EA010424B1

EA010424B1 - ПИРИДО[2,3-d]ПИРИМИДИН-2,4-ДИАМИНЫ В КАЧЕСТВЕ ИНГИБИТОРОВ PDE 2

Info

Publication number: EA010424B1
Application number: EA200600973A
Authority: EA
Inventors: Томас Артур Бейер; Роберт Джеймс Чамберс; Келвин Лэм; Мей ЛИ; Эндрю Ян Моррелл; Дэвид Дьюэйн Томпсон
Original assignee: Пфайзер Продактс Инк.
Priority date: 2003-12-16
Filing date: 2004-12-06
Publication date: 2008-08-29
Also published as: SI1697356T1; HRP20080142T3; CA2549510A1; AR046766A1; RS50575B; CN1894245A; JP2007513996A; DK1697356T3; KR20060105776A; WO2005061497A1; MXPA06006777A; NL1027787C2; ECSP066643A; PL1697356T3; DE602004012154D1; TNSN06186A1; US20070135457A1; CN100439366C; NL1027787A1; TW200522952A

Abstract

Изобретение относится к соединениям формулы (I), их пролекарствам и фармацевтически приемлемым солям соединений или пролекарств, где значение символов n, X и Y определено в настоящей заявке, а также к фармацевтическим композициям, комбинациям и применениям упомянутых соединений.

Description

Изобретение относится к некоторым пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диаминам, применимым в качестве ингибиторов ΡΌΕ 2; их фармацевтическим композициям, их комбинациям, а также их применениям.

Уровень техники

Семейство ферментов фосфодиэстераз (ΡΌΕ) регулирует внутриклеточное содержание вторичных мессенджеров сАМР или сСМР путем гидролитического регулирования. Фосфодиэстераза типа II (ΡΌΕ 2) обладает каталитическим доменом низкой аффинности и аллостерическим доменом, специфичным для сСМР. Каталитический сайт низкой аффиности может гидролизовать как сАМР, так и сСМР с более низкой кажущейся К_М в случае сСМР по сравнению с сАМР. Однако, когда сСМР связывается с аллостерическим сайтом, каталитический сайт претерпевает конформационное изменение, демонстрируя высокую аффиность к сАМР. Наивысшая экспрессия РОЕ 2 наблюдается в мозге, но он обнаружен также и во многих других тканях и, следовательно, имеет широкий спектр функций и потенциальную терапевтическую применимость (Ι.Α. Веауо, Веу. РЫкю. Вюсйет. РНагт.. 135, 67, (1999)). Примеры функций и терапевтического потенциала РОЕ 2 встречаются в таких областях, как развитие нейронов, обучение и память (ЛУ.С’.С. уал 8!ауегеп, е! а1., Вгаш Век., 888, 275 (2001) и 1. ОНоппеИ, е! а1., 1. Рйагт. Ехр. Тйег., 302, 249 (2002)); секреция пролактина и альдостерона (М.О. Уе1агбе7, е! а1., Еиг. 1. Епбо., 143, 279 (2000) и N. Са11о-Рауе! е! а1., Епбо., 140, 3594 (1999)); дифференцировка костных клеток, рост и ресорбция костей (С. А11агб!-ЬатЬегд, е! а1., Вюсйет. Рйагт., 59, 1133 (2000) и 8. ^акаЬауакЫ, е! а1., 1. Вопе. Мшег. Век., 17, 249 (2002)); иммунологический ответ (М.О. Ноик1ау, е! а1., Се11 81дпа1., 8, 97 (1996)); сосудистый ангиогенез (Т. Кегау1к, е! а1., 1. Уакс. Век., 37, 235 (2000)); перенос воспалительных клеток (8.Ь. ХУоИа, е! а1., 1. Н1к!осйет.Су!осйет., 47, 895 (1999)); сердечные сокращения (В. Р1ксйте1к!ег, е! а1., 1. С1ш. 1пуек!., 99, 2710 (1997), Р. Попхеаи-Соиде, е! а1., 1. РЕукю1., 533, 329 (2001) и Ό.Ε Ра!егкоп, е! а1., Сагб. Век., 52, 446 (2001)); агрегация тромбоцитов (В.1. Нак1ат, е! а1., Вюсйет. 1., 323, 371 (1997)); расстройство женского полового возбуждения (Ρ8ΑΌ) (С.Р. Хаутал, е! а1., Еигореап Ра!еп! АррНса!юп РиЬЕсаЕоп №№ ЕР 10977707 и 1097706); и гипоксическое сужение легочных сосудов (1. Наупек, е! а1., 1. Рйагт. Ехр. Тйег., 276, 752 (1996)). Было показано, что ΕНNΑ (эритро-9-(2-гидрокси-3-нонил)аденин), т.е. мощный ингибитор аденозиндезаминазы, селективно ингибирует РОЕ 2, однако, применение ΕНNΑ в качестве основного терапевтического средства в отношении РОЕ 2 ограничено из-за низкой эффективности ингибирования РОЕ 2 и высокой эффективности ингибирования аденозиндезаминазы (В. Б1ксйше1к!ег, е! а1., Мо1. Рйагт., 48, 121 (1995)).

В настоящее время обнаружено, что некоторые производные пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диаминов формулы (I), приведенной далее в настоящей заявке, ингибируют РОЕ 2 и, следовательно, применимы в лечении физиологических расстройств, опосредованных клеточными сигнальными путями сАМР или сСМР.

Патенты США №№ 5547954 и 5710157 раскрывают некоторые 2,4-диамино-5,6-дизамещенные и 5,6,7-тризамещенные-5-деазаптеридины, их композиции, а также их применения для регулирования численности насекомых на сельскохозяйственных культурах.

Сущность изобретения

Изобретение относится к соединениям формулы (I)

их фармацевтически приемлемым солям, причем символы п, X и Υ определены далее в настоящей заявке; к их фармацевтическим композициям, их комбинациям, а также их применениям в способах лечения опосредованных РОЕ 2 состояний, заболеваний или симптомов.

Подробное описание изобретения

Настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I)

их фармацевтически приемлемым солям, где

В¹ и В² представляют собой водород или метоксигруппу, при условии, что В¹ и В² одновременно не являются водородом или метоксигруппой;

- 1 010424 η представляет собой 1, 2, 3 или 4;

X представляет собой связь; О; С=О; -Ν(Β)-, где В представляет -(С₁-С₃)алкил;

Υ представляет собой бензоксазолил, бензотиазолил. пиридил. фенил или тиенил. причем Υ необязательно замещен заместителями в количестве от 1 до 3. независимо выбранными из галогена. трифтор метила, метокси. -С(=О)СН₃, циано. -С(СН₃)2ОН, -СН(СН₃)ОН, -СН(СЕ₃)ОН, -С(С=О)СЕ_: или оксадиазолила.

Предпочтительная подгруппа соединений формулы (I). в основном. включает такие соединения. в которых X представляет собой связь и Υ представляет собой тиенил. пиридил или фенил. причем фенил необязательно замещен одним или двумя заместителями. независимо выбранными из галогена. трифторметила, метокси. -С(=О)СН₃, циано. -С(Сн₃)₂ОН, -СН(СН₃)ОН, -СН(СЕ₃)ОН, -С(С=О)СЕ₃ или оксадиазолила.

Особенно предпочтительная подгруппа соединений формулы (I) включает такие соединения. в которых X представляет собой связь. η представляет собой 2 или 3 и Υ представляет собой тиенил. пиридил или фенил. причем фенил необязательно замещен 1 или 2 заместителями. независимо выбранными из метокси. галогена. -С(Сн₃)₂ОН, -СН(СЕ₃)ОН или -С(С=О)СЕ₃.

Особенно предпочтительными соединениями настоящего изобретния являются следующие: Ν²,Ν⁴бис-(3,5-диметоксибензил)пиридо[2,3-й]пиримидин-2,4-диамин; ^-(3,5-диметоксибензил)-^-(2-пиридин4-илэтил)пиридо[2,3-й]пиримидин-2,4-диамин; Ц^,-(3.5-диметоксибензил)-^-(2-тиен-2-илэтил)пиридо[2.3-й] пиримидин-2,4-диамин; ^^,-(3.5-диметоксибензил)-^-2-фенетилпиридо[2.3-й]пиримидин-2.4-диамин; Ν⁴(3,5-диметоксибензил)-^-[2-(3,5-диметоксифенил)этил]пиридо[2,3-й]пиримидин-2,4-диамин; 2-(3-{3-[4(3,4-диметоксибензиламино)пиридо[2,3-й]пиримидин-2-иламино]пропил}фенил)пропан-2-ол; ^-(3,4-диметоксибензил)-^-[2-(4-фторфенил)этил]пиридо[2,3-й]пиримидин-2,4-диамин; ^-(3,4-диметоксибензил)^-фенетилпиридо[2,3-й]пиримидин-2,4-диамин; или ^-(3,4-диметоксибензил)-^-(3-фенилпропил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин; или их фармацевтически приемлемые соли.

Циклическая группа может быть связана с другой группой больше чем одним способом. Если не определен конкретный порядок связывания, подразумеваются все возможные расположения групп. Например, термин пиридил включает 2-, 3- или 4-пиридил и термин тиенил включает 2- или 3-тиенил.

В настоящем изобретении соединения и промежуточные соединения могут быть названы в соответствии с номенклатурной системой ШРАС (Международный союз теоретической и прикладной химии) или СА8 (Служба рефератов по химии, Со1итЬик, ОН).

Количество атомов углерода различных углеводородсодержащих фрагментов может быть показано с помощью префикса, обозначающего минимальное и максимальное число атомов углерода во фрагменте, т.е. префикс -(С_а-С_Ь)алкил обозначает алкильный фрагмент, содержащий атомы углерода в количестве от целого числа а до целого числа Ь, включительно.

Термин алкил означает прямые или разветвленные одновалентные цепи атомов углерода. Примеры алкильных групп включают метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил и т.п.

Термин галоген означает хлор, фтор, бром и йод.

Термин пролекарство относится к соединению, являющемуся предшественником лекарства, которое после введения высвобождает лекарство ίη νίνο за счет химических или физиологических процессов (например, при попадании в среду с физиологическим рН или благодаря действию ферментов). Обсуждение получения и применения пролекарств можно найти в Т. ШдисЫ и 81с11а. Ргобгидк ак Νονθΐ Оск'сгу 8ук1стк, Уо1. 14 АС8 8утрокшт 8спск. и Вюгсусг8|Ь1с Сатсгк ίη Эгид Όοκίβη. ред. Ей\гагй В. Восйс. Атспеаи Р11агтассиНеа1 Аккοс^аΐ^οη и Рсгдатон Ргскк (1987).

Термин млекопитающее означает животных, включая, например, собак, кошек, коров, овец, лошадей и людей. Предпочтительные млекопитающие включают людей обоих полов.

Термин соли относится к органическим или неорганическим солям соединений формулы (I) или их пролекарств. Эти соли могут быть получены ίη кйи в ходе окончательного выделения и очистки соединения или отдельно, взаимодействием соединения формулы (I) или его пролекарства с подходящими органическими или неорганическими кислотами или основаниями, с последующим выделением полученной таким образом соли. Типовые соли включают гидробромиды, гидрохлориды, сульфаты, бисульфаты, нитраты, ацетаты, оксалаты, безилаты, пальмитаты, стеараты, лаураты, бораты, бензоаты, лактаты, фосфаты, тозилаты, цитраты, малеаты, фумараты, сукцинаты, тартраты, нафтилаты, мезилаты, глюкогептонаты, лактобионаты и лаурилсульфонаты и т.п. Кроме этого они могут включать катионы щелочных или щелочно-земельных металлов, таких как натрий, литий, калий, кальций, магний и т.п., а также нетоксичные аммониевые, четвертичные аммониевые катионы и катионы аминов, включая, но не ограничиваясь перечисленным, аммоний, тетраметиламмоний, тетраэтиламмоний, метиламин, диметиламин, триметиламин, триэтиламин, этиламин и т.п. Другие примеры см., например, в Всгдс. с! а1., 1. Рйагт. 8сг, 66, 1-19 (1977).

Термин замещенный означает, что атом водорода в молекуле заменен другим атомом или молекулой. Атом или молекулу, заменяющие водород, именуют заместителем.

В рамках настоящей заявки термин терапевтически эффективное количество означает количество соединения, которое способно воздействовать на описанное патологическое состояние.

- 2 010424

Термины лечить и лечение включают предупреждающее (например, профилактическое) и паллиативное (например, восстанавливающее или корректирующее) лечение или действие, направленное на обеспечение предупреждающего или паллиативного лечения.

Соединения формулы (I) могут содержать ассиметрические или хиральные центры и, следовательно, существовать в виде различных стереоизомерных форм. Имеется в виду, что все стереоизомерные формы соединений и пролекарств формулы (I), а также их смеси, включая рацемические смеси, составляют часть настоящего изобретения. Кроме этого, настоящее изобретение охватывает все геометрические изомеры и изомеры положения. Например, если соединение или пролекарство формулы (I) включает двойную связь (связи), его цис- и транс-формы, а также их смесь входят в объем настоящего изобретения.

Смеси диастереомеров могут быть разделены на индивидуальные диастереомеры на основе их физико-химических различий способами, хорошо известными обычному специалисту в данной области техники, такими как хроматография и/или фракционированная кристаллизация. Энантиомеры могут быть разделены превращением смеси энантиомеров в смесь диастереомеров реакцией с подходящим оптически активным соединением (например, спиртом), разделением диастереомеров и превращением (например, гидролизом) отдельных диастереомеров в соответствующие чистые энантиомеры.

Соединения и пролекарства соединений формулы (I) могут существовать в несольватированных формах, а также в формах, сольватированных фармацевтически приемлемыми растворителями, такими как вода, этанол и т.п., и имеется в виду, что настоящее изобретение охватывает как сольватированные, так и несольватированные формы.

Кроме этого имеется возможность того, что соединения и пролекарства формулы (I) могут существовать в виде таутомеров, находящихся в равновесии, причем все такие формы включены в объем изобретения.

Помимо этого в объем настоящего изобретения входят соединения формулы (I), меченные изотопами, которые идентичны перечисленным в настоящей заявке соединениям, за исключением того, что 1 или несколько атомов заменены атомами, имеющими атомную массу или массовое число, отличное от атомной массы или массового числа, которые обычно встречаются в природе. Примеры изотопов, которые могут входить в соединения формулы (I), включают изотопы водорода, углерода, азота, кислорода, фосфора, фтора и хлора, как, например, ²Н, ³Н, ¹³С, ¹⁴С, ¹⁵Ν, ¹⁸О, ¹⁷О, ³¹Р, ³²Р, ³⁵8, ¹⁸Р и ³⁶С1, соответственно. Подразумевается, что соединения формулы (I) и их пролекарства, а также фармацевтически приемлемые соли соединений и пролекарств, которые содержат вышеупомянутые изотопы и/или другие изотопы других атомов, входят в объем данного изобретения.

