TWI291961B - Pyrido[2,3-d]pyrimidine-2,4-diamines as pde 2 inhibitors - Google Patents

Description

1291961 九、發明說明： 【發明所屬之技術領域】 本發明係關於用作PDE 2抑制劑之某些吼啶并[2,3-d]嘧 啶-2,4-二胺、其醫藥調配物、其組合及其用途。 【先前技術】 磷酸二酯酶（PDE)家族之酵素藉由水解控制來調節第二 信使cAMP或cGMP之細胞内含量。磷酸二酯酶II型（PDE 2) 擁有具體對cGMP特異性之低親和性催化區及別位區。低 親和性催化位點可以cGMP低於cAMP之表觀KM而水解 cAMP及cGMP兩者。然而，當cGMP結合至別位位點時， 催化位點經受對cAMP顯示高親和性之構象變化。PDE 2在 大腦中顯示最高之表現，但亦發現在許多其它組織中亦如 此且因而具有廣泛一系列功能及潛在治療效用（J. A. Beavo 等人，Rev. Physio. Biochem. Pharm·，135，67 (1999))。 PDE 2功能及治療潛力之實例在於神經元生長、學習及記 憶（W. C. G. van Staveren等人，Brain Res·，888，275 (2001) 及 J. O’Donnell 等人，J. Pharm. Exp. Ther·，302，249 (2002));催乳激素及醛固酮之分泌（M. O. Velardez等人， Eur. J. Endo·，143，279 (2000)及 N. Gallo-Payet 等人， Endo·，140，3594 (1999));骨細胞分化、生長及骨吸收（C· Allardt-Lamberg等人，Biochem· Pharm·，59，1 133 (2000)及 S· Wakabayashi 等人，J· Bone. Miner. Res·，17，249 (2002));免疫反應（M. D· Houslay等人，Cell· Signal·，8, 97 (1996);脈管之血管生成（T. Keravis等人，J. Vase· 97204.doc 1291961

Res·, 37，235 (2000);發炎細胞轉變（S. L. Wolda 等人，夂 Histochem. Cytochem·，47，895 (1999);心臟收縮（R·

Fischmeister等人，J· Clin. Invest·，99，2710 (1997)、P. Donzeau-Gouge等人，J· Physiol·，533，329 (2001)及 D. J· Paterson等人，Card. Res·，52，446 (2001));血小板凝集 (R. J· Haslam等人，Biochem. J” 323. 371 (1997);女性性 興奮障礙（FSAD)(C.P. Wayman等人，歐洲專利申請公開案 第EP 1 097 7707號及第1 0977 06號）及缺氧性肺部血管收 縮（J· Haynes 等人，J· Pharm· Exp· Ther·，276· 752(1996))。 已顯示一種有效之腺苦脫胺酶抑制劑EHNA(赤-9-(2-^基-3-壬基）腺嗓呤）選擇性地抑制PDE 2，然而由於抑制PDE 2 之低效能及抑制腺苷脫胺酶之高效能而使得EHNA作為基 於PDE 2之治療劑之使用受到限制（R· Fischmeister等人， Mol· Pharm·，48, 121(1995))。 現已發現下文式⑴之某些吡啶并[2,3-d]嘧啶_2,4-二胺衍 生物抑制PDE 2且因而適用於治療藉由cAMP或cGMP細胞 信號途徑介導之生理失調症。 美國專利第5,547,954號及第5,710，157號揭示了某些2,4-二胺-5,6-二取代-及5,6,7-三取代-5-去氮喋啶、其組合物及 其於控制農作物中之昆蟲的用途。 【發明内容】 本發明提供式⑴之化合物’ 97204.doc 1291961

其如藥及該等化合物或前藥之醫藥上可接受之鹽，其中 η、X及Y如文中所定義；其醫藥組合物；其組合；及其用 途。 【實施方式】 本發明提供式（I)之化合物，

其前藥及該等化合物或前藥之醫藥上可接受之鹽，其中··

Rl及R2為氫或甲氧基，其限制條件為以及!^不均為氯或 不均為曱氧基； η為 1、2、3或 4 ; X為一鍵、〇、s、c=o、-N(RH其中 R為氫或 _(Ci_C3)燒 基）、-C(OH)-或-S〇2 ;且 y為苯幷噁唑基、苯幷噻唑基、苯幷呋咕基、苯幷呋喃 基、苯幷噻二唑基、苯幷異噁唑基、笨幷異噻唑基、苯幷 咪唑基、吡啶基、靛紅基（isatinyl)、羥吲哚基、吲唑 基、吲哚基、苯基、噻吩基或呋喃基；其中γ視情況獨立 97204.doc 1291961 地以一至三個鹵素、三氟曱基、甲氧基、-c(=o)ch3、氰 基、-C(CH3)2OH、-CH(CH3)OH、-CH(CF3)OH、-c(c=o)cf3、 -S02NH2、-C(=0)0CH3、-CH2COOH、…>0、噻唑基或噁二唑 基取代。 式（I)化合物之通常較佳亞群包含彼等化合物，其中X為 一鍵且Y為苯幷呋咕基、噻吩基、呢啶基或苯基，其中苯 基視情況獨立地以一或兩個素、三氟甲基、甲氧基、-C(=0)CH3、氰基、-C(CH3)2OH、_CH(CH3)OH、 - CH(CF3)OH、-c(c=o)cf3、-S02NH2、_c(=o)och3、 - CH2COOH、口塞峻基或口惡二口坐基取代。 式（I)化合物之尤其較佳亞群包含彼等化合物，其中X為 一鍵，η為2或3，且Y為噻吩基、吼啶基或苯基，其中苯基 視情況獨立地以一或兩個甲氧基、鹵素、-C(CH3)2OH、 CH(CF3)OH或 _c(c=o)cf3取代。 環狀基團可以多於一種之方式鍵接至另一基團。若未列 出特定鍵接排列，則涵蓋所有可能之排列。例如，術語 π吡啶基"包括2-、3-或4-吡啶基，且術語”噻吩基”包括2-或 3-噻吩基。 本發明之化合物及中間體可根據IUPAC(國際純化學及應 用化學聯盟）或CAS(化學文摘服務社（Chemical Abstracts Service)，Columbus，OH)命名法系統來命名。 各種含烴之基團之碳原子含量可藉由指明基團中碳原子 最小及最大數目之前綴來表示，意即前綴”-(Ca-Cb)烷基π 表示包括整數至1’b”個碳原子之烷基。 97204.doc -9 - 1291961 術語π烷基”意謂碳原子之直的或分枝之單價鏈。烷基之 實例包括甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基及其 類似基團。 術語’’鹵素’’代表氣、氟、溴及碘。 術語”前藥’’係指藥物前體之化合物，其在施藥之後經由 化學或生理學方法（例如經由產生生理學pH或經由酵素活 性）於活體内釋放藥物。對於前藥之製備及使用之討論係 提供於 T· Higuchi 及 W· Stella 之"Prodrugs as Novel Delivery Systems”，ACS Symposium Series之第 14卷及’’Bioreversible Carriers in Drug Design”，Edward B. Roche編，American Pharmaceutical Association and Pergamon Press (1987) o 術語’’哺乳動物”意謂包括例如狗、貓、牛、羊、馬及人 之動物。較佳之哺乳動物包括任一性別的人。 術語”鹽”係指式（I)化合物或其前藥之有機及無機鹽。該 等鹽可在化合物之最終分離及純化過程中就地製備或藉由 使式（I)之化合物或其前藥與合適之有機或無機酸或酴獨立 反應且分離由此所形成之鹽來製備。代表性鹽包括氫溴酸 鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、硝酸鹽、乙酸鹽、草酸 鹽、苯磺酸鹽、棕櫚酸鹽、硬脂酸鹽、月桂酸鹽、硼酸 鹽、苯甲酸鹽、乳酸鹽、磷酸鹽、甲苯磺酸鹽、檸檬酸 鹽、順丁烯二酸鹽、反丁烯二酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸 鹽、萘酸鹽、甲磺酸鹽、葡庚糖酸鹽、乳糖酸鹽及月桂基 磺酸鹽及其類似鹽。其亦可包括基於鹼金屬及鹼土金屬 (諸如納、鋰、鉀、妈、錢及其類似金屬）及無毒鏔、四級 97204.doc -10- 1291961 銨之陽離子；及胺陽齙工 ,t 離子，包括（但不限於）銨、四甲基 銨、四乙銨、曱胺、二田… 一 一甲月女、二甲胺、三乙胺、乙胺及其 類似物。對於額外實你丨会 貝例參見例如Berge等人，J. Pharm.

Sci·，66，1-19 (1977) 〇 術語”經取代"意謂以不π 2 a 不同之原子或分子置換分子上之氫 原子。將置換氫原子之原子或分子稱為，，取代基"。 本文所用之術3吾 > 台療有效劑量"意謂可治療所述病理症 狀之化合物的量。 術^ /U療包括預防性（例如預防藥）及減輕（例如康復或 治癒）治療或提供預防或減輕治療之行為。 式（I)之化合物可含有不對稱或對f中心且因而以不同之 立體異構形式存在。預期式⑴化合物及前藥及其混合物之 所有立體異構形式包括外消旋混合物，其構成本發明之部 分。另外，本發明包含所有幾何及位置異構體。例如，若 式⑴化合物或前藥併入一（多個）雙鍵，則順式及反式形式 及其混合物均包含在本發明範圍内。 非對映異構體混合物可基於其物理化學差異藉由普通熟 習此項技術者習知之方法（諸如藉由層析法及/或分步結晶 法）分離成其個別非對映異構體。可藉由以下步驟分離對 映異構體：藉由使對映異構體混合物與合適之光學活性化 合物（例如醇）反應而將其轉化為非對映異構體混合物，分 離非對映異構體且將個別非對映異構體轉化成（例如水解） 相應之純對映異構體。 式（I)之化合物及前藥可與醫藥上可接受之溶劑（諸如 97204.doc -11 - 12919.61 求、乙醇及其類似物）以 ·_，，一，—厂·， ，w ,·/ ηΤ ^ ， Jd- 預期本發明包含溶劑化及非溶劑化形式。 式⑴之化合物及前藥亦可以平衡之互變異構體存在且所 有该等形式包含於本發明之範圍内。 本發明#包含與本文所述者等同之經同位t標記之式⑴ 化合物，但實際上經常發現一或多個原子係由具有不同於 此原子質量或質量數之原子質量及質量數的原子所置換之 事實。可併入式⑴化合物之同位素實例包括氯、碳、氮、 氧、磷、氟及氯之同位素，分別諸如2h、3H、13c、14c、 15N、18〇、17〇、31p、32p、 ^及C1。含有上述同位 ” /或其它原子之其它同位素的式⑴之化合物、JL前藥 及該等化合物及前藥之醫藥上可接受之鹽類^

範圍内。 I 及=同位素標記之式⑴化合物，例如其中併入諸如4 =放射性同位素的化合物適用於化合物及/或基本組 1:::: 代(意即3H)及碳_14(意即14㈣ 裊備相對谷易且易於偵測而 (意即2H)之較重之同位夸㈣ 佳另外，以諸如氖 …此」 可提供由更高代謝穩定性導 少，且因此在某此情、兄m 衣期增加或所需劑量減 物通常可… 經同位素標記之式⑴化合 物、：了猎由執行類似於下文所列流程及/或實 之备序、藉由以同位素標記述 製備。 取代非同位素標記試劑來 另一態樣中，本發明提供治 展而要此治療之哺乳動物中 97204.doc 1291961 由PDE 2介導之症狀、疾病或病症之方法，該方法包含向 哺礼動物施用治療有效劑量之式⑴化合物、其前藥或該化 合物或前藥之醫藥上可接受之鹽；或包含式⑴之化合物、 其f樂或此化合物或前藥之醫藥上可接受之鹽及醫藥上可 接文之媒劑、載劑或稀釋劑之醫藥組合物。 根據本方法可治療之較佳症狀、疾病或病症包括骨質疏 :症、肺動脈高血壓、女性性興奮障礙、記憶或認知減 ;、企小板凝集、脈管之血管生成、癡呆、癌症、心律失 :、血拴症、骨折及/或缺損、延遲癒合或不癒合之骨 二：椎融合、骨生長、顏面重整或缺氧症。尤其較佳症 狀為骨折及/或缺損。 心樣中，本發明提供用於抑制需要該抑制之哺乳 動物中之PDE 2活性的方法，該方法包含向哺乳動物施用 ^ 2抑制劑量之式⑴化合物、其前藥或該化合物或前藥 2:藥上可接受之鹽；或包含式⑴之化合物、其前藥或該 亦。物或則藥之醫藥上可接受之鹽及醫藥上可接受之媒 劑、載劑或稀釋劑之醫藥組合物。 、）之化3物、其如藥及該等化合物及前藥之醫藥上可 接=之鹽可以每天約0·001 mg至約200 mg範圍内之劑量水 二上用於甫乳動物。對於體重约7〇 kg之正常成年人，通 鈇 切里在母公斤體重约0·〇1 mg至約1〇〇 mg範圍内， j —匕通节劑置範圍可視所治療患者之年齡及體重、預期 施藥途抑、# # ^ ^ "知樂之特殊化合物及其類似因素而要求某些可 、於特殊哺乳動物患者之劑量範圍及最佳劑量之確 97204.doc -13- 1291961 定係在普通熟悉有利於本揭示之技術者之能力内。 在又一態樣中，本發明提供包含pDE 2抑制劑、Ei>2選擇 性:動劑之組合，及醫藥上可接受之媒劑、載劑或稀釋劑 的面某組合物，及使用該等組合物治療骨質疏鬆症、肺動 脈高血壓、女性性興奮障礙、記憶或認知減退、血小板凝 集、脈管之血管生成、癡呆、癌症、心律失常、血检症、 骨折及/或缺損、延遲癒合或不癒合之骨折、脊椎融合、 骨生長、顏面重整或缺氧症之方法。尤其較佳症狀為;折 及/或缺損。 在又一態樣中，本發明提供治療需要該治療之 中之骨折及/或缺損的方法’該等方法包含向哺乳動物施 用治療有效劑量之PDE 2抑制劑、其前藥或該抑制劑或前 藥之醫藥上可接受之鹽。 任何PDE 2抑制劑（包括本文之式⑴化合物）可用於本發 明之方法及組合中。已知之PDE 2抑制劑實例包含： EHNA、6-(3,4_二甲氧基苯甲基）小[(1，基-乙基）冬苯 基-丁基]_3·曱基· i，5·:氫，唾并[3,4_d]哺。定_4,請_ 6〇-755〇4國專利第6，174,884號），及9_(1_乙酿基_4_苯 基-丁基)-2-(3,4-二甲氧基-苯甲基)十9_二氫。票呤蝴美 國專利第5风396號）。觸2抑制劑之額外實例揭示於美 !^，JfM6l5396E^M〇lj774^^M5s5796 ^^ 弟6,5 55,547唬及PCT國際申請公開案第98/32755號中 任何EP-擇性受體激動劑可用於本發明之：人能樣 中，然而通常較佳之EP2選擇性受體激動劑種類揭^共 97204.doc 14 1291961

