en EtOAc y se lavó con sol. sat. de NaHCO3 y agua. La capa orgánica se secó sobre sulfato sódico y se concentró. obteniendo 5-cloro-3-fluoro-1.6-naftiridíne (152 mg. 91.5%) en forma de un sólido marrón pálido. Éste se utilizó sin modificación en la etapa siguiente sin purificación adicional. CL-EM m/z: 183.2 (M+1).
Etapa 5. Síntesis de 6-fluoro-4-({3-[4-(3-fluoro-1.6-naft¡r¡dín-5-¡l)p¡perazín-1-¡l]-2-h¡drox¡prop¡l}am¡no)-2H-1.3-benzoxazín-2-ona (compuesto 162):
Figure imgf000067_0003
El compuesto del título se preparó de acuerdo con la síntesis indicada para el compuesto 149. utilizando 5-cloro-3-fluoro-1.6-naftiridina. CL-EM m/z: 469.2 (M+1).
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): ó ppm 2.78-2.58 (m, 6H), 3.44-3.34 (m, 5H), 3.73-3.71 (m, 1H), 4.08-4.06 (m, 1H), 5.04-5.02 (m. 1H). 7.41-7.37 (m. 1H). 7.49 (d. J = 5.6 Hz. 1H). 7.65-7.61 (m. 1H). 8.18-8.11 (m. 2H). 8.31 (d. J = 8 Hz. 1H). 9.17-9.10 (m. 2H).
Preparación de compuesto 163
Figure imgf000068_0001
El compuesto 163, 6-fluoro-4-[(2-hidroxi-3-{4-[3-(trifluorometil)-1,6-na1tiridín-5-il]piperazín-1-il}propil)amino]-2H-1,3-benzoxazín-2-ona, se preparó de acuerdo con la síntesis indicada para el compuesto 162, partiendo de ácido 2-cloro-5-(triflurometil)piridín-3-carboxílico. CL-EM m/z: 519.2 (M+1).
RMN 1H (DMSO d6): ó ppm 2.26-2.18 (m, 4H), 3.62-3.72 (m, 8H), 4.24 (br. s, 1H), 7.18-7.21 (m, 1H), 7.21-7.34 (m, 2H), 7.51 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.74-7.75 (m, 1H), 8.35 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 8.52 (s, 1H), 9.09 (s, 1H).
Preparación de compuesto 166
El compuesto 166 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapa 1. Síntesis de 4-[3-(1.3-d¡oxo-1.3-d¡h¡dro-2H-¡so¡ndol-2-¡l)-2-h¡drox¡prop¡l1p¡perazín-1-carboxilato de tercbutilo:
Figure imgf000068_0002
Una mezcla de W-Boc-piperazina (15 g, 81 mmoles) y W-(2,3-epoxipropil)ftalimida (16.4 g, 81 mmoles) en acetonitrilo (100 ml) se calentó a 70°C durante 6 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente, se concentró al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía flash (gel de sílice, CHCb /MeOH 9/1), proporcionando 20.4 g de un sólido marrón (52 mmoles, Y=64%). CL-EM (M-H+)=390.1.
Etapa 2. Síntesis de 4-(3-am¡no-2-hidrox¡prop¡l)p¡perazín-1-carbox¡lato de terc-butilo:
Figure imgf000068_0003
Una solución de 4-[3-(1,3-d¡oxo-1,3-d¡h¡dro-2H-¡so¡ndol-2-il)-2-h¡drox¡prop¡l]p¡perazín-1-carbox¡lato de terc-butilo (20.4 g, 52 mmoles) y metilamina al 30% en EtOH (215 ml) se calentó a 50°C en un tubo sellado durante la noche. La mezcla se enfrió hasta la temperatura ambiente y se filtró. El filtrado se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía flash (gel de sílice, CHCb /MeOH 9/1), proporcionando 4-(3-amino-2-hidroxipropil)piperazín-1-carboxilato de terc-butilo (6.2 g, 24 mmoles, Y=46%). CL-Em (M-H+)=260.1.
Etapa 3. Síntesis de trifluorometanosulfonato de 6-fluoro-2-oxo-2H-cromén-4-ilo:
Figure imgf000069_0001
Una solución de 6-fluoro-4-hidroxi-2H-cromén-2-ona (10 g, 55.5 mmoles) y TEA (15.5 ml, 111 mmoles) en DCM (150 ml) se enfrió a -10°C. Se añadió gota a gota anhídrido trifluorometanosulfónico (10.3 ml, 61.1) en DCM (10 ml). La mezcla se sometió a agitación a -10°C durante 2 h y a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla se diluyó con hexano/éter dietílico 1/1; el sólido se filtró a través de un lecho de sílice y se concentró, proporcionando un sólido (11.2 g, 35 mmoles, Y=63%) que se utilizó sin ninguna purificación adicional. CG-EM=312.0.
Etapa 4. Síntesis de 4-{3-[(7-fluoro-2-oxo-2H-1-benzop¡rán-4-¡l)am¡no1-2-hidrox¡prop¡l}p¡perazín-1-carbox¡lato de terc-butilo:
Figure imgf000069_0002
Se añadió gota a gota trietilamina (4 ml, 28.7 mmoles) en acetonitrilo (20 ml) a una solución bajo agitación de trifluorometanosulfonato de 6-fluoro-2-oxo-2H-cromén-4-ilo (7.5 g, 23.9 mmoles) y 4-(3-amino-2-hidroxipropil)piperazín-1-carboxilato de terc-butilo (6.2 g, 23.9 mmoles) en acetonitrilo seco (50 ml). Una vez completada la adición, la solución se calentó bajo reflujo durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta la temperatura ambiente, se diluyó con DCM y se lavó con NaHCÜ3 saturado y agua. A continuación, se separó la fase orgánica, se secó sobre sulfato sódico y se evaporó al vacío. El material en bruto se purificó mediante cromatografía flash (gel de sílice, de 100% CHCb a CHCb/MeOH 85/15), obteniendo 4-{3-[(7-fluoro-2-oxo-2H-1-benzop¡rán-4-¡l)am¡no]-2-hidrox¡prop¡l}p¡perazín-1-carbox¡lato de terc-butilo (4.2 g, 10 mmoles, Y= 42%). CL-EM (M-H+): 422.2.
Etapa 5. Síntesis de hidrocloruro de 7-fluoro-4-{[2-h¡drox¡-3-(p¡perazín-1-¡l)prop¡l1am¡no}-2H-1-benzop¡rán-2-ona:
Figure imgf000070_0001
Se d¡solv¡ó terc-but¡l-4-{3-[(7-fluoro-2-oxo-2H-1-benzop¡rán-4-¡l)am¡no]-2-h¡drox¡ prop¡l}p¡perazín-1-carbox¡lato (4 g, 9.5 mmoles) en MeOH (30 ml), se añad¡ó HCl 1.25 M en MeOH (4.5 ml) y la mezcla se somet¡ó a reflujo durante 2 h. Tras el enfr¡am¡ento, el sól¡do blanco se f¡ltró y se secó, proporc¡onando h¡drocloruro de 7-fluoro-4-{[2-h¡drox¡-3-(p¡perazín-1-¡l)prop¡l]am¡no}-2H-1-benzop¡rán-2-ona (3.4 g, Y=cuant.), que evoluc¡onó s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. CL-EM (M-H+): 322.2.
Etapa 6. Síntes¡s de 6-fluoro-4-({2-h¡drox¡-3-[4-(1.6-naft¡r¡dín-5-¡l)p¡perazín-1-¡l1prop¡l}am¡no)-2H-1-benzop¡rán-2-ona (compuesto 166):
Figure imgf000070_0002
A una soluc¡ón de h¡drocloruro de 7-fluoro-4-{[2-h¡drox¡-3-(p¡perazín-1-¡l)prop¡l]am¡no}-2H-1-benzop¡rán-2-ona (261 mg, 0.73 mmoles) y TEA (0.2 ml, 1.46 mmoles) en DMF (3 ml), se le añad¡ó 5-cloro-1,6-naft¡r¡díne (80 mg, 0.49 mmoles). La mezcla se somet¡ó a ag¡tac¡ón a 100°C durante 18 h; después, se enfr¡ó, se d¡luyó con agua y se extrajo con EtOAc. La capa orgán¡ca se secó sobre sulfato sód¡co, se concentró al vacío y el res¡duo en bruto se pur¡f¡có med¡ante cromatografía flash (gel de síl¡ce, CHCl3/MeOH 95/5), obten¡endo 95 mg (0.21 mmoles, Y=29%) del compuesto del título. CL-EM (M-H+): 450.2.
RMN 1H (300MHz, CLOROFORMO-d) 6 = 9.01 (dd, J = 1.2, 4.3 Hz, 1 H), 8.42 - 8.33 (m, 2 H), 7.53 (d, J = 5.9 Hz, 1 H), 7.45 (dd, J = 4.3, 8.4 Hz, 1 H), 7.36 - 7.19 (m, 4 H), 5.78 (t, J = 4.3 Hz, 1 H), 5.36 (s, 1 H), 4.26 - 4.10 (m, 1 H), 3.50 (s, 6 H), 3.28 - 3.15 (m, 1 H), 3.05 - 2.93 (m, 2 H), 2.81 - 2.70 (m, 2 H), 2.62 (d, J = 6.8 Hz, 2 H).
Preparación de compuesto 171
El compuesto 171 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapa 1. Síntesis de dihidrocloruro de 3-metoxip¡per¡dín-4-am¡na:
Figure imgf000071_0001
Una solución de 4-amino-3-metoxipiperidin-1-carboxilato de terc-butilo (900 mg, 3.9 mmoles) en 1,4-dioxano (10 ml) se enfrió a 0-5 °C. Se añadió HCl 4 M en dioxano (9 ml). Tras agitar durante 2 h a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida. El producto en bruto resultante se trituró con éter de petróleo (3 x 25 ml), se filtró y se secó bajo presión reducida, proporcionando dihidrocloruro de 3-metoxipiperidín-4-amina (700 mg, en bruto) en forma de un sólido blanquecino. CL-EM (ELSD) m/z: 131,2 (M+H).
Etapa 2 - Síntesis de 1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)-3-metox¡p¡per¡dín-4-am¡na:
Figure imgf000071_0002
A una solución bajo agitación de dihidrocloruro de 3-metoxipiperidín-4-amina (700 mg, 3.4 mmoles) en 1-butanol (3 ml), se le añadió DIPEA (1.07 g, 8.28 mmoles). Tras agitar durante 15 min a temperatura ambiente, se añadió 1-cloro-7-fluoroisoquinolina (300 mg, 1.6 mmoles). La mezcla se sometió a agitación a 100°C durante 48 h; después, se enfrió y se concentró bajo presión reducida. El residuo se diluyó con agua (25 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Las capas orgánicas agrupadas se lavaron con solución hipersalina (20 ml), se secaron sobre sulfato sódico y se evaporaron al vacío. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía flash (gel de sílice, MeOH al 8-10% en DCM), proporcionando 1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)-3-metoxipiperidín-4-amina (150 mg, 32.9%) en forma de un sólido amarillo pálido. CL-EM m/z: 276,1 (M+H).
