EA024201B1

EA024201B1 - Ингибиторы вируса гепатита с

Info

Publication number: EA024201B1
Application number: EA201391685A
Authority: EA
Inventors: Ци Чэнь; Омар Д. Лопез; Джон А. Бендер; Гань Ван; Ван Н. Нгуен; Джон Ф. Кадов; Николас А. Минвелл; Маконен Белема
Original assignee: Бристол-Майерс Сквибб Компани
Priority date: 2011-05-12
Filing date: 2012-05-09
Publication date: 2016-08-31
Also published as: CO6821952A2; UY34066A; WO2012154777A1; ZA201309356B; MX2013012870A; CN103827108B; MA35104B1; CL2013003229A1; EA201391685A1; EP2707365B1; BR112013028679A2; TW201249834A; IL229331A0; JP5977819B2; US9546160B2; JP2014513690A; CA2835688A1; PH12013502177A1; PE20150105A1; AU2012253578A1

Abstract

Настоящее изобретение относится к соединениям, фармацевтическим композициям и способам лечения инфекции вируса гепатита С (HCV).

Description

(57) Настоящее изобретение относится к соединениям, фармацевтическим композициям и способам лечения инфекции вируса гепатита С (НСУ).

024201 ΒΙ

Настоящая заявка испрашивает приоритет по предварительной заявке на патент США № 61/485224, поданной 12 мая 2011.

Настоящее изобретение, в целом, относится к противовирусным соединениям и, более конкретно, к соединениям, которые могут ингибировать функцию белка Ν85Α, кодируемого вирусом гепатита С (НСУ), к композициям, содержащим указанные соединения, и способам ингибирования функции белка Ν85Α.

НСУ является одним из основных человеческих патогенов, инфицирующих, по оценкам, 170 млн человек по всему миру, что приблизительно в пять раз превышает число инфицированных вирусом иммунодефицита человека типа 1. У значительной части этих инфицированных НСУ индивидуумов развиваются серьезные прогрессирующие заболевания печени, включая цирроз печени и гепатоклеточную карциному.

В настоящее время стандартное лечение гепатита С, при котором применяется комбинация пегилированного интерферона и рибавирина, имеет неоптимальную частоту успеха в достижении устойчивого вирусологического ответа и вызывает многочисленные побочные эффекты. Таким образом, существует очевидная и давно ощущаемая необходимость разработки эффективных методов лечения для решения этой насущной медицинской потребности.

НСУ представляет собой вирус, содержащий плюс-цепь РНК. На основании сравнения расшифрованной аминокислотной последовательности и значительного сходства 5'-нетранслируемой области, НСУ был классифицирован как самостоятельный род в семействе флавивирусов (Р1ау1утбае). Все члены семейства Р1ау1утбае имеют заключенные в оболочку вирионы, которые содержит геном, представленный плюс-цепью РНК, кодирующий все известные вирусспецифические белки посредством трансляции одной непрерывной открытой рамки считывания.

Обнаруживается значительная гетерогенность на уровне нуклеотидной и кодированной аминокислотной последовательности во всем геноме вируса гепатита С из-за высокой частоты появления ошибок кодированной РНК-зависимой РНК-полимеразы, которой не хватает способности правильного считывания. Были охарактеризованы по меньшей мере шесть основных генотипов, и более 50 подтипов были описаны как распространенные по всему миру. Клиническая значимость генетической гетерогенности НСУ проявилась в склонности к мутациям, которые возникают при монотерапевтическом лечении, так что является желательным применение дополнительных вариантов лечения. Возможное модуляторное влияние генотипов на патогенез и лечение остается трудным для понимания.

Одноцепочечная РНК генома вируса гепатита С включает около 9500 нуклеотидов по длине и имеет одну открытую рамку считывания (ΘΚΡ), кодирующую один большой полипротеин, состоящий из около 3000 аминокислотных остатков. В инфицированных клетках этот полипротеин расщепляется на многих сайтах посредством клеточных и вирусных протеаз с образованием структурных и неструктурных (Ν8) белков. В случае с гепатитом С синтез зрелых неструктурных белков (N82, N83, Ν84Α, Ν84Β, Ν85Α и Ν85Β) осуществляется двумя вирусными протеазами. Полагают, что первая протеаза представляет собой металлопротеазу и расщепляет по соединению Ν82-Ν83, вторая является сериновой протеазой, содержащейся в Ν-концевом домене Ν83 (также называемом здесь Ν83 протеаза), которая опосредует все последующие расщепления в направлении Ν83, как в цис- на сайте расщепления Ν83-Ν84Α, так и в транс- на оставшихся сайтах Ν84Α-Ν84Β, Ν84Β-Ν85Α, Ν85Α-Ν85Β. Белок Ν84Α, по-видимому, выполняет много функций, либо действуя как кофактор для протеазы Ν83, либо способствуя локализации в мембране Ν83 и других компонентов репликации вируса. Образование комплекса Ν83-Ν84Α необходимо для нормальной активности протеазы, приводя к увеличению протеолитической эффективности расщепления. Белок Ν83 также проявляет нуклеозидтрифосфатазную и РНК геликазную активности. Белок Ν85Β (также называемый здесь полимераза НСУ) является РНК-зависимой РНК-полимеразой, которая вовлекается в репликацию НСУ с другими белками НСУ, включая Ν85Α, в репликазном комплексе.

Соединения, полезные для лечения НСУ-инфицированных пациентов, являются целевыми, когда они селективно ингибируют вирусную репликацию. В частности, целевыми являются соединения, которые эффективны для ингибирования функции белка Ν85Α. Белок НСУ Ν85Α описан, например, в следующих источниках: 8.Ь. Тап, е! а1., У1то1о§у, 284:1-12 (2001); К.-Т Рагк, е! а1., 1. ΒίοΙ. СЬет., 3071130718 (2003); Т.Ь. ТеШпдЬшкеп, е! а1., Уинге. 435, 374 (2005); Κ.Α. Ьоуе, е! а1., 1. У1го1, 83, 4395 (2009); Ν. Лрре( е! а1., 1. Βώ1. СЬет., 281, 9833 (2006); Ь. Ниапд, 1. Βώ1. СЬет., 280, 36417 (2005); С. Шее, е! а1., АО 2006093867.

В первом аспекте настоящего изобретения представлено соединение, выбранное из диметил (4,4’-бифенилдиилбис( 1Н-имидазол-4,2-диил{ 1 К,3 8,5К)-2азабицикло[3 1 0]гексан-3,2-диил(1-((1К,3 $,58)-6,6-дифторбицикло[3.10]гекс-3-ил)-2оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамата (диастереомер 1);

- 1 024201 диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2· азабицикло[31.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,35,58)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамата (диастереомер 2);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,Зз,58)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер 3), диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2азабицикло[31.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,Зг, 55)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамата (диастереомер 1);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2· азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К.,Зг,58)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамата (диастереомер 2), диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,Зг,58)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диас-тереомер 3), диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2· азабицикло[31.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,Зг,55)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1этандиил)))бискарбамата (диастереомер 1);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2· азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К.,Зг,55)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1этандиил)))бискарбамата (диастереомер 2), диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К.,Зг,58)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1этандиил)))бискарбамата (диастереомер 3), диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2· азабицикло[31.0]гексан-3,2-диил(1-((1К.,58,б5)-3-оксабицикло[3.1.0]гекс-6-ил)-2-оксо-2,1этандиил)))бискарбамата (диастереомер 1);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2· азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К.,58,6з)-3-оксабицикло[3.1 0]гекс-6-ил)-2-оксо-2,1этандиил)))бискарбамата (диастереомер 2), диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,58,б5)-3-оксабицикло[3.1 0]гекс-6-ил)-2-оксо-2,1этандиил)))бискарбамата (диастереомер 3);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2· азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К.,Зз,55)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1этандиил)))бискарбамата (диастереомер 1);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2азабицикло[31.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,3$, 58)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1этандиил)))бискарбамата (диастереомер 2), диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1Н-имидазол-4,2-диил( 1 К,3 8,5К)-2азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,Зз,58)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1этандиил)))бискарбамата (диастереомер 3), метил (2-((1К,38,5К)-3-(4-(4'-(4-хлор-2-((1К,38,5К)-2-(((1К,35,58)-6,6дифторбицикло [3.1.0]гекс-3-ил)((метоксикарбонил)амино) ацетил)-2азабицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-1Н-имидазол-5-ил)-4-бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-2азабицикло[3.1.0]гекс-2-ил)-1-((1К,3$,58)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксоэтил) карбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис((4-хлор-1Н-имидазол-5,2-диил)(1К,38,5К)-2азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К, Зз,58)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((28,58)-5-метил-2,1пирролидиндиил)( 1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер 1);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((28,58)-5-метил-2,1пирролидиндиил)(1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер 2), метил (2-((28,48)-2-(7-((2-((28,48)-1-((( метоксикарбонил )амино)(4оксаспиро[2.5]окт-7-ил)ацетил)-4-метил-2-пирролидинил)-1Н-бензимидазол-5-ил)этинил)1Н-нафто[ 1,2-<3]имидазол-2-ил )-4-метил-1 -пирролидинил)-1 -(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2оксоэтил)карбамата, метил (2-((28)-2-(7-(2-((28)-1-(((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7ил)ацетил)-2-пирролидинил)-1Н-бензимидазол-5-ил)-1Н-нафто[1,2-д]имидазол-2-ил)-1пирролидинил)-1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамата;

метил (2-(( 1 К,3 8,5К)-3-(4-(4-(2-(( 1 К,3 8,5К)-2-(((метоксикарбонил)амино)(4оксаспиро[2.5]окт-7-ил)ацетил)-2-азабицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-4,5-дигидро-ЗН-нафто[1,2б]имидазол-7-ил)фенил)-1 Н-имидазол-2-ил)-2-азабицикло[3.1,0]гекс-2-ил)-1 -(4оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамата, метил (2-((28)-2-(7-(2-((28)-1-(((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7ил)ацетил)-2-пирролидинил)-1Н-бензимидазол-5-ил)-4,5-дигидро-1Н-нафто[1,2б]имидазол-2-ил)-1-пирролидинил)-1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамата;

- 2 024201 диметил (1 Η, 1 'Н-7,7'-бинафто[ 1,2-<3]нмидазол-2,2'-диилбис((23)-2,1 пирролидиндиил(1-(4-оксаспиро[2 5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата, диметил (((38,3'8,58,5'8)-5,5'-(5,5^|-((18,28)-циклопропан-1,2-диилбис(4,1фенилен))бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(3-метилпирролидин-5,1-диил))бис(2-оксо-1-(4оксаспиро[2.5]октан-7-ил)этан-2,1-диил))дикарбамата;

метил (2-((( 18)-1 -(5-((2-(( 18)-1 -((((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2 5]окт-7ил)ацетил)(метил)амино)этил)-1Н-бензимидазол-6-ил)этинил)-1Н-бензимидазол-2ил)этил)(метил)амино)-1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамата, метил ((28)-1-(( 1К,38,5К.)-3-(5-(4'-(2-(( 1К,38,5К.)-2-(((метоксикарбонил)амино)(4оксаспиро[2.5]окт-7-ил)ацетил)-2-азабицикло [3.1.0]гекс-3-ил)-1Н-имидазол-5ил)бифенил-4-ил )-1Н-имидазол-2-ил)-2-азабицикло[3.1.0]гекс-2-ил)-3-метил-1-оксобутан2-ил)карбамата, диметил (((1К,ГК.,38,3'8,5К,5'К)-3,3'-(5,5'-(этин-1,2-диилбис(4,1-фенилен))бис(1Нимидазол-5,2-диил))бис(2-азабицикло [3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(2-оксо-1-(4-оксаспиро [2.5] октан-7-ил)э тан-2,1-диил ))дикарбамата, диметил (((1К.,ГК.,38,3'8,5К.,5'К.)-3,3^|-(5,5'-([1,Г-бифенил]-4,4'-диил)бис(4-хлор-1Нимидазол-5,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(2-оксо-1-(4-оксаспиро [2.5] октан-7-нл)этан-2,1-диил))дикарбамата;

метил (2-((23)-2-(5-(6-(4-(2-((28)-1-(((метоксикарбонил)амино)(4оксаспиро[2.5]окт-7-ил)ацетил)пирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-5-ил)фенил)пиридин-3ил)-1Н-имидазол-2-ил)пирролидин-1-ил)-1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2оксоэтил)карбамата, диметил (((28,2'8)-2,2'-(5,5'-(этин-1,2-диилбис(4,1-фенилен))бис(1Н-имидазол-5,2диил))бис( пирролидин-2,1 -диил ))бис(2-оксо-1 -(4-оксаспиро[2 5]октан-7-ил)этан-2,1 диил))дикарбамата, диметил (бензол-1,4-диилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(28)пирролидин-2,1-диил(1-(4оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтан-2,1-динл)))бискарбамата;

диметил (((ЗК.,3'К.)-3,3'-(5,5'-([1,1'-бифенил]-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-5,2диил ))бис( морфолин-4,3-диил))бис(2-оксо-1-(4-оксаспиро[2.5]октан-7-ил)этан-2,1диил))дикарбамата;

метил (2-((23)-2-(5-(4-((2-((23)-1-(((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2 5]окт7-ил)ацетил)пирролидин-2-ил)-1Н-бензимидазол-4-ил)окси)фенил)-1Н-бензимид азол-2ил)пирролидин-1-ил)-1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамата;

метил (2-((28)-2-(7-(2-((28)-1-(((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7ил)ацетил)-2-пнрролидинил)-1Н-бензимндазол-5-ил)-4,5-днгидро-1Н-нафто[1,2<3]имидазол-2-ил)-1-пирролидинил)-1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамата;

диметил (((23,2'3)-2,2'-(5,5'-(этин-1,2-диил)бис(1Н-бензо[с1]имидазол-5,2диил))бис(пирролидин-2,1 -диил))бис(2-оксо-1 -(4-оксаспиро[2 5]октан-7-ил)этан-2,1 диил))дикарбамата, диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,33,5К)-2азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(( 13)-2-оксо-1 -(4-оксоциклогексил)-2,1 этандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,33,5К)-2азабицикло[3.1 0]гексан-3,2-диил(( 13)-2-оксо-1 -(З-(трифторметил)бицикло [1.1.1 ]пент-1 ил)-2,1 -этандиил)))бискарбамата, диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((23,53)-5-метил-2,1пирролидиндиил)(( 18)-2-оксо-1 -(3-(трифторметил)бицикло[ 1.1.1 ]пент-1 -ил)-2,1 этандиил)))бискарбамата;

диметил ((3-метил-4,4'-бифенилдиил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил((28,58)-5-метил2.1- пирролидиндиил)(1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-11л)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата, диметил ((3-фтор-4,4'-бифенилдиил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил((23,53)-5-метил2.1- пирролидиндиил)(1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата и

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((1К,33,5К)-5-метил-2азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил)(1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1этандиил)))бискарбамата;

или их фармацевтически приемлемой соли.

Во втором аспекте настоящего изобретения представлено соединение, выбранное из

- 3 024201

или их фармацевтически приемлемой соли.

В третьем аспекте настоящего изобретения представлено соединение, которое представляет собой диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2-диил((25,5 5)-5 -метил-2,1 -пирролидиндиил)( 1 -(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамат или его фармацевтически приемлемую соль.

В четвертом аспекте настоящего изобретения представлена фармацевтическая композиция для лечения инфекции НСУ, содержащая соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель. Согласно первому варианту осуществления четвертого аспекта изобретения эта композиция содержит по меньшей мере одно дополнительное соединение, обладающее противовирусной активностью в отношении НСУ. Согласно второму варианту осуществления четвертого аспекта изобретения по меньшей мере одно из дополнительных соединений представляет собой интерферон или рибавирин. Согласно третьему варианту осуществления четвертого аспекта изобретения интерферон выбран из интерферона альфа 2В, пегилированного интерферона альфа, пегилированного интерферона лямбда, консенсусного интерферона, интерферона альфа 2А и лимфобластоидного интерферона тау.

Четвертый вариант осуществления четвертого аспекта настоящего изобретения относится к композиции, содержащей соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль, фармацевтически приемлемый носитель и по меньшей мере одно дополнительное соединение, обладающее противовирусной активностью в отношении НСУ, где по меньшей мере одно из дополнительных соединений выбрано из интерлейкина 2, интерлейкина 6, интерлейкина 12, соединения, которое усиливает развитие ответа хелперных Т-клеток типа 1, интерферирующей РНК, антисмысловой РНК, имиквимода, рибавирина, ингибитора инозин-5'-монофосфат-дегидрогеназы, амантадина и римантадина.

В пятом варианте осуществления четвертого аспекта настоящего изобретения представлена композиция, содержащая соединение согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемую соль, фармацевтически приемлемый носитель и по меньшей мере одно дополнительное соединение, имеющее противовирусную активность, в которой по меньшей мере одно из дополнительных соедине- 4 024201 ний эффективно ингибирует функцию мишени, выбранной из металлопротеазы НСУ, сериновой протеазы НСУ, полимеразы НСУ, геликазы НСУ, белка Ν84Β НСУ, проникновения НСУ в клетку, сборки вирионов НСУ, выхода вирионов НСУ из клетки, белка Ν85Λ НСУ и 1МРНН (инозинмонофосфатдегидрогеназы) для лечения НСУ инфекции.

В пятом аспекте настоящего изобретения представлен способ лечения инфекции НСУ у пациента, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли. В первом варианте осуществления пятого аспекта изобретения способ дополнительно включает введение по меньшей мере одного дополнительного соединения, обладающего противовирусной активностью в отношении НСУ, до, после или одновременно с соединением согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой солью. Во втором варианте осуществления пятого аспекта изобретения по меньшей мере одно из дополнительных соединений представляет собой интерферон или рибавирин. В третьем варианте осуществления пятого аспекта изобретения интерферон выбран из интерферона альфа 2В, пегилированного интерферона альфа, консенсусного интерферона, интерферона альфа 2А и лимфобластного интерферона тау.

В четвертом варианте осуществления пятого аспекта настоящего изобретения предложен способ лечения НСУ инфекции у пациента, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и введение по меньшей мере одного дополнительного соединения, обладающего противовирусной активностью в отношении НСУ, до, после или одновременно с соединением формулы (I) или его фармацевтически приемлемой солью, где по меньшей мере одно из дополнительных соединений выбрано из интерлейкина 2, интерлейкина 6, интерлейкина 12, соединения, которое увеличивает развитие ответа Т хелперных клеток типа 1, интерферирующей РНК, антисмысловой РНК, имиквода, рибавирина, ингибитора инозин 5'-монофосфатдегидрогеназы, амантадина и римантадина.

В пятом варианте осуществления пятого аспекта настоящего изобретения предложен способ лечения инфекции НСУ у пациента, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли и введение по меньшей мере одного дополнительного соединения, обладающего противовирусной активностью в отношении НСУ, до, после или одновременно с соединением согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой солью, где по меньшей мере одно из дополнительных соединений является эффективным, чтобы ингибировать функцию мишени, выбранной из металлопротеазы НСУ, сериновой протеазы НСУ, полимеразы НСУ, геликазы НСУ, белка Ν84Β НСУ, проникновения НСУ в клетку, сборки вирионов НСУ, выхода вирионов НСУ из клетки, белка Ν85Λ НСУ и ГМРОН для лечения НСУ инфекции.

Другие аспекты настоящего изобретения могут включать подходящие комбинации вариантов осуществления, описанных в настоящем документе.

Кроме того, другие аспекты и варианты осуществления настоящего изобретения могут быть найдены в представленном здесь описании.

Описание настоящего изобретения здесь следует интерпретировать в соответствии с законами и принципами образования химической связи. В некоторых случаях может быть необходимым удаление атома водорода в целях размещения заместителя в какой-либо заданной позиции.

Следует понимать, что соединения, охватываемые настоящим описанием, являются соответственно стабильными для использования в качестве фармацевтического средства.

Все патенты, заявки на патенты и литературные публикации, цитированные в описании изобретения, включены в данное описание посредством ссылки во всей своей полноте. В случае несоответствия, настоящее описание, включая определения, имеет преимущественную силу.

Используемые в настоящем описании следующие термины имеют значения, обозначающие: если не указано иное, все арильные, циклоалкильные и гетероциклические группы согласно настоящему изобретению могут иметь заместителей, описанных в каждом из соответствующих определений. Например, арильная часть арилалкильной группы может иметь заместителей, описанных в определении термина арил.

Термин алкенил в контексте данного описания относится к группе, включающей от двух до шести атомов углерода с прямой или разветвленной цепью, содержащей по меньшей мере одну углеродуглеродную двойную связь.

Термин алкенилокси в контексте данного описания относится к алкенильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту через атом кислорода.

Термин алкенилоксикарбонил в контексте данного описания относится к алкенилоксигруппе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Термин алкокси в контексте данного описания относится к алкильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту через атом кислорода.

Термин алкоксиалкил в контексте данного описания относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя алкоксигруппами.

Термин алкоксиалкилкарбонил в контексте данного описания относится к алкоксиалкильной

- 5 024201 группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Термин алкоксикарбонил в контексте данного описания относится к алкоксигруппе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту через карбонильную группу.

Термин алкил в контексте данного описания относится к группе, образованной из насыщенного углеводорода с неразветвленной или разветвленной цепью, содержащего от одного до шести атомов углерода.

Термин алкилкарбонил в контексте данного описания относится к алкильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин алкилкарбонилокси в контексте данного описания относится к алкилкарбонильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством атома кислорода.

Термин алкилсульфанил в контексте данного описания относится к алкильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством атома серы.

Термин алкилсульфонил в контексте данного описания относится к алкильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством сульфонильной группы.

Термин арил в контексте данного описания относится к фенильной группе или бициклической сконденсированной кольцевой системе, где одно или оба кольца представляют собой фенильную группу. Бициклические сконденсированные кольцевые системы состоят из фенильной группы, сконденсированной с четырех-шестичленным ароматическим или неароматическим карбоциклическим кольцом. Арильные группы согласно настоящему изобретению могут быть присоединены к основному молекулярному фрагменту посредством какого-либо замещаемого атома углерода в группе. Типичные примеры арильных групп включают, но не ограничиваются ими, инданил, инденил, нафтил, фенил и тетрагидронафтил. Арильные группы согласно настоящему изобретению необязательно замещены одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, независимо выбранными из алкенила, алкокси, алкоксиалкила, алкоксикарбонила, алкила, алкилкарбонила, второй арильной группы, арилалкокси, арилалкила, арилкарбонила, циано, гало, галоалкокси, галоалкила, гетероциклила, гетероциклилалкила, гетероциклилкарбонила, гидрокси, гидроксиалкила, нитро, -ΝΚ/'Κ.-'. (МК.^хК^у)алкила, оксо и -Р(О)ОК₂, где каждый К независимо выбран из водорода и алкила; и где алкильная часть арилалкила и гетероциклилалкила являются незамещенными, и где вторая арильная группа, арильная часть арилалкила, арильная часть арилкарбонила, гетероциклил и гетероциклильная часть гетероциклилалкила и гетероциклилкарбонила также необязательно замещены одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, циано, гало, галоалкокси, галоалкила и нитро.

Термин арилалкокси в контексте данного описания относится к арильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту через алкоксигруппу.

Термин арилалкоксикарбонил в контексте данного описания относится к арилалкоксигруппе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин арилалкил в контексте данного описания относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя арильными группами. Алкильная часть арилалкила является также необязательно замещенной одной или двумя дополнительными группами, независимо выбранными из алкокси, алкилкарбонилокси, гало, галоалкокси, галоалкила, гетероциклила, гидрокси и -ΝΚ°Κ^ά, где указанный гетероциклил является также необязательно замещенным одним или двумя заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, незамещенного арила, незамещенного арилалкокси, незамещенного арилалкоксикарбонила, гало, галоалкокси, галоалкила, гидрокси, -ΝΚ^ΧΚ и оксо.

Термин арилалкилкарбонил в контексте данного описания относится к арилалкильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин арилкарбонил в контексте данного описания относится к арильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин арилокси в контексте данного описания относится к арильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством атома кислорода.

Термин арилоксикарбонил в контексте данного описания относится к арилоксигруппе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин арилсульфонил в контексте данного описания относится к арильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством сульфонильной группы.

Термин бициклоалкил в контексте данного описания относится к насыщенной, конденсированной, соединенной мостиковой связью или спироциклической бициклической углеводородной кольцевой системе, имеющей от пяти до двенадцати углеродных атомов и не имеющей гетероатомов. Эти бициклоалкильные группы согласно настоящему изобретению необязательно замещены одной или двумя группами, независимо выбранными из алкила, гало и галоалкила.

Термин карбонил в контексте данного описания относится к -С(О)-.

Термин карбокси в контексте данного описания относится к -СО₂Н.

Термин циано в контексте данного описания относится к -ΟΝ.

Термин циклоалкил в контексте данного описания относится к насыщенной моноциклической углеводородной кольцевой системе, имеющей от трех до семи атомов углерода и не имеющей гетероато- 6 024201 мов. Типичные примеры циклоалкильных групп включают, но не ограничиваются ими, циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил. Циклоалкильные группы согласно настоящему изобретению необязательно замещены одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, арила, циано, гало, галоалкокси, галоалкила, гетероциклила, гидрокси, гидроксиалкила, нитро и -ΝΚ^ΧΚ^Υ, где указанные арил и гетероциклил также необязательно замещены одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, циано, гало, галоалкокси, галоалкила, гидрокси и нитро.

Термин (циклоалкил)алкил в контексте данного описания относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя циклоалкильными группами.

Термин циклоалкилокси в контексте данного описания относится к циклоалкильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством атома кислорода.

Термин циклоалкилоксикарбонил в контексте данного описания относится к циклоалкилоксигруппе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин циклоалкилсульфонил в контексте данного описания относится к циклоалкильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством сульфонильной группы.

Термин циклоалкил-замещенный-гетероциклил в контексте данного описания относится к насыщенной, моноциклической гетероциклильной группе, замещенной одной или двумя циклоалкильными группами.

Термин этенилциклоалкил в контексте данного описания относится к

где т имеет значения 1, 2 или 3.

Термин формил в контексте данного описания относится к -СНО.

Термин конденсированный бициклогетероциклил в контексте данного описания относится к четырех-, пяти-, шести- или семичленному насыщенному или ненасыщенному кольцу, содержащему один, два или три гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, сконденсированному с трехпятичленным насыщенным карбоциклическим кольцом. Указанные гетероциклильные группы согласно настоящему изобретению могут быть присоединены к основному молекулярному фрагменту посредством какого-либо атома углерода или атома азота в этой группе. Бициклогетероциклильные группы согласно настоящему изобретению необязательно замещены одной или двумя группами, независимо выбранными из алкила, спироциклила, гало и галоалкила.

Термин гало в контексте данного описания относится к С1, Вг, Р или I.

Термин галоалкокси в контексте данного описания относится к галоалкильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством атома кислорода.

Термин галоалкоксикарбонил в контексте данного описания относится к галоалкоксигруппе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин галоалкил в контексте данного описания относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя, тремя или четырьмя атомами галогена.

Термин гетероциклил в контексте данного описания относится к четырех-, пяти-, шести- или семичленному кольцу, содержащему один, два, три или четыре гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы. Четырехчленное кольцо не имеет двойных связей, пятичленное кольцо имеет от нуля до двух двойных связей и шести- и семичленное кольца имеют от нуля до трех двойных связей. Термин гетероциклил также включает бициклические группы, в которых гетероциклильное кольцо сконденсировано с другой моноциклической гетероциклильной группой или с четырех-шестичленным ароматическим или неароматическим карбоциклическим кольцом; а также соединенные мостиковой связью бициклические группы, такие как 7-азабицикло[2.2.1]гепт-7-ил, 2-азабицикло[2.2.2]окт-2-ил, 2,5-диазабицикло[2.2.1]гептан-2-ил и 2-азабицикло[2.2.2]окт-3-ил. Эти гетероциклильные группы согласно настоящему изобретению могут быть присоединены к основному молекулярному фрагменту посредством атома углерода или атома азота в этой группе. Примеры гетероциклильных групп включают, но не ограничиваются ими, бензотиенил, фурил, имидазолил, индолинил, индолил, изохинолинил, изотиазолил, изоксазолил, морфолинил, оксазолил, оксетанил, пиперазинил, пиперидинил, пиразолил, пиридинил, пирролидинил, пирролопиридинил, пирролил, хинолинил, тетрагидрофуранил, тетрагидропиранил, тиазолил, тиенил, и тиоморфолинил. Гетероциклильные группы согласно настоящему изобретению необязательно замещены одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, независимо выбранными из алкенила, алкокси, алкоксиалкила, алкоксикарбонила, алкила, алкилкарбонила, арила, арилалкоксикарбонила, арилалкила, арилкарбонила, циано, гало, галоалкокси, галоалкила, второй гетероциклильной группы, гетероциклилалкила, гетероциклилкарбонила, гидрокси, гидроксиалкила, нитро, -ΝΚ^ΧΚ^Υ, (NΚ^xΚ^у)алкила и оксо, где алкильная часть арилалкила и гетероциклилалкила являются незамещенными, и где арил, арильная часть арилалкила, арильная часть арилкарбонила, вторая гетероциклильная группа и

- 7 024201 гетероциклильная часть гетероциклилалкила и гетероциклилкарбонила также необязательно замещены одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, циано, гало, галоалкокси, галоалкила и нитро.

Термин гетероциклилалкокси в контексте данного описания относится к гетероциклильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством алкоксигруппы.

Термин гетероциклилалкоксикарбонил в контексте данного описания относится к гетероциклилалкоксигруппе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин гетероциклилалкил в контексте данного описания относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя гетероциклильными группами. Алкильная часть гетероциклилалкила дополнительно необязательно замещена одной или двумя дополнительными группами, независимо выбранными из алкокси, алкилкарбонилокси, арила, гало, галоалкокси, галоалкила, гидрокси и -ЫК^сК', где арил дополнительно необязательно замещен одним или двумя заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, незамещенного арила, незамещенного арилалкокси, незамещенного арилалкоксикарбонила, гало, галоалкокси, галоалкила, гидрокси и -ΝΚ^ΧΚ^Υ.

Термин гетероциклилалкилкарбонил в контексте данного описания относится к гетероциклилалкильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин гетероциклилкарбонил в контексте данного описания относится к гетероциклильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин гетероциклилэтенил в контексте данного описания относится к

где А представляет собой пяти-семичленный моноциклический гетероцикл, не содержащий дополнительных двойных связей, и где «А и “ *” обозначают точку присоединения к -ΝΚ°Κ^ά группе и к основной молекулярной группировке.

Термин гетероциклилокси в контексте данного описания относится к гетероциклильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством атома кислорода.

Термин гетероциклилоксикарбонил в контексте данного описания относится к гетероциклилоксигруппе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин гидрокси в контексте данного описания относится к -ОН.

Термин гидроксиалкил в контексте данного описания относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя гидроксильными группами.

Термин гидроксиалкилкарбонил в контексте данного описания относится к гидроксиалкильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин нитро в контексте данного описания относится к -ΝΟ₂.

Термин -ΝΚ°Κ^ά в контексте данного описания относится к двум группам К^с и К.'¹, которые присоединены к основному молекулярному фрагменту посредством атома азота. К^с и К' независимо выбраны из водорода, алкенилоксикарбонила, алкоксиалкилкарбонила, алкоксикарбонила, алкила, алкилкарбонила, алкилсульфонила, арила, арилалкоксикарбонила, арилалкила, арилалкилкарбонила, арилкарбонила, арилоксикарбонила, арилсульфонила, циклоалкила, циклоалкилокси, циклоалкилоксикарбонила, циклоалкилсульфонила, формила, галоалкоксикарбонила, гетероциклила, гетероциклилалкоксикарбонила, гетероциклилалкила, гетероциклилалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила, гетероциклилоксикарбонила, гидроксиалкилкарбонила, (НК^еК^г)алкила, (ЫК^еК^г)алкилкарбонила, АК^еК^г)карбонила, (КК^еК^г)сульфонила, -0(ΝΟΝ)ΟΚ' и -Ο(ΝΟΝ)ΝΚ^ΧΚ^Υ, где К' выбран из алкила и незамещенного фенила, и где алкильная часть арилалкила, арилалкилкарбонила, гетероциклилалкила и гетероциклилалкилкарбонила дополнительно необязательно замещены одной -НК^еК^г группой; и где арил, арильная часть арилалкоксикарбонила, арилалкила, арилалкилкарбонила, арилкарбонила, арилоксикарбонила и арилсульфонила, гетероциклил и гетероциклильная часть гетероциклилалкоксикарбонила, гетероциклилалкила, гетероциклилалкилкарбонила, гетероциклилкарбонила и гетероциклилоксикарбонила дополнительно необязательно замещены одним, двумя или тремя заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, циано, гало, галоалкокси, галоалкила и нитро.

Термин (НК^сК')алкенил в контексте данного описания относится к

- 8 024201 где К^с и К⁴ являются такими, как здесь описано, и каждый К⁴ независимо представляет собой водород или С^алкил.

Термин (МК^сК^а)алкил в контексте данного описания относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя -ΝΚΚ'¹ группами. Алкильная часть (МК^сК^а)алкила также необязательно замещена одной или двумя дополнительными группами, выбранными из алкокси, алкоксиалкилкарбонила, алкоксикарбонила, алкилсульфанила, арилалкоксикарбонила, карбокси, циклоалкила, гетероциклила, гетероциклилкарбонила, гидрокси и (МК^еК^г)карбонила; где гетероциклил также необязательно замещен одним, двумя, тремя, четырьмя или пятью заместителями, независимо выбранными из алкокси, алкила, циано, гало, галоалкокси, галоалкила и нитро.

Термин -МК^еК^г в контексте данного описания относится к двум группам, К^е и К, которые присоединены к основному молекулярному фрагменту посредством атома азота. К^е и К^г независимо выбраны из водорода, алкила, незамещенного арила, незамещенного арилалкила, незамещенного циклоалкила, незамещенного (циклоалкил)алкила, незамещенного гетероциклила, незамещенного гетероциклилалкила, (МК^хК^у)алкила и (МК^хК^у)карбонила.

Термин (МК^еК^г)алкил в контексте данного описания относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя -МК^еК^г группами.

Термин (МК^еК^г)алкилкарбонил в контексте данного описания относится к (МК^еК^г)алкильной группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин (МК^еК^г)карбонил в контексте данного описания относится к -ЫК^еК^г группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин (МК^еК^г)сульфонил в контексте данного описания относится к -МК^еК^г группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством сульфонильной группы.

Термин -№К^хК^у в контексте данного описания относится к двум группам К^х и К^у, которые присоединены к основному молекулярному фрагменту посредством атома азота. К^х и К^у независимо выбраны из водорода, алкоксикарбонила, алкила, алкилкарбонила, незамещенного арила, незамещенного арилалкоксикарбонила, незамещенного арилалкила, незамещенного циклоалкила, незамещенного гетероциклила и (МК^х'К^у')карбонила, где К^х' и К^у' независимо выбраны из водорода и алкила.

Термин (МК^хК^у)алкил в контексте данного описания относится к алкильной группе, замещенной одной, двумя или тремя -МК^хК^у группами.

Термин (МК^хК^у)карбонил в контексте данного описания относится к -ЫК^хК^у группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин (ΝΚ К^у )карбонил в контексте данного описания относится к -ΝΚ К^у группе, присоединенной к основному молекулярному фрагменту посредством карбонильной группы.

Термин оксо в контексте данного описания относится к =0.

Термин оксоциклоалкил в контексте данного описания относится к циклоалкильной группе, замещенной оксогруппой.

Термин спироциклогетероциклил в контексте данного описания относится к четырех-, пяти-, шести- или семичленному замещенному или незамещенному кольцу, содержащему один, два или три гетероатома, независимо выбранных из азота, кислорода и серы, присоединенных к одному или двум трехпятичленным насыщенным кольцам, необязательно содержащим один атом кислорода, посредством одного или двух отдельных атомов углерода соответственно. Гетероциклильные группы согласно настоящему изобретению могут быть присоединены к основному молекулярному фрагменту посредством какого-либо атома углерода или атома азота в группе. Спироциклогетероциклильные группы согласно настоящему изобретению необязательно замещены одной или двумя группами, независимо выбранными из алкила, гало и галоалкила.

Термин спироциклил в контексте данного описания относится к трех-, четырех- или пятичленному насыщенному кольцу, присоединенному к основному молекулярному фрагменту посредством одного атома углерода.

Термин сульфонил в контексте данного описания относится к -§0₂-.

Термин тиоалкил в контексте данного описания представляет алкильную группу, присоединенную к основному молекулярному фрагменту посредством атома серы.

В соединениях согласно настоящему изобретению имеются асимметричные центры. Эти центры обозначены символами К или § в зависимости от взаимного расположения заместителей вокруг хирального атома углерода. Следует понимать, что изобретение охватывает все стереохимические изомерные формы или их смеси, которые обладают способностью ингибировать Ν85Α. Отдельные стереоизомеры соединений могут быть получены синтетическим путем из коммерчески доступных исходных материалов, которые имеют хиральные центры, или путем получения смесей энантиомерных продуктов с последующим разделением, таким как преобразование в смесь диастереомеров, сопровождаемое их разделением с применением техник повторной кристаллизации, хроматографии или прямого разделения энантиомеров на хиральных хроматографических колонках. Исходные соединения в отдельных вариантах стереохимии являются либо коммерчески доступными, либо могут быть получены и разделены способами, известными в данной области.

- 9 024201

Некоторые соединения согласно настоящему изобретению также могут существовать в виде различных устойчивых конформационных форм, которые могут быть разделены. Торсионная асимметрия может позволить разделение различных конформеров вследствие ограниченного вращения вокруг асимметричной одинарной связи, например, из-за стерических препятствий или напряжения кольца. Настоящее изобретение включает каждый конформационный изомер этих соединений и их смеси.

Соединения согласно настоящему изобретению существуют также в виде таутомеров; поэтому настоящее изобретение также включает все таутомерные формы.

