EA029088B1 - Макроциклические и бициклические ингибиторы вируса гепатита c - Google Patents
Макроциклические и бициклические ингибиторы вируса гепатита c Download PDFInfo
- Publication number
- EA029088B1 EA029088B1 EA201591456A EA201591456A EA029088B1 EA 029088 B1 EA029088 B1 EA 029088B1 EA 201591456 A EA201591456 A EA 201591456A EA 201591456 A EA201591456 A EA 201591456A EA 029088 B1 EA029088 B1 EA 029088B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- mmol
- resulting
- added
- exp
- lcms
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/64—Cyclic peptides containing only normal peptide links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
- A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
- A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D203/00—Heterocyclic compounds containing three-membered rings with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D203/02—Preparation by ring-closure
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
- C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
- C07D498/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains four or more hetero rings
Abstract
В изобретении предложены соединения, представляющие собой макроциклические и бициклические ингибиторы вируса гепатита C (ВГС), и их фармацевтически приемлемые соли, применение указанных соединений, фармацевтическая композиция, содержащая указанные соединения, и способ лечения инфекции, вызванной ВГС.
Description
данное изобретение испрашивает приоритет согласно § 119(е) главы 35 Свода Законов США предварительной заявки на патент США № 61/798961, поданной 15 марта 2013 г., которая полностью включена в настоящий текст посредством ссылки.
Область техники
Раскрыты новые низкомолекулярные ингибиторы репликации вирусов, также раскрыты композиции, содержащие такие соединения, и терапевтические способы, включающие введение таких соединений.
Уровень техники
Вирус гепатита С (ВГС), принадлежащий к роду гепацивирусов семейства Пауйзпбае, является ведущей причиной хронических заболеваний печени в мире (Воуег, N. е! а1. ί. Нера1о1. 2000, 32, 98-112). Как следствие этого, современные противовирусные исследования в значительной степени сфокусированы на разработке улучшенных способов лечения хронических ВГС-инфекций у людей (С1е8ек, 8., νοη Найи Т., Маии8, М.Р., С1ш. Ыуег Όίδ., 2011, 15, 597-609; Зопаио, V. е! а1., I. АийтктоЪ. Сйето!йег., 2011, 66, 1573-1686; Вгобу, Н., №!ите Ои!1оок, 2011, 474, 81-87; Оогбои, С.Р., е! а1., I. Меб. Сйет. 2005, 48, 1-20; Матаброит, Ό., е! а1., №1. Κ£ν. М1сго. 2007, 5, 453-463).
Вирусологическое излечение пациентов с хронической ВГС-инфекцией труднодостижимо из-за огромных количеств вирусов, образующихся ежедневно в организме пациента с хронической инфекцией, и высокой частоты спонтанных мутаций у вируса ВГС (№итаии, е! а1., 8с1еисе, 1998, 282, 103-7; Рик1то!о, е! а1., Нера!о1оду, 1996, 24, 1351-4; Ооттдо, е! а1., Оеие 1985, 40, 1-8; Майей, е! а1., I. Мго1. 1992, 66, 3225-9). Лечение ВГС дополнительно затрудняется генетическим разнообразием ВГС и тем, что он экспрессируется в виде нескольких различных генотипов и множества подтипов. Например, в настоящее время выделяют шесть основных генотипов ВГС (обозначаемых 1-6), множество подтипов (обозначаемых а, Ъ, с и т.д). и примерно 100 различных штаммов (которым присвоены номера 1, 2, 3 и т.д). ВГС встречается во всем мире, при этом генотипы 1, 2 и 3 являются преобладающими в США, Европе, Австралии и Восточной Азии (Япония, Тайвань, Тайланд и Китай). Генотип 4 встречается в основном на Среднем Востоке, в Египте и Центральной Африке, а генотипы 5 и 6 встречаются преимущественно в Южной Африке и Юго-Восточной Азии (Пттоибв, Р. е! а1. I. Мго1. 84: 4597-4610, 2010).
Комбинация нуклеозидного аналога рибавирина и интерферона-альфа (α) (ИФН) используется для лечения нескольких генотипов хронических ВГС-инфекций у человека. Однако у пациентов наблюдаются различные клинические ответы, а токсичность этой схемы лечения ограничивает ее применимость. Добавление ингибитора протеазы ВГС (телапревира или боцепревира) в схему с использованием рибавирина и ИФН значительно улучшает показатели вирусологического ответа через 12 недель после лечения (§νΚ12). Однако в настоящее время эта схема одобрена только для пациентов с генотипом 1, и она также характеризуется токсичностью и другими побочными эффектами.
Применение противовирусных средств направленного действия для лечения нескольких генотипов ВГС-инфекции оказалось затруднительным из-за различий в активности противовирусных средств в отношении различных генотипов. Ингибиторы протеаз ВГС часто демонстрируют более низкую активность ш уйго против генотипов 2 и 3 ВГС, чем против генотипа 1 (см., например, таблицу 1 в работе 8итта, V. е! а1., Аи!1тюгоЫа1 Адеи!8 аиб СйетоШетару, 2012, 56, 4161-4167; СоШтет, ί. е! а1., Оа8!гоеи!ето1оду, 2011, 141, 1067-1079). Соответственно, клиническая эффективность в отношении различных генотипов ВГС также оказалась высоко вариабельной. Например, средства лечения, обладающие высокой эффективностью в отношении генотипов 1 и 2 ВГС, могут обладать ограниченной или нулевой клинической эффективностью в отношении генотипа 3. (Могеио, С. е! а1., Ро8!ег 895, 618! ААЗЬО Мее!ш§, Во8!ои, МА, США, Ос!. 29 - Μν. 2, 2010; Огайат, Р., е! а1., Оа81тоеи!его1о§у, 2011, 141, 881-889; Ро8!ет, О.К. е! а1., 45 ежегодная встреча ЕА§Ь, 14-18 апреля 2010 г., Вена, Австрия). В некоторых случаях противовирусные агенты обладают хорошей клинической эффективностью против генотипа 1, но их клиническая эффективность против генотипов 2 и 3 ниже и вариабельнее. (Ке18ег, М. е! а1., Нера!о1оду, 2005, 41,832-835). Для преодоления сниженной эффективности у пациентов с 3 генотипом могут требоваться значительно более высокие дозы для достижения значимого снижения вирусной нагрузки (Рга8ег, 1.Р. е! а1., АЪ8!гас! #48, НЕР ПАКТ 2011, Ко1оа, Н1, ОесетЪег 2011).
Также существует потребность в противовирусных агентах, в меньшей степени подверженных вирусной резистентности. Например, связанные с резистентностью мутации в положениях 155 и 168 протеазы ВГС часто вызывают значительное снижение противовирусной эффективности ингибиторов протеазы ВГС (Маш, N. Аии Рогит Со11аЪ НГУ Ке8., 2012, 14, 1-8; Котаио, К.Р. е! а1., Рт§, 2010, 107, 20986-20991; Ьет О., АийтюгоЪ1а1 адеи!8 аиб сйетоШегару, 2010, 54, 1878-1887).
Ввиду ограничений существующей терапии ВГС существует потребность в разработке более эффективных терапевтических средств против ВГС. Также было бы полезно получить средства лечения, эффективные против нескольких генотипов и подтипов ВГС.
- 1 029088
Краткое описание изобретения
Раскрыты новые соединения, которые ингибируют протеазу N83 вируса гепатита С (ВГС). В некоторых вариантах реализации раскрытые соединения ингибируют несколько генотипов вируса гепатита С. Эти соединения полезны для лечения ВГС-инфекции (инфекции, вызванной вирусом гепатита С) и связанных с ней симптомов.
В одном варианте реализации предложено соединение, выбранное из группы, состоящей из:
- 2 029088
- 3 029088
или его фармацевтически приемлемая соль.
4
029088
В другом варианте реализации предложено соединение, выбранное из группы, состоящей из:
или его фармацевтически приемлемая соль.
Один вариант реализации обеспечивает применение соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли для лечения инфекции, вызванной вирусом гепатита С (ВГС), у нуждающегося в этом пациента.
Один вариант реализации обеспечивает фармацевтическую композицию, содержащую соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль, и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
Один вариант реализации обеспечивает способ лечения инфекции, вызванной вирусом 1'1а\ч\чпс1ае (например, ВГС-инфекции), у нуждающегося в этом пациента (например, млекопитающего, такого как человек). Способ включает введение указанному пациенту соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли.
Другие варианты реализации, задачи, признаки и преимущества будут приведены в нижеследующем подробном описании вариантов реализации и частично будут понятны из описания или могут быть установлены при осуществлении настоящего изобретения. Эти задачи и преимущества будут решены и достигнуты благодаря способам и композициям, конкретно указанным в описании и приведенной здесь формуле изобретения. Приведенное выше краткое описание было сделано с пониманием того, что его следует рассматривать как общую сводку некоторых вариантов реализации, раскрытых в настоящем документе, и приведено исключительно для пользы и удобства читателя, и ни в коей мере не предназначено для какого-либо ограничения объема, или диапазона, или эквивалентов, для чего правомерно предназначена прилагаемая
Claims (5)
1. Соединение, выбранное из группы, состоящей из:
- 88 029088
89 029088
- 90 029088
или его фармацевтически приемлемая соль.
1,1 ммоль) и Э8С (349 мг, 1,36 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при 45°С в течение 50 мин. Добавляли еще Э8С (115 мг, 0,449 ммоль) и перемешивали реакционную смесь еще 15 ч. Реакционную смесь затем помещали в ванну с водой и льдом и добавляли по каплям при помощи шприца в течение 30 с Н2О (1,5 мл). Добавляли еще ДМФ (2,5 мл) для облегчения перемешивания. Добавляли Ь-третлейцин (174 мг, 1,33 ммоль), а затем К3РО4 (550 мг, 2,6 ммоль). Реакционную смесь извлекали из холодной ванны и оставляли перемешиваться при к.т. в течение 2 ч. Добавляли еще Ь-трет-лейцин (50 мг, 0,38 ммоль) и К3РО4 (162 мг, 0,76 ммоль) и перемешивали реакционную смесь еще 2 ч. Смесь после этого разбавляли этилацетатом (30 мл) и Н2О (30 мл) и водную фазу подкисляли 3 М водным раствором НС1 до рН ~3. Разделяли фазы и органическую фазу промывали 0,2 М водным раствором НС1 (3x20 мл) и сушили над безводным Па28О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный сырой остаток промежуточного соединения В8 использовали далее без дальнейшей очистки.
- 45 029088
Группа промежуточных соединений С. Получение промежуточного соединения С1.
Этап 1. Получение С1-1.
10% палладий на активированном угле (10,0 г, 0,300 моль) добавляли при к.т. к перемешиваемому раствору 4-метокси-2-нитроанилина (46,0 г, 275 ммоль) в метаноле (1 л). Смесь перемешивали в атмосфере 50 фунтов/кв. дюйм Н2 в течение 17 ч, затем фильтровали через целит. Удаляли растворитель под вакуумом, в результате чего получали С1-1.
1Н-ЯМР (ДМСО-б6, 400 МГц): δ 6,42 (б, 1=8,4 Гц, 1Н), 6,16 (б, 1=2,8 Гц, 1Н), 5,97 (бб, 1=8,4, 2,8 Гц, 1Н), 4,45 (δ, 2Н), 3,94 (δ, 2Н), 3,57 (δ, 3Н).
Этап 2. Получение С1-2.
Суспензию С1-1 в диэтилоксалате (235 г) обрабатывали Εί3Ν (54,6 г) и нагревали при 155°С в течение 2 ч. Смеси давали остыть до к.т. и фильтровали. Собранное твердое вещество промывали водой и ЕЮН, затем сушили, в результате чего получали С1-2.
1Н-ЯМР (ДМСО-б6, 400 МГц): δ 11,81 (б, 1=18 Гц, 2Н), 7,04 (б, 1=8,8 Гц, 1Н), 6,72 (бб, 1=8,8, 2,8 Гц, 1Н), 6,68 (б, 1=2,8 Гц, 1Н), 3,72 (δ, 3Н).
Этап 3. Получение промежуточного соединения С1.
В сухую колбу в сухой атмосфере Ν2 41,0 г (213 ммоль) помещали соединение С1-2, 200 мл и РОС13 и 41 мл три-н-пропиламин (41 мл, 217 ммоль). Затем смесь, в которой проходила экзотермическая реакция, оставляли перемешиваться при к.т. в течение 1 ч, после чего нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Смесь снова охлаждали до к.т. и медленно выливали на смесь лед/вода. Полученную водную смесь перемешивали при к.т. в течение 20 мин, затем фильтровали. Выделенный преципитат промывали водой и растворяли в хлороформе. Раствор в хлороформе фильтровали для удаления нерастворимого материала и фильтрат последовательно промывали водой, насыщенным раствором бикарбоната натрия и солевым раствором. Промытый раствор концентрировали под вакуумом, а затем перекристаллизовывали остаток из этанола. Продукт очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали промежуточное соединение С1.
1Н-ЯМР (ДМСО-б6, 400 МГц): δ 7,99 (б, 1=9,2 Гц, 1Н), 7,59 (бб, 1=9,2, 2,8 Гц, 1Н), 7,50 (б, 1=2,8 Гц, 1Н), 3,96 (δ, 1Н).
Получение промежуточного соединения С2.
Промежуточное соединение С2 (2-хлор-6-метокси-3-(метилсульфонил)хиноксалин) получали в соответствии с МаНа1а, Р.К., е! а1. Огд. ЕеП. 2005, 7, 2169.
- 46 029088
Получение промежуточного соединения С3.
Этап 1. Получение С3-1.
1,0 М раствор КНМЭ5 в ТГФ (10 мл, 10 ммоль) разбавляли тетрагидрофураном (10 мл) в атмосфере аргона и охлаждали полученный раствор до -78°С. Добавляли бицикло[3.1.1]гептан-2-он (1,0 г, 9,1 ммоль, полученный в соответствии с Υΐη, θί а1. 1. Огд. СЬет. 1985, 50, 531) в виде раствора в ТГФ (5 мл) на протяжении 2 мин, промывая дополнительным количеством ТГФ (2x2,5 мл) для обеспечения полного переноса. Полученную смесь перемешивали в течение 30 мин и добавляли \-(5-\лор-2пиридил)-бис-(трифторметансульфонамид) (3,8 г, 9,Ί ммоль) в виде раствора в ТГФ (10 мл) в течение 2 мин, промывая дополнительным количеством ТГФ (2x2,5 мл). Полученную смесь перемешивали в те- 43 029088
чение 5 мин и извлекали из холодной ванны. После перемешивания в течение 30 мин реакционную смесь разбавляли этилацетатом (70 мл) и 1 М водным раствором НС1 (50 мл). Разделяли фазы и органическую фазу промывали 1 М водным раствором ЫаОН (2x30 мл). Объединенную органическую фазу сушили над безводным Мд§О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток фильтровали через пробку из силикагеля с использованием 30% ЕЮАс в гексанах, в результате чего получали неочищенный остаток, которое использовали непосредственно на следующем этапе.
Этап 2. Получение В6-1.
К раствору 3-бутеналь диэтилацеталя (1,4 мл, 8,3 ммоль) в атмосфере аргона при 0°С добавляли 0,5 М раствор 9-борабицикло[3.3.1]нонан (15,9 мл, 7,95 ммоль) в течение 3 мин. Реакционной смеси давали нагреться до к.т. при перемешивании в течение 20 ч. Затем добавляли 3 М водный раствор №ЮН (2,9 мл, 8,7 ммоль). После перемешивания в течение 20 мин полученный раствор переносили в колбу, содержащую винилтрифлат (приблизительно 5,16 ммоль), описанный выше, и РбС12(бррГ)СН2С12 (420 мг, 0,51 ммоль). Полученную смесь перемешивали при 60°С в течение 14 ч, давали остыть до к.т. и разбавляли этилацетатом (50 мл) и Н2О (50 мл). Разделяли фазы и органическую фазу сушили над безводным Мд§О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Очистка хроматографией на силикагеле (от 0 до 10% ЕЮАс в гексанах после предварительного уравновешивания с 1% Εΐ3Ν в ЕЮАс) давала промежуточное соединение В6-1.
’Н-ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 5,36-5,28 (т, 1Н), 4,59 (1, 1=5,6 Гц, 1Н), 3,73-3,58 (т, 2Н), 3,54-3,39 (т, 2Н), 2,72-2,60 (т, 1Н), 2,45-2,34 (т, 3Н), 2,23-2,08 (т, 4Н), 1,89-1,76 (т, 2Н), 1,67 (61, 1=16,1, 6,9 Гц, 2Н), 1,58-1,47 (т, 2Н), 1,23 (1, 1=7,0 Гц, 6Н).
Этап 3. Получение В6-2.
Раствор олефина В6-1 (660 мг, 2,77 ммоль) в ТГФ (25 мл) при 0°С обрабатывали реагентом ВН3-§Ме2 в виде 1 М раствор в СН2С12 (2,9 мл, 2,9 ммоль) в течение 1 мин. Полученный раствор перемешивали в течение 2 ч при 0°С и давали нагреться до к.т. После перемешивания в течение еще 3 ч реакционную смесь снова охлаждали до 0°С и разбавляли 2 М водным раствором №ЮН (7 мл), а затем 30% водным раствором Н2О2 (7 мл). Полученной смеси давали нагреться до к.т. при перемешивании в течение еще 16 ч. Смесь разделяли между Е12О (100 мл) и Н2О (50 мл). Разделяли фазы и органическую фазу промывали 0,5 М водным раствором №ЮН (50 мл). Органическую фазу сушили над безводным Мд§О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток, который очищали хроматографией на силикагеле (от 15 до 40% ЕЮАс в гексанах), в результате чего получали целевое соединение.
’Н-ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 4,60 (1, 1=5,6 Гц, 1Н), 3,76-3,60 (т, 3Н), 3,58-3,42 (т, 2Н), 2,39-2,05 (т, 4Н), 1,91-1,48 (т, 9Н), 1,43-1,35 (т, 1Н), 1,25 (1, 1=7,0 Гц, 6Н), 1,06-0,98 (т, 1Н).
Этапы 4 и 5. Получение (±)-В6-3.
Ацеталь В6-2 (360 мг, 1,4 ммоль) растворяли в ТГФ (8 мл) и Н2О (2 мл). Добавляли паратолуолсульфоновой кислоты моногидрат (40 мг, 0,2 ммоль) и перемешивали полученный раствор 16 ч при к.т. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (50 мл) и Н2О (30 мл) и разделяли фазы. Водную фазу экстрагировали диэтиловым эфиром (30 мл), объединенную органическую фазу промывали насыщенным водным NаНСО3 (15 мл). Органическую фазу сушили над безводным Мд§О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток, который сразу использовали на следующем этапе. Метилтрифенилфосфония бромид (1,66 г, 4,6 ммоль) суспендировали в ТГФ (40 мл) в атмосфере аргона и охлаждали до -78°С. Добавляли по каплям 1 М раствор NаНМ^§ в ТГФ (4,2 мл, 4,2 ммоль) и перемешивали полученную желтую суспензию в течение 5 мин. Смесь извлекали из холодной ванны и продолжали перемешивание еще 30 мин. Смесь затем снова охлаждали до -78°С и добавляли сухой остаток из предыдущего этапа (приблизительно 1,4 ммоль) в виде раствора в ТГФ (5 мл) в течение 5 мин, промывая дополнительным количеством ТГФ (2x2,5 мл) для обеспечения полного переноса. Полученную смесь перемешивали в течение 5 мин и затем помещали в ванну с водой и льдом и перемешивали еще 1 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором ΝΠ·|0 (20 мл) и разбавляли этилацетатом (30 мл) и Н2О (20 мл). Разделяли фазы и органическую фазу сушили над безводным Мд§О4, фильтровали и адсорбировали на 5 г силикагеля. Очистка хроматографией на силикагеле (от 10 до 30% Е1ОАс в гексанах) давала (±)-В6-3.
’Н-ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 6,01-5,81 (т, 1Н), 5,22-5,05 (т, 2Н), 3,79-3,66 (т, 1Н), 2,43-2,25 (т, 2Н), 2,24-2,04 (т,4Н), 1,83-1,16 (т, 10Н).
Этап 6. Получение смеси промежуточных соединений В6 и В7.
Спирт (±)-В6-3 (270 мг, 1,5 ммоль) растворяли в ДМФ (2,0 мл). Добавляли пиридин (125 мкл, 1,5 ммоль) и О§С (500 мг, 1,9 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при 45°С в течение 15 ч. Реакционную смесь затем помещали в ванну с водой и льдом и добавляли Н2О (2,0 мл) по каплям при помощи шприца в течение 30 с. Смесь извлекали из холодной ванны и оставляли перемешиваться 10 мин. Смесь снова охлаждали в ванне со льдом и водой и добавляли Ь-трет-лейцин (259 мг, 1,97 ммоль), а затем К3РО4 (835 мг, 3,93 ммоль). Реакционную смесь извлекали из холодной ванны и оставляли перемешиваться при к.т. в течение 5,25 ч. Смесь после этого разбавляли этилацетатом (40 мл) и 1 М водным
- 44 029088
раствором НС1 (20 мл) и Н2О (15 мл). Разделяли фазы и водную фазу экстрагировали этилацетатом (30 мл). Объединенную органическую фазу промывали 0,2 М водным раствором НС1 (2x25 мл), сушили над безводным Па28О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали Смесь промежуточных соединений В6 и В7.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для СхрНз^Оу 338,2; эксп.: 337,8. Получение промежуточного соединения В8.
Этапы 1 и 2. Получение В 8-1.
К раствору НМРА (1,8 мл) в ТГФ (4,4 мл) в атмосфере аргона, охлажденному до -78°С, добавляли 1 М раствор Ь1НМО8 (2,2 мл, 2,2 ммоль). Добавляли (1К,58)бицикло[3.1.0]гексан-2-он (200 мг, 2,08 ммоль, полученный согласно Нойдзоп, Ό.Μ. еГ. а1. 8упГйез13, 2005, 2264) в виде раствора в ТГФ (2 мл) на протяжении 1 мин, промывая дополнительным количеством ТГФ (2x1 мл) для обеспечения полного переноса. Через 50 мин добавляли в течение 30 с 5-йодопент-1-ен (870 мг, 4,4 ммоль, полученный, как описано в .Гт, I. еГ. а1. I. Огд. СНет. 2007, 72, 5098). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч и нагревали до -50°С. Через 2 ч температура ванны достигала -35°С и снова снижалась до -50°С. Еще через 2 ч температура ванны достигала 0°С. Реакционную смесь после этого вливали в насыщенный водный раствор ХН4С1 (50 мл) и разбавляли этилацетатом. Разделяли фазы и органическую фазу сушили над безводным Па28О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Очистка хроматографией на силикагеле (от 0 до 15% ЕгОАс в гексанах) давала бесцветное масло (245 мг). Указанный остаток (200 мг, 1,22 ммоль) растворяли в МеОН (5 мл) и охлаждали ванну до -50°С. Добавляли одной порцией №ВН4 (188 мг, 4,97 ммоль) в полученную смесь перемешивали в течение 30 мин и извлекали из холодной ванны. Еще через 30 мин реакцию гасили насыщенным водным раствором МН4С1 (15 мл) и разбавляли этилацетатом (25 мл) и Н2О (20 мл). Разделяли фазы и органическую фазу экстрагировали этилацетатом (30 мл). Объединенную органическую фазу сушили над безводным Па28О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Очистка хроматографией на силикагеле (от 10 до 30% ЕгОАс в гексанах) давала В8-1.
'Н-ЯМР (300 МГц, СЭС13): δ 5,88-5,71 (т, 1Н), 5,04-4,88 (т, 2Н), 4,01 (йй, 1=7,4, 4,8 Гц, 1Н), 2,081,99 (т, 2Н), 1,93 (йй, 1=12,3, 6,9 Гц, 1Н), 1,67-1,09 (т, 9Н), 0,60-0,52 (т, 1Н), 0,41-0,31 (т, 1Н) ррт.
Этап 3. Получение промежуточного соединения В8.
Спирт В8-1 (180 мг, 1,08 ммоль) растворяли в ДМФ (1,5 мл). Добавляли пиридин (90 мкл,
1) удаление защиты
1 представляет собой -О-, -СН2-, -СР2-, -С(О)-, -Ν(Κ16)- или прямую связь;
Т1 представляет собой С5-С12-спиробициклический карбоциклен, который присоединен к 1 и М через два соседних атома углерода, причем указанный спиробициклический карбоциклен необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1;
Т2 представляет собой С5-С12-конденсированный бициклический карбоциклен, который присоединен к 1 и М через два соседних атома углерода, причем указанный конденсированный бициклический карбоциклен необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1;
Т3 представляет собой С5-С12 мостиковый бициклический карбоциклен, который присоединен к 1 и М через два соседних атома углерода, причем указанный мостиковый бициклический карбоциклен необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1;
Т4 представляет собой С5-С12-спиробициклический гетероциклен, который присоединен к 1 и М через два соседних атома, причем указанный спиробициклический гетероциклен необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1;
Т5 представляет собой С5-С12-конденсированный бициклический гетероциклен, который присоединен к 1 и М через два соседних атома, причем указанный конденсированный бициклический гетероциклен необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1;
Т6 представляет собой С5-С12-мостиковый бициклический гетероциклен, который присоединен к 1 и М через два соседних атома, причем указанный мостиковый бициклический гетероциклен необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1;
р1 представляет собой Н, С1-С8-алкил, С3-С8-карбоциклил, С6-С10-арил, 5-6-членный гетероарил или 5-6-членный гетероциклил, причем если р1 не является Н, указанный р1 необязательно содержит 1-3 заместителя, выбранных из галогена, -ОК6, -§К6, -Ν(Κ6)2, С6-С10-арила, С1-С6-алкила,
С1-С6-галогеналкила, С1-С6-галогеналкокси, -ΟΝ, -8О2(С1-С6-алкила), -8(О)(С1-С6-алкил), -ΝΚ6δΟ2Ζ2,
-δΟ2ΝΚ17Κ18, -ЖСООК16, -ΝΗ^Ζ2, -ΝΙ 1СО\1 ПК, -СО2К6, -С(О)К6 или -СО\(К")<
р2 представляет собой С5-С10-спиробициклический карбоциклил, который необязательно содержит
в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1;
- 22 029088
р3 представляет собой С5-Сю-конденсированный бициклический карбоциклил, который необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1;
Р''1 представляет собой С5-С10-мостиковый бициклический карбоциклил, который необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1;
р5 представляет собой 4-8-членный гетероциклил, содержащий 1 гетероатом, выбранный из Ν, О или 8, причем р5 необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1;
р6 представляет собой С1-С8-алкил, С3-С8-карбоциклил, С6-С10-арил, 5-6-членный гетероарил или 5-6-членный гетероциклил, причем р6 содержит в качестве заместителей 1 оксогруппу и необязательно содержит 1-3 заместителя, независимо выбранных из галогена, -ОК6, -8К6, -Ν(Κ6)2, С6-С10-арила, С1-С6-алкила, С1-С6-галогеналкила, С1-С6-галогеналкокси, -ΝΟ2, -ΟΝ, -СР3, -8О2(С1-С6-алкила),
-СО2К6, -С(О)К6 и
-νηοοζ2, -ннсо:инк16,
-8(О)(С1-С6-алкила), -ΝΚ68Ο2Ζ2, -8ОХК К \ -ΝΗΟΟΟΚ1'
-ΟΟΝ(Κ6)2;
О" выбран из С3-С8-карбоциклила, причем р" содержит в качестве заместителей 4-8 атомов Р и каждый атом углерода в р" содержит в качестве заместителей 0-2 атома Р;
С6-алкенил;
С6-алкил;
С6-галогеналкил;
С6-галогеналкенил;
С6-карбоциклил;
Е1 представляет собой С2 Е2 представляет собой С1 Е3 представляет собой С1 Е4 представляет собой С2 Е5 представляет собой С3
Е6 представляет собой С1-С6-алкил, содержащий в качестве заместителя -ОСН3, -ОСР3. -ОСР3 или
-ОСР2Н;
А6 или А7;
А независимо представляет собой А1, А2, А3, А4, А А1 представляет собой оксо, галоген, -ОК6, С1-С6-алкил, -ΟΝ
-СРз, -8К6
-С(О)2К6, -Ο(Ο)Ν(Κ6)2,
-С(О)К6, -Ν(Κ6)Ο(Ο)Κ6, -8О2(С1-С6-алкил), -8(О)(С1-С6-алкил), С3-С8-карбоциклил, С3-С8-циклоалкокси, С1-С6-галогеналкил, -Ν(Κ6)2, -NК6(С1-С6-алкил)О(С1-С6-алкил), галоген(С1-С6-алкокси), -ΝΚ68Ο2Κ6, -8Ο2Ν(Κ6)2, -ΝΗΟΟΟΚ6, -ΝΗΟΟΝΗΚ6, С6-С10-арил, 5-14-членный гетероарил, 4-10-членный гетероциклил или -О-(4-10-членный гетероциклил), причем указанные С1-С6-алкил, С3-С8-карбоциклил, С3-С8-циклоалкокси, С1-С6-галогеналкил, галоген(С1-С6-алкокси), С6-С10-арил, 5-14-членный гетероарил или 4-10-членный гетероциклил необязательно содержат в качестве заместителей 1-4 группы Ζ10;
А2 представляет собой С1-С6-алкокси, содержащий в качестве заместителя 5-14-членный гетероарил или С6-С10-арил; причем указанный гетероарил или арил содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ10;
А3 представляет собой С2-С6-алкинил, содержащий в качестве заместителя С6-С10-арил, С3-С8-карбоциклил, С1-С8-алкил, С1-С6-галогеналкил, 4-10-членный гетероциклил или 5-14-членный гетероарил; причем указанные арил, карбоциклил, алкил, галогеналкил, гетероциклил, или гетероарил необязательно содержат в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1;
А4 представляет собой -8Р5;
А5 представляет собой -О(С2-С6-алкил)ОК, где К22 представляет собой С6-С10-арил, 5-14-членный гетероарил или 4-10-членный гетероциклил, который необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1;
А6 представляет собой О(С2-С6-алкил)NК16К22, причем К22 представляет собой С6-С10-арил, 5-14-членный гетероарил или 4-10-членный гетероциклил, который необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1;
А7 представляет собой -О(5-14-членный гетероарил); причем указанный -О(5-14-членный гетероарил) необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1, и 2 соседних заместителя указанного -О(5-14-членного гетероарила) могут быть объединены с образованием 3-6-членного циклического кольца, содержащего 0-3 гетероатома, независимо выбранные из Ν, О или 8;
К6 представляет собой Н, С1-С6-алкил или С6-С10-арил, причем указанный С6-С10-арил или С1-С6-алкил необязательно содержит 1-4 заместителя, независимо выбранных из галогена, С1-С6-алкила, С6-С10-арила, С3-С8-карбоциклила, 5-14-членного гетероарила, 4-10-членного гетероциклила, галоген(С1-С6-алкокси), -ОН, -О(С1-С6-алкила), -8Н, -8(С1-С6-алкила), -ΝΗ2, ^НЮ-С^алкила), -ЭДС1-С6-алкила)2, -С(О)(С1-С6-алкила), -8О2ЭДС1-С6-алкила)2, ^НСОО^-С^алкила),
-NΗСΟ(С1-С6-алкила), -NΗСΟNΗ(С1-С6-алкила), -СО2(С1-С6-алкила) и -С(О)ЭДС1-С6-алкил)2; причем указанный 4-10-членный гетероциклил необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ10;
К16 представляет собой Н, С1-С3 алкил, С2-С8-алкенил, С2-С8-алкинил, С3-С8-карбоциклил, С5-С10-бициклический карбоциклил, С6-С10-арил, 5-14-членный гетероарил или 4-10-членный гетероциклил, причем указанные С1-С8-алкил, С2-С8-алкенил, С2-С8-алкинил, С3-С8-карбоциклил, С6-С10-арил, 5-14-членный гетероарил или 4-10-членный гетероциклил в К16 необязательно содержат в качестве заместителей 1-4 группы Ζ10;
К17 и К18 каждый независимо выбран из Н, С1-С8-алкила, С2-С8-алкенила, С2-С8-алкинила, С3-С8-карбоциклила, С5-С10-бициклического карбоциклила, -С(О)К16, -С(О)ОК16, С6-С10-арила, 5-14-членного гетероарила или 4-10-членного гетероциклила, причем указанные алкил, алкенил, алки- 23 029088
нил, карбоциклил, арил, гетероарил или гетероциклил в К17 или К18 необязательно содержат в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1ε, или К17 и К18 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют 4-7-членную гетероциклильную группу, причем указанная 4-7-членная гетероциклильная группа необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1ε;
каждый Ζ1 независимо представляет собой оксо, галоген, С1-С8-алкил, С2-С8-алкенил, С2-С8-алкинил, С3-С8-карбоциклил, С5-С10-бициклический карбоциклил, С1-С8-галогеналкил, С6-С10-арил, 5-14-членный гетероарил, 4-10-членный гетероциклил, -СП, -С(О)К16, -С(О)ОК16, -С(О)ПК17К18, -νκ17κ18
-ПК16С(О)К16
-М<|6С(О)М<|7К18.