Некоторые соединения формулы (I), меченные изотопами, например те соединения, в состав которых входят такие радиоизотопы, как ³Н и ¹⁴С, применимы при анализе соединений и/или исследовании распределения в тканях. Соединения, меченные тритием, т.е. изотопом ³Н, и углеродом-14, т.е. изотопом ¹⁴С, являются особенно предпочтительными благодаря относительной легкости их получения и несложному детектированию. Кроме того, замещение тяжелыми изотопами, такими как дейтерий, т.е. ²Н, может предоставить определенные терапевтические преимущества, являющиеся следствием большей устойчивости к метаболизму, например увеличение времени полужизни ίη νίνο или уменьшение требуемой дозировки, и, следовательно, в некоторых обстоятельствах может оказаться предпочтительным. Соединения формулы (I), меченные изотопами, в основном, могут быть получены с помощью методик, аналогичных тем, которые раскрыты в схемах и/или примерах, приведенных далее в настоящей заявке, путем замены реагента, не меченного изотопами, на реагент, меченный изотопами.

В другом аспекте настоящее изобретение относится к способам лечения опосредованных ΡΌΕ 2 состояний, заболеваний или симптомов у млекопитающих, нуждающихся в таком лечении, причем упомянутые способы включают введение млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы (I), его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли соединения или пролекарства; или фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I), его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль соединения или пролекарства, а также фармацевтически приемлемую основу, носитель или разбавитель.

Предпочтительные состояния, заболевания или симптомы, которые могут подвергаться лечению в соответствии со способами настоящего изобретения, включают остеопороз, легочную гипертензию, расстройство полового влечения у женщин, ухудшение памяти или познавательной способности, агрегацию тромбоцитов, сосудистый ангиогенез, деменцию, рак, аритмию, тромбоз, перелом и/или дефект костей, медленно срастающийся или несросшийся перелом, сподилодез, врастание костей, реконструкцию лицевой части черепа или гипоксию. Особенно предпочтительным состоянием является перелом и/или дефект костей.

В другом аспекте изобретение относится к способам ингибирования активности ΡΌΕ 2 у млекопитающих, нуждающихся в таком ингибировании, причем упомянутые способы включают введение млекопитающему ингибирующего ΡΌΕ 2 количества соединения формулы (I), его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли соединения или пролекарства; или фармацевтической композиции, содержащей соединение формулы (I), его пролекарство или фармацевтически приемлемую соль соединения или пролекарства, а также фармацевтически приемлемую основу, носитель или разбавитель.

Соединения формулы (I), их пролекарства и фармацевтически приемлемые соли соединений или пролекарств могут вводиться млекопитающим в дозе в диапазоне от примерно 0,001 до примерно 200 мг

- 3 010424 в день. В случае обычного взрослого человека, имеющего массу тела около 70 кг, как правило, предпочтительна дозировка от 0,01 до примерно 100 мг на кг массы тела, однако, могут потребоваться некоторые изменения в основном диапазоне доз, в зависимости от возраста и массы подвергаемого лечению пациента, планируемого пути введения, конкретного вводимого соединения и т.п. факторов. Определение диапазонов доз и оптимальных доз для конкретного субъекта из числа млекопитающих доступно обычному специалисту в области техники, к которой принадлежит описываемое изобретение.

Еще в одном аспекте изобретение относится к фармацевтическим композициям, содержащим комбинацию ингибитора ΡΌΕ 2, селективного агониста ЕР₂ и фармацевтически приемлемой основы, носителя или разбавителя; а также к способам лечения остеопороза, легочной гипертензии, расстройств полового влечения у женщин, ухудшения памяти или познавательной способности, агрегации тромбоцитов, сосудистого ангиогенеза, деменции, рака, аритмии, тромбоза, переломов и/или дефектов костей, медленно срастающегося или несросшегося перелома, сподилодеза, врастания костей, реконструкции лицевой части черепа или гипоксии с применением таких композиций. Особенно предпочтительным состоянием является перелом и/или дефект костей.

Еще в одном аспекте изобретение относится к способам лечения переломов и/или дефектов костей у млекопитающих, нуждающихся в таком лечении, причем упомянутые способы включают введение млекопитающему терапевтически эффективного количества ингибитора ΡΌΕ 2, его пролекарства или фармацевтически приемлемой соли упомянутого ингибитора или пролекарства.

В способах и комбинациях по настоящему изобретению может быть применен любой ингибитор ΡΌΕ 2, включая соединения формулы (I) настоящей заявки. Примеры известных ингибиторов ΡΌΕ 2 включают ΕΗΝΑ, 6-(3,4-диметоксибензил)-1-[( 1-гидроксиэтил)-4-фенилбутил]-3 -метил-1,5-дигидропиразоло[3,4-б]пиримидин-4-он (ΒΑΥ-60-7550; патент США № 6174884) и 9-(1-ацетил-4-фенилбутил)-2-(3,4диметоксибензил)-1,9-дигидропурин-6-он (патент США № 5861396). Дополнительные примеры ингибиторов ΡΌΕ 2 раскрыты в патентах США №№ 5861396; 5401774; 6458796 и 6555547, а также в публикации международной заявки РСТ № 98/32755.

В аспектах настоящего изобретения, относящихся к комбинациям, может быть применен любой селективный агонист рецептора ЕР₂, однако, в основном, предпочтительный класс селективных агонистов рецептора ЕР2, раскрытый в переуступленном патенте США № 6498172, включает соединения формулы АА

Формула АА их пролекарства и их фармацевтически приемлемые соли, причем значения символов С, Α, В, К, М, О и Ζ соответствуют определениям, приведенным в патенте. В основном, предпочтительными соединениями формулы АА являются (3-(((пиридин-3-сульфонил)(4-пиримидин-5-илбензил)амино)метил)фенил)уксусная кислота; (3-(((5-фенилфуран-2-илметил)-(пиридин3-сульфонил)амино)метил)фенил)уксусная кислота; (3-(((пиридин-3-сульфонил)-(4-пиримидин-2-илбензил) амино)метил)фенил)уксусная кислота; (3-(((пиридин-3-сульфонил)-(4-тиазол-2-илбензил)амино)метил) фенил)уксусная кислота; (3-(((4-пиразин-2-илбензил)-(пиридин-3-сульфонил)амино)метил)фенил)уксусная кислота; (3-(((4-циклогексилбензил)-(пиридин-3-сульфонил)амино)метил)фенокси)уксусная кислота; (3-(((пиридин-3-сульфонил)-(4-пиридин-2-илбензил)амино)метил)фенокси)уксусная кислота; (3-(((пиридин3-сульфонил)-(4-пиридин-3-илбензил)амино)метил)фенокси)уксусная кислота; (3-(((пиридин-3-сульфонил)(4-пиридин-4-илбензил)амино)метил)фенокси)уксусная кислота; (3 -(((пиридин-3 -сульфонил)-(4-тиазол2-илбензил)амино)метил)фенокси)уксусная кислота; 5-(3-((пиридин-3-сульфонил)-(4-тиазол-2-илбензил) амино)пропил)тиофен-2-карбоновая кислота; (3 -(((2,3-дигидробензо [1,4] диоксин-6-илметил)-(пиридин-3 сульфонил)амино)метил)фенил)уксусная кислота; и (3-((бензофуран-2-илметил-(пиридин-3-сульфонил) амино)метил)фенил)уксусная кислота; (3 -(((4-бутилбензил)-(пиридин-3-сульфонил)амино)метил)фенил) уксусная кислота; (3-((бензолсульфонил(4-бутилбензил)амино)метил)фенил)уксусная кислота; (3-(((4-бутилбензил)-( 1 -метил-1Н-имидазол-4-сульфонил)амино)метил)фенил)уксусная кислота; и (3 -(((4-диметиламинобензил)-(пиридин-3-сульфонил)амино)метил)фенил)уксусная кислота; (3-(((4-диметиламинобензил)(пиридин-3-сульфонил)амино)метил)фенокси)уксусная кислота; и (3-(((4-трет-бутилбензил)-(пиридин-3сульфонил)амино)метил)фенокси)уксусная кислота; транс-(3-(((3-(3,5-дихлорфенил)аллил)-(пиридин-3сульфонил)амино)метил)фенил)уксусная кислота; (3-(((2-(3,5-дихлорфенокси)этил)-(пиридин-3-сульфонил) амино)метил)фенокси)уксусная кислота; пролекарства перечисленных соединений, а также фармацевтически приемлемые соли соединений и пролекарств.

Особенно предпочтительным соединением формулы АА является (3-(((4-трет-бутилбензил)-(пиридин-3-сульфонил)амино)метил)фенокси)уксусная кислота, ее пролекарства, или фармацевтически приемлемые соли соединения или пролекарств. Особенно предпочтительной солью является натриевая соль.

Другой, в основном, предпочтительный класс селективных агонистов рецептора ЕР2, применимый в аспекте настоящего изобретения, связанном с комбинациями, включает соединения, пролекарства и фармацевтически приемлемые соли приведенной ниже формулы ВВ, которые описаны в переуступлен

- 4 010424 ном патенте США № 6288120,

I к—м

Формула ВВ причем определения символов А, В, К, М, О и Ζ приведены в патенте.

В основном, предпочтительными соединениями формулы ВВ являются 7-[(2'-гидроксиметилбифенил-

4- илметил)метансульфониламино]гептановая кислота; 7{[4-(3-гидроксиметилтиофен-2-ил)бензил]метансульфониламино}гептановая кислота; 7-[(2'-хлорбифенил-4-илметил)метансульфониламино]гептановая кислота; 7-{[4-(1-гидроксигексил)бензил]метансульфониламино}гептановая кислота; 7-[(4-бутилбензил) метансульфониламино] гептановая кислота; 7-{[5-(1-гидроксигексил)тиофен-2-илметил]метансульфониламино}гептановая кислота; (3-{[(4-бутилбензил)метансульфониламино]метил}фенил)уксусная кислота; 7-{[3 -(3-хлорфенил)пропил]метансульфониламино }гептановая кислота; 7-{ [3 -(3,5-дихлорфенил)пропил] метансульфониламино }гептановая кислота; 5-(3-{ [3-(3-хлорфенил)пропил]метансульфониламино}пропил) тиофен-2-карбоновая кислота; 7-{[2-(3,5-дихлорфенокси)этил]метансульфониламино}гептановая кислота;

5- (3-{[2-(3,5-дихлорфенокси)этил]метансульфониламино}пропил)тиофен-2-карбоновая кислота; Ν-[2-(3,5дихлорфенокси)этил]-Н-[6-(1Н-тетразол-5-ил)гексил]метансульфонамид; транс-(4-{[3-(3,5-дихлорфенил) аллил]метансульфониламино}бутокси)уксусная кислота; транс-Н-[3-(3,5-дихлорфенил)аллил]-Ы-[6-(1Нтетразолил-5-ил)гексил]метансульфонамид; транс-5-(3-{[3-(3,5-дихлорфенил)аллил]метансульфониламино}пропил)тиофен-2-карбоновая кислота; транс-[3-({[3-(3,5-дихлорфенил)аллил]метансульфониламино} метил)фенил]уксусная кислота, пролекарства перечисленных соединений, а также фармацевтически приемлемые соли соединений и пролекарств.

Особенно предпочтительным соединением формулы ВВ является 7-[(4-бутилбензил)метансульфониламино] гептановая кислота, ее пролекарства или фармацевтически приемлемые соли соединения и пролекарств. Предпочтительной солью является мононатриевая соль.

Другие селективные агонисты рецептора ЕР₂, применимые в аспекте данного изобретения, имеющем отношение к комбинациям, включают агонисты рецептора простагландина, раскрытые в патентах США №№ 6531485, 6376533, 6124314, 5877211, 5716835, 5698598 и 5462968, опубликованной заявке на патент США № 2002/187961; N. Όιιο1<\\όγ11ι. е! а1., 1оитпа1 о! Епбоетшо1о§у, 172 (2), 263-269 (2002); К. Таш, е! а1., 8уп1е!!., 2, 239-242 (2002); К. Таш, е! а1., Вюотдаше & Меб1еша1 Сйеш18йу, 10 (4), 1107-1114 (2002); К. Таш, е! а1., Вюотдаше & Меб1са1 Сйешкйу, 10 (4), 1093-1106 (2002); 1. М1ейе1е!, е! а1., ЕР 1175891 А1; К. Таш, е! а1., Вюотдаше & Мебюша1 Сйешкйу Ьейетк, 11 (15), 2025-2028 (2001); ТУ. Спбет, е! а1., 1п1егпа1юпа1 1оитпа1 о! Епупоптеп!а1 8!иб1е5, 58 (1), 35-46 (2000); ТУ. Опбег. е! а1., 1отпа1 о! Оси1аг Рйаттаео1оду апб Тйегареибек, 17 (1), 35-46 (2001); Ό.Ε. ^ооб^атб, е! а1., 1оита1 о! Оси1аг Рйаттоео1оду апб Тйегареибек, 11 (3), 447-54 (1995); А.Т. №ак, е! а1., СатбюуакеЫат Эгид Ве\зе\\'5. 11 (2), 165-79 (1993); и Ό.Ε. ^ооб^атб, е! а1., Ргойад1апбш8, 46 (4), 371-83 (1993).

В аспекте данного изобретения, относящемся к комбинациям, агонисты селективного рецептора ЕР2 могут вводиться млекопитающим в дозах, находящихся в диапазоне от примерно 0,001 до примерно 100 мг/кг массы тела в день. Для нормального взрослого человека, имеющего массу тела примерно 70 кг, как правило, предпочтительна доза в пределах от примерно 0,01 до примерно 50 мг/кг массы тела, однако, может потребоваться некоторое изменение основного диапазона доз, в зависимости от возраста и массы подвергаемого лечению пациента, намеченного пути введения, конкретного вводимого соединения и т.п. Определение диапазонов доз комбинаций и оптимальной дозировки для конкретного субъекта из числа млекопитающих доступно обычному специалисту в той области техники, к которой относится данное описание.

Фармацевтические композиции, пригодные для парентеральной инъекции, могут содержать фармацевтически приемлемые стерильные водные или неводные растворы, дисперсии, суспензии или эмульсии, а также стерильные порошки для немедленного восстановления стерильных растворов или дисперсий, пригодных для инъекций. Примеры подходящих водных и неводных носителей, основ и разбавителей включают воду, этанол, полиолы (как, например, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, глицерин и т.п.), их подходящие смеси, растительные масла (как, например, оливковое масло), а также пригодные для инъекций органические сложные эфиры, такие как этилолеат. Надлежащая текучесть может поддерживаться, например, применением покрытий, таких как лецитин, поддержанием требуемого размера частиц в случае дисперсий, а также применением ПАВ.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению могут дополнительно содержать вспомогательные средства, такие как консервирующие, смачивающие, эмульгирующие и диспергирующие средства. Предотвращение загрязнения растворимых композиций микроорганизмами может быть осуществлено с помощью различных антибактериальных и противогрибковых средств, например парабенов, хлорбутанола, фенола, сорбиновой кислоты и т.п. Кроме этого может быть желательно включить изотонические средства, например сахара, хлорид натрия и т.п. Пролонгированная абсорбция пригодных для

- 5 010424 инъекций фармацевтических композиций может быть достигнута применением средств, допускающих замедленную абсорбцию, например моностеарата алюминия или желатина.