同讓渡之美國專利號M98，172中，包含式aa之化合物 式AA 其前藥及其醫藥上可接受之鹽，其中G、a、b、k、m、q 及Z如其中所定義。 通常較佳之式AA化合物為（3_(((吡啶磺醯基H4_嘧 咬-5-基-苯甲基卜胺基）·甲基 > 苯基）_乙酸、糾❿苯基-咬 南七基甲基）_(吡啶_3-磺醯基）_胺基甲基）_苯基）_乙酸、 = _(((吡啶-3-磺醯基H4_嘧啶_2_基_苯甲基）_胺基）_甲基）_ 苯基l·乙酸、（3-(((啦啶-3-磺醯基）_(4_噻唑基·苯甲基> 月女基）-曱基）_本基）_乙酸、（3-(((4_σ比嗪_2_基-苯曱基）_( 口比 啶-3-磺醯基）_胺基）·甲基）_苯基）_乙酸、（3_(((4_環己基-苯 甲基）-(吡啶-3-磺醯基）·胺基）_甲基）_苯氧基）_乙酸、（3_ (((¾啶-3-磺醯基Η4-吼啶-2-基·苯甲基）·胺基）_甲基 > 苯氧 基）-乙酸、（3-(((吼啶-3-磺醯基）-(4-吼啶-3-基-苯甲基）_胺 基）-甲基）-苯氧基）·乙酸、（3-(((π比啶_3_磺醯基比啶_4_ 基-苯甲基）-胺基）-甲基苯氧基）-乙酸、（3-(((吼啶_3_續醯 基）-(4-噻唑-2-基-苯甲基）_胺基）_曱基）_苯氧基）_乙酸、％ (3-((吨啶-3-磺醯基）-(4-噻唑-2-基-苯甲基）-胺基）_丙基）_嗔 吩I羧酸、（3·(((2,3_二氫-苯幷[μ]二氧己環_6_基曱基> (吼唆-3-磺醯基）-胺基）·甲基)_苯基）_乙酸及（3-((苯幷咬喃· 2-基甲基·（吼啶-3-磺醯基）-胺基）-甲基苯基）_乙酸、（3_ (((4-丁基-苯甲基）-(吼啶·3_磺醯基）_胺基）_曱基）_苯基）·乙 97204.doc -15- 1291961 酸、（3-((苯磺醯基-(4-丁基-苯甲基胺基）-曱基）-苯基）-乙 酸、（3-(((4-丁基·苯甲基）-(1_甲基-1Η-咪唑磺醯基）-胺 基）-甲基）-苯基）-乙酸及（3-(((4-二甲基胺基-苯曱基）-(。比啶· 3-磺醯基）-胺基）-甲基）_苯基）_乙酸、（3_(((4_二甲基胺基_ 苯甲基）-〇比啶-3-磺醯基）-胺基）_甲基）_苯氧基）_乙酸及（3_ (((4-第三丁基-苯甲基比啶_3_磺醯基胺基甲基）_苯氧 基）·乙酸、反式_(3-(((3-(3,5-二氣基-苯基）_烯丙基）·（ϋ比啶一 3-石頁醯基）-胺基）-甲基苯基乙酸、2_(3,5_二氯基_ 苯氧基）-乙基Μ吼啶-3-磺醯基）_胺基）_曱基）_苯氧基）_乙 酸，其前藥及該等化合物及前藥之醫藥上可接受之鹽。 尤其較佳之式ΑΑ化合物為（3_(((4_第三丁基_苯甲基η吡 咬-3-續醯基）_胺基）_甲基）_笨氧基）乙酸，其前藥或該化合 物或前藥之醫藥上可接受之鹽。尤其較佳之鹽為納鹽。 另通常較佳之適用於本發明之組合態樣之Eh選擇性 受體激動劑種類包含下列共同讓渡之美國專利第6,288，12〇 號中所揭示之式ΒΒ之化合物、其前藥及醫藥上可接受之 式ΒΒ 其中^^、〖、河^如其所定義。 通常較佳之式ΒΒ化合物為7「 馮7-[(2_經甲基-聯苯-4-基甲 基）_甲石頁醯基-胺基]_庚酸、7 丨[4-(3-羥甲基_噻吩-2-基）-苯 曱基]·甲磺醯基-胺基卜庚酸、7 > [(2 -乳基-聯苯-4-基甲基）- 97204.doc -16- 1291961 甲磺醯基-胺基]-庚酸、7-{[4-(1-羥己基）-苯甲基]-甲磺醯 基-胺基卜庚酸、7-[(4-丁基-苯甲基）-曱磺醯基-胺基]-庚 酸、7-{[5-(1-羥己基）-噻吩-2-基曱基]-曱磺醯基-胺基卜庚 酸、（3-{[(4-丁基-笨甲基）-曱磺醯基-胺基;]_甲基卜苯基乙 酸、7-{[3-(3-氯基-苯基）-丙基]-甲磺醯基-胺基卜庚酸、7-{[3-(3,5--氣基-本基丙基]-甲石黃酿基胺基}-庚酸、5-(3-{[3-(3 -氣基-本基）-丙基]-甲石黃酿基-胺基丙基）塞吩_2-魏 酉欠、7-{[2-(3,5 -一氣基-苯氧基）·乙基]-曱績醯基·胺基丨_庚 酸、5-(3-{[2-(3,5-二氯基-苯氧基）-乙基]_甲磺醯基_胺基卜 丙基）-噻吩-2-羧酸、Ν-[2-(3,5-二氯基_苯氧基）-乙基]-Ν-[6_(1Η-四唑-5-基）-己基]-曱磺醯胺、反式二氯 基-苯基）-烯丙基]-曱磺醯基-胺基卜丁氧基）_乙酸、反式 [3-(3,5-一氣基-苯基）_烯丙基]_；^-[6-(111-四唾-5-基）-己基]-甲磺醯胺、反式-5-(3-{[3-(3,5-二氯基-苯基）-烯丙基卜甲磺 醯基-胺基卜丙基）-噻吩-2-羧酸、反式-[3-({[3-(3,5-二氯基-苯基）-烯丙基]-甲磺醯基-胺基卜甲基）_苯基乙酸、其前藥 及該等化合物及前藥之醫藥上可接受之鹽。 尤其較佳之式BB化合物為7·[(4-丁基-苯甲基）_甲磺醯基- 胺基]-庚酸、其前藥或該化合物或前藥之醫藥上可接受之 鹽。較佳之鹽為單納鹽。 適用於本發明之組合態樣中之其它ερ2選擇性受體激動 劑包含下列文獻中描述之前列腺素受體激動劑··美國專利 第6,531，485 !虎、第 6,376,533 號、第6，124,314號、第 5,877,21 1 號、第 5,716,835 號、第 5,698,598 號及第 97204.doc -17- 1291961 5,462,968號；美國公開專利申請案第2002/187961號；N. Duckworth等人，Journal of Endocrinology，172 (2)，263-269 (2002) ； K. Tani等人，Synlett，2，239-242 (2002)； K. Tani等人，Bioorganic & Medicinal Chemistry，10(4)， 1107-1114 (2002) ; K. Tani等人，Bioorganic & Medicinal Chemistry，10 (4)，1093-1106 (2002) ; J. Michelet等人， EP 1 175 891 A1 ; K.Tani等人，Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters，11 (15)，2025-2028 (2001) ; J. Y.