Etapa 3. Síntesis de 2-({r1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)-3-metoxipiperidín-4-illamino}metil)Hlbenzopiranor4,3-blpirrol-4(1H)-ona (compuesto 171):
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de Compuesto 145, utilizando 1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)-3-metoxipiperidín-4-amina. Una purificación mediante cromatografía flash (gel de sílice, MeOH al 5% en DCM) seguido de separación mediante CFS quiral proporcionó 2-({[1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)-3-metoxipiperidín-4-il]amino}metil)[1]benzopirano[4,3-b]pirrol-4(1H)-ona (estereoisómero no asignado, Y=11%). CL-EM (M-H+)=473.2.
RMN 1H (DMSO d6): ó ppm 12.60 (brs, 1H), 8.08 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 8.07-7.97 (m, 1H), 7.77-7.74 (m, 1H), 7.66­ 7.62 (m, 1H), 7.45-7.34 (m, 4H), 6.58 (s, 1H), 3.92-3.91 (m, 2H), 3.72-3.63 (m, 3H), 3.33-3.29 (m, 3H), 3.11-3.08 (m, 2H), 2.93-2.91 (m, 1H), 1.91-1.83 (m, 2H).
Preparación de compuesto 172
Figure imgf000072_0001
Se preparó el compuesto 172 siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de Compuesto 171, utilizando 4-amino-3-fluoropiperidín-1-carboxilato de terc-butilo. Una purificación mediante cromatografía flash (gel de sílice, MeOH al 5% en DCm ) seguido de separación mediante CFS quiral proporcionó 2-({[3-fluoro-1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperidín-4-il]amino}metil)[1]benzopirano[4,3-b]pirrol-4(1H)-ona (estereoisómero no asignado, Y=7%). CL-EM m/z: 461.2 (M+1).
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): ó ppm 12.56 (brs, 1H), 8.11-8.08 (m,2H), 8.02-7.98 (m, 1H), 7.75 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 7.67-7.62 (m, 1H), 7.46-7.34 (m, 4H), 6.60 (s, 1H), 5.07-4.95 (m, 1H), 3.99-3.93 (m, 3H), 3.74-3.71 (m, 1H), 3.22-2.99 (m, 1H), 2.97-2.78 (m, 2H), 1.98-1.97 (m, 2H).
Preparación de compuesto 177
Figure imgf000072_0002
Se preparó 2-({[1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)-3-metilpiperidín-4-il]amino}metil)[1]benzopirano[4,3-b]pirrol-4(1H)-ona siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de compuesto 171, utilizando 4-amino-3-metilpiperidín-1-carboxilato de terc-butilo. Una purificación mediante cromatografía flash (gel de sílice, MeOH al 0-6% en DCM) seguido de separación mediante CFS quiral proporcionó el compuesto del título (estereoisómero no asignado, Y=7%). CL-EM m/z: 457.2 (M+H).
RMN 1H (DMSO d6): ó ppm 12.55 (brs, 1H), 8.09-8.06 (m, 2H), 8.01-7.97 (m, 1H), 7.67-7.62 (m, 2H), 7.45-7.35 (m, 4H), 6.59 (s, 1H), 4.01-3.98 (m, 1H), 3.90-3.86 (m, 1H), 3.72-3.69 (m, 1H), 3.62-3.59 (m, 1H), 2.89 (t, J = 12Hz, 1H), 2.68-2.60 (m, 1H), 2.33-2.15 (m, 2H), 1.86-1.80 (m, 1H),1.65-1.60 (m, 1H), 1.01 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
Preparación de compuesto 184
El compuesto 184 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapa 1. Síntesis de 4-am¡no-1-bencilp¡per¡dín-3-carbox¡lato de etilo:
Figure imgf000073_0001
El compuesto del título en forma de mezcla racémica syn/anti se preparó siguiendo el procedimiento indicado para el intermedio 4-amino-3-(benciloxi)piperidín-1-carboxilato de terc-butilo (ver el compuesto 186) utilizando 1-bencil-4-oxopiperidín-3-carboxilato de etilo (Y=65%). CL-EM m/z: 263.2 (M+H).
Etapa 2. Síntesis de 1-bencil-4-r(terc-butoxicarbonil)aminolpiperidín-3-carboxilato de etilo:
Figure imgf000073_0002
A una solución fría (0-5 °C) de 4-amino-1-bencilpiperidín-3-carboxilato de etilo (6 g, 22.87 mmoles) en DCM (20 ml), se le añadió lentamente TEA (9.5 ml, 68.61 mmoles) y anhídrido de Boc (5.98 g, 27.4 mmoles). Tras agitar durante 4 h a temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con agua (25 ml) y se extrajo con DCM (3 x 30 ml). Las capas orgánicas agrupadas se lavaron con agua (25 ml) y solución hipersalina (25 ml), se secaron sobre sulfato sódico y se concentraron al vacío. El producto en bruto resultante se purificó mediante cromatografía flash (gel de sílice, EtOAc al 30-35% en éter de petróleo), proporcionando el compuesto del título en forma de mezcla racémica syn/anti (1.4 g). CL-EM m/z: 363.2 (M+H). RMN 1H (400 MHz, CDCla): ó ppm 7.31-7.28 (m, 5H), 5.32 (brs, 1H), 4.17-4.12 (m, 3H), 3.90-3.80 (m, 1H), 3.60-3.31 (m, 2H), 3.15-3.08 (m, 1H), 2.79-2.76 (m, 1H), 2.24-2.20 (m, 3H), 2.09-2.06 (m, 1H), 1.61-1.59 (m, 1H), 1.45 (s, 9H), 1.22-1.18 (m, 2H).
Etapa 3. Síntesis de 4-[(terc-butox¡carbon¡l)am¡no]p¡per¡dín-3-carbox¡lato de etilo:
Figure imgf000074_0001
A una soluc¡ón bajo ag¡tac¡ón de 1-benc¡l-4-[(terc-butox¡carbon¡l)am¡no]p¡per¡dín-3-carbox¡lato de etilo (1.4 g, 3.86 mmoles) en AcOH (30 ml, se le añad¡ó Pd/C al 10% (140 mg, 50% húmedo) a temperatura amb¡ente bajo una atmósfera de n¡trógeno. La mezcla de reacc¡ón se h¡drogenó a 50°C durante 24 h; después, se f¡ltró por un lecho de Cel¡te y el f¡ltrado se concentró bajo pres¡ón reduc¡da, proporc¡onando 4-[(terc-butox¡carbon¡l)am¡no]p¡per¡dín-3-carbox¡lato de etilo (900 mg, rend¡m¡ento: 85%) en forma de mezcla racém¡ca syn/anti. CL-EM (ELSD) m/z: 273.2 (M+H). RMN 1H (400 MHz, CDCla): 6 ppm 5.56-5.45 (m, 1H), 4.33-4.12 (m, 2H), 3.90-3.78 (m, 1H), 3.45­ 3.33 (m, 1H), 3.15-3.01 (m, 1H), 2.86-2.68 (m, 3H), 1.88-1.76 (m, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.32-1.23 (m, 3H).
Etapa 4. Síntes¡s de 4-[(terc-butox¡carbon¡l)am¡nol-1-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-3-carbox¡lato de etilo:
Figure imgf000074_0002
El compuesto del título en forma de mezcla racémica syn/anti se preparó siguiendo el procedimiento indicado para intermedio 1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)-3-metox¡p¡peridín-4-am¡na (ver el compuesto 171), utilizando 4-[(tercbutox¡carbon¡l)amino]p¡per¡dín-3-carbox¡lato de etilo (Y=24%). CL-Em m/z: 418.2 (M+H). r Mn 1H (CDCb): 6 ppm 8.18-8.16 (m, 1H), 7.91-7.88 (m, 1H), 7.87-7.85 (m, 1H), 7.52-7.44 (m, 1H), 7.35-7.30 (m, 1H), 5.67 (brs, 1H), 4.29­ 4.01 (m, 4H), 3.35-3.33 (m, 1H), 3.20-3.18 (m, 1H), 2.45-2.42 (m, 2H), 2.08-1.98 (m, 2H), 1.45 (s, 9H), 1.25-1.17 (m, 3H).
Etapa 5. Síntesis de hidrocloruro de 4-am¡no-1-(7-fluoro¡soauinolín-1-¡l)p¡per¡dín-3-carbox¡lato de etilo:
Figure imgf000074_0003
El compuesto del título en forma de mezcla racémica syn/anti se preparó siguiendo el procedimiento indicado para el intermedio dihidrocloruro de 3-metoxipiper¡dín-4-am¡na (ver el compuesto 171) utilizando 4-[(terc-butox¡carbon¡l)am¡no]-1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)piper¡dín-3-carbox¡lato de etilo (Y=88%). CL-EM m/z: 318.1 (M+H).
Etapa 6. Síntesis de 1-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)-4-{r(4-oxo-1.4-d¡h¡droHlbenzop¡ranor4.3-blp¡rrol-2-¡l)met¡llam¡no} p¡per¡dín-3-carbox¡lato de etilo (compuesto 184):
Figure imgf000075_0001
El compuesto del título en forma de mezcla racem¡ca syn/anti se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de compuesto 145. ut¡l¡zando h¡drocloruro de 4-am¡no-1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-3-carbox¡lato de etilo (Y=9%). CL-EM m/z: 515.2 (M+H).
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6): ó ppm 12.48 (brs, 1H), 8.12 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.03 - 7.98 (m. 1H). 7.71 - 7.63 (m. 2H). 7.46 - 7.24 (m. 4H). 6.59 (s. 1H). 4.07 - 3.84 (m. 5H). 3.59 - 3.11 (m. 5H). 2.08 - 1.92 (m. 2H). 1.04-1.03 (m. 3H).
Preparac¡ón de compuesto 186
El compuesto 186 se preparó tal como se ¡nd¡ca poster¡ormente en la presente memor¡a.
Etapa 1. Síntes¡s de 4-am¡no-3-(benc¡lox¡)p¡per¡dín-1-carbox¡lato de terc-but¡lo:
Figure imgf000075_0002
Una soluc¡ón de 3-(benc¡lox¡)-4-oxop¡per¡dín-1-carbox¡lato de terc-butílo (1.9 g. 6.2 mmoles) y acetato amón¡co (3.35 g. 43.5 mmoles) en metanol (100 ml) se somet¡ó a ag¡tac¡ón durante 2 h a temperatura amb¡ente; después. se enfr¡ó a 10°C. Se añad¡ó c¡anoboroh¡druro sód¡co (580 mg. 9.3 mmoles) y la mezcla se somet¡ó a ag¡tac¡ón a temperatura amb¡ente durante 18 h. La mezcla de reacc¡ón se concentró al vacío. se d¡luyó con agua (20 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Las capas orgán¡cas agrupadas se lavaron con soluc¡ón h¡persal¡na (40 ml). se secaron sobre sulfato sód¡co y se concentraron al vacío. proporc¡onando 4-am¡no-3-(benc¡lox¡)p¡per¡dín-1-carbox¡lato de terc-but¡lo en bruto (1.6 g) en forma de una goma verde pál¡do. D¡cho producto en bruto se trató ad¡c¡onalmente s¡n mod¡f¡cac¡ón hasta la etapa s¡gu¡ente s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. CL-EM m/z: 307.1 (M+H).