-ΝΚ168(Ο)2ΟΚ16, -ОК16,
-νκ168(Ο)2κ16, -пк16з(О)2пк17к18,
8(О)2К16 или -8(О)2НК17К18 причем указанные алкил, алкенил, алкинил, карбоциклил, бициклический карбоциклил, арил, гетероарил или гетероциклил в Ζ1 необязательно содержат в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1α;
каждый Ζ1α независимо представляет собой оксо, галоген, С2-С8-алкенил, С2-С8-алкинил, С3-С8-карбоциклил, С5-С10-бициклический карбоциклил, С1-С8-галогеналкил, С6-С10-арил, 5-14-членный гетероарил, 4-10-членный гетероциклил, -СП, -С(О)К16, -С(О)ОК16, -С(О)НК17К18, -ЯК17К18,
-ОС(О)К1
-ос(ож17к18,
-8К16, -8(О)К16,
16
-мг’пож16, -пк16с(О)ок16, -т16с(О)т17К18, -т16з(О)2К16,
-ОК16, -ОС(О)К16, -ОС(О)НК17К18, -8К16, -8(О)К16, -3(О)2К16 или -3(О)2НК17К18, причем указанные алкенил, алкинил, карбоциклил, бициклический карбоциклил, арил, гетероарил или гетероциклил в Ζ1α необязательно содержат в качестве заместителей 1-4 группы Ζ1ε;
каждый /1с независимо представляет собой оксо, галоген, С1-С8-алкил, С3-С8-карбоциклил, С5-С10-бициклический карбоциклил, С1-С8-галогеналкил, С6-С10-арил, 5-14-членный гетероарил, 4-10-членный гетероциклил, -СП, -С(О)(С1-С8-алкил), -С(О)О(С1-С8-алкил), -С(О)Н(С1-С8-алкил)2, -ΝΗ2, -ПН(С1-С8-алкил), -П(С1-С8-алкил)2, -ННС(О)О(СгС8-алкил), -ННС(О)(СгС8-алкил), -ΝΗ^Ο)ΝΗ(Α^алкил), -ОН, -О(С1-С8-алкил), С3-С8-циклоалкокси, С5-С10-бициклический карбоциклилокси, -8(С1-С8-алкил) или -8(О)^(СгС8-алкил)2 причем указанные алкил, карбоциклил, бициклический карбоциклил, арил, гетероарил, гетероциклил или циклоалкокси, являющийся частью Ζ1ε, необязательно содержат в качестве заместителей 1-4 атома галогена, С1-С6-алкокси, 8(О)2С1-С6-алкил или С1-С6-галогеналкокси;
каждый Ζ2 независимо представляет собой С1-С8-алкил, С3-С8-карбоциклил, С5-С10-бициклический карбоциклил, С6-С10-арил, 5-14-членный гетероарил, 4-10-членный гетероциклил, -НК17К18 или -ОК16, причем любой алкил, карбоциклил, бициклический карбоциклил, арил, гетероарил или гетероциклил, являющийся частью Ζ2, необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 группы Ζ2α;
каждый Ζ2α независимо представляет собой водород, оксо, галоген, С1-С8-алкил, С2-С8-алкинил, С3-С8-карбоциклил, С5-С10-бициклический карбоциклил, С1-С8-галогеналкил, С6-С10-арил, 5-14-членный гетероарил, 4-10-членный гетероциклил, -(С2-С8-алкинил)арил, -(С2-С8-алкинил)гетероарил, -СН -С(О)(СгС6-алкил), -С(О)О(СгС6-алкил), -С(О)Н(С1-С6-алкил)2,-НН2, -НН(СгС6-алкил),
-МСгС6-алкил)2, -ННС(О)О(С1-С6-алкил), -ННС(О)(СгС6-алкил), -ННС(О)НН(СгС6-алкил), -ОН, -О(С1-С6-алкил), галоген(С1-С6-алкокси), С3-С8-циклоалкокси, -8(С1-С6-алкил) или -8О2Н(С1-С6-алкил)2; причем любой алкил, алкинил, карбоциклил, циклоалкокси, бициклический карбоциклил, арил, гетероарил или гетероциклил, являющийся частью Ζ2α, необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 галогена или С1-С6-алкоксигруппы;
каждый Ζ3 независимо представляет собой оксо, С2-С8-алкенил, С2-С8-алкинил, С3-С8-карбоциклил, С5-С10-бициклический карбоциклил, С1-С8-галогеналкил, С6-С10-арил, 5-14-членный гетероарил, 4-10членный гетероциклил, -СН, -С(О)ОК16, -С(О)НК17К18, -НК17К18, -НК16С(О)НК17К18, -ОК16, -8К16 или -8О2К16, причем любой алкенил, алкинил, карбоциклил, арил, гетероарил или гетероциклил, являющийся частью Ζ3, необязательно содержит в качестве заместителей 1-4 галоген; или
-т16з(О)2т17К18
-т16з(О)2ОК
I представляет собой -СН2- или -СР2-;
® представляет собой и1, и2, и3, и4, и5, и6, и7 или и8
и1 представляет собой — —
причем каждый и1 необязательно содержит в качестве заместителей 1-2 группы ^;
и2 представляет собой
причем каждый и2 необязательно содержит в качестве заместителей 1-2 группы ^;
и3 представляет собой
причем каждый и3 необязательно содержит в качестве заместителей 1-2 группы ^;
- 24 029088
и4 представляет собой
причем каждый и4 необязательно содержит в качестве заместителей 1-2 группы
и5 представляет собой причем каждый и5 необязательно содержит в качестве заместителей 1-2 группы ^; и6 представляет собой
причем каждый и необязательно содержит в качестве заместителей 1-2 группы ^; и7 представляет собой
причем каждый и7 необязательно содержит в качестве заместителей 1-2 группы ^;
и8 представляет собой
причем каждый и8 необязательно содержит в качестве заместителей 1-2 группы ^;
В другом варианте реализации
С) представляет собой Н, С1-С8-алкил, 4-8-членный гетероциклил или С3-С8-карбоциклил;
Е представляет собой С1-С4-алкил, С2-С4-алкенил, С3-С6-карбоциклил, причем Е необязательно содержит в качестве заместителей один или больше атомов галогена; или I представляет собой -СН2- или -СР2-;
® представляет собой бициклический или трициклический гетероарил или гетероциклил, необязательно содержащий в качестве заместителя 1-2 группы ^;
каждый независимо представляет собой галоген, -ОК6, С1-С6-алкил, -СЫ, -СР3 или С1-С6-галогеналкил;
каждый К6 независимо выбран из Н или С1-С4-алкила.
Схема 1
На схеме 1 показана общая схема синтеза сульфонамидного промежуточного соединения 81-3, которое можно применять для получения описанных в настоящем документе соединений. Циклопропилсульфонамид 81-1 включает защитную группу РС. Неограничивающим примером защитной группы РС является Вос. С защищенного циклопропилсульфонамида 81-1 удаляют защиту (например, н-бутиллитий) и обрабатывают его электрофилом, содержащим соответствующую уходящую группу ЕС, в результате чего получают замещенный сульфонамид 81-2. Реагенты, которые можно применять для удаления защиты, включают н-бутиллитий, но не ограничиваются им. Примеры электрофилов включают алкилгалогенида, но не ограничиваются ими. Удаление защиты кислотой (например, 4н. НС1 в диоксане) дает промежуточное соединение 81-3.
- 25 029088
На схеме 2 суммированы способы получения промежуточных соединений 82-3, 82-4, 82-6 и 82-7, которые можно применять для получения описанных в настоящем документе соединений. Исходный материал 82-1 содержит защитную группу РО. Неограничивающими примерами защитных групп РО являются Вое и СЬ/. К в исходном материале 82-1 представляет собой алкил, который отщепляется в ходе гидролиза, в результате чего получали карбоновую кислоту 82-3, 82-4, 82-6 и 82-7. Примеры подходящих групп К включают следующие, но не ограничиваются ими: -метил, -этил и -бензил. Дополнительная защита амина в 82-1 (например, Вос2О), с последующим окислительным расщеплением (например, ОзО4) дает промежуточный альдегид 82-2, который затем фторируют (например, ΌΆ8Τ), подвергают гидролизу сложного эфира (например, ИОН), в результате чего получали промежуточный дифторметил 82-3. Промежуточное соединение 82-4 получают непосредственно путем восстановления олефинового фрагмента в 82-1, с последующим гидролизом сложного эфира (например, Н2, КЪ/Л12О3, затем ПОН). В альтернативном варианте 82-1 подвергают гидроборонированию и окислению (например, ВН3-ТГФ, затем №ВО3), в результате чего получают спирт 82-5. Фторирование соединения 82-5 с последующим гидролизом (например, ΌΆ8Τ, а затем ИОН) дает монофторэтильные молекулы 82-6. Промежуточное соединение 82-5 также окисляют до альдегида (например, с использованием перйодинана ДессМартина), фторируют (например, ΌΆ8Τ или деоксофтор (Эеохойиог)) и, наконец, гидролизируют (например, ЬЮН), в результате чего получают дифторэтил 82-7.
На схеме 3 показан общий путь получения промежуточного соединения 83-3, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений. Защищенную аминокислоту 81-3 получают как показано на схеме 2, где Е соответствует приведенному в настоящем документе определению. Как показано на схеме 2, конкретные примеры соединения 81-3 включают следующие, но не ограничиваются ими: 82-3, 82-4, 82-6 и 82-7. Соответственно, примеры групп Е для соединений 83-1 включают следующие, но не ограничиваются ими: этил, 1-фторэтил, 1-дифторэтил и дифторметил. Сульфонамид 81-3 подвергают реакции сочетания с защищенной аминокислотой 83-1 при помощи связывающего агента в присутствии соответствующего основания (например, СЭ1 с ЭВИ), в результате
- 26 029088
чего получают пептид 83-2. Аминозащитную группу удаляют путем обработки соответствующим реагентом (например, 4н. НС1 в диоксане, если РО представляет собой Вос), в результате чего получают промежуточное соединение 83-3.
На схеме 4 показаны некоторые общие способы получения фторированных промежуточных соединений, которые можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений. Метилирование аллилбромида 84-1 (например, н-ВиЫ), с последующей обработкой оксалатом 84-2 (например, диэтилоксалатом) дает кетоэфир 84-3. Альтернативное метилирование 84-1 (например, индием) с последующей обработкой глиоксилатом 84-4 дает α-гидроксиэфир 84-5. Гидролиз (например, ЫОН) соединения 84-5 дает промежуточную α-гидроксикислоту 84-6. Обработка 84-5 окисляющей средой (например, ТЕМРО/гипохлорит натрия) с последующим гидролизом (например, ЫОН) дает кетокислоту 84-7, которую можно выделить в α-кетоформе (Х1=Х2=О), гидратированной форме (Х1=Х2=-ОН) или форме полуацеталя (Х1=-ОН, Х2=-ОК, где К представляет собой -метил - и бензил в зависимости от условий выделения.
На схеме 5 показан общий способ синтеза дихлорхиноксалина 85-3, который можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений. Обработка диамина 85-1 диэтил оксилатом 84-2 дает хиноксалин 85-2. Дегидрогалогенирование (например, РОС13) этого промежуточного соединения дает промежуточный дихлорхиноксалин 85-3.
На схеме 6 показан общий путь получения промежуточного соединения 86-5, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений. Обмен ацеталя между 86-1 и 86-2 дает смешанное ацетальное промежуточное соединение 86-3. Конденсирование 86-4 с сопутствующим галогенированием (например, РОС13) дает тиоэфир 86-4. Сульфидное окисление (например, т-СРВА) соединения 86-4 дает сульфон 86-5.
На схеме 7 показан общий путь получения промежуточного соединения 87-3, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, где соответствует приведенному в данном тексте определению. В соответствии с общей схемой 7 α-кетокислота 84-7 или
- 27 029088
гидрат такого соединения объединяют с нитроанилином 87-1 в условиях восстанавливающей циклизации (например, Ре, АсОН), в результате чего получают 87-2. Активация (например, дегидрогалогенирование под действием РОС13 или Τ£2Ο/ΏΙΡΕΑ) спиртовой группы в гидроксихиноксалин 87-2 до подходящей уходящей группы (ЬО) дает промежуточное соединение 87-3. Примеры уходящих групп включают следующие, но не ограничиваются ими: -С1, -Р, -Вг, -I, -8О2Ме и -ΟΤί.
На схеме 8 показан альтернативный общий путь получения промежуточного соединения 87-3, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, где \У,, соответствует приведенному в данном тексте определению. В общей схеме 8 кетокислоту 84-7 или кетоэфир 84-3 или гидрат таких соединений нагревают с диамином 85-1 (например, К = алкил) или в присутствии реагента сочетания (например, ΗΑΤϋ, если К = Н) и основания (например, ΏΙΡΕΑ), что дает альтернативный путь получения промежуточного соединения 87-2. Активация (например, дегидрогалогенирование под действием РОС13 или Τ£2Ο/ΏΙΡΕΑ) спирта в гидроксихиноксалине 87-2 до соответствующей уходящей группы (ЬО) дает промежуточное соединение 87-3. Примеры уходящих групп ЬО включают следующие, но не ограничиваются ими: -С1, -Р, -Вг, -I, -8О2Ме и -(.ЛТ.
Схема 9
псевдогалоген
87-2 87-3
На схеме 9 показан другой альтернативный общий путь получения промежуточного соединения 87-3, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, где А',, соответствует приведенному в данном тексте определению. В общей схеме 9 α-гидроксикислоту 84-6 защищают как эфир (например, ΤΜ8Ο) с последующей активацией кислоты (например, ΗΑΤϋ) и сочетанием с анилином 87-1, в результате чего получают промежуточное соединение 89-1, в котором РО представляет собой подходящую защитную группу. Удаление защиты с продукта 89-1 (например, НС1, МеОН) с последующим окислением (например, ΤΕΜΡΟ, NСδ) дает соединение 89-2, которое выделяют как смесь гидрата и полуацеталя. Последующее восстановление (например, Ре, ΑΟ) функциональной ароматической нитрогруппы приводит к циклоконденсации ΐπ δίΐιι, в результате чего получают гидроксихиноксолин 87-2. Активация (например, дегидрогалогенирование под действием РОС13 или 'ГРО/ОП’! А) спиртовой группы в гидроксихиноксалине 87-2 до подходящей уходящей группы (ЬО) дает промежуточное соединение 87-3. Примеры уходящих групп ЬО включают следующие, но не ограничиваются ими: -С1, -Р, -Вг, -I, -8О2Ме и -(.ЛТ.
- 28 029088
Схема 10
Схема 10 обобщает два различных способа получения группы ©, соответствующей приведенному в настоящем документе определению, с транс-1,2 положением М (если М=-О-) и группами 1, присоединенными к соседним атомам группы ©, ' из общего исходного эпоксидного соединения. Как показано на схеме 10, ©, М, 1 и Ьр соответствуют приведенным выше определениям. Эпоксидное кольцо группы © предшественника 810-1 может быть раскрыто с образованием спирта 810-2 при помощи органометаллического нуклеофила (например, реактива Гриньяра или органокупратного реагента). Этоксид 810-1 также можно активировать (например, при помощи кислоты Льюиса) и раскрыть при помощи фрагмента Г-Ьр (например, 1-гидрокси-у-алкенил), в результате чего получают 810-3.
Ьр представляет собой "линкерный фрагмент" (т.е. предшественник Ь), причем связанная ненасыщенная углерод-углеродная часть (например, алкен или алкин) части Ьр, расположенной дистально по отношению к ©, облегчает в качестве неограничивающего примера катализируемую металлом реакцию, которая приводит к связыванию Ьр с и с образованием группы Ь.
Неограничивающие примеры, которые приводят к такому связыванию, включают катализируемое Ки замыкание кольца или катализируемую Ρά реакцию кросс-сочетания (например, реакции сочетания по Негиши, Хеку или Соногашире).
Схема 11
На общей схеме 11 показаны два дополнительных способа получения группы © с транс-1,2 положением М (если М=-О-) и 1, присоединенными к соседним атомам группы ©.
Как показано на схеме 10, © и Ьр соответствуют приведенным в настоящем документе определениям. Используя в качестве исходного материала общий кетон 811-1 путем обработки соответствующим основанием (например, ЬЭЛ или ΕίΗΜΏ8), образуют енолят, который после обработки соответствующим электрофилом (например, алкилбромидом) дает после выделения функционализированный кетон 811-2. Этот кетон восстанавливают (например, №ВН4), в результате чего получают рацемическую смесь промежуточного фрагмента 810-2 после отделения от цис-диастереомеров посредством хроматографии или перекристаллизации. В альтернативном варианте енолят, полученный из кетона 811-1, фиксируют
- 29 029088
(например, ЬЭЛ, затем Т£2О) с образованием винилтрифлата 811-3. Это соединение подвергают катализируемому палладием кросс-сочетанию (например, сочетание по Судзуки или Хеку), в результате чего получают группу ЬР в промежуточном соединении 811-4. Гидроборирование олефина с последующим окислением (например, ΒΗ3·ΏΜ8, затем №ОН/Н2О2) дает 811-5. Гидролиз ацеталя (например, водным раствором НС1) с последующей олефинизацией (например, с использованием реагента Виттига или Теббе) дает промежуточный олефин 810-2 в виде рацемической смеси.
На схеме 12 показан общий путь получения промежуточного соединения 812-5, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, где ЬР соответствует приведенному в данном тексте определению. На общей схеме 12 показан стереоселективный путь получения групп Θ, таких как 812-5. Аллиловый спирт 812-1 может быть защищен (например, Ρίν-Ο) с получением смешанного диацеталя 812-2. Ацетильная группа может быть подвергнута селективному гидролизу в мягких условиях (например, К2СО3, МеОН), в результате чего получают аллиловый спирт 812-3. Затем это промежуточное соединение подвергают 8н2'-вытеснению (например, с использованием органокупратного реагента), в результате чего получают аллиловый спирт 812-4. Циклопропанирование (например, в условиях Симмонса-Смита) дает конденсированное бициклическое промежуточное соединение 812-5.
На схеме 13 показан общий путь получения промежуточного соединения 813-4, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, где ЬР соответствует приведенному в данном тексте определению. На схеме 13 циклопента-1,3-диен металлируют (например, Να), а затем обрабатывают линкерным фрагментом, содержащим защищенную кислородную функциональную группу (РС, например силиловый эфир или диалкилацеталь) и уходящую группу (ЬС, например галогеновую или псевдогалогеновую уходящую группу), в результате чего получают промежуточное соединение 813-1. Последующее гидроборирование-окисление (например, ΒΗ3·ΏΜ8, №ОН/Н2О2) дает спирт 813-2, который подвергается стереоселективному циклоприсоединению (например, циклопропанированию Симмонса-Смита), в результате чего получают конденсированный [3,1,0]бицикл 813-3. Снятие защиты с защищенного функционального кислорода в ЬР (например, водным раствором кислоты для ацеталя или ТВАР для силилового эфира) происходит с последующим окислением до альдегидной степени окисления (например, с использованием перйодинана Десс-Мартина), при необходимости. И, наконец, олефинизация (например, с использованием метилтрифенилфосфония бромида, №НМ08) дает промежуточное соединение 813-4.
- 30 029088
Схема 14
О о 314-5
На схеме 14 показан общий путь получения промежуточного соединения 814-5, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, где 1, и Т соответствуют приведенным в настоящем документе определениям. В соответствии со Схемой 14 алкен 8141 обрабатывают реагентом сочетания (например, Э8С) и основанием (например, пиридин), в результате чего получают активированное промежуточное соединение 814-2, где ЬО представляет собой подходящую уходящую группу. Примеры уходящих групп ЬО включают следующие, но не ограничиваются ими: имидазол и Ν-ОН сукцинимид. Промежуточное соединение 814-2 затем обрабатывают аминоэфиром 814-3 в присутствии основания (например, К3РО4), в результате чего получают промежуточное соединение 814-4. Гидролиз (например, ЬлОН) сложного эфира дает аминокислоту 814-5.
Схема 15
О о
315-4
На схеме 15 показан общий путь получения промежуточного соединения 815-4, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, в которых 1, Ьр, Т и Р соответствуют приведенным в настоящем документе определениям. В соответствии со схемой 15 алкин 815-1 обрабатывают реагентом сочетания (например, Э8С) и основанием (например, пиридином), в результате чего получают активированное промежуточное соединение 815-2, в котором ЬО представляет собой подходящую уходящую группу. Примеры уходящих групп включают следующие, но не ограничиваются ими: имидазол и Ν-ОН сукцинимид. Промежуточное соединение 815-2 затем обрабатывают аминоэфиром 814-3 в присутствии основания (например, К3РО4), в результате чего получают промежуточное соединение 815-3. Гидролиз (например, ЬлОН) сложного эфира дает аминокислоту 815-4.
- 31 029088
Схема 16
агент пептидного
316-1 816-2 814-3
Где:
К=алкил
РЕ=защитная группа
Ю=имидазол, Ν-ОН сукцинимид ит.д.
гидролиз
2. Соединение, выбранное из группы, состоящей из:
или его фармацевтически приемлемая соль.
2,7-Дихлор-3-(проп-2-ен-1-ил)хиназолин-4(3Н)-он (промежуточное соединение С12) получали в соответствии с этапом 3 для промежуточного соединения Ό5 в УО 2012/040040, с. 53-54.
Получение промежуточного соединения С13.
Этап 1. В круглодонную колбу объемом 1 л, продутую азотом и с поддерживаемой нейтральной атмосферой азота, помещали нафталин-1-амин (15 г, 104,76 ммоль, 1,00 экв.), 1,1-бис-(метилсульфанил)-2нитроэтен С13-1 (17,3 г, 104,70 ммоль, 1,00 экв.) и этанол (520 мл). Полученный раствор перемешивали при 80°С в течение 18 ч. Твердые вещества собирали фильтрацией и промывали 1x100 мл эфира, в результате чего получали 20 г (73%) ^[(2)-1-(метилсульфанил)-2-нитроэтенил]нафталин-1-амина С13-2 в виде желтого твердого вещества.
(Е8, т/ζ): 261[М+Н]+.
Этап 2. В трехгорлую круглодонную колбу объемом 250 мл, продутую азотом и с поддерживаемой нейтральной атмосферой азота, помещали ^[(2)-1-(метилсульфанил)-2-нитроэтенил]нафталин-1-амин С13-2 (10 г, 38,42 ммоль, 1,00 экв.), ^^Ν (92 мл), а затем добавляли фосфороилтрихлорид (10,8 мл, 3,00 экв.), по каплям с перемешиванием при 0°С. Смесь перемешивали при 0°С в течение 15 мин и при 80°С в течение 4 ч. Полученную смесь концентрировали под вакуумом, остаток разбавляли 300 мл дихлорметана. Полученную смесь промывали 2x200 мл бикарбоната натрия (насыщ) и 1x100 мл солевого раствора, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток наносили на колонку с силикагелем, элюируя смесью этилацетат:РЕ (1:20), в результате чего получали 5,5 г (27%) 3-хлор-2-(метилсульфанил)бензо[1]хиноксалина С13-3 в виде желтого твердого вещества.
Этап 3. В круглодонную колбу объемом 1 л, продутую азотом и с поддерживаемой нейтральной атмосферой азота, помещали раствор 3-хлор-2-(метилсульфанил)бензо[1]хиноксалиан С13-3 (5,0 г, 19,18 ммоль, 1,00 экв.) в дихлорметане (116 мл). К этой смеси добавляли раствор 3-хлорбензол-1карбопероксовой кислоты (16,6 г, 96,20 ммоль, 5,00 экв.) в дихлорметане (263 мл) при 0°С. Смесь перемешивали при 0°С в течение 30 мин и при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь затем нейтрализовали добавлением 200 мл воды. Полученную смесь промывали 2x300 мл №НСО3 (10 %), 2x200 мл Н2О и 2x200 мл солевого раствора, сушили над безводным сульфатом натрия и концентрировали под вакуумом. Остаток растирали с 30 мл СН3СК Твердые вещества собирали фильтрацией, в результате чего получали 5,0 г (89%) 3-хлор-2-метансульфонилбензо[1]хиноксалина С13 в виде желтого твердого вещества.
(Электрораспыление, т/ζ): 293 [М+Н]+.
1Н-ЯМР: (СЭС13, 300МГц): δ 9,03-9,00 (т, 1Н), 8,26 (б, 1=2,7 Гц, 1Н), 8,05-8,03 (т, 1Н), 7,97 (б, 1=9,3 Гц, 1Н), 7,88-7,85 (т, 2Н), 3,68 (δ, 3Н).
- 54 029088
Группа промежуточных соединений Ό. Получение промежуточного соединения Ό1.
Промежуточное соединение Ό1 получали в соответствии со способом, описанным в примере 4А международной патентной публикации № АО 2006/007700, с. 87.
Получение примеров.
Пример 1. Получение (1а8,2аК,68,98,11К,23аК,23Ъ8)-6-трет-бутил-Ы-[(1К,2К)-1[(циклопропилсульфонил)карбамоил]-2-(дифторметил)циклопропил]-15-метокси-4,7-диоксо1а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23а,23Ъ-гексадекагидро-1Н,9Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[1',2':18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ъ]хиноксалин-9-карбоксамида.
Этап 1. Получение 1-1.
Хиноксалин С1 (2,29 г, 10,0 ммоль) объединяли с Ы-Вос-транс-4-гидрокси-Ь-пролина метиловым эфиром (2,65 г, 11,0 ммоль) и Сз2СО3 (3,59 г, 11,0 ммоль) в виде суспензии в МеСЫ (20 мл). Перемешиваемую реакционную смесь нагревали до 85°С в течение 16 ч, затем фильтровали через целит и концен- 55 029088
трировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле (от 5 до 50% ЕЮАс/гекс), в результате чего получали 1-1.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением' (т/ζ): [М-Вос+2Н]+ расч. для С15Н17СШ3О4: 338,09; эксп.: 337,94.
Этап 2. Получение 1-2.
Карбамат 1-1 (401 мг, 0,916 ммоль) растворяли в ДХМ (10 мл) и обрабатывали соляной кислотой (4,0 М в диоксане, 2 мл, 8 ммоль). После перемешивания при к.т. в течение 16 ч реакционную смесь концентрировали под вакуумом, в результате чего получали гидрохлорид амина 1-2, который использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С15Н17С1М3О4: 338,09; эксп.: 338,30.
Этап 3. Получение 1 -3.
Объединяли гидрохлорид амина 1-2 (0,916 ммоль) и промежуточное соединение В3 (413 мг, 1,28 ммоль) и обрабатывали ВЕР (351 мг, 1,28 ммоль), ЕЮАс (9 мл), ИМР (1 мл) и ΌΙΡΕΑ (0,80 мл, 4,6 ммоль). Перемешиваемую смесь нагревали до 50°С в течение 3 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали последовательно насыщенным водным ИаНСО3 и солевым раствором. Органическую фазу сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле (от 25 до 40% ЕЮАс/гекс), в результате чего получали амид 1-3.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н44С1И4О7: 643,29; эксп.: 644,15.
Этап 4. Получение 1-4.
Хлорхиноксалин 1-3 (367 мг, 0,571 ммоль) обрабатывали винилтрифторборатом калия (115 мг, 0,856 ммоль), Рб(брр£)С12-ДХМ (47 мг, 0,057 ммоль), ЕЮН (6 мл) и Εΐ3Ν (0,12 мл, 0,86 ммоль). Реакционную смесь перемешивали с обратным охладителем в течение 1 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом. Органическую фазу промывали водой и солевым раствором, затем сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле (от 25 до 40% ЕЮАс/гекс), в результате чего получали винилхиноксалин 1-4.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С35Н47И4О7: 635,34; эксп.: 635,43.
Этап 5. Получение 1-5.
Винилхиноксалин 1-4 (327 мг, 0,515 ммоль) растворяли в дихлорэтане (103 мл) и обрабатывали катализатором 2Еап-1В (35 мг, 0,052 ммоль). Смесь дегазировали барботируемым Ν2 в течение 18 мин и нагревали с обратным холодильником в течение 1,75 ч. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом и очищали сырой остаток хроматографией на силикагеле (от 25 до 40% ЕЮАс/гекс), в результате чего получали макроцикл 1-5.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н43И4О7: 607,31; эксп.: 607,46.
Этап 6. Получение 1-6.
Макроцикл 1-5 (236 мг, 0,389 ммоль) растворяли в ЕЮН (20 мл) и ЕЮАс (5 мл). Добавляли 10% Ρά/С (56 мг) и барботировали через суспензию водород в течение 4 мин. Перемешиваемую реакционную смесь выдерживали под 1 атм Н2 в течение 50 мин, а затем фильтровали через целит и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали 1-6, которое использовали дальше без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н45И4О7: 609,33; эксп.: 609,34.
Этап 7. Получение 1-7.
Соединение 1-6 (приблизительно 0,389 ммоль) обрабатывали тетрагидрофураном (10 мл) и ЬЮН (1,0 М в Н2О, 10 мл, 10 ммоль). Смесь перемешивали в течение 15 ч, затем вливали в делительную воронку, содержащую 40 мл 10% водный раствор НС1. Водный слой экстрагировали дихлорметаном. Объединенные органические вещества сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали карбоновую кислоту 1-7, которую использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н43И4О7: 595,31; эксп.: 595,38.
Этап 8. Получение примера 1.
Карбоновую кислоту 1-7 (95 мг, 0,160 ммоль) обрабатывали промежуточным соединением А9 (60 мг, 0,21 ммоль), ТВТИ (62 мг, 0,19 ммоль), ОМАР (23 мг, 0,19 ммоль), ДХМ (2 мл) и О1РЕА (0,14 мл, 0,80 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, после чего добавляли еще промежуточное соединение А9 (35 мг, 0,12 ммоль), ТВТИ (20 мг, 0,062 ммоль) и О1РЕА (0,14 мл, 0,80 ммоль). После еще 34 мин при комнатной температуре реакционную смесь концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали ЖХВД, в результате чего получали пример 1 в виде соли трифторуксусной кислоты.
- 56 029088
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,89 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С40Н53Р2Н5О98: 831,36; эксп.: 831,58.
Ή-ЯМР (400 МГц, СОаОП): δ 9,36 (δ, 1Н), 7,79 (άά, 1=7,7, 1,9 Гц, 1Н), 7,27-7,18 (т, 2Н), 6,09 (ί, 1=3,5 Гц, 1Н), 5,90 (ίά, 1=55,9, 6,7 Гц, 1Н), 5,00 (ά, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,53-4,37 (т, 2Н), 4,33 (δ, 1Н), 4,12 (άά, 1=11,8, 3,8 Гц, 1Н), 3,93 (δ, 3Н), 3,05-2,89 (т, 2Н), 2,84-2,70 (т, 1Н), 2,49 (άά, 1=13,8, 6,2 Гц, 1Н), 2,31-2,13 (т, 2Н), 2,09-1,91 (т, 3Н), 1,79 (άά, 1=28,6, 9,7 Гц, 2Н), 1,68-1,46 (т, 5Н), 1,46-1,19 (т, 7Н), 1,17-1,09 (т,2Н), 1,09-1,02 (т, 11Н), 0,63-0,45 (т, 2Н).
Пример 2. Получение (1а8,2аК,68,98,11К,23аК,23Ъ8)-6-трет-бутил-№[(1К,2К)-2-(дифторметил)-1{[(1 -метилциклопропил)сульфонил] карбамоил} циклопропил] -15-метокси-4,7-диоксо1а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23а,23Ъ-гексадекагидро-1Н,9Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[ 1 ',2': 18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ъ]хиноксалин-9-карбоксамида.
Пример 2 получали аналогично примеру 1, используя промежуточное соединение А10 вместо промежуточного соединения А9 на этапе 8. Пример 2 (107 мг) выделяли в виде соли трифторуксусной кислоты.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,85 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С41Н55Р2Н5О98: 845,37; эксп.: 845,67.
1Н-ЯМР (400 МГц, СЭзОЭ): δ 9,31 (δ, 1Н), 7,78 (ά, 1=8,8 Гц, 1Н), 7,20 (άί, 1=3,9, 2,6 Гц, 2Н), 6,06 (ί, 1=3,5 Гц, 1Н), 5,87 (ίά, 1=55,8, 6,7 Гц, 1н), 5,00 (ά, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,51-4,38 (т, 2Н), 4,34 (δ, 1Н), 4,11 (άά, 1=11,8, 3,8 Гц, 1Н), 3,92 (δ, 3Н), 3,04-2,85 (т, 1Н), 2,85-2,67 (т, 1Н), 2,49 (άά, 1=13,9, 6,4 Гц, 1Н), 2,24 (άάά, 1=20,1, 12,0, 6,2 Гц, 2Н), 2,08-1,90 (т, 3Н), 1,90-1,66 (т, 2Н), 1,66-1,46 (т, 10Н), 1,46-1,20 (т, 6Н), 1,05 (δ, 9Н), 0,98-0,82 (т, 3Н), 0,58 (ц, 1=4,1 Гц, 1Н), 0,55-0,45 (т, 1Н).
Пример 3. Получение (1а8,2аК,68,98,11К,23аК,23Ъ8)-6-трет-бутил-№[(1К,28)-1[(циклопропилсульфонил)карбамоил]-2-(2,2-дифторэтил)циклопропил]-15-метокси-4,7-диоксо1а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23а,23Ъ-гексадека-гидро-1Н,9Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[ 1 ',2': 18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ъ]хиноксалин-9-карбоксамида.
Пример 3 получали аналогично примеру 1, используя промежуточное соединение А7 вместо промежуточного соединения А9 на этапе 8. Пример 3 (52 мг) выделяли в виде соли трифторуксусной кислоты.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,82 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С41Н55Р2НзО98: 845,37; эксп.: 845,96.