Crider 等人，International Journal of Environmental Studies，58(1)，35-46(2000) ； J. Y. Crider 等人，Journal of Ocular Pharmacology and Therapeutics j 17 (1)，35-46 (2001) ; D. F. Woodward 等人，Journal of Ocular Pharmacology and Therapeutics 5 11 (3)，447-54 (1995)； A. T. Nials等人，Cardiovascular Drug Reviews，11 (2)， 165-79 (1993)及 D. F. Woodward等人，Prostaglandins，46 (4) 371-83 (1993) 〇 在本發明之組合態樣中，可以每天每公斤體重約0.001 mg至約100 mg之範圍内之劑量水平向哺乳動物施用EP2選 擇性受體激動劑。對於體重約70 kg之正常成年人，通常 較佳劑量在約0.01 mg/kg至約50 mg/kg體重範圍内，然而 視正在治療之患者之年齡及體重、預期施藥途徑、施藥之 特殊化合物及其類似因素而定可需要通常劑量範圍内之某 些可變性。用於特殊哺乳動物患者之組合劑量範圍及最佳 劑量之確定處在普通熟悉有利於本揭示之技術者之能力範 97204.doc -18- 1291961 圍内。 適合非經腸方式注射之醫藥組合物可包含醫藥上可接與 或非含水溶液、分散液、懸浮液或乳液及臨時 成·…、困注射溶液或分散液之無菌散劑。合適之含水或 非s水載剡、媒劑及稀釋劑實例包括水、乙醇、多元醇 (4如丙一醇、聚乙二醇、甘油及其類似物卜其合適之混 =物、植物油(諸如撖欖油)及諸如油酸乙醋之可注射有機 酉曰類舉例而S ’可藉由使用諸如_破脂之塗層，分散液 b况下藉由維持所需粒子尺寸，及藉由使用界面活性劑來 維持合適之流動性。 本發明之醫藥組合物可進一步包含佐劑，諸如防腐劑、 濕潤劑、乳化劑及分散劑。本發明組合物微生物污染之預 防可以各種抗細菌劑及抗真菌劑來完成，諸如對羥基苯甲 酉文S曰類氯丁醇、本S分、山梨酸及其類似物。亦可視需要 包括等滲劑，例如糖類、氯化鈉及其類似物。可注射醫藥 組合物之延長吸收可藉由使用例如單硬脂酸銘及明膠之能 延長吸收之物質來實現。 用於口服給藥之固體劑型包括膠囊劑、錠劑、散劑及顆 粒劑。在該等固體劑型中，活性化合物與諸如擰檬酸納或 鱗酸二鈣之至少一種惰性習知醫藥賦形劑（或載劑）共混 合’或與以下物質共混合··（a)填充劑或增量劑，例如殿 粉、乳糖、蔗糖、甘露醇及石夕酸；（b)黏合劑，例如幾甲基 纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯啶酮、蔗糖及阿拉伯 膠；（c)保濕劑，例如甘油；（d)崩解劑，例如瓊脂、碳酸 97204.doc -19- 1291961 約、馬鈴薯或木薯澱粉、海藻酸之某些複合_鹽及碳酸 鈉，⑷洛液阻滯劑，例如石壤吸 人" 乂 4，例如四 級銨化a物；（g)濕潤劑，例如十山 十/、烷％及早硬脂酸甘油 酯；（h)吸收劑，例如高嶺土及 斑脫土，及/或（1)潤滑劑， 例如滑石、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂美 硫酸鈉或其混合物。在膠囊劑及錠劑之情況下， ： 可進一步包含緩衝劑。 類似類型之固體組合物亦可作為填充劑用於使用諸如乳 糖或奶糖之賦形劑及高分子量之聚乙二醇及其類似物之: 質或硬質填充之明膠膠囊劑中。 固體劑型諸如錠劑、糖衣藥丸、膠囊劑及顆粒劑可以涂 層及外殼來製備，諸如腸衣及—般熟習此項技術者習知^ 其它物質。該等固體劑型亦可包含遮光劑且亦可為以延 時、持續或受控方式釋放活性化合物之化合物。可使用之 包埋組合物實例為聚合物質及蠟。若合適，則活性化合物 亦可為具有一或多種上文提及之賦形劑之微膠囊形式。 、用於口服給藥之液體劑型包括醫藥上可接受之乳劑、溶 .液、懸浮液、糖㈣及酿劑。除活性化合物外，液體劑型 可含有此項技術巾通用之惰性稀釋#卜諸如水或其它溶 劑，增溶劑及乳化劑，例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙 酸乙醋、苯τ醇、#甲酸苯f sl、丙二醇、μ•丁二醇、 二甲基甲醯胺、油類（尤其為棉籽油、花生油、玉米胚芽 油、撖欖油、蓖麻油及芝麻籽油）、甘油、四氫糠醇、聚 乙二醇及山梨糖醇酐脂肪酸醋類，或該等物質之混合物及 97204.doc -20- 1291961 其類似物。 除該等情性稀釋劑外，醫藥組合物亦可包括佐劑，諸如 濕潤劑、乳化劑及懸浮劑、甜味劑、調味劑及香味劑。 _ 14化σ物外，懸浮液可進—步包含懸浮劑，例如乙 ^基化異硬脂醇、聚氧乙稀山梨糖醇及山梨糖醇㈣、微 :曰、截、隹素、偏氫氧化鋁、斑脫土、瓊脂及黃芪膠，或上文 提及物質之混合物及其類似物。 用於直腸或陰道給藥之組合物較佳包含栓劑，其可藉由 將活性化合物與合適之非刺激性賦形劑或載劑混合來製 備’該等賦形劑或載劑諸如可可油、聚乙二醇或检劑壤，、 其在正常室溫下為固體’但在體溫下為液體且因此熔融於 直腸或陰道腔藉以釋放活性成份。 用於局部給藥之劑型可包含軟膏、散劑、噴霧劑及吸入 劑。活性藥劑在無菌條件下與醫藥上可接受之載劑、媒劑 或稀釋劑及可需要之任何防腐劑、缓衝劑或推進劑混合。 用於施用P D E 2抑制劑且包括式⑴化合物以及包含治療 骨折之PDE 2抑制劑及Ep2選擇性受體激動劑之組合之^常 較佳組合物包含可注射之流動性組合物，其藉由形成生物 可降解固體或膠體積存物、基質或植入物而在注射局部位 點提供持續釋放。該投藥系統之實例包含緩釋性、美於生 物:降解聚合物之傳輸系統。參見例如美國公開專^申請 案第 2003-0104031 A1 號。 该基於聚合物之傳輸系統通常包含溶解或分散於流動 性、生物可降解之熱塑性聚合物於有機溶劑令之溶液或分 97204.doc -21 - 1291961 散液中的治療有效劑。藉由組合物之注射，有機溶劑自注 射位點擴散，引起聚合物沉殺或膠著從而使藥劑進入緩釋 :存物。Ik後藥劑藉由自聚合物基質擴散及聚合物基質 之U虫而加以釋放。該基質藉由水解作用緩慢侵飯且最終 自、σ藥位點肩失。聚合物之分子量及濃度可控制藥劑之活 體内釋放及基質之降解速率。 基於聚合物之傳輸系統以在需要此系統之患者中的最小 或降低之叢發篁提供活性藥劑於活體内持久的持續釋放。 大叢發量之藥劑會因局部作用(例如刺激)而導致不良的局 部耐受性且將會使效能可用之藥量最小化。該施藥方法提 供之優點係在於其最小化或降低初#叢發量，但仍藉由單 一局部注射持久地以有效量來釋放藥劑。 該聚合物系統係藉由將流動性組合物與凝膠介質接觸以 使組合物凝結或膠著成一固體、多微孔聚合物基質或一凝 膠聚合物基質來製備。流動性組合物含有與合適之溶劑相 組合的熱塑性聚合物或共聚物。形成基質體之聚合物或共 聚物大體上為不溶（較佳為基本上完全不溶）於水及全部流 體。基質體之不溶性使其具有作為用於藥劑之受控釋放之 單一位點的作用。聚合物或共聚物在動物（例如哺乳動物） 體内亦為生物相容的及生物可降解的及/或生物可侵飯 的。生物可降解性使患者無需外科手術移除而代謝且排泄 聚合物基質。由於流動性組合物及聚合物系統係生物相容 的，因此體内插入過程及聚合物系統之存在不會在植入位 點處引起實質性組織刺激或壞死。本發明之組合物作為流 97204.doc -22- 1291961 動性組合物直接施用至全身組織。 用於併入控釋系統之固體基質之合適熱塑性聚合物為藉 由細胞作用及/或藉由體液作用而呈醫藥相容及生物可降 解的固體。適當熱塑性聚合物之實例包括二醇及二羧酸或 匕基羧酸之聚酯，諸如聚丙交酯、聚乙交酯及其共聚物。 更佳之聚合物包含經水解產生乳酸及乙醇酸之共聚物聚乳 酸共乙醇酸（縮寫為PLGH)。該共聚物之釋放叢發量可進一 步藉由添加聚乙二醇（PEG)以形成pEG封端之pLGH而加以 最小化。 人較佳材料包含聚丙交酯、聚乙交酯及其共聚物。該等聚 ϋ物可有利於聚合物系統，此部分上是由於其顯示極佳的 生物相谷性。該等聚合物產生（即便有）很少組織刺激、炎 \ 衷死或t性。在水之存在下，聚合物分別產生易於代 戶之礼S文及乙醇酸。聚丙交酯亦可合併乙交酯單體以提高 /斤=聚σ物之降解。該等聚合物因有效控制藥劑自聚合物 二先之釋放速率，且因其導致藥劑在施藥位點之局部保留 而亦較佳。 “、、達11聚合物於組合物之有機溶劑中之溶解性或可混合 :將依據諸如結晶性、親水性、氫鍵接能力及聚合物分子 之因素而變化。因此調整溶劑中聚合物之分子量及濃度 達成所要混合性及用於經合併藥劑之所要釋放速率。 ，聚合物、溶劑及藥劑之流動性組合物包含一穩定 纩。動物貝。較佳地生成藥劑於有機溶劑中之均質溶 …、2 f生χκ合物大體上可溶於有機溶劑中。將流動性組 97204.d〇( -23- 1291961 合物置於體内後，溶劑消散且聚合物固化或膠凝形成在固 體或凝膠聚合物基質中具有藥劑之聚合物系統。 對於某些較佳聚合物，將聚合物或共聚物之分子量調整 在約0.2至約0.4之固有黏度（I.V.，以分升/公克為單位）範圍 内用於有效持續釋放促進骨生長之化合物。經併入之藥劑 釋放之典型速率在約〇.2(約8,000至約16,000分子量）或約 0.3(約23,000至約45,000分子量）之I.V.下出現，但其可視組 合物之特定成份而變化。對於多數系統，將聚合物分子量 調整至約0.2 I.V.，以有效持續釋放藥劑較佳。 對於聚（DL-丙交酯）或丙交酯-共-乙交酯聚合物系統，所 要分子量範圍為約0.2至約0.4 I.V.，較佳為約0.2之I.V.。 聚合物之分子量可藉由習知方法調整。 尤其較佳之市售熱塑性聚合物包含如下：約0,2 dl/g之 固有黏度以1:1比率之乳酸及乙醇酸之PLGH共聚物（以 Copolymer RESOMER® RG 502 Η購自 Boehringer Ingelheim) (約12,000分子量）、約0·3 dl/g之固有黏度以1:1比率之乳酸 及乙醇酸之PLGH共聚物（以Copolymer RESOMER® RG 503 Η購自 Boehringer Ingelheim)(約 37,000之分子量）、約 0.4 dl/g之固有黏度以1:1比率之乳酸及乙醇酸之PLGH共聚物 (以 Copolymer RESOMER⑧ RG 504 Η 購自 Boehringer Ingelheim)(約47,000之分子量）及約0.79 dl/g之固有黏度以 1:1比率之乳酸及乙醇酸之經聚乙二醇（PEG)封端之PLGH 共聚物（以 PLG-PEG購自 Boehringer Ingelheim)(約 52,000之 分子量）。 97204.doc -24- 1291961 熱塑性組合物中使用之溶劑較佳為醫藥上可接受的、生

物相容的，且將就地分散於體液中以使其可以水中溶解性 範圍自高溶解至不溶解來分類。該等溶劑較佳在注射及植 入位點引起（若有）相對很少的組織刺激或壞死。較佳地溶 劑將具有至少最小程度之水溶解性。當有機溶劑為水不溶 性或最低程度地溶解於水中時，該溶劑將自流動性聚合物 組合物緩慢分散。結果將會是在其壽命期中可含有變化量 之殘餘溶劑之植入物。較佳地有機溶劑具有中等至高程度 ^水溶解性以使其將易於自聚合物組合物分散至體液中。 最佳地溶劑自聚合物組合物快速分散以快速形成固體植入 7。伴隨著溶劑之分散，熱塑性聚合物凝結或凝膠成固體 聚合物系、统。較佳地’當熱塑性聚合物凝結時，溶劑分散 (聚口物系統内小孔之形成。因此’含有熱塑性聚合 物/合”丨及某劑之流動性組合物將形成多孔的固體聚合物 :、 同樣田’谷劑為微溶於水或不溶於水時，溶劑分散

亦可導致固體多孔植入物之形成’或者若某溶劑留存於植 入物’則結果可形成具有較少或無孔之凝膠植入物。 ^ 口適之浴劑包括符合前文標準之液體有機化合物。通常 車乂佳，合劑包含义甲基_2_吡咯啶酮（NMp)。 用於熱塑性聚合物之流動性組合物之溶劑對於聚合物及 溶劑之相容性及合適之溶解性加以選擇。較低分子量之熱 中艰口物將通常比高分子量之聚合物更易溶解於溶劑 八 /合解於各種溶劑中之熱塑性聚合物的濃度視聚 口勿類型及其分子量的不同而不同。反之較高分子量之熱 97204.doc -25- 1291961 塑性聚合物將比極低分子量之熱塑性聚合物更快趨於凝 結、凝膠或固化。另外較高分子量之聚合物比低分子量材 料趨於產生更高的溶液黏度。因此，為有利之注射功效， 除有利之釋放速率外，還要控制溶劑中之聚合物分子量及 濃度。 自流動性組合物形成聚合物系統後，藥劑逐漸併入聚合 物基質中。在插入流動性組合物以形成聚合物系統之後， 藥劑藉由擴散及降解機制自基質釋放至相鄰組織或流體 中。該等機制之操縱亦可影響藥劑以受控速率至環境中之 釋放舉例而曰，在有效及/或足夠量藥劑自基質中釋放 之後，聚合物基質可得以調配而降解。因此，藥劑自基質 中之釋放可根據（例如）藥劑在水中之溶解性、基質内促進 骨生長之化合物之分佈或聚合物基質之尺寸、形狀、多孔 性、溶解性及生物可降解能力及其它因素而變化。藥劑自 基質中之釋放藉由改變聚合物分子量而相對於其固有速率 加以控制從而提供所要之釋放持續時間及速率。 舉例而言，藥劑之較佳劑型包含在施藥前以pLGHM NMP中之溶液來復原的凍乾物〇y〇phile)。由一個注射器 (注射器A)中之凍乾化合物及第二注射器（注射器b)中之 PLGH於NMP中之溶液組成之該劑型稱作a/b復原系統。兩 注射器之内容物在位點處或接近位點處之藥劑傳輸前立即 混合在一起。復原之後，内容物轉移至用於傳輸的刻度定 量注射器中。所施用劑型將為一溶液且將導致具有plgh 之化合物於NMP中以所要漠度分散，所要濃度例如為5及 97204.doc -26- 1291961 ‘ nigA/mI(mgA/ml係指藥劑之鈉鹽形式之游離酸當量）。 劑型為用於局部施藥之非腸道（例如皮下、肌内或脊髓内） 持績釋放性㈣#卜設計緩釋性（松⑽⑽）聚合物基質 、存;主射）中之D亥化合物用於在位點處或接近位點處施藥 ^不意在用於靜脈内施藥。為提供劑型之足夠儲藏壽命穩 疋丨生’較佳可以化合你 口物之納鹽形式使用上述雙注射器系統 ()較佳以化合物之游離酸形式之單相調配物係一較 佳的替代調配物。基於藥劑及聚合物之穩定性，藥劑之無 菌過;慮及聚σ物洛液之輻射較佳可用於製造穩定的無菌產 品。在一實施例中，劑型可以含有填充於一小袋中之来乾 物形式之藥劑及於另一袋中之聚合物溶液之注射器的獨立 紹袋來製造及運輸。用於束乾促進骨生長之化合物的傳輸 容器、系統及方法在公開PCT國際專利中請公開案第购 01/73363號中有描述。其它施藥方法包括藉由注射至特殊 位點之局部施藥或藉由導管至一位點之傳輸。額外實例可 在2001年11月30日中請之美國臨時中請案第6〇/335，156號 中找到。 b 文中所有美國專利案號中所揭示之教示其全文以引用方 式併入本文中。 式（I)之化合物、其前藥及該等化合物及前藥之醫藥上可 接受之鹽可依據以下流程及實例中所揭示之例示性合成途 徑，以及藉由一般熟習相關技術者所知之其它習知的哎在 本揭示中顯而易見之有機製備方法加以製偌 衣1W 本流程中所

揭不之方法意在用於例示本發明之目的且I ㈡日」且不以任何方式理 97204.doc -27- 1291961 解為限制本發明。 流程1 步驟1 烷基

(IV) W 卜R， R2 步驟2

H2N - (CH2)N - X-Y (VII) 、 (VI) -^ (I)