Твердые дозированные формы для перорального введения включают капсулы, таблетки, порошки и гранулы. В таких твердых дозированных формах активное соединение смешано по крайней мере с одним инертным общепринятым фармацевтическим эксципиентом (или носителем), таким как цитрат натрия или дикальцийфосфат или (а) наполнителями или разбавителями, например крахмалами, лактозой, сахарозой, маннитом и кремниевой кислотой; (Ь) связующими веществами, например карбоксиметилцеллюлозой, альгинатами, желатином, поливинилпирролидоном, сахарозой и гуммиарабиком; (с) увлажнителями, например глицерином; (б) дезинтегрирующими средствами, например агар-агаром, карбонатом кальция, картофельным крахмалом или крахмалом из маниоки, некоторыми сложными силикатами альгиновой кислоты и карбонатом натрия; (е) замедлителями растворения, например парафином; (ί) ускорителями абсорбции, например четвертичными аммониевыми соединениями; (д) смачивающими средствами, например цетиловым спиртом или моностеаратом глицерина; (11) адсорбентами, например каолином и бентонитом; и/или (ί) лубрикантами, например тальком, стеаратом кальция, стеаратом магния, твердыми полиэтиленгликолями, лаурилсульфатом натрия или их смесями. В случае капсул и таблеток дозированные формы могут дополнительно содержать буферные средства.

Твердые композиции подобного типа также могут применяться в качестве наполнителей в случае мягких или твердых наполненных желатиновых капсул, с применением таких эксципиентов, как лактоза или молочный сахар, а также полиэтиленгликоли высокой молекулярной массы и т.п.

Твердые дозированные формы, такие как таблетки, драже, капсулы и гранулы, могут быть получены с покрытиями и оболочками, такими как энтеропокрытия и другие виды покрытий, хорошо известные обычному специалисту в данной области техники. Они также могут включать средства для придания непрозрачности и, кроме этого, принадлежать к числу таких композиций, которые высвобождают активное соединение (соединения) с задержкой, в течение продолжительного времени или контролируемым образом. Примерами относящихся сюда композиций, которые могут быть применены, являются полимерные вещества и воски. Активное соединение (соединения) также может быть представлено в форме микрокапсул, если это уместно, с одним или несколькими из перечисленных выше эксципиентов.

Жидкие дозированные формы для перорального введения включают фармацевтически приемлемые эмульсии, растворы, суспензии, сиропы и эликсиры. Помимо активных соединений жидкие дозированные формы могут содержать инертные разбавители, обычно применяемые в технике, например воду или другие растворители, солюбилизирующие средства и эмульгаторы, например этиловый спирт, изопропиловый спирт, этилкарбонат, этилацетат, бензиловый спирт, бензилбензоат, пропиленгликоль, 1,3-бутиленгликоль, диметилформамид, масла, в частности масло хлопчатника, арахисовое масло, масло зародышей пшеницы, оливковое масло, касторовое масло и масло кунжута, глицерин, тетрагидрофурфуриловый спирт, полиэтиленгликоли, а также сложные эфиры жирных кислот и сорбитана или смеси перечисленных веществ и т. п.

Кроме названных инертных разбавителей фармацевтическая композиция также может содержать вспомогательные средства, такие как смачивающие средства, эмульгирующие и суспендирующие средства, подсластители, флаворанты и отдушки.

Суспензии, помимо активного соединения (соединений), могут дополнительно включать суспендирующие средства, например этоксипроизводные изостеариловых спиртов, сложные эфиры полиоксиэтиленсорбита и сорбитана, микрокристаллическую целлюлозу, метагидроксид алюминия, бентонит, агарагар и трагакант или смеси перечисленных выше веществ и т. п.

Композиции для ректального или вагинального введения предпочтительно включают суппозитории, которые могут быть получены смешиванием активного соединения (соединений) с подходящими не раздражающими эксципиентами или носителями, такими как масло какао, полиэтиленгликоль или воск для суппозиториев, которые являются твердыми при обычной комнатной температуре, но жидкими при температуре тела, и, следовательно, плавятся в прямой кишке или вагинальной полости, высвобождая, таким образом, активное соединение.

Дозированные формы для местного введения могут включать мази, порошки, аэрозоли и средства для ингаляции. Активное соединение (соединения) в стерильных условиях смешивают с фармацевтически приемлемым носителем, основой или разбавителем, а также любыми консервантами, буферами или пропеллентами, которые могут потребоваться.

В основном, предпочтительные композиции для введения ингибиторов ΡΌΕ 2, содержащие соединения формулы (I), а также комбинации, включающие ингибиторы ΡΌΕ 2 и селективные агонисты рецептора ЕР₂, при лечении переломов костей содержат пригодные для инъекции текучие композиции, которые обеспечивают продолжительное высвобождение действующего начала непосредственно в месте инъекции, за счет образования биоразлагаемого депо в виде твердого вещества или геля, а также матрицы или имплантата. Примеры подобной системы введения включают систему доставки с медленным высвобождением на основе биоразлагаемого полимера. См., например, опубликованную заявку на патент США № 2003-0104031 А1.

Подобная система доставки на основе полимеров обычно содержит терапевтически полезное сред

- 6 010424 ство (средства), растворенное или диспергированное в текучем, биоразлагаемом, термопластичном растворе или дисперсии полимера в органическом растворителе. При введении композиции органический растворитель диффундирует от места инъекции, вызывая превращение полимера в осадок или гель, что приводит к захвату молекул лекарственного средства (средств) в депо длительного высвобождения. Впоследствии лекарственное средство (средства) высвобождается за счет диффузии из полимерной матрицы и ее разрушения. Матрица медленно разрушается в результате гидролиза и, в конце концов, исчезает с места введения. Высвобождение лекарственного средства (средств) ίη νίνο, а также скорость разрушения матрицы можно контролировать за счет изменения молекулярной массы и концентрации полимера.

Системы доставки на основе полимеров обеспечивают пациенту в случае необходимости непрерывное высвобождение действующего средства (средств) ίη νίνο в течение длительного периода времени с минимальным или незначительным всплеском выделения. Значительный всплеск выделения действующего лекарственного средства (средств) мог бы привести к плохой местной переносимости из-за локальных воздействий (например, раздражения) и мог бы уменьшить количество лекарственного средства (средств), доступного для целевого воздействия. Преимущество, которое предоставляет такой способ введения, заключается в том, что он минимизирует или сокращает исходный всплеск, но по-прежнему доставляет лекарственное средство (средства) в эффективных количествах в течение продолжительного периода времени после одной местной инъекции.

Полимерную систему получают контактированием текучей композиции и гелеобразующей среды для коагуляции или образования геля, с превращением композиции в твердую микропористую полимерную матрицу или гелевую полимерную матрицу. Текучая композиция содержит термопластичный полимер или сополимер в сочетании с подходящим растворителем. Полимеры или сополимеры, которые образуют тело матрицы, являются, по существу, нерастворимыми, предпочтительно, по существу, полностью нерастворимыми в воде и жидких средах организма. Нерастворимость тела матрицы позволяет ей действовать в качестве единого центра контролируемого высвобождения лекарственного средства (средств). Кроме этого полимеры или сополимеры являются биосовместимыми и биоразлагаемыми и/или биоразрушаемыми в теле животного, например млекопитающего. Разрушение под действием биологической среды делает возможным усвоение и выведение полимерной матрицы пациентом, так что отсутствует необходимость ее хирургического удаления. Благодаря тому, что текучая композиция и полимерная система являются биосовместимыми, процесс введения полимерной системы и ее присутствие в организме не вызывают существенного раздражения или некроза тканей в месте нахождения имплантата. Композицию по настоящему изобретению вводят в виде текучей композиции непосредственно в ткани тела.

Термопластичные полимеры, которые подходят для включения в твердые матрицы систем с контролируемым высвобождением, являются твердыми, фармацевтически совместимыми и биоразрушаемыми под действием клеток и/или под действием жидких сред организма. Примеры подходящих термопластичных полимеров включают сложные полиэфиры диолов и дикарбоновых кислот или гидроксикарбоновых кислот, такие как полилактиды, полигликолиды и их сополимеры. Более предпочтительно полимеры включают сополимеры полимолочная-согликолевая кислота (сокращенно РЬСН), которые при гидролизе образуют молочную и гликолевую кислоты. Всплеск высвобождения из этого сополимера может быть дополнительно уменьшен добавлением полиэтиленгликоля (РЕС) для образования молекул РЬСН с включением РЕС в концевую часть.

Предпочтительные вещества включают полилактиды, полигликолиды и их сополимеры. Данные полимеры могут применяться для улучшения действия полимерной системы, в частности, благодаря тому, что они демонстрируют прекрасную биосовместимость. Они вызывают незначительные, если вообще вызывают, воспаление, раздражение, некроз или токсическое поражение тканей. В присутствии воды эти полимеры выделяют, соответственно, молочную или гликолевую кислоты, которые легко усваиваются. Полилактиды также могут включать мономеры гликолидов для улучшения итогового распада полимеров. Кроме этого данные полимеры являются предпочтительными благодаря тому, что с их помощью можно эффективно контролировать скорость высвобождения лекарственного средства (средств) из полимерной системы, и благодаря тому, что они приводят к локальному удерживанию лекарственного средства (средств) в месте введения.

Растворимость и смешиваемость термопластичных полимеров с органическим растворителем композиции будет меняться в соответствии с такими факторами, как кристалличность, гидрофильность, способность к образованию водородных связей, а также молекулярная масса полимера. Следовательно, для достижения желаемой смешиваемости, а также желаемой скорости высвобождения включенного в состав лекарственного средства (средств) регулируют молекулярную массу полимера и его концентрацию в растворителе.

Текучие композиции термопластичного полимера, растворителя и лекарственного средства (средств) включают стабильные текучие вещества. Предпочтительно образуется гомогенный раствор лекарственного средства (средств) в органическом растворителе. Термопластичный полимер в значительной степени растворим в органическом растворителе. При помещении текучей композиции в организм растворитель удаляется и полимер твердеет или превращается в гель с образованием полимерной системы, содержащей лекарственное средство (средства) в твердой или гелеобразной полимерной матрице.

- 7 010424

В случае некоторых предпочтительных полимеров для эффективного продолжительного высвобождения соединения, способствующего росту костей, молекулярную массу полимера или сополимера подбирают таким образом, чтобы собственная вязкость находилась в пределах примерно от 0,2 до 0,4 Ι.ν. (собственная вязкость, выражена в дл/г). Стандартная скорость высвобождения входящего в состав лекарственного средства (средств) наблюдается при Ι.ν. примерно 0,2 (при молекулярных массах от примерно 8000 до примерно 16000) или примерно 0,3 (при молекулярных массах от примерно 23000 до примерно 45000), но она может изменяться в зависимости от конкретных компонентов композиции. Для большинства систем предпочтительно подобрать молекулярную массу полимера, соответствующую Ι.ν. примерно 0,2, для эффективного продолжительного высвобождения лекарственного средства (средств).

Для поли(ПЬ-лактида) или полимерной системы лактид-согликолид желательный диапазон молекулярных масс составляет от примерно 0,2 до примерно 0,4 Ι.ν., причем предпочтительным является Ι.ν. приблизительно 0,2. Молекулярная масса полимера может быть изменена стандартными способами.

Особенно предпочтительные коммерчески доступные термопластичные полимеры включают следующие: сополимер РЬОН с соотношением молочной и гликолевой кислот 1:1 и собственной вязкостью примерно 0,2 дл/г (коммерчески доступный от Воейгтдег ИчдеШепп как Соро1утег ВЕ8ОМЕВ® ВО 502 Н) (молекулярная масса около 12000); сополимер РЬОН с соотношением молочной и гликолевой кислот 1:1 и собственной вязкостью примерно 0,3 дл/г (коммерчески доступный от Воейгтдег ИчдеШепп как Соро1утег ВЕ8ОМЕВ® ВО 503 Н) (молекулярная масса около 37000); сополимер РЬОН с соотношением молочной и гликолевой кислот 1:1 и собственной вязкостью примерно 0,4 дл/г (коммерчески доступный от Воейппдег ПщеШепп как Соро1утег ВЕ8ОМЕВ® ВО 504 Н) (молекулярная масса около 47000); и сополимер РЬОН с присоединенным к концу молекулы полиэтиленгликолем (РЕО), соотношением молочной и гликолевой кислот 1:1 и собственной вязкостью примерно 0,79 дл/г (коммерчески доступный от Воейппдег ПщеШепп как РЬО-РЕО) (молекулярная масса около 52000).

Растворители, применяемые в термопластичных композициях, предпочтительно являются фармацевтически приемлемыми, биосовместимыми и способными рассеиваться в жидких средах организма ίη 811и, так что они могут быть классифицированы как имеющие растворимость в воде от высокой до нерастворимых. Предпочтительно они вызывают относительно небольшое, если вообще наблюдаемое, раздражение или некроз тканей в месте инъекции и имплантации. Предпочтительно растворитель имеет, по крайней мере, минимальный уровень растворимости в воде. Если органический растворитель нерастворим или минимально растворим в воде, он будет медленно вымываться из текучей полимерной композиции. В результате этого имплантат в процессе своего существования может содержать различные количества остаточного растворителя. Предпочтительно органический растворитель имеет уровень растворимости в воде от умеренного до высокого, так что он будет легко вымываться из полимерной композиции в жидкие среды организма. Наиболее предпочтительно, если растворитель быстро удаляется из полимерной композиции, для быстрого образования твердого имплантата. По ходу удаления растворителя, термопластичный полимер коагулирует или образует гель, превращаясь в твердую полимерную систему. Предпочтительно, т.к. термопластичный полимер коагулирует, удаление растворителя вызывает образование пор внутри полимерной системы. В результате текучая композиция, содержащая термопластичный полимер, растворитель и лекарственное средство (средства), образует пористую твердую полимерную систему. Кроме этого, если растворитель слабо растворим или нерастворим в воде, вымывание растворителя может вести к образованию твердого пористого имплантата или, если часть растворителя остается в имплантате, результат может заключаться в образовании гелевого имплантата, содержащего незначительное количество или не содержащего пор.

Подходящие растворители включают такие жидкие органические соединения, которые удовлетворяют приведенным выше критериям. В основном, предпочтительные растворители включают Я-метил-2пирролидон (ЯМР).

Растворители для текучих композиций термопластичных полимеров выбирают с точки зрения совместимости и надлежащей растворимости полимера и растворителя. Термопластичные полимеры с более низкой молекулярной массой, как правило, легче растворяются в растворителях, чем полимеры с высокой молекулярной массой. В результате концентрация термопластичного полимера, растворенного в различных растворителях, различается в зависимости от типа полимера и его молекулярной массы. Наоборот, термопластичные полимеры с более высокой молекулярной массой склонны быстрее коагулировать, образовывать гели или затвердевать по сравнению с термопластичными полимерами с очень низкой молекулярной массой. Кроме того, полимеры с более высокой молекулярной массой склонны образовывать растворы с более высокими вязкостями по сравнению с веществами низкой молекулярной массы. Таким образом, для высокой эффективности инъекции, кроме оптимальной скорости высвобождения, контролируют молекулярную массу и концентрацию полимера в растворителе.