Ή-ЯМР (400 МГц, СЭзОЭ) δ 9,18 (δ, 1Н), 7,78 (άά, 1=8,1, 1,5 Гц, 1Н), 7,26-7,16 (т, 2Н), 6,07 (ί, 1=3,6 Гц, 1Н), 5,89 (ίί, 1=56,5, 4,1 Гц, 1Н), 4,99 (ά, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,45 (άά, 1=11,1, 5,9 Гц, 2н), 4,32 (δ, 1Н), 4,11 (άά, 1=11,9, 3,8 Гц, 1Н), 3,92 (δ, 3Н), 3,04-2,86 (т, 2Н), 2,86-2,68 (т, 1Н), 2,47 (άά, 1=13,8, 6,3 Гц, 1Н), 2,34-2,07 (т, 4Н), 1,95 (άά, 1=11,0, 4,4 Гц, 1Н), 1,79 (άά, 1=27,1, 9,7 Гц, 3Н), 1,71-1,47 (т, 6Н), 1,47-1,18
- 57 029088
(т, 8Н), 1,18-0,92 (т, 12Н), 0,64-0,43 (т, 2Н).
Пример 4. Получение (11\,48,4а1\,88,118,131\,25а1\)-8-фет-бутиа-Х'-[(1К,21\)-Г
[(циклопропилсульфонил)карбамоил]-2-(дифторметил)циклопропил]-17-метокси-6,9-диоксо2,3,4,4а,6,7,8,9,12,13,21,22,23,24,25,25а-гексадекагидро-1Н,11Н-1,4:10,13-диметанохиноксалино[2,3к][1,10,3,6]бензодиоксадиазациклононадецин-11 -карбоксамид.
Этап 1-3. Получение 4-1 и 4-2.
Пролин гидрохлорид 1-2 (1,3 ммоль) растворяли со смесью промежуточных соединений В1 и В2 1:1 В2 (1,29 ммоль) и БИРНА (1,0 мл, 5,7 ммоль) в ДМФ (6,5 мл). НАТи (597 мг, 1,57 ммоль) добавляли одной порцией. Реакционную смесь перемешивали 80 мин при к.т. и разбавляли насыщенным водным NаНСО3 (30 мл) и Е!ОАс (50 мл). Разделяли фазы и органическую фазу промывали водой (30 мл) и солевым раствором (30 мл). Органическую фазу сушили над безводным Х'а28О|. фильтровали и концентрировали под вакуумом с получением неочищенного остатка, который очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали остаток (732 мг; ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С34Н46СШ4О7: 657,3; эксп.: 657,0). Перемешиваемую смесь этого остатка,
Р0С12(йрр1)-СН2С12 (68 мг, 0,083 ммоль) и винилтрифторбората калия (304 мг, 2,27 ммоль) в Е!ОН (10 мл) барботировали аргоном в течение нескольких минут. Добавляли триэтиламин (330 мкл, 2,35 ммоль) и нагревали смесь до 75°С в течение 60 мин. Реакционную смесь охлаждали до температуры окружающей среды, промывали этилацетатом, промывали водой и солевым раствором. Органические вещества сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток, который очищали хроматографией на силикагеле (от 20 до 30% Е!ОАс в гексанах), в результате чего получали желтое масло (676 мг; ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С36Н49^О7: 649,4; эксп.: 649,1). Этот остаток (626 мг, 0,965 ммоль) растворяли в дихлорэтане (250 мл) и барботировали раствор аргоном в течение 15 мин. Добавляли катализатор ΣΛη 1В (75 мг, 0,050 ммоль) в виде раствора в дихлорэтане (10 мл) и перемешивали полученный раствор при 85°С в атмосфере аргона в течение 1,5 ч. Затем реакционную смесь концентрировали под вакуумом и очищали полученный остаток хроматографией на силикагеле (от 20 до 40% Е!ОАс в гексанах), в результате чего получали промежуточное соединение 4-1 (ЖХМС с ионизацией электрораспылением (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С34Н4^4О7: 621,3; эксп.: 621,1) и 4-2 (ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С34Н45ШО7: 621,3; эксп.: 621,1).
Этапы 4 и 5: Получение 4-3.
К раствору 4-1 (205 мг, 0,330 ммоль) в смеси 1:1 Е!ОАс:Е!ОН (5 мл) добавляли Рй/С (10 мас.% Рф 68 мг). Реакционный сосуд дважды продували водородом и перемешивали при к.т. при 1 атм Н2 в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита с этилацетатом и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток (188 мг, ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С34Н4Л4О7: 623,3; эксп.: 623,2). Этот остаток растворяли в ТГФ (4,3 мл) и Н2О (1,7 мл). Добавляли ЬЮН-Н2О (79 мг, 1,9 ммоль) и перемешивали смесь при к.т. в течение 14,5 ч. Реакционную смесь нейтрализовали 1 М водным раствором НС1 (2 мл) и разбавляли этилацетатом (30 мл) и 1 М водным раствором НС1 (20 мл). Разделяли фазы и водную фазу экстрагировали этилацетатом (30 мл). Объединенную органическую фазу сушили над безводным Nа28О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали 4-1, которое использовали непосредственно на следующем этапе без дальнейшей очистки.
- 58 029088
ЖХМС с ионизацией электрораспылением- (т/ζ): [М-Н]- расч. для С33Н43^О7: 607,3; эксп.: 607,0.
Этап 6. Получение примера 4.
К суспензии кислоты 4-3 (66,5 мг, 0,109 ммоль) и промежуточного соединения А9 (35 мг, 0,12 ммоль) в МеСN (1,6 мл) добавляли Б1РЕА (80 мкл, 0,46 ммоль). К полученному раствору добавляли НАТИ (52 мг, 0,137 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 60 мин и разбавляли этилацетатом (15 мл), 1 М водным раствором НС1 (10 мл) и солевым раствором (5 мл). Разделяли фазы и водную фазу экстрагировали этилацетатом (20 мл). Объединенную органическую фазу сушили над безводным Νί-υδΟι, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток. Очистка хроматографией на силикагеле (от 15 до 30% ацетона в гексанах) давала аморфный остаток, который лиофилизировали из воды и МеСЫ, в результате чего получали пример 4.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,95 мин.
ХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С41Н55Р2Н5Ос^: 845,4; эксп.: 845,2.
Н-ЯМР (300 МГц, СБС13): δ 10,28 (δ, 1Н), 7,82 (ά, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,19 (άά, 1=9,1, 2,8 Гц, 1Н), 7,11 (ά, 1=2,3 Гц, 2Н), 6,19-5,72 (т, 2Н), 5,37 (ά, 1=10,1 Гц, 1Н), 4,48 (ά, 1=10,1 Гц, 1Н), 4,42-4,24 (т, 3Н), 4,05 (άά, 1=11,6, 3,7 Гц, 1Н), 3,92 (δ, 3Н), 2,96-2,81 (т, 2Н), 2,73-2,59 (т, 2Н), 2,43-2,30 (т, 1Н), 2,20-2,04 (т, 3Н), 1,96-1,70 (т, 3Н), 1,70-0,96 (т, 27Н).
Пример 5. Получение (1Κ,4δ,4аΚ,8δ,11δ,13Κ,25аΚ)-8-τреτ-буτил-N-[(1Κ,2Κ)-2-(дифτормеτил)-1{[(1 -метилциклопропил)сульфонил]карбамоил} циклопропил] - 17-метокси-6,9-диоксо2,3,4,4а,6,7,8,9,12,13,21,22,23,24,25,25а-гексадекагидро-1Н,11Н-1,4:10,13-диметанохиноксалино[2,3к][1,10,3,6]бензодиоксадиазациклононадецин-11 -карбоксамида.
Пример 5 (59,3 мг) получали аналогично примеру 4, используя промежуточное соединение А10 вместо промежуточного соединения А9 на этапе 6.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,86 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С.12115-1;2Н,С)+: 859,4; эксп.:
859,3.
Ή-ЯМР (400 МГц, СБС13): δ 9,85 (δ, 1Н), 7,83 (ά, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,29 (δ, 1Н), 7,19 (άά, 1=9,1, 2,7 Гц, 1Н), 7,12 (ά, 1=2,7 Гц, 1Н), 6,17-5,67 (т, 2Н), 5,40 (ά, 1=10,1 Гц, 1Н), 4,53-4,26 (т, 4Н), 4,04 (άά, 1=12,1, 4,5 Гц, 1Н), 3,93 (δ, 3Н), 2,95-2,83 (т, 1Н), 2,74-2,60 (т, 2Н), 2,46-2,32 (т, 1н), 2,20-2,09 (т, 1=9,0 Гц, 2Н), 2,00-1,17 (т, 22Н), 1,06 (δ, 9Н), 0,92-0,77 (т, 3Н).
Пример 6. Получение (1δ,4Κ,4аδ,8δ,11δ,13Κ,25аδ)-8-τреτ-буτил-N-[(1Κ,2Κ)-1[(циклопропилсульфонил)карбамоил]-2-(дифторметил)циклопропил]-17-метокси-6,9-диоксо2,3,4,4а,6,7,8,9,12,13,21,22,23,24,25,25а-гексадекагидро-1Н,11Н-1,4:10,13-диметанохиноксалино[2,3к][1,10,3,6]бензодиоксадиазациклононадецин-11 -карбоксамида.
Этапы 1-3. Получение примера 6.
К раствору 4-2 (160 мг, 0,26 ммоль) в смеси 1:1 ЕЮАс:ЕЮН (4 мл) добавляли Ρά/С (10 мас.% Ρά, 55 мг). Реакционный сосуд дважды продували водородом и перемешивали при к.т. под 1 атм Н2 в течение 5,5 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита этилацетатом и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток (155 мг, ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С^Н^^О/ 623,3; эксп.: 623,2). Этот остаток затем растворяли в ТГФ (4,3 мл) и Н2О (1,7 мл). Добавляли ЬЮН-Н2О (64 мг, 1,5 ммоль) и перемешивали смесь при к.т. в течение 14,5 ч. Реакционную смесь нейтрализовали 1 М водным раствором НС1 (2 мл) и разбавляли этилацетатом
- 59 029088
(30 мл) и 1 М водным раствором НС1 (20 мл). Разделяли фазы и водную фазу экстрагировали этилацетатом (30 мл). Объединенную органическую фазу сушили над безводным Να28Ο4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали остаток (139 мг; ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для Ο33Η45Ν4Ο7: 609,3; эксп.: 608,9), которое использовали непосредственно на следующем этапе без дальнейшей очистки. К суспензии продукта предыдущего этапа (54 мг, 0,089 ммоль) и промежуточного соединения А9 (28,4 мг, 0,098 ммоль) в ΜβΟΝ (1,5 мл) добавляли ΌΙΡΕΑ (70 мкл, 0,40 ммоль). К полученному раствору добавляли НАТИ (43,5 мг, 0,114 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 120 мин и разбавляли этилацетатом (15 мл), 1 М водным раствором НС1 (10 мл), водой (10 мл) и солевым раствором (5 мл). Разделяли фазы и водную фазу экстрагировали этилацетатом (20 мл). Объединенную органическую фазу сушили над безводным Να28Ο4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток. Очистка хроматографией на силикагеле (от 17 до 40% ацетона в гексанах) давала аморфный остаток, который лиофилизировали из воды и ΜβΟΝ, в результате чего получали пример 6.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,85 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для Ο41Η55Ρ2Ν6Ο98: 845,4; эксп.: 845,2.
Ίί-ЯМР (300 МГц, ΟΌΟ13): δ 9,80 (δ, 1Н), 9,05 (δ, 1Н), 7,88-7,78 (т, 1Н), 7,24-7,17 (т, 2Н), 6,95 (ά, 1=9,9 Гц, 1Н), 6,08-5,96 (т, 1Н), 5,95-5,50 (т, 1Н), 4,66 (άά, 1=8,3, 3,8 Гц, 1Н), 4,41-4,30 (т, 2Н), 4,00 (δ, 1Н), 3,95 (δ, 3Н), 3,81 (άά, 1=10,5, 4,1 Гц, 1Н), 3,12-2,86 (т, 2Н), 2,79 (ΐ, 1=6,1 Гц, 2Н), 2,57-2,41 (т, 1Н), 2,31 (ά, 1=4,5Гц, 1Н), 2,13-1,91 (т, 3Н), 1,87-0,96 (т,28Н), 0,93-0,81 (т, 1Н).
Пример 7. Получение (1аК,1Ъ8,58,88,10К,22аК,23аК)-5-трет-бутил-№[(1К,2К)-1[(циклопропилсульфонил)карбамоил]-2-(дифторметил)циклопропил]-14-метокси-3,6-диоксо1а,1Ъ,3,4,5,6,9,10,18,19,20,21,22,22а,23,23а-гексадекагидро-1Н,8Н-7,10метаноциклопропа[3',4']циклопента[ 1',2':18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[ 11,12-
К раствору гидрохлорида амина 1-2 (268 мг, 0,65 ммоль) и промежуточного соединения В8 (0,54 ммоль) добавляли ίΡιγΝΕΐ (0,43 мл, 2,46 ммоль), а затем НАТИ (271 мг, 0,713 ммоль). Полученный раствор перемешивали 1,5 ч при к.т. и разбавляли этилацетатом (30 мл) и насыщенным водным раствором №НСО3 (20 мл). Разделяли фазы и органическую фазу промывали водой (2x20 мл), сушили над безводным Να28Ο4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Очистка хроматографией на силикагеле (от 10 до 30% ацетон в гексанах) давала 7-1.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для Ο33Η44Ο1Ν4Ο7: 643,3; эксп.:
643,3.
Этап 2. Получение 7-2.
Перемешиваемую смесь соединения 7-1 (155 мг, 0,24 ммоль), ΡάΟ12(άρρί)·ΟΗ2Ο12 (18 мг, 0,022 ммоль) и винилтрифторборат калия (84 мг, 0,63 ммоль) в ΕΐΟΗ (3 мл) барботировали аргоном в течение 5 мин. Добавляли триэтиламин (90 мкл, 0,64 ммоль) и перемешивали смесь при 70°С в течение 65 мин. Реакционную смесь охлаждали до температуры окружающей среды, промывали этилацетатом (30 мл) и промывали водой (30 мл). Органическую фазу сушили над безводным Να28Ο4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток, который очищали хроматографией на силикагеле (от 20 до 40% ΕΐΟΑο в гексанах), в результате чего получали 7-2.
- 60 029088
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С35Н47Н4О7: 635,3; эксп.: 635,2.
Этап 3. Получение 7-3.
Винилхиноксалин 7-2 (119 мг, 0,187 ммоль) растворяли в дихлорэтане (60 мл) и барботировали раствор аргоном в течение 10 мин. Добавляли катализатор /Иап 1В (16 мг, 0,022 ммоль) в виде раствора в дихлорэтане (1 мл) и перемешивали полученный раствор при 85°С в атмосфере аргона в течение 45 мин. Реакционную смесь затем концентрировали под вакуумом и очищали хроматографией на силикагеле (от 20 до 40% ЕЮАс в гексанах), в результате чего получали 7-3.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н43Н4О7: 607,3; эксп.: 607,3.
Этапы 4 и 5. Получение 7-4.
К раствору 7-3 (74 мг, 0,12 ммоль) в смеси 1:1 ЕЮАс:ЕЮН (3 мл) добавляли Рй/С (10 мас.% Рй, 45 мг). Реакционный сосуд дважды продували водородом и перемешивали при к.т. под 1 атм Н2 в течение 2 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита этилацетатом и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток, который использовали непосредственно на следующем этапе. (ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н45Н4О7: 609,3; эксп.: 608,9). Этот остаток растворяли в ТГФ (1,5 мл), добавляли Н2О (0,75 мл) и МеОН (0,75 мл). ЕЮН-Н2О (52 мг, 1,2 ммоль) и перемешивали смесь при 45°С в течение 70 мин. Реакционную смесь после этого нейтрализовали 1 М водным раствором НС1 (1,1 мл) и разбавляли дихлорметаном (20 мл) и 0,3 М водным раствором НС1 (20 мл). Разделяли фазы и водную фазу экстрагировали дихлорметаном (30 мл). Объединенную органическую фазу сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали 7-4.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н43Н4О7: 595,3; эксп.: 595,2.
Этап 6. Получение примера 7.
К суспензии кислоты 7-4 (36,6 мг, 0,0615 ммоль) и промежуточного соединения А9 (25 мг, 0,086 ммоль) в МеСN (1,5 мл) добавляли ΌΙΓΕΑ (56 мкл, 0,32 ммоль). К полученному раствору добавляли НАТи (35,5 мг, 0,093 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 90 мин и разбавляли этилацетатом (20 мл) и 0,2 М водным раствором НС1 (20 мл). Разделяли фазы и водную фазу экстрагировали этилацетатом (20 мл). Объединенную органическую фазу сушили над безводным Н28О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток. Очистка хроматографией на силикагеле (от 10 до 45% ацетона в гексанах) давала аморфный остаток, который лиофилизировали из воды и МеСН, в результате чего получали пример 7.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,67 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С40Н53Р2Н6О98: 831,4; эксп.:
831,3.
1Н-ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 10,28 (δ, 1Н), 7,82 (й, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,20 (йй, 1=9,1, 2,8 Гц, 1Н), 7,13 (й, 1=2,7 Гц, 1Н), 7,04 (δ, 1Н), 6,20-5,72 (т, 2Н), 5,45 (й, 1=9,8 Гц, 1Н), 5,21-5,10 (т, 1Н), 4,41 (й, 1=9,8 Гц, 1Н), 4,34 (йй, 1=10,9, 6,6 Гц, 1Н), 4,20 (й, 1=12,0 Гц, 1Н), 4,04 (йй, 1=11,8, 3,3 Гц, 1Н), 3,94 (δ, 3Н), 3,052,84 (т, 2Н), 2,70-2,55 (т, 2Н), 2,47-2,31 (т, 1Н), 2,14-2,07 (т, 1Н), 1,99-0,80 (т, 28Н), 0,66-0,56 (т, 1Н), 0,42 (йй, 1=13,0, 7,8 Гц, 1Н).
Пример 8. Получение (1аК,1Ь8,58,88,10К,22аК,23аК)-5-трет-бутил-Н-[(1К,2К)-2-(дифторметил)-1{[(1 -метилциклопропил)сульфонил] карбамоил } циклопропил] -14-метокси-3,6-диоксо1 а, 1 Ь,3,4,5,6,9,10,18,19,20,21,22,22а,23,23а-гексадекагидро-1Н,8Н-7,10метаноциклопропа[3',4']циклопента[ 1',2':18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино [11,12Ь]хиноксалин-8-карбоксамида.
Пример 8 получали аналогично примеру 7, используя промежуточное соединение А10 вместо промежуточного соединения А9 на этапе 6.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,79 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С41Н55Р2Н6О98: 845,4; эксп.: 845,2.
1Н-ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 9,85 (δ, 1Н), 7,82 (й, 1=9,0 Гц, 1Н), 7,20 (йй, 1=9,1, 2,7 Гц, 1Н), 7,13 (й, 1=2,7 Гц, 1Н), 7,08 (δ, 1Н), 6,17-5,68 (т, 2Н), 5,51 (й, 1=9,8 Гц, 1Н), 5,17 (ί, 1=5,9 Гц, 1Н), 4,47-4,33 (т, 2Н), 4,24 (й, 1=11,9 Гц, 1Н), 4,03 (йй, 1=11,9, 3,5 Гц, 1Н), 3,94 (δ, 3Н), 3,05-2,88 (т, 1Н), 2,72-2,57 (т, 2Н), 2,482,33 (т, 1Н), 2,11-2,04 (т, 1Н), 2,01-1,84 (т, 2Н), 1,82-1,13 (т, 17Н), 1,06 (δ, 9Н), 0,93-0,77 (т, 3Н), 0,65- 61 029088
0,55 (т, 1Н), 0,49-0,37 (т, 1Н).
Пример 9. Получение (1аЗ,2аК-,63,93,11К-,23аК-,23ЬЗ)-6-трет-бутил-Ы-[(1К-,2К_)-1[(циклопропилсульфонил)карбамоил]-2-(дифторметил)циклопропил]-19,19-дифтор-15-метокси-4,7диоксо-1 а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23 а,23Ь-гексадекагидро-1 Н,9Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[ 1 ',2' :18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ь]хиноксалин-9-карбоксамида.
Этап 1. Получение 9-1: Промежуточное соединение С4 (361 мг, 1,33 ммоль), №Вос-транс-4гидрокси-Ь-пролина метиловый эфир (489 мг, 2,00 ммоль, чистые реагенты А1М8) и карбонат цезия (651 мг, 2,00 ммоль) разбавляли в Ο^ΟΝ (5 мл) и нагревали до 80°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до к.т., разбавляли этилацетатом (15 мл) и фильтровали через слой целита. Остаток промывали этилацетатом и концентрировали фильтрат под вакуумом. Остаток очищали хроматографией на силикагеле (0-100% ЕЮАс/гекс). в результате чего получали 9-1.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением (т/ζ): [М+Н] расч. для С23Н28Р2НЮ6: 480,19; эксп.: 480,30.
Этап 2. Получение 9-2.
К раствору 9-1 (392 мг, 0,82 ммоль) в дихлорметане (3 мл) медленно добавляли триметилсилил трифторметансульфонат (212 мкл, 1,23 ммоль) при 23°С в атмосфере аргона. Через 20 мин полученную смесь концентрировали под вакуумом, в результате чего получали промежуточное соединение 9-2 в виде соли трифлатной кислоты, которую использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С18Н20Р2ИЮ4: 380,14; эксп.: 380,22.
Этап 3. Получение 9-3.
К раствору 9-2 (432 мг, 0,82 ммоль) в ДМФ (2 мл) добавляли промежуточное соединение В5 (275 мг, 0,89 ммоль), НАТи (467 мг, 1,23 ммоль) и ιΡγ2ΝΕϊ (0,71 мл, 4,09 ммоль) при 23°С. Через 40 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x20 мл). Объединенные органические слои промывали водой (50 мл), солевым раствором (25 мл), сушили над безводным МдЗО4 и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (0-100% ЕЮАс/гексан), в результате чего получали 9-3.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С35Н45р2Х4О7: 671,32; эксп.: 671,51.
- 62 029088
Этап 4. Получение 9-4.
К раствору 9-3 (300 мг, 0,45 ммоль) в дегазированном ДХЭ (100 мл) добавляли катализатор /Нап 1В (33 мг, 0,045 ммоль), а затем дополнительно дегазировали в течение 10 мин. Полученный раствор нагревали с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 75 мин. Реакционную смесь затем концентрировали под вакуумом и очищали хроматографией на силикагеле с использованием 0-100% ЕЮАс/гексан), получая в результате 9-4.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н41Р2НЮ7: 643,29; эксп.:
643.44.
Этапы 5 и 6. Получение 9-5.
К раствору соединения 9-4 (220 мг, 0,34 ммоль) в ЕЮН (7 мл) добавляли Ρά/С (10 мас.% Ρά, 38 мг). Атмосферу для реакции заменяли на Н2 и перемешивали реакционную смесь при к.т. под 1 атм Н2 в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали ЕЮН и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток, который снова помещали в реакционные условия еще на 2 дня. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этанолом и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток, который использовали далее без дальнейшей очистки. (ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н43Р2^О7: 645,30; эксп.: 645,51). Этот остаток растворяли в ТГФ (3 мл), Н2О (1 мл) и МеОН (1 мл). ЬЮН-Н2О (71 мг, 1,7 ммоль) добавляли и перемешивали смесь при 23°С в течение 2 ч. Растворители удаляли под вакуумом, остаток выделяли в этилацетате (10 мл) и 1 М НС1 (10 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (10 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным Мд8О4 и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали остаток 9-5, который использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н41Р2Н|О7: 631,29; эксп.: 631,46).
Этап 7. Получение примера 9.
К суспензии соединения 9-5 (56,8 мг, 0,090 ммоль) и промежуточного соединения А9 (39,3 мг, 0,135 ммоль) в ΜеСN (3 мл) добавляли НАТи (55 мг, 0,144 ммоль) и [)ΙΡ1Ά (78 мкл, 0,45 ммоль) при 23°С. Через 20 мин раствор непосредственно очищали обращенно-фазовой ЖХВД (колонка Оеш1ш 5 мкм С18 110 А, 50-100% ЛС\/Н2О + 0,1% ТФУК) и лиофилизировали, в результате чего получали пример 9 в виде соли ТФУК.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,87 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С40Н51Р4Н,О98: 867,33; эксп.:
867.45.
1Н-ЯМР (400 МГц, СП3ОЭ): δ 9,46 (§, 1Н), 7,93 (ά, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,33 (ά, 1=2,8 Гц, 1Н), 7,30 (ά, 1=2,8 Гц, 1Н), 7,28 (ά, 1=2,7 Гц, 1Н), 6,16 (ί, 1=3,6 Гц, 1Н), 5,89 (ίά, 1=55,7, 6,8 Гц, 1Н), 4,93 (ί, 1=9,8 Гц, 1Н), 4,49-4,37 (т,2Н), 4,32 (§, 1Н), 4,13 (άά, 1=11,9, 3,9 Гц, 1Н), 3,96 (ά, 1=4,9 Гц, 3Н), 3,04-2,91 (т, 1Н), 2,64-2,51 (т, 1Н), 2,64-2,51 (т, 1Н), 2,32-2,15 (т, 2Н), 2,11-1,90 (т, 4Н), 1,87-1,62 (т, 4Н), 1,61-1,36 (т, 4Н), 1,37-1,23 (т, 4Н), 1,14-1,02 (т, 11Н), 0,60-0,47 (т,2Н).
Пример 10. Получение (1а8,2аК,68,98,11К,23аК,23Ъ8)-6-трет-бутил-У-[(1К,2К)-2-(дифторметил)-1{[(1-метилциклопропил)сульфонил]карбамоил}циклопропил]-19,19-дифтор-15-метокси-4,7-диоксо1а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23а,23Ъ-гексадекагидро-1Н,9Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[1',2':18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ъ]хиноксалин-9-карбоксамида.
Пример 10 получали аналогично примеру 9, используя промежуточное соединение А10 вместо промежуточного соединения А9 на этапе 7. Пример 10 выделяли в виде соли трифторуксусной кислоты.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,91 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М-Н]+ расч. для С41Н51Р2Н,О98: 879,35; эксп.: 879,63.
1Н-ЯМР (400 МГц, СП3ОП): δ 9,43 (§, 1Н), 7,93 (ά, 1=9,1 Гц, 1Н), 7,32 (ά, 1=2,8 Гц, 1Н), 7,30 (ά, 1=2,8 Гц, 1Н), 7,27 (ά, 1=2,7 Гц, 1Н), 6,15 (ί, 1=3,6 Гц, 1н), 5,87 (ίά, 1=55,7, 6,9 Гц, 1Н), 4,94 (ά, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,51-4,38 (т, 2Н), 4,32 (§, 1Н), 4,13 (άά, 1=11,9, 3,9 Гц, 1Н), 3,96 (§, 3Н), 2,65-2,39 (т, 2Н), 2,34-2,14
- 63 029088
(т, 2Н), 2,12-1,88 (т, 4Н), 1,87-1,63 (т, 4Н), 1,62-1,43 (т, 8Н), 1,62-1,43 (т, 2Н), 1,09-1,03 (т, 10Н), 0,960,87 (т, 2Н), 0,54 (ςά, 1=8,3, 4,9 Гц, 2Н).
Пример 11. Получение (1а8,2аК,68,98,11К,23аК,23Ъ8)-6-трет-бутил-Ы-[(1К,2К)-2-(дифторметил)-1{[(1-метилциклопропил)сульфонил]карбамоил}циклопропил]-15-фтор-4,7-диоксо1а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23а,23Ь-гекса-декагидро- 1Н,9Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[ 1 ',2': 18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12-
Промежуточное соединение С3 (506 мг, 1,94 ммоль) объединяли с П-Вос-транс-4-гидрокси-Ьпролина метиловым эфиром (524 мг, 2,13 ммоль) и Сз2СО3 (759 мг, 2,33 ммоль), затем суспендировали в МеСЫ (10 мл). Перемешиваемую реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 72 ч, затем фильтровали через целит и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали 11-1.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М-Вос+2Н]+ расч. для С14Н14С1РЫ3О3: 326,07; эксп.: 326,68.
Этап 2. Получение 11-2.
Карбамат 11-1 (409 мг, 0,960 ммоль) растворяли в ДХМ (10 мл) и обрабатывали соляной кислотой (4,0 М в диоксане, 5 мл, 20 ммоль). После перемешивания при к.т. в течение 1,5 ч реакционную смесь концентрировали под вакуумом, в результате чего получали гидрохлорид амина 11-2, который использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С14Н14С1РЫ3О3: 326,07; эксп.: 326,52.
Этап 3. Получение 11-3.
Гидрохлорид амина 11-2 (0,960 ммоль) и промежуточное соединение В3 (229 мг, 0,704 ммоль) объединяли и обрабатывали реагентом ВЕР (231 мг, 0,845 ммоль), ЕЮАс (4,5 мл), \МР (0,5 мл) и 01РЕА (0,61 мл, 3,5 ммоль). Перемешиваемую смесь нагревали до 50°С в течение 2,5 ч. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали последовательно насыщенным водным №НСО3 и солевым раствором. Органическую фазу сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали амид 11-3.
- 64 029088
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н41С1ЕЫ4О6: 631,27; эксп.: 631,98.
Этап 4. Получение 11-4.
Хлорхиноксалин 11-3 (336 мг, 0,532 ммоль) обрабатывали винилтрифторборатом калия (107 мг, 0,799 ммоль), Р0(0рр£)С12-ДХМ (43 мг, 0,053 ммоль), ЕЮН (5 мл) и Εί3Ν (0,11 мл, 0,80 ммоль). Реакционную смесь перемешивали с обратным охладителем в течение 3,5 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом. Органическую фазу промывали водой и солевым раствором, затем сушили над безводным М§ЗО4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали винилхиноксалин 11-4.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С34Н44ЕЫ4О6: 623,32; эксп.:
623.45.
Этап 5. Получение 11-5.
Винилхиноксалин 11-4 (191 мг, 0,307 ммоль) растворяли в дихлорэтане (61 мл) и обрабатывали катализатором 2Ьап-1В (21 мг, 0,031 ммоль). Смесь дегазировали барботируемым Ν2 в течение 20 мин, нагревали с обратным холодильником в течение 1,5 ч. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом, сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали макроцикл 11-5.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н40ЕЫ4О6: 595,29; эксп.:
595.46.
Этапы 6 и 7. Получение 11-6.
Макроцикл 11-5 (155 мг, 0,261 ммоль) растворяли в ЕЮН (20 мл) и ЕЮАс (5 мл). Ρά/С (10 мас.% Ρά, 47 мг) добавляли и барботировали через суспензию водорода в течение 4 мин. Перемешиваемую реакционную смесь выдерживали под 1 атм Н2 в течение 52 мин, а затем фильтровали через целит и концентрировали под вакуумом. Этот остаток использовали далее без дальнейшей очистки. (ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н42ЕЫ4О6: 597,31; эксп.: 597,36). Этот остаток (0,261 ммоль, теор.) обрабатывали тетрагидрофураном (10 мл) и ИЮН (1,0 М в Н2О, 10 мл, 10 ммоль). Смесь перемешивали в течение 12,5 ч, затем вливали в делительную воронку содержащую 40 мл 10% водного раствор НС1. Водный слой экстрагировали 3х дихлорметаном. Объединенные органические вещества сушили над безводным М§ЗО4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали карбоновую кислоту 11-6, которую использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С31Н40ЕЫ4О6: 583,29; эксп.: 583,29.
Этап 8. Получение примера 11.
Карбоновую кислоту 11-6 (110 мг, 0,189 ммоль) обрабатывали промежуточным соединением А10 (86 мг, 0,28 ммоль), ТВТи (73 мг, 0,23 ммоль), ОМАР (28 мг, 0,23 ммоль), ДХМ (2 мл) и О1РЕА (0,16 мл, 0,95 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 2,5 ч, а затем концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали ЖХВД, в результате чего получали пример 11 в виде соли трифторуксусной кислоты.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 9,05 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С40Н52Е3Ы6О83: 833,35; эксп.: 833,17.
1Н-ЯМР (400 МГц, СП3ОП): δ 9,31 (§, 1Н), 7,94 (άά, 1=9,1, 5,8 Гц, 1Н), 7,47 (άά, 1=9,6, 2,7 Гц, 1Н), 7,40 (ίά, 1=8,8, 2,8 Гц, 1Н), 6,08 (ί, 1=3,6 Гц, 1Н), 5,87 (ίά, 1=55,7, 6,7 Гц, 1Н), 4,99 (ά, 1=7,6 Гц, 1Н), 4,514,38 (т, 2Н), 4,33 (§, 1Н), 4,12 (άά, 1=11,9, 3,8 Гц, 1Н), 3,08-2,91 (т, 1Н), 2,89-2,73 (т, 1Н), 2,50 (άά, 1=13,9, 6,6 Гц, 1Н), 2,25 (άάά, 1=18,5, 12,7, 5,4 Гц, 2Н), 2,10-1,92 (т, 3Н), 1,92-1,72 (т, 2Н), 1,72-1,15 (т, 15Н), 1,06 (ά, 1=10,1 Гц, 10Н), 0,97-0,88 (т, 2Н), 0,58 (ц, 1=4,1 Гц, 1Н), 0,55-0,45 (т, 1Н).
Пример 12. Получение (1аЗ,2аК,63,93,11К,23аК,23ЪЗ)-6-трет-бутил-Ы-[(1К,2К)-1[(циклопропилсульфонил)карбамоил]-2-(дифторметил)циклопропил]-15-фтор-4,7-диоксо1а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23а,23Ъ-гексадекагидро-1Н,9Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[ 1 ',2' :18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ъ]хиноксалин-9-карбоксамида.
Пример 12 получали аналогично примеру 11, используя промежуточное соединение А9 вместо промежуточного соединения А10 на этапе 8. После очистки препаративной ЖХВД выделяли пример 12
- 65 029088
(24 мг) в виде соли ТФУК.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,95 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С39Н50Р3Н5О83: 819,34; эксп.: 819,34.