DIPEA、DMSO、120°C

在流程1步驟1中，2,4-二氯基-吼啶并[2,3-d]嘧啶（IV)與 經適度取代之苄胺（V)在諸如三乙胺（TEA)或二異丙基乙胺 (DIPEA)之經三取代胺之酴或諸如0比σ定之芳族鹼之存在下 反應。該反應通常於諸如甲醇（MeOH)、乙醇（EtOH)或異 丙醇（IPA)之極性醇系溶劑中在約0°C至約l〇〇°C範圍之溫度 下達成。較佳地該反應在DIPEA於乙醇中之存在下，於約 室溫（RT)下達成。在步驟2中，所得縮合產物（VI)隨後與經 適度取代之胺（VII)在諸如TEA或DIPEA之經三取代胺鹼或 諸如吡啶之芳族驗之存在下反應以獲得化合物（I)。該反應 通常在極性非質子性溶劑諸如N，N-二甲基曱醯胺（DMF)、 二甲基亞石風（DMSO)、N-曱基σ比略σ定酮或環丁颯（sulfolane) 之存在下，於約60°C至約250°C範圍之高溫下達成。較佳 地該反應在DIPEA於DMSO中之存在下於約9CTC至約120°C 97204.doc -28- 1291961 之間達成。 雖然流私1已作為謹慎之兩步驟過程加以描述’其中中 間體（VI)經分離且隨後與胺（VII)反應，但是亦發現以單一 步驟便利地製備（IV)且使其與胺（VII)就地反應。在該過程 中，使用非質子性溶劑，較佳為DMS〇。該反應亦在 DIPEA於DMSO中之存在下於約9〇。〇至約之間溫度下 達成。 製備實例 除非另有說明 非另有說明，否 AcOH-乙酉变 dec-分解 否則所用之所有試劑均自市面購得。除 則下列實驗性縮寫具有指定含義： DMAP-4-二甲基胺基吡啶 EtOAc-乙酸乙酯 hr-小時（s) LAH-氫化鐘銘 min_分鐘（s) MS-質譜分析 NMR-核磁共振 THF-四氫呋喃 p-TsOH-對甲苯磺酸 製備1 (2_氣基比啶并【2,3-d】嘧啶-4-基)_ 名RT下A， -直 （*一甲氧基-苯甲基）-胺 在RT下向2,4-二氰基-%。定养「9 外 M，3、d]嘧啶（1 3 g，6 7 97204.doc -29- 1291961 mmol)及 3,5-二甲氧基苄胺（1·1 g，6.7 mmol)於 30 mL EtOH 中之經祝拌溶液中添加TEA(4 mL，28.7 mmol)。過濾所形 成之沉殿物且以冷EtOH繼之以己烷洗滌以產生ι·8 g之固 體狀標題化合物（82%)，11^185。(：（(16(：)。1^^]^11(〇]\180- d6) δ : 9.5 (t，1H)、8.9 (dd，1H)、8.7 (dd，1H)、7.5 (m， 1H)、6·5 (d，2H)、6·4 (t，1H)、4.6 (d，2H)、3·7 (s，6H)。 MS (m/z，％) : 331 (ίο。）。 製備2 (2·氣基-«比啶并[2,3_d]嘧啶-4_基)-(3,4-二甲氧基·苯甲基)-胺 該化合物係以類似於製備1中所述之方式使用合適之起 始物質製備。h-NMR (DMSO-d6) δ : 9.5 (t，1H)、8.9 (dd， 1H)、8_7 (dd，1H)、7.0 (s，1H)、6·9 (d，2H)、4.6 (d， 2H)、3.7 (s，3H)、3.7 (s，3H)。MS (m/z，°/〇) : 331 (100)。 製備3 2-(4-胺基甲基-苯基）-丙-2-醇 在0C下向4-(1-經基-1-甲基-乙基）_苯甲腈（2 ·〇 g，12.4 mmol)於30 mL THF中之經擾拌溶液中逐滴添加於thf中 (26 mL ’ 26· 1 mmol)之1 ·0 N LAH。允許混合物溫至rt且 接著回流20 min。然後將混合物冷卻至且以逐滴添加之 5 mL MeOH中止。以300 mL氣仿稀釋混合物且以水〇 χ 8〇 mL)洗務、經硫酸鎮乾燥且濃縮以產生1 ·9 g(95%)固體狀 之標題化合物。1H-NMR (CDC13) δ : 7.45 (d, 2H)、7·26 (d5 2Η)、3.83 (s，2Η)、1·57 (s，6Η)。GC-MS (m/e，〇/〇) ·· 164 (M+，15)、150 (80)、132 (75)、l〇6 (100)。 97204.doc -30- 1291961 製備4 3-(4-乙醯基-苯基）-丙腈 在75T：下將4-(2-溴乙基）苯乙酮（2.0 g，8.8 mmol)與KCN (0·6 g，8·8 mmol)於30 mL DMSO中之混合物加熱4 hr。以 水稀釋混合物且以EtOAc萃取。以水及鹽水連續洗滌有機 萃取物、乾燥且濃縮以產生一油。以40% EtOAc/己烷溶離 經矽膠層析產生0.8 g之油。^-NMR (CD3OD) δ : 7.9 (d， 2H)、7.4 (d，2H)、3.3 (t5 2H)、2.8 (t，2H)、2.6 (s，3H) 〇 GC-MS (m/e，％)·· 173 (M+，20)、158(100)。 製備5 3-[4_(l-羥基-1-甲基-乙基）-苯基卜丙腈 在-40°C下向3 Μ甲基氯化鎂於THF(3.3 mL，9·8 mmol)中 進一步以10 mL THF稀釋之經攪拌溶液中逐滴添加3-(4-乙 酸基-苯基）-丙腈（0.7 g，3.9 mmol)於10 mL THF中之溶 液。允許反應混合物緩慢溫至RT隔夜，冷卻至o°c，然後 以逐滴添加之AcOH中止。反應混合物以水洗務且以EtOAc 萃取。以水及鹽水連續洗滌有機萃取物、乾燥且濃縮以產 生 0.8 g之油。i-NMR (CD3OD) δ ·· 7·4 (d，2H)、7.2 (d5 2H)、2.9 (t，2H)、2·7 (t，2H)、1.5 (s，6H)。GC-MS (m/e5 %) : 189 (M+，5)、174 (100)。 製備6 2-[4·(3-胺基-丙基）-苯基】-丙-2-醇 在〇°C下向1 M LAH於THF中進一步以20 mL THF稀釋之 經攪拌溶液中逐滴添加3-[4-(1-羥基-1-甲基-乙基）-苯基]丙 97204.doc -31 - 1291961 腈（〇·8 g，4.0 mmol)於10 mL THF中之溶液。允許反應物 緩慢溫至RT，接著回流4 hr。反應混合物然後冷卻至〇°C且 以緩慢地逐滴添加之MeOH中止。混合物以氣仿稀釋且以 水洗滌。有機萃取物經由矽藻土過濾，濾液經濃縮然後以 乙酸乙酯稀釋、乾燥且濃縮以產生0.5 g之油。 (CD3OD) δ : 7.4 (d，2H)、7.1 (d，2H)、2.6 (m，4H)、1.7 (m，2H)、1.5 (s，6H)。MS (m/e，％) : 194 (M++1，100)、 176 (90) 〇 製備7 3-丨4-(2-甲基-[1，3]二氧戊環-2-基）-苯基]-丙腈 將3-(4-乙醯基-苯基）丙腈（2.2 g，13 mmol)、乙二醇（2.8 mL’ 51 mmol)與催化量之 p-TsOH(約 200 mg)於 100 mL 甲 苯中之混合物經Dean_Stark收集器回流1 8 hr。混合物以 EtOAc稀釋且以5%碳酸氫鈉溶液、水及鹽水連續洗滌、乾 燥（MgS〇4)且濃縮以產生油。以EtOAc/己烷溶液溶離經矽 膠層析產生2.5 g之油。iH-NMR (CDC13) δ : 7.4 (d，2H)、 7·2 (d，2H)、4.0 (m，2H)、3.8 (m，2H)、2.9 (t，2H)、2.6 (t，2H)、1.6 (s，3H)。MS (m/e，0/〇) : 216 (M+-1, 1)、 202(100) 〇 製備8 3-[4-(2-甲基[1，3]二氧戊環-2-基）-苯基卜丙胺 向3-[4-(2-甲基-[1，3]二氧戊環_2_基）_苯基]_丙腈（2·4 g，

11 mmol)於30 mL THF之經攪拌溶液中逐滴添加i M [AH 於THF中之溶液。允許混合物溫至rT，然後回流1 hr。將 97204.doc -32- 1291961 混合物冷部至〇 c然後以逐滴添加之MeOH中止。混合物以 氯仿稀釋且以水洗滌。所得懸浮液經由矽藻土過濾且分離 濾液層。有機萃取物經MgS〇4乾燥且濃縮以產生2 4 g之 油。tNMR (CDC13) δ : 7.4 (m，2H)、7.1 (d，2H)、4·〇 (m，2H)、3·8 (m，2H)、2.7 (m，2H)、2·6 (m，2H)、1·7 (m， 2H)、1.6 (s5 3H)。MS (m/e5 %) : 221 (M+，10)、206 (60) 、 189 (100) 〇 製備9 2,2,2-三氟基-1-(4_蛾基-苯基）-乙醇 在RT下向4-石典苯甲駿（2·〇 g，8.6 mmol)於20 mL THF之 經擾拌溶液中添加三曱基（三氟曱基μ夕烷於THF( 19 mL， 9·5 mmol)中之〇·5 Μ溶液繼之添加四丁基氟化銨（112 mg， 0·4 mmol)。混合物於下攪拌隔夜，傾入〇·ΐ N鹽酸中且 以EtO Ac萃取。有機萃取物依次以水及鹽水洗滌、乾燥 (MgS04)且濃縮以產生2.6 g之油。ih_Nmr (CDC13) δ : 7.7 (d，2Η)、7·2 (d，2Η)、5.0 (m，1Η)、2·7 (d，1Η)。MS (m/e， %) : 302 (M+，100)、233 (100)。 製備10 2 {3 [4-(2,2,2-二氣基-i-經基-乙基）_苯基]-丙-2-快基}•異 吲哚-1，3-二酮 在RT下向2,2,2-三氟基-1-(4-碘基-苯基）-乙醇（2.6 g，8.5 mmol)、N-炔丙基鄰苯二甲醯亞胺（1 6 g，8·5 mmol)、二 氣雙（二本基膦）纪（298 mg，0.43 mmol)及填化銅（1)(82 mg，0.43 mmol)於20 mL THF之經攪拌懸浮液中添加5 ml 97204.doc -33· 1291961 TEA。混合物於氮氣流下簡單除去空氣且然後回流6 hr。 混合物以氯仿稀釋、以水洗滌、經MgS04乾燥且濃縮以產 生一固體。該固體以EtOAc濕磨以產生2.2 g之固體。1!!-NMR (CDC13) δ : 7.9 (m，2H)、7.7 (m，2H)、7.5 (d，2H)、 7·4 (d，2H)、5.0 (m，1H)、4.7 (s，2H) 〇 MS (m/e，％) : 359 (M+，100) 〇 製備11 2-{3-[4·(2,2,2-三氟基-1_羥基-乙基）_苯基】-丙基卜異吲哚· 1，3 二酮 在RT下將2-{3-[4·(2,2,2-三氟基-1-羥基乙基）·苯基]_丙-2-炔基}-異 口引 u朵 _1，3-二 _ (2.2 g，6·1 mmol)及 10% Pd/C (220 mg)於 150 mL EtOH及 150 mL THF 中之混合物在 5〇 pSi 氫條件下於Parr裝置中振盪2 hr。然後添加額外之220 mg 之10% Pd/C且在RT、50 psi氫條件下振盛混合物另外之2 hr。隨後添加額外之220 mg之10% Pd/C且在RT、50 psi氯 條件下振盪混合物隔夜。混合物藉由矽藻土過滤且濃縮淚 液以產生一油。以EtOAc/己烷溶離經矽膠層析產生18羟之 油。咕-NMR (C1DC13) δ : 7.8 (m，2H)、7.7 (m，2H)、7_3 (d，2H)、7·2 (d，2H)、4.9 (m，1H)、3.7 (t，2H)、2·7 (t， 2H)、2·〇 (m，2H)。MS (m/e，％) : 363 (M+，15)、345 (35) 、 325 (50) 、 161 (100)。 製備12 l_[4-(3-胺基-丙基）_苯基】-2,2,2_三氟基-乙醇 在RT下向2-{3-[4-(2,2,2-三氟基-1-羥基_乙基）_苯基]_丙 97204.doc -34- 1291961 基卜異 °引 σ朵-1，3-二酮（1.8 g，5.0 mmol)於 50 mL MeOH 中之 免搜拌懸浮液中添加水合拼（〇·46 ml，15.0 mmol)。在RT 下授拌混合物1 8 hr。過濾、反應混合物且濃縮濾液以產生一 油。該油以氯仿濕磨、過濾且濃縮濾液以產生丨.〇 g之油。 ^•NMR (CDC13) δ ： 7.3 (d5 2H) > 7.2 (d? 2H) > 5.0 (m? 旧）、2·6 (m5 2H)、2·5 (m，2H)、1.6 (m5 2H)。MS (m/e， 〇/〇) : 363 (M+，10)、216 (100)。 製備13 二氟基-甲續酸苯幷[1，2,5】噁二唑-5-基酯