Etapa 2. Síntesis de dihidrocloruro de 33-íbenc¡lox¡)p¡per¡dín-4-am¡na:
Figure imgf000076_0001
Una soluc¡ón bajo ag¡tac¡ón de 4-am¡no-3-(benc¡lox¡)p¡per¡dín-1-carbox¡lato de terc-but¡lo (1.6 g, 5.2 mmoles) en 1,4-d¡oxano (5 ml) se enfr¡ó a 0-5°C. Se añad¡ó HCl (4 M en 1,4 d¡oxano, 16 ml) y la mezcla se somet¡ó a ag¡tac¡ón a temperatura amb¡ente durante 2 h. Se el¡m¡nó el solvente bajo pres¡ón reduc¡da; el producto en bruto resultante se tr¡turó con éter de petróleo (3x25 ml) y se f¡ltró. El sólido blanquec¡no se secó bajo pres¡ón reduc¡da, proporc¡onando d¡h¡drocloruro de 3-(benc¡lox¡)p¡per¡dín-4-am¡na (1.5 g, en bruto), que se trató ad¡c¡onalmente s¡n mod¡f¡cac¡ón hasta la etapa s¡gu¡ente s¡n purificación ad¡c¡onal. CL-EM m/z: 207.1 (M+H-2HCl).
Etapa 3. Síntes¡s de 3-(benc¡lox¡)-1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-am¡na:
Figure imgf000076_0002
El compuesto del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para el ¡ntermed¡o 1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-il)-3-metoxipiperidín-4-amina (ver el compuesto 171), ut¡l¡zando d¡h¡drocloruro de 3-(benciloxi)piperidín-4-amina (Y=35%). CL-EM m/z: 352.1 (M+H).
Etapa 4. Síntes¡s de 2-({f3-(benc¡lox¡)-1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-¡l1am¡no>met¡l)[11benzop¡ranof4.3-b1p¡rrol-4(1H)-ona:
Figure imgf000076_0003
El compuesto del título en forma de mezcla de estereo¡sómeros se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de compuesto 145, ut¡l¡zando 3-(benciloxi)-1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperidín-4-amina (Y=45%). CL-EM m/z 549.1 (M+H).
Etapa 5. Síntesis de 2-í(ri-í7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡h-3-h¡drox¡p¡per¡dín-4-l1am¡nomethinibenzop¡ranor4.3-b1p¡rrol-4(1H)-ona (compuesto 186):
Figure imgf000077_0001
A una soluc¡ón bajo ag¡tac¡ón de 2-({[3-(benc¡lox¡)-1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-¡l]am¡no}met¡l)[1] benzop¡rano[4,3-b]p¡rrol-4(1H)-ona (mezcla de estereo¡sómeros, 200 mg. 0.36 mmoles) en cloroformo (20 ml). se le añad¡ó lentamente yoduro de tr¡met¡ls¡l¡lo (0.729 g. 3.6 mmoles) a 0-5°C en un tubo proteg¡do. La mezcla se somet¡ó a ag¡tac¡ón durante 4 h a 70°C; después se diluyó con una soluc¡ón de t¡osulfato sód¡co (30 ml) y se f¡ltró. El res¡duo se lavó con cloroformo (3 x 15 ml) y éter de petróleo (2 x 20 ml). Una pur¡f¡cac¡ón med¡ante cromatografía flash (gel de síl¡ce, MeOH al 8-10% en DCM) segu¡do de separac¡ón med¡ante HPCL preparat¡va proporc¡onó 2-({[1-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)-3-h¡drox¡p¡per¡dín-4-¡l]am¡no}met¡l)[11benzop¡rano[4.3-b1p¡rrol-4(1H)-ona (estereo¡sómero no as¡gnado. 18 mg. rend¡m¡ento: 11%) en forma de un sólido blanquec¡no. CL-EM m/z: 459.2 (M+H).
RMN 1H (400 MHz, DMSO d6): 6 ppm 12.35 (brs, 1H), 8.09-7.95 (m, 4H), 7.65-7.60 (m, 1H), 7.44-7.35 (m, 4H), 6.57 (s. 1H). 5.03-5.02 (m. 1H). 3.99-3.93 (m. 1H). 3.91-3.72 (m. 2H). 3.69-3.33 (m. 2H). 3.05-3.01 (m. 2H). 2.76­ 2.67 (m. 1H). 1.89-1.77 (m. 2H).
Preparac¡ón de compuesto 187
El compuesto 187 se preparó tal como se ¡nd¡ca poster¡ormente en la presente memor¡a.
Etapa 1. Síntes¡s de [1-(1.6-naft¡r¡dín-5-¡l)p¡per¡dín-4-¡l]carbamato de terc-but¡lo:
Figure imgf000077_0002
Se preparó el ¡ntermed¡o [1-(1.6-naft¡r¡dín-5-¡l)p¡per¡dín-4-¡l]carbamato de terc-butílo s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de 1-(7-fluoro¡soau¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-¡l]carbamato de terc-but¡lo (ver el compuesto 145). ut¡l¡zando 5-cloro-1.6-naft¡r¡d¡na. Y=82%. CL-EM (M-H+)=329.3
Etapa 2. Síntesis de 1-(1.6-naft¡r¡dín-5-¡l)p¡per¡dín-4-am¡na:
Figure imgf000078_0001
Se preparó el ¡ntermed¡o 1-(1,6-naft¡r¡dín-5-¡l)p¡per¡dín-4-am¡na s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de 1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-am¡na (ver el compuesto 145) ut¡l¡zando [1-(1.6-naft¡r¡dín-5-¡l)p¡per¡dín-4-¡ljcarbamato de terc-but¡lo. Y=98%. Se ut¡l¡zó el compuesto s¡n n¡nguna caracter¡zac¡ón.
Etapa 3. Síntes¡s de 4-cloro-6-fluoro-2-oxo-2H-1-benzop¡rán-3-carbaldehído:
Figure imgf000078_0002
A un volumen bajo ag¡tac¡ón (25 ml) de DMF, se le anad¡ó POCl3 (25 ml) en una porc¡ón a 0°C. La soluc¡ón resultante se calentó a 50°C durante 0.5 h; después. se anad¡ó una soluc¡ón de 6-fluoro-4-h¡drox¡coumar¡n (5 g.
27.7 mmoles) en DMF (50 ml). La mezcla se somet¡ó a ag¡tac¡ón a 60°C durante 3 h; después se vert¡ó en h¡elo. Tras ag¡tar durante 20 m¡n, se anad¡ó DCM (50 ml) y se separó la fase orgán¡ca, se secó sobre Na2SO4 y se concentró al vacío. obten¡endo 6.2 g de 4-cloro-6-fluoro-2-oxo-2H-1-benzop¡rán-3-carbaldehído, que se ut¡l¡zó en la etapa s¡gu¡ente s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal.
Etapa 4. Síntes¡s de 8-fluoro-4-oxo-1.4-d¡h¡dro[11benzop¡rano [4.3-b1p¡rrol-2-carbox¡lato de et¡lo:
Figure imgf000078_0003
El ¡ntermed¡o 8-fluoro-4-oxo-1.4-d¡h¡dro[11benzop¡rano[4.3-b1p¡rrol-2-carbox¡lato de et¡lo se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de 4-oxo-1.4-d¡h¡dro[11benzop¡rano[4.3-b1p¡rrol-2-carbox¡lato (ver el compuesto 145). ut¡l¡zando 4-cloro-6-fluoro-2-oxo-2H-1-benzop¡rán-3-carbaldehído (Y=50%). CL-e M (M-H+)=276.1.
Etapa 5. Síntes¡s de 8-fluoro-2-(h¡drox¡met¡l)[11benzop¡rano[4.3-b1p¡rrol-4(1H)-ona:
El intermedio 8-fluoro-2-(hidroximetil)[1]benzopirano[4,3-b] pirrol-4(1H)-ona se preparó siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de 2-(hidroximetil)[1]benzopirano[4,3-b]pirrol-4(1H)-ona (ver el compuesto 145), utilizando 8-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro[1]benzopirano[4,3-b]pirrol-2-carboxilato. Se utilizó el compuesto en la etapa siguiente sin caracterización adicional. CL-EM (M-H+)=234.2.
Etapa 6. Síntesis de 8-fluoro-4-oxo-1.4-d¡h¡dro[11benzop¡rano[4.3-b]p¡rrol-2-carbaldehído:
Figure imgf000079_0001
El intermedio 8-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro[1]benzopirano[4,3-b]pirrol-2-carbaldehído se preparó siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de 4-oxo-1,4-dihidro[1]benzopirano[4,3-b]pirrol-2-carbaldehído (ver el compuesto 145), utilizando 8-fluoro-2-(hidroximetil)[1]benzopirano[4,3-b]pirrol-4(1H)-ona. Se utilizó el compuesto en la etapa siguiente sin caracterización adicional. CL-EM (M-H+)=232.2.
Etapa 7. Síntesis de 8-fluoro-2-({[1-(1,6-naftiridín-5-il)piperidín-4-il]amino}metil)[1]benzopirano[3,4-b]pirrol-4(3H)-ona (compuesto 187):
Figure imgf000079_0002
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de Compuesto 145, utilizando 8-fluoro-4-oxo-1,4-dihidro[1]benzopirano[4,3-b]pirrol-2-carbaldehído y 1-(1,6-naftiridín-5-il)piperidín-4-amina (Y=41%). CL-EM (M-H+)=444.3.
RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) ó ppm 1.55 - 1.69 (m, 2 H), 2.03 (d, J=10.15 Hz, 2 H), 2.67 - 2.76 (m, 1 H), 3.01 (t, J=11.12 Hz, 2 H), 3.77 (d, J=12.90 Hz, 2 H), 3.91 (s, 2 H), 6.59 (s, 1 H), 7.29 (td, J=8.65, 3.02 Hz, 1 H), 7.37 (d, J=6.04 Hz, 1 H), 7.47 (dd, J=9.06, 4.67 Hz, 1 H), 7.57 (dd, J=8.37, 4.25 Hz, 1 H), 7.95 (dd, J=9.06, 3.02 Hz, 1 H), 8.26 (d, J=5.76 Hz, 1 H), 8.39 (d, J=7.96 Hz, 1 H), 8.99 (dd, J=4.39, 1.65 Hz, 1 H), 11.96 - 13.07 (m, 1 H).