1Н-ЯМР (400 МГц, СБ3ОП): δ 9,35 (8, 1Н), 7,94 (бб, 1=9,1, 5,8 Гц, 1Н), 7,46 (бб, 1=9,6, 2,7 Гц, 1Н), 7,39 (!б, 1=8,7, 2,8 Гц, 1Н), 6,08 (!, 1=3,5 Гц, 1Н), 5,90 (!б, 1=55,9, 6,8 Гц, 1Н), 4,99 (б, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,504,36 (т, 2Н), 4,32 (8, 1Н), 4,12 (бб, 1=11,8, 3,8 Гц, 1Н), 3,05-2,91 (т, 2Н), 2,88-2,69 (т, 1Н), 2,49 (бб, 1=14,1, 6,3 Гц, 1Н), 2,33-2,11 (т, 2Н), 2,11-1,91 (т, 3Н), 1,84 (бб, 1=11,6, 7,1 Гц, 1Н), 1,75 (б, 1=14,6 Гц, 1Н), 1,70-1,15 (т, 12Н), 1,15-1,09 (т,2Н), 1,06 (б, 1=11,2 Гц, 11Н), 0,57 (ц, 1=4,2 Гц, 1н), 0,54-0,45 (т, 1Н).
Пример 13. Получение (1аЗ,2аК,63,93,11К,20Е,23аК,23ЪЗ)-6-трет-бутил-15-циано-Щ(1К,2К)-2(дифторметил)-1-{[(1-метилциклопропил)сульфонил]карбамоил}циклопропил]-19,19-дифтор-4,7-диоксо1а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,22,23,23а,23Ъ-тетрадекагидро-1Н,9Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[1',2':18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ъ]хиноксалин-9-карбоксамид.
Этап 1. Получение 13-1.
Промежуточное соединение С5 (213 мг, 0,8 ммоль), ^Вос-транс-4-гидрокси-Ь-пролина метиловый эфир (394 мг, 1,2 ммоль) и карбонат цезия (391 мг, 1,2 ммоль) объединяли в СН3С№ (4 мл) и нагревали до 80°С в течение 3 ч. Реакционную смесь охлаждали до к.т., разбавляли этилацетатом (15 мл) и фильтровали через слой целита. Слой целита промывали этилацетатом и концентрировали фильтрат под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали 13-1.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С23Н25Р2^О5: 475,47; эксп.:
475.10.
Этап 2. Получение 13-2.
К раствору соединения 13-1 (300 мг, 0,63 ммоль) в ДХМ (2 мл) медленно добавляли НС1 в диоксане (4 М, 1 мл, 4 ммоль) при к.т. Через 2,5 ч полученную смесь концентрировали под вакуумом, в результате чего получали пролин 13-2 в виде соли НС1, который использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С18Н17Р2^О3: 375,35; эксп.:
375.10.
Этап 3. Получение 13-3.
К раствору соединения 13-2 (320 мг, 0,8 ммоль) в ДМФ (2 мл) добавляли промежуточное соединение В5 (275 мг, 0,89 ммоль), НАТИ (467 мг, 1,23 ммоль) и 1Рг2КЕ! (0,71 мл, 4,09 ммоль) при к.т. Через
- 66 029088
16 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (ЕЮАс) (3x20 мл). Объединенные органические слои промывали водой (50 мл), солевым раствором (25 мл), сушили над безводным М§ЗО4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали 13-3.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М]+ расч. для С35Н41р2^5О6: 665,Ί3; эксп.: 665,93.
Этап 4. Получение 13-4.
К раствору диена 13-3 (290 мг, 0,43 ммоль) в дегазированном ДХЭ (80 мл) добавляли катализатор ΖΗαπ 1В (32 мг, 0,043 ммоль), а затем дополнительно дегазировали в течение 10 мин. Полученный раствор нагревали с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 2 ч. Реакционную смесь далее охлаждали до к.т., концентрировали под вакуумом и очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали макроцикл 13-4.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М]+ расч. для С^Н^Р^^Об: 63Ί,6Ί; эксп.: 63Ί,95.
Этапы 5 и 6. Получение примера 13.
К раствору 13-4 (200 мг, 0,31 ммоль) в ТГФ (1 мл) добавляли 1н. ЫОН (1 мл) и перемешивали смесь при 23°С в течение 2 ч. Растворители удаляли под вакуумом, остаток выделяли в ЕЮАс (10 мл) и 1 М НС1 (10 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (10 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным М§ЗО2 и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали остаток, который использовали далее без дальнейшей очистки. К суспензии этого остатка (50 мг, 0,08 ммоль) и промежуточного соединения А10 (36 мг, 0,12 ммоль) в МеС^ (1 мл) добавляли НАТи (46 мг, 0,12 ммоль) и ОГРЕЛ (Ί0 мкл, 0,4 ммоль) при к.т. Через 1 ч раствор непосредственно очищали обращенно-фазовой ЖХВД и лиофилизировали, в результате чего получали пример 13 в виде соли ТФУК.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,55 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением (т/ζ): [М] расч. для С^Н^Р^Ю^: 8Ί3,91; эксп.: 8Ί3,89.
1Н-ЯМР (400 МГц, СО3ОЭ): δ 9,38 (з, 1Н), 8,30 (ά,1Η), 8,18 (ά,1Η), Ί,90 (άά, 1Н), 6,30-6,15 (т, 3Н), 5,83 (т, 1Н), 4,93 (ά, 1Н), 4,61 (ά, 1Н), 4,45-4,38 (т, 2Н), 4,12 (т, 1Н), 2,55-2,48 (т, 2Н), 2,28-2,18 (т, 3Н), 2,01-1,90 (т, 3Н), 1,Ί9 (т, 1Н), 1,59-1,33 (т, 10Н), 1,05-0,91 (т, 11Н), 0,88 (т, 2Н), 0,62-0,4Ί (т, 2Н).
Пример 14. Получение (1а8,2аК-,68,98,11К-,23аК-,23Ъ8)-6-трет-бутил-15-циано-Ы-[(1К-,2К_)-2(дифторметил)-1-{[(1 -метилциклопропил)сульфонил]карбамоил } циклопропил] -19,19-дифтор-4,7-диоксо13,2,23,4,5,6,Ί, 10,11,19,20,21,22,23,23 а,23Ь-гексадекагидро-1 Н,9Н-8,11 метаноциклопропа[4',5']циклопента[ 1 ',2' :18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ь]хиноксалин-9-карбоксамида.
Этап 1. Получение примера 14.
К раствору примера 13 (88 мг, 0,1 ммоль) в ЕЮН (1 мл) добавляли Ρά/С (10 мас.% Ρά, 20 мг). Реакционный сосуд дважды продували водородом и перемешивали при к.т. под 1 атм Н2 в течение 6 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и концентрировали фильтрат под вакуумом. Сырой материал снова растворяли в диоксане (2,5 мл) и обрабатывали ΌΌ0 (34 мг, 0,15 ммоль). Через 1 ч раствор непосредственно очищали обращенно-фазовой ЖХВД и лиофилизировали, в результате чего получали пример 14 в виде соли ТФУК.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,64 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М]+ расч. для С^ЩдР^Ю^: 8Ί5,93; эксп.: 8Ί5,98.
1Н-ЯМР (400 МГц, СО3ОЭ): δ 8,32 (з, 1Н), 8,20 (ά,1Η), Ί,90 (ά, 1Н), 6,90 (ά, 1Н), 6,1Ί (ά, 1Н), 5,8Ί (т, 1Н), 4,90 (т, 1Н), 4,45 (т, 2Н), 4,28 (т,1Н), 4,12 (т, 2Н), 3,Ί0-3,50 (т, 3Н), 2,55-2,48 (т, 2Н), 2,282,18 (т, 3Н), 2,01-1,90 (т, 3Н), 1,Ί9 (т, 1Н), 1,59-1,33 (т, 10н), 1,05-0,91 (т, 11Н), 0,89 (т, 2Н), 0,5Ί-0,51 (т, 2Н).
- 6Ί 029088
Пример 15. Получение (1а8.2а1\.68.98.111\.23а1\.23Ь8)-6-трет-бутил-Х'-[(11\.21\)-1[(циклопропилсульфонил)карбамоил]-2-(дифторметил)циклопропил]-15,16,19,19-тетрафтор-4,7-диоксо1 а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23 а,23Ь-гексадекагидро- 1Н,9Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[ 1',2':18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ь]хиноксалин-9-карбоксамида.
Этап 1. Получение 15-1.
Промежуточное соединение С6 (575 мг, 2,22 ммоль), промежуточное соединение Ό1 (1,55 г, 3,34 ммоль) и карбонат цезия (2 г, 6,14 ммоль) объединяли в ΝΜΡ (10 мл) и нагревали до 70°С в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до к.т., разбавляли этилацетатом (50 мл), промывали водой (100 мл), солевым раствором (50 мл) и сушили над безводным Мд8О4. Раствор, полученный после фильтрации, концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали 15-1.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М-\а|' расч. для С22Н23Р4Нз№О5: 508,15; эксп.:
508,2.
Этап 2. Получение 15-2.
К раствору соединения 15-1 (392 мг, 0,82 ммоль) в дихлорметане (3 мл) добавляли 4н. НС1 в диоксане (3 мл). Полученную смесь оставляли перемешиваться в течение ночи при к.т. и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали 15-2 в виде соли НС1, который использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С^Н^Р^^О® 386,11; эксп.:
386,1.
Этап 3. Получение 15-3.
К раствору соединения 15-2 (393 мг, 0,93 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавляли промежуточное соединение В5 (240 мг, 0,78 ммоль), НАТи (324 мг, 0,853 ммоль) и ίΡί2ΝΕΐ (1,35 мл, 7,76 ммоль) при 23°С. Через 18 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические слои промывали водой (50 мл), солевым раствором (50 мл), сушили над безводным Мд8О4 и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали 15-3.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С^Н^Р^^О^ 677,30; эксп.: 677,04.
- 68 029088
Этап 4. Получение 15-4.
К раствору соединения 15-3 (450 мг, 0,665 ммоль) в дегазированном ДХЭ (133 мл) добавляли катализатор ΖΗαη 1В (52 мг, 0,067 ммоль). Полученный раствор нагревали с обратным холодильником в атмосфере Ν2 в течение 3 ч. Реакционную смесь затем концентрировали под вакуумом и очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали 15-4.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н37Т4Н4О6: 649,25; эксп.:
649,2.
Этапы 5 и 6: Получение 15-5.
К раствору соединения 15-4 (270 мг, 0,42 ммоль) в ЕЮН (8 мл) добавляли Рй/С (10 мас.% Рй, 270 мг). Реакционную атмосферу заменяли на Н2 и перемешивали реакционную смесь при к.т. под 1 атм Н2 в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и промывали этанолом и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток, который использовали далее без дальнейшей очистки. (ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н37Т4Н4О6: 651,28; эксп.: 651,3). Этот остаток растворяли в ТГФ (2 мл) и МеОН (1 мл). Добавляли 2н. водный раствор гидроксида лития (1 мл) и перемешивали смесь при 23°С в течение 2 ч. Растворители удаляли под вакуумом, остаток выделяли в этилацетате (10 мл) и 1 М НС1 (10 мл). Водный слой экстрагировали этилацетатом (10 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным Мд8О4 и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали остаток - соединение 15-5, который использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С31Н37Т4Н4Об: 637,26; эксп.: 637,3).
Этап 7. Получение примера 15.
К суспензии соединения 15-5 (37 мг, 0,058 ммоль) и промежуточного соединения А9 (21,2 мг, 0,073 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавляли НАТИ (28 мг, 0,73 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (126 мкл, 0,73 ммоль) при 23°С. Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение ночи, затем очищали путем ЖХВД и лиофилизировали, в результате чего получали пример 15 в виде соли ТФУК.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,87 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С39Н47Т6Н6О88: 873,31; эксп.: 873,09.
1Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 10,39 (8, 1Н), 7,88 (йй, 1=9,4, 8,8 Гц, 1Н), 7.61 (йй, 1=10,3, 7,7 Гц, 1Н), 6,73 (8, 1Н), 6,15 (8, 1Н), 5,97 (1й, 1=55,5, 6,9 Гц, 1Н), 5,23 (й, 1=9,5 Гц, 1Н), 4,90 (й, 1=7,4 Гц, 1Н), 4,50 (й, 1=12,2 Гц, 1Н), 4,37-4,20 (т, 2Н), 4,07 (йй, 1=11,8, 3,6 Гц, 1Н), 2,94 (1й, 1=8,3, 4,1 Гц, 1Н) 2,62-2,25 (т, 2Н), 2,62-2,25 (т, 2Н), 2,29-2,08 (т, 2Н), 2,07-1,69 (т, 6Н), 1,70-1,50 (т, 2Н), 1,51-1,15 (т, 6Н), 1,07 (8, 9Н), 1,05-0,77 (т, 2Н), 0,57-0,46 (т, 1Н), 0,46-0,35 (т, 1Н).
Пример 16. Получение (1а8,2аК,68,98,11К,23аК,23Ь8)-6-трет-бутил-Н-[(1К,2К)-1[(циклопропилсульфонил)карбамоил]-2-(дифторметил)циклопропил]-15-(дифторметокси)-19,19-дифтор4,7-диоксо-1а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23а,23Ь-гексадекагидро-1Н,9Н-8,11метаноциклопропа[4', 5 ']циклопента[ 1',2':18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ь]хиноксалин-9-карбоксамида.
- 69 029088
Этап 1. Получение 16-1.
К раствору промежуточного соединения С7 (425 мг, 1,39 ммоль) в МеСЫ (5 мл) добавляли карбонат цезия (906 мг, 2,78 ммоль) и Ы-Вос-транс-4-гидрокси-Ь-пролина метиловый эфир (410 мг, 1,67 ммоль). Полученную смесь оставляли перемешиваться 40 ч при к.т. и разбавляли этилацетатом (25 мл), промывали водой (15 мл) и солевым раствором (15 мл). Полученный раствор затем сушили над безводным МдЗО4 и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали замещенный хиноксалин 16-1.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Ыа]+ расч. для С23Н25Р4Ы3ЫаО6: 538,16; эксп.: 537,93.
Этап 2. Получение 16-2.
К раствору замещенного хиноксалина 16-1 (590 мг, 1,14 ммоль) в ДХМ (5 мл) добавляли 4н. НС1 в диоксане (5 мл). Полученную смесь оставляли перемешиваться в течение ночи при комнатной температуре, затем концентрировали под вакуумом, в результате чего получали 16-2, который использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С18Н18Р4Ы3О4: 416,12; эксп.: 415,96.
Этап 3. Получение 16-3.
К раствору гидрохлорида кумина 16-2 (420 мг, 0,93 ммоль) в ДМФ (3 мл) добавляли промежуточное соединение В5 (240 мг, 0,78 ммоль), НАТи (324 мг, 0,853 ммоль) и ιΡγ2ΝΕ1 (1,35 мл, 7,76 ммоль) при 23°С. Через 18 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические слои промывали водой (50 мл), солевым раствором (50 мл), сушили над безводным МдЗО4 и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали амид 16-3.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С35Н43Р4Ы4О7: 707,3; эксп.:
707,3.
Этап 4. Получение 16-4.
К раствору амида пролина 16-3 (350 мг, 0,49 ммоль) в дегазированном ДХЭ (100 мл) добавляли катализатор Ζ^η 1В (50 мг, 0,0,65 ммоль). Полученный раствор нагревали с обратным холодильником в атмосфере Ν2 в течение 1 ч. Реакционную смесь затем концентрировали под вакуумом и очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали олефин 16-4.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н39Р4Ы4О7: 679,3; эксп.:
679.2.
Этап 5. Получение 16-5.
К раствору олефина 16-4 (220 мг, 0,32 ммоль) в ЕЮН (25 мл) добавляли ΡίΚ' (10 мас.% Ρ6, 220 мг). Реакционную атмосферу заменяли на Н2 и перемешивали реакционную смесь при к.т. под 1 атм Н2 в течение 3 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита, который промывали этанолом, объединенные органические вещества концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали посредством ЖХВД, в результате чего получали 16-5.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н41Р4Ы4О7: 681,3; эксп.:
681.3.
- 70 029088
Этап 6. Получение 16-6.
Эфир пролина 16-5 растворяли в ТГФ (2 мл) и МеОН (1 мл). Добавляли водный 2н. раствор ЫОН (1 мл) и перемешивали смесь при 23°С в течение 1 ч. Растворители удаляли под вакуумом, остаток выделяли в этилацетате (10 мл) и 1 М растворе НС1 (10 мл). После экстракции этилацетатом (10 мл) объединенные органические слои сушили над безводным Мд8О4 и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали остаток - 16-6, который использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением (т/ζ): [М+Н] расч. для С32Н39Р4Х4О7: 667,3; эксп.:
667,3.
Этап 7. Получение примера 16.
К суспензии карбоновой кислоты 16-6 (67,9 мг, 0,102 ммоль) и промежуточного соединения А9 (37 мг, 0,128 ммоль) в ДМФ (1 мл) добавляли НАТи (49 мг, 0,128 ммоль) и Э1РЕА (177 мкл, 1,02 ммоль) при 23°С. Реакционную смесь оставляли перемешиваться в течение ночи, затем очищали путем ЖХВД и лиофилизировали, в результате чего получали пример 16 в виде соли ТФУК.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,75 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С40Н49Р6Х6О98: 903,32; эксп.: 903,14.
1Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 10,22 (з, 1Н), 7,95-7,77 (т, 2Н), 7,57 (йй, 1=9,1, 2,4 Гц, 1Н), 7,06 (з, 1Н), 6,77 (1, 1=72,9 Гц, 1Н), 6,16 (з, 1Н), 5,92 (1й, 1=55,7, 7,2 Гц, 1Н), 5,26 (й, 1=9,2 Гц, 1Н), 4,89 (й, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,53 (й, 1=11,7 Гц, 1Н), 4,33 (йй, 1=11,0, 6,2 Гц, 1Н), 4,26 (й, 1=9,1 Гц, 1Н), 4,08 (йй, 1=11,7, 3,7 Гц, 1Н), 2,98-2,78 (т, 1Н), 2,57-2,27 (т, 2Н), 2,25-2,12 (т, 1Н), 2,12-2,04 (т, 1Н), 2,03-1,94 (т, 3Н), 1,94-1,81 (т, 2Н), 1,82-1,66 (т, 2Н), 1,64-1,42 (т, 3Н), 1,42-1,18 (т, 6Н), 1,07 (з, 9Н), 1,05-0,93 (т, 2н), 0,58-0,46 (т, 1Н), 0,46-0,36 (т, 1Н).
Пример 17. Получение (1а8,2аК,68,98,11К,23аК,23Ь8)-6-трет-бутил-Х-[(1К,2К)-1[(циклопропилсульфонил)карбамоил]-2-(дифторметил)циклопропил]-19,19-дифтор-4,7-диоксо1 а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23 а,23Ь-гексадекагидро-1 Н,9Н-8,11 метаноциклопропа[4',5']циклопента[ 1 ',2' :18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ь]хиноксалин-9-карбоксамида.
Этап 1. Получение 17-1.
Смесь, содержащую промежуточное соединение С8 (0,94 г, 3,92 ммоль), Х-Вос-транс-4-гидрокси-Рпролина метиловый эфир (1,48 г, 4,71 ммоль) и Сз2СО3 (1,92 г, 5,88 ммоль) в МеСХ (10 мл) интенсивно перемешивали при 85°С в атмосфере Аг в течение 2 ч. Реакционную смесь затем фильтровали через слой целита и концентрировали фильтрат под вакуумом. Сырой материал очищали хроматографией на сили- 71 029088
кагеле, в результате чего получали 17-1.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С22Н25Р2ЩО5: 449,2; эксп.: 450,7.
Этап 2. Получение 17-2.
К раствору замещенного хиноксалина 17-1 в ДХМ (10 мл) добавляли соляную кислоту в диоксане (4 М, 25 мл, 98,4 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при к.т. в течение 5 ч. Сырой остаток концентрировали под вакуумом, в результате чего получали соединение 17-2, которое использовали на дальнейших этапах без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С17Н17Р2ЩО5: 349,1; эксп.: 350,1.
Этап 3. Получение 17-3.
К раствору гидрохлорида пролина 17-2 (1,00 г, 2,59 ммоль) в ДМФ (26 мл) добавляли промежуточное соединение В5 (0,82 г, 2,85 ммоль) в ДМФ, НАТО (1,18 г, 3,11 ммоль) и 01РЕА (2,48 мл, 14,26 ммоль) при 23°С. Через 40 ч реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и экстрагировали этилацетатом (3x20 мл). Объединенные органические слои промывали водой (50 мл), солевым раствором (25 мл), сушили над безводным №-ь8О4 и концентрировали под вакуумом. Сырой материал очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали 17-3.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С34Н42Р04О6: 640,31; эксп.: 641,36.
Этап 4. Получение 17-4.
К раствору диена 17-3 (1,38 г, 2,25 ммоль) в дегазированном ДХЭ (430 мл) добавляли катализатор Ζ1ι;·ιη 1В (158 мг, 0,215 ммоль) и дегазировали в течение еще 1 ч. Полученную реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в атмосфере аргона в течение 1 ч, охлаждали до к.т. и концентрировали под вакуумом. Сырой материал очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали макроцикл 17-4.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н38Р04О6: 612,28; эксп.:
613.31.
Этап 5. Получение 17-5.
К раствору макроцикла 17-4 (1,18 г, 1,92 ммоль) в Е!ОН (7 мл) добавляли Рб/С (10 мас.% Рб, 500 мг). Реакционный сосуд дважды продували водородом и перемешивали при к.т. под 1 атм Н2 в течение ночи. Реакционную смесь после этого нагревали до 50°С и перемешивали в течение еще 24 ч. Реакционную смесь фильтровали через слой целита и концентрировали под вакуумом. Сырой материал снова растворяли в диоксане (25 мл) и обрабатывали ΌΌΟ (525 мг, 2,31 ммоль). Через 1 ч удаляли растворитель под вакуумом и очищали полученный остаток хроматографией на силикагеле, в результате чего получали макроцикл 17-5.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н40Р2ЩО6: 614,29; эксп.: 615,17).
Этап 6. Получение 17-6.
Макроцикл 17-5 (1,0 г, 1,63 ммоль) растворяли в ТГФ (25 мл). Добавляли ЫОН (1,0 М, 25 мл, 25 ммоль) и перемешивали реакционную смесь в течение 5 ч при к.т. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом, а затем разбавляли этилацетатом (100 мл) и 1 М раствором НС1 (60 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали этилацетатом (50 мл). Объединенный органический слой сушили над безводным №-ь8О4 и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали 17-6 в виде остатка, который использовали без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С31Н38Р04О6: 600,28; эксп.: 601,16).
Этап 7. Получение примера 17.
К суспензии карбоновой кислоты 17-6 (350 мг, 0,583 ммоль) и промежуточного соединения А10 (259 мг, 0,850 ммоль) в МеСN (7 мл) добавляли НАТО (323 мг, 0,850 ммоль) и Э1РЕА (542 мкл, 3,11 ммоль) при 23°С. Через 45 мин раствор концентрировали и очищали обращенно-фазовой ЖХВД, затем хроматографией на силикагеле. ТФУК добавляли и лиофилизировали образец, в результате чего получали пример 17 в виде соли ТФУК.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,77 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С40Н51Р06О88: 851,93; эксп.:
851.31.
’Н-ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 9,83 (δ, 1Н), 8,13 (б, 1Н), 7,86 (б, 1Н), 7,77 (бб, 1Н), 7,67 (бб, 1Н), 7,17 (δ, 1Н), 6,22 (!, 1Н), 5,91 (!б, 1Н), 4,89 (б, 1Н), 4,52 (б, 1Н), 4,38-4,33 (т, 1Н), 4,26 (б, 1Н), 4,08 (бб, 1Н), 2,51-2,34 (т, 3Н), 2,10-1,94 (т, 5Н), 1,87-1,29 (т, 15Н), 1,08-1,01 (т, 10Н), 0,87 (т, 2Н), 0,53-0,50 (т, 1Н), 0,44-0,43 (т, 1Н).
- 72 029088
Пример 18. Получение (1а5,2аК,65,95,11К,23аК,23Ь5)-6-трет-бутил-^[(1К,2К)-2-(дифторметил)-1{[(1-метилциклопропил)сульфонил]карбамоил}циклопропил]-19,19-дифтор-4,7-диоксо1 а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23а,23Ь-гексадекагидро-1 Н,9Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[ 1 ',2': 18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ь]хиноксалин-9-карбоксамида.
Пример 18 получали аналогично примеру 17, используя промежуточное соединение А9 вместо промежуточного соединения А10 на этапе 7. Пример 18 (234 мг) выделяли в виде соли трифторуксусной кислоты.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,87 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С39Н49Р4Н5О85: 837,33; эксп.: 837,26.
Ή-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 10,21 (5, 1Н), 8,13 (ά, 1Н), 7,86 (ά, 1Н), 7,77 (άά, 1Н), 7,67 (άά, 1Н), 7,24 (5, 1Н), 6,22 (ί, 1Н), 5,91 (άί, 1Н), 5,36 (ά, 1Н), 4,89 (ά, 1Н), 4,51 (ά, 1Н), 4,37-4,33 (т, 1Н), 4,27 (ά, 1Н), 4,08 (άά, 1Н), 2,93-2,87 (т, 1Н), 2,50-2,32 (т, 3Н), 2,10-1,91 (т, 5Н), 1,80-1,25 (т, 13Н), 1,08-1,01 (т, 10Н), 0,53-0,50 (т, 1Н), 0,44-0,43 (т, 1Н).
Пример 19. Получение (1а5,2аК,65,95,11К,23аК,23Ь5)-6-трет-бутил-15-хлор-Щ(1К,2К)-1[(циклопропилсульфонил)карбамоил]-2-(дифторметил)циклопропил]-4,7-диоксо1а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23а,23Ь-гексадекагидро-1Н,9Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[ 1 ',2': 18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ь]хиноксалин-9-карбоксамида.
- 73 029088
Этап 1. Получение 19-1.
Промежуточное соединение С9 (1 г, 3,61 ммоль), ^Вос-транс-4-гидрокси-Ь-пролина метиловый эфир (1,06 г, 4,33 ммоль) и С§2СО3 (1,41 г, 4,33 ммоль) суспендировали в МеСN (18 мл). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 18 ч, затем фильтровали через слой целита. Твердые вещества споласкивали этилацетатом. Фильтрат и смывы объединяли и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали замещенный хиноксалин 19-1.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М-Вос+2Н]+ расч. для С14Н14С12^О3: 342,04; эксп.: 342,04.
Этап 2. Получение 19-2.
Замещенный хиноксалин 19-1 (425 мг, 0,961 ммоль) растворяли в ДХМ (10 мл) и обрабатывали соляной кислотой (4,0 М в диоксане, 5 мл, 20 ммоль). После перемешивания при к.т. в течение 2,5 ч реакционную смесь концентрировали под вакуумом, в результате чего получали гидрохлорид пролина 19-2, который использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С14Н14С1^3О3: 342,04; эксп.: 342,11.
Этап 3. Получение 19-3.
Соль гидрохлорид амина 19-2 (0,961 ммоль) обрабатывали промежуточным соединением В3 (348 мг, 1,08 ммоль), ВЕР (315 мг, 1,15 ммоль), Е1ОАс (9 мл), NМР (1 мл) и Э1РЕА (0,84 мл, 4,81 ммоль). После перемешивания при 50°С в течение 1,5 ч реакционную смесь разбавляли этилацетатом. Органический слой промывали насыщенным водным NаНСО3 и солевым раствором, затем сушили над безводным Мд§О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали амид 19-3.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н41С12^О6: 647,24; эксп.: 647,35.
Этап 4. Получение 19-4.
Хлорхиноксалин 19-3 (281 мг, 0,434 ммоль) обрабатывали винилтрифторборатом калия (87 мг, 0,651 ммоль), аддуктом Рб(брр£)С12-ДХМ (35 мг, 0,043 ммоль), Е1ОН (4 мл) и Е1^ (0,091 мл, 0,65 ммоль). Перемешиваемую реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 1 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом. Органическую смесь промывали водой и солевым раствором, затем сушили над безводным Мд§О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали винилхиноксалин 19-4.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С34Н44СШ4О6: 639,29; эксп.: 639,86.
Этапы 5 и 6. Получение 19-5.
Винилхиноксалин 19-4 (203 мг, 0,318 ммоль) объединяли с катализатором Ζ1ιαη-1Β (21 мг, 0,032 ммоль) в дихлорэтане (64 мл). Суспензию дегазировали в течение 20 мин барботируемым Ν2 затем нагревали с обратным холодильником в течение 40 мин. После охлаждения до комнатной температуры смесь концентрировали под вакуумом. Неочищенную смесь очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали макроцикл 19-5 (110 мг; ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н40СШ4О6: 611,26; эксп.: 611,30). Этот остаток (109 мг, 0,178 ммоль) растворяли в Е1ОАс (40 мл) и обрабатывали 5% КЬ/А12О3 (40 мг). Н2 барботировали через суспензию в течение 1 мин, затем реакционную смесь оставляли перемешиваться в атмосфере Н2 в течение 1 ч. По истечении этого времени добавляли еще 5% КЬ/А12О3 (80 мг) к реакционной смеси. Н2 барботировали через суспензию в течение 1 мин и оставляли реакционную смесь перемешиваться в атмосфере Н2 в течение еще 1 ч. Реакционную смесь фильтровали через целит, затем концентрировали под вакуумом, в результате чего получали метиловый эфир 19-5, который использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н42СШ4О6: 613,28; эксп.: 613,29.
Этап 7. Получение 19-6.
Метиловый эфир 19-5 (0,187 ммоль) обрабатывали тетрагидрофураном (10 мл) и ЫОН (1,0 М в Н2О, 10 мл, 10 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 3 ч, затем концентрировали под вакуумом для удаления ТГФ. Оставшуюся суспензию вливали в 10% НС1. Водный слой затем экстрагировали 3х дихлорметаном. Объединенные органические вещества сушили над безводным Мд§О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали карбоновую кислоту 19-6, которую использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С31Н40СШ4О6: 599,26; эксп.: 599,04.
- 74 029088
Этап 8. Получение примера 19.
В ДМФ (2 мл) объединяли карбоновую кислоту 19-6 (110 мг, 0,184 ммоль) с А9 (80 мг, 0,28 ммоль), НАТИ (84 мг, 0,22 ммоль) и Б1РЕА (0,16 мл, 0,92 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 1 ч, затем нейтрализовали добавлением 1 мл Н2О. Водную суспензию фильтровали и очищали при помощи ЖХВД, в результате чего получали пример 19 в виде соли трифторуксусной кислоты. Этот материал содержал примесь, поэтому его растворяли в ЕЮАс и промывали органический раствор 2х насыщенным водным ИаНСО3 для перевода материала в форму свободного основания. Органический слой сушили над Мд8О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали пример 19.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 9,30 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С39Н50С1Т2И6О88: 835,31; эксп.: 835,44.
Ή-ЯМР (400 МГц, ПТОП): δ 7,93-7,84 (т, 1Н), 7,83-7,76 (т, 1Н), 7,61-7,51 (т, 1Н), 6,87 (ά, 1=9,3 Гц, 1Н), 5,95 (т, 1=62,1, 31,3, 5,0 Гц, 2Н), 4,99 (ά, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,52-4,37 (т, 2Н), 4,32 (ά, 1=9,3 Гц, 1Н), 4,11 (άά, 1=11,9, 3,8 Гц, 1Н), 3,08-2,90 (т, 2Н), 2,81 (άάά, 1=14,0, 11,6, 4,6 Гц, 1Н), 2,50 (άά, 1=13,9, 6,2 Гц, 1Н), 2,37-2,12 (т, 2Н), 1,97 (άάά, 1=15,4, 10,2, 3,6 Гц, 3Н), 1,85 (άά, 1=12,0, 7,7 Гц, 1Н), 1,75 (ά, 1=14,6 Гц, 1Н), 1,71-1,20 (т, 13Н), 1,17-0,97 (т, 12Н), 0,97-0,79 (т, 1Н), 0,57 (άά, 1=8,6, 4,1 Гц, 1Н), 0,540,45 (т, 1Н).
Пример 20. Получение (1а8,2аК,68,98,11К,23аК,23Ь8)-6-трет-бутил-И-[(1К,28)-2-(2,2-дифторэтил)1-{ [(1-метилциклопропил)сульфонил]карбамоил} циклопропил]-19,19-дифтор-15 -метокси-4,7-диоксо1а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23а,23Ь-гексадекагидро-1Н,9Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[ 1',2':18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино [11,12Ь]хиноксалин-9-кар боксамида.
Пример 20 получали аналогично примеру 9, используя промежуточное соединение А8 вместо промежуточного соединения А9 на этапе 7. Пример 20 (9,4 мг) выделяли в виде соли трифторуксусной кислоты.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,90 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С42Н55Т2И6О98: 895,36; эксп.: 895,64.
Ή-ЯМР (400 МГц, ОТО!)): δ 9,23 (δ, 1Н), 7,93 (ά, 1=9,0 Гц, 1Н), 7,39-7,24 (т, 2Н), 6,15 (δ, 1Н), 5,89 (ΐΐ, 1=57,4, 4,2 Гц, 1Н), 4,94 (ά, 1=7,5 Гц, 1Н), 4,45 (άά, 1=11,2, 5,8 Гц, 2Н), 4,32 (δ, 1Н), 4,13 (άά, 1=12,0, 3,7 Гц, 1Н), 3,96 (δ, 3Н), 2,63-2,44 (т, 2Н), 2,31-1,91 (т, 6Н), 1,84-1,70 (т, 2Н), 1,71-1,25 (т, 15Н), 1,06 (δ, 10Н), 0,96-0,84 (т, 2Н), 0,59-0,48 (т, 2Н).