在-78 C下向5-羥基苯幷呋咕（le8 g，13〇 mm〇1)、TEA (2.4 mL，33·0 mmol)及 DMAP(79 mg，7 〇 mm〇1)K4〇 mL 二氯甲烷之經攪拌溶液中逐滴添加三氟甲磺酸酐（2·8 mL，17.0 mmol)於1〇 mL二氣甲烷中之溶液。允許混合物 經3 hr緩慢溫至RT，以二氣甲烷稀釋且以水洗滌。乾燥有 枝卒取物且濃縮以產生一油。以二氯甲烷溶離經矽膠層析 得到 3·1 g之油。h-NMR (CDC13) δ : 8.0 (dd，1H)、7·8 (dd，1H)、7.3 (dd，1H)。MS (m/e，％) : 268 (M+，60)、146 (60) 、 69(100) 〇 製備14 2-(苯幷[1，2,5】。惡二唾基丙快基卜異„_ 該化合物係以類似於製備1〇之方式使用合適之起始材料 加以製備。1H-NMR (CDCl3) δ : 8·2 (s，1H)、8 〇口 ⑽ 1Η)、7.9 (m，2Η)、7.8 (m，2Η)、7·5 (dd，2Η)、4.7 (s 2H)。MS (m/e，％) : 303 (M+，100)。 ’ 97204.doc -35- 1291961' 製備15 2-(3-苯幷[1，2,5】噁二唑_5-基-丙基兴異吲哚^一二鲷 該化合物係以類似於製備丨丨之方式使用合適之起始材料 加以製備。1H-NMR (CDC13) δ : 7.8 (m5 2H)、7 7 (m 3H)、7.6 (s，1H)、7·2 (m，iH)、3·8 (t，3H)、2.8 (t，2H)、 2.1 (m，2H)。MS (m/e，％) : 307 (M+，40)、29〇(3〇)、 272(20) 、 160(100) 〇 製備16

3-苯幷[1，2,5】噁二唑-5-基-丙胺 H 該化合物係以類似於製備12之方式使用合適之起始材料 加以製備。1H-NMR (DMSO-d6) : δ 7.9 (m，2H)、7 7 (m IH)、7·5 (m，1H)、2.7 (m，2H)、2.5 (m, 2H)、17 (m 2H)。MS (m/e，％) : 177 (M+，40)、160(100)。 製備17 三氟基-甲磺酸苯幷噻唑-6-基酯 該化合物係以類似於製備13之方式使用合適之起始材料 加以製備。^H-NMR (CDC13) δ : 9.1 (s，1H)、8.2 (d，1H)、 9 (d，1H)、7.4 (dd，1H)。MS (m/e，％) : 283 (M+，80)、i50 (100) 〇 製備18 2_(3-苯幷噻唑基_丙-2-炔基）_異吲哚 該化合物係以類似於製備10之方式以三氟基-甲確酸苯 幷嗟唾+基酯（製備17)替代2,2,2-三氟基-1-(‘碘基-苯基）_ 乙醇來製備。】H-NMR (d6-DMSO) δ : 9.4 (s，1H)、8·3 (d， 97204.doc -36- 1291961 1H)、8.0 (d5 2H)、7.9 (m，1H)、7.8 (m，2H)、7.5 (dd， 1H)、4.6 (s，2H)。MS (m/e，％) : 318 (M+，100)。 製備19 2 (3-本幷嘆嗤基-丙基）_異u弓丨嗓二嗣 該化合物係以類似於製備11之方式以2-(3-苯幷噻唑-6-基-丙-2·炔基異吲哚-13-二酮（製備19)替代2_{3·[4_ (2,2,2-二氟基-1_經基-乙基）_苯基]-丙-2-快基}_異。引1?朵-1，3-二酮（製備 10)來製備。1H-NMR (CDC13)S : 8·9 (s，1Η)、8.0 (d，1Η)、7·8 (m，2Η)、7.7 (m，2Η)、7.3 (dd，1Η)、3·8 (t， 2H)、2.8 (t，2H)、2·1 (m，2H)。MS (m/e，％) : 322 (M+， 80)、174(40)、162(100)。 製備20 3 -苯幷嘆嗤-6-基-丙胺 該化合物係以類似於製備12之方式以2-(3·苯幷噻唑-6-基-丙基）-異吲哚-1，3-二酮（製備20)替代2-{3-[4·(2,2,2-三氟 基-1-羥基-乙基）-苯基]-丙基卜異吲哚-1，3-二酮（製備11)來 製備。MS (m/e，％) : 192 (Μ+，20)、175 (100)。 製備21 2·(3-蛾基-苯基）-2-甲基-【1，3]二氧戊環 將 3-磁苯乙酮（3.0 g，12 mmol)、乙二醇（2.7 mL，48 mmol)及對甲苯磺酸（3 〇 mg)於50 mL甲苯之混合物在Dean-

Stark收集 器條件 下回流 18 hr 。 混 合物以 EtO Ac稀 釋且以 5%碳酸氫鈉、水及鹽水連續洗滌、經MgS04乾燥且濃縮以 產生一油。以EtOAc/己烷溶離經矽膠層析產生3.1 g之油。 97204.doc -37- 1291961' W-NMR (CDC13) δ : 7.8 (m5 1H)、7.6 (dd，1H)、7.4 (dd， 1H)、7.0 (m，1H)、4·〇 (m，2H)、3.7 (m，2H)、1.6 (s， 3H)。MS (m/e，％) : 290 (M+，20)、275(100)。 製備22 2-{3-[3-(2-甲基-U，3】二氧戊環基）_苯基卜丙·2_炔基}•異 吲哚-1，3-二酮 該化合物係以類似於製備1〇之方式以2_(3_碘基-苯基）_2_ 甲基-[1，3]二氧戊環（製備21)替代2,2，孓三氟基_丨_(4_碘基_ 苯基）_乙醇來製備。(Cdc13) δ : 7·9 (m，2H)、7.7 (m，2H)、7·5 (s，1H)、7.4 (m，1H)、7·3 (m，1H)，7.2 (m， 1H)、4.7 (s，2H)、4.0 (m，2H)、3.7 (m，2H)、1.6 (s5 6H)。 MS(m/e，。/0): 347 (M+，15)、332 (1〇〇)。 製備23 2-{3-[3-(2-曱基-Μ]二氧戊環基苯基】-丙基卜異吲鳴 1，3-二酮 該化合物係以類似於製備u之方式以2_{3_[3(2_甲基_ [1，3]二氧戊環-2-基）-苯基]_丙_2_块基卜異+朵-仏二酮戊 備22)替代2令[4-(2,2,2_三氟基小經基_乙奸苯基]丙_2· 炔基}八弓| * 1，3-一酮（製備1〇)來製備。1h_nmr (cDd) 5:7.8(m，2H)、7.7(m，2H)、7.2(m，4H)、7.1(d，1H)、 (S，3H”MS(m/e，％):351(M+5)、 製備24 "2-基）-苯基】-丙胺 3-[3·(2·甲基-[1，3】二氧戊環 97204.doc •38- 1291961 該化合物係以類似於製備12之方式以2_{3-[3-(2-曱基_ [1，3]二氧戊環·2-基）-苯基]-丙基卜異吲哚」，3_二酮（製備 23)替代2-{3-[4-(252,2-三氟基羥基-乙基）苯基]_丙基}_ 異口引 口朵-1，3-二酮來製備。iH-NMR (CDCl3) δ : 7.3 (m， 3H)、7.1 (dd5 1H)、4.0 (m，2H)、3.8 (m，2H)、2.7 (t， 2H)、2_6 (t，2H)、1.8 (m，2H)、1.6 (s，3H)。MS (m/e， %) : 221 (M+，20)、206 (60)、189(100)。 製備25 2-(3-蛾基·苯基）_丙_2_醇 在〇°C下向甲基氯化鎂（65 mmol)K 1〇〇 mL THF之經攪拌 溶液中逐滴添加3-碘苯乙酮（4 〇 g，ι6·3 mmol)。允許反應 混合物溫至RT然後冷卻至〇它且添加額外之等量甲基氣化 鎮。允許混合物溫至RT且攪拌5 hr。反應混合物以Me〇H 中止、以水稀釋、以冰AcOH酸化且以二氯甲烷萃取。以 5。/〇碳酸氫納萃取有機萃取物然後濃縮。以二氯甲烷溶離 經石夕膠層析產生一油，其於放置後凝固。MS (m/e，％): 262 (M+，80)、247 (1〇〇)。 製備26 2 {3 [3 (1·經基-i -甲基-乙基）_苯基卜丙_2_快基卜異n弓丨嗓_ 1，3·二酮 該化合物係以類似於製備1〇之方式以2-(3-碘基-苯基）-丙-2-醇（製備25)替代2,2,2-三氟基-1-(4-碘基-苯基）-乙醇來 製備。MS (m/e，％): 319 (M+，90)、301 (80)、160 (100)。 製備27 97204.doc 1291961 2-{3· [3-(1-經基-甲基-乙基）-苯基]•丙基}-異n弓丨鳴4,3-二酮 該化合物係以類似於製備11之方式以2-{3-[3-(1-輕基_卜 曱基-乙基）-苯基]-丙-2-快基卜異吲。朵-1，3-二_ (製備26)替 代2-{3-[4-(2,2,2-三氟基-1-羥基-乙基）-苯基]_丙_2_炔基卜 異吲哚-1，3-二酮（製備 10)來製備。MS (m/e，％) : 305 (Μ+_ Η205 80)、145 (100) 〇 製備28 2-[3·(3-胺基-丙基）-苯基】-丙-2-醇 該化合物係以類似於製備12之方式以® 曱基-乙基）-苯基]-丙基卜異吲。朵- I，3-二酮（製備27)替代2_ {3-[4-(2,2,2-三氟基-1-羥基_乙基）_苯基]_丙基卜異吲哚_ 1，3-二_來製備。MS (m/e，: 193 (M+，30)、162 (60)、 145 (100)。 製備29 4-[3-(1，3-二氧代·;ι，3_二氫-異吲哚_2_*)β丙炔基卜苯甲腈 該化合物係以類似於製備10之方式使用合適之起始材料 製備。tNMR (CDC13) δ : 7·8 (m，6Η)、7·6 (d，2Η)、4 6 9 (s，2Η)。MS (m/e，％) : 286 (Μ+，100)。 製備30 4 [3-(1,3-一氧代-i，3-二氫-異吲哚基卜丙基卜苯甲腈 該化合物係以類似於製備丨丨之方式以4_[3_(1，3_二氧代 1，3-二氫-異吲哚_2_基）_丙_1_炔基]_苯甲腈（製備29)替代2_ {3_[4·(2,2,2·三氟基-1 -經基-乙基）苯基]-丙-2-块基卜異。引 哚-1，3·二酮（製備10)來製備。】h_NMr (CDC1 Ό · /.〇 (dd5 97204.doc -40- 1291961 2H)、7·7 (dd，2H)、7.5 (d，2H)、7.3 (d5 2H)、3·7 (t 2H)、2.7 (t，2H)、2.0 (m，2H)。MS (m/e，〇/〇) : 290 (M + 60) 、 161 (100) 〇 製備31 4-(3-胺基-丙基）-苯甲腈 該化合物係以類似於製備12之方式以4-[3-(l，3-二氧代_ 1，3-二氫-異口引。朵-2-基）-丙基]-苯甲腈（製備3〇)替代2_{3-[4_ (2,2,2-三說基-1-經基-乙基）-苯基]-丙基卜異17引1!朵_13_二酉同 來製備。1H-NMR (CDC13) δ: 7.5 (d5 2H)，7.3 (d，2H) 2 7 (m，4H)，1.8 (m，2H) 〇 MS(m/e，％) : ι6〇 (M+，2〇)、143 (100) 〇 製備32 2-氣基-3,4-二甲氧基-苯曱搭辟 2 -鼠基-3,4 -一甲乳基本甲終（1.5 g’ 7.5 mmol)、鹽酸經 胺（650 mg，9.4 mmol)及乙酸鈉（1.5 g，18·8 mm〇1)於 3〇 ml M e Ο Η及1 5 ml水中之混合物在6 5 C下加熱1 8 hr。該混合物

以水稀釋且以EtOAc萃取。有機萃取物以水及鹽水連續洗 務’經MgS 〇4乾燦且濃縮以產生1.7 g之固體。1 H-NMR (CDC13) δ : 8.5 (s，1H)、7.6 (d，1H)、6.8 (d, 1H)、3·9 (s， 3Η)、3.8 (s，3Η)。MS (m/e，％) : 215 (Μ+，40)、199 (100)。 製備33 2-氣基-3,4-二甲氧基_节胺