Термин соединения согласно настоящему изобретению и эквивалентные выражения предназначены, чтобы охватить соединения формулы (I) и фармацевтически приемлемые энантиомеры, диастереомеры и их соли. Подобным образом, ссылки на промежуточные соединения предназначены, чтобы охватить их соли, где контекст позволяет это сделать.

Настоящее изобретение предполагает включение всех изотопов атомов, встречающихся в настоящих соединениях. Изотопы включают те атомы, которые имеют один и тот же атомный номер, но разные массовые числа. В качестве общего примера и без ограничения изотопы водорода включают дейтерий и тритий. Изотопы углерода включают ¹³С и ¹⁴С. Меченные изотопами соединения согласно изобретению обычно могут быть получены общепринятыми способами, известными специалистам в данной области, или с помощью способов, аналогичных описанным в настоящем документе с использованием соответствующего изотопно-меченого реагента вместо немеченого реагента, который используется в противном случае. Такие соединения могут иметь множество потенциальных применений, например, в качестве стандартов и реагентов при определении биологической активности. В случае стабильных изотопов такие соединения могут иметь потенциал для благоприятного изменения биологических, фармакологических или фармакокинетических свойств.

Соединения согласно настоящему изобретению могут существовать в виде фармацевтически приемлемых солей. Термин фармацевтически приемлемая соль в контексте данного описания представляет собой соли или цвиттер-ионные формы соединений согласно настоящему изобретению, которые являются водо- или масло-растворимыми или диспергируемыми, которые, согласно результатам тщательной медицинской оценки, пригодны для использования в контакте с тканями пациентов без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или другой проблемы или осложнения, соизмеримого с разумным соотношением польза/риск, и являются эффективными для их применения по назначению. Соли могут быть получены во время окончательного выделения и очищения соединений или отдельно путем взаимодействия подходящего атома азота с подходящей кислотой. Типичные примеры солей присоединения кислоты включают ацетат, адипат, альгинат, цитрат, аспартат, бензоат, бензолсульфонат, бисульфат, бутират, камфорат, камфорсульфонат; диглюконат, глицерофосфат, гемисульфат, гептаноат, гексаноат, формиат, фумарат, гидрохлорид, гидробромид, гидройодид, 2-гидроксиэтансульфонат, лактат, малеат, мезитиленсульфонат, метансульфонат, нафтиленсульфонат, никотинат, 2-нафталинсульфонат, оксалат, пальмоат, пектинат, персульфат, 3-фенилпропионат, пикрат, пивалат, пропионат, сукцинат, тартрат, трихлорацетат, трифторацетат, фосфат, глутамат, бикарбонат, паратолуолсульфонат и ундеканоат. Примеры кислот, которые могут быть использованы для формирования фармацевтически приемлемых солей присоединения, включают неорганические кислоты, такие как соляная, бромисто-водородная, серная и фосфорная, и органические кислоты, такие как щавелевая, малеиновая, янтарная и лимонная.

Соли присоединения основания могут быть получены во время окончательного выделения и очищения соединений путем взаимодействия карбоксильной группы с подходящим основанием, таким как гидроксид, карбонат или бикарбонат катиона металла, или с аммиаком или органическим первичным, вторичным или третичным амином. Катионы фармацевтически приемлемых солей включают литий, натрий, калий, кальций, магний и алюминий, а также нетоксичные катионы амина, такие как аммоний, тетраметиламмоний, тетраэтиламмоний, метиламин, диметиламин, триметиламин, триэтиламин, диэтиламин, этиламин, трибутиламин, пиридин, Ν,Ν-диметиланилин, Ν-метилпиперидин, Ν-метилморфолин, дициклогексиламин, прокаин, дибензиламин, Ν,Ν-дибензилфенетиламин и Ν,Ν'-дибензилэтилендиамин. Другие типичные органические амины, полезные для образования солей присоединения основания, включают этилендиамин, этаноламин, диэтаноламин, пиперидин и пиперазин.

Когда возможно, что для использования в терапии могут быть введены терапевтически эффективные количества соединения согласно настоящему изобретению, а также его фармацевтически приемлемых солей в виде исходного химического продукта, то можно представить активный ингредиент в виде фармацевтической композиции. Соответственно, изобретение дополнительно относится к фармацевтическим композициям, которые включают терапевтически эффективные количества соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемых солей, и одно или более, фармацевтически приемлемых носителей, разбавителей или вспомогательных веществ. Термин терапевтически эффективное количество в контексте данного описания относится к общему количеству каждого активного компонента, которого достаточно, чтобы проявить значимую пользу для пациента, например, постоянное снижение вирусной нагрузки. Применительно к отдельному активному ингредиенту, вводимому в чистом виде, термин относится к этому одному ингредиенту. При применении к комбинации термин относится к общему количеству активных ингредиентов, которые оказывают терапевтическое действие,

- 10 024201 независимо от того, вводятся они в комбинации, поочередно или одновременно. Соединения согласно настоящему изобретению и их фармацевтически приемлемые соли являются такими, как описано выше. Носитель(и), разбавитель(и) или вспомогательное(ые) вещество(а) должны быть приемлемыми, в том смысле, что они должны быть совместимыми с другими ингредиентами композиции и не вредными для реципиента. В соответствии с другим аспектом настоящее изобретение относится также к способу получения фармацевтической композиции, включающему смешивание соединения согласно настоящему изобретению или его фармацевтически приемлемой соли с одним или более фармацевтически приемлемыми носителями, разбавителями или вспомогательными веществами. Термин фармацевтически приемлемый в контексте данного описания относится к таким соединениям, материалам, композициям и/или лекарственным формам, которые в рамках тщательной медицинской оценки являются пригодными для использования в контакте с тканями пациентов без чрезмерной токсичности, раздражения, аллергической реакции или другой проблемы или осложнения, соразмерны с разумным соотношением польза / риск и являются эффективными при их применении по назначению.

Фармацевтические композиции могут быть представлены в форме стандартной дозы, содержащей определенное количество активного ингредиента на единицу дозы. Уровни дозирования от около 0,01 до около 250 миллиграмм на килограмм (мг/кг) массы тела в сутки, предпочтительно, от около 0,05 до около 100 мг/кг массы тела в сутки соединений согласно настоящему изобретению являются типичными при монотерапии для предупреждения и лечения НСУ опосредованного заболевания. Как правило, фармацевтические композиции согласно изобретению вводятся от около 1 до около 5 раз в сутки или в качестве альтернативы как непрерывная инфузия. Такое введение может быть использовано для терапии хронического или острого состояния. Количество активного ингредиента, которое может быть соединено с материалами носителя для получения единичной лекарственной формы, будет меняться в зависимости от состояния пациента, тяжести патологического состояния, времени введения, способа введения, скорости выведения принимаемого соединения, продолжительности лечения и возраста, пола, массы тела и состояния пациента. Предпочтительными единичными дозировками композиций являются такие, которые содержат суточную дозу или часть дозы так, как изложено выше, или подходящую часть дозы в качестве активного ингредиента. Как правило, лечение начинается с маленьких доз, существенно меньших, чем оптимальная доза соединения. Затем доза увеличивается небольшими порциями до тех пор, пока при данных обстоятельствах не будет достигнут оптимальный эффект. В общем, соединение, наиболее желательно, вводится при уровне концентрации, который, как правило, оказывает эффективное противовирусное воздействие, не вызывая при этом никаких вредных или разрушительных побочных эффектов.

Когда композиции согласно настоящему изобретению содержат комбинацию соединения согласно настоящему изобретению и одного или более дополнительных терапевтических или профилактических средств, в этом случае как соединение, так и дополнительное средство обычно присутствуют при уровнях дозирования от около 10 до 150% и более предпочтительно от около 10 до 80% от дозы, обычно вводимой при режиме монотерапии.

Фармацевтические композиции могут быть адаптированы для введения любым подходящим способом, например, перорально (в том числе буккально или сублингвально), ректально, назально, топически (в том числе буккально, сублингвально или трансдермально), вагинально или парентерально (в том числе подкожно, внутрикожно, внутримышечно, внутрисуставно, надчревно, интратекально, внутрь пораженных тканей, внутривенно или внутрикожно посредством инъекции или инфузии). Такие композиции могут быть изготовлены любым способом, известным в области фармацевтики, например, путем введения в композицию активного ингредиента с носителем (носителями) или вспомогательным веществом (веществами). Пероральное введение или введение путем инъекции являются предпочтительными.

Фармацевтические композиции, адаптированные для перорального введения, могут быть представлены в виде дискретных единиц, таких как капсулы или таблетки; порошки или гранулы; в виде растворов или суспензий в водных или неводных жидкостях; съедобных пен или взбитых масс; или жидких эмульсий масло-в-воде или эмульсий вода-в-масле.

Например, для перорального введения в форме таблеток или капсул активный лекарственный компонент может быть соединен с пероральным нетоксичным фармацевтически приемлемым инертным носителем, таким как этанол, глицерин, вода и тому подобное. Порошки получают путем истирания соединения для получения частиц соответствующего тонкого размера и смешивания его с подобным образом измельченным фармацевтическим носителем, таким как съедобный углевод, как, например, крахмал или маннит. Также могут присутствовать ароматизатор, консервант, диспергирующие и окрашивающие вещества.

Капсулы изготавливаются путем изготовления порошковой смеси, как описано выше, и наполнения ею сформированных желатиновых оболочек. Перед операцией заправки капсул к порошковой смеси могут быть добавлены вещества, способствующие скольжению, и смазывающие вещества, такие как коллоидный диоксид кремния, тальк, стеарат магния, стеарат кальция или твердый полиэтиленгликоль. Также, чтобы улучшить доступность лекарственного средства при проглатывании капсулы, к смеси может быть добавлен дезинтегрирующий или растворяющий агент, такой как агар-агар, карбонат кальция или карбонат натрия.

- 11 024201

Кроме того, при желании или необходимости подходящие связующие, смазывающие, дезинтегрирующие агенты и окрашивающие вещества также могут быть введены в смесь. Подходящие связующие вещества включают крахмал, желатин, натуральные сахара, такие как глюкоза или бета-лактоза, кукурузные подсластители, природные и синтетические смолы, такие как камедь, трагакант или натрия альгинат, карбоксиметилцеллюлоза, полиэтиленгликоль и тому подобное. Смазывающие вещества, используемые в этих лекарственных формах, включают олеат натрия, хлорид натрия и тому подобное. Дезинтеграторы включают, без ограничения, крахмал, метилцеллюлозу, агар, бентонит, ксантановую смолу и тому подобное. Таблетки изготавливаются, например, путем получения порошковой смеси, гранулирования или брикетирования с добавлением скользящего вещества и разрыхлителя и прессования в таблетки. Порошковая смесь готовится путем смешивания соединения, подходящим образом измельченного, с разбавителем или основой, как описано выше, и, необязательно, со связующим веществом, таким как карбоксиметилцеллюлоза, альгинат, желатин или поливинилпирролидон, замедлителем растворения, таким как парафин, ускорителем резорбции, таким как четвертичная соль, и/или поглощающим веществом, таким как бентонит, каолин или дикальцийфосфат. Порошковая смесь может быть гранулирована путем смачивания со связующим, таким как сироп, крахмальный клейстер, клейкое вещество на основе камеди, или с растворами целлюлозных или полимерных материалов и пропускания через сито. В качестве альтернативы гранулирования, порошкообразная смесь может быть пропущена через таблеточную машину и образовывать не полностью сформированные заготовки, измельчаемые в гранулы. Гранулы могут быть смазаны, чтобы предотвратить прилипание к формирующим таблетки штампам, путем добавления стеариновой кислоты, стеаратной соли, талька или минерального масла. Смазанная смесь затем прессуется в таблетки. Соединения согласно настоящему изобретению могут быть также объединены с сыпучим инертным носителем и спрессованы в таблетки непосредственно, минуя стадии гранулирования или получения заготовок. Прозрачное или непрозрачное защитное покрытие, состоящее из изолирующего слоя шеллака, покрытие из сахара или полимерного материала и полирующий состав покрытия из воска могут быть обеспечены. К этим покрытиям могут быть добавлены красящие вещества, чтобы сделать различия между лекарственными формами.

Пероральные жидкости, такие как растворы, сиропы и эликсиры, могут быть изготовлены в форме единицы дозирования, так чтобы данная величина содержала определенное количество соединения. Сиропы могут быть получены путем растворения соединения в водном растворе, ароматизированном соответствующим образом, в то время как эликсиры готовятся с использованием нетоксичных наполнителей. Также могут быть добавлены солюбилизаторы и эмульгаторы, такие как этоксилированные изостеариловые спирты и полиоксиэтиленовые простые эфиры сорбита, консерванты, ароматизирующие добавки, такие как масло мяты перечной, или натуральные подсластители, или сахарин или другие искусственные подсластители и тому подобное.

В случае необходимости, единица дозирования композиций для перорального введения может находиться в форме микрокапсул. Композиция может быть изготовлена таким образом, чтобы продлить или замедлить высвобождение, например, посредством покрытия или заделывания сыпучего материала в полимеры, воск и тому подобное.

Соединения согласно настоящему изобретению и их фармацевтически приемлемые соли могут также вводиться в форме липосомных систем доставки, таких как маленькие моноламеллярные везикулы, большие моноламеллярные везикулы и мультиламеллярные везикулы. Липосомы могут быть сформированы из различных фосфолипидов, таких как холестерин, стеариламин или фосфатидилхолины.

Соединения согласно настоящему изобретению и их фармацевтически приемлемые соли также могут быть доставлены с использованием моноклональных антител как индивидуальных носителей, к которым присоединяются молекулы соединения. Соединения также могут быть присоединены к растворимым полимерам, как наводимым на цель носителям лекарственных средств. Такие полимеры могут включать поливинилпирролидон, сополимер пирана, полигидроксипропилметакриламидфенол, полигидроксиэтиласпартамидфенол или полиэтиленоксидполилизин, замещенный группами палитоила. Кроме того, соединения могут быть связаны с биологически разлагаемыми полимерами, пригодными для достижения контролируемого высвобождения лекарственного средства, например, с полимерами молочной кислоты, полиэпсилон-капролактоном, полигидроксимасляной кислотой, поли-(орто)-сложными эфирами, полиацеталями, полидигидропиранами, полицианоакрилатами и сшитыми или амфипатическими блок-сополимерами гидрогелей.

Фармацевтические композиции, адаптированные для трансдермального введения, могут быть представлены в виде дискретных пластырей, которые предназначены оставаться в тесном контакте с эпидермисом реципиента в течение продолжительного периода времени. Например, активный ингредиент может быть доставлен из пластыря посредством ионтофореза, как, в общем, описано в РЬаттасеийса1 Кекеатсй 1986, 3(6), 318.

Фармацевтические композиции, адаптированные для местного введения, могут быть составлены в виде мазей, кремов, суспензий, лосьонов, порошков, растворов, паст, гелей, спреев, аэрозолей или масел.

Для лечения глаз или других внешних тканей, например рта и кожи, композиции предпочтительно применяются в виде наружной мази или крема. Когда композиция приготовлена в виде мази, активный

- 12 024201 ингредиент может быть использован либо с парафиновой, либо со смешивающейся с водой мазевой основой. В качестве альтернативы, активный ингредиент может быть введен в крем с основой для крема масло-в-воде или вода-в-масле.

Фармацевтические композиции, адаптированные для местного введения в глаз, включают глазные капли, в которых активный ингредиент растворяют или суспендируют в подходящем носителе, главным образом, в водном растворителе.

Фармацевтические композиции, адаптированные для местного введения в рот, включают таблетки для рассасывания, пастилки и жидкости для полоскания рта.

Фармацевтические композиции, адаптированные для ректального введения, могут быть представлены как свечи или как клизмы.

Фармацевтические композиции, адаптированные для назального введения, в которых носитель представляет собой твердое вещество, включают курсовой порошок, имеющий размер частиц, например, в диапазоне от 20 до 500 микрон. Этот порошок вводится посредством вдыхания через нос, то есть посредством быстрого вдоха через носовой проход из контейнера с порошком, который удерживается вплотную к носу. Подходящие композиции, в которых носитель представляет собой жидкость для введения в виде назального спрея или назальных капель для носа, включают водные или масляные растворы активного ингредиента.

Фармацевтические композиции, адаптированные для введения путем ингаляции, включают частицы в виде мелкой пыли или тумана, которые могут быть получены с помощью различных типов дозирующих, нагнетающих аэрозоли ингаляторов, небулайзеров или инсуффляторов.

Фармацевтические композиции, адаптированные для вагинального применения, могут быть представлены в виде пессариев, тампонов, кремов, гелей, паст, пен или распыляемых составов.

Фармацевтические композиции, адаптированные для парентерального введения, включают водные и неводные стерильные растворы для инъекций, которые могут содержать антиоксиданты, буферы, бактериостаты и вещества, которые переводят композицию в состояние, изотоническое с кровью предполагаемого реципиента; водные и неводные стерильные суспензии, которые могут включать суспендирующие агенты и загустители. Композиции могут быть представлены в однодозовых или многодозовых контейнерах, например, в запаянных ампулах и флаконах, и могут храниться в сублимированном (лиофилизированном) состоянии, требуя лишь добавления стерильного жидкого носителя, например, воды для инъекций, непосредственно перед применением. Приготовленные для немедленного введения растворы для инъекций и суспензии могут быть получены из стерильных порошков, гранул и таблеток.

Следует иметь в виду, что в дополнение к ингредиентам, в частности, упомянутым выше, композиции могут включать другие агенты, обычные в данной области, с учетом типа рассматриваемой композиции, например, композиции, подходящие для перорального введения, могут включать ароматизаторы.

Термин пациент включает в себя как человека, так и других млекопитающих.

Термин лечение относится к: (ί) предупреждению заболевания, расстройства или патологического состояния, встречающегося у пациента, который может быть предрасположен к болезни, расстройству и/или патологическому состоянию, но которому еще не поставлен такой диагноз; (ίί) ингибированию заболевания, расстройства или патологического состояния, то есть остановке его развития, и (ίίί) облегчению болезни, расстройства или патологического состояния, то есть приведению к регрессии заболевания, расстройства и/или патологического состояния.

Соединения согласно настоящему изобретению могут также вводиться с циклоспорином, например с циклоспорином А. Циклоспорин А, как было показано, проявляет противовирусную активность в отношении НСУ в клинических испытаниях (Нера1о1оду 2003, 38, 1282; ВюсЬет. ВюрЬук. Кек. Соттип. 2004, 313, 42; 1. Сак1гоеп1его1. 2003, 38, 567).

В табл. 1 ниже приведены некоторые иллюстративные примеры соединений, которые могут быть введены с соединениями согласно настоящему изобретению. Соединения согласно настоящему изобретению могут вводиться с другими соединениями, проявляющими активность в отношении НСУ, в комбинированной терапии либо совместно, либо отдельно, либо путем объединения соединений в композицию.

- 13 024201

Таблица 1

Торговая марка	Физиологический класс	Тип Ингибитора или Мишень	Фирма-поставщик
ΝΙΜ811		Ингибиторы циклофилина	ΝονάΠίδ
Задаксин		Иммуномодулятор	Зс1с1оие
8ιινιι$		Метиленовый синий	Βΐοβηνίδίοη
Асй1ои (СРС10101)		ТЬК9 агонист	Со1еу
Батабулин (Т67)	Противораковый	Ингибитор β- тубулина	Ти1апк 1пс., 8ои1Ь Зап Ргапс1$со, СА
1818 14803	Противовирусный	Антисмысловой	1818 РЬагтасеийсак 1пс, СагкЬай, СА/Е1ап РЬагтасеийсак 1пс , Νβνν Уогк, ΝΥ
8иммегге1	Противовирусный	Противовирусный	Εηάο РЬагтасеийсак Ηο1άίη§51пс., СЬаййз Рогд, РА
08-9132 (АСН- 806)	Противовирусный	Ингибитор НСУ	АсЬППоп/ОПеаа
Пиразолопиримиди новые соединения и соли Из \\Ό 2005/047288 26 Май 2005	Противовирусный	Ингибитор НСУ	Απονν ТЬегареийсз Όΐά.
Левовирин	Противовирусный	Ингибитор ΙΜΡΌΗ	ЮЬарЬагт 1пс., Соз1а Меза, СА
Меримеподиб (УХ-497)	Противовирусный	Ингибитор ΙΜΡΌΗ	УеПех РЬагтасеийсак 1пс, СатЬпа§е, МА
ХТЬ-6865 (ХТЬ- 002)	Противовирусный	Моноклональное антитело	ХТЬ ВюрЬагтасеийсак Ιτά, КеЬосог,кгае1
Телапревир (УХ- 950, ЬУ-570310)	Противовирусный	Ингибитор N83 серин-протеазы	УегГех РЬагтасеийсак 1пс., СатЬпа§е, МА/ЕН ЕП1у апа Со. 1пс., 1па1апароЙ5, ΙΝ
НСУ-796	Противовирусный	Ингибитор Ν85Β репликазы	\¥уегЬУйорЬагта
ΝΜ-283	Противовирусный	Ингибитор Ν85Β репликазы	Ыетх/Иоуагйз
ОЬ-59728	Противовирусный	Ингибитор Ν35Β репликазы	Оепе ЬаЬз/Кохагйз
ОЬ-60667	Противовирусный	Ингибитор Ν35Β репликазы	Оепе ЬаЬз/Иоуагйз
2'С МеА	Противовирусный	Ингибитор Ν35Β репликазы	ОПеад
Ρ8Ι6130	Противовирусный	Ингибитор Ν35Β репликазы	КосЬе
К1626	Противовирусный	Ингибитор Ν35Β репликазы	КосЬе
2'С Метиладенозин	Противовирусный	Ингибитор Ν85Β репликазы	Мегск
ЯК-003	Противовирусный	Ингибитор КаКр	1арап ТоЬассо 1пс., Токуо, 1арап
Левовирин	Противовирусный	рибавирин	1СХ РЬагтасеийсак, Созга Меза, СА
Рибавирин	Противовирусный	рибавирин	ЗсЬегт§-Р1оидЬ Согрогайоп, КепПлуогйч, N1
Вирамидин	Противовирусный	Рибавирин пролекарство	ГбЬарЬагт 1пс, Соз1а Меза, СА
Гептазим	Противовирусный	рибозим	КаЬогуте РЬагтасеийсак 1пс., ВоиМег, СО

- 14 024201

ΒΙΙ.Ν-2061	Противовирусный	Ингибитор серинпротеазы	ВоеЬпп§ег 1п§е1Ьепп РЬагта КС, ЬчдеПчепп, Оегтапу
8СН 503034	Противовирусный	Ингибитор серинпротеазы	8сЬепп§-Р1ои§Ь
Ζαάβζίηι	Иммуномодулятор	Иммуномодулятор	8с1С1опе РЬагтасеиНса1з 1пс., 8ап Ма1ео, СА
Цеплен	Иммуномодулятор	Иммуномодулятор	Мах1т РЬагтасеиНса1з 1пс., 8ап ϋΐβ^ο, СА
Селлсепт	Иммунодепрессант	1§О иммунодепрессант ВГС	Р. Нойтапп-Ьа КосЬе ЬТО, Вазе1, 8\У11гег1апН
Цпвацир	Иммунодепрессант	1§О Иммунодепрессант ВГС	ΝβΒί ВюрЬагтасеиНса1з 1пс, Воса Ка1оп, РЬ
Альбуферон-α	Интерферон	Альбумин ΙΡΝ-α2Η	Нитап Сепоте 8с1епсез 1пс., Коск\ч11е, Μϋ
Инферген А	Интерферон	ΙΡΝ альфакон-1	1п1егМипе РЬагтасеиНса1з 1пс, ВпзЬапе, СА
Омега ΙΡΝ	Интерферон	ΙΡΝ-ω	1п1агс1а ТЬегареиНсз
ΙΡΝ-β и ΕΜΖ701	Интерферон	ΙΡΝ-β ΠΕΜΖ701	ТгапзПюп ТЬегареиПсз 1пс., Ошапо, СапаНа
Ребиф	Интерферон	ΙΡΝ-β 1а	Зегопо, Сепе\а, Зу/ИгеНапН
Роферон А	Интерферон	1ГИ-а2а	Р. Нойтапп-Ьа КосЬе ЫсЬ, Вазе1, ЗдмйеНапд
Интрон А	Интерферон	ΙΡΝ-α2Β	ЗсЬепп§-Р1ои§Ь СогрогаНоп, КепНхуоПЬ, N1
Интрон А и Задаксин	Интерферон	ΙΡΝ-α26/α1-τιΐΜθ3ΐΐΗ	Ке§епеКх ВюрЬагта 1пс., ВеЛезНа, МО/ ЗсЮопе РЬагтасеиНса1з 1пс, Зап Ма1ео, СА
Ребетрон	Интерферон	1РН-а2Ь/рибавирин	5сЬегт§-Р1оидЬ СогрогаНоп, КепПлуойЬ, N1
Актиммун	Интерферон	ΙΝΡ-γ	1п1егМипе 1пс., ВпзЬапе, СА
Интерферон-β	Интерферон	Интерферон-β-1 а	Зегопо
Мультиферон	Интерферон	Пролонгированный ΙΡΝ	\Тга8еп/Уа1епП5
Вэллферон	Интерферон	Лимфобластоидный ΙΡΝ-αηΙ	01ахо8тЬЬК1те рЖХ, ихЬпН§е, ЦК
Омниферон	Интерферон	Натуральный ΙΡΝ-α	\Тга§еп 1пс., Р1ап1аНоп, РЬ
Пегасис	Интерферон	ПегилированныЙ ΙΡΝ- а2а	Р Нойтапп-Ьа КосЬе ЬТО, Вазе1, ЗипиеНапН
Пегасис и Цеплен	Интерферон	ПегилированныЙ ΙΡΝ- а2а/Иммуномодулято Ρ	Мах1т РЬагтасеиНса1з 1пс., Зап Οΐβ^ο, СА
Пегасис и Рибавирин	Интерферон	ПегилированныЙ ΙΡΝ- а2а/рибавирин	Р Нойтапп-Ьа КосЬе ЬТО, Вазе1, 8\У11гег1ап0
ПегИнтрон	Интерферон	ПегилированныЙ ΙΡΝ- а2Ь	5сЬепп§-Р1ои§Ь СогрогаНоп, КепПиопЬ, N1
ПегИнтрон/Рибави рин	Интерферон	ПегилированныЙ ΙΡΝ- а2Ь/рибавирин	8сЬепп§-Р1ои§Ь СогрогаНоп, Кет1\уопЬ, N1
ΙΡ-501	Защита печени	Противофиброзный	1пс1еуиз РЬагтасеиНса1з 1пс., ЬехтЩоп. МА

- 15 024201

ΙϋΝ-6556	Зашита печени	Ингибитор каспазы	1бип РЬаппасеиПсаЕ 1пс., Зап ϋίβ^ο, СА
ΙΤΜΝ-191 (К-7227)	Противовирусный	Ингибитор серинпротеазы	1п!егМипе РЬагтасеибсаЬ 1пс, ВпзЬапе, СА
ОЬ-59728	Противовирусный	Ингибитор Ν35Β репликазы	Оепе1аЪз
ΑΝΑ-971	Противовирусный	ТЪК-7 агонист	Апабуз
Боцепревир	Противовирусный	Ингибитор серинпротеазы	5сЬепп§-Р1ои§Ь
ТМ8-435	Противовирусный	Ингибитор серинпротеазы	ТЙ)01ес ВУВА, МесЬе1еп, Ве1§1ит
ΒΙ-201335	Противовирусный	Ингибитор серинпротеазы	ВоеЬппуег 1п§е1Ьепп РЬагта КО, 1п§е1Ье1т, Оегтапу
МК-7009	Противовирусный	Ингибитор серинпротеазы	Мегск
РР-00868554	Противовирусный	Ингибитор репликазы	Рйгег
ΑΝΑ598	Противовирусный	Ненуклеозидный ингибитор Ν35Β полимеразы	Апабуз РЬагтасеийса1з, 1пс, Зап Ке^о, СА, иЗА
ГОХ375	Противовирусный	Ненуклеозидный ингибитор репликазы	1бетх РЬаппасеипсак, СатЬпб§е, МА, ИЗА
В1ЬВ 1941	Противовирусный	Ингибитор Ν35Β полимеразы	ВоеЬпп§ег 1п§е1Ье1т Сапаба 1дб Κ&ϋ, Ьауа1, С^С, Сапаба
Ρ3Ι-7851	Противовирусный	Нуклеозидный ингибитор полимеразы	РЬагтаззег Рппсеюп, Νί, изА
Ρ5Ι-7977	Противовирусный	Нуклеотидный ингибитор Ν35Β полимеразы	РЬагтаззе!, РппсеЮп, М. изА
УСН-759	Противовирусный	Ингибитор Ν35Β полимеразы	УтоСЬет РЬагта
УСН-916	Противовирусный	Ингибитор Ν35Β полимеразы	УтоСЬет РЬагта
08-9190	Противовирусный	Ингибитор Ν35Β полимеразы	СПеаб
Пегинтерферон лямбда	Противовирусный	Интерферон	2утоОепейс$/Вп$(о1- Муегз 8цшЪЬ

Соединения согласно настоящему изобретению могут также применяться в качестве лабораторных реагентов. Соединения могут играть важную роль в обеспечении исследовательских инструментов при выполнении анализов вирусной репликации, подтверждения правильности животных тест-систем и структурных биологических исследований для дальнейшего расширения знаний о механизмах заболевания вирусным гепатитом. Кроме того, соединения согласно настоящему изобретению полезны в установлении или определении сайтов связывания других противовирусных соединений, например, путем конкурентного ингибирования.

Соединения согласно настоящему изобретению могут также применяться для обработки или предупреждения вирусного загрязнения материалов. Вследствие этого они могут снижать риск вирусного инфицирования лабораторных или медицинских работников и пациентов, которые вступают в контакт с такими материалами, например, с кровью, тканями, хирургическими инструментами и одеждой, лабораторными инструментами и одеждой и аппаратами и материалами для сбора или переливания крови.

Настоящее изобретение предназначено охватить соединения согласно настоящему изобретению, когда они получаются посредством синтетических способов или метаболических процессов, включая те, которые происходят в организме человека или животного (ιη νίνο), или в процессах, происходящих т νίίτο.

Сокращения, применяемые в настоящей заявке, включая, в частности, иллюстративные примеры, которые следуют ниже, хорошо известны специалистам в данной области. Некоторые из использованных сокращений представляют собой следующие: са. для около; ΑСN или ΜΕСN для ацетонитрила; ТРА для трифторуксусной кислоты; тт или ттз для минут; ЕЮАс, или ЕЮАс, или ЕА для этилацетата; Г)СМ для дихлорметана; Нех для гексанов; ТНР для тетрагидрофурана; ΏΜ8Ο для диметилсульфоксида; Εί₃Ν или ТЕА для триэтиламина; ТВ8-С1 для трет-бутил диметилсилил хлорида; Εί₂Ο для простого диэтилового эфира; МеОН для метанола; ΕίΟΗ для этанола; τί или КТ для комнатной температуры или времени удерживания (согласно контексту); Κ_ί для времени удерживания; Тз для паратолилсульфонила; Рй для

- 16 024201 фенила; ΗΗΜΌδ для гексаметилдисилазида лития; Ме для метила; ίΡΓ₂ΕΐΝ, ΌΙΕΑ или ΌίΡΕΆ для диизопропилэтиламина; Ь, или Ьг, или Ьг8 для ч; ΟΝ для в течение ночи; ТВ§ для трет-бутилдиметилсилила; ΌΜΡ для Ν,Ν-диметилформамида; ρΤδΟΗ для паратолилсульфоновой кислоты; АсОН для уксусной кислоты; НАТИ для О-(7-азабензотриазол-1-ил)-ЫА№,№-тетраметилуроний гексафторфосфата; ВОС для трет-бутоксикарбонила; ΌΜΕ для 1,2-диметоксиэтана; ΌΜΑΡ для Ν,Ν-диметиламинопиридина; НОВТ для 1-гидроксибензотриазола и ΕΌΟ для 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимида.

Далее настоящее изобретение будет описано в связи с некоторыми вариантами осуществления, которые не предназначены для ограничения объема изобретения. Напротив, настоящее изобретение охватывает все альтернативы, модификации и эквиваленты, которые могут быть включены в объем Формулы изобретения. Таким образом, следующие примеры, которые включают в себя определенные варианты осуществления, будут иллюстрировать какое-нибудь одно осуществление настоящего изобретения. При этом следует понимать, что примеры даны в целях иллюстрации некоторых вариантов осуществления и представлены для обеспечения того, что, как считается, является в наибольшей степени полезным и легким для понимания описания процедур и концептуальных аспектов.

Исходные материалы могут быть получены из коммерческих источников или изготовлены способами, хорошо обоснованными в литературе и известными специалистам в данной области.

Условие 1

Начальная концентрация растворителя В (%) = О Конечная концентрация растворителя В (%) =100 Продолжительность градиентного элюирования = 2 мин Длительность анализа = 3 мин

Скорость потока = 1 мл/мин Длина волны = 220 нм

Растворитель А = 10% АС№90% Н2О/0.1% ТРА Растворитель В = 90% Α€Ν/10% Н₂О/0 1% ТРА

Колонка = РЬепоплепех-Ьипа С18, 30x2, 3 мкм

Условие 2

Начальная концентрация растворителя В (%) = 0 Конечная концентрация растворителя В (%) =100 Продолжительность градиентного элюирования = 2 мин Длительность анализа = 3 мин

Скорость потока = 4 мл/мин Длина волны = 220 нм

Растворитель А = 0.1% ТРА в 10% метанол/90% вода Растворитель В = 0.1% ТРА в 90% метанол/10% вода Колонка = РНепотепех-Ьипа 3.0x50 мм 810

Условие 3

Начальная концентрация растворителя В (%) = 0 Конечная концентрация растворителя В (%) =100 Продолжительность градиентного элюирования = 4 мин Длительность анализа = 5 мин

Скорость потока = 0.8 мл/мин Длина волны = 220 нм

Растворитель А = 10% АС№90% Н₂О/0.1% ТРА Растворитель В = 90% АС№10% Н₂О/0.1% ТРА Колонка = РНепотепех-Ьипа С18, 50x2, 3 мкм

Условие 4

Начальная концентрация растворителя В (%) = 2 Конечная концентрация растворителя В (%) = 98 Продолжительность градиентного элюирования = 1 мин Длительность анализа = 15 мин

Скорость потока = 0.8 мл/мин Длина волны = 220 нм Растворитель А =100% Н₂0/0.05% ТРА Растворитель В = 100% АС№0.05% ТРА Колонка = \¥а(ег5 Асрш(у 8Б8

- 17 024201

Условие 5

Условие 6

Условие 7

Условие 8

Условие 9

Скорость потока = 1 мл/мин Длина волны = 220 нм

Растворитель А = 0.1 % ТРА в 10% метанол/90% вода Растворитель В = 0.1% ТРА в 90% метанол/10% вода Колонка = РЬепотепех-Ьипа 2.0x30 мм 3 мкм

Начальная концентрация растворителя В (%) =10 Конечная концентрация растворителя В (%) =100 Продолжительность градиентного элюирования = 30 мин Длительность анализа = 33 мин

Скорость потока = 1 мл/мин Длина волны = 220 нм

Растворитель А = 10мМ бикарбонат аммония (рН=9.5)/95% вода/5% метанол Растворитель В = ЮмМ бикарбонат аммония (рН=9.5)/5% вода/95% метанол Колонка = Х1н'1С1це РНепуI 3 5 мкм, 3.0x150 мм

Начальная концентрация растворителя В (%) = 10 Конечная концентрация растворителя В (%) =100 Р1родолжигельность градиентного элюирования = 15 мин Длительность анализа =18 мин

Скорость потока = 1 мл/мин Длина волны = 220 нм

Растворитель А = 0.1% ТРА/95% вода/5% ацетонитрил Растворитель В = 0.1% ТРА/5% вода/95% ацетонитрил Колонка = ХЬпс1§е С18 3 5 мкм, 3.0x150 мм

Начальная концентрация растворителя В (%) = 0

Конечная концентрация растворителя В (%) = 100

Продолжительность градиентного элюирования = 4 мин

Длительность анализа = 5 мин

Скорость потока = 0.8 мл/мин

Длина волны = 220 нм

Растворитель А = 10% МеОН/90% Н₂О/0 1% ТРА

Растворитель В = 90% МеОН/10% Н₂О/0.1% ТРА

Колонка = РЬепотепех-Ьипа С18, 50x2, 3 мкм

Температура печи = 40°С

Начальная концентрация растворителя В (%) = 10

Конечная концентрация растворителя В (%) = 50

Продолжительность градиентного элюирования = 20 мин

Длительность анализа = 25 мин

Скорость потока = 1 мл/мин

Длина волны 1 = 220 нм

Длина волны 2 = 254 нм

Растворитель А = 5% АС№95% Н₂О/0.1% ТРА

Растворитель В = 95% АС№5% Н₂О/0 1% ТРА

Колонка = ХУагегй Зипйге С18, 150x4,6, 3.5 мкм (низкий рН).

- 18 024201

Раствор трет-бутилдиазоацетата (1.832 мл, 13.22 ммоль) в 50 мл СН₂С1₂ добавляли к смеси 2,5дигидрофурана (9.76 мл, 132 ммоль), димера ацетата родия(11) (0.058 г, 0.132 ммоль) в 40 мл СН₂С1₂ по каплям посредством шприцевого насоса в течение 5 ч. Полученную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель затем удаляли под вакуумом. Остаток очищали посредством хроматографии (силикагель, 0-15% ЕЮАс/гексаны), чтобы получить Кэп-1 стадия а (трансизомер) (720 мг) и Кэп-1 стадия а (цис-изомер) (360 мг) в виде прозрачного масла. Кэп-1 стадия а (трансизомер): Ή ЯМР (500 МГц, СПСГ) δ ррт 3.88 (2Н, 6, 1=8.55 Гц), 3.70 (2Н, 6, 1=8.55 Гц), 2.03-2.07 (2Н, т), 1.47 (1Н, 1, 1=3.20 Гц), 1.41 (9Н, к); Кэп-1 стадия а (цис-изомер): ^!Н ЯМР (400 МГц, СНСТ) δ ррт 4.06 (2Н, 6, 1=8.53 Гц), 3.73 (2Н, 6, 1=8.03 Гц), 1.81-1.86 (2Н, т), 1.65-1.71 (1Н, т), 1.43-1.47 (9Н, т).