Preparación de compuesto 188
El compuesto 188 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapas 1-2. Síntesis de 1-(6-metoxi-1,5-naftiridín-4-il)piperidín-4-amina:
Figure imgf000080_0001
Una mezcla de 8-bromo-2-metox¡-1,5-naftmd¡na (250 mg, 1 mmol), 4-(N-Boc-am¡no)p¡per¡dma (600 mg, 3 mmoles) y DIPEA (44 pl, 0.25 mmoles) en NMP (4 ml) se agitó a 90°C durante la noche. Se añadió DCM (20 ml) y la mezcla se lavó con sol. sat. de NaHCÜ3. Se eliminó el solvente al vacío y el material en bruto se purificó mediante columna de Si, eluyendo con Cy a acetato de etilo 100%. El producto se disolvió en DCM (20 ml); se añadió TFA (4 mL) y la mezcla se sometió a agitación a 40°C durante 1 h. Se evaporó el solvente al vacío y el residuo se purificó mediante columna de SCX, obteniendo 265 mg de 1-(6-metoxi-1,5-naftiridín-4-il)piperidín-4-amina. CL-Em (M-H+)=259.2.
Etapa 3. Síntesis de 8-fluoro-2-({[1-(6-metoxi-1,5-naftiridín-4-il)piperidín-4-il1amino}metil)[11benzopirano[3,4-b1pirrol-4(3H)-ona (compuesto 188):
Figure imgf000080_0002
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de compuesto 187, utilizando 1-(6-metoxi-1,5-naftiridín-4-il)piperidín-4-amina (Y= 23%). CL-EM (M-H+)=474.3.
RMN 1H (500 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 1.48 - 1.65 (m, 2 H), 2.04 (d, J=10.15 Hz, 2 H), 2.66 - 2.79 (m, 1 H), 3.00 (t, J=10.84 Hz, 2 H), 3.91 (s, 2 H), 3.97 (s, 3 H), 4.26 (d, J=12.35 Hz, 2 H), 6.59 (s, 1 H), 6.93 (d, J=5.49 Hz, 1 H), 7.16 (d, J=9.06 Hz, 1 H), 7.29 (td, J=8.65, 3.02 Hz, 1 H), 7.47 (dd, J=9.06, 4.67 Hz, 1 H), 7.95 (dd, J=9.06, 3.02 Hz, 1 H), 8.13 (d, J=8.78 Hz, 1 H), 8.43 (d, J=5.21 Hz, 1 H), 11.53 - 13.13 (m, 1 H).
Preparación de compuesto 192
El compuesto 192 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapas 1-2. Síntesis de 1-(3-fluoro-6-metoxi-1.5-naft¡r¡dín-4-¡l)p¡per¡dín-4-am¡na:
Figure imgf000081_0001
En un vial, se agrupó 8-bromo-7-fluoro-2-metoxi-1,5-naftiridíne (250 mg, 0.97 mmoles), N-(piperidín-4-il)carbamato de terc-butilo (194 mg, 0.97 mmoles), tris(dibencilidén-acetona)dipaladio (0) (53 mg, 0.06 mmoles), rac-BINAP (37 mg, 0.06 mmoles), Cs2CO3 (664 mg, 2.04 mmoles) y 18-Corona-6 (26 mg, 0.097mmoles) en dioxano (10 ml) y se enjuagaron con N2. El vial se calentó a 100°C bajo agitación rápida. Tras 12 h, se filtró la solución, se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía flash (gel de sílice, MeOH al 1% en DCM), proporcionando [1-(3-fluoro-6-metoxi-1,5-naftiridín-4-il)piperidín-4-il]carbamato de terc-butilo (309 mg, 0.82 mmoles, rendimiento: 82%) en forma de un sólido naranja, que se utilizó sin caracterización adicional. El compuesto se disolvió en DCM (20 ml) y se enfrió a 0°C. Se añadió TFA (3 ml) y la mezcla se sometió a agitación durante 1 h. Se eliminó el solvente y el residuo se disolvió en diclorometano/MeOH y se cargó en un cartucho de SCX que se eluyó con MeOH y después una solución 2 M de amonio en MeOH. Se evaporaron las fracciones básicas, proporcionando 1-(3-fluoro-6-metoxi-1,5-naftiridín-4-il)piperidín-4-amina (180 mg, 0.66 mmoles, rendimiento: 80%). CL-EM (M-H+)=277.3.
Etapa 3. Síntesis de 8-fluoro-2-({[1-(3-fluoro-6-metox¡-1.5-naft¡r¡dín-4-¡l)p¡per¡dín-4-¡l1am¡no}met¡l)[11benzop¡rano [3.4-b1p¡rrol-4(3H)-ona (compuesto 192):
Figure imgf000082_0001
El compuesto del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de compuesto 187. ut¡l¡zando 1-(3-fluoro-6-metox¡-1,5-naft¡r¡dín-4-¡l)p¡per¡dín-4-am¡na (Y=16%). CL-EM (M-H+)=492.1
RMN 1H (400 MHz, METANOL-d4) ó ppm 1.68 - 1.82 (m, 2 H), 2.12 (d, J=9.29 Hz, 2 H), 2.81 - 2.92 (m, 1 H), 3.37 (t. J=12.42 Hz. 2 H). 4.02 (s. 2 H). 4.04 - 4.08 (m. 3 H). 4.15 (d. J=11.80 Hz. 2 H). 6.73 (s. 1 H). 7.10 (d. J=9.03 Hz.
1 H). 7.22 (td. J=8.72. 2.89 Hz. 1 H). 7.44 (dd. J=8.70. 4.52 Hz. 1 H). 7.65 (dd. J=8.70. 2.90 Hz. 1 H). 8.08 (d. J=9.04 Hz. 1 H). 8.42 (d. J=4.77 Hz. 1 H).
Preparac¡ón de compuesto 195
El compuesto 195 se preparó tal como se ¡nd¡ca poster¡ormente en la presente memor¡a.
Etapa 1. Síntes¡s de {[(6-metox¡p¡r¡dín-3-¡l)am¡no1met¡l¡dén}propaned¡oato de d¡et¡lo:
Figure imgf000082_0002
Una soluc¡ón de 6-metox¡p¡r¡dín-3-am¡na (5 g. 40.3 mmoles) y eten-1.1.2-tr¡carbox¡lato de tr¡et¡lo (8.13 mL. 40.3 mmoles) en EtOH (50 ml) se somet¡ó a reflujo durante 3 h. Tras enfr¡ar la mezcla. se concentró al vacío. proporc¡onando {[(6-metox¡p¡r¡dín-3-¡l)am¡no]met¡l¡dén}propaned¡oato de d¡et¡lo en forma de un ace¡te rojo oscuro (12 g. cuant.). que se ut¡l¡zó s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. CL-EM (M-H+)=295.3.
Etapa 2. Síntesis de 6-metox¡-4-oxo-1.4-dih¡dro-1.5-naft¡r¡dín-3-carbox¡lato de etilo:
Figure imgf000083_0001
Se llevó Dowtherm® A (10 ml) a ebull¡c¡ón (250°C) en un matraz de 3 cuello de 50 ml dotado de cabeza de dest¡lac¡ón y un condensador de reflujo. Se añad¡ó en partes {[(6-metox¡p¡r¡dín-3-¡l)am¡no]met¡l¡dén}propanod¡oato de d¡et¡lo (2.1 g. 7.2 mmoles). La mezcla se somet¡ó a ebull¡c¡ón durante 15'; después. se enfr¡ó hasta la temperatura amb¡ente, se diluyó con Cy (15 ml) y se enfr¡ó a -20°C durante la noche. Se f¡ltró el prec¡p¡tado marrón y se lavó con Cy. obten¡endo un sól¡do marrón que se trituró con EtOAc. La suspens¡ón se f¡ltró, proporc¡onando 6-metox¡-4-oxo-1.4-d¡h¡dro-1.5-naft¡r¡dín-3-carbox¡lato de etilo en forma de un sól¡do gris (1.04 g.
4.2 mmoles. rend¡m¡ento: 58%). CL-EM (M-H+)=249.2.
Etapa 3. Síntes¡s de 4-bromo-6-metox¡-1.5-naft¡r¡dín-3-carbox¡lato de et¡lo:
Figure imgf000083_0002
Una suspens¡ón de 6-metox¡-4-oxo-1.4-d¡h¡dro-1.5-naft¡r¡dín-3-carbox¡lato de etilo (6.3 g. 25.4 mmoles) en DMF (20 ml) se sometió a agitación bajo N2 a temperatura ambiente. Se añadió gota a gota tribromuro de fósforo (2.5 ml. 26.7 mmoles) y la mezcla de reacción se sometió a agitación durante 30' adicionales. La mezcla se introdujo en un baño de hielo y se añadió agua (120 ml). seguido de sol. sat. de Na2CO3 hasta pH 7. El sólido se filtró al vacío. se lavó con agua y se secó al vacío. El producto en bruto se purificó mediante un cartucho de NH (eluyente de Cy 100% a Cy/EtoAc 95/5%). obteniendo 4-bromo-6-metoxi-1.5-naftir¡dín-3-carbox¡lato de etilo (6.6 g. 21 mmoles. rendimiento: 83%). CL-EM (M-H+)=311.1.
Etapa 4. Síntesis de ácido 4-bromo-6-metoxi-1.5-naft¡r¡dín-3-carboxíl¡co:
Figure imgf000083_0003
Una solución de 4-bromo-6-metoxi-1.5-naftir¡dín-3-carbox¡lato de etilo (500 mg. 1.6 mmoles) en THF (4.5 ml) y agua (1.5 ml) se trató con LOH.H2O (201 mg. 4.8 mmoles). La mezcla se sometió a agitación a temperatura amb¡ente durante 4 h segu¡do de concentrac¡ón. El res¡duo se d¡solv¡ó en agua (5 ml) y se ajustó a pH 4 con HCl 1 N. proporcionando un precipitado. que se filtró y se lavó con agua fría. obteniendo ácido 4-bromo-6-metox¡-1.5-naftiridín-3-carboxílico (409 mg. 1.45 mmoles. rendimiento: 90%) en forma de un sólido blanco. CL-EM (M-H+)=283.1.
Etapa 5. Síntesis de 4-cloro-6-metoxi-1.5-naft¡r¡dín-3-carboxam¡da:
Figure imgf000083_0004
A una solución de ácido 4-bromo-6-metoxi-1.5-naftir¡dín-3-carboxíl¡co (350 mg. 1.24 mmoles) en DCM seco (5 ml). se le añadió SOCh (136 pl. 1.86 mmoles) y la mezcla de reacción se sometió a agitación durante 3 h a temperatura ambiente. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en solución 0.5 M de amonio en dioxano (7.4 ml. 3.7 mmoles). La mezcla de reacción se sometió a agitación durante 1 h; después. se concentró y el producto en bruto 4-cloro-6-metoxi-1,5-naftiridín-3-carboxamida (0.6 g) se trató adicionalmente hasta la etapa siguiente sin purificación adicional. CL-EM (M-H+)=238.2.