При образовании полимерной системы из текучей композиции лекарственное средство (средства) оказывается заключенным в полимерную матрицу. После введения текучей композиции для образования полимерной системы лекарственное средство (средства) высвобождается из матрицы в близлежащие ткани или жидкие среды за счет механизмов диффузии и распада. Управление этими механизмами также

- 8 010424 может влиять на высвобождение лекарственного средства (средств) в окружающую среду с контролируемой скоростью. Например, можно выбрать такой состав полимерной матрицы, чтобы она распадалась после того, как эффективное и/или значительное количество лекарственного средства (средств) высвобождено из матрицы. Таким образом, высвобождение лекарственного средства (средств) из матрицы можно изменять за счет, например, растворимости лекарственного средства (средств) в воде, распределения соединений, стимулирующих рост костей в матрице, или, среди прочих факторов, за счет размера, формы, пористости, растворимости и биоразрушаемости полимерной матрицы. Высвобождение лекарственного средства (средств) из матрицы контролируется относительно естественной скорости за счет изменения молекулярной массы полимера для обеспечения желательной продолжительности и скорости высвобождения.

Например, предпочтительные дозированные формы лекарственного средства (средств) включают лиофилизованное соединение, предназначенное для восстановления перед введением раствором РЬСН в ΝΜΡ. Дозированная форма, состоящая из лиофилизованного соединения в одном шприце (шприц А) и раствора РЬСН в ΝΜΡ во втором шприце (шприц В), известна как система восстановления А/В. Содержимое обоих шприцов смешивают непосредственно перед введением дозы в необходимое место или рядом с ним. После восстановления содержимое переносят в градуированный дозирующий шприц для введения. Введенные дозированные формы будут представлять собой раствор, и в результате будет получена дисперсия соединения с РЬСН в ΝΜΡ в желаемых концентрациях, например 5 и 50 мгА/мл (мгА/мл относится к эквиваленту свободной кислоты в форме натриевой соли лекарственного средства (средств)). Дозированная форма представляет собой состав для парентеральной (например, подкожной, внутримышечной или внутрикостной) инъекции с продолжительным высвобождением для местного введения. Данное соединение в составе полимерной матрицы с медленным высвобождением (депо-инъекция) предназначена для введения в требуемое место или рядом с ним, и не предназначена для внутривенного введения. Для обеспечения достаточной устойчивости подобной дозированной формы при хранении может быть использована описанная выше система двух шприцев, предпочтительно с использованием соединения в форме натриевой соли. Композиция в виде одной фазы, предпочтительно содержащая соединение в форме свободной кислоты, представляет собой предпочтительную альтернативную композицию. Основанное на устойчивости лекарственного средства (средств) и полимера, стерильное фильтрование лекарственного средства (средств) и облучение раствора полимера может быть предпочтительным для производства стабильного стерильного продукта. В одном из вариантов осуществления дозированная форма может быть произведена и доставлена потребителю в виде отдельных алюминиевых пакетов, содержащих шприцы, заполненные лиофильной формой лекарственного средства (средств), в одном пакете и раствор полимера в другом пакете. Емкости для доставки, системы и способы лиофилизации соединений, стимулирующих рост костей, описаны в опубликованной международной патентной заявке XV О 01/73363. Другие способы введения включают местное введение путем инъекции в конкретное место или доставки в конкретное место с помощью катетера. Дополнительные примеры можно найти в предварительной заявке США №60/335156, поданной 30 ноября 2001 г.

Содержание всех патентов США, номера которых указаны в настоящей заявке, включено в заявку во всей полноте с помощью ссылок.

Соединения формулы (I), их пролекарства, а также фармацевтически приемлемые соли соединений и пролекарств могут быть получены в соответствии с типовыми путями синтеза, раскрытыми ниже на схемах и в примерах, а также с помощью других общепринятых препаративных органических методик, известных или очевидных специалисту в данной области техники в свете настоящего описания. Раскрытые в данных схемах способы предназначены служить примерами, иллюстрирующими настоящее изобретение, и никоим образом не должны истолковываться как ограничения объема изобретения.

На стадии 1 схемы 1, 2,4-дихлорпиридо[2,3-й]пиримидин (IV) вводят во взаимодействие с соответствующим образом замещенным бензиламином (V) в присутствии в качестве основания третичного амина, например триэтиламина (ТЕА) или диизопропилэтиламина (ΌΙΡΕΑ), или ароматического основания,

- 9 010424 например пиридина. Реакцию, как правило, проводят в полярном спиртовом растворителе, таком как метанол (МеОН), этанол (ΕΐΟΗ) или изопропанол (ΙΡΑ), при температуре, находящейся в пределах от примерно 0 до примерно 100°С. Предпочтительно реакцию проводят в присутствии ΌΙΡΕΑ в этаноле при температуре, приблизительно равной комнатной (ВТ). Затем на стадии 2 для получения соединения (I) итоговый продукт конденсации (VI) вводят во взаимодействие с соответствующим образом замещенным амином (VII) в присутствии в качестве основания третичного амина, такого как ТЕА или ΌΙΡΕΑ, или ароматического основания, такого как пиридин. Реакцию, как правило, проводят в апротонном полярном растворителе, таком как диметилформамид (ДМФА), диметилсульфоксид (ДМСО), Ν-метилпирролидинон или сульфолан при повышенной температуре, находящейся в пределах от примерно 60 до примерно 250°С. Предпочтительно реакцию проводят в ДМСО в присутствии ΌΓΡΕΑ при температуре от примерно 90 до примерно 120°С.

Хотя схема 1 изображена в виде дискретного двухстадийного процесса, в котором промежуточное соединение (VI) выделяют и затем вводят во взаимодействие с амином (VII), также было найдено, что удобно получать и осуществлять реакцию соединения (IV) с амином (VII) ίη 5Йи в одну стадию. В таком способе применяют апротонный растворитель, предпочтительно ДМСО. Реакцию также проводят в присутствии ΌΨΕΑ в ДМСО при температуре от примерно 90 до примерно 120°С.

Экспериментальная часть

Если не указано иначе, все использованные реактивы были получены на коммерческой основе. Если не указано иначе, используемые далее в описании экспериментов сокращения имеют приведенные ниже значения:

АсОН - уксусная кислота бес - разложение

ΌΜΑΡ - 4-диметиламинопиридин

ΕΐОΑс - этилацетат ч - час(ы)

ΕΑΗ - литийалюминийгидрид м - минута (минуты)

МС - масс-спектрометрия

ЯМР - ядерный магнитный резонанс

ТГФ - тетрагидрофуран р-ТкОН - п-толуолсульфоновая кислота

Синтез 1. (2-Хлорпиридо[2,3-б]пиримидин-4-ил)-(3,5-диметоксибензил)амин.

К перемешиваемому раствору 2,4-дихлорпиридо[2,3-б]пиримидина (1,3 г, 6,7 ммоль) и 3,5-диметоксибензиламина (1,1 г, 6,7 ммоль) в 30 мл ΕΐΟΗ при комнатной температуре добавляют ΤΕΑ (4 мл, 28,7 ммоль). Образовавшийся осадок отфильтровывают и промывают холодным этанолом и затем гексаном, получая

1.8 г соединения, указанного в заглавии (82%) в виде твердого вещества. Т.пл. 185°С (с разложением). ¹Н ЯМР (ДМСО-б₆) δ: 9,5 (т, 1Н), 8,9 (дд, 1Н), 8,7 (дд, 1Н), 7,5 (м, 1Н), 6,5 (д, 2Н), 6,4 (т, 1Н), 4,6 (д, 2Н), 3,7 (с, 6Н). МС (т/ζ, %): 331 (100).

Синтез 2. (2-Хлорпиридо[2,3-б]пиримидин-4-ил)-(3,4-диметоксибензил)амин.

Данное соединение получают способом, аналогичным описанному в синтезе 1, используя соответствующие исходные вещества. ¹Н ЯМР (ДМСО-б₆) δ: 9,5 (т, 1Н), 8,9 (дд, 1Н), 8,7 (дд, 1Н), 7,0 (с, 1Н), 6,9 (д, 2Н), 4,6 (д, 2Н), 3,7 (с, 3Н). МС (т/ζ, %): 331 (100).

Синтез 3. 2-(4-Аминометилфенил)пропан-2-ол.

К перемешиваемому раствору 4-(1-гидрокси-1-метилэтил)бензонитрила (2,0 г, 12,4 ммоль) в 30 мл ТГФ при 0°С добавляют по каплям 1,0н. литийалюминийгидрид в ТГФ (26 мл, 26,1 ммоль). Смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры и затем кипятят с обратным холодильником в течение 20 мин. Затем смесь охлаждают до 0°С и гасят 5 мл МеОН, добавляя его по каплям. Смесь разбавляют 300 мл хлороформа, промывают водой (1x80 мл), высушивают над сульфатом магния и концентрируют, получая

1.9 г (95%) указанного в заглавии соединения в виде твердого вещества. ¹Н ЯМР (СЭС1₃) δ: 7,45 (д, 2Н), 7,26 (д, 2Н), 3,83 (с, 2Н), 1,57 (с, 6Н). ГХ-МС (т/е, %): 164 (М⁴, 15), 150 (80), 132 (75), 106 (100).

Синтез 4. 3-(4-Ацетилфенил)пропионитрил.

Смесь 4-(2-бромэтил)ацетофенона (2,0 г, 8,8 ммоль) и ΚΟΝ (0,6 г, 8,8 ммоль) нагревают в 30 мл ДМСО при 75°С в течение 4 ч. Реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют ΕΐΟΑ^ Органический экстракт последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли, высушивают и концентрируют, получая масло. Хроматография на силикагеле с использованием в качестве элюента 40% ΕΐΟΑс/гексан позволяет получить 0,8 г масла. ¹Н ЯМР (ΟΌ₃ΟΌ) δ: 7,9 (д, 2Н), 7,4 (д, 2Н), 3,3 (т, 2Н), 2,8 (т, 2Н), 2,6 (с, 3Н). ГХ-МС (т/е, %): 173 (М⁴, 20), 158 (100).

Синтез 5. 3-[4-(1-Гидрокси-1-метилэтил)фенил]пропионитрил.

К перемешиваемому 3М раствору метилмагнийхлорида в ТГФ (3,3 мл, 9,8 ммоль), дополнительно разбавленному 10 мл ТГФ, по каплям при -40°С добавляют раствор 3-(4-ацетилфенил)пропионитрила

- 10 010424 (0,7 г, 3,9 ммоль) в 10 мл ТГФ. Реакционную смесь оставляют медленно нагреваться до комнатной температуры в течение ночи, охлаждают до 0°С, затем гасят, добавляя по каплям водный раствор АсОН. Реакционную смесь разбавляют водой и экстрагируют ЕЮАс. Органический экстракт последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли, высушивают и концентрируют, получая 0,8 г масла. ¹Н ЯМР (СПЮП) δ: 7,4 (д, 2Н), 7,2 (д, 2Н), 2,9 (т, 2Н), 2,7 (т, 2Н), 1,5 (с, 6Н). ГХ-МС (т/е, %): 189 (М⁴, 5), 174 (100).

Синтез 6. 2-[4-(3-Аминопропил)фенил]пропан-2-ол.

К перемешиваемому 1М раствору литийалюминийгидрида в ТГФ, дополнительно разбавленному 20 мл ТГФ, при 0°С по каплям добавляют раствор 3-[4-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]пропионитрила (0,8 г, 4,0 ммоль) в 10 мл ТГФ. Реакционную смесь оставляют медленно нагреваться до комнатной температуры, затем 4 ч кипятят с обратным холодильником. После этого реакционную смесь охлаждают до 0°С и гасят, медленно по каплям добавляя МеОН. Смесь разбавляют хлороформом и промывают водой. Органический экстракт фильтруют через диатомовую землю, фильтрат концентрируют, затем разбавляют этилацетатом, высушивают и концентрируют, получая 0,5 г масла.

Ή ЯМР (ΟΌ₃ΘΌ) δ: 7,4 (д, 2Н), 7,1 (д, 2Н), 2,6 (м, 2Н), 1,7 (м, 2Н), 1,5 (с, 6Н). МС (т/е, %): 194 (М⁺+1, 100), 176 (90).

Синтез 7. 3-[4-(2-Метил[1,3]диоксолан-2-ил)фенил]пропионитрил.

Смесь 3-(4-ацетилфенил)пропионитрила (2,2 г, 13 ммоль), этиленгликоля (2,8 мл, 51 ммоль) и каталитического количества р-ТкОН (~200 мг) кипятят в 100 мл толуола с обратным холодильником и ловушкой Дина-Старка в течение 18 ч. Смесь разбавляют ЕЮАс и последовательно промывают 5% раствором бикарбоната, водой и насыщенным раствором соли, высушивают (Мд§О₄) и концентрируют, получая масло. Хроматография на силикагеле при элюировании смесью ЕЮАс/гексан дает 2,5 г масла. ¹Н ЯМР (СИС1₃) δ: 7,4 (д, 2Н), 7,2 (д, 2Н), 4,0 (м, 2Н), 3,8 (м, 2Н), 2,9 (т, 2Н), 2,6 (т, 2Н), 1,6 (с, 3Н). МС (т/е, %): 216 (М⁺-1, 1), 202 (100).

Синтез 8. 3-[4-(2-Метил[1,3]диоксолан-2-ил)фенил]пропиламин.

К перемешиваемому раствору 3-[4-(2-метил[1,3]диоксолан-2-ил)фенил]пропионитрила (2,4 г, 11 ммоль) в 30 мл ТГФ по каплям добавляют 1М раствор литийалюминийгидрида в ТГФ. Смесь оставляют нагреваться до комнатной температуры, затем кипятят с обратным холодильником в течение 1 ч. Смесь охлаждают до 0°С, затем гасят добавляемым по каплям МеОН. Смесь разбавляют хлороформом и промывают водой. Полученную суспензию фильтруют через диатомовую землю и собирают слои фильтрата. Органический экстракт высушивают над Мд§О₄ и концентрируют, получая 2,4 г масла. ¹Н ЯМР (СИС1₃) δ: 7,4 (м, 2Н), 7,1 (д, 2Н), 4,0 (м, 2Н), 3,8 (м, 2Н), 2,7 (м, 2Н), 2,6 (м, 2Н), 1,7 (м, 2Н), 1,6 (с, 3Н). МС (т/е, %): 221 (М⁴, 10), 206 (60), 189 (100).

Синтез 9. 2,2,2-Трифтор-1-(4-йодфенил)этанол.

К перемешиваемому раствору 4-йодбензальдегида (2,0 г, 8,6 ммоль) в 20 мл ТГФ при комнатной температуре добавляют 0,5М раствор триметил(трифторметил)силана в ТГФ (19 мл, 9,5 ммоль) и затем тетрабутиламмонийфторид (112 мг, 0,4 ммоль). Смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре, выливают в 0,1н. раствор соляной кислоты и экстрагируют ЕЮАс. Органический экстракт по очереди промывают водой и насыщенным раствором соли, высушивают (Мд§О₄) и концентрируют, получая 2,6 г масла. Ή ЯМР (СОС1₃) δ: 7,7 (д, 2Н), 7,2 (д, 2Н), 5,0 (м, 1Н), 2,7 (д, 1Н). МС (т/е, %): 302 (М⁺, 100), 233 (100).