К раствору (Кэп-1 стадия а (транс-изомер)) (700 мг, 3.80 ммоль) в 15 мл диэтилового эфира при -10°С добавляли по каплям ЫА1Н₄ (7.60 мл, 7.0 ммоль) (1М в ТНР) в течение 1 ч. Полученную смесь перемешивали при -10°С в течение 1 ч, затем при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь затем охлаждали до -5°С. 10 мл водного раствора сегнетовой соли (смешанный виннокислый калий-натрий) добавляли по каплям, чтобы остановить реакцию. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 мин, затем экстрагировали ЕЮАс (3х). Объединенные органические слои высушивали над М§§0₄ и концентрировали с получением Кэп-1 стадия Ь (380 мг) в виде светло-желтого масла. Этот продукт использовали на следующей стадии без очищения. 'Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ ррт 3.85 (2Н, 6, 1=8.28 Гц), 3.68 (2Н, 6, 1=8.53 Гц), 3.45-3.55 (2Н, т), 1.50-1.56 (2Н, т), 1.02-1.11 (1Н, т).

К раствору ΌΜ80 (4.82 мл, 67.9 ммоль) в СН₂С1₂ (70 мл) медленно по каплям добавляли оксалилхлорид (3.14 мл, 35.8 ммоль) при температуре -78°С. Полученную смесь перемешивали при -78°С в течение 15 мин. Добавляли раствор Кэп-1 стадия Ь (3.10 г, 27.2 ммоль) в 35 мл СН₂С1₂ и смесь перемешивали при -78°С в течение 1 ч. Затем по каплям добавляли Εΐ₃Ν (18.93 мл, 136 ммоль). Через 30 мин охлаждающую баню удаляли и реакцию останавливали холодным 20% водным раствором К₂НР0₄ (10 мл) и водой. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин, затем разбавляли Е1₂0. Слои разделяли. Водный слой экстрагировали Е1₂0 (2х). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над М§§0₄ и концентрировали. Остаток очищали посредством флэшхроматографии (силикагель, 100% СН₂С1₂), чтобы получить Кэп-1 стадия с (2.71 г) в виде светло-желтого масла. Ή ЯМР (500 МГц, СИСЬ) δ ррт 9.41 (1Н, 6, 1=4.27 Гц), 3.96 (2Н, 6, 1=8.85 Гц), 3.80 (2Н, 6, 1=8.55 Гц), 2.27-2.33 (2Н, т), 1.93 (1Н, т).

К смеси Кэп-1, стадия с (2.7 г, 24.08 ммоль) в 50 мл воды при 0°С добавляли бисульфит натрия

- 19 024201 (2.506 г, 24.08 ммоль) и КСЫ (1.631 г, 25.04 ммоль), а затем раствор (К)-2-амино-2-фенилэтанола (3.30 г, 24.08 ммоль) в 18 мл МеОН. Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и затем нагревали с обратным холодильником в течение ночи. Смесь охлаждали до комнатной температуры. Добавляли 100 мл ЕЮАс. После перемешивания в течение 15 мин слои разделяли. Водный слой экстрагировали ЕЮАс (2х). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над М§§0₄ и концентрировали. Сырую диастереомерную смесь очищали посредством обращеннофазовой ВЭЖХ (колонка: \Уа1ег5 §иийге 30x150 мм, ацетонитрил/вода/ХН₄0Ас), чтобы получить два диастереомера Кэп-1 стадия й. Абсолютную стереохимию каждого изомера не определяли. Диастереомер 1 (более поздняя фракция) (570 мг): ЖХ (Условие 1): КТ = 0.97 мин; ЖХ-МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₅Н₁₉Ы₂0₂ 259.14; найдено 259.2.

Кэп-ί стадия е

К раствору Кэп-1, стадия й (диастереомер 1) (570 мг, 2.207 ммоль) в 20 мл СН₂С1₂ и 20 мл МеОН при 0°С добавляли тетраацетат свинца (1174 мг, 2.65 ммоль). Полученную смесь оранжевого цвета перемешивали при 0°С в течение 10 мин. Затем в эту смесь добавляли воду (20 мл) и смесь фильтровали через диатомитовую землю (Се1йе®). Фильтрат концентрировали и разбавляли 25 мл 6 н. водного раствора НС1. Полученную в результате смесь кипятили с обратным холодильником в течение 4 ч. Смесь отфильтровывали и промывали СН2С12. Водный слой концентрировали с получением Кэп-1 стадия е (соль НС1). Сырой продукт использовали на следующей стадии без дополнительного очищения. 'Н ЯМР (500 МГц, МеОЭ) δ ррт 3.87-3.91 (2Н, т), 3.73 (2Н, йй, 1=8.70, 2.90 Гц), 3.55 (1Н, й, 1=10.07 Гц), 2.02-2.07 (1Н, т), 1.94-1.99 (1Н, т), 1.03-1.10 (1Н, т).

Кэп-]

СООН

К смеси вышеуказанного сырого Кэп-1, стадия е в 1 н. водном растворе (10 мл) ЫаОН добавляли бикарбонат натрия (371 мг, 4.42 ммоль). Затем добавляли по каплям метилхлорформиат (0.342 мл, 4.42 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь нейтрализовали 1 н. водным раствором НС1, затем экстрагировали ЕЮАс (3х). Объединенные органические слои высушивали над М§§0₄ и концентрировали с получением Кэп-1 (100 мг, 21.1% в две стадии) в виде светло-желтого масла. ЖХ (Условие 1): КТ = 0.54 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₉Н₁₄Ы0₅ 216.09; найдено 216.1; ^!Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ ррт 5.29 (1Н, Ьг. 5.), 3.53-4.02 (8Н, т), 1.661.92 (2Н, т), 1.08 (1Н, Ьг. 5.).

Раствор циклопент-3-енола (5 г, 59.4 ммоль) и Εΐ₃Ν (9.94 мл, 71.3 ммоль) в 50 мл СН₂С1₂ перемешивали при комнатной температуре в течение 15 мин. Затем по каплям добавляли бензоилхлорид (8.28 мл, 71.3 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Затем смесь промывали водой. Органический слой высушивали над М§§0₄ и концентрировали. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель, ЕЮАс/гексаны 0-10%), чтобы получить Кэп-2 стадия а (9.25 г) в виде прозрачного масла. ЖХ (Условие 1): КТ = 1.77 мин; ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ ррт 8.01-8.07 (2Н, т), 7.55 (1Н, 1, 1=7.40 Гц), 7.43 (2Н, 1, 1=7.65 Гц), 5.79 (2Н, 5), 5.64 (1Н, «, 1=6.93, 2.60 Гц), 2.87 (2Н, йй, 1=16.56, 6.78 Гц), 2.52-2.63 (2Н, т).

- 20 024201

В круглодонную колбу, снабженную магнитной мешалкой, добавляли чистый фторид натрия (5.02 мг, 0.120 ммоль) и Кэп-2 стадия а (2.25 г, 11.95 ммоль). Колбу нагревали до 100°С и медленно с помощью шприцевого насоса добавляли чистый триметилсилил 2,2-дифтор-2-(фторсульфонил)ацетат (5.89 мл, 29.9 ммоль) в течение 5 ч. Смесь перемешивали при 100°С в течение ночи. Смесь затем разбавляли СН₂С1₂, промывали водой, насыщенным водным раствором ЫаНСО₃ и солевым раствором, высушивали над Мд§О₄ и концентрировали. Сырой продукт очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель, 0-5% ЕЮАс/гексаны), чтобы получить Кэп-2 стадия Ь (изомер 1) (750 мг) и Кэп-2 стадия Ь (изомер 2) (480 мг) в виде прозрачных масел. Относительное стереохимическое распределение устанавливали на основании ΝΟΕ-экспериментов. Кэп-2 стадия Ь (изомер 1): ЖХ (Условие 1): КТ = 1.83 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₃Н₁₃Р₂О₂ 239.09; найдено 239.2; ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ ррт 7.99-8.04 (2Н, т), 7.56 (1Н, ΐ, 1=7.32 Гц), 7.43 (2Н, ΐ, 1=7.63 Гц), 5.25-5.33 (1Н, т), 2.50 (2Н, бб, 1=14.04, 6.71 Гц), 2.14-2.22 (2Н, т), 2.08-2.14 (2Н, т); Кэп-2 стадия Ь (изомер 2): ЖХ (Условие 1): КТ = 1.79 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₃Н1₃Р₂О₂ 239.09; найдено 239.2; ¹Н ЯМР (400 МГц, СПСЬ) δ ррт 7.98-8.08 (2Н, т), 7.53-7.59 (1Н, т), 7.41-7.48 (2Н, т), 5.53-5.62 (1Н, т), 2.59-2.70 (2Н, т), 2.01-2.11 (4Н, т).

К раствору Кэп-2 стадия Ь (изомер 2) (480 мг, 2.015 ммоль) в 4 мл МеОН добавляли КОН (4 мл, 2.015 ммоль) (10% водный раствор). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь затем экстрагировали СН₂С1₂ (3х). Объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄ и концентрировали с получением Кэп-2 стадия с (220 мг) в виде твердого вещества светложелтого цвета. ^!Н ЯМР (500 МГц, СПСР) δ ррт 4.41-4.54 (1Н, т), 2.38-2.50 (2Н, т), 1.89-1.99 (2Н, т), 1.81 (2Н, бб, 1=14.50, 5.04 Гц).

Толилсульфонил-С1 (625 мг, 3.28 ммоль) добавляли к раствору Кэп-2 стадия с (220 мг, 1.640 ммоль) и пиридина (0.531 мл, 6.56 ммоль) в 7 мл СН₂С1₂. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем разбавляли СН2С12, промывали водой и 1 н водным раствором НС1. Органический слой высушивали (Мд§О₄) и концентрировали. Остаток очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель, 0-15% ЕЮАс/гексан), чтобы получить Кэп-2 стадия б (325 мг) в виде прозрачного масла. ЖХ (Условие 1): КТ = 1.72 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для |Μ+Ν;·ι|' С1₃Н1₄Р₂№О₃8 311.05; найдено 311.2; Ή ЯМР (500 МГц, СПСЬ) δ ррт 7.76 (2Н, б, 1=8.24 Гц), 7.34 (2Н, б, 1=8.24 Гц), 4.99-5.08 (1Н, т), 2.45 (3Н, 5), 2.31-2.41 (2Н, т), 1.84-1.94 (4Н, т).

В микроволновую трубку добавляли этиловый эфир ^(дифенилметилен)глицина (241 мг, 0.902 ммоль) и Кэп-2 стадия б (260 мг, 0.902 ммоль) в 2 мл толуола. Трубку плотно закрывали и добавляли по каплям ЬШМО§ (1.082 мл, 1.082 ммоль) (1 н. в ТНР) в атмосфере Ν₂. Полученный темно-коричневый раствор нагревали при температуре 100°С в микроволновой печи в течение 5 ч. Реакцию затем останавливали водой и смесь экстрагировали ЕЮАс (3х). Объединенные органические слои промывали водой, высушивали над Мд§О₄ и концентрировали. Сырой продукт очищали посредством флэш-хроматографии

- 21 024201 (силикагель, 0-5% ЕЮАс/гексаны), чтобы получить рацемическую смесь Кэп-2 стадия е (240 мг) в виде светло-желтого масла. Смесь переносили на следующую стадию без разделения. ЖХ (Условие 2): КТ = 1.91 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Ыа]+ С₂₃Н₂₄Р₂ыО₂ 384.18, найдено 384.35. ¹Н ЯМР (500 МГц, СИСЬ) δ ррт 7.63-7.70 (2Н, т), 7.43-7.51 (3Н, т), 7.38-7.43 (1Н, т), 7.31-7.38 (2Н, т), 7.137.22 (2Н, т), 4.13-4.22 (2Н, т), 3.95 (1Н, б, 1=6.41 Гц), 2.67-2.79 (1Н, т), 2.07-2.16 (1Н, т), 1.97-2.07 (2Н, т), 1.90 (2Н, т), 1.65-1.76 (1Н, т), 1.25 (3Н, 1, 1=7.17 Гц).

Рацемическая смесь

К раствору Кэп-2 стадия е (240 мг, 0.626 ммоль) в 4 мл ТНР добавляли НС1 (1 мл, 2.0 ммоль) (2 н водный). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь затем промывали ЕЮАс, нейтрализовали насыщенным водным раствором ЫаНСО₃, затем экстрагировали ЕЮАс (3х). Объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄ и концентрировали с получением Кэп-2 стадия ί (120 мг) в виде прозрачного масла. ЖХ (Условие 2): КТ = 0.85 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₀Н₁₆Р₂ЫО₂ 220.11; найдено 220.26; ^!Н ЯМР (500 МГц, С1ХТ) δ ррт 4.14-4.25 (2Н, т), 3.26 (1Н, б, 1=6.71 Гц), 2.22-2.35 (1Н, т), 1.90-2.11 (5 Н, т), 1.79-1.90 (1Н, т), 1.22-1.34 (3Н, т).

Кэп-2 стжил у

МеО

ΝΗ О

Г

Р Р

Рацемическая смесь

К раствору Кэп-2 стадия ί (120 мг, 0.547 ммоль) в 2 мл СН₂С1₂ добавляли метилхлорформиат (0.085 мл, 1.095 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь разбавляли СН₂С1₂ и промывали водой. Органический слой высушивали над Ыа₂8О₄ и концентрировали с получением Кэп-2 стадия д (150 мг) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХ (Условие 1): КТ = 1.45 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₂Н₁₈Р₂ЫО₄ 278.12; найдено 278.2; ¹Н ЯМР (500 МГц, СПС1₃) δ ррт 5.23 (1Н, б, 1=8.24 Гц), 4.29 (1Н, 1, 1=7.48 Гц), 4.15-4.23 (2Н, т), 3.68 (3Н, 5), 2.37 (1Н, Ьг. 5.), 2.02-2.10 (1Н, т), 1.85-2.00 (4Н, т), 1.75-1.84 (1Н, т), 1.27 (3Н, 1, 1=7.02 Гц).

К смеси Кэп-2 стадия д (150 мг, 0.541 ммоль) в 2 мл ТНР и 1 мл воды добавляли ЬЮН (0.811 мл, 1.623 ммоль) (2 н водный раствор). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь нейтрализовали 1 н водным раствором НС1 и экстрагировали Е1ОАс (3х). Объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄ и концентрировали с получением Кэп-2 (133 мг) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХ (Условие 2): КТ = 1.07 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₀Н₁₄Р₂ЫО₄ 250.09; найдено 250.13; Ή ЯМР (500 МГц, СОС1_;) δ ррт 5.18-5.36 (1Н, т), 4.28-4.44 (1Н, т), 3.70 (3Н, 5), 2.37-2.56 (1Н, т), 1.74-2.31 (6Н, т).

Кэп-3 синтезировали из Кэп-2 стадия Ь (изомер 1) в соответствии с методикой, описанной для Кэп- 22 024201

2. ЖХ (Условие 2): КТ = 1.08 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₀Н₁₄Р^0₄ 250.09, найдено 249.86. ¹Н ЯМР (500 МГц, СПС1₃) δ ррт 5.15 (1Н, 4, 1=8.24 Гц), 4.32 (1Н, 1, 1=7.48 Гц), 3.69 (3Н, 5), 2.83-2.99 (1Н, т), 1.96-2.26 (4Н, т), 1.70 (1Н, 1, 1=11.75 Гц), 1.59 (1Н, 1, 1=12.05 Гц).

Смесь этил 2-амино-2-((1К,3г,5§)-бицикло[3.1.0]гексан-3-ил)ацетата (приготовлен из коммерчески доступного (1К,3г,5§)-бицикло [3.1.0]гексан-3-ола с использованием таких же процедур, какие описаны для получения Кэп-2; 350 мг, 1.910 ммоль), ΌΙΡΕΑ (0.667 мл, 3.82 ммоль), метилхлорформиата (0.296 мл, 3.82 ммоль) в 5 мл СН₂С1₂ перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Смесь затем разбавляли СН₂С1₂ и промывали водой. Органический слой высушивали над М§§0₄ и концентрировали с получением Кэп-4 стадия а (461 мг) в виде желтого масла. ЖХ (Условие 1): КТ = 1.43 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ 0₂Η₂₀ΝΟ₄ 242.14; найдено 242.2; ¹Н ЯМР (500 МГц, СИС1₃) δ ррт 5.04 (1Н, 4, 1=7.63 Гц), 4.09-4.20 (2Н, т), 4.05 (1Н, 1, 1=8.39 Гц), 3.63 (3Н, 5), 2.55-2.70 (1Н, т), 1.96-2.09 (2Н, т), 1.37-1.60 (4Н, т), 1.24 (3Н, 1, 1=7.17 Гц), 0.66-0.76 (1Н, т), -0.03-0.06 (1Н, т).

К смеси сложного этилового эфира Кэп-4 стадия а (461 мг, 1.911 ммоль) в 5 мл ТНР и 2 мл воды добавляли ЫОН (2.87 мл, 5.73 ммоль) (2 н водный раствор). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь затем нейтрализовали 1 н водным раствором НС1 и экстрагировали Е1ОАс (3х). Объединенные органические слои высушивали над М§§0₄ и концентрировали с получением Кэп-4 (350 мг) в виде прозрачного масла. ЖХ (Условие 1): КТ = 1.04 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для |2Μ+Ν;·ι|' С₂₀Н₃₀^№0₈ 449.19; найдено 449.3; ¹Н ЯМР (500 МГц, СИС1₃) δ ррт 5.07 (1Н, 4, 1=8.85 Гц), 4.13 (1Н, 1, 1=8.24 Гц), 3.68 (3Н, 5), 2.64-2.79 (1Н, т), 2.04-2.21 (2Н, т), 1.23-1.49 (4Н, т), 0.71-0.81 (1Н, т), 0.03-0.12 (1Н, т).

Смесь метил 3,3-диметоксипропаноата (10 г, 68 ммоль) и Ы0Н (8.08 г, 337 ммоль) в МеОН (40 мл), ТНР (40 мл) и воде (40 мл) нагревали при 80°С в течение 2 ч. Смесь затем охлаждали до комнатной температуры и подкисляли 1 н водным раствором НС1 (рН>3). Смесь затем экстрагировали СН₂С1₂ (3х). Объединенные органические слои высушивали над М§§0₄ и концентрировали с получением Кэп 5, стадия а (6.3 г) в виде прозрачного масла. Этот продукт использовали в следующей реакции без дополни- 23 024201 тельного очищения. Ή ЯМР (500 МГц, СИС1₃) δ 4.82 (ΐ, 1=5.8 Гц, 1Н), 3.36 (5, 6Н), 2.69 (ά, 1=5.8 Гц, 2Н); ¹³С ЯМР (125 МГц, СИС1₃) δ 175.22, 101.09, 53.68, 38.76.

Кэп 5, стадия Ь

МеО.

.ОМе

ΥΎΎ

ОМе О О

К раствору Кэп 5, стадия а (4.55 г, 33.9 ммоль) в ТНР (40 мл) добавляли суспензию Ν,Ν'-карбонилдиимидазола (6.60 г, 40.7 ммоль) в ТНР (40 мл) по каплям. Раствор становился желтым и наблюдалось выделение газа. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. В то же самое время в другой колбе перемешивали при комнатной температуре малонат монокалия монометила (7.95 г, 50.9 ммоль) и хлорида магния (3.55 г, 37.3 ммоль) в ТНР (80 мл) в течение 2 ч. Имидазольный раствор затем переносили в раствор Мд(ООССН₂СООМе)₂ с помощью шприца, и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Смесь затем подкисляли с помощью 2М NаН§О₄ (60 мл) и экстрагировали ЕЮАс (3х). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором NаНСО₃, солевым раствором, высушивали над Мд§О₄ и концентрировали с получением Кэп 5, стадия Ь (4.9 г) в виде масла, окрашенного в светло-пурпурный цвет. Полученное масло использовали в следующей стадии без дополнительного очищения. 'Н ЯМР (500 МГц, СИС1₃) δ 4.75 (1, 1=5.5 Гц, 1Н), 3.72 (5, 3Н), 3.50 (5, 2Н), 3.35 (5, 6Н), 2.84 (ά, 1=5.5 Гц, 2Н).

Кэп 5, стадия с

МеО.

ΪΎΎ

ОМе ОН О

ОМе

К раствору Кэп 5, стадия Ь (4.9 г, 26 ммоль) в МеОН (70 мл) медленно добавляли боргидрид натрия (1.07 г, 28.3 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, и реакцию затем останавливали 1 н. НС1 (15 мл). Смесь экстрагировали Е1ОАс (3х). Объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄ и концентрировали с получением Кэп 5, стадия с (4.4 г) в виде светложелтого масла. Этот продукт использовали на следующей стадии без дополнительного очищения. ¹Н ЯМР (400 МГц, СИС13) δ 4.60 (1, 1=5.5 Гц, 1Н), 4.25-4.16 (т, 1Н), 3.70 (5, 3Н), 3.38 (5, 3Н), 3.37 (5, 3Н), 2.52-2.48 (т, 2Н), 1.83-1.77 (т, 2Н); ¹³С ЯМР (100 МГц, СИС13) δ 172.21, 102.73, 64.61, 53.22, 52.95, 51.30,

41.00, 38.65.

Кэп 5, стадия ά

МеО

ΥΥΥ'

ОМе ОТВЭЭ

ОМе

К раствору Кэп 5, стадия с (4.4 г, 22.89 ммоль) в ИМР (50 мл) добавляли имидазол (3.12 г, 45.8 ммоль) и ТВ8-С1 (5.52 г, 36.6 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 дней. Затем реакционную смесь разбавляли СН₂С1₂ и промывали водой. Органическую фазу промывали солевым раствором, высушивали над Мд§О4 и концентрировали. Сырой продукт очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель, 0-15% Е1ОАс/гексаны), чтобы получить Кэп 5, стадия ά (5,0 г) в виде прозрачного масла. ¹Н ЯМР (400 МГц, СИС13) δ 4.55-4.50 (т, 1Н), 4.30-4.21 (т, 1Н), 3.67 (5, 3Н), 3.32 (5, 3Н), 3.31 (5, 3Н), 2.51 (ά, 1=6.3 Гц, 2Н), 1.89-1.77 (т, 2Н), 0.88 (5, 9Н), 0.08 (5, 3Н), 0.06 (5, 3Н); ¹³С ЯМР (100 МГц, СИС13) δ 171.41, 101.24, 65.85, 52.35, 52.09, 51.04, 42.40, 39.92, 25.37, 25.27,

17.55, -3.95, -5.15.

Кэп 5, стадия е

ОМе ОТВЗОН МеО^х^^^х^

К раствору Кэп 5, стадия ά (5.0 г, 16 ммоль) в простом эфире (50 мл) на льдо-водяной бане добавляли раствор тетраизопропилтитаната (0.971 мл, 3.26 ммоль) в простом эфире (10 мл). Затем по каплям с помощью шприцевого насоса добавляли этилмагнийбромид (48.9 мл, 48.9 ммоль) (1М в ТНР) в течение 1 ч. Смесь затем перемешивали на льдо-водяной бане в течение 2 ч. Смесь разбавляли простым эфиром, и реакцию медленно останавливали насыщенным водным раствором N^01. Полученный белый осадок отфильтровывали. Фильтрат экстрагировали Е1₂О (3х). Объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄ и концентрировали. Сырой продукт затем очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель, 0-20% Е1ОАс/гексаны), чтобы получить Кэп 5, стадия е (4.02 г) в виде прозрачного масла. ¹Н ЯМР (500 МГц, СИС13) δ 4.47 (1, 1=5.6 Гц, 1Н), 4.21-4.14 (т, 1Н), 3.71 (5, 1Н), 3.32 (5, 3Н), 3.31 (5, 3Н), 2.05-1.88 (т, 3Н), 1.66-1.58 (т, 1Н), 0.90 (5, 9Н), 0.83-0.76 (т, 1Н), 0.71-0.65 (т, 1Н), 0.47 (т, 1Н), 0.400.34 (т, 1Н), 0.14 (5, 3Н), 0.11 (5, 3Н); ¹³С ЯМР (100 МГц, СИС13) δ 102.09, 69.97, 54.44, 52.97, 52.84, 43.27, 40.00, 25.92, 17.96, 14.04, 12.06, -4.32, -4.61.

- 24 024201

Раствор Кэп 5, стадия е (4.02 г, 13.2 ммоль) и моногидрата п-толуолсульфокислоты (3.01 г, 15.8 ммоль) в МеОН (120 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. К смеси добавляли насыщенный водный раствор №-1НС0₃ (100 мл) и смесь экстрагировали СН₂С1₂ (3х). Объединенные органические слои высушивали над Мд§0₄ и концентрировали. Сырой продукт очищали, пропуская его через слой силикагеля с 70% ЕЮАс/гексаны, чтобы получить Кэп 5, стадия £ (1.7 г; смесь диастереомеров) в виде прозрачного масла. ^!Н ЯМР (500 МГц, С1)С1;) δ 4.79 (ΐ, 1=3.7 Гц, 1Н), 4.59 (66, 1=5.3, 2.9 Гц, 1Н), 4.30-4.22 (т, 1Н), 4.03 (Ьг. к., 1Н), 3.37 (к, 3Н), 3.31 (к, 3Н), 2.09-2.03 (т, 1Н), 2.00 (616, 1=13.1, 4.0, 1.5 Гц, 1Н), 1.86 (66, 1=13.1, 3.7 Гц, 1Н), 1.81-1.61 (т, 7Н), 0.94-0.87 (т, 1Н), 0.83-0.77 (т, 1Н), 0.74-0.69 (т, 1Н), 0.65-0.56 (т, 2Н), 0.48-0.40 (т, 2Н), 0.37-0.30 (т, 1Н); ¹³С ЯМР (100 МГц, С1)С1;) δ 100.86, 100.27, 65.75,

64.35, 56.24, 55.92, 53.80, 52.35, 40.86, 39.92, 39.28, 38.05, 12.10, 12.06, 9.91, 9.37.

К раствору Кэп 5, стадия £ (1.7 г, 11 ммоль) в СН₂С1₂ (20 мл) добавляли бис(триметилсилил)трифторацетамид (2.14 мл, 8.06 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Смесь затем охлаждали до -10°С, добавляли по каплям триэтилсилан (6.87 мл, 43.0 ммоль) и затем сложноэфирный комплекс трифторида бора (3.40 мл, 26.9 ммоль). Смесь затем оставляли медленно нагреваться до 0°С и перемешивали при 0°С в течение 30 мин. Затем реакцию останавливали водой и смесь экстрагировали Е10Ас (3х). Объединенные органические слои высушивали над Мд§0₄ и концентрировали. Сырой продукт очищали, пропуская его через слой силикагеля с 70% Е10Ас/гексаны, чтобы получить Кэп 5, стадия д (1.5 г) в виде прозрачного масла. ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ 6.43 (Ьг. к., 1Н), 3.96 (11, 1=9.5, 4.7 Гц, 1Н), 3.86 (61, 1=11.5, 4.0 Гц, 1Н), 3.51 (16, 1=11.1, 2.7 Гц, 1Н), 1.98-1.84 (т, 2Н), 1.66-1.50 (т, 2Н), 0.86-0.79 (т, 1Н), 0.66-0.59 (т, 1Н), 0.53-0.46 (т, 1Н), 0.34 (т, 1Н); ¹³С ЯМР (100 МГц, СПС'К) δ 67.41, 64.37, 57.99,41.28, 35.22, 11.74, 11.32.

К раствору оксалилхлорида (1.090 мл, 12.45 ммоль) в СН₂С1₂ (30 мл) при -78°С добавляли по каплям раствор ЭМ80 (1.767 мл, 24.90 ммоль) в СН₂С1₂ (20 мл). Смесь перемешивали в течение 20 мин и добавляли по каплям Кэп 5, стадия д (1.33 г, 10.4 ммоль) в СН₂С1₂ (20 мл). Смесь перемешивали при -78°С в течение 20 мин. Затем добавляли Ε1зN (7.52 мл, 54.0 ммоль), и смесь медленно нагревали до комнатной температуры в течение 30 мин. Реакцию затем останавливали водой и смесь экстрагировали СН₂С1₂ (3х). Органические слои объединяли, высушивали над Мд§0₄ и концентрировали, чтобы получить Кэп 5, стадия Ь (1.3 г) в виде прозрачного масла. Сырой продукт использовали на следующей стадии без очищения. Ή ЯМР (500 МГц, СИСЬ) δ 3.95 (1, 1=6.0 Гц, 2Н), 2.55-2.50 (т, 2Н), 2.46 (к, 2Н), 0.84 (т, 2Н), 0.50 (т, 2Н).

К раствору метил 2-(((бензилокси)карбонил)амино)-2-(диметоксифосфорил)ацетата (3.41 г, 10.3 ммоль) в ТНР (20 мл) при -20°С добавляли 1,1,3,3-тетраметилгуанидин (2.85 мл, 22.7 ммоль). Полученную смесь перемешивали при -20°С в течение 1 ч. Затем добавляли Кэп 5, стадия Ь (1.3 г, 10.30 ммоль) в ТНР (10 мл). Полученную смесь коричневого цвета перемешивали при комнатной температуре в течение 6 дней. Реакционную смесь затем концентрировали и сырой продукт очищали посредством флэшхроматографии (силикагель, 0-25% Е10Ас/гексаны), чтобы получить Кэп 5, стадия ί (850 мг) (смесь изомеров) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХ (Условие 2): КТ = 1.88 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₈Н₂^0₅ 332.15; найдено 332.14; Ή ЯМР (500 МГц, С1)С1_;) δ 7.45-7.29 (т, 5Н),

- 25 024201

6.09-5.81 (т, 1Н), 5.18-5.08 (т, 2Н), 3.88-3.49 (т, 5Н), 3.06-2.82 (т, 2Н), 2.52-2.36 (т, 2Н), 0.82-0.64 (т, 2Н), 0.58-0.32 (т, 2Н).

Раствор Кэп 5, стадия ί (смесь изомеров) (730 мг, 2.20 ммоль) в МеОН (5 мл) барботировали Ν₂ в 500 мл колбе для гидрирования под давлением в течение 30 мин. К смеси добавляли (-)-1,2-бис((2§, 58)2,5-диметилфосфолано)этан(циклооктадиен)родий(1) тетрафторборат (24.5 мг, 0.044 ммоль), и колбу затем помещали на шейкер Парра. Смесь гидрировали при давлении 60 фунтов на квадратный дюйм в течение 3 дней. Смесь концентрировали, и сырой продукт разделяли посредством хиральной ВЭЖХ (колонка СЫта1рак ΛΌ, 21x250 мм, 10 мкм, элюирование смесью 85% 0,1% диэтиламин/гептан-15% ЕЮН при 15 мл/мин), чтобы получить Кэп 5.1, стадия _) (220 мг) (первая фракция элюирования) и Кэп 5.2, стадия _) (290 мг) (вторая фракция элюирования) в виде прозрачного масла. Абсолютную стереохимию изомеров не определяли.

Кэп 5.1, стадия ф ЖХ (Условие 2): КТ = 1.89 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для |Μ+Να|' С₁₈Н₂^аО₅ 356.15; найдено 356.16; Ή ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ 7.41-7.28 (т, 5Н), 5.34 (ά, 1=8.9 Гц, 1Н), 5.10 (5, 2Н), 4.37 (άά, 1=9.0, 5.0 Гц, 1Н), 3.89-3.82 (т, 1Н), 3.75 (в, 3Н), 3.48 (ίά, 1=11.1, 3.1 Гц, 1Н), 2.29-2.17 (т, 1Н), 1.96 (ί, 1=12.7 Гц, 1Н), 1.57-1.43 (т, 2Н), 1.07-0.98 (т, 1Н), 0.87-0.78 (т, 1Н), 0.66-0.56 (т, 1Н), 0.56-0.47 (т, 1Н), 0.37-0.27 (т, 1Н);

Кэп 5.2, стадия ф ЖХ (Условие 2): КТ = 1.90 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для |Μ+Ν;·ι|' СЭРЛХаО, 356.15; найдено 356.17; Ή ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ 7.40-7.28 (т, 5Н), 5.33 (ά, 1=8.5 Гц, 1Н), 5.10 (5, 2Н), 4.36 (άά, 1=8.9, 5.8 Гц, 1Н), 3.86 (άά, 1=11.0, 3.1 Гц, 1Н), 3.74 (5, 3Н), 3.53-3.43 (т, 1Н), 2.25-2.14 (т, 1Н), 1.94 (ί, 1=12.5 Гц, 1Н), 1.67-1.44 (т, 2Н), 0.97-0.90 (т, 1Н), 0.86-0.79 (т, 1Н), 0.66-0.57 (т, 1Н), 0.53-0.44 (т, 1Н), 0.33-0.24 (т, 1Н).

Примечание: данные для абсолютного стереохимического распределения см. ниже.

К раствору Кэп 5.1, стадия _) (210 мг, 0.630 ммоль) в МеОН (10 мл) в колбе для гидрирования добавляли диметилдикарбонат (0.135 мл, 1.26 ммоль) и 10% Ρά/С (33.5 мг, 0.031 ммоль). Колбу помещали на шейкер Пара и смесь гидрировали при давлении 50 фунтов на кв. дюйм в течение 4 ч. Смесь затем фильтровали через диатомитовую землю (Сс1Пс®) и фильтрат концентрировали с получением Кэп 5.1, стадия к (165 мг) в виде прозрачного масла. ЖХ (Условие 2): КТ = 1.56 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₂Н₂₀т₅ 258.13; найдено 258.16; ^!Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ 5.39 (ά, 1=8.5 Гц, 1Н), 4.30 (άά, 1=8.9, 5.2 Гц, 1Н), 3.84-3.78 (т, 1Н), 3.70 (в, 3Н), 3.63 (в, 3Н), 3.47-3.39 (т, 1Н), 2.23-2.12 (т, 1Н), 1.91 (ί, 1=12.5 Гц, 1Н), 1.49-1.39 (т, 2Н), 0.97 (άά, 1=13.1, 2.4 Гц, 1Н), 0.81-0.74 (т, 1Н), 0.61-0.52 (т, 1Н), 0.46 (άί, 1=10.1, 6.0 Гц, 1Н), 0.32-0.24 (т, 1Н).

К смеси Кэп 5.1, стадия к (165 мг, 0.641 ммоль) в ТНР (2 мл) и воды (1 мл) добавляли 2 М ЬЮН (1 мл, 2.0 ммоль) (водный). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь затем промывали простым эфиром (1 мл). Водную фазу подкисляли 1 н водным раствором НС1 и экстрагировали простым эфиром (6х). Объединенные органические слои высушивали над М§8О₄ и концентрировали с получением Кэп 5.1 (150 мг) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХ (Условие 2): КТ= 1.10 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СпН^О₅ 244.12; найдено 244.09; ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭСМ) δ 5.27 (ά, 1=8.9 Гц, 1Н), 4.39 (άά, 1=8.5, 4.9 Гц, 1Н), 3.94-3.86 (т, 1Н), 3.70 (в, 3Н), 3.56-3.46 (т, 1Н), 2.36-2.24 (т, 1Н), 2.01 (ί, 1=12.7 Гц, 1Н), 1.63-1.48 (т, 2Н), 1.14-1.05 (т, 1Н), 0.92-0.80 (т, 1Н), 0.69-0.60 (т, 1Н), 0.58-0.49 (т, 1Н), 0.40-0.31 (т, 1Н).

- 26 024201

Примечание: Кэп 5.1 связывали с (8)-1-(нафталин-2-ил)этанамином через соединение с НАТИ, и полученный амид кристаллизовали. С помощью рентгеноструктурного анализа этого аналога устанавливали относительную и абсолютную стереохимию Кэп 5.1, которая была такой, как показано.

Кэп 5.2 изготавливали из Кэп 5.2, стадия _) в соответствии с процедурой, описанной для Кэп 5.1. ЖХ (Условие 2): КТ = 1.12 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СпН^0₅ 244.12; найдено 244.09; ^!Н ЯМР (500 МГц, δ 5.27 (й, 1=8.9 Гц, 1Н), 4.38 (йй, 1=8.2, 4.9 Гц, 1Н), 3.91 (йй, 1=11.1, 3.2

Гц, 1Н), 3.69 (5, 3Н), 3.52 (1, 1=11.0 Гц, 1Н), 2.34-2.23 (т, 1Н), 2.07-1.97 (т, 1Н), 1.72-1.61 (т, 1Н), 1.54 (цй, 1=12.6, 4.7 Гц, 1Н), 1.04-0.96 (т, 1Н), 0.90-0.82 (т, 1Н), 0.68-0.61 (т, 1Н), 0.56-0.49 (т, 1Н), 0.39-0.30 (т, 1Н).

Раствор 1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-она (15 г, 96 ммоль) в Е10Ас (150 мл) добавляли к раствору метил-2-(бензилоксикарбониламино)-2-(диметооксифосфорил)ацетата (21.21 г, 64.0 ммоль) в 1,1,3,3-тетраметилгуанидине (10.45 мл, 83 ммоль) и Е10Ас (150 мл). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 72 ч и затем разбавляли Е10Ас (25 мл). Органический слой промывали 1н НС1 (75 мл), Н₂О (100 мл) и солевым раствором (100 мл), высушивали (М§§0₄), фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством флеш-хроматографической системы В|о1аде (от 5 до 25% Е10Ас/гексаны; 300 г колонка). Объединенные фракции, содержащие продукт, затем концентрировали под вакуумом, и остаток перекристаллизовывали из гексанов/Е10Ас, чтобы получить белые кристаллы, которые соответствовали метил 2-[(бензилокси)карбонил]амино)-2-(1,4-диоксаспиро[4.5]декан-8-илиден)ацетату (6.2 г). ^!Н ЯМР (400 МГц, СПС1₃-й) δ ррт 7.30-7.44 (5Н, т), 6.02 (1Н, Ьг. 5.), 5.15 (2Н, 5), 3.97 (4Н, 5), 3.76 (3Н, Ьг. 5.), 2.84-2.92 (2Н, т), 2.47 (2Н, 1, 1=6.40 Гц), 1.74-1.83 (4Н, т). ЖХ (Условие 0Ь1): К= 2.89 мин. ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+№]+ С19Н₂₃NNаО₆: 745.21; найдено: 745.47.