Etapa 6. Síntesis de 4-cloro-6-metoxi-1.5-naft¡r¡dín-3-carboxam¡da:
Figure imgf000084_0001
A una suspensión de 4-cloro-6-metoxi-1,5-naftiridín-3-carboxamida (en bruto. 0.6 g. 2.5 mmoles) en THF (15 ml). se le añadió reactivo de Burgess (1.2 g. 5.0 mmoles) y la mezcla se sometió a agitación a temperatura ambiente durante 1 h. Se eliminó el solvente al vacío y el residuo se purificó con una columna de cromatografía SNAP-25. eluyendo con DCM. para proporcionar 190 mg (0.87 mmoles. rendimiento: 35%) de 4-cloro-6-metoxi-1.5-naftiridín-3-carbonitrilo. CL-EM (M-H+)=220.2.
Etapa 7. Síntesis de [1-(3-ciano-6-metoxi-1.5-naftiridín-4-il)piperidín-4-il]carbamato de terc-butilo:
Figure imgf000084_0002
El intermedio del título se preparó siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de [1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperidín-4-il]carbamato de terc-butilo (ver el compuesto 145). utilizando 4-cloro-6-metoxi-1.5-naftiridín-3-carbonitrilo. Y=92%. CL-EM (M-H+)=384.4.
Etapa 8. Síntesis de 4-(4-aminopiperidín-1-il)-6-metoxi-1.5-naftiridín-3-carbonitrilo:
Figure imgf000084_0003
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de 1-(7-fluoroisoquinolín-1-il)piperidín-4-amina (ver el compuesto 145). utilizando [1-(3-ciano-6-metoxi-1.5-naftiridín-4-il)piperidín-4-il]carbamato de terc-butilo. Y=88%. CL-EM (M-H+)=284.3.
Etapa 9. Síntesis de 4-(4-([(8-fluoro-4-oxo-3.4-d¡h¡dro[11 benzop¡rano[3.4-b1p¡rrol-2-¡l)met¡l1am¡no}p¡per¡dín-1-¡l)-6-metox¡-1.5-naft¡r¡dín-3-carbonitr¡lo (compuesto 195):
Figure imgf000085_0001
El compuesto del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de Compuesto 187. ut¡l¡zando 4-(4-am¡nop¡per¡dín-1-¡l)-6-metox¡-1.5-naft¡r¡dín-3-carbon¡tr¡lo (Y = 35%). CL-EM (M-H+)=499.4.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó ppm 1.54 - 1.72 (m, 2 H), 2.02 - 2.14 (m, 2 H), 2.63 (br. s., 1 H), 2.75 - 2.87 (m, 1 H). 3.52 (t. J=11.07 Hz. 2 H). 3.92 (s. 2 H). 3.96 (s. 3 H). 4.32 (d. J=11.10 Hz. 2 H). 6.60 (s. 1 H). 7.22 - 7.35 (m. 2 H). 7.47 (dd. J=9.15. 4.66 Hz. 1 H). 7.95 (dd. J=9.10. 2.96 Hz. 1 H). 8.17 (d. J=8.99 Hz. 1 H). 8.57 (s. 1 H). 12.50 (br. s.. 1 H).
Preparac¡ón de compuesto 196
El compuesto 196 se preparó tal como se ¡nd¡ca poster¡ormente en la presente memor¡a.
Etapa 1. Síntes¡s de 5-clorop¡r¡do[3.4-b1p¡raz¡na:
Figure imgf000085_0002
Una mezcla de 2-clorop¡r¡dín-3.4-d¡am¡na (1 g. 6.96 mmoles) y soluc¡ón de etanod¡al (al 40% en peso en agua. 3.2 ml. 27.84 mmoles) en etanol (20 ml) se somet¡ó a reflujo durante 2 horas y después se somet¡ó a reflujo durante 2 horas; después. se enfr¡ó hasta la temperatura amb¡ente. El prec¡p¡tado se f¡ltró. se lavó con EtOH y se secó al vacío. proporc¡onando 5-clorop¡r¡do[3.4-b1p¡raz¡na (0.3 g. 1.8 mmoles. rend¡m¡ento: 26%). que se trató ad¡c¡onalmente s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. c L-EM (M-H+)=166.1.
Etapa 2. Síntesis de [1-(p¡r¡do[3.4-b1p¡razín-5-¡l)p¡per¡dín-4-¡l1carbamato de terc-butilo:
Figure imgf000086_0001
El ¡ntermed¡o del titulo se preparo s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la sintes¡s de [ [1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-¡l1carbamato de terc-butilo (ver el compuesto 145). ut¡l¡zando 5-clorop¡r¡do[3,4-b]p¡raz¡na. Y=69%. CL-EM (M-H+)=330.4.
Etapa 3. Síntes¡s de 1-(p¡r¡do[3.4-b1p¡razín-5-¡l)p¡per¡dín-4-am¡na:
Figure imgf000086_0002
El compuesto del título se preparo s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de 1-(7-fluoro¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡per¡dín-4-am¡na (ver el compuesto 145). ut¡l¡zando [1-(p¡r¡do[3.4-b1p¡razín-5-¡l)p¡per¡dín-4-¡l]carbamato de tercbutilo. Y=98%. CL-EM (M-H+)=230.3.
Etapa 4. Síntes¡s de 8-fluoro-2-({[1-(p¡r¡do[3.4-b1p¡razín-5-¡l)p¡per¡dín-4-¡l1am¡no}met¡l)[11benzop¡rano[3.4-b1p¡rrol-4(3H)-ona (sal formato. compuesto 196):
Figure imgf000086_0003
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de compuesto 187, utilizando 1-(pirido[3,4-b]pirazín-5-il)piperidín-4-amina (Y=37%). CL-EM (M-H+)=445.4.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó ppm 1.42 - 1.61 (m, 2 H), 2.02 (d, J=10.30 Hz, 2 H), 2.76 - 2.91 (m, 1 H), 3.22 (t, J=11.46 Hz, 2 H), 3.96 (s, 2 H), 4.80 (d, J=11.50 Hz, 2 H), 6.62 (s, 1 H), 7.20 (d, J=5.70 Hz, 1 H), 7.29 (td, J=8.74, 3.01 Hz, 1 H), 7.47 (dd, J=9.10, 4.60 Hz, 1 H), 7.95 (dd, J=9.10, 2.96 Hz, 1 H), 8.24 (d, J=5.70 Hz, 1 H), 8.83 (d, J=1.75 Hz, 1 H), 8.98 (d, J=1.75 Hz, 1 H).
Preparación de compuesto 199
El compuesto 199 se preparó tal como se indica posteriormente en la presente memoria.
Etapa 1. Síntesis de 5-clorop¡r¡do[3,4-b1p¡razín-3(4H)-ona:
Figure imgf000087_0001
Una mezcla de 2-cloropiridín-3,4-diamina (1 g, 6.96 mmol) y solución de ácido glioxílico (al 50% en peso en H2O, 0.92 ml, 8.35 mmoles) en MeOH (20 ml) se calentó en un vial a 50°C durante la noche. La mezcla se enfrió hasta la temperatura ambiente y se eliminó el solvente al vacío. El residuo se trituró con Et2O y se filtró la suspensión. El producto en bruto se purificó mediante columna de cromatografía C-18 (de 100% agua ácido fórmico al 0.1% a 80/20 agua ácido fórmico al 0.1% / MeCN ácido fórmico al 0.1%), proporcionando 5-cloropirido[3,4-b1pirazín-3(4H)-ona (255 mg, 1.4 mmoles, rendimiento: 20%). CL-EM (M-H+)=182.1.
Etapa 2. Síntesis de 3.5-d¡clorop¡r¡do[3.4-b1p¡raz¡na:
Figure imgf000087_0002
Una mezcla de 5-cloropirido[3,4-b1pirazín-3(4H)-ona (200 mg, 1.1 mmoles) y oxicloruro de fósforo (6 ml) se sometió a reflujo durante 2 horas. Tras el enfriamiento, el solvente se redujo al vacío. La mezcla de reacción se vertió cuidadosamente en hielo y se neutralizó con una solución saturada de Na2CO3. Se añadió DCM; se lavó la fase orgánica con solución hipersalina, se secó sobre sulfato sódico y se concentró. El material en bruto se purificó mediante cromatografía de NH (de 100% DCM a 80/20 DCM/EtOAc), obteniendo 3,5-dicloropirido[3,4-b1pirazina (200 mg, 1 mmol, rendimiento: 91%). CL-EM (M-H+)=200.1.
Etapa 3. Síntesis de 5-cloro-3-metox¡p¡r¡do[3.4-b]p¡raz¡na:
Figure imgf000088_0001
A una solución de 3,5-diclorop¡r¡do[3,4-b]p¡razina (200 mg. 1 mmol) en DMF (3 ml). se le añadió metóxido sódico (solución 0.5 M en MeOH. 2.2 ml. 1.1 mmoles) y la reacción se sometió a agitación a temperatura ambiente durante 10 minutos. La solución se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. Se secó la capa orgánica sobre sulfato sódico. se filtró y se concentró. proporcionando 5-cloro-3-metoxip¡r¡do[3.4-b]p¡raz¡na (150 mg. 0.77 mmol. rendimiento: 77%). CL-EM (M-H+)=196.1.
Etapa 4. Síntesis de [1-(3-metox¡p¡r¡do[3.4-b1p¡razín-5-il)p¡per¡dín-4-¡l1carbamato de terc-butilo:
Figure imgf000088_0002
Se suspendió 5-cloro-3-metoxip¡r¡do[3.4-b]p¡raz¡na (100 mg. 0.55 mmoles) y 4-(W-Boc-amino)piper¡d¡na (332 mg.
1.66 mmoles) en isopropanol (5 ml) y se agitaron bajo reflujo durante 2 horas. La solución de reacción se concentró y se purificó mediante cromatografía de NH (de 100% DCM a 95/5 DCM/MeOH). obteniendo [1-(3-metoxipirido[3.4-b]p¡razín-5-¡l)p¡per¡dín-4-il]carbamato de terc-butilo (170 mg. 0.47 mmoles. rendimiento: 85%). CL-EM (M-H+)=360.4.
Etapa 5. Síntesis de 1-(3-metox¡p¡r¡do[3.4-b1p¡razín-5-¡l)p¡per¡dín-4-am¡na:
Figure imgf000088_0003
El compuesto del título se preparó siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de 1-(7-fluoroisoquinolín-1-¡l)piperidín-4-am¡na (ver el compuesto 145). ut¡l¡zando[1-(3-metox¡p¡r¡do[3,4-b]p¡razín-5-¡l)p¡per¡dín-4-¡l]carbamato de terc-butilo. Y=91%. CL-EM (M-H+)=260.3.