- 75 029088
Пример 21. Получение (1а8,2аК,68,98,11К,23аК,23Ь8)-6-трет-бутил-Ы-[(1К,2К)-1[(циклопропилсульфонил)карбамоил]-2-(дифторметил)циклопропил]-15-метокси-4,7-диоксо1а,2,2а,4,5,6,7,10,11,19,20,21,22,23,23а,23Ь-гексадекагидро-1Н.9Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[ 1',2':18,19][1,10,3,6]диоксадиазациклононадецино[11,12Ь]хинолинил-9-карбоксамида.
21-6 Пример 21
Этап 1. Получение 21-1.
Промежуточное соединение С10 (1 г, 3,92 ммоль) объединяли с промежуточным соединением Ό1 (1,51 г, 3,24 ммоль) и Сз2СО3 (1,92 г, 5,88 ммоль) в виде суспензии в ЫМР (30 мл) и нагревали до 40°С. Через 16 ч реакционную смесь охлаждали до к.т., промывали этилацетатом и промывали последовательно водой, насыщенным водным раствором ЫаНСО3 и солевым раствором. Органическую фазу сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали соединение 21-1, которое использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С21Н26ВгЫ2О6: 481,10; эксп.: 480,95.
Этап 2. Получение 21-2.
Бромхинолинил 21-1 (1,48 г, 3,07 ммоль) обрабатывали винилтрифторборатом калия (618 мг, 4,61 ммоль), Рй(йрр1)С12-ДХМ (125 мг, 0,15 ммоль), Е1ОН (30 мл) и Εΐ3Ν (0,63 мл, 4,61 ммоль). Реакционную смесь перемешивали с обратным охладителем в течение 1,5 ч, затем охлаждали до комнатной температуры и разбавляли этилацетатом. Органическую фазу промывали водой и солевым раствором, затем сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле (от 10 до 40% ЕЮАс/гекс), в результате чего получали винилхинолинил 21-2.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С23Н29Ы2О6: 429,20; эксп.: 429,44.
Этап 3. Получение 21-3.
Винилхинолинил 21-2 (920 мг, 2,15 ммоль) растворяли в ДХМ (5 мл) и МеОН (1 мл) и обрабатывали соляной кислотой (4,0 М в диоксане, 5 мл). После перемешивания при к.т. в течение 3 ч реакционную смесь концентрировали под вакуумом, в результате чего получали гидрохлорид амина 21-3, который использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением (т/ζ): [М+Н] расч. для С18Н21Ы2О4: 329,15; эксп.: 329,2.
- 76 029088
Этап 4. Получение 21-4.
Гидрохлорид амида 21-3 (358 мг, 0,96 ммоль) и промежуточное соединение В3 (310 мг, 0,96 ммоль) объединяли и обрабатывали ВЕР (289 мг, 1,06 ммоль), ЕЮАс (9 мл), NМР (1 мл) и ПРЕД (0,50 мл, 2,88 ммоль). После перемешивания при 40°С в течение 1,5 ч добавляли дополнительное количество ПРЕЛ (0,2 мл, 1,15 ммоль) и перемешивали смесь еще 30 мин. После охлаждения до комнатной температуры реакционную смесь разбавляли этилацетатом и промывали последовательно насыщенным водным №11СО3 и солевым раствором. Органическую фазу сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле (от 10 до 40% ЕЮАс/гекс), в результате чего получали амид 21-4.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С36Н480О7: 634,35; эксп.: 634,47.
Этап 6. Получение 21-5.
Винилхинолинил 21-4 (358 мг, 0,56 ммоль) растворяли в дихлорэтане (100 мл) и обрабатывали катализатором 2Еап-1В (41 мг, 0,06 ммоль). Смесь дегазировали барботируемым Ν2 в течение 30 мин, нагревали с обратным холодильником в течение 45 мин. Реакционную смесь концентрировали под вакуумом, сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле (от 0 до 30% ЕЮАс/гекс), в результате чего получали макроцикл 21-5.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С34Н440О7: 606,32; эксп.: 606,16.
Этапы 6 и 7. Получение 21-6.
Макроцикл 21-5 (235 мг, 0,39 ммоль) растворяли в ЕЮН (6 мл). Добавляли Ρά/С (10 мас.% Ρά, 200 мг) и барботировали через суспензию водород в течение 2 мин. Перемешиваемую реакционную смесь выдерживали под 1 атм Н2 в течение 45 мин, а затем фильтровали через целит и концентрировали под вакуумом. Этот остаток использовали далее без дальнейшей очистки. (ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н42Р0О6: 597,31; эксп.: 597,36). Этот остаток (0,39 ммоль, теор.) обрабатывали тетрагидрофураном (3 мл), Н2О (3 мл) и ЕЮН (28 мг, 1,17 ммоль). Смесь перемешивали в течение 1 ч, затем разбавляли этилацетатом. Смесь подкисляли до рН 3 при помощи 1н. НС1 и экстрагировали 3х этилацетатом. Объединенные органические вещества промывали солевым раствором и сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали карбоновую кислоту 21-6, которую использовали далее без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н440О7: 594,32; эксп.: 594,50.
Этап 8. Получение примера 21.
Карбоновую кислоту 21-6 (175 мг, 0,30 ммоль) обрабатывали промежуточным соединением А9 (113 мг, 0,39 ммоль), ТВТИ (140 мг, 0,44 ммоль), ОМАР (55 мг, 0,45 ммоль), ДХМ (5 мл) и ПРЕЛ (0,16 мл, 0,90 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч и добавляли еще ПРЕЛ (0,10 мл, 0,55 ммоль). После перемешивания в течение 30 мин, смесь разбавляли этилацетатом, промывали насыщенным водным №11СО3 и солевым раствором. Органическую фазу сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали ЖХВД, в результате чего получали пример 21 в виде соли трифторуксусной кислоты.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 9,17 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С41Н54Р20О98: 830,36; эксп.: 830,55.
Ή-ЯМР (400 МГц, СВ3ОВ) δ 9,36 (8, 1Н), 7,84 (8, 1Н), 7,62 (ά, 1=8,9 Гц, 1Н), 7,19 (ά, 1=2,4 Гц, 1Н), 7,02 (άά, 1=8,9, 2,5 Гц, 1Н), 6,11 (ΐ, 1=3,6 Гц, 1Н), 5,90 (ΐά, 1=55,8, 6,6 Гц, 1Н), 5,49 (8, 1Н), 5,03 (ά, 1=7,6 Гц, 1Н), 4,40 (άά, 1=12,0, 6,9 Гц, 3Н), 4,10 (άά, 1=11,6, 3,9 Гц, 1Н), 3,90 (8, 3Н), 3,06-2,91 (т, 1Н), 2,74 (т, 1Н), 2,60-2,40 (т, 2Н), 2,30-2,13 (т, 2Н), 2,09-1,89 (т, 5Н), 1,81-1,18 (т, 13Н), 1,16-1,09 (т, 2Н), 1,05 (ά, 1=14,4 Гц, 9Н), 0,62-0,45 (т, 2Н).
Пример 22. Получение (33К,358,918,93К,94К,958,58)-5-(трет-бутил)^-((1К,2К)-2-(дифторметил)-1(((1-метилциклопропил)сульфонил)карбамоил)циклопропил)-4,7-диоксо-2,8-диокса-6-аза-1(2,3)бензо [1]хиноксалина-3(3,1 )-пирролидина-9(3,4)-бицикло [3.1.0] гексанациклотетрадекафан-35карбоксамида.
- 77 029088
Пример 22 получали аналогично примеру 11, используя промежуточное соединение С13 вместо промежуточного соединения С3 на этапе 1. Пример 22 выделяли в виде соли трифторуксусной кислоты (53 мг).
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 9,63 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С^Н^Р^бО^: 865,38; эксп.: 865,51.
Пример 23. Получение (33Κ,35δ,91δ,93Κ,94Κ,95δ,5δ)-5-(трет-бутил)-17-циано-N-((1Κ,2Κ)-2(дифторметил)-1-(((1-метилциклопропил)сульфонил)карбамоил)циклопропил)-4,7-диоксо-2,8-диокса-6аза-1 (2,3)-хиноксалина-3 (3,1 )-пирролидина-9(3,4)-бицикло[3.1.0]гексанациклотетрадекафан-3 5 карбоксамида.
Промежуточное соединение 23-1 получали, как промежуточное соединение 11-5, с использованием промежуточного соединения С11 вместо промежуточного соединения С3 на этапе 1.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С^Н^^Ог 683,34; эксп.: 683,39.
Этап 1. Получение 23-2. Смесь промежуточного соединения 23-1 (318 мг, 0,466 ммоль) в 46 мл этанола и 46 мл этилацетата гидрогенировали над 318 мг 10% палладия на угле. Через 4 ч смесь фильтровали через целит и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (5-60% этилацетат в гексанах), в результате чего получали 23-2 (245 мг).
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для СзгЩзЩО?: 595,31; эксп.: 595,23.
Этап 2. Получение 23-3.
Смесь промежуточного соединения 23-2 (245 мг, 0,412 ммоль) в 1,6 мл дихлорметана охлаждали в ледяной ванне, а затем добавляли триэтиламин (0,459 мл, 3,3 ммоль), а после этого трифторметансульфоновый ангидрид (0,104 мл, 0,618 ммоль). Смесь оставляли перемешиваться и дойти до комнатной тем- 78 029088
пературы. После завершения реакцию гасили водой и экстрагировали продукт в этилацетате. Органический слой сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (25-75% этилацетат в гексанах), в результате чего получали 23-3 (245 мг).
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н42Р3Ы4О98: 727,26; эксп.: 727,33.
Этап 3. Получение 23-4.
Смесь промежуточного соединения 23-3 (158 мг, 0,217 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия 2,0 М в эфире (25,12 мг, 0,02 ммоль) и цианида цинка, 98% (51,07 мг, 0,43 ммоль) в 1 мл диметилформамида дегазировали аргоном в течение 10 мин, затем нагревали при 80°С в течение 30 мин. Смесь затем концентрировали при пониженном давлении. Полученный остаток очищали хроматографией на силикагеле (5-70% этилацетат в гексанах), в результате чего получали 23-4 (122 мг).
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н42Ы5О6: 604,31; эксп.: 604,03.
Этап 4. Получение 23-5.
Смесь промежуточного соединения 23-4 (120 мг, 0,199 ммоль) в 1,5 мл тетрагидрофурана, 1,0 мл воды обрабатывали моногидратом гидроксида лития (33,36 мг, 0,8 ммоль). Через 6 ч добавляли 1 мл 2н. соляной кислоты и концентрировали смесь при пониженном давлении. Полученный остаток разделяли между водой этилацетатом, добавляя 2н. соляную кислоту для обеспечения кислой среды. Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали, в результате чего получали 23-5 (101 мг).
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н40Ы5О6: 590,30; эксп.: 590,15.
Этап 5. Получение 23-6.
К суспензии карбоновой кислоты 23-5 (95 мг, 0,161 ммоль) и промежуточного соединения А10 (59 мг, 0,193 ммоль) в ДМФ (0,8 мл) добавляли НАТи (74 мг, 0,193 ммоль) и О№ЕА (113 мкл, 0,644 ммоль) при 23°С. Через 10 мин раствор обрабатывали 0,5 мл муравьиной кислоты и очищали обращенно-фазовой ЖХВД, в результате чего получали пример 23 в виде соли ТФУК.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,86 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С41Н52Р4Ы7О88: 840,177; эксп.: 840,29.
Пример 24. Получение (1а8,2аК,68,98,11К,24аК,24Ь8)-6-трет-бутил-Ы-[(1К,2К)-2-(дифторметил)-1{[(1-метилциклопропил)сульфонил]карбамоил}циклопропил]-4,7,18-триоксо1а,2,2а,4,5,6,7,10,11,20,21,22,23,24,24а,24Ь-гексадекагидро-1Н,9Н,18Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[1',2':18,19][1,10,3,6,12]диоксатриазациклононадецино[11,12Ь]хиназолин-9-карбоксамида.
Промежуточное соединение 24-1 получали, как промежуточное соединение 17-4, используя промежуточное соединение С12 вместо промежуточного соединения С8 на этапе 1.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н40С1Ы4О7: 627,26; эксп.: 627,10.
- 79 029088
Этап 1. Получение 25-1 и 24-2.
Макроциклический олефин 24-1 (0,574г, 0,915 ммоль) растворяли в 100 мл этилацетата. После дегазирования аргоном добавляли 5% КЬ/А1 (0,12 г, 115 ммоль) и гидрогенировали смесь в течение 24 ч при давлении 1 атм. Фильтрация через целит, концентрирование и хроматография на силикагеле (градиент 10-25% этилацетата в гексанах) давали промежуточное соединение 24-2 (24 мг) и промежуточное соединение 25-1 (385 мг).
Для 25-1 ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для Ο32Η42Ο1Ν4Ο7: 629,27; эксп.: 629,28.
Для 24-2 ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для Ο32Η43Ν4Ο7: 595,31; эксп.: 594,91.
Этап 2. Получение 24-3.
Смесь промежуточного соединения 24-2 (24 мг) в 1 мл метанола обрабатывали 0,25 мл 1н. гидроксида лития. Через 2 ч смесь концентрировали при пониженном давлении и разделяли между водой и этилацетат. Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали, в результате чего получали 24-3 (25 мг).
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для Ο31Η41Ν4Ο7: 581,30; эксп.: 581,03.
Этап 3. Получение примера 24.
К суспензии карбоновой кислоты 24-3 (25 мг, 0,044 ммоль) и промежуточного соединения А10 (16 мг, 0,053 ммоль) в ДМФ (0,2 мл) добавляли НАТИ (20 мг, 0,053 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (31 мкл, 0,176 ммоль) при 23°С. Через 10 мин раствор обрабатывали 0,5 мл муравьиной кислоты и очищали обращенно-фазовой ЖХВД, в результате чего получали пример 24 в виде соли ТФУК (11,7 мг).
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,72 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для Ο40Η53Ρ2Ν6Ο98: 831,95; эксп.: 831,36.
- 80 029088
Пример 25. Получение (1а8,2аК,68,98,11К,24аК,24Ь8)-6-трет-бутил-15-циано-№[(1К,2К)-2(дифторметил)-1-{[(1 -метилциклопропил)сульфонил] карбамоил } циклопропил] -4,7,18 -триоксо1а,2,2а,4,5,6,7,10,11,20,21,22,23,24,24а,24Ь-гексадекагидро-1Н,9Н,18Н-8,11метаноциклопропа[4',5']циклопента[1',2':18,19][1,10,3,6,12]диоксатриазациклононадецино[11,12Ь]хиназолин-9-карбоксамида.
Этап 1. Получение 25-2.
Промежуточное соединение 25-1 (0,315 г, 0,501 ммоль), бис-(пинаколато)диборон (0,25 г, 1 ммоль) и ацетат калия (0,15 г, 1,5 ммоль) растворяли в 5 мл 1,4-диоксана и дегазировали аргоном в течение 15 мин. Затем добавляли трис-(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (0,02 г, 0,02 ммоль) 2-(дициклогексилфосфино)-2',4',6'-триизопропилбифенил (0,02 г, 0,05 ммоль) и нагревали смесь при 90° в течение 45 мин. Смесь концентрировали и очищали хроматографией на силикагеле (градиент 5-80% этилацетат в гексанах), в результате чего получали промежуточное соединение 25-2 (0,456г).
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С38Н54В^О9: 721,40; эксп.: 721,20.
Этап 2. Получение 25-3.
Раствор 25-2 (0,360 г, 0,5 ммоль) в 4 мл ТГФ и 4 мл 0,5н. гидроксида натрия обрабатывали пероксидом водорода (35%, 485,48 мг, 5 ммоль) и триэтиламином (0,81 мл, 5,81 ммоль). Через 5 мин реакцию гасили при помощи 1н. НС1 и экстрагировали этилацетатом. Органический слой сушили над №28О4, фильтровали и концентрировали. Хроматография на силикагеле с использованием градиента 5-100% этилацетат в гексанах 25-3 (224 мг).
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С32Н4Л4О8: 611,31; эксп.: 611,14.
- 81 029088
Этап 3. Получение 25-4.
Ледяной раствор соединения 25-3 (0,104 г, 0,17 ммоль) и триэтиламина (0,19 мл, 1,362 ммоль) в 1 мл ДХМ обрабатывали раствором трифторметансульфоновым ангидридом, 1 М в метиленхлориде (0,043 мл, 0,26 ммоль), добавляемым по каплям. После перемешивания в течение 3 ч реакцию гасили водой и экстрагировали этилацетатом. Органический слой промывали водой и солевым раствором, сушили над \а;8О,, фильтровали и концентрировали. Хроматография на силикагеле с использованием градиента 25-75% этилацетата в гексанах давала 25-4 (126 мг).
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н42Р^4О108: 743,26; эксп.: 743,06.
Этап 4. Получение 25-5.
Дегазировали смесь макроциклического трифлата 25-4 (126 мг, 0,17 ммоль), тетракис(трифенилфосфин)палладия (19,6 мг, 0,017 ммоль), цианида цинка, 98% (39,9 мг, 0,34 ммоль) в 1,7 мл ДМФ в течение 10 мин. Реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 30 мин. Реакционную смесь концентрировали. Сырой продукт очищали хроматографией на силикагеле с использованием градиента 5-70% этилацетата в гексанах, в результате чего получали промежуточное соединение 25-5 (94 мг).
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н4^5О7: 620,31; эксп.: 620,09.
Этапы 5 и 6. Получение примера 25.
Раствор 25-5 (94 мг, 0,015 ммоль) в 1,5 мл ТГФ и 1 мл воды обрабатывали моногидратом гидроксида лития (25 мг, 0,061 ммоль) и перемешивали в течение 1,5 ч при комнатной температуре. Смесь подкисляли 1н. соляной кислотой и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу отделяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали, в результате чего получали 87 мг неочищенной карбоновой кислоты. Этот остаток обрабатывали НАТИ (65,5 мг, 0,172 ммоль) и 0,8 мл ДМФ, затем добавляли А10 (53мг, 0,172 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (0,1 мл, 0,58 ммоль). Через 25 мин добавляли несколько капель муравьиной кислоты и метанола до общего объема 1,2 мл и очищали продукт обращенно-фазовой ЖХВД, в результате чего получали пример 25 (75 мг) в виде соли ТФУК.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,65 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): 10 [М+Н]+ расч. для С4хН52Р^7О98: 856,35; эксп.: 855,95.
Пример 26. Получение (1а8,2аК,68,98,11К,24аК,24Ь8)-6-трет-бутил-Ы-[(1К,2К)-2-(дифторметил)-1{[(1-метилциклопропил)сульфонил]карбамоил}циклопропил]-15-метокси-4,7,18-триоксо1 а,2,2а,4,5,6,7,10,11,20,21,22,23,24,24а,24Ь-гексадекагидро- 151Н,9Н,18Н-8,11 метаноциклопропа[4',5']циклопента[1',2':18,19][1,10,3,6,12]диоксатриазациклононадецино[11,12Ь]хиназолин-9-карбоксамида.
Этап 1. Получение 26-1.
К раствору 25-3 (110 мг, 0,18 ммоль) в 2 мл метанола добавляли йодометан (0,03 мл, 0,54 ммоль) и карбонат калия (74,68 мг, 0,54 ммоль). Смесь нагревали при 80°С в течение 30 мин, затем разбавляли этилацетатом и промывали водой и солевым раствором. Органическую фазу концентрировали, в резуль- 82 029088
тате чего получали не очищенное соединение 26-1, 105 мг (93,3%), которое сразу использовали на этапе 2.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С33Н45Н4О8: 625,32; эксп.: 625,18.
Этапы 2 и 3. Получение примера 26.
К раствору соединения 26-1 (105 мг, 0,17 ммоль) в 1 мл ТГФ, 1 мл метанола и 1 мл воды добавляли моногидрат гидроксида лития (28 мг, 0,67 ммоль). Через 3,5 ч реакционную смесь подкисляли 1н. соляной кислотой и экстрагировали в этилацетате. Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали, а затем сушили под вакуумом, в результате чего получали 103 мг сырой карбоновой кислоты. Этот остаток обрабатывали НАТИ (76 мг, 0,20 ммоль) и 1,7 мл ДМФ, затем добавляли А10 (61 мг, 0,20 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (0,117 мл, 0,668 ммоль). Через 1 ч добавляли несколько капель муравьиной кислоты и метанола до общего объема 1,2 мл и очищали продукт обращеннофазовой ЖХВД, в результате чего получали пример 26 (23 мг) в виде соли ТФУК.
Время удерживания в аналитической ЖХВД: 8,67 мин.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С41Н55Н6О108: 861,37; эксп.: 861,08.
Биологическая активность.
Экспрессия и очистка протеаз N83 генотипа 1а, 2а и 3.
Получение плазмид экспрессии протеазы N83.
Кодирующую последовательность домена протеазы N83 ВГС генотипа 1Ь (штамм соп-1) амплифицировали путем ПЦР с плазмиды, кодирующей репликон 13891ис-иЫ-пео/Н83-3'/ЕТ (КеЬБкоп, Майн, Германия). Разработали 5'-праймер для ПЦР, кодирующий Ν-концевую гексагистидиновую метку К3 и вводящий находящийся внутри рамки считывания сайт расщепления протеазой вируса табачной мозаики (гТЕУ) в последовательность, кодирующую N83. Полученный фрагмент ДНК клонировали в вектор экспрессии белков рЕТ28 (1пуЬгодеп, СагЬЪай, Калифорния, США), в результате чего получили плазмиду р28-Н6Н-Теу-Н83( 181)1Ь.
Кодирующие последовательности домена протеазы ВГС генотипа 3 амплифицировали методом ПЦР с обратной транскриптазой с использованием набора ТИап Опе ТиЬе КТ-РСК Κίΐ (КосЬе, 1пЙ1апаро118, ΙΝ) и РНК, выделенной из ВГС-положительной человеческой сыворотки (ВВ1 П1адпо8ЙС8, МА), с использованием набора Ц1Атр иИга8еп8 Уии8 Κίΐ (Ц1адеп, Уа1епс1а, СА). Конаструировали 5'-праймеры для ПЦР, кодирующие и вводящие находящийся внутри рамки считывания сайт расщепления протеазой вируса табачной мозаики (гТЕУ) в последовательность, кодирующую N83. Полученные фрагменты ДНК клонировали в вектор экспрессии белков рЕТ28 (ЗпуНгодеи СагЬЪай, Калифорния, США), в результате чего получили плазмиду р28-ЖН-Теу-Н83(181)1а и р28-Н6Н-Теу-Н83(181)3 соответственно.
Экспрессия белка протеазы N83.
Бактерии ВБ21А1 (1пуЦгодеп, СагЬЪай, СА, США) трансформировали векторами экспрессии N83 генотипа 1Ь или 3 N83 и использовали для инокуляции 20 л ферментатора (8агйгш8 ВВ1 8у81ет 1пс., Ве1Ь1еЬет, РА, США), содержащего 18 л свежей среды 2УТ, дополненной 50 мкг/мл канамицина. Когда значения плотности достигали ОП600=1, температуру культур снижали с 37 до 28°С и сразу инициировали индукцию путем добавления 30 мкМ Ζη8Ο4, 14 мМ Ь-арабинозы и 1 мМ изопропил-β-Όтиогалактозида (1РТС) (приведены конечные концентрации). Клетки собирали центрифугированием через 4 ч после индукции и хранили в виде замороженных осадков при температуре -80°С до очистки белка N83.
Очистка протеаз N83.
Очистка протеазы N83 генотипа 1Ь.
Клеточные осадки размораживали и ресуспендировали при концентрации 10 мл/г в лизирующем буфере, содержащем 50 мМ буфера ЙТ8 с рН 7,6, содержащего 300 мМ Ν;·ιίΊ 0,1% 3-[(3-хлорамидопропил)диметиламмонио]-1-пропансульфоната (СНАР8), 5% глицерина и 2 мМ β-меркаптоэтанола. Затем суспензию клеток обрабатывали ультразвуком, фильтровали через марлю и трижды пропускали через микрофлюидизатор при 18000 фунтов/дюйм2. Полученные лизаты центрифугировали при 15500 об/мин. в течение 45 мин и загружали супернатанты на колонку Н18Тгар НР (СЕ Ы1е8с1епсе8), предварительно уравновешенную пятью объемами Νί буфера А (50 мМ ΐή8, рН 7,6, 300 мМ №С1, 0,1% СНАР8, 5% глицерина, 2 мМ β-меркаптоэтанола, 50 мМ имидазола-НС1). Белки элюировали градиентом 0-100% Νί буфера А плюс 500 мМ имидазол-НС1, фракции собирали и объединяли. Пул Н18Тгар разбавляли 1:10, буфером 8Р-А (50 мМ 1τΪ8, рН 7,0, 10% глицерина, 2 мМ дитиотреитола (ОТТ)) и загружали на колонку ШТгар 8Р-НР (СЕ Ы1е8с1епсе8), уравновешенную буфером 8Р-А. Протеазу N83 элюировали 0-100% градиентом буфера 8Р-В (буфер 8Р-А плюс 1 М №С1). Концентрированные пулы содержащих N83 фракций 8Р аликвотировали, быстро замораживали и хранили при -80°С.
- 83 029088
Очистка протеаз N83 генотипа 3.
Осадки бактерий, собранные в результате экспрессии протеазы N83 ВГС генотипа, гомогенизировали в лизирующем буфере (буфер с 25 мМ ίίίδ, рН 7,5, содержащий 150 мМ №С1 и 1 мМ фенилметансульфонилфторида (РМ8Р)) и пропускали через микрофлюидизатор при 18000 фунтов/дюйм2.
Гомогенизированные лизаты клеток центрифугировали при 30000хд в течение 30 мин при 4°С. Полученные осадки Р1 промывали промывочным буфером I (25 мМ буфер ίίίδ, рН 7,5, содержащий 1% СНАР8), а затем центрифугировали при 1,000хд в течение 30 мин при 4°С. Полученные осадки Р2 промывали промывочным буфером II (50 мМ буфера САР8, рН 10,8, содержащего 2 М №С1 и 2 М мочевину), а затем центрифугировали при 30000хд при 4°С. Полученные осадки Р3 ресуспендировали в солюбилизирующем буфере (20 мл буфера 25 мМ ίίίδ, рН 7,5, содержащего 150 мМ №С1 и 8 М мочевины) и инкубировали при 4°С в течение 1 ч. Солюбилизированные белки пропускали через фильтр размером пор 0,45 мкм. Измеряли концентрации белков, доводили растворы до 40 мМ ИТТ, инкубировали в течение 30 мин при 4°С, а затем быстро обрабатывали буфером для рефолдинга (25 мМ ίίίδ, рН 8,5, 0,8 М гуанидина-НС1, 0,4 М Ь-аргинина, 10 мМ 7п8О4) при перемешивании. Растворы белков инкубировали при 4°С в течение ночи для обеспечения рефолдинга. Протеазы после рефолдинга центрифугировали при 30000хд в течение 10 мин для удаления остаточных преципитатов. Затем измеряли конечные концентрации белков и протеазы N83 аликвотировали, быстро замораживали в жидком азоте и хранили при -80°С.
Определение Κι протеазы N83 генотипов 1Ъ и 3а.
Очищенные протеазные домены N83 (аминокислоты 1-181) вируса генотипа 1Ъ и 3а получали, как описано выше. Депсипептидный субстрат с внутренним гашением флуоресценции Ас-^Е^(Еάаηδ)-ЕЕАЪиΨ[СОО]А8Κ(^аЪсу1)-NН2 и синтетический пептид, содержащий остатки гидрофобного ядра белка-кофактора N846 (пептид ККО8УУ1УОК11Г8ОККК; №4А), получали из Аηаδрес, 1пс. (8ап .^е, СА). Другие химические и биохимические реагенты были использованы для анализа.
Реакции проводили при комнатной температуре в буфере, состоящем из 50 мМ НЕРЕ8, 40% глицерина, 0,05% ТгЦоп Х-100, 10 мМ ОТТ и 10% ДМСО. Конечные растворы для анализа содержали 50 пМ протеазы N83 генотипа 1Ъ или 200 пМ протеазы генотипа 3а, 20 мкМ пептида N846 и 4 мкМ субстрата (генотип 1Ъ) или 2 мкМ субстрата (генотип 3а). Концентрации ингибитора варьировали от 100 нМ до 5 пМ в 3-кратных разведениях, также в эксперимент включали контроли без ингибитора.
Готовили разведения соединений в ДМСО с концентрацией 20х конечная концентрация. Готовили реакционные смеси в 96-луночных планшетах для анализа. Раствор фермента и пептида N84А в аналитическом буфере (объем 25 мкл с обоими реагентами в концентрации 4х конечная концентрация) смешивали с 45 мл аналитического буфера и 5 мкл ингибитора или ИМ8О и преинкубировали при комнатной температуре в течение 1 ч. Инициировали реакцию путем добавления 25 мкл раствора субстрата с концентрацией 4х конечная концентрация. Планшеты интенсивно встряхивали в течение 5-10 с и оставляли для протекания реакции на 90 мин. Флуоресценцию измеряли каждые 30 с между 90 и 120 мин временем реакции на мультирежимном планшетном ридере Тесап 1пйшТе М1000 или Регк1пЕ1шег Еην^δ^оη при длине возбуждения 340 нм и длине испускания 490 нм.
Скорости рассчитывали по кривым протекания реакции в стационарном состоянии в период 90-120 мин после добавления субстрата. Для определения К; строили графики скоростей как функции от концентрации ингибитора и аппроксимировали данные уравнением 1 (Моп^оп, ГР., БюсЫтша еί Β^орйуδ^са АсИа 1969, 185, 269-286) для расчета К; арр с использованием ОгарйРай Р1^ш 5. Активную фракцию фермента определяли путем титрования активного сайта с известными эффективными ингибиторами. К; определяли по формуле К;арр/(1+[[8]/Кт]).
и, -м, -©"Έμ -м, -л}1+<е]©г
а 2[Е], <1)
Оценка активности против ВГС против клеток.
Определяли противовирусную эффективность (ЕС50) в стабильной линии клеток, содержащей субгеномный репликон ВГС, и клетках, временно трансфицированных репликоном ВГС. Термин "полумаксимальная концентрация (ЕС50)" относится к концентрации, которая вызывает ответ, составляющий медианное значение между фоном и максимумом после указанного ниже времени воздействия.
Стабильные субгеномные репликоны 1а, 1Ъ, 2а, 3 а и 4а внедряли в клетки-производные Ний-7, как описано у Ьойтапп еί а1. (Ьойтапп V., Когпег Р., Косй I., еί а1. Керйсайоп ой δиЪдепош^с йерайЩ С νΪΓπδ КNАδ 1п а йераЮта се11 йпе. 8с1епсе, 1999; 285:119-3). Каждая стабильная линия клеток содержит бицистронный репликон, который кодирует репортерный ген гуманизированной люциферазы КепШа (йКЛис), слитый с селектируемым геном устойчивости к неомицину, а затем с областью, кодирующей 1КЕ8 вируса энцефаломиокардита ЕМСV 1КЕ8 и N83^853 ВГС. Отбор клеток, конститутивно экспрессирующих репликон ВГС, осуществляли в присутствии селективного антибиотика неомицина (О418). Измеряли активность люциферазы как маркера уровней внутриклеточной репликации ВГС.
Стабильный репликон генотипа 1а был получен из штамма Н77 вируса гепатита С и содержал адаптивные мутации Р1496Й и 822041. Стабильный репликон генотипа 1Ъ был получен из штамма Соп1 виру- 84 029088
са гепатита С и содержал адаптивные мутации Е1202О, Т12801 и К1846Т. Стабильный репликон 2а был получен из штамма ЛЕН-1 вируса гепатита С, для него не требовалось адаптивных мутаций. Стабильный репликон генотипа был получен из штамма 852 ВГС и содержал адаптивные мутации Р1121Б, А1198Т и 822101 (эквивалент 822041 в генотипе 1). Стабильный репликон генотипа 4а был получен из штамма ЕЭ43 вируса гепатита С и содержал адаптивные мутации О1691К и 822041. Все содержащие репликоны линии клеток размножали в клетках Ний-7-производных и поддерживали в среде Дульбекко, модифицированной по методу Игла (ЭМЕМ), дополненной 10% фетальной бычьей сыворотки (ФБС) и 0,5 мг/мл О418.
Создавали временно трансфицируемые репликоны ВГС для генотипа 1а, 1Ъ, 3а и для устойчивых к ингибитору протеазы N83/4;·! вариантов Ω168Λ в генотие 1Ъ или К155К в генотипе 1а. Транзиентно трансфицируемые репликоны также являются бицистронными субгеномными репликонами, но не содержат маркеры селекции с неомицином, присутствующие в стабильных репликонах. Эти репликоны кодируют 1КЕ8 полиовируса, а также репортерный ген йКЬис, 1КЕ8 вируса энцефаломиокардита и, наконец, кодирующую область Ν83-Ν85Β ВГС. Репликоны дикого типа генотипов 1а (Н77) и 1Ъ (Сои1) получали из того же штамма, и они содержали те же адаптивные мутации, которые перечислены выше. Транзиентный репликон генотипа 3а получали из штамма 852 вируса гепатита С, как описано выше, но он содержал несколько отличных адаптивных мутаций Р1112Б, К1615Е и 822101. В частности, вторичную адаптивную мутацию А1198Т (А166Т) в протеазном домене стабильного репликона генотипа 3а была заменена на К1615Е (К583Е) в геликазе N83, без влияния на эффективность репликации. Удаление А166Т, расположенной в протеазном домене, минимизирует влияние этого варианта на ингибиторы, нацеленные на протеазный домен, и представляет репликазный домен, более близкий к дикому типу для генотипа 3а. Устойчивые репликоны, кодирующие ингибирующие мутации протеазы N83/4 вводят в ген N83 дикого типа 1Ъ или 1а путем сайт-направленного мутагенеза. Транскрибируемые в \йго РНК из всех транзиентных репликонов трансфицируют с линии клеток, полученных из Ний-7, путем электропорации. Измеряли люциферазную активность в качестве маркера уровней внутриклеточной репликации.