Сложный эфир Кэп-176, стадия Ь, получали из алкена Кэп-176, стадия а, в соответствии со способом, описанным Вигк, М.1.; Ого55, М.Р. и МагЬпе/ Ι.Ρ. (1. Ат. СЬет. §ос., 1995, 117, 9375-9376 и приведенным там ссылкам): 500-мл колбу высокого давления заполняли алкеном Кэп-176, стадия а (3.5 г, 9.68 ммоль), в дегазированном МеОН (200 мл) под защитой Ν₂. В раствор затем загружали (-)-1,2-бис((2§, 5§)-2,5-диметилфосфолано)этан (циклооктадиен)родий (I) тетрафторборат (0.108 г, 0.194 ммоль), полученную смесь продували Ν₂ (3х) и загружали Н₂ (3х). Раствор энергично встряхивали при давлении Н₂ 70 фунтов/кв. дюйм при комнатной температуре в течение 72 ч. Растворитель удаляли при пониженном давлении и полученный остаток переносили в Е10Ас. Коричневатый раствор затем фильтровали через слой силикагеля и элюировали Е10Ас. Растворитель концентрировали под вакуумом, получая при этом прозрачное масло, соответствующее сложному эфиру Кэп-176, стадия Ь (3.4 г). ¹Н ЯМР (500 МГц, СПС1₃-й) δ ррт 7.28-7.43 (5 Н, т), 5.32 (1Н, й, 1=9.16 Гц), 5.06-5.16 (2Н, т), 4.37 (1Н, йй, 1=9.00, 5.04 Гц), 3.92 (4Н, 1, 1=3.05 Гц), 3.75 (3Н, 5), 1.64-1.92 (4Н, т), 1.37-1.60 (5 Н, т). ЖХ (Условие 0Ь1): К₁ = 1.95 мин. ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₉Н₂^0₆: 364.18; найдено: 364.27.

- 27 024201

Кэп-6, стадия Ь (6.68 г, 18.38 ммоль) растворяли в МеОН (150 мл), добавляли Рб/С (0.39 г, 0.368 ммоль), и суспензию помещали под давление 1 атм. Н2. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч и фильтровали через слой диатомитовой земли (СеШе®), и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Масло янтарного цвета, соответствующее Кэп-6, стадия с (3.8 г, 16.57 ммоль, выход 90%), извлекали и использовали без дальнейшего очищения. ¹Н ЯМР 400 МГц, СЭСЕ-б) δ 3.92 (Ьг. 5., 4Н), 3.71 (5, 3Н), 3.31 (б, 1=4.0 Гц, 1Н), 1.87-1.44 (т, 9Н). ¹³С ЯМР (101 МГц, СПСЬ-б) δ 176.1, 108.7, 64.5 (2С), 59.1, 52.0, 41.1, 34.7, 34.6, 27.2, 25.4.

Метилхлорформиат (2.57 мл, 33.1 ммоль) добавляли к раствору Кэп 6, стадия с (3.8 г, 16.57 ммоль) и ΌΙΕΑ (23.16 мл, 133 ммоль) в СН₂С1₂ (200 мл). Полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч и летучие вещества удаляли при пониженном давлении. Остаток очищали посредством флеш-хроматогрофической системы Вю1аде (30% ЕЮАс/гексаны; 160 г колонка). Получали масло янтарного цвета, соответствующее Кэп-6, стадия б (3 г, 10.44 ммоль, 63.0% выход). ¹Н ЯМР (500 МГц, СПС1₃-с1) δ 5.24 (б, 1=8.5 Гц, 1Н), 4.34 (бб, 1=8.9, 4.9 Гц, 1Н), 3.92 (5, 4Н), 3.74 (5, 3Н), 3.67 (5, 3Н), 1.89-1.73 (т, 3Н), 1.67 (б, 1=12.5 Гц, 1Н), 1.62-1.33 (т, 5Н). ¹³С ЯМР (126 МГц, СОСЪ-сЕ 172.4, 156.7, 108.1, 64.2, 64.2, 57.7, 52.3, 52.2, 39.6, 34.2 (2С), 26.5, 25.0.

Кэп-6, стадия б (1.5 г, 4.0 ммоль) растворяли в ТНР (50 мл), сопровождая последовательным добавлением воды (30 мл), ледяной АсОН (8.02 мл, 140 ммоль) и дихлоруксусной кислоты (1.985 мл, 24.02 ммоль). Смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре, затем реакцию останавливали медленным добавлением твердого карбоната натрия при энергичном перемешивании до тех пор, пока больше не наблюдалось выделение газа. Сырой продукт экстрагировали 10%-ной смесью этилацетатдихлорметан, и органические слои объединяли, высушивали (Мд§О₄), фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством флеш-хроматографической системы ВЮаде (от 0 до 30% ЕЮАс/гексаны. 40 г колонка) и получали прозрачное масло, соответствующее Кэп-6, стадия е (0.72 г, 2.96 ммоль, 73.9% выход). ^!Н ЯМР (500 МГц, СПСЬ-б) δ 5.36 (б, 1=8.2 Гц, 1Н), 4.46 (бб, 1=8.4, 5.0 Гц, 1Н), 3.77 (5, 3Н), 3.68 (5, 3Н), 2.46-2.39 (т, 2Н), 2.38-2.29 (т, 2Н), 2.09-2.03 (т, 1Н), 1.96-1.88 (т, 1Н), 1.64-1.51 (т, 2Н). ¹³С ЯМР (126 МГц, СОСЪ-сЕ δ 210.1, 171.9, 156.7, 57.2, 52.5 (2С), 40.2, 40.2, 39.4, 28.7, 27.6.

Раствор Кэп-6, стадия е (0.68 г, 2.80 ммоль) в ТНР (7.5 мл) и МеОН (7.50 мл) охлаждали до 0°С. Добавляли по каплям 2 н водный раствор №ЮН (1.9 мл, 3.80 ммоль), и полученный раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляли смесь 1:1 гексаны:ЕьО (20 мл), и органический слой удаляли. Затем водный слой подкисляли до рН~1, используя 10% водный раствор КН8О₄, и смесь экстрагировали ЕЮАс (2х). Объединенные органические слои высушивали (Мд§О₄), фильтровали и концентрировали. Белую пену, соответствующую Кэп-6 (0,55 г), извлекали и использовали без дополнительного очищения. ^!Н ЯМР (500МГц, ПМ8О-б6) δ 12.70 (Ьг. 5., 1Н), 7.49 (б, 1=8.5 Гц, 1Н), 4.01 (бб, 1=8.2, 6.7 Гц, 1Н), 3.54 (5, 3Н), 2.45-2.30 (т, 2Н), 2.23-2.13 (т, 3Н), 1.94-1.79 (т, 3Н), 1.57 (дб, 1=12.7, 4.1 Гц, 1Н), 1.47 (дб, 1=12.7, 4.4 Гц, 1Н). ¹³С ЯМР (126МГц, ПМ8О-б6) δ 210.2, 173.0, 156.8, 57.6, 51.5, 39.7 (2С), 36.9, 28.6, 27.5.

- 28 024201

К смеси (§)-2-амино-2-(3-(трифторметил)бицикло[1.1.1]пентан-1-ил)уксусной кислоты (полученной из коммерческого источника; 0.5151 г, 2.463 ммоль) и карбоната натрия (0.131 г, 1.231 ммоль) в водном растворе гидроксида натрия 1М (2.4 мл, 2.400 ммоль) при 0°С добавляли метилкарбонохлоридат (0.2 мл, 2.59 ммоль) по каплям. Реакционную смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Затем ее охлаждали на льдо-водяной бане, добавляли диэтиловый эфир (25 мл) и перемешивали. Слои затем разделяли. Водный слой промывали диэтиловым эфиром (2х25 мл). Водный слой охлаждали на льдо-водяной бане и подкисляли 12 н водным раствором НС1 до рН в интервале 1-2. Смесь экстрагировали СН₂С1₂ (3х50 мл), высушивали над Мд§О₄ и концентрировали под вакуумом с получением Кэп-7 (480.7 мг) в виде не совсем белого твердого вещества, которое использовали без дополнительного очищения. ^!Н ЯМР (400 МГц, 1)\18О-б.) δ 12.86 (Ьг 5, 1Н), 7.61 (Ьг б, 1=8.0 Гц, 1Н), 4.16 (б, 1=8.0 Гц, 1Н), 3.57 (5, 3Н), 2.00 (б, 1 = 8.3 Гц, 3Н), 1.93 (б, 1 = 9.3, 3Н).

Смесь 4-левулиновой кислоты (6 г, 46.1 ммоль), дифенилдиселенида (14.39 г, 46.1 ммоль) и персульфата аммония (15.92 мл, 138 ммоль) в МеОН (200 мл) перемешивали при температуре дефлегмации в течение 3 ч. Смесь затем выливали в воду и экстрагировали СН2С12 (3х75 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над Мд§О₄ и концентрировали. Сырой продукт очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель, 0-15% Е1ОАс/гексаны), чтобы получить Кэп 8, стадия а (7.1 г) в виде желтого масла. ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭСЕ) δ 4.53 (5, 1Н), 3.67 (5, 3Н), 3.42 (5, 6Н), 2.89 (1, 1=6.6 Гц, 2Н), 2.60 (1, 1=6.6 Гц, 2Н).

К раствору Кэп 8, стадия а (7.1 г, 37.3 ммоль) в МеОН (100 мл) медленно добавляли боргидрид натрия (1.554 г, 41.1 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. К смеси добавляли 1 н водный раствор НС1 до кислой реакции и затем экстрагировали СН2С12 (3х50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором, высушивали над Мд§О₄и концентрировали с получением Кэп 8, стадия Ь (7.1 г) в виде оранжевого масла, которое было загрязнено в соотношении 1:1.7 соответствующим циклизованным побочным продуктом 5-(диметоксиметил)дигидрофуран-2(3Н)-он. Смесь использовали без дополнительного очищения.

К раствору Кэп 8, стадия Ь (7.1 г, 36.9 ммоль) в ЭМР (50 мл) добавляли имидазол (5.03 г, 73.9 ммоль) и ТВ8-С1 (8.91 г, 59.1 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Затем реакционную смесь разбавляли СН2С12, промывали водой и солевым раствором, высушивали над Мд§О₄ и концентрировали. Сырой продукт очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель, 0-5%, затем 10% Е1ОАс/гексаны), чтобы получить Кэп 8, стадия с в виде прозрачного масла. ¹Н ЯМР (500 МГц, СПС1₃) δ 4.07 (б, 1=5.5 Гц, 1Н), 3.72-3.67 (т, 1Н), 3.66 (5, 3Н), 3.40 (5, 3Н), 3.39 (5, 3Н), 2.48-2.35 (т, 2Н), 1.92 (бббб, 1=13.8, 9.3, 6.9, 4.1 Гц, 1Н), 1.82-1.71 (т, 1Н), 0.88 (5, 9Н), 0.07 (5, 3Н), 0.05

- 29 024201 (5, 3Н).

К раствору Кэп 8, стадия с (4.4 г, 14.36 ммоль) в Е!₂О (50 мл) на водяной бане добавляли тетраизопропилтитаната (0.855 мл, 2.87 ммоль) в простом эфире (10 мл), и раствор становился желтым. Затем добавляли по каплям этилмагнийбромид (14.36 мл, 43.1 ммоль, 1М в ТГФ) с помощью шприцевого насоса в течение 1 ч. Раствор становился темно-коричневым с некоторым осадком. Смесь затем перемешивали на водяной бане в течение 2 ч. Смесь разбавляли простым эфиром, и реакцию останавливали медленным добавлением насыщенного водного раствора ΝΉ₄Ο. Смесь фильтровали, чтобы удалить образовавшийся осадок белого цвета. Два слоя разделяли и водный слой экстрагировали Е!₂О (3x50 мл). Объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄ и концентрировали. Сырой продукт затем очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель, 0-20% Е!ОΑс/гексаны), чтобы получить Кэп 8, стадия б (2.9 г) в виде прозрачного масла. ^!Н ЯМР (500 МГц, С1)С1_;) δ 4.26 (б, 6=6.1 Гц, 1Н), 3.81-3.72 (т, 1Н), 3.46 (5, 3Н), 3.43 (5, 3Н), 1.90-1.75 (т, 3Н), 1.52-1.43 (т, 1Н), 0.90 (5, 9Н), 0.82-0.74 (т, 1Н), 0.73-0.67 (т, 1Н), 0.47-0.40 (т, 2Н), 0.11-0.10 (т, 6Н).

Раствор Кэп 8, стадия б (2.9 г, 9.52 ммоль) и п-Т5ОН-Н₂О (2.174 г, 11.43 ммоль) в метаноле (40 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. В смесь добавляли 200 мл насыщенного раствора NаНСО₃, и смесь экстрагировали СН₂С1₂ (3x50 мл). Объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄ и концентрировали. Сырой продукт фильтровали через слой силикагеля (элюировали 70% Е!ОΑс/гексаны), чтобы получить Кэп 8, стадия е (1 г) в виде прозрачного масла, которое состояло из смеси диастереомеров, которые не разделяли. 'Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ 4.16 (б, 1=7.3 Гц, 1Н), 3.553.46 (т, 1Н), 3.44-3.38 (т, 2Н), 2.50-2.22 (т, 1Н), 2.13-2.00 (т, 1Н), 1.71-1.59 (т, 1Н), 1.22-1.14 (т, 1Н), 0.99-0.77 (т, 1Н), 0.70-0.59 (т, 1Н), 0.57-0.46 (т, 1Н), 0.45-0.30 (т, 1Н).

Кэп 8, стадия /

К раствору Кэп 8, стадия е (1 г, 6.32 ммоль) в СН₂С1₂ (15 мл) добавляли бис(триметилсилил)трифторацетамид (1.26 мл, 4.74 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч, и в течение этого времени она становилась оранжевой. Смесь затем охлаждали до -10°С и добавляли по каплям триэтилсилан (4.04 мл, 25.3 ммоль) и затем комплекс бор трехфтористый-простой эфир (2.00 мл, 15.80 ммоль). Смесь приобретала светло-пурпурный цвет сразу же после добавления комплекса трифторида бора с простым эфиром. Смесь затем оставляли медленно нагреваться до 0°С и перемешивали при 0°С в течение 30 мин. Затем реакцию останавливали водой, и смесь экстрагировали ЕЮЛс (3x20 мл). Объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄ и концентрировали. Сырой продукт фильтровали через слой силикагеля (элюируя 70% Е!ОΑс/гексаны) и фильтрат концентрировали с получением Кэп 8, стадия ί (0.8 г) в виде прозрачного масла. ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 4.19 (б, 1=6.8 Гц, 1Н), 3.77 (бб, 1=11.3, 2.5 Гц, 1Н), 3.55 (б, 1=6.0 Гц, 1Н), 2.14-2.06 (т, 2Н), 1.75-1.62 (т, 1Н), 1.44 (бб, 1=12.4, 7.2 Гц, 1Н), 0.97-0.88 (т, 2Н), 0.65 (бббб, 1=10.8, 6.2, 4.8, 1.5 Гц, 1Н), 0.59-0.51 (т, 1Н), 0.48-0.40 (т, 2Н).

Кэп 8, стадия £

К раствору оксалилхлорида (0.664 мл, 7.58 ммоль) в СН₂С1₂ (10 мл) при -78°С добавляли по каплям ЭМ5О (1.076 мл, 15.17 ммоль) в СН₂С1₂ (7 мл). Смесь перемешивали в течение 20 мин и добавляли по каплям Кэп 8, стадия ί (810 мг, 6.32 ммоль) в СН₂С1₂ (7 мл). Смесь перемешивали при -78°С в течение 20 мин. Затем добавляли Ε!₃Ν (4.58 мл, 32.9 ммоль) и смесь медленно нагревали до комнатной температуры в течение 30 мин. Реакцию затем останавливали водой, и смесь экстрагировали СН₂С1₂ (3x10 мл). Органические слои объединяли и высушивали над Мд§О₄ и концентрировали с получением Кэп 8, стадия д (0.8 г) в виде прозрачного масла. Этот продукт использовали без дополнительного очищения. ¹Н ЯМР

- 30 024201 (500 МГц, СОС1_;) δ 4.56 (5, 1Н), 4.00 (5, 1Н), 2.53-2.46 (т, 1Н), 2.40-2.32 (т, 1Н), 2.08 (1, 1=6.9 Гц, 1Н), 1.82 (41, 1=13.5, 5.8 Гц, 1Н), 1.09-0.99 (т, 1Н), 0.89-0.82 (т, 1Н), 0.70 (444, 1=10.2, 6.9, 5.8 Гц, 1Н), 0.54 (444, 1=10.2, 6.7, 5.6 Гц, 1Н).

К раствору метил 2-(((бензилокси)карбонил)амино)-2-(диметоксифосфорил)ацетата (3.19 г, 9.63 ммоль) в ТНР (10 мл) при -20°С добавляли 1,1,3,3-тетраметилгуанидин (2.42 мл, 19.26 ммоль). Полученную смесь перемешивали при -20°С в течение 1 ч, при этом смесь становилась молочно-белого цвета. Добавляли раствор Кэп 8, стадия д (810 мг, 6.42 ммоль) в ТНР (5 мл) и полученную коричневую смесь затем перемешивали при комнатной температуре в течение двух дней. Затем реакционную смесь концентрировали и сырой продукт очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель, 0-5% Е10Ас/СН₂С1₂), чтобы получить Кэп 8, стадия И (смесь цис-транс изомеров) (400 мг) в виде прозрачного масла. ЖХ (Условие 3): КТ = 1.74 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+№]+ С₁₈Н₂₁И№0₅354.13; найдено 354.04. ¹Н ЯМР (500 МГц, СИСЬ) δ 7.42-7.31 (т, 10Н), 5.19-5.10 (т, 4Н), 4.66 (Ьг. 5., 1Н), 4.23 (5, 1Н), 3.84-3.70 (т, 5Н), 3.39 (5, 3Н), 2.68-2.53 (т, 2Н), 1.81-1.74 (т, 2Н), 1.30-1.21 (т, 2Н), 0.960.80 (т, 4Н), 0.76 (41, 1=11.1, 5.7 Гц, 1Н), 0.56-0.39 (т, 4Н).

Через раствор Кэп 8, стадия И (смесь изомеров) (400 мг, 1.207 ммоль) в МеОН (10 мл) в 500 мл трубке для гидрирования под давлением пропускали Ν₂ в течение 30 мин. К смеси добавляли (-)-1,2бис((2§,5§)-2,5-диметилфосфолано)этан(циклооктадиен)родий(1) тетрафторборат (13.43 мг, 0.024 ммоль). Смесь затем помещали на шейкер Парра и гидрировали при давлении 60 фунтов на кв. дюйм в течение 3 дней. Затем смесь концентрировали. Сырой продукт затем разделяли посредством хиральной ВЭЖХ (колонка СЫга1рак 01, 21x250 мм, 10 мкм), элюируя смесью 90% 0,1% диэтиламин/гептан-10% Е10Н при 15 мл/мин, чтобы получить Кэп 8, стадия ί.1 (55 мг; первая фракция элюирования) и Кэп 8, стадия 1.2 (65 мг; вторая фракция элюирования) в виде прозрачного масла. Абсолютную стереохимию изомеров не определяли.

Кэп 8, стадия ί.1: ЖХ (Условие 3): КТ = 1.93 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+№]+ С-₈Н_;ЛЛа0, 356.15; найдено 356.04; ¹Н ЯМР (500 МГц, СОС1_;) δ 7.45-7.30 (т, 5Н), 5.38-5.30 (т, 1Н), 5.18-5.06 (т, 2Н), 4.41 (44, 1=8.9, 5.8 Гц, 1Н), 3.83 (4, 1=11.0 Гц, 1Н), 3.77 (5, 3Н), 3.35 (1, 1=10.8 Гц, 1Н), 2.21-2.09 (т, 1Н), 2.07-1.98 (т, 1Н), 1.70 (4, 1=11.0 Гц, 2Н), 1.54 (ц4, 1=12.1, 4.1 Гц, 1Н), 1.19 (41, 1=13.6, 3.4 Гц, 1Н), 0.83 (41, 1=11.1, 5.7 Гц, 1Н), 0.63 (41, 1=10.5, 5.1 Гц, 1Н), 0.49 (41, 1=10.1, 6.0 Гц, 1Н), 0.36-0.29 (т, 1Н).

Кэп 8, стадия ί.2: ЖХ (Условие 5): КТ = 1.55 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+№]+ С-₈Н_;ЛЛа0, 356.15; найдено 356.06; ¹Н ЯМР (500 МГц, СИСЬ) δ 7.40-7.32 (т, 5Н), 5.31 (4, 1=8.5 Гц, 1Н), 5.12 (5, 2Н), 4.39-4.33 (т, 1Н), 3.77 (5, 3Н), 3.74 (4, 1=2.1 Гц, 1Н), 3.39 (1, 1=10.5 Гц, 1Н), 2.07 (4, 1=4.0 Гц, 1Н), 2.04-1.95 (т, 1Н), 1.82 (4, 1=10.7 Гц, 1Н), 1.34-1.21 (т, 2Н), 0.82 (41, 1=11.0, 5.8 Гц, 1Н), 0.68-0.61 (т, 1Н), 0.49 (41, 1=9.9, 5.9 Гц, 1Н), 0.34 (444, 1=10.1, 6.4, 4.9 Гц, 1Н).

К раствору Кэп 8, стадия ί.1 (55 мг, 0.165 ммоль) в 10 мл МеОН в колбе для гидрирования добавляли диметилдикарбонат (0.035 мл, 0.33 ммоль) и Р4/С (8.78 мг, 08.25 мкмоль). Колбу помещали на шейкер Пара, и смесь гидрировали при давлении 50 фунтов на кв. дюйм в течение 4 ч. Смесь затем фильтровали через диатомитовую землю (СеШе®) и фильтрат концентрировали с получением Кэп 8, стадия р1 (50 мг) в виде прозрачного масла. ЖХ (Условие 1): КТ = 1.09 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₁₂Н₂₀ДО₅ 258.13; найдено 258.05; ¹Н ЯМР (500 МГц, СОС1_;) δ 4.39 (44, 1=8.7, 6.0 Гц, 1Н), 3.85- 31 024201

3.80 (т, 1Н), 3.79-3.76 (т, 3Н), 3.71 (δ, 3Н), 3.36 (ί, 1=10.8 Гц, 1Н), 2.14 (б, 1=4.9 Гц, 1Н), 2.03 (ί, 6=13.0 Гц, 1Н), 1.71 (ббб, 1=12.7, 3.7, 2.0 Гц, 1Н), 1.55 (ί', 1=12.1, 4.1 Гц, 1Н), 1.20 (б, 1=13.4 Гц, 1Н), 0.83 ('ί, 1=11.0, 5.8 Гц, 1Н), 0.67-0.60 (т, 1Н), 0.49 ('ί, 1=9.9, 6.0 Гц, 1Н), 0.37-0.29 (т, 1Н). Бензилкарбамат Кэп 8, стадия 1.2 получали таким же образом, как и метилкарбамат, Кэп 8, стадия ).2.

Кэп 8.1 и Кэп 8.2

К смеси Кэп 8, стадия р1 (50 мг, 0.194 ммоль) в ТНР и воды (0.5 мл) добавляли ЬЮН (0.292 мл, 0.583 ммоль) (2М водный). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь экстрагировали Εί₂Ο (5 мл). Водную фазу подкисляли 1 н. водным раствором НС1 и экстрагировали Εί₂Ο (6х). Объединенные органические слои высушивали над Μ§δΟ₄ и концентрировали с получением Кэп 8.1 (35 мг) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХ (Условие 1): КТ = 0.95 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С11Η₁₈NΟ5 244.12; найдено 244.02; ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃,) δ 5.24 (б, 1=7.5 Гц, 1Н), 4.43 (Ьг. 5., 1Н), 3.89 (б, 1=12.0 Гц, 1Н), 3.73 (5, 3Н), 3.41 (ί, 1=10.8 Гц, 1Н), 2.22 (б, 1=4.3 Гц, 1Н), 2.11-2.00 (т, 1Н), 1.78 ('ί, 1=12.6, 1.9 Гц, 1Н), 1.65-1.54 (т, 1Н), 1.30-1.18 (т, 2Н), 0.85 ('ί, 1=11.1, 5.9 Гц, 1Н), 0.70-0.61 (т, 1Н), 0.50 ('ί, 1=10.0, 5.9 Гц, 1Н), 0.40-0.31 (т, 1Н).

Кэп 8.2 синтезировали из Кэп 8, стадия ).2 в соответствии с процедурой, описанной для Кэп-8.1. ЖХ (Условие 1): КТ = 0.96 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С11Η1₈NΟ5 244.12; найдено 244.02; ^!Н ЯМР (500 МГц, СПСК) δ 5.44 (б, 1=8.5 Гц, 1Н), 4.35 (ί, 1=7.6 Гц, 1Н), 3.81 (б, 1=8.9 Гц, 1Н), 3.71 (5, 3Н), 3.49-3.41 (т, 1Н), 2.14 (Ьг. 5., 1Н), 2.04-1.86 (т, 2Н), 1.69-1.55 (т, 1Н), 1.34-1.25 (т, 2Н), 0.83 ('ί, 1=11.0, 5.8 Гц, 1Н), 0.67 ('ί, 1=10.5, 5.1 Гц, 1Н), 0.54-0.45 (т, 1Н), 0.40-0.34 (т, 1Н).

Метансульфокислоту (3.89 мл, 59.9 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору бут-3-ен-1-ола (2.06 г, 28.5 ммоль) и циклобутанону (2.00 г, 28.5 ммоль) в Όί'.'Μ (20 мл) и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакцию медленно останавливали насыщенным водным раствором NаΗСΟ₃ (до щелочной реакции), слои разделяли, и водный слой экстрагировали Όί'Μ (20 мл). Объединенные органические слои высушивали (Μ§δΟ₄), фильтровали и концентрировали, получая при этом сырое желтое масло. Сырое масло очищали посредством хроматографической системы Вю1аде Ноп/оп (90 г δίΟ₂, 040% ΕίΟΑс/гексаны), чтобы получить Кэп 9, стадия а (5.3 г) в виде оранжевого масла. ¹Н ЯМР (400 МГц, СОСИ δ 4.93-4.81 (т, 1Н), 3.84 ('ί, 1=12.1, 4.1 Гц, 1Н), 3.50 (ббб, 1=12.1, 10.9, 2.6 Гц, 1Н), 3.05 (5, 3Н), 2.28 (ббб, 1=12.7, 4.4, 1.8 Гц, 1Н), 2.22-2.12 (т, 1Н), 2.09-1.96 (т, 4Н), 1.90-1.64 (т, 4Н).

В 35-мл сосуде высокого давления растворяли бензил 2-((дифенилметилен)амино)ацетат (972 мг, 2.95 ммоль) и Кэп 9, стадия а (500 мг, 2.270 ммоль) в толуоле (10 мл) и ТНР (2 мл), и прозрачный бесцветный раствор перемешивали в атмосфере азота в течение 5 мин. Затем добавляли 1М ^^ΗΜ^§/ΤΗР (2.95 мл, 2.95 ммоль), и сосуд плотно закрывали и затем нагревали при 100°С в течение 9 ч. Реакционную смесь оставляли охлаждаться и затем выливали в 1/2 насыщенный водный раствор ИН₄С1 (~40 мл) и экстрагировали ΕίΟΑс (~40 мл). Органическую фазу промывали солевым раствором (~40 мл), высушивали (Μ§δΟ₄), фильтровали и концентрировали. Сырое оранжевое масло очищали посредством хроматографической системы Вю!аде Ноп/оп (0-30% ΕίΟΑс/гексан, 40 г δίΟ₂), чтобы получить Кэп 9, стадия Ь (смесь из четырех стереоизомеров) (350 мг) в виде оранжево-желтого масла. ЖХ-МС время удерживания 1.920 мин; т/ζ 454.32 (МН+). ЖХ данные записывали с помощью жидкостного хроматографа δΐιίιηα'ζιι ЬС-10А§, оборудованного колонкой РЬепотепех-Ьипа 3 мкм С18 2.0x50 мм, с использованием детектора §ΡΌ-10Αν υν-νί5 при длине волны детектирования 220 нм. Условия элюирования представляли собой: скорость потока 0.8 мл/мин, градиент от 100% растворителя А/0% растворителя В до 0% растворителя А/100% растворителя В, продолжительность градиентного элюирования 2 мин, время удерживания 1 мин и длительность анализа 3 мин, при этом растворитель А представлял собой 10% ацетонитрил/90%

- 32 024201

Н₂О/0,1% трифторуксусная кислота, и растворитель В представлял собой 10% Н₂О/90% ацетонитрил/0,1% трифторуксусная кислота. МС данные определяли с использованием детектора М1стота55 Р1а1Гогт для ЖХ в режиме электрораспыления.

Кэп 9, Стадия с

Кэп 9, стадия Ь (345 мг, 0.761 ммоль) в ТНР (8 мл) обрабатывали 1.5 М НС1 (3.04 мл, 4.56 ммоль) (водный раствор) и перемешивали в течение 1.5 ч. Реакционную смесь затем концентрировали при высоком вакууме. Остаток растворяли в ОСМ (4 мл), обрабатывали ΌΙΡΕΆ (0.531 мл, 3.04 ммоль) и метилхлорформиатом (0.088 мл, 1.14 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавляли водой (~10 мл) и ОСМ (10 мл), разделяли, и водный слой экстрагировали ОСМ (10 мл). Объединенный органический слой высушивали (Мд§О₄), фильтровали и концентрировали. Остаток очищали посредством препаративной ВЭЖХ (вода/ΑСN с ТРА буфером), чтобы получить Кэп 9, стадия с (смесь из четырех стереоизомеров; 108 мг) в виде оранжевого стекла. ЖХ-МС время удерживания 2.833 мин; т/ζ 348.3 (МН+). ЖХ данные записывали с помощью жидкостного хроматографа 8Ытаάζιι ЬС-10А§, оборудованного колонкой РЕепотепех Ьииа 3 мкм С18 2.0x50 мм, с использованием детектора §ΡΌ-10Αν υν-νίδ при длине волны детектирования 220 нм. Условия элюирования представляли собой: скорость потока 0.8 мл/мин, градиент от 100% растворителя А/0% растворителя В до 0% растворителя А/100% растворителя В, продолжительность градиентного элюирования 4 мин, время удерживания 1 мин, и длительность анализа 5 мин, при этом растворитель А представлял собой 10% ацетонитрил/90% Н2О/0,1% трифторуксусная кислота, и растворитель В представлял собой 10% Н2О/90% ацетонитрил/0,1% трифторуксусная кислота. МС данные определяли с использованием детектора М1сгота55 Р1аГогт для ЖХ в режиме электрораспыления.

Смесь стереоизомеров разделяли посредством хиральной препаративной сверхкритической флюидной хроматографии (§РС):

Препаративная колонка СЫга1рак АЭ-Н 30 х 250 мм, 5 мкм

Подвижная фаза: 15% 2:1 гептан:ЕЮН в СО₂ @ 150 бар

Температура: 35°С

Скорость потока: 70.0 мл/мин в течение 14 мин

Контролируемое УФ-излучение @ 220 нм

Введение: 0.35 мл с ~27 мг/мл в ЕЮН (~108 мг всего посредством последовательного введения одного за другим), чтобы получить:

Кэп 9, стадия с.1: Первый пик элюирования: 22.3 мг; ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 7.47-7.32 (т, 5Н), 5.37-5.21 (т, 2Н), 5.10 (б, 6=12.0 Гц, 1Н), 4.42 (бб, 1=9.0, 4.8 Гц, 1Н), 3.79-3.65 (т, 4Н), 3.38 (1б, 1=11.5, 3.3 Гц, 1Н), 2.15-2.01 (т, 2Н), 1.98-1.65 (т, 4Н), 1.56-1.14 (т, 5Н).

Кэп 9, стадия с.2: Второй пик элюирования: 20.6 мг; ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 7.45-7.32 (т, 5Н),

5.26 (б, 1=9.0 Гц, 1Н), 5.20 (5, 2Н), 4.37 (бб, 1=9.0, 5.0 Гц, 1Н), 3.77-3.67 (т, 4Н), 3.41-3.29 (т, 1Н), 2.161.99 (т, 2Н), 1.96-1.68 (т, 4Н), 1.58-1.19 (т, 5Н).

Кэп 9, стадия с.3: Третий пик элюирования: 25.0 мг; ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 7.44-7.31 (т, 5Н),

5.27 (б, 1=8.8 Гц, 1Н), 5.20 (5, 2Н), 4.37 (бб, 1=9.0, 5.0 Гц, 1Н), 3.77-3.66 (т, 4Н), 3.40-3.28 (т, 1Н), 2.142.00 (т, 2Н), 1.97-1.69 (т, 4Н), 1.62-1.23 (т, 5Н).

Кэп 9, стадия с. 4: Четвертый пик элюирования: 22.4 мг; 'Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 7.45-7.32 (т,5Н), 5.37-5.21 (т, 2Н), 5.10 (б, 1=12.0 Гц, 1Н), 4.42 (бб, 1=9.0, 4.8 Гц, 1Н), 3.78-3.66 (т, 4Н), 3.38 (1б, 1=11.5, 3.3 Гц, 1Н), 2.06 (ц, 1=10.1 Гц, 2Н), 1.96-1.67 (т, 4Н), 1.56-1.14 (т,5Н).

Из данных ¹Н ЯМР анализов следовало, что Кэп 9, стадия с.1 и Кэп 9, стадия с.4 представляли собой энантиомеры, как и Кэп 9, стадия с.2 и Кэп 9, стадия с.3. Каждый отдельный стереоизомер обрабатывали независимо от других.

От Кэп 9.1 до Кэп 9.4

Кэп 9, стадия с.1 (22.3 мг, 0.064 ммоль) растворяли в МеОН (3 мл) и добавляли к 10% Рб/С (5.46 мг, 5.14 мкмоль). Реакционную смесь под вакуумом продували азотом (4х) и затем водородом (4х) и оставляли перемешиваться в атмосфере баллонного водорода в течение ночи. В реакционную смесь вносили диатомитовую землю (Се1Ее®) и затем фильтровали через диатомитовую землю (Се1Ее®) и концентрировали, чтобы получить Кэп 9.1 (16.8 мг) в виде бесцветного стекла. ЖХ-МС время удерживания 1.008 мин; т/ζ 258.2 (МН+). ЖХ данные записывали с помощью жидкостного хроматографа §Е^табζи ЬС10А8, оборудованного колонкой РЕепотепех Ьииа 3 мкм С18 2.0x50 мм, с использованием детектора §ΡΌ-10Αν υν-νίδ при длине волны детектирования 220 нм. Условия элюирования представляли собой: скорость потока 0.8 мл/мин, градиент от 100% растворителя А/0% растворителя В до 0% растворителя А/100% растворителя В, продолжительность градиентного элюирования 2 мин, время удерживания 1

- 33 024201 мин, и длительность анализа 3 мин, при этом растворитель А представлял собой 10% ацетонитрил/90% Н₂О/0,1% трифторуксусная кислота, и растворитель В представлял собой 10% Н₂О/90% ацетонитрил/0,1% трифторуксусная кислота. МС данные определяли с использованием детектора Мюготакк Р1а1£огт для ЖХ в режиме электрораспыления.

Другие стереоизомеры, относящиеся к Кэп 9 стадии от с.2 до с.4, независимо обрабатывали с использованием процедуры, описанной выше.

Кэп 9.2: ЖХ-МС время удерживания 1.011 мин; т/ζ 258.15 (МН+).

Кэп 9.3: ЖХ-МС время удерживания 1.054 мин; т/ζ 258.2 (МН+).

Кэп 9.4: ЖХ-МС время удерживания 1.045 мин; т/ζ 258.2 (МН+).

Метансульфокислоту (3.89 мл, 59.9 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору бут-3-ен-1-ола (2.058 г, 28.5 ммоль) и циклопентанона (2.40 г, 28.5 ммоль) в ЭСМ (20 мл), и реакционную смесь перемешивали в течение ночи. Реакцию медленно останавливали насыщенным водным раствором NаНС0з (до щелочной реакции), слои разделяли, и водный слой экстрагировали ЭСМ (20 мл). Объединенные органические слои высушивали (Мд§0₄), фильтровали и концентрировали с получением сырого масла оранжевого цвета. Сырое масло очищали с помощью хроматографической системы Вю1аде НоШоп (90 г δί0₂, 0-40% Е10Ас/гексаны), чтобы получить Кэп 10, стадия а (4.68 г) в виде оранжевого масла. ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 5.02-4.82 (т, 1Н), 3.85 (61, 1=12.4, 4.2 Гц, 1Н), 3.60 (666, 1=12.4, 10.7, 3.0 Гц, 1Н), 3.04 (к, 3Н), 2.11-1.97 (т, 2Н), 1.95-1.54 (т, 9Н), 1.52-1.40 (т, 1Н).