在0°C下向製備32之產物（1.7 g，7.8 mmol)於40 mL THF 97204.doc -41 - 1291961 中之經攪拌溶液中緩慢地逐滴添加LAH(17 mL，17 於THF中之1 M溶液。允許混合物緩慢溫至rt，然後回流2 匕a物/令部至q C且以逐滴緩慢添加Me〇H來中止反 應。混合物以水稀釋且以氯仿萃取。所得乳液以矽藻土過 濾且分離濾液層。有機萃取物以水洗滌、乾燥（MgS04)且 /辰縮以產生 U g之油。MS (m/e，％) : 202 (M+，1〇〇)。 製備34 氧基-4-甲氧基-苯甲醛肟 該化合物係以類似於製備32之方式使用合適之起始材料 製備。W-NMR (CDC13) δ : 8.1 (s，1H)、7.2 (d，1H)、7·〇 ㈣，1Η)、6·8 (d，1Η)、4·1 (q，2Η)、3·9 (s，3Η)、i 5 (t， 3Η)。MS (m/e，％) ·· 195 (Μ+，1〇〇)。 ， 製備35 3-乙氧基-4-甲氧基-苄胺 該化合物係以類似於製備33之方式使用合適之起始材 製備。tNMR (CDC13) δ : 6.9 (s，1H)、6·8 (s, 2H)、4 工 (q，2H)、3·8 (s，2H)、b (t，3H)。MS (m/e，％) : i8 100) 〇 5 製備36 2-(3-吡啶-4-基-丙基）_異吲哚q，、二輞 在〇°C下向4-°比π定丙醇Λ 疋内和（2.0 g，14·5 mm〇1)、鄰苯 亞胺（2.1 g，14.5 _〇1)及三苯基 6 mm〇i)於 50 mL THF中之經攪拌溶液中逐滴添加偶氮二羧酸二乙^ (2.5就，㈣職❶1)。允許屍合物緩慢溫騰，然_ = 97204.doc -42- 1291961 隔夜。混合物以0.1 N之鹽酸稀釋且以乙醚洗滌。含水萃 取物以6 N之氫氧化鈉來鹼化且以Et0Ac萃取。有機萃取物 以1 N氫氧化鈉及水洗滌、經MgS〇4乾燥且濃縮以產生18 g固體。W-NMR (CDC13) δ : 8.5 (s，2H)、7 8 (m，2H)、7 7 (m，2H)、7·2 (m，2H)、3·7 (t，2H)、2 7 (t，2h)、2 〇 ⑼， 2H)。 ’ 製備37 3-吡啶-4-基·丙胺 該化合物係以類似於製備12之方式使用製備36之標題化 合物製備。iH-NMR (CDC13) δ : 8.4 (m，2Η)、（m， 2H)、2.7 (t，2H)、2.6 (t，2H)、1.8 (m, 2H)。MS (m/e， %) : 136 (M+，30)、119 (35)、l〇7 (ίο。）。 式（I)之化合物如下列實例中所述來製備。 實例1

Nip，5-二甲氧基·苯甲基卜妒气2^比啶_2_基_乙基）比啶并 【2,3-d】嘧啶-2,4-二胺 在90 C下將製備1之標題化合物（174 mg，〇.5 mm〇1)、2-(2-胺基乙基）·吡啶（386 mg，3.2 mmol)及 DIPEA(0.2 mL， 1·1 mmol)於1 mL之DMSO中之混合物加熱18 hr。將混合物 傾入水中且以二氣甲烷萃取。有機萃取物以鹽水洗滌、經 MgSCU乾燥且濃縮。所得殘餘物以Et〇Ac濕磨以產生83 mg(40°/〇)之標題化合物，111{.157_8<^。1]^_1^^1^(〇]^0-d6) · δ 8.6 (dd，1H)、8.5 (d，1H)、8.4 (dd5 1H)、7·7 (m， 1H) > 7.2 (m? ih) > 7.0 (m5 2H) ^ 6.5 (m5 2H) ' 6.3 (m? 97204.doc -43- 1291961 1H)、4.6 (m，2H)、3.7 (s，6H)、3·6 (m，2H)、3.0 (m5 2H)。MS (m/z，％) : 417 (100)。C23U24N6〇2之分析值： C，66·3 ; Η，5.8 ; N，20.2。實驗值· c，65.3 ; Η， 6.3 ; Ν，18·3。 ::2至5之化合物係， 合適之起始材料製備。 a列1中所1 實例2 N、(3，S-二甲氧基_苯甲基 、 比啶_3-纂-乙基）-吡啶并 【2,3-cn’变 m.P. 185-代。c23H2 —胺 ^，2。.2。實驗值：。，2广分析值：。，66.3;11， 實例 3 64.s ; Η，5.6 ; N ’ 19_6。 Ν4-(3,5-二甲氧基_苯甲基 A弋2_吡啶基-乙基）-吡啶并 【2,3喇嘧啶 m.P· 234-51。C23li24N 一胺 …心⑽實驗值：匕^分析值：。’66·3;11， 實例 4 6·〇 ; η，5.6 ; N ’ 20.0。 ΝΊ甲氧基.苯甲基)〜如·基甲基_吼咬并

m.P· 222-3°C。C22H22Kf6〇 5.5 ; Ν，20.9。實驗值·· ^， 實例S U，3’啶二胺 2之分析值·· c，65·7 ; Η ’ 65 ;Η ， 5·5 ; Ν ， 20·8 0 Ν _Ν4-雙_(3,5-二甲氧基_笼 未甲基）_吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4· 二胺 97204.doc •44、 129196Γ m.p· 159-160°C。C25H27N5〇4之分析值：C，65.1 ; Η， 5·9 ; Ν，15.2。實驗值·· C，65.3 ; Η，5.9 ; Ν，15.1。 實例6 Ν4-(3,5-二甲氧基-苯甲基）-Ν\[2兴心甲氧基-苯基乙基卜„比 咬并【2,3-d]嘴咬-2,4-二胺 在90 C下將製備1之標題化合物（1 〇〇 mg，0.5 mmol)、對 曱氧基苯乙胺（89 μί，0.61 mmol)及 DIPEA(105 μί，0.61 mmol)於0·8 mL之DMSO中之混合物加熱is hr。藉由直接 注射於逆相製備性HPLC(Shimadzu corp· ; Kyoto, Japan)上 使用含0.1%氫氧化銨之乙腈/水之階段梯度作為溶離液自 粗反應混合物中分離及純化該化合物。將含所要產物之溶 離份組合、濃縮且自IPA中再結晶殘餘物以產生80 mg

6.3 ; N，15.2。

具體例外事項。 實例7 (3-苯基-丙基）_吡啶并丨2,3 d】 N4-(3,5-二甲氧基_苯甲基卜 喊咬-2,4-二胺 Ή-NMR (DMS〇-d6): 8.6 (dd, 1H； br，3H)、7.1 (m, br, 2H)、6.3 (s5 br，iH)、 7·1 (m， ，iH)、8.4 (d，1H)、7.2 (m，

97204.doc -45- 1291961 (m，br，2H)、1·8 (m，br，2H)、1.7 (m，br，2H)。MS (m/z， %) : 417 (100)。MS (m/z，％) : 430 (100)。 實例8 N2-[2-(4•氣基-苯基）-乙基]-N4-(3,5 -二曱氧基-苯甲基比咬 并[2,3-d】嘧啶-2,4-二胺 m.p_ 85-90°C。C24H24N502C1之分析值·· C，64.1 ; Η， 5.4 ; Ν，15.6。實驗值：C，63.6 ; Η，5.7 ; Ν，15.3。 實例9 Ν2-苯曱基_Ν4-(3,5-二甲氧基·苯曱基）-吡啶并[2,3-d]嘧啶- 2,4_ 二胺 m.p. 84-85°C。C23H23N502 之分析值：C，68·8 ; Η， 5.8 ; Ν，17.4。實驗值：C，68.5 ; Η，6.0 ; Ν，17.4。 實例10 Ν4-(3,5-二甲氧基-苯甲基）-Ν2-(2-噻吩-2-基-乙基）-吡啶并 [2,3-d]嘧啶-2,4-二胺 m.p. 120-1°C。C22H23N502S 之分析值：C，62.7 ; Η， 5·5 ; Ν，16.6。實驗值：C，62·2 ; Η，6.0 ; Ν，15_6。 實例11 2-(4-{[4_(3,5-二甲氧基-苯甲基胺基）-啦啶并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基卜甲基}"苯基）-丙-2 -醇 m.p. 105-9°C。C26H29N503 之分析值：C，68.0 ; Η， 6.4 ; Ν，15.2。實驗值：C，67.7 ; Η，6·6 ; Ν，14.4。 實例12 Ν4-(3,5-二甲氧基-苯曱基）-Ν2_2-苯乙基-吡啶并[2,3-d]嘧 97204.doc -46- 1291961 啶-2,4-二胺 m.p. 112-4°C。C24H25N502 之分析值：C，69·4 ; Η， 6·1 ; Ν，16·9。實驗值：C，68·5 ; Η，6.9 ; Ν，15.3。 實例13 Ν4-(3,5-二甲氧基-苯甲基）-Ν2-[2-(3,5-二甲氧基-苯基）-乙 基】-吡啶并[2,3-d】嘧啶-2,4-二胺 m.p. 95-100°C。C26H29N504之分析值：C，65·7 ; Η， 6·2 ; Ν，14·7。實驗值：C，65.5 ; Η，6.6 ; Ν，14.5。 實例14 Ν4-(3,4 -二甲氧基-苯甲基）·Ν2_[2-(3氣基·苯基）-乙基】-11比 啶并丨2,3-d]嘧啶-2,4-二胺 m.p. 227-8°C。C24H24N502F之分析值：C，66.5 ; Η， 5.6 ; Ν，16.2。實驗值：C，66.6 ; Η，5·6 ; Ν，16.2。 實例15 Ν4-(3,4 -二甲氧基_苯甲基）-Ν2·[2-(2 -氣基-苯基）-乙基】比 啶并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺 m.p. 220-2°C。C24H24N502F之分析值：C，66.5 ; Η， 5.6 ; Ν，16·2。實驗值：C，66.4 ; Η，5·5 ; Ν，16·1。 實例16 Ν4-(3,4 -二曱氧基-苯甲基）-Ν2-[2-(4 -氣基-苯基）-乙基]-11比 啶并[2,3_d]嘧啶-2,4-二胺 m.p. 225-6°C。C24H24N502F之分析值：C，66.5 ; Η， 5.6 ; Ν，16.2。實驗值：C，66.4 ; Η，5·6 ; Ν，16.2。 實例17 97204.doc -47- 1291961 N4-(3,4-二甲氧基-苯甲基-N2-苯乙基-11比淀并丨2,3_d】喊淀- 2,4-二胺 m.p. 217-8C。C24H25N5O2之分析值· C ’ 69.4，Η 6·1 ; Ν，16.9。實驗值：C，69.4 ; Η，6.0 ; Ν，16.8。 實例18 Ν4-(3,4-二甲氧基·苯甲基(‘苯基-丁基）·吼啶并[2,3-d】 嘧啶-2,4-二胺

m.p. 194-5°C。C26H29N5〇2 之分析值：C，70.4 ; Η， 6·6 ; Ν，15.8。實驗值：C，70.5 ; Η，6.6 ; Ν，15.9。 實例19 Ν4-(3,4-二甲氧基·苯甲基）苯氧基·乙基）βΙΙ比啶并 【2,3-d]嘧啶_2,4_二胺 m.p. 227-8°C。C24H25N5〇3之分析值：C，66.8 ; Η， 5·8 ; Ν，16·2。實驗值：c，66.7 ; Η，5.7 ; Ν，16.2。 實例20