Для проведения анализа ЕС50 клетки с каждым репликоном помещали в 384-луночные планшеты. Соединения растворяли в ДМСО в концентрации 10 мМ и разбавляли с ДМСО при помощи автоматического пипетирующего устройства. Трехкратные серийные разведения соединений непосредственно добавляли к клеткам при помощи автоматического устройства. В качестве отрицательного контроля использовали ДМСО (растворитель; без ингибирования), а в качестве положительного контроля использовали комбинацию трех ингибиторов, включая ингибитор протеазы, и нуклеозидный ингибитор использовали в концентрациях > 100хЕС50 (100% ингибирование). Через 72 ч лизировали клетки и измеряли активность люциферазы Кет11а в соответствии с рекомендациями производителя (Р^οтеда-Маб^8οη, ^1, США). Значение ЕС50 определяли с использованием нелинейной регрессии.
Результаты показаны в табл. 1 и 2.
- 85 029088
Таблица 1
Значения биологической активности для стабильных линий
с субгеномным репликоном ВГС
Значения биологической активности для транзиенто 'трансфицированных репликоном ВГС линий клеток
Таблица 2
*^Т = дикий тип.
ΐ устойчивые к ингибиторам протеазы Х83/4а варианты К155К в генотипе 1а. устойчивые к ингибиторам протеазы Х83/4а варианты Э168А в генотипе 1Ь.
- 86 029088
Данные в табл. 1 и 2 представлены как среднее за время каждого теста для каждого соединения. Для некоторых вариантов в ходе проекта проводили несколько экспериментов.
Фармацевтические композиции.
Ниже приведены представительные примеры фармацевтических лекарственных форм, содержащих соединение формулы I, II или III (соединение X'), для терапевтического или профилактического применения у людей.
Описанные выше составы могут быть получены обычными методиками, известными в области фармацевтики.
Все цитируемые источники, включая публикации, патенты и патентные документы, включены в настоящий текст посредством ссылки так, как если бы они были включены путем ссылки по отдельности. Настоящее изобретение описано с указанием различных и предпочтительных вариантов реализации и методик. Однако следует понимать, что в рамках сущности и объема настоящего изобретения могут быть реализованы различные варианты и модификации.
Применение терминов в единственном числе с модификаторами "этот" и "указанный" в контексте настоящего описания (в частности, в контексте следующей далее формулы изобретения) охватывает как единственное, так и множественное число, если в настоящем документе явно не указано обратное и если это не противоречит прямо контексту. Все описанные здесь способы могут осуществляться в любом подходящем порядке, если в настоящем документе явно не указано обратное и если это не противоречит прямо контексту. Применение любого из примеров или всех примеров или выражений, используемых для описания примеров (например, "такой как", "предпочтительный", "предпочтительно") в настоящем документе, предназначено исключительно для иллюстрации описания и не ограничивает объем заявленного изобретения. Никакое выражение в описании не следует рассматривать как указывающее на то, что какой-либо незаявленный элемент является существенным для реализации настоящего изобретения.
В настоящем тексте описаны альтернативные варианты реализации настоящего изобретения, включая наилучшие известные авторам средства осуществления заявленного изобретения. Из них специалисту после прочтения приведенного выше описания станут понятны вариации раскрытых вариантов реализации. Авторы настоящего изобретения ожидают, что опытные специалисты будут при необходимости использовать такие варианты (например, изменяя или комбинируя признаки или варианты реализации), и авторы изобретения предполагают, что изобретение может быть реализовано иначе, чем конкретно описано в настоящем документе.
Соответственно, это изобретение включает все модификации и эквиваленты изобретений, объектов, указанных в формуле изобретения, прилагаемой к описанию, допустимых с точки зрения соответствующего законодательства. Более того, любая комбинация описанных выше элементов во всех их возможных вариациях включена в настоящее изобретение, если иное не указано в настоящем документе или
- 87 029088
если это прямо не противоречит контексту.
Применение конкретных численных значений подразумевает приближенные значения, как если бы перед значениями стояло слово "примерно" или "приблизительно". Аналогично, численные значения в различных диапазонах, если иное не указано в явном виде, подразумевают приблизительные значения, как если бы перед минимальным или максимальным значениями стояло слово "примерно" или "приблизительно". Таким образом, варианты выше и ниже указанных диапазонов могут применяться для достижения, по существу, тех же результатов, что и со значениями, попадающими в эти диапазоны. В настоящем тексте термины "примерно" и "приблизительно" применительно к численным значениям имеют свое понятное и обычное для среднего специалиста значение в области, в которой раскрытое изобретение наиболее близко связано, или в области, к которой относится рассматриваемый диапазон или элемент, значение. Значение возможного отклонения от конкретной численной границы зависит от многих факторов. Например, считается, что такие факторы включают критическое значение элемента и/или влияние определенного количества на реализацию заявленного изобретения, а также другие соображения, известные специалистам в данной области. В настоящем тексте применение отличающихся количеств значащих разрядов для различных численных значений не ограничивает того, как применение слов "примерно" или "приблизительно" расширяет конкретное численное значение или диапазон. Соответственно, обычно "примерно" или "приблизительно" расширяет численное значение. Также раскрытие диапазонов предполагает непрерывный диапазон, включающий каждое значение между минимальным и максимальным значениями плюс расширение диапазона, обеспечиваемое применением термина "примерно" или "приблизительно". Соответственно, указание диапазонов значений в настоящем документе служит исключительно в качестве удобного метода указания каждого значения, попадающего в этот диапазон, отдельно, если в настоящем документе не указано иное, и каждое отдельное значение включено в описание, как если бы оно было конкретно указано в данном тексте.
Предполагается, что любые диапазоны, отношения и диапазоны отношений, которые могут быть образованы или получены из любых раскрытых в настоящем документе данных, представляют дальнейшие варианты реализации настоящего описания и включены в настоящее описание так, как если бы они были приведены в явном виде. Это включает диапазоны, которые могут быть образованы, которые включают или не включают верхний предел и/или нижний предел. Соответственно, средний специалист в области, наиболее близкой указанному диапазону, отношению или диапазону отношений, поймет, что такие значения однозначно выводятся из представленных в настоящем документе данных.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
2,1 г промежуточного соединения С4.
'Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 8,028 (й, 1=10 Гц, 1Н), 7,46 (йй, 1=3 Гц, 9 Гц, 1Н), 7,32 (й, 1=3 Гц, 1Н), 6,549-6,478 (т, 1Н), 5,86 (й1, 1=17,2 Гц, 1Н), 5,67 (й, 1=11 Гц, 1Н), 3,981 (з, 3Н).
Способ В:
В трехгорлую колбу с круглым дном объемом 1 л помещали раствор 3-бром-3,3-дифторпроп-1-ена (25 г, 159,3 ммоль) в ДМФ (360 мл) и воду (90 мл). Полученный раствор обрабатывали этил 2-оксоацетатом (33 мл, 1 М в толуоле) и индием (25 г). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при к.т. и затем экстрагировали 3x300 мл эфира. Органические соли объединяли, промывали 1x100 мл насыщенного водного раствора ΝΗ4ί'1 и 1x100 мл солевого раствора, сушили над безводным Ха28О4 и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали 25г соединения С4-4, которое использовали далее без дополнительной очистки.
Этап 2. Получение С4-5.
К С4-4 (2,0 г, 11,10 ммоль) в сосуде с круглым дном объемом 250 мл добавляли ТНР (20 мл) и воду (4 мл). Одной порцией при температуре 20-25°С добавляли ЫОН-Н2О (0,7 г, 16,7 ммоль, 1,5 экв.). Реакционную смесь перемешивали при к.т. до готовности согласно ТЖХ. После завершения добавляли воду (10 мл) и МТВЕ (10 мл). Водный слой (рН>9) сепарировали, после чего органический слой один раз экстрагировали водой (4 мл). Водные слои объединяли и добавляли МТВЕ (10 мл). Двухфазную смесь помешивали по мере добавления 1н. НС1 до уровня рН 1. Водный слой экстрагировали метил-третбутиловым эфиром (10 мл). Комбинированные слои МТВЕ промывали один раз 25% раствором Ναί',Ί (4 мл), затем сушили безводной Ха28О4 и концентрировали под вакуумом с получением С4-5.
'Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 5,97-6,07 (т, 1н), 5,76-5,82 (т, 1Н), 5,60 (йй, 1=0,6, 10,9 Гц, 1Н), 4,4 (йй, 1=8,0, 13,1 Гц, 1Н).
Этап 3. Получение С4-6.
Гидроксикислоту С4-5 (27,7 г, 182,1 ммоль) добавляли в сосуд объемом 1 л, оборудованный датчиком температуры и верхней мешалкой. К субстрату при температуре 20-25°С добавляли ДХМ (280 мл), ЭМАР (2,0 г, 16,5 ммоль) и пиридин (29,4 мл, 364,1 ммоль). На протяжении 1 ч добавляли ТМ8С1 (46,0 мл, 364,1 ммоль) с такой скоростью, чтобы поддерживать внутреннюю температуру в диапазоне 1828°С. Затем суспензию перемешивали в течение 1,5 ч при температуре 20°С. Реакционную смесь охлаждали до 0°С и обрабатывали ДМФ (0,1 мл) и (СОС1)2 (15,6 мл, 182,1 ммоль), который добавляли с такой
- 48 029088
скоростью, чтобы поддерживать внутреннюю температуру ниже 10°С. Эту суспензию перемешивали в течение 1 ч при 0°С и 30 мин при температуре 20°С. Температуру суспензии затем понижали до 0°С и добавляли пиридин (20,0 мл, 248,3 ммоль), поддерживая внутреннюю температуру ниже 10°С. По мере добавления пиридина начиналось формирование твердой фазы, из-за чего требовалось более интенсивное помешивание. Порциями добавляли 5-метокси-2-нитроанилин (27,8 г, 165,5 ммоль), поддерживая внутреннюю температуру ниже 10°С. После завершения добавления температуру реакционной смеси повышали до 20°С. После завершения реакции (согласно результатам сверхэффективной ЖХ) суспензию фильтровали и промывали твердую фазу ДХМ. Раствор ДХМ промывали 1 М НС1 и затем суспендировали с силикагелем в течение 15 мин. Суспензию фильтровали и промывали ДХМ. Добавляли НС1 в МеОН (приготовленный из МеОН и ΑсС1 (1,3 экв.) при 0°С), после чего контролировали ход реакции сверхэффективной ЖХ до полного завершения. Раствор ДХМ нейтрализовывали насыщенным водным ЫаНСОз. Водный слой экстрагировали дихлорметаном и концентрировали комбинированные слои ДХМ до состояния пены. Пену помещали в ДХМ и нагревали до 35°С. Медленно добавляли гептан, добавляли затравку, перемешивали суспензию в течение 30 мин. Медленно на протяжении 1 ч добавляли гептан, суспензию выдерживали в течение 1 ч и затем охлаждали до 25°С на протяжении 1 ч. Суспензию помешивали в течение 2 ч, фильтровали и промывали в ДХМ/гептане (смесь 1:3) с получением С4-6.
’Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 11,64 (5, 1Н), 8,36 (ά, 1=2,3 Гц, 1Н), 8,20 (ά, 1=9,4 Гц, 1Н), 6,69 (άά, 1=9,4, 2,1 Гц, 1Н), 6,19-5,95 (т, 1Н), 5,78 (Ьг-ά, 1=17,4 Гц, 1Н), 5,58 (ά, 1=11,1 Гц, 1Н), 4,53 (1, 1=10,2 Гц, 1Н), 3,90 (5, 3Н).
Этап 4. Получение С4-7.
Нитроанилин С4-6 (10,96 г, 36,3 ммоль) разбавляли в ДХМ (75 мл) и обрабатывали ГЕМРО (569 мг, 3,64 ммоль) и Ви4ЫС1 (1,0 г, 3,6 ммоль) в трехгорлой колбе объемом 500 мл, оборудованной верхней мешалкой и внутренним датчиком температуры. Добавляли буферный раствор (0,5 М №НСО3. 0,05 М №-ьСО3. 90 мл) и интенсивно перемешивали смесь. Одной порцией добавляли ЫС8 (5,85 г, 43,8 ммоль). Через 2,25 ч добавляли ЕЮН (2,5 мл), что способствовало растворению твердого вещества. Водный слой удаляли и один раз экстрагировали ДХМ. Комбинированные слои ДХМ промывали насыщенным раствором тиосульфата натрия, водой и затем суспендировали с силикагелем (15 г). Кремний фильтровали и промывали ДХМ. После концентрирования под вакуумом собирали С4-7. Этот материал растворяли в 45 мл горячего ДХМ. По каплям добавляли гептан (25 мл) в течение 3 мин и вводили в качестве затравки в полученный раствор 30 мг гидрата продукта. Кристаллизующуюся смесь перемешивали 5 мин при температуре ~45°С и затем охлаждали до комнатной температуры. Затем для более интенсивного перемешивания подключали механическую мешалку. При помощи шприцевого насоса добавляли дополнительно гептан (35 мл) со скоростью 20 мл/мин и перемешивали полученную суспензию в течение ночи. Затем твердое вещество фильтровали вакуумной фильтрацией через воронку со спеченным фильтром средней пористости и промывали фильтровальный осадок 4x9 мл раствора 2:1 гептан:ДХМ. После сушки получали смесь гидрата и этил гемикеталь.
’Н-ЯМР (400 МГц, ά6-ацетон): δ 8,41 (ά, 1=2,8 Гц, 1Н), 8,30 (ά, 1=9,4 Гц, 1Н), 6,90 (άά, 1=9,4, 2,7 Гц, 1Н), 6,34-6,16 (т, 1Н), 5,75 (Ьг-ά, 1=17,4 Гц, 1Н), 5,62 (ά, 1=11,1 Гц, 1Н), 3,97 (5, 3Н) ррт.
(Замечание: соответствующие компоненты этил кеталя/гемикеталя также до некоторой степени будут наблюдаться вместе с целевым продуктом. Эти побочные продукты хорошо заметны благодаря дублированию пиков и мультиплетам в диапазоне 3,4-3,9 и 0,9-1,3 ррт. Перечисленные значения соответствуют основному продукту).
Этап 5. Получение С4-3.
Нитроанилин С4-6 (32,9 г, 103 ммоль) суспендировали в ЕЮН (460 мл) и НОАс (190 мл) в трехгорлой колбе, оборудованной верхней мешалкой, датчиком температуры и впуском Ν2. Добавляли железный порошок (37,5 г, 672 ммоль) и нагревали гетерогенную смесь при интенсивном перемешивании в термоблоке, заранее подогретом до 55°С. Через 20 мин внутренняя температуре реакции достигала ~50°С, после чего на основании увеличения температуры полагали, что реакция проходит экзотермический пик. Подогрев прекращали, после чего внутренняя температура реакции продолжала увеличиваться до 57°С на протяжении 10 мин. После того как температура начинала спадать, источник тепла возвращали. После этого наблюдалась относительно постоянная внутренняя температура 51°С. Через 3 ч реакционную смесь разбавляли этилацетатом (300 мл) и добавляли целит (50 г). Полученную густую реакционную смесь фильтровали через короткую целитную пластинку, промывали достаточным количеством ΕЮΑс до получения элюата желтого/красного цвета. Фильтрат концентрировали под вакуумом и разделяли между ΕЮΑс (300 мл), 0,2 М водной НС1 (250 мл) и солевым раствором (50 мл). Слои сепарировали и промывали органическую фазу 2x300 мл 15% насыщенного солевого раствора, 1x300 мл смеси 1:1 Н2О:насыщенного водного NаΗСΟ3 и 200 мл солевого раствора. Органическую фазу сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали с получением 50 г золотистого твердого осадка. Добавляли дополнительные 30 мл ΕЮΑс и нагревали гетерогенную смесь в термоблоке при температуре 65°С. Добавляли по каплям гексан (500 мл) через капельную воронку на протяжении 1 ч и охлаждали полученную суспензию до температуры окружающей среды, после чего перемешивали дополнительно ещё 5 ч.
- 49 029088
Фильтровали через стеклянную воронку с фильтром из спеченного стекла средней пористости с получением целевого продукта.
1Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 12,43 (з, 1Н), 7,83 (ά, 1=9,0 Гц, 1Н), 6,98 (ά, 1=8,9 Гц, 1Н), 6,81 (з, 1Н), 6,64-6,42 (т, 1Н), 5,90 (Ьг-ά, 1=17,4 Гц, 1Н), 5,59 (ά, 1=11,0 Гц, 1Н), 3,93 (з, 3Н) ррт.
Этап 6. Получение промежуточного соединения С4.
Гидроксихиноксалин (22,4 г, 88,8 ммоль) растворяли в ДМФ (45 мл) в сосуде с круглым дном, оборудованном датчиком температуры и впуском Ν2. При помощи шприца добавляли РОС13 (12,5 мл, 134 ммоль, 1,5 экв.) с такой скоростью, чтобы поддерживать внутреннюю температуру реакции ниже 50°С. Затем темно-красный раствор нагревали при помощи термоблока, предварительно нагретого до 75°С (внутренняя температура ~74°С). Через 2,5 ч реакционную смесь переносили через канюлю в 370 мл Н2О в трехгорлой колбе, оборудованной датчиком температуры, верхней мешалкой и атмосферным клапаном. Скорость гашения регулировали так, чтобы внутренняя температура оставалась ниже 35°С. Три дополнительные части ДМФ (3 мл каждая) использовали для обеспечения полного переноса. Как только внутренняя температура понижалась до 30°С, добавляли 3 М водного №ОН до уровня рН ~67 (160 мл всего). Коричневую гетерогенную смесь далее охлаждали до внутренней температуры 15°С и фильтровали через спеченный фильтр класса М. Осадок на фильтре промывали водой (2x30 мл) и 3:1 Η2О:ΜеСN (3x20 мл). Осадок на фильтре суспендировали в СН2С12 (200 мл), сушили смесь безводной Мд8О4 и фильтровали через тонкую целитную пластинку. Концентрировали под вакуумом с получением 19 г темно-красного масла. Это масло растворяли в СН2С12 (100 мл) и суспендировали с силикагелем (40 г) в течение 20 мин. Суспензию фильтровали через короткую пластинку свежего силикагеля (20 г) и промывали 6x40 мл СН2С12. Фильтрат концентрировали, в результате чего получали целевой продукт. Этот материал перекристаллизовывали из горячих гексанов, в результате чего получали 14,5 г промежуточного соединения С4 в виде желтых игольчатых кристаллов.
1Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 8,02 (ά, 1=9,2 Гц, 1Н), 7,45 (άά, 1=9,3, 2,8 Гц, 1Н), 7,32 (ά, 1=2,7 Гц, 1Н), 6,59-6,43 (т, 1Н), 5,86 (άΐ, 1=17,3, 2,5 Гц, 1Н), 5,67 (ά, 1=11,0 Гц, 1Н), 3,98 (з, 3Н) ррт.
Способ С:
Этап 1. Получение С4-8.
К гидроксиэфиру С4-4 (58,1 г, 323 ммоль) добавляли ДХМ (700 мл) в трехгорлой колбе объемом 2 л, оборудованной верхней мешалкой и внутренним датчиком температуры. Затем последовательно добавляли ТЕМРО (5,4 г, 35 ммоль), дополнительный буферный раствор (полученный при растворении
2) аллилирование
О О 516-5
сложного
эфира
О О
516-4
На схеме 16 показан общий путь получения промежуточного соединения 816-5, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, где Ьр, Т, М и О соответствуют приведенным в настоящем документе определениям. Спирт 816-1 содержит защитную группу РС. Примеры подходящих защитных групп включают следующие, но не ограничиваются ими: -ТВ8, -Т1Р8, -Вп, -РМВ и -Ас. Схема 16 начинается с обработки защищенного спирта 816-1 реагентом сочетания (например, О8С) и основанием (например, пиридином), в результате чего получают активированное промежуточное соединение 816-2. Затем это промежуточное соединение подвергают реакции сочетания с аминоэфиром 814-3 в присутствии основания (например, К3РО4), в результате чего получают промежуточное соединение 816-3. Снятие защиты спирта (например, с использованием ТВАР, если РС представляет собой кремниевую защитную группу) с последующей обработкой подходящим алкил- или алкенил (например, аллилбромидом) дает алкен 816-4. Гидролиз сложного эфира (например, МОН) соединения 816-4 дает кислоту 816-5.
На схеме 17 показан общий путь получения промежуточных соединений 817-4 и 817-6, которые можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, где и и Шп соответствуют приведенным в настоящем документе определениям. В соответствии со схемой 17 молекула защищенного пролина 817-2 содержит две уходящие группы, ЬО1 и ЬО2, которые могут быть одинаковыми или разными. Примеры уходящих групп ЬО1 и ЬО2 включают следующие, но не ограничиваются ими: хлор или ОН. 817-2 подвергается реакции этерификации в таких условиях реакции, как 8\Аг (например, К_2=Н, Сз2СО3, обработанный соединением 817-1, где ЬО=-С1), 8\-2 - замещение пролинолбросилата (817-2, в котором К2=Вз) под действием 817-1, в котором ЬО=-ОН, или реакция Мицунобу (например, обработка ΌΙΑΌ и трифенилфосфином подходящего полинола, например 817-2, в котором К2=Н), а затем добавлению 817-1, в котором ЬО=-ОН, в результате чего получают пролиновый эфир
817-3, где РО представляет собой подходящую защитную группу. Удаление защитной группы (например, ТФУК, если РО=Вос) дает 817-4.
- 32 029088
В альтернативном варианте промежуточное соединение 817-3 подвергается катализируемому металлом кросс-сочетанию (например, Судзуки с использованием винилтрифторбората калия), в результате чего получают винилированное соединение 817-5, причем последующее удаление защитной группы (например, ТФУК, если РО=Вос) дает 817-6.
На схеме 18 показан общий путь получения промежуточного соединения 818-3, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, где и и Υη соответствуют приведенным в настоящем документе определениям. В соответствии со схемой 18 соединение
818-1 включает уходящую группу, ЬО. Примеры уходящих групп ЬО включают следующие, но не ограничиваются ими: хлор или ОН. Защитные пролиновые соединения 817-2 (где РО представляет собой подходящую защитную группу) подвергаются реакции этерификации в таких условиях реакции, как 8пАг (например, К2=Н, Сз2СО3, обработанный соединением 818-1, где ЬО=-С1), 8Ν2 - вытеснение пролинолбросилата (817-2, где К2=Вз) соединением 818-1, где ЬО=-ОН или реакция Мицунобу (например, обработка Э1АЭ и трифенилфосфином соответствующего пролинола, например 817-2, где К2=Н), а с последующим добавлением соединения 818-1, в котором ЬО=-ОН, с получением пролинового эфира 818-2. Удаление защитной группы (например, ТФУК, если РО=Вос) дает 818-3.
На схеме 19 показан общий путь получения промежуточного соединения 819-4, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, в которых 1, Ьр, Т, и, Υη и Р соответствуют приведенным в настоящем документе определениям. В соответствии со схемой 19 пролин 817-4 (ЬО представляет собой подходящую защитную группу) и кислоту 816-5 подвергают реакции сочетания в присутствии реагента сочетания (например, НАТИ) и основания (например,
- 33 029088
ΏΙΡΕΑ), в результате чего получают промежуточное соединение 819-1. Катализируемое металлом кросссочетание (например, Судзуки с винилтрифторборатом калия) дает винилированные соединения 819-2. Последующий метатезис с замыкание кольца (например, /йаи 1В) дает макроциклическое промежуточное соединение 819-3. Восстановление двойной связи в макроцикле (например, Н2, Ρά/С или КЬ/А12О3) дает 819-4.
На схеме 20 показан другой общий путь получения промежуточного соединения 819-4, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, в которых Ер, Т, и, Ж, и Ц соответствуют приведенным в настоящем документе определениям. Схема 20 начинается с реакции сочетания пролина 817-6 и кислоты 816-5 в присутствии реагента сочетания (например, НАТИ) и основания (например, ΏΙΡΕΑ), в результате чего получают промежуточное соединение 819-2. Последующий метатезис с замыканием кольца (например, /йап 1В) дает макроциклическое промежуточное соединение 819-3. Восстановление макроциклическое двойной связи (например, Н2 Ρά/С или Кй/А12О3) дает 819-4.
Схема 21
521-2 521-3
На схеме 21 показан общий путь получения промежуточного соединения 821-3, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, в которых 1, Ьр, Т, и, и Ц соответствуют приведенным в настоящем документе определениям. Схема 21 начинается с реакцией сочетания пролина 818-2 и кислоты 816-5 в присутствии реагента сочетания (например, НАТИ) и основания (например, ΏΙΡΕΑ), в результате чего получают промежуточное соединение 821-1. Последующий метатезис с замыканием кольца (например, /йап 1В) дает макроциклическое соединение 821-2. Восстановление двойной связи в макроцикле (например, Н2, Ρά/С или Кй/А12О3) дает 821-3.
- 34 029088
На схеме 22 показана альтернативная последовательность этапов получения промежуточного соединения 819-4, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, в которых ί, ЬР, Т, и, Шп и 0 соответствуют приведенным в настоящем документе определениям. С соответствии со схемой 22 пролин 817-4 включает уходящую группу ЬО1. Пролин 817-4 и защищенную аминокислоту 822-1 подвергают сочетанию путем обработки реагентом сочетания (например, НАТИ) и основанием (например, ΌΙΡΕΑ), в результате чего получают промежуточное соединение 822-2. Удаление защиты амина (например, НС1, если РО=Вос) дает промежуточное соединение 822-3, которое обрабатывают промежуточным соединением 814-2 в присутствии подходящего основания (например, триэтиламина), в результате чего получают соединения 822-4. Катализируемое металлом кросссочетание (например, Судзуки с винилтрифторборатом калия) дает диеновое промежуточное соединение
819-2, которое затем помещают в условия реакции метатезиса с замыканием кольца (например, ΖΗαη 1В), в результате чего получают промежуточное соединение 819-3. Восстановление двойной связи в макроцикле (например, Н2, Рд/С или КН/А12О3) дает 819-4.
- 35 029088
На схеме 23 показан общий синтез промежуточного соединения 819-4, которое можно применять для получения некоторых описанных в настоящем документе соединений, в которых I, Ьр, Τ, и, Уп и 0 соответствуют приведенным в настоящем документе определениям. В соответствии со схемой 23 промежуточное соединение 822-2 содержит защитную группу РО и уходящую группу ЬО1. Промежуточное соединение 822-2 подвергается реакции катализируемого металлом кросс-сочетания (например, реакция Соногашира) с активированным алкинильным линкерным фрагментом 815-2, в результате чего получают промежуточное соединение 823-1. Восстановление алкина (например, Н2, Рб/С или КЪ/Л12О3) дает промежуточное соединение 823-2. Удаление защиты амина (например, НС1, если РО=Вос) с последующей карбоциклизацией через образование карбамата в присутствии основания (например, триэтиламина) дает 823-3.
На схеме 24 показан общий синтез промежуточных соединений 824-3 и 824-4, которые можно применять для получения некоторых описанных здесь соединений, в которых I, Ьр, Τ, и, Уп и 0 соответствуют приведенным в настоящем документе определениям. В соответствии со схемой 24 удаление защиты 819-3 или 819-4 с удалением Уп (например, Н2 Рб/С, если РО = бензил) дает промежуточный гетероарильный спирт 824-1. Активация полученного спирта (например, ’ГОО) до подходящей уходящей группы (ЬО), такой как трифлат, дает промежуточное соединение 824-2. Последующее катализируемое металлом кросс-сочетание (например, Судзуки) дает промежуточное соединение 824-4. Промежуточное соединение 824-1 в альтернативном варианте может быть алкилировано (например, алкилгалогенидом), в результате чего получают промежуточное соединение 824-3.
- 36 029088
Схема 25
На схеме 25 показан общий путь получения 825-1, в котором I, ЬР, Т, и, Л и 0 соответствуют приведенным в настоящем документе определениям. В соответствии со схемой 25 промежуточный сложный эфир пролина 819-4 гидролизуют до соответствующей карбоновой кислоты, после чего подвергают реакции сочетания с промежуточным соединением 83-3 в присутствии агента сочетания (например, НЛТИ) и основания (например, ΌΙΡΕΑ), в результате чего получают соединения общего типа 825-1.
Приведенные ниже неограничивающие способы получения и примеры иллюстрируют получение различных раскрытых здесь вариантов реализации.
Спектры 1Н ядерного магнитного резонанса (ЯМР) во всех случаях совпадали с предполагаемыми структурами. Характеристические химические сдвиги (δ) приведены в частях на миллион в сторону слабого поля относительно тетраметилсилана с использованием обычных сокращений для основных пиков: например, 8, синглет; ф дублет; 1, триплет; ς, квартет; т, мультиплет; Ьг, широкий. Для обычных растворителей, применяемых в экспериментах с использованием ядерного магнитного резонанса, используются следующие сокращения: СОС13, дейторохлороформ; Οϋ3ΟΌ, пердейтерометанол; Οϋ3ΠΝ, пердейтероацетонитрил; 06-ДМСО, пердейтеродиметилсульфоксид. Масс-спектры получали с использованием массспектрометров ТНегто 8с1епййс или Адйеп! ТесНпо1од1е8, оборудованных устройством для ионизации электрораспылением (Ε8Ι). Массы приведены в виде отношений массы к заряду (т/ζ). Измерения методом аналитической ЖХВД проводили на приборе АдПеп! ТесНпо1од1е8 8епе8 1100 ПРЕС с использованием колонки РНепотепех Кте1ех С18, 2,6 мкм 100 А, 4,6x100 мм с программой элюирования, включающей 2% растворитель В в течение 0,55 мин, градиент до 98% растворителя В в течение 8 мин и поддержание 98% растворителя В в течение 0,40 мин с последующим возвратом к 2% растворителя В в течение 0,02 мин и поддержанием 2% растворителя В в течение 2,03 мин при скорости потока 1,5 мл/мин (растворитель А = Н2О, профильтрованная на фильтре МШр + 0,1% ТФУК, растворитель В = ΜόΠΝ + 0,1% ТФУК). Термин "тонкослойная хроматография (ТСХ)" относится к хроматографии на силикагеле с использованием силикагелевых пластин 60 Р254. Фактор удерживания ("К./) соединения представляет собой расстояние, пройденное соединением, разделенное на расстояние, пройденное фронтом растворителя на пластине для ТСХ. Такие термины, как "рано элюируемый" и "поздно элюируемый", относятся к порядку, в котором соединение элюируется или выделяется из твердой стационарной фазы/подвижной фазы жидкого растворителя на основании метода хроматографии (например, хроматография на силикагеле с нормальными фазами или обращенно-фазовая жидкостная хроматография высокого давления (ЖХВД)).
Примеры
Получение некоторых промежуточных соединений.
Г руппа промежуточных соединений А.
Получение промежуточного соединения А1.
Этапы 1-3.
Получение промежуточного соединения А1.
Промежуточное соединение А1 получали, следуя процедуре, подробно описанной в примере 2.12 международной патентной публикации № ^О 2008/064066 (с. 75-76), используя (1К,28)-метил 1-(третбутоксикарбониламино)-2-винилциклопропанкарбоксилат (полученный в соответствии с БеаиНеи, Р.К, е! а1., I. Огд. СНет. 2005, 70, 5869) вместо (1К,28)-этил 1-(трет-бутоксикарбониламино)-2винилциклопропанкарбоксилата.
- 37 029088
Получение промежуточного соединения А2.
Промежуточное соединение А2 получали аналогично промежуточному соединению А1, используя 1-метилциклопропан-1-сульфонамид (полученный в соответствии с примером 1.2 международной патентной публикации № АО 2008/064066, с. 47) вместо циклопропансульфонамида.
Получение промежуточного соединения А3.
Этап 1. Получение А3-1.
Циклопропановый эфир А3-1 получали из (1К,28)-метил 1-(трет-бутоксикарбониламино)-2винилциклопропанкарбоксилата (полученного согласно ВеаиЬеи, Р.Ь., е! а1., I. Огд. СЬет. 2005, 70, 5869) с использованием процедуры, подробно описанной в примере 26 международной патентной публикации № АО 2009005677 (с. 176).
Этапы 2-4.
Получение промежуточного соединения А3.
Промежуточное соединение А3 получали аналогично (1К,28)-1-амино-Ы-(циклопропилсульфонил)2-винилциклопропанкарбоксамида гидрохлориду из примера 2.12 международной патентной публикации № АО 2008/064066 (с. 75, 76), используя А3-1 вместо (1К,28)-этил 1-(трет-бутоксикарбониламино)-2винилциклопропанкарбоксилата.
Получение промежуточного соединения А4.
Промежуточное соединение А4 получали аналогично промежуточному соединению А3, используя 1-метилциклопропан-1-сульфонамид (полученный в соответствии с примером 1.2 международной патентной публикации № АО 2008/064066, с. 47) вместо циклопропансульфонамида.
Получение промежуточного соединения А5.
Этапы 1-3.
Получение промежуточного соединения А5.