Кэп 10, стадия Ь

В 48-мл сосуде высокого давления растворяли бензил 2-((дифенилметилен)амино)ацетат (1.46 г, 4.44 ммоль) и Кэп 10, стадия а (800 мг, 3.41 ммоль) в толуоле (15 мл) и ТГФ (3 мл), и прозрачный бесцветный раствор перемешивали в атмосфере азота в течение 5 мин. Затем добавляли 1М ЬШМО§ (4.44 мл, 4.44 ммоль) в ТГФ, и сосуд плотно закрывали и затем нагревали при 100°С в течение 9 ч. Реакционной смеси позволяли охлаждаться, и затем ее выливали в 1/2 насыщенный водный раствор ΝΉ₄Ο (~60 мл) и экстрагировали Е10Ас (~60 мл). Органическую фазу промывали солевым раствором (~40 мл), высушивали (Мд§0₄), фильтровали и концентрировали. Сырое оранжевое масло очищали с помощью хроматографической системы Вю1аде НоШоп (0-40% Е10Ас/гексан, 90 г δί0₂), чтобы получить Кэп 10, стадия Ь (смесь четырех стереоизомеров) (480 мг) в виде вязкого оранжевого масла. ЖХ-МС время удерживания 1.991 мин; т/ζ 468.4 (МН+). ЖХ данные записывали с использованием жидкостного хроматографа 5>1ιίιη;·ι6ζιι ЬС-10А§, оборудованного колонкой РЬепотепех Ьипа 3 мкм С18 2.0х50 мм, с использованием детектора δΡΌ-ЮАУ ИУ-У1к при длине волны детектирования 220 нм. Условия элюирования представляли собой: скорость потока 0.8 мл/мин, градиент от 100% растворителя А/0% растворителя В до 0% растворителя А/100% растворителя В, продолжительность градиентного элюирования 2 мин, время удерживания 1 мин, длительность анализа 3 мин, при этом растворитель А представлял собой 10% ацетонитрил/90% Н2О/0,1% трифторуксусная кислота, и растворитель В представлял собой 10% Н2О/90% ацетонитрил/0,1% трифторуксусная кислота. МС данные определяли с использованием детектора М1сготакк Р1а1Гогт для ЖХ в режиме электрораспыления.

Кэп 10, стадия Ь (475 мг, 1.02 ммоль) растворяли в ТГФ (12 мл) и затем обрабатывали 1.5 М НС1 (4.06 мл, 6.09 ммоль) (водный) и перемешивали в течение 1.5 ч. Реакционную смесь концентрировали под высоким вакуумом. Затем остаток растворяли в ЭСМ (6 мл) и обрабатывали О1РЕА (0.710 мл, 4.06 ммоль) и метилхлорформиатом (0.118 мл, 1.52 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 1.5 дней. Реакционную смесь разбавляли водой (~10 мл) и ЭСМ (10 мл), разделяли, и водный слой дополнительно экстрагировали ЭСМ (10 мл). Объединенные органические слои высушивали

- 34 024201 (Мд§О₄), фильтровали и концентрировали. Остаток очищали с помощью хроматографической системы Вю1аде Ноп/оп (12 г 8Ю₂, 0-25% Е1ОАс/гексан), чтобы получить 284 мг оранжевого масла. Этот продукт дополнительно очищали посредством препаративной ВЭЖХ (вода/АСЫ с буфером ТРА), чтобы получить Кэп 10, стадия с (смесь из четырех стереоизомеров) (200 мг) в виде прозрачного почти бесцветного стекла. ЖХ-МС время удерживания 3.025 мин; т/ζ 362.3 (МН+). ЖХ данные записывали с помощью жидкостного хроматографа δй^табζи ЬС-10А8, оборудованного колонкой Рйепотепех Ьипа 3 мкм С18 2.0х50 мм, с использованием детектора 8РЭ-10АУ ИУ-У15 при длине волны детектирования 220 нм. Условия элюирования представляли собой: скорость потока 0.8 мл/мин, градиент от 100% растворителя А/0% растворителя В до 0% растворителя А/100% растворителя В, продолжительность градиентного элюирования 4 мин, время удерживания 1 мин и длительность анализа 5 мин, при этом растворитель А представлял собой 10% ацетонитрил/90% Н2О/0,1% трифторуксусная кислота, и растворитель В представлял собой 10% Н₂О/90% ацетонитрил/0,1% трифторуксусная кислота. МС данные определяли, используя детектор М1сгота55 Р1а1Гогт для ЖХ в режиме электрораспыления.

Смесь стереоизомеров разделяли посредством хиральной полу-препаративной хроматографии:

Сййа1рак ΛΌ-Н препаративная колонка 30x250 мм, 5 мкм

Подвижная фаза: 8% Е1ОН/гептан с 0.1% Е1₂ЫН

Контролируемое УФ-излучение @ 220 нм

Введение: 0.5 мл ~30 мг/мл в Е1ОН (~200 мг в общем),

Чтобы получить:

Кэп 10, стадия с.1: Первый пик элюирования: 30.5 мг; ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 7.45-7.31 (т, 5Н), 5.34-5.19 (т, 2Н), 5.10 (б, 1=12.0 Гц, 1Н), 4.39 (бб, 1=9.0, 4.8 Гц, 1Н), 3.78-3.66 (т, 4Н), 3.51 (1б, 1=12.0, 2.6 Гц, 1Н), 2.20-2.06 (т, 1Н), 1.92-1.79 (т, 1Н), 1.76-1.11 (т, 11Н).

Кэп 10, стадия с.2: Второй пик элюирования: 29.6 мг; ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 7.43-7.31 (т, 5Н), 5.28-5.15 (т, 3Н), 4.34 (бб, 1=9.0, 5.3 Гц, 1Н), 3.78-3.66 (т, 4Н), 3.53-3.40 (т, 1Н), 2.10 (1б, 1=10.6, 5.4 Гц, 1Н), 1.94-1.82 (т, 1Н), 1.76-1.62 (т, 3Н), 1.59-1.24 (т, 8Н).

Кэп 10, стадия с.3: Третий пик элюирования: 27.8 мг; ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 7.46-7.31 (т, 5Н), 5.30-5.14 (т, 3Н), 4.34 (бб, 1=8.9, 5.1 Гц, 1Н), 3.79-3.63 (т, 4Н), 3.53-3.40 (т, 1Н), 2.10 (1б, 1=10.4, 5.5 Гц, 1Н), 1.95-1.82 (т, 1Н), 1.76-1.63 (т, 3Н), 1.60-1.22 (т, 8Н).

Кэп 10, стадия с.4: Четвертый пик элюирования: 21.7 мг; ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 7.45-7.32 (т, 5Н), 5.36-5.18 (т, 2Н), 5.10 (б, 1=12.0 Гц, 1Н), 4.39 (бб, 1=9.0, 4.8 Гц, 1Н), 3.79-3.67 (т, 4Н), 3.51 (1б, 1=12.0, 2.6 Гц, 1Н), 2.19-2.06 (т, 1Н), 1.92-1.79 (т, 1Н), 1.77-1.10 (т, 11Н).

Из данных ¹Н ЯМР следует, что Кэп 10, стадия с.1 и Кэп 10, стадия с.4 представляют собой энантиомерную пару, также как и Кэп 10, стадия с.2 и Кэп 10, стадия с.3. Каждый отдельный стереоизомер обрабатывали в дальнейшем независимо один от другого.

Кэп 10.1-10.4

Кэп 10, стадия с.1 (24.4 мг, 0.068 ммоль) растворяли в МеОН (3 мл) и добавляли к 10% Рб/С (5.8 мг, 5.40 мкмоль). Реакционную смесь под вакуумом продували азотом (4х) и затем водородом (4х) и оставляли перемешиваться в атмосфере баллоного водорода в течение ночи. Реакционную смесь обрабатывали диатомитовой землей (Целит®) и затем фильтровали через диатомитовую землю (Сей1е®) и концентрировали с получением Кэп 10,1 (16.3 мг) в виде бесцветного стекла. ЖХ-МС время удерживания 1.139 мин; т/ζ 272,/ (МН+). ЖХ данные записывали с помощью жидкостного хроматографа δΐιίπκ^ζιι ЬС10А8, оборудованного колонкой Рйепотепех Ьипа 3 мкм С18 2.0х50 мм, с использованием детектора δР^-10АV ИУ-У15 при длине волны детектирования 220 нм. Условия элюирования представляли скорость потока 0,8 мл/мин, градиент от 100% растворитель А/0% растворитель В до 0% растворитель А/100% растворитель В, продолжительность градиентного элюирования 2 мин, время удерживания 1 мин и длительность анализа 3 мин, где растворитель А представлял собой 10% ацетонитрил/90% Н₂О/0,1% трифторуксусная кислота, и растворитель В представлял собой 10% Н₂О/90% ацетонитрил/0,1% трифторуксусная кислота. МС данные определяли с помощью детектора М1сгота55 Р1а1Гогт для ЖХ в режиме электрораспыления. ¹Н ЯМР (400 МГц, МеОН-б₄) δ 4.11-4.03 (т, 1Н), 3.77-3.70 (т, 1Н), 3.66 (5, 3Н), 3.65-3.56 (т, 1Н), 3.37-3.34 (т, 1Н), 2.22-2.08 (т, 1Н), 2.02-1.93 (т, 1Н), 1.77-1.28 (т, 11Н).

Другие три стереоизомера Кэп 10, стадия с.2 до с.4 обрабатывали независимо, используя процедуру, описанную выше:

Кэп 10.2 (бесцветное стекло): ЖХ-МС время удерживания 1.018 мин; т/ζ 272.2 (МН+). ¹Н ЯМР (400 МГц, МеОН-б₄) δ 4.10-4.03 (т, 1Н), 3.78-3.71 (т, 1Н), 3.66 (5, 3Н), 3.59 (1б, 1=12.1, 2.4 Гц, 1Н), 3.383.34 (т, 1Н), 2.22-2.09 (т, 1Н), 2.06-1.96 (т, 1Н), 1.79-1.27 (т, 11Н).

Кэп 10.3 (бесцветное стекло): ^!Н ЯМР (400 МГц, МеОН-б₄) δ 4.10-4.03 (т, 1Н), 3.78-3.70 (т, 1Н), 3.66 (5, 3Н), 3.59 (1б, 1=12.1, 2.4 Гц, 1Н), 3.38-3.35 (т, 1Н), 2.23-2.09 (т, 1Н), 2.05-1.94 (т, 1Н), 1.79-1.26 (т, 11Н).

Кэп 10.4 (бесцветное стекло): ^!Н ЯМР (400 МГц, МеОН-б₄) δ 4.06 (б, 1=6.0 Гц, 1Н), 3.77-3.70 (т, 1Н), 3.69-3.57 (т, 4Н), 3.36 (5, 1Н), 2.22-2.06 (т, 1Н), 2.02-1.92 (т, 1Н), 1.79-1.26 (т, 11Н).

- 35 024201

К раствору 3-(бензилокси)циклобутанона (5 г, 28.4 ммоль) в СН₂С1₂ (200 мл) при 0°С в атмосфере азота добавляли метил 2-(диметоксифосфорил)-2-(метоксикарбониламино)ацетат (14.48 г, 56.7 ммоль) с последующим добавлением 1,1,3,3-тетраметилгуанидина (7.33 мл, 62.4 ммоль). Реакционную смесь удаляли из холодной бани и оставляли перемешиваться при ~ 25°С в атмосфере азота в течение 24.5 ч. Реакционную смесь обрабатывали насыщенным водным раствором МН₄С1 (100 мл). Слои разделяли и водный слой экстрагировали СН₂С1₂ (2x100 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором (50 мл), высушивали над М§§0₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Вязкое масло разбавляли хлороформом (5 мл) и наносили на силикагелевый картридж Томсона, элюируя смесью 25% этилацетат/гексаны, чтобы получить Кэп-11, стадия а (6.84 г) в виде светло-желтого вязкого масла. ЖХ/МС: аналитически рассчитано для |Μ+Ν;·ι|' ί'.’ι₆Η|₉ΝΝ;·ιΟ₅ 328.12; найдено 328.00. ¹Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟά₆) δ 8.49 (Ьг. 5., 1Н), 7.41-7.26 (т, 5Н), 4.43 (5, 2Н), 4.20-4.10 (т, 1Н), 3.65 (5, 3Н), 3.56 (5, 3Н), 3.35-3.24 (т, 1Н), 3.01 (άά1, 1=17.4, 6.8, 3.5 Гц, 1Н), 2.96-2.84 (т, 1Н), 2.72-2.62 (т, 1Н).

К раствору Кэп-11, стадия а (6.84 г, 22.40 ммоль) в МеОН (100 мл) в атмосфере азота добавляли суспензию палладия на угле, 10% (2.384 г, 2.240 ммоль) в МеОН (20 мл) в атмосфере азота. Смесь затем подвергали воздействию баллонного водорода в течение 26 ч. Реакционную смесь фильтровали через диатомитовую землю (Се1йе®) и концентрировали в вакууме, получая при этом Кэп-11, стадия Ь (4.84 г) в виде светло-желтого вязкого масла. ЖХ/МС: аналитически рассчитано для |Μ+Ν;·ι|' ΟΉ^ΝΝαΟ^ 240.08; найдено 240.01. ^!Н ЯМР (400 МГц, Ме0Н-а₄) δ 7.40-7.25 (т, 1Н), 4.91 (5, 2Н), 4.19-3.99 (т, 2Н), 3.72 (5, 3Н), 3.67 (5, 3Н), 2.42-2.25 (т, 2Н), 2.24-2.02 (т, 1Н), 1.91-1.61 (т, 1Н).

К раствору ΌΜδΟ (4.0 мл, 56.4 ммоль) в СН₂С1₂ (70 мл) при -78°С в атмосфере азота добавляли оксалилхлорид, 2М раствор в СН₂С1₂ (15.3 мл, 30.6 ммоль) по каплям. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч. Раствор Кэп-11, стадия Ь (4.814 г, 22.16 ммоль) в СН₂С1₂ (35.0 мл) добавляли к реакционной смеси, оставляя перемешиваться при -78°С в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали в течение 1.5 ч. Триэтиламин (15.5 мл, 111 ммоль) добавляли к реакционной смеси по каплям, при этом оставляли перемешиваться при -78°С в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали в течение 16 ч. Реакцию останавливали холодным 20% водным раствором К₂НР0₄ (50 мл) и водой (50 мл). Смесь перемешивали при ~25°С в течение 15 мин. Затем реакционную смесь разбавляли этилацетатом (50 мл), и слои разделяли. Водный слой экстрагировали этилацетатом (2x50 мл). Объединенные органические слои промывали солевым раствором, высушивали над Μ§δΟ₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток наносили на силикагелевый картридж Томсона, элюируя смесью 40% этилацетат/гексаны, чтобы получить Кэп-11, стадия с (3.71 д) в виде светло-желтого вязкого масла. ¹Н ЯМР (400 МГц, ΌΜδΟ-ά₆) δ 7.86 (ά, 1=8.0 Гц, 1Н), 4.27 (1, 1=8.4 Гц, 1Н), 3.65 (5, 3Н), 3.57 (5, 3Н), 3.16, 2.86 (т, 4Н), 2.82-2.61 (т,

- 36 024201

1Н).

Смесь метилтрифенилфосфонийбромида (3 г, 8.40 ммоль) и трет-бутоксида калия (1 г, 8.91 ммоль) в 1,4-диоксане (35 мл) нагревали при 40°С в атмосфере азота в течение 3 ч. Реакционную смесь удаляли из тепла и охлаждали в холодной бане до 10°С. Раствор Кэп-11, стадия с (1.48 г, 6.88 ммоль) в 1,4диоксане (7 мл) добавляли по каплям, и реакционную смесь продолжали перемешивать при 10°С в атмосфере азота в течение 45 ч. Все растворители удаляли в вакууме. Остаток переносили в этилацетат (50 мл) и насыщенный водный раствор ΝΉ₄0 (50 мл). Слои разделяли, и водный слой экстрагировали затем этилацетатом (2х50 мл). Объединенные органические слои промывали насыщенным водным раствором ΝαΟ (50 мл), высушивали над М§§0₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток переносили в СНС13 (1 мл) и наносили на силикагелевый картридж Томсона, элюируя смесью этилацетат/гексаны от 5% до 15% более 4 л, чтобы получить Кэп-11, стадия й (533 мг) в виде бесцветного вязкого масла, которое затвердевало при стоянии, превращаясь в твердое вещество белого цвета. ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 5.21 (й, 1=7.8 Гц, 1Н), 4.83-4.74 (т, 2Н), 4.41 (1, 1=7.7 Гц, 1Н), 3.74 (5, 3Н), 3.70 (5, 3Н), 2.82-2.52 (т, 5Н).

К СН₂С1₂ (2.5 мл) при 0°С в атмосфере азота добавляли диэтилцинк 1М в гексанах (6.69 мл, 6.69 ммоль) с последующим добавлением по каплям трифторуксусной кислоты (в 1 мл СН₂С1₂) (0.516 мл, 6.69 ммоль) в течение 10 мин. Через 1 час добавляли по каплям дийодометан (в 1 мл СН₂С1₂) (0.540 мл, 6.69 ммоль) в течение 10 мин., сопровождая добавлением Кэп-11, стадия й (в 1 мл СН₂С1₂) (0.2378 г, 1.115 ммоль) по каплям. После этого добавления реакционную смесь удаляли из холодной бани и оставляли перемешиваться при ~25°С в атмосфере азота в течение 12.5 ч. Реакцию останавливали 0.1 н. водным раствором НС1 (50 мл). Полученный продукт экстрагировали этилацетатом (3х50 мл). Объединенные органические слои высушивали над М§§0₄, фильтровали и концентрировали в вакууме. Остаток наносили на силикагелевый картридж Томсона, элюируя смесью 15% этилацетат/гексаны, чтобы получить Кэп11, стадия е (206.1 мг, выход 81%) в виде твердого вещества белого цвета. ¹Н ЯМР (400 МГц, ЭМ50-й₆) δ 7.65 (й, 1=7.8 Гц, 1Н), 4.08 (йй, 1=9.5, 8.0 Гц, 1Н), 3.62 (5, 3Н), 3.56 (5, 3Н), 2.76-2.57 (т, 1Н), 2.11-2.00 (т, 3Н), 2.00-1.90 (т, 1Н), 0.48-0.28 (т, 4Н).

Кэп-11 (Рацемическая смесь)

К раствору Кэп-11, стадия е (0.2804 г, 1.234 ммоль) в МеОН (4 мл) при ~25°С добавляли раствор гидроксида лития (0.035 г, 1.481 ммоль) в воде (2 мл). Реакционную смесь перемешивали в течение 4 ч, все летучие компоненты удаляли в вакууме. Остаток разбавляли водой (25 мл) и подкисляли 6 н. НС1 до рН ~1-2. Полученный продукт экстрагировали этилацетатом (3x25 мл), высушивали над М§§0₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением Кэп-11 (258.1 мг) в виде твердого вещества белого цвета. ^!Н ЯМР (400 МГц, ПМЭ0-с1₆) δ 12.52 (5, 1Н), 7.48 (й, 1=8.3 Гц, 1Н), 3.99 (йй, 1=9.3, 8.3 Гц, 1Н), 3.55 (5, 3Н), 2.74-2.57 (т, 1Н), 2.17-1.89 (т, 4Н), 0.49-0.25 (т, 4Н).

К раствору Кэп-11, стадия й (0.200 г, 0.938 ммоль) в МеОН (3 мл) добавляли раствор гидроксида лития (0.027 г, 1.126 ммоль) в воде (1.5 мл) по каплям. Реакционную смесь перемешивали при ~25°С в течение 6 ч. Все летучие компоненты удаляли в вакууме. Остаток разбавляли водой (10 мл) и подкисляли 6 н НС1 до рН ~1-2. Полученный продукт экстрагировали этилацетатом (3x25 мл). Объединенные органические слои высушивали над М§§0₄, фильтровали и концентрировали в вакууме с получением Кэп-12 (178 мг) в виде твердого вещества белого цвета. ¹Н ЯМР (400 МГц, ЭМ50-й₆) δ 12.59 (5, 1Н), 7.54 (й, 1=8.0 Гц, 1Н), 4.75 (Ьг. 5., 2Н), 3.95 (1, 1=8.2 Гц, 1Н), 3.55 (5, 3Н), 2.76-2.51 (т, 4Н), 2.51-2.42 (т, 1Н).

- 37 024201

(Диэтилоксоний)трифторборат (3.64 мл, 29.0 ммоль) добавляли по каплям (свыше 10 мин) к раствору циклопропанкарбальдегида (4.25 мл, 56.9 ммоль) и (Е)-((4-метоксибута-1,3-диен-2-ил)окси)триметилсилана (4.90 г, 28.4 ммоль) в Εΐ₂Ο (100 мл), который был охлажден до -78°С в атмосфере азота. Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 2.5 ч, и затем добавляли насыщенный водный раствор NаΗСΟз (50 мл), и реакционную смесь оставляли медленно нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Слои разделяли, водный слой экстрагировали Εΐ₂Ο (100 мл), и объединенные органические слои промывали насыщенным солевым раствором (~50 мл), высушивали (Μ§δΟ₄), фильтровали и концентрировали, что позволяло получить сырое масло оранжевого цвета. Сырое масло очищали с помощью хроматографической системы Вю1аде Ηοπζοη (80 г δίΟ₂, 0-30% ΕЮАс/гексаны), чтобы получить Кэп 13, стадия а (2.826 г) в виде желтого масла. Этот продукт использовали без дополнительного очищения. ^!Н ЯМР (400 МГц, ОСТ) δ 7.37 (ά, 1=6.0 Гц, 1Н), 5.40 (άά, 1=6.0, 1.0 Гц, 1Н), 3.70 (άάά, 1=13.1, 8.8, 3.8 Гц, 1Н), 2.74-2.63 (т, 1Н), 2.60-2.52 (т, 1Н), 1.24-1.14 (т, 1Н), 0.75-0.61 (т, 2Н), 0.54-0.46 (т, 1Н), 0.35-0.28 (т, 1Н).

Кэп 13, стадия а (800 мг, 5.79 ммоль) растворяли в метаноле (50 мл) и затем обрабатывали 10% Ρά/С (185 мг, 0.174 ммоль). Реакционную смесь перемешивали и под вакуумом продували азотом (4х) и затем водородом (4х). Затем реакционную смесь оставляли перемешиваться в атмосфере баллонного водорода в течение 2 ч. К реакционной смеси добавляли диатомитовую землю (СеШе®) и перемешивали, и затем реакционную смесь фильтровали через диатомитовую землю (Сей1е®) и концентрировали с получением сырого масла. Сырое масло очищали с помощью хроматографической системы Вю1аде ^ήζοη (25 г δίΟ₂, 0-50% ΕΐΟАс/гексаны), чтобы получить Кэп 13, стадия Ь (650 мг загрязненный 25% масс/масс ΕΐΟАс) в виде бесцветного невязкого масла. ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 3.92 (άάά, 1=11.5, 5.1, 1.8 Гц, 1Н), 3.56-3.45 (т, 1Н), 3.23 (з, 3Н), 3.16 (з, 3Н), 2.70 (άάά, 1=11.2, 8.7, 2.1 Гц, 1Н), 2.10 (άΐ, 1=13.4, 2.6 Гц, 1Н), 1.93-1.84 (т, 1Н), 1.68-1.57 (т, 1Н), 1.46 (άά, 1=13.3, 11.5 Гц, 1Н), 0.96-0.85 (т, 1Н), 0.63-0.45 (т, 2Н), 0.37 (ά4, 1=9.4, 4.8 Гц, 1Н), 0.19 (άφ 1=9.5, 4.8 Гц, 1Н).

Кэп 13, стадия Ь (650 мг, 2.65 ммоль, загрязненный 25% мас./мас. ΕΐΟАс) растворяли в ТНР (7 мл) и затем обрабатывали 1.5 М раствором НС1 (водный) (7.07 мл, 10.61 ммоль) и перемешивали в течение 30 мин. Реакционную смесь разбавляли солевым раствором (~30 мл), экстрагировали ЭСМ (3х25 мл) и объединенные органические слои высушивали (Μ§δΟ₄), фильтровали и концентрировали с получением Кэп 13, стадия с (543 мг, загрязненного 12% мас./мас. ТНР и другими незначительными примесями) в виде прозрачного бесцветного масла. Этот продукт использовали без дальнейшего очищения. ¹Н ЯМР (400 МГц, ОСЬ) δ 4.31 (άάά, 1=11.5, 7.4, 1.6 Гц, 1Н), 3.67-3.57 (т, 1Н), 2.98-2.88 (т, 1Н), 2.68-2.42 (т, 3Н), 2.37-2.28 (т, 1Н), 1.03 (д1, 1=8.1, 4.8 Гц, 1Н), 0.69-0.52 (т, 2Н), 0.49-0.40 (т, 1Н), 0.30-0.21 (т, 1Н).

- 38 024201

Кэп 13, стадия ,.1.1 и ά.2

Этил 2-изоцианоацетат (390 мг, 3.45 ммоль) разбавляли Е1₂О (15 мл) и затем обрабатывали оксидом меди (76 мг, 0.530 ммоль). Суспензию перемешивали 10 мин и затем добавляли Кэп 13, стадия с (371 мг, 2.65 ммоль) в Е12О (10 мл), и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакционную смесь затем охлаждали до 0°С, добавляли по каплям 1 М калий трет-бутоксид (3.45 мл, 3.45 ммоль) в ТНР и перемешивали в течение 1 ч при 0°С. Добавляли уксусную кислоту (0.197 мл, 3.45 ммоль) в ЭСМ (2 мл), и реакционную смесь оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в течение ночи. Сырую реакционную смесь разбавляли водой (~20 мл) и экстрагировали Е1ОАс (3х25 мл). Объединенные органические слои высушивали (М§§О₄), фильтровали и концентрировали до образования темно-красного масла. Это масло очищали с помощью хроматографической системы Вю1аде Ноп/оп (25г §Ю₂, 50-75% Е1ОАс, гексаны), чтобы получить рацемический Кэп 13, стадия ά.1 ((2)-изомер; 250 мг) и Кэп 13, стадия ά.2 ((Е)-изомер; 243 мг), каждого в виде не совсем белого твердого вещества. Распределение Е/Ζ определяли на основании NОЕ экспериментов. Кэп 13, стадия ά.1: ЖХ-МС время удерживания 1.007 мин; т/ζ 254.2 (МН'). ’Н ЯМР (400 МГц, МеОН-ά^ δ 8.10 (5, 1Н), 4.20 (ц, 1=7.0 Гц, 2Н), 4.08 (άάά, 1=11.2, 5.6, 1.8 Гц, 1Н), 3.45-3.36 (т, 1Н), 3.35-3.29 (т, 1Н), 2.75-2.67 (т, 2Н), 2.30 (άάά, 1=13.9, 12.4, 5.5 Гц, 1Н), 2.07 (άά, 1=14.1, 11.0 Гц, 1Н), 1.34-1.22 (т, 3Н), 0.95 (ц1, 1=8.1, 4.8 Гц, 1Н), 0.57-0.47 (т, 2Н), 0.40-0.23 (т, 2Н). Кэп 13, стадия ά.2: ЖХ-МС время удерживания 1.067 мин; т/ζ 254.2 (МН'). ЖХ данные записывали с помощью жидкостного хроматографа δΐιίιηαάζιι ЬС-10А§, оборудованного колонкой РЬепотепех Ьипа 3 мкм С18 2.0х30 мм, с использованием детектора 8РЭ-10ЛУ иУ-У15 при длине волны детектирования 220 нм. Условия элюирования представляли собой: скорость потока 0.8 мл/мин, градиент от 100% растворителя А/0% растворителя В до 0% растворителя А/100% растворителя В, продолжительность градиентного элюирования 2 мин, время удерживания 1 мин и длительность анализа 3 мин, где растворитель А представлял собой 10% ацетонитрил/90% Н₂О/0,1% трифторуксусная кислота, и растворитель В представлял собой 10% Н2О/90% ацетонитрил/0,1% трифторуксусная кислота. МС данные определяли, используя детектор М1сгота55 Р1аНогт для ЖХ в режиме электрораспыления. ’Н ЯМР (400 МГц, метанол^₄) δ 8.08 (5, 1Н), 4.21 (ц, 1=7.0 Гц, 2Н), 4.08 (άάά, 1=11.1, 5.6, 1.9 Гц, 1Н), 3.51 (ά1, 1=14.0, 2.0 Гц, 1Н), 3.42 (1ά, 1=11.5, 2.5 Гц, 1Н), 2.70 (άάά, 1=10.6, 8.2, 2.3 Гц, 1Н), 2.49 (άφ 1=14.1, 2.2 Гц, 1Н), 2.26-2.12 (т, 2Н), 1.34-1.24 (т, 3Н), 0.96 (ц1, 1=8.1, 4.9 Гц, 1Н), 0.58-0.49 (т, 2Н), 0.37 (άάάά, 1=7.8, 6.3, 3.0, 1.3 Гц, 1Н), 0.26 (άάάά, 1=5.2, 4.0, 2.9, 1.4 Гц, 1Н).

Рацемический Кэп 13, стадия ά.1 (625 мг) растворяли в 16 мл Е1ОН и разделяли на несколько введений посредством препаративной хиральной ВЭЖХ (СЫга1Рак А§ колонка, 10% Е1ОН/гептан 0.1% диэтиламин) для получения Кэп 13, стадия е.1 (450 мг, первый пик элюирования) и Кэп 13, стадия е.2 (360 мг, второй пик элюирования), каждый в виде не совсем белого твердого вещества. Энантиомеры разделяли чисто, и хотя каждый образец был чистым согласно данным ЖХ/МС и хиральной аналитической ВЭЖХ, однако согласно данным ¹Н ЯМР присутствовало неидентифицированное загрязнение. Каждый продукт использовали без дополнительного очищения. ’Н ЯМР (400 МГц, МеОН-ά.-ι) δ 8.08 (5, 1Н), 4.21 (ц. 1=7.0 Гц, 2Н), 4.08 (άάά, 1=11.1, 5.6, 1.9 Гц, 1Н), 3.51 (ά1, 1=13.9, 2.1 Гц, 1Н), 3.46-3.38 (т, 1Н), 2.70 (άάά, 1=10.7, 8.2, 2.3 Гц, 1Н), 2.49 (άφ 1=14.1, 2.2 Гц, 1Н), 2.26-2.12 (т, 2Н), 1.34-1.22 (т, 3Н), 0.96 (ц1, 1=8.2, 5.0 Гц, 1Н), 0.58-0.48 (т, 2Н), 0.37 (άάάά, 1=7.7, 6.3, 2.9, 1.4 Гц, 1Н), 0.28-0.22 (т, 1Н).

Кэп 13, стадия/,1 и/. 2

На шейкере Парра в 500-мл реакционном сосуде растворяли Кэп 13, стадия е.1 (310 мг, загрязненный неизвестной примесью) в МеОН (20 мл) и затем добавляли (-)-1,2-бис((2§,5§)-2,5-диметил- 39 024201 фосфолано)этан(циклооктадиен)родий(1) тетрафторборат (17.0 мг, 0.031 ммоль). Азот барботировали через реакционную смесь в течение 10 мин, и затем реакционную смесь под вакуумом продували азотом (4х) и затем водородом (4х). Реакционную смесь затем встряхивали при давлении водорода 60 фунтов на кв. дюйм в течение 2,5 дней. Реакционную смесь концентрировали до образования коричнево-желтого масла и затем очищали, используя хроматографическую систему Бю1аде Ноп/оп (12 г δίθ₂, 60-80% Е!ОΑс/гексан) для получения Кэп 13, стадия £.1 (201 мг) в виде прозрачного бесцветного масла. ЖХ-МС время удерживания 1.681 мин; т/ζ 256.25 (МН+). ЖХ данные записывали посредством 51йтаб/и ЬС10Α8 жидкостного хроматографа, оборудованного колонкой РЬепотепех Ьипа 3 мкм С18 2.0x50 мм, с использованием детектора БРЭ-ЧЖУ ИУ-У15 при длине волны детектирования 220 нм. Использованные условия элюирования представляли собой: скорость потока 0.8 мл/мин, градиент от 100% растворитель А/0% растворитель В до 0% растворитель А/100% растворитель В, продолжительность градиентного элюирования 4 мин, время удерживания 1 мин и длительность анализа 5 мин, где растворитель А представлял собой 10% ацетонитрила/90% Н2О/0,1% трифторуксусной кислоты, и растворитель В представлял собой 10% Н2О/90% ацетонитрила/0,1% трифторуксусной кислоты. МС данные определяли с использованием детектора М1сгота55 Р1а££огт для ЖХ в режиме электрораспыления. Согласно данным ¹Н ЯМР, продукт представлял собой смесь 12:1 амидных ротамеров. Для основного ротамера: ¹Н ЯМР (400 МГц, СОСЧ) δ 8.26 (5, 1Н), 6.09 (б, 1=7.8 Гц, 1Н), 4.88 (!, 1=8.7 Гц, 1Н), 4.25 (φ 1=7.0 Гц, 2Н), 3.89-3.72 (т, 2Н), 2.89 (ббб, 1=9.5, 6.2, 3.9 Гц, 1Н), 2.32-2.20 (т, 1Н), 1.80-1.70 (т, 1Н), 1.69-1.58 (т, 2Н), 1.50 (б!, 1=6.8, 3.4 Гц, 1Н), 1.33 (!, 1=7.2 Гц, 3Н), 1.13-1.03 (т, 1Н), 0.63-0.49 (т, 2Н), 0.44-0.35 (т, 1Н), 0.18-0.10 (т, 1Н).

Кэп 13, стадия £.2 (бесцветное масло) получали из Кэп 13, стадия е.2 в соответствии с процедурой, описанной выше. ЖХ-МС время удерживания 1.753 мин; т/ζ 256.25 (МН+). ¹Н ЯМР (400 МГц, СИС1₃) δ 8.28 (5, 1Н), 6.16 (б, 1=8.8 Гц, 1Н), 4.72 (бб, 1=8.9, 4.6 Гц, 1Н), 4.25 (ф 1=7.1 Гц, 2Н), 4.09-4.02 (т, 1Н), 3.41-3.29 (т, 1Н), 2.54 (ббб, 1=10.9, 8.5, 2.0 Гц, 1Н), 2.15-2.04 (т, 1Н), 1.80 (бб, 1=13.2, 1.9 Гц, 1Н), 1.491.42 (т, 2Н), 1.32 (!, 1=7.2 Гц, 3Н), 0.94-0.82 (т, 1Н), 0.60-0.45 (т, 2Н), 0.39-0.31 (т, 1Н), 0.21-0.13 (т, 1Н). Ориентировочное распределение транс (Кэп 13, стадия £.1) и цис (Кэп 13, стадия £.2) стереоизомеров было получено на основе ¹Н ЯМР сцеплений на некоторых ТНР протонах.

Кэп 13, стадия §

Кэп 13, стадия £.1 (213 мг, 0.834 ммоль) растворяли в МеОН (5 мл) и затем добавляли 1.5 М раствор НС1 (1.11 мл, 1.67 ммоль), и реакционную смесь плотно закрывали с помощью мембраны, которую затем прокалывали иглой и оставляли открытой для воздуха. Реакционную смесь затем нагревали при 50°С в течение ночи, концентрировали, растворяли в ОСМ (5 мл) и затем обрабатывали ΌΙΡΕΑ (0.583 мл, 3.34 ммоль) и метилхлорформиатом (0.13 мл, 1.7 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Реакцию останавливали водой (~5 мл), смесь перемешивали, разделяли и водный слой в дальнейшем экстрагировали ОСМ (3x5 мл). Объединенные органические слои высушивали (Мд8О₄), фильтровали и концентрировали. Сырое светло-коричневое масло очищали, используя хроматографическую систему Бю1аде Ноп/оп (12 г δίθ₂, 25-25% Е!ОΑс/гексаны), чтобы получить Кэп 13, стадия д.1 (131 мг). ЖХ-МС время удерживания 2.020 мин; т/ζ 286.2 (МН+). ЖХ данные записывали посредством ЗЬипаб/и ^-10Αδ жидкостного хроматографа, оборудованного колонкой РЬепотепех Ьипа 3 мкм С18 2.0x50 мм, с использованием детектора БРЭ-ЧЖУ ИУ-У15 при длине волны детектирования 220 нм. Условия элюирования составляли: скорость потока 0.8 мл/мин, градиент от 100% растворителя А/0% растворителя В до 0% растворителя А/100% растворителя В, продолжительность градиентного элюирования 4 мин, время удерживания 1 мин и длительность анализа 5 мин, где растворитель А представлял собой 10% ацетонитрила/90% Н₂О/0.1% трифторуксусной кислоты, и растворитель В представлял собой 10% Н₂О/90% ацетонитрила/0.1% трифторуксусной кислоты. МС данные определяли с использованием детектора МЧ сгота55 Р1а££огт для ЖХ в режиме электрораспыления. ¹Н ЯМР (400 МГц, СИС1₃) δ 5.17 (б, 1=9.3 Гц, 1Н), 4.49 (!, 1=8.7 Гц, 1Н), 4.30-4.18 (т, 2Н), 3.89-3.80 (т, 1Н), 3.79-3.67 (т, 1Н), 3.69 (5, 3Н), 2.94-2.83 (т, 1Н), 2.26-2.16 (т, 1Н), 1.78-1.47 (т, 4Н), 1.33 (!, 1= 7.2 Гц, 3Н), 1.08 (б!, 1=8.6, 4.4 Гц, 1Н), 0.63-0.47 (т, 2Н), 0.44-0.36 (т, 1Н), 0.18-0.09 (т, 1Н).

Кэп 13, стадия д. 2 получали из Кэп 13, стадия £.2 в соответствии с процедурой, описанной выше. ЖХ-МС время удерживания 2.053 мин; т/ζ 286.25 (МН+). Ή ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-б) δ 5.27 (б, 1=8.8 Гц, 1Н), 4.34 (бб, 1=9.0, 4.8 Гц, 1Н), 4.23 (ф 1=7.3 Гц, 2Н), 4.05 (б!, 1=11.2, 3.2 Гц, 1Н), 3.71 (5, 3Н), 3.41-3.30 (т, 1Н), 2.55 (ббб, 1=10.7, 8.5, 1.9 Гц, 1Н), 2.09-1.96 (т, 1Н), 1.77 (б, 1=12.8 Гц, 1Н), 1.48-1.38 (т, 2Н), 1.35-1.22 (т, 1Н), 1.31 (!, 1=7.3 Гц, 3Н), 0.89 (ςί, 1=8.2, 4.9 Гц, 1Н), 0.61-0.44 (т, 2Н), 0.39-0.30 (т, 1Н), 0.17 (бд, 1=9.4, 4.7 Гц, 1Н).