Etapa 6. Síntesis de 8-fluoro-2-({[1-(3-metox¡p¡r¡do[3.4-b1p¡razín-5-¡l)p¡per¡dín-4-¡l1am¡no}met¡l)[11benzop¡rano[3.4-b1p¡rrol-4(3H)-ona (sal formato, compuesto 199):
Figure imgf000089_0001
El compuesto del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de compuesto 187. ut¡l¡zando 1-(3-metox¡p¡r¡do[3,4-b]p¡razín-5-¡l)p¡per¡dín-4-am¡na (Y=44%). CL-EM (M-H+)=475.2.
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó ppm 1.35 - 1.53 (m, 2 H), 1.89 - 2.02 (m, 2 H), 2.69 - 2.84 (m, 1 H), 3.11 (t, J=11.35 Hz. 2 H). 3.90 (s. 2 H). 3.99 (s. 3 H). 4.60 - 4.71 (m. 2 H). 6.57 (s. 1 H). 6.98 (d. J=5.67 Hz. 1 H). 7.26 (td. J=8.75, 3.03 Hz. 1 H). 7.44 (dd. J=9.10. 4.60 Hz. 1 H). 7.92 (dd. J=9.10. 3.03 Hz. 1 H). 8.13 (d. J=5.48 Hz. 1 H). 8.15 (s. 1 H). 8.42 (s. 1 H). 12.68 (br. s.. 1 H).
Preparac¡ón de compuesto 203
El compuesto 203 se preparó tal como se ¡nd¡ca poster¡ormente en la presente memor¡a.
Etapa 1. Síntes¡s de 1-bromo-7-metox¡¡soqu¡nolín-3-am¡na:
Figure imgf000089_0002
El ¡ntermed¡o del título se preparó s¡gu¡endo el proced¡m¡ento ¡nd¡cado para la síntes¡s de 2-(c¡anomet¡l)-5-fluorobenzon¡tr¡lo (ver el compuesto 149). ut¡l¡zando 2-(c¡anomet¡l)-5-metox¡benzon¡tr¡lo (Y=17%). CL-EM m/z: 253.0 (M+1). RMN 1H (300 MHz, DMSO-d6) ó ppm 7.55 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 7.22 (dd, J = 9.0, 2.5 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 2.5 Hz. 1H). 6.64 (s. 1H). 6.05 (s. 2H). 3.85 (s. 3H).
Etapa 2 - Síntesis de 1-bromo-3-fluoro-7-metoxi-¡soau¡nol¡na:
Figure imgf000090_0001
El intermedio del titulo se preparo siguiendo el procedimiento indicado para la síntesis de 1-bromo-3,7-difluoroisoquinolina (ver el compuesto 149), utilizando 1-bromo-7-metox¡¡soqu¡nolín-3-am¡na (Y=66%). CL-EM m/z: 256,0 (M+1). RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 8.01 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.58 (dd, J = 9.3, 2.2 Hz, 1H), 7.43 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H).
Etapa 3 - Síntesis de 6-fluoro-4-({3-[4-(3-fluoro-7-metox¡¡soau¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡ll-2-h¡drox¡prop¡l}am¡no)-2H-1-benzopirán-2-ona (compuesto 203):
Figure imgf000090_0002
Se anadio W,W-D-isopropiletilamina (1.7 mL, 9.57 mmoles) a una suspensión bajo agitación de 1-bromo-3-fluoro-7-metoxiisoquinolina (490 mg, 1.91 mmoles) e hidrocloruro de 6-fluoro-4-{[2-h¡drox¡-3-(p¡perazín-1-¡l)prop¡l]am¡no}-2H-1-benzop¡rán-2-ona (preparada tal como en la síntesis de compuesto 166, 754 mg, 1.91 mmoles) en DMSO (15 ml). La mezcla resultante se agitó a 100°C durante 18 h; después, se enfrió, se vertió en agua (25 ml) y se extrajo con éter dietílico (3 x 25 ml) y con DCM (20 ml). Las capas orgánicas agrupadas se secaron sobre sulfato de magnesio, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se adsorbió en gel de sílice y se purificó mediante cromatografía flash (DCM/MeOH/NH3), proporcionando 6-fluoro-4-({3-[4-(3-fluoro-7-metox¡¡soqu¡nolín-1-¡l)p¡perazín-1-¡l]-2-h¡drox¡prop¡l}am¡no)-2H-1-benzop¡rán-2-ona (375 mg, rendimiento: 39%) en forma de un sólido de color beige. CL-EM m/z: 497.1 (M+1).
RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6 ppm 8.02 (dd, J = 10.0, 2.9 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.71 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 7.52 - 7.43 (m, 1H), 7.42 - 7.33 (m, 2H), 7.28 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.01 (s, 1H), 5.34 (s, 1H), 4.99 (d, J = 4.8 Hz, 1H), 4.03 - 3.92 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.48 - 3.35 (m, 5H), 3.29 - 3.18 (m, 1H), 2.83 - 2.68 (m, 4H).
Preparación de compuesto 89
Se preparó el compuesto 89 tal como se indica posteriormente en la presente memoria, siguiendo la ruta sintética R.
Figure imgf000091_0001
Etapa 1
Una mezcla de carbonato potásico (634 mg, 4.6 mmoles, 1.5 eq.), 1-cloroisoquinolina (500 mg, 3.1 mmoles, 1 eq.) y piperazín-2-carboxilato de metilo (880 mg, 6.1 mmoles, 2 eq.) en DMSO (4 ml) se calentó a 120°C bajo radiación de microondas durante 5 horas. Se dejó que la reacción se enfriase hasta la temperatura ambiente. Se filtró el sólido, se lavó con agua y después se secó bajo presión reducida, proporcionando 4-(isoquinolín-1-il)piperazín-2-carboxilato de metilo, compuesto intermedio R1 (Y=81%).
Etapa 2
Se añadió NaH (dispersión al 60% en aceite mineral, 81 mg, 2 mmoles, 1.1 eq.) y N-(3-bromopropil)carbamato de terc-butilo (330 mg, 1.4 mmoles, 0.75 eq.) a una solución bajo agitación del compuesto intermedio R1 (488 mg, 1.8 mmoles, 1 eq.) en DMF anhidro (6 ml). La mezcla se sometió a agitación durante 4 horas; después, se desactivó con agua y se extrajo con acetato de etilo. Se secó la fase orgánica sobre sulfato sódico y se cromatografió en sílice, eluyendo con un gradiente de EtOAc al 50-100% en éter de petróleo, proporcionando el compuesto intermedio 1-{3-[(terc-butoxicarbonil)amino]propil}-4-(isoquinolín-1-il)piperazín-2-carboxilato de metilo R2 (Y=51%).
Etapa 3
A una solución de compuesto intermedio R2 (130 mg, 0.3 mmoles, 1 eq.) en THF/agua 9:1 (10 ml), se le añadió LiOH (13 mg, 0.33 mmoles, 1.1 eq.). La mezcla se sometió a agitación a 60°C durante 5 horas; después, se concentró bajo presión reducida. El material en bruto se disolvió en DMF (2 ml), se añadió TEA (62 pl, 0.45 mmoles, 1.5 eq.), seguido de hexametildisilazane (72.4 mg, 0.45 mmoles, 1.5 eq.). La mezcla se enfrió a 0°C y se añadió HATU (137mg, 0.36 mmoles, 1.2 eq.). Tras agitar durante 3 h a t.a., se evaporó el solvente al vacío, el residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con solución hipersalina. Se separó la fase orgánica, se secó y se evaporó al vacío. El material en bruto se purificó mediante columna de Si, eluyendo con acetato de etilo a acetato de etilo/MeOH 95:5, obteniendo 90 mg de {3-[2-carbamoil-4-(isoquinolín-1-il)piperazín-1-il]propil}carbamato de tercbutilo, compuesto intermedio R3 (Y=58%). CL-EM (M-H+)=414.4.
Etapa 4
Se añadió TFA (1 ml) a una solución de compuesto intermedio R3 (78 mg, 0.2 mmoles, 1 eq.) en diclorometano (3 ml) a temperatura ambiente y la mezcla resultante se agitó durante 60 minutos. Se evaporaron los volátiles bajo presión reducida; después, el residuo se disolvió en MeOH (2 ml) y se cargó en un cartucho de SCX preacondicionado (1 g). Se eluyó el SCX con MEOH y después con una solución 2 M de amonio en metanol. Se evaporaron las fracciones básicas bajo presión reducida, proporcionando 56 mg de 1-(3-aminopropil)-4-(isoquinolín-1-il)piperazín-2-carboxamida, compuesto intermedio r 4 (Y=cuant.). CL-EM (M-H+)=314.2.
Etapa 5
Una solución de compuesto intermedio R4 (56 mg, 0.2 mmoles, 1.1 eq.), trietilamina (37 pl, 0.27 mmoles, 1.5 eq.) y trifluorometanosulfonato de 2-oxo-2H-cromén-4-ilo, compuesto intermedio A1 (53 mg, 0.18 mmoles, 1 eq.) en acetonitrilo (2 ml) se calentó a 70°C durante 1 hora. La mezcla de reacción se concentró bajo presión reducida y el residuo se repartió entre diclorometano (10 ml) y una mezcla de solución hipersalina/bicarbonato sódico (1:1, 10 ml). La mezcla se filtró a través de una frita hidrófoba (separador de fases), lavando con diclorometano (10 ml). La fase orgánica se evaporó bajo presión reducida y el residuo se cromatografió en gel de sílice modificado con NH (2x SNAP 11 en serie), eluyendo con un gradiente de EtOAc al 20-100% en ciclohexano, proporcionando 79 mg de una goma pegajosa incolora. El producto se disolvió en diclorometano (3 ml) y se trató con solución 1 M de HCl en éter dietílico (0.46 ml), causando la precipitación. La mezcla resultante se evaporó bajo presión reducida y el residuo se trituró con éter dietílico. Se secaron los sólidos, proporcionando hidrocloruro de 4-(isoquinolín-1-il)-1-{3-[(2-oxo-2H-cromén-4-il)amino]propil}piperazín-2-carboxamida (compuesto 89) (Y=25%). CL-EM (M-H+)=458.4.
Compuesto 89 : RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) ó 10.23 (br. s., 1H), 8.38 (br. s., 1H), 8.19 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.15 (d, J=5.8 Hz, 1H), 8.05 (d, J=7.3 Hz, 1H), 7.99 (br. s., 1H), 7.96 (d, J=8.3 Hz, 1H), 7.83 (t, J=5.8 Hz, 1H), 7.78 (t, J=7.4 Hz, 1H), 7.70 - 7.64 (m, 1H), 7.64 - 7.58 (m, 1H), 7.54 (d, J=5.8 Hz, 1H), 7.39 - 7.29 (m, 2H), 5.29 (s, 1H), 4.49 - 3.82 (m, 4H), 3.75 - 3.53 (m, 2H), 3.48 - 3.19 (m, 6H), 2.24 - 1.93 (m, 2H).