Синтез 10. 2-{3-[4-(2,2,2-Трифтор-1-гидроксиэтил)фенил]проп-2-инил}изоиндол-1,3-дион.

К перемешиваемой суспензии 2,2,2-трифтор-1-(4-йодфенил)этанола (2,6 г, 8,5 ммоль), Ν-пропаргилфталимида (1,6 г, 8,5 ммоль), дихлор-бис-(трифенилфосфин)палладия (298 мг, 0,43 ммоль) и йодида меди(1) (82 мг, 0,43 ммоль) в 20 мл ТГФ при комнатной температуре добавляют 5 мл ТЕА. Из смеси быстро удаляют воздух, пропуская ток азота, и затем кипятят в течение 6 ч. Смесь разбавляют хлороформом, промывают водой, высушивают над Мд§О₄ и концентрируют, получая твердое вещество. Затем его растирают с ЕЮАс, что позволяет получить 2,2 г твердого вещества. Ή ЯМР (СИС1₃) δ: 7,9 (м, 2Н), 7,7 (м, 2Н), 7,5 (д, 2Н), 7,4 (д, 2Н), 5,0 (м, 1Н), 4,7 (с, 2Н). МС (т/е, %): 359 (М⁴, 100).

Синтез 11. 2-{3-[4-(2,2,2-Трифтор-1-гидроксиэтил)фенил]пропил}изоиндол-1,3-дион.

Смесь 2-{3-[4-(2,2,2-трифтор-1-гидроксиэтил)фенил]проп-2-инил}изоиндол-1,3-диона (2,2 г, 6,1 ммоль) и 10% Рб/С (220 мг) в 150 мл ЕЮН и 150 мл ТГФ встряхивают в аппарате Парра при давлении водорода 50 фунт/кв.дюйм и комнатной температуре в течение 2 ч. Добавляют еще 220 мг 10% Рб/С и смесь встряхивают при давлении водорода 50 фунт/кв.дюйм и комнатной температуре в течение еще 2 ч. Затем добавляют еще 220 мг 10% Рб/С и смесь встряхивают при давлении водорода 50 фунт/кв.дюйм и комнатной температуре в течение ночи. Смесь фильтруют через диатомовую землю и фильтрат концентрируют, получая масло. Хроматография на силикагеле при элюировании смесью ЕЮАс/гексан дает 1,8 г масла. ¹Н ЯМР (СПС1₃) δ: 7,8 (м, 2Н), 7,7 (м, 2Н), 7,3 (д, 2Н), 7,2 (д, 2Н), 4,9 (м, 1Н), 3,7 (т, 2Н), 2,7 (т, 2Н), 2,0 (м, 2Н). МС (т/е, %): 363 (М⁴, 15), 345 (35), 325 (50), 161 (100).

Синтез 12. 1-[4-(3-Аминопропил)фенил]-2,2,2-трифторэтанол.

К перемешиваемой суспензии 2-{3-[4-(2,2,2-трифтор-1-гидроксиэтил)фенил]пропил}изоиндол-1,3

- 11 010424 диона (1,8 г, 5,0 ммоль) в 50 мл МеОН при комнатной температуре добавляют гидразингидрат (0,46 мл, 15,0 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 18 ч. Затем реакционную смесь фильтруют и фильтрат концентрируют, получая масло. Масло растирают с хлороформом, фильтруют и фильтрат концентрируют, получая 1,0 г масла. Ή ЯМР (СЭСЕ) δ: 7,3 (д, 2Н), 7,2 (д, 2Н), 5,0 (м, 1Н), 2,6 (м, 2Н), 2,5 (м, 2Н), 1,6 (м, 2Н). МС (т/е, %): 363 (М⁴, 10), 216 (100).

Синтез 13. Бензо[1,2,5]оксадиазол-5-иловый эфир трифторметансульфоновой кислоты.

К перемешиваемому раствору 5-гидроксибензофуразана (1,8 г, 13,0 ммоль), ΤΕΑ (2,4 мл, 33,0 ммоль) и ΌΜΑΡ (79 мг, 7,0 ммоль) в 40 мл дихлорметана при -78°С по каплям добавляют раствор ангидрида трифторметансульфоновой кислоты (2,8 мл, 17,0 ммоль) в 10 мл дихлорметана. Смеси дают медленно нагреться до комнатной температуры в течение 3 ч, разбавляют дихлорметаном и промывают водой. Органический экстракт высушивают и концентрируют, получая масло. Хроматография на силикагеле при элюировании дихлорметаном дает 3,1 г масла. ¹Н ЯМР (СЭС1₃) δ: 8,0 (дд, 1Н), 7,8 (дд, 1Н), 7,3 (дд, 1Н). МС (т/е, %): 268 (М⁴, 60), 146 (60), 69 (100).

Синтез 14. 2-(Бензо [1,2,5]оксадиазол-5-илпроп-2-инил)изоиндол-1,3-дион.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 10, используя соответствующие исходные вещества. Ή ЯМР (СЭСЕ) δ: 8,2 (с, 1Н), 8,0 (дд, 1Н), 7,9 (м, 2Н), 7,8 (м, 2Н), 7,5 (дд, 2Н), 4,7 (с, 2Н). МС (т/е, %): 303 (М⁴, 100).

Синтез 15. 2-(3 -Бензо [1,2,5]оксадиазол-5-илпропил)изоиндол-1,3-дион.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 11, используя соответствующие исходные вещества. ¹Н ЯМР (СЭСЕ) δ: 7,8 (м, 2Н), 7,7 (м, 3Н), 7,6 (с, 1Н), 7,2 (м, 1Н), 3,8 (т, 3Н), 2,8 (т, 2Н), 2,1 (м, 2Н). МС (т/е, %): 307 (М⁴, 40), 290 (30), 272 (20), 160 (100).

Синтез 16. 3-Бензо[1,2,5]оксадиазол-5-илпропиламин.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 12, используя соответствующие исходные вещества. Ή ЯМР (ДМСО-6₆) δ: 7,9 (м, 2Н), 7,7 (м, 1Н), 7,5 (м, 1Н), 2,7 (м, 2Н), 2,5 (м, 2Н), 1,7 (м, 2Н). МС (т/е, %): 177 (М⁴, 40), 160 (100).

Синтез 17. Бензотиазол-6-иловый эфир трифторметансульфоновой кислоты.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 13, используя соответствующие исходные вещества. Ή ЯМР (СЭСЕ) δ: 9,1 (с, 1Н), 8,2 (д, 1Н), 7,9 (д, 1Н), 7,4 (дд, 1Н). МС (т/е, %): 283 (М⁴, 80), 150 (100).

Синтез 18. 2-(3-Бензотиазол-6-илпроп-2-инил)изоиндол-1,3-дион.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 10, используя бензотиазол6-иловый эфир трифторметансульфоновой кислоты (синтез 17) вместо 2,2,2-трифтор-1-(4-йодфенил)этанола. Ή ЯМР (ДМСО-6₆) δ: 9,4 (с, 1Н), 8,3 (д, 1Н), 8,0 (д, 2Н), 7,9 (м, 1Н), 7,8 (м, 2Н), 7,5 (дд, 1Н), 4,6 (с, 2Н). МС (т/е, %): 318 (М⁴, 100).

Синтез 19. 2-(3-Бензотиазол-6-илпропил)изоиндол-1,3-дион.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 11, используя 2-(3-бензотиазол-6-илпроп-2-инил)изоиндол-1,3-дион (синтез 19) вместо 2-{3-[4-(2,2,2-трифтор-1-гидроксиэтил)фенил]проп-2-инил}изоиндол-1,3-диона (синтез 10). ¹Н ЯМР (СЭС1₃) δ: 8,9 (с, 1Н), 8,0 (д, 1Н), 7,8 (м, 2Н),

7.7 (м, 2Н), 7,3 (дд, 1Н), 3,8 (т, 2Н), 2,8 (т, 2Н), 2,1 (м, 2Н). МС (т/е, %): 322 (М⁴, 80), 174 (40), 162 (100).

Синтез 20. 3-Бензотиазол-6-илпропиламин.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 12, используя 2-(3-бензотиазол-6-илпропил)изоиндол-1,3-дион (синтез 20) вместо 2-{3-[4-(2,2,2-трифтор-1-гидроксиэтил)фенил]пропил}изоиндол-1,3-диона (синтез 11). МС (т/е, %): 192 (М⁴, 20), 175 (100).

Синтез 21. 2-(3-Йодфенил)-2-метил[1,3]диоксолан.

Смесь 3-йодацетофенона (3,0 г, 12 ммоль), этиленгликоля (2,7 мл, 48 ммоль) и п-толуолсульфоновой кислоты (30 мг) кипятят с обратным холодильником и ловушкой Дина-Старка в 50 мл толуола в течение 18 ч. Смесь разбавляют ΕιΟΑο и последовательно промывают 5% раствором бикарбоната натрия, водой и насыщенным раствором соли, высушивают над Мд§О₄ и концентрируют, получая масло. Хроматография на силикагеле с элюированием смесью ΕιΟΑο/гексан дает 3,1 г масла. ¹Н ЯМР (СЭСЕ) δ: 7,8 (м, 1Н), 7,6 (дд, 1Н), 7,4 (дд, 1Н), 7,0 (м, 1Н), 4,0 (м, 2Н), 3,7 (м, 2Н), 1,6 (с, 3Н). МС (т/е, %): 290 (М⁴, 20), 275 (100).

Синтез 22. 2-{3-[3-(2-Метил[1,3]диоксолан-2-ил)фенил]проп-2-инил}изоиндол-1,3-дион.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 10, используя 2-(3йодфенил)-2-метил[1,3]диоксолан (синтез 21) вместо 2,2,2-трифтор-1-(4-йодфенил)этанола. ¹Н ЯМР (СПС1₃) δ: 7,9 (м, 2Н), 7,7 (м, 2Н), 7,5 (с, 2Н), 7,4 (м, 1Н), 7,3 (м, 1Н), 7,2 (м, 1Н), 4,7 (с, 2Н), 4,0 (м, 2Н),

3.7 (м, 2Н), 1,6 (с, 6Н). МС (т/е, %): 347 (М⁴, 15), 332 (100).

Синтез 23. 2-{3-[3-(2-Метил[1,3]диоксолан-2-ил)фенил]пропил}изоиндол-1,3-дион.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 11, используя 2-{3-[3-(2метил[1,3]диоксолан-2-ил)фенил]проп-2-инил}изоиндол-1,3-дион (синтез 22) вместо 2-{3-[4-(2,2,2-трифтор-1-гидроксиэтил)фенил]проп-2-инил}изоиндол-1,3-диона (синтез 10). ¹Н ЯМР (СЭСЕ,) δ: 7,8 (м, 2Н),

7.7 (м, 2Н), 7,2 (м, 4Н), 7,1 (д, 1Н), 4,0 (м, 2Н), 3,7 (м,4Н), 2,6 (т, 2Н), 2,0 (м, 2Н), 1,6 (с, 3Н). МС (т/е, %):

- 12 010424

351 (М⁴, 5), 336 (100).

Синтез 24. 3-[3-(2-Метил[1,3]диоксолан-2-ил)фенил]пропиламин.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 12, используя 2-{3-[3-(2метил[1,3]диоксолан-2-ил)фенил]пропил}изоиндол-1,3-дион (синтез 23) вместо 2-{3-[4-(2,2,2-трифтор-1гидроксиэтил)фенил]пропил}изоиндол-1,3-диона. ’Н ЯМР (СЭСЙ,) δ: 7,3 (м, 3Н), 7,1 (дд, 1Н), 4,0 (м, 2Н), 3,8 (м, 2Н), 2,7 (т, 2Н), 2,6 (т, 2Н), 1,8 (м, 2Н), 1,6 (с, 3Н). МС (т/е, %): 221 (М⁺, 20), 206 (60), 189 (100).

Синтез 25. 2-(3-Йодфенил)пропан-2-ол.

К перемешиваемому раствору метилмагнийхлорида (65 ммоль) в 100 мл ТГФ при 0°С по каплям добавляют 3-йодацетофенон (4,0 г, 16,3 ммоль). Реакционной смеси дают нагреться до комнатной температуры, затем охлаждают до 0°С и добавляют еще 1 экв. метилмагнийхлорида. Смеси дают нагреться до комнатной температуры и перемешивают в течение 5 ч. Реакционную смесь гасят МеОН, разбавляют водой, подкисляют ледяной АсОН и экстрагируют дихлорметаном. Органический экстракт промывают 5% раствором бикарбоната натрия и затем концентрируют. Хроматографическая очистка на силикагеле с элюированием дихлорметаном дает масло, которое затвердевает при стоянии. МС (т/е, %): 262 (М⁴, 80), 247 (100).

Синтез 26. 2-{3-[3-(1-Г идрокси-1 -метилэтил)фенил]проп-2-инил}изоиндол-1,3-дион.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 10, используя 2-(3-йодфенил)пропан-2-ол (синтез 25) вместо 2,2,2-трифтор-1-(4-йодфенил)этанола. МС (т/е, %): 319 (М'. 90), 301 (80), 160 (100).

Синтез 27. 2-{3-[3-(1-Г идрокси-1 -метилэтил)фенил]пропил}изоиндол-1,2-дион.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 11, используя 2-{3-[3-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]проп-2-инил}изоиндол-1,3-дион (синтез 26) вместо 2-{3-[4-(2,2,2-трифтор-1-гидроксиэтил)фенил]проп-2-инил}изоиндол-1,3-диона (синтез 10). МС (т/е, %): 305 (М⁺-Н₂О, 80), 145 (100).

Синтез 28. 2-[3-(3-Аминопропил)фенил]пропан-2-ол.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 12, используя 2-{3-[3-(1-гидрокси-1-метилэтил)фенил]пропил}изоиндол-1,3-дион (синтез 27) вместо 2-{3-[4-(2,2,2-трифтор-1-гидроксиэтил)фенил]пропил}изоиндол-1,3-диона. МС (т/е, %): 193 (М⁴, 30), 162 (60), 145 (100).

Синтез 29. 4-[3-(1,3-Диоксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)проп-1-инил]бензонитрил.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 10, используя соответствующие исходные вещества. ’Н ЯМР (СОС1₃) δ: 7,8 (м, 6Н), 7,6 (д, 2Н), 4,6 (с, 2Н). МС (т/е, %): 286 (М⁺, 100).

Синтез 30. 4-[3-(1,3-Диоксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропил]бензонитрил.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 11, используя 4-[3-(1,3-диоксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)проп-1-инил]бензонитрил (синтез 29) вместо 2-{3-[4-(2,2,2-трифтор-1-гидроксиэтил)фенил]проп-2-инил}изоиндол-1,3-диона (синтез 10). ’Н ЯМР (СЭС1₃) δ: 7,8 (дд, 2Н), 7,7 (дд, 2Н), 7,5 (д, 2Н), 7,3 (д, 2Н), 3,7 (т, 2Н), 2,7 (т, 2Н), 2,0 (м, 2Н). МС (т/е, %): 290 (М⁴, 60), 161 (100).