- 40 024201

Кэп 13.1 и 13.2

Кэп 13, стадия §.1 (131 мг, 0.459 ммоль) растворяли в ТНР (5.5 мл) и затем обрабатывали 0.5 М водным рствором ЫОН (3.67 мл, 1.836 ммоль) и перемешивали в течение 5 ч. Реакцию останавливали 1 н НС1 (1.9 мл), и смесь концентрировали в потоке азота. Продукт разбавляли водой (~4 мл) и затем экстрагировали смесью ЭСМ:МеОН (~5:1, 3х3 мл). Объединенные органические слои концентрировали, чтобы получить Кэп 13.1 (117 мг) в виде бесцветного стекла. Этот продукт использовали без дальнейшего очищения. ЖХ-МС время удерживания 2.441 мин; т/ζ 258.2 (МН+). ЖХ данные записывали с помощью жидкостного хроматографа δΐιίιικ^ζιι ЬС-10А8, оборудованного колонкой РЬепотепех Ьипа 3 мкм С18 2.0х50 мм, с использованием детектора 8РЭ-10АУ ИУ-У15 при длине волны детектирования 220 нм. Условия элюирования составляли: скорость потока 0.8 мл/мин, градиент от 100% растворителя А/0% растворителя В до 0% растворителя А/100% растворителя В, продолжительность градиентного элюирования 4 мин, время удерживания 1 мин и длительность анализа 5 мин, где растворитель А представлял собой 10% ацетонитрила/90% Н₂О/0.1% трифторуксусной кислоты, и растворитель В представлял собой 10% Н₂О/90% ацетонитрила/0.1% трифторуксусной кислоты. МС данные определяли с использованием детектора Мктота55 Р1а1Гогт для ЖХ в режиме электрораспыления.

Кэп 13.2 получали из Кэп 13, стадия §.2, используя описанную выше процедуру. ЖХ-МС время удерживания 2.553 мин; т/ζ 258.2 (МН+).

Раствор метил 2-(бензилоксикарбониламино)-2-(диметоксифосфорил)ацетата (300 мг, 0.906 ммоль) в МеОН (10 мл) в 500 мл трубке для гидрирования под давлением барботировали Ν₂ в течение 30 мин. К смеси добавляли диметилдикабонат (0.146 мл, 1.358 ммоль) и Рб/С (48.2 мг, 0.045 ммоль) (10%), и затем помещали на шейкер Парра и гидрировали при давлении 60 фунтов на кв. дюйм в течение 5 ч. Смесь фильтровали через слой диатомитовой земли (СеШе®), и фильтрат концентрировали с получением Кэп 14, стадия а (230 мг) в виде светло-желтого масла, которое использовали без дальнейшего очищения. ЖХ (Условие 1): КТ = 1.60 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С-Н^О-Р 256.06; найдено 256.20. Ή ЯМР (400 МГц, СЭС1₃) δ 5.54 (б, 1=8.0 Гц, 1Н), 5.00-4.86 (т, 1Н), 3.87-3.82 (т, 9Н), 3.73 (5, 3Н).

К раствору Кэп 14, стадия а (230 мг, 0.901 ммоль) в ТНР (1 мл) при -20°С добавляли 1,1,3,3-тетраметилгуанидин (0.125 мл, 0.992 ммоль). Полученную светло-желтую смесь перемешивали при -20°С в течение 1 ч. Затем добавляли дигидро-2Н-пиран-4(3Н)-он (99 мг, 0.992 ммоль) в ТНР (0.5 мл) и полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (5 мл) и промывали 0.1 н раствором НС1. Водный слой экстрагировали ЕЮАс (2х 10 мл), и объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄ и концентрировали. Сырой продукт очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель, 50% ЕЮАс/гексаны), чтобы получить Кэп 14, стадия Ь виде твердого вещества белого цвета. ¹Н ЯМР (500 МГц, СЭС1₃) δ 5.93 (Ьг. 5., 1Н), 3.81-3.75 (т, 7Н), 3.73 (5, 3Н), 2.95 (ΐ, 1=5.5 Гц, 2Н), 2.44 (ΐ, 1=5.2 Гц, 2Н).

Кэп 14

К смеси Кэп 14, стадия Ь (150 мг, 0.654 ммоль) в ТНР (2 мл) и воды (1 мл) добавляли раствор ЫОН (0.982 мл, 1.963 ммоль) (2М водный). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь экстрагировали ЕьО (5 мл). Водную фазу подкисляли 1 н. водным раствором НС1 и экстрагировали ЕЮАс (6х). Объединенные органические слои высушивали над Мд§О₄ и концентрировали с получением Кэп 14 в виде твердого вещества белого цвета (100 мг). ¹Н ЯМР (400 МГц, СЭЮЭ) δ 8.34 (Ьг. 5., 1Н), 3.73-3.67 (т, 4Н), 3.65 (5, 3Н), 3.29 (6ϊ, 1=3.3, 1.7 Гц, 2Н), 2.38 (ΐ, 1=5.3 Гц, 2Н).

- 41 024201

К раствору 4,4'-бис(2-((1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)-1Н-имидазол-4-ил)бифенил, 4 НС1 (50 мг, 0.084 ммоль), и Кэп-2 (рацемическая смесь) (41.9 мг, 0.168 ммоль) в 2 мл ΌΜΤ добавляли ΌΙΡΕΑ (0.088 мл, 0.505 ммоль). К полученной смеси добавляли НАТИ (64.0 мг, 0.168 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель затем удаляли, что позволяло получить сырую смесь из 3 диастереомеров, находящихся в соотношении ~1:2:1, для анализов посредством ЖХ (Условие 3). Смесь затем очищали посредством обращенно-фазовой ВЭЖХ (колонка: \Уа1егв 8ипйте 30x150 мм; ацетонитрил/вода/NН₄ОАс) чтобы получить свободные основания трех диастереомеров (Образцы рС-1.1, РС-1.2 и рС-1.3) в виде твердых веществ белого цвета. Образец РС-1.1 (9.1 мг): ЖХ (Условие 1): КТ =1.15 мин; >95%; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Н₅₁Р₄^О₆911.39; найдено 456.5 (М/2+1); МСВР (МС высокого разрешения): Аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Н₅₁Р₄иЮ₆ 911.3862; найдено 911.3869; Ή ЯМР (500 МГц, С1ТО1)) δ ррт 7.61-7.88 (8Н, т), 7.36 (2Н, Ьг. в.), 5.09-5.21 (2Н, т), 4.66-4.77 (2Н, т), 3.69 (6Н, в), 2.36-2.62 (6Н, т), 1.86-2.14 (16 Н, т), 1.03-1.17 (2Н, т), 0.70-0.84 (2Н, т). Образец РС-1.2 (24.5 мг,): ЖХ (Условие 1): КТ =1.19 мин; >97% чистый. ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Н₅1р₄^О₆ 911.39; найдено 456.5 (М/2+1); МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Н₅1р₄^О₆ 911.3862; найдено 911.3865; ¹Н ЯМР (500 МГц, СО₃ОЭ) δ ррт 7.59-7.89 (8Н, т), 7.36 (2Н, ά, 1=4.88 Гц), 5.08-5.24 (2Н, т), 4.60-4.76 (2Н, т), 3.69 (6Н, в), 2.36-2.71 (6Н, т), 1.82-2.20 (16 Н, т), 1.16-1.25 (1Н, т), 1.03-1.14 (1Н, т), 0.66-0.83 (2Н, т). Образец РС-1.3 (14.7 мг): ЖХ (Условие 1): КТ = 1.22 мин; >99% чистый. ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Н₅1р₄^О₆ 911.39; найдено 456.5 (М/2+1); МСВР: Аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Н₅1р₄^О₆911.3862; найдено 911.3864. ^!Н ЯМР (500 МГц, С1ТО1)) δ ррт 7.61-7.88 (8Н, т), 7.36 (2Н, Ьг. в.), 5.095.21 (2Н, т), 4.66-4.77 (2Н, т), 3.69 (6Н, в), 2.36-2.62 (6Н, т), 1.86-2.14 (16Н, т), 1.03-1.17 (2Н, т), 0.700.84 (2Н, т).

Образцы от ОС-2.1 до ОС-3.3 получали в соответствии с процедурой, описанной для Образца ОС-1, при использовании соответствующих Кэп. Образцы от ОС-4.1 до ОС-4.3 также получали подобным образом, за исключением того, что система растворителей МеОН/вода/ТРА (колонка: ^АТЕК8 АНапЬв ОБО 30x100 мм 5 мкм) применялась для обращенно-фазовой ВЭЖХ очистки. Хотя ожидалось только одно соединение при использовании Кэп-1, все таки были получены 3 различных диастереомера, указывая на то, что рацемизация могла происходить в процессе синтеза Кэп-1.

Образец	О Лу	Изомер	КТ (ЖХ-Условне); индекс однородности, %; МС данные
От ОС-2 А до ОС-2.3	н ^Ме°ТнЛ Я	1	К.Т = 1.99 минут (Условие 3); 100%; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+НГ С₄₈Н51р4ВДб 911.39, найдено 456 2 (М/2+1); МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С+эНз^^Об 911.3862, найдено 911.3873

- 42 024201

		2	КТ = 2.06 минут (Условие 3), >97%, ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ ΟίβΗίΐΡίΝδΟό 91139; найдено 456 2 (М/2+1); МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СцвНлЕцИзОб 911.3862; найдено 911.3868
3	КТ = 2.14 минут (Условие 3); >99%; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ 91139; найдено 456.2 (М/2+1), МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СцзНяРдХзОц 911.3862; найдено 911.3866
От ОС-3.1 до дсз.з	^Ме0Тн^>	1	КТ = 1.17 минут (Условие 1); >98%; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С₄$Нл>кС)б 83942, найдено 839.8; МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С48Н₅₅Ж)₆ 839.4239, найдено 839.4243
2	КТ = 1.21 минут (Условие 1); 100%; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С₄₈Н₅₅Ж)б 839.42; найдено 839.8
3	КТ = 1.25 минут (Условие 1), >97%, ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С₄хНл>кС)б 83942, найдено 839.8; МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ 04₈Η₅₅Ν₈0₆ 839.4239; найдено 839.4242
От ζ)Ο-4.1 до ОС4.3	Н ? -°γ^Ν'Λ	1	КТ = 0.93 минут (Условие 1); >96%; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С₄бН51М₈О₈ 843 38, найдено 843.7; МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С^НяМвОз 843 3824, найдено 843.3834

		2	КТ = 1.18 минут (Условие 2), >93%, ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С^Нг^зО» 843 38, найдено 843 53; МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С4бН₅₁Ж)₈ 843.3824; найдено 843.3823
3	КТ = 0.99 минут (Условие 1); ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С₄бН51М₈О₈ 843.38, найдено 843.6.

Образцы ОС-5.1, ОС-5.2 и ОС-5.3 (Три диастереомера с не установленным стереогенным центром)

Образец ОС-5 стадия а

Рацемическая смесь

2-((1К,38,55)-бицикло[3.1.0]гексан-3-ил)-2-(трет-бутоксикарбониламино) уксусную кислоту (Образец ОС-5 стадия а) получали из коммерчески доступного (цис)-бицикло[3.1.0]гексан-3-ола, который сначала преобразовывали в его (транс)-бицикло[3.1.0]гексан-3-ол изомер, используя стандартный протокол МДзипоЬи, и затем превращали в этил 2-амино-2-((1К,38,58)-бицикло[3.1.0]гексан-3-ил)ацетат, придерживаясь последовательности реакций, описанных для продуктов от Кэп-2 стадия 4 до Кэп-2 стадия £. Амин затем защищали ВОС производным, с последующим гидролизом сложного этилового эфира в соответствии со стандартными протоколами, получая при этом кислоту Образец ОС-5 стадия а.

- 43 024201

К раствору 4,4'-бис(2-((1К,3§,5§)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3-ил)-1Н-имидазол-4-ил)бифенила, 4 НС1 (50 мг, 0.084 ммоль) и кислоты Образец ОС-5 стадия а (43.0 мг, 0.168 ммоль) в 2 мл ΌΜΡ добавляли ΌΙΡΕΑ (0.088 мл, 0.505 ммоль) и НАТи (64.0 мг, 0.168 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель затем удаляли в вакууме, и сырой продукт очищали посредством обращенно-фазовой ВЭЖХ (колонка: АЛТНКЗ А11ап115 ΟΒΌ 30x100 мм 5 мкм, МеОН/вода/ТНР), чтобы получить ТРА соль Образца ОС-5 стадия Ь (97 мг) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХ (Условие 1): КТ = 1.47 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С5₄Η₆7N₈Ο₆ 923.52; найдено 462.8 (М/2+1); ^!Н ЯМР (500 МГц, (Ό_;ΟΙ)) δ ррт 7.82-7.91 (10 Н, т), 5.08-5.18 (2Н, т), 4.57 (1Н, б, 1=7.63 Гц), 4.48 (1Н, б, 1=8.24 Гц), 4.06-4.12 (1Н, т), 3.79-3.86 (1Н, т), 3.02 (3Н, 5), 2.88 (3Н, 5), 2.66-2.75 (2Н, т), 2.43-2.54 (2Н, т), 2.01-2.16 (4Н, т), 1.88-1.97 (2Н, т), 1.68-1.82 (4Н, т), 1.57-1.68 (2Н, т), 1.47 (9Н, 5), 1.41 (9Н, 5), 1.25-1.36 (6Н, т), 1.16-1.24 (1Н, т), 1.04-1.11 (1Н, т), 0.81-0.93 (2Н, т), 0.29-0.39 (2Н, т), 0.19-0.27 (2Н, т).

К смеси Образца ОС-5 стадия Ь (97 мг, 0.084 ммоль) в 1 мл СН₂С1₂ добавляли НС1 (2 мл, 4.00 ммоль) (2 н в простом диэтиловом эфире). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель затем удаляли, чтобы получить НС1 соль Образца ОС-5 стадия с (73 мг) в виде твердого вещества желтого цвета. ЖХ (Условие 1): КТ = 0.84 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С^ЩА^ 723.41; найдено 723.6.

Образцы ОС-5.1, ОС-5.2 и ОС-5.3

К смеси НС1 соли Образца ОС-5 стадия Ь (73 мг, 0.084 ммоль) в 2 мл СН₂С1₂ добавляли ΌΙΡΕΑ (0.117 мл, 0.672 ммоль) и метилхлорформиат (0.026 мл, 0.336 ммоль). Полученную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч. Добавляли аммиак (2 мл, 4.00 ммоль) (2 н в метаноле), и полученную смесь перемешивали в течение 2 ч. Растворитель затем удаляли в вакууме, и сырой продукт очищали посредством обращенно-фазовой ВЭЖХ (колонка: \Уа1ег §ипйге 30x150 мм, ацетонитрил/вода/NΗ₄ΟΑс), чтобы получить свободные основания трех диастереомеров (Образцы ОС-5.1, ОС-5.2 и ОС-5.3) в виде твердых веществ от белого до светло-желтого цвета. Образец ОС-5.1 (8.5 мг): ЖХ (Условие 3): КТ = 2.05 мин, >95% чистый; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Η55N₈Ο₆ 839.42; найдено 839.7. МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Η55N₈Ο₆ 839.4239; найдено 839.4243. ¹Н ЯМР (500 МГц, Π)/)Ι)ί δ ррт 7.64-7.87 (8Н, т), 7.37 (2Н, Ьг. 5.), 5.10-5.22 (2Н, т), 4.57-4.72 (2Н, т), 3.68 (6Н, 5), 2.38-2.58 (4Н, т), 1.90-2.31 (6Н, т), 1.55-1.87 (6Н, т), 1.20-1.38 (6Н, т), 1.04-1.19 (2Н, т), 0.720.85 (2Н, т), 0.28-0.37 (2Н, т), 0.22-0.28 (2Н, т). Образец ОС-5.2 (18 мг): ЖХ (Условие 3): КТ = 2.14 мин; >99% чистый; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С48Η55N8Ο6 839.42; найдено 839.7; МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С48Η55N8Ο6 839.4239; найдено 839.4243; ¹Н ЯМР (500 МГц, Π):()Ι)ί δ ррт 7.63-7.86 (8Н, т), 7.37 (2Н, б), 5.11-5.22 (2Н, т), 4.51-4.70 (2Н, т), 3.68 (6Н, б), 2.38-2.59 (4Н, т), 1.90-2.15 (6Н, т), 1.57-1.84 (6Н, т), 1.18-1.38 (6Н, т), 1.03-1.16 (2Н, т), 0.72-0.83 (2Н, т), 0.280.39 (2Н, т), 0.22-0.28 (2Н, т). Образец ОС-5.3 (9.1 мг): ЖХ (Условие 3): КТ = 2.23 мин; >95% чистый. ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Η55N₈Ο₆ 839.42; найдено 839.7; МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Η55N₈Ο₆ 839.4239; найдено 839.4242. ^!Н ЯМР (500 МГц, С1ΧΟ12) δ ррт 7.637.93 (8Н, т), 7.36 (2Н, 5), 5.17-5.29 (2Н, т), 4.55 (2Н, б, 1=8.5 Гц), 3.69 (6Н, 5), 2.39-2.64 (4Н, т), 1.92-2.20 (6Н, т), 1.58-1.86 (6Н, т), 1.27-1.45 (6Н, т), 1.17-1.27 (2Н, т), 0.70-0.84 (2Н, т), 0.31-0.45 (2Н, т), 0.200.30 (2Н, т).

К смеси Образца ОС-2.1 (50 мг, 0.044 ммоль) в 1 мл ΌΜΡ добавляли NСδ (7.03 мг, 0.053 ммоль).

- 44 024201

Полученную смесь перемешивали при 50°С в течение ночи. Растворитель затем удаляли, и сырой продукт очищали посредством обращенно-фазовой ВЭЖХ (колонка: ХУЛТЕКБ §ипйге С18 ΟΒΌ 30x100 мм 5 мкм, МеОН/вода/ТРА), чтобы получить ТРА соли Образца ОС-6 и Образца СО-7 в виде твердых веществ белого и светло-желтого цвета, соответственно. Образец ОС-6 (20 мг): ЖХ (Условие 2): КТ = 1.72 мин, >99% чистый; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ Ο^^οΟΡνΝβΟβ 945.35; найдено 473.16 (М/2+1); МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]+ Ο^^οΟΡ^βΟβ 945.3472; найдено 945.3440; Ή ЯМР (500 МГц, СЭР)])) δ ррт 7.77-7.92 (9Н, т), 5.06-5.13 (1Н, т), 4.97-5.04 (1Н, т), 4.614.70 (2Н, т), 3.78-3.85 (1Н, т), 3.71-3.75 (1Н, т), 3.69 (6Н, ά), 2.63-2.74 (1Н, т), 2.39-2.55 (5Н, т), 1.832.14 (14Н, т), 1.00-1.12 (2Н, т), 0.81-0.89 (1Н, т), 0.72-0.79 (1Н, т). Образец ЦС-7 (19 мг): ЖХ (Условие 2): КТ = 2.03 мин, >96% чистый; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С^Н^С^Р^^ 979.31; найдено 490.17 (М/2+1); МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]+ 979.3083; найдено

979.3043; Ή ЯМР (500 МГц, С^зΟ^) δ ррт 7.74-7.88 (8Н, т), 4.97-5.05 (2Н, т), 4.63-4.71 (2Н, т), 3.713.78 (2Н, т), 3.69 (6Н, 5), 2.39-2.55 (6Н, т), 1.87-2.11 (14Н, т), 1.01-1.11 (2Н, т), 0.73-0.81 (2Н, т).

К раствору 4,4'-бис(2-((2§,5§)-5-метилпирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-4-ил)-1,1'-бифенила, 4 НС1 (25 мг, 0.042 ммоль) и Кэп 5.1 (20.32 мг, 0.084 ммоль) в 2 мл ΌΜΕ добавляли ΌΙΡΕΑ (0.044 мл, 0.251 ммоль). К полученной смеси добавляли НАТИ (31.8 мг, 0.084 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удаляли под вакуумом. Сырой продукт очищали посредством обращенно-фазовой ВЭЖХ (колонка: ^АТЕК§ §иийге С18 ΟΒΌ 30x100 мм 5 мкм, метанол/вода/ТРА), чтобы получить ТРА соль Образца ОС-8.1 в виде твердого вещества белого цвета (32 мг, 64.3%). ЖХ (Условие 1): КТ = 1.04 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СзоНйЫ^ 903.48; найдено: 903.7; МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СзоНйЫ^ 903.4763; найдено: 903.4753; Ή ЯМР (500 МГц, С^зΟ^) δ 8.03-7.78 (т, 10Н), 5.16 (άά, 1=10.5, 7.2 Гц, 2Н), 4.84-4.73 (т, 2Н), 4.33-4.18 (т, 2Н), 3.92-3.78 (т, 2Н), 3.74-3.63 (т, 6Н), 3.61-3.43 (т, 2Н), 2.69-2.47 (т, 2Н), 2.43-2.07 (т, 6Н), 2.06-1.95 (т, 2Н), 1.95-1.74 (т, 4Н), 1.56 (ά, 1=6.4 Гц, 6Н), 1.42 (т, 2Н), 0.83-0.70 (т, 2Н), 0.67-0.49 (т, 4Н), 0.45-0.33 (т, 2Н), 0.21-0.10 (т, 2Н).

ТРА соль Образца ОС-8.2 получали путем замены Кэп 5.2 на Кэп 5.7, используя такую же процедуру, как описано для Образца ЦС-8.1. ЖХ (Условие 1): КТ =1.01 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ ί^^^ΝβΟβ 903.48; найдено: 903.7; МСВР: аналитически рассчитано для [М+Н]+ ί^^^ΝβΟβ 903.4763; найдено: 903.4761; ^!Н ЯМР (500 МГц, С^зΟ^) δ 8.05-7.78 (т, 10Н), 5.16 (άά, 1=10.4, 7.0 Гц, 2Н), 4.83-4.75 (т, 2Н), 4.36-4.18 (т, 2Н), 3.92-3.75 (т, 2Н), 3.74-3.61 (т, 6Н), 3.57-3.37 (т, 2Н), 2.72-2.47 (т, 2Н), 2.44-2.24 (т, 4Н), 2.24-2.07 (т, 2Н), 1.99 (т, 2Н), 1.95-1.77 (т, 2Н), 1.58 (ά, 1=6.4 Гц, 6Н), 1.521.40 (т, 2Н), 1.39-1.19 (т, 4Н), 0.76 (т, 2Н), 0.67-0.44 (т, 4Н), 0.38 (т, 2Н).

Образцы от ОС-9 до ОС-16 и Образцы от ΟΌ1 до ΟΌ10 получали, используя такую же процедуру, как описано для Образца ЦС-1.1, соединяя соответствующее ядро (см. ссылки в табл.) либо с Кэп 5.1, либо с Кэп 5.2, и эти продукты очищали при условии обращенно-фазовой ВЭЖХ и получали в виде ТРА солей. Образец ΟΌ10 получали из соответствующего ядра и Кэп 6, используя ЕОС/СН₂С1₂ стандартное условие связывания, и этот продукт очищали при условии обращенно-фазовой ВЭЖХ и получали в виде свободного основания. Образцы ΟΌ11 и ΟΌ12 получали из соответствующего ядра и Кэп 7, используя стандартное условие связывания НΑТυ/^IΕΑ/^ΜР, и эти продукты очищали при условии обращеннофазовой ВЭЖХ и получали в виде ТРА солей.

- 45 024201

Образец	Структура	Ссылка на предпо- следний предшест венник	К-ОН	ЖХМС анализ
<2С9		\УО20Ю/ 096302	Кэп 5.2	ЖХ (Условие 4): КТ = 0 81 мин, ЖХ/МС аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ с,₂н₆₁ж)₈ 925.46, найдено 926.12, ВЭЖХ (Условие 6): КТ = 27.33; 100%
оао	'к	ХУО20Ю/ 096302	Кэп 5.2	ЖХ (Условие 5): КТ = 1.66 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [м+нГ СцкНлуМкОз 873.43; найдено 873 51; ВЭЖХ (Условие 6): КТ = 24.01, 99%
осп		ХУ02009/ 102633	Кэп 5.2	ЖХ (Условие 4): КТ = 0.75 мин, ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СэгНб^вОв

				925.46; найдено 925 87; ВЭЖХ (Условие 6): КТ = 25.22, 97%
0С12	п—ЛП Ν:=ξ	\У02009/ 102633	Кэп 5.2	ЖХ (Условие 4): КТ = 0 76 мин, ЖХ/МС аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С₅₂Н_5ЧХ₈О_К 923.45, найдено 923.82, ВЭЖХ (Условие 6): КТ = 26.01, 100%
оаз	К \ Н	Ψ02010/ 096302	Кэп 5.2	ЖХ (Условие 5): КТ = 1.52 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СдзНздМзОк 875.45, найдено 875.47; ВЭЖХ (Условие 6): КТ = 23.98; 99%
ОЫ	н П /=\,^Ν·γ^Λ'Ν в ру-ЛЛ-ТГСтх-м к	Ψ02010/ 117635	Кэп 5.1	ЖХ (Условие 4): КТ = 0.8 мин; ЖХ/МС аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С₅₃Нб₆К₈О₈ 943.51; найдено 943 88; ВЭЖХ

- 46 024201

				(Условие 7): КТ = 11.32, 94%
012		№02010/ 017401	Кэп 5.2	ЖХ (Условие 5): КТ = 1.77 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СдцР^^Ок 823 .41; найдено 823 40; ВЭЖХ (Условие 7): КТ = 11.34, 95%
ОЬЗ	- й,О\ ν ,Ώ4ΖΗΖ/Λ?ν ₀У~~_а У ^{н н}х	№02008/ 021927	Кэп 5.2	ЖХ (Условие 5): КТ = 1.62 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ с₄₈н₅₅ж)7 831.43, найдено 831.40, ВЭЖХ (Условие 7): КТ = 10.76; 93%
014	~х /х - %·^ - = > >	№02010/ 117635	Кэп 5.2	ЖХ (Условие 4): КТ = 0.78 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [м+нГ С52Н₅₉М_КО₈ 923.45; найдено 923.77, ВЭЖХ (Условие 7): КТ = 11.65, 93%

ОЬ5	,^С\| н У У ^С\|		Кэп 5.2	ЖХ (Условие 4): КТ = 0.98 мин, ЖХ/МС аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ ο₅οΗ₅₇α₂Ν₈ο₈ 967.37, найдено 967.32, ВЭЖХ (Условие 7): КТ = 13.44, 95%
ОЬб	К, Ν-% К	№02008/ 021928	Кэп 5.2	ЖХ (Условие 5): КТ = 1.55 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СдтНзЛОк 876.44, найдено 876 39; ВЭЖХ (Условие 7): КТ = 4.93, 93%
017	в η О 0	№02010/ 117635	Кэп 5.2	ЖХ (Условие 5): КТ = 1 65 мин, ЖХ/МС аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ с₅оН₅₉ад₈ 899.45; найдено 899 51; ВЭЖХ (Условие 7): КТ = 5.79; 95%

- 47 024201

ОС14	в ΝΎ ^н. 1! г О ^н	у	у	н N А	_Ί,0 ?Ν К	Смотри примечание внизу Таблицы	Кэп 5.2	ЖХ (Условие 4): КТ = 0.65 мин, ЖХ/МС аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ с₄₂н₅₅к₈о₈ 799.41, найдено 799.50, ВЭЖХ (Условие 6): КТ = 20.85; 97%
								ЖХ (Условие 5):
						Смотри		КТ = 161 мин,
							ЖХ/МС:
	/^Ν'^Κ				ло	ХУ02008/ 021927	Кэп	аналитически рассчитано для
						ДЛЯ
ОЬ8	Т у		л_					[М+Н]⁺
				А	_у 4-Ν	соответст	5.2
						вующей проце- дуры		04κΗ59ΝκΟιο 907.44; найдено 907.26, ВЭЖХ (Условие 7): КТ = 5.49; 93%
								ЖХ (Условие 4):
								КТ = 0.76 мин;
								ЖХ/МС:
					К ’			аналитически
	/Г	у.						рассчитано для
	ни \_		у	у		\УО20Ю/	Кэп
<2С15					{/ у-ΝΗ	017401	5.2	[М+Н]⁺
	'В							05θΗ59ΐΝ8θ9 915.44, найдено 915.68, ВЭЖХ (Условие 6): КТ = 25.90, 99%

ОС16	в , ΎΟ В	\¥02010/ 017401	Кэп 5.2	ЖХ (Условие 4): КТ = 0.78 мин, ЖХ/МС аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ с₅₂н_5Чк₈о₉ 939.44, найдено 939.73, ВЭЖХ (Условие 6): КТ = 26.17; 93%
ОЬ9	^к ХГРО н	ХУО20Ю/ 017401	Кэп 5.2	ЖХ (Условие 5): КТ = 1.67 мин, ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ С4бН55МцО₈ 847.41; найдено 847.6; ВЭЖХ (Условие 7): КТ = 5.38; 95%
ОЫО	в,_____ Н/НУйХХ /] ^н	ХУ02008/ 021927	Кэп 6	ЖХ (Условие 3): КТ = 2.37 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ с₄₈н₅₅ж)₈ 871.41, найдено 871.6; ВЭЖХ (Условие 7): КТ = 7.29; 95%

- 48 024201

ОШ	н Л Л ^{й Ν}	\У02008/ 021927	Кэп 7	ЖХ/МС (Условие 8): КТ = 3 36 мин, ЖХ/МС аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ СдДбВДОб 947.37, найдено 947.39, ВЭЖХ (Условие 9): КТ = 16.28, 100%
ОЫ2	ΥαΥΟΚΟοΤ ^νβ .....О ^н	\У02009/ 102325	Кэп 7	ЖХ/МС (Условие 8): КТ = 3.446 мин, ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]⁺ (ХНО/АОб 951.40, найдено 951.41; ВЭЖХ (Условие 9): КТ = 17.44; 1009¼

Предпоследний предшественник Образца 0С14 получали, начиная с 1,1'-(1,4-фенилен)-бис(2аминоэтанон)дигидрохлорида (см. ТЬ, 1986, р. 5759 для препаративной процедуры) и Вοс-^-пролина, в соответствии с трехстадийным протоколом (связывание с амидом, циклизация кетонамида с имидазолом и снятие Вос-защиты), как описано в \УО 2008/021927.

К раствору 4-бром-2-метилбензойной кислоты (10 г, 46.5 ммоль) в ЭМР (150 мл) добавляли Ν,Οдиметилгидроксиламин гидрохлорид (5.44 г, 55.8 ммоль) при комнатной температуре с последующим добавлением НОВТ (8.55 г, 55.8 ммоль). Затем добавляли ΕΟΟ (10.7 г, 55.8 ммоль) с последующим добавлением ΩΙΡΕΛ (24.4 мл, 140 ммоль) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 12 ч. Реакционную смесь затем разбавляли ΕΐΟАс (150 мл), промывали водой (3х250 мл) и солевым раствором (150 мл), высушивали над Ν₂δΟ₄, фильтровали и концентрировали в вакууме, чтобы получить сырой 0С-17.Е стадия а (9.5 г), который передавали на следующую стадию как таковой. ¹Н ЯМР (СПС13, δ = 7.26 ррт, 400 МГц): δ 7.37 (ά, ΐ = 1.6 Гц, 1Н), 7.34 (άά, ΐ = 8.0, 1.6 Гц, 1Н), 7.14 (ά, ΐ= 8.0 Гц, 1Н), 3.47 (8, 3Н), 3.30 (з, 3Н), 2.31 (з, 3Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СюН13⁸¹В1ХО2: 260.01; найдено 260.0.

Образец ОС-17.1, стадия а (9.5 г, 36.8 ммоль) растворяли в простом диэтиловом эфире (150 мл) и охлаждали до 0°С. Затем добавляли по каплям метилмагний йодид (3.0 М в простом диэтиловом эфире, 24.54 мл, 73.6 ммоль) в течение 10 мин. Реакционную смесь перемешивали в течение 6 ч при 40°С и затем доводили до комнатной температуры и перемешивали в течение 12 ч. Реакционную смесь охлаждали до 0°С, реакцию останавливали льдом и затем 1.5 н НС1 (50 мл). Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали простым метил-трет-бутиловым эфиром (2х 100 мл), высушивали над Ν;·ι₂δΟ₂ и концентрировали при пониженном давлении. Сырой продукт очищали посредством флэш-хроматографии (силикагель, 60-120, ΕΐΟАс: петролейный эфир, 2:98), чтобы получить ОС-17.1, стадия Ь (6.25 г) в виде жидкости бледно-желтого цвета. ¹Н ЯМР (СОС1₃, δ = 7.26 ррт, 400 МГц): δ 7.55 (ά, ΐ = 8.0 Гц, 1Н), 7.41 (з, 1Н), 7.40 (ά, ΐ = 8.0 Гц, 1Н), 2.55 (з, 3Н), 2.50 (з, 3Н).

- 49 024201

Образец ОС-17.1, стадия с

4-Ацетилфенилбороновую кислоту (5.39 г, 32.9 ммоль) добавляли в запаянную трубку, содержащую Образец ОС-17.1, стадия Ь (7.0 г, 32.9 ммоль) в МеОН (75.0 мл), и реакционную смесь продували азотом 10 мин. Затем добавляли К₂СО₃ (9.08 г, 65.7 ммоль), затем Рб(РЬ₃Р)₄ (1.139 г, 0.986 ммоль), и реакционную смесь дополнительно продували азотом еще 10 мин. Реакционную смесь нагревали до 75°С в течение 12 ч. Затем реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении, и остаток разбавляли ЕЮАс (100 мл) и промывали водой (2x100 мл), солевым раствором (50 мл), высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством комбифлэш-хроматографии (§Шсус1е, §Ю₂, 10-15% ЕЮАс/петролейный эфир), чтобы получить ОС-17.1, стадия с (6.5 г) в виде твердого вещества белого цвета. ¹Н ЯМР (СОС1₃, δ = 7.26 ррт, 400 МГц): δ 8.068.04 (т, 2Н), 7.81 (б, 1 = 8.0 Гц, 1Н), 7.72-7.70 (т, 2Н), 7.54-7.49 (т, 2Н), 2.65 (5, 3Н), 2.63 (5, 6Н).

Образец ОС-17.1. стадия д

Бром (1.12 мл, 21.8 ммоль) (разбавляли в 10 мл диоксана) добавляли медленно (в течение 10 мин) к раствору ОС-17.1, стадия с (2.75 г, 10.90 ммоль) в диоксане (50 мл) при 10°С и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакцию останавливали 10% NаНСО₃ (25 мл) и смесь экстрагировали ОСМ (50 мл). Органическую фазу высушивали над №₂8О₄ и концентрировали при пониженном давлении, получая при этом сырой ОС-17.1, стадия б (5.0 г), который использовали как есть на следующей стадии без очищения. ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С1₇Н₁₅ ^79/81Вт₂О₂: 410.94; найдено 411.0.

К раствору сырого ОС-17.1, стадия б (5.1 г, 12 ммоль) в ацетонитриле (75 мл) добавляли ОС-17.1, стадия а (5.70 г, 24.9 ммоль), затем Э1РЕА (8.69 мл, 49.7 ммоль) при 0°С. После 10 мин поднимали температуру до комнатной и смесь перемешивали в течение 2 ч. Затем реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (100 мл) и промывали 10% NаНСО₃ (50 мл) и солевым раствором (50 мл), высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством комбифлэш-хроматографии (§Шсус1е §Ю₂, 25-30% ЕЮАс/петролейный эфир), что позволяло получить ОС-17.1, стадия е (5.8 г) в виде масла бледно-желтого цвета. ¹Н ЯМР (СОС13, δ = 7.26 ррт, 400 МГц): δ 8.00 (арр Ьб, 2Н), 7.71 (арр б, 3Н), 7.53-7.51 (т, 2Н), 5.61-5.34 (т, 2Н), 5.29-5.04 (т, 2Н), 4.51-4.36 (т, 2Н), 4.09-3.91 (т, 2Н), 2.59 (5, 3Н), 2.35-2.21 (т, 4Н), 2.15-2.04 (т, 2Н), 1.80-1.63 (т, 2Н), 1.47/1.44 (5, 18Н), 1.35-1.27 (т, 6Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М-Н]^- С39Н₄₉^О1₀: 705.35; найдено 705.30.

К раствору ОС-17.1, стадия е (5.6 г, 7.92 ммоль) в ксилолах (75 мл) добавляли ЯН₄ОАс (12.21 г, 158 ммоль), и реакционную смесь продували азотом в течение 10 мин. После нагревания в течение 18 ч при 130°С реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и летучие компоненты удаляли при пониженном давлении. Затем реакционную смесь разбавляли ЕЮАс (100 мл) и промывали 10% NаНСО₃(50 мл), солевым раствором (50 мл), высушивали над №₂8О₄, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством комбифлэш-хроматографии (колонка Кеб1 8ер, С-18, 30-40% ацетонитрил:10 ммоль бикарбонат аммония), чтобы получить ОС-17.1, стадия Г (2.3 г) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета. ¹Н ЯМР (ОМ§О-б6, δ = 2.50 ррт, 400 МГц): δ 12.27/12.0/11.77/11.71 (5, 2Н), 7.92-7.63 (т, 5Н), 7.58-7.47 (т, 3Н), 7.24 (Ьг 5, 1Н), 4.90-4.75 (т, 2Н), 3.923.84 (т, 2Н), 2.54 (5, 3Н), 2.20-2.01 (т, 6Н), 1.73-1.65 (т, 2Н), 1.48-1.12 (т, 24Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М-Н]^- С39Н₄₉^О₄: 665.39; найдено 665.4.

- 50 024201

К раствору ОС-17.1. стадия Г (1.55 г, 2.32 ммоль) в МеОН (10 мл) добавляли НС1/МеОН (4 н, 58.1 мл), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Летучие компоненты удаляли в вакууме, и остаток выпаривали совместно с сухим ЭСМ (3х25 мл). Полученное твердое вещество подвергали воздействию высокого вакуума, что позволяло получить соль НС1 и ОС-17.1. стадия е (1.3 г) в виде твердого вещества бледно-желтого цвета. ¹Н ЯМР (МеОЭ. δ = 3.34 ррт, 400 МГц): δ 8.06 (Ьг 5, 1Н), 7.98 (б, I = 8.4 Гц, 2Н), 7.90 (б, I = 8.4 Гц, 2Н), 7.86 (Ьг 5, 1Н), 7.78 (Ьг 5, 1Н), 7.74 (б, I = 8.4 Гц, 1Н), 7.71 (б, I = 8.4 Гц, 1Н), 5.27-5.20 (т, 2Н), 4.04-4.00 (т, 2Н), 2.80-2.67 (т, 4Н), 2.59 (5, 3Н), 2.55-2.46 (т, 2Н), 2.15-2.06 (т, 2Н), 1.60 (б, ί = 6.4, 6Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂9Н₃₅^: 467.28; найдено 467.2.