Ensayos biológicos
Ejemplo 1
Inhibición de ADN girasa y Topo IV en E.coli y S. aureus
Los compuestos anteriormente indicados se sometieron a ensayo para la inhibición del enzima ADN girasa en un ensayo de superenrollamiento de girasa y para la inhibición del enzima topoisomerasa IV en un ensayo de desconcatenación, tanto en bacterias Gram-positivas como Gram-negativas, siguiendo los métodos siguientes.
Ambos ensayos se llevaron a cabo según un método de configuración modificado del artículo de Blanche F, et al. "Differential Behaviors of Staphylococcus aureus and Escherichia coli Type II DNA Topoisomerases", Antimicrob. Agents Chemother., vol. 40, n° 12 p. 2714-2720, 1996.
Los compuestos se cribaron a una única concentración (200, 100 o 50 pM), por duplicado.
Se utilizó ciprofloxacino y novobiocina como compuestos de referencia, a una concentración única de 200 y 50 pM, respectivamente.
Ensayo de superenrrollamiento de ADN girasa.
Se utilizaron los reactivos de los kits de ensayo de superenrollamiento de girasa de S. aureus y E. coli (Inspiralis, Reino Unido). Se preparó una mezcla maestra con un volumen total suficiente para el número de reacciones a realizar, con los reactivos siguientes: Tampón de ensayo 5x, sustrato de pBR322 relajado (0.5 pg/reacción), agua libre de ARNasa-ADNasa. Se dispensaron alícuotas de dicha mezcla en cada tubo; después, se añadieron soluciones madre de compuesto 10x o de control de vehículo (DMSO) a cada tubo de reacción.
Se inició la reacción con la adición de enzima de girasa de E.coli (2 U/reacción) o de S.aureus (1 U/reacción).
Se utilizó una muestra añadida a un volumen igual de tampón de dilución a modo de control negativo (sin enzima).
Los tubos de reacción se sometieron a agitación suave con vórtex y se incubaron durante 30 minutos a 37°C. Cada reacción se detuvo mediante la adición de 30 pl de tampón de parada y 30 pl de cloroformo/alcohol isoamílico (24/1), se agitó brevemente con vórtex durante 5 a 10 segundos y se centrifugó a 20000xg durante 2 minutos. Las muestras se cargaron en un gel de agarosa al 1% y se sometieron a electroforesis durante 1 hora a 80 V de voltaje constante en TAE (Tris-acetato 40 mM, EDTA 2 mM).
Adquisición y análisis de datos. El tratamiento de pBR322 relajado con ADN girasa convirtió los topoisómeros relajados (a Dn de diferente número de enlace) a la forma superenrollada del plásmido, que migra más rápido en un gel de agarosa. Una banda superior también puede ser visible, que consiste en ADN abierto circular (con muesca) que se encuentra presente en el sustrato relajado, aunque comigra con algunos de los topoisómeros relajados.
Las bandas se visualizaron mediante tinción con bromuro de etidio (dilución 1:20000) durante 30 minutos, seguido de desteñido en agua destilada durante 10 minutos.
A fin de evaluar la actividad de los compuestos sobre el enzima, las bandas de ADN superenrollado en el gel se fotografiaron mediante un sistema digital de obtención de imágenes, ImageQuant LAS 4000 (GE Healthcare) siguiendo las instrucciones del fabricante.
La intensidad de la fluorescencia de cada banda se analizó con el software ImageQuant TL y se expresó en volumen (volumen de la cantidad no calibrada de material en el elemento de imagen tras la resta de la intensidad de fondo mediante la utilización del método de bola rodante).
Se comparó la intensidad de cada banda, en porcentaje, con la intensidad de la banda de muestra de vehículo, que sirvió de control positivo, en el mismo gel.
Se expresó la actividad inhibitoria como porcentaje de inhibición frente al control positivo.
Los resultados se resumen en la tabla 2, posteriormente.
Ensayo de desconcatenación de topoisomerasa IV
Se utilizaron los kits de desconcatenación de topoisomerasa IV de S.aureus y E.coli (Inspiralis, Reino Unido). Se preparó una mezcla maestra con un volumen total suficiente para el número de reacciones que se deben realizar, con los reactivos siguientes: Tampón de ensayo 5x (HEPES-KOH 50 mM (pH 7.6), glutamato potásico 100 mM, acetato de magnesio 10 mM, DTT 10 mM, ATP 1 mM, 50 pg/ml de albúmina), sustrato de ADNk (200 ng/reacción), agua libre de ARNasa-ADNasa. Se dispensaron alícuotas de dicha mezcla en cada tubo; después, se añadieron soluciones madre de compuesto 10x o de control de vehículo (DMSO) a cada tubo de reacción.
Se inició la reacción mediante la adición de enzima topoisomerasa IV (0.5 U/reacción).
Se utilizó una muestra añadida a un volumen igual de tampón de dilución a modo de control negativo (sin enzima). Los tubos de reacción se sometieron a agitación suave con vórtex y se incubaron durante 30 minutos a 37°C. Cada reacción se detuvo mediante la adición de 30 pl de tampón de parada y 30 pl de cloroformo/alcohol isoamílico (24/1), se agitó brevemente con vórtex durante 5 a 10 segundos y se centrifugó a 20000xg durante 2 minutos. Las muestras obtenidas de la fase superior se cargaron en gel de agarosa al 1% y se sometieron a electroforesis durante 1 hora a 80 V de voltaje constante en TAE (Tris-acetato 40 mM, EDTA 2 mM).
Adquisición y análisis de datos. Debido a la elevada masa molecular, el ADNk no pudo entrar en el gel de agarosa bajo las condiciones de electroforesis normales, aunque permaneció en los pocillos. En presencia de topoisomerasa Topo IV, se liberaron minicírculos (2.5 Kb) a partir del ADNk por desconcatenación y se resolvieron rápida y fácilmente en el gel a voltajes relativamente elevados.
Las bandas se visualizaron mediante tinción con bromuro de etidio (dilución 1:20000) durante 30 minutos, seguido de desteñido en agua destilada durante 10 minutos.
Para el ensayo de cribado de una única concentración, a fin de evaluar la actividad de los compuestos sobre los enzimas, las bandas de ADN desconcatenado en el gel se fotografiaron con un sistema digital de obtención de imágenes ImageQuant LAS 4000 (GE Healthcare) siguiendo las instrucciones del fabricante.
La intensidad de la fluorescencia de cada banda se analizó con el software ImageQuant TL y se expresó en volumen (volumen de la cantidad no calibrada de material en el elemento de imagen tras la resta de la intensidad de fondo mediante la utilización del método de bola rodante).
Se comparó la intensidad de cada banda, en porcentaje, con la intensidad de la banda de muestra de vehículo, que sirvió de control positivo, en el mismo gel.
Se expresó la actividad inhibitoria como porcentaje de inhibición frente al control positivo.
Los resultados se resumen en la tabla 2, a continuación, en la que los compuestos marcados con un asterisco no forman parte de la invención.
Tabla 2
Figure imgf000094_0001
Figure imgf000095_0001
Los resultados anteriores demuestran que los compuestos ejemplificados inhiben eficazmente tanto la ADN girasa como la Topo IV de E. coli, que es una bacteria Gram-positiva, y/o S. aureus, que es una bacteria Gram-negativa.
Ejemplo 2
Determinación de la IC50
Los compuestos que en el Ejemplo 1 anterior mostraban una actividad inhibitoria superior al valor de corte seleccionado (es decir, una inhibición mínima de 50% a una única concentración) se sometieron a ensayo adicional en una curva de concentración-respuesta (ocho concentraciones semilogarítmicas comprendidas entre 0.1 y 300 pM) a fin de determinar la IC50.
Las bandas de ADN superenrolladas o desconcatenadas obtenidas tal como se indica en el Ejemplo 1 se analizaron de la manera siguiente.
Las bandas se analizaron con equipos de documentación de gel (Syngene, Cambridge, Reino Unido) y se cuantificaron utilizando software Gene Tools de Syngene. Los datos de geles en bruto (volúmenes de banda fluorescente) recogidos del software de análisis de geles GeneTools de Syngene se convirtieron en porcentaje respecto al 100% del control (la banda de ADN totalmente superenrollada o desconcatenada). Se analizaron dichos datos utilizando SigmaPlot versión 12.3 (2013). Se calcularon los datos de IC50 mediante la utilización de la herramienta de regresión no lineal de ajuste global de la curva mediante la selección de la función única de ajuste de 2 parámetros de la categoría de ecuación de degradación exponencial.
Se informa de los resultados en la Tabla 3, a continuación, en la que los compuestos marcados con un asterisco no forman parte de la invención.
Tabla 3
Figure imgf000095_0002
Figure imgf000096_0001

Claims (14)

REIVINDICACIONES
1. Compuesto de fórmula (I):
Figure imgf000097_0001
en el que
G1 y G2, idénticos o diferentes entre sí, son CH o N, con la condición de que por lo menos uno de G1 y G2 sea N;
R1 es átomo de hidrógeno, átomo de halógeno, OH, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3), alquil (C1-3)-OH, -COOR' o -CONR'R", en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3); L1 es un enlace o, -CH2-, -O- o -NH-;
Y es grupo alquilenilo (C1-6), grupo -NH-alquilenilo (C1-6) o grupo cicloalquilenilo (C4-5), estando dicho grupo sustituido opcionalmente con un grupo hidroxi o un grupo amino o un grupo formamido-(NH-CHO);
L2 es un enlace o, -NH- o -NH-(alquMenMo C1-6)-;
A es un grupo bicíclico fusionado que presenta la fórmula (III):
Figure imgf000097_0002
en el que
G3 es N o C(R'), en el que R' es H o alquilo (C1-3);
G4, G5 y G6, idénticos o diferentes entre sí, son CH, CF, C-CN o N,
R2 es átomo de hidrógeno, átomo de halógeno, hidroxi, ciano, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3), CF3, OCF3 o NR'R", en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3); y R3 es átomo de hidrógeno, átomo de halógeno, hidroxi, ciano, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3), trifluorometilo o NR'R", en el que R' y R" son átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3);
y
B es un grupo bicíclico fusionado que presenta la fórmula (V) siguiente, o un grupo tricíclico fusionado que presenta la fórmula (VII) siguiente:
Figure imgf000098_0001
en el que
Pi es N o CR', en el que R' es H, CN o CF3;
n es 0 o 1; y
R6 es átomo de hidrógeno, átomo de halógeno, CF3, hidroxi o NR'R",
en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3);
y sales de adición con ácidos o bases orgánicos/as o inorgánicos/as farmacéuticamente aceptables, enantiómeros, N-óxidos y sales de amonio cuaternario de dicho compuesto de fórmula (I).