Синтез 31. 4-(3-Аминопропил)бензонитрил.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 12, используя 4-[3-(1,3-диоксо-1,3-дигидроизоиндол-2-ил)пропил]бензонитрил (синтез 30) вместо 2-{3-[4-(2,2,2-трифтор-1-гидроксиэтил)фенил]пропил}изоиндол-1,3-диона. ’Н ЯМР (СЭСТ) δ: 7,5 (д, 2Н), 7,3 (д, 2Н), 2,7 (м, 4Н), 1,8 (м, 2Н). МС (т/е, %): 160 (М⁴, 20), 143 (100).

Синтез 32. Оксим 2-хлор-3,4-диметоксибензальдегида.

Смесь 2-хлор-3,4-диметоксибензальдегида (1,5 г, 7,5 ммоль), гидрохлорида гидроксиламина (650 мг, 9,4 ммоль) и ацетата натрия (1,5 г, 18,8 ммоль) в 30 мл МеОН и 15 мл воды нагревают до 65°С в течение 18 ч. Смесь разбавляют водой и экстрагируют ЕЮАс. Органический экстракт последовательно промывают водой и насыщенным раствором соли, высушивают над Мд§О₄ и концентрируют, получая 1,7 г твердого вещества. ’Н ЯМР (СОС1₃) δ: 8,5 (с, 1Н), 7,6 (д, 1Н), 6,8 (д, 1Н), 3,9 (с, 3Н), 3,8 (с, 3Н). МС (т/е, %): 215 (М⁴, 40), 199 (100).

Синтез 33. 2-Хлор-3,4-диметоксибензиламин.

К перемешиваемому раствору продукта синтеза 32 (1,7 г, 7,8 ммоль) в 40 мл ТГФ при 0°С медленно по каплям добавляют 1М раствор литийалюминийгидрида в ТГФ (17 мл, 17 ммоль). Температуре смеси дают медленно подняться до комнатной и затем кипятят с обратным холодильником в течение 2 ч. Смесь охлаждают до 0°С и гасят, медленно по каплям добавляя МеОН. Смесь разбавляют водой и экстрагируют хлороформом. Полученную эмульсию фильтруют через диатомовую землю и разделяют слои фильтрата. Органический экстракт промывают водой, высушивают (Мд§О₄) и концентрируют, получая 1,1 г масла. МС (т/е, %): 202 (М⁴, 100).

Синтез 34. Оксим 3-этокси-4-метоксибензальдегида.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 32, используя соответствующие исходные вещества. ’Н ЯМР (СЭСТ) δ: 8,1 (с, 1Н), 7,2 (д, 1Н), 7,0 (м, 1Н), 6,8 (д, 1Н), 4,1 (кв, 2Н), 3,9 (с, 3Н), 1,5 (т, 3Н). МС (т/е, %) : 195 (М⁴, 100).

Синтез 35. 3-Этокси-4-метоксибензиламин.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 33, используя соответствую

- 13 010424 щие исходные вещества. ^!Н ЯМР (СЭС1₃) δ: 6,9 (с, 1Н), 6,8 (с, 2Н), 4,1 (кв, 2Н), 3,8 (с, 2Н), 1,5 (т, 3Н). МС (т/е, %): 181 (М⁴, 100).

Синтез 36. 2-(3-Пиридин-4-илпропил)изоиндол-1,3-дион.

К перемешиваемому раствору 4-пиридинпропанола (2,0 г, 14,5 ммоль), фталимида (2,1 г, 14,5 ммоль) и трифенилфосфина (4,9 г, 15,2 ммоль) в 50 мл ТГФ при 0°С по каплям добавляют диэтилазодикарбоксилат (2,5 мл, 16,0 ммоль). Смеси дают медленно нагреться до комнатной температуры, затем перемешивают в течение ночи. Смесь разбавляют 0,1н. раствором соляной кислоты и промывают диэтиловым эфиром. Водный экстракт подщелачивают 6н. гидроксидом натрия и экстрагируют ЕЮАс. Органический экстракт промывают 1н. гидроксидом натрия и водой, высушивают над Мд§О₄ и концентрируют, получая 1,8 г твердого вещества. Ή ЯМР (СЭС1₃) δ: 8,5 (с, 2Н), 7,8 (м, 2Н), 7,7 (м, 2Н), 7,2 (м, 2Н), 3,7 (т, 2Н),

2,7 (т, 2Н), 2,0 (м, 2Н).

Синтез 37. 3-Пиридин-4-илпропиламин.

Данное соединение получают способом, аналогичным способу синтеза 12, используя соединение, указанное в заглавии синтеза 36. ¹Н ЯМР (СЭС1₃) δ: 8,4 (м, 2Н), 7,1 (м, 2Н), 2,7 (т, 2Н), 2,6 (т, 2Н), 1,8 (м, 2Н). МС (т/е, %): 136 (М⁴, 30), 119 (35), 107 (100).

Соединения формулы (I) получают, как описано в следующих примерах.

Пример 1. Ы⁴-(3,5-Диметоксибензил)-М²-(2-пиридин-2-илэтил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин.

Смесь соединения, указанного в заглавии синтеза 1 (174 мг, 0,5 ммоль), 2-(2-аминоэтил)пиридина (386 мг, 3,2 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (0,2 мл, 1,1 ммоль) в 1 мл ДМСО нагревают при 90°С в течение 18 ч. Смесь выливают в воду и экстрагируют метиленхлоридом. Органический экстракт промывают насыщенным раствором соли, высушивают над Мд§О₄ и концентрируют. Полученный остаток растирают с ЕЮАс. получая 83 мг (40%) соединения, указанного в заглавии примера. Т.пл. 157-158°С. 'Н ЯМР (ДМСО-б₆) δ:

8,6 (дд, 1Н), 8,5 (д, 1Н), 8,4 (дд, 1Н), 7,7 (м, 1Н), 7,2 (м, 1Н), 7,0 (м, 2Н), 6,5 (м, 2Н), 6,3 (м, 1Н), 4,6 (м, 2Н), 3,7 (с, 6Н), 3,6 (м, 2Н), 3,0 (м, 2Н). МС (т/ζ, %): 417 (100). Данные элементного анализа: вычислено для С₂₃Н₂₄Ы₆О₂: С 66,3; Н 5,8; N 20,2; найдено: С 65,3; Н 6,3; N 18,3.

Соединения примеров 2-5 получают способом, аналогичным описанному в примере 1, используя соответствующие исходные соединения.

Пример 2. ^-(3,5-Диметоксибензил)-^-(2-пиридин-3-илэтил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 185-186°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₃Н₂₄Н₆О₂: С 66,3; Н 5,8; N 20,2; найдено: С 64,5; Н 5,6; N 19,6.

Пример 3. ^-(3,5-Диметоксибензил)-Н²-(2-пиридин-4-илэтил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 234-235°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₃Н₂₄Ы₆О₂: С 66,3; Н 5,8; N 20,2; найдено: С 66,0; Н 5,6; N 20,0.

Пример 4. ^-(3,5-Диметоксибензил)-Н²-2-пиридин-3-илметилпиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 222-223°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₂Н₂₂Ы₆О₂: С 65,7; Н 5,5; N 20,9; найдено: С 65,5; Н 5,5; N 20,8.

Пример 5. ^-Н⁴-бис-(3,5-Диметоксибензил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 159-160°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₅Н₂₇^О₄: С 65,1; Н 5,9; N 15,2; найдено: С 65,3; Н 5,9; N 15,1.

Пример 6. ^-(3,5-Диметоксибензил)-Н²-[2-(4-метоксифенил)этил]пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин.

Смесь соединения, указанного в заглавии синтеза 1 (100 мг, 0,5 ммоль), п-метоксифенетиламина (89 мкл, 0,61 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (105 мкл, 0,61 ммоль) в 0,8 мл ДМСО нагревают при 90°С в течение 18 ч. Соединение выделяют из полученной реакционной смеси и очищают, непосредственно впрыскивая его в прибор для обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ (81ιίιη;·ιάζι.ι Согр.; Κγοΐο, .Гараи), используя в качестве элюента ступенчатый градиент ацетонитрил/вода, содержащий 0,1% гидроксида аммония. Фракции, содержащие желаемый продукт, объединяют, концентрируют и остаток перекристаллизовывают из изопропанола, получая 80 мг (60%) соединения, указанного в заглавии примера. Т.пл. 88-89°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₅Н₂₇^О₃: С 67,4; Н 6,1; N 15,7; найдено: С 67,0; Н 6,3; N 15,2.

Соединения примеров 7-31 получают способом, аналогичным описанному в примере 6, используя соответствующие исходные вещества. Отмечены конкретные отклонения от стандартных условий проведения реакции и/или использованные условия очистки.

Пример 7. ^-(3,5-Диметоксибензил)-Н²-(3-фенилпропил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин.

Ή ЯМР (ДМСО-б₆) δ: 8,6 (дд, 1Н), 8,4 (д, 1Н), 7,2 (м, уш, 3Н), 7,1 (м, уш, 2Н), 7,0 (м, уш, 1Н), 6,5 (с, уш, 2Н), 6,3 (с, уш, 1Н), 4,6 (м, уш, 2Н), 3,7 (с, уш, 6Н), 2,6 (м, уш, 2Н), 1,8 (м, уш, 2Н), 1,7 (м, уш, 2Н). МС (т/ζ, %): 417 (100). МС (т/ζ, %): 430 (100).

Пример 8. ^-[2-(4-Хлорфенил)этил]-Н⁴-(3,5-диметоксибензил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 85-90°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₄Н₂₄Н₅О₂С1: С 64,1; Н 5,4; N 15,6; найдено: С 63,6; Н 5,7; N 15,3.

Пример 9. ^-Бензил-4⁴-(3,5-диметоксибензил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 84-85°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₃Н₂₃^О₂: С 68,8; Н 5,8; N 17,4; найдено: С 68,5; Н 6,0; N 17,4.

- 14 010424

Пример 10. ^-(3,5-Диметоксибензил)-^-(2-тиофен-2-илэтил)пиридо[2,3-й]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 120-121°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₂Н₂₃^О₂8: С 62,7; Н 5,5; N 16,6; найдено: С 62,2; Н 6,0; N 15,6.

Пример 11. 2-(4-{[4-(3,5-Диметоксибензиламино)пиридо[2,3-й]пиримидин-2-иламино]метил}фенил) пропан-2-ол.

Т.пл. 105-109°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₆Н₂₉^О₃: С 68,0; Н 6,4; N 15,2; найдено: С 67,7; Н 6,6; N 14,4.

Пример 12. ^-(3,5-Диметоксибензил)-^-2-фенетилпиридо[2,3-й]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 112-114°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₄Н₂₅^О₂: С 69,4; Н 6,1; N 16,9; найдено: С 68,5; Н 6,9; N 15,3.

Пример 13. ^-(3,5-Диметоксибензил)-^-[2-(3,5-диметоксифенил)этил]пиридо[2,3-й]пиримидин-2,4диамин.

Т.пл. 95-100°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₆Н₂₉^О₄: С 65,7; Н 6,2; N 14,7; найдено: С 65,5; Н 6,6; N 14,5.

Пример 14. ^-(3,4-Диметоксибензил)-^-[2-(3-фторфенил)этил]пиридо[2,3-й]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 227-228°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₄Н₂₄^О₂Р: С 66,5; Н 5,6; N 16,2; найдено: С 66,6; Н 5,6; N 16,2.

Пример 15. ^-(3,4-Диметоксибензил)-^-[2-(2-фторфенил)этил]пиридо[2,3-й]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 220-222°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₄Н₂₄^О₂Р: С 66,5; Н 5,6; N 16,2; найдено: С 66,4; Н 5,5; N 16,1.

Пример 16. ^-(3,4-Диметоксибензил)-^-[2-(4-фторфенил)этил]пиридо[2,3-й]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 225-226°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₄Н₂₄^О₂Р: С 66,5; Н 5,6; N 16,2; найдено: С 66,4; Н 5,6; N 16,2.

Пример 17. N^(3,4- Диметоксибензил)-№фенетилпиридо [2,3-й] пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 217-218°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₄Н₂₅^О₂: С 69,4; Н 6,1; N 16,9; найдено: С 69,4; Н 6,0; N 16,8.

Пример 18. ^-(3,4-Диметоксибензил)-^-(4-фенилбутил)пиридо[2,3-й]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 194-195°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₆Н₂₉^О₂: С 70,4; Н 6,6; N 15,8; найдено: С 70,5; Н 6,6; N 15,9.

Пример 19. ^-(3,4-Диметоксибензил)-^-(4-феноксиэтил)пиридо[2,3-й]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 227-228°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₄Н₂₅^О₃: С 66,8; Н 5,8; N 16,2; найдено: С 66,7; Н 5,7; N 16,2.

Пример 20. ^-(3,4-Диметоксибензил)-^-(2-трифторметилбензил)пиридо[2,3-й]пиримидин-2,4-диамин.

Т.пл. 227-228°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₄Н₂₂^О₂Р₃: С 61,4; Н 4,7; N 14,9; найдено: С 60,6; Н 4,9; N 14,8.

Пример 21. 2-(4-{3-[4-(3,4-Диметоксибензиламино)пиридо[2,3-й]пиримидин-2-иламино]пропил}фенил)пропан-2-ол.

Полученные при осуществлении обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ фракции, содержащие неочищенный желаемый продукт, концентрируют и остаток перекристаллизовывают из ЕЮАе. Т.пл. 198-199°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₈Н₃₃^О₃: С 69,0; Н 6,8; N 14,4; найдено: С 68,7; Н 6,9; N 14,3.

Пример 22. 2-(4-{3-[4-(3,5-Диметоксибензиламино)пиридо[2,3-й]пиримидин-2-иламино]пропил}фенил)пропан-2-ол.

Аморфное твердое вещество. Т.пл. 70-75°С. Ή ЯМР (ДМСО-й₆) δ: 8,6 (дд, 1Н), 8,4 (д, 1Н), 7,3 (м, уш, 2Н), 7,1 (м, уш, 2Н), 7,0 (м, уш, 2Н), 6,5 (с, уш, 2Н), 6,3 (с, уш, 1Н), 4,6 (м, уш, 2Н), 3,7 (с, уш, 6Н), 2,6 (м, уш, 2Н), 1,8 (м, уш, 2Н), 1,7 (м, уш, 2Н), 1,4 (с, 6Н). МС (т/ζ, %): 430 (100). МС (т/ζ, %): 488 (М+1, 100), 470 (50). Данные элементного анализа: вычислено для С₂₈Н₃₃^О₃: С 69,0; Н 6,8; N 14,4; найдено: С 67,1; Н 7,0; N 12,1.

Пример 23. 1-(4-{[4-(3,4-Диметоксибензиламино)пиридо[2,3-й]пиримидин-2-иламино]метил}фенил)2,2,2-трифторэтанол.

Полученные при осуществлении обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ фракции, содержащие неочищенный желаемый продукт, концентрируют и остаток перекристаллизовывают из смеси ацетонитрил/вода. Т.пл. 121-122°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₅Н₂/Ц₅О₃Е₃: С 60,1; Н 4,8; N 14,0; найдено: С 58,0; Н 5,0; N 13,4.

Пример 24. 1-(4-{3-[4-(3,4-Диметоксибензиламино)пиридо[2,3-й]пиримидин-2-иламино]пропил}фенил)этанон.