Образец ЦС-17.1

НАТИ (37.2 мг, 0.098 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору Кэп 5.2 (26.2 мг, 0.108 ммоль) и ЦС-17.1, стадия § (30 мг, 0.049 ммоль) в ЭМР (2 мл) и Э1РЕА (0.051 мл, 0.294 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали под вакуумом. Остаток разбавляли МеОН, фильтровали и очищали посредством препаративной ВЭЖХ (\Ма1ег5 8ипйге С18 ОВЭ 30х100 мм 5 мкм; МеОН/вода/ТРА буфер), чтобы получить ТРА соль ОС-17.1 (34 мг) в виде твердого вещества не совсем белого цвета. ЖХ/МС (Условие 1): КТ = 1.743 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СлН₆^₈О₈ 917.12; найдено 917.9; ВЭЖХ (Условие 6): КТ = 26.27; 97% однородность. ^!Н ЯМР (500 МГц, СО₃ОЭ) δ 8.05-7.92 (т, 1Н), 7.90-7.83 (т, 4Н), 7.75 (5, 1Н), 7.72-7.65 (т, 1Н), 7.63 (5, 1Н), 7.56 (б, 1=8.2 Гц, 1Н), 5.25-5.10 (т, 2Н), 4.84-4.78 (т, 2Н), 4.27-4.15 (т, 2Н), 3.79 (б, 1=7.9 Гц, 2Н), 3.65 (5, 4Н), 3.49-3.38 (т, 2Н), 2.59-2.51 (т, 2Н), 2.47 (5, 3Н), 2.42-2.33 (т, 2Н), 2.33-2.23 (т, 2Н), 2.16 (б, 1=17.7 Гц, 2Н), 2.04-1.95 (т, 2Н), 1.82 (ΐ, 1=12.2 Гц, 2Н), 1.67-1.52 (т, 6Н), 1.51-1.38 (т, 2Н), 1.361.21 (т, 5Н), 0.83-0.72 (т, 2Н), 0.63-0.45 (т, 4Н), 0.43-0.30 (т, 2Н).

ТРА соль Образца ОС-17.2 получали путем замены Кэп 5.1 на Кэп 5.2, используя те же самые процедуры, что и описанные для Образца ОС-17.1. ЖХ/МС (Условие 1): КТ = 1.710 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₅1Н₆₅^О₈ 917.12; найдено 917.6; ВЭЖХ (Условие 6): КТ = 26.05; 98% однородность. Ή ЯМР (500 МГц, СП₃ОП) δ 8.01-7.95 (т, 1Н), 7.90 (5, 1Н), 7.88-7.80 (т, 5Н), 7.75 (5, 1Н), 7.72-7.66 (т, 2Н), 7.63 (5, 1Н), 7.54 (б, 1=7.9 Гц, 1Н), 5.16 (бб, 1=10.1, 7.3 Гц, 2Н), 4.82-4.74 (т, 2Н), 4.22 (б, 1=8.9 Гц, 2Н), 3.89-3.81 (т, 2Н), 3.67 (5, 6Н), 3.53-3.45 (т, 2Н), 2.58-2.50 (т, 3Н), 2.47 (5, 3Н), 2.42-2.33 (т, 3Н), 2.27 (Ьг. 5., 2Н), 2.15 (бб, 1=19.5, 10.1 Гц, 2Н), 1.98 (бб, 1=11.7, 5.3 Гц, 2Н), 1.89 (ΐ, 1=12.4 Гц, 2Н), 1.79 (б, 1=12.2 Гц, 2Н), 1.55 (ΐ, 1=6.7 Гц, 6Н), 1.46-1.38 (т, 2Н), 1.35-1.27 (т, 3Н), 0.76 (6ϊ, 1=11.1, 5.3 Гц, 2Н), 0.69-0.50 (т, 5Н), 0.38 (б, 1=5.5 Гц, 2Н), 0.25-0.12 (т, 2Н).

К раствору 1-(4-бром-2-фторфенил)этанона (5.0 г, 23 ммоль) в диоксане (150 мл) и простом эфире (150 мл) на льдо-водяной бане при 0°С добавляли бром (1.18 мл, 23.0 ммоль) по каплям. Реакционную смесь перемешивали в течение 1 ч, оставляли нагреваться до комнатной температуры и перемешивали в

- 51 024201 течение 16 ч. Смесь разделяли между Е1ОАс (50 мл) и насыщенным раствором NаНСОз (50 мл), и органический слой промывали водой и высушивали над №₂8О₄. Летучие компоненты выпаривали в вакууме, и твердое вещество высушивали под вакуумом в течение ночи, получая при этом Образец ЦС-18.1, стадия а (6.94 г) в виде твердого вещества белого цвета. ’Н ЯМР (ОМ5>ОЛ₆, δ = 2.5 ррт, 400 МГц): 7.87-7.79 (т, 2Н), 7.62-7.60 (т, 1Н), 4.84 (5, 2Н).

Образе/] ОС 18.1, стадия Ь

Вос

К раствору Образца ОС-18.1, стадия а (2.58 г, 8.72 ммоль) и (2§,5§)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5метилпирролидин-2-карбоновой кислоты (2.00 г, 8.72 ммоль) в ацетонитриле (50 мл) добавляли О1ЕА (2.285 мл, 13.08 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 64 ч. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток разделяли между Е1ОАс (40 мл) и водой (30 мл). Органический слой промывали насыщенным раствором NаНСОз и солевым раствором, высушивали над №ь8О₄ и выпаривали в вакууме, получая при этом Образец ЦС-18.1, стадия Ь (3.8 г) в виде твердого вещества желтого цвета. ’Н ЯМР (СОС1₃, 400 МГц): 7.87 (т, 1Н), 7.44 (т, 2Н), 5.42-5.09 (т, 2Н), 4.53-4.40 (т, 1Н), 4.10-3.95 (т, 1Н), 2.31 (т, 2Н), 2.09 (т, 1Н), 1.75 (т, 1Н), 1.49-1.46 (двойной синглет, 9Н), 1.33 (т, 3Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для |М+№|' С₁₉Н₂₄В1^№О5: 466.06; найдено: 466.03.

В трубку высокого давления, содержащую раствор Образца ЦС-18.1, стадия Ь (3.8 г, 8.6 ммоль) в ксилолах (40 мл), добавляли ацетат аммония (6.59 г, 86 ммоль), и реакционный сосуд закрывли и нагревали при 140°С в течение 6 ч. Летучие компоненты выпаривали в вакууме, и остаток разделяли между ЭСМ (80 мл) и водой (50 мл). Органический слой отделяли и промывали насыщенным раствором NаНСОз и высушивали над №₂8О₄. Удаление растворителя в вакууме приводило к образованию красного масла, которое очищали посредством флэш-хроматографии (0-40% Е1ОАс/гексан), чтобы получить Образец ОС 18.1, стадия с (2.3 г) в виде твердого вещества коричневого цвета. ’Н ЯМР (ОМ5>ОЛ₆, δ = 2.5 ррт, 400 МГц): 7.98 (арр. 1, 1=8.4 Гц, 1Н), 7.65 (άά, 1 = 11, 1.9 Гц, 1Н), 7.45 (άά, 1 = 8.3, 2, 1Н), 7.36 (т, 1Н), 4.85 (т, 1Н), 3.90 (т, 1Н), 2.15-2.07 (т, 3Н), 1.73 (т, 1Н), 1.40-1.17 (т, 12Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для |М+№|' С’₉Н₂₃ ⁷⁹ВгР^№О₂: 446.09; найдено: 446.00.

Образец ОС-18.1, стадия ά

Вос

К раствору 2-бром-1-(4-бромфенил)этанона (2.425 г, 8.72 ммоль) и (2§,5§)-1-(трет-бутоксикарбонил)-5-метилпирролидин-2-карбоновой кислоты (2 г, 8.72 ммоль) в ацетонитриле (50 мл) добавляли О1ЕА (1.524 мл, 8.72 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Растворитель удаляли в вакууме, и остаток разделяли между Е1ОАс (40 мл) и водой (30 мл). Органическую фазу промывали насыщенным раствором NаНСО₃ и солевым раствором и высушивали над №ь8О₄. Удаление летучих компонентов в вакууме позволяло получить Образец ОС 18.1, стадия ά (1.74 г) в виде твердого вещества светло-желтого цвета, которое использовали без дополнительного очищения. ’Н ЯМР (ОМ5>ОЛ₆, δ = 2.5 ррт, 400 МГц): 7.95-7.90 (т, 2Н), 7.81 (т, 1Н), 7.79 (т, 1Н), 5.63-5.44 (т, 2Н), 4.36 (т, 1Н), 3.99 (т, 1Н), 2.27 (т, 1Н), 2.09 (т, 2Н), 1.63 (т, 1Н), 1.41-1.37 (двойной синглет, 9Н), 1.19 (т, 3Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для |М+№|' С’₉Н₂₄В1^№О₅: 448.07; найдено: 448.06.

Образец ОС-18.1, стадия е

В трубку высокого давления, содержащую раствор Образца ОС-18.1, стадия ά (3.4 г, 8.0 ммоль) в ксилолах (40 мл), добавляли ацетат аммония (6.15 г, 80 ммоль), и смесь нагревали при 140°С в течение 6 ч. Летучие компоненты удаляли в вакууме, остаток осторожно разделяли между ЭСМ (60 мл) и насыщенным раствором NаНСО₃ (30 мл) и органический слой отделяли и высушивали над №ь8О₄. Раствори- 52 024201 тель удаляли в вакууме, с получением твердого вещества красного цвета, которое очищали посредством флэш-хроматографии (5-50% Е1ОАс/гексан), чтобы получить Образец ОС-18.1, стадия е (2.65 г) в виде твердого вещества светло-коричневого цвета. ¹Н ЯМР (^МδО-б₆, δ = 2.5 ррт, 400 МГц): 7.73-7.71 (т, 2Н), 7.59-7.50 (т, 3Н), 4.80 (т, 1Н), 3.89 (т, 1Н), 2.10 (т, 3Н), 1.71 (т, 1Н), 1.40-1.17 (т, 12Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Ыа]+ С1дН₂₄ВгЫ₃ЫаО₂: 428.09; найдено: 428.07.

К раствору Образца ЦС-18.1, стадия е (2.64 г, 6.50 ммоль) и 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'бис(1,3,2-диоксаборолана) (3.30 г, 13.0 ммоль) в диоксане (40 мл) добавляли уксусно-кислый калий (1.594 г, 16.24 ммоль). Смесь дегазировали, барботируя азот в течение 10 мин, добавляли Рб(Рй₃Р)₄ (0.375 г, 0.325 ммоль), и барботирование продолжали в течение дополнительных 15 мин. Реакционный сосуд затем плотно закрывали, и смесь нагревали при 80°С в течение 16 ч. Летучие компоненты выпаривали в вакууме, и остаток разделяли между ОСМ (100 мл) и полунасыщенным раствором ЫаНСО₃ (50 мл). Органический слой отделяли, высушивали над Ыа^О₄ и выпаривали в вакууме, получая при этом сырое масло красного цвета, которое очищали посредством флэш-хроматографии (10-90% Е1ОАс/гексаны). Образец ЦС-18.1, стадия Г (2.7г) получали в виде желтой пены. ¹Н ЯМР (^МδО-б₆, δ = 2.5 ррт, 400 МГц): 7.77 (б, 1= 8.3 Гц, 2Н), 7.64-7.53 (т, 3Н), 4.80 (т, 1Н), 3.88 (т, 1Н), 2.09 (т, 3Н), 1.73 (т, 1Н), 1.431.08 (т, 24Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₅Н₃₇ВгВЫ₃О₄: 454.29; найдено: 454.23.

В трубку высокого давления, содержащую раствор Образца ОС-18.1, стадия Г (2.70 г, 5.96 ммоль), и Образца 4, стадия с (2.30 г, 5.42 ммоль) в ОМЕ (70 мл) добавляли воду (17.50 мл) и бикарбонат натрия (2.27 г, 27.1 ммоль). Смесь дегазировали, барботируя азот в течение 15 мин, добавляли Рб(Рй₃Р)₄ (0.313 г, 0.271 ммоль), и дегазирование продолжали в течение дополнительных 15 мин. Реакционный сосуд плотно закрывали, и смесь нагревали при 80°С в течение 15 ч. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток разделяли между ОСМ (100 мл) и водой (50 мл). Органический слой отделяли, высушивали над Ыа^О₄, летучие компоненты удаляли в вакууме, и полученный сырой твердый продукт красного цвета очищали посредством флэш-хроматографии (30-100% Е1ОАс/гексан). Образец ЦС-18.1, стадия д (1.95г) получали в виде твердого вещества желтого цвета. ¹Н ЯМР (^МδО-б₆, δ = 2.5 ррт, 400 МГц): 8.10 (т, 1Н), 7.877.71 (т, 4Н), 7.61-7.55 (т, 3Н), 7.37 (т, 1Н), 4.85 (т, 2Н), 3.91 (т, 2Н), 2.11 (т, 6Н), 1.76 (т, 2Н), 1.421.08 (т, 24Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₅Н₄₈РЫ₆О₄: 671.37; найдено: 671.35.

К суспензии суспензиия Образца ЦС-18.1, стадия д (1.95 г, 2.91 ммоль) в диоксане (10 мл) добавляли 4 н НС1 в диоксане (9.72 мл, 320 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Добавляли метанол (1 мл), и перемешивание продолжали в течение 1 ч. Летучие компоненты удаляли в вакууме, и остаток высушивали под вакуумом в течение ночи. НС1 соль Образца ОС 18.1, стадия й (1.7 г) получали в виде твердого вещества желтого цвета. ¹Н ЯМР (^МδО-б₆), δ = 2.5 ррт, 400 МГц): 10.34/10.29/9.43/9.08 (четыре широких δ, ~4Н), 8.16 (1, 1 = 8.3 Гц, 1Н), 8.10 (Ьг 5, 1Н), 8.00 (б, 1 = 8.3 Гц, 2Н), 7.92 (б, 1 = 8.3 Гц, 2Н), 7.78-7.72 (т, 3Н), 4.99-4.89 (т, 2Н), 3.80 (т, 2Н), 2.53-2.42 (т, 4Н), 2.25 (т, 2Н), 1.87 (т, 2Н), 1.44 (б, 1= 6.5, 3Н), 1.43 (б, 1 = 6.5, 3Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₂₈Н₃₂РЫ₆: 471.27; найдено: 471.17.

Образец ЦС-18.1

НАТИ (37.0 мг, 0.097 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору Кэп 5.2 (26.0 мг, 0.107 ммоль) и Образца ЦС-18.1, стадия Г (30 мг, 0.049 ммоль) в ОМР (2 мл) и О1РЕА (0.051 мл, 0.294 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали под вакуумом. Остаток разбавляли МеОН, фильтровали и очищали посредством препаративной ВЭЖХ (колонка \Уа1ег5 δικιΠίΌ С18 ОВЭ 30х100 мм 5 мкм; МеОН/вода/ТРА буфер), что позволяло получить ТРА соль Образца ЦС-17.1 (34 мг) в виде не совсем белого твердого вещества. ЖХ/МС (Условие 1): КТ = 1.77 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₅₀Н₆₂РЫ₈О₈ 921.47; найдено 921.11; ВЭЖХ (Условие 6): КТ = 26.39; 99% однородность. ^!Н ЯМР (500 МГц, СО₃ОО) δ 8.13-7.98 (т, 1Н), 7.95-7.84 (т, 5Н),

- 53 024201

7.82 (в, 1Н), 7.75-7.67 (т, 2Н), 5.24-5.12 (т, 2Н), 4.82-4.76 (т, 2Н), 4.28-4.17 (т, 2Н), 3.87-3.75 (т, 2Н), 3.72-3.61 (т, 6Н), 3.42 (ί, 1=11.6 Гц, 2Н), 2.52 (ά, 1=3.4 Гц, 2Н), 2.44-2.23 (т, 4Н), 2.18-2.08 (т, 2Н), 2.031.94 (т, 2Н), 1.82 (ί, 1=12.2 Гц, 2Н), 1.58 (ά, 1=6.7 Гц, 6Н), 1.47 (ίά, 1=12.1, 8.2 Гц, 2Н), 1.33-1.18 (т, 5Н), 0.84-0.74 (т, 2Н), 0.57 (Ьг. в., 2Н), 0.50 (Ьг. в., 2Н), 0.37 (ά, 1=4.0 Гц, 2Н).

ТРА соль Образца ОС-18.2 получали путем замены Кэп 5.1 на Кэп 5.2, используя такую же процедуру, как и в случае, описанном для Образца ОС-18.1. ЖХ/МС (Условие 1): КТ = 1.75 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₅₀Н₆₂Р^О₈ 921.47; найдено 921.25; ВЭЖХ (Условие 6): КТ = 26.02; 98% однородность. ^!Н ЯМР (400 МГц, С1СО1)) δ 7.96 (ά, 1=9.3 Гц, 1Н), 7.92-7.80 (т, 6Н), 7.79-7.64 (т, 4Н), 5.26-5.12 (т, 2Н), 4.22 (ά, 1=6.5 Гц, 3Н), 3.84 (ά, 1=7.8 Гц, 3Н), 3.73-3.64 (т, 7Н), 3.48 (ί, 1=11.8 Гц, 3Н), 2.56-2.48 (т, 2Н), 2.45-2.23 (т, 5Н), 2.18-2.09 (т, 2Н), 2.04-1.94 (т, 3Н), 1.94-1.74 (т, 5Н), 1.55 (ά, 1=6.3 Гц, 6Н), 1.47-1.35 (т, 3Н), 1.29 (Ьг. в., 4Н), 1.03-0.84 (т, 3Н), 0.81-0.70 (т, 3Н), 0.63 (ί, 1=13.6 Гц, 3Н), 0.54 (ά, 1=4.8 Гц, 2Н), 0.38 (ά, 1=5.3 Гц, 2Н), 0.24-0.08 (т, 2Н).

Представленный выше сложный эфир получали как диастереомерную смесь из (8)-1-трет-бутил 2метил 5-оксопирролидин-1,2-дикарбоксилата в соответствии с процедурой, описанной в Теί^аЬеά^οη Ье11егв, 2003, 3203-3205.

Образец ОС-19, стадия Ь /°γ

О Вос

К охлажденному (-50°С) толуольному (45 мл) раствору Образца ОС-19, стадия а (4.75 г, 18.5 ммоль) добавляли супергидрид (триэтилборгидрид лития) (19.20 мл 1М/ТНР, 19.20 ммоль) по каплям в течение 10 мин. Добавляли основание Хунига (13.6 мл, 78 ммоль), и смесь перемешивали в течение 10 мин; затем добавляли ОМАР (0.122 г, 0.997 ммоль) в виде твердого вещества, перемешивали в течение 15 мин; затем добавляли по каплям трифторуксусный ангидрид (2.98 мл, 21.1 ммоль) в течение 15 мин. Охлаждающую баню удаляли, и перемешивание продолжали в течение 4 ч, позволяя смеси нагреваться до комнатной температуры. Реакционную смесь промывали водой (50 мл), насыщенным раствором ΝαΟ (30 мл), и органическую фазу концентрировали в вакууме. Полученный сырой продукт очищали посредством флэш-хроматографии (8-60% ЕЮАс/гексан), чтобы получить Образец ОС-19, стадия Ь в виде желтого масла (2.85 г). Ή ЯМР (СОС1₃, 400 МГц): 6.36 (в, 0.5Н), 6.25 (в, 0.5Н), 4.70-4.57 (т, 1Н), 3.78 (в, 3Н), 2.96 (т, 1Н), 2.54 (т, 1Н), 1.70 (в, 3Н), 1.50 (в, 4.5Н), 1.44 (в, 4.5Н).

Образец ОС-19, стадия с

-О

У'Ч?

Вос

О?

Вос

Образец ОС-19. стадия с. С Образец ОС-19, стадия с. 2

Диэтилцинк (1.1 Μ в толуоле, 59.1 мл, 65.0 ммоль) добавляли по каплям в течение 20 мин к охлажденному (-23°С) толуольному (60 мл) раствору Образца ОС-19, стадия Ь (5.23 г, 21.7 ммоль), и перемешивали в течение 10 мин. Хлорйодометан (9.44 мл, 130 ммоль) добавляли по каплям в течение 10 мин, и реакционную смесь перемешивали при -21°С в течение 16 ч. К реакционной смеси добавляли насыщен- 54 024201 ный раствор №-1НСО₃, (60 мл), охлаждающую баню удаляли, и смесь перемешивали в течение 10 мин. Затем смесь фильтровали, и осадок на фильтре промывали толуолом (50 мл). Отфильтрованный раствор разделяли, и органический слой высушивали над №₂8О₄, и концентрировали в вакууме. Полученный сырой продукт очищали посредством флэш-хроматографии (2-10% Е!ОΑс/гексан), чтобы получить Образец ОС-19, стадия с.1 (первое извлечение; бесцветное масло; 2.88 г) и Образец ОС-19, стадия с.2 (второе извлечение; бесцветное масло; 1.01 г). Относительное стереохимическое распределение было получено на основании ΝΟΕ экспериментов. Образец ОС-19, стадия с.1: ¹Н ЯМР (СОСЧ. 400 МГц): 4.65-4.52 (т, 1Н), 3.72 (5, 3Н), 3.28-3.17 (т, 1Н), 2.44-2.32 (т, 1Н), 2.16-2.10 (т, 1Н), 1.51-1.42 (Шо 5, 9Н), 1.24 (5, 3Н), 1.07 (т, 1Н), 0.69-0.60 (т, 1Н). Образец ОС-19, стадия с.2: Ή ЯМР (СОС1₃, 400 МГц): 4.0 (т, 1Н), 3.76 (5, 3Н), 3.32-3.16 (т, 1Н), 2.43 (т, 1Н), 2.01 (т, 1Н), 1.44 (5, 9Н), 1.35 (5, 3Н), 0.76-0.66 (т, 2Н).

Образец ОС-19, стадия 4

Образец ОС-19, стадия 4.1 у Образец ОС-19, стадия 4.2

К раствору Образца ОС-19, стадия с.1 (2.88 г, 11.3 ммоль) в этаноле (20 мл) добавляли раствор ПОН (0.324 г, 13.5 ммоль) в воде (10.00 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Большую часть летучих компонентов удаляли в вакууме, и остаток разделяли между водой (20 мл) и простым эфиром (20 мл). Водный слой охлаждали на льдо-водяной бане, подкисляли 1 н НС1 до рН в районе 2 и экстрагировали Е!ОΑс (30 мл, 4ж). Объединенную органическую фазу высушивали над Ν;·ι₂δΟ.·ι и выпаривали в вакууме, получая при этом Образец ОС-19, стадия б.1 в виде липкого твердого вещества (2.55 г). Ή ЯМР (СОС1₃, 400 МГц): 4.64 (т, 1Н), 3.25 (арр! 5, 1Н), 2.70-2.40 (т, 1Н), 2.14 (т, 1Н), 1.54-1.44 (т, 9Н), 1.27 (5, 3Н), 1.10-0.80 (т, 1Н), 0.67 (т, 1Н). Образец ОС-19, стадия б.2 получали подобным образом из Образца ОС-19, стадия с.2. ¹Н ЯМР (СОС1₃, 400 МГц): 4.13 (арр Ьг 5, 1Н), 3.06 (арр Ьг 5, 1Н), 2.55/2.41 (перекрывание арр Ьг 5, 2Н), 1.51 (5, 9Н), 1.27 (5, 3Н), 0.76 (арр !, 1 = 5.6 Гц, 1Н), 0.60 (арр Ьг 5, 1Н).

Образец ОС-19, стадия е

Вос ί

Вос

К суспензии Образца ОС-19, стадия б.2 (1.09 г, 4.52 ммоль) и 1,1'-(бифенил-4,4'-диил)-бис(2бромэтанона) (0.869 г, 2.19 ммоль) в ацетонитриле (40 мл) добавляли ΌΙΕΑ (0.789 мл, 4.52 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 4 ч. Летучие компоненты удаляли в вакууме, и остаток разделяли между Е!ОΑс (70 мл) и водой (50 мл). Органический слой промывали насыщенным раствором NаНСО₃ (50 мл), высушивали над №₂8О₄, выпаривали в вакууме и высушивали под вакуумом, получая при этом Образец ОС-19, стадия е (1.54 г) в виде белой пены. ¹Н ЯМР (ОМ8О-б₆, δ = 2.5 ррт, 400 МГц): 8.13 (б, 1=8.3 Гц, 4Н), 7.99 (б, 1=8.5 Гц, 4Н), 5.70-5.54 (т, 4Н), 4.17 (т, 2Н), 3.13-3.11 (т, 2Н), 2.58-2.46 (т, 2Н), 2.19 (т, 2Н), 1.42-1.37 (Шо 5, 18Н), 1.24 (5, 6Н), 0.76-0.70 (т, 4Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для |М+№|' С^^ЮаО^: 739.32; найдено: 739.52.

В трубку высокого давления, содержащую раствор Образца ОС-19, стадия е (1.54 г, 2.15 ммоль) в ксилолах (40 мл), добавляли уксусно-кислый аммоний (1.656 г, 21.48 ммоль), и сосуд закрывали и нагревали при 140°С в течение 5 ч. Летучие компоненты удаляли в вакууме, и остаток осторожно разделяли между ОСМ (50 мл) и водой (50 мл), добавляя при этом достаточно насыщенный раствор NаНСО₃, так что в конце разделения водная фаза становилась нейтральной или основной. Органический слой высушивали над №₂8О₄, выпаривали в вакууме, и полученный сырой продукт очищали посредством флэшхроматографии (10-100% Е!ОΑс/гексан), чтобы получить Образец ОС-19, стадия £ (0.65 г) в виде твердого вещества коричневого цвета. ¹Н ЯМР (ОМ8О-б₆, δ = 2.5 ррт, 400 МГц): 7.84-7.65 (т, 8Н), 7.55-7.54 (т, 1.7Н), 7.32-7.30 (т, 0.3Н), 4.60 (т, 2Н), 3.20 (т, 2Н), 2.48-2.43 (т, 2Н), 2.12 (т, 2Н), 1.45-1.07 (т,

- 55 024201

24Н), 0.77 (т, 2Н), 0.69 (т, 2Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СдЩдэИЮд: 677.38; найдено: 677.45.

К раствору Образца ОС-19, стадия £ (0.65 г, 0.960 ммоль) в диоксане (5 мл) добавляли 4 н НС1 в диоксане (5.84 мл, 192 ммоль) и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 6 ч. Летучие компоненты удаляли в вакууме и высушивали под вакуумом в течение ночи, получая при этом НС1 соль Образца ОС-19, стадия д (0.6 г) в виде твердого вещества коричневого цвета. ¹Н ЯМР (ΌΜδΟ-'₆, δ = 2.5 ррт, 400 МГц): 10.5-10 (Ьг 5, ~3.2Н), 7.99 (Ьг 5, 2Н), 7.95 (б, I = 8.5, 4Н), 7.85 (б, I = 8.5 Гц, 4Н), 4.76 (т, 2Н), 3.18 (т, 2Н), 2.61-2.46 (т, 4Н; перекрывается сигналом растворителя), 1.35 (5, 6Н), 1.30 (т, 2Н), 0.82 (арр Ьг ί, I = 7.1, 2Н). ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₃₀Нз₃К₆: 477.28; найдено: 477.22.

Образец ОС-19

ΗΑΤυ (37.0 мг, 0.097 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору Кэп 5.2 (23.5 мг, 0.096 ммоль) и Образца ОС-19, стадия д (30 мг, 0.048 ммоль), в ΌΜΡ (2 мл) и ΌΙΡΕΑ (0.051 мл, 0.294 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч и концентрировали под вакуумом. Остаток разбавляли МеОН, фильтровали и очищали посредством препаративной ВЭЖХ (Аа1ег5 §ипйге С18 ΟΒΌ 30 х 100 мм 5 мкм; МеОН/вода/ΤРΑ буфер), чтобы получить ΤРΑ соль Образца ОС191 (31 мг) в виде твердого вещества не совсем белого цвета. ЖХ/МС (Условие 1): КТ = 1.72 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С5₂Η₆зN₈Ο₈ 927.48; найдено 927.05; ВЭЖХ (Условие 6): КТ = 26.32; 100% однородность. ^!Н ЯМР (500 МГц, Π)_:()Ι)ί δ 7.96-7.74 (т, 10Н), 5.02 (ί, 1=8.5 Гц, 2Н), 4.56 (б, 1=7.9 Гц, 2Н), 3.82 (б, 1=10.7 Гц, 2Н), 3.66 (5, 5Н), 3.60 (б, 1=3.4 Гц, 2Н), 3.54-3.44 (т, 2Н), 2.77 (бб, 1=13.3, 9.3 Гц, 2Н), 2.32-2.15 (т, 4Н), 1.88 (ί, 1=12.5 Гц, 2Н), 1.53 (Ьг. 5., 4Н), 1.41 (5, 6Н), 1.11 (б, 1=11.9 Гц, 2Н), 1.00 (б, 1=5.5 Гц, 2Н), 0.95 (б, 1=5.5 Гц, 2Н), 0.76 ('ί, 1=10.8, 5.5 Гц, 2Н), 0.64-0.58 (т, 2Н), 0.52-0.45 (т, 2Н), 0.42-0.32 (т, 2Н).

Образцы 1.1 и 1.2

ΤРΑ соль Образца 1.1 получали из Кэп 8.2 в соответствии с процедурой, описанной для Образца ОС-8.1. ЖХ (Условие 1): КТ =1.15 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С5οΗ₆зN₈Ο₈903.48; найдено: 903.50; МСВР: аналитически рассчитано для [Μ+Н]’ С5₀Η₆зN₈Ο₈ 903.4763; найдено: 903.4755; ^!Н ЯМР (500 МГц, ΌΜ8Ο-'₆) δ 7.89 (Ьг. 5., 8Н), 7.73 (б, 1=7.9 Гц, 2Н), 5.02 (ί, 1=8.5 Гц, 2Н), 4.71-4.61 (т, 2Н), 4.11 (ί, 1=8.7 Гц, 2Н), 3.78-3.67 (т, 3Н), 3.55 (5, 6Н), 3.24 (ί, 1=10.5 Гц, 2Н), 2.36 (Ьг. 5., 2Н), 2.30-2.06 (т, 4Н), 1.98 (б, 1=9.8 Гц, 2Н), 1.89-1.72 (т, 3Н), 1.49 (б, 1=6.4 Гц, 6Н), 1.23 (б, 1=5.8 Гц, 1Н), 1.09 (б, 1=13.4 Гц, 2Н), 0.68 ('ί, 1=10.6, 5.2 Гц, 2Н), 0.56-0.40 (т, 4Н), 0.36-0.27 (т, 2Н).

ΤРΑ соль Образца 1.2 получали, используя Кэп 8.1 в соответствии с процедурой, описанной для Образца ОС-8.1. ЖХ (Условие 1): КТ = 1.19 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ СзоН^^ 903.48; найдено: 903.50; ^!Н ЯМР (500 МГц, ΌΜ8Ο-'₆) δ 8.02-7.87 (т, 8Н), 7.71 (б, 1=8.5 Гц, 2Н), 5.09-4.97 (т, 2Н), 4.62 (ί, 1=6.7 Гц, 2Н), 4.30 (ί, 1=9.0 Гц, 2Н), 3.56 (5, 6Н), 3.38 (б, 1=8.9 Гц, 2Н), 3.17 (бб, 1=10.8, 8.1 Гц, 2Н), 2.36 (Ьг. 5., 2Н), 2.29-2.08 (т, 4Н), 1.99 (б, 1=3.4 Гц, 2Н), 1.86-1.75 (т, 3Н), 1.54 (б, 1=9.2 Гц, 2Н), 1.47 (б, 1=6.7 Гц, 6Н), 1.42 (Ьг. 5., 2Н), 1.26 (б, 1=6.1 Гц, 1Н), 0.68-0.59 (т, 2Н), 0.57-0.48 (т, 2Н), 0.45-0.31 (т, 4Н).

Образг^ы от 2.1 до 2.4

ΗΑΤυ (24.38 мг, 0.064 ммоль) добавляли к перемешиваемому раствору 4,4'-бис(2-((2§,5§)-5метилпирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-5-ил)-1,1'-бифенила, 4 НС1 (18.3 мг, 0.031 ммоль) и Кэп 9.1 (16.5

- 56 024201 мг, 0.064 ммоль) в ΌΜΕ (0.8 мл) и Э1РЕА (0.037 мл, 0.21 ммоль). Реакционную смесь продували азотом, плотно закрывали и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь частично концентрировали под струей азота и затем очищали посредством препаративной ВЭЖХ (АСЫ/вода с ТРА буфером), чтобы получить ТРА соль Образца 2.1 в виде не совсем белого твердого вещества (23.1 мг). ЖХ-МС время удерживания 2.205 мин; 1/2 т/ζ 466.55 (МН+). ЖХ данные записывали с помощью жидкостного хроматографа δΐιίιηαάζιι ЬС-10А§, оборудованного колонкой РЬепотепех-Ьипа 3 мкм С18 2.0x50 мм, с использованием детектора §РИ-10АУ ИУ-У15, при длине волны детектирования 220 нм. Условия элюирования представляли: скорость потока 0.8 мл/мин, градиент от 100% растворитель А/0% растворитель В до 0% растворитель А/100% растворитель В, продолжительность градиентного элюирования 4 мин, а время удерживания 1 мин и длительность анализа 5 мин, где растворитель А представлял собой 10% ацетонитрил/90% Н₂О/0.1% трифторуксусная кислота, и растворитель В представлял собой 10% Н₂О/90% ацетонитрил/0.1% трифторуксусная кислота. МС данные определяли, используя детектор ΜίαΓ0ΐη;ΐ55 Р1а£Гогт для ЖХ в режиме электрораспыления.

ТРА соли Образцов от 2.2 до 2.4 получали и охарактеризовывали согласно процедуре, описанной для Образца 2.1, если не указано иное.

Образец #	Исходная кислота	Время удерживания	'Л т/ζ (МН+)
Образец 2.2	Кэп 9.2	2.183	466.55
Образец 2.3	Кэп 9.3	1.145*	466.55
Образец 2,4	Кэп 9.4	1.183*	466.55

Продолжительность градиентного элюирования 2 мин, время задержки 1 мин и длительность анализа 3 мин.

НАТИ (22.8 мг, 0.060 ммоль) добавляли к перемешиваемому очищенному раствору 4,4'-бис(2((2§,5§)-5-метилпирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-5-ил)-1,1'-бифенила, 4 НС1 (17.1 мг, 0.029 ммоль) и Кэп

10.1 (16.3 мг, 0.060 ммоль) в ΌΜΕ (0.8 мл) и И1РЕА (0.035 мл, 0.200 ммоль). Реакционную смесь продували азотом, плотно закрывали и затем перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакционную смесь частично концентрировали под струей азота и затем очищали посредством препаративной ВЭЖХ (АСМ/вода с ТРА буфером), чтобы получить ТРА соль Образца 3.1 (23.4 мг) в виде твердого вещества белого цвета. ЖХ-МС время удерживания 2.425 мин; 1/2 т/ζ 480.55 (МН+). ЖХ данные записывали с помощью жидкостного хроматографа δΐιίιηαάζιι ЬС-10А§, оборудованного колонкой РЬепотепехЬипа 3 мкм С18 2.0x50 мм, с использованием детектора §РИ-10АУ ИУ-У15 при длине волны детектирования 220 нм. Условия элюирования представляли: скорость потока 0.8 мл/мин, градиент от 100% растворитель А/0% растворитель В до 0% растворитель А/100% растворитель В, продолжительность градиентного элюирования 4 мин, время удерживания 1 мин и длительность анализа 5 мин, где растворитель А представлял собой 10% ацетонитрил/90% Н₂О/0.1% трифторуксусная кислота, и растворитель В представлял собой 10% Н₂О/90% ацетонитрил/0.1% трифторуксусная кислота. МС данные определяли с использованием детектора ΜίαΓ0ΐη;ΐ55 Р1а1Гогт для ЖХ в режиме электрораспыления. ¹Н ЯМР (400 МГц, ΜеΟН-ά₄) δ 7.96-7.83 (т, 10Н), 5.32 (ΐ, 1=8.4 Гц, 2Н), 4.56 (ΐ, 1=6.4 Гц, 2Н), 4.34 (ά, 1=8.3 Гц, 2Н), 3.81-3.53 (т, 10Н), 2.70-2.59 (т, 2Н), 2.42-2.21 (т, 4Н), 2.12-1.91 (т, 6Н), 1.81-1.42 (т, 28Н).

ТРА соли Образцов от 3.2 до 3.4 получали и охарактеризовывали согласно процедуре, описанной для Образца 10.1, если не указано иное.

Образец ϋ	Исходная кислота	Время удерживания	'/2 т/ζ (МН+)
Образец 3.2	Кэп 10, стадия 4,2	1.332*	480.5
Образец 3.3	Кэп 10, стадия <4.3	2.126	480.6
Образец 3.4	Кэп 10, стадия ά4	2273	480.6

- 57 024201

К раствору 4,4'-бис(2-((2§,5§)-5-метилпирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-5-ил)-1,1'-бифенилтетрагидрохлорида (0.134 г, 0.224 ммоль), Кэп-12 (0.1034 г, 0.519 ммоль) и Ν,Ν-диизопропилэтиламина (0.313 мл, 1.791 ммоль) в ЭМР (1.5 мл) добавляли НАТи (0.179 г, 0.470 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при ~25°С в течение 3.5 ч. Затем реакционную смесь разбавляли МеОН (3.5 мл), и полученный продукт очищали посредством препаративной ВЭЖХ (введенный объем: 2000 мкл; продолжительность градиентного элюирования: 15 мин; начальная концентрация растворителя В (%): 30, конечная концентрация растворителя В (%): 100, скорость потока: 30 мл/мин; длительность анализа: 15 мин. Растворитель А: 10% МеОН - 90% Н₂О - 0.1% ТРА, Растворитель В: 90% МеОН - 10% Н₂О - 0.1% ТРА; колонка: ХТЕККА 30x100 мм §5; отбор посредством УФ: 220 нм), что позволяло получить смесь диастереомеров. Смесь диастереомеров затем разделяли посредством препаративной ВЭЖХ (введенный объем: 2000 мкл; продолжительность градиентного элюирования: 30 мин; начальная концентрация растворителя В (%): 10, конечная концентрация растворителя В (%): 50, скорость потока: 30 мл/мин; длительность анализа: 30 мин. Растворитель А: 10% ацетонитрил - 90% Н₂О - 0.1% ТРА, растворитель В: 90% ацетонитрил - 10% Н₂О - 0.1% ТРА; колонка: \Уа1ег5-§ипНге 30x100 мм §5; отбор посредством УФ: 220 нм), чтобы выделить два симметричных диастереомера: Образец 4.1 (первое извлечение) (35.5 мг) в виде не совсем белой пены. ЖХ (Условие 1): КТ = 13.696 мин. ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₆Н₅₅^О₆ 815.42; найдено 815.49; Образец 4.2 (последнее извлечение) (38.3 мг) в виде не совсем белой пены. ЖХ (Условие 1): КТ = 14.492 мин. ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₆Н₅₅^О₆815.42; найдено 815.49.