Ν -(3,4-二甲氧基-苯甲基喟2_(2三氟甲基·苯甲基卜吡啶并 [2,3-d】嘧啶_2,4_二胺 61·4 ; Η， 14.8。 m_p· 227-8 C。C24H22N5〇2f3之分析值：c， 4·7 ’ N ’ 14.9。實驗值·· c，6〇 6 ; H，4 9 ; N 實例21 2-(4-{3_[4_(3,4_二甲氧基_苯甲基胺基卜吼唆并【w_d】嘧唆-2-基胺基卜丙基p苯基）_丙-：2-醇 份且自EtOAc 3之分析值·· /辰縮含所要粗產物之逆相製備性HPlc溶離 争再結晶殘餘物。m.p, 198-9°C0C2sH33N5〇 97204.doc -48- 1291961 C，69·〇 ; Η，6·8 ; N，14.4。實驗值：C，68·7 ; Η， 6·9 ; Ν ， 14·3 。 實例22 2-(4-{3-丨4·(3,5-二甲氧基-苯甲基胺基）-吡啶并[2,3-d]嘧啶-2·基胺基卜丙基卜苯基）-丙-2-醇 (非晶系固體）ιη·ρ· 70-5°C。W-NMR (DMSO-d6) : 8.6 (dd，1H)、8·4 (d，1H)、7·3 (m，br，2H)、7·1 (m，br，2H)、 7.0 (m，br，2H)、6·5 (s5 br，2H)、6.3 (s，br，1H)、4.6 (m， br，2H)、3·7 (s，br，6H)、2.6 (m，br，2H)、1·8 (m，br， 2H)、1.7 (m，br，2H)、1.4 (s 6H) 〇 MS (m/z，％) : 430 (100)。MS (m/z，％) : 488 (M++1，100)、470 (50)。 C28H33N503之分析值：c，69·0 ; Η，6·8 ; N，14.4。實驗 值：C，67·1 ; Η，7·0 ; Ν，12.1。 實例23 ^(^{[4-(3,4-二甲氧基-苯甲基胺基）_吡啶并【2,3-d】嘧啶_2-基胺基】_甲基卜苯基）-2,2,2-三氟基-乙醇 濃縮含所要粗產物之逆相製備性HPLC溶離份且自乙腈/ 水中再結晶殘餘物。m.p· 121-2°C。C25H24N503F3之分析 值 C，60.1 , Η，4.8 ; N，14.0。實驗值·· c，58·0 ; Η， 5.0 ; Ν，13.4 〇 實例24 1_(4屮-【4-(3,4_二甲氧基_苯子基胺基）_咐啶并【2,3__咬_ 2-基胺基卜丙基卜苯基）_乙酮 將含粗產物之反應混合物傾入水 、不1Ρ且過濾所得沉澱物。 97204.doc 1291961 將殘餘物溶解於30 mL之MeOH中且添加1〇 mL之1 N鹽 酉文。在RT下將混合物擾拌4 hr、濃縮、以$ %之碳酸氫納中 和且以二氯甲烧萃取。組合有機萃取物且以鹽水洗滌、經 MgS〇4乾燥且濃縮。粗產物藉由如實例6中所述之逆相 HPLC純化。將含所要產物之溶離份組合、濃縮且自乙猜/ 水中再結晶殘餘物以產生一固體，m.p· l84-5〇c。 C27H29N503之分析值：C，68.8 ; Η，6.2 ; N，14.9。實驗 值·· C，68·7 ; Η，6.0 ; Ν，14.6 〇 實例25 ^(^^-[‘^，‘二曱氧基-苯甲基胺基卜吼咬并丨之一-…嘧啶-2·基胺基]-丙基}-苯基）-2,2,2-三I基-乙醇 m.p· 222-4°C。h-NMR (DMSO-d6) : δ 8.6 (dd，1Η)、8.4 (dd，1H)、7·4 (m，br，2H)、7.3 (m，1H)、7.0 (m，br，2H)、 6.8 (s，br，2H)、6.7 (d，1H)、5.0 (m，br5 1H)、4.6 (s，br， 2H)、3.7 (m，6H)、3.3 (m，2H)、2.6 (m，br，2H)、1.8 (m， br，2H)。MS (m/z，％) : 528 (M+，100) 〇 實例26 N2-3_(苯幷[1，2,5】噁二唑-5-基-丙*)_N4-(3,4-二甲氧基-苯 甲基）-吡啶并[2,3_d]嘧啶-2,4-二胺 該產物藉由以於2 N氨水/二氣甲烷中之2.5% MeOH溶離 經矽膠層析法分離以產生粗固體。以EtOAc濕磨產生一固 體，m.p. 191-3〇C。W-NMR (DMSO-d6) : δ 8.6 (dd，1H)、 8.4 (dd，1H)、7.9 (m，br，1H)、7.7 (m，1H)、7.5 (m，br5 1H)、7.0 (m，br，2H)、6.8 (m，2H)、4.6 (m, br，2H)、3.7 97204.doc -50- 1291961 (m，6H)、3·4 (m，2H)、2.7 (m，br，2H)、1.9 (m，br，2H)。 MS (m/z，％) : 472 (M+, loo)。 實例27 N2-3-(苯幷噻唑_6-基·丙基）-N4彳3,4-二甲氧基_苯曱基）_吡 咬并[2,3-d】喊咬4-二胺 該產物藉由以於2 N氨水/二氯甲烷中之2.5% MeOH溶離 經矽膠層析法分離以產生一固體。mp 191-3°C。MS (m/z， : 487 (M+，100)。c26H26n6〇2S之分析值：C，64·2 ; Η，5.4 ; Ν，17·3。實驗值：C，64.5 ; Η，5.5 ; Ν， 16.8。 實例28 Ν4-(3,4-二甲氧基·苯甲基）_νΜ3-[3-(2-甲基-[1，3卜二氧戊 環-2-基）-苯基卜丙基卜吡啶并[2,3-d】嘧啶-2,4-二胺 W-NMR (DMSO-d6) : δ 8.6 (d，1H)、8.3 (d，1H)、7.2 (m，br，3H)、7.0 (m，br，3H)、6·9 (m，br，2H)、4·6 (m，br， 2H)、4.1 (m，2H)、3.9 (m，2H)、3·7 (m，br，8H)、2.6 (m， br，2H)、1.8 (m，br5 2H)、1·5 (s，3H) 〇 MS (m/z，％) : 516 (M++1，100) 〇 實例29 2-(3_{3_[4-(3,4-二甲氧基·苯甲基胺基）_,比啶并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基卜丙基卜苯基）-丙-2-醇 tn.p. 204-5〇C。h-NMR (DMSO-d6) : δ 8.6 (d，1H)、8,3 (d，1H)、7.3 (m，br，1H)、7.2 (m，br，1H)、7·1 (m，br， 1H)、7.0 (m，br，3H)、6.8 (s，br，2H)、4·6 (s，br，2H)、3.7 97204.doc -51 - 1291961 (m，br，6H)、3.3 (m，br，2H)、2·6 (m，br，2H)、1·8 (m，br， 2H)、1.4 (s，6H)。MS (m/z，％) : 488 (M++1，100)。 實例30 4-{3-[4-(3,4-二甲氧基-苯甲基胺基)-吡啶并[2,3-d】嘧咬-2- 基胺基】-丙基}_苯甲腈 m.p. 220-2〇C。W-NMR (DMSO-d6) ·· δ 8.6 (d，1H)、8·3 (d5 1Η)、7·7 (m，br，2Η)、7·4 (m，bi·，2Η)、7·0 (m，br， 2H)、6·8 (s，br，2H)、4.6 (s，br，2H)、3.7 (m，br，6H)、3.3 (m，br，2H)、2.7 (m，br，2H)、1.8 (m，br，2H) 〇 MS (m/z， %) : 455 (M++1，100) o 實例31 N4-(3,5-二甲氧基-苯甲基）-N2-(3-吡啶-4-基-丙基）-吡啶并 [2,3-d]嘧啶-2,4-二胺 iH-NMR (CD2C12) : δ 9.1 (d，1H)、8.9 (m，br，1H)、8.4 (m，br，3H)、7.2 (m，br，2H)、7.1 (m，br，1H)、7.0 (s，br， 1H)、6.9 (d，1H)、6.6 (d，1H)、4.8 (d，2H)、3.7 (s，3H)、 3.7 (s，3H)、3.6 (m，2H)、2.7 (m，2H)、2_0 (m，2H)。MS (m/z，％) : 432 (M++1，20)、256 (15)、237(30)、216 (100)。 實例32-35之化合物根據下列概述程序製備。注意所用 之反應及/或純化條件之具體例外。 在RT下向2,4-二氯基-吡啶并[2,3-d]嘧啶（〇·75 mmol)及 DIPEA(1.5 mmol)於3 mL DMSO中之經攪拌溶液中添加 0.75 mmol對應於式（V)、流程1、步驟1之胺。混合物在反丁 97204.doc -52- 1291961 下攪拌1 hr，然後添加2.25 mmol對應於式（VII)、流程1、 步驟2之胺及額外之DIPEA(2.25 mmol)，且在90°C下加熱 混合物兩小時。 實例32 Ν4_(3,4·二甲氧基·苯甲基）-N2-(3-苯基_丙基卜吡啶并丨2,3_d】 嘧啶-2,4-二胺

藉由直接注射於逆相製備性111>1^(：上使用含〇1%氫氧化 銨之乙腈/水之階段梯度作為溶離液自粗反應混合物中分 離及純化該化合物。將含化合物之溶離份組合且濃縮以產

生一固體，χη·ρ· 19〇-2。(：。iH_nmr (d6-DMS〇) : δ 8 6 (dd， 1H)、8.4 (dd，1H)、7·2 (m，br，3H)、7」（m，br, 2H)、7 〇 (m, br’ 2H)、6.8 (m，br，2H)、4.6 (m，br，2H)、3.7 (d，br， 6H)、3.3 (m，br，2H)、2.6 (m，br，2H)、1·8 (m，2H)。MS _，％):431(Μ++1，5〇)、43〇(μ+，ι〇〇)。 實例33