Реакционную смесь, содержащую неочищенный продукт, выливают в воду и образовавшийся осадок удаляют фильтрованием. Остаток растворяют в 30 мл МеОН и добавляют 10 мл 1н. соляной кислоты. Смесь перемешивают 4 ч при комнатной температуре, концентрируют, нейтрализуют 5% раствором бикарбоната натрия и экстрагируют дихлорметаном. Органические экстракты объединяют, промывают насыщенным раствором соли, высушивают над Мд8О₄ и концентрируют. Неочищенный продукт очищают

- 15 010424 обращенно-фазовой ВЭЖХ, как описано в примере 6. Фракции, содержащие желаемый продукт, объединяют, концентрируют и остаток перекристаллизовывают из смеси ацетонитрил/вода, получая твердое вещество. Т.пл. 184-185°С. Данные элементного анализа: вычислено для Ск-Ш-ХЮс С 68,8; Н 6,2; N 14,9; найдено: С 68,7; Н 6,0; N 14,6.

Пример 25. 1-(4-{3-[4-(3,4-Диметоксибензиламино)пиридо[2,3-6]пиримидин-2-иламино]пропил}фенил)-2,2,2-трифторэтанол.

Т.пл. 222-224°С. Ή ЯМР (ДМСО-6₆): δ 8,6 (дд, 1Н), 8,4 (дд, 1Н), 7,4 (м, уш, 2Н), 7,3 (м, 1Н), 7,0 (м, уш, 2Н), 6,8 (с, уш, 2Н), 6,7 (д, 1Н), 5,0 (м, уш, 1Н), 4,6 (с, уш, 2Н), 3,7 (м, 6Н), 2,6 (м, уш, 2Н), 1,8 (м, уш, 2Н). МС (т/ζ, %): 528 (М⁴, 100).

Пример 26. Ν²-3 -(Бензо [1,2,5]оксадиазол-5-илпропил)-^-(3,4-диметоксибензил)пиридо [2,3-6] пиримидин-2,4-диамин.

Продукт выделяют хроматографией на силикагеле, элюируя 2,5% МеОН в смеси 2н. аммиак/дихлорметан, получая неочищенное твердое вещество. Растирание с ЕЮАс дает твердое вещество. Т.пл. 191-193°С. Ή ЯМР (ДМСО-6₆): δ 8,6 (дд, 1Н), 8,4 (дд, 1Н), 7,9 (м, уш, 1Н), 7,7 (м, 1Н), 7,5 (м, уш, 1Н), 7,0 (м, уш, 2Н), 6,8 (м, 2Н), 4,6 (м, уш, 2Н), 3,7 (м, 6Н), 3,4 (м, 2Н), 2,7 (м, уш, 2Н), 1,9 (м, уш, 2Н). МС (т/ζ, %): 472 (М⁴, 100).

Пример 27. ^-3-(Бензотиазол-6-илпропил)-^-(3,4-диметоксибензил)пиридо[2,3-6]пиримидин-2,4 диамин.

Продукт выделяют хроматографией на силикагеле, элюируя 2,5% МеОН в смеси 2н. раствор аммиака/дихлорметан, получая твердое вещество. Т.пл. 191-193°С. МС (т/ζ, %): 487 (М⁴, 100). Данные элементного анализа: вычислено для Ο₂₆Η₂₆Ν₆Θ₂§: С 64,2; Н 5,4; N 17,3; найдено: С 64,5; Н 5,5; N 16,8.

Пример 28. ^-(3,4-Диметоксибензил)-^-{3-[3-(2-метил[1,3]диоксолан-2-ил)фенил]пропил}пиридо [2,3-6] пиримидин-2,4-диамин.

Ή ЯМР (ДМСО-6₆): δ 8,6 (д, 1Н), 8,3 (д, 1Н), 7,2 (м, уш, 3Н), 7,0 (м, уш, 3Н), 6,9 (м, уш, 2Н), 4,6 (м, уш, 2Н), 4,1 (м, 2Н), 3,9 (м, 2Н), 3,7 (м, уш, 8Н), 2,6 (м, уш, 2Н), 1,8 (м, уш, 2Н), 1,5 (с, 3Н). МС (т/ζ, %): 516 (М⁺+1, 100).

Пример 29. 2-(3-{3-[4-(3,4-Диметоксибензиламино)пиридо[2,3-6]пиримидин-2-иламино]пропил}фенил)пропан-2-ол.

Т.пл. 204-205°С. Ή ЯМР (ДМСО-6₆): δ 8,6 (д, 1Н), 8,3 (д, 1Н), 7,3 (м, уш, 1Н), 7,2 (м, уш, 1Н), 7,1 (м, уш, 1Н), 7,0 (м, уш, 3Н), 6,8 (с, уш, 2Н), 4,6 (с, уш, 2Н), 3,7 (м, уш, 6Н), 3,3 (м, уш, 2Н), 2,6 (м, уш, 2Н), 1,8 (м, уш, 2Н), 1,4 (с, 6Н). МС (т/ζ, %): 488 (М⁺+1, 100).

Пример 30. 4-{3-[4-(3,4-Диметоксибензиламино)пиридо[2,3-6]пиримидин-2-иламино]пропил}бен зонитрил.

Т.пл. 220-222°С. Ή ЯМР (ДМСО-6₆): δ 8,6 (д, 1Н), 8,3 (д, 1Н), 7,7 (м, уш, 2Н), 7,4 (м, уш, 2Н), 7,0 (м, уш, 2Н), 6,8 (с, уш, 2Н), 4,6 (с, уш, 2Н), 3,7 (м, уш, 6Н), 3,3 (м, уш, 2Н), 2,7 (м, уш, 2Н), 1,8 (м, уш, 2Н). МС (т/ζ, %): 455 (М⁺+1, 100).

Пример 31. ^^,-(3,5-Диметоксибензил)-^-(3-пиридин-4-илпропил)пиридо[2,3-6]пиримидин-2,4-диамин.

Ή ЯМР (СЭ₂С1₂): δ 9,1 (д, 1Н), 8,9 (м, уш, 1Н), 8,4 (м, уш, 3Н), 7,2 (м, уш, 2Н), 7,1 (м, уш, 1Н), 7,0 (с, уш, 1Н), 6,9 (д, 1Н), 6,6 (д, 1Н), 4,8 (д, 2Н), 3,7 (с, 3Н), 3,7 (с, 3Н), 3,6 (м, 2Н), 2,7 (м, 2Н), 2,0 (м, 2Н). МС (т/ζ, %): 432 (М⁺+1, 20), 256 (15), 237 (30), 216 (100).

Соединения примеров 32-35 получают в соответствии со следующей обобщенной методикой. Отмечены конкретные исключения, относящиеся к использованным условиям реакций и/или очистки.

К перемешиваемому раствору 2,4-дихлорпиридо[2,3-6]пиримидина (0,75 ммоль) и ΌΙΡΕΑ (1,5 ммоль) в 3 мл ДМСО при комнатной температуре добавляют 0,75 ммоль амина, соответствующего формуле (V) на стадии 1 схемы 1. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1 ч, затем добавляют 2,25 ммоль амина, соответствующего формуле (VII) стадии 2 схемы 1, и добавочное количество ΌΙΡΕΑ (2,25 ммоль) и смесь нагревают при 90°С в течение 2 ч.

Пример 32. ^-(3,4-Диметоксибензил)-^-(3-фенилпропил)пиридо[2,3-6]пиримидин-2,4-диамин.

Соединение выделяют и очищают из полученной реакционной смеси непосредственным впрыскиванием в прибор для обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюента ступенчатый градиент смеси ацетонитрил/вода, содержащей 0,1% гидроксид аммония. Фракции, содержащие соединение, объединяют и концентрируют, получая твердое вещество. Т.пл. 190-192°С. ¹Н ЯМР (ДМСО-6₆): δ

8.6 (дд, 1Н), 8,4 (дд, 1Н), 7,2 (м, уш, 3Н), 7,1 (м, уш, 2Н), 7,0 (м, уш, 2Н), 6,8 (м, уш, 2Н), 4,6 (м, уш, 2Н),

3.7 (д, уш, 6Н), 3,3 (м, уш, 2Н), 2,6 (м, уш, 2Н), 1,8 (м, 2Н). МС (т/е, %): 431 (М⁺+1,50), 430 (М⁴, 100).

Пример 33. ^-(3,5-Диметоксибензил)-^-(3-феноксиэтил)пиридо[2,3-6]пиримидин-2,4-диамин.

Соединение выделяют и очищают из полученной реакционной смеси непосредственным впрыскиванием в прибор для обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюента ступенчатый градиент смеси ацетонитрил/вода, содержащей 0,1% гидроксид аммония. Фракции, содержащие соединение, объединяют, концентрируют и остаток перекристаллизовывают из смеси изопропанол/вода. Т.пл. 165-167°С. Ή ЯМР (ДМСО-6₆): δ 8,6 (дд, 1Н), 8,4 (д, 1Н), 7,2 (м, уш, 3Н), 7,1 (м, уш, 2Н), 7,0 (м, 1Н), 6,9 (м, уш, 2Н), 6,8 (м, уш, 1Н), 6,5 (д, 2Н), 6,4 (с, 1Н), 4,6 (м, уш, 2Н), 4,0 (м, уш, 2Н), 3,7 (м, уш,

- 16 010424

8Н). МС (т/е, %): 433 (М⁺+1,50), 432 (М⁺, 100).

Пример 34. ^-(3-Этокси-4-метоксибензил)-^-(3-фенилпропил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин.

Соединение выделяют и очищают из полученной реакционной смеси непосредственным впрыскиванием в прибор для обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюента ступенчатый градиент смеси ацетонитрил/вода, содержащей 0,1% гидроксид аммония. Фракции, содержащие соединение, объединяют, концентрируют и перекристаллизовывают из смеси ацетонитрил/вода. Т.пл. 181182°С. Данные элементного анализа: вычислено для С₂₆Н₂₉^О₂: С 70,4; Н 6,6; N 15,8; найдено: С 70,7; Н 6,9; N 15,9.

Пример 35. 2-(4-{3-[4-(3-Этокси-4-метоксибензиламино)пиридо[2,3-б]пиримидин-2-иламино]пропил} фенил)пропан-2-ол.

Соединение выделяют и очищают из полученной реакционной смеси непосредственным впрыскиванием в прибор для обращенно-фазовой препаративной ВЭЖХ, используя в качестве элюента ступенчатый градиент смеси ацетонитрил/вода, содержащей 0,1% гидроксид аммония. Фракции, содержащие желаемое соединение, объединяют, концентрируют и перекристаллизовывают из смеси ацетонитрил/вода. Т.пл. 150-152°С. Данные элементного анализа: вычислено для СЕдН^Юу С 69,4; Н 7,0; N 13,7; найдено: С 69,1; Н 6,9; N 13,7.

Пример 36. 1-(4-{3-[4-(3,4-Диметоксибензиламино)пиридо[2,3-б]пиримидин-2-иламино]пропил}фенил)-2,2,2-трифторэтанон.

К перемешиваемому раствору соединения, указанного в заглавии примера 25 (150 мг, 0,28 ммоль), в 15 мл дихлорметана при комнатной температуре добавляют 1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2-бензйодоксол-3(1Н)-она (180 мг, 0,43 ммоль). Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 6 ч, затем добавляют дополнительную порцию 1,1,1-триацетокси-1,1-дигидро-1,2-бензйодоксол-3(1Н)-она (180 мг, 0,43 ммоль) и смесь перемешивают в течение ночи при комнатной температуре. Смесь разбавляют хлороформом, промывают водой, высушивают над Мд§О₄ и концентрируют, получая масло. Хроматография на силикагеле с элюированием 5% МеОН в смеси 2н. аммиак/дихлорметан позволяет получить масло. Растирание с ΕίΟΛο дает 45 мг твердого вещества. Т.пл. 198-200°С. ¹Н ЯМР (ДМСО-б₆): δ

8,6 (дд, 1Н), 8,4 (дд, 1Н), 7,9 (м, уш, 2Н), 7,5 (м, уш, 2Н), 7,0 (м, уш, 2Н), 6,8 (м, уш, 2Н), 4,6 (м, 2Н), 3,7 (м, 6Н), 3,3 (м, 2Н), 2,7 (м, уш, 2Н), 1,9 (м, уш, 2Н). МС (т/е, %): 526 (М⁺, 100).

Пример 37. 1-(3-{3-[4-(3,4-Диметоксибензиламино)пиридо[2,3-б]пиримидин-2-иламино]пропил}фенил)этанон.

Смесь соединения, указанного в заглавии синтеза 27 (419 мг, 0,81 ммоль), в 8 мл ТГФ, содержащего 10 мл 6н. соляной кислоты, перемешивают при комнатной температуре в течение 6 ч. Реакционную смесь экстрагируют ΕίΟΛο. органический экстракт промывают 5% раствором бикарбоната натрия, затем концентрируют, получая твердое вещество. Т.пл. 152-155°С. Ή ЯМР (ДМСО-б₆): δ 8,8 (д, 1Н), 8,7 (д, 1Н), 7,7 (м, 2Н), 7,4 (м, 3Н), 7,0 (с, 1Н), 6,8 (м, 2Н), 4,6 (д, 2Н), 3,7 (с, 3Н), 3,6 (с, 3Н), 3,5 (м, 2Н), 2,7 (м, 2Н), 2,5 (с, 3Н), 1,9 (м, 2Н). МС (т/е, %): 471 (М⁺, 30), 470 (100).

Биологические методики

Выделение фермента ΡΌΕ 2

Фермент ΡΌΕ 2 выделяют из тромбоцитов человека, используя примерно 1,4 л крови многих доноров для получения осадка тромбоцитов. Тромбоциты повторно суспендируют примерно в 75 мл буферного раствора для лизиса [20 мМ Тпк рН 7,2, 5 мМ МдС1₂, 250 мМ сахарозы, 1 мМ ΌΤΤ, 1 мкл ингибитора протеазы йдта #8340, 81дта-А1бпск, §ЕЬошк, МО] и подвергают лизису обработкой ультразвуком при 4°С, 3 цикла импульсов по 1 мин, затем в течение ночи при 4°С вращают в центрифуге при 100000/д. Просветленные лизаты загружают в прибор АКТА Εχρίοτβτ ΕΡΕΟ (Атегккат Вюкстенсек; Ρ^ксаιа\νау. N1) в виде трех последовательных хроматографических разделений со средним объемом загрузки 25 мл. Применяют 5 мл анионообменную колонку НГТгар О (Атегккат Вюкстепсек). Буферный раствор А [20 мМ Тпк рН 7,2, 5 мМ МдС1₂, 1 мкл/2 мл ингибитора протеазы 81дта #8340] смешивают с градиентом буфера В [20 мМ Тпк рН 7,2, 500 мМ №С1, 5 мМ МдС1₂, 1 мкл/2 мл ингибитора протеазы йдта #8340], так что при пропускании объема, равного 20 объемам колонки от первоначальной концентрации буфера В 0%, конечная концентрация повышается до 100%. Наблюдают пики гидролиза сСМБ со средним разрешением при низком содержании соли - 125 мМ №101 (ΡΌΕ 5) - и высоком содержании соли 325 мМ №С1 (ΡΌΕ 2). Выделяют и собирают отдельно две основные фракции, демонстрирующие активность в отношении сСМΡ (ΡΌΕ 5 и ΡΌΕ 2). Суммарный объем собранных фракций ΡΌΕ 2 составляет приблизительно 40 мл, причем их распределяют по криопробиркам, 200 мкл/пробирка, и помещают на хранение при -80°С.