Промежуточное соединение А5 получали аналогично (1К,28)-1-амино-Ы-(циклопропилсульфонил)2-винилциклопропан-карбоксамида гидрохлориду из примера 2.12 международной патентной публикации № АО 2008/064066 (с. 75, 76), используя А5-1 (полученный в соответствии с примером 104 международной патентной публикации № АО 2009/005677, с. 265) вместо (1К,28)-этил 1-(третбутоксикарбониламино)-2-винилциклопропанкарбоксилата.
Получение промежуточного соединения А6.
Промежуточное соединение А6 получали аналогично промежуточному соединению А5, используя 1-метилциклопропан-1-сульфонамид (полученный в соответствии с примером 1.2 международной па- 38 029088
тентной публикации № АО 2008/064066, с. 47) вместо циклопропансульфонамида. Получение промежуточного соединения А7.
Промежуточное соединение А7 получали в соответствии с примером 97.1.6 патентной публикации США № 2009/274652, с. 72-73.
Получение промежуточного соединения А8.
Этапы 1, 2.
Получение промежуточного соединения А8.
Промежуточное соединение А8 получали аналогично (1К,28)-1-амино-^(циклопропилсульфонил)2-винилциклопропанкарбоксамида гидрохлориду из примера 2.12 международной патентной публикации № АО 2008/064066 (с. 75, 76), используя А8-1 (полученный согласно процедуре, подробно описанной в примере 97.1.4 патентной публикации США № 2009/274652, с. 72-73) вместо (1К,28)-1-(третбутоксикарбониламино)-2-винилциклопропанкарбоновой кислоты и используя 1-метилциклопропан-1сульфонамид (полученный в соответствии с примером 1.2 международной патентной публикации № АО 2008/064066, с. 47) вместо циклопропансульфонамида.
Получение промежуточного соединения А9.
Этап 1, 2. Получение промежуточного соединения А9: Промежуточное соединение А9 получали аналогично (1К,28)-1-амино-^(циклопропилсульфонил)-2-винилциклопропан-карбоксамида гидрохлориду из примера 2.12 международной патентной публикации № АО 2008/064066 (с. 75-76), используя А9-1 (полученный в соответствии с примером 1, Этапы 1Б-1О международной патентной публикации № АО 2009/134987, с. 75-77) вместо (1К,28)-1-(трет-бутоксикарбониламино)-2винилциклопропанкарбоновой кислоты.
Получение промежуточного соединения А10.
Этап 1. Получение А10-1.
Раствор А9-1 (25 г, 100 ммоль) и 1-метилциклопропан-1-сульфонамида (полученного в соответствии с примером 1.2 международной патентной публикации № АО 2008/064066, стр. 47; 15 г, 110 ммоль) в ДХМ (330 мл) обрабатывали диметиламнопиридином (24,4 г, 200 ммоль), после чего медленно добавляли БОС (38,3 г, 200 ммоль) при 0°С. После завершения добавления смесь перемешивали интенсивно при 0°С и давали нагреться до комнатной температуры в течение 36 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом (300 мл). Органический слой промывали 10% лимонной кислотой (3x30 мл) и насыщенным ΝηΙ 1СО3 (2x20 мл). Объединенные водные смывы экстрагировали один раз этилацетатом. Объединенные органические слои промывали солевым раствором (2x25 мл), сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. После растирания со смесью гексан/ЕЮАс (10/1) получали ацилсульфонамид А10-1 (31 г) в форме белого твердого вещества.
Этап 2. Получение промежуточного соединения А10.
К суспензии ацилсульфонамида А10-1 (18,5 г, 50 ммоль) в ДХМ (300 мл) медленно добавляли 4 М НС1 в диоксане (150 мл, 600 ммоль). После завершения добавления смесь перемешивали интенсивно при комнатной температуре в течение 4 ч. Реакционную смесь затем концентрировали под вакуумом, а остаток растирали с Е12О, в результате чего получали промежуточное соединение А10 (14,7 г) в виде аморф- 39 029088
ного белого твердого вещества.
1Н-ЯМР (400 МГц, СЭзОЭ): δ 5,94 (т, 1Н), 2,26 (т, 2Н), 1,76 (т, 1Н), 1,62 (т, 1Н), 1,60 (т, 1Н), 1,53 (8, 3Н), 0,93 (т, 2н).
Группа промежуточных соединений В.
Получение смеси промежуточных соединений В1 и В2.
Этапы 1 и 2. Получение рацемата В1-1.
Металлический магний (1,32 г, 54,3 ммоль) добавляли в двухгорлую колбу, оборудованную обратным охладителем, и продували сосуд аргоном. Добавляли ТГФ (42 мл), а затем йод (приблизительно 5 мг). Перемешиваемую суспензию нагревали до 45°С и добавляли одной порцией 5-бромпент-1-ен (1,2 г, 8,1 ммоль). После перемешивания в течение нескольких минут добавляли еще 5-бромпент-1-ен (5,5 г, 37 ммоль) со скоростью, достаточной для поддержания аккуратного дефлегмирования. Полученную смесь перемешивали при 50°С в течение 15 мин, а затем охлаждали до температуры окружающей среды и сразу использовали на следующем этапе. Суспензию Си1 (630 мг, 3,3 ммоль) в ТГФ (24 мл) в атмосфере аргона охлаждали до -5°С. Аликвоту пент-4-енилмагния бромида (приблизительно 0,95 М, 20 мл, 19 ммоль), полученного на этапе 1, добавляли на протяжении 5 мин, полученную смесь перемешивали в течение еще 15 мин. Реакционную смесь далее охлаждали до -20°С и добавляли (±)-экзо-2,3эпоксинорборнан (1,5 г, 14 ммоль) в виде раствора в ТГФ (5 мл) на протяжении 1 мин. Использовали две дополнительные части ТГФ (по 2,5 мл каждая) для обеспечения завершения переноса, полученную смесь перемешивали в течение 20 мин. Реакционную смесь затем извлекали из холодной ванны и нагревали до комнатной температуры. После перемешивания в течение еще 1,75 ч реакцию гасили насыщенным водным раствором Ν44ίΊ (5 мл) и фильтровали с использованием этилацетата (100 мл) и Н2О (100 мл) через целит. Разделяли фазы и органическую фазу сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали (±)-В1-1.
Ή-ЯМР (300 МГц, СЭС13): δ 5,90-5,67 (т, 1Н), 5,04-4,86 (т, 2Н), 3,12 (8, 1Н), 2,20-1,92 (т, 5Н), 1,69-1,57 (т, 1Н), 1,55-1,12 (т, 9Н), 1,03-0,84 (т, 1Н).
Этап 3. Получение диастереомерной промежуточной смеси В1 и В2.
Смесь спиртов (±)-В1-1 (813 мг, 4,51 ммоль) растворяли в ДМФ (4,5 мл). Добавляли пиридин (370 мкл, 4,5 ммоль), а затем Э8С (1,5 г, 5,8 ммоль). Реакционную смесь нагревали до 45°С и перемешивали в течение 4 ч. Реакционную смесь далее охлаждали до 0°С и по каплям в течение 2 мин добавляли воду (4,5 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 5 мин и извлекали из холодной ванны. После еще 5 мин реакционную смесь охлаждали до 0°С и добавляли Ь-трет-лейцин (835 мг, 6,37 ммоль) и К3РО4 (2,70 г, 12,7 ммоль). Смесь перемешивали в течение 10 мин и извлекали из холодной ванны. После перемешивания в течение еще 24 ч смесь разбавляли этилацетатом (30 мл), подкисляли 1 М водным раствором НС1 (15 мл) и разбавляли 0,2 М водным раствором НС1 (15 мл). Разделяли фазы и органическую фазу промывали 0,2 М водным раствором НС1 (2x20 мл), сушили над безводным Ка28О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали диастереомерную промежуточную смесь В1 и В2 (1,64 г).
ЖХМС с ионизацией электрораспылением- (т/ζ): [М-Н]- расч. для С/уН^УОд 336,2; эксп.: 336,0.
- 40 029088
Получение смеси промежуточных соединений В3 и В4.
Этап 1
Ζ©0Η — ДУ
Этап 2
В4
(±)-ВЗ-4
Этап 1. Получение В3-1.
К раствору К2Сг2О7 (121 г, 0,41 моль) в Н2О (1,5 л) добавляли по каплям Н28О4 (143 г, 1,46 моль) при комнатной температуре и перемешивали смесь в течение 1 ч. Смесь далее охлаждали до 0°С и добавляли по каплям (1К,3г,58)бицикло[3.1.0]гексан-3-ол (80 г, 0,814 моль, полученный в соответствии с разделом А, промежуточное соединение 1 заявки на патент США 8178491 В2, р. 192) в МТВЕ (1,5 л). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение 2 ч. Водную фазу экстрагировали метил-третбутиловым эфиром (3x500 мл), сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Сырой продукт очищали путем дистилляции (20 мм рт. ст., т.к.: 60-62°С), в результате чего получали В3-1.
1Н-ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 2,57-2,63 (т, 2Н), 2,14-2,19 (ά, 1=20 Гц, 2Н), 1,52-1,57 (т, 2Н), 0,890,94 (т, 1Н), -(0,05-0,02) (т, 1Н).
Этап 2. Получение (±)-В3-2.
В атмосфере аргона смесь ТГФ (4,4 мл) и НМРА (1,8 мл) охлаждали до -78°С. Добавляли 1 М раствор ПНМП8 в ТГФ (2,2 мл, 2,2 ммоль). Добавляли кетон В3-1 (202 мг, 2,10 ммоль) в виде раствора в ТГФ (2 мл) на протяжении 1 мин, промывая дополнительным количеством ТГФ (2x1 мл) для обеспечения полного переноса. Через 25 мин добавляли 5-йодопент-1-ен (полученный согласно Ли, I. еЬ а1. I. Огд. Сйет. 2007, 72, 5098-5103) (880 мг, 4,5 ммоль) на протяжении 30 с при помощи шприца. Через 10 мин реакционную смесь помещали в холодную ванну при -45°С и нагревали до -30°С в течение 1,5 ч. Реакционную смесь гасили насыщенным водным раствором Ν^Ο (15 мл) и разбавляли этилацетатом (30 мл) и Н2О (15 мл). Разделяли фазы и водную фазу экстрагировали этилацетатом (30 мл). Объединенные органические вещества сушили над безводным №28О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали неочищенный остаток, который очищали хроматографией на силикагеле (от 0 до 15% ЕЮАс в гексанах), в результате чего получали (±)-В3-2.
ХН-ЯМР (400 МГц, СОС13): δ 5,82-5,67 (т, 1Н), 5,03-4,87 (т, 2Н), 2,61-2,51 (т, 1Н), 2,11 (ά, 1=19,1 Гц, 1Н), 2,08- 1,99 (т, 3Н), 1,61-1,40 (т, 5Н), 1,36-1,28 (т, 1Н), 0,92-0,81 (т, 1Н), -(0,03-0,11) (т, 1Н).
Этап 3. Получение (±)-В3-3 и (±)-В3-4.
Раствор (±)-В3-2 (142 мг, 0,865 ммоль) в ТГФ (4 мл) охлаждали до -78°С. По каплям в течение 30 с добавляли 1 М раствор иВНЕЦ в ТГФ (1,3 мл, 1,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали 15 мин и извлекали из холодной ванны. После нагревания до к.т. (15 мин) реакцию гасили насыщенным водным раствором Ν^Ο (1 мл). Полученную смесь разбавляли этилацетатом (20 мл) и Н2О (20 мл). Разделяли фазы и водную фазу экстрагировали диэтиловым эфиром (20 мл). Объединенные органические вещества сушили над безводным Мд8О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом. Очистка хроматографией на силикагеле (от 0 до 10% ЕЮАс в гексанах) давала 133 мг смеси диастереомеров (±)-В3-3 и (±)-В3-4. Объединенный материал из двух экспериментов (253 мг) очищали хроматографией на силикагеле (от 0 до 15% ЕЮАс в гексанах), в результате чего получали (±)-В3-3 (150 мг) и (±)-В3-4 (58 мг).
ХН-ЯМР для (±)-В3-3 (300 МГц, СПС13): δ 5,91-5,69 (т, 1Н), 5,07-4,88 (т, 2Н), 3,97 (ά, 1=6,7 Гц, 1Н), 2,19-1,99 (т, 3Н), 1,84-1,73 (т, 1Н), 1,62 (ά, 1=14,1 Гц, 1Н), 1,54-1,40 (т, 2Н), 1,32-1,17 (т, 3Н), 1,16-1,06 (т, 1Н), 0,60-0,43 (т, 2Н).
ХН-ЯМР для (±)-В3-4 (300 МГц, СПС13): δ 5,95-5,73 (т, 1Н), 5,09-4,88 (т, 2Н), 4,05-3,86 (т, 1Н), 2,17-1,84 (т, 4Н), 1,72-1,34 (т, 5Н), 1,28-1,08 (т, 3Н), 0,49-0,36 (т, 1Н), 0,21-0,11 (т, 1Н).
Этап 4. Получение диастереомерной промежуточной смеси В3 и В4.
Смесь (±)-В3-3 (150 мг, 0,90 ммоль) растворяли в ДМФ (1,0 мл). Добавляли пиридин (75 мкл, 0,92 ммоль) и (О8С (302 мг, 1,18 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при 45°С в течение 21,5 ч.
- 41 029088
Реакционную смесь затем помещали в ванну с водой и льдом и добавляли Н2О (1,0 мл) по каплям при помощи шприца на протяжении 1 мин. Смесь извлекали из холодной ванны и оставляли перемешиваться в течение 5 мин. Смесь снова охлаждали в ванне со льдом и водой и добавляли Ь-трет-лейцин (154 мг, 1,17 ммоль), а затем К3РО4 (502 мг, 2,36 ммоль). Реакционную смесь извлекали из холодной ванны и оставляли перемешиваться при к.т. в течение 24 ч. Смесь после этого разбавляли этилацетатом (40 мл) и 1 М водным раствором НС1 (20 мл). Разделяли фазы и водную фазу экстрагировали этилацетатом (30 мл). Объединенную органическую фазу промывали 0,2 М водным раствором НС1 (2x20 мл), сушили над безводным Мд§О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали диастереомерную промежуточную смесь В3 и В4.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением- (т/ζ): [М-Н]- расч. для С/Д Ι28ΝΌ4: 322,2; эксп.: 322,0. Получение промежуточного соединения В3.
Этап 1. Получение В3-5.
К раствору (18,4К)-цис-4-ацетокси-2-циклопент-1-ола (ЛМпсй, 10 г, 70,4 ммоль), триэтиламина (48,8 мл, 350 ммоль) и ЭМЛР (4,29 г, 35,2 ммоль) в дихлорметане (352 мл) по каплям при помощи шприца добавляли пивалоилхлорид (10,8 мл, 87,75 ммоль) при 0°С в атмосфере аргона. Через 2 ч реакционную смесь разбавляли насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (500 мл) и экстрагировали дихлорметаном (2x500 мл). Объединенные органические экстракты сушили над безводным №2ЗО4 и концентрирорвали под вакуумом, в результате чего получали В3-5.
1Н-ЯМР (300 МГц, СОС13): δ 6,08 (Ьг 8, 2Н), 5,54 (ΐά, 1=8,0, 4,1 Гц, 2Н), 2,88 (άΐ, 1=14,9, 7,5 Гц, 1Н), 2,07 (8, 3Н), 1,69 (άΐ, 1=14,7, 4,1 Гц, 1Н), 1,20 (8, 9Н).
Этап 2. Получение В3-6.
К раствору В3-5 (15,0 г, 70,4 ммоль) в метаноле (352 мл) добавляли карбонат калия (9,73 г, 70,4 ммоль) при к.т. в атмосфере аргона. Через 5 ч реакционную смесь фильтровали и концентрировали под вакуумом. Остаток растворяли в этилацетате (500 мл), полученную смесь промывали водой (500 мл) и солевым раствором (500 мл), сушили над безводным №2ЗО4 и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле (0-100% этилацетат/гексаны), в результате чего получали В3-6.
1Н-ЯМР (300 МГц, СЭС13): δ 6,11 (Ьг ά, 1=5,5 Гц, 1Н), 5,97 (Ьг ά, 1=5,6 Гц, 1Н), 5,48 (Ьг8, 1Н), 4,73 (Ьг 8, 1Н), 2,82 (άΐ, 1=14,6, 7,3 Гц, 1Н), 1,67 (8, 1Н), 1,61 (άΐ, 1=14,5, 4,0 Гц, 1Н), 1,20 (8, 1=3,8 Гц, 9Н).
Этап 3. Получение В3-7.
К раствору цианида меди(1) (5,10 г, 57,0 ммоль) в диэтиловом эфире (95 мл) добавляли пент-4-анилмагния бромид (Νονβ1 Сйет1са1 8о1ийоп8, 0,5 М в ТГФ, 114 мл, 57,0 ммоль) по каплям через канюлю в течение периода продолжительностью 30 мин при 0°С в атмосфере аргона. Через 10 мин медленно через канюлю добавляли В3-6 (3,50 г, 19,0 ммоль) в диэтиловом эфире (10 мл). Затем реакционной смеси давали медленно нагреться до комнатной температуры. Через 16 ч полученную смесь гасили насыщенным водным раствором хлорида аммония (400 мл), полученную смесь экстрагировали в этилацетате (2x400 мл). Объединенные органические фазы промывали солевым раствором (400 мл), сушили над безводным №2ЗО4 и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле (0-100% этилацетат/гексаны), в результате чего получали В3-7.
'Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 5,80 (άάΐ, 1=16,9, 10,2, 6,7 Гц, 1Н), 5,69 (άά, 1=5,8, 1,7 Гц, 1Н), 5,65 (ά, 1=7,2 Гц, 1Н), 5,00 (άά, 1=17,1, 1,3 Гц, 1Н), 4,94 (ά, 1=10,2 Гц, 1Н), 4,12-4,05 (т, 1Н), 2,69 (άάά, 1=17,2, 6,4, 1,5 Гц, 1Н), 2,54-2,45 (т, 1Н), 2,24 (ά, 1=17,2 Гц, 1Н), 1,69 (Ьг8, 1Н), 1,52-1,19 (т, 6Н).
- 42 029088
Этап 4. Получение (13,2К,3К,53)-В3-3.
К раствору Β3-Ί (20 мг, 0,13 ммоль) и диэтилцинка (1 М в гексанах, 132 мкл, 0,132 ммоль) в диэтиловом эфире (0,66 мл) при к.т. в атмосфере аргона добавляли дийодометан (21 мкл, 0,26 ммоль). Через 2 ч реакционную смесь гасили 1н. водным раствором НС1 (0,66 мл). Через 5 мин полученную желтую смесь разбавляли насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (5 мл), полученную смесь экстрагировали дихлорметаном (3x5 мл). Объединенные органические экстракты сушили над безводным \а28О4 и концентрировали под вакуумом. Сырой остаток очищали хроматографией на силикагеле (0100% этилацетат/гексаны), в результате чего получали (15,2К,3К,55)-В3-3.
1Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 5,83 (άάί, 1=16,9, 10,2, 6,Ί Гц, 1Н), 5,02 (ά, Ι=1Ί,2 Гц, 1Н), 4,96 (ά, 1=11,3 Гц, 1Н), 4,00 (ά, 1=6,Ί Гц, 1Н), 2,19-2,02 (т, 3Н), 1,82 (ί, 1=Ί,2 Гц, 1Н), 1,64 (ά, 1=14,2 Гц, 1Н), 1,551,42 (т, 2Н), 1,38-1,20 (т,4Н), 1,19-1,08 (т, 1Н), 0,62-0,4Ί (т, 2Н).
Этап 5. Получение промежуточного соединения В3.
Спирт (15,2К,3К,55)-В3-3 (0,450 г, 2,Ί ммоль) выделяли в ДМФ (2,Ί мл) и обрабатывали последовательно Э5С (0,92 г, 3,52 ммоль) и пиридином (0,22 мл, 2,8 ммоль). Реакционную смесь после этого нагревали до 50°С в течение ночи. Реакционную смесь далее охлаждали до 0°С и по каплям на протяжении 1 мин добавляли воду (5,5 мл). Полученную мутную суспензию перемешивали при к.т. в течение 10 мин, а затем снова охлаждали до 0°С. Реакционную смесь затем обрабатывали последовательно Ь-трет-лейцином (0,462 г, 3,5 ммоль) и К3РО4 (1,5 г, Ί,0 ммоль) и давали ей нагреться до комнатной температуры в течение ночи при интенсивном перемешивании. Полученную мутную суспензию разбавляли этилацетатом и 1 М водным раствором НС1. Добавляли по каплям дополнительное количество НС1 (12 М) для доведения рН до ~3. Водный слой экстрагировали этилацетатом, объединенные органические вещества промывали солевым раствором и сушили над безводным М§5О4. После концентрирования под вакуумом получали промежуточное соединение В3, которое концентрировали с использованием небольших количеств ДМФ и ЕЮАс. Полученный материал использовали в последующих реакциях без дальнейшей очистки.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С18Н3^О4: 324,2; эксп.: 324,Ί.
Получение промежуточного соединения В5:
Промежуточное соединение В5 получали аналогично получению промежуточного соединения В3, используя бут-3-анилмагния бромид вместо пент-4-анил магния бромида на этапе 3.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для СпН2^О4: 310,2; эксп.: 310,8. Получение смеси промежуточных соединений В6 и ΒΊ:
Этап 1. Получение В6-1.
3. Применение соединения или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пп.1, 2 для лечения инфекции, вызванной вирусом гепатита С (ВГС), у нуждающегося в этом пациента.
- 91 029088
3-Фторанилин (50 г, 0,45 моль) и 1,1-бис-(метилтио)-2-нитроэтилен (74 г, 0,45 моль) в 500 мл этанола нагревали с обратным холодильником в течение 24 ч при постоянном перемешивании. Реакционную смесь охлаждали смесью лед-вода, фильтровали и промывали эфиром, в результате чего получали соединение С3-1.
Этап 2. Получение С3-2.
К суспензии соединения С3-1 (25 г, 110 ммоль) в 200 мл ΟΗ^Ν добавляли РОС13 (51 г, 330 ммоль) по каплям при 0°С в течение 15 мин при постоянном перемешивании. После завершения добавления реакционную смесь нагревали до 80°С в течение 3 ч. Затем растворитель удаляли под вакуумом и полученный остаток нейтрализовали ледяным насыщенным раствором \а11СО3. Водные слои экстрагировали дихлорметаном, объединенные органические вещества промывали водой, солевым раствором и сушили над безводным №^О4. Растворитель выпаривали под вакуумом и остаток очищали хроматографией на силикагеле (РЕ/ЕЮАс: 30/1), в результате чего получали С3-2.
Этап 3. Получение промежуточного соединения С3.
Раствор тСРВА (5,6 г, 32 ммоль) в СН2С12 (100 мл) добавляли по каплям к перемешиваемому раствору соединения С3-2 (3,0 г, 13 ммоль) в СН2С12 (100 мл) при 0°С в течение 30 мин, а затем давали нагреться до к.т. при перемешивании в течение ночи. Затем его промывали 1н. водным раствором Να(.)Ι I (3x100 мл), водой (100 мл) и солевым раствором (100 мл), а затем сушили над безводным №^О4. Растворитель выпаривали под вакуумом, остаток очищали хроматографией на силикагеле (РЕ/ЕЮАе = 10/1), в результате чего получали промежуточное соединение С3.
1Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 3,55 (δ, 3Н), 7,73-7,82 (т, 2Н), 8,15 (άά, 1=9,2, 5,6 Гц, 1Н).
Получение промежуточного соединения С4.
Способ А:
Этап 1. Получение С4-1.
К раствору 3-бром-3,3-дифторпроп-1-ена (25,0 г, 159 ммоль) и диэтилоксалата (21,6 мл, 159 ммоль) в ТГФ (380 мл), диэтилового эфира (90 мл) и н-пентана (90 мл) при -100°С добавляли по каплям н-бутиллитий (2,5 М в гексане, 67 мл, 167,6 ммоль) в течение 30 мин. Реакционную смесь перемешивали при -95°С в течение 1 ч и при -78°С в течение 2 ч и гасили водным раствором КН4С1 (11 г в 150 мл воды). Смесь экстрагировали эфиром (3 раза). Органические соли промывали 1н. водным раствором НС1, солевым раствором, сушили над безводным ΝίΓδΟ) и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали сырой остаток, который очищали хроматографией на силикагеле (ЕЮАс в гексанах: от 0 до 40%), в результате чего получали С4-1.
- 47 029088
'Н-ЯМР (300 МГц, СЭС13): δ 5,98-6,18 (т, 1Н), 5,78 (йй, 1=0,9 Гц, 13 Гц, 1Н), 5,60 (йй, 1=0,9 Гц, 11 Гц, 1Н), 4,38 (д, 1=6,9 Гц, 2Н), 1,37 (1, 1=7,2 Гц, 3Н).
Этап 2. Получение С4-2 и С4-3.
К раствору соединения С4-1 (14,0 г, 78,6 ммоль) и 4-метоксибензол-1,2-диамин дигидрохлорида (15,08 г, 71,4 ммоль) в ЕЮН (360 мл) при к.т. Добавляли триэтиламин (19,9 мл, 142,8 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при к.т. в течение ночи. Смесь концентрировали под вакуумом. Перемешивание в дихлорметане (30 мл) и фильтрация приводили к некоторому разделению региоизомеров с осаждением молекул С4-2.
'Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 11,940 (Ьг 8, 1Н), 7,850 (й, 1=9 Гц, 1Н), 6,985 (йй, 1=3 Гц, 9 Гц, 1Н), 6,754 (й, 1=2 Гц, 1Н), 6,625-6,498 (т, 1Н), 5,907 (й1, 1=17, 2 Гц, 1Н), 5,601 (й, 1=11 Гц, 1Н), 3,938 (з, 3Н).
Смесь разбавляли, фильтровали и концентрировали под вакуумом еще один раз, затем очищали хроматографией на силикагеле (ЕЮАе в гексанах: от 5 до 34%), в результате чего получали С4-3 в виде элюируемого первого компонента.
'Н-ЯМР (400 МГц, СЭС13): δ 12,05 (Ьг 8, 1Н), 7,850 (й, 1=9 Гц, 1Н), 6,986 (йй, 1=3 Гц, 9 Гц, 1Н), 6,761 (й, 1=3 Гц, 1Н), 6,597-6,526 (т, 1Н), 5,91 (й1, 1=17, 2 Гц, 1Н), 5,601 (й, 1=11 Гц, 1Н), 3,939 (з, 3Н).
Этап 3. Получение промежуточного соединения С4.
Раствор С4-3 (2,07 г, 8,2 ммоль в 1 мл ДМФ) обрабатывали РОС13 (0,8 мл) и нагревали при 65°С в течение 2,5 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и гасили, вливая в смесь вода-лед. Органическую фазу промывали последовательно насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и солевым раствором, сушили над безводным Ха28О4 и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали
4. Фармацевтическая композиция для лечения инфекции, вызванной ВГС, содержащая соединение или его фармацевтически приемлемую соль по любому из пп.1, 2 и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
4-Метокси-2-нитроанилин (10,0 г, 59,5 ммоль), ке!а1-ас1б С4-9 (11,1 г, 74,4 ммоль) и ВНТ (1,31 г, 5,95 ммоль) добавляли в трехгорлую колбу объемом 1 л, оборудованную верхней мешалкой, датчиком температуры и клапаном для впуска Аг. Последовательно добавляли этанол (200 мл) и уксусную кислоту (100 мл) при температуре 20°С, после чего колбу продували Аг. Добавляли железный порошок (16,6 г, 297 ммоль) и при интенсивном перемешивании нагревали гетерогенную смесь в термоблоке, заранее подогретом до 65°С. Через 10 мин внутренняя температура достигала максимального значения 70°С, что интерпретировали как прохождение экзотермического пика на основании повышения температуры. Подогрев прекращали, после чего внутренняя температура опускалась до 65°С, после чего источник тепла возвращали. Через 30 мин в реакционной смеси наблюдали наличие коричневого твердого осадка, после чего смеси давали остыть до к.т. Затем смесь разбавляли этилацетатом (1 л), добавляли силикагель (200 мл) и перемешивали. Полученную суспензию фильтровали через воронку со спеченным фильтром с крупными порами промывали достаточным количеством этилацетата с получением элюата желаемого продукта. Полученный прозрачный светло-красный/оранжевый фильтрат концентрировали под вакуумом и разделяли сырой остаток между этилацетатом (300 мл) и насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (300 мл). Фазы отделяли и сушили органическую фазу над безводным Ыа28О4, фильтровали и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали соотношение ~4:1 региоизомеров с преобладанием С4-3. Твердый осадок суспендировали в этилацетате (150 мл) и перемешивали магнитной мешалкой до превращения смеси в однородную хорошо перемешанную суспензию (~10 мин). В течение ~10 мин медленно добавляли гексаны (1,5 л) и собирали полученное твердое вещество из суспензии вакуумной фильтрацией через воронку со спеченным фильтром со средними порами, в результате чего получали целевой продукт в виде бежевого порошка после сушки.
Этап 4. Получение промежуточного соединения С-4.
Гидроксихиноксалин смеси С4-2 и С4-3 (46,8 г, 97:3 смесь региоизомеров, 186 ммоль) растворяли в ДМФ (93 мл) в трехгорлой колбе объемом 1 л, оборудованной верхней мешалкой, датчиком температуры, клапаном впуска Аг. Медленно при помощи шприца добавляли ΡОС13 (20,2 мл, 217 ммоль) с такой скоростью, чтобы поддерживать внутреннюю температуру реакции ниже 45°С. Затем темно-красный раствор нагревали при помощи термоблока, предварительно нагретого до 65°С. Через 4 ч реакционной смеси давали остыть до к.т. Затем реакционную смесь медленно через канюлю переносили в 1 л воды при интенсивном помешивании. Скорость гашения регулировали так, чтобы внутренняя температура оставалась ниже 35°С. После гашения реакционной смеси получали коричневое твердое вещество. Полученную смесь ощелачивали до рН 8 медленным добавлением 50 вес.% водного раствора КОН со скоростью, позволяющей поддерживать внутреннюю температуру ниже 35°С. Твердые вещества собирали вакуумной фильтрацией через воронку с крупнопористым спеченным фильтром, в результате чего получали твердое вещество. Твердые вещества выделяли в дихлорметан (500 мл, 10 об), полученную смесь суспендировали с силикагелем (50 г, 10 з). Суспензию фильтровали через пластинку силикагеля (50 г, 10 з) через воронку с крупнопористым спеченным фильтром, а затем промывали 3x10 мл дихлорметана. Фильтрат концентрировали под вакуумом, в результате чего получали твердое вещество, которое перекристаллизовывали из горячих гексанов (50 мл, 65°С), в результате чего получали промежуточное соединение С-4.
Получение промежуточного соединения С5.
ΟΝ
С4-9 3,4-диаминобензонитрил
Этап 1. Получение С5-1 и С5-2.
Раствор С4-9 (0,5 г, 3,3 ммоль) в ЕЮН (12 мл) обрабатывали 3,4-диаминобензонитрилом (0,47 г, 3,5 ммоль). Реакционную смесь нагревали при 80°С в течение 1 ч, затем концентрировали под вакуумом. Полученный остаток абсорбировали на силикагель, после чего очищали методом колоночной хроматографии, в результате чего получали С5-2 как первый элюент.
'Н-ЯМР (400 МГц, СВ3ОО): δ 8,01 (б, 1Н), 7,65 (бб, 2Н), 6,49 (т, 1Н), 5,80 (б1, 1Н), 5,60 (б, 1Н).
С5-1 получали как второй элюент.
'Н-ЯМР (400 МГц, СВ3ОО): δ 8,25 (б, 1Н), 7,87 (бб, 1Н), 7,41 (б, 1Н), 6,49 (т, 1Н), 5,80 (б1, 1Н), 5,59 (б, 1Н).
Этап 2. Получение промежуточного соединения С5.
Раствор С5-2 (0,5 г, 2 ммоль в 4,5 мл ДМФ) обрабатывали ΡОС13 (3 мл) и нагревали при 65°С в течение 3 ч. Реакционную смесь разбавляли этилацетатом и гасили, наливая в ледяную воду. Органиче- 51 029088
скую фазу промывали последовательно насыщенным водным \а11СО3 и солевым раствором, сушили над безводным ΝΥδΟι и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали промежуточное соединение С5.
Получение промежуточного соединения С6.
Этап 1. Получение промежуточного соединения С6.
К раствору С4-1 (2,1 г, 11,79 ммоль) и 4,5-дифторбензол-1,2-диамина (1,715 г, 11,9 ммоль) в ЕЮН (50 мл) при к.т. добавляли триэтиламин (3,0 мл, 21,5 ммоль). Реакционную смесь нагревали с обратным холодильником в течение 2 ч. Затем концентрировали реакционную смесь под вакуумом, после чего осадок очищали хроматографией на силикагеле, в результате чего получали промежуточное соединение С6.
ЖХМС-Ионизация электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для СцН7Р4^О: 259,0; эксп.: 259,0.
Этап 1. Получение С7-1.
К раствору С4-1 (1,84 г, 10,93 ммоль) и 4-(дифторметокси)бензол-1,2-диамина (1,90 г, 10,93 ммоль, приготовленного согласно справочному примеру 30у международной патентной публикации № \СО 2003/035065, с. 511). в ДМФ (40 мл) при к.т. добавляли Э1РЕА (9,5 мл, 54,65 ммоль) и НАТи (6,23 г, 16,4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 24 ч, разбавляли этилацетатом (100 мл), промывали водой (100 мл) и солевым раствором (50 мл). Смесь концентрировали под вакуумом. Очищали хроматографией на силикагеле (ЕЮАс в гексанах: 20-60%) с получением С7-1 как более поздний элюент из двух с одинаковым масс-спектром.