2. Compuesto según la reivindicación 1, en el que A es un anillo bicíclico fusionado que presenta una de las fórmulas siguientes:
Figure imgf000099_0001
en el que
R' es H o alquilo (C1-3)
R2 es átomo de hidrógeno, átomo de halógeno, hidroxi, ciano, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3), OCF3 o NR'R", en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3); y
R3 es átomo de hidrógeno, átomo de halógeno, hidroxi, ciano, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3), trifluorometilo o NR'R", en el que R' y R" son átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3).
3. Compuesto según la reivindicación 1, en el que B es un grupo bicíclico o tricíclico fusionado que presenta una de las fórmulas siguientes:
Figure imgf000099_0002
en el que R6 es átomo de hidrógeno, átomo de halógeno, CF3, hidroxi o NR'R", en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3).
4. Compuesto según la reivindicación 1, en el que G3 es N, CH o C(CH3).
5. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones anteriores 1 a 4, en el que R3 es átomo de hidrógeno, átomo de halógeno, ciano, alquilo (C1-3) o NR'R", en el que R' y R" son átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3).
6. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones anteriores 1 a 4, en el que R3 es átomo de hidrógeno, F, Cl, ciano, CH3, NH2 o N(CH3)2.
7. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones anteriores 1 a 4, en el que dicho R1 es átomo de hidrógeno, átomo de flúor, átomo de cloro, OH, alquilo (C1-3)-OH, -COOR' o -CON(R')(R"), en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomo de hidrógeno o alquilo (C1-3).
8. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones anteriores 1 a 4, en el que R2 es átomo de hidrógeno, átomo de halógeno, ciano, alquilo (C1-3), alcoxi (C1-3), o NR'R", en el que R' y R", idénticos o diferentes entre sí, son átomos de hidrógeno o alquilo (C1-3).
9. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones anteriores 1 a 4, en el que dicho Y es un grupo alquilenilo (C1-4), un grupo -NH-alquilenilo (C1-4) o un grupo cicloalquilenilo (C4-5), estando dicho grupo sustituido opcionalmente con un grupo hidroxi o un grupo amino.
10. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones anteriores 1 a 4, en el que dicho R6 es un átomo de hidrógeno o un átomo de halógeno.
11. Composición farmacéutica que comprende por lo menos un compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones anteriores 1 a 10, una sal del mismo con un ácido o una base orgánico/a o inorgánico/a farmacéuticamente aceptable, o un enantiómero del mismo, o una sal de amonio cuaternario del mismo, o un N-óxido del mismo, y por lo menos un excipiente farmacéuticamente aceptable inerte.
12. Compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, para la utilización en medicina.
13. Compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones anteriores 1 a 10, para la utilización en el tratamiento de infecciones bacterianas.
14. Compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones anteriores 1 a 10 para la utilización según la reivindicación 13, en el que dichas infecciones bacterianas se seleccionan de entre el grupo que consiste en una infección de la piel, una infección mucosa, una infección ginecológica, una infección de las vías respiratorias (RTI), una infección del SNC, una infección gastrointestinal, una infección ósea, una infección cardiovascular, una infección de transmisión sexual o una infección de las vías urinarias.
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Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MA41168A (fr) * 2014-12-17 2017-10-24 Acraf Nouveaux composés antibactériens
MY196319A (en) 2015-12-17 2023-03-24 Merck Patent Gmbh Polycyclic TLR7/8 Antagonists and use Thereof in the Treatment of Immune Disorders
EP3468975B1 (en) * 2016-06-08 2020-04-01 Aziende Chimiche Riunite Angelini Francesco A.C.R. New antibacterial compounds
SG11201900947RA (en) 2016-08-08 2019-02-27 Merck Patent Gmbh Tlr7/8 antagonists and uses thereof
TWI673271B (zh) 2016-12-15 2019-10-01 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 製備btk抑制劑之方法
CN108689876B (zh) * 2018-06-28 2020-11-27 苏州东南药业股份有限公司 一种8-(2-羟基苯甲酰胺基)辛酸钠的制备方法
ES2952567T3 (es) * 2019-05-20 2023-11-02 Lonza Guangzhou Pharmaceutical Ltd Método para la preparación de Carsalam
RU2748748C1 (ru) * 2020-06-25 2021-05-31 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Пермский государственный национальный исследовательский университет" (ПГНИУ) Противотуберкулёзное средство на основе (Z)-3-(3,3-Диметил-2-оксобутилиден)-3,4-дигидро-2H-1,4-бензоксазин-2-она и способ его синтеза
CN114085194B (zh) * 2021-12-08 2023-07-18 青岛科技大学 一种2-(2-羟苯基)-4h-[1,3]-苯并噁嗪-4-酮制备方法

Family Cites Families (39)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2679481A (en) * 1952-02-07 1954-05-25 Socony Vacuum Oil Co Inc Antioxidants
GB1187680A (en) * 1967-11-15 1970-04-15 Science Union & Cie New Heterocyclic Substituted Piperazines
DE2037852C3 (de) * 1970-07-30 1980-06-26 Boehringer Sohn Ingelheim Neue Piperazinderivate und Verfahren zu ihrer Herstellung
US3859438A (en) * 1971-07-08 1975-01-07 Boehringer Sohn Ingelheim Pharmaceutical compositions containing an n-(1-bicyclic aryl-propyl-2)-n-bicyclic aryl-piperazine and method of use
DE2325633A1 (de) * 1973-05-21 1974-12-12 Boehringer Sohn Ingelheim Piperazinderivate
DE2429253A1 (de) * 1974-06-19 1976-01-15 Boehringer Sohn Ingelheim Phenylalkanolamine
FI60041C (fi) * 1980-05-21 1981-11-10 Ahlstroem Oy Foerfarande foer tillverkning av alkalisk sulfitmassa
MX173362B (es) * 1987-03-02 1994-02-23 Pfizer Compuestos de piperazinil heterociclicos y procedimiento para su preparacion
US4831031A (en) * 1988-01-22 1989-05-16 Pfizer Inc. Aryl piperazinyl-(C2 or C4) alkylene heterocyclic compounds having neuroleptic activity
US4883795A (en) * 1988-01-22 1989-11-28 Pfizer Inc. Piperazinyl-heterocyclic compounds
FR2640266B2 (fr) * 1988-07-12 1992-07-10 Synthelabo Derives de (hydroxy-1 piperidinyl-2 alkyl) indolones-2, quinoleinones-2, benzo(b)azepinones-2 et benzimidazolones-2, leur preparation et leur application en therapeutique
US5153206A (en) * 1988-12-02 1992-10-06 Pfizer Inc. Arylpiperidine derivatives
US5618819A (en) * 1994-07-07 1997-04-08 Adir Et Compagnie 1,3-dihydro-2H-pyrrolo[2,3-b]pyridin-2-one and oxazolo[4,5-b]pyridin-2-(3H)-one compounds
US5607936A (en) 1994-09-30 1997-03-04 Merck & Co., Inc. Substituted aryl piperazines as neurokinin antagonists
CN1169795C (zh) * 1996-10-01 2004-10-06 协和发酵工业株式会社 环胺取代的含氮杂环化合物及其组合物
US6008352A (en) * 1997-04-03 1999-12-28 Neurogen Corporation 1-(isoquinolin-1-yl)-4-(1-phenylmethyl) piperazines; dopamine receptor subtype specific ligands
IL125951A (en) * 1997-09-05 2003-09-17 Pfizer Prod Inc A pharmaceutical composition comprising a piperazinyl-heterocyclic compound for treating tourette's syndrome, obsessive compulsive disorder, chronic motor or vocal tic disorder in a mammal
IL127497A (en) * 1997-12-18 2002-07-25 Pfizer Prod Inc Medicinal products containing piperazinyl-heterocyclic compounds for the treatment of psychiatric disorders
FR2822154B1 (fr) 2001-03-13 2005-10-21 Aventis Pharma Sa Derives de la quinolyl propyl piperidine, leur preparation et les compositions qui les contiennent
EP1534703A2 (en) * 2002-06-12 2005-06-01 Abbott Laboratories Antagonists of melanin concentrating hormone receptor
GB0227240D0 (en) * 2002-11-21 2002-12-31 Glaxo Group Ltd Compounds
TW200507841A (en) * 2003-03-27 2005-03-01 Glaxo Group Ltd Antibacterial agents
DE10316081A1 (de) * 2003-04-08 2004-10-21 Morphochem AG Aktiengesellschaft für kombinatorische Chemie Neue Verbindungen mit antibakterieller Aktivität
BRPI0410378A (pt) * 2003-05-16 2006-06-13 Pfizer Prod Inc tratamento de distúrbios psicóticos e depressivos
BRPI0416852A (pt) * 2003-11-21 2007-02-27 Array Biopharma Inc inibidores da quinase akt
JP2008505920A (ja) 2004-07-08 2008-02-28 グラクソ　グループ　リミテッド 抗菌剤
DE102004041163A1 (de) 2004-08-25 2006-03-02 Morphochem Aktiengesellschaft für kombinatorische Chemie Neue Verbindungen mit antibakterieller Aktivität
WO2006105289A1 (en) 2005-03-31 2006-10-05 Janssen Pharmaceutica N.V. Bicyclic pyrazole compounds as antibacterial agents
WO2007042325A1 (de) * 2005-10-13 2007-04-19 Morphochem Aktiengesellschaft für kombinatorische Chemie 5-chinolinderivate mit antibakterieller aktivität
WO2008020306A2 (en) * 2006-08-18 2008-02-21 Pfizer Products Inc. Isoindole derivatives
KR20120011093A (ko) 2007-05-09 2012-02-06 화이자 인코포레이티드 치환된 헤테로사이클릭 유도체 및 조성물 및 항균제로서의 이의 약학적 용도
KR20110018380A (ko) * 2008-05-22 2011-02-23 알러간, 인코포레이티드 Ｃｘｃｒ4 수용체에서 활성을 갖는 이환식 화합물
US8318940B2 (en) 2009-01-15 2012-11-27 Glaxo Group Limited Naphthyridin-2 (1 H)-one compounds useful as antibacterials
CN102361863B (zh) 2009-01-21 2014-12-03 巴斯利尔药物股份公司 新的二环抗生素
US9156822B2 (en) 2010-07-02 2015-10-13 The University Of North Carolina At Chapel Hill Functionally selective ligands of dopamine D2 receptors
BR112013001257A2 (pt) 2010-07-20 2016-05-17 Glaxo Group Ltd processo.
TWI594996B (zh) 2011-11-08 2017-08-11 艾克泰聯製藥有限公司 ２－氧代－唑烷－３，５－二基抗生素衍生物
CN103958525A (zh) 2011-11-30 2014-07-30 埃科特莱茵药品有限公司 3,7-二取代八氢-2H-吡啶并[4,3-e][1,3]噁嗪-2-酮抗生素
MA41168A (fr) * 2014-12-17 2017-10-24 Acraf Nouveaux composés antibactériens

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