Исследование связывания фермента ΡΌΕ 2

Ингибирующую активность соединений формулы (I) по отношению к рекомбинантному или выделенному ферменту ΡΌΕ 2, а также другим ферментам семейства ΡΌΕ определяют, используя наборы [³Н]сАМР для сцинтилляционного анализа близости (8ΡΑ) фирмы Атегккат 1п1егпа1юпа1 (Ъкйе Скаткой, Бидк-тб). Анализы 8ΡΑ проводят с использованием 96-луночных планшетов. Шарики силиката иттрия для 8ΡΑ ΡΌΕ (Атегккат Вюкстенсек) предпочтительно связываются с линейным нуклеотидом, т.е. СМΡ,

- 17 010424 по сравнению с циклическим нуклеотидом, т.е. сСМР. ³Н-сСМР добавляют в реакцию, и когда продукт, т.е. ³Н-СМР, находится в близком соседстве с шариками, в шариках возбуждается сцинтиллятор, который определяют с использованием счетчика сцинтилляции Раскагб (Регкт-ЕЗтег ЫЕе 8с1епсек; Вок!оп, МА). Так как использованная концентрация фермента находится в линейной области, определяют К_тфермента (15 мкМ). Итоговая концентрация субстрата составляет <1/3 К_т (1 мкМ), поэтому величины ГС50 могли бы аппроксимировать величины К[. Описанный анализ показывает удовлетворительные результаты при использовании в качестве контрольных образцов известных в литературе соединений перед исследованием соединений по настоящему изобретению. Затем сравнивают измерения каталитической активности РОЕ, полученные в присутствии тестируемых соединений, и измерения, полученные в отсутствие тестируемых соединений, и определяют значения Κ₅₀.

Радиоактивные субстраты и продукты реакций РОЕ количественно определяют с использованием счетчика сцинтилляции жидкостей ВАСК-ВЕТА 1219 (ЬКВ ^а11ас, РгеФигд, РВС). Значения Κ’₅₀ (концентрации, соответствующие 50% ингибированию) определяют с использованием 1 мкМ сАМР или сСМР, используя пиковые фракции. Данные аппроксимируют по четырем параметрам с помощью сигмоидальной логистической функции.

Используя описанные ранее ферменты РОЕ, выделенные из тромбоцитов человека, и способы исследования тестируемых соединений, предназначенных для ингибирования данного фермента, определяют ГС50 для ΕНNΑ, равную 1,7 мкМ. Кроме этого, с использованием упомянутой выше методики дополнительно определяют Κ'\₀ для 9-(1-ацетил-4-фенилбутил)-2-(3,4-диметоксибензил)-1,9-дигидропурин-6она, составляющую 3 нМ.

Соединения формулы (I), в основном, демонстрируют ингибирующую активность в отношении РОЕ 2, выраженную через ТС₅₀, которая составляет <1000 нм. Диапазоны ингибирующей активности в отношении РОЕ 2 для соединений формулы (I) примеров 1-37 показаны в нижеследующей таблице.

Пример	Ингибирование ΡϋΕ 2	Пример	Ингибирование РОЕ 2
1	+ +	22	4-4-
2	++	23	+
3	+	24	+
4	4-	25	++
5	+++	26	+
6	4-	27	+
7	++	28	+
е	+	29	+
9	+	30	+
10	+++	31	+
11	4-	32	+
12	++	33	++
13	++	34	+
14	++	35	4-
15	++	36	4-
16	+++	37	4-
17	+++
18	4-4-
19	++
20	4-
21	+

Ингибирование РОЕ 2: +++ (Ю;о<50 нМ), ++ (ТС₅₀ 50-250 нМ), + (ТС₅₀ 250-1000 нМ).

Способность ингибиторов РОЕ 2, включая соединения формулы (I), воздействовать на переломы и/или дефекты костей или содействовать срастанию костей может быть продемонстрирована в соответствии со следующими протоколами.

Модель поперечного перелома бедра у крысы

Используют мужских особей крыс 8ргадие-Оает1еу в возрасте от 3 до 4 месяцев. Животным проводят анестезию кетамином и ксилазином в дозировке 100 и 10 мг/кг, соответственно. Правую заднюю конечность каждой крысы бреют и очищают. Выполняют 1 см разрез сбоку от коленной чашки и раскрывают бедренный мыщелок. В костно-мозговой канал через межмыщелковую часть вводят проволоку Киршнера (диаметром 0,045), предназначенную для внутренней стабилизации. Разрез в мышце зашивают викрилом и разрез на коже стягивают скобками для ран из нержавеющей стали. Осуществляют перелом диафиза скрепленной бедренной кости с помощью трехточечного устройства для изгибания, приводимого в движение падающим грузом. После пробуждения от анестезии допускают полную нагрузку на лапу крысы и неограниченную активность. Тестируемые соединения вводят в различные сроки после хирургического вмешательства с помощью чрескожной инъекции в место перелома. После воздействия

- 18 010424 тестируемых соединений животных умерщвляют и собирают для исследования бедренные кости. Степень излечения перелома определяют с использованием рентгенографии, гистологического и биомеханического тестов (Е. Воппагепк, е1 а1., 1оигпа1 о£ ОгШораебю Векеагсй, 2, 97-101 (1984)).

Протокол и результаты исследований модели поперечного перелома бедренной кости у крысы

Мужских особей крыс трехмесячного возраста под общим наркозом подвергают поперечному перелому правой бедренной кости. Осуществляют чрескожную инъекцию 1 дозы (5 мг) Я⁴-(3,4-диметоксибензил)-Ы²-(3-фенилпропил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамина в места переломов после завершения формирования переломов. Через 3 недели после инъекций крыс умерщвляют и их правые бедренные кости собирают и анализируют. Усилие разрушения и жесткость (параметры, показывающие прочность кости) возрастают на 19 и 62%, соответственно, в случае воздействия на бедренную кость Я⁴-(3,4-диметоксибензил)-Ы²-(3-фенилпропил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамина по сравнению с теми же параметрами бедренной кости, на которую воздействуют плацебо.

Модель инъекции в надкостницу крысы

Крыс анестезируют изофлураном (2-3 мин) в камере, расположенной в вытяжном шкафу. Правую заднюю конечность каждой крысы бреют и очищают. К шприцу, предварительно заполненному композицией тестируемого соединения для местной инъекции, присоединяют иглу 25 размера. Композицию вводят в поднадкостничную область бедренной кости в объеме 5-15 мкл в течение 14 дней. После окончания введения доз крыс умерщвляют, собирают бедренные кости и затем исследуют с помощью рентгенографии и рентгеновской абсорбциометрии с двойной энергией (ИЕХА).

Протокол и результаты исследований модели инъекции в надкостницу крыс раз в неделю в течение 2 недель осуществляют ежедневные инъекции носителя или тестируемого соединения в правую бедренную кость мужских особей крыс 8ргадие-0а\у1еу трехнедельного возраста. На 15 день всех крыс умерщвляют и собирают правые бедренные кости для исследования. Индукцию костной ткани надкостницей определяют с использованием рентгенографии и ИЕХЛ. Рентгенография показывает образование новой костной ткани, расположенной в месте инъекции во всех бедренных костях, подвергшихся воздействию тестируемых соединений. Содержание минералов в костной ткани (ВМС) бедренной кости в области инъекции (область между малым вертелом и средней третью бедренной кости) измеряют с помощью ИЕХЛ, сравнивая крыс, подвергшихся воздействию тестируемого соединения, и крыс, подвергшихся только воздействию носителя. В данной модели Ы⁴-(3,5-диметоксибензил)-Х²(2-пиридин-4-илэтил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин, 2-(3-{3-[4-(3,4-диметоксибензиламино)пиридо[2,3-б]пиримидин-2-иламино]пропил}фенил)пропан-2-ол и Ы⁴-(3,4-диметоксибензил)-Х²-(3-фенилпропил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин увеличивают ВМС на 34, 49 и 33%, соответственно. Кроме этого, 9-(1-ацетил-4-фенилбутил)-2-(3,4-диметоксибензил)-1,9-дигидропурин-6-он в вышеупомянутой модели увеличивает ВМС на 20%.

Claims

1. Соединения формулы (Ι) или их фармацевтически приемлемые соли, в которых

В¹ и В² представляют собой водород или метоксигруппу при условии, что В¹ и В² одновременно не являются водородом или метоксигруппой;

η представляет собой 1, 2, 3 или 4;

X представляет собой связь; О; С=О; -Я(В)-, где В представляет -(С1-С₃)алкил;

Υ представляет собой бензоксазолил, бензотиазолил, пиридил, фенил или тиенил, причем Υ необязательно замещен заместителями в количестве от 1 до 3, независимо выбранными из галогена, трифторметила, метокси, -С(=О)СН₃, циано, -С(СН₃ЕОН, -СН(СН₃)ОН, -СН(СЕ₃)ОН, -С(С=О)СЕ₃, ·* или оксадиазолила.

2. Соединение по п.1, в котором X представляет собой связь и Υ представляет собой тиенил, пиридил или фенил, причем фенил необязательно замещен 1 или 2 заместителями, независимо выбранными из галогена, трифторметила, метокси, -С(=О)СН₃, циано, -С(СН₃)₂ОН, -СН(СН₃)ОН, -СН(СЕ₃)ОН, -(С=О)СЕ₃ или оксадиазолила.

3. Соединение по п.1 или 2, в котором Х представляет собой связь, п представляет собой 2 или 3 и Υ представляет собой тиенил, пиридил или фенил, причем фенил необязательно замещен 1 или 2 замести

- 19 010424 телями, независимо выбранными из метокси, галогена, -С(СН₃)₂ОН, -СН(СР₃)ОН или -(С=О)СЕ₃.

4. №,Ы⁴-бис-(3,5-Диметоксибензил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин; ^-(3,5-диметоксибензил)-^-(2-пиридин-4-илэтил)пиридо[2,3-6]пиримидин-2,4-диамин; Ы⁴-(3,5-диметоксибензил)-Ы²-(2-тиен-2-илэтил)пиридо[2,3-б]пиримидин-2,4-диамин; Ы⁴-(3,5-диметоксибензил)-Ы²-2-фенетилпиридо [2,3-6] пиримидин-2,4-диамин; Ы⁴-(3,5-диметоксибензил)-Ы²-[2-(3,5-диметоксифенил)этил]пиридо[2,3-6]пиримидин-2,4-диамин; 2-(3-{3-[4-(3,4-диметоксибензиламино)пиридо[2,3-6]пиримидин-2-иламино]пропил}фенил)пропан-

2-ол;

М⁴-(3,4-диметоксибензил)-Ы²-[2-(4-фторфенил)этил]пиридо[2,3-6]пиримидин-2,4-диамин; М⁴-(3,4-диметоксибензил)-Ы²-фенетилпиридо [2,3-6] пиримидин-2,4-диамин или М⁴-(3,4-диметоксибензил)-Ы²-(3-фенилпропил)пиридо[2,3-6]пиримидин-2,4-диамин или их фармацевтически приемлемые соли.

5. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) по любому из пп.1-4 или фармацевтически приемлемую соль упомянутого соединения, а также фармацевтически приемлемую основу, носитель или разбавитель.

6. Способ лечения опосредованных ΡΌΕ 2 состояний, заболеваний или симптомов у млекопитающих, нуждающихся в таком лечении, где указанный способ включает введение упомянутому млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) по любому из пп.1-4, или фармацевтически приемлемой соли упомянутого соединения; или фармацевтической композиции, включающей упомянутое соединение формулы (I), или фармацевтически приемлемую соль упомянутого соединения, а также фармацевтически приемлемую основу, носитель или разбавитель.

7. Способ по п.6, в котором упомянутое состояние, заболевание или симптом представляет собой остеопороз, легочную гипертензию, расстройство полового влечения у женщин, ухудшение памяти или познавательной способности, агрегацию тромбоцитов, сосудистый ангиогенез, деменцию, рак, аритмию, тромбоз, перелом и/или дефект костей, медленно срастающийся или несросшийся перелом, сподилодез, врастание костей, реконструкцию лицевой части черепа или гипоксию, где способ включает введение млекопитающему, нуждающемуся в таком лечении, терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) по п.1, или фармацевтически приемлемой соли упомянутого соединения, или фармацевтической композиции, включающей упомянутое соединение, или упомянутую фармацевтически приемлемую соль упомянутого соединения.

8. Способ по п.6, в котором упомянутое состояние представляет собой перелом и/или дефект костей.

9. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение формулы (I) по п.1 в качестве ингибитора ΡΌΕ 2, селективный агонист рецептора ЕР₂ и фармацевтически приемлемую основу, носитель или разбавитель.

10. Композиция по п.9, в которой упомянутый ингибитор ΡΌΕ 2 представляет собой Ν⁴-(3,5диметоксибензил)-Ы²-(2-пиридин-4-илэтил)пиридо[2,3-6]пиримидин-2,4-диамин; 2-(3-{3-[4-(3,4-диметоксибензиламино)пиридо[2,3-6]пиримидин-2-иламино]пропил}фенил)пропан-2-ол; ^-(3,4-диметоксибензил)-^-(3-фенилпропил)пиридо[2,3-6]пиримидин-2,4-диамин или фармацевтически приемлемые соли упомянутых соединений.

11. Композиция по п.9 или 10, в которой упомянутый селективный агонист рецептора ЕР2 представляет собой (3-(((4-трет-бутилбензил)(пиридин-3-сульфонил)амино)метил)фенокси)уксусную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль.

12. Способ по любому из пп.6-8, дополнительно включающий введение упомянутому млекопитающему терапевтически эффективного количества селективного агониста рецептора ЕР2 или фармацевтической композиции, включающей комбинацию упомянутого соединения формулы (I) по п.1 и упомянутого селективного агониста рецептора ЕР2.

13. Способ по п.12, в котором упомянутый ингибитор ΡΌΕ 2 представляет собой Ν⁴-(3,5диметоксибензил)-^-(2-пиридин-4-илэтил)пиридо [2,3-6]пиримидин-2,4-диамин; 2-(3 -{ 3 -[4-(3,4-диметоксибензиламино)пиридо[2,3-6]пиримидин-2-иламино]пропил}фенил)пропан-2-ол; ^-(3,4-диметоксибензил)-^-(3-фенилпропил)пиридо[2,3-6]пиримидин-2,4-диамин или фармацевтически приемлемые соли упомянутых соединений.

14. Способ по п.12 или 13, в котором упомянутый селективный агонист рецептора ЕР₂ представляет собой (3-(((4-трет-бутилбензил)(пиридин-3-сульфонил)амино)метил)фенокси)уксусную кислоту или ее фармацевтически приемлемую соль.

15. Способ лечения перелома и/или дефекта костей у млекопитающего, нуждающегося в таком лечении, где способ включает введение упомянутому млекопитающему терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) по п.1 в качестве ингибитора ΡΌΕ 2 или фармацевтически приемлемой соли упомянутого ингибитора.