N -(3’5一甲氧基-笨甲基）·Ν2·(3-苯氧基-乙基）-咐咬并 [2,3_d】嘧啶-2,4-二胺 藉由直接&射於逆相製備性上使用含⑺氮氧化 女 胃&之又梯度作為溶離液自粗反應混合物中之 刀離及、、、屯化忒化合物。將含該化合物之溶離份組合、濃縮 且自1PA/水中再結晶殘—Hl65-7t：JH-NMR(d6· DMSO) : 8.6 (dd，1H)、》ι )8·4 (d，1H)、7·2 (m，br，3H)、7·1 (m，br，2H)、7.Mm，lH)、69(m，br，2H)、68(m,br， 97204.doc '53- 1291961 br，2H)、3.7 (m，br，8H)。MS (m/e，％) : 433 (M++1，5〇) ' 432(M+，100) 〇 實例34 ΝΑ乙氧基氧基·苯f基㈣仆苯基·丙奸心定并 [2,3-d]嘧咬 _2,4_二胺 藉由直接注射於逆相製備'随PLC上使用纟0.1%氫氧化 錢之乙腈/水之階段梯度作為溶㈣自粗反應混合物中分 離及純化該化合物。將含該化合物之溶離份組合、濃縮且 自乙腈/水中再結晶。m.p 值：C，70.4 ; Η，6·6 ; N， 6·9 ; Ν ， 15.9 〇 181-2°C。C26H29N502之分析 15.8。實驗值：c，70.7 ; Η， 實例35 2-(4-{3_[4-(3_乙氧基+甲氧基-苯甲基胺基^唆并【2,3-d】 嘧啶基胺基】_丙基}苯基)_丙-2-醇 藉由直接注射於逆相製備性hplc上使用含〇1%氫氧化 按之乙猜/水之階段梯度作為溶離液自粗反應混合物中分 離及純化該化合物。將含所要化合物之溶離份組合、濃縮 且自乙腈/水中再結晶。mp_ l5〇-2t：。C29H35N5〇3之分析 值：C ’ 69·4 ; Η ’ 7·0 ; N，13.7。實驗值：C，69.1 ; Η， 6.9 ; Ν ， 13·7 。 實例36 1-(4-{3-[4-(3,4·二甲氧基_笨甲基胺基比啶并丨2,3_d】嘧啶_ 2-基胺基卜丙基卜苯基）_2,2,2三氟-乙酮 在RT下向貫例25之標題化合物（15〇 mg，0.28 mmol)於 97204.doc -54. 1291961 15 mL二氣甲烷中之經攪拌溶液中添加m —三乙醯氧基_ !，1 一 氲 1，2-本并碳氧雜環戊-3(1ϋ)-_(ΐ8〇 mg，0.43 mmol)。混合物在！^了下攪拌六小時，然後添加額外份數之 ι，ι，ΐ-三乙醯氧基_ι，ι·二氫苯并碘氧雜環戊_3(1Η)_酮 (180 mg，0.43 mmol)且在RT下攪拌混合物隔夜。混合物 以氯仿稀釋、以水洗滌、經MgS〇4乾燥且濃縮以產生一 油。於矽膠上層析以5% Me0H 2 N於氨水/二氯曱烧中之 溶液溶離得到一油。以EtOAc濕磨產生45 mg之固體，111.?· 198-200°C。^-NMR (d6-DMSO) : δ 8·6 (dd5 1H)、8·4 (dd， 1H)、7·9 (m，br5 2H)、7.5 (m，br，2H)、7.0 (m, br，2H)、 6·8 (m5 br5 2H)、4·6 (m，2H)、3·7 (m，6H)、3.3 (m，2H)、 2·7 (m，br，2H)、1.9 (m，br，2H)。MS (m/e，％) : 526 (M+， 100) 〇 實例37 1-(3-{3-[4_(3,4-二甲氧基-苯甲基胺基）-«比咬并[2,3_(1】嘧唆_ 2-基胺基】-丙基卜苯基）-乙酮 在RT下將製備27之標題化合物（419 mg，0.81 mmol)於 含10 mL 6 N鹽酸之8 mL THF中之混合物攪拌6 hr。反應混 合物以EtOAc萃取，有機萃取物以5%碳酸氫鈉溶液洗滌且 然後濃縮以產生一 DMSO) : 8.8 (d，1H)、8.7 (d，1H)、7.7 (m，2H)、7_4 (m， 3H)、7·0 (s，1H)、6.8 (m，2H)、4.6 (d，2H)、3.7 (s，3H)、 3.6 (s，3H)、3.5 (m，2H)、2.7 (m，2H)、2.5 (s，3H)、1.9 (m，2H)。MS (m/e，％) ·· 471(M+，30)、470 (100)。 97204.doc -55- 1291961 生物學方法 PDE 2酶之分離 自具有來自多個捐贈者之用於製造血小板小球之約L4 L 血液之人類血小板中分離PDE 2酶。將血小板再懸浮於約 75 mL 之溶解緩衝液[20 mM Tris pH 7.2、5 mM MgCl2、 250 mM蔗糖、1 mM DTT、1 /xL/2 mL Sigma蛋白酶抑制劑 #8340 ； Sigma-Aldrich ； St. Louis，MO]且在 4〇C 下以 1 分鐘 脈衝3圈之超音波降解法溶解，然後以100,000x g於4°C下 旋轉隔夜。將經清潔之溶解產物以25 mL之平均負載體積 載入至以一連串三次層析分離的AKTA Explorer FPLC (Amersham Biosciences ; Piscataway，NJ)中。使用 5 mL HiTrap Q 陰離子交換柱（Amersham Biosciences)。緩衝液 [20 mM Tris pH 7·2、5 mM MgCL、1 #1/2 mL Sigma蛋白 酶抑制劑#8340]與經20管柱容量以自初始B緩衝液濃度0% 至100%之最終濃度之梯度與B緩衝液[20 mM Tris pH 7.2、 500 mM NaCl、5 mM MgCl2、1 μ1/2 mL Sigma蛋白酶抑制 劑#8340]混合。cGMP-水解波峰以低鹽-125 mM NaCl (PDE 5)及高鹽_325 mM NaCl(PDE 2)下之平均分離度記 錄。分離且單獨合併兩個主要的cGMP活性溶離份（PDE 5 及PDE 2)。合併有PDE 2之溶離份總量大約為40 mL，其分 佈於200 /xl/小瓶之耐珠小甑（cryovial)中且置於-80°C下儲 存。 PDE 2酶結合分析 式（I)化合物對重組或獨立之PDE 2及其它PDE之抑制活 97204.doc -56- 1291961 性係使用購自 Amersham International(Little Chalfont， England)之[3H]c AMP閃爍親近檢測（SPA)套組來測定。SPA 分析使用96孔板執行。與環狀核苷cGMP相比，PDE SPA 石夕酸紀珠粒（Amersham Biosciences)優先結合至線性核苦 GMP。添加3H-cGMP至該反應中，且當產物3H-GMP密切 接近珠粒時，激發珠粒内之閃爍，該閃爍使用Packard閃 燦計數器（Perkin-Elmer Life Sciences ; Boston，MA)來測 定。所用之酶濃度係在線性範圍内且測定酶之Km(l 5 uM)。最終物質濃度為<1/3 Km(l μΜ)以使得IC5〇值接近Ki 值。在測試化合物之前該分析使用文獻化合物作為對照組 驗證。隨後比較在測試化合物之存在下獲得及在缺乏測試 化合物下獲得之PDE催化活性量測值且測定IC5G值。 使用RACK-BETA 1219液體閃爍計數器（LKB Wallac ; Freiburg，FRG)定量測定該等放射性物質及PDE反應產 物。以1 μΜ cAMP或cGMP使用波峰溶離份來測定IC50值 (50%抑制之濃度）。藉助於Σ邏輯運算函數以四個參數擬合 該數據。 使用先前所述自人類血小板中分離之PDE 2酶及用於分 析測試化合物對酶之抑制之方法測定對於EHNA之1 · 7 uM 之IC50。另外’ 9-(1-乙酸基-4 -苯基-丁基）-2_(3,4 -二甲乳 基·苯曱基）-1，9-二氫嘌呤-6-酮之3 nM之IC5〇亦使用上文提 及之方法測定。 式⑴之化合物通常展現抑制活性，以對PDE 2之IC50來 表示，其為<1，〇〇〇 nM。實例1-37中式（I)化合物之PDE 2抑 97204.doc -57- 1291961 制活性範圍在表1中給出。 表1 實例 PDE 2抑制性 實例 PDE 2抑制性 1 ++ 22 ++ 2 ++ 23 + 3 + 24 + 4 + 25 ++ 5 +++ 26 + 6 + 27 + 7 ++ 28 + 8 + 29 + 9 + 30 + 10 +++ 31 + 11 + 32 + 12 ++ 33 ++ 13 ++ 34 + 14 ++ 35 + 15 ++ 36 + 16 +++ 37 + 17 +++ 18 ++ 19 ++ 20 + 21 + PDE 2抑制性：+++(IC50<50 nM)，++(IC50 50-250 nM)， + (IC5〇 250-1,000 nM) 97204.doc -58- 1291961 包括式（I)化合物之PDE 2抑制劑對於治療骨折及/或缺損 或促進骨生長之能力可依據下列方案加以論證。 大鼠股骨橫向折斷模型 使用3至4月大之雄性sprague_Dawley大鼠。該等動物分 別以克他命（ketamine)及甲苯噻嗪（xylazine)以ι〇〇及1〇 mg/kg之劑量麻醉。剃刮且清潔各大鼠之右後肢。於膝蓋 骨正側部形成1 cm之切口且暴露股骨踩。Kirschner細線 (直徑0.045")經由踝間部分引入髓内管以作為内部穩定 器。肌肉切口以微喬（vicryl)線閉合且皮膚切口以不銹鋼創 傷夾閉合。經釘住之腿節骨之中間主骨藉助於由落重驅動 之三點彎曲裝置來折斷。自麻醉清醒後允許大鼠完全負重 且自由活動。手術後藉由經皮注射至折斷點上於不同天數 施藥測試化合物。治療後處死動物且收集腿節骨用於分 析。折斷癒合係藉由使用放射線照相術、組織學及生物機 械學測试來評估（F. Bonnarens等人，Journal of Orthopaedic Research，2，97-101 (1984)) 〇 大鼠股骨橫向折斷模型中之研究方案及結果 在通常麻醉下使三個月大之雄性大鼠經受其右腿節骨橫 向折斷。單一劑量（5 mg)之n4-(3,4-二甲氧基-苯曱基）-N2-(3-苯基-丙基）-吡啶并[2,3-d]嘧啶-2,4-二胺於折斷形成完全 時經皮注射至折斷點。注射三週之後，處死大鼠且收集右 腿骨且分析。與以安慰劑治療之腿骨相比較，以N4-(3,4-一甲氧基-苯甲基）-N2-(3 -苯基-丙基）-吼唆并[2,3-d] 口密咬-2,4- 一胺治療之腿骨中，最大負荷（force-to-failure)及硬度 97204.doc -59- 1291961 (骨密度指數）分別增加了 19%及62%。 大鼠骨膜注射模型 在安置於通風櫥中的傳導腔中以異氟烷麻醉（2_3 min)大 乳。剃刮且清潔各大鼠之右後肢。附於注射器上之25號針 頭預填充用於局部注射之測試化合物之調配物。調配物以 5-15 μί之體積注射於腿骨之下骨膜上14天。定量給藥後 處死大鼠收集腿骨，且然後藉由放射線照相術及雙能量X 射線吸收法（DEXA)分析。 大鼠骨膜注射模型中之研究方案及結果 二週大之雄性Sprague-Dawley大鼠之右腿骨接受每日注 射媒劑或測試化合物每週五次持續兩週。在第15天處死所 有大鼠且收集右腿骨用於分析。使用放射線照相術及 DEXA分析骨膜的骨感應。放射線照相術顯示定位於以測 試化合物治療之所有腿骨之注射位點上的新骨形成乂腿骨 注射區（腿骨之較小轉子與中軸之間的區域）之骨礦物質含 篁（BMC)係藉由DEXA分析以測試化合物治療之大鼠與僅 以媒劑治療者相比較來進行評估。在該模型中，n4_(3 5· 二甲氧基-苯甲基）-Ν2·(2“4_基·乙基）“比。定并[2,3外密 啶-2,4-二胺、2·(3_{3_[4·(3,4·二甲氧基_苯甲基胺基 > 吡啶 并[2,3-d]嘧啶·2_基胺基]_丙基卜苯基）_丙_2_醇及n4_(3，心二 甲氧基-苯甲基）-N2-(3·苯基-丙基）-吼啶并[2,3-d]喷啶’·2,4_ 二胺分別增加了 BMC 34〇/❶、49%及33。/〇。另外，9_(1_乙醯 基-4-苯基-丁基）_2_(3,4_二甲氧基.苯甲基）]，9_二氣嗓吟·卜 酮在上述模型中增加了 BMC 20%。 97204.doc -60·

Claims (1)

1. 29^^J138972號專利申請案 中文申請專利範圍替換本 十、申請專利範圍：¥年< 月（y日修(更)正本 1· 一種式⑴之化合物Γ™ — ---

   ⑴ 該等化合物之醫藥上可接受之鹽，其中： Rl及R2為氫或甲氧基，其限制條件為R】及Μ不均為氫 或不均為甲氧基； η為 1、2、3 或 4 ; X為一鍵、〇、s、c=〇、_N(R)_，其中R為氫或_(c】_ c3)烷基、-C(0H)-或-S02 ;且 Y為苯幷噁唑基、苯幷噻唑基、苯幷呋（咕）基、苯幷呋 喃基、苯幷噻二唑基、苯幷異噁唑基、苯幷異噻唑基、 苯幷啼嗤基…比咬基、鼓紅基、經σ弓卜朵基…弓卜坐基、吲 木基、苯基、噻吩基或呋喃基；其中¥視情況獨立地以 一至三個以下基團取代：鹵素、三敦甲基、甲氧基、 c( 0)CH3、氰基、_c(CH3)2〇H、_CH(CH3)0H、 调 CF3)0H C(C，CF3、別2而2、c(=〇)〇cH3、 ‘CP^COOH、»、噻唑基或噁二唑基。 2.如明求項1之化合物，其中χ為一鍵且丫為苯幷呋咕基、 塞力基、咐^疋基或苯基，其中苯基視情況獨立地以一或 兩個以下基團取代：齒素、三氟甲基、甲氧基、 97204-960614.doc 1291961 -c(=o)ch3、氰基、-C(CH3)2OH、-CH(CH3)OH、 -CH(CF3)〇H、-C(C=0)CF3、-S02NH2、-c(=o)och3、 -ch2co〇h、噻唑基或噁二唑基。 3·如請求項1或2之化合物，其中χ為一鍵，η為2或3，且Υ 為噻吩基、π比啶基或苯基，其中苯基視情況獨立地以一 或兩個甲氧基、齒素、-C(CH3)2〇H、CH(CF3)〇H或 -c(c=o)cf3 取代。 4. 如請求項！之化合物，其為N2，N、雙_(3,5_二甲氧基_苯甲 基）-吡啶并[2,3-d]嘧啶_2,4_二胺、n4_(3,5_二甲氧基_苯 甲基）-N -(2-°比啶-4-基-乙基）^比啶并[2,3_d]n密啶_2,4_二 胺、N4-(3,5-二甲氧基·苯甲基）_N2_(2_^吩_2_基-乙基）_ 吼咬并U，3-d]。密咬-2,4_二胺、ν4_(3,5·二甲氧基·苯甲 基）-Ν -2-苯乙基 比咬并[2,3_d]喷咬 _2,4_ 二胺、Ν4_(3,5_ 二甲氧基-苯曱基）_Ν2·[2_(3,5二甲氧基_苯基）_乙基]-吼 咬开 U，3-㈣定-2,4_二胺、2_(3_{3_[4-(3,4_二甲氧基-苯 甲基胺基）㈣并[2,3_d]錢_2姻基]•丙基}•苯基）· 丙-2-醇、n4-(3,4_二甲童| 〜 .w A1 一甲虱基·本甲基）-N2-[2-(4-氟基-苯 Γ苯甲 r>T[2,3_d]㈣·2,4·:胺、ν4·(3,4·二甲氧 i(34 基，并[2,3，。定-2,4-二胺、或 物-一或該化合物Γ:筚基:丙基)+邮 5. -種醫藥組合物，其包含如請：項可接受之鹽。 化八物、十兮儿人 尺項中任一項之式（I) 接：之婢W物之醫藥上可接受之鹽，及醫藥上可 接之媒蜊、载劑或稀釋劑。 97204-960614.doc 1291)61 6_ 任一項之式(1)化合物或該化合物醫 中由心介二之广用狀％其係用於製備治療在哺乳動物 Ί如&本s 疾狀、疾病或病症之藥物。 •如印求項6之用途，其中該症狀 鬆症、肺動脈古0上 疾病或病症為月質疏 動脈_、女性性興奮障礙、 :常ί:凝集、脈管之血管生成、癡呆、癌症、心律 折“症、骨折及/或缺損、延遲癒合或不癒合之骨 折、脊椎融合、骨生异、多g品壬於、 心月 括向# ϋ 、 ^ 整或缺氧症，該方法包 =而要“療之哺乳動物施用治療有效劑量之如請求 項1之式(I)化合物、或該化合物 式白人Q木丄J按又之鹽； :戈…亥化合物、或該化合物之醫 藥組合物。 牧又 < 鹽的醫 8·如請求項6之用途，其中該症狀為骨折及/或缺損。 .E:種二藥广’其包含如請求項1之咖2抑制劑、 稀釋 ^ 擇性受體激動劑及醫藥上可接受之媒劑、載劑或 】〇.如請求項9之組合物，其中該咖2抑制劑為心，5_二 7基_苯甲基)’(2…基-乙基)-吼唆并[2,3♦密 =二胺、2_(3_{3例3,4-二甲氧 W 定开[以♦密咬_2_基胺基]•丙基卜苯基）_丙_2_醇、π ::二甲氧基-苯甲基冰(3·苯基_丙基)“比咬并叫 岔疋-2，；二胺、或該化合物之醫藥上可接受之鹽。 請求項9或10之組合物’其中該奶選擇性受现體激動劑 為（3-(((4-第三丁基-苯甲基）十比咬〜黃酿基）胺朴甲 97204-960614.doc -3- 1291^61 基l·苯氧基）-乙酸、或該化合物之醫藥上可接受之鹽。 12.:請求項6_8中任一項之錢，進一步包含向該哺乳動物 施用治療有效劑量之Eh選擇性受體激動劑或包含該如 請求項1之式⑴之化合物與該EP2選擇性受體激 : 合的醫藥組合物。 ^ A如請求項12之用途，其中該觸2抑制劑為^仏$•二甲 氧基-苯甲基吼。定_4_基.乙基）_D比唆并[2,3_d㈣· 2,4-二胺、甲氧基-苯甲基胺基）“比啶并 = ’3-d]錢·2_基胺基]_丙基卜苯基）_丙_2_醇、 虱基本甲基）-Nip-苯基-丙基）· 0比咬并[2,3_d]鳴咬_2扣 一胺、或該化合物之醫藥上可接受之鹽。 ， 14·如請求項12或13之用 ^ (((A % 一 思…中忒EP2選擇性受體激動劑 ”、、—·第二丁基-苯甲基Μ吡啶-3·磺醯基）_胺基 基）-苯氧基）-乙酸、戋嗲介人 + 土）甲 15 一綠… 合物之醫藥上可接受之鹽。 丄!)· 一種如晴求項1之PDT? 94/ Λί·ί 、 抑制劑或該抑制劑醫藥上可拉Α 之鹽之用途，豆待用於制 接又 損。 “治療哺乳動物的骨折及/或缺 97204-960614.doc