Образцы 5.1 и 5.2 получали из 4,4'-бис(2-((2§,5§)-5-метилпирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-5-ил)-1,1'бифенилтетрагидрохлорида и Кэп-11 в соответствии с процедурой, описанной для Образцов 4.1 и 4.2. Образец 5.1 (первое извлечение) (56.4 мг) получали в виде светло-желтой пены: ЖХ (Условие 1): КТ = 15.124 мин. ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Н₅₉^О₆ 843.46; найдено 843.40; и Образец 5.2 (последнее извлечение) (50.7 мг) получали в виде белой пены. ЖХ (Условие 1): КТ = 16.559 мин. ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₄₈Н₅₉^О₆ 843.46; найдено 843.40.

НАТи (173 мг, 0.455 ммоль) добавляли к перемешиваемому очищенному раствору 4,4'-бис(2((2§,5§)-5-метилпирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-5-ил)-1,1'-бифенила, 4 НС1 (109 мг, 0.182 ммоль) и Кэп

13.1 (117 мг, 0.455 ммоль) в ЭМР (2.0 мл) и Э1РЕА (0.222 мл, 1.27 ммоль). Реакционную смесь продували азотом, плотно закрывали и затем перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь частично концентрировали под струей азота и затем очищали посредством препаративной ВЭЖХ (АС0/вода с ТРА буфером), чтобы получить ТРА соль Образца 6 (135 мг) в виде не совсем белого твердого вещества. ЖХ-МС время удерживания 2.196 мин; т/ζ 931.7 (МН+). ЖХ данные записывали с помощью жидкостного хроматографа δΐιίπκ^ζιι ЬС-10А§, оборудованного колонкой РЬепотепех-Ьипа 3 мкм С18 2.0x50 мм, с использованием детектора §РЭ-10АУ υν-νί5 при длине волны детектирования 220 нм. Условия элюирования представляли: скорость потока 0.8 мл/мин, градиент 100% растворитель А/0% растворитель В до 0% растворитель А/100% растворитель В, Продолжительность градиентного элюирования 4 мин, время удерживания 1 мин и длительность анализа 5 мин, где растворитель А представлял собой 10% ацетонитрил/90% Н₂О/0.1% трифторуксусная кислота, и растворитель В представлял собой 10% Н₂О/90% ацетонитрил/0.1% трифторуксусная кислота. МС данные определяли с использованием

- 58 024201 детектора М1сгота55 Р1а£Гогт для ЖХ в режиме электрораспыления. ¹Н ЯМР (400 МГц, МеОН-б₄) δ 7.96 (5, 2Н), 7.88 (5, 8Н), 5.20 (бб, 1=10.7, 7.2 Гц, 2Н), 4.79 (ΐ, 1=6.8 Гц, 2Н), 4.31-4.24 (т, 2Н), 3.85-3.76 (т, 2Н), 3.74-3.69 (т, 2Н), 3.67 (5, 6Н), 2.91-2.83 (т, 2Н), 2.55 (6ϊ, 1=12.8, 6.7 Гц, 2Н), 2.47-2.23 (т, 6Н), 2.00 (бб, 1=12.3, 5.8 Гц, 2Н), 1.79 (б, 1=12.3 Гц, 2Н), 1.69-1.27 (т, 12Н), 1.15 (бб, 1=8.3, 4.3 Гц, 2Н), 0.47 (ϊ6, 1=8.5, 3.9 Гц, 2Н), 0.34-0.21 (т, 4Н), -0.01--0.09 (т, 2Н).

ТРА соль Образца 7 получали из Кэп 13.2 и охарактеризовывали согласно процедуре, описанной для Образца 6. ЖХ-МС: время удерживания 2.208 мин; т/ζ 931.7 (МН+).

К суспензии (К)-5-(гидроксиметил)пирролидин-2-она (5 г, 43.4 ммоль) и трифенилфосфина (17.09 г,

65.1 ммоль) в ацетонитриле (300 мл) при 0°С добавляли по каплям на льдо-водяной бане раствор карботетрабромида (21.60 г, 65.1 ммоль) в ацетонитриле (80 мл). Суспензия постепенно изменялась, становясь прозрачным раствором в течение 1 ч, и баню удаляли, а раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 23 ч. Растворитель удаляли в вакууме, и полученный сырой продукт подвергали флэшхроматографии (30-100% ЕЮАс/гексан, 10-20% МеОН/ЕЮАс), чтобы получить Образец 8, Стадия а в виде коричневого масла (6.3 г). ЖХ (Условие II): КТ = 1.29 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₅Н₉В^О: 179.99; найдено: 178.11. Ή ЯМР (СОС1₃, δ = 7.26 ррт, 400 МГц) δ 6.09 (Ьг. 5., 1Н), 4.07-3.92 (т, 1Н), 3.46 (бб, 1=10.3, 4.8 Гц, 1Н), 3.36 (бб, 1=10.3, 7.5 Гц, 1Н), 2.55-2.30 (т, 3Н), 1.99-1.81 (т, 1Н).

Образец 8, Стадия Ь

Н

К смеси твердого Образца 8, Стадия а (6.33 г, 35.6 ммоль) и фторида серебра (I) (14.21 г, 112 ммоль) добавляли ацетонитрил (500 мл) медленно с помощью шприца, при этом реакционная колба была закрыта алюминиевой фольгой. Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 40 ч. Смесь фильтровали через диатомитовую землю (СеШе®), и растворитель удаляли в вакууме. Полученный сырой продукт подвергали флэш-хроматографии (50-100% ЕЮАс/гексаны, ЕЮАс, 10-20% МеОН/ЕЮАс), чтобы получить Образец 8, Стадия Ь (1.96 г) в виде бесцветного масла. ЖХ (Условие II): КТ = 0.78 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С5Н₉РNΟ: 118.07; найдено: 118.0. ¹Н ЯМР (СПС1₃, δ = 7.26 ррт, 400 МГц) δ 6.07 (Ьг. 5., 1Н), 4.51 (бб, 1=9.5, 3.5 Гц, 0.5Н), 4.43-4.31 (т, 1Н), 4.23 (бб, 1=9.5, 7.3 Гц, 0.5Н), 4.06-3.91 (т, 1Н), 2.48-2.34 (т, 2Н), 2.32-2.18 (т, 1Н), 1.84 (т, 1Н).

Образец 8, Стадия с

Вое

К раствору Образца 8, Стадия Ь (2.61 г, 22.28 ммоль) и ОМАР (0.109 г, 0.891 ммоль) в ЭСМ (110 мл) добавляли ди-трет-бутил дикарбонат (5.11 г, 23.40 ммоль) тремя порциями на льдо-водяной бане при 0°С в течение 10 мин. Баню удаляли, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч. Добавляли 50% насыщенный раствор NаНСΟ₃ (30 мл) и смесь перемешивали в течение 10 мин. Органический слой отделяли и высушивали над №₂8О₄. Растворитель выпаривали в вакууме, получая при этом сырой продукт в виде желтого масла. Полученный сырой продукт подвергали флэш-хроматографии (080% ЕЮАс/гексан), чтобы получить Образец 8, Стадия с (3.87 г) в виде бесцветного масла. ЖХ (Условие

- 59 024201

II): КТ = 2.64 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Ыа]+ С₁₀Н₁₆РМ№0₃: 240.10; найдено: 240.14. ¹Н ЯМР (СПС1₃, δ = 7.26 ррт, 500 МГц) 4.68 (444, 1=48.2, 9.8, 3.5 Гц, 1Н), 4.50 (444, 1=45.7, 9.8, 2.5 Гц, 1Н), 4.31 (44т, 1=27.7, 8.8 Гц, 1Н), 2.69 (414, 1=17.7, 9.8, 1.9 Гц, 1Н), 2.44 (44ц, 1=17.7, 9.8, 1.1 Гц, 1Н), 2.20 (т, 1Н), 2.06 (т, 1Н), 1.51 (5, 9Н).

Образец 8, Стадия ά из.

ОМе

Вое

К раствору Образца 8, Стадия с (2.67 г, 12.29 ммоль) в ТНР (50 мл) в сухой льдо-ацетоновой бане при -78°С добавляли по каплям супергидрид (14.75 мл, 14.75 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при -78°С в течение 40 мин. К смеси добавляли насыщенный водный раствор (15 мл) NаΗСΟ₃, и сухую льдо-ацетоновую баню удаляли, и температуру поднимали до комнатной. Добавляли по каплям 20 капель 50% Н₂О₂, и смесь перемешивали в течение 20 мин. Органический слой отделяли, и водный слой экстрагировали простым эфиром (2x40 мл), Объединенный органический слой высушивали над Ыа₂80₄, растворитель выпаривали в вакууме, получая при этом сырой промежуточный продукт (2.34 г) в виде прозрачного масла. Этот сырой промежуточный продукт растворяли в метаноле (30 мл) и добавляли ртолуолсульфоновой кислоты моногидат (0.223 г, 1.174 ммоль), смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Добавляли насыщенный водный раствор NаΗСΟ₃ (5 мл), экстрагировали простым эфиром (3x35 мл), высушивали над Ыа₂80₄ и выпаривали в вакууме, получая при этом прозрачное масло как сырой продукт. Полученный сырой продукт подвергали флэш-хроматографии (0-40% Е10Ас/гексан), чтобы получить Образец 8, Стадия 4 в виде бесцветного масла (1.97 г). ЖХ (Условие II): КТ = 3.43 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Ыа]+ СцН₂₀Ж№10₃: 256.13; найдено: 256.19. ¹Н ЯМР (СПС1₃, δ = 7.26 ррт, 400 МГц) 5.27-5.16 (т, 1Н), 4.59-4.26 (т, 2Н), 4.03 (Ьг. 5., 1Н), 3.29 (Ьг. 5., 3Н), 2.17-1.96 (т, 2Н), 1.96-1.85 (т, 1Н), 1.85-1.70 (т, 1Н), 1.55-1.39 (т, 9Н).

Образец 8, Стадия е ¹ ι

Вое Вое

К раствору Образца 8, Стадия 4 (1.97 г, 8.44 ммоль) в ЭСМ (50 мл), охлажденному с помощью -78°С сухой льдо-ацетоновой бани, добавляли триметилсилил цианид (1.698 мл, 12.67 ммоль), сопровождая эфирным комплексом (1.605 мл, 12.67 ммоль) трехфтористого бора. Смесь перемешивали в течение 1 ч. Добавляли насыщенный раствор NаΗСΟ₃ (20 мл), и баню удаляли, и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Органический слой отделяли и экстрагировали ЭСМ (40 мл х 2), высушивали над Ν;·ι₂δ0.·ι и выпаривали в вакууме. Полученный сырой продукт подвергали флэш-хроматографии (0-40%, 40-55% Е10Ас/гексан), чтобы получить первое извлечение Образец 8, Стадия е.1 (транс; 1.12 г) и второе извлечение Образец 8, Стадия е.2 (цис; 0.63 г) в виде твердых веществ белого цвета. ЖХ (Условие II): КТ = 3.04 мин; ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Ыа]+ СпН₁₇Р^№0₂: 251.12; найдено: 251.16. ¹Н ЯМР (СОС1₃, δ = 7.26 ррт, 400 МГц): 4 4.67-4.44 (т, 3Н), 4.12-4.06 (т, 1Н), 2.32 (Ьг 5, 2Н), 2.18 (Ьг 5, 2Н), 1.52 (5, 9Н).

Образец 8, Стадия/

К раствору Образца 8, Стадия е 7-цис (0.51 г, 2.234 ммоль) в диоксане (3 мл) добавляли НС1 (12 М, 3 мл, 99 ммоль). Смесь нагревали при 80°С в течение 8 ч. Растворитель выпаривали в вакууме, и остаток высушивали под вакуумом в течение 16 ч, получая при этом сырой промежуточный продукт (0.55 г) в виде желтого твердого вещества. Этот сырой промежуточный продукт (0.55 г) растворяли в ТНР (4 мл), №0Н (2 М, 3.44 мл, 6.89 ммоль), и добавляли ди-трет-бутил дикарбонат (0.719 г, 3.30 ммоль), и смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч. Растворитель выпаривали в вакууме и добавляли воду (5 мл) и простой эфир (5 мл). Водный слой отделяли и подкисляли 10% НС1 до рН 3 на льдоводяной бане, экстрагировали Е10Ас (15 мл, 3х) и высушивали над Ыа₂80₄, растворитель выпаривали в вакууме, получая при этом Образец 8, стадия £ (0.50 г) в виде твердого вещества желтого цвета. ¹Н ЯМР (СПС1₃, δ = 7.26 ррт, 400 МГц): δ 4.69-4.14 (т, 4Н), 2.29-2.07 (т, 4Н), 1.50-1.48 (Шо 5, 9Н).

- 60 024201

Образец 8, стадия £ тщательно прорабатывали, чтобы получить Образец 8 в соответствии с процедурой, описанной для синтеза Образца 0С17.1 с использованием указанных и других подходящих предшественников. ЖХ/МС: аналитически рассчитано для [М+Н]+ С₅₀Н₆₁РА₈О₈: 939.46; найдено: 939.77. КТ = 15.99 мин при следующем ЖХ условии: начальная концентрация растворителя В (%) = 10; конечная концентрация растворителя В (%) = 98; продолжительность градиентного элюирования = 35 мин; длительность анализа = 35 мин; скорость потока = 0.35 мл/мин; длина волны = 306 нм; растворитель А = вода с 0.05% ТРА; растворитель В = ацетонитрил с 0.05% ТРА; колонка = \Уа1егз Асдийу ВЕН С18; 1.7 мкм; 150х2.1 мм; ГО; (температура 35°С).

Биологическая активность

В настоящем изобретении использовали анализ репликона НСУ, который подготавливали, проводили и подтверждали в соответствии с тем, как описано в РСТ/ϋδ 2006/022197, заявке того же заявителя, что и данная заявка, и в ОВук е1 а1., Ληΐ^т^с^οЬ. Адеп1з СЬетοίЬе^., 2005 Арг., 49(4): 1346-53. Также были использованы методы анализа, включающие применение люциферазных репортеров (описание см.

Ара^гот).

Для исследования семейства соединений, описанного в настоящем изобретении, использовали клетки с репликоном ΗСV-ηеο и клетки с репликоном, содержащие резистентные заместители в №5А фрагменте. Как было установлено, эти соединения имели различную степень пониженной ингибирующей активности в отношении клеток, содержащих мутации, в сравнении с соответствующей ингибирующей активностью в отношении клеток дикого типа. Таким образом, соединения согласно настоящему изобретению могут являться эффективными ингибиторами функции белка НСУ №5А и, как предполагается, они могут быть так же эффективны в комбинациях, описанных ранее в заявке РСТ/ϋδ 2006/022197 и в заявке того же заявителя \УО/04014852. Необходимо понимать, что соединения согласно настоящему изобретению могут ингибировать несколько генотипов НСУ. В табл. 2 приведены значения ΕС5₀ (эффективная концентрация для достижения 50%-го ингибирования) для типичных соединений согласно настоящему изобретению в отношении генотипа НСУ 1Ь.

Соединения согласно настоящему изобретению могут ингибировать НСУ по механизмам, аналогичным ингибированию №5А, в дополнение к ним или иным, чем ингибирование №5А. В одном варианте осуществления, соединения согласно настоящему изобретению ингибируют репликон НСУ, а в другом варианте осуществления, соединения согласно настоящему изобретению ингибируют №5А. Соединения согласно настоящему изобретению могут ингибировать несколько генотипов НСУ. Диапазоны ΕС5₀ в отношении генотипа НСУ 1Ь являются следующими: А (900.01 пМ-140 нМ); В (100.01 пМ-900 пМ); С (5.01-100 пМ); Ό (0.5-5 пМ).

- 61 024201

Таблица 2

Образец	1Ь (мкМ)	Диапазон	Наименование
осы		Э	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2- диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- диил(1-((1К, Зз, 55)-6,6-дифторбицикло[3 1 0]гекс-3- ил)-2-оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамат (диастереомер 1)
ОС 1.2	4.90Е-06	ϋ	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2- диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- диил(1-((1К,Зз,55)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3- ил)-2-оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамат (диастереомер 2)
ОС 1.3		В	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2- диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- диил(1-((1К,Зз,55)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3- ил)-2-оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамат (диастереомер 3)
0С2.1		э	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2- диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- диил(1-((1К,Зг,58)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3- ил)-2-оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамат (диастереомер 1)
ОС 2.2		с	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2- диил(1К,35,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- диил(1-((1К,Зг,58)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3- ил)-2-оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамат (диастереомер 2)
ОС 2.3	1.08Е-03	А	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2- диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- диил(1-((1К,Зг,58)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3- ил)-2-оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамат (диастереомер 3)
ОС 3.1		Э	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2- диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-
			диил(1-((1К,Зг,58)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо- 2,1-этандиил)))бискарбамат (диастереомер 1)
ОС3.2		С	диметил (4,4’-бифенилдиилбис( 1Н-имидазол-4,2диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- диил(1-((1К,Зг,55)-6 нцикло[3.1.0]гекс-3-ил )-2-оксо- 2,1-этандиил)))бискарбамат (диастереомер 2)
ОС 3.3		В	диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2- диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3 10]гексан-3,2- диил(1-((1К,Зг,58)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо- 2,1-этандиил)))бискарбамат (диастереомер 3)
ОС4.1		С	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2- диил(1К,35,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- диил( 1 -((1 К, 5 8,6$)-3-оксабицикло[3.1,0]гекс-6-ил)- 2-оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамат (диастереомер 1)
ОС'4.2		В	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2- диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- диил(1-((1К,58,6з)-3-оксабицикло[3.1.0]гекс-6-ил)- 2-оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамат (диастереомер 2)
ОС 4.3			диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2- диил(1К,35,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- диил(1-((1К,58,6з)-3-оксабицикло[3.1.0]гекс-6-ил)- 2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамат (диа стереомер 3)
0С5.1	5.93Е-07	ϋ	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2- диил(1К,35,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- днил(1-((1К,Зз,55)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2- оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамат (диастереомер 1)
ОС5.2		э	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2- диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- диил(1-((1К,Зз,58)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2- оксо-2,1-этандиил)))бискарбамат (диастереомер 2)
ОС5.3	5.55Е-06	с	диметил (4,4’-бифенилдиилбис( 1Н-имидазол-4,2-

- 62 024201

			диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- диил(1-((1К,38,58)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2- оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамат (диастереомер 3)
ОС6		ϋ	метил (2-((1К,38,5К)-3-(4-(4'-(4-хлор-2-((1К,35,5К)- 2-(((1К,Зз,55)-6,6-дифторбицикло [3.1.О]гекс-3- ил)((метоксикарбонил)амино) ацетил)-2- азабнцнкло[3 1 0]гекс-3-ил)-1Н-имидазол-5-ил)-4- бифенилил)-1Н-имидазол-2-ил)-2- азабицикло[3.1,0]гекс-2-ил)-1 -((1К,3 5,58)-6,6- дифторбицикло[3.1,0]гекс-3-ил)-2-оксоэтил) карбамат
0С7		ϋ	диметил (4,4'-бифенилдиилбис((4-хлор-1Н- имидазол-5,2-днил)( 1 К.,3 8,5К)-2- азабицикло[31.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,3$, 58)-6,6- дифторбицикло[3.1,0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1- этандиил)))бискарбамат
ОС8.1		ϋ	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2- диил((28,58)-5-метил-2,1-пирролидиндиил)(1-(4- оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1- этандиил)))бискарбамат (диастереомер 1)
0С8.2		ϋ	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1 Н-имидазол-4,2диил((25,5 8)-5-метил-2,1 -пирролидиндиил)( 1 -(4- оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1- этандиил)))бискарбамат (диастереомер 2)
0С9		С	метил (2-((28,48)-2-(7-((2-((28,48)-1- (((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7- ил)ацетил)-4-метил-2-пирролидинил)-1Н- бензимидазол-5-ил)этинил)-1Н-нафто[1,2- 0]имидазол-2-ил )-4-метил-1 -пирролидинил)-1 -(4- оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамат
ОСЮ	2.59Е-04	Β	метил (2-((28)-2-(7-(2-((28)-1- (((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7- ил)ацетил)-2-пирролидинил)-1Н-бензимидазол-5- ил)-1 Н-нафто[ 1,2-д]имидазол-2-ил)-1 -

		пирролидинил)-1-(4-оксаспиро[2.5]ост-7-ил)-2- оксоэтил)карбамат
ОС и	с	метил (2-((17?,35,57?)-3-(4-(4-(2-((17?,30’,57?)-2- (((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7- ил)ацетил)-2-азабицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-4,5- дигидро-3#-нафто[1,2-б/]имидазол-7-ил)фенил)- 1Я-имидазол-2-ил)-2-азабицикло[3.1.0]гекс-2-ил)- 1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамат
0С12	в	метил (2-((28)-2-(7-(2-((28)-1- (((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7- ил)ацетил)-2-пирролидинил)-1 Н-бензимидазол-5- ил)-4,5-дигидро-1Н-нафто[1,2-<1]имидазол-2-ил)-1- пирролидинил)-1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2- оксоэтил)карбамат
ОС13	с	диметил (1Н,ГН-7,7'-бинафто[1,2-д]имидазол-2,2'- диилбис( (28)-2,1 -пирролидиндиил( 1 -(4- оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1 - этандиил)))бискарбамат
ОП	с	диметил (((38,3'8,58,5'8)-5,5'-(5,5-((18,28)- циклопропан-1,2-диилбис(4,1 -фенилен))бис(1Нимидазол-5,2-диил))бис(3-метилпирролидин-5,1- диил))бис(2-оксо-1-(4-оксаспиро[2.5]остан-7- ил)этан-2,1 -диил))дикарбамат
ОЬ2	с	метил (2-(((18)-1-(5-((2-((18)-1- ((((метоксикарбонил )амино)(4-оксаспиро[2.5]окт- 7-ил)ацетил)(метил)амино)этил)-1Н-бензимидазол- 6-ил)этинил)-1Н-бензимидазол-2- ил )этил)( метил )амино)-1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7- ил)-2-оксоэтил)карбамат
оьз	с	метил ((25)-1-((1К,35,5К)-3-(5-(4'-(2-((1К,35,5К)-2- (((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7- ил)ацетил)-2-азабицикло [3 1.0]гекс-3-ил)-1Н- имидазол-5-ил)бифенил-4-ил)-1Н-имидазол-2-ил)- 2-азабицикло[3.1.0]гекс-2-ил)-3-метил-1 -

- 63 024201

			оксобутан-2-ил)карбамат
ОЬ4		С	диметил (((1 К,1 ^,К,38,3'8,5К,5'К)-3,3^,-(5,5'-(этин - 1,2-диилбис(4,1-фенилен))бис(1Н-имидазол-5,2- диил))бис( 2-азабицикло [3.1.0]гексан-3,2- диил))бис(2-оксо-1-(4-оксаспиро [2.5]октан-7- ил)этан-2,1 -диил))дикарбамат
ОЬ5		С	диметил (((1К.,ГК.,38,3'8,5К.,5'К.)-3,3'-(5,5'-([1,Г- бифенил]-4,4'-диил)бис(4-хлор-1Н-имидазол-5,2- диил))бис(2-азабицикло[3.1.0] гексан-3,2- диил))бис(2-оксо-1-(4-оксаспиро [2.5]октан-7- ил)этан-2,1 -диил))дикарбамат
ОЛб		в	метил (2-((28)-2-(5-(6-(4-(2-((23)-1- (((метоксикарбонил )амино)(4-оксаспиро[2 5]οκτ-7- ил)аиеτил)πиρροлидин-2-ил)-1Η-имидазοл-5- ил)φенил)πиρидин-3-ил)-1Η-имидазοл-2- ил)пирролидин-1-ил)-1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)- 2-оксоэтил)карбамат
ОЛ7		с	диметил (((23,2'3)-2,2'-(5,5'-(этин-1,2-диилбис(4,1- фенилен))бис( 1 Н-имидазол-5,2- диил))бис( пирролидин-2,1 -диил ))бис(2-оксо-1 -(4- оксаспиро[2 5]октан-7-ил)этан-2,1 - диил))дикарбамат
ОС14	1.45Е-02	А	диметил (беюен-1,4-диилбис(1#-имидазол-4,2- диил(2$)пирролидин-2,1 -диил( 1 -(4- оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтан-2,1- диил)))бискарбамат
ОЛ8		В	диметил (((ЗК,3'К)-3,3'-(5,5'-([1,Г-бифенил]-4,4'- диил)бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(морфолин- 4,3-диил))бис(2-оксо-1-(4-оксаспиро[2 5]октан-7- ил)этан-2,1 -диил))дикарбамат
ОС15		С	метил (2-((25)-2-(5-(4-((2-((25)-1- (((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7- ил)ацетил)пнрролидин-2-ил)-1#-бензнмидазол-4- ил)окси)фенил)- Ш-бензимидазол-2-
			ил)пирролидин-1-ил)-1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)- 2-оксоэтил)карбамат
ОС16		В	метил (2-((23)-2-(7-(2-((23)-1- (((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7- ил)ацетил)-2-пирролидинил)-1Н-бензимидазол-5- нл)-4,5-дигидро- 1Н-нафто[ 1,2-б]имидазол-2-ил)-1 пирролидинил)-1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2- оксоэтил)карбамат
ОЛ9		В	диметил (((23,2'3)-2,2'-(5,5'-(этин-1,2-диил)бис(1Н- бензо[б]имидазол-5,2-диил))бис(пирролидин-2,1- диил))бис(2-оксо-1-(4-оксаспиро[2.5]октан-7- ил)этан-2,1 -диил))дикарбамат
ОНО		В	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1Н-имидазол-4,2диил( 1 К.,3 8,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2- диил(( 13)-2-оксо-1 -(4-оксоциклогексил )-2,1 - этандиил)))бискарбамат
ОЛП		С	диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2- диил(1К,33,5К)-2-азабицикло[3 1 0]гексан-3,2- диил(( 13)-2-оксо-1 -(З-(трифторметил)бицикло [1.1.1 ]пент-1 -ил )-2,1 -этандиил)))бискарбамат
ОЛ12		в	диметил (4,4'-бифенилдиилбис( 1Н-имидазол-4,2диил((28,58)-5-метил-2,1-пирролидиндиил )((18)-2- оксо-1-(3-(трифторметил)бицикло[1.1.1]пент-1-ил)- 2,1 -этандиил)))бискарбамат
^)С17.1		ϋ	диметил ((3-метил-4,4'-бифенилдиил)бис(1Н- имидазол-4,2-диил((28,58)-5-метил-2,1- пирролидиндиил)(1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2- оксо-2,1-этандиил)))бискарбамат (диастереомер 1)
ОС 17.2		ϋ	диметил ((З-метил-4,4’-бифенилдиил)бис(1Н- имидазол-4,2-диил((23,53)-5-метил-2,1- пирролидиндиил)(1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2- оксо-2,1-этандиил)))бискарбамат (диастереомер 2)
£)С18.1		ϋ	диметил ((3-фтор-4,4'-бифенилдиил)бис(1Н- имидазол-4,2-диил((28,58)-5-метил-2,1-

- 64 024201

			пирролидиндиил)(1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2- оксо-2,1-этандиил)))бискарбамат (диастереомер 1)
ζ)(218.2		ϋ	диметил ((З-фтор-4,4'-бифенилдиил)бис( 1Н- имидазол-4,2-диил((23,53)-5-метил-2,1- пирролидиндиил)(1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2- оксо-2,1-этандиил)))бискарбамат (диастереомер 2)
ОС19		С	диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2- диил((1К,33,5К)-5-метил-2- азабицикло[3.1 0]гексан-3,2-диил)(1-(4- оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1- этандиил)))бискарбамат
1.1		С
1.2		с
2.1		А
2.2		А
2.3	4.88Е-06	ϋ
2.4		С
3 1		А
3.2		А
3.3	5.04Е-06	С
3.4		С
4.1		ϋ
4.2	243Е-04	В
5.1		ϋ
5.2	9.07Е-03	А
6		С
7		С
8		С

Для специалиста в данной области очевидно, что настоящее изобретение не ограничивается приведенными выше иллюстративными образцами и что оно может быть осуществлено в других конкретных формах без отступления от его существенных признаков. Поэтому желательно, чтобы эти образцы рассматривались во всех отношениях как иллюстративные, а не как ограничительные. Ссылочный материал делается к прилагаемой формуле изобретения, а не к вышеприведенным образцам, и все изменения, которые находятся в пределах значения и области соответствия формуле изобретения, поэтому, как предполагается, охватываются в ней.

Claims

1);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,3г,58)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер

1);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,3в,58)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер

1. Соединение, выбранное из диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,3в,58)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер

2. Соединение, выбранное из

- 67 024201 или их фармацевтически приемлемой соли.

2);

3. Соединение, которое представляет собой диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((2§,5§)-5-метил-2,1-пирролидиндиил)(1-(4оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамат или его фармацевтически приемлемую соль.

3);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,3г,58)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер 1);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,3г,58)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер 2);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,3г,58)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер 3);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,38,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,58,6в)-3-оксабицикло[3.1.0]гекс-6-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер 1);

- 65 024201 диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К^,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил( 1-((1Κ5δ,65)-3 -оксабицикло [3.1.0]гекс-6-ил)-2-оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамата (диастереомер 2);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К^,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К^,65)-3-оксабицикло[3.1.0]гекс-6-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер 3);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К^,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,35^)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер 1);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К^,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,35^)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер 2);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К^,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(1-((1К,35^)-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер 3);

метил (2-((1К^,5К)-3-(4-(4'-(4-хлор-2-((1К^,5К)-2-(((1К,35^)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3ил)((метоксикарбонил)амино)ацетил)-2-азабицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-1Н-имидазол-5-ил)-4-бифенилил)1Н-имидазол-2-ил)-2-азабицикло[3.1.0]гекс-2-ил)-1-((1К,35^)-6,6-дифторбицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-2оксоэтил)карбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис((4-хлор-1Н-имидазол-5,2-диил)(1К^,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил( 1 -((1К,35^)-6,6-дифторбицикло [3.1.0] гекс-3 -ил)-2-оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((2δ,5δ)-5-метил-2,1-пирролидиндиил)(1-(4оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер 1);

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((2δ,5δ)-5-метил-2,1-пирролидиндиил)(1-(4оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата (диастереомер 2);

метил (2-(^^)-2-(7-((2-(^^)-1-(((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)ацетил)4-метил-2-пирролидинил)-1Н-бензимидазол-5-ил)этинил)-1Н-нафто[1,2-б]имидазол-2-ил)-4-метил-1-пирролидинил)-1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамата;

метил (2-(^)-2-(7-(2-(^)-1-(((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)ацетил)-2-пирролидинил)-1Н-бензимидазол-5-ил)-1Н-нафто[1,2-б]имидазол-2-ил)-1-пирролидинил)-1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамата;

метил (2-((1К^,5К)-3-(4-(4-(2-((1К^,5К)-2-(((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7ил)ацетил)-2-азабицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-4,5-дигидро-3Н-нафто[1,2-б]имидазол-7-ил)фенил)-1Нимидазол-2-ил)-2-азабицикло[3.1.0]гекс-2-ил)-1-(4-оксаспиро[2.5] окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамата;

метил (2-(^)-2-(7-(2-(^)-1-(((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)ацетил)-2-пирролидинил)-1Н-бензимидазол-5-ил)-4,5-дигидро-1Н-нафто[1,2-б]имидазол-2-ил)-1-пирролидинил)-1-(4оксаспиро [2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамата;

диметил (1Н,1 'Н-7,7'-бинафто [ 1,2-б]имидазол-2,2'-диилбис((2δ)-2,1 -пирролидиндиил( 1 -(4оксаспиро [2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1 -этандиил)))бискарбамата;

диметил ((^,3^^,5^)-5,5'-(5,5'-((Ш^)-циклопропан-1,2-диилбис(4,1-фенилен))бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(3 -метилпирролидин-5,1 -диил))бис(2-оксо-1 -(4-оксаспиро [2.5]октан-7 -ил)этан-2,1 диил))дикарбамата;

метил (2-(((Ш)-1-(5-((2-((Ш)-1-((((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)ацетил)(метил)амино)этил)-1Н-бензимидазол-6-ил)этинил)-1Н-бензимидазол-2-ил)этил)(метил)амино)-1-(4-оксаспиро [2.5]окт-7-ил) -2-оксоэтил)карбамата;

метил (^)-1-((1К^,5К)-3-(5-(4'-(2-((1К^,5К)-2-(((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт7-ил)ацетил)-2-азабицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-1Н-имидазол-5-ил)бифенил-4-ил)-1Н-имидазол-2-ил)-2-азабицикло[3.1.0]гекс-2-ил)-3-метил-1-оксобутан-2-ил)карбамата;

диметил (((1К,1'К^,3^,5К,5'К)-3,3'-(5,5'-(этин-1,2-диилбис(4,1-фенилен))бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(2-азабицикло [3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(2-оксо-1 -(4-оксаспиро [2.5]октан-7-ил)этан-2,1 -диил))дикарбамата;

диметил (((1К,1'К^,3^,5К,5'К)-3,3'-(5,5'-([1,Г-бифенил]-4,4'-диил)бис(4-хлор-1Н-имидазол-5,2-диил))бис(2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил))бис(2-оксо-1-(4-оксаспиро[2.5]октан-7-ил)этан-2,1-диил))дикарбамата;

метил (2-(^)-2-(5-(6-(4-(2-(^)-1-(((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)ацетил)пирролидин-2-ил)-1Н-имидазол-5-ил)фенил)пиридин-3-ил)-1Н-имидазол-2-ил)пирролидин-1-ил)-1(4-оксаспиро [2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамата;

диметил ((^,2^)-2,2'-(5,5'-(этин-1,2-диилбис(4,1-фенилен))бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(пирролидин-2,1 -диил))бис(2-оксо-1 -(4-оксаспиро [2.5]октан-7-ил)этан-2,1 -диил))дикарбамата;

диметил (бензен-1,4-диилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(2δ)пирролидин-2,1 -диил( 1 -(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтан-2,1-диил)))бискарбамата;

диметил (((3К,3'К)-3,3'-(5,5'-([1,1'-бифенил]-4,4'-диил)бис(1Н-имидазол-5,2-диил))бис(морфолин4,3-диил))бис(2-оксо-1-(4-оксаспиро[2.5]октан-7-ил)этан-2,1-диил))дикарбамата;

метил (2-(^)-2-(5-(4-((2-(^)-1-(((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)ацетил)пирролидин-2-ил)-1Н-бензимидазол-4-ил)окси)фенил)-1Н-бензимидазол-2-ил)пирролидин-1-ил)-1-(4оксаспиро [2.5]окт-7-ил) -2-оксоэтил)карбамата;

метил (2-(ДО)-2-(7-(2-(ДО)-1-(((метоксикарбонил)амино)(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)ацетил)-2-пир- 66 024201 ролидинил)-1Н-бензимидазол-5-ил)-4,5-дигидро-1Н-нафто[1,2^]имидазол-2-ил)-1-пирролидинил)-1-(4оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксоэтил)карбамата;

диметил (((2§,2'§)-2,2'-(5,5'-(этин-1,2-диил)бис(1Н-бензоВДимидазол-5,2-диил))бис(пирролидин-2,1диил))бис(2-оксо-1-(4-оксаспиро[2.5]октан-7-ил)этан-2,1-диил))дикарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,3§,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил((18)-2-оксо-1-(4-оксоциклогексил)-2,1-этандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил(1К,3§,5К)-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил(( 1 §)-2-оксо-1-(3-(трифторметил)бицикло [1.1.1]пент-1 -ил)-2,1 -этандиил)))бискарбамата;

диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((2§,5§)-5-метил-2,1-пирролидиндиил)((18)-2оксо-1-(3 -(трифторметил)бицикло[1.1.1]пент-1-ил)-2,1-этандиил)))бискарбамата;

диметил ((3-метил-4,4'-бифенилдиил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил((2§,5§)-5-метил-2,1-пирролидиндиил)(1-(4-оксаспиро [2.5 ]окт-7-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата;

диметил ((3-фтор-4,4'-бифенилдиил)бис(1Н-имидазол-4,2-диил((2§,5§)-5-метил-2,1-пирролидиндиил)(1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата и диметил (4,4'-бифенилдиилбис(1Н-имидазол-4,2-диил((1К,3§,5К)-5-метил-2-азабицикло[3.1.0]гексан-3,2-диил)(1-(4-оксаспиро[2.5]окт-7-ил)-2-оксо-2,1-этандиил)))бискарбамата;

или их фармацевтически приемлемой соли.

3);

4. Фармацевтическая композиция для лечения инфекции ΗСV, содержащая соединение по п.1 или его фармацевтически приемлемую соль и фармацевтически приемлемый носитель.

5. Способ лечения инфекции ΗСV у пациента, включающий введение пациенту терапевтически эффективного количества соединения по п. 1 или его фармацевтически приемлемой соли.