ЖХМС-Ионизация электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для СпН9Р4^О: 289,2; эксп. :289,0.
Этап 2. Получение промежуточного соединения С7.
Гидроксихиноксалин С7-1 (800 мг, 2,8 ммоль), РОС13 (1,65 мл, 3,0 ммоль) и ДМФ (10 мл) объединяли при к.т., а затем нагревали до 65°С в течение 2,5 ч, в то же время добавляя РОС13 (0,2 мл, 0,36 ммоль). Реакционную смесь нагревали дополнительно 3 ч при 65°С, затем охлаждали до комнатной температуры. Реакционную смесь гасили добавлением холодной воды (30 мл) и выделяли в этилацетате (50 мл), промывали насыщенным водным раствором \а2СО3 (100 мл), а затем солевым раствором (50 мл) и сушили над безводным Мд8О4 Полученный раствор концентрировали под вакуумом, в результате чего получали промежуточное соединение С7, которое далее использовали без дополнительной очистки.
ЖХМС-Ионизация электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С12Н8С1Р4^О: 307,0; эксп.: 307,0.
Получение промежуточного соединения С8.
Промежуточное соединение С8 получали аналогично способу А получения промежуточного соединения С4, используя 1,2-диаминобензол вместо 4-метоксибензол-1,2-диамина дигидрохлорида на этапе 2.
Получение промежуточного соединения С9.
Промежуточное соединение С9 получали согласно Vеηкаίе8Ь, С., е! а1. Огд. РеИ. 2005, 7, 2169.
- 52 029088
Получение промежуточного соединения С10.
Промежуточное соединение С10 получали в соответствии со способом, описанным в этапах 1 и 2 промежуточного соединения С11 из патентной публикации США № 2010/0099695, с. 31.
Получение промежуточного соединения С11.
Этап 1. Получение С11-1.
В круглодонной колбе 3-(бензилокси)анилин (4,025 г, 20,20 ммоль) и 1,1-бис-(метилтио)-2нитроэтилен (3,338 г, 20,20 ммоль) в этаноле (40 мл) нагревали с обратным холодильником в течение 24 ч при постоянном перемешивании. Реакционную смесь затем охлаждали в ванне со льдом и разбавляли эфиром (150 мл). Смесь фильтровали и промывали эфиром, в результате чего получали С11-1 (3,32 г) в виде желтого твердого вещества, которое прямо использовали на следующем этапе.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для ^6Η17Ν2Ο38: 317,1; эксп.: 317,1.
Этап 2. Получение С11-2.
К суспензии С11-1 (3,32 г, 10,49 ммоль) в 25 мл МеСN добавляли РОС13 (2,93 мл, 31,5 ммоль) по каплям в течение 15 мин при постоянном перемешивании. Реакционную смесь нагревали до 80°С и перемешивали в течение 5 ч. Реакционную смесь затем охлаждали до окружающей температуры и нейтрализовали ледяным насыщенным водным раствором NаΗСΟ3, экстрагировали три раза дихлорметаном (100 мл), промывали водой, солевым раствором и сушили над безводным Nа28Ο4. Растворитель удаляли при пониженном давлении. Сырой материал элюировали через пробку из целита дихлорметаном. Растворитель удаляли при пониженном давлении, а твердое вещество промывали ацетонитрилом, в результате чего получали С11-2 (1,56 г) в виде беловатого твердого вещества.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С16Н14СШ2О8: 317,1; эксп.: 317,3.
Этап 3. Получение промежуточного соединения С11.
Раствор тСРВА (1,87 г, 10,83 ммоль) в СН2С12 (40 мл) добавляли по каплям к перемешиваемому раствору С11-2 (1,56 г, 4,92 ммоль) в СН2С12 (40 мл) при 0°С в течение 30 мин. Реакционную смесь далее перемешивали при температуре окружающей среды в течение 5 ч. Затем ее вливали в ледяной насыщенный водный раствор NаΗСΟ3 и разделяли дихлорметаном. Органический слой промывали далее последовательно водой, солевым раствором и сушили над безводным Nа28Ο4. Растворитель удаляли при пониженном давлении и очищали полученный материал хроматографией с обычной фазой с использованием СН2С12, в результате чего получали указанное в заголовке промежуточное соединение С11 в виде бледно-желтого твердого вещества.
ЖХМС с ионизацией электрораспылением+ (т/ζ): [М+Н]+ расч. для С16Н14СШ2О38: 349,0; эксп.: 349,0.
- 53 029088
Получение промежуточного соединения С12.
4,2 г №НСО3 и 0,53 г №2СО3 на 100 мл воды, 700 мл, 7 об.) и №ОС1 (С1огох 6,15 вес.%, 422 мл, 395 ммоль) в колбу при температуре 20°С. Через 2 ч органический слой отделяли и экстрагировали водную фазу в этилацетате (2x300 мл). Объединенные органические слои сушили над безводным №28О4 и концентрировали под вакуумом, в результате чего получали С4-8.
Ίί-ЯМР (300 МГц, СЭС13): δ 5,98-6,18 (т, 1Н), 5,78 (άά, 1=0,9 Гц, 13 Гц, 1Н), 5,60 (άά, 1=0,9 Гц, 11 Гц, 1Н), 4,38 (ς, 1=6,9 Гц, 2Н), 1,37 (ΐ, 1=7,2 Гц, 3Н).
Этап 2. Получение С4-9.
К раствору этил 3,3-дифтор-2,2-дигидроксипент-4-эноата С4-8 (57,4 г, 292 ммоль) в ТГФ (725 мл) и воде (131 мл) добавляли АОНН2О (22 г, 529 ммоль) при температуре 20°С. Через 2,5 ч реакционную смесь концентрировали под вакуумом. Твердый осадок суспендировали в воде (300 мл), полученную смесь окисляли до уровня рН 1 концентрированным водным раствором соляной кислоты. Полученную смесь перемешивали до растворения твердой фазы (~1,5 ч) и затем добавляли хлорид натрия до насыщения раствора. Полученный раствор экстрагировали метил-трет-бутиловым эфиром (2x500 мл) и этилацетатом (2x500 мл) и сушили объединенные органические слои над безводным №28О4, после чего концентрировали под вакуумом. Сырой оранжевый твердый осадок суспендировали в ДХМ (100 мл) и перемешивали до равномерного распределения твердого вещества, после чего через капельную воронку медленно добавляли гексаны (75 мл). Полученное твердое вещество собирали вакуумной фильтрацией через воронку с фриттированным стеклом средней пористости, и промывали 1:1 раствором дихлорметан/гексаны (2x10 мл), в результате чего получали целевой продукт.
- 50 029088
'Н-ЯМР (400 МГц, ДМСО-б6): δ 13,17 (Ьз, 1Н), 6,18-6,01 (т, 1Н), 5,64-5,52 (т, 2Н).
Этап 3. Получение С4-2 и С4-3.
5. Способ лечения инфекции, вызванной ВГС, у нуждающегося в этом пациента, включающий введение указанному пациенту соединения по любому из пп.1, 2 или фармацевтической композиции по п.4.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201361798961P | 2013-03-15 | 2013-03-15 | |
| PCT/US2014/029765 WO2014145095A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-03-14 | Macrocyclic and bicyclic inhibitors of hepatitis c virus |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA201591456A1 EA201591456A1 (ru) | 2016-02-29 |
| EA029088B1 true EA029088B1 (ru) | 2018-02-28 |
Family
ID=50694007
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| EA201591456A EA029088B1 (ru) | 2013-03-15 | 2014-03-14 | Макроциклические и бициклические ингибиторы вируса гепатита c |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US9617310B2 (ru) |
| EP (1) | EP2970335B1 (ru) |
| JP (2) | JP6511432B2 (ru) |
| KR (1) | KR102215400B1 (ru) |
| CN (1) | CN105073758B (ru) |
| AU (1) | AU2014233390B2 (ru) |
| BR (1) | BR112015021768A2 (ru) |
| CA (1) | CA2902569A1 (ru) |
| EA (1) | EA029088B1 (ru) |
| ES (1) | ES2735355T3 (ru) |
| HK (1) | HK1217196A1 (ru) |
| IL (1) | IL240662A0 (ru) |
| MX (1) | MX2015013224A (ru) |
| SG (1) | SG11201507223TA (ru) |
| WO (1) | WO2014145095A1 (ru) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| UA119315C2 (uk) | 2012-07-03 | 2019-06-10 | Гіліад Фармассет Елелсі | Інгібітори вірусу гепатиту с |
| EA201791460A1 (ru) | 2014-12-26 | 2017-12-29 | Эмори Юниверсити | N4-гидроксицитидин и связанные с ним производные и варианты противовирусного применения |
| CN105503751B (zh) * | 2015-12-22 | 2018-06-05 | 广西师范大学 | 一种喹喔啉衍生物的高效合成方法 |
| BR122022008466B1 (pt) | 2017-12-07 | 2023-12-05 | Emory University | Uso de um composto |
| CN108329332A (zh) * | 2018-03-16 | 2018-07-27 | 安徽华昌高科药业有限公司 | 一种制备Glecaprevir的方法 |
| CN111004188B (zh) * | 2019-12-18 | 2021-04-20 | 安徽红杉生物医药科技有限公司 | Ns3/4a蛋白酶抑制剂中间体及其合成方法、应用 |
| CN111018795B (zh) * | 2019-12-25 | 2023-03-28 | 上海彩迩文生化科技有限公司 | 一种碱性条件下合成喹喔啉-3-酮的方法 |
Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007131966A1 (en) * | 2006-05-15 | 2007-11-22 | Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti Spa | Macrocyclic compounds as antiviral agents |
| WO2009005676A2 (en) * | 2007-06-29 | 2009-01-08 | Gilead Sciences, Inc. | Antiviral compounds |
| WO2010011566A1 (en) * | 2008-07-22 | 2010-01-28 | Merck & Co., Inc. | Macrocyclic quinoxaline compounds as hcv ns3 protease inhibitors |
| WO2012040040A1 (en) * | 2010-09-21 | 2012-03-29 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Hcv ns3 protease inhibitors |
| WO2014008285A1 (en) * | 2012-07-03 | 2014-01-09 | Gilead Sciences, Inc. | Inhibitors of hepatitis c virus |
Family Cites Families (102)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| AR031905A1 (es) | 2000-12-12 | 2003-10-08 | Schering Corp | Peptidos diarilicos como inhibidores de ns3-serina proteasa en hepatitis de virus c |
| JP5039268B2 (ja) | 2001-10-26 | 2012-10-03 | アベンティス・ファーマスーティカルズ・インコーポレイテツド | ベンゾイミダゾールおよび類縁体および蛋白キナーゼ阻害剤としてのその使用 |
| WO2003099316A1 (en) | 2002-05-20 | 2003-12-04 | Bristol-Myers Squibb Company | Heterocyclicsulfonamide hepatitis c virus inhibitors |
| EP1506172B1 (en) | 2002-05-20 | 2011-03-30 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis c virus inhibitors |
| US6878722B2 (en) | 2002-05-20 | 2005-04-12 | Bristol-Myers Squibb Company | Substituted cycloalkyl P1′ hepatitis C virus inhibitors |
| ATE422895T1 (de) | 2003-04-16 | 2009-03-15 | Bristol Myers Squibb Co | Makrocyclische isochinolinpeptidinhibitoren des hepatitis-c-virus |
| EP2143727B1 (en) | 2003-04-18 | 2015-01-21 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors |
| US7176208B2 (en) | 2003-04-18 | 2007-02-13 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors |
| RS51294B (sr) | 2003-05-21 | 2010-12-31 | Boehringer Ingelheim International Gmbh. | Inhibitorna jedinjenja za hepatitis c |
| WO2005018330A1 (en) * | 2003-08-18 | 2005-03-03 | Pharmasset, Inc. | Dosing regimen for flaviviridae therapy |
| US7135462B2 (en) | 2003-11-20 | 2006-11-14 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| EA200700336A1 (ru) | 2004-07-16 | 2009-12-30 | Джилид Сайэнс, Инк. | Противовирусные соединения |
| UY29016A1 (es) | 2004-07-20 | 2006-02-24 | Boehringer Ingelheim Int | Analogos de dipeptidos inhibidores de la hepatitis c |
| WO2007001406A2 (en) | 2004-10-05 | 2007-01-04 | Chiron Corporation | Aryl-containing macrocyclic compounds |
| JP4705164B2 (ja) | 2005-05-02 | 2011-06-22 | メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション | Ｈｃｖｎｓ３プロテアーゼ阻害剤 |
| TWI387603B (zh) | 2005-07-20 | 2013-03-01 | Merck Sharp & Dohme | Ｈｃｖ ｎｓ３蛋白酶抑制劑 |
| CN101263156A (zh) | 2005-07-25 | 2008-09-10 | 因特蒙公司 | C型肝炎病毒复制的新颖大环抑制剂 |
| PE20070211A1 (es) | 2005-07-29 | 2007-05-12 | Medivir Ab | Compuestos macrociclicos como inhibidores del virus de hepatitis c |
| NZ565269A (en) | 2005-08-01 | 2010-03-26 | Merck & Co Inc | Macrocyclic peptides as HCV NS3 protease inhibitors |
| DK1999129T3 (da) | 2005-10-11 | 2011-02-07 | Intermune Inc | Forbindelser og fremgangsmåder til inhibering af replikationen af hepatitis C-virus |
| US7772183B2 (en) | 2005-10-12 | 2010-08-10 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| GB0612423D0 (en) | 2006-06-23 | 2006-08-02 | Angeletti P Ist Richerche Bio | Therapeutic agents |
| KR20090024834A (ko) | 2006-07-05 | 2009-03-09 | 인터뮨, 인크. | Ｃ형 간염 바이러스 복제의 신규 억제제 |
| JP2010507656A (ja) | 2006-10-24 | 2010-03-11 | メルク エンド カムパニー インコーポレーテッド | Ｈｃｖｎｓ３プロテアーゼ阻害剤 |
| AU2007309488B2 (en) | 2006-10-24 | 2012-10-11 | Merck Sharp & Dohme Corp. | HCV NS3 protease inhibitors |
| JP5345541B2 (ja) | 2006-10-24 | 2013-11-20 | メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション | Ｈｃｖｎｓ３プロテアーゼ阻害剤 |
| JP5268927B2 (ja) | 2006-10-27 | 2013-08-21 | メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション | Ｈｃｖｎｓ３プロテアーゼ阻害剤 |
| CN101568346B (zh) | 2006-10-27 | 2015-11-25 | 默沙东公司 | Hcv ns3蛋白酶抑制剂 |
| US7888464B2 (en) | 2006-11-16 | 2011-02-15 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| WO2008134397A1 (en) | 2007-04-26 | 2008-11-06 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Aza-tripeptide hepatitis c serine protease inhibitors |
| SG174809A1 (en) | 2007-05-03 | 2011-10-28 | Intermune Inc | Macrocyclic compounds useful as inhibitors of hepatitis c virus |
| CL2008001381A1 (es) | 2007-05-10 | 2008-11-03 | Intermune Inc Y Array Biopharma Inc | Compuestos derivados de tripeptidos que contienen heterociclos nitrogenados; composicion farmaceutica que comprende a dichos compuestos; y uso para tratar una infeccion de hepatitis c o vih. |
| US20090005387A1 (en) | 2007-06-26 | 2009-01-01 | Deqiang Niu | Quinoxalinyl macrocyclic hepatitis c virus serine protease inhibitors |
| EP2162432A2 (en) | 2007-06-29 | 2010-03-17 | Gilead Sciences, Inc. | Antiviral compounds |
| CA2699891C (en) | 2007-07-19 | 2013-10-22 | Nigel Liverton | Macrocyclic compounds as antiviral agents |
| JP2010540549A (ja) | 2007-09-24 | 2010-12-24 | アキリオン ファーマシューティカルズ，インコーポレーテッド | ウイルス複製阻害剤としての尿素含有ペプチド |
| EP2215076A4 (en) | 2007-10-24 | 2012-05-02 | Virobay Inc | COMPOUNDS CAPABLE OF INHIBITING CATHEPSIN S PROTEASE AND HCV REPLICATION |
| WO2009055335A2 (en) | 2007-10-25 | 2009-04-30 | Taigen Biotechnology Co., Ltd. | Hcv protease inhibitors |
| CL2008003384A1 (es) | 2007-11-14 | 2009-12-11 | Enanta Pharm Inc | Compuestos derivados de quinoxalina macrocíclica, inhibidores de serina proteasa; composicion farmaceutica que los comprende; y su uso en el tratamiento de la hepatitis c. |
| WO2009070692A1 (en) | 2007-11-29 | 2009-06-04 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | C5-substituted, proline-derived, macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors |
| WO2009070689A1 (en) | 2007-11-29 | 2009-06-04 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Bicyclic, c5-substituted proline derivatives as inhibitors of the hepatitis c virus ns3 protease |
| MX2010006209A (es) | 2007-12-05 | 2010-08-10 | Enanta Pharm Inc | Derivados de quinoxalinilo. |
| WO2009079353A1 (en) | 2007-12-14 | 2009-06-25 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Triazole-containing macrocyclic hcv serine protease inhibitors |
| US8309685B2 (en) | 2007-12-21 | 2012-11-13 | Celgene Avilomics Research, Inc. | HCV protease inhibitors and uses thereof |
| US8202996B2 (en) | 2007-12-21 | 2012-06-19 | Bristol-Myers Squibb Company | Crystalline forms of N-(tert-butoxycarbonyl)-3-methyl-L-valyl-(4R)-4-((7-chloro-4-methoxy-1-isoquinolinyl)oxy)-N- ((1R,2S)-1-((cyclopropylsulfonyl)carbamoyl)-2-vinylcyclopropyl)-L-prolinamide |
| KR20150117305A (ko) | 2007-12-21 | 2015-10-19 | 셀진 아빌로믹스 리서치, 인코포레이티드 | Ｈｃｖ 프로테아제 억제제 및 이의 용도 |
| US8293705B2 (en) | 2007-12-21 | 2012-10-23 | Avila Therapeutics, Inc. | HCV protease inhibitors and uses thereof |
| MX2010008109A (es) | 2008-01-24 | 2010-09-22 | Enanta Pharm Inc | Tripéptidos difluorizados como inhibidores de proteasa de serina de virus de hepatitis c (hcv). |
| BRPI0908021A2 (pt) | 2008-02-04 | 2015-07-21 | Idenix Pharmaceuticals Inc | Composto, composição farmacêutica, e, usos do composto ou da composição farmacêutica |
| EP2268285B1 (en) | 2008-02-25 | 2018-06-27 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Therapeutic compounds |
| WO2009114633A1 (en) | 2008-03-12 | 2009-09-17 | Virobay, Inc. | Process for the preparation of (3s)-3-amino-n-cyclopropyl-2-hydroxyalkanamide derivatives |
| EP2268619A4 (en) | 2008-03-20 | 2012-04-04 | Enanta Pharm Inc | FLUORINATED MACROCYCLIC COMPOUNDS AS INHIBITORS OF HEPATITIS C VIRUS |
| JP2011519364A (ja) | 2008-04-15 | 2011-07-07 | インターミューン・インコーポレーテッド | Ｃ型肝炎ウイルス複製の新規大環状阻害剤 |
| US8163921B2 (en) | 2008-04-16 | 2012-04-24 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| AU2009241445A1 (en) | 2008-04-28 | 2009-11-05 | Merck Sharp & Dohme Corp. | HCV NS3 protease inhibitors |
| WO2009134987A1 (en) | 2008-04-30 | 2009-11-05 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Difluoromethyl-containing macrocyclic compounds as hepatitis c virus inhibitors |
| EP2323981B1 (en) | 2008-08-07 | 2014-03-12 | F. Hoffmann-La Roche AG | Process for the preparation of a macrocycle |
| EP2334680A2 (en) | 2008-08-20 | 2011-06-22 | Sequoia Pharmaceuticals, Inc. | Hcv protease inhibitors |
| UY32099A (es) | 2008-09-11 | 2010-04-30 | Enanta Pharm Inc | Inhibidores macrocíclicos de serina proteasas de hepatitis c |
| PL2331538T3 (pl) | 2008-09-16 | 2014-09-30 | Boehringer Ingelheim Int | Krystaliczne postacie 2-tiazolylo-4chinolinyl-oksy-pochodnej, silnego inhibitora HCV |
| WO2010033466A1 (en) | 2008-09-16 | 2010-03-25 | Phenomix Corporation | Macrocyclic inhibitors of hepatitis c protease |
| US8563505B2 (en) | 2008-09-29 | 2013-10-22 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| US20100080770A1 (en) | 2008-09-29 | 2010-04-01 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C Virus Inhibitors |
| US8044087B2 (en) | 2008-09-29 | 2011-10-25 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| JP2012505897A (ja) | 2008-10-15 | 2012-03-08 | インターミューン・インコーポレーテッド | 治療用抗ウイルス性ペプチド |
| EP2364159A4 (en) | 2008-10-23 | 2012-06-13 | Concert Pharmaceuticals Inc | DETERIORIC MACROCYCLIC INHIBITORS OF NS3 VIRAL PROTEASE |
| NZ592110A (en) | 2008-11-20 | 2012-06-29 | Achillion Pharmaceuticals Inc | Cyclic carboxamide compounds and analogues thereof as of hepatitis c virus |
| SG171771A1 (en) | 2008-11-21 | 2011-07-28 | Boehringer Ingelheim Int | Pharmaceutical composition of a potent hcv inhibitor for oral administration |
| US20100272674A1 (en) | 2008-12-04 | 2010-10-28 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C Virus Inhibitors |
| CA2746265A1 (en) | 2008-12-10 | 2010-06-17 | Achillion Pharmaceuticals, Inc. | 4-amino-4-oxobutanoyl peptide cyclic analogues, inhibitors of viral replication |
| US8283310B2 (en) | 2008-12-15 | 2012-10-09 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| KR20110114582A (ko) * | 2008-12-19 | 2011-10-19 | 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 | Ｈｃｖ ｎｓ３ 프로테아제 억제제 |
| AR074863A1 (es) | 2008-12-23 | 2011-02-16 | Ortho Mcneil Janssen Pharm | Proceso y compuestos intermedios para preparar un inhibidor de proteasa macrociclico del vhc |
| US8936781B2 (en) | 2009-05-13 | 2015-01-20 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Macrocyclic compounds as hepatitis C virus inhibitors |
| WO2010135748A1 (en) | 2009-05-22 | 2010-11-25 | Sequoia Pharmaceuticals Inc. | Bimacrocyclic hcv ns3 protease inhibitors |
| WO2011014487A1 (en) | 2009-07-30 | 2011-02-03 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Hepatitis c virus ns3 protease inhibitors |
| WO2011025849A1 (en) | 2009-08-27 | 2011-03-03 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Processes for preparing protease inhibitors of hepatitis c virus |
| AU2010298028A1 (en) | 2009-09-28 | 2012-04-19 | Intermune, Inc. | Cyclic peptide inhibitors of hepatitis C virus replication |
| WO2011041551A1 (en) | 2009-10-01 | 2011-04-07 | Intermune, Inc. | Therapeutic antiviral peptides |
| TW201119667A (en) | 2009-10-19 | 2011-06-16 | Enanta Pharm Inc | Bismacrocyclic compounds as hepatitis C virus inhibitors |
| CA2792601C (en) | 2010-03-10 | 2015-09-29 | Abbott Laboratories | Solid compositions of amorphous hcv inhibitors |
| US8530497B2 (en) | 2010-03-11 | 2013-09-10 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Crystalline salts of a potent HCV inhibitor |
| CN103025736B (zh) | 2010-06-07 | 2016-07-06 | Abbvie公司 | 大环的丙型肝炎丝氨酸蛋白酶抑制剂 |
| WO2012019299A1 (en) | 2010-08-11 | 2012-02-16 | Boehringer Ingelheim International Gmbh | Hepatitis c inhibitor compounds |
| US20120094897A1 (en) | 2010-09-15 | 2012-04-19 | Intermune, Inc. | Novel inhibitors of hepatitis c virus replication |
| AU2011305695B2 (en) | 2010-09-21 | 2016-05-19 | Enanta Pharmaceuticals, Inc. | Macrocyclic proline derived HCV serine protease inhibitors |
| US20120095211A1 (en) | 2010-09-22 | 2012-04-19 | Intermune, Inc. | Substituted proline inhibitors of hepatitis c virus replication |
| WO2012047764A1 (en) | 2010-10-04 | 2012-04-12 | Intermune, Inc. | Therapeutic antiviral peptides |
| WO2012054874A1 (en) | 2010-10-22 | 2012-04-26 | Intermune, Inc. | Novel macrocyclic inhibitors of hepatitis c virus replication |
| MX2013004906A (es) | 2010-11-01 | 2013-12-06 | Genoscience Pharma | Nuevos inhibidores especificos de la proteasa ns3 de hcv. |
| CN103717067A (zh) | 2010-12-14 | 2014-04-09 | 默沙东公司 | 制备大环内酰胺的方法与中间体 |
| WO2012092409A2 (en) | 2010-12-30 | 2012-07-05 | Enanta Phararmaceuticals, Inc | Macrocyclic hepatitis c serine protease inhibitors |
| AU2011352145A1 (en) | 2010-12-30 | 2013-07-18 | Abbvie Inc. | Phenanthridine macrocyclic hepatitis C serine protease inhibitors |
| US8957203B2 (en) | 2011-05-05 | 2015-02-17 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| US20130129671A1 (en) | 2011-05-27 | 2013-05-23 | Bristol-Myers Squibb Company | Tripeptides Incorporating Deuterium as Inhibitors of Hepatitis C Virus |
| US8691757B2 (en) | 2011-06-15 | 2014-04-08 | Bristol-Myers Squibb Company | Hepatitis C virus inhibitors |
| WO2012171332A1 (zh) | 2011-06-16 | 2012-12-20 | 爱博新药研发(上海)有限公司 | 抑制丙型肝炎病毒的大环状杂环化合物及其制备和应用 |
| US8912141B2 (en) | 2011-06-23 | 2014-12-16 | Panmed Ltd. | Treatment of hepatitis C virus |
| BR112014003798A2 (pt) | 2011-08-19 | 2017-03-01 | Merck Sharp & Dohme | método para fabricar um composto, e, composto |
| BR112014010545A2 (pt) | 2011-10-31 | 2017-05-02 | Merk Sharp & Dohme Corp | composição farmacêutica, método para tratar um paciente infectado com vírus da hepatite c, uso de uma composição |
| EP2780026B1 (en) | 2011-11-15 | 2019-10-23 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Hcv ns3 protease inhibitors |
| CN104244926A (zh) | 2012-01-12 | 2014-12-24 | 勃林格殷格翰国际有限公司 | 作为强效的hcv 抑制剂的稳定的药物制剂 |
-
2014
- 2014-03-14 JP JP2016503218A patent/JP6511432B2/ja active Active
- 2014-03-14 BR BR112015021768A patent/BR112015021768A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2014-03-14 MX MX2015013224A patent/MX2015013224A/es unknown
- 2014-03-14 AU AU2014233390A patent/AU2014233390B2/en active Active
- 2014-03-14 WO PCT/US2014/029765 patent/WO2014145095A1/en active Application Filing
- 2014-03-14 ES ES14723582T patent/ES2735355T3/es active Active
- 2014-03-14 CA CA2902569A patent/CA2902569A1/en not_active Abandoned
- 2014-03-14 EA EA201591456A patent/EA029088B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2014-03-14 KR KR1020157028437A patent/KR102215400B1/ko active IP Right Grant
- 2014-03-14 CN CN201480015589.0A patent/CN105073758B/zh active Active
- 2014-03-14 SG SG11201507223TA patent/SG11201507223TA/en unknown
- 2014-03-14 EP EP14723582.4A patent/EP2970335B1/en active Active
- 2014-03-14 US US14/214,477 patent/US9617310B2/en active Active
-
2015
- 2015-08-18 IL IL240662A patent/IL240662A0/en unknown
-
2016
- 2016-05-05 HK HK16105156.1A patent/HK1217196A1/zh unknown
-
2017
- 2017-03-10 US US15/455,508 patent/US20170313745A1/en not_active Abandoned
-
2018
- 2018-12-13 JP JP2018233621A patent/JP2019059775A/ja not_active Withdrawn
Patent Citations (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2007131966A1 (en) * | 2006-05-15 | 2007-11-22 | Istituto Di Ricerche Di Biologia Molecolare P. Angeletti Spa | Macrocyclic compounds as antiviral agents |
| WO2009005676A2 (en) * | 2007-06-29 | 2009-01-08 | Gilead Sciences, Inc. | Antiviral compounds |
| WO2010011566A1 (en) * | 2008-07-22 | 2010-01-28 | Merck & Co., Inc. | Macrocyclic quinoxaline compounds as hcv ns3 protease inhibitors |
| WO2012040040A1 (en) * | 2010-09-21 | 2012-03-29 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Hcv ns3 protease inhibitors |
| WO2014008285A1 (en) * | 2012-07-03 | 2014-01-09 | Gilead Sciences, Inc. | Inhibitors of hepatitis c virus |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| WO -A1-2007131966 * |
| WO -A1-2010011566 * |
| WO -A1-2012040040 * |
| WO -A1-2014008285 * |
| WO -A2-2009005676 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| IL240662A0 (en) | 2015-10-29 |
| ES2735355T3 (es) | 2019-12-18 |
| EP2970335B1 (en) | 2019-05-08 |
| EP2970335A1 (en) | 2016-01-20 |
| BR112015021768A2 (pt) | 2016-02-02 |
| CA2902569A1 (en) | 2014-09-18 |
| US20170313745A1 (en) | 2017-11-02 |
| AU2014233390A1 (en) | 2015-09-03 |
| US20140274884A1 (en) | 2014-09-18 |
| US9617310B2 (en) | 2017-04-11 |
| HK1217196A1 (zh) | 2016-12-30 |
| WO2014145095A1 (en) | 2014-09-18 |
| KR20150130456A (ko) | 2015-11-23 |
| JP2016516069A (ja) | 2016-06-02 |
| CN105073758A (zh) | 2015-11-18 |
| AU2014233390B2 (en) | 2018-03-01 |
| JP2019059775A (ja) | 2019-04-18 |
| MX2015013224A (es) | 2015-12-11 |
| JP6511432B2 (ja) | 2019-05-15 |
| CN105073758B (zh) | 2017-08-11 |
| KR102215400B1 (ko) | 2021-02-10 |
| SG11201507223TA (en) | 2015-10-29 |
| EA201591456A1 (ru) | 2016-02-29 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EA029088B1 (ru) | Макроциклические и бициклические ингибиторы вируса гепатита c | |
| KR102548191B1 (ko) | 표적 단백질 분해 화합물, 이의 항종양 응용, 이의 중간체 및 중간체의 응용 | |
| AU2017286890B2 (en) | Oxadiazepinone derivatives and their use in the treatment of hepatitis B infections | |
| KR102050150B1 (ko) | 융합-고리 화합물, 약학 조성물 및 이들의 용도 | |
| ES2729498T3 (es) | Derivados del ácido piridin-3-il acético como inhibidores de la replicación del virus de la inmunodeficiencia humana | |
| JP6530764B2 (ja) | ＲＯＲγ調節因子としてのピロリジニルスルホン誘導体およびその使用 | |
| EA027390B1 (ru) | Ингибиторы вируса гепатита с | |
| EA026114B1 (ru) | Макроциклические ингибиторы вирусов flaviviridae | |
| EA014427B1 (ru) | Соединение бициклического циннамида | |
| EA020815B1 (ru) | Ингибиторы вируса гепатита с | |
| EA025402B1 (ru) | Азаиндолы в качестве противовирусных агентов против респираторного синцитиального вируса | |
| EP2632895B1 (en) | Hiv protease inhibitors | |
| EA027134B1 (ru) | Макроциклические ингибиторы вирусов flaviviridae | |
| JP2008517896A (ja) | Ｃ型肝炎ウイルスプロテアーゼの阻害剤並びにそれを用いた組成物及び治療 | |
| JP2014504643A (ja) | Ｃ型肝炎ウイルス阻害剤 | |
| EA024201B1 (ru) | Ингибиторы вируса гепатита с | |
| EA026668B1 (ru) | Новые бициклические пиридиноны | |
| JP7285838B2 (ja) | アンドロゲン受容体拮抗薬として使用されるジアリールチオヒダントイン化合物 | |
| CA3011677A1 (en) | Derivatives of pyrroloimidazole or analogues thereof which are useful for the treatment of inter alia cancer | |
| UA126950C2 (uk) | Інгібітори міжбілкової взаємодії keap1-nrf2 | |
| AU2012372019A1 (en) | Cyclic amide derivatives as inhibitors of 11 - beta - hydroxysteroid dehydrogenase and uses thereof | |
| KR20190129968A (ko) | 기생충성 질환의 치료를 위한 화합물 및 방법 | |
| CN110198941B (zh) | 吡咯并吡啶类n-氧化衍生物及其制备方法和应用 | |
| ES2553387T3 (es) | Compuestos heterocíclicos para el tratamiento o la prevención de trastornos causados por neurotransmisión reducida de serotonina, norepinefrina o dopamina | |
| CN111801333A (zh) | 作为正粘病毒复制抑制剂用于治疗流感的10-(二(苯基)甲基)-4-羟基-8,9,9a,10-四氢-7H-吡咯并[1’,2’:4,5]吡嗪并[1,2-b]哒嗪-3,5-二酮衍生物及相关化合物 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | Lapse of a eurasian patent due to non-payment of renewal fees within the time limit in the following designated state(s) |
Designated state(s): AM AZ BY KZ KG TJ TM RU |